PROTENAS

Aminocidos , ligao peptidica

Estrutura de proteinas

Funo de proteinas

1
 As Protenas so polmeros de -aminocidos ligados entre si
por ligaes peptdicas

So molculas fundamentais para o funcionamento celular, actuam como fontes

de energia, funo estrutural (pele, cabelo, msculos, cartilagens e ossos), como
enzimas e como hormonas (ex. insulina).

Bactria
produz cerca Humano
de 3000 produz cerca
protenas de 35000
protenas

2
 Os aminocidos
Existem dois tipos de aminocidos: os aminocidos COMUNS e os DERIVADOS

Os aminocidos comuns (20 a.a.) sntese

de protenas; codificados por, pelo menos, um
codo.

Os aminocidos derivados resultam de uma modificao

qumica especfica de um aminocido comum, numa reaco
catalisada por uma enzima (normalmente o aminocido
comum j se encontra incorporado na protena)
Tipos de reaces de modificao qumica: hidroxilao,
metilao, acetilao, carboxilao e fosforilao

3
Aminocidos derivados

Parede das clulas vegetais

Prolina 4 hidroxo-prolina

Encontrado na protrombina e outras

protenas que ligam Ca2+ como parte da
sua funo biolgica

5 hidroxo lisina
Protenas contracteis
Colagnio, protenas fibrosas, miosina
6-N-metil lisina

Selenocisteina caso especial, introduzido na sntese proteica.

4
Os aminocidos
-carbono alfa central

- grupo carboxil

- grupo amina

- hidrognio

-R = cadeia lateral,
caracterstica de cada
aminocido.

5
Aminocidos comuns

6 6
7
 Aminocidos Essenciais
-aqueles que o organismo no capaz de sintetizar e precisam de ser ingeridos

Arginina, Metionina, Fenilalanina, Histidina, Isoleucina,

Leucina, Lisina, Treonina, Triptofano, Valina

Aminocidos condicionalmente essenciais

Aglutamina, Prolina, Glicina, Tirosina, Cisteina,
Serina Ac aspartico

8
 As propriedases fsico-qumicas (cont.)
Absoro no ultravioleta
Para alm de todos os a.a. apresentarem absoro a
<230 nm, os aminocidos aromticos absorvem
fortemente entre 250 e 300 nm


forte absoro das protenas a 280 nm
quantificao.

Ionizao
Em soluo aquosa, os aminocidos podem
comportar-se como cidos e bases normalmente
existem na sua forma inica como ies dipolares
(tambm denominados Zwitteries)

(pH7,0)

Um aminocido pode, ento, actuar como um cido ou como uma base

substncia anfotrica, i.e., os a.a. so anflitos.

9
Os grupos ionizveis dos aminocidos

Os valores de pKa so
dependentes:
temperatura, fora inica
e polaridade do meio
(potencial formao de
ligaes de H)
micro-ambiente volta
do grupo ionizvel

10
 Pptidos e protenas: a ligao peptdica
Os pptidos e as protenas so polmeros de -aminocidos (ismeros L)
covalentemente ligados por ligaes peptdicas (ligao amida)

Reaco de condensao
entre o grupo -carboxlico
de um aminocido e o grupo
-amino de um segundo
aminocido, com eliminao
de uma H2O

A repetio sequencial deste processo produz um (poli)pptido ou uma protena (>100 a.a.)
com uma sequncia de aminocidos especfica (R1-R2-R3-Rn)

NH3+ COO-

(resduos de aminocidos / cadeia polipeptdica)

11
 A ligao peptdica
As ligaes peptdicas ocorrem numa ressonncia hbrida carcter parcial
de dupla ligao (maior rigidez)

A co-planaridade dos
tomos que constituem a
ligao peptdica devida
estabilizao da
conformao pela
deslocalizao electrnica
que se estabelece entre o
O, o C e o N

12
 Polmero de planos de ligaes peptdicas interligados pelos tomos de C (rotao
livre dos planos adjacentes)

excepo da Pro, todas as ligaes

peptdicas ocorrem na configurao
trans:

trans cis

13
 Nomenclatura dos polipptidos

TirGliGliFenLeu Tirosil-Glicil-Glicil-fenilalanil-Leucina

N-terminal C-terminal
(dipeptdo, tri-, oligo/poli-)

14
 Pptidos biologicamente activos
Pptidos que desempenham funes biolgicas relevantes em organismos animais e
vegetais (2 a 30 resduos de aminocidos)

Glutationa (glutatio), tripptido que

possui propriedades antioxidantes (agente
redutor); envolvida na destoxificao
celular (remoo de perxidos txicos) (forma reduzida)

(forma oxidada)

Aspartame; pptido sinttico comercial (ster metlico de L-aspartil-L-fenilalanina)

15
 Propriedades cido-base dos pptidos e protenas
As propriedades cido-base dos pptidos resultam da contribuio de todos os grupos
ionizveis em soluo
Carga total
negativa

(pH=7,0)

Carga total
positiva

excepo dos grupos -amino e -

carboxilo terminais, todos os grupos
esto envolvidos em ligaes
peptdicas, deixando de ser ionizveis

16
 Ligao peptdica
Estrutura primria
Aminocidos
Pontes
de H

Estrutura secundria

Hlice Loop
Folha

Estrutura terciria

Estrutura quaternria

17
 Nveis de estrutura
A funo de uma protena s pode ser compreendida em termos da sua estrutura

A estrutura primria. Definida pela sequncia linear de aminocidos da cadeia

polipeptdica.

A estrutura secundria. Descreve o arranjo espacial da cadeia polipeptdica

sem ter em conta a conformao das cadeias laterais. Refere-se s repeties
conformacionais locais que so estabilizadas por pontes de hidrognio (hlice
, folha , hlice tripla de colagnio).

A estrutura terciria. Refere-se estrutura tridimensional da cadeia

polipeptdica total. Inclui as interaces conformacionais espaciais e
geomtricas locais ou distantes.

A estrutura quaternria. Descreve a estrutura e as interaces das associaes

no-covalentes das subunidades das protenas polimricas.

18
 A estrutura primria
A estrutura primria de uma protena corresponde sequncia de aminocidos e
determinada pela sequncia do DNA do gene que a codifica.

 Sequncia de a.a. do citocromo c humano. Comparao com protenas homlogas de outras

espcies:

a.a. conservados
a.a. substitudos semelhantes - substituies conservativas
(identidade / homologia; motivos / sequncias consensus)
a.a. variveis
A funo/estrutura nativa de uma protena depende da sua sequncia de a.a. a
estrutura determinada pela sequncia de a.a.

19
 A estrutura secundria
A estrutura secundria de uma protena define-se como a conformao local da cadeia
polipeptdica, excluindo a contribuio das cadeias laterais (backbone)

C
As cadeias polipeptdicas so flexveis mas Plano da amida
tm restries conformacionais
N
A conformao de uma cadeia polipeptdica
pode ser descrita pelos ngulos rotacionais, e O C
(ngulos diedros) das ligaes covalentes C
As rotaes em torno das ligaes adjacentes
ligao peptdica originam dois tipos de
estruturas: hlices (hlice ) e folhas N
R
pregueadas (folhas )
para a formao de hlices, a rotao d-se
no mesmo sentido (embora com valores C
diferentes) e para as folhas os ngulos de O
toro tm sinal contrrio
Plano da amida
so estabilizadas por pontes de H

20
 Elementos de estrutura secundria: a hlice
A estrutura secundria das protenas
consiste em repeties sucessivas de um
A folha
mesmo padro estrutural estrutura
primria

Hlice (Glu, Met, Ala, Leu)
folha (Val, Ile)
[loops/turns (Pro, Gli, Asn)]

A hlice e a folha so as estruturas

secundrias termodinamicamente mais
estveis em protenas; so
predominantemente estabilizadas por
pontes de hidrognio entre grupos CO e NH
das ligaes peptdicas
A hlice
21
 A hlice
um arranjo rgido e compacto da cadeia polipeptdica, comum em
protenas fibrosas e globulares, estabilizadas por pontes de H.

 Carbono
 Hidrognio
Oxignio
Passo = 5,4
Azoto
 Grupo R

(R)
 Os planos das ligaes
peptdicas localizam-se
paralelamente ao eixo da
hlice

 Todos os grupos C=O e NH das

ligaes peptdicas formam
ligaes de hidrognio intracadeia

22
A hlice : representaes esquemticas

23
 A hlice
A formao de hlice dependente do tipo e da sequncia de aminocidos
A estrutura destabilizada:
por repulso electrosttica entre grupos laterais carregados de resduos
consecutivos (Glu, Lis e Arg)
resduos com cadeias laterias volumosas prximos destabilizam por impedimentos
estricos (Asn, Ser, Tre, Leu)
ocorrncia de Pro ou Gli
A hlice ainda estabilizada pela ocorrncia de interaces (inicas ou hidrofbicas)
entre resduos no consecutivos

24
 A folha
uma estrutura relativamente distendida, com todos os grupos C=O e NH das
ligaes peptdicas em ligaes de hidrognio entre cadeias

Antiparalela: Paralela:

Vista de topo Vista de topo

Vista de lado Vista de lado

25
A folha : representaes esquemticas

26
 turns
turns e loops no so estruturas regulares ou peridicas como as hlices e
as folhas , mas so geralmente rgidas e bem definidas inverses no
sentido da cadeia polipeptdica
Encontram-se muitas vezes superfcie das protenas onde podem participar
em interaces com outras molculas
Na turn, o grupo C=O do resduo i forma uma ligao de hidrognio com o
grupo NH do resduo i+3 para estabilizar a volta

27
 Estrutura secundria: consideraes
As conformaes das hlices e das folhas permitem uma compactao da estrutura,
representando mais de 60% da estrutura das protenas
A formao de uma hlice um fenmeno cooperativo: uma vez formado um passo
da hlice, os seguintes j tm um molde para a sua orientao
Devido composio exclusiva em L-aminocidos, as cadeias polipeptdicas tendem a
enrolar para a direita
O empacotamento antiparalelo de segmentos adjacentes normalmente favorecido
(menos custos energticos)
Na formao helicoidal todas as cadeias laterais dos aminocidos ficam no exterior da
hlice espao versus repulses electrostticas ou repulso estrica

28
 A estrutura terciria
Estrutura tri-dimensional que uma protena adopta como consequncia das interaces
entre os grupos laterais dos diferentes resduos

Backbone da cadeia Incluso das cadeias Surface contour,

polipeptdica, destaca laterais, cdigo de cores vizualizao de
os elementos de (azul para os a.a. cavidades
estrutura secundria hidrofbicos)

29
 A estrutura terciria
As protenas enrolam-se formando estruturas compactas em gua

Resduos no-polares (Val, Leu, Ile,

Met, e Fen) interior
Resduos polares carregados (Arg, His,
Lis, Asp, e Glu) superfcie, em
contacto com o solvente aquoso
Resduos polares no-carregados (Ser,
Tre, Asn, Gln, e Tir) superfcie /
interior (pontes de H).

Exterior Interior

A estrutura terciria estabilizada por interaces fracas:

Interaces electrostticas, pontes de hidrognio, interaces hidrofbicas.
Tambm podem ocorrer ligaes covalentes: ligaes dissulfureto (S-S) entre resduos de cis;
ligaes entre um metal ou outro cofactor e a cadeia polipeptdica

30
Estrutura: ligaes em protenas /
estabilidade

31
 Desnaturao representa a ruptura da conformao nativa da protena
(desenrolamento e perda da estrutura terciria).

Pode ser reversvel ou irreversvel.

32
Flexibilidade / rigidez das estruturas proteicas
Algumas protenas so rgidas enquanto que outras apresentam flexibilidade

As estruturas rigdas esto, normalmente, associadas a funes estruturais

Protenas com estruturas flexveis (limitada) esto associadas a funes de
catlise, interaco protenas/ligando

As alteraes conformacionais que ocorrem devido ligao de Fe na lactoferrina permite

que outras molculas possam distinguir as formas ligadas e no-ligado ao metal

- Na clula h protenas que ajudam ao enrolamento e insero de co-factores chaperones

33
 A estrutura quaternria
Refere-se ao arranjo das cadeias polipeptdicas nas protenas oligomricas e natureza
das interaces entre elas  associaes, quase sempre reversveis por ligaes fracas
(no covalentes), entre vrias cadeias polipeptdicas idnticas ou diferentes (
ocorrncia em protenas oligomricas)
Trata-se de um nvel de complexidade superior na estrutura das protenas; confere um
nvel suplementar na regulao de protenas funcionais

Estrutura quaternria da Hemoglobina, 22  Porque que ocorrem?

Estabilidade: reduo da
razo superfcie/volume
Economia e eficincia a nvel
de gentico
Proximidade dos centros
catalticos em enzimas
Cooperatividade

34
 Protenas: Funo
Funo
Catlise enzimtica
Estrutural (proteco e suporte)
Coordenao de movimentos
Defesa (proteco imunolgica)
Regulao
Transporte
Formao e propagao do impulso nervoso

Conhecimento da estrutura / funo

35
1. Forma:
Protenas: Classificao
Fibrosas, em forma de bastonete, longas, insolveis em gua, rgidas
Normalmente tm funes estruturais (rigidez/flexibilidade) e de
proteco
Constitudas por cadeias estendidas ou em hlice enroladas ou
associadas em fibras
Globulares, esfricas, compactas, geralmente solveis em gua.
Normalmente tm funes dinmicas

36
 Exs. protenas fibrosas

-queratina: componente estrutural de cabelo

e unhas. Filamentos intermdios do citoesqueleto
das clulas.
Apresenta conformao estendida regular:
-regio da cabea no terminal amina
(no helicoidal)
-domnio central (hlices alpha estendidas:
sequncias repetitivas de 7 resduos de a.a. de natureza
hidrfoba) => papel fundamental na associao das cadeias polipeptdicas).
-regio da cauda (terminal carboxilo no helicoidal).

Estrutura quaternria: super-hlice formada pelo entrelaar de duas cadeias

polipeptdicas.

37
 Exs. protenas fibrosas

Fibrona: a protena da seda (casulo do bicho-da-seda e teia de aranha).

constituda por folhas antiparalelas, que se dispem paralelamente ao eixo da fibra.

Cada cadeia composta por mltiplas repeties da sequncia de
resduos
Gly-ser ala-gly-ala sendo a estrutura estabilizada por pontes de
hidrognio e interaes de Van der Waals entre os resduos laterais das
cadeias na folha .
Gly-ser-ala-gly-ala

38
 Exs. protenas fibrosas

colagnio: a protena estrutural mais abundante

no corpo humano.
Origina filamentos que conferem resistncia aos tendes e redes de fibras que
suportam a pele e os rgos internos.
Hlice no -hlice. A cadeia caracterizada pela repetio de tripletos Gly-X-Y
X e Y so frequentemente resduos de Prolina.
Glys formam o interior da hlice, estabilizando-a por pontes de hidrognio entre o
grupo amida da glicina e o grupo carbonilo do resduo X do tripleto.
A prolina nas posies X e Y confere rigidez e estabilidade estrutura.

Estrutura quaternria: super-hlice formada pelo

entrelaar de trs cadeias polipeptdicas.
Estas ainda se podem organizar em feixes.

39
 As enzimas solveis so protenas globulares
A sua eficincia e especificidade deriva do arranjo 3D dos grupos catalticos o(s)
substrato(s) liga(m)-se a um stio especfico da enzima denominado centro (stio) activo,
onde ocorre a catlise
O centro activo:
contm os resduos de aminocidos directamente
envolvidos na reaco
ocupa uma parte relativamente pequena do volume
total da enzima
trata-se de uma entidade tridimensional
corresponde, geralmente, a uma cavidade na
molcula de enzima, com um ambiente qumico
muito prprio
o substrato entra no stio activo e liga-se enzima
normalmente atravs de interaces fracas, no-
covalentes (por vezes h formao transiente de
ligaes covalentes entre a enzima e o substrato)

Ligao do substrato ao
centro activo
Complexo quimotripsina-substrato
40
 Protenas: Classificao
Composio:
Simples, constitudas apenas pela cadeia polipeptdica
Conjugadas, contm, para alm da cadeia polipeptdica, pelo menos um grupo qumico
(cofactor)

Cofactor io inorgnico ou coenzima necessrio para a actividade de uma enzima
Grupo prosttico io metlico ou composto orgnico (que no um a.a.), que est covalentemente
ligado cadeia polipeptdica e que essencial para a sua actividade
Coenzima cofactor orgnico necessrio para a actividade de uma enzima; muitas vezes uma das
componentes deriva de vitaminas.

Haloprotena protena + cofactores

Apoprotena protena sem os cofactores

41
 PROTENAS CONJUGADAS

Protenas Conjugadas

42
 Protenas: composio
Monomricas Polimricas
homopolimricas / heteropolimricas
(homodmero / heterodmero)

Dados Moleculares de Protenas

43
Electroforese em gel de policrilamida em
condies nativas ou desnaturantes

44
Interaes Protena-ligando

45
 Para desempenhar funes as protenas precisam de interactuar com outras molculas.
As protenas ligam-se eficazmente a outras protenas e outras molculas devido:
(1) ao tipo de interaes que estabelecem (maus usual: no covalentes)
-hidrfobas, pontes de H entre grupo carbonilo e amina de cadeias laterais,
inicas, etc.
(2) sua flexibilidade estrutural
(3) complementaridade entre protena e ligando.

Cada protena apresenta um equilbrio entre a sua

estabilidade estrutural, a sua flexibilidade e os
parmetros fsicos na qual so funcionais:
- valor de pH
-T
- fora inica.

46
 Uma protena muito estvel pode apresentar pouca flexibilidade e, consequentemente, um
dfice funcional. A estabilidade e flexibilidade tm de ser adequadas ao meio ambiente em que
aprotena desempenha funes.

A COMPLEMENTARIDADE PROTENA-LIGANDO determina a especificidade

A interaco de um ligando a uma protena segue, quase sempre um perfil hiperblico:

Quantidade relativa de
Protena com ligando
Y

Concentrao de ligando
50 100
47
 O local de interao pode alterar a sua afinidade com o ligando na presena de moduladores
que induzem alteraes conformacionais na protena.
ALOSTERIA ocorre quando h mais do que um local para ligandos.

1. O exemplo mais simples a mltipla ligao das protenas oligomricas

com um nico local de interao por subunidade.
A ligao de uma molcula de ligando a uma subunidade no afecta a interao dos ligandos com
outras subunidades.
A ligao de uma molcula de ligando a uma subunidade afecta positivamente a interao dos ligandos
com outras subunidades (aumento de afinidade) efeito homotrpico positivo.
A ligao de uma molcula de ligando a uma subunidade afecta negativamente a interao dos
ligandos com outras subunidades (diminuio de afinidade) efeito homotrpico negativo.

2. Ex. mais complicado sero dois locais de ligao diferentes por subunidade numa
protena polimrica. Obtem-se um efeito multiplicativo de conformaes e afinidades.
- efeito heterotrpico positivo.
- efeito heterotrpico negativo.

48
Protenas: estrutura e funo
TRANSPORTE DE O2 E CO2

49
Sistema circulatrio: Corao e vasos sanguneos
A utilizao de oxignio traz vantagens para os organismos mas a sua baixa
solubilidade (10-4 M) e a impossibilidade da difuso a grandes distncias so
um problema para o desenvolvimento de organismos de grandes dimenses
sistema circulatrio e de molculas transportadoras de O2

Sistema circulatrio permite o transporte em todo o

organismo de:
Nutrientes
O2, CO2
Electrlitos
Hormonas
Produtos de metabolismo

50
 Transporte de oxignio: hemoglobina
Propriedades do O2:
pO2 (1 atmosfera) = 150-160 mmHg
pO2 max no sangue arterial igual a 100 mmHg (0,15 mmol/L
de O2 dissolvido)
Solubilidade limitada em gua


No sangue transportado complexado hemoglobina (98%
ligado Hb e 2% dissolvido no plasma), aumentando o seu
contedo 60x (8,6 mmol/L)
A quantidade de O2 que a Hb pode transportar depende:
pO2
pH
Temperatura
BFG (2,3-bifosfoglicerato)

51
 A hemoglobina (Hb)
A hemoglobina (Hb) responsvel pelo
transporte de O2 dos pulmes (ou guelras)
para os capilares dos tecidos onde usado
na respirao (transporta CO2 (e H+))
A hemoglobina uma protena tetramrica
(64,5 kDa) com uma estrutura quaternria
do tipo 22 (interaces hidrofbicas,
pontes de hidrognio e algumas interaces
inicas), Perutz 1959

52
 Hemoglobina
Protena tetramrica com um grupo prosttico heme por subunidade, o
que a torna capaz de ligar e transportar oxignio.
Grupo heme: uma porfirina com um tomo de ferro central (ligado aos 4 azotos
da molcula). Cada grupo heme fica localizado numa bolsa hidrfoba na
protena perto de uma histidina e alterando a conformao da molcula.
O tomo de Ferro ligado ao oxignio puxa a histidina proximal, o que origina
uma alterao estrutural da referida subunidade que se estende s outras
subunidades e conformao global da hemoglobina.

53
 O grupo hemo

Hemo
(Fe-protoporfirina IX)

Anel porfirnico (protoporfirina IX): 4 grupos pirrlicos / 4 grupos metilo / 2 grupos vinilo / 2 grupos
propionato
Os grupos propionato orientam os hemos
Hemo do tipo b, o anel porfirnico no se encontra covalentemente ligado cadeia polipeptdica

54
 Meio envolvente do grupo hemo
O hemo est localizado numa cavidade hidrofbica (excepto 2 His); os grupos propionato ficam
voltados para o exterior
A funo do grupo prosttico (hemo) modulada pela cadeia polipeptdica:
A cadeia polipeptdica mantm o Fe no estado +2 (Fe3+ no liga O2) minimizando a sua auto-
oxidao (Fe2+Fe3+); permite a ligao reversvel de O2 e estabiliza o estado de transio
(Fe2+O2); a His E7 diminui a afinidade do hemo para o O2 e CO.

CO, NO, H2S so gases muito

txicos, porque tm maior
afinidade para o hemo do que
o O2

A His F8 (histidina
proximal) est ligada ao
ferro na 5 posio de
coordenao A His E7 (histidina distal)
importante para
diminuir a afinidade
para o CO

55
 A hemoglobina
As subunidades (141 a.a.) e (146 a.a.) so
estruturalmente muito semelhantes entre si
(e tambm mioglobina dos msculos)
um dmero de dmeros (); muitas
interaces entre subunidades e e poucas
interaces 12 ou 12

Mioglobina Hemoglobina

Forma T corresponde hemoglobina na forma totalmente desoxigenada (uma

conformao mais rgida)

Forma R corresponde conformao da hemoglobina quando est completamente

oxigenada (mais flexvel).

56
 Cooperatividade / Alosteria da Hb
A ligao da 1 molcula de O2 a uma subunidade provoca alteraes conformacionais que se
transmitem s outras subunidades, tornando a ligao sucessiva de O2 cada vez mais fcil
cooperatividade positiva
A Hb pode ento adoptar duas conformaes: T (menor afinidade para o O2) e R (maior afinidade
para o O2)
A transio T R envolve a quebra de algumas interaces inicas e pontes de hidrognio entre as
subunidades, originando numa estrutura mais compacta

O2

(Forma T, tense) (Forma R,relaxed)

A forma T apresenta maior rigidez e menor afinidade para o O2 do que a forma R

57
 A Hb uma protena alostrica
Alosteria, do grego allos stereo. A funo da Hb modificada:
Protenas alostricas so positivamente, em que a ligao da 1 molcula de
normalmente multimricas O2 aumenta a afinidade da protena para as

restantes molculas de O2 cooperatividade
A interaco de pequenas molculas, homotrpica positiva na ligao do O2
efectores ou moduladores negativamente, em que a afinidade para o O2
alostricos, com a protena em locais diminui pela interaco com vrios efectores
distinctos do stio de ligao do alostricos: H+, CO2 e BFG cooperatividade
ligando/subtrato, por vezes bastante heterotrpica negativa com efectores alostricos
afastadas, exerce um efeito (positivo As cooperatividades (positivas e negativas) tornam a
ou negativo) na ligao do hemoglobina um transportador de oxignio mais
ligando/substrato, promovendo a eficiente
transio entre conformaes de
elevada e baixa afinidade para o A mioglobina no uma protena alostrica; no
ligando (alteraes nas estruturas apresenta cooperatividade positiva nem regulao por
tercirias e/ou quaternrias) efectores alostricos

58
 A curva de saturao e a transio T R
A ligao do O2 promove a transio entre a forma T de baixa afinidade e a
forma R de elevada afinidade
A proporo de formas T e R depende da pO2

59
 Cooperatividade
Cooperatividade: processo em que a interaco de um ligando com um local de
ligao afecta a conformao proteica, no sentido de facilitar a interaco
protena-ligando noutro local de ligao da referida protena.
Forma T a bolsa hidrfoba do grupo heme est pouco acessvel ao solvente o
que dificulta a ligao ao O2.

Aps a ligao da 1 molcula a uma das 4 subunidades da hemoglobina h

uma alterao conformacional que torna as bolsas hidrfobas do grupo heme
das outras subunidades mais acessveis entrada de O2, originado um
crescimento EXPONENCIAL da afinidade da hemoglobina com o O2.
A curva de saturao da hemoglobina pelo oxignio segue um perfil sigmoidal.

60
 Eficincia no transporte de O2
A hemoglobina tem pouca afinidade com o O2 para baixas presses de O2.
Segue-se um crescendo exponencial da afinidade para presses mdias de O2.
Elevada afinidade para altas presses de O2.

A hemoglobina tem de ter grande afinidade com o O2 para presses

semelhantes existente nos pulmes,
E fraca afinidade para as presses de O2 existentes o nvel das clulas
tecidulares.

Tendo em conta que se um tecido metabolicamente activo precisa de mais

oxignio para a respirao celular, existe uma optimizao da funo da
hemoglobina nestes sistemas.

61
 Modulao da funo da Hb pelo H+
(Efeito de Bohr-Haldane)
O metabolismo nos tecidos gera CO2 que por sua vez baixa o pH pela reaco catalisada pela
anidrase carbnica:
Anidrase carbnica
(eritrcitos)
(eritrcitos)
CO2 + H2O H+ + HCO3-
(respirao)

A diminuio do pH sinaliza a necessidade de mais O2 (para a respirao):

pH ([H+] ) diminuio da afinidade da Hb para O2; fornecimento ainda mais
eficiente aos msculos quando estes se encontram em actividade elevada: pH 7,4 pH
7,2 libertao de +10% de O2


Este efeito do pH na afinidade da Hb para O2 denominado de efeito de Bohr:

O sangue re-circula at aos pulmes onde a ligao de O2 Hb implica libertao de H+ e o

equlbrio desloca-se no sentido directo. O bicarbonato dissolvido no sangue pode ser
libertado e expirado na forma de CO2 pela reaco inversa catalisada pela anidrase carbnica

62
 Modulao da funo da Hb pelo H+
(Efeito de Bohr-Haldane)
A forma T tem maior afinidade para o H+ do que a forma R:
Na forma T, a His146 est na forma protonada;


[H+] favorece a forma T e promove a libertao de mais O2

Ao processo global de alterao da afinidade da hemoglobina pelo O2 na presena

de H3O+, de CO2 e O2, designa-se por efeito de Bohr-Haldane.

63
 O transporte de CO2 dos tecidos para os

pulmes
O CO produzido pelo metabolismo nos tecidos baixa a afinidade da
2
Hb para o O2 de duas formas:
A maior parte do CO2 convertido em bicarbonato com libertao de H+
(que contribui para o efeito de Bohr)
O restante CO2 dissolve-se no sangue; parte reage directamente com a Hb
(forma T) ligando-se aos grupos N-terminal das cadeias para formar
carbamino-Hb:

R NH2 + CO2 R NH COO- + H+

(grupos -amino) (carbamatos)

Efeito de Bohr

A forma T estabilizada promovendo a dissociao de CO2 da Hb pCO2 nos capilares

venosos diminui a afinidade da Hb para o O2


A cooperatividade negativa heterotrpica entre a ligao de O2, o CO2 e o H+ fundamental para
a optimizao da funo transportadora da hemoglobina

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 Modulao da funo da Hb para o O2: o efeito do BFG
A Hb das clulas vermelhas (sangue) tem menor afinidade para o O2 do que a hemoglobina
pura. O sangue deve conter substncias que reduzem a afinidade da Hb para o O2: o 2,3-
bisfosfoglicerato (BFG ou BPG)

O BFG uma molcula orgnica muito aninica presente nos glbulos vermelhos
humanos, numa concentrao idntica da Hb (4-5 mM)


O efeito do BFG essencial para que a hemoglobina liberte o oxignio nos
tecidos.

O BFG estabiliza a forma T e diminui a afinidade da hemoglobina para o O2

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Transporte de O2 pela Hb: efeitos alostricos
Cooperatividade homotrpica positiva:
A ligao do O2 hemoglobina aumenta a afinidade dos outros centros
para o O2. A ligao do O2 estabiliza a forma R.

Cooperatividade heterotrpica negativa:

H+ e CO2 estabilizam a forma T e promovem a libertao de O2
BPG estabiliza a forma T e baixa a afinidade da hemoglobina para o O2.

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 O envenamento por CO: curiosidade
A afinidade da Hb para o CO (monxido de carbono) cerca de 250x
maior do para o O2 ligao preferencial para o CO.
Histidina distal se no fosse a histidina seria 20000x superior
(envenenamento pelo pouco CO na atmosfera). O Oxignio no
afectado pela presena da histidina.
Exposio prolongada ao CO provoca a formao quase irreversvel
da forma carboxi-Hb, muito txica terapias em cmaras de O2
onde administrado 100% O2
Em fumadores frequentes, 20% dos stios de ligao de O2 ocupados
com CO.

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