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Cincia e Tecnologia de Alimentos ISSN 0101-2061

Original
Atividade antioxidante e teor de fenlicos totais
em hortalias orgnicas e convencionais
Antioxidant activity and phenolic content in organic and conventional vegetables

Kettelin Aparecida ARBOS1*, Renato Joo Sossela de FREITAS2,


Snia Cachoeira STERTZ2, Marlos Ferreira DORNAS3

Resumo
Considerando que os consumidores esto mais conscientes com a sua sade e mais preocupados com as condies ambientais, verifica-se
uma crescente demanda por alimentos orgnicos. O objetivo deste estudo foi comparar a atividade antioxidante e o teor de fenlicos totais
entre alface, rcula e almeiro de cultivos orgnico e convencional, plantados em uma mesma horta. A atividade antioxidante dos extratos
metanlicos das hortalias foi determinada atravs do ensaio do DPPH. O teor de fenlicos totais foi obtido espectrofotometricamente
de acordo com o mtodo de Folin-Ciocalteu e calculado como equivalente de cido glico. A atividade antioxidante contra o radical livre
DPPH foi: rcula orgnica > almeiro orgnico > alface orgnica > rcula convencional > almeiro convencional > alface convencional. O
teor de fenlicos totais foi superior nos vegetais orgnicos. Os resultados deste estudo sugerem que as hortalias orgnicas podem ser uma
importante fonte de antioxidantes naturais e de compostos fenlicos e, portanto, seu consumo deve ser estimulado.
Palavras-chave: hortalias; ao antioxidante; sistema de produo; DPPH; fenlicos.

Abstract
Considering that consumers are becoming more conscious of their health and more concerned with environmental conditions, there has
been an increasing demand for organic foods. The aim of this study was to compare the antioxidant activity and determine the total phenolic
content of organic and conventional cultivations of lettuce, arugula, and chicory grown in the same vegetable garden. The antioxidant activity
of the methanol extracts of these leaf vegetables wasdetermined using DPPH free radical scavenging assay. The total phenolic content in the
extracts was determined spectrometrically according to the Folin-Ciocalteu method and calculated as equivalent of gallic acid. The antioxidant
activity against the DPPH free radical was: organic arugula> organic chicory > organic lettuce > conventional arugula > conventional chicory
> conventional lettuce. The total phenolic content was higher in the organic vegetables. The results of this study suggest that the organic
vegetable can be a good dietary source of natural antioxidant and phenolic compounds; therefore, their consumption must be encouraged.
Keywords: vegetables; antioxidant action; production system; DPPH; phenolic.

1 Introduo
O sistema de produo denominado atualmente de principalmente a partir da dcada de 90 (PENTEADO, 2000;
convencional baseia-se na utilizao intensiva de insumos MACHADO; CORAZZA, 2004). Contudo, embora crescente,
qumicos (agrotxicos), mecanizao pesada e melhoramento a rea agriculturvel destinada produo de orgnicos
gentico voltado para a produtividade fsica. No entanto, esse estimada em apenas 0,25% da brasileira (BUAINAIN;
padro de produo visando exclusivamente produtividade, BATALHA, 2007).
vem sendo muito questionado, em funo da divulgao de Em relao aos atributos de qualidade dos alimentos
aspectos negativos, tais como esgotamento dos recursos naturais, orgnicos, os resultados ainda so pouco conclusivos. Darolt
degradao ambiental, excluso social, elevao dos custos de (2003a) afirma existir um grande nmero de fatores que pode
produo, contaminao dos alimentos por agrotxicos e afetar a qualidade de um alimento, como fatores genticos
reduo de sua qualidade (PRIMAVESI, 1988; ORMOND etal., (variedades), clima, condies de solo, armazenamento ps
2002; STAUB, 2003; CAMPOS, 2005). colheita e modo de produo (orgnico ou convencional).
Uma consequncia da divulgao e da percepo desses indiscutvel a ao benfica que o consumo regular de
aspectos indesejveis tem sido a busca dos consumidores por frutas, verduras e hortalias proporciona sade do homem.
dietas mais saudveis e sem riscos para a sade, materializada Estudos epidemiolgicos tm demonstrado que o efeito protetor
no crescimento da produo de alimentos orgnicos, exercido pelo consumo desses alimentos se deve presena

Recebido para publicao em 22/7/2008


Aceito para publicao em 16/5/2009 (003700)
1
Programa de Ps-Graduao em Tecnologia de Alimentos, Universidade Federal do Paran UFPR, Centro de Cincia e Tecnologia de Alimentos, Universidade Anhanguera
UNIDERP, Rua Alexandre Herculano, 1400, Jardim Veraneio, CEP 79480-000, Campo Grande - MS, Brasil, E-mail: kettelin.arbos@gmail.com
2
Programa de Ps-Graduao em Tecnologia de Alimentos, Centro Politcnico, Universidade Federal do Paran UFPR, CEP 81531-990, Curitiba - PR, Brasil
3
Universidade para o Desenvolvimento do Estado e da Regio do Pantanal UNIVERSIA, Campo Grande - MS, Brasil
*A quem a correspondncia deve ser enviada

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Atividade antioxidante de hortalias

de componentes bioativos como a vitamina C, vitamina E e de irrigao utilizado foi do tipo gotejamento, sendo aplicados
fitoqumicos com ao antioxidante, dentre os quais se destacam turnos de rega dirios de acordo com as necessidades das
os compostos fenlicos, -caroteno e vrios outros carotenoides espcies cultivadas.
(RICE-EVANS; MILLER; PAGANGA, 1996; WANG; CAO;
No sistema orgnico de produo, a adubao foi composta
PRIOR, 1996; VELIOGLU et al., 1998; VISON et al., 1998;
por biofertilizante preparado por meio da fermentao,
MELO etal., 2006).
contendo esterco de bovinos fresco e gua, na proporo de
A eficcia da ao antioxidante dos componentes bioativos 50% v/v, por um perodo de 21 dias, em recipiente plsticos
depende da estrutura qumica e da sua concentrao no e na ausncia de ar. No sistema convencional, alm de esterco
alimento. Por sua vez, o teor de fitoqumicos em hortalias bovino, foi utilizado o fertilizante NPK (10:10:20), aps 15,
amplamente influenciado por fatores genticos, condies 30e 45 dias.
ambientais, sistema de produo, alm do grau de maturao
e variedade da planta, entre outros (KAHKONEN etal., 1999; 2.2 Coleta das amostras
KAUR; KAPOOR, 2001; KOLEVA et al., 2002; MELO et al.,
2006). Coletaram-se ao acaso nas hortas orgnica e convencional,
cinco amostras de alface, rcula e almeiro, em ponto de
Numerosos estudos j foram conduzidos abordando as maturao comercial, ou seja, aproximadamente 32 dias
propriedades antioxidantes de frutas e hortalias, e plantas aps o transplante. As hortalias foram encaminhadas
medicinais (RAMOS etal., 2003; CAI etal., 2004; MIGUELetal., imediatamente para o Centro de Cincia e Tecnologia de
2004; SCHAFFER; SCHMITT-SCHILLIG; ECKERT, 2005; Alimentos da UNIDERP para a elaborao dos extratos
HSU; CHAN; CHANG, 2007; YU etal., 2007). Todavia, poucos metanlicos empregados na avaliao do potencial antioxidante
trabalhos so conduzidos visando verificar a influncia do tipo e quantificao de fenlicos.
de cultivo na ao antioxidante desses alimentos. O que se
pode verificar nesses estudos que os alimentos produzidos 2.3 Obteno do extrato metanlico
organicamente tm tendncia a possurem menor teor de nitrato,
maior teor de vitamina C e matria seca, bem como maior teor As hortalias in natura (50 g) previamente fracionadas
de compostos com ao antioxidante, tais como flavonoides e foram maceradas por seis dias utilizando-se metanol 70% como
carotenoides (WORTHINGTON, 2001; BOURN; PRESCOTT, solvente. Os extratos obtidos foram concentrados em rotavapor
2002; WILLIAMS, 2002; DAROLT, 2003b; STERTZ; ROSA; sob presso reduzida e temperatura inferior a 50 C e o volume
FREITAS, 2005; MAGKOS; ARVANITI; ZAMPELAS, 2006). final aferido para 50 mL com metanol. A partir dos extratos
metanlicos foram feitas diluies para obteno das solues
No presente trabalho foram comparados a atividade testes nas concentraes de 0,01; 0,1; 1 e 10 mg.mL-1.
antioxidante e o teor de compostos fenlicos de alface, rcula
e almeiro, obtidos de cultivos orgnico e convencional.
2.4 Determinao da atividade antioxidante
2 Material e mtodos A atividade antioxidante das hortalias orgnicas e
convencionais analisadas neste estudo foram mensuradas
2.1 Cultivo das amostras de acordo com o mtodo da reduo do radical livre DPPH,
descrito por Koleva etal. (2002) com modificaes propostas por
As amostras de alface, rcula e almeiro analisadas neste Choi etal. (2002). Assim, alquotas de 2,5 mL dos extratos das
estudo foram provenientes de um mesmo lote de sementes, hortalias orgnicas e convencionais nas concentraes de 0,01a
germinadas concomitantemente e cultivadas em canteiros 10 mg.mL-1 foram tratadas com 1 mL de soluo metanlica
orgnicos e convencionais. Dessa forma, alguns condicionantes de DPPH 0,3 mM. Aps agitao, os tubos foram deixados em
que poderiam afetar a qualidade nutricional dessas hortalias e, repouso ao abrigo da luz por 30 minutos. Decorrido o tempo de
consequentemente, influenciar na ao antioxidante puderam reao, a absorbncia das amostras foi obtida em 518 nm contra
ser minimizados, uma vez que as condies climticas, um branco especfico para cada concentrao (2,5 mL de extrato
variedade, irrigao, tempo de maturao e condies de e 1,0 mL de metanol). A capacidade de sequestrar o radical livre
armazenamento foram as mesmas para as hortalias cultivadas foi expressa de duas formas: atravs do valor da concentrao
orgnica e convencionalmente. inibitria (IC50), que representa a quantidade de substncia
Sementes peletizadas de alface (Lactuca sativa) cultivar antioxidante necessria para reduzir em 50% a concentrao
Vernica (AF 257), rcula (Eruca sativa) e almeiro inicial de DPPH e atravs do percentual de inibio de oxidao
(Cichorium intybus L.) foram semeadas em bandejas com do radical calculado segundo a Equao 1:
128clulas, sob cultivo protegido em estrutura fechada com tela. Abs. controle Abs. amostra
A semeadura constou de duas ou quatro sementes por clula, % de Reduo (DPPH consumido) = 100 (1)
Abs. controle
sendo nessa fase empregado substrato orgnico produzido no
local. 2.5 Determinao de fenlicos totais
Aps aproximadamente 15 dias da germinao, as mudas O teor de fenlicos totais dos extratos metanlicos das
foram transplantadas para o solo: metade das mudas foi plantada hortalias orgnicas e convencionais foi determinado atravs
na horta orgnica e metade na horta convencional. O sistema do mtodo espectrofotomtrico, utilizando o reagente de

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Arbos et al.

Folin-Ciocalteau (SWAUN; HILLIS, 1959; WETTASINGLE; s convencionais, houve variao na intensidade do efeito
SHAHIDI, 1999) e curva padro de cido glico (EAG). Os antioxidante.
resultados foram expressos em mg de fenlicos totais em
Os extratos de alface orgnica e convencional analisados
equivalente de cido glico (EAG) por 100 g de hortalia.
neste estudo reduziram na concentrao de 1 mg.mL -1,
respectivamente, 72,3 0,93% e 62,7 0,51% do DPPH,
2.6 Anlise estatstica possuindo capacidade antioxidante superior aos extratos
Os dados obtidos foram analisados estatisticamente analisados por Melo etal. (2006), uma vez que estes autores
pelo programa GraphPad Instat, verso 3.06. A significncia relataram reduo de 36 e 50% do DPPH nos extratos
estatstica foi estudada atravs da anlise de varincia (ANOVA) metanlicos de alface crespa e lisa, respectivamente.
e teste de Tukey (p 0,05).
Matsuura et al. (2003) relataram, na concentrao de
1mg.mL-1, reduo de apenas 20% do DPPH nas amostras de
3 Resultados e discusso rcula analisadas. Resultados semelhantes foram obtidos por
O ensaio de reduo do radical livre DPPH constitui um Pieroni etal. (2002), ao analisarem extratos etanlicos de rcula
mtodo qumico frequentemente utilizado para a investigao na concentrao de 2,5 mg.mL-1. Comparando esses dados com
do potencial antioxidante de extratos de vegetais (GUO etal., os obtidos neste trabalho, observou-se que, independente do
2001; SANDOVAL et al., 2002; LLORACH et al., 2003) e tipo de cultivo, as amostras de rcula foram mais efetivas, uma
possibilita variao no modo de apresentao dos resultados vez que reduziram na concentrao de 1 mg.mL-1 mais de 70%
concernentes atividade antioxidante investigada. Assim, os o DPPH inicial.
resultados deste trabalho foram expressos como a capacidade de
sequestrar/reduzir o radical DPPH em porcentagem (Figura 1)
e pelo valor de IC50 (Tabela 1), que um parmetro indicativo Tabela 1. Atividade antioxidante dos extratos metanlicos das
da concentrao inibitria necessria para diminuir em 50% hortalias provenientes de cultivos orgnico e convencional.
o radical livre DPPH (IC50) (EL; KARAKAYA, 2004; QIAN; Hortalias Concentrao inibitria (IC50)
NIHORIMBERE, 2004). mg.mL-1
Rcula orgnica 0,60
Em relao capacidade de sequestrar o radical livre DPPH,
Almeiro orgnico 0,62
expressa como o percentual de inibio (% DPPH consumido)
dos extratos das hortalias orgnicas e convencionais analisadas, Alface orgnico 0,64
verificou-se que, quando avaliados individualmente, a Rcula convencional 0,68
ao antioxidante foi significativamente maior nos extratos Almeiro convencional 0,71
mais concentrados. No entanto, ao comparar as diferentes Alface convencional 0,77
concentraes dos extratos das hortalias orgnicas frente Vitamina C 0,03

Figura 1. Avaliao da capacidade antioxidante dos extrato das hortalias pelo mtodo de reduo do radical DPPH.

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Atividade antioxidante de hortalias

A atividade antioxidante obtida pelos extratos de almeiro Os teores de fenlicos da rcula, alface e almeiro,
orgnico (13,1 0,20%) e convencional (23,1 0,25%) foi pelo provenientes das hortas orgnica e convencional, foram
menos duas vezes superior ao efeito obtido pelos extratos desta quantificados, uma vez que reconhecido que as propriedades
mesma hortalia, na concentrao de 0,1 mg.mL-1, analisados benficas das hortalias se devem, preponderantemente,
por El e Karakaya (2004), os quais encontraram reduo de presena desses compostos (CAO; SOFIC; PRIOR, 1996;
apenas 5,95% do radical livre DPPH. Por outro lado, extratos GUOetal., 2001; MENSOR etal., 2001; KOLEVA etal., 2002;
de almeiro mais concentrados (2,5 mg.mL-1), avaliados por EL; KARAKAYA, 2004).
Pieroni etal. (2002), foram capazes de reduzir em cerca de 30% O teor de compostos fenlicos dos extratos das
o radical livre. hortalias, em ordem decrescente, foi: rcula orgnica
De maneira geral, a alface orgnica apresentou ao (126,84 4,46 mg EAG.100 g -1 ), a lface orgnica
antioxidante mais efetiva que a convencional nas concentraes (108,72 2,34 mg EAG.100 g -1 ), almeiro orgnico
de 0,1 e 1 mg.mL-1, reduzindo 23,1 0,35% e 72,3 0,93% o (92,15 1,09 mg EAG.100 g -1 ), alface convencional
DPPH. Essas concentraes foram tambm as mais efetivas nos (91,22 0,91 mg EAG.100 g -1 ), rcula convencional
extratos de rcula orgnica, quando comparado convencional, (90,78 2,23 mg EAG.100 g -1) e almeiro convencional
reduzindo 23 0,85% o DPPH na concentrao 0,1 mg.mL-1 e (81,04 3,64 mg EAG.100 g-1).
77,3 0,74% na concentrao 1 mg.mL-1. Em relao aos extratos Devido ao limitado nmero de estudos disponveis, o
de almeiro orgnico, a atividade antioxidante foi superior nos enfoque principal na quantificao dos compostos fenlicos
extratos menos concentrados, 0,01 e 0,1 mg.mL-1, reduzindo o dos extratos avaliados foi o de verificar a influncia do tipo de
DPPH em 5,3 0,20% e 13,1 0,20%, respectivamente. cultivo no teor dessas substncias reconhecidas pela sua ao
Foi possvel verificar que, na concentrao de 1 mg.mL-1, protetora ao organismo humano. De acordo com os resultados
todos os extratos das hortalias orgnicas foram significativa obtidos (Tabela 2), pode-se verificar que os extratos das
mente mais efetivos (p 0,05) na reduo do DPPH, quando hortalias provenientes de cultivo orgnico apresentaram teores
comparados aos respectivos extratos obtidos na cultura de compostos fenlicos superiores significativamente (p 0,05)
convencional, conforme demonstrado na Figura 1, reduzindo aos extratos obtidos das hortalias convencionais.
em mais de 70% o DPPH. Marinova, Ribarova e Atanassova (2005) quantificaram
Devido variao no efeito antioxidante dos extratos das em extratos de rcula 160 mg.100 g-1 de compostos fenlicos e
hortalias em funo das concentraes empregadas no ensaio, em alface teores de 116,2 mg.100 g-1, valores semelhantes aos
frequentemente os resultados so apresentados atravs do valor determinados neste estudo.
de IC50, possibilitando uma melhor avaliao, uma vez que Apesar de os extratos de almeiro orgnico e convencional
esse parmetro indica a concentrao da amostra necessria terem apresentado os menores teores de compostos fenlicos
para reduzir em 50% o DPPH. Quanto menor o valor de IC50, entre as hortalias avaliadas, esse resultado foi superior ao
maior a atividade antioxidante da hortalia. encontrado por Aqilk, Ahmad e Mehmood (2006).
Os valores de IC50 obtidos pelas hortalias orgnicas e Melo etal. (2006) analisaram a capacidade antioxidante e o
convencionais esto apresentados na Tabela 1. teor de fenlicos de 14 hortalias adquiridas em SoPauloBrasil,
dentre elas, as amostras de alface crespa e lisa apresentaram
Dentre as hortalias analisadas, a efetividade na capacidade teores de compostos fenlicos de 22,6 e 13,85 mg.100 g-1,
antioxidante foi, em ordem decrescente, obtida pela rcula respectivamente.
orgnica (IC50 de 0,60 mg.mL-1), almeiro orgnico (IC50 de
0,62 mg.mL-1), alface orgnica (IC50 de 0,64 mg.mL-1), rcula O teor dos compostos fenlicos e demais fitoqumicos
convencional (IC50 de 0,68 mg.mL-1), almeiro convencional presentes nas frutas e hortalias amplamente influenciado
(IC50 de 0,71 mg.mL -1) e alface convencional (IC50 de por fatores genticos, condies ambientais, tipo de cultivo,
0,77 mg.mL-1), hortalia esta com a menor ao antioxidante. alm do grau de maturao e variedade da planta, entre
outros (KAHKONEN et al., 1999; KAUR; KAPOOR, 2001;
Ainda que a atividade antioxidante das hortalias KOLEVAetal., 2002; MELO etal., 2006).
provenientes de cultivo orgnico tenha sido superior s
convencionais, uma vez que apresentaram menores valores
para o parmetro de IC50, ainda assim essa ao foi inferior Tabela 2. Teor de fenlicos totais, expresso em mg de equivalente de
atividade antioxidante exercida pelo padro de vitamina C cido glico EAG.100 g-1 de hortalia.
(IC50 de 0,03 mg.mL-1). Isso pode ser justificado em virtude Hortalias Extratos Extratos
da vitamina C ser um padro purificado e que os extratos das hortalias orgnicas hortalias convencionais
hortalias apresentam inmeras substncias que contribuem Rcula 126,84 4,46a,A 90,78 2,23b,D
para o efeito antioxidante, tais como compostos fenlicos, Alface 108,72 2,34c,B 91,22 0,91d,D
carotenoides e a prpria ao da vitamina C. Almeiro 92,15 1,09e,C 81,04 3,64f,E
Considerando-se o conjunto dos resultados, todas as Os valores representam mdia desvio padro obtidos por meio de trs determinaes
de compostos fenlicos totais; valores com letras minsculas diferentes na mesma linha
hortalias estudadas apresentaram ao antioxidante, entretanto indicam que houve diferena estatisticamente significativa entre as mdias ao nvel de
a intensidade dessa ao foi diferenciada, tanto entre as espcies 5%; e valores com letras maisculas diferentes na mesma coluna indicam que houve
de hortalias como em funo do tipo de cultivo. diferena estatisticamente significativa entre as mdias ao nvel de 5%.

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Arbos et al.

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