QUESTION�RIO � MICROBIOLOGIA

2) O que acoplamento energ�tico e por que ele � importante para a sobreviv�ncia da

c�lula? �
� a inerfus�o das energias. Ex. Rea��es anab�licas s�o acopladas � quebra do ATP, e
as rea��es catab�licas s�o acopladas � s�ntese do ATP. Quando mol�culas complexas
s�o quebradas (catabolismo), parte da energia � transferida e captada no ATP, e o
restante � liberado como calor. Quando mol�culas simples s�o combinadas para formar
mol�culas complexas (anabolismo), o ATP fornece a energia para a s�ntese, e outra
vez parte da energia � liberada como calor. O acoplamento � importante para a
gera��o da energia para fun��es vitais da c�lula. Ex. respira��o celular.
�

3) Diferencie fosforila��o em n�vel de substrato, fosforila��o oxidativa e

fotofosforila��o.
Fosforila��o no n�vel do substrato: � aquela onde o ADP � fosforilado para formar
ATP em rea��es que n�o envolvem oxida��o-redu��o, como ocorre no ciclo de Krebs,
quando o succinil-CoA vira succinato atrav�s da a��o da succinil-CoA sintetase
Fosforila��o oxidativa: � aquela que ocorre na cadeia respirat�ria e � baseada na
forma��o de um gradiente eletroqu�mico (gradiente de H+ ) entre a matriz
mitocondrial e o espa�o intermembranas. O gradiente � formado pela energia liberada
durante rea��es de oxidoredu��o que levam � oxida��o do NADH e do FADH2 nos
complexos I e II, respectivamente, e por transfer�ncias subsequentes dos el�trons
para os complexos III e IV. A volta dos H+ para a matriz mitocondrial ocorre
atrav�s do complexo V, que aproveita a energia estocada em forma de um potencial
eletroqu�mico para sintetizar ATP a partir de ADP + Pi (ou seja, para fosforilar o
ADP)
Fotofosforila��o: processo de s�ntese de�ATP�a partir de�ADP�+�fosfato�levado a
cabo pelas�ATP sintases�da membrana do�tilacoide, nos�cloroplastos�das�c�lulas
vegetais. � um processo da�fase luminosa�da�fotoss�ntese�no qual se utiliza a
energia libertada no transporte de�el�trons�para bombear pr�tons desde o estroma
para o interior da tilacoide com o fim de criar um�gradiente electroqu�mico, o
qual, ao dissipar-se devido � sa�da de pr�tons do tilacoide para o estroma atrav�s
das ATP-sintases, acopla esta energia �fosforila��o�do ADP para formar ATP.

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4) Como uma c�lula utiliza a fermenta��o para regenerar o NAD? �
O NAD � regenerado utilizando um aceptor end�geno (geralmente compostos org�nicos)
produzido pela pr�pria c�lula.
�

5) Como uma c�lula utiliza a respira��o para regenerar o NAD?

Em condi��es aer�bias essa reoxida��o se d� com a transfer�ncia de el�trons da
coenzima para o oxig�nio, atrav�s dos complexos enzim�ticos da cadeia de transporte
de el�trons, caracterizando a fosforila��o oxidativa. O aceptor final de el�trons �
externo. Diferentemente da fermenta��o, al�m da regenera��o de NAD, h� produ��o de
for�a pr�ton-motiva para a s�ntese adicional de ATP.
�

6) Por que a respira��o � mais eficiente que a fermenta��o na extra��o de energia

qu�mica da glicose? �
A respira��o e a fermenta��o s�o formas de desassimila��o. Na respira��o, o
fornecimento cont�nuo de oxig�nio ir� decompor o composto org�nico at� g�s
carb�nico e �gua. Na fermenta��o essa decomposi��o � parcial, com a produ��o no
final de uma determinada subst�ncia (�lcool, �cido, etc.), g�s carb�nico, etc. A
energia liberada na respira��o � superior � da fermenta��o porque na respira��o
temos uma decomposi��o total e na fermenta��o uma decomposi��o parcial.
�

15) O que s�o operons?

Dois ou mais genes que codificam produtos com fun��es relacionadas, ocupam posi��es
adjacentes e est�o sob controle de uma �nica regi�o reguladora.
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16) O que � regi�o reguladora, codificadora e terminadora?

Regi�o reguladora ou promotora: regi�o situada antes da regi�o codificadora. � o
sitio do DNA onde se liga a enzima RNA-polimerase, a enzima respons�vel pela
transcri��o do gene.
Regi�o codificadora: regi�o a qual a enzima polimerase ir� ler o DNA e transcrever
em RNA.
Regi�o terminadora: � a seq��ncia nucleot�dica que determina o desligamento da RNA-
polimerase.
�

17) Suponha que voc� utiliza tr�s frascos de meio de cultura para cultivar a
bact�ria Escherichia coli. O frasco A contem apenas glicose. O frasco B cont�m
glicose e lactose. O frasco C cont�m apenas lactose. Ap�s algumas horas de
incuba��o, voc� testa os frascos para a presen�a da enzima �-galactosidase,
codificada pelo operon Lac. Que frasco(s) apresentara(ao) essa enzima em grande
quantidade? Justifique.
Muita glicose diminui a quantidade de AMPc dentro da c�lula, diminui��o vai
interferir na a��o da prote�na catabolica ativadora (cap), o cap se liga ao operon
e auxilia na produ��o quando tem pouca glicose. O operon precisa da liga��o do AMPc
para estar ativado, ent�o n�o tem produ��o de enzima.
Muita lactose tem ativa��o do operon lac, um dos produtos do catabolismo da lactose
� o alolactose, que vai se ligar a um repressor que fica ligado ao operon e vai
inativar esse repressor deixando o operon livre para que ocorra a transcri��o.
Os frascos B e C apresentar�o grande quantidade dessa enzima. A �-galactosidase �
dita uma enzima indut�vel, ou seja, sua express�o varia com as necessidades
celulares: caso a bact�ria esteja crescendo em meio rico em lactose, sua express�o
ser� alta e caso a fonte de carbono seja outro carboidrato, sua express�o ser�
reduzida.

18) Qual e a fun��o do operon trp (triptofano)? Como ocorre a regula��o da

express�o g�nica nesse operon?
A fun��o do operon trp � o controle da s�ntese das enzimas sintetizadoras de
triptofano. O processo � alcan�ado pela ativa��o de um repressor sol�vel que, na
aus�ncia de triptofano, � inativo. A ativa��o � feita, compreensivelmente, pelo
pr�prio triptofano que assim, estando presente, bloqueia sua pr�pria s�ntese
end�gena.

21) Descreva as principais caracter�sticas dos fungos.

- Se desenvolvem, principalmente, em locais com grande presen�a de material
org�nico e umidade. A aus�ncia de luminosidade tamb�m facilita o desenvolvimento
dos fungos.
�- Podem ser pluricelulares (compostos por mais de uma c�lula) ou unicelulares
(composto por apenas uma c�lula). Os fungos pluricelulares, que s�o a maioria,
possuem o talo que � denominado mic�lio. Este mic�lio � composto por filamentos
(hifas).
�- Os fungos n�o possuem clorofila.
�- A nutri��o dos fungos � heterotr�fica, ou seja, os nutrientes que necessitam
para viver s�o obtidos atrav�s de mat�ria org�nica. Por�m, os fungos n�o ingerem as
mat�rias org�nicas, mas obt�m seus nutrientes atrav�s de um processo de absor��o. A
digest�o ocorre fora do corpo, ou seja, eles liberam enzimas que digerem a mat�ria
org�nica e s� depois deste processo os nutrientes s�o absorvidos.
�- Podem se reproduzir de forma sexuada ou assexuada.
�- A reprodu��o atrav�s de esporos tamb�m � muito comum em v�rias esp�cies de
fungos.
�- Possuem a capacidade de armazenar material reserva que, assim como muitos
animais, � o glicog�nio.
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22) Explique as diferen�as estruturais entre fungos filamentosos e leveduras. ��

As�leveduras�s�o�fungos�unicelulares. Devido a esta caracter�stica elas crescem e
se reproduzem mais rapidamente. Esta categoria de fungos n�o � vis�vel a olho nu.
Os fungos pluricelulares possuem uma caracter�stica morfol�gica que os diferencia
dos demais seres vivos. Seu corpo � constitu�do por dois componentes: o corpo de
frutifica��o�� respons�vel pela reprodu��o do fungo, por meio de c�lulas
reprodutoras especiais, os�esporos,�e o�mic�lio�� constitu�do por uma trama de
filamentos, onde cada filamento � chamado de hifa. Na maioria dos fungos, a parede
celular � complexa e constitu�da de�quitina. O carboidrato de reserva energ�tica da
maioria dos fungos � o�glicog�nio, do mesmo modo que acontece com os animais.

23) Explique os principais tipos de micoses causadas por fungos.

As micoses s�o classificadas em cinco grupos de acordo com o grau de envolvimento
no tecido e o modo de entrada no hospedeiro: sist�mica, subcut�nea, cut�nea,
superficial ou oportunista.
Micoses sist�micas: n�o s�o restritas a nenhuma regi�o particular, mas podem afetar
v�rios tecidos e �rg�os. As micoses sist�micas normalmente s�o causadas por fungos
que vivem no solo. A inala��o dos esporos � a rota da transmiss�o; essas infec��es
em geral se iniciam nos pulm�es e se difundem para outros tecidos do corpo.
Micoses subcut�neas s�o infec��es f�ngicas localizadas abaixo da pele, envolvendo
camadas mais profundas da derme e do tecido subcut�neo, causadas por fungos
saprof�ticos que vivem no solo e na vegeta��o. A infec��o ocorre por implanta��o
direta dos esporos ou de fragmentos de mic�lio em uma perfura��o na pele.
Micoses cut�neas: infec��es que afetam apenas a epiderme, o cabelo e as unhas
causadas por fungos dermat�fitos. Os dermat�fitos secretam queratinase (degrada a
queratina). A infec��o � transmitida por contato direto ou contato com fios e
c�lulas epid�rmicas infectadas.
Micoses superficiais: causada por fungos localizados ao longo dos fios de cabelos e
em c�lulas epid�rmicas superficiais que se desenvolvem apenas na parte mais
superficial do estrato c�rneo e n�o costumam induzir uma resposta inflamat�ria no
hospedeiro.
Micoses oportunistas: s�o infec��es cosmopolita causada por fungos de baixa
virul�ncia mas ao encontrar condi��es favor�veis como dist�rbios do sistema
imunol�gico desenvolvem poder patog�nico invadindo os tecidos.

24) Explique o processo de reprodu��o dos fungos por esporos assexuais.

Os esporos assexuais s�o formados pelas hifas de um organismo. Quando esses esporos
germinam, tornam-se organismos geneticamente id�nticos ao parental.. Os esporos
assexuais s�o produzidos pelos fungos por mitose e subsequente divis�o celular; n�o
h� fus�o de n�cleos de c�lulas. Dois tipos de esporos assexuais s�o produzidos
pelos fungos. Um deles � o conidi�sporo ou con�dio, um esporo unicelular ou
multicelular que n�o � armazenado em uma bolsa. Os con�dios s�o produzidos em
cadeias na extremidade do conidi�foro. Outro tipo de esporo assexual � o
esporangi�sporo, formado no interior de um espor�ngio, ou bolsa, na extremidade de
uma hifa a�rea denominada esporangi�foro. O espor�ngio pode conter centenas de
esporangi�sporos. Esses esporos s�o produzidos por Rhizopus.
�

25) Explique o processo de reprodu��o dos fungos por esporos sexuais.

Os esporos sexuais resultam da fus�o de n�cleos de duas linhagens opostas de
cruzamento de uma mesma esp�cie do fungo. Os organismos que crescem a partir de
esporos sexuais apresentar�o caracter�sticas de ambas as linhagens parentais. Um
esporo sexual f�ngico resulta da reprodu��o sexuada, consistindo de tr�s etapas: 1.
Plasmogamia. Um n�cleo haploide de uma c�lula doadora (+) penetra no citoplasma da
c�lula receptora (�). 2. Cariogamia. Os n�cleos (+) e (�) se fundem para formar um
n�cleo zigoto diploide. 3. Meiose. O n�cleo diploide origina um n�cleo haploide,
esporos sexuais, dos quais alguns podem ser recombinantes gen�ticos.
�

26) Descreva as principais caracter�sticas dos v�rus.

Cont�m um �nico tipo de �cido nucleico, DNA ou RNA.
Cont�m um inv�lucro proteico (�s vezes recoberto por um envelope de lip�deos,
prote�nas e carboidratos) que envolve o �cido nucleico.
Multiplicam-se no interior de c�lulas vivas utilizando a maquinaria de s�ntese
celular.
Induzem a s�ntese de estruturas especializadas na transfer�ncia do �cido nucleico
viral para outras c�lulas.
Os v�rus possuem poucas ou mesmo nenhuma enzima pr�pria para seu metabolismo
�

27) Explique as principais estruturas que comp�e os v�rus.

�cido nucleico: os v�rus podem possuir tanto DNA como RNA, mas nunca ambos. O �cido
nucleico dos v�rus pode ser de fita simples ou dupla. Assim, existem v�rus com DNA
de fita dupla, DNA de fita simples, RNA de fita dupla e RNA de fita simples. O
�cido nucleico pode ser linear ou circular.
Caps�deo: O �cido nucleico dos v�rus � protegido por um envolt�rio proteico chamado
de caps�deo A estrutura do caps�deo � determinada basicamente pelo genoma viral e
constitui a maior parte da massa viral. Cada caps�deo � composto por subunidades
proteicas chamadas de caps�meros (de um tipo ou de v�rios).
Envelope: cobre o caps�deo, normalmente consiste em uma combina��o de lip�deos,
prote�nas e carboidratos. Dependendo do v�rus, os envelopes podem ou n�o apresentar
esp�culas, constitu�das por complexos carboidrato-prote�na que se projetam da
superf�cie do envelope.
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28) Explique os principais tipos de cultivos de v�rus. �

Em animais vivos: A inocula��o de animais (camundongos, coelhos e cobaias) pode ser
utilizada como um procedimento diagn�stico para a identifica��o e o isolamento de
um v�rus a partir de amostras cl�nicas. Ap�s ser inoculado com o esp�cime cl�nico,
o animal � observado quanto ao aparecimento de sinais de doen�a ou � sacrificado
para que seus tecidos possam ser analisados � procura de part�culas virais.
Em ovos embrionados: Uma perfura��o � feita na casca do ovo embrionado, e uma
suspens�o viral ou uma suspens�o de tecido suspeito de conter v�rus � injetada no
fluido presente no interior do ovo. O ovo cont�m v�rias membranas, e os v�rus
tamb�m podem ser injetados pr�ximos da membrana mais adequada � sua multiplica��o.
A multiplica��o viral se manifesta pela morte do embri�o, por danos �s c�lulas
embrion�rias ou pela forma��o de les�es t�picas nas membranas.
Em culturas de c�lulas: A obten��o de uma linhagem celular � iniciada com o
tratamento enzim�tico de fragmentos do tecido animal para separa��o das c�lulas. As
c�lulas isoladas s�o suspensas em uma solu��o com press�o osm�tica, nutrientes e
fatores de crescimento necess�rios ao seu desenvolvimento. As c�lulas normais
tendem a aderir ao recipiente de pl�stico ou vidro e se reproduzem formando uma
monocamada. A infec��o viral dessa monocamada muitas vezes causa a sua destrui��o �
medida que os v�rus se multiplicam. Essa destrui��o celular � denominada efeito
citop�tico (ECP). O ECP pode ser detectado e quantificado da mesma forma que as
placas de lise produzidas por bacteri�fagos em monocamadas de bact�ria, sendo
informado como UFP/mL. Os v�rus podem se multiplicar em c�lulas de linhagem
prim�ria ou cont�nua. As c�lulas de linhagem prim�ria, derivadas de fragmentos de
tecidos, tendem a morrer ap�s poucas gera��es. As c�lulas de linhagem cont�nua s�o
utilizadas na multiplica��o rotineira de v�rus em laborat�rio. S�o c�lulas
transformadas (ou cancer�genas) aquelas que podem ser mantidas por um n�mero
indefinido de gera��es, sendo �s vezes chamadas de linhagens imortais.
�

29) Explique o ciclo l�tico.

O ciclo l�tico termina com a lise e a morte da c�lula hospedeira. 1. O fago adsorve
a c�lula hospedeira e injeta seu DNA. 2. O DNA do fago circulariza e entra em ciclo
l�tico. 3. O DNA e as prote�nas dos novos fagos s�o sintetizados e montados,
formando novos v�rions. 4. Lise celular e libera��o de novos v�rions.
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30) Explique o ciclo lisog�nico

O ciclo lisog�nico a c�lula hospedeira permanece viva. 1. O fago adsorve a c�lula
hospedeira e injeta seu DNA. 2. O DNA do fago circulariza e entra em ciclo
lisog�nico. 3. Por um processo de recombina��o, o DNA do fago se integra ao
cromossomo bacteriano e se torna um profago. 4. A bact�ria lisog�nica se reproduz
normalmente. Ocasionalmente, o profago pode ser removido do cromossomo bacteriano
por outro evento de recombina��o, iniciando um ciclo l�tico.
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31) Cite os principais v�rus de DNA oncog�nicos.

Os v�rus oncog�nicos fazem parte de in�meras fam�lias de v�rus com genoma DNA.
Essas fam�lias incluem Adenoviridae, Herpesviridae, Poxviridae, Papovaviridae e
Hepadnaviridae. Dentre esses, o papilomav�rus (fam�lia papovav�rus) causa c�ncer
uterino (cervical), o v�rus Epstein-Baar (EB) est� associado ao linfoma de Burkitt
e o v�rus da hepatite B est� associado ao c�ncer de f�gado.
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32) Cite os principais v�rus de RNA oncog�nicos.

Entre os v�rus de RNA, somente os oncov�rus da fam�lia Retroviridae causam c�ncer.
Os v�rus da leucemia de c�lulas T s�o retrov�rus que causam linfoma e leucemia de
c�lulas T em seres humanos adultos; os v�rus do sarcoma felino, avi�rio e murino,
bem como os v�rus de tumor de mama em camundongos, tamb�m s�o retrov�rus e o v�rus
da leucemia felina, causa leucemia em gatos e � transmiss�vel entre eles.
�

33) O que s�o vir�ides?

S�o formas de vida que consistem apenas em fragmentos de RNA infecciosos, n�o
envoltos por c�psula proteica. Essa mol�cula fica sempre dentro de c�lulas
hospedeiras e tem a capacidade de autoduplica��o, mas n�o comanda a s�ntese de
prote�nas. Os viroides passam de uma c�lula para outra somente quando h� rompimento
das membranas das c�lulas e contato citoplasm�tico direto entre elas. Provocam
desenvolvimento anormal de plantas, podendo lev�-las � morte
�

34) O que s�o pr�ons?

Os pr�ons s�o prote�nas infecciosas que provocam doen�as neurodegenerativas, como
encefalopatia espongiforme bovina, e v�rias doen�as na esp�cie humana, como a
doen�a de Creutzfeldt-Jakob (tipo de encefalopatia espongiforme humana). O pr�on
foi descrito pela primeira vez em 1982 pelo bioqu�mico Staniey Prusiner. A forma
normal dessas prote�nas ocorre na membrana plasm�tica de c�lulas nervosas. Essas
prote�nas s�o sintetizadas pela pr�pria c�lula, mas sob certas circunst�ncias podem
sofrer muta��es na forma, dando origem a prote�nas anormais, os pr�ons, que causam
doen�as. Uma vez formados, esses pr�ons t�m a capacidade de induzir as prote�nas
normais a mudarem de forma. Com isso, h� aumento do n�mero de pr�ons. Assim, os
pr�ons aparentemente t�m capacidade de "reprodu��o". O aumento num�rico, no
entanto, ocorre em fun��o da altera��o na forma de outras prote�nas normais j�
prontas na c�lula.

35) Defina antibi�tico

Antibi�tico � uma subst�ncia produzida por um micro-organismo que, em pequenas
quantidades, pode inibir outros micro-organismos.
�

36) Explique os principais mecanismos de a��o dos antimicrobianos, bem como o alvo
e a droga envolvida.
Inibi��o da s�ntese de parede celular: enfraquecem a parede celular da c�lula,
provocando lise celular. Baixa toxicidade, pois as c�lulas do humanas n�o possuem
parede celular. Ex: penicilinas, cefalosporinas, bacitracina, vancomicina
Inibi��o da s�ntese proteica: afetam os ribossomos das c�lulas, impedindo a s�ntese
de novas prote�nas. Possuem toxicidade seletiva, dependente de quais ribossomos
atacam. Ex: cloranfenicol, eritromicina, tetraciclinas, estreptomicina
Inibi��o da replica��o de �cidos nucleicos e da transcri��o: interferem nos
processos de replica��o de DNA e transcri��o em micro-organismos. Algumas drogas
com essa atividade apresentam utilidade limitada, uma vez que tamb�m interferem no
metabolismo de DNA e RNA de mam�feros. Ex: quinolonas, rifampina
Dano � membrana plasm�tica: induzem mudan�as na permeabilidade da membrana
plasm�tica, resultando na perda de metab�litos importantes pela c�lula microbiana.
Ex: polimixina B, anfotericina B, o miconazol e o cetoconazol
Inibi��o da s�ntese de metab�litos essenciais:funcionam como antimetab�litos,
fazendo a inibi��o competitiva da atividade enzim�tica dos microrganismos. Ex:
sulfanilamida, trimetoprim
�

37) Explique os principais mecanismos de resist�ncia microbiana

Destrui��o ou inativa��o enzim�tica da droga: afeta principalmente antibi�ticos que
s�o produtos naturais, como as penicilinas e as cefalosporinas. Enzimas modificam a
estrutura da droga, inativando-a.
Preven��o da entrada no s�tio-alvo dentro do micr�bio: ocorre modifica��o da
abertura das porinas de forma que os antibi�ticos s�o incapazes de entrar no espa�o
periplasm�tico
Altera��es no s�tio-alvo da droga: modifica��es no s�tio que neutralizam os efeitos
dos antibi�ticos sem que ocorram altera��es significativas nas fun��es celulares
Efluxo r�pido (eje��o) do antibi�tico: bombas que expelem os antibi�ticos,
impedindo que alcancem uma concentra��o efetiva. As bact�rias normalmente
apresentam muitas dessas bombas de efluxo para eliminar subst�ncias t�xicas.