1 Laura Caroline Cavalheiro – ATM 2025/B

Duplicação do DNA
• Proteínas SSB: Proteínas que estabilizam a fita simples
• Primase: primer
• Helicase: Rompe as pontes de hidrogênio (É UM TIPO DE ENDONUCLEASE).
• Ligase: Une os fragmentos
• Topoisomerases: Catalisam a quebra e a religação entre fitas (alívio de torção), onde se liga nos
nucleotídeos, quebrando a ligação fosfodiéster do nucleotídeo, aliviando a torção e não super
enrolando.
Cada fita será usada como molde para síntese de uma nova fita. → Duplicação semiconservativa
Princípio da desnaturação do DNA = separação de dupla fita através da ruptura das pontes de
hidrogênio. Uma molécula anteriormente desnaturada pode voltar a sua condição original com algum
agente que constitui as pontes, ou seja, a renaturação, que retorna a molécula ao seu estado original.

Desnaturação/ dissociação in vivo = Helicase Desnaturação/ dissociação in vitro =

que rompe as pontes de hidrogênio. Normalmente usado extremos de temperatura
ou PH extremamente alcalino, porém o ph
interfere na função da enzima, então não é tão
usado (o PH ácido acaba degradando). Extremo
de temperatura (aumenta) – ENTRE 94 E 96
GRAUS.
Renaturação / hibridização in vitro = Baixa a temperatura, variando entre 50 e 60 GRAUS.

DNA POLIMERASE

Catalizam as ligações de um nucleotídeo e corrigem os erros do DNA, removendo os nucleotídeos mal

pareados. Só funciona no sentido 5’ – 3’.
• Dna polimerase dna dependente → Envolvida em replicação, reparo e recombinação do DNA.
• Cofatores de dna polimerase normalmente é o magnésio (Mg 2+), ou seja, precisa de cátions
bivalentes.
• Necessidade de 3’ OH livre fornecido pelo iniciador (primer).
• Acrescimento de nucleotídeos a fita recém sintetizada obedecendo o pareamento de bases
com a fita molde.
• Atividade de revisão e remoção de nucleotídeos que podem ter se duplicado de maneira
incorreta – ATIVIDADE EXONUCLEASE (em ambos os sentidos).
• Dna polimerase alfa e delta (eucariotos)
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Necessidade para polimerase conseguir duplicar:

• Todos os 4 precursores ativados
• Íon MG 2+
• Cadeia primer com 3’-OH livre
• Molde de DNA

Dna bacteriano (procariotos): Circular, somente uma origem de replicação

Dna eucariotos: Linear, múltiplas origens de replicação, unidas pela ligase.
Uma das fitas é duplicada de maneira descontínua e a outra é de maneira contínua, todas no sentido 5’
– 3’

ENZIMA PRIMASE

Sintetiza primer de RNA , tipo de dna polimerase lento e sujeito a erros, já que será tirado pelo dna
polimerase na hora de corrigir. Depois de fornecer a hidroxila, a polimerase sintetiza. É necessário
colocar devido ao gasto energético da célula.
Fita líder ou contínua: Age somente uma vez Fita retardada ou descontínua: Age várias
para a cópia vezes para a cópia

Os primers de rna são removidos devido a polimerase (atividade exonuclease) → polimerase coloca os
nucleotídeos para substituir os removidos → os fragmentos de okasaki são ligados pelo dna ligase,
catalisando a ligação fosfodiéster entre um nucleotídeo e outro. (dna ligase somente faz a ligação).

Duplicação dos telômeros

Enzimas telomerases: Enzimas do tipo transcriptase reversa → produção de DNA a partir de um

molde de RNA. Logo, a telomerase contém na sua estrutura uma pequena sequência de RNA para
poder parear com o DNA. – sequência rica em adenina e citosina.
A telomerase vai parear através da fita contínua (maior) → alonga a fita contínua.
Logo, as outras duplicam a fita descontínua
Disceratose congênita = displasia ectodérmica hereditária – associado a telomerase.
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MUTAÇÃO E REPARO DO DNA

Todos os organismos sofrem um certo número de mutações.

Mutações espontâneas sempre ocorrem em nível basal.
Mutação induzida → sempre em contato com agentes mutagênicos.
Principal agente mutagênico = SOL.
Mutações espontâneas normalmente dados por mudanças tautoméricas, induzindo a pareamentos
diferentes.
Lesões hidrolíticas: ocorrem pela hidrólise da água

Mutágenos físicos: Radiações ionizantes - Mutágenos químicos: Reagem com bases

quebram o dna, gerando aberrações gerando mudanças tautoméricas (ex:
cromossômicas. E não ionizantes. agrotóxicos).

Análogos de base: Pode parear com as bases, induz ao pareamento incorreto → pode trocar as
bases.
Sítio apurínico = ausência de base púrica