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5. Na célula eucarióta identifica vários tipos de RNAs. Qual destas moléculas possui o
terminal 3’poli A (nucleótidos de adenina no terminal 3’)?
a. RNA ribossómico
b. RNA transferência
c. RNA mensageiro
d. RNA mitocondrial
10. Os “spliceossomas”
a. Atuam na regulação pós transcrição, através da excisão dos intrões do pré-
mRNA
b. Atuam na regulação da transcrição, através da ligação de sequências
reguladoras do DNA
c. Atuam na exportação das moléculas dos RNAs não codificantes, através do
poro nuclear
d. Atuam na distribuição das moleclas de RNAs no citosol, através de
modificações pós-tradução
14. Para sintetizar o cDNA (DNA complementar) a partir do RNA mensageito, qual das
enzimas escolhe?
a. DNA ligase
b. Transcriptase reversa
c. Telomerase
d. DNA polimerase
16. Qual dos processos referidos a seguir não é utilizado para inserir DNA (DNA
recombinante) em células?
a. O recurso à eletroporação (ou eletrotransformação)
b. O recurso à hibridação entre moléculas de DNA
c. O recurso à alteração da permeabilização da membrana plasmática
d. O recurso à microinjeção
3. Funções do genoma:
a. Envolvem as designadas proteínas de manutenção dos cromossomas (SMC) mas
apenas nos eucariotas, estando (largamente ou vagamente?) ausentes no caso dos
procariotas
b. São independentes da arquitetura tridimensional dos cromossomas no núcleo da
célula
c. Requerem transformações reversíveis na estrutura da cromatina ao longo do ciclo
celular, nomeadamente a compactação e a condensação dos cromossomas
durante a interfase
d. Requerem a ação de diversas proteínas, nomeadamente os complexos proteicos
condensina e da coesina, essenciais à (não me lembro) e segregação do genoma
em todos os organismos
e. Envolvem a ação da coesina e da condensina, proteínas cuja função é manter a
coesão dos cromatídeos durante a (não me lebro) e a segregação dos
cromossomas na interfase, respetivamente
9. Relativamente:
a. À relação entre o genoma, o trancriptoma e o proteoma, e devido aos milhões de
genes contidos no genoma humano, pode afirmar-se o princípio de um gene, um
RNA, uma proteína
b. Ao designado “DNA lixo”, ou DNA que não codifica para as proteínas, é constituído
por sequências e estruturas aberrantes de DNA sem qualquer função biológica
conhecida
c. Ao genoma humano, apenas uma pequena percentagem é transcrito em proteínas
(aproximadamente 2%) e outra ainda em RNAs que não o mRNA ou o tRNA
d. Ao genoma humano, cerca de 90% codifica para proteínas ainda que estas possam
sofrer modificações químicas críticas à sua atividade biológica
e. Ao designado RNA não codificante (ncRNA) pode resultar da transcrição do DNA
mas tem apenas um pequeno papel no processo de tradução
Teórico-Prático
2. No laboratório, quer fazer o estudo comparativo entre os genes que estão a ser
expressos numa amostra de pele normal e numa amostra de melanoma. Para isso,
adquiriu a plataforma de “biochip/microarray de DNA”
2.1. A placa de “biochip/microarrays de DNA” contém sondas que são constituídas por:
a. Moléculas de RNA marcadas com fluoróforo
b. Sequência nucleotídica com cerca de 1000 nucleótidos e que emitem
fluorescência
c. Fragmentos de DNA com cerca de 15 nucleótidos e cuja sequência de
nucleótidos é conhecida
d. Fragmentos de DNA com cerca de 100 nucleótidos que emitem
fluorescência sob a ação de radiação laser
2.2. O padrão de expressão genética das células é determinado após adição do cDNA
de ambas as amostras à placa de “biochip”, incubação e registo da emissão de
fluorescência. Nesta etapa ocorre:
a. A reação de hibridação entre os cDNAs das amostras e as sondas do
biochip marcadas previamente com fluoróforos de cores diferentes
b. A marcação das moléculas de cDNA de ambas as amostras e a hibridação
com as sondas do biochip marcadas com fluoróforo de cor diferente
c. A reação de hibridação dos cDNAs das amostras, marcados previamente
com fluoróforos de cores diferentes, com as sondas do biochip
d. A hibridação entre os cDNAs de ambas as amostras, marcadas previamente
com fluoróforos de cores diferentes, e ligação por complementaridade
com as sondas do biochip
3. No laboratório, quer produzir a proteína “insulina recombinante” e irá utilizar a célula
hospedeira procariota E. coli. Para isto, obteve células do pâncreas e dessas células é
necessário:
a. Isolar o segmento de DNA cromossómico que contem o gene da insulina
b. Isolar o extrato nuclear que contem o pré-mRNA da insulina
c. Isolar as moléculas de RNA do citosol das células
d. Isolar as moléculas de cDNA do núcleo das células
4. Para sintetizar eritropoietina “in vitro”, começa por fazer a transfecção de células
hospedeiras com o gene da eritropoietina inserido no gene LacZ do vetor. A seguir,
coloca as células em meio de cultura para amplificação.
a. Nesse meio de cultura contendo antibiótico e o substrato X-gal, terá que
selecionar a colónia de células de cor azul
b. Nesse meio de cultura contendo antibiótico e o substrato X-gal, terá que
selecionar a colónia de células de cor branca
c. Nesse meio de cultura contendo antibiótico e o substrato X-gal, recolhe a
eritropoietina produzida pelo clone de células de cor azul
d. Nesse meio de cultura contendo antibiótico e o substrato X-gal, recolhe a beta
galactosidase produzida pelo clone de células de cor branca e que servirá para a
síntese de eritropoietina
5. Está no laboratório de biologia molecular e pretende clivar uma molécula de DNA para
construir um mapa de restrição. Para o efeito usa uma enzima de restrição que cliva o
ácido nucleico em quadro locais.
5.2. Supondo que dois dos fragmentos obtidos após a digestão têm o mesmo peso
molecular, quantas bandas espera obter após a sua separação por eletroforese em
gel de agarose?
a. 3
b. 4
c. 5
d. 6
e. 7
Técnicas
A probe/sonda é uma sequência de DNA, usada em: Southern blotting Northern blotting
É uma técnica de hibridação DNA-DNA Southern blotting Northern blotting
Na membrana encontra-se imobilizada uma amostra de RNA Southern blotting Northern blotting
A hibridação pode ser detetada por autoradiografia Southern blotting Northern blotting
A eletroforese é um dos passos iniciais da técnica de : Southern blotting Northern blotting
Permite detetar a transcrição de um gene Southern blotting Northern blotting
7.3. Indique qual a molécula habitualmente usada para identificar a pegada de DNA e
refira sucintamente o seu mecanismo de ação.