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Exame de Biologia Molecular 2018/2019

Grupo I – escolha múltipla


1. No DNA cromossómico, a sequência nucleotídica de início da transcrição de um gene,
designa-se por:
a. Origem de replicação
b. Região reguladora
c. Região promotora
d. Região codificante

2. Relativamente à transcrição genética em células procarióticas e em eucarióticas, qual


dos processos apresenta maior semelhança entre os dois tipos de células?
a. Regulação no início da transcrição
b. Regulação no processamento do RNA
c. Excisão dos intrões
d. Processamento das moléculas de RNAs

3. Na célula eucariótica, qual das enzimas atua na transcrição do DNA em RNA


mensageiro primário (pre-mRNA)?
a. RNA Polimerase I
b. RNA Polimerase II
c. RNA Polimerase III
d. DNA Polimerase

4. Na sequência TATA box do promotor de um gene ligam-se:


a. As enzimas de replicação do DNA
b. Os primers ou iniciadores
c. Os fatores gerais da transcrição
d. As enzimas de reorganização da cromatina

5. Na célula eucarióta identifica vários tipos de RNAs. Qual destas moléculas possui o
terminal 3’poli A (nucleótidos de adenina no terminal 3’)?
a. RNA ribossómico
b. RNA transferência
c. RNA mensageiro
d. RNA mitocondrial

6. Na transcrição genética através do sistema do operão (ex. operão da lactose e do


triptofano)
a. A transcrição ocorre sem a participação de uma região promotora
b. A transcrição não envolve a participação de proteínas reguladoras
c. Vários genes são transcritos através do “splicing” alternativo
d. Vários genes são transcritos através de um promotor
7. Na referência a uma patologia genética, é indicada a localização do gene no
cromossoma humano, por exemplo, locus: 11p15. Esta designação de locus enquadra-
se:
a. Na sequenciação do DNA no cromossoma
b. Na determinação dos genes expressos no cromossoma
c. No padrão de bandeamento do cromossoma corado
d. Na determinação do polimorfismo genético do cromossoma

8. De acordo com o sistema internacional de citogenética humana: a nomenclatura: locus


7q23, significa que o gene está localizado:
a. No braço curto do cromossoma 23
b. No braço longo do cromossoma 23
c. No braço curto do cromossoma 7
d. No braço longo do cromossoma 7

9. Nas células eucariotas do organismo humano, cinco proteínas(isoformes)produzidas


por “splicing” alternativo podem resultar:
a. De um gene com 2 exões e 2 intrões
b. De um gene com 4 exões e 3 intrões
c. De genes constitutivos com alteração em 5 nucleótidos
d. De genes com deleção de 5 exões

10. Os “spliceossomas”
a. Atuam na regulação pós transcrição, através da excisão dos intrões do pré-
mRNA
b. Atuam na regulação da transcrição, através da ligação de sequências
reguladoras do DNA
c. Atuam na exportação das moléculas dos RNAs não codificantes, através do
poro nuclear
d. Atuam na distribuição das moleclas de RNAs no citosol, através de
modificações pós-tradução

11. O desenvolvimento inicial do embrião da Drosophila é controlado a nível transcricional


a. Por genes homeóticos
b. Por genes de segmentação
c. Por moléculas de RNA mensageiro sintetizadas durante a formação do óvulo
(oogénese)
d. Por moléculas de RNAs processadas durantes as divisões nucleares
(endomitoses)

12. Durante as primeiras fases do desenvolvimento do embrião da Drossophila, forma-se o


“sincício”
a. Porque ocorre fusão de vários núcleos no processo de endomitoses
b. Porque ocorrem mitoses que não são acompanhadas por citocinese
c. Porque ocorrem citocineses em simultâneo com divisões nucleares
d. Porque ocorre o processo de “celularização” antes das divisões nucleares do
óvulo fertilizado
13. Se pretender clonar um fragmento de DNA de grandes dimensões (600kb) que tipo de
vector escolhe
a. Plasmídeo
b. Fago
c. Cosmídeo
d. Cromossoma artificial

14. Para sintetizar o cDNA (DNA complementar) a partir do RNA mensageito, qual das
enzimas escolhe?
a. DNA ligase
b. Transcriptase reversa
c. Telomerase
d. DNA polimerase

15. No laboratório, pretende comparar o padrão de expressão genética dos linfócitos em


casos de leucemia. Para isso, faz a colheita do sangue, isola os linfócitos e opta pelo
método:
a. De Southern blot
b. De Northern blot
c. De microarrays de DNA
d. De clonagem de expressão

16. Qual dos processos referidos a seguir não é utilizado para inserir DNA (DNA
recombinante) em células?
a. O recurso à eletroporação (ou eletrotransformação)
b. O recurso à hibridação entre moléculas de DNA
c. O recurso à alteração da permeabilização da membrana plasmática
d. O recurso à microinjeção

17. Na síntese de proteínas pela tecnologia do DNA recombinante, usa um vetor de


expressão. Em relação ao vetor de clonagem, o vetor de expressão possui
adicionalmente:
a. Gene de resistência, origem de replicação e local de clonagem
b. Região promotora, sequência de ligação aos ribossomas e codão de
terminação
c. Várias origens de replicação, um gene repórter e um gene de resistência a
antibiótico
d. Vários locais de resistência a antibióticos, vários locais de clonagem e o gene
repórter

18. Para obtenção de uma planta transgénica, utiliza a Agrobacterium tumefaciens e


insere o gene de interesse (transgene):
a. No local de resistência do genoma da Agrobacterium
b. Na região T do plasmídeo (Ti) da Agrobacterium
c. No genoma da planta infetada pela Agrobacterium
d. Na origem de replicação do plasmídeo T da Agrobacterium
19. Na primeira etapa da preparação de um ratinho transgénico poderia optar pela
manipulação:
a. Do núcleo do óvulo antes da fertilização
b. Do núcleo da célula somática antes da reprogramação induzida pelo óvulo
c. De um dos pró-núcleos do óvulo fertilizado
d. Do óvulo com núcleo de célula somática

20. A clonagem de um organismo permite:


a. Criar modelos animais com locus genéticos especificamente modificados
b. Obter organismos mais saudáveis
c. Produzir organismos genética e fenotipicamente idênticos
d. O melhoramento animal

Grupo II – verdadeiros e falsos


( ) Os genes constitutivos são expressos em todas as células do mesmo organismo
( ) As diferentes células do organismo humano contêm diferentes genes no seu genoma
( ) Todos os genes que constituem o genoma humano são constituídos pelo mesmo número
de exões
( ) A inativação de um gene em célula estaminal embrionária no blastocisto de um ratinho, é
uma alteração que irá ser transmitida aos descendentes diretos
( ) No cromossoma artificial de levedura, utilixado como vetor de clonagem, estão inseridas
sequências de telómero e centrómero
( ) Para a construção de uma biblioteca de DNA genómico, é necessário obter um conjunto de
sondas de (não me lembro) contendo fragmentos do DNA genómico
( ) A maior parte do DNA mitocondrial é constituído por sequências não codificantes
( ) O DNA mitocondrial codifica para 3 tipos de RNAs (mensageiro, ribossómico e
transferência)
( ) Animal clonado resulta do processo de transferência nuclear de célula somática
( ) animal “knoch-out” resulta da inserção de um gene no genoma do organismo

Grupo III – escolha múltipla a descontar

1. Pode corretamente afirmar-se que:


a. Os microRNAs são pequenos RNAs não-codificantes que regulas a expressão
genética, sobretudo ao nível da pós-transcrição
b. A relação entre o tamanho do genoma de uma espécie e a respetiva complexidade
biológica é uma relação linear, quanto maior o número de genes, mais complexo o
organismo
c. A condensina atua nas “forquilhas de replicação” do DNA, quebrando as pontes de
hidrogénio e separando as duas cadeias do DNA
d. O mRNA é exportado do núcleo para o citoplasma através da difusão passiva na
membrana nuclear
e. A transcrição de genes pode ser ativada ou inibida por modificações químicas
reversíveis do gene, quer no DNA quer nas proteínas
2. As modificações epigenéticas:
a. Referem.se a alterações na expressão dos genes que envolvem a modificação
química do DNA (por exemplo metilação) e das histonas (por exemplo acetilação)
mas que não são passadas à geração seguinte e não provocam quaisquer
alterações do fenótipo
b. Envolvem modificações reversíveis no DNA e nas histonas catalisadas por enzimas
como, por exemplo, metiltransferases e acetiltransferases, com impacto na
transcrição
c. Ao contrário dos eucariotas, são relevantes nos procariotas devido à ausência de
núcleo e maior exposição do DNA a fatores ambientais
d. Ocorrem sobretudo no DNA em condições associadas a doença devido à alteração
da sequência dos pares de bases
e. É um processo bem descrito para as proteínas associadas com o DNA mas sem
qualquer significado na modificação química das bases

3. Funções do genoma:
a. Envolvem as designadas proteínas de manutenção dos cromossomas (SMC) mas
apenas nos eucariotas, estando (largamente ou vagamente?) ausentes no caso dos
procariotas
b. São independentes da arquitetura tridimensional dos cromossomas no núcleo da
célula
c. Requerem transformações reversíveis na estrutura da cromatina ao longo do ciclo
celular, nomeadamente a compactação e a condensação dos cromossomas
durante a interfase
d. Requerem a ação de diversas proteínas, nomeadamente os complexos proteicos
condensina e da coesina, essenciais à (não me lembro) e segregação do genoma
em todos os organismos
e. Envolvem a ação da coesina e da condensina, proteínas cuja função é manter a
coesão dos cromatídeos durante a (não me lebro) e a segregação dos
cromossomas na interfase, respetivamente

4. Relativamente à estrutura do DNA:


a. Quanto maior a abundância de adenina e timina mais forte a interação entre as
cadeias de DNA
b. É uma molécula neutra a ph fisiológico, não possuindo qualquer carga elétrica,
nem positiva nem negativa
c. Em cadeia, os nucleotídeos adjacentes ligam-se por ligações químicas fortes, as
ligações covalentes fosfodiéster
d. É semelhante à do RNA, diferindo apenas nas bases que os compõem
e. A complementaridade entre as bases púricas e pirimídicas resulta da interação por
pontes de hidrogénio entre adenina-citosina e timina-guanina

5. Considerando as propriedades físico-químicas dos ácidos nucleicos:


a. Os grupos polares fosfatos no exterior da molécula podem ser neutralizados por
acetilação, mecanismo que está na base das modificações epigenéticas
b. Uma vez que o RNA é constituído por uma cadeia simples e que as bases são
hidrofóbicas, não ocorrem interações complementares entre as bases de modo a
formar estruturas secundárias e terciárias
c. As ligações por pontes de hidrogénio entre as bases complementares são uma
característica fundamental da dupla hélice, contribuindo para a estabilidade do
DNA e para a especificidade da interação entre as bases
d. No arranjo do DNA em dupla hélice os grupos fosfato ionizados conferem um
caracter polar à molécula do DNA embora esta seja pouco solúvel em água
e. As ligações por pontes de hidrogénio são ligações muito fortes que se estabelecem
entre os pares de bases, evitando a hidrólise do DNA; estas pontes são apenas
quebradas por enzimas durante o processo da transcrição

6. O arranjo dos cromossomas no núcleo:


a. É um processo dinâmico e não homogéneo, formando territórios cromossomais,
em grande parte regulado por proteínas associadas aos cromossomas (proteínas
SMC) que têm um papel relevante na regulação da expressão genética
b. Leva a um arranjo topológico formado por domínios de cromatina com uma
distribuição e densidade de genes aleatórias por toda a região nuclear
c. Forma os designados territórios cromossomais, embora sem quaisquer
comunicação entre si nem qualquer relação com o processo de transcrição
d. Não tem qualquer interferência com a expressão de genes uma vez que a
expressão do genoma é exclusivamente regulado pela sequência de bases no DNA
e. É uma propriedade fundamental do genoma e, logo, estática, sendo os
cromossomas individuais visíveis durante todo o ciclo celular

7. Relativamente à conformação dos ácidos nucleicos:


a. O mRNA e o tRNA, apesar de cadeias simples, organizam-se em duplas hélices
longas de modo semelhante ao DNA
b. Nos eucariotas é possível encontrar DNA circular quer nas mitocôndrias quer no
núcleo
c. Uma regra geral é que em todos os eucariotas o DNA possui exclusivamente o
arranjo em dupla hélice
d. O RNA é uma cadeia linear curta, não possuindo qualquer outro arranjo
tridimensional estável
e. Quer em procariotas quer em eucariotas há arranjos de DNA alternativos à dupla
hélice, nomeadamente DNA quadruplex nos telómeros

8. Relativamente à síntese de DNA:


a. É iniciada nas “forquilhas de replicação” de modo bidirecional num processo que
envolve o recrutamento inicial para estas regiões dos designados “complexos de
reconhecimento de origem” (ORC)
b. As DNA polimerases catalizam o alongamento de modo bidirecional, no sentido 5’
--> 3’ e vice-versa
c. A helicase é a enzima que liga as duas cadeias de DNA após a síntese através da
formação das pontes fosfodiéster
d. Ambas as cadeiras originadas na forquilha de replicação, a “cadeia líder” (leading
strand) e a “cadeia atrasada” (lagging strand) resultam da junção de fragmentos de
Okazaki
e. Está confinada à fase S do ciclo células e a replicação ocorre de modo contínuo a
partir de uma extremidade do cromossoma

9. Relativamente:
a. À relação entre o genoma, o trancriptoma e o proteoma, e devido aos milhões de
genes contidos no genoma humano, pode afirmar-se o princípio de um gene, um
RNA, uma proteína
b. Ao designado “DNA lixo”, ou DNA que não codifica para as proteínas, é constituído
por sequências e estruturas aberrantes de DNA sem qualquer função biológica
conhecida
c. Ao genoma humano, apenas uma pequena percentagem é transcrito em proteínas
(aproximadamente 2%) e outra ainda em RNAs que não o mRNA ou o tRNA
d. Ao genoma humano, cerca de 90% codifica para proteínas ainda que estas possam
sofrer modificações químicas críticas à sua atividade biológica
e. Ao designado RNA não codificante (ncRNA) pode resultar da transcrição do DNA
mas tem apenas um pequeno papel no processo de tradução

10. O empacotamento do DNA:


a. Em nucleossomas consiste num “core” central constituído pelo DNA em dupla
hélice, revestido no exterior por proteínas designadas por histonas
b. Nas mitocôndrias, e ao contrário do núcleo, o DNA enrola-se em outras proteínas
que não as histonas, formando unidades estruturais básicas semelhantes aos
nucleossomas
c. Nos procariotas consiste no enrolamento da dupla hélice em histonas que se ligam
à parede da célula
d. Nos eucariotas dá origem à eucromatina e à heterocromatina, ambas as regiões
com idêntica densidade de genes e atividade transcricional intensa
e. Nos eucariotas consiste numa unidade básica que se repete na cromatina,
formada por nucleossomas em que o DNA se enrola em octâmeros de histonas

11. No núcleo dos eucariotas:


a. Os cromossomas são estruturas simétricas com número constante de genes
b. As extremidades dos cromossomas, designadas telómeros, consistem em regiões
codificantes com papel relevante na segregação dos cromossomas durante a
mitose
c. O empacotamento do DNA em cromatina é aleatório, dispersando-se
uniformemente por todo o núcleo sem estruturas definidas observáveis
d. Para além das histonas que desempenham um papel importante na ligação ao
DNA e nos processos de transcrição, não se conhecem quaisquer proteínas
associadas à cromatina
e. Observa-se uma hierarquia na organização e empacotamento da cromatina desde
os nucleossomas, “beads on a string”, fibras e voltas (“loops”) de maior dimensão
até aos cromossomas

12. O designado “código das histonas”:


a. É o processo pelo qual a híper-metilação da citosina leva ao aumento da expressão
de genes através do recrutamento de fatores de transcrição
b. Refere-se ao perfil da modificação química nas caudas das histonas (por exemplo
acetilação e fosforilação) que, interferindo com a compactação da cromatina,
define a acessibilidade ao DNA e, logo, regula a transcrição
c. É um processo dinâmico que afeta a ligação de chaperonas ao DNA mas que
ocorre fundamentalmente no “núcleo” proteico e não nas caudas das proteínas
d. Nomeadamente através da acetilação em resíduos de lisina implica a alteração da
carga eletrostática nas proteínas, contribuindo para um empacotamento
extremamente denso do DNA designado por “supercoilded”
e. Refere-se, em particular, à acetilação das histonas, a única modificação conhecida
com impacto na remodelação cromatina

13. Pode corretamente afirmar-se:


a. A regulação da expressão de genes ocorre fundamentalmente na exportação do
mRNA do núcleo para o citoplasma através dos poros da membrana nuclear
b. As proteínas, produtos funcionais dos genes, são em número idêntico ao número
de genes no genoma humano
c. O DNA codifica informação através da sequência dos pares de bases mas as
modificações epigenéticas regulam o fluxo da informação genética, determinando
de modo dinâmico a expressão de genes em função, por exemplo, de modificações
químicas na cromatina dependentes do estilo de vida e da dieta
d. O código genético é universal e todos os tripletos codificam para aminoácidos
e. O gene é uma sequência de nucleótidos numa posição fixa de um cromossoma ou
com existência independente no núcleo, contendo regiões codificantes e regiões
não-codificantes

14. A remodelação da cromatina:


a. Pode envolver alterações epigenéticas mas pouco extensas pois de outro modo
correr-se-ia o risco de mutações com impacto deletério na sobrevivência celular
b. Nomeadamente a condensação da cromatina é dirigida por modificações químicas
irreversíveis no DNA que são passadas à geração seguinte
c. É um processo dinâmico que envolve, por exemplo, a metilação do DNA mas sem
quaisquer consequências na regulação da expressão de genes
d. Envolve a alteração do empacotamento do DNA com as histonas de modo a
permitir a interação dos fatores de transcrição e da RNA polimerase com DNA
e. É um processo que pode ocorrer no núcleo mas de modo irrelevante ao longo do
ciclo celular pois levaria a perturbações na estabilidade do genoma

Teórico-Prático

1. O diagrama representa uma parte do cromatograma obtido na sequenciação do DNA


pelo método de Sanger (do didesoxinucleótido)

NNNN-indica o primer; está no sentido 5’  3’


1.1. Qual a sequência de nucleótidos na cadeia de DNA que foi sintetizada na reação de
sequenciação?
a. 5’ TACTCG 3’
b. 5’ ACGATC 3’
c. 5’ TGCTAG 3’
d. 5’ CGATCG 3’
1.2. Suponha que a sequência de nucleótidos na cadeia de DNA que foi sintetizada na
reação de sequenciação era a seguinte: 5’ GCTAGCTA 3’. Qual é a sequência de
nucleótidos no fragmento de DNA que tinha para analisar?
a. 3’ GACTCGAT 5’
b. 3’ CGATCGAT 5’
c. 3’ ACGATCTG 5’
d. 3’ TGCTAGAC 5’

1.3. Na sequenciação do DNA pelo método de Sanger, qual a função dos


didesoxinucleótidos adicionados ao meio de reação?
a. Atuam como primer para a DNA polimerase
b. Atuam como primer para a enzima transcriptase reversa
c. Cortam a sequência de nucleótidos em locais específicos da nova cadeia de
DNA
d. Terminam a síntese da nova cadeia de DNA por impedir a formação de ligação
fosfodiéster

2. No laboratório, quer fazer o estudo comparativo entre os genes que estão a ser
expressos numa amostra de pele normal e numa amostra de melanoma. Para isso,
adquiriu a plataforma de “biochip/microarray de DNA”
2.1. A placa de “biochip/microarrays de DNA” contém sondas que são constituídas por:
a. Moléculas de RNA marcadas com fluoróforo
b. Sequência nucleotídica com cerca de 1000 nucleótidos e que emitem
fluorescência
c. Fragmentos de DNA com cerca de 15 nucleótidos e cuja sequência de
nucleótidos é conhecida
d. Fragmentos de DNA com cerca de 100 nucleótidos que emitem
fluorescência sob a ação de radiação laser

2.2. O padrão de expressão genética das células é determinado após adição do cDNA
de ambas as amostras à placa de “biochip”, incubação e registo da emissão de
fluorescência. Nesta etapa ocorre:
a. A reação de hibridação entre os cDNAs das amostras e as sondas do
biochip marcadas previamente com fluoróforos de cores diferentes
b. A marcação das moléculas de cDNA de ambas as amostras e a hibridação
com as sondas do biochip marcadas com fluoróforo de cor diferente
c. A reação de hibridação dos cDNAs das amostras, marcados previamente
com fluoróforos de cores diferentes, com as sondas do biochip
d. A hibridação entre os cDNAs de ambas as amostras, marcadas previamente
com fluoróforos de cores diferentes, e ligação por complementaridade
com as sondas do biochip
3. No laboratório, quer produzir a proteína “insulina recombinante” e irá utilizar a célula
hospedeira procariota E. coli. Para isto, obteve células do pâncreas e dessas células é
necessário:
a. Isolar o segmento de DNA cromossómico que contem o gene da insulina
b. Isolar o extrato nuclear que contem o pré-mRNA da insulina
c. Isolar as moléculas de RNA do citosol das células
d. Isolar as moléculas de cDNA do núcleo das células

4. Para sintetizar eritropoietina “in vitro”, começa por fazer a transfecção de células
hospedeiras com o gene da eritropoietina inserido no gene LacZ do vetor. A seguir,
coloca as células em meio de cultura para amplificação.
a. Nesse meio de cultura contendo antibiótico e o substrato X-gal, terá que
selecionar a colónia de células de cor azul
b. Nesse meio de cultura contendo antibiótico e o substrato X-gal, terá que
selecionar a colónia de células de cor branca
c. Nesse meio de cultura contendo antibiótico e o substrato X-gal, recolhe a
eritropoietina produzida pelo clone de células de cor azul
d. Nesse meio de cultura contendo antibiótico e o substrato X-gal, recolhe a beta
galactosidase produzida pelo clone de células de cor branca e que servirá para a
síntese de eritropoietina

5. Está no laboratório de biologia molecular e pretende clivar uma molécula de DNA para
construir um mapa de restrição. Para o efeito usa uma enzima de restrição que cliva o
ácido nucleico em quadro locais.

5.1. Quantos fragmentos de restrição obtém?


a. 3
b. 5
c. 5
d. 6
e. 7

5.2. Supondo que dois dos fragmentos obtidos após a digestão têm o mesmo peso
molecular, quantas bandas espera obter após a sua separação por eletroforese em
gel de agarose?
a. 3
b. 4
c. 5
d. 6
e. 7

5.3. Caso os fragmentos de restrição obtidos tenham um elevado peso molecular


(tipicamente entre 30-50 kb), como pode proceder de modo a separá-los com
maior precisão?
a. Aumentar a concentração do gel de agarose
b. Aumentar a intensidade da corrente elétrica, uma técnica designada por
eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE)
c. Variar a direção da corrente elétrica, uma técnica designada por
eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE)
d. Não é possível separar fragmentos de DNA com mais de 30 kb com
precisão
e. Diminuir o pH do tampão de corrida

5.4. Que informação pode retirar do mapa de restrição obtido?


a. Conformação estrutural do ácido nucleico
b. Conformação estrutural da enzima de restrição
c. Localização dos locais de clivagem da enzima de restrição
d. Ordem da ligação dos fragmentos de restrição
e. A carga dos fragmentos de restrição

6. Na tabela seguinte encontram-se afirmações reativas às técnicas de Southern e


Northern blotting. Faça um círculo em torno da(s) técnica(s) para as quais a afirmação
correspondente é verdadeira.

Técnicas
A probe/sonda é uma sequência de DNA, usada em: Southern blotting Northern blotting
É uma técnica de hibridação DNA-DNA Southern blotting Northern blotting
Na membrana encontra-se imobilizada uma amostra de RNA Southern blotting Northern blotting
A hibridação pode ser detetada por autoradiografia Southern blotting Northern blotting
A eletroforese é um dos passos iniciais da técnica de : Southern blotting Northern blotting
Permite detetar a transcrição de um gene Southern blotting Northern blotting

7. Considere as autoradiografias apresentadas:

Tinha 3, em que uma era tipo esta:

7.1. Qual das autorradiografias (A,B ou C) representa uma experiência


de DNA footprinting (pegada de DNA)?

7.2. Indique, na imagem correspondente, o local da pegada de DNA


(footprint).

7.3. Indique qual a molécula habitualmente usada para identificar a pegada de DNA e
refira sucintamente o seu mecanismo de ação.

8. Escolhas múltiplas a descontar

8.1. A reação em cadeia da polimerase (“PCR”):


a. Utiliza um par de “iniciadores” (“primers”), isto é oligonucleótidos que
definem o segmento de DNA a ser amplificado
b. É uma técnica que permite a amplificação de uma pequena sequência de
DNA, gerando uma mistura de cópias com sequências distintas que têm
que ser posteriormente separadas por eletroforese
c. Embora muito útil em investigação genética e em diagnóstico médico tem
a desvantagem de, durante o passo de desnaturação do DNA, extensão ou
alongamento da cadeia de DNA e, por último, emparelhamento das
cadeias
d. É um método automático que ocorre num termociclador para amplificação
de sequências de DNA a partir de células e até de órgãos isolados

8.2. A transcriptase reversa:


a. É, entre outras atividades, uma DNA polimerase dependente de RNA, isto
é, que utiliza uma sequêmcia (“template”) de RNA para iniciar a síntese de
novo DNA, designado por cDNA
b. É um caso particular de uma enzima de restrição que cinde o DNA na
sequência – GAATTC
c. É utilizada em conjugação com a técnica de PCR para a amplificação das
designadas STR, regiões não codificantes de DNA que se repetem em
sequência (“short tandem repeats”), na determinação de perfis de DNA
(“DNA profiling”) em humanos.
d. É uma enzima que atua em conjugação com a DNA polimerase na
replicação do DNA nos eucariotas
e. É uma enzima complexa com várias atividades enzimáticas, que ao
contrário das DNA polimerases, inicia a síntese de DNA da extremidade 3’
para a extremidade 5’

9. Um dos marcadores genéticos mais frequentes usados para traçado de perfis


genéticos são os microssatélites de DNA ou STRs (short tandem repeats). Na tabela
abaixo representa-se o resultado de traçado genético obtido por análise multiplexada
de STRs para resolução de um caso de paternidade

locus criança mãe #1 #2

Relativamente a este caso indique qual das seguintes afirmações é verdadeira:


a. Os STRs são de marcadores moleculares muito informativos porque são bi-
alélicos
b. A criança é homozigótica para o locus … e heterozigótica para o locus …
c. Os loci mais informativos são os … e … porque há partila dos mesmos
alelos entre a mãe e a criança
d. O indivíduo #2 é o mais provável pai da criança
e. A análise multiplexada pressupões a avaliação de vários alelos para o
mesmo locus

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