Imunomodulação inata em animais

alimentícios: evidências de imunidade

treinada?

A resistência antimicrobiana (AMR) é um problema significativo nos

cuidados de saúde, saúde animal e segurança alimentar. Para limitar a
RAM, há necessidade de alternativas aos antibióticos para aumentar a
resistência às doenças e apoiar o uso criterioso de antibióticos em
animais e humanos. A imunomodulação é uma estratégia promissora
para aumentar a resistência a doenças sem antibióticos em animais para
alimentação. Um campo de evolução rápida da imunomodulação é a
memória inata, na qual as células imunes inatas sofrem alterações
epigenéticas de remodelação da cromatina e reprogramação metabólica
após um evento de priming que resulta em responsividade aumentada
ou suprimida a estímulos secundários (treinamento ou tolerância,
respectivamente). A exposição a agentes vivos como bacilo Calmette-
Guerin (BCG) ou produtos derivados de micróbios, como LPS ou ß-
glucanos da parede celular de levedura, podem reprogramar ou
“treinar” o sistema imunológico inato. Na última década, avanços
significativos aumentaram nossa compreensão do treinamento inato em
humanos e modelos de roedores, e estratégias estão sendo
desenvolvidas para direcionar ou regular especificamente a memória
inata. Em espécies veterinárias, o conceito de melhorar o sistema
imunológico inato não é novo; no entanto, existem poucos estudos
disponíveis que investigaram propositalmente o treinamento inato,
conforme definido na literatura humana. O desenvolvimento de
abordagens direcionadas para envolver o treinamento inato em animais
para alimentação, com o objetivo prático de aumentar a capacidade de
limitar as doenças sem o uso de antibióticos, é uma área que merece
atenção. Nesta revisão, fornecemos uma visão geral da
imunomodulação e memória inatas e os mecanismos que regulam essa
reprogramação funcional de longo prazo em outros animais (por
exemplo, humanos, roedores). Nós nos concentramos em estudos que
descrevem o treinamento inato, ou fenômeno semelhante (muitas vezes
referido como proteção heteróloga ou não específica), em espécies de
bovinos, ovinos, caprinos, suínos, aves e peixes; e discutir os benefícios
e deficiências potenciais de envolver o treinamento inato para aumentar
a resistência a doenças.

Modulação inata
Embora várias abordagens sejam usadas para limitar doenças e o uso de
antibióticos em animais agrícolas, estratégias eficazes de intervenção
permanecem indisponíveis para muitas doenças. A imunomodulação é
uma abordagem para engajar ou preparar (1) o próprio sistema
imunológico do hospedeiro para se defender contra doenças infecciosas.
As vacinas são imunomoduladores eficazes, preparando o sistema
imunológico adaptativo e bem compreendidos por especialistas em
doenças infecciosas. No entanto, menos comum ou pelo menos discutido
com menos frequência é a imunomodulação do braço inato do sistema
imunológico para maior proteção contra doenças. Um campo de
imunomodulação relacionado e em rápida evolução é o treinamento
inato, que se baseia na memória do sistema imunológico inato (veja a
caixa de texto).
Imunomodulação

Alterações no sistema imunológico após a exposição a uma substância

ou composto (ou seja, agonista) que estimula ou suprime a resposta
imunológica. Esta revisão é focada na imunomodulação que altera a
resposta imune à exposição subsequente com agonista imune não
relacionado (heterólogo), não o agonista de iniciação.

Imunomodulação da imunidade adaptativa: a vacinação alterada ou a

exposição natural de um animal a patógenos ou outros agentes
estranhos induz a geração de células T e B efetoras e de memória para
fornecer proteção de longo prazo (de vários anos à vida) contra o agente
estranho.

Exposição de um animal a uma substância ou composto de iniciação,

geralmente uma proteína ou polissacarídeo de proteína, de modo que a
exposição subsequente a um composto semelhante resulte em resposta
de reação cruzada. dependente de células B e T. anergia e tolerância são
funções de não-repsonsividade ou respostas supressivas por células B
ou T
Imunomodulação da imunidade inata (memória inata): a exposição de
um animal ou células a uma substância ou composto de iniciação (ou
seja, agonista), muitas vezes um padrão molecular microbiano
associado (MAMP), de modo que a exposição a agonista imunológico
não relacionado resulta em aumento resposta (treinada) ou suprimida
(tolerante). Observado em células não T, não B e principalmente em
linhagem mieloide e células NK. O mecanismo inclui a reprogramação
epigenética e metabólica de células imunes inatas e células
progenitoras. A duração do efeito ainda não foi determinada, mas há
evidências de meses a alguns anos.

Treinamento: resposta aprimorada a agonistas heterólogos

Tolerância: diminuição da resposta a agonistas heterólogos

Embora a memória imune adaptativa seja bem compreendida no nível

celular e molecular, o sistema inato não era conhecido por ter memória
e, concordantemente, as estratégias de prevenção de doenças visavam
principalmente o sistema imune adaptativo (por exemplo, vacinação).
No entanto, o paradigma da memória inata mudou recentemente, com
evidências substanciais indicando que as células imunes inatas se
adaptam funcionalmente após estimulação ou exposição microbiana.
Mais especificamente, monócitos circulantes, macrófagos derivados de
monócitos e células NK alteraram as respostas secundárias a vários
patógenos ou padrões moleculares associados a micróbios (MAMPs)
após um evento de priming inicial com o mesmo ou diferente MAMP (1-
4). In vitro, monócitos purificados estimulados com agonistas inatos
específicos, como β-glucano ou vacina de tuberculose viva atenuada
[Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guerin (BCG)], e reestimulados
dias depois com um MAMP heterólogo, tiveram respostas aumentadas
em comparação com células que não foram preparados com β-glucano
ou BCG [revisado em (3)]. Assim, o sistema imunológico adaptativo pode
não ser a única consideração para o desenvolvimento de estratégias de
intervenção em doenças para melhorar a saúde animal dos alimentos.
O efeito sustentado da imunidade inata treinada depende de mudanças
epigenéticas, remodelação da cromatina e mudanças metabólicas basais
que ocorrem na célula após a estimulação primária, com efeitos que
podem ser duradouros. A exposição primária a MAMP (5, 6) deixa a
célula em um estado “equilibrado”, ou um estado em que a célula está
pronta para responder ao insulto ou exposição secundária. Em uma
resposta treinada, as células respondem com aumento da produção de
moléculas efetoras, incluindo citocinas pró-inflamatórias, após
estimulação secundária ou exposição (Figura 1). A resposta treinada
difere da tolerância inata, na qual células prontas respondem com
produção reduzida de moléculas efetoras (Figura 1). Embora as células
imunes circulantes, como monócitos e células NK, possam exibir uma
resposta treinada, a vida útil das células circulantes é relativamente
curta (7) e o período de tempo que as células exibem um fenótipo
treinado pode concordantemente ter vida curta. No entanto, a
modificação epigenética das células progenitoras da medula óssea que
se tornam células efetoras circulantes (incluindo monócitos e células
NK), fundamenta o treinamento inato in vivo e contribui para a
longevidade do treinamento inato (8, 9). A vacinação experimental de
humanos com BCG aumenta a produção de citocinas pró-inflamatórias
de PBMC in vitro após estimulação com o lipopolissacarídeo MAMP
(LPS), mesmo 12 meses após a administração de BCG (1). Além disso,
estudos epidemiológicos com bebês humanos descobriram que a
vacinação BCG está associada à proteção não específica (isto é, não
relacionada ao BCG). Em outras palavras, as crianças vacinadas com BCG
aumentaram a resistência a outras doenças (5, 6), levando a um
aumento da sobrevida geral e à diminuição da incidência de morbidade.
É importante ressaltar que os benefícios protetores foram observados
meses a anos após a vacinação (10). Os animais destinados à
alimentação têm vida relativamente curta, e as mudanças na imunidade
inata no início da vida podem proporcionar um efeito protetor contra
doenças por toda a vida dos animais.
Figura 1. Esquema geral da resposta imune associada à memória inata.
A exposição inicial a um agonista de priming (linhas vermelhas e azuis)
induz uma resposta inata, normalmente medida como indução da
produção de citocinas pró-inflamatórias. Após um período de descanso,
a estimulação subsequente das mesmas células ou animal com um
agonista heterólogo (comumente LPS ou Pam3CSK4) resulta em
tolerância ou resposta treinada, marcada por produção de citocina
reduzida (linha vermelha) ou aumentada (linha azul) em comparação
com a resposta naïve (linha preta). Citocinas pró-inflamatórias,
incluindo IL-1β, TNF-α ou IL-6, são as citocinas mais comuns medidas
para a memória inata. A iniciação e a estimulação heteróloga podem
ocorrer in vitro com células primárias; na Vivo; ou uma combinação de
in vivo com estimulação celular ex vivo.
Neste artigo, revisamos brevemente conceitos importantes da literatura
de camundongos, coelhos e humanos, incluindo mecanismos de
memória inata, treinamento e agentes tolerantes e evidências de
treinamento inato em vários tipos de células. No entanto, o foco
principal desta revisão é resumir as evidências disponíveis para
imunomodulação inata e memória em espécies agrícolas, incluindo
gado, porcos, aves, peixes e pequenos ruminantes.
Revisão da literatura sobre modelos humanos e animais
Moléculas Imunomoduladoras
A endotoxina bacteriana, ou LPS, é o primeiro e mais conhecido agonista
capaz de modular o sistema imunológico inato (11). O priming de células
inatas, mais notavelmente monócitos, com baixas doses de LPS, seguido
por reestimulação de LPS homólogo resultou em uma resposta imune
inflamatória deprimida (isto é, tolerância) (12, 13). No entanto, Gregory
Shwartzman descreveu um fenômeno pelo qual coelhos injetados por
via intradérmica com doses super baixas de filtrado de cultura estéril
Gram-negativo tinham necrose dérmica no local da injeção após a
reintrodução intravenosa com o mesmo filtrado (14), sugerindo as
células preparadas no local da injeção inicial respondeu à estimulação
secundária com uma resposta intensificada. A descoberta do “fenômeno
Shwartzman” foi seguida por vários estudos destacando a importância
da dose, já que baixas doses de LPS induziam tolerância, enquanto doses
super baixas resultavam em respostas imunológicas aumentadas (15–
18). Os compostos além do LPS podem induzir um estado tolerante em
células mieloides quando reestimulados com a mesma molécula
(tolerância homóloga). Além disso, o priming com um agonista pode
induzir tolerância em resposta à reestimulação com um agonista
heterólogo, um processo denominado tolerância cruzada (13, 19, 20).
Zymosan, uma preparação particulada de β-glucanos, mananos e
proteínas de Saccharomyces cerevisiae foi um dos primeiros indutores
conhecidos de tolerância cruzada (21, 22). Coletivamente, várias
moléculas têm sido implicadas na tolerância, e a dose na exposição
primária impacta a indução da tolerância.
Como o LPS é conhecido como um agente tolerante clássico, a vacina
BCG é um indutor altamente descrito de treinamento inato. Existem
inúmeros relatos sobre os efeitos não específicos da vacinação com BCG
em bebês em países que administram ativamente o BCG neonatal, com
reduções significativas nas doenças não tuberculosas (5, 6, 23). Em um
conjunto de estudos particularmente convincentes, a vacinação BCG de
bebês com baixo peso ao nascer na Guiné-Bissau foi associada a uma
redução de quase 50% nas taxas de mortalidade, principalmente devido
a reduções na sepse e infecções respiratórias (5, 6). Monócitos e células
NK de adultos e crianças vacinados com BCG, em comparação com
coortes não vacinadas, exibem expressão aumentada de receptores
semelhantes a toll e produção aumentada de citocinas em resposta a
vários patógenos e seus produtos (por exemplo, M. tuberculosis,
Candida albicans, Staphylcoccus aureus, LPS e Pam3CSK4) (17–19).
Camundongos vacinados com BCG são protegidos do desafio letal de C.
albicans por meio de um mecanismo que requer macrófagos (24) e
humanos vacinados com BCG apresentam título viral reduzido quando
experimentalmente infectados com a cepa de vacina do vírus da febre
amarela atenuada (25). No entanto, a imunidade treinada induzida por
BCG não protegeu os camundongos contra a infecção experimental por
influenza A (26). Os primeiros estudos com Mycobacterium tuberculosis
ou BCG indicam que a resistência aumentada contra doenças
subsequentes pode não ser um fenômeno universal. Embora tenha sido
observada proteção em camundongos contra Bacillus anthracis,
Brucella suis, Staphylococcus aureus, Pasteurella pestis, Listeria
monocytogenes e Klebsiella pneumonia (27-30), camundongos tratados
com BCG são mais sensíveis à endotoxina e tiveram mortalidade
semelhante a camundongos não tratados quando desafiados por via
intravenosa com uma dose baixa de enterite por Salmonella (1 × 104
UFC) (31). Embora não seja abrangente, vários relatórios indicam que a
administração de BCG em humanos ou modelos de animais roedores
aumenta a resistência a doenças subsequentes com respostas
imunológicas aumentadas ao agente secundário, uma marca registrada
do treinamento inato.
Os β-glucanos, que ativam as células inatas por meio do receptor
Dectina-1 ou CR3, também podem induzir o treinamento inato. No
entanto, a fonte e o tipo de β-glucana afetam a resposta imune primária
e a subsequente indução da memória inata. As células da linhagem
mieloide humana requerem a ligação cruzada do receptor Dectina-1 e a
formação de uma sinapse fagocítica para sinalização a jusante (32). Os
β-glucanos solúveis, como a laminarina com ligações (1–3) (1–6),
podem se ligar ao receptor da Dectina-1, mas são incapazes de reticular
vários receptores e, portanto, não conseguem iniciar uma resposta
imune (32, 33 ) Conforme discutido acima, o zimosan induz tolerância
em monócitos. É um composto complexo de β-glucana com ligações
altamente ramificadas (1–3) (1–6) que, junto com o manano e as
proteínas, forma a parede celular. No entanto, monócitos humanos e de
camundongo iniciados com β-glucano de C. albicans exibiram um
fenótipo treinado após a reestimulação heteróloga (17, 34-36). Na
verdade, C. albicans inativada pelo calor por si só é suficiente para
induzir um estado treinado em monócitos humanos (34). Os β-glucanos
induzem principalmente o treinamento inato, mas há casos em que a
tolerância é induzida, embora a razão possa não estar relacionada à
dose, mas à ligação ao receptor ou sinalização por componentes
adicionais da parede celular contidos no produto.
Existem muitos benefícios documentados e percebidos associados à
memória inata, mas algumas desvantagens potenciais. Enquanto β-
glucanos e BCG são os agonistas de iniciação inatos mais estudados,
outras moléculas de MAMP, como flagelina, dipeptídeo muramil (MDP),
polinossínico-policitidílico [Poly (I: C)] podem induzir treinamento
inato (1, 17). O treinamento inato é o mecanismo proposto para os
benefícios não específicos observados com certas vacinas, incluindo a
vacina contra a febre amarela, a vacina contra o sarampo, a vacínia e a
vacina contra a influenza (37, 38). No entanto, uma resposta
imunológica intensificada a infecções subsequentes pode resultar em
aumento da patologia, um efeito indesejado. Na verdade, a hipótese de
imunidade treinada contribui para doenças autoimunes (39, 40) e em
um experimento controlado, os pacientes vacinados com BCG e
posteriormente infectados com malária apresentaram sintomas mais
precoces e clinicamente graves do que aqueles não vacinados com BCG
(41). Assim, uma compreensão mais profunda das implicações
associadas ao aproveitamento da memória inata é garantida.
Mecanismos e células na imunidade treinada
A imunidade treinada é baseada na reprogramação epigenética em
células imunes inatas, que foi documentada principalmente em
monócitos (35, 42). As modificações epigenéticas levam a mudanças na
expressão gênica e conseqüente produção de proteínas após
estimulação secundária. As modificações da cromatina e as mudanças
na acessibilidade do DNA são os processos centrais da reprogramação
epigenética associada à imunidade treinada. Modificações da histona,
como aumento da metilação do potenciador latente histona H3 em K4
(H3K4me1), redução da metilação das marcas repressoras de histona,
como histona H3 em K9 (H3K9me3) e o marcador de histona mais
informativo, aumento da acetilação no potenciador pronto / ativo marca
(H3K27ac), estão associados a um fenótipo treinado (1, 2, 35, 36).
Outros mecanismos regulatórios pós-transcricionais, como a
modulação dos níveis de mRNA por microRNA (miRNA), estão
envolvidos na regulação da resposta imune (43). Genes de microRNAs,
assim como genes codificadores de proteínas, podem ser regulados por
modificações de histonas e, ao mesmo tempo, miRNAs podem direcionar
direta e indiretamente os efetores da maquinaria epigenética (44) e
mRNAs do sistema imunológico.
Mudanças no estado metabólico também são observadas em células
treinadas, e provavelmente o resultado da reprogramação epigenética
pela qual as células são preparadas para responder à estimulação
secundária. O estado metabólico é importante para a liberação rápida
de substratos intermediários, como nucleicos e aminoácidos,
necessários para a produção de moléculas efetoras (45). O treinamento
inato por C. albicans β-glucana é evidenciado por um aumento na
glicólise basal e uma diminuição na respiração mitocondrial basal, uma
medida de fosforilação oxidativa (efeito Warburg) (46). A importância
da glicólise no treinamento inato mediado por β-glucana foi observada
em um ensaio clínico em que a injeção de β-glucana foi administrada a
voluntários humanos, com uma coorte recebendo também metformina
(um medicamento que previne a gliconeogênese). Os indivíduos que
tomaram metformina não exibiram produção aumentada de citocinas ex
vivo após a reestimulação heteróloga, o que foi em contraste com os
voluntários que receberam a injeção de β-glucano sem tratamento
prévio com metformina (47). Assim, a disponibilidade e a capacidade de
utilizar a glicose são críticas em células inatas treinadas.

Além da evidência de que o estado metabólico afeta o treinamento

induzido por β-glucanas, o BCG afeta o metabolismo celular. As células
tratadas com BCG têm um aumento na glicólise basal, bem como na
fosforilação oxidativa (48). A ativação da via metabólica Akt / mTOR /
HIF1 é uma característica crítica da imunidade treinada mediada por
BCG. A inibição do metabolismo da glutamina ou mTOR / glicólise
durante o treinamento in vitro com BCG inibiu a expressão do mRNA e
também preveniu as alterações epigenéticas (H3K4me3 e H3K9me3)
normalmente associadas à imunidade treinada com BCG (48).
Coletivamente, as alterações epigenéticas e metabólicas associadas ao
treinamento induzido por BCG, ou a falta delas, estão relacionadas.
Compreender os mecanismos associados ao treinamento pode fornecer
uma abordagem mais direcionada para modular o estado imunológico.
O treinamento inato e a tolerância são bem descritos em monócitos e
macrófagos derivados de monócitos e, em menor extensão, em células
NK (19, 34, 46, 49, 50). Estudos in vitro com monócitos purificados e
estudos in vivo com camundongos imunodeficientes combinados graves
(SCID) indicam que as células T e B não são necessárias para o
desenvolvimento de imunidade treinada (1). A reprogramação
epigenética de células progenitoras mieloides leva a mudanças
duradouras nos monócitos emigrantes, contribuindo para a longevidade
do treinamento inato (8, 9). Macrófagos residentes no tecido (por
exemplo, células de Kupffer no fígado) são diferenciados terminalmente
e não dependem de monócitos circulantes para regeneração (51). Não
está claro se os macrófagos residentes no tecido podem ser treinados ou
se a presença de células de linhagem mieloide treinada no tecido é o
resultado da migração de monócitos circulantes para um tecido. Um
estudo identificando macrófagos alveolares com um fenótipo treinado
mostrou que as células T CD8 eram necessárias para a indução de um
estado treinado após uma infecção viral (52). Em outro estudo, a
reprogramação de macrófagos residentes no tecido ocorreu após a
colocação em novos microambientes, e as células podem ser conduzidas
a um fenótipo treinado ou tolerante (53). O treinamento inato é
observado em outros tipos de células, incluindo células dendríticas (54,
55), células não imunes, como células-tronco mesenquimais e epiteliais,
e células estromais intestinais (56). Pesquisas adicionais serão
necessárias para entender como as alterações na capacidade de
resposta inata de vários tipos de células podem contribuir para a
resistência a doenças no nível do organismo.

Memória inata em animais alimentícios

A memória inata, definida como treinamento e tolerância, é bem

descrita na literatura humana e de roedores, e um modelo mecanicista
de treinamento inato, conforme descrito acima, está começando a ser
definido. No entanto, existe uma escassez de informações sobre a
memória inata em animais de agricultura. Embora amplamente
semelhantes aos sistemas imunológicos humanos e de roedores,
existem importantes diferenças específicas das espécies nos sistemas
imunológicos inatos de animais comestíveis individuais que podem
impactar significativamente o desenvolvimento da memória inata. Por
exemplo, a dose de LPS desempenha um papel crítico na indução de
tolerância ou treinamento. No entanto, é difícil traçar paralelos entre as
espécies por causa das diferenças nas sensibilidades de LPS. Uma dose
muito baixa de LPS pode induzir mudanças celulares e fisiológicas em
ovelhas, enquanto uma dose muito maior é necessária para um efeito
semelhante em galinhas (57, 58). Assim, no futuro, será extremamente
importante avaliar a indução e os efeitos do treinamento inato em cada
espécie individual, garantindo que as diferenças específicas da espécie
na função imune inata sejam totalmente reconhecidas. Como um ímpeto
para encorajar pesquisas futuras, esta revisão enfoca as evidências do
treinamento inato em espécies agrícolas individuais comercialmente
importantes e os benefícios e limitações potenciais do treinamento inato
para aumentar a resistência a doenças.
Gado

Até o momento, existem apenas alguns relatórios detalhando o

treinamento inato, conforme descrito por Netea et al. (3) em gado. Em
um relatório, a vacinação de bezerros de corte de 3 a 6 meses de idade
com M. bovis morto pelo calor resultou em uma capacidade aumentada
de macrófagos derivados de monócitos desses animais para fagocitar e
matar M. bovis in vitro. Este efeito foi independente das respostas
imunes adaptativas humorais ou celulares e durou até 6 meses após a
vacinação (59). Dados recentes de nosso grupo mostraram que a
vacinação com aerossol BCG induz um fenótipo treinado em monócitos
bovinos circulantes. Especificamente, monócitos isolados de bezerros
vacinados com BCG produzem mais citocinas pró-inflamatórias em
resposta à estimulação com LPS ou Pam3CSK4 em comparação com
células de bezerros de controle não vacinados (60). Assim, está claro
que o sistema imunológico inato bovino pode ser treinado de forma
semelhante ao de humanos e roedores. Uma análise mais aprofundada
da literatura sugere outros casos em que o treinamento inato pode
ocorrer em bovinos, embora sem experimentos projetados para abordar
especificamente a duração ou os mecanismos da memória inata, deve-
se inferir com base na natureza dos estímulos ou fenótipo resultante.
Em um relatório, a imunização de bovinos com um lisado ultrassônico
de Corynebacterium cutis teve efeitos positivos na morbidade e
mortalidade em três grupos de idade diferentes de animais (61).
Bezerros de dez dias de idade que receberam o lisado de C. cutis
demonstraram uma redução de quase 50% na morbidade em
comparação com controles devido a doenças entéricas e respiratórias
nos primeiros 6 meses de vida. Quando vacas grávidas receberam lisado
de C. cutis no último mês de gestação, os bezerros resultantes tiveram
um peso maior ao nascer e maior ganho de peso nos primeiros 3 meses
de vida. Dos 23 bezerros de controle que nasceram, apenas 15 bezerros
sobreviveram até os 3 meses de idade, enquanto 25 de 25 bezerros das
mães imunizadas com C. cutis sobreviveram até o ponto final do estudo
(61). Em uma série de estudos iniciais, a vacinação oral de bezerros
usando mutantes auxotróficos vivos atenuados de Salmonella
enteritidis sorovar Typhimirium (S. Typhimurium) resultou em
proteção homóloga e heteróloga contra S. Typhimurium e S. Dublin (62-
64). A proteção era inespecífica e independente de células T e durou
cerca de 1 mês após a vacinação. Resultados semelhantes foram
subsequentemente recapitulados em modelos de camundongos (65); e,
de fato, resultados mais recentes mostraram que a vacinação oral com
S. Typhimurium vivo atenuado induz proteção não específica suficiente
para prevenir a infecção letal do vírus influenza em um modelo de
camundongo (66). Assim, embora os autores não tenham investigado os
mecanismos de resistência inespecífica em bezerros, especulamos que
a vacina viva de Salmonella pode ter induzido alguma forma de memória
inata.
Várias terapias comerciais recentes surgiram com potencial para
aumentar a resposta imune inata bovina durante períodos de estresse.
Um tal imunoestimulante à base de DNA, comercializado como o
produto comercial Zelnate ™, pode reduzir as pontuações de patologia
pulmonar em bovinos desafiados experimentalmente com M.
haemolytica (67) e reduzir significativamente a mortalidade em bovinos
de alto risco após confinamento (68, 69) . Embora o (s) mecanismo (s)
de ação exato (s) do produto não esteja (ão) bem definido (s), ele
provavelmente está estimulando o sistema imunológico por meio de
receptores de reconhecimento de padrões, como o TLR9 ou o DNA
citosólico inato que detecta a via c-GAS-STING (70). Não está claro,
entretanto, se o mecanismo de ação de Zelnate ™ pode ser classificado
como memória inata. A literatura do produto incentiva o uso de Zelnate
imediatamente antes ou dentro de 24 horas de um evento estressante
percebido. Dado que um aspecto crítico do treinamento inato é a
duração do efeito, esta forma de imunomodulação pode não se
enquadrar na definição. Outro produto imunomodulador,
comercializado como Amplimune ™, é uma fração da parede celular
micobacteriana derivada do Mycobacterium phlei não patogênico.
Amplimune ™ não ativa especificamente o sistema imunológico inato e
pode reduzir significativamente a incidência e a gravidade da infecção
por Escherichia coli K99 em bezerros recém-nascidos (71). Atualmente
é comercializado nos Estados Unidos e Canadá para esse uso. Um estudo
recente revelou que Amplimune ™ também teve efeitos benéficos
significativos na redução da incidência e mortalidade associada à
doença respiratória bovina em bezerros de corte leves recém-recebidos
(72), sugerindo que pode ter aplicações mais amplas para a saúde de
ruminantes. Outro imunomodulador comercial, Baypamun ™, uma
preparação inativada do vírus Orf (Parapoxvirus ovis), foi vendido na
Europa por vários anos para uso em animais de alimentação e cavalos.
O tratamento com Baypamun ™ imediatamente antes ou nos estágios
iniciais da infecção por rinotraqueíte infecciosa bovina mostrou reduzir
significativamente a doença clínica e a disseminação do vírus (73-76).
Novamente, embora seja evidente que esses produtos comerciais têm
efeitos intensificadores sobre o sistema imunológico inato, não está
claro se o sistema imunológico permanece em um estado equilibrado
por períodos prolongados após o tratamento. Mais pesquisas serão
necessárias para determinar se esses produtos têm a capacidade de
induzir os efeitos de longo prazo da memória inata, ou simplesmente um
aumento transitório na ativação inata.
O uso de compostos imunomoduladores para rações tem crescido com
o crescente interesse em alternativas aos antibióticos. Muitos desses
compostos são constituídos por uma mistura de levedura inteira ou
componentes da parede celular da levedura. Vários podem promover
funções imunológicas inatas, como aumentar a atividade fagocítica,
aumentar a geração de espécies reativas de oxigênio ou restaurar a
secreção de citocinas pró-inflamatórias para leucócitos de vacas de
transição (77-82). O uso de determinados aditivos imunomoduladores
para rações pode aumentar a resistência a doenças em bovinos. Por
exemplo, a suplementação com um produto de fermentação de S.
cerevisiae melhora o resultado de desafios experimentais de Salmonella
ou Cryptosporidium em bezerros pré-desmamados (83-85); e reduz o
tamanho e o número de abscessos hepáticos em novilhos de corte em
terminação, com eficácia comparável aos regimes de antibióticos
padrão na ração (86). O gado suplementado com levedura reduziu a
incidência de doença respiratória bovina durante o período de
recebimento (87, 88); enquanto bezerros leiteiros pré-desmamados
recebendo um suplemento à base de levedura melhoraram os escores
fecais e as reduções gerais na morbidade e mortalidade durante os
primeiros 70 dias de vida. Dada a capacidade do componente da parede
celular de levedura, β-glucano, de treinar o sistema imunológico inato
em roedores e humanos (34, 35, 46), parece provável que pelo menos
alguns dos efeitos positivos de tais aditivos à base de levedura sobre a
saúde bovina pode ser atribuída à indução da memória inata. Análises
mais aprofundadas da função celular inata e as alterações epigenéticas
e metabólicas específicas que acompanham essas mudanças serão
necessárias para determinar se a memória inata é um mecanismo que
contribui para o aumento da resistência a doenças.

Ovelhas e cabras

Semelhante às outras espécies nesta revisão, os β-glucanos são os

compostos imunomoduladores mais comuns investigados em ovelhas.
A suplementação oral de β- (1-3) (1-6) -glucanos para ovelhas tem
efeitos positivos no desempenho reprodutivo e na taxa de crescimento
e composição corporal dos cordeiros resultantes (89), potencialmente
devido aos efeitos positivos de β- suplementação de glucana na
produção e composição do leite em ovelhas em lactação (89, 90).
Monócitos e neutrófilos isolados de cordeiros alimentados com β-
glucanos aumentaram as atividades fagocíticas e de explosão
respiratória e aumentaram a atividade da lisozima (90, 91). Ovelhas em
lactação alimentadas com β-glucanos reduziram a contagem de células
somáticas no leite (89), enquanto uma infusão intramamária de β-
glucanos resultou no recrutamento seletivo de monócitos / macrófagos
CD14 + para o úbere (92), potencialmente preparando o animal para ser
mais resistente a mastite.

Uma série recente de estudos mostrou que a levedura marinha,

Debaryomyces hansenii e sua parede celular, tem o potencial de treinar
o sistema imunológico inato em cabras recém-nascidas (93-96). A
suplementação in vivo de cabras recém-nascidas com D. hansenii vivo
induziu a regulação positiva dos genes que codificam para TLR2, 4 e 6,
IL-1β e TNF-α em leucócitos circulantes, e resultou em aumento da
atividade respiratória, catalase e superóxido dismutase (94 –96). A
parede celular de D. hansenii é composta principalmente por (1-6)
ramificado (1-3) -β-D-glucano (96). O treinamento in vitro de monócitos
de cabra com β-glucanos de D. hansenii purificados resulta em
expressão aumentada de CD11b e do gene F4 / 80 associado a
macrófagos, viabilidade aumentada após desafio com LPS e atividade
fagocítica aumentada (93). In vivo, cabritos recém-nascidos
suplementados com β-glucanos purificados de D. hansenii e
subsequentemente desafiados com LPS demonstram concentrações
plasmáticas aumentadas de IL-6, IL-1β e TNF-α, e leucócitos isolados
mostram atividade de explosão respiratória aumentada e óxido nítrico
produção (93).
O BCG não foi amplamente estudado em ovinos. No entanto, alguns
estudos iniciais mostraram que a vacinação com BCG oferece alguma
resistência à infecção pelo vírus da febre do vale do Rift (97) e
resistência à linfadenite caseosa causada por Corynebacterium
pseudotuberculosis (98). No primeiro estudo, uma fração das ovelhas
imunizadas com BCG desenvolveu febres curtas e viremia por apenas
24–48 h, enquanto as ovelhas controle ficaram virêmicas e febris por até
8 dias após o desafio. Ovelhas que receberam duas doses de BCG foram
completamente protegidas do envolvimento do fígado devido à infecção
por febre do vale do Rift (97). O último estudo acompanhou mais de 500
cabeças de ovelhas e usou um modelo de infecção natural por C.
pseudotuberculosis, semeando o rebanho com animais infectados
clinicamente. Durante um período de 4 anos, 99% dos cordeiros
vacinados com BCG foram protegidos do desenvolvimento de
linfadenite caseiosa (98). Assim, parece que o sistema imunológico inato
de ovelhas e cabras tem capacidade para ser treinado, e a estratégia tem
potencial significativo para promover resistência a doenças em
pequenos ruminantes.

Suínos

Os β-glucanos são prontamente usados em sistemas de produção de

suínos em todo o mundo com notáveis benefícios à saúde [revisado em
(99)]. Os produtos alimentícios comerciais podem ser formulados com
β-glucano purificado de várias fontes (levedura, algas, fungos) ou conter
levedura viva, levedura com produtos de fermentação ou uma mistura
semi-purificada de polissacarídeos de parede celular (mananas). Cada
produto inclui uma certa quantidade de β-glucano, purificado ou na
parede celular, que é presumivelmente o ingrediente responsável por
alterações notadas no estado de saúde. A suplementação oral com β-
glucanas pode melhorar o ganho de peso, embora nem todos os estudos
indiquem um melhor desempenho (100–103). O β-glucano oral pode
melhorar o desempenho quando baixos níveis de aflatoxina também
estão presentes (104). A diarreia pós-desmame em porcos é causada
por E. coli enterotoxigênica (ETEC), e antibióticos são comumente
administrados para limitar a ETEC. A suplementação oral de β-glucana
por 2 semanas após o desmame diminuiu a suscetibilidade ao ETEC
(105). A adição de produto de fermentação de levedura à dieta diminui
a fixação de ETEC à mucosa (106). No entanto, a frequência de diarreia
após o desafio de ETEC aumenta com uma dieta suplementada com
levedura de células inteiras, embora os níveis de E. coli nas fezes não
aumentem (107). Curiosamente, o β-glucano na dieta melhora a saúde
dos leitões após a infecção por rotavírus (108). No entanto, a inclusão
de β-glucana na dieta aumenta a suscetibilidade ao desafio intravenoso
de Streptococcus suis, mesmo com medidas de desempenho
aumentadas (100). Os autores levantam a hipótese de que o β-glucano
na dieta aumenta a expressão do antagonista de IL-1R, o que pode
aumentar a ingestão de alimento por meio do bloqueio da sinalização de
IL-1R, mas aumenta a suscetibilidade à doença devido à falta da
sinalização necessária de IL-1R. Após a injeção de LPS, os porcos com
dieta β-glucana têm menos TNF-α e IL-6 no plasma (103), sugerindo
resposta reduzida após estimulação secundária. Embora o β-glucano e
produtos relacionados sejam usados em sistemas de produção de
suínos, os mecanismos de melhoria da saúde não são completamente
compreendidos e vários fatores, incluindo microbiota, idade e insulto ao
patógeno podem afetar os resultados.
Embora o β-glucano seja mais comumente administrado por via oral, as
alterações no estado imunológico periférico, ao contrário do intestinal,
são frequentemente avaliadas. Vários tipos de células têm receptores
para β-glucanos em porcos, incluindo células progenitoras mieloides na
medula óssea (22, 109, 110); e em camundongos, β-glucano marcado
com fluorescência injetada por injeção intravenosa está localizado em
macrófagos e neutrófilos da medula óssea (111). Assim, os β-glucanos
podem se translocar do intestino para a periferia para modular as
células progenitoras, com impacto periférico. Como observado acima, os
níveis de citocinas pró-inflamatórias no soro são mais baixos em
resposta à injeção de LPS quando os porcos são alimentados com uma
dieta suplementada com β-glucano (102, 103). A inclusão de células
inteiras de levedura na dieta leva a mudanças nas populações de
leucócitos circulantes (107, 112), embora o impacto das mudanças na
resistência às doenças não seja claro. As células mononucleares do
sangue periférico produzem menos citocinas pró-inflamatórias após a
estimulação com LPS se a dieta dos suínos for suplementada com β-
glucana (103). Embora a Dectina-1 e CR3 sejam expressas por diferentes
leucócitos de porco (109), e as células dendríticas intestinais possam ser
as primeiras a encontrar β-glucana dietética (113), não está claro como
a suplementação dietética altera a capacidade de resposta das células
imunes periféricas à estimulação heteróloga. Em geral, os produtos
dietéticos que contêm levedura e / ou β-glucana podem modular as
respostas imunológicas periféricas, mas a longevidade das mudanças e
a tradução para a memória inata justificam uma investigação mais
aprofundada.
Embora o BCG seja um agonista de treinamento classicamente definido
em várias espécies, há poucos relatórios sobre o impacto da
administração de BCG na imunidade inata de suínos. Coe et al. relatam
que a administração de BCG em porcos não alterou a função dos
neutrófilos (114). Em um estudo recente, porcos aos quais foi
administrada a vacina inativada de Mycobacterium paratuberculosis
aumentaram a patologia e as respostas inflamatórias após o desafio com
Actinobacillus pleuropneumoniae (115), sugerindo uma resposta
secundária elevada indicativa de treinamento inato. O BCG interage
prontamente com as células do sistema imunológico inato; no entanto,
em porcos não está claro se as alterações resultam em proteção contra
infecções heterólogas. Os porcos são um modelo proposto para a
pesquisa da tuberculose (116) e a vacinação com BCG em javalis para
limitar a infecção por M. bovis (117, 118). Dados os aspectos
conservados da imunidade inata entre as espécies, prevê-se que o BCG
induza a memória inata em porcos, mas ainda não foi adequadamente
demonstrado.

Aves

Dos animais para alimentação, aves de corte comercial (incluindo

galinhas, perus, patos e codornas) têm alguns dos tempos mais curtos
para o mercado, com frangos de corte atingindo o peso de mercado em
uma média de 47 dias após o nascimento (119). Embora as raças de aves
criadas para a produção de ovos tenham uma vida mais longa (1–2 anos)
(120), elas apresentam desafios de doenças no início da vida e
limitações do sistema imunológico adaptativo semelhantes às aves de
corte. A prevenção de doenças por meio do sistema imune adaptativo é
controlada por meio da vacinação contra organismos específicos e
atinge seu potencial máximo por volta de 3 semanas após a vacinação
(quase metade da vida útil de frangos de corte comerciais) (119, 121).
Durante esse intervalo de 3 semanas, os anticorpos maternos fornecem
proteção adicional ao pintinho, mas são dependentes de vários fatores,
como os níveis de título de anticorpos individuais e o tempo pós-
vacinação (122). A vacinação é relativamente cara, com cada vacina
fornecendo proteção contra poucos patógenos. Em contraste com a
resposta imune adaptativa, a indução rápida e a amplitude da memória
inata apresentam um mecanismo principal para reduzir doenças e
organismos transmitidos por alimentos nas aves.
Os β-glucanos são os mais bem estudados dos conhecidos
imunoestimulantes de memória inata em aves (123, 124). No entanto,
devido à limitação prática de inocular milhares de pássaros com β-
glucanos, a estimulação com β-glucanos ocorre quase exclusivamente
por via oral via suplementação alimentar (125-129). A levedura é a
forma mais comum de β-glucana na dieta, uma vez que β-glucanas de
cereais com ligações (1–4) (1–6) (ou seja, cevada e aveia) são
prejudiciais à produção de aves devido à redução da digestão e adsorção
de nutrientes (130) . Em pintinhos, a suplementação dietética com β-
glucanas de levedura reduz a colonização de Salmonella no ceco (131) e
órgãos viscerais (131, 132). A alimentação intermitente de um produto
de levedura contendo β-glucana diminuiu os efeitos do estresse de
transporte em perus perus e tendeu a diminuir a colonização do ceco
com os patógenos de origem alimentar, Salmonella e Campylobacter
(129, 133). Curiosamente, o mesmo efeito positivo não foi observado
com a alimentação contínua do produto β-glucano de levedura (129).
Nenhum benefício de uma dieta β-glucana foi observado quando os
frangos de corte foram desafiados com oocistos de Eimeria (128).
Embora nenhum estudo em aves tenha abordado diretamente a
capacidade dos β-glucanos ou outros imunoestimulantes de induzir
imunidade treinada, os β-glucanos podem alterar o sistema imunológico
dos frangos in vitro e in vivo. A produção de óxido nítrico e IL-1, mas não
IL-6, foi aumentada em uma linha celular de macrófago de galinha após
estimulação de β- (1-3) (1-6) -glucano (134). O mesmo estudo também
detectou aumentos na atividade fagocítica dos macrófagos ex vivo. A
função leucocitária heterófila (fagocitose, morte bactericida, explosão
oxidativa) é alterada em pintos de frango alimentados com levedura e
β-glucano e perus
Os benefícios de produção (peso corporal, ração: taxas de ganho,
consumo de ração) de β-glucanos dietéticos em aves são menos claros,
pois os β-glucanos e produtos de levedura podem aumentar, reduzir ou
não alterar os parâmetros de produção em galinhas, perus ou patos
(125, 127, 135). Não está claro se os resultados conflitantes são devidos
a produtos diferentes (levedura inteira, mananoligossacarídeos, β-
glucana purificada, etc.), origem do produto de levedura
(Saccharomyces cerevisiae, Aureobasidium pullulan ou outro), dose
relativa de β-glucana, idade dos animais, ou algum outro fator. Huff et al.
(135) sugerem um mecanismo potencial para diferenças nos
parâmetros de produção, pois descobriram na ausência de desafio de E.
coli, pintinhos em dietas de controle tinham pesos corporais e taxas de
alimentação: ganho maiores do que pintinhos alimentados com β-
glucana, mas com desafio, o β Pintos de glucana apresentaram
parâmetros de produção mais elevados. O β-glucano dietético também
está associado a funções de barreira intestinal aumentadas (relação
altura de vilosidade / profundidade da cripta aumentada, número de
células caliciformes e níveis de IgA secreta), mas os autores não
determinaram se o efeito foi devido à estimulação direta de β-glucano
de células imunes hospedeiras ou alterações nas populações
microbianas intestinais (131, 136).
A injeção in ovo de vacinas ou imunoestimulantes representa uma
maneira interessante de alterar o sistema imunológico das aves antes
da eclosão e da exposição ambiental a patógenos. Nos últimos 25 anos,
os produtores de aves têm utilizado tecnologias in ovo para vacinar com
segurança e eficácia embriões de frango, peru e codorna contra doenças
comuns de aves, como doença de Marek, doença infecciosa da bolsa (DII)
e coccidiose (137). Recentemente, os imunoestimulantes chegaram à
vanguarda das aplicações in ovo como um mecanismo para melhorar
não especificamente o sistema imunológico das aves antes do
nascimento. A injeção in ovo de resiquimod, um agonista de TLR7 / 8,
no dia 18 do embrião aumentou os macrófagos positivos para MCR1L-B
na traqueia, pulmões, duodeno e intestino grosso dos pintinhos ao
nascer (138). Além disso, os autores mostram que após a infecção com
vírus da laringotraqueíte infecciosa (ILTV) 1 dia após a eclosão, a
liberação cloacal de ILTV 7 dias após a infecção foi significativamente
reduzida em embriões injetados com resiquimod e que o tratamento
com resiquimod induziu atividade IFN tipo 1 em macrófagos. Dos
imunoestimulantes in ovo, o DNA CpG é talvez o mais bem estudado
(139-141). Abdul-Cader et al. (140) mostram que o DNA CpG entregue
in ovo regula positivamente a expressão de IL-1β e as proporções de
macrófagos nos pulmões e essas alterações estão associadas à redução
da mortalidade induzida por ILTV e perda de peso em pintinhos. Um
estudo de 2018 (139) com administração in ovo de DNA CpG relatou
mortalidade reduzida e escores clínicos de infecção experimental por E.
coli de sacos vitelinos em pintinhos de um dia. De fato, um produto
comercial Victrio®, é um imunoestimulante de DNA in ovo
comercializado para reduzir a mortalidade em ovos embrionados e
pintos de E. coli e é mostrado para ativar TLR21 em macrófagos de
frango e aumentar a produção de óxido nítrico (70). Em geral, a
exposição in ovo a agonistas inatos alterou as respostas imunológicas à
doença; no entanto, não está claro se o impacto é o resultado da ativação
imunológica contínua ou foi o resultado da memória inata. O período de
tempo desde a exposição ao agonista até o teste de desafio sugere que a
memória inata pode estar em jogo, mas estudos direcionados são
necessários para definir claramente o mecanismo de proteção.

Peixe
Ao contrário da maioria das outras espécies de animais comestíveis,
artigos de revisão foram publicados resumindo as evidências de
imunidade treinada em peixes (142, 143) e gostaríamos de direcionar
os leitores a essas fontes para uma revisão aprofundada do treinamento
inato em várias espécies de peixes. Desde a década de 1990, o β-glucano
de uma variedade de fontes foi estudado ou alimentado em pescarias
comerciais por seus efeitos de promoção de crescimento e
imunomoduladores (144, 145). No entanto, uma análise detalhada
sugere que os benefícios observados dependem da fonte e da dose de β-
glucana, da espécie de peixe e da idade (145). A proteção heteróloga
contra o desafio bacteriano ocorre após a administração intraperitoneal
ou oral de β-glucanos em várias espécies de peixes que variam de peixe-
zebra (Danio rerio) (146) a cauda amarela (Seriola quinqueradiata)
(147) a garoupa manchada de laranja (Epinephelus coioides) (148). Os
pesquisadores observaram mortalidade mais baixa; aumento da
explosão oxidativa, produção de citocina e atividade da lisozima (143,
146, 147). A diminuição da mortalidade foi observada até 30 dias após
o término da alimentação com β-glucana (148). A duração do efeito após
a retirada sugere, semelhante aos estudos em mamíferos (34, 36, 123),
o tratamento dietético com β-glucano em peixes induz mudanças
epigenéticas no nível do progenitor, permitindo mudanças sustentadas
nas células imunes inatas. Os peixes expressam uma maior diversidade
e variação de receptores inatos que são semelhantes e distintos dos
receptores de mamíferos (149). A dectina-1, uma lectina do tipo C, é o
receptor mieloide primário para β-glucanos em mamíferos (32, 150–
152); no entanto, nenhum receptor β-glucano correspondente foi
identificado em peixes. Recentemente, Petit et al. (153) identificaram
vários receptores candidatos potenciais para β-glucano na carpa
comum europeia (Cyprinus carpio carpio). Eles também mostraram
que, como acontece com os mamíferos, a via da lectina do tipo C está
envolvida na detecção e sinalização em resposta ao β-glucano (153).
Este e outros estudos estabelecem a base para o trabalho mecanicista
em peixes para determinar o efeito direto e duradouro do β-glucano no
sistema imunológico dos peixes.
Das moléculas conhecidas por estimular a memória inata (1, 123, 154),
os β-glucanos são os mais comumente usados na aquicultura, mas
outras, incluindo micobactérias, foram estudadas. Revisado em Petit e
Wiegertjes (142), estudos mostram que a injeção intraperitoneal com
Mycobacterium butyricum aumenta a atividade bactericida até 33 dias
após a injeção (155). Uma série de estudos de Kato et al. (156-158)
indicam que a injeção com BCG aumenta as respostas imunes inatas em
várias espécies de peixes e induz proteção contra o desafio com
Nocardia seriolae em linguado japonês. Yellowtail (Seriola
quinqueradiata) primeiro exposta a um dos vários imunoestimulantes
foram protegidas contra a doença de Pasteurella piscicada.
Especificamente, a pré-exposição ao adjuvante completo de Freund
(CFA), que contém M. bovis inativado, foi considerada a mais protetora
(147). De fato, enquanto a sobrevivência aumentada e os marcadores
imunológicos foram observados com o pré-tratamento com glucano, o
efeito foi acentuado com o tratamento com CFA. A proteção cruzada
observada com estes últimos estudos são marcas registradas do
treinamento inato e é uma forte evidência da memória inata em peixes.
Ao revisar a literatura publicada antes que a memória inata fosse bem
descrita e na ausência de estudos especificamente projetados para
investigar a indução de proteção heteróloga independente do sistema
imune adaptativo, pode ser difícil atribuir a memória inata como o
mecanismo para aumentar a resistência à doença. Por exemplo,
Lorenzen et al. (159) observaram proteção cruzada contra o vírus da
septicemia hemorrágica viral (VHSV) em trutas arco-íris inoculadas com
um DNA plasmídeo que codifica a glicoproteína viral de um vírus não
relacionado. A mortalidade diminuiu em peixes inoculados com
plasmídeo quando desafiados com vírus 4 e 7 dias após a inoculação do
plasmídeo, mas não aos 60 ou 84 dias após a inoculação. A janela
limitada de proteção sugere um mecanismo independente da imunidade
adaptativa. Um estudo posterior de pregado juvinal (Scophthalmus
maximus) inoculado com plasmídeo de DNA que codifica a glicoproteína
do envelope de VHSV e desafiado com vírus não relacionado também
observou mortalidade reduzida nos peixes inoculados com plasmídeo
(160). Não está claro se a proteção foi devido ao treinamento inato, ou
apenas proteção não específica devido à resposta primária ao DNA do
plasmídeo. Apesar disso, ocorreu alguma imunomodulação para
aumentar a resistência à doença. Evidências mecanicistas de imunidade
treinada contemporânea (conforme descrito pela literatura humana e
de roedores) ainda precisam ser descritas. À medida que a demanda por
peixes aumenta, métodos para aumentar a resistência a doenças em
peixes de viveiro sem alto custo e antibióticos são desejados.

Implementando Modulação Inata na Agricultura Animal para Alimentos

O objetivo principal da imunomodulação inata em animais para

alimentação é aumentar o estado imunológico do animal, resistindo
assim às doenças para aumentar o bem-estar animal e a eficiência da
produção. Aumentar a capacidade do animal de resistir a doenças pode
reduzir a necessidade de antibióticos e a quantidade de ração necessária
para que o animal atinja o peso comercial. Na maioria dos sistemas de
produção, há períodos claramente definidos nos quais os animais
apresentam alto risco de infecção. Universal para todos os sistemas de
produção é a suscetibilidade do animal neonatal ou muito jovem a
doenças (161). À medida que a imunidade materna diminui e o sistema
imunológico adaptativo do próprio bebê é inexperiente, há uma janela
de vulnerabilidade aumentada à doença. O sistema imune adaptativo
pode não estar totalmente amadurecido em neonatos, mas o sistema
imune inato é ativo e fornece um papel fundamental nas respostas
imunes nesta idade [revisado em (162)] tornando-o um bom alvo para
proteção aprimorada. Em humanos, o treinamento inato mediado por
BCG é eficaz por mais de um ano (124). Embora a longevidade da
proteção por treinamento inato seja importante, também pode ser
importante iniciar a proteção no início da vida. O tempo desde o
nascimento até o mercado para uma determinada espécie pode variar
de semanas a anos, por exemplo, os frangos vão para o mercado por
volta das 6 semanas de idade, porcos aos 6 meses e bovinos de corte aos
2 anos. Assim, uma consideração importante para aproveitar o
treinamento inato é a duração da proteção, mas também a rapidez com
que a proteção do treinamento inato é evidente no animal. Uma revisão
recente do uso de antibióticos por produtores de suínos na Bélgica
relatou que mais de 80% de todos os antibióticos são administrados a
leitões com menos de 10 semanas de idade (163); e resultados
semelhantes foram relatados para a América do Norte e vários outros
países da Europa (164). Uma consideração importante para aproveitar
o treinamento inato é a duração da proteção, mas também a rapidez com
que a proteção do treinamento inato é induzida para minimizar a
doença durante um período de alto risco.

Os bezerros são mais suscetíveis a doenças diarreicas nas primeiras 4

semanas de vida e, então, o risco de doenças respiratórias aumenta à
medida que atingem os 2-6 meses de idade. Espera-se que a indução do
treinamento inato no período neonatal promova a melhora da
resistência à doença até pelo menos 6 meses de idade, quando a “janela
de suscetibilidade” à infecção é maior (165). Os períodos subsequentes
de alto risco para gado de corte incluem o período de embarque e
recebimento (primeiros 50 dias na alimentação), quando o gado é
desmamado, transportado em caminhão, misturado e colocado no
confinamento (166). A administração de BCG, β-glucano ou outro
imunomodulador conhecido no período anterior ao desmame e
transporte pode proteger o animal durante o período de recebimento.
Em apoio a esta suposição, os imunomoduladores comerciais Zelnate ™
e Amplimune ™ mostraram algum benefício quando administrados a
bezerros imediatamente antes ou após a colocação no confinamento
(67-69, 72). Bovinos leiteiros são conhecidos por passar por um período
de imunossupressão durante o período de transição (as 3 semanas antes
do parto, até as 3 semanas após o parto) levando a um aumento
acentuado na prevalência de doenças infecciosas e metabólicas (167,
168). Explorar os efeitos do treinamento inato ou da tolerância durante
o período periparturiente pode ter efeitos benéficos na saúde e no
desempenho das vacas.
Tal como acontece com porcos e gado, peixes e aves são mais suscetíveis
a doenças enquanto são muito jovens. Em peixes, os imunoestimulantes
têm sido administrados a larvas recém-eclodidas diretamente por meio
de ração granulada ou indiretamente por meio de tratamento com
banho (143, 144, 169-171). Em aves, conforme descrito em detalhes
acima, a vacinação in ovo é o padrão da indústria e existem evidências
experimentais e comerciais (Victrio®) de proteção contra doenças com
imunoestimulantes não específicos (70, 139, 140). Como animais que
colocam ovos, a imunomodulação pode ocorrer antes da eclosão e antes
que os filhotes ou pintinhos sejam expostos a uma ampla gama de
patógenos. Além disso, a transferência passiva de anticorpos da mãe
para a progênie através da gema em espécies de postura de ovos é bem
descrita, mas em peixes, foi demonstrado que componentes imunes
inatos são transferidos das mães para os oócitos e passagem direta de
imunoestimulantes de mãe para jovem também foram descritos (172-
174). Um último benefício da modulação inata em aves e peixes é a
evidência da passagem de mudanças epigenéticas transgeracionais para
genes e fenótipos imunes inatos para frangos de corte (175) e peixes
(176, 177). Combinado com a capacidade da mãe de produzir um grande
número de ovos, as mudanças nos fenótipos epigenéticos (a marca
registrada da memória inata) podem ser herdadas pelos embroyos,
permitindo que os animais eclodam em um estado preparado para
enfrentar o desafio bacteriano ou viral. De certa forma, os produtores de
peixes e aves têm uma vantagem além da das espécies de mamíferos
para aproveitar a memória inata para prevenir doenças, e ambas as
indústrias fizeram progressos para estudar e utilizar essas vantagens
evolutivas.

Potenciais armadilhas do treinamento inato

Embora aproveitar o treinamento inato para aumentar a resistência a

doenças seja atraente, particularmente no contexto dos períodos
conhecidos de suscetibilidade ou imunossupressão descritos acima,
ainda existem armadilhas potenciais que merecem consideração. Em
humanos e roedores, o treinamento inato pode ter efeitos deletérios no
contexto de condições inflamatórias crônicas, como autoimunidade,
aterosclerose e diabetes (3). Em animais produtores de alimentos,
enquanto as respostas imunológicas intensificadas podem ser benéficas
para a eliminação do patógeno, uma resposta inflamatória aumentada
pode levar a danos nos tecidos. No caso de doenças respiratórias, por
exemplo, as respostas inflamatórias desreguladas são frequentemente
implicadas como causadoras de mais danos ao hospedeiro do que o
próprio patógeno (178–181). Aumentar ainda mais essa resposta
inflamatória inata pode não ser ideal. Porém, se o treinamento inato tem
a capacidade de reduzir a eliminação do organismo, seu uso ainda pode
trazer benefícios significativos à saúde do rebanho ao reduzir o risco de
transmissão de doenças. O impacto do treinamento inato na patologia
do tecido, carga do patógeno e resultado geral da doença precisará ser
avaliado cuidadosamente no contexto de configurações de doença
particulares, a fim de determinar o risco versus recompensa de engajar
a memória inata.
Além do potencial de intensificar a patologia de uma doença, o controle
do sistema imunológico para a resistência a doenças pode impactar
negativamente os parâmetros de produção. A ativação do sistema
imunológico tem um custo metabólico considerável para um organismo
(182-185) e torna-se a energia que não é gasta na produção de músculo
ou leite. A ativação das células para a síntese e secreção de citocinas e
proteínas de fase aguda e a proliferação celular requerem glicose,
aminoácidos e energia. Para garantir a sobrevivência do hospedeiro, a
integridade do sistema imunológico é mantida acima de quase todas as
outras funções biológicas, separando os nutrientes do crescimento,
reprodução e lactação (182). Embora atualmente haja pouca evidência
de apoio disponível, é quase certo que a indução e manutenção das
células imunes inatas em um estado treinado tem algum custo
catabólico para o animal. A glicólise, a via metabólica favorecida por
monócitos e macrófagos treinados (46, 47), é menos eficiente que a
fosforilação oxidativa; aumentando assim o custo do uso de energia por
célula. Além disso, a ativação inicial do sistema imunológico para induzir
um estado treinado utiliza recursos metabólicos. Embora haja um
benefício significativo para o animal em limitar a doença após a
exposição ao patógeno, atualmente não se sabe se os custos de energia
de um sistema imunológico treinado afetarão negativamente o
desempenho, ou se esta possível perda de desempenho superará o
benefício do aumento da resistência à doença. Estudos adicionais
focados na eficácia do treinamento inato para a prevenção de doenças
em animais para alimentação, bem como os impactos do treinamento no
desempenho e crescimento animal, serão necessários para desvendar
essas possibilidades. Independentemente disso, as estratégias que
aumentam a resistência a doenças sem antibióticos justificam a
consideração de limitar os impactos da resistência antimicrobiana.

Sumário e conclusões

Poucos estudos examinaram diretamente a imunidade treinada em

espécies de animais para alimentação. No entanto, como discutido aqui,
existe uma abundância de evidências para uma variedade de
imunoestimulantes para aumentar a proteção heteróloga não específica
contra doenças bacterianas e virais em bovinos, suínos, aves, peixes e
pequenos ruminantes. A memória inata apresenta uma excelente
oportunidade para prevenir ou limitar doenças, bem como reduzir o uso
de antibióticos e AMR em animais agrícolas. Existem várias
oportunidades para estudos mecanísticos para elucidar os tipos de
células, vias e moléculas envolvidas na memória inata em animais
alimentícios. Até que o treinamento inato e a tolerância sejam melhor
compreendidos, é necessário cautela para determinar os custos
imunológicos e metabólicos e a eficácia da proteção contra doenças
específicas. Dentro da memória inata está o potencial para reduzir a
carga de doenças e o uso de antibióticos na pecuária, e sentimos que esta
área de investigação representa um dos campos de estudo mais
interessantes para uma nova geração de cientistas.