UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

FACULDADE DE ODONTOLOGIA

PARTÍCULAS DE CARGA FUNCIONALIZADAS COM TIOURETANOS:

CARACTERIZAÇÃO EM COMPÓSITOS EXPERIMENTAIS

Niterói
2018
 UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE
FACULDADE DE ODONTOLOGIA

PARTÍCULAS DE CARGA FUNCIONALIZADAS COM TIOURETANOS:

CARACTERIZAÇÃO EM COMPÓSITOS EXPERIMENTAIS

AMANDA BARRETO RAMOS

Tese apresentada à Faculdade de

Odontologia da Universidade Federal
Fluminense, como parte dos requisitos para
obtenção do título de Doutora, pelo Programa
de Pós-Graduação em Odontologia.

Orientadora: Profª. Dra. Larissa Maria Assad Cavalcante

Co-orientadora: Profa. Dra. Carmem Silvia Pfeifer

Niterói
2018
BANCA EXAMINADORA

Profa. Dra. Larissa Maria Assad Cavalcante

Instituição: Faculdade de Odontologia da Universidade Federal Fluminense
Decisão:_________________________Assinatura:_____________________

Profa. Dra. Ângela Scarparo Lima Teixeira

Instituição: Faculdade de Odontologia da Universidade Federal Fluminense
Decisão: ________________________Assinatura: ______________________

Prof. Dr. Marcos de Oliveira Barceleiro

Instituição: Faculdade de Odontologia da Universidade Federal Fluminense
Decisão: ________________________Assinatura: ______________________

Prof. Dr. Raphael Hirata Júnior

Instituição: Faculdade de Ciências Médicas da Universidade do Estado do Rio de
Janeiro
Decisão: ________________________Assinatura: ______________________

Prof. Dr. Cesar dos Reis Peres

Instituição: Faculdade de Odontologia da Universidade do Estado do Rio de Janeiro
Decisão: ________________________Assinatura: ______________________
 DEDICATÓRIA

A Deus,
Que me sustentou e guiou em toda minha trajetória e me concedeu tudo que tenho.
À minha esperada filha Melissa,
Minha companheirinha ainda na barriga que vivenciou intensamente comigo as
últimas fases do doutorado.
Ao meu marido Júnior,
Por todo carinho, compreensão, incentivo e por sempre acreditar em mim.
Aos meus pais e meu irmão Ralph,
Por toda ajuda e todo esforço que sempre fizeram por mim. Por me apoiarem
incondicionalmente e me impulsionarem.
Aos meus familiares e amigos,
Por toda força, conselho e apoio em todo tempo.
 AGRADECIMENTOS

Ao meu Deus por todas as coisas. Sem Ele, certamente, não chegaria até aqui.
Ao meu marido Júnior, por todo companheirismo e pelas palavras de força e
carinho. Obrigada por ter lutado comigo, me dado apoio nos momentos difíceis, por
se alegrar com as minhas conquistas e estar sempre ao meu lado.
Aos meus pais, que sempre primaram pela minha educação e não mediram
esforços para que eu tivesse um bom estudo. Obrigada, Armando e Renata, por tudo
que fizeram, por estarem sempre comigo, pelo amor, carinho e compreensão.
Ao meu irmão Ralph, por seu amor puro e sincero que sempre me inspira e
incentiva.
Aos meus familiares e amigos que compreenderam minha ausência e sempre
me apoiaram. Em especial, à minha amiga Mayla por ter vivenciado e participado de
muitos momentos, difíceis e alegres, durante o doutorado sempre me dando forças e
torcendo por mim.
À minha orientadora, Profa. Dra. Larissa Maria Assad Cavalcante, por todo
apoio, confiança e incentivo. Obrigada por ter me recebido na UFF, me aceitado e me
ajudado em todo período do doutorado. Agradeço pelos conselhos e orientação que
obtive em todas as etapas.
Ao Prof. Dr. Luis Felipe Jochims Schneider por toda ajuda em fases importantes
para o desenvolvimento deste trabalho. Agradeço também pelo suporte dado nas
fases iniciais do meu estágio docente na disciplina de Odontologia Baseada em
Evidências, na qual obtive muitos aprendizados. Ainda aproveito para agradecer ao
suporte e orientação no desenvolvimento de alguns testes no laboratório da
Universidade Veiga de Almeida, à qual estendo este agradecimento.
À Profa. Dra. Carmem Silvia Pfeifer como co-orientadora deste trabalho.
Agradeço por todo suporte e esclarecimentos que ofereceu sempre que precisei.
Ao colega Alan Rodrigo Muniz Palialol que sempre foi muito solícito e me
auxiliou na condução da manipulação dos materiais experimentais no laboratório de
pesquisas “Prof. Dr. Raul Sartini Filho” da Faculdade de Odontologia de Piracicaba
(FOP) da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP).
Ao Prof. Dr. Gutemberg Gomes Alves e Prof. Dr. Henrique Eduardo Oliveira
pela participação como banca de qualificação e por todas as considerações feitas no
meu projeto de tese que foram fundamentais para o desenvolvimento deste trabalho.
 À equipe da Unidade de Pesquisa Clínica (UPC) do Hospital Universitário
Antônio Pedro da Universidade Federal Fluminense. Em especial à aluna Daniela
Costa Silva que me acompanhou e instruiu no teste de citotoxicidade realizado no
laboratório juntamente com a supervisão e orientação do Prof. Dr. Gutemberg Gomes
Alves. Agradeço também às queridas Ângela e Sharlene por toda a ajuda e carinho
que me receberam.
Ao colega Vinícius Esteves Salgado por toda ajuda e suporte na condução do
teste de propriedades ópticas. Agradeço também por ter aceito o convite de participar
como suplente externo para a banca de defesa desta tese.
À equipe do Laboratório de Biotecnologia Aplicada – setor Mecânica (LABA) da
Faculdade de Odontologia da Universidade Federal Fluminense/ UFF, em especial ao
Hugo Ribeiro da Igreja que me auxiliou em várias etapas técnicas para realização dos
testes com muita dedicação e empenho. Agradeço também ao Marco Antônio Teixeira
e Wellington Casemiro por toda ajuda.
Ao Prof. Dr. Rafael Hirata Junior e sua equipe do laboratório da Faculdade de
Ciências Médicas da Universidade do Estado do Rio de Janeiro pela ajuda e
colaboração na condução do teste antimicrobiano.
Aos professores doutores Cesar dos Reis Perez, Rafael Hirata Junior, Ângela
Scarparo Caldo Teixeira e Marcos de Oliveira Barceleiro por terem sido tão atenciosos
e solícitos na participação da banca e pelas considerações e colaboração com o
trabalho.
Aos funcionários da Faculdade de Odontologia da UFF pela atenção e apoio
durante minha pós-graduação, em especial aos servidores João e Luci do PPGO.
Agradeço também a todos que participaram desta conquista, direta ou
indiretamente, certa de que não seria possível citar todos neste breve espaço.
SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO .............................................................................................. 12
2 METODOLOGIA ............................................................................................14
3 ARTIGOS PRODUZIDOS.............................................................................. 22
4 CONCLUSÕES.............................................................................................. 54
5 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ..............................................................55
6 ANEXOS .........................................................................................................57
 RESUMO

RAMOS, AB. Partículas de carga funcionalizadas com tiouretanos: caracterização em

compósitos experimentais [tese]. Niterói: Universidade Federal Fluminense,
Faculdade de Odontologia; 2018.

A presente tese de doutorado divide-se em Fase 1 (Artigo 1) e Fase 2 (Artigo 2).

Na Fase 1, o objetivo foi realizar um levantamento bibliográfico sobre o
desenvolvimento, propriedades e aplicações de compósitos experimentais com a
incorporação de tiouretanos. Na Fase 2, o trabalho foi avaliar o grau de conversão, a
absorção e solubilidade, a estabilidade de cor, a rugosidade superficial, as
propriedades antimicrobianas e a citotoxicidade de compósitos formulados com
diferentes concentrações de tiouretano (TU) como revestimento de partículas de carga
em um compósito experimental. A concentração de partículas de carga revestidas
com TU variou de acordo com os seguintes grupos experimentais: 0 (Controle - TU0),
25% (TU25), 50% (TU50), 75% (TU75) e 100% (TU100) em peso de carga. O grau de
conversão foi mensurado por Espectroscopia de infravermelho transformada por
Fourier (FTIR). A absorção e a solubilidade foram realizadas de acordo com a ISO
4049:2009. A estabilidade de cor foi analisada empregando o parâmetro CIELab (CIE
L*, CIE a*, and CIE b*) e o iluminante D65. Os valores de rugosidade de superfície
foram obtidos em um rugosímetro e as propriedades antimicrobianas foram
detectadas por meio do teste exaustão e contagem de colônias de Streptococus
mutans. Para avaliar a possível citotoxicidade do material à fibroblastos gengivais
humanos um teste multiparamétrico foi conduzido, avaliando três diferentes
parâmetros (XTT, NRU e CVDE) nas mesmas células. O teste ELISA foi usado para
mensuração dos marcadores IL-6 e b-FGF. Não houve diferença estatística entre os
grupos experimentais e o controle nas análises do grau de conversão e de absorção
e solubilidade. O grupo controle (TU0) apresentou os melhores valores de estabilidade
de cor e os grupos TU75 e TU100 a maior variação de cor. A rugosidade superficial
apresentou diferença estatística significativa comparada ao controle apenas no grupo
TU100. Os grupos testados não demonstraram capacidade inibitória da formação de
biofilme. Nenhum dos grupos experimentais apresentou valores inferiores a 70% de
sobrevivência celular (citotóxico) nos períodos avaliados (24h e 7 dias). Controle
positivo (tóxico) apresentou altos valores de IL-6 e baixos valores de b-FGF. O uso de
tiouretano não interferiu na absorção e solubilidade, nem no grau de conversão. A
estabilidade de cor e a rugosidade de superfície foram afetadas à medida que a
concentração de TU aumentou. O material não apresentou atividade antimicrobiana e
citotóxica às células. Tais resultados são de importante significância, uma vez que
mostram que o material experimental com TU na composição não é citotóxico às
células orais, o que pode predizer seu uso no meio oral. Somado a isso, em suas
menores concentrações o material mantém suas propriedades equivalentes aos
compósitos convencionais.

Palavras-chaves: oligômeros tiouretanos; aditivos pré-polimerizados; solubilidade;

fenômenos ópticos; citotoxicidade
 ABSTRACT

The current thesis was divided in Phase 1 and Phase 2. For Phase 1 the aim was
to review the literature on the development, properties and applications of composite
materials based on the addition of thiourethanes. Phase 2 aimed to evaluate the
degree of conversion, absorption and solubility, color stability, surface roughness,
antimicrobial properties and cytotoxicity of experimental composites containing
different concentrations of thiourethane-functionalized fillers (TU). The
concentration of TU varied according to the following experimental groups: 0
(Control-TU0), 25% (TU25), 50% (TU50), 75% (TU75) and 100wt% (TU100). The
degree of conversion was measured by Fourier Transform Infrared Spectroscopy
(FTIR). Absorption and solubility were performed according to ISO 4049: 2009.
Color stability were analyzed using the CIELab parameter (CIE L *, CIE a *, and CIE
b *) and illuminant D65. The surface roughness values were obtained in a
rugosimeter. The antimicrobial properties were detected through the exhaustion test
and counting of Streptococus mutans colonies. To evaluate the possible cytotoxicity
of the material to human gingival fibroblasts a multiparametric test was conducted,
evaluating three different parameters (XTT, NRU and CVDE) in the same cells.
ELISA was used to measure the IL-6 and b-FGF markers. There was no statistical
difference among experimental groups and the control in the analyzes of absorption,
solubility and degree conversion. The control group (TU0) presented the best values
of color stability and the TU75 and TU100 groups had higher values of color
variation. The surface roughness presented a statistically significant difference
compared to the control only in the TU100 group. The groups tested did not
demonstrate the inhibitory capacity of biofilm formation. None of the experimental
groups presented values below 70% of cell survival (cytotoxic) in the evaluated
periods (24h and 7 days). Positive control (toxic) had high IL-6 values and low b-
FGF values. The use of thiourethane did not interfere with absorption and solubility,
nor on degree of conversion. Color stability and surface roughness were affected as
TU concentration increased. The material did not present antimicrobial and cytotoxic
activity to the cells. These results are significant, once that shows that the
experimental material with TU in the composition is not cytotoxic to oral cells, which
may predict its use in the oral environment. In addition, in its lower concentrations
the material maintains its properties equivalent to those conventionally used.
Key-words: thio-urethane oligomers; prepolymerized additives; solubility; optical
concepts; cytotoxicity.