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EMISSÃO: 08.03.2016
POP REVISÃO Nº: 02
PESQUISA DO D FRACO (DU) DATA DA REVISÃO: 23.06.2020
POP AGT 072
RESPONSÁVEL: Farmacêutica Generalista
ABRANGÊNCIA: Agência Transfusional
FINALIDADE:
Consiste em verificar se o RhD é parcialmente ou totalmente negativo .

SIGLAS E DEFINIÇÕES:
 POP: Procedimento Operacional Padrão.
 AGT: Agencia Transfusional.
 AGH: Anti-humano Blend (Coombs).
 CHM: Concentrado de hemácias.

AGENTE (S):
 Farmacêutica Generalista
 Técnico em hemoterapia
 Estagiário (a) com supervisão

PERIODICIDADE:
 Sempre que houver Rh negativo.

MATERIAL:
 EPI´s(Jaleco com manga longa, luvas descartáveis e óculos de proteção).
 Centrífuga.
 Reagente Anti-D.
 Controle de Rh.
 Soro Anti Humano Blend (AGH).
 Controcel®.
 Banho - Maria.
 Termômetro Digital.
 Soro Fisiológico 0,9%.
 Papel absorvente.
 Temporizador.
 Aglutinoscópio.
 Tubo de acrílico Kahn
 Pincel
 Laudo de Calibração de Centrífuga atualizado

PROCEDIMENTOS:
1. Identificar 2 tubos de acrílico Kahn com a Letra D e a Letra C;
2. Pingar uma gota de anti-D e Controle de Rh nos seus respectivos tubos: (VERIFICAR
OBSERVAÇÃO 1);

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POP AGT 072
RESPONSÁVEL: Farmacêutica Generalista
ABRANGÊNCIA: Agência Transfusional
3. Colocar os tubos na centrífuga de modo equilibrado;
4. Centrifugar os tubos para formação de botão conforme o último laudo de Calibração da
centrífuga
5. Ressuspender o botão observando a aglutinação;
6. Incubar os tubos D e Controle de Rh utilizados na tipagem sanguínea em Banho-Maria a
37°C por 15 minutos;
7. Retirar após o tempo necessário enxugando o final do tubo com papel absorvente;
8. Acrescentar Soro Fisiológico até 2/3 tubo;
9. Colocar na centrífuga de modo equilibrado;
1. Centrifugar os tubos para lavagem conforme último laudo de Calibração da centrífuga;
10.Remover o sobrenadante jogando o soro no expurgo em cima da bancada (VERIFICAR
OBSERVAÇÃO 2);
11.Realizar esse procedimento por mais 2 vezes;
12.Remover todo sobrenadante após a terceira lavagem invertendo o tubo e descartando o soro
fisiológico no expurgo e (sem virar) bater delicadamente os tubos sobre um papel absorvente
até a total remoção do soro no tubo;
13. Adicionar duas gotas (100µL) de Anti-humano Blend em cada tubo;
14. Centrifugar para formação de botão conforme último laudo de calibração de centrífuga;
15. Ressuspender o botão delicadamente observando a aglutinação (VERIFICAR
OBSERVAÇÃO 3);
16. Confirmar o resultado negativo pingando 1 gota do reagente Controcel®;
17. Centrifugar para formação de botão conforme último laudo de calibração de centrífuga e ler
no aglutinoscópio ressuspendendo o botão (VERIFICAR OBSERVAÇÃO 4);

OBSERVAÇÃO:
1. Caso a reação apresente resultado positivo após a centrifugação não continuar com a
pesquisa de D fraco.

2. O botão de hemácias ficará fixado no fundo do tubo somente o soro fisiológico é despejado
no expurgo. Fazer esse movimento apenas uma vez por rotação, se não, pode haver o
desprendimento do botão e o botão poderá ser erroneamente descartado no expurgo.

3. Caso resultado nesta etapa seja positivo com aglutinação, esse paciente é considerado D
Fraco Positivo, ou seja, ele é parcialmente positivo. Esse teste para paciente te apenas o
intuito de registro, pois o CHM utilizado para prova cruzada neste paciente mesmo sendo D
fraco positivo, deverá ser RhD negativo. Para retipagem de bolsas que obtém na etiqueta
negativo se apresentarem Du positivo, essa bolsa deverá ser reprovada pela inspeção de
qualidade, a Bioquímica Responsável deverá ser informada e a bolsa deverá ficar na gaveta
de não liberados até a verificação do ocorrido.

Se o tubo identificado com a letra C (controle) aglutinar, deverá abrir um protocolo de

atendimento e enviar amostras para o hemocentro para ser investigado, pois poderá ter

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eventual presença de anticorpos aderidos á hemácia.

4. Para confirmação do resultado negativo, deverá aglutinar. Se não aglutinar refazer o teste.

REVISÕES:
Num. da Revisão Data da Revisão Alteração Realizada
01 03.10.2017 Sem alteração.
02 22.01.2019 Acrescentado 5, 8, 9,11. Observação 2, 3 e 4. E
03 23.06.2020 Referências.

REFERÊNCIAS:
1. BRASIL. Art.178. Portaria nº 158, de 04 de Fevereiro 2016. Redefine o regulamento técnico de
procedimentos hemoterápicos. Ministério da Saúde. Gabinete do Ministro.
2. BRASIL. Resolução da Diretoria Colegiada N°34. Dispõe sobre as Boas Práticas do Ciclo do Sangue.
Ministério da Saúde. ANVISA.

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