Comunicado 49 Tcnico

Aspectos epidemiolgicos da babesiose bovina em So Carlos, SP

Foto: Mrcia Cristina de Sena Oliveira

ISSN 1517-1116 So Carlos, SP Junho, 2004

Babesia bovis

Babesia bigemina

Mrcia Cristina de Sena Oliveira1 Teresa Cristina Goulart de Oliveira-Sequeira2

As babesioses bovinas, no Brasil, so causadas por duas espcies, Babesia bovis e Babesia bigemina, ambas transmitidas pelo carrapato Boophilus microplus. Essas parasitoses fazem parte de um complexo de doenas, conhecido no Brasil como tristeza parasitria bovina. As babsias multiplicam-se exclusivamente no interior dos eritrcitos, resultando uma enfermidade hemoltica e febril cuja gravidade depende de vrios fatores relacionados ao parasita (cepa, espcie de protozorio, tamanho do inculo) e ao hospedeiro (idade, raa, estado fisiolgico e imunitrio). Clinicamente, as babesioses caracterizam-se por febre, anemia hemoltica, hemoglobinria, ictercia e morte em casos graves da doena (McCosker, 1981).

Do ponto de vista epidemiolgico, as reas de ocorrncia das babesioses bovinas podem ser classificadas de acordo com a distribuio e a dinmica populacional do seu vetor, o carrapato Boophilus microplus. Dessa forma, trs situaes ocorrem: reas livres ou indenes, reas de instabilidade e reas de estabilidade enzotica. As reas indenes so aquelas onde as condies climticas dos no permitem e o desenvolvimento carrapatos dessa

maneira as babesioses no ocorrem. As reas de instabilidade enzotica se localizam nas reas limtrofes de distribuio dos carrapatos e com isso, em determinadas pocas as condies climticas impedem o desenvolvimento do caro. Durante esse perodo de ausncia dos

Pesquisadora da Embrapa Pecuria Sudeste, Rod. Washington Luiz, km 234, Caixa Postal 339, CEP: 13560-970, So Carlos, SP. Endereo eletrnico: marcia@cppse.embrapa.br 2 Professora do Departamento de Parasitologia, IB, Unesp-Botucatu, Rubio Jnior s/no, Botucatu, SP. Endereo eletrnico: sequeira@ibb.unesp.br

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carrapatos,

ocorre

queda

dos

nveis

de

informam sobre o estgio da infeco (Wagner et al., 1992). As maiores dificuldades so encontradas nos estudos sobre a dinmica das infeces por Babesia nos carrapatos. A pesquisa desses protozorios em esfregaos de hemolinfa e em macerados de ovos e larvas de Boophilus microplus apresenta como principais limitaes a dificuldade de se identificar as espcies a partir das esporocinetos (formas evolutivas das babsias encontradas na hemolinfa das fmeas adultas) e a baixa sensibilidade dos exames diretos. Por isso, tornou-se prioridade desenvolver mtodos de diagnstico especficos e sensveis, que possibilitem diferenciar as duas espcies de babsias e tambm a deteco de bovinos com

anticorpos contra as babsias nos bovinos e, quando a situao climtica permite novamente o desenvolvimento desses vetores, surtos da doena podem aparecer. Nas regies em que o clima permite que as populaes de carrapatos se mantenham, mesmo que flutuantes, ao longo dos anos, ocorre a chamada estabilidade enzotica. Nessas condies, o rebanho constantemente inoculado com babsias, o que mantm os nveis de anticorpos contra esses parasitas em patamares elevados. Em regies de estabilidade enzotica, so mais freqentes os casos clnicos em animais jovens ou em animais com queda de resistncia individual. As perdas ocasionadas por essas

infeces inaparentes (portadores sadios) e os carrapatos naturalmente infectados (Guglielmone et al., 1997). Avanos recentes no campo da biologia molecular tornaram possvel o uso de tcnicas de amplificao de DNA para verificar, de maneira relativamente rpida e com alta sensibilidade, a presena de hemoparasitas tanto nos carrapatos vetores como nos bovinos (Singh, 1997). A utilizao dessas tcnicas possibilita o melhor conhecimento da

hemoparasitoses so atribudas a menor ganho de peso dos animais, decrscimo na produo de leite, infertilidade As de touros, abortos e mortalidade. babesioses representam

tambm grande obstculo introduo de animais geneticamente superiores, provenientes de reas livres, que geralmente so introduzidos com o propsito de aumentar a produtividade dos rebanhos O diagnstico das babesioses bovinas feito principalmente de por meio do de exame sangue microscpico no esfregaos de estudos bovinos

epidemiologia das babesioses e a obteno de dados que permitem o aprimoramento de mtodos de controle. Com a finalidade de obter dados que permitissem a caracterizao epidemiolgica da regio de So Carlos e testar mtodos mais sensveis e especficos para o diagnstico das babesioses bovinas, as taxas de infeco por esses parasitas foram avaliados em 27 bezerros e 25 vacas mestias leiteiras (Bos taurus x Bos indicus) criados na Embrapa Pecuria Sudeste e

perifrico. Essa tcnica de grande importncia diagnstico Em clinicamente no afetados. epidemiolgicos,

entanto, ela apresenta limitaes, porque no capaz de detectar animais em fases iniciais da doena e aqueles que j sofreram a doena e se estabeleceram como portadores. Os exames sorolgicos, que detectam anticorpos especficos, tambm apresentam limitaes, porque indicam a exposio ao agente, mas no

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em fmeas adultas de B. microplus colhidas desses animais. Amostras de sangue da jugular de todos os animais foram utilizadas para a extrao de DNA e posterior amplificao do DNA das babsias, utilizando a tcnica de PCR (reao em cadeia da polimerase), conforme Figueroa et al. (1993), com algumas modificaes. Amostras de sangue perifrico foram utilizadas para a confeco de esfregaos corados com Giemsa. Esses esfregaos foram lidos em microscpio ptico, sendo verificado o nmero por de clulas foi parasitadas avaliada em 1000 exame

nmero significativamente superior (P<0,01) de animais positivos para Babesia bovis e Babesia bigemina. Com essa tcnica, apenas quatro bezerros foram negativos para B. bovis e dois para B. bigemina. Entre as vacas todas foram positivas para B. bovis e quatro foram negativas para B. bigemina. As taxas de infeco dos bezerros, por ambas as espcies de Babesia, no diferiram significativamente (P<0,01) da obtida nas vacas. Nas fmeas adultas de B. microplus colhidas de bezerros, o nmero de exemplares com infeco simples por B. bigemina (145) foi significativamente maior (P<0,01) do que o de exemplares com infeco simples por B. bovis (12) e o de exemplares com infeces mistas (11). Nas fmeas de carrapatos colhidas de vacas, as taxas de infeco por B. bovis e por B. bigemina foram semelhantes (P>0,05), maiores do que as de infeco mista (P<0,01) e menores do que a taxa de teleginas com ausncia de hemoparasitas (negativas) (P<0,01). A amplificao de DNA em amostras de ovos revelou elevada porcentagem de posturas negativas, especialmente quando os carrapatos se ingurgitaram em vacas. Para as fmeas de carrapatos que realizaram o repasto sangneo em bezerros, predominou nas posturas a infeco simples por B. bigemina. Fmeas de carrapatos colhidas de vacas produziram menor nmero de posturas infectadas, mas o nmero de posturas infectadas por B. bovis foi semelhante ao de posturas infectadas por B. bigemina. Para os 431 pares de amostras de teleginas e posturas analisados, ficou evidente o encontro de nmero expressivo de posturas

eritrcitos. A taxa de infeco dos carrapatos babsias pelo microscpico de amostras de hemolinfa e pela amplificao do DNA parasitrio de dez fmeas adultas de B. microplus. Amostras de ovos de todas as fmeas de carrapatos tambm foram avaliadas para infeco por babsias por meio do exame direto de esfregaos de macerado desses ovos e pela tcnica de PCR. Os resultados referentes aos exames microscpicos e amplificao de DNA para Babesia bovis e Babesia bigemina esto resumidos na Tabela 1. Dos 27 bezerros examinados, 12 foram positivos ao exame microscpico para B. bigemina, com parasitemias que variaram de menos de 0,1% a 0,2%. A presena de B. bovis foi detectada em 3 animais. Alm das babsias, Anaplasma marginale foi encontrado em 12 animais, nos quais a parasitemia variou de 0,4% a 3,6%. Entre as 25 vacas, nenhuma foi positiva ao exame direto de esfregaos de sangue para babsias. Uma vaca apresentou parasitemia patente por A. marginale (0,6% de eritrcitos parasitados). As tcnicas de amplificao de DNA parasitrio a partir de amostras de sangue foram capazes de detectar

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Tabela 1. Comparao dos resultados obtidos pelo exame direto de esfregaos de sangue e por amplificao de DNA (PCR/nPCR) para o diagnstico de Babesia bovis e Babesia bigemina em 27 bezerros e 25 vacas mestias leiteiras criadas no Estado de So Paulo.

Exame direto Positivo Negativo

Amplificao de DNA (PCR/nPCR) Bezerros Vacas B. bovis B. bigemina B. bovis B. bigemina Pos. Neg. Pos. Neg. Pos. Neg. Pos. Neg. 3 0 12 0 0 0 0 0 20 4 13 2 25 0 21 4

negativas (60,3%). Alm disso, verificou-se que 70% das posturas produzidas por fmeas infectadas com B. bovis foram negativas, enquanto que as fmeas infectadas por B. bigemina transmitiram a infeco para 61% de posturas produzidas. A elevada taxa de infeco apresentada pelos bovinos indica que a regio estudada apresenta caractersticas de estabilidade endmica, situao em que a transmisso de babsias contnua (Mahoney & Ross, 1972; Goff et al., 1982), propiciando a infeco dos animais jovens. Como no se observou a presena de sinais clnicos de babesiose nos bezerros, presume-se que a imunidade passiva e inata seja suficiente para proteg-los contra os efeitos das babesioses clnicas durante os primeiros meses de vida, j que a imunidade ativa comea a se efetivar a partir dos quatro meses de idade (Passos et al., 1997). Esses achados esto na de acordo com de aqueles regies encontrados literatura para

em diversas regies do Brasil (Kessler et al., 1983; Madruga et al., 1983; FARIA, 1995). Essa ocorrncia tem sido atribuda reduo dos nveis de anticorpos colostrais associada adoo de prticas de manejo que impedem o contato dos bezerros com os carrapatos durante os primeiros meses de vida. No rebanho estudado, o contato precoce dos animais com os carrapatos nos pastos e a proteo colostral parecem ser responsveis pela ausncia de sinais clnicos de babesioses nos bezerros. Quanto s vacas, elas apresentam forte imunidade, em razo da prolongada exposio e, dessa maneira, raramente desenvolvem sinais clnicos. A alta sensibilidade das tcnicas de amplificao de DNA permitiu a identificao de nmero significativamente maior de animais infectados por B. bovis e B. bigemina do que o detectado por meio de exames diretos. Esses resultados esto de acordo com observaes anteriores relativas s infeces por Babesia em vrias espcies (Fahrimal et al., 1992; Figueroa et al., 1992, 1993; Battsetseg et al., 2001, 2002). Como os testes de amplificao de DNA detectam o parasita independentemente do

classificadas como de estabilidade endmica (Mahoney & Ross, 1972). A ocorrncia de babesioses em bezerros, do nascimento ao desmame, tem sido descrita

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desenvolvimento da resposta imunolgica, foi possvel diagnosticar infeces, tanto por B. bigemina como por B. bovis, nos bezerros, ainda no primeiro ms de vida. Nas fmeas de carrapatos, as taxas de infeco pelas duas espcies de Babesia detectadas pela amplificao de DNA diferiram em funo da categoria etria dos bovinos nos quais elas haviam se alimentado. Nas teleginas colhidas de bezerros, houve predominncia de infeces teleginas diferena por entre B. o bigemina, de nmero enquanto no de nas colhidas vacas houve

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teleginas

infectadas por B. bigemina e por B. bovis. Com base neste estudo, concluiu-se que, nas condies da regio estudada, o ideal manter o contato precoce dos bezerros com os carrapatos, evitando o surgimento de casos clnicos graves nos primeiros meses de vida. Para o rebanho em geral, seria conveniente manter a populao de carrapatos sob controle, de forma que o nmero de carrapatos por animal no seja suficientemente elevado para causar prejuzos provocados pela espoliao de sangue, mas que no seja to baixo a ponto de reduzir de maneira drstica os nveis de anticorpos circulantes contra os hemoparasitas.

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Apoio:

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