Bioqumica do Msculo Cardaco: Estrutura das Protenas Contrteis. Prof.

Mrio IBqM - UFRJ

Msculo: Tipos e Controle de Contrao

Esqueltico

Cardaco

Liso

Viso Geral da Contrao Cardaca

Msculo: Estrutura Muscular

Msculo Esqueltico em Detalhe.

Estmulo Nervoso da Contrao do Msculo Esqueltico em Detalhe.

Acomplamento Excitao-Contrao no Musculo Esqueltico.

Dinmica da Contrao Muscular

Estrutura da Unidade Contrtil: O Sarcmero.

Interao Protena-Protena: Contrao Muscular

Miosina
O Homohexmero possui massa molecular total de 540 kDa. Consiste de 4 cadeias leves (4 x 20 kDa) 2 cadeias pesadas (2 x 220 kDa), Cabea globular na poro N-terminal, contendo as unidades menores Cauda com 150 nm de comprimento que se entrelaam para formar uma super hlice

20 kDa 220 kDa Trypsin Papain

Cadeias leves em azul, 20 KDa; cadeias pesadas em rosa, 200 KDa.

 S1 = subfragmento 1 onde se d a hidrlise da ATP. 2 pontos de mobilidade, brao e cabea.

Miosina Fragmento S1
O domnio cataltico o responsvel pela hidrlise de ATP. Ligante qumico: ATP e Ca2+

Catalytic Domain

ATP-Binding Site Actin-Binding Site ELC RLC

Filamento Grosso de Miosina

O conjunto formado por 200 molculas de miosinas formam um filamento espesso que representa 65% do total de protenas da fibra muscular.

Uma mutao gentica da miosina est associado com aproximadamente 40% dos casos de Cardiomiopatia Hipertrfica (HCM).

Viso Geral da Miosina

Tropomiosina
O monmero possui 64 kDa. Se extende ao longo do filamento de Actina, numa sobreposio de molculas do tipo Head-to-Tail. composta de 2 -hlices antiparalelas, que se entrelaam para formar complexo homodimrico.
1 NH2 30 190 284 - COONH2 1 30

Tropomiosina

Tropomiosina
190

- COO284

COO NH2 COO NH2

NH2 COO NH2 COO

PDB: 1C1G

Tropomiosina
Existem 4 genes que codificam para a tropomiosina, TPM1: Tropomiosina 1 (alpha) TPM2: Tropomiosina 2 (beta) TPM3: Tropomiosina 3 TPM4: Tropomiosina 4

Os genes mais estudados so: TPM1: Mutao nesse gene est associado com uma cardiomiopatia hipertrfica familiar do tipo 3. TPM2: Troca de aminocidos resulta em fraqueza muscular e deformidades no membro distal. TPM3: Mutao nesse gene resulta em miopatia autossomal dominante e cncer.
Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol (March 18, 2004)

Troponina: Ou o complexo Troponina...

Troponina.
Complexo heterotrimrico formado por trs protenas regulatrias com 78 kDa:
Troponina T Forma o complexo troponina-tropomiosina. Troponina C Liga ons de Ca2+ para produzir a troca conformacional da Troponina I. Troponina I Liga o complexo troponina-tropomiosina ao miofilamento de actina.

Troponina.
A deteco da Troponina T e I no sangue so indicadores de injria no cardiomicito !!!!
Infarte do miocrdio Vasoespasmo coronariano Taquicardia severa - taquicardia supraventricular devido ao aumento na demanda de oxignio ou suprimento inadequado do msculo corao. Falha cardaca - morte ou anomalias do ritmo ventricular. Cardiomiopatias dilatadas ou hipertrficas.

Troponina C.
No msculo esqueltico a Troponina C, possui 4 stios de ligao ao Clcio No msculo cardaco a Troponina C, possui 3 stios de ligao ao Clcio

Ca2+ Ca2+

Ca2+ Ca2+

Ca2+ Troponina C

Ca2+

Actina.
Mg2+

Mg2+

ATP

Mg2+

Protena mais abundante nas clulas eucariticas. Importante papel na motilidade, regulao e forma da clula. Defeitos neste gene tem sido associado com com cardiomiopatia dilatada idioptica (IDC) e cardiomiopatia hipertrofica familiar (FHC).

Actina.
O Monmero, a G-Actina, possui 42 kDa de massa molecular. A F-Actina, o polmero, representa de 20-25% da estrutura muscular. Exerce sua funo pela polimerizao em filamento de F-actina. Ligantes qumicos: ATP e Mg2+

Increase [Mg2+]

Decrease [Mg2+]

Hydrolysis of ATP occurs yielding ADP/Pi/G-Actin Subunits in filament

ATP

ATP

ATP/G-Actin subunits added 5-10X faster

Mecanismo de Ao do Complexo TroponinaTropomiosina-Actina

Arranjo Estrutural do Complexo Troponina-Tropomiosina-Actina

Arranjo Estrutural do Complexo TroponinaTropomiosina-Actina-Miosina

Efeito bloqueador da interao ActinaMiosina.

ATP e a Contrao Muscular: Fases 1 e 2.

Fase 1: Em repouso a cabea de miosina est ligada a uma molcula de ATP em configurao de baixa energia e incapaz de acessar a actina. Neste estado a miosina pode hidrolizar o ATP em ADP + Pi.

Fase 1

ATP

ADP Pi

A energia liberada modifica a estrutura da miosina e promove uma configurao de alta energia.
Fase 2: Quando a miosina se liga a actina, libera o ADP + Pi.

A liberao do ADP + Pi, altera a configurao da miosina para uma de baixa energia.
A nova conformao da cabea da miosina,a faz caminhar sobre o filamento de actina, aproximando as duas bandas Z e encurtando o sarcomro.

ADP ADP Pi Pi

Fase 2

ATP e a Contrao Muscular:Fases 2 e 3.

Fase 3 Fase 3:
ATP

A miosina se mantm ligada a actina num estado conhecido como rigor at que uma nova molcula de ATP se ligue a miosina.

ATP

Fase 4:

A ligao com o ATP desliga a miosina da actina. Fase 4 O ATP associado est pronto para um novo ciclo de hidrlise.
ATP ATP

Interao Protena-Protena: Contrao Muscular

Titina.
4 MDa
Funo Integradora Scaffold Molecular

Teleotonina

Titina
Titina interage com muitas proteinas sarcomricas inclundo:
Regio Linha Z : Teletonina e Alfa-Actina Regio Banda I: Calpaina-3 e Obscurina Regio Linha M: Proteina C ligada Myosin, Calmodulina 1, CAPN3, e MURF1

A mutao neste gene est associada com:

Cardiomiopatia Hipertrfica Familiar, Distrofia Mscular Tibial.

Contrao do Msculo Cardaco

SEMELHANA PRINCIPAL: Fora contrtil gerado por miofilamentos sarcomricos controladas por Ca + + por meio de um sistema de troponina-tropomiosina.

DIFERENAS MAIS IMPORTANTES: Celulas Uninucleares. Msculo Esqueltico Neurognico x Corao

Miognico.
Msculo Esqueltico ocorre o Isolamento Eltrico x Corao h o Acoplamento Eltrico. Potencial de ao de micitos cardacos maior !

Contrao do Msculo Cardaco: Papel dos Discos Intercalados

Acomplamento ExcitaoContrao.
Musculo Esqueltico

Corao

Estrutura do Musculo Liso.

Corpos Densos Filamentos de Desmina

Acomplamento Excitao-Contrao no Msculo Liso.

No Tem Tbulo T Sem Troponina !!!!!!!!!!!!!! Reticulo Sarcoplasmatico Rudimentar !!!!!

Caractersticas das Fibras Musculares.

Table 4. Characteristics of Muscle Fibres (Adapted from Table 11-6 in Vander et al., p. 345) Smooth muscle Characteristic Thick and thin filaments Sarcomeres banding pattern Transverse tubules Sarcoplasmic reticulum (SR)* Gap junctions between fibres Source of activating calcium Site of calcium regulation Spontaneous production of action potentials by pacemakers Effect of nerve stimulation Physiological effects of hormones on excitability and contraction Skeletal muscle Yes Yes Yes ++++ No SR Troponin No Single unit Yes No No + Yes SR and extracellular Myosin Yes Multiunit Yes No No + Few SR and extracellular Myosin No Cardiac muscle Yes Yes Yes ++ Yes SR and extracellular Troponin Yes; most are not spontaneously active

Excitation No

Excitation or inhibition Yes

Excitation or inhibition Yes

Excitation or inhibition Yes

Cardiomiopatias Hipertrficas Familiares:Genes Afetados

Cardiomiopatias Hipertrficas Familiares: Protenas Afetadas

-MyHc MLCs TnI TnT TM

220 kDa

Hipertrofia do Ventrculo Esquerdo

Cardiomiopatia Hipertrfica
-Tropomyosin Mutation D175N in Familial Hypertrophic Cardiomyopathy

20 m

20 m

A, area of normal histological structure of the left ventricular free wall.

B, area with myocyte disarray of the ventricular septum.

Figure 2. Effect of specific sports training on LV cavity dimension or wall thickness in elite athletes, representing 27 different sporting disciplines.

Maron B J , Pelliccia A Circulation 2006;114:1633-1644

Copyright American Heart Association

O QUE LEVA FADIGA MUSCULAR ?

Deficincia de ATP. Incapacidade de propagao do estmulo nervoso atravs da membrana celular. Acmulo de cido Ltico.

Rigor mortis.
Sinal reconhecvel de morte que causa um enrijecimento do cadver.

Inicia-se entre 3 e 4 horas post mortem, com total efeito do rigor em +/ 12 horas e finalmente, relaxamento em + / 36 horas.

Mecanismo de Ao das Toxinas Botulnica e Tetnica.

Toxina Botulnica.
Em pequenas doses, a toxina vem sendo usada para tratar doenas relacionadas a contraes musculares indesejadas.