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TÉCNICAS
refere-se ao organismo de
onde foi isolado. A primeira Enzima Local de restrição Organismo de origem
descoberta ou a linhagem
da qual foi isolado. Smal
Serratia marcescens
Enzimas
Uma de restrição
enzima de restrição ou endonuclease de
restrição é um tipo de nuclease que cliva uma
cadeia dupla de DNA sempre que identificar uma
sequência específica de 4 a 8 pares de bases que
seja o local de restrição da enzima (Smith &
Wilcox, 1970).
As seqüências
reconhecidas
apresentam nas
duas cadeias
complementares
seqüências idênticas
mas invertidas –
palíndromo.
PCR – REAÇÃO EM CADEIA DE
POLIMERASE
• Aquecimento do DNA a ser amplificado a temperatura de 94°C por
1 minuto, o que provoca separação da dupla hélice. Depois, com a
temperatura mais baixa, são empregadas as polimerases, que
atuam em cada uma das cadeias do DNA, complementando os
pares de bases.
• A cada ciclo, a quantidade de DNA-alvo é duplicada, de modo que
em 10 ciclos obtêm-se 1024 vezes mais DNA-alvo; em 20 ciclos,
cerca de 1 milhão de vezes mais DNA-alvo.
• Propicia um aumento na eficiência da análise de material genético
• Polimerases são enzimas que ocorrem nas células e catalisam
reações de polimerização (formação de moléculas de cadeias
longas)
• Pela técnica PCR promove-se a duplicação de trechos do DNA in
vitro.
PCR
VISUALIZAÇÃO DO DNA
Uso de sondas: pequenos segmentos de DNA radioativados, cuja
seqüência de bases é conhecida. Acoplam-se às seqüências de
DNA das quais são complementares, ligando-se às mesmas.
Tristeza ou remorso ?
RESULTADOS DE TESTES
Em 1987: casal de noivos – Matthew Brock e Kelly Lynn Perry
(também estuprada) – é achado baleado na cabeça (bala de rifle
calibre 30) em Rodman Dam, área de recreação na Flórida.
Principais suspeitos: os adolescentes Randall Scott Jones e Chris
Reesh.