Institut o de Cincias Biom di ca s Departa m e n t o de Bioqu mi ca Mdica - CCS- Bloco B- 1 o andar.

Faculdad e de Farmcia

Disciplina : Bioqu mic a II Bloco I ro!ess or respo n s " e l: #na Bloco %& C'(M'

aula $alent e

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ESTUDO DIRIGIDO I

UFRJ

GLICLISE HISTRICO
1) Louis Past e u r, em 1861, publicou a desc ob e r t a histric a de que o cresci me n t o de leve dur a s , por gra m a de glicos e , maior na pres e n a de ar do que na aus n ci a de ar !sta "oi a primeir a de mo n s t r a # o de que o me c a ni s m o de gliclise aerbic a mais e"icient e do que o da gliclise ana e r bic a Past e ur ta mb m obs ervo u que a glicos e cons u mi d a mais lent a m e n t e na pres e n a de ar do que em condi$ e s ana e r bic a s !sse e"eito conh e cido como %e"eito Past e ur% constituiu& se nu m enig m a par a os bioqu' micos dura nt e muitos anos, que elabor a r a m as mais di"ere nt e s hipt e s e s par a est e "en( m e n o )oc pode imagin a r uma hipt e s e que e*plique o e"eito Past e ur +

,) - enor m e a d'vida mun di al com o gnio que "oi Past e u r .a poc a de Past e u r /18,,& 1801), dua s teorias tent a v a m e*plicar a conver s # o de glicos e e m seus produt o s de degr a d a # o /"er me n t a # o ) 2 a teoria dos %ger m e s % /"er me n t a # o caus a d a por microor g a ni s m o s ) ou a teoria da gera # o espon t 3 n e a /"er me n t a # o ger a d a por degr a d a # o qu'mic a) 4niciando seus estu do s sobr e a produ # o de vinho, vinagr e / produt o s da "er me n t a # o de glicos e) obs ervou que os comp o s t o s obtidos "requ e n t e m e n t e continh a m produt o s otica m e n t e ativos 5uand o Past e ur iniciou seus trab alho s como qu'mico havia estu d a d o a molc ul a de tart ar a t o, que poss u' a is(me r o s tica m e n t e ativos e est a b e l e c e u que a ativida d e tica est a v a relacion a d a com %vida6 7endo assi m, conve n c e u& se que a "erme n t a # o ocorreria na pres e n a de microor g a ni s m o s vivos Propon do que cad a proce s s o "er me n t a tivo poderia ser atribu'do a um microor g a ni s m o esp e c'"ico, Past e ur dirigiu sua ate n # o ao isola me n t o e ao estu do das nec e s si d a d e s nutricion ais dos microorg a ni s m o s empr e g a d o s a mpl a m e n t e at ent # o na "erme n t a # o industrial !n"im, Past e ur lanou a 8teoria vitalist a 6 que di9ia que 8a "erme n t a # o s ocorre na pres e n a de microor g a ni s m o s vivos6, e que "oi aceit a pela comu nid a d e cient'"ica por muitos anos )oc acre dit a na %teoria vitalist a%+ :omo voc provaria /ou n#o) est a teoria+

,) ;ois irm#o s /os irm# o s <uchn e r) "ora m des p e di d o s de um "amos o labor a t rio de qu'mic a, dado = sua %total incap a cid a d e para o trab alho cient'"ico% >o tent a r e m "abricar um me dic a m e n t o = bas e de suco conc e n t r a d o de levedur a /que era muito utili9ado par a o trat a m e n t o de doe n a s pul mo n a r e s ) , os irm# os <uchn e r cresc e r a m gra nd e s qua ntid a d e s de levedur a , que pas s a r a m em prens a s para conc e n t r a r e est e rili9ar, ma t a n d o os microor g a ni s m o s .a tent a tiv a de pres e r v a r e melhor a r o sabor, os irm#o s <uchn e r acre s c e n t a r a m a?c a r, um conh e cido cons e r v a n t e par a doc e s Para sua surpr e s a a "er me n t a # o "oi imedi a t a , muito maior que a obs erv a d a com os microor g a ni s m o s vivos

)oc pode e*plicar a e*pe ri nci a dos irm# o s <uchn e r = lu9 da %teoria vitalist a%+ ! com os conhe ci m e n t o s de noss a poc a + @m dos %inAb ei s% irm# o s <uchn e r continuo u trab alh a n d o em qu'mic a e ganho u o pr mi o .obel alguns anos aps

OS PASSO S DE DEGRADAO DE GLICOSE B) Carde n e Doung, em 10E0, isolara m o primeiro inter m e di A rio da via glicol'tica, utili9ando par a est e est ud o o me s m o %suco de leved ur a % pelos irm# os <uchn e r !m condi$e s de ana e r o bios e , o suco de leved ur a trans"or m a glicos e e m Alcool e :F , Carde n e Doung obs e rv a r a m uma estr a n h a ativa # o pelo suco de leve dur a "ervido e tent a r a m identi"icar ess e ativa dor Para tal, reali9ar a m o conGunt o de e*pe ri nci a s abai*o2 a) Habela 42 !"eito da adi# o de suco de leve dur a "ervido na "erme n t a # o total de glicos e por suco de leved ur a

Su c o (mL) ,1 ,1 ,1 ,1 ,1 ,1

gu a (mL) ,1 & 1E & I1 &

Su c o fe !" # o (mL) & ,1 & 1E & I1

G$"co % e (g) 1 1 I1 I1 1E 1E

Tem & o (') IE IE IE IE IE IE

CO ( fo m a # o (g) E E E E E E ,B6 J16 18E BJ1 1B1 111

5ual o e"eito da adi# o de suco "ervido na "erm e n t a # o +

b) Habela 442 ;iAlise de suco de leved ur a "ervido E)& e " m e * + o gu Su c o Re% , # u D"a$" % a # Tem & CO ( a fe !" # o o (mL) o (mL) o (') fo m a # o ( g ) (mL) (mL) ,1 & & & B8 E ,68 & ,1 & & B8 E B0I & & ,1 & B8 E ,I6 ,1 & & & I, E 11J ( & ,1 & & I, E JJB & & ,1 & I, E 180 & & & ,1 I, E JJB . ,1 & & & B8 E 11B & & & ,1 B8 E ,11 O/S0 Hodos os tubos continh a m ,1 mL de suco n#o "ervido K 1g de glicos e K tolue n o /cons e rv a n t e ) .o e*p eri m e n t o J, o suco de leved ur a "oi dialisad o ant e s de ser "ervido F que a diAlise est A sep a r a n d o + 5ual comp o n e n t e te m ativida d e + 5ual o obGetivo do e*p eri m e n t o J da tab el a 44+ 5uais s#o as caract e r's tic a s do ativad o r que voc conh e c e at agor a+

5ual seria o pr*imo pas s o para desco brir o ativa d or+

c) Habela 4442 !quival ncia de :F , e*tr a "orma d o dura n t e o per'odo inicial, e "os"ato adicion a d o E)& e " m e *+o % ( . 5 6 7 8 CO ( (g) o1 % e ! a #o E E E E E E E E0E E1B E18 E6E 1E6 1EJ 11J CO ( (g) ca$c u $ a # o a &a +" #o fo% f a + o E E86 E E11 E E11 E EB0 E 11, E 1E1 E 11, E)& e " m e *+o % 2 3 -4 --( -. -5 CO ( (g) o1 % e ! a# o E E E E E E E 106 E66 E1I E16 E10 E68 EI1 CO ( (g) ca$c u $ a # o a &a +" #o fo % f a + o E 10I E E61 E E61 E E61 E E61 E EIE E EIE

O/S0 .os e*p eri m e n t o s 1 a I "oi adicion a d o suco de leved ur a "ervido > qua n tid a d e de Pi pres e n t e no suco "oi esti m a d a por precipit a # o com citrat o de ma g n s io e o :F, esp e r a d o ser produ9ido "oi calcula d o a partir do Pi esti m a d o .os e*p eri m e n t o s 8 a 1B "oi adicion a d o "os"ato de potA s sio d) .a tab el a 4), abai*o, ,1 mL de suco de leved ur a "ora m utili9ado s e a tab el a re"er e& se ao "os"ato det e r mi n a d o !m />)2 Lgua que n t e "oi adicion a d a = ,1 mL de suco de leved ur a > mistur a "oi "ervida, "iltrad a e o coag ula d o "oi lavado ant e s da det e r mi n a # o de "os"ato !m /<)2 >o suco de leved u r a /,1 mL) "ora m adicion a d o s uma solu# o JEM de glicos e K E JI, g de "os"ato de ma g n s io > mistur a "oi imedia t a m e n t e "ervida, "iltrad a e o coag ula d o "oi lavado !m /:)2 :omo em /<), mas a mistur a "oi per mitid a "erm e n t a r dura n t e 6E minuto s >ps ess e te m p o, a mistur a "oi "ervida, "iltrad a e o coag ul a d o lavad o F "s"oro total "oi me did o aps hidrlis e Acida por precipita # o com citrat o de Ng na pres e n a de e*ce s s o de am( ni a A / C Su c o o "g" * a $ Su c o 9 fo % f a + o Su c o 9 fo % f a + o *: o fe m e * + a # o Fe m e * + a # o Coa g u $ a # o E E1J E E1I E EI, F"$+ a # o E 1,6 E B8E E EIE E ,I1 E ,8, E 6I0 E 8,1

a) P e c" & " + a # o &o c"+ a + o #e ;g F"$+ a # o 1) <: o & e c" & " + a # o &o c"+ a + o #e ;g To+a$

E B1E E 810 e) >nalise as tab el a s acim a e interpr e t e os result a d o s 5ual o ativa d o r desco b e r t o por Card e n e Doung+ F que est A acon t e c e n d o com o Pi+

)oc sab e ria prop(r um des tino para glicos e+ Card e n e Doung cheg a r a m as seg uint e s conclus $ e s 2

1& !m pres e n a de supri m e n t o amplo de Pi a "erm e n t a # o alcolica da glicos e pelo e*tr a t o de leved u r a proc e d e at que toda glicos e seGa cons u mi d a ,& !m condi$ e s ond e a qua n tid a d e de Pi limita d a a "erm e n t a # o se torn a mais lent a e a Orutos e& 1,6& bi"os"at o acu m ul a Por que+ Fnde o Pi particip a+ J& >di#o de peq u e n a s qua n tid a d e s de Pi ao e*tr a t o de leved u r a com limita # o de Pi caus a um rApido au m e n t o da ta* a de "erm e n t a # o dura n t e a qual 1 mol de :F, produ9ido por mol de Pi adicion a d o ") !m 10,8, a estru t u r a qu'mica do comp o s t o n#o precipit a d o por citrat o de Ng "oi identi"ica d a no labor a t rio de Levine e PaQmo n d como corres p o n d e n d o = "rutos e 1& 6 bi"os"at oR o primeiro inter m e di A rio isolado de uma via met a b lica Propon h a como seria est a via me t a b lica com bas e nos dado s obtidos at ent # o 1) Por volta de 10JE, F NeQerho" lanou uma met o d olo gi a de isola m e n t o de en9im a s , nota d a m e n t e as da via glicol'tica !sse pes q uis a d o r veri"icou que o e*tr a t o cet( nico de m?s c ulo de coelho era cap a9 de utili9ar glicog nio com mais "acilidad e do que utili9ava glicos e > situa # o se modi"icav a na pres e n a de um %ativa d o r% obtido de leved ur a , con"or m e "igura abai*o a) @tili9a# o de glicos e e glicog nio pelo p de ace t o n a env elh e cido por trs se m a n a s 2 Lactato (mg) 1.5
Slicognio

Slicose K ativador

1
Slicose

0.5 0 0 20 40 60

.enhuma adi#o

80

100

Tempo (min)

b) F ativa d or "oi obtido por autlis e de leved ur a na pres e n a de peq u e n a s qua n tid a d e s de tolue n o e precipita d o por Alcool F ativa d or insol?v el em

Alcool, sol?vel em Agu a, perd e a ativida d e se aqu e cido por 1 minut o a 1E T:, inativa d o por Alcali ou Acido e cons er v a& se be m em gelo )oc pod e imagin a r a natur e 9 a des s e ativa d or+ Para voc esp a n t o s o que se obt e n h a um ativad o r de m?sc ulo de coelho a partir de leved ur a + c) .um seg u n d o e*p e ri m e n t o , o e*tr a t o do m?sc ulo de coelho e o ativa d or "ora m sep a r a d o s por um "ilme de colide e glicos e "oi adicion a d a Fbs ervo u& se um au m e n t o da velocida d e de "orm a # o de Acido lAtico @m au m e n t o de velocida d e ta m b m era obs erv a d o qua n d o glicos e era adicion a d a a uma solu# o de ativad o r >ps algun s minuto s os comp o s t o s era m sep a r a d o s por ultra"iltra # o e o "iltrado adicion a d o ao e*tr a t o de m?s c ulo )oc pode agor a dar um nom e ao %ativad o r% + d) >gora analis e o grA"ico ab ai*o retirad o do trab al ho de F NeQerh o" 5ue conclus $ e s pod e cheg a r a res p eit o dos camin h o s de degr a d a # o de glicos e no m?s c ulo de coelho e no suco de leved ur a + Netabolis mo de ,mg de glicos e pelo e*tr a t o de m?sc ulo com

16 14 Consumo de acar (mg) 12 10 08 06 04 02 00 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 Tempo (min) Tempo (min)

10 08 06 04 02 00 !os"a#o es#eri"icado

com "os"ato adicional sem "os"ato adicional

he*ocin a s e e) Oinalm e n t e , obs erv e no seu livro o proc e s s o de degr a d a # o de glicog nio )oc pod e di9er porqu e glicog nio era utili9ado pelo e*tr a t o cet(nico de m?s c ulo de coelho mais rapid a m e n t e do que glicos e+

6) !ntre 10BE e 101E, princip al m e n t e nos labor a t rios de Uarburg, NeQerh o" e :ori, as vArias en9im a s da via glicol'tica "ora m puri"icad a s e isolad a s /a maioria delas na "orm a cristalin a) e seus modo s de a#o e*te n siv a m e n t e inves tig a d o s ;a mes m a ma n eir a os di"ere n t e s inter m e d i A rios "ora m sen d o isolados com o uso de inibidor e s Flhe agor a par a a rota da gliclise em seus livros F inibidor n#o "isiolgico, "luoret o, inibe a en9im a enola s e , enq u a n t o o iodoac e t a t o inibe a glicer ald e'd o J& "os"ato desidrog e n a s e Propon h a quais seria m os novos inter m e di A rios mais prov Av eis de sere m isolado s aps a inibi#o por iodoac e t a t o e por "luoret o I) .s GA vimos que na rota da gliclise e*ist e m rea$ e s rever s'v eis e irrever s'v eis > regula # o da velocid a d e da via e*ercid a sobre as en9im a s que catalis a m rea$ e s irrev er s'v eis )oc sab e ri a e*plicar uma vant a g e m "isiolgica des s e "ato+ @ma en9im a chav e no controle da velocid a d e da via glicol'tica a "os"o"ruto q uin a s e !ssa en9im a ativa d a por bai*a s conc e n t r a $ e s de >HP e inibida por alta s conc e n t r a $ e s de >HP que diminu e m a sua a"inida d e pelo seu subs tr a t o , o u seGa, a "rutos e& 6& "os"ato >ltas conc e n t r a $ e s de >NP e citrat o ta m b e m in"luencia m a velocid a d e des s a en9im a )oc pod e propor se seria m inibidor e s ou ativa d or e s + 5ual o sentido "isiolgico des s a s regula $ e s + 8) I1 anos apos o isola m e n t o da "rutos e 1& 6 di"os"ato, uma seg u n d a molcula de "rutos e di"os"ato "oi isolad a de clulas de hep a t cito s Ooi veri"icado que clulas de hep a t cito s incub a d a s com gluca g o n tinha m a ativida d e da "os"o"ruto q uin a s e "orte m e n t e inibida > en9im a isolad a em tubo de ens aio apr e s e n t a v a proprie d a d e s nor m ais ;o e*tr a t o controle de clulas de hep a t cito s , na aus n ci a de gluca g o n , "oi isolado um comp o s t o , carac t e ri9 a d o como "rutos e ,& 6 di"os"at o, que tinh a o seguint e e"eito na "os"o"ruto q uin a s e isolad a de "'gado a) !"eito da Oru& ,,6& P , na (a) a"inida d e da POV par a Oru 6& P e (1) na inibi#o da en9im a por >HP

W>HPX constante Y 1 1 mN 10 08 )#i*idade re+a#i*a 06 04 02 00 0 1 2 3 4 5

WOru 6&PX constante Y E ,1 mN

(a)
com Oru&,,6&P,,

(1)

com Oru&,,6&P,,

10 08 06 04 )#i*idade re+a#i*a

sem Oru&,,6&P,

sem Oru&,,6&P,

02 00

$!ru%6%&' (m()

$)T&' (m()

>nalise a "igura 5ual o e"eito da "rutos e ,& 6 di"os"at o na velocid a d e da via glicol'tica+ 5ual o e"eito de gluca g o n no "'gado+ 0) > conc e n t r a # o de "rutos e ,& 6 di"os"ato na clula de "'gado est A na "ai*a de micro m ol ar !sta conc e n t r a # o mais bai*a no "'gado de ratos diab ticos F comp o s t o "orma d o a partir de >HP e "rutos e 6 "os"ato por uma en9im a deno mi n a d a "os"o"ruto q ui n a s e , >HP K Oru& 6& P >HP K Oru& 6& P

POV,

>;P K Oru ,& 6 P, >;P K Oru ,& 6 P,

O<O, Pi e >NP in"luencia m ess a en9im a 5ue e"eito voc esp e r a ri a de Pi e >NP sobre a velocid a d e da "os"o"ruto q uin a s e , /POV,)+ > "rutos e ,& 6 di"os"ato hidrolisa d a a "rutos e 6 P pela en9im a "rutos e ,& 6 bi"os"at a s e 4ncub a n d o "atias de "'gado com gluca g o n , que e"eito voc esp e r a ri a do gluca g o n sobr e a ativida d e de POV, e de "rutos e ,& 6 bi"os"at a s e + Porqu e a conc e n t r a # o de "rutos e ,& 6 di"os"ato bai*a em ratos diab tico s + 1E) ;iscut a os des tino s do Acido pir?vico em condi$ e s de aero bios e e ana e r o bios e !m que condi$ e s hav er A maior rendi m e n t o ener g tic o+ >gora, = lu9 dos conh e ci m e n t o s atu ais, e*pliqu e o e"eito Past e u r !*pliqu e ta m b e m o ac? m ulo de "rutos e 1& 6 di"os"ato nas condi$ e s e*p e ri m e n t a i s utili9ad a s por Card e n e Doung 11) >lguns orga nis m o s respo n d e m = ano*ia seg u n d o um mec a ni s m o ada p t a tivo altern a tivo ao e"eito Past e u r !sses orga nis m o s , por n#o pod er e m acu m ul a r qua n tid a d e s elev a d a s de Acido lAtico /prod u t o t*ico), res po n d e m = ano*ia diminuin d o as sua s ta*a s met a b lic a s Fbs erv e a tab el a ab ai*o )oc pod e e*plicar o mec a nis m o molec ul ar das regula $ e s envolvid a s + 5ual o regula d o r alost rico mais pote n t e da via glicol'tica+ a) Habela 12 :once n t r a $ e s de algun s met a b licos em cre b r o de ca mu n d o n g o dura n t e isque mi a e m?s c ulo adut or M*tilus edulis dura n t e an*ia )alores est # o e*pr e s s o s em nmolZ g peso molha d o C= e 1 o # e ca m u * # o * g o A#u + o ;e+ a 1 > $ " + o % Co* + o$ e (6 % # e Co* + o$ e 56 m"* "%? u e m " a a* > )" a Slicos e 6& P ,,B 01 11E 1IE Orutos e 6& P 1E ,I ,J J1 Orutos e &1,6& P , ,I 11J B, JE ;ihidro*ice t o n a & P 1J J0 J1 JE P&enolpiruv a t o J1 81 1J 1E Piruvat o J0 I, 1E B Lactat o IIE 18,E 0E 1I1 >HP ,18E ,B1E BBEE J1EE >;P 60E IJE 61E 1E1E

>NP Oos"ag nio Pi

1JE JIBE JJ1E

1JE ,EEE BB1E

1E ,BEE 81E

,EE ,EEE 161E

Fbs2 Oos"ag nio a cre a tin a& P no cre br o de cam u n d o n g o e arginin a& P no adut or M. edulis 1,) )ocs GA vira m que m?sc ulos produ9 e m Acido lAtico cuGa qua n tid a d e au m e n t a no m?sc ulo em movi m e n t o 5ual o des tino me t a b lico do Acido lAtico produ9ido no m?sc ulo+ CASO CL@<ICO0 >) Pacient e 2 18 anos, se*o mas c ulino, apar e n t e m e n t e robus t o 5uei*a s principais2 nAus e a s , dore s mus c ul ar e s , caimbr a s e alter a # o da cor da urina aps o e*erc'cio Cistria patolgic a pregr e s s a e "amiliar2 irm# o, irm# e apis mor m ai s Pais se m cons a n g [i nid a d e 4ntoler 3 n ci a ao e*erc'cio des d e se m p r e Hest e prelimin a r e s 2 & Pacient e em repou s o2 Do % a g e m % = " c a Cb /gM) 7SFH /@ZmL) >ldolas e /@ZmL) :PV /@ZmL) L;C /@ZmL) Pac" e * + e 11 IE 1, B6 1,E <o m a$ 1I BE J 1, ,EE

& Heste de e*erc'cio isqu mico do ant e b r a o 2 interro m p e & se a circula # o san g u'n e a atrav s de um ma n g uito de borrac h a e pacien t e dev e aper t a r uma pequ e n a bola dura n t e um minuto >ps isso, colet a& se o san g u e de uma veia da m# o Du a A : o Do Co* + a + u a Lac+ a + o Pac" e * + e BE s 7im 7im n#o <o m a$ 6E s .#o .#o 7im

4sque mi a contr a # o

CICLO DO CIDO C@TRICOB

1) !m 1I8E, Lavoisier e Laplac e estu d a v a m os mec a ni s m o s de respir a # o num mi*to de calor'm e t r o e res pir( m e t r o contru'do por les prprios e publicav a m 2 Produ # o de :F , :arv#o :obaia 11, J 1 g 11 8I g Selo derre tid o ,008 g JJE J g SeloZ:F , ,6 60 ,I 8E

>nalise a tab el a 5ual conclus # o voc pod e tirar dos dado s +

.os seus trab al ho s , Lavoisier comp a r a v a a res pir a # o de um anim al com a quei m a de uma vela \le tinha not a d o que em amb o s os proc e s s o s havia cons u m o de o*ig nio e produ # o de :F, Lavoisier concluia seus estu d o s sobr e res pira # o em ser e s vivos com a seg uint e "ras e ]% Pespira # o , por cons e g ui n t e , uma comb u s t # o , muito lenta verd a d e , mas de outr a ma n eir a per"eit a m e n t e igual =qu el a do carv # oR ela ocorr e no interior dos pulm$ e s , se m prod u9ir lu9 perc e p t'v el, porqu e a cha m a imedia t a m e n t e absorvid a pela umid a d e dos rg#o s% 5uant o ao ma t e ri al que supos t a m e n t e so"ria comb u s t # o dura n t e a respira # o , Lavoisier prop$ e que %um humo r princip al m e n t e comp o s t o de hidrog nio e carbo n o, carre g a d o pelo sang u e e deriva d o da comid a% ,) Lavoisier morr e u na guilhotin a :omo pro"eti9a d o por La Srang e %Nais de ce m anos pod er # o se pas s a r ant e s que apar e a outra cab e a como ess a % !ntre 10J1& 10J6, 79ent& SQ^rgQi come o u a publicar uma srie de estu d o s sobr e res pira # o us an d o sus p e n s # o de m?s c ulo peitor al de pom b o 7end o um m?s c ulo utili9ado par a voar, e port a n t o e*tr e m a m e n t e requ e r e n t e de en er gi a, a cap acid a d e o*idativ a des t e tecido e*tr a or din = ri a m e n t e alta, o que torn a v a seus produ t o s de o*ida # o me n s u r A v ei s !sses pes q uis a d o r e s de m o n s t r a r a m que2 a) 5uan tid a d e s min?s c ul a s de Acidos dicarbo *'licos / succ'nico, "umArico, mAlico e o*alac e t a t o ) s#o cap a9 e s de au m e n t a r a respira # o , e ess e au m e n t o um m?ltiplo da qua n tid a d e de o*ignio nec e s s A ri a para a o*ida # o des s a s subs t 3 n ci a s b) Fs Acidos dicarb o*'licos n#o s#o cons u mi d o s , pode n d o ser subs e q u e n t e m e n t e det e c t a d o s no meio c) :ompo s t o s de J carbo n o s /inter m e di A rio s da via glicol'tica) era m cap a9 e s de tran s" e rir seus hidrog nio s /na pres e n a de o*ig nio) para o o*alac e t a t o d) Nalonat o, que inibe o*ida # o de succina t o nos tecidos um pod er o s o inibidor da respira # o celular !stav a "eita uma liga # o entr e o que acont e c e na %quei m a % de glicos e /comid a) e a res pir a # o celular !*plique cad a um dos res ult a d o s obtidos em cad a um dos ite ms

>nalise ess e s dado s e propo n h a uma rota de utili9a # o de glicos e na pres e n a de o*ignio 79ent& SQ^rgQi GA tinha conh e ci m e n t o de en9im a s cha m a d a s %desidro g e n a s e s % q u e levav a m hidrog nio s at o o*ignio !strut ur a dos comp o s t o s envolvidos

J) !m 10JI, Vrebs e _ohnso n publicar a m que Acido c'trico um ativa d or cat al'tico da o*ida # o de carbo hidr a t o s em m?s c ulo :omo voc provaria que o Acido c'trico particip a ou n#o da me s m a rota mt a b lica dos outros Acidos dicarbi*'licos+ B) !m maro de 10JI, Nartius e Vnoop desco b rira m o ca minh o biolgico para o*ida # o de citrat o

7 "oi poss'v el de mo n s t r a r ess a rea # o utili9and o um inibidor esp e c'"ico da o*ida # o de Acidos cet( nicos , o *ido de ars nio, que levav a ao ac? m ulo de /& ceto glut a r a t o F que voc ach a que Vrebs "e9 qua n d o leu os trab al ho s de Nartius e Vnoop+ 1) ;es e n h e agor a o ciclo do Acido c'trico com todos os inter m e di A rios que voc prop$ e > liga# o entr e a gliclise e o ciclo de Vrebs n#o "oi esclar e cid a nes s a poc a >pen a s 1E anos mais tard e , LQnen descr e v e u a conv er s # o de piruv a t o a ace til :o> que ent # o se cond e n s a ri a com o*alac e t a t o par a "orma r citrat o

6) !m seus trab alh o s , em 10J6, 79ent& SQ^rgQi propo s que %trios e% /inter m e d i A rio de J carbo n o s da via glicol'tica) "orma ri a o*alac e t a t o dura n t e a sua %quei m a % na pres e n a de o*ig nio !stav a 79ent& SQ^rgQi erra d o+

I) .o decorr er da histria da hum a ni d a d e , os gran d e s ava n o s no ent e n di m e n t o do @nivers o e no trat a m e n t o de doe n a s se bas e a r a m no des e n v olvi m e n t o da cincia > clebr e "ras e %.#o e*ist e cincia aplicad a R e*ist e m aplica$ e s da cincia%,"oi dita por Past e u r no sculo `4` _A em 10JI, em decorr n ci a de seus trab alh o s , VorAnQi e 79ent& SQ^rgQi anun ci av a m que diminuia m o grau de acidos e met a b lica em pacie n t e s diab ticos alime n t a n d o & os com Acido succ'nico !mbor a ess e trat a m e n t o n#o ten h a se mos tr a d o su"icient e par a a cura da diab e t e , at hoGe trat a& se crise glic mic a com uma mistur a que inclue citrat o em sua comp o si # o Vrebs, em 10JI, sug e ri a ess e me dic a m e n t o alter n a tivo por ser %mais agra d A v e l ao palad a r e mais bar a t o% )oc pod e propor uma bas e met a b lic a par a ess e s trat a m e n t o s + F que "altaria ao diab tico+

8) Porqu e %in vivo% o n'vel de inter m e d i A rios do ciclo de Vrebs n#o per m a n e c e cons t a n t e dura n t e as di"ere n t e s situa$ e s me t a b lica s + 5ual o des tino dos hidrog nio s libera d o s no ciclo do Acido c'trico+ ;iscut a o pap el centr al do ciclo do Acido c'trico no me t a b olis m o inter m e di A rio

0) F ciclo de Vrebs pas s a& se na ma tri9 mitoco n d rial !m que condi$ e s hav eria citrat o no citoplas m a celular+ 5uais as cons e q u n ci a s met a b lic a s des s e "ato