Fosforilao Oxidativa

ou

Como conseguimos acoplar a oxidao de

NADH e FADH2 produo de ATP
Prof. Henning Ulrich

A clula precisa trabalhar

Portanto, precisa de energia

Respirao celular
Uso de oxignio

Catabolismo

Sem oxignio

Fermentao

Ganha enrgia com ATP

Repete

A Base do Catabolismo
Reagentes

Produtos

Transferncia de eltrons

Reaes redox
Transferncia de eltrons

Oxidao: perda de eltrons

Reduo: ganho de eltrons
Agente redutor
Xe- + Y

X + YeAgente oxidante

Respirao celular
REAGENTES
Glicose + oxignio

C6H12O6 + 6 O2

PRODUTOS
Dixido + gua
de carbono

6 CO2 + 6 H2O

Reduo
Oxidao

Ganho de enrgia

Eletronegatividade
baixa

Glicose

NADH
Cadeia de transporte de eltrons

Eletronegatividade alta

Oxignio

Fosforilao do
ATP

Respirao celular
Gliclise
Glicose 2 piruvato
Reaes redox liberam NADH
Citossol

Ciclo de Krebs
Piruvato CO2
Reaes redox liberam NADH
Matriz mitocondrial

Transporte de eltrons
Aceita eltrons (do NADH)
Gera ATP
Membrana interna

Fosforilao ao nivel do
substrato
+

Fosforilao oxidativa

38 ATP

Gliclise

Piruvato acetil CoA

1. CO2 liberado
2. Acetato formado (NAD+ NADH)
3. Coenzima A ligado

Ciclo de Krebs
Acetil-CoA (2 Carbonos)

2 CO2 + 3NADH + 1 FADH +

1 ATP

Atualmente 2 Acetil-CoA
da gliclise !!

Glicolise (2 ATP +2 NADH)

+

Acetyl CoA synthesis (2 NADH)

+
Ciclo de Krebs (1 ATP + 3 NADH + 1 FADH)
+
Ciclo de Krebs (1 ATP + 3 NADH + 1 FADH)
4 ATP + 10 NADH + 2 FADH

Citossolo:
Enzimas de
Gliclise
(glicose at
Piruvato)

Esquema geral de fosforilao oxidativa pela cadeia repiratria

(Fosforilao de ADP, oxidao de NADH e FADH2 )

Coenzima Q
ou
Ubiquinona
ou
Q

Porfirnas nos citocromos

Fe2+ (red)
ou
Fe3+ (ox)

Centros ferro-enxofre (Fe-S)

Fe2+ (red)/Fe3+ (ox)

Fe2+

2Fe2S

4Fe4S

Potenciais de reduo de meia reaes da cadeia respiratria

Eo: Medida de afinidade para e- da molcula/ion sendo reduzida

DEo = Eo (aceitor de e-) Eo (doador de e-)
Se DE > 0, reao tende ir para frente
DG = -n x F x DE

F = 96,5 kJ/V.mol

Separao dos
complexos
funcionais da
cadeia respiratria

Reaes catalizados por fraes isolados in vitro

Mtodo para determinao da seqncia de carregadoras de eltrons

>------------------------Eo --------------------------- >

reduzida

oxidada

Complexo I - NADH:ubiquinona oxidoreductase

Uma bomba de protons utiliza a energia de transferncia de eltrons
para criar um gradiente de H+ atravs da membrana. A energia de
transferncia de e- est momentariamente guardada na forma desta gradiente.

42 subunidades

Inibida por amytal (barbiturato),

Rotenona (insecticida), e
Piericidina A (antibitico)

Coenzima Q
ou
Ubiquinona
ou
Q

Complexo I:
recebe e- de
NADH e
transfere
para citQ

Complexo II:
Recebe e- de FADH2

(em succinato desidrogenase no ciclo de Krebs)

e transfere para cytQ.

Complexo III - ubiquinona:citocromo c oxidoreductase

Dmero de monmeros iguais

Cada monmero tem 11 subunidades
(somente monmero mostrado)

Dmero de Complexo III

QN e QP:
stios para
ligao de
citQ

Oscila entre
cytb e cytc1

Receba e- de QH2 e transfere para citc

e bombeia 4 H+ per citQH2 para fora da mitocndria,
aumentando o gradiente de H+.

Complexo IV - Citocromo oxidase: transfere e- de citc para O2, formando H20

(4e-) 4 citc 4 CuA 4 heme a 4 cita3/CuB O2 2 H2O

NADH + H+ + O2 NAD+ + H2O

DEo = +1,14 volts, DGo = 220 kJ/mol

Energia liberado pela oxidao guardado na forma de um gradiente de H+.

NADH + 11 H+in + O2 NAD+ + 10 H+ex + H2O

Fora protomotiva = DG = RTln(Cp/Cn) + ZFDy = 200 kJ per 10 H+
Energia da gradiente de H+ (DpH=0,75)

Energia de differena
de carga (Dy=0,2 V)

FORA PROTOMOTIVA

Modelo quimioosmtico
de gerao de ATP a partir de gradiente de H+

ADP + Pi + nH+ex ATP + H2O + nH+in

Acoplamento de sntese de ATP e consumo de O2

Desacoplamento de consumo de O2 e a sntese de ATP

DNP um desacoplador da
cadeia respiratria da sntese de ATP

F0F1 ATP sintase

Complexo F1 = a3b3gde

matriz

externa

g ou C-biotina-avidin-actina
(fluorescente)

Na sintase, cada 3 H+ produz 1 ATP

Mas precisa 1 H+ para transportar Pi
Logo , 4 H+/ATP

Logo: NADH desloca 10 H+ e

produz 2,5 ATP
FADH2 desloca 6 H+ e
produz 1,5 ATP

Lanadeira malato-aspartato: transferncia de NADHcit para mitocndria

Lanadeira glicerol - fosfato

Desacoplamento de mitocndria
em tecido adiposo marrom de
mamferos recm-nascidos
produz calor

Regulao das vias

de produo de ATP