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INSTRUÇÕES DE USO BioSystems

COD 11832
1 x 50 ml
COD 12533 A25
5 x 50 ml
COD 11533
1 x 200 ml
COD 11568
1 x 500 ml
COD 11562
1x1L
ALANINA
50 testes 200 testes 500 testes 1000 testes
250 testes
CONSERVAR A 2-8 ºC
AMINOTRANSFERASE
Somente para diagnóstico "in vitro" (ALT/GPT)
Contínua-espectrofotométrica
DESCRIÇÃO DE USO
Reagente para determinação in vitro, da atividade de IFCC
ALT (GPT) Transaminase Pirúvica, em soro, através do
método cinético IFCC (Federação Internacional de  O reagente uma vez usado, contém soro,
Química Clínica). eventualmente infectado, e deve ser tratado como
material potencialmente infeccioso. Descartar em
PRINCÍPIO DO MÉTODO lugar apropriado para esta finalidade.
A Alanina Aminotransferase (ALT ou GPT) catalisa a  Evitar contato dos reagentes A e B com os olhos
transferência do grupo amino da alanina ao 2-oxo- pois são produtos irritantes.
glutarato, formando piruvato e glutamato. A  Não pipetar com a boca os reagentes B, pois é
concentração catalítica se determina, empregando a produto tóxico.
reação acoplada de lactato desidrogenase (LDH), a  Risco de reações explosivas do Fosfato de piridoxal
partir da velocidade de desaparecimento do NADH, : contato com cobre, chumbo, mercúrio e outros
medido à 340 nm. metais pesados. Diluir bastante antes de descartar.
 Em caso de contato com os olhos, mucosas, ou
ALT pele, lavar abundantemente com água corrente.
Alanina + 2-Oxoglutarato -----------> Piruvato + Glutamato  Em caso de ingestão procurar atendimento médico.

LDH PREPARAÇÃO DOS REAGENTES


Piruvato + NADH + H+ ------------> Lactato + NAD+
Reagente de Trabalho sem Fosfato de Piridoxal :
Transferir o conteúdo do frasco de Reagente B para o
COMPONENTES de Reagente A. Agitar suavemente. Se deseja preparar
COD COD COD COD COD
outros volumes, misturar na proporção : 4 mL de
11832 12533 11533 11568 11562
Reagente A 1 x 40 ml 5 x 40 ml 1 x 160 ml 1 x 400 ml 1 x 800 ml
Reativo A + 1 mL de Reativo B. Estável 2 meses a 2-8
Reagente B 1 x 10 ml 5 x 10 ml 1 x 40 ml 1 x 100 ml 1 x 200 ml ºC.
Reagente de Trabalho com Fosfato de Piridoxal (Nota
1) : Misturar na proporção : 10 mL de Reativo de
CONTEÚDO E COMPOSIÇÃO Trabalho sem Fosfato de Pirodoxal + 0,1 mL de Fosfato
Reagente A: Tris 150 mmol/L, L-alanina 750 mmol/L, de piridoxal (Reagente C). Estável 6 dias a 2-8 ºC.
lactato deshidrogenase > 1350 U/L, pH 7,3.
Reagente B: NADH 1,3 mmol/L, 2-oxoglutarato 75 PREPARAÇÃO DAS AMOSTRAS
mmol/L. Nocivo (Xn): R22: Nocivo por ingestão. R31: Em Utilizar soro como amostra.
contato com ácidos libera gases tóxicos. S28.1: Em caso de O alanina aminotransferase em soro, é estável pelo
contato com a pele, lavar imediatamente e abundantemente menos por 7 dias a 2-8º C.
com água. S45: Em caso de acidente ou mal estar, recorrer
imediatamente ao médico. PROCEDIMENTO DO ENSAIO
1. Pré-aquecer o Reagente de Trabalho a 37º C durante
REAGENTES AUXILIARES alguns minutos.
Reagente C . Fosfato de piridoxal 10 mmol/L 2. Pipetar em uma cubeta (Nota 2):
(Biosystems Cod. 11666) , 5 ml. Nocivo: Não pipetar 37 ºC 30 ºC
com a boca. Reagente de Trabalho 1,0 mL 1,0 mL
Amostra 50 uL 100 uL
MATERIAL ADICIONAL NÃO FORNECIDO
 Banho de água a 37º C. 3. Misturar e inserir em porta-cubetas termostatizada a
 Espectrofotômetro, com cubeta termostatizável, 37º C. Acionar o cronômetro.
para leituras à 340 nm. 4. Após 1 minuto (Nota 1), anotar a absorbância inicial e
 Cubetas de 1,0 cm de passo de luz. efetuar novas leituras a cada minuto durante 3 minutos.
5. Comprovar que as diferenças entre as absorbâncias
CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO sejam sensivelmente iguais. Calcular o incremento
Armazenar o kit entre 2 e 8º C, desde quando o médio de absorbância por minuto (A/min).
receber, mesmo quando não estiver em uso, até a data
de expiração inscrita no rótulo da embalagem. CÁLCULOS
Indicações de deterioração : Presença de material A concentração de ALT/GPT na amostra calcula-se a partir da
particulado, turbidez, absorbância do branco abaixo de seguinte fórmula general:
1.200 a 340 nm (cubeta 1 cm)

CUIDADOS E PRECAUÇÕES
 O kit destina-se somente para uso diagnóstico in
vitro. O coeficiente de absorção molar () do NADH a 340 nm é
6.300, a passagem de luz é 1 cm, o volume total de reação (Vt)
é 1,05 a 37ºC e 1,1 a 30ºC, o volume de amostra (Vs) é 0,05 a
37ºC e 0,1 a 30ºC, e 1 U/L equivale a 0,0166 ukat/L. Deduz-se
os seguintes fatores para calcular a concentração catalítica :
Imunotech Sistemas Diagnósticos - e-mail : geral@imunotech.com.br - Fone (61) 3878-5000
INSTRUÇÕES DE USO BioSystems
NOTAS
37 ºC 30 ºC 1. O IFCC recomenda método específico a adição do
A/min X 3333 = U/L X 1746 = U/L fosfato piridoxal. O tempo de espera da dosagem deve
X 55,55 = ukat/L X 29,1 = ukat/L ser aumentado para 2 minutos.
2. Este reagente pode ser utilizado na maioria dos
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS analisadores automáticos. Solicite informação a seu
Valores normais adultos: distribuidor.
BIBLIOGRAFIA
37 ºC 30 ºC 1. Sociedad Española de Química Clínica, Comité Científico, Comisión
Sem fosfato de piridoxal 41 U/L = 0,68 ukat/L 29 U/L = 0,48 ukat/ de Enzimas. Metódo recomendado para la determinación en rutina
Com fosfato de piridoxal 65 U/L = 1,08 ukat/ 35 U/L = 0,58 ukat/ de la concentración catalítica de la alanina aminotransferasa en
suero sanguíneo humano. Quim Clin 1987; 6: 241-244.
Valores normais crianças: 2. Approved Recommendation (1985) on IFCC Methods for the
Measurement of Catalytic Concentration of Enzymes. Part 3: IFCC
 1-5 dias : < 35 U/L
Method for Alanine Aminotransferase (EC 2.6.1.2). J. Clin Chem
 6 dias - 6 meses : < 56 U/L Clin Biochem 1986; 24: 481-495.
 7-12 meses : < 54 U/L 3. Gella FJ, Olivella T, Cruz Pastor M, Arenas J, Moreno R, Durban R
 1-3 anos : < 33 U/L and Gómez JA. A simple procedure for routine determination of
aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase with
 4-6 anos : < 29 U/L
pyridoxal phosphate. Clin Chim Acta 1985; 153: 241-247.
 7-12 anos : < 39
4. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC
Estes valores são unicamente a título orientativo; é Press, 1997.
recomendável que cada laboratório estabeleça seus 5. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests,
próprios intervalos de normalidade. 3th ed. AACC Press, 1997.
6. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 2nd edition. Burtis CA,
SIGNIFICADO CLÍNICO e FISIOPATOLÓGICO Ashwood ER. WB Saunders Co., 1994.
As aminotransferases catalizam a formação de ácido glutámico
a partir de 2-oxoglutarato mediante a transferência de grupos TERMO DE GARANTIA
amino. A ALT encontra-se em diferentes tecidos ainda que as Este kit como um todo, tem garantia de troca, desde que
suas maiores concentrações se encontrem no fígado e rins. esteja dentro do prazo de validade e seja comprovado pela
Observam-se concentrações séricas elevadas de ALT na Assessoria Científica da IMUNOTECH SISTEMAS
hepatite e outras doenças hepáticas associadas com necroses: DIAGNÓSTICOS, de que não ocorreram falhas técnicas na
mononucleose infecciosa, colestases, cirrose, carcinoma execução e manuseio do teste, do equipamento, e da
metastásico do fígado, delirium tremens, assim como após a conservação do produto.
administração de algunos medicamentos como opiáceos,
salicilatos ou ampicilina5,6. IMPORTADO E DISTRIBUÍDO POR
Tambem se pode encontrar concentrações séricas elevadas de IMUNOTECH SISTEMAS DIAGNÓSTICOS
ALT em doenças do músculo esquelético ou cardiaco5,6. IMPORTAÇÃO E EXPORTAÇÃO LTDA.
O diagnóstico clínico não se deve realizar tendo em conta o ADE – Lote 08- Conj. 13 – Águas Claras
resultado de um único teste, mas deve integrar-se nos dados CEP 71987-720 - Brasília DF
clínicos e de laboratório. CGC: 00.904.728/0001-48
Fone: ( 0xx61) 3878-5000 Fax: (0xx61) 3878-5001
CARACTERÍSTICAS DO MÉTODO Resp. Técnico: Dra. Ana Marta de Araújo Ferreira
− Limite de detecção: 1,6 U/L = 0,027 ìkat/L (CRBM-GO 353)
− Limite de lineariedade: 500 U/L = 8,33 ìkat/L. Quando se obtêm
valores superiores, diluir a amostra 1/10 com água destilada e repetir a FABRICADO POR
medição.
- Precisão :
BIOSYSTEMS S. A
Amostras (n) foram testadas para as seguintes concentrações de ALT, 43 Costa Brava 30-4 º - 08030 Barcelona – Espanha
U/L e 192 U/L. Obteve-se os resultados representados abaixo para Fone: 0034 3 311-0811 Fax : 0034 3 3467799
Repetitividade (intra) e Reprodutividade (inter).
Valores encontrados com o aparelho Selectra-2 (Vitalab)
SAC
n 43 U/L 192 U/L SERVIÇO DE ATENDIMENTO AO CLIENTE
Repetitividade (intra) 20 1,8 % 2,8 % Quaisquer dúvidas técnicas no manuseio deste kit ou no
Reprodutividade (inter) 25 5,3 % 2,7 % seu procedimento, entrar em contato com a Assessoria
Cientifica da IMUNOTECH, através do telefone (0xx61)
− Sensibilidade: 0,3 ÄmA L/U min = 0,00502 ÄmA L/ìkat min 3878-5000– Brasília.
− Veracidade: Os resultados obtidos com estes reagentes não mostram
diferenças sistemáticas significativas quando comparados com reagentes
de referência. Os detalhes do estudo comparativo estão abaixo DATA DA REVISÃO DAS INSTRUÇÕES DE USO
disponivéis. Revisada em Janeiro de 2008.
− Interferências: A hemólisis (hemoglobina 10 g/L) e a bilirrubina (20
mg/dL) não interferem. A lipemia (triglicéridos 2 g/L) pode afetar os
resultados. Outros medicamentos e substâncias podem interferir4. REGISTRO NO MINISTÉRIO DA SAÚDE
Estes dados foram obtidos utilizando um analizador. Os resultados Número: 80046190048
podem variar ao mudar de equipamento ou ao realizar-se o procedimento
manualmente.
Validade do registro: 24/04/2012

Imunotech Sistemas Diagnósticos - e-mail : geral@imunotech.com.br - Fone (61) 3878-5000