Farmacopeia Brasileira (5 Edição)

Farmacopeia
Brasileira
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
Volume 1
5 edio
Braslia
2010
Copyright 2010 Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria / Fundao Oswaldo Cruz
Todos os direitos reservados. permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte.
5 edio
Presidente da Repblica
Luiz Incio Lula da Silva
Ministro de Estado da Sade
Jos Gomes Temporo
Diretor-Presidente
Dirceu Raposo de Mello
Adjunto do Diretor-Presidente
Pedro Ivo Sebba Ramalho
Diretores
Dirceu Aparecido Brs Barbano
Jos Agenor lvares da Silva
Maria Ceclia Martins Brito
Adjunto de Diretores
Luiz Roberto da Silva Klassmann
Neilton Araujo de Oliveira
Luiz Armando Erthal
Chefe de Gabinete
Iliana Alves Canoff
Elaborao e edio:
AGNCIA NACIONAL DE VIGILNCIA SANITRIA
SIA Trecho 5, rea Especial 57, Lote 200
71205-050, Braslia DF
Tel.: (61) 3462-6000
Home page: www.anvisa.gov.br
Brasil. Farmacopeia Brasileira, volume 2 / Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Braslia: Anvisa, 2010.
546p., 1v/il.
1. Substncias farmacuticas qumicas, vegetais e biolgicas. 2. Medicamentos e correlatos. 3. Especifcaes e mtodos
de anlise. I Ttulo.

Fundao oswaldo Cruz
Presidente
Paulo Gadelha
Vice-Presidente de Ensino, Informao e Comunicao
Maria do Carmo Leal
Editora FioCruz
Diretora
Maria do Carmo Leal
Editor Executivo
Joo Carlos Canossa Mendes
Editores Cientfcos
Nsia Trindade Lima e Ricardo Ventura Santos
Conselho Editorial
Ana Lcia Teles Rabello
Armando de Oliveira Schubach
Carlos E. A. Coimbra Jr.
Gerson Oliveira Penna
Gilberto Hochman
Joseli Lannes Vieira
Lgia Vieira da Silva
Maria Ceclia de Souza Minayo
RESOLUO DA DIRETORIA COLEGIADA - RDC N. 49, DE 23 DE NOVEMBRO DE 2010
Aprova a Farmacopeia Brasileira, 5 edio e d outras providncias.
A Diretoria Colegiada da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria, no uso da atribuio que lhe confere o inciso IV do
art. 11 do Regulamento aprovado pelo Decreto n. 3.029, de 16 de abril de 1999, e tendo em vista o disposto no inciso
II e 1 e 3 do art. 54 do Regimento Interno aprovado nos termos do Anexo I da Portaria N 354 da ANVISA, de 11 de
agosto de 2006, republicada no DOU de 21 de agosto de 2006, e ainda o que consta do art. 7 inciso XIX da Lei n. 9.782,
de 26 de janeiro de 1999, em reunio realizada em 11 de novembro de 2010, adota a seguinte Resoluo da Diretoria
Colegiada e eu, Diretor-Presidente, determino a sua publicao:
Art. 1 Fica aprovada a Farmacopeia Brasileira, 5 edio, constituda de Volume 1 Mtodos Gerais e textos e Volume
2 Monografas.
Art. 2 Os insumos farmacuticos, os medicamentos e outros produtos sujeitos vigilncia sanitria devem atender s
normas e especifcaes estabelecidas na Farmacopeia Brasileira.
Pargrafo nico. Na ausncia de monografa ofcial de matria-prima, formas farmacuticas, correlatos e mtodos gerais
na quinta edio da Farmacopeia Brasileira, para o controle de insumos e produtos farmacuticos admitir-se- a adoo
de monografa ofcial, em sua ltima edio, de cdigos farmacuticos estrangeiros, na forma disposta em normas
especfcas.
Art. 3 vedada a impresso, distribuio, reproduo ou venda da Farmacopeia Brasileira, 5 edio sem a prvia e
expressa anuncia da ANVISA.
Pargrafo nico. Sem prejuzo do disposto no caput desse artigo, a ANVISA disponibilizar gratuitamente em seu
endereo eletrnico cpia da quinta edio e de suas atualizaes.
Art. 4 Fica autorizada a Fundao Oswaldo Cruz, por meio da Editora Fiocruz, para a comercializao dos exemplares
da quinta edio da Farmacopeia Brasileira
Art. 5 Ficam revogadas todas as monografas e mtodos gerais das edies anteriores da Farmacopeia Brasileira.
Art. 6 Esta Resoluo entrar em vigor noventa (90) dias aps a sua publicao.
Braslia, em 24 de novembro de 2010
DIRCEU RAPOSO DE MELLO
Diretor-Presidente da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
Publicada no DOU N 224, 24 de novembro de 2010
SUMRIO
Volume 1
1 PREFCIO ______________________________________________________________________________ 7
2 HISTRICO _____________________________________________________________________________ 13
3 FARMACOPEIA BRASILEIRA _____________________________________________________________ 21
4 GENERALIDADES _______________________________________________________________________ 39
5 MTODOS GERAIS ______________________________________________________________________ 59
5.1 Mtodos gerais aplicados a medicamentos ______________________________________________________ 59
5.2 Mtodos fsicos e fsico-qumicos ____________________________________________________________ 81
5.3 Mtodos qumicos _________________________________________________________________________ 162
5.4 Mtodos de farmacognosia __________________________________________________________________ 192
5.5 Mtodos biolgicos, ensaios biolgicos e microbiolgicos _________________________________________ 207
5.6 Mtodos imunoqumicos ___________________________________________________________________ 278
5.7 Mtodos fsicos aplicados a materiais cirrgicos e hospitalares ______________________________________ 279
6 RECIPIENTES PARA MEDICAMENTOS E CORRELATOS ______________________________________ 285
6.1 Recipientes de vidro ______________________________________________________________________ 285
6.2 Recipientes plsticos _______________________________________________________________________ 288
7 PREPARAO DE PRODUTOS ESTREIS ___________________________________________________ 321
7.1 Esterilizao e garantia de esterilidade _________________________________________________________ 321
7.2 Indicadores biolgicos _____________________________________________________________________ 326
7.3 Processo assptico ________________________________________________________________________ 329
7.4 Salas limpas e ambientes controlados associados ________________________________________________ 330
7.5 Procedimentos de liberao _________________________________________________________________ 336
8 PROCEDIMENTOS ESTATSTICOS APLICVEIS AOS ENSAIOS BIOLGICOS ___________________ 338
8.1 Glossrio de smbolos ______________________________________________________________________ 338
8.2 Fundamentos _____________________________________________________________________________ 339
8.3 Valores atpicos ___________________________________________________________________________ 340
8.4 Ensaios diretos ___________________________________________________________________________ 341
8.5 Ensaios indiretos quantitativos _______________________________________________________________ 341
8.6 Mdias mveis ___________________________________________________________________________ 346
8.7 Ensaios indiretos tudo ou nada _____________________________________________________________ 347
8.8 Combinao de estimativas de potncia ________________________________________________________ 347
8.9 Tabelas estatsticas ________________________________________________________________________ 349
8.10 Exemplos de clculos estatsticos aplicados em ensaios biolgicos __________________________________ 359
9 RADIOFRMACOS ______________________________________________________________________ 373
10 EQUIVALNCIA FARMACUTICA E BIOEQUIVALNCIA DE MEDICAMENTOS _________________ 387
11 GUA PARA USO FARMACUTICO ________________________________________________________ 391
12 SUBSTNCIAS QUMICAS DE REFERNCIA _______________________________________________ 399
13 SUBSTNCIAS CORANTES _______________________________________________________________ 401
14 REAGENTES ____________________________________________________________________________ 413
14.1 Indicadores e solues indicadoras ____________________________________________________________ 413
14.2 Reagentes e solues reagentes ______________________________________________________________ 421
14.3 Solues volumtricas _____________________________________________________________________ 501
14.4 Tampes ________________________________________________________________________________ 506
ANEXO A - TABELA PERIDICA DOS ELEMENTOS QUMICOS - NOMES, SMBOLOS
E MASSAS ATMICAS ________________________________________________________________________ 511
ANEXO B - UNIDADES DO SISTEMA INTERNACIONAL (SI) USADAS NA FARMACOPEIA E AS
EQUIVALNCIAS COM OUTRAS UNIDADES ____________________________________________________ 517
ANEXO C SOLVENTES PARA CROMATOGRAFIA _______________________________________________ 523
ANEXO D ALCOOMETRIA ___________________________________________________________________ 525

Volume 2
MONOGRAFIAS
Farmacopeia Brasileira, 5 edio
7 Farmacopeia Brasileira, 5 edio
a
1
1 PREFCIO
A produo cientfca emanada da quinta edio elevou
a FB 5 a um grau de destaque tcnico-cientfco com
reconhecimento por congneres internacionais.
Nada disso teria sido realizado, no fosse a estrutura
construda pela Comisso Permanente de Reviso da
Farmacopeia Brasileira, responsvel pela quarta edio, que
tem o mrito de ter estabelecido a dinmica necessria para
se elaborar um documento de tamanha responsabilidade
e, principalmente, ter consolidado a mentalidade da real
importncia desse compndio para uma sociedade em
constante evoluo.
Dessa forma, pode a CFB e seus Comits, em consonncia
com a Anvisa, trazer sociedade brasileira um novo cdigo
totalmente revitalizado, apresentado em dois volumes
divididos em Mtodos Gerais e Monografas. Esto
includos cento e setenta e seis mtodos gerais e quinhentas
e noventa e nove monografas, das quais duzentas e setenta
e sete de insumos farmacuticos, duzentas e dez de
especialidades, cinquenta e sete de plantas medicinais, seis
de correlatos, trinta de produtos biolgicos e dezenove de
hemocomponentes e hemoderivados.
No captulo de Generalidades (4), foi realizada a atualizao
das defnies e a incluso de inmeras outras, atendendo
s especifcidades de cada Comit.
Em Procedimentos tcnicos aplicados a medicamentos (5.1)
destacam-se a completa reviso do mtodo de uniformidade
de doses unitrias (5.1.6), agora harmonizado com
novos mtodos publicados pelas principais farmacopeias
internacionais. Outro destaque a incluso do teste de
gotejamento (5.1.8), de grande importncia para os estudos
de equivalncia farmacutica das formas farmacuticas
lquidas de uso oral.
Em Mtodos fsicos e fsico-qumicos (5.2), foi realizada
uma reviso completa dos Mtodos de espectrometria
atmica (5.2.13), bem como dos mtodos de cromatografa
(5.2.17) que foram reescritos e se encontram bem mais
completos. Foi includo texto sobre mtodos de eletroforese
capilar (5.2.22.1) e inmeros outros que passaram ou por
reviso completa ou por modifcao de texto.
Para os Mtodos qumicos (5.3), foi realizada reviso
completa dos ensaios limite, com nfase para a eliminao
do uso de cido sulfdrico e a incluso da espectrometria
atmica no Ensaio limite para metais pesados (5.3.2.3).
Incluiu-se o Ensaio iodomtrico de antibiticos (5.3.3.10),
cujo procedimento era, anteriormente, descrito em cada
monografa passando, agora, a contar com um mtodo
geral prprio.
Os Mtodos de farmacognosia (5.4) foram revistos e
ampliados, com destaque para os Mtodos de preparao
e anlise de extratos vegetais (5.4.3), com o acrscimo de
seis novos mtodos gerais.
Prefaciar uma obra da magnitude de uma farmacopeia
nacional no tarefa fcil. Ao apresentar um trabalho, em
que se teve envolvimento em todo o processo construtivo,
deve se cuidar para emitir uma opinio com a maior
iseno possvel.
Entretanto, um enorme orgulho poder externar, em nome
de uma Comisso e de diversos Comits, as impresses
fnais de uma obra de cunho tcnico e cientfco, a ser
instrumento para aes de sade pblica que se destinam a
proteger a populao de seu pas por meio da preveno do
risco sanitrio. No se deve negligenciar a fora poltica que
a Farmacopeia Brasileira, 5 edio (FB 5) traz para o Pas.
Convocados que fomos, pela Agncia Nacional de
Vigilncia Sanitria (Anvisa), para presidir os trabalhos que
iriam dar forma quinta edio da Farmacopeia Brasileira,
no titubeamos um minuto sequer por conhecermos o
nvel de competncia, compromisso e responsabilidade
dos integrantes da Comisso da Farmacopeia Brasileira
(CFB). Na sequncia, a CFB indicou os coordenadores dos
Comits Tcnicos Temticos (CTT) e esses formaram suas
equipes utilizando o mesmo critrio.
Temos, agora, uma obra que um marco divisor dessa e das
futuras edies, bem como nas relaes profssionais entre
o corpo tcnico-cientfco, o administrativo e a sociedade.
As edies anteriores da Farmacopeia Brasileira no foram,
at ento, revogadas e, portanto, legalmente estavam em
vigor. Alm do prejuzo cientfco, pela defasagem dos
mtodos descritos, traziam certo entrave para as aes
sanitrias que so baseadas nas descries farmacopeicas
quer para a rea de registro, quer para a rea de controle de
qualidade, bem como para a fscalizao.
Por determinao superior, a CFB realizou rduo trabalho
de reviso das mil setecentas e vinte e sete monografas
inseridas nas quatro edies anteriores e props excluses,
reavaliaes textuais, reavaliaes metodolgicas,
atualizaes para procedimentos mais seguros, incluses
de novos textos, dentre outros.
Deu-se incio a projetos fnanciados pela Anvisa com
participao de conceituadas Instituies de Ensino e
Pesquisa em uma forma pioneira de trabalho que envolveu
duas centenas de profssionais da rea da sade, dentre eles
uma boa parte do meio acadmico, fornecendo ao pas mo
de obra qualifcada para atendimento ao setor farmacutico
brasileiro.
O envolvimento com a Academia, como era de se esperar,
levou produo de uma centena de informaes tcnicas e
cientfcas por meio de publicaes de artigos, apresentao
de trabalhos em congressos, discusses em mesas
redondas, palestras em eventos nacionais e internacionais,
elaborao de teses de doutorado, dissertaes de mestrado
e monografas de concluso de cursos de especializao.
1
Os Mtodos biolgicos, ensaios biolgicos e
microbiolgicos (5.5) so apresentados com a incluso
de uma srie de Mtodos biolgicos (5.5.1), tais como os
doseamentos de fatores da coagulao sangunea humana,
totalizando dezesseis novos mtodos. Realizou-se o
trabalho de reorganizao; reviso e ampliao dos ensaios
biolgicos (5.5.2) e microbiolgicos (5.5.3).
Em Recipientes para medicamentos e correlatos (6), bem
como em Mtodos de preparao de produtos estreis (7),
foram realizadas reviso completa com reorganizao e
ampliao de textos para medicamentos e correlatos.
Novos exemplos de ensaios foram inseridos e, aqueles
constantes da quarta edio da Farmacopeia Brasileira
foram revisados em Procedimentos estatsticos aplicveis
aos ensaios biolgicos (8).
Trs novos captulos foram includos: Equivalncia
Farmacutica e Bioequivalncia (10); gua para uso
farmacutico (11) e Substncias qumicas de referncia
(12). A incluso de novos captulos foi iniciativa dos
referidos Comits e traz luz informaes de literatura
aliada s experincias profssionais de seus respectivos
membros. O captulo de Substncias corantes (13) foi
revisto e ampliado.
Trabalho especial foi a consolidao do captulo de
Reagentes (14). Nesse captulo foram congregados todos
os indicadores, solues indicadoras, reagentes, solues
reagentes, solues volumtricas e tampes descritos nas
monografas do volume 2 da FB 5. Com isso, eliminou-se
a descrio do reagente na prpria monografa dando uma
leitura mais dinmica por meio da utilizao do captulo
especfco. So descritos, atualmente, mil e cinquenta e um
ttulos que representam um acrscimo acima de cem por
cento em relao edio anterior.
Todos os anexos foram revisados e foi includo o Anexo C,
que trata de solventes comumente empregados em anlises
cromatogrfcas.
No podemos ter a ingenuidade de pensar uma farmacopeia
sem equvocos. Apesar de todos os textos terem sido
submetidos a consulta pblica e a uma reviso criteriosa,
caso ainda tenha sido includa alguma informao
inadequada, que possa levar difculdade compreenso
fnal, haver na Coordenao da Farmacopeia Brasileira
um procedimento para sanar a dvida e providenciar a
substituio, se for o caso, com rapidez. Novos textos ou
correes estaro disponibilizadas no meio eletrnico da
farmacopeia, novidade da presente edio.
No estaramos entregando a FB 5 no fosse a dedicao
extrema de todos os membros da CFB, dos CTT, da
COFAR e de todos os colaboradores. Sem o conhecimento
tcnico-cientfco dessas pessoas e sem a conduo frme
da Diretora Maria Ceclia Brito Martins, nosso caminho
teria sido ainda mais tortuoso.
Apesar de insistir nos agradecimentos, entendemos que
essas pessoas, por se identifcarem com os problemas
sanitrios do Pas, participaram de todo esse processo
imbudos em um esprito cvico j que so, em sua maioria,
voluntrios.
Reiteramos que todo o processo que culminou com a
publicao da FB 5 se perder se no for implementada
uma real poltica de Estado que nos garanta a continuidade
dos trabalhos da Comisso da Farmacopeia Brasileira e dos
CTT responsveis pelos demais produtos: Farmacopeia
Homeoptica, Formulrio Nacional, Denominaes
Comuns Brasileiras, Substncias Qumicas de Referncia
e Formulrio Fitoterpico.
Gerson Antnio Pianetti
Presidente da CFB
Farmacopeia Brasileira, 5 edio 9 Farmacopeia Brasileira, 5 edio
a
1
PREFCIO DA PHARMACOPEIA DOS ESTADOS
UNIDOS DO BRASIL, 1 EDIO
At a data da independncia do Brasil - 7 de Setembro
de 1822 - vigorou como cdigo pharmaceutico offcial
a Pharmacopa Geral para o Reino e domnios de
Portugal, de autoria do Dr. Francisco Tavares, professor
da Universidade de Coimbra, e publicada em 1794 por
ordem da rainha fdelssima D. Maria I.
Dessa data em diante, apezar de nossa emancipao
poltica, continuou a ser adoptada no s a mesma
pharmacopeia, como tambm o Codex medicamentarius
francez, aps 1837.
O Regulamento da Junta de Hygiene Publica, mandado
executar pelo Decreto n. 828, de 29 de Setembro de 1851,
sem determinar explicitamente qual a pharmacopeia que
deveria ser seguida, estabeleceu uma lista dos livros que
as pharmacias teriam que possuir e que so os seguintes:
Codex francez, Conspecto das pharmacopeias, por
Jourdan; Materia medica, formulario de Bouchardat;
Pharmacopeia Geral; Pharmacopeia de Foy; Codigo
Pharmaceutico e Pharmacographia do Agostinho Albano
da Silveira Pinto (ultima edio).
A primeira meno legal estabelecendo obrigatoriamente
o Codex francez como pharmacopeia offcial do Brasil
a que consta do artigo 58 do Regulamento que baixou
com o Decreto n. 8.387, de 19 de Janeiro de 1882, cujo
ther o seguinte: para, a preparao dos, remdios
offcinaes seguir-se- a pharmacopeia franceza, at que
esteja composta uma pharmacopeia brasiliense, para o
que nomear o Governo uma Commisso de pessoas
competentes. Depois de publicada por autorizao do
Governo a pharmacopeia brasiliense, os pharmaceuticos
tero os preparados segundo as formulas desta
pharmacopeia, o que no inhibir de tel-os segundo as
formulas de outras para satisfazerem s prescripes dos
facultativos, os quaes podem receitar como entenderem.
Redigido, porm, para um paiz em tudo to differente
do nosso, como a Frana, o Codex medicamentarius
gallicus no poderia satisfazer as nossas necessidades, o
que todos eram accordes em proclamar, sem que os nossos
dirigentes, sempre surdos e indifferentes aos appellos da
classe pharmaceutica, tomassem qualquer iniciativa para
dotar o Brasil de um cdigo pharmaceutico.
Em vista de tal descaso do poder publico as associaes
pharmaceuticas e medicas procuraram por mais de uma
vez levar avante a organizao da nossa pharmacopeia,
tendo, porm, fracassado todas as tentativas por falta de
apoio offcial e devido a impecilhos de toda ordem.
O Brasil, porm, que sempre tem sabido hombrear com as
demais naes civilizadas em todos os ramos das sciencias,
das artes, etc., no podia continuar a ser regido, quanto ao
exerccio da Pharmacia, por um codigo estrangeiro, que,
embora optimo para o seu paiz, no satisfazia em absoluto
as nossas necessidades. Por isso, embora reconhecendo
o arrojo de tal iniciativa, resolvemos arcar com a rdua
tarefa e alta responsabilidade de redigir o nosso futuro
cdigo pharmaceutico, fados em que o nosso grande
amor profsso vencesse todos os obices, transpuzesse
todos os obstculos. Aps mais de dois lustros de paciente
trabalho, tivemos a ventura de apresentar o nosso projecto
de Pharmacopeia Brasileira ao Exmo. Sr. Dr. Carlos
Chagas, ento, director geral do Departamento Nacional
de Sade Publica, solicitando de S. Ex. a nomeao de uma
commisso para julgal-o, a qual fcou assim constituida:
Professores Drs. Antonio Pacheco Leo, Renato de Souza
Lopes e Artidonio Pamplona e Pharmaceuticos Alfredo da
Silva Moreira, Malhado Filho e Isaac Werneck, da Silva
Santos.
Aps exame minucioso da obra, essa commisso resolveu
acceital-a, solicitando do Governo a sua offcializao
como Cdigo nacional pharmaceutico, com a suppresso,
porm, dos artigos seguintes, por dia considerados de
uso asss restricto para serem offcializados: Abacaxi -
Acetato bsico de cobre - Acetylarsanilato de sodio - Acido
chrysophanico -. Acido dipropylobarbiturico - Acido
iodhydrico diluido - Agarico do carvalho- Agua de Carlsbad
artifcial - Agua imperial - Alcoolatura vulneraria - Aloe
liquefeito - Amylo de arroz - Apocyno - Apozemas amargo,
de cusso, de romeira, de semen-contra, estomachico,
purgativo e sudorifco - Bromto de estroncio - Bromto
de lithio - Canna fstula - Carbonato de estroncio - Cardo
santo - Carvalho -. Cataplasma de farinha de mandioca
- Cataplasma de fecula de batata - Caustico de Vienna -
Cerato de espermacete Cerato de moscada - Cereja preta
- Cereja vermelha Chloralformamida - Chlorto de ouro e
de sodio - Chloro-amidto de .mercurio - Citrato de cafeina
effervescente - Citrato de ferro e quinina - Clyster de
amylo - Clyster de camomilla - Clyster laxativo - Collodio
cantharidado - Collodio iodoformado - Conserva de canna
fstula - Coto - Electuarios de caroba composto, de copaba
composto e de senna - Elixir adjuvante - Elixir de ans -
Elixir de antipyrina - Elixir de bucco - Elixir de genciana
Elixir de phosphato ferrico - Elixir de sucupira - Elixir
dentifricio - Emplastro de sabo canforado - Emplastro
de sabo salicylado - Emplastro oxycrocco - Emulso de
essencia de terebinthina - Espirito de zimbro composto
- Essencia de pimenta - Estaphisagria - Ethylocarbonato
de diquinina - Ethylosalicylato de quinina - Extracto de
bistorta - Extracto de cardo santo - Extracto de centaurea
menor - Extracto de cicuta - Extracto de cimicifuga -
Extracto de dce-amarga - Extracto fuido de angelica -
Extracto fuido de calamo aromatico - Extracto fuido de
cannela da China - Extracto fuido de cardo santo Extracto
fuido de carvalho - Extracto fuido de coto - Extracto
fuido de estaphisagria - Extracto fuido de mercurial -
Mellito de mercurial - Mercurial Methylenocitrato de
hexamethylenotetramina - Mostarda branca - Nitrato neutro
de bismutho - Paratoluolsulfonodichloramida - Pastilhas
de balsamo de Tol - de bicarbonato de sodio, de borato de
sodio, de carvo, de chlorato de potassio, de chlorhydrato
de cocaina, do codeina, de enxofre, de hortel-pimenta, de
ipecacuanha, de ipecacuanha opiadas, de kermes, de kermes
opiadas, de phenolphtaleina, de santonina, de santonina
compostas e do tannino - Pediluvio sinapizado - Phosphato
de sodio effervescente - Ps de apocyno, de dce-amarga e
de quebracho - Polpa de canna fstula purifcada - Pomada
do chloroamidto de mercurio - Pomada de tannino - Purga
de cayap - Quebracho - Sal de Carlsbad artifcial - Soluto
1
de acetotartarato de aluminio, de creosoto, de cresol, de
phosphato de sdio composto e de sulfato basico de ferro
- Succo de abacaxi - Succo de cereja - Tintura de coto -
Valerianato de zinco - Vinho aromatico - Vinho de cacau
- Vinho de ipecacuanha - Xarope de abacaxi, de acido
iodhydrico, do cereja, de cip azougue, de dce-amarga,
de espelina, de gengibre, do manac, do mangerona, de
muirapuama e de poejo.
PREFCIO DA FARMACOPEIA DOS ESTADOS
UNIDOS DO BRASIL, 2 EDIO
J se haviam decorrido trinta anos que estava em vigor a
primeira edio da Farmacopeia BRASILEIRA, editada
que fra em 1929. Nesse largo lapso de tempo, tornara-se o
Cdigo Farmacutico Brasileiro antiquado e desatualizado,
em face do imenso progresso que alcanaram as cincias
mdicas e farmacuticas, em todo o mundo.
Releve-se, tambm, que desde 1.950 achava-se a obra
inteiramente esgotada, criando, assim, srias difculdades s
novas Farmcias e Laboratrios Industriais Farmacuticos,
que legalmente no podem funcionar sem a presena dsse
Cdigo Ofcial. Conseqentemente, de tdas as localidades
do Pas eram enviadas aos poderes pblicos constantes
advertncias salientando a necessidade de ser elaborada
uma nova edio, o que mais se avolumou durante os nove
anos de seu total esgotamento.
Eram estas fortes razes para que fsse ativada a elaborao
de uma segunda edio. Entretanto, difculdades de tda
a ordem foram aparecendo, impedindo que fsse levado
a trmo, mais depressa, to almejada obra, a despeito
do empenho e da boa vontade das nossas autoridades
sanitrias.
que se impunha uma completa reviso e atualizao de
todo o contedo da primeira edio, e essa tarefa era, sem
dvida, das mais difceis e delicadas, mxime num Pas
de larga extenso territorial, como o Brasil, quando se
faz mister uma colaborao ou contribuio de carter
nacional, como exigido no caso.
Pouco tempo depois da publicao da Farmacopeia e de
seu uso nos laboratrios farmacuticos, comearam a
surgir crticas, observaes, as quais foram sendo coligidas
e coordenadas pela ASSOCIAO BRASILEIRA DE
FARMACUTICOS, sediada na Capital da Repblica,
de vez que no existia, ainda, Comisso Ofcial para o seu
estudo e reviso.
Em O HISTRICO DA Farmacopeia BRASILEIRA,
inserto na presente edio, se encontra notcia detalhada
das atividades desenvolvidas para a completa reviso e
atualizao desta segunda edio do Cdigo Farmacutico
Brasileiro. Acrescente-se que uma Comisso paritria,
constituda de membros da Capital da Repblica e de
So Paulo, teve a seu cargo a reviso fnal da obra em
impresso, com poderes para dirimir dvidas e falhas
verifcadas, bem como o de dar necessria uniformizao
linguagem farmacopica adotada pela Comisso Revisora
Ofcial.
Na elaborao da presente edio, a COMISSO DE
REVISO DA Farmacopeia seguiu, em princpio,
a mesma orientao adotada pela Farmacopeia
NORTE AMERICANA e, em parte, a da Farmacopeia
INTERNACIONAL, no que diz respeito distribuio
da matria e estudo das monografas; no tocante a ltima
Farmacopeia, levou em conta que foi o Brasil um dos
primeiros pases, que adotaram aqule Cdigo de carter
internacional.
As monografas que constam da primeira edio e que
vo continuar na segunda sofreram uma completa reviso,
de modo a serem atualizadas, quanto aos processos de
ensaio, de doseamento e outros requisitos, a fm de bem
corresponderem s exigncias da tcnica moderna.
Foi mantida a nomenclatura dos medicamentos em
portugus, na ordem alfabtica, como na edio anterior,
bem como os sinnimos e corrigida a nomenclatura ofcial
em latim.
Para os produtos patenteados ou registrados, foram adotados
os nomes pelos quais so conhecidos, assinalando-se com
clssico asterisco (*).
Na 1 Edio da Farmacopeia Brasileira, embora no
houvesse o Brasil assinado os Protocolos de Bruxelas
de 1.906 e 1.929, relativos Unifcao da Frmula
dos Medicamentos Hericos foram acolhidas na quase
totalidade as prescries nles contidas, conforme se
pode verifcar nos quadros comparativos includos na
Farmacopeia.
Pelo novo Protocolo de 20 de Maio de 1.952 foram
derrogados os anteriores, sendo adotadas em substituio as
prescries correspondentes da Farmacopeia Internacional,
da Organizao Mundial de Sade. Acolhida com aplausos
no Brasil a Farmacopeia Internacional, como bem traduziu
sua delegao ao 2 Congresso Pan-Americano de Farmcia
e Bioqumica, realizado no Peru em 1951, a 2 edio da
Farmacopeia Brasileira atendeu tanto quanto possvel s
referidas prescries.
A Comisso de Reviso, aps meticuloso estudo, deliberou
que um grande nmero de drogas e preparaes galnicas
ofcinais diversas, presentemente de pouco emprgo,
fssem suprimidas da 2 edio, sendo includas, em
grande parte, no Formulrio Nacional, a ser em breve
tempo publicado, como complemento da Farmacopeia.
A Comisso, tendo em vista a nulidade de ao teraputica
de muitas drogas e medicamentos, bem como o completo
desuso atualmente de numerosos outros, deliberou, aps
longos interrogatrios a todos os membros da Comisso
Ofcial e das Sub-Comisses Estaduais, a excluso de
monografas cuja relao vai mais adiante.
Tomando em considerao o grande progresso atingido nas
trs ltimas dcadas no campo da Medicina e da Farmcia,
foram includas na presente edio numerosas monografas
de valiosos medicamentos, que presentemente dominam
a teraputica moderna tais como: anti-biticos, sulfas,
hormnios, vitaminas, barbitricos, etc., conforme a
relao que se ver mais adiante.
a
1
Por fm vai transcrita a completa relao de tdas as
personalidades, que, com tanto empenho e devotamento,
deram sua valiosa colaborao, para que a nova edio
se tornasse brilhante realidade. Neste ponto, seria injusto
se no fsse destacada especialmente a COMISSO
DE PADRONIZAO FARMACUTICA DE SO
PAULO que, patrioticamente, deu preciosa e constante
contribuio, empregando o mximo de seu esfro para
que a nova edio chegasse a seu trmino, nos moldes das
mais adiantadas Farmacopeias do Mundo.
A Comisso de Reviso da Farmacopeia sentir-se-
recompensada pelo grande esfro despendido, se a nova
edio puder corresponder, como de esperar, sua elevada
fnalidade prtica, que a perfeita seleo das matrias
primas de emprgo medicinal e sua padronizao, condio
precpua da atividade e efcincia dos medicamentos,
prestando destarte, sade pblica do Pas, relevante
servio.
Rio de Janeiro, 22 de fevereiro de 1959
Luis Salgado Lima Filho
Presidente da Comisso de Reviso da Farmacopeia
APRESENTAO DA FARMACOPEIA
BRASILEIRA, 3 EDIO
No contexto dos numerosos eventos que vem assinalando
a execuo dos Planos Nacionais de Desenvolvimento,
como marcos histricos no crescimento global do pas,
no poderia estar ausente o setor Sade e, dentre as
suas realizaes bsicas, o lanamento da Farmacopeia
Brasileira, em edio revista e atualizada, para os tempos
de hoje.
Da a tomada de algumas providncias no frutifcadas,
a partir de 1962, que s se corporifcaram e vieram a ter
culminncia na atual gesto do Ministro Paulo Almeida
Machado, mediante nova iniciativa, concretizada atravs da
Secretaria Nacional de Sade e do seu rgo especfco, o
Servio Nacional de Fiscalizao da Medicina e Farmcia.
Designou o Sr. Ministro a nova Comisso de Reviso da
Farmacopeia, mediante a Portaria 276/75, colegiado esse
que cumpriu a sua misso, em prazo satisfatrio, havendo
contado com a valiosa cooperao do Conselho Federal de
Farmcia.
Aprovando esta 3 edio da Farmacopeia, com a expedio
do Decreto 78.840/76, referendado pelo Ministro da
Sade, o Exmo. Sr. Presidente da Repblica contemplou
o Ministrio da Sade e a classe mdica e farmacutica
do pas, com mais esse importante instrumento farmaco
tcnico e normativo de grande alcance, na sequncia
de outras medidas de operacionalizao que vm sendo
implantadas nesse destacado Setor da vida nacional.
Ao submeter os originais desta 3 edio aprovao do
Presidente Ernesto Geisel, o Ministro no s a obteve, como
pde, e era de seu empenho, comemorar o cinquentenrio
da 1 edio, lanada, exatamente, no dia 25 de novembro
de 1927, dia e ms coincidentes com os desta publicao.
A reviso realizada sobre a edio anterior foi laboriosa e
minuciosa, de molde a que pudessem os meios interessados,
contar com um instrumento de normas e consultas da
maior credibilidade e segurana, o que se evidenciar ao se
examinarem as grandes modifcaes acrescidas no texto atual.
Considerou-se, e muito, que a experincia internacional
ganhou mais fortes convices de que os farmacos
utilizados, e os meios de sua identifcao e controle, cada
vez mais se generalizam. Conquanto legtimo fortalecer-
se os fundamentos dos valores teraputicos regionalizados,
sobressai, por evidente a uniformizao dos controles.
A parte os recursos teraputicos advindos da fora - com
representatividade cada vez menor - a responder pelas
distines locais, crescem os quimioterpicos, no volume e
na qualidade, favorecendo a uniformizao dos mtodos de
identifcao e controle. Decorreram da as Farmacopeias
Europias e Internacional, esta ltima ganhando estatura
de parmetro a respeitar e acolher.
No foi outro o roteiro da Comisso. No quanto foi
possvel, prevaleceram as normas da Organizao Mundial
da Sade. Assim, a nomenclatura latina precedendo a
nacional, o nome qumico e a frmula molecular, e mesmo
os mtodos gerais de anlises.
No se perdeu de vista os recursos laboratoriais dentro
da realidade nacional Por isso mesmo, e quando possvel
e necessrio, adotaram-se mtodos diversos, simples
e sofsticados, para um mesmo exame. Por outro lado,
tendo presente como necessidade incontornvel a
precisa identifcao dos agentes teraputicas constantes
dos ftofrmacos, s foram includos na Farmacopeia
aqueles para os quais j dispomos de mtodos efcazes de
identifcao e doseamento. Edies subseqntes sob a
forma de Suplementos, e o prprio Formulrio Nacional
- que certamente se editar - viro preencher lacunas
existentes.
A vasta listagem de novos agentes teraputicas obriga,
necessariamente, ajuizar sua efetiva necessidade a nvel
nacional.
A indstria farmacutica foi convidada a se manifestar,
oferecendo subsdios por via das entidades representativas,
contribuio essa que mereceu judiciosa triagem da
Comisso.
Acresce, ainda, que a par dessa relao e dos subsdios,
tomou-se por legtimo, tambm, um levantamento dos
medicamentos de maior representatividade no receiturio
e consumo nacionais.
Tem-se, pois, que esse elenco e, mais, as monografas
revistas, remanescentes da 2 edio, constituem, no
todo, o acervo monogrfco da 3 edio da Farmacopeia
Brasileira.
Por certo restaro outras monografas a acrescentar,
tanto como algumas existentes, ou persistentes, talvez
possam estar suscetveis de supresso. Esta evidncia s
1
fala em favor da prpria Farmacopeia, dinmica como a
teraputica, e pendente de atualizaes mais frequentes,
como soe ser a prpria Farmacologia.
Tendo em conta que a 2 edio da Farmacopeia
Brasileira encontra-se esgotada, e que muitas monografas
constantes da mesma, no revistas, representam ainda
fonte bibliogrfca de mrito e com fora legal, decidiu a
Comisso que o 1 Suplemento da 3 edio representar,
no todo e exclusivamente, o constante daquele acervo, a se
publicar em sequncia imediata a desta nova edio.
Crticas, correes e reparos, que se espera, todos sero
compreensivelmente aceitos. E roga-se, desde agora,
que sejam feitos de modo claro e objetivo, para maior
facilidade das edies que se sucedero. Todos eles,
quando construtivos, representaro valioso subsdio para
o aprimoramento da Farmacopeia Brasileira, tanto quanto
este trabalho pretende ser, no confronto natural com a
edio anterior.
PREFCIO DA FARMACOPEIA BRASILEIRA,
4 EDIO
Dando cumprimento s disposies do Decreto Federal
n 78.840, de 25/11/1976, a nova edio da Farmacopeia
Brasileira vem ao encontro dos desejos da comunidade
tcnico-cientfca brasileira, manifestamente interessada
na reviso da edio anterior.
A Comisso Permanente de Reviso da Farmacopeia
Brasileira, constituda pela Portaria n 151/82 do Exmo.
Ministro da Sade, s pde realizar seu trabalho graas
ao apoio decisivo da Secretaria Nacional de Vigilncia
Sanitria - SNVS - do Ministrio da Sade. Acordos
e convnios celebrados entre a SNVS, a Central de
Medicamentos - CEME - do Ministrio da Previdncia
e Assistncia Social - MPAS - e o Conselho Nacional
de Desenvolvimento Cientfco e Tecnolgico - CNPq
-, asseguraram Comisso recursos fnanceiros
indispensveis, incluindo bolsas de estudos para execuo
dos trabalhos.
A elaborao das monografas foi confada a profssionais
com efetiva experincia no assunto; estas monografas
foram revisadas por outros profssionais do mesmo campo
de atividade. Apesar disto, eventuais imperfeies, erros ou
omisses so de responsabilidade exclusiva da Comisso
Permanente de Reviso da Farmacopeia Brasileira, a quem
coube a aprovao do texto fnal.
A 4 Edio da Farmacopeia Brasileira marca o incio de
nova era. Trata-se de edio na qual se adota novo sistema de
apresentao. O rpido avano da tecnologia e a crescente
complexidade das substncias medicinais determinam a
necessidade de frequentes revises da Farmacopeia. Para
facilitar estas revises e possibilitar introduo de novas
monografas e mtodos de anlise necessrios, a Comisso
adotou esta nova forma de apresentao.
O presente volume constitui a Parte I da Farmacopeia e
compreende as generalidades, e os mtodos gerais de
anlise. A Parte II ser constituda de monografas de
matrias-primas e especialidades farmacuticas, publicadas
em fascculos. Um ndice indicar o ttulo das monografas,
seus nmeros de referncia e a data para sua entrada em
vigor.
A Farmacopeia Brasileira em sua 4 edio tem vigncia
em todo o Territrio Nacional. A nomenclatura, os mtodos
de identifcao e anlise e todos os demais dados nela
contidos prevalecem sobre quaisquer outros assinalados
em cdigos farmacuticos diversos. Nos casos omissos,
podem ser utilizados a Farmacopeia Internacional, a
Farmacopeia Europia e outros cdigos farmacuticos em
suas ltimas edies.*
As monografas da Farmacopeia Brasileira 4 edio
estabelecem parmetros que o produto dever satisfazer
a qualquer tempo durante seu perodo de uso e no para
serem interpretados somente como especifcaes para
liberao por parte do fabricante.
A no incluso de um frmaco ou adjuvante de fabricao
na 4 edio da Farmacopeia Brasileira no dispensa estas
substncias de anlise segundo outros cdigos ofciais; assim
como a presena de impureza no descrita especifcamente
na Farmacopeia no signifca que a substncia pode ser
usada pelo simples fato de a Farmacopeia no a especifcar.
Nestes casos, a deciso deve ser tomada com base no bom
senso tcnico e nas boas prticas de fabricao.
A Farmacopeia obra para profssionais devidamente
qualifcados e treinados. Por este motivo, no fornece
explicaes didticas, apresentando as monografas com
redao clara, sucinta e desprovidas de mincias julgadas
desnecessrias pela Comisso.
A Comisso Permanente de Reviso da Farmacopeia
Brasileira torna pblicos seus agradecimentos a todos
aqueles que colaboraram no preparo desta edio e, em
especial, ao Conselho Federal de Farmcia pelo apoio que
possibilitou a publicao ofcial da F. Bras. IV.
* Normas Nacionais extrafarmacopicas devero obter
previamente aprovao da Comisso Permanente de
Reviso da Farmacopeia Brasileira do Conselho Nacional
de Sade.
2
2 HISTRICO
A terceira edio da Farmacopeia Brasileira esperou
dezessete anos para ser publicada por meio do Decreto N
78.840 de vinte e cinco de novembro de 1976 e refora a
edio anterior ampliando e modernizando o seu contedo.
Da mesma forma que as anteriores, a quarta edio da
Farmacopeia Brasileira foi elaborada a partir de iniciativa
de abnegados profssionais da sade. Os trabalhos foram
iniciados 1982 com a criao da Comisso de Reviso da
Farmacopeia Brasileira (CPRFB) nomeada pelo Diretor da
Secretaria Nacional de Vigilncia Sanitria, Dr. Antnio
Carlos Zanini.
Somente em 1988 foi possvel o lanamento da Parte I da
quarta edio, contendo mtodos gerais, e deu-se incio a
elaborao da Parte II contendo as monografas de frmacos
e especialidades. A entrega do primeiro fascculo se deu
em 1996. A dedicao, persistncia e incansvel trabalho
do Dr. Celso F. Bittencourt, ento Presidente da CPRFB,
contriburam para a criao e manuteno da infraestrutura
necessria ao desenvolvimento dos fascculos da quarta
edio at a sua concluso reforando as bases para o
prosseguimento dos trabalhos at o presente. A participao
do meio acadmico, por meio de universidades pblicas,
foi e continua a ser, intensa e imprescindvel.
Com a criao da Anvisa, em 1999, a reviso permanente
da Farmacopeia Brasileira passa a ser de responsabilidade
administrativa, tcnica e cientfca da agncia. O slido
apoio da Diretoria Colegiada, desde ento, especialmente
por seu primeiro Diretor Presidente Dr. Gonzalo Vecina
Neto, levou a Comisso Permanente de Reviso da
Farmacopeia Brasileira a atingir a maturidade de seus
trabalhos.
Foram construdas metodologias de trabalho baseadas
nas mais modernas e atualizadas referncias mundiais em
consonncia com publicaes de cdigos farmacuticos
realizados por congneres de farmacopeias internacionais
de grande respeitabilidade na esfera farmacutica mundial.
Por meio de contratos e convnios conseguiu-se fnanciar
estudos laboratoriais e pode-se, assim, serem lanados os
fascculos 2 (2000); 3 (2002); 4 (2003); 5 (2004) e 6 (2005)
esse ltimo j na gesto do Diretor-Presidente Dr. Dirceu
Raposo de Mello, completando assim, a quarta edio da
Farmacopeia Brasileira.
Nesse nterim foram ainda publicados, o fascculo 1
da Farmacopeia Homeoptica Brasileira 2 edio, e
o Formulrio Nacional. Foram certifcados 67 lotes
de substncias qumicas de referncia da Farmacopeia
Brasileira e monitorados outros 58 lotes.
O fato de uma nova edio da Farmacopeia Brasileira,
no revogar edies anteriores sempre foi um entrave
para as aes reguladoras de vigilncia sanitria. Decidiu-
se, portanto, trabalhar a quinta edio de forma a realizar
BREVE ATUALIZAO HISTRICA DA
FARMACOPEIA BRASILEIRA, 5 EDIO
A quase centenria Farmacopeia Brasileira ilustra um
ciclo de grande importncia para o pas. Partindo de sua
primeira edio, fruto de laborioso trabalho de um nico
farmacutico, atravessou oito dcadas buscando seu
espao, de fato e de direito, como instrumento fundamental
de apoio s polticas nacionais de sade emanadas de
governos com projetos srios de proteo ao cidado
brasileiro.
Tivessem sido respeitadas as determinaes dos decretos
e resolues que indicavam reviso a cada quinqunio
estar-se-ia publicando a sua dcima stima edio o que
infelizmente no est ocorrendo, certamente por problemas
ocorridos mas sem nenhum demrito ao passado, visto que
o nosso objetivo sempre olhar para frente.
Inicia-se o sculo XX, as boticas so os principais locais
da prtica sanitria e o pas experimenta a convivncia com
a sua jovem repblica. Rodolpho Albino Dias da Silva se
entrega a um trabalho hercleo de repassar para um livro
toda uma vida de pesquisa sobre as drogas vegetais e
animais, descrio de produtos qumicos e de preparaes
ofcinais. Nasce, assim, a primeira edio da Farmacopeia
Brasileira, ofcializada pelo governo federal por meio do
decreto N 17.509 de quatro de novembro de 1926, porm
obrigatria a partir de quinze de agosto de 1929.
Uma grande guerra assola o planeta nos anos quarenta e
em seguida uma grande mudana mundial se faz sentir em
todos os pases desenvolvidos ou em desenvolvimento, e
a nossa primeira edio j no mais cumpre o seu papel.
As boticas so substitudas, gradativamente, por farmcias
que no mais realizam a arte da manipulao magistral e
decretado o incio de um fm do enorme servio prestado
pelo profssional de farmcia populao. O pas invadido
por indstrias multinacionais que, aos poucos, conseguem
eliminar todas as pequenas empresas brasileiras do ramo.
Paralelamente, tem-se incio ao acesso de medicamentos
modernos que exigem controle de qualidade diferenciado
devido produo em grande escala e quantidade de
frmacos sintetizados e originrios de diversas fontes.
A Farmacopeia no escapou do movimento modernista
impresso pelo Presidente Juscelino Kubitschek que, em
1959 assina o Decreto N 45.502 aprovando a segunda
edio da Farmacopeia Brasileira.
J em outra realidade, aquela edio se apresenta voltada
para os insumos e especialidades farmacuticas buscando
padres nacionais de qualidade dos bens de sade a serem
disponibilizados sociedade. As formulaes ofcinais
foram, ento, enviadas para uma publicao futura que
se pretendia publicar como Formulrio Nacional o que
somente ocorreu nos anos oitenta.
2
um levantamento exaustivo de todos os textos publicados
nas quatro edies, avaliar necessidades de permanncia,
de substituio de textos e procedimentos com ou sem
avaliao laboratorial, e de excluso de monografas
obsoletas.
Dessa forma, a quinta edio revoga todas as demais edies
e pretende servir de ncleo central de edies futuras
em um processo contnuo de reviso buscando sempre a
insero em uma realidade internacional colocando-a em
destaque entre as melhores farmacopeias. Servir, tambm,
para nortear a proposta de uma farmacopeia conjunta
com pases do Continente sul americano. Atualmente a
Comisso da Farmacopeia Brasileira possui assento como
observador das Farmacopeias Europeia e Internacional e
reconhecimento mtuo com a Farmacopeia Argentina.
A Comisso da Farmacopeia Brasileira e todos seus
comits possuem hoje fortes aliados dentro da Agncia
Nacional de Vigilncia Sanitria com destaque especial
para a Dra. Maria Ceclia Martins Brito, incansvel
batalhadora para que se tornem realidade todas as aes
propostas pelo colegiado da Comisso e dos Comits. No
nos tem faltado posicionamento favorvel, quer seja na
conduo dos processos de aprovao de projetos inerentes
s nossas atividades, bem como nas inmeras necessidades
logsticas para facilitao dos trabalhos da Comisso e dos
Comits compostos por profssionais de alto nvel e que
exerciam a funo por meio do voluntariado.
Ter uma farmacopeia uma questo de segurana nacional,
desenvolvimento tcnico e cientfco, insero em um
patamar de reconhecimento mundial e no est mais na
esfera de simples poltica de Governo e sim de Estado.
Este fato traz CFB tranquilidade em saber que executa
um projeto de interesse nacional sem volta e com agenda
a ser cumprida dentro da poltica sanitria praticada pelo
rgo regulador e pelo Ministrio da Sade.
No se pode ser ingnuo em no se assumir que algumas
falhas nesta quinta edio sero rapidamente identifcadas,
porm est em fase de criao na Coordenao da
Farmacopeia Brasileira, estrutura que visa atender
rapidamente aos questionamentos dos usurios fornecendo
respostas rpidas e objetivas que possam esclarecer dvidas
sobre os textos publicados. Pretende-se, ao fnal de 2011,
lanar o primeiro suplemento trazendo as modifcaes,
correes e incluses.
Faz-se necessrio informar que todos os textos publicados
na quinta edio passaram por consulta pblica para
acesso do cidado e livre manifestao, portanto uma
obra cuja construo foi coletiva com a participao dos
interessados no tema. Todas as manifestaes externas
foram consideradas.
A histria da nossa farmacopeia vem sendo contada, com
primor, pelos nossos decessores e contm dados muito
importantes para a compreenso de toda a sua evoluo.
Optamos em reproduzi-los, com exceo do histrico
no contemplado na 1 edio, sem nenhum retoque para
resguardar a autenticidade e fornecer ao leitor a impresso
de, tambm, estar participando dessa histria.
Como Presidente da Comisso da Farmacopeia Brasileira
resta-nos o espao para externar os sinceros agradecimentos
a todos que ajudaram a construir esta obra e ter a certeza
que continuaremos a trabalhar de forma parceira para
fnalmente conseguirmos manter atualizada e moderna a
FARMACOPEIA BRASILEIRA.
Gerson Antnio Pianetti
Presidente da CFB
HISTRICO DA FARMACOPEIA BRASILEIRA,
2 EDIO
A primeira meno legal estabelecendo obrigatriamente o
Codex francs como Farmacopeia ofcial do Brasil a que
consta do Decreto n 828 de 29 de setembro de 1.851, em
seu artigo 45, cujo teor o seguinte:
vigorou como cdigo farmacutico ofcial a Farmacopeia
Geral para o Reino e Domnios de Portugal, de autoria
do Dr. Francisco Tavares, professor da Universidade de
Coimbra, publicada em 1.794 por ordem da Rainha D.
Maria I.
Dessa data em diante, apesar de nossa emancipao
poltica, continuou a ser adotada a mesma Farmacopeia,
e aps 1.837 tambm o Codex Medicamentarius, francs.
Para a composio dos remdios ofcinais seguir-se-
a Farmacopeia Francesa, at que se ache organizada
uma Farmacopeia Brasiliense, para o que o Govrno
nomear urna Comisso de pessoas competentes. Depois
de publicada a Farmacopeia Brasiliense, que o ser
por autorizao do Govrno, os Boticrios devero,
ter os remdios preparados segundo as frmulas dessa
Farmacopeia, o que no inibe que os possam ter segundo
as frmulas de outras Farmacopeias para satisfazerem s
prescries dos facultativos, os quais podem receitar como
entenderem.
No anexo ao Regulamento, contendo a Tabela dos
medicamentos, vasilhames, instrumentos, utenslios e
livros, organizada para as boticas do Imprio, veio a
lista dos livros que deviam as boticas possuir: - Cdigo
Francs; Conspecto das Farmacopeias, por Jourdan;
Matria mdica e Formul rio de Bouchardat; Farmacopeia
Geral; Farmacopeia de Foy; Cdigo Farmacutico e
Farmacografa de Agostinho Albano da Silveira Pinto
(ltima edio).
O artigo 58 do Decreto n 8.387, de 19 de janeiro de 1.882,
reproduziu as determinaes do artigo 45 do Decreto n
828 de 1.851; apenas houve a modifcao de algumas
palavras e da lista de livros, de cuja ltima edio, o
farmacutico devia sempre possuir um exemplar. Alm
do Codex francs, eram exigidos mais os formulrios
de Dorvault, Bouchardat. Fosagrives, Jeannel, Rveil,
Gallois, Chernoviz, Langaard, Farmcia prtica de
Deschamps (dAvallon), Anurio de Mhu, Guia prtico de
Le Page e Patrouillaud, Tratado de Farmcia de Soubeiran,
Dicionrio de alteraes e falsifcaes de Chevalier e
Baudrimont, Vademecum de Ferrand.
2
Durante o longo perodo de 1.851 a 1.929 foi obrigatrio o
Codex francs, para a confeco dos preparados ofcinais,
at que estivesse organizado o Cdigo Farmacutico
Brasileiro. Assim determinaram todos os regulamentos
sanitrios, entre les os dos Decretos n 169 de 1.890; n
1.172, de 1.892; n 1.647, de 1.894; n 2.449, de 1.897,
cuja tabela de livros foi reduzida ao Codex francs e
aos Formulrios de Dorvault, Bouchardat, Chernoviz e
Langaard; n 2.458 de 1.897; 5.156 de 1.904; 14.189 e
14.354, de 1.920 (D. N. S. P.); 15.003, de 1.921 e 16.300,
de 31-12-1923.
No entanto, o desejo de possurem os farmacuticos
brasileiros seu Cdigo Nacional foi manifestado em muitas
oportunidades pelos rgos cientfcos de classe. Vrias
comisses foram nomeadas para sua elaborao, sem
resultado.
Foram vos os esforos de Ezequiel Corra dos Santos,
de Silva Costa, de Corra Dutra, Oliveira Fausto, Almeida
Rego, Eugnio Marques de Hollanda, Eduardo Julio
Janvrot e outros.
Smente em 1.887, atendendo s solicitaes dos centros
cientfcos nacionais, o Govrno Imperial procurou resolver
o problema, instituindo uma comisso, da qual faziam
parte, entre outros, Ezequiel Corra dos Santos Filho,
Agostinho Jos de Souza Lima e Marques de Hollanda.
Dessa comisso, porm, nada de prtico resultou, de sorte
que, passados dez anos, em 1.897, o Ministro do Interior
e Justia, Amaro Cavalcanti, nomeou outra comisso com
a mesma fnalidade e da qual faziam parte os professres
Agostinho de Souza Lima, Csar Diogo e Orlando Rangel.
Fracassou tambm a nova tentativa.
O Brasil, porm, que sempre tem sabido ombrear com as
demais naes civilizadas em todos os ramos das cincias,
das artes, etc., no podia continuar a ser regido, quanto ao
exerccio da Farmcia, por um cdigo estrangeiro, que,
embora timo para o seu pas, no satisfazia em absoluto
s novas necessidades. Por isso, embora reconhecendo
o arrjo de tal iniciativa, resolvemos arcar com a rdua
tarefa e alta responsabilidade de redigir o nosso futuro
cdigo farmacutico, fados em que o nosso grande amor
profsso vencesse todos os bices, transpusesse todos
os obstculos. (*) O Farmacutico, na ocasio ainda de
nome pouco conhecido, Rodolpho Albino Dias da Silva,
em 1.924, aps mais de dez anos de paciente trabalho, pde
apresentar seu projeto de Farmacopeia Brasileira ao Dr.
Carlos Chagas, Diretor Geral do Departamento Nacional
de Sade Pblica. Para julgar sse trabalho, nomeou o
Dr. Chagas uma comisso, constituda pelos Professres
Doutores Antnio Pacheco Leo, Renato de Souza Lopes
e Artidnio Pamplona, e Farmacuticos Alfredo da Silva
Moreira, Jos Malhado Filho e Isaac Werneck da Silva
Santos.
Aps exame minucioso da obra, essa Comisso resolveu
aceit-la, solicitando do Govrno a sua ofcializao, como
Cdigo Nacional Farmacutico, com a supresso, porm,
de certos artigos por ela considerados de uso assaz restrito
para serem ofcializados, os quais vm enumerados no
prefcio da primeira edio.
Em 4 de novembro de 1.926, pelo Decreto n 17.509,
assinado pelo Presidente da Repblica, Dr. Arthur da Silva
Bernardes, e pelo Ministro do Interior e Justia, Dr. Affonso
Penna Junior, nos termos do artigo 252 do Decreto n.
16.300, de 31 de dezembro de 1923, foi aprovada e adotada
como Cdigo Farmacutico Brasileiro a Farmacopeia
Brasileira, elaborada pelo Farmacutico Rodolpho Albino
Dias da Silva, com as emendas da comisso revisora. O
Cdigo entraria em vigor 60 dias depois da publicao da
primeira edio ofcial, fcando sua execuo a cargo do
Departamento Nacional de Sade Pblica, por intermdio
da Inspetoria de Fiscalizao do Exerccio da Medicina.
Executou a obra, mediante concorrncia publica, a
Companhia Editra Nacional, de So Paulo, que terminou
sua publicao em 1.929. Ficou obrigatria a Farmacopeia
a partir de 15 de agsto de 1.929.
Afnal, tinha o Brasil sua Farmacopeia, obra de um
s homem, obra que era, no julgamento de eminentes
farmaclogos do mundo, um dos mais adiantados e
atualizados cdigos farmacuticos do seu tempo.
Rodolpho Albino, natural do Estado do Rio de Janeiro,
nascido na cidade de Cantagalo, faleceu prematuramente
no Rio de Janeiro, aos 42 anos de idade, a 7 de outubro de
1931.
Todos os cdigos farmacuticos so revistos
peridicamente; e assim, a fm de coligir, coordenar e
estudar sugestes, de modo a proporcionar facilidades para
uma futura reviso, em 1.932, por proposta feita em uma
das sesses da Associao Brasileira de Farmacuticos, foi
nomeada uma comisso para tal fm, cabendo a presidncia
ao Prof. Joo Vicente de Souza Martins, que elaborou uni
regimento interno, criando vrias seces. Esta comisso
trabalhou at 1.938, quando o presidente da Associao
Brasileira de Farmacuticos, Prof. Virglio Lucas, dirigiu
ao Ministro da Educao e Sade o pedido de nomeao
de uma comisso ofcial para proceder reviso do nosso
Cdigo, visto j haver matria bastante a estudar e deliberar.
Essa Comisso, nomeada pela Portaria n 1.21-A, de 23
de junho de 1.938, pelo Ministro Gustavo Capanema, foi
constituda pelos sete membros seguintes: Profs. Renato
Guimares de Souza Lopes, Oswaldo de Almeida Costa,
Virglio Lucas e Abel Elias de Oliveira; Farms. Antnio
Caetano de Azevedo Coutinho e Oswaldo de Lazzarini
Peckolt e mdico Sebastio Duarte de Barros. Pela portaria
n 141, de 22 de abril de 1.939, foi a comisso acrescida de
mais dois membros, o Prof. Artidnio Pamplona e o Farm.
Jos Eduardo Alves Filho.
Essa Comisso, a despeito das difculdades encontradas,
realizou alguma coisa de til, propondo excluses de
drogas obsoletas e incluses de outras de maior intersse,
conforme o relatrio apresentado pelo Farm. Oswaldo
Peckolt ao Terceiro Congresso Brasileiro de Farmcia,
reunido em Belo Horizonte, de 14 a 21 de abril de 1.939.
O Decreto n 810, de 1 de julho de 1.942, que aprovou
o Regimento do Servio Nacional de Fiscalizao da
Medicina, imprimindo nova feio a sse rgo, considerou
adstritas ao mesmo, sob a presidncia do respectivo
diretor, a Comisso de Biofarmcia e a de Reviso da
2
Farmacopeia; passou ento esta a ser constituda de um
professor da Faculdade Nacional de Farmcia ou de
outra a ela equiparada, um mdico clnico, um biologista
lotado no Instituto Oswaldo Cruz, um qumico, um tcnico
da indstria farmacutica e um farmacutico lotado no
S.N.F.M.F.
Em consequncia, o Diretor Geral do Departamento
Nacional de Sade, pela Portaria n 136, de 11 de julho do
mesmo ano, designou para essas funes o Prof. Oswaldo de
Almeida Costa, o mdico Dr. Sebastio Duarte de Barros, o
biologista Dr. Gilberto Guimares Vilela; o qumico Farm.
Oswaldo de Lazzarini Peckolt, o tcnico Prof. Virgilio
Lucas e o Farm. assistente Antnio Caetano de Azevedo
Coutinho, funcionando na presidncia o Diretor do Servio,
Dr. Roberval Cordeiro de Farias, e como Coordenador dos
trabalhos o Dr. Sebastio de Barros; posteriormente, o
Dr. Gilberto Vilela foi substitudo, a pedido, pelo tambm
biologista Dr. Tito Arcoverde de Albuquerque Cavalcanti,
e o Farm. Caetano Coutinho, que se aposentara do Servio
Pblico, teve como substituto o seu colega de repartio,
Farm. Flvio Frota, que passou a exercer funes de
secretrio, de acrdo com as disposies regimentares.
A nova Comisso, com a experincia recolhida das
comisses anteriores e com a da sua prpria atividade,
publicou o Primeiro Suplemento da Farmacopeia, psto
em vigor pela Portaria n 42, de 2 de maro de 1.943.
Prosseguiram os estudos, bem coordenados e com bom
rendimento, constituindo boa prova o aparecimento do
Segundo Suplemento e do Terceiro Suplemento, aprovados,
respectivamente, pelas Portarias n 24, de 14 de abril de
1.945, e n 39, de 13 de junho de 1.950.
Essas publicaes se apresentaram assaz interessantes, sob
vrios aspectos, entre les a incluso de drogas nacionais
como sucedneas de similares importadas, o registro de
novas frmulas e a substituio, em outras, de substncias
estrangeiras por nacionais, tudo isso sem comprometimento
das respectivas aes teraputicas.
O Regimento Interno baixado com o Decreto n 21.339, de
20 de junho de 1.946, e modifcado pelo Decreto n 29.828,
de 30 de julho de 1.951, tendo por fnalidade a organizao
e a competncia dos diversos rgos de sade pblica, no
alterou substancialmente as disposies que haviam sido
estabelecidas anteriormente, continuando a Comisso a
funcionar regularmente.
A Portaria n 147, de 6 de novembro de 1.951, aprovando as
Instrues sugeridas pelo Servio Nacional de Fiscalizao
da Medicina, de acrdo com o Regimento citado, e
modifcando a orientao at ento seguida, determinou a
nomeao, para a Comisso de Reviso da Farmacopeia
e suas subcomisses, de cientistas de todo o pas,
especializados nas matrias em estudo e incumbindo-a de
reeditar decenalmente a Farmacopeia; transformou ainda o
primitivo rgo em Comisso Executiva, coordenadora e
principal responsvel por todos os trabalhos.
Assim foram confrmados na qualidade de membros da
Comisso Executiva os antigos componentes da Comisso
Revisora, ocorrendo posteriormente a substituio do
presidente, Dr. Roberval Cordeiro de Farias, pelo Dr.
Vasco Barcelos e depois pelo Dr. Benoni Laurindo Ribas,
que o haviam sucedido tambm na Diretoria do Servio;
outrossim, nos impedimentos ocasionais dos respectivos
titulares, ocupou a presidncia o Dr. Luiz Salgado Lima
Filho, que posteriormente passou a ser seu presidente
efetivo.
Foram ento escolhidos os membros das subcomisses
tcnicas, recaindo a preferncia em profssionais do
Rio e dos Estados, farmacuticos, mdicos, qumicos e
professres, sendo depois aumentado o nmero, em virtude
de ulteriores designaes.
As subcomisses, em nmero de 10, fcaram assim
organizadas: Incluses, Excluses e Posologia;
Farmacognosia; Qumica Orgnica; Qumica Inorgnica;
Farmcia Galnica; Ensaios Biolgicos, Hormnios e
Vitaminas; Sros, Vacinas, Antibiticos e Esterilizao;
Generalidades, Ensaios, Reagentes e Tabelas;
Planejamento Geral; Redao; tendo como coordenadores,
respectivamente, o Dr. Sebastio de Barros, da primeira,
stima, nona e dcima; Prof. Oswaldo Costa, da segunda e
quarta; Farm. Oswaldo Peckolt, da terceira e oitava: Prof.
Virgilio Lucas, da quinta, e Dr. Tito Cavalcanti, da sexta.
Nessa mesma oportunidade foram criadas Comisses
Regionais nos Estados do Paran, Minas Gerais, Rio
Grande do Sul e So Paulo.
Neste Estado os trabalhos tiveram grande impulso, por
ter sido na sua Capital instalada, para fns idnticos, uma
Comisso de Padronizao Farmacutica, por comum
acrdo entre o Instituto Adolfo Lutz, a Universidade de
S. Paulo, a Fiscalizao do Exerccio Profssional e as
associaes estaduais representativas da indstria e do
comrcio da Farmcia, integrando-a as fguras de maior
evidncia rios meios cientfcos daquela unidade da
Federao, presidindo-a e secretariando-a o Dr. Ariosto
Bller Souto e o Farm. Jlio Sauerbronn de Toledo,
respectivamente.
Quando se reuniu, na cidade de So Paulo, o V Congresso
Brasileiro de Farmcia, conjuntamente com o III Congresso
Farmacutico e Bioqumico Pan-Americano, de 1 a 8 de
dezembro de 1954, a contribuio paulista se concretizou
num ante-projeto da Farmacopeia, apresentado quele
certmen, sendo dados novos rumos aos trabalhos.
O Congresso, ratifcando moo aprovada no III Congresso
Brasileiro de Farmcia, realizado em Belo-Horizonte de 14
a 21 de abril de 1.939, e o voto expresso no II Congresso
Farmacutico e Bioqumico Pan-Americano, levado a
efeito em Lima de 1 a 8 de dezembro de 1.951, recomendou
a organizao de um Formulrio Nacional, como unidade
complementar, do qual passariam a constar as drogas e os
medicamentos de emprgo usual que no constassem da
Farmacopeia.
Dos debates realizados resultou a deliberao de exame em
conjunto, pelas comisses do Rio e de So Paulo, de todo o
material de estudo at ento reunido, de modo a possibilitar
o trmino da reviso em curto prazo.
2
Encerrado o V Congresso, foi organizada nova
subcomisso tcnica de Planejamento e Reviso, assim
constituda: Antnio Caetano de Azeredo Coutinho,
Flvio Frota, Militino Cesrio Rosa, Oswaldo de Almeida
Costa, Oswaldo de Lazzarini Peckolt, Tito Arcoverde
de Albuquerque Cavalcanti, Virglio Lucas e Sebastio
Duarte de Barros, do Rio; Ariosto Bller Souto, Cendy de
Castro Guimares, Germnio Nazrio, Henrique Tastaldi,
Hrcules Vieira de Campos, Quintino Mingoja, Richard
Wasicky e Jlio Sauerbronn de Toledo, de So Paulo,
exercendo as funes de coordenador o Dr. Sebastio
Duarte de Barros e continuando na presidncia o Dr. Benoni
Ribas. Mses depois, os Drs. Oswaldo de Almeida Costa
e Tito Arcoverde de Albuquerque Cavalcanti cederam
seus lugares aos Professres Jayme Pecegueiro Gomes
da Cruz e Raymundo Moniz de Arago, temporriamente
substitudo pelo Almirante Vicente de Paulo Castilho.
Com a volta do Dr. Moniz de Arago coincidiu a incluso
no rgo paritrio de mais quatro elementos: o Prof. Carlos
Henrique R. Liberalli e o Farm. Vicente Ferreira Greco,
de So Paulo, e o Prof. Abel Elias de Oliveira e o Alm.
Farm. Vicente de Paulo Castilho, do Rio.
Por essa poca, o Dr. Sebastilio de Barros, que continuou
a integrar o grupo do Rio, deixou o cargo de coordenador,
sendo sucedido pelo Farm. Oswaldo de Lazzarini Peckolt
e, por ltimo, pelo Farm. Flvio Frota.
Dos trabalhos desta subcomisso, realizados no Rio e
em So Paulo, resultou ser possvel apresentar, em 1
de setembro de 1.955, ao Ministro da Sade, Dr. Aramis
Athayde, a 2 edio da Farmacopeia, nos seus originais,
sendo na mesma data assinado pelo Presidente da
Repblica, Dr. Joo Caf Filho, o Decreto n 37.843 de 1
de setembro de 1.955 que a ofcializou.
Atravs do Dr. Luiz Salgado Lima Filho, o Ministro da
Sade Mano Pinotti apresentou ao Presidente da Repblica,
Dr. Juscelino Kubitschek, decreto com novas incluses
e modifcaes e que tornou obrigatria a Farmacopeia
nas farmcias, laboratrios industriais farmacuticos e
estabelecimentos congneres. ste decreto tomou o n
45.502 de 27 de fevereiro de 1959.
Aqui se encontram a codifcao dos frmacos e frmulas
de atualidade, a normalizao das tcnicas empregadas
nas diversas prticas farmacuticas, a padronizao dos
mtodos, ensios, reagentes e tabelas, necessrios ao
exerccio profssional.
Da primeira edio muito se aproveitou, to sbiamente
fra ela redigida; numerosas monografas dela retiradas
passaro a constar do Formulrio Nacional, cuja feitura
j se encontra em fase de concluso, esperando-se sua
publicao em curto prazo, como segundo volume do
Cdigo Farmacutico Brasileiro.
(*) Rodolpho Albino Dias da Silva - Farmacopeia dos
Estados Unidos do Brasil- Prefcio, pg. VIII, 1 edio,
1.929.
Falecido.
3 EDIO
A importncia das farmacopeias - assim considerados
os cdigos ofciais, ou ofcialmente reconhecidos, onde
se estabelecem a identifcao e os padres de qualidade
das substncias empregadas em farmacologia - cresce na
proporo do desenvolvimento cultural da Farmcia e da
Medicina.
Consignada sua primeira existncia no sculo III da nossa
Era, foi desde meados do sculo passado que as farmacopeias
ganharam ntidas caractersticas de necessidade nacional,
corporifcando o esforo do ajustamento dos recursos de
identifcao e controle das substncias teraputicas
natureza regional dos prprios frmacos, eis que, em sua
grande maioria, advinham da fora, usualmente nativa e
local, de rgos animais, e dos minerais admitidos como
prprios para fns teraputicos.
Caudatrio de Portugal na cincia e na tcnica, nosso Pas
sujeitou-se, ao tempo da Colnia, Farmacopeia Geral
para o Reino e Domnios, de Portugal, editada em 1.794.
Com a Independncia do Brasil, em 1.822, ocorreram
aberturas para outras infuncias culturais, e com facilidade
nosso Pas perflou-se orientao francesa, prevalecente
na poca para o mundo ocidental. Tanto assim que, em
1.851, por Decreto, foi estabelecida a obrigatoriedade da
Farmacopeia Francesa como cdigo ofcial para o Brasil.
De 1.851 a 1.929 toda a legislao sanitria brasileira
sustentou a mesma obrigatoriedade para a confeco
dos preparados ofcinais, at que estivesse organizado o
Cdigo Farmacutico Brasileiro.
Quinze de agosto de 1.929 foi o marco dessa redeno,
porquanto a partir daquela data passou a vigorar a
Farmacopeia dos Estados Unidos do Brasil, em todo o
territrio nacional, conquista amplamente festejada, ainda
mais porque se exaltava tambm o grande responsvel pela
mesma, o extraordinrio farmacutico Rodolfo Albino
Dias da Silva, que consumira doze anos inteiros, num
labor silencioso e beneditino, na composio das pginas
iluminadas de saber que haveriam de se erigir em brevirio
para os da sua grei, to harmonioso a ponto de se lhe
incluir como um dos melhores entre os coetneos, embora
devido competncia de artfce nico, feito difcil de ser
repetido.
Quanto ao mais da histria dos cdigos farmacuticos, a
2 edio da Farmacopeia Brasileira constitui repositrio
de mrito irrefutvel, at ao tempo daquela edio, motivo
plausvel para no remontarmos detalhes j conhecidos.
prprio das Farmacopeias, por melhor que sejam
elaboradas, sua reviso peridica, natural caracterstica
decorrente da evoluo da Farmacologia.
Da porque o Decreto Federal n 45.502, de 27 de fevereiro
de 1959, ao aprovar a Segunda Edio da Farmacopeia
Brasileira, j fxava sua reviso a cada dez anos,
independente das edies intermedirias de Suplementos.
2
Tanto assim que a 13 de Junho de 1962, mediante Portaria
n 82 do Departamento Nacional de Sade; uma primeira
comisso foi constituda para os trabalhos de reviso,
para ela nomeados os Drs. Fernando Luz Filho, Lauro
Sollero, Maria Alzira Ferreira Nobrega, Laerte Manhes
de Andrade, Ansio Faria e Souza, Mrio Victor de Assis
Pacheco, Nilson dos Reis Rodrigues, e EIza Magalhes
Pcego como Secretria. Os trabalhos dessa comisso
fcaram adstritos a providncias preliminares, dando azo
a que em 16.4.68, pela Portaria n 28 do Departamento
Nacional de Sade, una nova comisso fosse constituda,
dela constando os Drs. Lcio Costa, Maria Alzira Ferreira
Nobrega, Lauro Sollero, Gobert de Arajo Costa, Emlio
Diniz da Silva, Joo Haikal Helou e Anbal da Rocha
Nogueira Jnior, e Josepha Paul como Secretria, com
desenvolvimento de trabalho semelhante ao da comisso
anterior.
A Portaria Ministerial n 112 de 20 de maro de 1972
criou um grupo de trabalho, composto pelos Drs. Evaldo
de Oliveira, Moacir Nogueira, Caio Romero Cavalcante e
Ten. Cel. Farm. Ex. Jlio Fernandes Silva, grupo este que
fxou algumas bases de trabalho, descontinuados em face
de razes aleatrias e contingentes.
Finalmente, a 25 de junho de 1975, por fora da Portaria
Ministerial n 266, foi constituda uma nova Comisso
de Reviso da Farmacopeia, dela participando os Drs.
Fernando Ayres da Cunha, Diretor do Servio Nacional
de Fiscalizao da Medicina e Farmcia, e Presidente da
Comisso, talo Suassuna, Maria Alzira Ferreira Nobrega,
Evaldo de Oliveira, Jos Aleixo Prates e Silva, Lauro
Sollero, Paulo Dias da Costa e, como Secretria, Dora
Alves Gonalves Cruz.
Disposta, desde o incio dos trabalhos, a concluir sua
misso em curto prazo, a Comisso, reunida pela primeira
vez a 5 de agosto de 1975, decidiu promover reunies
semanais na sede do Servio Nacional de Fiscalizao da
Medicina e Farmcia, Rio de Janeiro.
De princpio, absteve-se de constituir sub-comisses,
optando pela solicitao de colaboradores especiais para
os assuntos em que a prpria Comisso se julgasse incapaz
ou insufcientemente segura para decidir.
Com esta orientao, as etapas foram superadas
paulatinamente, e ganhando celeridade medida em que a
problemas se delineavam mais claros.
Na impossibilidade material e tcnica de resolver a todos
os problemas, a Comisso valeu-se da experincia de
outras comisses e rgos Tcnicos, e de Farmacopeias,
notadamente no que respeitava s orientaes da
Organizao Mundial da Sade. Aceitou, tambm,
oportunamente, o apoio do Conselho Federal de Farmcia
que, para uma colaborao mais integrada, montou todo
um dispositivo tcnico de servio permanente, facilitando
sobremaneira as diversas etapas do trabalho. Desde a
reavaliao da listagem primitiva das monografas, visando
atualiz-las, ao exaustivo esforo de alcanar unidade
redacional e tcnica s colaboraes advindas de relatores
de todos os recantos do Pas, afora tradues.
de muita pertinncia ressaltar o signifcativo fato de
que a colaborao profssional para relatar: monografas
representou um movimento de sentido nacional, acorrendo
adeses de todos os quadrantes do Pas.
Desse esforo conjunto - Ministrio da Sade (pelo
Servio Nacional de Fiscalizao da Medicina e Farmcia),
Comisso de Reviso da Farmacopeia (pelo esprito
de equipe presente em todos os estgios de trabalho),
Conselho Federal de Farmcia (que favoreceu infra-
estrutura material e humana para imprimir velocidade
ao trabalho) e relatores - foi possvel vencer o desafo
inicial de conquistar aprovao dos originais no evento do
cinquentenrio da 1 edio da Farmacopeia Brasileira.
A fxao dessa data, sobre ser justa homenagem, passou
a confgurar um prazo impossvel de ser prorrogado,
emprestando a todo o trabalho, por consequncia, clima
favorvel e dinmico, exigente de objetividade.
Temos, ao fnal, que das 770 monografas constantes da
2 edio subsistiram 280, mediante reviso de seu texto,
sendo que para tanto de muito valeram os reparos publicados
pelo Prof. Dr. Joo Haikal Helou. Foram incorporados 205
novas monografas, naturalmente aquelas que representam
novos agentes teraputicos, atendidas as normativas fxadas
pela Comisso e j referidas no Prefcio desta edio.
Admite-se que talvez coubessem outras monografas;
admite-se, por igual, que algumas no coubessem mais.
Mas ser preciso ter; presente que a Comisso adotou
critrios prprios, sujeitos realidade nosolgica e
teraputica nacional. Estes critrios, e no as monografas
podero suscitar pertinncias ou no. Naturalmente, a
Comisso nica e exclusiva responsvel pelos mesmos,
sem compartilhar com outros os mritos ou demritos de
sua orientao.
De mxima relevncia, a ter-se em conta, o fato de,
consoante os termos do ato que aprovou a 3 edio, as
monografas anteriores, no expressamente canceladas
nesta Farmacopeia, subsistem com validade para todos os
efeitos legais.
Admite-se, fnalmente, que no se ignora a tendncia
universal de corporifcar farmacopeia e formulrio num
s texto. Tentada desde logo a isso, a Comisso, decidiu,
entretanto, optar por um trabalho parcelado, disposta a
elaborar, logo a seguir, o Formulrio Nacional. Ainda
assim, esta segunda providncia nada mais representar
seno o desdobramento de um trabalho que se visa unifcar
na etapa subsequente elaborao do Formulrio, e que se
pretende, efetivamente cumprir.
4 EDIO
So de natureza efmera os livros desta ordem, destinados
a espelharem um dos lados da farmacologia, cincia que
vai percorrer atualmente a fase mais acelerada da sua
evoluo. SOUZA MARTINS, in Relatrio de Introduo
da 3
a
edio da Farmacopeia Portuguesa, 1876.
2
O vocbulo Farmacopeia provm da aglutinao de
dois termos gregos, a saber, u = medicamento
ou veneno, e = fabricante e fabricao. As
Farmacopeias constituem cdigos farmacuticos ofciais
ou ofcialmente adotados, nos quais se estabelecem a
identifcao, os padres de qualidade e os mtodos de
anlise dos frmacos em uso. Existentes desde o sculo
III, os primeiros compndios eram de carter regional,
pois os frmacos de ento eram provenientes de rgos de
animais, de minerais e, sobretudo, da fora local e nativa.
Alguns chegaram a ser ofcializados, embora em carter
regional, como, por exemplo, o formulrio da Escola de
Salerno Regimen Sanitatis, de 1066, adotado em 1240
por Frederico II, Rei das Duas Siclias. As tentativas
empreendidas individualmente por diversos autores
no sentido de unifcar a descrio e identifcao dos
frmacos mais importantes datam do fnal do sculo XVII,
e do sculo XVIII. Entre outras obras, merecem citao
a Pharmacopeia Internationalis de Lmery (1690), as
Farmacopeias de James (1747), de De Quincy (1758),
de Triller (1764) e, especialmente, a Pharmacopeia
Universalis, de Jourdan (1828), que compilava dados de
quase 50 Farmacopeias e compndios diferentes. Nenhum
destes trabalhos, entretanto, possua carter ofcial.
As Farmacopeias nacionais, de carter ofcial e adoo
obrigatria, comeam a surgir no fnal do sculo XVIII e
incio do sculo XIX. Assim, foram publicadas as primeiras
edies das Farmacopeias, portuguesa (1794), holandesa
(1805), francesa (1818) e americana (1820).
O Brasil Colnia adotava a Pharmacopia Geral para o
Reino e Domnios de Portugal, de 1794, cuja autoria
atribuda a Francisco Tavares, professor da Universidade
de Coimbra.
Com a Independncia, volta-se o Brasil orientao
cultural francesa e, no campo da Farmcia, o Codex
Medicamentarius francs adquire fora legal. O
Regulamento da Junta de Higiene Pblica, mandado
executar pelo Decreto n
o
828 de 29/09/1851, sem especifcar
qual a Farmacopeia a ser cumprida, estabelece lista de
livros que as farmcias deveriam possuir, constando dela,
entre outros, a Farmacopeia Portuguesa de 1794, o Codex
Francs e o Cdigo Farmacutico Lusitano, da autoria de
Agostinho Albano da Silveira Pinto, cuja primeira edio
foi publicada em 1835 e hoje considerada como a 2
a
edio
da Farmacopeia Portuguesa.
J o Decreto n
o
8.387 de 19/01/1882 estabelece
textualmente: para a preparao dos remdios ofciais
seguir-se- a Farmacopeia francesa, at que esteja
composta uma Farmacopeia brasileira..., situao esta
que iria perdurar at 1926, quando o Decreto n
o
17.509 de
04/11/1926 aprovou a primeira Farmacopeia Brasileira,
de autoria de Rodolpho Albino Dias da Silva, tornada
obrigatria a partir de 15 de agosto de 1929.
A primeira edio da Farmacopeia Brasileira ombreava com
as Farmacopeias da poca, dos pases mais desenvolvidos,
revelando-se notvel pela preciso das monografas e,
sobretudo, pelo grande nmero de incluses de frmacos
obtidos da fora brasileira, no existentes em nenhuma
outra Farmacopeia.
A constante evoluo da farmacologia, a introduo de
novos frmacos na teraputica, o surgimento de novos
mtodos de anlise, mais modernos e precisos, e a
necessidade de especifcaes atualizadas para o controle
de matria-prima e produtos farmacuticos so fatores
fundamentais determinantes da obsolescncia dos cdigos
farmacuticos e da necessidade de revis-los e atualiz-
los periodicamente. O Decreto que aprovou a primeira
edio da Farmacopeia Brasileira foi omisso quanto s
revises; assim, a segunda edio veio luz quase 30 anos
aps a primeira e representou cinco anos de trabalho de
dez subcomisses especializadas. A 2
a
edio incorporou
as aquisies decorrentes da prpria atualizao da
farmacologia. No conseguiu, contudo, ser mais rica e
precisa do que a primeira edio, fruto de um s autor.
O Decreto Federal n
o
45.502 de 27/02/1959, ao aprovar
a 2
a
edio da Farmacopeia Brasileira, fxou sua reviso
a cada dez anos. Infelizmente, empecilhos diversos no
permitiram o cumprimento desse Decreto. Mais de 15 anos
decorreram, at que se cogitasse de uma nova edio.
Assim que, em 25 de novembro de 1976, foi ofcializada,
pelo Decreto n
o
78.840, a terceira edio da Farmacopeia
Brasileira. O mesmo Decreto fxou em cinco anos o prazo
para sua reviso. Realizada em tempo determinado e muito
curto, tarefa possvel de levar a termo somente graas ao
apoio do Conselho Federal de Farmcia, a obra despertou
sensveis manifestaes da comunidade tcnico-cientfca,
a recomendarem rpida reviso do seu texto, independente
do dispositivo legal.
Assim, a 4
a
edio surge com algum atraso. Procurou-se,
nesta edio, sanar as defcincias da anterior. Procurou-se,
tambm, adotar mtodos modernos de anlise, compatveis,
porm, com a realidade nacional. A publicao desta parte
e a adoo de uma nova sistemtica de apresentao que
possibilita sua contnua atualizao atravs de revises
permanentes so as metas prioritrias que a Comisso
Permanente de Reviso da Farmacopeia Brasileira se
prope alcanar.
3
3 FARMACOPEIA BRASILEIRA
PRESIDENTES DAS EDIES ANTERIORES DA FARMACOPEIA BRASILEIRA
RODOLPHO ALBINO DIAS DA SILVA 1 edio
LUIZ SALGADO LIMA FILHO 2 edio
FERNANDO AYRES CUNHA 3 edio
JOO GILVAN ROCHA 4 edio Parte I
CELSO FIGUEIREDO BITTENCOURT 4 edio Parte II
COMISSO DA FARMACOPEIA BRASILEIRA - CFB
PRESIDENTE
GERSON ANTNIO PIANETTI
VICE-PRESIDENTE
MIRACY MUNIZ DE ALBUQUERQUE
MEMBROS
ADRIANO ANTUNES DE SOUZA ARAJO
Universidade Federal de Sergipe - UFS
ANTONIO CARLOS DA COSTA BEZERRA
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria - Anvisa
CLVIA FERREIRA DUARTE GARROTE
Universidade Federal de Gois - UFG
EDUARDO CHAVES LEAL
Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade INCQS / FIOCRUZ
ELFRIDES EVA SCHERMAN SCHAPOVAL
Universidade Federal do Rio Grande do Sul - UFRGS
RICO MARLON DE MORAES FLORES
Universidade Federal de Santa Maria - UFSM
Universidade Federal de Minas Gerais - UFMG
JOO CARLOS PALAZZO DE MELLO
Conselho Federal de Farmcia - CFF
JOS CARLOS TAVARES
Universidade Federal do Amap - UNIFAP
3
KTIA REGINA TORRES
Ministrio da Sade - MS
LAURO DOMINGOS MORETTO
Sindicato da Indstria de Produtos Farmacuticos no Estado de So Paulo - Sindusfarma
LEANDRO MACHADO ROCHA
Universidade Federal Fluminense - UFF
LUIZ ALBERTO LIRA SOARES
Universidade Federal do Rio Grande do Norte - UFRN
Universidade Federal de Pernambuco - UFPE
ONSIMO ZARA PEREIRA
Associao Brasileira da Indstria Farmoqumica e de Insumos Farmacuticos - ABIQUIFI
SILVANA TERESA LACERDA JALES
Associao dos Laboratrios Farmacuticos Ofciais do Brasil - ALFOB
VLADI OLGA CONSIGLIERI
Universidade de So Paulo - USP
COORDENAO DA FARMACOPEIA BRASILEIRA
AGNCIA NACIONAL DE VIGILNCIA SANITRIA - Anvisa
ANTONIO CARLOS DA COSTA BEZERRA - Coodenador
Especialistas em Regulao e Vigilncia Sanitria
ANDREA REZENDE DE OLIVEIRA
JAIMARA AZEVEDO OLIVEIRA
MARIA LCIA SILVEIRA MALTA DE ALENCAR
SILVNIA VAZ DE MELO MATTOS
COMITS TCNICOS TEMTICOS DA COMISSO
DA FARMACOPEIA BRASILEIRA - CTT
ANA MARIA SOARES PEREIRA
Universidade de Ribeiro Preto - UNAERP
BERTA MARIA HEINZMANN
ELFRIEDE MARIANNE BACCHI
EMIDIO VASCONCELOS LEITO DA CUNHA
Universidade Estadual de Campina Grande - UECG
APOIO POLTICA NACIONAL DE PLANTAS
MEDICINAIS E FITOTERPICOS
JOS CARLOS TAVARES CARVALHO - Coordenador
ANA CECLIA BEZERRA CARVALHO
ANA CLAUDIA FERNANDES AMARAL
Instituto de Tecnologia de Frmacos - Farmanguinhos /
FIOCRUZ
3
LUIZ ANTNIO BATISTA DA COSTA
Centro de Excelncia em Sade Integral do Paran - CESIP
NILTON LUZ NETTO JNIOR
Universidade Catlica de Braslia - UCB
ROSANE MARIA SILVA ALVES
Ministrio da Sade MS
WAGNER LUIZ RAMOS BARBOSA
Universidade Federal do Par - UFPA
CORRELATOS DE MEDICAMENTOS
TEREZINHA DE JESUS ANDREOLI PINTO -
Coordenadora
ADRIANA BUGNO
Instituto Adolfo Lutz - IAL
ALBA VALRIA DOS SANTOS
Baxter Hospitalar Ltda
DHALIA GUTEMBERG
Cmara Brasileira de Diagnstico Laboratorial - CBDL
IRENE SATIKO KIKUCHI
MICHELE FEITOSA SILVA
Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade -
INCQS / FIOCRUZ
RENATA ARACELLI PIRES
WALFREDO DA SILVA CALMON
DENOMINAES COMUNS BRASILEIRAS
AULUS CONRADO BASILE - Coordenador
Universidade de So Paulo USP
CARLOS CZAR FLORES VIDOTTI
Conselho Federal de Farmcia CFF
ONSIMO ZARA PEREIRA
Associao Brasileira da Indstria Farmoqumica e de
Insumos Farmacuticos - ABIQUIFI
PAULO CHANEL DEODATO DE FREITAS
RICARDO CHIAPPA
Unio Educacional do Planalto Central - UNIPLAC
ROSANA MIGUEL MESSIAS MASTELARO
Sindicato da Indstria de Produtos Farmacuticos no
Estado de So Paulo - Sindusfarma
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
EQUIVALNCIA FARMACUTICA E
BIOEQUIVALNCIA DE MEDICAMENTOS
SLVIA STORPIRTIS - Coordenadora
CHANG CHIANN
Universidade Federal Minas Gerais - UFMG
JACQUELINE DE SOUZA
Universidade Federal de Ouro Preto - UFOP
LEONARDO DE SOUZA TEIXEIRA
Instituto de Cincias Farmacuticas de Estudos e Pesquisas
ICF
RAQUEL LIMA E SILVA
RODRIGO CRISTOFOLETTI
SOLANGE MARIA COUTINHO BRANDO
INCQS / FIOCRUZ
TERESA CRISTINA TAVARES DALLA COSTA
ESPECIALIDADES FARMACUTICAS
ELFRIDES EVA SCHERMAN SCHAPOVAL -
Coordenadora
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
ANIL KUMAR SINGH
HRIDA REGINA NUNES SALGADO
Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho -
UNESP
JAIR CALIXTO
3
LUCIANE VARINI LAPORTA
Centro Universitrio Franciscano - UNIFRA
MNICA DA LUZ CARVALHO SOARES
NADIA MARIA VOLPATO
RUTH RIESINGER STRATTMANN
EXCIPIENTES E ADJUVANTES
PEDRO JOS ROLIM NETO - Coordenador
DLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
Universidade Federal do Amazonas - UFAM
FABIANA CREMASCHI PALMA
Associao Brasileira dos Distribuidores e Importadores
de Insumos Farmacuticos, Cosmticos, Veterinrios,
Alimentcios e Aditivos - ABRIFAR
FABRICIO CARNEIRO DE OLIVEIRA
GABRIELA GONALVES DA SILVA
GEISIANE MARIA ALVES PRESMICH
Laboratrio Industrial Farmacutico de Alagoas LIFAL
JOS LAMARTINE SOARES SOBRINHO
Universidade Federal do Piau - UFPI
ROSALI MARIA FERREIRA DA SILVA
Universidade Federal do Par UFPA
FARMACOGNOSIA
AMLIA TERESINHA HENRIQUES - Coordenadora
CID AIMBIR DE MORAES SANTOS
Universidade Federal do Paran - UFPR
EVELIN ELFRIEDE BALBINO
JOS ANGELO SILVEIRA ZUANAZZI (Ad hoc)
LILIAN AULER MENTZ
MARIA DAS GRAAS LINS BRANDO
RODNEY ALEXANDRE FERREIRA RODRIGUES
Universidade Estadual de Campinas - UNICAMP
TATIANE PEREIRA DE SOUZA
GASES MEDICINAIS
ALADE ALINE XAVIER LEAL - Coordenadora
Instituto de Tecnologia em Imunobiolgicos - Bio
Manguinhos FIOCRUZ
CRISTIANE RODRIGUES AUGUSTO
Instituto Nacional de Metrologia, Normatizao e
Qualidade Industrial - INMETRO
DESIRE MICHELS CORTEZ
Linde Gases Ltda.
HEITOR CONRADO
Air Liquide do Brasil Ltda
JOO PAULO SILVRIO PERFEITO
KOICHI MIZUTA
Instituto de Pesquisas Tecnolgicas do Estado de So
Paulo - IPTSP
SLVIO FILGUEIRAS
Linde Gases Ltda.
HEMOCOMPONENTES E HEMODERIVADOS
JLIO CSAR CARESTIATO - Coordenador
DENISE FERREIRA LEITE
HELDER TEIXEIRA MELO
JANANA DUQUE DE SOUZA
Bio Manguinhos - FIOCRUZ
3
MARISA COELHO ADATI
INCQS / FIOCRUZ
MELNIA DE FTIMA CORDELINO
NEEMIAS SILVA DE ANDRADE
SEVERINO BARBOSA
Universidade Federal do Pernambuco - UFPE
HOMEOPATIA
LEANDRO MACHADO ROCHA - Coordenador
BIANCA RODRIGUES DE OLIVEIRA (Ad hoc)
Universidade do Vale do Itaja - UNIVALI
CARLA HOLANDINO QUARESMA
Universidade Federal do Rio de Janeiro - UFRJ
EZEQUIEL PAULO VIRIATO
Laboratrio Homeoptico Almeida Prado Ltda
FRANCISCO JOS DE FREITAS
MARCELO CAMILO MORERA
MARIA DIANA CERQUEIRA SALES
Faculdade Brasileira - UNIVIX
RICARDO CHIAPPA
RINALDO FERREIRA
INGREDIENTES FARMACUTICOS ATIVOS
MIRACY MUNIZ DE ALBUQUERQUE - Coordenadora
Universidade Federal de Pernambuco UFPE
ADRIANO ANTUNES SOUZA DE ARAJO
Universidade Federal de Sergipe UFS
ANDR AUGUSTO GOMES FARACO
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
DANIEL KARL RESENDE
LCIA DE FTIMA FRANCELINO DA SILVA
Laboratrio Central de Sade Pblica de Pernambuco -
LACEN
SAID GONALVES DA CRUZ FONSECA
Universidade Federal do Cear UFC
SEVERINO GRANJEIRO JNIOR
Laboratrio Farmacutico do Estado de Pernambuco
LAFEPE
TRCIO PASCHKE OPPE
MARCADORES PARA FITOTERPICOS
JOO CARLOS PALAZZO DE MELLO - Coordenador
Universidade Estadual de Maring UEM
ALBERTO JOS CAVALHEIRO
Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho
UNESP
CECLIA ELENA DE FIGUEIREDO OGNIBENE
Associao dos Laboratrios Farmacuticos Nacionais
ALANAC
FERNO CASTRO BRAGA
MARIA DO CARMO VASQUES GARCIA
INCQS / FIOCRUZ
VALQUIRIA LINCK BASSANI
VALDIR FLORNCIO DA VEIGA JUNIOR
Universidade Federal Amazonas UFAM
SILVIA PAREDES FONTES
MICROBIOLOGIA
CLVIA FERREIRA DUARTE GARROTE -
Coordenadora
ANA CRISTINA REGIS DE BARROS CORREIA
Universidade Federal de Pernambuco UFPE
CLAUDIO KIYOSHI HIRAI
Biolab Sanus Farmacutica Ltda
MARTIN STEPPE
3
MIRIAM DE FTIMA VIANNA LEONEL
ROSEMARIE APARECIDA DE ARAJO BONATTO
Merck Sharp & Dohme Farmacutica Ltda
SILSIA DE SOUZA AMORIM
TEREZINHA DE JESUS ANDREOLI PINTO
NORMATIZAO DE TEXTOS E IDENTIDADE
VISUAL DA FARMACOPEIA BRASILEIRA
ANTNIO BASLIO PEREIRA - Coordenador
FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA
ISABELA DA COSTA CSAR
ICF
JOS ANTNIO DE AQUINO RIBEIRO
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria - EMBRAPA
LAS SANTANA DANTAS
PAULA CRISTINA REZENDE ENAS
PRODUTOS BIOLGICOS
EDUARDO CHAVES LEAL - Coordenador
INCQS / FIOCRUZ
DANIELA MARRECO CERQUEIRA
DARCY AKEMI HOKAMA
Manguinhos FIOCRUZ
HISAKO GONDO HIGASHI
UNESP
LILIA RIBEIRO SERDIO
Instituto Vital Brazil - IVB
MARA EL-CORAB MOREIRA DE OLIVEIRA
MARCO ANTONIO STEPHANO
ORLANDO SILVA
Serono Produtos Farmacuticos Ltda.
PRODUTOS MAGISTRAIS E OFICINAIS
VLADI OLGA CONSIGLIERI - Coordenadora
ELISABETE PEREIRA DOS SANTOS
JOS ANTONIO DE OLIVEIRA BATISTUZZO
Faculdades Oswaldo Cruz
LETCIA NORMA CARPENTIERI RODRIGUES
Universidade Federal de So Paulo - UNIFESP
GUILHERME DINIZ TAVARES
MRCIA MACIEL ANTUNES
Farmcia de Manipulao de Cosmticos Ltda - FACIAL
PATRICIA HAUSCHILDT DE OLIVEIRA MENDES
PAULA RENATA APARECIDA NIGRO RIVERA
CARAZZATTO
Associao Nacional de Farmacuticos Magistrais -
ANFARMAG
ROBERTO PONTAROLO
RADIOFRMACOS
ELOY JULIUS GARCIA - Coordenador
Universidade Estadual do Rio Grande do Sul - UERGS
ANA MARIA SILVEIRA BRAGHIROLLI
Instituto de Engenharia Nuclear - IEN-CNEN
ELAINE BORTOLETI DE ARAJO
Instituto de Pesquisas Energticas e Nucleares - IPEN
LUIZ CLUDIO MARTINS ALEIXO
MARYANGELA REZENDE MASCARENHAS
MARYCEL ROSA FELISA FIGOLS DE BARBOSA
3
NEUZA TAEKO OKASAKI FUKUMORI
RALPH SANTOS OLIVEIRA
SUBSTNCIA QUMICA DE REFERNCIA
PEDRO EDUARDO FREHLICH - Coordenador
MARIA ALICE BCKELMANN
Cristlia Produtos Qumicos Farmacuticos Ltda
INCQS / FIOCRUZ
RENATA BARBOSA DE OLIVEIRA
VALRIA PEREIRA DE SOUSA
AMADEU CARDOSO JUNIOR
AMANDA THOMAS BARDEN
AMARILIS SCREMIN PAULINO
Universidade Federal de Santa Catarina - UFSC
AMLIA TERESINHA HENRIQUES
ANA CAROLINA ZAVAREZI
ANA CECLIA BEZERRA CARVALHO
ANA CLAUDIA FERNANDES AMARAL
Instituto de Tecnologia de Frmacos - Farmanguinhos /
FIOCRUZ
ANA CRISTINA REGIS DE BARROS CORREIA
ANA ELISA DE OLIVEIRA
ANA GABRIELA REIS SOLANO
Universidade Federal de So Joo Del Rei - UFSJ
ANA LAURA ESCARRONE
ANA LCIA ABOY
ADILSON SARTORATTO
DLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
ADRIANA BUGNO
ADRIANA DA SILVA SANTOS DE OLIVEIRA
ADRIANA PASSOS OLIVEIRA
ADRIANO ANTUNES SOUZA DE ARAJO
Universidade Federal de Sergipe - UFS
ALADE ALINE XAVIER LEAL
Instituto de Tecnologia em Imunobiolgicos Bio-
Manguinhos / FIOCRUZ
ALBA VALRIA SANTOS
ALBERTO JOS CAVALHEIRO
UNESP
ALICE SIMON
ALINE LIMA HERMES MLLER
ALLAN WEBERLING MATOS
COLABORADORES DA 5 EDIO DA FARMACOPEIA BRASILEIRA
3
ANA MARIA BERGOLD
ANA MARIA SILVEIRA BRAGHIROLLI
ANA MARIA SOARES PEREIRA
Universidade de Ribeiro Preto - UNAERP
ANDR AUGUSTO GOMES FARACO
ANDR LIMA DE OLIVEIRA COSTA
ANDR LUIS GEMAL
INCQS / FIOCRUZ
ANDREA REZENDE DE OLIVEIRA
ANDREJUS KOROLKOVAS (In memoriam)
Comisso Permanente de Reviso da Farmacopeia
Brasileira 4 edio
ANDRESSA BLAINSKI
Universidade Estadual de Maring - UEM
ANDRESSA DALMAS NARVAEZ
ANGELA CRISTINA LEAL BADAR TRINDADE
ANGELICA GARCIA COUTO
ANGELO JOS COLOMBO
Brasileira 4 edio
ANIL KUMAR SINGH
ANNA KAROLINA PASTOREK
ANTNIA MARIA CAVALCANTI DE OLIVEIRA
ANTNIO BASLIO PEREIRA
ANTNIO CARLOS DA COSTA BEZERRA
ARMANDO DA SILVA CUNHA JNIOR
ARTHUR LUIZ CORRA
ATANA MPALANTINOS DA SILVA
AULUS CONRADO BASILE
UREA SILVEIRA CRUZ
BERTA MARIA HEINZMANN
BEATRIZ PINHEIRO BEZERRA
Universidade Federal do Cear - UFC
BIANCA FERNANDES GLAUSER
BIANCA RODRIGUES DE OLIVEIRA
BRUNA TRINDADE DE CARVALHO
BRUNO VALENTE
CAIO PINHO FERNANDES
CAMILA ADOLFO GONALVES
CARLA HOLANDINO QUARESMA
CARLOS CZAR FLORES VIDOTTI
Conselho Federal de Farmcia - CFF
CARLOS EDUARDO DE OLIVEIRA PEREIRA
CAROLINA DOS SANTOS PASSOS
CAROLINA LUPI DIAS
CSSIA VIRGINIA GARCIA
CECLIA ELENA DE FIGUEIREDO OGNIBENE
Associao dos Laboratrios Farmacuticos Nacionais -
ALANAC
3
CLIA DE FREITAS GUIMARES PRAA
CELINA ROCHA FILGUEIRAS
CELSO FIGUEIREDO BITTENCOURT
Brasileira 4 edio
CSAR ALEXANDRE JUNQUEIRA
CHANG CHIANN
CHARISE DALLAZEM BERTOL
CHRISTIANE SOUTO MORAES
CID AIMBIR DE MORAES SANTOS
CLARICE MITIE SANO YUI
Medley S.A. Indstria Farmacutica
CLARISSA MARQUES MOREIRA DOS SANTOS
CLARISSE MADALENA BUENO ROLIM
CLUDIA MARIA OLIVEIRA SIMES
CLAUDIA SEIDL
CLAUDIO KIYOSHI HIRAI
Biolab Sanus Farmacutica Ltda
CLSIO SOLDATELI PAIM
CLVIA FERREIRA DUARTE GARROTE
CRISTIANE DA SILVA
CRISTIANE DE BONA DA SILVA
CRISTIANE RODRIGUES AUGUSTO
Instituto Nacional de Metrologia, Normatizao e
Qualidade Industrial - INMETRO
CRISTIANNE DA SILVA GONALVES
CRISTINA DUARTE VIANNA SOARES
CYPRIANO CARDOSO FILHO
Brasileira 4 edio
DANIEL KARL RESENDE
DANIELA MARRECO CERQUEIRA
DANIELE DE SOUZA TEIXEIRA
DANILE RUBERT PEREIRA
DARCY AKEMI HOKAMA
Manguinhos FIOCRUZ
DEISE CRISTINA DA SILVA
DENILSON DA SILVA SANTOS
DENISE FERREIRA LEITE
DESIRE MICHELS CORTEZ
Linde Gases Ltda.
DHALIA GUTEMBERG
Cmara Brasileira de Diagnstico Laboratorial - CBDL
DIEGO LEONEL DA COSTA VIEIRA
DIOGO POMPU DE MORAES
ECIO GEOVANI NETO
DER LISANDRO DE MORAES FLORES
EDSON IRINEU MLLER
EDUARDO AUGUSTO MOREIRA
Brasileira 4 edio
3
EDUARDO CHAVES LEAL
INCQS / FIOCRUZ
EDUARDO SCHMIDT DE SOUZA
ELAINE BORTOLETI DE ARAUJO
ELDA AZEVEDO GUERRA
ELFRIDES EVA SCHERMAN SCHAPOVAL
ELIANA NUNES
ELIANE COUTINHO DE MEDEIROS
ELISABETE PEREIRA DOS SANTOS
ELIZABETH IGNE FERREIRA
Brasileira 4 edio
ELIZABETH MARIA ROCHA LOBO
ELIZABETH VALVERDE DOS SANTOS
ELOY JULIUS GARCIA
Universidade Estadual do Rio Grande do Sul - UERGS
ELZA ANDERS SAAD
Brasileira 4 edio
ELZRIA DE AGUIAR NUNAN
EMANUELA ANSELMO VIEIRA
EMIDIO VASCONCELOS LEITO DA CUNHA
Universidade Estadual de Paraba UEPB
EVELIN ELFRIEDE BALBINO
EZEQUIEL PAULO VIRIATO
Laboratrio Homeoptico Almeida Prado Ltda
FABIANA CREMASCHI PALMA
FABIANA ERNESTINA BARCELLOS DA SILVA
Universidade Federal do Pampa - UNIPAMPA
FABIANE GOLDCHMIDT ANTES
FBIO ANDREI DUARTE
Universidade Federal do Rio Grande - FURG
FBIO SEIGI MURAKAMI
FABRICIO CARNEIRO DE OLIVEIRA
FVERO REISDORFER PAULA
Universidade Federal do Pampa - UNIPAMPA
FELIPE DA ROSA NOBRE
FELIPE REBELLO LOURENO
FERNANDA HERMSDORFF DAS NEVES
FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA
FERNO CASTRO BRAGA
FLBIO DA ROSA PONS JNIOR
FLVIA DIAS MARQUES MARINHO
FLVIA NEVES ROCHA ALVES
FRANCINETE RAMOS CAMPOS
FRANCISCA MARIA BARROS SOUSA
FRANCISCO JOS DE FREITAS
3
GABRIELA GONALVES DA SILVA
GEISIANE MARIA ALVES PRESMICH
Laboratrio Industrial Farmacutico de Alagoas - LIFAL
GERALDO FENERICH
Brasileira 4 edio
Universidade Federal Minas Gerais - UFMG
GILBERTO DOLEJAL ZANETTI
GILSON ANDRADE RAMALDES
GIOVANA SECRETTI VENDRUSCOLO
Universidade Comunitria da Regio de Chapec -
UNOCHAPEC
GISELE DA SILVA BOTAS
GISELY CRISTINY LOPES
GISLAINE CARMO ROESCH
GISLAINE KUMINEK
GIZELE SCOTTI DO CANTO
GLYN MARA FIGUEIRA
GUILHERME DINIZ TAVARES
GUSTAVO RODRIGUES DE REZENDE
HRIDA REGINA NUNES SALGADO
UNESP
HIDELGARDO SEIBERT FRANA
HISAKO GONDO HIGASHI
UNESP
IARA COUTINHO DESMARAIS
ILIO MONTANARI JNIOR
INGRID BEZERRA
IRENE SATIKO KIKUCHI
ISABEL CRISTINA FRAO DIEFENBACH
ISABELA DA COSTA CSAR
- ICF
ISABELLA PIAZZA
JACQUELINE DE SOUZA
Universidade Federal de Ouro Preto - UFOP
JAIR CALIXTO
JAIR CSSIO FARIA
Colaborador Independente
JANANA DUQUE DE SOUZA
Bio Manguinhos - FIOCRUZ
JARBAS FARIAS LEAL
JOO BATISTA DA SILVA JNIOR
JOO CARLOS PALAZZO DE MELLO
JOO CLEVERSON GASPARETTO
JOO DIMAS RIBEIRO
3
JOO FERREIRA MARTINS
Instituto Nacional de Controle da Qualidade em Sade
INCQS / FIOCRUZ
JOO MXIMO DE SIQUEIRA
Universidade Federal do Mato Grosso do Sul - UFMS
JOO PAULO SILVRIO PERFEITO
JONATHAS FELIPE REVOREDO LOBO
JOS ALEIXO PRATES E SILVA
Brasileira 4 edio
JOS ANGELO SILVEIRA ZUANAZZI
JOS ANTNIO DE AQUINO RIBEIRO
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria - EMBRAPA
JOS ANTONIO DE OLIVEIRA BATISTUZZO
Faculdades Oswaldo Cruz
JOS CARLOS BARBRIO
Genese Produtos Diagnsticos Ltda.
JOS CARLOS TAVARES CARVALHO
JOS LAMARTINE SOARES SOBRINHO
Universidade Federal do Piau - UFPI
JOS LOURENO DE FREITAS NETO
JOS MARIA BARBOSA FILHO
Universidade Federal da Paraba - UFPB
JOS MURADIAN FILHO
Pall do Brasil Ltda.
JOSEANE MARIA BEZERRA DE MENEZES
Vigilncia Sanitaria - RN
JOSIANE DE CARVALHO VITORINO
JULIA APARECIDA LOURENO DE SOUZA
JULIANA ASSUMPO DA SILVA
JULIANA SEVERO FAGUNDES PEREIRA
JULIANO DE MORAIS FERREIRA SILVA
JULIANO SMANIOTO BARIN
JLIO CSAR CARESTIATO
KARINA ALVES DA SILVA
KATIA ANDREA DOMINGOS DE MORAIS
KATIA REGINA TORRES
KATIA SUZI DA SILVEIRA SILVA
KOICHI MIZUTA
Instituto de Pesquisas Tecnolgicas do Estado de So
Paulo - IPTSP
LAS SANTANA DANTAS
LARISSA SAKIS BERNARDIS
LAURA JANE MOREIRA SANTIAGO
Universidade Estadual do Norte Fluminense - UENF
LAURA TERUMI UEDA HERNANDES MELERO
LAUREN ROSA CROSSETTI VAUCHER
LAURO DOMINGOS MORETTO
LEANDRO MACHADO ROCHA
LEANDRO SOARES PINHEIRO
LEILA BRASIL FERREIRA
LEILA SCHREINER DELGADO
LENISE DE LIMA SILVA
3
LEONARDO BAHIA TAVARES
LEONARDO DE SOUZA TEIXEIRA
- ICF
LEONARDO PAES CINELLI
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
LEOPOLDO CLEMENTE BARATTO
LETCIA LENZ SFAIR
LETICIA NORMA CARPENTIERI RODRIGUES
Universidade Federal de So Paulo UNIFESP
LETCIA SCHERER KOESTER
LIDIANE BUENO DE MORAES
LGIA MARIA MOREIRA DE CAMPOS
LILIA RIBEIRO SERDIO
Instituto Vital Brazil - IVB
LILIAN AULER MENTZ
LIVIA DUARTE PEREIRA
LORENA FRATINI
LUANA LENZI
LUANA MARTINS DA LUZ
LUCLIA MAGALHES DA SILVA
LCIA DE FTIMA FRANCELINO DA SILVA
Laboratrio Central de Sade Pblica de Pernambuco -
LACEN
LUCIANA CATIA BLOCK
LUCIANA CRISTINA MOTA
LUCIANE VARINI LAPORTA
LUS CARLOS BRGIDO MOURA
LUIS CARLOS DE ALENCAR SAMPAIO FILHO
LUIZ ANTNIO BATISTA DA COSTA
Centro de Excelncia em Sade Integral do Paran - CESIP
LUIZ ARMANDO ERTHAL
LUIZ CLUDIO MARTINS ALEIXO
LUIZ FERNANDO SECIOSO CHIAVEGATTO
LUIZ GUSTAVO TORRES
Naturofarma Produtos Naturais Ltda.
LUIZA DE CASTRO MENEZES CANDIDO
LUMA WOSCH
Universidade Federal do Paran UFPR
LUZIA DE FTIMA PEREIRA
Alko do Brasil Ind e Com LTDA
MAGDA RHAYANNY ASSUNO FERREIRA
MAIQUE WEBER BIAVATTI
MANUELA DA COSTA SOLIZ
MARA EL CORAB MOREIRA DE OLIVEIRA
MARCELA ZART AREND
MARCELE GIACOMIN GONALVES
MARCELO CAMILO MORERA
3
MRCIA FOSTER MESKO
Universidade Federal de Pelotas - UFPel
MRCIA VIGNOLI DA SILVA
Universidade Federal de Cincias da Sade de Porto
Alegre - UFCSPA
MRCIO LABASTIE (In memorian)
INCQS / FIOCRUZ
MARCO ANDR CARDOSO
MARCO ANTONIO STEPHANO
MARCOS ANTONIO SEGATTO SILVA
MARCOS ROBERTO DOS SANTOS
MARGARETH LINDE ATHAYDE
MARGARETH MIE NAKAMURA MATSUDA
MARIA ALICE BCKELMANN
Cristlia Produtos Qumicos Farmacuticos Ltda.
MARIA AUGUSTA TRAVASSOS LEMOS
MARIA AUXILIADORA MILANEZE GUTIERRE
MARIA CRISTINA DICIAULA
MARIA DAS GRAAS LINS BRANDO
MARIA DIANA CERQUEIRA SALES
Faculdade Brasileira - UNIVIX
MARIA DO CARMO ESTANISLAU DO AMARAL
INCQS / FIOCRUZ
MARIA DO ROSRIO SILVEIRA BRITTO
MARIA ELISA GIRO MOREIRA
MARIA ELISABETE AMARAL DE MORAES
MARIA ELIZABETE DALMORA
MARIA JOS CARNEIRO DO NASCIMENTO
Empresa Brasileira de Hemoderivados e Biotecnologia -
HEMOBRAS
MARIA LCIA SILVEIRA MALTA DE ALENCAR
MARIA TERESINHA KREINEKER DRESH
MARIANE GEHLEN PERIN
MARINGELA TORCHIA DO NASCIMENTO
MARIBETE HOMRICH HOLZSCHUH
MARILI VILLA NOVA RODRIGUES
MARILIA DE MORAES CASTRO
MARINA DAUMAS NEVES DUARTE
MARINA SCOPEL
MARINS JOST E SOUZA
MRIO LUIS RIBEIRO MOURA
MRIO SRGIO PIANTAVINI
MARISA COELHO ADATI
INCQS / FIOCRUZ
MARISA DE MOURA SOUZA DA LUZ
Laboratrio de Controle de Qualidade e Pesquisa - LCQPq
MARISA KEIKO UEMA
Eurofarma Comercial e Importadora Ltda
MARTA CRISTINA TEIXEIRA DUARTE
3
MARTHA ANA GATTUSO
Universidade Nacional de Rosrio, Argentina
MARTIN STEPPE
MARY ANN FOGLIO
MARYANGELA REZENDE MASCARENHAS
MARYCEL ROSA FELISA F. BARBOSA
MAURO FERREIRA WITZEL
Blanver Farmoquimica Ltda
MAX WEBER PEREIRA
MELNIA DE FTIMA CORDELINO
MELNIA PALERMO MANFRON
MERIANE PIRES CARVALHO
MICHELE FEITOSA SILVA
INCQS / FIOCRUZ
MICHELI WRASSE SANGI
MIGUEL DE LUCCA NETO
Medley S.A. Industria Farmacutica
MILENA BANDEIRA BARROZO
MIRIAM ANDERS APEL
MIRIAM DE FTIMA VIANNA LEONEL
MIRIAN PARENTE PINHEIRO
MNICA DA LUZ CARVALHO SOARES
MONIKA TAGLIARI
NADIA LIMA DIAS CABRAL
NADIA MARIA VOLPATO
NAIALY FERNANDES ARAJO REIS
NARA DEITOS BITTENCOURT
Universidade Federal de Santa Maria UFSM
NEEMIAS SILVA DE ANDRADE
NELIO DE BASTOS MORAIS
NELISE GONALVES DUARTE E DUARTE
NEUZA TAEKO OKASAKI FUKUMORI
NIKOLAI SHARAPIN (In memoriam)
Brasileira 4 edio
NILTON LUZ NETTO JNIOR
Universidade Catlica de Braslia - UCB
NIRLA RODRIGUES ROMERO
ONSIMO ZARA PEREIRA
Associao Brasileira da Indstria Farmoqumica e de
Insumos Farmacuticos - ABIQUIFI
ORLANDO FATIBELLO FILHO
Universidade Federal de So Carlos - UFSCar
ORLANDO SILVA
Serono Produtos Farmacuticos Ltda
PAOLA DE AZEVEDO MELLO
PATRCIA DE ANDRADE MARTINS
PATRICIA HAUSCHILDT DE OLIVEIRA MENDES
PAULA CRISTINA REZENDE ENAS
3
PAULA REGINA ALVES DE SIQUEIRA
PAULA RENATA APARECIDA NIGRO RIVERA
CARAZZATTO
Associao Nacional de Farmacuticos Magistrais -
ANFARMAG
PAULA ROCHA CHELLINI
PAULO ANTONIO DE SOUZA MOURO
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
PAULO CHANEL DEODATO DE FREITAS
PAULO EDUARDO MAYORGA BORGES
PAULO RENATO DE OLIVEIRA
PAULO VICTOR PIRES DOS SANTOS
PEDRO EDUARDO FREHLICH
PEDRO JOS ROLIM NETO
PEDRO MELILO DE MAGALHES
POLIANA BERNARDES GONALVES
POLIANA DE FTIMA HILRIO
PRISCILLA STUDART
RAFAEL DEITOS BEGNIS
RAFAEL NICOLAY PEREIRA
RAFAELA MARIN
RAFAELLA GOMES BEZERRA
RALPH SANTOS OLIVEIRA
RAPHAEL DE ANDRADE LUCAS E SILVA
RAQUEL LIMA E SILVA
REBECA RIBEIRO DE MOURA
RENATA APARECIDA DIAS
RENATA ARACELLI PIRES
RENATA BARBOSA DE OLIVEIRA
RENIERE HENRIQUE DA SILVA
RICARDO CHIAPPA
RICARDO PEREIRA LOURO
RINALDO FERREIRA
ROBERTO PONTAROLO
ROCHELE CASSANTA ROSSI
ROCHELE SOGARI PICOLOTO
RODNEY ALEXANDRE FERREIRA RODRIGUES
RODRIGO ALVES SOARES CRUZ
RODRIGO CRISTOFOLETTI
RODRIGO FERNANDES ALEXANDRE
RONALDO FERREIRA DA SILVA
ROSA NORIKO YAMAMOTO
3
ROSALI MARIA FERREIRA DA SILVA
ROSANA MIGUEL MESSIAS MASTELARO
ROSANE MARIA SILVA ALVES
ROSANGELA ANDRADE
Linde Gases Ltda.
ROSANGELA BOLZAN
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria - Anvisa.
ROSE VANESSA BANDEIRA
ROSEMARIE APARECIDA DE ARAJO BONATTO
Merck Sharp & Dohme Farmacutica Ltda
ROSILENE RODRIGUES SANTIAGO
ROSIMAR LEITENBERG DA SILVEIRA
ROSIMEIRE PEREIRA ALVES DA CRUZ
RUBENS RAPHAEL SIMES DE OLIVEIRA
RUTH RIESINGER STRATTMANN
SAID GONALVES DA CRUZ FONSECA
SALVADOR ALVES PEREIRA (In memoriam)
Brasileira 4 edio
SLVIO FILGUEIRAS
Linde Gases Ltda.
SAMANTA CARDOSO MOURO
SAULO FERNANDES DE ANDRADE
SEBASTIO BAETA HENRIQUE
Brasileira 4 edio
SERGIO LUIZ DALMORA
SERGIO ROBERTO MORTARI
SEVERINO BARBOSA
Universidade Federal do Pernambuco - UFPE
SEVERINO GRANJEIRO JNIOR
Laboratrio Farmacutico do Estado de Pernambuco -
LAFEPE
SILAS GOUVEIA
Fundao Ezequiel Dias - FUNED
SILSIA DE SOUZA AMORIM
SILVANA TERESA LACERDA JALES
Associao dos Laboratrios Ofciais Brasileiros - ALFOB
SILVIA DEBENEDETTI
Universidade Nacional Argentina
SILVIA HELENA MIOLLO BORGMANN
Universidade Federal de Santa Catarina UFSC
SILVIA PAREDES FONTES
SLVIA STORPIRTIS
SIMONE CRISTINA BENOVIT
SIMONE GONALVES CARDOSO
SOLANGE MARIA COUTINHO BRANDO
INCQS / FIOCRUZ
SUSANA JULIA GATTUSO BITTEL
Universidade Nacional de Rosrio, Argentina
SUZANA MACHADO DE VILA
Brasileira 4 edio
TAILANE SANTANNA MOREIRA
TALITA GESSER CESCA
TANIA MARI BELL BRESOLIN
3
TATIANE PEREIRA DE SOUZA
TAYOMARA DE SOUSA NASCIMENTO
TELMA MARY KANEKO
TRCIO PASCHKE OPPE
TERESA CRISTINA TAVARES DALLA COSTA
TEREZINHA DE JESUS ANDREOLI PINTO
THAIS MARTINS GUIMARES DE FRANCISCO
THAIS MESQUITA DO COUTO ARAUJO
THELMA DE BARROS MACHADO
THEREZA CRISTINA VESSONI PENNA
THEREZINHA COELHO BARBOSA TOMASSINI
Brasileira 4 edio
THIELE FACCIN DE BRUM
TIAGO ASSIS MIRANDA
VALDIR FLORNCIO DA VEIGA JUNIOR
Universidade Federal Amazonas - UFAM
VALRIA PEREIRA DE SOUSA
VALQUIRIA LINCK BASSANI
VERA LCIA GARCIA REHDER
VIVIANE DE OLIVEIRA GARCIA
VLADI OLGA CONSIGLIERI
VOLKER BITTRICH
WAGNER LUIZ RAMOS BARBOSA
WALFREDO DA SILVA CALMON
WILSON CAMARGO
INCQS / FIOCRUZ
WILSON REINHARDT FILHO
Brasileira 4 edio
YASMIN LOURENZO FIGUEIREDO
Vigilncia Sanitria e Ambiental - BA
YEDO ALQUINI
4
4 GENERALIDADES
considerada fortemente alcalina quando se cora de azul
por uma gota de timolftaleina SI (pH 9,3 a 10.5) ou de
vermelho por uma gota de fenolftaleina SI (pH 10,0 a 13,0).
Adesivo
o sistema destinado a produzir um efeito sistmico
pela difuso do(s) princpio(s) ativo(s) numa velocidade
constante por um perodo de tempo prolongado.
gua para injetveis
gua para injetveis o insumo utilizado na preparao
de medicamentos para administrao parenteral, como
veculo ou na dissoluo ou diluio de substncias ou de
preparaes.
gua para uso farmacutico
Considera-se como gua para uso farmacutico os diversos
tipos de gua empregados na sntese de frmacos, na
formulao e produo de medicamentos, em laboratrios
de ensaios, diagnsticos e demais aplicaes relacionadas
rea da sade, inclusive como principal componente na
limpeza de utenslios, equipamentos e sistemas.
gua purifcada
gua purifcada a gua potvel que passou por algum
tipo de tratamento para retirar os possveis contaminantes
e atender aos requisitos de pureza estabelecidos na
monografa.
gua ultrapurifcada
gua ultrapurifcada a gua purifcada que passou por
tratamento adicional para retirar os possveis contaminantes
e atender aos requisitos de pureza estabelecidos na
monografa.
guas aromticas
So solues saturadas de leos essenciais ou outras
substncias aromticas em gua. Possuem odor
caracterstico das drogas com as quais so preparadas,
recebendo, tambm, o nome delas.
Banho-maria e banho a vapor
um banho de gua fervente, a no ser que a monografa
especifque outra temperatura. As expresses gua quente
e gua muito quente indicam temperaturas aproximadas
entre 60
o
C e 70
o
C e entre 85
o
C e 95
o
C respectivamente.
TTULO
O ttulo completo desta obra Farmacopeia da Repblica
Federativa do Brasil, 5 edio. Pode ser denominada
Farmacopeia Brasileira, 5 edio ou FB 5.
DEFINIES
Ao, uso e doses
So as constantes do relatrio para registro do produto no
rgo sanitrio, atualizadas mediante reviso bibliogrfca
nacional e internacional, quando for o caso.
Quando indicadas nas monografas, as doses representam
a quantidade do medicamento usualmente prescrita
que tenha efccia teraputica, para pacientes adultos. O
prescritor habilitado, a seu critrio e sob sua exclusiva
responsabilidade, considerando a farmacocintica e
farmacodinmica, poder variar as quantidades e a
frequncia de administrao de qualquer medicamento.
Entretanto, a prescrio de doses muito superiores s
usuais, estabelecida em literatura, obriga o farmacutico
a confrmar, com o prescritor da receita, as doses
estabelecidas.
Acidez e alcalinidade - ensaios rpidos
Uma soluo considerada neutra quando no modifca a
cor dos papis azul e vermelho de tornassol, ou quando o
papel indicador universal adquire as cores da escala neutra,
ou quando 1 mL da mesma soluo se cora de verde com
uma gota de azul de bromotimol SI (pH 7,0).
considerada cida quando cora em vermelho o papel
azul de tornassol ou 1 mL se cora de amarelo por uma gota
de vermelho de fenol SI (pH 1,0 a 6,6).
considerada fracamente cida quando cora levemente de
vermelho o papel azul de tornassol ou 1 mL se cora de
alaranjado por uma gota de vermelho de metila SI (pH 4,0
a 6,6).
considerada fortemente cida quando cora de azul o
papel vermelho de congo ou 1 mL se cora de vermelho
pela adio de uma gota de alaranjado de metila SI (pH
1,0 a 4,0).
considerada alcalina quando cora de azul o papel
vermelho de tornassol ou 1 mL se cora de azul por uma
gota de azul de bromotimol SI (pH 7,6 a 13,0).
considerada fracamente alcalina quando cora de azul o
papel vermelho de tornassol ou 1 mL se cora de rosa por
uma gota de vermelho de cresol SI (pH 7,6 a 8,8).
4
Banho a vapor signifca exposio ao vapor fuente ou
outra forma de calor, correspondendo em temperatura do
vapor fuente.
Biodisponibilidade
Indica a velocidade e a extenso de absoro de um
princpio ativo em uma forma de dosagem, a partir de sua
curva concentrao/tempo na circulao sistmica ou sua
excreo na urina.
Bioequivalncia
Consiste na comprovao de equivalncia farmacutica
entre produtos apresentados sob a mesma forma
farmacutica, contendo idntica composio qualitativa
e quantitativa de princpio(s) ativo(s), e que tenham
comparvel biodisponibilidade, quando estudados sob um
mesmo desenho experimental.
Cpsula
a forma farmacutica slida em que o princpio ativo e os
excipientes esto contidos em um invlucro solvel duro
ou mole, de formatos e tamanhos variados, usualmente,
contendo uma dose nica do princpio ativo. Normalmente
formada de gelatina, mas pode, tambm, ser de amido ou
de outras substncias. Abreviatura: cap.
Cpsula dura
a cpsula que consiste de duas sees cilndricas pr-
fabricadas (corpo e tampa) que se encaixam e cujas
extremidades so arredondadas. tipicamente preenchida
com princpios ativos e excipientes na forma slida.
Normalmente formada de gelatina, mas pode tambm ser
de outras substncias. Abreviatura: cap. dura
Cpsula dura de liberao prolongada
a cpsula que consiste de duas sees cilndricas
pr-fabricadas (corpo tampa) que se encaixam e cujas
Normalmente formada de gelatina, mas pode tambm
ser de outras substncias. Vide defnio geral de liberao
prolongada. Abreviatura: cap. dura. lib. prol.
Cpsula dura de liberao retardada
a cpsula que consiste de duas sees cilndricas pr-
fabricadas (corpo e tampa) que se encaixam e cujas
Normalmente formada de gelatina, mas pode tambm
ser de outras substncias. Vide defnio geral de liberao
retardada. Abreviatura: cap. dura lib. ret.
Cpsula mole
a cpsula constituda de um invlucro de gelatina, de
vrios formatos, mais malevel do que o das cpsulas duras.
Normalmente so preenchidas com contedos lquidos ou
semisslidos, mas podem ser preenchidas tambm com ps
e outros slidos secos. Abreviatura: cap. mole
Cpsula mole de liberao prolongada
e outros slidos secos. Vide defnio geral de liberao
prolongada. Abreviatura: cap. mole lib.prol.
Cpsula mole de liberao retardada
e outros slidos secos. Vide defnio geral de liberao
retardada. Abreviatura: cap. mole lib. ret.
Cilindro de gs
o recipiente metlico, perfeitamente fechado, de paredes
resistentes, destinado a conter gs sob presso, obturado
por vlvula regulvel, capaz de manter a sada do gs em
vazo determinada.
Colrio
a preparao farmacutica lquida destinada aplicao
sobre a mucosa ocular. Abreviatura: col.
Complexo protrombnico humano total lioflizado
uma frao de protenas plasmticas que contm
obrigatoriamente os Fatores II, VII, IX e X da coagulao
humana.
Comprimido
a forma farmacutica slida contendo uma dose nica
de um ou mais princpios ativos, com ou sem excipientes,
obtida pela compresso de volumes uniformes de partculas.
Pode ser de uma ampla variedade de tamanhos, formatos,
apresentar marcaes na superfcie e ser revestido ou no.
Abreviatura: comp.
Comprimido de liberao modifcada
o Comprimido que tem uma liberao modifcada. Deve ser
classifcado como de liberao modifcada apenas quando as
classifcaes liberao retardada e liberao prolongada
no forem adequadas. Abreviatura: comp. lib. mod.
Comprimido de liberao prolongada
o comprimido cujos excipientes so destinados
especifcamente a modifcar a liberao do princpio
ativo nos fuidos digestivos. Veja defnio de liberao
prolongada. Abreviatura: comp. lib. prol.
4
Comprimido efervescente
o comprimido contendo, em adio aos ingredientes
ativos, substncias cidas e carbonatos ou bicarbonatos, os
quais liberam dixido de carbono quando o comprimido
dissolvido em gua. destinado a ser dissolvido ou
disperso em gua antes da administrao. Abreviatura:
comp. efer.
Comprimido mastigvel
o comprimido formulado para que possa ser mastigado,
produzindo um sabor residual agradvel na cavidade oral.
Abreviatura: comp. mast.
Comprimido orodispersvel
o comprimido que desintegra ou dissolve, rapidamente,
quando colocado sobre a lngua. Abreviatura: comp. orodis.
Comprimido para colutrio
o comprimido que deve ser dissolvido em gua para a
preparao do colutrio, que um lquido destinado ao
enxgue bucal de ao sobre as gengivas e as mucosas da
boca e da garganta. No deve ser deglutido. Abreviatura:
comp. colu.
Comprimido para soluo
o comprimido destinado a ser dissolvido na gua antes
da administrao. A soluo produzida pode ser levemente
leitosa devido aos excipientes utilizados na fabricao dos
comprimidos. Abreviatura: comp. sol.
Comprimido para suspenso
o comprimido que quando em contato com um
lquido, rapidamente produz uma disperso homognea
(suspenso). destinado a ser disperso antes da
administrao. Abreviatura: comp. susp.
Comprimido revestido
o comprimido que possui uma ou mais camadas fnas
de revestimento, normalmente, polimricas, destinadas a
proteger o frmaco do ar ou umidade; para frmacos com
odor e sabor desagradveis; para melhorar a aparncia dos
comprimidos, ou para alguma outra propriedade que no
seja a de alterar a velocidade ou extenso da liberao do
princpio ativo. Abreviatura: comp. rev.
Comprimido revestido de liberao prolongada
de revestimento, normalmente polimricas, destinadas
a modifcar a velocidade ou extenso da liberao dos
princpios ativos. Veja a defnio de liberao prolongada
Abreviatura: comp. rev. lib. prol.
Comprimido revestido de liberao retardada
princpios ativos, apresentando uma liberao retardada
do princpio ativo. Veja defnio de liberao retardada.
Abreviatura: comp. rev. lib. ret.
Comprimido sem revestimento
o comprimido em que excipientes usados no so
destinados, especifcamente, a modifcar a liberao do
princpio ativo nos fuidos digestivos. Abreviatura: comp.
sem rev.
Controle de qualidade
o conjunto de medidas destinadas a garantir, a qualquer
momento, a produo de lotes de medicamentos e demais
produtos, que satisfaam s normas de identidade,
atividade, teor, pureza, efccia e inocuidade.
Corantes
So substncias adicionais aos medicamentos, produtos
dietticos, cosmticos, perfumes, produtos de higiene e
similares, saneantes domissanitrios e similares, com o
efeito de lhes conferir cor e, em determinados tipos de
cosmticos, transferi-la para a superfcie cutnea e anexos
da pele. Para seu uso observar a legislao Federal e as
resolues editadas pela Anvisa.
Correlato
Produto para a sade, tal como equipamento, aparelho,
material, artigo ou sistema de uso ou aplicao mdica,
odontolgica ou laboratorial, destinado preveno,
diagnstico, tratamento, reabilitao ou anticoncepo
e que no utiliza meio farmacolgico, imunolgico ou
metablico para realizar a sua principal funo em seres
humanos podendo, entretanto, ser auxiliado em suas
funes por tais meios.
Cosmticos
So produtos para uso externo; destinados proteo, ou ao
embelezamento das diferentes partes do corpo, tais como
ps faciais; talcos; cremes de beleza; creme para as mos
e similares; mscaras faciais; loes de beleza; solues
leitosas; cremosas e adstringentes; loes para as mos;
bases de maquilagem e leos cosmticos; ruges; blushes;
batons; lpis labiais; preparados antisolares; bronzeadores
e simulatrios; rimeis; sombras; delineadores; tinturas
capilares; agentes clareadores de cabelos; preparados para
ondular e para alisar cabelos; fxadores de cabelos; laqus;
brilhantinas e similares; loes capilares; depilatrios e
epilatrios; preparados para unhas e outros.
4
Creme
a forma farmacutica semisslida que consiste de
uma emulso, formada por uma fase lipoflica e uma
fase hidroflica. Contm um ou mais princpios ativos
dissolvidos ou dispersos em uma base apropriada e
utilizada, normalmente, para aplicao externa na pele ou
nas membranas mucosas.
Crioprecipitados do plasma fresco humano
So constitudos pelas fraes insolveis a frio contendo
principalmente os Fatores I (140 a 250 mg ) e VIII (70 a
120 UI) da coagulao humana por unidade de coleta de
sangue humano. Outros fatores da coagulao tambm
so encontrados em menores concentraes junto ao
crioprecipitado como o Fator de Von Willebrand (40 a
70%) e o Fator XIII (20 a 30%).
Denominao Comum Brasileira (DCB)
a denominao do frmaco ou princpio farmacologica-
mente ativo, aprovada no rgo federal responsvel pela
vigilncia sanitria.
Denominao Comum Internacional (DCI)
a denominao do frmaco ou princpio farmacologicamen-
te ativo, recomendada na Organizao Mundial de Sade.
Densidade de massa e densidade relativa
Densidade de massa () de uma substncia a razo de sua
massa por seu volume a 20
o
C.
A densidade relativa usualmente adotada ( ) defnida
como a relao entre a massa de uma substncia ao ar
a 20
o
C

e a massa de igual volume de gua na mesma
temperatura.
Desinfetantes
So produtos destinados a destruir, indiscriminada ou
seletivamente, micro-organismos, quando aplicados em
objetos inanimados ou ambientes.
Detergentes
So produtos destinados a dissolver gorduras; higiene de
recipientes e vasilhas e a aplicaes de uso domstico.
Doadores de sangue
So indivduos saudveis e cuidadosamente selecionados
que, aps exames mdicos, testes sanguneos laboratoriais
e estudo de sua histria mdica, estejam ausentes de
agentes infecciosos transmissveis podem ser aceitos e
utilizados para coleta de seu sangue total ou das suas
fraes celulares ou plasmticas para fns proflticos,
curativos ou de fracionamento.
Drgeas
So comprimidos revestidos com camadas constitudas por
misturas de substncias diversas, como resinas, naturais
ou sintticas, gomas, gelatinas, materiais inativos e
insolveis, aucares, plastifcantes, poliis, ceras , corantes
autorizados e, s vezes, aromatizantes e princpios ativos.
Abreviatura: drag.
Elixir
a preparao farmacutica, lquida, lmpida, hidroalco-
lica, de sabor adocicado, agradvel, apresentando teor al-
colico na faixa de 20% a 50%.
Os elixires so preparados por dissoluo simples e devem
ser envasados em frascos de cor mbar e mantidos em lu-
gar fresco e ao abrigo da luz.
Embalagem
o invlucro, recipiente ou qualquer forma de
acondicionamento, removvel ou no, destinada a cobrir,
empacotar, envasar, proteger ou manter, especifcamente
ou no, os medicamentos, as drogas, os insumos
farmacuticos e correlatos, os cosmticos, os saneantes e
outros produtos. As condies de acondicionamento so
descritas nas monografas individuais utilizando-se os
termos relacionados a seguir.
Embalagem primria
a que est em contato direto com seu contedo durante
todo o tempo. Considera-se material de embalagem
primria: ampola, bisnaga, envelope, estojo, faconete,
frasco de vidro ou de plstico, frasco-ampola, cartucho,
lata, pote, saco de papel e outros.
No deve haver qualquer interao entre o material de
embalagem primria e o seu contedo capaz de alterar
a concentrao, a qualidade ou a pureza do material
acondicionado.
Embalagem secundria
a que possibilita total proteo do material de
acondicionamento nas condies usuais de transporte,
armazenagem e distribuio. Considera-se embalagem
secundria: caixas de papelo, cartuchos de cartolina,
madeira ou material plstico ou estojo de cartolina e outros.
Emplasto
a forma farmacutica semisslida para aplicao externa.
Consiste de uma base adesiva contendo um ou mais
princpios ativos distribudos em uma camada uniforme
num suporte apropriado feito de material sinttico ou
natural. Destinada a manter o princpio ativo em contato
com a pele atuando como protetor ou como agente
queratoltico. Abreviatura: emp.

20
20
d
4
Emulso
a forma farmacutica lquida de um ou mais princpios
ativos que consiste de um sistema de duas fases que
envolvem pelo menos dois lquidos imiscveis e na qual
um lquido disperso na forma de pequenas gotas (fase
interna ou dispersa) atravs de outro lquido (fase externa
ou contnua). Normalmente estabilizada por meio de um
ou mais agentes emulsifcantes. Abreviatura: emu.
Emulso aerossol
a emulso embalada sob presso contendo um gs
propelente e ingredientes terapeuticamente ativos que so
liberados aps a ativao de um sistema apropriado de
vlvulas. Abreviatura: emu. aer.
Emulso gotas
a emulso destinada administrao na forma de gotas.
Abreviatura: emu. go.
Emulso injetvel
a emulso estril. Abreviatura: emu. inj.
Emulso para infuso
a emulso estril com gua como a fase contnua,
normalmente, isotnica com o sangue e utilizada
principalmente para administrao em grande volume.
Abreviatura: emu. inf.
Emulso spray
a emulso administrada na forma de lquido fnamente
dividido por um jato de ar ou vapor. Abreviatura: emu. spray
Ensaios biolgicos
So procedimentos destinados a avaliar a potncia
de princpios ativos contidos nas matrias-primas e
preparaes farmacopeicas, utilizando reagentes biolgicos
tais como micro-organismos, animais, fuidos e rgos
isolados de animais.
Esprito
a forma farmacutica lquida alcolica ou hidroalcolica,
contendo princpios aromticos ou medicamentosos e
classifcados em simples e compostos. Abreviatura: esp.
Os espritos so obtidos pela dissoluo de substncias
aromticas em etanol, geralmente na proporo de 5%
(p/v).
Esterilidade
Esterilidade a ausncia de micro-organismos viveis.
Extrato
a preparao de consistncia lquida, slida ou
intermediria, obtida a partir de material animal ou vegetal.
O material utilizado na preparao de extratos pode sofrer
tratamento preliminar, tais como, inativao de enzimas,
moagem ou desengorduramento. Abreviatura: ext.
O extrato preparado por percolao, macerao ou outro
mtodo adequado e validado, utilizando como solvente
lcool etlico, gua ou outro solvente adequado. Aps a
extrao, materiais indesejveis podem ser eliminados.
Extrato fuido
a preparao lquida obtida de drogas vegetais ou
animais por extrao com liquido apropriado ou por
dissoluo do extrato seco correspondente, em que,
exceto quando indicado de maneira diferente, uma parte
do extrato, em massa ou volume corresponde a uma parte,
em massa, da droga, seca utilizada na sua preparao. Se
necessrio, os extratos fudos podem ser padronizados em
termos de concentrao do solvente; teor de constituintes,
ou de resduo seco. Se necessrio podem ser adicionados
conservantes inibidores do crescimento microbiano.
Devem apresentar teor de princpios ativos e resduos
secos prescritos nas respectivas monografas. Abreviatura:
ext. fu.
Extrato mole
a preparao de consistncia pastosa obtida por
evaporao parcial de solvente utilizado na sua preparao.
So utilizados como solvente, unicamente, lcool etlico,
gua, ou misturas alcol etlico/gua em proporo
adequada. Apresentam, no mnimo, 70% de resduo seco
(p/p). Se necessrio podem ser adicionados conservantes
inibidores do crescimento microbiano. Abreviatura: ext.
mole
Extrato seco
a preparao slida; obtida por evaporao do solvente
utilizado na sua preparao. Apresenta, no mnimo, 95%
de resduo seco, calculado como porcentagem de massa.
Podem ser adicionados de materiais inertes adequados.
Abreviatura: ext. seco
Os extratos secos padronizados tm o teor de seus
constituintes ajustado pela adio de materiais inertes
adequados ou pela adio de extratos secos obtidos com o
mesmo frmaco utilizado na preparao.
Fabricao
So todas as operaes que se fazem necessrias para a
obteno dos produtos para a sade.
Faixa de destilao
Faixa de destilao o intervalo de temperatura corrigida
para a presso de 101,3 kPa (760 mm de Hg), dentro do
4
qual o lquido, ou frao especfca do lquido, destila
inteiramente.
Faixa de fuso
Faixa de fuso de uma substncia o intervalo de
temperatura compreendido entre o incio (no qual a
substncia comea a fuidifcar-se) e o trmino da fuso
(que evidenciado pelo desaparecimento da fase slida).
Frmaco
Veja Insumo farmacutico ativo.
Farmacopeico
A expresso farmacopeico substitui as expresses: ofcial e
ofcinal, utilizadas em edies anteriores, equivalendo-se a
essas expresses para todos os efeitos.
Fator VII da coagulao sangunea humana, lioflizado
a frao protica do plasma que contm o Fator VII
(um derivado glicoprotico de cadeia simples), podendo
igualmente conter pequenas quantidades da sua forma
ativada (o derivado de 2 cadeias ou Fator VIIa).
Fator VIII da coagulao sangunea de origem humana,
lioflizado
a frao proteica do plasma que contm uma glicoprotena
chamada Fator VIII da coagulao e, em funo do mtodo
de purifcao, quantidades variveis do Fator de Von
Willebrand. preparado a partir de uma mistura de plasma
humano para fracionamento obtido de doadores sadios.
Fibrinognio humano, lioflizado
a frao solvel do plasma humano, obtida a partir do
Plasma humano para fracionamento, que por adio da
trombina, transforma-se em fbrina. A preparao pode
conter aditivos (sais, tampes ou estabilizantes) e quando
reconstituda (adio do diluente) deve conter no mnimo,
10 g/L de fbrinognio.
Forma farmacutica
o estado fnal de apresentao dos princpios ativos
farmacuticos aps uma ou mais operaes farmacuticas
executadas com a adio ou no de excipientes apropriados
a fm de facilitar a sua utilizao e obter o efeito
teraputico desejado, com caractersticas apropriadas a
uma determinada via de administrao.
Gel
a forma farmacutica semisslida de um ou mais princpios
ativos que contm um agente gelifcante para fornecer
frmeza a uma soluo ou disperso coloidal (um sistema
no qual partculas de dimenso coloidal tipicamente entre
1 nm e 1 um so distribudas uniformemente atravs do
lquido). Um gel pode conter partculas suspensas.
Gel hidrofbico
o gel que consiste, usualmente, de parafna lquida com
polietileno ou leos gordurosos com slica coloidal ou
sabes de alumnio ou zinco.
Gel lipoflico
o gel resultante da preparao obtida pela incorporao
de agentes gelifcantes tragacanta, amido, derivados de
celulose, polmeros carboxivinlicos e silicatos duplos de
magnsio e alumnio gua, glicerol ou propilenoglicol.
Glbulo
a forma farmacutica slida que se apresenta sob a forma
de pequenas esferas constitudas de sacarose ou de mistura
de sacarose e lactose. So impregnadas pela potncia
desejada e com lcool acima de 70%.
Goma de mascar
a forma farmacutica slida de dose nica contendo um
ou mais princpios ativos, que consiste de material plstico
insolvel, doce e saboroso. Quando mastigado, libera o
princpio ativo.
Granulado
a forma farmacutica slida contendo uma dose nica
de um ou mais princpios ativos, com ou sem excipientes.
Consiste de agregados slidos e secos de volumes
uniformes de partculas de p resistentes ao manuseio.
Abreviatura: granu.
Granulado efervescente
o granulado contendo, em adio aos ingredientes
ativos, substncias cidas e carbonatos ou bicarbonatos,
os quais liberam dixido de carbono quando o granulado
dissolvido em gua. destinado a ser dissolvido ou
disperso em gua antes da administrao. Abreviatura:
granu. efer.
Granulado para soluo
o granulado destinado a ser dissolvido na gua antes da
administrao. A soluo produzida pode ser levemente
leitosa devido aos excipientes utilizados na fabricao dos
granulados. Abreviatura: granu. sol.
Granulado para suspenso
o granulado que em contato com um lquido, rapidamente,
produz uma disperso homognea (suspenso). destinado a
ser disperso antes da administrao. Abreviatura: granu. susp.
4
Granulado revestido
o granulado que possui uma ou mais camadas fnas de
revestimento, normalmente polimricas, destinadas a
proteger o frmaco do ar ou umidade, para frmacos com
odor e sabor desagradveis, para melhorar a aparncia
dos granulados ou para alguma outra propriedade que no
seja a de alterar a velocidade ou extenso da liberao do
princpio ativo. Abreviatura: granu. rev.
Granulado revestido de liberao prolongada
o granulado que possui uma ou mais camadas fnas
princpios ativos. Vide defnio de liberao prolongada.
Abreviatura: gran. rev. lib. prol.
Granulado revestido de liberao retardada
o granulado que possui uma ou mais camadas fnas
princpios ativos, apresentando uma liberao retardada do
princpio ativo. Vide defnio geral de liberao retardada.
Abreviatura: granu. rev. lib. ret.
Imunoglobulina humana contra a hepatite A
uma preparao estril; lquida, ou lioflizada contendo
imunoglobulinas, principalmente a imunoglobulina G.
Imunoglobulina humana contra a hepatite B
imunoglobulinas, imunoglobulina humana contra a
hepatite B principalmente a imunoglobulina G.
Imunoglobulina humana contra a hepatite B para uso
intravenoso
Imunoglobulina humana contra a raiva
Imunoglobulina humana contra a rubola
Imunoglobulina humana contra a varicela
Imunoglobulina humana contra a varicela para uso
intravenoso
Imunoglobulina humana contra o antgeno D
Imunoglobulina humana contra o sarampo
Imunoglobulina humana contra o ttano
obtida a partir do plasma contendo anticorpos especfcos
contra a toxina do Clostridium tetani.
Imunoglobulina humana normal
principalmente IgG. Outras protenas, tambm, podem
estar presentes.
Imunoglobulina humana normal para administrao por
via intravenosa
imunoglobulinas, principalmente a imunoglobulina G
(IgG). Podem estar presentes outras protenas. Contm
anticorpos IgG de indivduos normais.
Indicador biolgico
uma preparao caracterizada de micro-organismo
especfco que possui resistncia defnida e estvel a um
determinado processo de esterilizao.
ndice de refrao
O ndice de refrao (n) de uma substncia a relao entre
a velocidade da luz no vcuo e sua velocidade no interior
da substncia.
Para fns prticos mede-se a refrao com referncia ao ar e
substncia e no com referncia ao vcuo e substncia.
Pode-se defnir o ndice de refrao como a relao entre
o seno do ngulo de incidncia e o seno do ngulo de
refrao, isto , n = sen i / sen r.
Injetvel
a preparao estril destinada administrao parenteral.
Apresenta-se como soluo, suspenso, ou emulso.
Abreviatura: inj.
4
Inseticidas
So produtos para usos externos, destinados preveno e
ao controle dos insetos, em habitaes, recintos e lugares
de uso pblico e suas cercanias.
Insulina
Insulina uma protena que afeta o metabolismo da glicose.
Ela obtida do pncreas de bovinos e sunos saudveis, ou
ambos, utilizados como alimento pelos humanos.
Insulina humana
Insulina humana uma protena correspondente a um
princpio ativo elabora no pncreas humano que afeta o
metabolismo dos carboidratos (particularmente glicose),
lpides, e protenas.
Insulina humana isfana suspenso
Insulina humana isfana suspenso uma suspenso estril
de cristais de insulina humana zinco e sulfato protamina
na gua tamponada para a injeo, combinados de uma
maneira tal que a fase slida da suspenso composta por
cristais de insulina humana, protamina, e zinco.
Insulina humana isfana suspenso e injeo insulina
humana
Insulina humana isfana suspenso e insulina humana
injeo uma suspenso estril tamponada de insulina
humana, complexada com sulfato de protamina, em uma
soluo de insulina humana.
Insulina humana zinco suspenso
uma suspenso estril de insulina humana em gua
tamponada para a injeo, modifcada pela adio de um sal
de zinco adequado de modo que a fase slida da suspenso
constituda por uma mistura de insulina cristalina e
amorfa em uma razo de cerca de 7 partes de cristais e de 3
partes de material amorfo.
Insulina humana zinco suspenso estendida
uma suspenso estril de insulina humana em gua
tamponada para a injeo, modifcada pela adio de um
sal de zinco adequado de modo a que a fase slida da
suspenso predominantemente cristalina.
Insulina injetvel
Insulina injetvel uma soluo isotnica e estril de
insulina.
Insulina lispro
idntica em estrutura insulina humana, exceto
que ela tem de lisina e prolina nas posies 28 e 29,
respectivamente, da cadeia B, enquanto esta sequncia
invertida em insulina humana. Insulina lispro produzida
por sntese microbiana atravs de um processo de DNA
recombinante.
Insumo farmacutico ativo
uma substncia qumica ativa, frmaco, droga, ou
matria-prima que tenha propriedades farmacolgicas
com fnalidade medicamentosa utilizada para diagnstico,
alvio, ou tratamento, empregada para modifcar ou
explorar sistemas fsiolgicos ou estados patolgicos em
benefcio da pessoa na qual se administra.
Quando se destinada a emprego em medicamentos,
devem atender s exigncias previstas nas monografas
individuais.
Isoladores
So equipamentos que empregam tecnologia usada para
dupla proposta, de proteger o produto da contaminao
do ambiente e pessoas durante envase e fechamento e de
proteger pessoas de produtos txicos ou deletrios que so
produzidos.
Liberao convencional
o tipo de liberao de formas farmacuticas que no
so modifcadas intencionalmente por um desenho de
formulao especial e/ou mtodo de fabricao.
Liberao paramtrica
defnida como a liberao de carga ou lotes de
produtos submetidos esterilizao terminal, por meio
do cumprimento de parmetros crticos do processo de
esterilizao, sem a necessidade de realizao do teste de
esterilidade.
Liberao prolongada
o tipo de liberao modifcada de formas farmacuticas
que possibilita pelo menos uma reduo na frequncia de
dose quando comparada com o medicamento apresentado
na forma de liberao convencional. obtida por meio
de um desenho de formulao especial e/ou mtodo de
fabricao.
Liberao retardada
o tipo de liberao modifcada de formas farmacuticas
que apresenta uma liberao retardada do princpio ativo.
A liberao retardada obtida por meio de um desenho
de formulao especial e/ou mtodo de fabricao. As
preparaes gastrorresistentes so consideradas formas de
liberao retardada, pois so destinadas a resistir ao fuido
gstrico e liberar o princpio ativo no fuido intestinal.
4
Loo
a preparao lquida aquosa ou hidroalcolica, com
viscosidade varivel, para aplicao na pele, incluindo o
couro cabeludo. Pode ser soluo, emulso ou supenso
contendo um ou mais princpios ativos ou adjuvantes.
Lote ou partida
a quantidade de um medicamento, ou outro produto, que
se produz em um ciclo de fabricao e cuja caracterstica
essencial a homogeneidade.
Material de embalagem
Compreende-se por material de embalagem o recipiente;
envoltrio; invlucro; ou qualquer outra forma de proteo,
removvel ou no, usado para envasar; proteger; manter;
cobrir; ou empacotar, especifcamente, ou no, matrias-
primas; reagentes e medicamentos. Abreviatura: mat. emb.
Matrias-primas
Substncias ativas ou inativas que se empregam na
fabricao de medicamentos e de outros produtos, tanto
as que permanecem inalteradas quanto as passveis de
sofrerem modifcaes.
Media fll
um teste para simulao das operaes asspticas em
que o produto substitudo por um meio de cultura e serve
para assegurar que os processos utilizados so capazes de
produzir produtos estreis.
Medicamento
o produto farmacutico, tecnicamente, obtido, ou
elaborado, que contm um ou mais frmacos e outras
substncias, com fnalidade profltica; curativa; paliativa;
ou para fns de diagnstico.
Medicamento de referncia
o produto inovador registrado no rgo federal Brasileiro,
responsvel pela vigilncia sanitria e comercializado
no pas, cuja efccia, segurana e qualidade foram
comprovados, cientifcamente, no rgo federal
competente, por ocasio do registro.
Medicamento genrico
o medicamento similar a um produto de referncia ou
inovador, que pretende ser com esse intercambivel,
geralmente produzido aps a expirao ou renncia da
proteo patentria ou de outros direitos de exclusividade,
comprovada a sua efccia, segurana e qualidade, e
designado pela DCB ou, na sua ausncia, pela DCI.
Medicamento intercambivel
o medicamento equivalente teraputico de um
medicamento de referncia, comprovados, essencialmente,
os mesmos efeitos de efccia e segurana.
Medicamento magistral
todo medicamento cuja prescrio pormenoriza a
composio, a forma farmacutica e a posologia.
preparado na farmcia, por um profssional farmacutico
habilitado ou sob sua superviso direta.
Medicamento pressurizado
o medicamento acondicionado em frascos mantidos
sobre presso, contendo um gs propelente e ingredientes,
terapeuticamente ativo que liberado aps a ativao de
sistema apropriado de vlvulas.
Medicamento similar
aquele que contm o mesmo ou os mesmos princpios
ativos, apresenta a mesma concentrao, forma
farmacutica, via de administrao, posologia e indicao
teraputica, e que equivalente ao medicamento registrado
no rgo federal, responsvel pela vigilncia sanitria,
podendo diferir somente em caractersticas relativas
ao tamanho e forma do produto, prazo de validade,
embalagem, rotulagem, excipientes e veculo, devendo
sempre ser identifcado por nome comercial ou marca.
Meia-vida biolgica
o tempo necessrio para um organismo remover, por
eliminao biolgica, metade da quantidade de uma
substncia administrada.
Meia-vida efetiva
o tempo necessrio para um radionucldeo em um
organismo diminuir sua atividade pela metade como
um resultado combinado da eliminao biolgica e do
decaimento radioativo. A meia-vida efetiva importante
para o clculo da dose tima do radiofrmaco a ser
administrada e no monitoramento da quantidade de
exposio radiao.
Mtodos imunoqumicos
So mtodos que se baseiam numa ligao seletiva,
reversvel e no covalente entre antgenos e anticorpos.
Misturas de plasma humano excedente tratado por
inativao viral
Preparao congelada ou lioflizada, estril, apirognica,
obtida a partir de plasma humano excedente proveniente
de doadores do mesmo grupo sanguneo ABO e Rh(D
u
).
A preparao descongelada ou reconstituda antes
4
de seu uso de modo a obter uma soluo injetvel. O
plasma humano utilizado deve satisfazer s exigncias da
monografa Plasma humano para fracionamento.
Nvel de garantia de esterilidade
o grau de garantia que o processo em questo esterilizauma
populao de itens, sendo expresso como a probabilidade
de um item no estril naquela populao.
Nome qumico
o nome da substncia farmacopeica, de acordo com a
nomenclatura preconizada pela Unio Internacional de
Qumica Pura e Aplicada (IUPAC).
Nmero do lote
Designao impressa na rotulagem de um medicamento e de
outros produtos que permita identifcar o lote ou a partida a
que pertenam e, em caso de necessidade, localizar e rever
todas as operaes de fabricao e inspeo praticadas
durante a produo.
Nutrimentos
So substncias constituintes dos alimentos de valor
nutricional, incluindo protenas, gorduras, hidratos de
carbono, gua, elementos minerais e vitaminas.
Osmolalidade
uma forma prtica que d uma medida total da
contribuio de vrios solutos numa soluo pela presso
osmtica da soluo. A unidade de osmolalidade osmol
por kilograma (osmol/kg), mas o submltiplo miliosmol
por kilograma (mosmol/kg) normalmente usado.
vulo
a forma farmacutica slida, de dose nica, contendo
um ou mais princpios ativos dispersos ou dissolvidos em
uma base adequada que tem vrios formatos, usualmente,
ovide. Fundem na temperatura do corpo.
Padres de referncia da Farmacopeia Brasileira
De acordo com defnio da OMS, padres de referncia
farmacopeicos (PRef) so produtos de uniformidade
reconhecida, destinados ao uso em ensaios onde uma ou
mais de suas propriedades ser(o) comparada(s) com
a(s) da substncia em exame. Possuem um grau de pureza
adequado ao uso ao qual se destinam.
O PRef estabelecido e distribudo por autoridades
farmacopeicas, cujo valor atribudo a uma ou mais de suas
propriedades aceito sem necessitar comparao com
outro padro, destinado ao uso em ensaios especfcos
descritos nas monografas farmacopeicas. Incluem
substncias qumicas de referncia, produtos biolgicos,
extratos e ps vegetais, radiofrmacos, entre outros. A
expresso relacionada mais usada : Substncia Qumica
de Referncia Farmacopeica.
Pasta
a pomada contendo grande quantidade de slidos
em disperso (pelo menos 25%). Devero atender as
especifcaes estabelecidas para pomadas.
Pastilha
a forma farmacutica slida que contm um ou mais
princpios ativos, usualmente, em uma base adocicada e
com sabor. utilizada para dissoluo, ou desintegrao
lenta na boca. Pode ser preparada por modelagem, ou por
compresso. Abreviatura: pas.
Pastilha dura
Pastilha rgida para ser dissolvida lentamente. Abreviatura:
pas. dura
Pastilha gomosa
Pastilha fexvel e macia de misturas contendo polmeros
sintticos ou naturais. Abreviatura: pas. go.
Perfume
o produto de composio aromtica obtida base de
substncias naturais ou sintticas, que, em concentraes
e veculos apropriados, tenham como principal fnalidade a
odorizao de pessoas ou ambientes, includos os extratos,
as guas perfumadas, os perfumes cremosos, preparados
para banho e os odorizantes de ambientes, apresentados em
forma lquida, geleifcada, pastosa ou slida.
Plasma fresco congelado
a parte liquida remanescente de uma unidade de sangue
total obtida aps centrifugao e separao de suas
fraes celulares que dever ser totalmente congelado at
4 horas aps coleta do sangue total que lhe deu origem,
assegurando a manuteno da integridade e concentraes
dos fatores lbeis da coagulao.
Plasma humano para fracionamento
a parte lquida remanescente do sangue total aps
separao das fraes celulares sanguneas mediante o uso
de sistemas fechados apropriados de coleta ou centrifugao,
que contem os fatores lbeis da coagulao. Contm
soluo anticoagulante, conservadora e preservadora,
sendo armazenado a uma temperatura de 30 C ou inferior.
Destina-se preparao de hemoderivados de acordo com
as Boas Prticas de Fabricao de Medicamentos.
4
P
a forma farmacutica slida contendo um ou mais
princpios ativos secos e com tamanho de partcula
reduzido, com ou sem excipientes.
P aerossol
o p embalado sob presso contendo um gs propelente
e ingredientes terapeuticamente ativos que so liberados
aps a ativao de um sistema apropriado de vlvulas.
Abreviatura: p aer.
P efervescente
o p contendo, em adio aos ingredientes ativos,
substncias cidas e carbonatos ou bicarbonatos, os quais
liberam dixido de carbono quando o p dissolvido em
gua. destinado a ser dissolvido ou disperso em gua
antes da administrao. Abreviatura: p efev.
P lioflizado para soluo injetvel
o p estril destinado adio subsequente de lquido
para formar uma soluo. Preparado por lioflizao, um
processo que envolve a remoo de gua dos produtos
pelo congelamento a presses extremamente baixas.
Abreviatura: p liof. sol. inj.
P lioflizado para suspenso injetvel
o p estril destinado adio subsequente de
lquido para formar uma suspenso. Preparado por
lioflizao, um processo que envolve a remoo
de gua dos produtos pelo congelamento a presses
extremamente baixas. Abreviatura: p liof. sus. inj.
P lioflizado para suspenso injetvel de liberao
prolongada
para formar uma suspenso. Preparado por lioflizao,
um processo que envolve a remoo de gua dos produtos
pelo congelamento a presses extremamente baixas. Veja
defnio geral de liberao prolongada. Abreviatura: p.
liof. sus. inj. lib. prol.
P para colutrio
o p que deve ser dissolvido em gua antes do uso para
o preparo do colutrio, que um lquido destinado ao
enxgue bucal para agir sobre as gengivas e as mucosas da
boca e da garganta. No deve ser deglutido. Abreviatura:
p colu.
P para soluo
o p destinado a ser reconstitudo para formar uma
soluo. Abreviatura: p sol.
P para soluo injetvel
para formar uma soluo. Abreviatura: p sol. inj.
P para soluo para infuso
o p estril destinado reconstituio para formar uma
soluo para uso por infuso. Essa soluo , normalmente,
isotnica com o sangue e utilizada principalmente para
administrao em grande volume. Abreviatura: p sol. inf.
P para suspenso
o p destinado a ser reconstitudo para formar uma
suspenso. Abreviatura: p sus.
P para suspenso injetvel
para formar uma suspenso. Abreviatura: p sus. inj.
P para suspenso injetvel de liberao prolongada
para formar uma suspenso. Veja defnio de liberao
prolongada. Abreviatura: p sus. inj. lib.prol.
Pomada
a forma farmacutica semisslida, para aplicao na
pele ou em membranas mucosas, que consiste da soluo
ou disperso de um ou mais princpios ativos em baixas
propores em uma base adequada usualmente no aquosa.
Abreviatura: pom.
Prazo de validade
o tempo durante o qual o produto poder ser usado,
caracterizado como perodo de vida til e fundamentada
nos estudos de estabilidade especfcos. Abreviatura: val.
O prazo de validade dever ser indicado nas embalagens
primrias e secundrias. Quando indicar ms e ano,
entende-se como vencimento do prazo o ltimo dia desse
ms. As condies especifcadas, pelo fabricante, de
armazenamento e transporte devem ser mantidas.
Preparao tpica semisslida
a preparao prevista para aplicao na pele ou em
certas mucosas para ao local ou penetrao percutnea
de medicamentos, ou ainda por sua ao emoliente ou
protetora.
Processo assptico
aquele projetado de forma a prevenir a contaminao
dos componentes estreis por micro-organismos viveis ou
ainda na fase intermediria da produo.
4
Produto de higiene
o produto para uso externo; antissptico ou no; destinado
ao asseio ou desinfeco corporal, compreendendo
o sabonete, xampu, dentifrcio, enxaguatrio bucal,
antiperspirante, desodorante, produto para barbear e aps o
barbear, estptico e outros. Abreviatura: pro. hig.
Produto diettico
o produto tecnicamente elaborado para atender s ne-
cessidades dietticas de pessoas em condies fsiolgicas
especiais. Abreviatura: pro. diet.
Produto semielaborado
toda substncia ou mistura de substncias ainda sob o
processo de fabricao.
Pureza
Grau em que um frmaco, matria-prima contm outros
materiais estranhos.
Raticida
a preparao destinada ao combate a ratos, camundongos
e outros roedores, em domiclios, embarcaes, recintos
e lugares de uso pblico, contendo substncias ativas,
isoladas ou em associao, que no ofeream risco vida
ou sade do homem e dos animais teis de sangue quente,
quando aplicados em conformidade com as recomendaes
contidas em sua apresentao.
Reaes qumicas de identifcao
So reaes usadas no auxlio da caracterizao de uma
substncia. Embora especfcas, s sero sufcientes
para estabelecer ou confrmar a identidade da substncia
quando consideradas em conjunto com outros testes e
especifcaes constantes na monografa.
A no ser que a monografa especifque diferentemente,
as reaes qumicas so feitas em tubos de ensaio de
aproximadamente 15 mm de dimetro interno. Utilizam-
se 5 mL do lquido ou soluo a examinar, adicionando-
se trs gotas de reagente ou de cada reagente. O exame
do contedo do tubo de ensaio deve ser feito sobre toda a
camada lquida, observando de cima para baixo, no sentido
do eixo longitudinal dos tubos, aps cinco minutos de
repouso.
Usualmente, apresentada na monografa a ordem de
preferncia dos testes de identifcao. Quando no
constar a ordem, todos os testes de identifcao devem ser
realizados.
Reagentes
So substncias utilizadas em testes, reaes, ensaios
e doseamentos farmacopeicos, quer como tais ou em
solues.
Recipiente bem fechado
aquele que protege seu contedo de perdas e
contaminao por slidos estranhos, nas condies usuais
de manipulao, armazenagem, distribuio e transporte.
Recipiente hermtico
aquele impermevel ao ar, ou qualquer outro gs,
nas condies usuais de manipulao, armazenagem,
distribuio e transporte.
Recipiente opaco
aquele que impede a visualizao do contedo,
abrangendo todas as cores. Constitui barreira de proteo
luminosidade.
Recipiente para dose nica
o recipiente hermtico que contm determinada
quantidade do medicamento destinada a ser administrada
de uma s vez e que depois de aberto, no poder ser
fechado com garantia de esterilidade.
Recipiente para doses mltiplas
o recipiente hermtico que possibilita a retirada de pores
sucessivas de seu contedo, sem modifcar a concentrao,
a pureza e a esterilidade da poro remanescente.
Recipiente perfeitamente fechado
aquele que protege seu contedo de perdas e de
contaminao por slidos, lquidos e vapores estranhos,
eforescncia, deliquescencia, ou evaporao nas condies
usuais de manipulao, armazenagem, distribuio, e
transporte.
Recipiente translcido
aquele que possibilita a visualizao parcial do contedo,
abrangendo todas as cores exceto o mbar.
Recipiente transparente
aquele que possibilita a visualizao total do contedo,
abrangendo todas as cores exceto o mbar.
Registro
a inscrio, em livro prprio aps o despacho concessivo
do dirigente do rgo do Ministrio da Sade, sob nmero de
ordem, dos produtos, com a indicao do nome, fabricante,
da procedncia, fnalidade e dos outros elementos que os
caracterizem.
Resistncia hidroltica ou alcalinidade
o ensaio que quantifca a intensidade da reao qumica
entre a gua e os elementos alcalinos existentes no vidro,
4
especialmente sdio e potssio. Essa resistncia determina
a classifcao do tipo de vidro.
Rtulo
a identifcao impressa ou litografada, bem como
os dizeres pintados ou gravados a fogo, a presso ou
autoadesiva, aplicados diretamente sobre recipientes;
invlucros; envoltrios; cartuchos; ou qualquer outro
protetor de embalagem, externo ou interno, no podendo
ser removido ou alterado durante o uso do produto e
durante seu transporte, ou seu armazenamento.
A confeco dos rtulos dever obedecer s normas
vigentes do rgo federal de Vigilncia Sanitria.
Sala limpa
Sala na qual a concentrao de partculas em suspenso
no ar controlada. construda e utilizada de maneira a
minimizar a introduo, gerao e reteno de partculas
dentro da sala, na qual os outros parmetros relevantes
como, por exemplo, temperatura, umidade e presso, so
controlados conforme necessrio.
Saneante domissanitrio
a substncia ou preparao destinada higienizao;
desinfeco ou desinfestao domiciliar; de ambientes
coletivos, particulares ou pblicos, em lugares de uso
comum e no tratamento da gua.
Sangue humano
um tecido vivo, circulante, conjuntivo, de natureza celular,
plasmtica e ou protica, que se encontra contido dentro
do aparelho cardiovascular, desempenhando mltiplas e
complexas funes que assegurem ao organismo humano a
manuteno da vida.
Sangue humano transfusional
o sangue total humano in vitro proveniente de doadores
saudveis colhido em sistemas de envase para coleta,
armazenamento e processamento do sangue humano
contendo soluo anticoagulante conservadora e
preservadora.
Sistema fechado
Sistema de administrao de solues parenterais que,
durante todo o preparo e administrao, no permite o
contato da soluo com o meio ambiente.
Sistemas de envase para coleta, armazenamento e
processamento do sangue humano ou sistemas fechados
de coleta de sangue humano
So recipientes conhecidos ou denominados por bolsas
plsticas contendo ou no uma soluo anticoagulante,
conservadora e preservadora, destinados a coleta,
armazenamento, fracionamento e administrao do sangue
humano ou de seus derivados. So atxicos, estreis,
apirognicos e descartveis, podendo ser fabricados a
partir de um ou vrios polmeros, e conforme os casos,
de certos aditivos e so validados pelos seus respectivos
mtodos analticos.
Soluo forma farmacutica
a forma farmacutica lquida; lmpida e homognea, que
contm um ou mais princpios ativos dissolvidos em um
solvente adequado ou numa mistura de solventes miscveis.
Abreviatura: sol.
Soluo colorimtrica
a soluo utilizada na preparao de padres
colorimtricos para fns de comparao. So designadas
por SC.
Soluo de albumina humana
Soluo de albumina humana uma soluo protica,
estril e apirognica obtida do plasma humano que est de
acordo com as exigncias da monografa Plasma Humano
para Fracionamento.
Soluo molal
a soluo que contm um mol do soluto por kilograma
de solvente.
Soluo molar
a soluo que contm uma molcula-grama do soluto em
1000 mL da soluo. Os mltiplos e submltiplos da soluo
molar, tambm, so designados por nmeros inteiros ou
fraes decimais como: 2 M; M; 0,5 M; 0,1 M; etc.
Soluo normal
a soluo que contm um equivalente grama do soluto em
1000 mL da soluo. Os mltiplos e submltiplos da soluo
normal, tambm, so designados por nmeros inteiros ou
fraes decimais como 2 N, N; 0,5 N, 0,1 N, etc.
Soluo volumtrica
a soluo de reagentes, de concentrao conhecida,
destinada ao uso em determinaes quantitativas. Na FB 5
as concentraes das solues volumtricas so expressas
em molaridade. So designadas por SV.
Solues anticoagulantes conservadoras e preservadoras
do sangue humano
So solues destinadas coleta do sangue humano
objetivando no s torn-lo incoagulvel, mas tambm
assegurar a manuteno e a integridade morfofuncionais
e proticas de seus constituintes celulares e plasmticos.
4
Solues indicadoras
So solues de indicadores em solventes especfcos e
concentraes defnidas. So designadas por SI.
Solues reagentes
So solues de reagentes em solventes especfcos e
concentraes defnidas. So designadas por SR.
Soros hiperimunes para uso humano
Os soros hiperimunes so preparaes contendo
imunoglobulinas purifcadas, de origem animal, que
neutralizam especifcamente toxinas bacterianas, bactrias,
vrus ou componentes txicos do veneno de uma ou mais
espcies de animais peonhentos.
Substncia adjuvante
a substncia com fnalidade especfca adicionada s
preparaes injetveis. Essa substncia deve ser selecionada
tendo em vista o aumento da estabilidade do produto; no
interferncia na efccia teraputica nem no doseamento do
principio ativo; tampouco causar toxicidade na quantidade
administrada ao paciente. A substncia adjuvante pode
ser solubilizante; antioxidante; agente quelante; tampo;
agente antibacteriano; agente antifngico; agente anti-
espumante e outros, quando especifcado na monografa
individual. Abreviatura: subs. adj.
A presena de substncia adjuvante deve ser, claramente,
indicada nos rtulos das embalagens primrias e
secundrias, em que o produto entregue para o consumo.
Se no houver contra indicao expressa, o ar dos
recipientes pode ser substitudo por dixido de carbono ou
nitrognio. No permitida a adio de substncia corante.
Esto relacionados a seguir os limites mximos para alguns
adjuvantes, a menos que a monografa especifque de outra
forma:
a) para agentes contendo mercrio ou compostos
tensoativos catinicos 0,01%;
b) para agentes do tipo clorobutanol, cresol e fenol
0,5%;
c) para dixido de enxofre, ou quantidade equivalente de
sulfto, bissulfto ou metabissulfto de potssio ou sdio
0,2%.
Substncia qumica caracterizada
SQR utilizada na inexistncia de uma SQR Farmacopeica.
Essa SQR deve ser caracterizada por meio de ensaios
adequados e os valores obtidos devem ser devidamente
documentados.
Substncia Qumica de Referncia da Farmacopeia
Brasileira (SQR.FB)
estabelecida e disponibilizada pela Direo da
Farmacopeia Brasileira, seguindo os princpios da OMS,
e ofcializada pela Anvisa, sendo o seu uso obrigatrio
em todo territrio nacional. Na ausncia de uma SQR.
FB permitido o uso de SQR estabelecida por outras
farmacopeias reconhecidas, conforme legislao vigente.
Os padres para Espectrofotometria de Absoro Atmica
so identifcados por meio da denominao do metal,
seguida da sigla SRA (Soluo Reagente para Absoro
Atmica).
Substncia qumica de trabalho
estabelecida por comparao com uma SQR
Farmacopeica, por meio de ensaios farmacopeicos,
ou devidamente validados, e registrados pelo prprio
laboratrio que ir utiliz-la. Nessa situao, devero ser
mantidos os registros analticos e realizados controles
peridicos, empregando-se uma SQR Farmacopeica.
Substncias insaponifcveis
Substncias insaponifcveis so aquelas remanescentes
reao de saponifcao, no volteis a 100 - 105 C e que
foram carreadas no processo de extrao da substncia a
ensaiar.
Supositrio
a forma farmacutica slida de vrios tamanhos e
formatos adaptados para introduo no orifcio retal,
vaginal ou uretral do corpo humano, contendo um ou
mais princpios ativos dissolvidos numa base adequada.
Eles, usualmente, se fundem, derretem ou dissolvem na
temperatura do corpo Abreviatura: supo.
Suspenso
a forma farmacutica lquida que contm partculas
slidas dispersas em um veculo lquido, no qual as
partculas no so solveis. Abreviatura: sus.
Suspenso aerossol
a suspenso embalada sob presso contendo um gs
propelente e ingredientes terapeuticamente ativos que so
liberados aps a ativao de um sistema apropriado de
vlvulas. Abreviatura: sus. aer.
Suspenso de liberao prolongada
partculas no so solveis. Veja defnio de liberao
prolongada. Abreviatura: sus. lib. prol.
Suspenso de liberao retardada
partculas no so solveis. Veja defnio de liberao
retardada. Abreviatura: sus. lib. ret.
4
Suspenso gotas
a suspenso destinada administrao na forma de gotas.
Abreviatura: sus. go.
Suspenso injetvel
a suspenso estril. Abreviatura: sus. inj.
Suspenso injetvel de liberao prolongada
a suspenso estril. Veja defnio de liberao
prolongada. Abreviatura: sus. inj. lib. prol.
Suspenso spray
a suspenso administrada na forma de lquido fnamente
dividido por um jato de ar ou vapor. Abreviatura: sus. spray.
Tablete
a forma farmacutica slida preparada a partir de uma
massa feita com soluo hidroalcolica, o princpio ativo
e lactose, ou da prpria triturao umedecida em soluo
hidroalcolica. moldada em tableteiros e frgil e
quebradia.
Tampo
a preparao base de sais que so capazes de suportar
variaes na atividade de ons hidrognio.
Temperatura ou ponto de congelamento
Temperatura ou ponto de congelamento de lquido ou de
slido fundido a mais alta temperatura na qual ele se
solidifca.
Para substncias puras que fundem sem decomposio, o
ponto de congelamento do lquido igual a seu ponto de
fuso.
Temperatura ou ponto de ebulio
Temperatura ou ponto de ebulio de um lquido a
temperatura corrigida na qual o lquido ferve sob presso
de vapor de 101,3 kPa (760 mm de Hg).
Temperatura ou ponto de fuso
Temperatura ou ponto de fuso de uma substncia a
temperatura na qual esta se encontra completamente
fundida.
Tintura
a preparao alcolica ou hidroalcolica resultante da
extrao de drogas vegetais ou animais ou da diluio dos
respectivos extratos. classifcada em simples e composta,
conforme preparada com uma ou mais matrias-primas.
Abreviatura: tin.
A menos que indicado de maneira diferente na monografa
individual, 10 mL de tintura simples correspondem a 1 g
de droga seca.
Vacinas
Produtos biolgicos que contem uma ou mais substncias
antignicas que, quando inoculadas, so capazes de induzir
imunidade especfca ativa e proteger contra doena
causada pelo agente infeccioso que originou o antgeno.
Valor D (tempo de reduo decimal)
o tempo, em minutos, necessrio para reduzir a populao
microbiana em 90% ou um ciclo logartmico.
Valor F
o
uma medida da efccia esterilizante, isto , o nmero de
minutos de esterilizao trmica por vapor determinada
temperatura fornecida a um recipiente ou unidade de
produto, num dado valor Z.
Valor Z
a elevao de temperatura, em graus, necessria para
reduzir o Valor D em 90% ou produzir a reduo de um
ciclo logartmico na curva de resistncia trmica.
Vias de administrao
o local do organismo por meio do qual o medicamento
administrado.
Viscosidade
a expresso da resistncia de lquidos ao escoamento,
ou seja, ao deslocamento de parte de suas moleculas sobre
moleculas vizinhas. A viscosidade dos lquidos vem do
atrito interno, isso , das foras de coeso entre molculas
relativamente juntas. Com o aumento da temperatura,
aumenta a energia cintica mdia das molculas, diminui
(em mdia) o intervalo de tempo que as molculas passam
umas junto das outras, menos efetivas se tornam as foras
intermoleculares e menor a viscosidade.
A unidade dinmica, Sistema CGS, de viscosidade o poise.
O Sistema CGS de unidades um sistema de unidades de
medidas fsicas, ou sistema dimensional, de tipologia LMT
(comprimento, massa tempo), cujas unidades base so o
centmetro para o comprimento, o grama para a massa e o
segundo para o tempo.
Xarope
a forma farmacutica aquosa caracterizada pela alta
viscosidade, que apresenta no menos que 45% (p/p) de
sacarose ou outros acares na sua composio. Os xaropes
geralmente contm agentes favorizantes. Abreviatura: xpe.
4
Quando no se destina ao consumo imediato, deve ser
adicionado de conservadores antimicrobianos autorizados.
INFORMAES GERAIS
gua
A gua mencionada nos testes, reaes e ensaios gua
purifcada. Para preparaes injetveis, deve-se utilizar
gua para injetveis, descrita em monografa individual.
Quando for prescrito o uso de gua isenta de dixido
de carbono, utilizar gua purifcada fervida durante, no
mnimo, cinco minutos e protegida do ar atmosfrico
durante o resfriamento e armazenagem.
Aparelhos volumtricos
Os aparelhos volumtricos so empregados nas medidas
de volume nos testes, nos ensaios e nos doseamentos
farmacopeicos, e devem estar aferidos temperatura de
25 C. Caso o aparelho volumtrico no tenha sido aferido
a 25 C, as medidas de volume devem ser realizadas na
temperatura nele indicada.
Nas medies de volume, o nvel inferior do menisco
do lquido contido nos aparelhos volumtricos deve
tangenciar a parte superior da linha de referncia, com
a linha de viso no mesmo plano. Nos casos de lquidos
fortemente corados, ou opacos utiliza-se como referncia
a borda superior do menisco, no plano horizontal de viso.
Os aparelhos volumtricos para transferncia de lquidos
(pipetas; ou buretas), em virtude de terem sido aferidos com
gua, s podero fornecer exatamente o volume indicado
quando os lquidos a medir tiverem, aproximadamente, a
viscosidade, a tenso superfcial e a densidade da gua.
Conservao
As substncias farmacopeicas devem ser conservadas
sob condies tais que evitem sua contaminao ou
deteriorao. As condies de conservao de substncias
farmacopeicas fguram nas respectivas monografas.
Proteger da luz signifca que a substncia deve ser
conservada em recipiente opaco ou capaz de impedir a
ao da luz.
Proteger da poeira signifca que a substncia deve ser
mantida em frasco arrolhado e usar capuz protetor.
Na monografa podem estar defnidas as condies de
temperatura em que a substncia deve ser conservada,
utilizando-se termos descritos a seguir.
Em congelador Em temperatura entre -20 C e 0 C.
Em refrigerador Em temperatura entre 2 C e 8 C.
Local fresco Ambiente cuja temperatura permanece entre
8 C e 15 C.
Local frio Ambiente cuja temperatura no excede 8 C.
Temperatura ambiente Temperatura, normalmente,
encontrada em um ambiente de trabalho, entre 15 C e 30 C.
Local quente Ambiente cuja temperatura permanece
entre 30 C e 40 C.
Calor excessivo Indica temperaturas acima de 40 C.
Quando for necessrio conservar um frmaco em local
fresco, pode-se conserv-lo em refrigerador, a menos que
indicado de maneira diferente na monografa individual.
Quando na monografa no forem especifcadas condies
de conservao, elas incluem proteo contra a umidade,
congelamento e calor excessivo.
Descrio de substncia
As informaes referentes descrio de uma substncia
so genricas e destinam-se avaliao preliminar da sua
integridade. A descrio, por si, no indicativa da pureza,
devendo ser associada a outros testes farmacopeicos
para assegurar que a substncia esteja de acordo com a
monografa.
Dessecao at peso constante
Essa expresso signifca que a secagem deve prosseguir
at que duas pesagens consecutivas no difram em mais
de 0,5 mg por grama da substncia em exame, sendo que
a segunda pesagem deve ser efetuada aps uma hora de
secagem adicional nas condies especifcadas.
Dessecador
Compreende-se por dessecador um recipiente que possa
ser perfeitamente fechado, de formato e dimenses
adequadas que possibilitam manter atmosfera de baixo
teor de umidade por meio de agentes dessecantes nele
introduzidos, tais como: slica-gel; cloreto de clcio anidro;
pentxido de fsforo; cido sulfrico; dentre outros.
Dessecador presso reduzida o que possibilita manter
atmosfera de baixa umidade presso reduzida de no
mais que 6,7 kPa (aproximadamente 50 mm de mercrio),
ou presso indicada na monografa.
Doseamento e determinao da potncia
Quando o resultado de um ensaio ou de um doseamento
expresso em relao substncia seca; em relao
substncia; ou qualquer outra base especfca, a
determinao da perda por secagem, do teor de gua ou de
outra propriedade designada efetuada segundo o mtodo
descrito no respectivo ensaio na monografa da substncia
em causa, ou segundo o descrito na rotulagem.
Ensaios de identifcao
Os ensaios de identifcao possibilitam verifcar, com um
nvel de certeza aceitvel, que a identidade do material
4
sob exame est de acordo com o rtulo de sua embalagem.
Embora especfcos, eles no so, necessariamente,
sufcientes para estabelecer prova absoluta de identidade.
Entretanto, o no cumprimento dos requerimentos de um
ensaio de identifcao pode signifcar erro de rotulagem
do material. Outros testes e especifcaes na monografa
contribuem para a confrmao da identidade do artigo sob
exame.
Alguns ensaios de identifcao devem ser considerados
conclusivos como; infravermelho; espectrofotometria
com absoro especfca e cromatografa a lquido de alta
efcincia acoplada a espectrofotometria. Esses ensaios
devem ser realizados em complemento ao ensaio do contra
on, quando aplicvel.
Estrutura das monografas
As monografas de matrias-primas so identifcadas por
suas denominaes comuns Brasileiras (DCB), grafadas
em caixa alta e centralizadas. Alm disso, so includos,
tambm:
sempre que possvel, a denominao em latim proposta
pelo INN International Non-proprietary Names
Nomes genricos internacionais da Organizao
Mundial da Sade;
a frmula estrutural da substncia;
frmula molecular seguida da massa molar;
Denominao Comum Brasileira e seu respectivo
nmero;
nome qumico, segundo a ACS American Chemical
Society;
registro CAS Chemical Abstracts Service;
texto da monografa.
As monografas das preparaes farmacuticas so
identifcadas pelo nome da matria-prima correspondente,
seguido do nome da forma farmacutica.
Expresso de concentraes
As concentraes em porcentagem so expressas como
segue.
Por cento p/p (peso em peso) ou % p/p Expressa o nmero
de g de um componente em 100 g de mistura.
Por cento p/v (peso em volume) ou % p/v Expressa o
nmero de g de um componente em 100 mL de soluo.
Por cento v/v (volume em volume) ou % v/v Expressa o
nmero de mL de um componente em 100 mL de soluo.
Por cento v/p (volume em peso) ou % v/p Expressa o
nmero de mL de um componente em 100 g de mistura.
A expresso por cento, usada sem outra atribuio,
signifca: mistura de slidos e semisslidos, por cento p/p;
para solues ou suspenses de slidos em lquidos, por
cento p/v; para solues de lquidos, por cento v/v; para
solues de gases em lquidos, por cento p/v; para expressar
teor de leos essenciais em drogas vegetais, por cento v/p.
Impurezas
Os testes descritos nas monografas limitam as impurezas
a quantidades que assegurem qualidade ao frmaco. O fato
dos ensaios no inclurem uma impureza pouco frequente
no signifca que ela possa ser tolerada.
Incinerao at peso constante
Essa expresso signifca que a incinerao deve prosseguir
a 800 25 C, ou em outra temperatura indicada na
monografa, at que duas pesagens consecutivas no
difram em mais de 0,5 mg por grama da substncia em
exame, sendo que a segunda pesagem deve ser efetuada
depois de quinze minutos de incinerao adicional.
Interpretao da preciso dos dados numricos e limites
de tolerncia
A preciso desejada nos testes; reaes e ensaios
farmacopeicos indicada pelo nmero de decimais que
se apresenta no texto. Por exemplo, o valor numrico 20
indica valores no menores que 19,5 e no maiores que
20,5; o valor numrico 2,0 indica valores no menores que
1,95 e no maiores que 2,05; o valor numrico 0,20 indica
valores no menores que 0,195 e no maior que 0,205.
Os limites de tolerncia, expressos, numericamente,
por um valor mximo e mnimo, indicam a pureza de
uma substncia farmacopeica. Esses valores podem ser
expressos em porcentagem ou nmeros absolutos.
A faixa da variao deve ser estritamente observada, no
sendo tolerados valores fora dos limites mximo e mnimo.
Material de embalagem primria e secundria
Compreende-se por material de embalagem o recipiente;
envoltrio; invlucro ou qualquer outra forma de proteo;
removvel ou no; usado para envasar; proteger; manter;
cobrir ou empacotar, especifcamente ou no, matrias-
primas; reagentes e medicamentos.
Material de embalagem primria o que est em contato
direto com seu contedo durante todo o tempo. Considera-
se material de embalagem primria: ampola; bisnaga;
envelope; estojo; faconete; frasco de vidro ou de plstico;
frasco-ampola; cartucho; lata; pote; saco de papel e outros.
Embalagem secundria a que se destina total proteo
do material de acondicionamento nas condies usuais
de transporte, armazenagem e distribuio. Considera-
se embalagem secundria: caixas de papelo; cartuchos
de cartolina; madeira ou material plstico ou estojo de
cartolina e outros. No deve haver qualquer interao entre
o material de embalagem primria e o seu contedo capaz de
alterar a concentrao; a qualidade; ou a pureza do material
acondicionado. As condies de acondicionamento so
descritas nas monografas individuais, utilizando-se os
termos relacionados a seguir.
Recipiente bem fechado aquele que protege seu
contedo de perdas e contaminao por slidos estranhos,
4
nas condies usuais de manipulao; de armazenagem; de
distribuio e de transporte.
Recipiente perfeitamente fechado aquele que protege
seu contedo de perdas e de contaminao por slidos,
lquidos e vapores estranhos, eforescncia, deliquescencia,
ou evaporao nas condies usuais de manipulao;
armazenagem; distribuio e transporte.
Recipiente hermtico aquele impermevel ao ar, ou
qualquer outro gs, nas condies usuais de manipulao;
armazenagem; distribuio e transporte,
Cilindro de gs o recipiente metlico, perfeitamente
fechado, de paredes resistentes, destinado a conter gs sob
presso, obturado por vlvula regulvel, capaz de manter a
sada do gs em vazo determinada.
Recipiente para dose nica o recipiente hermtico que
contm determinada quantidade do medicamento destinada
a ser administrada de uma s vez e que depois de aberto,
no poder ser fechado com garantia de esterilidade.
Recipiente para doses mltiplas o recipiente hermtico
que permite a retirada de pores sucessivas de seu
contedo, sem modifcar a concentrao; a pureza e a
esterilidade da poro remanescente.
Medidas de presso
A expresso pascal (Pa), usada para medidas de presso
como a arterial; a atmosfrica ou a interna de um aparelho,
refere-se ao uso de manmetros ou barmetros calibrados
em relao presso exercida pela fora de 1 Newton
uniformemente distribuda sobre uma superfcie plana de
1 m
2
de rea perpendicular direo da fora; 1 pascal
equivale a 7,5 10
-3
mm de mercrio.
Odor
As expresses: inodora; praticamente inodora; leve odor
caracterstico; ou suas variaes, so usadas examinando-
se a amostra depois de exposta ao ar por quinze minutos,
quando se tratarem de embalagens de at 25 g abertas
recentemente. No caso de embalagens maiores, transferir
amostras de aproximadamente 25 g para cpsula de 100
mL de capacidade.
A caracterizao do odor apenas descritiva e no pode
ser considerada como padro de pureza, exceto nos casos
em que um odor particular, no permitido, seja indicado na
monografa individual.
Preparao de solues
Todas as solues utilizadas em testes, ensaios e reaes
so preparadas com gua purifcada, a menos que seja
A expresso recentemente preparada, referente ao preparo
de solues utilizadas em testes, ensaios e reaes, indica
que a soluo deve ser preparada, no mximo, 24 horas
antes da realizao do ensaio.
Presso reduzida
A expresso presso reduzida signifca presso menor ou
igual a 6,7 kPa (aproximadamente 50 mm de mercrio), a
menos que indicado de maneira diferente na monografa.
Quando na monografa for indicada dessecao sob
presso reduzida sobre agente dessecante, a operao
deve ser feita sob presso reduzida em dessecador ou outro
aparelho adequado.
Processos de fabricao
Qualquer que seja o mtodo utilizado, o produto fnal deve
corresponder s especifcaes includas na Farmacopeia
Brasileira, 5 edio.
Na fabricao de produtos injetveis; comprimidos;
cpsulas; ou de outras preparaes farmacopeicas,
permitido o uso de substncias adjuvantes, descritas nas
monografas e adicionadas com fnalidade especfca. Elas
devem ser incuas e no devem ter infuncia adversa
sobre a efccia teraputica da substncia ativa contida na
preparao, nem interferir nos ensaios e determinaes.
Prova em branco
As expresses: executar branco paralelo; fazer prova em
branco; ou efetuar ensaio em branco, signifca repetir a
determinao em condies idnticas e com quantidades
idnticas de reagentes, omitindo-se, apenas, a substncia
em exame.
Recipientes para injetveis
Os recipientes para preparaes injetveis devem ser
fabricados com materiais que no provoquem interao
com o contedo e possuam transparncia sufciente para
permitir inspeo visual. As tampas, quando usadas,
tampouco podem infuir na composio ou na conservao
do medicamento, oferecendo perfeita vedao, mesmo
depois de perfuradas vrias vezes.
Os recipientes para preparaes injetveis so classifcados em:
recipientes para dose nica;
recipientes para dose mltipla;
recipientes para perfuso.
Os recipientes para dose nica: ampolas e cartuchos de
uso odontolgico, so frascos de vidro ou de material
plstico adequado; fechados pela fuso do vidro ou com
a utilizao de oprculos fxos ou mveis. O contedo s
deve ser utilizado em uma nica dose, no podendo ser
reaproveitado.
Os recipientes para dose mltipla so frascos de vidro de
paredes resistentes que, depois de cheios com preparaes
lquidas ou com slidos para serem dissolvidos ou
suspensos, so selados com tampa de outro material.
O contedo desses frascos pode ser removido para
administrao em uma nica ou em vrias doses.
4
Os recipientes para perfuso so frascos com mais de 50
mL de capacidade, podendo atingir 1000 mL, selados com
tampa de outro material ou no, fabricados de vidro ou
de plstico. Os medicamentos envasados nesses tipos de
recipientes devem ser administrados em uma nica vez,
com a utilizao de equipos estreis, e no podem conter
agentes bactericidas ou antifngicos. O uso de outros tipos
de adjuvantes deve ser considerado cuidadosamente.
Solubilidade
A solubilidade indicada no deve ser tomada no sentido
estrito de constante fsica, porm, complementa e corrobora
com os demais ensaios, podendo ter um valor defnitivo
caso a substncia no apresente a solubilidade mnima
exigida, principalmente, no solvente gua.
As indicaes sobre a solubilidade referem-se s
determinaes feitas temperatura de 25 C. A expresso
solvente refere-se gua, a menos que indicado de maneira
diferente na monografa individual.
A expresso partes refere-se dissoluo de 1 g de um
slido no nmero de mililitros do solvente estabelecido no
nmero de partes.
As solubilidades aproximadas constantes nas monografas
so designadas por termos descritivos cujos signifcados
esto relacionados na Tabela 1.
Tabela 1 - Termos descritivos de solubilidade e seus signifcados
Solvente Termo descritivo
Muito solvel menos de 1 parte
Facilmente solvel De 1 a 10 partes
Solvel De 10 a 30 partes
Ligeiramente solvel De 30 a 100 partes
Pouco solvel De 100 a 1000 partes
Muito pouco solvel De 1000 a 10 000 partes
Praticamente insolvel
ou insolvel
mais de 10 000 partes
Temperatura
Todas as temperaturas constantes na FB 5. so expressas na
escala Celsius, e as medidas so feitas a 25 C, exceto para
medida de densidade e a menos que indicado de maneira
diferente na monografa individual.
Unidades de medida
So adotadas nessa Farmacopeia as unidades constantes
do Sistema Internacional de Unidades (SI), conforme
relacionado no Anexo B.
Veculos aquosos
Usa-se, geralmente, gua para injetveis como veculo
para injetveis aquosos. Solues de cloreto de sdio
ou soluo de Ringer ou outras solues adequadas,
preparadas com gua para injetveis, podem ser usadas
em parte ou totalmente ao invs de somente gua para
injetveis, a menos que a monografa especifque de outra
forma.
Veculos no aquosos
Veculos no aquosos utilizados parcial ou totalmente na
obteno de preparaes injetveis podem ser miscveis ou
imiscveis com a gua. Entre os veculos miscveis com a
gua, os mais usados so os polilcoois e os polmeros do
xido de etileno. Entre os imiscveis com a gua, os mais
usados so os leos fxos de origem vegetal e os mono e
diglicerdeos de cidos graxos.
Os leos fxos so inodoros ou quase inodoros e seu odor e
sabor no devem lembrar os de rano. Devem satisfazer s
exigncias especifcadas nas monografas e apresentar as
caractersticas descritas a seguir.
a) teste de resfriamento transferir quantidade de leo
fxo, previamente dessecado a 105 C por duas horas
e resfriado temperatura ambiente em dessecador
contendo slica-gel, para recipiente de vidro incolor
cilndrico, com dimetro interno de aproximadamente
25 mm. Fechar o recipiente e mergulhar durante
quatro horas em gua mantida a 10 C. O lquido
deve permanecer sufcientemente lmpido, para que
possa facilmente ser vista uma linha negra de 0,5 mm
de espessura, quando mantida verticalmente atrs do
cilindro e contra fundo branco;
b) ndice de saponifcao entre 185 e 200 (5.5.29.8);
c) ndice de iodo entre 79 e 128 (5.5.29.10);
d) substncias insaponifcveis refuxar em banho-maria
10 mL do leo com 15 mL de hidrxido de sdio (1:16)
e 30 mL de lcool etlico, agitando ocasionalmente
at que a mistura se torne clara. Transferir a mistura
para cpsula de porcelana, evaporar o lcool etlico em
banho-maria e misturar o resduo com 100 mL de gua.
Deve resultar soluo;
e) cidos graxos livres os cidos graxos livres em
10 g do leo devem consumir, no mximo, 2 mL de
hidrxido de sdio 0,02 M.
Os mono ou diglicerdeos sintticos de cidos graxos
devem obedecer s seguintes exigncias:
a) so lquidos e permanecem lmpidos quando resfriados
a 10 C;
b) ndice de iodo no superior a 140 (5.5.29.10).
Os veculos no aquosos devem ser selecionados com
especial cuidado, pois no podem ser irritantes, txicos
ou sensibilizantes e no devem interferir na efccia
teraputica da preparao.Em casos excepcionais, nomes
muito difundidos, porm diferentes dos adotados pela
Denominao Comum Brasileira para Frmacos podem ser
citados como outra denomi nao.
5
PROCEDIMENTO PARA PRODUTOS EM DOSE
UNITRIA
Para produtos em dose unitria, o teste permite verifcar se
as unidades de um mesmo lote apresentam uniformidade
de peso. Para realizar o teste, necessrio determinar,
previamente, o peso mdio de unidades do lote.
Comprimidos no revestidos ou revestidos com flme
Pesar, individualmente, 20 comprimidos e determinar o
peso mdio. Pode-se tolerar no mais que duas unidades
fora dos limites especifcados na Tabela 1, em relao ao
peso mdio, porm, nenhuma poder estar acima ou abaixo
do dobro das porcentagens indicadas.
Comprimidos com revestimento aucarado (drgeas)
Pesar, individualmente, 20 drgeas e determinar o peso
mdio. Pode-se tolerar no mais que cinco unidades fora
dos limites especifcados na Tabela 1, em relao ao peso
mdio, porm, nenhuma poder estar acima ou abaixo do
dobro das porcentagens indicadas.
Cpsulas duras
Pesar, individualmente, 20 unidades, remover o contedo
de cada uma, limpar adequadamente e pesar novamente.
Determinar o peso do contedo de cada cpsula pela
diferena de peso entre a cpsula cheia e a vazia. Com os
valores obtidos, determinar o peso mdio do contedo.
Pode-se tolerar no mais que duas unidades fora dos limites
especifcados na Tabela 1, em relao ao peso mdio do
contedo, porm, nenhuma poder estar acima ou abaixo
do dobro das porcentagens indicadas.
Cpsulas moles
Proceder como descrito para Cpsulas duras. Para
determinar o peso mdio do contedo, cortar as cpsulas
previamente pesadas e lav-las com ter etlico ou outro
solvente adequado. Deixar os invlucros expostos ao ar,
em temperatura ambiente, at completa evaporao do
solvente. Pesar novamente.
Supositrios e vulos
Pesar, individualmente, 20 supositrios ou vulos e
determinar o peso mdio. Pode-se tolerar no mais que
duas unidades fora dos limites especifcados na Tabela 1,
em relao ao peso mdio, porm, nenhuma poder estar
acima ou abaixo do dobro das porcentagens indicadas.
Ps estreis, ps lioflizados e ps para injetveis
Realizar o teste com 20 unidades. Remover os lacres
metlicos, no caso de frascos-ampola. Retirar rtulos que
possam sofrer danos durante o teste. Secar, se necessrio, a
superfcie externa dos recipientes. Pesar, individualmente,
as 20 unidades, com as respectivas tampas. Remover o
contedo e lavar os respectivos recipientes utilizando gua
e em seguida etanol. Secar em estufa a 105 C, por 1 hora, ou
em temperaturas inferiores a essa, dependendo da natureza
do material, at peso constante. Resfriar temperatura
ambiente, recolocar a tampa e pesar novamente. A
diferena entre as duas pesagens representa o peso do
contedo. Determinar o peso mdio do contedo das 20
unidades. Pode-se tolerar no mais que duas unidades fora
dos limites especifcados na Tabela 1, em relao ao peso
mdio, porm, nenhuma poder estar acima ou abaixo do
dobro das porcentagens indicadas.
Ps para reconstituio (uso oral)
Proceder conforme descrito para Ps estreis, ps
lioflizados e ps para injetveis. Pode-se tolerar no mais
que duas unidades fora dos limites especifcados na Tabela
1, em relao ao peso mdio, porm, nenhuma poder estar
acima ou abaixo do dobro das porcentagens indicadas.
5 MTODOS GERAIS
5.1 MTODOS GERAIS
APLICADOS A
MEDICAMENTOS
5.1.1 DETERMINAO DE PESO
O teste se aplica a formas farmacuticas slidas em dose
unitria (comprimidos no revestidos, comprimidos
revestidos, pastilhas, cpsulas duras e moles e supositrios),
formas farmacuticas slidas acondicionadas em recipientes
para dose unitria (ps estreis, ps lioflizados, ps para
injetveis e ps para reconstituio de uso oral) e a formas
farmacuticas slidas e semisslidas acondicionadas em
recipientes para doses mltiplas (granulados, ps, gis,
cremes, pomadas e ps para reconstituio).
As pesagens so feitas em balanas de sensibilidade
adequada.
5
PROCEDIMENTO PARA PRODUTOS EM DOSES
MLTIPLAS
Para produtos acondicionados em recipientes para doses
mltiplas, o teste permite verifcar a homogeneidade no
envase.
Ps para reconstituio (uso oral e parenteral)
Pesar, individualmente, 10 unidades. Remover o contedo
e lavar os respectivos recipientes utilizando solvente
adequado. Secar, esfriar temperatura ambiente e pesar
novamente. A diferena entre as duas pesagens representa
o peso do contedo.
Determinar o peso mdio do contedo das 10 unidades. Os
valores individuais no diferem de 10% em relao ao
peso mdio.
Tabela 2 Critrios de avaliao da determinao de peso para formas farmacuticas em doses mltiplas.
Formas farmacuticas em doses mltiplas Peso declarado
Porcentagem mnima em
relao ao peso declarado
Granulados, ps, gis, cremes e pomadas
at 60 g 90,0%
acima de 60 g e at 150 g 92,5%
acima de 150,0 g 95,0%
Ps estreis, ps lioflizados e ps para injetveis mais que 40 mg* 10,0%
Ps para reconstituio (uso oral) menos que 300 mg 10,0%
300 mg ou mais 7,5%
_______________
(*) Se o peso mdio for de 40 mg ou menos, submeter ao teste de Uniformidade de doses unitrias (5.1.6).
Tabela 1 Critrios de avaliao da determinao de peso para formas farmacuticas slidas em dose unitria.
Formas farmacuticas em dose unitria Peso mdio Limites de variao
Comprimidos no revestidos ou revestidos com flme,
comprimidos efervescentes, comprimidos sublinguais,
comprimidos vaginais e pastilhas
80 mg ou menos 10,0%
mais que 80 mg e menos que 250 mg 7,5%
250 mg ou mais 5,0%
Comprimidos com revestimento aucarado (drgeas) 25 mg ou menos 15,0%
mais que 25 mg e at 150 mg 10,0%
mais que 150 mg e menos que 300 mg 7,5%
300 mg ou mais 5,0%
Cpsulas duras e moles, cpsulas vaginais menos que 300 mg 10,0%
300 mg ou mais 7,5%
Supositrios e vulos independente do peso mdio 5,0 %
Granulados, ps, gis, cremes e pomadas
Nota: para realizar o teste, necessrio conhecer a
quantidade nominal do envase.
Pesar, individualmente, 10 unidades. Remover o contedo
e lavar os respectivos recipientes utilizando solvente
adequado. Secar, esfriar temperatura ambiente e pesar
novamente. A diferena entre as duas pesagens representa
o peso do contedo.
Determinar o peso mdio do contedo das 10 unidades. O
peso mdio dos contedos no inferior ao peso declarado
e o peso individual de nenhuma das unidades testadas
inferior porcentagem indicada na Tabela 2, em relao
ao peso declarado.
Caso no seja cumprida essa exigncia, determinar o peso
individual do contedo de 20 unidades adicionais. O peso
mdio do contedo das 30 unidades no inferior ao peso
declarado, e o peso individual de no mais que uma unidade
em 30 inferior porcentagem indicada na Tabela 2, em
relao ao peso declarado.
5
5.1.2 DETERMINAO DE
VOLUME
O teste de determinao de volume requerido para
produtos lquidos em recipientes para doses mltiplas e
produtos lquidos em recipientes para dose nica. O teste
se aplica tanto a preparaes lquidas quanto a preparaes
lquidas obtidas a partir de ps para reconstituio. O teste
no requerido para produtos lquidos em recipientes
para dose nica quando, na monografa individual, constar
requerimento para Uniformidade de doses unitrias (5.1.6).
PROCEDIMENTO
Produtos lquidos em recipientes para doses mltiplas
(exceto injetveis)
Separar 10 unidades. Remover os lacres metlicos, quando
for o caso. Retirar rtulos que possam sofrer danos
durante o teste. Pesar, individualmente, cada recipiente
com as respectivas tampas. Homogeneizar, remover e
reunir os contedos e reservar para a determinao da
densidade de massa. Lavar os recipientes e as tampas
com gua e, em seguida, com etanol. Secar em estufa a
105 C, por uma hora, ou em temperatura compatvel
com o material do recipiente, at peso constante. Esfriar
temperatura ambiente, recolocar a tampa e outras partes
correspondentes e pesar novamente. A diferena entre as
duas pesagens representa o peso do contedo. Determinar
os volumes individuais correspondentes (V), em mL,
utilizando a expresso:
m
V =
em que
m = peso do contedo, em g;
= densidade de massa do produto, em g/mL, determinada
a 20 C, conforme descrito em Determinao da densidade
de massa e densidade relativa (5.2.5).
A partir dos valores obtidos, calcular o volume mdio
das unidades testadas. O volume mdio no inferior ao
volume declarado e o volume individual de nenhuma das
unidades testadas inferior a 95,0% do volume declarado.
obtidos a partir de ps para reconstituio (exceto
injetveis)
Separar 10 unidades. Reconstituir cada unidade conforme
indicado no rtulo. Proceder conforme descrito em
(exceto injetveis).
volume declarado e o volume individual de nenhuma das
unidades testadas inferior a 95,0% ou superior a 110,0%
do volume declarado.
Produtos lquidos em recipientes para dose nica (exceto
injetveis)
Separar 10 unidades. Verter, separadamente, o contedo de
cada unidade em provetas secas calibradas de capacidade
que no exceda 2,5 vezes o volume a ser medido, tomando
precaues para evitar a formao de bolhas. Deixar o
lquido escoar por 5 segundos, a menos que indicado de
maneira diferente na monografa individual. Efetuar a
medio.
volume declarado, e o volume individual de nenhuma das
unidades testadas inferior a 95,0% ou superior a 110,0%
do volume declarado.
Produtos lquidos injetveis
O teste se aplica a produtos lquidos injetveis
acondicionados em recipientes como ampolas, frascos-
ampola, bolsas plsticas, frascos plsticos, carpules ou
seringas pr-carregadas. Os recipientes so preenchidos
com pequeno excesso volume, de acordo com as
caractersticas do produto, para permitir a administrao
do volume declarado. Os excessos mnimos de volume
recomendados na Tabela 1 geralmente so sufcientes para
permitir a retirada e a administrao do volume declarado.
Tabela 1 Excesso de volume recomendado
para produtos lquidos injetveis.
Volume declarado (mL)
Excesso mnimo de
volume recomendado
mveis / mL viscosos / mL
0,5 0,10 0,12
1,0 0,10 0,15
2,0 0,15 0,25
3,0 0,20 0,35
4,0 0,25 0,45
5,0 0,30 0,50
10,0 0,50 0,70
20,0 0,60 0,90
30,0 0,80 1,20
50,0 ou mais 2% 3%
Suspenses e emulses devem ser agitadas antes da
retirada do contedo e antes da determinao da densidade.
Preparaes oleosas ou muito viscosas podem ser
aquecidas, se necessrio, segundo as indicaes do rtulo
ou a 37 C, e agitadas vigorosamente antes da retirada do
contedo. Os contedos so ento esfriados entre 20 C e
25 C antes da medio do volume.
Para injetveis em recipientes para dose nica, testar 6
unidades se o volume declarado igual ou superior a 10
mL, 10 unidades se o volume declarado superior a 3 mL
e inferior a 10 mL, ou 12 unidades se o volume declarado
igual ou inferior a 3 mL. Remover o contedo total de cada
unidade com auxlio de seringa de capacidade que no
exceda 3 vezes o volume a ser medido, munida de agulha
5
nmero 21 com no menos que 2,5 cm de comprimento.
Eliminar bolhas eventualmente existentes na agulha e na
seringa e transferir o contedo da seringa, sem esvaziar a
agulha, para proveta seca calibrada de capacidade que no
exceda 2,5 vezes o volume a ser medido. Alternativamente,
o contedo da seringa pode ser transferido para bquer seco
tarado, sendo o volume calculado pelo peso do lquido,
em gramas, dividido pela sua densidade. Para recipientes
com volume declarado de 2 mL ou menos, os contedos
dos recipientes podem ser reunidos para obter o volume
necessrio para a medio, devendo-se utilizar seringas e
agulhas secas separadas para cada recipiente. O contedo de
recipientes com volume declarado de 10 mL ou mais pode
ser determinado esvaziando-se o contedo de cada recipiente
diretamente em provetas calibradas ou bqueres tarados.
O volume de cada recipiente examinado no inferior ao
volume declarado. No caso de recipientes com volume
declarado de 2 mL ou menos, o volume dos contedos
reunidos no inferior soma dos volumes declarados dos
recipientes utilizados no teste.
Para injetveis em recipientes para doses mltiplas
rotulados para conter um nmero especfco de doses de um
determinado volume, selecionar uma unidade e proceder
conforme descrito para injetveis em recipientes para dose
nica, utilizando nmero de seringas e agulhas separadas
equivalente ao nmero de doses especifcadas no rtulo.
O volume dispensado por cada seringa no inferior ao
volume declarado por dose.
Para injetveis em cartuchos ou seringas pr-carregadas,
testar uma unidade se o volume declarado igual ou
superior a 10 mL, 3 unidades se o volume declarado
superior a 3 mL e inferior a 10 mL ou 5 unidades se o
volume declarado igual ou inferior a 3 mL. Ajustar aos
recipientes os acessrios necessrios para sua utilizao
(agulha, mbolo, corpo de seringa), quando for o caso, e
transferir o contedo de cada recipiente, sem esvaziar a
agulha, para bquer seco tarado, empurrando o mbolo
lenta e regularmente. Calcular o volume, em mililitros,
dividindo o peso do lquido, em gramas, pela sua
densidade. O volume de cada recipiente no inferior ao
volume declarado.
Para preparaes injetveis de grande volume (infuses
parenterais), selecionar duas unidades e transferir o contedo
de cada recipiente para provetas secas calibradas de capacidade
que no exceda 2,5 vezes o volume a ser medido. O volume
de cada recipiente no inferior ao volume declarado.
5.1.3 DETERMINAO DE
RESISTNCIA MECNICA EM
COMPRIMIDOS
Os testes de resistncia mecnica, tais como dureza e
friabilidade, so considerados ofciais dentro do contexto
legal desta Farmacopeia, constituindo-se em elementos
teis na avaliao da qualidade integral dos comprimidos.
Estes testes visam demonstrar a resistncia dos comprimidos
ruptura provocada por quedas ou frico.
5.1.3.1 TESTE DE DUREZA
O teste de dureza permite determinar a resistncia do
comprimido ao esmagamento ou ruptura sob presso
radial. A dureza de um comprimido proporcional fora de
compresso e inversamente proporcional sua porosidade.
O teste se aplica, principalmente, a comprimidos no
revestidos.
O teste consiste em submeter o comprimido ao de
um aparelho que mea a fora, aplicada diametralmente,
necessria para esmag-lo. A fora medida em newtons (N).
APARELHAGEM
Podem ser utilizados diferentes tipos de aparelhos, os quais
diferem basicamente quanto ao mecanismo empregado para
exercer a presso. A fora pode ser exercida manualmente
ou mecanicamente. medida que a presso aumenta, um
mbolo, uma placa ou um pisto aplica determinada fora
sobre o comprimido, apoiado em base fxa. O aparelho
calibrado com preciso de 1 N.
PROCEDIMENTO
O teste realizado com 10 comprimidos, eliminando
qualquer resduo superfcial antes de cada determinao. Os
comprimidos so testados, individualmente, obedecendo
sempre mesma orientao (considerar a forma, presena
de ranhura e gravao). Expressar o resultado como a
mdia dos valores obtidos nas determinaes. O resultado
do teste informativo.
5.1.3.2 TESTE DE FRIABILIDADE
O teste de friabilidade permite determinar a resistncia
dos comprimidos abraso, quando submetidos ao
mecnica de aparelhagem especfca. O teste se aplica,
unicamente, a comprimidos no revestidos.
O teste consiste em pesar com exatido um nmero
determinado de comprimidos, submet-los ao do
aparelho e retir-los depois de efetuadas 100 rotaes.
Aps remover qualquer resduo de p dos comprimidos,
eles so novamente pesados. A diferena entre o peso
inicial e o fnal representa a friabilidade, medida em funo
da porcentagem de p perdido.
APARELHAGEM
O aparelho (Figura 1) consiste de um cilindro rotativo,
com 287,0 4,0 mm de dimetro e 38,0 2,0 mm
de profundidade, constitudo de polmero sinttico
transparente com faces internas polidas de baixa atividade
esttica, o qual gira em torno de seu eixo a uma velocidade
de 25 1 rotaes por minuto. Uma das faces do cilindro
removvel. Os comprimidos so recolhidos a cada volta
do cilindro por uma projeo curva com raio interno de
80,5 5,0 mm que se estende do centro parede externa
do cilindro, e levados a uma altura de 156,0 2,0 mm, de
onde caem repetidamente.
5
Figura 1 Aparelho para teste de friabilidade (friabilmetro).
PROCEDIMENTO
Para comprimidos com peso mdio igual ou inferior a 0,65
g, utilizar 20 comprimidos. Para comprimidos com peso
mdio superior a 0,65 g, utilizar 10 comprimidos. Pesar,
com exatido, os comprimidos, introduzi-los no aparelho.
Ajustar a velocidade para 25 rotaes por minuto e o
tempo de teste para 4 minutos. Decorrido o prazo, remover
qualquer resduo de p da superfcie dos comprimidos e
pesar novamente. Nenhum comprimido pode apresentar-
se, ao fnal do teste, quebrado, lascado, rachado ou partido.
So considerados aceitveis os comprimidos com perda
igual ou inferior a 1,5% do seu peso ou a porcentagem
estabelecida na monografa. Se o resultado for duvidoso
ou se a perda for superior ao limite especifcado, repetir o
teste por mais duas vezes, considerando-se, na avaliao, o
resultado mdio das trs determinaes.
5.1.4 TESTES DE
DESINTEGRAO
5.1.4.1 TESTE DE DESINTEGRAO
PARA COMPRIMIDOS E CPSULAS
O teste de desintegrao permite verifcar se comprimidos
e cpsulas se desintegram dentro do limite de tempo
especifcado, quando seis unidades do lote so submetidas
ao de aparelhagem especfca sob condies
experimentais descritas.
O teste se aplica a comprimidos no revestidos, revestidos
com flme ou com revestimento aucarado (drgeas),
comprimidos com revestimento entrico, comprimidos
sublinguais, comprimidos solveis, comprimidos
dispersveis, cpsulas duras e cpsulas moles. Pode
ser aplicado a comprimidos mastigveis, nesse caso as
condies e critrios de avaliao constaro na monografa
individual. O teste no se aplica a pastilhas e comprimidos
ou cpsulas de liberao controlada (prolongada).
A desintegrao defnida, para os fns desse teste, como
o estado no qual nenhum resduo das unidades testadas
(cpsulas ou comprimidos) permanece na tela metlica do
aparelho de desintegrao, salvo fragmentos insolveis de
revestimento de comprimidos ou invlucros de cpsulas.
Consideram-se, tambm, como desintegradas as unidades
que durante o teste se transformam em massa pastosa,
desde que no apresentem ncleo palpvel.
APARELHAGEM
Consiste de sistema de cestas e tubos (Figura 1), de
recipiente apropriado para o lquido de imerso (um bquer
com capacidade de 1 litro), de termostato para manter o
lquido a 37 1 C e de mecanismo para movimentar
verticalmente a cesta e os tubos no lquido de imerso,
com frequncia constante e percurso especfco. O volume
do lquido de imerso dever ser sufciente para que, ao
atingir o ponto mais alto do percurso, a parte inferior da
cesta fque, no mnimo, a 25 mm abaixo da superfcie do
lquido, e que no ponto mais baixo fque, no mnimo, a
25 mm do fundo do bquer. Os movimentos ascendente e
descendente devero ter a mesma velocidade e a mudana
do sentido do movimento deve ser suave.
5
A cesta consiste em seis tubos de vidro ou acrlico
transparente, abertos em ambos os lados. As dimenses
dos tubos so: comprimento 77,5 2,5 mm, dimetro
interno entre 20,7 mm e 23,0 mm e espessura das paredes
aproximadamente 2 mm.
Os tubos so mantidos verticalmente, adaptando-se
em cada extremidade da cesta um disco de material
transparente adequado, com dimetro entre 88,0 mm e
92,0 mm e espessura entre 5,0 mm e 8,5 mm, possuindo
seis orifcios nos quais so introduzidos os tubos. Os seis
orifcios eqidistam do centro de cada disco, estando
igualmente espaados. Na face externa do disco inferior
encontra-se uma tela de arame (dimetro de 0,635 0,030
mm) de ao inoxidvel, com abertura entre 1,8 mm e 2,2
mm, presa por meio de trs parafusos.
Para o teste de desintegrao de cpsulas, uma tela de
arame de ao inoxidvel, semelhante quela adaptada ao
disco inferior da cesta, ou outro dispositivo adequado pode
ser adaptado face externa do disco superior para evitar
que as cpsulas escapem dos tubos durante o teste.
As partes que constituem a cesta so montadas e mantidas
frmemente unidas mediante eixo metlico central, com
dimetro de cerca de 5 mm. A extremidade superior do eixo
central deve ter dispositivo para fxar a cesta ao mecanismo
que produz o movimento vertical do sistema.
Quando indicado, deve ser adicionado em cada tubo
da cesta um disco cilndrico de material transparente
adequado, com densidade relativa entre 1,18 e 1,20,
dimetro de 20,70 0,15 mm, e espessura de 9,50 0,15
mm. Cada disco possui cinco orifcios, cada um com 2 mm
de dimetro, sendo um orifcio no eixo do cilindro e os
outros quatro eqidistantes, dispostos sobre um crculo
de 6 mm de raio relativo ao centro do disco. A superfcie
lateral do disco possui quatro mossas eqidistantes, com
profundidade de 2,6 0,1 mm, em forma de V, as quais,
no lado superior do disco, medem 9,4 0,2 mm de largura,
e no lado inferior, 1,6 mm. Todas as superfcies do disco
so lisas. O desenho e montagem da cesta podem variar
desde que as especifcaes para os tubos e abertura das
telas sejam mantidas.
Figura 1 Aparelho para teste de desintegrao de
comprimidos e cpsulas (dimenses em mm).
PROCEDIMENTO
Comprimidos no revestidos
Utilizar seis comprimidos no teste. Colocar um comprimido
em cada um dos seis tubos da cesta, adicionar um disco a
cada tubo e acionar o aparelho, utilizando gua mantida
a 37 1 C como lquido de imerso, a menos que outro
lquido seja especifcado na monografa do medicamento.
Ao fnal do intervalo de tempo especifcado, cessar o
movimento da cesta e observar o material em cada um dos
tubos. Todos os comprimidos devem estar completamente
desintegrados. Se os comprimidos no se desintegrarem
devido aderncia aos discos, repetir o teste com seis
outros comprimidos, omitindo os discos. Ao fnal do
teste, todos os comprimidos devem estar completamente
desintegrados. O limite de tempo estabelecido como
critrio geral para a desintegrao de comprimidos no
5
revestidos de 30 minutos, a menos que indicado de
maneira diferente na monografa individual.
Comprimidos com revestimento aucarado (drgeas) ou
revestidos com flme
Utilizar seis comprimidos no teste. Colocar um comprimido
em cada um dos seis tubos da cesta. Colocar um disco em
cada tubo e acionar o aparelho, utilizando gua mantida
a 37 1 C, como lquido de imerso. Ao fnal do
intervalo de tempo especifcado, cessar o movimento da
cesta e observar o material em cada um dos tubos. Se os
comprimidos no estiverem completamente desintegrados,
testar outros seis comprimidos, substituindo a gua por
cido clordrico 0,1 M, mantido a 37 1 C, como lquido
de imerso. Ao fnal do intervalo de tempo especifcado,
cessar o movimento da cesta e observar o material em
cada um dos tubos. Todos os comprimidos devem estar
completamente desintegrados. Se os comprimidos no
se desintegrarem devido aderncia aos discos, repetir
o teste com seis outros comprimidos, omitindo os
discos. Ao fnal do teste, todos os comprimidos devem
estar completamente desintegrados. O limite de tempo
estabelecido como critrio geral para a desintegrao de
comprimidos revestidos com flme de 30 minutos, e para
comprimidos com revestimento aucarado (drgeas) de
60 minutos, a menos que indicado de maneira diferente na
Comprimidos ou cpsulas com revestimento entrico
(gastro-resistentes)
Utilizar seis unidades no teste. Colocar uma unidade
em cada um dos seis tubos da cesta. Acionar o aparelho,
sem adicionar os discos, utilizando cido clordrico 0,1
M mantido a 37 1 C como lquido de imerso, por 60
minutos ou o tempo especifcado na monografa individual.
Cessar o movimento da cesta e observar os comprimidos
ou cpsulas. Nenhuma unidade pode apresentar qualquer
sinal de desintegrao, rachadura ou amolecimento, que
possibilite o extravasamento do seu contedo. Colocar
um disco em cada tubo e acionar o aparelho, utilizando
soluo tampo fosfato pH 6,8 mantido a 37 1 C como
lquido de imerso. Decorridos 45 minutos ou o tempo
especifcado na monografa, cessar o movimento da cesta
e observar o material em cada um dos tubos. Todos os
comprimidos ou cpsulas devem estar completamente
desintegrados, podendo restar apenas fragmentos de
revestimento insolveis. Se os comprimidos ou cpsulas
no se desintegrarem devido aderncia aos discos, repetir
o teste com seis outras unidades, omitindo os discos. Ao
fnal do teste, todos os comprimidos ou cpsulas devem
estar completamente desintegrados. O teste no se aplica
a cpsulas no revestidas que contm preparao de
liberao entrica.
Comprimidos sublinguais
Realizar o teste conforme descrito para Comprimidos no
revestidos, omitindo o uso de discos. Aps 5 minutos,
todos os comprimidos devem estar completamente
desintegrados.
Comprimidos solveis e comprimidos dispersveis
Realizar o teste conforme descrito para Comprimidos
no revestidos, utilizando gua mantida entre 15 C e 25
C, como lquido de imerso. Aps 3 minutos, todos os
comprimidos devem estar completamente desintegrados.
Cpsulas gelatinosas (duras)
no revestidos, omitindo o uso dos discos. Utilizar uma
tela com abertura de 1,8 mm a 2,2 mm, de arame de ao
inoxidvel adaptada tampa da cesta, conforme descrito no
item Aparelhagem. Observar as cpsulas aps 45 minutos
ou conforme especifcado na monografa do medicamento.
Todas as cpsulas devem estar completamente
desintegradas, ou restando, na tela, apenas fragmentos
insolveis de consistncia mole.
Cpsulas moles
no revestidos, utilizando os discos. Observar as
cpsulas aps 30 minutos ou conforme especifcado na
monografa do medicamento. Todas as cpsulas devem
estar completamente desintegradas, ou restando, na tela,
apenas fragmentos insolveis de consistncia mole. Se
as cpsulas no se desintegrarem devido aderncia aos
discos, repetir o teste com seis outras unidades, omitindo
os discos. Ao fnal do teste, todas as cpsulas devem estar
completamente desintegradas.
5.1.4.2 TESTE DE DESINTEGRAO
DE SUPOSITRIOS, VULOS E
COMPRIMIDOS VAGINAIS
Este teste permite verifcar a maior ou menor capacidade
dessas formas farmacuticas de amolecerem ou se
desagregarem em meio lquido, no espao de tempo
prescrito.
Considera-se desintegrao completa quando o supositrio
ou vulo apresentar:
a) dissoluo completa;
b) separao completa de seus componentes, acumulando-
se substncias graxas fundidas na superfcie do lquido,
depositando-se os ps insolveis no fundo do recipiente e
dissolvendo-se os componentes solveis da amostra, sendo
que a distribuio dos componentes ocorre de um ou mais
dos modos descritos acima;
c) amolecimento da amostra que pode ser acompanhado
pela mudana da sua forma sem que ocorra separao
completa de seus componentes; o amolecimento deve ser
tal que, ao pressionar a amostra amolecida com basto de
vidro, no se perceba existncia de camada mais dura na
sua superfcie;
d) ruptura da cpsula gelatinosa de vulos, permitindo
liberao de seus componentes;
5
e) ausncia de resduo sobre o disco perfurado ou, quando
houver, tenha a consistncia de massa mole que no oferea
resistncia presso de basto de vidro.
APARELHAGEM
A aparelhagem (Figura 1) consiste de cilindro de vidro ou
plstico, transparente, com paredes de espessura apropriada,
em cujo interior se encontra preso, por trs ganchos de
metal, um dispositivo metlico que consiste de dois discos
perfurados de ao inoxidvel, contendo cada um 39 orifcios
de 4 mm de dimetro cada. O dimetro de cada disco
tal que permite a sua introduo no cilindro transparente,
fcando os discos afastados de, aproximadamente, 30 cm. A
determinao levada a efeito utilizando-se trs aparelhos,
contendo cada um uma nica amostra. Cada aparelho
introduzido no interior de bquer de, pelo menos, 4 litros de
capacidade, contendo gua temperatura de 36 C a 37 C,
a menos que indicado de maneira diferente na monografa
individual. O bquer provido de agitador que opere em
velocidade lenta e dispositivo que permita inverter o cilindro
sem retir-lo da gua.
Figura 1 Aparelho para teste de desintegrao de supositrios,
vulos e comprimidos vaginais (dimenses em mm).
PROCEDIMENTO
Supositrios e vulos
Utilizar trs supositrios ou vulos. Colocar cada um deles
sobre o disco inferior do dispositivo, introduzir e fxar o
disco no interior do cilindro. Inverter o aparelho a cada
10 minutos. Examinar as amostras depois de decorrido
o tempo prescrito na monografa. O teste considerado
satisfatrio se todas as amostras se apresentarem
desintegradas. O limite de tempo estabelecido como
critrio geral para a desintegrao de 30 minutos para
supositrios, vulos e comprimidos vaginais com base
hidrofbica, e de 60 minutos para supositrios com base
hidroflica, a menos que indicado de maneira diferente na
Comprimidos vaginais
Utilizar o aparelho descrito em Desintegrao de
supositrios e vulos, montado conforme Figura 2.
Introduzir o cilindro em bquer de dimetro adequado
contendo gua entre 36 C e 37 C que deve cobrir
uniformemente as perfuraes do disco. Utilizar trs
aparelhos, colocando em cada um deles um comprimido
vaginal sobre o disco superior. Cobrir o aparelho com
uma placa de vidro para assegurar a umidade adequada.
Examinar o estado de cada amostra depois de decorrido
o tempo prescrito na monografa. O teste considerado
satisfatrio se todas as amostras se apresentarem
desintegradas.
Figura 2 Aparelho para teste de desintegrao de
supositrios, vulos e comprimidos vaginais.
_______________
A, placa de vidro; B, comprimido vaginal;C, superfcie da gua; D, gua;
E, fundo do recipiente.
5.1.5 TESTE DE DISSOLUO
O teste de dissoluo possibilita determinar a quantidade de
substncia ativa dissolvida no meio de dissoluo quando
o produto submetido ao de aparelhagem especfca,
sob condies experimentais descritas. O resultado
expresso em porcentagem da quantidade declarada no
rtulo. O teste se destina a demonstrar se o produto atende
s exigncias constantes na monografa do medicamento
em comprimidos; cpsulas e outros casos em que o teste
seja requerido.
5
APARELHAGEM PARA OS MTODOS 1 E 2
O aparelho de dissoluo consiste de um sistema de trs
componentes, descritos a seguir.
(1) Recipientes abertos de forma cilndrica e fundo
hemisfrico (cubas), feitos em vidro boro silicato, plstico
ou outro material transparente e inerte, aos quais pode
ser adaptada tampa de material inerte, com aberturas
adequadas para o agitador, coleta de amostras e insero
de termmetro. As cubas podem apresentar as seguintes
dimenses e capacidades: 185 25 mm de altura e 102 4
mm de dimetro interno para uma capacidade nominal de
um litro; 290 10 mm de altura e 102 4 mm de dimetro
interno para uma capacidade nominal de dois litros; 290
10 mm de altura e 150 5 mm de dimetro interno para
uma capacidade nominal de quatro litros.
(2) Hastes em ao inoxidvel para prover agitao do meio,
que podem apresentar sob duas formas: cestas (Mtodo
1) ou ps (Mtodo 2) (Figuras 1 e 2). A haste deve ser
centralizada de tal forma que, ao ser acionada, seu eixo
de rotao no se afaste mais de 2 mm em relao ao eixo
vertical do recipiente contendo o meio de dissoluo.
(3) Um motor que possibilita ajustar a velocidade de rotao
da haste quela especifcada na monografa individual,
mantendo-a nos limites de 4%. A rotao no deve produzir
efeitos indesejveis na hidrodinmica do sistema.
As cubas so imersas em banho de gua termostatizado,
de material transparente e tamanho adequado, em que
a temperatura seja mantida a 37 C 0,5 C durante a
execuo do teste. O aparelho deve ser isento de qualquer
fonte de vibrao, inclusive externa, que possa infuir na
hidrodinmica do sistema. De preferncia, o aparelho deve
possibilitar a visualizao das amostras e dos agitadores
durante o teste.
Mtodo 1: Cestas
Quando especifcado na monografa, utiliza-se como
agitador uma haste de ao inoxidvel, em cuja extremidade
se adapta uma cesta do mesmo material (Figura 1). A tela
padro utilizada na confeco da cesta possui dimetro de
fo de 0,25 mm e abertura de malha quadrada de 0,40
0,04 mm (mesh 40), salvo especifcao em contrrio na
monografa individual. A amostra deve ser colocada dentro
da cesta seca, antes do incio do teste. Durante sua execuo,
uma distncia de 25 2 mm deve ser mantida entre a parte
inferior da cesta e o fundo interno do recipiente que contm
o meio de dissoluo.
Figura 1 Mtodo 1 (Cestas). A cesta e a cuba no esto na mesma proporo.
5
Mtodo 2: Ps
Quando especifcado na monografa, utiliza-se como
agitador uma haste de ao inoxidvel, revestida ou no de
material inerte, cuja extremidade apresenta a forma de p
(Figura 2), capaz de girar suavemente e sem desvio de eixo
durante o tempo e velocidade especifcados na monografa
correspondente. A amostra deve ser adicionada, sempre que
possvel, antes do incio do teste. Durante sua execuo,
uma distncia de 25 2 mm deve ser mantida entre o
extremo inferior das ps e o fundo interno do recipiente
que contm o meio de dissoluo.
importante que as amostras no futuem no meio de
dissoluo. Pode-se recorrer a um dispositivo apropriado,
confeccionado em fo de ao espiralado em poucas voltas
e em dimetro sufciente para a prisionar a cpsula ou o
comprimido sem deform-los nem reduzir a rea de contato
com o meio.
Figura 2 Mtodo 2 (Ps). A p e a cuba no esto na mesma proporo.
APARELHAGEM PARA O MTODO 3
Mtodo 3: Cilindros Alternantes
O aparelho de dissoluo para o Mtodo 3 consiste de
uma srie de frascos cilndricos de fundo plano; uma srie
de cilindros de vidro com sistema de fecho de material
inerte (ao inoxidvel ou outro material adequado) e telas
confeccionadas de material no adsorvente e no reativo,
destinadas a serem acopladas nas partes: superior e inferior
dos cilindros. Um motor e um dispositivo de encaixe dos
cilindros devem possibilitar movimento alternante vertical,
ascendente e descendente, dos cilindros nos frascos e,
tambm, propiciar deslocamento horizontal do cilindro
para outro frasco disposto em uma fla diferente.
Os frascos permanecem parcialmente imersos em um
banho de gua, de dimenses adequadas, que possibilita
a termo estatizao a 37 C 0,5 C durante o perodo de
ensaio. O aparelho deve estar isento de qualquer vibrao,
5
interna ou externa, que possa infuir no movimento suave
ascendente e descendente dos cilindros. O aparelho deve
possuir dispositivo de ajuste da velocidade de movimento
alternante, de acordo com o preconizado na monografa
individual, com variao mxima de 5%.
Preferentemente, o aparelho deve possibilitar a visualizao
dos cilindros e das amostras em anlise em seu interior. Os
frascos possuem tampa adequada, a qual deve permanecer
fxa durante a realizao do ensaio. Os componentes do
conjunto possuem as dimenses apresentadas na Figura
3, a menos que haja alguma especifcao diferenciada na
monografa.
Figura 3 Mtodo 3 (Cilindros alternantes).
As dimenses indicadas so em milmetros.
MEIO DE DISSOLUO
Utiliza-se o meio de dissoluo especifcado na monografa
do produto, previamente desgaseifcado por procedimento
conveniente, quando necessrio, para evitar a formao de
bolhas que possam interferir na velocidade de dissoluo
a ser medida. Quando o meio de dissoluo for soluo
tampo, o pH deve ser ajustado a 0,05 unidades do valor
do pH especifcado na monografa do produto.
TEMPO DE DISSOLUO
Quando um nico tempo for especifcado na monografa do
produto, ele representa o tempo mximo dentro do qual deve
ser dissolvida a quantidade mnima, em porcentagem, de
substncia ativa nela estabelecida. Quando mais de um tempo
for especifcado na monografa, devem ser tomadas alquotas,
adequadamente medidas, ao fnal de cada tempo indicado.
PROCEDIMENTO GERAL PARA OS MTODOS 1 E 2
Montar e verifcar a aparelhagem conforme especifcaes
mencionadas anteriormente, a fm de reduzir, ao mnimo,
fatores que alterem signifcativamente a hidrodinmica
do sistema (desvio de eixo, vibrao, etc.). Adicionar o
volume medido do Meio de dissoluo especifcado na
monografa do produto, convenientemente desgaseifcado,
caso necessrio, ao recipiente da aparelhagem de
dissoluo. Manter a temperatura do meio a 37 C 0,5
C, retirando o termmetro antes de iniciar a agitao.
No caso do Mtodo 1, colocar a amostra dentro da cesta
seca. No caso do Mtodo 2, colocar a amostra dentro do
recipiente de dissoluo, como descrito anteriormente.
Em ambos os casos, ao observar formao de bolhas na
superfcie das amostras, quando em contato com o meio
de dissoluo, verifcar sua infuncia no resultado. Iniciar
imediatamente a agitao, conforme velocidade pr-fxada.
Em intervalo(s) de tempo especifcado(s) na monografa do
produto, retirar alquota para anlise da regio intermdia
entre a superfcie do meio de dissoluo e a parte superior
do cesto ou ps, a no menos que 1 cm da parede interna do
recipiente (Figuras 1 e 2). Durante a retirada da alquota,
manter a agitao. Filtrar imediatamente as amostras,
caso no esteja utilizando fltros acoplados ao sistema de
amostragem. Os fltros empregados devem ser inertes,
no adsorver poro signifcativa do frmaco e possuir
porosidade adequada. De acordo com o especifcado na
monografa do produto, o volume de amostra retirado
pode ou no ser reposto. Se necessria a reposio, o
mesmo meio de dissoluo aquecido a 37 C deve ser
utilizado. Caso a reposio do meio de dissoluo no seja
realizada, corrigir o volume nos clculos. Aps fltrao e
diluio (quando necessrio) da alquota, a quantifcao
do frmaco efetuada mediante a tcnica indicada na
monografa do produto. Repetir o teste com doses unitrias
adicionais, conforme necessrio, considerando os Critrios
de aceitao.
Dissoluo de cpsulas: caso se obtenha resultado
insatisfatrio, repetir o teste da seguinte forma: quando o
meio de dissoluo for gua ou tampo com pH inferior a
6,8, utilizar o mesmo meio de dissoluo especifcado com
5
adio de pepsina purifcada com atividade de, no mximo,
750 000 unidades/ 1000 mL. Para meio de dissoluo com
pH igual ou superior a 6,8, adicionar pancreatina de, no
mximo, 1750 unidades de protease/ 1000 mL.
PROCEDIMENTO PARA FORMAS FARMACUTICAS
DE LIBERAO RETARDADA
Empregar o Mtodo A ou o Mtodo B ou o mtodo indicado
na monografa individual.
Mtodo A
Estgio cido: utilizar 750 mL de HCl 0,1 M como Meio
de dissoluo nas cubas quando empregando os Mtodos
1 e 2. Montar o aparelho de dissoluo conforme descrito
em Aparelhagem para os Mtodos 1 e 2 e adicionar uma
unidade de ensaio em cada cuba ou cesta, conforme o
caso. Proceder ao teste com a velocidade especifcada na
monografa por 2 horas. Ao fnal deste tempo, retirar uma
alquota do Meio de dissoluo e, imediatamente, executar
o Estgio tampo pH 6,8. Determinar a quantidade de
frmaco dissolvido na alquota amostrada, empregando
mtodo analtico adequado.
Estgio tampo pH 6,8: executar o preparo do estgio tampo
e ajuste do pH em 5 minutos. Com o aparelho de dissoluo
operando na velocidade especifcada para o produto,
adicionar ao Meio de dissoluo do Estgio cido 250 mL
de soluo de fosfato de sdio tribsico 0,20 M previamente
climatizado a 37 C 0,5 C. Ajustar, se necessrio, o pH
para 6,8 0,05 com HCl 2 M ou NaOH 2 M. Continuar
operando o aparelho de dissoluo por 45 minutos, ou o
tempo especifcado na monografa. Ao fnal deste tempo,
retirar alquota do Meio de dissoluo do Estgio tampo
pH 6,8 e determinar a quantidade de frmaco dissolvido,
empregando mtodo analtico adequado.
Mtodo B
Estgio cido: utilizar 1000 mL de HCl 0,1 M como Meio
de dissoluo nas cubas e montar o aparelho de dissoluo
conforme descrito em Aparelhagem para os Mtodos 1
e 2. Adicionar uma unidade de ensaio em cada cuba ou
cesta, conforme o caso. Proceder ao teste com a velocidade
especifcada na monografa por 2 horas. Ao fnal desse
tempo, retirar uma alquota do Meio de dissoluo e,
imediatamente, executar o Estgio tampo pH 6,8.
Determinar a quantidade de frmaco dissolvido na alquota
amostrada, empregando mtodo analtico adequado.
Estgio tampo pH 6,8: empregar tampo fosfato pH 6,8
previamente climatizado a 37 C 0,5 C. Drenar o meio de
dissoluo do Estgio cido das cubas e adicionar 1000 mL de
meio de dissoluo tampo fosfato pH 6,8. Como alternativa
pode-se remover cada cuba com o meio do Estgio cido do
aparelho de dissoluo e substituir por outra cuba com o meio
do Estgio tampo pH 6,8, transferindo cuidadosamente a
unidade de ensaio do medicamento em teste. Continuar
operando o aparelho de dissoluo por 45 minutos, ou o
tempo especifcado na monografa. Ao fnal desse tempo,
retirar alquota do meio de dissoluo do Estgio tampo
pH 6,8 e determinar a quantidade de frmaco dissolvido,
empregando mtodo analtico adequado. O tampo pH 6,8
pode ser preparado pela mistura de 3 volumes de HCl 0,1 M
e 1 volume de soluo de fosfato de sdio tribsico 0,20 M,
ajustando, se necessrio, o pH para 6,8 0,05 com HCl 2 M
ou NaOH 2 M.
PROCEDIMENTO PARA O MTODO 3
Formas farmacuticas de liberao imediata: empregando
o Mtodo 3, adicionar o volume do Meio de dissoluo
especifcado na monografa do produto em cada frasco
do aparelho, dispor os frascos no banho do instrumental
para climatizar a 37 C 0,5 C e remover os termmetros
antes de iniciar o teste. Colocar uma unidade de dosagem
da amostra em cada um dos seis cilindros alternantes,
evitando a formao de bolhas de ar na superfcie do
material, e, imediatamente, iniciar a operao do aparelho
de acordo com o especifcado na monografa individual do
produto. Durante o movimento ascendente e descendente
dos cilindros, a amplitude em altura deve situar-se entre
9,9 e 10,1 cm. No(s) intervalo(s) de tempo especifcado(s)
na monografa individual, erguer os cilindros e amostrar
uma alquota do Meio de dissoluo de cada frasco, da
regio intermdia entre a superfcie do lquido e o fundo
do frasco. Aps fltrao e diluio (quando necessrio) da
alquota, realizar anlise quantitativa do frmaco dissolvido
de acordo com o preconizado na monografa individual
do produto. Se necessrio, repetir o teste com unidades
adicionais do medicamento. Repor o volume de meio
amostrado com igual volume de Meio de dissoluo fresco
mantido a 37 C ou, em situaes onde comprovadamente
no seja necessria a reposio do meio, efetuar a correo
da alterao do volume durante os clculos. Manter os
frascos cobertos com suas respectivas tampas durante a
execuo do teste e verifcar periodicamente a temperatura
do meio. Para o meio e o tempo de dissoluo seguir as
orientaes gerais indicadas em Meio de dissoluo e
Tempo de dissoluo.
Formas farmacuticas de liberao prolongada:
empregando o Mtodo 3, executar o procedimento
conforme descrito em Formas farmacuticas de liberao
imediata e seguir as orientaes gerais indicadas em Meio
de dissoluo e Tempo de dissoluo. Os tempos so
expressos em horas e normalmente so indicados pelo
menos 3 intervalos de tempo.
Formas farmacuticas de liberao retardada:
empregando o Mtodo 3, tomar como base o procedimento
indicado em Mtodo B para Formas farmacuticas de
liberao retardada, empregando uma fla de frascos para
o Estgio cido e a fla sucessiva de frascos para o estgio
com soluo tampo pH 6,8, adicionando o volume de
meio especifcado na monografa (usualmente 300 mL). Os
tempos de coleta so os especifcados na monografa ou os
gerais indicados em Mtodo B para Formas farmacuticas
de liberao retardada.
5
CRITRIOS DE ACEITAO PARA FORMAS FARMACUTICAS DE LIBERAO IMEDIATA
O produto cumpre o teste se os resultados atenderem as exigncias descritas na Tabela 1, salvo especifcao em contrrio
na monografa individual.
Tabela 1 Critrios de aceitao para o teste de dissoluo de formas farmacuticas de liberao imediata.
Estgios
N de amostras
testadas
Critrios de aceitao
E
1
06 Cada unidade apresenta resultado maior ou igual a Q + 5%
E
2
06
Mdia de 12 unidades (E
1
+ E
2
) igual ou maior que Q e nenhuma unidade apresenta
resultado inferior a Q 15%.
E
3
12
Mdia de 24 unidades (E
1
+ E
2
+ E
3
) igual ou maior do que Q, no mais que duas
unidades apresentam resultados inferiores a Q 15% e nenhuma unidade apresenta
inferior a Q 15%, o produto est em conformidade com
o especifcado, no sendo necessrio efetuar o Estgio E
3
.
Estgio E
3
Caso o critrio para o Estgio E
2
ainda no seja atendido,
repetir o teste com mais 12 unidades. Se a mdia das 24
unidades testadas (Estgios E
1
, E
2
e E
3
) maior ou igual a Q,
no mximo duas unidades apresentam resultados inferiores
a Q 15% e nenhuma unidade apresentar resultado
inferior a Q 25%, o produto est em conformidade com
o especifcado. Caso o critrio para o Estgio E
3
ainda no
seja atendido, o produto considerado insatisfatrio.
CRITRIOS DE ACEITAO PARA FORMAS
FARMACUTICAS DE LIBERAO PROLONGADA
O produto cumpre o teste se os resultados preencherem as
exigncias apresentadas na Tabela 2, salvo especifcao
em contrrio na monografa individual. Os termos Q1 e Q2
correspondem quantidade mnima e mxima de frmaco
dissolvido em cada intervalo de tempo especifcado na
monografa, expressos como porcentagem da quantidade
declarada. No ltimo tempo a especifcao pode ser
apresentada apenas com um valor de Q mnimo. Os
termos L
1
, L
2
e L
3
referem-se aos trs possveis estgios de
avaliao da liberao (L).
O termo Q corresponde quantidade dissolvida de
frmaco, especifcada na monografa individual, expressa
como porcentagem da quantidade declarada. Os valores
5%, 15% e 25% tambm representam porcentagens da
quantidade declarada.
Em circunstncias especiais, a porcentagem mxima de
dissoluo deve ser estabelecida experimentalmente.
Nesses casos, assegurar um valor de Q (quantidade
dissolvida em tempo infnito) verifcando que duas
dosagens consecutivas no diferem entre si mais de 2%
aps 10 minutos.
Estgio E
1
No Estgio E
1
so testadas seis unidades. Se cada unidade,
individualmente, apresentar resultado igual ou maior
do que Q + 5%, o produto est em conformidade com o
especifcado, no sendo necessrio efetuar o Estgio E
2
.
Estgio E
2
Caso o critrio para o Estgio E
1
no seja atendido, repetir
o teste com mais seis unidades. Se a mdia das doze
unidades testadas (Estgios E
1
e E
2
) maior ou igual a Q
e, se nenhuma das unidades testadas apresentar resultado
5
Tabela 2 - Critrios de aceitao para o teste de dissoluo (liberao) realizado para formas farmacuticas de liberao prolongada.
Estgios
N
o
de unidades
testadas
Critrios de aceitao
L
1
6 Cada resultado individual se insere no intervalo estabelecido (Q1 e Q2) para cada
determinado tempo e nenhum resultado individual inferior ao Q do ltimo tempo.
L
2
6 A mdia de 12 unidades (E
1
+ E
2
) se insere no intervalo estabelecido (Q1 e Q2) para
cada determinado tempo e no inferior ao Q do ltimo tempo.
Nenhuma unidade individual apresenta resultado que supera os limites de Q1 e Q2
em 10% da quantidade declarada, para cada determinado tempo, e nenhum resultado
individual fornece valor inferior ao Q do ltimo tempo que supera em 10% a quantidade
declarada.
L
3
12 A mdia de 24 unidades (E
1
+ E
2
+ E
3
) se insere no intervalo estabelecido (Q1 e Q2) para
cada determinado tempo e no inferior ao Q do ltimo tempo.
No mais que 2 unidades das 24 testadas apresentam resultados que superam os limites
de Q1 e Q2 em 10% da quantidade declarada, para cada determinado tempo, e no mais
que 2 unidades das 24 testadas apresentam resultados com valor inferior ao Q do ltimo
tempo que superem em 10% a quantidade declarada.
Nenhuma unidade individual apresenta resultado que supera os limites de Q1 e Q2
em 20% da quantidade declarada, para cada determinado tempo, e nenhum resultado
individual fornece valor inferior ao Q do ltimo tempo que supera em 20% a quantidade
declarada.
salvo especifcao em contrrio na monografa individual.
Empregar o valor de Q indicado na monografa do produto
e, quando no especifcado, empregar 75% como valor de Q
no Estgio tampo pH 6,8. Os termos A
1
, A
2
e A
3
referem-
se aos trs possveis estgios de avaliao no Estgio cido
(A) e os termos B
1
, B
2
e B
3
referem-se aos trs possveis
estgios de avaliao no Estgio tampo pH 6,8 (B).
CRITRIOS DE ACEITAO PARA FORMAS
FARMACUTICAS DE LIBERAO RETARDADA
O produto cumpre o teste se os resultados preencherem
as exigncias apresentadas na Tabela 3 no Estgio cido
(Mtodos A ou B) e, tambm, as exigncias indicadas na
Tabela 4 no Estgio tampo pH 6,8 (Mtodos A ou B),
Tabela 3 - Critrios de aceitao para o Estgio cido do teste de dissoluo (Mtodos
A ou B) realizado para Formas farmacuticas de liberao retardada.
Estgios
N
o
de unidades
testadas
Critrios de aceitao
A
1
06 Nenhuma unidade individual apresenta quantidade dissolvida superior a 10%
do declarado.
A
2
06 A mdia de 12 unidades no superior a 10% do declarado e nenhuma unidade
individual apresenta quantidade dissolvida superior a 25% do declarado.
A
3
12 A mdia de 24 unidades no superior a 10% do declarado e nenhuma unidade
individual apresenta quantidade dissolvida superior a 25% do declarado.
5
Tabela 4 Critrios de aceitao para o Estgio tampo pH 6,8 do teste de dissoluo (Mtodos
A ou B) realizado para Formas farmacuticas de liberao retardada.
Estgios
N
o
de unidades
testadas
Critrios de aceitao
B
1
06 Cada unidade apresenta resultado maior ou igual a Q + 5%
B
2
06 Mdia de 12 unidades (B
1
+ B
2
) igual ou maior que Q e nenhuma unidade apresenta
B
3
12 Mdia de 24 unidades (B
1
+ B
2
+ B
3
) igual ou maior do que Q, no mais que duas
unidades apresentam resultados inferiores a Q 15% e nenhuma unidade apresenta
s formas farmacuticas com um nico frmaco ou com
mais de um componente ativo. A menos que indicado
de maneira diferente na monografa individual, o teste
se aplica, individualmente, a cada componente ativo do
produto.
A uniformidade das doses unitrias de formas farmacuticas
pode ser avaliada por dois mtodos: Variao de peso e
Uniformidade de Contedo. A aplicao de cada mtodo
considerando a forma farmacutica, dose e proporo do
frmaco apresentada na Tabela 1.
5.1.6 UNIFORMIDADE DE
DOSES UNITRIAS
Para assegurar a administrao de doses corretas, cada
unidade do lote de um medicamento deve conter quantidade
do componente ativo prxima da quantidade declarada. O
teste de uniformidade de doses unitrias permite avaliar a
quantidade de componente ativo em unidades individuais
do lote e verifcar se esta quantidade uniforme nas
unidades testadas. As especifcaes deste teste se aplicam
Tabela 1 Aplicao do mtodo de Uniformidade de Contedo (UC) ou de Variao de
peso (VP) de acordo com a forma farmacutica, dose e proporo do frmaco.
Forma Farmacutica Tipo Subtipo
Dose e proporo
do frmaco
25 mg e
25%
< 25 mg ou
< 25%
Comprimidos no revestidos VP UC
revestidos flme VP UC
outros UC UC
Cpsulas duras VP UC
moles suspenses, emulses ou gis UC UC
solues VP VP
Slidos acondicionados
em recipientes
para dose nica
componente nico VP VP
mltiplos componentes soluo lioflizada no
recipiente fnal
VP VP
outros UC UC
Solues acondicionadas
em recipientes
para dose nica
VP VP
Outros UC UC
O mtodo de Uniformidade de Contedo para preparaes
em doses unitrias baseia-se no doseamento do contedo
individual do componente ativo de um nmero de doses
unitrias para determinar se o contedo individual est
dentro dos limites especifcados. O mtodo de Uniformidade
de Contedo pode ser aplicado em todos os casos.
O mtodo de Variao de peso pode ser aplicado s
seguintes formas farmacuticas:
1. solues acondicionadas em recipientes para dose nica
e em cpsulas moles;
5
2. slidos (incluindo ps, grnulos e slidos estreis)
acondicionados em recipientes para dose nica que no
contm outras substncias adicionadas, sejam elas ativas
ou inativas;
3. slidos (incluindo slidos estreis) acondicionados em
recipientes para dose nica, contendo ou no substncias
ativas ou inativas adicionadas, que tenham sido preparados
a partir de solues homogneas lioflizadas nos recipientes
fnais, e sejam rotulados de modo a indicar este modo de
preparao;
4. cpsulas duras, comprimidos no revestidos ou revestidos
com flme, contendo 25 mg ou mais da substncia ativa
compreendendo 25% ou mais, em peso, da dose unitria
ou, no caso de cpsulas duras, o contedo da cpsula,
exceto que a uniformidade de outras substncias ativas
presentes em menores propores deve ser demonstrada
pelo mtodo de Uniformidade de Contedo.
O mtodo de Uniformidade de Contedo exigido
para todas as formas farmacuticas que no atendem s
condies especifcadas para aplicao do mtodo de
Variao de peso.
UNIFORMIDADE DE CONTEDO
Para determinar a uniformidade de doses unitrias
pelo mtodo de uniformidade de contedo separar, no
mnimo, 30 unidades e proceder conforme descrito para
as formas farmacuticas indicadas. Quando a quantidade
de componente ativo de uma dose unitria for diferente do
especifcado no doseamento, fazer os ajustes de diluio
das solues e/ou o volume das alquotas de modo a obter
a concentrao do componente ativo na soluo fnal
semelhante do doseamento. No caso de doseamento por
titulao, utilizar titulante com concentrao diferente, se
necessrio, para consumo de volume adequado de titulante.
Considerar qualquer modifcao das diluies para efetuar
os clculos.
Quando houver procedimento especial para o teste de
uniformidade de contedo na monografa individual, fazer
a correo necessria dos resultados obtidos conforme
descrito a seguir.
1. Pesar quantidade de unidades do produto sufciente para
efetuar o doseamento e o procedimento especial do teste
de uniformidade de contedo apresentados na monografa
individual. Reduzir os comprimidos a p fno (ou misturar
os contedos das cpsulas, solues, suspenses, emulses,
gis ou slidos em recipientes para dose nica) para obter
mistura homognea. Se no for possvel obter mistura
homognea desta forma, usar solventes apropriados ou
outros procedimentos para obter soluo contendo o
frmaco. Empregar alquotas apropriadas desta soluo
para os ensaios especifcados.
2. Analisar, separadamente, pores da amostra, medidas
com preciso, conforme o procedimento indicado para o
doseamento (D) e o procedimento especial indicado para
uniformidade de contedo (E), descritos na monografa
individual.
3. Calcular a quantidade de frmaco por peso mdio
utilizando os resultados obtidos pelo procedimento de
doseamento (D) e pelo procedimento especial (E).
4. Calcular o fator de correo (F) segundo a equao:
F = D/E
em que
D = quantidade do componente ativo por peso mdio
da forma farmacutica obtida pelo procedimento de
doseamento;
E = quantidade do componente ativo por peso mdio da
forma farmacutica obtida pelo procedimento especial.
Se (100|D E|)/D for superior a 10, no vlido o uso de F.
1. Se F estiver entre 0,970 e 1,030, no h necessidade de
correo.
2. A correo ser aplicada quando o valor de F estiver
entre 0,900 e 0,970 e entre 1,030 e 1,100 e deve ser efetuada
calculando-se a quantidade do frmaco em cada unidade,
multiplicando-se as quantidades obtidas no procedimento
especial pelo fator de correo F.
Formas farmacuticas slidas
Analisar, individualmente, 10 unidades conforme indicado na
monografa individual para o doseamento, a menos que um
procedimento especial para uniformidade de contedo seja
descrito na monografa. Calcular o Valor de Aceitao (VA).
Formas farmacuticas lquidas
Analisar, individualmente, 10 unidades conforme indicado
na monografa individual para o doseamento, a menos
que um procedimento especial para uniformidade de
contedo seja descrito na monografa. Conduzir o teste,
individualmente, em quantidade homognea do material
que removida de cada recipiente em condies normais
de uso. Expressar o resultado como quantidade dispensada
por unidade. Calcular o Valor de Aceitao (VA).
Valor de Aceitao para Uniformidade de Contedo
Calcular o Valor de Aceitao (VA) segundo a equao:
cujos termos so defnidos na Tabela 2.
VARIAO DE PESO
Para determinar a uniformidade de doses unitrias pelo
mtodo de variao de peso separar, no mnimo, 30 unidades
e proceder conforme descrito para as formas farmacuticas
indicadas. A quantidade de frmaco por unidade
estimada a partir do resultado do doseamento e dos pesos
individuais, assumindo-se distribuio homognea do
componente ativo. As quantidades individuais estimadas
(x
i
) so calculadas segundo a equao:
x
i
= p
i
A/P
5
em que
p
i
= pesos individuais das unidades ou dos contedos das
unidades testadas;
A = quantidade de componente ativo, expressa em
porcentagem da quantidade declarada, determinada no
doseamento;
P = peso mdio das unidades utilizadas no doseamento.
Comprimidos no revestidos ou revestidos com flme
Pesar, exatamente e individualmente, 10 comprimidos. A
partir do resultado do doseamento e do peso individual de
cada comprimido, estimar a quantidade de componente
ativo em cada unidade e expressar os resultados individuais
em porcentagem da quantidade declarada. Calcular o Valor
de Aceitao (VA).
Cpsulas duras
Pesar, exatamente e individualmente, 10 cpsulas,
preservando a identidade de cada uma. Remover,
cuidadosamente, o contedo e pesar as cpsulas vazias.
Calcular o peso do contedo de cada cpsula e, a partir
do resultado do doseamento, estimar a quantidade de
componente ativo em cada cpsula. Expressar os resultados
individuais em porcentagem da quantidade declarada.
Calcular o Valor de Aceitao (VA).
Cpsulas moles
Pesar, exatamente e individualmente, 10 cpsulas,
preservando a identidade de cada uma. Cortar as cpsulas
com lmina e retirar o contedo, lavando os invlucros com
solvente adequado. Deixar os invlucros temperatura
ambiente, por 30 minutos, para completa evaporao do
solvente, tomando precaues para evitar adio ou perda
de umidade. Pesar as cpsulas vazias e calcular o peso
do contedo de cada cpsula. Estimar a quantidade de
componente ativo em cada cpsula a partir do resultado
do doseamento e do peso do contedo de cada cpsula.
Calcular o Valor de Aceitao (VA).
Formas farmacuticas slidas (exceto comprimidos e
cpsulas)
Proceder como indicado em Cpsulas duras. Calcular o
Valor de Aceitao.
Formas farmacuticas lquidas
Pesar, exatamente e individualmente, a quantidade de
lquido que removida de cada um de 10 recipientes em
condies normais de uso. Se necessrio, calcular o volume
equivalente do contedo removido aps a determinao da
densidade. Estimar a quantidade de componente ativo em
cada recipiente a partir do resultado do doseamento e do
peso do contedo removido dos recipientes individuais.
Calcular o Valor de Aceitao.
Valor de Aceitao para Variao de Peso
Calcular o Valor de Aceitao conforme descrito em Valor
de Aceitao para Uniformidade de Contedo, exceto
que as quantidades individuais de componente ativo nas
unidades so substitudas pelas quantidades individuais
estimadas.
CRITRIOS
Aplicar os critrios a seguir, tanto para Uniformidade
de Contedo como para Variao de peso, a menos que
Formas farmacuticas slidas e lquidas
O produto cumpre o teste de uniformidade de doses
unitrias se o Valor de Aceitao calculado para as 10
primeiras unidades testadas no maior que L1. Se o Valor
de Aceitao for maior que L1, testar mais 20 unidades e
calcular o Valor de Aceitao. O produto cumpre o teste de
uniformidade de doses unitrias se o Valor de Aceitao
fnal calculado para as 30 unidades testadas no maior
que L1 e a quantidade de componente ativo de nenhuma
unidade individual menor que (1 L2 0,01)M ou maior
que (1 + L2 0,01)M. A menos que indicado de maneira
diferente na monografa individual, L1 15,0 e L2 25,0.
5
Tabela 2 Termos e expresses para o clculo do Valor de Aceitao (VA).
Varivel Defnio Condies Valores
X
Mdia dos contedos
individuais (x
1
, x
2
,..., x
n
),
expressa como porcentagem
da quantidade declarada.
x
1
, x
2
,..., x
n
Contedos individuais das
unidades testadas, expressos
como porcentagem da
quantidade declarada.
n Nmero de unidades testadas
k Constante de aceitabilidade Se n = 10, ento k = 2,4
Se n = 30, ento k = 2,0
s Desvio padro da amostra
M a ser utilizado
quando
T 101,5 (caso 1)
Valor de referncia Se 98,5% X 101,5%, ento
Se X < 98,5%, ento
Se X > 101,5%, ento % 5 , 101 = M
M a ser utilizado
quando
T > 101,5 (caso 2)
Valor de referncia Se 98,5 X T, ento X M =
Se X < 98,5%, ento
Se X > T, ento
T M =
Valor de
Aceitao (VA)
Frmula geral:
Os clculos so especifcados
acima para os diferentes casos
L1 Valor mximo permitido
para o valor de aceitao
L1 = 15,0 a menos
que especifcado de
forma diferente na
monografa individual
L2 Desvio mximo permitido para
cada unidade testada em relao
ao valor de M utilizado nos
clculos do valor de aceitao.
Nenhum resultado individual
menor que
(1 L2 0,01)M ou maior
que (1 + L2 0,01)M
L2 = 25,0 a menos
que especifcado de
forma diferente na
monografa individual
T Mdia dos limites especifcados
na monografa individual para a
quantidade ou potncia declarada,
expressa em porcentagem.
T igual a 100% a menos que
outro valor tenha sido aprovado
por razes de estabilidade; nestes
casos, T maior que 100%.
|M-X|+ks
5
5.1.7 CONTAMINAO POR
PARTCULAS
5.1.7.1 PARTCULAS SUB-VISVEIS
A contaminao de injetveis por partculas a presena
de materiais insolveis, estranhos e mveis que no sejam
bolhas de ar.
As especifcaes exigidas para as preparaes
farmacuticas encontram-se descritas nas monografas
especfcas.
A contaminao, por partculas, das preparaes para uso
parentrico e das preparaes para perfuso constituda
de partculas estranhas no solveis e mveis, alm das
bolhas de gs que se encontram, involuntariamente, nessas
preparaes. Para a determinao da contaminao por
partculas especifcam-se a seguir 2 mtodos: mtodo
1 (ensaio de contagem de partculas por bloqueio da
luz) e mtodo 2 (ensaio de contagem de partculas por
microscopia ptica). Para a determinao de partculas
no visveis nas preparaes injetveis e nas preparaes
para perfuso utilize de preferncia o mtodo 1. Em
determinadas preparaes, entretanto, pode ser necessrio
realizar ensaios de contagem de partculas por bloqueio da
luz em primeiro lugar e s depois por microscopia ptica
para poder concluir quanto conformidade dos resultados
obtidos.
A pesquisa das partculas no visveis efetuada aplicando
um destes mtodos, ou mesmo os dois, no possvel para
todas as preparaes injetveis. Quando o mtodo 1 no
aplicvel, por exemplo no caso das preparaes pouco
lmpidas ou muito viscosas, o ensaio realizado pelo
mtodo 2 (caso das emulses, das solues coloidais e das
preparaes de lipossomas). Do mesmo modo, um ensaio
de contagem de partculas por microscopia ptica pode
igualmente ser exigido no caso de produtos que formem
bolhas de ar ou de gs quando passam atravs do detector.
Se a viscosidade da preparao tal que o exame por um
ou outro dos mtodos impossvel, pode efetuar-se uma
diluio quantitativa com um diluente apropriado de modo
a reduzir a viscosidade at o grau considerado sufciente
para permitir o ensaio.
Os resultados obtidos quando se examina uma unidade
ou um grupo de unidades no pode ser extrapolado
com confabilidade a outras unidades que no foram
analisadas. Por consequncia, convm estabelecer planos
de amostragem estatisticamente vlidos se quiser tirar
concluses vlidas, a partir dos dados recolhidos, para
determinar o grau de contaminao particulado de um
grande grupo de unidades.
A gua utilizada nos ensaios livre de partculas. gua livre
de partculas pode ser obtida por fltrao em membrana de
porosidade de 0,22 m.
MTODO 1 CONTAGEM DE PARTCULAS POR
BLOQUEIO DA LUZ
Equipamento
Utilizar contador de partculas com funcionamento
baseado no princpio de bloqueio de luz que possibilite
a determinao do tamanho das partculas e seu nmero
conforme suas dimenses.
Calibrao
Calibrar o equipamento com o auxlio de partculas
esfricas padres de tamanho compreendido entre 10 a 25
m. Essas partculas padres so dispersas em gua livre
de partculas. Evitar a agregao das partculas durante a
disperso.
Precaues
Realizar o teste em condies de contaminao limitada,
preferencialmente, em capela de fuxo laminar. Lavar
a vidraria e o equipamento de fltrao utilizado, com
exceo das membranas fltrantes, com soluo detergente
morna e enxaguar com gua at que todo o detergente
seja removido. Imediatamente antes do uso, enxaguar o
equipamento da parte superior para a inferior, interna e
externamente com gua livre de partculas.
Observar para no introduzir bolhas de ar na amostra a
ser analisada, especialmente quando alquotas de amostra
esto sendo transferidas para o acessrio de leitura.
Para verifcar a adequabilidade do ambiente, da vidraria
e da gua utilizada, efetuar a contagem de partculas
em cinco amostras de 5 mL de gua livre de partculas,
de acordo com o mtodo descrito nesse captulo. Caso o
nmero de partculas maiores do que 10 m exceder a 25,
para o volume total de 25 mL, o ambiente no apresenta
condies para realizar o teste.
Procedimento
Homogeneizar a amostra por meio de 25 inverses
consecutivas lentas e suaves do recipiente. Eliminar as
bolhas deixando a amostra em repouso por 2 minutos.
Transferir quatro pores no menores que 5 mL, e
determinar o nmero de partculas com tamanho igual ou
maior que 10 e 25 m. Desconsiderar o resultado obtido
com a primeira alquota, e calcular o nmero mdio de
partculas para a amostra sob exame.
Avaliao
Empregar o teste A, teste B ou teste C, assim como, o
nmero de amostras, conforme indicado na monografa
especfca, da forma farmacutica.
Teste A - Solues para injetveis em recipientes, com volume
declarado, maior que 100 mL. A amostra cumpre o teste se
o nmero mdio de partculas, com tamanho igual ou maior
5
que 10 m, presentes nas unidades testadas no exceda 25
partculas por mL e o nmero de partculas com tamanho
iguais ou maiores que 25 m no exceda a 3 por mL.
Teste B - Solues para injetveis em recipientes, com
volume declarado, igual ou menor que 100 mL. A amostra
cumpre o teste se o nmero mdio de partculas, com
tamanho igual ou maior que 10 m, presentes nas unidades
testadas no exceda 6 000 partculas por recipiente e o
nmero de partculas com tamanho iguais ou maiores que
25 m no exceda a 600 partculas por recipiente.
Teste C - Ps para injetveis em recipientes, com volume
declarado, igual ou menor que 100 mL. A amostra
reconstituda com gua ou diluente apropriado livre de
partculas cumpre o teste se o nmero mdio de partculas,
com tamanho iguais ou maiores que 10 m, presentes
nas unidades testadas no exceda 10 000 partculas por
recipiente e o nmero de partculas com tamanho igual
ou maiores que 25 m no exceda a 1000 partculas por
recipiente.
MTODO 2 CONTAGEM DE PARTCULAS POR
MICROSCOPIA
Equipamento
Utilize um microscpio binocular apropriado, um
dispositivo de fltrao para reter a contaminao particular
e uma membrana fltrante. O microscpio equipado com
um micrmetro ocular calibrado, com um micrmetro de
objetiva, uma platina de movimentos cruzados capaz de
manter e de atravessar toda a superfcie de fltrao da
membrana fltrante, dois iluminadores apropriados que
permitem iluminao episcpica e iluminao oblqua,
ajustado para ampliao de 100 10 vezes.
O micrometro ocular um retculo circular e compreende
um grande crculo dividido em quadrantes, por linhas
cruzadas, crculos de referncia pretos e transparentes de
dimetro de 10 m e de 25 m com um aumento de 100
e uma escala linear graduada de 10 em 10 m (Figura 1).
O grande crculo denominado campo de viso do
retculo. So necessrios dois iluminadores, um iluminador
episcpico para fundo claro, interno do microscpio, e
um iluminador auxiliar externo regulvel, ajustvel para
permitir uma iluminao oblqua refetida segundo um
ngulo de 10-20. O dispositivo de fltrao destinado a
reter a contaminao particular compreende um suporte de
fltro de vidro ou outro material conveniente, uma fonte de
vcuo e uma membrana fltrante adequada. A membrana
fltrante, de dimenses apropriadas, de cor preta ou cinza
escura; coberta ou no com uma grelha e o tamanho dos
poros inferior ou igual a 1,0 m.
Figura 1 - Retculo circular.
Calibrao
calibrado com um micrometro de objetiva certifcado
por uma organizao internacional ou nacional de
normalizao. aceitvel um erro relativo de 2% para a
escala linear do retculo.
Precaues gerais
Realizar o teste em condies de contaminao limitada,
preferencialmente, em capela de fuxo laminar. Lavar
a vidraria e o equipamento de fltrao utilizado, com
exceo das membranas fltrantes, com soluo detergente
morna e enxaguar com gua at que todo o detergente seja
removido. Imediatamente antes do uso, lave os dois lados
da membrana fltrante enxaguar o equipamento da parte
superior para a inferior, interna e externamente com gua
livre de partculas.
Para verifcar a adequabilidade do ambiente, da vidraria e
da gua utilizada, efetuar a contagem de partculas em 50
mL de gua livre de partculas, de acordo com o mtodo
5
descrito neste captulo. Caso o nmero de partculas de 10
m ou maiores exceder a 20, ou se mais de 5 partculas de
25 m ou maiores estiverem presentes , o ambiente no
apresenta condies para realizar o teste.
Procedimento
Homogeneizar a amostra por meio de 25 inverses
consecutivas lentas e suaves do recipiente. Se necessrio,
retire com cuidado o dispositivo de fechamento. Lave as
superfcies exteriores da abertura do frasco com um jato
de gua isenta de partculas e retire o fechamento evitando
qualquer contaminao do contedo.
No caso das preparaes parenterais de grande volume,
efetue o ensaio em unidades separadas. No caso de
preparaes parenterais de grande volume ou de pequeno
volume igual ou superior a 25 mL, podem ser sufcientes
para o ensaio menos de 10 embalagens de acordo com um
plano de amostragem apropriado. Quanto s preparaes
parenterais de pequeno volume, cujo volume seja inferior
a 25 mL rena o contedo de 10 unidades ou mais num
recipiente limpo de modo a obter um volume mnimo de
25 mL; em casos justifcados e autorizados, a soluo
problema pode ser preparada misturando o contedo de
um nmero apropriado de frascos e completando 25 mL
com gua isenta de partculas R ou um solvente apropriado
isento de contaminao particular, quando a gua isenta de
partculas R no for apropriada. As preparaes parenterais
de pequeno volume cujo volume for superior ou igual a 25
mL podem ser examinadas individualmente.
No caso dos ps para uso parenteral, reconstitua a
preparao com gua isenta de partculas ou um solvente
apropriado isento de contaminao particular, quando a
gua isenta de partculas no for apropriada.
Umedecer o interior do suporte do fltro munido da
membrana fltrante com alguns mililitros de gua isenta
de partculas. Passe para o fltro a totalidade da amostra
(mistura das tomadas de ensaio ou a unidade em ensaio)
e aplique o vcuo. Se necessrio, junte, pouco a pouco,
pores da soluo at que o volume total seja fltrado.
Aps a ltima adio, comece a lavagem das paredes
internas do suporte do fltro utilizando um jato de gua
isenta de partculas. Mantenha o vcuo at que a superfcie
da membrana fltrante fque isenta de lquido.
Coloque o fltro numa placa de Petri e seque ao ar deixando
a placa ligeiramente aberta. Quando o fltro estiver seco,
coloque a placa de Petri na platina do microscpio, efetue a
varredura de toda a membrana fltrante sobre a luz refetida
do iluminador e conte o nmero de partculas de tamanho
superior ou igual a 10 m e o nmero de partculas de
tamanho superior ou igual a 25 m. igualmente possvel
efetuar contagem parcial e determinar por clculo o nmero
total de partculas retidas no fltro. Calcule o nmero
mdio de partculas presentes na amostra. Para determinar
o tamanho das partculas com auxlio do retculo circular,
proceda transformao da imagem de cada partcula num
crculo e depois compare-a com os crculos de referncia
do retculo de 10 m e de 25 m. Assim, as partculas
mantm a sua posio inicial no interior do campo de
viso do retculo e no se sobrepem aos crculos de
referncia para fns de comparao. O dimetro interior
dos crculos de referncia transparentes do retculo
utilizado para determinar o tamanho das partculas brancas
ou transparentes enquanto que o tamanho das partculas
escuras determinado com o dimetro exterior dos crculos
de referncia pretos e opacos do retculo. Quando realizar
um ensaio de contagem de partculas ao microscpio no
procure medir ou enumerar matrias amorfas, semi-lquidas
ou morfologicamente indistintas que se assemelham a uma
mancha ou zona descorada da membrana fltrante. Estes
materiais podem apresentar um brilho fraco ou nulo e
assumir aspecto gelatinoso ou a aparncia de uma pelcula.
A interpretao da avaliao pode ser facilitada realizando
um ensaio de contagem das partculas por reteno da luz
sobre uma amostra da soluo.
Avaliao
Empregar os critrios abaixo, de acordo com o volume das
amostras ou conforme indicado na monografa especfca,
da forma farmacutica.
Nas preparaes acondicionadas em recipientes de
contedo nominal superior a 100 mL, a preparao satisfaz
ao ensaio se o nmero mdio de partculas presentes nas
unidades examinadas no for superior a 12 por mililitro
para as partculas de tamanho superior ou igual a 10 m
e no exceder de 2 partculas por mililitro para as de
tamanho superior ou igual a 25 m.
Nas preparaes acondicionadas em recipientes de
contedo nominal igual ou inferior a 100 mL, a preparao
satisfaz ao ensaio se o nmero mdio de partculas
presentes nas unidades examinadas no for superior a 3000
por recipiente para as partculas de tamanho superior ou
igual a 10 m e a 300 por recipiente para as partculas de
tamanho superior ou igual a 25 m.
5.1.7.2 PARTCULAS VISVEIS
A contaminao por partculas das preparaes injetveis e
das preparaes injetveis para perfuso constituda por
partculas estranhas, no dissolvidas e mveis, alm das
bolhas de gs, e que se encontram involuntariamente nestas
solues. A fnalidade do ensaio fornecer um mtodo
simples de avaliao visual da qualidade das solues no
que respeita s partculas visveis. Podem utilizar-se outros
mtodos validados.
Aparelhagem
O aparelho (Figura 1) composto por um posto de
observao, compreendendo: um painel preto opaco, de
dimenses apropriadas, colocado em posio vertical,
um painel branco antirrefexo de dimenses apropriadas,
colocado em posio vertical ao lado do painel preto, uma
rampa de iluminao ajustvel, com uma fonte de luz
branca protegida e um difusor apropriado (um sistema de
iluminao contendo 2 lmpadas fuorescentes de 13 W, com
comprimento de onda de 525 nm cada uma, apropriado).
5
A intensidade da iluminao no ponto de observao
mantida entre 2000 e 3750 lux sendo aconselhvel uma
intensidade mais elevada para recipientes de vidro corado
ou de plstico.
Figura 1 - Aparelho para partculas visveis.
Procedimento
Retire eventualmente os rtulos, lave e seque o exterior do
recipiente. Agite suavemente e inverta cada recipiente com
precauo, evitando a formao de bolhas de ar e observe-o
durante cerca de 5 segundos contra o painel branco. Repita
este procedimento, observando o recipiente contra o painel
preto. Anote a presena de qualquer partcula.
5.1.8 TESTE DE GOTEJAMENTO
O teste de gotejamento destina-se a determinar a relao
do nmero de gotas por mililitro e a quantidade de frmaco
por gota em formas farmacuticas lquidas acondicionadas
em recipientes com dispositivo dosador integrado. Para
realizar o teste necessrio conhecer o nmero declarado
de gotas por mililitro, ou a quantidade declarada de frmaco
em massa por gota.
PROCEDIMENTO
Determinao do nmero de gotas por mililitro
O gotejamento deve ser realizado com o frasco invertido
na posio vertical ou conforme o ngulo de gotejamento
declarado pelo fabricante, permitindo o fuxo por
gravidade, a uma taxa constante, sem qualquer tipo de
presso adicional. Uma leve presso pode ser aplicada em
frascos de polietileno.
Separar 30 unidades. Proceder ao teste utilizando 10
unidades, em ambiente com temperatura controlada de 20
2 C. Para cada unidade determinar a massa relativa ao
nmero de gotas correspondente a 1 mililitro, conforme
declarado pelo fabricante. Se esta relao no estiver
declarada, utilizar 20 gotas para o teste.
Calcular o nmero de gotas por mililitro para cada unidade
testada (N
t
) segundo a equao:
( )
i
t
m
N
N

=
1
em que
N
1
= nmero de gotas utilizado no teste, que pode ser o
nmero de gotas declaradas por mililitro (N
d
) ou 20 gotas;
= densidade de massa do produto, em g/mL, determinada
a 20 C, conforme descrito em Determinao de densidade
de massa e densidade relativa (5.2.5);
m
i
= massa, em g, correspondente ao nmero de gotas
utilizado no teste.
Determinao da quantidade de frmaco por gota
Calcular a quantidade do frmaco, em mg/gota, para cada
unidade testada (q
t
), segundo a equao:
t
t
N
Q
q =
em que
Q = quantidade de frmaco, em mg/mL, determinada no
doseamento;
N
t
= nmero de gotas por mililitro calculado para cada
unidade testada.
Calcular a porcentagem em relao quantidade declarada,
para cada unidade testada (%Q
t
ou %q
t
), empregando uma
das equaes abaixo:

100
) / (
% =
d
t
t
N Qd
q
Q
ou 100 % =
d
t
t
q
q
q
em que
q
t
= quantidade do frmaco, em mg/gota, calculada para
cada unidade testada;
Q
d
= quantidade declarada do frmaco, em mg/mL;
N
d
= nmero declarado de gotas por mililitro;
q
d
= quantidade declarada do frmaco em mg/ gota.
Calcular a mdia das porcentagens individuais obtidas
( Q % ) e o desvio padro relativo (DPR) segundo as
equaes:
Q
s
DPR
%
100
=
em que
%Q
t
= porcentagem em relao quantidade declarada
calculada para cada unidade testada;
s = desvio padro;
n = nmero de unidades testadas.
5
CRITRIOS
O produto cumpre os requisitos do teste se as porcentagens
individuais, para cada uma das 10 unidades testadas, esto
situadas entre 85,0% e 115,0% da quantidade declarada e o
desvio padro relativo (DPR) no maior que 6,0%.
Se uma unidade estiver fora da faixa de 85,0% a 115,0%
da quantidade declarada, ou se o DPR for maior que 6,0%,
ou se ambas as condies forem observadas, testar mais 20
unidades.
O produto cumpre o teste se no mximo uma unidade est
fora da faixa de 85,0% a 115,0% da quantidade declarada,
nenhuma unidade est fora da faixa de 75,0% a 125,0% e
o DPR das 30 unidades testadas no maior que 7,8%.
5.2 MTODOS FSICOS E
FSICO-QUMICOS
5.2.1 DETERMINAO DA
MASSA
Para se efetuar a medio da massa, as balanas devem
apresentar capacidade e sensibilidade de acordo com o
grau de preciso requerido e certifcado de calibrao
atualizado.
Tratando-se de atividades que exijam pesagens exatas,
na determinao de massas iguais ou maiores que 50 mg
utilizar balana analtica de 100 a 200 g de capacidade e
0,1 mg de sensibilidade. Para quantidades inferiores a 50
mg utilizar balana analtica de 20 g de capacidade e 0,01
mg de sensibilidade.
APARELHAGEM
As balanas analticas a serem utilizadas nesse ensaio
devem ser de prato nico, preferencialmente eletrnicas.
As balanas devem possuir dispositivo adequado que
possibilite a verifcao da carga aplicada, desde que
sejam calibradas periodicamente por meio de massas de
referncia aferidas.
As balanas analticas devem apresentar as seguintes
caractersticas:
- armrio ou caixa de proteo, com aberturas apropriadas
para possibilitar operaes em seu interior e excluir
correntes de ar;
- estar instalada sobre base de material compacto e resistente
(mrmore, granito, metal ou borracha, por exemplo);
- indicador de nvel (gravimtrico ou hidrulico) e
dispositivo que possibilite seu nivelamento;
- estar instalada sobre sistema amortecedor (magntico,
pneumtico ou hidrulico, por exemplo) para restabelecer
prontamente o equilbrio;
- sistema que possibilite a leitura da massa (por intermdio
de mostradores e/ou projeo ptica de escala etc.).
Devem, tambm, suportar sua carga total sem sofrer tenses
inadequadas que possam comprometer sua sensibilidade
em pesagens sucessivas nessas condies.
A balana no deve ser sobrecarregada.
Localizao da balana analtica
A balana analtica deve assentar-se nivelada sobre mesa
ou prateleira frme e pesada, protegida por amortecedores
de choque, como esteiras de cortia ou lminas de borracha,
ou ainda sobre bancada de concreto, apoiada a pilares que
estejam fxos no cho ou conectados aos elementos da
construo do prdio a fm de impedir vibraes. Deve
estar em local isolado, que oferea segurana e estabilidade
medida, em ambiente de atmosfera relativamente seca,
protegida do ataque de gases e vapores cidos, distncia
de fontes de calor (luz solar direta, fornos, estufas, mufas
etc.) e de correntes de ar.
Conservao e limpeza
O prato e demais partes da balana, inclusive sua caixa
de proteo, devem permanecer limpos, isentos de p e
substncias que acidentalmente caiam no prato da balana
ou no piso da caixa. Tais materiais devem ser removidos
imediatamente.
Os corpos a serem pesados no devem ser colocados
diretamente sobre o prato. Para tanto, utilizam-se papis
ou recipientes adequados massa, como bqueres, vidros
de relgios, cadinhos, cpsulas de porcelana e pesa-fltros
com ou sem tampa.
As partes mveis da balana e os pesos no devem
ser tocados com as mos. Usa-se, para este fm, pina
apropriada, que deve ser guardada na caixa de pesos.
Agentes dessecantes, tais como slica-gel ou cloreto de
clcio, podem ser colocados no interior da caixa de proteo,
para manuteno de atmosfera relativamente seca.
Quando a balana no estiver em uso, suas portas devero
permanecer fechadas e travadas.
A sensibilidade da balana analtica deve ser,
periodicamente, inspecionada e aferida por tcnico
habilitado.
Utilizao da balana analtica
O material a ser pesado deve estar em equilbrio trmico
com o ar do interior da caixa de proteo da balana a fm
de evitar erros devido s correntes de conveco, alm da
condensao da umidade sobre os corpos frios.
5
A balana deve estar nivelada na ocasio de seu uso. A
posio de equilbrio com ou sem carga deve ser conferida
vrias vezes com 10% da carga total e com a carga total. A
diferena de equilbrio, encontrada em duas determinaes
sucessivas, feitas com pesos iguais, no deve exceder a 0,1
mg para balanas analticas (mximo 200 g) e 0,01 mg para
balanas analticas (mximo 20 g).
Tanto os pesos quanto o material a ser pesado devem ser
depositados no centro do prato. Durante as operaes
de pesagem, as portas da caixa de proteo devem estar
fechadas.
5.2.2 DETERMINAO DO
PONTO OU INTERVALO DE
FUSO
Temperatura ou ponto de fuso de uma substncia
a temperatura corrigida na qual esta se encontra
completamente fundida.
Intervalo de fuso de uma substncia aquela
compreendida entre a temperatura corrigida na qual a
substncia comea a fuidifcar-se ou a formar gotculas na
parede do tubo capilar e a temperatura corrigida na qual
est completamente fundida, o que evidenciado pelo
desaparecimento da fase slida.
Existem, basicamente, quatro mtodos para determinao
do ponto ou intervalo de fuso.
MTODO I - MTODO DO CAPILAR
Geralmente aplicado para substncias facilmente
transformadas em p.
Aparelhagem
Consiste do aparelho apresentado na Figura 1.
Figura 1 aparelho para determinao do ponto
ou intervalo de fuso pelo mtodo do capilar.
O bquer deve ter capacidade de 150 mL e conter
lquido apropriado para o banho de imerso de acordo
com a temperatura desejada. Esses lquidos podem ser:
parafna liquida de alto ponto de ebulio, silicona fuida
de alto ponto de ebulio, cido sulfrico concentrado,
etilenoglicol ou gua.
O agitador deve misturar o lquido rapidamente, mantendo
homognea a temperatura do meio. O termmetro,
calibrado at sua marca de imerso, deve abranger uma
faixa de -10 a 360
o
C, com divises de 1
o
C e colocado a 2
cm do fundo do bquer.
O capilar de vidro borossilicato deve ser fechado em uma
das extremidades e ter aproximadamente 8 a 9 cm de
comprimento, 0,8 a 1,2 mm de dimetro interno e paredes
com 0,10 a 0,30 mm de espessura. Para observar o tubo
capilar deve-se empregar lente de aumento. Como fonte de
calor, utilizar bico de gs ou chapa eltrica.
Procedimento
Pulverizar a substncia em anlise e dessecar em estufa
a vcuo sobre slica-gel, pentxido de fsforo ou outro
agente dessecante durante 24 horas.
Introduzir poro do p no tubo capilar seco e compact-lo,
batendo o capilar sobre superfcie dura de modo a formar
coluna de aproximadamente 3 a 4 mm de altura.
Aquecer o banho rapidamente, sob agitao constante.
Quando a temperatura atingir 10
o
C abaixo da pressuposta
faixa de fuso, regular a velocidade de aumento da
temperatura para 1 a 2
o
C por minuto, dependendo da
estabilidade da substncia sob ensaio.
5
Quando o banho estiver 10
o
C

abaixo da faixa de fuso,
introduzir o capilar no banho, de forma que sua parte inferior
esteja bem prxima do meio do bulbo do termmetro.
As temperaturas obtidas so corrigidas mediante adaptao
de termmetro auxiliar ao dispositivo anterior, de forma
que seu bulbo encoste no termmetro do banho, na
zona mdia da coluna emergente de mercrio, quando a
substncia funde, lendo-se nesta altura a temperatura t
marcada no termmetro auxiliar.
O clculo da correo a ser adicionada a cada uma das
temperaturas, que defnem o ponto de fuso, efetuado
atravs da expresso
0,00015 N(T-t)
em que
N = nmero de graus correspondentes coluna emergente,
T = temperatura lida no termmetro padro,
t = temperatura lida no termmetro auxiliar.
O equipamento deve ser calibrado atravs do emprego de
padres de ponto de fuso dentre aqueles reconhecidos
internacionalmente ou outros.
MTODO II - MTODO DO CAPILAR ABERTO
Geralmente aplicado para substncias que no so
facilmente transformadas em p.
Aparelhagem
Deve-se empregar aparelho semelhante ao descrito no
Mtodo do Capilar, com as seguintes modifcaes:
- o banho de aquecimento deve ser a gua;
- o termmetro deve ser graduado em 0,2
o
C, abrangendo
faixa de -10 a 100
o
C; e
- o tubo capilar. semelhante quele empregado no Mtodo
do Capilar, deve ser aberto em ambas as extremidades.
Procedimento
Fundir a substncia rapidamente temperatura no superior
a 10
o
C acima do ponto de fuso completo. Agitar e, se
necessrio, fltrar atravs de fltro de papel seco.
Inserir a substncia fundida na extremidade do capilar at
formar coluna de 8 a 12 mm de altura. Esfriar o capilar
contendo a amostra temperatura de 15
o
C, mantendo-a,
no mnimo, por 16 horas. Prender o tubo capilar no
termmetro de forma tal que a coluna de substncia se
localize na parte mdia do bulbo de mercrio. Colocar o
sistema em banho de gua a 15
o
C, profundidade de 3
cm da superfcie da gua. Aquecer com agitao constante
para que a temperatura aumente 2
o
C por minuto.
A temperatura na qual a substncia comea a ascender no
capilar o ponto de fuso.
MTODO III - MTODO DA GOTA
Geralmente aplicado para determinao do ponto de fuso
de substncias graxas de consistncia pastosa.
Aparelhagem
Deve-se empregar aparelhagem semelhante ao do Mtodo
I, com as seguintes diferenas:
- termmetro com leitura at 100
o
C graduado em 1
o
C
- no utiliza capilar
- o lquido de imerso a gua.
Procedimento
Fundir a amostra, agitando at atingir uma temperatura
de 90 a 92
o
C e imediatamente deixar a amostra fundida
resfriar at uma temperatura de 8 a 10
o
C acima do ponto
de fuso esperado. Resfriar o bulbo de um termmetro at
5
o
C, secar e, enquanto estiver frio, submergi-lo na amostra
fundida at a altura da metade do bulbo, aproximadamente.
Retirar imediatamente e mant-lo em posio vertical
at que a superfcie da amostra depositada sobre o bulbo
solidifque, mantendo-o em banho de gua durante
aproximadamente 5 minutos a uma temperatura no maior
que 16
o
C. Adaptar o termmetro com a amostra dentro de
um tubo de ensaio por meio de uma rolha de borracha ou
cortia, de modo que seu extremo inferior fque cerca de
15 mm acima do fundo do tubo de ensaio. Suspender o
tubo de ensaio em um banho de gua a uma temperatura
de 16
o
C e elevar a temperatura do banho at 30
o
C a uma
velocidade de 2
o
C por minuto e depois a uma velocidade
de 1
o
C por minuto, at que a primeira gota se desprenda do
termmetro. A temperatura na qual isto ocorre representa o
ponto de fuso.
Para cada determinao empregar uma poro recm
fundida da amostra. Se a variao de trs determinaes for
menor que 1
o
C, calcular a mdia. Se a variao for maior
que 1
o
C realizar mais duas determinaes e determinar a
mdia das cinco leituras.
MTODO IV - MTODO DO BLOCO METLICO
AQUECIDO
De aplicao generalizada na determinao do ponto ou
intervalo de fuso de substncias.
Aparelhagem
Consiste de bloco metlico de elevada condutividade
trmica, resistente s substncias sob anlise e de superfcie
plana e polida, como bronze, ao inoxidvel e similares.
O bloco deve conter cavidade cilndrica interna, paralela
sua superfcie superior e a cerca de 3 mm desta, com
dimenses adequadas para acomodar termmetro
calibrado.
5
O bloco deve ser uniformemente aquecido atravs de
resistncia eltrica ou chama microajustvel. O aparelho
deve ser calibrado constantemente com substncias
apropriadas e de comprovado grau de pureza.
Procedimento
Aquecer o bloco rapidamente at temperatura de 10
o
C abaixo do ponto de fuso previsto e, ento, ajustar o
aquecimento para incrementos de temperatura da ordem de
1
o
C por minuto.
Em intervalos regulares, colocar algumas partculas da
amostra, previamente pulverizada e seca, sobre a superfcie
metlica, na regio imediatamente acima do bulbo do
termmetro. Limpar a superfcie aps cada ensaio. Anotar
a temperatura (t
1
)

na qual a substncia funde imediatamente
aps o contato com o metal. Interromper o aquecimento.
Durante o resfriamento, colocar novamente algumas
partculas da amostra, a intervalos regulares, no mesmo
local do bloco, limpando a superfcie aps cada ensaio.
Anotar a temperatura (t
2
)

na qual a substncia solidifca
instantaneamente ao contato com o metal.
O ponto de fuso instantneo da amostra calculado
mediante a seguinte expresso:
5.2.3 DETERMINAO DA
TEMPERATURA DE EBULIO
E FAIXA DE DESTILAO
Temperatura ou ponto de ebulio de um lquido a
temperatura corrigida na qual o lquido ferve sob presso
de vapor de 101,3 kPa (760 mm de Hg).
Faixa de destilao o intervalo de temperatura corrigida
para a presso de 101,3 kPa (760 mm de Hg), no qual o
lquido, ou frao especfca do lquido, destila inteiramente.
APARELHAGEM
Usar aparelho como o sugerido na Figura 1 em que A um
balo de destilao com capacidade de 100 mL conectado
ao condensador B. Na extremidade inferior de B se acopla
o adaptador C. Uma proveta de 50 mL graduada em 0,2 mL
utilizada como coletor. O termmetro deve ser adaptado
ao balo de forma que o sensor de temperatura situe-se no
centro do gargalo e a cerca de 5 mm abaixo do nvel do
tubo lateral. O aquecimento (a gs, eltrico ou atravs de
banho) deve ser selecionado de acordo com a natureza da
substncia.
Figura 1 - Aparelho para determinao da faixa de destilao (dimenses em mm). A, balo de destilao; B, condensador; C, adaptador.
5
PROCEDIMENTO
Adicionar ao balo cerca de 50 mL da amostra de modo a
no escoar para o tubo lateral. Adicionar prolas de vidro
ou outro material poroso adequado. Adaptar o termmetro
ao balo e aquecer, lentamente, protegendo o sistema
contra corrente de ar.
Registrar a temperatura na qual forem coletadas as cinco
primeiras gotas do destilado. Ajustar o aquecimento para
obter o destilado vazo de 3 a 4 mL por minuto. Anotar
a temperatura na qual a ltima gota evaporar do balo de
destilao ou quando a frao especifcada for coletada.
Manter o destilado mesma temperatura na qual o lquido
foi originalmente medido e anotar o volume do destilado.
Comparar os valores obtidos do ponto de ebulio, faixa
de destilao e volume do destilado com as respectivas
especifcaes das monografas.
Corrigir as leituras em funo da presso atmosfrica
utilizando a frmula:
t
1
= t
2
+ k (101,3 b)
Onde:
t
1
= temperatura corrigida;
t
2
= temperatura observada a presso atmosfrica b;
k = fator de converso (Tabela 1), a menos que esse fator
no seja considerado;
b = presso atmosfrica, expressa em quilopascal, durante
a destilao.
Tabela 1 - Fatores de correo para
diferentes temperaturas de destilao.
Temperatura de destilao Fator de correo k
At 100
o
C
Acima de 100
o
C e at 140
o
C
Acima de 140
o
C e at 190
o
C
Acima de 190
o
C e at 240
o
C
Acima de 240
o
C
0,30
0,34
0,38
0,41
0,45
Nota 1: quando o lquido puro, a maior parte destila
a temperatura constante (em uma faixa de 0,5
o
C). Essa
temperatura o ponto de ebulio do lquido.
Nota 2: lquidos que destilam abaixo de 80 C devem
ser resfriados a 10-15 C antes de se medir o volume e a
proveta que recebe o destilado deve estar imersa em banho
de gelo.
Nota 3: quando o ponto de ebulio superior a 140-
150 C, pode-se substituir o condensador de gua por
condensador de ar.
5.2.4 DETERMINAO
DA TEMPERATURA DE
CONGELAMENTO
Temperatura ou ponto de congelamento de lquido ou de
slido fundido a mais alta temperatura na qual ocorre
solidifcao.
Para substncias puras que fundem sem decomposio,
o ponto de congelamento do lquido igual ao ponto de
fuso.
APARELHAGEM
O aparelho (Figura 1) consiste em tubo de ensaio de
aproximadamente 25 mm de dimetro interno e 150 mm de
comprimento suspenso por intermdio de rolha adequada
dentro de um segundo tubo maior de 40 mm de dimetro
interno e 160 mm de comprimento formando uma camisa de
ar que evita mudana brusca de temperatura. Esse sistema
fxo por garra no centro do bquer com capacidade de
1000 mL contendo gua ou soluo refrigerante.
O tubo interior vedado com rolha de modo a conter
haste agitadora e termmetro com divises de 0,2 C. O
sensor de temperatura do termmetro deve estar fxo a
aproximadamente 15 mm do fundo do tubo. O agitador
um basto de vidro adaptado com anel na sua extremidade
inferior (Figura 1).
Figura 1 - Aparelho para determinao do
ponto de congelamento
5
PROCEDIMENTO
Transferir a amostra em quantidade sufciente para
atingir 30 mm no tubo interno. Transferir para o bquer
a mistura refrigerante adequada a 5 C abaixo do ponto
de congelamento esperado. Quando a amostra estiver
resfriada a cerca de 5 C acima do ponto de congelamento,
mover verticalmente o agitador entre a superfcie e o fundo
por, aproximadamente, 20 ciclos por minuto e registrar
a temperatura do termmetro de 30 em 30 segundos.
Interromper a agitao quando a temperatura permanecer
constante ou apresentar leve aumento. Registrar a
temperatura de 30 em 30 segundos por no mnimo 3 minutos
aps a temperatura comear a diminuir novamente.
Registrar o mximo na curva da temperatura-tempo que
ocorre aps a temperatura permanecer constante, ou
apresentar leve aumento, e antes da temperatura comear
a diminuir novamente. O ponto de congelamento
atribudo mdia de no menos que trs pontos mximos
consecutivos que estejam dentro de uma faixa de 0,4 C.
Nota 1: se a substncia slida a temperatura ambiente,
fundir a substncia e aquecer at no mximo 20 C acima
da temperatura de congelamento esperada antes de
transferir para o tubo interno.
Nota 2: se a substncia lquida a temperatura ambiente
utilizar banho a 15 C abaixo da temperatura de
congelamento esperada.
5.2.5 DETERMINAO DA
DENSIDADE DE MASSA E
DENSIDADE RELATIVA
Densidade de massa () de uma substncia a razo de
sua massa por seu volume a 20 C. A densidade de massa
da substncia (
t
) em uma determinada temperatura (t)
calculada a partir de sua densidade relativa (
t
t
d ) pela
frmula:
t
= d
(gua)
t
t
d + 0,0012
expressa em g/mL ou kg/L.
Quando a temperatura, for exemplo, 20 C a frmula
expressa por:
Tabela 1 - Densidade da gua de 0 a 40 C.
Temp. (C)
Densidade
(g/mL)
Temp. (C)
Densidade
(g/mL)
Temp. (C)
Densidade
(g/mL)
Temp. (C)
Densidade
(g/mL)
0 0,99984 10 0,99970 20 0,99820 30 0,99565
1 0,99990 11 0,99961 21 0,99799 31 0,99534
2 0,99994 12 0,99950 22 0,99777 32 0,99503
3 0,99996 13 0,99938 23 0,99754 33 0,99470
4 0,99997 14 0,99924 24 0,99730 34 0,99437
5 0,99996 15 0,99910 25 0,99704 35 0,99403
6 0,99994 16 0,99894 26 0,99678 36 0,99368
7 0,99990 17 0,99877 27 0,99651 37 0,99333
8 0,99985 18 0,99860 28 0,99623 38 0,99297
9 0,99978 19 0,99841 29 0,99594 39 0,99259
10 0,99970 20 0,99820 30 0,99565 40 0,99222
Densidade relativa de uma substncia a razo de sua
massa pela massa de igual volume de gua, ambas a 20 C
(
20
20
d
) ou por massa de igual volume de gua a 4 C (
20
4
d
):

20
4
d
= 0,998234
20
20
d
PROCEDIMENTO
A densidade relativa da substncia pode ser determinada
atravs de picnmetro, balana hidrosttica ou densmetro.
O uso desses dois ltimos condicionado ao tipo de
aparelhagem disponvel.
MTODO DO PICNMETRO
Utilizar picnmetro limpo e seco, com capacidade de,
no mnimo, 5 mL que tenha sido previamente calibrado.
A calibrao consiste na determinao da massa do
picnmetro vazio e da massa de seu contedo com gua,
recentemente destilada e fervida, a 20 C.
Transferir a amostra para o picnmetro. Ajustar a
temperatura para 20 C, remover excesso da substncia,
se necessrio, e pesar. Obter o peso da amostra atravs da
diferena de massa do picnmetro cheio e vazio. Calcular
a densidade relativa (
20
20
d
) determinando a razo entre a
massa da amostra lquida e a massa da gua, ambas a 20
C. Utilizar a densidade relativa para calcular a densidade
de massa ().
5.2.6 DETERMINAO DO
NDICE DE REFRAO
ndice de refrao (n) de uma substncia a relao entre a
velocidade da luz no vcuo e sua velocidade na substncia.
5
Quando um raio de luz monocromtica passa de um meio
transparente para outro de densidade ptica diferente
esse refetido ou refratado, exceto quando incide
perpendicularmente a interface. A relao entre o seno do
ngulo de incidncia (sen i) e o seno do ngulo de refrao
(sen r) constante. Essa relao equivale ao ndice de
refrao (n).
Para fns prticos mede-se a refrao com referncia ao ar e
substncia e no com referncia ao vcuo e substncia,
porquanto as diferenas entre os valores obtidos com ambas
as medidas no so signifcativas para fns farmacopeicos.
Em substncias isotrpicas, o ndice de refrao
caracterstica constante em determinado comprimento de
onda, temperatura e presso. Por essa razo, esse ndice
til no s para identifcar a substncia, mas, tambm,
para detectar a presena de impurezas. empregado para
caracterizar principalmente gorduras, leos graxos, ceras,
acares e solventes orgnicos, bem como para identifcar
certos frmacos. igualmente usado para determinar a
pureza de leos volteis.
Geralmente determina-se o ndice de refrao em funo
da luz de sdio no comprimento de onda 589,3 nm (raia
D) e a 20 0,5
o
C. Da expressar-se o valor do ndice de
refrao como
20
D
n .
REFRATMETROS
Os refratmetros utilizados normalmente em anlise
farmacopeica usam luz branca, mas so calibrados de modo
a fornecer o ndice de refrao em termos de comprimento
de onda correspondente ao da luz da raia D de sdio.
O refratmetro Abb mede a faixa de valores de ndice
de refrao das substncias farmacuticas. Outros
refratmetros de maior ou igual preciso podem ser
empregados.
Visto que o ndice de refrao varia signifcativamente com a
temperatura, durante a leitura deve-se ajustar e manter a 20
o
C.
A calibrao do aparelho realizada com padro fornecido
pelo fabricante. Para controle da temperatura e limpeza do
equipamento deve-se determinar o ndice de refrao da
gua destilada cujos valores so 1,3330 a 20 C e 1,3325 a
25 C.
5.2.7 DETERMINAO DA
VISCOSIDADE
Viscosidade a expresso da resistncia de lquidos ao
escoamento, ou seja, ao deslocamento de parte de suas
molculas sobre molculas vizinhas. A viscosidade dos
lquidos vem do atrito interno, isto , das foras de coeso
entre molculas relativamente juntas. Com o aumento
da temperatura, aumenta a energia cintica mdia das
molculas, diminui (em mdia) o intervalo de tempo que as
molculas passam umas junto das outras, menos efetivas se
tornam as foras intermoleculares e menor a viscosidade.
A unidade dinmica, Sistema CGS, de viscosidade o poise.
O Sistema CGS de unidades um sistema de unidades de
medidas fsicas, ou sistema dimensional, de tipologia LMT
(comprimento, massa tempo), cujas unidades-base so o
centmetro para o comprimento, o grama para a massa e o
segundo para o tempo.
A unidade dinmica anloga no Sistema Internacional de
Unidades (SI) o pascal segundo. O poise frequentemente
utilizado com o prefxo centi; um centipoise (cP) um
milipascal segundo (mPas) em unidades SI.
Sistema CGS poise (P)
1 P = 1 g cm
1
s
1
Por defnio, poise a fora, em dinas, necessria ao
deslocamento de camada plana de lquido, com rea de 1
cm
2
, sobre outra camada idntica, paralela e distanciada
da primeira em 1 cm, velocidade de 1 cm/s. O poise ,
contudo, demasiado grande para a maioria das aplicaes,
recorrendo-se da ao centipoise, cP, correspondente a
um centsimo de poise. s vezes conveniente utilizar-
se a viscosidade cinemtica, que consiste na relao
entre a viscosidade dinmica e a densidade. Nesse caso,
no sistema CGS, a unidade o stoke. A exemplo do que
ocorre com viscosidade absoluta (medida em poise),
mais conveniente exprimir-se viscosidade cinemtica em
centistokes (100 centistokes = 1 stoke) para caracterizar a
maioria dos lquidos usuais em Farmcia e Qumica.
Sistema Internacional de Unidades pascal segundo(Pas)
1 Pas = 1 kg m
1
s
1
= 10 P
Pascal segundo equivale a 10 poise, mas, normalmente,
mais utilizado milipascal segundo (mPas)
Na Tabela 1 est registrada a viscosidade de alguns
lquidos.
Tabela 1 Viscosidade de alguns lquidos.
Lquido
Viscosidade
(P)
a
Unidades
CGS
Viscosidade
N s m
Unidades SI
Viscosidade
cP = mPa.s
gua 0,0101 (298 K) 0,00101 0,890
Acetona 0,00316 0,000316 0,306
Etanol 0,01200 0,001200 1,074
Glicerina 14,9 1,49 934
____________________
a
1 poise (P) = 1 dina. s. cm-2 = 0,1 N s m-2. cP = centi-poise = mPa.s =
mili Pascal vezes Seg.
A determinao da viscosidade ensaio para o qual a
especifcao da temperatura imprescindvel devido
sua infuncia decisiva sobre o resultado (em geral, a
viscosidade inversamente proporcional temperatura) -
efetuada com base em propriedades diversas. O mtodo
mais frequente baseia-se no tempo de escoamento de
lquidos atravs de capilares (viscosmetros de Ostwald,
5
Ubbelohde, Baum e Engler) devido simplicidade e ao
preo acessvel dos aparelhos. Viscosmetros que tm como
princpio de funcionamento a determinao do tempo de
queda livre de esferas atravs de tubos contendo o liquido
sob ensaio (Hoppler) ou a velocidade de rotao de eixos
metlicos imersos no liquido (Brookfeld, entre outros) so
igualmente empregados.
Diversas metodologias que podem ser empregadas:
resistncia de lquidos ao escoamento, tempo de vazo
de um lquido atravs de um capilar (viscosmetro de
Oswald, Ubbelohde, Baum e Engler);
medida do tempo de queda de uma esfera atravs de
tubos contendo o lquido sob ensaio (Hppler);
medindo a resistncia ao movimento de rotao de
eixos metlicos quando imersos no lquido (remetro
de Brookfeld).
Embora seja possvel a determinao de viscosidade
absoluta, com base nas dimenses exatas do viscosmetro
empregado, mais frequente a prtica da calibrao
prvia do aparelho com lquido de viscosidade conhecida,
permitindo, por comparao, avaliao relativa da
viscosidade do lquido sob ensaio. Assim, empregando-
se viscosmetro de Ostwald ou similar, determinam-se
os tempos de escoamento t
1
e t
2
de volumes iguais dos
lquidos de referncia e amostra, de densidade d
1
e d
2
,
respectivamente. Sendo n
2
a viscosidade do lquido de
referncia, a viscosidade absoluta (cP) do, lquido amostra,
pode ser calculada pela equao:
ou melhor
O quociente
2
/t
2
.d
2
possui valor constante, k, para cada
lquido de referncia, no mesmo viscosmetro. Assim,
conhecido esse valor (geralmente, encontrado no manual
do aparelho), simplifca-se a equao:
O valor de k pode, tambm, ser determinado,
experimentalmente, medindo-se o tempo de escoamento
de lquido padro, puro, e aplicando-se a equao:
Empregando-se gua como padro, usual para determinao
de lquidos de baixa viscosidade, adotam-se os valores
de viscosidade registrados na Tabela 2, conforme a
temperatura do ensaio:
Tabela 2 Valores de viscosidade, de acordo
com a temperatura do ensaio.
Temperatura (
o
C) n(cP)
15 1,140
16 1,110
17 1,082
18 1,055
19 1,029
20 1,004
21 0,980
22 0,957
23 0,936
24 0,915
25 0,895
Para lquidos muito viscosos (glicerina e leos em geral),
pode-se determinar a viscosidade relativa pelo mtodo da
velocidade da queda de bolas atravs do lquido, usando
o viscosmetro de Hppler. Esse mtodo, tambm,
apropriado para determinar a viscosidade absoluta de
lquidos, aplicando-se a equao:
Onde:
t = tempo de queda da bola (seg).
K = cte especfca da bola (mPcm
3
), fornecido pelo
fabricante.
d
S
= densidade da bola (g/cm
3
).
d
L
= densidade do lquido (g/cm
3
).
A densidade do lquido (d
L
), para uma certa temperatura,
pode ser obtida em livros de referncia (como handbooks),
ou determinada experimentalmente.
A viscosidade relativa no mtodo de Hppler pode ser
determinada aplicando-se a equao:
onde , d e t so, respectivamente, o coefciente de
viscosidade dinmica, a massa especfca e o tempo de
escoamento de igual volume dos lquidos 1 e 2.
VISCOSMETRO DE OSTWALD
O princpio operacional do viscosmetro de Stokes
baseia-se na determinao da velocidade de queda livre
de uma esfera atravs do fuido do qual se deseja obter a
viscosidade.
O viscosmetro de Ostwald o mais simples e popular
dentre os aparelhos disponveis. Consta de tubo dobrado
em U (Figura 1), com um dos ramos munido de ampola
terminada em capilar. H dois traos de referncia, um
imediatamente acima da ampola e o outro sobre o capilar.
O outro ramo sufcientemente largo para permitir seu
enchimento com o lquido sob ensaio at a altura de cerca
de 5 mm abaixo do trao de referncia inferior. Para
possibilitar maior variedade de viscosidades, passveis de
5
determinao, empregam-se colees de viscosmetros,
com diferentes calibres. O aparelho indicado para
determinada avaliao o que possibilita escoamento da
amostra em perodo no inferior a 60 segundos.
Para a determinao propriamente dita, transferir para
o viscosmetro escolhido, lavado e seco, quantidade
sufciente de lquido para atingir nvel da ordem de 5 mm
abaixo do trao de referncia inferior. Fixar o aparelho
em termostato (20
o
C), aps aguardar que o liquido no
interior do aparelho adquira a temperatura controlada,
aspirar o lquido pelo tubo capilar/ampola (por meio de
tubo de borracha fxado na extremidade) at que o nvel do
lquido exceda ligeiramente o trao de referncia superior.
Soltar ento o tubo e, no instante em que o menisco
atingir o trao de referncia superior, acionar cronmetro
de preciso, retravando-o quando o menisco passar pelo
trao de referncia inferior. Registrar o tempo decorrido
e repetir o ensaio diversas vezes com intervalos de alguns
minutos at que tempos sucessivos no difram em mais de
0,5 segundos Determinar a densidade do liquido sob ensaio
(5.2.5), corrigindo o valor para a densidade relativa gua,
a 20
o
C, e calcular a viscosidade do lquido amostra pela
frmula indicada, empregando a constante k fornecida ou
determinada por procedimento similar.
Figura 1 Viscosmetro de Ostwald
(dimenses em mm).
VISCOSMETRO DE HPPLER
O sistema de medida Hppler, mede o tempo que uma
esfera slida precisa para percorrer uma distncia entre
dois pontos de referncia dentro de um tubo inclinado
com amostra. Os resultados obtidos so considerados
como viscosidade dinmica na medida estandardizada no
Sistema Internacional (mPa.s). Determina a viscosidade
de lquidos Newtonianos e gases (com uma bola especial
para gases), com preciso. Entre suas aplicaes fguram
a investigao, o controle de processos e o controle de
qualidade, utilizado principalmente para substncias de
baixa viscosidade, entre 0,6 e 100 000 mPa.s.
O Viscosmetro de Hppler composto por um tubo de
vidro com duas marcas (A e B) espaadas de 10 mm entre
si na coluna, as quais defnem a distncia de medio. Uma
bola (em vidro, liga de nquel e ferro ou ao), com dimetro
compatvel com o calibre do tubo de vidro instalada no topo
do seu contedo lquido. O tubo envolvido por um cilindro
de vidro cheio com gua em circulao, sob temperatura
controlada. Todo o conjunto se encontra disposto em posio
ligeiramente inclinada (10% na vertical), podendo ser girado
180
o
em torno de um eixo perpendicular a ambos os tubos,
para possibilitar a repetio das determinaes e o retorno
da bola posio inicial. A tcnica consiste, em cronometrar
o tempo (de queda) que uma esfera (com densidade e
dimetro variveis com a respectiva constituio estrutural)
leva a percorrer o espao entre aquelas duas marcas (A e
B) existentes nas extremidades do tubo de vidro. Quanto
maior for a viscosidade maior ser o tempo que a bola
levar a percorrer aquele espao. O tipo de esfera a utilizar
escolhido em funo do valor presumvel da viscosidade
do lquido em observao. No caso do sangue so utilizadas
esferas de vidro. Os resultados da viscosidade, dos lquidos
newtonianos so expressos em unidades absolutas padres
internacionais (milipascal. segundo, mPa.s).
Para a determinao propriamente dita, enxaguar o
viscosmetro, escolhido, lavado e seco, com o lquido que
for usado para determinar a viscosidade. Ajustar o prumo
do aparelho. Escolher a esfera adequada para cada lquido
(gua = esfera de vidro). Encher completamente o tubo
interno do viscosmetro com gua. Anotar o tempo de
queda da esfera entre as marcas A e B no viscosmetro.
Fazer mais duas determinaes para obter a melhor mdia.
VISCOSMETRO BROOKFIELD
A viscosidade de uma forma farmacutica pode ser
determinada por um viscosmetro de Brookfeld, que mede
a viscosidade pela fora necessria para girar o spindle no
lquido que est sendo testado.
Para utilizar esse aparelho, deve-se proceder da seguinte
forma:
adicionar a amostra a ser analisada no recipiente coletor
do aparelho, at a marca desejada;
programar o aparelho, escolhendo um nmero de
spindle e uma rotao a serem testados, de acordo com
metodologia especfca;
imergir o spindle na amostra a ser analisada;
acionar o aparelho e, aps estabilizao do valor, que
aparecer no display do aparelho, anotar esse valor que
ser expresso em centipoise (cP);
caso no haja estabilizao do valor, teste novamente,
utilizando outro nmero de spindle ou outra rotao.
5
VISCOSMETRO DE EFLUXO - MODELO TIPO FORD
Selecionar o orifcio adequado. A diretriz para a seleo do
orifcio deve ser a obteno de um tempo de escoamento
do lquido em teste ao redor de 60 segundos. Deve-se ter
um tempo de escoamento entre 20 e 100, segundos, para a
amostra a 25 C.
A amostra deve ser, perfeitamente, homogeneizada. No
momento do ensaio, o viscosmetro e o material a ser
ensaiado devem estar a 25 0,1 C. Fechar o orifcio com
lmina de vidro plana e preencher o copo com amostra
at o nvel mais elevado. Verter a amostra, lentamente,
evitando a formao de bolhas. Nivelar a amostra no
copo utilizando placa de vidro plana. Retirar a lmina do
orifcio. A amostra fcar retida dentro do copo. Remova
a placa de vidro plana e acione o cronmetro quando a
amostra comear a escoar pelo orifcio. Quando ocorrer
a primeira interrupo do fuxo de escoamento, parar o
cronmetro e anotar o tempo transcorrido em segundos.
Realizar o ensaio, no mnimo, em triplicata. A viscosidade
ser a mdia dos valores obtidos, expressa em mm
2
/s ou
Centistokes, sendo permitido um desvio padro mximo
3%. A converso de segundos para mm
2
/s ou Centistokes
dada de acordo com o manual do equipamento utilizado.
5.2.8 DETERMINAO
DO PODER ROTATRIO
E DO PODER ROTATRIO
ESPECFICO
Muitas substncias farmacuticas so opticamente ativas,
logo desviam a luz plano-polarizada de modo que a luz
transmitida desviada em um determinado ngulo em
relao incidente.
Substncias com a mesma estrutura contendo um ou mais
centros quirais as quais so imagens especulares no
superponveis uma da outra so denominadas enantimeros.
Um dos enantimeros desvia a luz plano-polarizada para
a direita (+) e chamado de dextrgiro, ou d; o antpoda
desvia para a esquerda (-) e conhecido como levgiro
ou l. O ngulo desse desvio igual em mdulo para os
enantimeros, porm com sinais opostos.
As propriedades fsico-qumicas dos enantimeros como
densidade, ndice de refrao, momento dipolo-dipolo,
pontos de ebulio e fuso so idnticas j que o ambiente
qumico no qual est inserido cada tomo igual para os
enantimeros.
A polarimetria, isso , a medio do poder rotatrio de
uma substncia com polarmetro um dos mtodos mais
prtico para distinguir os enantimeros e, portanto, um
importante critrio de identifcao, caracterizao e de
determinao de pureza enantiomrica dos frmacos.
O poder rotatrio varia com a temperatura, o comprimento
de onda da luz incidente, o solvente utilizado, a natureza da
substncia e sua concentrao. Se a soluo contiver duas
substncias opticamente ativas e estas no reagirem entre
si, o ngulo de desvio ser a soma algbrica dos ngulos de
desvio de ambas.
Polarmetro
Historicamente, a polarimetria foi realizada utilizando
um instrumento em que o poder rotatrio estimado pela
visualizao da intensidade de campos divididos. Por essa
razo, a linha-D da lmpada de sdio no comprimento de
onda visvel a 589 nm foi o mais frequentemente utilizado.
O poder rotatrio especfco determinado na linha D
expresso, na maioria das vezes, pelo smbolo:
O uso de comprimentos de onda mais baixos como os
disponveis com as linhas de lmpada de mercrio isolados
por meio de fltros de transmitncia mxima a cerca de 578,
546, 436, 405 e 365 nm em um polarmetro fotoeltrico
mostraram maior sensibilidade; consequentemente houve
uma reduo na concentrao da substncia no ensaio.
Em geral, o poder rotatrio observado em 436 nm
aproximadamente o dobro e em 365 nm cerca de trs
vezes maior que o em 589 nm.
Poder rotatrio e poder rotatrio especifco
A equao geral usada em polarimetria :
Em que [] o poder rotatrio especfco no comprimento
de onda e na temperatura t, a o poder rotatrio observado
em graus (), l o caminho ptico em decmetros e c a
concentrao da substncia em g por 100 mL. Assim, []
100 vezes para uma soluo contendo 1 g em 100 mL
em uma clula com um caminho ptico de 1,0 decmetro
sob condies defnidas do comprimento de onda da luz
incidente e da temperatura.
Procedimento
O poder rotatrio especfco de um frmaco um valor de
referncia e deve ser calculado a partir do poder rotatrio
observado para a soluo da amostra ou para o lquido
conforme especifcado na monografa. As medidas do poder
rotatrio so realizadas a 589 nm a 20 C exceto quando
especifcado. Sempre que um polarmetro fotoeltrico
usado, uma nica medida corrigida pelo branco realizada.
Para um polarmetro visual empregada a mdia de pelo
menos cinco determinaes corrigidas pelo branco. Em
ambos os casos, o solvente utilizado para o preparo da
soluo da amostra deve ser utilizado como branco ou o tubo
vazio no caso de lquidos. A temperatura experimental deve
ser mantida em 0,5 C em relao ao valor especifcado.
Usar o mesmo tubo do polarmetro na mesma orientao
angular para a amostra e o branco. Posicionar o tubo para
que a luz passe por ele na mesma direo cada vez.
5
O poder rotatrio das solues deve ser determinado dentro
de 30 minutos aps a preparao. Nos casos nos quais
ocorre racemizao ou mutarrotao todas as condies
devem ser padronizadas desde o tempo de preparo da
soluo e o de medida no polarmetro.
O poder rotatrio e o poder rotatrio especfco referem-se
substncia seca, anidra ou isenta de solvente em todas as
monografas em que se fornecem os valores da umidade,
perda por dessecao ou contedo de solvente.
5.2.9 DETERMINAO DA
PERDA POR DESSECAO
Esse ensaio se destina a determinar a quantidade de
substncia voltil de qualquer natureza eliminada nas
condies especifcadas na monografa. No caso de ser a
gua a nica substncia voltil, basta determinar seu teor
segundo um dos mtodos descritos em Determinao de
gua (5.2.20).
Para os demais casos, o procedimento adotado o descrito
abaixo, sendo o mtodo a ser adotado especifcado nas
monografas.
PROCEDIMENTO
Mtodo Gravimtrico
Reduzir a substncia a p fno, caso se apresente na
forma de cristais volumosos. Pesar, exatamente, cerca
de 1 a 2 g e transferir para pesa-fltro chato previamente
dessecado durante 30 minutos nas mesmas condies a
serem empregadas na determinao. Aps resfriamento
em dessecador, pesar o pesa-fltro, tampado, contendo a
amostra. Agitar o pesa-fltro brandamente para distribuir
a amostra da maneira mais uniforme possvel, a uma
altura ideal de 5 mm. Colocar o pesa-fltro na estufa,
retirar a tampa, deixando-a tambm na estufa. Secar a
amostra (geralmente a 105
o
C) e por um determinado prazo
(geralmente 2 horas) especifcado na monografa. Esfriar
at temperatura ambiente em dessecador. Pesar. Repetir a
operao at peso constante.
Observao: No caso de a substncia fundir a uma
temperatura mais baixa que a especifcada para a
determinao, manter o pesa-fltro com seu contedo por
1 a 2 horas temperatura de 5 a 10
o
C abaixo do ponto de
fuso, antes de sec-la temperatura especifcada. Quando
a substncia se decompe a temperatura de 105
o
C, ela deve
ser dessecada em uma temperatura mais baixa. Em ambos
os casos, pode-se realizar a secagem presso reduzida,
em dessecador.
A porcentagem de perda por dessecao dada pela
equao
em que
Pa = peso da amostra,
Pu = peso do pesa-fltro contendo a amostra antes da
dessecao,
Ps = peso do pesa-fltro contendo a amostra aps a
dessecao.
Balana por infravermelho ou utilizando lmpada
halogenada
O procedimento deve ser realizado como a seguir.
Retirar a umidade do equipamento;
pesar cerca de 1g da substncia a ser analisada e
distribuir o material uniformemente no coletor de
alumnio contido dentro do aparelho;
defnir o tempo e temperatura de secagem segundo
descrito na monografa da respectiva substncia. Na
maioria das vezes, utiliza-se um (1) minuto a 105 C.
acionar o aparelho e anotar o valor da umidade, em
percentual, que aparecer no display do aparelho.
Termogravimetria
Proceder conforme descrito em Anlise Trmica (5.2.27).
5.2.10 DETERMINAO
DE CINZAS SULFATADAS
(RESDUO POR INCINERAO)
Cinzas sulfatadas compreendem o resduo no voltil
incinerao na presena de cido sulfrico, conforme a
tcnica especifcada. Em geral, o ensaio visa a determinar o
teor de constituintes ou impurezas inorgnicas contidos em
substncias orgnicas. Tambm se destina determinao
de componentes inorgnicos em misturas e da quantidade
de impurezas contidas em substncias inorgnicas
termolbeis.
PROCEDIMENTO
Pesar exatamente de 1 a 2 g (ou a quantidade especifcada
na monografa) de substncia pulverizada, transferir para
cadinho (como exemplo: platina, porcelana, slica, quartzo)
previamente calcinado, esfriado em dessecador e tarado,
e adicionar cerca de 1 mL de cido sulfrico. Aquecer
brandamente at carbonizao em temperatura no
superior a 600
o
C 50
o
C. Esfriar e adicionar lentamente
cerca de 1 mL de cido sulfrico para umedecer o resduo,
carbonizar e incinerar com aquecimento gradativo at 600
o
C 50
o
C. Esfriar, pesar novamente e incinerar por mais
30 minutos. Repita este procedimento at que a diferena
entre duas pesagens sucessivas no seja maior que 0,5
mg. Um equipamento calibrado, por exemplo mufa, deve
ser utilizado para o controle da temperatura. Calcular a
5
porcentagem de cinzas sulfatadas em relao substncia
sob ensaio, utilizando o seguinte clculo:
em que:
P
1
= Peso do cadinho aps a calcinao e esfriamento (tara
do cadinho);
P
2
= Peso do cadinho com amostra aps a calcinao e
esfriamento em dessecador;
P
3
= Peso da amostra inicial
100 = Fator de porcentagem.
5.2.11 DETERMINAO DA
GRANULOMETRIA DOS PS
O grau de diviso ou a granulometria de ps expresso pela
referncia abertura nominal da malha do tamis utilizado.
Os tamises empregados so de ao inoxidvel, lato, no
sendo permitido o revestimento dos fos.
Na descrio dos ps so utilizados os termos abaixo:
P grosso - aquele cujas partculas passam em sua
totalidade pelo tamis com abertura nominal demalha de
1,70 mm e, no mximo, 40% pelo tamis com abertura
nominal de malha de 355 um.
P moderadamente grosso - aquele cujas partculas
passam em sua totalidade pelo tamis com abertura nominal
de malha de 710 um e, no mximo, 40% pelo tamis com
abertura nominal de malha de 250 um.
P semifno - aquele cujas partculas passam em sua
totalidade pelo tamis de abertura nominal de malha de 355
um e, no mximo, 40% pelo tamis com abertura nominal
de malha de 180 um.
P fno - aquele cujas partculas passam em sua totalidade
pelo tamis com abertura nominal de malha de 180 um.
P fnssimo - aquele cujas partculas passam em sua
totalidade pelo tamis com abertura nominal de malha de
125 um.
A determinao da granulometria de ps feita pelo
processo descrito abaixo, com o auxilio de tamises, cujas
caractersticas esto padronizadas na tabela anexa.
PROCEDIMENTO
A granulometria determinada com o auxlio de tamises
operados por dispositivo mecnico. Este tipo de dispositivo
reproduz os movimentos horizontais e verticais da operao
manual, atravs da ao mecnica uniforme. Para utilizar
este dispositivo, proceda da seguinte forma:
Separar, pelo menos, 4 tamises que estejam descritos na
Tabela 1, de acordo com as caractersticas da amostra.
Montar o conjunto com o tamis de maior abertura sobre
o de abertura menor. Colocar o conjunto sobre o receptor
de tamises.
Pesar cerca de 25 g da amostra (dependendo da natureza
do material, densidade do p ou grnulo e do dimetro dos
tamises a serem utilizados). Transferir a amostra para o
tamis superior, distribuindo uniformemente o p. Tampar
o conjunto.
Acionar o aparelho, por cerca de 15 minutos, com vibrao
adequada. Aps o trmino deste tempo, utilizando um
pincel adequado, remover toda a amostra retida na superfcie
superior de cada malha para um papel impermevel, e
pesar o p. Pesar tambm o p retido no coletor.
Calcular o percentual retido em cada tamis, utilizando o
seguinte clculo:
onde:
P
1
= Peso da amostra retida em cada tamis (em gramas);
P
2
= Soma dos pesos retidos em cada tamis e no coletor
(em gramas);
100 = Fator de porcentagem.
Tabela 1 - Abertura de malha dos tamises.
Nmero do tamis
(ABNT/ ASTM)
Orifcio do tamis
2 9,5 mm
3,5 5,6 mm
4 4,75 mm
8 2,36 mm
10 2 mm
20 850 m
30 600 m
40 425 m
50 300 m
60 250 m
70 212 m
80 180 m
100 150 m
120 125 m
200 75 m
230 63 m
270 53 m
325 45 m
400 38 m
500 25 m
635 20 m
_____________
* O nmero do tamis corresponde classifcao da Associao
Brasileira de Normas Tcnicas ABNT (1984), ISO 3310 1:2000.
5.2.12 COR DE LQUIDOS
A avaliao da cor de lquidos executada por comparao
da soluo sob anlise - preparada conforme instrues
da monografa - e solues-padro de cor (SC). Tais
solues encontram emprego como referncia para alguns
5
frmacos e em testes de carbonizao com cido sulfrico
especifcados em diversas monografas.
O processo comparativo, salvo especifcao em contrrio,
deve ser executado em tubos de ensaio de vidro transparente
e fundo chato, com dimetro da ordem de 16 mm, do tipo
empregado em ensaio limite de impurezas. Os tubos devem
ser os mais uniformes possveis.
Para a avaliao, utilizar volumes de 10 mL tanto para
a preparao amostra quanto para a preparao padro,
assegurando altura aproximada de 50 mm para os lquidos
nos tubos. Observar os tubos transversalmente contra fundo
branco, sob luz difusa. importante comparar as solues
nas mesmas condies, inclusive de temperatura (25
o
C).
A preparao amostra preparada de modo a apresentar
colorao semelhante da preparao de referncia
especifcada.
PADRES BSICOS
As solues de referncia de cor (SC) so obtidas a partir
de trs solues bsicas, a serem preparadas e armazenadas
em frascos hermticos. Dessas - com base na Tabela 1,
contendo indicaes de volumes para a preparao de 20
solues-padro de cor (SC) designadas com as letras
do alfabeto, de A a T - preparar a soluo ou solues
especifcadas para a comparao. Transferir os volumes
indicados (deixar a gua por ltimo) e homogeneizar,
diretamente, nos tubos de comparao.
Soluo base de cloreto de cobalto II
Preparar soluo de 25 mL de cido clordrico e 975
mL de gua. Dissolver 65 g de cloreto de cobalto(II) em
aproximadamente 900 mL dessa soluo e completar o
volume para 1000 mL com o mesmo solvente. Transferir,
usando pipeta, 5 mL dessa soluo para frasco de iodo de
250 mL, juntar 5 mL de perxido de hidrognio SR e 15
mL de hidrxido de sdio 5 M. Ferver durante dez minutos,
resfriar e adicionar 2 g de iodeto de potssio e 20 mL de
cido sulfrico 0,26 M. Titular com tiossulfato de sdio 0,1
M SV, juntando 3 mL de amido SI como indicador. Corrigir
o volume de titulante consumido por determinao em
branco. Cada mL de tiossulfato de sdio 0,1 M SV equivale
a 23,79 mg de CoCl
2
.6H
2
O. Ajustar o volume da soluo
adicionando quantidade sufciente de soluo de cido
clordrico e gua para obter soluo contendo exatamente
59,5 mg de CoCl
2
.6H
2
O por mL de soluo.
Soluo base de sulfato cprico
Preparar soluo de 25 mL de cido clordrico e 975 mL
de gua. Dissolver 65 g de sulfato cprico (CuSO
4
.5H
2
O)
em 900 mL dessa soluo e completar o volume para 1000
mL com a mesma soluo. Transferir, usando pipeta, 10
mL dessa soluo para frasco de iodo de 250 mL, juntar
40 mL de gua, 4 mL de cido actico glacial, 3 g de
iodeto de potssio e 5 mL de cido clordrico. Titular o
iodo liberado com tiossulfato de sdio 0,1 M SV, juntando
3 mL de amido SI como indicador. Corrigir o volume de
titulante consumido por determinao em branco. Cada
mL de tiossulfato de sdio 0,1 M SV equivale a 24,97 mg
de CuSO
4
.5H
2
O. Ajustar o volume da soluo adicionando
quantidade sufciente de mistura de cido clordrico e
gua para obter soluo contendo exatamente 62,4 mg de
CuSO
4
.5H
2
O por mL de soluo.
Soluo base de cloreto frrico
Preparar soluo de 25 mL de cido clordrico e 975 mL de
gua. Dissolver cerca de 55 g de cloreto frrico (FeCl
3
.6H
2
O)
em aproximadamente 900 mL dessa soluo e completar o
volume para 1000 mL com a mesma soluo. Transferir,
utilizando pipeta, 10 mL dessa soluo para frasco de iodo de
250 mL, adicionar 15 mL de gua, 3 g de iodeto de potssio
e 5 mL de cido clordrico. Deixar em repouso durante 15
minutos. Completar o volume da soluo para 100 mL com
gua e titular o iodo liberado com tiossulfato de sdio 0,1 M
SV, juntando 3 mL de amido SI como indicador. Corrigir o
volume de titulante consumido por determinao em branco.
Cada mL de tiossulfato de sdio 0.1 M SV equivale a 27,03
mg de FeCl
3.
6H
2
O. Ajustar o volume da soluo adicionando
quantidade sufciente de soluo de cido clordrico e
gua para obter soluo contendo exatamente 45,0 mg de
FeCI
3.
6H
2
O por mL de soluo.
Tabela 1 - Composio das solues-padro de cor (SC).
SC
Partes de
Soluo
base de
cloreto de
cobalto II,
em mL
Soluo
base de
cloreto
frrico,
em mL
Soluo
base de
sulfato
cprico,
em mL
gua,
para
completar
10 mL.
A 0,1 0,4 0,1 4,4
B 0,3 0,9 0,3 8,5
C 0,1 0,6 0,1 4,2
D 0,3 0,6 0,4 3,7
E 0,4 1,2 0,3 3,1
F 0,3 1,2 0,0 3,5
G 0,5 1,2 0,2 3,1
H 0,2 1,5 0,0 3,3
I 0,4 2,2 0,1 2,3
J 0,4 3,5 0,1 1,0
K 0,5 4,5 0,0 0,0
L 0,8 3,8 0,1 0,3
M 0,1 2,0 0,1 2,8
N 0,0 4,9 0,1 0,0
O 0,1 4,8 0,1 0,0
P 0,2 0,4 0,1 4,3
Q 0,2 0,3 0,1 4,4
R 0,3 0,4 0,2 4,1
S 0,2 0,1 0,0 4,7
T 0,5 0,5 0,4 3,6
5
5.2.13 ESPECTROMETRIA
ATMICA
5.2.13.1 ESPECTROMETRIA DE
ABSORO ATMICA
A espectrometria de absoro atmica utilizada para a
determinao de diversos elementos da tabela peridica e
consiste, basicamente, de quatro tcnicas: absoro atmica
com chama, gerao de hidretos, gerao de vapor frio e
forno de grafte. As tcnicas que utilizam chama e forno
de grafte como atomizadores permitem a determinao de
cerca de 70 elementos sendo a maioria metais. A tcnica
de gerao de hidretos permite a determinao de arsnio,
antimnio, selnio, bismuto, telrio, chumbo, ndio,
estanho, germnio e tlio; j a gerao de vapor frio
utilizada, basicamente, para a determinao de mercrio.
Para a determinao da concentrao do analito por
absoro atmica, a radiao de uma fonte de comprimento
de onda especfco de acordo com o elemento analisado
incide sob o vapor atmico contendo tomos livres desse
elemento no estado fundamental. A atenuao da radiao
proporcional concentrao do analito segundo a lei de
Lambert-Beer.
A instrumentao para absoro atmica consiste,
basicamente, de fonte de radiao, atomizador,
monocromador, detector e sistema de processamento de
dados. Como fontes de luz utilizam-se lmpadas de ctodo
oco e lmpadas de descarga sem eletrodo que emitem
radiao intensa de mesmo comprimento de onda que a
absorvida pelo elemento a ser determinado. O atomizador
pode ser constitudo de uma chama ou um forno de
grafte. O monocromador responsvel pela separao
do comprimento de onda desejado. A radiao incide no
monocromador por uma fenda estreita; em seguida,
separada em seus diferentes comprimentos de onda em
uma rede de difrao e, posteriormente, direcionada ao
detector. O detector, geralmente, um fotomultiplicador,
que transforma a energia luminosa em corrente eltrica, a
qual amplifcada e, posteriormente, interpretada por um
sistema de leitura.
PROCEDIMENTO
Para operar os espectrmetros de absoro atmica,
recomenda-se seguir as instrues do fabricante. As
determinaes so feitas por comparao com solues de
referncia contendo concentraes conhecidas do analito.
As determinaes podem ser efetuadas pelo Mtodo de
calibrao direta (Mtodo I) ou pelo Mtodo de adio
padro (Mtodo II). Recomenda-se o Mtodo I, salvo
quando especifcado.
Mtodo de calibrao direta (Mtodo I): preparar no
mnimo quatro solues de referncia do elemento a
ser determinado utilizando a faixa de concentrao
recomendada pelo fabricante do equipamento para o
analito. Todos os reagentes empregados no preparo da
amostra devem ser igualmente includos, nas mesmas
concentraes, no preparo das solues de referncia. Aps
a calibrao do equipamento com solvente, introduzir no
atomizador trs vezes cada uma das solues de referncia
e, aps a leitura, registrar o resultado. Lavar o sistema
de introduo da amostra com gua aps cada operao.
Traar a curva analtica para a mdia das absorvncias das
trs leituras para cada soluo referncia com a respectiva
concentrao. Preparar a amostra conforme indicado na
monografa ajustando sua concentrao para que essa situe-
se na faixa de concentrao das solues de referncia para
o analito. Introduzir a amostra no atomizador, registrar a
leitura e lavar o sistema de introduo da amostra com
gua. Repetir essa sequncia duas vezes. Determinar a
concentrao do elemento pela curva analtica utilizando a
mdia das trs leituras.
Mtodo de adio padro (Mtodo II): adicionar a, no
mnimo, quatro bales volumtricos volumes iguais
da soluo da substncia a ser determinada preparada
conforme indicado na monografa. Aos bales, exceto
em um, adicionar volumes determinados da soluo de
referncia especifcada de modo a obter uma srie de
solues contendo quantidades crescentes do analito.
Completar o volume de cada balo com gua. Aps calibrar
o espectrmetro com gua, registrar trs vezes as leituras
de cada soluo. Traar a curva analtica para a mdia das
absorvncias das trs leituras para cada soluo versus a
respectiva quantidade do analito adicionada soluo.
Registrar a quantidade do analito em mdulo na amostra
por extrapolao da curva analtica no eixo das abcissas.
5.2.13.1.1 Espectrometria de absoro atmica
com chama
O sistema consiste de uma cmara de pr-mistura na qual
o combustvel e o oxidante so misturados e do queimador
que recebe a mistura combustvel-oxidante. A soluo
introduzida atravs de um nebulizador pneumtico, no qual
gerado um fno aerossol que conduzido at a chama. A
quantidade de energia que pode ser fornecida pela chama
para a dissociao e atomizao da amostra proporcional
temperatura. Se uma chama de baixa temperatura
utilizada, a soluo pode no ser convertida em tomos
neutros. Por outro lado, se uma chama com temperatura
muito elevada for empregada poder ocorrer a formao de
grande quantidade de ons que no absorvem radiao da
fonte. Atravs da modifcao da proporo de oxidante e
combustvel utilizados para cada tipo de chama, possvel
alterar signifcativamente sua temperatura. As chamas mais
popularmente utilizadas so as produzidas por ar-acetileno
(2100 - 2400

C) e acetileno-xido nitroso (2650 - 2850
C). A mistura ar-acetileno utilizada para elementos com
temperaturas de atomizao inferiores como Na, K, Mg,
Cd, Zn, Cu, Mn, Co, etc. A chama gerada por acetileno-
xido nitroso aplicada a elementos refratrios como Al,
V, Ti, Si, U, entre outros.
5
INTERFERNCIAS
Interferncias fsicas: a utilizao da preparao amostra
com propriedades fsicas como viscosidade e tenso
superfcial diferentes da preparao padro pode resultar
em diferenas em relao aspirao e nebulizao
levando a leituras incorretas. Deve-se sempre que possvel
utilizar as preparaes com as mesmas propriedades fsicas
e constituintes de matriz.
Interferncia de ionizao: ocorre, normalmente, para
elementos alcalinos e alcalinos terrosos que so facilmente
ionizveis. Quanto maior o grau de ionizao menor a
absorvncia. Para minimizar interferncias de ionizao,
possvel utilizar chamas com temperaturas mais baixas
ou usar supressores de ionizao que so elementos
como o csio que se ionizam mais facilmente que o
analito aumentando, assim, o nmero de tomos no estado
fundamental.
Interferncias qumicas: a formao de compostos
termicamente estveis na chama como os xidos de alguns
elementos (Ca, Ti, Cr, V, Al, etc) reduz a populao de
tomos no estado fundamental. Isso pode ser resolvido
pelo aumento da temperatura da chama o que resulta na
dissociao desses compostos. Outra possibilidade a
utilizao de um agente supressor ou libertador que
possui maior afnidade pelo oxignio em relao ao analito
evitando a formao dos xidos. A soluo contendo cloreto
de csio e cloreto de lantnio, Soluo de Schinkel, a
mais comumente empregada.
Interferncias espectrais: ocorrem por meio da absoro
ou espalhamento da radiao selecionada para o analito.
As interferncias espectrais causadas por tomos so
pouco comuns e podem ser resolvidas alterando a linha
espectral utilizada. As interferncias causadas por espcies
moleculares so mais graves mas, normalmente, so
contornadas atravs da correo de fundo.
com gerao de hidretos
A espectrometria de absoro atmica com gerao de
hidretos uma tcnica utilizada para a determinao
de elementos formadores de hidretos volteis mais
comumente para As, Se, Sb, Bi, Ge, Sn, Pb e Te. O processo
constitudo de trs etapas principais: gerao, transporte
e atomizao dos hidretos. O sistema pode ser construdo
em batelada ou em fuxo. A gerao dos hidretos consiste
da reao do analito, normalmente em meio cido, com um
redutor (NaBH
4
). O transporte dos hidretos do frasco de
reao at a cela de quartzo feito atravs de um gs inerte
de arraste tal como argnio ou nitrognio. Para elementos
que absorvem em comprimento de onda inferior a 200 nm,
antes da etapa de gerao dos hidretos, deve-se efetuar uma
purga para remoo dos gases atmosfricos a fm de evitar
que esses gases absorvam a radiao da fonte. A atomizao
feita em uma cela de quartzo aquecida eletricamente ou
com um queimador tpico de sistemas de atomizao com
chama; a temperatura interna da cela de 850 a 1000
o
C.
O sinal obtido, normalmente, do tipo transiente; cerca de
20 segundos so necessrios para total integrao do sinal
para quase todos os elementos.
INTERFERNCIAS
Infuncia do Estado de Oxidao: os analitos possuem,
normalmente, mais de um estado de oxidao. Arsnio e
antimnio, por exemplo, possuem estados de oxidao III
e V e selnio e telrio possuem estados de oxidao IV

e
VI, respectivamente. Os estados de oxidao superiores,
em geral, so inertes para a converso a hidretos volteis;
necessria, portanto, a pr-reduo antes da determinao
nesses casos.
Elementos Formadores de Hidretos: interferncias mtuas
podem ocorrer entre os elementos formadores de hidretos,
como por exemplo, entre arsnio e selnio. Nesses casos,
a cintica de volatilizao e atomizao decisiva no
processo.
Elementos de Transio: alguns ons metlicos como
Cu
2+
e Ni
2+
, se presentes em elevadas concentraes, so
reduzidos formando precipitados que podem adsorver os
hidretos volteis.
com gerao de vapor frio
A espectrometria de absoro atmica com gerao de
vapor frio utilizada para a determinao de mercrio. O
equipamento e os reagentes so os mesmos utilizados no
sistema de gerao de hidretos, porm a cela de quartzo
no precisa ser aquecida, pois o mercrio reduzido a
mercrio metlico que voltil a temperatura ambiente.
No entanto, vapor dgua pode ser transportado pelo gs de
arraste e interferir na determinao. Para solucionar esse
problema, utiliza-se uma lmpada de infravermelho para
aquecer a cela de quartzo, prevenindo a condensao de
vapor dgua. Nesse caso, normalmente no necessrio
efetuar a purga, pois o comprimento de onda utilizado para
a determinao de Hg 253,7 nm no qual rara a absoro
de radiao por gases da atmosfera.
com forno de grafte
A espectrometria de absoro atmica com forno de grafte
uma tcnica abrangente que possui elevada sensibilidade.
O forno consiste de um tubo de grafte de 3 a 5 cm de
comprimento e de 3 a 8 mm de dimetro revestido com
grafte piroltico. A quantidade de amostra injetada no forno
varia de 5 L a 50 L e geralmente introduzida por um
sistema automatizado. O forno aquecido eletricamente
atravs da passagem de corrente eltrica de modo
longitudinal ou transversal. Fluxos de gases inertes como
argnio so mantidos externamente e internamente para
evitar a combusto do forno. Alm disso, o fuxo interno
expulsa o ar atmosfrico do forno e tambm os vapores
gerados durante as etapas de secagem e pirlise. Um forno
5
de grafte apresenta durabilidade de, aproximadamente,
300 ciclos dependendo do modelo.
A anlise com o forno de grafte pode ser dividida nas
seguintes etapas: secagem da amostra, pirlise, atomizao
e limpeza. A passagem de uma etapa para outra
marcada pelo o aumento da temperatura, portanto um
programa especial de aquecimento deve ser planejado.
Primeiramente realizada a secagem da amostra; nessa
etapa os solventes e cidos residuais so evaporados.
Aps a secagem, a temperatura elevada para remoo
da matriz (etapa de pirlise). Em seguida, o aumento da
temperatura leva atomizao do analito para posterior
quantifcao. Finalmente realizada a limpeza do forno
em alta temperatura (p. ex. 2600 C) durante poucos
segundos. A temperatura e a durao de cada etapa de
aquecimento podem ser controladas; isso essencial para
o desenvolvimento de metodologias analticas.
Curvas de atomizao e pirlise so usadas para otimizao
das temperaturas para tais processos. A curva de pirlise
permite determinar a temperatura mxima em que no
ocorre perda do analito. A curva de atomizao permite
determinar a temperatura mnima de atomizao do analito
com adequada sensibilidade. Recomenda-se que as curvas
de pirlise e atomizao sejam feitas sempre que uma
amostra desconhecida for analisada.
O processo de atomizao em um forno de grafte
complexo e depende de vrios fatores como o material
do forno e da plataforma, a atmosfera dentro do tubo, a
velocidade de aquecimento, a temperatura e a natureza
das substncias. Para a obteno de melhores resultados
recomenda-se o uso da plataforma de LVov no interior do
tubo e aquecimento transversal. O sinal obtido do tipo
transiente; so necessrios, no mximo, 12 segundos para
a integrao do sinal.
INTERFERNCIAS
Interferncias espectrais: interferncias causadas por
sobreposies de linhas entre tomos so pouco comuns.
A atenuao do feixe de radiao por espcies geradas
durante o processo de atomizao decorrentes da matriz
so mais frequentes. Para solucionar tal problema deve-se
eliminar efcientemente a matriz. O uso de um modifcador
de matriz e de um corretor de fundo so essenciais para a
confabilidade dos resultados.
Formao de substncias volteis: em amostras com
elevados teores de halognios (especialmente Cl) existe
a possibilidade de formao de substncias volteis do
analito que podero ser perdidas em temperaturas baixas
ocasionando em erro na anlise. Nesse caso, o uso de
um modifcador qumico capaz de formar complexos
termicamente estveis com o analito minimiza a formao
de substncias volteis. Alm disso, quando o modifcador
qumico combinado com a plataforma de Lvov, os
efeitos de interferncia de matriz so bastante reduzidos.
importante salientar que um determinado modifcador
qumico pode ser muito efcaz para alguns elementos,
porm inefciente para outros.
5.2.13.2 ESPECTROMETRIA DE EMISSO
ATMICA
Espectrometria de emisso atmica o mtodo que permite
determinar a concentrao de um elemento em uma amostra
pela medida da intensidade de uma das linhas de emisso
do elemento. A determinao feita no comprimento de
onda correspondente a essa linha de emisso. As fontes
de emisso em espectrometria de emisso atmica devem
possuir energia para gerar atmos neutros e para excitar os
elementos de interesse.
5.2.13.2.1 Fotometria de chama
A fotometria de chama uma tcnica que apresenta boa
sensibilidade sendo utilizada, principalmente, para a
determinao de metais alcalinos. O equipamento consiste
de uma chama normalmente produzida por mistura ar-gs
liquefeito de petrleo, um monocromador e um detector.
O solvente de escolha para o preparo da soluo amostra e
solues de referncia deve ser, preferencialmente, aquoso.
Os solventes orgnicos podem ser usados, desde que no
interfra na estabilidade da chama.
INTERFERNCIAS
As interferncias que ocorrem na fotometria de chama so
muito semelhantes s observadas na Espectrometria de
absoro atmica (5.2.13.1). No entanto, podem ocorrer
interferncias espectrais causadas pela emisso de bandas
de rotao-vibrao molecular, tais como OH (310-330
nm), NH (em torno de 340 nm), N
2
+
(em torno de 390 nm),
C
2
(em torno de 450 nm), etc.
SOLVENTES
O solvente deve ser selecionado com cautela. Se houver
diferena signifcativa de tenso superfcial ou viscosidade
entre amostra e soluo de referncia ocorrero variaes
nas taxas de aspirao e nebulizao e, em consequncia,
diferenas signifcativas nos sinais produzidos. Assim,
o solvente empregado no preparo das amostra e das
referncias deve ser o mais similar possvel.
PROCEDIMENTO
O equipamento deve ser operado de acordo com as
instrues do fabricante e no comprimento de onda
especifcado. Ajustar o zero com o solvente. Em seguida,
injetar a soluo de referncia mais concentrada e ajustar
a sensibilidade desejada. As determinaes so feitas
por comparao com solues de referncia contendo
concentraes conhecidas do analito. As determinaes
podem ser realizadas pelo Mtodo de calibrao direta
(Mtodo I) ou pelo Mtodo de adio padro (Mtodo II)
conforme descrito em Espectrometria de absoro atmica
(5.2.13.1).
5
5.2.13.2.2 Espectrometria de emisso tica com
plasma indutivamente acoplado
A espectrometria de emisso tica com plasma
indutivamente acoplado uma tcnica bastante abrangente
que possui elevada sensibilidade e com caracterstica
multielementar. De maneira geral, na espectrometria com
plasma indutivamente acoplado, o aerossol da amostra
introduzido em uma fonte de plasma, onde evaporado
e dissociado em tomos e ons livres que so excitados.
O plasma consiste de um gs parcialmente ionizado de
elevada temperatura (6000 a 10 000 C), eletricamente
neutro e com boa condutividade eltrica. Devido
alta temperatura do plasma gerada uma radiao
policromtica decorrente da emisso de vrios elementos e
ons presentes na amostra. Portanto, necessrio o uso de
um monocromador com elevada capacidade de resoluo
para separao dos comprimentos de onda caractersticos
para cada elemento. A deteco da radiao gerada por
comprimentos de onda especfcos pode ser aplicada para
anlise qualitativa e as intensidades destes comprimentos
de onda podem ser usadas para anlise quantitativa.
INSTRUMENTAO
Os instrumentos utilizados na espectrometria com plasma
indutivamente acoplado consistem basicamente do gerador
e do processador de sinal. O gerador formado por fonte
plasma e sistema de introduo de amostra (bomba
propulsora e nebulizador). O processador de sinal
compreendido por sistemas pticos e eletrnicos e unidade
de aquisio de dados.
Fontes de plasma: a mais comum o plasma indutivamente
acoplado. O plasma gerado em uma tocha que consiste
em trs tubos concntricos geralmente de quartzo.
Fluxos de gs geralmente argnio so mantidos nos trs
compartimentos formados pelos tubos concntricos. No
compartimento externo, o gs utilizado para a formao
do plasma. O compartimento intermedirio carreia o gs
auxiliar que responsvel por manter o plasma afastado
do compartimento interno e prevenir deposio de carbono
e sais provenientes da amostra nesse compartimento. O
fuxo de argnio interno carreia o aerossol da amostra
para o centro do plasma. Quando uma determinada
potncia (entre 700 e 1500 W) aplicada pelo gerador
de radiofrequncia na bobina de induo uma corrente
alternada gerada na bobina em uma frequncia de 27
ou 40 MHz. Essa oscilao na bobina resulta em um
intenso campo eletromagntico na extremidade da tocha.
Com o argnio fuindo pela tocha uma descarga eltrica
de alta voltagem aplicada no gs gerando eltrons e ons
argnio. Os eltrons so acelerados pelo campo magntico
e colidem com mais tomos de argnio gerando mais ons
e eltrons. A ionizao do argnio continua em uma reao
em cadeia gerando o plasma que consiste de tomos de
argnio, eltrons e ons argnio.
Sistema de deteco para espectrometria de Emisso
tica com Plasma Indutivamente Acoplado: todos os
elementos presentes no plasma emitem radiao ao
mesmo tempo, logo necessrio o uso de um sistema
de deteco multielementar. Os espectrmetros podem
ser simultneos ou sequenciais. Para a espectrometria de
emisso tica com plasma indutivamente acoplado, tanto
os espectrmetros sequenciais quanto os simultneos
so amplamente utilizados. A confgurao mais comum
para espectrmetros sequenciais a Czerny-Turner. J os
espectrmetros simultneos so encontrados, basicamente,
com as confguraes Echelle e Paschen-Runge.
INTERFERNCIAS
A sobreposio das linhas de emisso uma das principais
interferncias para espectrometria de emisso ptica com
plasma indutivamente acoplado. Este tipo de interferncia
pode ser eliminado com o uso de espectrmetros de alta
resoluo e procedimentos de correo de fundo. Muitas
interferncias espectrais so observadas na faixa de 200 a
400 nm, na qual mais de 200 000 linhas de emisso atmica
e bandas moleculares so observadas.
As interferncias fsicas so semelhantes aquelas em
Espectrometria de absoro atmica com chama
(5.2.13.1.1).
SOLVENTES
O solvente ideal para a espectrometria de emisso tica com
plasma indutivamente acoplado interfere o menos possvel
nos processos de emisso. O tipo de solvente deve ser
selecionado com cautela. Se houver diferena signifcativa
de tenso superfcial ou viscosidade entre amostra e
soluo de referncia, ocorrero variaes nas velocidades
de aspirao e nebulizao e, em consequncia, diferenas
signifcativas nos sinais produzidos. Assim, os solventes
empregados no preparo das amostras e das solues de
referncia devem ser o mais similar possvel.
PROCEDIMENTO
instrues do fabricante e no comprimento de onda
adequado para cada elemento. As determinaes so feitas
por comparao com solues de referncia contendo
concentraes conhecidas dos analitos. As determinaes
podem ser feitas pelo Mtodo de calibrao direta
(Mtodo I) ou pelo Mtodo de adio padro (Mtodo II)
conforme descrito em Espectrometria de absoro atmica
(5.2.13.1).
5.2.13.3 ESPECTROMETRIA DE MASSAS
COM PLASMA INDUTIVAMENTE
ACOPLADO
A espectrometria de massas com plasma indutivamente
acoplado utilizada para a determinao de diversos
elementos com elevada sensibilidade, na faixa de ppt, e
com capacidade multielementar.
5
INSTRUMENTAO
Assim como na espectrometria de emisso ptica
com plasma indutivamente acoplado (5.2.13.2.2), a
espectrometria de massas com plasma indutivamente
acoplado consiste de duas unidades principais: o gerador
de sinal e o processador de sinal. A diferena fundamental
que na espectrometria de massas com plasma indutivamente
acoplado o processador de sinal compreendido por
uma interface, um separador de massa e uma unidade
de aquisio de dados. A interface responsvel pela
amostragem e o transporte efciente dos ons do plasma a
presso atmosfrica (760 Torr) at o separador de massa
(10
-6
Torr) feita pela reduo de presso atravs da
aplicao de vcuo. A interface consiste em dois cones
metlicos com orifcios muito pequenos (da ordem de 1
mm de dimetro). Aps a gerao dos ons no plasma, eles
passam pelo primeiro cone (cone de amostragem) e, logo
aps, pelo segundo cone (skimmer). Aps a passagem dos
ons pelo skimmer, devido expanso, h a necessidade de
que os mesmos sejam focados para garantir sua chegada
at o analisador de massas. Os ons so focados pela ao
de uma lente inica ou conjunto de lentes inicas, que
consiste de um cilindro (ou uma srie de cilindros ou placas
perfuradas) metlico oco submetido a uma diferena de
potencial (normalmente na faixa de 2 a 15 V de corrente
contnua). Grande parte dos espectrmetros de massas
com plasma indutivamente acoplado comercializados
atualmente utiliza o quadrupolo como separador de
massas. O quadrupolo consiste em quatro barras metlicas
cilndricas ou hiperblicas de mesmo comprimento e
dimetro. Pela aplicao combinada de corrente contnua
(cc) e de corrente alternada (ca) aos eletrodos (quadrupolo),
somente os ons com uma determinada razo massa/carga
(m/z) so conduzidos atravs do quadrupolo. Os demais
ons colidem com os eletrodos ou so removidos do interior
do quadrupolo. Desta forma, os ons so sequencialmente
separados pelo quadrupolo. Vrios tipos de detectores
podem ser utilizados para coletar os ons na sada do
quadrupolo e converter em sinal eltrico, mas os mais
populares so os de dinodos discretos, copo de Faraday
(Faraday Cup) e Chaneltron.
INTERFERNCIAS
Assim como em outras tcnicas espectromtricas, a
espectrometria de massas com plasma indutivamente
acoplado possui interferncias espectrais e no espectrais.
As interferncias espectrais so dependentes da espcie
presente e podem ser divididas em quatro tipos principais:
poliatmicas, isobricas, ons de carga dupla e ons
de xidos refratrios. Este tipo de interferncia pode
ser corrigida pela simulao da composio da matriz,
pela escolha de outro istopo (quando possvel) ou pelo
uso de cela de reao e/ou coliso. Em alguns casos, as
interferncias espectrais podem ser corrigidas com o uso
de um programa de computador apropriado.
As interferncias no espectrais podem surgir por vrios
motivos: deposio sobre os cones da interface, presena de
outro elemento facilmente ionizvel, efeito espao carga,
entre outros. No entanto, a maioria das interferncias no-
espectrais pode ser corrigida pelo uso de padro interno.
Neste caso, o padro interno deve possuir razo massa/
carga e potencial de ionizao semelhante ao analito.
Escndio e Rdio, por exemplo, so amplamente utilizados
como padro interno para elementos com baixa e alta razo
massa/carga, respectivamente.
SOLVENTES
O solvente ideal para a espectrometria de massas com
plasma indutivamente acoplado deve interferir o menos
possvel nos processos de ionizao. O tipo de solvente
deve ser selecionado com cautela. Se houver diferena
signifcativa de tenso superfcial ou viscosidade entre
amostra e soluo de referncia, ocorrero variaes nas
velocidades de aspirao e nebulizao e, em consequncia,
diferenas signifcativas nos sinais produzidos. Assim,
os solventes empregados no preparo das amostras e das
solues de referncia devem ser o mais similar possvel.
PROCEDIMENTO
instrues do fabricante e com o istopo adequado para
cada elemento. Ajustar o zero com o solvente injetado no
equipamento. As determinaes so feitas por comparao
com solues de referncia, contendo concentraes
conhecidas dos analitos. As determinaes podem ser
feitas pelo Mtodo de Calibrao Direta (Mtodo I), pelo
Mtodo de Adio Padro (Mtodo II) ou pelo Mtodo de
Padro Interno (Mtodo III).
Mtodo de Calibrao Direta (Mtodo I). Preparar
ao menos quatro solues de referncia dos analitos,
abrangendo a faixa de concentraes recomendada pelo
fabricante do equipamento para os elementos em anlise.
Todos os reagentes empregados no preparo da soluo
amostra devem ser igualmente includos, nas mesmas
concentraes, s solues de referncia. Aps a calibrao
do equipamento com solvente, injetar, trs vezes, cada
uma das solues de referncia e, aps a estabilizao
da leitura, registrar o resultado, lavando o sistema com
o solvente aps cada injeo. Traar a curva analtica,
plotando a mdia das leituras de cada grupo de trs, com a
respectiva concentrao. Preparar a soluo da substncia
a ser determinada conforme indicado na monografa,
ajustando sua concentrao para que esta fque dentro
da faixa das concentraes das solues de referncia.
Introduzir a amostra no equipamento, registrar a leitura e
lavar o sistema com solvente. Repetir esta sequncia duas
vezes e, adotando a mdia de trs medies, determinar a
concentrao do analito pela curva analtica.
Mtodo de Adio Padro (Mtodo II). Adicionar a cada
um de, ao menos, quatro bales volumtricos similares,
volumes iguais de soluo da substncia a ser determinada,
preparada conforme indicado na monografa. Juntar a
todos os bales, com exceo de um, volumes medidos da
soluo de referncia especifcada, de modo a obter uma
srie de solues contendo quantidades crescentes dos
analitos. Diluir convenientemente o volume de cada balo
com gua. Aps calibrar o espectrmetro com gua, como
5
indicado acima, registrar trs vezes as leituras de cada
soluo.
Mtodo de Padro Interno (Mtodo III). Preparar ao menos
quatro solues de referncia dos analitos, abrangendo
a faixa de concentraes recomendada pelo fabricante
do equipamento para os analitos. Todos os reagentes
empregados no preparo da soluo amostra devem ser
igualmente includos, nas mesmas concentraes, s
solues de referncia. O padro interno deve ser adicionado
em todas as solues (solvente, solues de referncia e
amostras), com concentrao fxa e na mesma ordem de
grandeza dos analitos. Aps a calibrao do equipamento
com solvente, injetar, trs vezes, cada uma das solues
de referncia e, aps a estabilizao da leitura, registrar
o resultado, lavando o sistema com o solvente aps cada
injeo. Traar a curva analtica, plotando um grfco da
razo entre a mdia das intensidades das leituras de cada
grupo de trs e a intensidade do padro interno, com a
respectiva concentrao. Preparar a soluo da substncia
a ser determinada conforme indicado na monografa,
ajustando sua concentrao para que esta fque dentro
da faixa das concentraes das solues de referncia.
Injetar a amostra no equipamento, registrar a leitura e
lavar o sistema com solvente. Repetir esta sequncia duas
vezes e, adotando a mdia de trs medies, determinar a
concentrao do analito pela curva analtica.
5.2.14 ESPECTROFOTOMETRIA
NO ULTRAVIOLETA,VISVEL E
INFRAVERMELHO
As tcnicas espectrofotomtricas esto fundamentadas
na absoro da energia eletromagntica por molculas
que depende tanto da concentrao quanto da estrutura
das mesmas. De acordo com o intervalo de frequncia da
energia eletromagntica aplicada, a espectrofotometria
de absoro pode ser dividida em ultravioleta, visvel e
infravermelho, podendo ser utilizada como tcnica de
identifcao e quantifcao de substncias.
RADIAO ELETROMAGNTICA
A radiao eletromagntica uma forma de energia que se
propaga como ondas e, geralmente, pode ser subdividida
em regies de comprimento de onda caracterstico.
Ainda, pode ser considerada, tambm, como um fuxo
de partculas denominadas ftons (ou quanta). Cada
fton contm determinada energia cuja magnitude
proporcional frequncia e inversamente proporcional
ao comprimento de onda. O comprimento de onda () ,
geralmente, especifcado em nanmetros, nm (10
-9
m), e
em alguns casos em micrmetros, um (10
-6
m). No caso
do infravermelho a radiao eletromagntica pode ser,
tambm, descrita em termos de nmero de onda e expressa
em cm
-1
. As faixas de comprimento de onda de energia
eletromagntica de interesse para a espectrofotometria so
as descritas na Tabela 1.
Tabela 1 Faixas de comprimento de onda
de interesse para a espectrofotometria.
Regio
Faixa de comprimento de
onda
Ultravioleta (UV) 190 380 nm
Visvel (VIS) 380 780 nm
Infravermelho prximo (NIR) 780 2500 nm (12800 4000 cm
-1
)
Infravermelho mdio (MIR) 4 25 um (2500 400 cm
-1
)
Infravermelho distante 25 300 um (400 33 cm
-1
)
INTERAO ENERGIA-MATRIA
A energia total da molcula envolve a energia derivada
da vibrao (energia vibracional, devida ao movimento
relativo de tomos ou grupos de tomos constituintes da
molcula); da rotao (energia rotacional, devida rotao
da molcula em torno de um eixo) e, normalmente, da
energia eletrnica, gerada pela confgurao de eltrons na
molcula.
As molculas ao absorverem energia sofrem uma transio
para um estado de maior energia ou estado excitado. A
passagem ao estado excitado no de natureza contnua
realizando-se, geralmente, em etapas chamadas de
transies. Na regio do ultravioleta e visvel as transies
so eletrnicas e ocorrem em pores da molcula
chamadas de cromforos. Estas transies compreendem
promoes de eltrons de orbitais moleculares ocupados,
geralmente, o e ligantes e no ligantes, para os orbitais
de energia imediatamente superiores, antiligantes * e o*.
Na regio do infravermelho mdio (MIR) ocorrem
somente transies de energia vibracional por ser a
radiao nesta regio insufcientemente energtica para
promover transies eletrnicas. As vibraes induzidas
por radiao infravermelha compreendem estiramentos e
tensionamentos de ligaes inter-atmicas e modifcaes
de ngulos de ligaes.
Os espectros no infravermelho prximo (NIR) so
caracterizados pela absoro da radiao por sobretons
e combinao de modos vibracionais fundamentais de
ligaes como C-H, N-H, O-H e S-H. As bandas de um
espectro NIR, so, geralmente, mais fracas que as bandas
do espectro MIR. Informaes qumicas e fsicas, de
caracterstica qualitativa e quantitativa, podem ser obtidas
a partir do espectro NIR. Porm, a comparao direta entre
o espectro da amostra e da substncia qumica de referncia
no recomendada.
A espectrofotometria NIR amplamente utilizada
para anlises fsicas e qumicas, como por exemplo:
quantifcao e identifcao de princpios ativos
e excipientes, identifcao de formas cristalinas e
polimorfas, determinao do tamanho de partcula, padro
de desintegrao e controle de processo.
MODOS DE AQUISIO DOS ESPECTROS
Os espectros podem ser obtidos utilizando-se diferentes
modos de aquisio. No caso da espectrofotometria
UV/VIS o principal modo a transmisso. No caso da
5
espectrofotometria NIR e MIR os espectros podem ser
adquiridos utilizando o modo transmisso e refexo. Esta
ltima subdivide-se em refexo difusa e refexo total
atenuada. H ainda a possibilidade da combinao dos
modos de transmisso e refexo, chamada de transrefexo.
Transmisso: a medida da diminuio da intensidade da
radiao em determinados comprimentos de onda quando
a radiao passa atravs da amostra. A amostra disposta
no feixe ptico entre a fonte e o detector. A transmisso (T)
pode ser calculada pela frmula abaixo:
0
I
I
T =
I
0
= intensidade da radiao incidente
I = intensidade da radiao transmitida.
Os espectros em transmisso podem ser convertidos para
absorvncia:
Refexo difusa: a medida da razo da intensidade da luz
refetida pela amostra e a luz refetida por uma superfcie
refetiva de referncia. A radiao no absorvida refetida
em direo ao detector.
Refexo total atenuada: a radiao infravermelha propaga-
se no interior de um elemento de refexo interna (alto
ndice de refrao) atravs de refexes nas paredes deste
elemento. A amostra colocada em contato com a parede
deste elemento de refexo onde interage com a radiao
infravermelha (onda evanescente).
Transrefexo: esse modo a combinao dos modos de
transmisso e refexo. Na medida por transrefexo um
espelho ou uma superfcie refetiva usado para refetir
a radiao transmitida atravs da amostra, incidindo uma
segunda vez na mesma para, ento, dobrar o caminho
ptico. A radiao no absorvida e refetida em direo ao
detector.
INSTRUMENTAO UTILIZADA NO ULTRAVIOLE-
TA (UV) E VISVEL (VIS)
Espectrofotmetros utilizados na regio do ultravioleta
e visvel so dotados, fundamentalmente, de fonte de
radiao; seletor de comprimento de onda; celas de
absoro (cubetas), para insero de solues de amostras
no feixe de luz monocromtica; detector de radiao e uma
unidade de leitura e de processamento de sinal.
As lmpadas mais empregadas como fonte de radiao na
espectrofotometria na regio do ultravioleta e visvel so de
deutrio e tungstnio, que fornecem radiao compreendida
entre 160 a 380 nm e 320 a 2500 nm, respectivamente. Os
instrumentos para as regies do UV/VIS so, geralmente,
equipados com um ou mais dispositivos para restringir
a radiao que est sendo medida dentro de uma banda
estreita que absorvida ou emitida pelo analito. A maioria
dos equipamentos utiliza um monocromador ou fltro
para isolar a banda de comprimento de onda desejada de
forma que somente a banda de interesse seja detectada e
medida. Os monocromadores, geralmente, possuem uma
rede de difrao, enquanto que os fltros podem ser de
interferncia ou de absoro. Os fotmetros ou colormetros
so instrumentos mais simples que utilizam um fltro para
seleo do comprimento de onda e so utilizados, geralmente,
na regio do visvel. Os espectrofotmetros, por sua vez,
utilizam monocromadores para seleo do comprimento de
onda e so utilizados nas regies do UV/VIS.
O compartimentos utilizados para receber a amostra so
denominados de cubetas que devem apresentar janelas que
sejam transparentes na regio espectral de interesse. Para a
regio do UV so necessrias cubetas de quartzo enquanto
que, para a regio do VIS, pode-se empregar cubetas de
vidro ou acrlico.
Os principais tipos de detectores so os fototubos, os
arranjos de fotodiodos e os dispositivos de transferncia
de carga. Os fototubos so os detectores mais simples e
sua resposta est baseada no efeito fotoeltrico. O detector
de arranjo de diodos permite que todos os comprimentos
de onda possam ser monitorados simultaneamente. Os
dispositivos de transferncia de carga tm sido empregados
em nmero crescente em instrumentos espectroscpicos.
Os espectrofotmetros podem ser encontrados na
confgurao de feixo nico, feixe duplo e multicanal.
Os instrumentos de feixe duplo apresentam a vantagem
de compensar qualquer futuao na potncia radiante da
fonte, quando comparados com os instrumentos de feixe
simples. J os instrumentos multicanal so mais recentes,
utilizam detectores do tipo arranjo de diodo e dispositivos
de transferncia de carga e permitem a obteno do espectro
total de uma amostra em menos de um segundo. Nestes
instrumentos o sistema dispersivo um espectrgrafo de
rede colocado aps a clula da amostra.
Espectrofotmetros podem dispor de registradores grfcos
que permitem a obteno de espectros de absoro.
Tal recurso importante para fns de caracterizao da
substncia a partir da obteno dos comprimentos de
onda onde se obtm as maiores absorvncias (
mximo
).
Atualmente, a maior parte dos espectrofotmetros
apresenta conexo a um microcomputador e programa
apropriado, que permitem a obteno dos espectros de
absoro das substncias em meio digital.
INSTRUMENTAO UTILIZADA NO INFRAVERME-
LHO MDIO (MIR) E INFRAVERMELHO PRXIMO
(NIR)
Os espectrofotmetros utilizados para aquisio de
espectros no infravermelho mdio e prximo consistem
de uma fonte de luz, monocromador ou interfermetro e
detector, e permitem a obteno de espectros na regio
compreendida entre 750 a 2500 nm (13300 a 400 cm
-1
).
Atualmente, os espectrofotmetros no infravermelho
mdio (4000 a 400 cm
-1
) utilizam o interfermetro ao
invs do monocromador e a radiao policromtica incide
sob a amostra e os espectros so obtidos no domnio da
frequncia com auxlio da transformada de Fourier.
5
Clulas de transmisso, acessrios para refexo difusa e
refexo total atenuada so os acessrios mais comuns para
a aquisio dos espectros.
A espectrofotometria no infravermelho prximo (NIR)
uma tcnica que permite a obteno de espectros na regio
compreendida entre 13300 a 4000 cm
-1
(750 a 2500 nm).
Os espectrofotmetros na regio do NIR so constitudos
de fonte de radiao apropriada, monocromador ou
interfermetro e detector. Cubetas convencionais, fbras
pticas, clulas de transmisso e acessrios para refexo
difusa so os acessrios mais comuns para aquisio dos
espectros.
IDENTIFICAO POR ESPECTROFOTOMETRIA
A identifcao de diversas substncias farmacuticas
pode ser feita utilizando as regies ultravioleta, visvel,
infravermelho mdio e infravermelho prximo. De maneira
geral, a espectrofotometria nas regies UV/VIS requer
solues com concentrao na ordem de 10 ug mL
-1
da
substncia enquanto que para o MIR e NIR so necessrias
concentraes na ordem de 100 mg mL
-1
. Apesar de mais
sensvel os espectros obtidos nas regies do UV/VIS
apresentam menor especifcidade quando comparados com
os espectros na regio do MIR. No caso do MIR as medidas
realizadas utilizando os modos de refexo (difusa e total
atenuada) fornecem informao espectral equivalente
quela obtida pelo modo de transmisso. Quando possvel
deve ser feita a comparao do espectro obtido frente ao
espectro da substncia qumica de referncia.
Ultravioleta (UV) e visvel (VIS)
Diversas monografas incluem espectros de absoro no
ultravioleta como prova de identifcao. Nestes casos,
haver especifcao da extenso da varredura, solvente,
concentrao da soluo e espessura da cubeta. Alguns
frmacos requerem o uso de padres de referncia. As
leituras de padro e amostra so efetuadas simultaneamente
e em condies idnticas quanto a comprimento de onda,
tamanho de cubeta, etc.
Para a caracterizao utilizando a espectrofotometria UV/
VIS, o frmaco dissolvido utilizando solvente apropriado.
Muitos solventes so apropriados incluindo gua, alcois,
teres e solues cidas e alcalinas diludas. Deve-se
observar para que os solventes no absorvam na regio
espectral que est sendo utilizada.
Infravermelho mdio (MIR)
A espectrofotometria no MIR um ensaio de identifcao
por excelncia sendo capaz de diferenciar substncias com
diferenas estruturais. Das trs regies do infravermelho
(prximo, mdio e distante) a regio compreendida entre
4000 a 400 cm
-1
(infravermelho mdio) a mais empregada
para fns de identifcao.
Os espectros de transmisso de amostras slidas so
obtidos a partir da sua disperso em leo mineral ou
mediante a preparao de pastilhas de haletos de potssio e
sdio. Disperses da amostra so preparadas triturando-se
cerca de 5 mg da substncia em uma gota de leo mineral
de grau espectroscpico. A pasta obtida espalhada entre
duas janelas de brometo de potssio ou cloreto de sdio.
Para o preparo das pastilhas cerca de 1 mg da amostra
triturada com aproximadamente 300 mg de brometo de
potssio de grau espectroscpico.
Para amostras slidas em p opacas a transmisso da
radiao infravermelha, o espectro pode ser, tambm,
adquirido mediante a utilizao de acessrio para
refexo difusa. Neste acessrio a radiao infravermelha
incide diretamente na amostra em p. Parte da radiao
absorvida e em seguida refetida de forma difusa em
direo ao detector. Neste caso a amostra na forma de p
misturada com brometo de potssio, aproximadamente,
5% (p/p) e disposta no acessrio de refexo difusa.
Por fm, o espectro de amostras slidas em p e pastosas,
pode ser obtido utilizando acessrio para refexo total
atenuada. A amostra na forma de p disposta sob o cristal
de alto ndice de refrao onde entra em contato com a
radiao infravermelha no exigindo preparo prvio da
amostra.
UTILIZAO QUANTITATIVA DA ESPECTROFOTO-
METRIA
Espectrofotometria no UV/VIS
A anlise espectrofotomtrica quantitativa por absoro
tem como princpio a relao direta existente entre a
quantidade de luz absorvida e a concentrao da substncia,
tambm conhecida como lei de Beer.
Quando a concentrao (c) expressa em mol. L
-1
e o
caminho ptico (b) em centmetro, a equao torna-se:
A = c b c
em que
A = absorvncia, logaritmo do inverso da transmitncia (A
= - log T)
c = absortividade molar.
T = transmitncia
Sabendo-se que a transmitncia o quociente entre a
intensidade da radiao transmitida pela soluo (I
0
) e a
intensidade da radiao incidente (I), tem-se:
log
10
(I
0
/I) = A = c b c
A intensidade da absoro da luz ultravioleta por
substncias cromforas , em geral, expressa como
absortividade molar, nas condies de mxima absoro.
Se a massa molar da substncia no for conhecida,
possvel expressar a intensidade de absoro pela equao
da absortividade especfca A (1%, 1 cm):
A (1%, 1 cm) = A / b c
em que A(1%, 1 cm) corresponde a absorvncia da soluo
a 1% (p/v) da substncia quando o caminho ptico 1 cm.
5
Para evitar possveis desvios na lei de Beer deve-se
procurar trabalhar com solues diludas (da ordem de
0,01 M), evitando associaes entre as molculas, e com
radiaes monocromticas.
Espectrofotometria no Infravermelho prximo
A quantifcao atravs da espectrofotometria no NIR pode
ser realizada utilizando dados obtidos de um mtodo de
referncia ou a partir de um conjunto de calibrao com
amostras de composio conhecida. Os espectros podem ser
obtidos utilizando os modos de transmisso e refexo com
o auxlio de acessrios adequados. Num primeiro momento
os dados espectrais so tratados atravs de transformaes
matemticas com o objetivo de reduzir fontes de variaes
indesejadas antes da etapa de calibrao. O processo de
calibrao consiste na construo de um modelo matemtico
que relaciona a resposta do espectrofotmetro a uma
propriedade da amostra. Existe uma srie de algoritmos
quimiomtricos que podem ser utilizados na calibrao.
Geralmente, estes algoritmos esto disponveis em
softwares e disponibilizados junto com o espectrofotmetro.
Os principais algoritmos de calibrao so: regresso linear
mltipla (do ingls, multiple linear regression - MLR),
mnimos quadrados parciais (do ingls, partial least squares
- PLS) e regresso de componentes principais (do ingls,
principal component regression - PCR).
A validao de uma metodologia que emprega a
espectrofotometria NIR semelhante quela requerida
para qualquer procedimento analtico e, geralmente,
estabelecida a partir de ferramentas quimiomtricas. Os
principais parmetros a serem avaliados so: especifcidade,
linearidade, faixa de trabalho, exatido, preciso e robustez.
A extenso da especifcidade dependente do procedimento
utilizado. A demonstrao da especifcidade dos mtodos
NIR pode ser feita atravs das seguintes formas: (i) os
comprimentos de onda utilizados nos modelos de calibrao
devem corresponder a bandas do analito de interesse; (ii)
para calibrao utilizando PLS os coefcientes devem ser
plotados e as regies de maior coefciente comparadas com
o espectro do analito; (iii) variaes na matriz da amostra
no devem afetar de forma signifcativa a quantifcao do
analito.
A validao da linearidade do mtodo NIR envolve a
demonstrao da resposta linear da tcnica para amostras
distribudas atravs de uma faixa defnida de calibrao.
O coefciente de correlao, r, no uma ferramenta
adequada para verifcao de linearidade, mas a medida
da variao dos dados que adequadamente modelada pela
equao. A melhor maneira de demonstrar a linearidade
dos mtodos NIR atravs da avaliao estatstica dos
valores da inclinao e intercepto obtidos para o conjunto
de validao.
A faixa de trabalho dos valores de referncia do analito do
conjunto de validao defne a faixa de trabalho do mtodo
NIR. Controles devem ser estabelecidos para garantir que
os resultados fora da faixa de trabalho no sejam aceitos. A
validao de um mtodo NIR deve gerar um valor anmalo
quando uma amostra contendo analito fora da faixa de
trabalho for analisada.
A exatido de um mtodo NIR demonstrada pela
correlao dos resultados NIR com os dados da tcnica
de referncia. Alm disso, a exatido pode ser verifcada
a partir da proximidade do erro padro de predio (SEP)
com o erro do mtodo de referncia. O erro do mtodo
de referncia deve ser conhecido com base nos valores
histricos. Diferentes mtodos estatsticos podem ser
utilizados para verifcar diferenas estatsticas entre
os resultados obtidos pelo mtodo NIR e o mtodo de
referncia.
A preciso de um mtodo NIR expressa a concordncia
entre uma srie de medidas obtidas sob condies pr-
determinadas. H dois nveis de preciso que podem ser
considerados: a repetitividade e a preciso intermediria. A
preciso de um mtodo NIR tipicamente expressa como
coefciente de variao.
A robustez do mtodo NIR pode ser verifcada atravs
de mudanas de parmetros do mtodo como: condies
ambientais, temperatura da amostra, caractersticas da
amostra e mudanas instrumentais.
5.2.15 ESPECTROFOTOMETRIA
DE FLUORESCNCIA
Algumas substncias podem ser analisadas com
maior sensibilidade e especifcidade por meio de
mtodos fuorimtricos do que por outras tcnicas
espectrofotomtricas. A espectrofotometria de
fuorescncia, ou espectrofuorimetria, compreende a
medida da fuorescncia emitida quando estas substncias
- ditas fuorescentes - so expostas radiao ultravioleta,
visvel ou outras tambm de natureza eletromagntica.
Tais radiaes promovem a excitao de eltrons da
molcula para nveis energticos mais elevados. Aps
curta permanncia no estado excitado - cerca de 10
-8
a 10
-4

segundos - os eltrons retornam ao estado fundamental por
meio de processo no radioativo, denominado desativao
por coliso, aliado a processo radioativo chamado
luminescncia (fuorescncia ou fosforescncia), ao
contrrio do que ocorre com a maioria das substncias em
que o retorno ao estado menos energtico no compreende
emisso de luz. Na desativao por coliso, a energia se
perde como calor nos choques entre as molculas. No
processo radiante, o excesso de energia reemitido com
intensidade mxima em comprimento de onda maior (em
cerca de 20 a 30 nm) que o da radiao excitatria absorvida,
devido perda energtica que acontece no processo.
Sendo de natureza fuorescente, a radiao emitida pela
substncia cessa quando a fonte de energia retirada e esta
caracterstica a distingue da fosforescncia, que prossegue
por algum tempo aps o trmino da excitao.
A intensidade da luz emitida por uma soluo fuorescente
, em determinadas condies, proporcional
concentrao do soluto e, em consequncia, utilizada para
fns analticos. A medida da intensidade de fuorescncia
5
no pode ser usada diretamente para a determinao da
concentrao do analito. Por isso, a determinao feita
atravs da comparao da intensidade de fuorescncia
obtida para uma soluo amostra com solues padro,
cujas concentraes so conhecidas. O fundamento
da espectrofuorescncia consiste, pois, em excitar a
substncia com radiao no comprimento de onda de
mxima absoro e medir comparativamente a intensidade
da luz fuorescente emitida frente a um padro.
DEFINIES
Intensidade de fuorescncia: Expresso emprica
da atividade fuorescente, em unidades arbitrrias
proporcionais resposta do detector.
Espectro de excitao de fuorescncia: Representao
grfca do espectro de ativao, apresentando a intensidade
da radiao emitida por substncia ativada (ordenada) e
o comprimento de onda da radiao incidente excitatria
(abcissa).
Espectro de emisso de fuorescncia: Representao
grfca da distribuio espectral da radiao emitida por
substncia ativada, apresentando a intensidade da radiao
emitida como ordenada e o comprimento de onda como
abcissa.
EQUIPAMENTO
A determinao da intensidade de fuorescncia pode ser
efetuada em simples fuormetro de fltro (fuormetro),
em espectrofotmetros de absoro adaptados ou em
espectrofotmetro de fuorescncia (espectrofuormetro).
O fuormetro de fltro compreende fonte de luz, fltro
primrio, cmara de amostra, fltro secundrio e sistema de
deteco. Nos fuormetros deste tipo, o detector encontra-
se disposto a 90
o
em relao luz incidente. Tal disposio
em ngulo reto permite que a luz incidente atravesse a
soluo da amostra sem interferir com o sinal fuorescente
captado pelo detector. Tal mecanismo no impede que
parte da luz difusa atinja o detector devido s propriedades
difusoras inerentes s solues ou em funo da presena
de partculas slidas suspensas. Esta disperso residual
controlada com emprego de fltros. O fltro primrio
seleciona a radiao de comprimento de onda apropriado
excitao da amostra enquanto o fltro secundrio seleciona
a radiao fuorescente de comprimento de onda maior,
bloqueando o acesso da radiao dispersa ao detector.
Em sua maioria, os detectores de fuormetros de fltro so
equipados com vlvulas fotomultiplicadoras, havendo,
contudo, diferenas entre tipos de equipamentos quanto
regio espectral de mxima sensibilidade. Amplifcada
a corrente eltrica gerada no fotomultiplicador, obtm-
se leitura correspondente em instrumento analgico ou
digital.
Espectrofotmetros de fuorescncia, por sua vez,
diferenciam-se de fuormetros por no disporem de fltros e
sim de monocromadores de prisma ou de grade de difrao,
proporcionando maior seletividade de comprimento de
onda e fexibilidade.
Tanto fuormetros como espectrofotmetros de
fuorescncia permitem emprego de diversas fontes de luz.
Lmpadas de mercrio ou tungstnio, embora comuns,
so substitudas com vantagem pela lmpada de arco de
xennio alta presso, pois esta proporciona, ao contrrio
das demais, espectro contnuo desde o ultravioleta at o
infravermelho. De qualquer forma, a radiao muito
intensa e no deve jamais ser observada com os olhos
desprotegidos, sob risco de leses permanentes.
Os monocromadores, por sua vez, dispem de ajuste
de largura de fenda. Fendas estreitas propiciam maior
resoluo e menor rudo espectral enquanto fendas largas
asseguram maior intensidade de luz em detrimento destas
caractersticas. A largura de fenda a ser adotada funo da
diferena entre os comprimentos de onda da luz incidente
e emitida, assim como do nvel de sensibilidade necessrio
anlise.
A cmara de amostra geralmente permite uso de tubos
redondos e cubetas quadradas, semelhantes s empregadas
em espectrofotometria de absoro, salvo pela necessidade
de as quatro paredes verticais serem polidas. Volumes de
amostra da ordem de 2 a 3 mL so adequados embora alguns
instrumentos possam estar dotados de cubetas pequenas,
com capacidade para 0,1 a 0,3 mL ou ainda de suportes
para capilares que requerem volumes ainda menores.
Calibrao do equipamento
Fluormetros e espectrofuormetros devem ser calibrados
com substncias fuorforas, estveis, de modo a assegurar
resultados reprodutveis. As variaes so, em geral,
devidas a alteraes na intensidade das lmpadas ou na
sensibilidade do tubo fotomultiplicador. O fuorforo
pode ser a amostra pura da substncia a ser analisada ou
qualquer outra substncia fuorescente de fcil purifcao,
cujos comprimentos de onda de absoro e fuorescncia
sejam semelhantes aos da substncia em anlise. Por
exemplo, quinina em cido sulfrico 0,05 M um
padro adequado para fuorescncia azul. Por outro lado,
fuorescena em hidrxido de sdio 0,1 M apropriada para
fuorescncia verde e rodamina fuorforo de escolha na
fuorescncia vermelha. A escala de comprimentos de onda
do espectrofotmetro de fuorescncia tambm requer
calibrao peridica.
PREPARO DAS SOLUES
A escolha do solvente utilizado na preparao de solues
fuorescentes requer precaues. Natureza, pureza e pH
do solvente so parmetros relevantes na intensidade e
distribuio espectral da fuorescncia. Em consequncia,
recomendvel ater-se ao volume especifcado em mtodos
estabelecidos. Muitas substncias apresentam fuorescncia
em solventes orgnicos, mas so praticamente no
fuorescentes quando dissolvidas em gua. Assim, cabe a
experimentao em diversos solventes para determinar a
propriedade fuorescente de uma substncia.
5
Para fns quantitativos, fundamental que a intensidade
da fuorescncia guarde relao linear com a concentrao
da amostra dentro de limites compatveis com a tcnica.
Se a soluo for muito concentrada, parte signifcativa da
luz incidente ser absorvida na periferia da cubeta e menor
ser a quantidade de radiao a alcanar a regio central.
Isto signifca que a prpria substncia atuar como fltro
interno. Todavia, tal fenmeno raro, considerando-se
que a espectrofotometria de fuorescncia uma tcnica de
elevada sensibilidade, permitindo o emprego de solues
de concentraes da ordem de 10
-5
a 10
-7
M.
Devido aos limites de concentrao usualmente estreitos
nos quais a fuorescncia proporcional concentrao
da substncia, tem-se como regra a obedincia relao
(c-d)/(a-b) = 0,40 a 2,50. Neste caso, a a intensidade de
fuorescncia da soluo de referncia, b a intensidade
do branco correspondente, c a intensidade da soluo-
amostra e d a intensidade do branco correspondente.
As determinaes de fuorescncia so sensveis
presena de partculas slidas nas solues. Tais impurezas
reduzem a intensidade do feixe incidente, produzindo
falsas leituras elevadas devido a refexes mltiplas na
cubeta. , portanto, necessrio eliminar estes slidos por
centrifugao ou fltrao antes da leitura, levando em
considerao, contudo, que alguns papis de fltro podem
conter impurezas fuorescentes.
A presena de oxignio dissolvido no solvente exerce
efeito atenuador sobre a intensidade da fuorescncia e cabe
elimin-lo usando, por exemplo, passagem de corrente
de nitrognio, hlio ou qualquer gs inerte na soluo,
previamente leitura.
O controle de temperatura tambm importante. Em
algumas substncias, a emisso de fuorescncia pode
diminuir de 1 a 2% a cada aumento de temperatura de 1
o
C.
Em vista disso, quando for necessria mxima preciso,
recomendado o emprego de cubetas termostatizadas.
Entretanto, para anlise de rotina, no h necessidade
deste recurso desde que as determinaes sejam feitas
com rapidez sufciente para evitar aquecimento devido
exposio da soluo luz intensa.
Algumas substncias fuorescentes so sensveis luz
e, quando expostas radiao luminosa intensa do
espectrofotmetro de fuorescncia, podem se decompor
em produtos mais ou menos fuorescentes. Tal efeito pode
ser detectado observando-se a resposta do detector em
relao ao tempo e atenuado com a reduo da intensidade
luminosa incidente pela utilizao de fltros.
5.2.16 TURBIDIMETRIA E
NEFELOMETRIA
Turbidimetria e nefelometria - variantes de
espectrofotometria - destinam-se avaliao quantitativa
de substncias em funo da turbidez de suas suspenses,
proporcional a seu poder de difrao sobre luz incidente
(efeito Tyndall).
Na turbidimetria, tambm conhecida por opacimetria,
mede-se a intensidade da luz transmitida no mesmo
sentido de direo da luz incidente. Embora existam
turbidmetros, destinados especifcamente medida de
turbidez, colormetros e espectrofotmetros convencionais
so satisfatrios medida da luz transmitida desde que
ajustados para comprimento de onda apropriado.
A nefelometria (ou difusimetria), por sua vez, compreende
a medida da intensidade de luz difundida (refetida)
pelas partculas em suspenso, em ngulo reto ao feixe
de luz incidente. Mais uma vez, alm de nefelmetros,
possvel o emprego de colormetros e espectrofotmetros
na medida nefelomtrica. Para tanto, cabe modifc-los
de forma a permitir a captao perpendicular ao ngulo
da luz incidente, seja por transferncia da fonte de luz,
seja por alterao de posio do detector. Fluormetros,
a exemplo de nefelmetros, destinam-se medida de luz
dispersa (posicionamento do detector em ngulo de 90
em
relao luz incidente) sendo, portanto, compatveis com
a nefelometria.
Turbidncia
Turbidncia (S) em analogia transmitncia (T), defnida
em Espectrofotometria de absoro no utlravioleta, visvel
e infravermelho (5.2.14) a expresso ofcial de disperso
da luz produzida por partculas suspensas. E determinvel
por turbidimetria ou nefelometria, correspondendo
equao
em que
P
0
= intensidade de radiao incidente;
P = intensidade de radiao transmitida;
b = espessura da amostra (cubeta);
C = concentrao da amostra;
d = dimetro mdio das partculas;
= comprimento de onda;
k = constante de proporcionalidade, dependente da natureza
da suspenso e do mtodo de medida.
Uma suspenso avaliada em dado instrumento, sob luz
monocromtica, apresenta turbidncia que corresponde
ao produto da concentrao C por uma constante de
proporcionalidade k, que combina os demais parmetros
da equao acima. Tem-se, portanto, S = kC, expresso
da lei de Lambert-Beer, permitindo que procedimentos
turbidimtricos e nefelomtricos sejam anlogos aos
adotados em espectrofotometria. , contudo, relevante
observar que a proporcionalidade s verdadeira para
suspenses muito diludas, pois refexes secundrias
provocam excessivo desvio de linearidade quando o nmero
de partculas em suspenso ultrapassa determinado limite.
Outra fonte de erro em medidas turbidimtricas e
nefelomtricas a decantao das partculas em suspenso.
Tal ocorrncia pode ser minimizada com o aumento da
viscosidade, com a incorporao de colide protetor
5
- gelatina, goma arbica ou amido - ao meio lquido da
suspenso.
PROCEDIMENTO
O procedimento bsico para o emprego de tcnicas
turbidimtricas ou nefelomtricas obedece aos princpios
das tcnicas espectrofotomtricas, compreendendo a
preparao das solues de referncia com suspenses
de concentrao conhecida, Na prtica, permissvel
a plotagem contra valores de transmitncia em vez de
turbidncia.
As etapas do procedimento compreendem, em resumo:
(1) ajustar o instrumento no comprimento de onda
especifcado na monografa (para colormetros, na falta
de especifcao, empregar fltro que fornea luz na
faixa azul); (2) preencher a cubeta com a suspenso mais
concentrada e ajustar a leitura de transmitncia para 100%
(transmitncia oferece mais linearidade que absorvncia);
(3) medir a transmitncia das demais suspenses-padro
e traar reta de calibrao (com emprego do mtodo dos
mnimos quadrados) e (4) medir a transmitncia da amostra
determinando sua concentrao pela reta de calibrao.
Comparao visual
Medidas de turbidez podem ser executadas por comparao
visual, tcnica pela qual a suspenso de amostra
confrontada com suspenso ou suspenses-padro. Para
tanto, empregar tubos de ensaio idnticos, de fundo plano
com 70 mL de capacidade e cerca de 23 mm de dimetro
interno. Os tubos devem ser comparados horizontalmente
sobre fundo escuro, com incidncia de luz lateral.
5.2.17 CROMATOGRAFIA
5.2.17.1 CROMATOGRAFIA EM CAMADA
DELGADA
Consiste no sistema cromatogrfco em que a separao
dos componentes de uma mistura ocorre atravs da
migrao diferencial sobre uma fase estacionria composta
por uma fna camada de adsorvente aplicado sobre um
suporte plano, o qual pode ser constitudo de diversos
materiais tais como vidro, alumnio ou polister. A fase
mvel por sua vez constituda por diversas misturas de
solventes e permanece no interior de um recipiente ou
cuba de material transparente e inerte, geralmente vidro,
permanecendo vedada onde se deposita a cromatoplaca em
posio vertical sob uma atmosfera saturada da fase mvel.
EQUIPAMENTOS E PROCEDIMENTOS:
Os equipamentos utilizados para a cromatografa em
camada delgada consistem em: placa, cuba ou cmara de
eluio, fase estacionria, fase mvel, sistema revelador.
As placas geralmente so de vidro, alumnio ou material
plstico. Os tamanhos variam conforme a seguir: 20 cm x
20 cm; 10 cm x 20 cm; 10 cm x 10 cm; 5 cm x 10 cm.
Fase estacionria (adsorventes)
Slica o adsorvente mais amplamente utilizado
na CCD. um adsorvente amorfo, poroso. usado
tambm na cromatografa em coluna, entretanto a slica
utilizada em CCD mais fna. A slica preparada por
espontnea polimerizao e desidratao do cido silcico.
As substncias so adsorvidas pela slica via ponte de
hidrognio e interao dipolo-dipolo. Uma slica de
condio satisfatria aquela com 11 a 12% de gua
em peso. Um nvel de 11 a 12% de umidade alcanado
quando a slica est em equilbrio com o ar, a uma umidade
relativa de 50% e uma temperatura de 20 C.
As slicas comerciais possuem tamanhos de poros variveis
entre 40 a 150 ngstrons. Os tamanhos de partculas variam
de 5 a 40 m, com mdia de 10 a 15 m, dependendo do
fabricante.
Reduzindo o tamanho da partcula, aumenta-se a efcincia
da slica. Partculas de tamanho de 5 a 6 m so utilizadas
para preparar CCDAE (Cromatografa em camada delgada
de alta efcincia). Os tamanhos de poros afetam a
seletividade e, portanto, podem ser utilizados para as taxas
de migrao e resoluo dos componentes das amostras.
Os tamanhos de poros de slica mais comuns
comercialmente so 40, 60, 80 e 100 ngstrons. Sendo a
slica 60 ngstrons, a mais verstil e amplamente utilizada.
As slicas so utilizadas para a separao de compostos
lipoflicos como aldedos, cetonas, fenis, cidos graxos,
aminocidos, alcaloides, terpenides e esteroides, usando
o mecanismo de adsoro.
Alumina Depois da slica, o adsorvente mais utilizado.
As propriedades fsicas da alumina so similares s da slica
em termos de tamanho de partcula, dimetro mdio do
poro e superfcie. So disponveis comercialmente alumina
cida (pH 4,0 - 4,5), neutra (7,0 - 8,0) e bsica (9,0 - 10,0).
Assim como a slica, a alumina separa os componentes das
amostras por polaridade, pontes de hidrognio ou foras
dipolo. A seletividade da alumina na CCD de adsoro
similar slica-gel, portanto a alumina um adsorvente
melhor que a slica para separao de substncias cidas
lipoflicas. A alumina de carter cido atrai fortemente
compostos bsicos, enquanto a alumina de carter bsico
atrai mais fortemente compostos cidos. A alumina retm
compostos aromticos mais fortemente que a slica-gel.
Tem o inconveniente de promover a catlise de algumas
reaes de substncias lbeis. empregada na separao
de vitaminas lipossolveis, alcaloides, certos antibiticos,
hidrocarbonetos policclicos.
Kieselguhr - a Terra de Diatomcea termicamente tratada
de granulao de 5 a 40 m. Seu principal constituinte
SiO
2
. Uma variedade de outros compostos inorgnicos
tambm esto presentes. Os tamanhos dos poros so muito
variveis, suas caractersticas a tornam adequada para a
separao de acares, aminocidos e outras substncias
polares similares.
5
Celulose - A celulose um polissacardeo altamente
polimerizado por monmeros de celobiose. A presena de
grande nmero de grupos hidroxila livre permite a ligao
de hidrognio com lquidos de baixo peso molecular
como gua e lcoois. Celulose , portanto, adequada
para a separao de substncias hidroflicas, tais como
carboidratos e aminocidos.
Poliamida - Em contraste com a celulose, a poliamida
uma resina sinttica. Dois tipos de poliamida so
utilizadas: poliamida 6 e poliamida 11. A poliamida 6
vem da aminopolicaprolactama, enquanto a poliamida
11 preparada a partir do cido poliaminoundecanico.
Poliamidas so utilizadas para a separao de compostos
polares que so capazes de interagir com o grupo
amida por ligaes de hidrognio devido sua estrutura
molecular. Dentre elas esto aminocidos e derivados,
benzodiazepnicos, cidos carboxlicos, ciclodextrinas,
cidos graxos, favonoides, conservantes, praguicidas.
Silicato de magnsio - ideal para separao de acares,
antraquinonas, favonas, glicosdeos, esteroides, lipdeos,
resduos de praguicidas, vitaminas, carbazis, acetato de
hidrocortisona.
Reveladores e mtodos de deteco
Aps o desenvolvimento da cromatografa e a evaporao
dos solventes, passa-se ao mtodo de revelao das
manchas. Este por sua vez, pode ser fsico ou qumico. Os
mtodos fsicos compreendem: luz ultravioleta (lmpadas
com emisso de radiao entre 254 a 366 nm), no caso de
substncias que se tornam fuorescentes, quando excitadas
por luz UV ou visvel. Os mtodos qumicos compreendem
utilizao de reagentes cromgenos. H uma ampla lista de
reveladores apropriados para cada grupo de compostos.
Identifcao
A posio fnal de cada mancha designada pelo Rf. Aps
a revelao da cromatoplaca, mede-se a distncia atingida
por cada mancha a partir da origem. Essa distncia uma
frao da distncia total percorrida pelo solvente na fase
estacionria.
Rf = (distncia atingida pela mancha a partir da origem) /
(distncia percorrida pelo solvente desde a origem)
5.2.17.2 CROMATOGRAFIA EM PAPEL
tiliza para a separao e identifcao das substncias ou
componentes da mistura a migrao diferencial sobre a
superfcie de um papel de fltro de qualidade especial (fase
estacionria). A fase mvel pode ser um solvente puro ou
uma mistura de solventes.
No papel cromatogrfco, o adsorvente uma camada
de papel de textura e espessura adequadas. A separao
cromatogrfca procede atravs da ao da fase mvel
lquida semelhante ao processo da adsoro em
cromatografa em coluna. Devido ao contedo de gua
intrnseco do papel, ou inibio seletiva do componente
hidroflico da fase lquida pelas fbras de papel, que pode
ser considerado como fase estacionria, um mecanismo
de partio pode contribuir signifcativamente para a
separao.
O cromatograma desenvolvido pela passagem lenta da
fase mvel sobre a camada. O desenvolvimento pode ser
ascendente, no caso de solvente carreado para cima atravs
de foras capilares, ou descendente, no caso em que o fuxo
do solvente auxiliado por fora da gravidade.
A forma mais simples da cromatografa em papel a
cromatografa ascendente que utiliza uma tira de papel
de comprimento e largura variveis, em funo da cuba
cromatogrfca a ser utilizada.
Este mtodo muito til para separar substncias
muito polares, como acares e aminocidos. Possui
o inconveniente de se poder aplicar pouca quantidade
de substncia de cada vez. Deve-se procurar trabalhar
nas condies mais prximas possveis, de qualidade e
quantidade, entre padro e amostra, usando-se o mesmo
papel, fase mvel, temperatura, etc.
EQUIPAMENTO E PROCEDIMENTOS
Consiste em cmara ou cuba cromatogrfca de vidro,
provida de bordas e tampa esmerilhadas e de dimenses
adequadas para conter o papel cromatogrfco, que pode ser
adaptado para cromatografa ascendente ou descendente.
importante que no deixe escapar os vapores da fase mvel.
Utilizar papel de fltro especial para cromatografa, cortado
no sentido das fbras em tiras de comprimento varivel
e largura no inferior a 2,5 cm. Existem vrios tipos de
papel para cromatografa com fnalidades diferentes
para separao de substncias hidrflas ou hidrofbica,
orgnicas ou inorgnicas, anfteras ou com muitas
hidroxilas, entre outras.
Para cromatografa descendente, utilizar cuba com tampa
provida de orifcio central, fechado por rolha de vidro ou
outro mateiral inerte. Na parte superior da cuba, h uma
cubeta suspensa, que contm dispositivo para prender o
papel (geralmente haste ou basto de vidro). De cada lado
da cubeta h guias de vidro, que sustentam o papel, de
modo a no tocar nas paredes da cuba cromatogrfca. A
largura do papel cromatogrfco no pode ser superior da
cubeta suspensa e a altura deve ser aproximadamente igual
altura da cmara cromatogrfca.
Para cromatografa ascendente, na parte superior da cuba
h dispositivo que permite sustentar o papel cromatogrfco
e que pode descer sem abrir a cmera cromatogrfca.
Manipula-se o papel com cuidado e pelas pontas, e cortam-
se tiras em tamanhos que possam ser contidos nas cubas.
importante cortar o papel seguindo o eixo das fbras, pois
a celulose est orientada neste sentido, o que facilitar a
passagem da fase mvel. A tira de papel no deve tocar as
paredes da cuba.
Ao adicionar o papel na cuba (no se deve demorar a
colocar o papel para no haver perda de saturao), cuidar
para que a amostra no entre em contato direto com o
5
eluente, deixando que ascenda ou descenda pela superfcie
do papel, apenas por capilaridade.
Quando a tcnica utilizada for a de cromatografa
ascendente, traar linha fna com lpis a 3 cm da borda
inferior do papel; se a cromatografa descendente, traar
linha distncia, tal que a mesma fque poucos centmetros
abaixo da vareta que prende o papel na cubeta do eluente.
Deve-se marcar tambm a linha de chegada da fase mvel
(ou frente do solvente), geralmente distando 10 cm do
ponto de partida.
Aplicar as solues na forma de manchas circulares
(utilizam-se tubos capilares ou micropipetas), contendo
de 1 a 20 g da amostra, sendo que cada mancha deve
Figura 1 - Diferentes tipos de cromatografa em papel de acordo
com as tcnicas de desenvolvimento.
___________
FM: Fase Mvel; PP: Ponto de Partida; LC: Linha de Chegada; dr1 e dr2: distncias percorridas pelas substncias; dm: distncia de migrao da fase mvel
CROMATOGRAFIA DESCENDENTE
Na cromatografa descendente, a fase mvel possui um
fuxo voltado para baixo e conta com a ao da gravidade.
Introduzir na cmara uma camada de eluente especifcado
na monografa, tampar e deixar em repouso por 24 horas.
Aplicar a amostra no papel, colocando-o adequadamente
sobre as guias de maneira que a extremidade superior
permanea dentro da cubeta suspensa e prend-lo com a
vareta de vidro. Fechar a cuba e deixar em repouso por
1 hora e meia. Em seguida, atravs do orifcio na tampa
introduzir o eluente na cubeta. Desenvolver o cromatograma
at a distncia ou tempo prescritos, protegendo o papel
da incidncia de luz direta. Remover o papel, marcar
o percurso da fase mvel, secar e visualizar da maneira
prescrita na monografa.
CROMATOGRAFIA ASCENDENTE
O fuxo ascendente da fase mvel sobre o papel
cromatogrfco permitido pela ao da capilaridade.
Colocar no fundo da cmara recipiente contendo o eluente,
fechar a cuba e mant-la em repouso por 24 horas. Aplicar
a amostra no papel introduzindo-o na cuba e deixar em
repouso por 1 hora e meia. Sem abrir a cmera, baixar
o papel de modo a colocar sua extremidade inferior em
contato com o eluente e desenvolver o cromatograma at
a distncia ou tempo prescritos. Retirar o papel, marcar o
percurso do eluente, secar e visualizar da maneira prescrita
na monografa.
5.2.17.3 CROMATOGRAFIA EM COLUNA
Cromatografa preparativa em coluna um mtodo
de separao que desempenha um papel importante
na purifcao de compostos de valor na investigao,
na operao de planta piloto e produo de produtos
farmacuticos. um mtodo que pode ser utilizado,
de maneira rpida e econmica, para a obteno de
substncias com pureza elevada. Na prtica, adsorventes
padronizados so utilizados, pois fornecem um alto grau de
confabilidade do mtodo, a transferncia direta de escala
de anlise e um processamento otimizado. Os tipos de
cromatografa em coluna podem ser: por adsoro (lquido-
slido), por partio (lquido-lquido) ou por troca inica.
produzir uma largura entre 6 a 10 mm sobre a linha
traada com lpis. Dependendo da largura do papel, pode-
se colocar apenas uma alquota do padro ou da amostra,
centralizando-se esta aplicao na linha de partida. No
caso da possibilidade de colocar-se mais de uma alquota
no ponto de partida, deixa-se 2 cm de distncia das bordas
laterais e um intervalo entre os pontos de aplicao de 3
cm. Se cada mancha produzida for maior que 6 a 10 mm,
aplicar a amostra em pores, deixando-se evaporar o
solvente antes de aplicar a poro seguinte.
O nvel da fase mvel deve fcar abaixo do ponto de partida
da substncia, devendo, sempre, haver uma boa vedao da
cuba cromatogrfca para que no se perca o vapor desta
fase. No fnal da corrida, esperar secar o papel e submet-lo
a algum processo de revelao.
5
EQUIPAMENTO
Os aparelhos utilizados para procedimentos em colunas
cromatogrfcas consistem de um tubo cromatogrfco
cilndrico, em posio vertical, de vidro (ou outro
material inerte e transparente especifcado em monografa
individual) de comprimento e dimetros variveis em cuja
parte inferior h estrangulamento (de passagem reduzida)
e torneira para regulagem da vazo dos vrios tipos de
solventes ou sistemas de eluio utilizados. Em algumas
colunas, a parte inferior apresenta em sua base, um disco
de vidro poroso cuja fnalidade evitar a sada da fase fxa
(slica-gel). As colunas tm dimenses variveis, porm, em
anlise farmacutica, as faixas mais comumente utilizadas
so de 10 a 30 mm de dimetro ao longo do tubo e de 3
a 6 mm na sua parte inferior, onde a torneira encontra-se
acoplada. O comprimento do tubo usualmente de 150 a
400 mm. Na parte superior da coluna poder haver uma
dilatao de forma esfrica, destinada a conter um maior
volume de solvente seguido de uma conexo esmerilhada,
cilndrica tamponada por uma rolha cilndrica de plstico,
de vidro, ao inoxidvel, alumnio (ou outro material
especifcado em monografa individual) frmemente fxada
veia. A veia da haste substancialmente menor que o
dimetro da coluna e possui, no mnimo, 5 cm a mais em
relao ao efetivo comprimento da coluna. A rolha tem um
dimetro menor em aproximadamente 1 mm em relao ao
dimetro interno da coluna.
PROCEDIMENTO
Cromatografa em coluna por adsoro
Iniciar o preparo da coluna, se necessrio, tamponando-
se a parte inferior, prxima torneira, com um pedao de
algodo ou l de vidro na base do tubo a fm de impedir a
passagem do material adsorvente e a entrada de ar (evitando
formao de bolhas). Preencher ento uniformemente
o tubo (conforme altura especifcada) com esse material
adsorvente (tal como alumina ativada ou slica-gel, slica
diatomceas ou slica calcinada) previamente suspensa
na fase mvel (sistema de solventes), realizando retirada
do excesso de eluente. Aps sedimentao do material
adsorvente, aplicar a mistura de substncias previamente
solubilizada em uma pequena quantidade de solvente no
topo da coluna at que penetre no material adsorvente.
Uma certa quantidade de solvente pode ser adicionada ao
topo para ajudar na adsoro das substncias no material
adsorvente, deixando-se, em seguida, sedimentar por
ao da gravidade ou pela aplicao de presso positiva
de ar fcando a mistura adsorvida em uma estreita faixa
horizontal no topo da coluna. A taxa de movimentao de
uma determinada substncia determinada ou afetada por
diversas variveis, incluindo a baixa ou alta adsortividade
do material adsorvente, o tamanho de partcula e a rea
superfcial (superfcie de contato), a natureza e polaridade
do solvente, a presso aplicada e a temperatura do sistema
cromatogrfco.
Um cromatograma de fuxo amplamente utilizado e
obtido por um processo em que solventes percorrem
a coluna, at que a substncia seja separada em soluo
efuente, conhecido como eluato. O eluato controlado,
recolhendo-se fraes conforme especifcado na
monografa e examinando-se cada frao por mtodo
adequado. A substncia pode ser determinada no eluato
por vrios mtodos: titulao, colorimetria, espectrometria
ou ser isolada (purifcada) quando da evaporao do
solvente. A efcincia da separao pode ser aferida por
cromatografa em camada delgada (CCD) de cada frao
recolhida ao longo da corrida cromatogrfca.
Cromatografa em coluna por partio
Na cromatografa de partio, as substncias a serem
separadas so repartidas entre dois lquidos imiscveis, um
dos quais, a fase fxa, adsorvido em um suporte slido,
apresentando assim uma rea de superfcie bastante ampla
para o solvente circulante ou fase mvel. O elevado nmero
de sucessivos contatos entre lquido-lquido permite uma
separao efetiva, a qual no ocorre atravs da extrao
lquido-lquido habitual.
O suporte slido geralmente polar, enquanto a fase
fxa adsorvente mais polar do que a fase mvel. O
suporte slido mais utilizado consiste em terra silicosa
cromatogrfca cujo tamanho de partcula satisfatrio
para a vazo apropriada do eluente. Na cromatografa de
partio de fase reversa, a fase adsorvida fxa menos
polar do que a fase mvel, e o adsorvente slido, torna-
se apolar por tratamento com um agente silanizante (ex.:
diclorodimetilsilano; parafnas), para produzir uma areia
cromatogrfca silanizada.
A amostra a ser cromatografada geralmente inserida em
um sistema cromatogrfco de duas maneiras: (a) uma
soluo da amostra em um pequeno volume da fase mvel
no topo da coluna; ou (b) uma soluo da amostra em um
pequeno volume da fase fxa misturada com o suporte
slido e transferida para a coluna formando uma camada
transversal sobre o material adsorvente.
O desenvolvimento e a eluio so atingidos atravs da
corrida do solvente circulante. O solvente (fase mvel)
geralmente saturado com o solvente (fase fxa) antes do uso.
No caso de cromatografa de partio lquido-lquido
convencional, o grau de partio de um determinado
composto entre as duas fases lquidas expresso atravs
de seu coefciente de partio ou distribuio. No caso
de compostos que se dissociam, pode-se controlar a
distribuio ao modifcar o pH, constante dieltrica, fora
inica, e outras propriedades das duas fases. A eluio
seletiva dos componentes da mistura pode ser atingida
com a mudana bem-sucedida da fase mvel para uma que
proporcione um coefciente de partio mais favorvel,
ou alterando o pH da fase fxa in situ com uma fase fxa
constituda da soluo de um cido ou uma base apropriados
em um solvente orgnico.
Salvo disposio contrria da monografa individual,
ensaios e testes empregando cromatografa de partio em
coluna so realizados em consonncia com os mtodos
convencionais descritos a seguir.
5
Suporte slido Utilizar areia de slica purifcada. Para
fase reversa de cromatografa de partio, utilizar areia de
slica cromatogrfca.
Fase estacionria Utilizar o solvente ou soluo
especifcada na monografa individual. Se for utilizada uma
mistura de lquidos na fase estacionria, misturar antes de
introduzir o suporte slido.
Fase mvel Utilizar o solvente ou soluo especifcados
na monografa individual. Equilibrar com gua, se a fase
estacionria for uma soluo aquosa; se a fase estacionria
for um fuido polar orgnico, equilibrar com este fuido.
Preparao de uma Coluna Cromatogrfca O tubo
cromatogrfco mede cerca de 22 mm de dimetro interno
e de 200 a 300 mm de comprimento, sem disco de vidro
poroso, no qual acoplado um tubo de distribuio,
sem torneira, com cerca de 4 mm de dimetro interno e
aproximadamente 50 mm de comprimento. Introduzir um
tampo delgado de l de vidro na base do tubo. Adicionar
a quantidade especifcada de suporte slido em um
bquer (proveta) de 100-250 mL e misturar at produzir
uma pasta homognea. Transferir a mistura para o tubo
cromatogrfco, tampar, pressionando-o levemente, at
obter uma massa uniforme. Se a quantidade de suporte
slido especifcada for mais de 3 g, transferir a mistura para
a coluna em pores de aproximadamente 2 g, tampando
cada poro. Se o ensaio ou teste requisitar uma coluna
multissegmentada, com uma fase estacionria diferente
para cada segmento, tampar aps a adio de cada
segmento, e adicionar cada segmento seguinte diretamente
ao anterior. Se uma soluo do analito for incorporada na
fase estacionria, completar a transferncia quantitativa
para o tubo cromatogrfco atravs da lavagem do bquer
utilizado para a preparao da mistura de ensaio com uma
mistura de aproximadamente 1 g de suporte slido e vrias
gotas do solvente utilizado para preparar a soluo de
ensaio. Introduza um tampo delgado de l de vidro em
cima da coluna de enchimento completa. A fase mvel fui
atravs de uma coluna adequadamente preenchida como
uma corrente moderada ou, se for utilizada a cromatografa
de fase reversa, lentamente, gota a gota.
Transferir a fase mvel para o espao da coluna sobre
a coluna de preenchimento, e deixe-a fuir atravs da
coluna sob ao da gravidade. Umedecer a ponta da
coluna cromatogrfca com cerca de 1 mL da fase mvel
antes de cada mudana de composio da fase mvel
e aps completar a eluio. Se o analito for introduzido
na coluna como uma soluo da fase mvel, deixe-o
passar completamente pela coluna de preenchimento,
ento adicione a fase mvel em vrias pores menores,
permitindo que cada uma seja completamente removida
antes de adicionar a fase mvel estocada.
Cromatografa em coluna por troca inica
Utilizar como fase estacionria resina de troca inica. A
troca de ons consiste em intercmbio reversvel de ons
presentes na soluo com ons do polmero resinoso (celulose
modifcada ou suporte de slica-gel). A escolha da resina, forte
ou fraca, aninica ou catinica, depender em grande parte
do pH no qual dever ocorrer a troca inica e da natureza
dos ons (nions ou ctions) a serem trocados. As resinas
fortemente cidas e fortemente bsicas so convenientes para
a maioria das aplicaes analticas. Emprega-se, na prtica,
grande excesso (200 - 300%) de resina sobre a quantidade da
amostra estequiometricamente calculada; a capacidade das
resinas varia de 2 a 5 mM/g (peso seco).
Tratamento da resina e preparo da coluna - Suspender a
resina de troca inica em gua e deixar em repouso por
24 horas. Introduzi-la em coluna adequada e, tratando-se
de resina aninica, convert-la em bsica passando atravs
da coluna, soluo de hidrxido de sdio SR, velocidade
de 3 mL/ min., at que o eluato fornea reao negativa
para cloreto. Passar, em seguida, gua isenta de dixido
de carbono. Em caso de resina catinica, a converso para
a forma cida se d pela passagem de cido clordrico SR
atravs da coluna, seguida de lavagem com gua isenta de
dixido de carbono at que o eluato fornea reao neutra.
Desenvolve-se coluna de troca inica de maneira anloga
descrita para cromatografa de adsoro. Terminada a
operao, regenera-se a resina lavando-a com hidrxido
de sdio SR (colunas aninicas) ou com cido clordrico
SR (colunas catinicas) e, em seguida, com gua isenta de
dixido de carbono at que fornea reao neutra.
5.2.17.4 CROMATOGRAFIA A LQUIDO
DE ALTA EFICINCIA
A cromatografa a lquido de alta efcincia (CLAE) uma
tcnica de separao fundamentada na distribuio dos
componentes de uma mistura entre duas fases imiscveis,
a fase mvel, lquida, e a fase estacionria slida, contida
em uma coluna cilndrica. As separaes so alcanadas
por partio, adsoro, troca inica, excluso por tamanho
ou interaes estereoqumicas, dependendo do tipo de fase
estacionria utilizada. A CLAE apresenta vantagens sobre
a cromatografa a gs para as anlises de combinaes
orgnicas. Amostras no volteis e termolbeis so,
preferencialmente, analisadas por CLAE. A maioria das
anlises farmacuticas est baseada no mtodo de separao
por partio e devem ocorrer em tempo curto de anlise.
Vrios fatores qumicos e fsico-qumicos infuenciam na
separao cromatogrfca, os quais dependem da natureza
qumica das substncias a serem separadas, da composio
e vazo da fase mvel, da composio e rea superfcial da
fase estacionria.
APARELHAGEM
O equipamento utilizado consiste em um reservatrio
que contm a fase mvel, uma bomba com a fnalidade
de impelir a fase mvel pelo sistema cromatogrfco, um
injetor para introduzir a amostra no sistema, uma coluna
cromatogrfca, um detector e um dispositivo de captura
de dados, como um software, integrador ou registrador.
Alm de receber e enviar informaes para o detector,
softwares so utilizados para controlar todo o sistema
cromatogrfco, proporcionando maior operacionalidade e
logstica de anlise.
5
Os sistemas cromatogrfcos modernos consistem de
bombas para pressurizar a fase mvel, controladas por
software, que podem ser programadas para variar a relao
de componentes da fase mvel, como requerido para
cromatografa por gradiente de solvente, ou para misturar,
de forma isocrtica, a fase mvel (fases mveis com relao
fxa de solventes). Presses operacionais de at 5000 psi
(cerca de 345 bar) e vazo de at 10 mL por minuto podem
ser utilizadas. Presses superiores fcam condicionadas a
evoluo do instrumental.
Aps dissolver a amostra na fase mvel ou em outro
solvente adequado, a soluo injetada no sistema
cromatogrfco, de forma manual, utilizando seringa
apropriada, ou por meio de um injetor ou amostrador
automtico. Este consiste em um carrossel ou bandeja,
capaz de acomodar diversos frascos contendo as amostras.
Alguns amostradores automticos podem ser programados
para injetar diferentes volumes de amostra, diversas
quantidades de injees, controlar o intervalo entre
injees e outras variveis operacionais.
Quando se trabalha a altas presses, uma vlvula de
injeo essencial. Essa apresenta um sistema calibrado,
com volume defnido, denominado anel de injeo ou ala
de amostragem, que ser preenchido com a soluo a ser
analisada e, posteriormente, transferida coluna.
Para a maioria das anlises farmacuticas, a separao
alcanada por partio dos componentes, presentes na
soluo a ser analisada, entre as fases mvel e estacionria.
Sistemas que consistem de fases estacionrias polares e
fases mveis apolares so defnidos como cromatografa
em fase normal, enquanto o oposto, fases mveis
polares e fases estacionrias apolares, so denominados
de cromatografa em fase reversa. A afnidade de uma
substncia pela fase estacionria e, consequentemente, seu
tempo de reteno na coluna, controlado pela polaridade
da fase mvel.
As fases estacionrias utilizadas em cromatografa em fase
reversa consistem, tipicamente, de uma molcula orgnica
quimicamente ligada s partculas de slica ou outros
suportes, como grafta porosa. O dimetro das partculas
de, normalmente, 3 m a 10 m. Quanto menores o dimetro
da partcula e a pelcula que recobre o suporte, mais rpida
e efciente ser a transferncia das substncias entre as fases
estacionrias e mveis. A polaridade da coluna depende
dos grupos funcionais presentes, sendo os mais comuns
os grupos apolares octil, octadecil, fenil, cianopropil e
polar, nitrila. A proporo de grupos silanis no ligados
ao grupo funcional infuencia, signifcativamente, na
efcincia da separao cromatogrfca e no formato do
pico eludo. Comercialmente, esto disponveis colunas
cromatogrfcas com diferentes qualidades de fases
estacionrias, inclusive aquelas com pequena proporo de
grupos silanis livres, denominadas capeadas. Geralmente,
colunas de slica em fase reversa apresentam vida til
na faixa de pH de 2 a 8, entretanto, colunas contendo
grafta porosa ou materiais polimricos, como o estireno-
divinilbenzeno, so estveis em uma faixa mais ampla
de pH. De forma menos comum, podem ser utilizados
lquidos, no ligados, como revestimento do suporte de
slica e, portanto, devem ser imiscveis com a fase mvel.
As colunas normalmente usadas para separaes analticas
tm dimetros internos de 1 mm a 5 mm. Essas podem ser
aquecidas, proporcionando separaes mais efcientes, mas
s raramente so utilizadas temperaturas superiores a 60
C, devido ao potencial de degradao da fase estacionria
ou volatilidade da fase mvel. A menos que especifcado
na monografa da substncia a ser analisada, as colunas so
utilizadas em temperatura ambiente.
Os detectores mais frequentemente utilizados em
cromatografa a lquido de alta efcincia so os
espectrofotomtricos (UV/Vis). Os detectores
espectrofotomtricos so utilizados para detectar
compostos com grupamento cromforo. Tais detectores
consistem de uma clula de fuxo localizada no trmino
da coluna cromatogrfca. A radiao ultravioleta
atravessa, constantemente, pela clula de fuxo e
recebida no detector. Com o sistema em funcionamento,
as substncias so eludas da coluna, passam pela clula de
detector e absorvem a radiao, resultando em alteraes
mensurveis no nvel de energia. Esses detectores podem
apresentar comprimento de onda fxo, varivel ou mltiplo.
Detectores de comprimento de onda fxo operam em um
nico valor, tipicamente 254 nm, emitido por uma lmpada
de mercrio de baixa presso. Aqueles com comprimento
de onda varivel contm uma fonte contnua de emisso,
como uma lmpada de deutrio ou xennio de alta presso,
e um monocromador ou um fltro de interferncia, de modo
a gerar radiao monocromtica a um valor selecionado
pelo operador, podendo, ainda, ser programados para
alterar o comprimento de onda durante o desenvolvimento
da anlise. Os detectores de comprimento de onda mltiplo
medem, simultaneamente, a absorvncia em dois ou mais
comprimentos de onda, sendo denominados de detectores
de arranjo de diodos (DAD). Nestes, a radiao ultravioleta
transmitida atravs da clula de fuxo, absorvida pela
amostra e ento separada em seus componentes originais,
que so detectados, individualmente, pelo detector de
fotodiodos, registrando dados de absorvncia em toda a
faixa do espectro do ultravioleta e visvel e, adicionalmente,
os espectros de cada pico registrado no cromatograma.
Os detectores de ndice de refrao medem a diferena
entre o ndice de refrao da fase mvel pura e da fase
mvel contendo a substncia a ser analisada. So utilizados
para detectar substncias que no absorvem no ultravioleta
ou visvel, entretanto so menos sensveis que os detectores
espectrofotomtricos. Os detectores de ndice de refrao
apresentam a desvantagem de serem sensveis a pequenas
mudanas da composio dos solventes da fase mvel,
taxa de fuxo e temperatura.
Os detectores fuorimtricos so utilizados para detectar
compostos com grupamento fuorforo ou que podem ser
convertidos em derivados fuorescentes, por transformao
qumica ou adicionando reagentes fuorescentes a grupos
funcionais especfcos. Se a reao qumica requerida,
pode-se realiz-la no momento da preparao da amostra
ou, alternativamente, o reagente pode ser introduzido na
fase mvel, com a reao ocorrendo antes da deteco.
5
Os detectores potenciomtricos, voltamtricos ou
eletroqumicos so teis para quantifcao de substncias
que podem ser oxidadas ou reduzidas em um eletrodo.
Esses detectores so altamente seletivos, sensveis e
seguros, mas requerem fases mveis livres de oxignio e
ons de metais redutveis. Uma bomba de fuxo contnuo
deve ser utilizada, assegurando que o pH, a fora inica,
e a temperatura da fase mvel permanecem constantes.
Detectores eletroqumicos com eletrodo especfcos
de carbono podem ser utilizados, vantajosamente,
para quantifcar nanogramas de substncias facilmente
oxidveis, como fenis e catecis.
Os detectores de espectrometria de massas tm a
capacidade de medir a massa molar de uma substncia,
combinados com a cromatografa lquida proporcionam
uma alta seletividade uma vez que picos no resolvidos
podem ser isolados monitorando-se um valor de massa
selecionado. Esses detectores podem ser de quadrupolo
simples denominados (MS) ou tandem (MS/MS), quando
associados, para exemplifcar alguns dos modelos
utilizados. As fontes de ionizao mais comuns so os do
tipo ionizao por eletrospray e a ionizao qumica a
presso atmosfrica.
Os detectores de condutividade tm aplicao na
cromatografa de troca inica e medem a condutividade
da fase mvel continuamente que modifcada com a
presena de analitos na clula.
Atualmente, sistemas de coleta de dados modernos esto
disponveis com as funes de receber e armazenar os sinais
provenientes do detector e, posteriormente, proporcionar
o manejo dessas informaes, gerando os cromatogramas
com os dados de rea e altura do pico, identifcao da
amostra e mtodos. As informaes tambm podem ser
coletadas em sistemas simples de gravao de dados, como
registradores, para a garantia da integridade dos dados
gerados.
PROCEDIMENTO
O comprimento e o dimetro interno da coluna, o tipo e o
tamanho das partculas da fase estacionria, a temperatura
da operao, a composio e a vazo da fase mvel e o tipo
de deteco so descritos nas monografas individuais.
A composio da fase mvel tem infuncia signifcativa
na performance cromatogrfca e na separao das
substncias presentes na soluo a ser analisada. Para uma
anlise quantitativa precisa, reagentes de elevado grau de
pureza ou solventes orgnicos de pureza cromatogrfca
devem ser utilizados. A gua, de qualidade adequada, deve
apresentar baixas condutividade e absoro na faixa do
ultravioleta. Na cromatografa de partio, o coefciente
de partio e, consequentemente, a separao podem ser
modifcados pela adio de outro solvente fase mvel. Na
cromatografa de troca-inica, a reteno das substncias
afetada pelo pH, pela fora inica e por outras modifcaes
na composio da fase mvel. A tcnica de modifcar
continuamente a composio dos solventes da fase mvel
durante a corrida cromatogrfca denominada de eluio
gradiente, e aplicada para separar misturas complexas
de substncias com diferentes fatores de capacidade.
Entretanto, detectores que so sensveis a modifcaes na
composio da fase mvel, como os refratmetros, tm sua
utilizao limitada com a tcnica de eluio gradiente.
O detector deve apresentar uma ampla faixa de atuao e
as substncias a serem analisadas devem estar separadas de
qualquer interferente. A faixa linear para uma substncia
aquela na qual a resposta do detector diretamente
proporcional sua concentrao.
Os sistemas de CLAE so calibrados comparando-
se as respostas dos picos obtidos com as respectivas
concentraes de substncias qumicas de referncia
(SQR). Resultados quantitativos confveis so obtidos por
meio de calibrao com padro externo, quando injetores
ou amostradores automticos so preferencialmente
utilizados. Esse mtodo envolve a comparao direta das
respostas obtidas com os picos, separadamente analisados,
das solues padro e amostra. Nos casos em que a
padronizao externa utilizada, os clculos podem ser
realizados segundo a equao:
em que,
Ca = concentrao da soluo amostra;
Cp = concentrao da soluo padro;
Ra = resposta (rea ou altura) do pico da soluo amostra;
Rp = resposta (rea ou altura) do pico da soluo padro.
Se a injeo realizada por meio de seringa, melhores
resultados quantitativos so obtidos por meio de calibrao
com padro interno, adicionando-se uma quantidade
conhecida de uma substncia qumica de referncia no
interferente s solues padro e amostra. A relao das
respostas obtidas com a substncia a ser analisada e com
o padro interno utilizada para expressar o resultado
quantitativo. Nos casos em que a padronizao interna
utilizada, os clculos podem ser realizados segundo a
equao:
em que,
Rai = resposta (rea ou altura) do pico do padro interno
na soluo amostra;
Rpi = resposta (rea ou altura) do pico do padro interno
na soluo padro.
Devido a variaes normais entre equipamentos, solventes,
reagentes e tcnicas, necessrio um teste de adequao
do sistema para assegurar que o mtodo descrito seja
aplicado de forma irrestrita. Os principais parmetros da
adequao do sistema esto descritos em Interpretao dos
cromatogramas e em Adequao do sistema.
INTERPRETAO DOS CROMATOGRAMAS
Na Figura 1 representada uma separao cromatogrfca
tpica de duas substncias, sendo t
1
e t
2
os respectivos
/
5
tempos de reteno. Os termos h, h/2 e W
h/2
correspondem altura, meia altura e largura a meia altura, respectivamente,
e W representa a largura do pico na linha de base, pelo mtodo da triangulao. O sinal relativo ao tempo morto, t
0
, refere-
se a uma substncia no retida na coluna cromatogrfca.
Figura 1 Separao cromatogrfca de duas substncias.
Tempo de reteno (t), Fator de reteno (k) e Tempo de
reteno relativo
O tempo de reteno em cromatografa caracterstico
da substncia analisada, entretanto no exclusivo. A
comparao entre os tempos de reteno da amostra e da
substncia qumica de referncia pode ser utilizada como
indicativo da identidade da substncia, porm insufciente
para garantir a total caracterizao da amostra. O tempo
de reteno absoluto pode variar entre equipamentos e
conforme o uso de solventes e reagentes diferentes. Nesse
sentido, as comparaes so feitas em termos de fator de
reteno, k, calculado segundo a expresso:
0
0
t
t t
k

=
em que,
t = tempo de reteno da substncia analisada;
t
0
= tempo morto.
O fator de reteno, k, a razo entre a quantidade
da substncia com afnidade pela fase estacionria e a
quantidade com afnidade pela fase mvel. Quanto maior a
afnidade da substncia pela fase estacionria maior a sua
reteno.
O conceito de tempo de reteno relativo tambm pode
ser aplicado. Para tanto, deve-se defnir uma substncia,
de uma mistura, como a principal. Essa ter o tempo de
reteno relativo de 1. Todas as outras substncias tero
seus tempos de reteno relacionados com o tempo de
reteno da substncia principal.
Nmero de pratos tericos (N)
O nmero de pratos tericos, N, indicativo da efcincia
da coluna. Pode ser expresso em nmeros de pratos tericos
por coluna ou nmero de pratos tericos por metro. Para
picos com formato gaussiano, o nmero de pratos tericos
por coluna calculado segundo as expresses:

O valor de N depende da substncia a ser analisada e das
condies de anlise, como fase mvel, temperatura e fase
estacionria.
Resoluo (R)
A resoluo, R, o parmetro cromatogrfco que indica o
grau de separao entre duas substncias em uma mistura,
e calculada segundo as expresses,
em que,
t
2
e t
1
= tempos de reteno das duas substncias da mistura;
W
1
e W
2
= respectivas larguras dos picos na linha de base,
pelo mtodo da triangulao;
W
1,h/2
e W
2,h/2
= respectivas larguras dos picos meia altura.
A rea ou a altura do pico so, usualmente, proporcionais
quantidade da substncia eluda. A rea sob o pico,
geralmente, mais utilizada, entretanto pode ser menos
precisa se houver outros picos interferentes. Para medidas
manuais, o grfco deve ser obtido em velocidade maior que
a usual, minimizando os erros na obteno da largura e da
largura meia altura dos picos. Para a anlise quantitativa,
as substncias devem estar totalmente separadas de
qualquer substncia interferente.
5
Fator de cauda (T)
O fator de cauda, T, que indica a simetria do pico,
apresenta valor igual a 1 quando o pico perfeitamente
simtrico. Esse valor aumenta medida que a assimetria
do pico se torna mais pronunciada. Em alguns casos,
valores inferiores a 1 podem ser observados. medida
que a assimetria do pico aumenta, a integrao e a preciso
se tornam menos confveis. O fator de cauda calculado
segundo a expresso:
em que,
W
0,05
= largura do pico a 5% da altura;
f = valor da poro anterior do pico, em relao largura a
5% da altura, de acordo com a Figura 2.
Figura 2 Cromatograma representando a assimetria do pico.
ADEQUABILIDADE DO SISTEMA
Os testes de adequabilidade do sistema so parte integrante
dos mtodos de cromatografa lquida. So aplicados com
a fnalidade de verifcar se a resoluo e a reprodutibilidade
do sistema cromatogrfco esto adequadas para as anlises
a serem realizadas. Os principais parmetros necessrios
para a verifcao da adequabilidade do sistema so
descritos a seguir.
A resoluo, R, funo da efcincia da coluna, N,
e especifcada para garantir que substncias eludas
proximamente, apresentem separao satisfatria sem
interferncias mtuas.
Replicatas de injees da soluo padro so trabalhadas,
estatisticamente, para verifcar se os requerimentos
para a preciso da anlise foram atingidos. A menos que
especifcado na monografa individual, so utilizados os
dados de cinco replicatas de injees para calcular o desvio
padro relativo (DPR), se a especifcao for igual ou
inferior a 2,0%. Se o desvio padro relativo especifcado
for superior a 2,0%, os dados de seis replicatas devem ser
utilizados.
O fator de cauda, T, que indica a simetria do pico, igual
a 1 para picos perfeitamente simtricos e maior que 1 para
picos que apresentam assimetria. Em alguns casos, valores
menores que 1 podem ser observados.
Esses testes so realizados aps coletar os resultados de
replicatas de injees da soluo padro ou outra soluo
especifcada na monografa individual. A especifcao
desses parmetros cromatogrfcos, em uma monografa,
no impede a modifcao das condies de anlise.
Ajustes nas condies de trabalho, de forma a atingir os
parmetros de adequabilidade do sistema, podem ser
necessrios. A menos que especifcado na monografa
individual, os parmetros de adequabilidade do sistema
so determinados a partir dos dados obtidos com o pico da
substncia de interesse. A preciso do sistema, demonstrada
por meio de replicatas da soluo padro, deve ser
alcanada antes das injees das solues amostras. A
adequabilidade do sistema deve ser verifcada durante toda
a anlise cromatogrfca, por injeo de soluo padro em
intervalos de tempo apropriados. Quando houver mudana
signifcativa no equipamento ou em um reagente, os testes
de adequabilidade do sistema devem ser realizados antes
das injees da amostra. A anlise no ser vlida a menos
que os requerimentos do teste de adequabilidade do sistema
sejam alcanados.
5.2.17.4.1 Cromatografa de ons
A cromatografa de ons refere-se ao mtodo de separao
e determinao de ons utilizando cromatografa a lquido
de alta efcincia (CLAE). Esta tcnica baseada em um
processo de separao dos componentes da amostra entre
duas fases: fase mvel e fase estacionria. O processo
de separao resultante de interaes especfcas entre
as espcies presentes na amostra em ambas as fases. O
5
mecanismo de interao com a fase estacionria a troca
inica, onde as colunas utilizadas so constitudas por
um grupo funcional carregado, geralmente SO
3
-
, COO
-
,
NH
3
+
, NR
3
+
ligado a uma matriz polimrica, como slica
ou copolmero do tipo poliestireno-divinilbenzeno. A
fase mvel tambm contm espcies inicas ocorrendo,
desta forma, uma competio entre a distribuio das
espcies presentes na amostra entre a fase mvel e a
fase estacionria. Para cada on, o processo de troca
caracterizado pelo equilbrio de distribuio entre a fase
mvel e a fase estacionria.
Os trocadores utilizados podem ser classifcados em fortes,
mdios e fracos, dependendo do grupo funcional ligado
matriz polimrica. Os trocadores inicos fortes so aqueles
que se ionizam completamente em uma ampla faixa de
pH, como grupo sulfnico e amnio quaternrio. O grau
de dissociao dos trocadores inicos fracos e mdios
dependente do pH e, desta forma, a capacidade destes
trocadores varia em funo do pH. Pode-se citar como
exemplo, o grupo carboxlico e poliamina.
Esta tcnica permite que a condutividade eltrica seja
usada para a deteco e determinao quantitativa dos ons
em soluo, aps a separao. Geralmente, a cromatografa
de ons com coluna de troca aninica e detector por
condutividade pode ser utilizada para a determinao dos
ons F
-
, Cl
-
, Br
-
, SO
4
2-
, PO
4
3-
, I
-
, entre outros. Em virtude
da condutividade eltrica ser uma propriedade comum
a todas as espcies inicas em soluo, o detector por
condutividade tem a capacidade de monitorar todas as
espcies inicas. O problema que ocorre na utilizao da
condutividade eltrica para quantifcar as espcies inicas
eludas pode ser causado pela alta condutividade dos ons
presentes na fase mvel, principalmente devido ao on
sdio, impossibilitando a quantifcao de outros ons.
Este problema superado com o uso de um supressor do
eluente, posicionado aps a coluna de separao, onde
ocorre a converso dos ons do eluente em espcies que
contribuam para uma condutncia baixa ou nula. O cido
carbnico, resultante da troca catinica, fracamente
dissociado, possuindo uma baixa condutividade (sinal de
condutividade da linha base menos signifcativo). Desta
forma, a sensibilidade, para a determinao de nions,
pode ser aumentada signifcativamente, em um fator de 10
vezes ou superior, quando so utilizados supressores.
Um equipamento de cromatografa de ons consiste,
basicamente, no mesmo sistema utilizado para CLAE.
Este sistema consiste de uma bomba de alta propulso,
uma vlvula de injeo com ala de amostragem adequada,
coluna de separao (para a separao de nions deve ser
utilizada uma coluna de troca aninica), uma ps-coluna,
caso necessrio, para converso dos ons do eluente em
espcies com menor condutividade e um detector de
condutividade.
PROCEDIMENTO
Para operar o cromatgrafo de ons, recomenda-se seguir
as instrues do fabricante. As determinaes so feitas
por comparao com solues de referncia, contendo
concentraes conhecidas do analito.
Fase mvel: preparar a fase mvel de acordo com as
especifcaes recomendadas pelo fabricante da coluna
de troca aninica utilizada. Recomenda-se a utilizao
de fase mvel composta por uma mistura de carbonato
e bicarbonato de sdio (Na
2
CO
3
/NaHCO
3
), na faixa de
concentrao de 1,0 a 4 mmol/L, dependendo da coluna
utilizada. Utilizar a vazo da fase mvel recomendada
pelo fabricante do equipamento e de acordo com a coluna
de troca inica utilizada. Durante as anlises utilizando
a deteco por condutividade, regenerar a coluna de
supresso qumica, conforme recomendao do fabricante.
Recomenda-se a utilizao de H
2
SO
4
0,005 mol/L e
posterior lavagem com gua purifcada.
Calibrao: preparar ao menos quatro solues de
referncia do elemento a ser determinado, abrangendo
a faixa de concentrao recomendada pelo fabricante
do equipamento para o analito em anlise e injetar,
separadamente, cada soluo de referncia no equipamento,
utilizando ala de amostragem adequada. Recomenda-se o
uso de ala de amostragem de 20 a 100 L. Registrar os
cromatogramas e integrar os sinais em rea ou em altura
de pico. Aps a calibrao, traar a curva de calibrao.
Preparar a soluo da amostra conforme indicado na
monografa, ajustando sua concentrao para que esta fque
situada dentro da faixa de concentrao das solues de
referncia. Injetar a amostra no cromatgrafo, registrar a
leitura e repetir esta sequncia trs vezes, adotando a mdia
das trs leituras. Determinar a concentrao do elemento
pela curva de calibrao. Caso seja feita a determinao
simultnea de vrios nions, podem ser feitas solues de
referncia contendo todos os analitos.
5.2.17.5 CROMATOGRAFIA A GS
Cromatografa a gs (CG) uma tcnica de separao
cromatogrfca baseada na diferena de distribuio de
espcies de uma mistura entre duas fases no miscveis,
na qual a fase mvel um gs de arraste que se move
atravs da fase estacionria contida em uma coluna. CG
est baseada no mecanismo de adsoro, distribuio de
massa ou excluso por tamanho. aplicada a substncias
e seus derivados que se volatilizam sob as temperaturas
empregadas, e utilizada para identifcao, teste de
pureza e determinao quantitativa.
Quando um constituinte vaporizado conduzido pelo gs
de arraste para dentro da coluna, ele particionado entre a
fase mvel gasosa e a fase estacionria por um processo de
distribuio contracorrente dinmico, apresentando uma
reteno maior ou menor devido a fenmenos de soro e
dessoro sobre a fase estacionria.
EQUIPAMENTO
O equipamento consiste em uma fonte de gs de arraste
e um controlador de fuxo, uma cmara de injeo, uma
coluna cromatogrfca contida em um forno, um detector
e um sistema de aquisio de dados (ou um integrador ou
registrador). O gs de arraste circula pela coluna com fuxo
e presso controlados e segue diretamente para o detector.
5
O injetor, a coluna e o detector apresentam temperatura
controlada. A cromatografa se realiza a temperatura
constante ou utilizando um programa de temperatura
adequado. Os compostos a serem cromatografados, tanto
em soluo como gases, so injetados, entrando em contato
com o gs de arraste na cmara de injeo. Dependendo
da confgurao do equipamento, a mistura a ser analisada
deve ser injetada diretamente na coluna ou deve ser
vaporizada na cmara de injeo e misturada no gs de
arraste antes de entrar na coluna.
Uma vez na coluna, os constituintes da mistura so
separados em funo de seus diferentes ndices de reteno
linear, os quais so dependentes da presso de vapor e
do grau de interao com a fase estacionria. O ndice
de reteno, que defne a resoluo, o tempo de reteno
e a efcincia da coluna em relao aos componentes da
mistura, tambm temperatura-dependente. O uso de
programas de temperatura para o forno onde est a coluna
apresenta uma vantagem na efcincia de separao dos
compostos que se comportam diferentemente na presso
de vapor.
Os compostos saem separados da coluna, passando por
um detector, que responde a quantidade de cada composto
presente. O tipo de detector a ser utilizado depende da
natureza dos compostos a serem analisados e especifcado
em cada monografa. Os detectores so aquecidos para
evitar a condensao dos compostos eludos. A sada do
detector dada em funo do tempo de reteno, gerando
um cromatograma, que consiste de uma srie de picos
no eixo do tempo. Cada pico representa um composto
da mistura vaporizada, embora alguns picos possam sair
sobrepostos. O tempo de eluio caracterstico de um
composto individual e a resposta do instrumento, medido
como a rea do pico ou a altura do pico, em funo da
quantidade presente.
Injetores
Injees diretas de solues o modo usual de injeo, a
menos que seja indicado diferentemente na monografa. A
injeo pode se realizar diretamente na cabea da coluna
utilizando uma seringa ou uma vlvula de injeo, ou em
uma cmara de vaporizao que pode estar equipada com
um divisor de fuxo. A quantidade de amostra que pode
ser injetada em uma coluna capilar sem saturara menor
quando comparada quantidade que pode ser injetada
em colunas empacotadas. Colunas capilares, portanto,
frequentemente so utilizadas com injetores capazes de
dividir a amostra em duas fraes (modo split), uma menor
que entra na coluna e outra maior que descartada. Esses
injetores podem ser utilizados sem divisor de amostra
(modo splitless) para anlises de componentes em menor
quantidade ou em traos.
As injees da fase de vapor podem ser efetuadas por
sistema de injeo em espao confnado (headspace)
esttico ou dinmico.
Sistema de injeo em espao confnado (headspace)
esttico (purge e trap) inclui um dispositivo de
concentrao, por onde as substncias volteis da soluo
so arrastadas at uma coluna adsorvente, mantida a baixa
temperatura onde so adsorvidas. As substncias retidas
so ento dessorvidas em uma fase mvel por aquecimento
rpido da coluna adsorvente.
Sistema de injeo em espao confnado (headspace)
dinmico inclui uma cmara de aquecimento das amostras,
termostaticamente controlada, na qual se colocam frascos
(vials) fechados onde amostras slidas ou lquidas so
colocadas por um perodo de tempo determinado, para
permitir que os componentes volteis das amostras atinjam
o equilbrio entre a fase no gasosa e a fase de vapor.
Depois de estabelecido o equilbrio, uma quantidade pr-
determinada do espao confnado do frasco injetada no
cromatgrafo.
Fases estacionrias
As fases estacionrias esto contidas em colunas que
podem ser:
Uma coluna capilar de slica fundida cuja
parede est revestida com a fase estacionria;
Uma coluna empacotada com partculas inertes
impregnadas com a fase estacionria;
Uma coluna empacotada com a fase estacionria slida.
As colunas capilares, usualmente feitas de slica fundida,
apresentam um dimetro interno ( ) de 0,10 a 0,53 mm e
um comprimento de 5 a 60 m. A fase lquida ou estacionria
que pode estar quimicamente ligada superfcie interna,
um flme de 0,1 a 5,0 m de espessura, embora fases
estacionrias no polares possam atingir 5 m de espessura.
As colunas empacotadas, de vidro ou metlicas, apresentam
comprimento de 1a 3 m com um dimetro interno ( ) de
2 a 4 mm. As fases estacionrias consistem, geralmente,
em polmeros porosos ou suportes slidos impregnados
com a fase lquida chegando a, aproximadamente, 5%
(p/p). Colunas de alta capacidade, com a fase lquida
chegando a, aproximadamente, 20% (p/p), so utilizadas
para uma ampla faixa de compostos e para determinao
de compostos com baixo peso molecular como a gua.
A capacidade requerida infuencia a escolha do suporte
slido.
Os suportes para anlise de compostos polares em
colunas empacotadas com uma fase estacionria de baixa
polaridade e baixa capacidade devem ser inertes para evitar
um excessivo prolongamento dos picos. A reatividade dos
materiais de suporte pode ser reduzida por silanizao
antes do preenchimento com a fase lquida. Geralmente se
utiliza terra de diatomceas lavadas com cido e calcinadas.
Os materiais esto disponveis em diversos tamanhos de
partcula, sendo as partculas mais comumente utilizadas
de 150 a 180 m (80 a 100 mesh) e de 125 a 150 m (100
a 120 mesh).
Fases mveis
O suprimento do gs de arraste pode ser obtido a partir
de um cilindro de alta presso ou por um gerador de gs
5
de alta pureza. Em ambos os casos, o gs passa por uma
vlvula de reduo de presso e o fuxo medido para,
ento, entrar na cmara de injeo e na coluna. O tempo
de reteno e a efcincia do pico dependem da qualidade
do gs de arraste; o tempo de reteno diretamente
proporcional ao comprimento da coluna e a resoluo
proporcional raiz quadrada do comprimento da coluna.
Para colunas empacotadas, a mdia de fuxo do gs
carreador usualmente expressa em mililitros por minuto,
presso atmosfrica e temperatura ambiente. O fuxo
mdio medido na sada do detector, ou com um dispositivo
mecnico calibrado ou com um tubo de borbulhamento,
enquanto a coluna est com temperatura de funcionamento.
A velocidade linear do gs de arraste atravs da coluna
empacotada inversamente proporcional raiz quadrada
do dimetro interno da coluna para um dado volume de
fuxo. Fluxos de 60 mL/min em uma coluna de 2 mm de
dimetro interno e 15 mL/min em uma coluna de 2 mm
de dimetro interno, proporcionam velocidades lineares
idnticas e, com isso, tempos de reteno similares. A
menos que especifcado na monografa, a mdia de fuxo
para colunas empacotadas de, aproximadamente, 30 a
60 mL/min. Para colunas capilares, a velocidade do fuxo
linear usualmente utilizada ao invs da mdia de fuxo.
Isto determinado a partir do comprimento da coluna e
do tempo de reteno de uma amostra de metano diluda,
utilizando um detector por ionizao de chama. Operando
a altas temperaturas, existe presso de vapor sufciente para
que ocorra uma gradual perda da fase lquida, um processo
chamado sangramento.
Hlio ou nitrognio so, geralmente, empregados como
gases de arraste para colunas empacotadas, enquanto que
os gases de arraste utilizados para colunas capilares so
nitrognio, hlio e hidrognio.
Detectores
Detectores por ionizao de chama so os mais utilizados
mas, dependendo da fnalidade da anlise, outros detectores
podem ser empregados, incluindo: condutividade trmica,
captura de eltrons, nitrognio-fsforo, espectrometria de
massas, espectrometria no infravermelho com transformada
de Fourier, entre outros. Para anlises quantitativas, os
detectores devem apresentar uma ampla variao dinmica
linear: a resposta deve ser diretamente proporcional
quantidade de composto presente no detector em uma
ampla faixa de concentraes. Detectores por ionizao de
chama apresentam uma ampla faixa linear e so sensveis
maioria dos compostos. A resposta dos detectores depende
da estrutura e da concentrao do composto e da mdia de
fuxo da combusto, do ar e do gs de arraste. A menos que
especifcado diferentemente na monografa, detectores por
ionizao de chama operam tanto com hlio quanto com
nitrognio como gs de arraste para colunas empacotadas,
e com hlio ou hidrognio para colunas capilares.
Os detectores por condutividade trmica empregam fo de
metal aquecido localizado na corrente do gs de arraste.
Quando um analito entra no detector com o gs de arraste,
a diferena na condutividade trmica da corrente de gs
de arraste (gs e componentes da amostra) relativo a um
fuxo de referncia do gs de arraste sem analito medido.
Em geral, detectores por condutividade trmica respondem
uniformemente a compostos volteis sem considerar sua
estrutura; entretanto, so considerados menos sensveis
que o detector por ionizao de chama.
Detectores por ionizao de chama alcalina, tambm
chamado NP ou detector nitrognio-fsforo, contm uma
fonte terminica, com um sal metal-lcali ou um elemento
de vidro contendo rubdio ou outro metal, que resulta numa
efciente ionizao de nitrognio orgnico e compostos
contendo fsforo. um detector seletivo que apresenta
baixa resposta para hidrocarbonetos.
Detectores por captura de eltrons contm uma fonte
radioativa de radiao ionizante. Exibem uma resposta
extremamente alta a compostos halogenados e grupo nitro,
mas pouca resposta a hidrocarbonetos. A sensibilidade
aumenta com o nmero e o peso atmico de tomos de
halognio.
Dispositivos para tratamento de dados
Estaes de tratamento de dados conectadas na sada dos
detectores calculam a rea e a altura dos picos, e apresentam
os cromatogramas completos contendo os parmetros da
corrida e os dados dos picos. Os dados dos cromatogramas
podem ser armazenados e reprocessados por integrao
eletrnica ou outro tipo de clculo que seja necessrio.
Essas estaes de tratamento de dados so utilizadas
tambm para programar as corridas cromatogrfcas.
PROCEDIMENTO
Colunas empacotadas e capilares devem ser condicionados
antes do uso at que a linha de base esteja estvel. Isso
deve ser realizado operando a uma temperatura acima da
especifcada pelo mtodo ou por repetidas injees do
composto ou da mistura a ser cromatografada. O fabricante
da coluna geralmente fornece instrues para o adequado
procedimento de condicionamento da coluna. Em caso de
polisiloxanos metil e fenil substitudos termicamente estveis,
uma sequncia especial aumenta a efcincia e a inatividade:
manter a coluna temperatura de 250 C por 1 hora, com
fuxo de gs hlio, para remover o oxignio e solvente. Para o
fuxo de hlio, aquecer at 340 C por 4 horas, e ento reduzir
o aquecimento at temperatura de 250 C, e condicionar com
fuxo de hlio at a estabilidade da linha de base.
Aps o procedimento de condicionamento, equilibrar a
coluna, o injetor e o detector s temperaturas e fuxo dos
gases especifcados na monografa at a obteno de uma
linha de base estvel. Preparar a(s) soluo(es) amostra
e de referncia como descrito. As solues devem estar
isentas de partculas slidas.
Muitos frmacos so molculas polares reativas. Nesse
caso, pode ser necessria a converso destes a derivados
menos polares e mais volteis, por tratamento dos grupos
reativos com reagentes apropriados.
Os ensaios requerem comparao quantitativa de um
cromatograma com outro. A maior fonte de erro a
5
irreprodutibilidade da quantidade de amostra injetada,
notadamente quando injees manuais so realizadas com o
auxlio de uma seringa. Os efeitos de variabilidade podem ser
minimizados pela adio de um padro interno, um composto
no interferente adicionado na mesma concentrao nas
solues amostra e padro. A mdia das respostas do pico
do analito em relao ao padro interno comparada entre
os cromatogramas da amostra e do padro. Quando o padro
interno quimicamente similar substncia a ser analisada,
existe tambm uma compensao para variaes menores
na coluna e nas caractersticas do detector. Em alguns
casos, o padro interno pode ser conduzido atravs da
preparao da amostra antes da anlise cromatogrfca para
controlar outros aspectos quantitativos do ensaio. Injetores
automticos aumentam a reprodutibilidade das injees das
amostras e reduzem a necessidade de padres internos.
5.2.17.5.1 Cromatografa a gs em espao
confnado (headspace)
A cromatografa a gs em espao confnado (headspace)
uma tcnica particularmente adequada para a separao e
determinao de compostos volteis presentes em amostras
slidas e lquidas. Este mtodo est baseado na anlise de
uma fase de vapor em equilbrio com uma fase slida ou
lquida.
EQUIPAMENTO
O equipamento consta de um cromatgrafo a gs ao qual
se adapta um dispositivo para a introduo da amostra, que
pode estar conectado a um mdulo de programao que
controle automaticamente a presso e a temperatura. Se for
necessrio, pode-se acoplar um dispositivo de eliminao
de solventes. A amostra a ser analisada introduzida em um
frasco provido de um obturador adequado que o fecha e de
um sistema de vlvulas que permite a entrada de um gs de
arraste. O frasco colocado em uma cmara termostatizada
a determinada temperatura para a amostra ser examinada. A
amostra deixada nesta temperatura por tempo sufciente
para permitir que se estabelea o equilbrio entre a fase
slida e a fase gasosa. O gs de arraste introduzido no
frasco e, depois de determinado tempo, uma vlvula
aberta para permitir que o gs se expanda at a coluna
cromatogrfca, arrastando os componentes volteis.
Ao invs de utilizar um cromatgrafo especialmente
adaptado para a introduo das amostras, tambm
podem-se utilizar seringas hermticas e um cromatgrafo
convencional. Neste caso, o equilbrio entre as duas
fases conduzido em uma cmara separada e a fase de
vapor transferida para a coluna, tomando as precaues
necessrias para evitar qualquer modifcao do equilbrio.
PROCEDIMENTO
Ajustar as condies de trabalho do equipamento a fm de
obter uma resposta satisfatria, utilizando as solues de
referncia.
Calibrao direta
Introduzir separadamente, em frascos idnticos, a
preparao a examinar e cada uma das solues de
referncia, segundo as condies descritas na monografa
e evitando o contato entre a amostra e o dispositivo de
injeo. Fechar hermeticamente os frascos e introduzi-los
na cmara termostatizada a temperatura e presso descritas
na monografa. Aps atingir o equilbrio, proceder anlise
cromatogrfca nas condies descritas.
Adio de padro
Adicionar, a uma srie de frascos idnticos, volumes
iguais da soluo a examinar. Adicionar a todos os frascos,
exceto a um deles, quantidades crescentes de uma soluo
de referncia, de concentrao conhecida da substncia a
examinar. Deste modo, se obtm uma srie de preparaes
contendo quantidades crescentes de determinada
substncia. Fechar hermeticamente os frascos e introduzi-
los na cmara termostatizada, segundo condies de
temperatura e presso descritas na monografa. Aps
alcanar o equilbrio, proceder anlise cromatogrfca
nas condies descritas.
Calcular a equao da reta por regresso linear, utilizando
o mtodo dos mnimos quadrados e, a partir dela, obter a
concentrao da substncia em exame na preparao da
amostra, indicada pelo intercepto da equao.
5.2.18 POLAROGRAFIA
A polarografa, mtodo analtico eletroqumico,
fundamenta-se na medida da corrente eltrica resultante
da eletrlise de substncias eletroativas (reduzveis
ou oxidveis) sob determinado potencial de eletrodo e
condies controladas. Em outras palavras, a tcnica
implica no registro do aumento da corrente em eletrodo
polarizvel, durante a eletrlise de substncia dissolvida
no meio eletroltico, em funo do aumento da tenso
aplicada ao sistema. O grfco desta evoluo da corrente
em relao tenso - o polarograma - fornece informaes
quali e quantitativas sobre constituintes eletro-redutveis
ou eletro-oxidveis da amostra.
Dentre as variantes de metodologia polarogrfca, a
mais simples a tcnica em corrente contnua. Requer, a
exemplo da potenciometria, o emprego de dois eletrodos, o
de referncia (geralmente eletrodo de calomelano saturado,
ECS) e o microeletrodo indicador (geralmente eletrodo de
mercrio gotejante, EMG). Em alguns casos emprega-se
um terceiro eletrodo, auxiliar. O ECS - de elevada rea
superfcial - fornece potencial constante durante o ensaio,
enquanto o EMG - gotas de mercrio de dimenses
reprodutveis fuindo periodicamente da extremidade de
capilar ligado ao reservatrio do metal - assume o potencial
que lhe conferido pela fonte externa. O equipamento
polarogrfco compreende, alm dos eletrodos, a clula
polarogrfca (cuba de eletrlise), fonte de alimentao
varivel, dotada de voltmetro e microampermetro
(galvanmetro) e registrador grfco ou digital.
5
De forma simplifcada, a tcnica consiste na dissoluo da
amostra (o mtodo tem sensibilidade para concentraes
de espcie eletroativa na faixa de 10
-2
a 10
-4
M) em
eletrlito de suporte, responsvel pela manuteno de
pequena corrente residual, mas que se mostra inerte na
faixa de potencial de transformao da amostra (janela
de potencial). Inicialmente, sem aplicao de tenso na
fonte, (potenciostato de preciso), a tenso fornecida ao
microeletrodo nula e no haver indicao de corrente
no microampermetro. O crescente aumento de tenso
far com que pequeno potencial alcance os eletrodos.
Sob esta tenso, ainda reduzida, eventuais impurezas do
eletrlito suporte e pequenas concentraes de oxignio
podem sofrer reduo no EMG (catodo, neste caso),
reduzindo-se e provocando a indicao de pequena
passagem de corrente. A elevao progressiva da tenso
aplicada acentuar o processo de reduo e o aumento
quase proporcional da corrente. Atinge-se, fnalmente, o
potencial necessrio reduo do analito na soluo da
amostra, o que se refete em elevao acentuada da corrente
lida no microampermetro (galvanmetro) e registrada no
polarograma. H, contudo, limite para a proporcionalidade
da elevao tenso-corrente. Enquanto a corrente se eleva
(e a reduo se processa), ocorre diminuio progressiva
da concentrao da espcie eletroativa original junto
superfcie do eletrodo. Em dado momento - a velocidade
da eletrlise sendo constante - tal concentrao atinge
nvel insufciente para permitir elevao adicional da
corrente e esta ltima passa a ser limitada pela difuso
com a qual a espcie eletroativa consegue se difundir no
seio (interior) da soluo eletroltica para a superfcie do
EMG. Surge o patamar observado no polarograma (Figura
1), sendo a corrente medida - ento denominada corrente
de difuso um parmetro proporcional concentrao
de espcie eletroativa na amostra (aspecto quantitativo
da polarografa). Superado determinado nvel de tenso, a
corrente volta a se elevar. Esse aumento causado pela
reao do eletrlito suporte. Sua presena, em elevadas
concentraes, impede que as molculas eletroativas da
amostra alcancem o microeletrodo por migrao eltrica e
assegura, por isso, que a corrente limite seja efetivamente
regulada apenas por difuso.
Ao se empregar um microeletrodo de mercrio gotejante, a
superfcie do eletrodo constantemente renovada (forma-
se gota nova a cada 3-5 segundos), ocorrendo, da, variao
na corrente medida dentro de dado intervalo; a corrente
mais baixa quando a gota se forma, chegando ao mximo
no instante da queda. O fenmeno explica a forma dente
de serra caracterstica da onda polarogrfca.
Figura 1- Polarograma de espcie eletrorredutvel.
POLAROGRAMA
ilustrado na Figura 1 um polarograma tpico (EMG),
caracterizado por 4 fases distintas. O segmento A devido
corrente capacitiva, i
c
, incorporada corrente faradaica,
i
f
, resultante da oxidao ou reduo de impurezas do
eletrlito suporte, ou da amostra e pequenas concentraes
de oxignio, quando esse no retirado por completo da
soluo. O conjunto destas correntes denomina-se corrente
residual, i
r
(i
r
= i
c
+ i
f
). No segmento B do polarograma
ocorre a corrente faradaica, i
f
, devida converso da
substncia sob ensaio. A eletrodecomposio leva escassez
desta substncia junto ao microeletrodo, verifcando-se o
patamar (segmento C) onde aparece a corrente limite, i
l
.
Esta compreende a soma das correntes residual e de difuso
(i
1
= i
r
+ i
d
) em que a corrente de difuso - proporcional
concentrao da espcie eletroativa na amostra - tem seu
valor determinado por:
i
d
= i
l
+ i
r
Duas outras correntes indesejveis - a de migrao e a de
conveco - podem incorporar a corrente limite. A primeira
suprimida pelo emprego de eletrlito suporte inerte na
faixa de potencial empregada, em concentraes, no
mnimo, 100 vezes maiores que as da espcie eletroativa.
5
A corrente de conveco, por sua vez, eliminada pela no
agitao da soluo.
Finalmente, o segmento D do polarograma, no qual
ocorre reverso da proporcionalidade tenso-corrente,
corresponde reduo de outras espcies eletroativas,
quando presentes, ou, mais frequentemente, eletrlise do
suporte.
Equao de Ilkovic
A equao de Ilkovic estabelece relaes entre variveis
compreendidas na medida polarogrfca e a corrente de
difuso no EMG:
em que
i
d
= corrente de difuso, em uA
708 = constante dependente de diversos parmetros,
incluindo a unidade adotada para as variveis, dimenso da
gota de mercrio e instante da medida de i
d
,
n = nmero de eltrons necessrios reduo ou oxidao
de uma molcula ou on de substncia eletroativa,
D = coefciente de difuso, em cm
2
/s,
C = concentrao de substncia eletroativa, em milimoles/L,
m = massa do fuxo de mercrio, em mg/s,
t = tempo de vida da gota, em s.
A constante 708 - englobando constante natural e o valor do
faraday - estabelecida para operao a 25
o
C e aplicvel
polarografa de corrente contnua amostrada, na qual, em vez
do registro contnuo de corrente, efetua-se apenas a leitura da
corrente ao trmino da vida da gota de mercrio, permitindo
obteno de polarograma linear. Entretanto, ao empregarem-
se instrumentos dotados de amortecedor de dente de serra
no registrador, considera-se a corrente mdia dos pulsos. A
corrente de difuso obtida segundo a equao de Ilkovic passa
a ser a mdia para toda a vida da gota de mercrio. Neste caso
a constante adquire o valor 607.
As variveis compreendidas na equao de Ilkovic
devem ser controladas para que a corrente de difuso
seja efetivamente proporcional concentrao de espcie
eletroativa na amostra analisada. Alguns ons e molculas
orgnicas em soluo aquosa modifcam seu coefciente
de difuso razo de 1 a 2% para cada grau centgrado
aumentado, tornando necessrio que a clula polarogrfca
tenha sua temperatura controlada com tolerncia de 0,5
o
C Os parmetros m e t, relacionados com dimenso e
velocidade de renovao da gota de mercrio, dependem
da geometria do capilar, sendo a corrente de difuso
proporcional raiz quadrada da altura da coluna de
mercrio. Alturas adequadas - medindo-se da extremidade
do capilar at o nvel de mercrio no reservatrio - situam-
se entre 40 e 80 cm. O dimetro interno do capilar neste
caso de 0,04 mm para comprimentos entre 6 e 15 cm. A
altura exata do capilar ajustada para permitir a formao
de uma gota a cada 3-5 segundos, com circuito aberto e
capilar imerso no eletrlito sob ensaio.
Assim, se durante um ensaio em particular todos os
parmetros - exceo da concentrao da espcie
eletroativa - forem mantidos constantes, a equao de
Ilkovic pode ser escrita como
i
d
= KC
em que K representa o conjunto de variveis mantidas
constantes.
Esta relao direta entre corrente de difuso e concentrao
usualmente adotada mediante a determinao prvia
da corrente de difuso de soluo padro de referncia,
de concentrao conhecida. Em seguida, sob condies
idnticas, determina-se a corrente de difuso da amostra e,
fnalmente, sua concentrao:
em que P e A correspondem, respectivamente, a padro e
amostra.
Uma vez que polargrafos, em sua maioria, so dotados
de registradores automticos, mais fcil determinar
grafcamente correntes de difuso pela medida da altura da
onda polarogrfca (ver Figura 1). Os valores anotados,
em cm, podem ser diretamente aplicados frmula, sem
necessidade de sua converso em unidades de corrente
eltrica:
A
P
A
P
C
C
A
A
=
em que A
P
e A
A
correspondem s alturas das ondas
polarogrfcas do padro e da amostra, respectivamente.
Potencial de meia-onda
A medida da altura da onda polarogrfca para fns de
anlise quantitativa deve ser efetuada traando-se linhas
retas rentes aos picos das oscilaes da corrente residual
e da corrente limite e unindo-se, por meio de terceira reta
paralela ao eixo das abcissas, os prolongamentos das duas
primeiras. A reta vertical traada passando pelo ponto de
infexo da onda polarogrfca, correspondendo metade
da distncia entre a corrente residual e a corrente limite (I
= l / 2i
d
). A projeo desta reta sobre o eixo das ordenadas
fornece o chamado potencial de meia-onda, parmetro
empregado para caracterizar substncias eletroativas
(aspecto qualitativo da polarografa). O potencial de
meia-onda, E
1/2
, dado em volts versus ECS (eletrodo de
referncia), salvo quando houver especifcao diferente, e
seu valor como parmetro de identifcao decorre de sua
independncia da concentrao e caractersticas do EMG.
Entretanto, este parmetro varia em funo da composio,
pH e temperatura do meio eletroltico. Cabe ressaltar que,
para os equipamentos modernos, a medida da altura da onda
polarogrfca pode ser feita automaticamente empregando
programas especfcos para aquisio e processamento de
dados.
5
Remoo de oxignio
O oxignio reduzido no EMG em duas etapas,
convertendo-se inicialmente em perxido de hidrognio
e, em seguida, em gua. O fato de tais reaes ocorrerem
em potenciais mais negativos que zero volts, versus ECS,
podendo assim interferir com a onda polarogrfca da
amostra, torna necessrio eliminar o gs dissolvido na
soluo previamente determinao. A melhor forma
consiste em borbulhar nitrognio isento de oxignio
atravs da soluo durante um perodo de 10 a 15 minutos
imediatamente antes do ensaio, tomando a precauo de
previamente saturar o nitrognio (para evitar alteraes na
soluo eletroltica devidas evaporao) borbulhando-o
atravs de pequeno volume de soluo eletroltica em
recipiente separado.
importante manter a cuba eletroltica parada e sem
vibraes durante o registro polarogrfco com o intuito
de se evitar a formao de correntes de conveco. Em
consequncia, necessrio retirar o tubo de nitrognio
da soluo durante o registro, e deixar o tubo sobre a
superfcie da soluo para preencher a parte superior da
clula polarogrfca com nitrognio (N
2(g)
) prevenindo,
assim, a entrada de ar na clula polarogrfca. Solues
alcalinas podem ser desoxigenadas pela adio de bissulfto
de sdio, desde que este no interaja com integrantes da
soluo eletroltica.
Mximo polarogrfco
Efetuada a reduo da espcie eletroativa (EMG
catodizado), muitas vezes a onda polarogrfca eleva-se
acentuadamente, muitas vezes, antes de cair, de forma
igualmente acentuada, at o valor da corrente limite.
O fenmeno denominado mximo polarogrfco e a
corrente correspondente recebe o nome de corrente de
adsoro (i
a
). Traz o inconveniente de difcultar a medida
da onda polarogrfca (corrente de difuso) e suas causas
- ainda pouco esclarecidas - compreendem a adsoro de
eletrlito superfcie da gota de mercrio. A eliminao
do mximo polarogrfco , contudo, facilmente efetuada
mediante adio de quantidades diminutas de determinados
tensoativos (supressores de mximo) ao meio eletroltico.
Sobressaem, para tal fm, o uso de soluo de gelatina a
0,005% (p/v) e soluo de vermelho de metila a 0,01%
(p/v), entre outras.
Advertncia
Vapores de mercrio so txicos. Ao manusear o metal,
trabalhar em rea ventilada e evitar derrames que, caso
ocorram, devem ser imediata e cuidadosamente recolhidos.
POLAROGRAFIA DE PULSO
Polarografa de pulso consiste em uma variante de tcnica,
superior, pela preciso e sensibilidade, polarografa de
corrente contnua no doseamento e na identifcao de
elevado nmero de substncias em baixas concentraes,
incluindo elementos de trao, metablitos e, evidentemente,
frmacos. Sua sensibilidade, cerca de 10 vezes mais
elevada que a da polarografa DC, permite determinaes
na ordem de 10
-6
M.
Figura 2 - Medida da corrente em relao ao tempo na
polarografa de corrente contnua (A); na polarografa de
pulso (B); e na polarografa de pulso diferencial (C).
Em lugar da aplicao linearmente progressiva de potencial
e medida contnua da corrente desenvolvida, a polarografa
de pulso compreende a aplicao de pulsos de potencial
crescente ao EMG, coincidentes com o perodo fnal
de vida das gotas de mercrio, cada pulso apresentando
potencial ligeiramente superior ao anterior. A corrente, por
sua vez, amostrada no instante fnal de durao do pulso
de potencial, perodo no qual a corrente capacitiva adquire
valor praticamente nulo e a corrente residual se compe
quase que exclusivamente da corrente de difuso.
5
Figura 3 - Polarograma obtido na
polarografa de pulso diferencial.
Por outro lado, a tcnica de pulsos no provoca diminuio
acelerada da camada de difuso (concentrao de espcies
eletroativas junto ao eletrodo), propiciando a obteno de
correntes de difuso mais elevadas para concentraes
equivalentes. Da o aumento de sensibilidade inerente
tcnica. Outro aspecto favorvel da polarografa de pulso
a maior facilidade na medida da corrente limite, isenta de
oscilaes, ao contrrio do que ocorre na polarografa de
corrente contnua.
Na polarografa de pulso diferencial, pulsos constantes,
de pequena amplitude, so sobrepostos a uma rampa de
potencial de tenso linearmente crescente. A medida da
corrente efetuada duas vezes a cada pulso - imediatamente
antes da aplicao do pulso e, novamente, em seu instante
fnal - registrando-se apenas a diferena entre os dois valores
medidos (Figura 2). O registro grfco deste sistema de
medida diferencial fornece curva semelhante derivada da
onda polarogrfca, mostrando pico caracterstico (Figura
3). O potencial do pico polarogrfco corresponde a E
1/2

- AE/2 em que AE representa a altura do pico. Graas
natureza do polarograma, que apresenta picos em vez
de ondas polarogrfcas tradicionais, a polarografa de
pulso diferencial propicia resoluo mais elevada, a
ponto de permitir determinaes simultneas de espcies
eletroativas com potenciais de meia-onda prximos entre
si, em concentraes da ordem de 10
-7
M.
5.2.19 DETERMINAO DO pH
DETERMINAO POTENCIOMTRICA DO pH
O valor de pH defnido como a medida da atividade
do on hidrognio de uma soluo. Convencionalmente
usada a escala da concentrao de on hidrognio da
soluo. A gua um eletrlito extremamente fraco, cuja
autoionizao produz on hidrnio (hidrognio hidratado)
e on hidrxido:
H
2
O + H
2
O H
3
O
+
+ OH
-
As concentraes do on hidrnio nas solues aquosas
podem variar entre limites amplos, que experimentalmente
vo de 1 a 10-14 M, que defnida pela simplifcada
relao:
pH = - log [H
3
O
+
]

= log 1/[H
3
O
+
],
Desta forma, a escala de pH uma escala invertida em
relao s concentraes de on hidrnio, ou seja, quanto
menor a concentrao de on hidrnio, maior o valor do
pH.
A determinao potenciomtrica do pH feita pela
medidada diferena de potencial entre dois eletrodos
adequados, imersos na soluo em exame. Um destes
eletrodos sensvel aos ons hidrognio e o outro o
eletrodo de referncia, de potencial constante.
A equao que expressa a medida potenciomtrica de uma
clula :
pH = pH
t
= (E E
t
)/ K,
em que
E = potencial medido quando a clula contm a soluo
amostra,
Et = potencial medido quando a clula contm a soluo
tampo,
pH = valor de pH na soluo amostra
pHt = valor de ph na soluo tampo, e
K = variao do potencial por unidade de variao de pH -
teoricamente equivale a 0,0591631 + 0,000198 (t25), em
que t corresponde temperatura na qual se opera.
O valor de pH expresso pela equao em relao ao pH
da soluo padro (pHp) e determinado em peagmetro
utilizando eletrodo de vidro.
Os aparelhos comercialmente utilizados para a
determinao de pH so instrumentos potenciomtricos,
providos de amplifcadores eletrnicos de corrente com
clula de vidro-calomelano, os quais so capazes de
reproduzir valores correspondentes a 0,02 de unidades
de pH. A escala de pH calibrada no s em milivolts,
mas tambm em unidades correspondentes de pH. Dessa
forma, no h necessidade de se aplicar a equao acima,
que traduz a medida eletromtrica de pH. Uma vez que as
medidas de atividade hidrognica so sensveis a variaes
de temperatura, todos os medidores de pH so equipados
com ajuste eletrnico de temperatura.
Solues-tampo para calibrao do medidor de pH
So empregadas visando aferio do aparelho, permitindo
linearidade nas respostas em relao s alteraes de
potencial observadas. As mais importantes so: tetraoxalato
de potssio 0,05 M, fosfato equimolar 0,05 M, tetraborato
de sdio 0,01 M, carbonato de sdio e hidrxido de clcio
saturado a 25 C.
As solues-tampo so preparadas da seguinte maneira:
Tetraoxalato de potssio, 0,05 M Reduzir o tetraoxalato
de potssio a p fno e dessecar em dessecador com slica.
Dissolver exatamente 12,71g de KH
3
(C
2
O
4
)2H
2
O em gua
para perfazer 1000 ml.
5
Biftalato de potssio, 0,05M Reduzir o biftalato de
potssio a p fno e dessecar a 110
o
C at peso constante.
Dissolver exatamente 10,21g de KHC
8
H
4
O
4
, previamente
dessecado a 100 C durante 1 hora, em gua, para perfazer
1000 ml.
Fosfato equimolar, 0,05M Reduzir o Na
2
HPO
4
e
KH
2
PO
4
a p fno e dessecar a 110
o
C at peso constante.
Dissolver 3,55g de Na
2
HPO
4
e 3,40g de KH
2
PO
4
, em gua,
para perfazer 1000 ml.
Tetraborato de sdio, 0,01M - Dessecar o tetraborato
de sdio em dessecador contendo soluo aquosa de
brometo de sdio at peso constante. Dissolver 3,81g de
Na
2
B
4
O
7
10H
2
O, em gua, para perfazer 1000 ml. Evitar
absoro de dixido de carbono.
Hidrxido de clcio, saturado a 25C Reduzir o hidrxido
de clcio a p fno e dessecar com slica em dessecador
at peso constante. Transferir 5 g a balo volumtrico e
adicionar gua at 1000 ml. Agitar bem e manter em
temperatura de 25
o
C 2
o
C, para adequada saturao
(aproximadamente 0.02 M). Decantar a 25C antes de usar.
Proteger de modo a evitar absoro de dixido de carbono.
Carbonato de sdio Dessecar o carbonato de sdio
em dessecador com slica gel at peso constante. Pesar
exatamente 2,10 g. Dessecar em estufa de 300 a 500 C at
peso constante. Pesar 2,65 g. Dissolver ambas as amostras
em gua at 1000 ml.
Tais solues devem ser recm-preparadas com gua
isenta de dixido de carbono e empregadas em prazo de
trs meses, tomando-se cautela para evitar o crescimento
de fungos e bactrias. Se aceita o emprego de conservantes
desde que no interfra na medio potenciomtrica do pH.
A gua utilizada no preparo das solues deve ser
recentemente destilada, aquecida ebulio por, no mnimo,
15 minutos, resfriada e mantida em recipiente impermevel
a dixido de carbono. Preparar, individualmente, as seis
solues-padro e armazen-las em frascos de vidro ou de
polietileno adequados. Observar o prazo de validade das
solues, uma vez que o pH sofre alteraes com o passar
do tempo.
Tabela 1 Relao entre as temperaturas e os valores de pH das solues-tampo
para calibrao do medidor de pH
Temperatura
(
o
C)
Tetraoxalato
de potssio
0,05M
Biftalato
de potssio
0,05M
Fosfato
equimolar
Tetraborato
de sdio
0,01M
Hidrxido de
clcio saturado
a 25C
Carbonato
de sdio
10 1,67 4,00 6,92 9,33 13,00 10,18
15 1,67 4,00 6,90 9,27 12,81 10,12
20 1,68 4,00 6,88 9,22 12,63 10,07
25 1,68 4,01 6,86 9,18 12,45 10,02
30 1,68 4,01 6,85 9,14 12,30 9,97
35 1,69 4,02 6,84 9,10 12,14 9,93
40 1,70 4,03 6,84 9,07 11,99 -
PROCEDIMENTO
Aferio do peagmetro
Retirar o bquer contendo soluo de KCl na qual est
mergulhado o eletrodo quando o medidor no est em uso;
Lavar o eletrodo com jatos de gua destilada e enxugar
com papel fltro;
Imergir o eletrodo em soluo tampo de referncia,
verifcando-se a temperatura em que se vai operar;
Ajustar o valor de pH at o valor tabelado, mediante o
valor de calibrao;
Lavar o eletrodo com vrias pores da segunda soluo
tampo de referncia, imergir o eletrodo e verifcar o
valor de pH registrado. O valor de pH no deve apresentar
variaes que superem 0,07 do valor tabelado para a
segunda soluo padro. H aparelhos que possuem
frascos acoplados com detergentes aninicos, empregados
como solues de lavagem entre cada uma das operaes
de aferio dos valores de pH. A gua tambm se presta a
essa funo;
Se no houver preciso nas medidas, verifcar possveis
danos nos eletrodos e troc-los.
Determinao do pH na soluo amostra
Aps a aferio conveniente, lavar o eletrodo com gua
(ou solues prprias) e com vrias pores da soluo
amostra. Para diluio das amostras, usar gua destilada
isenta de dixido de carbono;
A primeira determinao fornece valor varivel, havendo
necessidade de proceder a novas leituras. Os valores
encontrados posteriormente no devero variar mais do
que 0,05 de unidade em trs leituras sucessivas;
Para determinaes que exijam alta preciso, as
temperaturas das solues-tampo e amostra, dos eletrodos
e das guas de lavagem no devem estar acima de 2 C
entre si. Assim, para que se reduzam os efeitos de histerese
trmica ou eltrica dos eletrodos, as solues devem estar
5
mesma temperatura por, no mnimo, 30 minutos antes do
incio da operao;
importante que, aps a utilizao do aparelho, se conserve
o eletrodo em soluo apropriada, normalmente de KCl.
Contaminaes das solues-estoque devem ser evitadas
pela adoo de procedimentos sistemticos, tais como o
fechamento imediato dos frascos contendo as solues,
a fm de prevenir introdues acidentais de pipetas ou
bastes, o uso de pipetas individuais para cada soluo.
DETERMINAO COLORIMTRICA DO pH
Baseia-se no emprego de solues indicadoras ou de papis
indicadores, que tem a propriedade de mudar de colorao
conforme a variao do pH. Neste caso, trata-se de medida
aproximada, indicando apenas uma faixa de valores,
mais ou menos larga, conforme o indicador empregado.
A determinao levada a efeito adicionando-se gotas da
soluo indicadora soluo em exame ou umedecendo-se
papis indicadores com a soluo em exame e observando-
se a mudana de colorao. As cores desenvolvidas pelos
indicadores em diversas faixas de pH esto relacionadas
em Indicadores (14.1)
ACIDEZ E ALCALINIDADE: ENSAIOS RPIDOS
Uma soluo considerada neutra quando no modifca a
cor dos papis azul e vermelho de tornassol, ou quando o
papel indicador universal adquire as cores da escala neutra,
ou quando 1 ml da mesma soluo se cora de verde com
uma gota de azul de bromotimol SI (pH 7,0).
considerada cida quando cora em vermelho o papel
azul de tornassol ou 1 ml se cora de amarelo por uma gota
de vermelho de fenol SI (pH 1,0 a 6,6).
considerada fracamente cida quando cora levemente
de vermelho o papel azul de tornassol ou 1 ml se cora de
alaranjado por uma gota de vermelho de metila SI (pH 4,0
a 6,6).
considerada fortemente cida quando cora de azul o
papel de vermelho de congo ou 1 ml se cora de vermelho
pela adio de uma gota de alaranjado de metila SI (pH
1,0 a 4,0).
considerada alcalina quando cora de azul o papel
vermelho de tornassol ou 1 ml se cora de azul por uma gota
de azul de bromotimol SI (pH 7,6 a 13,0).
considerada fracamente alcalina quando cora de azul o
papel vermelho de tornassol ou 1 ml se cora de rosa por
uma gota de vermelho de cresol SI (PH 7,6 a 8,8).
considerada fortemente alcalina quando se cora de azul
por uma gota de timolftalena SI (pH 9,3 a 10,5) ou de
vermelho por uma gota de fenolftalena SI (pH 10,0 a 13,0).
5.2.20 DETERMINAO DE
GUA
Muitas substncias farmacopeicas encontram-se na forma
hidratada ou contm gua absorvida, tornando-se relevante
sua determinao por mtodos especfcos como o mtodo
volumtrico (5.2.20.1); mtodo da destilao azeotrpica
(5.2.20.2), ou mtodo semimicro (5.2.20.3), sendo indicado
na monografa especifca para cada substncia.
5.2.20.1 MTODO VOLUMTRICO
Determinar o teor de gua, pelo mtodo direto, salvo quando
houver outra especifcao na monografa especifca da
substncia em analise.
MTODO DIRETO
Baseia-se na reao quantitativa da gua com soluo
anidra de dixido de enxofre e iodo em presena de uma
soluo tampo que reage com ons hidrognio.
Na soluo volumtrica, original, conhecida como
Reagente de Karl Fischer, o dixido de enxofre e o iodo
so dissolvidos em piridina e metanol. A amostra pode
tanto ser titulada diretamente (mtodo direto) quanto por
retorno (mtodo indireto).
Aparelhagem
Admite-se o emprego de qualquer equipamento que
permita a excluso adequada da umidade atmosfrica e a
determinao do ponto fnal da titulao. Para substncias
incolores, possvel detectar-se o ponto de equivalncia
pela mudana de cor do reagente, de amarelo canrio para
mbar. O inverso observado ao se adotar a titulao por
retorno. Todavia, mais frequente e preciso determinar-se
o fnal da titulao eletrometricamente. Compreende o uso
de dispositivo eltrico capaz de gerar diferena de potencial
de 200 mV entre dois eletrodos de platina imersos na
soluo a titular. Ao ser atingido o ponto de equivalncia,
ligeiro excesso de reagente provoca elevao brusca do
fuxo de corrente entre 50 a 150 A, durante 30 segundos a
30 minutos, dependendo da natureza da amostra (o perodo
menor quando a substncia solvel no reagente).
Alguns tituladores automticos possuem mecanismo para
fechamento imediato da vlvula que controla a entrada do
titulante, assim que detecta a mudana de potencial. Os
aparelhos comercialmente disponveis possuem um sistema
fechado que consiste de uma ou duas buretas automticas,
copo de titulao, agitador magntico e eletrodo especifco.
O ar no sistema mantido seco, com o uso de dessecantes
adequados.
Reagente de Karl Fischer
Adicionar 125 g de iodo a uma soluo contendo 670 mL
de metanol e 170 mL de piridina. Deixar resfriar. Transferir
100 mL de piridina para proveta de 250 mL, mantida fria
5
em banho de gelo, passar corrente de dixido de enxofre
atravs do solvente at que seu volume atinja 200 mL.
Lentamente, e sob agitao, adicionar essa soluo
mistura de iodo, fria, previamente preparada. Agitar at
completa dissoluo do iodo e aguardar 24 horas antes de
padronizar. Quando recm-preparada, a soluo reagente
neutraliza cerca de 5 mg de gua/mL, mas deteriora-se
com rapidez, portanto, recomenda-se a sua padronizao
imediatamente antes do uso, ou diariamente, quando em
uso contnuo. Proteger da luz quando em uso. Armazenar
o reagente sob refrigerao em frasco mbar, provido de
tampa esmerilhada hermtica. Como opo ao preparo do
reagente, pode-se recorrer a solues reagentes comerciais.
Tambm, podem ser utilizados reagentes comerciais que
contenham outros solventes, base diferente da piridina ou
outro lcool que no o metanol. Esses reagentes podem
ser solues individuais ou obtidas pela mistura de dois
reagentes provenientes de solues distintas. Quando a
monografa especifcar que o reagente deve ser diludo,
seguir as instrues do fabricante do produto. Como
diluente pode utilizar-se metanol ou outro solvente
adequado, como ter monoetlico de etilenoglicol.
Padronizao do reagente
Colocar quantidade sufciente de metanol. ou outro solvente
apropriado no frasco de titulao para cobrir os eletrodos e
adicionar quantidade sufciente de reagente para fornecer a
cor caracterstica da viragem ou a indicao de (100 50)
microamperes de corrente contnua quando da aplicao de
200 mV entre os eletrodos.
Para a determinao de traos de gua (menos de 1%),
prefervel usar reagentes com um fator de equivalncia de
gua inferior a 2,0, como o tartarato de sdio di-hidratado
(C
4
H
4
Na
2
O
6
.2H
2
O), previamente dessecado a 150 C,
por 3 horas. Pesar, rapidamente, de 150 a 350 mg do sal,
exatamente pesados, por diferena, no frasco de titulao
e titular at o ponto de equivalncia. O ttulo do reagente,
em mg de gua/mL de reagente, fornecido pela equao:
em que
18,02 = peso molecular da gua
230,08 = peso molecular do tartarato de sdio di-hidratado
p = massa, em mg, da tomada de ensaio de sal,
v = volume, em mL, de reagente consumido na titulao.
Para a determinao precisa de quantidade signifcativa
de gua (mais de 1%), utilizar gua como referncia.
Transferir de 25 a 250 mg de gua, exatamente pesados,
por diferena, para o frasco de titulao e titular at o ponto
de equivalncia. Calcular o ttulo do reagente, T, em mg de
gua/mL de reagente, pela equao
em que
p = massa, em mg, da gua,
v = o volume, em mL, de reagente consumido.
Procedimento
Salvo quando na monografa especifcar de modo diverso,
transferir 35 a 40 mL de metanol, ou outro solvente
apropriado, para o recipiente de titulao e titular com o
reagente padronizado at viragem visual ou eletromtrica,
com o intuito de eliminar toda a umidade que possa estar
presente (desconsiderar o volume consumido, pois ele no
entra nos clculos). Rapidamente, adicionar ao recipiente
de titulao quantidade, exatamente pesada da amostra,
que contenha 10 a 250 mg de gua, misturar e titular at
viragem visual ou eletromtrica. Calcular o teor de gua da
amostra, em mg, pela equao
Teor de gua (mg) = v T
em que
v = volume, em mL, de reagente consumido;
T = ttulo do reagente.
MTODO INDIRETO
Segue o mesmo principio do mtodo direto, porm, nesse
caso, incorpora-se excesso de reagente amostra e, aps
aguardar-se o tempo necessrio reao quantitativa,
titula-se o excesso de reagente com soluo padro de gua
em metanol. Essa tcnica, de uso irrestrito, especialmente
recomendada para substncias que liberam, lentamente,
seu contedo de gua.
Aparelhagem e reagente
Utilizar os mesmos descritos no mtodo direto.
Padronizao de soluo padro de gua (mtodo indireto)
Preparar soluo padro de gua diluindo 2 mL de gua
em quantidade sufciente de metanol, ou outro solvente
adequado, para completar 1000 mL. Padronizar essa
soluo conforme o procedimento anterior, utilizando
alquotas de 25 mL. Calcular o contedo de gua, em mg/
mL de soluo, pela equao
em que
v = volume, em mL, de reagente consumido,
T = ttulo do reagente, em mg/mL.
Procedimento
Quando na monografa assim especifcar, transferir
35 a 40 mL de metanol, ou outro solvente apropriado,
para o recipiente de titulao e titular com o reagente
padronizado at viragem visual ou eletromtrica, com o
intuito de eliminar toda a umidade que possa estar presente
(desconsiderar o volume consumido, pois ele no entra
nos clculos). Rapidamente, adicionar ao recipiente de
titulao, quantidade, exatamente pesada da amostra, que
contenha 10 a 250 mg de gua e um volume em excesso,
exatamente medido, do reagente. Deixar em repouso pelo
tempo necessrio para que a reao se complete e titular o
5
reagente no consumido com soluo padro de gua, at
viragem visual ou eletromtrica. Calcular o contedo, em
mg, de gua na tomada de ensaio pela equao:
em que
T = ttulo do reagente,
v = volume, em mL, do reagente adicionado em excesso
aps a incorporao da tomada de ensaio,
v = volume, em mL, de soluo padro de gua, necessrio
neutralizao do excesso de reagente,
v
r
= volume, em mL, de reagente por mL de soluo padro
de gua, determinado na padronizao dessa.
Caso seja especifcado na monografa, calcular o teor de
gua em porcentagem.
MTODO CULOMBIMTRICO
Para determinao culombimtrica da gua se utiliza o
reagente de Karl Fischer. O iodo, no entanto, no utilizado
como soluo volumtrica, mas obtido por oxidao
andica de uma soluo contendo iodeto. A clula de
reao constituda de um amplo compartimento andico
e de um restrito compartimento catdico; separados, entre
si, por um diafragma. Tambm, podem ser utilizados
outros tipos adequados de clulas de reao, como por
exemplo, sem o diafragma. Cada compartimento tem
um eletrodo de platina que conduz a corrente atravs da
clula. O iodo, que se produz no eletrodo andico, reage,
imediatamente, com a gua que est no compartimento.
Quando toda a gua for consumida, produz-se um excesso
de iodo que normalmente se detecta, eletrometricamente,
indicando o ponto fnal. No necessrio trocar o reagente
de Karl Fischer depois de cada determinao. Um requisito
necessrio para esse mtodo que cada componente da
amostra seja compatvel com os demais componentes e
que no produzam reaes secundrias. Normalmente as
amostras so transferidas ao recipiente de titulao, na
forma de solues, mediante a injeo atravs de um septo.
Os gases podem ser introduzidos na clula utilizando um
tubo de entrada adequado. A preciso do mtodo depende,
fundamentalmente, da eliminao da umidade no sistema. O
controle do sistema pode ser monitorado pela linha de base.
Esse mtodo , especialmente adequado, para substncias
qumicas inertes como hidrocarbonetos, alcois e teres.
Em comparao com o mtodo volumtrico de Karl
Fischer, a culombimetria um mtodo de microtitulao.
Aparelhagem
Admite-se o emprego de qualquer equipamento disponvel
comercialmente que possua um sistema totalmente
hermtico, equipado com eletrodos especfcos e agitador
magntico. O microprocessador do equipamento controla
o procedimento analtico e possibilita a visualizao dos
resultados. No necessrio proceder calibrao prvia
do equipamento, j que a corrente consumida pode ser
medida na forma absoluta.
Reagente
Utilizar o mesmo descrito no mtodo direto.
Preparao da amostra
Se a amostra for solvel, dissolver quantidade adequada,
exatamente pesada, em metanol anidro ou em outro
solvente adequado. Se a amostra for insolvel, pode
extrair-se a gua utilizando-se um solvente anidro que pode
ser injetado, em quantidade adequada, exatamente pesada,
na soluo do analito. Alternativamente, pode utilizar-se
tcnica de evaporao, em que a gua liberada coletada
em um tubo de ar corrente de gs inerte e anidro.
Procedimento
Com uma seringa seca, injetar rapidamente, a amostra
previamente preparada conforme descrito em Preparao
da amostra, medido com exatido e com um contedo
de gua estimado de 0,5 mg a 5 mg, ou de acordo com
as instrues do fabricante do equipamento. Misturar
e quantifcar por culombimetria, determinando o ponto
fnal eletrometricamente. Determinar o contedo de gua
na amostra diretamente na planilha do equipamento e
calcular a porcentagem presente da substncia. Realizar
a determinao em branco e proceder as correes
necessrias.
5.2.20.2 MTODO DA DESTILAO
AZEOTRPICA
semelhana do mtodo volumtrico, o azeotrpico
possibilita a determinao de gua contida em amostras de
natureza mltipla. A gua presente destilada com tolueno,
solvente no qual praticamente imiscvel, e separada em
tubo receptor apropriado aps resfriamento. Convm,
contudo, empregar tolueno previamente saturado com gua
para evitar resultados baixos devido dissoluo de gua
residual no solvente anidro.
APARELHO
Utilizar balo de fundo redondo (A) com capacidade para
500 mL, conectado por um tubo cilndrico (D) ao tubo
receptor (B) (Figura 1). As dimenses crticas das peas
do aparelho so: tubo cilndrico de 9 a 11 mm de dimetro
interno; tubo receptor com capacidade de 5 mL, e poro
cilndrica, com 146 - 156 mm de comprimento, graduada
em subdivises de 0,1 mL, de modo que o erro de leitura
no seja superior a 0,05 mL para qualquer volume indicado,
podendo, opcionalmente, ser provido de torneira. A parte
superior do tubo cilndrico liga-se, sempre, por meio de
juntas esmerilhadas, ao condensador de refuxo vertical (C)
de, aproximadamente, 400 mm de comprimento por, pelo
menos, 8 mm de dimetro interno.
Partes do balo e do tubo cilndrico podem ser guarnecidas
com tecido de amianto para maior isolamento trmico. O
5
calor para a destilao deve ser, preferivelmente, fornecido
por aquecedor eltrico dotado de controle por reostato ou
banho de leo.
Limpar o tubo receptor e condensador com mistura
sulfocrmica, enxaguar com gua e secar em estufa.
Introduzir no balo seco 200 mL de tolueno e
aproximadamente 2 mL de gua e destilar durante 2 horas.
Resfriar e, aps cerca de meia hora, medir o volume de
gua acumulado no tubo graduado.
PROCEDIMENTO
Adicionar ao balo quantidade de amostra, exatamente
pesada, que contenha de 2 a 4 mL de gua. Se a substncia
for de natureza pastosa, embrulh-la em folha de alumnio
de modo que a dimenso do pacote seja sufciente somente
para a sua passagem pelo gargalo do frasco. Se a substncia
induzir a ebulio, adicionar areia lavada e seca em
quantidade sufciente para cobrir o fundo do balo ou tubos
capilares de vidro, do tipo empregado para determinao
de ponto de fuso, vedados em uma das extremidades.
Adicionar 200 mL de tolueno, ligar o equipamento e
aquecer, Moderadamente, durante 15 minutos. Quando o
tolueno comear a ferver, regular o aquecimento para que
destile 2 gotas por segundo. Destilada praticamente toda a
gua, acelerar a velocidade de destilao para 4 gotas por
segundo. Concluda a destilao da gua, verter cerca de 10
a 15 mL de tolueno pela boca do condensador de refuxo
e prosseguir a destilao por mais 5 minutos. Remover a
fonte de calor, aguardar o resfriamento do tubo receptor
temperatura ambiente e deslocar eventuais gotculas de gua
retidas na parede do tubo receptor com o auxlio de arame
de cobre com extremidade envolta em borracha (ltex). Uma
vez concluda a separao das fases, ler o volume de gua
depositado no tubo receptor (descontando o volume inicial)
e calcular a porcentagem de gua na tomada de ensaio.
Figura 1- Aparelho para determinao de gua pelo mtodo azeotrpico.
5
5.2.20.3 DETERMINAO DA GUA
PELO MTODO SEMIMICRO
A determinao da gua pelo mtodo semimicro
realizada em um aparelho de titulao de capacidade de
60 mL, munido de 2 eletrodos de platina, de um tubo
de admisso para o nitrognio, de uma rolha adaptada
extremidade de uma bureta e de um tubo de admisso
de ar protegido por um agente de secagem. A tomada de
ensaio introduzida por um tubo lateral munido de uma
rolha esmerilada. Durante a titulao, a agitao deve ser
assegurada mediante o auxlio de um agitador mecnico ou
atravs do borbulhamento de nitrognio seco.
O trmino da reao determinado pela intensidade da
amperagem. Um circuito apropriado, constitudo por
um potencimetro de aproximadamente 2000 , ligado
a uma pilha de 1,5 V, permite aplicar uma diferena de
potencial varivel. Essa ajustada de maneira a conduzir
uma corrente inicial fraca atravs dos eletrodos de platina
ligados em srie a um microampermetro. A agulha do
microampermetro desvia-se aps cada adio do reagente,
voltando imediatamente sua posio inicial. O fm
da reao indicado por um desvio que persiste por, no
mnimo, 30 segundos.
Utilizar o iodossulfuroso SR aps determinar seu
equivalente em gua. As solues e os reagentes utilizados
devem ser mantidos em condio anidra e preservados da
umidade atmosfrica durante o doseamento ou qualquer
manipulao.
O iodossulfuroso SR deve ser conservado ao abrigo da
luz, de preferncia num frasco munido de uma bureta
automtica.
As solues de iodossulfuroso SR, comercialmente,
disponveis apresentam (ou podem apresentar) uma
composio que difere da soluo de iodossulfuroso
SR por substituio da piridina por diversos compostos
bsicos. O emprego dessas solues reagentes deve ser
precedido de avaliao que permita, em cada caso, verifcar
estequiometria e ausncia de incompatibilidade entre a
substncia a ser ensaiada e o reagente. Salvo indicao
contrria, o Mtodo A deve ser utilizado.
Mtodo A. Introduzir no frasco de titulao cerca de 20 mL
de metanol anidro ou o solvente prescrito na monografa.
Adicione reagente iodossulfuroso SR soluo at a
viragem amperomtrica. Introduzir, rapidamente, a tomada
de ensaio, agitar durante 1 minuto e titular com a soluo
iodossulfuroso SR at nova viragem.
Mtodo B. Introduzir no frasco de titulao cerca de
10 mL de metanol anidro ou do solvente prescrito na
monografa. Adicionar iodossulfuroso SR at a viragem
amperomtrica. Introduzir, rapidamente, a tomada de
ensaio da substncia num estado de diviso conveniente,
e em seguida um volume de iodossulfuroso SR, sufciente
para obter um excesso de aproximadamente 1 mL. Nesse
caso, tambm, pode ser utilizado o volume prescrito
na monografa. Deixar em repouso em frasco fechado
e ao abrigo da luz durante 1 minuto ou durante o tempo
prescrito na monografa, agitando ocasionalmente. Titular
o excesso de iodossulfuroso SR com metanol anidro ou
com outro solvente prescrito na monografa, adicionado de
uma quantidade de gua conhecida e prxima de 2,5 g/L,
at regressar fraca corrente inicial.
5.2.21 ANLISE DE
SOLUBILIDADE POR FASES
A solubilidade de substncia pura em dado solvente,
temperatura constante, parmetro caracterstico da
substncia, podendo, pois, servir para fns de identifcao
e avaliao de grau de pureza. Nesse princpio, baseia-se a
anlise de solubilidade por fases. O procedimento consiste
na adio de pores crescentes de amostra a volumes
constantes de solvente no qual a substncia analisada
mostra apenas ligeira solubilidade, visando obteno de
soluo saturada dessa substncia. Uma vez promovido
o equilbrio do sistema - por agitao prolongada, sob
temperatura constante - determina-se o contedo total de
soluto na soluo sobrenadante (geralmente por tcnica
gravimtrica) e traa-se o diagrama de solubilidade
por fases, plotando a composio da soluo, em mg de
soluto por g de solvente (ordenadas), pela composio do
sistema, em mg de amostra adicionada por g de solvente
(abscissas). A Figura 1 ilustra diagrama desse tipo. Ao
longo do segmento AB, a totalidade do slido dissolve
e encontrada na soluo (inclinao corresponde
unidade). No ponto B a amostra satura a soluo e adies
subsequentes no acarretam aumento em sua concentrao.
A inclinao do segmento de reta BC , portanto, nula e a
interseo do prolongamento dessa reta com o eixo dos Y
fornece o valor da solubilidade da substncia.
Figura 1 Diagrama de solubilidade por fases de
amostra constituda por uma s substncia.
Se a amostra for constituda de duas substncias (uma
delas impureza da outra, por exemplo), o diagrama assume
a forma ilustrada na Figura 2. O segmento AB apresenta
inclinao unitria; o ponto B indica saturao da soluo
com relao a um dos componentes da amostra (geralmente
aquele que est presente em maior proporo); o segmento
BC indica a solubilizao do segundo componente e
o segmento CD a saturao da soluo com este ltimo
(inclinao nula).
5
Figura 2 Diagrama de solubilidade por fases
de amostra contendo duas substncias.
O valor da inclinao do segmento BC - fase em
que somente o segundo componente solubilizado -
corresponde proporo deste componente na amostra. A
subtrao deste valor da unidade fornece o contedo do
primeiro componente na amostra, permitindo o emprego
da frmula (1-1).100 para a obteno do teor. A inclinao,
i, obtida pela frmula (Y
2
-Y
1
) / (X
2
-X
1
), em queY
1
,Y
2
e X
1
, X
2
correspondem, respectivamente, a projees
de pontos do segmento de reta BC sobre a ordenada
(composio da soluo) e a abcissa (composio do
sistema). A extrapolao do segmento BC fornece o limite
de solubilidade, S
1
, em mg de soluto por g de solvente,
do primeiro componente, enquanto o prolongamento da
reta do segmento CD at o eixo dos Y leva soma das
solubilidades dos dois componentes, S
1
+ S
2
.
A ocorrncia de desvios pronunciados nos pontos que
constituem os segmentos de reta do diagrama indica falta
de equilbrio no sistema, embora estes tambm possam
ser atribudos existncia de soluo slida ou a desvios
do comportamento terico. Se necessrio, a inclinao I
pode ser calculada por aproximao grfca ou a partir do
mtodo estatstico dos mnimos quadrados.
Uma peculiaridade da analise de solubilidade por fases no
ser tcnica aplicvel a misturas cujos componentes esto
presentes na amostra na proporo de suas solubilidades.
Neste caso particular, ambos os componentes promovem
saturao no mesmo ponto, fornecendo, como resultado,
diagrama de fases equivalente ao de substncia pura.
ESCOLHA DE SOLVENTE
A escolha de solvente para anlise de solubilidade por fases
baseada na solubilidade do componente presente em
maior proporo na amostra e no mtodo de doseamento
adotado para a determinao da concentrao da soluo
formada. Sendo mais usual a tcnica gravimtrica, convm
ao solvente apresentar volatilidade sufciente para permitir
sua evaporao a vcuo, mas insufciente para difcultar
operaes de transferncia e pesagem. Recomendam-se
solventes com ponto de ebulio entre 60
o
C e 150
o
C.
Em termos de solubilidade, conveniente que o solvente
apresente capacidade de solubilizao de amostra em
proporo no inferior a 4 mg/g nem superior a 50 mg/g.
A solubilidade tima compreende a faixa de 10 a 20 mg.
Recomendaes adicionais incluem a inrcia do solvente
frente aos componentes da amostra (prevendo-se, inclusive,
a possibilidade de formao de solvatos ou sais) e o
emprego de solvente de pureza e concentrao conhecida
(traos de impurezas afetam intensamente a solubilidade),
admitindo-se, contudo, o emprego de misturas.
APARELHAGEM
Compreende banho-maria termostatizado, frascos e
ampolas apropriadas e balana analtica, com preciso de
10 ug.
O banho dgua provido de termostato com tolerncia de
controle de temperatura no superior a 0,1
o
C, especialmente
na faixa de 25-30
o
C, usual para os ensaios. O banho
equipado com haste horizontal rotativa (25 rpm) provida
de garras fxadoras para as ampolas. Como alternativa,
pode ser usado vibrador (100 a 120 vibraes / segundo)
igualmente provido de garras fxadoras de ampolas.
A ampola - com capacidade para 15 mL - ao lado do
chamado frasco de solubilidade tambm empregado
nos ensaios, est ilustrada na Figura 3. Recipientes
de especifcao diferente so admissveis desde que
hermticos e apropriados tcnica descrita.
Figura 3 Ampola utilizada na anlise de solubilidade por fases.
5
PROCEDIMENTO
Composio do sistema
Pesar com exatido um mnimo de 7 ampolas de 15 mL
rigorosamente limpas. Transferir quantidades crescentes
exatamente pesadas de amostra para cada ampola, de modo
que a primeira contenha quantidade apenas ligeiramente
menor que a solubilizvel em 5 mL de solvente e a ltima
contenha ligeiro excesso de amostra. Aps transferir 5,0
mL de solvente para cada ampola, resfri-las em mistura
de gelo seco e acetona e sel-las com maarico ar/gs,
tomando a precauo de guardar fragmentos de vidro
resultantes do processo.
Permitir s ampolas atingir a temperatura ambiente e pes-
las, juntamente com seus respectivos fragmentos de vidro.
Calcular a composio do sistema, em mg/g, para cada
ampola, pela frmula: 1000(M
2
-M
1
)/(M
3
-M
2
), em que M
2

corresponde massa da ampola contendo amostra; M
1
a
massa da ampola vazia e M
3
a massa da ampola contendo
amostra, solvente e eventuais fragmentos de vidro.
Equilbrio
O perodo necessrio ao estabelecimento de equilbrio
nos sistemas contidos nas ampolas varivel de acordo
com a natureza da amostra, mtodo de agitao (rotao
ou vibrao) e temperatura. A experincia indica prazo
mdio de 1 a 7 dias para agitao por vibrao e 7 a 14
dias para o processo rotacional. Para confrmar a promoo
de equilbrio, aquecer a penltima ampola da srie a 40
o
C com o intuito de obter supersaturao. O resultado
positivo se o ponto correspondente a esta ampola for
coerente com os demais no diagrama de fases. Todavia,
resultado diverso no signifca necessariamente no ter
sido atingido o equilbrio. H substncias com tendncia a
permanecer em soluo supersaturada e, sendo este o caso,
cabe a execuo de srie de anlises, variando-se o perodo
de espera com o fm de assegurar a coerncia dos pontos da
curva de solubilidade.
Composio da soluo
Atingido o equilbrio, colocar as ampolas em suporte
apropriado para que permaneam em posio vertical,
com os gargalos acima do nvel da gua do banho
termostatizado. Aguardar a decantao dos slidos nas
ampolas, abri-las e coletar 2,0 mL de cada uma por meio de
pipeta provida de chumao de algodo ou de outro material
capaz de atuar como fltro. Remover o material fltrante
da pipeta e transferir o lquido lmpido para frasco de
solubilidade (Figura 3) tarado e devidamente identifcado,
pesando cada frasco aps a operao. Esfriar os frascos em
banho de gelo seco e acetona e, em seguida, evaporar o
solvente sob presso reduzida. Aumentar gradativamente
a temperatura de evaporao, tomando a precauo de
no exceder o limite compatvel com a estabilidade da
amostra e dessecar o resduo at peso constante. Calcular
a composio da soluo em cada frasco, em mg/g, pela
frmula 1000 (P
3
-P
1
)/(P
2
-P
3
), em que P
3
corresponde
massa do frasco contendo o resduo da evaporao; P
1
a
massa do frasco de solubilidade vazio (tara) e P
2
a massa
do frasco contendo a soluo.
Traar diagrama de fases com base nos valores obtidos e
determinar a pureza porcentual da amostra em funo da
inclinao do segmento de reta.
APLICAO DA ANLISE DE SOLUBILIDADE POR
FASES NA PURIFICAO DE SUBSTNCIAS
Enquanto as solues obtidas no processo analtico descrito
contm essencialmente todas as impurezas presentes na
amostra em proporo aumentada em relao amostra
original, prestando-se - aps evaporao do solvente
determinao qualitativa das impurezas, a fase adequada,
pela elevada pureza, ao preparo de padres de referncia
para outros ensaios analticos.
Procedimento
Pesar quantidade apropriada de amostra e suspend-la em
solvente adequado de modo a - alcanado o equilbrio -
dissolver somente 10% do material. Fechar o frasco e
aguardar estabelecimento do equilbrio temperatura
ambiente (em geral, 24 horas so sufcientes). Em seguida,
recolher a soluo sobrenadante lmpida e evaporar,
temperatura ambiente ou prxima desta, at secura. Pelo
fato de a soluo conter as impurezas da amostra original,
obtm-se, por este procedimento, material em que a
proporo de impurezas encontra-se aumentada, sendo a
relao de enriquecimento aproximadamente igual razo
da massa da amostra pela massa de slidos dissolvidos no
volume de solvente empregado. Purifcar o resduo no
dissolvido por lavagem e secagem (padro de referncia).
5.2.22 ELETROFORESE
PRINCPIOS GERAIS
Por ao de um campo eltrico, as partculas carregadas
dissolvidas ou dispersas numa soluo eletroltica migram
em direo ao eletrodo de polaridade oposta. Na eletroforese
em gel, o deslocamento das partculas retardado pelas
interaes com o gel da matriz que constitui o meio de
migrao e comporta-se como um tamis molecular.
As interaes de oposio da fora eltrica e da tamizao
molecular resultam na taxa de diferencial de migrao
de acordo com o tamanho, forma e carga de partculas.
Devido s suas propriedades fsico-qumicas diferentes,
as diversas molculas contidas numa mistura migraro
a velocidades diferentes durante a eletroforese, fcando
assim separadas em fraes bem defnidas. As separaes
eletroforticas podem ser conduzidas em sistemas sem fase
de suporte (por exemplo, separao em soluo livre na
eletroforese capilar), e ou em meios estabilizados como
placas de camada fna, flmes ou gis.
5
ELETROFORESE DE FRONTEIRA, OU DIVISO, OU
LIMITE LIVRE, OU EM MOVIMENTO
Esse mtodo principalmente utilizado na determinao
de mobilidades, sendo as caractersticas experimentais
diretamente mensurveis e reprodutveis. Aplica-
se, sobretudo, a substncias de massa moleculares
relativamente elevadas, pouco difusveis. As divises so,
inicialmente, demarcadas por um processo fsico como a
refratometria ou a condutimetria. Aps a aplicao de um
campo eltrico defnido, durante um tempo determinado,
obtm-se novas divises e suas respectivas posies so
observadas. As condies operacionais possibilitam a
determinao das divises e dos constituintes.
ELETROFORESE EM SUPORTE, OU ELETROFORESE
DE ZONA
Esse mtodo usado apenas para amostras reduzidas. A
natureza do suporte, como papel, gel de agarose, acetato
de celulose, amido, agarose, metacrilamida ou gel misto,
introduz um nmero de fatores adicionais que modifcam
a mobilidade:
a) devido sinuosidade da canalizao do suporte,
distncia aparentemente percorrida que menor que a
distncia real;
b) certos suportes no so eletricamente neutros e, como o
meio constitui uma fase estacionria, pode algumas vezes
originar uma considervel corrente eletro-endosmtica
importante;
c) o aquecimento devido ao efeito de Joule pode produzir
certa evaporao do lquido do suporte, o que conduz,
por capilaridade, a um deslocamento da soluo das
extremidades para o centro; assim, a fora inica tende a
aumentar progressivamente.
A velocidade de migrao depende de quatro fatores
principais: mobilidade da partcula, corrente de eletro-
endosmtica, corrente de evaporao e intensidade
do campo. Por essas razes necessrio proceder em
condies experimentais bem determinadas e utilizar, se
possvel, padres de referncia.
Aparelhagem
Um aparelho de eletroforese consta de:
um gerador de corrente contnua de tenso controlvel e
de preferncia estabilizada;
uma cuba de eletroforese. Geralmente retangular, de vidro
ou de material plstico rgido, com dois compartimentos
separados, andico e catdico, que contm a soluo
tampo condutora. Em cada compartimento mergulha um
eletrodo, de platina ou de grafte, esses so conectados
por meio de um circuito devidamente isolado da fonte
de alimentao do terminal correspondente para formar,
respectivamente, o anodo e catodo, ligados por um circuito
convenientemente isolado ao borne correspondente do
gerador. O nvel do lquido nos dois compartimentos igual
para evitar o efeito de sifonagem. A cuba de eletroforese
deve ser equipada com uma tampa hermtica, permitindo
manter no seu interior uma atmosfera saturada de unidade
e atenuar assim, a evaporao do solvente durante a
migrao. Utiliza-se um dispositivo de segurana que corte
a corrente, quando se retira a tampa da cuba. Se a medida
de corrente eltrica exceder a 10 W prefervel resfriar o
suporte;
um dispositivo de suporte:
Eletroforese em tiras. Na eletroforese as tiras no suporte, so
previamente impregnadas com a mesma soluo condutora
e cada extremidade mergulhada no compartimento do
eletrodo. As tiras fcam bem estendidas, fxadas sobre
um suporte apropriado para evitar a difuso da soluo
condutora como, por exemplo, uma moldura horizontal,
um suporte em V invertido, ou uma superfcie uniforme,
com pontos de contato em intervalos adequados.
Eletroforese em gel. Na eletroforese em gel, o dispositivo
consiste numa placa de vidro, como, por exemplo, uma
simples lmina de microscpio, na qual se deposita uma
camada de gel aderente e de espessura uniforme em toda
a superfcie da lmina. O contato entre o gel e a soluo
condutora varia em funo do tipo do aparelho utilizado.
Evita-se qualquer condensao de umidade ou secagem da
camada slida;
um dispositivo de medio ou meios de deteco.
Procedimento. Colocar a soluo de eletrlito nos
compartimentos dos eletrodos. Colocar o suporte,
convenientemente embebido com a soluo do eletrlito
na cuba, de acordo com o tipo de aparelho utilizado. Traar
a linha de partida e aplicar a amostra de ensaio. Deixar
passar a corrente durante o tempo indicado; em seguida
desligar a corrente, retirar o suporte da cuba, secar e revelar.
ELETROFORESE EM GEL DE POLIACRILAMIDA EM
TUBO CILNDRICO
Na eletroforese em gel de poliacrilamida, cilndrico (em
tubo) a fase estacionria constituda por um gel preparado
a partir de acrilamida e de N,N-metilenobisacrilamida. Os
gis so preparados em tubos, geralmente com 7,5 cm de
comprimento e 0,5 cm de dimetro interno (gel cilndrico);
uma nica amostra aplicada em cada tubo.
Aparelhagem. O aparelho constitudo de dois reservatrios
destinados a receber as solues tampo e construdos
com um material apropriado, tal como o polimetacrilato
de metila. Esto dispostos, verticalmente, um acima do
outro, e so munidos, cada um, de um eletrodo de platina.
Esses dois eletrodos so ligados a uma fonte de corrente
possibilitando operar com intensidade e tenso constantes.
Para gis cilndricos, o aparelho tem na base superior do
reservatrio um nmero de juntas de elastmero situadas a
igual distncia do eletrodo.
Procedimento. De um modo geral, recomenda-se
desgaseifcar as solues antes da polimerizao e utilizar
o gel imediatamente aps a sua preparao. Preparar
o gel segundo as indicaes da monografa. Colocar a
mistura de gel nos tubos de vidro apropriados, fechados
5
na extremidade inferior com uma rolha, at uma altura
igual em todos eles, distncia de cerca de 1 cm do bordo
superior do tubo. Evitar a introduo de bolhas de ar nos
tubos. Cubra a mistura com uma camada de gua a fm de
impedir o contato com o ar e deixar de repouso. A formao
do gel requer, geralmente, cerca de 30 minutos e est
completa quando aparece uma delimitao ntida entre o
gel e a camada aquosa. Eliminar a camada aquosa. Encher
o reservatrio inferior com a soluo tampo, prescrita e
remover as rolhas dos tubos. Encaixar os tubos nas juntas
do reservatrio superior de modo que a sua parte inferior
mergulhe na soluo tampo do reservatrio inferior e
ajuste de forma que o fundo dos tubos esteja imersos na
soluo tampo do reservatrio inferior. Delicadamente
encher os tubos na soluo do reservatrio inferior. Preparar
as solues problema e padro contendo o corante indicado
prescrito. Encher, cuidadosamente, os tubos com a soluo
tampo indicada. Aplicar as solues, cuja densidade
foi aumentada, por adio de sacarose, por exemplo,
superfcie do gel, utilizando um tubo diferente para cada
soluo. Colocar a mesma soluo tampo no reservatrio
superior. Ligar os eletrodos fonte de corrente e proceder
eletroforese, utilizando a corrente de intensidade ou de
tenso constante e temperatura prescrita na monografa.
Interrompa a corrente quando o indicador corado atingir
o reservatrio inferior. Retirar, imediatamente, os tubos e
proceder extruso do gel. Localizar a posio das bandas
nos eletroforetogramas segundo o procedimento indicado.
ELETROFORESE EM GEL DE POLIACRILAMIDA
COM DODECILSULFATO DE SDIO (DSS-EGPA)
Campo de aplicao. A eletroforese em gel de
poliacrilamida utilizada para a caracterizao qualitativa
das protenas contidas em preparaes biolgicas, para
controles de pureza e determinaes quantitativas.
Finalidade. A anlise por eletroforese em gel um processo
adaptado identifcao e ao controle da homogeneidade
das protenas contidas em preparaes farmacuticas.
utilizada como rotina para avaliar a massa molecular das
subunidades proticas e determinar as subunidades que
compem as protenas purifcadas. No mercado existe uma
grande variedade de gis e reagentes prontos para serem
utilizados em vez dos que se descrevem a seguir, desde que
os resultados obtidos sejam equivalentes e que possam ser
satisfeitas as condies de validade descritas em Validao
do ensaio.
Caractersticas dos gis de poliacrilamida
As propriedades de tamis dos gis de poliacrilamida
esto relacionadas com a sua estrutura particular que a
de uma rede tridimensional de fbras e poros resultantes
da formao de ligaes cruzadas entre a bisacrilamida
bifuncional e as cadeias adjacentes de poliacrilamida. A
polimerizao catalisada por um gerador de radicais livres
composto de persulfato de amnia (PSA) e N,N,N,N-
tetrametiletilenodiamina (TEMED). O tamanho real dos
poros de um gel tanto menor quanto mais elevada for a
sua concentrao em acrilamida. Como a concentrao de
acrilamida do gel aumenta, a sua porosidade efetiva diminui.
A porosidade real de um gel defnida de modo operacional
pelas suas propriedades de tamis molecular, isso , a
resistncia que ele ope migrao das macromolculas.
Existem limites para as concentraes de acrilamida que
podem ser utilizadas. Em concentraes muito elevadas
os gis desfazem-se mais facilmente e tornam-se difceis
de manipular. Quando o tamanho dos poros de um gel
diminui, a velocidade de migrao de uma protena nesse
gel diminui, tambm. Ajustando a porosidade de um
gel, alterando a concentrao em acrilamida, possvel
otimizar a resoluo do mtodo para um determinado
produto proteico. Desse modo, as caractersticas fsicas de
um gel dependem, portanto, do seu teor em acrilamida e
em bisacrilamida. Alm da composio do gel, o estado
da protena constitui outro fator importante para a sua
mobilidade eletrofortica.
No caso das protenas, a mobilidade eletrofortica depende
do pK dos grupos com carga eltrica e do tamanho da
molcula. igualmente afetada pela natureza, concentrao
e pH do tampo, pela temperatura, intensidade do campo
eltrico e pela natureza do suporte.
ELETROFORESE EM GEL DE POLIACRILAMIDA EM
CONDIES DESNATURANTES
O mtodo descrito a ttulo de exemplo aplicvel
anlise dos polipeptdeos monmeros de massa molecular
compreendida entre 14 000 e 100 000 daltons. possvel
ampliar esse intervalo por diferentes tcnicas (por exemplo,
pelos empregos de gis em gradiente ou de sistemas
tampo especiais), mas tais tcnicas no fazem parte
deste texto. A eletroforese em gel de poliacrilamida em
condies desnaturantes usando o dodecilsulfato de sdio
(DSS-EGPA) a tcnica de eletroforese mais utilizada para
avaliar a qualidade farmacutica dos produtos proteicos e
sobretudo o foco deste texto. De modo geral, a eletroforese
analtica das protenas realizada em gel de poliacrilamida
em condies que favorecem a dissociao das protenas nas
suas subunidades polipeptdicas e que limitam o fenmeno
de agregao. Utiliza-se frequentemente esse efeito do
dodecilsulfato de sdio (DSS) um detergente fortemente
aninico, para dissociar as protenas antes da sua aplicao
no gel, em combinao com o calor. Os polipeptdeos
desnaturados ligam-se ao DSS, adquirem cargas negativas
e caracteriza-se por uma relao carga/massa constante
qualquer que seja o tipo de protena considerada. Sendo
a quantidade de DSS ligada quase sempre proporcional a
massa molecular do polipeptdeo e independente da sua
sequncia, os complexos DSS-polipeptdeo migram nos
gis de poliacrilamida com mobilidades que so funo do
tamanho do polipeptdeo.
A mobilidade eletrofortica dos complexos detergente-
polipeptdeos resultantes apresenta sempre a mesma
relao funcional com a massa molecular. A migrao dos
complexos DSS , como seria de se prever, em direo ao
anodo velocidade mais elevada para os complexos de
baixa massa molecular do que para os de alta. , assim,
possvel determinar a massa molecular de uma protena a
partir da sua mobilidade relativa, aps comparao com
solues padro de valor de massa molecular conhecida
5
e a observao de uma banda nica constitui um critrio
de pureza. Todavia, as modifcaes eventuais na
constituio do polipeptdeo, por exemplo, uma N- ou
uma O-glicosilao, tm um impacto signifcante no
negligencivel sobre a massa molecular aparente de uma
protena, no se liga a uma molcula de carboidratos
de forma semelhante a um polipeptdeo. Com efeito, o
DSS no se liga da mesma maneira aos agrupamentos
glicdicos ou aos agrupamentos peptdicos, de modo que a
constncia da relao carga/massa deixa de ser verifcada.
A massa molecular aparente das protenas que sofreram
modifcaes ps-translacionais no refete realmente a
massa da cadeia polipeptdica.
Condies redutoras
A associao das subunidades polipeptdicas e a estrutura
tridimensional das protenas baseiam-se, muitas vezes,
na existncia de pontes dissulfeto. Um dos objetivos a
atingir na anlise DSS- EGPA em condies redutoras
romper essa estrutura por reduo das pontes dissulfeto.
A desnaturao e a dissociao completas das protenas
por tratamento com 2-mercaptoetanol ou com ditiotreitol
(DTT) provocam um desdobramento da cadeia
polipeptdica seguida de uma complexao com o DSS.
Nessas condies, a massa molecular das subunidades
polipeptdicas pode ser calculada por regresso linear com
a ajuda de padres de massa molecular apropriada.
Condies no redutoras
Para certas anlises, a dissociao completa da protena
em subunidades peptdicas no desejvel. Na
ausncia de tratamento pelos agentes redutores, como
o 2-mercaptoetanol ou o DTT, as pontes dissulfeto
covalentes permanecem intactas e a conformao
oligomrica da protena preservada. Os complexos DSS-
oligmero migram mais lentamente que as subunidades
DSS-peptdicas. Alm disso, as protenas no reduzidas
podem no ser, totalmente, saturadas em DSS e, por
consequncia, no se ligam ao detergente numa relao de
massa constante. Essa circunstncia torna a determinao
da massa molecular dessas molculas pelo DSS- EGPA
mais difcil que a anlise de polipeptdeos totalmente
desnaturados, pois, para que a comparao seja possvel
necessrio que os padres e as protenas desconhecidas
tenham confguraes semelhantes. Entretanto, a obteno
no gel de uma nica banda corada permanece como critrio
de pureza.
CARACTERSTICAS DA ELETROFORESE DE GEL
EM SISTEMA TAMPO DESCONTNUO
O mtodo eletrofortico mais divulgado para a
caracterizao das misturas complexas de protenas
fundamenta-se no emprego de um sistema tampo
descontnuo que inclui dois gis contnuos, mas distintos:
um gel (inferior) de separao ou de resoluo e um
gel (superior) de concentrao. Esses dois gis so de
porosidade, pH e fora inica diferentes. Alem disso, os
diferentes ons mveis so usados nos gis e nos tampes
do eletrodo. A descontinuidade do sistema tampo conduz
a uma concentrao de grande volume das amostras no gel
de concentrao e, portanto, a uma melhoria da resoluo.
Quando o campo eltrico aplicado, um gradiente de
tenso negativo instaura-se atravs da soluo da amostra
e arrasta as protenas do gel de concentrao para o gel
de empilhamento. Os ons glicinato contidos no tampo
do eletrodo seguem as protenas no gel de empilhamento.
Forma-se, rapidamente, uma zona de diviso mvel cuja
frente constituda pelos ons cloreto de alta mobilidade e a
parte de trs pelos ons glicinato mais lentos. Um gradiente
de alta tenso localizado instaura-se entre as frentes inicas
da cabea e da cauda e leva os complexos DSS-protena
a concentrarem-se numa banda muito estreita que migra
entre as fraes cloreto e glicinato.
Em larga escala, independentemente do volume da amostra
aplicado, o conjunto dos complexos DSS-protena sofre
um efeito de condensao e penetra no gel de separao
na forma de uma banda estreita, bem defnida, de alta
densidade proteica. O gel de empilhamento, de poros
largos, no retarda, geralmente, a migrao das protenas,
mas desempenha, principalmente, o papel de meio
anticonvequitivo. Na interface dos gis de empilhamento
e de separao, as protenas so confrontadas com um
brusco aumento do efeito de retardamento devido ao
pequeno dimetro dos poros do gel de separao. Quando
penetram no gel de separao, esse retardamento prossegue
devido ao efeito de tamis molecular exercido pela matriz.
Os ons glicinato ultrapassam as protenas cuja migrao
prossegue, ento, num meio de pH uniforme constitudo
pela soluo tampo de trometamina (TRIS) e pela glicina.
O efeito de tamis molecular conduz a uma separao dos
complexos DSS-polipeptdeo com base na sua respectiva
massa molecular.
PREPARAO DE GIS DE POLIACRILAMIDA DSS
VERTICAIS DE TAMPO DESCONTNUO
Montagem do molde
Com um detergente suave, limpar as duas placas de
vidro (por exemplo de tamanho 10 cm x 8 cm), o pente
de politetrafuoroetileno, os dois espaadores e o tubo de
borracha de silicone (por exemplo, dimetro de 0,6 mm x
350 mm), e enxaguar, abundantemente, com gua. Secar
todos os elementos com papel toalha ou tecido. Lubrifcar
os espaadores e o tubo com lubrifcante que no seja base
de silicone. Colocar os espaadores a 2 mm da borda ao
longo dos dois lados curtos e de um dos lados compridos da
placa de vidro. Esse ltimo corresponder ao fundo do gel.
Comear a instalar o tubo sobre a placa de vidro utilizando
um dos espaadores como guia. Atingida a extremidade
do espaador, dobrar o tubo com precauo para faz-lo
seguir o lado longo da placa de vidro. Mantenha o tubo
no seu lugar com um dos dedos, dobre-o de novo para
faz-lo seguir o segundo lado curto da placa, utilizar o
espaador como guia. Colocar a segunda placa no lugar,
alinhando-a, perfeitamente, sobre a primeira, e mantenha o
conjunto por presso manual. Colocar duas pinas em cada
um dos lados curtos do molde e depois, com precauo,
quatro outras pinas no lado longo que constituir a base
5
do molde. Verifcar se o tubo segue a borda das placas e
no se deslocou aps a colocao das pinas. O molde est
pronto e o gel pode ser colocado nele.
Preparao dos gis
Para os gis do sistema tampo descontnuo, recomenda-se
colocar primeiro o gel de separao e deix-lo polimerizar
antes de colocar o gel de concentrao, porque o teor em
acrilamida-bisacrilamida nos dois gis, no tampo e do pH
diferente.
Preparao do gel de separao. Num erlenmayer preparar
o volume apropriado de uma soluo de acrilamida de
concentrao desejada, usando os valores indicados na
Tabela 1. Misturar os componentes pela ordem indicada.
Antes de adicionar a soluo de persulfato de amnia
e a de tetrametiletilenodiamina (TEMED), fltrar, se
necessrio, por suco usando uma membrana de acetato
de celulose (dimetro dos poros; 0,45 m); mantenha sob
suco agitando a unidade de fltrao at no mais formar
bolhas na soluo. Adicionar as quantidades apropriadas
de soluo de PSA e de TEMED (Tabela 1), agitar e
introduzir, imediatamente, no espao que separa as duas
placas de vidro do molde. Deixar uma altura livre sufciente
para o gel de concentrao (altura de um dente do pente
mais 1 cm). Usando uma pipeta de vidro aflada, recubra,
com precauo, a soluo com lcool isobutlico saturado
de gua. Deixar polimerizar o gel em posio vertical,
temperatura ambiente.
Preparao do gel de empilhamento. Quando a
polimerizao terminar (cerca de 30 minutos), esgotar o
lcool isobutlico e lavar vrias vezes a superfcie do gel
com gua para eliminar completamente o lcool isobutlico
e, se necessrio, a acrilamida no polimerizada. Deixar o
mnimo de lquido na superfcie do gel e, eventualmente,
absorva a gua residual com a ponta de uma toalha de
papel. Num erlenmyer, preparar um volume apropriado
de uma soluo de acrilamida de concentrao desejada
usando os valores registrados na Tabela 2. Misturar os
componentes pela ordem indicada.
Antes de juntar a soluo de PSA e de TEMED, fltrar
se necessrio, por suco por uma membrana de acetato
de celulose (dimetro dos poros: 0,45 ); mantenha
sob suco agitando a unidade de fltrao at no mais
formar bolhas na soluo. Adicionar as quantidades
apropriadas de solues de persulfato de amnia e de
TEMED (Tabela 2), agitar e adicionar, imediatamente,
sobre o gel de separao. Colocar, imediatamente, no
lugar um pente de politetrafuoroetileno limpo na soluo
do gel de concentrao, tomando a precauo de evitar a
formao de bolhas de ar. Adicionar soluo para o gel de
concentrao de modo a encher totalmente os interstcios
do pente. Deixar polimerizar o gel em posio vertical,
5
Tabela 1 - Preparao do Gel de Resoluo.
Componentes da soluo
Volume dos componentes em mL por volume do molde do gel de:
5 mL 10 mL 15 mL 20 mL 25 mL 30 mL 40 mL 50 mL
6% de Acrilamida
gua 2,6 5,3 7,9 10,6 13,2 15,9 21,2 16,5
Soluo de acrilamida
(1)
1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 8,0 10,0
Tris 1,5 M pH 8,8
(2)
1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(DSS) 100 g/L de Dodecil Sulfato de Sdio
(3)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(PSA) 100 g/L de Persulfato de Amnia
(4)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(TEMED) Tetrametiletilenodiamina
(5)
0,004 0,008 0,012 0,016 0,02 0,024 0,032 0,04
8% de Acrilamida
gua 2,3 4,6 6,9 9,3 11,5 13,9 18,5 23,2
Soluo de acrilamida
(1)
1,3 2,7 4,0 5,3 6,7 8,0 10,7 13,3
Tris 1,5 M pH 8,8
(2)
1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(3)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(4)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(5)
0,003 0,006 0,009 0,002 0,005 0,008 0,024 0,03
10% de Acrilamida
gua 1,9 4,0 5,9 7,9 9,9 11,9 15,9 19,8
Soluo de acrilamida
(1)
1,7 3,3 5,0 6,7 8,3 10,0 13,3 16,7
Tris 1,5 M pH 8,8
(2)
1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(3)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(4)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(5)
0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,002 0,016 0,02
12% de Acrilamida
gua 1,6 3,3 4,9 6,6 8,2 9,9 13,2 16,5
Soluo de acrilamida
(1)
2,0 4,0 6,0 8,0 10,0 12,0 16,0 20,0
Tris 1,5 M pH 8,8
(2)
1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(3)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(4)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(5)
0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
14% de Acrilamida
gua 1,4 2,7 3,9 5,3 6,6 8,0 10,6 13,8
Soluo de acrilamida
(1)
2,3 4,6 7,0 9,3 11,6 13,9 18,6 23,2
Tris 1,5 M pH 8,8
(2)
1,2 2,5 3,6 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(3)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(4)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(5)
0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
15% de Acrilamida
gua 1,1 2,3 3,4 4,6 5,7 6,9 9,2 11,5
Soluo de acrilamida
(1)
2,5 5,0 7,5 10,0 12,5 15,0 20,0 25,0
Tris 1,5 M pH 8,8
(2)
1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(3)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(4)
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(5)
0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
______________
(1) Soluo de acrilamida: acrilamida/bisacrilamida (29:1) a 30% (p/v) SR
(2) Tris 1,5 M pH 8,8: tampo de triscloridrato 1,5 M pH 8,8.
(3) DSS 100 g/L: soluo de dodecilsulfato de sdio a 10% (p/v).
(4) PSA 100 g/L: soluo de persulfato de amnio a 10% (p/v). O persulfato de amnio fornece os radicais livres que induzem a polimerizao da
acrilamida e da bisacrilamida. A soluo de persulfato de amnia decompe-se, lentamente, e renovada toda a semana.
(5) TEMED: N,N,N,N-tetrametiletilenodiamina.
5
Tabela 2 - Preparao do gel de empilhamento.
Componentes da soluo
Volume dos componentes em mL por volume do molde do gel de:
1 mL 2 mL 3 mL 4 mL 5 mL 6 mL 8 mL 10 mL
gua 0,68 1,4 2,1 2,7 3,4 4,1 5,5 6,8
Soluo de acrilamida
(1)
0,17 0,33 0,5 0,67 0,83 1,0 1,3 1,7
Tris M pH 6,8
(2)
0,13 0,25 0,38 0,5 0,63 0,75 1,0 1,25
(3)
0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,08 0,1
(4)
0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,08 0,1
(5)
0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 0,006 0,008 0,01
_____________
(1) Soluo de acrilamida: acrilamida/bisacrilamida (29:1) a 30% (p/v) SR
(2) Tris M pH 6,8: tampo de triscloridrato M de pH 6,8.
(3) DSS 100 g/L: soluo de dodecilsulfato de sdio a 10% (p/v).
(4) PSA 100 g/L: soluo de persulfato de amnia a 10% (p/v). O persulfato de amnia fornece os radicais livres que induzem a polimerizao da
acrilamida e da bisacrilamida. A soluo de persulfato de amnia decompe-se, lentamente, e renovada toda a semana.
(5) TEMED: N,N,N,N-tetrametiletilenodiamina.
DETECO DAS PROTENAS NOS GIS
A colorao com azul de Coomassie o mtodo mais
correntemente utilizado para as protenas, com um nvel de
deteco da ordem de 1 g a 10 g de protena por banda.
A colorao com nitrato de prata o mtodo mais sensvel
para a visualizao das protenas em gis; possibilita a
deteco de bandas com 10 ng a 100 ng de protena. Todas
as etapas da colorao dos gis so realizadas temperatura
ambiente; com agitao moderada e com movimento
orbital num equipamento apropriado. necessrio o uso
de luvas para evitar depositar no gel impresses digitais
que tambm fcariam coradas.
Colorao com azul de Coomassie. Mergulhar o gel
durante, pelo menos, uma hora num grande excesso de
azul de Coomassie SR. Eliminar a soluo de colorao.
Mergulhar o gel num grande excesso de soluo de
descolorao (consiste em uma mistura de 1 volume de
cido actico glacial e 4 volumes de metanol e 5 volumes
de gua). Renovar vrias vezes a soluo de descolorao
at que as bandas proticas apaream, nitidamente, sobre
fundo claro. Quanto mais forte for a descolorao do gel,
tanto menor quantidades de protenas so detectveis
por esse mtodo. possvel acelerar a descolorao
incorporando na soluo de descolorao alguns gramas
de resina de troca inica ou uma esponja.
Nota : as solues cido-alcolicas utilizadas nesse mtodo
no fxam totalmente as protenas do gel. Pode, portanto,
haver perda de certas protenas de massa molecular baixa
durante as operaes de colorao e descolorao dos
gis fnos. Pode ser conseguida uma fxao permanente
colocando o gel durante 1 hora numa mistura de 1 volume
de cido tricloroactico, 4 volumes de metanol e 5 volumes
de gua, antes de se mergulhar na azul de Coomassie SR.
Colorao com nitrato de prata. Mergulhar o gel durante 1
hora num grande volume de soluo de fxao (consiste em
adicionar 0,27 mL de formaldedo em 250 mL de metanol e
Montagem do gel no aparelho de eletroforese e separao
eletrofortica
Quando a polimerizao terminar (cerca de 30
minutos), retirar o pente com precauo. Lavar os poos
imediatamente com gua ou tampo de eletroforese DSS-
EGPA para eliminar a acrilamida eventualmente no
polimerizada. Se necessrio, endireitar os dentes do gel
de empilhamento, com uma agulha hipodrmica, de ponta
partida, anexada a uma seringa, de um dos lados curtos da
placa, retirar com precauo o tubo e recolocar as pinas.
Proceda do mesmo modo do outro lado curto e depois na
base do molde.
Introduzir o gel no aparelho de eletroforese. Introduzir
os tampes de eletroforese nos reservatrios superior e
inferior. Eliminar as bolhas, eventualmente aprisionadas,
na base do gel entre as placas de vidro. recomendvel
empregar para esse fm uma agulha hipodrmica dobrada
fxada numa seringa. Nunca estabelea tenso eltrica no
gel sem as amostras porque pode destruir a descontinuidade
do sistema tampo. Antes de depositar a amostra, lave
ou preencha os poos com precauo com tampo de
eletroforese DSS-EGPA. Preparar as solues problema
e padro utilizando o tampo para amostra recomendada
e tratar como se especifca na monografa da substncia a
ser analisada. Aplicar nos poos do gel de concentrao
o volume apropriado das diferentes solues. Proceda
eletroforese nas condies recomendadas pelo fabricante
do aparelho. Certos fabricantes de aparelhos para DSS-
EGPA fornecem gis de diversas superfcies e espessuras.
Para obter uma separao tima, pode ser necessrio fazer
variar a durao da eletroforese e os parmetros eltricos
como indicado pelo fabricante. Verifcar que a frente de
colorao se desloca no gel de separao, ela atinge a base
do gel, parar a eletroforese. Retirar o molde do aparelho
e separar as duas placas de vidro. Retirar os espaadores,
separar e rejeitar o gel de empilhamento e proceder,
imediatamente, colorao.
5
diluir para 500 mL com gua). Eliminar e renovar a soluo
de fxao e deixar incubar durante, pelos menos, 1 hora, ou
durante toda a noite, se assim for mais prtico. Eliminar a
soluo de fxao e colocar o gel num volume em excesso
de gua durante 1 hora e, em seguida, mergulhar durante
15 minutos em soluo de glutaraldedo a 1% (v/v). Lavar
o gel colocando-o por duas vezes num volume excessivo
de gua durante 15 minutos e, em seguida, mergulh-lo
durante 15 minutos, ao abrigo da luz, em nitrato de prata
SR1 recentemente preparado. Lavar o gel colocando-o
por trs vezes num volume excessivo de gua durante 15
minutos e, em seguida, mergulh-lo durante cerca de 1
minuto em soluo de desenvolvimento (consiste em diluir
2,5 mL de cido ctrico monoidratado a 2% (p/v) e 0,27
mL de formaldedo em gua a 500 mL) at obter colorao
satisfatria. Suspenda o desenvolvimento por imerso
durante 15 minutos em soluo de cido actico a 10%
(v/v). Lavar com gua.
Secagem dos gis de poliacrilamida DSS corados
O tratamento dos gis ligeiramente diferente conforme
o mtodo de colorao utilizado. No caso da colorao
com Coomassie, a etapa de descolorao seguida de
uma imerso do gel em soluo de glicerol a 10% (p/v)
durante, pelo menos, 2 horas (ou uma noite). No caso
da colorao com prata, a lavagem fnal seguida de
uma imerso em soluo de glicerol a 2% (p/v) durante
5 minutos. Mergulhar duas folhas de celulose porosa em
gua durante 5 a 10 minutos. Colocar uma das folhas numa
moldura de secagem. Levantar, delicadamente, o gel e
deposit-lo sobre a folha de celulose. Eliminar bolhas que,
eventualmente, tenham fcado aprisionadas e adicionar
alguns mililitros de gua ao longo das bordas do gel. Cobrir
com a segunda folha e eliminar eventuais bolhas de ar
aprisionadas. Terminar o conjunto do quadro de secagem.
Colocar na estufa ou deixar secar temperatura ambiente.
DETERMINAO DA MASSA MOLECULAR
A massa molecular das protenas determinada por
comparao da sua mobilidade com a mobilidade de vrios
marcadores proteicos de peso molecular conhecidos.
Existem, para a padronizao dos gis, misturas de
protenas de massa molecular exatamente conhecida
que possibilitam obter uma colorao uniforme. Tais
misturas esto disponveis para diferentes faixas de massa
molecular. As solues me concentradas das protenas
de massa molecular conhecida so diludas em tampo
para amostragem apropriada e depositadas no mesmo gel
que a amostra proteica a examinar. Imediatamente aps
a eletroforese, determinar a posio exata do corante de
marcao (azul de bromofenol) para identifcar a frente de
migrao dos ons. Para esse efeito, pode cortar-se uma
pequena poro da borda do gel, ou mergulhar no interior
do gel, no nvel da frente de migrao do corante, uma
agulha molhada em tinta da China. Aps a colorao do
gel, determinar a distncia de migrao de cada banda
protica (marcadores e bandas desconhecidas) a partir
do bordo superior do gel de separao e dividir cada uma
dessas distncias de migrao pela distncia percorrida pelo
corante de marcao. As distncias de migrao, assim,
obtidas so chamadas mobilidades relativas das protenas
(em referncia frente de colorao) e, convencionalmente,
representadas por Rf. Construir um grfco usando os
logaritmos da massa molecular relativa (Mr) dos padres
proteicos em funo dos Rf correspondentes. Os grfcos
obtidos so ligeiramente sigmides. O clculo das massas
moleculares desconhecidas pode ser calculado por
regresso linear, ou por interpolao a partir da curva de
variao de log (Mr) em funo do Rf desde que os valores
obtidos para as amostras desconhecidas se situem na parte
linear do grfco.
Validao do ensaio
O ensaio s ser vlido se as protenas utilizadas como
marcadores de massa molecular distriburem-se em 80%
do comprimento do gel e se, no intervalo de separao
desejada (por exemplo, o intervalo que cubra o produto e o
seu dmero, ou o produto e as suas impurezas aparentadas)
existir para as bandas proteicas em causa uma relao
linear entre o logaritmo da massa molecular e o valor
do Rf. Exigncias de validao suplementares dizendo
respeito preparao da amostra podem ser especifcadas
nas monografas em particular.
DETERMINAO QUANTITATIVA DAS IMPUREZAS
Quando for especifcado numa monografa em particular
um teor em impurezas, conveniente preparar uma
soluo padro correspondente a esse teor diluindo a
soluo problema. Se, por exemplo, este limite for de 5%, a
soluo padro uma diluio a 1:20 da soluo problema.
O eletroforetograma obtido com a soluo problema no
apresenta nenhuma banda devido impureza (alm da
banda principal) que seja mais intensa que a banda principal
do eletroforetograma obtido com a soluo padro. Desde
que se opere em condies validadas, possvel quantifcar
as impurezas por normalizao em relao banda
principal, utilizando um densitmetro integrador. Nesse
caso, verifcada a linearidade das respostas.
5.2.22.1 ELETROFORESE CAPILAR
Eletroforese capilar (EC) um mtodo fsico de anlise
baseado na migrao, dentro de um capilar, de solutos
carregados, dissolvidos em uma soluo eletroltica,
sob a infuncia de uma corrente eltrica. Atualmente,
a EC compreende uma famlia de tcnicas de separao
eletrocinticas que separam compostos baseada, sobretudo,
na diferena de mobilidade eletrofortica, partio entre
fases, ponto isoeltrico, tamanho molecular, ou ainda, na
combinao de uma ou mais destas propriedades.
PRINCPIOS GERAIS
Em EC, a separao governada por dois fatores. O
primeiro corresponde ao movimento dos solutos no capilar
devido ao campo eltrico (E), tambm denominado de
velocidade eletrofortica. O segundo ocorre em funo
do fuxo do eletrlito devido superfcie carregada na
5
parede do capilar, sendo chamado de fuxo eletrosmtico.
A mobilidade eletrofortica de um soluto (
ep
) est
relacionada a caractersticas especfcas como tamanho
molecular, forma e carga eltrica bem como propriedades
inerentes ao eletrlito no qual a migrao ocorre (fora
inica do eletrlito, pH, viscosidade e presena de aditivos).
Sob a infuncia de tenso, os solutos carregados migram
atravs do eletrlito com uma determinada velocidade, V
ep
,
dada em cm/s, e calculada pela equao:
onde:
u
ep
= mobilidade eletrofortica;
E = tenso aplicada;
q = carga efetiva do soluto;
n = viscosidade do eletrlito;
r = raio de Stokes;
V = voltagem aplicada ao sistema;
L = comprimento total do capilar.
Quando um campo eltrico aplicado ao longo do capilar,
um fuxo de eletrlito gerado no interior do mesmo. A
migrao de diferentes solutos ao longo do capilar em
direo ao detector, independente da presena de carga
inica, indica que alm da mobilidade eletrofortica, est
envolvida uma fora adicional. Caso no houvesse esta fora
adicional, compostos com carga positiva migrariam pelo
capilar enquanto os nions permaneceriam distncia do
detector e os solutos neutros simplesmente no migrariam.
A fora adicional que direciona todos os solutos atravs
do capilar denominada de fuxo eletrosmtico (FEO) e
possui papel importante nos diversos tipos de EC.
O FEO tem sua origem a partir da ionizao dos grupos
silanis na parede interna do capilar, que so transformados
em grupos silanoato (Si-O
-
), em pH acima de trs. Estes
grupos com carga negativa atraem os ctions do eletrlito,
formando uma camada interna na parede do capilar. A
dupla camada formada prxima superfcie do capilar
essencialmente esttica. A camada mais difusa, prxima
dupla camada mvel e, sob ao de uma tenso eltrica,
migra em direo ao ctodo carreando juntamente a gua de
hidratao. Entre as duas camadas existe um plano de atrito
e o desequilbrio eltrico gerado corresponde diferena
de potencial que atravessa as duas camadas, denominada
de potencial zeta ().
A velocidade do fuxo eletrosmtico dependente da
mobilidade eletrosmtica (
eo
) que, por sua vez, est
diretamente relacionada densidade de carga da parede
interna do capilar e s caractersticas do eletrlito. A
velocidade do fuxo eletrosmtico (V
eo
) pode ser calculada
pela equao:
onde:
c= constante dieltrica do eletrlito;
= potencial zeta da superfcie do capilar;
n = viscosidade do eletrlito;
V = voltagem aplicada ao sistema;
L = comprimento total do capilar.
As mobilidades eletrofortica e eletrosmtica de um soluto
podem atuar na mesma direo ou em direes opostas,
dependendo da carga (positiva ou negativa) do soluto e da
velocidade do soluto (v), conforme a equao abaixo:
A soma ou diferena entre as duas velocidades usada na
dependncia das mobilidades atuarem na mesma direo ou
em direes opostas. Na eletroforese capilar na sua forma
mais usual, nions migraro em direo oposta ao fuxo
eletrosmtico e suas velocidades sero menores do que a
velocidade do fuxo eletrosmtico. Ctions migraro na
mesma direo do fuxo eletrosmtico e suas velocidades
sero maiores do que a velocidade do fuxo eletrosmtico.
Nesta condio, na qual existe uma rpida velocidade de
fuxo eletrosmtico em relao velocidade eletrofortica
dos solutos, ctions e nions podem ser separados na
mesma corrida eletrofortica.
O tempo (t) necessrio para o soluto migrar uma distncia
(l) do terminal de injeo do capilar at a janela de deteco
do capilar (comprimento efetivo do capilar) defnido pela
equao:
onde:
l = distncia do terminal de injeo do capilar at a janela
de deteco do capilar (comprimento efetivo do capilar);
V
ep
= velocidade eletrofortica;
V
eo
= velocidade do fuxo eletrosmtico.
A reprodutibilidade na velocidade de migrao dos solutos
est diretamente relacionada manuteno de um valor
constante do fuxo eletrosmtico entre diferentes corridas
eletroforticas. Para algumas aplicaes especfcas,
pode ser necessrio reduzir ou mesmo suprimir o fuxo
eletrosmtico atravs de modifcaes na parede do capilar
ou na concentrao, composio e/ou pH da soluo
eletroltica.
Aps introduo da amostra no capilar, cada soluto
da amostra migra junto ao eletrlito como uma banda
independente, conforme sua mobilidade intrnseca. Sob
condies ideais o nico fator que pode contribuir para o
alargamento da banda oriundo da difuso molecular do
soluto ao longo do capilar (difuso longitudinal). Neste
caso, a efcincia da banda expressa como nmero de
pratos tericos (N) de acordo com a equao:
onde:
D = coefciente de difuso molecular do soluto no eletrlito;
Os demais termos foram abordados anteriormente.
5
A separao entre duas bandas pode ser alcanada pela
modifcao da mobilidade eletrofortica dos solutos,
pelo fuxo eletrosmtico e pelo aumento da efcincia das
bandas de cada soluto em anlise. A resoluo pode ser
calculada atravs da equao:
onde:
epa
e
epb
= mobilidades eletroforticas de dois solutos a
serem separados;
eo
= mobilidade do fuxo eletrosmtico
;
ep
= mobilidade eletrofortica mdia dos solutos .
EQUIPAMENTO
Um equipamento de eletroforese capilar composto por:
- uma fonte de alta voltagem;
- dois reservatrios de eletrlitos, mantidos no mesmo
nvel, contendo solues andica e catdica;
- dois eletrodos (ctodo e nodo), imersos nos reservatrios
dos eletrlitos e conectados fonte de alta voltagem;
- um capilar de slica fundida provido de janela de deteco
para alinhamento a determinados tipos de detectores. Os
terminais do capilar so imersos nos reservatrios contendo
as solues eletrolticas. O capilar deve ser preenchido
com a soluo eletroltica prescrita na monografa;
- sistema de injeo da amostra de soluto(s) por ao
hidrodinmica ou eletrocintica. A escolha do processo
de injeo e sua automao so imprescindveis na
anlise quantitativa por eletroforese capilar. A introduo
da amostra pelo modo eletrocintico deve levar em
considerao a mobilidade eletrofortica intrnseca de cada
soluto, permitindo adequada discriminao dos diferentes
componentes da amostra;
- detector capaz de monitorar a quantidade de solutos que
passam atravs do segmento de deteco do capilar em
intervalo especfco de tempo. Os detectores mais usuais
so baseados em espectrofotometria de absoro (UV e
UV-VIS) ou fuorimetria. Anlises tambm podem ser
realizadas utilizando detectores eletroqumicos ou atravs
da espectrometria de massas;
- sistema de controle de temperatura capaz de mant-la
constante no interior do capilar. Alteraes de temperatura
implicam em falta de reprodutibilidade na separao de
solutos;
- sistema computadorizado para registro e integrao dos
eletroferogramas.
A monografa de cada substncia deve detalhar o tipo
de capilar, as solues eletrolticas, o mtodo de pr-
condicionamento, as condies da amostra e da migrao
eletrofortica.
A soluo eletroltica deve ser fltrada (fltro de 0,45 m)
para remover partculas e desaerada para evitar a formao
de bolhas que possam interferir no sistema de deteco
ou interromper o contato eltrico no capilar durante a
migrao eletrofortica. Os mtodos eletroforticos devem
estabelecer um detalhado procedimento de lavagem do
capilar entre cada corrida a fm de permitir tempos de
migrao reprodutveis dos solutos em anlise.
5.2.22.1.1 Eletroforese capilar em soluo livre
PRINCPIO
Nesta tcnica os solutos so separados em um
capilar contendo apenas eletrlito sem qualquer meio
anticonvectivo. O mecanismo de separao est baseado
nas diferenas apresentadas pela razo carga / massa das
espcies analisadas que migram como bandas a velocidades
diferenciadas. Os solutos so separados pela combinao
entre a mobilidade eletrofortica intrnseca e a magnitude
do fuxo eletrosmtico no capilar. Capilares recobertos
internamente, com reduzido fuxo eletrosmtico, podem
ser utilizados para aumentar a capacidade de separao dos
solutos que adsorvem na superfcie do capilar.
A tcnica em soluo livre adequada para anlise de
solutos de pequena massa molecular (PM < 2000) e elevada
massa molecular (2000 < PM < 100 000). Devido alta
efcincia do sistema, molculas com diferenas mnimas
em sua razo massa / carga podem ser discriminadas. A
tcnica tambm permite separao de solutos quirais
atravs da adio de seletores quirais no eletrlito de
separao. A otimizao da separao requer a avaliao
de diferentes parmetros instrumentais e relacionados
soluo eletroltica.
PARMETROS INSTRUMENTAIS
Voltagem - o tempo de separao proporcional
voltagem aplicada. Todavia, um aumento na voltagem
usada pode causar produo de calor excessivo (efeito
Joule), determinando elevao da temperatura e gradientes
de viscosidade no eletrlito dentro do capilar, os quais
so responsveis pelo alargamento da banda e reduo na
resoluo dos solutos em anlise;
Polaridade - a polaridade do eletrodo pode ser normal
(nodo na admisso e ctodo na sada). Neste caso o fuxo
eletrosmtico move em direo ao ctodo. Se a polaridade
do eletrodo for revertida, a direo do fuxo eletrosmtico
contrria sada e apenas solutos carregados com
mobilidade eletrofortica superior ao do fuxo eletrosmtico
migram em direo sada;
Temperatura - o principal efeito da temperatura
observado na viscosidade e condutividade eltrica do
eletrlito. Alteraes nestas duas propriedades do eletrlito
determinam diferenas na velocidade de migrao;
Capilar - o comprimento e dimetro interno infuenciam
parmetros analticos como tempo de migrao total dos
solutos, efcincia das separaes e capacidade de carga.
Sob voltagem constante, o aumento do comprimento total e
efetivo do capilar pode diminuir a corrente eltrica que, por
5
sua vez, determina o aumento no tempo de migrao dos
analitos. Capilares com menor dimetro interno possuem
melhor capacidade de dissipao do calor gerado pela
corrente eltrica (efeito Joule), permitindo a elevao da
voltagem aplicada e reduo no tempo de anlise. O limite
de deteco do mtodo tambm pode ser infuenciado
pelo dimetro interno, dependendo do volume de amostra
injetado e do sistema de deteco utilizado. A efcincia
das separaes tambm pode ser aumentada pela reduo
do dimetro interno do capilar.
A adsoro de componentes da amostra na parede
interna do capilar pode limitar a efcincia. Por esta
razo, estratgias para evitar estas interaes devem
ser consideradas no desenvolvimento de um mtodo de
separao por eletroforese capilar. Este um fator crtico,
por exemplo, em amostras contendo protenas. Uma destas
estratgias (uso de pH(s) extremos e adsoro de eletrlitos
carregados com carga positiva) requer a modifcao da
composio do eletrlito para prevenir a adsoro das
protenas. Alternativamente, possvel recobrir a parede
interna do capilar com um polmero atravs de ligaes
covalentes, prevenindo a interao de protenas com a
superfcie da slica carregada negativamente. Para esta
proposta, capilares com a parede interna previamente
recoberta com polmeros de natureza neutro-hidroflica,
catinica e aninica so disponveis comercialmente.
PARMETROS DA SOLUO ELETROLTICA
Natureza do tampo e concentrao - Os eletrlitos
para eletroforese capilar devem apresentar capacidade
tamponante adequada na faixa de pH escolhido e baixa
mobilidade a fm de minimizar a gerao de corrente
eltrica. Para diminuir a distoro do pico eletrofortico
importante combinar a mobilidade do on do eletrlito
mobilidade do soluto. A escolha do solvente da amostra
importante para alcanar uma uniformidade do soluto o qual
permite o aumento da efcincia de separao e melhora
a deteco. Alm disso, um aumento na concentrao do
eletrlito em um pH especfco determina a diminuio do
fuxo eletrosmtico e da velocidade do soluto.
pH do eletrlito - O pH do eletrlito pode afetar a separao
atravs da modifcao da carga do soluto ou de outros
aditivos, bem como da alterao do fuxo eletrosmtico.
A mudana no valor do pH do eletrlito acima ou abaixo
do ponto isoeltrico de protenas e peptdeos infuencia a
separao destes solutos, atravs da modifcao da carga
lquida de carter negativo para positivo. Em geral, um
aumento no pH do eletrlito ocasiona elevao do fuxo
eletrosmtico.
Solventes orgnicos - Solventes orgnicos como metanol,
acetonitrila entre outros podem ser adicionados ao
eletrlito aquoso para aumentar a solubilidade do soluto
e/ou de outros aditivos presentes no eletrlito, ou ainda,
infuenciar o grau de ionizao dos solutos da amostra. A
adio destes solventes no eletrlito geralmente provoca a
reduo do fuxo eletrosmtico.
Aditivos para separaes quirais - As separaes
enantiomricas devem ser realizadas atravs da adio
de seletores quirais ao eletrlito de corrida. Os seletores
quirais mais utilizados so as ciclodextrinas. Porm,
teres coroa, polissacardeos e protenas tambm podem
ser empregados para esta fnalidade. A discriminao
enantiomrica regida por diferentes interaes entre o
seletor quiral e cada um dos enantimeros do soluto em
anlise. Assim, a escolha correta do seletor infuencia
diretamente a resoluo enantiomrica obtida para solutos
quirais. Durante o desenvolvimento de um mtodo
para separao enantiomrica, recomendvel testar
ciclodextrinas de diferentes tamanhos de cavidade, (, |,
), ciclodextrinas modifcadas com grupamentos neutros
(metil, etil, hidroxialquil, etc.), ou com grupamentos
ionizveis (aminometil, carboximetil, sulfobutilter, etc.).
A resoluo de separaes quirais igualmente controlada
pela concentrao do seletor quiral, da composio e
pH do eletrlito e da temperatura de anlise. Aditivos
orgnicos como metanol e Ureia podem ser empregados
para modifcar a resoluo obtida.
5.2.22.1.2 Cromatografa Eletrocintica Micelar
(CEM)
PRINCPIO
Na Cromatografa Eletrocintica Micelar, a separao ocorre
em uma soluo eletroltica que contm um tensoativo a
uma concentrao acima da concentrao micelar crtica
(cmc). As molculas do soluto so distribudas entre
o eletrlito e a fase pseudo-estacionria composta de
micelas, de acordo com o coefciente de partio do soluto.
uma tcnica que pode ser usada para separao de solutos
neutros e/ou ionizados, mantendo a efcincia, velocidade
e adequabilidade instrumental da eletroforese capilar. O
tensoativo aninico dodecil sulfato de sdio (DSS) um
dos tensoativos mais usados na CEM, apesar de outros
tambm serem utilizados, como, por exemplo, tensoativos
catinicos (sais de cetiltrimetilamnio).
Em pH neutro ou alcalino, um forte fuxo eletro-osmtico
gerado movimentando os ons do eletrlito de separao na
direo do ctodo. Se DSS for utilizado como tensoativo, a
migrao eletrofortica da micela aninica ser na direo
oposta, em direo ao nodo. Como resultado, a velocidade
de migrao micelar total reduzida, em comparao ao
fuxo da soluo eletroltica. No caso de solutos neutros,
uma vez que o analito pode estar distribudo entre a micela e
o eletrlito, e no h mobilidade eletrofortica, a velocidade
de migrao do analito depender somente do coefciente de
partio entre a micela e o eletrlito. No eletroferograma,
os picos correspondentes a cada soluto neutro esto sempre
localizados entre o marcador de fuxo eletrosmtico e o da
micela (o tempo decorrido entre estes dois picos chamado
de janela de separao). Para solutos ionizados, a velocidade
de migrao depende do coefciente de partio do soluto
entre a micela e eletrlito e da mobilidade eletrofortica do
soluto na ausncia da micela.
Na CEM o mecanismo de solutos neutros e fracamente
ionizados essencialmente cromatogrfca. Assim, a
migrao do soluto e a resoluo podem ser representadas
5
em termos de fator de reteno do soluto (k), tambm
denominada de razo de distribuio de massa (D
m
), que
a relao entre nmero de moles do soluto no interior da
micela e na fase mvel. Para uma substncia neutra, k pode
ser calculado atravs da seguinte equao:
onde
t
R
= tempo de migrao do soluto;
t
0
= tempo de migrao de um soluto no retido (determinado
pela injeo de um marcador de fuxo eletrosmtico que
no se liga micela, por exemplo, metanol);
t
mc
= tempo de migrao da micela (determinado pela
injeo de um marcador de micela, como Sudan III, o
qual migra continuamente associado micela ao longo da
migrao eletrofortica);
K = coefciente de partio do soluto;
V
S
= volume da fase micelar;
V
M
= volume da fase mvel;
Igualmente, a resoluo entre 2 picos adjacentes (R
s
)
dada por:
onde:
N = nmero de pratos tericos de cada soluto;
= seletividade;
k
a
e k
b
= fatores de reteno para ambos solutos
repectivamente (k
b
> k
a
).
De forma similar, porm no idntica, as equaes
fornecem valores de k e R
s
para solutos com carga.
OTIMIZAO
O desenvolvimento de mtodos por CEM envolve
parmetros instrumentais e da soluo eletroltica:
Parmetros instrumentais
Voltagem - O tempo de separao inversamente
proporcional voltagem aplicada. Todavia, um aumento
na voltagem pode causar produo excessiva de calor,
elevando os gradientes de temperatura e viscosidade do
eletrlito na seo transversal do capilar. Este efeito pode
apresentar impacto relevante em eletrlitos que apresentem
maior condutividade como aqueles que contm sistemas
micelares. Os sistemas que apresentam menor capacidade
de dissipao do calor determinam alargamento das bandas
e menor resoluo entre os picos.
Temperatura - Alteraes na temperatura do capilar afetam
o coefciente de partio do soluto entre o eletrlito e as
micelas, a concentrao micelar crtica e a viscosidade
do eletrlito. Estes parmetros infuenciam diretamente
no tempo de migrao dos solutos durante a separao
eletrofortica. A utilizao de um adequado sistema de
refrigerao aumenta a reprodutibilidade do tempo de
migrao dos solutos.
Capilar - As dimenses do capilar (comprimento e dimetro
interno) contribuem no tempo de anlise e na efcincia das
separaes. Um aumento do comprimento total e efetivo
do capilar pode diminuir a corrente eltrica (sob voltagem
constante), aumenta o tempo de migrao e melhora a
efcincia de separao. O dimentro interno do capilar
controla a dissipao do calor (em um dado eletrlito e
corrente eltrica) e consequentemente o alargamento das
bandas dos solutos.
Parmetros da soluo eletroltica
Natureza do tensoativo e concentrao - A natureza
do tensoativo, de forma anloga fase estacionria
em cromatografa, afeta a resoluo, pois modifca a
seletividade da separao. O log k de uma substncia neutra
aumenta linearmente com a concentrao do tensoativo na
fase mvel. Visto que a resoluo em CEM alcana um
mximo quando k apresenta valor prximo
0
t t
mc
modifcaes na concentrao de tensoativo presente na
fase mvel determinam alteraes na resoluo das bandas.
pH do eletrlito - o pH no altera o coefciente de partio
de solutos no ionizados, mas pode determinar mudanas
no fuxo eletrosmtico em capilares no recobertos. Uma
diminuio no pH do eletrlito reduz o fuxo eletrosmtico,
proporcionando um aumento na resoluo dos solutos
neutros e no tempo de anlise.
Solventes orgnicos - solventes orgnicos (metanol,
propanol, acetonitrila) podem ser adicionados soluo
eletroltica para melhorar a separao de solutos
hidrofbicos. Em geral, a adio destes modifcadores
reduz o tempo de migrao e a seletividade da separao. O
porcentual de solvente orgnico adicionado deve levar em
considerao a concentrao micelar crtica do tensoativo,
tendo em vista que valores excessivos podem afetar, ou
mesmo, inibir o processo de formao das micelas e,
por conseguinte, a ausncia do fenmeno de partio. A
dissociao de micelas na presena de porcentuais elevados
de modifcador no signifca necessariamente melhores
resultados na separao. Em determinadas situaes, a
interao hidrofbica entre o monmero do tensoativo e
solutos neutros formam complexos solvofbicos que pode
ser separados eletroforeticamente.
Modifcadores para separaes quirais - a separao
de enantimeros em CEM pode ser obtida atravs da
incluso de seletores quirais ao sistema micelar, ligados
covalentemente ao tensoativo ou adicionados ao eletrlito de
separao. Micelas que possuem ligaes com propriedades
de discriminao quiral incluem sais de N-dodecanoil- L
aminocidos, sais biliares, entre outros. A resoluo quiral
tambm pode ser obtida atravs de seletores quirais, tais
5
como as ciclodextrinas, adicionadas diretamente s solues
eletrolticas que contm tensoativos no quirais.
Outros aditivos - A seletividade pode ser modifcada atravs
de vrias estratgias, por adio de substncias qumicas ao
eletrlito. A adio de diversos tipos de ciclodextrinas ao
eletrlito tambm pode ser utilizada para reduzir interao
de solutos hidrofbicos com a micela, aumentando assim a
seletividade para este tipo de soluto.
A adio de substncias capazes de modifcar as interaes
soluto-micela por adsoro nesta ltima tem sido usada
para aumentar a seletividade das separaes em CEM.
Estes aditivos podem ser um segundo tensoativo (inico
ou no inico) que origina mistura de micelas ou ctions
metlicos que dissolvem a micela formando complexos de
coordenao com os solutos.
QUANTIFICAO
As reas dos picos devem ser divididas pelo tempo de
migrao correspondente para fornecer a rea correta com
o objetivo de:
- compensar o deslocamento no tempo de migrao entre
corridas, reduzindo assim a variao da resposta;
- compensar as diferentes respostas dos componentes da
amostra com diferentes tempos de migrao.
Quando um padro interno utilizado, deve-se verifcar
se nenhum pico de soluto a ser analisado apresenta
sobreposio ao pico do padro interno.
CLCULOS
O teor do componente (ou componentes) em anlise
deve ser calculado a partir dos valores obtidos. Quando
prescritos, o teor porcentual de um ou mais componentes
da amostra a ser analisada calculado pela determinao
da rea corrigida (s) do pico (s) como uma porcentagem
do total das reas corrigidas de todos os picos, excluindo
aqueles resultantes de solventes ou reagentes adicionados
(processo de normalizao). recomendvel a utilizao
de um sistema de integrao automtica (integrador ou
sistema de aquisio e processamento de dados).
ADEQUABILIDADE DO SISTEMA
Os parmetros de adequabilidade do sistema so
empregados para verifcar o comportamento do mtodo por
eletroforese capilar. A escolha destes parmetros depende
do tipo de Eletroforese Capilar utilizado. Os fatores
so: fator de reteno (k) (apenas para cromatografa
eletrocintica micelar), nmero aparente de pratos tericos
(N), fator de simetria (A
s
) e resoluo (R
s
). As equaes
que permitem calcular os valores de N e R
s
atravs dos
eletroferogramas so fornecidas abaixo.
Nmero aparente de pratos tericos
O nmero aparente de pratos tericos (N) pode ser
calculado usando a expresso:
onde:
t
R
= tempo de migrao ou distncia da linha de base a
partir do ponto de injeo at a linha perpendicular do
ponto mximo do pico correspondente ao componente;
w
h
= largura do pico meia altura
Resoluo
A resoluo (R
s
) entre picos de alturas similares de 2
componentes pode ser calculada usando a expresso:
onde:
t
R1
e t
R2
= tempos de migrao ou distncias da linha de
base a partir do ponto de injeo at a linha perpendicular
do ponto mximo de dois picos adjacentes
w
h1
e w
h2
= largura dos picos meia altura
Quando apropriado, a resoluo pode ser calculada atravs
da medida da altura do vale (H
v
) entre 2 picos parcialmente
resolvidos em uma preparao padro e a altura do pico
menor (H
p
), calculando a razo pico/vale (p/v):
Fator de simetria
O fator de simetria (A
s
) de um pico pode ser calculado
usando a expresso:
onde:
w
0,05
= largura do pico determinada a 5% do valor da altura;
d = distncia entre a linha perpendicular do pico mximo e
a tangente do pico a 5% da altura do pico.
Testes para repetibilidade de rea (desvio padro das
reas ou da razo rea / tempo de migrao) e para
repetibilidade do tempo de migrao (desvio padro do
tempo de migrao) so introduzidos como parmetros
de adequabilidade. A repetibilidade do tempo de migrao
fornece um teste para adequabilidade de procedimentos
de lavagem do capilar. Uma prtica alternativa para evitar
a falta de repetibilidade do tempo de migrao usar o
tempo de migrao relativo a um padro interno.
Um teste para verifcar a razo sinal/rudo de uma
preparao padro (ou a determinao do limite de
quantifcao) tambm pode ser til para determinao de
substncias relacionadas.
5
Proporo sinal : rudo
Os limites de deteco e quantifcao correspondem
razo sinal : rudo de 3 e 10, respectivamente.
A proporo sinal : rudo (S/N) calculada usando a
expresso:
onde:
H = altura do pico correspondente ao componente
especfco, no eletroferograma obtido com a soluo
referncia, medida a partir do mximo do pico at a linha
de base extrapolada do sinal observado ao longo de uma
distncia igual a 20 vezes a largura a meia altura do pico;
h = intervalo da linha de base em um eletroferograma
obtido aps injeo do branco, observado a uma distncia
igual a 20 vezes a largura a meia altura do pico no
eletroferograma obtido com a soluo referncia, e se
possvel, localizado prximo do tempo de reteno onde
este pico seria encontrado.
5.2.23 ANLISE
ENANTIOMRICA
FRMACOS QUIRAIS
Os enantimeros geralmente exibem diferentes
propriedades farmacolgicas e toxicolgicas devido
aos principais alvos moleculares como protenas,
cidos nucleicos e polissacardeos serem quirais. Por
exemplo, os enantimeros do ter metlico do levorfanol,
o dextrometorfano e o levometorfano, so utilizados
diferentemente na teraputica. Enquanto o dextrometorfano
indicado como antitussgeno, o levometorfano indicado
como analgsico.
Devido ao reconhecimento da importncia do uso clnico
de frmacos enantiomericamente puros no tratamento
de diversas doenas, as indstrias farmacuticas so
incentivadas constantemente a disponibilizar frmacos
resolvidos em quantidades industriais.
Para garantir a segurana e a efcincia dos frmacos
disponveis e em desenvolvimento, necessrio resolver
os enantimeros e examinar cada um quanto s atividades
farmacolgicas e toxicolgicas. Aps a identifcao
do enantimero mais ativo (eutmero) deve-se avaliar o
excesso enantiomrico do eutmero desde a sntese at o
consumo para garantir a qualidade do medicamento.
SEPARAO E DETERMINAO ENANTIOMRICA
DE FRMACOS
A separao, ou resoluo, de enantimeros por
cromatografa a lquido de alta efcincia (CLAE) comeou
a ser aplicada desde os anos sessenta. Nos anos setenta,
com o aparecimento das colunas de pequenas partculas
para cromatografa a lquido, iniciou-se o desenvolvimento
das fases estacionrias quirais para resoluo de frmacos
racmicos.
A CLAE considerada uma das tcnicas mais efcientes
para separao, deteco e quantifcao de frmacos. O
uso de fase estacionria quiral (FEQ) adequada torna-se
um poderoso mtodo para a separao dos enantimeros.
A resoluo cromatogrfca dos enantimeros pode ser
alcanada por vrios mtodos, todavia, sempre necessrio
o uso de algum tipo de discriminador ou seletor quiral.
O mtodo indireto e o direto so os dois caminhos para
separao dos enantimeros utilizando cromatografa a
lquido.
No mtodo indireto, os enantimeros so convertidos em
diastereoismeros pela reao com uma substncia quiral.
Os diastereoismeros so substncias que apresentam
propriedades fsico-qumicas diferentes e, portanto, podem
ser separados utilizando fase estacionria no quiral.
O mtodo indireto foi largamente utilizado no passado.
Entretanto apresenta limitaes como necessidade do
isolamento da substncia de interesse e sua derivatizao.
Esses fatos difcultam o desenvolvimento do processo
automatizado para grande nmero de amostras. Alm
disso, a pureza enantiomrica dos agentes derivatizantes
importante para evitar falsos resultados. Outra limitao
so as diferentes velocidades e/ou constantes de reao para
os enantimeros j que os estados de transio reacionais
so diastereoisomricos o que pode resultar em proporo
diferente da composio enantiomrica inicial.
No mtodo direto, a mistura de enantimeros a ser
resolvida injetada diretamente no cromatgrafo. Para a
separao dos enantimeros pode-se utilizar uma FEQ, ou
um solvente quiral, ou uma fase mvel com aditivo quiral.
A resoluo ocorre devido formao de complexos
diastereoisomricos entre a mistura enantiomrica e o
seletor quiral utilizado para a resoluo. O uso de FEQ
hoje o mtodo mais empregado para resoluo por CLAE.
Nas tabelas a seguir (Tabelas 1, 2, 3, 4 e 5) so apresentadas
as principais classes de fases estacionrias utilizadas para
a resoluo de misturas racmicas e alguns exemplos de
seletores quirais em cada classe. Consultar o fabricante
para a indicao do uso de cada seletor.
Tabela 1 - Fases estacionrias quirais do tipo Pirkle.
Discriminador quiral*
(R)-DNB-fenilglicina
(S)-DNB-fenilglicina
(R)-DNB-leucina
(S)-DNB-leucina
Fosfonato de dimetila de DNB--amino-2,2-dimetil-4-
pentenila
DNB-tetraidrofenantreno
Naftiletilamida
______________
* A maioria das colunas do tipo Pirkle so disponveis nas duas formas
enantiomricas.
5
Tabela 2 - Fases estacionrias quirais do tipo protena.
Discriminador quiral
1
-Glicoprotena cida
Albumina srica bovina
Albumina srica humana
Celobioidrolase I
Pepsina
Ovomucoid
Tabela 3 - Fases estacionrias quirais do tipo cavidade ou incluso.
-Ciclodextrina
|-Ciclodextrina
-Ciclodextrina
O-(S)-2-Hidroxipropil-|-ciclodextrina
O-(R/S) 2-Hidroxipropil-|-ciclodextrina
O-(S)-Naftiletilcarbamoil-|-ciclodextrina
Tabela 4 - Fases estacionrias quirais do tipo carboidratos.
Tris(dimetilfenilcarbamoil)celulose
Tris(4-metilbenzoato)celulose
Tris(fenilcarbamoil)celulose
Triacetato de celulose
Tribenzoato de celulose
ter tribenzlico de celulose
Tricinamato de celulose
Tabela 5 - Fases estacionrias quirais do
tipo antibiticos macrocclicos.
Vancomicina
Teicoplanina
Ristocetina
5.2.24 CONDUTIVIDADE DA
GUA
A condutividade eltrica da gua uma medida do fuxo
de eltrons o qual facilitado pela presena de ons.
Molculas de gua dissociam-se em ons em funo do
pH e da temperatura resultando em uma determinada
condutividade. Alguns gases, em especial o dixido de
carbono, dissolvem-se em gua e interagem para formar
ons que afetam a condutividade e o pH da gua. Esses ons
e sua condutividade resultante podem ser considerados
como intrnsecos gua. A exposio da amostra
atmosfera pode alterar a condutividade/resistividade,
devido perda ou ganho de gases dissolvidos.
O on cloreto e o on amnio so algumas das principais
impurezas encontradas na gua e, tambm, infuenciam na
sua condutividade. Esses ons externos podem ter impacto
signifcativo na pureza qumica da gua e comprometer a
sua utilizao em aplicaes farmacuticas.
As condutividades combinadas dos ons intrnsecos
secos e dos ons externos variam em funo do pH e so
a base para as especifcaes da condutividade descritas
na tabela 3 e empregadas quando realizada a etapa 3 do
teste. Duas etapas preliminares so includas neste teste.
Se as condies do teste e os limites de condutividade so
atendidos em qualquer uma destas etapas preliminares
(Etapas 1 e 2), a gua satisfaz as exigncias deste teste e
no necessria a aplicao da Etapa 3. Somente no caso
da amostra no obedecer s exigncias da Etapa 3, a gua
julgada como no conforme com os requerimentos do teste
de condutividade.
INSTRUMENTAO E PARMETROS
OPERACIONAIS
A condutividade da gua deve ser medida usando
instrumentos calibrados com resoluo de 0,1 /cm. O
termmetro deve ter divises de 0,1 C e cobrir a faixa de
23 a 27 C. Os eletrodos devem ser mantidos conforme a
recomendao do fabricante do aparelho.
A constante de condutividade da clula um fator
usado como multiplicador para os valores da escala do
condutivmetro.
Constante da clula: o valor deve ser conhecido em
2%. Geralmente clulas de condutividade apresentam
constante na ordem de 0,1 cm
-1
, 1 cm
-1
e 2 cm
-1
. A
maioria dos equipamentos apresenta a constante da clula
defnida. necessrio aferir essa constante com soluo
de KCl de referncia descrita na Tabela 1. Normalmente
a verifcao realizada utilizando somente uma soluo
de referncia; nesse caso utilizar a soluo de referncia
de menor condutividade. Porm, recomendvel medir
periodicamente a condutividade dos demais padres e
observar a concordncia entre a leitura do condutivmetro
e o valor nominal de cada soluo de referncia.
Calibrao: conforme instrues do fabricante. A maioria
dos equipamentos de mltiplas escalas possui um nico
ponto calibrao, logo necessrio calibrar sempre que
usar uma escala diferente. A leitura obtida deve estar entre
+ 0,1 uS/cm do valor nominal da soluo de referncia.
Para a calibrao do condutivmetro, utilizar as solues de
referncias descritas a seguir.
Soluo A (0,01 M): pesar exatamente 0,7455 g de cloreto
de potssio seco a 105 C durante 2 horas, transferir para
balo volumtrico de 1000 mL e completar o volume com
gua.
Soluo B (0,005 M): pipetar 50 mL da Soluo A para
balo volumtrico de 100 mL e completar com gua.
Soluo C (0,001 M): pipetar 10 mL da Soluo A para
5
Soluo D (0,0005 M): pipetar 5 mL da Soluo A para
Soluo E (0,0001 M): pipetar 5 mL da Soluo A para
Nota 1: para o preparo das solues acima utilizar
sempre gua isenta de dixido de carbono, ou seja, com
condutividade inferior a 0,10 S.cm
-1
.
Nota 2: no utilizar compensao de temperatura e manter
as solues de referncia a 25 C durante a leitura.
Tabela 1 - Condutividade das solues
de cloreto de potssio (25C).
Soluo
Concentrao
(mol/L)
Condutividade
( /cm)
A 0,01 1412
B 0,005 717,5
C 0,001 146,9
D 0,0005 73,9
E 0,0001 14,9
PROCEDIMENTO
O procedimento descrito a seguir estabelecido para
medidas de gua purifcada e gua para injetveis.
Alternativamente, a Etapa 1 pode ser realizada (com
modifcaes apropriadas de acordo com o item 1 da Etapa
1) usando-se instrumentao do tipo em linha que tenha
sido calibrada apropriadamente, cujas constantes de clula
tenham sido exatamente determinadas e cujas funes de
compensao de temperatura tenham sido desabilitadas.
A adequabilidade de tais instrumentos em linha para
testes de controle de qualidade tambm dependente
da localizao no sistema de gua. Evidentemente, o
posicionamento do instrumento precisa refetir a qualidade
da gua que ser usada.
Etapa 1
1 Enxaguar a clula com pelo menos trs pores da
amostra.
A determinao deve ser realizada em recipiente apropriado
ou como determinao em linha. O valor obtido deve ser
inferior a 1,3 S/cm, na temperatura de 25,0 C + 0,1C.
3 Na Tabela 2, localizar o valor de temperatura mais
prximo e menor que a temperatura na qual a condutividade
foi medida. O valor de condutividade correspondente a
essa temperatura o limite. (No interpolar)
4 Se o valor de condutividade medido no maior que
o valor correspondente na Tabela 2, a gua atende s
exigncias para a condutividade. Porm, se o valor medido
maior que o da tabela, proceder determinao de acordo
com a Etapa 2.
Tabela 2 - Valores limites para condutividade de
acordo com a temperatura (somente para valores de
condutividade sem compensao de temperatura).
Temperatura (C) Condutividade (/cm)
0 0,6
5 0,8
10 0,9
15 1,0
20 1,1
25 1,3
30 1,4
35 1,5
40 1,7
45 1,8
50 1,9
55 2,1
60 2,2
65 2,4
70 2,5
75 2,7
80 2,7
85 2,7
90 2,7
95 2,9
100 3,1
Etapa 2
1 Transferir quantidade sufciente de gua (100 mL ou
mais) para recipiente apropriado e agitar a amostra. Ajustar
a (25 1) C e agitar a amostra vigorosamente observando
periodicamente a leitura do condutivmetro. Quando a
mudana na condutividade devido absoro de dixido
de carbono atmosfrico menor que 0,1 /cm por 5
minutos, registrar a condutividade.
2 Se a condutividade no maior que 2,1 /cm, a gua
obedece s exigncias para o teste de condutividade. Se a
condutividade maior que 2,1 /cm, proceder conforme
a Etapa 3.
Etapa 3
Realizar este teste no mximo 5 minutos aps a Etapa 2 com
a mesma amostra mantendo a temperatura da amostra a (25
1) C. Adicionar soluo saturada de cloreto de potssio
(0,3 mL para 100 mL de amostra) e determinar o pH com
preciso de 0,1 unidade de acordo com Determinao do
pH (5.2.19). Utilizando a Tabela 3 determinar o valor
limite para a condutividade de acordo com o pH.
5
Tabela 3 - Valores limites de condutividade de
acordo com o pH (somente para amostras mantidas
em atmosfera e temperatura equilibradas).
pH Condutividade (/cm)
5,0 4,7
5,1 4,1
5,2 3,6
5,3 3,3
5,4 3,0
5,5 2,8
5,6 2,6
5,7 2,5
5,8 2,4
5,9 2,4
6,0 2,4
6,1 2,4
6,2 2,5
6,3 2,4
6,4 2,3
6,5 2,2
6,6 2,1
6,7 2,6
6,8 3,1
6,9 3,8
7,0 4,6
Aps determinado o pH e estabelecido o limite de acordo
com a Tabela 3, a gua atende o teste se a condutividade
medida na Etapa 2 no maior que esse limite. Se a
condutividade for maior ou o valor do pH est fora da faixa
de 5 a 7, a gua no atende o teste para condutividade.
GUA ULTRAPURIFICADA
Para a gua ultrapurifcada, em geral os condutivmetros
ou resistivmetros instalados nos equipamentos de
purifcao de gua possuem um circuito de compensao
da temperatura para 25,0 C e fornecem a leitura direta.
Esses equipamentos devem ser calibrados periodicamente.
A condutividade da gua ultrapurifcada deve ser 0,055
uS/cm a 25,0 C (resistividade > 18,0 MO.cm) para uma
aplicao especfca.
Alternativamente, caso o equipamento no fornea a leitura
direta da condutividade, proceder conforme abaixo:
1 Enxaguar a clula com pelo menos trs pores da
amostra.
2 Determinar simultaneamente a temperatura e a
condutividade da gua sem compensao automtica
da temperatura. A determinao deve ser realizada em
recipiente apropriado ou como determinao em linha.
O valor obtido deve ser inferior a 0,055 uS/cm, na
temperatura de 25,0 C + 0,1C.
3 Na Tabela 4, localizar o valor de temperatura mais
prximo e menor que a temperatura na qual a condutividade
foi medida. O valor de condutividade correspondente a
essa temperatura o limite. (No interpolar)
4 Se o valor de condutividade medido no maior que o
valor correspondente na Tabela 4, a gua ultrapurifcada
atende s exigncias para a condutividade.
Tabela 4 - Valores limites para condutividade de
acordo com a temperatura (somente para valores de
condutividade sem compensao de temperatura).
Temperatura (C) Condutividade (/cm)
0 0,012
5 0,017
10 0,023
15 0,031
20 0,042
25 0,055
30 0,071
35 0,090
40 0,113
45 0,140
50 0,171
55 0,207
60 0,247
65 0,294
70 0,345
75 0,403
80 0,467
85 0,537
90 0,614
95 0,696
100 0,785
5.2.25 LIMPIDEZ DE LQUIDOS
PROCEDIMENTO
Utilizar tubos de vidro neutro, incolor e transparente, com
fundo chato e de 15 a 25 mm de dimetro interno, a menos
que indicado de maneira diferente na monografa. Introduzir,
em tubos separados, o lquido em exame e a suspenso
de referncia indicada na monografa, preparando-a
por ocasio do uso, conforme especifcado na Tabela 1.
O lquido em exame e a suspenso de referncia devem
atingir, nos tubos, uma altura de 40 mm. Cinco minutos
aps o preparo da suspenso de referncia, comparar o
contedo dos tubos, observando-os, verticalmente, sob
luz visvel difusa e contra fundo preto. A difuso da luz
deve ser tal que a suspenso de referncia I seja facilmente
distinguida da gua e da suspenso de referncia II.
Um lquido considerado lmpido quando, ao ser examinado
nas condies anteriormente descritas, sua transparncia
corresponde da gua ou do solvente utilizado, ou
quando sua opalescncia no mais pronunciada que a da
suspenso de referncia I.
Padro de opalescncia
Dissolver 1 g de sulfato de hidrazina em gua e completar
o volume para 100 mL com o mesmo solvente. Deixar em
5
repouso por 4 a 6 horas. Adicionar 25 mL dessa soluo
a uma soluo contendo 2,5 g de metenamina em 25 mL
de gua. Misturar bem e deixar em repouso por 24 horas.
Essa suspenso estvel por dois meses se conservada
em recipiente de vidro, com superfcie livre de defeitos. A
suspenso no deve aderir s paredes do recipiente e deve
ser, vigorosamente, agitada, no recipiente original, antes
do uso. Para o preparo do padro de opalescncia, diluir
15 mL da suspenso para 1000 mL com gua. O padro
de opalescncia deve ser preparado no momento do uso e
pode ser conservado por, no mximo, 24 horas.
Tabela 1 Preparo das suspenses de referncia
Suspenso de referncia I II III IV
Padro de opalescncia (mL) 5 10 30 50
gua (mL) 95 90 70 50
5.2.26 ALCOOMETRIA
Alcoometria a determinao do grau alcolico ou ttulo
etanlico das misturas de gua e lcool etlico.
O ttulo alcoomtrico volumtrico de uma mistura de gua
e lcool expresso pelo nmero de volumes de etanol a
20 C contido em 100 volumes dessa mistura a mesma
temperatura. expresso em % (v/v).
O ttulo alcoomtrico ponderal expresso pela relao
entre a massa de etanol contida em uma mistura de gua e
etanol e a massa total dessa. expresso em % (m/m).
O lcool etlico contm, no mnimo, 95,1% (v/v)
correspondendo a 92,55% (m/m) e, no mximo, 96,9%
(v/v) correspondendo a 95,16% (m/m) de C
2
H
6
O a 20 C.
O lcool etlico absoluto contm, no mnimo, 99,5% (v/v)
correspondendo a 99,18% (m/m) de C
2
H
6
O a 20 C. Esses
valores podem ser observados na tabela alcoomtrica
(Anexo D).
DETERMINAO DO GRAU ALCOLICO OU TTU-
LO ALCOOMTRICO
O alcometro centesimal se destina determinao do grau
alcolico das misturas de gua e lcool indicando somente
a concentrao do lcool em volume e expresso pela sua
unidade de medida, grau Gay-Lussac (G.L.).
As determinaes do alcometro so exatas somente para a
mistura de gua e lcool a 20 C, na qual o instrumento foi
graduado. Se a temperatura durante o ensaio for inferior ou
superior a 20 C torna-se necessrio corrigir a temperatura
do lcool para 20 C.
A determinao do grau alcolico das misturas de agua em
volume realizada pelo alcometro.
Para a determinao do grau alcolico das misturas de
gua e lcool em massa, pode ser utilizado o mtodo da
densidade relativa ou verifcada a graduao na tabela
alcoomtricaaps a determinao pelo alcometro.
5.2.27 ANLISE TRMICA
A anlise trmica um conjunto de tcnicas que possibilitam
medir as propriedades fsico-qumicas de uma substncia
em funo da temperatura. As tcnicas mais comumente
utilizadas so as que medem as variaes de energia ou de
massa de uma substncia.
TERMOGRAVIMETRIA (TG)
A termogravimetria a tcnica de anlise trmica em
que a variao de massa da amostra determinada como
uma funo da temperatura, ou tempo de aquecimento,
utilizando um programa controlado de temperatura.
Aparelhagem
constitudo basicamente de uma termobalana que uma
associao entre o forno eltrico e uma balana eletrnica
de alta preciso na qual a substncia inserida em um porta-
amostra sob atmosfera especifcada e programa controlado
de temperatura. O dispositivo possibilita aquecer e medir
simultaneamente a massa do analito. Em certos casos, o
aparelho pode ser associado a um sistema que possibilita
detectar e analisar os produtos volteis.
Calibrao e/ou aferio da termobalana. Transferir uma
quantidade adequada de oxalato de clcio monoidratado
SQR no porta-amostra. A termobalana indicar com
grande preciso e exatido a sua massa. Empregar a razo
de aquecimento de 10
o
C/min e aquecer a amostra at 900
o
C. Ao fnalizar o processo trmico registrar: i) a curva
termogravimtrica (TG) marcando a temperatura no eixo
das abscissas (valores crescentes da esquerda para a direita)
e a massa percentual da amostra no eixo das ordenadas
(valores crescentes de baixo para cima); ii) a curva
termogravimtrica derivada (DTG), derivada primeira da
curva TG, que possibilita defnir melhor onde se iniciou
e fnalizou a perda de massa. Determine no grfco a
distncia entre os patamares inicial e fnal da curva massa-
temperatura, distncia que representa a perda de massa da
amostra no dado intervalo de temperatura. As perdas de
massas declaradas do oxalato de clcio monoidratado SQR
so calculadas, estequiometricamente, a partir das trs
etapas de perdas de massas devido s sucessivas liberaes
de: a) H
2
O; b) CO; c) CO
2
. A verifcao da escala da
temperatura pode ser realizada utilizando a tcnica do
gancho metlico fundvel (In, Pb, Zn, Al, Ag e Au) de
acordo com as indicaes do fabricante.
Procedimento
Utilizar o mesmo mtodo descrito para calibrao e/
ou aferio adicionando uma quantidade adequada de
amostra. As curvas TG e DTG ilustradas na Figura 1
indicam uma etapa de perda de massa da amostra. Na curva
DTG, observa-se que entre os pontos ab situa-se o patamar
inicial. A perda de massa se inicia no ponto b e fnaliza-se
no ponto c. Entre os pontos cd situa-se o patamar fnal.
O intervalo bc corresponde ao intervalo reacional. Para
calcular a perda de massa da amostra na curva TG, utiliza-
5
se a comparao com a curva DTG para maior preciso na
localizao dos pontos b e c. Traar os prolongamentos dos
patamares inicial e fnal da curva TG no eixo das ordenadas
utilizando os pontos b e c. A distncia medida corresponde
perda de massa (Am) da amostra. As projees dos pontos
b e c no eixo de abscissas correspondem, respectivamente,
temperatura inicial (Ti) e fnal (Tf) da perda de massa.
Registrar o resultado em percentagem da relao m/m.
Nota 1: necessria a obteno de uma curva do ensaio em
branco (aquecimento nas mesmas condies experimentais
empregando-se o porta-amostra vazio) antes do ensaio da
amostra para subtrao de linha base.
Nota 2: no caso da utilizao frequente do aparelho,
realizar, regularmente, verifcao e/ou calibrao. Em
caso contrrio, realizar essas operaes antes de cada
determinao.
Nota 3: como a atmosfera pode afetar os resultados so
registradas a vazo e a composio do gs para cada
ensaio.
Figura 1 - Exemplo da curva termogravimtrica e suas medidas.
Aplicaes
A determinao da variao da massa para uma substncia
em determinados intervalos de temperatura pode ser
utilizada para avaliao do comportamento trmico;
determinao do teor de umidade e/ou solventes;
determinao da temperatura de ebulio e sublimao;
determinao da temperatura de decomposio trmica e
determinao do teor de cinzas.
CALORIMETRIA EXPLORATRIA DIFERENCIAL
(DSC)
A calorimetria exploratria diferencial uma tcnica
que possibilita avaliar os fenmenos energticos, fsicos
e/ou qumicos produzidos durante o aquecimento (ou
resfriamento) de uma substncia. Essa tcnica possibilita
medir o fuxo de calor diferencial entre a amostra e um
material de referncia termicamente inerte em funo da
temperatura e/ou tempo de aquecimento sob um programa
controlado de temperatura. A amostra e o material de
referncia so mantidos a aproximadamente a mesma
temperatura durante o experimento. Podem-se determinar
as variaes de entalpia; as mudanas de calor especfco
e a temperatura de eventos endo e exotrmicos. De acordo
com o mtodo de medio utilizado, h duas modalidades:
o DSC com compensao de potncia e o DSC com fuxo
de calor.
APARELHAGEM
O DSC com compensao de potncia constitudo por
uma clula calorimtrica que contm dois fornos, um
para o material de referncia e o outro para a amostra.
O DSC com fuxo de calor constitui-se por uma clula
calorimtrica contendo um nico forno que dispe de
um sensor calorimtrico para a referncia e amostra. Os
equipamentos comportam um dispositivo de programao
controlada da temperatura, um ou vrios detectores
trmicos e um sistema de registro que pode ser associado a
um sistema de tratamento de dados. As determinaes so
efetuadas sob atmosfera especifcada.
Calibrao e/ou aferio do apareIho. Calibrar o aparelho
para o eixo de temperatura e de fuxo de calor utilizando
ndio metlico de alta pureza ou qualquer outro material
certifcado apropriado de acordo com as indicaes do
fabricante. Para o ajuste da linearidade, utiliza-se uma
combinao de dois metais como o ndio e o zinco para a
aferio do eixo de temperatura.
PROCEDIMENTO
Para um porta-amostra adequado transferir uma quantidade
da amostra, rigorosamente conhecida. Fixar a temperatura
inicial e fnal do ensaio e a razo de aquecimento. Iniciar o
aquecimento. Aps o ensaio, registrar a curva da calorimetria
exploratria diferencial escrevendo no eixo das abscissas a
temperatura, ou o tempo (valores crescentes da esquerda
para a direita) e o fuxo de calor no eixo das ordenadas,
indicando o sentido (endotrmico ou exotrmico). Na curva
DSC ilustrada na Figura 2 observa-se a variao entlpica
entre os pontos acd. O ponto de interseco b, referente ao
prolongamento da linha de base com a tangente no ponto de
maior inclinao (ponto de infexo) da curva, corresponde
temperatura onset (incio extrapolado do evento, T
onset
),
empregado em eventos de fuso como a temperatura inicial
da mudana de estado. O fm do evento trmico marcado
pelo ponto c (T
pico
), no entanto para fnalidades do clculo
de rea da curvas considera-se o ponto d (T
fnal
). A variao
de entalpia (AH) do fenmeno proporcional rea sob
a curva limitada pelos pontos acd sendo determinado o
fator de proporcionalidade a partir da determinao da
entalpia de fuso de uma substncia padro conhecida
(ndio, por exemplo) nas mesmas condies de trabalho.
Cada curva termo analtica registrada contendo os
seguintes dados: indicao da ltima calibrao, tamanho
e identidade da amostra, tipo de porta-amostra, material de
referncia, atmosfera (vazo e composio do gs), taxa de
aquecimento e sensibilidade da clula calorimtrica.
5
Figura 2 - Exemplo de uma curva DSC tpica e suas medidas.
Aplicaes
A avaliao do fuxo de calor diferencial referente s
variaes de capacidade trmica e da entalpia das transies
de fase de uma substncia em funo da temperatura
pode ser utilizada para a determinao do ponto e faixa
de fuso; determinao da temperatura de sublimao,
evaporao e solidifcao; determinao da temperatura
de transio vtrea; avaliao de polimorfsmo, construo
de diagrama de fases, determinao da pureza (exceto as
substncias amorfas, os polimorfos instveis na faixa da
temperatura experimental, os compostos que fundem
com decomposio trmica e as substncias que possuem
pureza inferior a 95%).
Determinao de pureza
O mtodo baseado no fato de que a presena de pequenas
quantidades de impurezas num dado material diminui o
seu ponto de fuso e alarga a sua faixa global de fuso.
A Figura 3 ilustra esse comportamento para trs amostras
hipotticas, uma delas a padro e as outras duas contem
pequenas quantidades de impurezas.
Figura 3 - Exemplo de curvas DSC de uma amostra
hipottica comdiferentes teores de pureza
Baseando-se na equao de vant Hoff (Equao 1),
possvel a determinao da frao molar das impurezas X
2

(nmero de mols das impurezas pelo total de nmero de
mols da amostra) considerando que no h formao de
fase slida durante a fuso.
2
=
(
2

em que T
m
representa a temperatura de fuso da amostra; T
o

o ponto de fuso da substncia pura em graus Kelvin; R
a constante dos gases (8,3143 J.K
-1
. mol
-1
); AH
f
o calor de
fuso do principal componente expresso em J.mol
-1
.
Quando no h formao de fase slida, a concentrao de
impureza na fase lquida em uma dada temperatura durante
a fuso inversamente proporcional frao fundida
nessa temperatura e a diminuio do ponto de fuso
diretamente proporcional frao molar de impureza. O
grfco da temperatura da amostra (T
s
) versus o inverso da
frao fundida (1/F) na temperatura T
s
resulta em uma reta
com inclinao igual diminuio do ponto de fuso (T
o
-
T
m
). O ponto de fuso terico da substncia pura pode ser
obtido por extrapolao quando 1/F = 0.
Substituindo os valores experimentais obtidos para T
o
- T
m
,
AH
f
e T
o
na equao 1 possvel calcular a frao molar
das impurezas na amostra.
5.2.28 DETERMINAO DA
OSMOLALIDADE
Osmolalidade uma forma prtica que d uma medida total
da contribuio de vrios solutos presentes na soluo pela
presso osmtica da soluo. Uma aceitvel aproximao
da osmolalidade em soluo aquosa dada por: c
m
= vm,
se o soluto no ionizado, v= 1; no entanto v o nmero
total de ons sempre presente ou formado pela lise da
soluo de uma molcula de soluto; m = molalidade da
soluo, que o nmero de moles do soluto por kilograma
de solvente; = coefciente osmtico molar o qual
quantifcado da interao entre ons da carga oposta da
soluo. dependente do valor de m. Se a complexidade
da soluo aumenta, comea a ser difcil de medir. A
unidade de osmolalidade osmol por kilograma (osmol/
kg), mas o submltiplo miliosmol por kilograma (mosmol/
kg) normalmente usado.
De outra forma descrita, a osmolalidade determinada
pela medida da diminuio do ponto de congelamento.
Existe uma relao entre a osmolalidade e a diminuio do
ponto de congelamento T:
c
m
= T / 1,86 x 1000 mosmol/kg
EQUIPAMENTO
O equipamento Osmmetro - consiste de: continer
refrigerado para a medida; sistema de medio de
(Equao 1)
5
temperatura munido de um termosensor, com um
dispositivo de medio de diferentes potenciais que
pode ser graduado para a diminuio da temperatura ou
diretamente na osmolalidade; e deve ser includo um
recurso para homogeneizar a soluo.
PROCEDIMENTO
Preparar a soluo referncia conforme descrito na Tabela
1. Determinar o zero do equipamento usando gua. Calibrar
o equipamento usando a soluo de referncia: pipetar 50 a
250 L da amostra a ser analisada; transferir para a clula de
medio e iniciar o sistema de resfriamento. Normalmente,
um dispositivo de homogeneizar programado para operar
a temperatura abaixo da esperada da diminuio crioscpica
para prevenir super resfriamento. Um dispositivo indica
quando o equilbrio alcanado. Antes de cada medio
rinsar a clula de medio com a soluo a ser examinada.
Tabela 1 - Informaes para preparar-se a soluo de referncia para a calibrao do Osmmetro.
Massa em g da
soluo de Cloreto de
sdio por kg de gua
Osmolalidade real
(mosmol/kg)
Osmolalidade ideal
(mosmol/kg)
Coefciente
osmtico molal
Diminuio
crioscpica (C)
3,087 100 105,67 0,9463 0,186
6,260 200 214,20 0,9337 0,372
9,463 300 323,83 0,9264 0,558
12,684 400 434,07 0,9215 0,744
15,916 500 544,66 0,9180 0,930
19,147 600 655,24 0,9157 1,116
22,380 700 765,86 0,9140 1,302
Realizar a mesma operao com a amostra teste. Ler
diretamente a osmolalidade ou calcular pela medio
da diminuio do ponto de congelamento. O teste
considerado vlido quando o valor encontrado est entre
dois valores da escala de calibrao.
5.2.29 ENSAIOS FSICOS E
FSICO QUMICOS PARA
GORDURAS E LEOS
5.2.29.1 DETERMINAO DA
DENSIDADE RELATIVA
Proceder conforme descrito em Determinao da
densidade de massa e densidade relativa (5.2.5).
TEMPERATURA DE FUSO
temperatura e faixa de fuso, Metodo III (5.2.2).
TEMPERATURA DE SOLIDIFICAO
SEPARAO DOS CIDOS GRAXOS
Transferir 75 mL de soluo de hidrxido de potssio
em glicerol (25 g de hidrxido de potssio em 100 mL
de glicerol) para bquer de 1000 mL e aquecer a 150 C.
Adicionar 50 mL de amostra tratada conforme indicado
na monografa especfca e prosseguir o aquecimento sob
agitao. A temperatura no deve ultrapassar 150 C.
A saponifcao dada por concluda quando a mistura
apresentar homogeneidade, sem vestgios de material
particulado. Transferir a mistura para outro bquer de 1000
mL, contendo 500 mL de gua quase fervente. Juntar,
lentamente, 50 mL de soluo de cido sulfrico 25%
(v/v) e aquecer, sob agitao, at separao defnida de
fase lmpida (cidos graxos). Lavar a fase graxa com gua
fervente a fm de isent-la de cido sulfrico e mant-la, em
bquer pequeno, em banho-maria fervente at decantao
da gua, deixando lmpida a fase oleosa. Filtrar e recolher a
mistura de cidos graxos enquanto ainda quente em bquer
seco e dessec-la a 150 C durante 20 minutos. Transferir a
mistura quente para frasco apropriado e mant-la em banho
de gelo at solidifcao.
5
Para avaliar o grau de pureza dos cidos graxos separados
pelo procedimento anterior, transferir, previamente ao
congelamento, 3 mL da soluo de cidos graxos dessecados
para tubo de ensaio e adicionar 15 mL de etanol. Aquecer a
soluo at fervura e juntar 15 mL de hidrxido de amnio
6 M. A preparao resultante deve ser lmpida.
PROCEDIMENTO
temperatura de congelamento (5.2.4).
5.2.29.4 DETERMINAO DO NDICE DE
REFRAO
O ndice de refrao de um meio referido ao ar igual
relao entre o seno do ngulo de incidncia de um raio
luminoso no ar e o seno do ngulo de refrao do raio
refratado no meio considerado. Salvo indicao contrria,
o ndice de refrao determinado a 20 C 0,5 C e em
comprimento de onda 589,3 nm, correspondente ao da luz
da raia D do sdio. Nesse caso, o smbolo que representa o
ndice de refrao .
Nos refratmetros correntes h determinao do ngulo
limite. Em alguns aparelhos, a parte essencial um prisma
de ndice de refrao conhecido, em contato com o lquido
em ensaio.
Para calibrao do aparelho, utilizar os lquidos de referncia
mencionados na Tabela 1. O valor do ndice de refrao de
cada lquido de referncia indicado no seu rtulo.
Tabela 1 Lquidos de referncia na
determinao do ndice de refrao.
Lquido de referncia
n/t (coefciente
de temperatura)
Trimetilpentano 0,00049
Tolueno 0,00056
Metilnaftaleno 0,0048
Se for utilizada luz branca para a determinao do
ndice de refrao, o refratmetro possui um sistema de
compensao. O aparelho dever fornecer leituras exatas
at a terceira casa decimal, no mnimo, e possuir um
dispositivo que possibilite operar temperatura prescrita:
o termmetro possibilita a leitura com a aproximao de,
pelo menos, 0,5 C.
5.2.29.5 DETERMINAO DO PODER
ROTATRIO
Proceder conforme descrito em Determinao do poder
rotatrio e do poder rotatrio especfco (5.2.8).
5.2.29.6 DETERMINAO DE GUA
Proceder conforme descrito em Mtodo volumtrico
(5.2.20.1).
5.2.29.7 NDICE DE ACIDEZ
O ndice de acidez, I
A
, expressa, em miligramas, a
quantidade necessria de hidrxido de potssio para a
neutralizao dos cidos graxos livres em 1 g de amostra.
ndices elevados de acidez so sugestivos de hidrlise
acentuada dos steres constituintes da matria graxa.
As causas da degradao incluem tratamentos qumicos
integrantes dos processos industriais de extrao e
purifcao, atividade bacteriana, ao cataltica (calor,
luz), estocagem inadequada e presena de impurezas como
a umidade, entre outros.
PROCEDIMENTO
Pesar, colocada em erlenmeyer de 250 mL, cerca de 10,0 g
ou exatamente a quantidade prescrita (em g) da substncia
teste. Adicionar 50 mL de uma mistura de etanol 96% e ter
etlico (1:1) v/v. Exceto quando houver indicao contrria
na monografa especfca, a mistura de solventes deve
ser previamente neutralizada com hidrxido de potssio
0,1 M, ou hidrxido de sdio 0,1 M, em presena de 0,5
mL de soluo de fenolftalena. Aquecer a amostra at 90
C se for necessrio para a dissoluo da mesma. Aps
solubilizao completa; titular com hidrxido de potssio
0,1 M at observao da cor rosa plida persistente por,
no mnimo, 15 segundos. Proceder ao ensaio em branco e
corrigir o volume de titulante consumido.
Calcular o I
A
de acordo com a equao:
Em que
n = volume (em mL) de hidrxido de potssio 0,1 M gasto
na titulao
m = massa de amostra em gramas.
SAPONIFICAO
O ndice de saponifcao I
S
exprime, em miligramas,
a quantidade de hidrxido de potssio necessria para
neutralizar os cidos livres e saponifcar os steres
existentes em 1 g de substncia.
O I
S
fornece indcios de adulteraes da matria graxa com
substncias insaponifcveis (leo mineral, por exemplo).
5
Salvo indicao na monografa especfca, utilizar a
quantidade de amostra indicada na Tabela 1.
Tabela 1 Quantidade de amostra para
determinar o ndice de saponifcao.
Valor esperado de I
S
Quantidade de
amostra (g)
3 - 10 12 - 15
10 - 40 8 - 12
40 - 60 5 - 8
60 - 100 3 - 5
100 - 200 2,5 - 3
200 - 300 1 - 2
300 - 400 0,5 - 1
Pesar, colocada em balo de 250 mL, a quantidade de
amostra indicada (m), adicionar 25,0 mL de soluo
metanlica de hidrxido de potssio 0,5 M e algumas
pedras de ebulio. Adaptar o condensador de refuxo
vertical. Aquecer em banho-maria durante 30 min, salvo
em indicao especfca. Acrescentar 1 mL de soluo
de fenolftalena e titular, imediatamente, o excesso de
hidrxido de potssio com soluo de cido clordrico 0,5
M (mL). Efetuar ensaio em branco nas mesmas condies
e corrigir o volume do titulante (n
2
mL).
Calcular o ndice de saponifcao (I
S
), utilizando a
expresso:
STERES
O ndice de steres, I
E
, expressa a quantidade de hidrxido
de potssio, em miligramas, necessria para a saponifcao
dos steres presentes em 1 g de amostra. O I
E
calculado a
partir do ndice de saponifcao I
S
e do ndice de acidez I
A
,
conforme a equao:
I
E
= I
S
I
A
5.2.29.10 DETERMINAO DO NDICE
DE IODO
O ndice de iodo I
i
, expressa, em gramas, a quantidade de
iodo suscetvel a complexao em 100 g de substncia
sob as condies descritas a seguir. Constitui medida
quantitativa do grau de insaturaes dos cidos graxos,
esterifcados e livres, na amostra. O I
i
valor encontrado na
determinao sugestivo do grau de pureza do material
ensaiado bem como da presena de adulterantes. A
substituio do Mtodo A pelo Mtodo B deve ser objeto
de uma validao.
MTODO A
Salvo indicao na monografa especfca, utilizar a
quantidade de amostra indicada na Tabela 1.
Tabela 1 Quantidade de amostra para
determinao do ndice de iodo.
ndice esperado I
i
Quantidade de amostra
Inferior a 20 1,0
20 60 0,5 0,25
60 100 0,25 0,15
Superior a 100 0,15 0,10
Em recipiente de 250 mL, munido de rolha esmerilhada,
seco, ou lavado com cido actico glacial, introduzir a
amostra (m g) e dissolv-la em 15 mL de clorofrmio,
salvo em indicaes especifcadas na respectiva
monografa. Acrescentar 25,0 mL de soluo de brometo
de iodo. Tampar o recipiente e conserv-lo sob proteo
da luz durante 30 min, agitando-o, frequentemente. Aps
adio de 10 mL de soluo de iodeto de potssio a 100
g/L e 100 mL de gua, titular com tiossulfato de sdio 0,1
M agitando, energicamente, at que a colorao amarela
quase tenha desaparecido. Juntar 5 mL de soluo de
amido e continuar a titulao, adicionando o tiossulfato de
sdio 0,1 M, gota a gota, agitando, at o desaparecimento
da colorao (n
2
mL). O teste em branco deve ser realizado
nas mesmas condies e sem a amostra (n
1
mL).
Calcular o ndice de iodo pela expresso:
MTODO B
Salvo indicao em contrrio, utilizar a quantidade de
amostra indicada na Tabela 2.
5
Tabela 2 Quantidade de amostra para determinao do ndice de iodo.
ndice de iodo provvel I
i
Massa (g) correspondente
a um excesso de 150
por cento de ICl
Massa (g) correspondente
a um excesso de 100
por cento de ICl
Soluo de cloreto
de iodo (mL)
<3 10 10 25
3 8,4613 10,5760 25
5 5,0770 6,3460 25
10 2,5384 3,1730 20
20 0,8461 1,5865 20
40 0,6346 0,7935 20
60 0,4321 0,5288 20
80 0,3173 0,3966 20
100 0,2538 0,3173 20
120 0,2115 0,2644 20
140 0,1813 0,2266 20
160 0,1587 0,1983 20
180 0,1410 0,1762 20
200 0,1269 0,1586 20
min, exatamente, e adicionar 30 mL de gua. Titular com
tiossulfato de sdio 0,01 M, adicionando, lentamente, sem
cessar a agitao enrgica at que a colorao amarela
tenha quase desaparecido. Acrescentar 5 mL de soluo
de amido. Continuar a titulao agitando energicamente,
at desaparecimento da colorao (n
1
mL de tiossulfato de
sdio 0,01 M). Realizar um ensaio em branco nas mesmas
condies (n
2
mL de tiossulfato de sdio 0,01 M). O ensaio
em branco no consome mais de 0,1 mL de tiossulfato de
sdio 0,1 M.
Calcular o ndice de perxidos pela expresso:
MTODO B
Nota: operar ao abrigo da luz.
Num erlenmeyer, com rolha esmerilhada, introduzir
50 mL de uma mistura v/v de cido actico glacial com
trimetilpentano (3:2). Arrolhar e agitar at dissoluo da
amostra (Tabela 1). Adicionar 0,5 mL de soluo saturada
de iodeto de potssio, arrolhar novamente e deixar a soluo
em repouso durante 60 1s. Nesse tempo de repouso, agitar,
pelo menos, trs vezes e, em seguida, acrescentar 30 mL
de gua. Titular com soluo de tiossulfato de sdio 0,01
M (v
1
mL), adicionado lentamente, com agitao enrgica
e constante, at desaparecimento quase total da colorao
amarela dada pela presena do iodo. Adicionar cerca de
0,5 mL de soluo de amido SI e continuar a titulao, sem
cessar a agitao, em especial quando estiver prximo do
ponto de equivalncia, para garantir a liberao do iodo do
solvente. Adicionar, gota a gota, a soluo de tiossulfato
de sdio at que a cor azul comece a desaparecer. Se na
titulao for gasto menos de 0,5 mL de tiossulfato de sdio
0,1 M, repetir o procedimento utilizando tiossulfato de
sdio 0,01 M (v
1
mL) sob agitao constante e enrgica.
Em recipiente de 250 mL com rolha esmerilada, previamente
lavado com cido actico glacial ou seco, introduzir a
quantidade de amostra (m g) e dissolv-la em 15 mL de uma
mistura de volumes iguais de ciclohexano e cido actico
glacial, salvo em indicao contrria. Se necessrio, fundir
previamente a substncia (ponto de fuso superior a 50 C).
Adicionar, lentamente, o volume de soluo de cloreto de
iodo indicado na Tabela 2. Tampar o recipiente e agitar, ao
abrigo da luz, durante 30 min, salvo indicao contrria.
Adicionar 10 mL de soluo de iodeto de potssio a 100
g/L e 100 mL de gua. Titular com tiossulfato de sdio 0,1
M, agitando, energicamente, at que a colorao amarela
quase desaparea. Acrescentar 5 mL de soluo de amido e
continuar a titulao adicionando, gota a gota, o tiossulfato
de sdio 0,1 M at desaparecimento da colorao (n
1
mL de
tiossulfato de sdio 0,1 M). Realizar um ensaio em branco
nas mesmas condies (n
2
mL de tiossulfato de sdio 0,1 M).
Calcular o ndice de iodo utilizando a seguinte expresso:
DE PERXIDOS
O ndice de perxido I
p
o nmero que exprime, em
miliequivalentes de oxignio ativo, a quantidade de
perxido em 1000 g de substncia.
Se a monografa no indicar o mtodo a ser utilizado,
executar o Mtodo A. A substituio do Mtodo A pelo
Mtodo B sempre objeto de validao.
MTODO A
Pesar 5,00 g da amostra, colocada em erlenmeyer de 250 mL
com rolha esmerilhada. Adicionar 30 mL de uma mistura
v/v de cido actico glacial e clorofrmio (proporo
3:2). Agitar at dissoluo da amostra e juntar 0,5 mL de
soluo saturada de iodeto de potssio. Agitar durante1
5
No caso do ndice de perxido for igual ou superior a 70, e
ocorrendo retardo na mudana de cor do indicador amido
de 15 a 30 s, agitar, vigorosamente, at o desaparecimento
da colorao amarela. Isso devido tendncia do
trimetilpentano sobrenadar na fase aquosa e ao tempo
necessrio para obter uma mistura adequada entre o
solvente e o titulante aquoso.
Para ndices de perxido inferiores a 150, utiliza-se
tiossulfato de sdio 0,01 M. Pode adicionar-se mistura uma
pequena quantidade (0,5 a 1,0% (m/m)) de emulsifcante
apropriado, para retardar a separao das fases e diminuir o
tempo de liberao do iodo (por exemplo, polissorbato 60).
Efetuar um ensaio em branco (v
0
mL). Se for consumido,
mais de 0,1 mL de tiossulfato de sdio 0,01 M, substituir
os reagentes e repetir a titulao. O ndice de perxido
calculado pela frmula a seguir.
em que:
c = concentrao da soluo de tiossulfato de sdio em
moles por litro.
Tabela 1 - Quantidade de amostra para
determinao do ndice de perxido
Valor esperado de I
p
Quantidade de amostra (g)
0 12 2,00 5,00
12 20 1,20 2,00
20 30 0,80 1,20
30 50 0,500 0,800
50 90 0,300 0,500
DE HIDROXILA
O ndice de hidroxila I
OH
o nmero que exprime, em
miligramas, a quantidade de hidrxido de potssio
necessria para a neutralizao de cido que se combina,
por acilao, com 1 g de substncia.
MTODO A
Introduzir a amostra, exatamente pesada (g), de acordo com
a quantidade indicada na Tabela 1, em balo de acetilao
de 150 mL, salvo se na monografa especfca estiver
preconizado outro valor. Adicionar o volume de soluo
de anidrido actico indicado e adaptar o condensador de
refuxo.
Tabela 1 Quantidade de amostra e
volume do reagente acetilante.
I
OH
esperado
Quantidade de
amostra (g)
Volume de
reagente (de
acetilao) em
mililitros
10 - 100 2,0 5,0
100 - 150 1,5 5,0
150 - 200 1,0 5,0
200 - 250 0,75 5,0
250 - 300 0,6 ou 1,20 5,0 ou 10
300 - 350 1,0 10,0
350 - 700 0,75 15,0
700 - 950 0,5 15,0
Aquecer em banho-maria durante 1 h, cuidando para
manter o nvel da gua do banho cerca de 2,5 cm acima do
nvel do lquido contido no balo. Retirar o balo e deix-lo
arrefecer. Adicionar 5 mL de gua atravs da extremidade
superior do condensador. Se a adio da gua originar uma
turvao, acrescentar piridina at o desaparecimento da
turvao e anotar o volume adicionado. Agitar, aquecer
novamente o balo em banho de gua durante 10 min.
Retirar o balo e deix-lo arrefecer. Lavar o condensador
e as paredes do balo com 5 mL de lcool, previamente
neutralizado em presena de soluo de fenolftalena.
Titular com soluo alcolica de hidrxido de potssio
0,5 M, em presena de 0,2 mL de soluo de fenolftalena
SI (n
1
mL). Realizar um ensaio em branco, nas mesmas
condies (n
2
mL).
Calcular o ndice de hidroxila utilizando a expresso:
em que
I
A
= ndice de acidez
MTODO B
Em erlenmeyer seco e munido de rolha esmerilhada
introduzir a tomada de ensaio (m g). Adicionar 2,0 mL de
reagente de anidrido propinico, arrolhar o balo e agitar
suavemente, at dissoluo. Aps 2 h de repouso, salvo
sob indicao contrria, retirar a rolha do erlenmeyer e
transferir seu contedo para outro de 500 mL com boca
larga contendo 25,0 mL de soluo de anilina a 9 g/L
em ciclohexano e 30 mL de cido actico glacial. Agitar
e aps 5 min de repouso adicionar 0,05 mL de soluo
cristal violeta SI. Titular com cido perclrico 0,1 M at a
5
viragem para verde esmeralda (n
1
mL). Realizar um ensaio
em branco nas mesmas condies (n
2
mL).
Calcular o ndice de hidroxila utilizando a expresso:
em que
I
A
= ndice de acidez
Pela possibilidade de haver presena de gua, determinar o
teor de umidade (y por cento) na amostra segundo o mtodo
especfco. O ndice de hidroxila obtido pela equao:
I
OH
= (ndice encontrado) - 31,1y
DE ACETILA
O ndice de acetila a quantidade de lcali, em mg de
hidrxido de potssio, necessria para a neutralizao do
cido actico liberado pela hidrlise de 1 g de substncia
acetilada. usado para estabelecer o grau de presena de
lcoois livres em substncias graxas. calculado com base
na diferena entre os ndices de saponifcao da substncia
acetilada pela tcnica descrita a seguir e da substncia no
acetilada.
PROCEDIMENTO
Transferir 10 g de substncia e 20 mL de anidrido actico
para balo Kjeldahl de 200 mL de capacidade. Adaptar
o condensador de refuxo. Apoiar o frasco sobre tela de
amianto em cujo centro tenha sido cortado orifcio de cerca
de 4 cm de dimetro e aquecer sobre chama de bico de gs
com altura mxima de 25 mm (evitando que a chama alcance
a base do balo). Manter em ebulio regular durante 2
horas, resfriar e transferir o contedo do balo para bquer
de 1000 mL contendo 600 mL de gua. Adicionar 0,2 g de
p de pedra pomes e ferver durante 30 minutos. Resfriar
e transferir a mistura para funil de separao, rejeitando a
camada aquosa inferior. Lavar a substncia acetilada com
trs ou mais pores de 50 mL de soluo saturada quente
de cloreto de sdio, at que a soluo de lavagem no mais
fornea reao cida ao papel de tornassol. Adicionar,
ainda, 20 mL de gua quente ao funil e agitar, removendo,
em seguida, o mais completamente possvel, a fase aquosa.
Transferir a substncia para cpsula de porcelana, adicionar
1 g de sulfato de sdio pulverizado e fltrar atravs de papel
de fltro pregueado. Determinar o ndice de saponifcao
da substncia original, no acetilada, e da substncia
acetilada pelo procedimento descrito e calcular o ndice de
acetila pela frmula:
em que
a = ndice de saponifcao da substncia original,
b = ndice de saponifcao da substncia acetilada.
5.2.29.14 DETERMINAO DE
SUBSTNCIAS INSAPONIFICVEIS
Substncias insaponifcveis so aquelas remanescentes
reao de saponifcao, no volteis a 100 - 105 C e que
foram carreadas no processo de extrao da substncia a
ensaiar.
Se a monografa especfca no indicar o procedimento,
utilizar o Mtodo I. Utilize material de vidro com boca
esmerilhada e desengordurado.
MTODO I
Adicionar 2,0 - 2,5 g da amostra em balo de 250 mL.
Adicionar 25 mL de hidrxido de potssio etanlico 0,5 M.
Acoplar um condensador de refuxo ao balo e ferver em
banho-maria por 1 hora, sob agitao. Transferir o contedo
do balo para funil de separao, usando 50 mL de gua e,
enquanto o lquido inda estiver morno, extrair, mediante
agitao vigorosa, com trs quantidades de 50 mL de ter
isento de perxidos. Lavar o balo com a primeira alquota
de ter. Misturar as solues etreas em funil de separao
contendo 20 mL de gua. (Se as solues etreas contm
slidos em suspenso, fltrar para o funil de separao
atravs de um fltro de papel livre de gordura. Lavar o
fltro com ter livre de perxido). Agitar, cuidadosamente,
e descartar a fase aquosa. Lavar a frao orgnica, com
duas pores de 20 mL de gua. Em seguida, adicionar
trs quantidades de 20 mL de hidrxido de potssio 0,5 M
e agitar, vigorosamente, em cada uma das adies. Aps
cada tratamento deve ser realizada lavagem com 20 mL
de gua. Finalmente, lave com quantidades sucessivas de
20 mL de gua at que a fase aquosa no mostre reao
alcalina em presena de fenolftalena. Transferir a frao
orgnica para um balo previamente tarado, lavando o funil
de separao com ter isento de perxidos. Eliminar o ter
e adicionar 3 mL de acetona ao balo. Eliminar o solvente
por completo at constante a temperatura no superior a
80 C. Dissolver o contedo do balo em 10 mL de etanol
recentemente fervido (96%) e previamente neutralizado.
Titular com hidrxido de sdio etanlico 0,1 M e soluo
de fenolftalena como indicador. Se o volume de soluo
titulante gasto no exceder 0,1 mL, a quantidade de resduos
pesados, deve ser tomado como matria insaponifcvel.
Calcular a matria insaponifcvel como uma porcentagem
da substncia a ser examinada. Se o volume de titulante
gasto exceder 0,1 mL, a quantidade de resduos pesados
no podem ser tomadas como a matria insaponifcvel e
do teste deve ser repetido.
MTODO II
Num balo de 250 mL, acoplado em sistema de condensao
por refuxo, introduzir a quantidade prescrita (m g) da
amostra. Juntar 50 mL de soluo alcolica de hidrxido
de potssio 2 M e aquecer em banho-maria, durante 1 h
sob agitao. Aps arrefecer a temperatura inferior a 25
C, transfrir o contedo do balo para funil de separao.
Adicionar 100 mL de gua. Adicionar 100 mL de ter isento
5
de perxidos e agitar cautelosamente. Repetir a operao
mais duas vezes com 100 mL de ter etlico. Reunir as
fraes etreas em outro funil de separao contendo 40
mL de gua. Agitar, suavemente, durante alguns minutos e
deixar separar as fases. Rejeitar a fase aquosa. Lavar a fase
etrea duas vezes com 40 mL de gua a cada vez. Lavar
em seguida, sucessivamente, com 40 mL de hidrxido
de potssio a 30 g/L e com 40 mL de gua. Repetir trs
vezes esta operao. Lavar, repetidamente, a fase etrea
com 40 mL de gua de cada vez, at que a fase aquosa no
d reao alcalina fenolftalena. Transferir a fase etrea
para um balo, tarado, lavando o funil de separao com
ter isento de perxidos. Evaporar o ter at a secura, com
as precaues usuais. Juntar 6 mL de acetona ao resduo.
Eliminar, cuidadosamente, o solvente em corrente de ar.
Seque a 100 - 105 C, at massa constante, deixe arrefecer
em dessecador e pese (a g). O resultado calculado em
percentagem m/m.
Dissolver o resduo em 20 mL de lcool, neutralizados
previamente em presena de soluo de fenolftalena e
titular com soluo alcolica de hidrxido de sdio 0,1 M.
Se o volume de soluo alcolica de hidrxido de sdio
0,1 M gasto nessa titulao for superior a 0,2 mL, indica
que houve separao incompleta das duas fases e resduo
obtido no pode ser considerado insaponifcvel. O ensaio
deve ser repetido.
5.2.29.15 IDENTIFICAO DE LEOS
FIXOS
5.2.29.15.1 Identifcao dos leos vegetais por
cromatografa em camada delgada
Fase fxa: gel de slica octadecilsilanizada (RP-18).
Soluo amostra. Salvo indicao em monografa
especfca, dissolver cerca de 20 mg (1 gota) da amostra
em 3 mL de diclorometano.
Soluo padro. Dissolver cerca de 20 mg (1 gota) de leo
de milho em 3 mL de diclorometano.
Procedimento. Aplicar, separadamente, 1 L de cada
soluo na placa. Desenvolver duas vezes na distncia de
0,5 cm com ter. Em seguida, desenvolver duas vezes a
distncias de 8 cm com mistura de diclorometano, cido
actico glacial com acetona (2:4:5). Deixar a placa secar ao
ar e nebulizar com soluo de cido fosfomolbdico a 100
g/L em lcool. Aquecer a placa a 120 C durante cerca de 3
min. Examinar luz do dia.
O cromatograma apresenta manchas comparveis s
reproduzidas na Figura 1.
Figura 1 - Cromatografa em camada delgada
para a identifcao dos leos fxos.
________________
1 leo de amendoim 6 leo de soja
2 Azeite de oliva 7 leo de girassol
3 leo de ssamo 8 leo de canola
4 leo de milho 9 leo de canola (isento de cido ercico)
5 leo de amndoas 10 leo de germes de trigo
5.2.29.15.2 Impurezas alcalinas
Introduzir 10 mL de acetona recentemente destilada,
0,3 mL de gua e 0,05 mL de soluo alcolica de azul
de bromofenol a 0,4 g/L em tubo de ensaio. Neutralizar,
se necessrio, com cido clordrico 0,01 M ou hidrxido
de sdio 0,01 M. Adicionar 10 mL da amostra, agitar e
deixar em repouso. O ponto de viragem indicado pelo
desenvolvimento de cor amarela na camada superior. No
necessrio volume superior a 1,1 mL de cido clordrico
0,01 M.
5.2.29.15.3 leos estranhos em leos vegetais
por cromatografa em camada delgada
Proceder por cromatografa em camada delgada (5.2.17.1),
utilizando placa (kieselguhr G). Impregnar a placa,
colocando-a numa cmara fechada contendo a quantidade
necessria da mistura de ter etlico e parafna lquida
(90:10; v/v) de forma a que a superfcie do lquido atinja
cerca de 5 mm da camada de adsorvente. Quando a mistura
de impregnao tiver percorrido, pelo menos, 12 cm da
camada, retirar a placa da cmara e deixar evaporar o
solvente durante 5 min. Desenvolver na mesma direo da
impregnao.
Preparao da mistura de cidos graxos. Aquecer sob
refuxo, durante 45 min, 2 g da amostra com 30 mL de
soluo alcolica de hidrxido de potssio 0,5 M. Juntar
50 mL de gua, deixar arrefecer. Transferir para funil de
separao. Agitar trs vezes com 50 mL de ter etlico de
cada vez. Rejeitar as solues etreas. Acidifcar a fase
aquosa com cido clordrico e agitar trs vezes com 50 mL
de ter etlico de cada vez. Rena as solues etreas e lave-
as trs vezes com 10 mL de gua de cada vez. Rejeitar as
guas de lavagem. Adicionar sulfato de sdio anidro frao
5
etrea e fltrar. Evaporar o ter em temperatura inferior a 50
C. Utilizar o resduo para preparar a soluo problema.
Os cidos graxos podem, tambm, ser obtidos a partir da
soluo saponifcada resultante da reao de determinao
de insaponifcveis.
Soluo amostra. Dissolver 40 mg da mistura de cidos
graxos obtidos da amostra em 4 mL de clorofrmio.
Soluo padro. Dissolver, em 4 mL de clorofrmio, 40
mg da mistura de cidos graxos obtidos a partir de uma
mistura de 19 volumes de leo de milho e 1 volume de
leo de canola.
Procedimento. Aplicar, separadamente, na placa, 3 L de
cada soluo. Desenvolver o cromatograma com mistura
de cido actico glacial: gua (90:10 v/v) por percurso
de 8 cm. Secar a placa a 110 C durante 10 min. Deixar
arrefecer. Introduzir a placa, salvo indicao em contrrio,
em cuba de cromatografa saturada de vapores de iodo.
Para tal, coloque iodo em cristalizador, de forma baixa,
no fundo da cuba. Aps certo tempo, aparecem manchas
castanhas ou amarelas acastanhadas. Retirar a placa da
cuba e aguardar alguns minutos. Quando a colorao de
fundo, castanha da camada desaparecer, pulverizar com
soluo de amido; aparecem, ento, manchas azuis que,
quando secam, podem passar a castanhas e voltam de
novo a azul aps pulverizao com gua. O cromatograma
obtido com a Soluo amostra apresenta sempre manchas
correspondentes s manchas do cromatograma obtido com
a Soluo padro: uma com Rf prximo de 0,5 (cido
oleico) e outra com Rf prximo de 0,65 (cido linoleico).
Em certos leos pode aparecer uma mancha com Rf
prximo de 0,75 (cido linolnico). Por comparao com
o cromatograma obtido com a Soluo padro, verifque
a ausncia da mancha com Rf 0,25 (cido ercico) no
cromatograma obtido com a soluo problema.
5.2.29.15.4 leos estranhos em leos fxos por
cromatografa a gs
Quando no houver qualquer indicao na monografa
especfca, utilize o Mtodo A. A pesquisa de leos
estranhos efetuada sobre os steres metlicos dos cidos
graxos do leo em anlise, utilizando cromatografa a gs
(5.2.17.5).
MTODO A
Esse mtodo no se aplica aos leos contendo glicerdeos de
cidos graxos com grupos epoxi, hidro epoxi, ciclopropilo
ou ciclopropenilo, nem aos que contm grande quantidade
de cidos graxos com nmero de tomos de carbono na
cadeia inferior a 8, nem queles cujo ndice de cido seja
superior a 2,0.
Soluo amostra. Se a monografa indicar, seque a amostra
antes de iniciar o ensaio. Pesar 1,0 g da amostra, em balo
de boca esmerilhada de 25 mL. Acoplar condensador de
refuxo e um dispositivo que possibilite fazer passar uma
corrente de nitrognio no interior do balo. Adicionar 10
mL de metanol anidro e 0,2 mL de soluo de hidrxido
de potssio a 60 g/L em metanol. Adaptar o condensador e
fazer passar uma corrente de nitrognio com fuxo de cerca
de 50 mL/min at eliminao do ar. Agitar e aquecer
ebulio. Quando a preparao fcar lmpida (normalmente
cerca de 10 min depois), aquecer por mais 5 min. Arrefecer
em gua corrente e transfrir para um funil de separao.
Lavar o balo com 5 mL de heptano, adicionar ao contedo
do funil de separao e agitar. adicionar 10 mL de soluo
de cloreto de sdio a 200 g/L e agitar vigorosamente.
Deixar separar as fases e transfrir a fase orgnica para um
balo contendo sulfato de sdio anidro. Deixar em repouso
e fltrar.
Soluo padro (a). Preparar 0,50 g de mistura de
substncias de referncia, conforme prescrito na monografa
especfca. Se a monografa no indicar a soluo padro,
utilize uma das que so descritas na Tabela 1. Dissolver
em heptano e diluir a 50,0 mL com o mesmo solvente.
Observao: Para cromatografa em coluna capilar e razo
de split recomendado que o componente com cadeia
longa da mistura em anlise seja adicionado mistura de
calibrao, quando a anlise quantitativa for realizada por
curva de calibrao.
Soluo padro (b). Diluir 1,0 mL da soluo padro (a) e
completar para 10,0 mL com heptano.
Soluo padro (c). Preparar 0,50 g de uma mistura de metil
steres de cidos graxos conforme indicado na monografa
da substncia em anlise. Dissolver em heptano e diluir
at 50 mL em balo volumtrico com o mesmo solvente.
Misturas comerciais de metil steres de cidos graxos,
tambm, podem ser utilizadas.
Condies cromatogrfcas
Coluna:
- material: slica fundida, vidro ou quartzo;
- tamanho: 10 a 30 m de comprimento e 0,2 a 0,8 mm de
dimetro interno;
- fase estacionria: poli(cianopropil)metilfenilmetilsiloxano
ou de macrogol
20 000 (espessura do flme de 0,1 a 0,5 m) ou outra fase
estacionria apropriada;
Gs de arraste: hlio ou hidrognio para cromatografa;
Fluxo do gs de arraste: 1,3 mL/min (para colunas de 0,32
mm de dimetro interno);
Razo de split: 1:100 ou menor, de acordo com o dimetro
interno da coluna em uso (1:50 quando o dimetro for de
0,32 mm);
Detector: ionizao de chama;
Temperatura:
- coluna: 160 - 200 C, de acordo com a fase estacionria
e comprimento (200 C para uma coluna de 30 m de
comprimento, revestida internamente com macrogol
20 000). Se necessrio ou indicado na monografa da
5
substncia em anlise, elevar a temperatura da coluna
de 170 a 230 C com rampa de aquecimento de 3 C por
minuto (coluna com macrogol 20 000).
- injetor: 250 C;
- detector: 250 C;
Volume de injeo: 1 L;
Sensibilidade: A altura do pico principal no cromatograma
obtido com a Soluo de padro (a) de 50 a 70% da
escala total do registrador.
Adequao do sistema quando forem utilizadas as misturas
de substncias referncia (Tabela 2).
Observao. Para cromatografa em coluna capilar e razo
curva de calibrao.
- resoluo: no mnimo, de 4 entre os picos de caprilato
de metila e caprato de metila, calculados no cromatograma
obtido com a Soluo padro (a);
- razo sinal/rudo: no mnimo, 5 para o pico referente ao
caprato de metila, observado no cromatograma obtido pela
anlise da Soluo padro (b);
- nmero de pratos tericos: mnimo de 15000, calculado
para o pico correspondente ao caproato de metila.
Adequao do sistema quando forem utilizadas as misturas
de substncias referncia listadas nas Tabelas 1, ou 3:
Observao. Para cromatografa em coluna capilar e razo
curva de calibrao.
- resoluo: no mnimo, de 1,8 entre os picos de oleato de
metila e estearato de metila, calculados no cromatograma
obtido com a Soluo padro (a);
- razo sinal/rudo: no mnimo, 5 para o pico referente ao
miristato de metila observado no cromatograma obtido
pela anlise da Soluo padro (b);
- nmero de pratos tericos: mnimo de 30 000, calculado
para o pico correspondente ao estearato de metila.
Avaliao do cromatograma. Evite condies de anlise que
possibilitem o surgimento de picos mascarados (presena
de constituintes com tempos de reteno prximos como,
por exemplo, os cidos linolnico e araqudico).
Anlise qualitativa
Identifcar os picos do cromatograma obtido com a Soluo
padro (c) (em condies isotrmicas de operao ou com
programao linear de temperatura).
Quando forem utilizadas condies isotrmicas de
operao, os picos podem ser identifcados por comparao
com o cromatograma obtido da Soluo padro (a) e
informaes registradas nas Tabelas 1, 2, ou 3:
a) medir o tempo de reteno reduzido (t
R
) de cada pico
obtido da Soluo padro (a). O t
R
o tempo de reteno
medido em relao ao pico do solvente e no em relao ao
tempo da injeo. Traar a reta por meio da equao:
Log (t
R
)

= f (nmero de carbonos da cadeia equivalente)
b) os logaritmos dos tempos de reteno reduzidos
dos cidos insaturados so pontos da reta com valores
no inteiros de tomos de carbono denominados de
comprimento equivalente de cadeia. O comprimento
equivalente de cadeia corresponde ao nmero terico de
tomos de carbonos de cidos graxos saturados que teriam
o mesmo t
R
. Por exemplo, o cido linoleico possui t
R

como cido graxo teoricamente saturado com 18,8 tomos
de carbono. Identifcar os picos do cromatograma obtido
com a soluo teste por curva de calibrao e pelo tempo
de reteno reduzido. Comprimentos de cadeia esto
registrados na Tabela 4.
Anlise quantitativa
Geralmente, a quantifcao realizada usando o mtodo
de normalizao, no qual a soma das reas sob os picos
do cromatograma, com exceo do pico do solvente,
considerada como sendo igual a 100%. Utilizar,
preferencialmente, um integrador eletrnico.
O teor percentual de cada componente calculado
determinando a rea sob o pico correspondente em relao
soma das reas sob todos os picos. No considerar os
picos cuja rea for inferior a 0,05 por cento da rea total.
Em determinados casos, quando a cadeia de cidos graxos
inferior ou igual a doze tomos de carbono, podem ser
indicados fatores de correo nas monografas individuais
para converter a rea sob os picos em porcentagem m/m.
Tabela 1 Mistura de substncias para calibrao.
Mistura de substncias Composio (% m/m)
Laurato de metila 5
Miristato de metila 5
Palmitato de metila 10
Estearato de metila 20
Araquidato de metila 40
Oleato de metila 20
Caproato de metila 10
Caprilato de metila 10
Caprato de metila 20
Laurato de metila 20
5
Palmitato de metila 10
Estearato de metila 15
Araquidato de metila 20
Oleato de metila 20
Eicosanoato de metila 10
Behenato de metila 10
Lignocerato de metila 10
Tabela 4 - Comprimento equivalente de cadeia
(valores calculados a partir de curva de calibrao
e anlise com coluna de macrogol 20000).
cido graxo
Comprimento de
cadeia equivalente
cido caproico 6,0
cido caprlico 8,0
cido cprico 10,0
cido lurico 12,0
cido misrstico 14,0
cido palmtico 16,0
cido palmitoleico 16,3
cido margrico 17,0
cido esterico 18,0
cido oleico 18,3
cido linoleico 18,8
cido gama-linolnico 19,0
cido alfa-linolnico 19,2
cido araquidico 0,0
cido eicosanoico 20,2
cido araquidnico 21,2
cido behnico 22,0
cido ercico 22,2
cido 12-oxoesterico 22,7
cido ricinolico 23,9
cido 12-hidroxiesterico 23,9
Lignocerato de metila 24,0
cido nervnico 24,2
MTODO B
Esse mtodo no se aplica aos leos que contenham
glicerdeos de cido graxos com grupos epoxi, hidroepoxi,
ciclopropilo ou ciclopropenilo, nem aos leos cujo ndice
de cido seja superior a 2,0.
Soluo problema. Introduzir 0,100 g da amostra em tubo
de centrfuga de 10 mL com rolha esmerilhada. Dissolver
com 1 mL de heptano e 1 mL de dimetilcarbonato. Agitar
energicamente, aquecendo a calor brando (50 - 60
o
C).
Adicionar 1 mL de soluo de sdio a 12 g/L em metanol
anidro soluo ainda quente. Agitar energicamente,
durante cerca de 5 min. Adicionar 3 mL de gua destilada
e agitar energicamente, durante cerca de 30 s. Centrifugar
durante 15 min a 1500 g. Injetar 1 L da fase orgnica.
Solues padro e avaliao dos cromatogramas. Na
ausncia de indicao especfca na monografa individual,
proceda conforme descrito em Mtodo A.
Condies cromatogrfcas. A cromatografa pode ser
realizada, utilizando:
coluna de slica fundida de 30 m de comprimento e 0,25
mm de dimetro interno, recoberta com macrogol 20 000
(espessura da pelcula: 0,25 m);
gs de arraste: hlio para cromatografa, com fuxo 0,9
mL/min;
detector de ionizao de chama;
razo de split 1:100
Utilizar a programao de temperatura representada na
Tabela 1.
Tabela 1 - Programao de temperatura para cromatografa.
Tempo (minutos) Temperatura (C)
Coluna 0 15 100
15 36 100 225
36 61 225
Injetor 250
Detector 250
MTODO C
Esse mtodo no se aplica aos leos que contenham
glicerdeos de cido graxos com grupos epoxi, hidroperoxi,
aldedo, cetona, ciclopropilo e ciclopropenilo, bem como,
aos leos com grupos polinsaturados conjugados ou com
grupos acetilnicos por causa da destruio parcial ou total
desses grupos.
Soluo problema. Em frasco cnico de 25 mL, dissolver
0,10 g da amostra em 2 mL de soluo de hidrxido de
sdio a 20 g/L em metanol. Adaptar o frasco ao condensador
de refuxo vertical e aquecer durante 30 min. Atravs do
condensador, adicionar 2,0 mL de soluo metanlica
de trifuoreto de boro e aquecer durante 30 min. Atravs
do condensador, adicionar 4 mL de heptano e aquecer
durante 5 min. Arrefecer a mistura e adicionar 10,0 mL de
soluo saturada de cloreto de sdio. Agitar durante 15 s e
adicionar uma quantidade de soluo saturada de cloreto
de sdio sufciente para fazer a fase superior chegar ao
colo do frasco recipiente. Retirar alquota de 2 mL da fase
superior. Lavar trs vezes com 2 mL de gua de cada vez e
secar com sulfato de sdio anidro.
Solues padro, condies cromatogrfcas e avaliao
dos cromatogramas. Na ausncia de indicao na
monografa especfca, proceder conforme descrito em
Mtodo A.
5
5.2.29.16 DETERMINAO DE ESTERIS
EM LEOS FIXOS
SEPARAO DA FRAO DE ESTERIS
Preparar a frao insaponifcvel. Separar a frao de
esteris do leo fxo por cromatografa em camada
delgada, utilizando uma placa de gel de slica G (espessura
da camada entre 0,3 mm e 0,5 mm).
Soluo amostra (a). Em balo de 150 mL, introduzir
volume de soluo de betulina a 2 g/L em diclorometano, que
corresponda a cerca de 10% do teor de esteris da amostra
utilizada para o doseamento (por exemplo, volume de 500 L
de soluo de betulina no caso do leo de oliva virgem, e de
1500 L no caso de outros leos vegetais). Se na monografa
estiver registrada a exigncia do clculo do teor percentual
de cada esterol na frao esterlica, a adio da betulina pode
ser omitida. Evaporar at a secura em corrente de nitrognio.
Adicionar 5,00 g da amostra e adicionar 50 mL de hidrxido
de potssio alcolico 2 M. Acoplar condensador de refuxo
vertical. Aquecer em banho-maria durante 1 h, sob agitao.
Arrefecer at temperatura inferior a 25 C e transferir o
contedo do balo para um funil de separao, com o auxlio
de 100 mL de gua. Agitar, com precauo, trs vezes
com 100 mL de ter etlico isento de perxidos. Reunir as
fraes etreas em outro funil de separao com o auxlio
de 40 mL de gua destilada. Agitar suavemente durante
alguns minutos. Deixar separar as fases por decantao e
rejeitar a fase aquosa. Lavar a fase orgnica vrias vezes
com 40 mL de gua (a cada vez) at que a fase aquosa no
apresente reao alcalina a fenolftalena. Transferir a frao
orgnica para um balo, tarado e lavar o funil de separao
com ter etlico. Evaporar o ter. Adicionar ao resduo 6
mL de acetona. Eliminar, cuidadosamente, o solvente com
corrente de nitrognio. Secar em estufa a 100 - 105 C at
massa constante. Dissolver o resduo com volume mnimo
de diclorometano.
Soluo amostra (b).Submeter 5,00 g de leo de canola
ao mesmo procedimento descrito para a Soluo amostra
(a) a partir de Adicionar 50 mL de hidrxido de potssio
alcolico 2 M....
Soluo problema (c). Submeter 5,00 g de leo de girassol
ao mesmo procedimento descrito para a Soluo problema
(a) a partir de Adicionar 50 mL de hidrxido de potssio
alcolico 2 M....
Soluo padro. Dissolver 25 mg de colesterol e 10 mg
de betulina em 1 mL de diclorometano. Utilizar uma placa
diferente para cada soluo problema.
Aplicar, separadamente, 20 L da Soluo padro em
forma de banda de 20 mm por 3 mm e 0,4 mL da soluo
problema (a), (b) ou (c) em forma de banda de 40 mm por
3 mm. Migrar pela distncia de 18 cm com a fase mvel
ter:n-hexano (35:65; v/v). Secar as placas em corrente de
nitrognio. Revelar com soluo de diclorofuorescena a 2
g/L em etanol. Examinar em 254 nm.
O cromatograma obtido com a Soluo padro
apresenta bandas correspondentes, respectivamente, ao
colesterol e betulina. Os cromatogramas obtidos com
as Solues amostra apresentam bandas de Rf prximos
dos correspondentes aos esteris. De cada um dos
cromatogramas raspar a regio da placa correspondente s
bandas dos esteris bem como uma zona situada 2 - 3 mm
para cima e para baixo das zonas visveis correspondentes
soluo padro. Colocar essas regies em trs erlenmeyer
diferentes de 50 mL. Adicionar a cada um, 15 mL de
diclorometano quente e agitar. Filtrar, separadamente, cada
soluo por um fltro de vidro poroso (40), ou por fltro
de papel apropriado. Lavar, cada fltro, trs vezes com 15
mL de diclorometano. Transferir o fltrado e lquidos de
lavagem em erlenmeyer, tarado. Evaporar at a secura em
corrente de nitrognio e pesar.
DOSEAMENTO DOS ESTERIS
Proceder por cromatografa a gs (5.2.17.5). O doseamento
deve ser realizado ao abrigo da umidade e preparar as
solues no momento do uso.
Soluo amostra. Aos esteris separados a partir da amostra
por cromatografa em camada delgada, adicionar 0,02 mL
da mistura, recentemente preparada, de clorotrimetilsilano:
hexametildissilazano : piridina anidra (1:3:9; v/v/v)
por miligrama de resduo. Agitar, cuidadosamente, at
dissoluo completa dos esteris. Deixar em repouso em
dessecador com pentxido de difsforo durante 30 min.
Centrifugar, se necessrio, e utilizar o sobrenadante.
Soluo padro (a). A nove partes dos esteris separados
do leo de canola por cromatografa em camada delgada,
juntar uma parte de colesterol. Adicionar 0,02 mL da
mistura, recentemente preparada, de clorotrimetilsila
no:hexametildissilazano:piridina anidra (1:3:9; v/v/v)
por miligrama de resduo. Agitar, cuidadosamente, at
dissoluo completa dos esteris. Deixar em repouso em
dessecador com pentxido de difsforo durante 30 min.
Centrifugar, se necessrio, e utilizar o sobrenadante.
Soluo padro (b). Aos esteris separados do leo
de girassol por cromatografa em camada delgada,
juntar 0,02 mL da mistura, recentemente preparada,
de clorotrimetilsilano : hexametildissilazano : piridina
anidra (1:3:9; v/v/v) por miligrama de resduo. Agitar,
cuidadosamente, at dissoluo completa dos esteris.
Deixar em repouso em dessecador com pentxido de
difsforo durante 30 min. Centrifugar, se necessrio, e
utilizar o sobrenadante.
Condies cromatogrfcas
- coluna de slica fundida de 20 a 30 m de comprimento e
0,25-0,32 mm de dimetro interno, recoberta por pelcula
de poli[metil(95)fenil(5)]siloxano ou de poli[metil(94)
fenil(5)vinil(l)]siloxano (espessura da pelcula 0,25 m);
- gs de arraste: gs hidrognio com fuxo de 30 a 50 cm/s
ou hlio com fuxo de 20 a 35 cm/s;
- razo de split (1/50 ou 1/100);
- temperaturas: coluna: 260 C; injetor: 280 C; detector:
290 C;
- volume de injeo: 1 L.
5
Resultados. O cromatograma obtido com a Soluo padro
(a) apresenta quatro picos principais correspondendo,
respectivamente, ao colesterol, brassicasterol,
campesterol e -sitosterol. O cromatograma obtido com
a Soluo padro (b) apresenta quatro picos principais
correspondendo, respectivamente, ao campesterol,
estigmasterol, -sitosterol e
7
-estigmastenol. Os tempos
de reteno relativos dos diferentes esteris em relao ao
-sitosterol so indicados na Tabela 1.
O pico correspondente ao padro interno (betulina) est,
nitidamente separado, dos picos correspondentes aos
esteris a serem quantifcados.
Tabela 1 Tempos de reteno relativos, dos esteris em
relao ao -sitosterol, obtidos com duas diferentes colunas.
Esteris
Poli[metil(95)
fenil(5) siloxano
Poli[metil(94)
fenil(5)
vinil(1)
siloxano
Colesterol 0,63 0,67
Brassicasterol 0,71 0,73
24-Metilenocolesterol 0,80 0,82
Campesterol 0,81 0,83
Campestanol 0,82 0,85
Estigmasterol 0,87 0,88
7
-Campesterol 0,92 0,93
5,23
-Estigmastadienol 0,95 0,95
Clerosterol 0,96 0,96
-Sitosterol 1 1
Sitostanol 1,02 1,02
5
-Avenasterol 1,03 1,03
5,24
-Estigmastadienol 1,08 1,08
7
-Estigmastenol 1,12 1,12
A
7
-Avenasterol 1,16 1,16
Betulina 1,4 1,6
Examinar o cromatograma obtido com a Soluo amostra.
Identifcar os picos e calcular o teor porcentual de cada
esterol na frao de esteris usando a equao:
em que
A = rea sob o pico correspondente do composto a
quantifcar;
S = soma das reas sob os picos correspondentes aos
compostos indicados na Tabela 1.
Se na monografa houver exigncia, calcule o teor de
cada esterol na amostra, em miligramas por 100 gramas,
utilizando a expresso:
em que
A = rea sob o pico correspondente ao composto a ser
quantifcado;
A
s
= rea sob o pico correspondente a betulina;
m = massa da tomada da amostra para o ensaio, em gramas;
m
s
= massa, em miligramas, da betulina adicionada
5.2.30 CARBONO ORGNICO
TOTAL
A determinao do carbono orgnico total (COT) um
mtodo sensvel e inespecfco de quantifcar os tomos de
carbono ligados por covalncia em molculas orgnicas
presentes em uma amostra. A anlise utilizada para
identifcar a contaminao da gua por impurezas orgnicas
e auxiliar no controle dos processos de purifcao e
distribuio. Baixos nveis de COT sugerem a ausncia de
compostos qumicos orgnicos potencialmente perigosos
na gua usada na elaborao de frmacos. O teor de COT
pode estar relacionado ocorrncia de endotoxinas, ao
crescimento microbiano e ao desenvolvimento de bioflmes
nas paredes da tubulao dos sistemas de distribuio de
gua de uso farmacutico. O contedo de COT independe
do estado de oxidao da matria orgnica e no sofre
interferncia de outros tomos ligados estrutura orgnica,
como nitrognio e hidrognio. H vrios mtodos
apropriados para a anlise do COT e as determinaes
podem ocorrer em linha ou no laboratrio (fora de linha).
Os mtodos em geral fundamentam-se na oxidao
completa das molculas orgnicas a dixido de carbono,
que quantifcado como carbono. Normalmente, o carbono
orgnico oxidado por combusto, aplicando calor,
emisso de raios ultravioleta ou agentes oxidantes, como o
persulfato de sdio. A quantifcao do dixido de carbono
feita por deteco do gs produzido com infravermelho
ou pela leitura da condutividade da soluo.
O mtodo abrangido nesse captulo sugestivo e o
usurio pode adotar qualquer outro que seja apropriado
e acessvel s suas fnalidades especfcas, desde que o
limite de quantifcao seja adequado faixa de leitura
esperada. Utiliza uma soluo padro de substncia
facilmente oxidvel, como a sacarose, por exemplo,
numa concentrao tal que a resposta instrumental obtida
corresponda ao limite estabelecido para o COT. O mtodo
pode igualmente ser realizado com um aparelho instalado
em linha, que tenha sido convenientemente calibrado e que
satisfaa ao ensaio de conformidade do sistema.
Na Tabela 1 so mostrados os valores mdios esperados
para os principais tipos de purifcao de gua.
5
Tabela1 Valores tpicos de COT em gua.
Tipo de purifcao Faixa esperada de COT (mg/L)
gua potvel 0,5 a 7,0
Destilao Cerca de 0,10
Deionizao 0,05 a 0,50
Osmose reversa 0,04 a 0,10
Osmose reversa + deionizao 0,01 a 0,05
Tecnologias combinadas 0,003 a 0,005
Tecnologias combinadas + Oxidao UV < 0,002
PREPARAO DAS SOLUES
Branco. Preparar a soluo do branco, ou quaisquer
outras solues necessrias para defnir a linha de base, ou
proceder calibrao, segundo as instrues do fabricante.
Utilizar o branco apropriado para regular o zero do
aparelho.
Soluo padro. Dissolver a sacarose R, previamente
dessecada em temperatura de 105 C durante 3 h, em gua
COT, de modo a obter uma soluo contendo 1,19 mg
de sacarose por litro (0,50 mg de carbono por litro), para
verifcar o instrumento.
Utilizar soluo, em gua COT, de ftalato cido de
potssio, previamente seco a 105 C durante 4 h, na
concentrao determinada pelo fabricante do equipamento,
para a calibrao do instrumento. Preservar a soluo,
acidifcando com H
3
PO
4
concentrado ou H
2
SO
4
concentrado
a pH < 2. Para determinar carbono orgnico e inorgnico,
separadamente, preparar, tambm, a soluo padro de
soluo de bicarbonato de sdio (seco em dessecador, por
no mnimo 18 horas) e carbonato de sdio decaidratado
(seco a 500 600 C por 30 minutos), na proporo do
contedo de carbono de 1:1, em gua COT.
A concentrao da soluo padro est calculada para a
gua purifcada, cujo limite de COT de 500 ppb. Para
outros tipos de gua, fazer a devida adequao.
Soluo de conformidade do sistema. Dissolver
1,4-benzoquinona em gua COT, de modo a obter uma
soluo a 0,75 mg de 1,4-benzoquinona por litro (0,50 mg
de carbono por litro).
Amostra. Coletar a amostra de gua em recipiente limpo;
seco e com tampa, deixando um mnimo de ar. Cuidar para
no haver qualquer tipo de contaminao. No utilizar
material de plstico. Proceder anlise o mais breve
possvel, de modo a minimizar os riscos de deteriorao ou
de contaminao da amostra.
CONFORMIDADE DO SISTEMA
Proceder as leituras (L) das solues de gua COT
(L
Cot
), soluo padro (L
Pa
), soluo de conformidade do
sistema (L
CS
) e registrar. Calcular a efccia do sistema em
percentagem, usando a expresso:
EQUIPAMENTO
Consiste de um injetor, um equipamento para decompor
a amostra, um sistema para separar o dixido de carbono
formado, um detector e um registrador do sinal eltrico
emitido. O tubo de decomposio deve ser capaz de gerar,
no mnimo, 0,450 mg/L de carbono orgnico, para uma
amostra de 1,071 mg/L de sacarose.
O limite de deteco do equipamento, especifcado pelo
fabricante, igual ou inferior a 0,050 mg de carbono por
litro (0,05 ppm). A conformidade do sistema verifcada,
periodicamente, por meio de uma soluo preparada com
uma substncia de difcil oxidao, como por exemplo, a
1,4-benzoquinona. A localizao do aparelho escolhida
de modo a assegurar que os resultados obtidos sejam
representativos da gua utilizada. A leitura deve ser feita
imediatamente aps a coleta da amostra de gua.
GUA COT (ACOT)
Utilizar gua de alta pureza, que satisfaa s seguintes
especifcaes:
- Condutividade: no mximo 0,1 S.cm
1
a 25 C;
- Carbono orgnico total - no mximo 0,10 mg/L.
Dependendo do tipo de equipamento utilizado os teores em
metais pesados e em cobre podem ser crticos. Observar as
instrues do fabricante.
Utilizar a gua COT como branco; na preparao das
solues do padro; de soluo de conformidade do
sistema e na limpeza do equipamento. A preparao da
soluo padro e da soluo de conformidade do sistema
deve ser concomitante da amostra.
PREPARAO DO MATERIAL DE VIDRO.
Lavar, cuidadosamente, o material de vidro por meio de
um processo que elimine a matria orgnica. Deixar o
material imerso em mistura de partes iguais de soluo
de perxido de hidrognio diludo a 30% e cido ntrico
diludo. Enxaguar com gua COT.
Caso use uma microseringa para injetar a amostra, essa
deve ser lavada com mistura de soluo de hidrxido de
sdio a 5% com lcool etlico absoluto (1:1), ou em cido
clordrico a 25%. Enxaguar abundantemente com gua
COT.
5
O sistema estar conforme se o valor obtido estiver entre
85% e 115% do valor terico.
PROCEDIMENTO
Empregar o mtodo analtico recomendado pelo fabricante
do equipamento utilizado. Injetar volume adequado da
amostra e proceder leitura do carbono total.
Determinar a leitura da amostra (L
Am
). A amostra satisfaz o
ensaio se L
Am
no for superior a L
Pa
- L
Cot
.
L
Am
< L
Pa
L
Cot
.
Para clculos diferenciados das fraes de carbono
orgnico e inorgnico, fazer a leitura do carbono orgnico
total, mudar a confgurao do equipamento para a leitura
de carbono inorgnico e calcular o carbono orgnico
por subtrao. Alternativamente, pode medir o carbono
orgnico aps remoo do carbono inorgnico e subtrair
do carbono total. Normalmente, para guas de alta pureza
a frao de carbono inorgnico desprezvel.
5.3 MTODOS QUMICOS
5.3.1 REAES DE
IDENTIFICAO
5.3.1.1 ONS, GRUPOS E FUNES
Os mtodos clssicos de identifcao de funes ou
determinados grupos qumicos presentes em frmacos
consistem em reaes que resultam em formao de
precipitado, produto colorido, desprendimento de gs,
descoramento do reagente utilizado ou outro fenmeno
qualquer facilmente perceptvel. Estes ensaios no so
aplicveis a misturas de frmacos.
Acetato
1) Aquecer a amostra com quantidade igual de cido
oxlico; desprendem-se vapores cidos com odor
caracterstico de cido actico.
2) Aquecer a amostra com cido sulfrico SR e etanol;
desprende-se acetato de etila, de odor caracterstico.
3) Tratar soluo neutra da amostra com cloreto frrico
SR; produz-se cor vermelho-escura, que desaparece pela
adio de cidos minerais.
4) Dissolver a amostra em gua, adicionar cinco gotas
de nitrato de lantnio SR, duas gotas de iodo 0,1 M e
uma gota de soluo concentrada de amnia. Aquecer
cuidadosamente at ebulio. Aps alguns minutos forma-
se precipitado azul ou aparece colorao azul intensa.
Acetila
Colocar a amostra em tubo de ensaio e juntar trs gotas de
cido fosfrico SR. Fechar o tubo com tampa atravessada
por outro tubo de ensaio menor cheio de gua e em cujo
exterior se depositou uma gota de nitrato de lantnio
SR. Aquecer o conjunto em banho-maria durante cinco
minutos (certas substncias acetiladas se hidrolisam
com difculdade; neste caso a mistura deve ser aquecida
lentamente, at ebulio, sobre chama direta). Transferir a
gota de nitrato de lantnio SR a uma cpsula de porcelana
e misturar com uma gota de iodo SR. Colocar na borda da
mistura uma gota de hidrxido de amnio 2 M. Na zona de
contato dos dois lquidos aparece lentamente cor azul que
persiste por pouco tempo.
Alcaloide
Dissolver alguns miligramas da amostra em 5 mL de gua,
juntar cido clordrico SR at acidifcar a soluo e, em
seguida, verter 1 mL de iodobismutato de potssio aquo-
actico; forma-se imediatamente precipitado alaranjado ou
vermelho-alaranjado.
Alumnio, on
1) Juntar a amostra a hidrxido de amnio 6 M; forma-
se precipitado branco gelatinoso, insolvel em excesso do
mesmo reagente.
2) Adicionar a amostra a hidrxido de sdio M ou sulfeto
de sdio SR; forma-se precipitado branco gelatinoso,
solvel em excesso do mesmo reagente.
3) A soluo da amostra juntar hidrxido de amnio 5 M
at que se forme turvao. Adicionar, em seguida, trs a
quatro gotas da soluo recm-preparada de quinalizarina
a 0,05% em hidrxido de sdio a 1% (p/v). Aquecer at
ebulio, resfriar e acidifcar com excesso de cido actico
5 M; produz-se cor violeta-avermelhado.
Amina aromtica primria
Acidifcar a soluo da amostra com cido clordrico 2
M e juntar quatro gotas de nitrito de sdio SR. Aps 1 a
2 minutos, acrescentar 1 mL de 2-naftol SR; aparece cor
alaranjada intensa ou vermelha, formando-se geralmente
precipitado.
Amnia e amina aliftica voltil
Dissolver a amostra em tubo de ensaio, acrescentar xido
de magnsio e aquecer se necessrio; desprendem-se
paulatinamente vapores alcalinos, que escurecem o papel
de prata-mangans colocado na parte superior do tubo.
5
Amnio, on
Juntar amostra excesso de hidrxido de sdio M a frio;
ocorre desprendimento de amnia, de odor caracterstico, e
que muda para azul a cor vermelha do papel de tornassol.
A decomposio acelerada pelo aquecimento.
Antimno(III), on
1) Tratar a soluo da amostra, fortemente acidifcada
por cido clordrico (no mximo 2 M), com sulfeto de
hidrognio SR; forma-se precipitado alaranjado de sulfeto
de antimnio, insolvel em hidrxido de amnio 6 M, mas
solvel em sulfeto de amnio SR, hidrxido de sdio 2 M
e cido clordrico concentrado.
2) Dissolver a amostra em tartarato de sdio e potssio
SR; aps resfriamento, juntar, gota a gota, sulfeto de sdio
SR1; forma-se precipitado vermelho-alaranjado solvel
em hidrxido de sdio 2 M.
Arsnio
1) A uma soluo amoniacal da amostra adicionar sulfeto de
sdio SR e acidifcar com cido clordrico diludo; forma-
se precipitado amarelo, insolvel em cido clordrico, mas
solvel em solues alcalinas.
2) Aquecer 5 mL da soluo da amostra fortemente
clordrica em banho-maria com volume igual de hipofosfto
de sdio SR; forma-se precipitado de cor marrom a preta.
Caso se tratar de As(V), a reduo mais lenta; o acrscimo
de iodeto de potssio SR exercer efeito cataltico.
Barbtrico sem substituinte no nitrognio
A uma soluo metanlica da amostra juntar algumas gotas
de soluo contendo nitrato de cobalto(II) a 10% (p/v) e
cloreto de clcio a 10% (p/v), misturar e acrescentar, com
agitao, algumas gotas de hidrxido de sdio 2 M; forma-
se precipitado azul-violeta.
Brio, on
1) Tratar soluo da amostra com cido sulfrico M; forma-
se precipitado branco, insolvel nos cidos clordrico e
ntrico.
2) Colocar a amostra na zona redutora de chama; esta
adquire cor verde-amarela, que se apresenta azul quando
vista atravs de vidro verde.
Benzoato
1) Tratar soluo neutra da amostra com cloreto frrico
SR; forma-se precipitado amarelo escuro, solvel em ter
etlico.
2) Acidular soluo moderadamente concentrada da
amostra com cido sulfrico M; forma-se precipitado de
cido benzico, facilmente solvel em ter etlico.
Bicarbonato
1) Tratar a amostra com cido mineral; produz-se
efervescncia com desprendimento de gs incolor que, ao
reagir com hidrxido de clcio SR, forma imediatamente
precipitado branco.
2) A uma soluo fria da amostra juntar fenolftalena SI;
a soluo permanece inalterada ou fca apenas levemente
colorida.
Bismuto, on
Dissolver a amostra em ligeiro excesso de cidos ntrico ou
clordrico e diluir com gua; forma-se precipitado branco
que, tratado com sulfeto de hidrognio, passa a marrom; o
composto resultante solvel em mistura quente de partes
iguais de cido ntrico e gua, mas insolvel em sulfeto de
amnio SR.
Bissulfto
Tratar a amostra com cido clordrico 3 M; desprende-se
dixido de enxofre, reconhecido por seu odor pungente
caracterstico e por escurecer papel de fltro umedecido
com nitrato de mercrio(I) SR.
Borato
1) A uma soluo da amostra acidulada com cido
clordrico, juntar algumas gotas de soluo de iodo a 0,1%
(p/v) e de soluo de lcool polivinlico a 2% (p/v); produz-
se cor verde intensa. A reao alterada por agentes de
oxidao ou reduo.
2) Tratar a amostra com cido sulfrico, acrescentar
metanol e levar a mistura ignio; ela queima com chama
de bordos verdes.
Brometo
1) soluo da amostra acidifcada com cido sulfrico SR,
juntar gua de cloro SR; desprende-se bromo, que confere
cor parda soluo; agitando-se esta com clorofrmio,
o solvente adquire cor variando de vermelho a marrom-
avermelhado e a camada aquosa permanece incolor.
2) Tratar a soluo da amostra com cido ntrico SR e
nitrato de prata SR; forma-se precipitado caseoso branco
levemente amarelado, insolvel em cido ntrico e pouco
solvel em hidrxido de amnio 6 M
Clcio, on
1) Umedecer a amostra com cido clordrico e lev-la
zona redutora da chama; aparece cor vermelho-alaranjada
transitria.
2) Dissolver a amostra, juntar duas gotas de vermelho
de metila SI, neutralizar com hidrxido de amnio 6 M,
acrescentar cido clordrico 3 M, gota a gota, at acidular
a soluo e verter oxalato de amnio SR; forma-se
5
precipitado branco de oxalato de clcio, insolvel em cido
actico 6 M, mas solvel em cido clordrico SR.
Carbonato
1) Tratar a amostra com cido mineral; produz-se
efervescncia, com desprendimento de gs incolor que, ao
reagir com hidrxido de clcio SR, forma imediatamente
precipitado branco.
2) A uma soluo fria da amostra solvel juntar fenolftalena
SI; aparece cor vermelha.
Chumbo, on
1) Tratar soluo da amostra com cido sulfrico M; forma-
se precipitado branco, insolvel em cido clordrico 3 M ou
cido ntrico 2 M, mas solvel em hidrxido de sdio M
aquecido, em acetato de amnio a 10% (p/v) e em excesso
de cido sulfrico M.
2) Tratar soluo da amostra, isenta de cidos minerais,
com cromato de potssio SR; forma-se precipitado
amarelo, insolvel em cido actico 6 M, mas solvel em
hidrxido de sdio M e em cido ntrico, a quente.
Cianeto
Tratar soluo da amostra com sulfato ferroso SR, hidrxido
de sdio SR e cloreto frrico SR, aquecer at ebulio e
acidular com cido clordrico; produz-se colorao ou
precipitado azul. Se a quantidade de cianeto presente for
pequena, forma-se soluo coloidal de colorao azul -
esverdeada.
Citrato
A 15 mL de piridina adicionar alguns miligramas da
amostra dissolvida ou suspensa em 1 mL de gua, agitar,
juntar 5 mL de anidrido actico mistura, agitar novamente;
aparece cor vermelha clara.
Clorato
1) Tratar soluo da amostra com nitrato de prata SR em
meio de cido ntrico SR; no se forma precipitado. Verter
cido sulfuroso ou soluo recente de nitrito de sdio SR
a esta mistura; forma-se precipitado branco, insolvel em
cido ntrico SR, mas solvel em hidrxido de amnio 6 M.
2) Submeter a amostra ignio; forma-se cloreto,
identifcado por ensaios apropriados.
3) Tratar a amostra seca com cido sulfrico; ocorre
crepitao desprendendo-se gs amarelo esverdeado (para
este ensaio usar quantidade pequena de clorato, devendo-
se tomar cuidado extremo ao execut-lo, pois o gs que se
forma decompe-se de modo explosivo acima de 45 C -
utilizar capela).
Cloreto
1) Tratar soluo da amostra, acidifcada com cido ntrico,
com nitrato de prata SR; forma-se precipitado branco
caseoso, insolvel em cido ntrico, mas, solvel em ligeiro
excesso de hidrxido de amnio 6 M.
2) Misturar a amostra seca com igual peso de dixido de
mangans, umedecer com cido sulfrico SR e aquecer
brandamente; desprende-se cloro, identifcado pelo odor
e pela produo de cor azul em papel de amido iodetado
umedecido.
Cobre (II), on
1) Tratar a soluo da amostra com ferrocianeto de potssio
SR; forma-se precipitado marrom-avermelhado, insolvel
em cidos diludos, mas solvel em hidrxido de amnio.
2) Tratar soluo da amostra com cido clordrico e
limalhas de ferro metlico; deposita-se pelcula vermelha
de cobre metlico.
3) Tratar soluo da amostra com excesso de hidrxido de
amnio 6 M; forma-se primeiro precipitado azulado e, em
seguida, soluo fortemente azulada.
ster
Juntar amostra soluo de cloridrato de hidroxilamina a
7% (p/v) em metanol e soluo de hidrxido de potssio a
10% (p/v) em etanol, aquecer at ebulio, resfriar, acidular
com cido clordrico SR e juntar soluo de cloreto frrico
SI; produz-se cor vermelho-azulada ou vermelha.
Ferro
Tratar a amostra com sulfeto de amnio SR; forma-se
precipitado preto, que se dissolve em cido clordrico 3 M,
com desprendimento de gs sulfdrico, caracterizado pelo
papel acetato de chumbo.
Frrico, on
1) Tratar soluo cida da amostra com ferrocianeto
de potssio SR; forma-se precipitado azul escuro, que
no dissolve por adio de cido clordrico SR, mas
decomposto por hidrxido de sdio 2 M.
2) Tratar a amostra com tiocianato de amnio SR; produz-
se cor vermelha intensa que no desaparece com adio
de cidos minerais diludos, mas pode ser extrada com
ter etlico, passando a colorao vermelha para a camada
etrea.
Ferroso, on
1) Tratar soluo da amostra com ferricianeto de potssio
SR; forma-se precipitado azul escuro, insolvel em cido
clordrico 3 M, mas decomposto por hidrxido de sdio M.
5
2) Tratar soluo da amostra com hidrxido de sdio
M; forma-se precipitado branco-esverdeado, que passa
rapidamente a verde e, em seguida, quando agitado, a
marrom.
Fosfato (ou ortofosfato)
1) Tratar soluo neutra da amostra com nitrato de prata
SR; forma-se precipitado amarelo, solvel em cido ntrico
2 M ou hidrxido de amnio 6 M.
2) Tratar soluo ntrica da amostra com molibdato de
amnio SR; forma-se precipitado amarelo, solvel em
hidrxido de amnio 6 M; a reao acelerada pelo calor.
Hipofosfto
1) Aquecer soluo da amostra, acidulada por cido
sulfrico SR, com sulfato cprico SR; forma-se precipitado
vermelho.
2) Tratar soluo da amostra com cloreto mercrico SR;
forma-se precipitado branco, que se toma cinzento na
presena de excesso de hipofosfto.
Iodeto
1) Tratar soluo da amostra com gua de cloro SR, gota
a gota; desprende-se iodo, que muda a cor da soluo de
amarela para vermelha; agitando-se esta soluo com
clorofrmio, este adquire cor violeta.
2) Tratar soluo da amostra acidifcada com cido ntrico
SR, com nitrato de prata SR; forma-se precipitado amarelo
caseoso, insolvel em cido ntrico SR e hidrxido de
amnio 6 M
Lactato
Tratar soluo da amostra, acidulada por cido sulfrico
SR, com permanganato de potssio SR e aquecer a
mistura; desprende-se acetaldedo, identifcado pelo odor
caracterstico.
Ltio, on
1) Tratar a soluo da amostra moderadamente concentrada
e alcalinizada por hidrxido de sdio SR, com carbonato de
sdio SR; forma-se, por aquecimento, precipitado branco,
solvel em cloreto de amnio SR.
2) Umedecer a amostra com cido clordrico e aquecer na
zona redutora da chama; esta adquire cor vermelha intensa.
Magnsio, on
1) Tratar soluo da amostra com hidrxido de sdio SR;
forma-se precipitado branco, que se dissolve com a adio
de cloreto de amnio SR.
2) Tratar soluo da amostra, na presena de cloreto de
amnio SR, com carbonato de amnio SR; no se forma
precipitado mas, ao se adicionar fosfato de sdio dibsico
heptaidratado SR, forma-se precipitado cristalino branco,
insolvel em hidrxido de amnio 6 M.
Mercrio
1) Tratar soluo da amostra com sulfeto de hidrognio
SR; forma-se precipitado preto, insolvel em sulfeto de
amnio SR e em cido ntrico 2 M fervente.
2) Aplicar soluo da amostra, sem excesso de cido
ntrico, em lmina de cobre brilhante; forma-se depsito
que, ao ser polido, se toma brilhante e prateado.
Mercrio (II), on
1) Tratar soluo da amostra com hidrxido de sdio M;
forma-se precipitado amarelo.
2) Tratar soluo neutra da amostra com iodeto de potssio
SR; forma-se precipitado escarlate, muito solvel em
excesso de reagente.
Mercrio(I),on
1) Tratar a amostra com hidrxido de sdio M; o sal
decompe-se, dando cor preta.
2) Tratar soluo da amostra com cido clordrico SR;
forma-se precipitado branco, que escurece ao ser tratado
com hidrxido de amnio 6 M.
3) Tratar soluo da amostra com iodeto de potssio SR;
forma-se precipitado amarelo que, com o tempo, pode
passar a verde.
Nitrato
1) Aquecer a amostra com cido sulfrico e cobre metlico;
desprendem-se vapores vermelho pardos (realizar em
capela).
2) Tratar soluo da amostra com igual volume de cido
sulfrico, esfriar a mistura e juntar 0,5 mL de soluo de
sulfato ferroso 0,5 M; na interface produz-se cor parda a
roxa.
Nitrito
1) Tratar a amostra com cidos minerais diludos ou com
cido actico 5 M; desprendem-se vapores pardacentos
(realizar em capela).
2) Tratar papel de amido iodetado com soluo da amostra;
o indicador se cora de azul.
3) Adicionar a amostra soluo acidifcada de
permanganato de potssio SR; desaparece a cor.
Oxalato
1) Tratar soluo neutra ou alcalina da amostra com cloreto
de clcio SR; forma-se precipitado branco, insolvel em
cido actico 6 M, mas solvel em cido clordrico.
5
2) Tratar soluo acidifcada quente da amostra com
permanganato de potssio SR; desaparece a cor.
Permanganato
1) Tratar soluo da amostra, acidulada por cido sulfrico
SR, com perxido de hidrognio a 3% (p/v) SR; a cor
desaparece a frio.
2) Tratar soluo da amostra, acidulada por cido sulfrico
SR, com cido oxlico SR em soluo aquecida; a cor
desaparece.
Perxido
Tratar soluo da amostra, ligeiramente acidulada por
cido sulfrico SR, com dicromato de potssio SR; aparece
cor azul intensa. Agitando a mistura com igual volume de
ter etlico e deixando os lquidos se separarem, a cor azul
passa para a camada etrea.
Potssio, on
1) Tratar soluo alcalina da amostra com tetrafenilborato
sdico a 1% (p/v); forma-se precipitado branco.
2) Tratar soluo da amostra com cido actico SR e 1
mL de cobaltinitrito de sdio SR; forma-se imediatamente
precipitado amarelo ou amarelo alaranjado, na ausncia de
ons amnio.
3) Colocar a soluo da amostra, acidulada com cido
clordrico SR, na zona redutora da chama; esta adquire
cor violeta; a presena de pequena quantidade de sdio
mascara a cor.
4) Tratar soluo da amostra com cido perclrico SR;
forma-se precipitado branco cristalino.
Prata, on
1) Tratar soluo da amostra com cido clordrico; forma-
se precipitado caseoso branco, insolvel em cido ntrico
SR, mas facilmente solvel em hidrxido de amnio 6 M
2) Tratar a soluo da amostra com hidrxido de amnio
6 M e pequena quantidade de soluo de formaldedo; por
aquecimento, deposita-se espelho de prata metlica na
superfcie do recipiente.
Salicilato
1) Tratar a soluo diluda da amostra com cloreto frrico
SR; produz-se cor violeta.
2) Tratar soluo moderadamente concentrada da amostra
com cido mineral; forma-se precipitado cristalino branco
de cido saliclico, que funde entre 156 e 160 C.
Sdio, on
1) Colocar soluo da amostra, acidulada, com cido
clordrico SR, na zona redutora da chama; esta adquire cor
amarela intensa.
2) Tratar soluo da amostra com cido clordrico ou ntrico
e, em seguida, com acetato de uranila e zinco SR; forma-
se precipitado cristalino amarelo-ouro, aps agitao por
alguns minutos.
Succinato
1) Tratar soluo neutra da amostra com cloreto frrico SR;
forma-se precipitado marrom claro.
2) Tratar soluo neutra da amostra com nitrato de prata
SR; forma-se precipitado branco, facilmente solvel em
hidrxido de amnio 6 M.
Sulfato
1) Tratar soluo da amostra com cloreto de brio SR;
forma-se precipitado branco, insolvel em cido clordrico
SR e em cido ntrico SR.
2) Tratar soluo da amostra com acetato de chumbo SR;
forma-se precipitado branco, solvel. em acetato de amnio
SR, mas insolvel em cido clordrico ou ntrico SR.
3) Tratar soluo da amostra com cido clordrico SR; no
se forma nenhum precipitado (distino do tiossulfato).
Sulfto
1) Tratar a amostra com cido clordrico 3 M; desprende-
se dixido de enxofre, reconhecido por seu odor pungente
caracterstico e por escurecer papel de fltro umedecido
com nitrato de mercrio(I) SR.
2) Acidifcar soluo da amostra com cido clordrico
SR, aquecer com algumas gotas de permanganato de
potssio SR e juntar gotas de cloreto de brio SR; forma-se
precipitado branco.
Tartarato
1) Dissolver alguns miligramas da amostra em gua,
acidifcada com cido actico SR, adicionar uma gota
de soluo de sulfato ferroso a 1% (p/v) e uma gota de
perxido de hidrognio a 3% (p/v); produz-se cor amarela
fugaz. Juntar hidrxido de sdio 2 M gota a gota; produz-se
cor azul intensa.
2) Acidifcar soluo da amostra com cido sulfrico M,
juntar algumas gotas de resorcinol 2% (p/v) e adicionar,
cuidadosamente, cido sulfrico, de modo a se formarem
duas camadas; aquecendo em banho-maria, por alguns
minutos, na interface aparece anel vermelho.
Tiocianato
Tratar soluo da amostra com cloreto frrico SR; produz-
se cor vermelha, que no desaparece pela adio de cidos
minerais moderadamente concentrados e pode ser extrada
com ter etlico, passando a colorao vermelha para a
camada etrea.
5
Tiossulfato
1) Tratar soluo da amostra com cido clordrico; forma-se
precipitado branco, que passa logo a amarelo, e desprende-
se dixido de enxofre, reconhecido pelo odor.
2) Tratar soluo actica da amostra com cloreto frrico SR;
produz-se cor violeta escura que desaparece rapidamente.
Xantina
Tratar a amostra com duas gotas de soluo concentrada
de perxido de hidrognio concentrado e cinco gotas de
cido clordrico 2 M, e aquecer at secura em banho-maria;
obtm-se resduo vermelho-amarelado que, tratado com
hidrxido de amnio 2 M, muda para vermelho-violeta.
Zinco, on
1) Tratar soluo da amostra com ferrocianeto de potssio
SR; forma-se precipitado branco, insolvel em cido
clordrico 3 M
2) Tratar soluo neutra ou alcalina da amostra com sulfeto
de amnio SR; forma-se precipitado branco.
3) Tratar soluo da amostra com soluo de hidrxido
de sdio 2 M, gota a gota; forma-se precipitado branco,
focoso, solvel em excesso de hidrxido de sdio SR.
5.3.1.2 IDENTIFICAO DE ESTEROIDES
POR CROMATOGRAFIA EM CAMADA
DELGADA
PROCEDIMENTO
Preparar cromatoplaca utilizando Kieselguhr G como
suporte. Introduzir a cromatoplaca na cuba contendo o
solvente de impregnao e deixar desenvolver at que
o solvente atinja o topo da cromatoplaca. Remover a
cromatoplaca da cuba e deixar evaporar o solvente.
Preparar soluo da amostra a 0,25% (p/v) e soluo do
padro a 0,25% (p/v) utilizando, como solvente, mistura
de 9 volumes de clorofrmio e 1 volume de metanol. A no
ser que a monografa estabelea diferentemente, aplicar
sobre a cromatoplaca 2 uL da soluo de amostra, 2 uL
da soluo padro e 2 uL da mistura 1:1 das solues da
amostra e do padro. Desenvolver o cromatograma com o
eluente especifcado na monografa, deixando-o subir no
mesmo sentido que o solvente de impregnao. Remover a
cromatoplaca da cuba, deixar evaporar o eluente, aquecer
a cromatoplaca a 120
o
C por 15 minutos e nebulizar com
soluo de cido sulfrico a 10% (v/v) em etanol a 96%.
Aquecer a 120
o
C por mais 10 minutos, deixar esfriar e
examinar luz normal e luz ultravioleta (366 nm). A
mancha principal do cromatograma obtido com a soluo
da amostra corresponder mancha principal obtida no
cromatograma da soluo do padro. A mancha principal
resultante da aplicao da mistura das solues de amostra
e de padro aparecer como nica e compacta.
Solventes de impregnao
I - Mistura de 1 volume de formamida e 9 volumes de
acetona
II - Mistura de 1 volume de 1 ,2-propanodiol e 9 volumes
de acetona
III - Mistura de 1 volume de parafna lquida e 9 volumes
de ter de petrleo de faixa de ebulio 40 -60
o
C.
Eluentes
A - Clorofrmio
B - Mistura de 3 volumes de tolueno e 1 volume de
clorofrmio
C - Tolueno
D - Mistura de 4 volumes de cicloexano e 1 volume de
tolueno
E - Mistura de volumes iguais de cicloexano e ter de
petrleo de faixa de ebulio 40 - 60
o
C
F - Mistura de 2 volumes de cido actico glacial e 3
volumes de gua
G - Mistura de 8 volumes de hexano e 2 volumes de
dioxano.
5.3.1.3 PESQUISAS DE ESTEROIDES
ESTRANHOS POR CROMATOGRAFIA
EM CAMADA DELGADA
PROCEDIMENTO I
Preparar cromatoplacas conforme descrito em
Cromatografa em camada delgada (5.2.17.1), utilizando
silica-gel G como suporte. Preparar 3 solues utilizando,
como solvente, mistura de 9 volumes de clorofrmio e 1
volume de metanol nas seguintes concentraes: 1,5%
(p/v) da substncia em exame Soluo 1; 1,5% (p/v) da
substncia qumica de referncia (SQR) correspondente
Soluo 2 e 0,03% (p/v) de cada um das seguintes SQR:
prednisolona e acetato de cortisona Soluo 3. Aplicar
sobre a cromatoplaca 1 uL de cada uma destas solues,
separadamente, e desenvolver o cromatograma utilizando,
como eluente, mistura de 77 volumes de diclorometano, 15
volumes de ter, 8 volumes de metanol e 1,2 volumes de
gua. Secar o cromatograma ao ar, aquecer a 105
o
C por
10 minutos e nebulizar com soluo de azul de tetrazlio
alcalina SR. A mancha principal do cromatograma
obtida com a Soluo 1 corresponde, em posio, cor e
intensidade, mancha principal do cromatograma obtido
com a Soluo 2. Qualquer mancha secundria obtida
com a Soluo 1 no mais intensa do que a mancha
correspondente no cromatograma obtida com a Soluo 3.
PROCEDIMENTO II
Proceder cromatografa utilizando slica-gel G como
suporte e, como eluente, mistura de 95 volumes de
1,2-dicloroetano, 5 volumes de metanol e 0,2 volumes de
gua.
5
Aplicar sobre a cromatoplaca, separadamente, 1 uL de
cada uma das 3 solues em mistura de 9 volumes de
clorofrmio e 1 volume de metanol, como no Procedimento
I, com exceo da Soluo 3, em que se adiciona acetato de
desoxicortona SQR.
5.3.1.4 PESQUISA DE SUBSTNCIAS
RELACIONADAS A SULFONAMIDAS
DELGADA
PROCEDIMENTO I
Proceder cromatografa em camada delgada (5.2.17.1)
utilizando slica-gel H como suporte. Preparar soluo
da substncia em exame a 1,0% (p/v) utilizando, como
solvente, mistura de 9 volumes de etanol a 96% e 1 volume
de hidrxido de amnio 13,5 M Soluo 1. Preparar
soluo de sulfanilamida SQR a 0,005% (p/v), usando
o mesmo solvente Soluo 2. Aplicar separadamente
sobre a cromatoplaca 10 uL da Soluo 1 e da Soluo
2. Desenvolver o cromatograma usando mistura de 15
volumes de 1-butanol e 3 volumes de hidrxido de amnio
M como eluente. Remover a cromatoplaca da cuba, aquecer
a 105
o
C por 10 minutos e nebulizar com soluo a 0,1%
(p/v) de 4-dimetilaminobenzaldedo em etanol a 96%,
contendo 1% de cido clordrico (v/v): qualquer mancha
secundria obtida no cromatograma com a Soluo 1,
diferente da mancha principal, no mais intensa que
aquela obtida no cromatograma com a Soluo 2.
PROCEDIMENTO II
Proceder cromatografa em camada delgada (5.2.17.1)
utilizando slica-gel H como suporte e mistura de 20
volumes de clorofrmio, 2 volumes de metanol e 1
volume de dimetilformamida como fase mvel. Aplicar
sobre a cromatoplaca, separadamente, 10 uL de cada uma
das seguintes solues: 0,25% (p/v) da substncia em
exame em mistura de 9 volumes de etanol e 1 volume de
hidrxido de amnio 13,5 M Soluo 1; 0,00125% (p/v)
de sulfanilamida SQR no mesmo solvente da Soluo 1
Soluo 2. Desenvolver o cromatograma, deixar secar ao ar
e revelar conforme prescrito no Procedimento I: qualquer
mancha secundria obtida com a Soluo 1, diferente da
mancha principal, no mais intensa que aquela obtida no
cromatograma com a Soluo 2.
5.3.1.5 IDENTIFICAO DE
FENOTIAZINAS POR CROMATOGRAFIA
EM CAMADA DELGADA
Proceder conforme descrito em Cromatografa em camada
delgada (5.2.17.1). Usar Kieselguhr G como suporte.
Impregnar a cromatoplaca seca, colocando-a em cuba
contendo mistura de 10 volumes de 2-fenoxietanol, 5
volumes de macrogol 300 e 85 volumes de acetona. Deixar
o eluente subir pelo menos 17 cm. Remover a cromatoplaca
da cuba e utilizar imediatamente.
Aplicar sobre a cromatoplaca, separadamente, 2 L de
cada uma das solues seguintes: 0,2% (p/v) da substncia
em exame em clorofrmio Soluo 1 e 0,2% (p/v) da
substncia qumica de referncia (SQR) correspondente
Soluo 2, operando em atmosfera de nitrognio
e luz reduzida. Desenvolver o cromatograma usando,
como eluente, mistura de 2 volumes de dietilamina e 100
volumes de ter de petrleo de faixa de ebulio 40 - 60
o
C saturada com 2-fenoxietanol. Remover a cromatoplaca
da cuba, deixar secar ao ar e examinar sob luz ultravioleta
com intensidade mxima em 366 nm: observa-se
fuorescncia, produzida em poucos minutos. Em seguida,
nebulizar a cromatoplaca com soluo de cido sulfrico
a 10% (v/v) em etanol e observar a colorao produzida:
a mancha principal no cromatograma, obtida com a
Soluo 1, corresponde, em posio, cor e intensidade
de fuorescncia quela obtida no cromatograma com a
Soluo 2 e tem a mesma estabilidade pelo perodo de,
pelo menos, 20 minutos depois da nebulizao.
5.3.1.6 PESQUISA DE IMPUREZAS
RELACIONADAS A FENOTIAZINAS
DELGADA
PROCEDIMENTO
Preparar cromatoplacas utilizando slica-gel GF
254
como
suporte, operando em atmosfera de nitrognio e ao abrigo
da luz. Preparar soluo contendo 2,0% (p/v) da substncia
em exame em mistura de 95 volumes de metanol e 5 volumes
de dietilamina Soluo 1. Preparar soluo a 0,01% (p/v)
da substncia em exame, utilizando o mesmo solvente
Soluo 2. Aplicar sobre a cromatoplaca, separadamente,
10 uL de cada soluo recm preparada. Usar fase mvel
especifcada na monografa. Deixar o solvente subir 12 cm
acima do ponto de aplicao. Remover a cromatoplaca da
cuba, deixar secar ao ar e examinar sob luz ultravioleta
(254 nm). Desprezar qualquer mancha sobre a linha base.
Qualquer mancha secundria obtida no cromatograma
com a Soluo 1, exceto a mancha principal, no mais
intensa que a mancha obtida com a Soluo 2, exceto se a
monografa estabelecer diferentemente.
Fases mveis
A Mistura de 80 volumes de cicloexano, 10 volumes de
acetona e 10 volumes de dietilamina
B Mistura de 85 volumes de hexano, 10 volumes de
acetona e 5 volumes de dietilamina
C Mistura de 15 volumes de 1-butanol e 3 volumes de
hidrxido de amnio M
5
5.3.2 ENSAIOS LIMITE PARA
IMPUREZAS INORGNICAS
5.3.2.1 ENSAIO LIMITE PARA CLORETOS
Preparao amostra: transferir a quantidade de amostra
especifcada na monografa, ou indicada na Tabela 1, ou
calculada, para um tubo de Nessler (capacidade de 50 mL e
22 mm de dimetro interno), adicionando um volume de 30
a 40 mL de gua destilada. Caso seja utilizada uma soluo
da amostra, transferir o volume da soluo especifcado
na monografa, ou calculado, para o tubo de Nessler e
completar o volume para 30 a 40 mL com gua destilada.
Neutralizar, se necessrio, com cido ntrico SR Deve-se
empregar uma quantidade de amostra que possibilite o uso
de volume maior do que 0,2 mL de cido clordrico padro.
Fixando-se o volume de soluo padro em 1 mL pode
calcular-se m (massa em grama da amostra) pela frmula:
m = 354,6
l
sendo l o limite de cloreto em ppm na matria-prima.
Preparao padro: transferir o volume de cido clordrico
padro (HCl 0,01 M SV), indicado na monografa, ou
na Tabela 1, ou calculado, para um tubo de Nessler e
adicionar um volume de 30 a 40 mL de gua destilada.
Procedimento: aos tubos de Nessler contendo a preparao
padro e a preparao amostra, adicionar 1 mL de cido
ntrico SR. Se, aps a acidifcao, a preparao no estiver
perfeitamente lmpida, fltrar atravs de papel de fltro isento
de cloreto, transferir o fltrado para o tubo de Nessler e
adicionar 1 mL de nitrato de prata SR. Completar o volume
para 50 mL com gua destilada e homogeneizar. Deixar em
repouso, ao abrigo da luz, durante 5 minutos. A turbidez da
preparao amostra no deve ser superior da padro.
Tabela 1 Limites de impureza cloreto e quantidades correspondentes da matria-prima para se realizar o ensaio
considerando a utilizao constante de 1,0 mL da soluo padro que contm 3,546 x 10
-4
g de cloreto.
Quantidade de amostra (g) Limite de cloreto (ppm) Quantidade de amostra (g) Limite de cloreto (ppm)
0,10 3546 (= 0,355%) 3,8 93
0,15 2364 (= 0,236%) 4,0 88
0,20 1773 (= 0,180%) 4,2 84
0,25 1418 (= 0,l42%) 4,4 80
0,30 1182 (= 0,120%) 4,6 77
0,35 1013 (= 0,100%) 4,8 74
0,40 886 5,0 71
0,45 788 5,2 68
0,50 709 5,4 65
0,55 645 5,6 63
0,60 591 5,8 61
0,65 545 6,0 59
0,70 506 6,2 57
0,75 473 6,4 55
0,80 443 6,6 53
0,85 417 6,8 52
0,90 394 7,0 50
0,95 373 7,2 49
1,00 354 7,4 48
1,2 295 7,6 46
1,4 253 7,8 45
1,6 221 8,0 44
1,8 197 8,2 43
2,0 177 8,4 42
2,2 161 8,6 41
2,4 148 8,8 40
2,6 136 9,0 39
2,8 126 9,2 38
3,0 118 9,4 37
3,2 111 9,6 37
3,4 104 9,8 36
3,6 98 10,0 35
5
Sendo fxa a quantidade de cloreto (= 3,546 x 10
-4
g) na
preparao padro, se o limite de cloreto em determinada
substncia for, por exemplo, 354 ppm, dever-se- utilizar
1 g da substncia para obter-se at a mesma turbidez do
padro; se o limite for de 71 ppm de cloreto, devero ser
utilizados 5 g de amostra e assim por diante.
Alternativamente, proceder conforme descrito em
Cromatografa inica (5.2.17.4.1), utilizando cromatgrafo
equipado com coluna de troca aninica e detector por
condutividade com supresso qumica.
5.3.2.2. ENSAIO LIMITE PARA SULFATOS
Preparao amostra: transferir a quantidade da amostra
especifcada na monografa, ou indicada na Tabela 2, ou
calculada, para um tubo de Nessler (capacidade de 50
mL e 22 mm de dimetro interno), adicionando 30 a 40
mL de gua destilada. Caso seja utilizada uma soluo
da amostra, transferir o volume da soluo especifcado
na monografa, ou calculado, para o tubo de Nessler e
completar o volume para 30 a 40 mL com gua destilada.
Se necessrio, neutralizar com cido clordrico SR. Pode-
se, eventualmente, utilizar cido actico. Se a preparao
no estiver perfeitamente lmpida, fltrar atravs de papel
de fltro isento de sulfato. Transferir o fltrado para tubo
de Nessler. Deve-se empregar uma quantidade de amostra
que possibilite o uso de volume maior do que 0,2 mL de
soluo de cido sulfrico padro. Fixando-se o volume de
soluo padro em 2,5 mL pode calcular-se m (massa em
grama da amostra) pela frmula:
m = 1200,8
l
sendo l o limite de sulfato em ppm na matria-prima.
Preparao padro: transferir o volume de cido sulfrico
padro (H
2
SO
4
0,005 M SV) indicado na monografa,
ou indicado na Tabela 2, ou calculado, para um tubo de
Nessler e adicionar um volume de 30 a 40 mL de gua
destilada.
Procedimento: aos tubos de Nessler contendo a preparao
padro e a preparao amostra, adicionar 1 mL de cido
clordrico 3 M e 3 mL de cloreto de brio SR. Completar
o volume para 50 mL com gua destilada. Homogeneizar.
Deixar em repouso por cerca de 10 minutos. A turbidez da
preparao amostra no deve ser superior da padro.
Tabela 2 Limites de impureza sulfato e quantidades correspondentes da matria-prima para se realizar o ensaio
considerando a utilizao constante de 2,5 mL da soluo padro que contm 1,2008 x 10
-3
g de sulfato.
Quantidade de amostra (g) Limite de sulfato (ppm) Quantidade de amostra (g) Limite de sulfato (ppm)
0,50 2401 (= 0,240%) 4,6 261
0,55 2183 (= 0,220%) 4,8 250
0,60 2001 (= 0,200%) 5,0 240
0,65 1847 (= 0,185%) 5,2 231
0,70 1715 (= 0,171%) 5,4 222
0,75 1601 (= 0,160%) 5,6 214
0,80 1501 (= 0,150%) 5,8 207
0,85 1412 (= 0,141%) 6,0 200
0,90 1334 (= 0,133%) 6,2 194
0,95 1264 (= 0,126%) 6,4 187
1,00 1200 (= 0,120%) 6,6 182
1,2 1001 (= 0,100%) 6,8 177
1,4 858 7,0 171
1,6 750 7,2 166
1,8 667 7,4 162
2,0 600 7,6 158
2,2 546 7,8 154
2,4 500 8,0 151
2,6 462 8,2 146
2,8 429 8,4 143
3,0 400 8,6 139
3,2 375 8,8 136
3,4 353 9,0 133
3,6 333 9,2 130
3,8 316 9,4 127
4,0 300 9,6 125
4,2 286 9,8 122
4,4 273 10,0 120
5
Sendo fxa a quantidade de sulfato (= 1,2008 x 10
-3
g),
se o limite de sulfato em determinada substncia for, por
exemplo, 500 ppm, devero ser utilizados 2,4 g de amostra
para obter-se at a mesma turbidez do padro; se o limite
for de 151 ppm de sulfato, devero ser utilizados 8 g de
amostra e assim por diante.
Cromatografa inica (5.2.17.4.1), utilizando cromatgrafo
equipado com coluna de troca aninica e detector por
condutividade com supresso qumica.
5.3.2.3 ENSAIO LIMITE PARA METAIS
PESADOS
A determinao de metais pesados pode ser efetuada por
dois mtodos: ensaio limite por formao de partculas
slidas de sulfetos ou determinao por espectrometria
atmica.
O ensaio limite consiste na formao de partculas slidas
dos sulfetos de metais pesados, em suspenso, e posterior
comparao visual da intensidade da cor nas preparaes
amostra e padro em tubo de Nessler. O ensaio semi
quantitativo e possibilita inferir se a amostra passa ou no
no teste, representando o somatrio da concentrao dos
elementos contaminantes na amostra.
O mtodo por espectrometria atmica possibilita
quantifcar cada elemento contaminante na amostra
e limites diferenciados so estabelecidos para cada
elemento de acordo com a sua toxicidade e o tipo de forma
farmacutica. Elementos como As, Cd, Pb e Hg, devido
elevada toxicidade apresentam limites mais baixos que os
demais. Devido maior biodisponibilidade de elementos
eventualmente presentes em substncias utilizadas na
fabricao de produtos parenterais, os limites requeridos so
inferiores aqueles relacionados para utilizao por via oral.
MTODO DO ENSAIO LIMITE
Reagentes especiais
Soluo estoque de nitrato de chumbo: dissolver,
exatamente, 159,8 mg de nitrato de chumbo em 100 mL de
gua adicionada de 1 mL de cido ntrico. Diluir com gua
para 1000 mL e homogeneizar. Preparar e estocar essa
soluo em recipientes de vidro isentos de sais solveis de
chumbo.
Soluo padro de chumbo (10 ppm Pb): no dia do uso,
diluir 10 mL da soluo estoque de nitrato de chumbo para
100 mL com gua. Cada mililitro dessa soluo contm o
equivalente a 10 g de chumbo (10 ppm Pb).
Tampo acetato pH 3,5: dissolver 25,0 g de acetato de
amnio em 25 mL de gua e adicionar 38 mL de cido
clordrico 6 M. Se necessrio, ajustar o pH em 3,5 com
hidrxido de amnio 6 M ou cido clordrico 6 M. Diluir
para 100 mL com gua e homogeneizar.
Preparo do reagente de tioacetamida: dissolver 4 g de
tioacetamida em gua e completar o volume a 100 mL.
Tomar 0,2 mL e adicionar a 1 mL da mistura de hidrxido
de sdio M, 5 mL de gua e 20 mL de glicerina. Aquecer
em banho-maria por 20 s, resfriar e utilizar imediatamente.
MTODO I
Preparao amostra: transferir para tubo adequado
soluo da amostra preparada conforme especifcado na
monografa e diluir para 25 mL com gua, ou dissolver e
diluir com gua para 25 mL a quantidade de amostra, em
gramas, especifcada na monografa ou calculada segundo
a equao:
2 / (1000l)
em que
l = limite de metais pesados na amostra em porcentagem
(p/p).
Ajustar o pH entre 3,0 e 4,0 com cido actico M ou
hidrxido de amnio 6 M utilizando papel indicador de
faixa estreita como indicador externo. Diluir com gua
para aproximadamente 40 mL e homogeneizar.
Preparao padro: transferir para tubo adequado 2 mL de
soluo padro de chumbo (10 ppm Pb) e diluir para 25 mL
com gua. Ajustar o pH entre 3,0 e 4,0 com cido actico
M ou hidrxido de amnio 6 M utilizando papel indicador
de faixa estreita como indicador externo. Diluir com gua
Preparao controle: transferir para um terceiro tubo
volume de soluo da amostra preparada conforme descrito
na monografa ou em preparao amostra e adicionar 2 mL
de soluo padro de chumbo (10 ppm Pb). Ajustar o pH
entre 3,0 e 4,0 com cido actico M ou hidrxido de amnio
6 M utilizando papel indicador de faixa estreita como
indicador externo. Diluir com gua para aproximadamente
40 mL e homogeneizar.
Procedimento: a cada uma das preparaes adicionar 2
mL de tampo acetato pH 3,5 e 1,2 mL de tioacetamida.
Diluir com gua para 50 mL, homogeneizar e deixar em
repouso por 2 minutos. Aps 2 minutos, desenvolver-
se- tonalidade que varia do amarelo ao preto. Observar
as preparaes de cima para baixo, segundo o eixo
vertical do tubo, sobre fundo branco. Qualquer colorao
desenvolvida na preparao amostra no mais intensa do
na padro. O teste somente vlido se a intensidade da
colorao desenvolvida na preparao controle for igual ou
superior quela da padro.
MTODO II
Preparao amostra: transferir para tubo adequado
soluo da amostra preparada conforme especifcado na
monografa e diluir para 25 mL com solvente orgnico
(dioxano ou acetona, contendo, no mnimo, 15% v/v de
gua), ou dissolver e diluir com o mesmo solvente para 25
mL a quantidade de amostra, em gramas, especifcada na
monografa ou calculada segundo a equao:
5
2 / (1000l)
em que
(p/p).
Ajustar o pH entre 3,0 e 4,0 com cido actico M ou
faixa estreita como indicador externo. Diluir com gua
Preparao padro: transferir para tubo adequado 2 mL
de soluo padro de chumbo (10 ppm Pb) e diluir para 25
mL com o mesmo solvente empregado para a dissoluo da
amostra. Ajustar o pH entre 3,0 e 4,0 com cido actico M
ou hidrxido de amnio 6 M utilizando papel indicador de
faixa estreita como indicador externo. Diluir com o mesmo
solvente empregado para a dissoluo da amostra para
aproximadamente 40 mL e homogeneizar.
volume de soluo da amostra preparada conforme
descrito na monografa ou em preparao amostra e
adicionar 2 mL de soluo padro de chumbo (10 ppm
Pb). Ajustar o pH entre 3,0 e 4,0 com cido actico M ou
Procedimento: a cada uma das preparaes adicionar 2 mL
de tampo acetato pH 3,5 e 1,2 mL de tioacetamida. Diluir
com gua para 50 mL, homogeneizar e deixar em repouso
por 2 minutos. Aps 2 minutos, desenvolver-se- colorao
que varia do amarelo ao preto. Observar as preparaes
de cima para baixo, segundo o eixo vertical do tubo,
sobre fundo branco. Qualquer colorao desenvolvida na
preparao amostra no mais intensa do que na padro.
O teste somente vlido se a intensidade da colorao
desenvolvida na preparao controle for igual ou superior
quela na padro.
MTODO III
Preparo da amostra: utilizar a quantidade de amostra, em
gramas, especifcada na monografa ou calculada segundo
a equao:
2 / (1000l)
em que
(p/p).
Transferir a amostra para cadinho adequado, adicionar
cido sulfrico sufciente para umedecer a substncia
e incinerar, cuidadosamente, sob temperatura baixa.
Adicionar massa carbonizada 2 mL de cido ntrico e 5
gotas de cido sulfrico. Aquecer, com cuidado, at que
no mais se desprendam vapores brancos. Incinerar em
mufa a 500 - 600 C at completa combusto do carbono.
Resfriar em temperatura ambiente, adicionar 4 mL de
cido clordrico 6 M, cobrir, digerir em banho-maria
por 15 minutos, descobrir e evaporar em banho-maria,
lentamente, at secura. Umedecer o resduo com 1 gota
de cido clordrico, adicionar 10 mL de gua quente e
digerir em banho-maria por 2 minutos. Alcalinizar ao papel
tornassol com hidrxido de amnio 6 M adicionado gota a
gota. Diluir com gua para 25 mL e ajustar o pH entre 3,0
e 4,0 com cido actico M, utilizando papel indicador de
faixa estreita como indicador externo. Filtrar se necessrio,
lavar o cadinho e o fltro com 10 mL de gua e combinar
o fltrado e as guas de lavagem em tubo adequado para
comparao de cor. Diluir com gua para aproximadamente
Preparao padro: transferir para tubo adequado 2 mL
de soluo padro de chumbo (10 ppm Pb) e diluir para 25
mL com o mesmo solvente empregado para a dissoluo da
amostra. Ajustar o pH entre 3,0 e 4,0 com cido actico M
ou hidrxido de amnio 6 M utilizando papel indicador de
volume de soluo da amostra preparada conforme
descrito na monografa ou em preparao amostra e
adicionar 2 mL de soluo padro de chumbo (10 ppm
Pb). Ajustar o pH entre 3,0 e 4,0 com cido actico M ou
que varia do amarelo ao preto.Observar as preparaes
sobre fundo branco. Qualquer colorao desenvolvida
na preparao amostra no mais intensa do que aquela
colorao desenvolvida na preparao controle for igual ou
superior quela na padro.
MTODO IV
Preparo da amostra: Pesar, exatamente, quantidade de
amostra recomendada na monografa ou calculada segundo
a equao:
2 / (1000l)
em que
(p/p).
Transferir para tubo de digesto de vidro borossilicato
de 100 mL e adicionar cerca de 10 mL de cido ntrico.
Proceder digesto em chapa de aquecimento ou bloco
5
digestor em temperatura de 120 C, durante 3 horas.
Recomenda-se aquecer o sistema lentamente, para evitar
projeo da amostra. Caso haja evaporao do cido,
adicionar outra alquota de 5 mL. Caso uma preparao
lmpida no seja obtida, adicionar, aps resfriamento, 2 mL
de perxido de hidrognio a 30% (p/p) e aquecer a 140 C
por mais uma hora. Esfriar e diluir, cautelosamente, com
pequeno volume de gua. Transferir, com lavagem, para
tubo de Nessler de 50 mL, sem ultrapassar 25 mL.
sobre fundo branco. Qualquer colorao desenvolvida na
preparao amostra no mais intensa do que na padro.
O teste somente vlido se a intensidade da colorao
desenvolvida na preparao controle for igual ou superior
quela na padro.
MTODO V
Preparo da amostra: nos casos em que os mtodos anteriores
de preparo de amostra no forem efcientes, proceder
conforme descrito em Decomposio por via mida em
sistema fechado ou Mtodo de combusto iniciada por
micro-ondas em sistema pressurizado descritos em Mtodo
de espectrometria atmica.
sobre fundo branco. Qualquer colorao desenvolvida
na preparao amostra no mais intensa do que aquela
colorao desenvolvida na preparao controle igual ou
superior quela na padro.
MTODO DE ESPECTROMETRIA ATMICA
Utilizar tcnicas de espectrometria atmica para
determinao de As, Cd, Cr, Cu, Hg, Ir, Mn, Mo, Ni, Os,
Pb, Pd, Pt, Rh, Ru e V, conforme Espectrometria atmica
(5.2.13). Entretanto, diferentes procedimentos de preparo
da amostra podem ser aplicados, como demonstrado na
Figura 1.
Figura 1 - Procedimentos de preparo de amostra para o mtodo de espectrometria atmica.
5
No caso de substncias solveis em gua, no h
necessidade da decomposio prvia da amostra e essa
pode ser analisada diretamente aps dissoluo. Caso no
seja solvel em gua e apresentar solubilidade em outro
solvente, a substncia pode ser analisada diretamente
aps dissoluo se no houver incompatibilidade entre o
solvente e a tcnica de espectrometria atmica utilizada.
Quando nenhuma das condies anteriores for atendida,
recomenda-se a decomposio prvia da amostra. Nesses
casos, dois procedimentos so recomendados:
Decomposio por via mida em sistema fechado
Pesar, exatamente, quantidade de amostra entre 0,1 e
0,5 g de amostra e adicionar cido ntrico conforme
recomendao do fabricante e proceder a digesto em
sistema fechado com aquecimento convencional ou com
micro-ondas em temperatura de 180 C ou superior.
Nos sistemas que empregam aquecimento convencional
e micro-ondas, quando no houver especifcao na
monografa, recomenda-se a digesto por 240 min e 20
min, respectivamente.
Mtodo de combusto iniciada por micro-ondas em
sistema pressurizado
Proceder conforme descrito no item Mtodos de combusto
(5.3.3.3).
Em princpio, os dois procedimentos de decomposio
descritos podem ser utilizados indistintamente. Entretanto,
se recomenda a utilizao da decomposio por via mida
devido a maior simplicidade e capacidade de processamento
de amostras. Outros reagentes, tais como cido clordrico,
cido sulfrico, perxido de hidrognio e cido fuordrico
(no pode ser utilizado em frascos de quartzo), tambm,
podem ser utilizados na etapa de digesto, dependendo da
necessidade.
A decomposio por combusto iniciada por micro-ondas
recomendada nos casos em que a digesto por via mida
no for efciente para amostras orgnicas.
Os limites mximos permitidos para cada elemento esto
descritos na Tabela 1.
Tabela 1 - Limites permitidos de impurezas de metais e no metais.
Elemento
Uso oral
Limite mximo (g g
-1
)
Uso parenteral
Limite mximo (g g
-1
)
Arsnio (As) 1,5 0,15
Cdmio (Cd) 0,5 0,05
Chumbo (Pb) 1,0 0,1
Mercrio (Hg) 1,5 0,15
Cromo (Cr) 25 2,5
Cobre (Cu) 250 25
Mangans (Mn) 250 25
Molibdnio (Mo) 25 2,5
Nquel (Ni) 25 2,5
Paldio (Pd) 10 1,0
Platina (Pt) 10 1,0
Vandio (V) 25 2,5
Irdio (Ir) O somatrio da concentrao no
pode exceder 10
O somatrio da concentrao no
pode exceder 10
smio (Os)
Rdio(Rh)
Rutnio (Ru)
MTODO I
Preparao amostra: dissolver quantidade da amostra
especifcada na monografa, ou na Tabela 1, ou calculada,
em solvente adequado, transferir para tubo de Nessler
(capacidade de 50 mL e 22 mm de dimetro interno).
Adicionar gua destilada, ou o solvente indicado na
monografa, em quantidade sufciente para 40 mL.
Adicionar 2 mL de cido ctrico a 20% (p/v).
Fixando-se o volume da Soluo padro de ferro (100 ppm
Fe) em 1 mL, pode-se calcular o valor de m (massa em
grama da amostra) pela frmula:
5.3.2.4 ENSAIO LIMITE PARA FERRO
Soluo padro de ferro (100 ppm Fe): dissolver 0,8634
g de sulfato frrico amoniacal dodecaidratado em gua
destilada em um balo volumtrico de 1000 mL. Adicionar
5 mL de cido sulfrico SR e completar o volume com
gua destilada.
Soluo padro de ferro (10 ppm Fe): diluir 10 mL da
Soluo padro de ferro (100 ppm Fe) com gua destilada
e completar o volume para 100 mL.
Soluo padro de ferro (2 ppm Fe): diluir 2 mL da
Soluo padro de ferro (100 ppm Fe) com gua destilada
e completar o volume para 100 mL.
5
sendo l o limite de ferro em ppm na matria-prima.
Preparao padro: empregar 10 mL de Soluo padro
de ferro (10 ppm de Fe) ou 1 mL da Soluo padro de
ferro (100 ppm Fe), conforme Tabela 1, ou volume
calculado, adicionar gua destilada, ou o solvente indicado
na monografa, em quantidade sufciente para 40 mL.
Adicionar 2 mL de cido ctrico a 20% (p/v).
Procedimento: concomitantemente, acrescentar aos tubos
contendo as preparaes amostra e padro duas gotas
de cido tiogliclico. Homogeneizar, alcalinizar com
hidrxido de amnio, completar o volume para 50 mL com
gua destilada e homogeneizar. Deixar em repouso por 5
minutos. A cor rsea produzida na preparao amostra no
deve ser mais intensa do que na padro.
MTODO II
Preparao amostra: dissolver quantidade da amostra
especifcada na monografa, ou calculada, em solvente
adequado, ou utilizar volume da soluo da amostra
conforme especifcado na monografa. Adicionar 2 mL de
cido clordrico 2 M e 0,5 mL de gua de bromo SR. Aps
5 minutos, retirar o excesso de bromo por corrente de ar
em capela (CUIDADO! REAGENTE TXICO) e tranferir
para tubo de Nessler (capacidade de 50 mL e 22 mm de
dimetro interno).
Preparao padro: submeter o volume da Soluo padro
de ferro (2 ppm ou 10 ppm de Fe) indicado na monografa,
ou o volume calculado, conforme descrito na preparao
amostra.
Procedimento: concomitantemente, acrescentar aos
tubos contendo as preparaes amostra e padro, 3 mL
de tiocianato de potssio M, completar o volume para 50
mL, homogeneizar e deixar em repouso por 5 minutos. A
colorao produzida na preparao amostra no deve ser
mais intensa do que na padro.
MTODO III
Preparao amostra: transferir para um tubo de Nessler
(capacidade de 50 mL e 22 mm de dimetro interno) a
quantidade de amostra especifcada na monografa, ou
calculada, ou o volume da soluo da amostra indicado
na monografa. Diluir para 40 mL com gua destilada.
Adicionar 2 mL de cido clordrico M e homogeneizar.
Preparao padro: transferir o volume da Soluo padro
de ferro (10 ppm Fe) indicado na monografa, ou volume
calculado, para um tubo de Nessler e proceder conforme
descrito na preparao amostra.
Procedimento: adicionar aos tubos contendo as preparaes
amostra e padro 50 mg de cristais de peroxidissulfato
de amnio. Acrescentar 3 mL de tiocianato de amnio
SR, completar o volume para 50 mL com gua destilada
e homogeneizar. A colorao produzida na preparao
amostra no deve ser mais intensa do que na padro.
Tabela 1 Limites de impureza ferro e quantidade correspondentes da matria-prima para se realizar o ensaio considerando
a utilizao constante de 1,0 mL da soluo padro de ferro de 100 ppm, que contm 10
-4
g de ferro, na preparao padro.
Quantidade de amostra (g) Limite de ferro (ppm) Quantidade de amostra (g) Limite de ferro (ppm)
0,100 1000 0,4 250
0,105 950 0,5 200
0,111 900 0,667 150
0,116 850 1 100
0,125 800 1,111 90
0,133 750 1,250 80
0,143 700 1,429 70
0,154 650 1,667 60
0,167 600 2 50
0,182 550 2,5 40
0,200 500 3,333 30
0,222 450 5 20
0,250 400 10 10
0,285 350 20 5
0,333 300
Sendo fxa a quantidade de ferro (= 10
-4
g de Fe) na
Preparao padro, se o limite de ferro em determinada
substncia for, por exemplo, 1000 ppm, dever ser utilizado
0,1 g de amostra para se obter at a mesma colorao da
preparao padro; se o limite for 200 ppm de ferro, dever
ser utilizado 0,5 g de amostra, e assim por diante.
MTODO IV
Alternativamente, para determinao de ferro, proceder
ao preparo da soluo amostra conforme descrito em
Ensaio limite para metais pesados (5.3.2.3) e efetuar a
determinao por uma das tcnicas de Espectrometria
atmica (5.2.13).
5
5.3.2.5 ENSAIO LIMITE PARA ARSNIO
MTODO ESPECTROFOTOMTRICO
O mtodo est baseado na reao entre a arsina (AsH
3
)
liberada e dietilditiocarbamato de prata que formam
complexo vermelho; a absoro da radiao pode ser
medida em espectrofotmetro ou colormetro.
Dois mtodos podem ser empregados diferindo, apenas, no
preparo da amostra e do padro. O Mtodo I , em geral,
utilizado para substncias inorgnicas, enquanto o Mtodo
II empregado para substncias orgnicas.
O sistema utilizado - Figura 1 - compreende: (a) gerador
de arsina; (b) e (d) juntas; (c) unidade esmerilhada; (e)
tubo de absoro. Outro sistema adaptado que tenha
as caractersticas essenciais do apresentado pode,
eventualmente, ser utilizado.
Figura 1 - Sistema para determinao de
arsnio pelo mtodo espectrofotomtrico.
Soluo estoque padro de arsnio: secar trixido de
arsnio por 1 hora a 105 C. Pesar, exatamente, 132 mg e
dissolver em 5 mL de soluo de hidrxido de sdio (1:5)
em balo volumtrico de 1000 mL. Neutralizar com cido
sulfrico M e, em seguida, acrescentar mais 10 mL de
cido sulfrico M. Completar o volume com gua recm-
fervida e resfriada.
Soluo padro de arsnio: transferir 1 mL (ou 0,5; ou
0,25; ou 0,1 mL) da soluo estoque padro de arsnio para
um balo volumtrico de 100 mL (ou de 50, ou de 25, ou
de 10 mL, de acordo com a necessidade do laboratrio)
Preservar o meio ambiente. Acrescentar 1 mL de cido
sulfrico M e completar o volume com gua recm-fervida
e, posteriormente, resfriada. Homogeneizar. Conservar
a soluo em recipiente de vidro e utilizar em at 3 dias.
Cada mL da soluo obtida contm 1 ug de arsnio.
Mtodo I
Preparao amostra: transferir para frasco gerador de
arsina a quantidade de substncia indicada na monografa,
ou a quantidade calculada.
Fixando-se o volume da soluo padro de arsnio em 3
mL pode-se calcular m (massa em grama da amostra) pela
frmula:
sendo l o limite de arsnio em ppm na matria-prima.
Dissolver com gua destilada completando o volume para 35
mL. Adicionar 20 mL de cido sulfrico M, 2 mL de iodeto
de potssio SR, 0,5 mL de cloreto estanoso SR fortemente
cido e 1 mL de lcool isoproplico. Homogeneizar. Deixar
em repouso por 30 minutos a temperatura ambiente. Na
unidade (c) do aparelho descrito, colocar duas pores
de algodo embebidas em soluo saturada de acetato de
chumbo, deixando entre elas espao de 2 mm. O excesso
da soluo deve ser eliminado espremendo-se as pores
de algodo e secando-as a presso reduzida a temperatura
ambiente. As juntas (b) e (d) devem ser lubrifcadas com
vaselina e unidas como na Figura 1.
Preparao padro: transferir para o frasco gerador de
arsina 3 mL da Soluo padro de arsnio. Diluir com
gua destilada para 35 mL. Proceder da mesma forma
descrita para a preparao amostra.
Procedimento: transferir 3 mL de dietilditiocarbamato
de prata SR para a unidade de absoro (e) dos frascos
geradores contendo as preparaes amostra e padro.
Adicionar 3 g de zinco granulado (malha de 1 mm)
mistura em cada frasco gerador de arsina. Imediatamente
unir as unidades (c) e (e) ao frasco gerador. Deixar em
banho de gua a (25 3) C por 45 minutos. Em intervalos
de 10 minutos agitar, vagarosamente. Aps esse perodo,
transferir o contedo da unidade de absoro para cela de
1 cm. Comparar a cor vermelha produzida nas preparaes
amostra e padro. A colorao produzida na preparao
amostra no deve ser mais intensa do que na padro. Caso
necessrio, determinar a absoro em espectrofotmetro
ou colormetro em comprimento de onda entre 535 e 540
nm empregando dietilditiocarbamato de prata SR como
branco para o ajuste do zero.
Mtodo II
Esse mtodo emprega, adicionalmente, perxido de
hidrognio na digesto da amostra. Com certas substncias
pode provocar reao violenta. Assim, importante
proceder, cuidadosamente, em todas as etapas. Deve-
se tomar cuidado, tambm, na presena de compostos
5
halogenados, especialmente, quando aquecer a amostra
com cido sulfrico e, posteriormente, adicionar perxido
de hidrognio a 26% (v/v). O aquecimento deve ser mais
brando impedindo que atinja a temperatura de ebulio da
mistura e carbonizao para evitar a perda de arsnio.
Preparao amostra: transferir para o frasco gerador
quantidade da amostra especifcada na monografa, ou
calculada.
Fixando-se o volume da soluo padro de arsnio em 3
mL pode-se calcular m (massa em grama da amostra) pela
frmula:
sendo l o limite de arsnio em ppm na matria-prima.
Adicionar 5 mL de cido sulfrico e prolas de vidro.
Se necessrio, empregar maior quantidade do cido para
umedecer completamente a substncia cuidando para que
o volume no ultrapasse 10 mL. Proceder a digesto em
capela de preferncia usando placa de aquecimento com
temperatura no superior a 120
o
C por tempo necessrio
ao incio da digesto. Uma vez iniciada a decomposio
da amostra, adicionar gota a gota, cuidadosamente,
perxido de hidrognio concentrado. Esperar que a reao
se abrande e, ento, aquecer entre adio de cada gota.
Caso haja excesso de espuma, interromper o aquecimento.
Assim que diminuir a intensidade da reao, aquecer,
cautelosamente, com agitao do frasco para promover
aquecimento homogneo. necessrio que se mantenham
as condies oxidantes durante toda a digesto. Para tanto,
adicionar pequenas quantidades de perxido de hidrognio
concentrado sempre que a mistura tornar-se marrom
ou escurecer. Destruda a matria orgnica, aumentar
paulatinamente a temperatura de aquecimento permitindo
que os vapores de trixido de enxofre sejam desprendidos
e a soluo se torne incolor ou levemente bege. Resfriar,
adicionar, cuidadosamente, 10 mL de gua destilada,
evaporar at o trixido de enxofre seja novamente
desprendido e resfriar. Caso necessrio, repetir a operao,
removendo traos de perxido de hidrognio. Resfriar
e acrescentar 10 mL de gua destilada. Lavar o frasco e
diluir com gua destilada completando o volume para 35
mL. Proceder como na preparao amostra do Mtodo I
iniciando por Adicionar 20 mL de cido sulfrico M....
Preparao padro: transferir para frasco gerador de arsina
3 mL da Soluo padro de arsnio e adicionar 2 mL de
cido sulfrico. Homogeneizar. Acrescentar o mesmo
volume de perxido de hidrognio concentrado empregado
para a preparao amostra. Proceder, em seguida, ao
aquecimento da soluo obtida at que se formem vapores.
Resfriar e adicionar, cuidadosamente, 10 mL de gua
destilada. Repetir o procedimento de aquecimento com
mais 10 mL e, aps, resfriar novamente e diluir com gua
destilada para completar 35 mL. Proceder como para a
preparao amostra.
Procedimento: proceder conforme descrito no Mtodo I.
Nota: antimnio interferente da reao, uma vez que forma
estibina (SbH
3
) fornecendo resultado falsamente positivo
no desenvolvimento de cor com dietilditiocarbamato de
prata SR. Nesses casos, deve-se comparar as preparaes
em comprimento de onda de 535 e 540 nm, no qual a
interferncia da estibina desprezvel.
MTODO DE ESPECTROMETRIA DE ABSORO
ATMICA COM GERAO DE HIDRETOS
Proceder a preparao amostra conforme descrito no
item Decomposio por via mida em sistema fechado
Ensaio limite para metais pesados (5.3.2.3) e determinar
por Espectrometria de absoro atmica com gerao
de hidretos (5.2.13.1.2). Proceder de acordo com as
especifcaes do fabricante empregando comprimento de
onda de 193,7 nm e resoluo do monocromador de (0,5
0,1) nm.
MTODO DE ESPECTROMETRIA DE EMISSO
TICA COM PLASMA INDUTIVAMENTE ACOPLADO
Proceder a preparao da amostra conforme descrito no
item Decomposio por via mida em sistema fechado -
Ensaio limite para metais pesados (5.3.2.3) e determinar por
Espectrometria de emisso ptica com plasma indutivamente
acoplado (5.2.13.2.2). Proceder de acordo com as
especifcaes do fabricante. Recomenda-se a utilizao do
comprimento de onda de 188,979 a 189,042 nm.
5.3.2.6 ENSAIO LIMITE PARA AMNIA
Soluo padro de amnia (2,5 ppm NH
3
): transferir 1 mL
da soluo de cloreto de amnio 0,00741% (p/v) para um
balo volumtrico de 10 mL. Completar o volume com
gua destilada.
Soluo padro de amnia (1 ppm NH
3
): diluir 40 mL da
soluo padro de amnia (2,5 ppm de NH
3
) para 100 mL
com gua destilada.
Preparao amostra: dissolver a quantidade indicada
da substncia em anlise em 12 mL de gua destilada,
alcalinizar, se necessrio, com hidrxido de sdio 2 M.
Transferir para balo volumtrico de 15 mL, adicionar
0,3 mL de soluo alcalina de tetraiodomercurato (II)
de potssio e completar o volume com gua destilada.
Homogeneizar e deixar em repouso por 5 minutos.
Transferir para um tubo de Nessler (capacidade de 50 mL e
dimetro interno de 22 mm).
Preparao padro: transferir 10 mL de soluo padro de
amnia (1 ppm de NH
3
), ou o volume calculado, para balo
volumtrico de 15 mL, adicionar 4,0 mL de gua destilada,
0,3 mL de soluo alcalina de tetraiodomercurato (II) de
potssio e completar o volume. Homogeneizar e deixar em
repouso por 5 minutos. Transferir para um tubo de Nessler.
Procedimento: comparar a cor desenvolvida nas
preparaes. A cor amarela produzida na preparao
5
5.3.2.7 ENSAIO LIMITE PARA CLCIO
Soluo padro alcolica de clcio (100 ppm Ca): pesar,
exatamente, 2,5 g de carbonato de clcio e transferir para
balo volumtrico de 1000 mL com 12 mL de cido actico.
Dissolver e completar o volume com gua destilada.
Transferir, imediatamente antes do uso, 10 mL dessa
soluo para balo volumtrico de 100 mL e completar o
volume com etanol.
Soluo padro de clcio (10 ppm Ca): pesar, exatamente,
0,624 g de carbonato de clcio e transferir para balo
volumtrico de 250 mL com 3 mL de cido actico.
Dissolver e completar o volume com gua destilada.
Transferir, imediatamente antes do uso, 10 mL dessa
volume com gua.
Preparao amostra: adicionar 1 mL de oxalato de amnio
SR a um tubo de Nessler (capacidade de 50 mL e 22 mm
de dimetro interno) contendo 0,2 mL da soluo padro
alcolica de clcio (100 ppm Ca). Aguardar 1 minuto,
adicionar mistura de 1 mL de cido actico diludo e 15
mL da soluo da amostra preparada como descrito na
monografa.
Preparao padro: transferir para um tubo de Nessler as
mesmas quantidades de oxalato de amnio SR e da soluo
padro alcoolica de clcio (100 ppm Ca) conforme
preparao amostra. Aguardar 1 minuto, adicionar mistura
de 10 mL da soluo padro de clcio (10 ppm Ca), 1 mL
de cido actico diludo e 5 mL de gua destilada.
Procedimento: Homogeneizar as preparaes nos tubos
de Nessler. Aps 15 minutos, a turbidez da preparao
amostra no deve ser mais intensa do que a da padro.
Alternativamente, proceder o preparo da amostra conforme
indicado na monografa e efetuar a determinao de
clcio por Espectrometria de absoro atmica com
chama (5.2.13.1.1) empregando chama do tipo ar-
acetileno, comprimento de onda de 422,7 nm e resoluo
do monocromador de (0,7 0,1) nm; ou Espectrometria
de emisso tica com plasma indutivamente acoplado
(5.2.13.2.2) empregando o comprimento de onda de
393,366 nm.
5.3.2.8 ENSAIO LIMITE PARA MAGNSIO
Preparao amostra: adicionar 0,1 g de tetraborato sdico
a 10 mL da soluo da amostra preparada conforme o
especifcado na monografa. Ajustar o pH entre 8,8-9,2
com cido clordrico SR ou hidrxido de sdio SR.
Preparao padro: adicionar 0,1 g de tetraborato sdico
a uma mistura de 1 mL da soluo padro de magnsio (10
ppm Mg) e 9 mL de gua destilada. Proceder conforme
preparao amostra.
Procedimento: transferir a preparao amostra para um
funil de separao e extrair 2 vezes, agitando por 1 minuto
cada vez, com 5 mL de uma soluo de hidroxiquinolina a
0,1% (p/v) em clorofrmio. Descartar as fases orgnicas e
adicionar fase aquosa 0,4 mL de butilamina e 0,1 mL de
trietanolamina. Ajustar o pH entre 10,5-11,5 se necessrio.
Adicionar 4 mL da soluo de hidroxiquinolina a 0,1% (p/v)
em clorofrmio e agitar por 1 minuto. Utilizar a fase inferior
para a comparao. Proceder da mesma maneira com a
preparao padro. A colorao produzida na preparao
Alternativamente, proceder determinao de magnsio por
Espectrometria de absoro atmica com chama (5.2.13.1.1)
empregando chama do tipo ar-acetileno, comprimento
de onda de 285,2 nm e resoluo do monocromador de
(1,2 0,1) nm; ou Espectrometria de emisso tica com
plasma indutivamente acoplado (5.2.13.2.2) empregando
comprimento de onda de 285,213 nm.
5.3.2.9 ENSAIO LIMITE PARA MAGNSIO
E METAIS ALCALINOS TERROSOS
A 200 mL de gua destilada adicionar 0,1 g de cloridrato
de hidroxilamina, 10 mL de tampo cloreto de amnio pH
10, 1 mL de soluo de sulfato de zinco 0,1 M e cerca de 15
mg de negro de eriocromo T. Aquecer a, aproximadamente,
40 C. Titular com EDTA dissdico 0,01 M SV at a
colorao violeta mudar para azul. Adicionar a essa soluo
quantidade recomendada da amostra dissolvida em 100
mL de gua destilada ou preparada de modo descrito na
monografa. Se a colorao da soluo mudar para violeta,
titular com EDTA dissdico 0,01 M SV at a viragem para
azul. O volume da soluo de EDTA dissdico 0,01 M SV
utilizado na segunda titulao no deve exceder o volume
estabelecido na monografa.
5.3.2.10 ENSAIO LIMITE PARA
ALUMNIO
Soluo padro de alumnio (200 ppm Al): tratar uma
poro de alumnio metlico com cido clordrico 6 M a
80 C por poucos minutos. Pesar 100 mg da poro tratada
e dissolver em mistura de 10 mL de cido clordrico e 2
mL de cido ntrico, a 80 C por, aproximadamente, 30
minutos. Manter sob aquecimento at reduo do volume
para cerca de 4 mL. Arrefecer at temperatura ambiente
e adicionar 4 mL de gua destilada. Deixar evaporar at
obter o volume de 2 mL. Arrefecer e transferir a soluo,
quantitativamente, usando gua destilada, para balo
volumtrico de 100 mL. Completar o volume com gua
destilada e homogeneizar. Pipetar 20 mL dessa soluo
e transferir para outro balo volumtrico de 100 mL.
Completar o volume com gua destilada e homogeneizar.
Soluo padro de alumnio (10 ppm Al): transferir,
imediatamente antes do uso, 5 mL da Soluo padro de
alumnio (200 ppm Al) para balo volumtrico de 100 mL;
completar o volume com gua destilada e homogeneizar.
Soluo padro de alumnio (2 ppm Al): transferir,
imediatamente antes do uso, 1 mL da Soluo padro de
alumnio (200 ppm Al) para balo volumtrico de 100 mL;
completar o volume com gua destilada e homogeneizar.
5
Soluo diluente de cido ntrico: transferir 40 mL de cido
ntrico para balo volumtrico de 1000 mL; completar o
volume com gua destilada e homogeneizar.
MTODO I
Preparao amostra: utilizar a quantidade especifcada da
amostra, ou calculada, preparada conforme especifcado na
monografa.
Preparao padro: utilizar o volume especifcado, ou
calculado, da Soluo padro de alumnio (10 ppm ou 2
ppm).
Procedimento: transferir para funis de separao as
preparaes amostra e padro e extrair com 3 pores (20,
20 e 10 mL) da soluo de hidroxiquinolina a 0,5% (p/v)
em clorofrmio. Juntar os extratos clorofrmicos e diluir
para 50 mL com clorofrmio. Realizar uma preparao em
branco utilizando o mesmo solvente. Medir a intensidade
da fuorescncia (5.2.15) da preparao amostra (I
1
), da
preparao padro (I
2
) e da preparao em branco (I
3
)
utilizando comprimento de onda de excitao de 392 nm
e monocromador ajustado em 518 nm. A fuorescncia da
preparao amostra (I
1
), descontada da preparao em
branco (I
3
) no deve ser maior do que a da preparao
padro (I
2
), descontada da preparao em branco (I
3
).
MTODO II
Preparao amostra: transferir quantidade da amostra
especifcada na monografa, ou calculada, para balo
volumtrico de plstico de 100 mL, adicionar 50 mL de
gua destilada e submeter ao ultrassom durante 30 minutos.
Adicionar 4 mL de cido ntrico; completar o volume com
gua destilada e homogeneizar.
Preparaes padro: preparar solues contendo 0,01,
0,02 e 0,04 ppm de alumnio, imediatamente antes do uso,
por meio da diluio da Soluo padro de alumnio (1
ppm Al) com Soluo diluente de cido ntrico em balo
volumtrico de 100 mL.
Procedimento: determinar as absorvncias das preparaes
padro e da preparao amostra por Espectrometria
de absoro atmica com forno de grafte (5.2.13.1.4)
equipado com lmpada de ctodo oco de alumnio. Ajustar
o comprimento de onda em 309,3 nm empregando uma
resoluo do monocromador de (0,7 0,1) nm. Utilizar a
Soluo diluente de cido ntrico como branco e proceder
a calibrao conforme descrito em (5.2.13.1.4) Mtodo
I (Calibrao direta). Determinar a concentrao de Al
na preparao amostra em ppm. Calcular a quantidade
de Al na amostra em ppm, por meio da multiplicao da
concentrao da preparao amostra em ppm por 100/P
no qual P a massa em gramas da substncia utilizada na
preparao amostra.
MTODO III
Proceder conforme descrito no Mtodo II e efetuar a
determinao por Espectrometria de emisso tica com
plasma indutivamente acoplado (5.2.13.2.2). Proceder de
acordo com as especifcaes do fabricante. Recomenda-se
a utilizao do comprimento de onda de 396,153 nm.
5.3.2.11 ENSAIO LIMITE PARA FOSFATOS
Soluo padro de fosfato (5 ppm): dissolver 0,716 g
de fosfato de potssio monobsico em gua destilada
e completar o volume para 1000 mL. Transferir 10 mL
dessa soluo para um balo volumtrico de 1000 mL e
completar o volume com gua destilada.
Preparao amostra: transferir a quantidade da amostra
especifcada, ou calculada, ou o volume da soluo da
amostra preparada conforme descrito na monografa para
solvente adequado. Transferir essa soluo para bquer
e adicionar 4 mL de reagente sulfomolbdico, 0,1 mL de
cloreto estanoso SR e homogeneizar.
Preparao padro: transferir 2 mL da Soluo padro
de fosfato (5 ppm) para balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com solvente adequado. Continuar
conforme descrito na preparao amostra.
Procedimento: aguardar 10 minutos, transferir 20 mL do
contedo das preparaes amostra e padro para tubos de
Nessler (capacidade de 50 mL e 22 mL de dimetro interno)
e comparar a colorao das preparaes. A colorao
produzida na preparao amostra no mais intensa do que
na padro.
Cromatografa inica (5.2.17.4.1) utilizando cromatgrafo
equipado com coluna de troca inica para separao
de nions e detector por condutividade com supresso
qumica.
5.3.2.12 ENSAIO LIMITE PARA CHUMBO
Soluo padro de chumbo diluda (1 ppm Pb): diluir
volume exatamente medido da Soluo padro de chumbo
(10 ppm Pb) preparada conforme descrito em Ensaio limite
para metais pesados (5.3.2.3) com 9 volumes de cido
ntrico a 1% (v/v).
Nota: armazenar todas as solues de reagentes em
recipientes de vidro de borossilicato. Enxaguar toda a
vidraria com soluo de cido ntrico a 20% (v/v) e, em
seguida, com gua destilada.
Preparao amostra: na ausncia de especifcao na
monografa, preparar a soluo amostra como segue.
Proceder cautelosamente, pois algumas substncias podem
reagir com violncia quando digeridas com perxido de
hidrognio. Transferir 1 g da amostra para frasco adequado,
acrescentar 5 mL de cido sulfrico, algumas prolas de
vidro e aquecer em placa de aquecimento, em capela, at
evoluo de fumos. Podem ser utilizados outros meios de
aquecimento adequados. Se necessrio, adicionar excesso
de cido sulfrico para umedecer completamente a amostra
5
no ultrapassando um total de 10 mL. Acrescentar, gota a
gota, com cuidado, perxido de hidrognio concentrado,
aquecendo entre as adies, permitindo que a reao
ocorra. Adicionar as primeiras gotas aos poucos e muito
lentamente misturando cuidadosamente para prevenir
reao rpida e interrompendo o aquecimento se ocorrer
excessiva formao de espuma. Agitar a soluo no frasco
para permitir a reao da amostra aderida nas paredes.
Acrescentar perxido de hidrognio sempre que a mistura
se tornar marrom ou escurecer. Continuar a digesto at
que vapores de trixido de enxofre sejam desprendidos
abundantemente para que a reao seja completa e
a soluo torne-se incolor. Resfriar, cautelosamente,
com o acrscimo de 10 mL de gua destilada, evaporar
novamente at que o trixido de enxofre se desprenda por
completo e resfriar. Repetir esse procedimento com 10 mL
de gua destilada para remover qualquer trao de perxido
de hidrognio. Cuidadosamente, diluir com 10 mL de gua
destilada e resfriar.
Nota: se, antes de aquecer, a amostra reagir muito
rapidamente e comear a fumegar com 5 mL de cido
sulfrico, deve-se utilizar 10 mL de cido sulfrico a 50%
(v/v) a frio e acrescentar algumas gotas de perxido de
hidrognio antes de aquecer.
Preparao padro: utilizar volume especifcado, ou
calculado da Soluo padro de chumbo diluda (1 ppm
Pb). Submeter ao mesmo tratamento da preparao
amostra.
Procedimento: transferir as preparaes amostra e padro
para um funil de separao usando 10 mL de gua destilada.
Acrescentar 6 mL de citrato de amnio SR e 2 mL de
cloridrato de hidroxilamina SR1 (para a determinao de
chumbo em sais de ferro usar 10 mL de citrato de amnio
SR). Adicionar duas gotas de vermelho de fenol a 0,1%
(p/v) em etanol, alcalinizar com hidrxido de amnio at
colorao vermelha e homogeneizar. Resfriar a soluo, se
necessrio, e acrescentar 2 mL de cianeto de potssio SR.
Extrair, imediatamente, com pores de 5 mL da soluo
extratora de ditizona e recolher cada extrato para outro
funil de separao at que a soluo de ditizona mantenha
sua cor verde. Agitar as solues de ditizona combinadas
durante 30 segundos com 20 mL de cido ntrico a 1%
(v/v) e descartar a fase orgnica. Adicionar soluo cida,
5 mL da soluo padro de ditizona e 4 mL de cianeto-
amnia SR, e agitar durante 30 segundos. A colorao
violeta produzida na fase orgnica da preparao amostra
no mais intensa do que na padro.
Alternativamente, preparar a amostra conforme descrito em
Ensaio limite para metais pesados (5.3.2.3) e determinar
chumbo por uma das tcnicas de Espectrometria atmica
(5.2.13).
5.3.3 ENSAIOS QUMICOS
5.3.3.1 TITULAES POR DIAZOTAO
Esse tipo de titulao muito til na anlise de frmacos
que contm grupo amino aromtico primrio tais como
as sulfonamidas e os anestsicos locais derivados do
cido aminobenzico. A titulao realizada com soluo
volumtrica de nitrito de sdio, em meio cido, fornecendo
o sal de diaznio da amina aromtica primria.
So utilizados dois mtodos de quantifcao.
No Mtodo I, utilizada soluo de amido iodetado ou
papel de amido iodetado como indicador. O excesso de
cido nitroso converte o iodeto a iodo, que em contato com
o amido resulta a cor azul caracterstica.
No Mtodo II, o ponto fnal da titulao determinado
potenciometricamente. Nesse mtodo, empregam-se
eletrodos de platina-calomelano ou platina-platina com
diferena de potencial e sensibilidade adequados. Aps o
uso, deve-se imergir os eletrodos por alguns segundos em
cido ntrico SR ao qual se adicionou 1 mg/mL de cloreto
frrico e, em seguida, lavar com gua destilada.
MTODO I
Tcnica - Pesar, exatamente, cerca de 500 mg da
sulfonamida ou a quantidade especifcada na monografa
para outras aminas aromticas primrias. Transferir para
erlenmeyer de 250 mL, e adicionar, com agitao, 100
mL de cido clordrico SR para solubilizar a amostra.
Em seguida, adicionar cerca de 30 mL de gua e resfriar
em banho de gelo at aproximadamente 15 C. Titular,
sob agitao constante, com soluo de nitrito de sdio
0,1 M SV previamente padronizada com sulfanilamida
SQR. Atinge-se o ponto fnal de titulao quando uma
gota da soluo do erlenmeyer formar, imediatamente,
uma colorao azul com uma soluo de amido iodetado
SI em placa de toque ou sobre papel de amido iodetado
SI umedecido. Para se comprovar o trmino da titulao,
repetir a prova de toque 2 minutos aps a ltima adio.
Essa deve continuar positiva.
O peso, em mg, da amostra correspondente a cada mL
de nitrito de sdio 0,1 M SV encontra-se descrito na
monografa de cada frmaco.
MTODO II
Tcnica - Pesar, exatamente, cerca de 500 mg da
sulfonamida, ou o equivalente em massa do princpio ativo
5
para as especialidades farmacuticas, ou a quantidade
especifcada na monografa para outras aminas aromticas
primrias. No caso de injetveis ou outras formas lquidas
deve pipetar-se quantidade equivalente a 500 mg de
princpio ativo ou a quantidade especifcada na monografa.
Transferir para erlenmeyer e adicionar 20 mL de cido
clordrico SR e 50 mL de gua. Agitar at dissoluo.
Resfriar at aproximadamente 15 C mantendo essa
temperatura no curso da titulao. Acrescentar catalisador
adequado quando especifcado. Titular, lentamente e
sob agitao magntica, com nitrito de sdio 0,1 M SV
previamente padronizado com sulfanilamida SQR.
O peso, em mg, da amostra que equivale a cada mL de nitrito
de sdio 0,1 M SV adicionado encontra-se especifcado na
monografa de cada frmaco.
Nota: a ponta da bureta deve permanecer pouco acima da
superfcie da soluo a fm de evitar a oxidao do nitrito
de sdio. Deve-se agitar com cuidado evitando a formao
de um turbilho de ar abaixo da superfcie. Quando a
titulao estiver a, aproximadamente, 1 mL do ponto fnal
calculado, acrescentar volumes de 0,1 mL em intervalos
de, no mnimo, 1 minuto.
NITROGNIO PELO METODO DE
KJELDAHL
O mtodo de Kjeldahl descrito na forma de macro e de
semimicrotcnica destina-se determinao de nitrognio
em substncias relativamente lbeis como amidas e
aminas. Compreende duas fases: (1) digesto cataltica da
substncia orgnica em cido sulfrico com a decorrente
converso quantitativa do nitrognio em sulfato de
amnio; (2) destilao do digesto alcalinizado e titulao
volumtrica da amnia liberada no processo.
5.3.3.2.1 Macrodeterminao (mtodo I)
Transferir, exatamente, cerca de 1 g de amostra para
balo de Kjeldahl de 500 mL. Adicionar 10 g de sulfato
de potssio, 0,5 g de sulfato cprico e 20 mL de cido
sulfrico. Inclinar o balo cerca de 45
o
e aquecer,
lentamente, mantendo a temperatura abaixo do ponto de
ebulio enquanto houver desenvolvimento de espuma.
Aumentar a temperatura at a ebulio vvida do cido e
prosseguir com o aquecimento por 30 minutos at a mistura
fcar lmpida e adquirir cor verde clara. Resfriar, adicionar
150 mL de gua, misturar e resfriar novamente. Adicionar,
cuidadosamente, 100 mL da soluo de hidrxido de
sdio 40% (p/v) possibilitando que o lcali escorra pela
parede do balo e forme fase independente sob a soluo
cida. Adicionar pequena quantidade de zinco granulado;
imediatamente, conectar o balo ao bulbo de isolamento
previamente fxado ao condensador, e imergir o tubo
coletor em 100 mL de soluo de cido brico 5% (p/v) em
erlenmeyer de 500 mL. Homogeneizar a mistura no balo
agitando suavemente e destilar at recolher no erlenmeyer
cerca de 80% do volume contido no balo. Adicionar
cerca de 3 gotas de mistura de vermelho de metila com
azul de metileno SI ao erlenmeyer e titular com cido
sulfrico 0,25 M SV. Realizar ensaio em branco e fazer
as correes necessrias. Cada mL de cido sulfrico 0,25
M SV equivale a 7,003 mg de nitrognio. Para amostras
com baixo teor de nitrognio, empregar cido sulfrico
0,05 M SV. Nesse caso, cada mL equivale a 1,401 mg de
nitrognio.
Na presena de nitratos ou nitritos
Transferir quantidade exatamente pesada da amostra
contendo cerca de 150 mg de nitrognio para balo de
Kjeldahl de 500 mL e adicionar 25 mL de cido sulfrico
contendo 1 g de cido saliclico dissolvido. Misturar
e aguardar durante cerca de 30 minutos agitando com
frequncia. Adicionar 5 g de tiossulfato de sdio, misturar
e, em seguida, adicionar 0,5 g de sulfato cprico. Prosseguir
conforme indicado no procedimento anterior a partir de
Inclinar o balo cerca de 45
o
....
Quando o teor de nitrognio na amostra exceder 10%,
adicionar, previamente digesto, 0,5 a 1,0 g de cido
benzico para facilitar a decomposio da substncia.
5.3.3.2.2 Semimicrodeterminao (mtodo II)
Transferir quantidade exatamente pesada da substncia
correspondente a 2 - 3 mg de nitrognio para balo
de Kjeldahl compatvel com o aparelho. Adicionar 1
g de sulfato de potssio e 0,1 g de sulfato cprico e, se
necessrio, lavar os slidos aderentes ao gargalo com
fno jato de gua. Adicionar 7 mL de cido sulfrico e,
em seguida, 1 mL de perxido de hidrognio a 30% (v/v)
de modo que os lquidos escorram pela parede do balo.
Aquecer o frasco e manter a digesto at desaparecimento
dos resduos de carbonizao e a preparao azul clara
estiver perfeitamente lmpida. Cuidadosamente, adicionar
70 mL de gua e resfriar. Conectar o balo ao aparelho de
destilao e, atravs do funil, adicionar 30 mL de soluo
de hidrxido de sdio 40% (p/v) possibilitando que o lcali
escorra pela parede do balo e forme fase independente sob
a soluo cida. Lavar o funil com gua e, imediatamente,
iniciar destilao. Recolher o destilado em erlenmeyer
de 250 mL contendo 15 mL de soluo de cido brico
5% (p/v), quantidade de gua sufciente para imergir o tubo
coletor e 3 gotas de mistura de vermelho de metila com
azul de metileno SI. Destilar at que o volume de destilado
atinja 80 a 100 mL; remover o frasco coletor, lavar as
paredes com pequena quantidade de gua e titular com
cido sulfrico 0,005 M SV. Realizar ensaio em branco e
fazer as correes necessrias. Cada mL de cido sulfrico
0,005 M SV equivale a 0,1401 mg de nitrognio.
5
5.3.3.3 MTODO DE COMBUSTO
Os mtodos de combusto consistem na decomposio
de substncias orgnicas na presena de oxignio, atravs
da oxidao da matria orgnica para a subsequente etapa
de identifcao ou doseamento. Estes mtodos podem
ser aplicados de duas maneiras: mtodo do frasco de
combusto em presso atmosfrica e mtodo de combusto
iniciada por micro-ondas em sistema pressurizado.
MTODO DO FRASCO DE COMBUSTO EM
PRESSO ATMOSFRICA
Aparelhagem
Compreende um frasco cnico de vidro borossilicato
refratrio resistente, com volume interno de 500 mL e
tampa de vidro esmerilhada. Para determinao de for,
emprega-se frasco de quartzo. A base da tampa esmerilhada
que acompanha o frasco apresenta um prolongamento de
vidro no qual fxado um fo de platina com extremidade
composta por uma suporte de platina onde introduzida a
amostra (Figura 1).
Amostras slidas
Pesar a quantidade especifcada na monografa em pedao
de papel de fltro de formato e dimenses apropriadas,
dobrar e prender na tela de platina, deixando livre uma
parte da extremidade. Colocar no interior do frasco a
soluo absorvedora especifcada e borbulhar oxignio
nesta soluo para saturar o interior do frasco. Fazer
a ignio da extremidade do papel (veja Nota 1) e, sem
demora, colocar a tampa no frasco, mantendo-o em posio
com frmeza para evitar seu deslocamento devido presso
exercida pelos gases de combusto. Inverter o frasco para
assegurar vedao lquida na tampa, tomando a precauo
de evitar que material incompletamente queimado caia no
lquido. Concluda a combusto, agitar o frasco, at que
os gases formados no processo desapaream. Decorridos
15 a 30 minutos, colocar pequena poro de gua na
borda do frasco e remover a tampa, permitindo que esta
gua fua para o interior do frasco, lavando as paredes do
gargalo. Lavar tampa, gargalo, fo e rede de platina com
gua e juntar estas guas de lavagem soluo absorvente.
A soluo obtida segundo este procedimento designada
soluo amostra. Para o preparo do branco, proceder da
mesma maneira, omitindo a amostra (Nota 2).
Amostras lquidas
Embalar pequena quantidade de algodo absorvente em
pedao de papel de fltro e pesar, neste dispositivo, a
quantidade especifcada da amostra, que absorvida no
algodo. Aps a fxao do algodo envolvido no papel de
fltro grade de platina, proceder combusto tal como
descrita para amostras slidas.
Determinao de cloro e bromo
Queimar a quantidade especifcada de substncia sob
exame, empregando como soluo absorvente 20 mL
de gua acrescidos de 1 mL de perxido de hidrognio
concentrado e 3 mL de hidrxido de sdio 0,1 M.
Concluda a absoro, juntar 2 gotas de azul de bromofenol
e quantidade sufciente de cido ntrico 0,1 M para virar
o indicador de azul para amarelo, incorporando 0,5 mL
de excesso. Se a substncia em anlise contiver enxofre,
adicionar algumas gotas de nitrato de brio 0,005 M.
Juntar 100 mL de etanol aproveitando a adio para lavar
as paredes internas do frasco e, em seguida, 15 gotas de
difenilcarbazona SI. Titular com nitrato de mercrio(II)
0,005 M SV at colorao rsea permanente. Cada mL de
nitrato de mercrio(II) 0,005 M SV equivale a 0,3550 mg
de cloro ou a 0,79904 mg de bromo.
Alternativamente, proceder conforme descrito
em Cromatografa de ons (5.2.17.4.1), utilizando
cromatgrafo equipado com coluna de troca aninica e
detector por condutividade com supresso qumica.
Determinao de iodo
exame da forma descrita, empregando como lquido
absorvente 10 mL de gua acrescidos de 2 mL de hidrxido
de sdio M. Concluda a absoro, juntar 1 mL de soluo
de hidrato de hidrazina 4 M em gua, tampar novamente o
frasco e agitar at descoramento da soluo. Em seguida,
proceder como descrito em Determinao de cloro e bromo
a partir de Concluda a absoro.... Cada mL de nitrato
de mercrio (II) 0,005 M SV equivale a 1,269 mg de iodo.
cromatgrafo equipado com coluna de troca inica para
separao de nions e detector por condutividade com
supresso qumica.
Determinao de for
Queimar quantidade especifcada de substncia sob exame
da forma descrita, empregando como soluo absorvedora
15 mL de gua. Completada a operao, lavar tampa, fo
de platina, tela de platina e paredes do frasco (Nota 3) com
40 mL de gua. Adicionar 0,6 mL de alizarina SI e, em
seguida, gota a gota, hidrxido de sdio 0,1 M at que a cor
mude de rosado para amarelo. Adicionar 5 mL de soluo
tampo acetato cido clordrico pH 3,5 e titular com
nitrato de trio 0,005 M SV at que a cor amarela mude
para amarelo rosado. Cada mL de nitrato de trio 0,005 M
SV equivale a 0,380 mg de for. Havendo difculdade na
identifcao do ponto de viragem, fazer ensaio preliminar
com soluo padronizada de for inorgnico.
cromatgrafo equipado com coluna de troca inica para
separao de nions e detector por condutividade com
supresso qumica.
5
Determinao de enxofre
exame da forma descrita, empregando como soluo
absorvedora 12,5 mL de perxido de hidrognio SR.
Concluda a absoro, juntar 40 mL de gua, aproveitando
para lavar tampa, fo e tela de platina e paredes do frasco.
Ferver a soluo por 10 minutos, esfriar, adicionar 2 mL de
cido actico SR e 20 mL de etanol. Titular com nitrato de
brio 0,01 M SV, usando 2 gotas de torina SI e 2 gotas de
cloreto de metiltionnio SI como indicador at que, a cor
amarela mude para rsea. Cada mL de nitrato de brio 0,01
M SV equivale a 0,3206 g de enxofre.
cromatgrafo equipado com coluna de troca aninica e
detector por condutividade com supresso qumica.
Notas:
1. Recomenda-se ao analista usar culos de segurana e
proteo adequada para evitar que estilhaos de frasco
o atinjam em caso de acidente. Atualmente, existem
comercialmente sistemas que evitam a ignio manual,
empregando radiao infravermelha ou corrente eltrica,
diminuindo os riscos ao operador.
2. Assegurar-se de que os frascos de combusto estejam
limpos e isentos de traos de solventes orgnicos.
3. Substncias contendo for fornecem teores baixos se a
combusto for executada em frascos de vidro borossilicato.
Obtm-se resultados satisfatrios em frascos de vidro-soda
isento de boro mas o rendimento ideal implica no emprego
de frascos de quartzo.
Figura 1 - Frasco de oxignio para
determnao de enxofre e halognios.
MTODO DE COMBUSTO INICIADA POR MICRO-
ONDAS EM SISTEMA PRESSURIZADO
Aparelhagem
Compreende um frasco quartzo com volume interno de 80
mL e presso operacional de trabalho de 80 atm. A tampa
que acompanha o frasco de polmero fuorado, que possui
um orifcio para liberar os gases no caso da decomposio
por via mida, o qual utilizado para a pressurizao
do sistema com oxignio. Um suporte de quartzo para a
amostra inserido no interior do frasco de decomposio.
Amostras slidas
Pesar a quantidade especifcada de substncia e prensar
na forma de comprimido (aproximadamente 1,2 cm de
dimetro). Colocar a amostra sobre o suporte de quartzo
contendo um pedao de papel de fltro (aproximadamente
10 mg) umedecido com nitrato de amnio 6 M. Colocar
no interior do frasco a soluo absorvente especifcada e
inserir o suporte contendo a amostra e o papel no interior
do frasco. Fechar o sistema adequadamente, conforme
especifcaes do fabricante, e pressurizar com 20 atm de
oxignio. Proceder a insero dos frascos de decomposio
no rotor do forno de micro-ondas e, sem demora, colocar
o rotor na cavidade do forno, iniciando imediatamente a
irradiao. Iniciada a ignio, utilizando potncia mxima,
a irradiao pode ser continuada por mais 5 min, para
que o refuxo da soluo absorvente acontea, permitindo
a completa absoro dos analitos na soluo. Aps o
resfriamento (20 min), o frasco de decomposio pode ser
aberto e a soluo transferida para recipiente apropriado
com auxlio de gua e aferida a volume conhecido, para
a subsequente identifcao ou determinao dos analitos
de interesse. A soluo obtida segundo este procedimento
designada soluo amostra. Para o preparo do branco,
proceder da maneira descrita, omitindo a amostra.
Determinao de cloro e bromo
Prosseguir conforme descrito em Determinao de cloro
e bromo no Mtodo do Frasco de Combusto em Presso
Atmosfrica.
Determinao de iodo
Prosseguir conforme descrito em Determinao de
iodo no Mtodo do Frasco de Combusto em Presso
Atmosfrica.
Determinao de for
for no Mtodo do Frasco de Combusto em Presso
Atmosfrica.
Determinao de enxofre
enxofre no Mtodo do Frasco de Combusto em Presso
Atmosfrica.
5.3.3.4 TITULAES
COMPLEXOMTRICAS
Complexometria o mtodo analtico volumtrico que
compreende a titulao de ons metlicos (A) com agente
complexante (B). A reao envolvida do seguinte tipo:
5
A
n+
+ B
m-
= AB
n-m
Muitos complexantes denominados quelantes so capazes
de formar estruturas cclicas por meio da coordenao
simultnea de vrios grupos com o on metlico. O cido
edtico (cido etilenodiaminotetractico, EDTA) o
exemplo tpico. Esse cido o agente complexante mais
utilizado. O EDTA forma complexos 1:1 com muitos
metais com estado de oxidao superior a +1 sendo esses
complexos muito solveis em gua.
A estabilidade dos complexos com EDTA dependente do
pH para os diversos metais. Logo condies ideais de pH
devem ser estabelecidas para a anlise por complexao
para cada metal.
Na complexometria, o ponto de viragem pode ser
determinado visual, ou instrumentalmente. Empregam-
se indicadores complexantes que exibem profundas
alteraes de cor mediante coordenao com o metal.
Exemplos tpicos so: alaranjado de xilenol, calcona e
negro de eriocromo T. O indicador complexomtrico atua
de forma competitiva com o agente titulante, logo deve
ser deslocado efetivamente por este nas proximidades do
ponto de equivalncia.
PROCEDIMENTOS
Alumnio
Pesar, exatamente, a quantidade da substncia indicada
na monografa, adicionar 50 mL de gua e acidifcar, se
necessrio, com quantidade mnima de cido clordrico
M, salvo se a monografa indicar outro tipo de solvente.
Adicionar 25 mL de edetato dissdico 0,1 M SV e 10 mL da
mistura, em volumes iguais, de acetato de amnio 2 M com
cido actico 2 M. Aquecer a soluo at ebulio e manter
por 2 minutos. Resfriar. Adicionar 50 mL de etanol e 3 mL
de soluo recm-preparada de ditizona a 0,025% (p/v) em
etanol. Titular o excesso de edetato dissdico com sulfato
de zinco 0,1 M SV at mudana da cor de azul-esverdeada
para violeta-rsea. Cada mL de edetato dissdico 0,1 M SV
equivalente a 2,698 mg de alumnio.
Bismuto
na monografa e dissolver em quantidade mnima de
cido ntrico 2 M. Adicionar 50 mL de gua e soluo
concentrada de amnia, gota a gota com agitao, at
que a preparao fque turva. Adicionar 0,5 mL de cido
ntrico. Aquecer a 70 C at o desaparecimento da turbidez
da preparao. Adicionar algumas gotas de alaranjado de
xilenol SI. Titular, lentamente, com edetato dissdico 0,05
M SV at mudana da cor de violeta-rsea para amarela.
Cada mL de edetato dissdico 0,05 M SV equivalente a
10,45 mg de bismuto.
Clcio
na monografa, dissolver em alguns mililitros de gua e
acidifcar, se necessrio, com quantidade mnima de cido
clordrico 2 M. Diluir para 100 mL com gua. Titular
com edetato dissdico 0,05 M SV at cerca de 2 mL antes
do ponto de equivalncia previsto. Adicionar 4 mL de
hidrxido de sdio 10 M e gotas de calcona SI. Prosseguir
a titulao at que a cor mude de rsea para azul intensa.
Cada mL de edetato dissdico 0,05 M SV equivalente a
2,004 mg de clcio.
Chumbo
na monografa e dissolver em 5 a 10 mL de gua, ou em
quantidade mnima de cido actico 5 M. Diluir para 50
mL com gua. Adicionar gotas de alaranjado de xilenol SI
e metenamina sufciente (cerca de 5 g) para que a soluo
adquira cor violeta. Titular com edetato dissdico 0,05 M
SV, ou 0,1 M SV, conforme indicado na monografa at
mudana da cor de violeta para amarela. Cada mL de
edetato dissdico 0,05 M SV equivalente a 10,36 mg
de chumbo. Cada mL de edetato dissdico 0,1 M SV
equivalente a 20,72 mg de chumbo.
Magnsio
quantidade mnima de cido clordrico 2 M. Diluir com
gua para 50 mL. Adicionar 10 mL de tampo de cloreto de
amnio pH 10,0, e algumas gotas de negro de eriocromo T
SI. Titular com edetato dissdico 0,05 M SV ou 0,1 M SV,
conforme indicado na monografa, at mudana da cor de
violeta para azul. Cada mL de edetato dissdico 0,05 M SV
equivalente a 1,215 mg de magnsio. Cada mL de edetato
dissdico 0,1 M SV equivalente a 2,431 mg de magnsio.
Zinco
quantidade mnima de cido actico 5 M. Diluir para 50
mL com gua. Adicionar gotas de alaranjado de xilenol SI
e metenamina sufciente (cerca de 5 g) para que a soluo
adquira cor violeta. Titular com edetato dissdico 0,05
M SV ou 0,1 M SV, conforme indicado na monografa,
at mudana da cor de violeta para amarela. Cada mL
de edetato dissdico 0,05 M SV equivalente a 3,268
mg de zinco. Cada mL de edetato dissdico 0,1 M SV
equivalente a 6,536 mg de zinco.
5.3.3.5 TITULAES EM MEIO NO
AQUOSO
Os frmacos que so bases ou cidos fracos no podem ser
quantifcados em meio aquoso, mas podem ser em meio
no aquoso.
A titulao em meio no aquoso se baseia no conceito
cido / bsico de Brnsted-Lowry, no qual o cido uma
substncia que doa prton e a base aquela que recebe
5
prton. Substncias potencialmente cidas so cidas
somente em presena de base qual possam doar prton e
vice-versa.
O solvente desempenha, por conseguinte, papel muito
importante na determinao do carter cido / bsico de
uma substncia, j que a fora do cido ou da base depende
da capacidade do solvente de receber ou doar prtons.
A gua deveria ser o solvente de escolha, devido fcil
disponibilidade. Entretanto, o cido mais forte que pode
existir em meio aquoso o on hidrnio (H
3
O
+
) e a base
mais forte o on hidrxido (OH
-
), isso conhecido como
efeito nivelador do solvente. No doseamento de cidos ou
bases muito fracos, o titulante deve ser uma base ou cido
muito forte, respectivamente, para que a reao cido-base
ocorra; contudo devido ao efeito nivelador da gua no
possvel titular tais substncias em meio aquoso.
Utilizando solventes fracamente protoflicos como o cido
actico, possvel a titulao de bases muito fracas j que o
on acetnio (CH
3
COOH
2
+
) um cido muito mais forte do
que o on hidrnio. cidos mais fortes do que o on hidrnio
no podem ser diferenciados em meio aquoso, mas podem
em cido actico mostrando que a ordem decrescente para
a fora dos cidos perclrico, bromdrico, sulfrico,
clordrico e ntrico. Analogamente, a titulao de cidos
fracos possvel com o uso de solventes bsicos como a
n-butilamina. O amideto (CH
3
CH
2
CH
2
CH
2
NH
-
) uma
base muito mais forte que o hidrxido.
Os solventes empregados na titulao em meio no aquoso
devem satisfazer certas exigncias: (1) no reagir com a
substncia nem com o titulante; (2) dissolver a substncia
possibilitando, no mnimo, preparo de soluo 0,01 M;
(3) dissolver o produto da titulao - se a precipitao for
inevitvel, o precipitado deve ser compacto e cristalino;
(4) possibilitar, com facilidade, a visualizao do ponto
fnal, seja esse medido com o uso de indicadores ou
potencimetro; (5) ser de baixo custo e de fcil purifcao.
Para a titulao de substncias de carter bsico (aminas,
heterocclicos nitrogenados, compostos de amnio
quaternrio, sais alcalinos de cidos orgnicos e inorgnicos
e alguns sais de aminas) empregam-se solventes de natureza
relativamente neutra, ou cida, sendo o cido actico
glacial o mais utilizado. O anidrido actico reserva-se para
bases muito fracas como amidas. A mistura de dioxana com
cido actico pode ocasionalmente ser utilizada a fm da
reduo da constante dieltrica e consequentemente menor
potencial de ionizao dos cidos favorecendo a reao
de neutralizao. Como titulante emprega-se, geralmente,
a soluo de cido perclrico em cido actico. Outros
titulantes teis so cido perclrico em dioxana; cido
p-toluenossulfnico (cido tsico) e cido fuorsulfnico
so geralmente utilizados com solventes aprticos como
clorofrmio.
Para o doseamento de sais de cidos halogenados (cloridrato,
bromidrato e iodidrato) deve adicionar-se acetato de
mercrio; esse no se dissocia em soluo de cido actico.
O on haleto uma base demasiadamente fraca para reagir
quantitativamente com cido perclrico em cido actico.
Esse on pode ser substitudo, quantitativamente, pelo on
acetato sendo removido na forma de complexo mercrico
que no se dissocia. O acetato, que uma base relativamente
forte em cido actico, pode ser precisamente titulado com
cido perclrico.
Para a titulao de substncias que se comportam como
cidos (haletos de cidos, anidridos de cidos, cidos
carboxlicos, aminocidos, enis, imidas, fenis, pirris e
sulfas) empregam-se como solventes os de natureza bsica
ou aprtica. No doseamento de substncias de acidez
intermediria comum o uso de dimetilformamida. J
no doseamento de cidos fracos empregam-se bases mais
fortes como morfolina, etilenodiamina e n-butilamina. Os
solventes bsicos selecionados, adequadamente, podem
possibilitar a determinao seletiva de mistura de cidos.
Duas classes de titulantes podem ser empregadas para
determinao de substncias cidas: os alcxidos de metais
alcalinos e os hidrxidos de alquilamnio quaternrio. O
metxido de sdio o mais empregado dos alcxidos
em mistura de metanol e tolueno ou metanol e benzeno.
O metxido de ltio em metanol e benzeno utilizado
para os compostos que formam precipitado gelatinoso
nas titulaes com metxido de sdio. O mais utilizado
entre os hidrxidos o de tetrabutilamnio. Com os
hidrxidos de amnio quaternrio como os hidrxidos
de tetrabutilamnio e o de trimetilexadecilamnio (em
mistura de benzeno e metanol ou lcool isoproplico) h a
vantagem de que o sal do cido titulado , em geral, solvel
no meio de titulao.
importante que se protejam os solventes para a titulao
de substncias cidas da exposio excessiva atmosfera
devido interferncia de CO
2
. Por isso, pode-se empregar
atmosfera inerte ou aparelho especial durante a titulao.
Para determinar a absoro de CO
2
deve-se proceder
titulao do branco que no deve consumir mais que
0,01 mL do metxido de sdio 0,1 M SV por mililitro de
solvente.
O ponto fnal do doseamento pode ser determinado
visualmente pela mudana de cor ou potenciometricamente.
Geralmente a escolha do mtodo baseia-se no pKa dos
analitos em gua. Para bases com o pKa da ordem de 4, a
deteco , em geral, por meio de indicadores; para as que
o pKa est entre 1 e 4, a deteco potenciomtrica. Nesse
caso, o eletrodo de vidro / calomelano til. Em cido
actico, tal eletrodo funciona de acordo com o previsto
teoricamente. No caso do eletrodo de calomelano como
referncia, vantajoso substituir a ponte salina de cloreto
de potssio aquoso por perclorato de ltio 0,1 M em cido
actico glacial para titulao em solventes cidos ou por
cloreto de potssio em metanol para a titulao em solventes
bsicos. A determinao do ponto fnal na quantifcao de
cidos cujo pKa em gua em torno de 7 pode ser feita
com o uso de indicador. Para os cidos com pKa entre 7
e 11 recomenda-se determinao potenciomtrica, ainda
que em certos casos se recorra a indicadores, como violeta
azoico ou o-nitroanilina com menor preciso.
Com o uso de solventes orgnicos, deve-se considerar o
alto coefciente de expanso cbica da maioria desses em
relao ao da gua. Isso porque h possibilidade de ocorrer
5
variao do teor do titulante em meio no aquoso em funo da temperatura. Deve-se corrigir o volume do titulante,
multiplicando-o pelo fator de correo abaixo:
[1 + coefciente de expanso cbica do solvente (t
0
- t)]
em que:
t
0
= temperatura de padronizao do titulante,
t = temperatura de utilizao do titulante.
Os sistemas mais empregados para a titulao em meio no aquoso esto relacionados na Tabela 1.
Tabela 1 - Sistemas para titulao em meio no aquoso.
Tipo de solvente Solvente
a
Indicador Eletrodos
cido (para titulao
de bases ou seus sais)
cido actico glacial Alfazurina 2 G Mercrio / Acetato de mercrio
cido frmico Cloreto de metilrosanilina Vidro / calomelano
cido propinico p-Naftolbenzena Vidro / prata / cloreto de prata
Anidrido actico Verde de malaquita
Cloreto de sulfonila Vermelho de quinaldina
Relativamente neutro
(para titulao
diferencial de bases)
Acetato de etila p-Naftolbenzena Calomelano / prata / cloreto de
prata
Acetonitrila Vermelho de metila Vidro / calomelano
lcoois Alaranjado de metila
Benzeno
Clorobenzeno
Clorofrmio
Dioxana
Bsico (para titulao
de cidos)
n-Butilamina p-Hidroxiazobenzeno Antimnio / calomelano
Dimetilformamida o-Nitroanilina Antimnio / vidro
Etilenodiamina Timolftalena Platina / calomelano
Morfolina Violeta azico Vidro / calomelano
Relativamente neutro
(para titulao
diferencial de cidos)
Acetona Azul de bromotimol Antimnio / calomelano
Acetonitrila Azul de timol Vidro / calomelano
lcool tert-butlico p-Hidroxiazobenzeno Vidro / platina
b
2-Butanona Violeta azico
Isopropilacetona
_____________
a) solventes relativamente neutros de constante dieltrica baixa, tais
como benzeno, clorofrmio, ou dioxana, podem ser utilizados junto com
qualquer solvente cido ou bsico a fm de aumentar a sensibilidade dos
pontos de viragem da titulao.
b) no titulante.
Titulao de substncias bsicas
Dissolver quantidade da substncia indicada na monografa
em quantidade especifcada do solvente, ou mistura de
solventes adequados. No caso da titulao de sais de
cidos halogenados, deve-se adicionar 10 mL de acetato
de mercrio SR. Adicionar o indicador apropriado, ou
no caso de determinao potenciomtrica, empregar
eletrodo adequado titulando com cido perclrico 0,1 M
SV em cido actico. Para realizao do ensaio em branco,
proceder da maneira descrita omitindo a amostra.
Se t
0
for diferente de t corrigir o volume por:
[1 + 0,0011(t
0
t)]
em que:
t
0
= temperatura na qual o titulante foi padronizado,
t = temperatura na qual a titulao foi realizada.
Titulao de substncias cidas
Mtodo I - Dissolver quantidade da substncia especifcada
na monografa no solvente ou mistura de solventes
indicados. Adicionar o indicador recomendado ou, se
for o caso, usar o eletrodo adequado determinao
potenciomtrica. Titular com metxido de sdio 0,1 M
SV previamente padronizada com cido benzoico. Evitar
a absoro de dixido de carbono. Efetuar titulao na
preparao em branco. Fazer as correes necessrias.
Mtodo II - Dissolver quantidade da substncia indicada na
monografa no solvente ou mistura de solventes indicados.
5
Titular com hidrxido de tetrabutilamnio 0,1 M SV
utilizando bureta equipada com absorvedor de dixido de
carbono. Determinar o ponto fnal potenciometricamente.
Efetuar titulao na preparao em branco. Fazer as
correes necessrias.
5.3.3.6 DETERMINAO DE METOXILA
A tcnica destinada determinao de grupos metoxila
em substncias orgnicas por reao com cido ioddrico
concentrado. O iodeto de metila formado separado por
destilao sob corrente contnua de nitrognio ou dixido
de carbono, lavado e absorvido em soluo bromo / actica.
O iodeto de metila convertido a iodo e, em seguida,
titulado com tiossulfato de sdio.
APARELHAGEM
O aparelho (Figura 1) empregado na determinao
da metoxila consiste de balo de fundo redondo com
capacidade de 50 mL ao qual se encontra soldado um brao
lateral capilar com 1 mm de dimetro interno destinado ao
infuxo de gs de arraste inerte - nitrognio ou dixido
de carbono. Ao balo conecta-se por juntas esmerilhadas
um condensador vertical de 24 cm de altura e 12 mm de
dimetro externo em cujo topo est afxado tubo curvo cuja
extremidade capilar com 3 mm de dimetro encontra-se
imersa em frasco de lavagem. A sada do lavador consiste
em tubo de cerca de 10 mm de dimetro que termina em
tubo removvel de 6 mm de dimetro imerso no lquido
absorvente.
Figura 1 - Aparelho empregado na determinao da metoxila.
PROCEDIMENTO
Preparao lavadora: suspender 1 g de fsforo vermelho
em 100 mL de gua.
Lquido absorvente: dissolver 15 g de acetato de potssio
em 150 mL de uma mistura de cido actico glacial e
anidrido actico (9:1). A 145 mL dessa soluo adicionar 5
mL de bromo. Preparar imediatamente antes do uso.
Adicionar preparao lavadora sufciente para cobrir
metade do lavador de gs. Adicionar 20 mL do lquido
absorvente ao tubo de absoro. Adicionar ao balo
quantidade de amostra correspondente a 6,5 mg de metoxila
ou a quantidade indicada na monografa. Adicionar
prolas de vidro e 6 mL de cido ioddrico. Umedecer
a junta esmerilhada com cido ioddrico e conectar ao
condensador de ar. Conectar as duas partes do aparelho
pela junta de bola utilizando graxa de silicone para
vedao. Ajustar o infuxo de gs pelo tubo B sufciente
para formao de duas bolhas por segundo no lavador de
gs E. Aquecer gradativamente por 20 - 30 minutos o balo
at 150 C e manter o aquecimento nessa temperatura por
60 minutos. Aps o resfriamento do balo at temperatura
ambiente sob fuxo de gs, verter a preparao contida
no tubo de absoro em erlenmeyer com capacidade de
500 mL provido de tampa esmerilhada contendo 10 mL
da soluo aquosa de acetato de sdio triidratado (1:5).
Lavar as paredes do tubo com gua, transferir a gua de
lavagem para o erlenmeyer e diluir para 200 mL com
gua. Adicionar cido frmico gota a gota com agitao
at o desaparecimento da cor avermelhada do bromo e
adicionar mais 1 mL de cido frmico. Adicionar 3 g de
iodeto de potssio e 15 mL de cido sulfrico M; tampar,
agitar suavemente e deixar em repouso por 5 minutos.
Titular o iodo liberado com tiossulfato de sdio 0,1 M SV
empregando amido SI como indicador. Realizar titulao
na preparao em branco procedendo da maneira descrita
omitindo a amostra e efetuar correo se necessrio. Cada
mL de Na
2
S
2
O
3
0,1 M SV equivale a 0,5172 mg de metoxila
(CH
3
O).
5
5.3.3.7 DETERMINAO DE DIXIDO DE
ENXOFRE
O mtodo compreende o arraste de SO
2
liberado no
aquecimento da substncia em meio aquoso acidifcado
por corrente de dixido de carbono seguido da absoro
do SO
2
em soluo de perxido de hidrognio. O cido
sulfrico formado no processo titulado com hidrxido de
sdio padronizado.
APARELHAGEM
O aparelho (Figura 1) empregado na determinao de
dixido de enxofre consiste de balo de fundo redondo
tritubulado de capacidade de 1000 a l500 mL. A uma das
sadas laterais do balo acopla-se dispositivo destinado
ao infuxo de dixido de carbono. Funil de adio de
capacidade de 100 mL e condensador de refuxo vertical
ambos providos de juntas esmerilhadas so acoplados a
outra sada lateral e a sada central, respectivamente. Na
extremidade superior do condensador conectado o tubo
de absoro D.
PROCEDIMENTO
Transferir para o balo cerca de 300 mL de gua, fxar o
balo ao aparelho e promover infuxo lento e uniforme de
dixido de carbono durante 15 minutos. Adicionar ao tubo
de absoro 20 mL de perxido de hidrognio 3% (p/v)
SR previamente neutralizado com hidrxido de sdio 0,1
M utilizando como indicador azul de bromofenol SI. Sem
interromper o infuxo do gs, remover momentaneamente
o funil, adicionar ao balo, exatamente, cerca de 50 g de
amostra e 200 mL de gua. Adicionar, gota a gota, 50 mL
de cido clordrico 6 M pelo funil e manter em refuxo por
45 minutos. Transferir, quantitativamente, por lavagem
com gua, o lquido contido no tubo de absoro para
erlenmeyer de 250 mL e titular com hidrxido de sdio
0,1 M SV empregando como indicador azul de bromofenol
SI. Realizar titulao na preparao em branco procedendo
da maneira descrita omitindo a amostra e efetuar correo
se necessrio. Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV
equivale a 3,203 mg de dixido de enxofre.
Figura 1 - Aparelho empregado na determinao de dixido de enxofre.
5
5.3.3.8 DETERMINAO DO LCOOL
5.3.3.8.1 Mtodo por destilao
Esse mtodo deve ser usado na determinao de lcool, em
soluo que contenha lcool, a menos que na monografa
seja especifcado outro mtodo. adequado para anlise da
maioria dos extratos fuidos e tinturas.
PROCEDIMENTO
Nota
Deve ser usado balo destilador com capacidade de duas a
quatro, vezes, o volume, do lquido a ser aquecido.
Durante todas as manipulaes, tomar precauo para
minimizar a perda de lcool por evaporao.
Para evitar a ocorrncia de ebulio violenta, adicionar
fragmentos de material insolvel e poroso, tal como
carbonato de silcio ou prolas de vidro.
Os lquidos que formem demasiada espuma durante a
destilao devem ser tratados previamente com cido
fosfrico, sulfrico ou tnico, at reao fortemente cida
ou com ligeiro excesso de soluo de cloreto de clcio, ou
pequena quantidade de parafna ou ainda leo de silicona,
antes de iniciar a destilao.
A velocidade de destilao deve ser tal que permita a
produo de destilados lmpidos. Destilados turvos devem
ser clarifcados por agitao com talco ou com carbonato
de clcio, precipitados e fltrados. Ajustar a temperatura do
fltrado e determinar o teor de lcool pela densidade.
Mtodo 1
Lquidos com menos de 30% de lcool - Transferir para
aparelho destilador adequado, por meio de pipeta, amostra
de, no mnimo, 35 mL do lquido no qual est sendo
determinado o teor de lcool, registrar a temperatura na qual
o volume foi medido. Adicionar igual quantidade de gua,
destilar e coletar um volume de destilado que seja cerca
de 2 mL menor que o volume inicial da amostra. Ajustar
a temperatura do destilado quela em que foi medida a
amostra e adicionar gua sufciente at obter o volume
inicial da amostra e homogeneizar. O destilado deve ser
lmpido ou, no mximo, levemente turvo. Determinar a
densidade do lquido a 20
o
C. Com o resultado, avaliar a
porcentagem, em volume, de C
2
H
5
OH contido no lquido
examinado, pela Tabela Alcoomtrica.
Mtodo 2
Lquidos com mais de 30% de lcool - Proceder como
indicado no mtodo anterior, com a seguinte modifcao:
diluir a amostra com volume de gua duas vezes maior e
coletar volume de destilado cerca de 2 mL menor que duas
vezes o volume inicial da amostra. Ajustar a temperatura
do destilado quela em que foi medida a amostra e
completar com gua a volume igual a duas vezes o volume
inicial da amostra. Misturar e determinar a densidade a 20
0
C. A proporo de C
2
H
5
OH, em volume, nesse destilado,
avaliada pela densidade, igual metade daquela do
lquido examinado.
Tratamentos especiais
cidos e Bases Volteis - Lquidos contendo bases volteis
devem ser tratados com cido sulfrico diludo SR, at
reao levemente cida. Se estiverem presentes cidos
volteis, preparao dever ser adicionado hidrxido de
sdio SR at reao levemente alcalina.
Glicerol - Lquidos contendo glicerol devem ser
adicionados de volume tal de gua que o resduo, aps a
destilao, contenha, no mnimo, 50% de gua.
Iodo - Solues contendo iodo livre devem ser tratadas
antes da destilao com zinco pulverizado ou descoradas
com quantidade sufciente de soluo de tiossulfato de
sdio 10% (p/v) seguida da adio de algumas gotas de
hidrxido de sdio SR.
Outras substncias volteis - Elixires, tinturas e
preparaes similares que contenham propores
apreciveis de substncias volteis, alm de lcool e gua,
tais como: leos volteis, clorofrmio, ter, cnfora etc.,
devem sofrer, antes da destilao, um dos tratamentos a
seguir.
1) Lquidos com menos de 50% de lcool - Misturar a
amostra de 35 mL, exatamente medidos, com volume igual
de gua, em funil de separao, saturando essa mistura
com cloreto de sdio. Extrair os componentes volteis,
agitando com poro de 25 mL de hexano. Transferir
a camada inferior para um segundo funil de separao
e repetir a extrao com mais duas pores de hexano.
Reunir as pores de hexano e tratar com 3 pores de
10 mL de soluo saturada de cloreto de sdio. Reunir as
solues salinas e destilar recolhendo volume de destilado
correspondente a duas vezes o volume inicial da amostra.
2) Lquidos com mais de 50% de lcool - Medir uma amostra
e diluir com gua de modo que contenha aproximadamente
25% de lcool e que seu volume fnal seja cerca de 35 mL.
A seguir proceder como indicado para lquidos com menos
de 50% de lcool, prosseguindo a partir de saturando essa
mistura com cloreto de sdio.
Na preparao de coldio para destilao, usar gua em
lugar da soluo saturada de cloreto de sdio, indicada
anteriormente. Se no foi empregado na amostra o
tratamento com hexano e o destilado obtido for turvo
(devido presena de leos volteis presentes em pequenas
propores), ele pode ser clarifcado e adequado para a
determinao da densidade, por agitao com cerca de 1/5
de seu volume de hexano ou por fltrao atravs de fna
camada de talco.
5
5.3.3.8.2 Mtodo por cromatografa a gs
Proceder de acordo com as especifcaes gerais para
Cromatografa a gs (5.2.17.5). Usar aparelho efciente
para a determinao quantitativa de lcool.
Soluo padro
Para lquidos contendo mais que 10% de lcool, preparar
duas solues padro de lcool em gua, de maneira que as
concentraes sejam, respectivamente, cerca de 5% abaixo
(soluo padro 1) e cerca de 5% acima (soluo padro 2)
da concentrao de lcool esperada na amostra sob anlise.
Determinar a densidade de cada uma das solues padro
a 20
o
C (5.2.5) e obter a concentrao exata de C
2
H
5
OH
pela Tabela Alcoomtrica. Para lquidos contendo menos
que 10% de lcool, preparar, exatamente, duas solues
padro de lcool, de maneira que as concentraes sejam,
respectivamente, cerca de 1% menor e cerca de 1%
maior que a concentrao, esperada, diluindo com gua.
Determinar as densidades das solues do mesmo modo
que as anteriores.
EQUIPAMENTO
Sob condies tpicas, o instrumento contm uma coluna
de 2 m x 4 mm carregada com macrogol (polietilenoglicol)
400 a 20% em slica cromatogrfca calcinada. A coluna
mantida na temperatura de 100
o
C; o injetor equipado
com fltro para slidos e mantido a 160
o
C; como condutor
usa-se gs inerte, como hlio, fuindo com vazo de cerca
de 60 mL por minuto.
PROCEDIMENTO
Proceder com a amostra e cada uma das solues padro
como segue: transferir 25 mL para recipiente adequado
de rolha esmerilhada, adicionar 1,0 mL do padro interno
(acetona, a menos que especifcado diferentemente na
monografa) para cada 6% de lcool estimado na amostra
e misturar. Adicionar gua somente se for necessrio
para efetuar a soluo. Injetar quantidade, apropriada da
soluo, no aparelho. Calcular a relao entre a rea sob
o pico do lcool e a rea sob o pico do padro interno
nos cromatogramas. Calcular a porcentagem de lcool na
amostra pela frmula
em que
P
1
= porcentagem de lcool na soluo padro 1,
P
2
= porcentagem de lcool na soluo padro 2,
X = relao entre a rea sob o pico do lcool e a rea sob o
pico do padro interno da soluo padro 1,
Y = relao entre a rea sob o pico do lcool e a rea sob o
pico do padro interno da soluo padro 2
Z = relao entre a rea sob o pico do lcool e a rea sob o
pico do padro interno da soluo Amostra.
Se o valor obtido estiver fora da faixa dos valores includos
pelas solues padro, repetir o procedimento usando
aquelas que forneam uma faixa que inclua o valor da
amostra.
5.3.3.9 ANLISE DE AMINOCIDOS
A anlise de aminocidos realizada por meio de duas
etapas: hidrlise das ligaes peptdicas e avaliao de
cada aminocido no hidrolisado resultante.
Tcnica para hidrlise de protenas e peptdeos isolados
1) Transferir quantidade de amostra contendo de 4 a 10
mg de protena para tubo de ensaio de 20 x 150 mm com
tampa de rosca e disco de politetrafuoretileno previamente
lavado com hidrxido de sdio 0,2 M, enxaguado e seco
em estufa.
2) Se a amostra for slida, adicionar 5 de cido clordrico
e 5 mL de gua. Se a amostra for lquida, adicionar cido
clordrico de modo que a concentrao fnal de cido
clordrico seja 6 M.
3) Remover o oxignio do tubo por fuxo de nitrognio
durante 2 - 3 minutos. Fechar em seguida o tubo com disco
e tampa rosquevel.
4) Colocar o tubo na posio vertical em estufa regulada a
110 C 2 C mantendo-o por 22 h.
5) Remover o tubo da estufa e, ainda na vertical, resfri-lo
em gua corrente ou banho de gelo.
6) Transferir, quantitativamente, o contedo do tubo para
gua destilada.
7) Se houver algum resduo ou precipitado, remov-lo por
centrifugao e fltrao em placa de vidro sinterizado, ou
membrana fltrante de 0,45 um de porosidade.
8) Pipetar 5,0 mL da soluo, transferir para balo de fundo
redondo e remover o solvente a presso reduzida a, no
mximo, 50 C.
9) Adicionar ao resduo do balo 10 mL de gua destilada
e re-evaporar. Essa operao deve ser repetida mais duas
vezes, ou at o resduo no apresentar odor de cido
clordrico.
10) Solubilizar a pelcula seca formada pelo hidrolisado
em volume adequado de tampo citrato pH 2,2 (0,20 M em
Na
+
). A soluo resultante de aminocidos deve ento ser
mantida em frasco de vidro, tampado e sob refrigerao at
a realizao da anlise.
Tcnica para hidrlise de amostras com baixo teor de
protena contendo carboidratos e/ou lipdeos
1) Transferir quantidade de amostra que contenha 10 mg
de protena para balo de 150 mL de fundo redondo e boca
esmerilhada.
5
2) Adicionar ao meio 40 mL de cido clordrico 6 M e
algumas prolas de vidro.
3) Conectar condensador de refuxo e iniciar o aquecimento
do balo usando manta eltrica. Manter a suspenso sob
ebulio constante e suave por 24 h.
4) Resfriar at a temperatura ambiente e transferir,
quantitativamente, o contedo para balo volumtrico de
50 mL completando o volume com gua destilada.
5) Seguir as demais etapas conforme os itens 7 a 10 da
tcnica anterior.
Misturas de aminocidos em soluo (soros) ou em
preparaes farmacuticas
1) Diluir, adequadamente, a soluo com tampo citrato
pH 2,2 (0,20 M em Na
+
) podendo ser analisada em seguida.
2) Caso esteja na forma de p, ou comprimido, solubilizar
a amostra em cido clordrico 0,1 M.
3) Transferir o material para balo volumtrico e completar
o volume com o mesmo tampo acima.
4) Filtrar a soluo e manter sob refrigerao (4
o
C) at ser
analisada.
Tcnica de hidrlise com oxidao de cistina e metionina
Devido a perdas durante a hidrlise cida de protenas, os
aminocidos sulfurados so preferencialmente analisados
por meio de seus respectivos derivados oxidados. A
oxidao promovida por cido perfrmico, que converte
cistina e cistena em cido cisteico e metionina em
metionina / sulfona, ambos resistentes s condies de
hidrlise.
1) Preparar o cido perfrmico acrescentando 1 mL
de perxido de hidrognio 30 volumes a 9 mL de cido
frmico.
2) Agitar ligeiramente a soluo mantendo-a em seguida
em repouso por 1 h a temperatura ambiente.
3) Resfriar o cido perfrmico formado em banho de gelo.
4) Pesar a amostra contendo 10 mg de protena em balo
de fundo redondo de 25 mL e adicionar 2 mL de cido
perfrmico gelado.
5) Manter a mistura em banho de gelo durante 4 h, se a
amostra for solvel, ou 16 h, se for insolvel.
6) Adicionar 0,5 mL de cido bromdrico 40% para remover
o excesso de cido perfrmico.
7) Acoplar o balo a evaporador rotatrio e remover por
meio de presso reduzida o bromo residual fazendo os
vapores passar por soluo de hidrxido de sdio M.
8) Proceder hidrlise como descrito anteriormente.
Separao e anlise quantitativa de aminocidos isolados
A separao dos aminocidos nos hidrolisados ,
normalmente, realizada por cromatografa de troca inica por
meio de resinas de poliestireno sulfonado em analisadores
de aminocidos. Nesses aparelhos, aps a separao,
os aminocidos eludos das colunas cromatogrfcas
formam substncias de colorao azul/violeta pela
reao com ninidrina. A determinao quantitativa feita
espectrofotometricamente. No uso de autoanalisadores de
aminocidos, devem ser seguidas as especifcaes dos
respectivos fabricantes.
5.3.3.10 ENSAIO IODOMTRICO DE
ANTIBITICOS
Este ensaio iodomtrico de antibitico destina-se ao
doseamento de frmacos antibiticos penicilmicos e de
seus produtos farmacuticos elaborados, para os quais a
titulao iodomtrica particularmente adequada.
Preparao padro
Dissolver quantidade adequada, exatamente pesada, da
substncia qumica de referncia (SQR), previamente
dessecada, especifcada na monografa individual,
utilizando o solvente descrito na Tabela 1 ou conforme
descrito na monografa. Diluir, quantitativamente,
com o mesmo solvente, de modo a obter soluo com
concentrao fnal conhecida, especifcada na Tabela 1 ou
conforme descrito na monografa. Transferir 2,0 mL desta
soluo para erlenmeyer de 250 mL com tampa.
Preparao amostra
A menos que especifcado de outra forma na monografa
individual, dissolver quantidade adequada, exatamente
pesada, da amostra, utilizando o solvente descrito na Tabela
1. Diluir, quantitativamente, com o mesmo solvente, de
modo a obter soluo com concentrao fnal conhecida,
especifcada na Tabela 1. Transferir 2,0 mL desta soluo
para erlenmeyer de 250 mL com tampa.
5
Tabela 1 - Solventes e concentraes fnais.
Antibitico Solvente* Concentrao fnal
Amoxicilina tri-idratada gua 2,00 mg/mL
Ampicilina gua 2,50 mg/mL
Ampicilina sdica Soluo 1 2,50 mg/mL
Ampicilina tri-idratada gua 2,50 mg/mL
Benzilpenicilina benzatina Soluo 1 4000 U/mL
Benzilpenicilina potssica Soluo 1 4000 U/mL
Benzilpenicilina procana Soluo 1 4000 U/mL
Benzilpenicilina sdica Soluo 1 4000 U/mL
Cloxacilina sdica gua 2,50 mg/mL
Ciclacilina gua 2,00 mg/mL
Dicloxacilina sdica Soluo 1 2,50 mg/mL
Fenoximetilpenicilina potssica Soluo 1 2,50 mg/mL
Feneticilina potssica Soluo 1 2,50 mg/mL
Meticilina sdica Soluo 1 2,50 mg/mL
Nafcilina sdica Soluo 1 2,50 mg/mL
Oxacilina sdica Soluo 1 2,50 mg/mL
__________
*A menos que especifcado de outra forma, a Soluo 1 aquela defnida na seo Solues em Ensaio microbiolgico de antibiticos (5.5.3.3), exceto
que a esterilizao no necessria.
PROCEDIMENTO
Inativao e titulao
A cada erlenmeyer contendo, respectivamente, 2,0 mL
das preparaes padro e amostra, adicionar 2 mL de
hidrxido de sdio 1,0 M, homogeneizar com movimentos
circulares e deixar em repouso por 15 minutos. Adicionar
2 mL de cido clordrico 1,2 M, 20,0 mL de iodo 0,005
M SV, tampar imediatamente e deixar em repouso por
15 minutos. Titular com tiossulfato de sdio 0,01 M SV.
Prximo ao ponto fnal da titulao, adicionar 3 gotas de
amido SI e prosseguir com a titulao at desaparecimento
da cor azul.
Ensaio em branco
Adicionar 20,0 mL de iodo 0,005 M SV a cada erlenmeyer
contendo 2,0 mL da preparao padro. Se a preparao
padro contiver amoxilina ou ampicilina, adicionar
imediatamente 0,1 mL de cido clordrico 1,2 M. Titular
com tiossulfato de sdio 0,01 M SV. Prximo ao ponto fnal
da titulao, adicionar 3 gotas de amido SI e prosseguir
com a titulao at desaparecimento da cor azul. Proceder
de forma similar para erlenmeyer contendo 2,0 mL da
preparao amostra.
Clculos
Calcular o fator de equivalncia (F), em microgramas ou
Unidade, para cada mililitro de tiossulfato de sdio 0,01 M
SV consumido pela preparao padro segundo a equao:
( )
i b
p p
V V
P C
F
=
x 2
em que
C
p
= concentrao, em mg/mL, da substncia qumica de
referncia na preparao padro;
P
p
= potncia, em ug/mg ou Unidades/mg, da substncia
qumica de referncia;
V
b
= volume do titulante, em mL, consumido em Ensaio
em branco;
V
i
= volume do titulante, em mL, consumido em Inativao
e titulao.
5.4 MTODOS DE
FARMACOGNOSIA
5.4.1 EXAME VISUAL E
INSPEO MICROSCPICA
5.4.1.1 EXAME VISUAL, ODOR E SABOR
A identidade, pureza e qualidade de um material vegetal
devem ser estabelecidas mediante detalhado exame visual,
macroscpico e microscpico. Sempre que possvel, o
material vegetal deve ser comparado com matria-prima
autntica, oriunda de amostra perfeitamente identifcada
na Farmacopeia. A amostra que no for semelhante em
cor, consistncia, odor e sabor deve ser descartada por
no apresentar os requisitos mnimos especifcados nas
monografas. A identifcao macroscpica das drogas,
quando inteiras, baseada na forma; tamanho; cor;
superfcie; textura; fratura e aparncia da superfcie de
fratura. Em virtude dessas caractersticas de identifcao
serem subjetivas e existirem adulterantes muito parecidos,
5
necessrio realizar, ao mesmo tempo, anlises microscpica
e fsico-qumica da amostra. A inspeo microscpica
indispensvel quando o material estiver rasurado ou em p.
Tamanho
Medidas de comprimento, largura e espessura devem
coincidir com aquelas citadas nas monografas. Frutos
e sementes pequenos exigem uma amostra igual a dez
unidades e posteriores clculos da mdia e do desvio
padro.
Cor
Examinar a matria-prima antes de qualquer tratamento,
luz do dia ou sob lmpadas de comprimento de onda
similares aos da luz do dia. A cor da amostra deve ser
comparada com o material de referncia.
Superfcie, textura e fratura
Examinar a matria-prima antes de qualquer tratamento.
Quando necessrio, utilizar lente de cinco at dez
aumentos. Quando indicado na monografa, umedecer com
gua ou reagente especifcado para observar caractersticas
da superfcie de fratura. Tocar o material para verifcar se
macio ou duro, dobrar e partir o material para a obteno
de informaes quanto fragilidade e aparncia da fratura,
se fbrosa, lisa, rugosa, granulada, entre outras.
Odor
Antes de verifcar o odor do material, certifcar-se de
que no existe risco. Colocar uma pequena amostra na
palma da mo ou em recipiente de vidro e inalar devagar
e repetidamente. Se o odor for indistinto, pressionar parte
do material entre os dedos e inalar novamente. Quando
a monografa indicar material txico, colocar um pouco
de material esmagado em gua quente. Primeiramente,
determinar a intensidade do odor: nenhum; fraco; distinto
ou forte e, a seguir, a sensao causada pelo odor:
aromtico; frutoso; mofado ou ranoso. Quando possvel,
importante a comparao do odor com substncia defnida,
como, por exemplo, hortel-pimenta deve ter odor similar
ao mentol e cravo-da-ndia, similar ao eugenol.
Sabor
Testar o sabor apenas quando exigido na monografa.
5.4.1.2 PREPARAO DO MATERIAL
PARA ANLISE MICROSCPICA
AMOLECIMENTO DO MATERIAL
Os rgos e tecidos vegetais empregados normalmente se
apresentam secos, e para serem observados ao microscpio,
conveniente primeiro amolec-los mediante tratamento
com gua quente. O tempo necessrio para o amolecimento
de cada rgo vegetal ou suas partes varia de acordo com
a sua textura. Tratando-se de rgo recm-colhido, apenas
os de consistncia mais frme necessitam de tal tratamento.
Mtodo de hidratao para materiais secos
Colocar a amostra em soluo de hidratao, preparada
com cinco partes de gua, quatro partes de etanol, uma
parte de glicerina e cinco gotas de detergente comercial
para cada 200 mL de soluo, em estufa a 60 C, por, no
mnimo, 48 horas.
EXECUO DOS CORTES
Uma vez amolecidos, proceder preparao dos cortes
dos rgos vegetais ou suas partes. As seces podem ser
realizadas com o auxlio de objeto cortante como navalha,
lmina de barbear ou bisturi, para cortes mo livre. A
fm de ser seccionada, incluir a amostra em material
adequado, que permita fxar o fragmento. Seces de
melhor qualidade podem ser obtidas com o emprego de
micrtomos. H, basicamente, trs tipos de micrtomos:
os de congelamento, usados para os materiais mais frgeis;
os rotativos, para cortes em srie de material includo
em parafna; e os de guia, para aqueles materiais mais
resistentes, como ramos, partes de caules e de razes. Nesse
ltimo caso, um mtodo relativamente fcil de preparo do
material a ser seccionado consiste em sua incluso em
macrogol solvel em gua ou em historresina.
Incluso do material em parafna
- Ferver a amostra em gua, quando seca, para amolecer e
retirar o ar;
- desidratar a amostra em srie de etanol diludo em gua:
50, 70, 80, 96% e, por ltimo, em etanol absoluto;
- transferir a amostra para mistura de etanol absoluto e
xileno na proporo 3:1 (v/v) e, a seguir, para 1:1 e 1:3;
- transferir a amostra para xileno puro;
- transferir a amostra para xileno em parafna na proporo
1:1, mantendo-a em estufa;
- transferir a amostra para parafna aquecida, para
que ocorra a infltrao, mantendo-a na estufa at que
permanea depositada no fundo do recipiente;
- emblocar e deixar esfriar em recipiente com gua gelada;
- aparar o bloco para introduo no micrtomo;
- seccionar o material e colocar em lmina de vidro
previamente untada com adesivo de Haupt ou Bissing;
- colocar as lminas sobre placa aquecedora para distender
os cortes;
- desparafnizar;
- aguardar, no mnimo, uma hora antes de corar.
Incluso do material em macrogol (polietilenoglicol
PEG 4000 ou PEG 6000)
- Ferver a amostra em gua, quando seca, para amolecer e
retirar o ar;
5
- colocar a amostra em bquer, contendo macrogol a 20%
(p/v);
- marcar o bquer, a partir da superfcie do lquido,
dividindo-o em cinco partes aproximadamente iguais;
- deixar o material em estufa a 65 C por 3 a 4 dias;
- quando a soluo evaporar at 1/5 de seu volume inicial,
transferir a amostra para macrogol puro e fundido onde
deve permanecer durante 12 a 25 horas, em estufa a 65 C;
- retirar da estufa, emblocar e deixar esfriar temperatura
ambiente;
- aparar os blocos para introduo no micrtomo;
- seccionar o material a seco;
- lavar os cortes com gua e corar.
Incluso em historresina
Existem diferentes marcas de historresina no mercado,
comercializadas em kits, sendo a metodologia para
emblocamento caracterstica de cada fabricante. Obedecer
ao manual de instrues. Todas contm trs elementos
principais: uma resina, um agente endurecedor e um
agente acelerador ou catalisador. A mistura e temperatura
devem seguir as especifcaes, para que haja completa
interao, obtendo-se como produto fnal um polmero.
Os materiais vegetais devem ser previamente fxados e
desidratados. Sugere-se que as seces a serem emblocadas
sejam imersas na resina durante uma noite, para que
haja completa infltrao. S aps, substituir a resina de
infltrao pela mistura de nova poro de resina, agente
endurecedor e agente acelerador. A resina de infltrao
pode ser reutilizada por duas a quatro vezes, devendo ento
ser descartada. Os cortes so colocados sobre as lminas
sem adesivo. Corar.
MTODOS DE COLORAO
Os mtodos de colorao podem compreender a aplicao
de um s corante (colorao simples) ou de dois ou trs
corantes diferentes (colorao composta).
Colorao simples (alguns corantes que podem ser usados)
- Soluo de safranina a 1% (p/v) em etanol: colorao de
cutina, lignina e suberina.
- Soluo de Fast Green a 0,5% (p/v) em etanol: colorao
de celulose.
- Azul de Astra a 1% (p/v) em etanol: colorao de
compostos pcticos da lamela mdia e parede.
- Floroglucina SR: colorao de lignina.
Colorao composta (algumas misturas de corantes que
podem ser usadas)
- Safranina-Azul de Astra: colore a lignina de vermelho e a
celulose de azul. Colocar a amostra em soluo aquosa de
safranina a 1% (p/v) por 5 a 25 minutos. Lavar duas vezes
com gua destilada. Colocar em Azul de Astra por 10 a 25
minutos. Lavar duas vezes com gua destilada. Passar por
bateria de etanol a 50%, 70%, 90%, 96%, e etanol absoluto
(duas vezes), xileno. Montar em lminas com blsamo do
Canad ou resina sinttica.
- Safranina-Fast Green: colore a lignina de vermelho e a
celulose de verde. No desparafnizar as lminas. Colocar
em soluo aquosa de safranina a 1% (p/v) por 10 a 20
minutos (ou mais). Lavar em gua corrente. Colocar em
gua destilada por 1 minuto. Escorrer a gua da lmina.
Colocar em Fast Green a 0,5% (p/v) em etanol por 10 a
40 minutos. Lavar em gua corrente. Colocar em gua
destilada por 1 minuto. Repetir a operao. Escorrer a gua
da lmina. Secar em placa aquecedora por 30 minutos.
Remover a parafna com xileno em duas trocas de 5
minutos. Montar em lminas com blsamo do Canad ou
resina sinttica.
PREPARO E MONTAGEM DAS LMINAS
Os cortes histolgicos so montados, entre lmina e lamnula,
em gua, glicerol, hidrxido de potssio a 30% (p/v),
hidrato de cloral a 50% (p/v), ou outro lquido qualquer que
possibilite a observao. O glicerol mais usado nos estudos
microqumicos de mucilagens, goma, inulina e aleurona.
O hidrxido de potssio agente diafanizador, tendo ao
sobre protenas, amido, gordura, resinas e matrias corantes.
O hidrato de cloral, tambm, agente diafanizador e,
embora de ao mais lenta que os hidrxidos alcalinos, tem
a vantagem de no dissolver o oxalato de clcio.
Dependendo da fnalidade a que se destina, podem-se
montar os cortes em lminas para observao imediata ou
em lminas ditas permanentes.
Nas preparaes para observao, imediata, depois de
selecionados e corados, montam-se os cortes em meio
adequado, tomando-se o cuidado de evitar a formao de
bolhas de ar. Se o exame for mais prolongado, recomenda-
se revestir os bordos da lamnula de um luto (selo), que
pode ser esmalte de unhas, blsamo do Canad ou soluo
alcolica de goma-laca, para evitar a evaporao do meio
de montagem, todos eles aplicveis com o auxlio de pincel
macio e pequeno.
Nas preparaes, permanentes, depois de selecionados
e corados, os cortes devem ser montados entre lmina e
lamnula, com resina sinttica, blsamo do Canad ou outro
meio conveniente. Deve-se manter a montagem comprimida
por meio da aplicao de pequenos pesos sobre a lamnula,
em posio perfeitamente horizontal e sobre papel de fltro,
com a fnalidade de evitar possveis extravasamentos do
meio de montagem.
MACERAO DOS TECIDOS
Seces de caules, razes, cascas ou outras partes vegetais nem
sempre do idia precisa da natureza real de suas clulas. O
mesmo acontece com matria-prima comercializada, quando
rasurada ou em p. Para se revelar algumas particularidades,
como, por exemplo, espessamentos e pontoaes, devem-se
empregar um dos mtodos indicados para a dissociao de
tecidos. Nesses mtodos, a estrutura a ser estudada tratada
com substncias qumicas capazes de dissolver a lamela
mdia e, dessa forma, possibilitar a separao das clulas.
5
- transferir os fragmentos para uma lmina, cuidando para
que a face abaxial fque disposta para cima;
- adicionar uma gota de hidrato de cloral e uma gota de
etanol glicerinado e cobrir com lamnula para impedir a
desidratao. Selar.
Classifcao dos estmatos e determinao do ndice
estomtico
A classifcao empregada, didaticamente, para determinao
dos tipos de estmatos (Figura 1), se baseia na forma e
disposio das clulas que os rodeiam. Os tipos bsicos so:
1) Anomoctico (clulas irregulares): os estmatos so
rodeados por um nmero varivel de clulas que no
diferem, em geral, em nenhuma caracterstica das outras
clulas fundamentais da epiderme;
2) Anisoctico (clulas desiguais): os estmatos so
normalmente rodeados por 3 ou 4 clulas subsidirias, sendo
uma delas, nitidamente, menor do que as outras;
3) Diactico (clulas transversais): os estmatos so
acompanhados por 2 clulas subsidirias, cujas paredes
comuns formam um ngulo reto com as clulas-guarda dos
estmatos;
4) Paractico (clulas paralelas): os estmatos apresentam de
cada lado uma ou vrias clulas subsidirias paralelas ao eixo
longitudinal do ostolo e s clulas-guarda dos estmatos.
Figura 1 - Tipos de estmatos. 1. anomoctico;
2. anisoctico; 3. diactico; 4. paractico.
ndice estomtico
O ndice de estmatos calculado segundo a equao
100S / (E + S), sendo S o nmero de estmatos em uma
rea determinada da superfcie da folha e E o nmero de
clulas epidrmicas, incluindo os tricomas, existentes no
mesmo campo microscpico observado. Para cada amostra
de folhas, efetuar e calcular a mdia de, no mnimo, dez
determinaes.
Mtodo de dissociao de tecidos
- Cortar o material em pequenos fragmentos ou em fatias
com cerca de 300 nm de espessura e colocar em gua;
- retirar todo o ar do material, fervendo e resfriando
rapidamente;
- macerar o material em soluo de Jeffrey. O tempo de
macerao varia com a natureza do material. Geralmente
as clulas comeam a se separar em cerca de 24 horas.
Se necessrio, pode ser usado basto de vidro de ponta
arredondada para amassar muito levemente o material.
- Havendo difculdade na separao das clulas, renovar a
soluo maceradora;
- lavar muito bem o material com gua de torneira, para
remover os cidos. Verter a mistura com o tecido macerado
para um funil contendo papel de fltro;
- fechar a abertura inferior do funil e cobrir o macerado
com soluo aquosa de safranina a 1% (p/v), durante tempo
sufciente para boa colorao do material (de 15 minutos a
6 horas);
- abrir a ponta do funil e lavar novamente com gua, at
retirar o excesso de corante;
- desidratar pela adio de solues de etanol a 50%, 70%,
90% e etanol absoluto;
retirar com pina o macerado do papel de fltro e colocar em
xileno;
- montar entre lmina e lamnula, com resina sinttica ou
blsamo do Canad;
- manter a lmina em posio horizontal, porm no utilizar
peso sobre a lamnula, pois as clulas maceradas so muito
frgeis.
OBSERVAO DA EPIDERME FOLIAR
Separao da epiderme com soluo de Jeffrey
- Para obter epiderme foliar, seccionar pequenos pedaos de
folha e coloc-los em soluo de Jeffrey diluda em gua
destilada a 50% (v/v), tampar o recipiente e deixar de 12 a
48 horas, de acordo com a textura da folha (a soluo atacar
o mesflo, deixando a epiderme isolada);
- quando o mesflo estiver destrudo, lavar as amostras
vrias vezes com gua destilada;
- colocar uma amostra sobre lmina, seccionar entre as
epidermes e colocar as duas partes de forma que as faces
externas estejam voltadas para cima;
- corar o material sobre a lmina com soluo etanlica de
safranina a 1% (p/v);
- preparar a lmina com gelatina glicerinada e selar.
Separao da epiderme com hidrato de cloral
- Usar fragmentos de folhas de cerca de 0,5 cm de largura
por 0,5 cm de comprimento;
- colocar os fragmentos em um tubo de ensaio, adicionando
5 mL de hidrato de cloral, aquecer em banho-maria por cerca
de 15 minutos ou at que os fragmentos fquem transparentes;
5
ANLISE DO P (IDENTIFICAO DE MATRIA-
PRIMA COMERCIALIZADA EM P)
- Colocar 1 ou 2 gotas de gua, ou glicerol-etanol (1:1) ou
hidrato de cloral em uma lmina;
- acrescentar um pouco do p e misturar com um pincel fno
e macio;
- cobrir com lamnula e observar ao microscpio;
- outros fuidos podem ser usados com a mesma tcnica;
- corantes ou reaes histoqumicas podem ser utilizados.
REAES HISTOQUMICAS
As reaes podem ser feitas com material fresco seccionado
ou material cortado em micrtomo e includo em parafna ou
macrogol, adicionando-se uma gota dos reativos sobre uma
lmina com uma seco da amostra.
Amido. Adicionar uma gota de iodo SR. O amido adquire
colorao azul ou azul-violeta.
Carbonato de clcio. Adicionar cido actico a 6% (p/v)
ou cido clordrico a 7% (p/v). Cristais ou depsitos de
carbonato de clcio dissolvem-se lentamente, com produo
de efervescncia.
Hidroxiantraquinonas. Adicionar uma gota de
hidrxido de potssio a 5% (p/v). As clulas que contm
1,8-diidroxiantraquinonas coram de vermelho.
Inulina. Adicionar 1 gota de 1-naftol SR e cido sulfrico.
Esferocristais de inulina coram-se de roxo-avermelhado e se
dissolvem.
Lignina. Adicionar 1 gota de foroglucina SR, aquecer
rapidamente a lmina e adicionar uma gota de cido
clordrico a 25% (p/v). A lignina cora-se de vermelho.
Lipdeos. Adicionar Sudan III SR ou Sudan IV SR por 10
minutos, lavar rapidamente com etanol a 70% (v/v). Lipdios,
cutina e suberina coram-se de laranja-avermelhado.
Mucilagens. Adicionar 1 gota de tinta nanquim sobre
amostra seca. A mucilagem aparece como fragmentos
esfricos dilatados e transparentes sobre um fundo negro. A
caracterizao, tambm, pode ser realizada pela adio de
Tabela 1 Nmero de embalagens a serem amostradas de acordo com o nmero de embalagens existentes.
Nmero de embalagens Nmero de embalagens a serem amostradas
1 a 3 Todos
4 a 10 3
11 a 20 5
21 a 50 6
51 a 80 8
81 a 100 10
Mais de 100 10% do total de embalagens
1 gota de tionina SR amostra seca, deixando repousar por
15 minutos, seguida de lavagem em etanol a 20% (v/v). A
mucilagem toma-se violeta-avermelhada (lignina e celulose
coram-se de azul ou azul-violeta).
Oxalato de clcio. Cristais de oxalato de clcio so
insolveis em cido actico a 6% (p/v) e solveis em cido
clordrico a 7% (p/v), sem produzir efervescncia.
Protenas. Adicionar ninidrina a 0,5% (p/v) em etanol
absoluto, e manter a 37 C por 24 horas. Lavar em etanol
absoluto e em gua destilada, adicionar fucsina descorada
SR e deixar em contato por 10 a 30 minutos. Lavar em
gua e adicionar bissulfto de sdio a 2% (p/v), deixar em
contato por 1 a 2 minutos. Lavar em gua corrente por 10
a 20 minutos, desidratar e montar a lmina. As protenas
coram-se de vermelho prpura. Realizar esse procedimento
somente com material fresco.
Saponinas. Adicionar uma gota de cido sulfrico. Ocorre
uma sequncia de cor amarela, seguida de cor vermelha e,
fnalmente, cor violeta ou azul-esverdeada.
Taninos. Adicionar cloreto frrico a 10% (p/v) e uma
pequena quantidade de carbonato de sdio, deixar em
contato por 2 a 3 minutos, lavar com gua destilada. Os
taninos coram-se de azul-esverdeado.
5.4.2 MTODOS DE ANLISE
DE DROGAS VEGETAIS
5.4.2.1 AMOSTRAGEM
Os procedimentos de amostragem especifcados levam
em considerao trs aspectos: (a) nmero de embalagens
que contm a droga; (b) grau de diviso da droga e (c)
quantidade de droga disponvel.
NMERO DE EMBALAGENS
Examinar a integridade dos recipientes de embalagem e a
natureza da droga neles contida. Havendo homogeneidade,
recolher amostras conforme especifcado na Tabela 1.
5
PROCEDIMENTO
Determinar a quantidade de amostra a ser submetida ao
ensaio conforme especifcado a seguir.
- Razes, rizomas, cascas, planta inteira e partes areas: 500 g;
- folhas, inforescncias, sementes e frutos: 250 g;
- materiais particulados ou fracionados (peso mdio
inferior a 0,5 g/componente): 50 g;
- ps: 25 g.
Colher, por quarteamento, a quantidade de amostra
especifcada, a partir da amostra obtida, segundo o
procedimento descrito anteriormente, e espalh-la em
camada fna sobre a superfcie plana. Separar, manualmente
os materiais estranhos droga, inicialmente a olho nu e,
em seguida, com auxlio de lente de aumento (cinco a
dez vezes). Pesar o material separado e determinar sua
porcentagem com base no peso da amostra submetida ao
ensaio.
5.4.2.3 DETERMINAO DE GUA EM
DROGAS VEGETAIS
Trs mtodos so empregados para a determinao de gua
em drogas vegetais: mtodo gravimtrico (dessecao),
mtodo azeotrpico (destilao com tolueno) e mtodo
volumtrico (Karl Fischer). O primeiro, tecnicamente mais
simples e rpido, no aplicvel quando a droga contm
substncias volteis. Os demais requerem equipamentos
especiais e compreendem tcnicas mais complexas.
PREPARO DA AMOSTRA
Reduzir por corte, granulao ou fragmentao drogas no
pulverizadas ou trituradas de forma a limitar a dimenso
de seus componentes a, no mximo, 3 mm de espessura.
Sementes e frutos, mesmo de dimenses inferiores a 3 mm,
devem ser quebrados. Evitar moinhos de alta velocidade
ou outros procedimentos que acarretem perda de umidade
da amostra.
Mtodo gravimtrico
Transferir cerca de 2 a 5 g, ou o especifcado, na monografa,
exatamente pesados, de amostra preparada conforme
instrues anteriores, para pesa-fltro tarado, previamente
dessecado nas mesmas condies a serem adotadas para
a amostra, durante 30 minutos. Dessecar a amostra a 100-
105 C durante 5 horas, at peso constante. Calcular a
porcentagem de gua em relao droga seca ao ar.
Mtodo volumtrico
Proceder conforme descrito em Determinao de gua
(5.2.20.1).
GRAU DE DIVISO E QUANTIDADE DE DROGA
Consistindo a droga de componentes de dimenses
inferiores a 1 cm ou quando ela se constituir de material
fnamente fragmentado ou pulverizado, empregar
aparelho de amostragem (tubo provido de dispositivo de
fechamento na base). Recolher amostras de cima para
baixo e de baixo para cima (direo vertical) e lateralmente
(direo horizontal), perfazendo amostra de, no mnimo,
250 g para at 100 kg de droga. Havendo mais de 100 kg
a amostrar, proceder amostragem seguida de seleo
por quarteamento, gerando amostra de 250 g no fnal do
processo.
Para drogas com dimenses superiores a 1 cm, proceder
amostragem manual. Combinar as amostras retiradas
de cada embalagem aberta, tomando a precauo de no
aumentar seu grau de fragmentao durante a manipulao.
Para quantidades de droga at 100 kg, a amostra deve
constituir-se de, no mnimo, 500 g. Havendo mais de 100
kg de droga a amostrar, proceder amostragem seguida de
seleo por quarteamento, gerando amostra de 500 g no
fnal do processo.
Em ambos os casos, drogas com dimenses inferiores ou
superiores a 1 cm, permissvel amostrar quantidades
inferiores s especifcadas acima desde que a quantidade
total de droga disponvel seja inferior a 10 kg. Todavia, a
amostra fnal no dever ser inferior a 125 g.
QUARTEAMENTO
Distribuir a droga sobre rea quadrada, em quatro partes
iguais. Com a mo distribuir a droga sobre a rea de
modo homogneo e rejeitar as pores contidas em dois
quadrados opostos, em uma das diagonais do quadrado.
Juntar as duas pores restantes e repetir o processo, se
necessrio. Havendo diferena acentuada em dimenses
de fragmentos, executar separao manual e anotar as
porcentagens aproximadas dos componentes de diferentes
graus de diviso encontrados na amostra.
5.4.2.2 DETERMINAO DE MATRIA
ESTRANHA
Os frmacos vegetais so isentos de fungos, de insetos e de
outras contaminaes de origem animal. Salvo indicao
em contrrio, a porcentagem de elementos estranhos no
deve ser superior a 2% m/m. Matria estranha droga
classifcada em trs tipos: (a) partes do organismo ou
organismos dos quais a droga deriva, excetuados aqueles
includos na defnio e descrio da droga, acima do limite
de tolerncia especifcado na monografa; (b) quaisquer
organismos, pores ou produtos de organismos alm
daqueles especifcados na defnio e descrio da droga,
em sua respectiva monografa; e (c) impurezas de natureza,
minerais ou orgnicas, no-inerentes droga.
5
Mtodo azeotrpico
Proceder conforme descrito em Determinao de gua
(5.2.20.2).
5.4.2.4 DETERMINAO DE CINZAS
TOTAIS
As cinzas totais incluem cinzas fsiolgicas e cinzas no-
fsiolgicas.
PROCEDIMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 3 g da amostra pulverizada,
ou a quantidade especifcada na monografa, transferir
para cadinho (de silcio ou platina) previamente tarado.
Distribuir a amostra uniformemente no cadinho e incinerar
aumentando, gradativamente, a temperatura at, no
mximo, 600 25 C, at que todo o carvo seja eliminado.
Um gradiente de temperatura (30 minutos a 200 C, 60
minutos a 400 C e 90 minutos a 600 C) pode ser utilizado.
Resfriar em dessecador e pesar. Nos casos em que o carvo
no puder ser eliminado totalmente, resfriar o cadinho e
umedecer o resduo com cerca de 2 mL de gua ou soluo
saturada de nitrato de amnio. Evaporar at secura em
banho-maria e, em seguida, sobre chapa quente, e incinerar
at peso constante. Calcular a porcentagem de cinzas em
relao droga seca ao ar.
INSOLVEIS EM CIDO
Cinzas, insolveis em cido, constituem, o resduo obtido
na fervura de cinzas totais, ou sulfatadas com cido
clordrico diludo aps fltragem; lavagem e incinerao. O
mtodo destina-se determinao de slica e constituintes
silcicos da droga.
PROCEDIMENTO
Ferver o resduo obtido na determinao de cinzas totais
durante 5 minutos com 25 mL de cido clordrico a 7%
(p/v) em cadinho coberto com vidro de relgio. Lavar o
vidro de relgio com 5 mL de gua quente, juntando a gua
de lavagem ao cadinho. Recolher o resduo, insolvel em
cido, sobre papel de fltro, isento de cinza, lavando-o com
gua quente at que o fltrado se mostre neutro. Transferir o
papel de fltro contendo o resduo para o cadinho original,
secar sobre chapa quente e incinerar a cerca de 500 C
at peso constante. Calcular a porcentagem de cinzas
insolveis em cido em relao droga seca ao ar.
SULFATADAS
PROCEDIMENTO
Aquecer ao rubro por 10 minutos um cadinho de porcelana,
deixar esfriar em um dessecador e pesar. Colocar
exatamente cerca de 1,0 g da droga no cadinho previamente
tarado e umedea a droga com cido sulfrico concentrado
e carbonize em bico de Bunsen. Umedea novamente com
cido sulfrico concentrado, carbonize e incinere com
aquecimento gradativo at 800 C. Esfrie, pese novamente,
incinere por mais 15 minutos. Repita esse procedimento
at que a diferena entre duas pesagens sucessivas no seja
maior que 0,5 mg.
5.4.2.7 DETERMINAO DE LEOS
VOLTEIS EM DROGAS VEGETAIS
O teor de leos volteis em drogas vegetais determinado
pelo processo de destilao por arraste de vapor, com auxlio
de equipamento descrito a seguir.
O equipamento (Figura 1), confeccionado em vidro
resistente, de qualidade apropriada, compreende:
Figura 1 aparelho para determinao do teor de leos volteis
em drogas vegetais pelo processo de destilao por arraste de vapor.
5
1) balo de fundo redondo de 500 mL a 1000 mL de
capacidade, de colo curto, provido de uma junta 24/40,
fmea;
2) condensador, adaptvel ao balo por meio de uma junta
esmerilhada 24/40, macho, construdo em pea nica de
vidro, compreendendo as partes descritas a seguir, com as
respectivas medidas:
2.1) tubo vertical (AC) de 210 a 260 mm de comprimento e
13-15 mm de dimetro interno;
2.2) tubo dobrado, com segmentos (CD) e (DE) medindo
145-155 mm de comprimento cada e dimetro interno de
7-8 mm;
2.3) condensador de bolas, tipo Allihn (FG), de 145-155 mm
de comprimento e dimetro interno de 15 mm nas bolas e
8-10 mm nos estreitamentos;
2.4) rolha (junta esmerilhada 14/20) (K) contendo orifcio de
cerca de 1 mm de dimetro, que obtura uma sada lateral (K)
provida de junta esmerilhada 14/20 fmea, na extremidade;
2.5) tubo (GH) de 30-40 mm de comprimento e 7-8 mm de
dimetro interno, formando as partes (HK) ngulo (GHK)
de 30 a 40;
2.6) alargamento em forma de pra (J) de 3 mL de capacidade;
2.7) tubo (JL) provido de escala graduada de 100-110 mm;
de 3 mL de capacidade e subdividida em vigsimos de
mililitro;
2.8) alargamento em forma de bola (L) de aproximadamente
2 mL de capacidade;
2.9) torneira de 3 vias;
2.10) tubo de conexo (BM) de 7-8 mm de dimetro, provido
de tubo de segurana. O ponto de insero (B) encontra-se a
20-25 mm acima da parte mais alta da escala graduada;
3) onte de calor que pode ser aquecedor eltrico ou bico de
gs dotado de regulagem fna da chama;
4) suporte vertical adequado.
Antes da utilizao, o aparelho deve ser limpo por
lavagens repetidas e sucessivas com acetona, gua, mistura
sulfocrmica e novamente gua. Depois de seco, deve ser
montado em local protegido de correntes de ar. A escala
graduada deve ser aferida e, se necessrio, estabelecer fator
de correo para cada aparelho.
PROCEDIMENTO
Introduzir no balo o volume do lquido indicado na
monografa e fragmentos de porcelana porosa ou contas de
vidro para regularizar a ebulio. Adaptar o condensador ao
balo. Retirar a rolha esmerilhada (K) e, pela abertura (K),
introduzir a gua at que essa comece a escorrer em (B).
Usando pipeta volumtrica, introduzir xileno, na quantidade
prescrita, apoiando-se a ponta da pipeta no fundo da sada
lateral (K). Aquecer o lquido no interior do balo at o
incio da ebulio e destilar na razo de 2 a 3 mL por minuto,
ou conforme prescrito na monografa.
Para determinar a velocidade da destilao, escoar a gua
com auxlio de torneira de trs vias, at que o menisco esteja
no nvel do trao de referncia inferior (Figura 2). Fechar
a torneira e cronometrar o tempo necessrio para encher o
volume compreendido entre os traos de referncia inferior
e superior (3 mL). Abrir a torneira e continuar a destilao
por 30 minutos. Desligar o aquecimento, deixar esfriar por
10 minutos e fazer a leitura do volume de xileno no tubo
graduado.
Figura 2 Indicao para determinar a velocidade de destilao.
Introduzir no balo a quantidade de droga prescrita na
monografa e destilar por arraste de vapor, como descrito
acima, pelo tempo e na velocidade indicada na monografa.
Terminada a operao, deixar esfriar por 10 minutos e ler
o volume do leo essencial recolhido no tubo graduado.
Subtrair da leitura o volume do xileno determinado
anteriormente. A diferena representa a quantidade de
leo essencial contida na amostra. Calcular o resultado em
mililitros de leo essencial por 100 g da droga.
5.4.2.8 DETERMINAO DE LEOS
FIXOS
A determinao de leos fxos baseia-se na sua extrao por
solvente que, depois de evaporado, deixa como resduo o
leo cuja quantidade determinada por pesagem.
Caso a amostra contenha teor elevado de componentes
hidrossolveis (carboidratos, ureia, cido ltico, entre
outros), cabe pr-tratamento da amostra a fm de evitar
interferncia na determinao de matrias graxas. Para tanto,
transferir a tomada de ensaio para funil contendo papel de
fltro, lavar com gua e secar o resduo em estufa a 105 C
durante 2 horas.
Empregar o aparelho de Soxhlet (Figura 1). O equipamento,
confeccionado em vidro resistente, de qualidade apropriada,
compreende balo de fundo redondo (A), com 500 mL a
1000 mL de capacidade, conectado ao extrator Soxhlet (B) e
condensador de refuxo (C).
5
Figura 1 Aparelho de Soxhlet.
Antes da utilizao, o aparelho deve ser limpo por
lavagens repetidas e sucessivas com acetona, gua, mistura
sulfocrmica e, novamente, gua. Depois de seco, deve ser
montado em local protegido de correntes de ar.
PROCEDIMENTO
Transferir, exatamente, cerca de 10 g de droga previamente
dessecada conforme descrito em Determinao de gua em
drogas vegetais (5.4.2.3), Mtodo gravimtrico, e transferir
para aparelho extrator de Soxhlet (B), cobrindo-a com
algodo desengordurado. Pesar o balo (A) limpo e seco
(contendo fragmentos de porcelana ou contas de vidro)
e mont-lo no aparelho sobre banho-maria, tomando a
precauo de assegurar vedao na junta esmerilhada do
balo (recomenda-se operao em capela). Transferir para
o extrator ter de petrleo em quantidade sufciente para
realizar trs sifonagens e encaixar o condensador de refuxo
(C). Proceder extrao sob aquecimento sufciente para
manter o solvente em ebulio moderada durante 4 horas.
Concluda a extrao, aguardar esfriamento, transferir o
contedo do cartucho para almofariz de porcelana e juntar
quantidade aproximadamente igual de areia lavada e seca.
Pulverizar a droga e transferi-la novamente, no interior do
cartucho, para o extrator. Reiniciar e manter a extrao nas
condies acima por perodo adicional de 2 horas. Desligar
o balo do aparelho e evaporar o solvente (de preferncia por
destilao sob corrente de dixido de carbono). Transferir
o balo para estufa a 105 C, resfriar e pesar. Repetir a
operao at peso constante. Calcular a porcentagem de
leos fxos na droga com base na massa de droga pesada e
na massa de leo obtida.
5.4.2.9 DETERMINAO DE 1,8-CINEOL
EM LEOS ESSENCIAIS
A determinao de cineol compreende a determinao da
temperatura de congelamento (criometria) do composto de
combinao molecular entre cineol e o-cresol-cresineol.
Sendo essa temperatura proporcional ao contedo de cineol
no composto, possvel estabelecer-se seu teor pela anlise
dos dados registrados na Tabela 1.
O mtodo empregado na dosagem de cineol em essncias
de eucalipto e niaouli. Determinaes em outras essncias no
so recomendadas sem comprovao prvia de exatido em
vista de alguns constituintes do leo essencial solubilizarem o
cresineol (mesmo na essncia de eucalipto, h riscos de erro
quando o contedo de alfa-terpineol for superior a 12,5%).
Erros, tambm, advm da presena de umidade, seja na
essncia ou no o-cresol. O o-cresol empregado deve ser puro
e seco, apresentando ponto de fuso superior a 30 C. Deve ser
conservado em frasco hermtico, por ser higroscpico.
PROCEDIMENTO
Secar a amostra do leo essencial em ensaio, agitando-a em
mistura com sulfato de sdio ou com cloreto de clcio, anidros,
em tubo de ensaio ou em Erlenmeyer provido de tampa
esmerilhada. Deixar em contato durante 24 horas e fltrar.
Transferir para tubo de ensaio (cerca de 15 mm de dimetro e
80 mm de altura) 3,0 g de leo essencial, exatamente, pesados
e adicionar 2,1 g de o-cresol em sobrefuso. Agitar a mistura
com bulbo de termmetro (0 - 60 C, graduado em dcimos
de grau) suspenso sobre o tubo de modo que a extremidade do
bulbo no ultrapasse o limite de 5 mm da base do tubo e sem
tocar em suas paredes, at induo de cristalizao. Anotar
a temperatura mxima observada no termmetro durante a
cristalizao. Aquecer o tubo a cerca de 5-10 C acima da
temperatura lida e introduzi-lo em outro tubo maior (cerca
de 60 mm de dimetro e 100 mm de altura) de modo a criar
camada de ar. Fixar o tubo menor dentro do outro com auxlio
de placas de cortia adaptadas ou por qualquer outro meio
e mergulhar o conjunto em banho de gua com temperatura
controlada, mantendo a temperatura cerca de 5 C abaixo do
ponto de congelamento previamente anotado para o cresineol.
Agitar a mistura com movimentos verticais do termmetro e,
ao iniciar-se a cristalizao (turvao do lquido), observar a
estabilizao da temperatura. Havendo futuaes durante a
cristalizao, considerar sempre a temperatura mxima lida
durante o perodo de congelamento.
Repetir a determinao quantas vezes for necessrio para que
duas leituras sucessivas acusem variao mxima de 0,1 C.
5
ESPUMA
Pesar, exatamente, 1 g do material vegetal reduzido a p
fno (malha de 180 m, 5.2.11) e transferir para erlenmeyer
contendo 50 mL de gua fervente. Manter sob fervura
moderada durante 30 minutos. Resfriar, fltrar para balo
volumtrico de 100 mL. Completar o volume, atravs do
fltro, at 100 mL.
Distribuir o decocto obtido, em 10 tubos de ensaio com
tampa (16 mm de dimetro por 16 cm de altura), em srie
sucessiva de 1, 2, 3, at 10 mL, e ajustar o volume do
lquido em cada tubo a 10 mL com gua. Tampar os tubos
e agit-los com movimentos verticais por 15 segundos,
com duas agitaes por segundo. Deixar em repouso por
15 minutos e medir a altura da espuma.
Tabela 1 - Teor de 1,8-cineol em leos essenciais em funo da temperatura de congelamento.
Temperatura (C) 0,0 0,1 0,2 0,3 04 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9
24 45,6 45,7 45,9 46,0 46,1 46,3 46,4 46,5 46,6 46,8
25 46,9 47,0 47,2 47,3 47,4 47,6 47,7 47,8 47,9 48,1
26 48,2 48,3 48,5 48,6 48,7 48,9 49,0 49,1 49,2 49,4
27 49,5 49,6 49,8 49,9 50,0 50,2 50,3 50,4 50,5 50,7
28 50,8 50,9 51,1 51,2 51,3 51,5 51,6 51,7 51,8 52,0
29 52,1 52,2 52,4 52,5 52,6 52,8 52,9 53,0 53,1 53,3
30 53,4 53,5 53,7 53,8 53,9 54,1 54,2 54,3 54,4 54,6
31 54,7 54,8 55,0 55,1 55,2 55,4 55,5 55,6 55,7 55,9
32 56,0 56,1 56,3 56,4 56,5 56,7 56,8 56,9 57,0 57,2
33 57,3 57,4 57,6 57,7 57,8 58,0 58,1 58,2 58,3 58,5
34 58,6 58,7 58,9 59,0 59,1 59,3 59,4 59,5 59,6 59,8
35 59,9 60,0 60,2 60,3 60,4 60,6 60,7 60,8 60,9 61,1
36 61,2 61,3 61,5 61,6 61,7 61,9 62,0 62,1 62,2 62,4
37 62,5 62,6 62,8 62,9 63,0 63,2 63,3 63,4 63,5 63,7
38 63,8 63,9 64,1 64,2 64,4 64,5 64,6 64,8 64,9 65,1
39 65,2 65,4 65,5 65,7 65,8 66,0 66,2 66,3 66,5 56,6
40 66,8 67,0 67,2 67,3 67,5 67,7 67,9 68,1 68,2 68,4
41 68,6 68,8 69,0 69,2 69,4 69,6 69,7 69,9 70,1 70,3
42 70,5 70,7 70,9 71,0 71,2 71,4 71,6 71,8 71,9 72,1
43 72,3 72,5 72,7 72,9 73,1 73,3 73,4 73,6 73,8 74,0
44 74,2 74,4 74,6 74,8 75,0 75,2 75,3 75,5 75,7 75,9
45 76,1 76,3 76,5 76,7 76,9 77,1 77,2 77,4 77,6 77,8
46 78,0 78,2 78,4 78,6 78,8 79,0 79,2 79,4 79,6 79,8
47 80,0 80,2 80,4 80,6 80,8 81,1 81,3 81,5 81,7 81,9
48 82,1 82,3 82,5 82,7 82,9 83,2 83,4 83,6 83,8 84,0
49 84,2 84,4 84,6 84,8 85,0 85,3 85,5 85,7 85,9 86,1
50 86,3 86,6 86,8 87,1 87,3 87,6 87,8 88,1 88,3 88,6
51 88,8 89,1 89,3 89,6 89,8 90,1 90,3 90,6 90,8 91,1
52 91,3 91,6 91,8 92,1 92,3 92,6 92,8 93,1 93,3 93,6
53 93,8 94,1 94,3 94,6 94,8 95,1 95,3 95,6 95,8 96,1
54 96,3 96,6 96,9 97,2 97,5 97,8 98,1 98,4 98,7 99,0
55 99,3 99,7 100,0
Se a altura da espuma de todos os tubos for inferior a 1 cm,
o ndice de espuma menor do que 100.
Se, em qualquer um dos tubos, a altura da espuma medida
for 1 cm, a diluio do material vegetal nesse tubo (A) o
ndice observado. Se esse tubo for o primeiro ou segundo
na srie, necessrio fazer uma diluio intermediria,
pelo mesmo mtodo descrito anteriormente, para obter um
resultado mais preciso.
Se a altura da espuma for maior do que 1 cm em todos
os tubos, o ndice de espuma maior do que 1000. Nesse
caso, a determinao precisa ser feita com uma nova srie
de diluies do decocto para se obter um resultado preciso.
O ndice de espuma calculado segundo a equao
1000/A, sendo A o volume, em mililitros, do decocto usado
para preparao da diluio no tubo onde a espuma foi
observada.
5
SUBSTNCIAS EXTRAVEIS POR
LCOOL (EXTRATO ALCOLICO)
MTODO A: EXTRAO POR SOXHLET
Pesar, exatamente, cerca de 2 g da droga e transferir para
cartucho do extrator de Soxhlet, previamente tarado e seco.
Introduzir no balo do extrator 0,2 g de hidrxido de sdio
e etanol absoluto em quantidade sufciente. Extrair por 5
horas, retirar o cartucho com o resduo e sec-lo em estufa
a 105 C por 30 minutos. Pesar o resduo seco e calcular
o teor de substncias extraveis por etanol por diferena
entre o peso da amostra e o peso do resduo seco. Referir o
resultado em relao droga seca (Determinao de gua
em drogas vegetais, 5.4.2.3).
MTODO B: EXTRAO A QUENTE
Pesar um Erlenmeyer de 250 mL, com boca esmerilhada,
transferir para ele, exatamente, cerca de 4,0 g de droga
vegetal seca, fnamente, pulverizada. Adicionar 100 mL de
gua e pesar para obter o peso total, incluindo o frasco.
Tampar, agitar bem e deixar descansar por 1 h. Acoplar
um condensador de refuxo e aquecer por 1 h, resfriar e
pesar. Aps o refuxo, corrija o peso original com solvente
especifcado no ensaio para a droga vegetal. Misturar bem
e fltrar, rapidamente, por meio de um fltro seco. Transferir
25 mL do fltrado para uma cpsula de porcelana tarada e
evaporar at secura em banho de gua. Secar 105 C por 6
h, esfriar em dessecador por 30 min e pesar, imediatamente.
Calcular a porcentagem de materiais extrados em mg/g de
material seco.
MTODO C: EXTRAO A FRIO
Pesar um erlenmeyer de 250 mL, com boca esmerilhada
e transferir para ele, exatamente, cerca de 4,0 g de droga
vegetal seca, fnamente, pulverizada. Macerar, com
100 mL de solvente especifcado, durante 6 h, agitando
frequentemente, e deixar em repouso por 18 h. Filtrar,
rapidamente, sem deixar perder qualquer quantidade de
solvente; transferir 25 mL do fltrado para uma cpsula de
porcelana tarada e evaporar at secura em banho de gua.
Secar a 105 C por 6 h, esfriar em dessecador por 30 min e
pesar imediatamente. Calcular a porcentagem de materiais
extrados em mg/g de material vegetal seco.
Para materiais extraveis com etanol, use a concentrao
especifcada para o solvente no teste para cada droga
vegetal. Para os materiais extraveis com gua, use a gua
Tabela 1 Diluies de cloridrato de quinina para o teste inicial na obteno do ndice de amargor.
1 2 3 4 5 6 7 8 9
SQ (mL) 4,2 4,4 4,6 4,8 5,0 5,2 5,4 5,6 5,8
gua potvel (mL) 5,8 5,6 5,4 5,2 5,0 4,8 4,6 4,4 4,2
Cloridrato de quinina (mg/10 mL) (c) 0,042 0,044 0,046 0,048 0,050 0,052 0,054 0,056 0,058
como solvente. Use outros solventes, especifcados em
cada monografa.
AMARGOR
As propriedades amargas dos materiais vegetais so
determinadas pela comparao da concentrao limiar
de amargor de um extrato com a de uma soluo diluda
de cloridrato de quinina. O valor do ndice de amargor
expresso em termos de unidades, equivalentes a uma
soluo de cloridrato de quinina a 0,05% (p/v).
Para a extrao dos materiais vegetais e para a lavagem
da boca depois de cada degustao, deve-se utilizar gua
potvel como veculo. A dureza da gua raramente tem
infuncia signifcativa sobre o amargor.
A sensibilidade ao amargor pode variar de indivduo para
indivduo ou, mesmo para um indivduo em situaes
diferentes (fadiga, fumo, ingesto de alimentos). Portanto,
a determinao da concentrao limiar de amargor do
material a ser testado com cloridrato de quinina deve ser
feita pela mesma pessoa, dentro de um curto espao de
tempo. A sensao de amargor no percebida por toda
a superfcie da lngua, mas restrita s partes superior e
lateral da base da lngua. A determinao da concentrao
limiar da soluo requer treinamento do analista.
Primeiramente, feita a determinao da concentrao
limiar do cloridrato de quinina e, em seguida, a do material
a ser testado. Indivduos insensveis sensao amarga
induzida por uma soluo contendo 0,058 mg de cloridrato
de quinina em 10 mL de gua no so indicados para a
realizao do teste.
A preparao da soluo-estoque de material vegetal
a ser testado (ST) deve ser especifcada na monografa
correspondente. Em sries nicas de teste, a determinao
sempre inicia com a menor concentrao (a menos que
outra ordem seja especifcada na monografa) para manter
a sensibilidade dos botes gustativos.
PREPARO DAS SOLUES
Soluo estoque e soluo diluda de cloridrato de quinina
Dissolver 0,1 g de cloridrato de quinina em quantidade
sufciente de gua potvel para completar 100 mL. Diluir
5 mL dessa soluo para 500 mL com gua potvel. Essa
soluo padro de cloridrato de quinina (SQ) contm 0,01
mg/mL. Para o teste inicial, utilizar nove tubos de ensaio
para a diluio em srie, como registrado na Tabela 1.
5
Soluo estoque e soluo diluda do material vegetal
Preparar a soluo estoque como especifcado na monografa (ST). Utilizar 10 tubos de ensaio para a diluio em srie,
como indicado na Tabela 2 para o segundo teste.
Tabela 2 Diluies da soluo estoque para o segundo teste na obteno do ndice de amargor.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
ST (b) (mL) 1,00 2,00 3,00 4,00 5,00 6,00 7,00 8,00 9,00 10,0
gua potvel (mL) 9,00 8,00 7,00 6,00 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 -
PROCEDIMENTO
Aps enxaguar a boca com gua potvel, provar 10 mL da
diluio, girando-a na boca, principalmente perto da base
da lngua por 30 segundos. Sempre comear com a soluo
menos concentrada da srie, exceto quando prescrito de
maneira diferente na monografa. Se a sensao de amargor
no mais sentida, remover a soluo e esperar 1 minuto
para assegurar que no h sensibilidade retardada. Enxaguar
a boca com gua. Aguardar, pelo menos, 10 minutos para
testar a prxima diluio. A concentrao limiar de amargor
a diluio de menor concentrao em que o material ainda
provoca sensao de amargor. Aps a primeira srie de
testes, enxaguar bem a boca com gua, at que o amargor
no seja mais percebido e esperar, no mnimo, 10 minutos
antes de fazer a segunda srie de testes.
Nessa srie de testes, para maior rapidez, aconselhvel
assegurar que a soluo no tubo nmero 5 (contendo
5 mL de ST em 10 mL de soluo) provoque sensao
de amargor. Se percebida, encontrar a concentrao de
amargor do material, provando as diluies nos tubos de
nmeros 1 a 4. Se a soluo no tubo de nmero 5 no
provocar sensao de amargor, encontrar a concentrao
limiar de amargor nos tubos de nmeros 6 a 10.
Todas as solues e a gua devem estar numa temperatura
entre 20 C e 25 C.
O ndice de amargor calculado segundo a equao:
em que
V = valor de amargor, em unidades/g;
a = quantidade de material, em mg/mL, na ST;
b = volume de ST em 10 mL da diluio da concentrao
limiar de amargor;
c = quantidade de cloridrato de quinina, em mg/10 mL, na
diluio da concentrao limiar de amargor.
5.4.2.13 DETERMINAO DA ATIVIDADE
HEMOLTICA
A atividade hemoltica de extratos vegetais, ou de uma
preparao contendo saponinas, determinada por
comparao com a atividade de uma referncia de saponina
com atividade hemoltica de 1000 unidades por grama. Uma
suspenso de eritrcitos misturada com volumes iguais
de uma diluio em srie do extrato. A menor concentrao
a provocar hemlise completa determinada aps deixar o
sistema em repouso por um perodo especfco de tempo.
Um teste similar feito simultaneamente com soluo de
referncia de saponina.
PROCEDIMENTO
Para a preparao da suspenso de sangue, colocar citrato
de sdio a 3,65% (p/v) em um frasco com tampa at 1/10 de
sua capacidade. Agitar para molhar totalmente as paredes do
frasco e adicionar sangue bovino fresco, com nova agitao.
O sangue, com citrato de sdio, assim preparado pode ser
armazenado por 8 dias a uma temperatura entre 2
o
C e 4
o
C.
Em balo volumtrico de 50 mL, diluir, cuidadosamente,
1 mL de sangue com citrato de sdio em quantidade
sufciente de tampo fosfato pH 7,4 para completar 50 mL.
Essa suspenso de sangue diluda (2%) pode ser utilizada
durante o tempo em que o lquido sobrenadante permanecer
lmpido e incolor, sendo mantida fria.
Para a soluo de referncia, transferir, exatamente, 10 mg
de saponina para balo volumtrico de 100 mL e completar
o volume com tampo fosfato pH 7,4. Essa soluo deve ser
recm-preparada. O extrato vegetal e diluies devem ser
preparados como especifcado na monografa, utilizando-
se, tambm, tampo fosfato pH 7,4.
Teste preliminar
Preparar uma diluio em srie do extrato vegetal com a
tampo fosfato pH 7,4 e suspenso de sangue (2%), usando
4 tubos de ensaio conforme Tabela 1.
Tabela 1 Diluio em srie do extrato vegetal para determinao da atividade hemoltica.
Tubo 1 2 3 4
Extrato vegetal (mL) 0,10 0,20 0,50 1,00
Tampo fosfato pH 7,4 (mL) 0,90 0,80 0,50
Suspenso de sangue (2%) (mL) 1,00 1,00 1,00 1,00
5
Logo que os tubos forem preparados, invert-los
cuidadosamente para misturar, evitando a formao da
espuma. Aps 30 minutos, agitar novamente e deixar
descansar por 6 horas temperatura ambiente. Examinar
os tubos e anotar em qual diluio ocorreu hemlise total,
o que ser constatado no lquido, lmpido, vermelho e sem
depsito de eritrcitos.
Se a hemlise total for observada apenas no tubo de nmero
4, usar o extrato vegetal original diretamente para o teste
principal.
Se a hemlise total for observada nos tubos 3 e 4, diluir
duas vezes o extrato original com tampo fosfato.
Se a hemlise total for observada nos tubos 2, 3 e 4, preparar
uma soluo diluda cinco vezes, como descrito acima.
Se, aps 6 horas, todos os tubos contiverem um lquido
lmpido e vermelho, preparar uma soluo diluda 10 vezes
e fazer o teste preliminar, como descrito acima.
Se a hemlise total no for observada em nenhum dos
tubos, repetir o teste preliminar, usando um extrato mais
concentrado.
Teste principal
Preparar a diluio em srie do extrato vegetal, diluindo ou
no, como consta no teste preliminar, com tampo fosfato
pH 7,4 e suspenso de sangue (2%), utilizando 13 tubos de
ensaio, conforme especifcado na Tabela 2.
Tabela 2 Diluio em srie do extrato vegetal com tampo fosfato e suspenso de sangue para o Teste principal.
Tubos 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Extrato vegetal (ou
diluio) (mL)
0,40 0,45 0,50 0,55 0,60 0,65 0,70 0,75 0,80 0,85 0,90 0,95 1,00
Tampo fosfato (mL) 0,60 0,55 0,50 0,45 0,40 0,35 0,30 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05
Suspenso de
sangue 2% (mL)
1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00
Fazer as diluies e avaliaes como no teste preliminar,
observando os resultados aps 24 horas. Calcular a
quantidade de material vegetal em gramas, ou proporo
em g/mL que produz hemlise total (b).
Teste para saponinas
Para eliminar o efeito de variaes individuais na resistncia
de suspenso de sangue soluo de saponina, preparar
uma srie de diluies de saponina da mesma maneira
descrita anteriormente para o extrato vegetal. Calcular a
quantidade de saponinas (g) que produz hemlise total (a).
Atividade hemoltica
A atividade hemoltica calculada segundo a equao
1000 a / b
em que
1000 = atividade hemoltica da saponina, em relao ao
sangue bovino;
a = quantidade, em gramas, de saponina;
b = quantidade, em gramas, de material vegetal.
INTUMESCNCIA
O ndice de intumescncia ou ndice de intumescimento a
medida do volume ocupado pelo intumescimento de 1 g da
droga, pela adio de gua ou outro agente intumescente,
sob condies defnidas.
Conduzir, simultaneamente, no mnimo, trs
determinaes. Pesar, exatamente, 1 g da droga vegetal
pulverizada e colocar em proveta de 25 mL com tampa
esmerilhada. O comprimento da parte graduada deve ser
de, aproximadamente, 125 mm e o dimetro, interno,
prximo a 16 mm, subdividido em 0,2 mL, marcado de 0 a
25 mL, de forma ascendente. Adicionar 25 mL de gua, ou
outro agente defnido, e agitar a cada 10 minutos, por uma
hora. Deixar a mistura repousar por 3 horas, temperatura
ambiente. Medir o volume, em mililitros, ocupado pelo
material vegetal acrescido da mucilagem ou qualquer
outro material aderido subtrado do volume inicial da
droga. Calcular o valor mdio obtido a partir das vrias
determinaes individuais realizadas e relacionar a 1 g de
material vegetal.
5.4.3 MTODOS DE
PREPARAO E ANLISE DE
EXTRATOS VEGETAIS
5.4.3.1 MTODOS DE PREPARAO DE
EXTRATOS VEGETAIS
5.4.3.1.1 Extratos fuidos (Extracta fuida)
DEFINIO
Extratos fuidos so preparaes lquidas nas quais, exceto
quando especifcado de maneira diferente, uma parte do
5
extrato, em massa ou volume, corresponde a uma parte,
em massa, da droga seca, utilizada na sua preparao. Se
necessrio, os extratos fuidos podem ser padronizados, em
termos de concentrao do solvente, teor de constituintes
ou resduo seco. Se necessrio, podem ser adicionados de
conservantes inibidores do crescimento microbiano.
OBTENO
Os extratos fuidos podem ser obtidos por percolao,
macerao ou por dissoluo de extratos secos ou moles
utilizando como solvente unicamente etanol, gua
ou misturas etanol/gua de proporo adequada. Se
necessrio, o extrato obtido pode ser fltrado. Qualquer que
seja o processo de obteno, os extratos fuidos apresentam
composio e caractersticas comparveis. A formao de
um ligeiro sedimento durante a armazenagem aceitvel,
desde que a composio do extrato no sofra modifcaes
signifcativas.
ENSAIOS DE PUREZA
Densidade relativa (5.2.5). Quando for o caso, os extratos
fuidos devem cumprir com os limites prescritos na
monografa.
Determinao de etanol (5.3.3.8). Determinar teor de
etanol em extratos fuidos obtidos com etanol ou misturas
etanol/gua. O teor de etanol deve cumprir o especifcado
na monografa.
Determinao de metanol e 2-propanol (5.4.3.2.1). A
menos que especifcado de maneira diferente, os extratos
fuidos devem conter no mais de 0,05% (v/v) de metanol
e no mais de 0,05% (v/v) de 2-propanol.
Determinao do resduo seco (5.4.3.2.2). O resduo seco
deve cumprir com o especifcado na monografa.
EMBALAGEM E ARMAZENAMENTO
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
O rtulo deve conter as seguintes informaes:
- nomenclatura botnica da droga que deu origem ao
extrato;
- se o extrato foi preparado com planta fresca (quando for
o caso);
- composio do solvente e o teor de etanol em porcentagem
(v/v) no solvente utilizado na
- preparao;
- quando for o caso o teor de etanol em porcentagem (v/v)
no produto fnal;
- teor de princpios ativos e/ou relao droga/extrato fnal;
- nome e concentrao de conservantes antimicrobianos
adicionados.
5.4.3.1.2 Extratos moles (Extracta spissa)
DEFINIO
Os extratos moles so preparaes de consistncia pastosa
obtidos por evaporao parcial do solvente utilizado
na sua preparao. So obtidos utilizando-se como
solvente unicamente etanol, gua ou misturas etanol/
gua na proporo adequada. Apresentam, no mnimo,
70% de resduo seco (p/p). Os extratos moles podem ser
adicionados de conservantes para inibir o crescimento
microbiano.
OBTENO
Os extratos moles so obtidos a partir de extratos fuidos
preparados empregando unicamente etanol, gua ou
misturas etanol/gua na proporo adequada; aps
evaporao parcial do solvente. Apresentam no mnimo 70
% de resduo seco (p/p).
ENSAIOS DE PUREZA
Resduo seco (5.4.3.2.2). O resduo seco deve cumprir
com o especifcado na monografa.
ROTULAGEM
O rtulo deve conter as seguintes informaes:
extrato;
- nome e quantidade do material inerte utilizado;
o caso);
- composio do solvente e o teor de etanol em porcentagem
(v/v) no extrato lquido que lhe deu origem;
teor de princpios ativos e/ou relao droga/extrato fnal;
- nome e concentrao de conservantes antimicrobianos
adicionados.
5.4.3.1.3 Extratos secos (Extracta sicca)
DEFINIO
Extratos secos so preparaes slidas obtidas pela
evaporao do solvente utilizado na sua preparao.
Apresentam, no mnimo, 95% de resduo seco, calculados
como percentagem de massa. Os extratos secos podem ser
adicionados de materiais inertes adequados.
5
adequados ou pela adio de extratos secos obtidos com a
mesma droga utilizada na preparao.
Quando necessrio, a monografa poder prescrever
realizao de ensaio limite para o solvente utilizado na
preparao.
OBTENO
Extratos secos so preparaes slidas obtidas por
evaporao ou vaporizao do solvente. Independente da
tcnica de secagem, devem apresentar no mnimo 95 % de
resduo seco, calculados como percentagem de massa.
ENSAIOS DE PUREZA
Em recipientes hermeticamente fechados, ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
O rtulo deve conter:
extrato;
o caso);
- nome do solvente e o teor de etanol em porcentagem (v/v)
no solvente utilizado na preparao;
- teor de princpios ativos e/ou relao droga / extrato fnal.
5.4.3.1.3 Extratos secos (Extracta sicca)
DEFINIO
Extratos secos so preparaes slidas obtidas pela
evaporao do solvente utilizado na sua preparao.
Apresentam, no mnimo, 95% de resduo seco, calculados
como percentagem de massa. Os extratos secos podem ser
adicionados de materiais inertes adequados.
adequados ou pela adio de extratos secos obtidos com a
mesma droga utilizada na preparao.
Quando necessrio, a monografa poder prescrever
realizao de ensaio limite para o solvente utilizado na
preparao.
OBTENO
Extratos secos so preparaes slidas obtidas por
evaporao ou vaporizao do solvente. Independente da
tcnica de secagem, devem apresentar no mnimo 95 % de
resduo seco, calculados como percentagem de massa.
ENSAIOS DE PUREZA
ROTULAGEM
O rtulo deve conter:
extrato;
o caso);
- nome do solvente e o teor de etanol em porcentagem (v/v)
no solvente utilizado na preparao;
- teor de princpios ativos e/ou relao droga / extrato fnal.
5.4.3.2 MTODOS DE ANLISE DE
EXTRATOS VEGETAIS
5.4.3.2.1 Determinao de metanol e 2-propanol
em extratos fuidos
Proceder destilao do extrato conforme descrito
em Determinao de etanol (5.3.3.8.1). Examinar o
destilado por Cromatografa a gs (5.2.17.5), utilizando
cromatgrafo provido de detector de ionizao de chama,
coluna cromatogrfca de vidro com 2 m de comprimento
e 2 mm de dimetro interno, empacotada com copolmero
de etilvinilbenzeno / divinilbenzeno, partculas de 125 m
a 150 m, e nitrognio para cromatografa como gs de
arraste, com fuxo de 30 mL/min. Manter a temperatura da
coluna em 130 C, a temperatura do injetor em 200 C e a
temperatura do detector em 220 C.
Soluo padro interno: soluo de 1-propanol a 2,5%
(v/v) em gua.
Soluo amostra: adicionar a um volume determinado do
destilado 2 mL da soluo padro interno. Diluir para 50
mL com gua ou etanol a 90% (v/v), ajustando o teor de
etanol para 10% (v/v).
Soluo padro: preparar 50 mL de soluo contendo 2
mL de soluo padro interno, 10% de etanol (v/v), 0,05%
de 2-propanol (v/v) e 0,05% de metanol anidro (v/v).
5
Procedimento: injetar, separadamente, 1 L da Soluo
padro e da Soluo amostra, registrar os cromatogramas
e medir as reas dos picos. Calcular os teores de metanol
e 2-propanol em relao amostra submetida destilao
a partir das respostas obtidas com a Soluo padro e a
Soluo amostra.
5.4.3.2.2 Determinao de resduo seco em
extratos fuidos e moles
Transferir 2 mL ou 2 g de extrato para pesa-fltros ou placa
de Petri, medindo, aproximadamente, 50 mm em dimetro
e 30 mm de altura. Evaporar at secura em banho-maria
e dessecar em estufa a 100 - 105 C, por 3 horas. Deixar
esfriar em dessecador, sobre pentxido de fsforo e pesar.
Calcular o resduo seco em porcentagem sobre a massa ou
sobre o volume.
5.4.3.2.3 Determinao de resduo seco em
extratos secos
Pesar, em placa de Petri medindo, aproximadamente, 50
mm em dimetro e 30 mm de altura, 0,50 g de extrato seco
fnamente pulverizado. Dessecar em estufa a 100 - 105 C
por 3 horas. Deixar esfriar em dessecador, sobre pentxido
de fsforo e pesar. Calcular o resduo seco em porcentagem
sobre a massa.
5.5 MTODOS BIOLGICOS,
ENSAIOS BIOLGICOS E
MICROBIOLGICOS
5.5.1 MTODOS BIOLGICOS
5.5.1.1 DETERMINAO DA HEPARINA
NOS FATORES DA COAGULAO
A heparina determinada sob a forma de um complexo
antitrombina III (AT) via inibio da atividade do Fator
Xa da coagulao. Na mistura reativa mantido um
excesso de AT para garantir uma concentrao constante
do complexo heparina-AT. O Fator Xa neutralizado pelo
complexo heparina-AT e o Fator Xa residual hidrolisa um
substrato cromognico peptdico especfco libertando um
cromforo. A quantidade do cromforo inversamente
proporcional atividade da heparina.
Substrato cromognico para o Fator Xa: substrato
cromognico especfco do Fator Xa tal como: o cloridrato
de N--benzoil-L-isoleucil-L-glutamil-glicil-L-arginina-4-
nitro-anilida. Reconstitua de acordo com as instrues do
fabricante.
Tampo de diluio: soluo de trometamina a 0,605%
(p/v). Se necessrio, ajuste para pH 8,4 com cido
clordrico.
Soluo problema: diluir a amostra com o Tampo de
diluio de modo a obter uma soluo que supostamente
contenha 0,1 UI de heparina por mililitro.
Soluo de referncia: diluir a preparao de referncia
da heparina com o Tampo de diluio de modo a obter
uma soluo que contenha 0,1 UI de heparina por mililitro.
As condies descritas so aplicveis s placas de
microtitulao. Se o ensaio realizado em tubos, ajustar
os volumes de modo a manter as propores na mistura.
Pouco tempo antes do ensaio, colocar todas as solues
a 37 C em banho-maria. Distribuir numa srie de poos,
20 L de plasma humano normal e 20 L de antitrombina
III SR. Juntar aos poos uma srie de volumes (20 L, 60
L, 100 L e 140 L) da Soluo problema ou da Soluo
de referncia e completar o volume de cada poo com 200
L utilizando o Tampo de diluio (0,02 - 0,08 UI de
heparina por mililitro na mistura reativa fnal).
MTODO DO PONTO DE EQUIVALNCIA
Transferir 40 L de cada poo para uma segunda srie
de poos, juntar 20 L da soluo do Fator Xa bovino
e incubar a 37 C durante 30 segundos. Juntar 40 L de
soluo do Substrato cromognico para o Fator Xa a 1
mmol/L e incubar a 37 C, durante 3 minutos. Parar a
reao diminuindo o pH com um reagente apropriado, tal
como uma soluo de cido actico glacial a 20% (v/v) e
medir a absorvncia a 405 nm (5.2.14). O tempo de reao
geralmente da ordem de 3 minutos a 15 minutos, mas so
toleradas certas variaes se elas permitirem melhorar a
linearidade da curva dose/resposta.
MTODO CINTICO
Transferir 40 L de cada poo para uma segunda srie de
poos, juntar 20 L da soluo do Fator Xa bovino e incubar
a 37 C durante 30 segundos. Juntar 40 L da soluo
do Substrato cromognico para o Fator Xa a 2 mmol/L,
incubar a 37 C e determinar a velocidade de clivagem
do substrato procedendo leitura contnua da variao
de absorvncia a 405 nm (5.2.14) possibilitando, assim,
calcular a velocidade inicial de clivagem do substrato. Essa
velocidade deve ser proporcional concentrao residual
do Fator Xa. Verifcar a validade do ensaio e calcular a
atividade da heparina da amostra pelos procedimentos
estatsticos aplicveis aos ensaios biolgicos (8).
5.5.1.2 DETERMINAO DO FATOR DE
VON WILLEBRAND HUMANO
A potncia do Fator de Von Willebrand humano determinada
pela comparao, em condies obrigatoriamente
dadas, da sua atividade em colgeno ou como cofator de
ristocetina com a mesma atividade, e calibrada utilizando-
se um padro de referncia internacional, em unidades
5
internacionais, quando aplicvel. A Unidade Internacional
a atividade de um montante declarado do padro de
referncia internacional para o Fator de Von Willebrand
existente no concentrado de Fator VIII da coagulao do
sangue humano. A equivalncia em unidades internacionais
do padro de referncia internacional indicada pela
Organizao Mundial de Sade (OMS).
DOSEAMENTO DA LIGAO AO COLGENO
A ligao ao colgeno determinada por tcnica de
imunoensaio enzimtico em placas de micro titulao,
revestidas por colgeno. O mtodo baseia-se na ligao
especfca do Fator de Von Willebrand s fbras de colgeno
e da subsequente ligao de um anticorpo policlonal anti-
Fator de Von Willebrand conjugado a uma enzima. Aps
a adio de um substrato cromognico h a formao
de um produto quantifcvel espectrofotometricamente.
Em condies apropriadas, h uma relao linear entre
o colgeno, Fator de Von Willebrand e a absorvncia
indicada.
MATERIAIS
Colgeno: usar fbrilas de colgeno de eqino nativo, ou
humanas, tipo I ou III. Para facilitar o manuseio, podem ser
usadas as solues de colgeno.
Diluente de colgeno: dissolver 50 g de glicose em gua.
Ajustar o pH em 2,7 a 2,9 com cido clordrico M e diluir
em gua a 1000 mL.
Tampo de cloreto-fosfato: dissolver 8 g de cloreto de
sdio, 1,05 g de fosfato de sdio dibsico, diidratado,
0,2 g de fosfato de sdio monobsico diidratado e 0,2 g
de cloreto de potssio em gua. Ajustar o pH em 7,2 com
hidrxido de sdio M ou cido clordrico M. Diluir a 1000
mL com gua.
Soluo de lavagem tamponada: soluo de polissorbato
20 a 0,1% (p/v) em Tampo de cloreto-fosfato.
Reagente de neutralizao: preparar o Tampo de cloreto-
fosfato contendo polissorbato 20 a 0,1% (p/v) e albumina
bovina a 1% (p/v).
Tampo para diluio: preparar o Tampo de cloreto-
fosfato contendo polissorbato 20 a 0,1% (p/v) e albumina
bovina a 5% (p/v).
Conjugao: soro de coelho do anti-Fator de Von Willebrand
humano conjugado peroxidase do rbano silvestre, um
marcador histoqumico. Seguir as recomendaes do
fabricante.
Soluo de substrato: dissolver, imediatamente antes de seu
uso, um comprimido de cloridrato de o-fenilenodiamina e
um comprimido de perxido de carbamida em 20 mL de
gua, ou usar um volume adequado de gua oxigenada.
Proteger da luz.
Placas de microtitulao: devem possuir fundo plano,
placas de poliestireno com propriedades de superfcie
otimizadas para ensaio imunoenzimtico e protena de alta
capacidade de ligao.
PROCEDIMENTO
Soluo teste: reconstituir a preparao a ser analisada
como indicado no rtulo. Diluir com Tampo para diluio
de modo a preparar uma soluo contendo cerca de 1 UI/
mL de Fator de Von Willebrand. Preparar duas sries
independentes com pelo menos trs diluies mediante o
uso do Tampo para diluio.
Solues de referncia: reconstituir a preparao de
referncia como indicado. Diluir com Tampo para
diluio de modo a preparar uma soluo contendo cerca de
1 UI/mL de Fator de Von Willebrand. Preparar duas sries
independentes com pelo menos trs diluies mediante o
uso do Tampo para diluio.
Possibilitar que a soluo de colgeno atinja a temperatura
ambiente. Diluir com Diluente de colgeno de modo a obter
uma soluo contendo 30 a 75 mg/mL de colgeno. Misturar,
brandamente, para produzir uma suspenso uniforme das
fbras do colgeno e em seguida pipetar 0,1 mL e transferir
para cada poo da microplaca. Cobrir a placa com flme
plstico e incubar a 37 C de um dia para o outro. Esvaziar
os poos da placa revestida com o colgeno por inverso e
drenagem em uma toalha de papel. Adicionar 0,25 mL de
Soluo de lavagem tamponada. Esvaziar os poos da placa
por inverso e drenar em uma toalha de papel, repetindo essa
operao trs vezes. Adicionar, a cada poo, 0,25 mL de
Reagente de neutralizao, cobrir a placa com flme plstico
e incubar a 37 C por 1 hora. Os poos da placa devem ser
esvaziados por inverso e drenagem em toalha de papel.
Adicionar 0,25 mL de Soluo de lavagem tamponada.
Esvaziar os poos da placa por inverso e drenar em uma
toalha de papel. Repetir essa operao trs vezes.
Adicionar 0,1 mL de cada uma das Solues teste ou
referncia aos poos. Adicionar 0,1 mL de Tampo para
diluio a uma srie de poos de modo a obter-se o controle
negativo. Cobrir a placa com flme plstico e incub-la a 37
C por 2 horas. Os poos da placa devem ser esvaziados
por inverso e drenagem em toalha de papel. Adicionar
0,25 mL de Soluo de lavagem tamponada. Esvaziar os
poos da placa por inverso e drenagem em uma toalha de
papel, repetindo esta operao por trs vezes.
Preparar uma diluio adequada de Conjugao com
Tampo de cloreto-fosfato contendo albumina bovina a
0,5% (p/v) e adicionar 0,1 mL a cada poo. Cobrir a placa
com flme plstico e incubar a 37 C por 2 horas. Esvaziar
os poos da placa por inverso e drenagem em uma toalha
de papel. Adicionar 0,25 mL de Soluo de lavagem
tamponada. Esvaziar os poos da placa por inverso e
drenar em uma toalha de papel. Repetir esta operao trs
vezes.
Adicionar 0,1 mL de Soluo de substrato a cada um
dos poos e incubar temperatura ambiente por 20
5
PROCEDIMENTO
Soluo teste: diluir a amostra no Tampo de diluio de
modo a obter uma soluo contendo 0,015 UI de Fator
II por mililitro. Preparar, pelo menos, mais trs diluies
dessa soluo em Tampo de diluio.
Soluo padro: diluir o padro no Tampo de diluio de
modo a obter uma soluo contendo 0,015 UI de Fator II
por mililitro. Preparar, pelo menos, mais trs diluies dessa
soluo no Tampo de diluio. Colocar todas as solues
em banho-maria a 37 C, pouco tempo antes do ensaio. As
condies descritas aplicam-se s placas de microtitulao.
Se a determinao realizada em tubos, ajustar os volumes
de modo a manter as propores na mistura. Introduzir
25 L das diferentes diluies da Soluo amostra e
da Soluo padro, numa srie de poos da placa de
microtitulao mantida a 37 C. Juntar em cada poo 125
L do Tampo de diluio e 25 L de Ativador especfco
do Fator II proveniente do veneno da vbora e incubar
durante exatamente 2 minutos. Juntar em cada poo 25 L
de Substrato cromognico para o Fator IIa.
Proceder leitura da velocidade de variao da absorvncia
em 405 nm (5.2.14) e continuar durante trs minutos de
modo obter a velocidade mdia de variao da absorvncia.
Se no for possvel uma leitura contnua, determinar
a absorvncia em 405 nm em intervalos consecutivos
apropriados, por exemplo, de 40 em 40 segundos. Construir
o grfco linear dos valores de absoro em funo do
tempo e calcular a velocidade mdia de variao da
absorvncia. A partir dos valores individuais encontrados
para cada diluio do padro e da amostra, calcular a
atividade da amostra e verifcar a validade do doseamento
pelos mtodos estatsticos habituais (8).
5.5.1.4 DETERMINAO DO FATOR
IX DA COAGULAO SANGUNEA
HUMANA
Determina-se a atividade da amostra, comparando a
quantidade da amostra necessria para reduzir o tempo
de coagulao de uma mistura de prova que contm
as substncias, alm do Fator IX, necessrias para a
coagulao do sangue; com a quantidade de uma preparao
de referncia, avaliada em unidades internacionais,
necessrias para obter o mesmo efeito.
A Unidade Internacional corresponde atividade de
uma determinada quantidade do Padro Internacional
constitudo por um concentrado lioflizado do Fator IX
da coagulao sangunea. A equivalncia em unidades
internacionais do padro internacional estabelecida pela
Organizao Mundial de Sade.
Reconstituir, respectivamente, a amostra e a preparao de
referncia de acordo com as indicaes do rtulo e utilize
imediatamente. Quando aplicvel, determinar a quantidade
de heparina presente e neutralize-a juntando sulfato de
protamina (10 g de sulfato de protamina neutralizam
1,0 UI de heparina). Dilua a amostra e a preparao de
minutos no escuro. Adicionar 0,1 mL de cido clordrico
M a cada um dos poos. Medir a absorvncia a 492 nm
(5.2.14). Utilizar os valores de absorvncia para estimar a
potncia da preparao a ser analisada mediante o emprego
dos procedimentos estatsticos aplicveis aos ensaios
biolgicos (8).
O ensaio vlido se as absorvncias medidas para os
controles negativos forem maiores do que 0,05.
5.5.1.3 DETERMINAO DO FATOR II DA
COAGULAO SANGUINEA HUMANA
A determinao do Fator II da coagulao humana
realizada aps ativao especfca em Fator IIa. O Fator
IIa calculado comparando a sua atividade em um
substrato cromognico peptdico especfco com a mesma
atividade do padro internacional ou de uma preparao
padro calibrada em Unidades Internacionais (UI). A
Unidade Internacional do Fator II corresponde atividade
de uma dada quantidade do padro internacional, que
constitudo por um concentrado lioflizado do Fator II da
coagulao sangunea. A correspondncia entre a Unidade
Internacional e o Padro Internacional estabelecida pela
O mtodo da determinao cromognica inclui duas etapas
sucessivas: ativao do Fator II por ao do veneno de cobra
e a clivagem enzimtica de um substrato cromognico
pelo Fator IIa que liberta um cromforo quantifcvel
por espectrofotometria. Em condies de doseamento
apropriados, existe uma relao linear entre a atividade do
Fator IIa e a clivagem do substrato cromognico.
REAGENTES
Ativador especfco do Fator II proveniente do veneno
da vbora (Ecarina): protena obtida a partir do veneno
da vbora Echis carinatus, ativa especifcamente o Fator
II. Reconstituir a preparao seguindo as instrues do
fabricante. Uma vez reconstituda, conservar a 4 C e
utilizar no espao de 1 ms.
Substrato cromognico para o Fator IIa: substrato
cromognico especfco do Fator IIa como: cloridrato de
H-D-fenilalanil-L-pipecolil-L-arginina-4-nitroanilida,
4-toluenosulfonil-glicil-prolil-Larginina-4-nitroanilida,
H-D- ciclohexilglicil--aminobutiril-L-arginina-4-
nitroanilida, D-ciclohexilglicil-L-alanilarginina-4-
nitroanilida-diacetato. Reconstituir seguindo as instrues
do fabricante.
Tampo de diluio: soluo contendo 0,606% (p/v)
de trometamina, cloreto de sdio a 1,753% (p/v), cido
edtico a 0,279% (p/v) e albumina bovina ou de albumina
humana a 0,1% (p/v). Ajustar, se necessrio, o pH para 8,4
com cido clordrico.
5
referncia com tampo de imidazol de pH 7,3 de modo a
obter solues com 0,5 a 2,0 UI por mililitro. Com uma
mistura de citrato de sdio a 3,8% (p/v) e tampo de
imidazol de pH 7,3 (1:5), preparar uma srie de diluies
compreendendo 1/10, 1/20, 1/40 e 1/80. Essas diluies
devero ser preparadas com preciso e so utilizadas
imediatamente.
Utilizar, por exemplo, tubos de incubao mantidos em
banho-maria a 37 C. Introduzir em cada tubo 0,1 mL de
substrato de plasma e 0,1 mL de cada uma das diluies
da preparao de referncia e da amostra. Juntar em cada
tubo 0,1 mL de uma diluio apropriada de cefalina SR ou
substituto de plaquetas e 0,1 mL de uma suspenso de 0,5 g
de caolim leve em 100 mL de cloreto de sdio a 0,9% (p/v)
e deixar em repouso durante cerca de 10 min, inclinando os
tubos regularmente. Juntar a cada tubo 0,1 mL de soluo
de cloreto de clcio a 0,74% (p/v). Com o auxlio de um
cronmetro, determine o tempo de coagulao, isso , o
intervalo de tempo entre o momento da adio do cloreto
de clcio e a primeira indicao da formao de fbrina
que se observa visualmente ou com aparelhos apropriados.
Calcular a atividade utilizando o procedimento estatstico
aplicveis aos ensaios biolgicos (8).
Para assegurar que no existe contaminao aprecivel
do substrato de plasma pelo Fator IX, realizar um ensaio
em branco utilizando, em vez da amostra, um volume
correspondente de uma mistura de citrato de sdio a 3,8%
(p/v) e tampo de imidazol de pH 7,3 (1:5). O ensaio s
vlido se o tempo de coagulao determinado no ensaio
em branco estiver compreendido entre 100 e 200 segundos.
VII DA COAGULAO SANGUINEA
HUMANA
A determinao do Fator VII da coagulao realizada
pela determinao da sua atividade biolgica como um
cofator na ativao do Fator X pelo Fator VIIa/Fator
Tecidular em presena de ons de clcio e de fosfolipdios.
A atividade de uma preparao do Fator VII calculada por
comparao das quantidades respectivas dessa preparao
e do padro internacional ou de uma preparao de
referncia determinada em unidades internacionais que
so necessrias para obter uma velocidade de formao
do Fator Xa num meio de reao contendo as diferentes
substncias que intervm na ativao do Fator X.
A Unidade Internacional da atividade do Fator VII
corresponde atividade de uma dada quantidade do
padro internacional que atualmente constitudo por um
plasma lioflizado. A correspondncia entre a Unidade
Internacional e o Padro Internacional estabelecida pela
O mtodo da determinao cromognica comporta duas
etapas sucessivas: a ativao do Fator X, sob a ao
do Fator VIIa, numa mistura reativa contendo o Fator
Tecidular/fosfolipdeo e o on clcio e a lise enzimtica
de um substrato cromognico pelo Fator Xa que liberta
um cromforo quantifcvel por espectrofotometria. Em
condies apropriadas de doseamento, existe uma relao
linear entre a velocidade de formao do Fator Xa e a
concentrao do Fator VII. O esquema seguinte resume o
princpio da determinao:
Etapa 1
Fator Tecidular + Ca
2+
a) Fator VII Fator VIIa
Fator VIIa + Ca
2+

+ Fator Tecidular/fosfolipdeo
b) Fator X Fator Xa
Etapa 2
Fator Xa
a) Substrato cromognico Peptdeo + cromforo
As duas etapas utilizam reagentes disponveis no mercado,
originrio de diversos fornecedores. Embora a composio
desses reagentes possa variar, ligeiramente, as suas
caractersticas essenciais so descritas nas especifcaes
que se seguem.
REAGENTES
A mistura reativa de fatores da coagulao contm,
especialmente, protenas purifcadas de origem humana,
ou bovina, especifcamente o Fator X, a tromboplastina e
Fator Tecidular/fosfolipdeo e um ativador do Fator VII.
Essas protenas so, parcialmente, purifcadas e no contm
impurezas capazes de interferir na ativao do Fator VII ou
do Fator X. O Fator X est presente em quantidade tal que
a sua concentrao fnal, fora da etapa de ativao, seja
de 10 - 350 nmol/L, de preferncia de 14 - 70 nmol/L.
A tromboplastina utilizada pode ser de origem natural
(crebro de boi ou coelho) ou sinttica. A tromboplastina
utilizada para a determinao do tempo de Quick diluda
de 5 a 50 vezes numa soluo tampo de maneira que a
concentrao fnal de Ca
2+
seja de 15-25 nmol/L. A etapa
fnal de formao do Fator Xa conduzida numa soluo
contendo albumina humana ou albumina bovina a uma
concentrao em que no ocorram perdas na adsoro e,
convenientemente, tamponada a pH compreendido entre
7,3 e 8,0. O Fator VII o nico Fator que limita a formao
do Fator Xa na mistura de incubao fnal e nenhum dos
constituintes reativos da mistura tem o poder de induzir por
si s a formao do Fator Xa.
A segunda etapa consiste na quantifcao do Fator Xa
formado na etapa precedente, no meio de um substrato
cromognico especfco do Fator Xa. Esse substrato
geralmente um peptdeo curto derivado de 3 a 5 cidos
aminados ligados a um grupamento cromforo. A ciso
desse grupamento e do substrato peptdico promove
um deslocamento da atividade cromofrica para um
comprimento de onda que possibilita a sua quantifcao
por espectrofotometria. O substrato geralmente
dissolvido em gua e utilizado numa concentrao fnal de
0,2 - 2 nmol/L. Pode igualmente compreender os inibidores

5
variaes se possibilitarem melhorar a linearidade da curva
dose-resposta. Verifque a validade da titulao e calcule a
atividade da preparao da amostra pelos procedimentos
5.5.1.6 DETERMINAO DO FATOR X DA
COAGULAO SANGUINEA HUMANA
A determinao do Fator X da coagulao sangunea
humana realizada aps ativao especfca em Fator
Xa, que calculada por comparao da sua atividade em
clivar um substrato cromognico peptdico especfco
com a mesma atividade do Padro Internacional ou
de uma preparao de referncia aferida em Unidades
Internacionais.
A Unidade Internacional do Fator X corresponde
atividade de uma dada quantidade do Padro Internacional
que constitudo por um concentrado lioflizado do Fator
X da coagulao sangunea humana.
A correspondncia entre a Unidade Internacional e o
Padro Internacional estabelecida pela Organizao
Mundial de Sade.
O mtodo da determinao cromognica inclui duas etapas:
ativao do Fator X sob ao do veneno de cobra, seguida
de clivagem enzimtica de um substrato cromognico
pelo Fator Xa que liberta um cromforo quantifcvel
por espectrofotometria. Em condies de doseamento
apropriados, existe uma relao linear entre a atividade do
Fator Xa e a clivagem do substrato.
REAGENTES
Ativador especfco do Fator X proveniente do veneno
da vbora de Russel (VVR): protena obtida a partir do
veneno da vbora de Russel (Vipera russelli) que ativa,
especifcamente, o Fator X. Reconstituir a preparao
seguindo as instrues do fabricante. Uma vez reconstituda,
conservar a 4 C e utilizar no espao de 1 ms.
Substrato cromognico para o Fator Xa: substrato
cromognico especfco do Fator Xa tal como: cloridrato
de N--benziloxicarbonil-D-arginil-L-glicil-L-arginina-
4-nitroanilida, cloridrato de Nbenzoil-L-isoleucil-L-
glutamil-glicil-L-arginina-4-nitroanilida, metanosulfonil-
D-leucil-glicil-L-arginina-4-nitroanilida, acetato de
metoxicarbonil-D-ciclo-hexilalanil-glicil-L-arginina-
4-nitroanilida. Reconstituir seguindo as instrues do
fabricante.
Tampo de diluio: soluo contendo trometamina a
0,37% (p/v), cloreto de sdio a 1,8% (p/v), imidazol a
0,21% (p/v), brometo de hexadimetrina a 0,002% (p/v) e
albumina bovina, ou de albumina humana a 0,1% (p/v). Se
necessrio, ajustar para pH 8,4 com cido clordrico.
PROCEDIMENTO
Soluo teste: diluir a amostra no Tampo de diluio de
modo a obter uma soluo contendo 0,18 UI do Fator X
apropriados impedindo o prosseguir da formao do Fator
Xa (adio de iodeto).
PROCEDIMENTO
Reconstituir, separadamente, o contedo de uma ampola
da preparao de referncia e da amostra adicionando uma
quantidade de gua pretendida e uma vez reconstitudas
utilize-as no espao de uma hora. Adicionar s preparaes
reconstitudas as quantidades de pr-diluente necessrias
para obter solues a 0,5 - 2,0 UI do Fator VII por mililitro.
Preparar as diluies seguintes da preparao de referncia
e da amostra com uma soluo tampo isotnica sem
agente de quelao, contendo albumina humana ou bovina
a 1% (p/v), e de preferncia tamponada para pH 7,3 - 8,0.
Fazer de cada uma das duas preparaes pelo menos trs
diluies separadas independentes, de preferncia, em
duplicata. As concentraes dessas diluies em Fator
VII so ajustadas de modo que a concentrao fnal seja
inferior a 0,005 UI/mL.
Preparar, igualmente, uma soluo controle contendo o
conjunto dos constituintes da mistura reativa com exceo
do Fator VII.
Todas as diluies so preparadas em tubos de plstico e
utilizadas durante a primeira hora.
Etapa 1. A cada uma das diluies, obtidas a partir da
preparao de referncia e da amostra, adicionar um volume
apropriado do reagente de coagulao pr-aquecido (ou de
uma mistura dos seus constituintes separados), misturar
e incubar a 37 C em tubos de plstico ou poos de uma
microplaca. A concentrao dos diferentes constituintes
durante a formao do Fator Xa como a especifcada
em reagentes. Deixar desenvolver a reao de ativao do
Fator X durante um tempo apropriado; o trmino da reao
acontece, de preferncia, antes que a concentrao em
Fator Xa tenha atingido o seu nvel mximo, a fm de que a
curva dose-resposta apresente uma linearidade satisfatria.
O tempo de reao igualmente escolhido de modo que
a condio de linearidade da curva de produo do Fator
Xa em funo do tempo seja satisfatria. geralmente
da ordem de 2 a 5 minutos, mas so admissveis certas
variaes para possibilitarem melhorar a linearidade da
curva dose-resposta.
Etapa 2. Parar a reao de ativao por adio de uma
mistura reativa contendo o substrato cromognico. A
velocidade de lise do substrato, que proporcional
concentrao do Fator Xa determinada com o auxlio de
um espectrofotmetro pela variao da absorvncia num
comprimento de onda apropriado. Pode determinar-se a
absorvncia, continuamente, o que possibilita calcular a
velocidade inicial de lise do substrato, quer interrompendo
a reao de hidrlise ao fm de um tempo apropriado,
baixando o pH com um reagente apropriado tal como o
cido actico a 50% (p/v) ou uma soluo de citrato de sdio
M em pH 3,0. Ajustar o tempo de hidrlise de modo que
a condio de linearidade de formao do cromforo em
funo do tempo seja satisfatria. Esse tempo geralmente
da ordem dos 3 a 15 minutos, mas so toleradas certas
5
por mililitro. Preparar, pelo menos, mais trs diluies
dessa soluo no Tampo de diluio.
Soluo padro: diluir a preparao padro no Tampo de
diluio de modo a obter uma soluo contendo 0,18 UI
do Fator X por mililitro. Preparar, pelo menos, mais trs
diluies dessa soluo no Tampo de diluio.
Pouco tempo antes do ensaio, colocar todas as solues em
banho-maria a 37 C.
As condies descritas aplicam-se s placas de
microtitulao. Se a determinao realizada em tubos,
ajustar os volumes de modo a manter a proporo nas
misturas.
Transferir 12,5 L das diferentes diluies da Soluo teste
ou da Soluo padro para uma srie de poos de uma placa
de microtitulao mantida a 37 C. Adicionar em cada poo
25 L de VVR. Incubar durante exatamente 90 segundos.
Adicionar a cada poo, 150 L Substrato cromognico
para o Fator Xa, diludo seis vezes no Tampo de diluio.
Proceder leitura da variao de absorvncia em 405 nm
(5.2.14) e continuar durante trs minutos de modo a obter
a velocidade mdia de variao da absorvncia. Se no for
possvel uma leitura continua, determinar a absorvncia
em 405 nm com intervalos consecutivos apropriados, por
exemplo, de 40 em 40 segundos. Construir o grfco linear
dos valores de absorvncia em funo do tempo e calcular
a velocidade mdia de variao da absorvncia. A partir
dos valores individuais encontrados para cada diluio
do padro e da amostra, calcular a atividade da amostra e
verifcar a validade da aferio pelos mtodos estatsticos
habituais (8).
VIII DA COAGULAO SANGUNEA
HUMANA, LIOFILIZADO
E realizado pela determinao da atividade biolgica
do Fator VIII como um cofator na ativao do Fator X
pelo Fator IX ativado (IXa) em presena de ons clcio
e de fosfolipdios. A atividade de uma preparao do
Fator VIII calculada por comparao das quantidades
respectivas dessa preparao e do Padro Internacional;
ou de uma preparao de referencia aferida em unidades
internacionais que so necessrias para se obter uma
determinada velocidade de formao do Fator Xa num
meio de reao contendo as diferentes substancias que
participam na ativao do Fator X.
A Unidade Internacional da atividade do Fator VIII
corresponde atividade de uma determinada quantidade
do Padro Internacional que consiste em um concentrado
lioflizado do Fator VIII da coagulao sangunea humana.
A equivalncia do Padro Internacional com Unidades
Internacionais estabelecida pela Organizao Mundial de
Sade (OMS). O concentrado de Fator VIII da coagulao
sangunea humana aferido em unidades internacionais
em relao ao Padro Internacional. O mtodo de aferio
colorimtrica consiste em duas etapas sucessivas: a ativao
do Fator X sob a ao do Fator VIII numa mistura reativa de
fatores de coagulao compostos de substncias purifcadas
e a clivagem enzimtica de um substrato cromognico
pelo Fator Xa que libera um cromforo quantifcvel por
espectrofotometria. Em condies apropriadas de aferio
h uma relao linear entre a velocidade de formao do
Fator Xa e a concentrao do Fator VIII. No esquema
seguinte resume-se o principio da aferio:
Etapa 1
Fator VIII ativado
Fator X Fator Xa
Fator IXa, fosfolipdio, Ca
2+
Etapa 2
Fator Xa
substrato cromognico peptdeo + cromforo
As duas etapas utilizam reagentes que podem ser
obtidos comercialmente. Embora a composio desses
reagentes possa estar sujeita a alguma variao, suas
caractersticas essenciais so descritas nas presentes
especifcaes. Podem ser permitidos desvios em relao a
tais especifcaes desde que seja demonstrado, mediante
o uso do Padro Internacional, que os resultados obtidos
no diferem signifcativamente. As embalagens comerciais
so utilizadas de acordo com as instrues do fabricante;
importante assegurar que a embalagem escolhida
adequada.
Os conjuntos usados devem ser devidamente validados,
podendo ser utilizado nesse caso, a verifcao do tempo
de gerao do Fator Xa, a fm de determinar o tempo
necessrio para alcanar 50% de formao mxima de
Fator Xa.
REAGENTES
A mistura reativa de fatores da coagulao corresponde
s protenas purifcadas, de origem humana, ou bovina,
especifcadamente, o Fator X, o Fator IXa e um ativador
do Fator VIII, geralmente a trombina. Essas protenas so
parcialmente purifcadas, preferencialmente, no mnimo
a 50% e no contm impurezas capazes de interferir na
ativao do Fator VIII, ou Fator X. A trombina pode estar
presente sob a forma do seu precursor, a protrombina, desde
que sua ativao na mistura reativa seja sufcientemente
rpida para possibilitar uma ativao completa e quase
instantnea do Fator VIII no ensaio. A mistura reativa deve
conter fosfolipdios que podem ser de origem natural (por
exemplo: crebro, medula espinhal bovina e extrato de
soja) ou obtida artifcialmente, sendo constituda, por cerca
de 15 a 31% de fosfatidilserina. A concentrao fnal em
fosfolipdios durante a etapa de formao do Fator Xa
de, aproximadamente, 10 a 35 mol/L. A mistura reativa
contm, tambm, ons clcio em quantidade tal que a sua
concentrao fnal seja de 5 a 15 mmol/L. A etapa fnal
de formao do Fator Xa conduzida numa soluo que
deve conter, no mnimo, 1 mg/mL de albumina humana,
ou bovina, convenientemente tamponada (pH 7,3 a 8,0).
Os diferentes constituintes do meio reativo so geralmente
reunidos em duas preparaes separadas, que no devero

5
induzir por si s a formao de Fator Xa. Depois da
reconstituio essas duas preparaes podem ser reunidas
com a condio de que no se formem quantidades de
Fator Xa na ausncia do Fator VIII. O Fator VIII o nico
fator que limita a formao do Fator Xa na mistura de
incubao fnal. A segunda etapa consiste na quantifcao
do Fator Xa formado na etapa anterior no meio de um
substrato cromognico especfco do Fator Xa. Esse
substrato geralmente um peptdeo curto derivado de 3
a 5 aminocidos ligados a um agrupamento cromforo. A
ciso desse grupamento e do substrato peptdico promove
um deslocamento da atividade cromofrica para um
comprimento de onda que possibilita a sua quantifcao
por espectrofotometria. O substrato, geralmente dissolvido
em gua e utilizado numa concentrao fnal de 0,2 a
2 mmol/L, deve conter os inibidores apropriados ao
impedimento da formao adicional do Fator Xa e suprimir
toda a atividade trombnica, o que possibilita melhorar a
seletividade do doseamento em presena do Fator Xa.
PROCEDIMENTO
Deve ser reconstitudo todo contedo de uma ampola
da preparao de referencia e da amostra adicionando
a quantidade de gua; usar imediatamente. Adicionar
quantidades de pr-diluentes necessrios para obter
solues entre 0,5 a 2,0 UI/mL. O pr-diluente constitudo
por plasma proveniente de um doador portador grave da
hemoflia A, ou de um reagente preparado artifcialmente,
dando resultados equivalentes aos obtidos com plasma
hemoflico e com as mesmas preparaes padro e
amostra. As solues pr-diludas devem apresentar boa
estabilidade para alem do tempo necessrio determinao
(pelo menos 30 minutos) a 20 C, e devem ser utilizadas
dentro de 15 minutos. Realizar as diluies seguintes da
preparao padro e da amostra por meio de uma soluo
tampo isotnica sem agente de quelao, e contendo 1%
de albumina humana ou bovina; a soluo pode conter,
por exemplo, trometamina ou imidazol e de preferncia
tamponada (pH 7,3 a 8,0). Preparar, no mnimo, trs
diluies adicionais independentes, de preferncia em
duplicata. As solues devem ser preparadas de modo
que a concentrao fnal em Fator VIII, fora da etapa de
formao do Fator Xa, seja inferior a 0,03 UI/mL e de
preferncia a 0,01 UI/mL. Preparar um padro contendo o
conjunto dos constituintes da mistura reativa, com exceo
do Fator VIII. Preparar as diluies em tubos plsticos e
usar imediatamente.
Etapa 1. A cada uma das diluies pr-aquecidas, obtidas a
partir da preparao padro e da amostra, juntar um volume
apropriado do reagente de coagulao pr-aquecido (ou de
uma mistura dos seus constituintes separados), misturar
e incubar a 37 C em tubos plsticos ou poo de uma
micro-placa. Deixar correr a reao de ativao do Fator
X durante tempo apropriado; o fm da reao acontece de
preferncia antes que a concentrao em Fator X tenha
atingido o seu nvel Maximo, a fm de que a curva dose
resposta apresente uma linearidade satisfatria. O tempo
de reao igualmente escolhido de modo que a condio
de linearidade da curva de produo do Fator Xa em funo
do tempo seja satisfatria. E geralmente da ordem de 2 a
5 minutos no sendo admissveis certas variaes que
possibilitem melhorar a linearidade da curva dose resposta.
Etapa 2. Interromper a reao de ativao por adio de
uma mistura reativa contendo o substrato cromognico.
A velocidade de clivagem do substrato, que
proporcional a concentrao do Fator Xa, determinada
num espectrofotmetro, pela variao da absorvncia
num comprimento de onda apropriado. Determinar a
absorvncia, continuadamente, de modo a possibilitar o
clculo da velocidade inicial de clivagem do substrato, quer
interrompendo a reao de hidrolise ao fm de um tempo
apropriado baixando o pH, com um reagente apropriado
tal como o acido actico (50% v/v de C
2
H
4
O
2
) ou tampo
citrato M pH 3,0. Ajustar o tempo de hidrolise de modo que
a condio de linearidade da formao do cromforo em
funo do tempo seja satisfatria. Esse tempo geralmente
da ordem dos 3 a 15 minutos, sendo toleradas certas
variaes, desde que possibilitam o melhoramento da
linearidade da curva dose resposta. Verifcar a validade do
ensaio e calcular a atividade da amostra por procedimentos
estatsticos aplicados aos ensaios biolgicos (8).
5.5.1.8 DETERMINAO DE FATORES
DA COAGULAO ATIVADOS
Se a amostra contiver heparina, determine a quantidade
existente e neutralize-a juntando sulfato de protamina (10
g de sulfato de protamina neutralizam 1 UI de heparina).
Com o tampo tris-cloreto de sdio pH 7,5, prepare
diluies a 1/10 e 1/100. Coloque uma srie de tubos de
poliestireno em banho-maria a 37 C. Introduza em cada
tubo 0,1 mL de plasma pobre em plaquetas e 0,1 mL de uma
diluio apropriada de cefalina SR ou de uma preparao
fosfolipdica que atue como substituto de plaquetas. Deixe
em repouso durante 60 segundos e junte a cada tubo 0,1
mL de uma das diluies e para o tubo de ensaio em branco
0,1 mL da soluo tampo.
Junte, imediatamente, a cada tubo 0,1 mL de uma soluo
de cloreto de clcio a 0,37% (p/v), previamente aquecida a
37 C, e determine o intervalo de tempo entre a adio da
soluo de cloreto de clcio e a formao do cogulo, essa
determinao realizada nos 30 minutos que se seguem
primeira diluio. O ensaio s vlido se o tempo de
coagulao do ensaio em branco for de 200 a 350 segundos.
5.5.1.9 DETERMINAO DE TTULO DE
HEMAGLUTININAS ANTI-A E ANTI-B
(MTODO INDIRETO)
Preparar uma diluio seriada em duplicata da preparao
a ser examinada em soluo de cloreto de sdio a 0,9%
(p/v). Para cada diluio de uma srie, adicionar volume
igual a 5% (v/v) da suspenso de hemcias do grupo A1.
As hemcias devem ser previamente lavadas trs vezes em
soluo de cloreto de sdio. Para cada diluio da outra
srie adicionar volume igual de 5% (v/v) da suspenso de
hemcias do grupo B. As hemcias devem ser previamente
lavadas trs vezes em soluo de cloreto de sdio a
5
0,9% (p/v). Incubar as sries de diluio a 37 C por 30
minutos e ento lavar trs vezes com cloreto de sdio a
0,9% (p/v). Deixar as hemcias em contato com o reagente
antiglobulina humano polivalente por 30 minutos. Sem
centrifugar, examinar cada suspenso para aglutinao em
microscpio.
5.5.1.10 TCNICAS DE AMPLIFICAO
DE CIDOS NUCLEICOS
INTRODUO
As tcnicas de amplifcao de cidos nucleicos foram
estabelecidas com base em dois princpios diferentes:
a) amplifcao de uma sequncia alvo de cidos nucleicos
utilizando a reao em cadeia da polimerase (PCR), a
reao em cadeia da ligase (LCR), ou a amplifcao
isotrmica de uma sequncia de cido ribonucleico (RNA);
b) amplifcao de um sinal de hibridizao para o cido
desoxirribonucleico (DNA) mediante o emprego do
mtodo do DNA ramifcado (bDNA), a exemplo. Nesse
caso, a amplifcao do sinal se realiza sem submeter o
cido nucleico a ciclos repetitivos de amplifcao.
Em linhas gerais, o mtodo PCR descrito como a tcnica
de referncia. Podem ser utilizados mtodos alternativos,
desde que satisfaam os requisitos da qualidade e sejam
devidamente validados.
CAMPO DE APLICAO
Estabelecer os requisitos de preparao da amostra,
da amplifcao de sequncias do DNA e da deteco
especfca do produto da reao PCR. A PCR possibilita
deteco e amplifcao de sequncias defnidas de
DNA e de RNA (aps sua transcrio reversa em DNA
complementar - cDNA).
PRINCPIO DO MTODO
A PCR o fundamento de um mtodo que possibilita a
amplifcao especfca in vitro de segmentos de DNA ou
RNA. Aps a desnaturao da cadeia dupla de DNA em
cadeias simples de DNA, dois oligonucleotdeos sintticos
iniciadores, de polaridade oposta, se hibridizam com
suas respectivas sequncias complementares, no DNA a
ser amplifcado. Nesse caso, a atividade dos iniciadores
possibilita que seja completada a cadeia simples do DNA,
dando lugar a sequncias curtas, biquaternrias que rodeiam
o fragmento do DNA a ser amplifcado; servindo assim
como ponto de partida da sntese do DNA. Salientando-se
que tal processo realizado mediante a ao de uma DNA
polimerase termoestvel.
A amplifcao do DNA ocorre em ciclos que consistem em:
- desnaturao do cido nucleico pelo calor (sequncia
alvo a ser amplifcada) em duas cadeias monoquaternrias;
- hibridizao especfca dos iniciadores com a sequncia a
ser amplifcada, sob condies adequadas de reao;
- alongamento, mediante a ao da DNA polimerase, dos
iniciadores ligados a cada uma das duas cadeias simples,
a uma temperatura adequada (favorvel ao processo de
sntese de DNA).
Os ciclos repetidos de desnaturao pelo calor, a
hibridizao dos iniciadores e a sntese de DNA do lugar
a uma amplifcao exponencial do fragmento de DNA
ento delimitado pelos iniciadores.
O produto especfco da reao de PCR, conhecido como
amplicon, pode ser detectado por meio de uma variedade
de mtodos de especifcidade e sensibilidade apropriadas.
O ensaio de PCR Multiplex usa vrios pares de iniciadores,
destinados a amplifcao simultnea para diferentes alvos
de uma reao.
MATERIAL PARA O ENSAIO
Devido grande sensibilidade da PCR, as amostras
devem ser protegidas da incidncia de luz e de qualquer
contaminao externa. A amostragem, conservao
e transporte do material a ser ensaiado devem ser
desenvolvidos em condies que possibilitam reduzir
ao mnimo os riscos de degradao da sequncia a ser
amplifcada. No caso das sequncias de RNA marcado,
devem ser tomadas precaues especiais j que o RNA
muito sensvel degradao por ribonucleases, como
tambm, a alguns aditivos (anticoagulantes e conservantes)
que podem interferir nos ensaios.
PROCEDIMENTO
Preveno dos contaminantes
O risco de contaminao requer a existncia de reas
restritas, segundo a natureza dos materiais e tecnologia
utilizados. Os pontos a serem considerados incluem:
a movimentao de pessoal, o fuxo de trabalho, a
movimentao de materiais, sistemas de ventilao e os
procedimentos de descontaminao.
Convm realizar uma subdiviso do sistema em reas,
como:
- rea de preparao primria (local onde se manipulam
exclusivamente os materiais no contidos na matriz, por
exemplo, os iniciadores e tampes);
- rea pr-PCR (onde so manipulados os reativos, as
amostras e os controles);
- rea de amplifcao (onde o material amplifcado
manipulado em sistema fechado);
- rea de deteco ps-PCR (nica rea em que os produtos
da amplifcao so manipulados em sistema aberto).
Preparo das amostras
A preparao das amostras consiste na extrao ou na
liberao da sequncia alvo a ser amplifcada a partir
5
do material a examinar. O mtodo utilizado para tal fm
deve ser efcaz, ter reprodutibilidade e compatibilidade
com a realizao da amplifcao nas condies de reao
selecionadas. Pode ser utilizada uma variedade de mtodos
fsico-qumicos para extrao e/ou de enriquecimento.
Possveis aditivos no material em anlise podem interferir
no mtodo PCR. Devem ser utilizados os procedimentos
descritos no item de Controle Interno, com objetivo de
verifcar a ausncia de fatores de inibio no material a ser
examinado.
Quanto aos modelos de RNA, devem ser tomadas
precaues para que haja ausncia de atividade do tipo
ribonuclease.
Amplifcao
A amplifcao de uma sequncia alvo pela tcnica de
PCR requer, no mnimo, um par de iniciadores, os quatro
tipos de desoxinucleotdeos trifosfato (dNTPs), ons de
magnsio (MgCl
2
), e uma DNA polimerase termoestvel
para sntese do DNA.
A amplifcao da sequncia alvo por PCR conduzida
sob condies cclicas defnidas: perfl de temperatura
para desnaturao da dupla-hlice de DNA; anelamento
e extenso dos iniciadores e tempos de incubao em
temperaturas selecionadas dentro de uma faixa de variao.
Devem ser considerados os seguintes parmetros:
- o comprimento e a composio base do iniciador e da
sequncia alvo;
- o tipo de DNA polimerase, a composio do tampo e o
volume de reao usado na amplifcao;
- o tipo de termociclador usado e a taxa de condutividade
trmica entre o equipamento, o tubo de reao e o meio de
reao.
A amplifcao ocorre em ciclos que consistem em:
- desnaturao da sequncia alvo do cido nuclico por
aquecimento das duas hlices simples; reao aquecida
entre 92 - 96 C;
- anelamento especfco dos iniciadores sequncia alvo
que ser sintetizada, sob condies adequadas de reao.
A temperatura normalmente de 55 C, dependendo da
homologia dos iniciadores pela sequncia alvo a ser
amplifcada, da composio dos iniciadores e da quantidade
de bases citosina e guanina;
- extenso dos iniciadores que esto ligados s hlices
simples, por meio da ao da DNA
polimerase termoestvel, a uma temperatura adequada
sntese de DNA. Normalmente a 72 C;
- aps o trmino do ciclo tem-se o resfriamento a 4 C e
conservao.
Deteco
A sequncia amplifcada gerada pode ser identifcada: pelo
seu tamanho, pela sua sequncia, por modifcao qumica
ou pela combinao desses parmetros. A deteco e
caracterizao por meio do tamanho pode ser realizada por
eletroforese em gel (utilizando placas de gel de agarose,
ou de gel de poliacrilamida, ou por eletroforese capilar),
ou ainda por cromatografa de coluna (por exemplo, HPLC
High performance liquid chromatography)). A deteco
e caracterizao mediante a composio da sequncia
pode ser realizada por hibridizao especfca com sondas
complementares da sequncia alvo ou por fragmentao
do material amplifcado mediante uma enzima de restrio
nos stios especfcos da sequncia a ser amplifcada. A
caracterizao por meio da modifcao qumica pode ser
realizada por incorporao de um fuorforo nas sequncias
marcadas e posterior excitao e deteco da fuorescena.
Podem ser, tambm, utilizadas sondas marcadas que
possibilitam uma deteco posterior radioisotpica ou
imunoenzimtica.
AVALIAO E INTERPRETAO DOS RESULTADOS
O resultado de um ensaio s vlido se o(s) controle(s)
positivo(s) (so), inequivocamente positivo e o controle(s)
negativo(s) (so), inequivocamente negativo(s). Devido
alta sensibilidade do mtodo PCR e aos riscos inerentes
de contaminao, necessrio confrmar os resultados
positivos realizando o ensaio em duplicata ou, quando
h possibilidade, com uma nova alquota da amostra. A
amostra se considera positiva se ao menos um dos ensaios
repetidos apresentar resultado positivo.
GARANTIA DA QUALIDADE
Validao do sistema de ensaio da PCR
O programa de validao deve incluir os equipamentos
e o mtodo PCR utilizado. Como referncias devem ser
utilizadas as recomendaes do ICH (The International
Conference on Harmonisation of Technical Requirements
for Registration of Pharmaceuticals for Human Use: Q2B,
Validao do Mtodo Analtico), ou referncia alternativa
equivalente.
indispensvel efetuar essa validao mediante padres
biolgicos de referncia ofciais, adequadamente calibrados
por meio de Padres Internacionais para as sequncias alvo
utilizadas no ensaio.
A validao deve incluir a determinao do limiar de
resposta positiva, ou seja, o nmero mnimo de sequncias
marcadas por unidade de volume que se podem detectar em
pelo menos 95% dos ensaios. Esse valor depende de vrios
fatores inter-relacionados, como: o volume da amostra
submetida extrao e da efccia do mtodo de extrao;
da transcrio do RNA marcado em DNA complementar;
do procedimento de amplifcao e do sistema de deteco.
Para defnir o limite de deteco do sistema utilizado,
convm considerar o limiar de resposta positiva para
cada sequncia a ser amplifcada e as caractersticas de
funcionamento do ensaio com os respectivos limites
mximos e mnimos da resposta positiva.
5
Controle de qualidade dos reagentes
Todos os reagentes cruciais usados na metodologia posta
em prtica devem ser objeto de controle antes de seu
uso em rotina. A aceitao/rejeio deve ser baseada em
critrios de qualidade pr-defnidos.
Os iniciadores constituem um dos componentes essenciais
do mtodo PCR exigindo assim, ateno particular quanto
a sua concepo; pureza e validao de seu uso no ensaio.
Cada novo lote de iniciadores deve ser controlado quanto
especifcidade; efccia da amplifcao e ausncia de
impurezas inibidoras. Os iniciadores podem ser modifcados
(por exemplo, por conjugao com um fuorforo, ou um
antgeno) de forma a possibilitar a utilizao de um mtodo
especfco de deteco da sequncia alvo a ser amplifcada;
desde que aquelas modifcaes no inibam a preciso e a
efccia da amplifcao da sequncia alvo.
Controles do ensaio
Controles externos
Para detectar eventuais contaminaes e assegurar a
sensibilidade adequada, convm incluir em todos os
ensaios de PCR os seguintes controles externos:
- um controle positivo com um nmero defnido de cpias
da sequncia alvo, sendo esse nmero determinado,
especifcamente, para cada sistema de ensaio e expresso
como um mltiplo do limiar de resposta positiva do sistema
em questo;
- um controle negativo constitudo por uma amostra de
matriz que demonstrou estar isenta de sequncias alvo.
Controle interno
O controle interno formado por sequncias nucleotdicas
defnidas contendo os locais de ligao do iniciador. O
controle interno deve ser amplifcado com efccia defnida
e os produtos devem ser claramente discernveis. Esse
controle interno deve pertencer ao mesmo tipo de cido
nucleico (DNA/RNA) da amostra. O controle interno
preferencialmente adicionado amostra antes do
isolamento do cido nucleico e, portanto, age como um
controle global (extrao, transcrio reversa, amplifcao
e deteco).
Avaliao externa da qualidade
Para cada laboratrio e cada operador, a participao em
programas externos da avaliao de qualidade constitui um
aspecto importante da garantia de qualidade em matria de
PCR.
A seo seguinte (5.5.1.10.1) dada a ttulo de informao.
5.5.1.10.1 Recomendaes para a validao das tcnicas
de amplifcao dos cidos nucleicos para a deteco do
RNA do vrus da hepatite c (HCV) nas misturas de plasma.
INTRODUO
Este captulo fornecido a ttulo de informao.
A maioria das tcnicas de amplifcao de cidos nucleicos
corresponde a ensaios analticos quantitativos destinados
a detectar sua presena. H alguns ensaios quantitativos
comercializados ou desenvolvidos internamente pelos
prprios laboratrios. Para detectar a contaminao de RNA
do HCV nas misturas de plasma, so adequados os ensaios
qualitativos, podendo, inclusive, serem considerados
como ensaios limite para controle de impurezas. Nessas
recomendaes esto descritos os mtodos de validao das
tcnicas de amplifcao dos cidos nucleicos aplicveis
apenas aos ensaios qualitativos destinados a detectar o
RNA do VHC nas misturas de plasma. Por conseguinte,
os dois parmetros de validao considerados os mais
importantes so a especifcidade e o limite de deteco. A
robustez , tambm, avaliada. Contudo, esse documento
pode, tambm, ser utilizado como base de validao geral
das tcnicas de amplifcao.
Nesse documento est defnida a tcnica analtica como o
conjunto de operaes realizadas aps extrao do cido
nucleico, seguido de deteco dos produtos amplifcados.
Salientando-se que em casos de uso de conjuntos
comerciais, como parte do procedimento analtico
completo, as consideraes de validao documentadas
j realizadas pelo fabricante podem substituir a validao
pelo operador. Entretanto, o desempenho do conjunto
comercializado com respeito ao uso ao qual se destina tem
de ser demonstrado pelo usurio (ex: limite de deteco,
robustez e contaminao cruzada).
ESPECIFICIDADE
A especifcidade a capacidade para avaliar,
inequivocamente, o cido nucleico em presena de
componentes de presena no esperada.
A especifcidade dos procedimentos analticos de
amplifcao do cido nucleico dependente da escolha
dos iniciadores, da escolha da sonda (para anlise do
produto fnal) e o rigor das condies de teste (para ambas
as etapas de amplifcao e deteco).
Na concepo dos iniciadores e das sondas, um dos
aspectos a ser considerado a sua especifcidade na
deteco do RNA do HCV; para esse fato conveniente
comparar as sequncias alvo com as sequncias publicadas
em bancos de dados. Para o HCV, os iniciadores e sondas
so, normalmente, escolhidos a partir das reas da regio
5 no codifcante (5NCR) do genoma do HCV, composta
por 341 nucleotdeos, que so as mais conservadas entre os
diferentes isolados do HCV.
O produto amplifcado deve ser identifcado,
inequivocamente, pelo uso de mtodos como: amplifcao
com iniciadores entrelaados, anlise de enzimas de
restrio, seqenciamento, ou hibridizao com sonda
especfca.
Para validao da especifcidade da tcnica analtica,
conveniente testar, no mnimo, 100 misturas de plasma
5
negativo para o RNA do HCV, e todos os resultados obtidos
serem negativos. A Organizao Mundial de Sade (OMS)
dispe de amostras apropriadas de plasmas no reativos.
A capacidade da tcnica na deteco de todos os gentipos
do HCV depender da escolha dos iniciadores, das sondas
e dos parmetros operacionais. conveniente que essa
capacidade seja demonstrada por meio do uso de uma
coleo de preparaes de referncia caracterizadas.
Tem sido sugerido que o padro de distribuio dos
gentipos do HCV no Brasil semelhante ao encontrado
em muitos pases europeus, com a prevalncia dos tipos
1 e 3. Observa-se um comportamento epidemiolgico
tpico de uma propagao exponencial nos ltimos anos,
provavelmente em decorrncia de transfuses sanguneas.
Nesse contexto, os gentipos 1 e 3 devem ser detectados
em nveis apropriados.
LIMITE DE DETECO
O limite de deteco de uma tcnica individual a menor
quantidade de cido nucleico que pode ser detectada, mas,
no, necessariamente, quantifcada, com um valor exato na
amostra.
O processo de amplifcao utilizado para a deteco do
RNA do HCV nas misturas de plasmas fornece, geralmente,
resultados qualitativos. O nmero de resultados possveis
limita-se a duas respostas: positivo ou negativo. Embora
seja recomendada a determinao do limite de deteco, por
razes prticas, determinado o limiar da resposta positiva
para as tcnicas de amplifcao do cido nucleico. O limiar
da resposta positiva o nmero mnimo de sequncias alvo
por unidade de volume que pode ser detectado em 95% dos
ensaios. Esse limiar da resposta positiva infuenciado pela
distribuio dos genomas virais nas amostras individuais
ensaiadas e por fatores tais como a efccia da enzima, que
podem levar a diferenas de 95% nos limiares da resposta
positiva obtidos nas anlises individuais.
Para determinar o limiar de resposta positiva,
indispensvel executar a tcnica em dias diferentes com
uma srie de diluies de um reagente de trabalho ou
do vrus da Hepatite C (padro biolgico de referncia),
calibrado por comparao com o Padro Internacional do
HCV 96/790 OMS, a fm de avaliar entre os vrios ensaios.
So testadas, no mnimo, trs sries de diluies separadas
com um nmero sufciente de replicaes de cada diluio
de modo a obter um nmero total de 24 resultados por
diluio e possibilitar, assim, a anlise estatstica dos
resultados.
Por exemplo, num laboratrio testa-se trs sries de
diluies com oito replicaes para cada diluio em dias
diferentes; quatro sries de diluio com seis replicaes
para cada diluio em dias diferentes, ou seis sries de
diluies com quatro replicaes para cada diluio em
dias diferentes.
Para que o nmero de diluies utilizadas se mantenha
igual, indispensvel efetuar um ensaio preliminar (como,
por exemplo, diluies logartmicas na amostra da mistura
de plasma para obter um valor preliminar do limiar de
resposta positiva, ou seja, a maior diluio em que ocorre
um sinal positivo).
A distribuio das diluies pode ento ser realizada com
base nesse valor preliminar pr-calculado (utilizando, por
exemplo, um fator de diluio de 0,5 log), ou inferior a
uma mistura de plasma negativo como matriz de diluio.
O teor em RNA do HCV que pode ser detectado de 95%
nos ensaios e pode ser calculado utilizando um mtodo
estatstico apropriado.
Esses resultados, tambm, servem para demonstrar a
variao interna do ensaio e a variao nos vrios dias do
mtodo analtico.
ROBUSTEZ
A robustez de um mtodo analtico a medida da sua
capacidade de permanecer inaltervel quando sujeito a
pequenas, mas deliberadas, variaes nos parmetros
operacionais e fornece uma indicao da viabilidade da
tcnica nas condies normais de utilizao. A avaliao da
robustez um dos aspectos a ser considerado durante a fase
de desenvolvimento. Possibilita estabelecer a viabilidade
da tcnica face s variaes deliberadas nos parmetros
operacionais. Nas tcnicas de amplifcao dos cidos
nucleicos, pequenas variaes nos parmetros operacionais
podem ter uma importncia especial. Contudo, a robustez
desaa pode ser demonstrada durante o desenvolvimento
do mtodo, quando so ensaiadas pequenas variaes
na concentrao de reagentes (por exemplo: MgCl
2
,
iniciadores, ou dNTPs). Para demonstrar a robustez
durante a validao, devem examinar-se, no mnimo, vinte
misturas de plasma (escolhidos ao acaso) negativas para
RNA do HCV s quais adicionada uma concentrao,
tpica fnal, que corresponde ao limiar da resposta positiva,
previamente, determinada. Todos os resultados obtidos so
positivos.
Podem surgir problemas com a robustez no caso de mtodos
em que se usam, em sua fase inicial, a ultracentrifugao
previamente extrao do RNA viral. Por conseguinte para
testar a robustez desses mtodos. So ensaiadas, no mnimo,
vinte misturas de plasma contendo concentraes variadas
de RNA do HCV, mas isentas de anticorpos especfcos do
HCV. Todos os resultados obtidos so positivos.
conveniente demonstrar a ausncia de contaminao
cruzada pela deteco exata de um conjunto de, pelo
menos vinte amostras, alternando amostras de misturas
de plasma negativas e de misturas de plasma negativos s
quais foi adicionada uma alta concentrao do HCV (no
mnimo, 10
2
vezes 95% do limiar de resposta positiva, ou,
no mnimo, 10
4
UI/mL.
GARANTIA DA QUALIDADE
Os mtodos de ensaios biolgicos tais como a tcnica
de amplifcao dos cidos nucleicos, podem apresentar
problemas especfcos que interferem na validao e
interpretao dos resultados.
5
Os procedimentos devem ser descritos precisamente na
forma de procedimentos operacionais padro (POPs), que
devem abranger:
- modo de amostragem (tipo de recipientes, etc.);
- preparao das minimisturas (se for o caso);
- condies de conservao antes da anlise;
- descrio exata das condies operacionais (incluindo
precaues que devem ser tomadas, a fm de evitar
contaminao cruzada ou destruio do RNA viral) assim
como dos reagentes e preparaes de referncia utilizadas;
- frmulas detalhadas do clculo dos resultados, incluindo
a avaliao estatstica.
O uso de um controle apropriado (por exemplo, uma
diluio apropriada do vrus da hepatite C, padro biolgico
de referncia; ou de plasma ao qual foi adicionada uma
amostra do HCV calibrada por comparao com o
Padro Internacional do HCV 96/790 da OMS) pode ser
considerado um meio estvel satisfatrio de controle do
sistema e de assegurar e manter a viabilidade da tcnica em
cada utilizao.
Qualifcao tcnica. Para cada elemento crtico do
equipamento utilizado criada uma instalao apropriada
e um programa de qualifcao operacional. Depois de
qualquer modifcao de um equipamento crtico (por
exemplo, os termocicladores) indispensvel reconfrmar
a aceitabilidade da tcnica procedendo em paralelo o
exame de oito amostras de uma mistura de plasma ao qual
se adicionou uma concentrao tripla de RNA do HCV
daquela que corresponde ao limiar de resposta positiva
previamente determinada; todos os resultados obtidos so
positivos.
Qualifcao dos operadores. desenvolvido um programa
apropriado de qualifcao para o conjunto de operadores
envolvidos no ensaio. Para esse efeito, conveniente que
cada operador examine pelo menos oito amostras de uma
mistura de plasma qual foi adicionada uma concentrao
tripla de RNA do HCV que corresponde ao limiar de
resposta positiva, previamente, determinada. Esse ensaio
(oito amostras) repetido duas vezes em dias diferentes
num total de vinte e quatro anlises realizadas em trs dias
diferentes. Todos os resultados obtidos so positivos.
5.5.1.11 DETERMINAO DO TTULO
DO ATIVADOR DA PR-CALICRENA
O ativador da pr-calicrena (APC) transforma a pr-
calicrena em calicrena e pode ser titulado por apresentar
a capacidade de cindir um cromforo de um substrato
peptdico sinttico, determinando-se a velocidade da
reao por espectrofotometria. A concentrao em APC
calculada por comparao com a preparao padro cuja
atividade expressa em unidades internacionais. A Unidade
Internacional corresponde atividade de uma determinada
quantidade de Padro Internacional constitudo por
ativador da pr-calicrena lioflizada. A correspondncia
entre a Unidade Internacional e o Padro Internacional
estabelecida pela Organizao Mundial de Sade.
REAGENTES
Tampo A
Trometamina 6,055 g
Cloreto de sdio 1,17 g
Brometo de hexadimetrina 50 mg
Azida Sdica 0,100 g
Dissolver os reagentes em gua, ajustar o pH para 8,0 com
cido clordrico 2 M e completar a 1000 mL com gua.
Tampo B
Trometamina 6,055 g
Dissolver os reagentes em gua, ajustar o pH para 8,0 com
cido clordrico 2 M e completar a 1000 mL com gua.
PREPARAO DO SUBSTRATO DE PR-
CALICRENA.
O sangue ou o plasma usado na preparao da pr-
calicrena deve ser colhido e manipulado apenas em
materiais de plstico ou de vidro siliconado de modo a
evitar a ativao da pr-calicrena resultante da coagulao.
Misturar 9 volumes de sangue humano com 1 volume de
soluo anticoagulante (ACD, CPD ou uma soluo de
citrato de sdio a 38 g/L) adicionada de 1 mg por mililitro
de brometo de hexadimetrina. Centrifugar a 3600 g durante
5 minutos. Separar o plasma e centrifugar a 6000 g durante
20 minutos para separar as plaquetas. Separar o plasma
pobre em plaquetas e proceder dilise contra 10 volumes
de Tampo A durante 20 horas. Aps a dilise, depositar o
plasma numa coluna de cromatografa contendo duas vezes
o seu volume de agarose-DEAE para cromatografa de troca
inica previamente equilibrada com Tampo A. Proceder
a eluio com Tampo A (dbito de 20 mL/cm
2
/hora).
Recolher o eluato por fraes e registrar a absorvncia em
280 nm (5.2.14). Reunir as fraes que contm o primeiro
pico de protenas de modo a obter um volume de cerca de,
1,2 vezes o do plasma pobre em plaquetas.
Para verifcar que o substrato no apresenta calicrena
ativa, misturar 1 volume com 20 volumes de soluo de
substrato cromognico que ser utilizado no doseamento,
previamente aquecido a 37 C, e manter a mistura a 37 C
durante 2 minutos. O substrato apropriado se a absorvncia
no aumentar mais de 0,001 por minuto. Adicionar soluo
de substrato 7 g por litro de cloreto de sdio e fltrar por
membrana (0,45 m). Congelar o fltrado aps particion-lo
em alquotas e conservar a -25 C; pode-se, tambm, lioflizar
o fltrado antes da conservao. Realizar as operaes
compreendidas entre a cromatografa e a congelao das
alquotas no mesmo dia.
5
TITULAO
De preferncia, a titulao realizada num analisador
enzimtico automtico, a 37 C. Ajustar os volumes, a
concentrao dos substratos e os tempos de incubao de
modo a que a velocidade da reao seja linear pelo menos at
35 UI por mililitro. Se necessrio, pode-se diluir os padres,
as amostras e o substrato de pr-calicrena com Tampo B.
Incubar os padres ou as amostras diludas com o substrato
de pr-calicrena durante 10 minutos; o volume do padro
ou da amostra antes da diluio no excede 1/10 do volume
total da mistura a ser incubada para evitar erros resultantes
das diferenas de fora inica ou de pH. Incubar a mistura
ou uma parte da mistura com um volume igual ou superior
de uma soluo de um substrato cromognico sinttico,
reconhecidamente especfco, para a calicrena (por exemplo,
acetato de N-benzoil-L-prolil- L-fenilalanil- L-arginina
4-nitroanilida ou dicloridrato de D-propil- L-fenilalanil-
L-arginina 4-nitroanilida ) e dissolvido em Tampo B.
Registrar a variao da absorvncia por minuto (A/min)
durante 2 a 10 minutos no comprimento de onda apropriado
para o substrato utilizado. Para cada mistura do padro ou da
amostra, preparar um branco substituindo o substrato de pr-
calicrena por Tampo B. Corrigir a variao da absorvncia
por minuto subtraindo o valor obtido com o branco
correspondente. Traar uma curva de calibrao a partir dos
valores da variao da absorvncia por minuto, obtidos com
o padro e as respectivas concentraes e determinar o teor
em APC da amostra.
ANTITROMBINA III HUMANA
O teor de antitrombina III da amostra determinado
comparando-se a sua capacidade de inativao da trombina
em presena de um excesso de heparina com a capacidade
de uma preparao padro de concentrado de antitrombina
III humana de concentrao em unidades internacionais.
Quantidades variveis da amostra so adicionadas a uma
trombina e a atividade trombnica residual determinada
com um substrato cromognico apropriado.
A Unidade Internacional corresponde atividade de
uma quantidade determinada do Padro Internacional de
concentrado de antitrombina III humana. A equivalncia
da Unidade Internacional com o Padro Internacional
indicada pela Organizao Mundial de Sade.
PROCEDIMENTO
Para a amostra e para o padro preparar com tampo de
tris-EDTA ASB de pH 8,4 contendo 15 UI de heparina
por mililitro, duas sries independentes de trs ou quatro
diluies compreendidas entre 1/75 e 1/200 a partir de 1 UI/
mL. Aquecer a 37 C durante 1 a 2 minutos 200 L de cada
diluio. Adicionar a cada diluio 200 L de uma soluo
de trombina bovina contendo 2 UI/mL em tampo de tris-
EDTA ASB de pH 8,4. Misturar e manter a 37 C durante,
exatamente, 1 minuto. Adicionar 500 L de um substrato
cromognico apropriado (por exemplo, D-fenilalanil-L-
pipecolil-L-arginina-4-nitroanilida; dissolver esse substrato
em gua para obter uma soluo contendo 4 mmol/L e diluir
com tampo de tris-EDTA ASB de pH 8,4 sem albumina
at uma concentrao apropriada para o ensaio de titulao).
Determinar, imediatamente, a absorvncia em 405 nm
(5.2.14) por pelo menos 30 segundos. Calcular a variao
da absorvncia (A/min). Pode-se utilizar igualmente uma
titulao de ponto fnal parando a reao com cido actico
e determinando a absorvncia em 405 nm. A variao
da absorvncia (A/min) inversamente proporcional
atividade da antitrombina III humana. Verifcar a validade do
ensaio e calcular a atividade da amostra pelos procedimentos
ATIVIDADE ANTICOMPLEMENTAR DA
IMUNOGLOBULINA
A determinao da atividade anticomplementar (AAC) da
imunoglobulina realizada por incubao de uma amostra de
imunoglobulina (10 mg) com uma determinada quantidade
de complemento de cobaia (20 CH
50
). Segue-se a titulao
do complemento restante: a atividade anticomplementar
expressa pela proporo do complemento consumido,
tomando o complemento padro como 100%.
A unidade hemoltica de atividade complementar (CH
50
) a
quantidade de complemento que, nas estipuladas condies
de reao, provoca a lise de 2,5 x 10
8
de um nmero total de
5 x 10
8
hemcias devidamente sensibilizadas
REAGENTES
Soluo me de magnsio e de clcio. Dissolver 1,103 g de
cloreto de clcio e 5,083 g de cloreto de magnsio em gua
e completar 25 mL com o mesmo solvente.
Soluo me de tampo de barbital. Dissolver 207,5 g de
cloreto de sdio e 25,48 g de barbital sdico em 4000 mL
de gua e ajustar o pH para 7,3 com cido clordrico M.
Adicionar 12,5 mL de Soluo me de magnsio e de clcio
e completar 5000 mL com gua. Filtrar por membrana (0,22
m) e conservar a 4 C em recipiente de vidro.
Soluo de gelatina. Dissolver 12,5 g de gelatina em cerca
de 800 mL de gua e aquecer a ebulio em banho-maria.
Resfriar at 20 C e completar a 10 litros com gua. Filtrar
por membrana (0,22 m) e conservar a 4 C. Utilizar,
unicamente, uma soluo lmpida.
Soluo citratada. Dissolver 8 g de citrato de sdio, 4,2 g
de cloreto de sdio e 20,5 g de glicose em 750 mL de gua.
Ajustar a pH 6,1 com soluo de cido ctrico a 10% (p/v) e
completar 1000 mL com gua.
Tampo de gelatina-barbital. Juntar 4 volumes de Soluo
de gelatina a 1 volume de Soluo me de tampo barbital
e misturar. Se necessrio, ajustar o pH para 7,3 com cido
clordrico M ou hidrxido de sdio M e conservar a 4 C.
Preparar, diariamente, uma nova soluo.
5
tampo. Determinar a concentrao celular pelo seguinte
mtodo: adicionar 0,2 mL da suspenso a 2,8 mL de gua
e centrifuguar o lisado durante 5 minutos a 1000 g. A
concentrao celular adequada se a absorvncia (5.2.14)
do sobrenadante, determinada em 541 nm, for de 0,62
0,01. Corrigir a concentrao celular por adio de Tampo
de gelatina-barbital, de acordo com a frmula:
em que
V
f
= volume fnal,
V
i
= volume inicial,
A = absorvncia determinada em 541 nm para a suspenso
original.
Uma vez ajustada a concentrao celular, a suspenso
contm cerca de 1 x 10
9
clulas por mililitro.
Titulao de hemolisina
Preparar as diluies de hemolisina de acordo com a Tabela
1.
Sangue de carneiro estabilizado. Recolher 1 volume de
sangue de carneiro em 1 volume de Soluo citratada e
misturar. Conservar o sangue estabilizado a 4 C durante,
pelo menos, 7 dias e, no mximo, durante 28 dias. O sangue
de carneiro ou os eritrcitos de carneiro estabilizados podem
ser obtidos, comercialmente, em diversos fornecedores.
Hemolisina. Soro anti-hemcia de carneiro, preparada em
coelho. Tais soros podem ser obtidos, comercialmente, em
diversos fornecedores.
Complemento de cobaia. Misturar os soros obtidos a partir
de, pelo menos, 10 cobaias. Separar o soro do sangue
coagulado por centrifugao a uma temperatura cerca
de 4 C. Conservar o soro, em pequenas pores, a uma
temperatura inferior a -70 C.
PROCEDIMENTO
Padronizao da soluo de hemcias de carneiro a 5%.
Separar as hemcias de carneiro por centrifugao de um
volume apropriado de sangue de carneiro estabilizado; lavar
as clulas, pelo menos trs vezes, com a Tampo gelatina-
barbital e preparar uma suspenso a 5% (v/v) no mesmo
Tabela 1 - Diluies de hemolisina.
Diluio de hemolisina
a preparar
Tampo de gelatina-barbital Hemolisina
Volume (mL) Diluio (1/...) Volume (mL)
7,5 0,65 no diludo 0,1
10 0,90 no diludo 0,1
75 1,80 7,5 0,2
100 1,80 10 0,2
150 1,00 75 1,0
200 1,00 100 1,0
300 1,00 150 1,0
400 1,00 200 1,0
600 1,00 300 1,0
800 1,00 400 1,0
1200 1,00 600 1,0
1600 1,00 800 1,0
2400 1,00 1200 1,0
3200(*) 1,00 1600 1,0
4800(*) 1,00 2400 1,0
______________
(*) rejeite 1,0 mL da mistura.
5
Juntar 1 mL da suspenso a 5% de hemcias de carneiro
em cada um dos tubos da srie de diluies de hemolisina
a partir da diluio a 1/75 e misturar. Incubar os tubos a 37
C durante 30 minutos. Transferir 0,2 mL de cada mistura
incubada de diluio de hemolisina para novos tubos e
adicionar 1,1 mL de Tampo de gelatina-barbital e 0,2 mL
de uma diluio de complemento de cobaia (por exemplo,
1/150). Realizar essas manipulaes em duplicata.
Preparar trs tubos controle de clulas no hemolisadas
transferindo para cada um deles 1,4 mL de Tampo
gelatina-barbital e 0,1 mL da suspenso de hemcias de
carneiro a 5%.
Preparar trs tubos controle de clulas totalmente
hemolisadas transferindo para cada um deles 1,4 mL de
gua e 0,1 mL da suspenso de eritrcitos de carneiro a 5%.
Incubar todos os tubos a 37 C durante 60 minutos e
centrifugar a 1000 g durante 5 minutos. Determinar a
absorvncia (5.2.14) dos sobrenadantes em 541 nm e
calcular a porcentagem de hemlise ocorrida em cada tubo,
usando a frmula:
100
1
1
A A
A A
b
a
em que
A
a
= absorvncia dos tubos contendo a diluio de
hemolisina,
A
b
= absorvncia mdia dos trs tubos com hemlise total,
A
1
= absorvncia mdia dos trs tubos controle sem
hemlise.
Construir um grfco contendo as porcentagens de
hemlises no eixo das ordenadas e os inversos das diluies
de hemolisina no eixo das abscissas. Determinar a diluio
tima de hemolisina a partir do grfco, escolhendo uma
diluio tal que um aumento da quantidade de hemolisina
no produza uma variao aprecivel no grau de hemlise.
Essa diluio se considera como contendo 1 unidade de
hemlise mnima (1 UHM) em 1,0 mL. Para a preparao
das hemcias de carneiro sensibilizadas, a diluio de
hemolisina correspondente hemlise tima contm 2
UHM por mililitro.
A titulao de hemolisina s vlida se a porcentagem de
hemlise total estiver compreendida entre 50 e 70%.
Caso a porcentagem de hemlise total no possa ser
determinada a partir da diluio utilizada, repetir a titulao
utilizando uma soluo de complemento mais ou menos
diluda.
Preparao tima de hemcias de carneiro sensibilizada
(sistema hemoltico).
Preparar uma quantidade apropriada de hemolisina
diluda contendo 2 UHM por mililitro e um volume igual
de suspenso padronizada de eritrcitos de carneiro a
5%. Adicionar a diluio de hemolisina suspenso
padronizada de clulas e misturar. Incubar a 37 C durante
15 minutos, conservar a temperatura de 2 a 8 C e utilizar
dentro do perodo de 6 horas.
Titulao do complemento
Preparar uma diluio apropriada de complemento (por
exemplo, 1:250) utilizando a Tampo de gelatina-barbital
e realizar a titulao, em duplicata, de acordo com as
informaes registradas na Tabela 2.
A cada tubo, adicionar 0,2 mL de eritrcitos de carneiro
sensibilizados, misturar bem e incubar todos os tubos a
37 C durante 60 minutos. Resfriar os tubos em gua com
gelo e centrifugar a 1000 g durante 5 minutos. Determinar
a absorvncia dos sobrenadantes em 541 nm e calcular o
grau de hemlise (Y), usando a frmula:
100
1
1
A A
A A
b
c
em que
A
c
= absorvncia dos tubos 1 a 12,
A
b
= absorvncia mdia dos tubos com 100% de hemlise,
A
1
= absorvncia mdia dos tubos com 0% de hemlise.
Tabela 2 Diluio do complemento.
Nmero do tubo
Volume do complemento diludo
em mililitros (por exemplo, 1:250)
Volume de Tampo de gelatina-
barbital em mililitros
1 0,1 1,2
2 0,2 1,1
3 0,3 1,0
4 0,4 0,9
5 0,5 0,8
6 0,6 0,7
7 0,7 0,6
8 0,8 0,5
9 0,9 0,4
10 1,0 0,3
11 1,1 0,2
12 1,2 0,1
3 tubos controle com 0% de hemlise - 1,3
3 tubos controle com 100% de hemlise - 1,3 mL de gua
5
Construir um grfco inscrevendo os valores em abscissas,
e o correspondente volume em mililitros de complemento
diludo em ordenadas.
A partir dos pontos, traar a reta ideal e determinar a
ordenada da dose hemoltica a 50% do complemento no
ponto onde Y/(1Y) = 1,0. Calcular a atividade em termos
de unidades hemolticas (CH
50
/mL) de acordo com a
frmula:
5
a
d
C
C
em que
C
d
= valor inverso da diluio de complemento,
C
a
= volume em mililitros de complemento diludo que
produz 50% de hemlise,
5 = Fator de escala para ter em conta o nmero de
eritrcitos.
O ensaio s vlido se, entre 15 e 85% de hemlise, a
curva obtida for uma reta cuja inclinao se situe entre 0,15
e 0,40, de preferncia, entre 0,18 e 0,30.
Determinao de atividade anticomplementar
Diluir o complemento de cobaia titulada com a Tampo
de gelatina-barbital de modo a obter 100 CH
50
/mL.
Se necessrio, ajustar a amostra para pH 7,0. Para uma
imunoglobulina contendo 50 mg/mL, preparar as misturas
de incubao (Tabela 3)
Tabela 3 - Misturas de incubao.
Amostra Complemento controle
Imunoglobulina (50 mg/mL) 0,2 mL
Tampo de gelatina-barbital 0,6 mL 0,8 mL
Complemento 0,2 mL 0,2 mL
Realizar a determinao na amostra e preparar o controle da
AAC negativo e positivo a partir de um padro internacional
de imunoglobulina humana, de acordo com as instrues
fornecidas no rtulo que acompanha a preparao padro.
Se a amostra no contiver 50 mg/mL de imunoglobulina,
ajustar os volumes da preparao e do Tampo de gelatina-
barbital; por exemplo, pipetar 0,33 mL de uma preparao
que contem 30 mg/mL de imunoglobulina e adicionar 0,47
mL de Tampo de gelatina-barbital de modo a obter o
mesmo volume total de 0,8 mL. Fechar os tubos e incub-
los a 37 C durante 60 minutos. Adicionar 0,2 mL de cada
mistura de incubao a 9,8 mL de Tampo de gelatina-
barbital para diluir o complemento. Em cada tubo, realizar
as titulaes do complemento tal como descrito acima para
determinar a atividade anticomplementar residual (Tabela
2). Calcular a atividade anticomplementar da amostra, por
referncia ao controle do complemento considerado como
100%, de acordo com a frmula:
100
a
b a
em que
a = atividade complementar mdia (CH
50
/mL) dos
controles,
b = atividade complementar (CH
50
/mL) da amostra.
O ensaio s vlido se:
as atividades anticomplementar encontradas para o
controle AAC negativo e controle AAC positivo se situarem
dentro dos limites indicados no rtulo que acompanha a
preparao padro;
a atividade complementar do controle do complemento
(a) for de 80 a 120 CH
50
/mL.
5.5.1.14 DOSEAMENTO DE PROTENAS
TOTAIS
MTODO 1
As protenas em soluo absorvem a luz ultravioleta no
comprimento de onda de 280 nm, devido presena na
sua estrutura de aminocidos aromticos (especialmente
tirosina e triptofano), propriedade que pode ser utilizada
para o doseamento de protenas. O uso de um tampo como
lquido de compensao pode remediar a interferncia
produzida no caso de o tampo utilizado para dissoluo
da protena possuir absorvncia elevada, o que poderia
comprometer os resultados. Em baixas concentraes,
a protena adsorvida sobre a curva pode provocar uma
diminuio signifcativa do teor protico da soluo.
possvel prevenir esse fenmeno preparando amostras
de teor elevado ou utilizando um detergente no inico
durante a preparao.
Soluo amostra. Dissolver uma quantidade apropriada da
amostra no tampo escolhido de modo a obter uma soluo
cuja concentrao protica se situe entre 0,2 mg/mL e 2
mg/mL.
Soluo padro. Preparar uma soluo da substncia de
referncia apropriada correspondente protena a dosar,
no mesmo tampo que se usa para a soluo da amostra e
de modo a obter a mesma concentrao.
5
Procedimento. Manter a soluo da amostra, a soluo
padro e o lquido de compensao mesma temperatura
durante todo o ensaio. Determinar a absorvncia (5.2.14)
da soluo amostra e da soluo padro em 280 nm em
cubetas de quartzo, utilizando o tampo especfco como
lquido de compensao. Para a exatido dos resultados, a
resposta linear no intervalo das concentraes proticas
a dosar.
Difuso da luz. A difuso da luz pela amostra pode afetar
a exatido do doseamento das protenas. Se as protenas
em soluo formam partculas cujo tamanho da mesma
ordem de grandeza do comprimento de onda do feixe de
medida (250 - 300 nm), a difuso do feixe luminoso traduz-
se por um aumento da absorvncia aparente da amostra.
Para calcular a contribuio desse efeito de difuso na
absorvncia lida em 280 nm, determinar a absorvncia da
soluo da amostra em vrios comprimentos de onda (320
nm, 325 nm, 330 nm, 335 nm, 340 nm, 345 nm e 350 nm).
Construir um grfco do logartimo da absorvncia lida
em funo do logaritmo do respectivo comprimento de
onda e determinar, por anlise de regresso linear, a curva
de calibrao que melhor se ajuste aos diferentes pontos
inscritos no grfco.
Determinar por extrapolao o logaritmo da absorvncia
em 280 nm. A absorvncia devido ao efeito de difuso
o antilogaritmo desse valor. Corrigir os valores
observados subtraindo-se a absorvncia total em 280 nm
da absorvncia devido ao efeito de difuso para obter o
valor da absorvncia devido protena em soluo.
possvel realizar uma fltrao usando um fltro de 0,2
que no absorva as protenas, ou uma clarifcao por
centrifugao, a fm de que sejam reduzidos os efeitos da
difuso da luz em caso de soluo.
Clculos. Utilizar os valores corrigidos para os clculos.
Calcular o teor em protena da soluo da amostra (C
u
),
usando a expresso:
|
|
.
|
\
|
=
s
u
s u
A
A
C C
em que
C
S
= teor em protena da soluo padro;
A
u
= valor da absorvncia corrigida da soluo da amostra;
A
S
= valor da absorvncia corrigida da soluo padro.
MTODO 2
Esse mtodo foi concebido com base na propriedade
que as protenas possuem de reduzir cidos
fosfomolibdniotungstnico contidos no reagente
fosfomolibdnio e tungstnio; essa reao cromognica e
traduz-se pela existncia de um pico de absoro em 750 nm.
O reagente fosfomolibdnio e tungstnio reagem
primeiramente com os resduos da tirosina da protena. O
desenvolvimento da colorao atinge um mximo ao fm
de 20 - 30 minutos de incubao temperatura ambiente;
produz-se em seguida uma descolorao progressiva.
Sendo o mtodo sensvel a substncias interferentes, pode
utilizar-se um tratamento que produza a precipitao
das protenas da amostra. A maior parte das substncias
interferentes reduz a intensidade da colorao obtida,
mas alguns detergentes aumentam-na, ligeiramente. Uma
forte concentrao salina pode provocar a formao de um
precipitado. Dado que a intensidade da colorao obtida
pode variar segundo a espcie protica considerada, a
protena a dosar e a protena padro so as mesmas. Se
for necessrio, separar as substncias interferentes da
protena da amostra, proceder como indicado a seguir
em substncias interferentes antes de preparar a soluo
da amostra. possvel minimizar o efeito das substncias
interferentes por diluio, desde que o teor em protena a
dosar se mantenha sufcientemente elevado para possibilitar
uma determinao exata.
Utilizar a gua destilada para a preparao de todos os
tampes e reagentes utilizados nesse mtodo.
Soluo amostra. Dissolver uma quantidade apropriada
da amostra no tampo especifcado de modo a obter uma
concentrao compreendida no intervalo abrangido pela
curva de calibrao. O pH de uma soluo preparada com
um tampo apropriado est compreendido entre 10,0 e
10,5.
Solues padro. Dissolver a substncia de referncia
correspondente protena a dosar no tampo especifcado.
Tomar amostras dessa soluo e complet-las com o mesmo
tampo de modo a obter, pelo menos, cinco solues padro
de diferentes concentraes compreendidas entre 5 g/
mL e 100 g/mL e uniformemente repartidas no intervalo
escolhido.
Soluo em branco. Utilizar o mesmo tampo que foi
utilizado para preparar a Soluo amostra e as Solues
padro.
Reagente de sulfato de cobre. Dissolver 100 mg de sulfato
de cobre e 0,2 g de tartarato de sdio em gua destilada e
completar 50 mL com o mesmo diluente. Dissolver 10 g de
carbonato de sdio anidro em gua destilada e completar
50 mL com o mesmo diluente. Verter, lentamente, a
soluo de carbonato de sdio na soluo de sulfato de
cobre, misturando sempre. Essa soluo utilizada nas 24
horas que se seguem sua preparao.
Reagente alcalino de cobre. Preparar uma mistura de
1 volume de Reagente de sulfato de cobre, 2 volumes
de laurilsulfato de sdio a 5% (p/v) com 1 volume de
hidrxido de sdio a 3,2% (p/v). Conservar essa mistura
temperatura ambiente. A mistura utilizada nas 2 semanas
que seguem sua preparao.
Reagente fosfomolibdnio e tungstnico diludo. Misturar
5 mL de reagente fosfomolibdnio e tungstnico com 55
mL de gua destilada. Conservar o reagente temperatura
ambiente em frasco de vidro mbar.
Procedimento. A 1 mL de cada Soluo padro, da
Soluo amostra e da Soluo em branco adicionar 1
mL do Reagente alcalino de cobre e misturar. Deixar em
repouso durante 10 minutos. Adicionar 0,5 mL do Reagente
fosfomolibdnio e tungstnio diludo, misturar e deixar
em repouso temperatura ambiente durante 30 minutos.
5
Determinar a absorvncia (5.2.14) das solues em 750
nm, utilizando a soluo em branco para ajuste do zero.
Clculos. A relao entre a absorvncia e o teor em protena
no linear; entretanto, se o intervalo de concentrao
abrangido pela curva de calibrao for sufcientemente
estreito, a curva obtida ser sensivelmente linear. Construir
um grfco da absorvncia das solues padro em funo
do teor em protena dessas solues e determinar a curva de
calibrao por anlise de regresso linear. A partir da curva
de calibrao e da absorvncia da soluo da amostra,
determinar o teor em protena da soluo amostra.
Substncias interferentes. Nesse mtodo adiciona-se
desoxicolato de sdio e cido tricloroactico amostra
para precipitar as protenas e separ-las das substncias
interferentes, antes de dosar. Essa tcnica pode igualmente
ser utilizada para concentrar as protenas contidas numa
soluo muito diluda. A 1 mL de uma soluo da amostra
adicione 0,1 mL de desoxicolato de sdio a 0,15% (p/v).
Agitar com um agitador tipo vortex e deixar em repouso
temperatura ambiente durante 10 minutos. Adicionar
0,1 mL de cido tricloroactico a 72% (p/v). Agitar com
um agitador tipo vortex e centrifuguar a 3000 g durante
30 minutos. Rejeitar o sobrenadante lquido e eliminar o
lquido residual com uma pipeta. Dissolver o cogulo em 1
mL do Reagente alcalino de cobre.
MTODO 3
Esse mtodo foi baseado na propriedade que as protenas
possuem de deslocar de 470 nm para 595 nm o mximo
de absoro do azul cido 90 quando se ligam ao corante.
O corante azul cido 90 apresenta uma afnidade marcada
para os resduos de arginina e de lisina na protena o que
pode provocar variaes da resposta ao doseamento de
diferentes protenas. A protena utilizada como substncia
de referncia deve, portanto, ser a mesma que a protena
a ser dosada. Existem, relativamente, poucas substncias
interferentes, mas prefervel evitar os detergentes e os
analitos na amostra a dosar. Amostras muito alcalinas
podem provocar interferncias com o reagente cido.
tampes e reagentes a serem usados nesse mtodo.
da amostra no tampo indicado de modo a obter uma
concentrao compreendida no intervalo coberto pela
curva de calibrao.
correspondente protena a dosar no tampo indicado.
Tomar amostras dessa soluo e completar com o mesmo
tampo de modo a obter pelo menos cinco solues padro
de concentraes proticas compreendidas entre 0,1 mg/
mL e 1 mg/mL e uniformemente repartidas no intervalo
escolhido.
utilizado para preparar a soluo da amostra e as solues
padro.
Reagente azul cido 90. Dissolver 0,10 g de azul cido 90
em 50 mL de etanol. Adicionar 100 mL de cido fosfrico,
completar 1000 mL com gua destilada e misturar. Filtrar a
soluo e conserv-la a temperatura ambiente em frasco de
vidro mbar. Produz-se uma lenta precipitao do corante
durante a armazenagem. O precipitado eliminado por
fltrao antes de se utilizar o reagente.
Procedimento. A 0,100 mL de cada Soluo padro, da
Soluo amostra e da Soluo em branco adicionar 5 mL
do Reagente azul cido 90. Homogeneizar a mistura por
rotao, evitando a formao de espuma que pode criar
problemas de reprodutibilidade. Determinar a absorvncia
(5.2.14) das Solues padro e da Soluo amostra em
595 nm, utilizando a Soluo em branco para ajuste do
zero. Evita-se o uso de cubetas de quartzo (slica) j que o
corante se liga a esse material.
no linear. Entretanto, se o intervalo de concentrao
coberto pela curva de calibrao for sufcientemente
estreito, a curva obtida ser sensivelmente linear. Construir
um grfco da absorvncia das Solues padro em funo
do teor em protena dessas solues e determinar a curva
de calibrao por anlise de regresso linear. A partir da
curva de calibrao e da absorvncia da Soluo amostra
determinar o teor em protena da Soluo amostra.
MTODO 4
Esse mtodo, tambm, conhecido como mtodo do
cido bicinconnico (BCA), foi elaborado com base na
propriedade que as protenas possuem de reduzir o on
cprico (Cu
2+
) a on cuproso (Cu
+
). O reagente de cido
bicinconnico serve para detectar os ons cuprosos.
Existem poucas substncias interferentes. Se existirem
substncias interferentes, possvel minimizar os seus
efeitos por diluio, desde que o teor em protenas a dosar
se mantenha sufcientemente elevado para possibilitar uma
determinao exata. A tcnica de precipitao das protenas
descrita no Mtodo 2 pode ser utilizada para eliminar as
substncias interferentes. A intensidade da colorao
obtida pela reao com o reagente pode variar de um tipo
de protena para outro e, por isso, a protena a dosar e a
protena de referncia so as mesmas.
da amostra no tampo indicado de modo a obter uma
concentrao compreendida no intervalo da concentrao
das Solues padro.
correspondente protena a dosar no tampo indicado.
Tomar amostras dessa soluo e completar com o mesmo
tampo de modo a obter pelo menos cinco solues padro
de concentraes compreendidas entre 10 g/mL e 1200
g/mL e uniformemente repartidas no intervalo escolhido.
5
utilizado para preparar a Soluo da amostra e as Solues
padro.
Reagente BCA. Dissolver 10 g de bicinconinato dissdico,
20 g de carbonato de sdio monoidratado, 1,6 g de tartarato
de sdio, 4 g de hidrxido de sdio e 9,5 g de bicarbonato
de sdio em gua destilada. Se necessrio, ajustar o pH para
11,25 com soluo de hidrxido de sdio ou bicarbonato
de sdio. Completar para 1000 mL com gua destilada e
misturar.
Reagente de cobre-BCA. Misturar 1 mL de sulfato de cobre
a 4% (p/v) com 50 mL de Reagente BCA.
Procedimento. Misturar 0,1 mL de cada Soluo padro,
da Soluo amostra e da Soluo em branco com 2 mL
de Reagente de cobre-BCA. Incubar as solues a 37 C
durante 30 minutos, tomar nota da hora e deixar resfriar
at temperatura ambiente. Nos 60 minutos a seguir ao
perodo de incubao, determinar a absorvncia (5.2.14)
em 562 nm das Solues padro e da Soluo amostra em
cubetas de quartzo, utilizando a Soluo em branco para
ajuste do zero. Quando a temperatura das solues retornar
para a temperatura ambiente, a intensidade da colorao
continua a aumentar, progressivamente.
no linear. Entretanto, se o intervalo de concentrao
coberto pela curva de calibrao for sufcientemente
estreito, a curva obtida ser sensivelmente linear. Registrar
num grfco a absorvncia das solues padro em funo
do teor em protena dessas solues e determinar a curva
de calibrao por anlise de regresso linear. A partir da
curva de calibrao e da absorvncia da soluo da amostra
determine o teor em protena da soluo da amostra.
MTODO 5
Esse mtodo, tambm, conhecido como mtodo do
biureto, elaborado com base na propriedade que as
protenas possuem de interagir com o on cprico (Cu
2+
),
em meio alcalino, dando um produto de reao que
apresenta absorvncia em 545 nm. A utilizao desse
mtodo possibilita obter um desvio mnimo entre amostras
equivalentes de lgG e de albumina. Pelo contrrio, a adio
simultnea de hidrxido de sdio e do reagente de biureto
(na forma de mistura), uma homogeneizao insufciente
aps a adio do hidrxido de sdio ou um intervalo de
tempo muito longo entre a adio do hidrxido de sdio e
do reagente de biureto conduz obteno de uma resposta
mais elevada com amostras de lgG do que com amostras
de albumina. O tratamento com cido tricloroactico
utilizado para reduzir as interferncias pode igualmente
permitir quantifcar a protena quando a sua concentrao
na amostra for inferior a 0,5 mg/mL.
Soluo amostra. Dissolver uma quantidade apropriada da
amostra em soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) de
modo a obter uma concentrao compreendida no intervalo
da concentrao das solues padro.
correspondente protena a dosar em soluo de cloreto
de sdio a 0,9% (p/v). Tomar amostras dessa soluo e
completar com soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v)
de modo a obter pelo menos trs solues padro de
concentraes compreendidas entre 0,5 mg/mL e 10 mg/
mL e, uniformemente, repartidas no intervalo escolhido.
Soluo em branco. Utilizar soluo de cloreto de sdio a
0,9% (p/v).
Reagente de biureto. Dissolver 3,46 g de sulfato de
cobre em 10 mL de gua destilada quente e deixe resfriar
(soluo A). Dissolver 34,6 g de citrato de sdio e 20 g
de carbonato de sdio anidro em 80 mL de gua destilada
quente e deixar resfriar (soluo B). Misturar as solues
A e B e completar 200 mL com gua destilada. Esse
reagente utilizado dentro dos 6 meses que se seguem
sua preparao; no utilizado se desenvolver turvao ou
precipitado.
Procedimento. A um volume da Soluo amostra adicionar
um volume igual de soluo de hidrxido de sdio a 6%
(p/v) e misturar. Adicionar, imediatamente, 0,4 volume
(calculado em relao soluo da amostra) de Reagente
de biureto e misturar rapidamente. Manter as amostras
durante, pelo menos, 15 minutos a uma temperatura
compreendida entre 15 C e 25 C. Nos 90 minutos que
se seguem adio do reagente, determinar a absorvncia
(5.2.14), no mximo em 545 nm, das Solues padro
e da Soluo da amostra, usando a Soluo em branco
como lquido de compensao. Se nas solues surgirem
turvao ou precipitado, no so usadas para o clculo do
teor em protena.
, sensivelmente, linear no intervalo de concentraes
indicado para as Solues padro. Construir um grfco da
absorvncia das Solues padro em funo do teor em
protena dessas solues e determinar a curva de calibrao
por anlise de regresso linear. Calcular o coefciente de
correlao para a curva de calibrao. O sistema satisfaz
se obtiver uma reta cujo coefciente de correlao for,
pelo menos, de 0,99. A partir da curva de calibrao e da
absorvncia da Soluo amostra determinar o teor em
protena da Soluo amostra.
Substncias interferentes. possvel limitar o efeito das
substncias interferentes precipitando, como se indica
a seguir, a protena da amostra: junte 0,1 volume de
soluo de cido tricloroactico a 50% (p/v) a 1 volume de
Soluo da amostra, eliminar o sobrenadante e dissolver
o precipitado num pequeno volume de hidrxido de sdio
0,5 M. Utilizar a soluo assim obtida para preparar a
soluo da amostra.
5
MTODO 6
Esse mtodo fuorimtrico foi elaborado com base numa
derivao da protena pelo o-ftalaldedo que reage com
as aminas primrias da protena, isso , o aminocido
N-terminal e a funo -amina dos resduos de lisina. A
sensibilidade do doseamento pode ser melhorada por
uma hidrlise prvia da protena, antes da adio do
o-ftalaldedo. A hidrlise liberta a funo -amina dos
aminocidos constituintes da protena e que lhe possibilita
reagir com o reagente de ftalaldedo. Esse mtodo
aplicvel a diminutas quantidades de protena.
As aminas primrias contidas, por exemplo, nos tampes
de trometamina e nos tampes de aminocidos reagem
com o ftalaldedo e so, portanto, de evitar ou eliminar.
A amnia em elevada concentrao reage igualmente com
o ftalaldedo. A fuorescncia resultante da reao amina
ftalaldedo pode ser instvel. O emprego de processos
automatizados para padronizar o mtodo pode possibilitar
melhorar-lhe a exatido e a viabilidade.
Utilize a gua destilada para a preparao de todos os
tampes e reagentes a usar nesse mtodo.
da amostra em soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v)
de modo a obter uma concentrao compreendida no
intervalo da concentrao das Solues padro. Ajustar o
pH da soluo para 8 - 10,5 antes de juntar o Reagente de
ftalaldedo.
correspondente protena a dosear em soluo de cloreto
de sdio a 0,9% (p/v). Tomar amostras dessa soluo e
completar com soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v)
de modo a obter pelo menos cinco solues padro de
concentraes compreendidas entre 10 g/mL e 200 g/
mL e uniformemente repartidas no intervalo escolhido.
Ajustar o pH das solues para 8-10,5 antes de adicionar o
Reagente de ftalaldeido.
Soluo em branco. Utilizar soluo de cloreto de sdio a
0,9% (p/v).
Tampo de borato. Dissolver 61,83 g de cido brico em
gua destilada e ajuste o pH para 10,4 com soluo de
hidrxido de potssio. Completar a 1000 mL com gua
destilada e misturar.
Soluo me de ftalaldedo. Dissolver 1,20 g de ftalaldedo
em 1,5 mL de metanol, adicionar 100 mL de Tampo de
borato e misturar. Adicionar 0,6 mL de soluo de ter
lurico de macrogol 23 a 30% (p/v) e misturar. Conservar
a soluo temperatura ambiente e utilizar, dentro das 3
semanas que seguem sua preparao.
Reagente de ftalaldedo. A 5 mL da Soluo me de
ftalaldedo junte 15 L de 2-mercaptoetanol. Preparar o
reagente 30 minutos, pelo menos, antes de utilizar e dentro
das 24 horas aps a sua preparao.
Tcnica. Misturar 10 L da Soluo da amostra e de cada
uma das Solues padro com 0,1 mL de Reagente de
ftalaldedo e deixar em repouso temperatura ambiente
durante 15 minutos. Adicionar 3 mL de hidrxido de sdio
0,5 M e misturar. Determinar a intensidade da fuorescncia
(5.2.15) das amostras da Soluo padro e da Soluo
amostra no comprimento de onda de excitao de 340 nm e
no comprimento de onda de emisso de 440 nm a 455 nm.
Determinar a intensidade da fuorescncia de uma amostra
uma s vez porque a irradiao provoca uma diminuio
da intensidade da fuorescncia.
Clculos. A relao entre a intensidade de fuorescncia
e o teor em protena linear. Registrar num grfco as
intensidades de fuorescncia obtidas com as Solues
padro em funo do teor em protena dessas solues e
determine a curva de calibrao por anlise de regresso
linear. A partir da curva de calibrao e da intensidade de
fuorescncia da Soluo amostra, determine o teor em
protena da Soluo amostra.
MTODO 7
Esse mtodo foi elaborado com base na quantifcao das
protenas por doseamento do nitrognio. A presena na
amostra de outras substncias nitrogenadas pode afetar
o resultado do doseamento das protenas. As tcnicas
utilizadas para dosar o nitrognio conduzem destruio
da amostra durante a anlise, mas no se limitam
determinao das protenas em meio aquoso.
Tcnica A. Proceder como indicado para o doseamento
do nitrognio aps mineralizao pelo cido sulfrico
(5.3.3.2) ou utilizar instrumentos disponveis no mercado
adaptados ao doseamento do nitrognio pelo mtodo de
Kjeldahl.
Tcnica B. Existem no mercado instrumentos adaptados
para o doseamento do nitrognio. A maior parte deles
utiliza a pirlise (combusto da amostra em presena
do oxignio a temperaturas prximas de 1000 C), que
provoca a formao de monxido de nitrognio (NO) e
outros xidos de forma NO
x
a partir do nitrognio existente
na amostra. Certos instrumentos convertem esses xidos
de nitrognio em nitrognio gasoso que quantifcado
por condutimetria trmica. Outros misturam o monxido
de nitrognio (NO) com oznio (O
3
) para produzir
dixido de nitrognio no estado excitado (NO
2
) que
emite uma radiao luminosa quando do seu decrscimo
e quantifcado por quimiluminescncia. Um produto de
referncia, relativamente puro, e semelhante, quanto sua
composio, protena a dosar utilizado para otimizar
os parmetros de injeo e de pirlise e para avaliar a
reprodutibilidade da anlise.
Clculos. O teor em protena calcula-se dividindo o teor em
nitrognio da amostra pelo teor em nitrognio (conhecido)
da protena que pode ser determinado quer a partir da
estrutura qumica da protena, quer por comparao com
uma substncia de referncia apropriada
5
IMUNOGLOBULINA HUMANA ANTI-D
A atividade da imunoglobulina humana anti-D
avaliada por comparao da quantidade necessria para
produzir a aglutinao de eritrcitos D-positivos e a
de uma preparao de referncia, aferida em unidades
internacionais, necessrias para produzir o mesmo efeito.
A Unidade Internacional corresponde atividade de uma
determinada quantidade da preparao internacional de
referncia. A correspondncia entre unidades internacionais
e a preparao de referncia internacional indicada pela
Utilizar uma mistura de eritrcitos D-positivos, com menos
de 7 dias e conservados nas condies adequadas, obtida a
partir de, pelo menos, quatro doadores do grupo OR
1
R
1
. A
um volume apropriado de eritrcitos, lavados, previamente,
trs vezes com soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v),
juntar um volume igual de bromelna SR, deixar em
repouso a 37 C durante 10 minutos. Centrifugar, eliminar
o lquido sobrenadante e lavar trs vezes os eritrcitos com
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v). Suspender 20
volumes dos eritrcitos em uma mistura de 15 volumes de
soro inerte, 20 volumes de soluo de albumina bovina a
30% (p/v) e 45 volumes de soluo de cloreto de sdio a
0,9% (p/v). Colocar a suspenso em gua com gelo sob
agitao contnua.
Com um aparelho automtico de diluio calibrado
preparar diluies da amostra e da preparao de referncia
numa soluo de albumina bovina a 0,5% (p/v) e soluo
de cloreto de sdio a 0,9% (p/v).
Utilizar um aparelho apropriado para anlise automtica
contnua; mantenha a temperatura nos estojos a 15 C
com exceo das espirais de incubao. Aspirar para os
estojos de admisso do aparelho a suspenso de eritrcitos
com um dbito de 0,1 mL por minuto e uma soluo de
metilcelulose 450 a 0,3% (p/v) com um dbito de 0,05 mL
por minuto.
Introduzir as diluies da amostra e da preparao de
referncia com um dbito de 0,1 mL por minuto durante 2
minutos e depois o diluente razo de 0,1 mL por minuto
durante 4 minutos antes de introduzir a diluio seguinte.
Introduzir ar razo de 0,6 mL por minuto. Incubar a 37
C durante 18 minutos e depois dispersar as espirais por
introduo, com um dbito de 1,6 mL por minuto, de uma
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) que contm um
agente molhante apropriado (por exemplo, polissorbato 20
numa concentrao fnal de 0,2 g/L) para evitar alterar a
continuidade das bolhas. Deixar depositar os aglutinados
e decantar 2 vezes, a primeira vez a 0,4 mL por minuto
e a segunda vez a 0,6 mL por minuto. Proceder a lise do
resduo dos eritrcitos no aglutinados com a ajuda de uma
soluo de octoxinol 10 a 0,5% (p/v), de ferricianeto de
potssio a 0,02% (p/v), de bicarbonato de sdio a 0,1% (p/v)
e de cianeto de potssio a 0,005% (p/v), com um dbito
de 2,5 mL por minuto. introduzida uma serpentina de
retardamento de 10 minutos para permitir a transformao
da hemoglobina.
Realizar o registro contnuo da absorvncia (5.2.14) do
hemolisado no comprimento de onda de 540 a 550 nm.
Determinar as concentraes de anticorpos para as
quais existe uma relao linear entre a concentrao e a
modifcao da absorvncia (A). Com base nos resultados,
construir uma curva de calibrao e utilizar a parte linear
da curva para determinar a atividade da amostra. Calcular
a atividade da amostra em unidades internacionais por
mililitro usando a frmula:
D
d a
em que
a = atividade da preparao referncia em unidades
internacionais por mililitro para uma diluio de 1 em D,
d = fator de diluio da amostra que corresponde a um
dado valor de A,
D = fator de diluio da preparao de referncia que
corresponde ao mesmo valor de A.
5.5.1.16 DETERMINAO DA FUNO F
C

DA IMUNOGLOBULINA
REAGENTES
Sangue humano estabilizado. Fazer uma febotomia
para coletar o sangue humano do grupo O em soluo
anticoagulante conservadora e preservadora do tipo ACD.
Conservar o sangue humano estabilizado a 4 C, durante 3
semanas, no mximo.
Soluo salina tamponada de fosfato de pH 7,2. Dissolver
1,022 g de fosfato de sdio dibsico anidro, 0,336 g de
fosfato de sdio monobsico e 8,766 g de cloreto de sdio
em 800 mL de gua e completar 1000 mL com o mesmo
diluente.
Soluo me de magnsio e de clcio. Dissolver 1,103 g de
cloreto de clcio e 5,083 g de cloreto de magnsio em gua
e completar 25 mL com o mesmo diluente.
Soluo me de tampo de barbital. Dissolver 207,5 g
de cloreto de sdio e 25,48 g de barbital sdico em 4000
mL de gua e ajustar para pH 7,3 com cido clordrico M.
Juntar 12,5 mL da Soluo me de magnsio e de clcio e
completar 5000 mL com gua. Filtrar por membrana (0,22
m) e conservar a 4 C em recipiente de vidro.
Tampo de albumina-barbital. Dissolver 0,150 g de
albumina bovina em 20 mL de Soluo me de tampo de
barbital e completar 100 mL com gua.
Soluo de cido tnico. Dissolver 10 mg de cido tnico
em 100 mL de Soluo salina tamponada de fosfato de pH
7.2. Preparar imediatamente antes do uso.
Complemento de cobaia. Misturar os soros obtidos a
partir de, pelo menos, 10 cobaias. Separar o soro do
5
sangue coagulado por centrifugao a uma temperatura
de aproximadamente de 4 C. Conservar o soro, em
pequenas pores, a uma temperatura inferior a -70 C.
Imediatamente antes de se iniciar a hemlise por ao do
complemento, diluir para 125 - 200 CH
50
por mililitro com
Tampo de albumina-barbital e, durante o ensaio, manter a
soluo diluda num banho de gelo.
Antgeno da rubola. Antgeno de rubola apropriado para
as titulaes da inibio de hemaglutinao. Ttulo > 256
unidades HA.
PROCEDIMENTO
Tratamento dos eritrcitos humanos com cido tnico.
Separar os eritrcitos por centrifugao de um volume
apropriado de sangue humano estabilizado. Lavar os
eritrcitos, pelo menos trs vezes, com Soluo salina
tamponada de fosfato de pH 7,2 e depois suspender a 2%
(v/v) em Soluo salina tamponada de fosfato de pH 7,2.
Tomar 0,1 mL da Soluo de cido tnico e completar
7,5 mL com Soluo salina tamponada de fosfato de pH
7,2 (concentrao fnal 1,3 mg/L); misturar 1 volume
da diluio recentemente preparada com l volume da
suspenso de eritrcitos e incubar a 37 C durante 10
minutos. Recolher os eritrcitos tratados com cido tnico
por centrifugao (400 - 800 g, durante 10 minutos), rejeitar
o sobrenadante e lavar os eritrcitos uma vez com Soluo
salina tamponada de fosfato de pH 7,2. Suspender a 1%
(v/v) os eritrcitos tratados com cido tnico na Soluo
salina tamponada de fosfato de pH 7,2.
Adio dos antgenos aos eritrcitos. Tomar um volume
apropriado (v
s
) de eritrcitos tratados com cido tnico,
junte 0,2 mL de antgeno da rubola por 1,0 mL de
eritrcitos e incubar a 37 C durante 30 minutos. Recolher
os eritrcitos por centrifugao (400-800 g, durante 10
minutos) e rejeitar o sobrenadante, deixando um volume
de 200 L. Juntar um volume de Tampo de albumina-
barbital igual ao volume do sobrenadante rejeitado,
agitar at suspenso dos eritrcitos, recolher esses como
acima descritos e repitir a lavagem. Completar o volume
remanescente obtido de 0,2 mL at trs-quartos de v
s
,
obtendo assim o volume inicial (v
i
).
Misturar 900 L de Tampo de albumina-barbital com
100 L de v
i
, que assim reduzido ao volume residual e
determinar a absorvncia inicial em 541 nm (A). Diluir v
r

por um fator igual a A utilizando Tampo de albumina-
barbital. Obtm-se, assim, o volume fnal ajustado v
f
= v
r

x A de eritrcitos humanos sensibilizados e um valor para
A de 1,0 0,1 no caso de uma diluio a 1/10.
Ligao dos anticorpos aos eritrcitos com cido
tnico e cobertos de antgeno. Preparar, em duplicata e,
sucessivamente, as seguintes solues utilizando para
cada soluo, em separado, uma cubeta semimicro (por
exemplo, placas descartveis) ou um tubo de ensaio para
cada soluo:
(1) Solues problema. Se necessrio, ajustar a amostra
a pH 7 adicionando, por exemplo, hidrxido de sdio M.
Tomar volumes da amostra contendo, respectivamente,
30 e 40 mg de imunoglobulina e completar 900 L com
Tampo de albumina-barbital.
(2) Soluo padro. Preparar a soluo tal como se
descreve para a Soluo problema a partir de um padro de
referncia para imunoglobulina humana.
(3) Testemunho do Complemento. 900 L de Tampo de
albumina-barbital. A cada cubeta/tubo de ensaio juntar
100 L de eritrcitos humanos sensibilizados e misturar
cuidadosamente. Deixar em repouso durante 15 minutos,
juntar 1000 L de Tampo de albumina-barbital, recolher
os eritrcitos por centrifugao (1000 g durante 10
minutos) da cubeta/tubo de ensaio e retirar 1900 L do
sobrenadante. Substituir este volume com 1900 L de
Tampo de albumina-barbital e repetir o procedimento da
lavagem deixando um volume fnal de 200 L. As amostras
podem ser conservadas em cubetas/tubos de ensaio
fechados a 4 C durante 24 horas.
Hemlise por ao do complemento. Para a determinao da
hemlise adicionar 600 L de Tampo de albumina-barbital
aquecida a 37 C amostra, suspender, cuidadosamente,
os eritrcitos pipetando-os, repetidamente, (pelo menos
cinco vezes) e colocar a cubeta no porta-amostra de um
espectrofotmetro com termostato. Aps 2 minutos, juntar
200 L de Complemento de cobaia diludo para 125 -
200 CH
50
/mL, misturar, cuidadosamente, pipetando a
mistura duas vezes e inicie imediatamente aps a segunda
pipetagem o registro da absorvncia em 541 nm em funo
do tempo, utilizando o Tampo de albumina-barbital como
lquido de compensao. Parar o registro se a curva da
absorvncia em funo do tempo ultrapassar nitidamente o
ponto de infexo.
Doseamento. Determinar o declive (S) da curva de
hemlise no ponto aproximado da infexo segmentando a
curva na regio de maior declive por intervalos de tempo
apropriados (por exemplo, t = 1 minuto) e calculando S,
expresso em A por minuto entre os pontos de interseco
adjacentes. O valor mais elevado de S corresponde a (S
exp
).
Determinar, tambm, a absorvncia no incio da curva (A
s
)
por extrapolao da curva, a qual quase sempre linear
e paralela ao eixo do tempo nos primeiros minutos do
registro. Corrigir S
exp
de acordo com a frmula:
s
A
S
S
exp
' =
Para cada preparao, calcular a mdia aritmtica dos
valores de S. Calcular o ndice da funo Fc (I
Fc
) a partir
da frmula:
c s
c
F
S S
S S
I
c
' '
' '
100
=
5
S = mdia aritmtica do declive corrigido para a amostra;
S
s
= mdia aritmtica do declive corrigida para o padro;
S
c
= mdia aritmtica do declive corrigida para o
testemunho do complemento.
Calcular o ndice da funo F
c
para a amostra. O valor no
inferior ao indicado pelo fabricante do padro.
5.5.2 ENSAIOS BIOLGICOS
5.5.2.1 PIROGNIOS
O teste de pirognios fundamenta-se na medida do
aumento da temperatura corporal de coelhos, aps injeo
intravenosa da soluo estril em anlise.
Para produtos bem tolerados pelos animais, utilizar uma
dose que no exceda 10 mL/kg, injetada em tempo no
superior a 10 minutos.
Para os produtos que necessitem preparao preliminar
ou condies especiais de administrao, seguir as
recomendaes estabelecidas na monografa.
Condies gerais
Usar coelhos do mesmo sexo, adultos, sadios,
preferencialmente da mesma raa, pesando, no mnimo, 1,5
kg.
Aps a seleo, manter os animais em gaiolas individuais
em sala com temperatura uniforme entre 20 e 23 C livre
de perturbaes que possam estress-los. A temperatura
selecionada pode variar at 3 C.
Realizar condicionamento para determinao da
temperatura dos animais, pelo menos uma vez, at
sete dias antes de iniciar o teste. Os animais devero
ser condicionados segundo o mesmo procedimento do
teste apenas sem inoculao do produto. Animais que
apresentarem elevao de temperatura igual ou superior a
0,5 C, em relao temperatura inicial, no devero ser
utilizados no teste.
Quando da realizao do teste, usar apenas animais
com temperatura igual ou inferior a 39,8
o
C e que no
apresentem, de um para o outro, variao superior a 1,0 C.
Registro da temperatura
Usar termmetro clnico calibrado com preciso de 0,1
C ou qualquer outro dispositivo de registro de temperatura
calibrado de igual sensibilidade.
Introduzir o termmetro no reto do animal em profundidade
aproximada de 6 centmetros. Se for utilizado dispositivo
registrador, que deva permanecer no reto durante o
perodo do teste, conter os coelhos de maneira que fquem
em postura natural de repouso. Quando se empregar
termmetro clnico, deixar transcorrer o tempo necessrio
(previamente determinado) para que alcance a temperatura
mxima, antes de proceder leitura.
Material
As seringas, agulhas e vidrarias estreis e apirognicas.
Os diluentes e solues extratoras ou de lavagem devem,
tambm, ser estreis e apirognicos.
Procedimento
Executar o teste em rea especialmente destinada para
o teste, sob condies ambientais controladas, livre de
perturbaes que possam estressar os coelhos. Nas duas
horas precedentes e durante o teste, suprimir a alimentao.
O acesso gua permitido, mas pode ser restringido
durante o teste.
No mximo 40 minutos antes da injeo da dose do
produto a ser testado, registrar a temperatura de cada
animal mediante duas leituras efetuadas com intervalo de
30 minutos. A mdia das duas leituras ser adotada como
temperatura de controle necessria para avaliar qualquer
aumento individual de temperatura subsequente injeo
da amostra.
Preparar o produto a ser testado conforme especifcado
na monografa e aquecer a 37 2 C. Para o teste de
pirognios de materiais de uso hospitalar lavar, com soluo
fsiolgica estril, as superfcies do material que entram em
contato com o produto, local de injeo ou tecido interno
do paciente. Efetuar os procedimentos assegurando que a
soluo no seja contaminada.
Injetar pela veia marginal da orelha de trs coelhos no
menos do que 0,5 mL nem mais que 10 mL da soluo
por kg de peso corporal ou a quantidade indicada na
monografa. A injeo no deve durar mais que 10 minutos,
a menos que na monografa se especifque tempo diferente.
Registrar a temperatura de cada animal em intervalos de 30
minutos durante 3 horas aps a injeo.
Interpretao
No considerar os decrscimos de temperatura apresentados
pelos animais durante o teste. O aumento de temperatura
verifcado pela diferena entre a maior temperatura
apresentada pelo coelho durante o teste e a sua temperatura
de controle.
Se nenhum dos trs coelhos apresentar aumento individual
da temperatura igual ou superior a 0,5
o
C, em relao s
suas respectivas temperaturas controle, o produto cumpre
com os requisitos do teste de pirognios.
Se algum coelho apresentar aumento da temperatura igual
ou superior a 0,5
o
C, repetir o teste utilizando outros cinco
animais.
5
O produto em exame cumpre os requisitos para ausncia de
pirognios se no mximo trs dos oito coelhos apresentarem
aumentos individuais de temperatura iguais ou superiores
a 0,5
o
C, e se a soma dos aumentos individuais de todos os
coelhos no exceder a 3,3
o
C.
5.5.2.2 ENDOTOXINAS BACTERIANAS
O teste de endotoxina bacteriana usado para detectar
ou quantifcar endotoxinas de bactrias gram negativas
presentes em amostras para qual o teste preconizado.
Utiliza-se o extrato aquoso dos amebcitos circulantes
do Limulus polyphemus ou do Tachypleus tridentatus
preparado e caracterizado como reagente LAL.
H duas tcnicas com sensibilidade diferente para este
teste:
1. MTODO DE COAGULAO EM GEL: baseado na
formao de cogulo ou gel (mtodo semi-quantitativo)
2. MTODOS FOTOMTRICOS quantitativos que
incluem:
O MTODO TURBIDIMTRICO, (baseado no
desenvolvimento de turbidez aps quebra de um substrato
endgeno);
O MTODO CROMOGNICO (baseado no
desenvolvimento de cor aps quebra de um complexo
peptdeo sinttico cromgeno).
Qualquer um destes procedimentos pode ser realizado, a
menos que indicado contrrio na monografa.
No mtodo de coagulao em gel, a determinao do ponto
fnal da reao feita a partir de diluies da substncia
sob teste em comparao direta com diluies paralelas
da endotoxina padro. As quantidades de endotoxinas so
expressas em unidades de endotoxina (UE) defnidas.
Nota: 1 UE igual a 1 UI (unidade internacional).
O reagente LAL (lisado de amemcito de Limulus sp.)
preparado para as leituras turbidimtricas ou colorimtricas
e estes procedimentos podem ser utilizados se cumprirem
os requisitos dos mtodos. Para sua calibrao necessria
a elaborao de uma curva padro obtendo-se a sua
regresso linear, na qual se determina, por interpolao, a
concentrao de endotoxina da substncia sob teste.
O procedimento inclui incubao da endotoxina padro
para obteno de uma curva de calibrao e das solues
controle com reagente LAL, por tempo pr-determinado
e leitura espectrofotomtrica no comprimento de onda
adequado.
No caso do procedimento do mtodo turbidimtrico, a leitura
feita imediatamente aps perodo fnal de incubao, e
para o procedimento colorimtrico a reao enzimtica
interrompida no fnal do tempo pr-determinado pela adio
do reagente, antes das leituras. Para os procedimentos
cinticos turbidimtricos e colorimtricos os valores de
absorvncia medida durante o perodo da reao e valores
de velocidades so determinados para aquelas leituras.
VIDRARIAS E DESCARTVEIS.
Todas as vidrarias devem ser despirogenisadas em
estufa usando um processo validado. Utilize um tempo
e temperatura mnimos de 250 C por 30 minutos. Se
utilizar descartveis plsticos, como ponteiras e pipetas
usem somente os certifcados que indicam ser livres de
endotoxinas para no haver interferncia no teste.
PREPARAO DA ENDOTOXINA PADRO DE
REFERNCIA E DO PADRO DE ENDOTOXINA
O padro de endotoxina de referencia tem uma potncia
defnida de 10.000 UE (unidades de endotoxina) por frasco.
Reconstitua o frasco com 5 mL de agua grau reagente LAL
(livre de pirognio) e agite em vrtex intermitentemente por
30 minutos. Use esta soluo concentrada (conservada em
refrigerador por no mais que 14 dias) para fazer diluies
seriadas. Agite vigorosamente antes do uso por pelo menos
3 minutos e proceda s diluies seriadas, agitando no
mnimo 30 segundos antes das prximas diluies. Aps
o uso desprezar as diluies devido perda de atividade
por adsoro. Para a preparao do padro de endotoxina
(siga as orientaes do fornecedor, certifcados no laudo
de endotoxina).
Preparao para o teste
Usar reagente LAL com sensibilidade declarada
confrmada.
A validade dos resultados do teste para endotoxinas
bacterianas requer a demonstrao de que as amostras,
solues de lavagens ou extratos sob teste no inibem
ou potencializam a reao e tampouco interferem com o
teste. A validao realizada por meio de teste de inibio
ou potencializao descrito para cada uma das tcnicas
indicadas. So includos controles negativos apropriados.
A validao deve ser repetida se houver mudana na
origem do reagente LAL, no mtodo de produo ou na
formulao da substancia sob teste.
Preparao da amostra
Prepare a soluo de amostra dissolvendo a mesma em
gua grau reagente LAL. Se necessrio ajuste o pH da
soluo da amostra para que a mistura reagente LAL
mais amostra caia na faixa de pH de 6 a 8. O pH pode ser
justado usando um tampo adequado recomendado pelo
fornecedor. cidos e bases podem ser preparados com
gua grau reagente LAL e ser validados para serem livres
de endotoxinas e fatores de interferentes.
DETERMINAO DA MXIMA DILUIO VALIDA
(MDV)
A mxima diluio vlida a mxima diluio permitida
da amostra em anlise onde o limite de endotoxina pode
5
ser determinado. Ela se aplica para injees ou solues de
administrao parenteral na forma reconstituda ou diluda
para administrao, quantidade de frmaco por peso, se o
volume da forma da dosagem for varivel.
A frmula para o clculo da MDV a seguinte:
em que:
= a sensibilidade rotulada do reagente de LAL
Observao: frmula usada para quando o limite de
endotoxina do frmaco especifcado na monografa estiver
em volume (UE/mL)
Quando limite de endotoxina do frmaco especifcado na
monografa estiver em peso (UE/mg) ou em unidade do
frmaco ativo (UE/unidades) o MDV calculado pela
seguinte frmula:
em que:
= a sensibilidade rotulada do reagente de LAL
O MDV obtido o fator de diluio limite para que o teste
seja validado.
ESTABELECIMENTO DO LIMITE DE ENDOTOXINA
A frmula para estabelecer limite de endotoxina para
drogas parenterais :
em que:
LE o limite de endotoxina
K a dose limite humana de endotoxina por quilo de peso
corpreo;
M igual mxima dose do produto por kg de peso em um
perodo de uma hora.
O limite de endotoxina especifcado nas monografas
individuais das drogas parenterais em UE/mL, UE/mg ou
UE/unidade de atividade biolgica .
TCNICA DE COAGULAO EM GEL
A tcnica da coagulao em gel permite a deteco
e quantifcao de endotoxinas baseada na reao de
gelifcao do reagente LAL
A sensibilidade do LAL rotulada a concentrao de
endotoxina necessria para causar uma gelifcao do
reagente LAL
Para garantir a preciso e validade do teste so necessrios
testes para confrmar a sensibilidade do LAL rotulada
assim como testes para verifcao de fatores interferente,
como descrito na preparao da amostra para o teste.
Teste para confrmao de sensibilidade do LAL
Confrmar a sensibilidade declarada do LAL usando no
mnimo 01 frasco de reagente LAL e preparar uma srie de
diluies de endotoxina usando o padro de Endotoxina de
referncia (RSE) ou o padro de Endotoxina (CSE), com
razo geomtrica igual a 2 para obter as concentraes de
0,25 , 0,5 , e 2 s, onde a sensibilidade declarada
do LAL em UE/mL. Executar o teste com as quatro
concentraes do padro de endotoxina em quadruplicata
e incluir controles negativos. A mdia geomtrica da
concentrao do ponto fnal cujo clculo e interpretao
encontram-se a seguir deve ser maior ou igual a 0,5 e
menor ou igual a 2 . A confrmao da sensibilidade do
LAL deve ser realizada para cada novo lote de LAL.
Clculo e interpretao. O ponto fnal de gelifcao
o ultimo teste da serie decrescente de concentrao
de endotoxina padro que formou gel. Calcule a media
geomtrica logartmica dos pontos fnais de gelifcao e o
antilog da mdia pela frmula:
em que
Ee - a soma dos log das concentraes do ponto fnal da
srie de diluies utilizada
f - o numero de replicatas.
A sensibilidade do reagente LAL em UE/mL calculada
pela frmula acima e no deve ser menor que 0,5 e maior
que 2 .
Testes de interferncias no mtodo coagulao em gel
(Inibio/Potencializao)
Realizar o teste em alquotas da amostra na qual no h
endotoxina detectvel e em diluies que no exceda o
MDV (mxima diluio vlida). Executar o teste, como
no procedimento do teste, na amostra sem adio de
endotoxina (soluo A) e na amostra com endotoxina
adicionada (soluo B), nas concentraes de , , 1
e 2 , em quadruplicatas, e testando tambm em paralelo as
mesmas concentraes de endotoxina em gua (soluo C)
e controle negativo em gua grau reagente LAL (soluo
D) em duplicata.
Calcular a mdia geomtrica da concentrao de endotoxina
do ponto fnal de gelifcao da amostra como descrito no
procedimento do teste acima (teste para confrmao da
sensibilidade do LAL).
O teste vlido para a amostra sob anlise se a mdia
geomtrica desta concentrao for maior ou igual a 0,5
e menor ou igual a 2 . Se o resultado obtido nas amostras
nas quais foram adicionadas endotoxina estiver fora do
limite especifcado, o teste de inibio ou potencializao
de endotoxina dever ser repetido aps neutralizao,
inativao ou remoo das substancias interferentes ou
aps a diluio da amostra por fator que no exceda a
MDV. Repetir o teste numa diluio maior no excedendo
a MDV ou usar um LAL de sensibilidade maior para que
a interferncia possa ser eliminada na amostra analisada.
5
Interferncias podem ser eliminadas por um tratamento
adequado como fltrao, neutralizao, dilise ou
aquecimento.
COAGULAO EM GEL - TESTE LIMITE
Este teste usado quando a monografa contm
requerimentos para limite de endotoxina.
Procedimento. Realize os testes em duplicatas com as
solues A, B, C, D como se segue. Prepare soluo de
amostra diluda sem adio de endotoxina (soluo A);
com adio de endotoxina (controle positivo do produto)
a 2 (soluo B); gua grau reagente LAL com adio de
endotoxina a 2 (soluo C) e gua grau reagente LAL
sem adio de endotoxina (soluo D - controle negativo).
A diluio da soluo A e B no deve ultrapassar o MDV.
Interpretao. O teste somente ser valido se as rplicas
dos controles positivos das solues B e C formarem gel,
e a rplicas dos controles negativos das solues A e C no
formarem gel. Resultados contrrios, no sero vlidos e
devero ser repetidos.
Ensaio do teste pela coagulao em gel
Misture um volume (ex. 100 L) de LAL com igual volume
das solues acima, amostra, padres, e controle negativo
do teste em tubos de ensaio 10 x 75mm, em duplicatas.
Incubar os tubos por 1 hora a 37 C 1 C, evitando
vibraes. Aps este perodo retire os tubos um a um,
virando a 180 graus e verifcando a integridade do gel; se o
gel permanecer frme aps a inverso dos tubos considere
o resultado como positivo, e se no houver formao de
gel ou o mesmo no se apresentar frme considere como
negativo.
O teste somente ser vlido se as seguintes condies
forem obedecidas:
Se ambas as rplicas do controle negativo (D) apresentarem
reaes negativas;
Se ambas as rplicas do controle positivo do produto (B)
apresentarem reaes positivas;
Se a mdia geomtrica da soluo C estiver dentro da faixa
de 0,5 a 2 .
Para calcular a concentrao de endotoxina da soluo A,
calcule a concentrao do ponto fnal de cada rplica da
serie de diluies, multiplicando cada fator de diluio do
ponto fnal pela sensibilidade rotulada do reagente LAL ()
A concentrao de endotoxina na soluo teste a mdia
geomtrica da concentrao do limite das replicas.
Se o teste realizado na amostra diluda, determine
a concentrao de endotoxina na soluo original
multiplicando o resultado pelo fator de diluio da amostra.
Se nenhuma das diluies da amostra teste for positiva,
expresse o resultado da concentrao de endotoxina como
menor que a sensibilidade do LAL () ou menor do que
a sensibilidade do LAL multiplicado pelo menor fator de
diluio da amostra.
Se todas as diluies da amostra apresentarem reaes
positivas, a concentrao de endotoxina expressa como
igual ou maior que multiplicado pelo mais alto fator de
diluio da amostra.
A amostra encontra os requerimentos do teste se a
concentrao de endotoxina for menor do que o limite
individual especifcado na monografa.
TCNICAS FOTOMTRICAS
Os mtodos fotomtricos quantitativos incluem:
A. Mtodo cintico turbidimtrico: baseado no
desenvolvimento de turbidez aps quebra de um substrato
endgeno.
B. Mtodo cintico cromognico: baseado no
desenvolvimento de cor aps quebra de um complexo
peptdeo sinttico cromgeno.
C. Mtodo cromognico limite (endpoint).
D. mtodo turbidimtrico limite (endpoint).
Tcnica turbidimtrica
Esta tcnica baseia-se na medida de aumento de turbidez, e
dependendo do principio empregado, pode ser classifcado
em 2 tipos:
A. Limite Turbidimtrico: baseado na relao entre a
concentrao de endotoxina e a turbidez (absorvncia ou
transmisso) da reao
B. Cintico Turbidimtrico: mtodo baseado no tempo de
reao (onset time) necessrio para a mistura de a reao
atingir uma absorvncia pr-determinada ou na relao de
desenvolvimento de turbidez.
O teste realizado numa temperatura de incubao
recomendada de 37 C 1 C.
Tcnica cromognica
Esta tcnica baseada na medida de um cromforo liberado
por um peptdeo cromognico pela reao da endotoxina
com o lisado e dependendo do principio empregado pode
ser classifcado em dois tipos:
A. Teste cromognico limite- baseado na relao entre a
concentrao de endotoxina e a quantidade do cromforo
liberado no fnal de um perodo de incubao.
B. Teste cintico cromognico: baseado na medida do
tempo de reao (onset time) necessrio para a mistura de
a reao atingir uma pr-determinada absorvncia ou na
velocidade de desenvolvimento de cor.
O teste realizado numa temperatura de incubao
recomendada de 37 1 C.
5
Preparao do teste
Para assegurar a preciso e validade dos testes
turbidimtricos e cromognicos, testes preparatrios so
realizados para assegurar os critrios para a curva padro
so satisfatrios e a amostra em teste no interfere com o
teste.
A validao do mtodo requerida quando qualquer
mudana nas condies experimentais realizada e pode
interferir no teste.
Critrios para a curva padro
Prepare uma curva padro utilizando trs concentraes de
endotoxina, usando uma soluo preparada de padro de
endotoxina, e realize o teste, no mnimo em triplicata de
cada concentrao, como recomendado pelo fornecedor do
LAL (relao de volume, tempo de incubao, temperatura
e pH,etc.)
Se for desejado uma faixa maior que 2 logs, uma
concentrao padro dever ser adicionada para aumentar
a faixa da curva padro.
O valor absoluto de correlao linear R dever ser maior ou
igual a 0,980 para a faixa. De concentrao de endotoxina
indicada pelo fornecedor de LAL.
Teste para fatores de interferncia para as tcnicas
fotomtricas
Prepare solues de amostra diluda sem exceder a MDV
(mxima diluio vlida) sem endotoxina (soluo A) e
com endotoxina adicionada (soluo B) na concentrao
igual ou prxima do ponto mdio da curva padro. Prepare
tambm uma srie de controle positivo com solues de
endotoxina (seduo C) com trs concentraes diferentes,
e tambm o controle negativo com gua apirognica
(soluo D) e realizar os testes adicionando reagente LAL,
no mnimo em duplicata (siga as orientaes do reagente
utilizado com relao ao volume de amostra e do reagente,
tempo de incubao), o ponto mais baixo da curva
considerado .
Calcule a mdia de recuperao da endotoxina adicionada
amostra subtraindo-se a mdia da concentrao de endotoxina
na soluo teste (soluo A) (se houver) da mdia da soluo
cuja endotoxina foi adicionada (soluo B).
A soluo teste considerada livre de interferentes se a
medida da concentrao de endotoxina adicionada
soluo teste (soluo B) estiver na faixa de 50 a 200%
de recuperao, aps subtrao de qualquer endotoxina
detectada na soluo sem adio de endotoxina.
Quando a recuperao de endotoxina estiver na faixa de
especifcao, fatores interferentes devem ser removidos
conforme descritos na seo da tcnica de coagulao em gel.
Procedimento
Siga os procedimentos descritos acima nos itens:
Preparao para o teste e Testes para fatores interferentes.
Clculos para tcnicas fotomtricas
Calcule a concentrao de endotoxina para cada replicata
da soluo A, usando a curva padro gerada pela srie de
controle positivo soluo C.
O teste somente vlido se os trs requisitos abaixo forem
encontrados:
O resultado obtido da soluo D (controle negativo) no
exceda o limite do valor do branco requerido na descrio
do lisado empregado;
O resultado obtido com a srie de controle positivo, soluo
C, estiver de acordo com os requerimentos para validao
defnidos nos critrios para curva padro.
A recuperao de endotoxina, calculada a partir da
endotoxina encontrada na soluo B aps subtrao da
concentrao de endotoxina encontrada na soluo A
estiver dentro da faixa de 50 a 200%.
Interpretao dos resultados em ensaios fotomtricos
A soluo de amostra a ser examinada estar de acordo
com o teste se a mdia da concentrao de endotoxina
encontrada nas replicatas (soluo A), aps correo
para diluio e concentrao for menor que o limite de
endotoxina do produto testado.
REAGENTES
Lisado de Amebcito
O lisado de amebcito um lioflizado obtido do lisado de
amebcitos de crustceo em forma de ferradura (Limulus
polyphemus ou Tachypleus tridentatus) Este reagente
refere-se apenas ao produto manufaturado de acordo com
as regulamentaes de autoridade competente.
O lisado reage tambm com alguns B-Glucanos alm de
endotoxinas.
Preparado do lisado que no reage com B-Glucanos tambm
esto disponveis; eles so preparados ou por remoo ou
por inibio do fator G, que reage com os glucanos. Estes
preparados podem ser utilizados para teste de endotoxina
na presena de glucanos.
Reconstituio do reagente. Dissolva o lisado de amebcito
(LAL) em gua grau reagente para BET (teste de endotoxina
bacteriana) ou tampo, sem agitao e armazene o mesmo
em refrigerador ou freezer de acordo com a recomendao
do fornecedor.
gua para teste de endotoxina bacteriana
A gua para o teste a gua para injeo ou gua produzida
por outros procedimentos que demonstre no haver
5
nenhuma reao com o lisado empregado no limite de
deteco do reagente.
5.5.2.3 TOXICIDADE
O teste de toxicidade possibilita detectar reatividade
biolgica inesperada e no aceitvel de frmacos e
medicamentos. Esse teste in vivo sugerido para a
avaliao da segurana de produtos biolgicos e derivados
de biotecnologia.
TESTE GERAL
Seleo dos animais
Usar camundongos sadios, de ambos os sexos, de linhagem
conhecidos, no utilizados previamente em testes
biolgicos. Mant-los sob dieta uniforme, gua vontade e
em temperatura ambiente constante de 21 3 C. No dia do
teste, selecionar camundongos com peso entre 17 g e 22 g.
Preparao da amostra
A amostra deve ser preparada conforme especifcado na
respectiva monografa e administrada imediatamente.
Procedimento
Usar seringas, agulhas e vidraria estreis. Administrar,
em cinco camundongos, volume da preparao amostra
indicada na monografa, por uma das vias descritas a seguir.
Intravenosa - Injetar a dose na veia caudal, mantendo-se a
velocidade constante de 0,1 mL por segundo ou a indicada
na monografa.
Intraperitoneal - Injetar a dose na cavidade peritoneal.
Subcutnea - Injetar a dose na regio cervical ou abdominal.
Oral - Administrar a dose por meio de sonda ou outro
dispositivo adequado.
Interpretao
Manter os animais em observao durante 48 horas aps
a administrao ou pelo tempo indicado na monografa.
A amostra cumpre o teste se todos os animais sobrevivem
e no mais que um apresenta sintomas anormais no
intervalo de tempo estabelecido. Se um ou dois animais
morrerem, ou mais de um apresentar sintomas anormais
ou de toxicidade inesperada, repetir o teste utilizando
outros cinco ou mais camundongos, com peso entre 19
g e 21 g. A amostra cumpre os requisitos do teste se o
nmero de camundongos mortos no excede 10% do total
de animais testados, incluindo o teste original, e nenhum
animal do segundo grupo apresenta sintomas indicativos
de toxicidade anormal.
TESTE PARA PRODUTOS BIOLGICOS, SOROS E
VACINAS
Seleo dos animais
Usar, pelo menos, cinco camundongos com peso entre 17
g e 22 g e, pelo menos, dois cobaios sadios com peso entre
250 g e 350 g.
Procedimento
Pesar os animais e registrar em formulrio prprio antes
de injetar a amostra. A menos que especifcado de outra
forma na monografa, injetar intraperitonealmente em cada
animal o equivalente a uma dose humana da preparao,
sem ultrapassar 1,0 mL para camundongos e 5,0 mL para
cobaios. A dose humana defnida no rtulo da preparao
sob teste ou na bula que a acompanha.
Interpretao
Por um perodo de, no mnimo, 7 dias, observar os
animais quanto a sinais de enfermidade, perda de peso,
anormalidades ou morte. Se, durante o perodo de
observao, todos os animais sobrevivem, no manifestam
respostas que no so especfcas ou esperadas para o
produto e no sofrem reduo de peso, a preparao
cumpre o teste. Do contrrio, o teste deve ser repetido para
as espcies nas quais os requisitos no foram cumpridos. A
preparao cumpre o teste se todos os animais do segundo
grupo preenchem os critrios especifcados para o teste
inicial.
Se, aps o segundo teste, a preparao no cumprir
os requisitos, mas no forem observadas mortes em
porcentagem igual ou superior a 50% do nmero total de
animais testados, um segundo reteste pode ser realizado,
nas espcies nas quais se observou o no cumprimento
dos requisitos. Utilizar o dobro de animais do teste inicial.
Se os animais preenchem os critrios especifcados para o
teste inicial, a preparao cumpre o teste.
5.5.2.4 SUBSTNCIAS VASOPRESSORAS
Preparao padro de referncia
Como preparao padro, empregar bitartarato de
epinefrina. Essa preparao deve ser conservada em
frascos hermticos e opacos e dessecada sobre slica-gel
durante 18 horas antes do uso.
Soluo padro de referncia
Dissolver 91 mg de bitartarato de epinefrina (equivalente a
50 mg de epinefrina base C
9
H
13
NO
3
) em soluo recente de
bissulfto de sdio 0,4% (p/v). Completar 50 mL com gua
e homogeneizar. A soluo fnal ter 1,0 mg de epinefrina
(base livre) por mililitro. Conservar, sob refrigerao, em
frasco hermtico mbar. Usa, no mximo, durante seis
5
meses. Desprezar a soluo quando essa apresentar algum
sinal de deteriorao, tal como mudana de cor.
Diluio do padro
Diluir a soluo padro de referncia de epinefrina, em
soluo fsiolgica, de modo que a administrao de dose
entre 0,1 mL e 0,5 mL produza aumento de 20 mm a 70
mm de mercrio na presso arterial.
Mtodo proposto
Selecionar rato com peso entre 275 g e 325 g e anestesiar
com anestsico que possibilita a manuteno da presso
arterial constante. (isento de efeito sobre presso arterial).
Imobilizar o animal e mant-lo aquecido para prevenir
a perda de calor corporal. Cirurgicamente proceder
intubao traqueal, se necessrio, e expor a veia femoral
ou jugular, preparando-a, para injees intravenosas.
Administrar 200 unidades de heparina por 100 g de peso
corporal. Cirurgicamente expor a artria cartida e canular,
conectando-a ao manmetro ajustado para o registro
contnuo da presso arterial.
Injetar, intravenosamente, soluo de sulfato de atropina
0,1% (p/v) na proporo de 1 mL por quilograma de peso
corporal. Considerar o receptor muscarnico sufcientemente
bloqueado somente se injees subsequentes da soluo
recente de cloreto de acetilcolina 0,001% (p/v) na dose
de 1 mL por quilograma de peso no produzir queda
transitria na presso arterial. Se esse mecanismo no
estiver sufcientemente paralisado, injetar dose de 0,5 mL
da soluo de sulfato de atropina at paralisia completa.
Procedimento
Selecionar dose da diluio padro que produza aumento
entre 2,7 kPa e 9,3 kPa (20 mm a 70 mm de mercrio)
na presso arterial. Injetar a dose a intervalos constantes
de, no mnimo, cinco minutos para possibilitar o retorno
da presso arterial ao nvel basal. Aps cada injeo
administrar, imediatamente, 0,2 mL de soluo fsiolgica
para lavar a cnula. Assegurar-se da reprodutibilidade da
resposta, repetindo a dose duas ou mais vezes. Administrar
nova dose da diluio do padro de modo a obter respostas
hipertensora aproximadamente 20% maior do que a mdia
das respostas da dose menor. Considerar o animal apto para
o teste se (1) as respostas para a primeira dose selecionada
forem reprodutveis entre 2,7 kPa e 9,3 kPa (20 mm a 70
mm de mercrio) e (2) signifcativamente menores em
relao resposta da dose maior.
Mantendo constante o intervalo de tempo estabelecido,
injetar srie de cinco doses na qual se alternem a dose
selecionada da diluio padro e dose de igual volume
da substncia sob teste, diluda convenientemente. Aps
cada uma das cinco injees, medir a variao na presso
arterial.
Calcular a diferena entre cada resposta da amostra e
a mdia das respostas das doses da diluio padro,
imediatamente anterior e posterior. A amostra cumpre os
requisitos do teste se a mdia dessas diferenas signifcar
que as respostas obtidas com soluo da amostra no so
maiores do que aquelas da diluio padro. Os resultados
devem corresponder ao limite de atividade pressora
especifcado para esse teste na monografa correspondente.
5.5.2.5 HISTAMINA
Submeter a eutansia uma cobaia com peso entre 250 g
e 350 g, em jejum de aproximadamente 24 horas. Retirar
aproximadamente 10 cm da poro distal do leo. Lavar
internamente com soluo nutritiva. Selecionar poro com
cerca de dois ou trs centmetros de comprimento e amarrar
duas linhas fnas nas extremidades. Efetuar pequena
inciso na poro central do tecido. Transferi-lo para cuba-
de-rgo-isolado, de 10 mL a 20 mL de capacidade, em
temperatura controlada entre 34 C a 36 C sob corrente
de ar ou mistura de 95% de oxignio e 5% de CO
2
. Fixar
uma das linhas no fundo da cuba e amarrar a outra na
alavanca destinada a registrar as contraes musculares no
quimgrafo ou outro sistema de registro adequado. Ajustar
a alavanca para o registro das contraes do leo com grau
de amplifcao da ordem de 20 vezes. Lavar a preparao
com soluo e deix-la em repouso por 10 minutos.
Adicionar volumes conhecidos da ordem de 0,2 mL a
0,5 mL de soluo padro de referncia de histamina (1 g/
mL) para obter resposta submxima (dose maior). Lavar
o leo trs vezes com soluo nutritiva. Efetuar as adies
sucessivas em intervalos regulares de aproximadamente
2 minutos. Adicionar novas doses de soluo padro de
referncia de histamina obtida por diluio da soluo
original, de modo a manter os volumes de doses sempre
iguais estabelecendo a dose responsvel por resposta cuja
intensidade seja a metade da dose maior (dose menor).
Prosseguir o teste adicionando sequncias de trs doses:
dose padro de referncia menor, dose de soluo da
substncia sob teste e dose padro de referncia maior.
Ajustar a diluio da amostra para que, ocorrendo contrao
do leo, esta seja menor que a produzida pela dose padro
de referncia maior.
Estabelecer a reprodutividade da contrao por repeties
sucessivas das sequncias de doses.
Calcular a atividade da substncia sob teste em termos de
seu equivalente em micrograma por mililitro de histamina
(base livre), tomando por base as diluies efetuadas. O
valor encontrado no deve exceder o limite estabelecido
na monografa.
No ocorrendo contrao no teste supracitado por efeito
da amostra ensaiada, preparar nova soluo da amostra,
adicionado quantidade de histamina correspondente ao
limite mximo especifcado na monografa e observar
se a contrao produzida proporcional quantidade de
histamina adicionada. Considerar o teste vlido se essa
resposta for proporcional e se confrmar a reprodutibilidade
das contraes induzidas pela sequncia de doses: dose
padro de referncia menor, dose de soluo da substncia
5
sob teste e dose padro de referncia maior. Caso contrrio,
realizar o teste para substncias vasodepressoras.
Soluo nutritiva (preparar no momento da utilizao)
Soluo A* 50 mL
Sulfato de atropina 0,5 mg
Bicarbonato de Sdio 1,0 g
Dextrose anidra (para uso parenteral) 0,5 g
gua para injetveis sufciente para 1000 mL
Soluo A
Cloreto de potssio 4,0 g
Cloreto de clcio anidro 2,0 g
Cloreto de magnsio anidro 1,0 g
Fosfato de sdio dibsico 0,05 g
gua para injetveis sufciente para 1000 mL
5.5.2.6 SUBSTNCIAS
VASODEPRESSORAS
Preparao do padro de referncia
Empregar dicloridrato de histamina, conservando em frasco
hermtico e opaco, dessecado sobre slica-gel durante duas
horas, antes do uso.
Soluo padro de referncia
Dissolver, em gua para injetvel estril, quantidade
sufciente e exatamente pesada de dicloridrato de histamina
para obter soluo contendo o equivalente a 1 mg/mL de
histamina (base livre). Conservar sob refrigerao em
recipiente de vidro mbar dotado de tampa esmerilhada,
ao abrigo da luz, durante um ms. No dia do teste, preparar
soluo padro de referncia contendo o equivalente a 1
g/mL de histamina (base livre), em soluo fsiolgica.
Soluo de amostra
Preparar a soluo de amostra conforme a especifcao da
monografa respectiva.
Mtodo sugerido
Realizar o teste usando um gato com peso mnimo de 2
kg (pesar gato adulto e sadio) (no caso de fmeas, que
no estejam prenhes) e anestesi-lo por meio de injeo
de cloralose ou barbitrico que possibilite a manuteno
de presso arterial uniforme. Imobilizar o animal e
proteg-lo para prevenir perda de calor corporal, fazer o
monitoramento retal da temperatura para manuteno dos
limites fsiolgicos.
Dissecar a veia femoral, ou jugular, preparando-a por
insero de cnula repleta de heparina (1000 unidades/mL
de soluo fsiolgica) para a administrao das solues
padro de referncia e amostra.
Expor, cirurgicamente, a artria cartida, dissecando-a
completamente das estruturas circundantes, inclusive o
nervo vago. Inserir uma cnula conectando-a diretamente
ao manmetro de mercrio ou outro dispositivo apropriado
para o registro contnuo de presso arterial.
Avaliar a sensibilidade do gato a histamina, injetando em
intervalos uniformes de, no mnimo cinco minutos, doses
correspondentes a 0,05 g (dose A); 0,10 g (dose B) e
0,15 g (dose C) de histamina (base livre) por quilograma
de peso corporal. Aps cada administrao, lavar
imediatamente a cnula por injeo de aproximadamente
0,5 mL de soluo fsiolgica, para remover atividade
residual. Repetir trs vezes a administrao da dose B a
fm de observar a uniformidade de resposta mesma dose.
O animal considerado apto realizao do teste se as
respostas aos trs nveis de dosagem forem nitidamente
diferenciadas e as respostas sequncia de doses B forem
aproximadamente similares, correspondendo a quedas
de presso arterial no inferiores a 2,7 kPa (20 mm de
mercrio).
Injetar duas sries de quatro doses, consistindo cada srie
de duas injees da dose especifcada na monografa da
amostra, intercaladas com a dose B, sempre com intervalo
uniforme de, no mnimo, cinco minutos.
Medir a alterao da presso arterial aps cada uma das
injees. Na anlise dos resultados, considera-se que a
amostra cumpre os requisitos do teste se a mdia de suas
respostas depressoras for inferior quela da dose B.
Terminar o teste administrando uma dose C do padro para
comprovar que a resposta se mantm superior dose B:
caso isto no ocorra, o teste no vlido.
O animal pode ser usado enquanto permanecer estvel e
responder, adequadamente, administrao da soluo
padro de referncia.
5.5.3 ENSAIOS
MICROBIOLGICOS
5.5.3.1 ENSAIOS MICROBIOLGICOS
PARA PRODUTOS NO ESTREIS
A contaminao microbiana de um produto pode acarretar
alteraes em suas propriedades fsicas e qumicas e
ainda caracteriza risco de infeco para o usurio. Assim,
produtos farmacuticos de uso oral e tpico (cpsulas,
comprimidos, suspenses, cremes, adesivos, etc.) que no
tm como requerimento serem estreis devem estar sujeitos
ao controle de contaminao microbiana.
A garantia da qualidade e o controle de fabricao previstos
nas boas prticas devem garantir que o produto cumpra
as especifcaes determinadas, isto , que atendam alm
5
de outros parmetros, aos limites aceitveis para micro-
organismos.
Para a realizao do teste devem ser considerados os limites
microbianos, o tipo de contaminao mais provvel nas
diferentes categorias de produtos e a via de administrao.
A natureza e a frequncia do teste variam de acordo
com o produto. Certas categorias devem ser testadas
rotineiramente quanto contaminao total microbiana,
tais como: produtos de origem vegetal, mineral e/ou animal
assim como produtos com elevado teor de gua (solues
orais aquosas, cremes, etc). Para as demais categorias
como comprimidos, ps, cpsulas, produtos lquidos no
aquosos, pomadas e supositrios, a frequncia do teste pode
ser estabelecida com base em dados histricos dos testes de
monitoramento microbiolgico tanto o ambiental quanto o
de equipamentos. Outros critrios a serem considerados
seriam a carga microbiana da matria-prima, o processo
de fabricao, a formulao do produto e os resultados
de determinao da atividade de gua, quando aplicvel.
Resultados de baixa atividade de gua (igual ou inferior
a 0,75 medidos 25 C), assim como baixo ou alto pH,
ausncia de nutrientes e adio de conservantes ajudam a
prevenir a contaminao microbiana.
5.5.3.1.1 Condies gerais
Para os ensaios microbiolgicos em produtos no estreis,
deve-se utilizar tcnicas asspticas na amostragem
e na execuo do teste. O teste deve ser realizado,
preferencialmente, em capela de fuxo laminar e empregar,
quando possvel, a tcnica de fltrao por membrana.
Se a amostra possuir atividade antimicrobiana, essa deve
ser convenientemente removida ou neutralizada.
A efccia e a ausncia de toxicidade do agente inativante para
os micro-organismos considerados deve ser demonstrada.
Se usar substncias tensoativas na preparao da amostra,
tambm, deve ser demonstrada a ausncia de toxicidade
para os micro-organismos e compatibilidade com o agente
inativante, conforme descrito em Contagem do nmero
total de micro-organismos mesoflicos (5.5.3.1.2).
SOLUES E MEIOS DE CULTURA
As solues e os meios de culturas descritos so
considerados satisfatrios para realizar os ensaios limite de
contaminao microbiana prescritos. No entanto, podem
ser utilizados outros meios que possuam propriedades
nutritivas e seletivas similares para as espcies microbianas
pesquisadas.
Soluo Tampo cloreto de sdio-peptona, pH 7,0
Fosfato de potssio monobsico 3,6 g
Fosfato dissdico diidratado 7,2 g
Peptona (carne ou casena) 1,0 g
gua purifcada 1000 mL
Esterilizar em autoclave usando ciclo validado.
Tampo Fosfato pH 7,2 Soluo estoque
Hidrxido de sdio 4% Adicionar aproximadamente 175 mL
Dissolver o fosfato de potssio monobsico em 500 mL
de gua, acertar o pH para 7,2 0,2 com hidrxido de
sdio 4%. Completar o volume com gua, esterilizar e
conservar sob refrigerao. Quando da utilizao diluir a
soluo estoque com gua na proporo de 1 para 800 (v/v)
e esterilizar.
Fluido de lavagem
Peptona de carne digesto pptica 1,0 g
Polissorbato 80 1,0 g (se necessrio)
gua 1000 mL
Pesar e dissolver o ingrediente na gua destilada agitando
constantemente. Aquecer se necessrio. Ajustar o pH
de forma que seja 7,1 0,2. Esterilizao em autoclave
usando ciclo validado.
Diluente Universal
Fosfato dissdico Diidratado 7,2 g
Peptona de carne ou de casena 1,0 g
Lecitina de gema de ovo 3,0 g
L-histidina 1,0 g
Polissorbato 80 30,0 g
Pesar e dissolver os ingredientes na gua destilada agitando
constantemente. Aquecer se necessrio. Ajustar o pH de
forma que seja 6,8 0,2. Esterilizar em autoclave usando
ciclo validado.
5
Caldo neutralizante DEY-ENGLEY
Casena enzimtica hidrolisada 5,0 g
Prpura Bromocresol 20,0 mg
Extrato de Levedura 2,50 g
Tiossulfato de Sdio 6,00 g
Tioglicolato de Sdio 1,0 g
Bissulfto de sdio 2,50 g
Dextrose 10,0 g
Lecitina 7,0 g
gua 1000 mL
Pesar e dissolver os ingredientes na gua destilada agitando
constantemente. Aquecer se necessrio. Ajustar o pH de
ciclo validado.
Caldo Casena-soja
Peptona de Casena pancretica 17,0 g
Farinha de soja obtida por digesto papanica 3,0 g
Fosfato de potssio dibsico 2,5 g
Glicose monoidratada 2,5 g
pH 7,3 0,2. Esterilizar em autoclave usando ciclo
validado.
gar Casena-soja
Peptona de casena pancretica 15,0 g
Farinha de soja obtida por digesto papanica 5,0 g
Agar 15,0 g
validado.
gar Violeta Vermelho Neutro Glicose
Extrato de levedura 3,0 g
Peptona de gelatina pancretica 7,0 g
Sais Biliares 1,5 g
Agar 15,0 g
Vermelho neutro 30,0 mg
Cristal violeta 2,0 mg
pH 7,4 0,2.. Aquecer at ebulio. No esterilizar em
autoclave.
Caldo de Enriquecimento para Enterobactrias Mossel
Hidrolisado de pancretico de gelatina 10,0 g
Bile de boi desidratada 20,0 g
Fosfato de potssico monobsico 2,0 g
Fosfato dissdico didratado 8,0 g
Verde brilhante 15,0 mg
pH 7,2 0,2. Aquecer a 100 C durante 30 minutos. Esfriar
imediatamente.
Caldo MacConkey
Lactose monoidratada 10,0 g
Prpura de bromocresol 10,0 mg
validado.
gar MacConkey
Peptona (carne ou casena) 3,0 g
Vermelho neutro 30,0 mg
Cristal violeta 1,0 mg
Agar 13,5 g
pH 7,1 0,2. Ferver 1 minuto com constante agitao.
Esterilizar em autoclave usando ciclo validado.
gar Xilose, Lisina, Desoxicolato
Xilose 3,5 g
L-Lisina 5,0 g
Sacarose 7,5 g
Vermelho fenol 80,0 mg
Agar 13,5 g
5
Desoxicolato de sdio 2,5 g
Citrato de amnio frrico 0,8 g
Tiossulfato de sdio 6,8 g
Ajustar de forma que aps aquecimento seja pH 7,4 0,2.
Aquecer at a ebulio.No esterilizar em autoclave.
Caldo Enriquecimento Salmonella Rappaport Vassiliadis
Peptona de soja 4,5 g
Cloreto de magnsio hexaidratado 29,0 g
Verde malaquita 36,0 mg
pH 5,2 0,2. Esterilizar em autoclave em temperatura que
no exceda a 115 C.
gar Cetrimida
Cloreto de magnsio 1,4 g
Sulfato dipotssico 10,0 g
Cetrimida 0,3 g
Agar 13,6 g
Glicerol 10,0 mL
Ferver 1 minuto com constante agitao. Ajustar o pH
de forma que seja 7,2 0,2. Esterilizao em autoclave
usando ciclo validado.
Agar Sal Manitol
Hidrolisado de pancretico de casena 5,0 g
Peptona pptica de tecido animal 5,0 g
Extrato de carne 1,0 g
D-manitol 10,0 g
Agar 15,0 g
Vermelho fenol 25 ,0 mg
Ferver 1 minuto com constante agitao. Ajustar o pH de
ciclo validado.
gar Batata-dextrose
Infuso de batata 200,0 g
Dextrose 20,0 g
Agar 15,0 g
Suspender 39 g em 1000 mL de gua. pH 5,6 0,2.
Esterilizar em autoclave usando ciclo validado. Se pretende
pH 3,5, adicionar aproximadamente 14 mL de soluo
estril de cido tartrico 10% (p/v) ao meio arrefecido a
45-50 C.
gar Sabouraud-dextrose 4%
Dextrose 40,0 g
Peptonas 10,0 g
Agar 15,0 g
validado.
Caldo Sabouraud-dextrose
Dextrose 20,0 g
Peptonas 10,0 g
validado.
gar Seletivo para Candida segundo Nickerson
Peptona farinha de soja 2,0 g
Glicina 10,0 g
Glicose 10,0 g
Indicador bismuto-sulfto 2,0 g
Agar 15,0 g
Dissolver 40 g em 1000 mL de gua. pH 6,5 0,2.
Esterilizar sob vapor fuente.
Meio Reforado para Clostridium
Peptona 10,0 g
Amido solvel 1,0 g
Glicose monoidratado 5,0 g
Cloridrato de cistena 0,5 g
Acetato de sdio 3,0 g
Agar 0,5 g
Deixar intumescer o Agar e dissolver aquecendo ebulio,
agitando constantemente. Se necessrio ajustar o pH de
5
ciclo validado.
gar Columbia
Hidrolisado de pancretico de casena 10,0 g
Peptona de carne digesto 5,0 g
Digesto pancretico de corao 3,0 g
Amido de milho 1,0 g
Agar, de acordo com o poder gelifcante 10,0 - 15,0 g
Deixar intumescer o gar e dissolver aquecendo at
ebulio, agitando constantemente. Se necessrio ajustar o
pH de forma que seja 7,3 0,2. Esterilizar em autoclave
usando ciclo validado. Esfriar para 45 a 50 C e adicionar,
se necessrio, sulfato de gentamicina correspondente a 20
mg de gentamicina base, verter em placas de Petri.
5.5.3.1.2 Contagem do nmero total de micro-
organismos mesoflicos
Com esse teste possvel determinar o nmero total de
bactrias mesflas e fungos em produtos e matrias-primas
no estreis e aplicado para determinar se o produto
satisfaz s exigncias microbiolgicas farmacopeicas.
Quando usado para esse propsito, deve-se seguir as
indicaes dadas, incluindo o nmero de amostras tomadas
e interpretao dos resultados. O teste no aplicado para
produtos que contm micro-organismos viveis como
ingrediente ativo.
Esse teste consiste na contagem da populao de micro-
organismos que apresentam crescimento visvel, em at 5
dias, em gar casena-soja a 32,5
o
C 2,5
o
C e em at 7
dias, em gar Sabouraud-dextrose a 22,5
o
C 2,5
o
C.
Mtodos microbiolgicos alternativos, inclusive os
automatizados, podem ser utilizados desde que sua
equivalncia com o mtodo farmacopeico tenha sido
devidamente validada.
PREPARAO DAS AMOSTRAS
Produtos hidrossolveis
Transferir 10 g ou 10 mL da mistura de amostra para 90
mL de soluo tampo cloreto de sdio-peptona - pH 7,0
ou soluo tampo fosfato - pH 7,2, Caldo Casena-soja ou
outro diluente adequado. Se necessrio, ajustar o pH para
6,0 a 8,0 com soluo HCl 0,1 M ou NaOH 0,1 M. Preparar
diluies decimais sucessivas com o mesmo diluente.
Produtos de natureza no lipdica insolveis em gua
Preparar uma suspenso de 10 g ou 10 mL da mistura de
amostra em soluo tampo cloreto de sdio-peptona,
pH 7,0 ou caldo de casena-soja ou um outro diluente
adequado. Em geral, a proporo de diluente e amostra
de 10:1, mas as caractersticas do produto podem exigir
que seja alterada essa relao. Pode ser adicionado agente
tensoativo como polissorbato 80, na concentrao de 1 g/L,
para facilitar a disperso. Se necessrio, ajustar o pH para
6,0 a 8,0. Preparar diluies decimais sucessivas com o
mesmo diluente.
Produtos de natureza lipdica
Mtodo de fltrao por membrana - Dissolver 1 g ou 1
mL da mistura de amostra em 100 mL de miristato de
isopropila esterilizado por fltrao em membrana (e seu
extrato aquoso deve apresentar pH no inferior a 6,5) e
aquecido a 40 - 45 C. Pode ser utilizado polissorbato 80
estril ou outro agente tensoativo no inibitrio;
Mtodo de contagem em placa Transferir 10 g ou 10
mL da mistura de amostra para frasco contendo no mais
que 5 g de polissorbato 20 ou 80 estril ou outro agente
tensoativo no inibitrio. Aquecer se necessrio, a uma
temperatura entre 40 - 45 C.
Homogeneizar, cuidadosamente, mantendo, se necessrio,
a temperatura 40 - 45 C. Adicionar diluente adequado
dentre os apresentados em 5.5.3.1.1 Solues e Meios de
Cultura, previamente aquecido, na quantidade necessria
para obter uma diluio a 1:10 do produto inicial.
Misturar, cuidadosamente, mantendo a temperatura
mxima de 40 - 45 C durante o tempo necessrio para
a formao de uma emulso, em qualquer caso no mais
que 30 minutos. Se necessrio, ajustar o pH para 6,5 -
7,5. Preparar diluies decimais sucessivas com o mesmo
diluente acrescido de polissorbato 20 ou 80.
Cremes e pomadas insolveis em miristato de isopropila
Transferir 10 g da mistura de amostra para obter uma
diluio a 1:10 em caldo casena-soja contendo 0,1 de
tetradecilsulfato de sdio, aquecido a 40 - 45 C. Agitar at
mistura homognea.
Misturar, cuidadosamente, mantendo sempre a temperatura
durante o tempo mnimo necessrio para a formao de
uma emulso, em qualquer caso no mais que 30 minutos.
Se necessrio, ajustar o pH para 6,5 - 7,5. Preparar diluies
decimais sucessivas com o mesmo diluente acrescido de
0,1% de tetradecilsulfato de sdio.
Aerossis
Resfriar pelo menos 10 recipientes do produto em mistura
de lcool e gelo seco durante uma hora. Abrir os recipientes
e deix-los temperatura ambiente para que o propelente
seja eliminado. Retirar 10 g ou 10 mL dos recipientes e
transferir o produto para equipamento de fltrao ou para
frasco contendo soluo tampo fosfato pH 7,2 ou outro
diluente adequado para obter diluio 1:10. Se necessrio,
ajustar o pH para 6,0 a 8,0. Preparar diluies decimais
sucessivas com o mesmo diluente.
5
Cpsulas vazias
Transferir 10 g de cpsulas vazias para 90 mL de soluo
tampo fosfato pH 7,2 aquecido a 40 - 45 C e agitar no
mximo durante 30 minutos. Completar o volume para 100
mL (diluio 5:10). Se necessrio, ajustar o pH para 6,0 a
8,0.. Preparar diluies decimais sucessivas com o mesmo
diluente.
Gelatinas
Transferir 10 g da mistura de amostra para frasco contendo
gua estril aquecida a 40 - 45 C e deixar em repouso
durante uma hora (diluio 1:10). Em seguida transferir o
frasco para banho-maria a 45 C, agitando vigorosamente
a intervalos frequentes. Se necessrio, ajustar o pH para
6,0 a 8,0. Preparar diluies decimais sucessivas em gua
estril.
Dispositivo transdrmico
Com pinas estreis, retirar a pelcula protetora de 10
dispositivos transdrmicos e coloc-los com a face adesiva
para cima, em placas estreis e cobrir a face adesiva com
gaze esterilizada. Transferir os 10 dispositivos para 500 mL,
no mnimo, de soluo tampo cloreto de sdio-peptona
- pH 7,0 contendo agente inativante apropriado como
polissorbato 80 ou lecitina de soja. Agitar vigorosamente
durante no mximo de 30 minutos.
Correlatos
Algodo e gaze transferir trs pores de 3,3 g das partes
mais internas das amostras para soluo tampo cloreto
de sdio-peptona - pH 7,0 contendo agente inativante
apropriado. Preparar diluies decimais sucessivas com o
mesmo diluente.
Outros correlatos transferir 10 unidades cuja forma e
dimenso permita sua fragmentao ou imerso total em
no mais que 1000 mL de soluo tampo cloreto de sdio-
peptona - pH 7,0 ou outro diluente adequado. Deixar
em contato entre 10 - 30 minutos. Preparar diluies
decimais sucessivas com o mesmo diluente. Para aqueles
que no podem ser fragmentados ou imersos, introduzir
assepticamente, no recipiente 100 mL de soluo tampo
cloreto de sdio-peptona - pH 7,0. Agitar. Utilizar mtodo
de fltrao por membrana de 0,45 m.
O mtodo para preparao depende das caractersticas
fsicas do produto a ser testado. Se nenhum dos
procedimentos descritos demonstrarem satisfatrio,
desenvolver um procedimento adequado.
1
1 Alguns produtos podem requerer um aquecimento maior na
preparao da amostra, mas esta no deve ultrapassar 48 C.
ANLISE DO PRODUTO
Quantidade de amostra
Salvo indicao em contrrio, utilizar mistura de amostras
contendo 10 g ou 10 mL do produto a examinar. Tomar
10 unidades para aerossol forma lquida ou slida e para
dispositivos transdrmicos.
A quantidade a ser testada poder ser reduzida no caso
de substncias ativas que so formuladas nas seguintes
condies: a quantidade por dose unitria (exemplo:
comprimido, cpsula) menor ou igual a 1 mg. Nesse caso,
a quantidade de amostra a ser testada no deve ser menor
que a quantidade presente em 10 doses unitrias.
Para produtos em que o tamanho do lote extremamente
pequeno (isso , menor que 1000 mL ou 1000 g), a
quantidade a ser testada deve ser 1% do lote ou menor
quando justifcado ou autorizado.
Para produtos onde o nmero total de unidades no lote
menor que 200, usar duas unidades ou uma unidade se o
lote for menor ou igual a 100 unidades.
Na amostragem de produtos em processamento, coletar
3 amostras do incio, 4 do meio e 3 do fm do processo.
Executar o teste na mistura dessas amostras.
PROCEDIMENTOS
A determinao pode ser efetuada pelo Mtodo de
fltrao por membrana, Mtodo em placa ou Mtodo dos
Tubos Mltiplos (MNP). Esse ltimo reservado para as
determinaes bacterianas que no possam ser realizadas
por um dos outros mtodos e quando se espera que o
produto apresente baixa densidade bacteriana.
A escolha do mtodo determinada por fatores tais
como a natureza do produto e o nmero esperado de
micro-organismos. Qualquer mtodo escolhido deve ser
devidamente validado.
Filtrao por membrana
Utilizar equipamento de fltrao que possibilite a
transferncia da membrana para os meios de cultura. As
membranas de nitrato de celulose, por exemplo, podem ser
utilizadas para solues aquosas, oleosas ou fracamente
alcolicas e as membranas de acetato de celulose para
solues fortemente alcolicas. Preparar a amostra usando
mtodo mais adequado previamente determinado .
5
Transferir 10 mL, ou a quantidade de diluio que
represente 1 g ou 1 mL da amostra a ser testada, para duas
membranas e fltrar imediatamente. Se necessrio, diluir a
amostra de forma a obter contagem de colnias entre 10
e 100 UFC. Lavar as membranas pelo menos trs vezes
com aproximadamente 100 mL do fuido de lavagem
adequado. Transferir uma das membranas para a superfcie
de uma placa contendo gar casena-soja, incubar a 32,5 C
2,5 C durante 3-5 dias, para determinao do nmero
de micro-organismos aerbicos totais. Transferir a outra
membrana para a superfcie de uma placa contendo gar
Sabouraud-dextrose e incubar a 22,5 C 2,5 C durante
5-7 dias, para a determinao de bolores e leveduras.
Calcular o numero de UFC por grama ou mililitro do
produto.
Quando analisar dispositivos transdrmicos e produtos
mdicos, fltrar, separadamente, 10% do volume da
preparao, conforme procedimento de adequao do
produto, e proceder lavagem e incubao conforme
descrito anteriormente.
Contagem em placa
Mtodo de profundidade - Adicionar 1 mL da amostra
preparada como descrito em Preparao das amostras, em
placa de Petri e verter, separadamente, 15 - 20 mL de gar
casena soja e, gar Sabouraud-dextrose mantidos a 45 - 50
C. Utilizar duas placas para cada meio e diluio. Incubar
as placas contendo gar casena-soja a 32,5 C 2,5 C
durante 3 - 5 dias e as placas contendo gar Sabouraud-
dextrose a 22,5 C 2,5 C durante 5-7 dias para
determinao do nmero de micro-organismos aerbicos
totais e bolores e leveduras, respectivamente. Somente as
placas que apresentarem numero de colnias inferior a 250
(bactrias) e 50 (bolores e leveduras) por placa devero ser
consideradas para o registro dos resultados. Tomar a mdia
aritmtica das placas de cada meio e calcular o nmero de
UFC por grama ou mL do produto.
Mtodo de superfcie - adicionar em placas de Petri,
separadamente, 15 - 20 mL de gar casena soja e gar
Sabouraud-dextrose e deixar solidifcar. Secar as placas.
Adicionar superfcie de cada meio de cultura, 0,1 mL
da amostra preparada como descrito em Preparao das
amostras. Incubar as placas contendo gar casena-soja
a 32,5 C 2,5 C durante 3-5 dias e as placas contendo
gar Sabouraud-dextrose a 22,5 C 2,5 C durante 5 - 7
dias para determinao do nmero de micro-organismos
aerbicos totais e bolores e leveduras, respectivamente.
Tomar a mdia aritmtica das placas de cada meio e
calcular o nmero de UFC por grama ou mL do produto.
Exemplo de clculo:
Diluio
Colnias por
placas
UFC/g, ou mL
1:100 293 2,93 x 10
4

1:100 100 1,00 x 10
4
1:1000 41 4,10 x 10
4
1:1000 12 1,20 x 10
4
Nmero Mais Provvel
Preparar a amostra conforme procedimentos de adequao
do produto. Preparar diluies 1:10; 1:100; 1:1000.
Transferir 1 mL de cada uma das diluies, para 3 tubos,
contendo cada um, 9 mL de caldo casena-soja. Incubar
todos os tubos a 32,5 C 2,5 C durante 3 - 5 dias. Anotar
o nmero de tubos positivos e o nmero de tubos negativos.
Se a natureza da amostra tornar a leitura difcil, como, por
exemplo, uma suspenso, efetuar subcultura para o mesmo
caldo ou para gar casena-soja por 2 dias na mesma
temperatura.
Determinar o nmero mais provvel de micro-organismos
viveis por grama ou mililitro do produto, de acordo com
as informaes descritas na Tabela 1.
5
Tabela 1 Valor do Nmero Mais Provvel de Micro-organismos - NMP.
Nmero de tubos positivos
NMP por g, ou
mL do produto
Limite de
confana a 95%
Nmero de g, ou mL do produto por tubo
10
-1
(0,1) 10
-2
(0,01) 10
-3
(0,001)
0 0 0 <3 0,0 9,4
0 0 1 3 0,1 9,5
0 1 0 3 0,1 10
0 1 1 6,1 1,2 17
0 2 0 6,2 1,2 17
0 3 0 9,4 3,5 35
1 0 0 3,6 0,2 17
1 0 1 7,2 1,2 17
1 0 2 11 04 35
1 1 0 7,4 1,3 20
1 1 1 11 04 35
1 2 0 11 04 35
1 2 1 15 05 38
1 3 0 16 05 38
2 0 0 9,2 1,5 35
2 0 1 14 04 35
2 0 2 20 05 38
2 1 0 15 04 38
2 1 1 20 05 38
2 1 2 27 09 94
2 2 0 21 05 40
2 2 1 28 09 94
2 2 2 35 09 94
2 3 0 29 09 94
2 3 1 36 09 94
3 0 0 23 05 94
3 0 1 38 09 104
3 0 2 64 16 181
3 1 0 43 09 181
3 1 1 75 17 199
3 1 2 120 30 360
3 1 3 160 30 380
3 2 0 93 18 360
3 2 1 150 30 380
3 2 2 210 30 400
3 2 3 290 90 990
3 3 0 240 40 990
3 3 1 460 90 1980
3 3 2 1100 200 4000
3 3 3 >1100
5.5.3.1.3 Pesquisa de micro-organismos
patognicos
Esse mtodo possibilita verifcar a presena ou a ausncia
de micro-organismos especfcos em meios seletivos. Os
procedimentos experimentais devem incluir etapas de pr-
enriquecimento para garantir a recuperao dos micro-
organismos, se presentes no produto.
Mtodos microbiolgicos alternativos, inclusive os
automatizados, podem ser utilizados desde que sua
equivalncia ao mtodo farmacopeico tenha sido
devidamente validada.
PROCEDIMENTO
Bactrias gram-negativas bile tolerantes
Preparo da amostra e pr-incubao - Preparar a amostra
usando a diluio 1:10 de no menos que 1 g ou 1 mL do
produto a ser testado, conforme descrito em Contagem do
nmero total de micro-organismos mesoflicos (5.5.3.1.2),
5
usando caldo casena-soja (Diluio A) como diluente.
Homogeneizar e incubar a 22,5 C 2,5 C por 2 horas
e no mais que 5 horas (tempo necessrio para reativar a
bactria, mas no o sufciente para estimular a multiplicao
do micro-organismo).
Teste de ausncia - Homogeneizar a Diluio A e transferir
volume correspondente a 1 g ou 1 mL do produto para o
Caldo de Enriquecimento de Enterobactrias segundo
Mossel (Aeromonas e Pseudomonas tambm podem
crescer neste meio, bem como outros tipos de bactrias).
Incubar a 32,5 C 2,5 C por 24 a 48 horas. Preparar
subcultura em placas contendo gar Violeta Vermelho
Neutro Bile Glicose. Incubar a 32,5 C 2,5 C durante
18 a 24 horas.O produto cumpre o teste se no houver
crescimento de colnias.
Teste quantitativo (seleo e subcultura) - Diluir quantidade
apropriada da Diluio A para o Caldo de Enriquecimento
de Enterobactrias segundo Mossel, de modo a obter
diluies contendo 0,1; 0,01 e 0,001 g (ou 0,1; 0,01 e
0,001 mL) do produto a ser testado. Incubar a 32,5 C
2,5 C durante 24 a 48 horas. Para cada tubo positivo,
realizar subculturas em Agar Violeta Vermelho Neutro Bile
Glicose. Incubar a 32,5 C 2,5 C durante 18 a 24 horas.
Interpretao - O crescimento de colnias bem
desenvolvidas de bactrias Gram-negativas, geralmente
vermelhas ou avermelhadas, indica contaminao
(resultado positivo). Anotar os resultados positivos e
negativos. Determinar o nmero mais provvel de bactrias
por grama ou mililitro do produto segundo Tabela 1.
Tabela 1 Interpretao dos resultados do teste quantitativo
para bactrias gram-negativas bile tolerantes.
Resultados para quantidade
de produto de Nmero provvel de
bactrias por grama,
ou mililitro do produto
0,1 g, ou
0,1 mL
0,01 g,
ou 0,01
mL
0,001 g,
ou 0,001
mL
+ + + Mais de 10
3
+ + - Menos de 10
3
e

mais de 10
2
+ - - Menos de 10
2
e mais de 10
- - - Menos de 10
Escherichia coli
Preparo da amostra e pr-incubao - Preparar a amostra
usando a diluio 1:10 de no menos que 1 g do produto a
ser examinado conforme descrito em Contagem do nmero
total de micro-organismos mesoflicos (5.5.3.1.2).
Utilizar 10 mL da diluio para 90 mL de Caldo de
Enriquecimento (Caldo Casena-soja), ou quantidade
correspondente a 1 g ou 1 mL. Homogeneizar e incubar
32,5 C 2,5 C durante 18 a 24 horas.
Seleo e subcultura - Agitar e transferir 1 mL da amostra
enriquecida para 100 mL de Caldo MacConkey. Incubar
a 43 C 1 C durante 24 48 horas. Realizar subcultura
em placa de Agar MacConkey e incubar a 32,5 C 2,5 C
durante 18 a 72 horas.
Interpretao - O crescimento de colnias vermelhas,
geralmente no mucosas, com micromorfologia
caracterstica de bacilo Gram-negativo, indica presena
provvel de E.coli que deve ser confrmada por testes de
identifcao microbiana. O produto cumpre o teste se no
for observado crescimento de tais colnias ou se as provas
microbianas forem negativas.
Salmonella
Preparao da amostra e pr-incubao - Preparar a
amostra usando a diluio 1:10 de no menos que 10 g,
ou 10 mL do produto a ser examinado, conforme descrito
em Contagem do nmero total de micro-organismos
mesoflicos (5.5.3.1.2). Homogeneizar e incubar 32,5 C
2,5 C durante 18 a 24 horas.
Seleo e subcultura - Agitar e transferir 0,1 mL do
contedo para 10 mL de Caldo Enriquecimento Salmonella
Rappaport Vassiliadis. Incubar a 32,5 C 2,5 C durante
18 a 24 horas. Realizar subcultura em placa contendo Agar
Xilose Lisina Desoxicolato e incubar a 32,5 C 2,5 C
durante 18 a 48 horas.
Interpretao - O crescimento de colnias bem
desenvolvidas, vermelhas com ou sem centro negro indica
presena provvel de Salmonella que deve ser confrmada
por testes de identifcao microbiana. O produto cumpre o
teste se no for observado crescimento de tais colnias ou
se as provas microbianas forem negativas.
Pseudomonas aeruginosa
amostra usando a diluio 1:10 de no menos que 1 g do
produto a ser examinado, conforme descrito em Contagem
do nmero total de micro-organismos mesoflicos
(5.5.3.1.2). Utilizar 10 mL da diluio para 90 mL de Caldo
de Casena-soja ou quantidade correspondente a 1 g ou 1
mL. Homogeneizar e incubar 32,5 C 2,5 C durante 18
a 24 horas.
Quando testar o dispositivo transdrmico, fltrar 50 mL
de Caldo Casena-soja por membrana estril e transferir a
membrana para 100 mL de Caldo Casena-soja. Incubar a
Seleo e subcultura - Agitar e transferir uma ala para
placa contendo Agar Cetrimida. Incubar a 32,5 C 2,5 C
durante 18 72 horas. O crescimento de colnias indica
presena provvel de Pseudomonas aeruginosa que deve
ser confrmada por testes de identifcao microbiana. O
produto cumpre o teste se no for observado crescimento
de tais colnias ou se as provas de identifcao forem
negativas.
5
Staphylococcus aureus
amostra usando a diluio 1:10 de no menos que 1 g do
produto a ser examinada conforme descrito em Contagem
do nmero total de micro-organismos mesoflicos
(5.5.3.1.2). Utilizar 10 mL da diluio para 90 mL de Caldo
de Enriquecimento (Caldo Casena-soja) ou quantidade
correspondente a 1 g ou 1 mL. Homogeneizar e incubar
Quando testar o dispositivo transdrmico, fltrar 50 mL de
Caldo de Enriquecimento por membrana estril e transferir
a membrana para 100 mL de Caldo Casena-soja. Incubar a
Seleo e subcultura - Agitar e transferir uma ala para
placa contendo Agar Sal Manitol. Incubar a 32,5 C 2,5
C durante 18 72 horas.
Interpretao - O crescimento de colnias amarelas ou
brancas rodeada por uma zona amarela indica presena
provvel de S. aureus que deve ser confrmada por testes
de identifcao microbiana.
O produto cumpre o teste se no for observado crescimento
de tais colnias ou se as provas de identifcao foram
negativas.
Clostridium
amostra conforme descrito em Contagem do nmero total
de micro-organismos mesoflicos (5.5.3.1.2). Utilizar duas
fraes iguais correspondentes a no menos que 1 g ou mL
do produto a ser examinado. Aquecer uma das pores a 80
C durante 10 minutos e esfriar imediatamente. Inocular 10
mL de cada frao homogeneizada em 2 frascos contendo
100 mL de meio Caldo Reforado para Clostridium.
Incubar em anaerobiose a 32,5 C 2,5 C durante 48
horas.
Seleo e subcultura - Transferir uma ala de cada
frasco para placa contendo Agar Columbia. Incubar em
anaerobiose a 32,5 C 2,5 C durante 48 horas.
Interpretao - O crescimento de colnias catalase-
negativas, com micromorfologia de bacilo Gram-positivo
(com ou sem endsporos) indica presena provvel de
Clostridium. O produto cumpre o teste se no for observado
crescimento de micro-organismo anaerbio ou se o teste de
catalase for negativo.
Candida albicans
amostra usando a diluio 1:10 de no menos que 1 g,
ou mL do produto a ser examinada conforme descrito
mesoflicos (5.5.3.1.2). Utilizar 10 mL da diluio para 90
mL de Caldo Sabouraud Dextrose. Incubar 32,5 C 2,5
C durante 3 a 5 dias.
Seleo e subcultura - Transferir uma ala para placa
contendo Agar Sabouraud Dextrose ou Agar Nickerson.
Incubar a 32,5 C 2,5 C durante 24 48 horas.
Interpretao - O crescimento de colnias brancas em Agar
Sabouraud ou colnias marrom/preta em Agar Nickerson
indica presena provvel de C. albicans que deve ser
confrmada por testes de identifcao microbiana. O
produto cumpre o teste se no for observado o crescimento
das colnias.
5.5.3.1.4 Adequao dos mtodos
farmacopeicos
Para adequao dos mtodos farmacopeicos aos produtos
no estreis deve ser demonstrada a eliminao de
qualquer propriedade antimicrobiana antes da verifcao
da existncia de contaminao microbiana nos produtos.
O protocolo do teste de adequao deve mimetizar o teste
de limite microbiano preparao da amostra, tipo de meio
de cultura e solues tampo, nmero e tipo da soluo
de lavagens das membranas bem como as condies
de incubao. Esse protocolo requer o uso de micro-
organismos para o teste de recuperao microbiana.
Durante a adequao, demonstrar que a escolha do mtodo
para estimativa qualitativa e/ou quantitativa dos micro-
organismos viveis sensvel, exato e confvel e que
capaz eliminar qualquer interferncia ou inibio durante a
recuperao dos micro-organismos viveis.
Revalidar o mtodo de adequao se forem modifcadas as
condies de ensaio e/ou ocorrerem alteraes no produto
que possam afet-lo.
Com a fnalidade de indicao, foram listados os micro-
organismos disponveis na ATCC. Os mesmos micro-
organismos podem, tambm, ser obtidos de outras fontes:
INCQS, CIP, NBRC, NCIMB, NCPF, NCTC, NCYC,
IMI e IP. A correspondncia entre os micro-organismos e
os endereos das entidades que os fornecem encontra-se
indicada em Micro-organismos empregados em testes e
ensaios (5.5.3.5).
CONTAGEM DO NMERO TOTAL DE MICRO-
ORGANISMOS MESOFLICOS
Manuteno e preparao dos micro-organismos teste
As culturas lioflizadas devem ser reidratadas de acordo com
as instrues de fornecedores e mantidas por transferncias
para meios de cultura recm preparados ou por processo de
congelamento ou de refrigerao por perodo de estocagem
que mantenha as caractersticas originais da cultura.
Usar suspenses padronizadas dos micro-organismos
conforme estabelecido a seguir. Utilizar tcnica de
manuteno de forma que o inculo no ultrapasse 5
passagens da cultura original. Realizar subculturas de cada
micro-organismo (bactria e fungo) separadamente como
descrito na Tabela 1.
5
Tabela 1 Preparao e uso dos micro-organismos.
Micro-organismo
Meios de cultura
para manuteno
Meios de cultura para
enriquecimento
Meios de cultura para adequao
do mtodo de contagem na
presena do produto
Contagem total
de bactrias
aerbicas
Contagem total
de bolores e
leveduras
Contagem Total
de bactrias
aerbicas
Contagem total
de bolores e
leveduras
Staphylococcus
aureus (ATCC 6538)
Agar Casena-
soja ou Caldo
de Casena-soja
32,5 C 2,5 C,
18-24 horas
gar Casena-
soja e Caldo de
Casena-soja
100 UFC
32,5 C 2,5
C, 3 dias
- Agar Casena-
soja /MNP Caldo
de Casena-soja
100 UFC
32,5C 2,5
C, 3 dias
-
Pseudomonas
aeruginosa
(ATCC 9027)
Agar Casena-
soja ou Caldo
de Casena-soja
32,5 C 2,5 C,
18-24 horas
gar Casena-
soja e Caldo de
Casena-soja
100 UFC
32,5 C 2,5
C, 3 dias
- Agar Casena-
soja /MNP Caldo
de Casena-soja
100 UFC
32,5 C 2,5
C, 3 dias
-
Bacillus subtilis
(ATCC 6633)
Agar Casena-
soja ou Caldo
de Casena-soja
32,5 C 2,5 C,
18-24 horas
gar Casena-
soja e Caldo de
Casena-soja
100 UFC
32,5 C 2,5
C, 3 dias
- gar Casena-
soja /MNP Caldo
de Casena-soja
100 UFC
32,5 C 2,5
C, 3 dias
-
Cndida albicans
(ATCC 10231)
gar Sabouraud-
dextrose ou Caldo
Sabouraud
22,5 C 2,5 C
2-3 dias
gar Casena-
soja
100 UFC
32,5 C 2,5
C, 5 dias
gar Sabouraud-
dextrose
100 UFC
22,5 C 2,5
C, 5 dias
gar Casena-
soja
100 UFC
32,5 C 2,5
C, 5 dias
NMP: no
se aplica
gar Sabouraud-
dextrose
100 UFC
22,5 C 2,5
C, 5 dias
Aspergillus
brasiliensis
(ATCC 16404)
gar Sabouraud-
dextrose ou gar
Batata-dextrose
22,5 C 2,5 C
5-7 dias, ou at
esporulao
evidente
gar Casena-
soja
100 UFC
32,5 C 2,5
C, 5 dias
gar Sabouraud-
dextrose
100 UFC
22,5 C 2,5
C, 5 dias
gar Casena-
soja
100 UFC
32,5 C 2,5
C, 5 dias
NMP: no
se aplica
Agar Sabouraud-
dextrose
100 UFC
22,5 C 2,5
C, 5 dias
____________
Usar soluo tampo cloreto de sdio-peptona pH - 7,0 ou soluo tampo fosfato pH 7,2 para preparar as suspenses. Ao preparar a suspenso de
esporos de A. brasiliensis, adicionar soluo tampo 0,05% de polissorbato 80. Usar as suspenses dentro de 2 horas ou dentro de 24 horas se mantidas
temperatura de 2- 8 C. Tempos maiores podero ser utilizados desde que validados.
5
Para demonstrar a recuperao do micro-organismo no
produto, usar o menor fator de diluio possvel. Se a
recuperao no for adequada dever se realizado um mtodo
alternativo como neutralizao, diluio ou fltrao.
A) Neutralizao/remoo da atividade antimicrobiana
O nmero de micro-organismos recuperados na amostra
diluda comparvel com o nmero de micro-organismos
no controle.
Se o crescimento for inibido (reduo menor que 50%),
deve-se fazer modifcaes no procedimento de contagem
para assegurar a validade dos resultados. As modifcaes
incluem as relacionadas a seguir.
Aumentar o volume do diluente ou meio de cultura,
mantendo constante a quantidade do produto.
Incorporar um agente neutralizante especfco ou agente
neutralizante universal.
Associar ambos os procedimentos acima.
Realizar fltrao por membrana.
Se as modifcaes no mtodo de neutralizao forem
inefcazes, possvel atribuir que a falha seja devido
atividade antimicrobiana do produto, que no permite o
desenvolvimento do micro-organismo controle testado.
B) Agentes neutralizantes
Agentes neutralizantes para inibio da atividade
antimicrobiana devem ser adicionados ao diluente
escolhido ou ao meio de cultura preferencialmente antes da
esterilizao (Tabela 2). Demonstrar sua efccia e ausncia
de toxicidade aos micro-organismos teste utilizando
diluente com neutralizante e produto e realizando um
branco com diluente e neutralizante, respectivamente.
Capacidade nutritiva dos meios de cultura
Para os meios indicados na Tabela 3, inocular uma pequena
quantidade de micro-organismo, inferior a 100 UFC. Usar
uma placa ou tubo para cada micro-organismo.
Testar cada lote de meio de cultura quanto a sua capacidade
nutritiva conforme descrito a seguir:
Meio de cultura lquido: inocular menos que 100
UFC do micro-organismo teste no meio de cultura
indicado. Incubar temperatura adequada e observar
o crescimento visvel comparando com um controle
(branco) do mesmo meio de cultura.
Meio de cultura slido: inocular cada placa contendo o
meio de cultura indicado com menos que 100 UFC do
micro-organismo teste. Incubar temperatura adequada
e comparar o crescimento obtido que no deve ser
inferior a 50% em relao ao inculo padronizado.
Controle negativo - Para verifcar a esterilidade dos meios
de cultura, coloc-los em incubao por, no mnimo,
72 horas, na temperatura adequada. No deve haver
crescimento de micro-organismos.
Inoculao dos micro-organismos teste na amostra
Adicionar amostra diluda e ao controle (diluente sem
amostra) conforme descrito em Preparao da amostra,
mesoflicos (5.5.3.1.2), quantidade sufciente do micro-
organismo para obter uma concentrao de no mais que
100 UFC/mL. O volume da suspenso do inoculo no deve
exceder 1% do volume do produto diludo.
Deve ser demonstrada a capacidade do meio de cultura
para detectar micro-organismos na presena e na ausncia
da amostra.
5
Tabela 2 Agentes conservantes e neutralizantes.
Conservantes Agente neutralizante/mtodo de neutralizao
lcool Diluio
Aldedos Diluio, Tiossulfato, Glicina
Bis-biguanidas Lecitina
Cloreto de mercrio e outros compostos mercuriais Tioglicolato*; Tiossulfato de sdio
Clorhexamida Polissorbatos e Lecitina
Compostos amnio quartenrios Lecitina, Polissorbato 80
Compostos Fenlicos Diluio e Polissorbato 80
EDTA ons de Mg
++
e Ca
++

Glutaraldeido Glicina e Bissulfto de sdio
Halognios Tiossulfato
Hipoclorito de sdio Tiossulfato de sdio
cidos orgnicos e seus steres Diluio e Polissorbato 80
Parabenos Polissorbato 80 e Lecitina
Sorbatos Diluio
Antibitico beta-lactmico Beta-lactamase
Cloranfenicol Cloranfenicol acetiltransferase
Sulfonamida cido p-aminobenzoico
Trimetoprima Timidina
____________
* Tioglicolato pode ser txico para certos micro-organismos, especialmente esporos e staphylococos; tiossulfato pode ser txico para staphylococos.
Utilizar Caldo Neutralizante Dey-Engley ou Neutralizante Universal.
Se a neutralizao no for adequada pode-se admitir que a falha em recuperar o micro-organismo inoculado seja atribuda atividade antimicrobiana do
produto. Esta informao serve para indicar que o produto no susceptvel a contaminao pelos micro-organismos testados, porm pode no inibir
outros no includos na lista, os quais no so representativos e podero ser empregados em substituio queles preconizados.
Recuperao dos micro-organismos no produto
Realizar os testes separadamente para cada micro-
organismo teste listado na Tabela 3. Utilizar a amostra
conforme preparada em Inoculao dos micro-organismos
teste na amostra.
A) Filtrao por membrana
Usar membrana fltrante com 0,45 m de dimetro
de porosidade e efccia comprovada de reteno. As
membranas de nitrato de celulose, por exemplo, podem ser
utilizadas para solues aquosas, oleosas ou fracamente
alcolicas e as de acetato de celulose para solues
fortemente alcolicas. Para cada micro-organismo teste,
utilize uma membrana.
Da amostra preparada, conforme descrito em Inoculao
dos micro-organismos teste na amostra, transferir 10
mL para equipamento de fltrao por membrana e fltrar
imediatamente. Lavar a membrana com volume apropriado
de lquido de lavagem.
Para determinao da contagem de micro-organismo
aerbico e contagem de bolores e leveduras, transferir as
membranas para gar Casena-soja e gar Sabouraud-
dextrose, respectivamente. Incubar nas condies descritas
na Tabela 3 e realizar a contagem das colnias.
B) Contagem em placa
Mtodo de profundidade - Utilizar placas com 9 cm de
dimetro. Adicionar 1 mL da amostra preparada como
descrito em Inoculao dos micro-organismos teste na
amostra e adicionar 15 - 20 mL de gar Casena-soja ou
gar Sabouraud-dextrose mantidos a 45 - 50 C. Para
cada micro-organismo testado, utilizar duas placas
para cada meio e cada diluio. Incubar nas condies
descritas na Tabela 1. Tomar a mdia aritmtica das
placas com cada meio de cultura e calcular o nmero
de UFC.
Mtodo de superfcie - Para cada placa de Petri de
9 cm, adicionar 15 - 20 mL de gar casena soja ou
gar Sabouraud-dextrose e deixar solidifcar. Secar as
placas. Adicionar superfcie do meio de cultura 0,1
mL da amostra preparada como descrito em inoculao
do micro-organismo na amostra. Para cada micro-
organismo testado utilizar duas placas. Realizar a
contagem e calcular o nmero de UFC.
C) Mtodo do Nmero Mais Provvel
A partir da amostra preparada conforme descrito em
Inoculao dos micro-organismos teste na amostra (1:10),
preparar diluies 1:100 e 1:1000. Transferir 1 mL de cada
diluio para 3 tubos contendo cada um 9 mL de caldo
Casena-soja. Se necessrio adicionar agente inativante.
5
Incubar todos os tubos a 32,5 C 2,5 C no mais que 5 dias.
Anotar o nmero de tubos positivos. Se a natureza da amostra
tornar a leitura difcil, efetuar subcultura para outros tubos
contendo o mesmo meio de cultura ou para gar Casena-
soja por 2 dias na mesma temperatura. Determinar o nmero
mais provvel de micro-organismo por grama ou mililitro do
produto de acordo com informaes na Tabela 3.
Resultados e interpretao
Quando se utiliza o mtodo de fltrao por membrana e
os mtodos de contagem em placas, o nmero de colnias
obtido no deve ser menor que 50% (fator 2) do inculo
inicial para cada micro-organismo na ausncia do produto
e, o nmero de colnias obtido no diluente no deve ser
menor que 50% (fator 2) do inculo padro.
Quando se utiliza o mtodo de NMP o valor calculado
est compreendido no intervalo de confana de 95% dos
resultados obtidos.
PESQUISA DE MICRO-ORGANISMOS PATOGNICOS
Condies gerais
Neutralizar convenientemente a amostra se essa possuir
atividade antimicrobiana. Se for utilizado agente
tensoativo, para a preparao da amostra, demonstrar
ausncia de toxicidade para os micro-organismos e sua
compatibilidade com o agente inativante, como descrito
em Neutralizao/remoo da atividade antimicrobiana
do item Contagem do nmero total de micro-organismos
mesoflicos deste mtodo geral.
Micro-organismos isolados do ambiente ou outras espcies
podem ser includos nos testes de desafos, especialmente,
se eles representarem contaminantes que possam ser
introduzidos durante a fabricao ou durante o uso do
produto.
Manuteno e preparao dos micro-organismos teste
As culturas lioflizadas devem ser reidratadas de acordo
com as instrues de fornecedores e mantidas por
transferncias para meios frescos ou por processo de
congelamento ou refrigerao por perodos de estocagem
devidamente qualifcados.
Usar suspenses padronizadas das cepas testes conforme
estabelecido abaixo. Utilizar tcnica de manuteno de
forma que o inculo no ultrapasse 5 passagens do cultivo
original. Cultivar cada micro-organismo (bactria e fungo)
separadamente.
Usar soluo tampo cloreto de sdio-peptona pH - 7,0 ou
soluo tampo fosfato pH 7,2 para preparar as suspenses
dos micro-organismos. Ao preparar a suspenso de esporos
de A. brasiliensis, adicionar soluo tampo 0,05% de
polissorbato 80. Usar as suspenses dentro de 2 horas ou
dentro de 24 horas se mantidas temperatura de 2 - 8
o
C.
Micro-organismos
A) Micro-organismos aerbicos:
Staphylococcus aureus ATCC 6538 P
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Escherichia coli ATCC 8739
Salmonella enterica ssp sorotipo typhimurium ATCC
14028
Candida albicans ATCC 10231
Realizar subculturas separadamente em tubos contendo
meio de cultura Caldo Casena-soja ou gar Casena Soja
a 32,5
o
C 2,5
o
C durante 18 a 24 horas. Cultivar Candida
albicans em gar Sabouraud-dextrose a 22,5
o
C 2,5
o
C
durante 2 - 3 dias. Utilize soluo tampo cloreto de sdio-
peptona pH 7,0 ou soluo tampo fosfato pH7,2 para
preparar as suspenses. Us-las dentro de 2 horas ou dentro
de 24 horas se armazenadas a 2 8 C.
B) Micro-organismo anaerbico
Clostridium sporogenes ATCC 11437
Cultivar a cepa Clostridium sporogenes sob condies
anaerbicas em Meio Reforado para Clostrdium a
32,5
o
C 2,5
o
C durante 24 48 horas. Como mtodo
alternativo, realizar diluies de uma suspenso de clulas
vegetativas de Clostridium sporogenes. Esta suspenso de
esporos pode ser utilizada como inculo se mantida a 2 8
o
C por um perodo adequado.
Capacidade nutritiva e seletiva dos meios de cultura
Para os meios de cultura indicados na Tabela 3, inocular
uma pequena quantidade de micro-organismo teste (no
mais que 100 UFC). Usar uma placa de Petri ou tubo para
cada micro-organismo.
Testar cada lote de meio de cultura utilizado nos ensaios
quanto a sua capacidade nutritiva ou seletiva conforme
descrito a seguir.
Meio de cultura lquido - Inocular menos que 100 UFC
do micro-organismo teste no meio de cultura indicado.
Incubar temperatura adequada e observar o crescimento
visvel comparando com um controle (branco) do mesmo
meio de cultura..
Meio de cultura slido - Inocular cada placa contendo
o meio de cultura indicado com menos que 100 UFC
do micro-organismo teste. Incubar temperatura. O
crescimento obtido deve possuir as caractersticas padres
do micro-organismo no meio utilizado.
Controle negativo
Para verifcar as condies do ensaio, realizar teste
de esterilidade dos meios de culturas. No deve haver
crescimento de micro-organismos.
5
Tabela 3 Promoo do crescimento, propriedades inibitrias e indicativas do meio de cultura.
Meio de cultura Propriedade Micro-organismo teste
Bactria Gram-negativa bile tolerante
Caldo de Enriquecimento de Enterobacterias
segundo Mossel
Promoo de crescimento Escherichia coli
Psedomonas aeruginosa
Inibitria Staphylococcus aureus
gar Bile, Violeta, Vermelho e Glicose Crescimento presuntivo E. coli
P. aeruginosa
Escherichia coli
Caldo MacConkey Promoo de crescimento E. coli
Inibitria S. aureus
Agar MacConkey Crescimento presuntivo E. coli
Salmonella
Caldo Enriquecimento Salmonella, segundo
Rappaport Vassiliadis
Promoo de crescimento Salmonella enterica ssp sorotipo
typhimurium
ou S. entrica ssp sorotipo abony
Inibitria S. aureus
Agar Xilose Lisina Desoxicolato Crescimento presuntivo S. enterica ssp sorotipo typhimurium
ou S. entrica ssp sorotipo abony
Pseudomonas aeruginosa
Agar Cetrimida Crescimento presuntivo P. aeruginosa
Inibitria E. coli
Staphylococcus aureus
Agar Sal Manitol Crescimento presuntivo S. aureus
Inibitria E. coli
Clostridium
Meio Reforado para Clostridium Promoo de crescimento Clostridium sporogenes
Agar Columbia Promoo de crescimento C. sporogenes
Candida albicans
Caldo Sabouraud Promoo de crescimento Candida albicans
Agar Sabouraud-dextrose Crescimento Presuntivo C. albicans
Agar Nickerson Crescimento Presuntivo C. albicans
Recuperao dos micro-organismos no produto
Para cada produto a ser analisado realize o teste conforme
descrito em Procedimento, em Mtodo geral para pesquisa
de micro-organismos patognicos (5.5.3.1.3).
Ao homogeneizar, adicionar cada cepa descrita na
promoo de crescimento. Inocular os micro-organismos
individualmente em inculos contendo no mais que 100
UFC. A realizao do teste deve ocorrer no menor perodo
de tempo.
Os micro-organismos devem ser detectados pelas reaes
indicadas nos pargrafos correspondentes, descritos em
Procedimento, em Mtodo geral para pesquisa de micro-
organismos patognicos (5.5.3.1.3).
Se o produto possuir atividade antimicrobiana e for
necessrio modifcar a metodologia proceda como em
Neutralizao/remoo de atividade antimicrobiana deste
captulo utilizando Caldo de Casena-soja como diluente
5.5.3.1.5 Limites microbianos
A contaminao microbiana de um produto no estril
(especialidade e matria-prima farmacutica) pode
conduzir no somente sua deteriorao, com as mudanas
fsicas e qumicas associadas, mas tambm, ao risco de
infeco para o usurio. Consequentemente, os produtos
farmacuticos orais e tpicos (cpsulas, comprimidos,
suspenses, cremes, etc.), que no so estreis, devem ser
submetidos aos controles da contaminao microbiana.
A garantia de qualidade e os controles de produo devem
ser tais que os micro-organismos capazes de proliferar e
contaminar o produto, estejam dentro dos limites. Os limites
microbianos devem ser adequados s vrias categorias
de produtos que refitam o tipo de contaminao mais
provvel introduzida durante a fabricao, bem como a via
de administrao, o consumidor fnal (neonatos, crianas,
idosos, debilitados), o uso de agentes imunossupressores,
corticosterides e outros fatores. Ao avaliar os resultados
5
dos testes microbiolgicos, o nmero e os tipos de micro-
organismos presentes devem ser considerados no contexto
do uso do produto proposto.
O teste microbiolgico de produtos no estreis e de
matria-prima para uso farmacutico realizado segundo
a metodologia descrita em Ensaios microbiolgicos para
produtos no estreis (5.5.3.1).
Os limites de aceitao esto descritos na Tabela 1 e so
interpretados do seguinte modo:
- 10
1
UFC: valor mximo aceitvel = 20
- 10
2
UFC: valor mximo aceitvel = 200
- 10
3
UFC: valor mximo aceitvel = 2000 e, assim
sucessivamente
5
Tabela 1 - Limites microbianos para produtos no estreis.
Via de administrao*
Contagem total
de bactrias
aerbias
UFC/g ou mL
Contagem total
de Fungos/
leveduras
UFC/g ou mL
Pesquisa de Patgenos
Produtos sintticos e biolgicos
a
Preparao aquosa para uso oral 10
2
10
1
Ausncia de Escherichia coli em 1 g, ou mL
Preparao no aquosa para uso
oral
10
3
10
2
Ausncia de Escherichia coli em 1 g, ou mL
Preparao para uso retal 10
3
10
2

Preparao uso tpico (oromucosa,
nasal, gengival, cutneo, auricular)
10
2
10
1
Ausncia de Staphylococcus aureus e
Pseudomonas aeruginosa em 1 g, ou mL
Inalatrios 10
2
10
1
Ausncia de Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa e Bactria Gram
negativa bile tolerante
b
em 1 g, ou mL
Preparao vaginal 10
2
10
1
Ausncia de Staphylococcus aureus ,
Pseudomonas aeruginosa e Candida albicans
em 1 g, ou mL
Dispositivo Transdrmico (limite
por unidade)
10
2
10
1
Ausncia de Staphylococcus aureus e
Pseudomonas aeruginosa/dispositivo
Produtos de origem vegetal, mineral e/ou animal
a
Preparao para uso oral contendo
matria-prima de origem natural
10
4
10
2
Ausncia de Escherichia coli e Staphylococous
aureus em 1 g, ou mL. Ausncia de Salmonella
em 10 g, ou 10 mL. Limite mximo de 10
2

bactrias Gram negativa bile tolerante
b
em 1
g, ou mL.
Drogas vegetais que sero
submetidas a processos extrativos
a quente
10
7
10
4
Limite mximo de 10
2
Escherichia coli em 1 g.
Limite mximo de 10
4
bactrias Gram negativa
bile tolerante
b
em 1 g, ou mL. Ausncia de
Salmonella em 10 g
Drogas vegetais que sero
submetidas a processos extrativos
a frio
10
5
10
3
Limite mximo de 10
1
Escherichia coli em 1 g.
Limite mximo de 10
3
bactrias Gram negativa
bile tolerante
b
em 1 g, ou mL. Ausncia de
Salmonella em 10 g
Extrato seco 10
4
10
3
Ausncia de Salmonella spp e Escherichia
coli em 10 g
Tintura, Extrato fuido 10
4
10
3
-
Substncias para uso farmacutico
Matria-prima, base galnica 10
3
10
2
Ausncia de Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa e
Staphylococous aureus em 1 g, ou mL.
Ausncia de Salmonella spp em 10 g, ou
10mL.
____________
(a) para produtos que se enquadrem em mais de uma situao prevalecero os limites mais restritivos
(b) outras enterobactrias
5
Com base em dados histricos dos testes de monitoramento
microbiolgico, da baixa carga microbiana da matria-
prima, dos ingredientes aquosos, do processo de fabricao,
da formulao, a frequncia do teste para a determinao
do limite microbiano pode ser alterada para as formas
farmacuticas se apresentarem atividade de gua (A
a
)
inferior a 0,75 medida a 25 C.
Para os correlatos, considerar como limite microbiano
queles expressos de acordo com a via de aplicao.
5.5.3.2 ENSAIOS MICROBIOLGICOS
PARA PRODUTOS ESTREIS
5.5.3.2.1 Teste de esterilidade
Os testes de esterilidade aplicam-se a insumos
farmacuticos, medicamentos e produtos para sade que,
de acordo com a Farmacopeia, devem ser estreis, sendo
adequados para revelar a presena de bactrias e fungos.
Contudo, um resultado satisfatrio indica que no foi
encontrado micro-organismo contaminante somente na
amostra examinada.
A extenso desse resultado ao restante do lote requer a
segurana de que todas as unidades do mesmo lote tenham
sido preparadas de modo a garantir grande probabilidade
de que todo o lote passaria pelo teste. Obviamente, isso
depende das precaues tomadas durante os processos
operacionais de fabricao, de acordo com as Boas Prticas
de Fabricao.
PRECAUES DURANTE O TESTE
Para a realizao do teste de esterilidade importante que
as pessoas sejam adequadamente treinadas e qualifcadas.
Os testes devem ser realizados sob condies asspticas,
utilizando, por exemplo, capela de fuxo laminar classe II
tipo A (mximo 3520 partculas 0,5 m/m
3
), que deve
estar instalada em sala limpa classe B - ISO 7 (mximo
352 000 partculas 0,5 m/m
3
). Para testes de esterilidade
de frmacos oncognicos, mutagnicos, antibiticos,
hormnios, esteroides e outros, os testes devem ser
realizados na capela classe II tipo B2, que possui sistema
de exausto externo ao ambiente do laboratrio.
No devem ser realizados testes sob exposio direta de
luz ultravioleta ou em reas sob tratamento com aerossis.
As condies devem ser adequadas de forma a evitar
contaminao acidental da amostra durante o teste e,
tambm, no afetar a deteco de possveis contaminantes.
Controles ambientais das reas de trabalho devem ser
realizados regularmente (controle do ar e de superfcies,
contagens de partculas, determinao de velocidade e
direo do fuxo de ar, entre outros).
MEIOS DE CULTURA
Os meios de cultura utilizados para testes de esterilidade
so o Meio fuido de tioglicolato e o Caldo de casena-
soja. O primeiro utilizado primariamente para cultura de
bactrias anaerbicas, embora, tambm, possa detectar o
crescimento de bactrias aerbicas. O segundo adequado
para a cultura de leveduras, fungos e bactrias aerbicas.
Os meios utilizados devem cumprir com os requisitos
dos Testes de promoo de crescimento dos meios de
cultura. Preparar os meios de cultura conforme descrito
a seguir. Formulaes desidratadas, tambm, podem ser
utilizadas, devendo-se demonstrar que, aps reconstituio
conforme indicaes do fabricante, os requisitos dos Testes
de promoo de crescimento dos meios de cultura sejam
cumpridos. Os meios de cultura devem ser esterilizados
por processo validado.
Meio fuido de tioglicolato
L-Cistina 0,5 g
Dextrose 5,5 g
gar granulado (umidade no superior a 15%) 0,75 g
Extrato de levedura (solvel em gua) 5,0 g
Casena obtida por digesto pancretica 15,0 g
Tioglicolato de sdio (ou cido tiogliclico) 0,5 g (0,3 mL)
Resazurina sdica a 0,1% (p/v) recentemente preparada 1,0 mL
pH do meio aps esterilizao 7,1 0,2
Misturar a L-cistina, cloreto de sdio, dextrose, extrato de
levedura e casena de digesto pancretica com 1000 mL
de gua purifcada e aquecer at dissoluo total. Dissolver
o tioglicolato de sdio ou cido tiogliclico nessa soluo e
ajustar o pH com hidrxido de sdio M de modo que, aps
a esterilizao, o pH da soluo seja de 7,1 0,2. Se houver
necessidade de fltrao, aquecer a soluo novamente,
sem deixar alcanar a ebulio e fltrar, ainda quente, em
papel de fltro. Adicionar a soluo de resazurina sdica,
misturar e distribuir em frascos adequados. O meio deve
apresentar uma colorao rsea na sua superfcie que no
exceda um tero da altura da sua massa lquida. No caso
de se obter um meio com colorao rsea em mais de um
tero de sua massa lquida, restaurar o meio por um nico
aquecimento em banho-maria ou em vapor fuente.
Esterilizar utilizando processo validado. Se no for utilizar
imediatamente, estocar em temperatura entre 2 C e 25 C
conforme orientao do fabricante. No utilizar o meio por
um perodo de estocagem superior quele para o qual ele
foi validado.
O Meio lquido de tioglicolato deve ser incubado a 32,5 C
2,5 C sob condies aerbicas.
5
Meio alternativo do fuido tioglicolato
Proceder conforme descrito para Meio fuido de tioglicolato
sem a adio do gar e da resazurina sdica. O pH aps
esterilizao 7,1 0,2.
O Meio alternativo do fuido tioglicolato deve ser incubado
a 32,5 C 2,5 C sob condies anaerbicas.
Caldo de casena soja
Casena de digesto pancretica 17,0 g
Farinha de soja de digesto papanica 3,0 g
Dextrose 2,5 g
pH do meio aps esterilizao 7,3 0,2
Dissolver todos os componentes em gua purifcada,
aquecendo brandamente. Resfriar temperatura ambiente
e ajustar o pH com hidrxido de sdio M de modo que,
aps a esterilizao, o pH da soluo seja de 7,3 0,2.
Se necessrio, fltrar para clarifcao do meio. Distribuir
em frascos adequados e esterilizar utilizando processo
validado. Se no for utilizar imediatamente, estocar em
temperatura entre 22,5 C 2,5 C, conforme orientao
do fabricante. No utilizar o meio por um perodo de
estocagem superior quele para o qual ele foi validado.
O Caldo de casena soja deve ser incubado a 22,5 C + 2,5
C sob condies aerbicas.
Meios para penicilinas e cefalosporinas
Nos casos em que os meios de cultura so utilizados para
o teste de esterilidade de penicilinas e cefalosporinas pelo
mtodo de Inoculao direta, a preparao do Meio fuido de
tioglicolato e do Caldo de casena soja deve ser modifcada
conforme descrito a seguir. Transferir, assepticamente, para
os frascos esterilizados contendo cada meio, quantidade de
-lactamase sufciente para inativar o antibitico presente
na amostra. Nmero representativo de frascos contendo
meio com -lactamase sem amostra devem ser incubados
durante o perodo do teste (controle negativo). Controles
positivos, tambm,devem ser includos para verifcar se
toda penicilina ou cefalosporina foi inativada. Proceder
ao teste de validao para bacteriostase e fungistase,
utilizando Staphylococcus aureus (ATCC 6538 / INCQS
00039) como micro-organismo teste. A observao de
crescimento microbiano tpico constitui confrmao de
que a concentrao de -lactamase utilizada apropriada.
PADRONIZAO DO INCULO
Usualmente, so necessrios ajustes para se obter
densidade especfca de clulas microbianas viveis (no
mais que 100 UFC) no meio de cultura. Para estabelecer
um volume que contenha a densidade recomendada de
clulas, diluies em srie devem ser realizadas a partir
de uma suspenso estoque, procedendo-se a contagem em
placas para determinar a densidade microbiana obtida com
cada diluio.
Se o procedimento estiver bem padronizado, possvel
reproduzir os resultados com a mesma cepa microbiana.
recomendvel a utilizao de subculturas de micro-
organismos at no mximo 5 transferncias, a partir da
cultura original.
Nota: os meios de cultura utilizados na padronizao do
inculo so aqueles descritos no captulo Contagem do
nmero total de micro-organismos mesoflicos (5.5.3.1.2)
para cada micro-organismo.
Procedimento
Usando ala de cultivo, transferir o crescimento do micro-
organismo especfco para tubo de ensaio contendo gar
inclinado indicado para o seu crescimento. Semear a cultura
sobre a superfcie do gar inclinado, de modo a obter
pelcula uniforme de crescimento. Incubar nas condies
timas de crescimento do micro-organismo teste.
Como sugesto de diluies para o inculo, aps o perodo
de incubao lavar o crescimento do micro-organismo
com 1 mL de soluo estril de cloreto de sdio a 0,9%
(p/v) ou gua peptonada 0,1% (p/v) estril e transferir
para frasco contendo 99 mL de soluo estril de cloreto
de sdio a 0,9% (p/v) ou gua peptonada 0,1% (p/v)
estril - (suspenso estoque). Homogeneizar a suspenso
manualmente ou em agitador de tubos do tipo vrtex.
Preparar diluies em srie (1:100, 1:10000 e 1:1000000)
a partir da suspenso estoque utilizando soluo estril de
cloreto de sdio a 0,9% (p/v) ou gua peptonada 0,1% (p/v)
estril como diluente. Incorporar 1 mL de cada diluio
em meio slido adequado para o micro-organismo,
previamente fundido e resfriado a aproximadamente 45 C.
Homogeneizar e incubar.
Proceder contagem do nmero de colnias que se
desenvolveram no meio slido e escolher, a partir dos
resultados, a diluio a ser utilizada para obter-se, no
mximo, 100 UFC por frasco de meio de cultura.
Repetir o procedimento para cada micro-organismo
utilizado.
Para o preparo de suspenso fngica, a soluo de cloreto
de sdio a 0,9% (p/v) estril pode ser substituida por gua
purifcada estril.
TESTES DE ADEQUAO DOS MEIOS DE CULTURA
Os meios de cultura utilizados devem cumprir com os testes
descritos a seguir, realizados antes do Teste de esterilidade
da amostra.
5
Esterilidade
Confrmar a esterilidade de cada lote de meio esterilizado
incubando todos os frascos dos meios nas condies
especifcadas por 14 dias. No deve ocorrer crescimento
microbiano.
A ocorrncia de crescimento microbiano inutiliza o lote de
meio para o teste de esterilidade.
Promoo de crescimento
Cada lote de meio de cultura esterilizado deve ser testado
quanto sua capacidade em promover o crescimento de
micro-organismos. Inocular, separadamente, em duplicata,
tubos de cada meio com volume de inculo contendo no
mais que 100 UFC de cada cepa microbiana listada na
Tabela 1 e incubar conforme as condies especifcadas
para cada meio. O teste de promoo de crescimento
considerado vlido se houver evidncia de crescimento
microbiano, visualizado pela turvao e/ou por mtodos
microscpicos, aps 3 dias de incubao dos meios
inoculados com bactrias e aps 5 dias de incubao dos
meios inoculados com fungos.
Tabela 1 Micro-organismos indicados para utilizao em testes de promoo de crescimento e de validao.
Meio Micro-organismo Cepa
Meio fuido de
tioglicolato
Staphylococcus aureus ATCC 6538, NCTC 10788, NCIMB 9518, CIP 4.83,
NBRC 13276, INCQS 00039
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, NCIMB 8626, CIP 82.118, NBRC 13275,
INCQS 00230
Clostridium sporogenes* ATCC 19404, NCTC 532, CIP 79.3, INCQS 00352
ou ATCC 11437, NCIMB 14239, CIP 100651, NBRC
14293
Alternativo do
tioglicolato
Clostridium sporogenes ATCC 19404 ,NCTC 532, CIP 79.3, INCQS 00352
ou ATCC 11437, NCIMB 14239, CIP 100651, NBRC
14293
Caldo de casena-soja Bacillus subtilis ATCC 6633, NCIMB 8054, CIP 52.62, NBRC 3134,
INCQS 00001
Candida albicans ATCC 10231, NCPF 3179, IP 48.72, NBRC 1594,
INCQS 40006
Aspergillus brasiliensis ATCC 16404, IMI 149007, IP 1431.83, NBRC 9455,
INCQS 40036
Bacterides vulgatus (ATCC 8482, NCTC 11154, INCQS
00059) pode ser utilizado alternativamente a Clostridium
sporogenes, quando no for necessrio o uso de um micro-
organismo esporulado.
Uma alternativa a Staphylococcus aureus o Bacillus
subtilis (INCQS 00001, ATCC 6633, CIP 52.62,NBRC
3134, NCIMB 8054, NCTC 10400).
Um micro-organismo alternativo para Pseudomonas
aeruginosa a Kocuria rhizophila (INCQS 00010, ATCC
9341, CIP 53.65, NCTC 8340).
ARMAZENAMENTO DOS MEIOS
Se os meios preparados forem estocados em frascos no
hermeticamente fechados, podero ser utilizados por 1 ms,
desde que sejam testados para promoo de crescimento
dentro de 15 dias a partir do tempo de uso e que cumpram
o requisito para o indicador de cor.
Se os meios forem estocados em frascos hermeticamente
fechados, podero ser usados por 1 ano, desde que sejam
testados para promoo de crescimento dentro de 3 meses
a partir do tempo de uso e que cumpram o requisito para o
indicador de cor.
FLUIDOS DE DILUIO E LAVAGEM
Fluido I
Peptona de Carne 1,0 g
pH aps esterilizao 7,1 0,2
Dissolver a peptona de carne em gua purifcada, fltrar
ou centrifugar para clarifcao do meio, se necessrio e
ajustar o pH em 7,1 0,2. Distribuir em frascos adequados
e esterilizar utilizando processo validado.
5
Preparao para penicilinas ou cefalosporinas. Para a
realizao do ensaio de esterilidade de penicilinas ou
cefalosporinas pelo mtodo de fltrao em membrana,
adicionar, assepticamente, ao Fluido I esterilizado,
quantidade de -lactamase sufciente para inativar qualquer
atividade antibitica residual na membrana aps a fltrao
da amostra.
Fluido II
Para cada litro de Fluido I, adicionar 1 mL de polissorbato
80 antes da esterilizao. Ajustar o pH em 7,1 0,2.
Distribuir em frascos adequados e esterilizar utilizando
processo validado.
Usar esse fuido para produtos que contm lecitina ou leo
e para produtos para sade.
Fluido III
Peptona de carne 5,0 g
gua purifcada q.s.p. 1000 mL
pH aps esterilizao 6,9 0,2
Misturar todos os componentes e aquecer, brandamente,
at dissoluo. Filtrar, se necessrio, e ajustar o pH para
obter, aps a esterilizao, o valor de 6,9 0,2. Distribuir
em frascos adequados e esterilizar utilizando processo
validado.
TESTE DE VALIDAO PARA BACTERIOSTASE E
FUNGISTASE
Antes de se estabelecer um procedimento para o teste de
esterilidade de insumos farmacuticos, medicamentos
ou produtos para sade, deve-se garantir que qualquer
atividade bacteriosttica ou fungisttica inerente ao
produto no tem infuncia adversa sobre a confabilidade
do teste, demonstrando-se que o procedimento utilizado
adequado para o produto sob exame.
O teste de validao para bacteriostase e fungistase deve
ser realizado quando o teste de esterilidade for realizado
pela primeira vez para um produto e sempre que houver
modifcaes na formulao do produto e/ou nas condies
experimentais do teste. A validao deve ser feita
previamente ao teste de esterilidade do produto sob exame.
Procedimento
Para realizar o teste de validao, proceder conforme
descrito em Procedimentos para o Teste de Esterilidade,
empregando exatamente os mesmos mtodos, exceto para
as modifcaes que se seguem.
Nota: para ambos mtodos descritos a seguir, utilizar os
micro-organismos previamente especifcados (Tabela 1).
Realizar testes de Promoo de crescimento como controle
positivo. Incubar todos os frascos contendo os meios por
no mais que 5 dias.
Mtodo de fltrao em membrana. Aps transferncia do
contedo do(s) frasco (s) a ser(em) testado(s) (conforme
especifcado na Tabela 3) para o dispositivo de fltrao,
adicionar no mais que 100 UFC do micro-organismo teste
ltima alquota do fuido estril utilizado para lavagem
da membrana.
Mtodo de inoculao direta. Aps transferncia do
contedo do(s) frasco(s) a ser(em) testado(s) (conforme
especifcado na Tabela 3) para frascos contendo os meios
de cultura, adicionar no mais que 100 UFC dos micro-
organismos testes aos meios.
Interpretao
Se o crescimento de micro-organismos obtido aps a
incubao visivelmente comparvel quele obtido no
controle positivo (frasco sem adio de amostra), a amostra
no apresenta atividade antimicrobiana sob as condies
do teste ou tal atividade foi satisfatoriamente eliminada.
O teste de esterilidade pode, ento, ser conduzido sem
necessidade de modifcaes.
Se o crescimento de micro-organismos no obtido
na presena da amostra, ou se ele no visivelmente
comparvel quele obtido nos controles positivos, a
amostra apresenta atividade antimicrobiana que no foi
satisfatoriamente eliminada, sob as condies do teste.
Nesse caso, devem ser feitas modifcaes nas condies
do teste para eliminar a atividade antimicrobiana, tais como
diluio, uso de substncias neutralizantes, aumento do
nmero de lavagens no mtodo de fltrao em membrana
ou uma combinao delas. O teste de validao deve ser
repetido para verifcar se a atividade antimicrobiana foi
eliminada pela modifcao proposta.
PROCEDIMENTOS PARA O TESTE
DE ESTERILIDADE
O teste de esterilidade pode ser realizado utilizando os
mtodos de fltrao em membrana ou de inoculao direta
conforme a natureza do produto, exceto quando um dos
mtodos for especifcado na monografa individual. Em
ambos casos, controles negativos apropriados devem ser
includos.
Antes de proceder ao teste, efetuar assepsia das superfcies
externas dos frascos e ampolas,
mergulhando-os em soluo antissptica adequada, ou
utilizando outros procedimentos de desinfeco externa
das embalagens como por exemplo, vapores de perxido
de hidrognio. No caso de artigos cujas embalagens no
resistam a esse tratamento, fazer assepsia das amostras por
meio de tecido no liberador de partculas embebido em
soluo antissptica.
5
Amostragem
A menos que especifcado de forma diferente na
monografa individual, testar o nmero de unidades da
amostra especifcado na Tabela 2. Se as unidades da
amostra apresentam contedo em quantidade sufciente
Tabela 2 Nmero mnimo de unidades a serem testadas em funo do tamanho do lote.
Nmero de unidades do lote Nmero mnimo de unidades a serem testadas
a,b
Preparaes parenterais
At 100 10% ou 4 unidades (o que for maior)
Acima de 100 at 500 10 unidades
Acima de 500 2% ou 20 unidades (o que for menor)
Parenterais de grande volume 2% ou 10 unidades (o que for menor)
Antibiticos slidos
Frascos com capacidade < 5 g 20 unidades
Frascos com capacidade > 5 g 6 unidades
Oftlmicos e outras preparaes no injetveis
Acima de 200 10 unidades
Produto apresentado em embalagem de dose nica aplicar o mesmo recomendado para preparaes parenterais
Produtos para sade
Acima de 500 2% ou 20 unidades (o que for menor)
Produtos slidos a granel
At 4 cada unidade
Acima de 4 at 50 20% ou 4 unidades (o que for maior)
Acima de 50 2% ou 10 unidades (o que for maior)
Dispositivos mdicos cirrgicos
Categute e outras suturas 2% ou 5 embalagens (o que for maior) at o mximo de 20
embalagens
Acima de 500 2% ou 20 unidades (o que for maior)
__________
a amostragem especifcada considerando-se que o contedo de um recipiente sufciente para inocular ambos os meios de cultura.
b para matrias-primas, a amostragem satisfatria pode ser baseada na raiz quadrada do nmero total de recipientes do lote.
(Tabela 3), o contedo de cada unidade pode ser dividido
em duas pores iguais para cada tipo de meio de cultura
utilizado. Se as unidades da amostra no apresentam
contedo em quantidade sufciente para cada meio, separar
o dobro do nmero de unidades especifcado na Tabela 2
para realizao do teste.
5
Tabela 3 Quantidades mnimas a serem utilizadas para cada meio de cultura.
Quantidade por recipiente Volume mnimo a ser inoculado em cada meio (mL)
Lquidos (no antibiticos)
menos de 1 mL todo o contedo
de 1 a 40 mL metade do contedo, mas no menos que 1 mL
acima de 40 mL at 100 mL 20mL
acima de 100 mL 10% do contedo do produto, mas no menos que 20 mL
Antibiticos (lquidos) 1 mL
Outras preparaes solveis em gua ou em solvente do
tipo miristato de isopropila
contedo total, mas no menos que 0,2 g
Cremes e pomadas insolveis a serem suspensos ou
emulsifcados
contedo total, mas no menos que 0,2 g
Slidos
menos de 0,05 g todo o contedo
acima de 0,05g at 0,3 g metade do contedo mas no menos que 0,05g
acima de 0,3 g at 5 g 0,15 g
acima de 5 g 0,5 g
Produtos para sade
suturas cirrgicas 3 partes do fo (30 cm de comprimento cada)
esparadrapo cirrgico / gaze / algodo em embalagem
mltipla
0,1 g por embalagem
suturas e outros materiais em embalagens individuais todo o material
outros correlatos mdicos todo o material cortado em pedaos, ou desmontado
MTODO DE FILTRAO EM MEMBRANA
Utilizar membranas fltrantes com porosidade nominal
no superior a 0,45 m cuja efcincia em reter micro-
organismos tenha sido estabelecida. Filtros de nitrato
de celulose, por exemplo, so utilizados para solues
aquosas, oleosas e fracamente alcolicas e fltros de
acetato de celulose, por exemplo, para solues fortemente
alcolicas. Filtros especialmente adaptados podem ser
requeridos para determinados produtos, como antibiticos.
Para produtos oncolgicos extremamente agressivos
substituir a membrana de ster de celulose por difuoreto de
polivinilideno (PVDF) ou politetrafuoroetileno (PTFE).
Os procedimentos descritos a seguir aplicam-se a
membranas com dimetro de aproximadamente 50 mm. Se
fltros com dimetros diferentes so utilizados, os volumes
das diluies e lavagens devem ser ajustados conforme
o dimetro da membrana empregada. O dispositivo de
fltrao e a membrana so esterilizados por processo
adequado. O dispositivo apresenta confgurao tal que
a soluo a ser examinada pode ser introduzida e fltrada
sob condies asspticas. O dispositivo de fltrao deve
possibilitar, ainda, a remoo assptica da membrana para
sua transferncia ao meio de cultura ou ser adequado para
proceder incubao aps adio do meio de cultura ao
prprio dispositivo. O tipo de fuido utilizado na lavagem
da membrana depende da natureza do produto, sendo
especifcado na monografa individual, quando for o caso.
Controles negativos, ou brancos devem ser includos para
os fuidos e solventes utilizados, para os quais no se
deve observar crescimento microbiano. Deve-se verifcar,
ainda, se os fuidos utilizados no apresentam atividade
antimicrobiana nas condies do teste.
Lquidos miscveis em veculos aquosos
Transferir pequena quantidade de diluente estril, como
o Fluido I, para a membrana e fltrar. O diluente pode
conter substncias neutralizantes e ou inativantes, como
no caso de ntibiticos. Transferir
para a membrana os contedos dos recipientes a serem
testados ou a diluio apropriada (previamente defnida
no Teste de validao para bacteriostase e fungistase) em
quantidades no inferiores s recomendadas nas Tabelas
2 e 3 e fltrar imediatamente. Se o produto apresentar
atividade antimicrobiana, lavar a membrana, no mnimo,
trs vezes fltrando, a cada vez, o volume do diluente estril
estabelecido no Teste de validao para bacteriostase e
fungistase. A quantidade de fuido de lavagem utilizada
no deve ser superior a cinco pores de 200 mL, mesmo
se durante o teste de validao tenha sido demonstrado
que tal ciclo de lavagens no elimina completamente a
atividade antimicrobiana. Transferir a membrana inteira
para meios selecionados. Utilizar os mesmos volumes de
meio empregados no teste de validao. Incubar os meios
por pelo menos 14 dias.
leos e solues oleosas
Utilizar, para cada meio de cultura a quantidade de amostra
especifcada nas Tabelas 2 e 3. leos e solues oleosas de
baixa viscosidade podem ser fltradas sem diluio atravs
da membrana seca. leos viscosos devem ser diludos em
solvente estril adequado como, por exemplo, miristato
de isoproprila, desde que demonstrado no possuir
atividade antimicrobiana nas condies do teste. Deixar
o leo penetrar na membrana, fltrar utilizando vcuo
gradualmente. Lavar a membrana com, no mnimo, trs
pores do Fluido III. Prosseguir conforme descrito para
Lquidos miscveis em veculos aquosos.
5
Pomadas e cremes
Utilizar, para cada meio de cultura, quantidade de amostra
especifcada nas Tabelas 2 e 3. Pomadas de base oleosa e
emulses do tipo gua em leo podem ser diludas para 1%
em solvente adequado (miristato de isopropila, ou outro)
como descrito no item anterior, aquecendo, se necessrio,
a 40 C (em casos excepcionais, aquecer no mximo at
44 C). Filtrar, o mais rapidamente possvel, e prosseguir
conforme descrito em leos e solues oleosas. No caso de
utilizao do miristato de isopropila como diluente, desde
que demonstrado no possuir atividade antimicrobiana
nas condies do teste, esse deve ser esterilizado antes do
uso, por fltrao em membrana, e seu extrato aquoso deve
apresentar pH no inferior a 6,5.
Slidos solveis (no antibiticos)
Utilizar, para cada meio de cultura, quantidade de amostra
especifcada nas Tabelas 2 e 3. Dissolver o produto em
fuido adequado, como o Fluido I, e prosseguir conforme
descrito para Lquidos miscveis em veculos aquosos.
Slidos para preparaes injetveis (no antibiticos)
Reconstituir o produto como descrito no rtulo e proceder
conforme descrito para Lquidos miscveis em veculos
aquosos, ou leos e solues oleosas, dependendo do caso.
Se necessrio, pode ser utilizado um excesso de diluente
para auxiliar na reconstituio e fltrao do produto.
Antibiticos slidos para preparaes injetveis
Para embalagens com menos de 5 g retirar, assepticamente,
de cada um dos 20 frascos recomendados, cerca de 0,3 g
de amostra, dissolver em 200 mL de Fluido I e misturar.
Alternativamente, reconstituir o produto conforme
descrito no rtulo, transferir o equivalente, em lquido, a
0,3 g de amostra e diluir para 200 mL com Fluido I. Para
embalagens com 5 g ou mais transferir, assepticamente, de
cada seis recipientes, 1 g de amostra para frasco adequado,
dissolver em 200 mL de Fluido I e misturar.
Alternativamente, reconstituir os seis frascos do produto
como recomendado pelo fabricante, transferir quantidade
de lquido, equivalente a 1 g da amostra, para frasco
adequado, diluir para 200 mL com Fluido I e misturar.
Prosseguir conforme descrito para Lquidos miscveis em
veculos aquosos.
Aerossis estreis
Para produtos lquidos pressurizados, congelar o contedo
em mistura de etanol e gelo seco a pelo menos -20 C, por
aproximadamente 1 hora. Se possvel, antes da abertura
da embalagem, deixar o propelente escapar e transferir
assepticamente o contedo para frasco adequado estril.
Adicionar 100 mL de Fluido II e homogeneizar suavemente.
veculos aquosos ou leos e solues oleosas, conforme
o caso.
Seringas j preenchidas com ou sem agulha acoplada
Expelir o contedo de cada seringa diretamente sobre a(s)
membrana(s) ou em frascos separados e depois fltrar.
veculos aquosos.
Dispositivos estreis
Passar assepticamente um volume de Fluido II no inferior
a 10% do volume de cada unidade do total de dispositivos
a serem testados conforme estabelecido nas Tabelas 2 e
3. Recolher o fuido em um recipiente adequado estril e
proceder conforme indicado para lquidos miscveis em
veculos aquosos ou solues aquosas de leos e solues
oleosas, conforme o caso. No caso das seringas vazias,
estreis, extrair o diluente estril do recipiente atravs
da agulha estril, se estiver acoplada, ou atravs de uma
agulha estril acoplada para proceder ao ensaio, e expulsar
o contedo em um recipiente estril. Proceder como
indicado anteriormente.
MTODO DE INOCULAO DIRETA
EM MEIO DE CULTURA
Transferir, direta e assepticamente, para os meios de cultura
a quantidade do produto especifcada nas Tabelas 2 e 3, de
tal forma que o volume do produto no seja maior que 10%
do volume do meio de cultura, a menos que especifcado
de maneira diferente na monografa individual ou nessa
seo. Se a amostra apresentar atividade antimicrobiana,
realizar o teste aps a neutralizao da atividade com
uma substncia neutralizante adequada ou por diluio
em quantidade sufciente de meio de cultura. Quando for
necessrio o uso de grandes volumes do produto, pode-
se trabalhar com meio de cultura concentrado, preparado
levando-se em conta a diluio subsequente adio do
produto. Se o recipiente comportar, o meio concentrado
pode ser adicionado diretamente amostra.
Lquidos
Transferir o volume indicado de cada amostra conforme
Tabela 3 para tubos contendo os meios fuido de tioglicolato
e caldo de casena-soja, utilizando pipeta estril ou seringa
e agulha estreis. Misturar o lquido com o meio, sem aerar
excessivamente. Incubar nas condies especifcadas para
cada meio durante 14 dias.
Lquidos oleosos
Utilizar meio de cultura contendo agente emulsifcante
apropriado em concentrao que tenha se mostrado adequada
na validao, por exemplo, polissorbato 80 a 1% (p/v).
Pomadas e cremes
Preparar diluio da amostra a 10% utilizando um agente
emulsifcante adequado adicionado a um diluente estril
como o Fluido I. Transferir a amostra diluda para meios
de cultura sem emulsifcante. Incubar os meios inoculados
5
por, no mnimo, 14 dias. Observar os meios durante todo
o perodo de incubao. Agitar, suavemente, os frascos de
meio de cultura contendo leo, diariamente, durante todo
o perodo de incubao. Os frascos contendo Meio lquido
de tioglicolato ou outro meio similar devem ser agitados de
forma a no prejudicar as condies de anaerobiose.
Slidos
Transferir a quantidade de amostra especifcada nas Tabelas
2 e 3 ou preparar uma soluo ou suspenso do produto
adicionando volume no superior a 20 mL de diluente
estril ao recipiente. Transferir o material assim obtido
para 200 mL de Meio fuido de tioglicolato. Do mesmo
modo, transferir a mesma quantidade do material para
200 mL de Caldo de casena-soja e misturar. Prosseguir
conforme descrito para Lquidos.
Categute e outras suturas cirrgicas
Para cada meio, utilizar a quantidade de amostra especifcada
nas Tabelas 2 e 3. Abrir a embalagem assepticamente e
remover trs pores do fo para cada meio de cultura.
Essas pores devem ser retiradas no incio, no meio e no
fnal e terem 30 cm de comprimento. Cobrir cada parte do
fo com volume sufciente dos meios (20 mL a 150 mL).
Algodo purifcado, gaze, bandagem e material relacionado
De cada embalagem de algodo, gaze em rolo ou gaze em
bandagem a ser analisada, retirar, com instrumentos estreis,
duas pores de 0,1 g a 0,5 g das partes mais internas da
amostra. Para materiais em embalagem individual, tais
como chumao de gaze, retirar duas pores individuais de
0,25 g a 0,5 g, ou duas unidades totais, no caso de unidades
pequenas (ex: bandagens menores que 25 mm a 75 mm).
Transferir uma poro para tubo com 40 mL de Meio fuido
de tioglicolato e outra para tubos com 40 mL de Caldo de
casena-soja. Prosseguir conforme descrito para Lquidos.
Aparelhos parenterais
Para aparelhos de formas e dimenses que permitam sua
imerso em volume de meio que no ultrapasse 1000 mL,
fazer a sua imerso utilizando as quantidades especifcadas
nas Tabelas 2 e 3 e proceder conforme descrito em Lquidos.
Para aparelhos muito grandes, fazer a imerso de partes
que entrem em contato com o paciente em volume de meio
sufciente para a imerso de todas as partes. Para catteres
cujos lumens, interno e externo, devam ser estreis, passar
o meio dentro do lmen ou preencher o lmen com o meio
e promover a imerso do aparelho inteiro.
OBSERVAES E INTERPRETAO DOS RESULTADOS
Durante o perodo de incubao e at o seu trmino,
examinar os meios quanto s evidncias macroscpicas de
crescimento microbiano. Se a amostra sob exame provoca
turvao dos meios de cultura, de modo a impedir a
observao do crescimento microbiano, transferir pores
adequadas de cada frasco (no menos que 1 mL) para
frascos novos dos mesmos meios 14 dias aps o incio da
incubao. Incubar os frascos originais e os frascos novos
por um perodo adicional de no menos que 4 dias. Se, ao
fnal do perodo de incubao, no houver evidncias de
crescimento microbiano, a amostra sob exame cumpre com
o requisito de esterilidade. Se for evidenciado crescimento
de micro-organismos, a amostra no cumpre com o requisito
de esterilidade, a no ser que se evidencie falha durante a
execuo do teste como, por exemplo, contaminao no
relacionada com o produto em anlise.
O teste de esterilidade pode ser considerado invlido se
uma ou mais das seguintes condies forem observadas.
a) os dados de monitoramento microbiolgico da rea de
realizao do teste demonstram falha;
b) uma reviso dos procedimentos analticos utilizados
durante o teste revela falha;
c) crescimento microbiano observado nos controles
negativos;
d) aps a identifcao do micro-organismo(s) isolado(s)
a partir do teste, o crescimento dessa espcie(s) pode ser
atribudo, inequivocadamente, a falhas relacionadas ao
material utilizado e/ou a tcnicas utilizadas na execuo do
teste de esterilidade.
Se for considerado invlido, o teste de esterilidade deve
ser repetido com o mesmo nmero de unidades do teste
inicial. Se, aps a repetio do teste, no for observado
crescimento microbiano, a amostra cumpre com o requisito
de esterilidade. Se for observado crescimento microbiano
aps a repetio do teste, a amostra sob exame no cumpre
com o requisito de esterilidade.
Tcnicas microbiolgicas/bioqumicas convencionais so
geralmente satisfatrias para identifcao dos micro-
organismos recuperados em um teste de esterilidade. No
caso de se considerar somente que, aps a determinao
da identidade dos micro-organismos isolados no teste,
o crescimento dessa(s) espcie(s) possa ser atribudo
inequivocamente a falhas com respeito ao material e/ou
tcnica utilizados no procedimento do ensaio de esterilidade,
pode ser necessrio empregar tcnicas mais sensveis para
demonstrar que o micro-organismo isolado no produto
idntico ao isolado em materiais ou no ambiente. Enquanto
as tcnicas de identifcao microbiolgicas / bioqumicas
de rotina podem demonstrar que 2 isolados no so
idnticos, esses mtodos podem no ser sufcientemente
sensveis ou confveis para fornecer evidncia inequvoca
de que dois isolados so provenientes de uma mesma
fonte. Mtodos moleculares podem ser empregados para
determinar se dois micro-organismos pertencem a um
mesmo clone e possuem origem em comum.
APLICAO DO TESTE DE ESTERILIDADE A
PREPARAES PARENTERAIS, OFTLMICAS
E OUTRAS PREPARAES NO-INJETVEIS
COM REQUERIMENTO PARA ESTERILIDADE.
Ao empregar a tcnica de fltrao por membrana, utilizar,
sempre que possvel, todo o contedo do recipiente, mas
5
no menos que a quantidade indicada nas Tabelas 2 e 3,
diluindo, quando necessrio, para aproximadamente 100
mL com uma soluo estril adequada, como o Fluido I.
Ao empregar a tcnica de inoculao direta, utilizar as
quantidades indicadas nas Tabelas 2 e 3, a menos que
de outra forma autorizada e justifcada. Os testes para
bactrias e fungos so realizados com uma mesma unidade
da amostra sob exame. Quando o volume ou a quantidade
em um nico recipiente insufciente para a realizao
do teste, os contedos de dois ou mais recipientes so
utilizados para inocular os diferentes meios.
APLICAO DO TESTE DE ESTERILIDADE A
PRODUTOS FARMACUTICOS RADIOATIVOS
Devido ao rpido decaimento radioativo, no praticvel
atrasar a liberao de alguns produtos farmacuticos
radioativos por conta do teste de esterilidade.
Em tais casos, os resultados dos testes de esterilidade
fornecem apenas evidncia retrospectiva confrmatria
para a garantia da esterilidade, e portanto dependem
dos mtodos iniciais estabelecidos na fabricao e nos
procedimentos de validao / certifcao.
5.5.3.3 ENSAIO MICROBIOLGICO DE
ANTIBITICOS
Determina-se a potncia ou atividade de um produto
contendo antibitico comparando a dose que inibe o
crescimento de um micro-organismo susceptvel em
relao dose de uma substncia padro ou preparao
biolgica de referncia do antibitico que produz inibio
similar.
UNIDADE INTERNACIONAL E
PREPARAO PADRO
Unidade Internacional a atividade especfca contida em
uma quantidade (massa) de Padro Biolgico Internacional
ou Preparao de Referncia Biolgica Internacional. A
quantidade equivalente de unidades para uso internacional
estabelecida, sempre que necessrio, pela Organizao
Mundial da Sade.
Substncias Qumicas de Referncia Internacional no
apresentam unidades de atividade biolgica defnidas.
Quando so necessrios ensaios biolgicos, a potncia
desses produtos em termos de massa equivalente da
substncia pura.
O nmero de unidades, ou a massa equivalente da
substncia pura, em microgramas, contidos em 1 mg de
substncia antibitica, est indicado na monografa de cada
um dos produtos inscritos na Farmacopeia.
Para os ensaios microbiolgicos registrados na
Farmacopeia, Preparaes Padro (Padres Primrios)
so os Padres Internacionais e Preparaes de Referncia
estabelecidos pela Organizao Mundial da Sade e pela
Farmacopeia Europeia ou os Padres e Preparaes de
Referncia brasileiros. Outras preparaes adequadas,
de uso internacional corrente, nas quais a potncia tenha
sido determinada em relao s preparaes padro da
Organizao Mundial da Sade, possuem valor legal
idntico.
Recomenda-se que sejam preparados e empregados padres
de trabalho (secundrios); todavia, imprescindvel que a
potncia tenha sido determinada por nmero adequado de
ensaios comparativos em relao a um padro primrio ou
farmacopeico, validados por anlise estatstica apropriada e
que os dados e resultados sejam arquivados disposio da
fscalizao competente por prazo idntico ao da validade
dos produtos ensaiados.
Para o ensaio de lotes de substncias antibiticas para as
quais existam Preparaes Padro nacionais, referendadas
por organizaes internacionais, obrigatrio o uso dessas
preparaes.
SOLUES
Soluo 1 (tampo fosfato de potssio a 1%, estril. pH
6,0) - Dissolver 2,0 g de fosfato de potssio dibsico e 8
g de fosfato de potssio monobsico em gua purifcada
sufciente para perfazer 1000 mL. Esterilizar a soluo por
20 minutos em autoclave a 121 C e, se necessrio, ajustar
o pH para 5,9 - 6,1 com cido fosfrico 6 M ou hidrxido
de potssio 10 M.
Soluo 2 (tampo fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH
8,0) - Dissolver 16,73 g de fosfato de potssio dibsico
e 0,523 g de fosfato de potssio monobsico em gua
purifcada sufciente para perfazer 1000 mL. Esterilizar
a soluo por 20 minutos em autoclave a 121 C e, se
necessrio, ajustar o pH para 7,9 - 8,1 com cido fosfrico
6 M ou hidrxido de potssio 10 M.
4,5) - Dissolver 13,6 g de fosfato de potssio monobsico
em gua purifcada sufciente para perfazer 1000 mL.
Esterilizar a soluo por 20 minutos em autoclave a 121
C e, se necessrio, ajustar o pH para 4,4 - 4,5 com cido
fosfrico 6 M ou hidrxido de potssio 10 M
Soluo 4 (tampo fosfato de potssio a 10%, estril,
pH 6,0) - Dissolver 20,0 g de fosfato de potssio dibsico
e 80,0 g de fosfato de potssio monobsico em gua
purifcada sufciente para perfazer 1000 mL. Esterilizar
a soluo por 20 minutos em autoclave a 121 C e, se
necessrio, ajustar o pH 5,9 - 6,1 com cido fosfrico 6 M
ou hidrxido de potssio 10 M.
Soluo 5 (tampo fosfato de potssio 0,2 M, estril,
pH 10,5) - Dissolver 35,0 g de fosfato de potssio
dibsico e adicionar 2,0 mL de hidrxido de potssio 10
M em gua purifcada sufciente para perfazer 1000 mL.
Esterilizar a soluo por 20 minutos em autoclave a 121 C
e, se necessrio, ajustar o pH para 10,4 - 10,6 com cido
fosfrico 6 M ou hidrxido de potssio 10 M
Soluo 6 (cido clordrico metanlico 0,1 M) - Diluir
10,0 mL de cido clordrico 1,0 M em metanol sufciente
para perfazer 1000 mL.
5
Soluo 7 (soluo de lcool isoproplico a 80%) - Diluir
800 mL de lcool isoproplico em gua purifcada sufciente
para perfazer 1000 mL.
7,0) - Dissolver 13,6 g de fosfato de potssio dibsico e 4,0
g de fosfato de potssio monobsico em gua purifcada
sufciente para perfazer 1000 mL. Esterilizar a soluo por
20 minutos em autoclave a 121 C e, se necessrio, ajustar
o pH para 6,8 - 7,2 com cido fosfrico 6 M ou hidrxido
de potssio 10 M.
MEIOS DE CULTURA
Podem ser empregados meios de cultura desidratados,
disponveis no comrcio que, ao serem reconstitudos com
gua purifcada, conforme as especifcaes do fabricante,
possuam a mesma composio que o meio produzido
com os ingredientes individualmente indicados para sua
obteno.
Meio de cultura n 1 - Dissolver 6,0 g de peptona seca,
4,0 g de casena de digesto pancretica. 3,0 g de extrato
de levedura, 1,0 g de dextrose e 15,0 g de gar em gua
purifcada sufciente para perfazer 1000 mL. O pH, aps
esterilizao, dever ser 6,6.
Meio de cultura n 2 - Dissolver 6,0 g de peptona seca, 3,0
g de extrato de levedura, 1,5 g de extrato de carne e 15,0
g de gar em gua purifcada sufciente para perfazer 1000
mL. O pH, aps esterilizao, dever ser 6,6.
1,5 g de extrato de levedura, 1,5 g de extrato de carne,
2,5 g de cloreto de sdio, 1,0 g de dextrose, 3,68 g de
fosfato de potssio dibsico e 1,32 g de fosfato de potssio
monobsico, em gua purifcada sufciente para perfazer
1000 mL. O pH, aps esterilizao, dever ser 7,0.
Meio de cultura n 4 - Dissolver 6,0 g de peptona seca, 3,0
g de extrato de levedura, 1,5 g de extrato de carne, 1,0 g
de D-glicose e 15,0 g de gar em gua purifcada sufciente
para perfazer 1000 mL. O pH, aps esterilizao, dever
ser 6,6.
Meio de cultura n 5 - Usar o meio de cultura n 2, porm,
o pH, aps esterilizao, dever ser 7,8.
Meio de cultura n 6 - Dissolver 40,0 g de dextrose e
10,0 g de peptona seca em gua purifcada sufciente para
perfazer 1000 mL. O pH, aps esterilizao, dever ser 5,6.
Meio de cultura n 7 - Usar o meio de cultura n 1,
esterilizado e res friado a 50 C. Preparar soluo aquosa
contendo 10 mg de neomicina por mL e esterilizar por
fltra o em membrana com porosidade de 0,22 m.
Adicionar, assepticamente, soluo estril de sulfato de
neomicina, para obter concentrao fnal com potncia de
100 g de neomicina por mL de meio.
Meio de cultura n

8 - Usar o meio de cultura n 2, porm,
o pH, aps esterilizao, dever ser ajustado para 5,8 - 6,0.
Meio de cultura n 9 - Dissolver 17,0 g de casena de
digesto pancre tica, 3,0 g de soja de digesto papanica,
5,0 g de cloreto de sdio, 2,5 g de fosfato de potssio
dibsico, 2,5 g de dextrose e 20,0 g de gar em gua
purifcada sufciente para perfazer 1000 mL. O pH, aps
esterilizao, dever ser 7,3.
Meio de cultura n

10 - Usar o meio de cultura n 9,
adicionando, porm, ao invs de 20,0 g, 12,0 g de gar
e 10,0 mL de polissorbato 80 (esse ltimo adicionado
aps aquecer o meio para dissolver o gar, diluindo
imediatamente, com gua para perfazer 1000 mL). O pH,
aps esterilizao, dever ser 7,3.
Meio de cultura n

11 - Usar o meio de cultura n
o
1, mas o
pH, aps esterilizao, dever ser ajustado para 8,0.
Meio de cultura n

12 - Preparar como o meio de cultura
n

1, adicionando, porm, 300 mg de sulfato de mangans
hidratado (MnSO
4
.H
2
O) para cada 1000 mL de meio.
Meio de cultura n

13 - Dissolver 10,0 g de peptona seca
e 20,0 g de dextrose em gua purifcada sufciente para
Meio de cultura a

14 - Dissolver 10,0 g de glicerol, l0,6
g de peptona seca, 10,6 g de extrato de carne e 3,0 g de
cloreto de sdio em gua purifcada sufciente para perfazer
Meio de cultura n 15 - Preparar como o meio de cultura
n 14, adicionando, porm, 17,0 g de gar para cada 1000
mL de meio.
Meio de cultura n

16 - Dissolver 15,0 g de casena de
digesto pancretica, 5,0 g de soja de digesto papanica, 5
g de cloreto de sdio e 15,0 g de gar em gua purifcada
sufciente para perfazer 1000 mL. O pH, aps esterilizao,
dever ser 7,3.
Meio de cultura n

17 - Dissolver 17,0 g de casena de
digesto pancretica, 3,0 g de peptona de soja, 2,5 g de
dextrose. 5,0 g de cloreto de sdio e 2,5 g de fosfato de
potssio dibsico em gua purifcada sufciente para
mas, aps aquecer a soluo para dissolver os ingredientes,
adicionar 20,0 mL de polissorbato 80. O pH, aps
esterilizao dever ser 8,0.
4,7 g de extrato de levedura, 2,4 g de extrato de carne, 15,0
g de cloreto de sdio, 10,0 g de dextrose e 23,5 g gar em
gua purifcada sufciente para perfazer 1000 mL. O pH,
aps esterilizao, dever ser 6,1.
Meio de cultura n 20 - Dissolver 40,0 g de dextrose, 10,0
g de peptona seca, 15,0 g de gar e 0,05 g de clorafenicol
(em potncia) em gua purifcada sufciente para perfazer
esterilizado e resfriado a 50 C. Adicionar, assepticamente,
2,0 mL de soluo estril de cicloeximida para cada 100
mL de gar fundido. Preparar soluo contendo 10,0 mg de
cicloeximida por mL, em gua purifcada, e esterilizar, por
fltrao em membrana com porosidade de 0,22 m.
5
5,0 g de farinha de soja de digesto papanica, 4,0 g de
cloreto de sdio, 0,2 g de sulfto de sdio, 0,7 g de L-cistina,
5,5 g de dextrose e 15,0 g de gar, em gua purifcada suf-
ciente para perfazer 1000 mL. O pH, aps esterili zao,
dever ser 7,0.
PREPARAO DO INCULO
Micro-organismos recomendados
Staphylococcus aureus (ATCC 6538p)
Micrococcus luteus (ATCC 7468)
Kocuria rhizophila (ATCC 9341)
Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228)
Saccharomyces cerevisiae (ATCC 9763)
Bordetella bronchiseptica (ATCC 4617)
Bacilius cereus var. mycoides (ATCC 11778)
Bacillus subtilis (ATCC 6633)
Klebsiella pneumoniae (ATCC 10031)
Escherichia coli (ATCC 10536)
Enterococcus hirae (ATCC 10541)
Microsporum gypseum (ATCC 14683)
Pseudomonas aeruginosa (ATCC 25619)
Mycobacterium smegmatis (ATCC 607)
Com a fnalidade de indicao, foram listados os micro-
organismos disponveis na ATCC. Os mesmos micro-
organismos podem, tambm, ser obtidos de outras fontes:
INCQS, CIP, NBRC, NCIMB, NCPF, NCTC, NCYC, IMI
e IP. A correspondncia entre os micro-organismos e os
endereos das entidades que os fornecem encontram-se
indicadas em Micro-organismos empregados em testes e
ensaios (5.5.3.5).
Procedimento 1 - Staphylococcus aureus, Micrococcus
luteus, Kocuria rhizophila, Staphylococcus epidermidis,
Bordetella bronchiseptica, Bacillus subtilis, Klebsiella
pneumoniae, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa.
Preparao da suspenso - Transferir o micro-organismo
de uma cultura estoque para tubos contendo 10 mL de meio
de cultura n 1 inclinado. Incubar o tubo a 32 - 35 C, por
24 horas. Aps incubao, lavar o crescimento do micro-
organismo com 50 mL de soluo fsiolgica estril.
Padronizao da suspenso - Diluir a suspenso preparada,
com soluo fsiolgica estril, de modo a obter a
transmitncia de 25% no comprimento de onda de 580
nm, empregando espectrofotmetro adequado e tubos de
ensaio com 13 mm de dimetro como cuba de absoro.
Determinar a quantidade de suspenso a ser adicionada a
cada 100 mL de gar ou caldo nutriente para produzir zonas
de inibio claras e defnidas ou relao satisfatria dose-
resposta no mtodo turbidimtrico. As suspenses dos
micro-organismos submetidos ao procedimento 1 podem
ser estocadas temperatura de 4 C, respectivamente,
pelos seguintes perodos: 1 semana, 2 semanas, 2 semanas,
2 semanas, 2 semanas, 6 meses, 1 semana, 2 semanas e 2
semanas.
Micrococcus luteus ATCC 14452. Efetuar como indicado
no Procedimento 1. Empregar, entretanto, no tubo com
meio inclinado e no frasco de Roux, meio de cultura n 7,
incubando o frasco por perodo de 48 horas. A suspenso
pode ser estocada por duas semanas, temperatura no
superior a 4 C.
Procedimento 2 - Bacillus subtillis.
Efetuar como indicado no Procedimento 1. Na preparao
da suspenso, porm, empregar meio de cultura n 12,
cujo perodo de incubao de 5 dias. Na padronizao
da suspenso, proceder a choque trmico e padronizar a
suspenso como segue: centrifugar e decantar o lquido
sobrenadante. Ressuspender o sedimento com 50 a 70 mL
de soluo fsiolgica estril e aquecer a suspenso por 30
minutos a 70 C. Executar testes em placas, para assegurar
a viabilidade dos esporos e determinar a quantidade
que dever ser adicionada a cada 100 mL de meio, para
obter zonas de inibio adequadas. A suspenso pode ser
estocada, por 6 meses, em temperatura no superior a 4 C.
Procedimento 3 - Bacillus cereus.
Efetuar como indicado no Procedimento 1. Entretanto,
incubar o tubo com o micro-organismo por uma semana.
Na padronizao da suspenso, proceder a choque trmico
e padronizar a suspenso como segue: aquecer a suspenso
por 30 minutos, a 80 C. Lavar trs vezes a suspenso de
esporos com 20 a 25 mL de gua estril. Ressuspender
os micro-organismos em 50 a 70 mL de gua estril e
promover novo choque trmico por 30 minutos a 70 C.
Executar testes em placas para se assegurar da viabilidade
dos esporos e determinar a quantidade dos que devero ser
adicionados a cada 100 mL de gar, para obter zonas de
inibio adequadas. A suspenso pode ser estocada, por 6
meses, temperatura no superior a 4 C.
Procedimento 4 - Microsporum gypseum.
Incubar o micro-organismo, por 6 a 8 semanas a 25 C, em
frascos de Erlenmeyer de 3 litros, contendo 200 mL de meio
de cultura n 6. Verifcar o crescimento por esporulao.
Quando a esporulao for 80% ou mais, recolher os condios
da camada micelial com esptula estril ou outro instrumento
adequado. Os condios estaro na parte superior da camada
futuante. Manter os condios em 50 mL de soluo
fsiolgica. Determinar, experimentalmente, a quantidade de
condios para o ensaio. A suspenso pode ser estocada, por
dois meses, temperatura no superior a 4 C.
Procedimento 5 - Enterococcus hirae.
Transferir o micro-organismo de uma cultura estoque para
meio n 33 e incubar, por 16 a 18 horas, a 37 C. Determinar,
experimentalmente, a quantidade de micro-organismos
5
para o ensaio. Manter essa cultura sob refrigerao por
prazo no superior a 24 horas.
Procedimento 6 - Saccharomyces cerevisiae. (ATCC 9763).
Manter o micro-organismo em tubos contendo 10 mL de
meio de cultura n 19 inclinado. Incubar os tubos a 32 - 35
C, durante 24 horas. Inocular 100 mL de caldo nutriente
meio de cultura n 13 e incubar, por 16 a 18 horas,
a 37 C. Padronizar a suspenso conforme descrito no
Procedimento 1. A suspenso pode ser estocada, por 4
semanas, temperatura no superior a 4 C.
Procedimento 7 - Saccharomyces cerevisiae. (ATCC 9763
e ATCC 2601).
Seguir o indicado no Procedimento 1. Incubar, porm,
o tubo inclinado com o meio de cultura n 19, a 30 C,
o ltimo por perodo de 48 horas. A suspenso pode ser
estocada, por 4 semanas, temperatura no superior a 4 C.
Procedimento 8 - Mycobacterium smegmatis.
Manter o micro-organismo em tubos com meio inclinado
contendo 10 mL do meio de cultura n 16 e efetuar repiques
semanalmente. Incubar o tubo a 37 C, por 48 horas.
Usando 3 mL de soluo fsiolgica estril, transferir as
culturas que cresceram no gar inclinado para frasco
erlenmeyer de 500 mL, contendo 100 mL de meio de
cultura n 14 e 50 g de prolas de vidro. Agitar a cultura
por rotao velocidade de 130 ciclos por minuto, num
raio de 3,5 cm e temperatura de 27 C, por perodo de
cinco dias. Determinar a quanti dade de suspenso a ser
adicionada a cada 100 mL de gar por meio de ensaio em
placas. A suspenso pode ser estocada, por duas semanas,
temperatura no superior a 4 C.
* os micro-organismos podem ser utilizados em condies
que garantam no mximo 5 passagens da cultura de origem.
DESSECAO DE SUBSTNCIAS ANTIBITICAS
Utilizar para dessecao dos padres, os procedimentos
indicados a seguir, e recomendados de acordo com as
informaes descritas nas Tabelas 2 em 5.5.3.3.1 e
5.5.3.3.2.
Mtodo 1
Transferir quantidade sufciente de padro para pesa-fltro
tarado provido de tampa esmerilhada. Pesar o frasco e
coloc-lo em estufa sob presso reduzida, inclinando a
tampa sobre a boca do frasco para assegurar que permanea
aberto durante a dessecao. Dessecar a 60 C, sob presso
de 0,67 kPa ou menos, durante trs horas. Concludo o
processo, introduzir ar seco na estufa, submetendo-o a
agente dessecante como cido sulfrico ou silica-gel.
Repor a tampa e colocar o pesa-fltro em dessecador
contendo agente dessecante como pentxido de fsforo ou
slica-gel. Deixar esfriar temperatura ambiente e pesar,
calculando a perda porcentual de massa do padro.
Mtodo 2
Proceder conforme o Mtodo 1. Empregar, porm,
pesa-fltro tarado provido de tampa com tubo capilar de
dimetro interno da ordem de 0,20 a 0,25 mm, e dessecar
sem remover a tampa.
Mtodo 3
Proceder conforme o Mtodo 1. Dessecar, porm a amostra
a 110 C, sob presso de 0,67 kPa ou menos, durante trs
horas.
Mtodo 4
Proceder conforme o Mtodo 1. Dessecar, porm a amostra a
40 C, sob presso de 0,67 kPa ou menos, durante duas horas.
Mtodo 5
Proceder conforme o Mtodo 1. Dessecar, porm a amostra
a 100 C, sob presso de 0,67 kPa ou menos, durante
quatro horas.
Mtodo 6
40 C, sob presso de 0,67 kPa ou menos, durante trs horas.
Mtodo 7
25 C, sob presso de 0,67 kPa ou menos, durante trs horas.
Mtodo 8
A substncia antibitica no submetida dessecao.
PROCEDIMENTO
Todo material deve ser adequado para o uso pretendido
e deve ser minuciosamente limpo, aps cada utilizao,
para remover qualquer vestgio de antibitico. O material
deve permanecer coberto quando no estiver em uso. Toda
vidraria utilizada em contato com o micro-organismo deve
ser esterilizada em estufa, em temperatura entre 200
o
C e
220
o
C por 2 horas. Na diluio da soluo padro e amostra
empregar bales volumtricos, pipetas ou equipamentos
cuidadosamente calibrados.
5.5.3.3.1 Ensaio microbiolgico por difuso em gar
PROCEDIMENTO
Para cada antibitico relacionado na Tabela 1, verifcar
o meio de cultura (conforme a relao dos meios de
cultura), a quantidade de meio a ser usada na camada base
e na camada inoculada e o micro-organismo de ensaio.
O volume de inculo a ser adicionado a cada 100 mL de
meio de cultura deve ser determinado experimentalmente.
5
Entretanto, como referncia inicial, sugere-se quantidade
de inculo a ser adicionada por 100 mL de meio.
Preparar a camada base por meio da adio de quantidade
apropriada de gar fundido nas placas de Petri as quais
devem ser, especialmente selecionadas, ter fundo plano,
possuir dimenses de 20 x 100 mm e tampa de material
apropriado. Distribuir o gar uniformemente nas placas,
que devem ser colocadas em superfcie nivelada para que
a camada de meio tenha profundidade uniforme. Colocar a
tampa de cada placa ao lado dessa; se for utilizada tampa
no porosa, deix-la levemente entreaberta para evitar o
acmulo de umidade condensada a partir da camada de gar
quente. Aps o endurecimento do gar, tampar as placas.
Para preparar a camada inoculada - superfcie, adicionar
o volume de inculo determinado para a quantidade
apropriada de meio de cultura que tenha sido fundido e
resfriado entre 46
o
C e 48
o
C. Agitar o frasco, por rotao,
para obter suspenso homognea e adicionar a quantidade
indicada do meio inoculado em cada placa de Petri, contendo
a camada base no inoculada. Espalhar uniformemente a
camada, tampar as placas e permitir o seu endurecimento
sobre superfcie plana. Aps o endurecimento do meio,
colocar seis cilindros de ao inoxidvel, com dimetro
externo de 8 mm 0,1 mm, dimetro interno de 6 mm 0,1
mm e comprimento de 10 mm 0,1 mm, sobre a superfcie
do gar inoculado, de maneira que formem entre si ngulo
de 60 e com raio de 2,8 cm. Tambm, podem ser utilizados
cilindros confeccionados em vidro, porcelana ou alumnio
e esterilizados nas condies j descritas. Em lugar dos
cilindros, podem ser perfurados, no meio, com furador
estril, poos de 5 a 8 mm de dimetro. Podem, ainda,
ser usados discos de papel, confeccionados com papel de
qualidade apropriada ou moldes de ao inoxidvel. Quando
so usados discos de papel, estes devem ser estreis.
Preparao da soluo padro de trabalho, da amostra e
da curva padro
A preparao das amostras dos antibiticos est indicada
na respectiva monografa.
As concentraes do antibitico utilizadas no ensaio
devem estar em progresso geomtrica; por exemplo, pela
preparao de sries de diluio na razo 2:1 ou outra
determinada experimentalmente desde que seja comprovada
a relao linear entre o logaritmo da concentrao do
antibitico e o dimetro do halo de inibio.
Na Tabela 2 est indicada para cada antibitico, a
preparao da soluo padro de trabalho e da curva
padro, compreendendo:
a) condies de dessecao, conforme descrito no item
Dessecao de substncias antibiticas (5.5.3.3);
b) solvente inicial para dissoluo do antibitico, caso
seja necessrio, e at qual concentrao usado;
c) soluo para diluio at a concentrao de trabalho,
conforme descrito em Solues;
d) concentrao da soluo de trabalho, expressa em peso,
ou Unidades Internacionais por mL de soluo;
e) prazo de validade da soluo padro de trabalho sob
refrigerao;
f) soluo empregada para diluio da soluo de
trabalho, por ocasio da preparao da curva padro,
conforme Solues;
g) faixas de concentrao sugeridas, em peso ou Unidades
Internacionais por mL, dentro das quais podem ser
encontradas as concentraes adequadas para a curva
padro.
Procedimento para delineamento retas paralelas (3 x 3 ou
2 x 2)
Empregar, no ensaio, pelo menos seis placas de Petri.
Dispor as solues do padro e amostra, em cada placa,
com 3 concentraes para ensaio 3 x 3 (baixa, mdia
e alta) ou 2 concentraes para ensaio 2 x 2 (baixa e
alta). As solues devem ser distribudas de tal forma
que as solues da preparao padro e amostra estejam
alternadas na camada inoculada (concentrao alta e baixa)
para evitar a sobreposio dos halos de inibio.
Procedimento para delineamento 5 x 1
Para a curva padro, utilizar um total de 12 placas, 3 para
cada uma das solues do padro (P
1
, P
2
, P
4
, P
5
), exceto para
a concentrao mdia da curva (P
3
) que includa em todas
as placas. Em cada conjunto de 3 placas, utilizar 3 cilindros
para a concentrao mdia (P
3
) e alternar 3 cilindros para
a concentrao baixa (P
1
) e assim sucessivamente com as
demais solues do padro. Dessa maneira, obtm-se 36 halos
de inibio para a concentrao (P
3
) e 9 halos de inibio para
cada uma das outras quatro concentraes da curva.
Para cada amostra, empregar 3 placas, onde sero
colocados 3 cilindros para a concentrao mdia do padro
(P
3
) e 3 com a soluo da amostra preparada na mesma
concentrao do padro (A
3
).
Aplicar 0,2 mL das solues nos cilindros ou nos moldes
de ao inoxidvel por meio de pipeta ou outro instrumento
calibrado. Quando for usado o sistema de poos, o volume
de lquido aplicado deve ser sufciente para ench-los
completamente.
Aps realizar os procedimentos adequados para o
delineamento escolhido, incubar as placas na temperatura
indicada, cuja variao no dever exceder 0,5 C,
durante um perodo de 16 a 18 horas. Em seguida, medir
o dimetro dos halos de inibio empregando dispositivo
adequado para medida, como paqumetro, ou projetor
ptico que tenha preciso de 0,1 mm ou menos.
Para alguns micro-organismos, o procedimento pode
ser melhorado se as placas preparadas permanecerem
temperatura ambiente por perodo de 30 minutos a 2 horas
antes da incubao, perodo em que ocorre a difuso do
antibitico para o meio.
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5.5.3.3.2 Ensaio microbiolgico por
turbidimetria
PROCEDIMENTO
Preparao da soluo de trabalho, da amostra e da curva padro
A preparao das amostras dos antibiticos est indicada
na respectiva monografa.
Na Tabela 2, apresentada a seguir, h indicao, para cada
antibitico, da preparao da soluo padro de trabalho e
da curva padro, compreendendo:
a) condies de dessecao, conforme descrito no item
Dessecao de substncias antibiticas (5.5.3.3);
b) solvente inicial para dissoluo do antibitico, caso seja
necessrio, e at qual concen trao usado;
c) soluo para diluio do antibitico at a concentrao
de trabalho, conforme Solues;
d) concentrao de soluo de trabalho, expressa em peso
ou Unidades Internacionais por mL de soluo;
e) prazo de validade da soluo padro de trabalho sob
refrigerao;
f) soluo empregada para diluio da soluo de trabalho, na
ocasio da preparao da curva padro, conforme Solues;
g) faixa de concentrao, em peso ou Unidades
Internacionais por mL, dentro da qual as concen traes
adequadas para a curva padro podem ser encontradas.
Empregar para cada antibitico o micro-organismo e o
caldo nutritivo relacionados na Tabela 1. Determinar
experimentalmente o volume de inculo a ser adicionado
a 100 mL de caldo a partir da quantidade sugerida como
referncia inicial. O meio inoculado deve ser preparado e
utilizado imediatamente.
Procedimento para delineamento retas paralelas (3 x 3 ou 2 x 2)
Distribuir, em tubos idnticos, volume igual de cada uma
das solues do padro e da amostra. Adicionar para
cada tubo volume igual de caldo nutriente inoculado, por
exemplo, 1 mL de soluo com antibitico e 9 mL do
meio (0,1 mL de soluo para gramicidina e tirotricina).
Pelo menos dezoito tubos so usados para ensaio por retas
paralelas 3 x 3 e doze tubos para ensaio por retas paralelas 2
x 2. O nmero de replicas por concentrao em cada ensaio
deve ser sufciente para assegurar a preciso estatstica
especifcada na monografa, porm deve-se realizar, no
mnimo, trs tubos para cada concentrao do padro
e da amostra. Pode ser necessrio realizar o ensaio com
nmero maior de doses do padro e da amostra ou repeti-lo
e combinar os resultados para obter a preciso requerida.
As doses usadas devem estar em progresso geomtrica.
Procedimento para delineamento curva 5 x 1
Para o delineamento 5 x 1, prepare diluies que representem
5 concentraes do padro (P
1
, P
2
, P
3
, P
4
e P
5
) e 1 concentrao
da amostra (A
3
). A soluo da amostra deve corresponder
mesma diluio do padro que corresponde concentrao
mdia da curva (P
3
). Empregar, pelo menos trs tubos para
cada concentrao do padro e da amostra. Dessa forma, pelo
menos dezoito tubos so necessrios no ensaio.
Aps realizar os procedimentos adequados para o
delineamento escolhido, inocular o meio de cultura
recomendado com quantidade conhecida de suspenso
do micro-organismo sensvel ao antibitico, de modo
que, aps incubao de aproximadamente quatro horas,
a turbidez bacteriana no meio seja de fcil medida e
mantenha correlao entre a dose e a resposta da substncia
em anlise.
Na Tabela 1 esto descritos os antibiticos a serem
analisados pelo mtodo turbidimtrico com descrio do
micro-organismo, meio de cultura, volume de inculo
padronizado sugerido como referncia inicial e temperatura
de incubao para cada caso.
Incubar em banho-maria, por 3 a 4 horas, tomando a
precauo de assegurar temperatura adequada e uniforme
para todos os tubos. O tempo adequado deve ser verifcado
pela observao do crescimento no tubo contendo a
concentrao mdia (P
3
) utilizada no ensaio. Aps o
perodo de incubao, interromper a mu1tiplicao dos
micro-organismos pela adio de 0,5 mL de soluo de
formaldedo a 12 por cento, em cada tubo.
Determinar a absorvncia para cada tubo em
espectrofotmetro, no comprimento de onda de 530
nm. Padronizar o aparelho em absorvncia por meio do
branco contendo a mesma quantidade de caldo nutriente e
formaldedo, a 12%.
Em ensaios de rotina, quando a linearidade do sistema
foi comprovada por nmero adequado de experimentos
usando o ensaio de trs pontos (3 x 3), pode ser empregado
ensaio de dois pontos (2 x 2). Ser aceito, igualmente,
o delineamento 5 x 1, adotado ofcialmente por outras
farmacopeias de uso internacional corrente. Todavia, em
caso de controvrsia ou litgio, deve ser aplicado o ensaio
de trs pontos.
Clculo da potncia
A partir dos resultados, calcular a potncia da amostra e seus
limites de confana, por meio de mtodo estatstico padro
descrito em Procedimentos estatsticos aplicveis aos ensaios
biolgicos - ensaios indiretos quantitativos (8.5).
Intervalo de confana (IC)
A preciso de um ensaio verifcada pelo intervalo de
confana o qual garante que a verdadeira potncia est
dentro dos limites especifcados.
Na ausncia do IC na monografa do produto,
recomendvel limites de confana superior e inferior de
5% ou menos, em relao potncia calculada, sendo
aceitos valores limites de at 10%.
5
Tabela 1 Ensaio microbiolgico por turbidimetria.
Antibitico Micro-organismo
Caldo
nutriente
Volume do
inculo
mL/100 mL
Temperatura de
incubao (C)
Amicacina
Canamicina
Candicidina
Capreomicina
Ciclosserina
Cloranfenicol
Clortetraciclina
Demeclociclina
Diidroestreptomicina
Doxicilina
Espectinomicina
Estreptomicina
Gramicidina
Lincomicina
Minociclina
Oxitetraciclina
Rolitetraciclina
Tetraciclina
Tirotricina
Tobramicina
3
3
13
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
0,1
0,2
0,2
0,05
0,4
0,7
0,1
0,1
0,1
0,1
0,1
0,1
1,0
0,1
0,2
0,1
0,1
0,1
1,0
0,15
37
37
28
37
37
37
36
37
37
37
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5.5.3.4 TESTE DE EFICCIA
ANTIMICROBIANA
OBJETIVO
Assegurar, a efccia de conservantes antimicrobianos
adicionados aos produtos farmacuticos.
Conservantes antimicrobianos so substncias adicionadas
em formas farmacuticas no estreis com a fnalidade
de proteg-las de quaisquer crescimentos microbianos.
Para as formas farmacuticas estreis, acondicionadas
em embalagens de doses mltiplas, os conservantes
antimicrobianos so adicionados para inibir o crescimento
de micro-organismos contaminantes durante o uso repetido
das doses individuais.
A quantidade de conservante utilizada em uma formulao
dever ser a mnima necessria para a proteo do produto
sem prejudicar o paciente ou consumidor.
A efccia antimicrobiana, seja ela inerente ao produto ou
devida adio de conservantes , precisa ser demonstrada para
produtos tpicos mltipla-dose; produtos orais; oftlmicos;
otolgicos; nasais; fuidos de dilise; irrigao, etc.
Tabela 1 - Condies para reconstituio das cepas.
Micro-organismo Meio de cultura
Temperatura
de incubao
Tempo de
incubao
do inculo
Tempo de
incubao
para a
recuperao
microbiana
Escherichia coli ATCC 8739 Soybean-Casein Digest Broth /
Soybean-Casein Digest Agar
32,5 C 2,5C 18 24
horas
3 5 dias
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 Soybean-Casein Digest Broth /
32,5 C 2,5C 18 24
horas
3 5 dias
Staphylococcus aureus ATCC 6538 Soybean-Casein Digest Broth /
32,5 C 2,5C 18 24
horas
3 5 dias
Candida albicans ATCC 10231 Sabouraud Dextrose Broth /
Sabouraud Dextrose Agar
22,5 C 2,5C 44 52
horas
3 5 dias
Aspergillus niger ATCC 16404 Sabouraud Dextrose Broth /
Sabouraud Dextrose Agar
22,5 C 2,5C 6 10 dias 3 7 dias
Se a recuperao do micro-organismo se der em meio de
cultura lquido, aps incubao, centrifugar e descartar o
sobrenadante. Suspender o sedimento com uma diluio
1/20 do meio de cultura de manuteno estril e acrescentar
um volume igual de soluo de glicerol estril 20% v/v em
gua.
Se a recuperao do micro-organismo se der em meio de
cultura slido, transferir o crescimento da superfcie para
o meio de cultura de manuteno lquido estril, acrescido
de 10% de glicerol estril.
O teste e os critrios estabelecidos se aplicam ao produto
na forma como encontrado no mercado.
MICRO-ORGANISMOS UTILIZADOS
- Candida albicans ATCC 10231
- Aspergillus niger ATCC 16404
- Escherichia coli ATCC 8739
- Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
- Staphylococcus aureus ATCC 6538
Os micro-organismos utilizados no teste no devem ter
mais que 5 passagens contadas a partir da cultura ATCC
original. Uma passagem defnida como a transferncia de
uma cultura estabelecida para um meio de cultura estril.
No caso de culturas mantidas por tcnicas de congelamento,
cada ciclo de congelamento; descongelamento e reativao
considerado uma passagem.
As culturas lioflizadas recebidas do ATCC devem ser
reconstitudas conforme as instrues fornecidas com o
material.
Recuperar o material em meio de cultura lquido ou slido.
As condies para a preparao da cultura esto registradas
na Tabela 1.
Em ambos os casos, dispensar pequenas alquotas da
suspenso em tubos criognicos estreis, apropriados para
congelamento de micro-organismos.
Estocar os tubos criognicos em nitrognio lquido ou
ultrafreezer (no mais que -50 C).
Essa cultura estoque pode ser utilizada para inocular uma
srie de cultura de trabalho.
5
ou mais embalagens originais para um frasco com tampa,
previamente esterilizado e de tamanho adequado para
conter a quantidade necessria de amostra para a realizao
de todas as etapas do teste.
Inocular cada embalagem original ou frasco com tampa
estril, com cada um dos micro-organismos requeridos.
A concentrao do inculo utilizado deve ser sufciente
para se obter uma concentrao fnal no produto entre 1 x
10
5
e 1 x 10
6
UFCs / g ou mL aplicvel s categorias 1, 2
e 3 (vide Tabela 2 coluna Tipo de Produto).
Para a categoria 4, a concentrao do inculo dever ser
sufciente para se obter uma concentrao fnal no produto
entre 1 x 10
3
e 1 x 10
4
UFCs / g ou mL.
O volume de inculo a ser introduzido deve estar entre
0,5% e 1,0% em relao ao volume (amostra lquida) ou
peso (amostra slida ou semisslida) total do produto.
Incubar as amostras inoculadas em estufa com temperatura
entre 22,5 C 2,5C.
Amostrar cada embalagem ou frasco com amostra
inoculada em intervalos de 7, 14 e 28 dias.
Determinar pelo mtodo de plaqueamento, o nmero
de Unidades Formadoras de Colnias (UFCs) de cada
amostra, no tempo inicial e em cada intervalo de tempo
especifcado.
Um agente neutralizante especfco para o(s) preservativo(s)
presentes na formulao do produto, determinado no
estudo de validao, deve(m) ser incorporado(s) nas placas
de contagem ou na diluio da amostra preparada para o
plaqueamento.
Calcular a concentrao de cada micro-organismo (UFC/
mL) presente na amostra, comparar com a contagem no
tempo inicial e expressar a mudana em termos de redues
logartmicas.
CATEGORIA DE PRODUTO E CRITRIOS PARA A
EFICCIA ANTIMICROBIANA
Para o propsito com o teste, os produtos foram separados
em 4 categorias conforme a Tabela 2.
Os requisitos para a efccia antimicrobiana do conservante
so cumpridos se atenderem aos critrios estabelecidos
para cada categoria conforme Tabela 2.
MEIOS DE CULTURA UTILIZADOS
Todos os meios de cultura utilizados no teste devem ser
testados quanto capacidade de crescimento
PREPARAO DO INCULO
A partir da cultura estoque, inocular a superfcie do meio
de cultura slido especifcado na Tabela 1.
Para recolher o crescimento de bactrias e leveduras,
utilizar soluo salina estril. Coletar a suspenso obtida
em um tubo ou frasco estril apropriado e acrescentar
quantidade sufciente de soluo salina estril para obter
uma concentrao de 1 x 10
8
UFC/mL.
Para recolher o crescimento de A. niger, utilizar soluo
salina estril contendo 0,05% de polissorbato 80. Coletar a
suspenso obtida em um tubo ou frasco estril apropriado
e acrescentar quantidade sufciente de soluo salina estril
para obter uma concentrao de 1 x 10
8
UFC/mL.
Alternativamente, a cultura estoque pode ser inoculada
em meio lquido (Tabela 1), incubadas e posteriormente
centrifugadas. Descartar o sobrenadante e suspender o
sedimento com quantidade sufciente de soluo salina
estril para obter uma concentrao de 1 x 10
8
UFC /mL.
Refrigerar as suspenses se no utiliz-las em um perodo
de 2 horas.
Determinar o nmero de UFCs /mL de cada suspenso por
turbidimetria ou contagem em placa, verifcando as condies
de tempo e temperatura de incubao e o tempo de incubao
para a recuperao microbiana descritas na Tabela 1, com
o objetivo de confrmar a contagem em UFC inicial. Esses
valores serviro para calibrar o tamanho do inculo a ser
utilizado nas contaminaes do produto em teste.
A suspenso de bactrias e leveduras dever ser utilizada
em 24 horas. A suspenso de bolores pode ser utilizada em
at 7 dias se mantida sob refrigerao.
PROCEDIMENTO
Quando o tipo de embalagem permitir a introduo da
suspenso de micro-organismos e quando seu contedo
for sufciente para a realizao de todas as etapas,
conduzir o teste em 5 embalagens originais do produto a
ser testado. Caso contrrio, transferir o contedo de uma
5
Tabela 2 Categorias de produtos e critrios para a efccia antimicrobiana.
Tipo de produto Micro-organismo 7 dia 14 dia 28 dia
Categoria 1 - Injetveis, outros
parenterais incluindo emulses,
produtos otolgicos, nasais
estreis, oftlmicos constitudos
de base ou veculo aquoso
Bactrias Deve haver
reduo de 1 log
do n de UFCs
inicialmente
inoculados
Deve haver
reduo de 3 logs
do n de UFCs
inicialmente
inoculados
A contagem no
deve aumentar em
relao ao 14 dia
Bolores e Leveduras No deve haver
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculados
No deve haver
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculado
No deve haver
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculado
Categoria 2 - Produtos de uso
tpico. constitudos de base,
ou veculo aquoso, produtos
nasais no estreis e emulses,
incluindo aqueles aplicados em
membranas mucosas
Bactrias ---- Deve haver
reduo de 2 logs
do n de UFCs
inicialmente
inoculados
No deve haver
aumento da
contagem em
relao ao 14 dia
Bolores e Leveduras ---- No deve haver
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculados
No deve haver
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculados
Categoria 3 - Produtos orais
constitudos de base ou veculo
aquoso, exceto anticidos
Bactrias ---- Deve haver
reduo de 1 log
do n de UFCs
inicialmente
inoculados
A contagem no
deve aumentar em
relao ao 14 dia.
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculados
No deve haver
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculados
Categoria 4 - Anticidos
constitudo de base aquosa
Bactrias ---- No deve haver
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculados
No deve haver
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculados
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculados
No deve haver
aumento do
n de UFCs
inicialmente
inoculados
Nota. O no aumento do n de UFCs inoculados defnido como no mais que 0,5 log
10
de unidades maiores que o
valor previamente obtido.
5
5.5.3.5 MICRO-ORGANISMOS
EMPREGADOS EM TESTES E ENSAIOS
Os micro-organismos relacionados na Tabela 1
so indicados para ensaios e testes preconizados na
farmacopeia.
Principais fornecedores de culturas de micro-organismos:
ATCC American Type Culture Collection
http://www.atcc.org
CIP Collection de lInstitut Pasteur
http://www.pasteur.fr/ip/index.jsp
IMI United Kingdom National Culture Collection (UKNCC)
http://www.cabi.org
Email: cultures@cabi.org
INCQS Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade
Departamento de Microbiologia - Laboratrio
de Materiais de Referncia
Av. Brasil, 4365, Manguinhos, Rio de Janeiro,
RJ, Brasil, CEP: 21.040-900
http://www.incqs.focruz.br
Email: coleo@incqs.focruz.br
NCIMB National Collection of Industrial Bacteria
http://www.ncimb.com
Email:enquiries@ncimb.com
NBRC NITE Biological Resource Center
http://www.nbrc.nite.go.jp
Email: collection@nbrc.nite.go.jp
NCPF National Collection of Pathogenic Fungi
http://www.hpacultures.or.uk
Email: hpacultures@hpa.org.uk
NCTC National Collection of Type Cultures
http://www.hpacultures.or.uk
Email: hpacultures@hpa.org.uk
NCYC National Collection of Yeast Cultures
http://www.ncyc.co.uk
Email: ncyc@ncyc.co.uk
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5
5.6 MTODOS
IMUNOQUMICOS
Os mtodos imunoqumicos baseiam-se numa ligao
seletiva, reversvel e no covalente entre antgenos e
anticorpos. Esses mtodos so utilizados para detectar ou
dosar antgenos e anticorpos. A deteco ou doseamento
do complexo antgeno-anticorpo pode ser realizada por
vrias tcnicas. Os requisitos desse mtodo se aplicam
aos mtodos imunoqumicos utilizados, no caso de
reagentes marcados ou no. Os resultados dos mtodos
imunoqumicos dependem das condies da experincia;
da natureza e da qualidade dos reagentes empregados.
essencial aferir os componentes de um ensaio imunolgico
e utilizar Preparaes Internacionais de Referncia para
Imunodoseamento sempre que disponveis. Os reagentes
necessrios a muitos dos mtodos imunoqumicos
esto disponveis no mercado sob a forma de conjuntos
que incluem reagentes (especialmente o antgeno ou o
anticorpo) e os materiais destinados avaliao in vitro
de uma determinada substncia; bem como as instrues
necessrias para a sua correta utilizao. Os conjuntos
devem ser utilizados de acordo com as instrues do
fabricante, sendo importante assegurar que eles so
adequados anlise da amostra, especialmente, no que
diz respeito seletividade e sensibilidade. Os requisitos
relativos aos conjuntos para imunodoseamento so
fornecidos pela Organizao Mundial de Sade (Srie de
Reports Techniques 658,1981).
MTODOS EM QUE SO UTLIZADOS ANTGENOS,
OU ANTICORPOS MARCADOS
As tcnicas que utilizam substncias marcadas devem
empregar marcadores apropriados, tais como enzimas
e radioistopos. Quando o marcador um radioistopo
chamamos tcnica de ensaio radioimunolgico. Todas
as tcnicas realizadas com substncias radioativas devem
ser feitas em conformidade com a legislao nacional e
internacional para proteo contra o risco de radiaes.
MTODOS EM QUE SO UTILIZADOS ANTGENOS,
OU ANTICORPOS NO MARCADOS
Mtodos de Imunoprecipitao. Os mtodos de
imunoprecipitao incluem as reaes de foculao e
de precipitao. Quando uma soluo de um antgeno
misturada aos anticorpos correspondentes, em condies
adequadas, os reagentes formam agregados foculantes ou
precipitantes. A relao entre as quantidades dos reagentes
correspondentes ao mais curto tempo de foculao, ou
precipitao mais acentuada chama-se relao tima.
Essa geralmente obtida em presena de quantidades
equivalentes de antgeno e anticorpo. A imunoprecipitao
pode ser avaliada, visualmente, ou pela medio da
disperso da luz.
Mtodos Imunoqumicos Turbidimtricos. Pode obter-se
um aumento da sensibilidade do mtodo mediante o uso
de partculas revestidas de anticorpos, ou de antgenos
(por exemplo, ltex). Nos mtodos de foculao utilizam-
se, geralmente, diluies sucessivas de um dos reagentes
enquanto que no mtodo de imunodifuso (ID), a diluio
obtida por difuso num gel. So obtidos gradientes
de concentrao de um, ou dois reagentes de modo a
criar no gel zonas nas quais as propores de reagentes
favoream a precipitao. Enquanto que os mtodos
de foculao so realizados em tubos de ensaio, os
mtodos de imunodifuso podem ser realizados usando-
se diferentes suportes, como: provetas, placas, lminas,
tinas, ou cmaras. Chama-se imunoprecipitao simples
quando o antgeno reage apenas com o seu anticorpo
correspondente; diz-se complexa quando se utilizam
vrios reagentes sorologicamente aparentados; e mltiplos,
quando se utilizam vrios reagentes sorologicamente no
aparentados. No mtodo de difuso simples estabelecido
um gradiente de concentrao somente para um dos
reagentes difundidos a partir de uma fonte exterior para
dentro do gel que contm o reagente correspondente a uma
concentrao relativamente baixa.
Imuno Difuso Radial Simples (IDRS). uma tcnica de
imunodifuso simples quantitativa. Quando se estabelece
o equilbrio entre os reagentes externo e interno, a rea da
zona circular de precipitao, originada a partir do reagente
externo, diretamente proporcional concentrao
do antgeno aplicado e inversamente proporcional
concentrao de anticorpos no gel.
Mtodos de Difuso Dupla. Os gradientes de concentrao
so estabelecidos para dois reagentes. Tanto o antgeno
como o anticorpo difunde a partir de locais separados num
gel inicialmente neutro sob o ponto de vista imunolgico.
Os mtodos de imunodifuso dupla so utilizados para
comparar, qualitativamente, vrios antgenos em relao
a um anticorpo apropriado ou vice-versa. A comparao
baseada na presena ou ausncia de interao entre os
padres de precipitao. possvel distinguir reaes de
identidade, de no identidade, ou de identidade parcial
entre antgenos e anticorpos.
Mtodos de Imunoeletroforese. A Imunoeletroforese (IE)
uma tcnica qualitativa de dois mtodos associados:
eletroforese em gel, seguida de imunodifuso. A
Imunoeletroforese cruzada uma modifcao da
Imunoeletroforese (IE), adaptada anlise qualitativa
e quantitativa. Num primeiro tempo realizada uma
eletroforese clssica. Uma faixa do gel que contm
as fraes a analisar, separadas pela eletroforese,
posteriormente recortada e transferida outra placa. Essa
nova placa ento sujeita a uma segunda eletroforese
numa direo perpendicular faixa anterior, mediante o
uso de um gel que contm um teor relativamente baixo em
anticorpos correspondentes ao antgeno. Para uma dada
concentrao de anticorpos e espessura do gel, a relao
entre a rea de cada um dos picos de precipitao e a
quantidade do antgeno correspondente linear.
Mtodo Eletroimunolgico ou Emunoeletroforese
Fusiforme. O Ensaio Eletroimunolgico muitas vezes
referido como Emunoeletroforese Fusiforme um mtodo
rpido para se dosar os antgenos cuja carga difere do
anticorpo e vice-versa. A eletroforese do antgeno a
5
ser dosado realizada num gel que deve conter uma
concentrao. relativamente, inferior a do anticorpo
correspondente. A substncia a ser analisada e as diluies
do antgeno usado para a calibrao devem ser colocadas
nas diferentes cavidades do gel. Durante a eletroforese
formam-se zonas de precipitao fusiformes que migram
a partir das cavidades. Quando o antgeno j no est em
excesso, a linha de precipitao torna-se estacionria.
Para uma dada concentrao de anticorpos, a relao
entre a distncia percorrida pela linha de precipitao e a
quantidade de antgeno aplicada linear.
Contra-imunoeletroforese. um mtodo quantitativo rpido
que possibilita estabelecer gradientes de concentrao
de antgenos e anticorpos externos, num campo eltrico
dependente das suas diferentes cargas. As diluies do
padro e da amostra devem ser organizadas em uma fla de
cavidades no gel. Uma quantidade conhecida de reagente
correspondente colocada numa fla oposta de cavidades.
O ttulo da substncia a ser dosada pode ser considerado
como a maior diluio em que se observa uma linha de
precipitao. Existem variantes da imunoeletroforese
cruzada e do imunoeletrodoseamento. Outras tcnicas
associam a separao do antgeno pelo tamanho molecular
e propriedades sorolgicas. A visualizao e caracterizao
das linhas de imunoprecipitao podem ser realizadas por
coloraes seletivas, ou no seletivas, por fuorescncia,
por marcadores enzimticos, marcadores isotpicos, ou
por outras tcnicas apropriadas. As coloraes seletivas
so, habitualmente, utilizadas para a caracterizao de
substncias no proticas nos precipitados.
Nos gis translcidos, tais como gar ou agarose, a linha de
precipitao torna-se claramente visvel no gel, desde que
a concentrao de cada um dos reagentes seja apropriada.
VALIDAO DO MTODO
Critrios de validao.
Um mtodo imunoqumico quantitativo s ser vlido se:
a) o antgeno ou o anticorpo no discriminar,
signifcativamente, do padro a substncia em anlise. No
caso de um reagente marcado, o reagente correspondente
no deve distinguir, de maneira signifcativa, a substncia
marcada da no marcada;
b) o mtodo no seja infuenciado pela matriz do ensaio,
isso , todos os componentes da amostra em anlise, ou
seus excipientes, que possam variar de uma amostra a
outra. Esses podem incluir altas concentraes de outras
protenas, sais, conservantes em concentraes elevadas ou
exercer uma atividade de contaminao proteoltica;
c) o limite de quantifcao esteja abaixo dos critrios de
aceitabilidade indicados na monografa individual;
d) a exatido do doseamento seja tal que a variao dos
resultados corresponda s exigncias estabelecidas na
monografa individual;
e) no ocorrerem erros sistemticos ligados ordem em
que o ensaio realizado.
Mtodos de validao
Para que esses critrios sejam verifcados, a validao
inclui os seguintes elementos:
a) o ensaio deve ser efetuado pelo menos em triplicata;
b) o ensaio deve incluir pelo menos trs diluies diferentes
do padro e trs diluies diferentes da amostra com
suposta atividade semelhante da preparao padro;
c) a distribuio das amostras deve ser feita ao acaso;
d) se a amostra est presente no soro, ou se est misturada
com outros constituintes, o padro deve ser preparado do
mesmo modo;
e) o ensaio deve incluir uma medida de ligao no
especfca do reagente marcado;
f) para ensaios radioimunolgicos com deslocamento:
a
1
) deve ser determinada a ligao mxima (deslocamento
zero);
b
1
) as diluies devem cobrir a gama completa de respostas
para os valores mais prximos da ligao no especfca
ligao mxima, de preferncia tanto para a amostra como
para o padro.
CLCULO ESTATSTICO
Para anlise dos resultados, as curvas de resposta da amostra
e do padro podem ser analisadas pelos procedimentos
estatsticos aplicveis aos ensaios biolgicos (8). O no
paralelismo signifcativo indica que antgeno ou anticorpo
distingue a amostra do padro e implica a invalidao do
resultado. Nos imunodoseamentos com deslocamento,
os valores de ligao no especfca e do deslocamento
mximo a uma alta concentrao da amostra ou do padro
no devem ser signifcativamente diferentes. As diferenas
podero refetir efeitos devido matriz, quer seja por
inibio da ligao ou degradao do marcador.
5.7 MTODOS FSICOS
APLICADOS A MATERIAIS
CIRRGICOS E
HOSPITALARES
5.7.1 RESISTNCIA TRAO
A determinao da resistncia trao das suturas
cirrgicas deve ser realizada em ambiente com umidade
e temperatura constantes. A umidade relativa deve ser de
60 - 80 por cento e a temperatura 20 - 25 C.
EQUIPAMENTO
Na determinao da resistncia trao das suturas
cirrgicas o equipamento deve possuir motor eltrico que
aplique sutura em anlise taxa de carga constante por
unidade de tempo.
5
EQUIPAMENTO DE PLANO INCLINADO
Especifcaes
Os prendedores devem ser do tipo de rolo com superfcies
planas para a fxao das suturas. O dimetro do rolo deve
ser de 1,8 cm a 1,9 cm e as superfcies planas devem ter,
no mnimo, 2,5 cm de comprimento. A distncia entre
os prendedores deve ser de 1,25 cm. O atrito do carro da
carga deve permitir que a pena incritora deslize at 2,5%
da capacidade de registro quando no houver amostra.
A velocidade de inclinao do plano deve ser regulada de
modo a serem necessrios 20 segundos a partir do incio do
teste para que a inclinao mxima de 30 seja atingida.
PROCEDIMENTO
Determinar a resistncia trao das suturas cirrgicas
com os mesmos cuidados preliminares exigidos para o
teste de determinao do dimetro. Ajustar o peso do carro
para que, no momento em que ocorre a ruptura, a posio
da pena inscritora esteja entre 20 e 80% da capacidade de
registro.
Trao direta
Colocar a sutura no equipamento prendendo uma das
extremidades e passando a extremidade livre pelo outro
prendedor. Aplicar nessa ltima uma tenso equivalente a
1/4 da resistncia mnima exigida para a sutura em teste
e apertar o prendedor. Ajustar a pena inscritora no ponto
zero do grfco e ligar o equipamento; anotar a leitura e
avaliar a resistncia. Desprezar a determinao toda vez
que a sutura se romper em ponto prximo dos prendedores.
Trao sobre-n
Determinar a resistncia trao sobre-n cirrgico
executando na sutura em teste um n de cirurgio (Figura
1) sobre um segmento de 5 cm de comprimento de um tubo
de borracha fexvel de 6,5 mm de dimetro interno e 8,1
mm de dimetro externo. Colocar a sutura no equipamento
de modo que o n fque equidistante dos prendedores.
Ajustar a pena inscritora no ponto zero do grfco e ligar
o equipamento; anotar a leitura e avaliar a resistncia.
Desprezar a determinao toda vez que a sutura se romper
em ponto prximo dos prendedores.
Execuo do n cirrgico
Para fazer um n cirrgico, proceder conforme a seguir:
a) segurar as pontas da sutura cirrgica, uma em cada mo;
b) colocar a ponta que se encontra na mo esquerda sobre a
ponta da mo direita formando um crculo;
c) introduzir a ponta sobreposta no crculo;
d) repetir a operao;
e) prender no tubo de borracha fexvel;
f) colocar a ponta do lado direito sobre a ponta do esquerdo
formando um segundo crculo;
g) fechar o n.
Figura 1 N cirrgico.
Resultados
Os resultados devem atender ao descrito nas Tabelas 1, 2 e
3 das respectivas monografas.
5.7.2 DIMETRO DE SUTURAS
A determinao do dimetro das suturas cirrgicas deve
ser realizada em ambiente com umidade e temperatura
constante. A umidade relativa deve ser de 60 - 80 por centro
e a temperatura entre 20 - 25 C. Os pesos para pr-tenso
para determinao de dimetro de fos multiflamentares
esto registrados na Tabela 1.
APARELHAGEM
O relgio comparador utilizado para determinar o dimetro
de suturas do tipo peso morto, mecnico ou eletrnico
e equipado com um mostrador de leitura direta, digital
ou de sada de leitura impressa. A resoluo de escala
de pelo menos 0,002 mm e a sapata de apoio deve ter
aproximadamente 12,70 mm 0,02 mm de dimetro. A
sapata de apoio e as partes mveis conectadas a ela devem
aplicar uma carga total de 210 g 3 g amostra.
Para suturas de nmero cirrgico 9-0 e menores, remover o
peso adicional da sapata de maneira que o peso total sobre
a amostra no exceda 60 g.
A sapata e a base do equipamento devem apresentar
paralelismo e planicidade de 0,005 mm.
5
PROCEDIMENTO
O dimetro das suturas cirrgicas de origem natural,
acondicionadas sem lquido conservante determinado
aps sua permanncia durante 4 horas, no mnimo, em
atmosfera com a umidade e temperatura anteriormente
especifcadas. As suturas acondicionadas com lquido
conservante so submetidas ao teste, imediatamente, aps
sua remoo do lquido sem secagem prvia.
Suturas multiflamentares
Para a determinao do dimetro de suturas cirrgicas
multiflamentares, as medidas devem ser feitas mantendo-
as tensionadas com auxlio de um sistema de roldana fxa a
uma mesa, conforme a Figura 1 e procedendo da seguinte
forma:
a) fxar uma das pontas da sutura atravs de um grampo de
fxao;
b) na outra ponta livre, colocar um peso com massa de
acordo com a Tabela 1. Obs. deve-se tomar cuidado para
no distorcer a sutura;
c) posicionar a sutura no relgio comparador de modo
que passe pelo centro da base circular e, com auxlio da
alavanca, descer o p da haste mvel lentamente at que
toda a carga seja aplicada;
d) medir o dimetro da sutura em trs pontos,
aproximadamente a 1/4, 1/2 e 3/4 de seu comprimento
total;
e) no caso de suturas tranadas de dimetros superiores ao
nmero cirrgico 3-0, efetuar duas medidas perpendiculares
entre si em cada ponto.
Tabela 1 Pesos para pr-tenso para determinao de dimetro de fos multiflamentares.
Dimetro Massa (g)
Nmero conforme
sistema mtrico
Nmero cirrgico Suturas absorvveis Suturas no absorvveis
0,01 12-0 - -
0,1 11-0 - -
0,2 10-0 12,5 12
0,3 9-0 25 27
0,4 8-0 35 38
0,5 7-0 70 69
0,7 6-0 125 125
1,0 5-0 340 250
1,5 4-0 475 375
2 3-0 885 600
3 2-0 1340 900
3,5 0 1950 1350
4 1 2540 1700
5 2 3175 2200
6 3 e 4 3645 3050
7 5 - 3850
8 6 - 4550
9 7 - 5650
Figura 1 - Modelo de mesa sugerida para a medio de dimetro de suturas multiflamentares.
5
Suturas monoflamentares
Para determinao do dimetro das suturas monoflamen-
tares, deve-se proceder da seguinte forma:
a) efetuar a medida em suturas na forma seca ou com
fuido, imediatamente, aps sua remoo da embalagem
sem secagem prvia;
b) posicionar a sutura no relgio comparador, entre a base
fxa e a base da trava mvel;
c) descer a alavanca lentamente de modo que toda a carga
fque sob a sutura;
d) medir o dimetro da sutura em trs pontos,
aproximadamente a 1/4, 1/2 e 3/4 de seu comprimento total.
Resultado
A mdia das medidas realizadas nas suturas deve estar
compreendida entre os limites das tabelas 1, 2, ou 3 das
respectivas monografas.
Os valores individuais devem estar compreendidos
entre as mdias dos limites para os nmeros cirrgicos,
imediatamente, inferior e posterior ao analisado.
5.7.3 RESISTNCIA AO
ENCASTOAMENTO DA
AGULHA
A fnalidade desse ensaio avaliar a fxao dos fos para
suturas em agulhas atraumticas.
APARELHAGEM
Utilizar uma mquina universal de trao equipada com
motor eltrico que aplique taxa de carga constante por
unidade de tempo.
A clula de carga utilizada deve ser compatvel com a fora
de trao necessria para a verifcao.
PROCEDIMENTO
Fixar a agulha em um dos prendedores do equipamento de
modo que a parte encastoada fque livre e alinhada com
a direo em que se vai aplicar a fora pelo prendedor
mvel. Medir a fora requerida para desencastoar a sutura
da agulha.
Resultados
Os resultados devem ser avaliados considerando a Tabela 1.
Nota: a avaliao a resistncia ao encastoamento deve
considerar simultaneamente os limites individuais para
os fos e os limites para a mdia de cinco fos do lote
analisado. Caso um dos resultados de limite individual, e
no mais de que um, no satisfzer os limites mnimos para
valores individuais, repetir o ensaio com mais dez fos.
O requisito do ensaio ser atendido se nenhuma das 10
amostras estiver abaixo dos limites descritos.
Tabela 1 - Limites de resistncia ao encastoamento da agulha em relao ao nmero cirrgico.
Nmero
cirrgico
Nmero conforme sistema mtrico Limites mnimos de resistncia
Absorvvel
No
absorvvel
Mdia Individual
Natural Sinttica kgf N kgf N
11-0 - 0,1 0,1 0,007 0,07 0,005 0,05
10-0 - 0,2 0,2 0,014 0,14 0,010 0,10
9-0 0,4 0,3 0,3 0,021 0,21 0,015 0,15
8-0 0,5 0,4 0,4 0,05 0,49 0,025 0,25
7-0 0,7 0,5 0,5 0,08 0,78 0,045 0,44
6-0 1 0,7 0,7 0,17 1,67 0,08 0,78
5-0 1,5 1,0 1,0 0,23 226 0,11 1,08
4-0 2 1,5 1,5 0,45 4,41 0,23 2,26
3-0 3 2 2 0,68 6,67 0,34 3,33
2-0 3,5 3 3 1,10 10,79 0,45 4,41
0 4 3,5 3,5 1,50 14,71 0,45 4,41
1 5 4,0 4,0 1,80 17,65 0,60 5,88
2 6 5 5 1,80 17,65 0,70 6,86
3 7 6 6 2,00 19,61 0,90 8,83
4 8 6 6 2,00 19,61 0,90 8,83
5 - 7 7 2,20 21,57 1,10 10,79
5
5.7.4 DETERMINAO DE
ABSORO
Para a realizao dos testes de Determinao de absoro,
remover o algodo da sua embalagem original e condicion-
lo por, no mnimo, 4 horas, em atmosfera padro de 65%
2% de umidade relativa a 21 C 1,1 C.
PROCEDIMENTO
Utilizar cesto, que pese no mximo 3 g, constitudo de
arame de cobre de aproximadamente 0,4 mm de dimetro,
na forma de um cilindro de aproximadamente 5 cm de
dimetro e 8 cm de profundidade, com espaos de cerca
de 2 cm entre os arames. Transferir pores de algodo
hidrflo de, exatamente, cerca de 1 g 0,05 g, de cinco
diferentes partes do pacote, atravs de puxes e no de
cortes da amostra. Colocar as pores combinadas no cesto
e pesar. Segurar o cesto pela lateral aproximadamente
a 12 mm acima da superfcie da gua a 25 C 1 C e
deixar cair na mesma. Determinar, de preferncia pelo uso
de um cronmetro, o tempo em segundos requerido para
submerso completa.
Remover o cesto da gua, deix-lo drenar por 10
segundos na mesma posio horizontal, ento coloc-lo
imediatamente num recipiente tarado e coberto e pesar.
Calcular a massa de gua absorvida a partir da massa do
cesto de teste e da massa do algodo hidrflo.
5.7.5 DETERMINAO DO
COMPRIMENTO DA FIBRA
Para a realizao dos testes de Determinao do
comprimento da fbra, remover o algodo da sua
embalagem original e condicion-lo por, no mnimo, 4
horas, em atmosfera padro de 65% 2% de umidade
relativa a 21 C 1,1 C.
Este procedimento aplica-se ao aparelho separador dplex
de fbra de algodo Suter-Webb. Com alteraes no
procedimento, pode ser aplicado a dois separadores Baer
arranjados um atrs do outro ou aplicado a um Johannsen
ou outro aparelho semelhante.
APARELHAGEM
O separador consiste em dois bancos de pentes rigidamente
montados lado a lado sobre uma base comum. Cada banco
de pentes consiste em pelo menos 12 pentes individuais
espaados por 3,2 mm, um atrs do outro e montados
de modo encaixado para que, medida que eles sejam
aproximados durante o processo de fracionamento e no
mais necessrios, eles possam ser soltos para carem abaixo
do plano de trabalho. Cada pente tem uma srie simples de
dentes precisamente alinhados e bem pontiagudos, de 12
mm de comprimento, consistindo em agulhas de 0,38 mm
de dimetro. Os dentes so espaados de 62 mm a 25 mm
numa extenso de aproximadamente 50 mm.
Os acessrios consistem em frceps separador de fbras,
grade depressora de fbras, prato plano depressor de fbras
e pratos cobertos por veludo. O frceps separador consiste
em duas peas de lato, de 75 mm de comprimento,
aproximadamente, engonado de um lado e levemente
curvado, apresentando, assim, um formato de bico para
pegar as fbras que estejam fora e prximas s superfcies
dos pentes. Usualmente, uma das extremidades apanhadoras
tem um estofamento de couro ou outro material fbroso. A
extremidade apanhadora tem aproximadamente 19 mm de
largura.
A grade depressora de fbras consiste em sries de hastes
de metal espaadas por 3,2 mm, de modo que elas possam
ser colocadas entre os pentes para pressionar as fbras para
baixo entre os dentes. O prato plano depressor de fbras
consiste em um prato de metal polido, de aproximadamente
25 mm por 50 mm, com uma salincia arredondada
ou ala na superfcie superior por meio da qual o prato
pode ser aplainado sobre as fbras medida que elas so
colocadas na superfcie dos pratos cobertos por veludo.
Os pratos cobertos por veludo, sobre os quais as fbras
podem ser colocadas em ordem, so placas de alumnio
de aproximadamente 100 mm por 225 mm e 2,4 mm de
espessura, cobertas em ambos os lados por veludo de alta
qualidade, de preferncia preto.
SELEO DO ALGODO
Aps desenrolar o algodo, preparar uma amostra
representativa pela tomada, a partir de um pacote contendo
de 225 g a 450 g, de 32 amostras (cada uma com cerca de 75
mg) bem distribudas ao longo da pea, sendo 16 retiradas
de uma metade longitudinal e o restante da outra metade.
Evitar as extremidades da pea e tomar particular cuidado,
assegurando que as pores sejam retiradas levando-se em
conta a espessura da pea. Para evitar a seleo de somente
fbras longas ou fbras curtas, remover todas as fbras de
cada amostra e no deixar que as mesmas passem atravs
dos dedos.
De pacotes de, no mximo, 112,5 g, pesar 8 amostras e de
pacotes pesando entre 112,5 g e 225 g, pesar 16 amostras,
todas bem distribudas.
Misturar as amostras aos pares, indiscriminadamente,
e combinar cada par puxando e enrolando suavemente
nos dedos. Ento dividir longitudinalmente cada par
combinado em duas partes aproximadamente iguais e
utilizar uma parte na mistura posterior (a outra parte pode
ser descartada ou reservada para quaisquer outros testes ou
controles).
Repetir o processo descrito no pargrafo anterior com as
metades sucessivas das sries bifurcadas at que resulte
somente uma amostra. Suavemente, dispor em posio
paralela as fbras da amostra fnal, puxando e enrolando-
as nos dedos. Reter todas as fbras, incluindo, tanto como
possvel, as embaraadas e as massas de fbras tranadas,
descartando somente os fragmentos de sementes imaturos
com fbras e material estranho no fbroso tal como
pecolos, folhas e fragmentos de tegumentos.
5
A partir da amostra fnal descrita no pargrafo anterior,
separar longitudinalmente uma amostra de 75 mg 2 mg,
exatamente pesados. Reter o resduo para qualquer teste
necessrio.
PROCEDIMENTO
Utilizando a grade depressora de fbras, inserir
cuidadosamente a amostra pesada num banco de pentes do
separador de algodo, de modo que ela se estenda atravs
dos pentes em ngulos aproximadamente retos.
Com o frceps separador, segurar, pelas extremidades
livres, uma pequena poro das fbras que se estende atravs
dos dentes do pente mais prximo ao operador; suavemente
tir-la dos pentes e transferi-la para as pontas dos dentes do
segundo banco, deitando as fbras paralelamente umas s
outras, linearmente e aproximadamente em ngulos retos
em relao s faces dos pentes, liberando to prximo
face do pente frontal como possvel. Utilizando a grade
depressora, cuidadosamente pressionar as fbras transferidas
para baixo, nos dentes dos pentes. Continuar a operao at
que todas as fbras sejam transferidas para o segundo banco
de pentes. Durante esta transferncia das fbras, deixar cair
os pentes do primeiro banco sucessivamente quando e
enquanto todas as fbras salientes forem removidas.
Virar o equipamento a 180 e transferir as fbras de algodo
de volta para o primeiro banco de pentes maneira descrita
no pargrafo anterior.
Tomar muito cuidado ao aplainar as extremidades das
fbras durante ambas as transferncias, arranjando-as to
proximamente como possvel superfcie frontal do pente
proximal. Tal aplainamento pode envolver a retirada de
fbras isoladas de ambos os lados, frontal e distal, dos
bancos de pentes e o redepsito das mesmas no feixe
principal dos pentes.
Virar o equipamento novamente a 180. Deixar cair pentes
sucessivos, se necessrio, para expor as extremidades das
fbras mais longas. Pode ser necessrio redepositar algumas
fbras isoladas. Utilizando o frceps, retirar as poucas
fbras mais salientes. Desta maneira, continuar a retirar
sucessivamente as fbras salientes remanescentes de volta
face frontal do pente proximal. Deixar cair este pente e repetir
as sries de operaes da mesma maneira at que todas as
fbras tenham sido retiradas. Para no perturbar seriamente a
amostra e portanto viciar o fracionamento em grupos, puxar
diversas vezes (oito a dez) entre cada par de pentes.
Colocar os puxes sobre os pratos cobertos por veludo
em paralelo uns aos outros, to retamente como possvel,
com as extremidades to claramente defnidas como
possvel e com as partes distais arranjadas em linha reta,
pressionando-as para baixo suavemente com o prato plano
depressor de fbras antes de liberar o puxo do frceps.
Empregar, no mnimo, 50 e, no mximo, 100 puxes para
fracionar a amostra.
Agrupar todas as fbras que tenham comprimento de 12,5
mm ou mais e pesar o grupo at dcimos de miligrama.
Da mesma maneira, agrupar todas as fbras que tenham
comprimento de 6,25 mm ou menos e pesar da mesma
maneira. Finalmente, agrupar as fbras remanescentes,
de comprimentos intermedirios e pesar. A soma dos trs
pesos no deve diferir do peso inicial da amostra por mais
do que 3 mg. Dividir a massa de cada um dos dois primeiros
grupos pela massa da amostra para obter a porcentagem em
peso de fbra nas duas faixas de comprimento.
6
6 RECIPIENTES PARA MEDICAMENTOS E
CORRELATOS
6.1 RECIPIENTES DE VIDRO
CLASSIFICAO
Vidro tipo I. Vidro neutro do tipo borossilicato, no
alcalino, de alta resistncia trmica, mecnica e hidroltica,
com alcalinidade de at 1,0 mL de H
2
SO
4
0,01 M (ensaio
em frasco de vidro modo). Destinado ao acondicionamento
de medicamentos; para aplicao intravascular e uso
parenteral.
Vidro tipo II. Vidro alcalino do tipo sdico / clcico, de
resistncia hidroltica elevada, resultante do tratamento
apropriado da superfcie interna do vidro tipo III, de modo
que sua alcalinidade seja no mximo 0,7 mL de H
2
SO
4
0,01
M para frascos at 100 mL e 0,2 mL de H
2
SO
4
0,01 M para
capacidade acima de 100 mL (ensaio em frasco de vidro
inteiro). Destinado ao acondicionamento de solues de
uso parenteral; neutras e cidas, que no tenham seu pH
alterado.
Vidro tipo III. Vidro alcalino do tipo sdico / clcico, de
resistncia hidroltica mdia, porm com boa resistncia
mecnica, sem qualquer tratamento superfcial, com
alcalinidade mxima de 8,5 mL de H
2
SO
4
0,01 M (ensaio
em frasco de vidro modo). Destinado ao acondicionamento
de solues de uso tpico e oral; podendo ser utilizado
para solues parenterais, quando aprovado por ensaios de
estabilidade.
Vidro tipo NP (no parenteral). Vidro alcalino do tipo
sdico / clcico, de resistncia hidroltica baixa e alta
alcalinidade, de no mximo 15 mL de H
2
SO
4
0,01 M (ensaio
em frasco de vidro modo). Indicado ao acondicionamento
de produtos no parenterais, ou seja, de uso tpico e oral.
6.1.1 RESISTNCIA
HIDROLTICA OU
ALCALINIDADE
Ensaio que quantifca a intensidade da reao qumica
entre a gua e os elementos alcalinos existentes no vidro,
especialmente sdio e potssio. Essa resistncia determina
a classifcao do tipo de vidro.
EQUIPAMENTOS, MATERIAIS E REAGENTES
Autoclave com controle de temperatura de 121 C 1,0
C, equipada com termmetro, manmetro, vlvula de
segurana e prateleira para sustentao de, no mnimo,
12 frascos.
Moinho de bolas com estritor de ao duro e esferas
de ao polido ou almofariz em ao temperado com as
especifcaes na Figura 1.
Figura 1 - Almofariz e pistilo para pulverizao de vidro.
Estufa para secagem com temperatura de 140 C;
Balana de preciso com duas casas decimais;
Conjunto de peneiras em ao inoxidvel, n 20, n 40 e
n 50, com dimetro de 20,3 cm (8), incluindo a panela
e a tampa;
Im;
Bquer ou papel alumnio;
Erlenmeyer de 250 mL;
Dessecador;
Bureta e microbureta para titulao;
Proveta graduada de 100 mL;
gua bidestilada ou deionizada, com condutividade
mxima de 0,15 S/cm (ou 6,67 M/cm) a 25 C;
Soluo de vermelho de metila (24 mg em 100 mL de
gua);
Acetona PA;
Soluo de H
2
SO
4
a 0,01 M;
Soluo de HCl a 0,01 M.
6
PROCEDIMENTO DO ENSAIO EM FRASCO DE
VIDRO MODO
Lavar, no mnimo, seis frascos, escolhidos aleatoriamente,
com gua bidestilada ou deionizada, e sec-los em corrente
de ar limpo e seco.
Se necessrio, cortar os frascos e transferir e triturar de 30 a
40 g de vidro utilizando o moinho de bolas ou o almofariz.
Passar o vidro modo por peneira n 20 e transferir a poro
retida na peneira novamente para o moinho de bolas ou o
almofariz. Repetir as operaes de moagens e passagens
dos fragmentos pela peneira at que, pelo menos, 2/3 do
material tenha passado pela peneira n 20. Combinar todas
as pores de vidro modo que passaram pela peneira n
20 e passar por peneira n 40. Triturar a poro retida na
peneira e repetir a operao.
Combinar as pores de vidro modo que passaram pela
peneira n 40 e transferir para conjunto montado de peneiras
n 40 e n 50. Agitar horizontalmente por 5 minutos.
Recolher 12,0 g de vidro modo que passou pela peneira
n 40 mas no passou pela peneira n 50 e armazenar em
dessecador at ser utilizada no teste.
Espalhar a amostra de vidro modo sobre um pedao de
papel acetinado e passar o m, para remover possveis
fragmentos de ferro que podem ter sido introduzidos
durante o procedimento de moagem.
Transferir a amostra para erlenmeyer de 250 mL e lavar as
partculas de vidro com 6 pores de 30 mL de acetona PA,
agitando por cerca de 30 segundos a cada procedimento,
e decantar cuidadosamente a acetona. Aps a lavagem,
a amostra deve estar livre de blocos de p de vidro e a
superfcie dos gros deve estar praticamente livre da
aderncia de partculas fnas. Secar o material por 20
minutos a 140 C.
A amostra deve ser testada at 48 horas aps a secagem e
nesse caso, deve ser mantida em dessecador.
Pesar 10,0 g do vidro modo, transferir para erlenmeyer de
250 mL, previamente preparado com gua bidestilada ou
deionizada em banho a 90 C por, pelo menos, 24 horas ou
a 121 C por 1 hora, e adicionar 50 mL de gua bidestilada
ou deionizada.
Como branco, utilizar erlenmeyer de 250 mL, previamente
preparado em gua bidestilada ou deionizada em banho a
90 C por, pelo menos, 24 horas ou a 121 C por 1 hora, e
adicionar 50 mL de gua bidestilada ou deionizada.
Fechar os frascos erlenmeyer com o uso de bquer
invertido ou papel alumnio, previamente lavado com gua
bidestilada ou deionizada.
Coloc-los na autoclave e submet-los ao seguinte
tratamento:
promover o aumento da temperatura da autoclave
aps o fechamento da vlvula de escape, entre 19 a 23
minutos, at atingir 121 C + 1 C;
manter na temperatura de 121 C + 1 C durante 30
minutos;
descarregar a presso em um perodo de 38 a 46
minutos, at atingir a presso atmosfrica.
Retirar os frascos e resfri-los, imediatamente, em gua
corrente. Aps resfriamento, decantar a gua do erlenmeyer
e lavar o vidro modo com 4 pores de 15 mL de gua
bidestilada ou deionizada. Adicionar 5 gotas da soluo
de vermelho de metila e titular, imediatamente, com cido
sulfrico 0,01 M. Se o volume esperado de soluo que
ser utilizada na titulao for inferior a 10 mL, utilizar uma
microbureta.
Registrar o volume de cido sulfrico utilizado na titulao
e corrigir o valor em relao ao volume do branco.
Limites
O valor da alcalinidade mxima para o frasco de vidro tipo
I de 1,0 mL de H
2
SO
4
0,01 M para 10 g de vidro modo.
III de 8,5 mL de H
2
SO
4
NP de 15 mL de H
2
SO
4
PROCEDIMENTO DO ENSAIO EM FRASCO DE
VIDRO INTEIRO
Lavar frascos, escolhidos aleatoriamente, com gua
bidestilada ou deionizada e sec-los em corrente de ar
limpo e seco. Adicionar volume de gua bidestilada ou
deionizada correspondente a 90% da capacidade total do
frasco, determinada conforme descrito em Capacidade
Volumtrica Total (6.1.3).
Fechar os frascos com papel alumnio previamente lavado
com gua bidestilada ou deionizada e coloc-los na
autoclave. Submet-los ao seguinte tratamento:
aquecer a autoclave a 100 C, com a vlvula de escape
aberta, por 10 minutos;
promover o aumento da temperatura da autoclave aps
o fechamento da vlvula de escape, em 1 C/min, at
atingir 121 C + 1 C;
manter a temperatura de 121 C + 1 C durante 60
minutos;
baixar a temperatura, em 0,5 C/min, at atingir 100
C, descarregando a presso at atingir a presso
atmosfrica;
abrir a autoclave somente aps atingir a temperatura de
95 C;
transferir os frascos para banho-maria a 80 C.
Adicionar gua fria; tomando o cuidado de evitar a
contaminao da soluo de extrao, sendo que o
tempo de resfriamento no deve exceder 30 minutos.
Aps resfriamento, combinar a soluo de extrao de
cada um dos frascos. Medir o volume conforme registrado
na Tabela 1 e transferir para erlenmeyer de 250 mL.
Como branco, utilizar erlenmeyer de 250 mL e adicionar o
mesmo volume de gua bidestilada ou deionizada.
6
Tabela 1 Volume de soluo de extrao de acordo
com a capacidade volumtrica total do recipiente.
Capacidade volumtrica
do frasco (mL)
Volume de soluo
de extrao (mL)
3 25,0
De 3 a 30 50,0
De 30 a 100 100,0
100 100,0
Adicionar 5 gotas da soluo de vermelho de metila para
cada 25 mL de soluo de extrao e titular, imediatamente,
com cido clordrico 0,01 M, utilizando uma microbureta.
Registrar o volume de cido clordrico 0,01 M utilizado
na titulao e corrigir o valor em relao ao volume do
branco.
Limites
O valor de alcalinidade mxima no deve exceder os
valores indicados na Tabela 2.
Tabela 2 Alcalinidade mxima de acordo com o tipo
de vidro e a capacidade volumtrica do frasco.
Capacidade
volumtrica do
frasco (mL)
Volume mximo de HCl
0,01 M (mL) para 100 mL
de soluo de extrao
Tipos I e II Tipo III
< 1 2,0 20,0
De 1 a 2 1,8 17,6
De 2 a 5 1,3 13,2
De 5 a 10 1,0 10,2
De 10 a 20 0,80 8,1
De 20 a 50 0,60 6,1
De 50 a 100 0,50 4,8
De 100 a 200 0,40 3,8
De 200 a 500 0,30 2,9
> 500 0,20 2,2
PROCEDIMENTO DO ENSAIO DE ATAQUE DE GUA
A 121 C PARA QUALIFICAR O VIDRO DE TIPO II.
Enxaguar 3 ou mais frascos, escolhidos aleatoriamente,
com gua bidestilada ou deionizada por 2 vezes e sec-
los em corrente de ar limpo e seco. Adicionar volume de
gua bidestilada ou deionizada correspondente a 90% da
capacidade total do frasco, determinada conforme descrito
em Capacidade Volumtrica Total (6.1.3). Fechar os
frascos com o uso de bquer invertido ou papel alumnio,
previamente lavado com gua bidestilada, ou deionizada.
Coloc-los na autoclave e submet-los ao seguinte
tratamento:
promover o aumento da temperatura da autoclave
aps o fechamento da vlvula de escape, entre 19 a 23
minutos, at atingir 121 C + 1 C;
minutos;
descarregar a presso em um perodo de 38 a 46
minutos, at atingir a presso atmosfrica.
Combinar o volume de soluo de extrao de vrios
frascos, em proveta graduada e transferir 100,0 mL para
erlenmeyer de 250 mL. Adicionar 5 gotas da soluo de
vermelho de metila e titular, imediatamente, com cido
sulfrico 0,01 M. Completar a titulao dentro de 60
minutos aps a abertura da autoclave. Registrar o volume
de cido sulfrico utilizado na titulao e corrigir o
valor em relao ao volume do branco (100 mL de gua
bidestilada ou deionizada na mesma temperatura e com a
mesma quantidade de indicador).
Limites
II de 0,7 mL de H
2
SO
4
0,01 M para frascos com at 100
mL de capacidade volumtrica.
II de 0,2 mL de H
2
SO
4
0,01 M para frascos com mais de
100 mL de capacidade volumtrica.
6.1.2 ARSNIO
EQUIPAMENTOS, MATERIAIS E REAGENTES
Autoclave com controle de temperatura de 121 C 1,0
C, equipada com termmetro, manmetro, vlvula de
segurana e prateleira para sustentao de, no mnimo,
12 frascos;
estufa para secagem com temperatura de 140 C;
bquer ou papel alumnio;
erlenmeyer de 250 mL;
proveta graduada de 100 mL;
gua bidestilada ou deionizada, com condutividade
mxima de 0,15 S/cm (ou 6,67 M/cm) a 25 C.
PROCEDIMENTO
Lavar frascos, escolhidos aleatoriamente, com gua
bidestilada, ou deionizada e sec-los em corrente de ar
limpo e seco. Adicionar volume de gua bidestilada ou
deionizada correspondente a 90% da capacidade total do
frasco, determinada conforme descrito em Capacidade
Volumtrica Total (6.1.3). Fechar os frascos com papel
alumnio previamente lavado com gua bidestilada ou
deionizada e coloc-los na autoclave. Submet-los ao
seguinte tratamento:
aquecer a autoclave a 100 C, com a vlvula de escape
aberta, por 10 minutos;
promover o aumento da temperatura da autoclave aps
o fechamento da vlvula de escape, em 1 C/min, at
atingir 121 C + 1 C;
minutos;
6
baixar a temperatura, em 0,5 C/min, at atingir 100
C, descarregando a presso at atingir a presso
atmosfrica;
abrir a autoclave somente aps atingir a temperatura de
95 C;
transferir os frascos para banho-maria a 80 C.
Adicionar gua fria, cuidadosamente, para evitar a
contaminao da soluo de extrao, sendo que o
tempo de resfriamento no deve exceder 30 minutos.
Aps resfriamento, combinar a soluo de extrao de
cada um dos frascos para obter 35 mL e transferir para
erlenmeyer de 250 mL.
Proceder conforme descrito para Ensaios-limite de arsnio
(5.3.2.5). Limite para arsnio de 1 g/g.
6.1.3 CAPACIDADE
VOLUMTRICA TOTAL
Ensaio para determinar o volume de produto lquido que o
frasco pode conter, quando cheio, at a superfcie superior
da terminao.
EQUIPAMENTOS E MATERIAIS
Balana com resoluo mnima de 0,1 g;
termmetro de 0 C a 100 C, com resoluo de 0,5 C;
gua bidestilada.
PROCEDIMENTO
Selecionar seis unidades aleatoriamente. Tarar a balana
com o frasco seco e vazio.
Encher o frasco com gua bidestilada at a superfcie de
vedao da terminao (regio de fechamento do frasco,
tambm, denominada de gargalo, fnish, ou acabamento),
mantendo a superfcie externa totalmente seca, sendo que
para ampolas o enchimento deve ser realizado at a altura
do ponto A Figura 1.

Figura 1 - Preenchimento do volume de ampolas
(at o ponto A).
Determinar a temperatura da gua durante a realizao
do ensaio, assegurar que a temperatura da gua no tenha
variao acima de 1 C.
Pesar o frasco cheio e determinar a massa de gua nele
contida.
Calcular o volume do frasco dividindo a massa da gua
pela sua densidade, na temperatura do ensaio, com o uso
dos dados registrados na Tabela 1 para gua destilada.
Tabela 1 Densidade da gua destilada
em funo da temperatura.
Temperatura
(C)
Densidade
da gua
(g/mL)
Temperatura
(C)
Densidade
da gua
(g/mL)
10 0,99839 23 0,99660
11 0,99832 24 0,99638
12 0,99823 25 0,99617
13 0,99814 26 0,99593
14 0,99804 27 0,99569
15 0,99893 28 0,99544
16 0,99780 29 0,99518
17 0,99766 30 0,99491
18 0,99751 31 0,99464
19 0,99735 32 0,99435
20 0,99718 33 0,99406
21 0,99700 34 0,99375
22 0,99680 35 0,99345
RESULTADOS
Os resultados expressos em mL, com uma casa decimal,
devem estar de acordo com as especifcaes indicadas.
6.2 RECIPIENTES PLSTICOS
O objetivo pretendido com essa seo estabelecer
normas para materiais e componentes plsticos utilizados
para acondicionar medicamentos e correlatos. As normas
e testes para as propriedades funcionais dos recipientes
e de seus componentes so fornecidas em Recipientes de
Plstico Testes de desempenho (6.2.3).
Os artigos de plstico so identifcados e caracterizados por
espectroscopia de infravermelho e calorimetria diferencial
de varredura. Nessa seo esto descritos os procedimentos
de testes e normas para a identifcao e caracterizao dos
diferentes tipos de plstico. O grau de verifcao baseia-
-se no contato direto ou no com o medicamento, e o risco
baseia-se na via de administrao.
Os plsticos podem conter resduos do processo de
polimerizao, plastifcantes, estabilizadores, antioxidantes,
pigmentos e lubrifcantes. Os fatores como a composio
do plstico, processamento e procedimentos de limpeza,
tratamento de superfcie, meios de contato, corantes,
adesivos, absoro e permeabilidade de conservantes e
condies do armazenamento, tambm, podem afetar a
adequao de um plstico para um uso especfco. Os
6
testes de extraveis so planejados para caracterizar os
componentes extrados e identifcar os possveis migrantes.
O grau ou extenso dos testes para extrair substncias de um
componente depende da fnalidade de uso e do grau de risco
de impactar negativamente na efccia do produto. Nesse
captulo esto descritos os testes de extraveis especfcos
para resinas de polietileno, polipropileno, poli(tereftalato
de etileno) e poli(tereftalato de etileno glicol). Todos os
outros plsticos devem ser testados conforme descrito nos
Testes Fsico Qumicos de Mtodos de Teste (6.2.1.3). O
teste de Capacidade Tamponante deve ser testado para
recipientes destinados a embalar um produto lquido.
Os componentes plsticos utilizados para produtos de alto
risco, tais como aqueles destinados inalao; preparaes
parenterais e oftlmicas so testadas utilizando os Testes
Biolgicos de Mtodos de Teste (6.2.1.3).
Os recipientes plsticos destinados embalagem de
produtos parenterais devem cumprir os requisitos dos
Testes Biolgicos e dos Testes Fsico Qumicos. Tambm,
so fornecidas normas para os recipientes em polietileno
utilizados para embalar formas farmacuticas orais secas,
no destinadas para constituio em soluo.
6.2.1 RECIPIENTES E
CORRELATOS PLSTICOS
6.2.1.1 RECIPIENTES DE POLIETILENO
Polietilenos de alta e baixa densidade so polmeros de
cadeia longa, sintetizados sob condies controladas de
calor e presso, com o auxlio de catalisadores e a partir
de, no mnimo, 85,0% de etileno e um total de 95,0%
de olefnas. Tanto o polietileno de alta densidade quanto
o de baixa densidade tm um espectro de absoro
de infravermelho especfco do polietileno e possuem
propriedades trmicas caractersticas. O polietileno de alta
densidade tem uma densidade entre 0,941 e 0,965 g/cm
3
.
O polietileno de baixa densidade tem uma densidade entre
0,850 e 0,940 g/cm
3
. Outras propriedades que podem afetar
a adequao do polietileno incluem mdulo de elasticidade,
ndice de fuidez, resistncia quebra sob tenso ambiental
e grau de cristalinidade aps a moldagem.
As normas e ensaios descritos nessa seo caracterizam
recipientes e componentes, produzidos a partir do
polietileno de baixa ou de alta densidade de resinas
homopolimricas ou copolimricas.
Todos os componentes de polietileno esto sujeitos a
testes de espectroscopia no infravermelho e calorimetria
diferencial de varredura. Quando estudos de estabilidade
so realizados para determinar a data de validade de
uma forma farmacutica especial em um recipiente
de polietileno adequado, qualquer outro recipiente de
polietileno que cumpra esses requisitos pode ser igualmente
utilizado para embalar a forma farmacutica em questo,
desde que os programas de estabilidade apropriados
sejam ampliados para incluir o recipiente alternativo para
garantir que a identidade, a fora, a qualidade e a pureza
da forma farmacutica sejam mantidas durante o perodo
de validade.
ENSAIOS
Polietileno de Alta Densidade
Espectroscopia de Infravermelho. Utilizar o acessrio
de refexo total atenuada, conforme descrito no item
Infravermelho mdio (5.2.14). O espectro corrigido da
amostra deve apresentar bandas de maior absoro apenas
nos mesmos comprimentos de onda do espectro do padro
de referncia.
Calorimetria Diferencial de Varredura. Proceder
como descrito na Anlise Trmica de Mtodos de Testes
(6.2.1.3). O termograma da amostra deve ser parecido
com o do padro de referncia, determinado de maneira
semelhante, e a temperatura endotrmica (derretimento) no
termograma da amostra no deve diferir em mais de 6,0 C
dos padres de referncia.
Metais Pesados e Resduo No Voltil. Preparar extratos
da amostra conforme descrito nos Testes Fsico Qumicos,
em Mtodos de Testes (6.2.1.3), com poro de 60 cm
2
,
sem considerar a espessura, para cada 20,0 mL de Meio de
Extrao.
Metais Pesados. Os recipientes devem cumprir os
requisitos para Metais Pesados em Testes Fsico Qumicos,
em Mtodos de Testes (6.2.1.3).
Resduo No Voltil. Proceder como descrito em Resduo
No Voltil em Testes Fsico Qumicos em Mtodos de
Teste (6.2.1.3), sendo que o Branco deve ser o mesmo
solvente utilizado em cada uma das condies de teste. A
diferena entre as quantidades obtidas da Preparao da
Amostra e do Branco no deve exceder 12,0 mg quando a
gua mantida a 70 C utilizada como Meio de Extrao;
no exceder 75,0 mg quando o lcool mantido a 70 C
utilizado como Meio de Extrao; e no exceder 100,0 mg
quando o hexano mantido a 50 C utilizado como Meio
de Extrao.
Substncias Utilizadas em Contato com Lquidos Orais.
Proceder como descrito na Capacidade Tamponante de
Testes Fsico Qumicos, Mtodos de Testes (6.2.1.3).
Polietileno de Baixa Densidade
Espectroscopia de Infravermelho. Utilizar o acessrio
Infravermelho mdio (5.2.14). O espectro corrigido da
amostra deve apresentar bandas de maior absoro apenas
nos mesmos comprimentos de onda do espectro do padro
de referncia.
como descrito na Anlise Trmica, em Mtodos de Testes
(6.2.1.3). O termograma da amostra deve ser parecido
com o do padro de referncia, determinado de maneira
semelhante, e a temperatura endotrmica (derretimento) no
6
termograma da amostra no deve diferir em mais de 8,0 C
dos padres de referncia.
Metais Pesados, e Resduo No Voltil. Preparar extratos
da amostra conforme descrito em Preparao da Amostra
em Testes Fsico Qumicos de Mtodos de Testes, com
poro de 60 cm
2
, sem considerar a espessura, para cada
20,0 mL de Meio de Extrao.
requisitos para Metais Pesados de Testes Fsico Qumicos,
Resduo No Voltil. Proceder conforme descrito em
Resduo No Voltil de Testes Fsico Qumicos, em Mtodos
de Testes (6.2.1.3), sendo que o Branco deve ser o mesmo
utilizado como Meio de Extrao; e no exceder 350,0 mg
quando o hexano mantido a 50 C utilizado como Meio
de Extrao.
Proceder conforme descrito na Capacidade Tamponante de
Testes Fsico Qumicos, em Mtodos de Testes (6.2.1.3).
6.2.1.2 RECIPIENTES DE
POLIPROPILENO
Os polmeros de polipropileno so polmeros de cadeia
longa, sintetizados com o auxlio de catalisadores sob
condies controladas de calor e presso. Fatores como
composio do plstico, processamento e procedimentos
de limpeza, meios de contato, corantes, adesivos, absoro,
adsoro, permeabilidade de conservantes e condies de
armazenamento podem afetar a adequao de um plstico
para um uso especfco. A adequao de um polipropileno
caracterstico deve ser estabelecida por meio de testes
adequados.
O polipropileno tem um espectro no infravermelho distinto
e propriedades trmicas caractersticas. Possui uma
densidade de 0,880 a 0,913 g/cm
3
. As propriedades de
permeabilidade dos recipientes em polipropileno moldados
podem ser alteradas quando o polmero repulverizado
incorporado, dependendo de sua proporo no produto
fnal. Outras propriedades que podem afetar a adequao
de polipropileno utilizado em recipientes para embalagem
de medicamentos incluem permeabilidade ao oxignio
e umidade, mdulo de elasticidade, ndice de fuidez,
resistncia quebra sob tenso ambiental e grau de
cristalinidade aps a moldagem.
As normas e ensaios fornecidos caracterizam recipientes
em polipropileno, produzidos a partir de homopolmeros
ou copolmeros, que so adequados para acondicionamento
de formas farmacuticas orais secas slidas e lquidas.
Considerando-se que estudos adequados de estabilidade
tenham sido realizados para determinar a data de validade
de uma forma farmacutica especfca em um recipiente
apropriado em polipropileno, qualquer outro recipiente
em polipropileno que atenda a esses requisitos pode ser
utilizado para embalar a mesma forma farmacutica,
desde que os programas de estabilidade apropriados sejam
ampliados para incluir esse recipiente alternativo, a fm de
garantir que a identidade, a fora, a qualidade e a pureza
da forma farmacutica sejam mantidas durante o perodo
de validade.
ENSAIOS
Espectroscopia de Infravermelho. Utilizar acessrio
Espectrofotometria de absoro no infravermelho (5.2.14).
O espectro corrigido da amostra deve apresentar bandas
de maior absoro somente nos mesmos comprimentos
de onda do espectro do respectivo padro de referncia
(homopolmero ou copolmero de polipropileno)
determinado de forma semelhante.
conforme descrito na Anlise Trmica de Mtodos de
Testes (6.2.1.3). A temperatura endotrmica (derretimento)
no termograma no deve diferir em mais que 6,0 C dos
padres de referncia para homopolmeros. A temperatura
endotrmica obtida do termograma da amostra de
copolmero de polipropileno no deve diferir em mais que
12,0 C dos padres dessa substncia.
Metais Pesados e Resduo No Voltil. Preparar
extratos das amostras conforme descrito em Preparao
da Amostra, de Testes Fsico Qumicos, em Mtodos de
Testes (6.2.1.3), com poro de 60 cm
2
, sem considerar a
espessura, para cada 20,0 mL de Meio de Extrao.
requisitos para Metais Pesados de Testes Fsico Qumicos,
Resduo No Voltil. Proceder conforme descrito em
Resduo No Voltil de Testes Fsico Qumicos, em Mtodos
de Testes (6.2.1.3), sendo que o Branco deve ser o mesmo
utilizado como o Meio de Extrao; e no exceder 225,0
mg quando o hexano mantido a 50 C utilizado como
Meio de Extrao. Os recipientes devem atender aos
requisitos para Resduo No Voltil para todos os meios
de extrao.
Nota: hexano e lcool so infamveis. Ao evaporar esses
solventes, utilizar uma corrente de ar com banho-maria;
ao secar o resduo, utilizar estufa a prova de exploso.
Proceder conforme descrito na Capacidade Tamponante de
Testes Fsico Qumicos, em Mtodos de Testes (6.2.1.3).
6
6.2.1.3 RECIPIENTES DE
POLI(TEREFTALATO DE ETILENO)
E POLI(TEREFTALATO DE ETILENO
GLICOL)
Resinas de poli(tereftalato de etileno) (PET) so polmeros
cristalinos de cadeia longa preparados pela condensao do
etilenoglicol com dimetil tereftalato ou cido tereftlico.
As resinas de copolmero PET so preparadas de forma
semelhante, exceto que, tambm, podem conter uma
pequena quantidade de cido isoftlico (inferior a 3% de
mol da resina) ou 1,4-ciclo-hexano-dimetanol (inferior a
5% de mol da resina). A polimerizao conduzida sob
condies controladas de calor e vcuo; com o auxlio de
catalisadores e estabilizadores.
As resinas de copolmero PET tm propriedades fsicas
e espectrais semelhantes ao PET e, para efeitos prticos,
so tratadas como PET. Os ensaios e as especifcaes
fornecidas nesta seo para caracterizar resinas e recipientes
de PET, aplicam-se tambm s resinas de copolmero e aos
recipientes fabricados a partir delas.
Geralmente, o PET e suas resinas de copolmero apresentam
um grau elevado de ordem em sua estrutura molecular.
Como resultado, apresentam um comportamento trmico
caracterstico dependente da composio, incluindo uma
temperatura de transio vtrea de cerca de 76 C e uma
temperatura de fuso de aproximadamente 250 C. Essas
resinas tm um espectro de absoro de infravermelho
particular que permite a diferenciao de outros materiais
plsticos, como policarbonato; poliestireno; polietileno e
resinas poli(tereftalato de etileno glicol) (PETG). O PET
e suas resinas de copolmero tm uma densidade entre 1,3
e 1,4 g/cm
3
e uma viscosidade intrnseca mnima de 0,7
dL/g, que corresponde a um peso molecular mdio de cerca
de 23.000 Da.
As resinas PETG so polmeros de alto peso molecular
preparadas pela condensao do etilenoglicol com
dimetil tereftalato, ou cido tereftlico e com 15 a 34%
de 1,4-hexano-dimetanol molar. As resinas PETG so
polmeros transparentes, amorfos, com uma temperatura
de transio vtrea de cerca de 81 C e sem um ponto de
fuso cristalina, conforme determinado pela calorimetria
diferencial de varredura. As resinas PETG tm um espectro
de absoro infravermelho particular que possibilita a
distino entre outros materiais plsticos, inclusive o PET.
As resinas PETG tm uma densidade de aproximadamente
1,27 g/cm
3
e uma viscosidade intrnseca mnima de 0,65
dL/g, o que corresponde a um peso molecular mdio de
cerca de 16.000 Da.
As resinas PET e PETG no contm nenhum plastifcante,
apoio de processamento ou antioxidantes. Quando corantes
so utilizados na fabricao de recipientes de PET e de
PETG, esses no devem migrar para o lquido.
As normas e ensaios fornecidos nessa seo caracterizam
recipientes de tereftalato de polietileno (PET) e tereftalato
de polietileno glicol (PETG) que so usados para embalar
formas farmacuticas orais lquidas. Considerando
que estudos adequados de estabilidade tenham sido
realizados para determinar a validade de uma forma
farmacutica lquida particular em um recipiente que
atenda os requisitos para recipientes de PET ou de PETG,
qualquer outro recipiente dessas substncias que atenda a
esses requisitos pode ser utilizado para embalar a mesma
forma farmacutica, desde que programas de estabilidade
apropriados sejam ampliados para incluir esse recipiente
alternativo, para garantir que a identidade, a fora, a
qualidade e a pureza da forma farmacutica sejam mantidas
durante toda a validade. A adequao de um recipiente de
PET ou de PETG especfco para ser usado na dispensao
de uma forma farmacutica oral lquida especfca deve ser
estabelecida por meio de testes adequados.
ENSAIOS
Espectroscopia de Infravermelho. Utilizar acessrio
de refexo total atenuada, proceder conforme descrito
em Espectrofotometria de absoro no infravermelho
(5.2.14). O espectro corrigido da amostra apresenta bandas
de maior absoro apenas nos mesmos comprimentos de
onda do espectro dos padres de referncia, determinados
semelhantemente.
conforme descrito no item Anlise Trmica em Mtodos de
Testes. Para o tereftalato de polietileno, o termograma da
amostra deve ser parecido com o do padro de referncia,
determinado de forma semelhante; o ponto de derretimento
da amostra (Tm) no deve diferir dos padres de referncia
em mais de 9 C e a temperatura de transio vtrea em
mais de 4 C. Para o tereftalato de polietileno glicol,
o termograma da amostra deve ser parecido com o do
padro de referncia, determinado de forma semelhante; a
temperatura de transio vtrea da amostra (Tg) no deve
diferir em mais de 6 C dos padres de referncia.
Extrao de Corantes. Selecionar trs recipientes para
o ensaio. Cortar uma parte relativamente plana da parede
lateral de um recipiente e apar-la na medida necessria
para ajustar a amostra ao suporte do espectrofotmetro.
Realizar varredura (5.2.14) para obter o espectro visvel
de 350-700 nm da parede lateral. Com aproximao de 2
nm, determinar o comprimento de onda de absorvncia
mxima. Preencher os dois recipientes restantes com 50%
de etanol para recipientes PET e 25% de etanol para PETG.
Preparar os recipientes com vedaes impermeveis, como
uma folha de alumnio, e fechar com as tampas. Encher
com o solvente correspondente um recipiente de vidro de
mesma capacidade que os recipientes em teste, prepar-lo
com vedao impermevel, como uma folha de alumnio,
e fechar com uma tampa. Incubar os recipientes em teste
e o recipiente de vidro a 49 C por 10 dias. Retirar os
recipientes e aguardar que atinjam a temperatura ambiente.
Concomitantemente, determinar as absorvncias (5.2.14)
das solues em teste em clulas de 5 cm no comprimento
de onda de absorvncia mxima, utilizando o solvente
correspondente do recipiente de vidro como branco. Para
ambas as solues em teste, os valores de absorvncia,
assim, obtidos no devem ser inferiores a 0,01.
6
Determinar a absorvncia do extrato de n-Heptano em uma
clula de 1 cm, no comprimento de onda de absorvncia
mxima a cerca de 240 nm (5.2.14), utilizando como
branco o meio de extrao de n-Heptano. A absorvncia
do extrato no deve exceder 0,150, o que corresponde, no
mximo, 1 ppm de tereftaloila do meio.
Etilenoglicol.
Soluo de cido peridico. Dissolver 125 mg de cido
peridico em 10 mL de gua.
cido sulfrico diludo. Para 50 mL de gua, adicionar
lentamente e em constante agitao, 50 mL de cido
sulfrico e aguardar que atinja a temperatura ambiente.
Soluo de bissulfto de sdio. Dissolver 0,1 g de bissulfto
de sdio em 10 mL de gua. Utilizar essa soluo dentro
de 7 dias.
Soluo de cromotropato dissdico. Dissolver 100 mg de
cromotropato dissdico em 100 mL de cido sulfrico.
Proteger a soluo da luz e utiliz-la dentro de 7 dias.
Soluo padro. Dissolver uma quantidade, precisamente
pesada, de etilenoglicol em gua e diluir, quantitativamente,
passo a passo, se necessrio, para obter uma soluo com
uma concentrao de cerca de 1,0 g/mL.
Soluo teste. Utilizar o extrato em gua purifcada.
Procedimento. Transferir 1 mL da Soluo padro para um
balo volumtrico de 10 mL. Transferir 1 mL da Soluo
teste para um segundo balo volumtrico de 10 mL.
Transferir 1 mL do meio de extrao em gua purifcada
para um terceiro balo volumtrico de 10 mL. Para cada
um dos trs bales, adicionar 100 L da Soluo de cido
peridico, agitar para homogeneizar e deixar repousar por
60 minutos. Adicionar em cada balo 1 mL da Soluo
de bissulfto de sdio e homogeneizar. Adicionar 100 L
da Soluo de cromotropato dissdico para cada balo e
homogeneizar. Todas as solues devem ser analisadas at
1 hora aps a adio da Soluo de cromotropato dissdico.
Adicionar, cuidadosamente, 6 mL de cido sulfrico a cada
balo, homogeneizar e esperar que as solues atinjam a
Nota: a diluio do cido sulfrico produz calor
considervel e pode causar a ebulio da soluo. Realizar
essa adio cuidadosamente. O gs de dixido de enxofre
ser liberado. A utilizao de uma cmara de exausto
recomendada.
Diluir cada soluo com cido sulfrico diludo at
preencher o volume e homogeneizar. Concomitantemente,
determinar as absorvncias (5.2.14) das solues a partir
da Soluo padro e da Soluo teste em clulas de 1 cm,
no comprimento de onda de absorvncia mxima a cerca
de 575 nm, utilizando como branco a soluo retirada
do meio de extrao em gua purifcada. A absorvncia
da soluo obtida a partir da Soluo de teste no
Metais Pesados; Total de Tereftalola e Etilenoglicol.
Meios de extrao.
gua purifcada
Etanol a 50%. Diluir 125 mL de etanol em gua para 238
mL de soluo e homogeneizar.
Etanol a 25%. Diluir 125 mL de Etanol a 50% em gua
para 250 mL de soluo e homogeneizar.
n-Heptano.
Procedimento geral. Utilizar um meio de extrao de
Etanol a 50% para recipientes de PET e Etanol a 25% para
PETG. Para cada meio de extrao, encher um nmero
sufciente de recipientes testes com 90% da sua capacidade
nominal para obter no mnimo 30 mL. Encher um
nmero correspondente de recipientes de vidro com gua
purifcada, a mesma quantidade de recipientes com Etanol
a 50%, ou Etanol a 25% e o mesmo nmero de recipientes
de vidro com n-Heptano para ser utilizado como branco
dos meios de extrao. Colocar nos recipientes vedaes
impermeveis, como folha de alumnio, e tamp-los.
Incubar os recipientes testes e os recipientes de vidro
a 49 C por 10 dias. Retirar os recipientes testes com as
amostras e os brancos do meio de extrao e armazen-
los em temperatura ambiente. No transferir as amostras
do meio de extrao para recipientes de armazenamento
alternativos.
Metais Pesados. Pipetar 20 mL de gua purifcada extrada
dos recipientes testes, fltrada conforme necessrio, colocar
em um, ou dois tubos de 50 mL para comparao de cor e
guardar a gua purifcada restante para utilizar no teste de
Etilenoglicol. Ajustar o pH do extrato entre 3,0 e 4,0 com
cido actico M ou hidrxido de amnio 6 M, utilizando
um papel indicador de curto intervalo de pH. Diluir com
gua at cerca de 35 mL e homogeneizar.
Pipetar 2 mL da Soluo padro de chumbo (10 ppm Pb)
(5.3.2.3), preparada no dia do uso; transferir para um
segundo tubo de comparao de cor e adicionar 20 mL de
gua purifcada. Ajustar o pH entre 3,0 e 4,0 com cido
actico M ou hidrxido de amnio 6 M, utilizando um
papel indicador de curto intervalo de pH. Diluir com gua
at cerca de 35 mL e homogeneizar.
Em cada tubo, adicionar 1,2 mL de tioacetamida SR e 2 mL
de Tampo acetato pH 3,5 (5.3.2.3) diluir com gua at 50
mL de soluo e homogeneizar. Qualquer cor produzida
dentro de 10 minutos no tubo que contm a gua purifcada
extrada dos recipientes testes, no deve ser mais intensa
do que a do tubo contendo a Soluo padro de chumbo
(10 ppm Pb), ambas visualizadas sobre uma superfcie
branca (limite 1 ppm).
Total de tereftalola. Determinar a absorvncia do extrato
de Etanol a 50% ou de Etanol a 25% em uma clula de
1 cm, no comprimento de onda de absorvncia mxima a
cerca de 244 nm (5.2.14), utilizando como branco aquele
correspondente ao meio de extrao. A absorvncia do
extrato no deve exceder 0,150, o que corresponde, no
mximo, 1 ppm do total de tereftaloila do meio.
6
superior da soluo obtida a partir da Soluo padro,
correspondendo, no mximo, 1 ppm de etilenoglicol.
MTODOS DE TESTES
Refetncia Interna Mltipla
Equipamentos. Utilizar espectrofotmetro de infravermelho
capaz de corrigir para o espectro do branco e equipado com
um acessrio de refexo total atenuada e uma placa KRS-5
de refexo interna. O cristal KRS-5 de 2 mm de espessura,
com um ngulo de incidncia de 45 fornece um nmero
sufciente de refexes.
Preparao da amostra. Cortar duas pores planas
representativas da espessura mdia da parede do recipiente,
e apar-las conforme necessrio, para obter segmentos
adequados para montagem no acessrio de refetncia
interna mltipla. Para evitar riscar a superfcie, limpar as
amostras com papel seco ou, se necessrio, com um leno
macio umedecido com metanol e aguardar a secagem.
Encaixar frmemente as amostras em ambos os lados da
placa de refexo interna KRS-5, garantindo a superfcie
de contato adequada. Antes de colocar as amostras sobre
a placa, comprimi-las obtendo flmes fnos uniformes para
serem expostos a temperaturas de cerca de 177 C, sob alta
presso (15 000 psi ou mais).
Procedimento Geral. Colocar as partes encaixadas da
amostra no acessrio de refetncia interna mltipla e
colocar o conjunto no feixe de luz do espectrofotmetro de
infravermelho. Ajustar a posio da amostra e os espelhos
do equipamento para permitir a transmisso mxima de
luz pelo feixe de referncia no-atenuado. Completar os
ajustes do acessrio, atenuar o feixe de referncia para
permitir a escala total de defexo, durante a varredura da
amostra. Determinar o espectro infravermelho de 3500 a
600 cm
-1
para polietileno e polipropileno e de 4000 a 400
cm
-1
para PET e PETG.
Anlise Trmica
Procedimento Geral. Cortar uma seo com peso
aproximado de 12 mg e coloc-la no compartimento para
a amostra. O contato prximo entre o compartimento e o
termoelemento essencial para a reprodutibilidade dos
resultados. Determinar o termograma sob nitrognio,
utilizando as condies de aquecimento e resfriamento
conforme especifcadas para o tipo de resina e utilizar um
equipamento capaz de realizar as determinaes.
Para Polietileno. Determinar o termograma sob nitrognio
em temperaturas entre 40 C e 200 C, a uma taxa de
aquecimento entre 2 C e 10 C por minuto, seguido de
resfriamento para 40 C, a uma taxa entre 2 C e 10 C por
minuto.
Para Polipropileno. Determinar o termograma sob
nitrognio em temperaturas que variem entre a temperatura
ambiente e 30 C acima do ponto de fuso. Manter a
temperatura por 10 minutos, em seguida, resfriar para 50
C abaixo da temperatura mxima de cristalizao a uma
taxa de 10 C a 20 C por minuto.
Para poli(tereftalato de etileno). Aquecer a amostra
da temperatura ambiente at 280 C a uma taxa de
aquecimento de cerca de 20 C por minuto. Manter a
amostra a 280 C por 1 minuto. Resfriar rapidamente a
amostra para a temperatura ambiente e reaquec-la para
280 C a uma taxa de aquecimento de aproximadamente 5
C por minuto.
Para poli(tereftalato de etileno) glicol. Aquecer a
amostra da temperatura ambiente at 120 C a uma taxa
de aquecimento de cerca de 20 C por minuto. Manter a
amostra a 120 C por 1 minuto. Resfriar rapidamente a
amostra para a temperatura ambiente e reaquec-la para
120 C a uma taxa de aquecimento de aproximadamente
10 C por minuto.
Testes Biolgicos
Os testes biolgicos in vitro so realizados de acordo com
os procedimentos estabelecidos em Testes de reatividade
biolgica in vitro (6.2.5). Os componentes que satisfazem
os requisitos dos testes in vitro no precisam ser submetidos
a testes adicionais. Nenhuma designao de classe de
plstico atribuda a esses materiais. Os materiais que no
cumprem os requisitos dos testes in vitro no so adequados
para uso como recipientes de medicamentos.
Se a designao de classe for necessria para plsticos e
outros polmeros que atendam aos requisitos previstos em
Testes de reatividade biolgica in vitro (6.2.5), realizar o
teste in vivo adequado especifcado para Classifcao de
Plsticos em Testes de reatividade biolgica in vivo (6.2.6).
Testes Fsico Qumicos
Os seguintes testes destinados a determinar as propriedades
fsicas e qumicas de plsticos e seus extratos, so baseados
na extrao de material plstico, sendo essencial que a
quantidade designada do plstico seja utilizada. Alm disso,
a rea de superfcie especifcada deve estar disponvel para
a extrao na temperatura determinada.
Parmetros do teste:
Meio de Extrao. A menos que direcionado de outra forma
em um teste especfco a seguir, utilizar gua Purifcada
como meio de extrao, mantendo a temperatura a 70 C,
durante a extrao para a Preparao da amostra.
Branco. Utilizar gua Purifcada onde o branco
especifcado nos testes que se seguem.
Equipamentos. Utilizar banho-maria e Recipientes de
extrao, conforme descrito em Testes de reatividade
biolgica in vivo (6.2.6). Proceder conforme descrito na
Preparao de equipamentos em Testes de reatividade
biolgica in vivo (6.2.6). Os recipientes e equipamentos
no precisam ser estreis.
Preparao da Amostra. A partir de uma amostra
homognea de plstico, utilizar uma alquota para cada 20
6
mL de meio de extrao, equivalente a 120 cm
2
da rea da
superfcie total (unindo ambos os lados), e subdividida em
faixas de, aproximadamente, 3 mm de largura e prximo
a 5 cm de comprimento. Transferir a amostra subdividida
para uma proveta de vidro tipo I, graduada, de 250 mL com
tampa e adicionar cerca de 150 mL de gua purifcada.
Agitar por, aproximadamente, 30 segundos, esvaziar,
descartar o lquido e repetir uma segunda lavagem.
Extrao para Preparao da Amostra. Transferir a
Preparao da amostra pronta para um frasco de extrao
adequado e adicionar a quantidade solicitada de meio de
extrao. Extrair por 24 horas por aquecimento em um
banho-maria na temperatura especifcada para o meio de
extrao. Resfriar para temperaturas no abaixo de 20 C.
Pipetar 20 mL do extrato preparado para um recipiente
adequado. Utilizar essa parte no teste para Capacidade
Tamponante. Decantar, imediatamente, o extrato residual
em um recipiente limpo adequado e fech-lo.
Resduo No Voltil. Transferir, em alquotas adequadas,
50 mL do Extrato de Preparao da amostra para um
cadinho adequado tarado (preferencialmente um cadinho
de slica fundida que tenha sido limpo com cido) e
evaporar a parte voltil em um banho a vapor. Evaporar de
forma semelhante 50 mL do Branco em outro cadinho. Se
for esperado um resduo oleoso, examinar repetidamente o
cadinho durante a evaporao e o processo de secagem e
reduzir a quantidade de calor, se o leo tender a deslizar pela
parede do cadinho. Secar a 105 C por 1 hora. A diferena
entre as quantidades obtidas do Extrato para a Preparao
da amostra e o Branco no devem ser superiores a 15 mg.
Resduo por incinerao (5.2.10). No necessrio
realizar esse teste quando o resultado do teste de Resduo
No Voltil no exceder 5 mg. Proceder com a obteno
dos resduos, a partir do Extrato para a Preparao da
amostra e Branco descrito no teste para Resduo No Voltil
acima, utilizando, se necessrio, mais cido sulfrico para
a mesma quantidade em cada cadinho. A diferena entre as
quantidades obtidas de resduo de ignio a partir do Extrato
para a Preparao da amostra e do Branco no deve ser
superior a 5 mg.
Metais Pesados. Pipetar 20 mL do Extrato da Preparao
da amostra, fltrado, se necessrio, para um dos dois tubos
de 50 mL para comparao de cor. Ajustar o pH entre 3,0
e 4,0 com cido actico M ou hidrxido de amnio 6 M,
utilizando um papel indicador de curto intervalo de pH.
Diluir com gua at cerca de 35 mL e homogeneizar.
Pipetar 2 mL de Soluo padro de chumbo (10 ppm Pb)
(5.3.2.3), transferir para o segundo tubo para comparao
de cor e adicionar 20 mL do Branco. Ajustar o pH entre
3,0 e 4,0 com cido actico M ou hidrxido de amnio 6
M, utilizando um papel indicador de curto intervalo de pH.
Diluir com gua at cerca de 35 mL e homogeneizar. Em
cada tubo, adicionar 1,2 mL de tioacetamida SR e 2 mL de
Tampo acetato pH 3,5 (5.3.2.3), diluir com gua at 50 mL
de soluo e homogeneizar. Qualquer cor produzida dentro
de 10 minutos na preparao que contm o Extrato da
Preparao da amostra extrada dos recipientes testes, no
deve ser mais intensa do que na Preparao padro, ambas
visualizadas sobre uma superfcie branca (1 ppm no extrato).
Capacidade Tamponante. Titular, potenciometricamente,
as alquotas de 20 mL, previamente coletadas, do Extrato
da Preparao da amostra para um pH 7,0, utilizando cido
clordrico 0,010 M ou hidrxido de sdio 0,010 M, conforme
necessrio. Tratar, semelhantemente, uma alquota de 20 mL
do Branco. Se o mesmo titulante for necessrio para ambos
os titulados, a diferena entre os dois volumes no deve
ser superior a 10 mL; e se o cido for necessrio ou para o
Extrato da Preparao da amostra, ou para o Branco, e o
lcali para o outro, o total dos dois volumes solicitados no
deve ser superior a 10 mL.
6.2.2 TAMPAS DE ELASTMERO
Tampas de elastmero so fabricadas em materiais obtidos a
partir da polimerizao, poli adio ou poli condensao de
substncias orgnicas. Os polmeros obtidos so, geralmente
vulcanizados. As formulaes das tampas contm
elastmeros naturais ou sintticos e aditivos inorgnicos
e orgnicos para auxiliar ou controlar a vulcanizao,
proporcionar propriedades fsicas e qumicas, colorao, ou
estabilizar a formulao da tampa.
Para tampas formuladas com substncias de elastmero
naturais ou sintticas, utilizadas para estocagem de longo
prazo. No se aplica tampas fabricadas em elastmero
de silicone, mas se aplica tampas tratadas com silicone,
como dimeticona, e tampas revestidas com outros materiais
lubrifcantes, como materiais ligados quimicamente, ou
mecanicamente tampa.
Os comentrios a seguir referem-se apenas s tampas
laminadas ou revestidas com materiais destinados a fornecer
ou funcionar como uma barreira base do elastmero, por
exemplo poli(tetrafuoretileno) (PTFE) ou revestimentos
envernizados. No permitida a utilizao de um material
com o intuito de transformar uma tampa que no se encontra
dentro das exigncias especfcas para uma que esteja em
conformidade. No entanto, todos os testes fsico-qumicos se
aplicam frmula base de tais tampas, bem como s tampas
laminadas ou revestidas. Os testes de funcionalidade devem
ser realizados utilizando tampas de elastmero laminadas
ou revestidas. Os testes biolgicos aplicam-se aos materiais
revestidos ou laminados, bem como frmula base. Os testes
biolgicos podem ser realizados em tampas ou materiais
revestidos ou laminados e em tampas no laminadas e no
revestidas, sendo que os resultados devem ser reportados,
separadamente. A frmula base, utilizada nos testes fsico-
qumicos, ou biolgicos deve cumprir as especifcaes de
uma tampa com barreira de revestimento que deve ser similar
ao revestimento da tampa em confgurao e tamanho.
Os testes dessa seo limitam-se s tampas de elastmero
dos Tipos I e II, sendo que as do Tipo I so utilizadas para
preparaes aquosas e as do Tipo II so normalmente
destinadas s preparaes no aquosas. Se uma tampa no
atender a todas as exigncias do teste do Tipo I, mas atender
6
s exigncias para o teste do Tipo II, a tampa recebe a
classifcao fnal do Tipo II.
Nessa seo prope-se realizar uma triagem inicial
para identifcar tampas de elastmero que podem ser
apropriadas para o uso com preparaes injetveis, com
base em suas compatibilidades biolgicas; nas propriedades
fsico-qumicas de seus extratos aquosos e nas suas
funcionalidades. Todas as tampas de elastmero adequadas
para uso em preparaes injetveis cumprem tanto com os
limites do teste do Tipo I como do Tipo II. No entanto, com
essa especifcao no se tem o intuito de servir como um
nico critrio de avaliao para a seleo de tais tampas.
Dentre os requisitos para avaliao de tampas que esto
alm do mbito dessa seo est o estabelecimento
de testes de identifcao e especifcaes da tampa, a
verifcao da tampa, compatibilidade fsico qumica do
produto, a identifcao e a determinao de segurana de
tampas fltrveis encontradas na embalagem do produto, a
verifcao da funcionalidade da embalagem do produto sob
condies reais de estocagem e condies de uso.
O usurio das tampas deve obter do fornecedor uma garantia
de que a composio da tampa no varia e de que a mesma
utilizada no teste de compatibilidade. Quando o fornecedor
informar ao usurio fnal sobre mudanas na composio,
o teste de compatibilidade deve ser repetido, total ou
parcialmente, dependendo da natureza das mudanas.
CARACTERSTICAS
As tampas de elastmero so translcidas, ou opacas e
no tem colorao caracterstica, dependendo dos aditivos
utilizados. So homogneas e praticamente isentas de
materiais luminosos e acidentais, como fbras, partculas
estranhas, e resduos de borracha.
IDENTIFICAO
As tampas so fabricadas a partir de uma ampla variedade
de materiais elastomricos e revestimentos polimricos
opcionais. Portanto, nessa seo no se especifca testes de
identifcao envolvendo todas as possveis apresentaes
das tampas. de responsabilidade do fornecedor da tampa
e do fabricante do produto acabado verifcar a formulao
da tampa e quaisquer materiais revestidos, ou laminados
utilizados de acordo com os testes de identifcao
adequados. Exemplos de alguns testes analticos que podem
ser empregadas incluem densidade especfca, anlise de
cinzas, determinao do contedo de enxofre, cromatografa
em camada delgada do extrato, espectrofotometria de
absoro ultravioleta do extrato, ou espectrofotometria de
absoro.
PROCEDIMENTOS DE TESTES
As tampas de elastmero devem estar em conformidade
com as exigncias biolgicas; fsico-qumicas e funcionais.
Como as tampas de elastmero so processadas pelo fornecedor
antes da distribuio para o usurio fnal, o fornecedor deve
demonstrar a conformidade das tampas expostas s etapas
de processamento ou esterilizao. De modo anlogo, se
as tampas de elastmero recebidas pelo usurio fnal forem
processadas, ou esterilizadas, subsequentemente, o usurio
fnal responsvel em comprovar a conformidade continuada
das tampas subsequentes s condies de processamento ou
esterilizao. Isso importante se as tampas so expostas a
processos ou condies que possam ter impacto signifcativo
nas caractersticas biolgicas, fsico-qumicas ou funcionais
da tampa, como a radiao gama.
Para tampas que normalmente so lubrifcadas com silicone
antes do uso, permitido realizar o teste fsico-qumico em
tampas no lubrifcadas para evitar interferncia potencial de
mtodo e/ou difculdades na interpretao dos resultados do
teste. Para tampas fornecidas com outros lubrifcantes no
oclusivos, todos os testes devem ser realizados utilizando a
tampa revestida.
Para tampas revestidas, ou laminadas com revestimentos
destinados a conferir uma funo de barreira, como PTFE,
ou revestimentos envernizados, os testes fsico-qumicos
sero aplicados ao elastmero com base no revestida, bem
como s tampas revestidas. A tampa no revestida submetida
aos testes fsico-qumicos deve ser similar tampa revestida
em tamanho e confgurao. Os usurios fnais de tampas
revestidas, tambm, so responsveis em comprovar a
conformidade dessas tampas com das especifcaes fsico-
qumicas, processadas ou tratadas de uma maneira que
simula as condies normalmente empregadas pelo usurio
fnal antes do uso.
Em todos os casos adequado documentar as condies
de processamento, pr-tratamento, esterilizao ou
lubrifcao da tampa quando se relatam os resultados.
Na Tabela 1 esto resumidas as exigncias dos testes das
tampas e as responsabilidades do fornecedor e do usurio
fnal.
6
Tabela 1 Exigncias dos testes das tampas e as responsabilidades do fornecedor.
Tipos de tampas (como
fornecidos ou Usados)
Testes Fsico- qumicos Testes de Funcionalidade Testes Biolgicos
Tampas com ou sem
revestimento de silicone
Os testes devem
ser realizados
O uso do silicone opcional
Responsabilidade:
fornecedor e usurio fnal
Os testes devem
ser realizados
Responsabilidade:
Os testes devem
ser realizados
Responsabilidade:
Tampas com revestimentos
lubrifcantes (Materiais no
oclusivos, no silicone)
Os testes devem
ser realizados em
tampas revestidas
Responsabilidade:
Os testes devem
ser realizados em
tampas revestidas
Responsabilidade:
Os testes devem
ser realizados em
tampas revestidas
Responsabilidade:
Tampas com revestimentos
oclusivos
Os testes devem
ser realizados em
tampas revestidas
Responsabilidade:
E:
Os testes devem ser
realizados em tampas no
revestidas (frmula base)
Responsabilidade:
fornecedor
Os testes devem
ser realizados em
tampas revestidas
Responsabilidade:
Os testes devem
ser realizados em
tampas revestidas
OU:
Os testes devem ser
realizados em tampas
no revestidas (frmula
base) e material laminada/
revestida (reportar os
resultados separadamente)
Responsabilidade:
fornecedor e usurio fnal.
TESTES BIOLGICOS
So indicados dois estgios de teste. O primeiro estgio a
realizao do teste in vitro. Os materiais que no atendem
s exigncias do teste in vitro so submetidos ao segundo
estgio de testes in vivo, conforme descrito em Testes de
reatividade biolgica in vivo (6.2.6). Os materiais que
atendem as exigncias para os testes in vitro no necessitam
ser submetidos ao teste in vivo.
As tampas Tipo I e Tipo II devem estar em conformidade
com os testes de reatividade biolgica in vitro e in vivo.
TESTES FSICO-QUMICOS
Desenvolvimento da Preparao S
Colocar as tampas inteiras, no cortadas, correspondentes a
uma rea de superfcie de (100 10) cm
2
em um recipiente
de vidro adequado. Cobrir as tampas com 200 mL de gua
purifcada ou gua para injetveis. Se no for possvel obter
um tampa com a rea de superfcie prescrita utilizando
tampas no cortadas, selecionar um nmero de tampas que
iro se aproximar de 100 cm
2
, e ajustar o volume de gua
utilizado para o equivalente a 2 mL para cada 1 cm
2
da rea
de superfcie real da tampa utilizada. Ferver por 5 minutos
e enxaguar cinco vezes com gua purifcada ou gua para
injetveis fria.
Colocar as tampas lavadas em um frasco de vidro de gargalo
largo do Tipo I, adicionar a mesma quantidade de gua
purifcada ou gua para injetveis, inicialmente adicionada
s tampas e pesar. Cobrir a boca do frasco com um bquer
de vidro do Tipo I. Esterilizar em uma autoclave, de modo
que a temperatura de 121 C 2 C seja atingida dentro
de 20 a 30 minutos e manter essa temperatura durante 30
minutos. Deixar esfriar at atingir a temperatura ambiente
durante um perodo de aproximadamente 30 minutos.
Adicionar gua purifcada ou gua para injetveis para
voltar massa original. Agitar, decantar imediatamente e
coletar o lquido. Esse lquido deve ser agitado antes de ser
utilizado em cada um dos testes.
Preparao do Branco
A preparao do branco deve ser realizada similarmente,
utilizando 200 mL de gua purifcada, ou gua para
injetveis, omitindo as tampas.
6
Aparncia da Preparao (Turbidez e Colorao)
Determinao da Turbidez
A determinao da turbidez pode ser realizada por meio de
comparao visual (Procedimento A), ou instrumentalmente
utilizando um turbidmetro adequado (Procedimento B). A
avaliao instrumental da turbidez fornece um teste que
no depende da acuidade visual do analista.
Soluo de Sulfato de Hidrazina. Dissolver 1,0 g de
sulfato de hidrazina em gua e diluir com gua a 100,0 mL.
Deixar em repouso durante 4 a 6 horas.
Soluo de Hexametilenotetramina. Dissolver 2,5 g de
hexametilenotetramina em 25,0 mL de gua em frasco de
vidro, com rolha, de 100 mL.
Suspenso Estoque de Opalescncia. Adicionar 25,0
mL da soluo de sulfato de hidrazina soluo de
Tabela 2 Preparo das suspenses de referncia.
Referncia
Suspenso A
Referncia
Suspenso B
Referncia
Suspenso C
Referncia
Suspenso D
Padro de Opalescncia 5,0 mL 10,0 mL 30,0 mL 50,0 mL
gua 95,0 mL 90,0 mL 70,0 mL 50,0 mL
Unidade de Turbidez Nefelomtrica 3 UTN 6 UTN 18 UTN 30 UTN
hexametilenotetramina no frasco, misturar e deixar em
repouso durante 24 horas. Essa suspenso estvel por 2
meses, se estocada em um recipiente de vidro isento de
defeitos de superfcie. A suspenso no deve aderir ao
vidro e deve ser misturada antes do uso.
Preparao Padro de Opalescncia. Preparar uma
suspenso atravs da diluio de 15,0 mL da suspenso
estoque de opalescncia com gua para 1000,0 mL.
A preparao padro de opalescncia estvel por,
aproximadamente, 24 horas aps a preparao.
Suspenses de Referncia. Preparar de acordo com a
Tabela 2. Misturar e agitar antes do uso. Suspenses
estveis de formazina que podem ser utilizadas para
preparar padres estveis esto disponveis comercialmente
e podem ser utilizadas aps a comparao com padres
preparados como descrito.
Procedimento A. Comparao Visual - Utilizar tubos de
ensaio idnticos, de vidro incolor; transparente e neutro;
com uma base plana e um dimetro interno de 15 a 25
mm. Preencher um tubo com comprimento de 40 mm
com a Preparao S, um tubo de mesmo comprimento
com gua e quatro outros tubos de mesmo comprimento
com as Suspenses de Referncia A, B, C e D. Comparar
as preparaes em luz diurna difusa 5 minutos aps a
preparao das Suspenses de Referncia, visualizando,
verticalmente, contra um fundo preto. As condies de
luz devem ser tais que a Suspenso de Referncia A possa
ser prontamente distinguida da gua e que a Suspenso
de Referncia B possa ser prontamente distinguida da
Suspenso de Referncia A.
Limite. A Preparao S no deve ser mais opalescente do
que a Suspenso de Referncia B para as tampas do Tipo I,
e no mais opalescente do que a Suspenso de Referncia
C para as tampas do Tipo II. A Preparao S considerada
lmpida se a claridade a mesma do que a da gua quando
examinada como descrito acima, ou se sua opalescncia
no mais pronunciada do que a Suspenso de Referncia
A (consultar a Tabela 3).
Procedimento B. Comparao Instrumental: Medir a
turbidez das Suspenses de Referncia em um turbidmetro
calibrado adequado. O branco deve ser testado e os
resultados corrigidos para o branco. As Suspenses de
Referncia A, B, C e D representam 3, 6, 18 e 30 Unidades
de Turbidez Nefelomtricas (UTN) respectivamente.
Medir a turbidez da Soluo S utilizando o turbidmetro
calibrado.
Limite. A turbidez da Soluo S no deve ser maior do que
aquela para a Suspenso de Referncia B (6 UTN) para as
tampas do Tipo I, e no maior do que da Suspenso de
Referncia C (18 UTN) para as tampas do Tipo II (Tabela 3).
Tabela 3 Mtodo de comparao da turbidez desenvovida nas preparaes.
Exigncias de Opalescncia Procedimento A (visual) Procedimento B (Instrumental)
Tampas do Tipo I No mais opalescente do que a Suspenso B No mais do que 6 UTN
Tampas do Tipo II No mais opalescente do que a Suspenso C No mais do que 18 UTN
Determinao da Cor
Cor Padro. Preparar uma diluio 3,0 mL do Fluido
de Correspondncia O com 97,0 mL de cido clordrico
diludo.
Procedimento. Utilizar tubos idnticos, de vidro neutro,
incolor, transparente, com um fundo plano e dimetro
interno de 15 a 25 mm. Colocar num tubo, a Preparao S,
formando uma coluna lquida de 40 mm de comprimento
e num segundo o Padro de Cor formando a mesma
coluna lquida. Comparar os lquidos em luz diurna difusa,
visualizando, verticalmente, contra um fundo branco.
Limite. A Preparao S no deve ser mais intensamente
colorida do que o Padro de Cor.
6
Acidez ou Alcalinidade
Soluo de Azul de Bromotimol. Dissolver 50 mg de azul
de bromotimol em uma mistura de 4 mL de hidrxido de
sdio a 0,02 M e 20 mL de lcool. Diluir com gua para
100 mL.
Procedimento. Adicionar 0,1 mL da soluo de azul de
bromotimol a 20 mL da Preparao S.
Se a preparao fcar amarela, titular com hidrxido de
sdio a 0,01 M at que o ponto fnal azul seja alcanado.
Se a preparao fcar azul, titular com cido clordrico a
0,01 M at que o ponto fnal amarelo seja alcanado.
Se a preparao fcar verde, ela neutra e no necessria
a titulao.
Correo do Branco. Testar 20 mL do branco de modo
similar. Corrigir os resultados obtidos para a Preparao
S atravs da subtrao ou adio do volume de titulante
requerido para o branco, como apropriado.
Limite. No mais do que 0,3 mL de hidrxido de sdio a
0,01 M produz uma cor azul, ou no mais do que 0,8 mL
de cido clordrico a 0,01 M produz uma cor amarela, ou a
titulao no necessria.
Absorvncia
Procedimento. Realizar esse teste no espao de tempo
de 5 horas aps desenvolver a Preparao S. Filtrar a
Preparao S atravs de um fltro com poro de 0,45 m,
descartando o primeiro mL do fltrado. Medir a absorvncia
do fltrado em comprimentos de onda entre 220 e 360 nm
em uma clula de 1 cm utilizando o branco em uma clula
de correspondncia em um feixe de referncia. Se a diluio
do fltrado necessria antes da medida da absorvncia,
corrigir os resultados do teste para a diluio.
Limite. As absorvncias em todos esses comprimentos de
onda no devem exceder 0,2 para as tampas do Tipo I ou
4,0 para as tampas do Tipo II.
Substncias Redutoras
Procedimento. Realizar esse teste no espao de tempo de
4 horas aps desenvolver a Preparao S. A 20,0 mL da
Preparao S adicionar 1 mL de cido sulfrico diludo e
20,0 mL de permanganato de potssio a 0,002 M. Ferver
por 3 minutos. Resfriar, adicionar 1 g de iodeto de potssio,
e titular, imediatamente, com tiossulfato de sdio a 0,01 M,
utilizando 25,0 mL de soluo de amido TS como indicador.
Realizar a titulao utilizando 20,0 mL de branco e notar
a diferena no volume de tiossulfato de sdio a 0,01 M
necessrio.
Limite. A diferena entre os volumes de titulao no deve
ser maior do que 3,0 mL para as tampas do Tipo I e no
deve ser maior do que 7,0 mL para as tampas do Tipo II.
Metais Pesados
Procedimento. Proceder como direcionado para o Mtodo
1 em Metais Pesados. Usar 10,0 mL da Preparao S, na
preparao problema.
Limite. 2 ppm de metais pesados como chumbo.
Zinco Extravel.
Soluo Teste. Preparar uma Soluo Teste por meio
da diluio de 10,0 mL da Preparao S para 100 mL
com cido clordrico a 0,1 M. Preparar o branco do teste
similarmente, utilizando o branco para a Preparao S.
Soluo Padro de Zinco. Preparar uma soluo (10 ppm
de Zn) dissolvendo sulfato de zinco em cido clordrico
0,1 M.
Solues de Referncia. Preparar, no mnimo, 3 Solues
de Referncia por meio da diluio da Soluo Padro de
Zinco com cido clordrico 0,1 M. As concentraes de
zinco nessas Solues de Referncia so a extenso do
limite esperado da Soluo Teste.
Procedimento. Utilizar um espectrmetro de absoro
atmica; adequado e equipado com uma fonte de
radiao eletromagntica, adequada e uma chama de
ar acetileno. Um procedimento alternativo como uma
anlise por espectrometria de massa ou espectrometria
de emisso ptica com plasma indutivamente acoplado,
apropriadamente validada pode ser utilizado.
Testar cada uma das Solues Referncia em comprimento
de onda para Zinco selecionado em 213,9 nm, pelo
menos 3 vezes. Registrar as leituras estveis. Enxaguar o
equipamento com a soluo branco, toda vez para garantir
que a leitura retorna ao valor inicial do branco. Preparar
uma curva de calibrao a partir da mdia das leituras
obtidas para cada Soluo de Referncia. Registrar a
absorvncia da Soluo Teste. Determinar a concentrao
de zinco em ppm da Soluo Teste utilizando a curva de
calibrao.
Limite. A Preparao S contm, no mximo, 5 ppm de
zinco extravel.
Amnio
Soluo de Tetraiodomercurato (II) de Potssio Alcalina.
Preparar uma soluo de 100 mL contendo 11 g de
iodeto de potssio e 15 g de iodeto de mercrio em gua.
Imediatamente antes do uso, misturar 1 volume dessa
soluo com igual volume de uma soluo a 250 g por L de
hidrxido de sdio.
Soluo Teste. Diluir 5 mL da Preparao S em 14 mL de
gua. Tornar alcalina, se necessrio, por meio da adio
de hidrxido de sdio 1 M, e diluir em gua a 15 mL.
Adicionar 0,3 mL da soluo de tetraiodomercurato (II) de
potssio alcalina, e fechar o recipiente.
6
Soluo Padro de Amnio. Preparar uma soluo de
cloreto de amnio em gua (1 ppm de NH
4
). Misturar 10
mL da soluo de 1 ppm de cloreto de amnio com 5 mL
de gua e 0,3 mL de soluo de tetraidomercurato (II) de
potssio alcalina. Fechar o recipiente.
Limite. Aps 5 minutos, qualquer cor amarela na Soluo
Teste no deve ser mais escura do que na Soluo Padro
de Amnio (no mximo, 2 ppm de NH
4
na Preparao S).
Sulfetos Volteis
Procedimento. Colocar as tampas, cortar se necessrio,
com uma rea de superfcie total de (20 2) cm
2
em um
frasco de 100 mL, e adicionar 50 mL de uma soluo de
cido ctrico a 20 g por L. Da mesma maneira e ao mesmo
tempo, preparar uma soluo controle em um frasco de
100 mL separado por meio da dissoluo de 0,154 mg de
sulfeto de sdio em 50 mL de uma soluo de cido ctrico
a 20 g por L. Colocar um pedao de papel de acetato de
chumbo sobre a boca de cada frasco, e segurar o papel
na posio, colocando sobre ele um frasco de pesagem
invertido. Aquea os frascos em autoclave a 121 C 2 C
por 30 minutos.
Limite. Qualquer colorao preta no papel produzida pela
Preparao S no mais intensa do que a produzida pela
soluo controle.
TESTES FUNCIONAIS
As amostras tratadas como descrito para obter a Preparao
S e secas ao ar devem ser utilizadas para os Testes de
Funcionalidade; de Penetrabilidade; Fragmentao e
Capacidade Auto-Selante. Os Testes de Funcionalidade
so realizados em tampas destinadas a serem penetradas
por uma agulha hipodrmica. O teste de Capacidade Auto-
Selante necessria apenas para tampas destinadas para
recipientes de dose-mltipla. A agulha especifcada para
cada teste uma agulha hipodrmica lubrifcada com bisel
longo (ngulo do bisel 12 2)
2
.
Penetrabilidade
Procedimento. Preencher 10 frascos adequados ao volume
nominal, com gua, ajustar as tampas a serem examinadas
e fechar os frascos com as respectivas tampa. Utilizando
uma nova agulha hipodrmica, como j descrito, para cada
tampa, perfurar a tampa com a agulha perpendicular
superfcie.
Limite. A fora para perfurao de cada tampa no deve ser
maior do que 10 N (1 kgf), determinada com uma preciso
de 0,25 N (25 gf).
2 Refere-se a ISO 7864, agulhas hipodrmicas estreis de uso nico com
um dimetro externo de 0,8 mm (calibre 21).
Fragmentao
Tampas para Preparaes Lquidas. Preencher 12 frascos
limpos com gua at 4 mL menos que a capacidade
nominal. Ajustar as tampas que sero examinadas, fechar
com uma tampa e deixar em repouso por 16 horas.
Tampas para Preparaes Secas. Ajustar as tampas a
serem examinadas em 12 frascos limpos e fechar cada um
com uma tampa.
Procedimento. Utilizando uma agulha hipodrmica como
descrito anteriormente, ajustada a uma seringa limpa,
injetar dentro de cada frasco 1 mL de gua, enquanto se
remove 1 mL de ar. Repetir esse procedimento 4 vezes
para cada tampa, perfurar cada vez em um local diferente.
Utilizar uma nova agulha para cada tampa, verifcando se
ela no est rombuda durante o teste. Filtrar o volume total
do lquido em todos os frascos atravs de um fltro simples
com tamanho nominal de poro no maior do que 0,5 m.
Contar os fragmentos de borracha na superfcie do fltro
visveis a olho nu.
Limite. No h mais do que 5 fragmentos visveis. Esse
limite baseado na assuno de que os fragmentos com um
dimetro superior a 50 m so visveis a olho nu. No caso
de dvidas ou controvrsia, as partculas so examinadas
microscopicamente para verifcar suas naturezas e
tamanhos.
Capacidade Auto-Selante
Procedimento. Preencher 10 frascos adequados com
gua at o volume nominal. Ajustar as tampas a serem
examinadas e tampar. Utilizando uma nova agulha
hipodrmica como anteriormente para cada tampa,
perfurar cada tampa 10 vezes, cada vez em um local
diferente. Imergir os 10 frascos em uma soluo de azul de
metileno a 0,1% (1 g por L), e reduzir a presso externa por
27 kPa por 10 minutos. Restaurar a presso atmosfrica, e
deixar os frascos imersos por 30 minutos. Enxaguar a parte
externa dos frascos.
Limite. Nenhum dos frascos deve conter qualquer trao de
soluo azul.
6.2.3 RECIPIENTES DE
PLSTICO - TESTES DE
DESEMPENHO
Nessa seo esto propostos padres para as propriedades
funcionais de recipientes plsticos e seus componentes
utilizados para acondicionar medicamentos. Os testes a
seguir so estabelecidos para determinar a permeabilidade
umidade e transmisso de luz dos recipientes plsticos
aplicveis a cada tipo de embalagem.
Um recipiente destinado a fornecer proteo luz, ou
apresentado como recipiente resistente luz deve satisfazer
a exigncia de Teste de Transmisso da luz (6.2.3.5), onde
a proteo, ou a resistncia devido s propriedades
6
especfcas do material de que o recipiente composto,
incluindo qualquer revestimento aplicado a ele. Um
recipiente claro e incolor, ou translcido, fabricado como
resistente luz por meio de incluso de composto opaco
est isento dos requisitos do item Testes de Transmisso
de luz (6.2.3.5). Da forma como utilizado nesse captulo, o
termo recipiente refere-se ao sistema completo abrangendo
o recipiente em si, o revestimento quando utilizado, o
fechamento no caso de recipientes de unidades mltiplas e
as tampas e blister nos casos de recipientes de dose unitria.
6.2.3.1 RECIPIENTES DE MLTIPLAS
UNIDADES PARA CPSULAS E
COMPRIMIDOS
Dessecante. Colocar uma quantidade de cloreto de clcio
anidro (1) de 4 a 8 mesh em um recipiente raso, tendo o
cuidado de excluir qualquer p fno, secar a 110 C durante
uma hora e resfriar em um dessecador.
Procedimento. Selecionar 12 recipientes de tamanhos e
tipo uniformes, limpar as superfcies de fechamento com
um pano isento de fbras, fechar e abrir cada recipiente
30 vezes. Tampar frme e uniformemente toda vez que o
recipiente fechado. Tampar os recipientes com tampa
de rosca com movimento de torque que esteja dentro do
intervalo especifcado na Tabela 1. Adicionar dessecantes
a 10 recipientes, designados recipientes testes, preencher
cada um at 13 mm do fechamento se o volume for de
20 mL ou superior, ou preencher cada um at dois teros
da capacidade se o volume do recipiente for inferior a 20
mL. Se a parte interna do recipiente possuir mais de 63
mm de profundidade, um funil inerte ou espaador deve
ser colocado no fundo para minimizar o peso total do
recipiente e do dessecante; a camada de dessecante em tal
recipiente no deve ser inferior a 5 cm em profundidade.
Fechar cada um, imediatamente aps a adio do
dessecante, aplicando o torque designado na Tabela 1 no
caso de recipientes com tampa de rosca. Para cada um dos
2 recipientes remanescentes, designados como controles,
adicionar um nmero sufciente de esferas de vidro para
atingir um peso aproximadamente igual aos dos recipientes
testes e fechar aplicando o torque designado na Tabela 1
no caso de recipientes com tampa de rosca. Registrar o
peso dos recipientes, individualmente, assim, preparados
at a aproximao de 0,1 mg se o volume do recipiente
for inferior a 20 mL, ou at a aproximao em mg mais
prximo se o volume do recipiente for de 20 a 200 mL, ou
at a aproximao em centigramas (10 mg) se o volume
for de 200 mL ou superior. Estocar umidade relativa de
(75 3)% e temperatura de 23 C 2 C. Um sistema
saturado de 35 g de cloreto de sdio para cada 100 mL de
gua colocado no fundo do dessecador mantm a umidade
especifcada, ou outros mtodos podem ser empregados
para manter essas condies. Aps 336 h 1 h (14 dias),
registrar o peso dos recipientes individualmente da mesma
forma. Preencher, completamente, 5 recipientes vazios do
mesmo tamanho e tipo dos recipientes testes com gua ou
um slido no compressvel, de fuxo livre tal como esferas
de vidro pequenas bem acomodadas at nvel indicado
pela superfcie do fechamento. Transferir o contedo de
cada recipiente para uma proveta graduada, e determinar
o volume mdio do recipiente em mL. Calcular a taxa de
permeabilidade umidade, em mg por dia, por L, Por meio
da frmula:
em que
V o volume em mL do recipiente, (T
F
T
I
) a diferena
em mg entre o peso fnal e inicial de cada recipiente teste;
(C
F
C
I
) a diferena em mg entre a mdia fnal e a mdia
inicial dos pesos dos 2 controles.
Para recipientes utilizados em medicamentos dispensados
sob prescrio, os recipientes assim testados so do
tipo recipientes vedados, se no mais do que um dos 10
recipientes testes exceder a 100 mg por dia por L em
permeabilidade umidade, e nenhum exceder a 200 mg por
dia por L. Para recipientes utilizados para medicamentos
dispensados sob prescrio, os recipientes so bem
fechados se no mais do que um dos 10 recipientes testes
exceder a 2000 mg por dia por L em permeabilidade
umidade e nenhum exceder a 3000 mg por dia por L.
Tabela 1 - Torque aplicvel ao recipiente com tampa tipo rosca.
Dimetro do Fechamento
a

(mm)
Intervalo de aperto
sugerido com torque
aplicado manualmente
b

(polegadas / libras)
8 5
10 6
13 8
15 5-9
18 7-10
20 8-12
22 9-14
24 10-18
28 12-21
30 13-23
33 15-25
38 17-26
43 17-27
48 19-30
53 21-36
58 23-40
63 25-43
66 26-45
70 28-50
83 32-65
86 40-65
89 40-70
100 45-70
110 45-70
120 55-95
132 60-95
____________
a o torque designado para o prximo dimetro de fechamento maior deve
ser aplicado nos recipientes testes que tenham um dimetro de fechamento
intermedirio aos dimetros listados.
b utilizar equipamento adequado para medio de torque.
6
RECIPIENTES DE UNIDADES MLTIPLAS PARA
CPSULAS E COMPRIMIDOS (sem fechamento)
Recipiente de Polietileno. Fechar os recipientes, com selos
impenetrveis obtidos por meio de selagem a quente com
uma folha de alumnio laminada com polietileno ou outra
selagem adequada. Testar os recipientes conforme descrito
acima. Os recipientes de polietileno de alta densidade,
testados atendem aos requisitos se a permeabilidade
umidade exceder 10 mg por dia por L, no mximo, em
1 dos 10 recipientes testes e no exceder 25 mg por dia
por L em nenhum deles. Os recipientes de polietileno de
baixa densidade, assim, testados atendem aos requisitos se
a permeabilidade umidade exceder 20 mg por dia por L,
no mximo, em 1 dos 10 recipientes testes e no exceder
30 mg por dia por L em nenhum deles.
Recipientes de Polipropileno. Fechar os recipientes, com
selos impenetrveis obtidos por meio de selagem a quente
com uma folha de alumnio laminada com polietileno ou
outro fechamento adequado. Testar os recipientes conforme
descrito acima. Os recipientes atendem aos requisitos se a
permeabilidade umidade exceder 15 mg por dia por L, no
mximo, em 1 dos 10 recipientes testes e no exceder 25
mg por dia por L em nenhum deles.
6.2.3.2 RECIPIENTES DE UNIDADE
SIMPLES E DOSE UNITRIA PARA
CPSULAS E COMPRIMIDOS
Para permitir uma avaliao fundamentada em relao
adequabilidade da embalagem para um tipo especfco de
produto, os procedimentos e esquemas de classifcao a
seguir so apresentados para avaliar as caractersticas de
permeabilidade umidade dos recipientes para unidade
simples e para dose unitria. Visto que os desempenhos
do equipamento e do operador podem afetar a penetrao
de umidade em um recipiente formado ou fechado, as
caractersticas de penetrao de umidade do sistema de
embalagem utilizado devem ser determinadas.
Dessecante. Secar as pastilhas dessecantes apropriadas a
110 C durante 1 hora antes do uso. Utilizar pastilhas com
peso aproximado de 400 mg cada uma e com dimetro
de, aproximadamente, 8 mm. Se necessrio, devido
dimenso limitada do recipiente de dose unitria, podem
ser utilizadas pastilhas pesando menos do que 400 mg cada
uma e com dimetro inferior a 8 mm.
PROCEDIMENTO
Mtodo I. Selar no menos do que 10 recipientes de
dose unitria com uma pastilha cada um, e selar 10
unidades adicionais de recipientes de dose unitria vazios
para controle, utilizando dedos de luvas ou uma pina
almofadada para manipular os recipientes selados. Numerar
os recipientes e registrar os pesos, individualmente, com
a aproximao em mg mais prxima. Pesar os controles
como uma unidade e dividir o peso total pelo nmero de
controles para obter a mdia. Estocar todos os recipientes
umidade relativa de (75 3)% e temperatura de 23
C 2 C. Um sistema saturado de 35 g de cloreto de
sdio para cada 100 mL de gua colocado no fundo
de um dessecador mantm a umidade especifcada, ou
outros mtodos podem ser empregados para manter essas
condies. Aps um intervalo de 24 horas, e em cada
um de seus mltiplos, remover os recipientes da cmara,
e deixar equilibrar durante 15 a 60 minutos na rea de
pesagem. Novamente registrar o peso dos recipientes
individualmente e os controles combinados da mesma
maneira. Se nenhuma pastilha indicadora se tornar rosa
durante os procedimentos, ou se o aumento de peso da
pastilha exceder a 10%, fnalizar o teste e considerar vlida
apenas as primeiras determinaes. Retornar os recipientes
cmara de umidade. Calcular a taxa de penetrao de
umidade em mg por dia de cada recipiente utilizando a
frmula:
( ) ( ) ( ) [ ]
I F I F
C C W W N 1
em que
N o nmero de dias expirados no perodo de teste
(comeando aps as 24 horas iniciais de perodo de
equilbrio);
(W
F
W
I
) a diferena em mg entre os pesos fnais e
iniciais de cada recipiente teste;
(C
F
C
I
) a diferena em mg entre os pesos mdios
fnais e iniciais dos controles, com os dados calculados
com relao a dois algarismos signifcativos. Quando a
penetrao mensurada for inferior a 5 mg por dia, e quando
for observado que os controles alcanam o equilbrio
em um prazo de 7 dias, a penetrao individual pode ser
determinada mais precisamente, utilizando o recipiente
teste do 7 dia e o recipiente controle como W
I
e C
I
,
respectivamente, nos clculos. Nesse caso, um intervalo
adequado de teste para Classe A no deve ser inferior a 28
dias a partir do perodo de equilbrio do 7 dia (um total de
35 dias).
Mtodo II. Utilizar esse procedimento para embalagens,
como cartelas que podem ser perfuradas, que incorporam
um nmero de blisters ou recipientes de dose unitria
selados, separadamente. Selar um nmero sufciente de
embalagens, no mnimo, 4 e um total de, no mnimo, 10
recipientes de dose unitria ou blisters preenchidos com
uma pastilha em cada unidade a ser testada. Selar um
nmero correspondente de embalagens vazias, cada uma
contendo o mesmo nmero de recipientes de dose unitria
ou blisters iguais aos utilizados nas embalagens testes,
como controles. Estocar todos os recipientes em umidade
relativa de (75 3)% e temperatura de 23 C 2 C.
Um sistema saturado de 35 g de cloreto de sdio para cada
100 mL de gua, colocado no fundo do dessecador mantm
a umidade requerida, ou outros mtodos podem ser
empregados para manter essas condies. Aps 24 horas e
a cada 24 horas subsequentes, remover as embalagens da
cmara e deixar que se equilibrem temperatura ambiente
durante aproximadamente 45 minutos. Registrar os pesos
das embalagens individuais e retorn-las cmara. Pesar
as embalagens controle como uma unidade e dividir
o peso total pelo nmero de embalagens controle para
obter o peso mdio das embalagens vazias. Se qualquer
6
pastilha indicadora virar para a colorao rosa durante o
procedimento ou se o peso mdio da pastilha exceder a
10% em qualquer uma das embalagens, fnalizar o teste
e considerar vlidas apenas as primeiras determinaes.
Calcular a taxa mdia de penetrao de umidade, em mg
por dia para cada recipiente de dose unitria ou blister, em
cada embalagem de acordo com a frmula:
em que
N o nmero de dias decorridos dentro do perodo do
teste (comeando aps as 24 horas iniciais de perodo de
equilbrio);
X o nmero de unidades seladas separadamente por
embalagem;
(W
F
W
I
) a diferena em mg entre os pesos iniciais e
fnais de cada embalagem teste;
(C
F
C
I
) a diferena em mg entre os pesos mdios fnais
e iniciais das embalagens controle, sendo essas taxas
calculadas at dois algarismos signifcativos.
Limites. Os recipientes de dose unitria individuais, como
testados no Mtodo I, so classifcados como Classe A
se, no mximo, 1 dos 10 recipientes testados exceder 0,5
mg por dia em taxa de penetrao de umidade e nenhum
exceder 1 mg por dia; so classifcados como Classe B se,
no mximo, 1 dos 10 recipientes testados exceder 5 mg
por dia e nenhum exceder 10 mg por dia; so classifcados
como Classe C se, no mximo, 1 dos 10 recipientes
testados exceder 20 mg por dia e nenhum exceder 40 mg
por dia e so classifcados como Classe D se os recipientes
testados no cumprirem nenhum desses requisitos de taxa
de penetrao de umidade.
As embalagens, da forma como so testadas no Mtodo II,
so classifcadas como Classe A se nenhuma embalagem
testada exceder 0,5 mg por dia de taxa de penetrao de
umidade mdia por blister; so classifcadas como Classe
B se nenhuma embalagem testada exceder 5 mg por dia
de taxa de penetrao de umidade em mdia por blister;
so classifcadas como Classe C se nenhuma embalagem
exceder 20 mg de taxa de umidade em mdia por blister e
so classifcadas como Classe D se nenhuma embalagem
testada cumprir os requisitos de taxa de penetrao de
umidade em mdia por blister acima mencionados.
Com o uso do dessecante descrito no Mtodo I e Mtodo
II, aps cada 24 horas, os recipientes testes e controles so
pesados; os intervalos de teste adequados para as pesagens
fnais, WF e CF, devem ser o seguinte: 24 horas para
Classe D; 48 horas para Classe C; 7 dias para Classe B e,
no mnimo, 28 dias para Classe A.
6.2.3.3 RECIPIENTES DE DOSE
MLTIPLA E DE DOSE UNITRIA PARA
LQUIDOS
Os padres e os testes apresentados nessa seo so usados
para medir as caractersticas funcionais e de desempenho
de recipientes plsticos utilizados para embalar produtos
aquosos por meio da medida da perda de peso de gua
lquida como uma porcentagem de seu contedo. Esse
teste, tambm, pode ser utilizado para demonstrar uma
comparao funcional e de desempenho. Durante todo
o procedimento, determinar os pesos dos sistemas
individuais de fechamento dos recipientes (recipiente,
selagem interna se utilizada, e fechamento) ambos como
pesos de tara e pesos de envase, a uma aproximao de 0,1
mg se a capacidade mxima for inferior a 200 mL; uma
aproximao em mg se a capacidade mxima estiver entre
200 e 1000 mL ou uma aproximao em centgramos (10
mg) se a capacidade mxima for de 1000 mL ou superior.
Procedimentos para Testes de Recipientes Fechados
Comercializados (batoque se aplicvel, selagem interna
e tampa). Selecionar 10 recipientes de tipo e tamanho
uniformes e limpar as superfcies de selagem com um pano
isento de fbras. Montar cada recipiente com o batoque, se
aplicvel, e sistema de fechamento. Numerar cada sistema
de fechamento e registrar o peso tarado.
Remover os fechamentos e com o auxlio de uma pipeta,
preencher os recipientes com gua at a capacidade
mxima. Montar os recipientes com as selagens e aplicar os
fechamentos. Se forem utilizadas tampas de rosca, aplicar
o torque especifcado na Tabela 1 em Recipientes de
mltiplas unidades para cpsulas e comprimidos (6.2.3.1)
e estocar os recipientes fechados temperatura de 25 C
2 C e umidade relativa de (50 2)%. Aps 168 h 1 h
(7 dias), registrar o peso dos recipientes individualmente.
Retornar os recipientes ao local de estocagem durante mais
168 h 1 h. Aps decorrido o segundo perodo de 168 h
1 h, remover os recipientes, registrar os pesos de cada
sistema de recipiente, individualmente, e calcular a taxa de
penetrao de vapor de gua, em porcentagem de perda de
peso de gua, para cada recipiente por meio da frmula:
(W
7
- W
14
) 365 100/(W
7
-W
T
)7 = Porcentagem por ano
Em que
W
7
o peso em mg do recipiente aos 7 dias;
W
14
W
T
o peso da tara em g;
7 o tempo de teste em dias, aps 7 dias de perodo de
equilbrio. Os recipientes assim testados cumprem os
requisitos e so considerados como recipientes frmemente
vedados se a porcentagem de perda de peso de gua exceder
2,5% por ano, no mximo, em 1 dos 10 recipientes testados
e no exceder a 5,0%, por ano, em nenhum deles.
Os recipientes de dose unitria para lquidos cumprem os
requisitos de um recipiente frmemente vedado se o peso
mdio em perda de peso de gua for inferior ou igual a
2,5% (p/p) por ano e 5% ao fnal de 2 anos.
Procedimento para Testes de Recipientes de Doses
Mltiplas em Condies de Uso. Selecionar 10 recipientes
de tipo e tamanho uniformes. Se for utilizada uma selagem
interna, abrir os recipientes, cuidadosamente, e remover
as selagens internas de cada um. Montar cada recipiente
com batoque, se aplicvel, e seu sistema de fechamento.
Numerar cada sistema de fechamento de recipiente e
registrar o peso da tara. Abrir e fechar os recipientes 30
6
vezes, tendo cuidado para no perder lquido durante esse
procedimento. Fechar os recipientes com tampa de rosca
dentro do intervalo de torque apresentado na Tabela 1
em Recipientes de mltiplas unidades para cpsulas e
comprimidos (6.2.3.1) e estocar os recipientes selados
temperatura de 25 C 2 C e umidade relativa de (50 2)%.
Aps 168 h 1 h (7 dias), registrar o peso dos recipientes,
individualmente. Retornar ao local de estocagem durante
de mais 168 h 1 h. Aps o segundo perodo de 168 h
1 h, remover os recipientes, registrar os pesos de cada
sistema de recipiente, individualmente, e calcular a taxa de
penetrao de vapor de gua, em porcentagem de perda de
peso de gua, para cada recipiente por meio da frmula:
(W
7
- W
14
) 365 100/(W
7
-W
T
)7 = Porcentagem por ano
em que
W
7
W
14
W
T
o peso tarado em g e 7 o tempo de teste em dias,
aps 7 dias de perodo de equilbrio.
Os recipientes assim testados cumprem os requisitos e so
considerados como recipientes frmemente vedados se a
porcentagem de perda de peso de gua exceder 2,5% por
ano, no mximo, em 1 dos 10 recipientes testados e no
exceder a 5,0% em nenhum deles.
6.2.3.4 TESTE DE TRANSMISSO DE LUZ
Equipamento. Utilizar um espectrofotmetro de
sensibilidade e preciso, adequadas, adaptado, para medir
a quantidade de luz transmitida por materiais plsticos,
ou de vidro translcidos, ou transparentes, utilizados
como recipientes farmacuticos. Adicionalmente, o
espectrofotmetro deve medir e registrar a luz transmitida
difusa assim como raios paralelos.
Procedimento. Selecionar seces para representar a
espessura mdia da parede do recipiente. Cortar seces
circulares de duas ou mais reas do recipiente e aparar
o necessrio para fornecer segmentos de tamanhos
convenientes para sua insero no espectrofotmetro.
Cortar, lavar e secar cada amostra, tendo o cuidado de evitar
riscos na superfcie. Se a amostra for muito pequena para
cobrir a abertura no suporte de amostra, cobrir a poro
descoberta da abertura com um papel opaco ou fta adesiva,
fazendo com que o comprimento da amostra seja maior do
que a abertura no espectrofotmetro. Imediatamente antes
de montar o suporte da amostra, limpar a amostra com um
tecido prprio para limpar lentes. Montar a amostra com o
auxlio de uma cera viscosa, ou por meio de outros meios
convenientes, tomando o cuidado de no deixar impresses
digitais ou outras marcas nas superfcies pelas quais a
luz deve passar. Colocar a seco no espectrofotmetro
com o seu eixo cilndrico paralelo ao plano de abertura
e aproximadamente centralizado em relao abertura.
Quando colocado adequadamente, o feixe de luz normal
superfcie da seco e as perdas por refexo so mnimas.
Medir, continuamente, a transmitncia da seco com
referncia ao ar no comprimento de onda de interesse,
com um equipamento de registro ou em intervalos de
aproximadamente 20 nm com um equipamento manual, na
amplitude de onda entre 290 a 450 nm.
Limite. A transmisso de luz observada no deve exceder
aos limites constantes na Tabela 1 para recipientes
destinados ao uso parenteral.
Tabela 1 - Limites para plsticos classes I-VI.
Tamanho
Nominal
(em mL)
Porcentagem mxima de transmisso de
luz em qualquer comprimento de onda
entre 290 e 450 nm
Recipientes
termoselados
Recipientes selados
hermeticamente
1 50 25
2 45 20
5 40 15
10 35 13
20 30 12
50 15 10
Qualquer recipiente, com um tamanho intermedirio dos
listados na Tabela 1, apresenta uma transmisso no maior
do que o prximo tamanho maior, listado na tabela. Para
recipientes maiores do que 50 mL, aplicam-se os limites
para 50 mL.
A transmisso de luz observada para recipientes plsticos
para produtos destinados administrao oral ou tpica
no deve exceder a 10% em qualquer comprimento de
onda no intervalo entre 290 a 450 nm.
6.2.4 BIOCOMPATIBILIDADE
Nessa seo h orientaes sobre procedimentos de
avaliao da biocompatibilidade de recipientes plsticos
para medicamentos, tampas de elastmero e correlatos. A
biocompatibilidade refere-se tendncia desses produtos
permanecerem, biologicamente, inertes, quando em contato
com o corpo. Em combinao com os ensaios qumicos, os
processos biolgicos podem ser utilizados para detectar e
identifcar a toxicidade inerente ou adquirida de correlatos,
antes ou durante sua fabricao e processamento.
Os procedimentos utilizados para avaliar a
biocompatibilidade de um correlato ou de seus constituintes
foram classifcados em um painel de efeitos biolgicos
ou procedimentos de toxicidade como citotoxicidade,
sensibilizao, irritao ou reatividade intracutnea,
toxicidade sistmica aguda, toxicidade subcrnica
(toxicidade subaguda), genotoxicidade, implantao,
hemocompatibilidade, toxicidade crnica (prolonga em
10% a expectativa de vida do animal teste, ou para mais de
90 dias), carcinogenicidade, toxicidade reprodutiva ou de
desenvolvimento e biodegradao.
A pirogenicidade, em uma rea de toxicidade especial,
avaliada pelo Teste de Endotoxinas Bacterianas (5.5.2.2) e
Teste de Pirognios (5.5.2.1). Atualmente no h captulos
que detalham sobre sensibilizao, toxicidade subcrnica,
genotoxicidade, toxicidade crnica, carcinogenicidade,
6
hemotoxicidade, toxicidade reprodutiva ou requisitos de
teste de biodegradao.
6.2.4.1 RECIPIENTES PLSTICOS E
TAMPAS DE ELASTMEROS
Os recipientes plsticos podem ser constitudos por
polmeros que, por extrao, no apresentam toxicidade
ou no alteram a estabilidade do produto embalado. Os
requisitos de teste de biocompatibilidade de recipientes para
medicamentos so relacionados a Recipientes Plsticos. O
plstico, ou outras pores polimricas desses produtos so
testados de acordo com os procedimentos estabelecidos em
Testes de reatividade biolgica in vitro (6.2.5), sendo que
aqueles que no atendem aos requisitos desses testes no
so adequados para um recipiente de medicamentos. Os
materiais que atendem aos requisitos in vitro qualifcam-
se como materiais biocompatveis, sem a necessidade
de outros testes, e podem ser utilizados na fabricao de
um recipiente para medicamentos. Se for solicitada uma
designao de classe (classes I-VI) para plsticos ou
outros polmeros, os procedimentos adequados de teste so
realizados conforme apresentado em Testes de reatividade
biolgica in vivo (6.2.6) e Designao de Classe.
A biocompatibilidade de um material elastomrico avaliada
em duas fases, conforme descrito em Procedimentos de
Teste Biolgico em Tampas de Elastmero (6.2.2).
Ao contrrio de plsticos ou outros polmeros, um material
elastomrico que no atende s exigncias da primeira
fase de teste in vitro, pode ser considerado um material
biocompatvel, se for aprovado na segunda fase - in
vivo, que consiste no Teste de Injeo Sistmica e o Teste
Intracutneo em Testes de reatividade biolgica in vitro
(6.2.5). Nenhuma distino de classe ou tipo realizada
entre os materiais elastomricos que atendem aos requisitos
da primeira fase de teste e aqueles que cumprem o segundo
estgio, qualifcando-se como materiais biocompatveis.
Os materiais elastomricos no so classifcados nas
classes de I-VI.
6.2.4.2 CORRELATOS
A biocompatibilidade do plstico, de outros polmeros e
partes elastomricas desses produtos testada de acordo
com os procedimentos descritos em Testes de reatividade
biolgica in vitro (6.2.5). Se, tambm, for necessria uma
designao de classe para um plstico ou outro polmero,
so realizados os procedimentos de testes adequados
descritos em Testes de reatividade biolgica in vivo (6.2.6).
6.2.4.3 TESTES IN VITRO, TESTES IN
VIVO E DESIGNAO DE CLASSE PARA
PLSTICOS E OUTROS POLMEROS
Os requisitos de testes in vitro e in vivo so elaborados
para determinar a reatividade biolgica das culturas de
clulas de mamferos e a resposta biolgica de animais
aos materiais elastomricos, plsticos e outros polmeros,
quando em contato direto ou indireto com o paciente. A
reatividade biolgica desses materiais pode depender
tanto de suas caractersticas de superfcie, quanto de seus
componentes qumicos extraveis. Os procedimentos de
teste podem ser realizados com o material, ou um extrato
do material em teste, salvo indicao contrria.
Preparao de Extratos
Normalmente a avaliao da biocompatibilidade de um
correlato inteiro no realista e a utilizao de pores
representativas, ou de extratos de materiais selecionados
pode ser uma alternativa prtica para a realizao dos ensaios.
Quando pores ou extratos so utilizados, importante
considerar que a matria-prima pode sofrer alteraes qumicas
durante a fabricao; o processamento e a esterilizao de um
correlato. Ensaios, in vitro, de matria-prima podem servir
como um importante processo de triagem, mas a avaliao
fnal da biocompatibilidade do correlato deve ser realizada
com partes do produto, acabado e esterilizado.
As extraes podem ser realizadas em vrias temperaturas
(121, 70, 50, ou 37 C), em vrios intervalos de tempo
(1, 24, ou 72 horas) e em meios de extrao diferentes.
A escolha do meio de extrao para testes in vitro inclui
soluo de cloreto de sdio injetvel a 0,9%, ou meio de
cultura de tecidos com ou sem soro. Quando o meio com
soro utilizado, a temperatura de extrao no pode exceder
37 C. Ao escolher as condies de extrao, selecionar a
temperatura, o solvente e as variveis de tempo que melhor
simulem as condies de uso do produto. O desempenho
dos vrios testes em diversas condies pode ser utilizado
para simular as variaes das condies em uso. Uma
avaliao de biocompatibilidade realizada com o produto,
acabado e esterilizado, embora, uma seleo cuidadosa das
condies de extrao permita a simulao das condies
de produo e teste da matria-prima.
Teste in vitro
Quando testes in vitro so realizados, a amostra
biocompatvel, se as culturas de clulas no apresentarem
reatividade maior do que a suave (grau 2), conforme
descrito nos Testes de reatividade biolgica in vitro (6.2.5).
Teste in vivo e designao de classe
De acordo com a defnio de injeo e implantao
descritos em Testes de reatividade biolgica in vivo
(6.2.6), plsticos e outros polmeros so classifcados
em classes de I a VI. Para obter designao de plsticos,
ou outros polmeros, os extratos da substncia teste so
produzidos de acordo com os procedimentos descritos
em diversos meios. Para avaliar a biocompatibilidade, os
extratos so inoculados, por via sistmica e intracutnea,
em camundongos e coelhos. De acordo com os requisitos
para injeo, um plstico ou outro polmero pode ser
classifcado inicialmente como I, II, III, ou V. Se, alm
do teste de injeo, for realizado o teste de implantao
com o mesmo material, o plstico ou o polmero pode ser
classifcado como classe IV ou VI.
6
6.2.4.4 BIOCOMPATIBILDADE DE
CORRELATOS
Alm de avaliar os correlatos para esterilidade, Testes
in vitro e in vivo, os correlatos so avaliados para
sensibilizao, toxicidade subcrnica, genotoxicidade,
hemocompatibilidade, toxicidade crnica,
carcinogenicidade, toxicidade reprodutiva ou de
desenvolvimento e biodegradao.
Nas orientaes internacionais h indicao de que a
extenso dos testes executados para um correlato depende
dos seguintes fatores: a semelhana e a exclusividade
do produto em relao aos produtos anteriormente
comercializados, como considerado no Fluxograma
de Deciso; a extenso e a durao do contato entre o
produto e o paciente, como descrito na Categorizao de
Correlatos e a composio do material do produto, como
considerado nas sees Fluxograma de Deciso, Testes in
vivo e Designao de Classes.
FLUXOGRAMA DE DECISO
As orientaes para a comparao de um correlato com
produtos comercializados anteriormente so fornecidas
pelo Fluxograma de Deciso de Biocompatibilidade
(Figura 1).
Figura 1 - Fluxograma de biocompatibilidade adaptado a partir do FDA Blue Book Memorandum # G95-1.
O objetivo com o fuxograma determinar se os dados
disponveis de correlatos anteriormente comercializados
so sufcientes para garantir a segurana do correlato em
questo. Como indicado no fuxograma, a composio do
material e as tcnicas de fabricao de um produto so
comparadas com os correlatos j comercializados, que
entram em contato direto com o corpo. Alm disso, no
fuxograma h exigncia de uma avaliao da toxicidade
de um material exclusivo que no tenha sido utilizado
anteriormente em produtos correlatos. As respostas s
questes colocadas no fuxograma levam concluso de
que os dados disponveis so sufcientes, ou que testes
adicionais so necessrios para garantir a segurana
6
do produto. As orientaes quanto identifcao dos procedimentos apropriados para testes adicionais so fornecidas na
seo Matriz de Seleo de Teste.
CATEGORIZAO DE CORRELATOS
Para facilitar a identifcao dos procedimentos de testes adequados, os correlatos esto divididos e subdivididos, como
est registrado na Tabela 1 de acordo com a natureza e a extenso do seu contato com o corpo. As principais categorias de
correlatos so de superfcie, comunicao extracorprea e implantveis. Depois, essas classifcaes so subcategorizadas
e exemplos de correlatos pertencentes a cada uma das subcategorias (Tabela 1).
Tabela 1 - Classifcao e exemplos de correlatos.
Categoria do
Correlato
Subcategoria
do Correlato
Natureza ou Extenso
de Contato
Exemplos
Superfcie Pele Correlatos que entram em
contato somente com a
superfcie intacta da pele.
Eletrodos, prteses externas, ftas de
fxao, bandagens de compresso
e monitores de diversos tipos.
Mucosa Correlatos que se
comunicam com
membranas intactas
da mucosa.
Lentes de contato, cateteres urinrios,
dispositivos intravaginais e intra
intestinais (tubos de estmago,
sigmoidoscpios, colonoscpios,
gastroscpios), tubos endotraqueais,
broncoscpios, prteses dentrias,
dispositivos ortodnticos e intrauterinos.
Superfcies
Comprometidas
ou No ntegras
Correlatos que entram em
contato com superfcies
corporais comprometidas
ou no-ntegras.
Curativos, dispositivos de cicatrizao
e bandagens oclusivas para lcera,
queimadura e tecido granulado.
Vaso Sanguneo,
Indireto
Correlatos que entram
em contato com o
vaso sanguneo em um
ponto e servem como
canal de entrada para
o sistema vascular.
Conjunto de administrao de
soluo, de transferncia e de
administrao de sangue, extensores.
Comunicao
extracorprea
Comunicao
com Tecido, Osso
ou Dentina
Correlatos e materiais
que se comunicam
com tecido, osso ou
sistema dentina/polpa.
Laparoscpios, artroscpios, sistemas de
drenagem, cimento odontolgico, material
de enchimento dentrio e grampos de pele.
Circulao sangunea Correlatos que entram
em contato com a
circulao sangunea.
Cateteres intravasculares, eletrodos de
marca-passo temporrio, oxigenadores,
tubo de oxigenador extracorpreo
e acessrios, dialisadores, tubo de
dilise e acessrios, hemoadsorventes
e imunoadsorventes.
Implantveis Tecido ou Osso Correlatos que entram em
contato principalmente
com o osso, o tecido ou
com o fuido de tecido.
Exemplos de molde como pinos
ortopdicos, placas, juntas de substituio,
prteses de osso, cimentos e dispositivos
intra-sseos. Exemplos dos ltimos
so marca-passos, dispositivos de
suprimento de medicamentos, sensores
e estimuladores neuromusculares,
tendes de substituio, implantes
mamrios, laringes artifciais, implantes
subperiosteais e grampos de ligao.
Sangue Correlatos em contato
principalmente
com sangue.
Eletrodos de marca passo, fstula
arteriovenosa artifcial, vlvulas
cardacas, enxerto de vlvula, cateteres de
administrao interna de medicamentos
e dispositivos de assistncia ventricular.
6
MATRIZ DE SELEO DE TESTE
Na matriz h orientaes para identifcao dos
procedimentos adequados para testes biolgicos para as
trs categorias de correlatos: Testes para Dispositivos de
superfcie (Tabela 1 em Guia para a seleo de plstico
e outros polmeros (6.2.4.5)), Testes para Dispositivos
de Comunicao Extracorprea (Tabela 2 em Guia
para a seleo de plstico e outros polmeros (6.2.4.5)),
e Testes para Dispositivos Implantveis (Tabela 3 em
Guia para a seleo de plstico e outros polmeros
(6.2.4.5)). Cada categoria de correlatos subcategorizada
e subdividida conforme a durao do contato entre o
dispositivo e o corpo. A durao do contato defnida
como limitada (menos de 24 horas); prolongada (24
horas a 30 dias) ou permanente (mais de 30 dias). Os
efeitos biolgicos que esto includos na matriz so:
citotoxicidade, sensibilizao, irritao ou reatividade
intracutnea, toxicidade sistmica, toxicidade subcrnica,
genotoxicidade, implantao, hemocompatibilidade,
toxicidade crnica, carcinogenicidade, toxicidade
reprodutiva ou de desenvolvimento e biodegradao.
Na matriz, para cada subcategoria h um quadro associado
aos requisitos de teste e, geralmente, o nmero de testes
aumenta conforme a durao do contato entre o dispositivo
e o corpo estendida e de acordo com a proximidade de
contato entre o dispositivo e o sistema circulatrio. Dentro
das subcategorias, a opo de realizar testes adicionais
deve ser considerada caso a caso. As situaes especfcas,
como o uso de dispositivos implantveis permanentes ou
com comunicao extracorprea em mulheres grvidas,
devem ser consideradas pelo fabricante que decidir quanto
incluso do teste de reproduo ou de desenvolvimento.
As orientaes sobre a identifcao de eventuais
procedimentos adicionais para teste so fornecidas na
matriz de cada subcategoria de correlatos.
6.2.4.5 GUIA PARA A SELEO DE
PLSTICO E OUTROS POLMEROS
Designao de Classe para Correlato
Na Figura 1 h orientao para a escolha da designao da
classe apropriada do plstico ou de outro polmero para um
correlato e cada subcategoria de Dispositivos de Superfcie
e na Figura 2 para Dispositivos de Comunicao. As
designaes de classe podem ser encontradas em Testes de
reatividade biolgica in vivo (6.2.6).
Figura 1 - Requisitos de Classe de plsticos e outros polmeros para dispositivos de superfcie.
________________
* Categorizao baseada na durao do contato. Limitada: menos de 24 horas; prolongada: de 24 horas a 30 dias; permanente: mais de 30 dias.
Designao de Classe de Plsticos.
6
Figura 2 - Requisitos de Classe de plsticos e outros polmeros paradispositivos de comunicao extracorprea.
_________________
* Categorizao baseada na durao do contato. Limitada: menos de 24 horas; prolongada: de 24 horas a 30 dias; permanente: mais de 30 dias. Designao
de Classe de Plsticos.
O nmero da classe indicada aumenta conforme a durao
de contato entre o dispositivo e o corpo (risco). Na
categoria de Dispositivos Implantveis, o uso exclusivo da
classe VI obrigatrio. A designao de classes de plstico
baseada nas matrizes de seleo de testes ilustradas nas
Tabelas 1, 2 e 3.
A atribuio de classe de um plstico ou outro polmero
a uma subcategoria no se destina a restringir o uso de
categorias superiores de plsticos ou outros polmeros.
Embora a designao atribuda defna a classe numrica
mais baixa de plstico ou outro polmero que pode ser
utilizada no correlato correspondente, o uso de uma classe
de plstico numericamente maior opcional. Quando um
correlato pertencer a mais de uma categoria, o plstico, ou
outros polmeros devem satisfazer as exigncias da classe
numrica mais alta.
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6.2.5 TESTES DE REATIVIDADE
BIOLGICA IN VITRO
Os testes a seguir so elaborados para determinar a reatividade
biolgica de culturas de clulas de mamferos, aps o contato
com plsticos elastomricos e outros materiais polimricos,
que entram em contato direto, ou indireto com o paciente,
ou aps o contato com extratos especfcos elaborados a
partir dos materiais em teste. essencial que os testes sejam
realizados sobre a rea de superfcie especifcada. Quando a
superfcie da amostra no puder ser determinada, utilizar 0,1
g de elastmero ou 0,2 g de plstico, ou outro material, para
cada mL de fuido de extrao.
Trs ensaios so descritos: Teste de Difuso em gar, Teste
de Contato Direto e Teste de Eluio. A deciso de qual
tipo ou do nmero de ensaios a ser realizado para avaliar o
potencial da resposta biolgica de uma amostra especfca
ou de um extrato, depende do material, do produto fnal e de
suas intenes de uso. Outros fatores que, tambm, podem
afetar a adequao da amostra para um uso especfco so:
composio polimrica; procedimentos de processamento
e limpeza; meios de contato; corantes; adesivos; absoro,
adsoro e permeabilidade dos conservantes e as condies
de armazenamento. A avaliao de tais fatores deve ser
realizada por ensaios especfcos adicionais apropriados,
antes de determinar que um produto produzido por meio de
um material especfco, adequado para a sua inteno de uso.
Preparao da Cultura Celular. Em um meio essencial
mnimo suplementado com soro de densidade de semeadura
de cerca de 105 clulas por mL, preparar culturas mltiplas
de clulas fbroblsticas L-929 (linhagem celular ATCC
CCL 1, NCTC clone 929). Incubar as culturas a 37 C 1
C em uma incubadora umidifcada, com uma atmosfera de
(5 1)% de dixido de carbono, por no mnimo 24 horas
at a obteno de monocamada, com confuncia superior a
80%. Examinar as culturas preparadas com um microscpio
para assegurar um nvel uniforme de monocamadas quase
confuentes.
Solventes de extrao. Soluo de cloreto de sdio injetvel
(ver monografa correspondente). Alternativamente podem
ser utilizados meios livres ou suplementados com soro para
cultura de clulas de mamferos. A suplementao do soro
utilizada quando a extrao realizada a 37 C, por 24 horas.
Equipamentos
Autoclave. Empregar uma autoclave capaz de manter
a temperatura de 121 C 2 C e capaz de resfriar os
recipientes de ensaio em torno de 20 C.
Estufa. Utilizar preferencialmente um modelo de conveco
mecnica, capaz de manter as temperaturas de operao na
faixa de 50 C a 70 C 2 C.
Incubadora. Utilizar incubadora capaz de manter a
temperatura de 37 C 1 C e uma atmosfera mida com (5
1)% de dixido de carbono no ar.
Recipientes de Extrao. Utilizar apenas recipientes
de vidro Tipo I, tais como tubo de ensaio de cultura com
tampa de rosca, ou equivalente. A tampa de rosca deve ter
revestimento elastomrico apropriado. A superfcie exposta
desse revestimento deve ser totalmente protegida com um
disco slido inerte de 50-75 m de espessura.
Preparao dos Equipamentos. Limpar, completamente,
toda a vidraria com soluo de limpeza de cido crmico e,
se necessrio, com cido ntrico quente, seguido de enxgue
prolongado com gua estril para injetveis. Esterilizar e
secar os recipientes e equipamentos utilizados para extrao,
transferncia ou administrao do material de ensaio,
por meio de processo adequado. Se o xido de etileno for
utilizado como agente esterilizante, aguardar pelo menos 48
horas para desgaseifcao completa.
Procedimento
Preparao da Amostra para Extrato. Preparar conforme
descrito no Procedimento de Testes de reatividade biolgica
in vivo (6.2.6).
Preparao de Extratos. Preparar conforme descrito no
Procedimento de Testes de reatividade biolgica in vivo
(6.2.6), utilizando soluo de cloreto de sdio injetvel
(0,9% NaCl) ou meio livre de soro para cultura de clulas
de mamferos conforme descrito em Extrao de Solventes.
Se a extrao for feita a 37 C por 24 horas em incubadora,
utilizar meios de cultura celular suplementados com soro.
Em nenhum caso, as condies de extrao devem causar
mudanas fsicas, tais como fuso ou derretimento das
pores do material, exceto uma leve aderncia.
TESTE DE DIFUSO EM GAR
Esse teste foi elaborado para materiais elastomricos de
diversos modelos. A camada de gar atua como um suporte
para proteger as clulas de danos mecnicos, possibilitando
a difuso de produtos qumicos lixiviveis das amostras
polimricas. Em um pedao de papel de fltro, so aplicados
os extratos de materiais a serem testados.
Preparao da Amostra. Utilizar extratos preparados
conforme descrito ou pores das amostras com superfcies
planas e no inferiores a 100 mm
2
.
Preparao do Controle Positivo. Proceder conforme
descrito em Preparao da Amostra.
Preparao do Controle Negativo. Proceder conforme
Procedimento. Utilizar 7 mL da suspenso de clulas
preparada conforme descrito na Preparao da Cultura
Celular e preparar as camadas em placas de 60 mm de
dimetro. Depois de realizada a incubao, aspirar o meio
de cultura das camadas e substitu-lo por meio suplementado
com soro contendo quantidades de at 2% de gar. A qualidade
do gar deve ser adequada para sustentar o crescimento
celular. A camada de gar deve ser sufcientemente fna para
possibilitar a difuso dos produtos qumicos lixiviveis.
Colocar as superfcies planas da amostra, controle negativo
6
e controle positivo, ou seus extratos, em contato com a
superfcie solidifcada de gar, em duplicata. No utilizar
mais do que trs amostras em cada placa preparada. Incubar
todas as culturas a 37 C 1 C, por, no mnimo, 24 horas,
em incubadora apropriada. Examinar, visualmente, ou com
um microscpio cada cultura ao redor da amostra; controle
negativo e controle positivo, utilizando colorao adequada,
se necessrio.
Interpretao de Resultados. A reatividade biolgica,
ou seja, m-formao e degenerao celular, descrita
Tabela 1 - Classifcao da reatividade para Teste de Difuso em gar e Teste de Contato Direto.
Classifcao Reatividade Descrio da Zona de Reatividade
0 Nenhuma Nenhuma zona detectvel ao redor ou sob a amostra.
1 Leve Algumas clulas mal formadas ou degeneradas sob a amostra.
2 Suave Zona limitada rea sob a amostra.
3 Moderada Zona estende-se de 0,5 a 1,0 cm alm da amostra.
4 Forte Zona estende-se mais que 1,0 cm alm da amostra.
e classifcada em uma escala de 0 a 4 (Tabela 1). Medir
as respostas das culturas celulares da amostra, controle
negativo e controle positivo. O sistema de ensaio de cultura
de clulas adequado se as respostas observadas forem
classifcadas como 0 (sem reatividade) para o controle
negativo e no mnimo 3 (moderada) para o controle positivo.
A amostra atende aos requisitos do teste se a resposta no
for superior classifcao 2 (suavemente reativa). Repetir o
procedimento, se a adequao do sistema no for confrmada.
TESTE DE CONTATO DIRETO
Esse teste defnido para materiais em diversos formatos.
O procedimento possibilita extraes simultneas e teste
de produtos qumicos lixiviveis da amostra em um meio
suplementado com soro. O procedimento no apropriado
para materiais com densidade muito alta ou muito baixa,
pois pode causar danos mecnicos s clulas.
Preparao da Amostra. Utilizar poro da amostra com
superfcie plana no inferior a 100 mm
2
.
preparada conforme descrito em Preparao da Cultura
Celular, preparar as camadas em placas de 35 mm de
dimetro. Aps a incubao, aspirar o meio das culturas e
substitu-lo por 0,8 mL de meio de cultura fresco. Colocar
uma nica amostra, controle negativo e controle positivo
em cada uma das duplicatas do meio de cultura. Incubar
todas as culturas 37 C 1 C, por, no mnimo, 24 horas,
em incubadora apropriada. Examinar, visualmente, ou
com um microscpio cada cultura ao redor da amostra;
do controle negativo e do controle positivo, utilizando
colorao adequada, se necessrio.
Interpretao de Resultados. Proceder conforme a
interpretao de resultados do Teste de Difuso em gar.
A amostra atende aos requisitos do teste, se a resposta da
amostra no for superior classifcao 2 (suavemente
reativa). Repetir o procedimento, se a adequao do
sistema no for confrmada.
TESTE DE ELUIO
Esse ensaio defnido para a avaliao de extratos de
materiais polimricos. O procedimento possibilita a
extrao de amostras por intervalos de tempo variados
e em temperaturas fsiolgicas e no fsiolgicas.
apropriado para materiais de alta densidade e avaliaes
de dose resposta.
Preparao da Amostra. Preparar conforme descrito em
Preparao de Extratos, utilizando soluo de cloreto de
sdio injetvel (0,9% NaCl) ou meio livre de soro para cultura
de clulas de mamferos conforme Solventes de Extrao.
Se o tamanho da amostra no puder ser prontamente
medido, pode ser utilizada uma massa de no mnimo 0,1 g
de material elastomrico ou 0,2 g de plstico ou material
polimrico, por mL de meio de extrao. Alternativamente,
para simular condies mais prximas s fsiolgicas,
utilizar para a extrao, um meio de cultura de clulas de
mamferos, suplementado com soro. Preparar os extratos
por meio do aquecimento a 37 C 1 C por 24 horas, em
uma incubadora apropriada. Temperaturas superiores podem
causar a desnaturao das protenas do soro.
preparada conforme descrito na Preparao da Cultura
Celular, preparar as monocamadas em placas de 35 mm de
dimetro. Aps a incubao, aspirar o meio das camadas e
substitu-lo com extrato da amostra; do controle negativo e
do controle positivo. Os extratos dos meios suplementados,
ou no com soro so testados em duplicata, sem diluio
(100%). O extrato da soluo de cloreto de sdio injetvel
diludo com clulas do meio de cultura suplementado
com soro e testado, em duplicata, a uma concentrao
de 25%. Incubar todas as culturas a 37 C 1 C por 48
horas, em uma incubadora apropriada. Examinar com
um microscpio cada cultura aps 48 horas, utilizando
colorao adequada, se necessrio.
6
Interpretao de Resultados. Proceder conforme interpretao de resultados do Teste de Difuso em gar, porm
utilizando a Tabela 2. A amostra atende aos requisitos do teste, se a resposta da amostra no for superior classifcao
2 (suavemente reativa). Repetir o procedimento se a adequao do sistema no for confrmada. Para avaliaes de dose-
resposta, repetir o procedimento, utilizando diluies quantitativas do extrato da amostra.
Tabela 2 - Classifcao da reatividade para teste de eluio.
Classifcao Reatividade Condies das Culturas
0 Nenhuma Grnulos intracitoplasmticos descontnuos; sem lise celular.
1 Leve At 20% das clulas so redondas, vagamente unidas, sem grnulos
intracitoplasmticos; clulas lisadas esto ocasionalmente presentes.
2 Suave At 50% das clulas so redondas e desprovidas de grnulos citoplasmticos; sem
lise celular extensiva e reas vazias entre as clulas.
3 Moderada At 70% das camadas contm clulas arredondadas ou lisadas.
4 Forte Destruio quase integral das camadas de clulas.
6.2.6 TESTES DE REATIVIDADE
BIOLGICA IN VIVO
Os testes a seguir so elaborados para determinar a
resposta biolgica de animais a materiais elastomricos,
plsticos e outros materiais polimricos, que entram em
contato direto, ou indireto com o paciente, ou a resposta
inoculao de extratos especfcos elaborados a partir
dos materiais em teste. essencial disponibilizar a rea
de superfcie especfca para extrao. Quando a rea de
superfcie da amostra no puder ser determinada, utilizar
0,1 g de elastmero ou 0,2 g de plstico, ou outro material,
para cada mL de fuido de extrao.
Trs ensaios so descritos para classifcar plsticos e outros
polmeros, que so aplicveis a materiais e correlatos,
baseando-se em ensaios de reatividade biolgica in vivo.
Teste de Injeo Sistmica e Teste Intracutneo so
utilizados para materiais elastomricos, especialmente
para materiais em que o Teste de reatividade biolgica
in vitro (6.2.5) adequado indicou reatividade biolgica
signifcativa. O Teste de Implante usado para verifcar
a adequao de plsticos e outros polmeros, utilizados
na fabricao de recipientes e acessrios; em preparaes
parenterais, em correlatos, implantes e outros sistemas.
Nesse captulo se aplicam as seguintes defnies: amostra
o material em teste, ou o extrato preparado a partir de
um determinado material. O branco consiste da mesma
quantidade do meio que utilizado para a extrao da
amostra, sendo tratado da mesma forma que o meio que
contm a amostra analisada. O controle negativo uma
amostra que no apresenta nenhuma reao nas condies
do ensaio.
Classifcao de Plsticos. Seis classes de plstico so
defnidas (Tabela 1), baseadas nas respostas para uma
srie de ensaios in vivo no qual os extratos, materiais e
vias de administrao so especifcados. Esses testes esto,
diretamente relacionados, com a utilizao fnal dos artigos
de plstico. Nas preparaes em que os plsticos esto
susceptveis a entrar em contato com os veculos, a escolha
da soluo de extrao representativa. A classifcao
registrada na Tabela 1 resume os testes a serem realizados
em recipientes para injetveis e em dispositivos mdicos,
caso haja necessidade de classifcao.
6
Tabela 1 - Classifcao de plsticos e testes a serem realizados.
Classes de Plsticos
a
Testes a Serem Realizados
I II III IV V VI Material de Teste Animal Dose Procedimentos
b
x x x x x x Extrato de Amostra
em Soluo de Cloreto
de Sdio injetvel
Camundongo 50 mL/kg A (IV)
x x x x x x Coelho 0,2 mL/ animal em
cada um dos 10 stios
B
x x x x x Extrato de Amostra de
Soluo de lcool 1:20
em Soluo de Cloreto
de Sdio injetvel
Camundongo 50 mL/kg A (IV)
x x x x x Coelho 0,2 mL/animal em
B
x x x
Extrato de Amostra em
Polietilenoglicol 400
Camundongo 10 g/kg A (IP)
x x Coelho 0,2 mL/ animal em
B
x x x x
Extrato de Amostra
em leo Vegetal
Camundongo 50 mL/kg A (IP)
x x x Coelho 0,2 mL/ animal em
B
x x Tiras de Implante
de Amostra
Coelho 4 tiras/animal C
________________
a Testes exigidos para cada classe indicada com um x na coluna apropriada.
b Legenda: A (IP) Teste de Injeo Sistmica (intraperitoneal); A (IV) Teste de Injeo Sistmica (intravenosa); B Teste Intracutneo (intracutnea); C
Teste de Implantao (implantao intramuscular).
Com exceo do Teste de Implante, os procedimentos
so baseados na utilizao de extratos que, em funo da
resistncia trmica do material, so preparados em uma das
trs temperaturas padro: 50, 70 e 121 C. Por essa razo, a
designao da classe de um plstico deve ser acompanhada
por uma indicao da temperatura de extrao (por exemplo
IV-121 C, a designao da classe IV, de um plstico
extrado a 121 C; I-50 C, a designao da classe I,
de um plstico extrado a 50 C). Os plsticos podem ser
classifcados nas classes de I a VI, com base nos critrios
de resposta registrados na Tabela 1.
Essa classifcao no se aplica aos plsticos que so
destinados a serem utilizados como recipientes para
produtos tpicos ou orais, ou que possam ser utilizados
como parte integrante de uma formulao de medicamento.
As informaes registradas na Tabela 1 no se aplicam aos
elastmeros naturais, que so testados somente por meio
de soluo de cloreto de sdio injetvel e de leos vegetais.
O Teste de Injeo Sistmica e o Teste Intracutneo so
elaborados para determinar, respectivamente, as respostas
biolgicas sistmicas e as locais; em animais expostos aos
plsticos e outros polmeros, pela inoculao de dose nica
de extratos especfcos da amostra. O Teste de Implante
elaborado para avaliar a reao do tecido vivo ao plstico
e outros polmeros, por meio da implantao da prpria
amostra no tecido animal. A preparao adequada e a
colocao das amostras em condies de assepsia so
importantes na realizao do Teste de Implante.
Esses testes so elaborados para aplicao em materiais
nas condies em que so utilizados. Se, antes de sua
utilizao fnal, o material deve ser exposto a qualquer
processo de limpeza ou de esterilizao, os testes devem
ser realizados em uma amostra submetida a tais processos.
Meios de Extrao
Soluo de cloreto de sdio injetvel. Ver monografa
correspondente.
Soluo de lcool 1:20 em soluo de cloreto de sdio
injetvel.
Polietilenoglicol 400. Ver monografa correspondente.
leo vegetal. Utilizar leo de gergelim, leo de semente
de algodo ou outros leos vegetais apropriados (ver
monografa). Se possvel, obter leos recm-refnados.
Utilizar trs animais devidamente preparados e inocular
intracutaneamente em cada animal uma dose de 0,2 mL de
leo, em cada um dos 10 stios, e observar os animais por 24,
48 e 72 horas aps a inoculao. Classifcar as observaes
de cada local, conforme a escala numrica indicada na
Tabela 2. Em qualquer momento de observao, a resposta
mdia nos 3 coelhos (30 stios de inoculao) no deve ser
superior a 0,5 para eritema, deve ser inferior a 1,0 para o
edema, e em nenhum dos locais pode ocorrer uma reao
tecidual maior que 10 mm de dimetro total. O resduo de
leo no local da inoculao no deve ser interpretado como
edema. Quando pressionado suavemente, o edema tecidual
fca esbranquiado.
gua para injetveis. Ver monografa correspondente.
6
Tabela 2 - Avaliao das reaes da pele.
Eritema e Formao de Escaras Pontuao
Sem eritema 0
Eritema suave (muito pouco perceptvel) 1
Eritema bem defnido 2
Eritema moderado a grave 3
Eritema grave (vermelho beterraba) leve formao de escara (ferimentos profundos) 4
Formao de Edema Pontuao
Sem edema 0
Edema muito suave (muito pouco perceptvel) 1
Edema suave (bordas com rea bem defnida pelo aumento preciso) 2
Edema moderado (aproximadamente com 1 mm de salincia) 3
Edema grave (com mais de 1 mm de salincia e alm da rea de exposio) 4
________________
* Exclui o edema no-infamatrio (mecnico) a partir do branco ou do fuido de extrao.
Equipamentos
Autoclave. Empregar uma autoclave capaz de manter
a temperatura de 121 C 2 C e capaz de resfriar os
recipientes de ensaio em torno de 20 C.
Estufa. Utilizar preferencialmente um modelo de
conveco mecnica, capaz de manter as temperaturas de
operao na faixa de 50 a 70 C 2 C.
Recipientes de Extrao. Utilizar apenas recipientes de
vidro Tipo I, tais como tubo de ensaio de cultura com
tampa de rosca, ou equivalente. A tampa de rosca deve
ter revestimento elastomrico apropriado. A superfcie
exposta desse revestimento deve ser totalmente protegida
com um disco slido inerte de 50-75 m de espessura.
Preparao dos Equipamentos. Limpar completamente
toda a vidraria com soluo de limpeza de cido crmico e,
se necessrio, com cido ntrico quente, seguido de enxgue
prolongado com gua. Antes de utilizar na subdiviso da
amostra, limpar os equipamentos cortantes por meio de
um mtodo adequado, como limpezas sucessivas com
acetona e cloreto de metileno. Limpar todos os outros
equipamentos por meio de uma lavagem completa com
detergente adequado e enxgue prolongado com gua.
Esterilizar e secar os recipientes e equipamentos utilizados
para extrao, transferncia ou administrao do material
de ensaio, por meio de processo adequado. Se o xido de
etileno for utilizado como agente esterilizante, possibilitar
tempo adequado para a desgaseifcao completa.
Procedimento.
Preparao da amostra. O Teste de Injeo Sistmica e
o Teste Intracutneo podem ser realizados com o mesmo
extrato ou com extratos distintos. Selecionar e subdividir
em partes a amostra do tamanho indicado na Tabela
3. Remover o material particulado de cada amostra
subdividida, ou do controle negativo, colocando a amostra
em uma proveta graduada de 100 mL, de vidro de tipo I,
limpa e com tampa, e adicionar cerca de 70 mL de gua
para injetveis. Agitar por cerca de 30 segundos e drenar
a gua, repetir essa etapa e secar as peas preparadas para
a extrao com leo em uma estufa at 50 C. No limpar
a amostra com pano seco ou molhado ou lavar e enxaguar
com solvente orgnico, tensoativo, etc.
6
Tabela 3 - rea de superfcie da amostra a ser utilizada.
Forma do Material Espessura
Quantidade de Amostra para cada
20 mL de Meio de Extrao
Subdividida Em 1
Filme ou lmina <0,5 mm Equivalente a 120 cm
2
da rea total de
superfcie (ambos lados combinados)
Tiras com cerca de 5 0,3 cm
0,5 a 1 mm Equivalente a 60 cm
2
da rea total de
superfcie (ambos lados combinados)
Tubo <0,5 mm (parede) Comprimento (em cm) = 120 cm
2
/
(somatria das circunferncias
de dimetro interno e externo)
Partes com cerca de 5 0,3 cm
0,5 a 1 mm (parede) Comprimento (em cm) = 60 cm
2
/
(somatria das circunferncias
de dimetro interno e externo)
Tiras, tubo e
itens moldados
>1 mm Equivalente a 60 cm
2
da rea total
de superfcie (todas as superfcies
expostas combinadas)
Pedaos com at 5 0,3 cm
Elastmeros >1 mm Equivalente a 25 cm
2
da rea total
de superfcie (todas as superfcies
expostas combinadas)
Sem subdiviso
2
Preparao de extratos. Colocar uma amostra,
devidamente preparada, para ser testada em um recipiente
de extrao e adicionar 20 mL do meio adequado. Repetir
essas instrues para cada meio de extrao necessrio
para o teste. Preparar, tambm, um branco de 20 mL de
cada meio para injees paralelas e comparaes. Extrair
por aquecimento, em uma autoclave a 121 C, por 60
minutos, e no caso de um forno a 70 C, por 24 horas, ou a
50 C, por 72 horas. Possibilitar tempo sufciente para que
o lquido do recipiente atinja a temperatura de extrao.
Em nenhum momento as condies de extrao devem
causar alteraes fsicas, tais como fuso ou derretimento
das partes de amostra, para no resultar em uma diminuio
da superfcie disponvel. Uma leve aderncia das partes
pode ser tolerada. Adicionar sempre, individualmente, as
partes limpas ao meio de extrao. Se os tubos de cultura
so utilizados para extrao de leo vegetal com autoclave,
selar adequadamente as tampas de rosca com fta adesiva
sensvel presso. Resfriar at a temperatura ambiente,
porm, no inferior a 20 C, agitar, vigorosamente, por
vrios minutos e, imediatamente, decantar cada extrato de
forma assptica, em um recipiente estril e seco. Armazenar
os extratos a uma temperatura entre 20 C e 30 C e no
utilizar para testes aps 24 horas.
TESTE DE INJEO SISTMICA
Esse teste elaborado para avaliar as respostas sistmicas
aos extratos de materiais testados por meio de inoculao
em camundongos.
Animal de teste. Utilizar camundongos albinos saudveis,
no utilizados anteriormente, pesando entre 17 e 23 g.
Para cada grupo de teste, utilizar apenas os camundongos
da mesma origem. gua e alimentos de composio
conhecidos, comumente utilizados em animais de
laboratrio, so permitidos vontade.
Procedimento. Antes de retirar a dose de inoculao,
agitar, vigorosamente cada extrato para assegurar a
distribuio uniforme da matria extrada. As partculas
visveis no devem ser administradas por via intravenosa.
Em um grupo de teste, inocular em cada um dos cinco
camundongos a amostra ou o branco, conforme descrito na
Tabela 4, diluindo cada g do extrato da amostra preparada
com polietilenoglicol 400 e o branco correspondente, com
4,1 volumes de soluo de cloreto de sdio injetvel, para
obter uma soluo com uma concentrao de cerca de 200
mg de polietilenoglicol por mL.
Tabela 4 - Procedimento para inoculao - Teste de Injeo Sistmica
Extrato ou Branco Dose por kg
Via de
Administrao*
Velocidade de
Inoculao, L
por segundo
Soluo de lcool 1:20 em soluo de cloreto de sdio injetvel 50 mL IV 100
Polietilenoglicol 400 10 g IP
Veculo de medicamentos (quando aplicvel) 50 mL IV 100
50 mL IP
leo vegetal 50 mL IP
________________
* IV = intravenosa (amostra aquosa e branco); IP = intraperitoneal (amostra oleosa e branco).
6
Examinar os stios de inoculao para evidenciar qualquer
reao tecidual, tais como eritema, edema e necrose. Se
necessrio, limpar levemente a pele com lcool diludo
para facilitar a leitura dos locais de inoculao. Observar
todos os animais 24, 48 e 72 h aps a inoculao.
Classifcar as observaes em uma escala numrica para o
extrato da amostra e para o branco, utilizando a Tabela 2.
Se necessrio, prender novamente o plo durante o perodo
de observao. A mdia de pontuao de eritema e edema
para os locais da amostra e do branco so determinadas
para cada coelho e a cada intervalo de pontuao aps 24,
48 e 72 horas de inoculao. Depois da pontuao referente
a 72 horas, todas as pontuaes de eritema, mais as de
edema so totalizadas, separadamente, para cada amostra
e branco. Dividir cada total por 12 (2 animais 3 perodos
de pontuao 2 categorias de pontuao) para determinar
a mdia total para cada amostra versus cada branco
correspondente. Os requisitos do teste so cumpridos
se a diferena entre a pontuao mdia da amostra e do
branco for inferior ou igual a 1,0. Se em qualquer perodo
de observao, a mdia para a reao da amostra
questionvel por ser maior do que a mdia para a reao
do branco, repetir o teste utilizando trs coelhos adicionais.
Os requisitos do teste so cumpridos se a diferena entre
a pontuao mdia da amostra e do branco for igual ou
inferior a 1,0.
TESTE DE IMPLANTE
O teste de implante elaborado para avaliao de materiais
plsticos e outros polmeros quando entram em contato
direto com tecido vivo. A preparao adequada das tiras
de implante e a sua implantao devem ser realizadas sob
condies de assepsia. Preparar para implantao 8 tiras
da amostra e 4 tiras de padro . Cada tira deve medir no
mnimo 10 1 mm. As bordas das tiras devem ser o mais
suave possvel, para evitar traumas mecnicos adicionais na
implantao. As tiras de tamanho mnimo especifcado so
implantadas por meio de uma agulha hipodrmica (calibre
15 a 19) com ponta intravenosa e um trocarte estril.
Utilizar uma ou outra agulha pr-esterilizada em que as
tiras estreis de plstico so inseridas, assepticamente,
ou inserir cada tira limpa em uma agulha cuja cnula e o
orifcio central so protegidos com uma tampa adequada e,
em seguida, submetidos ao procedimento de esterilizao
apropriado.
Animal de teste. Selecionar coelhos adultos saudveis
com peso mnimo de 2,5 kg, e que possuam msculos
paravertebrais sufcientemente grandes para possibilitar a
implantao das tiras de teste. No utilizar nenhum tecido
muscular alm daquele situado na rea paravertebral. Os
animais devem ser anestesiados com um agente anestsico
comumente utilizado para um grau de profundidade
sufciente para impedir movimentos musculares, como
espasmos.
Procedimento. Realizar o teste em uma rea limpa. No dia
do teste ou at 20 horas antes, prender o plo dos animais
em ambos os lados da coluna vertebral. Remover os plos
soltos por meio de vcuo. Antes da inoculao, limpar
levemente a pele com lcool diludo e sec-la. Implantar
Observar os animais nos seguintes tempos: imediatamente
aps a inoculao, aps 4 horas e, no mnimo aps 24, 48
e 72 horas. Se durante o perodo de observao, nenhum
dos animais tratados com o extrato da amostra apresentar
uma reatividade biolgica signifcativamente maior que
os tratados com o branco, a amostra satisfaz os requisitos
desse teste. Se dois ou mais camundongos morrerem ou
apresentarem um comportamento anormal, como convulses
ou prostrao, ou se ocorrer perda de peso corporal superior a
2 g em trs ou mais camundongos, a amostra no atende aos
requisitos do teste. Se algum animal tratado com a amostra
mostrar somente leves sinais de reatividade biolgica, e se
apenas um animal apresentar sintomas graves de reatividade
biolgica ou morrer, repetir o teste utilizando grupos de 10
camundongos. No teste de repetio, durante o perodo de
observao, todos os 10 animais tratados com a amostra
no devem apresentar nenhuma reatividade biolgica
signifcativa a mais do que os tratados com o branco.
TESTE INTRACUTNEO
Esse teste foi elaborado para avaliar as respostas locais
para os extratos dos materiais testados, aps inoculao
intracutnea nos coelhos.
Animal de teste. Selecionar coelhos albinos saudveis,
cujo plo possibilite ser preso rente pele, sendo essa,
fna e livre de irritao ou trauma. Ao lidar com os animais
durante os perodos de observao, evitar tocar os locais
de inoculao, exceto para diferenciar um edema e um
resduo de leo. Os coelhos anteriormente utilizados em
testes independentes, como o teste de pirognio (5.5.2.1),
e que repousaram o perodo previsto, podem ser utilizados
para esse teste, desde que tenham pele limpa, sem manchas.
Procedimento. Antes de retirar a dose de inoculao, agitar,
vigorosamente, cada extrato para assegurar a distribuio
uniforme da matria extrada. No dia do teste, prender,
cuidadosamente, o plo das costas do animal, em ambos
os lados da coluna vertebral, em cima de uma rea de
teste sufcientemente grande. Evitar a irritao e o trauma.
Remover o plo solto por meio de vcuo. Se necessrio,
antes da inoculao, limpar levemente a pele com lcool
diludo e secar. Mais do que um extrato de um determinado
material pode ser utilizado por coelho, se for determinado
que os resultados no sero afetados. Para cada amostra,
utilizar dois animais e inocular via intracutnea, utilizando
um lado do animal para a amostra e o outro para o branco,
conforme descrito na Tabela 5. Diluir cada g do extrato da
amostra preparada com polietilenoglicol 400, e o branco
correspondente com 7,4 volumes de soluo de cloreto de
sdio injetvel para obter uma soluo com concentrao
de cerca de 120 mg de polietilenoglicol por mL.
Tabela 5 - Teste Intracutneo.
Extrato ou
Branco
Nmero de
Locais (por
animal)
Dose, L
por stio
Amostra 5 200
Branco 5 200
6
quatro tiras da amostra nos msculos paravertebrais,
distantes cerca de 2,5 cm uma da outra, em um lado da
coluna de cada um dos dois coelhos, de 2,5 a 5,0 cm da
linha mediana e paralela coluna vertebral. De forma
semelhante, implantar duas tiras padro no msculo
oposto de cada animal. Inserir um cateter estril na agulha
para segurar a tira de implante no tecido com a retirada
da agulha. Aps a implantao de uma tira, se ocorrer
um sangramento excessivo, colocar um outro pedao
em duplicata em outro local. Manter os animais por um
perodo mnimo de 120 horas, e sacrifc-los no fnal do
perodo de observao com uma overdose de um agente
anestsico ou de outros agentes adequados. Possibilitar
transcorrer um tempo sufciente para cortar o tecido, sem
sangramento. Examinar macroscopicamente a rea do
tecido ao redor da parte central de cada tira de implante.
Utilizar uma lente de aumento e uma fonte de luz auxiliar.
Observar se h hemorragias, necroses, descoloraes e
infeces nos locais de implante da amostra e do controle e
registrar as observaes. Se houver encapsulamento, medir
e registrar a largura da cpsula, arredondando para o 0,1
mm mais prximo, a partir da periferia do espao ocupado
pelo implante do controle ou da amostra at a periferia da
cpsula. Pontuar o encapsulamento, conforme a Tabela 6.
Tabela 6 - Avaliao de encapsulamento no Teste de Implante.
Largura da Cpsula Pontuao
Nenhuma 0
at 0,5 mm 1
0,61,0 mm 2
1,12,0 mm 3
Superior a 2,0 mm 4
Calcular as diferenas entre a mdia de pontuao para
os stios de amostra e de controle. Os requisitos do teste
so cumpridos se a diferena no for superior a 1, ou se a
diferena para mais que um dos quatro locais de implante,
no exceder a 1 em qualquer um dos animais.
7
7.1 ESTERILIZAO
E GARANTIA DE
ESTERILIDADE
Esterilidade a ausncia de micro-organismos viveis.
Como a obteno da esterilidade de qualquer item isolado
de uma populao submetida ao processo de esterilizao
no pode ser garantida nem demonstrada, a esterilidade de
um lote defnida em termos probabilsticos por meio de
um processo de produo adequadamente validado.
A inativao de micro-organismos por meios fsicos
ou qumicos segue uma lei exponencial e, portanto, h
uma probabilidade estatstica de que micro-organismos
possam sobreviver ao processo de esterilizao. Para um
determinado processo, a probabilidade de sobrevivncia
determinada pelo nmero; tipo e resistncia dos
micro-organismos presentes e pelo ambiente durante a
esterilizao. O nvel de garantia de esterilidade de um
processo de esterilizao traduz a segurana com que o
processo em questo esteriliza um conjunto de itens, sendo
expresso como a probabilidade de um item no estril
naquela populao. O nvel de garantia de esterilidade de
10
6
, por exemplo, indica a probabilidade de no mais que
um micro-organismo vivel em 1 10
6
itens esterilizados
do produto fnal. O nvel de garantia de esterilidade de um
processo para um determinado produto estabelecido por
meio de estudos de validao apropriados e geralmente
aceito que produtos injetveis ou dispositivos crticos
estreis submetidos esterilizao terminal alcancem uma
probabilidade de sobrevivncia microbiana de 10
6
. Com
produtos termoestveis, a abordagem frequente exceder
o tempo crtico necessrio para conseguir a probabilidade
de sobrevivncia microbiana de 10
6
(sobremorte).
Contudo, para produtos termossensveis, a abordagem de
sobremorte no pode ser empregada e o desenvolvimento
do ciclo de esterilizao depende do conhecimento da
carga microbiana do produto.
O valor D, tempo de reduo decimal, o tempo em minutos
necessrio para reduzir a populao microbiana em 90%,
ou 1 ciclo logartmico, a uma condio especfca, isso ,
para uma frao sobrevivente de 1/10. Portanto, onde o
valor D de uma preparao de indicador biolgico de, por
exemplo, esporos de Geobacillus stearothermophilus de
1,5 minutos sob os parmetros totais de processo, isto ,
a 121 C, se for tratado por 12 minutos sob as mesmas
condies, pode-se declarar que o incremento de letalidade
de 8 D. A aplicao desse incremento na esterilizao do
produto depende da carga microbiana inicial. Assumindo
que a carga microbiana do produto apresenta resistncia
ao processo de esterilizao igual resistncia do
indicador biolgico e que a carga inicial do produto
de 10
2
micro-organismos, o incremento de letalidade de
2 D reduziria a carga microbiana a 1 (teoricamente 10
0
)
e, consequentemente, 6 D adicionais resultaria em uma
probabilidade de sobrevivncia microbiana calculada
de 10
-6
. Sob as mesmas condies, um incremento de
letalidade de 12 D pode ser usado como abordagem
tpica para obteno da sobremorte. Geralmente, a
probabilidade de sobrevivncia da carga microbiana no
material, cujo processo de validao da esterilizao est
sendo realizado, no a mesma do indicador biolgico.
Para o uso vlido, portanto, essencial que a resistncia
do Indicador Biolgico seja maior que aquela da biocarga
do material a ser esterilizado, sendo necessrio assumir a
situao de pior caso durante a validao. O valor D do
indicador biolgico a ser empregado deve ser determinado
ou verifcado para cada programa de validao e, tambm,
na ocorrncia de alterao desse programa.
A determinao de curvas de sobrevivncia, ou abordagem
de ciclo fracionado, pode ser empregada para determinar o
valor D do indicador biolgico escolhido para o processo
de esterilizao especfco. Essa abordagem, tambm, pode
ser usada para avaliar a resistncia da biocarga do produto.
Ciclos fracionados so utilizados para avaliar a reduo
da contagem microbiana ou para alcanar frao negativa.
Esses nmeros podem ser usados tanto para determinar a
letalidade do processo sob condies de produo quanto
para estabelecer ciclos de esterilizao apropriados. Um
indicador biolgico adequado, tal como a preparao de
Geobacillus stearothermophilus, tambm, deve ser usado
durante a esterilizao de rotina. Qualquer mtodo de carga
microbiana, utilizado para a garantia de esterilidade requer
vigilncia adequada da resistncia microbiana do item para
detectar quaisquer mudanas.
7.1.1 MTODOS DE
ESTERILIZAO
Com um mtodo de esterilizao tem-se por fnalidade
remover, ou destruir todas as formas de vida, animal ou vegetal,
macroscpica ou microscpica, saprftas ou no, do produto
considerado, sem garantir a inativao de toxinas e enzimas
celulares. O procedimento selecionado para atingir o nvel de
garantia de esterilidade depende do conhecimento da natureza
do material a ser esterilizado; do processo de esterilizao a ser
empregado e das alteraes que podem ocorrer no material,
em funo da esterilizao. O conhecimento do tipo, da
quantidade e da fonte dos contaminantes nos produtos, antes
da esterilizao, e a aplicao de mtodos para minimizar tal
contaminao e preveni-la ps-processamento contribuem
para assegurar o xito da esterilizao.
Nesse captulo esto registrados conceitos e princpios
envolvidos no controle de qualidade de produtos que
devem cumprir a exigncia de esterilidade e inclui
descrio dos mtodos de esterilizao e instrues para
processo assptico.
7 PREPARAO DE PRODUTOS ESTREIS
7
7.1.1.1 MTODOS FSICOS
7.1.1.1.1 Esterilizao pelo calor
O calor o agente esterilizante mais simples, econmico
e seguro de que se dispe, contudo a sensibilidade dos
diferentes micro-organismos ao do calor bastante
variada, sendo as formas esporuladas as mais resistentes.
A efcincia na inativao dos micro-organismos
dependente da temperatura, tempo de exposio e presena
de gua, pois na presena dessa so exigidos menores
tempos de exposio e temperaturas. A esterilizao pelo
calor mido causa a coagulao das protenas celulares dos
micro-organismos, enquanto a esterilizao pelo calor seco
se d em funo de processos oxidativos, que necessitam
de altas temperaturas e longo tempo de exposio.
CALOR MIDO
O processo de esterilizao empregando vapor saturado
sob presso realizado em cmara denominada autoclave.
O princpio bsico de operao a substituio do ar
da cmara por vapor saturado. Para deslocar ar mais
efcientemente da cmara e de dentro dos produtos, o
ciclo de esterilizao pode incluir estgios de evacuao
de ar e de vapor. Para esse mtodo de esterilizao, a
condio de referncia para esterilizao de preparaes
aquosas de aquecimento de, no mnimo, 121 C por
pelo menos 15 minutos. Combinaes distintas de tempo
e temperatura podem ser utilizadas, contanto que validadas
e que demonstrem a efccia do processo escolhido,
proporcionando um nvel adequado e reprodutvel de
letalidade quando operado, rotineiramente, dentro das
tolerncias estabelecidas. So aplicados procedimentos e
precaues de modo a atingir um nvel de segurana de
esterilidade de 10
6
ou melhor. Combinaes de tempo
e temperatura devem ser estabelecidas baseadas em
fatores como natureza do material e sua termolabilidade,
penetrabilidade do vapor no produto a ser esterilizado e
outros parmetros defnidos no processo de validao.
Quando for utilizada temperatura de esterilizao diferente
de 121 C, o conceito de F
0
deve ser empregado. O F
0

em uma temperatura particular diferente de 121 C, o
tempo em minutos necessrio para fornecer a letalidade
equivalente quela fornecida a 121 C durante um referido
tempo. F
0
uma medida da efccia esterilizante, isso ,
o nmero de minutos de esterilizao trmica por vapor
determinada temperatura fornecida a um recipiente ou
unidade de produto num dado valor Z.
Para garantir a efcincia do processo de esterilizao, a
distribuio da carga na cmara deve ser feita de maneira
a propiciar o contato do vapor com as regies de mais
difcil acesso. Para materiais esterilizados por calor
mido, aceitvel que se alcance uma probabilidade
de sobrevivncia microbiana da ordem de 10
-6
. Para
produtos termoestveis, o tempo necessrio para atingir
a condio anterior pode ser excedido, resultando em
sobremorte, o que no se aplica a produtos que possam
sofrer alterao em funo da exposio excessiva ao
calor. Nessa situao, o desenvolvimento do ciclo de
esterilizao depende, especialmente, do conhecimento da
carga microbiana no produto, que deve ser determinada em
quantidade substancial de lotes do produto, anteriormente
esterilizao. O valor D do indicador biolgico adequado
usado, como Geobacillus stearothermophilus, deve ser
avaliado no programa de validao e na ocorrncia de
alguma alterao desse programa.
CALOR SECO
A esterilizao trmica por calor seco realizada em estufa
com distribuio homognea do calor, que pode ser obtida
por circulao forada de ar. Podem ser esterilizados
artigos como vidros, metais, ps, vaselinas, gorduras,
ceras, solues e suspenses oleosas, e tecidos especiais.
Esse processo aplicado, principalmente, para materiais
sensveis esterilizao por calor mido. Para esse
mtodo de esterilizao, a condio de referncia uma
temperatura mnima de 160 C por, pelo menos, 2 horas.
Combinaes distintas de tempo e temperatura podem ser
utilizadas, contanto que validadas e que demonstrem a
efccia do processo escolhido, proporcionando um nvel
adequado e reprodutvel de letalidade quando operado
rotineiramente dentro das tolerncias estabelecidas.
Um nvel de garantia de esterilidade de 10
-12
considerado
aceitvel para produtos termoestveis. Um exemplo de
indicador biolgico para validar e monitorar a esterilizao
por calor seco a preparao de esporos de Bacillus
atrophaeus.
O processo empregando o calor seco, tambm, pode ser
usado para esterilizao e despirogenizao como parte
integrante do processo de enchimento assptico, em que se
requer temperaturas muito altas devido ao menor tempo de
exposio ao calor. Nos processos contnuos, usualmente,
h necessidade de um estgio de resfriamento anterior
ao processo de envase. Em funo do menor tempo de
exposio do material. Com o programa de validao
devem-se abranger parmetros como a uniformidade de
temperatura e o tempo de permanncia.
O calor seco em temperaturas maiores que 220 C pode
ser utilizado para a esterilizao e despirogenizao de
vidraria. Nesse caso, um desafo com endotoxina bacteriana
deve fazer parte do programa de validao, demonstrando
uma reduo de no mnimo 3 ciclos logartmicos de
endotoxina resistente ao calor, ou seja, testar materiais
inoculados com no mnimo 1000 unidades de endotoxina
bacteriana. O teste, com lisado de Limulus, pode ser usado
para demonstrar que a endotoxina foi inativada a no
mais do que 1/1000 da quantidade original, sendo que o
remanescente de endotoxina medido para garantir a
reduo de 3 ciclos logartmicos.
7.1.1.1.2 Esterilizao por radiao ionizante
As radiaes ionizantes so emisses de alta energia,
sob a forma de ondas eletromagnticas ou partculas,
que ao se chocarem com os tomos do material irradiado
alteram sua carga eltrica por deslocamento de eltrons,
7
transformando os tomos irradiados em ons positivos ou
negativos. Quando essas radiaes atravessam as clulas
criam hidrognio livre; radicais hidroxilas e alguns
perxidos, que por sua vez podem causar diferentes leses
intracelulares. As principais fontes de radiao so: raios
alfa; beta; gama e raios X. Os dois tipos de radiao
ionizante em uso so decaimento de radioistopo (radiao
gama) e radiao por feixe de eltrons. Os produtos so
expostos a uma radiao ionizante na forma de radiao
gama de uma fonte radioisotpica adequada (por exemplo,
cobalto 60) ou de um feixe de eltrons energizados por
meio de um acelerador de eltrons.
Alm da possibilidade do processamento a baixas
temperaturas, o que possibilita a esterilizao de
produtos termossensveis, a esterilizao por radiao
ionizante possui vantagens como a baixa reatividade
qumica e o fato de existirem poucos parmetros a serem
controlados, sendo imprescindvel o controle da dose de
radiao absorvida. A dose de radiao estabelecida para
a esterilizao deve garantir o no comprometimento
dos materiais a serem esterilizados. Para a radiao
gama, a validao do processo inclui o estabelecimento
da compatibilidade do material, o estabelecimento do
modelo de carregamento do produto e o mapeamento de
dose no recipiente de esterilizao, identifcando as zonas
de doses mxima e mnima de radiao, a defnio do
tempo de exposio e a comprovao da aplicao da
dose de esterilizao requerida. Para irradiao por feixe
de eltrons, devem ser controlados, ainda, voltagem,
corrente, velocidade da esteira transportadora e dimenso
de varredura do feixe de eltrons. Para esse processo de
esterilizao, a dose absorvida de referncia de 25 kGy,
porm em algumas situaes h necessidade de seleo de
uma dose maior ou menor. A dose escolhida deve oferecer
um nvel de letalidade adequado e reprodutvel quando o
processo operado rotineiramente dentro das tolerncias
estabelecidas. Procedimentos e precaues devem ser
aplicados para atingir um nvel de garantia de esterilidade
de 10
6
ou melhor.
Para validar a efccia dessa esterilizao, especialmente
quando se utilizam doses menores, necessrio determinar
a resistncia radiao da carga microbiana do produto.
Padres de carregamento de produto especfco e a
distribuio de doses mnimas e mximas absorvidas devem
ser estabelecidos. As doses absorvidas so normalmente
medidas por meio de dosmetros especfcos, como
suporte plstico padronizado que mostra intensifcao da
cor proporcional quantidade de radiao absorvida. A
abordagem de ciclo fracionado fornece os dados utilizados
para determinar o valor D
10
do indicador biolgico,
informao aplicada para extrapolar a quantidade de
radiao absorvida, para estabelecer uma probabilidade
adequada de sobrevivncia microbiana. Atualmente, a dose
se baseia na resistncia radiao da carga microbiana
heterognea natural contida no produto a ser esterilizado.
Os procedimentos de validao podem usar a exposio de
produto inoculado, usando organismos resistentes, como
Bacillus pumilus, ou exposio de amostras de produto
acabado da linha de produo dose subletal de processo.
O procedimento para seleo da dose de radiao,
baseado na avaliao da resistncia dos micro-
organismos constituintes da carga microbiana do produto
a ser esterilizado, possibilita uma determinao mais
representativa da resistncia dessa ao se trabalhar com
micro-organismos com diferentes suscetibilidades
radiao. Esse procedimento exige a enumerao da
populao microbiana em amostragem representativa de
diferentes lotes de produto. Com o conhecimento da carga
microbiana, a dose de radiao estabelecida baseando-se
em tabela disponvel na literatura. Um outro mtodo que
possibilita o estabelecimento da dose de radiao baseia-se
no emprego de incrementos de doses de radiao at obter-
se, no mximo, uma amostra positiva em 100 unidades
irradiadas. Essa informao prov a base para extrapolao
dessa dose e obteno da dose de radiao. Avaliaes
peridicas devem ser feitas para garantir que os valores
estabelecidos continuam sendo efetivos (referncia: ISO
11137-1: 2006 - Sterilization of health care products
- Radiation - Part 1: Requirements for development,
validation and routine control of a sterilization process for
medical devices).
A efcincia do ciclo de esterilizao deve ser avaliada,
periodicamente, pela determinao da carga microbiana do
produto, ou pelo emprego de indicador biolgico e pelo
uso de dosmetros calibrados.
7.1.1.1.3 Esterilizao por fltrao
A fltrao empregada para esterilizao de solues
termossensveis por remoo fsica dos micro-organismos
contaminantes. O material fltrante no pode liberar fbras
ou materiais extraveis indesejveis para a soluo fltrada,
o que restringe a natureza do elemento fltrante a vidro,
metal, polmeros sintetizados e membranas polimricas.
A montagem de um fltro consiste de uma matriz porosa
inserida em um abrigo impermevel. A efcincia de um
meio, ou substrato fltrante depende do tamanho do poro
do material, da adsoro de micro-organismos sobre ou
dentro da matriz do fltro e do mecanismo de peneira ou
excluso. O efeito de excluso por tamanho funo da
abertura (dimetro) dos poros, e a adsoro depende da
composio, espessura do elemento fltrante e fuido que
est sendo fltrado.
O tamanho dos poros das membranas fltrantes estimado
por valor nominal que refete a capacidade da membrana
do fltro de reter micro-organismos representados por
cepas especfcas. A fltrao para fns de esterilizao ,
normalmente, realizada com membranas de graduao
de tamanho de poro nominal de 0,2 um, ou menor. Essas
membranas de fltrao esterilizante, classifcadas como
0,22 um ou 0,2 um, dependendo do fabricante, so
capazes de reter 100% de uma cultura contendo 10
7
micro-
organismos de Brevundimonas diminuta ATCC 19146, por
cm
2
de superfcie de membrana fltrante, sob uma presso
mnima de 30 psi (2,0 bar).
O usurio responsvel pela escolha do fltro em funo da
natureza do material a ser fltrado, que atenda necessidade
do processo de esterilizao, devendo, tambm, determinar
7
se os parmetros empregados na produo infuenciaro
a efcincia da reteno microbiana. Uma vez que a
efcincia do processo de fltrao, tambm, infuenciada
pela biocarga da soluo a ser fltrada, importante a
determinao da qualidade microbiana das solues antes
da fltrao, bem como o estabelecimento de parmetros
como presso; taxa de fuxo e caractersticas da unidade
fltrante.
O valor de reduo logartmica, tambm, pode ser utilizado
para avaliar a capacidade de reteno da membrana
fltrante. Por exemplo, um fltro de 0,2 um, que pode
reter 10
7
micro-organismos de uma cepa especfca, ter
um valor de reduo logartmica de, no mnimo, 7, sob
condies declaradas.
As membranas fltrantes comercialmente disponveis
incluem acetato de celulose, nitrato de celulose,
fuorcarbonato, polmeros acrlicos, polister,
policarbonato, cloreto de polivinila, vinil, nylon, polytef
e ainda, membranas metlicas. Os fltros de membrana,
por serem flmes polimricos, oferecem muitas vantagens
e algumas desvantagens quando comparados aos fltros
de profundidade como porcelana ou material sinterizado.
Como boa parte da superfcie da membrana um espao
vazio ou aberto, a correta montagem e esterilizao do
fltro proporcionam a vantagem de uma alta taxa de
fuxo. Uma desvantagem que, devido fragilidade da
membrana, deve-se garantir a ausncia de ruptura durante
a montagem, esterilizao, ou uso.
O sistema de fltrao deve ser testado antes e aps o
processo de fltrao para garantir a manuteno de sua
integridade durante o processo de fltrao. Testes tpicos
de uso incluem o teste do ponto de bolha, o teste de fuxo
de ar difusivo, o teste de reteno sob presso e o teste
de fuxo progressivo. O teste de ponto de bolha consiste
em teste no destrutivo, cuja denominao decorre da
visualizao de bolhas aps a aplicao de uma determinada
presso sobre o fltro. Como exemplo, aps a fltrao de
cerca de dois litros de gua destilada estril, aplica-se
presso constante de nitrognio, durante 5 minutos para
membranas de ster de celulose de 0,2 um. Para cada tipo
de fltro h um valor limite de presso a ser suportado, sem
que apresente a formao de bolhas, indicando a resistncia
do material fltrante. Os testes devem ser correlacionados
com a reteno de micro-organismos. Testes adicionais
realizados pelo fabricante do fltro, como o de desafo
microbiano, no so normalmente repetidos pelo usurio.
7.1.1.2 MTODO QUMICO
7.1.1.2.1 Gs xido de etileno
A esterilizao por gs pode ser o mtodo de escolha para
materiais que no resistem a altas temperaturas como no
processamento por calor seco ou calor mido. O agente
ativo geralmente empregado na esterilizao por gs
o xido de etileno. Entre as desvantagens desse agente
esterilizante esto suas propriedades mutagnicas; a
possibilidade de resduos txicos nos materiais tratados
e sua natureza altamente infamvel, exceto quando
em certas misturas com gases inertes. O processo de
esterilizao geralmente realizado em uma cmara
pressurizada projetada de forma semelhante autoclave,
mas com caractersticas especfcas como sistema para
desgaseifcao aps a esterilizao e minimizao da
exposio dos operadores ao gs.
O programa de qualifcao do processo de esterilizao
com xido de etileno mais amplo que de outros processos
de esterilizao, visto que alm da temperatura, devem
ser controlados a umidade; vcuo / presso positiva e a
concentrao de xido de etileno. importante determinar
e demonstrar que todos os parmetros crticos do processo
esto adequados no interior da cmara de esterilizao
durante todo o ciclo. Como os parmetros de esterilizao
aplicados aos produtos a serem processados so crticos,
recomendvel o pr-condicionamento da carga para
minimizar o tempo de exposio temperatura requerida. O
programa de validao geralmente realizado empregando
o produto inoculado, ou produto simulado inoculado
com preparaes apropriadas como esporos de Bacillus
atrophaeus. Os indicadores biolgicos, normalmente,
so empregados para estabelecer a probabilidade fnal
de sobrevivncia microbiana, usando o conceito de ciclo
fracionado, para se projetar um ciclo de esterilizao com
xido de etileno, e devem ser usados em cargas do produto,
ou produto simulado, com cmara cheia.
O indicador biolgico deve ser empregado no
monitoramento de ciclos de rotina, alm do planejamento
do ciclo de esterilizao por xido de etileno. Outro aspecto
importante do planejamento do processo de esterilizao
a defnio do tipo de acondicionamento do material a ser
processado e sua distribuio na cmara de esterilizao,
devido limitada capacidade de difuso do xido de
etileno em reas mais internas do produto.
7.1.2 VALIDAO DO
PROCESSO DE ESTERILIZAO
A validao deve demonstrar de forma documentada que o
processo de esterilizao estabelecido ir, consistentemente,
fornecer produtos que atendam o nvel de garantia de
esterilidade requerido. Os produtos esterilizados de acordo
com o processo validado devem atender as especifcaes
pr-determinadas e as caractersticas de qualidade
relacionadas funcionalidade e segurana.
Uma vez o processo validado, ele dever ser revalidado,
periodicamente, e aps alteraes de produto; equipamentos
e processo, que possam comprometer o nvel de garantia de
esterilidade especifcado.
Os principais elementos da validao so: Qualifcao de
Instalao; Qualifcao de Operao e Qualifcao de
Desempenho.
7
7.1.2.1 QUALIFICAO DE INSTALAO
A aplicao do plano de qualifcao de instalao deve
fornecer evidncia documentada que o equipamento e
todos os itens auxiliares foram fornecidos, instalados
e funcionam de acordo com as especifcaes. Deve
demonstrar-se que o equipamento de esterilizao, seus
componentes, itens auxiliares e suprimentos, como vapor,
gua e ar, foram corretamente projetados, instalados e
calibrados.
A fm de atender aos parmetros e limites recomendados
para a esterilizao, necessrio o emprego de
instrumentao apropriada para monitorar e controlar os
parmetros crticos como temperatura, tempo, umidade,
concentrao do gs esterilizante ou radiao absorvida.
Esses instrumentos devem ser avaliados na qualifcao de
instalao.
A qualifcao de instalao compreende os seguintes
elementos: equipamento, instalao e funo.
No que se refere ao equipamento e instalao, as
especifcaes do esterilizador; itens auxiliares e servios;
os procedimentos operacionais; a localizao de instalao
e a documentao devem ser previamente defnidas e
verifcadas na qualifcao de instalao, garantido sua
conformidade. Para garantir a funo, deve ser verifcado
que o equipamento e os sistemas de segurana operacional
funcionam de acordo com suas especifcaes; os ciclos
de operao esto de acordo com o defnido e que no h
evidncia de vazamento das utilidades ou esterilizador,
quando aplicvel.
Nos procedimentos documentados para a qualifcao de
instalao deve estar especifcado como cada elemento
da qualifcao planejado, realizado e revisado. A
documentao que proporciona suporte qualifcao de
instalao inclui descrio das caractersticas fsicas e
operacionais do equipamento; seus componentes e servios.
Desenhos e diagramas de processo e instrumentao
devem ser verifcados contra a confgurao proposta e
atualizados, quando necessrio. Sistemas de segurana
aplicveis devem ser avaliados para garantir desempenho;
qualidade e segurana dos equipamentos e operadores.
A qualifcao da instalao necessria para novos
equipamentos, ou quando o esterilizador existente
substitudo ou realocado. A qualifcao deve ser refeita
a intervalos de tempo defnidos, e ao menos parcialmente
quando ocorrerem modifcaes que possam alterar a
efccia do processo de esterilizao, como substituio
ou reforma de equipamentos, ou partes, modifcaes nos
suprimentos de processo e alterao em fonte radioativa
7.1.2.2 QUALIFICAO DE OPERAO
Na qualifcao de operao deve demonstrar-se que o
equipamento instalado capaz de realizar o processo de
esterilizao especifcado dentro dos intervalos defnidos.
O intervalo de parmetros e os limites de operao devem
ser estabelecidos na defnio do processo. Antes da
qualifcao de operao, o estado de calibrao de toda
instrumentao usada para monitorar, controlar, indicar e
registrar deve ser confrmado.
Para autoclaves e outros esterilizadores que empregam
processo trmico, devem ser realizados estudos de
distribuio do calor em diferentes posies considerando
o tamanho da cmara e a carga. Deve confrmar-se que a
cmara (vazia e cheia) opera dentro dos parmetros crticos
em todos os seus principais locais. O nmero e posio dos
termopares so determinados pelo tipo e confgurao da
carga; tamanho de equipamento; tipo de instrumento e ciclo
empregado. Uma faixa aceitvel de temperatura na cmara
vazia 1 C quando a temperatura da cmara 121 C.
Para esterilizadores a xido de etileno, a umidade relativa; a
concentrao do gs e a temperatura devem ser monitorados
por sensores distribudos em posies adequadas. Sistemas
de segurana aplicveis devem ser testados. Softwares de
controle devem ser validados e desafados em condies
de falha. A penetrao e distribuio da radiao ionizante
na carga deve ser realizada e monitorada por dosmetros.
A operao de qualifcao de fltros esterilizantes feita
por meio do teste de integridade dos fltros; medidas de
presso diferencial e velocidade de fuxo. Como os fuidos
esterilizados por membranas fltrantes podem ser expostos
ao ambiente durante o processamento seguinte, o controle
ambiental e a qualifcao e/ou validao da rea de
manuseio assptico devem ser parte integrante do processo
de esterilizao por fltrao.
7.1.2.3 QUALIFICAO DE
DESEMPENHO
Na qualifcao de desempenho deve demonstrar-se que o
processo de esterilizao capaz de atingir, repetidamente,
o nvel de garantia de esterilidade pr-determinado para
as cargas defnidas de produtos; que o equipamento opera
consistentemente de acordo com critrios pr-determinados
e que o produto atende aos requisitos especifcados de
segurana, qualidade e desempenho.
A qualifcao de desempenho compreende avaliaes
fsicas e microbiolgicas que demonstrem a efccia e
reprodutibilidade do processo de esterilizao, mantendo
as caractersticas especifcadas do produto.
Nos estudos fsicos devem ser considerados: critrios como
carga teste representativa do processo; embalagem idntica
ao produto; pr-condicionamento; perfl de temperatura e
temperatura no ponto de referncia; resposta de indicadores
qumicos; integridade de embalagem; documentao; entre
outros. A carga para esterilizao deve ser estabelecida
e documentada, levando em considerao parmetros
como confgurao, distribuio, orientao, densidade,
dimenso, composio do material, uso e tipo de pallets.
O produto ou material com caractersticas similares ao
produto (produto simulado) usado para a qualifcao
deve ter embalagem idntica ao produto e representar, no
mnimo, o pior caso da carga de rotina de produo, ou
seja, a confgurao mais difcil de esterilizar. Critrios
para reutilizao de carga devem ser defnidos, sendo que
7
ela deve ser equilibrada s condies ambientais ou aeradas
antes do reuso. Com os dados gerados deve demonstrar-
se a conformidade com os parmetros fsicos e qumicos
aplicveis. A relao entre as condies de posies de
monitoramento durante a qualifcao e a rotina deve ser
estabelecida.
Na qualifcao de desempenho fsico deve demonstrar-se
a reprodutibilidade do processo com mnimo de trs ciclos
consecutivos para verifcar o atendimento de todos os
critrios de aceitao.
Na qualifcao microbiolgica deve seguir-se requisitos
especfcos para cada agente esterilizante. Diferentes
mtodos podem ser usados na validao do processo de
esterilizao e incluem trs categorias: processo baseado
na inativao da carga microbiana natural (biocarga);
processo combinado com base na inativao de micro-
organismo referncia e conhecimento da carga microbiana
(biocarga e indicador biolgico) e processo baseado na
inativao de micro-organismo referncia (sobremorte ou
overkill). Indica-se que o desafo microbiano seja executado
nos parmetros mnimos de processo e deve atender o nvel
de garantia de esterilidade para todas as combinaes de
carga, podendo usar o pior caso de produto representante
das famlias. Para cada tipo de carga a ser esterilizada,
a reprodutibilidade do processo deve ser demonstrada
empregando-se, pelo menos, trs ciclos consecutivos. Os
indicadores biolgicos usados devem ser posicionados no
e/ou sobre o produto em localizao defnida.
A qualifcao de desempenho deve ser repetida quando
alteraes signifcativas forem propostas, como mudanas
em desenho e embalagem do produto; confgurao
ou densidade de carga e equipamento ou processo de
esterilizao. Os efeitos dessas mudanas nos estgios de
validao do processo de esterilizao devem ser avaliados.
7.1.3 REVISO E APROVAO
DA VALIDAO
A reviso documentada, dos dados de validao, gerados
nas qualifcaes de instalao, operao e desempenho
deve ser feita para confrmar a aceitabilidade do processo
de esterilizao e defnir a especifcao do processo,
incluindo parmetros e tolerncia.
O estgio fnal do programa de validao requer a
documentao dos dados de apoio desenvolvidos na
execuo desse programa.
7.2 INDICADORES
BIOLGICOS
O indicador biolgico defnido como uma preparao
caracterizada de micro-organismo especfco que fornece
uma resistncia defnida e estvel a um determinado
processo de esterilizao. Bactrias formadoras de esporos
so os micro-organismos reconhecidos como apropriados
para emprego como indicadores biolgicos uma vez
que, com exceo da radiao ionizante, esses micro-
organismos so, signifcativamente, mais resistentes aos
processos de esterilizao do que os micro-organismos
da carga microbiana natural do produto. Um indicador
biolgico pode ser usado na qualifcao de desempenho
do equipamento de esterilizao e no desenvolvimento
e estabelecimento do processo de esterilizao para
um produto especfco. Os indicadores biolgicos so
usados em processos de obteno de produto estril em
seu recipiente fnal e na esterilizao de equipamentos;
materiais e componentes de embalagem, empregados no
processo assptico. Os indicadores biolgicos podem,
ainda, ser utilizados para monitorar ciclos de esterilizao
em revalidaes peridicas e para avaliar a capacidade do
processo usado na descontaminao de isoladores ou salas
limpas.
7.2.1 TIPOS DE INDICADORES
BIOLGICOS
H, pelo menos, trs tipos de indicadores biolgicos, sendo
que cada tipo incorpora uma espcie microbiana com
resistncia conhecida ao processo de esterilizao.
Um tipo de indicador biolgico inclui os esporos que
so adicionados a um suporte ou carreador (disco, ou
tira de papel de fltro, vidro, plstico, ou outro material)
embalado de forma a manter a integridade e viabilidade
do material inoculado. Os carreadores e embalagens
primrias no devem conter qualquer tipo de contaminao
qumica, fsica ou microbiolgica que possa comprometer
o desempenho e estabilidade do indicador biolgico e
no podem sofrer alterao em funo do processo de
esterilizao submetido. Os carreadores e embalagens
primrias devem resistir ao transporte e manuseio at o
momento do uso e devem evitar a perda do inculo original
durante o transporte, manuseio e armazenamento at o
vencimento do perodo de validade.
Outro tipo de indicador biolgico consiste de uma suspenso
de esporos inoculada em unidades representativas do produto
a ser esterilizado. Quando no for possvel o emprego do
produto real, pode inocular-se um produto simulado, que
difere do produto real em algumas caractersticas, mas
se comporta de forma semelhante quando submetido s
condies de teste, ou de esterilizao. Uma suspenso
de esporos de valor D conhecido deve ser utilizada para
inoculao do produto real ou simulado, garantindo que
ao ser usado o produto simulado, esse no comprometa a
resistncia do indicador biolgico. A confgurao fsica
do produto a ser inoculado (real ou simulado) pode afetar
a resistncia da suspenso microbiana inoculada. No caso
de produtos lquidos recomendvel a determinao do
valor D e valor Z do indicador biolgico no produto lquido
especifcado. A populao, valor D, valor Z onde aplicvel
7
e tempo de destruio do micro-organismo devem ser
determinados.
Valor Z a elevao de temperatura em graus, necessria
para reduzir o valor D em 90%, ou produzir a reduo
de um ciclo logartmico na curva de resistncia trmica.
O terceiro tipo o indicador biolgico auto contido,
apresentado de tal forma que a embalagem primria
destinada para incubao aps a esterilizao contenha
o meio de crescimento requerido para a recuperao do
micro-organismo. Nesse caso, o sistema constitudo pelo
indicador biolgico e o meio de crescimento do micro-
organismo deve ser resistente ao processo de esterilizao
e deve possibilitar a penetrao do agente esterilizante.
O valor D, tempo de destruio do micro-organismo e o
tempo de sobrevivncia devem ser determinados para o
sistema e no somente para a tira ou disco de papel que
contm os micro-organismos. Aps a esterilizao,
permitido o contato das tiras ou discos, contendo os micro-
organismos, com o meio de cultura.
O indicador biolgico auto contido, tambm, pode
consistir de uma suspenso de esporos em um meio de
cultura contendo indicador de pH que permita visualizar a
presena ou a ausncia de crescimento aps a incubao.
A resistncia do sistema auto contido dependente da
penetrao do agente esterilizante na embalagem, que
deve ser controlada pelo fabricante por meio do desenho
e composio do material que constitui a embalagem,
ampola ou recipiente. O indicador biolgico auto contido
na forma de ampola pode ser incubado diretamente aps
a exposio ao processo de esterilizao, nas condies
especifcadas. A ausncia ou a presena do crescimento
microbiano determinada visualmente, a partir da
mudana de colorao de um indicador incorporado ao
meio, ou pela turbidez decorrente do desenvolvimento do
micro-organismo; ou ainda, pelo exame microscpico do
meio inoculado. O indicador biolgico auto contido deve
suportar o transporte e o manuseio durante o uso sem que
ocorram quebras ou perda do inculo original. Durante
ou aps o processo de esterilizao, o material do qual
constitudo o sistema auto contido no deve reter ou liberar
qualquer substncia que possa inibir o crescimento de
micro-organismos sobreviventes. A capacidade promotora
de crescimento do meio de cultura aps exposio ao
processo de esterilizao deve ser comprovada.
7.2.2 PREPARAO DO
INDICADOR BIOLGICO
Todas as operaes envolvidas na preparao de
indicadores biolgicos devem ser monitoradas por meio
de um sistema da qualidade documentado que possibilite
a rastreabilidade de todos os materiais e componentes
incorporados suspenso microbiana; o carreador
inoculado, ou o indicador biolgico. A preparao de
suspenses estoque dos esporos dos micro-organismos
selecionados como indicadores biolgicos requer o
desenvolvimento de procedimentos apropriados incluindo
seu cultivo, coleta, purifcao e manuteno. As
suspenses estoque devem conter, predominantemente,
esporos latentes (no germinativos) mantidos em lquido
no nutritivo. O produto fnal fornecido pelos fabricantes
(suspenso microbiana, carreador inoculado ou indicador
biolgico) no deve conter micro-organismo diferente do
micro-organismo teste em nmero sufciente que possa
afetar o produto. O sistema para minimizar a presena de
micro-organismos diferentes do micro-organismo teste
deve ser validado, monitorado e registrado.
7.2.3 SELEO DO INDICADOR
BIOLGICO PARA O PROCESSO
DE ESTERILIZAO
A escolha do indicador biolgico requer conhecimento de
sua resistncia ao processo de esterilizao especfco para
garantir que o sistema do indicador biolgico proporciona
desafo maior que o da carga microbiana no produto.
O uso efciente dos indicadores biolgicos para
desenvolvimento do ciclo, processo e validao, ou para
monitoramento do processo de esterilizao de rotina requer
conhecimento do material a ser esterilizado incluindo seus
componentes e material de embalagem. Apenas indicadores
biolgicos reconhecidos e especifcados nas monografas
devem ser usados no desenvolvimento ou validao de
um processo de esterilizao para garantir que o indicador
biolgico selecionado propicie um desafo maior ao
processo de esterilizao do que a carga microbiana no
produto.
Nos casos do uso de indicadores biolgicos com
caractersticas diferentes daqueles comercialmente
disponveis, pode cultivar-se micro-organismos descritos
em literatura cientfca para preparo de indicadores
biolgicos. O usurio deve ser capaz de determinar os
valores D e Z para os indicadores domsticos. Quando
indicador biolgico no comercial for utilizado, a
populao, pureza e validade devem ser confrmadas
para garantir a legitimidade dos testes a serem realizados
usando esse indicador.
Quando a defnio do processo de esterilizao
baseada na carga microbiana do produto, essa deve ser
quantifcada e as resistncias do indicador biolgico e
da carga microbiana devem ser comparadas. O processo
de esterilizao deve resultar em nvel de garantia de
esterilidade de no mnimo 10
-6
.
O mtodo de sobremorte (overkill) pode ser empregado no
desenvolvimento do processo de esterilizao e, nesse caso,
devem ser feitas consideraes especfcas relacionadas
suposta resistncia usada no estabelecimento dos requisitos
de letalidade do processo. Em geral, os processos de
sobremorte so desenvolvidos com a suposio de que a
carga microbiana igual a 10
6
micro-organismos altamente
resistentes. Um processo 12 D defnido como o processo
que prov letalidade sufciente para reduo de 12 ciclos
logartmicos, equivalente a 12 vezes o valor D para micro-
organismos com resistncia acima da resistncia mdia
7
dos micro-organismos presentes na carga microbiana do
produto. Ao assumir uma carga microbiana de 10
6
, um
processo de sobremorte resultar em uma probabilidade
de no esterilidade menor que 10
-6
. O uso do processo de
sobremorte e sua validao podem minimizar ou evitar
a necessidade de quantifcao e identifcao da carga
microbiana do produto.
Para o processo de calor mido, esporos de cepas
apropriadas de Geobacillus stearothermophilus esto
disponveis comercialmente como indicadores biolgicos.
Outros micro-organismos formadores de esporos
resistentes ao calor mido como Clostridium sporogenes,
Bacillus atrophaeus e Bacillus coagulans, tambm, podem
ser utilizados no desenvolvimento e validao de um
processo de esterilizao por calor mido.
Para a validao do processo de esterilizao, por via
calor seco, podem ser empregados esporos de Bacillus
atrophaeus. Durante a validao podem ser realizados
estudos para avaliao da despirogenizao no lugar da
inativao microbiana, uma vez que a taxa de inativao de
endotoxinas bacterinas bem mais lenta que a inativao
dos esporos de Bacillus atrophaeus. Na prtica, uma
reduo da ordem de pelo menos trs ciclos logartmicos
do nvel de endotoxina resulta em uma probabilidade de
no esterilidade menor que 10
-6
.
Para monitorar os processos de esterilizao empregando
radiao ionizante, esporos de Bacillus pumilus tm sido
usados apesar de no ser prtica usual. O mtodo de
estabelecimento da dose de radiao, mais empregado,
no usa indicadores biolgicos. Alguns micro-organismos
na carga microbiana do material a ser esterilizado, podem
apresentar maior resistncia ao processo de esterilizao
por radiao em comparao com os esporos de Bacillus
pumilus.
Para o processo de esterilizao por xido de etileno so
comumente utilizados esporos de subespcies de Bacillus
atrophaeus var. niger, quando se emprega xido de etileno
100%, ou diferentes misturas de gases.
Tabela 1 Caractersticas exemplifcativas de sistemas de indicadores biolgicos disponveis comercialmente.
Processo de Esterilizao
Valor D
(minutos)
Faixa de valor D para
seleo de indicador
biolgico (minutos)
Limites para resistncia adequada
(dependente do valor D em minutos)
Tempo de
sobrevivncia
Tempo de morte
Calor seco
a
(160 C)
1,9 Mn. 1,0
Mx. 3,0
Mn. 4,0
Mx. 14,0
10,0
32,0
xido de etileno
b
(600 mg/L, 54 C, 60% UR)
3,5 Mn. 2,5
Mx. 5,8
Mn. 10,0
Mx. 27,0
25,0
68,0
Calor mido
c
(121 C)
1,9 Mn. 1,5
Mx. 3,0
Mn. 4,5
Mx. 14,0
13,5
32,0
_______________________
a para 1,0 x 10
6
a 5,0 x 10
6
esporos / carreador
b
para 1,0 x 10
6
a 5,0 x 10
7
esporos / carreador
c
para 1,0 x 10
5
a 5,0 x 10
6
esporos / carreador
7.2.4 AVALIAO DE
DESEMPENHO
7.2.4.1 RESPONSABILIDADE DO
FABRICANTE
So responsabilidades do fabricante: determinao e
fornecimento das caractersticas de desempenho do lote de
indicador biolgico por meio de certifcado de anlise que
ateste a validade do desempenho declarado na embalagem
do produto; defnio do processo de esterilizao para o
qual o indicador biolgico recomendado; caracterizao
de cada tipo de indicador biolgico, usando condies
padronizadas e equipamentos adequados; valor D e
o mtodo pelo qual esse valor foi defnido; contagem
microbiana; estabilidade da resistncia at a validade
indicada no rtulo; condies de armazenagem, incluindo
temperatura e umidade relativa; orientaes sobre o meio
de cultura a ser empregado e as condies de recuperao
dos micro-organismos aps a exposio ao processo de
esterilizao e seu descarte.
7.2.4.2 RESPONSABILIDADE DO
USURIO
PRODUTOS COMERCIAIS
Quando um indicador biolgico adquirido, comercialmente,
sua adequao para uso em um processo de esterilizao
deve ter sido estabelecida em estudos, a no ser que existam
dados disponveis para confrmar o emprego do indicador em
um processo especfco. O usurio deve estabelecer dentro
de sua instituio, os critrios de aceitao para os lotes do
indicador biolgico. Ao adquirir um indicador biolgico,
esse deve vir acompanhado de um certifcado emitido para
cada lote. Se o indicador biolgico for empregado de forma
diferente daquela indicada pelo fabricante, o usurio deve
7
proceder ao registro das condies de uso, das verifcaes e
do desempenho do indicador biolgico.
Aps o recebimento de um lote de indicador biolgico, o
usurio deve quantifcar a carga de esporos por unidade
e proceder verifcao da morfologia e pureza dos
micro-organismos, confrmando, pelo menos, o gnero do
micro-organismo. As informaes referentes ao valor D;
s condies de armazenagem; ao prazo de validade e
estabilidade do indicador biolgico devem ser observadas
e registradas. O usurio pode considerar a necessidade de
auditar o valor D antes da aceitao do lote de indicador
biolgico. Para armazenamento por longo perodo,
importante verifcar o valor D e a estabilidade da contagem.
No caso de armazenamento da suspenso de esporos, por
perodo superior a 12 meses, sob condies documentadas,
a confrmao da contagem e a comprovao da resistncia
dos esporos devem ser realizadas, a menos que o
desempenho de uma cultura anterior tenha sido validado
aps longo perodo de armazenamento. Os resultados
dos ensaios de resistncia e contagem de esporos devem
estar dentro da faixa de aceitao estabelecida durante a
aprovao do lote de suspenso de esporos.
PRODUTOS NO COMERCIAIS
O usurio pode decidir cultivar micro-organismos para
desenvolvimento de indicadores biolgicos a serem
empregados no desenvolvimento ou na validao de um
processo de esterilizao. No caso do usurio tornar-se
um produtor, as exigncias de desempenho do indicador
biolgico devem ser satisfeitas. Se um sistema de indicador
biolgico for empregado para o desenvolvimento de
um novo processo de esterilizao ou validao de um
processo j existente, os mesmos critrios de desempenho
para produtos comerciais devem ser cumpridos.
7.2.4.3 PREPARAO DA SUSPENSO DE
ESPOROS
Os registros da identifcao das suspenses de esporos
devem ser mantidos por produtores comerciais ou no
comerciais e devem incluir informaes sobre a fonte da
cultura inicial de micro-organismos; a identifcao; a
rastreabilidade da cultura me de esporos, a frequncia de
subcultura; o meio de cultura utilizado para a esporulao;
as mudanas ocorridas na preparao do meio; as
observaes sobre contaminao da suspenso; os dados
anteriores e posteriores ao choque trmico; os registros do
uso da suspenso de esporos e a resistncia esterilizao
(particularmente, valores D e Z, onde aplicvel).
7.2.5 USO DE INDICADOR
BIOLGICO PARA VALIDAO
Independente do processo de esterilizao a ser empregado,
a populao inicial de micro-organismos, a sua resistncia
ao processo esterilizante e o local de inoculao do produto
podem infuenciar a taxa de inativao do indicador
biolgico. Durante o processo de validao, em vrios
locais do produto devem ser inoculados o indicador
biolgico, garantindo o desafo tanto da embalagem quanto
do produto nela contido, para que se assegure um nvel
de garantia de esterilidade de 10
-6
para o produto e para
a embalagem. Pode ser necessrio, por meio de estudos
laboratoriais, determinar se os componentes do produto
so mais difceis de esterilizar do que, por exemplo,
uma soluo, ou medicamento nele contido. A fase de
qualifcao de desempenho do produto deve identifcar
os parmetros mais importantes do processo para
inativao dos micro-organismos nos locais mais difceis
de esterilizar. A sobrevivncia do indicador biolgico
consequncia da resistncia e tamanho da populao
microbiana. Portanto, nem sempre um indicador biolgico
com populao de 10
6
necessrio para confrmar um
nvel de garantia de esterilidade de

10
-6
. O uso apropriado
dos indicadores biolgicos para confrmar que os
parmetros estabelecidos no processo de esterilizao
garantem o nvel de segurana de esterilidade desejado.
Na esterilizao por calor mido, o emprego do indicador
biolgico confrma a letalidade determinada por parmetros
fsicos. Indicadores biolgicos com valor D relevante
e populaes substancialmente menores que 10
6
so
adequados para validar muitos processos de esterilizao
e descontaminao. importante que os usurios estejam
capacitados para justifcar, cientifcamente, a escolha de
um indicador biolgico.
7.3 PROCESSO ASSPTICO
Embora a esterilizao terminal de um produto embalado
seja o procedimento que garanta riscos mnimos de
contaminao microbiana na produo de um lote, existem
classes de produtos que no podem ser esterilizados no
seu acondicionamento fnal e que devem ser preparados
empregando processo assptico. Esse processo projetado
de forma a prevenir a contaminao dos componentes
estreis por micro-organismos viveis, ou ainda, na fase
intermediria da produo, quando algum componente
deve ser fornecido isento de micro-organismos. Um
produto defnido como processado assepticamente
consiste de componentes que foram esterilizados por
um dos processos de esterilizao como, por exemplo, a
fltrao, no caso de tratar-se de um lquido. No caso de
material de acondicionamento constitudo por vidro, pode
ser empregado o calor seco e, quando se tratar de material
de acondicionamento polimrico, como tampas, pode ser
utilizada a autoclavao ou xido de etileno.
No processo assptico, o ambiente onde os insumos
so manipulados e a etapa de enchimento assptico
so considerados pontos crticos. As exigncias para
um projeto adequadamente validado e que mantenha
as condies necessrias para o processo assptico
abrangem um ambiente livre de micro-organismos viveis,
onde a qualidade do ar seja garantida por equipamentos
adequados, por pessoal treinado e paramentado de
acordo com as exigncias do ambiente e por operao
a ser realizada. O ambiente desejado pode ser obtido
por meio da tecnologia de fltrao do ar que propicia o
7
fornecimento do ar com a qualidade microbiana exigida.
O planejamento da planta deve proporcionar um sistema
de cascata de fuxo de ar com presso positiva maior, das
reas mais crticas (asspticas) para aquelas de exigncia
intermediria (reas de preparao) e fnalmente, aquelas
de menor exigncia de controle; e ainda, deve permitir
a troca frequente do ar, alm do emprego de fuxo de
ar unidirecional na vizinhana imediata do produto ou
componentes expostos e o controle da temperatura e
umidade (quando aplicvel). As instalaes devem incluir
sistemas de isolamento primrio (prximo ao produto) e
secundrio (onde o processo assptico realizado) por
meio de barreiras fsicas. As superfcies, como paredes e
teto, devem ser lisas possibilitando a sanitizao frequente.
Os vestirios devem ter espao adequado para o pessoal
e armazenamento das vestimentas estreis. O treinamento
do pessoal quanto paramentao, deve abranger o uso
correto das vestimentas como, macaces, luvas e outros
itens que propiciem a cobertura da superfcie do corpo.
Todo o processo de sanitizao deve ser documentado.
A certifcao e a validao do processo e instalaes
asspticas so realizadas por meio da confrmao da
efcincia dos sistemas de fltrao; pelos procedimentos
de monitoramento microbiolgico do ambiente e
pela simulao de enchimento assptico do produto,
empregando meio de cultura estril. O monitoramento
da instalao assptica deve incluir o exame peridico de
fltro ambiental, o monitoramento de rotina de material
particulado e vivel e o enchimento simulado com meio
de cultura estril.
7.4 SALAS LIMPAS E
AMBIENTES CONTROLADOS
ASSOCIADOS
Nessa seo esto includos alguns aspectos relacionados
ao processamento assptico de produtos com o
estabelecimento; manuteno e controle da qualidade
microbiolgica de salas e zonas limpas. Inclui a
classifcao desses ambientes controlados com base
nos limites de contagem de partculas; no programa de
avaliao microbiolgica para ambientes controlados;
no treinamento de funcionrios; nos fatores crticos no
projeto e implementao de um programa de avaliao
microbiolgica; no desenvolvimento de um plano de
amostragem; no estabelecimento de nveis microbiolgicos
de alerta e ao; nos mtodos e equipamentos usados
para amostragem microbiolgica; nos meios de
cultura e diluentes usados; na identifcao de isolados
microbiolgicos e na avaliao operacional por meio do
envase de meio de cultura (media fll).
Media fll um teste para simulao das operaes
asspticas em que o produto substitudo por um meio de
cultura e serve para assegurar que os processos utilizados
so capazes de conduzir a produtos estreis.
H mtodos alternativos para avaliar e controlar o estado
microbiolgico de salas e zonas limpas, com variedade de
equipamentos e mtodos para amostragem microbiolgica.
A aplicao imprpria de amostragem e anlises
microbiolgicas pode causar variabilidade signifcativa
e potencial para contaminao inadvertida. Um grande
nmero de produtos estreis fabricado por processamento
assptico, que depende da excluso de micro-organismos da
linha de processamento e, portanto, a preveno da entrada
dos micro-organismos em recipientes abertos durante o
envase e a carga microbiana do produto e do ambiente de
fabricao so fatores importantes relacionados ao nvel de
garantia de esterilidade destes produtos.
7.4.1 CLASSIFICAO DE
SALAS LIMPAS E AMBIENTES
CONTROLADOS ASSOCIADOS
Sala limpa a sala na qual a concentrao de partculas
em suspenso no ar controlada; construda e utilizada
de maneira a minimizar a introduo, gerao e reteno
de partculas dentro da sala, na qual outros parmetros
relevantes, como, por exemplo, temperatura; umidade e
presso, so controlados conforme necessrio.
A classifcao de limpeza do ar de salas e zonas limpas,
por meio da anlise de concentrao de partculas em
suspenso no ar, regulada pela norma ABNT NBR
ISO 14644-1 Salas limpas e ambientes controlados
associados Parte 1: classifcao da limpeza do ar. Esse
documento se aplica a partculas suspensas no ar dentro de
um ambiente controlado, mas no pretende caracterizar a
natureza vivel ou no vivel das partculas.
A aplicao dessa norma tem sido usada por fabricantes
de salas e zonas limpas para orientar a construo, a
preparao e a manuteno dessas instalaes. Contudo,
no fornece relao entre o nmero de partculas no
viveis e a concentrao de micro-organismos viveis.
A indstria farmacutica se preocupa com a contagem
de partculas viveis e, no caso de produtos injetveis,
h preocupao adicional com a contagem de partculas
totais. A justifcativa de que, quanto menor o nmero de
partculas presentes em uma sala limpa, menos provvel
que micro-organismos carreados pelo ar estejam presentes,
aceitvel e orientativa no projeto, na construo e na
operao de salas e zonas limpas.
Na Tabela 1 esto descritas as classes de limpeza de ar de
acordo com a norma ABNT NBR ISO 14644-1, que est
baseada em limites de partculas com tamanhos de 0,1 a 5
m. Na Tabela 2 h a relao entre os diferentes sistemas
de classifcao de salas limpas.
aceitvel que, se um menor nmero de partculas estiver
presente na sala limpa ou ambiente controlado, a contagem
microbiana sob condies operacionais ser menor, desde
que no haja mudanas no fuxo de ar, na temperatura e
na umidade. Salas limpas so mantidas sob um estado
de controle operacional com base em dados dinmicos
(operacionais).
7
Tabela 1 - Classes de limpeza do ar para partculas em suspenso, selecionadas para salas e zonas limpas.
Nmero de Classifcao ISO
Limites mximos de concentrao (partculas/m
3
de ar) para
partculas iguais ou maiores que os tamanhos considerados
(N) 0,1 m 0,2 m 0,3 m 0,5 m 1 m 5 m
ISO Classe 1 10 2
ISO Classe 2 100 24 10 4
ISO Classe 3 1 000 237 102 35 8
ISO Classe 4 10 000 2 370 1 020 352 83
ISO Classe 5 100 000 23 700 10 200 3 520 832 29
ISO Classe 6 1 000 000 237 000 102 000 35 200 8 320 293
ISO Classe 7 352 000 83 200 2 930
ISO Classe 8 3 520 000 832 000 29 300
ISO Classe 9 35 200 000 8 320 000 293 000
Tabela 2 - Comparao entre os diferentes sistemas de classifcao de limpeza de ar.
OMS e EEC(GMP) Estados Unidos (habitual) ISO
Classe A Classe 100 ISO 5
Classe B Classe 100 ISO 5
Classe C Classe 10.000 ISO 7
Classe D Classe 100.000 ISO 8
7.4.2 PROGRAMA DE
AVALIAO MICROBIOLGICA
PARA SALAS LIMPAS E
AMBIENTES CONTROLADOS
ASSOCIADOS
O monitoramento de partculas totais em suspenso no ar
em salas e zonas limpas no fornece informao sobre o
contedo microbiolgico do ambiente. A limitao bsica
dos contadores de partculas que normalmente medem
partculas de 0,5 m ou maiores e os micro-organismos
carregados pelo ar no so clulas que futuam livremente,
no esto sozinhas e frequentemente se associam com
partculas de 10 a 20 m. Contagens de partculas, bem
como, contagens microbianas dentro de salas e zonas
limpas, variam com as atividades conduzidas durante a
amostragem e a sua localizao. O monitoramento do
ambiente para partculas no viveis e micro-organismos
importante porque ambos so necessrios para alcanar as
exigncias relativas ao material particulado e esterilidade
estabelecidas para os produtos.
Programas de monitoramento microbiolgico para salas
e zonas limpas devem avaliar a efetividade das prticas
de limpeza e desinfeco que podem ter impacto sobre
a carga microbiana do ambiente. O monitoramento
microbiolgico, normalmente, no identifca e quantifca
todos os contaminantes microbianos nos ambientes; porm,
o monitoramento de rotina deve fornecer informao
sufciente para se certifcar de que o ambiente esteja
operando dentro do estado de controle adequado.
O monitoramento microbiolgico ambiental e a anlise
de dados realizados por pessoas qualifcadas possibilitam
que o estado de controle seja mantido em salas e zonas
limpas. O ambiente deve ser amostrado durante operaes
normais para possibilitar a coleta de dados signifcativos
e a amostragem microbiana deve ocorrer quando os
materiais estiverem na rea, as atividades de processamento
estiverem ocorrendo e todos os funcionrios estiverem em
operao no local.
O monitoramento microbiolgico de salas e zonas limpas
deve incluir a quantifcao do contedo microbiano do
ar ambiental; do ar comprimido que entra na rea crtica;
das superfcies; dos equipamentos; dos recipientes;
dos pisos; das paredes e das vestimentas das pessoas. O
objetivo pretendido com o programa obter estimativas
representativas da carga microbiana do ambiente e, uma
vez compilados e analisados, quaisquer tendncias devem
ser avaliadas por pessoas treinadas. importante rever
resultados ambientais com base em frequncia especifcada,
bem como rever resultados por perodos prolongados para
determinar se h tendncias presentes. Tendncias podem
ser visualizadas por meio de quadros de controle estatstico
que incluem nveis de alerta e de ao. O controle
microbiolgico de ambientes controlados, tambm, pode
ser avaliado com base nos dados de tendncia. Relatrios
ou resumos peridicos devem ser emitidos para alertar o
responsvel pela rea.
Quando o nvel microbiolgico especifcado para um
ambiente controlado for excedido, reviso da documentao
e investigao devem ocorrer. A investigao deve incluir
a reviso da documentao de manuteno da rea; da
documentao de desinfeco; dos parmetros fsicos ou
operacionais inerentes, tais como, mudanas na temperatura
7
ambiental e umidade relativa e o estgio de treinamento
dos funcionrios envolvidos. Em seguida investigao,
as aes adotadas podem incluir o reforo no treinamento
das pessoas para enfatizar o controle microbiolgico
do ambiente; a amostragem adicional em frequncia
aumentada; a desinfeco adicional; os testes adicionais
de produto; a identifcao do contaminante microbiano e
sua possvel fonte e a reavaliao e revalidao dos atuais
procedimentos operacionais padronizados, se necessrio.
Com base na reviso da investigao e nos resultados dos
testes, o signifcado do nvel microbiolgico excedido e a
aceitabilidade das operaes ou produtos processados sob
aquela condio podem ser defnidos. Toda investigao
e justifcativa das aes devem ser documentadas e fazer
parte do sistema de gerenciamento da qualidade.
Sala e zona limpa so defnidas por certifcao de acordo
com a norma aplicvel, sendo que os parmetros avaliados
incluem integridade de fltros, diferenciais de presso
e velocidade, padres e mudanas do ar. Um exemplo
de mtodo para conduzir o teste de desafo de partculas
para o sistema consiste em aumentar a concentrao de
partculas no ambiente por meio de fumaa no entorno de
reas de trabalho crticas e visualizar os movimentos do
ar. A presena de vrtices e zonas turbulentas podem ser
visualizados e o padro de fuxo de ar pode ser fnamente
ajustado para eliminar ou minimizar efeitos indesejveis.
Essa avaliao feita sob condies de produo simuladas;
porm, com equipamentos e funcionrios no local.
O teste e a otimizao apropriados das caractersticas fsicas
da sala limpa ou ambiente controlado so essenciais antes
de concluir a validao do programa de monitoramento
microbiolgico. A garantia de que o ambiente est operando
adequadamente e de acordo com suas especifcaes dar
maior garantia de que a carga microbiana do ambiente ser
apropriada para processamento assptico. Esses testes devem
ser repetidos durante a certifcao de rotina da sala ou zona
limpa e sempre que alteraes consideradas signifcativas
forem feitas na operao, tais como mudanas no fuxo
de pessoas, processamento, operao, fuxo de material,
sistemas de manipulao de ar ou layout de equipamentos.
7.4.3 TECNOLOGIAS
ALTERNATIVAS PARA
PROCESSO ASSPTICO
Devido forte correlao entre o envolvimento e
interveno humanos e o risco potencial para contaminao
de produto no envase assptico, sistemas de produo
onde pessoas so removidas das zonas crticas tm
sido implementados, empregando, portanto, estratgias
avanadas de processamento assptico, com requisitos
reduzidos de monitoramento ambiental de partculas
viveis e no viveis.
Seguem algumas defnies de sistemas usados para
reduzir a taxa de contaminao no processo assptico.
Barreiras: dispositivo que restringe o contato entre o
operador e o campo assptico. Barreiras no podem
ser esterilizadas e nem sempre possuem sistemas de
transferncia que permite a passagem de materiais para
dentro ou fora do sistema sem exposio ao ambiente
ao redor. H diferentes tipos de barreiras, desde cortinas
de plstico em zonas crticas at barreiras rgidas em
equipamentos, que podem incorporar elementos como
suporte de luvas e porta de transferncia.
Sopro/Enchimento/Selagem (Blow/Fill/Seal): esse sistema
combina a montagem do recipiente com o envase do produto
e a selagem em um nico equipamento. Do ponto de vista
microbiolgico, a sequncia de formao do recipiente,
envase do produto estril e a formao e aplicao do selo
so obtidos, assepticamente, em uma operao ininterrupta
com exposio mnima ao ambiente. Esses sistemas
existem h muitos anos e as taxas de contaminao so
menores que 0,1%.
Isoladores: tecnologia usada para dupla proposta, de
proteger o produto da contaminao do ambiente e de
pessoas durante envase e fechamento e de proteger pessoas
de produtos txicos ou deletrios durante sua produo.
Essa tecnologia baseada no princpio de colocar materiais
previamente esterilizados, como recipientes, produtos
e tampas, em um ambiente estril, que permanecem
estreis durante toda operao, uma vez que pessoas ou
componentes no estreis no esto dentro do isolador.
A barreira do isolador uma barreira absoluta que no
permite trocas entre ambientes protegidos e no protegidos.
Isoladores podem ser fsicamente selados contra a entrada
de contaminantes externos ou podem ser efetivamente
selados pela aplicao contnua de sobrepresso.
Manipulao de material por funcionrios realizada por
meio de luvas ou vestimentas completas ou parciais. O
ar que entra no isolador passa atravs de um fltro HEPA
ou ULPA e a exausto de ar normalmente passa por um
fltro HEPA. Vapores de perxido de hidrognio ou cido
peractico normalmente so usados para esterilizao das
superfcies ou ambiente interno. A esterilizao do interior
dos isoladores e todo contedo so normalmente validados
para um nvel de garantia de esterilidade de 10
-6
.
A introduo de equipamentos; componentes e materiais
pode ser feita de diversas maneiras, como uso de autoclave
de porta dupla, introduo contnua de componentes
atravs de uma esteira que passa por tnel de esterilizao
ou uso de um sistema de doca. necessrio monitorar a
integridade, calibrao e manuteno do isolador.
Os requisitos para os ambientes controlados adjacentes a
essas novas tecnologias usadas no processamento assptico
dependem do tipo de tecnologia usada.
Equipamentos de Sopro/Enchimento/Selagem que limitam
o contato do operador com o produto podem ser instalados
em um ambiente controlado, especialmente se alguma
interveno do operador possvel durante a produo.
Sistemas de barreiras requerem alguma forma de ambiente
controlado. Em funo dos numerosos tipos e aplicaes,
7
O treinamento de todos os funcionrios que trabalham
em salas e zonas limpas crtico. Esse treinamento,
tambm, importante para as pessoas responsveis pelo
programa de monitoramento microbiolgico, uma vez
que a contaminao da rea de trabalho pode ocorrer
inadvertidamente durante a amostragem microbiolgica,
por uso de tcnicas imprprias. Em operaes altamente
automatizadas, o monitoramento pode ser realizado por
pessoas que tm contato mais direto com zonas crticas
dentro da rea de processamento. O monitoramento dos
funcionrios deve ser conduzido antes e depois do trabalho
na rea de processamento.
O gerenciamento da instalao deve garantir que todas
as pessoas envolvidas em operaes nas salas e zonas
limpas conheam princpios microbiolgicos relevantes,
incluindo princpios bsicos do processamento assptico e
a relao dos procedimentos de fabricao e manipulao
com fontes potenciais de contaminao do produto.
Tambm, devem ter conhecimento sobre princpios
bsicos de microbiologia; fsiologia microbiana; limpeza,
desinfeco e esterilizao; seleo e preparao de meios
de cultura; de acordo com o envolvimento dos funcionrios
no processo. As pessoas envolvidas na identifcao
microbiana requerem treinamento especializado nos
mtodos laboratoriais aplicveis. Treinamento adicional
no gerenciamento dos dados ambientais coletados
deve ser fornecido. Conhecimento e compreenso dos
procedimentos operacionais padro aplicveis so
crticos, especialmente aqueles relacionados com as
medidas corretivas que so tomadas quando as condies
ambientais exigirem. A compreenso das polticas de
adeso s exigncias regulatrias e a responsabilidade de
cada indivduo, relativas s Boas Prticas de Fabricao
devem ser parte integrante do programa de treinamento,
bem como treinamento sobre como conduzir investigaes
e analisar dados.
O controle da contaminao microbiana associada com as
pessoas um dos elementos mais importantes do programa
de controle ambiental. A contaminao pode ocorrer a partir
da disseminao de micro-organismos por indivduos,
particularmente aqueles com infeces ativas e, portanto,
apenas indivduos saudveis devem ser autorizados a
acessar ambientes controlados. A boa higiene pessoal
e ateno cuidadosa nos detalhes dos procedimentos
de paramentao assptica so itens importantes. Os
funcionrios apropriadamente paramentados devem
ser cuidadosos em manter a integridade de suas luvas
e aventais durante todo o perodo de permanncia nos
ambientes controlados.
Como o programa de monitoramento ambiental no capaz
de detectar todos os eventos do processamento assptico
que poderiam comprometer a qualidade microbiolgica do
ambiente, estudos peridicos de envase de meio de cultura
ou simulao de processo so necessrios para garantir que
os controles operacionais apropriados e treinamento sejam
efetivamente mantidos.
os requisitos para o ambiente adjacente podem variar.
As estratgias de desenho e operao para o ambiente
onde circulam esses sistemas devem ser desenvolvidas
pelos produtores usando um critrio lgico e racional e a
capacidade do sistema de fornecer produtos estreis deve
ser validada de acordo com critrios pr-estabelecidos.
Em isoladores, o ar entra atravs dos fltros integrais de
qualidade HEPA, ou melhor, e seu interior , tipicamente,
esterilizado com um nvel de garantia de esterilidade de
10
-6
.

Portanto, isoladores que contm ar estril no trocam
ar com o ambiente ao redor e so livres de operadores
humanos. Entretanto, quando o isolador est em um
ambiente controlado, o potencial de produto contaminado
reduzido na eventualidade de um vazamento nas luvas
ou vestimentas.
A extenso e escopo do monitoramento microbiolgico
ambiental dependem do sistema utilizado. Produtores
devem balancear a frequncia da amostragem ambiental
que requer interveno humana, com os benefcios
acumulados pelos resultados do monitoramento. Uma vez
que barreiras so desenhadas para reduzir a interveno
humana, sistemas de amostragem remotos devem ser
usados em substituio interveno de pessoas. Em
geral, uma vez que a validao estabeleceu a efccia da
barreira, a frequncia de amostragem para monitorar o
estado microbiolgico da rea de processamento assptico
pode ser reduzida quando comparada frequncia de um
sistema clssico de processo assptico.
Sistemas de isoladores requerem frequncia menor
de monitoramento microbiolgico. O monitoramento
contnuo de partculas totais pode fornecer garantia de
que o sistema de fltrao de ar dentro do isolador est
funcionando adequadamente. Mtodos tradicionais para
amostragem microbiolgica quantitativa do ar podem no
serem sufcientes para testar o ambiente dentro do isolador.
Experincias com isoladores indicam que, sob condies
normais de operao, vazamento ou rompimento nas
luvas representam o maior potencial para contaminao
microbiolgica, o que requer testes frequentes de
integridade das luvas e monitoramento das suas superfcies.
O monitoramento no frequente de superfcies dentro do
isolador deve ser avaliado e pode ser benfco.
7.4.4 TREINAMENTO DE
FUNCIONRIOS
Produtos processados assepticamente exigem muita
ateno aos detalhes, disciplina rigorosa e superviso
estrita das pessoas, a fm de manter o nvel de qualidade
ambiental apropriado para a garantia de esterilidade do
produto fnal.
7
7.4.5 PROJETO E
IMPLANTAO DO
PROGRAMA DE CONTROLE
MICROBIOLGICO
AMBIENTAL
responsabilidade do fabricante desenvolver, iniciar,
implantar e documentar um programa de monitoramento
microbiano ambiental que seja capaz de detectar um
evento adverso nas condies microbiolgicas a tempo
de permitir aes corretivas signifcativas e efetivas.
imperativo que o programa seja feito sob medida para as
condies e instalaes especfcas.
Um meio de cultura de crescimento microbiolgico geral
como o meio de casena / soja, deve ser adequado na
maioria dos casos. Esse meio pode ser suplementado com
aditivos para contornar ou minimizar os efeitos dos agentes
desinfetantes ou de antibiticos, se usados ou processados
nesses ambientes. A deteco e quantifcao de leveduras
e bolores devem ser consideradas. Meios, geralmente
aceitos, so tais como Sabouraud e Sabouraud modifcado.
Outros meios validados para promover o crescimento de
fungos podem ser usados, tal como Agar casena / soja.
Em geral, a anlise de micro-organismos anaerbicos
obrigatrios no realizada na rotina, a no ser que
condies ou investigaes exijam. A capacidade dos
meios de cultura selecionados para detectar e quantifcar
os micro-organismos anaerbicos ou microaerflos deve
ser avaliada.
Os processos de esterilizao usados para preparar meios
de cultura para o programa ambiental devem ser validados
e devem ser examinados para esterilidade e promoo de
crescimento. Os meios devem ser capazes de manter o
crescimento quando inoculados com menos de 100 UFC.
A seleo de tempo e temperatura de incubao feita uma
vez que os meios apropriados tenham sido selecionados.
Tipicamente, temperaturas de incubao nos intervalos de
22,5 C 2,5 C e 32,5 C 2,5 C tm sido usadas com
tempos de incubao de 72 e 48 h, respectivamente.
O programa de controle ambiental deve incluir identifcao
e avaliao dos locais de amostragem e validao dos
mtodos de amostragem microbiolgica do ambiente.
7.4.6 PLANO E LOCAIS DE
AMOSTRAGEM
Durante a fase inicial de atividades, assim como, na
preparao de uma sala limpa, ou outro ambiente
controlado, locais especfcos para amostragem de ar ou de
superfcies devem ser determinados. Deve considerar-se a
proximidade do produto, se o ar e as superfcies existentes
na sala esto em contato com ele ou com superfcies
internas dos sistemas de fechamento dos recipientes.
A frequncia de amostragem depender da criticidade
dos locais especifcados e o tratamento subsequente ao
processo assptico.
medida que intervenes manuais durante a operao e
o potencial de contato pessoal com o produto aumentam,
cresce a importncia do programa de monitoramento
ambiental. Esse mais crtico para produtos processados
assepticamente do que para aqueles submetidos
esterilizao terminal. Quando o ciclo de esterilizao
terminal no se basear no conceito de sobremorte, o
programa de carga microbiana anterior esterilizao
crtico. Os planos de amostragem devem ser dinmicos com
frequncias de monitoramento e localizaes ajustados com
base no desempenho de tendncia. apropriado aumentar
ou diminuir a amostragem com base nesse desempenho.
7.4.7 LIMITES
MICROBIOLGICOS DE
ALERTA E AO EM SALAS E
ZONAS LIMPAS
Os princpios e conceitos de controle de processos
estatsticos so teis para estabelecer nveis de alerta e
ao, assim como mecanismos para controle de tendncias.
O nvel de alerta no monitoramento microbiolgico ambiental
evidencia nvel de contaminao signifcativamente superior
s condies de operao normais. Exceder o nvel de alerta
no necessariamente deve exigir ao corretiva, porm,
ao menos levar a uma investigao de acompanhamento
documentada, que pode incluir modifcaes no plano de
amostragem.
O indicativo de ao em monitoramento microbiolgico
ambiental, quando excedido, requer acompanhamento
imediato e, se necessrio, ao corretiva.
Nveis de alerta se baseiam normalmente em informaes
histricas obtidas de operaes de rotina do processo em
um ambiente controlado especfco.
Em uma instalao nova, esses nveis geralmente se
baseiam na experincia anterior de instalaes e processos
similares; e, em dados obtidos no decorrer de vrias
semanas. Esses nveis so normalmente re-examinados
para adequao a uma frequncia estabelecida. Tendncias
a uma deteriorao da qualidade ambiental requerem
ateno para determinar a causa e para instituir um
plano de ao corretiva, a fm de trazer as condies de
volta aos nveis esperados. Uma investigao deve ser
implementada, e a avaliao do impacto potencial sobre o
produto deve ser efetuada.
7
7.4.8 MTODOS E
EQUIPAMENTOS USADOS
PARA MONITORAMENTO
AMBIENTAL
Micro-organismos viveis do ar podem infuenciar a
qualidade microbiolgica dos produtos fabricados em salas
e zonas limpas. A quantifcao destes micro-organismos
pode ser infuenciada por instrumentos e procedimentos
utilizados nos ensaios. O emprego dos mtodos, ou
equipamentos alternativos deve ser precedido da verifcao
quanto equivalncia dos resultados. H diferentes formas
de monitoramento de tipos e tipos de equipamentos
disponveis para quantifcar micro-organismos viveis,
incluindo amostradores de sedimentao, de impacto
e centrfugos. A seleo e adequao do mtodo a ser
utilizado responsabilidade do usurio.
O mtodo utilizando placas de sedimentao ainda o
mais amplamente disseminado devido a sua simplicidade
e baixo custo e fornece informaes qualitativas sobre o
ambiente de exposio por tempo prolongado, porm,
a exposio de placas de Petri abertas e contendo meio
de gar no para avaliao quantitativa dos nveis de
contaminao microbiana de ambientes crticos.
Uma das principais limitaes dos amostradores de ar
mecnicos o tamanho da amostra de ar que est sendo
testada, pois o nvel de micro-organismos no ar de um
ambiente controlado normalmente reduzido e um grande
volume de ar deve ser testado para que o resultado seja
preciso e exato, o que, muitas vezes, no prtico. Para
demonstrar que as contagens microbianas no ambiente
no esto aumentando depois da amostragem, ela pode ser
estendida para determinar se o tempo de amostragem um
fator limitante para obter uma amostra representativa. H
equipamentos capazes de amostrar altas taxas de volume
de ar, mas deve considerar-se a ruptura do fuxo de ar
em reas crticas ou a criao de turbulncia que possam
aumentar a probabilidade de contaminao.
Amostradores centrfugos demonstram seletividade para
partculas maiores e, portanto, o uso desses equipamentos
pode resultar em contagens maiores de partculas no ar.
Ao usar esses amostradores, deve considerar-se seu efeito
na linearidade do fuxo de ar na zona controlada onde
posicionado para a amostragem. A utilizao de sondas
remotas requer que seja determinado se o tubo extra usado
no tem efeito adverso na contagem de partculas viveis,
pois esse efeito deve ser eliminado, ou um fator de correo
deve ser usado para os resultados obtidos.
7.4.9 MTODOS E
EQUIPAMENTOS USADOS
PARA MONITORAMENTO DE
PARTCULAS VIVEIS EM
SUPERFCIES
A amostragem de superfcies de equipamentos, de reas e
de funcionrios um componente do programa de controle
microbiolgico de ambientes controlados. Para minimizar
a ruptura de operaes crticas, normalmente a amostragem
realizada no fnal das operaes. A amostragem pode ser
feita usando placas de contato ou swab.
O monitoramento realizado normalmente nas reas que
entram em contato com o produto e em reas adjacentes.
Placas de contato com gar nutriente so usadas para
amostrar superfcies planas e so incubadas em temperatura
adequada para quantifcao de partculas viveis. gar
especfco pode ser usado para quantifcar fungos, esporos,
etc. O swab empregado em superfcies irregulares,
especialmente nos equipamentos. O swab colocado
em um diluente adequado e a estimativa de contagem
microbiana feita plaqueando uma alquota apropriada em
gar nutriente especfco. A rea a ser amostrada usando
swab defnida usando um molde de tamanho apropriado
estril, em geral entre 24 a 30 cm
2
. O resultado dado por
placa de contato, ou por swab.
7.4.10 MEIOS DE
CULTURA E DILUENTES
PARA AMOSTRAGEM
E QUANTIFICAO DE
PARTCULAS VIVEIS
Os meios de cultura e diluentes usados para amostragem e
quantifcao de micro-organismos em salas e zonas limpas
dependem dos procedimentos e equipamentos usados. O
gar casena / soja o meio slido normalmente usado, mas
h diferentes meios e diluentes disponveis para diferentes
propostas. Meios alternativos devem ser validados para a
proposta usada. Quando se usa desinfetantes ou antibiticos
na rea controlada, deve considerar-se o emprego de meios
com agentes inativantes apropriados.
7.4.11 IDENTIFICAO DE
ISOLADOS MICROBIANOS
O programa de controle ambiental inclui um nvel
apropriado de identifcao da fora obtida na amostragem.
O conhecimento da fora normal das salas e zonas limpas
importante para defnir o monitoramento da rea, a efccia
dos procedimentos de limpeza e desinfeco e os mtodos
7
de desinfeco microbiana. A informao obtida utilizando
o programa de identifcao pode ser til na investigao
de fontes de contaminao, especialmente quando os
limites de ao so excedidos. A identifcao de micro-
organismos isolados de reas crticas importante.
7.4.12 AVALIAO
OPERACIONAL DO ESTADO
MICROBIOLGICO DE
PRODUTOS ENVASADOS
ASSEPTICAMENTE
Salas e zonas limpas so monitoradas por um programa de
monitoramento ambiental apropriado. Para garantir carga
microbiana mnima, informao adicional na avaliao
do estado microbiolgico do ambiente pode ser obtida
por meio do teste de envase assptico de meio de cultura
(media fll). O teste de media fll empregado para avaliar
o processamento assptico usando meio de cultura estril
no lugar do produto. Resultados satisfatrios de media
fll demonstram a adequao da linha para a fabricao
do produto. Entretanto, outros fatores so importantes,
como construo das reas; monitoramento ambiental e
treinamento de pessoas.
Quando um processo assptico desenvolvido e instalado,
necessrio qualifcar o estado microbiolgico do processo,
realizando, no mnimo, trs media fll consecutivos. Os
problemas no desenvolvimento do programa de media
fll a serem considerados compreendem procedimentos
do envase do meio; seleo do meio; volume de envase;
tempo e temperatura de incubao; inspeo de unidades
envasadas; interpretao de resultados e possveis aes
corretivas requeridas.
Uma vez que o media fll realizado para simular o
processamento assptico de um produto, importante que
seja realizado em condies normais de produo. Isso
inclui nmero mximo de pessoas e uso de todas as etapas e
materiais usados no processo de produo normal. Durante
a conduo do media fll, intervenes pr-documentadas
conhecidas devem ser planejadas durante as corridas normais
de produo, como troca de bicos de envase, componentes de
fxao, etc. Alternativamente, para adicionar uma margem
de segurana, uma combinao de condies possveis pode
ser usada e exemplos incluem paradas frequentes; reparos
no esperados; troca de fltros, etc.
A qualifcao de um processo assptico deve ser feita para
todos os produtos e para cada linha. Desde que a geometria
do recipiente (como tamanho e abertura) e a velocidade
da linha sejam fatores que so variveis. A combinao
apropriada desses fatores, preferencialmente nos extremos,
deve ser usada na qualifcao. Uma anlise racional dos
produtos usados deve ser documentada.
Recomenda-se que o media fll seja realizado para
cobrir todos os turnos de produo para linha / produto
/ combinaes de recipientes para qualifcao inicial e
revalidaes peridicas. O programa de media fll deve
simular prticas de produo em tempos prolongados e
pode ser realizado no fnal do turno de produo.
Meios de cultura ricos podem ser usados, como caldo
casena / soja. Aps o processamento assptico do meio
de cultura, esses devem ser incubados a 22,5 C 2,5
C ou 32,5 C 2,5 C, por no mnimo 14 dias. Se duas
temperaturas forem usadas para a incubao das amostras
de meio de cultura, esses devem ser incubados, no mnimo,
7 dias em cada uma delas. Aps incubao, as amostras
devem ser inspecionadas para crescimento. Isolados
devem ser identifcados para gnero e, quando possvel,
para espcie a fm de propiciar a investigao das fontes de
contaminao.
Pontos crticos na realizao do media fll so nmero de
recipientes para qualifcar o processo assptico; nmero
de unidades enchidas para o media fll; interpretao
de resultados e implementao de aes corretivas.
Normalmente trs corridas de media fll so usadas para
qualifcao inicial, ou incio de uma rea para demonstrar
consistncia na linha de envase assptico. O nmero mnimo
para demonstrar a taxa de contaminao de no mais que
0,1%, critrio de aceitao para corrida de media fll, de,
no mnimo, 3000 unidades. Plantas pilotos que preparam
pequenos lotes podem usar nmero menor de unidades.
Uma vez que os funcionrios so uma fonte crtica de
contaminao em salas limpas, documentao visual pode
ser til para verifcar correlao de atividades de produo
com eventos de contaminao.
7.5 PROCEDIMENTOS DE
LIBERAO
Deve ser estabelecido um programa de garantia da qualidade
que descreva em detalhes os passos e a documentao
requerida para a liberao da carga ou lote. A liberao dos
produtos esterilizados depender de liberao que pode ser
convencional ou paramtrica.
LIBERAO PARAMTRICA DE PRODUTOS COM
ESTERILIZAO TERMINAL
A liberao paramtrica defnida como a liberao de
cargas ou lotes de produtos submetidos esterilizao
terminal por meio do cumprimento de parmetros crticos
do processo de esterilizao sem a necessidade de realizao
do teste de esterilidade. A liberao paramtrica uma
possibilidade quando o processo de esterilizao muito
bem conhecido, os pontos importantes de controle do
processo so bem defnidos, previsveis e mensurveis e a
letalidade do ciclo de esterilizao foi validada com indicador
biolgico adequado, ou, no caso de esterilizao por
radiao ionizante, a realizao dos testes microbiolgicos
e dosimtricos apropriados. O uso de liberao paramtrica
para processos de esterilizao requer aprovao prvia do
rgo regulatrio, que deve avaliar a justifcativa cientfca
para o processo de esterilizao empregado e os dados
documentados de validao.
7
importante considerar as limitaes do teste de
esterilidade na avaliao dos produtos submetidos
esterilizao terminal, que tem sensibilidade comprometida
e estatisticamente limitado devido baixa probabilidade
da presena de unidades contaminadas. Portanto, uma
vez que o processo de esterilizao esteja completamente
validado e operando, consistentemente, os dados fsicos
da esterilizao combinados com outros mtodos,
como por exemplo, indicadores biolgicos, indicadores
termoqumicos e integradores fsico-qumicos, podem
fornecer informaes mais exatas que o teste de esterilidade
para a liberao de produtos submetidos esterilizao
terminal.
Quatro processos de esterilizao podem ser qualifcados
para a liberao paramtrica: calor mido, calor seco, xido
de etileno e radiao ionizante. Os produtos submetidos
esterilizao terminal representam a categoria de
menor risco dentre os produtos farmacuticos estreis.
Ao contrrio de produtos estreis obtidos por produo
assptica em ambientes controlados, produtos submetidos
esterilizao terminal apresentam nvel de garantia de
esterilidade mensurvel.
Os produtos estreis obtidos por esterilizao terminal
devem atender a um nvel de garantia de esterilidade de
10
-6
, ou seja, no mais que uma unidade contaminada em
um milho de unidades produzidas. A aplicao apropriada
dos mtodos usados para desenvolvimento de processo
terminal requer amplo conhecimento cientfco do mtodo
de esterilizao selecionado, dentro de trs categorias, para
uso com produto especfco:
a) processo baseado na carga microbiana (biocarga);
b) processo combinado: indicador biolgico e biocarga;
c) processo de sobremorte.
O processo baseado na biocarga requer amplo
conhecimento da carga microbiana do produto. Deve ser
observado que diversos procedimentos de estabelecimento
de dose no processo de esterilizao por radiao utilizam
o conhecimento da carga microbiana do produto e sua
resistncia radiao. Esse mtodo exige, tambm, um
nvel de garantia de esterilidade de pelo menos 10
-6
. O
mtodo baseado na determinao da biocarga necessita que
sejam desenvolvidos pontos crticos de controle do processo
quanto carga microbiana do produto. Procedimentos de
anlise de risco, como Anlise de Perigos e Pontos Crticos
de Controle (HACCP), so teis para estabelecer condies
de controle de manufatura e parmetros apropriados de
controle em processo.
Para os produtos que possibilitam a sobrevivncia da
carga microbiana so necessrios ambientes de produo
mais controlados e controles de processo mais precisos.
Esse processo mais indicado para produtos limpos, com
reduzido nvel de carga microbiana e baixa frequncia de
micro-organismos formadores de esporos. Esse processo,
tambm, pode ser til para produtos que podem sofrer
alteraes quando submetidos a processos de esterilizao
mais drsticos.
O processo combinado que usa indicador biolgico e
biocarga geralmente empregado para produtos que
podem perder atributos ao usar processo de sobremorte
e quando se deseja um processo de esterilizao que
demonstre a inativao de altos nmeros de micro-
organismos dos indicadores biolgicos, reconhecidamente
mais resistentes ao processo de esterilizao. Esse
processo requer o conhecimento da carga microbiana do
produto e dados relativos sua resistncia ao processo de
esterilizao. A resistncia relativa do indicador biolgico
selecionado deve ser estabelecida pela inoculao dos
esporos microbianos no produto. Normalmente so usados
indicadores biolgicos com 10
6
esporos e valor D maior que
1 minuto. Ciclos fracionados so usados para determinar a
resistncia (valor D) relativa entre produto inoculado com
os micro-organismos do indicador biolgico e com aqueles,
frequentemente, encontrados na carga microbiana. Esse
processo empregado geralmente para desenvolvimento de
ciclos de esterilizao de produtos parenterais empregando
esterilizao terminal e esterilizao de correlatos por
xido de etileno.
O processo de sobremorte usado quando o produto a ser
esterilizado no deleteriamente infuenciado pelo agente
esterilizante ou condies do processo de esterilizao.
Quando empregar esse processo, importante conhecer a
carga microbiana do produto e a prevalncia dos micro-
organismos formadores de esporos. Nesse caso, os dados
sobre a carga microbiana no necessitam ser minuciosos
como para os outros dois processos (biocarga e indicador
biolgico / biocarga). Geralmente os indicadores biolgicos
so resistentes ao processo. A sobremorte demonstrada
pela reduo logartmica dos esporos do indicador
biolgico, calibrado em um processo que possibilita obter
F
0
mnimo de 12 minutos.
VALIDAO DO PROCESSO DE ESTERILIZAO
A liberao paramtrica requer que o processo
de esterilizao escolhido seja desenvolvido e
consistentemente validado, para inativao da carga
microbiana e o atendimento a um nvel de garantia de
esterilidade de 10
-6
. A validao da maioria dos processos
de esterilizao inclui a validao de parmetros fsicos
e da efccia microbiolgica por intermdio do uso de
indicadores biolgicos para demonstrar uma correlao
razovel entre a letalidade obtida por meio de medidas
fsicas (F
0
) e a letalidade biolgica determinada com o uso
de indicadores biolgicos.
Uma vez que a efccia do processo de esterilizao
terminal defnido em funo da biocarga est associada
com o nmero e a resistncia dos micro-organismos no
produto, um dos componentes da liberao paramtrica o
programa ativo de controle microbiolgico para monitorar
a contagem e resistncia da carga microbiana do produto.
O controle da carga microbiana e sua enumerao no um
fator crucial quando se emprega o mtodo de sobremorte,
pois, em geral, o mtodo de sobremorte no requer extensa
avaliao da carga microbiana no decorrer do processo
e exige menor controle em processo do ambiente de
produo.
8
8 PROCEDIMENTOS ESTATSTICOS
APLICVEIS AOS ENSAIOS BIOLGICOS
8.1 GLOSSRIO DE SMBOLOS
Smbolo Defnio
a
1
...z
1
doses das preparaes ensaiadas (amostras) A...Z.
a signifcncia estatstica de um resultado ou medida estimada do grau em que este resultado verdadeiro.
b
0
interseo das respostas (y) sobre log doses (x) na linha de regresso.
b, b
1
estimativa

da inclinao da linha de regresso da resposta (y) em relao ao logaritmo da dose (x).
bl nmero de blocos (animais) em um ensaio cruzado.
c constante utilizada na avaliao dos limites de confana (Tabela 15).
d nmero de nveis de doses para cada preparao num ensaio balanceado.
f nmero de diferenas nas respostas pareadas entre padro e amostra, nos ensaios realizados pelo
delineamento 5 x 1.
gl graus de liberdade.
h nmero de preparaes em um ensaio, incluindo a preparao padro.
h nmero de amostras ensaiadas.
k nmero de tratamentos diferentes dentro de um ensaio k = dh.
k nmero de logaritmos de potncias nos ensaios realizados pelo delineamento 5 x 1, para uma mesma
amostra.
n nmero de rplicas para cada tratamento.
n nmero de estimativas individuais da potncia.
n graus de liberdade utilizado para estimar a varincia s
2
M
no ensaio 5 x 1
p probabilidade
p
1
p
2
p
3
doses menor, mdia e maior da preparao padro P; em ensaios com somente dois nveis de doses, p
2

representa a dose maior.
r coefciente de correlao de Pearson
s
2
estimativa da varincia fornecida pelo quadrado mdio do erro na anlise da varincia. Tambm usado com
uma letra ndice, por exemplo, s
2
M
representa a varincia do log potncia M.
s estimativa do desvio padro, ou seja, a raiz quadrada de s
2
.
t estatstica de Student (Tabela 3).
t estatstica de Dunnett (Tabela 12).
v varincia para heterogeneidade entre ensaios.
w coefciente de ponderao.
x log dose tambm usado com ndice para indicar uma preparao particular.
x mdia dos log dose.
y resposta individual ou resposta individual transformada.
y resposta calculada para substituir um valor perdido.
y
P
... y
Z
mdias das respostas para as preparaes padro e amostra.
A...Z amostras ensaiadas.
A...Z soma das respostas para as amostras A...Z.
A
1
A
2
A
3
soma das respostas para as doses menor, mdia e maior da amostra A. Para um ensaio com dois nveis de
doses, A
2
representa a resposta para a dose maior. Similarmente para outras amostras ensaiadas.
B
1
...B
2n
soma das respostas para cada sujeito (1 a 2n) em ensaio duplo cruzado.
B total incompleto das respostas em fla ou bloco que tem um valor perdido.
C estatstica usado no clculo dos limites de confana (Frmula 14).
C
1
...C
n
soma de respostas em cada coluna (1 a n) em delineamento quadrado latino.
C soma incompleta das respostas em uma coluna de delineamento em quadrado latino com um valor perdido.
CV coefciente de variao.
;
2
constante estatstica da Tabela 18.
;
2
M
constante estatstica para testar homogeneidade de estimativas individuais de logaritmo da potncia.
8
Smbolo Defnio
E soma de quadrados para regresso (Tabela 10).
F razo de duas estimativas de varincias independentes (Tabelas 4 e 5).
F
I
, F
II
soma das respostas na fase I ou fase II num ensaio cruzado.
F
1
...F
n
soma das respostas em cada uma das flas 1 a n em delineamento de quadrado latino, ou em cada bloco de
um delineamento em blocos ao acaso.
G
1
, G
2
, G
3
estatstica utilizada no teste de valores aberrantes.
G total incompleto das respostas em um ensaio com excluso do valor perdido.
I intervalo entre log doses adjacentes, no ensaio de retas paralelas.
K termo de correo utilizado na anlise de varincia K = (y)
2
/N.
L intervalo de confana em logaritmos.
L
C
intervalo de confana em logaritmos para mdia semiponderada.
L
P
...L
Z
contrastes lineares para as preparaes padro e amostra.
M estimativa do log da potncia ou do log da razo de potncia usada com uma letra ndice em um ensaio
mltiplo, para denotar uma preparao particular (M = log R).
M
i
, M
s
limites de confana da estimativa do log da potncia.
M
mdia de vrias estimativas independentes de M.
M estimativa do log da potncia da amostra A ou do log da razo de potncias antes de corrigir pela potncia
suposta (M = log R).
M
s
, M
i
limites superior e inferior da estimativa do log da potncia, antes de corrigir pela potncia suposta.
N nmero total de respostas do ensaio.
N
P
, N
A
nmero total de respostas para as preparaes P e A.
P preparao padro.
P soma das respostas para a preparao padro.
P
1
, P
2
, P
3
soma das respostas para as doses inferior, mdia e superior da preparao padro P. Para ensaio de somente
dois nveis de dosagem, P
2
representa as respostas para a dose maior.
Q soma de quadrados para linearidade na mesma direo (Tabela 10).
QM soma de quadrados devido a uma fonte de variao dividido pelo respectivo grau de liberdade.
Q
P
...Q
Z
contraste quadrtico para as preparaes padro e amostra (Tabela 9).
R estimativa da potncia da amostra.
R
i
, R
s
limites de confana inferior e superior da estimativa de potncia.
R estimativa da razo de potncias antes da correo pela potncia suposta.
R+ constante especfca para testar valores atpicos (Tabela 2).
SA potncia suposta para a amostra A, quando se preparam as doses.
SQ soma de quadrados devido a uma fonte de variao.
T total incompleto das respostas para um tratamento excluindo o valor perdido.
V = 1/W varincia do logaritmo de potncia individual.
X diferenas nas respostas pareadas entre amostra e padro, divididas pelo coefciente de regresso (b
1
), no
delineamento 5 x 1
W ponderao estatstica usada na combinao de vrias estimativas independentes do log potncia.
W semi-ponderao de cada logaritmo de potncia numa srie de ensaios.
2
estatstica qui-quadrado (Tabela 18).
Nota: as Tabelas de 1 20 se encontram na seo 8.9 TABELAS ESTATSTICAS. As Tabelas de 21 47 se encontram na
seo 8.10 EXEMPLOS DE ENSAIOS ESTATSTICOS.
8.2 FUNDAMENTOS
ENSAIOS BIOLGICOS
So procedimentos destinados a avaliar a potncia de
princpios ativos contidos nas matrias primas e preparaes
farmacopeicas, utilizando reagentes biolgicos tais como
micro-organismos, animais, fuidos e rgos isolados de
animais. A caracterstica dos reativos biolgicos sua
variabilidade. Enquanto os reativos fsico qumicos podem
ser defnidos e padronizados para fornecerem resultados
idnticos em todos os laboratrios, impossvel defnir
totalmente os reagentes biolgicos, apesar dos esforos de
entidades internacionais nesse sentido. Essa variabilidade
inerente aos reativos biolgicos torna imprescindvel:
1) o emprego de padres de referncia adequados para
se obter potncias relativas e 2) o emprego de mtodos
estatsticos para os delineamentos experimentais e analise
dos resultados.
8
DELINEAMENTOS EXPERIMENTAIS
O delineamento de um ensaio compreende: a) seleo
do conjunto de doses do padro (P) e das amostras do
desconhecido (A) que sero ensaiados; b) especifcao
das unidades experimentais (animais, micro-organismos,
antissoros, sangue etc.); c) regras pelas quais se distribuiro
as doses para as unidades experimentais; d) especifcaes
das medidas ou outros registros que devam ser procedidos
em cada unidade experimental. O melhor delineamento
experimental aquele que produz a informao desejada
com a maior efcincia. Por difculdades prticas, pode
ser impossvel alcanar esse objetivo. Portanto, para
cada ensaio podem empregar-se diferentes delineamentos
experimentais, de acordo com a disponibilidade de pessoal,
reagentes e tempo. Todos os delineamentos que forneam
ensaios vlidos e de preciso adequada, como resultado
fnal, so cientifcamente aceitveis. Alm disso, devem
compreender algum sistema que assegure distribuio ao
acaso das unidades experimentais para as diversas doses
utilizadas.
ACASO E VCIO
Deve fazer-se distribuio ao acaso utilizando aparelho
empregado em jogos de azar ou tabela de nmeros
aleatrios. Convm assinalar que esse procedimento
no elimina todos os vcios. Por exemplo, por efeito do
acaso, os animais de maior peso podero ser destinados
determinada dose e essa diferena de pesos viciar os
resultados. Portanto, dever ser criado o equilbrio, ou
seja, devem classifcar-se os animais por faixa de peso e
distribuir, ao acaso, aqueles de mesmo peso para todas as
doses e preparaes (padro e amostra).
ANLISE ESTATSTICA
o procedimento matemtico aplicado aos resultados
experimentais com que se tem como objetivo estimar
a potncia da amostra e avaliar a validade e preciso
do ensaio. Os mtodos de anlise se relacionam com os
delineamentos experimentais utilizados.
RESULTADOS
Expressar os resultados de avaliao biolgica como
estimativa da potncia suposta para uma amostra (R), que
ser a expresso da verdadeira potncia relativa da amostra
em relao ao padro (). Essa ltima impossvel de ser
calculada com preciso devido variabilidade dos reativos
biolgicos. Tal estimativa da potncia suposta (R) deve
ser acompanhada pelos limites de confana inferior e
superior (Ri, Rs), ou intervalo que abrange a verdadeira
potncia relativa da amostra (). Nas monografas esto
estabelecidas especifcaes para a amplitude aceitvel
desses intervalos em relao potncia estimada. Essas
especifcaes levam em conta a difculdade dos mtodos
e a necessidade prtica de estimar-se a verdadeira potncia
com determinada preciso. Para alcanar os limites de
confana especifcados deve, s vezes, realizar-se mais
de um ensaio. Para se obter uma estimativa da potncia
com intervalo de confana reduzido, devem combinar-
se, estatisticamente, os resultados desses ensaios
independentes.
A probabilidade, que mede o grau de confana de que
a potncia esteja fora dos limites de confana superior
e inferior, dada pela signifcncia estatstica () de um
resultado ou medida estimada do grau em que esse resultado
verdadeiro. O nvel de signifcncia mais utilizado em
ensaios biolgicos de 5% ( = 0,05) ou 1% ( = 0,01).
Nos casos no especifcados explicitamente entender-se-
que o nvel de signifcncia utilizado no clculo dos limites
= 0,05.
Os procedimentos de clculo so planejados para o ensaio
em amostra nica. No caso de serem ensaiadas vrias
amostras, simultaneamente, empregar as modifcaes
descritas nesse volume.
8.3 VALORES ATPICOS
Todas as respostas obtidas sem obedecer estritamente
o protocolo pr - estabelecido devem ser eliminadas.
Quando, aps o registro das respostas, se observarem
valores aparentemente atpicos, a deciso de mant-los ou
elimin-los deve basear-se em critrios estatsticos, como
os descritos a seguir:
Critrio baseado na variao dentro de um nico grupo de
respostas supostamente equivalentes
Em mdia, para, relativamente, poucas respostas idnticas
dentro do grupo, sero desprezadas observaes validas em
2 ou 4% das provas. Comeando com o valor supostamente
atpico, indicar as respostas em ordem de magnitude de y
1

a y
n
, onde n representa o nmero de observaes no grupo
ou rplicas do mesmo tratamento. Calcular
( ) ( ), G
1 1 2 1
y y y y
n
= quando n = 3 a 7
( ) ( ), G
1 1 1 3 2
y y y y
n
=

quando n = 8 a 13 ou
( ) ( ), G
1 2 1 3 3
y y y y
n
=

quando n = 14 a 24
Se G
1
, G
2
ou G
3
excedem o valor crtico registrado na
Tabela 1 para o valor correspondente de n, existe base
estatstica para a eliminao do valor suspeito.
Critrio que contempla a amplitude de uma srie K = 2 ou
mais grupos de igual tamanho
Os grupos podem receber diferentes tratamentos, porm
todas as n respostas dentro de cada grupo decorrem do
mesmo tratamento. Nesse teste, estuda-se a variao dos
valores para cada tratamento que obtida pela diferena
entre o maior e menor valor. O valor obtido com maior
diferena deve ser dividido pela soma de todas as diferenas
e no deve exceder o valor tabelado de (R+) na Tabela 2
para k = nmero de doses e n = nmero de rplicas. Se o
valor calculado exceder o valor tabelado, a coluna suspeita
deve ser investigada para detectar o valor discrepante. Se
k for menor ou igual a 10, usar os valores apresentados na
Tabela 2; se maior, multiplicar R+ por (k + 2) e interpolar,
se necessrio, entre os valores apresentados na Tabela 2a.
8
Se R+ exceder o valor tabelado ou interpolado, o grupo
com intervalo maior suspeito ( = 0,05) e a observao
de seus dados permitir identifcar o valor que, ento, se
considera atpico. O procedimento pode ser repetido com
os demais intervalos se houver suspeita de valor atpico em
um segundo grupo.
8.4 ENSAIOS DIRETOS
Medem-se, diretamente, as doses de cada preparao
(padro e amostra) necessrias para produzir respostas
pr-determinadas em cada unidade experimental de
dois grupos equivalentes de animais ou outros reativos
biolgicos. Exemplo tpico o ensaio biolgico de digital.
Preparar as solues do padro e amostra de modo que
contenham aproximadamente a mesma potncia, levando
em considerao a atividade declarada da amostra ou
a estimada em ensaios prvios (S
A
). Transformar cada
resultado (dose efcaz) em logaritmos (x) e calcular os
valores mdios dos logaritmos das doses efcazes para o
padro (
P
x ) e para a amostra (
A
x ). Calcular a potncia
relativa da amostra (R), antes de ajustar pela potncia
suposta, como o antilogaritmo de M, em que:
A P
x x M =
'

(1)
Calcular a varincia de M como a soma das varincias das
duas mdias, a partir da equao
|
|
.
|
\
|
+ =
A P
2
x
2
M
N
1
N
1
s s
'
(2)
em que

2 N N
N N
s
A P
A
2
A A
A
2
A P
P
2
P
P
2
P
2
+

|
.
|
\
|
+
|
.
|
\
|
=

x x x x
x
(3)
N
P
e N
A
so nmeros de animais tratados como padro
e amostra;
P
e
A
representam somatrio dos resultados

calculados para as duas preparaes. Calcular os limites de
confana como:

(4)
Obter o valor apropriado de t na Tabela 3, de acordo com
os graus de liberdade (gl) dados pelo denominador da
equao (3).
Calcular a potncia relativa da amostra e os limites de
confana, levando em considerao a potncia suposta da
amostra (S
A
) utilizada para preparar as diluies:
M anti R log =

(5)
em que

A
S M M log
'
+ =

(6)
com limites de confana

(7)
Nesse ensaio, s
M
igual a s
M
.
Para que o ensaio seja vlido, a varincia de x
P
deve ser a
mesma de x
A
, diferindo somente por erros de amostragem.
Para testar, calcular as varincias e dividir a maior pela
menor. Desse modo, obtm-se uma relao de varincias
(F).
Calcular a varincia de x
P
do seguinte modo:
1 N
N
s
P
P
P
2
P
P
2
P
2
P
|
.
|
\
|
=

x x
x
(8)
Calcular analogamente
2
x
A
s .(8a)
A distribuio da razo de varincias (F) encontra-se nas
Tabelas 4 e 5, porm para esse teste os valores na Tabela
4 correspondem aos nveis de signifcncia = 0,05 e
os na Tabela 5 a = 0,01. O valor F do ensaio no deve
ultrapassar o valor na tabela, correspondente aos graus de
liberdade do numerador e denominador com que se obteve
F. Os graus de liberdade so aqueles dos denominadores
das varincias das equaes (8) e (8a).
8.5 ENSAIOS INDIRETOS
QUANTITATIVOS
NATUREZA E VALIDADE
Em geral no possvel medir diretamente a dose efcaz.
Por essa razo, a potncia determinada indiretamente,
comparando as respostas produzidas em escala quantitativa,
por exemplo, peso, por doses conhecidas do padro com
aquelas produzidas por uma ou mais doses de amostra.
Em um intervalo restrito de doses, as respostas ou sua
transformao conveniente (logaritmo, probito, etc.),
apresentam re1ao linear com o logaritmo das doses
correspondentes. Usar dois ou mais nveis de doses do
padro ou, preferencialmente, do padro e da amostra
para determinar a posio e a inc1inao da reta. Proceder
em cada ensaio dessa maneira, pois, dependendo da
sensibilidade dos reativos biolgicos utilizados, pode
variar tanto a posio quanto a inc1inao da reta.
Cada tratamento consiste de uma dose fxa do padro (p
1
,
p
2
, p
3,
etc.) ou da amostra (a
1
, a
2
, a
3
,

etc.) e administrado a
um certo nmero (n) de unidades experimentais (animais,
rgos, culturas, tubos etc.). Registrar n respostas, ou seja,
uma para cada unidade experimental. Para que os mtodos
apresentados nesse captulo sejam vlidos, devem-se
cumprir as seguintes condies:
1) as unidades experimentais correspondentes a cada
tratamento devem ser selecionadas ao acaso;
2) para cada tratamento, as respostas ou as suas
transformaes utilizada no clculo (y) constituem amostra
de distribuio normal;
8
3) o desvio padro da resposta ou de sua transformao
independente do nvel de resposta, ou seja, igual
para todos os tratamentos, s diferindo pelos erros de
amostragem;
4) a resposta, ou sua transformao utilizada nos clculos
(y), tem re1ao linear com o logaritmo da dose (x) no
intervalo de doses utilizadas;
5) a linha reta correspondente a uma ou mais amostras deve
ser paralela do padro.
A partir de estudos preliminares do mtodo de ensaio,
possvel supor o cumprimento das condies 2 e 3. De posse
dos resultados de cada ensaio, pode-se testar as condies
4 e 5. A condio 4 (linearidade) s pode ser verifcada em
ensaios em que se aplicam pelo menos trs diluies de
cada preparao. Quando se realiza ensaio com somente
duas diluies, presume-se que a linearidade do sistema
foi, previamente, estabelecida. A condio 5 (paralelismo)
deve ser testada em cada ensaio. Nesse, nunca devem ser
utilizadas menos de duas diluies de cada preparao.
Se no for cumprida qualquer das condies de 1 a 5, os
mtodos de clculo descritos nesse captulo no podem
ser aplicados e tornam-se necessrios estudos para que se
estabeleam as condies recomendadas.
conveniente que a amostra seja ensaiada com doses cujas
respostas sejam aproximadamente iguais quelas obtidas
com as correspondentes doses do padro. Isso aumenta a
preciso do resultado. Denominar a potncia suposta para
a amostra S
A
.
EXPRESSO DE POTNCIA E RESTRIES
Realizados os testes de validade correspondentes e sendo
satisfatrios os resultados, pode-se expressar a potncia
relativa de cada amostra em relao ao padro com uma
razo de potncias ou converter em unidades apropriadas
para cada amostra, por exemplo, unidades internacionais,
nacionais, unidades de peso etc. Tambm, podem calcular-
se os limites de confana a partir do conjunto de dados
obtidos no ensaio.
Para simplifcar os clculos da anlise estatstica
apresentados nesse captulo, necessrio impor as
seguintes restries ao delineamento dos ensaios:
a) testar cada preparao, padro e amostra, com o mesmo
nmero de diluies. Apresentam-se frmulas para ensaios
farmacopeicos, utilizando dois e trs nveis de doses para
cada preparao assim como o delineamento 5 x 1;
b) manter constante em cada ensaio a razo de doses
consecutivas para todos os tratamentos e
c) obter o mesmo nmero de respostas para cada tratamento.
Caso alguma resposta for perdida, essa pode ser
estimada pelos mtodos apropriados a cada delineamento
apresentado nesse captulo; se houver perda de um
tratamento, atender ao especifcado na seo de Ensaios
parcialmente balanceados.
8.5.1 TIPOS DE
DELINEAMENTO
AO ACASO
Quando as unidades experimentais forem, na sua totalidade,
razoavelmente homogneas e no houver indicao de
que a variabilidade da resposta poder ser menor em
certos subgrupos, proceder distribuio das unidades
experimentais para os diferentes tratamentos ao acaso.
Havendo possibilidade de alguns subgrupos como, por
exemplo, camadas, posies em estantes ou dias de
experimento, serem mais homogneos que a totalidade
das unidades, a preciso do ensaio pode ser aumentada
introduzindo-se uma ou mais restries no delineamento
experimental.
BLOCOS AO ACASO
Possibilita segregar uma fonte de variao tal como a
sensibilidade de diferentes ninhadas de animais ou a
variao entre as placas de Petri no ensaio microbiolgico
por difuso. Esse planejamento obriga que cada tratamento
seja aplicado uma vez em cada bloco (ninhada, placa, etc.)
e s pode ser realizado quando o bloco for sufcientemente
grande para acomodar todos os tratamentos.
CRUZADO
Utilizar esse planejamento quando o experimento puder
ser ajustado em blocos. Contudo, s possvel aplicar dois
tratamentos por bloco. Por exemplo, um bloco pode ser um
animal possvel de ser testado em duas ocasies diferentes.
Tem-se como objetivo aumentar a preciso, eliminando a
infuncia da variao dos animais, ao mesmo tempo que se
equilibram os efeitos de qualquer diferena entre os nveis
gerais de resposta, nas duas etapas do ensaio. Denominar
duplo cruzado o ensaio com duas doses do padro e da
amostra, e triplo cruzado aquele de trs doses de cada
preparao. Proceder o ensaio em duas fases conforme o
perodo de tempo defnido no mtodo. Distribuir os animais
em quatro ou seis grupos e realizar um tratamento em cada
grupo na primeira fase. Na segunda fase, os animais que
receberam uma preparao recebero outra; os animais
que receberam doses menores, nessa etapa recebero as
maiores. Seguir o esquema da Tabela 6.
QUADRADO LATINO
Adequado quando a resposta pode ser afetada por duas fontes
de variao, cada qual podendo ter k nveis diferentes. Por
exemplo, se realiza o experimento em k dias diferentes e por
k experimentadores, ou se realiza um ensaio de antibiticos
por difuso em placa, no qual os tratamentos podem ser
aplicados num esquema de k k, onde cada tratamento
s ocorre uma vez em cada fla e em cada coluna. Utilizar
somente quando o nmero de colunas, flas e tratamentos
forem iguais.
8
As respostas so registradas em forma de um quadrado
denominado latino. Existem muitas possibilidades de
quadrados latinos encontradas na literatura especializada.
A partir de um podem confeccionar-se outros, alternando
ao acaso flas e/ou colunas. Na Tabela 7 h exemplo de
quadrado latino com duas doses do padro e da amostra.
Para qualquer delineamento, a distribuio das unidades
experimentais nos blocos deve ser feita por procedimento ao
acaso, sendo as unidades mantidas o mais uniformemente
possvel antes e durante o experimento.
8.5.2 ANLISE DE VARINCIA
Ao realizar essa anlise tem-se como objetivo estudar a
validade do ensaio e calcular o erro residual. Com exceo
do clculo do erro residual, a anlise dos dados de um
ensaio idntica para os delineamentos ao acaso, blocos
ao acaso e quadrado latino. A seguir, sero descritas as
frmulas para a anlise de cada tipo de ensaio. Consultar
o glossrio de smbolos. As frmulas so apropriadas para
o caso em que se esteja comparando uma nica amostra
(A) contra o padro de referncia (P), como, tambm,
para o caso de ensaios mltiplos onde estejam includas
h-1 amostras (A...Z). As frmulas para os ensaios cruzados
no se enquadram no esquema geral e sero apresentadas
separadamente.
Se necessrio, transformar as respostas (y) para cumprir as
condies de validade descritas. Somar todos os valores
y para cada tratamento e para cada preparao, como se
observa nas Tabelas 8 e 9. A partir desses dados, obter os
contrastes lineares relacionados com as inclinaes das
linhas dose-resposta.
Quando so ensaiadas trs doses de cada preparao, se
obtm, tambm, contrastes quadrticos que representam a
curvatura das linhas. Ver frmulas nas Tabelas 8 e 9.
A variao total de respostas decorrente dos diferentes
tratamentos pode ser como se mostra na Tabela 10. As
somas de quadrados so obtidas a partir dos valores das
Tabelas 8 ou 9. K representa o quadrado da soma de todas
as respostas obtidas no ensaio dividido pelo nmero total
delas:
( ) { } N K
2
y =
Calcular o erro residual do ensaio subtraindo as variaes
controladas no delineamento da variao total nas
respostas (Tabela 11). Nessa tabela, y
2
representa a soma
dos quadrados de todas as respostas registradas no ensaio.
Convm assinalar que a soma de quadrados, reduzida,
correspondente, ao item tratamentos igual ao somatrio
das somas de quadrados reduzidas (Tabela 10) e que, para
o quadrado latino, o nmero de respostas replicadas (n)
igual ao nmero de flas, colunas ou tratamentos (k).
8.5.3 TESTES DE VALIDADE
Para testar a signifcncia das fontes de variao
relacionadas na Tabela 10, cada soma de quadrado reduzida
obtida na tabela deve ser dividida pelo correspondente grau
de liberdade para se obter o quadrado mdio. O quadrado
mdio do erro residual (s
2
) quociente similar, obtido da
linha apropriada na Tabela 11.
Para obter a razo conhecida como F, dividir o quadrado
mdio de cada fonte de variao a ser testada pela varincia
(s
2
). Calcular a signifcncia de cada fonte e comparar
com os valores tabelados (Tabelas 4 e 5) ao nvel de
signifcncia de 5% ( = 0,05) e 1% ( = 0,01). Os valores
de F so obtidos na coluna correspondente ao nmero de
graus de liberdade associado ao quadrado mdio da fonte
ensaiada (gl
1
) e na fla da tabela correspondente ao nmero
de graus de liberdade associado com s
2
(g1
2
). Se o valor
de F calculado for maior que o valor tabelado, a fonte de
variao ensaiada considerada signifcativa para o
nvel de probabilidade utilizada.
Considerar os ensaios estatisticamente vlidos se os
testes apresentarem os seguintes resultados:
Delineamento de retas paralelas
1) Regresso signifcativa, ou seja, F calculado maior
que o tabelado ao nvel de signifcncia de 1% ( = 0,01).
Indica que a inclinao da linha dose-resposta satisfatria;
2) termos quadrticos no signifcativos, ou seja, os
valores de F calculados devem ser menores que aqueles
tabelados ao nvel de signifcncia de 5% ( = 0,05).
Equivale a satisfazer a condio de linearidade da relao
entre a transformao da resposta utilizada e o logaritmo
da dose;
3) paralelismo no signifcativo, ou seja, F calculado deve
ser menor que o valor tabelado ao nvel de signifcncia de
5% ( = 0,05) indicando que as retas do padro e amostra
so paralelas. Caso estejam ensaiando-se vrias amostras,
simultaneamente, e obtenha-se um desvio signifcativo de
paralelismo, isso pode ser devido utilizao de alguma
preparao que forneceu linha dose-resposta com uma
inclinao diferente em relao s outras amostras. Nesse
caso, calcular o valor de t para cada preparao A...Z,
usando a equao
P A
-
L L
t' =
2s n
(9)
Cada t calculado deve ser comparado com o valor da
Tabela 12, onde g1
1
= h -1 e g1
2
igual ao nmero de
graus de liberdade associado com s
2
. Se encontrar valor
de t signifcativo para alguma amostra, todos os dados
relativos a essa preparao devem ser eliminados do ensaio
e a anlise repetida desde o incio.
Em ensaios com erro residual muito grande, uma razo F
signifcativa para o termo preparaes pode indicar que a
suposio de potncia que serviu de base para a preparao
das diluies no foi correta. Isso no condio de
invalidade. Chegando-se a essa concluso, a potncia
8
estimada no ensaio pode ser usada como potncia suposta
em ensaios posteriores.
Nos testes de paralelismo e quadrticos podem ocorrer
por acaso valores de F muito baixos, menores que 1. Se
isso acontecer, repetidamente, pode ser indicao de que
no se cumpriram as condies supostas, o que deve ser
investigado mais profundamente.
Delineamento 5 x 1
A validade se estabelece quando:
1) regresso signifcativa, ou seja, F calculado deve ser
maior que o valor tabelado para nvel de signifcncia
= 0,01. Indica que a inclinao da linha dose-resposta
satisfatria;
2) desvio de linearidade no signifcativo. A relao entre
ambas as variveis (logaritmo da dose e halo de inibio)
deve ser linear. O valor de F calculado deve ser menor que
aquele tabelado para nvel de signifcncia = 0,05. Outra
medida a ser realizada o coefciente de correlao de
Pearson (r) que deve ser maior que 0,98;
3) coefciente de variao (CV) menor que 5%
apropriado. A variabilidade da resposta na curva de
calibrao deve ser constante.
No caso de ensaios cruzados, com esquema de clculo
especial, as frmulas a utilizar encontram-se nas Tabelas
13 e 14.
Existem trs termos de interaes devidos s rplicas dentro
de cada grupo: Fases X Preparaes, Fases X Regresso e
Fases X Paralelismo.
Como nos delineamentos anteriormente discutidos, cada
soma de quadrados reduzida deve ser dividida pelo nmero
correspondente de graus de liberdade para se obter os
quadrados mdios.
No caso do delineamento duplo cruzado, obtm-se dois
quadrados mdios correspondentes aos erros I e II, que
se denominam s
2
I
e s
2
II
. Dividir o quadrado mdio de cada
fonte de variao pelo s
2
apropriado para se obter a razo F.
Para as fontes Paralelismo, Fases X Preparaes, Fases X
Regresso, utiliza-se s
2
I
. Para as outras fontes, utiliza-se
s
2
II
.
Calcular a signifcncia da fonte utilizando as Tabelas 4
e 5. Se F calculado for maior que o valor tabelado, para
os graus de liberdade da fonte ensaiada (g1
1
) e do s
2

correspondente (g1
2
), a fonte de variao considerada
signifcativa para o nvel de signifcncia utilizado ( =
0,05 ou = 0,01).
Para que o ensaio seja vlido, a regresso deve ser
signifcativa e o paralelismo e as trs interaes no
devem ser signifcativas.
No ensaio cruzado, o teste de paralelismo no muito
sensvel, pois depende da variao entre blocos (animais).
Estabelecida a validade estatstica dos ensaios feitos com
qualquer delineamento, calcular a potncia e os limites de
confana pelos mtodos descritos a seguir.
8.5.4 ESTIMATIVA DA
POTNCIA E LIMITES DE
CONFIANA
Clculos para delineamento de retas paralelas (3 x 3 ou
2 x 2)
Calcular primeiro a resposta mdia para cada preparao
( , ,...,
P A Z
y y y )
P
P
P
y =
N
(10)
e, analogamente, para outras preparaes.
Chamando-se de I o intervalo em logaritmo das
concentraes, para cada preparao, nos ensaios com
duas doses obtm-se a inclinao comum (b), a partir da
equao
P A Z
L +L +...L
b =
Inh
(11)
Para ensaios com trs doses de cada preparao, o
denominador Inh deve ser substitudo por 2 Inh.
O logaritmo da razo de potncia da amostra A (M
A
), antes
de corrigir pelo valor de S
A
,
A P
A
y -y
=
M'
b
(12)
A potncia calculada a estimativa da verdadeira potncia
de cada amostra. Os limites de confana (com 5% de
probabilidade de excluir a verdadeira potncia ou = 0,05)
podem ser calculados como o antilogaritmo da frmula
S
I
A
A
M'
M'
= CM
A

( )
2
2 2
- y y
1 1 ts C P A
+ +
b N N
P A E-s t
(13)
em que
C = E/(E - s
2
t
2
) (14)
Obter E da Tabela 10. O s
2
o erro residual da Tabela
11 dividido por seus graus de liberdade e t se encontra na
Tabela 3 de acordo com os graus de liberdade de s
2
.
Para ensaios balanceados de 2 e 3 doses por preparao, a
frmula para os limites da equao 13 pode simplifcar-se:
S
I
A
A
M'
M'
= CM
A

( )
( )
2 2
A
C-1 C +c'I
M'
(15)
em que c o coefciente obtido na Tabela 15 e C a
medida de signifcncia da regresso. Em ensaio com
8
inclinao bem defnida o valor de C estar muito prximo
da unidade.
Clculo para delineamento 5 x 1
Procedimento para construo da curva dose-resposta -
No mtodo turbidimtrico, medir a turbidez nos tubos com
meio lquido.
No mtodo por difuso em agar, medir os halos de inibio
para cada uma das concentraes do padro (P
1
, P
2
, P
3
, P
4
,
e P
5
) nos 4 conjuntos de placas. A mdia das 36 leituras da
concentrao intermediria do padro (P
3
) utilizada para
corrigir as mdias de cada uma das outras concentraes
do padro P
1
, P
2
, P
4
, P
5
.
A correo se efetua da seguinte maneira: medir as 36
leituras de P
3
em todas as placas e calcular a mdia. Medir
as 9 leituras de P
3
no conjunto de placas (3) para as outras
concentraes (P
1
, P
2
, P
4
e P
5
) e calcular a mdia. Calcular
a diferena entre a mdia total e a mdia nas 3 placas de
cada concentrao, a qual deve ser somada s medidas das
outras concentraes.
Exemplo:
valor mdio de P
3
nas 36 leituras: 18,2 mm
valor mdio de P
3
nas placas com P
1
: 18,0 mm
valor de P
1
na primeira leitura das 9 placas: 17,3 mm
valor corrigido no primeiro ponto P
1
: (18,2 18,0) + 17,3
= 17,5 mm
valor de P
1
na segunda leitura das 9 placas: 16,9 mm
valor corrigido no segundo ponto P
1
: (18,2 18,0) + 16,9
= 17,1 mm
Construir a tabela com as respostas corrigidas para as
respectivas concentraes (P
1
a P
5
) de acordo com a
Tabela 19 e efetuar a anlise de varincia. Confrmado a
validade dos resultados, calcular a diferena nas respostas
pareadas entre amostra e padro no ponto central da curva
pela equao
( )
A P 1
X = y - y /b (16)
em que y
A
uma das respostas da amostra dentre as
f repeties, yp a resposta pareada do padro e b
1
o
coefciente de regresso dado pela Tabela 20.
O logaritmo da razo de potncia

(17)
onde f o nmero de diferenas nas respostas pareadas
entre a amostra e o respectivo padro.
Quando um nmero de ensaios da mesma amostra obtido
atravs da mesma curva, calcule o coefciente de variao
(CV) para os resultados das amostras.
(18)
onde s = e y resposta de 1 a N para uma
mesma amostra. (18a)
A varincia calculada sobre os f valores de X para o total
de amostras ensaiadas como
(19)
onde Tx = X para uma nica amostra e n = f h e h
o nmero de amostras ensaiadas.
O logaritmo do intervalo de confana de cada amostra
L =
M
2s t
k'
(20)
onde s o desvio padro para o total de diferenas X, t se
encontra na Tabela 3 com os graus de liberdade de s
2
M
e k
o nmero de diferenas pareadas por amostra ensaiada.
Os limites de confana (com 5% de probabilidade de
excluir a verdadeira potncia) podem ser calculados com o
antilogaritmo da frmula
S
I
A
A
M'
M'
=
A M'
1/2L (21)
Obter a razo de potncia (R
A
) e os limites de confana
(Rs, Ri) tomando os antilogaritmos dos valores obtidos a
partir das frmulas 12 e 15 (delineamento retas paralelas 3
x 3 ou 2 x 2) e 17 e 21 (delineamento 5 x 1), aps somar
log S
A
a ambos:
M
A
= M
A
+ log S
A
(22)
R
A
= antilog M
A
(23)
M
As
= M
As
+ log S
A
(24)
M
Ai
= M
Ai
+ log S
A
(25)
R
As
= antilog M
As
R
Ai
= antilog M
Ai
Valores perdidos
Em ensaios balanceados requer-se o mesmo nmero de
observaes para cada concentrao. Se alguma resposta
for perdida por causa no relacionada com os tratamentos
aplicados, como a morte de um animal ou a quebra de
algum tubo de ensaio, a anlise estatstica torna-se muito
mais complexa. Pode-se restabelecer o equilbrio de dois
modos:
1) reduzir o nmero de observaes nos grupos maiores
at que o nmero de respostas seja o mesmo para cada
tratamento. Se o delineamento for totalmente ao acaso,
pode-se subtrair a mdia de cada grupo maior, tantas
vezes quantas forem necessrias, ou eliminar uma ou mais
respostas de cada grupo maior, selecionando-as ao acaso.
Para ensaio de blocos ao acaso, conservar somente os
blocos completos;
8
2) alternativamente, um grupo, casualmente, menor pode
ser recomposto ao tamanho original, quando o nmero
de respostas perdidas no for maior que um em qualquer
tratamento ou 5% no total do ensaio. Nesse caso, calcular
a substituio do valor perdido. Perde-se um grau
de liberdade na varincia do erro s
2
para cada valor
substitudo:
a) se o delineamento totalmente ao acaso, substituir o
valor perdido pela mdia das respostas restantes do grupo
incompleto;
b) se o delineamento de blocos ao acaso, substituir o
valor perdido aplicando a frmula
(26)
em que B o total incompleto das respostas no bloco
que contm o valor perdido, T o total incompleto das
respostas no tratamento que contm o valor perdido, G a
soma total das respostas obtidas no ensaio. Como se defniu
anteriormente, n o nmero de blocos e k o nmero de
tratamentos ou doses;
c) se o ensaio estiver baseado em delineamento de quadrado
latino, o valor perdido (y) se obtm pela equao

(27)
em que Be C so as somas das respostas nas flas e
colunas, respectivamente, que contm o valor perdido.
Nesse caso, k = n.
Se houver perda de mais do que um valor, substituir,
temporariamente, pela mdia do tratamento respectivo,
todos os lugares vazios, exceto um. Substituir esse lugar
com o valor y, calculado pela equao 27. Substituir
um por um os valores que haviam sido colocados,
temporariamente, pela mdia at se obter conjunto estvel
de valores para todas as respostas perdidas.
Se o nmero de valores substitudos for pequeno em relao
ao nmero total de observaes no ensaio (menor que 5%),
a aproximao decorrente das substituies descritas e da
reduo dos graus de liberdade, equivalente ao nmero
de valores substitudos, geralmente satisfatria. Porm,
a anlise deve ser interpretada com cuidado, sobretudo
se existe predominncia de valores perdidos em um
tratamento ou bloco particular. O mesmo vlido para o
caso de valores perdidos nos planejamentos cruzados.
Ensaios parcialmente balanceados
Se a potncia presumida das amostras (usada para calcular
as doses do ensaio) for muito diferente da verdadeira
potncia, possvel que a dose maior fornea resposta
mxima ou que a dose menor fornea resposta muito baixa
ou nula. Essas respostas estaro fora da zona linear da
curva log doserresposta e os testes de validade indicaro
curvatura e/ou desvio de paralelismo signifcativo.
Nesse caso, as respostas dose maior ou menor da
amostra podem ser desprezadas, calculando-se um valor
de potncia relativa a partir dos dados remanescentes.
Essa potncia pode ser tomada como potncia suposta
para selecionar doses de amostra para outro ensaio, com
o objetivo de se obterem respostas similares ao padro e,
desse modo, aumentar a preciso do resultado. A equao
que se emprega para calcular a potncia :
A P
A
-
y y
=
M'
b 2
I

(28)
Essa frmula similar frmula 12, porm, subtrai-se
a metade do intervalo log dose quando se omitirem as
respostas da dose menor e adiciona-se o mesmo intervalo
quando se desprezar a dose maior.
As respostas mdias
A
y
e
P
y
so obtidas da mesma
frmula que nos ensaios totalmente balanceados (frmula
10), porm deve-se introduzir modifcao no clculo da
inclinao (b) de acordo com o delineamento do ensaio.
Para ensaios mltiplos, que, obrigatoriamente, teriam
duas doses de cada preparao, os contrastes lineares
(
P L
...
Z L
) devem se formar excluindo
A L
(como as
respostas para a
1,
ou a
2
foram eliminadas, no possvel
formar um contraste
A L
). Calcular a inclinao a partir
da mdia dos valores de L dividida por In:
+ ... +
L L P Z
b =
I ( -1) n h
(29)
Para ensaio simples com uma amostra:
P L
b=
In
(30)
Para ensaios mltiplos com trs doses de cada preparao,
obter
A L
e os demais contrastes da Tabela 9. A equao
para a inclinao :
( )
( )
P Z A
2 + ... + +
L L L
b =
I 4 -3 n h
(31)
Se existir uma amostra nica, a equao se reduz a:
P A
2 +
L L
b =
5In
(32)
8.6 MDIAS MVEIS
No caso particular do ensaio biolgico da heparina, o
intervalo entre a dose que possibilita a coagulao e aquela
que a inibe to pequeno que a curva dose-resposta no
pode ser determinada explicitamente. Para interpolar o
logaritmo da dose correspondente a 50% da coagulao,
tanto para o padro quanto para a amostra, utilizam-se as
mdias mveis.
Clculo da potncia
Transformar em logaritmo os volumes da preparao
padro usados em 5 ou 6 tubos que constituem a srie, de
modo que 2 ou 3 tubos apresentem graus de coagulao
8
iguais ou menores que 0,5 e 2 ou 3 tubos tenham graus
iguais ou maiores que 0,5.
Confeccionar tabela correlacionando os tubos numerados,
consecutivamente, com o grau de coagulao observado.
Denominar x os logaritmos dos volumes utilizados e y os
graus de coagulao correspondentes. Calcular as mdias
emparelhadas x
i
e y
i
dos tubos 1, 2 e 3; dos tubos 2, 3 e 4 e
dos tubos 3, 4 e 5, e quando a srie consistir de 6 tubos, dos
tubos 4, 5 e 6, respectivamente. Se para um desses pares de
mdias o grau de coagulao mdio y
i
exatamente 0,50,
o correspondente x
i
a mediana do logaritmo do volume
da preparao padro x
p
. Caso isso no ocorra, interpolar
o x
p
a partir dos valores emparelhados de y
i
, x
i
e y
i+1
, x
i+1

que ocorram, imediatamente abaixo e acima do grau 0,50,
como:
( )( ) ( )
p i i i 1 i i i 1
0, 5 x x y x x y y
+ +
= + (33)
A partir dos dados emparelhados obtidos nos tubos da
amostra, calcular do mesmo modo a mediana do logaritmo
do volume x
A
. O logaritmo da potncia da amostra :
A A P A
S x x M log + = (34)
em que S
A
a suposio da potncia da amostra feita
na preparao da soluo correspondente dos tubos da
amostra.
Repetir o ensaio, independentemente, e calcular a mdia
de dois ou mais valores de M para obter M . Caso a
segunda determinao de M difra da primeira mais que
0,05, continuar realizando ensaios at que o logaritmo do
intervalo de confana, calculado conforme fnal da seo
Combinao de estimativas de potncia, no exceda 0,20.
A potncia da heparina sdica :
M anti R log =
8.7 ENSAIOS INDIRETOS
TUDO OU NADA
Em alguns ensaios no possvel nem conveniente medir o
efeito em cada unidade experimental (por exemplo, animal)
em escala quantitativa. Nesse caso, podem medir-se efeitos
de tudo ou nada, como morte ou ocorrncia de sintoma pr-
estabelecido. A proporo de unidades experimentais que
apresentam o sintoma constitui o resultado. Esses ensaios
so chamados quantais. Neste captulo ser apresentado
um clculo aproximado. No caso de dispor de facilidades
de computao, pode-se recorrer ao clculo terico exato.
Deve-se registrar, para cada dose, a porcentagem de
animais com efeito positivo. Exemplo: porcentagem de
camundongos em convulso. Transformar as porcentagens
em probitos, utilizando a Tabela 16. Cada probito ser
considerado como o valor da resposta transformada (y). O
mtodo a seguir utilizado quando no ocorrem respostas
equivalentes a porcentagens zero ou 100. Nesse caso,
empregar mtodos estatsticos completos de mxima
probabilidade (logito ou probito). Para cada valor de y,
deve-se obter um valor de coefciente de ponderao (w)
na Tabela 17.
As frmulas das somas de quadrados para os testes de
validade so as mesmas utilizadas nos ensaios indiretos
quantitativos (Tabela 10), tomando n = 1, com exceo do
termo erro (s
2
), que tem graus de liberdade iguais a infnito,
e se calcula como:
2
s
w
k
n
=
(35)
em que k = nmero de tratamentos, n = nmero de animais
utilizados em cada tratamento.
Calcular a potncia e os limites de confana usando
as frmulas 12 e 25. Esse mtodo aproximado til
quando o ensaio delineado de modo que as respostas
em porcentagem correspondentes s doses menores e
maiores estejam uniformemente espaadas ao redor de
50%. Se uma das doses testadas fornecer respostas zero
ou 100%, essas podem ser desprezadas. Nesse caso, obter
a estimativa de potncia pelos mtodos descritos na seo
Ensaios parcialmente balanceados.
8.8 COMBINAO DE
ESTIMATIVAS DE POTNCIA
Quando se realizam n ensaios independentes para cada
amostra, os resultados podem ser combinados a fm de se
obter uma potncia estimada com intervalo de confana
reduzido, que cumpra os limites estabelecidos em cada
monografa. Existem vrios mtodos para combinar
ensaios repetidos.
Adotar simplifcaes, levando-se em conta dois aspectos:
a) corrigir estimativas do log da potncia (M) pela
potncia suposta (S
A
) antes de realizar as combinaes (M
= M + log S
A
);
b) as estimativas devem ser independentes, ou seja, obtidas
em ensaios separados.
8.8.1 POTNCIA MDIA
PONDERADA E LIMITES DE
CONFIANA
Supor que foram analisados resultados de n ensaios para se
fornecerem n valores de M com limites de confana (em
logaritmos) associados a cada valor de M, obtidos segundo
as equaes 13 a 15 e 22 a 25. Para cada ensaio, obter o
intervalo de confana logartmico (L), subtraindo o limite
inferior do superior. Calcular, tambm, uma ponderao
(W) para cada valor de M a partir da equao 36, onde
t o mesmo valor empregado no calculo do intervalo de
confana:
8
2
2
4t
W=
L
(36)
Para cada ensaio, calcular o produto WM e dividir seu
somatrio pelo somatrio de todas as ponderaes a fm
de se obter o logaritmo da potncia media ponderada (M),
conforme a equao 37:
(37)
O erro padro da potncia mdia
( )
M
s a raiz quadrada
da recproca da ponderao total:
(38)
Calcular os limites de confana aproximados ( = 0,05),
a partir do antilogaritmo dos valores obtidos por meio da
frmula 39:
M
Mts (39)
Obtm-se o valor de t na Tabela 3, com graus de liberdade
equivalentes soma dos graus de liberdade da varincia do
erro dos ensaios individuais.
Esse mtodo aproximado de combinao d resultados
satisfatrios quando:
a) C for menor que 1,1 para cada um dos n ensaios;
b) as estimativas individuais da potncia formarem
um conjunto homogneo de acordo com o teste de
homogeneidade realizado, aplicando a estatstica
2

Essa calculada elevando-se ao quadrado a diferena
entre cada valor de M em re1ao mdia ponderada
M, multiplicando-se esse quadrado pela ponderao
correspondente (W) e somando-se os valores para todos
os ensaios:
(40)
Se o valor de calculado for menor que o correspondente
na Tabela 18 para (n - 1) graus de liberdade, considera-se
que no h elementos para suspeitar da heterogeneidade
de potncias. Nesse caso, a potncia mdia e os limites
calculados so corretos.
Se o valor de for maior que o da Tabela 18, considera-se
que as potncias so heterogneas, ou seja, que a disperso
dos valores individuais de M maior que a esperada, de
acordo com os respectivos limites de confana. Nesse
caso, no aplicar as frmulas 37 e 39, averiguar a origem
dessa heterogeneidade e, caso se considerar adequado,
calcular M usando semiponderaes W:
W'=1 (V+v)
(41)
em que
2
2
L
V=1/W=
4t
(42)
e v a varincia da heterogeneidade entre ensaios e se
calcula pela equao:
(43)
Quando v varia de tal maneira que v calculado nmero
negativo, pode-se calcular v aproximado, omitindo-se o
termo aps o sinal negativo na equao 43.
Para calcular a mdia semiponderada
( )
M , substituir
na equao 31 os valores de W e W pelos respectivos
valores de W e W:

(44)
Pode-se considerar esse valor de M prximo ao centro de
um intervalo de confana de tamanho aproximado L
c
, que
a raiz quadrada de:

(45)
em que t, da Tabela 3, tem graus de liberdade iguais ao
somatrio de graus de liberdade da varincia do erro dos n
ensaios individuais.
No caso especial do ensaio de heparina, todos os logaritmos
de potncia (M) tm a mesma ponderao e o intervalo de
confana de logaritmo da estimativa da potncia M se
determina como segue:
Clculo da varincia do erro com n - 1 graus de liberdade:

(46)
Determinar o limite de confana em logaritimos (L)
L=2st ' n

(47)
em que
2
s s = , t (Tabela 3) com n 1 graus de liberdade, n =
nmero de estimativas individuais da potncia.
Calcular os limites de confana:
s
M =M+1 2L (48)
i
M =M-1 2L (49)
s s
R =antilogM (50)
i i
R =antilogM (51)
8
8.9 TABELAS ESTATSTICAS
Tabela 1 - Tabela G para valores atpicos.
n 3 4 5 6 7
G
1
0,976 0,846 0,729 0,644 0,586
n 8 9 10 11 12 13
G
2
0,780 0,725 0,678 0,638 0,605 0,578
n 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
G
3
0,602 0,579 0,559 0,542 0,527 0,514 0,502 0,491 0,481 0,472 0,464
Tabela 2 Teste para grupos contendo valores atpicos.
k
Valor crtico de R+ para intervalo de n observaes cada um, ao nvel de signifcncia = 0,05
2 3 4 5 6 7 8 9 10
2 0,962 0,862 0,803 0,764 0,736 0,717 0,702 0,691 0,682
3 0,813 0,667 0,601 0,563 0,539 0,521 0,507 0,498 0,489
4 0,681 0,538 0,479 0,446 0,425 0,410 0,398 0,389 0,382
5 0,581 0,451 0,398 0,369 0,351 0,338 0,328 0,320 0,314
6 0,508 0,389 0,342 0,316 0,300 0,288 0,280 0,273 0,267
7 0,451 0,342 0,300 0,278 0,263 0,253 0,245 0,239 0,234
8 0,407 0,305 0,267 0,248 0,234 0,225 0,218 0,213 0,208
9 0,369 0,276 0,241 0,224 0,211 0,203 0,197 0,192 0,188
10 0,339 0,253 0,220 0,204 0,193 0,185 0,179 0,174 0,172
Tabela 2a Teste para grupos contendo valores atpicos.
k
Valor crtico de (k + 2) R+ para intervalo de n observaes cada um, ao nvel de signifcncia = 0,05
2 3 4 5 6 7 8 9 10
10 4,06 3,04 2,65 2,44 2,30 2,21 2,14 2,09 2,05
12 4,06 3,03 2,63 2,42 2,29 2,20 2,13 2,07 2,04
15 4,06 3,02 2,62 2,41 2,28 2,18 2,12 2,06 2,02
20 4,13 3,03 2,62 2,41 2,28 2,18 2,11 2,05 2,01
50 4,26 3,11 2,67 2,44 2,29 2,19 2,11 2,06 2,01
8
Tabela 3 Distribuio t de Student.
gl
0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 ,05 ,02 ,01 ,001
1 0,158 0,325 0,510 0,727 1,000 1,376 1,963 3,078 6,314 12,706 31,821 63,657 636,619
2 0,142 0,289 0,445 0,617 0,816 1,061 1,386 1,886 2,920 4,303 6,965 9,925 31,598
3 0,137 0,277 0,424 0,584 0,765 0,978 1,250 1,638 2,353 3,182 4,541 5,541 12,924
4 0,134 0,271 0,414 0,569 0,741 0,941 1,190 1,533 2,132 2,776 3,747 4,604 8,610
5 0,132 0,267 0,408 0,559 0,727 0,920 1,156 1,476 2,015 2,571 3,365 4,032 6,869
6 0,131 0,265 0,404 0,553 0,718 0,906 1,134 1,440 1,943 2,447 3,143 3,707 5,959
7 0,130 0,263 0,402 0,549 0,711 0,896 1,119 1,415 1,895 2,365 2,365 3,499 5,408
8 0,130 0,262 0,399 0,546 0,706 0,889 1,108 1,397 1,860 2,306 2,896 3,355 5,041
9 0,129 0,261 0,398 0,543 0,703 0,883 1,100 1,383 1,833 2,262 2,821 3,250 4,781
10 0,129 0,260 0,397 0,542 0,700 0,879 1,093 1,372 1,812 2,228 2,764 3,169 4,587
11 0,129 0,260 0,396 0,540 0,697 0,876 1,088 1,363 1,796 2,201 2,718 3,106 4,437
12 0,128 0,259 0,395 0,539 0,695 0,873 1,083 1,356 1,782 2,179 2,681 3,055 4,318
13 0,128 0,259 0,394 0,538 0,694 0,870 1,079 1,350 1,771 2,160 2,650 3,012 4,221
14 0,128 0,258 0,393 0,537 0,692 0,868 1,076 1,345 1,761 2,145 2,624 2,977 4,140
15 0,128 0,258 0,393 0,536 0,691 0,866 1,074 1,341 1,753 2,131 2,602 2,947 4,073
16 0,128 0,258 0,392 0,535 0,690 0,865 1,071 1,337 1,746 2,120 2,583 2,921 4,015
17 0,128 0,257 0,392 0,534 0,689 0,863 1,069 1,333 1,740 2,110 2,567 2,898 3,965
18 0,127 0,257 0,392 0,534 0,688 0,862 1,067 1,330 1,734 2,101 2,552 2,878 3,922
19 0,127 0,257 0,391 0,533 0,688 0,861 1,066 1,328 1,729 2,093 2,539 2,861 3,883
20 0,127 0,257 0,391 0,533 0,687 0,860 1,064 1,325 1,725 2,086 2,528 2,845 3,850
21 0,127 0,257 0,391 0,532 0,686 0,859 1,063 1,323 1,721 2,080 2,518 2,831 3,819
22 0,127 0,256 0,390 0,532 0,686 0,858 1,061 1,321 1,717 2,074 2,508 2,819 3,792
23 0,127 0,256 0,390 0,532 0,685 0,858 1,060 1,319 1,714 2,069 2,500 2,807 3,767
24 0,127 0,256 0,390 0,531 0,685 0,857 1,059 1,318 1,711 2,064 2,492 2,797 3,745
25 0,127 0,256 0,390 0,531 0,684 0,856 1,058 1,316 1,708 2,060 2,485 2,787 3,726
26 0,127 0,256 0,390 0,531 0,684 0,856 1,058 1,315 1,706 2,056 2,479 2,779 3,707
27 0,127 0,256 0,389 0,531 0,684 0,855 1,057 1,314 1,703 2,052 2,473 2,771 2,690
28 0,127 0,256 0,389 0,530 0,683 0,855 1,056 1,311 1,699 2,045 2,462 2,756 3,674
29 0,127 0,256 0,389 0,530 0,683 0,854 1,055 1,310 1,697 2,042 2,457 2,750 3,659
30 0,127 0,255 0,389 0,530 0,683 0,854 1,055 1,310 1,697 2,042 2,457 2,750 3,646
40 0,126 0,254 0,388 0,529 0,681 0,851 1,050 1,303 1,684 2,021 2,423 2,704 3,551
60 0,126 0,254 0,387 0,527 0,679 0,848 1,046 1,296 1,671 2,000 2,390 2,660 3,460
120 0,126 0,253 0,386 0,526 0,677 0,845 1,041 1,289 1,658 1,980 2,358 2,617 3,373
0,126 0,256 0,385 0,524 0,674 0,842 1,036 1,282 1,645 1,960 2,326 2,576 3,291
gl = graus de liberdade; = nvel de signifcncia
8
Tabela 4 - Distribuio F de Fisher para = 0,05.
gl
1

Denominador
gl
2
Numerador
1 2 3 4 5 6 8 12 24
1 161,40 199,50 215,70 224,60 230,20 234,00 238,90 243,90 249,00 254,30
2 18,51 19,00 19,16 19,25 19,30 19,33 19,37 19,41 19,45 19,50
3 10,13 9,55 9,28 9,12 9,01 8,94 8,84 8,74 8,64 8,53
4 7,71 6,94 6,59 6,39 6,26 6,16 6,04 5,91 5,77 5,63
5 6,61 5,79 5,41 5,19 5,05 4,95 4,82 4,68 4,53 4,36
6 5,99 5,14 4,76 4,53 4,39 4,28 4,15 4,00 3,84 3,67
7 5,59 4,74 4,35 4,12 3,97 3,87 3,73 3,57 3,41 3,23
8 5,32 4,46 4,07 3,84 3,69 3,58 3,44 3,28 3,12 2,93
9 5,12 4,26 3,86 3,63 3,48 3,37 3,23 3,07 2,90 2,71
10 4,96 4,10 3,71 3,48 3,33 3,22 3,07 2,91 2,74 2,54
11 4,84 3,98 3,59 3,36 3,20 3,09 2,95 2,79 2,61 2,40
12 4,75 3,88 3,49 3,26 3,11 3,00 2,85 2,69 2,50 2,30
13 4,67 3,80 3,41 3,18 3,02 2,92 2,77 2,60 2,42 2,21
14 4,60 3,74 3,34 3,11 2,96 2,85 2,70 2,53 2,35 2,13
15 4,54 3,68 3,29 3,06 2,90 2,79 2,64 2,48 2,29 2,07
16 4,49 3,63 3,24 3,01 2,85 2,74 2,59 2,42 2,24 2,01
17 4,45 3,59 3,20 2,96 2,81 2,70 2,55 2,38 2,19 1,96
18 4,41 3,55 3,16 2,93 2,77 2,66 2,51 2,34 2,15 1,92
19 4,38 3,52 3,13 2,90 2,74 2,63 2,48 2,31 2,11 1,88
20 4,35 3,49 3,10 2,87 2,71 2,60 2,45 2,28 2,08 1,84
21 4,32 3,47 3,07 2,84 2,68 2,57 2,42 2,25 2,05 1,81
22 4,30 3,44 3,05 2,82 2,66 2,55 2,40 2,23 2,03 1,78
23 4,28 3,42 3,03 2,80 2,64 2,53 2,38 2,20 2,00 1,76
24 4,26 3,40 3,01 2,78 2,62 2,51 2,36 2,18 1,98 1,73
25 4,24 3,38 2,99 2,76 2,60 2,49 2,34 2,16 1,96 1,71
26 4,22 3,37 2,98 2,74 2,59 2,47 2,32 2,15 1,95 1,69
27 4,21 3,35 2,96 2,73 2,57 2,46 2,30 2,13 1,93 1,67
28 4,20 3,34 2,95 2,71 2,56 2,44 2,29 2,12 1,91 1,65
29 4,18 3,33 2,93 2,70 2,54 2,43 2,28 2,10 1,90 1,64
30 4,17 3,32 2,92 2,69 2,53 2,42 2,27 2,09 1,89 1,62
40 4,08 3,23 2,84 2,61 2,45 2,34 2,18 2,00 1,79 1,51
60 4,00 3,15 2,76 2,52 2,37 2,25 2,10 1,92 1,70 1,39
120 3,92 3,07 2,68 2,45 2,29 2,17 2,02 1,83 1,61 1,25
3,84 2,99 2,60 2,37 2,21 2,10 1,94 1,75 1,52 1,00
8
Tabela 5 - Distribuio F de Fisher para = 0,01.
gl
2

Denominador
gl
1
Numerador
1 2 3 4 5 6 8 12 24
1 4052 4999 5403 5625 5764 5859 5982 6106 6234 6366
2 98,50 99,00 99,17 99,25 99,30 99,33 99,37 99,42 99,46 99,50
3 34,12 30,82 29,46 28,71 28,24 27,91 27,49 27,05 26,60 26,12
4 21,20 18,00 16,69 15,98 15,52 15,21 14,80 14,37 13,93 13,46
5 16,26 13,27 12,06 11,39 10,97 10,67 10,29 9,89 9,47 9,02
6 13,74 10,92 9,78 9,15 8,75 8,47 8,10 7,72 7,31 6,88
7 12,25 9,55 8,45 7,85 7,46 7,19 6,84 6,47 6,07 5,65
8 11,26 8,65 7,59 7,01 6,63 6,37 6,03 5,67 5,28 4,86
9 10,56 8,02 6,99 6,42 6,06 5,80 5,47 5,11 4,73 4,31
10 10,04 7,56 6,55 5,99 5,64 5,39 5,06 4,71 4,33 3,91
11 9,65 7,20 6,22 5,67 5,32 5,07 4,74 4,40 4,02 3,60
12 9,33 6,93 5,95 5,41 5,06 4,82 4,50 4,16 3,78 3,36
13 9,07 6,70 5,74 5,20 4,86 4,62 4,30 3,96 3,59 3,16
14 8,86 6,51 5,56 5,03 4,69 4,46 4,14 3,80 3,43 3,00
15 8,68 6,36 5,42 4,89 4,56 4,32 4,00 3,67 3,29 2,87
16 8,53 6,23 5,29 4,77 4,44 4,20 3,89 3,55 3,18 2,75
17 8,40 6,11 5,18 4,67 4,34 4,10 3,79 3,45 3,08 2,65
18 8,28 6,01 5,09 4,58 4,25 4,01 3,71 3,37 3,00 2,58
19 8,18 5,93 5,01 4,50 4,17 3,94 3,63 3,30 2,92 2,49
20 8,10 5,85 4,94 4,43 4,10 3,87 3,56 3,23 2,86 2,42
21 8,02 5,78 4,87 4,37 4,04 3,81 3,51 3,17 2,80 2,36
22 7,94 5,72 4,82 4,31 3,99 3,76 3,45 3,12 2,75 2,31
23 7,88 5,66 4,76 4,26 3,94 3,71 3,41 3,07 2,70 2,26
24 7,82 5,61 4,72 4,22 3,90 3,67 3,36 3,03 2,66 2,21
25 7,77 5,57 4,68 4,18 3,86 3,63 3,32 2,99 2,62 2,17
26 7,72 5,53 4,64 4,14 3,82 3,59 3,29 2,96 2,58 2,13
27 7,68 5,49 4,60 4,11 3,78 3,56 3,26 2,93 2,56 2,10
28 7,64 5,45 4,57 4,07 3,75 3,53 3,23 2,90 2,52 2,06
29 7,60 5,42 4,54 4,04 3,73 3,50 3,20 2,87 2,49 2,03
30 7,56 5,39 4,51 4,02 3,70 3,47 3,17 2,84 2,47 2,01
40 7,31 5,18 4,31 3,83 3,51 3,29 2,99 2,66 2,29 1,80
60 7,08 4,98 4,13 3,65 3,34 3,12 2,82 2,50 2,12 1,60
120 6,85 4,79 3,95 3,48 3,17 2,96 2,66 2,34 1,95 1,38
6,64 4,60 3,78 3,32 3,02 2,80 2,51 2,18 1,79 1,00
8
Tabela 6 Ordem de doses nos ensaios cruzados.
Grupo
Duplo Cruzado Triplo Cruzado
Fase I Fase II Fase I Fase II
1
1
a
2
1
a
3
2
2
a
1
2
a
2
3 a
1
3
a
1
4 a
2
1
a
1
3
5 - - a
2
2
6 - - a
3
1
Tabela 7 Exemplo de ordem de doses no quadrado latino.
a
2
1
a
1
2
a
1
1
a
2
a
1
a
2
2
a
2
a
1
Tabela 8 Frmulas para ensaios com duas doses de cada preparao.
Padro (P) 1 Amostra (A) Amostra h -1 (Z)
Dose menor (soma de respostas) P
1
A
1
Z
1
Dose maior (soma de respostas) P
2
A
2
Z
2
Por preparao (soma de respostas) P
1
+ P
2
= P A
1
+ A
2
= A Z
1
+ Z
2
= Z
Constraste linear P
2
P
1
= L
P
A
2
A
1
= L
A
Z
2
Z
1
= L
Z
Tabela 9 Frmulas para ensaio com trs doses de cada preparao.
Padro (P) 1 Amostra (A) Amostra h -1 (Z)
1
A
1
Z
1
Dose mdia (soma de respostas) P
2
A
2
Z
2
3
A
3
Z
3
Por preparao (soma de respostas) P
1
+ P
2
+ P
3
= P A
1
+ A
2
+ A
3
= A Z
1
+ Z
2
+ Z
3
= Z
Constraste linear P
3
P
1
= L
P
A
3
A
1
= L
A
Z
3
Z
1
= L
Z
Contraste quadrtico P
1
2P
2
+ P
3
= Q
P
A
1
2A
2
+ A
3
= Q
A
Z
1
2Z
2
+ Z
3
= Q
Z
8
Tabela 10 Testes de validade (anlise de varincia).
Fonte de variao Graus de liberdade (gl)
Soma de quadrados reduzida
Ensaio de duas doses Ensaio de trs doses
Preparaes h 1
K
2
Z A P
2 2 2
+ + +
n
K
K
3
Z A P
2 2 2
+ + +
n
K
Regresso 1
Paralelismo h 1 ( )
E
2
L L L
2
Z
2
A
2
P
+ + +
n
K ( )
E
2
L L L
2
Z
2
A
2
P
+ + +
n
K
Quadrtico 1 -
Diferena de Quadrticos h 1 - ( )
Q
6
Q Q Q
2
Z
2
A
2
P
+ + +
n
K
Tabela 11 Estimativa do erro residual.
Fonte de
variao
Graus de
liberdade (gl)
Delineamento ao acaso Blocos ao acaso Quadrado latino
Tratamentos k - 1
K
Z P P
2
d
2
2
2
1
+ + +
n
K
K
Z P P
2
d
2
2
2
1
+ + +
n
K
K
Z P P
2
d
2
2
2
1
+ + +
n
K
Blocos (flas) n - 1 --
K
F F F
2
n
2
2
2
1
+ + +
k
K
K
F F F
2
n
2
2
2
1
+ + +
k
K
Blocos (colunas) n - 1 -- --
K
C C C
2
n
2
2
2
1
+ + +
k
K
Erro residual Por diferena * * *
TOTAL N - 1 K
2
y K
2
y K
2
y
* Obitida subtraindo, da soma de quadrados reduzida total, todas as outras somas de quadrados reduzidas calculadas para o delineamento correspondente.
8
Tabela 12 Tabela de t para comparao bicaudal entre (h -1) amostras e um
padro para um coefciente de confana conjunto de p = 0,95.
gl
2
gl
1
= (h -1) = nmero de amostras (excluindo padro)
1 2 3 4 5 6 7 8 9
5 2,57 3,03 3,29 3,48 3,62 3,73 3,82 3,90 3,97
6 2,45 2,86 3,10 3,26 3,39 3,49 3,57 3,64 3,71
7 2,36 2,75 2,97 3,12 3,24 3,33 3,41 3,47 3,53
8 2,31 2,67 2,88 3,02 3,13 3,22 3,29 3,35 3,41
9 2,26 2,61 2,81 2,95 3,05 3,14 3,20 3,26 3,32
10 2,23 2,57 2,76 2,89 2,99 3,07 3,14 3,19 3,24
11 2,20 2,53 2,72 2,84 2,94 3,02 3,08 3,14 3,19
12 2,18 2,50 2,68 2,81 2,90 2,98 3,04 3,09 3,14
13 2,16 2,48 2,65 2,78 2,87 2,94 3,00 3,06 3,10
14 2,14 2,46 2,63 2,75 2,84 2,91 2,97 3,02 3,07
15 2,13 2,44 2,61 2,73 2,82 2,89 2,95 3,00 3,04
16 2,12 2,42 2,59 2,71 2,80 2,87 2,92 2,97 3,02
17 2,11 2,41 2,58 2,69 2,78 2,85 2,90 2,95 3,00
18 2,10 2,40 2,56 2,68 2,76 2,83 2,89 2,94 2,98
19 2,09 2,39 2,55 2,66 2,75 2,81 2,87 2,92 2,96
20 2,09 2,38 2,54 2,65 2,73 2,80 2,86 2,90 2,95
24 2,06 2,35 2,51 2,61 2,70 2,76 2,81 2,86 2,90
30 2,04 2,32 2,47 2,58 2,66 2,72 2,77 2,82 2,86
40 2,02 2,29 2,44 2,54 2,62 2,68 2,73 2,77 2,81
60 2,00 2,27 2,41 2,51 2,58 2,64 2,69 2,73 2,77
120 1,98 2,24 2,38 2,47 2,55 2,60 2,65 2,69 2,73
1,96 2,21 2,35 2,44 2,51 2,57 2,61 2,65 2,69
Tabela 13 Totais e contrates em ensaio com delineamento duplo cruzado.
Padro (P) Amostra (A) Total
FASE I
1I
A
1I
-
2I
A
2
-
Total P
I
A
I
P
I
+ A
I
= F
I
FASE II
1II
A
1II
-
2II
A
2II
-
Total P
II
A
II
P
II
+ A
II
= F
II
Por preparao (soma de respostas) P A y
Contraste linear
FASE I P
2I
P
1I
= L
PI
A
2I
A
1I
= L
AI
L
PI
+ L
AI
= L
I
FASE II P
2II
P
1II
= L
PII
A
2II
A
1II
= L
AII
L
PII
+ L
AII
= L
II
TOTAL P
2
+ P
1
= L
P
A
2
+ A
1
= L
A
L
P
+ L
A
= L
8
Tabela 14 Testes de validade em ensaio duplo cruzado.
Fonte de variao
Graus de
liberdade (gl)
Paralelismo 1
E
2
L L
2
A
2
P
+
n
Fases X Preparaes 1
(Fases Preparaes)
Fases X Regresso 1
Erro I Diferena Blocos Paralelismo (Fases X Preparaes) (Fases X Regresso)
Blocos (animais) bl 1
K
2
B B B
2
2
2
2
2
1
+ + +
n
K
Preparaes 1
K
2
A P
2 2
+
n
Regresso 1 ( )
E
N
L L
2
A P
=
+
Fases 1
Fases X Paralelismo 1 Paralelismo (Fases X Regresso)
Erro II Diferena Total Blocos Preparaes Regresso Fases (Fases X Paralelismo)
TOTAL N - 1 K
2
y
K = (y)
2
/N
N = nmero total de respostas
n = nmero total de rplicas por dose includas as duas fases
bl = nmero de blocos (animais)
B = soma das duas repostas para cada bloco (animal)
8
Tabela 15 Constante usada na frmula para os limites de confana.
Dose de cada preparao (d) Nmero de amostras ensaiadas (h 1) c
2 1 1
2 3/2
3 2
4 5/2
5 3
3 1 8/3
2 4
3 16/3
4 20/3
5 8
Tabela 16 Probitos correspondentes a porcentagem.
% 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
0 - 2,67 2,95 3,12 3,25 3,36 3,45 3,52 3,59 3,66
10 3,72 3,77 3,82 3,87 3,92 3,96 4,01 4,05 4,08 4,12
20 4,16 4,19 4,23 4,26 4,29 4,33 4,36 4,39 4,42 4,45
30 4,48 4,50 4,53 4,56 4,59 4,61 4,64 4,67 4,69 4,72
40 4,75 4,77 4,80 4,82 4,85 4,87 4,90 4,92 4,95 4,97
50 5,00 5,03 5,05 5,08 5,10 5,13 5,15 5,18 5,20 5,23
60 5,25 5,28 5,31 5,33 5,36 5,39 5,41 5,44 5,47 5,50
70 5,52 5,55 5,58 5,61 5,64 5,67 5,71 5,74 5,77 5,81
80 5,84 5,88 5,92 5,95 5,99 6,04 6,08 6,13 6,18 6,23
90 6,28 6,34 6,41 6,48 6,55 6,64 6,75 6,88 7,05 7,33
% 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9
97 6,88 6,90 6,91 6,93 6,94 6,96 6,98 7,00 7,01 7,03
98 7,05 7,07 7,10 7,12 7,14 7,17 7,20 7,23 7,26 7,29
99 7,33 7,37 7,41 7,46 7,51 7,58 7,65 7,75 7,88 8,09
Tabela 17 Coefcientes de ponderao para probitos (w).
Probitos 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9
1 0,001 0,001 0,001 0,002 0,002 0,003 0,005 0,006 0,008 0,011
2 0,015 0,019 0,025 0,031 0,040 0,050 0,062 0,076 0,092 0,110
3 0,131 0,154 0,180 0,208 0,238 0,269 0,302 0,336 0,370 0,405
4 0,439 0,471 0,503 0,532 0,558 0,581 0,601 0,616 0,627 0,634
5 0,637 0,634 0,627 0,616 0,601 0,581 0,558 0,532 0,503 0,471
6 0,439 0,405 0,370 0,336 0,302 0,269 0,238 0,208 0,180 0,154
7 0,131 0,110 0,092 0,076 0,062 0,050 0,040 0,031 0,025 0,019
8 0,015 0,011 0,008 0,006 0,005 0,003 0,002 0,002 0,001 0,001
Tabela 18 Valores de
2
( = 0,05).
gl
2
gl
2
1 3,84 9 16,92
2 5,99 10 18,31
3 7,81 11 19,67
4 9,49 12 21,03
5 11,07 13 22,36
6 12,59 14 23,69
7 14,07 15 25,00
8 15,51 20 31,41
25 37,65
8
Tabela 19 - Matriz de respostas no ensaio de antibiticos pelo delineamento 5 x 1, aps correo.
Padro Amostra
P
1
P
2
P
3
P
4
P
5
A B C
Respostas
y
11
y
21
y
31
y
41
y
51
A
31
B
31
...
y
12
y
22
y
32
y
42
y
52
A
32
B
32
...
y
13
y
23
y
33
y
43
y
53
A
33
B
33
...
y
14
y
24
y
34
y
44
y
54
A
34
B
34
...
y
15
y
25
y
35
y
45
y
55
A
35
B
35
...
y
16
y
26
y
36
y
46
y
56
A
36
B
36
...
y
17
y
27
y
37
y
47
y
57
A
37
B
37
...
y
18
y
28
y
38
y
48
y
58
A
38
B
38
...
y
19
y
29
y
39
y
49
y
59
A
39
B
39
...
Total y
1
. y
2
. y
3
. y
4
. y
5
. A
3
. B
3
.
ynz: n a concentrao (P1 a P5) e z a resposta (de 1 a 9)
Anz: n a concentrao mediana (P3) e z a resposta (de 1 a 9)
Tabela 20 - Tabela de Anlise de varincia para o modelo de regresso linear simples delineamento 5 x 1.
0 1
y = b + b x

0 1
b =y - b x

Fonte de
variao
gl Soma de quadrados Quadrado mdio F calculado
Regresso 1 SQ
reg
= b
1
xy + b
0
y (y)
2
/N QM
reg
= SQ
reg
QM
reg
/ QM
res
Erro residual N - 2 SQ
res
= y
2
b
1
xy b
0
y QM
res
=
SQres
N
- 2 ---
Desvio linear 3 SQ
desv
= SS
res
- SQ
ep
QM
desv
=
SQdesv.
3
QM
desv
/QM
ep
Erro puro (ep) N - 5 SQ
ep
= y
2
(yi)
2
/k QM
ep
=
SQep
N
- 5 ---
Total N - 1 SQ
reg
+ SQ
res
---
(yi)
2
= (y
11
+ y
12
+ y
13
+ + y
19
)
2
+ + (y
51
+ y
52
+ y
53
+ + y
59
)
2
2
(x-x)
N-1
= Sxx = desvio padro da varivel (x)
2
(y-y)
N-1
= Syy = desvio padro da varivel resposta (y)
8
8.10 EXEMPLOS DE
CLCULOS ESTATSTICOS
APLICADOS EM ENSAIOS
BIOLGICOS
8.10.1 EXEMPLO DE ENSAIO
DIRETO
Exemplo 1: ensaio direto com uma amostra.
Ensaio de digital pelo mtodo da parada cardaca em cobaia
A soluo do padro foi usada na concentrao de 0,0658
UI/mL. Uma diluio equivalente de amostra foi preparada
a partir da potncia suposta de S
A
= 1,3 UI/100 mg.
As cobaias foram perfundidas aleatoriamente com soluo
padro ou amostra, registrando-se o volume justamente
necessrio para produzir a parada cardaca em cada animal.
As respostas encontram-se na Tabela 19.
Clculo da estimativa de potncia e limites de confana
Da equao 1:
M= 1,3974 - 1,4089 = - 0,0115
Da equao 6:
M = - 0,0115 + log 1,3 = 0,1024
Da equao 5:
R = antilog 0,1024 = 1,2660
Da equao 3:
Da equao 2:
0251 , 0 000632 , 0 = =
M
s
Para = 0,05 com 22 gl, t = 2,07 (Tabela 3)
Da equao 7:
A estimativa mdia da potncia da amostra de digital
1,27 UI/100 mg. Os limites de confana (p = 0,05) para a
verdadeira potncia so 1,12 UI/100 mg e 1,43 UI/l00 mg.
Tabela 21 - Exemplo 1: Doses efcazes para produzir parada cardaca
Padro P Amostra A
Dose letal
mL/kg
Log dose letal
x
p
Dose letal
mL/kg
Log dose letal
x
A
27,57 1,4404 34,02 1,5317
25,97 1,4145 21,90 1,3404
27,74 1,4431 28,33 1,4523
30,94 1,4905 24,87 1,3957
28,31 1,4519 27,56 1,4403
27,29 1,4360 24,73 1,3932
22,13 1,3450 21,67 1,3359
23,63 1,3735 21,30 1,3284
21,39 1,3302 29,10 1,4639
22,13 1,3450 25,54 1,4072
20,97 1,3216
29,23 1,4658
23,78 1,3762
21,40 1,3304
x 19,5641 14,0890
x
1,3974 1,4089
x
2
27,3829 19,8879
s
2
0,003331 0,004211
N 14 10
8
Os ratos foram injetados subcutneamente com 0,20 mL
da soluo respectiva, durante trs dias consecutivos, num
total de 0,6 mL/rato.
Os pesos das vesculas seminais encontram-se na Tabela
22.
Tabela 22 - Exemplo 2: pesos de vesculas seminais (mg).
p
1
p
2
p
3
a
1
a
2
a
3
8,5 12,5 14,8 10,5 16,8 16,7
10,4 13,1 14,1 10,5 14,3 16,9
11,4 8,3 14,9 9,1 14,9 18,8
11,6 13,1 13,8 9,9 12,3 16,7
10,2 9,0 14,6 10,5 15,4 12,7
9,1 14,4 15,2 8,4 14,9 16,2
9,5 11,7 12,3 10,1 12,8 17,3
7,7 11,72* 15,5 10,1 10,0 12,8
* Valor perdido substitudo pela mdia do tratamento.
8.10.2 EXEMPLOS DE ENSAIOS
INDIRETOS QUANTITATIVOS
Exemplo 2: ensaio com trs doses, delineamento
completamente ao acaso.
Ensaio de gonadotrofna corinica humana pelo mtodo
do aumento de peso de vesculas seminais
As doses utilizadas do padro foram: p
1
= 1,0 UI/mL,
p
2
= 2,0 UI/mL e p
3
= 4,0 UI/mL. Doses equivalentes da
amostra foram preparadas a partir da potncia suposta S
A

= 3000 UI/mg.
Tabela 23 - Exemplo 2: totais e contrastes.
Padro P Amostra A
Dose menor P
1
= 78,40 A
1
= 79,10
Dose mdia P
2
= 93,82 A
2
= 111,10
Dose maior P
3
= 115,20 A
3
= 128,10
Preparao P = 287,42 A = 318,60
Contraste linear L
P
= 36,80 L
A
= 49,00
Contraste quadrtico Q
P
= 5,96 Q
A
= 15,60
Resultados obtidos com as frmulas da Tabela 9.
Tabela 24 - Exemplo 2: anlise de varincia.
Fonte de variao gl
Soma de
quadrados
Quadrado
mdio
F
Preparaes 1 20,26 20,26
Regresso 1 230,05 230,05 79,05 <0,01
Paralelismo 1 4,65 4,65 1,60 >0,05
Quadrtico 1 0,97 0,97 0,33 >0,05
Diferena de quadrados 1 4,84 4,84 1,66 >0,05
Tratamentos 5 260,77 52,15
Erro 41* 119,18 s
2
= 2,91
TOTAL 47 379,95
*Retirado um grau de liberdade por ter sido substitudo um valor perdido.
As somas de quadrados foram obtidas empregando-se as frmulas das Tabelas 9, 10 e 11.
8
N = 48
n = 8
K = (y)
2
/N = 7 651,25
y
2
= 8 031,21
Total = 8 031,21 7 651,25 = 379,95
Erro = 379,95 260,77 = 119,18
Validade do ensaio
O ensaio cumpre com as condies de validade:
a) regresso signifcativa, F calculado 79,05 maior que o
valor crtico da Tabela 5 para = 0,0l, g1
1
= 1 e g1
2
= 41;
b) desvio de paralelismo no signifcativo, F calculado
1,60 menor que o valor crtico da Tabela 4 para = 0,05,
g1
1
= 1 e gl
2
= 41e
c) desvio de linearidade no signifcativo, F = 0,33 e 1,66.
Utilizar frmulas 10 a 15.
I = log 2,0 = 0,3010
t = 2,02 com 41 gl da Tabela 3
S
A
= 3 000 log S
A
= 3,4771
M = 0,1460 + 3,4771 = 3,6231
R = anti log 3,6231 = 4 198,56 UI/mg
C = 8/3, da Tabela 15
M
s
= 0,2679
M
i
= 0,0381
Logaritmo dos limites de confana da potncia
M
s
= 0,2679 + 3,4771 = 3,7449
M
i
= 0,0381 + 3,4771 = 3,5151
Limites de confana da potncia
R
s
= anti log 3,7445 = 5552,64 UI/mg = anti log 3,5151 =
3274,16 UI/mg
Exemplo 3: ensaio com trs doses, delineamento blocos
ao acaso.
Ensaio de antibitico usando placas de Petri
As doses utilizadas do padro foram:
p
1
= 0,25 UI/mL, p
2
= 0,50 UI/mL e p
3
= 1,00 UI/mL.
Doses equivalentes da amostra foram preparadas com base
na potncia suposta S
A
= 1 650 UI/mg.
Os dimetros dos halos de inibio encontram-se na
Tabela 25.
Tabela 25 - Exemplo 3: dimetro de halos de inibio.
Placas
(Blocos)
Padro P Amostra A
Total
Bloco
p
1
p
2
p
3
a
1
a
2
a
3
1 17,0 20,4 24,0 17,4 20,7 24,4 123,9
2 14,9 19,7 22,7 14,9 19,3 22,2 113,7
3 15,0 18,6 22,0 15,0 18,0 22,3 110,9
4 14,6 18,3 22,4 14,8 19,0 22,2 111,3
5 14,7 18,0 22,3 14,4 17,8 22,6 109,8
6 14,4 19,1 23,3 14,5 19,3 23,0 113,6
7 14,9 19,0 22,5 15,0 19,4 22,4 113,2
yP=
287,42
24
= 11,97
8
Padro P Amostra A
Dose menor P
1
= 105,5 A
1
= 106,0
Dose mdia P
2
= 133,1 A
2
= 133,5
Dose maior P
3
= 159,2 A
3
= 159,1
Preparao P = 397,8 A = 398,6
Contraste linear L
P
= 53,7 L
A
= 53,1
Contraste quadrtico Q
P
= -1,5 Q
A
= -1,9
Resultados obtidos com as frmulas da Tabela 9
Fonte de variao gl
Soma de
quadrados
Quadrado
mdio
F
Preparaes 1 0,0150 0,0150 0,09 >0,05
Regresso 1 407,3657 407,3657 2396 <0,01
Paralelismo 1 0,0129 0,0129 0,080 >0,05
Quadrtico 1 0,1376 0,1376 0,81 >0,05
Diferena de quadrados 1 0,0019 0,0019 0,01 >0,05
Tratamentos 5 407,53 3020,25
Placas 6 22,18 3,70 21,8 < 0,01
Erro 30 4,99 s
2
= 0,17
N = 42
n = 7

=
2
y 15 535,96
Total = 15 535,96 - 15 101,261 = 434,7
Erro = 434,7 - 22,18 - 407,53 = 4,99
Validade do ensaio
a) regresso signifcativa, F calculado 2390 maior que o
valor crtico da Tabela 5 para = 0,01, g1
1
= 1 e g1
2
= 30;
0,08 menor que o valor crtico da Tabela 4 para = 0,05,
g1
1
= 1 e gl
2
= 30, e
c) desvio de linearidade no signifcativo, F calculados =
0,81 e 0,01.
I = log l,00-log 0,50 = 0,301 t =
t = 2,04 com 30 gl da Tabela 3.
8
S
A
= 1650 UI/mg
M = M + log 1650 = 0,003157 + 3,217480 = 3,2206
R = anti log 3,2206 = 1662
C = 407,3657/[407,3657 0,17 (2,04)
2
] = 1,0017
c = 8/3, da Tabela 15
M
s
= 0,0235
Mi = -0,0171
M
s
= 0,0235 + 3,2175 = 3,2410
M
i
=-0,0 171 + 3,2175 = 3,2004
R
s
= anti log 3,2410 = 1742 UI/mg
R
i
= anti log 3,2004 = 1586 UI/mg
Exemplo 4: ensaio com duas doses, delineamento
quadrado latino.
Ensaio de oxitocina mtodo da contrao do tero
isolado de rata
As doses administradas do padro foram: p
1
= 0,2 mL e p
2

= 0,25 mL de soluo contendo 0,02 UI/mL.
na potncia suposta de 10 UI/mL diluda 1:500.
Tabela 28 - Exemplo 4: ordem de adio das doses.
Filas
Colunas
1 2 3 4
1 p
1
p
2
a
1
a
2
2 p
2
p
1
a
2
a
1
3 a
1
a
2
p
1
p
2
4 a
2
a
1
p
2
p
1
Tabela 29 - Exemplo 4: registros de contraes em mm.
Filas
Colunas
Total
Filas
1 2 3 4
1 38 43 35 40 F
1
= 156
2 38 30 44 38 F
2
= 150
3 39 45 37 40 F
3
= 161
4 45 38 45 37 F
4
= 165
Total Coluna C
1
= 160 C
2
= 156 C
3
= 161 C
4
= 155
Total das doses P
1
= 142 P
2
= 166 A
1
= 150 A
2
= 174
Padro Amostra
Dose menor P
1
= 142 A
1
= 150
Dose maior P
2
= 166 A
2
= 174
Preparao P = 308 A = 324
Contraste linear L
P
= 24 L
A
= 24
8
N =16
n =4
K = (y)
2
/N = 632
2
/16 = 24 964
Tratamentos =
0 , 160 24964
4
174 150 166 142
2 2 2 2
=
+ + +
Colunas =
5 , 6 24964
4
155 161 156 160
2 2 2 2
=
+ + +
Total= 25220 - 24964 = 256,0
Erro= 256,0 - 160,0 - 31,5 - 6,5 = 58,0
A analise no apresentou diferenas signifcativas (p >
0,05) entre flas e entre colunas.
VaIidade do ensaio
valor crtico da Tabela 5 para = 0,01, gl
1
= 1 e g1
2
= 6;
b) desvio de paralelismo no signifcativo, F calculado 0,0
menor que o valor crtico da Tabela 4 para = 0,05, g1
1
= 1 e gl
2
= 6.
Utilizar frmulas 10 a 15
I = log 0,25 - log 0,20 = 0,0969
S
A
= 10 log S
A
= l
M = 0,0323 + 1 = 1,0323
R = anti log 1,0323 = 10,8 UI/mL = Potncia estimada
c = 1, da Tabela 15
M
s
= 0,1402
M
i
= -0,0324
M
s
= 0,1402 + 1 = 1,1402
M
i
= 0,0324+ 1 = 0,9676
R
s
= anti log 1,1402 = 13,81 UI/mL
R
i
= anti log 0,9676 = 9,28 UI/mL
Exemplo 5: ensaio duplo cruzado.
Ensaio de insulina em camundongos
As doses utilizadas do padro foram p
1
= 60 mUI/mL e p
2

= 120 mUI/mL. Foram preparadas doses equivalentes da
amostra, a
1
= 60 mUI/mI e a
2
= 120 mUI/mL a partir da
potncia suposta S
A
= 27,4 UI/mL.
Tabela 31 - Exemplo 4: anlise de varincia
Fonte de
variao
gl
Soma dos
quadrados
Quadrado mdio F
Preparapo 1 16,0 16,0 1,65 > 0,05
Regresso 1 144,0 144,0 14,89 < 0,01
Paralelismo 1 0,0 0,0 0,00 > 0,05
Tratamento 3 160,0
Filas 3 31,5 10,5 1,08 > 0,05
Colunas 3 6,5 2,2 0,23 > 0 05
Erro 6 58,0 s
2
= 9,67
Total 15 256,0
8
Os camundongos foram injetados com 0,1 mL da soluo respectiva para cada 10 g de peso mdio, de acordo com a
Tabela 6.
As respostas encontram-se na Tabela 30.
Tabela 32 - Exemplo 5: concentrao de glicose sangunea (mg/100 mL), quarenta minutos aps injeo.
Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4
p
1
a
2
total p
2
a
1
total a
1
p
2
total a
2
p
1
Total
37,1 16,6 53,7 32,4 32,4 80,8 36,8 17,0 53,8 30,9 52,1 83,0
35,2 40,1 75,3 35,2 35,2 103,0 53,2 24,9 78,1 27,8 59,4 87,2
43,1 33,9 77,0 35,3 35,3 108,4 71,2 58,2 129,4 35,4 39,1 74,5
41,3 16,2 57,5 32,9 32,9 78,1 37,1 24,8 61,9 49,8 79,0 128,8
54,2 33,2 87,4 31,9 31,9 65,0 45,9 22,7 68,6 28,2 37,3 65,5
41,4 13,1 54,4 51,2 51,2 113,6 82,2 42,7 124,9 49,9 51,1 101,0
48,6 32,7 81,3 38,2 38,2 114,4 64,8 33,9 98,7 28,3 59,5 87,8
57,8 50,4 108,2 39,7 39,7 89,8 49,1 37,6 86,7 39,6 55,8 95,4
71,1 47,3 118,4 37,0 37,0 110,8 44,1 10,4 54,5 32,2 40,6 72,8
60,8 26,1 86,9 38,9 38,9 103,5 64,7 34,7 99,4 55,1 68,2 123,3
78,2 50,9 129,1 42,6 42,6 97,2 88,0 61,6 149,6 40,6 61,4 102,0
76,1 54,4 130,5 30,4 30,4 80,0 90,1 60,3 150,4 43,5 52,8 96,3
Padro P Amostra A Total
FASE I
Dose menor P
1l
= 644,9 A
1l
= 727,2
Dose maior P
2l
= 445,7 A
2l
= 461,3
TOTAL P
l
= 1090,6 A
l
=1188,5 F
l
= 2279,1
FASE II
Dose menor P
1ll
= 656,3 A
1ll
= 704,9
Dose maior P
2ll
= 428,8 A
2ll
= 414,9
TOTAL P
ll
= 1085,1 A
ll
=1119,8 F
ll
= 2204,9
Preparao Contraste Linear P = 2175,7 A = 2308,3 y = 4484,0
FASE I L
Pl
= -199,2 L
Al
= -256,9 L
l
= -465,1
FASE II L
Pll
= -227,5 L
All
= -290,0 L
ll
=-517,5
TOTAL L
p
=-426,7 L
A
= -555,9 L = -982,6
Resultados obtidos com as frmulas da Tabela 13
Fonte de variao gl Soma de quadrados Quadrado mdio F
Paralelismo 1 173,88 173,88 0,53 > 0,05
Fases Preparaes 1 41,61 41,61 0,13 > 0,05
Fases Regresses 1 28,60 28,60 0,09 > 0,05
Erro I 44 14 545,64 330,58
Blocos 47 14 789,73 314,67
Preparaes 1 183,15 183,15 3,01 > 0,05
Regresso 1 10 057,32 10 057,32 165,52 < 0,01
Fases 1 57,35 57,35 0,94 > 0,05
Fases Paralelismo 1 0,19 0,19 0,00 > 0,05
Erro II 44 2 673,39 60,76
TOTAL 95 27 761,13
As somas de quadrados foram obtidas empregando as frmulas das Tabelas 13 e 14.
8
N = 96
n = 24
b1 = 48
K = (y
2
/N = 4 484,0
2
/96 = 209 440,17
y
2
= 237 201,30
Total = 237 201,30 209 440,17 = 27 761
Fase paralelismo =
=
Fase preparaes =
=
Erro I = 14 789,73 173,88 41,61 28,60 = 14 545,64
Erro II = 27 761,13 14 789,73 183,15 10 057,32
57,35 0,19 = 2 673,39
Validade do ensaio
O ensaio cumpre as condies de validade:
valor crtico da Tabela 5, para = 0,01, g1
1
= 1 e g1
2
= 44;
b) paralelismo no signifcativo, F calculado 0,53 menor
que o valor crtico da Tabela 4, para = 0,05, g1
1
= 1 e gl
2
= 44; e
c) nenhuma das trs interaes foi signifcativa os trs
valores de F calculados: 0,13, 0,09 e 0,00 foram menores
que o valor crtico da Tabela 4 para = 0,05, g1
1
= 1 e gl
2
= 44.
I = log 120 log 60 = 2,0792 l,77820,301
S
A
= 27,4 log S
A
= 1,4377
M = - 0,0406 + 1,4377 = 1,3791
Potncia estimada: R = antilog 1,3971 = 24,95 UI/mL
c = 1 da Tabela 15
( ) ( ) ( ) ( ) [ ]
2 2
301 , 0 1 0406 , 0 025 , 1 1 025 , 1 0406 , 0 025 , 1
'
'
+ =
i
s
M
M
M
s
= 0,0064 M
i
= - 0,0064
Logaritmo dos limites de confana
M
s
= 0,0064+1,4377 = 1,4441
M
i
= -0,0896+1,4377 = 1,3481
R
s
= anti log 1,4441 = 27,80 UI/mL
R
i
= anti log 1,3481 = 22,29 UI/mL
Exemplo 6: mdias mveis
Ensaio de heparina pelo mtodo de inibio da coagulao
de plasma ovino citratado
As doses utilizadas do padro, em mL, foram: = p
1
= 0,78;
p
2
= 0,76; p
3
= 0,74; p
4
= 0,72; p
5
= 0,70 e p
6
= 0,68. Doses
equivalentes (a) da amostra foram preparadas a partir da
potncia suposta S
A
= 140,6 UI/mg.
O ensaio foi desenvolvido conforme est descrito no
mtodo de avaliao de heparina nesse volume.
Foram realizados trs ensaios. A ttulo de exemplo do
clculo de M, somente se desenvolver o ensaio N
o
1.
Os graus de coagulao encontram-se na Tabela 35.
Tabela 35 - Exemplo 6: graus de coagulao = y.
Tubo
Padro P Amostra A
p (mL) y A (mL) Y
1 0,78 0,00 0,78 0,00
2 0,76 0,00 0,76 0,25
3 0,74 0,50 0,74 0,75
4 0,72 0,75 0,72 1,00
5 0,70 1,00 0,70 1,00
6 0,69 1,00 0,68 1,00
8
( ) 1731 , 2 3 / 1805 , 2 1995 , 2 1392 , 2 = + + = M
R = 0 , 149 log = M anti UI/mg
= (2,1392+2,1995+2,1805)/3 = 2,1731 = antilog M =
149,0 UI/mg
Calcular a varincia do erro:
s
2
= {14,1686 - 42,4999/3}/2
s
2
= 0,001
s = 0316 , 0 001 , 0 =
n = 3
t = 4,3 (Tabela 3 gl =2)
Calcular o intervalo de confana:
L = 1569 , 0
7321 , 1
3 , 4 0316 , 0 2
=

L/2 = 0,0784
M
s
= 2,1731 + 0,0784 = 2,2515
M
i
= 2,1731 - 0,0784 = 2,0947
R
s
= 178,4
R
i
= 124,4
Utilizar frmulas 27, 28 e 40 a 45.
x
iP
= 0,8691
y
iP
= 0,8572
x
(i + 1)
= 0,8691 y
(i + 1)
= 0,750
x
P
= ( ) 8661 , 0
750 , 0 417 , 0
8691 , 0 8572 , 0
5 , 0 4171 , 0 8691 , 0 =
+
x
iA
= 0,8807 y
iA
= 0,333
x
(i + 1)A
= 0,8691 y
(i + 1)A
= 0,667
x
A
=
( ) 8749 , 0
667 , 0 333 , 0
8807 , 0 8691
5 , 0 333 , 0 8807 , 0 =
+
S
A
= 140,6 UI/mg
M
1
= 0,8661 0,8749 + log 140,6 = 2,1392
Supondo que outros dois ensaios realizados com a mesma
amostra forneceram as estimativas:
M
2
= 2,1995 e M
3
= 2,1805, calcular M
Tabela 36 - Exemplo 6: mdias emparelhadas.
Tubo
Padro P Amostra A
Log dose
(mL 10)
x
P
Mdias
log dose
x
iP
Mdias grau
coagulao
y
iP
log dose
(mL 10)
x
A
Mdias
log dose
x
iA
Mdias grau
coagulao
y
iA
1 0,8921 - - 0,8921 - -
2 0,8808 0,8807 0,167 0,8808 0,8807 0,333
3 0,8692 0,8491 0,417 0,8692 0,8691 0,667
4 0,8572 0,8572 0,750 0,8573 0,8572 0,917
5 0,8450 0,8450 0,917 0,8451 0,8450 1,000
6 - - - 0,8325 - -
Exemplo 7: ensaio microbiolgico com 5 doses do
padro e uma dose da amostra (5 x 1)
Ensaio de antibitico usando placas de Petri - Doseamento
microbiolgico de Benzilpenicilina benzatina p para
injetvel.
As doses utilizadas do padro foram:
0,15 UI/mL; 0,30 UI/mL; 0,60 UI/mL; 1,20 UI/mL; 2,40
UI/mL
na potncia suposta
S
A
de 600.000 UI/frasco
8
Tabela 37 - Exemplo 7: leituras dos halos de inibio.
Dimetro dos
halos de inibio
P
1
P
3
P
2
P
3
P
4
P
3
P
5
P
3
13,87 19,88 16,24 19,54 23,47 19,21 27,41 19,32
12,95 20,60 16,35 19,85 23,04 18,97 27,62 19,61
13,08 20,43 16,88 19,86 23,19 19,39 26,67 19,72
12,86 19,85 15,34 18,49 23,04 19,68 27,50 19,65
13,24 20,07 15,98 19,06 22,65 19,14 27,41 19,27
13,08 20,06 15,50 19,20 23,01 19,65 26,53 20,04
12,88 19,75 16,26 19,96 23,99 19,81 27,30 19,25
13,39 20,30 16,70 19,70 23,85 19,72 27,49 19,53
13,31 20,30 16,70 19,95 23,82 19,55 27,27 19,90
Mdia 13,184 20,138 16,217 19,512 23,340 19,458 27,244 19,588
Mdia de P
3
(36 leituras): 19,674
Tabela 38 - Exemplo 7: leituras dos halos de inibio aps correo.
Dimetro dos
halos de inibio
P
1
P
2
P
3
P
4
P
5

x
1
= - 0,82391 x
2
= - 0,52288 x
3
= - 0,22185 x
4
= 0,079181 x
5
= 0,380211
13,406 16,402 19,674 23,686 27,496
12,486 16,512 19,674 23,256 27,706
12,616 17,042 19,674 23,406 26,756
12,396 15,502 19,674 23,256 27,586
12,776 16,142 19,674 22,866 27,496
12,616 15,662 19,674 23,226 26,616
12,416 16,422 19,674 24,206 27,386
12,926 16,862 19,674 24,066 27,576
12,846 16,862 19,674 24,036 27,356
(yi)
2
13106,59 21729,12 31352,37 44945,7 60503,21
x = concentrao do antibitico em logaritmo
Totais
N = 45
x = -9,983205
y = 896,936
y
2
= 19.076,73
(yi
2
)/9

= 19.070,78 xy = -100,374
(x x )(y y ) = 98,61069
(x x )
2
= 8,155715 (y y )
2
= 1.199,081
1
) (
2

N
x x
= 0,4305
1
) (
2

N
y y
= 5,2203
b
0
= 22,61426 b
1
= 12,09086
8
b
1
= 12,09 b
0
= 22,61 r = 0,997
Fonte de variao gl Soma de quadrados Quadrado mdio F calc.
Regresso 1 1.192,3 1192,3 5691,5
Erro residual 43 6,80 0,2 ---
Desvio de linearidade 3 0,85 0,3 3
Erro puro 40 5,95 0,1 ---
Total 44 1.199,1 ---
Tabela 40 - Exemplo 7: leitura das amostras.
A
1
P
3
A
2
P
3
A
3
P
3
19,66 19,78 19,57 18,73 18,69 18,57
19,49 19,45 18,91 19,12 19,04 18,89
19,94 19,50 19,02 19,70 19,28 19,12
19,38 19,68 19,41 19,55 19,38 19,14
19,88 19,90 19,32 19,38 19,22 19,40
19,88 19,91 19,55 19,74 19,22 19,10
19,74 19,45 19,41 19,33 20,03 19,45
19,15 19,04 19,47 19,68 19,33 19,45
19,45 19,32 19,48 19,46 19,45 19,45
y
i
2

= 31.176,96 y
i
2

= 30.986,56 y
i
2
=
30.324,74 y
i
2
=
30.516,6 y
i
2
=
30.150,85 y
i
2

= 29.780,40
Tabela 41 - Exemplo 7: diferenas nas respostas pareadas ou ( )
1
/
A P
X y y b = (frmula 16).
X
1
X
2
X
3
X
4
- 0,0099256 0,0694789 0,0099256 - 0,0198511
0,0033085 - 0,0173697 0,0124069 - 0,0256410
0,0363937 - 0,0562448 0,0132341 0,0330852
- 0,0248139 - 0,0115798 0,0198511 - 0,0281224
- 0,0016543 - 0,0049628 - 0,0148883 0,0066170
- 0,0024814 - 0,0157155 0,0099256 0,0016543
0,0239868 0,0066170 0,0479735 - 0,0281224
0,0090984 - 0,0173697 - 0,0099256 0,0645161
0,0107527 0,0016543 0,0000000 - 0,0264682
Tx = 0,044665 Tx = - 0,04549 Tx = 0,088503 Tx = - 0,02233
Tx
2
/9 = 0,000222 Tx
2
/9 = 0,00023 Tx
2
/9 = 0,00087 Tx
2
/9 = 0,0000554
X
2
= 0,024058 (Tx
2
/9) = 0,001377
t = 2,042 k = 9 f = 9 n = 32
s = 0,02662
L = 0,01812 (frmula 20)
8
Tabela 42 - Exemplo 7: logaritmo da razo de potncia e limites de confana para as amostras A
1
, A
2
, A
3
e A
4
.
A
1
A
2
A
3
A
4
Logaritmo da razo
de potncia (log)
0,004963 - 0,00505 0,009833 - 0,00248
M
AS
e M
AI
0,02308 - 0,01316 0,01307 0,01564 0,01564 0,02795 0,01564 - 0,02060
para amostra A
1
:
Utilizando as frmula 17 e 20 a 25
M(A
1
) = X
1
/9 = 0,004963
M = M + log 600.000 = 5,78311
R = antilog 5,78311 = 606.895,97 UI/frasco
M
as
(A
1
) + L = 0,004963 + 0,01812 = 0,02308
M
Ai
(A
1
) - L = 0,004963 - 0,01812 = -0,01316
M
As
(A
1
) = 0,02308 + log 600.000 = 5,80123
M
Ai
(A
1
) = -0,01316 + log 600.000 = 5,76499
R
s
= antilog 5,80123 = 632.746,9 UI/frasco
R
i
= antilog 5,76499 = 582.091,5 UI/frasco
Tabela 43 - Exemplo 7: coefciente de Variao (frmula 18).
A
1
A
2
A
3
A
4
Desvio padro (s) 0,269 0,232 0,356 0,229
Mdia 19,62 19,35 19,24 19,26
Coefciente de variao (CV) 1,37 1,20 1,85 1,19
Figura 1 - Exemplo 7: Grfco da curva de regresso
8
8.10.3 EXEMPLO DE ENSAIO
INDIRETO TUDO OU NADA
Exemplo 8: Ensaio dicotmico de duas doses, mtodo
de probitos simplifcado
Ensaio de insulina pelo mtodo de convulso em
camundongos
As doses utilizadas do padro foram p
1
= 18 mUI/
camundongo e p
2
= 30 mUI/camundongo.
Doses equivalentes da amostra (a
1
= 18 mUI/camundongo
e a
2
= 30 mUI/camundongo) foram preparadas com base na
potncia suposta S
A
= 40 UI/ mL.
Os camundongos foram injetados subcutaneamente com
0,25 mL/camundongo da soluo respectiva. Previamente
foram divididos ao acaso em quatro grupos, que receberam,
respectivamente,
Tabela 44 Exemplo 8: Respostas (% de camundongos em convulso).
Padro P Amostra A
p
1
p
2
a
1
a
2
Nmero de camundongos injetados (n) 30 28 28 24
Nmero de camundongos em convulso 9 17 11 18
Porcentagem de respostas (%) 30,0 60,7 39,3 75,0
Validade do ensaio
O ensaio cumpre as condies de validade:
a) regresso signifcativa, F calculado 12,15 maior que
o valor crtico da Tabela 5, para p = 0,01, gl
1
= 1 e gl
2
=
infnito; e
0,09 menor que o valor crtico da Tabela 4, para p = 0,05;
gl
1
= 1 e gl
2
= infnito.
Tabela 45 Exemplo 8: Transformao em probitos, totais e contrastes.
Padro P Amostra A
p
1
p
2
a
1
a
2
Probito (Tabela 16) P
1
= 4,48 P
2
= 5,27 A
1
= 4,73 A
2
= 5,67
Ponderao w (Tabela 17) 0,576 0,619 0,540 0,540
Preparao P = 9,75 A = 10,4 y = 20,15
Contraste linear L
P
= 0,79 L
A
= 0,94 L = 1,73
Resultados obtidos com as frmulas da Tabela 8.
Tabela 46 Exemplo 8: Anlise da varincia.
Fonte de variao gl
Soma de
quadrados
Quadrado mdio F p
Preparao 1 0,1056 0,1056 1,71 > 0,05
Regresso 1 0,7482 0,7482 12,15 < 0,01
Paralelismo 1 0,0056 0,0056 0,09 > 0,05
Erro Infnito s
2
= 0,0616
As somas de quadrados foram obtidas empregando-se as frmulas da Tabela 10, tomando n = 1.
8
I = log 30 log l8 = 1,4771 - l,2553 = 0,2219
t = 1,96 com gl = infnito e p = 0,05 (da Tabela 3)
S
A
= 40,0
log S
A
= 1,6021
M = 0,0839 + 1,6021 = 1,6860
R
A
= anti log 1,6860 = 48,53 UI/ mL = Potncia estimada

c = 1 (da Tabela 15)
( ) ( ) [ ]
2 2
2219 , 0 0839 , 0 425 , 1 4625 , 0 0839 , 0 4625 , 1
'
'
+ =
i
s
M
M
1658 , 0 1227 , 0
'
'
=
i
s
M
M
M
s
= 0,2885
M
i
= - 0,0431
Logaritmo dos limites de confana
M
s
= 0,2885 + 1,6021 = 1,8906
M
i
= 0,0431 + 1,6021 = 1,5590
R
s
= 77,73 UI/mL
R
i
= 36,22 UI/ mL
Usando o mtodo completo de anlise de probitos, obteve-
se uma estimativa de potncia de 48,48 com limites de 35,9
e 75,92 UI/ mL.
8.10.4 EXEMPLO DE
COMBINAO DE
ESTIMATIVAS DE POTNCIA
Exemplo 9: Combinao de estimativas de potncia
Combinao de ensaios de corticotrofna pelo mtodo
de depleo de cido ascrbico supra-renal em ratas
hipofsectomizadas
Trs ensaios independentes da mesma amostra foram
realizados conforme procedimento descrito em Combinao
de Estimativas de Potncia (8.8). Os resultados dos ensaios
encontram-se na Tabela 47.
Tabela 47 Exemplo 9: Dados para combinao de potncias.
Ensaio 1 Ensaio 2 Ensaio 3
M 1,24797 1,25164 1,42193
L 0,29097 0,90082 0,11555
t
2
4,1209 4,1209 4,2025
gl 34 33 27
Clculo da potncia mdia ponderada
13966
0148 , 1474
6174 , 2058
W
W
= =
=
M
M
R = anti log 1,3966 = 24,9
Teste de homogeneidade dos log das estimativas de
potncia.
( )
= = 5 , 5 W
2
2
M M
M
;
(Tabela 18) = 5,9
Como ;
2
calculado menor que o valor crtico, no se tem
elementos para suspeitar de heterogeneidade.
Clculo dos limites de confana
0260 , 0 0198 , 1474 / 1 W / 1 = = =
M
s
M
s
= 1,4226
M
i
= 1,3700
R
s
= 26,5
R
i
= 23,5
9
9 RADIOFRMACOS
GLOSSRIO
Atividade especfca (ou radioatividade especfca):
Radioatividade do radionucldeo relacionada massa
unitria do elemento ou composto. comumente referida
atividade de 1 g da substncia especifcada na monografa:
es/s/g desintegra
T M ou W
693 , 0 N
S
2 1
=
em que:
S = radioatividade especfca;
N = nmero de Avogadro;
W = peso atmico;
M = peso molecular.
Componentes no radioativos para marcao: preparao
ou conjunto de reagentes que devem ser reconstitudos
ou combinados com um radionucldeo para a sntese do
radiofrmaco fnal, antes da administrao ao paciente.
Podem vir na forma de reagentes lioflizados ou outras
substncias e so mais comumente conhecidos como kits
para marcao.
Concentrao radioativa: a concentrao radioativa da
soluo a radioatividade do radionucldeo contida no
volume unitrio e geralmente referida como atividade por 1
mL. Como ocorre com todas as especifcaes envolvendo
radionucldeos, necessrio declarar a data e, no caso
de radionucldeos com meia-vida curta, a hora na qual a
concentrao radioativa foi determinada.
Carreador: istopo estvel do radionucldeo em questo,
adicionado preparao radioativa na forma qumica
idntica quela na qual o radionucldeo est presente.
Decaimento radiativo: os ncleos dos elementos
radioativos radionucldeos sofrem perda de partculas
e/ou de energia segundo suas caractersticas prprias.
Essas caractersticas incluem a velocidade de decaimento
e o tipo de emisso. A emisso de partculas pelos ncleos
determina modifcao de seu nmero de massa. Quando
a partcula emitida portadora de carga positiva ou
negativa o ncleo sofre mudana de nmero atmico e,
consequentemente, o nmero de eltrons na eletrosfera
do tomo que lhe corresponde, determinando mudana
nas propriedades qumicas do tomo. A radioatividade
decai em razo exponencial, que caracterstica para cada
radionucldeo. A atividade em qualquer tempo pode ser
calculada pela exresso
t
e

=
0
A A
em que:
A = atividade no tempo t;
A
0
= atividade inicial;
= constante de decaimento - tambm denominada de
constante de desintegrao ou constante de transformao,
i.e., a frao de tomos radiativos que sofrem transformaes
na unidade de tempo, desde que este tempo seja curto em
comparao com a meia-vida fsica;
t = tempo decorrido;
e = base de logaritmos neperianos.
Desintegrao: transformao na qual o ncleo emite uma
ou mais partculas.
Gerador: sistema que incorpora um radionucldeo pai que,
por decaimento, produz um radionucldeo flho que pode
ser removido por eluio ou por algum outro mtodo para
ser utilizado como parte integrante de um radiofrmaco.
Istopos: nucldeos de um mesmo elemento qumico cujos
ncleos tm o mesmo nmero atmico e massa atmica
diferente.
Material de Partida: todos os constituintes que so
utilizados na preparao de radiofrmacos.
Meia-vida biolgica: tempo necessrio para um organismo
remover, por eliminao biolgica, metade da quantidade
de uma substncia administrada.
Meia-vida efetiva: tempo necessrio para um
radionucldeo em um organismo diminuir sua atividade
pela metade como um resultado combinado da eliminao
biolgica e do decaimento radioativo. A meia-vida efetiva
importante para o clculo da dose tima do radiofrmaco
a ser administrada e no monitoramento da quantidade de
exposio radiao.
Pode ser calculado a partir da frmula:
b p
b p
e
2 1 2 1
2 1 2 1
2 1
T T
T T
T
+
=
em que:
T
1/2e
= tempo de meia-vida efetiva do radiofrmaco;
T
1/2p
= tempo de meia-vida fsica do radionuclideo;
T
1/2b
= tempo de meia-vida biolgica do radiofrmaco.
Meia-vida fsica: tempo necessrio para metade de uma
populao de tomos de um radionucldeo decair para
outra forma nuclear. A meia-vida relacionada constante
de decaimento () pela equao:
Neutrino: partcula de difcil deteco, com massa
desprezvel, neutra, porm dotada de energia, emitida
simultaneamente emisso de partcula beta. A soma das
energias da partcula beta e do neutrino corresponde a valor
quantifcado para cada processo de desintegrao beta.
9
Nucldeos: espcies de tomos caracterizados pela
constituio do seu ncleo, em particular pelo seu nmero
de prtons e nutrons e, tambm, por seu estado de energia
nuclear.
Precursores ou matria-prima para sntese: geralmente,
esses precursores no so produzidos em larga escala.
Alguns precursores so sintetizados pelo laboratrio
de produo de radiofrmacos, outros so fornecidos
por laboratrios produtores especializados. Testes para
identidade, para pureza qumica e ensaio devem ser
realizados por meio de procedimentos validados. Quando
lotes de precursores so aceitos utilizando-se os certifcados
de anlise, evidncias adequadas devem ser estabelecidas
para demonstrar a confabilidade da anlise do fornecedor
e pelo menos um teste de identidade deve ser realizado.
Recomenda-se testar materiais precursores antes de seu
uso na rotina de produo do radiofrmaco, para garantir
que sob condies de produo especifcadas, o precursor
possibilita a preparao do radiofrmaco na quantidade e
qualidade especifcada.
Pureza Radionucldica: a razo, expressa em
porcentagem, da radioatividade do radionucldeo em
relao radioatividade total do radiofrmaco. As
impurezas radionucldicas relevantes esto listadas, com
seus limites, nas monografas individuais.
Radioatividade Especfca: a radioatividade de um
radionucldeo por unidade de massa do elemento ou do
produto qumico de interesse.
Radioatividade Total: a radioatividade do nucldeo por
unidade de massa do elemento ou do produto qumico de
interesse.
Radioistopos: istopos radioativos ou radionucldeos.
So istopos instveis os quais sofrem decaimento
radioativo e transmutam-se em novo elemento. So tomos
que se desintegram por emisso de radiao corpuscular
(partcula) ou eletromagntica. Todo radioistopo
caracterizado pelo seu tempo de meia-vida (T
1/2
), expresso
em unidades de tempo (segundos, minutos, horas, dias e
anos) e pela natureza e energia de sua radiao. A energia
pode ser expressa em eletronvolts (eV), kilo-eltronvolts
(keV) ou mega-eltronvolts (MeV).
Pureza qumica: pode ser entendida como a razo expressa
em porcentagem da massa da molcula do composto de
interesse em seu estado qumico indicado, em relao
massa total da preparao. As impurezas qumicas
relevantes esto listadas com seus limites nas monografas
individuais.
Pureza Radioqumica: pode ser entendida como a
razo expressa em porcentagem de radioatividade
do radionucldeo de interesse no seu estado qumico
indicado, em relao radioatividade total da preparao
radiofarmacutica. As impurezas radioqumicas relevantes
esto listadas, com seus limites, nas monografas
individuais.
INTRODUO
Radiofrmacos so preparaes farmacuticas com
fnalidade diagnstica ou teraputica que, quando prontas
para o uso , contm um ou mais radionucldeos.
Os radiofrmacos compreendem, tambm, os componentes
no-radioativos para marcao e os radionucldeos,
incluindo os componentes extrados dos geradores de
radionucldeos.
A produo dos radiofrmacos dever atender os requisitos das
Boas Prticas de Fabricao (BPF) de Radiofrmacos, alm
de atender s especifcaes farmacopeicas. Os radiofrmacos
tm a sua produo, suprimento, estocagem, uso e despejo
regulamentados pela legislao nacional vigente.
O radiofrmaco contm o radionucldeo numa das
seguintes formas:
como um elemento atmico ou molecular;
como um on;
includo ou ligado as molculas orgnicas, por processo
de quelao ou por ligao covalente.
As formas de obteno de radionucldeos, usados na
produo de radiofrmacos so:
bombardeamento de nutrons em reatores nucleares;
bombardeamento com partculas carregadas em
aceleradores de partculas;
fsso nuclear de nucldeos pesados aps
bombardeamento com nutrons ou com partculas;
sistemas geradores de radionucldeos que envolvem a
separao fsica ou qumica de um radionucldeo flho,
de meia-vida mais curta do que o radionucldeo pai.
ARMAZENAGEM
Os radiofrmacos devem ser mantidos em recipientes
vedados e em local sufcientemente protegido para
evitar irradiao do pessoal por emisses primrias ou
secundrias, de acordo com regulamentos nacionais e
internacionais sobre manuseio de substncias radioativas.
ESTABILIDADE
As preparaes de radiofrmacos tendem a serem
menos estveis do que os seus correspondentes inativos,
ocorrendo sua decomposio por radilise e, por isso,
devem ser utilizadas em curto prazo. Os efeitos da radiao
primria incluem a desintegrao do tomo radioativo e a
decomposio de molculas quando a frao de energia de
partcula emitida ou do raio gama absorvida por essas
molculas.
A estabilidade dos radiofrmacos depende de muitos
fatores, incluindo a energia e a natureza da radiao, a
atividade especfca e o tempo de armazenagem. Os efeitos
de radiao primria podem induzir efeitos secundrios
9
devidos formao de espcies excitadas, que podem
degradar outras molculas, por exemplo, as dos solventes
ou conservantes.
Tambm, deve ser considerada a susceptibilidade oxidao
e reduo de pequena quantidade de espcies qumicas
presentes. A excluso inicial de todos os traos de agentes
de oxidao e reduo nem sempre sufciente, porque
tais agentes podem formar-se continuamente por efeitos da
radiao. Durante o armazenamento, recipientes e solues
podem escurecer devido radioatividade emitida. Tal fato
no indica, necessariamente, a deteriorao da preparao.
Conservantes
Preparaes radiofarmacuticas injetveis so geralmente
acondicionadas em recipientes multidose. Os conservantes
antimicrobianos podem sofrer decomposio pela
infuncia da radiao e isso restringe seu uso para
alguns radiofrmacos injetveis. Portanto, a exigncia de
que preparaes injetveis contenham um conservante
antimicrobiano adequado, em concentrao adequada,
no se aplica necessariamente, s preparaes
radiofarmacuticas.
As preparaes radiofarmacuticas injetveis com perodo
de vida til maior que um dia e que no contenham um
conservante antimicrobiano devem ser fornecidas em
frascos de dose nica. Se, contudo, a preparao for
fornecida num recipiente multidose, deve ser utilizada
dentro de 24 horas aps a retirada da primeira dose, de
forma assptica.
As preparaes radiofarmacuticas injetveis para as quais
o perodo de vida til maior que um dia e que contenham
conservante antimicrobiano podem ser fornecidas em
recipientes multidose. Aps a retirada da primeira dose,
de forma assptica, o recipiente deve ser armazenado
em temperatura na faixa de 2 C a 8 C e os contedos
utilizados no prazo de 7 dias.
DILUIO
Caso necessrio fazer diluio prefervel utilizar veculos
de mesma composio que os presentes na preparao.
Em caso de radiofrmacos injetveis devem ser utilizados
solues e materiais estreis, livres de partculas e de traos
de matria orgnica.
A quantidade de material radioativo presente na preparao
frequentemente muito pequena para ser medida pelos
mtodos qumicos ou fsicos disponveis.
Considerando a frmula
em que:
S
max
= atividade especfca mxima,
W = peso atmico,
T
1/2
= tempo de meia-vida em horas.
Verifca-se que, por exemplo, para soluo de pertecnetato
de sdio (
99m
Tc) com a concentrao radioativa de 37 MBq
(1 mCi) por mL, a concentrao do pertecnetato pode ser
to baixa quanto 3 x 10
-10
g mL
-1
.
O comportamento de massas to pequenas em solues
muito diludas pode requerer a adio de carreador inerte
para limitar a adsoro superfcie do recipiente assim
como facilitar as reaes qumicas de preparao de
radiofrmacos.
CONTROLE BIOLGICO
Esterilidade
Radiofrmacos injetveis devem ser preparados de
acordo com as BPF de modo a assegurar a esterilidade,
atendendo aos critrios do Teste de esterilidade
(5.5.3.2.1). Por causa das caractersticas radioativas das
preparaes, no praticvel atrasar a liberao de alguns
produtos farmacuticos radioativos por conta do teste
de esterilidade. Em tais casos, os resultados dos testes
de esterilidade fornecem apenas evidncia retrospectiva
confrmatria para a garantia da esterilidade, que portanto,
depende dos mtodos iniciais estabelecidos na fabricao
e nos procedimentos de validao/certifcao. No caso
de radiofrmacos preparados em pequenos lotes e para os
quais a execuo do teste de esterilidade apresenta grau
elevado de risco radiolgico, a quantidade de amostra
requerida no teste de esterilidade deve ser considerada. Se
a preparao radiofarmacutica esterilizada por fltrao
ou processada assepticamente, a validao do processo
necessria.
Endotoxinas Bacterianas
Quando especifcado, uma monografa individual para uma
preparao radiofarmacutica requer conformidade com o
teste para endotoxinas bacterianas, descrito em Mtodos
Biolgicos Endotoxinas Bacterianas (5.5.2.2). Na
realizao do teste devem-se tomar as precaues necessrias
para limitar a irradiao do pessoal que realiza o teste.
O limite de endotoxinas bacterianas indicado nas
monografas dos radiofrmacos. A validao do teste
necessria para excluir qualquer interferncia devido
natureza do radiofrmaco. Nveis de radioatividade
devem ser padronizados j que alguns tipos de radiao
e radionucldeos, especialmente altos nveis de atividade,
podem interferir com o teste. O pH de algumas preparaes
radiofarmacuticas dever ser ajustado a pH 6,5 - 7,5 para
promover resultados timos.
Quando a natureza da preparao radiofarmacutica resultar
em uma interferncia por inibio ou potencializao e no
for possvel eliminar o fator interferente, a conformidade
com o teste para endotoxinas bacterianas deve ser
especifcada. Em alguns casos difcil concluir o teste
antes da liberao do lote para uso, quando a meia-vida
do radionucldeo na preparao curta. O teste ento se
constitui um controle da qualidade da produo.
9
PRAZO DE VALIDADE
Data limite especifcada pelo fabricante para a utilizao
de um radiofrmaco, antes e aps a reconstituio e/ou
marcao radioativa do produto, levando em conta produtos
de degradao qumicos, radioqumicos e radionucldicos,
sendo mantidas as condies de armazenagem e transporte
estabelecidos.
RADIOATIVIDADE
Propriedade que certos nucldeos tm de emitir radiao por
transformaes espontneas de seus ncleos. Geralmente o
termo radioatividade usado para descrever o fenmeno
de decaimento radioativo e para expressar a quantidade
fsica (atividade) desse fenmeno. A atividade de uma
preparao o nmero de transformaes nucleares por
unidade de tempo que ocorrem na preparao. Essas
transformaes podem envolver a emisso de partculas
carregadas, captura de eltrons ou transio isomrica.
As partculas carregadas emitidas pelo ncleo podem ser
partculas alfa (ncleos de hlio, de nmero de massa 4)
ou partculas beta (eltrons de carga negativa ou positiva,
respectivamente
-1
ngatron ou
+1
psitron). A emisso
de partculas beta acompanhada da emisso de neutrino.
A emisso de partculas carregadas pode ser acompanhada
de raios gama, os quais, tambm, so emitidos no processo
de transio isomrica. Essa emisso de raios gama pode ser
parcialmente substituda pela ejeo de eltrons, conhecidos
como eltrons de converso interna. Esse fenmeno, assim
como o processo de captura de eltrons, causa emisso
secundria de raios X, devido reorganizao de eltrons
no tomo. Essa emisso secundria causa, tambm, a
ejeo de eltrons de baixa energia conhecidos como
eltrons Auger. Raios X, eventualmente acompanhados
pelos raios gama, so emitidos no processo de captura de
eltrons. Partculas
+1
so aniquiladas em contato com
outro eltron (
-1
e) presente na matria, sendo esse processo
acompanhado pela emisso de dois ftons gama, cada um
com energia de 511 keV, geralmente emitidos a 180 um do
outro e que se denomina radiao de aniquilao.
O poder penetrante de cada radiao varia consideravelmente
de acordo com sua natureza e energia. Partculas alfa so
completamente absorvidas por espessuras de slidos ou
lquidos que variam de alguns a dezenas de micrometros;
partculas beta so absorvidas completamente na espessura
de alguns milmetros a vrios centmetros. Raios gama no
so completamente absorvidos, mas somente atenuados,
e uma reduo de dez vezes pode requerer, por exemplo,
alguns centmetros de chumbo. Quanto mais denso o
absorvente, menor o alcance de partculas alfa e beta e
maior a atenuao de raios gama.
Medida da radioatividade
A medida absoluta da radioatividade de uma amostra pode
ser efetuada se o esquema de decaimento do nucldeo
conhecido, mas na prtica muitas correes so requeridas
para se obter resultados acurados. Por essa razo comum
realizar medidas utilizando-se uma fonte padro primria.
Padres primrios podem no existirem para radionucldeos
de meia-vida curta, como por exemplo, emissores de
psitrons. Os instrumentos de medida so calibrados
utilizando-se padres apropriados para radionucldeos
emissores de partculas.
O contador Geiger-Mller pode ser utilizado para medir
emissores beta e beta-gama. Contadores de cintilao,
semicondutores ou cmaras de ionizao podem ser
utilizados para medir raios gama. Emissores beta de baixa
energia necessitam de contador de cintilao lquido.
Nesse caso, a amostra dissolvida na soluo de
uma ou mais (geralmente duas) substncias orgnicas
fuorescentes (cintiladores primrios e secundrios),
que convertem parte da energia de desintegrao em
ftons de luz, os quais so detectados e convertidos em
impulsos eltricos no fotomultiplicador. Quando se utiliza
o contador de cintilao lquido, medidas comparativas
devem ser corrigidas devido aos efeitos de interferncia da
luz. Medidas diretas devem ser feitas em condies que
assegurem que as condies geomtricas sejam constantes
(volumes idnticos dos recipientes e solues).
Qualquer que seja o equipamento usado essencial que
se trabalhe em condies geomtricas extremamente bem
defnidas, de modo que a fonte radioativa esteja sempre
na mesma posio no aparelho e, conseqentemente,
sua distncia do dispositivo de medio seja constante e
permanea a mesma, enquanto a amostra substituda pelo
padro.
Todas as medidas de radioatividade devem ser corrigidas
pela subtrao da atividade da radiao de fundo, devida
radiatividade do meio e aos sinais esprios gerados no
prprio aparelho. Em certos equipamentos, nos quais a
contagem feita em altos nveis de atividade, a correo
pode ser necessria em razo das perdas por coincidncia,
devidas ao tempo de resoluo do detector e do equipamento
eletrnico associado.
Para sistema de contagem com tempo morto fxo (), aps
cada contagem a correo dada pela equao:
N = taxa de contagem real por segundo;
N
0
= taxa de contagem medida por segundo;
= tempo morto em segundos.
Em certos equipamentos, a correo feita automaticamente.
Correes da perda por coincidncia devem ser feitas antes
das correes para radiao de fundo.
Nas determinaes de radioatividade h variaes
estatsticas porque esto relacionadas probabilidade de
desintegrao nuclear. Um nmero sufciente de contagens
deve ser feito para compensar variaes no nmero de
desintegraes por unidade de tempo. Pelo menos 10 000
contagens so necessrias para obter desvio padro de no
mais de 1%.
A atividade decai em razo exponencial, que
caracterstica de cada radionucldeo. Sua determinao
9
somente verdadeira no tempo de referncia especifcado.
A atividade em outros tempos pode ser calculada a partir
da equao exponencial ou pela tabela de decaimento ou,
ainda, pode ser obtida grafcamente da curva estabelecida
para cada radionucldeo. Todas as determinaes de
atividade devem ser acompanhadas de declarao da data
e, se necessrio, da hora em que as medidas foram feitas. A
medida da atividade de amostra em soluo calculada em
relao ao seu volume original e expressa por unidade de
volume - concentrao radioativa.
Unidades de Radioatividade
No Sistema Internacional (SI) a radioatividade expressa
em becquerel (Bq) que signifca uma transformao por
segundo. A unidade histrica de atividade o curie (Ci)
que equivalente a 3,7 x 10
10
Bq.
Os fatores de converso entre becquerel e curie e seus
submltiplos so assinalados na Tabela 1.
Tabela 1 - Unidades de radioatividade utilizadas em radiofarmcia
e as converses entre unidades SI e unidades histricas.
Nmero
de tomos
transformados
por segundo
Unidade SI:
becquerel (Bq)
Unidade
Histrica:
curie (Ci)
1 1 Bq 27 picocurie (pCi)
1000 1 kilobecquerel (KBq) 27 nanocurie (nCi)
1 x10
6
1 megabecquerel (MBq) 27 microcurie (uCi)
1 x10
9
1 gigabecquerel (GBq) 27 millicurie (mCi)
37 37 Bq 1 (nCi)
37.000 37 KBq 1 (uCi)
3,7 x 10
7
37 MBq 1 (mCi)
3,7 x 10
10
37 GBq 1 Ci
Identifcao de radionucldeos
O radionucldeo , geralmente, identifcado pela meia-
vida fsica ou pela natureza e energia de sua radiao ou
radiaes, ou por ambos.
Medida do tempo de meia-vida
A meia-vida medida com auxlio de aparelhos de
deteco tais como cmara de ionizao, contador Geiger-
Mller, contador de cintilaes ou detector semicondutor.
A quantidade de radioatividade, consideradas as condies
experimentais, deve ser sufcientemente alta para permitir
a deteco durante vrias meias-vidas presumveis, porm
no alta demais, para evitar o fenmeno de perda por
coincidncia devida, por exemplo, ao tempo morto do
equipamento.
A fonte radioativa preparada de modo a evitar perdas
durante sua manipulao. Amostras lquidas devem estar
contidas em frascos ou tubos selados. Produtos slidos
devem ser protegidos por capa de folha adesiva de acetato
de celulose, ou outro material cuja massa por unidade de
rea seja desprezvel para evitar a atenuao de quantidade
signifcativa da radiao em estudo. A mesma fonte
medida em condies geomtricas idnticas e em intervalos
que correspondem usualmente metade da meia-vida
e pelo tempo correspondente a aproximadamente trs
meias-vidas. O funcionamento correto do equipamento
verifcado por meio do uso de uma fonte permanente e
as variaes da contagem so corrigidas, se necessrio,
conforme descrito em Medida da radioatividade. Traa-se
uma curva lanando-se o tempo no eixo das abscissas e no
eixo das ordenadas, o logaritmo do nmero de contagens
por unidade de tempo, ou a corrente eltrica, conforme
o tipo do equipamento usado. A meia-vida calculada a
partir dessa curva deve atender especifcao descrita na
respectiva monografa.
Determinao da natureza e da energia da radiao
A natureza e a energia da radiao emitida podem
ser determinadas por diversos procedimentos que
incluem a elaborao da curva de atenuao e o uso de
espectrometria. A curva de atenuao usada geralmente
para a determinao da energia da radiao beta e a
espectrometria usada principalmente para determinao
da energia da radiao gama.
A curva de atenuao elaborada para emissores beta
puros ou para emissores beta-gama quando no h
disponibilidade de espectrmetro de raios gama. Esse
mtodo de determinao de energia mxima da radiao
beta fornece apenas valores aproximados.
A fonte, montada convenientemente para proporcionar
condies geomtricas constantes, colocada em frente
janela delgada do contador Geiger-Mller e protegida
conforme descrito em Medida do tempo de meia-vida.
A contagem da fonte , ento, medida. Entre a fonte e o
contador so colocados pelo menos seis absorvedores de
alumnio, de massa crescente por unidade de rea, at
que a taxa de contagem no seja afetada pela adio de
absorvedores adicionais. Os absorvedores so inseridos
de modo tal que as condies geomtricas sejam mantidas
constantes.
Constri-se uma curva colocando em abscissas a massa por
unidade de rea do absorvedor expressa em mg cm
-2
e, em
ordenadas, o logaritmo do nmero de contagens por unidade
de tempo para cada um dos absorvedores utilizados. Curva
idntica elaborada utilizando-se o padro. O coefciente
de atenuao de massa calculado em relao parte
mediana, praticamente retilnea, das curvas.
O coefciente de atenuao da massa, expresso em cm
2
mg
-1
,
depende da energia da emisso beta e das propriedades fsicas
e qumicas do absorvedor. Isso possibilita a identifcao de
emisso beta e o coefciente calculado, a partir de curvas
construdas como descrito anteriormente, pela expresso:
( )
2 1
1 2
A log A log
m m
303 , 2
m
= u
em que:
m
1
= massa por unidade de rea, do absorvedor mais leve;
m
2
= massa por unidade de rea, do absorvedor mais
pesado (medir m
1
e m
2
dentro da parte retilnea da curva);
9
A
1
= taxa de contagem para massa por unidade de rea m
L
;
A
2
= taxa de contagem para massa por unidade de rea m
2
.
O coefciente de atenuao assim calculado no deve
diferir em mais de 10% do coefciente obtido em condies
idnticas com o padro do mesmo radionucldeo.
A espectrometria gama usada para identifcar
radionucldeos pela energia e intensidade dos raios X ou
gama. Baseia-se na propriedade que certas substncias
(cintiladores) tm de emitirem luz quando interagem com
radiao eletromagntica. O nmero de ftons produzido
proporcional energia absorvida pelo cintilador. A
luz transformada em impulsos eltricos de amplitude
aproximadamente proporcional energia dissipada pelos
ftons gama.
Com a anlise dos impulsos de sada por porcentagem
obtem-se, com auxilio do analisador de pulsos, o espectro
de energia da fonte. Nos espectros de cintilao de raios
gama h um ou mais picos caractersticos correspondentes
s energias da radiao gama na fonte. Esses picos so
acompanhados por outros, mais ou menos largos, devidos a
efeitos secundrios da radiao no cintilador ou ao material
em torno dele. A forma do espectro varia de acordo com
o equipamento utilizado, tornando-se necessrio calibr-lo
com auxlio de padro do radionucldeo em questo.
O espectro de raios gama do radionucldeo que os emite
prprio dele, sendo caracterizado pelo nmero de
raios gama de energia individualizada produzida por
transformao. Essa propriedade pode ser utilizada para
identifcar quais radionucldeos esto presentes na fonte
e as quantidades de cada um deles. Possibilita, tambm,
avaliar o grau de impurezas presentes, pela deteco dos
picos estranhos queles esperados.
O detector preferido para a espectrometria de raios gama
um detector semicondutor de germnio ativado com ltio.
Os detectores de cintilao de iodeto de sdio ativados com
tlio, embora apresentem resoluo menor, tambm, podem
ser usados. A sada de cada um desses detectores ocorre na
forma de pulsos eltricos, cuja amplitude proporcional
energia dos raios gama detectados. Aps amplifcao,
esses pulsos so analisados em analisador multicanal, que
fornece o espectro de energia gama da fonte. A relao
entre energia gama e o nmero do canal pode ser facilmente
estabelecida utilizando-se fontes de raios gama de energia
conhecida. O sistema de deteco deve ser calibrado, pois
a efcincia do detector funo da energia da radiao
gama, da forma da fonte e da distncia da fonte ao detector.
A efcincia da deteco pode ser medida com auxlio
de fonte calibrada do radionucldeo em questo ou, para
trabalho mais genrico, pode ser construda uma curva de
efcincia versus energia gama a partir de uma srie de
fontes calibradas de vrios radionucldeos.
A utilizao de detector de baixa resoluo poder trazer
alguma difculdade em identifcar as impurezas, pois, os
picos no espectro podem no estar bem resolvidos. Nesse
caso, recomendvel a determinao da meia-vida por
medidas repetidas da amostra.
Se, numa fonte, a impureza radioativa de meia-vida
diferente estiver presente, ela facilmente detectvel pela
identifcao de picos caractersticos, cujas amplitudes
decrescem em taxas diferentes daquelas do radionucldeo
esperado. A determinao da meia-vida de picos
interferentes por medidas repetidas da amostra ajudar na
identifcao da impureza. possvel estabelecer a taxa de
decaimento da radioatividade usando espectrometria gama
desde que os picos diminuam em amplitude em funo da
meia-vida.
Informaes sobre as caractersticas fsicas dos
radionucldeos de relevncia na produo de radiofrmacos
so fornecidas na Tabela 2.
PUREZA RADIONUCLDICA
Para estabelecer a pureza radionucldica da preparao,
a radioatividade e a identidade de cada radionucldeo
presente devem ser conhecidas. O mtodo mais comumente
utilizado para examinar a pureza radionucldica o da
espectrometria gama. No um mtodo totalmente preciso
porque as impurezas alfa e beta-emissoras geralmente
no so detectveis e, quando so empregados detectores
de iodeto de sdio, os picos devidos s impurezas so
frequentemente encobertos pelo espectro do radionucldeo
principal.
Na monografa esto estabelecidas as exigncias gerais
para a pureza radionucldica (por exemplo, o espectro de
raios gama no deve diferir signifcativamente daquele da
fonte padro) e pode estabelecer limites para impurezas
radionucldicas especfcas (por exemplo, molibdnio-99
em tecncio-99m). Essas exigncias so necessrias
embora elas por si s no sejam sufcientes para assegurar
que a pureza radionucldica da preparao seja adequada
para uso humano. O fabricante deve analisar seus produtos,
especialmente as preparaes de radionucldeos de meia-
vida curta, quanto presena de impurezas de meia-vida
longa, aps perodo conveniente de decaimento. Dessa
maneira, podem ser obtidas informaes sobre a adequao
dos processos de fabricao e dos procedimentos de
controle.
Devido s diferenas nas meias vidas dos diferentes
radionucldeos presentes na preparao farmacutica, a
pureza radionucldica muda com o tempo. A especifcao
de pureza radionucldica deve ser garantida durante todo
o prazo de validade. s vezes difcil realizar esse teste
antes da liberao para uso de um lote produzido, quando
a meia-vida do radionucldeo na preparao curta. O
teste constitui-se, nesse caso, um controle de qualidade de
produo.
PUREZA RADIOQUMICA
A determinao da pureza radioqumica requer a
separao das substncias qumicas diferentes contendo
o radionucldeo e a estimativa da porcentagem da
radioatividade associada substncia qumica declarada.
9
Na determinao da pureza radioqumica podem ser usados
mtodos analticos de separao, tais como mtodos
cromatogrfcos (cromatografa em papel, em camada
delgada, de excluso molecular, cromatografa gasosa ou
cromatografa a lquido de alta efcincia), eletroforese e
extrao por solventes.
Na cromatografa, o volume da amostra a ser utilizado
depende da tcnica adotada. prefervel no diluir
a preparao em anlise, mas importante utilizar
quantidade de radioatividade tal que perdas de contagem
por coincidncia no venham a ocorrer durante a medida
da radioatividade.
Considerando as massas muito pequenas do material
radioativo aplicado aos cromatogramas, o uso de
carreadores , s vezes, necessrio e eles podem ser
adicionados quando a monografa assim o prescrever.
Aps o desenvolvimento da cromatografa em papel ou em
camada delgada, o suporte seco e as posies das reas
radioativas so detectadas ou pela autorradiografa ou pela
medida da radioatividade ao longo do cromatograma, com
auxlio de contadores devidamente colimados, ou pelo
corte das ftas e contagem de cada poro.
As posies das manchas ou reas permitem identifcao
qumica por comparao com solues das mesmas
substncias qumicas (no radioativas), visualizadas por
reao de cor ou exame sob luz ultravioleta. A visualizao
pela reao de cor direta da amostra radioativa nem sempre
possvel ou desejvel, j que a revelao pode causar
difuso da substncia radioativa para alm das manchas ou
reas identifcadas.
Medidas de radioatividade podem ser feitas por integrao,
utilizando-se equipamento automtico ou contador digital.
As propores das reas abaixo dos picos fornecem as
relaes das concentraes radioativas das substncias
qumicas. Quando as ftas so cortadas em pores,
as razes das quantidades de radioatividade medidas
fornecem as propores das concentraes de espcies
qumicas radioativas.
Como a pureza radioqumica pode mudar com o tempo,
principalmente por causa da decomposio por radiao,
o resultado do teste deve indicar que o produto apresenta
valores especifcados durante todo o prazo de validade do
radiofrmaco.
ATIVIDADE ESPECFICA
A atividade especfca calculada relacionando-se a
concentrao radioativa (radioatividade por unidade de
volume) com a concentrao da substncia qumica em
anlise, aps verifcao de que a radioatividade devida
somente ao radionucldeo (pureza radionucldica) e
espcie qumica (pureza radioqumica) em questo.
A atividade especfca muda com o tempo, devendo ser
expressa tendo como referncia a data e, se necessrio, a
hora. A especifcao deve ser garantida durante todo o
perodo de validade do radiofrmaco.
9
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10 EQUIVALNCIA FARMACUTICA E
BIOEQUIVALNCIA DE MEDICAMENTOS
INTRODUO
Nesse captulo so abordados aspectos cientfcos e tcnicos
relacionados aos ensaios de Equivalncia Farmacutica,
Dissoluo, Biodisponibilidade e Bioequivalncia
aplicveis a medicamentos, com nfase s formas
farmacuticas slidas de liberao imediata (FFSLI) de uso
oral e suspenses, no contexto da intercambialidade entre
medicamentos. Medicamentos biolgicos (vacinas, soros,
derivados de sangue, etc), biotecnolgicos, radiofrmacos
e ftoterpicos requerem outras consideraes e, portanto,
no sero abordados.
Os atos de registro e ps-registro de medicamentos so da
competncia da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
(Anvisa). Os aspectos cientfcos e tcnicos apresentados
nesse captulo esto em consonncia com os critrios
adotados internacionalmente e com a regulamentao
tcnica vigente no Brasil sobre os temas relacionados.
Os medicamentos genricos foram implantados no
Brasil em 1999, enquanto que em 2003 publicou-se
regulamentao tcnica especfca para o registro e para a
adequao do registro de medicamentos similares que j
eram comercializados no pas. Os medicamentos similares
que estavam no mercado haviam sido registrados segundo
normas que permitiam seu registro sanitrio por meio do
conceito de similaridade a um medicamento anteriormente
registrado, sem a necessidade de apresentao, por ocasio
do registro, dos resultados de ensaios in vitro ou in vivo
relacionados comprovao da efccia e segurana. As
novas regulamentaes para medicamentos similares
publicadas em 2003 destinam-se ao estabelecimento da
isonomia de critrios para registro e renovao de registro
de medicamentos no inovadores (genricos e similares),
tendo como base os preceitos da garantia da qualidade,
efccia e segurana.
A Equivalncia Farmacutica e a Bioequivalncia so
critrios aplicveis a medicamentos genricos e similares.
Para o registro de um medicamento genrico, a indstria
farmacutica deve solicitar Agncia Nacional de
Vigilncia Sanitria (Anvisa) a indicao do medicamento
de referncia para a realizao dos ensaios necessrios ao
desenvolvimento da formulao, da forma farmacutica e
do processo de fabricao, estabelecendo as condies para
os testes de estabilidade e as especifcaes do medicamento
de modo a comprovar sua Equivalncia Farmacutica (in
vitro) e Bioequivalncia (in vivo) com o medicamento de
referncia, condio indispensvel para a comprovao da
Equivalncia Teraputica entre o candidato a genrico e o
medicamento de referncia (geralmente o medicamento
inovador cuja biodisponibilidade conhecida e a efccia
clnica e a segurana foram comprovadas por ocasio do
registro sanitrio).
A Equivalncia Teraputica entre o genrico e o
medicamento de referncia possibilita a Intercambialidade
entre eles, o que, tambm, conhecido como substituio
genrica no ato da dispensao do medicamento
pelo farmacutico. Quando dois medicamentos so
considerados Equivalentes Teraputicos assume-se que
ambos vo apresentar a mesma efccia e segurana ao
serem administrados ao organismo, assim como o mesmo
potencial para causar efeitos adversos.
Caso uma indstria farmacutica pretenda registrar
um novo medicamento similar, deve verifcar a
regulamentao tcnica vigente. Para medicamentos
similares j comercializados, a regulamentao tcnica
pertinente apresenta um cronograma de adequao com
base no critrio de risco sanitrio, segundo o qual at o
ano de 2014 todos os medicamentos similares do mercado
tero se adequado aos mesmos critrios exigidos para o
registro de medicamentos genricos.
EQUIVALNCIA FARMACUTICA
A Equivalncia Farmacutica corresponde comprovao
de que dois medicamentos so equivalentes em relao aos
resultados dos testes in vitro. Por defnio, Equivalentes
Farmacuticos so medicamentos que contm o mesmo
frmaco, isso , mesmo sal ou ster da mesma molcula
terapeuticamente ativa, mesma forma farmacutica e via
de administrao e so idnticos em relao potncia ou
concentrao. Devem ser formulados para cumprir com
as mesmas especifcaes atualizadas da Farmacopeia
Brasileira e, na ausncia dessas, com as de outros cdigos
autorizados pela legislao vigente ou, ainda, com
outros padres aplicveis de qualidade; relacionados
identidade; dosagem; pureza; potncia; uniformidade
de contedo; tempo de desintegrao e velocidade de
dissoluo, quando for o caso. Entretanto, podem diferir
em caractersticas como forma, mecanismos de liberao,
embalagem, excipientes, prazo de validade e, dentro de
certos limites, rotulagem.
Os estudos de Equivalncia Farmacutica destinam-se
avaliao da qualidade dos medicamentos por meio
de anlise comparativa entre o medicamento teste e o
medicamento de referncia e devem ser, necessariamente,
realizados por laboratrios autorizados pela Anvisa. Alm
disso, os estudos devem ser realizados em amostras dentro
do prazo de validade, utilizando-se substncias qumicas
de referncia da Farmacopeia Brasileira, ofcializadas por
meio de Resoluo de Diretoria Colegiada da Anvisa ou
originrias de outras farmacopeias. No caso de inexistncia
dessas substncias, admite-se o uso de substncias qumicas
de trabalho com identidade, teor e perfl de impurezas
devidamente determinados.
10
Os mtodos analticos empregados para avaliao da
qualidade dos medicamentos apresentam importncia
considervel no estudo de Equivalncia Farmacutica.
Devem ser utilizados, preferencialmente, os mtodos
analticos descritos na monografa individual do
medicamento presente na Farmacopeia Brasileira,
sendo que, na ausncia dessa, permite-se a utilizao de
mtodos inclusos em outras farmacopeias autorizadas
pela legislao vigente. Quando no houver monografas
para o produto em farmacopeias ofciais, o estudo deve
ser realizado utilizando-se mtodos analticos validados,
complementando-se com os ensaios descritos em mtodos
gerais da Farmacopeia Brasileira. No caso em que o mtodo
analtico fornecido pelo fabricante do medicamento, os
parmetros de preciso, exatido e linearidade devem ser
determinados pelo laboratrio autorizado pela Anvisa onde
o estudo est sendo realizado.
Os testes de Equivalncia Farmacutica devem ser
realizados, simultaneamente, no medicamento candidato
a genrico, ou medicamento similar, e no respectivo
medicamento referncia, e se baseiam na comparao dos
resultados obtidos com ambos.
importante ressaltar que o medicamento em teste no
deve ser desenvolvido e formulado para ser superior ao
medicamento de referncia, mas sim para apresentar as
mesmas caractersticas relacionadas liberao do frmaco
e qualidade j estabelecidas para o medicamento de
referncia. A demonstrao da Equivalncia Farmacutica
entre os dois medicamentos um indicativo de que o
candidato a genrico, ou similar, poder apresentar a
mesma efccia e segurana do medicamento de referncia.
BIODISPONIBILIDADE, BIODISPONIBILIDADE
ABSOLUTA, BIODISPONIBILIDADE
RELATIVA E BIOEQUIVALNCIA
A Biodisponibilidade (BD) defnida como a velocidade
e a extenso da absoro de um frmaco, a partir de uma
forma farmacutica que se torna disponvel, para exercer
o efeito farmacolgico pretendido. Dependendo do
objetivo e do desenho empregado no estudo determina-se a
Biodisponibilidade Absoluta (BDA) de um medicamento ou
a Biodisponibilidade Relativa (BDR) entre medicamentos.
A BDA aplica-se a medicamentos inovadores que
so desenvolvidos como formas farmacuticas para
administrao por vias extravasculares. Em geral,
corresponde a um ensaio cruzado, realizado em voluntrios
sadios, constitudo por dois perodos separados por um
intervalo de tempo denominado washout. No primeiro
perodo, os voluntrios so distribudos aleatoriamente em
dois grupos (A e B). Os voluntrios do grupo A recebem
o medicamento em teste por via extravascular, enquanto
que aos voluntrios do grupo B administra-se, se possvel,
a mesma dose do medicamento por via intravascular.
As coletas de lquido biolgico so realizadas de acordo
com os procedimentos estabelecidos previamente e,
aps o intervalo de washout, inicia-se o segundo perodo
repetindo-se os procedimentos com os mesmos voluntrios,
invertendo-se os grupos. As concentraes do frmaco
nas amostras so quantifcadas empregando-se mtodo
bioanaltico validado, o que permite a construo das
curvas de concentraes versus tempo para a realizao
dos clculos dos parmetros farmacocinticos relativos
biodisponibilidade.
Quando determinada para uma forma farmacutica
administrada por via oral, por exemplo, a BDA
corresponde frao sistmica calculada em relao dose
administrada por via intravascular, cuja biodisponibilidade
, por defnio, igual a 100%. Caso seja possvel
administrar a mesma dose do medicamento pelas vias
oral e intravascular e a BDA calculada for igual a 80%,
isso signifca que o aproveitamento da dose por via oral
no completo, havendo perda de 20% que pode estar
relacionada s caractersticas do frmaco (eliminao pr-
sistmica) ou da formulao.
O clculo da biodisponibilidade realizado utilizando-se
os seguintes parmetros farmacocinticos: a) rea sob a
curva de concentraes do frmaco no lquido biolgico
versus tempo (ASC
0-t
), que expressa a quantidade de
frmaco absorvido, ou seja, a extenso da absoro; b)
concentrao mxima atingida aps administrao da dose
(C
max
), que est relacionada velocidade do processo de
absoro e ocorre no tempo denominado T
max
(Figura 1).
10
Figura 1 - Representao da curva de concentraes plasmticas de frmaco em funo do
tempo aps administrao de uma dose de medicamento por via extravascular.
No caso de um medicamento genrico ou de um
medicamento similar em adequao, o desenvolvimento
da formulao deve estar direcionado obteno de um
Equivalente Farmacutico que, in vivo, no apresente
diferenas signifcativas em relao biodisponibilidade do
medicamento de referncia, o que avaliado empregando-
se um estudo de BDR adequadamente planejado e um
critrio de aceitao aplicvel.
A Bioequivalncia (BE) corresponde a um caso particular
da BDR e envolve critrio de aceitao e anlise
estatstica que possibilitam concluir sobre a comparao
da biodisponibilidade entre dois medicamentos com
risco previamente estabelecido. Dois medicamentos so
considerados bioequivalentes e, portanto, intercambiveis,
quando os Intervalos de Confana (IC) de 90% calculados
para as razes das mdias geomtricas ASC
0-t
(T) / ASC
0-t

(R) e C
max
(T) / C
max
(R) encontram-se entre 80 e 125%,
considerando-se T como o medicamento em teste e R
como o medicamento de referncia, critrio adotado
internacionalmente para a aceitao da bioequivalncia.
FATORES RELACIONADOS
BIODISPONIBILIDADE E DISSOLUO
DE MEDICAMENTOS
De forma geral, os principais fatores que podem
alterar a biodisponibilidade de medicamentos esto
relacionados ao indivduo (idade, sexo, peso corporal,
fatores fsiopatolgicos associados) e s caractersticas
do medicamento (frmaco, formulao e processo de
fabricao). No caso dos fatores ligados ao indivduo, sua
infuncia deve ser minimizada ao mximo, o que ocorre
quando o planejamento do ensaio de biodisponibilidade
bem executado, por meio de critrios de incluso e excluso
bem defnidos, a seleo de um grupo de voluntrios
representativo em relao populao para o estudo e o
emprego de um desenho experimental adequado.
Entre os fatores ligados ao medicamento citam-se: natureza
qumica do frmaco; solubilidade; tamanho de partcula;
polimorfsmo; tipo e quantidade de excipientes; tempo de
mistura e secagem; tcnica de granulao e compresso;
instabilidade do frmaco. Nesse sentido, considera-se
indispensvel a realizao de estudos de pr-formulao
e de aumento de escala para obteno de uma formulao
estvel, a ser administrada por meio de uma forma
farmacutica e uma via adequadas ao objetivo teraputico.
Assim, o profssional envolvido no desenvolvimento
farmacotcnico deve conhecer amplamente as caractersticas
fsico-qumicas, farmacocinticas e farmacodinmicas
do frmaco, selecionando, tambm, os adjuvantes
farmacotcnicos (excipientes) mais adequados, alm das
melhores operaes unitrias envolvidas na fabricao.
Entre as formas farmacuticas mais comumente utilizadas
na teraputica, as formas slidas de uso oral so aquelas que
podem originar problemas potenciais de biodisponibilidade
devido s caractersticas do frmaco, da formulao, dos
processos empregados na fabricao e da via de administrao.
Nesses casos, aps a administrao, o processo de dissoluo
do frmaco fundamental para que ele esteja em soluo
e possa ser absorvido, podendo ser um fator limitante
para a absoro. Entretanto, as suspenses de uso oral ou
intramuscular, tambm, podem ocasionar problemas, uma vez
que o processo de dissoluo do frmaco, tambm, ocorre e
sofre a infuncia dos fatores citados.
PERFIL DE DISSOLUO
O perfl de dissoluo pode ser defnido como um ensaio
in vitro que permite a construo da curva de porcentagem
de frmaco dissolvido em funo do tempo, empregando-
10
se, geralmente, as condies estabelecidas no teste de
dissoluo descrito na monografa do medicamento inscrita
na Farmacopeia Brasileira ou, na sua ausncia, em outros
compndios autorizados pela legislao vigente.
Para realizao do perfl de dissoluo, no caso de
inexistncia de mtodo de dissoluo farmacopeico, a
empresa solicitante do registro deve desenvolver mtodo
analtico adequado ao produto avaliado de acordo com os
parmetros descritos na legislao vigente.
A avaliao do perfl de dissoluo aplicvel nos casos
de desenvolvimento de formulaes, controle de qualidade
lote-a-lote, iseno do estudo de bioequivalncia para
menores dosagens (quando o estudo de bioequivalncia
realizado com a maior dosagem e os perfs de dissoluo
para as dosagens consideradas so semelhantes ao perfl do
biolote, as formulaes dessas dosagens so proporcionais
e a farmacocintica linear dentro do intervalo entre a
maior e a menor dosagem) e alteraes ps-registro.
No caso de medicamentos que sero submetidos ao estudo
de bioequivalncia, a avaliao do perfl de dissoluo
comparativo em relao ao medicamento de referncia
indispensvel para o conhecimento do comportamento
das formulaes. Quando os perfs de dissoluo so
semelhantes, de acordo com os critrios aplicveis, h
uma indicao de que o medicamento teste poder ser
bioequivalente ao medicamento de referncia. Entretanto,
o mtodo de dissoluo deve ser discriminativo, permitindo
detectar alteraes signifcativas nas formulaes e nos
processos de fabricao.
11
11 GUA PARA USO FARMACUTICO
gram negativos, contaminantes crticos que devem ser
removidos adequadamente.
Esses contaminantes podem ser avaliados, principalmente,
pelos ensaios de carbono orgnico total COT (5.2.30) e
de condutividade (5.2.24). A condutividade, medida em
microsiemens/cm, recomendada para avaliar gua com
grande quantidade de ons e o seu recproco, a resistividade,
em megohm.cm, medida quando h baixa concentrao
de ons dissolvidos.
A maioria dos compostos orgnicos pode ser removida
por osmose reversa, entretanto, aqueles com baixo peso
molecular demandam de tcnicas adicionais, como a resina
de troca inica, carvo ativado ou oxidao por ultravioleta
ou oznio, para serem removidos.
Os limites estabelecidos para os parmetros dos
contaminantes qumicos orgnicos e inorgnicos destinam-
se a proteger a sade e evitar que compostos qumicos
crticos possam interferir na fase de pr-tratamento dos
sistemas de gua, considerando que, posteriormente,
podem ser de difcil remoo.
Contaminantes microbiolgicos
So representados principalmente por bactrias e
apresentam um grande desafo qualidade da gua. So
originrios da prpria microbiota da fonte de gua e,
tambm, de alguns equipamentos de purifcao. Podem
surgir, tambm, devido a procedimentos de limpeza
e sanitizao inadequados, que levam formao de
bioflmes e, por consequncia, instalam um ciclo contnuo
de crescimento a partir de compostos orgnicos que, em
ltima anlise, so os prprios nutrientes para os micro-
organismos. So detectados e quantifcados por fltrao
em porosidade de 0,45 m, para cultura posterior do fltro
em meio adequado.
As bactrias podem afetar a qualidade da gua por desativar
reagentes ou alterar substratos por ao enzimtica,
aumentar o contedo em COT, alterar a linha de base (rudo
de fundo) em anlises espectrais e produzir pirognios e
endotoxinas.
A contagem de bactrias reportada em unidades
formadoras de colnias por mililitro (UFC/mL) e, em
geral, aumenta com o tempo de estocagem da gua. Os
contaminantes mais frequentes so bastonetes gram-
negativos, principalmente dos gneros Alcaligenes,
Pseudomonas, Escherichia, Flavobacterium, Klebsiella,
Enterobacter, Aeromonas e Acinectobacter.
O padro microbiolgico especifcado, em paralelo
aos contaminantes qumicos, e consiste na ausncia de
coliformes totais e termotolerantes (micro-organismos
patognicos de origem fecal), alm de enterovrus,
INTRODUO
Nesse captulo so considerados como gua para uso
farmacutico os diversos tipos de gua empregados
na sntese de frmacos; na formulao e produo de
medicamentos; em laboratrios de ensaios; diagnsticos e
demais aplicaes, relacionadas rea da sade, inclusive
como principal componente na limpeza de utenslios,
equipamentos e sistemas.
A estrutura qumica da gua peculiar, com um momento
dipolo e grande facilidade em formar ligaes de
hidrognio. Essas propriedades tornam a gua um excelente
meio para solubilizar, absorver, adsorver ou suspender
diversos compostos, inclusive para carrear contaminantes e
substncias indesejveis, que vo alterar a pureza e efccia
de um produto farmacutico.
Em face de suas caractersticas, os processos de purifcao;
armazenamento e distribuio devem garantir que as
especifcaes farmacopeicas sejam atendidas, mantidas e
controladas adequadamente.
Os requisitos de qualidade da gua dependero de sua
fnalidade e emprego, e a escolha do sistema de purifcao
destina atender ao grau de pureza estabelecido. O usurio
responsvel pela seleo do tipo de gua adequado aos
seus objetivos, bem como pelos controles e verifcaes
necessrios, em intervalos que garantam a manuteno
da qualidade desejada. Ele deve assegurar que o sistema
apresenta desempenho adequado e capacidade para
fornecer gua com o nvel de qualidade estabelecido, para
atender aos parmetros especifcados nas monografas
correspondentes.
Nesse captulo no se esgota o tema e no h o propsito
de substituir a legislao, guias ou monografas ofciais
j existentes sobre gua para fns farmacuticos. Tem-se
como fnalidade apresentar subsdios que possibilitam aos
usurios um melhor entendimento de pontos fundamentais
relativos qualidade da gua no momento da obteno e
durante a distribuio e uso.
O controle da contaminao da gua crucial, uma vez
que a gua tem grande capacidade de agregar compostos
diversos e, tambm, de se contaminar novamente aps a
purifcao. Os contaminantes da gua so representados
por dois grandes grupos: qumico e microbiolgico.
Contaminantes qumicos
Os contaminantes orgnicos e inorgnicos tm origens
diversas: da fonte de alimentao; da extrao de materiais
com os quais ela entra em contato; da absoro de gases da
atmosfera; de resduos poluentes, ou resduos de produtos
utilizados na limpeza e sanitizao de equipamentos,
dentre muitos outros. Incluem-se aqui as endotoxinas
bacterianas, resultantes de micro-organismos aquticos
11
cistos e oocistos de protozorios, como Giardia sp e
Cryptosporidium sp em amostra de 100 mL.
Para atender a esses limites, as estaes de tratamento
utilizam processos de desinfeco com substncias qumicas
contendo cloro ou outros oxidantes, empregadas h dcadas,
e consideradas relativamente seguras para os seres humanos.
Entretanto, esses oxidantes podem reagir com o material
orgnico de origem natural e gerar produtos secundrios
da desinfeco, como trihalometanos, cloraminas ou ainda
deixar resduos dos prprios desinfetantes. Esses produtos
indesejveis requerem ateno especial, por parte dos
legisladores e usurios.
As cloraminas, em particular, podem danifcar
irreversivelmente um equipamento de declorao integrante
de um sistema de purifcao, alm de apresentarem risco de
formao e liberao de amnia.
Alm desses dois grupos fundamentais de contaminantes,
existem os particulados, constitudos por slica, resduos
da tubulao ou colides e que, alm de ser um risco
qualidade da gua purifcada, podem provocar entupimentos e
prejudicar gravemente o processo de purifcao, por reduzir
seu desempenho, ou at mesmo causar danos irreversveis aos
equipamentos. Podem ser detectados por fltrao, combinada
com gravimetria ou microscopia. Mas em geral no
necessrio identifcar o tipo de partcula, apenas remov-la.
Nesse captulo so abordadas algumas consideraes acerca
dos principais sistemas de purifcao normalmente utilizados
na produo da gua para uso farmacutico; suas principais
aplicaes; monitoramento e manuteno. Abrange, tambm,
os parmetros de pureza estabelecidos para aqueles tipos de
gua que no so cobertos pela legislao vigente.
TIPOS DE GUA
Basicamente, h trs tipos de gua para uso farmacutico: a
gua purifcada (AP); a gua para injetveis (API) e a gua
ultrapurifcada (AUP), cujas monografas encontram-se
nessa Farmacopeia. Compndios ofciais de outros pases ou
internacionais especifcam, alm desses, outros tipos de gua,
como: acondicionadas em frascos, estreis ou bacteriostticas,
para irrigao ou inalao. Porm, todas possuem
caractersticas de pureza semelhante aos tipos fundamentais
j mencionados.
Alm disso importante comentar, tambm, sobre a gua
potvel e a gua reagente, que so amplamente utilizadas
e tm aplicao direta em instalaes farmacuticas,
principalmente em procedimentos gerais de limpeza. Assim,
so considerados os cinco tipos de gua a seguir, em relao
s suas caractersticas principais e as sugestes de aplicao.
As monografas especfcas, quando disponveis, detalham os
parmetros de pureza estabelecidos para cada tipo.
gua potvel
Como diretriz fundamental, o ponto de partida para qualquer
processo de purifcao de gua para fns farmacuticos a
gua potvel. Essa obtida por tratamento da gua retirada de
mananciais, por meio de processos adequados para atender s
especifcaes da legislao brasileira relativa aos parmetros
fsicos, qumicos, microbiolgicos e radioativos, para um
determinado padro de potabilidade e, portanto, no possui
monografa especfca nesse compndio.
A gua potvel empregada, normalmente, nas etapas iniciais
de procedimentos de limpeza e como fonte de obteno de
gua de mais alto grau de pureza. Pode ser utilizada, tambm,
na climatizao trmica de alguns aparatos e na sntese de
ingredientes intermedirios.
O controle rigoroso e a manuteno de conformidade dos
parmetros de potabilidade da gua so fundamentais, crticos
e de responsabilidade do usurio do sistema de purifcao
que ser alimentado. O controle deve ser peridico para
garantir que o sistema de purifcao utilizado esteja
apropriado para as condies da fonte de alimentao e
que no houve alterao na qualidade da gua fornecida.
No entanto, a maioria das aplicaes requer tratamento
adicional da gua potvel, seja por destilao, deionizao,
troca inica, osmose reversa, isolados ou acoplados, ou outro
processo adequado para produzir a gua purifcada, livre da
interferncia de contaminantes que possam afetar a qualidade
dos medicamentos produzidos. Outra variante da gua potvel
a gua reagente, descrita a seguir, com carter informativo,
pois no possui monografa especfca.
gua reagente
produzida por um ou mais processos, como destilao
simples, deionizao, fltrao, desclorao ou outro,
adequados s caractersticas especfcas de seu uso.
Geralmente a gua reagente empregada na limpeza de
materiais e de alguns equipamentos e na fase fnal da sntese de
ingredientes ativos e de excipientes. Tambm, tem aplicao
no abastecimento de equipamentos, autoclaves, banho-
maria e em histologia. Devem ser adotadas medidas para
evitar a proliferao microbiana nos pontos de circulao,
distribuio e armazenamento. Os principais parmetros que
caracterizam a gua reagente so: condutividade de 1,0 a 5,0
uS/cm (resistividade > 0,2 MO-cm) e carbono orgnico total
(COT) < 0,20 mg/L.
gua purifcada (AP)
A gua purifcada produzida a partir da gua potvel ou da
gua reagente e deve atender s especifcaes estabelecidas na
respectiva monografa. No contm qualquer outra substncia
adicionada. obtida por uma combinao de sistemas de
purifcao, em uma sequncia lgica, tais como mltipla
destilao; troca inica; osmose reversa; eletrodeionizao;
ultra fltrao, ou outro processo capaz de atender, com a
efcincia desejada, aos limites especifcados para os diversos
contaminantes.
empregada como excipiente na produo de formas
farmacuticas no parenterais e em formulaes magistrais,
desde que no haja nenhuma recomendao de pureza
superior no seu uso ou que no necessite ser apirognica.
Tambm, pode ser utilizada na lavagem de material, preparo
de solues reagentes, meios de cultura, tampes, diluies
diversas, microbiologia em geral, anlises clnicas, tcnicas
11
por Elisa ou radioimunoensaio, aplicaes diversas na maioria
dos laboratrios, principalmente em anlises qualitativas
ou quantitativas menos exigentes (determinaes em
porcentagem). utilizada nos ensaios e determinaes que
indiquem o emprego de gua, a no ser que haja especifcao
em contrrio quanto ao nvel de pureza requerido, como por
exemplo, alguns mtodos analticos instrumentais e anlises
que exijam gua apirognica ou de pureza qumica superior.
Pode ser empregada em cromatografa a lquido de alta
efcincia, quando confrmado que o seu emprego no afeta a
exatido nem a preciso dos resultados.
Dependendo da aplicao, pode ser esterilizada, sem
necessariamente atingir o limite de endotoxinas bacterianas
estabelecido para a gua para Injetveis.
Necessita monitoramento de contagem do total de organismos
aerbicos viveis, na produo e estocagem, visto que
no possui nenhum inibidor de crescimento adicionado.
Minimamente, caracterizada por condutividade de 0,1 a
1,3 uS/cm a 25,0 C (resistividade > 1,0 MO-cm) e COT
< 0,50 mg/L, endotoxinas < 0,25 UI de endotoxina/mL e
contagem total de bactrias < 100 UFC/mL, a no ser que
especifcado de forma diferente. Todo o sistema de obteno;
armazenamento e distribuio deve ser devidamente validado
e monitorado quanto aos parmetros de condutividade e
contagem microbiana.
Ainda que seja especifcada uma contagem microbiana
mxima de 100 UFC/mL na monografa, cada instalao ou
instalao produtiva dever estabelecer o seu limite de alerta
ou de ao, caso as caractersticas especfcas de utilizao
sejam mais restritivas, e defnir limites apropriados.
gua ultrapurifcada (AUP)
A gua ultrapurifcada possui baixa concentrao inica, baixa
carga microbiana e baixo nvel de COT. Essa modalidade de
gua requerida em aplicaes mais exigentes, principalmente
em laboratrios de ensaios, para diluio de substncias
de referncia, em controle de qualidade e na limpeza fnal
de equipamentos e utenslios utilizados em processos que
entrem em contato direto com a amostra que requeira gua
com esse nvel de pureza. ideal para mtodos de anlise que
exigem mnima interferncia e mxima preciso e exatido.
A utilizao de gua ultrapurifcada em anlises quantitativas
de baixos teores de analito essencial para obteno de
resultados analticos precisos. Outros exemplos de aplicao
da gua ultrapurifcada so: anlises de resduos, dentre eles
os traos de elementos minerais, endotoxinas, preparaes
de calibradores, controles, substncia qumica de referncia,
espectrometria de absoro atmica em geral, ICP/IOS, ICP/
MS, espectrometria de massa, procedimentos enzimticos,
cromatografa a gs, cromatografa a lquido de alta efcincia
(determinao de resduos em ppm ou ppb), mtodos em
biologia molecular e com cultivo celular etc. Deve ser
utilizada no momento em que produzida, ou no mesmo dia
da coleta.
O laboratrio deve utilizar o mesmo tipo de gua requerida
para a leitura fnal da anlise na preparao das amostras, na
obteno da curva padro, de controles, preparo de solues,
brancos, lavagem fnal do material e em toda a vidraria que
estar em contato direto com a amostra, sempre que for
apropriado.
A gua ultrapurifcada caracteriza-se por condutividade de
0,055 a 0,1 a uS/cm a 25,0
o
C 0,5
o
C (resistividade > 18,0
MO-cm), COT < 0,05 mg/L (alguns casos < 0,03 mg/L),
endotoxinas < 0,03 UI de endotoxina/mL e contagem total de
bactrias < 1 UFC/100 mL.
gua para Injetveis (API)
gua para Injetveis utilizada como excipiente na preparao
de produtos farmacuticos parenterais de pequeno e grande
volume, na fabricao de princpios ativos de uso parenteral,
de produtos estreis, demais produtos que requeiram o
controle de endotoxinas e no so submetidos etapa posterior
de remoo, bem como na limpeza e preparao de processos,
equipamentos e componentes que entram em contato com as
formas parenterais na produo de frmacos. Essa modalidade
engloba, tambm, a gua esterilizada para injeo, utilizada
na administrao parenteral e a gua estril para injeo, que
embalada em frasco hermtico e esterilizada por tratamento
de calor.
O processo de purifcao de primeira escolha a destilao,
em equipamento cujas paredes internas sejam fabricadas em
metal apropriado, como o ao inox AISI 316L, vidro neutro
ou quartzo Alternativamente, a API, tambm, pode ser obtida
por processo equivalente ou superior destilao para a
remoo de contaminantes qumicos e micro-organismos,
desde que seja validado e monitorado quanto aos parmetros
estabelecidos. A gua de alimentao deve ser, no mnimo,
potvel e, em geral, necessitar ser pr-tratada para alimentar
os equipamentos. O processo assim especifcado em razo
da robustez que tais equipamentos apresentam quanto
operao e ao desempenho.
O sistema de obteno, distribuio e armazenamento da
gua deve ser validado e apropriado, de forma a impedir a
contaminao microbiana e a formao de endotoxinas
bacterianas. Deve atender aos requisitos estabelecidos na
monografa especfca. O controle ser mais rigoroso quando a
aplicao for para injetveis, que no permite a ocorrncia de
contaminao microbiana, nem de endotoxinas. A adio de
um ou mais agentes antimicrobianos gua purifcada estril
origina a gua bacteriosttica estril, que empregada como
diluente de algumas preparaes parenterais, embaladas em
doses individuais.
Outra variedade de gua a gua de hemodilise, que
tratada para obter a mxima reduo de contaminantes
qumicos e microbiolgicos. Possui regulamento prprio,
com especifcaes de qualidade e periodicidade especfcas
para o controle, e no abrangida nessa farmacopeia.
A gua para injetveis deve atender aos ensaios fsico
qumicos preconizados para a gua purifcada, alm dos
testes de contagem total de bactrias < 10 UFC/ 100 mL,
esterilidade, particulados e de endotoxinas bacterianas, cujo
valor mximo de 0,25 UI de endotoxina/mL.
Alguns parmetros de qualidade e sugestes de aplicaes
so registrados, na Tabela 1, para cada tipo de gua para uso
farmacutico
11
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11
SISTEMAS DE PURIFICAO DE GUA
TECNOLOGIAS DE PURIFICAO
Os projetos, instalaes e operao de sistemas para
produo de gua purifcada, gua para injetveis e a
gua ultrapurifcada possuem componentes, controles e
procedimentos similares. A diferena reside na presena do
parmetro endotoxinas bacterianas na gua para injetveis
e nos seus mtodos de preparao, especifcamente no
ltimo estgio. Essas similaridades de parmetros de
qualidade possibilitam estabelecer uma base comum para
o projeto de sistemas destinados a obteno de AP, API ou
AUP, sendo o ponto diferencial crtico, o grau de controle
do sistema e os estgios fnais de purifcao necessrios
para remover bactrias, endotoxinas bacterianas e reduzir
a condutividade.
Os processos de obteno empregam operaes unitrias
sequenciais os estgios de purifcao que esto voltados
remoo de determinados contaminantes e proteo
de estgios de purifcao subsequentes. Note-se que a
operao unitria fnal para obteno de gua para injetveis
limitada destilao ou outro processo equivalente ou
superior, na remoo de contaminantes qumicos, bem
como micro-organismos e seus componentes. A tecnologia
de destilao consagrada pelo seu longo histrico de
confabilidade e pode ser validada para produo de gua
para injetveis. Porm, outras tecnologias ou combinao
de tecnologias podem igualmente ser efetivas e validadas
para essa fnalidade. A ultrafltrao colocada em uma
sequncia aps outras tecnologias de purifcao de
contaminantes qumicos pode ser adequada para a produo
de gua para injetveis se demonstrar a mesma efccia e
confabilidade da destilao, na validao. Atualmente,
com a disponibilidade de novos materiais para tecnologias
como osmose reversa e ultrafltrao, o que permite operar
e sanitizar em temperatura mais elevada, para a reduo
microbiana, surgem novas e promissoras aplicaes
validveis para produzir a gua para injetveis.
O projeto de instalao de um sistema de purifcao de gua
deve levar em conta a qualidade da gua de fornecimento
e da gua desejada ao fnal, a vazo necessria, a distncia
entre o sistema de produo e os pontos de uso, o leiaute
(layout) da tubulao e conexes, o material empregado,
facilidades de assistncia tcnica e manuteno e os
instrumentos adequados para o monitoramento.
As tecnologias de purifcao aqui descritas destinam-
se remoo de contaminantes nos diversos estgios da
sequncia de purifcao. A escolha e a ordem em que so
aplicadas dependero principalmente da qualidade da gua
potvel de entrada, que determinar quais estgios sero
necessrios efetivamente. As principais tecnologias so
apresentadas a seguir em uma ordem sequencial lgica,
porm nem todas so necessariamente obrigatrias e so
utilizadas conforme a qualidade da gua de entrada e o tipo
de gua que se busca obter.
Pr-fltrao
Tambm, conhecida como fltrao de profundidade ou
fltrao inicial, destina-se a remover contaminantes
particulados na faixa de tamanho entre 5 e 10 m,
essencialmente para proteger as tecnologias subsequentes,
utilizando fltros de areia ou combinao de fltros.
Adsoro por carvo vegetal ativado
Essa tecnologia emprega a capacidade de adsoro do
carvo vegetal ativado em contato com compostos
orgnicos ou contaminantes, como as cloraminas. Alm
disso, remove agentes oxidantes por reduo qumica, em
especial o cloro livre, que afeta outras tecnologias baseadas
em membrana, como a osmose reversa ou a ultrafltrao.
A retirada de agentes sanitizantes propicia o crescimento
bacteriano e a formao de bioflme, o que implica na
necessidade de sanitizao do prprio carvo ativado, com
vapor direto ou gua quente, por exemplo, e do controle de
partculas e contagem microbiana de seu efuente.
Tratamento com aditivos qumicos
O uso de aditivos qumicos refere-se queles que se
destinam a ajustar o pH ou a remover carbonatos e amnia,
para a proteo de outras tecnologias, entre elas a osmose
reversa.
Como aditivos qumicos podem ser empregados: o oznio,
comumente usado no controle de micro-organismos e o
metabissulfto, aplicado como agente redutor para cloro
livre, em substituio ao carvo vegetal ativado.
Os aditivos qumicos so, necessariamente, removidos em
algum estgio posterior de purifcao e no podem deixar
resduo na gua fnal.
Tratamento com abrandadores
Nos casos em que a gua de alimentao dura, torna-se
necessrio usar os abrandadores. Essa tecnologia emprega
resinas regenerveis de troca inica, que capturam os
ons clcio e magnsio, e liberam ons sdio na gua. O
abrandamento utilizado na proteo de tecnologias
sensveis incrustao, como a osmose reversa.
Aqui, tambm, existe a preocupao com a formao de
bioflme e necessrio controlar a contagem microbiana,
com regenerao frequente, recirculao ou outras formas
de reduo de contagem microbiana.
Deionizao e eletrodeionizao contnua
A deionizao e a eletrodeionizao contnua so
tecnologias efcazes para a remoo de sais inorgnicos
dissolvidos. Os sistemas de deionizao, tambm,
conhecidos como deionizao convencional, produzem
gua purifcada de uso rotineiro, por meio de resinas de
troca inica especfcas para ctions ou para nions. So
polmeros orgnicos, geralmente sulfonados, na forma de
pequenas partculas. As resinas catinicas capturam os ons
liberando o on H
+
na gua e as aninicas liberam OH
-
.

So regenerveis com cidos e bases, respectivamente.
Esse processo isolado no produz gua de alta pureza, por
11
haver fuga de pequenos fragmentos da resina, facilidade
de crescimento microbiano e por haver baixa remoo de
orgnicos.
Os sistemas de eletrodeionizao contnua combinam
resinas catinicas e aninicas com membranas
semipermeveis e a aplicao de um campo eltrico,
promovendo assim a remoo de ons de forma contnua,
isso , sem necessidade de parada para regenerao.
Em ambos os casos necessrio ter um controle sobre
a gerao de partculas decorrente das regeneraes
sucessivas, alm de micro-organismos. Isso pode ser
realizado, controlando-se as regeneraes, no caso da
deionizao, utilizando-se recirculao da gua e aplicando-
se radiao UV para o controle de micro-organismos na
sada, cuja efccia precisa ser comprovada.
Osmose reversa
A osmose reversa uma tecnologia de purifcao baseada
em membranas semi permeveis e com propriedades
especiais de remoo de ons; micro-organismos e
endotoxinas bacterianas. Remove 90 a 99% da maioria
dos contaminantes. Entretanto, diversos fatores,
como pH; presso diferencial ao longo da membrana;
temperatura; tipo do polmero da membrana e a prpria
construo dos cartuchos de osmose reversa podem afetar
signifcativamente essa separao.
As membranas de osmose reversa devem ser devidamente
controladas quanto formao de incrustaes provenientes
de sais de clcio, magnsio e outros, e de bioflme, fonte
crtica de contaminao microbiana e de endotoxinas. Por
isso imprescindvel instalar um sistema de pr-tratamento
antes da osmose reversa, que remova partculas e agentes
oxidantes, e, em paralelo, deve fazer-se, periodicamente,
a sanitizao do sistema. Essa prtica ajuda a aumentar
a vida til das membranas e reduz a frequncia de sua
regenerao.
Existem, tambm, os sistemas de osmose reversa de
duplo passo, em que a gua purifcada pelo primeiro
estgio alimenta o segundo estgio, incrementando e
complementando a purifcao.
Ultrafltrao
Sistemas de ultrafltrao so frequentemente utilizados
em sistemas de gua para uso farmacutico, para a
remoo de endotoxinas. A ultrafltrao realizada
utilizando-se uma membrana especial com a propriedade
de reter molculas conforme o seu peso molecular e
estereoqumica. Denomina-se de Corte Nominal de Peso
Molecular cut off a faixa utilizada para a separao das
partculas, caracterizado pelo tamanho do peso molecular.
Na remoo de endotoxinas so utilizados fltros na faixa
de 10 000 Da, que retm molculas com massa molecular,
maior ou igual a 10 000 Da.
Essa tecnologia pode ser usada em uma etapa fnal
ou intermediria do sistema de purifcao, desde que
validada, e, da mesma forma que a osmose reversa, requer
um pr-tratamento, um controle adequado das condies
operacionais e procedimentos apropriados de limpeza e
sanitizao, para manter a qualidade da gua conforme o
estabelecido.
Filtrao com carga eletrosttica
Esse tipo de fltrao emprega cargas positivas na
superfcie das membranas e destina-se a reduzir os nveis
de endotoxinas que possuem natureza eltrica negativa.
Apresentam uma capacidade marginal de remoo
de micro-organismos, porm sua maior efcincia
devido remoo de endotoxinas. Apresenta uma
limitao importante: quando as cargas esto totalmente
neutralizadas, por saturao pela captura das endotoxinas,
a remoo se paralisa. Por essa razo, fltros com carga
eletrosttica so extremamente difceis de validar, dada
essa imprevisibilidade, quanto ao momento em que
efetivamente no mais retm esses contaminantes.
Microfltrao reteno de micro-organismos
Essa tecnologia utiliza membranas microporosas, com
uma especifcao de tamanho de poro de 0,2, ou 0,22
m. Devem ser validadas quanto reteno, por meio de
um teste bacteriolgico, que determina o valor da reduo
logartmica dos micro-organismos nas membranas. O
modelo usado atualmente emprega uma suspenso de
Brevundimonas diminuta a 10
7
UFC/cm
2
de rea fltrante, e
testa a esterilidade do fltrado. Ainda que a membrana seja
especifcada como 0,2 ou 0,22 m de tamanho de poro,
no necessariamente ser esterilizante, se no produzir um
fltrado estril por meio desse teste, ou seja, um valor de
reduo logartmica igual a 7. Caso a reduo logartmica
obtida no seja da ordem de sete, a membrana pode ser
utilizada para reduzir a fora microbiana, porm no serve
para esterilizar.
A microfltrao aplicada, igualmente, na fltrao de
gases, ou ventilao de tanques de armazenamento, para
evitar contaminao da gua neles contida. Nesses casos,
utilizam-se membranas hidrofbicas, para que o fltro opere
sem acmulo de gua condensada, a partir da umidade do
prprio ar.
Radiao ultravioleta (UV)
A radiao UV utilizada em sistemas de purifcao de
gua em dois comprimentos de onda: 185 nm + 254 nm,
que promovem dois efeitos:
185 nm + 254 nm Oxidao de compostos orgnicos e
consequente reduo de sua concentrao, para atender
aos limites da AP, AUP e API;
254 nm Ao germicida nos diversos pontos da
sequncia de purifcao, onde necessrio reduzir a
contagem microbiana.
Para a oxidao de orgnicos a gua deve estar no estgio
fnal da purifcao, e essa remoo ser mais efetiva
quanto menor a carga de contaminantes. Outra limitao
a presena de partculas, que se podem depositar na
11
superfcie da lmpada, diminuindo a intensidade da
radiao, e prejudicar a efcincia do mtodo. Deve-se
considerar ainda a profundidade / espessura do leito de
gua, o fuxo de gua no local da radiao e a potncia e
tempo de uso da fonte de radiao.
Destilao
Em instalaes industriais pode haver destiladores simples,
de mltiplos efeitos e os de compresso de vapor, que so
usados, em geral, para sistemas de produo de grandes
volumes. A gua de alimentao para esses equipamentos
requer controles diferentes daqueles usados em osmose
reversa. Nesse caso, a concentrao de silicatos crtica,
como em qualquer sistema de gerao de vapor. Outro
aspecto importante a possibilidade de carreamento de
compostos volteis no condensado. Isso especialmente
importante no que se refere a impurezas orgnicas, como
trihalometanos e gases dissolvidos na gua, como dixido
de carbono e amnia. Assim, o controle da gua potvel de
entrada, conforme mencionado sobre a gua de alimentao
para sistemas de purifcao, fundamental.
DISTRIBUIO, SANITIZAO,
ARMAZENAMENTO E VALIDAO
Distribuio
O desenho do sistema de distribuio deve levar em conta
a recirculao constante da gua purifcada e a manuteno
da temperatura da gua contida no tanque. Caso necessrio,
dever contar com um trocador de calor para fornecer gua
mais fria aos pontos de uso.
Tubulaes, vlvulas, instrumentos e outros dispositivos
devem ter construo e acabamento sanitrio, de forma
a no contriburem para que ocorra a contaminao
microbiana e ser sanitizados.
No devem ser utilizados fltros de reteno microbiolgica
na sada, ou no retorno dos sistemas de distribuio, pois
so repositrios de micro-organismos retidos e, portanto,
uma fonte crtica para a formao de endotoxinas.
Os pontos de uso devem ser projetados de forma a
evitar volumes mortos e possibilitar que a gua recircule
totalmente neles quando estiverem fechados.
Sanitizao
Diversos so os mtodos de sanitizao dos sistemas de
produo, armazenamento ou distribuio
O material de construo do sistema deve ser resistente aos
agentes empregados e a temperatura utilizada no processo
crtica. comum utilizar temperaturas de 80 C ou de 65 C,
com circulao contnua da gua. No entanto, para impedir
a formao de bioflmes normalmente empregada uma
combinao de calor e agentes qumicos na sanitizao. O
procedimento de sanitizao deve ser devidamente validado.
Como agentes qumicos, geralmente so usados oxidantes,
como os compostos halogenados, perxido de hidrognio,
oznio ou uma combinao desses. A frequncia da
sanitizao determinada pelo histrico dos resultados do
monitoramento e das curvas de tendncia, de forma que o
sistema funcione sem exceder o limite de alerta.
Armazenamento
As condies de estocagem devem ser adequadas
qualidade da gua. A gua ultrapurifcada no deve ser
armazenada por perodo superior a 24 horas.
A diretriz fundamental para o armazenamento da gua
purifcada, da gua ultrapurifcada, ou da gua para
injetveis levar em conta que, quanto maior o grau de
purifcao da gua, mais rapidamente ela tende a se
recontaminar.
Sendo assim, a gua deve ser mantida em recirculao
constante, por meio de seu sistema de distribuio, sempre
que aplicvel. As primeiras pores de gua produzida por
um sistema de purifcao que tenha fcado inativo por mais
de quatro horas devem ser desprezadas, proporcionalmente
ao volume morto do recipiente. Essas variveis devem ser
validadas, para as condies especfcas de cada sistema,
bem como, estabelecidos os parmetros a serem avaliados
na validao.
O reservatrio utilizado para a sua manuteno deve ser
apropriado aos fns a que se destina, composto por material
inerte, limpo e no servir de fonte de contaminao ao
contedo. O material de construo deve apresentar
caractersticas e rugosidade apropriadas para difcultar a
aderncia de resduos, a formao de bioflme e corroso
pelos agentes sanitizantes. O ao inoxidvel 316L
eletropolido, com rugosidade menor que 0,5 microRA,
a escolha mais frequente para atender a essas exigncias.
O reservatrio deve estar protegido de fontes de luz e calor
imprprios e a geometria deve permitir seu esgotamento
total pelo fundo, sem volumes mortos.
Procedimentos adequados devem ser adotados para
evitar a contaminao por particulados, orgnicos ou
micro-organismos. Deve possuir um fltro de respiro /
ventilao para evitar que haja contaminao do volume
do tanque pela admisso de ar / umidade, contaminados e
evitar uma recontaminao por essa via.
Em particular, mas no exclusivamente, reservatrios de
gua para injetveis devem ser encamisados, para manter
a gua circulante em temperatura superior a 80 C, que
restringe signifcativamente o crescimento bacteriano.
Validao
O propsito fundamental da validao assegurar a
confabilidade de um sistema de purifcao de gua,
envolvendo sua obteno, armazenamento, distribuio e
qualidade no ponto de uso.
A validao inclui a qualifcao do projeto (QP); da
instalao (QI); da operao (QO) e do desempenho (QD).
11
O plano de validao para um sistema de gua envolve as
seguintes etapas:
a) conhecer o padro de qualidade da fonte de alimentao;
b) estabelecer o padro de qualidade da gua purifcada;
c) defnir as tecnologias de purifcao e sua sequncia, a
partir da qualidade da gua de entrada;
d) selecionar os materiais de construo dos sistemas de
produo, armazenamento, distribuio e monitoramento
dos pontos de uso;
e) desenvolver os protocolos de qualifcao de projeto,
instalao, operao e desempenho;
f) estabelecer os parmetros crticos, nveis de alerta e de
ao e a periodicidade de sanitizao e de monitoramento;
g) estabelecer um plano de manuteno da validao,
que incluir mecanismos para o controle de mudanas
nos sistemas de gua e proporcionar subsdios para um
programa de manuteno preventiva.
Os protocolos de qualifcao devem estar previamente
aprovados antes de sua execuo.
MONITORAMENTO DA QUALIDADE DA GUA
O processo empregado na produo de gua para uso
farmacutico deve ser validado e, sistematicamente, os
parmetros estabelecidos na legislao e nas monografas
especfcas de cada tipo de gua devem ser verifcados.
O monitoramento da qualidade da gua deve abranger todos
os pontos crticos e representativos do sistema, de acordo
com o planejamento estabelecido, de forma consistente e
contnua.
Assim, devem ser estabelecidos procedimentos operacionais
e de sanitizao, um programa de monitoramento abrangente,
com manuteno preventiva e um sistema de controle de
mudanas, que determine criteriosamente se o sistema
necessitar ser revalidado aps qualquer modifcao.
As questes sazonais que podem afetar a qualidade da
gua da fonte de fornecimento devem ser consideradas na
elaborao do plano. A frequncia de coleta das amostras
defnida na validao do sistema, bem como os ensaios
necessrios para garantir a manuteno da qualidade da
gua requerida. Qualquer alterao no plano original deve
ser re avaliada.
Os equipamentos e aparatos utilizados nas verifcaes
devem ser capazes de fornecer a leitura na faixa requerida
para a pureza estabelecida. Os equipamentos utilizados
devem estar devidamente calibrados. As verifcaes
realizadas devem ser registradas em formulrio prprio,
em que conste, pelo menos, o(s) parmetro(s) medido(s),
a data da medio, o valor obtido, a faixa de aceitao
e o responsvel pela leitura. O pessoal que realiza essa
tarefa deve conhecer o plano de amostragem e os mtodos
utilizados, bem como os limites de alerta e de ao
estabelecidos. Caso o usurio terceirize esse controle, deve
garantir que o terceirizado cumpra com os requisitos e
procedimentos defnidos.
Os dados obtidos so comparados com as especifcaes
tpicas e os limites de alerta e de ao. Esses so
estabelecidos pelo usurio, que conhece tanto o histrico do
sistema de purifcao e distribuio, como as exigncias
de qualidade para uma determinada aplicao, e baseado
na validao.
Na maioria das aplicaes, o monitoramento da gua de
uso farmacutico se baseia no controle microbiolgico e
nos parmetros que assegurem a manuteno da qualidade
da gua desejada. Em geral, no necessrio identifcar os
micro-organismos presentes, mas sim, proceder contagem
total de bactrias, por meio de mtodo adequado para abranger
uma ampla gama de organismos. Amostras contendo agentes
sanitizantes devem ser neutralizadas antes de proceder
anlise. Os ensaios microbiolgicos devem ser realizados aps
curto intervalo de tempo da coleta da amostra, ou essa dever
ser refrigerada adequadamente e por tempo determinado, para
preservar as caractersticas originais.
O monitoramento fsico-qumico acompanha, principalmente,
a condutividade e o carbono orgnico total, que tambm
podem ser medidos em linha. Esses ensaios abrangem uma
ampla gama de contaminantes inorgnicos. Caso a amostra
no seja analisada em seguida coleta, deve ser preservada
e armazenada em condies que garantam a sua integridade
e conservao e por perodo adequado. Dependendo
da aplicao requerida os parmetros crticos a serem
monitorados podem variar.
O usurio deve defnir os limites de alerta e de ao, de
forma a evitar a utilizao do produto com especifcao
de qualidade inferior requerida para uma dada aplicao.
O limite de alerta indica um aviso de desvio da qualidade
e no necessariamente requer uma medida corretiva. Pode
ser estabelecido com base numa anlise estatstica do
histrico de tendncias, utilizando dois desvios-padro,
por exemplo, ou cerca de 70% do limite de ao, ou a 50%
da contagem do nmero de unidades viveis, o que for
menor. O limite de ao indica que o desvio da qualidade
excedeu os parmetros tolerveis e requer interrupo da
atividade para a correo.
a
12
12 SUBSTNCIAS QUMICAS DE
REFERNCIA
De acordo com defnio da OMS, padres de referncia
farmacopeicos (PRef) so produtos de uniformidade
reconhecida, destinados ao uso em ensaios onde uma ou
mais de suas propriedades ser(o) comparada(s) com
a(s) da substncia em exame. Possuem um grau de pureza
adequado ao uso ao qual se destinam.
O PRef estabelecido e distribudo por autoridades
farmacopeicas, cujo valor atribudo a uma ou mais de suas
propriedades aceito sem necessitar comparao com
outro padro, destinado ao uso em ensaios especfcos
descritos nas monografas farmacopeicas. Incluem
substncias qumicas de referncia, produtos biolgicos,
extratos e ps vegetais, radiofrmacos, entre outros. A
expresso relacionada mais usada : Substncia Qumica de
Referncia Farmacopeica. estabelecida e distribuda por
autoridades farmacopeicas, e amplamente reconhecida
como tendo grau de pureza apropriado, dentro de um
contexto especfco e cujo valor, quando utilizado como
referncia analtica, aceito sem requerer comparao com
outra substncia qumica.
SUBSTNCIA QUMICA DE REFERNCIA DA
FARMACOPEIA BRASILEIRA (SQR-FB)
estabelecida e distribuda pela Direo da Farmacopeia
Brasileira, seguindo os princpios da OMS, e ofcializada
pela Anvisa, sendo o seu uso obrigatrio em todo territrio
nacional. Na ausncia de uma SQR-FB permitido o uso de
SQR estabelecida por outras farmacopeias reconhecidas,
conforme legislao vigente.
SUBSTNCIA QUMICA DE TRABALHO
estabelecida por comparao com uma SQR
Farmacopeica, por meio de ensaios farmacopeicos,
ou devidamente validados, e registrados pelo prprio
laboratrio que ir utiliz-la. Nessa situao, devero ser
mantidos os registros analticos e realizados controles
peridicos, empregando-se uma SQR Farmacopeica.
SUBSTNCIA QUMICA CARACTERIZADA
SQR utilizada na inexistncia de uma SQR Farmacopeica.
Essa SQR deve ser caracterizada por meio de ensaios
adequados e os valores obtidos devem ser devidamente
documentados.
ASPECTOS GERAIS DAS SUBSTNCIAS QUMICAS
DE REFERNCIA DA FARMACOPEIA BRASILEIRA
(SQRFB)
As Substncias Qumicas de Referncia da Farmacopeia
Brasileira (SQRFB) so padres de referencia
farmacopeicos, cuja produo est sob a coordenao do
Comit Tcnico Temtico de Material de Referncia (CTT
MR) da Farmacopeia Brasileira, em consonncia com as
diretrizes da Comisso da Farmacopeia Brasileira.
As SQR-FB so estabelecidas e monitoradas de acordo
com os princpios da OMS, com a colaborao de
laboratrios pblicos e privados, por meio de estudos
interlaboratoriais que utilizam um protocolo analtico
previamente desenvolvido e validado, originando um
produto de elevada qualidade, cujo valor atribudo a uma
ou mais de suas propriedades fsicas e/ou qumicas no
necessita comparao com outra SQR.
Mtodos analticos utilizam, frequentemente, equipamentos
sofsticados para facilitar a preciso e rapidez do
procedimento utilizado, baseando-se em medidas relativas,
que necessitam de padres de referncia para obteno dos
resultados.
As SQR-FB so desenvolvidas para auxiliar na execuo
de ensaios descritos nas monografas da FB. Seu grau
de pureza pode variar de acordo com o ensaio ao qual
se destina. O valor declarado especfco para o ensaio
descrito na FB.
As SQR-FB devem ser armazenadas e manipuladas
adequadamente a fm de se obter resultados confveis
quando utilizadas. Devem ser armazenadas nos frascos
originais, fechados e em condies de temperatura e
umidade de acordo com as especifcaes constantes no
rtulo e/ou certifcado de anlise.
As quantidades fornecidas em cada frasco de SQR-FB
so adequadas para um determinado nmero de anlises,
a fm de evitar problemas com a exposio excessiva do
material. Contudo, as quantidades e o seu valor destinam
estimular o uso direto de SQR-FB, sem a necessidade do
estabelecimento de padres derivados.
Quando indicada a secagem do material antes do uso, esse
procedimento nunca ser realizado em sua embalagem
original, mas sim transferindo parte do material para
outro recipiente. Aps o uso, o material dessecado no
deve ser retornado ao frasco original, evitando possveis
contaminaes.
A validade de determinado lote deve ser acompanhada
pelo usurio atravs do stio da Farmacopeia Brasileira na
internet, que informar o lote vigente, a retirada de lotes
em uso e a disponibilidade de novos lotes. Nesse stio
constam, tambm, as informaes para a aquisio dos
padres de referncia farmacopeicos.
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13
13 SUBSTNCIAS CORANTES
Substncia corante qualquer composto orgnico ou
inorgnico, natural ou sinttico que, independente de
possuir ou no atividade farmacolgica, adicionado s
formas farmacuticas com a fnalidade nica de cor-las ou
de alterar a sua cor original.
As substncias corantes utilizadas so de dois tipos:
corantes;
pigmentos.
A diferena bsica entre pigmentos e corantes est no
tamanho de partcula e na solubilidade no meio em que
inserido. Os pigmentos possuem, no geral, tamanho de
partcula maior e so insolveis em gua, enquanto que
corantes so molculas solveis em gua. Pode afrmar-
se que os corantes so empregados em solues e os
pigmentos em suspenses. Alm disso, os pigmentos tm
maior estabilidade qumica e trmica que os corantes.
A solubilidade do corante pode ser determinada pela
presena de certos grupos qumicos na estrutura do
composto, os quais podem ocasionar as diferenciaes
entre pigmentos e corantes.
Os corantes utilizados so, na sua maioria, de origem
sinttica e podem ser, de modo geral, classifcados em um
dos sete grupos qumicos, descritos a seguir:
Grupo Indigoide;
Grupo Xantina;
Grupo Azo:
Grupo Nitro;
Grupo Trifenilmetano;
Grupo Quinolona;
Grupo Antraquinona;
Os corantes tambm podem ser subdivididos em corantes
azoicos (os que contm grupamentos -N=N-) e no
azoicos (que pertencem a uma ampla variedade de classes
qumicas). A maioria dos corantes de uso mais frequente
do tipo no azoico, sendo a eritrosina, o ndigo / carmim e o
amarelo de quinolina os trs mais amplamente conhecidos.
Dos pigmentos, dois so os tipos utilizados: xido de
ferro (preto, vermelho e amarelo), e dixido de titnio,
que branco e tambm empregado no revestimento
de comprimidos, para prevenir a fotodegradao de
componentes da formulao sensveis luz, ou ainda, para
obter invlucros de cpsulas opacos.
Os corantes podem ser classifcados, de acordo com o
Food and Drug Administration (FDA) em:
corantes designados como FD&C podem ser
empregados em alimentos, medicamentos e cosmticos;
corantes designados como D&C so autorizados para
uso em medicamentos e cosmticos;
corantes D&C de uso externo apresentam emprego
restrito aos medicamentos e cosmticos aplicados
externamente;
Aos medicamentos destinados aplicao por via
oral, retal, vaginal ou cutnea podem ser adicionadas
substncias corantes constantes da relao a seguir
(Tabela 1) ou da mistura destas substncias nos casos
e em quantidades compatveis com as boas prticas
de fabricao farmacutica. As substncias corantes
empregadas devem satisfazer s exigncias descritas nas
respectivas monografas.
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a
14
14 REAGENTES
14.1 INDICADORES E
SOLUES INDICADORAS
Indicadores so corantes empregados para indicar o ponto
fnal de uma anlise volumtrica ou para avaliar o pH de
solues no coradas. Os indicadores de uso mais frequente
esto listados na Tabela 1, em ordem crescente do limite
inferior de sua faixa transio de pH. Em seguida, esto
descritos os indicadores e as solues indicadoras (SI)
utilizadas na Farmacopeia.
Tabela 1 Indicadores de uso mais frequente.
Indicador
Faixa de
transio
Mudana de cor
Verde de malaquita 0,0 a 2,0 Amarelo a verde
Vermelho de cresol 0,2 a 1,8 Vermelho a amarelo
Prpura de
metacresol
0,5 a 2,5 Vermelho a amarelo
Tropeolina OO 1,0 a 2,8 Vermelho a amarelo
Azul de timol 1,2 a 2,8 Vermelho a amarelo
Amarelo naftol 2,0 a 3,2 Incolor a amarelo
Amarelo de dimetila 2,8 a 4,6 Vermelho a amarelo
Azul de bromofenol 2,8 a 4,6
Amarelo a
azul-violeta
Alaranjado
de metila
2,9 a 4,0 Vermelho a amarelo
Vermelho de metila 3,0 a 4,4 Vermelho a amarelo
Vermelho de Congo 3,0 a 5,0 Azul a vermelho
Verde de
bromocresol
3,6 a 5,2 Amarelo a azul
Resazurina 5,0 a 7,0 Rsea a violeta
Tornassol 5,0 a 8,0 Vermelho a azul
Prpura de
bromocresol
5,2 a 6,8
Amarelo a
azul-violeta
Azul de bromotimol 6,0 a 7,6 Amarelo a azul
Vermelho de fenol 6,8 a 8,4 Amarelo a vermelho
Vermelho de cresol 7,2 a 8,8 Amarelo a vermelho
Prpura de
metacresol
7,5 a 9,2 Amarelo a violeta
Azul de timol 8,0 a 9,6 Amarelo a azul
Fenolftalena 8,3 a 10,0
Incolor a violeta
intenso
Azul do Nilo A 9,0 a 13,0 Azul a vermelha
Timolftalena 9,3 a 10,5 Incolor a azul
Amarelo
alizarina GG
10,0 a 12,0
Amarelo plido
a marrom
Treopeolina O 11,0 a 12,7 Amarelo a laranja
Amarelo titan 12,0 a 13,0 Amarelo a vermelho
Alaranjado de metila (CI 13025)
CAS [547-58-0]
Frmula e massa molecular C
14
H
14
N
3
NaO
3
S 327,34
Descrio P cristalino amarelo-alaranjado.
Solubilidade Pouco solvel em gua e praticamente
insolvel em etanol a 96% (v/v).
Alaranjado de metila SI
Preparao Dissolver 0,1 g em 100 mL de etanol a 20% (v/v).
Faixa de pH 2,9 - 4,0
Mudana de cor - Fornece colorao vermelha em meio
moderadamente cido e colorao amarela em meio
fracamente cido e alcalino.
Ensaio de sensibilidade - A mistura de 0,1 mL de soluo
indicadora com 100 mL de gua isenta de dixido de
carbono apresenta cor amarela. So necessrios no mais
que 0,1 mL de cido clordrico 0,1 M para determinar a
mudana de cor para vermelho.
Alaranjado de metila, soluo
Preparao Dissolver 20 mg de alaranjado de metila e 0,1
g de verde de bromocresol em 1 mL de hidrxido de sdio
0,2 M e completar com gua at o volume de 100 mL.
Mudana de cor Fornece colorao laranja em solues
moderadamente cidas e colorao verde-oliva em
solues fracamente cidas e alcalinas.
Alaranjado de xilenol
CAS [3618-43-7]
31
H
28
N
2
Na
4
O
13
S 760,59
Descrio P cristalino marrom-avermelhado.
Solubilidade Solvel em gua e etanol.
Alaranjado de xilenol SI
Preparao Dissolver 0,1 g em 100 mL de etanol.
Mudana de cor Em meio cido apresenta cor amarela-
plida. Reagindo com certos metais (tais como chumbo
e zinco), forma complexo de cor vermelha intensa. Em
presena de excesso de edetato dissdico adquire cor
amarela.
Alizarina
CAS [130-22-3]
Frmula e massa molecular - C
14
H
7
NaO
7
S.H
2
O 360,26
Descrio P amarelo-alaranjado.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e em etanol.
14
Alizarina SI
Preparao Dissolver 0,1 g em 100 mL de gua.
Amarelo de alizarina GG (CI 14025)
CAS [584-42-9]
13
H
8
N
3
NaO
5
309,21
Descrio P amarelo.
Solubilidade Pouco solvel em gua fria e solvel em
gua quente.
Amarelo de alizarina GG SI
Faixa de pH - 10,0 - 12,0
Mudana de cor - Fornece colorao amarelo-plida em
solues fracamente alcalinas e colorao marrom em
solues fortemente alcalinas.
Amarelo de dimetila (CI 11020)
CAS [60-11-7]
14
H
15
N
3
225,29
Descrio - Cristais amarelos.
Solubilidade Insolvel em gua, solvel em etanol,
benzeno, clorofrmio, ter etlico e cidos minerais
diludos.
Amarelo de dimetila SI
Mudana de cor Fornece colorao vermelha em
solues moderadamente cidas e colorao amarela em
solues fracamente cidas e alcalinas.
Ensaio de homogeneidade Preparar soluo a 0,01% (p/v)
em cloreto de metileno e aplicar 0,01 mL desta soluo em
cromatoplaca de slica-gel G. Usar como eluente o cloreto
de metileno. O cromatograma deve mostrar uma nica
mancha.
Ensaio de sensibilidade Preparar soluo de 2 g de
cloreto de amnio em 25 mL de gua isenta de dixido de
carbono. Esta soluo, adicionada de 0,1 mL de amarelo de
dimetila SI, deve apresentar cor amarela. A colorao passa
a vermelha pela adio de no mais que 0,1 mL de cido
clordrico 0,1 M.
Amarelo de metanila (CI 13065)
CAS [587-98-4]
18
H
14
N
3
NaO
3
S 375,38
Descrio P amarelo amarronzado.
Solubilidade Solvel em gua e em etanol.
Amarelo de metanila SI
Preparao Dissolver 0,1 g em 100 mL de metanol.
Mudana de cor Em titulaes desenvolvidas em meio
no aquoso muda a colorao de amarela (meio bsico)
para carmim (meio cido).
Ensaio de sensibilidade Dissolver 0,1 mL de amarelo
de metanila SI em 50 mL de cido actico glacial anidro.
Esta soluo deve apresentar colorao vermelho-rosada.
Adicionar 0,05 mL de cido perclrico 0,1 M. A colorao
deve mudar para violeta.
Amarelo naftol (CI 10315)
CAS [887-79-6]
10
H
5
N
2
NaO
5
256,16
Descrio - P ou cristais amarelo-alaranjados.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e pouco solvel
em etanol a 96% (v/v).
Mudana de cor - Fornece soluo incolor em meio
fortemente cido e colorao amarela em solues menos
cidas.
Amarelo titan (CI 19540)
CAS [1829-00-1]
28
H
19
N
5
Na
2
O
6
S
4
695,72
Descrio P marrom-amarelado.
Amarelo titan SI
Preparao Dissolver 0,05 g em gua e completar o
volume para 100 mL.
Faixa de pH 12,0 - 13,0
Mudana de cor Em solues cidas e moderadamente
alcalinas fornece colorao amarela. Em solues
fortemente alcalinas apresenta cor vermelha.
Ensaio de sensibilidade Preparar mistura de 10 mL de
gua, 0,2 mL de soluo padro de magnsio (10 ppm de
Mg) e 10 mL de hidrxido de sdio M. Adicionar 0,1 mL
de amarelo titan SI. Preparar prova em branco de maneira
anloga, porm omitindo o padro de magnsio. Comparar
as duas solues: colorao rosa intensa desenvolve-se em
comparao prova em branco.
Amarelo titan, papel
Preparao Impregnar papel de fltro comum com
soluo de amarelo titan SI. Secar ao ar a temperatura
ambiente.
Amido (Amido solvel)
CAS [9005-84-9]
Frmula molecular (C
6
H
10
O
5
)
x
Descrio P branco ou quase branco.
Amido SI
Especifcao Soluo de amido solvel a 2% (p/v)
em gua quente. A soluo pode apresentar pequena
opalescncia.
Ensaio de sensibilidade - Misturar 1 mL de amido SI, 20
mL de gua, aproximadamente 50 mg de iodeto de potssio
e, fnalmente, 0,05 mL de iodo 0,01 M. H desenvolvimento
de cor azul.
a
14
Amido iodetado SI
Preparao Impregnar papel de fltro com amido SI,
recm-preparado, acrescido de 0,5 g de iodeto de potssio.
Amido isento de iodeto SI
Preparao Triturar 1 g de amido solvel com 5 mL de
gua e adicionar, com agitao constante, gua fervente
sufciente para 100 mL.
Estabilidade Preparar imediatamente antes do uso.
Amido iodetado, papel
Preparao Impregnar papel de fltro com amido SI,
recm-preparado, acrescido de 0,5 g de iodeto de potssio.
Azul de bromofenol
CAS [115-39-9]
19
H
10
Br
4
O
5
S 670,02
Descrio P amarelo-alaranjado claro.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua, pouco
solvel em etanol e facilmente solvel em solues de
hidrxidos alcalinos.
Azul de bromofenol SI
Preparao Dissolver, aquecendo brandamente, 0,2 g de
azul de bromofenol em 3 mL de hidrxido de sdio 0,1 M e
10 mL de etanol a 96% (v/v). Deixar esfriar e completar o
volume para 100 mL com etanol a 96% (v/v).
Mudana de cor Fornece cor amarela em solues
moderadamente cidas e cor azul-violeta em solues
fracamente cidas e alcalinas.
Azul de bromotimol
CAS [76-59-5]
27
H
28
Br
2
O
5
S 624,38
Descrio P marrom ou vermelho claro.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua, solvel em
etanol e solues diludas de hidrxidos alcalinos.
Azul de bromotimol SI
Preparao Aquecer 1 g de azul de bromotimol com 3,2
mL de hidrxido de sdio 0,05 M e 5 mL de etanol. Aps
dissoluo, completar o volume a 250 mL com etanol.
Mudana de cor Fornece colorao amarela em solues
fracamente cidas e colorao azul em solues fracamente
alcalinas. Em meio neutro fornece colorao verde.
Ensaio de sensibilidade A mistura de 0,3 mL de azul
de bromotimol SI e 100 mL de gua isenta de dixido de
carbono apresenta colorao amarela. A colorao muda
para azul pela adio de no mais que 0,1 mL de soluo
de hidrxido de sdio 0,02 M.
Azul de hidroxinaftol
CAS [63451-35-4]
20
H
11
N
2
Na
3
O
11
S
3
620,47
Azul de hidroxinaftol SI
Preparao Dissolver 0,1 g em etanol para 100 mL.
Mudana de cor Na faixa de pH entre 12,0 e 13,0, sua
soluo possui cor rosa-avermelhada em presena de ons
clcio. Diante de excesso de edetato dissdico, apresenta
cor azul intensa.
Azul de oracet B
CAS [12769-16-3]
21
H
16
N
2
O
2
328,36
Especifcao - Constitui-se de uma mistura de
1-metilamino-4-anilinantraquinona e de 1-amino-4-
anilinantraquinona.
Azul de oracet B SI
Preparao Dissolver 0,5 g em cido actico glacial
anidro e completar o volume para 100 mL.
Mudana de cor - Quando utilizado em titulaes em meio
no aquoso muda de colorao azul (meio bsico) para
prpura (meio neutro) e para rosa (meio cido).
Azul de timol
CAS [76-61-9]
27
H
30
O
5
S 466,60
Descrio - P cristalino verde-amarronzado ou azul-
esverdeado.
Solubilidade Pouco solvel em gua, solvel em etanol a
96% (v/v) e em solues diludas de hidrxidos alcalinos.
Azul de timol SI
Preparao - Aquecer 0,1 g do indicador com 4,3 mL de
hidrxido de sdio a 0,05% (p/v) e 5 mL de etanol a 90%
(v/v). Aps dissoluo, completar o volume a 250 mL com
etanol a 20% (v/v).
Faixa de pH 1,2 - 2,8 e 8,0 - 9,6
Mudana de cor - Apresenta colorao vermelha em
solues fortemente cidas (faixa de pH: 1,2 - 2,8),
colorao amarela em solues fracamente cidas e
alcalinas e colorao azul em solues mais alcalinas
(faixa de pH: 8,0 - 9,6).
Ensaio de sensibilidade A mistura de 0,1 mL de azul de
timol SI, 100 mL de gua isenta de dixido de carbono e
0,2 mL de hidrxido de sdio 0,02 M apresenta cor azul. A
colorao altera para amarela pela adio de no mais que
0,1 mL de cido clordrico 0,2 M.
14
Azul do nilo A (CI 51180)
CAS [3625-57-8]
40
H
40
N
6
O
6
S 732,85
Descrio - P cristalino verde com brilho de bronze.
Solubilidade Ligeiramente solvel em etanol, em cido
actico glacial e em piridina.
Azul do nilo A SI
Preparao Dissolver 1 g em cido actico glacial anidro
para 100 mL.
Faixa de pH 9,0 13,0
Mudana de cor - Confere colorao azul a solues
fracamente alcalinas e colorao vermelha a solues
fracamente alcalinas.
Ensaio de sensibilidade - A mistura de 0,25 mL de azul
do Nilo A SI em 50 mL de cido actico glacial anidro
apresenta cor azul. A colorao passa a azul-esverdeada
pela adio de no mais que 0,1 mL de cido perclrico 0,1
M em cido actico glacial.
Ensaio de identifcao A soluo a 0,0005% (p/v) em
etanol a 50% (v/v) apresenta mximo de absoro (5.2.14)
em 640 nm.
Calcona
CAS [2538-85-4]
20
H
13
N
2
NaO
5
S 416,4
Descrio P pardo-negro com nuances violceas.
Solubilidade - Muito solvel em gua e facilmente solvel
em etanol e acetona.
Calcona SI
Preparao Dissolver 0,1 g em 100 mL de metanol
anidro.
Mudana de cor - Fornece cor vermelho-prpura com
ons clcio em meio alcalino. Em presena de excesso de
edetato dissdico, a soluo adquire cor azul.
Calcona, mistura composta
Preparao - Misturar uma parte de calcona com 99 partes
de sulfato de sdio.
Ensaio de sensibilidade Dissolver 0,2 g de mistura
composta de calcona em 5 mL de gua. Misturar 1 mL da
soluo do corante, 50 mL de gua, 10 mL de hidrxido
de sdio M e 1 mL de sulfato de magnsio a 1% (p/v). A
soluo formada azul, tornando-se violeta pela adio de
0,1 mL de cloreto de clcio a 0,15% (p/v). A adio de 0,1
mL de edetato dissdico 0,01 M fornece cor azul intensa.
Cloreto de metilrosanilnio (CI 42555)
CAS [548-62-9]
Sinonmia Cristal violeta
25
H
30
CIN
3
408,00
Descrio - P ou cristais verde-escuros.
Solubilidade Solvel em gua e em etanol a 96% (v/v).
Cloreto de metilrosanilnio SI
Preparao Dissolver 0,5 g em 100 mL de cido actico
glacial anidro.
Mudana de cor Em titulaes em meio no aquoso
a colorao muda de violeta (meio bsico) para azul-
esverdeada (meio neutro) e para verde-amarelada (meio
cido).
Ensaio de sensibilidade A mistura de 0,1 mL de cloreto
de metilrosanilnio SI com 50 mL de cido actico glacial
anidro mostra colorao prpura azulada. A adio de 0,1
mL de cido perclrico 0,1 M em cido actico altera a
colorao para verde.
Cloreto frrico
CAS [10025-77-1]
Sinonmia Cloreto de ferro.
Frmula e massa molecular FeCl
3
.6H
2
O 270,30
Descrio - Massa cristalizada amarelo-laranja, deliquescente.
Solubilidade - Muito solvel em gua e solvel em etanol
e ter etlico. O sal e suas solues, expostas luz, sofrem
reduo parcial.
Cloreto frrico SI (aproximadamente 0,4 M)
Especifcao Contm 10,5 g em gua para 100 mL.
Conservao Em recipientes bem fechados.
Armazenagem Proteger da luz.
Corante BVF
Preparao Dissolver 0,1 g de azul de bromotimol, 0,02
g de vermelho de metila e 0,2 g de fenolftalena em etanol.
Completar com o mesmo solvente para fazer 100 mL.
Filtrar.
Difenilcarbazida
CAS [140-22-7]
13
H
14
N
4
O 242,29
Descrio - P cristalino branco ou quase branco,
gradualmente torna-se rosa com a exposio ao ar.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua, solvel em
acetona e em etanol a 96% (v/v) e em cido actico glacial.
Difenilcarbazida SI
Preparao Dissolver 1 g de difenilcarbazida em 100 mL
de etanol a quente. Armazenar ao abrigo da luz.
Difenilcarbazona
CAS [538-62-5]
13
H
12
N
4
O 240,27
Descrio Cristais ou p cristalino laranja-amarelo.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua e facilmente
solvel em etanol a 96% (v/v).
a
14
Difenilcarbazona SI
Preparao Dissolver 0,1 g em 100 mL de etanol.
Armazenar ao abrigo da luz.
Eosina Y (CI 45380)
CAS [17372-87-1]
20
H
6
Br
4
Na
2
O
5
691,91
Descrio P marrom.
Solubilidade Solvel em gua.
Eosina Y SI
Preparao Dissolver 1 g em 100 mL em gua.
Mudana de cor - A adio de 20 mL de hidrxido de sdio
a 40% (p/v) sobre 10 mL de eosina Y SI a 1% (p/v) forma
precipitado vermelho.
ster etilco de tetrabromofenolftalena
CAS [1176-74-5]
Nome qumico ster etlico do cido 2-[(3,5-dibromo-
4-hidroxifenil)(3,5-dibromo-4-oxo-2,5-cicloexadien-1-
ilideno)metil]-benzoico
Sinonmia Bromofenolftalena magenta E
22
H
14
Br
4
O
4
661,96
ster etlico de tetrabromofenolftalena SI
Preparao Dissolver 0,1 g de ster etlico de
tetrabromofenolftalena em 90 mL de cido actico glacial
e completar o volume para 100 mL com o mesmo solvente.
Preparar imediatamente antes do uso.
Fenolftalena
CAS [77-09-8]
20
H
14
O
4
318,33
Descrio P cristalino ou amorfo, branco ou levemente
amarelado. Inodoro.
Solubilidade Insolvel em gua e solvel em etanol
Fenolftalena SI
Mudana de cor Fornece solues incolores em meio
cido e fracamente alcalino. Apresenta colorao violeta
intenso em solues alcalinas mais fortes.
Ensaio de sensibilidade A mistura de 0,1 mL de
fenolftalena SI em 1000 mL em de gua isenta de dixido
de carbono incolor. So necessrios no mais que 0,2
mL de hidrxido de sdio 0,02 M para o aparecimento de
colorao rsea.
Fenolftalena, papel
Preparao Imergir tiras de papel de fltro comum
em fenolftalena SI por alguns minutos e secar ao ar
Ferrona
CAS [14634-91-4]
36
H
24
FeN
6
O
4
S 692,52
Ferrona SI
Preparao Dissolver 0,7 g de sulfato ferroso hepta-hidratado
e 1,49 g de 1,10-fenantrolina em 70 mL de gua e completar o
volume para 100 mL com o mesmo solvente.
Ensaio de sensibilidade A 50 mL de cido sulfrico M
adicionar 0,15 mL de tetrxido de smio SR e 0,1 mL de
ferrona SI. Aps a adio de 0,1 mL de sulfato crico
amoniacal 0,1 M SV, a cor passa de vermelho-alaranjado
para verde plido.
Magneson
CAS [74-39-5]
12
H
9
N
3
O
4
259,22
Descrio P castanho-avermelhado.
Magneson SI
Preparao Dissolver 0,2 g em 100 mL em tolueno.
Mudana de cor Em titulaes de meio no aquoso muda
a colorao laranja (meio cido) para azul (meio bsico),
passando pela colorao rosa.
Magneson, reagente
Preparao Solubilizar 0,1 g de magneson em 100 mL
de hidrxido de sdio a 1% (p/v).
1-Naftolbenzena
CAS [6948-88-5]
Sinonmia Fenilbis(4-hidroxinaftil)metanol.
27
H
20
O
3
392,50
Descrio P marrom-avermelhado.
Solubilidade Insolvel em gua; solvel em benzeno, em
ter etlico e em cido actico glacial.
1-Naftolbenzena SI
Preparao Dissolver 0,2 g de 1naftolbenzena em 100
mL de cido actico glacial.
Mudana de cor Quando utilizado em titulaes no-
aquosas, muda a colorao azul ou verde-azulada (meio
bsico) para laranja (meio neutro) e para verde-escura
(meio cido).
Ensaio de sensibilidade - Adicionar 0,25 mL de soluo
de 1naftolbenzena SI a 50 mL de cido actico glacial
anidro. So necessrios no mais que 0,05 mL de cido
perclrico 0,1 M em cido actico glacial para efetuar a
mudana da colorao amarelo-marrom para verde.
14
1-Naftolftalena
CAS [596-01-0]
28
H
18
O
4
418,42
Descrio P incolor quando puro, usualmente
vermelho acinzentado.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua e solvel
em etanol.
1-Naftolftalena SI
Mudana de cor Fornece soluo incolor ou vermelha
plida nos meios cido e neutro e colorao azul em
solues moderadamente alcalinas.
Negro de eriocromo T (CI 14645)
CAS [1787-61-7]
20
H
12
N
3
NaO
7
S 461,38
Descrio - P marrom escuro.
Solubilidade Solvel em gua e em etanol a 96% (v/v).
Negro de eriocromo T SI
Preparao - Dissolver 0,5 g de negro de eriocromo T e
4,5 g de cloridrato de hidroxilamina em metanol a 100 mL.
Preparar no momento do uso.
Mudana de cor Em meio cido clordrico produz
precipitado violeta-marrom; tratado com cido sulfrico
forma precipitado azul-escuro que, diludo, muda para
cor marrom. Em soluo aquosa de hidrxido de sdio
apresenta cor violeta.
Oxalato de amnio
CAS [6009-70-7]
2
H
8
N
2
O
4
.H
2
O 142,11
Descrio Cristais incolores transparentes ou p
cristalino branco. Inodoro.
Oxalato de amnio SI
Especifcao Contm 4 g de oxalato de amnio em gua
para 100 mL.
Prpura de bromocresol
CAS - [115-40-2]
21
H
16
Br
2
O
5
S 540,24
Descrio - P cristalino branco para rosa.
Solubilidade - Praticamente insolvel em gua, solvel
em etanol a 96% (v/v) e solues diludas de hidrxidos
alcalinos.
Prpura de bromocresol SI
Preparao - Aquecer 0,1 g de prpura de bromocresol
com 5 mL de etanol a 90% (v/v) at dissoluo. Adicionar
3,7 mL de hidrxido de sdio 0,05 M e etanol a 20% (v/v)
para completar o volume de 250 mL.
fracamente cidas e colorao azul-violeta em solues
alcalinas, neutras e cidas muito prximas neutralidade.
Ensaio de sensibilidade Misturar 0,2 mL de prpura de
bromocresol SI e 100 mL de gua isenta de dixido de
carbono. Adicionar 0,05 mL de hidrxido de sdio 0,02 M.
Esta soluo possui a colorao azul violcea. Para alterar
a colorao para amarela so necessrios no mais que 0,2
mL de cido clordrico 0,02 M.
Prpura de bromocresol, reagente
Soluo A Dissolver 38 g de fosfato de sdio monobsico
e 2 g de fosfato de sdio dibsico anidro em gua e
completar o volume a 1000 mL. Ajustar o pH a 5,3.
Soluo B Dissolver 0,4 g de prpura de bromocresol em
30 mL de gua, adicionar 6,3 mL de hidrxido de sdio 0,1
M e completar o volume a 500 mL com gua.
Preparao Misturar volumes iguais da Soluo A,
Soluo B e clorofrmio. Agitar durante 5 minutos, deixar
decantar e desprezar a camada clorofrmica.
Prpura de metacresol
CAS [2303-01-7]
21
H
16
O
5
S 382,44
Descrio P cristalino verde oliva.
Solubilidade Pouco solvel em gua, solvel em etanol,
cido actico glacial e em metanol.
Prpura de metacresol SI
Preparao Dissolver 0,1 g em 100 mL de hidrxido de
sdio 0,001 M.
Faixa de pH 0,5 - 2,5 e 7,5 - 9,2
Mudana de cor Apresenta colorao vermelha em
colorao amarela em solues menos cidas e neutras e
colorao violeta em solues moderadamente alcalinas
(faixa de pH: 7,5 - 9,2).
Resazurina
CAS [550-82-3]
12
H
7
NO
4
229,19
Descrio Cristais pequenos vermelho-escuros com
lustre esverdeado.
Solubilidade Insolvel em gua e ter etlico, pouco
solvel em etanol e solvel em solues diludas de
Resazurina SI
Preparao Dissolver 0,1 g em 100 mL de hidrxido
de sdio 0,02 M. Esta soluo indicadora deve ser de
preparao recente.
a
14
Mudana de cor Fornece colorao rsea em solues
fracamente cidas e colorao violeta em solues
fracamente alcalinas.
Resorcinol
CAS [108-46-3]
Sinonmia Resorcina.
6
H
6
O
2
110,11
Descrio Cristais ou p cristalino incolor ou amarelo
plido; exposto luz e ao ar, adquire colorao rsea.
Resorcinol SI
Preparao Dissolver 0,2 g de resorcinol em 100 mL de
benzeno. Deixar decantar.
Timolftalena
CAS [125-20-2]
28
H
30
O
4
430,54
Descrio P branco ou amarelo claro.
etanol e em solues de hidrxidos alcalinos.
Timolftalena SI
Mudana de cor incolor em meio cido e fracamente
alcalino. Fornece colorao azul em solues alcalinas
mais intensas.
Ensaio de sensibilidade A mistura de 0,05 mL de
timolftalena SI com 100 mL de gua isenta de dixido de
carbono incolor. So necessrios no mais que 0,05 mL de
hidrxido de sdio 0,1 M para mudar a colorao para azul.
Tiocianato de amnio
CAS [1762-95-4]
Frmula e massa molecular NH
4
SCN 76,12
Descrio Cristais incolores e deliquescentes.
Solubilidade Muito solvel em gua e solvel em etanol.
Tiocianato de amnio SI
Tornassol
CAS [1393-92-6]
Especifcao constitudo de pigmento ndigo azul
preparado a partir de vrias espcies de Rocella, Lecanosa
ou outros liquens. O pigmento possui odor caracterstico.
Tornassol SI
Preparao Ferver sob refuxo, durante uma hora, 25 g
de tornassol, fnamente pulverizado, com 100 mL de etanol
a 90% (v/v). Desprezar o etanol e repetir a operao por
duas vezes, utilizando em cada extrao 75 mL de etanol
a 90% (v/v). Tratar o tornassol extrado com 250 mL de
gua. Filtrar.
Mudana de cor Fornece colorao vermelha com os
cidos e azul com os lcalis.
Tornassol azul, papel
Preparao Ferver 10 partes de tornassol, fnamente
pulverizado, com 100 partes de etanol a 96% (v/v), sob
refuxo, por uma hora. Decantar e desprezar o etanol,
adicionar ao resduo mistura de 45 partes de etanol e 15
partes de gua. Deixar macerando por dois dias. Decantar
o sobrenadante e impregnar tiras de papel de fltro comum
com o extrato. Secar temperatura ambiente.
Ensaio de sensibilidade Mergulhar tira de papel de
tornassol azul, medindo 10 mm x 60 mm, em 100 mL de
mistura de 10 mL de cido clordrico 0,02 M e 90 mL de
gua. Agitar. O papel adquire cor vermelha ao fm de 45
segundos.
Tornassol vermeho, papel
Preparao Adicionar cido clordrico 2 M ao extrato
obtido no processo de preparao do papel azul, gota a
gota, at que a soluo apresente colorao vermelha.
Impregnar tiras de papel de fltro com esta soluo e deixar
secar temperatura ambiente.
Ensaio de sensibilidade Mergulhar tira de papel de
tornassol vermelho em 100 mL de hidrxido de sdio 0,002
M. Agitar. O papel deve fcar azul ao fnal de 45 segundos.
Tropeolina O (CI 14270)
CAS [547-57-9]
12
H
9
N
2
NaO
5
S 316,27
Descrio P marrom.
Tropeolina O SI
Preparao Dissolver 25 mg em 50 mL de metanol e
gua para completar 100 mL
Faixa de pH 11,0 - 12,7
Mudana de cor Fornece solues de colorao amarela
em meio moderadamente alcalino e colorao laranja em
solues fortemente alcalinas.
Ensaio de homogeneidade Aplicar 0,01 mL de tropeolina
O SI em cromatoplaca de celulose G. Desenvolver o
cromatograma com a. mistura lcool n-proplico, acetato
de etila e gua (5:1:4). O cromatograma deve mostrar uma
nica mancha com Rf aproximadamente 0,9.
14
Tropeolina OO (CI 13080)
CAS [554-73-4]
18
H
14
N
3
NaO
3
S 375,38
Descrio P amarelo ou amarelo alaranjado.
Mudana de cor Fornece colorao vermelha em solues
fortemente cidas e colorao amarela em solues menos cidas.
Verde de bromocresol
CAS [76-60-8]
21
H
14
Br
4
O
5
S 698,02
Descrio P branco amarronzado.
Solubilidade Pouco solvel em gua, solvel em etanol e
solues diludas de hidrxidos alcalinos.
Verde de bromocresol SI
Preparao Aquecer 0,1 g do corante com 2,9 mL de
hidrxido de sdio 0,05 M e 5 mL de etanol a 90% (v/v).
Aps dissoluo, adicionar etanol a 20% (v/v) at o volume
de 250 mL.
moderada-mente cidas e azul em solues fracamente
cidas e alcalinas.
Ensaio de sensibilidade - A mistura de 0,2 mL de verde
de bromocresol SI e 100 mL de gua isenta de dixido de
carbono apresenta cor azul. So necessrios no mais que
0,2 mL de cido clordrico 0,02 M para alterar a colorao
para amarela.
Verde de malaquita, oxalato
CAS [2437-29-8]
48
H
50
N
4
O
4
.2HC
2
O
4

927,10
Descrio Slido cristalino verde.
Solubilidade Muito solvel em gua.
Verde de malaquita SI
Preparao Dissolver 1 g de oxalato de verde de
malaquita em 100 mL de cido actico glacial.
Faixa de pH 0,0-2,0
cidas e verde em solues menos cidas e alcalinas.
Verde de metila (CI 42590)
CAS [14855-76-6]
27
H
35
BrClN
3
516,94
Descrio P verde. Normalmente, apresenta-se na
forma de sal com ZnCl
2
.
Verde de metila SI
Mudana de cor Em soluo de cido sulfrico apresenta
cor amarela. Pela diluio retorna colorao verde.
Vermelho cresol
CAS [1733-12-6]
21
H
18
O
5
S 382,43
Descrio P cristalino marrom avermelhado.
Solubilidade Pouco solvel em gua, solvel em etanol e
Vermelho cresol SI
Preparao - Aquecer 50 mg de vermelho cresol com 2,65 mL
de hidrxido de sdio 0,05 M e 5 mL de etanol a 90%. Aps
dissoluo, adicionar etanol a 20% at completar 250 mL.
Faixa de pH 0,2 - 1,8 e 7,2 - 8,8
Mudana de cor Fornece, colorao vermelha em
colorao amarela em solues menos cidas e neutras; em
solues moderadamente alcalinas apresenta cor vermelha
(faixa de pH: 7,2 - 8,8).
Ensaio de sensibilidade A mistura de 0,1 mL de vermelho
cresol SI e 1000 mL de gua, isenta de dixido de carbono,
adicionada de 0,15 mL de hidrxido de sdio 0,02 M
apresenta colorao vermelho prpura. A colorao muda
para amarela pela adio de no mais que 0,15 mL de cido
clordrico 0,02 M.
Vermelho de Congo (CI 22120)
CAS [573-58-0]
32
H
22
N
6
Na
2
O
6
S
2
696,67
Descrio P vermelho amarronzado.
Vermelho de Congo SI
Preparao Dissolver 0,25 g de vermelho de Congo em
50 mL de etanol a 90% (v/v) e gua at completar 250 mL.
Mudana de cor Apresenta colorao azul em solues
moderadamente cidas e colorao vermelha em solues
de Congo SI, 100 mL de gua isenta de dixido de carbono
e 0,3 mL de cido clordrico 0,1 M possui colorao azul.
So necessrios no mais que 0,3 mL de hidrxido de sdio
0,1 M para alterar a colorao para rsea.
Vermelho de Congo, papel
Preparao Mergulhar tiras de papel de fltro comum
em vermelho de Congo SI e deixar secar temperatura
ambiente.
a
14
Vermelho de fenol
CAS [143-74-8]
19
H
14
O
5
S 354,38
Descrio P cristalino vermelho claro ou escuro.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua e pouco
solvel em etanol.
Vermelho de fenol SI
Preparao - Aquecer 0,1 g de vermelho de fenol com 1,42
mL de hidrxido de sdio 0,2 M e 5 mL de etanol a 90%
(v/v). Aps dissoluo, adicionar etanol a 20% (v/v) para
completar 250 mL.
Faixa de pH 6,8-8,4
Mudana de pH Fornece colorao amarela em meio
neutro e vermelha em soluo fracamente alcalina.
de fenol SI e 100 mL de gua isenta de dixido de carbono
apresenta cor amarela. So necessrios no mais que 0,1
mL de hidrxido de sdio 0,02 M para alterar a colorao
para violeta-avermelhada.
Vermelho de metila (CI 13020)
CAS [493-52-7]
15
H
15
N
3
O
2
269,30
Descrio Cristais violetas ou p vermelho escuro.
em etanol.
Vermelho de metila SI
Preparao - Aquecer 0,1 g de vermelho de metila com
1,85 mL de hidrxido de sdio 0,2 M e 5 mL de etanol a
90% (v/v). Aps dissoluo, completar o volume de 250
mL com etanol a 50% (v/v).
Mudana de cor Fornece colorao vermelha em solues
fracamente cidas e colorao amarela em solues muito
de metila SI, 100 mL de gua isenta de dixido de carbono e
0,05 mL de cido clordrico 0,02 M apresenta cor vermelha.
So necessrios no mais que 0,1 mL de hidrxido de sdio
0,02 M para mudar a colorao para amarela.
Vermelho de quinaldina
CAS [117-92-0]
21
H
23
IN
2
430,33
Descrio P azul escuro.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua e facilmente
solvel em etanol.
Vermelho de quinaldina SI
Preparao Dissolver 0,1 g em 100 mL de metanol.
Mudana de cor Ocorre mudana de colorao carmim
para quase incolor. Utilizado em titulaes de bases com
cido perclrico.
14.2 REAGENTES E
SOLUES REAGENTES
Reagentes so substncias utilizadas, quer como tais, quer
como constituintes de solues, na realizao dos ensaios
farmacopeicos.
Acetal
CAS [105-57-7]
6
H
14
O
2
118,17
Descrio Lquido incolor, lmpido e voltil.
Caractersticas fsicas Densidade (20 C): cerca de 0,824.
ndice de refrao (20 C): cerca de 1,382. Temperatura de
ebulio: cerca de 103 C.
Miscibilidade Miscvel em gua e em etanol.
Acetaldedo
CAS [75-07-0]
Sinonmia Etanal.
2
H
4
O 44,05
Descrio Lquido incolor e lmpido.
Segurana Infamvel!
Acetanilida
CAS [103-84-4]
Nome qumico N-Fenilacetamida
8
H
9
NO 135,17
Descrio P branco cristalino, inodoro.
Caracterstica fsica Faixa de fuso: 114 C a 116 C.
Solubilidade Pouco solvel em gua, facilmente solvel
em clorofrmio e etanol, solvel em gua fervente, ter
etlico e glicerina.
Conservao Em recipientes fechados.
Acetato de amnio
CAS [631-61-8]
2
H
7
NO
2
77,08
Especifcao Contm, no mnimo, 98,0% (p/p).
Descrio Cristais incolores, muito deliquescentes, de
fraco odor actico.
Solubilidade Muito solvel em gua e em etanol.
Armazenagem Proteger da umidade.
14
Acetato de amnio SR
Especifcao Contm 15 g de acetato de amnio em
gua a 100 mL.
Estabilidade Preparar para uso imediato.
Acetato de bornila
CAS [5655-61-8]
12
H
20
O
2
196,29
Descrio Cristais incolores ou lquido incolor.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: cerca de 28 C.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua e solvel em
etanol.
Acetato de butila
CAS [123-86-4]
6
H
12
O
2
116,16
Descrio Lquido incolor e infamvel com odor
adocicado de fruta.
Caractersticas fsicas Densidade (20 C): cerca de
0,88. ndice de refrao (20 C): cerca de 1,395. Faixa de
ebulio: 125 C a 126 C.
Miscibilidade Pouco solvel em gua. Miscvel em
etanol e ter etlico.
Acetato de celulose
CAS [9004-35-7]
Especifcao Celulose parcialmente acetilada, com
graus de acetilao variados.
Descrio Slido amorfo branco.
Categoria Adsorvente em cromatografa em camada
delgada.
Acetato de chumbo, tri-hidratado
CAS [6080-56-4]
Sinonmia Acetato de chumbo(II) tri-hidratado.
4
H
6
PbO
4
.3H
2
0 379,33
Descrio Cristais incolores, transparentes ou p
cristalino branco, de odor actico fraco. Eforescente.
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: 75 C
(aquecimento rpido); decompe-se completamente a 200 C.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e solvel em
etanol.
Conservao Em recipientes hermticos.
Segurana Txico. Poluente.
Acetato de chumbo, papel
Preparao Impregnar papel adequado (geralmente
no tamanho 6 mm x 80 mm) com soluo de acetato de
chumbo SR. Secar o papel reagente a 100 C, evitando
contato com metal.
Armazenagem Proteger da luz e da umidade.
Acetato de chumbo SR (aproximadamente 0,25 M)
Especifcao Contm 9,5 g de acetato de chumbo em
100 mL de gua isenta de dixido de carbono.
Acetato de chumbo, soluo saturada
Especifcao Contm aproximadamente 35 g de acetato
de chumbo em 50 mL de gua isenta de dixido de carbono.
Acetato de clorexidina
CAS [56-95-1]
26
H
38
Cl
2
N
10
O
4
625,58
Descrio Cristais ou p cristalino branco a creme
plido; inodoro.
Armazenagem - Proteger da luz.
Segurana Irritante.
Categoria Antimicrobiano.
Acetato de clorexidina a 0,1% (p/v)
Especifcao Contm 0,1 g de acetato de clorexidina em
100 mL de gua.
Segurana Txico.
Categoria Antimicrobiano.
Acetato de cobre
CAS [142-71-2]
4
H
6
CuO
4
.H
2
O 199,65
Descrio P ou cristais verde-azulados.
Solubilidade Facilmente solvel em gua fervendo,
solvel em gua e em etanol pouco solvel em glicerol.
Acetato de cortisona
CAS [50-04-4]
23
H
30
O
6
402,49
Especifcao Contm, no mnimo, 96,0% (p/p),
calculado sobre a substncia dessecada.
Descrio Cristais incolores fracamente amarelados ou
p cristalino branco ou quase branco. Inodoro; inicialmente
inspido, depois amargo.
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso:
aproximadamente 240 C. Rotao ptica: + 209 a + 219
(determinar em soluo a 1,0% (p/v) em dioxana).
a
14
Categoria Corticosteride.
Acetato de cortisona, injetvel
Descrio Consiste de uma suspenso em meio aquoso
adequado, com pH entre 5,0 e 7,0.
Conservao Em ampolas de dose nica.
Acetato de desoxicortona
CAS [56-47-3]
Sinonmia Acetato de desoxicorticosterona.
23
H
32
O
4
372,50
Descrio Cristais incolores ou p cristalino branco.
Inodoro.
Caractersticas fsicas Faixa de fuso: 157 C a 161 C.
Rotao ptica: +171 a +179 (determinar em soluo a
1,0% (p/v) em dioxana).
Acetato de etila
CAS [141-78-6]
4
H
8
O
2
88,11
Especifcao Contm, no mnimo, 99,9% (p/v).
Descrio Lquido lmpido, incolor, voltil, de odor
caracterstico.
Caractersticas fsicas Densidade: aproximadamente
0,90. Temperatura de ebulio: aproximadamente 77 C.
ndice de refrao (20 C): 1,371 a 1,373.
Armazenagem Proteger do calor.
Segurana Infamvel.
Acetato de fenilmercrio
CAS [62-38-4]
8
H
8
HgO
2
336,74
Descrio Cristais pequenos ou p cristalino branco ou
cor creme, brilhante.
Acetato de indofenol SR
Sinonmia 2,6-Diclorofenolindofenol sdico em tampo
acetato.
Preparao Diluir 12 mL da soluo padro de
2,6-diclorofenol-indofenol sdico em 100 mL de gua. A
esta soluo juntar 100 mL de tampo acetato pH 7,0.
Estabilidade Utilizar em no mximo duas semanas.
Armazenagem Manter sob refrigerao.
Acetato de magnsio
CAS [16674-78-5]
4
H
6
MgO
4
.4H
2
O 214,45
Acetato de mentila
CAS [2623-23-6]
12
H
22
O
2
198,30
Descrio Lquido incolor.
Miscibilidade Pouco solvel em gua e miscvel em
etanol.
Acetato de mercrio
CAS [1600-27-7]
Sinonmia Acetato mercrico.
4
H
6
HgO
4
318,68
Descrio Cristais ou p cristalino branco, ou quase
brancos, com fraco odor actico.
Caracterstica fsica Faixa de fuso: 178 C a 180 C
(sobreaquecimento resulta em decomposio).
Conservao Em recipientes bem fechados
Segurana Txico.
Acetato de mercrio SR
Preparao Dissolver 6 g de acetato de mercrio em
cido actico glacial a 100mL.
Armazenagem Proteger da luz solar direta.
Acetato de metila
CAS [79-20-9]
3
H
6
O
2
74,07
0,933. ndice de refrao (20 C): cerca de 1,361. Faixa de
Miscibilidade Solvel em gua e miscvel em etanol.
14
Acetato de potssio
CAS [127-08-2]
2
H
3
KO
2
98,14
Descrio Cristais incolores ou p cristalino branco,
inodoro ou de odor actico fraco. Deliquescente.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: 292 C.
Acetato de potssio SR
Especifcao Contm 10 g de acetato de potssio em
100 mL de gua.
Acetato de prednisolona
CAS [52-21-1]
23
H
30
O
6
402,49
Especifcao Contm, no mnimo, 96,0% (p/p) calculado
sobre a substncia dessecada.
Descrio P cristalino branco ou quase branco. Inodoro.
Amargo.
aproximadamente 247 C. Rotao ptica: +112 a +119
(determinar em soluo a 1,0% (p/v) em dioxana).
Acetato de sdio
CAS [6131-90-4]
2
H
3
NaO
2
.3H
2
O 136,08
(se anidro 82,03)
inodoro ou de odor actico fraco. Eforescente.
Acetato de sdio SR (aproximadamente 0,02 M)
Especifcao Contm 0,272 g de acetato de sdio tri-
hidratado em gua a 100 mL.
Acetato de uranila
CAS [6159-44-0]
4
H
6
O
6
U.2H
2
O 424,15.
Descrio P cristalino amarelo, de odor actico fraco.
Segurana Substncia radioativa.
Acetato de uranila e zinco SR
Preparao Dissolver 10 g de acetato de uranila em 50
mL de gua quente e 5 mL de cido actico 30% (p/v).
Dissolver 30 g de acetato de zinco em 30 mL de gua
quente e 3 mL de cido actico 30% (p/v). Misturar as
preparaes anteriores. Deixar esfriar. Filtrar.
Segurana Substncia radioativa.
Acetato de zinco
CAS [5970-45-6]
4
H
6
O
4
Zn.2H
2
O 219,50
Descrio Cristais incolores ou brancos, ou escamas
cristalinas ou grnulos, de odor actico fraco, de sabor
metlico adstringente. Eforescente.
etanol.
Segurana Irritante.
Acetilacetona
CAS [123-54-6]
5
H
8
O
2
100,11
Descrio Lquido lmpido, incolor ou amarelado, de
odor aromtico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio:
aproximadamente 139 C. Densidade: aproximadamente
0,97. ndice de refrao (20 C): 1,4505 a 1,4525.
Miscibilidade Miscvel em acetona e etanol.
Segurana Irritante. Infamvel.
Acetona
CAS [67-64-1]
3
H
6
0 58,08
Especifcao - Contm, no mnimo, 98,0% (p/v).
caracterstico.
Caractersticas fsicas Densidade: 0,790 a 0,793.
ndice de refrao (20 C): 1,358 a 1,360. Temperatura de
ebulio: aproximadamente 56 C.
Segurana Infamvel. Irritante e txico.
Acetona desidratada
Especifcao Acetona, desidratada em sulfato de sdio
anidro.
Conservao Preparar no momento de uso.
Acetona tamponada SR
Preparao Dissolver 8,15 g de acetato de sdio tri-
hidratado e 42 g de cloreto de sdio em gua, adicionar
68 mL de cido clordrico 0,1 M e 150 mL de acetona.
Completar o volume com gua para 500 mL.
a
14
Acetonitrila
CAS [75-05-8]
2
H
3
N 41,05
Descrio Lquido lmpido e incolor. Odor semelhante
ao ter.
Caractersticas fsicas Densidade (20C): cerca de 0,78.
ndice de Refrao (20 C): cerca de 1,344.
Miscibilidade Miscvel em gua, acetona e metanol.
Segurana Txico. Infamvel!
cido actico M
Especifcao Contm 6 g de cido actico glacial em
gua a 100 mL.
Informao adicional Ao usar, confrmar o ttulo.
cido actico 6 M
gua a 1000 mL.
Segurana Corrosivo e infamvel.
cido actico diludo
gua a 100 mL.
cido actico SR
gua a 100 mL. Corresponde ao cido actico 5 M.
Descrio Lquido lmpido, incolor, de odor irritante.
cido actico glacial
CAS [64-19-7]
2
H
4
O
2
60,05
irritante e caracterstico. Cristalizvel a baixas temperaturas.
Temperatura de congelamento: aproximadamente 14 C.
Segurana Corrosivo. Infamvel. Proteger olhos, pele e
mucosas.
cido 7-aminodesacetoxicefalospornico
CAS [22252-43-3]
Sinonmia 7-ADCA
8
H
10
N
2
O
3
S 214,24
cido ascrbico
CAS [50-81-7]
6
H
8
O
6
176,13
Inodoro.
Caractersticas fsicas Soluo a 5% (p/v) apresenta pH
de 2,2 a 2,5. Temperatura de fuso: aproximadamente 190
C, com decomposio. Rotao ptica especfca: entre
+20,5 e +21,5, determinar em soluo aquosa a 1% (p/v).
Conservao Em recipientes bem fechados, no
metlicos.
cido benzoico
CAS [65-85-0]
7
H
6
O
2
122,12
Descrio Cristais incolores ou p cristalino branco, de
odor caracterstico.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso:
aproximadamente 122 C.
Solubilidade Pouco solvel em gua, solvel em gua
fervendo e facilmente solvel em etanol.
cido brico
CAS [10043-35-3]
Frmula e massa molecular H
3
BO
3
61,83
Descrio Cristais incolores brilhantes ou p fno
cristalino branco, untuoso ao tato, de sabor fracamente
cido e amargo.
Solubilidade Solvel em gua e em etanol, facilmente
solvel em gua fervendo.
cido brico, soluo saturada
Preparao Dissolver 5 g em 100 mL de gua.
cido bromdrico
CAS [10035-10-6]
Frmula e massa molecular HBr 80,91
Especifcao Contm 48,0% (p/v).
Descrio Lquido incolor ou fracamente amarelo, de
odor forte e irritante. Escurece lentamente pela exposio
ao ar e luz.
Armazenagem Proteger do ar e da luz.
Segurana Irritante. Corrosivo.
14
cido cafeico
CAS [331-39-5]
9
H
8
O
4
180,16
Descrio Cristais brancos ou quase brancos.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: cerca de 225
C, com decomposio.
Solubilidade Facilmente solvel em gua quente e etanol,
ligeiramente solvel em gua fria.
cido calconcarboxlico
CAS [3737-95-9]
21
H
14
N
2
O
7
S 438,40
Descrio P marrom-preto.
Solubilidade Pouco solvel em gua, muito pouco
solvel em acetona e em etanol, ligeiramente solvel em
solues diludas de hidrxido de sdio.
cido ciclobutano-1,1-dicarboxlico
CAS [5445-51-2]
6
H
10
O
4
144,13
Descrio Cristais brancos.
cido 1,2-cicloexileno-dinitrilo-tetractico
CAS [125572-95-4]
Sinonmia cido 1,2-cicloexileno-diamino-tetractico,
CDTA.
14
H
22
N
2
O
8
.H
2
O 364,35.
Descrio P branco.
Conservao Recipientes bem fechados, protegidos do
calor.
Segurana Irritante.
cido cinmico
CAS [140-10-3]
9
H
8
O 148,16
Descrio Cristais incolores.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua e facilmente
solvel em etanol.
cido ctrico, monoidratado
CAS [5949-29-1]
6
H
8
O
7
.H
2
O 210,14
Descrio Cristais ou grnulos incolores, ou p cristalino
branco ou quase branco. Eforescente.
Solubilidade Muito solvel em gua e facilmente solvel
em etanol.
cido clordrico
CAS [7647-01-0]
Sinonmia Cloreto de hidrognio e cido clordrico
concentrado.
Frmula e massa molecular HCl 36,46
Especifcao Contm, no mnimo, 35,0% (p/p)
constitudo de soluo de HCl gasoso em gua.
Descrio Lquido lmpido, incolor, fumegante, de odor
irritante.
1,18.
Conservao Em recipientes hermticos, de material
inerte ao reagente.
Armazenagem Proteger do calor (manter em temperaturas
menores que 20 C).
Segurana Corrosivo. Evitar contato externo, olhos e
pele, inalao e ingesto.
cido clordrico bromado SR
Preparao Adicionar 1 mL de bromo SR em 100 mL de
cido clordrico.
cido clordrico diludo
Especifcao Usar cido clordrico SR.
cido clordrico M
Especifcao Contm 103 g de cido clordrico em 1000
mL de gua.
Estabilidade Proteger do calor.
Segurana Corrosivo.
Informao adicional Ao usar, confrme o ttulo.
cido clordrico SR
Especifcao Contm 27,4 g de cido clordrico
concentrado em 100 mL de gua.
1,05.
Estabilidade Proteger do calor.
Segurana Corrosivo.
cido clordrico metanlico 0,01 M
Preparao Transferir 0,85 mL de cido clordrico para
metanol.
cido clordrico-estanho SR
Preparao Misturar 1 mL de cloreto estanoso SR1 com
100 mL de cido clordrico.
a
14
cido clorognico
CAS [327-97-9]
16
H
18
O
9
354,34
Descrio Agulhas ou p cristalino branco ou quase
branco.
Solubilidade Facilmente solvel em gua fervendo, em
acetona e em etanol.
cido cloroplatnico
CAS [18497-13-7]
Sinonmia Cloreto platnico, cloreto de platina, cido
cloroplatnico(IV).
2
PtCl
6
.6H
2
O 517,90
Especifcao Contm, no mnimo, 37,0% (p/p) de
platina.
Descrio Massa cristalina amarelo-amarronzada, muito
deliquescente.
Caractersticas fsicas Densidade: 2,431. Temperatura
de fuso: 60 C.
etanol.
Segurana Txico.
cido crmico
Onde constar, usar trixido de cromo (CrO
3
).
cido 3,5-dinitrobenzoico
CAS [99-34-3]
7
H
4
N
2
O
6
212,12
Descrio Cristais praticamente incolores.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: em torno de
206 C.
cido edtico
CAS [60-00-4]
Sinonmia cido etilenodiaminotetractico, EDTA.
10
H
16
N
2
O
8
292,24
Caracterstica fsica Decompe-se ao redor de 220 C,
podendo descarboxilar a 150 C.
cido fenoldissulfnico SR
CAS [96-77-5]
6
H
6
O
7
S
2
254,24
Descrio Lquido lmpido a marrom claro.
Preparao Dissolver 2,5 g de fenol em 15,0 mL de cido
sulfrico. Juntar 7,5 mL de cido sulfrico fumegante.
Aquecer a 100 C por duas horas. Transferir o produto
fuido para recipiente adequado. Para uso, liquefazer em
banho de gua.
Conservao Recipiente de vidro com tampa esmerilhada.
Segurana Irritante e corrosivo.
cido fenoxiactico
CAS [122-59-8]
8
H
8
O
3
152,15
Descrio Cristais quase brancos.
C.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua e facilmente
solvel em etanol e cido actico glacial.
cido fuordrico
CAS [7664-39-3]
Frmula e massa molecular HF 20,01
Especifcao Contm, no mnimo, 40% (p/p) de HF.
Conservao Em recipientes de polietileno bem fechados.
cido frmico
CAS [64-18-6]
Sinonmia cido metanoico.
Frmula e massa molecular CH
2
O
2
46,03
Especifcao A forma anidra contm, no mnimo, 98,0%
(p/p). O comercial contm em torno de 90,0% (p/p).
Descrio Lquido incolor, muito custico, de odor
picante.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: 100,5
C. Densidade: aproximadamente 1,22. ndice de refrao
(20 C): 1,3714. Solidifca a 70 C.
Segurana Custico.
cido fosfomolbdico
CAS [51429-74-4]
Sinonmia cido molibdofosfrico.
Frmula molecular Aproximadamente 12MoO
3
.H
3
PO
4
.xH
2
O.
Descrio Cristais fracamente amarelados.
cido fosfomolbdico SR
Preparao Dissolver 4 g de cido fosfomolbdico em 40
mL de gua sob aquecimento. Aps resfriamento adicionar
60 mL de cido sulfrico.
14
cido fosfrico
CAS [7664-38-2]
Sinonmia cido ortofosfrico
3
PO
4
98,00
Descrio Lquido lmpido, incolor, inodoro.
Higroscpio; consistncia xaroposa.
Caracterstica fsica Densidade: aproximadamente 1,7.
Segurana Corrosivo! Evitar contato com pele, mucosas,
membranas.
cido fosfrico SR
Preparao Misturar quantidade correspondente a 15 g de
cido fosfrico concentrado com gua at perfazer 100 mL.
cido fosfotngstico SR
Preparao Aquecer sob refuxo por 3 horas, a mistura de
10 g de tungstato de sdio com 8 mL de cido fosfrico e 75
mL de gua. Deixar resfriar e diluir para 100 mL com gua.
cido ftlico
CAS [88-99-3]
8
H
6
O
4
166,14
Descrio P cristalino branco ou quase branco.
Solubilidade Solvel em gua quente e em etanol.
cido glico
CAS [5995-86-8]
7
H
6
O
5
.H
2
O 188,14
Descrio Agulhas longas ou p cristalino incolor ou
amarelo claro.
Caractersticas fsicas Perde gua de cristalizao a
temperatura de 120 C e funde em cerca de 206 C, com
decomposio.
Solubilidade Solvel em gua, facilmente solvel em
gua quente, em etanol e em glicerol.
cido p-hidroxibenzoico
CAS [99-96-7]
7
H
6
O
3
138,13
Caracterstica fsica Faixa de fuso: 213-214 C.
cido hipofosforoso
CAS [6303-21-5]
Sinonmia cido hipofosforoso diludo.
3
PO
2
66,00
Especifcao Contm, no mnimo, 48% (p/v) de H
3
PO
2
.
Descrio Lquido incolor ou ligeiramente amarelo.
Miscibilidade Miscvel em gua e etanol.
cido ioddrico
CAS [10034-85-2]
Frmula e massa molecular HI 127,91
Descrio Soluo aquosa de cido ioddrico. Quando
recm preparado, incolor, mas com a exposio ao ar e
luz, apresenta cor amarelada a marrom.
Armazenagem Proteger da luz e do contato com o ar.
Manter em temperaturas menores que 30 C.
cido lctico
CAS [50-21-5]
Sinonmia cido 2-hidroxipropanoico
3
H
6
O
3
90,08
Especifcao Mistura do cido 2-hidroxipropanoico e
seus produtos de condensao. O equilbrio entre o cido
ltico e os cido polilticos dependente da concentrao e
da temperatura. O cido ltico normalmente um racemato
(R,S-cido ltico).
Descrio Lquido viscoso incolor ou levemente amarelo.
cido metafosfrico
CAS [10343-62-1]
Frmula e massa molecular (HPO
3
)n, monmero
79,98.
Especifcao Contm certa proporo de metafosfato de
sdio.
Descrio Slido ou massa vtrea, incolor. Higroscpico.
Em soluo aquosa, transforma-se lentamente em cido
fosfrico (H
3
PO
4
).
Caracterstica fsica Volatiliza sob aquecimento intenso.
cido metafosfrico-actico SR
Especifcao Contm 3 g de cido metafosfrico e 8 mL
de cido actico glacial em gua a 100 mL.
Estabilidade Limitada a dois dias.
Armazenagem Manter sob refrigerao.
cido metanossulfnico
CAS [75-75-2]
4
O
3
S 96,11
Descrio Lquido lmpido e incolor (solidifca a 20 C).
ndice de refrao: cerca de 1,430. Temperatura de fuso:
20 C.
a
14
Miscibilidade Miscvel em gua, pouco miscvel em
tolueno e praticamente imiscvel em hexano.
Segurana Irritante!
cido ntrico
CAS [7697-37-2]
Frmula e massa molecular HNO
3
63,01
Descrio Soluo lmpida, praticamente incolor, de
odor caracterstico.
Caracterstica fsica Densidade: 1,384 a 1,416.
Conservao Em recipientes hermticos, ao abrigo da
luz.
Segurana Corrosivo.
cido ntrico fumegante
Descrio Lquido lmpido, levemente amarelado,
fumegante no ar.
cido ntrico SR
Especifcao Contm cerca de 12,5% (p/v) de HNO
3
.
cido oxlico
CAS [6153-56-6]
Sinonmia cido etanodioico.
2
H
2
O
4
.2H
2
O 126,07
Especifcao Contm, no mnimo, 99% (p/p).
Segurana Veneno!
cido oxlico SR
Especifcao Soluo de cido oxlico a 6,3% (p/v).
cido perclrico
CAS [7601-90-3]
Frmula e massa molecular HClO
4
100,46
Especifcao Contm, no mnimo, 70,0% (p/p) e, no
mximo, 72,0% de HClO
4
.
Descrio Lquido lmpido, incolor, voltil e de odor
picante. Higroscpico.
Conservao Decompe-se espontaneamente, podendo
explodir especialmente em contato com substncias
oxidveis.
Segurana Irritante. Corrosivo!
cido perclrico M
Especifcao Contm 8,5 mL de HClO
4
em gua,
perfazendo 100 mL.
Estabilidade Usar soluo recm preparada.
cido perclrico SR
Usar cido perclrico M.
cido perfrmico
CAS [107-32-4]
Sinonmia cido peroxifrmico.
2
O
3
62,03
Preparao Misturar 1 mL de perxido de hidrognio a
30,0% (v/v), ou 9,0% (p/p), com 90 mL da cido frmico.
Segurana Irritante. Pode explodir em contato com
metais, seus xidos, substncias redutoras, ou na destilao.
cido peridico
CAS [10450-60-9]
5
IO
6
227,94
Descrio Cristais brancos a incolores.
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: 122 C.
Decompe entre 130 C e 140 C, formando I
2
O
5
, H
2
O e O
2
.
etanol.
cido pcrico
CAS [88-89-1]
Sinonmia 2,4,6-Trinitrofenol.
6
H
3
N
3
O
7
229,10
Especifcao Cristais amarelos ou placas umedecidas
com gua.
Conservao Em recipientes bem fechados, misturado
com igual massa de gua.
Armazenagem Em temperatura ambiente.
Segurana Explode quando aquecido rapidamente ou
submetido a choque. Para transporte seguro, 10% a 20%
de gua so geralmente adicionados.
cido pcrico SR
Preparao Adicionar 0,25 mL de hidrxido de sdio
10 M em 100 mL de soluo saturada de cido pcrico em
gua.
cido pcrico SR1
Preparao Dissolver o equivalente a 1 g de cido pcrico
em 100 mL de gua quente. Resfriar e fltrar, se necessrio.
14
cido rosmarnico
CAS [20283-92-5]
18
H
16
O
8
360,31
Descrio P vermelho alaranjado.
cido saliclico
CAS [69-72-7]
Sinonmia cido 2-hidroxibenzoico.
7
H
6
O
3
138,12
calculado sobre base seca.
Descrio P cristalino branco ou agulhas cristalinas
incolores. Inodoro e sabor cido adocicado e irritante.
Caracterstica fsica Faixa de fuso: 156-160 C.
em etanol a 96% (v/v), ligeiramente solvel em cloreto de
metileno.
cido selenioso
CAS [7783-00-8]
2
SeO
3
128,97
Especifcao Contm, no mnimo, 93% (p/p) de H
2
SeO
3
.
Descrio Cristais brancos ou incolores. Eforescente ao
ar seco e higroscpico ao ar mido.
cido sulfmico
CAS [5329-14-6]
3
NO
3
S 97,09
Sinonmia cido amidossulfnico.
Especifcao Cristais brancos ou p cristalino.
205 C, com decomposio.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, ligeiramente
solvel em acetona, em etanol e em metanol.
Conservao Em recipientes bem fechados de vidro
mbar.
Segurana Moderadamente irritante para pele e mucosas.
cido sulfanlico
CAS [6101-32-2]
Sinonmia cido 4-aminobenzenossulfnico.
6
H
7
NO
3
S.H
2
O 191,20;
anidro 173,84.
Descrio Cristais incolores ou p branco.
Caracterstica fsica O cido monoidratado decompe-se
sem fundir a aproximadamente 288 C.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua, praticamente
insolvel em etanol.
cido sulfanlico diazotado SR
Preparao Dissolver, cuidadosamente, 0,2 g de cido
sulfanlico em 20 mL de cido clordrico M, resfriar em
banho de gelo e adicionar, gota a gota, com agitao
contnua, 2,2 mL de soluo de nitrito de sdio a 4% (p/v).
Deixar em banho de gelo por 10 minutos e adicionar 1 mL
de soluo de cido sulfmico a 5% (p/v).
cido sulfanlico SR
Preparao Dissolver 0,5 g de cido sulfanlico fnamente
pulverizado, em gua. Adicionar 6 mL de cido clordrico
6 M. Completar com gua at 100 mL.
cido sulfrico
CAS [7664-93-9]
2
SO
4
98,07
Especifcao Contm, no mnimo 95,0% (p/p).
Descrio Lquido incolor, custico, de consistncia
oleosa, muito higroscpico.
Segurana Irritante. Corrosivo!
cido sulfrico diludo
Usar cido sulfrico SR.
cido sulfrico livre de nitrognio
Especifcao Cumpre o seguinte teste: em 5 mL
de gua, adicionar, cuidadosamente, 45 mL de cido
sulfrico, esperar esfriar para 40 C e adicionar 8 mg de
difenilbenzidina. A soluo resultante levemente rosa ou
um azul plido.
cido sulfrico metanlico 0,1 M
Preparao Diluir 5,4 mL de cido sulfrico com 20
mL de metanol. Completar para 1000 mL com o mesmo
solvente.
Informaes adicionais Preparar 24 horas antes do uso.
cido sulfrico/metanol SR
Preparao Adicionar lentamente 10 mL de cido
sulfrico em 90 mL de metanol.
Observao Manter o sistema resfriado.
cido sulfrico metanlico SR
Preparao A 30 mL de metanol anidro resfriado
em banho de gelo adicionar, cuidadosamente, cido
sulfrico em pequenas quantidades, sob agitao. Esfriar
temperatura ambiente e completar para 100 mL com cido
sulfrico. Homogeneizar.
a
14
cido sulfrico, soluo etanlica
Preparao Cuidadosamente e com constante
resfriamento, adicionar 20 mL de cido sulfrico em 60
mL de etanol. Continuar o resfriamento e diluir para 100
mL com etanol. Preparar imediatamente antes do uso.
cido sulfrico SR
Especifcao Contm cido sulfrico a 10% (p/v) em
gua.
Preparao Adicionar, cuidadosamente, 57 mL de cido
sulfrico em 100 mL de gua, resfriar e diluir para 1000
mL com gua.
cido sulfuroso
CAS [7782-99-2]
2
SO
3
82,07
Especifcao Contm 5,0 a 6,0% (p/p) de dixido de
enxofre puro. Preparar de acordo com o consumo.
Descrio Lquido cido, lmpido, incolor, de odor
sufocante de dixido de enxofre. Ao ar oxida-se
paulatinamente a cido sulfrico.
Conservao Em recipientes quase cheios, bem fechados,
em local frio.
cido tartrico
CAS [87-69-4]
Sinonmia cido L-(+)-tartrico.
4
H
6
O
6
150,09
Descrio Cristais ou ps cristalinos brancos.
Densidade (20 C): 1,756.
em etanol.
cido tiogliclico
CAS [68-11-1]
Sinonmia cido mercaptoactico.
2
H
4
O
2
S 92,11
Descrio Lquido incolor ou prximo a incolor, de odor
forte desagradvel.
Conservao Proteger do ar.
Segurana Pode causar graves queimaduras na pele.
Informao adicional Sua decomposio libera gs
sulfdrico.
cido p-toluenossulfnico
CAS [6192-52-5]
7
H
8
O
3
S.H
2
O 190,21
Especifcao Contm, no mnimo, 87% de C
7
H
8
O
3
S.
Descrio Cristais ou p cristalino branco ou quase
branco.
etanol.
cido tricloroactico
CAS [76-03-9]
2
HC1
3
O
2
163,39
Descrio Cristais incolores ou massa cristalina,
deliquescente, de odor caracterstico fracamente pungente,
irritante.
Caracterstica fsica Faixa de fuso: 55 a 61 C.
Armazenagem Proteger do calor e da umidade.
Segurana cido muito corrosivo.
cido tricloroactico-cloramina-T SR
Soluo A Cloramina-T a 3% (p/v).
Soluo B cido tricloroactico a 25% (v/v) em etanol
absoluto.
Preparao Misturar 10 mL da Soluo A com 40 mL da
Soluo B.
cido trifuoractico
CAS [76-05-1]
Sinonmia cido trifuoroactico.
2
HF
3
O
2
114,02
Descrio Lquido incolor, voltil, de odor irritante e
caracterstico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: 72,4 C.
Densidade: 1,535.
Miscibilidade Miscvel em acetona, benzeno, etanol, ter
etlico, hexano e tetracloreto de carbono.
Segurana Corrosivo. Infamvel. Proteger olhos, pele e
mucosas.
14
Acrilamida
CAS [79-06-1]
Sinonmia 2-Propenamida.
3
H
5
NO 71,08
Especifcao Qualidade apropriada para eletroforese.
Descrio P cristalino branco, ou quase branco, ou
escamas incolores ou brancas.
Solubilidade Muito solvel na gua e no metanol,
facilmente solvel no etanol.
Segurana Altamente txico e irritante. Causa paralisia
do sistema nervoso central. Pode ser absorvido pela pele
ntegra.
Acrilamida/bisacrilamida (29:1) a 30% (p/v) SR
Preparao Preparar uma soluo contendo 290 g de
acrilamida e 10 g de metilenobisacrilamida por 1000 mL
de gua quente. Filtrar.
gar
CAS [9002-18-0]
Sinonmia gar-agar, gelose.
Especifcao Polissacardeo extrado de Gelidium
cartilagineum (L) Gaillon (Gelidiaceae), Gracilaria
confervoides (L) Greville (Sphaerococcaceae) e algas
vermelhas afns (Rhodophyceae).
Descrio P fno, incolor ou ligeiramente amarelado,
seco, hidroflico.
Agarose, gel
CAS [9012-36-6]
Especifcao Polissacardeo linear, neutro, componente
do gar.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua fria e muito
pouco solvel em gua quente.
Uso Eletroforese.
Agarose-DEAE para cromatografa de troca inica
Especifcao Agarose reticulada contendo agrupamentos
dietilaminoetilo. Apresenta-se em forma de esferas.
gua de bromo SR
Preparao Misturar 3 mL de bromo com 100 mL de
gua at saturao. Agitar antes do uso. Aps decantao,
usar a soluo sobrenadante lmpida.
Armazenagem Conservar com excesso de bromo e ao
abrigo da luz.
Segurana Txico.
gua de cloro SR
Especifcao Soluo saturada de cloro em gua.
Armazenagem Proteger da luz e do ar. Manter em local
frio e escuro.
gua isenta de dixido de carbono
Especifcao gua fervida vigorosamente por 5 minutos
ou mais e protegida da atmosfera, durante resfriamento e
conservao.
Conservao Proteger do ar (da absoro de CO
2
).
gua isenta de amnia
Preparao Transferir 0,1 mL de cido sulfrico
96% (p/p) para 100 mL de gua e destilar empregando
equipamento com paredes isentas de amnia.
gua isenta de nitrato
Preparao Transferir 5 mg de permanganato de potssio
e 5 mg de hidrxido de brio para 100 mL de gua e destilar
empregando equipamento com paredes isentas de nitrato.
gua livre de partculas
Especifcao gua obtida por fltrao em membrana de
porosidade de 0,22 m.
Albumina bovina
CAS [9048-46-8]
Sinonmia Albumina srica de origem bovina.
Descrio P branco ou marrom amarelado claro.
Especifcao Contm, no mnimo, 96% de protenas.
gua (5.2.20.3) Determinar em 0,8 g da amostra. No
mximo, 30%.
Armazenagem Em temperaturas entre 2 C e 8 C.
Albumina humana
Sinonmia Albumina srica humana.
Especifcao Contm, no mnimo, 96% de albumina.
Albumina Humana, soluo reagente
Preparao Diluir a soluo de albumina humana com
15% a 25% (p/v) em soluo de cloreto de sdio a 0,9%
(p/v) at uma concentrao de 0,1% (p/v) em protenas.
Ajuste o pH para 3,5-4,5 com cido actico glacial.
lcool isoamlico
CAS [123-51-3]
Sinonmia 3-Metilbutan-1-ol.
5
H
12
O 88,15
a
14
Caracterstica fsica Temperatura de ebulio: cerca de
130 C.
etanol.
lcool isobutlico
CAS [78-83-1]
Sinonmia 2-Metilpropanol, 2-metil-1-propanol,
isobutanol.
4
H
10
O 74,12
ndice de refrao (15 C): 1,397 a 1,399. Temperatura de
Segurana Infamvel.
lcool isoproplico
CAS [67-63-0]
Sinonmia Isopropanol, 2-propanol.
3
H
8
O 60,10
Especifcao Contm, no mnimo, 99,0%.
Descrio Lquido incolor, de odor caracterstico.
0,785. Indice de refrao (20 C): 1,376 a 1,378.
Miscibilidade Miscvel em gua e com etanol.
Segurana Infamvel.
lcool n-amlico
CAS [71-41-0]
Sinonmia 1-Pentanol, pentan-1-ol
5
H
12
O 88,15
Caractersticas fsicas ndice de refrao (20 C):
cerca de 1,41. Temperatura de ebulio: cerca de 137 C.
Temperatura de fuso: cerca de -79 C.
Miscibilidade Ligeiramente solvel em gua e miscvel
em etanol.
Segurana Irritante!
lcool n-proplico
CAS [71-23-8]
Sinonmia 1-Propanol, propanol.
3
H
8
O 60,10
Descrio Lquido lmpido, incolor, de fraco odor
alcolico.
aproximadamente 97 C Densidade: 0,803 a 0,805.
Miscibilidade Miscvel com gua e com etanol.
Segurana Infamvel.
lcool polivinlico
CAS [9002-89-5]
Frmula molecular (C
2
H
4
O)
n

Descrio P branco.
Solubilidade Solvel em gua e insolvel em solventes
orgnicos.
lcool terc-amlico
CAS [75-85-4]
Sinonmia 2-Metil-2-butanol.
5
H
12
O 88,15
Descrio Lquido lmpido e incolor. Voltil.
Caractersticas fsicas Densidade relativa (20 C): cerca
de 0,81. Temperatura de fuso: cerca de -8 C. Temperatura
de ebulio: 102 C.
Miscibilidade Facilmente miscvel em gua. Miscvel em
etanol e em glicerol.
Segurana Infamvel.
lcool tert-butlico
CAS [75-65-0]
Sinonmia 2-Metil-2-propanol.
4
H
10
O 74,12
Descrio Lquido incolor e lmpido, ou massa cristalina
de odor canforado.
Caractersticas fsicas Densidade (25 C): 0,778 a 0,782.
Temperatura de fuso: 25,7 C. Temperatura de ebulio:
82,5 C a 83,5 C.
Miscibilidade Solvel em gua, miscvel com etanol e
ter etlico.
Alumnio, metlico
CAS [7429-90-5]
Elemento e massa atmica Al 26,98
Descrio Metal branco ou quase branco a azulado,
malevel, fexvel. Disponvel em barra, p, tiras ou fos.
Aluminon
CAS [569-58-4]
22
H
23
N
3
O
9
473,43
Descrio Cristais marrons avermelhados.
Solubilidade Facilmente solvel em gua.
14
Amaranto (CI 16185)
CAS [915-67-3]
20
H
11
N
2
Na
3
O
10
S
3
604,06
Descrio P fno, facilmente solvel em gua,
praticamente insolvel em etanol, acetona, ter etlico e
clorofrmio.
Amido iodetado SR
Usar amido iodetado SI.
Amido iodetado SR1
Preparao Dissolver 0,75 g de iodeto de potssio em
100 mL de gua. Aquecer at fervura e adicionar, agitando
constantemente, uma soluo contendo 0,5 g de amido
solvel em 35 mL de gua. Deixar ferver por 2 minutos e
resfriar.
Amido isento de iodeto SR
Usar amido isento de iodeto SI.
Amido solvel
Sinonmia Amilodextrina, amilognio.
Descrio P branco, fno, inodoro, inspido.
Amido SR
Usar amido SI.
Amidos
Descrio Extrados de cariopses maduras de Zea
mays L., Triticum aestivum L. ou Oryza sativa L. (fam.
Graminiae). P branco, fno, inodoro, inspido e que
produz ligeira crepitao quando comprimido.
Informao adicional A rotulagem deve indicar a origem
botnica.
4-Aminoantipirina
CAS [83-07-8]
Sinonmia Aminopirazolona
11
H
13
N
3
O 203,24
Descrio Cristais ou p cristalino, amarelo-claro.
Aminobutanol
CAS [96-20-8]
Nome qumico 2-Amino-1-butanol
4
H
11
NO 89,14
Descrio Lquido oleoso.
Caracterstica fsica Temperatura de ebulio: em torno
de 180 C.
Miscibilidade Miscvel com gua, solvel em lcoois.
2-Aminoeptano
CAS [123-82-0]
Sinonmia 2-Heptanamina; 2-heptilamina;
1-metilexanamina
7
H
17
N 115,22
Descrio Lquido voltil.
de 143 C.
Miscibilidade Pouco miscvel em gua, facilmente
miscvel em clorofrmio, etanol e ter etlico.
4-Aminofenol
CAS [123-30-8]
6
H
7
NO 109,13
Descrio P cristalino branco ou um pouco colorido
devido a exposio ao ar e luz.
C, com decomposio.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua e solvel em
etanol.
2-Aminopiridina
CAS [504-29-0]
Sinonmia -Aminopiridina, 2-piridinamina.
Descrio Cristais grandes ou folhetos.
58 C.
Amnia SR
Descrio Contm 37,5 mL da soluo concentrada
de amnia em 100 mL de soluo aquosa. Esta contm,
no mnimo, 10% (p/v) de hidrxido de amnio
(aproximadamente 6 M).
Amnia 6 M
Usar amnia SR.
Amnia 10 M
Preparao Diluir 56 mL de amnia para 100 mL com
gua.
a
14
Amnia, soluo concentrada
Sinonmia Hidrxido de amnio.
3
17,03
Especifcao Contm, no mnimo, 28,0% (p/p) e, no
mximo, 30,0% (p/p).
Descrio Lquido lmpido, incolor, de odor caracterstico
e asfxiante.
Conservao Em recipientes hermticos, no
completamente cheios.
Segurana Custico.
Anetol
CAS [4180-23-8]
Sinonmia trans-Anetol.
Descrio Massa cristalina branca ou quase branca em
temperatura entre 20 C e 21 C, lquido em temperatura
acima de 23 C.
Caractersticas fsicas ndice de refrao (25 C): cerca
de 1,56. Temperatura de ebulio: cerca de 230 C.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua, facilmente
solvel em etanol e solvel em acetato de etila e ter de
petrleo.
Anidrido actico
CAS [108-24-7]
4
H
6
O
3
102,09
Descrio Lquido mvel, incolor, odor actico intenso
e irritante.
1,075. Faixa de ebulio: 136 a 142 C.
Segurana Facilmente combustvel. Irritante forte.
Anidrido actico-piridina SR
Sinonmia Mistura anidrido actico-piridina SR
Descrio Misturar cautelosamente, e sob refrigerao,
25 g (ou 23 mL) de anidrido actico em 50 mL de piridina
anidra.
Estabilidade Preparar no momento de uso.
Segurana Txico.
Anidrido ftlico
CAS [85-44-9]
8
H
4
O
3
148,12
Descrio Flocos brancos ou quase brancos.
Solubilidade Pouco solvel em gua e solvel em etanol.
Anidrido propinico
CAS [123-62-6]
6
H
10
O
3
130,14
Descrio Lquido incolor de odor pungente.
Caractersticas fsicas Densidade: 1,01. Temperatura de
ebulio: em torno de 167 C.
Solubilidade Solvel em etanol.
Anisaldedo
CAS [123-11-5]
Sinonmia Aldedo ansico e p-metoxibenzaldedo.
8
H
8
O
2
136,14
Descrio Lquido oleoso, incolor e amarelado, de odor
aromtico.
Miscibilidade Pouco solvel em gua, miscvel com
etanol.
Anisaldedo, soluo
Preparao Misturar, na ordem, 0,5 mL de anisaldedo,
10 mL de cido actico glacial, 85 mL de metanol e 5 mL
de cido sulfrico.
Anisaldedo SR
Preparao A 10 mL de anisaldedo adicionar 90 mL
de etanol, misturar, adicionar 10 mL de cido sulfrico e
homogeneizar.
Anisaldedo SR1
Preparao Misturar 25 mL de cido actico glacial com
25 mL de etanol, adicionar 0,5 mL de anisaldedo e 1 mL
de cido sulfrico.
Antitrombina III
CAS [90170-80-2]
Especifcao A antitrombina III purifcada a partir do
plasma humano por cromatografa em gelose-heparina e
deve ter atividade especfca de, no mnimo, 6 UI/mg.
Antitrombina III SR
Preparao Reconstituir a antitrombina III segundo
as indicaes do fabricante e diluir com tampo de tris-
cloreto de sdio de pH 7,5, para obter soluo a 1 UI/mL.
Aprotinina
CAS [9087-70-1]
Descrio P quase branco.
Solubilidade Solvel em gua e em solues isotnicas,
praticamente insolvel em solventes orgnicos.
14
Asiaticosdeo
CAS [16830-15-2]
48
H
78
O
19
958,51
Descrio P branco ou quase branco. Higroscpico.
C, com decomposio.
Solubilidade Solvel em metanol, pouco solvel em
etanol e insolvel em acetonitrila.
Asparagina
CAS [5794-13-8]
4
H
8
N
2
O
3
.H
2
O 150,13
Descrio Cristais incolores, inodoros.
Caractersticas fsicas Ismero L: Temperatura de fuso:
234-235 C. Ismero D: Temperatura de fuso: 215 C.
Solubilidade Pouco solvel em gua , praticamente
insolvel em etanol e em cloreto de metileno.
Azida sdica
CAS [26628-22-8]
Frmula e massa molecular NaN
3
65,01
branco.
em etanol.
Azul cido 83
CAS [6104-59-2]
Sinonmia Azul brilhante.
45
H
44
N
3
NaO
7
S
2
825,99.
Descrio P castanho.
Solubilidade Insolvel em gua fria, pouco solvel em
gua fervendo e em etanol, solvel em cido sulfrico e
em cido actico glacial, solvel em solues diludas dos
hidrxidos de metais alcalinos.
Azul cido 90
CAS [6104-58-1]
47
H
48
N
3
NaO
7
S
2
854,04.
Descrio P castanho escuro, com refexos violceos e
partculas com refexos metlicos.
Solubilidade Solvel na gua e no etanol.
Azul de astra
CAS [82864-57-1]
47
H
52
CuN
14
O
6
S
3
1068,75
Azul de Coomassie SR
Preparao Preparar uma soluo de azul cido 83 a
0,125% (p/v) em uma mistura de cido actico glacial,
metanol e gua (1:4:5) e fltrar.
Azul de sulfano (CI 42045)
CAS [129-17-9]
Sinonmia Azul cido I.
27
H
31
N
2
NaO
6
S
2
566,68
Descrio P violeta. Em solues diludas, apresenta
colorao azul. Aps adio de cido clordrico
concentrado, h mudana de cor para amarelo.
Azul de tetrazlio
CAS [1871-22-3]
40
H
32
N
8
O
2
Cl
2
727,65
Descrio Cristais amarelos.
em clorofrmio, etanol e metanol, insolvel em acetona e
ter etlico.
Blsamo do Canad
CAS [8007-47-4]
Descrio Lquido oleoso amarelo ou esverdeado,
extrado da Abies balsames L., Pinaceae. Com cheiro
agradvel de pinho. Se exposto ao ar, solidifca-se
gradativamente em massa no cristalina.
Caractersticas fsicas Densidade: 0,987 a 0,994. ndice
de refrao: 1,53.
Miscibilidade Miscvel em gua, benzeno, clorofrmio
e xileno.
Informao adicional Usado para fxar de lminas para
microscpio.
Barbalona
CAS [1415-73-2]
Sinonmia Alona.
Descrio Agulhas amarelas ou p cristalino amarelo a
amarelo-escuro. Escurece com a exposio ao ar e luz.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua e em etanol,
solvel em acetona, em amnia e solues hidrxi-
alcalinas.
Barbital
CAS [57-44-3]
8
H
12
N
2
O
3
184,19
calculado em relao substncia dessecada.
inodoro, de sabor fracamente amargo.
Solubilidade Pouco solvel em gua, solvel em gua
fervendo e em etanol.
a
14
Barbital sdico
CAS [144-02-5]
8
H
11
N
2
NaO
3
206,18
Descrio Cristais incolores ou p cristalizado branco,
inodoro, de sabor amargo e fracamente custico.
em etanol.
Brio SRA - 1 mg/mL
Especifcao Contm 1,775 g de cloreto de brio em
gua a 1000 mL
Conservao Em recipientes bem fechados, inertes (tipo
polietileno).
Benzeno
CAS [71-43-2]
Sinonmia Benzol.
6
H
6
78,11
Descrio Lquido lmpido, incolor, refrativo, voltil, de
odor caracterstico.
Caractersticas fsicas Faixa de ebulio: 79 C a 81 C.
Densidade: 0,878 a 0,880. ndice de refrao: 1,5016.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua e miscvel
em etanol.
Segurana Altamente infamvel. Cancergeno.
Informao adicional Sempre que possvel usar tolueno.
Benzenossulfonamida
CAS [98-10-2]
6
H
5
SO
2
NH
2
157,19
Descrio Cristais brancos ou bege-plidos.
Benzil
CAS [134-81-6]
Nome qumico Difeniletanodiona
14
H
10
O
2
210,23
Descrio P cristalino amarelo.
95 C.
em etanol, acetato de etila e tolueno.
Benzoato de benzila
CAS [120-51-4]
Descrio Lquido oleoso, lmpido e incolor. Pelo
resfriamento, forma cristais incolores.
Caractersticas fsicas Temperatura de congelamento:
cerca de 17 C. Temperatura de ebulio: cerca de 324 C.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua e glicerol,
miscvel em etanol, ter etlico e clorofrmio.
Benzoato de colesterila
CAS [604-32-0]
34
H
50
O
2
490,76
Descrio Slido branco.
Solubilidade Insolvel em gua.
Benzoato de metila
CAS [93-58-3]
8
H
8
O
2
136,15
Caractersticas fsicas Densidade (20 C): 1,088.
Temperatura de ebulio: cerca de 200 C.
Benzofenona
CAS [119-61-9]
13
H
10
O 182,22
Descrio P cristalino branco.
Caractersticas Temperatura de fuso: em torno de 48
C.
solvel em etanol.
Benzona
CAS [119-53-9]
Nome qumico 2-Hidroxi-1,2-difeniletanona
14
H
12
O
2
212,25
Descrio Cristais ligeiramente amarelos.
Solubilidade Muito pouco solvel e gua, facilmente
solvel em acetona, solvel em etanol aquecido
Bicarbonato de sdio
CAS [144-55-8]
Sinonmia Carbonato cido de sdio, hidrogenocarbonato
de sdio.
Frmula e massa molecular NaHCO
3
84,01
Especifcao Contm, no mnimo, 99,0% e, no mximo
101,0% (p/p), calculado em base seca.
Descrio P cristalino branco, inodoro, de sabor salgado
e fracamente alcalino. Pelo aquecimento, transforma-se em
carbonato de sdio.
Solubilidade Solvel em gua, praticamente insolvel e
etanol.
14
Bicinconinato dissdico
CAS [979-88-4]
20
H
10
N
2
Na
2
O
4
388,28
Biftalato de potssio
CAS [877-24-7]
Sinonmia Ftalato cido de potssio, hidrogenoftalato de
potssio, diftalato de potssio.
8
H
5
KO
4
204,22
Especifcao Contm, no mnimo, 99,9% e, no mximo,
100,3% (p/p), calculado em relao substncia dessecada
a 120 C durante duas horas.
Solubilidade Solvel em gua e ligeiramente solvel em
etanol.
Biftalato de potssio 0,05 M
Preparao Dissolver 10,21 g em gua a 1000 mL
Bissulfato de potssio
CAS [7646-93-7]
Sinonmia Hidrogenossulfato de potssio; sulfato cido
de potssio.
Frmula e massa molecular KHSO
4
136,16.
Descrio Cristais incolores ou massa branca;
higroscpico.
Caractersticas fsicas Soluo aquosa com carter
fortemente cido. Temperatura de fuso: 197 C.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, resultando em
uma soluo muito cida.
Bissulfato de sdio
CAS [7681-38-1]
Sinonmia Sulfato cido de sdio, hidrogenossulfato de
sdio, pirossulfato de sdio.
Frmula e massa molecular NaHSO
4
120,06
315 C.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, muito solvel
em gua fervendo. Decompe em etanol, formando sulfato
de sdio e cido sulfrico livre.
Bissulfto de sdio
CAS [7631-90-5]
Sinonmia Hidrogenossulfto de sdio, sulfto cido de
sdio.
Frmula e massa molecular NaHSO
3
104,06
Descrio P cristalino branco ou quase branco. A
exposio ao ar, pode causar perda de dixido de enxofre e
a substncia gradualmente oxidada para sulfato.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e ligeiramente
solvel em etanol.
Bitartarato de sdio
CAS [6131-98-2]
Sinonmia cido tartarato de sdio.
4
H
5
NaO
6
.H
2
O 190,08
Descrio Cristais ou p cristalino branco.
Bitartarato de sdio SR
Preparao Dissolver 1 g de bitartarato de sdio em gua
e completar o volume para 10 mL. Preparar a soluo para
uso imediato.
Biureto
CAS [108-19-0]
2
H
5
N
3
O
2
103,08
Descrio Cristais brancos, ou quase brancos.
Higroscpicos.
Caracterstica fsica Faixa de fuso: 188 C a 190 C,
com decomposio.
Solubilidade Solvel em gua, ligeiramente solvel em
etanol, muito pouco solvel no ter etlico.
Conservao Em recipiente fechado.
Biureto, reagente
Preparao Dissolver 1,5 g de sulfato cprico penta-
hidratado e 6 g de tartarato de sdio e potssio em 500 mL
de gua . Adicionar 300 mL de soluo de hidrxido de
sdio a 10% (p/v) isenta de carbonato, completar 1000 mL
com a mesma soluo e misturar.
Boldina
CAS [476-70-0]
19
H
21
NO
4
327,37
Descrio P cristalino branco, ou quase branco.
etanol e em solues cidas diludas.
Borneol
CAS [507-70-0]
10
H
18
O 154,25
Descrio Cristais incolores, sublimam rapidamente.
solvel em etanol e em ter de petrleo.
a
14
Bromato de potssio
CAS [7758-01-2]
Frmula e massa molecular KBrO
3
167,00
Descrio Cristais ou p granular branco ou quase
branco.
Solubilidade Solvel em gua e pouco solvel em etanol.
Bromelina
CAS [37189-34-7]
Especifcao Concentrado de enzimas proteolticas
derivadas da Ananas comosus Merr.
Descrio P amarelado.
Bromelina SR
Preparao Solubilizar 1 g de bromelina em 100 mL de
uma mistura de tampo fosfato pH 5,5 e soluo de cloreto
de sdio a 0,9% (p/v) (1:9).
Brometo de dimdio
CAS [518-67-2]
20
H
18
BrN
3
380,28
Descrio - Cristal vermelho-escuro.
Solubilidade Pouco solvel em gua a 20 C, ligeiramente
solvel em gua a 60 C e em etanol.
Brometo de dimdio-azul de sulfano SR
Preparao Dissolver, separadamente, 0,5 g de brometo
de dimdio e 0,25 g de azul de sulfano em 30 mL de uma
mistura a quente de etanol e gua (1:9) (v/v) e agitar.
Misturar as duas solues e completar a 250 mL com a
mesma mistura de solventes. Misturar 20 mL desta soluo
com 20 mL de uma soluo de cido sulfrico a 14 %
(v/v), diluda previamente com cerca de 250 mL de gua e
completar a 500 mL com gua.
Armazenagem Proteger da exposio luz.
Brometo de hexadimetrina
CAS [28728-55-4]
Frmula molecular (C
13
H
30
Br
2
N
2
)
n
Descrio P branco, ou quase branco. Higroscpico.
Polmero amorfo.
Brometo de iodo
CAS [7789-33-5]
Frmula e massa molecular IBr 206,81
Descrio Cristais marrons escuros ou azuis escuros.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: cerca de
116 C. Temperatura de fuso: cerca de 40 C.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, em etanol e em
cido actico glacial.
Brometo de iodo SR
Preparao Dissolver 13,2 g de iodo em cido actico
glacial a 1000 mL. Determinar o teor de iodo em 20
mL desta soluo, mediante titulao com tiossulfato
de sdio 0,1 M SV. Ao restante da soluo de iodo (980
mL), adicionar quantidade de bromo equivalente ao iodo
determinado.
Conservao Em recipientes de vidro bem fechados.
Brometo de potssio
CAS [7758-02-3]
Frmula e massa molecular KBr 119,00
sabor acentuadamente salgado.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e em glicerol,
pouco solvel em etanol.
Brometo de tetrabutilamnio
CAS [1643-19-2]
16
H
36
BrN 322,37
Descrio P branco cristalino.
Caracterstica fsica Faixa de fuso: entre 103 C e 105 C.
Brometo de tetraeptilamnio
CAS [4368-51-8]
28
H
60
BrN 490,69
Descrio P branco, escamoso.
Brometo mercrico
CAS [7789-47-1]
Sinonmia Brometo de mercrio(II)
Frmula e massa molecular Br
2
Hg 360,39
Descrio Cristais brancos ou p cristalino, sensvel luz.
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: em torno
de 237 C.
Segurana Veneno!
14
Bromo
CAS [7726-95-6]
Frmula e massa molecular Br
2
159,80
Descrio Lquido vermelho-marrom, irritante, sufocante
e fumegante.
Caracterstica fsica Densidade (20 C): aproximadamente 3,1.
Miscibilidade Pouco solvel em gua e solvel em etanol.
Conservao Em recipientes hermticos ou ampolas.
Segurana Txico.
Bromo 0,2 M em cido actico glacial
Preparao Juntar 15 g de brometo de potssio e 5,5 mL
de bromo em cido actico glacial a 1000 mL. Agitar e
deixar em repouso por 24 horas. Titular antes do uso.
Segurana Txico.
Bromo SR
Preparao Dissolver 30 g de bromo e 30 g de brometo
de potssio em quantidade sufciente de gua para fazer
100 mL.
1-Butanol
CAS [71-36-3]
Sinonmia lcool butlico normal ou primrio, n-butanol,
lcool n-butlico.
4
H
10
O 74,12
Descrio Lquido lmpido, incolor, retrativo, de odor
caracterstico.
Caractersticas fsicas Faixa de ebulio: 117 C a 118
C. Densidade (20 C): 0,810. ndice de refrao (20 C):
1,3993.
Butanossulfonato de sdio
CAS [2386-54-1]
3
H
9
NaO
3
S 160,17
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: maior que
300 C.
Butil hidroxianisol
CAS [25013-16-5]
Sinonmia BHA.
11
H
16
O
2
180,24
Especifcao Mistura de dois ismeros: 2-terc-butil-4-
hidroxianisol e 3-terc-butil-4-hidroxianisol
Descrio Slido de aspecto ceroso.
Caracterstica fsica Faixa de fuso: de 48 C a 55 C.
em ter de petrleo.
Butilamina
CAS [109-73-9]
Sinonmia n-Butilamina
4
H
11
N 73,14
Descrio Lquido incolor, de odor amoniacal.
de 78 C.
Miscibilidade Miscvel em gua e etanol.
Informao adicional Destilar e utilizar em, no mximo,
30 dias.
Butilparabeno
CAS [94-26-8]
11
H
14
O
3
194,23
solvel em acetona, ter etlico e clorofrmio.
Calciferol
CAS [50-14-6]
Sinonmia Ergocalciferol, vitamina D
2
.
28
H
44
O 396,65
Especifcao Um grama corresponde em atividade anti-
raqutica a 40 milhes de Ul.
solvel em etanol, solvel em leo graxos.
Conservao Em recipientes hermticos, sob gs inerte.
Armazenagem Proteger do calor e da luz.
Clcio SRA - 400 ug/mL
Especifcao Contm 1,001 g de carbonato de clcio em
25 mL de cido clordrico M. Ferver. Completar com gua
a 1000 mL.
polietileno).
Canfeno
CAS [79-92-5]
10
H
16
136,23
a
14
Cnfora
CAS [76-22-2]
10
H
16
O 152,23
Caolim leve
CAS [1332-58-7]
Especifcao Silicato de alumnio natural, hidratado,
purifcado. Contm um agente de dispersante apropriado.
Descrio P branco, pouco denso, isento de partculas
granulosas, untuoso ao tato.
Solubilidade Praticamente insolvel na gua e nos cidos
inorgnicos.
Partculas grossas Adicionar 5 g da amostra numa
proveta com rolha (de 160 mm de comprimento e 35 mm de
dimetro interno) e junte 60 mL de soluo de pirofosfato
de sdio a 1% (p/v). Agitar vigorosamente e deixar em
repouso durante 5 minutos. Utilizando uma pipeta, retirar
50 mL do lquido sobrenadante, a partir de uma posio
em torno de 5 cm abaixo da superfcie da preparao. Ao
lquido restante junte 50 mL de gua, agitar, deixar em
repouso durante 5 minutos e retire 50 mL do lquido nas
condies prescritas anteriormente. Repetir o processo at
retirar um total de 400 mL. Transferir a suspenso para uma
cpsula de porcelana, evaporar at secura em banho-maria
e dessecar a 100-105 C at massa constante. A massa do
resduo no superior a 25 mg (0,5%).
Partculas fnas Dispersar 5 g da amostra em 250 mL de
gua, agitar vigorosamente durante 2 minutos e transferir,
imediatamente, para uma proveta de vidro (de 50 mm de
dimetro interno). Utilizando uma pipeta, transferir 20
mL do lquido para um vidro de relgio. Evaporar at
secura em banho-maria e dessecar a 100-105 C at massa
constante (m
1
). Deixar em repouso a 20 C durante 4 horas
a suspenso restante. Retirar 20 mL do lquido, a partir
de uma posio em torno de 5 cm abaixo da superfcie
da preparao, evitando dispersar o sedimento. Transferir
para um vidro de relgio, evaporar at secura em banho-
maria e dessecar a 100-105 C at massa constante (m
2
). O
valor de m
2
no inferior a 70% do valor de m
1
.
Carbonato de amnio
CAS [506-87-6]
Frmula e massa molecular (NH
4
)
2
CO
3
96,09
Especifcao Mistura em propores variveis de
bicarbonato de amnio (NH
4
HCO
3
79,06) e carbamato
de amnio (H
2
NCOONH
4
78,07). Contm, no mnimo,
30,0% de NH
3
(MM 17,3) (p/p).
Descrio Massas cristalinas brancas, translcidas, de
odor amoniacal forte.
Solubilidade Solvel em gua. Decompe em gua
fervente.
Armazenagem Proteger da luz e do calor.
Carbonato de amnio SR
Especifcao Contm 15,8 g de carbonato de amnio em
gua a 100 mL.
Carbonato de clcio
CAS [471-34-1]
Frmula e massa molecular CaCO
3
100,09
calculado em substncia seca.
Descrio P branco, inodoro e inspido.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua.
Carbonato de estrncio
CAS [1633-05-2]
Frmula e massa molecular SrCO
3
147,64
Descrio P branco, inodoro e sem sabor.
Carbonato de ltio
CAS [554-13-2]
Frmula e massa molecular Li
2
CO
3
73,89
Especifcao Contm, no mnimo, 98,5%, calculado em
base seca.
Descrio P branco, leve, inodoro.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua e muito
Carbonato de potssio, anidro
CAS [584-08-7]
Frmula e massa molecular K
2
CO
3
138,21
Descrio P granular ou grnulos brancos ou quase
brancos. Higroscpico.
Solubilidade Muito solvel em gua e praticamente
insolvel em etanol.
Carbonato de potssio, sesqui-hidratado
CAS [6381-79-9]
2
CO
3
.1H
2
O 165,23
Descrio Cristais granulares pequenos.
Segurana Irritante! Custico!
14
Carbonato de sdio, anidro
CAS [497-19-8]
Formula e massa molecular Na
2
CO
3
105,99
calculado em base seca.
Descrio P branco, higroscpico.
Carbonato de sdio, deca-hidratado
CAS [6132-02-1]
Frmula e massa molecular Na
2
CO
3
.10H
2
O 286,09
Descrio Cristais transparentes, incolores, eforescentes,
ou p cristalino branco; inodoro, de sabor alcalino e
salgado.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, e praticamente
insolvel em etanol.
Carbonato de sdio, monoidratado
CAS [5968-11-6]
2
CO
3
.H
2
O 124,00
Especifcao Contm, no mnimo, 83,0% (p/p)
Descrio Cristais incolores ou p cristalino branco;
inodoro, de sabor alcalino e salgado.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, e praticamente
insolvel em etanol.
Informao adicional Quando prescrito carbonato de
sdio para mistura em p, usar Na
2
CO
3
.H
2
O .
Carbonato de sdio SR
Especifcao Contm 10,6 g de carbonato de sdio
anidro em 100 mL de gua.
Carvona
CAS [2244-16-8]
10
H
14
O 150,24
ebulio: cerca de 230 C. Poder rotatrio (20 C): cerca
de +61.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua, miscvel
em etanol.
Catequina
CAS [154-23-4]
15
H
14
O
6
.xH
2
O 290,27
(para a substncia anidra)
Caractersticas fsicas Faixa de fuso: 93 C a 96 C, ou
175 C a 177 C quando na forma anidra.
Cefalina
Especifcao Consiste em steres de cido
glicerofosfrico com cidos graxos de cadeia longa, sendo
o grupo fosfato esferifcado com etanolamina.
Descrio Substncia amorfa amarelada, de odor e sabor
caractersticos.
Categoria Hemosttico local e reagente laboratorial em
testes de funo heptica.
Cefalina SR
Preparao - Adicionar 20 mL de acetona a uma quantidade
de 0,5 a 1 g de p de crebro de boi, deixar em repouso
durante 2 horas. Centrifugar durante 2 minutos e decantar
o lquido sobrenadante. Secar o resduo a presso reduzida.
Juntar 20 mL de clorofrmio ao material seco. Deixar em
repouso durante 2 horas, agitar frequentemente. Depois de
eliminar o material slido, por fltrao ou centrifugao,
evaporar o clorofrmio a presso reduzida. Colocar o
resduo em suspenso em 5 a 10 mL de soluo de cloreto
de sdio a 0,9 % (p/v). Os solventes utilizados para preparar
este reagente contm um antioxidante apropriado, tal como
o butil hidroxianisol a 0,002% (p/v).
Conservao Utilizar em at 3 meses, aps congelamento
ou lioflizao.
Celulose cromatogrfca
CAS [9004-34-6]
Sinonmia Celulose para cromatografa.
Descrio P fno, branco, homogneo. Tamanho mdio
de partculas no menor que 30 m.
Categoria Suporte para cromatografa.
Chumbo SRA - 100 ug/mL
Especifcao Contm 0,16 g de nitrato de chumbo(II)
em 5 mL de cido ntrico. Completar com gua a 1000 mL.
polietileno).
Cianeto de potssio
CAS [151-50-8]
Frmula e massa molecular KCN 65,12
Descrio P cristalino, massas ou grnulos brancos;
deliquescente.
a
14
Estabilidade Decompe-se gradualmente por exposio
ao ar, dixido de carbono e umidade.
Segurana Veneno!
Cianeto de potssio SR
Preparao Dissolver 50 g de cianeto de potssio em
gua destilada, completar o volume para 100 mL. Remover
o chumbo dessa soluo pela extrao com pores
sucessivas de soluo extratora de ditizona. Extrair a
ditizona remanescente na soluo de cianeto agitando
com clorofrmio. Diluir a soluo de cianeto com gua
destilada sufciente para que, cada 100 mL, contenha 10 g
de cianeto de potssio
Segurana Veneno!
Cianeto-amnia SR
Preparao Dissolver 2 g de cianeto de potssio em 15
mL de hidrxido de amnio e diluir para 100 mL com gua
destilada.
Cianoacetato de etila
CAS [105-56-6]
5
H
7
NO
2
113,11
Descrio Lquido incolor ou amarelo plido.
Caractersticas fsicas Densidade (25 C): 1,056. Faixa
de ebulio: 205 C a 209 C, com decomposio.
etanol e ter etlico.
Cicloexano
CAS [110-82-7]
6
H
12
84,16
caracterstico (semelhante ao da gasolina).
0,78. ndice de refrao (20 C): 1,426 a 1,427.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua. Miscvel
em solventes orgnicos.
Segurana Infamvel.
Cinamato de benzila
CAS [103-41-3]
16
H
14
O
2
238,28
Descrio Cristais incolores ou amarelados.
Cinamato de metila
CAS [103-26-4]
10
H
10
O
2
162,19
Temperatura de ebulio: cerca de 260 C. ndice de
refrao (20 C): cerca de 1,56.
em etanol.
Cinchonina
CAS [118-10-5]
19
H
22
N
2
O 294,39
Descrio P cristalino branco, ou quase branco.
Caractersticas fsicas Poder rotatrio especfco (20
C): +225 a +230, determinado em uma soluo a 5%
(p/v) em etanol a 96% (v/v). Temperatura de fuso: cerca
de 263 C.
1,8-Cineol
CAS [470-82-6]
Sinonmia Eucaliptol.
10
H
18
O 154,25
em etanol.
Citral
CAS [5392-40-5]
10
H
16
O 152,24
Descrio Lquido amarelo claro.
em etanol e glicerol.
Citrato de amnio SR
Preparao Dissolver 40 g de cido ctrico em 90 mL de
gua destilada. Acrescentar duas ou trs gotas de vermelho
de fenol a 0,1% (p/v) em etanol. Adicionar, cuidadosamente,
hidrxido de amnio at que a soluo adquira colorao
avermelhada. Remover qualquer chumbo presente pela
extrao com pores de 20 mL de soluo extratora de
ditizona at que a colorao verde-alaranjada na soluo
de ditizona seja mantida.
Citrato cprico alcalino SR
Preparao Sob aquecimento, dissolver 173 g de citrato
de sdio e 177 g de carbonato de sdio monoidratado
em 700 mL de gua. Filtrar se necessrio para obter uma
soluo lmpida. Em um frasco separado, dissolver 17,3
14
g de sulfato cprico penta-hidratado em 100 mL de gua.
Adicionar (lentamente e sob agitao constante) sobre esta
soluo, a primeira soluo preparada. Completar para o
volume de 1000 mL com gua.
Citrato de sdio
CAS [6132-04-3]
Sinonmia Citrato trissdico.
6
H
5
Na
3
O
7
.2H
2
O 294,10
Descrio Cristais ou p cristalino branco, inodoro, de
sabor salgado, refrescante. Deliquescente.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e praticamente
insolvel em etanol.
Citronelal
CAS [106-23-0]
10
H
18
O 154,25
Descrio Lquido incolor ou amarelo claro.
ndice de refrao (20 C): cerca de 1,446.
Miscibilidade Muito pouco solvel em gua e solvel
em etanol.
Citronelol
CAS [106-22-9]
10
H
20
O 156,26
Caractersticas fsicas Densidade (20 C): 0,857. ndice
de refrao (20 C): 1,456. Faixa de ebulio: 220 C a
222 C.
em etanol.
Cloramina-T
CAS [7080-50-4]
Sinonmia Sal sdico tri-hidratado da N-cloro-p-
toluenossulfonamida.
7
H
7
ClNNaO
2
S.3H
2
O
281,69
Descrio Cristais eforescentes brancos ou levemente
amarelados ou p cristalino.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, solvel
em etanol com decomposio, insolvel em benzeno,
clorofrmio e ter etlico.
Conservao Em recipientes perfeitamente fechados,
protegidos da luz, em refrigerador.
Clorato de potssio
CAS [3811-04-9]
Frmula e massa molecular KClO
3
122,55
Descrio Cristais ou grnulos, ou p branco ou quase
branco.
Segurana Evitar o contato com materiais orgnicos ou
outras substncias oxidveis.
Cloreto cobaltoso
CAS [7791-13-1]
Sinonmia Cloreto de cobalto(II).
Frmula e massa molecular CoCl
2
.6H
2
O 237,93
Descrio P cristalino ou cristais vermelho-violceos.
Cloreto cobaltoso SR
Especifcao Contm 6,5 g, adicionados de 70 mL de
cido clordrico SR, em gua a 100 mL.
Cloreto de acetila
CAS [75-36-5]
2
H
3
ClO 78,50
Descrio Lquido lmpido e incolor. Infamvel.
Decompe em contato com gua e com etanol.
Temperatura de ebulio: 52 C.
Miscibilidade Miscvel em cloreto de etileno, ter etlico
e cido actico glacial.
Segurana Irritante para os olhos!
Cloreto de alumnio hexa-hidratado
CAS [7784-13-6]
Frmula e massa molecular AlCl
3
.6H
2
O 241,43
Descrio P branco ou levemente amarelado ou cristais
incolores, deliquescente.
Solubilidade Muito solvel em gua, facilmente solvel
em etanol, solvel em glicerol.
Cloreto de alumnio SR
Preparao Dissolver 2 partes de cloreto de alumnio
hexa-hidratado em gua sufciente para 3 partes. Tratar a
soluo com carvo ativado, fltrar e, se necessrio, ajustar
o pH para 1,5 com hidrxido de sdio a 1% (p/v).
a
14
Cloreto de amnio
CAS [12125-02-9]
4
Cl 53,49
inodoro, de sabor salgado. Higroscpico.
Caracterstica fsica Sublima sem fundir a 338 C.
Cloreto de amnio SR
Especifcao Contm 10,7 g em gua a 100 mL
(aproximadamente 2 M).
Cloreto de amnio-hidrxido de amnio SR
Preparao Misturar volumes iguais de hidrxido de
amnio e gua e saturar com cloreto de amnio.
Cloreto de brio
CAS [10326-27-9]
Frmula e massa molecular BaCl
2
.2H
2
O 244,27.
em etanol.
Segurana Txico!
Cloreto de brio SR
Especifcao Contm 10 g em gua a 100 mL.
Cloreto de benzalcnio
CAS [8001-54-5]
Frmula e massa molecular [C
6
H
5
CH
2
N(CH
3
)
2
R]
+
Cl
-
-
360,00 (mdia)
Composio qumica Mistura de cloretos de
alquildimetilbenzilamnio, em que R representa alquila,
a partir de n-C
8
H
17
e homlogos superiores: n-C
12
H
25
,
n-C
14
H
29
, n-C
16
H
33
, em maior proporo.
Especifcao Contm, no mnimo, 95,0% em relao
mistura dessecada. Contedo dos homlogos alquilados
presentes, em relao ao total calculado sobre base seca:
n-C
12
H
25
: no mnimo 40,0% (p/p); n-C
14
H
29
: no mnimo
10,0% (p/p); a soma dos dois homlogos acima: no mnimo
70,0% (p/p).
Descrio P amorfo ou massa gelatinosa branca ou
branco-amarelada, de odor aromtico e de sabor amargo.
Solubilidade Muito solvel em gua e em etanol. Em
soluo aquosa, forma espuma sob agitao.
Armazenagem Proteger da luz e do ar.
Categoria Desinfetante. Detergente. Conservante.
Cloreto de benzetnio
CAS [121-54-0]
27
H
42
ClNO
2
.H
2
O 466,09
Descrio Cristais incolores, ou p fno branco, ou quase
branco.
Cloreto de benzila
CAS [100-44-7]
Sinonmia Clorometilbenzeno
7
H
7
Cl 126,58
Caractersticas fsicas Densidade (20 C): 1,100.
Temperatura de ebulio: 179 C. Faixa de fuso: -48 C
a -43 C.
Miscibilidade Insolvel em gua. Miscvel em etanol,
Armazenamento Proteger do calor.
Cloreto de clcio
CAS [10035-04-8]
Frmula e massa molecular CaCl
2
.2H
2
O 147,02
Descrio P cristalino ou grnulos brancos, inodoro, de
sabor salgado e fortemente amargo. Higroscpico.
etanol.
Cloreto de clcio, anidro
CAS [10043-52-4]
Frmula e massa molecular CaCl
2
110,99
Especifcao Contm, no mnimo, 98,0%(p/p), calculado
Descrio Grnulos brancos e secos. Deliquescentes.
em etanol e em metanol.
Conservao Em recipientes hermticos
Armazenagem Proteger da umidade
Categoria Dessecante
14
Cloreto de clcio SR
Especifcao Contem 7,35 g de cloreto de clcio em
gua a 100 mL (aproximadamente 0,5 M).
Cloreto de csio
CAS [7647-17-8]
Frmula e massa molecular CsCl 168,36
em metanol e praticamente solvel em acetona.
Cloreto de estanho(II) SR
Preparao Aquecer 20 g de estanho com 85 mL de cido
clordrico at que no ocorra mais liberao de hidrognio.
Cloreto de magnsio
CAS [7791-18-6]
Frmula e massa molecular MgCl
2
6H
2
O 203,30
Especifcao Contm, no mnimo, 98,0 % (p/p).
Descrio Cristais incolores, de sabor amargo.
Higroscpico.
em etanol.
Cloreto de mercrio(II)
CAS [7487-94-7]
Sinonmia Cloreto mercrico.
Frmula e massa molecular HgCl
2
271,50
Descrio Cristais incolores ou p cristalino branco ou
quase branco, ou massa cristalizada; inodoro.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: 277 C
(volatiliza a temperatura de aproximadamente 300 C).
Solubilidade Solvel em gua e em glicerol, facilmente
solvel em etanol.
Segurana Irritante. Custico. Txico. Poluente.
Informao adicional Antdoto: dimercaprol.
Cloreto de metileno
CAS [75-09-2]
Sinonmia Diclorometano.
2
Cl
2
84,94
semelhante ao do clorofrmio.
aproximadamente 40

C. Densidade: aproximadamente
1,32. ndice de refrao (20 C):1 ,424.
Miscibilidade Ligeiramente solvel em gua, miscvel
em etanol.
Segurana Irritante. Txico.
Cloreto de metileno saturado com amnia
Preparao Misturar 100 mL de cloreto de metileno
com 30 mL de soluo concentrada de amnia em funil
de separao. Deixar separar as fases e utilizar a camada
inferior.
Cloreto de metiltionnio
CAS [7220-79-3]
Sinonmia Cloreto de metiltionnio tri-hidratado, azul de
metileno.
16
H
18
ClN
3
.3H
2
O 373,90
Descrio P cristalino verde-escuro ou bronze. Pode ser
encontrado em diferentes forma hidratadas.
Cloreto de metiltionnio SR
Sinonmia Azul de metileno SR
Preparao Dissolver 23 mg de cloreto de metiltionnio
em quantidade sufciente de gua para fazer 100 mL.
Cloreto de metiltionnio SR1
Sinonmia Azul de metileno SR1
Preparao Dissolver 125 mg de cloreto de metiltionnio
em 100 mL de etanol e diluir em etanol para fazer 250 mL.
Cloreto de nquel(II)
CAS [7791-20-0]
Frmula e massa molecular NiCl
2
.6H
2
O 237,71
Descrio P cristalino verde, higroscpico.
Cloreto de nitrobenzola
CAS [122-04-3]
7
H
4
ClNO
3
185,57
Descrio Cristais amarelos, de odor pungente.
73 C.
Cloreto de ouro
CAS [16961-25-4]
Frmula e massa molecular HAuCl
4
.3H
2
O 393,83
Descrio Cristais monoclnicos amarelo-avermelhado a
amarelo-dourado. Muito higroscpio e deliquescente.
a
14
Cloreto de ouro SR
Preparao Dissolver 1 g de cloreto de ouro em 35 mL
de gua.
Cloreto de paldio
CAS [7647-10-1]
Frmula e massa molecular PdCl
2
177,31
Especifcao Contm, no mnimo, 59,0% (p/p) em
paldio.
Descrio P cristalino marrom avermelhado.
Caracterstica fsica Em altas temperaturas decompe-se
em paldio e cloro.
Segurana Txico!
Cloreto de potssio
CAS [7447-40-7]
Frmula e massa molecular KCl 74,55
inodoro, de sabor salino, fracamente amargo.
Cloreto de potssio, soluo saturada
Cloreto de sdio
CAS [7647-14-5]
Frmula e massa molecular NaCI 58,44
Especifcao Contm, no mnimo, 99,0% (p/p) calculado
inodoro, de sabor salino.
insolvel em etanol anidro.
Informao adicional Sal isento de aditivo.
Cloreto de sdio a 0,9% (p/v)
Sinonmia Cloreto de sdio aproximadamente 0,15 M,
soluo de cloreto de sdio isotnica, soluo fsiolgica,
soluo salina.
Descrio Contm 9 g de cloreto de sdio em gua a
1000 mL.
Cloreto estanoso
CAS [10025-69-1]
Frmula e massa molecular SnCl
2
.2H
2
O 225,63
Descrio Cristais incolores ou quase incolores.
em etanol, em cido actico glacial, e em cido clordrico
diludo e concentrado.
Armazenagem Proteger do ar e do calor.
Cloreto estanoso SR
Especifcao Contm 10 g de cloreto estanoso em cido
clordrico a 100 mL.
Cloreto estanoso SR1
Nome alternativo Cloreto de estanho(II) SR.
Preparao Aquecer 20 g de estanho com 85 mL de cido
clordrico at que no ocorra mais liberao de hidrognio.
Cloreto frrico
CAS [10025-77-1]
Sinonmia Cloreto de ferro hexa-hidratado.
Frmula e massa molecular FeCl
3
.6H
2
O 270,30
Especifcao Contm, 99,0% (p/p), calculado sobre a
substncia dessecada.
Descrio Massa cristalizada, amarelo-alaranjada ou
marrom. Deliquescente.
Cloreto frrico SR (aproximadamente 0,4 M)
Usar cloreto frrico SI.
Cloreto frrico cido SR
Preparao Dissolver 15 mg de cloreto frrico hexa
-hidratado em 20 mL de mistura de cido actico glacial e
cido sulfrico (1:1).
Cloreto frrico metanlico
Preparao Dissolver 1 g de cloreto frrico em 100 mL
de metanol.
Cloreto mercrico SR (aproximadamente 0,2 M)
Especifcao Contm 5,4 g de cloreto de mercrio(II)
em gua a 100 mL.
14
Cloreto platnico SR
Sinonmia Cloreto de platina SR
Preparao Dissolver 2,6 g de cido cloroplatnico em
gua a 20 mL.
Cloridrato de benzola
CAS [98-88-4]
7
H
5
ClO 140,57
Descrio Lquido incolor. Decompe em gua e etanol.
Cloridrato de (2-cloroetil)dietilamina
CAS [869-24-9]
6
H
14
ClN.HCl 172,10
Descrio P cristalino, branco, muito solvel em gua
e em metanol, facilmente solvel em cloreto de metileno,
praticamente insolvel em n-hexano.
211 C.
Cloridrato de dimetil-p-fenilenodiamina
CAS [536-46-9]
Sinonmia Dicloridrato de N,N-dimetil-p-fenilenodiamina.
8
H
12
N
2
.2HCl 209,12
Higroscpico.
etanol.
Cloridrato de o-fenilenodiamina
CAS [615-28-1]
Sinonmia Dicloridrato de 1,2-benzenodiamina.
6
H
8
N
2
.2HCl 181,14
Descrio P branco ou levemente rosado.
Cloridrato de p-fenilenodiamina
CAS [624-18-0]
Sinonmia Dicloridrato de 1,4-benzenodiamina.
Formula e massa molecular C
6
H
8
N
2
.2HCl 181,14
Descrio P cristalino branco, torna-se avermelhado em
contato com o ar.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, pouco solvel
em etanol e ter etlico.
Cloridrato de fenilidrazina
CAS [59-88-1]
6
H
8
N
2
.HCl 144,60
Descrio P cristalino branco ou quase branco, se
tornando marrom pela exposio ao ar.
Armazenagem Protegido da luz.
Cloridrato de fenilidrazina SR
Preparao - Dissolver 0,9 g de cloridrato de fenilidrazina
em 50 mL de gua. Descorar com carvo ativado e fltrar.
Recolher o fltrado em balo volumtrico de 250 mL,
adicionar 30 mL de cido clordrico e completar para
volume com gua.
Cloridrato de hidrastina
CAS [5936-28-7]
21
H
22
ClNO
6
419,86
Descrio P branco, ou quase branco. Higroscpico.
Caractersticas fsicas Poder rotatrio (17 C): cerca de
+127. Temperatura de fuso: cerca a 116 C.
Cloridrato de hidroxilamina
CAS [5470-11-1]
4
ClO 69,49
aproximadamente 151 C

.
Cloridrato de hidroxilamina SR
Preparao Dissolver 5 g em 5 mL de gua quente.
Completar a 100 mL com etanol.
Segurana Infamvel.
Cloridrato de hidroxilamina SR1
Preparao Dissolver 20 g de cloridrato de hidroxilamina
em gua destilada para obter, aproximadamente, 65 mL.
Transferir para funil de separao. Acrescentar cinco gotas
de azul de timol SI e adicionar hidrxido de amnio at que
a soluo adquira cor amarela. Adicionar 10 mL de soluo
aquosa de dietilditiocarbamato de sdio a 4% (p/v), agitar,
e deixar em repouso por 5 minutos. Extrair essa soluo
com sucessivas pores de 10 a 15 mL de clorofrmio at
que uma poro de 5 mL do extrato de clorofrmio no
adquira colorao amarela quando agitada com sulfato
cprico a 12,5% (p/v). Adicionar cido clordrico 3 M at
obter colorao rosa (se necessrio, adicionar uma ou duas
a
14
gotas de azul de timol SI) e diluir pra 100 mL com gua
destilada.
Cloro SR
Especifcao Soluo saturada de cloro em gua.
Conservao Em frascos completamente cheios e bem
fechados.
Armazenagem Em local frio, protegido da luz e do ar.
Observaes A soluo tende a se deteriorar mesmo se
protegida da luz e do ar.
Estabilidade Utilizar soluo recm preparada.
p-Cloroacetanilida
CAS [539-03-7]
8
H
8
ClNO 169,61
Descrio P cristalino.
C.
em etanol.
Clorobenzeno
CAS [108-90-7]
6
H
5
Cl 112,56
Descrio Lquido incolor, refringente, de odor
caracterstico.
1,11. ndice de refrao (20 C): 1,5251.
Segurana Txico. Infamvel.
1-Cloro-2,4-dinitrobenzeno
CAS [97-00-7]
6
H
3
ClN
2
O
4
202,55
Descrio Cristais amarelo-plidos ou p cristalino.
51 C.
Clorofrmio
Sinonmia Triclorometano
Frmula e massa molecular CHCl
3
119,40.
Descrio Lquido mvel, incolor, odor adocicado.
Segurana Txico.
Clorofrmio isento de lcool
Preparao Preparar imediatamente antes do uso. Agitar
cuidadosamente 20 mL de clorofrmio com 20 mL de gua
por 3 minutos. Retirar com cuidado a fase orgnica e lavar
com duas pores de 20 mL de gua. Filtrar o clorofrmio
atravs de papel seco. Adicionar 5 g de sulfato de sdio
anidro, agitar por 5 minutos e deixar em repouso por 2
horas. Decantar ou fltrar.
Clorotiazida
CAS [58-94-6]
7
H
6
ClN
3
O
4
S
2
295,73
Descrio P cristalino branco ou quase branco, inodoro.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua, ligeiramente
solvel em acetona, pouco solvel em etanol. Dissolve em
solues diludas de hidrxi-alcalinos.
Cobaltinitrito de sdio
CAS [13600-98-1]
3
CoN
6
O
12
403,94
Descrio P cristalino amarelo-alaranjado.
em etanol.
Cobaltinitrito de sdio SR
Cobre
CAS [7440-50-8]
Elemento e massa atmica Cu 63,546.
Descrio Lmina, fo, p ou fragmento, de cor
avermelhada e lustre metlico.
Conservao Em recipientes no metlicos.
Cobre SRA 1 mg/mL
Especifcao Contm 1 g de cobre dissolvido no menor
volume possvel de cido ntrico a 50% (v/v). Completar
com cido ntrico a 1% (v/v) a 1000 mL.
polietileno).
14
o-Cresol
CAS [95-48-7]
Sinonmia 2-Metilfenol.
7
H
8
O 108,14.
Descrio Lquido ou slido, incolor a amarelo-marrom,
que se cora pela luz e na presena de oxignio; de odor
fenlico. Deliquescente.
aproximadamente 30 C. Temperatura de ebulio:
1,03. ndice de refrao (20 C): 1,540 -1,550.
Miscibilidade Miscvel com etanol anidro, ligeiramente
solvel em gua e solvel em solues hidrxi-alcalinas.
Armazenagem Proteger da luz, umidade e oxignio.
Segurana Irritante. Custico. Txico.
Categoria Desinfetante.
Cromato de potssio
CAS [7789-00-6]
2
CrO
4
194,19
Descrio Cristais ou p cristalino amarelo.
Segurana Oxidante. Poluente.
Cromato de potssio SR
Segurana Oxidante. Poluente.
Cromotropato dissdico
CAS [5808-22-0]
Sinonmia Sal dissdico do cido cromotrpico di-
hidratado.
10
H
6
Na
2
O
8
S
2
.H
2
O 400,29
Descrio P branco-amarelado.
Solubilidade Solvel em gua e praticamente insolvel
em etanol.
Desoxicolato de sdio
CAS [302-95-4]
24
H
39
NaO
4
414,55
Dextrose
Ver glicose.
Dextrose 0,1% (p/v)
Ver glicose 0,1% (p/v) em piridina.
Diacetato de clorexidina
Usar acetato de clorexidina.
1,8-Diaminonaftaleno
CAS [479-27-6]
Sinonmia 1,8-Naftalenodiamina.
10
H
10
N
2
158,20
Descrio Cristais sublimveis.
Diaveridina
CAS [5355-16-8]
Nome qumico 5-[(3,4-Dimetoxifenil)metil]-2,4-
pirimidinodiamina
13
H
16
N
4
O
2
260,30
233 C.
2,6-Dibromoquinona-4-clorimida
CAS [537-45-1]
6
H
2
Br
2
ClNO 299,35
Caracterstica fsica Faixa de fuso: entre 82 C e 84C.
Solubilidade Insolvel em gua e solvel em etanol e em
solues hidrxi-alcalinas diludas.
Dibutilamina
CAS [111-92-2]
8
H
19
N 129,24
159 C. ndice de refrao (20 C): cerca de 1,417.
Miscibilidade Solvel em gua e etanol.
Dicloreto de etileno
CAS [107-06-2]
Sinonmia 1,2-Dicloroetano
2
H
4
Cl
2
98,96
Descrio Lquido incolor e lmpido, de odor similar ao
do clorofrmio.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: em
torno de 83 C. Densidade (20 C): em torno de 1,25.
ndice de refrao (20 C): 1,444.
Solubilidade Pouco solvel em gua e facilmente solvel
em etanol.
a
14
Segurana Irritante. Txico. Infamvel.
Dicloridrato de N-(1-naftil)etilenodiamina
CAS [1465-25-4]
Sinonmia Dicloridrato de N-1-naftalenil-1,2-
etanodiamina.
12
H
14
N
2
.2HCl 259,18
Descrio P branco ou branco amarelado.
Caraterstica fsica Faixa de fuso: 188 C a 190 C.
Solubilidade Solvel em gua e pouco solvel em etanol.
Dicloridrato de N-(1-naftil)etilenodiamina SR
Sinonmia Reagente de Bratton-Marshall
Preparao Dissolver 0,1 g de dicloridrato de N-(1-
naftil)etilenodiamina em 100 mL de gua.
2,6-Dicloroquinona-4-clorimida
CAS [101-38-2]
Sinonmia Reagente de Gibbs, 2,6-dicloro-4-
(cloroimino)-2,5-cicloexadien-1-ona.
6
H
2
Cl
3
NO 210,45
Descrio P cristalino amarelo ou alaranjado.
66 C.
etanol e em solues alcalinas diludas.
1-(2,6-Diclorofenil)-1,3-diidro-2H-indol-2-ona
(Impureza A do diclofenaco)
CAS [15362-40-0]
Sinonmia 1-(2,6-diclorofenil)indolin-2-ona
14
H
9
Cl
2
NO 278,14
2,6-Dicloroindofenol sdico
CAS [620-45-1]
Sinonmia 2,6-Diclorofenolindofenol sdico.
12
H
6
Cl
2
NNaO
2
290,08.
Descrio P verde escuro.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e em etanol
anidro. A soluo aquosa apresenta colorao azul escura e
quando acidifcada se torna rosa.
Dicromato de potssio
CAS [7778-50-9]
2
Cr
2
O
7
294,18
Especifcao Contm, no mnimo, 99,8%o (p/p),
Descrio Cristais vermelho alaranjados, e inodoro.
em etanol.
Segurana Custico. Oxidante. Poluente.
Dicromato de potssio SR
Segurana Custico. Oxidante. Poluente.
Dietilamina
CAS [109-89-7]
4
H
11
N 73,14
amoniacal. Reao fortemente alcalina.
Caractersticas fsicas Faixa de ebulio: 55 C a
58 C. ndice de refrao (20 C): 1,386. Densidade:
aproximadamente 0,707.
Dietilaminoetildextrano
CAS [9015-73-0]
12
H
28
N
2
O 216,36
Descrio P.
Dietilditiocarbamato de prata
CAS [1470-61-7]
5
H
10
AgNS
2
256,13
Descrio P amarelo claro a amarelo acinzentado.
em piridina.
Dietilditiocarbamato de prata SR
Especifcao Contm 0,25 g em piridina para 50 mL.
Segurana Txico.
Dietilditiocarbamato de sdio
CAS [20624-25-3]
5
H
10
NNaS
2
.3H
2
O 225,33
Descrio Cristais brancos ou quase brancos ou inolores.
etanol.
14
N,N-dietiletilenodiamina
CAS [100-36-7]
Nome qumico N,N-Dietil-1,2-diaminoetano
6
H
16
N
2
116,21
Descrio Lquido de aparncia levemente oleosa,
incolor ou levemente amarelado, com forte odor amoniacal,
irritante para a pele, olhos e membranas mucosas.
Caractersticas fsicas Densidade (20 C): 0,827. Faixa
de ebulio: 145 C a 147 C.
gua (5.2.20.1) Determinar em 0,5 g. No mximo 1,0%.
Dietilftalato
CAS [84-66-2]
12
H
14
O
4
222,24
Descrio Lquido oleoso incolor e praticamente inodoro.
Caractersticas fsicas densidade 1,118. Temperatura de
ebulio: 295 C.
Miscibilidade Miscvel em gua, etanol, ter etlico e
outros solventes orgnicos.
Segurana Irritante!
Difenilamina
CAS [122-39-4]
12
H
11
N 169,22
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: cerca de
55 C. Temperatura de ebulio: 302 C. Perde a cor em
presena da luz.
Forma sal em soluo com cidos fortes.
Difenilamina SR
Preparao Dissolver 1 g de difenilamina em 100 mL de
cido sulfrico.
Difenilbenzidina
CAS [531-91-9]
Sinonmia N,N-Difenilbenzidina.
24
H
20
N
2
336,43
Descrio P cristalino branco ou levemente cinza.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua, pouco
solvel em acetona e em etanol.
Difenilborato de aminoetanol
CAS [524-95-8]
14
H
16
BNO 225,09
Descrio P cristalino branco ou amarelado.
em etanol.
Difenilborato de aminoetanol SR
Preparao Dissolver 1 g de difenilborato de aminoetanol
em metanol e completar o volume para 100 mL com o
mesmo solvente.
Difenilcarbazida
CAS [140-22-7]
13
H
14
N
4
O 242,28
Descrio P cristalino branco; torna-se rseo pela
exposio ao ar.
acetona, em etanol e cido actico glacial.
Difenilcarbazida SR
Especifcao Contm 1 g de difenilcarbazida em etanol
para 100 mL.
Segurana Infamvel.
Difenilcarbazona
CAS [538-62-5]
13
H
12
N
4
O 240,26
Descrio Cristais de cor alaranjado-avermelhada.
aproximadamente 157 C, com decomposio.
solvel em etanol.
Difenilcarbazona-azul de bromofenol SR
Preparao Em balo volumtrico de 25 mL, dissolver
12 mg de difenilcarbazona e 12,5 mg de azul de bromofenol
em 15 mL de etanol. Completar o volume com etanol.
Conservao Acondicionar a soluo em recipiente de
vidro mbar temperatura de 4 C a 8 C.
Difenilcarbazona mercrica SR
Soluo A Dissolver 0,1 g de difenilcarbazona em etanol
a
14
Soluo B Dissolver 1 g de cloreto de mercrio(II) em etanol
Preparao Misturar volumes iguais das Solues A e B
no momento do uso.
N,N-Diisopropiletilenodiamina
CAS [4013-94-9]
8
H
20
N
2
144,26
Descrio Lquido incolor ou amarelado. Corrosivo,
infamvel e higroscpico.
Dimetilacetamida
CAS [127-19-5]
4
H
9
NO 87,12
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: cerca
de 165 C. ndice de refrao (20 C): cerca de 1,437.
Densidade (20 C): cerca de 0,94.
Miscibilidade Miscvel em gua e na maioria dos
solventes orgnicos.
p-Dimetilaminobenzaldedo
CAS [100-10-7]
Sinonmia 4-Dimetilaminobenzaldedo e Reagente de
Ehrlich.
9
H
11
NO 149,19
Descrio P cristalino, branco a fracamente amarelado.
Solubilidade Solvel em etanol e em solues cidas
diludas.
p-Dimetilaminobenzaldedo SR
Preparao Dissolver, sem aquecimento, 0,2 g de
p-dimetilaminobenzaldedo em mistura de 4,5 mL de gua
e 5,5 mL de cido clordrico. Preparar no momento de uso.
p-Dimetilaminobenzaldedo SR1
Preparao Dissolver 0,2 g de p-dimetilaminobenzaldedo
em 20 mL de etanol e adicionar 0,5 mL de cido clordrico.
Agitar a soluo com carvo ativado e fltrar. A colorao
da soluo menos intensa do que uma soluo de iodo a
0,0001 M recentemente preparada. Utilizar imediatamente
aps o preparo.
p-Dimetilaminobenzaldedo SR2
Sinonmia Reagente de Wasicky.
em 8,5 mL de cido sulfrico e adicionar, cuidadosamente,
8,5 mL de gua.
4-Dimetilaminocinamaldedo
CAS [6203-18-5]
11
H
13
NO 175,22
Descrio Cristais alaranjados ou marrom-alaranjados
ou p.
138 C.
Solubilidade Solvel em etanol, acetona e benzeno.
2,6-Dimetilanilina
CAS [87-62-7]
Sinonmia 2,6-Xilidina.
8
H
11
N 121,18
Caracterstica fsica Densidade (20 C): cerca de 0,98
N,N-Dimetilanilina
CAS [121-69-7]
Sinonmia N,N-Dimetilbenzenamina.
8
H
11
N 121,18
Descrio Lquido oleoso, lmpido, praticamente incolor,
escurece durante o armazenamento.
Caracterstica fsica Faixa de destilao: 192 C a 194 C.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua, facilmente
solvel em etanol e ter etlico.
1,1-Dimetiletilamina
CAS [75-64-9]
Sinonmia terc-Butilamina.
4
H
11
N 73,14
2,5-Dimetilfenol
CAS [95-87-4]
Sinonmia p-Xilenol.
8
H
10
O 122,16
74,5 C.
14
Dimetilformamida
CAS [68-12-2]
3
H
7
NO 73,09
Descrio Lquido lmpido, incolor, com odor semelhante
ao de aminas.
0,95. ndice de refrao (20 C): 1,428.
Dimetilsulfxido
CAS [67-68-5]
Sinonmia DMSO.
2
H
6
OS 78,13
Descrio Lquido incolor e inodoro. Higroscpico.
1,10. ndice de refrao (20 C): 1,479.
Armazenagem Proteger da umidade e da exposio luz.
Segurana Irritante.
1,3-Dinitrobenzeno
CAS [99-65-0]
6
H
4
N
2
O
4
168,11
Descrio Cristais amarelados.
89 C.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua e pouco
solvel em etanol.
1,3-Dinitrobenzeno SR
Especifcao Contm 1 g de 1,3-dinitrobenzeno em
etanol para 100 mL.
Conservao Recipiente bem fechado.
Dioxana
CAS [123-91-1]
Sinonmia 1,4-Dioxana, dixido de etileno, dioxano.
4
H
8
O
2
88,11
Descrio Lquido lmpido, incolor, com odor semelhante
ao de ter etlico.
torno de 101 C. Densidade: em torno de 1,03. ndice de
refrao (20 C): 1,421 a 1,424.
Miscibilidade Miscvel em gua e na maioria dos
solventes orgnicos.
Segurana Irritante. Txico. Infamvel.
Dixido de enxofre
CAS [7446-09-5]
Sinonmia Anidrido sulfuroso.
Frmula e massa molecular SO
2
64,06
Especifcao - Contm, no mnimo, 97,0%(v/v)
Descrio Gs incolor, de odor caracterstico, sufocante.
Conservao Em cilindros pressurizados.
Dixido de mangans
CAS [1313-13-9]
Frmula e massa molecular MnO
2
86,94
Descrio P fno preto ou marrom escuro.
Segurana Oxidante enrgico.
Dipropilenoglicol
CAS [25365-71-8]
Sinonmia 1,1-xido-2-propanol
6
H
14
O
3
134,17
Descrio Lquido incolor, praticamente sem odor.
Armazenagem Em locais bem ventilados.
Dissulfeto de carbono
CAS [75-15-0]
Frmula e massa molecular CS
2
76,14
Descrio Lquido incolor ou amarelado. Infamvel.
Faixa de ebulio: 46 C a 47 C.
em etanol.
Segurana Venenoso!
Ditiol
CAS [496-74-2]
Sinonmia 1,2-Dimercapto-4-metilbenzeno; tolueno
-3,4-ditiol.
7
H
8
S
2
156,27
Solubilidade Solvel em metanol e em solues hidrxi-
alcalinas.
a
14
Ditiol SR
Especifcao Contm 0,5 g em 100 mL de etanol.
Segurana Infamvel.
Ditiotreitol
CAS [3483-12-3]
4
H
10
O
2
S
2
154,26
Solubilidade Facilmente solvel em gua, em acetona e
em etanol.
Ditizona
CAS [60-10-6]
Sinonmia Difeniltiocarbazona.
13
H
12
N
4
S 256,32
Descrio P cristalino marrom escuro.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: 168

C, com
decomposio.
em etanol.
Ditizona SR
Especifcao Contm 0,05 g em 100 mL de tetracloreto
de carbono.
Segurana Veneno!
Ditizona, soluo concentrada
Preparao Dissolver 35 mg de ditizona em 80 mL de
clorofrmio (para anlise com ditizona). Transferir para
balo volumtrico de 500 mL completar o volume com
clorofrmio.
Conservao Em recipientes fechados e mbar.
Armazenagem Proteger da exposio luz e manter
temperatura de 4 a 8 C.
Estabilidade Esta soluo estvel por cinco meses.
Ditizona, soluo diluda
Preparao Diluir a soluo concentrada de ditizona em
clorofrmio (1:7).
Ditizona, soluo extratora
Preparao Dissolver 30 mg de ditizona em 1000 mL
de clorofrmio e acrescentar 5 mL de etanol. Antes do
uso, agitar um volume adequado da soluo extratora de
ditizona com metade de seu volume de cido ntrico a 1%
(v/v) descartando a fase cida.
Armazenagem Em refrigerador.
Edetato dissdico
CAS [6381-92-6]
Sinonmia EDTA dissdico; Sal dissdico di-hidratado
do cido(etilenodinitrila) actico
10
H
14
N
2
Na
2
O
8
.2H
2
O
372,24
Descrio P cristalino branco, de sabor salino fraco.
em etanol.
Categoria Quelante.
Edetato dissdico, soluo 0,05 M
Especifcao Contm 1,861 g, adicionados de 10 mL de
hidrxido de sdio M, e diluir em gua para 100 mL.
Emodina
CAS [518-82-1]
15
H
10
O
5
270,25
Descrio Agulhas vermelho-alaranjadas.
etanol e em solues hidrxi-alcalinas.
Enxofre
CAS [7704-34-9]
Elemento e massa atmica S 32,1
Descrio P leve, amarelo acinzentado, ou amarelo
esverdeado.
Escina
CAS [11072-93-8]
Especifcao Mistura de saponinas obtidas de sementes
de Aesculus hippocastanum L.
Descrio P amorfo, fno, quase branco, ou avermelhado,
ou amarelado.
14
Estanho metlico
CAS [7440-31-5]
Elemento e massa atmica Sn 118,71
Especifcao Pureza de, no mnimo, 99,5%.
Descrio Grnulos cinzas.
aproximadamente 231,9 C.
Armazenagem Proteger da exposio luz e do calor.
Segurana Irritante.
Estearato de metila
CAS [112-61-8]
19
H
38
O
2
298,50
Descrio Cristais brancos ou massa cristalina branca ou
amareloplida.
aproximadamente 38

C.
Solubilidade Solvel em etanol e ter de petrleo.
ster etilco de tetrabromofenolftalena
CAS [1176-74-5]
Sinonmia Bromofenolftalena magenta E
22
H
14
Br
4
O
4
661,96
Estolato de eritromicina
CAS [3521-62-8]
52
H
97
NO
18
S 1056,43.
Caracterstica fsica Faixa de fuso:135 C a 138

C.
solvel em etanol, solvel em acetona. praticamente
insolvel em cido clordrico diludo.
Armazenagem Proteger da luz e calor.
Categoria Antibitico.
Estrncio SRA - 1 mg/mL
Especifcao Contm 1,685 g de carbonato de estrncio
em 10,0 mL de cido clordrico a 50% (v/v). Completar
com gua a 1000 mL.
polietileno).
Etanol
CAS [64-17-5]
Sinonmia lcool etlico.
2
H
6
O 46,07
Especifcao Contm, no mnimo, 96,0% (v/v).
caracterstico.
aproximadamente 78

C. Densidade: 0,803 a 0,808.
Miscibilidade Miscvel em gua e em cloreto de metileno.
Etanol absoluto
CAS [64-17-5]
Sinonmia lcool anidro.
2
H
6
O 46,07
Descrio - Lquido lmpido, incolor, voltil, de odor
caracterstico. Higroscpico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: 78-79
C. Densidade: 0,790 a 0,794. ndice de refrao: (20 C):
1,361.
Etanol glicerinado
Preparao Misturar 20 mL de glicerina e 80 mL de
etanol a 70% (v/v).
ter de petrleo
CAS [8032-32-4]
Sinonmia Benzina.
caracterstico. No fuorescente.

C.
Densidade: 0,630 a 0,656.
em etanol.
Segurana Infamvel.
ter etlico
CAS [60-29-7]
4
H
10
O 74,12
Descrio Lquido lmpido, incolor, muito voltil, de
odor caracterstico, pungente. Higroscpico.
0,715. ndice de refrao (20 C): 1,355.
Armazenagem Proteger da luz e do calor (no exceder a
15 C).
Categoria Anestsico.
a
14
Segurana Infamvel. Risco de exploso!
ter isoproplico
CAS [108-20-3]
Sinonmia ter di-isoproplico.
6
H
14
O 102,17
Caractersticas fsicas Faixa de ebulio: 67 C a 69 C.
Densidade (20 C): 0,723 a 0,728.
Miscibilidade Muito pouco miscvel em gua e miscvel
em etanol.
Segurana Infamvel
Etilenoglicol
CAS [107-21-1]
Nome qumico 1,2-Etanodiol
2
H
6
O
2
62,07
Descrio Lquido viscoso, incolor.
torno de 196 C. Densidade: 1,113 a 1,115.
Etilparabeno
CAS [120-47-8]
9
H
10
O
3
166,17
Descrio Cristais pequenos e incolores ou p branco.
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: 116 C.
Faixa de ebulio: 297 C a 298 C, com decomposio.
Solubilidade Pouco solvel em gua. Facilmente solvel
em acetona, etanol e ter etlico.
Categoria Conservante.
Eugenol
CAS [97-53-0]
10
H
12
O
2
164,20
Descrio Lquido oleoso, incolor ou levemente
amarelado. Escurece, e torna-se mais viscoso, com a
exposio luz e com o contato com o ar.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua miscvel
em etanol, em leos graxos e leos essenciais.
Fast green (CI 42053)
CAS [2353-45-9]
37
H
34
N
2
Na
2
O
10
S
3
808,86
Descrio P ou grnulo verde escuro, com brilho
metlico.
Solubilidade Solvel em gua e ligeiramente solvel em
etanol.
Fator Xa da coagulao sangunea bovino
Especifcao Enzima que possibilita a converso da
protrombina em trombina. A substncia semi-purifcada
obtida a partir de plasma bovino lquido e preparada por
ativao do zimognio do Fator X por meio de um agente
apropriado, tal como o veneno de vbora de Russel.
Armazenagem A preparao lioflizada deve ser
armazenada a uma temperatura de -20 C. A preparao
congelada deve ser armazenada a uma temperatura inferior
a -20 C.
Fator Xa bovino, soluo
Preparao Reconstituir, segundo as instrues de
fabricante, e diluir com a soluo tampo de trometamina-
cloreto de sdio de pH 7,4.
Absorvncia (5.2.14) Qualquer modifcao da
absorvncia da soluo em 405 nm, usando a tampo de
trometamina-cloreto de sdio de pH 7,4, como branco, no
superior a 0,15-0,20 por minuto.
1,10-Fenantrolina
CAS [5144-89-8]
Sinonmia Ortofenantrolina.
12
H
8
N
2
.H
2
O 198,22
Solubilidade Pouco solvel em gua, solvel em acetona
e em etanol.
Categoria Indicador para sistemas de oxirreduo;
reagente para colorimetria.
DL-Fenilalanina
CAS [150-30-1]
9
H
11
NO
2
165,19
Especifcao Contm, no mnimo, 99,0%.
Descrio Cristais monoclnicos.
Caracterstica fsica Sublima no vcuo.
Fenol
CAS [108-95-2]
6
H
6
O 94,11
Descrio Massa cristalina ou cristais incolores ou
fracamente rseos ou amarelados, de odor caracterstico.
Deliquescente.
aproximadamente 43

C. Temperatura de ebulio:
14
Solubilidade Solvel em gua, muito solvel em etanol,
em glicerol e em cloreto de metileno.
Rotulagem Deve indicar o nome e a quantidade do
estabilizante.
Segurana Custico. Txico.
Fenolftalena
CAS [77-09-8]
20
H
14
O
4
318,33
Descrio P cristalino ou amorfo, branco ou levemente
amarelado. Inodoro.
em etanol.
Categoria Indicador cido-base.
Fenolftalena a 0,1% (p/v)
Especifcao Contm 0,1 g em etanol a 80% (v/v) a 100 mL.
Segurana Infamvel.
Informao adicional Para preparao de papel indicador.
2-Fenoxietanol
CAS [122-99-6]
8
H
10
O
2
138,17
Descrio Lquido incolor, fracamente viscoso, de odor
aromtico fraco e de sabor ardente.
ndice de refrao (20 C): 1,534.
Misibilidade Pouco solvel em gua, facilmente solvel
em etanol.
Ferricianeto de potssio
CAS [13746-66-2]
3
Fe(CN)
6
329,25
Descrio Cristais vermelhos.
Ferricianeto de potssio SR
Ferricianeto de potssio amoniacal
Preparao Dissolver 2 g de ferricianeto de potssio em
75 mL de gua. Adicionar 25 mL de hidrxido de amnio
e homogeneizar.
Ferrocianeto de potssio
CAS [14459-95-1]
4
Fe(CN)
6
.3H
2
O 422,39
Descrio Cristais transparentes ou p cristalino,
amarelo. Eforescente. Torna-se anidro a 100 C.
insolvel em etanol.
Ferrocianeto de potssio SR
Especifcao Contm 5,3 g em gua a 100 mL
(aproximadamente 0,125 M).
Fibrinognio
CAS [9001-32-5]
Ver monografa Fibrinognio humano lioflizado.
Floroglucina SR
Preparao Dissolver 1 g de foroglucinol em etanol e
diluir para 100 mL com o mesmo solvente.
Floroglucinol
CAS [6099-90-7]
6
H
6
O
3
.2H
2
O 162,14
Descrio Cristais ou p cristalino branco, ou amarelo
claro.
Solubilidade Pouco solvel em gua e solvel em etanol
e ter etlico.
Fluido gstrico simulado
Preparao Dissolver 2 g de cloreto de sdio e 3,2 g de
pepsina purifcada em 7 mL de cido clordrico e completar
o volume para 1000 mL com gua. Apresenta pH de cerca
de 1,2.
a
14
Fluido gstrico simulado (sem enzima)
Preparao Dissolver 2 g de cloreto de sdio em 100
mL de gua. Adicionar 7 mL cido clordrico e diluir para
1000 mL com gua. Ajustar o pH em 1,2 0,1 com cido
clordrico ou hidrxido de sdio 10 M.
Fluido intestinal simulado sem pancreatina pH 7,5
Preparao Dissolver 6,8 g de fosfato de potssio
monobsico em 900 mL de gua, adicionar 77 mL de
hidrxido de sdio 0,2 M e ajustar o pH em 7,5 0,1 com
hidrxido de sdio 0,2 M. Completar para 1000 mL com
gua e homogeneizar.
Fluoreto de amnio
CAS [12125-01-8]
4
F 37,04
Conservao Proteger da luz, calor e umidade.
Segurana Irritante.
Fluoreto de clcio
CAS [7789-75-5]
Frmula e massa molecular CaF
2
78,08
Descrio Cristais ou p branco.
Fluoreto de sdio
CAS [7681-49-4]
Frmula e massa molecular NaF 41,99
Descrio Cristais incolores ou p branco ou quase
branco.
Caractersticas fsicas Densidade: 2,78. Temperatura de
fuso: 993 C.
em etanol.
Segurana Venenoso!
Fluoreto de sdio SR
Preparao Secar aproximadamente 0,5 g de fuoreto de
sdio 200 C, por 4 horas. Pesar exatamente 0,222 g de
material seco e dissolver gua, completando o volume a 100
mL. Pipetar 10 mL desta soluo para balo volumtrico
de 1000 mL e completar o volume com gua. Cada mL
desta soluo equivale a 10 g de for.
Formaldedo, soluo
Sinonmia Formol, formalina.
2
O 30,03
Especifcao Contm, no mnimo, 34,0% (p/v) e, no
mximo, 37,0% (p/v).
Descrio Lquido incolor, lmpido; vapores irritantes.
1,08. ndice de refrao (20 C): 1,374.
Armazenagem Proteger da luz, do ar e de temperatura
abaixo de 9

C.
Estabilidade Pode conter metanol como estabilizante.
Formamida
CAS [75-12-7]
3
NO 45,04
Descrio Lquido lmpido, incolor, viscoso, de odor
amoniacal fraco.
1,13. ndice de refrao (20 C) 1,447.
Segurana Irritante.
Formato de amnio
CAS [540-69-2]
5
NO
2
63,06
Descrio Grnulos e cristais deliquescentes.
Caracterstica fsica Faixa de fuso: entre 119 C a 121 C.
Fosfatase alcalina, soluo
Soluo A Dissolver 3,1 g de cido brico em 500 mL de
gua. Adicionar 21 mL de hidrxido de sdio M e 10 mL de
cloreto de magnsio 0,1 M. Diluir com gua para 1000 mL.
Preparao Dissolver 95 mg de enzima fosfatase alcalina
em Soluo A. Diluir para 50 mL com o mesmo solvente.
Fosfato de amnio dibsico
CAS [7783-28-0]
4
)
2
HPO
4
132,06
Descrio Grnulos ou cristais brancos ou quase brancos.
Higroscpico.
Caracterstica fsica Apresenta pH de cerca de 8,0 em
soluo aquosa a 20% (p/v).
insolvel em etanol.
14
Fosfato de amnio monobsico
CAS [7722-76-1]
Sinonmia Diidrogeno fosfato de amnio.
4
)H
2
PO
4
115,03
Descrio Cristais brancos ou p cristalino.
Caracterstica fsica O pH de soluo a 0,2 M
em etanol, insolvel em acetona.
Fosfato de codena
CAS [41444-62-6]
Sinonmia Fosfato de codena hemi-hidratado.
18
H
21
NO
3
.H
3
PO
4
.1/2H
2
O
406,37
Descrio P cristalino branco ou quase branco, ou
cristais pequenos e incolores.
Solubilidade Facilmente solvel em gua. Pouco ou
muito pouco solvel em etanol.
Fosfato de potssio
CAS [7778-53-2]
3
PO
4
212,27
Sinonmia Fosfato de potssio tribsico.
Descrio Cristais ou p cristalino branco, deliquescente.
Solubilidade Solvel em gua e insolvel em etanol.
Fosfato de potssio monobsico
CAS [7778-77-0]
Sinonmia Bifosfato de potssio, di-hidrogenofosfato de
potssio, fosfato cido de potssio, fosfato monopotssico,
fosfato potssico de Sorensen.
Frmula e massa molecular KH
2
PO
4
136,09
Especifcao Contm, no mnimo, 98,0%, calculado
Fosfato de potssio dibsico
CAS [7758-11-4]
Sinonmia Fosfato de potssio monocido.
2
HPO
4
174,18
branco. Muito higroscpico.
Solubilidade Muito solvel em gua, muito pouco solvel
em etanol.
Fosfato de sdio dibsico, anidro
CAS [7558-79-4]
2
HPO
4
141,96
Descrio P branco higroscpico.
Fosfato de sdio dibsico, di-hidratado
CAS [10028-24-7]
2
HPO
4
.2H
2
O 178,00
em etanol.
Fosfato de sdio dibsico, dodeca-hidratado
CAS [10039-32-4]
2
HPO
4
.12H
2
O 358,08
Descrio Cristais ou grnulos incolores, transparentes,
inodoros, de sabor salino, fracamente alcalino. Eforescente.
Fosfato de sdio dibsico dodeca-hidratado SR
Fosfato de sdio dibsico, hepta-hidratado
CAS [7782-85-6]
2
HPO
4
.7H
2
O 268,07
Descrio P granular ou cristal incolor ou branco.
estvel ao ar. A soluo aquosa alcalina.
Fosfato de sdio dibsico hepta-hidratado SR
Especifcao Contm 12 g de fosfato de sdio dibsico
hepta-hidratado em 100 mL de gua.
Fosfato de sdio monobsico
CAS [7558-80-7]
Sinonmia Di-hidrogeno-ortofosfato de sdio.
Frmula e massa molecular NaH
2
PO
4
119,98
Descrio P branco ou quase branco. Higroscpio.
a
14
Fosfato de sdio monobsico, monoidratado
CAS [10049-21-5]
Frmula e massa molcula NaH
2
PO
4
.H
2
O 137,99
Descrio Cristais ou grnulos brancos ou quase brancos,
um pouco deliquescentes.
solvel em etanol. A soluo aquosa cida.
Fosfato de sdio monobsico, di-hidratado
CAS [13472-35-0]
Frmula e massa molcula NaH
2
PO
4
.2H
2
O 156,01
branco.
Solubilidade Muito solvel em gua e muito pouco
solvel em etanol.
Fosfato de sdio tribsico, dodeca-hidrato
CAS [10101-89-0]
Sinonmia Fosfato tribsico sdico, fosfato trissdico.
3
PO
4
.12H
2
O 380,12
Descrio Cristais incolores ou brancos. Eforescente.
Caracterstica fsica Funde a 75 C por aquecimento
rpido.
Fosfato de tetrabutilamnio
CAS [5574-97-0]
16
H
38
NO
4
P 339,46
Descrio P branco ou quase branco. Higroscpico.
Conservao Em recipiente fechados.
Fosfato de tributila
CAS [126-73-8]
12
H
27
O
4
P 266,31
Descrio Lquido incolor, ou pouco amarelado, e
inodoro.
Miscibilidade Pouco miscvel em gua.
Fosfato equimolar 0,05 M
Especifcao Contm 3,53 g de fosfato de sdio dibsico
e 3,39 g de fosfato de potssio monobsico em gua para
1000 mL.
Fosfato-prpura de bromocresol SR
Soluo A Dissolver 38 g de fosfato de sdio monobsico
e 2 g de fosfato de sdio dibsico anidro em gua e diluir
para 1000 mL com o mesmo solvente. Ajustar o pH, se
necessrio, em 5,3 0,1 utilizando hidrxido de sdio 5 M
ou cido fosfrico.
Soluo B Dissolver 400 mg de prpura de bromocresol
em 30 mL de gua, adicionar 6,3 mL de hidrxido de sdio
0,1 M e diluir com gua para 500 mL.
Preparao No dia da utilizao, misturar as Solues A
e B e clorofrmio (1:1:1) em funil de separao. Agitar e
desprezar a fase orgnica. Repetir a extrao com pores
iguais de clorofrmio at que a camada orgnica se
apresente incolor. Utilizar a fase aquosa.
Fsforo vermelho
CAS [7723-14-0]
Descrio P vermelho-escuro.
Solubilidade Insolvel em gua e em cidos diludos.
Segurana Infamvel!
Frutose
CAS [57-48-7]
Sinonmia |-D-Frutose, levulose.
6
H
12
O
6
180,16
Descrio P cristalino branco, inodoro, de forte sabor
adocidado.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso com
decomposio: aproximadamente 103

C.
Solubilidade Muito solvel em gua e solvel etanol.
Frutose a 0,1 % (p/v)
Especifcao Contm 0,1 g em piridina a 100 mL.
Segurana Txico.
Ftalaldedo
CAS [643-79-8]
8
H
6
O
2
134,14
Armazenagem Proteger da exposio luz e do contato
com o ar.
14
Ftalato de dibutila
CAS [84-74-2]
16
H
22
O
4
278,3
Sinonmia ster dibutlico do cido ftlico, ftalato de di-
n-butila e dibutil ftalato.
Descrio Lquido oleoso, lmpido, incolor ou
ligeiramente corado.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: 340 C.
Densidade: 1,043 a 1,048.
Miscibilidade Muito pouco solvel em gua, muito
solvel em acetona, benzeno, etanol e ter etlico.
Ftalazina
CAS [253-52-1]
8
H
6
N
2
130,15
Descrio Cristais amarelo plidos.
etanol anidro, em acetato de etila e em metanol.
Fucsina bsica (CI 42510)
CAS [632-99-5]
Sinonmia Magenta I, cloridrato de rosalina.
20
H
20
ClN
3
337,85
Descrio Cristais brilhosos de cor verde metlica.
Caracterstica fsica Decompe em temperaturas acima
de 200 C.
Categoria Corante. Antifngico.
Fucsina descorada SR
Sinonmia Reagente de Schiff.
Preparao Dissolver 1 g de fucsina bsica em 600 mL
de gua, adicionar 100 mL de sulfto de sdio anidro a
10% (p/v). Resfriar externamente com gelo, sob agitao.
Adicionar, lentamente, 10 mL de cido clordrico, diluir
com gua para 1000 mL e fltrar. Se a soluo escurecer,
agitar com 0,2 a 0,3 g de carvo ativado at descolorao,
fltrando imediatamente. Se ainda permanecer a colorao
rsea, adicionar de 2 a 3 mL de cido clordrico e agitar.
Conservao Deixar em repouso durante 1 hora antes da
utilizao, manter ao abrigo da luz.
Galactose
CAS [59-23-4]
6
H
12
O
6
180,16
Descrio P branco cristalino.
Galactose a 0,1% (p/v) em piridina
Segurana Txico.
Gelatina
CAS [9000-70-8]
Especifcao mistura de protenas hidrossolveis
obtidas por extrao de material contendo colgeno.
Descrio P, grnulos, escamas ou folhas transparentes,
brilhantes, incolores ou levemente amarelados.
Higroscpico, de odor caracterstico e sabor pouco
pronunciado.
Armazenagem Proteger do calor e umidade.
Gelatina glicerinada
Preparao Dissolver 1 g de gelatina em 100 mL de gua
aquecida temperatura no superior a 30 C. Acrescentar 1
mL de salicilato de sdio a 2% (p/v) e 15 mL de glicerina;
agitar bem e fltrar a mistura aquecida em l de vidro.
Gelatina SR
Preparao Dissolver 2,5 g de gelatina em 100 mL de
gua quente. Utilizar aps resfriamento at temperatura
ambiente.
Glicerol
CAS [56-81-5]
Sinonmia Glicerina.
3
H
8
O
3
92,09
Descrio Lquido viscoso, lmpido, incolor, inodoro,
higroscpico, de sabor adocicado.
Caractersticas fsicas Densidade: 1,255 a 1,263. ndice
de refrao (20 C): 1,470 a 1,474.
Miscibilidade Miscvel em gua e em etanol, pouco
solvel em acetona e praticamente insolvel em leos
graxos e leos essenciais.
Armazenagem Proteger de oxidantes.
Glicina
CAS [56-40-6]
2
H
5
NO
2
75,07
Descrio P cristalino branco e inodoro.
com decomposio.
em etanol e muito pouco solvel em ter etlico.
a
14
Glicose
CAS [50-99-7]
Sinonmia Dextrose.
6
H
12
O
6
180,16
Descrio P cristalino branco, inodoro, sabor adocicado.
Caracterstica fsica Poder rotatrio especfco (20 C):
+ 52,5 a + 53,0 (dissolver 10 g de glicose em 100 mL de
gua e adicionar 0,2 mL de amnia).
solvel em etanol.
Glicose a 0,1% (p/v) em piridina
Segurana Txico.
Glutaraldedo
CAS [111-30-8]
Frmula de massa molecular C
5
H
8
O
2
100,12
Descrio Lquido oleoso.
Caractersticas fsicas ndice de refrao (25 C): cerca
de 1,434. Temperatura de ebulio: cerca de 188 C.
Miscibilidade Miscvel em gua.
Guaiacol
CAS [95-05-1]
Sinonmia 2-metoxifenol, metilcatecol.
7
H
8
O
2
124,14
Descrio Cristais brancos ou levemente amarelados, ou
lquido incolor ou levemente amarelado. Higroscpico.
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: cerca de
28 C. Temperatura de ebulio: cerca de 205 C. Pouco
solvel em gua, muito solvel em cloreto de metileno e
facilmente solvel em etanol.
Guanina
CAS [73-40-5]
5
H
5
N
5
O 151,13
Descrio P branco ou quase branco, amorfo.
solvel em etanol. Dissolve em solues hidrxi-alcalinas
diludas.
Heparina sdica
CAS [9041-08-1]
Descrio Consiste em mistura de princpios ativos,
possuindo a propriedade de prolongar o tempo de
coagulao do sangue. Obtida, normalmente, de mucosa
intestinal, pulmes ou outro tecido adequado de mamferos
domsticos usados para alimento do homem.
Rotulagem A rotulagem deve indicar o rgo e a espcie
de origem. A potncia deve ser indicada em UI.
Categoria Anticoagulante.
Heptano
Especifcao Contm usualmente mistura de
hidrocarbonetos frao de petrleo com predomnio de
n -heptano.
Descrio Lquido lmpido, incolor, voltil, altamente
infamvel, de odor caracterstico.
Caractersticas fsicas Faixa de ebulio: 95 a 99 C.
Densidade: aproximadamente 0,69.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua e
solvel em etanol absoluto. Miscvel em ter etlico, em
clorofrmio, em benzeno e na maioria dos leos volteis e
no-volteis.
Armazenagem Proteger do calor. Manter distante de
chama/centelha.
Segurana Irritante do trato respiratrio. Infamvel.
n-Heptano
CAS [142-82-5]
7
H
16
100,20
Especifcao Principal componente de heptano.
Descrio Lquido lmpido e infamvel.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: 98,4 C.
Densidade: 0,684. ndice de refrao (20 C): 1,3855.
em etanol anidro.
Heptanossulfonato de sdio
CAS [22767-50-6]
7
H
15
NaO
3
S 202,25
Descrio Massa cristalina branca ou quase branca.
metanol.
14
Hexano
Especifcao Contm usualmente mistura de ismeros de
C
6
H
14
, predominantemente n-hexano e metilciclopentano
(C
6
H
12
).
Descrio Lquido lmpido, incolor, voltil, altamente
infamvel, de odor caracterstico.
Caractersticas fsicas Faixa de ebulio: 67 a 70 C

.
Densidade: 0,66.
chama/centelha.
Segurana Irritante do trato respiratrio. Infamvel.
nHexano
CAS [110-54-3]
6
H
14
86,18
Especifcao Principal componente de ter de petrleo
e de hexano.
Descrio Lquido lmpido, voltil, de odor semelhante
ao do petrleo.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: 69 C.
Densidade: 0,66. ndice de refrao (20 C): 1,375.
em etanol anidro.
chama/centelha.
Segurana Infamvel.
1-Hexanossulfonato de sdio
CAS [2832-45-3]
6
H
13
NaO
3
S 188,22
Hexilamina
CAS [111-26-2]
Sinonmia Hexanamina.
Frmula e massa molar C
6
H
15
N 101,19
Miscibilidade Pouco solvel em gua e solvel em etanol.
Hidrato de cloral
CAS [302-17-0]
Sinonmia Cloral hidratado.
2
H
3
Cl
3
O
2
165,40
Descrio Cristais transparentes, incolores, de odor
pungente caracterstico e de sabor picante e fracamente
amargo. Deliquescente.
em etanol.
Segurana Irritante pele.
Categoria Sedativo, hipntico.
Hidrazina, hidrato
CAS [7803-57-8]
Frmula e massa molecular N
2
H
4
.H
2
O 50,06
Hidrxido de amnio
Usar amnia, soluo concentrada.
Hidrxido de brio
CAS [12230-71-6]
Frmula e massa molecular Ba(OH)
2
.8H
2
O 315,46.
Hidrxido de clcio
CAS [1305-62-0]
Frmula e massa molecular Ca(OH)
2
74,09
Descrio P ou grnulos brancos moles, inodoros.
Armazenagem Proteger do dixido de carbono.
Hidrxido de clcio, soluo saturada
Usar hidrxido de clcio SR.
Hidrxido de clcio SR
Especifcao Contm 0,15 g em gua isenta de dixido
de carbono a 100 mL (soluo saturada).
Categoria Adstringente.
Hidrxido de ltio
CAS [1310-66-3]
Frmula e massa molecular LiOH.H
2
O 41,96
a
14
Descrio P granular branco, ou quase branco.
Solubilidade Solvel em gua, formando uma soluo
fortemente alcalina. Ligeiramente solvel em etanol.
Segurana Corrosivo.
Hidrxido de potssio
CAS [1310-58-3]
Frmula e massa molecular KOH 56,11
calculado como KOH, e, no mximo, 3,5% de K
2
CO
3
.
Descrio Massa branca, dura, seca, de estrutura
cristalina, inodora, muito higroscpica e vida por CO
2
.
Liquefaz - se ao ar. Apresentado nas formas de lentilhas,
cilindros ou escamas.
em etanol.
Conservao Em recipientes hermticos, inertes.
Armazenagem Proteger da umidade e do dixido de
carbono.
Segurana Muito custico.
Hidrxido de potssio etanlico SR (aproximadamente
0,5 M)
Preparao Dissolver 34,04 g de hidrxido de potssio
em 20 mL de gua; completar a 1000 mL com etanol
(isento de aldedo). Repouso de 24 horas Em recipientes
hermticos. Decantar. Usar o sobrenadante lmpido.
Hidrxido de potssio etanlico 2 M
Preparao Dissolver 6,6 g de hidrxido de potssio em
5 mL de gua, resfriar e completar o volume para 50 mL
com etanol. Decantar por 24 horas e utilizar o sobrenadante
lmpido.
Hidrxido de sdio
CAS [1310-73-2]
Sinonmia Soda custica.
Frmula e massa molecular NaOH 40,00
Especifcao Contm, no mnimo, 95,0% (p/p) de lcali
total, calculado como NaOH, e, no mximo, 3,0% (p/p) de
Na
2
CO
3
.
Descrio Massa dura, de estrutura cristalina, branca sob
a forma de pedaos, lentilhas e bastonetes. Deliquescente e
absorve dixido de carbono.
em etanol.
carbono.
Segurana Custico, corrosivo.
Hidrxido de sdio SR
Especifcao Contm 8% (p/v) de NaOH em gua.
Conservao Vide hidrxido de sdio M.
Hidrxido de sdio M
Especifcao Contm 40 g em gua isenta de dixido de
carbono a 1000 mL.
Conservao Em recipientes de vidro lcali-resistentes
ou de polietileno.
carbono.
Hidrxido de sdio, soluo concentrada SR
(aproximadamente 10 M)
Especifcao Contm 20 g de hidrxido de sdio em
gua a 50 mL.
Segurana Custico.
Hidrxido de tetrabutilamnio
CAS [2052-49-5]
Frmula e massa molecular (C
4
H
9
)
4
NOH 259,47
Hidrxido de tetrametilamnio
CAS [75-59-2]
4
H
13
NO 91,15
Descrio uma base mais forte que a amnia e absorve
rapidamente dixido de carbono do ar. Uma preparao em
meio aquoso a 25% (p/v), lmpida e incolor.
D--4-hidroxifenilglicina
CAS [22818-40-2]
8
H
9
NO
3
167,16
Descrio Folhetos brilhantes.
Caracterstica fsica Faixa de decomposio: entre 220
C e 247 C.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua, em etanol,
ter etlico e acetona. Solvel em minerais alcalinos e
cidos.
14
Hidroxiquinolina
CAS [148-24-3]
Sinonmia 8-hidroxiquinolina
9
H
7
NO 145,16
Descrio P cristalino branco, ou levemente amarelado.
75 C.
em acetona, em etanol e em solues diludas de cidos
minerais.
Hidroxitolueno butilado
CAS [128-37-0]
Sinonmia BHT.
15
H
24
O 220,34
Descrio P cristalino branco ou branco amarelado.
Caractersticas fsicas Temperatura de congelamento:
no menos do que 69,2 C. Temperatura de ebulio: 265
C. Densidade: 1,048.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua, muito
solvel em acetona, facilmente solvel em etanol e em
leos vegetais.
Segurana Pode causar dermatite por contato.
Hiperosdeo
CAS [482-36-0]
21
H
20
O
12
464,38
Descrio Agulhas amarelo plido.
C, com decomposio.
Solubilidade Solvel em metanol.
Hipoclorito de sdio
CAS [7681-52-9]
Frmula e massa molecular NaClO 74,44
Descrio Cristais brancos. Normalmente obtido
na forma penta-hidratada, sendo que sua forma anidra
explosiva.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: 18 C (forma
penta-hidratada)
Segurana Irritante!
Hipoclorito de sdio SR
Ver monografa Hipoclorito de sdio soluo diluda.
Hipofosfto de sdio
CAS [10039-56-2]
Frmula e massa molecular NaH
2
PO
2
H
2
O 105,99
Descrio P granulado ou cristalino branco ou cristais
incolores, inodoros, de sabor salino. Higroscpico.
etanol.
Hipofosfto de sdio SR
Especifcao Contm 5 g de hipofosfto de sdio em
10 mL de gua, acrescidos a 50 mL com cido clordrico.
Separar eventuais cristais formados. A soluo deve ser
lmpida e incolor.
Imidazol
CAS [288-32-4]
Sinonmia Glioxalina.
3
H
4
N
2
68,08
Caracterstica fsica Faixa de fuso: 90 a 91 C.
Iminodibenzila
CAS [494-19-9]
14
H
13
N 195,26
Descrio P cristalino amarelo plido.
solvel em acetona.
Iodato de potssio
CAS [7758-05-6]
Frmula e massa molecular KIO
3
214,00
Descrio Cristais brancos, inodoros, ou p cristalino.
560 C, com decomposio parcial.
Solubilidade Solvel em gua, insolvel em etanol.
Categoria Agente oxidante.
Iodeto de mercrio(II)
CAS [7774-29-0]
Sinonmia Bi-iodeto de mercrio, iodeto de mercrio
vermelho.
Frmula e massa molecular HgI
2
454,40
Descrio P cristalino, vermelho escarlate, denso,
inodoro e quase inspido.
Solubilidade Pouco solvel em gua, ligeiramente solvel
em acetona e em etanol, solvel em soluo de iodeto de
potssio em excesso.
a
14
Categoria Veneno!
Iodeto de potssio
CAS [7681-11-0]
Frmula e massa molecular KI 166,00
Descrio Cristais incolores, ou p cristalino branco,
inodoro, de sabor salgado e amargo. Fracamente
deliquescente.
em glicerol, solvel em etanol.
Armazenagem Proteger da luz e umidade.
Iodeto de potssio aproximadamente M
Usar iodeto de potssio SR.
Iodeto de potssio SR
Especifcao Contm 16,5 g de iodeto de potssio em
gua a 100 mL.
Conservao Em recipientes opacos bem fechados.
Iodeto de potssio mercrico alcalino SR
Sinonmia Reagente de Nessler, soluo alcalina de
tetraiodomercurato(II) de potssio, iodeto de potssio-
cloreto de mercrio SR.
Preparao Dissolver 5 g de iodeto de potssio em 5 mL
de gua, adicionar pouco a pouco soluo de cloreto de
mercrio(II) a 25% (p/v), controlando-se a adio, para que
o precipitado formado no incio no fque completamente
dissolvido. Deixar esfriar. Em seguida, adicionar soluo
de hidrxido de potssio a 50% (p/v), diluir com gua
at completar o volume de 100 mL e adicionar 0,5 mL da
soluo de cloreto de mercrio(II) a 25% (p/v). Deixar
decantar e usar o sobrenadante.
Iodeto de potssio mercrico alcalino SR1
Nome alternativo Tetraiodomercurato de potssio
alcalino SR.
Preparao Dissolver em gua, 11 g de iodeto de potssio
e 15 g de iodeto de mercrio(II) e completar o volume
para 100 mL com o mesmo solvente. Imediatamente antes
do uso, misturar a soluo anterior com igual volume de
hidrxido de sdio a 25% (p/v).
Iodeto de potssio mercrio SR
Sinonmia Reagente de Mayer.
Soluo A Dissolver 13,5 g de cloreto de mercrio(II) em
600 mL de gua.
Soluo B Dissolver 50 g de iodeto de potssio em 100
mL de gua.
Preparao Misturar as Solues A e B e completar o
volume para 1000 mL com gua.
Iodeto de sdio
CAS [7681-82-5]
Frmula e massa molecular NaI 149,89
Descrio P cristalino branco ou cristais incolores,
higroscpicos, inodoros.
em etanol.
Iodeto de sdio em cido actico
Especifcao Contm 10 g em cido actico glacial a
50 mL.
Iodeto de tetrabutilamnio
CAS [311-28-4]
Sinonmia Iodeto de tetra-n-butilamnio.
16
H
36
IN 369,38
Descrio Cristais ou p cristalino branco ou pouco
colorido.
ndigo carmim
CAS [860-22-0]
16
H
8
N
2
NaO
8
S
2
466,36
Descrio Grnulos azuis com brilho de cobre, ou p
azul ou azul-violeta.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua, praticamente
solvel em etanol. Precipita em solues aquosas de cloreto
de sdio.
ndigo carmim SR
Preparao Em uma mistura de 10 mL de cido clordrico
e 990 mL de cido sulfrico a 20% (p/v), adicionar 0,2 g de
ndigo carmim.
14
Iodo
CAS [7553-56-2]
Frmula e massa molecular I
2
253,80
Descrio Escamas, placas ou cristais pequenos, preto
azulados ou violeta acinzentados; brilho metlico, de odor
irritante.
Caractersticas fsicas Sublima lentamente temperatura
ambiente; aquecido, libera vapores violeta. Temperatura de
fuso: 113,6 C
etanol e pouco solvel em glicerol.
Conservao Em recipientes hermticos de vidro.
Segurana Vapores corrosivos!
Iodo SR
Sinonmia Soluo aquosa de iodo iodetada, reativo de
lugol.
Especifcao Contm 1 g de iodo e 2 g de iodeto de
potssio em gua a 100 mL.
Preparao Dissolver 1 g de iodo em 100 mL de gua,
acrescentar 2 g de iodeto de potssio, agitar, deixar em
repouso por algumas horas e fltrar em l de vidro.
Conservao Em recipientes de vidro mbar bem
fechados.
Iodo 0,05 M
Preparao Dissolver 20 g de iodeto de potssio na
mnima quantidade de gua, adicionar 13 g de iodo, em
seguida, adicionar gua para produzir 1000 mL.
Iodo 0,5 % (p/v) em clorofrmio
Especifcao Contm 0,5 g de iodo em clorofrmio a
100 mL.
Segurana Txico.
Iodo 1 % (p/v) em etanol
Sinonmia Soluo alcolica de iodo, soluo etanlica
de iodo.
Especifcao Contm 1% (p/v) de iodo em etanol.
Conservao Em recipientes de vidro bem fechados.
Segurana Infamvel.
Iodobismutato de potssio
Usar iodobismutato de potssio aquo-actico.
Iodobismutato de potssio aquo-actico
Preparao Misturar 58 mL de gua, 1,21 g de subnitrato
de bismuto, 14 mL de cido actico glacial e 28 mL de
soluo de iodeto de potssio a 40% (p/v).
Iodobismutato de potssio diludo SR
Preparao Dissolver 100 g de cido tartrico em
500 mL de gua. Separadamente, dissolver 100 g de
cido tartrico em 400 mL de gua e adicionar 8,5 g de
subnitrato de bismuto. Agitar por uma hora, adicionar 200
mL de soluo de iodeto de potssio a 40% (p/v) e agitar
bem. Deixar em repouso por 24 horas e fltrar. Misturar a
primeira soluo com 50 mL da segunda.
Iodeto de potssio e subnitrato de bismuto SR
Sinonmia Reagente de Dragendorff
Preparao Misturar volumes iguais de soluo de iodeto
de potssio a 40% (p/v) em gua e de soluo preparada
dissolvendo 0,85 g de subnitrato de bismuto em mistura
de 10 mL de cido actico glacial e 40 mL de gua. Diluir
1 volume dessa mistura com 2 volumes de cido actico
glacial e 10 volumes de gua imediatamente antes do uso.
lodobismutato de potssio SR
Preparao Dissolver 16,6 g de cido tartrico em 67
mL de gua e juntar 1,41 g de subnitrato de bismuto. Agitar
durante uma hora, adicionar 33 mL de soluo de iodeto
de potssio a 40% (p/v). Agitar durante mais uma hora.
Deixar em repouso por 24 horas. Filtrar.
Iodobismutato de potssio SR1
Preparao Dissolver 10 g de cido tartrico em 40
mL de gua e adicionar 0,85 g de subnitrato de bismuto.
Agitar durante uma hora. Adicionar 20 mL de soluo de
iodeto de potssio a 40% (p/v) e homogeneizar. Deixar em
repouso durante 24 horas e fltrar.
lodobismutato de potssio SR2
Preparao Suspender 1,7 g de subnitrato de bismuto
e 20 g de cido tartrico em 40 mL de gua. Adicionar,
suspenso, 40 mL de soluo de iodeto de potssio a 40%
(p/v). Agitar por uma hora e fltrar. Proteger a soluo da
exposio luz. Imediatamente antes de usar, misturar 5
mL da soluo anterior com 15 mL de gua.
Iodossulfuroso SR
Preparao Utilizar balo redondo de 3000 mL a 4000
mL, com trs tubuladuras, munido de um agitador, um
termmetro e um tubo de secagem. O balo dever estar
seco e fechado durante a preparao. Misturar 700 mL
a
14
de piridina anidra com 700 mL de metoxietanol; juntar,
com agitao, 220 g de iodo, fnamente pulverizado e
seco anteriormente, sob pentxido de fsforo. A agitao
deve ser mantida at completa dissoluo (por cerca de
30 minutos.). Resfriar a -10 C e, em agitao, introduzir
rapidamente 190 g de dixido de enxofre lquido. A
temperatura no deve ultrapassar 30 C. Resfriar.
Doseamento Determinar o ttulo no momento da
utilizao, trabalhando sempre ao abrigo da umidade.
Introduzir em um erlenmeyer cerca de 20 mL de metanol
anidro e proceder a Determinao da gua pelo mtodo
semi-micro (5.2.20.3), com a amostra, at ao ponto fnal da
titulao. Introduzir no erlenmeyer uma quantidade de gua
exatamente medida e efetuar uma nova titulao. Calcular
o equivalente em gua da amostra, em miligramas por
mililitro. Cada mililitro de iodossulfuroso SR corresponde,
no mnimo, a 3,5 mg de H
2
O.
Conservao Em recipiente seco.
Irganox 1010
CAS [6683-19-8]
73
H
108
O
12
1177,81
Descrio P branco a ligeiramente amarelado. Inodoro,
inspido.
Cristaliza em duas formas: forma alfa, faixa de fuso 120
C a 125 C; e forma beta, faixa de fuso 110 C a 115
C A faixa de fuso varia de acordo com a proporo das
formas cristalinas na mistura; esta proporo no infui na
efcincia do produto.
Informao adicional Estabilizador para substncias
orgnicas, tais como polietileno e polipropileno,
protegendo-as contra degradao termooxidativa.
Irganox 1076
CAS [2082-79-3]
35
H
62
O
3
530,97
Descrio P branco a ligeiramente amarelado. Inodoro,
estvel luz.
Informao adicional Antioxidante para substratos
orgnicos, tais como polietileno e polipropileno,
protegendo-os de degradao termooxidativa.
Irganox PS 800
CAS [123-28-4]
30
H
58
O
4
S 514,94
Informao adicional Estabilizador de poliolefnas,
especialmente polipropileno e polietileno de alta densidade.
Iso-octano
CAS [540-84-1]
Sinonmia 2,2,4-Trimetilpentano.
8
H
18
114,23
Descrio Lquido incolor e infamvel.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua e solvel
em etanol.
Isotiocianato de fuorescena
CAS [27072-45-3]
21
H
11
NO
5
S 389,38
Especifcao Mistura de ismeros: 5-isotiocianato e
6-isotiocianato.
Descrio Slido alaranjado, decompe com
aquecimento.
Lactose
CAS [5989-81-1]
Sinonmia Lactose monoidratada.
12
H
22
O
11
.H
2
O 360,31
Descrio P cristalino ou grnulos brancos. Inodoro, de
fraco sabor adocicado.
Caractersticas fsicas Rotao ptica especfca (20 C):
+52,2 a + 52,8 (determinar em soluo de lactose anidra
a 0,1 g/mL). Temperatura de fuso: 202 C
Informao adicional Adsorve odores estranhos.
Lactose a 0,1% (p/v) em piridina
Especifcao Contm 0,1% (p/v) em piridina.
Segurana Txico
Laurato de metila
CAS [111-82-0]
13
H
26
O
2
214,40
Descrio Lquido incolor ou amarelado.
0,870. ndice de refrao (20 C): aproximadamente 1,431.
Temperatura de fuso: aproximadamente 5 C
14
Laurilsulfato de sdio
CAS [151-21-3]
Sinonmia Sulfato dodecil sdico, dodecilsulfato de
sdio.
12
H
25
NaO
4
S 288,38
Especifcao Mistura de, no mnimo, 85,0% (p/p), de
alquilsulfatos de sdio, consistindo principalmente de
laurilsulfato de sdio [CH
3
(CH
2
)
10
,H
2
SO
4
,Na]. O contedo
combinado de NaCl e Na
2
SO
4
, no mximo, de 8,0% (p/p).
Descrio P, escamas ou cristais brancos ou amarelo
claro; odor fraco e caracterstico.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, e parcialmente
solvel em etanol.
Laurilsulfato de sdio SR
Descrio Contm 1 g em 100 mL de gua.
Lecitina
Especifcao Mistura de diglicerdeos, principalmente
dos cidos esterico, palmtico e olico, ligados ao ster
fosfrico da colina. Estrutura e composio variveis de
acordo com a fonte de obteno.
Descrio Massa gordurosa amarelo amarronzado a
marrom, de odor fraco caracterstico.
Rotulagem Especifcar origem.
Liga de nquel-alumnio
Descrio P fno cinza.
cidos minerais com formao de sal.
Linalol
CAS [78-70-6]
10
H
18
O 154,25
Descrio Lquido. Mistura de dois estereoismeros
(licareol e coriandrol).
0,860. Temperatura de ebulio: cerca de 200 C. ndice de
refrao (20 C): cerca de 1,462.
Ltio
CAS [7439-93-2]
Elemento e massa atmica Li 6,94
Solubilidade Reage violentamente com a gua. Solvel
em metanol, formando metxido de ltio. Praticamente
insolvel em ter de petrleo.
Ltio SRA - 2 mg/mL
Especifcao Contm 1,064 g de carbonato de ltio em
5 mL de cido clordrico. Completar com gua a 100 mL.
polietileno).
Macrogol 300
CAS [25322-68-3]
Sinonmia PEG 300, polietilenoglicol 300.
Frmula e massa molecular H(OCH
2
CH
2
)
n
OH Massa
molecular no inferior a 95% do valor nominal rotulado.
Apresenta o nmero mdio de grupos oxietileno: n = 6 ou 7.
Especifcao Mistura de produtos de policondensao
de xido de etileno e gua.
Descrio Lquido viscoso, lmpido, incolor ou quase, de
odor fraco e caracterstico, higroscpico.
Viscosidade: aproximadamente 80 cP.
Rotulagem Deve conter a massa molecular mdia.
Macrogol 1000
CAS [25322-68-3]
Sinonmia PEG 1000, polietilenoglicol 1000.
Frmula e massa molecular - H(OCH
2
CH
2
)
n
OH Massa
molecular no inferior a 95% do valor nominal rotulado.
Descrio Slido branco ou quase branco com aparncia
de cera. Higroscpico.
1,080. Faixa de congelamento: entre 35 C e 40 C.
em etanol e em cloreto de metileno. Praticamente insolvel
em leos graxos e em leos minerais.
Rotulagem Deve conter a massa molecular mdia.
Magnsio SRA - 1 mg/mL
Especifcao Contm 9 g de cloreto de magnsio em
gua a 500 mL.
Padronizao Em 25 mL desta soluo, adicionar 25 mL de
gua, 10 mL de tampo cloreto de amnia pH 10,7 e 0,1 g do
indicador negro de eriocromo T. Titular com edetato dissdico
0,05 M SV. Cada mL do titulante corresponde a 0,001215 g de
Mg. Para uso diluir concentrao de 1 mg/mL.
polietileno).
Magneson
CAS [74-39-5]
12
H
9
N
3
O
4
259,22
a
14
Descrio P castanho-avermelhado.
Categoria Indicador para magnsio e molibdnio.
Melamina
CAS [108-78-1]
3
H
6
N
6
126,12
Descrio P amorfo, branco ou quase branco.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua e em etanol.
2-Mercaptoetanol
CAS [60-24-2]
2
H
6
OS 78,14
Descrio Lquido lmpido e incolor.
1,116. Temperatura de ebulio: cerca de 157 C.
Mercrio
CAS [7439-97-6]
Elemento e massa atmica Hg 200,59
Especifcao Metal lquido, mvel, denso, prateado, de
superfcie espelhada.
Segurana Veneno! Voltil temperatura ambiente.
Mercrio SRA 1 mg/mL
Especifcao Contm 1,080 g de xido de mercrico
dissolvido no menor volume possvel de cido clordrico 2
M. Completar com gua a 1000 mL.
polietileno).
Metabissulfto sdico
CAS [7681-57-4]
Sinonmia Dissulfto de sdio, pirossulfto de sdio.
2
S
2
O
5
190,10
Especifcao Contm, no mnimo, 95% (p/p). Contm
quantidade de metabissulfto sdico equivalente a, no
mnimo, 65,0% e, no mximo, 67,4% de SO
2
.
branco-creme, de odor sulfuroso e de sabor cido e salino.
em etanol.
Conservao Em recipientes bem fechados, bem cheios.
Armazenagem Proteger do calor excessivo, do ar e da
umidade.
Estabilidade Oxida lentamente a sulfato, por exposio
ao ar e, umidade, com desintegrao dos cristais.
Metanol
CAS [67-56-1]
Sinonmia lcool metlico.
4
O 32,04
Descrio Lquido lmpido, incolor, infamvel, de odor
caracterstico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: 64 C
a 65 C. Densidade: 0,790 a 0,793. ndice de refrao (20
C): 1,328 a 1,330.
Metenamina
CAS [100-97-0]
Sinonmia Hexametilenotetramina.
6
H
12
N
4
140,19
Especifcao Contm, no mnimo, 99,0% (p/p), aps
dessecao sob pentxido de fsforo durante 4 horas.
Descrio P cristalino incolor.
Caractersticas fsicas Sublima sem fundir e com parcial
decomposio a aproximadamente 263 C. O pH da
soluo a 0,2 M: 8,4.
Categoria Antissptico urinrio.
Metilcelulose 450
CAS [9004-67-5]
Especifcao Celulose parcialmente O-metilada com
viscosidade de 450 mPa/segundo.
Descrio Grnulo ou p branco, ou branco amarelado,
ou branco acinzentado. Higroscpico.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua quente, em
acetona, etanol absoluto e tolueno.
4,4-Metilenobis-N,N-dimetilanilina
CAS [101-61-1]
Sinonmia Tetrametildiaminodifenilmetano.
17
H
22
N
2
254,37
Descrio Cristais ou folhetos brancos, ou branco-
azulados.
solvel em etanol e solvel em cidos minerais.
14
Metilenobisacrilamida
CAS [110-26-9]
Sinonmia N,N-metilenobisacrilamida,
metilenobispropenamida.
7
H
10
N
2
O
2
154,19
Descrio P fno branco ou quase branco.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: acima de 300
C, com decomposio.
Metil-etil-cetona
CAS [78-93-3]
Sinonmia Etil-metil-cetona; 2-butanona.
4
H
8
O 72,11
Descrio Lquido lmpido e incolor. Odor caracterstico
de acetona.
Temperatura de ebulio: 79,6 C.
Metilisobutilcetona
CAS [108-10-1]
Sinonmia 4-Metil-2-pentanona, isopropilacetona.
6
H
12
O 100,16
Descrio Lquido incolor, de odor cetnico e canforado.
torno de 115 C
Metilparabeno
CAS [99-76-3]
Nome qumico ster metlico do cido 4-hidroxibenzoico
8
H
8
O
3
152,15
Descrio Cristais brancos, pouco solveis em gua,
facilmente solveis em acetona, em etanol e em ter etlico.
solvel em etanol e em metanol.
4-Metilpentan-2-ol
CAS [108-11-2]
6
H
14
O 102,17
Descrio Lquido incolor, lmpido e voltil.
3-Metil-2-pentanona
CAS [565-61-7]
6
H
12
O 100,16
Descrio Lquido incolor e infamvel.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: cerca
de 118 C. Densidade (20 C): cerca de 0,815. ndice de
Refrao (20 C): cerca de 1,400.
Metoxiazobenzeno
CAS [2396-60-3]
13
H
12
N
2
O 212,3
Descrio Lminas alaranjadas.
etanol, em ter de petrleo e outros solventes orgnicos.
Cromatografa em camada delgada Aplicar, em placa
de slica-gel G, soluo de 5 mg de metoxiazobenzeno em
benzeno e desenvolver cromatograma com o mesmo solvente.
Aparece uma nica mancha com Rf em torno de 0,6.
Metoxiazobenzeno SR
Especifcao Soluo a 0,2% (p/v) em mistura de 1
volume de benzeno e 4 volumes de ter de petrleo.
Metxido de potssio
CAS [865-33-8]
3
OK 70,13
Uso Preparao extempornea.
Metxido de sdio
CAS [124-41-4]
3
ONa 54,02
Descrio P branco fno. Reage violentamente com
a gua com formao de calor. Sensvel ao ar. Pode
apresentar-se na forma de: CH
3
ONa. 2CH
3
OH, p branco.
Em soluo pode ser preparado in situ.
Solubilidade Solvel em etanol e em metanol.
Metoxietanol
CAS [109-86-4]
Sinonmia 2-Metoxietanol, ter etilenoglicol monometil.
3
H
8
O
2
76,09
0,9663. ndice de refrao (20 C): cerca de 1,4028.
Miscibilidade Miscvel em gua, em acetona e em etanol.
Segurana Venenoso! Usar em ambientes com ventilao
adequada.
Miristato de metila
CAS [124-10-7]
15
H
30
O
2
242,40
a
14
Descrio Lquido incolor ou fracamente amarelado.
Temperatura de fuso: aproximadamente 20 C.
Miscibilidade Miscvel em etanol e ter de petrleo.
Mistura de negro de eriocromo T
Preparao Misturar 0,2 partes de negro de eriocromo T
com 100 partes de cloreto de sdio.
Categoria Indicador para clcio e magnsio.
Mistura redutora
Preparao Pulverizar as substncias, adicionadas na
seguinte ordem, de modo a obter uma mistura homognea:
20 mg de brometo de potssio, 0,5 g de sulfato de hidrazina
e 5 g de cloreto de sdio.
Mistura sulfocrmica
Preparao Dissolver 50 g de dicromato de potssio
em cerca de 50 mL de gua e adicionar 1000 mL de cido
sulfrico.
Molibdato de amnio
CAS [12054-85-2]
4
)
6
Mo
7
O
24
.4H
2
O
1235,86
Descrio Cristais incolores at levemente amarelos ou
verde azulados, brilhantes.
em etanol.
Caractersticas fsicas Pelo aquecimento perde gua e
amnia.
Molibdato de amnio SR
Especifcao Contm 10 g de molibdato de amnio em
gua para 100 mL.
Molibdato de amnio SR1
Preparao Dissolver 6,5 g de cido molibdnico,
fnamente modo, em mistura de 14 mL de gua e 14,5 mL
de hidrxido de amnio. Resfriar a soluo e adicion-
la, lentamente e com agitao, a uma mistura resfriada
de 32 mL de cido ntrico e 40 mL de gua. Deixar em
repouso por 48 horas e fltrar atravs de cadinho com fundo
sinterizado de porosidade fna. Esta soluo se deteriora sob
armazenamento e inadequada para o uso se, aps adio
de 2 mL de fosfato de sdio dibsico dodeca-hidratado SR
para 5 mL de soluo, um precipitado amarelo abundante
no se forma imediatamente ou aps leve aquecimento. Se
ocorrer formao de precipitado durante o armazenamento,
empregar somente a soluo sobrenadante lmpida.
Molibdato de amnio, soluo cida
Preparao Diluir 25 mL de molibdato de amnio a 7%
(p/v) para 200 mL com gua. Adicionar, lentamente, 25 mL
de cido sulfrico 3,75 M e homogeneizar.
Molibdato de amnio a 1% (p/v) em cido sulfrico M
Preparao Pesar 1 g de molibdato de amnio R e
dissolver com 50 mL de soluo de cido sulfrico M.
Diluir a 100 mL com o mesmo solvente.
Molibdato de sdio
CAS [10102-40-6]
2
MoO
4
.2H
2
O 241,95
quase branco.
Molibdovandio SR
Sinonmia Reagente molibdatovanadato, reagente
molibdovandio.
Preparao Usando substncias fnamente pulverizadas,
preparar suspenso de 4 g de molibdato de amnio e 0,1 g
de vanadato de amnio em 70 mL de gua. Juntar 20 mL
de cido ntrico. Completar o volume de 100 mL com gua.
Morfolina
CAS [110-91-8]
Sinonmia Tetraidro-2H-1,4-oxazina; dietileno oximida
4
H
9
NO 87,12
Descrio Lquido incolor. Higroscpico.
de 128 C.
Morina
CAS [6472-38-4]
15
H
10
O
7
.2H
2
O 338,27
14
Naftaleno
CAS [91-20-3]
10
H
8
128,17
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: cerca de 80
C. Faixa de ebulio: entre 217 C e 219 C.
etanol e facilmente solvel em benzeno e clorofrmio.
Conservao Recipiente bem fechados.
1,3-Naftalenodiol
CAS [132-86-5]
10
H
8
O
2
160,17
Descrio P cristalino, geralmente, violeta-
amarronzado.
2,7-Naftalenodiol
CAS [582-17-2]
10
H
8
O
2
160,17
Descrio P ou slido cristalino amarelo a quase branco.
Caractersticas fsicas Faixa de fuso: 187 C e 191 C.
Naftalenodiol, reagente
Preparao Dissolver 20 mg de 1,3-naftalenodiol em 10
mL de etanol contendo 0,2 mL de cido sulfrico.
1-Naftilamina
CAS [134-32-7]
Sinonmia -Naftilamina.
10
H
9
N 143,12
Pela exposio ao ar e luz, torna-se avermelhado. Odor
desagradvel.
em etanol.
Segurana Vapor e p nocivos.
1-Naftol
CAS [90-15-3]
Sinonmia Alfanaftol, -naftol.
10
H
8
O 144,17
Descrio Cristais incolores, ou brancos ou quase
brancos; ou p cristalino branco ou quase branco. Escurece
com a exposio luz.
em etanol.
1-Naftol SR
Especifcao Contm 20% (p/v) em etanol.
2-Naftol
CAS [135-19-3]
Sinonmia Betanaftol, |-naftol
10
H
8
O 144,17
Descrio P cristalino branco a levemente rseo, de
odor fenlico fraco.
aproximadamente 122 C
Solubilidade Muito pouco solvel em gua e muito
solvel em etanol.
2-Naftol SR
Sinonmia Betanaftol SR, |-naftol SR.
Especifcao Contm 1 g em 100 mL de hidrxido de
sdio a 1% (p/v).
2-Naftol SR1
Sinonmia Betanaftol SR1, |-naftol SR1
Preparao Dissolver 5 g de 2-naftol, recentemente
recristalizado, em 40 mL de hidrxido de sdio 2 M e
completar para 100 mL com gua.
Naringina
CAS [10236-47-2]
27
H
32
O
14
580,54
Solubilidade Pouco solvel em gua, solvel em metanol
e em dimetilformamida.
a
14
Negro de amido 10B
CAS [1064-48-8]
22
H
14
N
6
Na
2
O
9
S
2
616,50
Descrio P castanho escuro a preto.
Solubilidade Ligeiramente solvel na gua, solvel em
etanol.
Negro de amido 10B SR
Especifcao Soluo de negro de amido 10B a 0,5%
(p/v) numa mistura de cido actico e metanol (10:90).
Ninidrina
CAS [485-47-2]
Sinonmia Ninhidrina.
9
H
4
O
3
.H
2
O 178,14
Descrio P cristalino branco a amarelo fracamente
plido.
Ninidrina etanlica actica SR
Preparao Dissolver 1 g de ninidrina em 50 mL de
etanol e adicionar 10 mL de cido actico glacial.
Ninidrina SR
Sinonmia Ninhidrina SR.
Especifcao Contm 0,2% (p/v) em mistura de
1-butanol e cido actico 2 M (95:5).
Segurana Infamvel.
Nitrato crico amoniacal
CAS [16774-21-3]
4
)
2
[Ce(NO
3
)
6
] 548,22
Descrio P cristalino amarelo-alaranjado ou cristais
alaranjados transparentes.
Nitrato de alumnio, nona-hidratado
CAS [7784-27-2]
Frmula e massa molecular Al(NO
3
)
3
.9H
2
O 375,14
Descrio Cristais deliquescentes.
Solubilidade Muito solveis em gua e etanol, muito
pouco solveis em acetona.
Conservao Em recipientes hermeticamente fechados
Nitrato de amnio
CAS [6484-52-2]
4
NO
3
80,04
Descrio Cristais incolores, deliquescentes, ou p
branco, de sabor salgado.
aproximadamente 155 C, decompe-se ao redor de 210
C em gua e xidos de nitrognio.
em metanol e solvel em etanol.
Nitrato de amnio SR
Especifcao Contm 5 g de nitrato de amnio em gua
para 100 mL.
Nitrato de amnio, soluo saturada
Especifcao Contm 20,1 g em 10 mL de gua.
Nitrato de brio
CAS [10022-31-8]
Frmula e massa molecular BaN
2
O
6
261,34
Descrio Cristais ou p cristalino.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, muito pouco
solvel em etanol e em acetona.
Segurana Veneno!
Nitrato de cdmio
CAS [10022-68-1]
Frmula e massa molecular Cd(NO
3
)
2
.4H
2
O 308,47
Descrio Cristais incolores. Higroscpicos.
Solubilidade Muito solvel em gua e solvel em acetona
e em etanol.
Nitrato de chumbo
CAS [10099-74-8]
Sinonmia Nitrato de chumbo(II).
Frmula e massa molecular Pb(NO
3
)
2
331,21
Descrio Cristais incolores, translcidos ou p cristalino
branco.
Segurana Veneno!
14
Nitrato de cobalto(II)
CAS [10026-22-9]
Sinonmia Nitrato cobaltoso.
Frmula e massa molecular CoN
2
O
6
.6H
2
O 291,03
Descrio Cristais pequenos, vermelhos, higroscpicos.
aproximadamente 55C.
Nitrato de cobalto(II) SR
Descrio Contm 1,0% (p/v) em metanol.
Segurana Infamvel. Txico.
Nitrato de lantnio
CAS [10277-43-7]
Frmula e massa molecular LaN
3
O
9
.6H
2
O 433,01
Descrio Cristais incolores, deliquescentes.
Nitrato de lantnio SR
Especifcao Contm 5% (p/v) em gua.
Nitrato de magnsio
CAS [13446-18-9]
Frmula e massa molecular Mg(NO
3
)
2
.6H
2
O 256,41
em etanol.
Nitrato de mercrio(I)
CAS [14836-60-3]
Sinonmia Nitrato mercuroso.
Frmula e massa molecular Hg
2
N
2
O
6
.2H
2
O 561,22
Descrio Cristais incolores, normalmente com fraco
odor de cido ntrico.
Segurana Veneno!
Nitrato de mercrio(I) SR
Sinonmia Nitrato mercuroso SR.
Especifcao Contm 15 g em mistura de 90 mL de gua
e 10 mL de cido ntrico a 10% (v/v)
Conservao Em recipientes fechados de vidro mbar.
Estabilidade Adicionar um pequeno glbulo de mercrio
metlico.
Nitrato de mercrio(II)
CAS [7783-34-8]
Sinonmia Nitrato mercrico.
Frmula e massa molecular HgN
2
O
6
.H
2
O 342,62
Descrio Cristais incolores ou fracamente corados.
Higroscpico.
Solubilidade Solvel em gua em presena de pequena
quantidade de cido ntrico.
Armazenagem Proteger da luz e da umidade.
Segurana Veneno!
Nitrato de potssio
CAS [7757-79-1]
Frmula e massa molecular KNO
3
101,10
Descrio Cristais incolores e transparentes, ou p
branco, cristalino ou granular.
Nitrato de prata
CAS [7761-88-8]
Frmula e massa molecular AgNO
3
169,87
Descrio Cristais incolores transparentes, ou p
cristalino branco. Inodoro
Conservao Em recipientes no metlicos fechados.
Segurana Custico. Veneno!
Nitrato de prata 0,1 M
Especifcao Contm 17 g em gua para 1000 mL.
Nitrato de prata SR
Especifcao Contm 4,25 % (p/v) em gua.
a
14
Nitrato de prata SR1
Nome alternativo Reagente de nitrato de prata.
Preparao Misturar 3 mL de soluo concentrada de
amnia e 40 mL de hidrxido de sdio M, adicionar, gota
a gota, com agitao, 8 mL de soluo de nitrato de prata a
20% (p/v). Diluir para 200 mL com gua.
Nitrato de sdio
CAS [7631-99-4]
Frmula e massa molecular NaNO
3
84,99
Descrio Cristais incolores e transparentes ou, grnulo
ou p branco ou quase branco. Deliquescente.
em etanol.
Nitrato de sdio SR
Especifcao Contm 10 g em gua para 100 mL.
Estabilidade Preparar imediatamente antes do uso.
Nitrato de trio
CAS [13470-07-0]
Frmula e massa molecular ThN
4
O
12
.4H
2
O 552,12
Descrio Cristais ou p cristalino branco, levemente
deliquescente.
Solubilidade Muito solvel em gua e etanol.
Nitrato de zirconila
CAS [14985-18-3]
Sinonmia Nitrato de zircnio.
Frmula molecular aproximadamente, ZrO(NO
3
)
2
.xH
2
O
Descrio Cristais, ou p branco, ou quase branco.
Nitrato de zirconila SR
Preparao Dissolver 0,1 g de nitrato de zirconila em
uma mistura de 60 mL de cido clordrico e 40 mL de gua.
Nitrato fenilmercrico
CAS [55-68-5]
Sinonmia Nitrato bsico de fenilmercrio e nitrato de
fenilmercrio.
6
H
5
HgNO
3
339,70
Especifcao Consiste em mistura de nitrato e hidrxido
de on fenilmercrio (C
6
H
5
Hg
+
). Contm, no mnimo,
87,9% de on fenilmercrico (p/p) e, no menos, de 62,75%
de mercrio (Hg) (p/p).
Descrio P cristalino branco, ou escamas brancas
lustrosas. Inodoro.
Caracterstica fsica Faixa de fuso: entre 175 C e 190
C, com decomposio.
Solubilidade Muito solvel em gua e em etanol, pouco
solvel em gua quente. Dissolve em glicerol e leos
graxos.
Nitrazepam
CAS [146-22-5]
15
H
11
N
3
O
3
281,27
Solubilidade Praticamente insolvel em gua, e pouco
solvel em etanol.
Nitrito de sdio
CAS [7632-00-0]
Frmula e massa molecular NaNO
2
69,00
Descrio Cristais incolores, ou p granulado branco, ou
levemente amarelado. Higroscpico.
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: 271C.
Decompe-se acima de 320 C.
Estabilidade Oxida-se ao ar muito lentamente a nitrato.
Nitrito de Sdio SR
Especifcao Contm 10 g de nitrito de sdio em gua
para 100 mL.
Conservao Preparar para consumo imediato.
p-Nitroanilina
CAS [100-01-6]
6
H
6
N
2
O
2
138,12
Descrio P cristalino claro.
Solubilidade Insolvel em gua e solvel em etanol e ter
etlico. Forma um sal solvel em soluo aquosa com cido
mineral forte.
14
p-Nitroanilina e nitrito de sdio SR
Soluo A Dissolver 0,3 g de p-nitroanilina em 100 mL
de cido clordrico 10 M.
Soluo B Dissolver 2,5 g de nitrito de sdio em 50 mL
de gua.
Preparao Misturar 90 mL da Soluo A e 10 mL da
Soluo B no momento do uso.
2-Nitrobenzaldedo
CAS [552-89-6]
7
H
5
NO
3
151,12
Descrio Cristais amarelos, de odor semelhante ao de
leo de amndoas.
42 C.
em etanol.
Nitrobenzeno
CAS [98-95-3]
Sinonmia Nitrobenzol.
6
H
5
NO
2
123,11
Descrio Lquido incolor a amarelo plido, de odor
semelhante ao de leo de amndoas.
aproximadamente 211C. Densidade: aproximadamente 1,20.
em etanol.
Segurana Veneno!
Nitrometano
CAS [75-52-5]
3
NO
2
61,04
Descrio Lquido oleoso incolor, de odor caracterstico.
de 102 C.
Miscibilidade Pouco miscvel em gua e miscvel em
etanol.
Nitroprusseto de sdio
CAS [13755-38-9]
Sinonmia Pentacianonitrosilferrato(III) dissdico
diidratado, nitroprussiato de sdio, nitroferrocianeto de
sdio.
2
[Fe(CN)
5
(NO)].2H
2
O
297,95
Descrio P ou cristais transparentes, vermelhos
escuros.
em etanol.
Nitroprusseto de sdio e piperazina SR
Especifcao Contm 0,1 g de nitroprusseto de sdio e
0,25 g de piperazina em 5 mL de gua.
1-Octanossulfonato de sdio
CAS [5324-84-5]
Frmula molecular e massa C
8
H
17
NaO
3
S 216,27
Especifcao Contm, no mnimo, 98,0% de
C
8
H
17
NaO
3
S.
Descrio Flocos ou ps cristalinos brancos ou quase
brancos.
Octilsulfato de sdio
CAS [142-31-4]
8
H
17
NaO
4
S 232,27
Descrio Flocos ou p cristalino branco ou quase
branco.
metanol.
Octoxinol 10
CAS [9002-93-1]
2
H
4
O)
10
C
14
H
22
O 647,00
Descrio Lquido viscoso, lmpido, amarelo claro.
Miscibilidade Miscvel em gua, em acetona e em etanol.
Solvel em tolueno.
Conservao Em recipiente bem fechado.
leo de oliva
CAS [8001-25-0]
Especifcao leo fxo obtido do fruto maduro de Olea
europaea L. Oleaceae.
Descrio leo amarelo plido ou amarelo esverdeado.
Miscibilidade Praticamente insolvel em etanol, miscvel
em clorofrmio, ter etlico e ter de petrleo.
Oxalato de amnio
CAS [6009-70-7]
2
H
8
N
2
O
4
.H
2
O 142,11
cristalino branco. Inodoro.
Segurana Custico. Corrosivo. Veneno!
Oxalato de amnio SR
Usar oxalato de amnio SI.
a
14
Oxalato de potssio
CAS [6487-48-5]
2
C
2
O
4
.H
2
O 184,23, se
anidro 166,22
Descrio Cristais incolores, inodoros, eforescentes ao
ar seco e quente.
Caracterstica fsica Perde sua gua a aproximadamente
160 C
Segurana Veneno!
Oxalato de sdio
CAS [62-76-0]
2
C
2
O
4
134,00
em etanol.
Oxalato de verde de malaquita
CAS [633-03-4]
Sinonmia Verde brilhante
27
H
34
N
2
O
4
S 428,64
Descrio Cristais brilhantes amarelo-dourado.
xido de alumnio
CAS [1344-28-1]
Sinonmia Alumina.
Frmula e massa molecular Al
2
O
3
101,96
Descrio P granulado fno, branco.
Caracterstica fsica O pH da suspenso a 10,0% (p/v):
entre 9,0 e 10,0.
xido de hlmio
CAS [12055-62-8]
Frmula e massa molecular Ho
2
O
3
377,85
Descrio P amarelado.
xido de magnsio
CAS [1309-48-4]
Sinonmia xido de magnsio leve ou pesado.
Frmula e massa molecular MgO 40,30
Descrio P amorfo fno, branco, inodoro, de sabor
alcalino fraco.
Armazenagem Proteger do contato com o ar e com a
umidade.
xido de prata
CAS [20667-12-3]
Frmula e massa molecular Ag
2
O 231,74
Descrio P cinza escuro.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua e em
etanol, facilmente solvel em cido ntrico diludo e em
hidrxido de amnio.
xido mercrico
CAS [21908-53-2]
Sinonmia xido amarelo de mercrio, xido de
mercrio(II).
Frmula e massa molecular HgO 216,59
Descrio P amarelo-alaranjado, denso, inodoro.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua e em etanol.
Segurana Veneno!
Paldio SRA - 1 mg/mL
Especifcao Contm l,67 g de cloreto de paldio em 200
mL de cido clordrico a 50% (v/v). Aquecer at dissoluo
completa. Resfriar e completar com gua a 1000 mL.
polietileno).
Palmitato de metila
CAS [112-39-0]
17
H
34
O
2
270,50
Descrio Massa cristalina branca ou amarela.
Caractersticas fsicas Densidade (30 C):
aproximadamente 0,86. Temperatura de fuso: cerca de 30
C.
Solubilidade Solvel em etanol e em ter de petrleo.
Papel de prata-mangans
Preparao mistura de volumes iguais de nitrato de
prata 0,1 M e de sulfato de mangans (1,5% (p/v) adicionar,
gota a gota, hidrxido de sdio 0,1 M at que se forme
precipitado persistente. Filtrar. A seguir, mergulhar tiras de
papel de fltro (por exemplo, Whatman N
o
1) na soluo,
durante 15 minutos. Secar temperatura ambiente, ao
abrigo da luz e de vapores cidos ou alcalinos. O papel de
prata-mangans deve ser incolor.
Ensaio de sensibilidade Em proveta de aproximadamente
40 mL de capacidade introduzir 1 mL de cloreto de amnio
a 1% (p/v). Adicionar 9 mL de gua e 1 g de xido de
14
magnsio. Fechar imediatamente o recipiente com tampa
de polietileno, sob a qual se coloca o papel de prata-
mangans. Agitar a soluo, tomando-se o cuidado para
que as partculas de magnsio no entrem em contato com
o papel. Manter a proveta a 50 C a 60 C durante 1 hora.
Aparece cor cinza no papel reagente.
Parafna lquida
Especifcao Mistura purifcada de hidrocarbonetos
saturados lquidos obtidos do petrleo.
Descrio Lquido oleoso incolor e transparente.
Caractersticas fsicas Densidade relativa: 0,827 a 0,890.
Viscosidade: 110 mPa a 230 mPa.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua e pouco
solvel em etanol. Miscvel em hidrocarbonetos.
1-Pentanossulfonato de sdio, monoidratado
CAS [207605-40-1]
5
H
11
NaO
3
S.H
2
O 192,21
Descrio Slido cristalino branco ou quase branco.
Pentxido de fsforo
CAS [1314-56-3]
Sinonmia Anidrido fosfrico.
Frmula e massa molecular P
2
O
5
141,94
Descrio P branco, amorfo, muito deliquescente.
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: 340 C
Temperatura de sublimao: 360 C.
Segurana Irritante. Corrosivo pele, mucosa e olhos.
Pentxido de vandio
CAS [1314-62-1]
Frmula e massa molecular V
2
O
5
181,88
Descrio P fno amarelo a amarelo alaranjado.
Solubilidade Pouco solvel em gua e solvel em cidos
minerais fortes e solues hidrxi-alcalinas com formao
de sais.
Pepsina purifcada
Especifcao Derivada da mucosa estomacal do porco,
com atividade de 800 a 2500 unidades/mg de protena.
Descrio P cristalino ou amorfo, branco ou pouco
amarelo. Higroscpio.
Solubilidade Solvel em gua, praticamente insolvel em
etanol. A soluo em gua pode fcar um pouco opalescente
com uma pequena quantidade de cido.
Armazenagem Protegido da luz e em temperatura de 2
C a 8C.
Rotulagem Deve expressar a atividade da pepsina.
Peptona
Especifcao Mistura de produtos de natureza
polipeptdica oriundos de protenas animais (carne,
casena). A origem determina as caractersticas fsicas,
composio e processo de produo.
Descrio P amarelo claro a marrom. Odor e sabor
caractersticos. Teor mnimo em nitrognio: 12,0% (p/p)
de casena e 14,2% (p/p) de carne.
Rotulagem Deve expressar origem e teor em nitrognio.
Perclorato de sdio
CAS [7791-07-3]
Nome qumico Sal sdico monoidratado do cido
perclrico
Frmula e massa molecular NaClO
4
.H
2
O 140,46
Descrio Cristais incolores, deliquescentes.
Solubilidade Muito solvel em gua, solvel em etanol.
Periodato de potssio
CAS [7790-21-8]
Sinonmia Metaperiodato de potssio
Frmula e massa molecular KIO
4
230,00
Descrio P branco cristalino ou cristais incolores.
Segurana Altamente irritante pele, olhos e mucosas.
Periodato frrico de potssio SR
Preparao Dissolver 1 g de periodato de potssio em
5 mL de soluo de hidrxido de potssio 12% (p/v),
recentemente preparada. Adicionar 20 mL de gua e 1,5
mL de cloreto frrico SR. Diluir a 50 mL com soluo de
hidrxido de potssio 12% (p/v) recentemente preparada.
Periodato de sdio
CAS [7790-28-5]
Sinonmia Metaperiodato de sdio.
Frmula e massa molecular NaIO
4
213,89
Especifcao Contm, no mnimo, 99,0% de periodato
de sdio.
Descrio Cristais brancos tetragonais.
a
14
Solubilidade Solvel em gua, cido actico, cido
ntrico e cido sulfrico.
Armazenagem Em locais ventilados.
Segurana Oxidante forte.
Permanganato de potssio
CAS [7722-64-7]
Frmula e massa molecular KMnO
4
158,03
Descrio Cristais violeta escuros, com brilho metlico,
inodoros, de sabor adocicado, adstringente.
Solubilidade Solvel em gua fria e facilmente solvel
em gua fervendo.
Segurana A substncia e suas solues apresentam risco
de exploso, quando em contato com materiais oxidveis.
Categoria Oxidante enrgico.
Permanganato de potssio SR (aproximadamente 0,2 M)
Especifcao Contm 3% (p/v) em gua.
Estabilidade Preparar para consumo imediato.
Segurana Irritante. Custico.
Perxido de carbamida
CAS [124-43-6]
Sinonmia Perxido de hidrognio e ureia.
6
N
2
O
3
94,07
Descrio Cristais ou p cristalino branco. Decompe ao
contato com o ar em ureia, oxignio e gua.
Informao adicional Agente oxidante.
Perxido de hidrognio concentrado
CAS [7722-84-1]
Sinonmia Peridrol.
2
O
2
34,01
Especifcao Contm, no mnimo, 29,0% (p/p) de H
2
O
2
.
Corresponde a aproximadamente 100 partes em volume.
Pode conter estabilizante.
Descrio Lquido incolor, irritante, de fraco odor.
Caracterstica fsica Densidade: 1,11.
Conservao Em recipientes preenchidos parcialmente,
providos de fecho de alvio.
Segurana Oxidante forte.
Perxido de hidrognio, 30 volumes, SR
2
O
2
34,01.
Especifcao Contm, no mnimo, 9,7% (p/v) e,
no mximo, 10,7% (p/v) de H
2
O
2
, correspondendo a
aproximadamente 30 partes em volume. Pode conter
estabilizante.
Descrio Diluir o perxido de hidrognio, concentrado.
Estabilidade Evitar perodos longos de armazenagem.
Perxido de hidrognio a 3% (p/v)
2
O
2
34,01
Especifcao Contm, no mnimo, 2,5% (p/v) e,
no mximo, 3,5% (p/v) de H
2
O
2
, correspondendo a
aproximadamente 10 partes em volume. Pode conter
estabilizante.
Descrio Lquido lmpido, incolor.
Conservao Em recipientes fechados. Evitar perodos
longos de armazenamento.
Perxido de hidrognio metanlico
Preparao No dia do uso, diluir 2 mL de perxido
de hidrognio concentrado para 100 mL com metanol e
armazenar em refrigerador. Imediatamente antes do uso,
diluir 2 mL desta soluo para 100 mL com metanol.
Perxido de sdio
CAS [1313-60-6]
2
O
2
77,98
Descrio P granular branco-amarelado.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, formando
hidrxido de sdio e perxido de hidrognio, que decompe
a gs oxignio e gua.
Conservao Em recipientes bem fechados, protegido de
compostos orgnicos e substncias oxidveis.
14
Persulfato de amnio
CAS [7727-54-0]
Sinonmia Peroxidissulfato de amnio.
8
N
2
O
8
S
2
228,10
Descrio Cristais ou p granulado branco. Inodoro.
Estvel durante meses quando puro e seco; decompe-se
em presena de umidade.
Armazenagem Proteger da umidade, do calor e de matria
orgnica.
Informao adicional Agente fortemente oxidante.
Persulfato de potssio
CAS [7727-21-1]
2
S
2
O
8
270,32
quase branco.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua,
praticamente insolvel em etanol. Em soluo aquosa
decompe temperatura ambiente, e aumenta velocidade
de decomposio com o aumento da temperatura.
Armazenagem Em local ventilado.
Persulfato de sdio
CAS [7775-27-1]
2
O
8
S
2
238,13
Descrio P cristalino branco. Decompe-se lentamente
com umidade e pelo calor.
Armazenagem Proteger da umidade e do calor.
Segurana Irritante.
Picrato de sdio alcalino SR
Preparao Misturar 20 mL de cido pcrico a 1% (p/v)
com 10 mL de hidrxido de sdio a 5% (p/v) e diluir para
100 mL com gua.
Estabilidade Utilizar dentro de, no mximo, dois dias.
Piperazina
CAS [110-85-0]
3
H
10
N
2
86,14
Descrio Grumos ou focos brancos ou quase brancos.
Odor amoniacal.
Solubilidade Solvel em gua e em etanol, insolvel em
ter etlico.
Piridina
CAS [110-86-1]
5
H
5
N 79,10
Descrio Lquido incolor, de odor caracterstico e
desagradvel.
C Densidade (25 C): aproximadamente 0,980. ndice de
refrao (20 C): 1,5092.
Piridina anidra
Especifcao Contm, no mximo, 0,01% (p/p) de gua.
Preparao Secar a piridina com carbonato de sdio
anidro. Filtrar e destilar.
Pirofosfato de sdio
CAS [13472-36-1]
4
P
2
O
7
.10H
2
O 265,90
Descrio Cristais incolores pouco eforescentes.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: 79,5 C.
Pirogalol
CAS [87-66-1]
6
H
6
O
3
126,11
Descrio Cristais branco ou quase branco. Tornando-se
marrom em exposio ao ar e luz.
Solues aquosas tornam-se marrons em exposio ao ar.
Poliacrilamida
CAS [9003-05-8]
Sinonmia Polmero de acrilamida.
3
H
5
NO)n; monmero
71,08.
Especifcao Polmero de vrias formas, solveis e
insolveis em gua, obtidos pelo aquecimento com vrios
catalisadores de polimerizao.
Segurana Altamente txico e irritante. Causa paralisia
do sistema nervoso central. Pode ser absorvido pela pele
ntegra.
a
14
Polissorbato 20
Ver monografa Polissorbato 20.
Polissorbato 80
Especifcao Mistura de oleatos do sorbitol e seus
anidridos copolimerizados com aproximadamente 20 M
de xido de etileno para cada mol de sorbitol anidro e
anidrido.
Descrio Lquido claro, amarelado ou amarelo escuro.
Oleoso. Fraco odor caracterstico.
Caractersticas fsicas Densidade: em torno de 1,08.
Viscosidade: aproximadamente 400 cP.
Categoria Tensoativo.
Potssio SRA 600 ug/mL
Especifcao Contm 1,144 g de cloreto de potssio em
gua a 1000 mL.
polietileno).
Prednisolona
CAS [50-24-8]
21
H
28
O
5
360,45
Higroscpico. Apresentado na forma anidra ou contendo
uma ou meia molcula de gua de hidratao.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: 240-241 C,
com decomposio.
etanol e em metanol, ligeiramente solvel em acetona e
pouco solvel em cloreto de metileno.
Categoria Corticide.
Prednisona
CAS [53-03-2]
21
H
26
O
5
358,43.
C
21
H
26
O
5
, calculado sobre a substncia dessecada.
aproximadamente 233C, com decomposio.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua e pouco
solvel em etanol e em cloreto de metileno.
Categoria Corticide.
Preto brilhante BN
CAS [2519-30-4]
28
H
17
N
5
Na
4
O
14
S
4
867,69
Descrio Cristais fnos, p azul violceo ou preto
acinzentado. Indicador de xido-reduo. Forma oxidada:
azul violcea. Forma reduzida: amarelo-marrom.
Caracterstica fsica A(1%, 1 cm) maior que 0,390 em
570 nm.
Propilenoglicol
CAS [57-55-6]
Sinonmia 1,2-Propanodiol.
3
H
8
O
2
76,09
Descrio Lquido incolor, viscoso, higroscpico.
Faixa de ebulio: 187 C a 189 C.
Propilparabeno
CAS [94-13-3]
Nome qumico ster proplico do cido 4-hidroxibenzico
10
H
12
O
3
180,20
Solubilidade Muito pouco solveis em gua, facilmente
solveis em etanol e em ter etlico.
Prpura de ftalena
CAS [2411-89-4]
Sinonmia Metalftalena.
32
H
32
N
2
O
12
636,61
Descrio P amarelo claro a marrom. Pode ser
encontrado na forma de sal sdico: p amarelo claro a rosa.
em etanol. Na forma de sal sdico solvel em gua e
praticamente insolvel em etanol.
Ensaio de sensibilidade Dissolver 10 mg em 1 mL de
soluo concentrada de amnia e diluir para 100 mL com
gua. A 5 mL da soluo, adicionar 95 mL de gua, 4 mL
de soluo concentrada de amnia, 50 mL de etanol e 0,1
mL de cloreto de brio 0,1 M SV. A soluo apresenta
colorao azul violeta. Adicionar 0,15 mL de edetato
dissdico 0,1 M SV. A soluo fcar incolor.
Quinalizarina (CI 58500)
CAS [81-61-8]
Sinonmia Mordente violeta 26
14
H
8
O
6
272,20.
Descrio P vermelho escuro.
14
Quinidina
CAS [56-54-2]
20
H
24
N
2
O
2
324,42
Descrio Cristais brancos, ou quase brancos.
Caractersticas fsicas Poder rotatrio especfco (20 C):
cerca de +260, determinado e uma soluo a 1% (p/v) em
etanol. Temperatura de fuso: cerca de 172 C.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua, ligeiramente
solvel em etanol e pouco solvel em metanol.
Armazenagem Proteger da exposio luz
Quinidrona
CAS [106-34-3]
12
H
10
O
4
218,21
Descrio Cristais lustrosos ou p cristalino verde
escuro.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: 170 C, pode
sublimar e se decompor parcialmente.
Solubilidade Pouco solvel em gua fria, solvel em
gua quente, amnia e ter etlico.
Quinina
CAS [130-95-0]
20
H
24
N
2
O
2
324,42
Descrio P microcristalino branco, ou quase branco.
Caractersticas fsicas Poder rotatrio especfco (20
C): cerca de -167, determinado e uma soluo a 1% (p/v)
em etanol. Temperatura de fuso: cerca de 175 C.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua, pouco
solvel em gua fervendo e muito solvel em etanol.
Raponticina
CAS [155-58-8]
21
H
24
O
9
420,41
Descrio P cristalino cinza-amarelado.
Solubilidade Solvel em etanol e em metanol.
Reagente de aluminon
Soluo A Dissolver 250 g de acetato de amnio em 500
mL de gua bidestilada. Adicionar 40 mL de cido actico
glacial, 0,5 g de aluminon dissolvido em 50 mL de gua
bidestilada, 1 g de cido benzoico dissolvido em 150 mL
de lcool isoproplico e 225 mL de lcool isoproplico.
Completar o volume para 1000 mL com gua bidestilada.
Soluo B Dissolver 5 g de gelatina em 125 mL de
gua bidestilada quente e misturar com 250 mL de gua
bidestilada fria. Filtrar e completar a 500 mL com gua
bidestilada.
Preparao Misturar com agitao as Solues A e B.
A mistura deve estar completamente lmpida quando fria.
Armazenar em frasco de polietileno, protegida da luz.
Reagente de colorao
Preparao Misturar 50 mL de cido actico glacial e 50
mL de cido sulfrico. Deixar em repouso de 2 horas antes
do uso. Estocar em geladeira por, no mximo, 24 horas.
Reagente de Erlich modifcado
em 1 mL de cido clordrico e diluir com etanol para 100 mL.
Reagente de Folin-Denis
Preparao A 75 mL de gua adicionar l0 g de tungstato
de sdio, 2 g de cido fosfomolbdico e 5 mL de cido
fosfrico. Manter a mistura em refuxo por 2 horas, resfriar
e diluir a 100 mL com gua. A soluo apresenta colorao
esverdeada.
Reagente de Hantzach
Preparao Dissolver 150 g de acetato de amnio em
500 mL de gua destilada contendo 3 mL de cido actico e
2 mL de acetilacetona. Completar o volume para 1000 mL.
Conservao Em recipiente fechado de vidro mbar.
Reagente de Jones
Preparao A 40 mL de gua adicionar 5,3 g de trixido
de cromo e 24 mL de mistura de gua e cido sulfrico (1:1).
Reagente de Marquis
Preparao Misturar 4 mL de soluo de formaldedo
com 100 mL de cido sulfrico.
Reagente de xantidrol
Preparao Dissolver 0,125 g de xantidrol em 100 mL de
cido actico glacial. Adicionar 1 mL de cido clordrico
antes de usar.
Reagente fosfomolibdotngstico
Preparao Dissolver 100 g de tungstato de sdio e 25 g
molibdato de sdio em 700 mL de gua. Adicionar 100 mL
de cido clordrico e 50 mL de cido fosfrico. Aquecer
a mistura sob refuxo em aparatos de vidro, durante 10
horas. Adicionar 150 g de sulfato de ltio, 50 mL de gua
e algumas gotas de bromo. Ferver para remover o excesso
de bromo (por cerca de 15 minutos), deixar resfriar e diluir
para 1000 mL com gua. Filtrar. O reagente apresenta
colorao amarela. Se a soluo apresentar colorao
esverdeada, no deve ser utilizada, devendo ser regenerada
com a adio de algumas gotas de bromo ao reagente em
ebulio. Posteriormente ferver o reagente para eliminar o
excesso de bromo.
Armazenagem Manter em temperatura de 2 C a 8 C.
a
14
Reagente iodoplatinado
Preparao Misturar volumes iguais de cido
cloroplatnico a 0,3% (p/v) e de iodeto de potssio a 6%
(p/v).
Reagente sulfomolbdico
Preparao Dissolver, com aquecimento, 2,5 g de
molibdato de amnio em 20 mL de gua. Diluir 28 mL de
cido sulfrico em 50 mL de gua e esfriar. Misturar as
duas solues e diluir para 100 mL com gua.
Reineckato de amnio
CAS [13573-16-5]
Sinonmia Tetratiocianatodiaminocromato de amnio.
4
H
10
CrN
7
S
4
.H
2
O 354,45
Descrio Cristais vermelho-escuros ou p vermelho
cristalino.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua gelada,
solvel em gua quente e etanol. Decompe-se lentamente
e soluo.
Reineckato de amnio SR
Preparao Agitar, constantemente, cerca de 0,5 g de
reineckato de amnio em 20 mL de gua durante uma hora
e fltrar.
Estabilidade Usar em, no mximo, dois dias.
Resazurina
CAS [550-82-3]
Sinonmia Diazorresorcinol
12
H
7
NO
4
229,18.
Descrio Cristais, ou p cristalino vermelho escuro.
Resorcinol
CAS [108-46-3]
Sinonmia Resorcina.
6
H
6
O
2
110,11
Descrio Cristais, ou p cristalino incolor ou amarelo
plido. Exposto luz e ao ar, adquire colorao rsea.
Ristocetina
CAS [1404-55-3]
Sinonmia Ristocetina A.
94
H
108
N
8
O
44
2053,89
Descrio Slido branco. Encontrado, tambm, como
ristocetina sulfatada.
Rodamina B
CAS [81-88-9]
Sinonmia Tetraetilrodamina, Violeta bsico 10.
28
H
31
ClN
2
O
3
479,01
Descrio Cristais verdes, ou p avermelhado.
Conservao Recipientes bem fechados.
Armazenagem Proteger da exposio luz e do calor.
Segurana Irritante
Rutina
CAS [153-18-4]
27
H
30
O
16
610,52
Descrio Cristais em forma de agulhas amarelo-plidas.
Escurece na presena da luz.
C, com decomposio.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua e solvel em
piridina.
Sacarose
CAS [57-50-1]
12
H
22
O
11
342,30
Especifcao obtida da Saccharum offcinarum
Linn (Famlia Gramineae), Beta vulgares Linn (Famlia
Chenopodiaceae) e outras fontes.
Descrio Cristais brancos ou incolores; p cristalino
ou massa cristalina ou blocos brancos. Inodoro. Sabor
adocicado. Estvel ao ar. Finamente dividido higroscpico
e absorve at 1 % de umidade. No contm aditivos.
Caracterstica fsica Decomposio: entre 160 C e 186 C.
Solubilidade Muito solvel em gua, pouco solvel em
etanol e praticamente insolvel em etanol anidro.
Sacarose 0,1% (p/v) em piridina
Especifcao Contm 0,1 g de sacarose em piridina a
100 mL.
Segurana Txico.
Safranina O
CAS [477-73-6]
Descrio P vermelho escuro. Consiste de mistura
de cloreto de 3,7-diamino-2,8-dimetil-5-fenilfenaznio
(C
20
H
19
ClN
4
350,85) e cloreto de 3,7-diamino-2,8-
14
dimetil-5,o-tolilfenaznio (C
21
H
21
ClN
4
364,88). Indicador
de xido-reduo. Forma oxidada: pH cido, violeta
azulado; pH alcalino, parda

Forma reduzida: incolor tanto
na acidez quanto na alcalinidade.
Caracterstica fsica Absoro mxima: 530533 nm.
Salicilato de sdio
CAS [54-21-7]
7
H
5
NaO
3
160,10
Descrio Cristais incolores pequenos ou p cristalino
branco ou focos brilhantes.
solvel em etanol.
Santonina
CAS [481-06-1]
15
H
18
O
3
246,30
Descrio Cristais incolores. Se expostos luz, podem
adquirir colorao amarela.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua, facilmente
solvel em etanol a quente e ligeiramente solvel em
etanol.
Saponinas
CAS [8047-15-2]
Descrio P amarelo claro.
Solubilidade Solvel em gua, e sob agitao, forma
espuma.
Slica, dessecada
CAS [7631-86-9]
Frmula e massa molecular SiO
2
60,08
Especifcao cido silcico coloidal, polimerizado,
previamente desidratado; contm cloreto de cobalto como
indicador.
Descrio Grnulos vtreos, amorfos, de granulometria
varivel, com grnulos impregnados com indicador de
capacidade de adsoro pela cor azul a rsea.
Categoria Dessecante.
Slica-gel G
CAS [112926-00-8]
Sinonmia Gel de slica G.
Especifcao Contm aproximadamente 13,0% (p/p) de
sulfato de clcio hemi-hidratado.
Descrio P fno branco de granulometria varivel entre
10 e 40 um, homogneo.
Caracterstica fsica O pH da suspenso a 10% (p/v)
em gua isenta de dixido de carbono, obtida por agitao
durante 15 minutos; determinao potenciomtrica:
Slica-gel GF
254
Sinonmia Gel de slica GF

254
.
Especifcao Contm aproximadamente 13,0% (p/p) de
sulfato de clcio hemi-hidratado e aproximadamente 1,5%
(p/p) de indicador de fuorescncia de intensidade mxima
a 254 nm.
10 e 40 m, homogneo.
Caracterstica fsica Ver slica-gel G.
Slica-gel H
Sinonmia Gel de slica H.
Descrio P fno branco, de granulometria varivel
entre 10 e 40 m, homogneo.
Slica-gel HF
254
Sinonmia Gel de slica HF

254
.
Especifcao Contm aproximadamente 1,5% (p/v) de
indicador de fuorescncia de intensidade mxima a 254 nm.
10 e 40 um, homogneo.
Slica kieselguhr
Solubilidade Praticamente insolvel em gua, solues
cidas diludas e solventes orgnicos.
Slica kieselguhr G
Especifcao Slica kieselghur tratada com cido
clordrico e calcinada, em que adiciona-se cerca de 15%
(p/p) de sulfato de clcio hemi-hidratado.
a
14
Descrio P fno branco acinzentado. Com tamanho
mdio de partculas de 10 m a 40 m.
Sdio SRA 200 g/mL
Especifcao Contm 0,5084 g de cloreto de sdio em
gua a 1000 mL.
polietileno).
Soluo de cloreto estanoso e ninidrina
Preparao Dissolver 0,2 g de ninidrina em 4 mL de
gua quente. Adicionar 5 mL de cloreto estanoso a 0,16%
(p/v) e deixar em repouso por 30 minutos. Filtrar e estocar
em refrigerador. No momento do uso, diluir 2,5 mL com 5
mL de gua e 45 mL de lcool isoproplico.
Soluo de Jeffrey
Preparao Misturar partes iguais de cido ntrico a 10%
(p/v) e cido crmico a 10% (p/v).
Soluo de Karl-Fischer
Sinonmia Reagente iodo-sulfurado.
Especifcao Constitudo de duas solues. Soluo 1:
a mistura de 70 mL de metanol e 35 mL de piridina, isenta
de gua, adicionar, sob refrigerao e ausncia de umidade,
dixido de enxofre seco at obter acrscimo em peso de 9
g. Misturar. Soluo 2: Contm 12,6 g de iodo em metanol
a 100 mL.
Estabilidade Decompese continuamente.
Armazenagem Proteger da umidade e da luz. Manter sob
refrigerao.
Informao adicional Para determinao do teor de gua.
Soluo de limpeza de cido crmico
Preparao 100 mL de cido sulfrico adicionar,
gradativamente e sob agitao constante, 3 g de dicromato
de potssio. Agitando at solubilizao do sal e deixar
resfriar at 40 C e armazenar em recipiente de vidro.
Soluo padro etanlica de clcio (100 ppm Ca)
Preparao Dissolver 2,5 g de carbonato de clcio,
previamente dessecado, em 12 mL de cido actico 5 M e
diluir com gua para 1000 mL. Diluir 1 volume dessa soluo
em 10 volumes de etanol, imediatamente, antes do uso.
Soluo padro de acetaldedo (100 ppm C
2
H
4
O)
Preparao Dissolver 1 g de acetaldedo em lcool
isoproplico e completar para 100 mL. Para uso diluir
1:100, com o mesmo solvente.
Informao Preparao extempornea.
Soluo padro de amnio (1 ppm NH
4
)
Preparao Dissolver 0,4444 g de nitrato de amnio em
1000 mL de gua destilada, corresponde a 100 mg/mL de
amnio. Para uso diluir 1:100.
Soluo padro de brio (10 ppm Ba)
Especifcao Contm 1,779 g de BaCl
2
.2H
2
O em gua
1000 mL. Para uso, diluir 1:100.
Conservao Em recipientes bem fechados e inertes (tipo
polietileno).
Soluo padro de cdmio (0,1% Cd)
Preparao Dissolver quantidade de nitrato de cdmio
contendo 0,1 g de cdmio em quantidade mnima de
mistura de gua e cido clordrico (1:1) e diluir para 100
mL com cido clordrico a 1% (v/v).
Soluo padro de cdmio (5 ppm Cd)
Especifcao Contm 0,229 g de sulfato de cdmio em
gua a 100 mL, corresponde a 1000 g/mL de cdmio.
Para uso, diluir 1:200.
Conservao Em recipientes bem fechados e inertes (tipo
polietileno).
Soluo padro de clcio (10 ppm Ca)
Preparao Dissolver 0,624 g de carbonato de clcio
previamente dessecado em gua destilada contendo 3 mL
de cido actico 5 M. Diluir para 250 mL com gua. Diluir
1 volume desta soluo em 100 volumes de gua destilada
imediatamente antes do uso.
Soluo padro de chumbo (0,1% Pb)
Preparao Dissolver 0,4 g de nitrato de chumbo(II) em
gua e diluir para 250 mL com o mesmo solvente.
Soluo padro de cobre (10 ppm Cu)
Preparao Dissolver 392,9 mg de sulfato cprico penta-
hidratado em 100 mL de gua. Diluir 1 mL desta soluo
com gua para 100 mL no momento do uso.
Soluo padro de cloreto (8 ppm Cl)
gua a 1000mL. Para uso diluir 1:100.
Soluo padro de cloreto (5 ppm Cl)
gua a 1000 mL. Para uso diluir 1:100.
14
Soluo padro de ditizona
Preparao Dissolver 10 mg de ditizona em clorofrmio
e completar o volume para 1000 mL com clorofrmio.
Conservao Acondicionar em recipiente isento de
chumbo, munido de tampa de vidro e, adequadamente,
embalado para proteger da luz.
Armazenagem Em refrigerador.
Soluo padro de estanho (5 ppm Sn)
Especifcao Contm 1,225 g de acetato de estanho
hemi-hidratado em 25 mL de cido clordrico em gua a
1000 mL. Para uso, diluir 1:100 em cido clordrico 2,5%
(p/v).
Soluo padro de magnsio (10 ppm Mg)
Preparao Dissolver 1,010 g de sulfato de magnsio
hepta-hidratado em gua e completar o volume para 100
mL com o mesmo solvente. Diluir 10 mL desta soluo
para 1000 mL com gua.
Soluo padro de nitrato (100 ppm NO
3
)
Preparao Dissolver 163,1 mg de nitrato de potssio
em 100 mL de gua. Diluir 10 mL desta soluo com gua
para 100 mL no momento do uso.
Soluo padro de nitrato (2 ppm NO
3
)
Preparao Dissolver 1,2903 g de nitrato de amnio em
1000 mL de gua, corresponde a 1000 mg/mL de nitrato.
Para uso, diluir 1:500.
Soluo padro de prata (5 ppm Ag)
Preparao Dissolver 79 mg de nitrato de prata em 100
mL de gua. Diluir 1 mL desta soluo com gua para 100
mL no momento do uso.
Soluo padro de selnio (100 ppm Se)
Preparao Dissolver 0,1 g de selnio em cido ntrico,
evaporar at secura, dissolver o resduo em 2 mL de gua e
evaporar at secura. Repetir o procedimento por trs vezes.
Dissolver o resduo com cido clordrico 2 M e completar o
volume para 1000 mL com o mesmo solvente.
Soluo padro de sdio (200 ppm Na)
Preparao Dissolver 0,509 g de cloreto de sdio em 100
mL de gua. No momento do uso, diluir 1:10.
Soluo padro de sulfato (10 ppm SO
4
)
Preparao Dissolver 0,182 g de sulfato de potssio em
100 mL de gua. Diluir 1 mL desta soluo em 100 mL de
gua no momento do uso.
Soluo padro de zinco (100 ppm Zn)
Preparao Dissolver 0,440 g de sulfato de zinco em
gua contendo 1 mL de cido actico 5 M e diluir para 100
mL com gua. Imediatamente antes do uso, diluir 1 volume
para 10 volumes com gua.
Soluo padro de zinco (10 ppm Zn)
Preparao Diluir 1 volume da soluo padro de zinco
(100 ppm Zn) para 10 volumes com gua imediatamente
antes do uso.
Soluo padro marrom
Preparao Fazer uma soluo composta por 30 mL de
Soluo base de cloreto frrico (5.2.12), 30 mL de Soluo
base de cloreto cobaltoso (5.2.12), 24 mL de Soluo base
de sulfato cprico (5.2.12) e 16 mL de cido clordrico a
1% (p/v).
Soluo redutora
Preparao Dissolver 5 g de tetraidroborato de sdio em
500 mL de hidrxido de sdio a 1% (p/v).
Subnitrato de bismuto
CAS [1304-85-4]
Sinonmia Oxinitrato de bismuto.
Frmula e massa molecular Bi
5
O(OH)
9
(NO
3
)
4
1461,99.
Especifcao sal bsico que contm, no mnimo, o
equivalente a 79,0% de trixido de bismuto (Bi
2
O
3
) (p/p).
Descrio P branco, denso, higroscpico, inodoro e
sem gosto. Apresenta reao alcalina diante do papel de
tornassol.
Categoria Anticido.
Substituto de plaquetas
Preparao A uma quantidade entre 0,5 g e 1 g de
fosfolpidos, adicionar 20 mL de acetona, e agite a mistura,
frequentemente, durante 2 horas. Centrifugue durante 2
minutos e elimine o lquido sobrenadante. Seque o resduo
com auxlio de uma trompa de gua, adicione 20 mL
de clorofrmio e agite durante 2 horas. Filtre a presso
reduzida e suspenda o resduo obtido em 5 mL a 10 mL de
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v).
Determinao da atividade do Fator IX Prepare uma
diluio em soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v),
tal que a diferena entre os tempos de coagulao das
diluies sucessivas da preparao de referncia seja cerca
de 10 segundos.
Conservao As suspenses diludas podem ser usadas
durante as 6 semanas que se seguem preparao, se
conservadas a -30 C.
Substrato de plasma
a
14
Preparao Separar o plasma do sangue humano, ou
bovino colhido em 1/9 do seu volume de soluo de citrato
de sdio a 3,8% (p/v), ou em 2/7 do seu volume de uma
soluo contendo 2% (p/v) de citrato cido de sdio e 2,5%
(p/v) de glicose. No primeiro caso, o substrato preparado
no dia da coleta do sangue; no ltimo caso, o substrato
de plasma pode ser preparado nos 2 dias que se seguem
coleta.
Conservao Em tubos plsticos, em pequenas
quantidades, a uma temperatura igual ou inferior a -20 C.
Substrato de plasma1
Preparao Utilizar equipamento hidrfobo fabricado
em material plstico apropriado ou vidro siliconado para
coleta e manipulao do sangue. De um nmero adequado
(cinco pelo menos) de carneiros, vivos ou no momento do
abate, recolha um volume de sangue apropriado de cada
um ( considerado como apropriado um volume de 285 mL
de sangue colhido sobre 15 mL de soluo anticoagulante).
A coleta feita por meio de uma agulha adaptada a uma
cnula com um comprimento sufciente para atingir o
fundo do recipiente coletor. Rejeite os primeiros mililitros
e colha, unicamente, o sangue que escoar livremente.
Misture o sangue com uma quantidade sufciente de
soluo anticoagulante contendo 8,7 g de citrato de sdio
e 4 mg de aprotinina em 100 mL de gua. para obter uma
proporo fnal de 19 volumes de sangue para 1 volume
de soluo anticoagulante. Durante e imediatamente aps a
coleta imprima ao recipiente um movimento rotatrio a fm
de que a mistura se faa sem formao de espuma. Logo
que termine a coleta feche o balo e deixe resfriar a 10-
15 C. Depois do resfriamento rena o contedo de todos
os frascos, exceo daqueles que apresentarem sinais de
evidente hemlise ou coagulao, e mantenha o sangue
colhido a 10-15 C. O mais cedo possvel e dentro das 4
horas seguintes coleta, centrifugue o sangue colhido a
1000-2000 g a 10-15 C, durante 30 minutos. Separe o
lquido sobrenadante e centrifugue-o a 5000 g, durante
30 minutos. Se necessrio, faa uma centrifugao mais
rpida, por exemplo, a 20 000 g, durante 30 minutos, para
clarifcar o plasma (no utilize processos de fltrao).
Separe os lquidos sobrenadantes e, imediatamente,
misture, cuidadosamente, e distribua o substrato de plasma
por pequenos recipientes, que so fechados no fm da
operao, em quantidades sufcientes que permitam uma
titulao completa da heparina (por exemplo, 10 mL a
30 mL). Imediatamente congele, rapidamente, a uma
temperatura inferior a -70 C (por exemplo, mergulhando
os recipientes em nitrognio lquido) e conserve a uma
temperatura inferior a -30 C. O plasma preparado nessas
condies pode ser utilizado como substrato de plasma
na titulao da heparina se nas condies da titulao se
obtiver um tempo de coagulao apropriado ao mtodo de
deteco utilizado e se obtiverem curvas dose-resposta/
log reprodutveis e com grande inclinao. No momento
do uso, descongele uma certa quantidade de substrato de
plasma num banho-maria a 37 C, misturando, lentamente,
at liquefao completa. Uma vez liquefeito, o plasma
mantido a 10-20 C e utilizado imediatamente. O
substrato de plasma descongelado pode ser, ligeiramente,
centrifugado, se necessrio (no utilize processos de
fltrao).
Substrato de plasma2
Preparao Preparar a partir do sangue humano que
tenha um teor em Fator IX inferior a 1 % do teor normal.
Recolha o sangue em 1/9 do seu volume de uma soluo de
citrato de sdio a 3,8% (p/v).
Conservao Em tubos plsticos, em pequenas
quantidades, a uma temperatura igual ou inferior a -30 C.
Substrato de plasma defciente em Fator V
Especifcao Utilizar, de preferncia, um plasma
congenitamente defciente ou preparado do seguinte
modo: separar o plasma do sangue humano que tenha sido
colhido em 1:10 do seu volume de uma soluo de oxalato
de sdio a 1,34% (p/v). Incubar a 37 C durante 24-36
horas. O plasma apresenta um tempo de coagulao de 70-
100 segundos. Se o tempo de coagulao for inferior a 70
segundos, incube o plasma de novo durante 12-24 horas.
Conservao: em pequenas quantidades, a temperatura
igual ou inferior a -20 C.
Sudan III
CAS [85-86-9]
22
H
16
N
4
O 352,40
Descrio P vermelho-marrom.
Sudan III SR
Preparao Dissolver 0,5 g de Sudan III em 100 mL de
etanol a 80% (v/v), aquecido a 60 C, esfriar e fltrar.
Sudan IV
CAS [85-83-6]
24
H
20
N
4
O 380,44
Descrio P marrom ou marrom avermelhado.
Decompe completamente a 260 C.
Solubilidade Praticamente insolvel em gua. Pouco
solvel em acetona, etanol e benzeno. Solvel em parafna
e fenol
Sudan IV SR
Preparao Dissolver 2 g de Sudan IV em 100 mL de
etanol a 92% (v/v), aquecido a 60 C, esfriar, fltrar e
adicionar 5 mL de glicerina.
14
Sulfamato de amnio
CAS [7773-06-0]
4
SO
3
NH
2
114,13
Descrio P cristalino branco, ou cristais incolores.
131 C.
Solubilidade Muito solvel em gua e pouco solvel em
etanol.
Conservao Em recipientes perfeitamente fechados.
Sulfanilamida
CAS [63-74-1]
Sinonmia 4-Aminobenzenossulfonamida.
6
H
8
N
2
O
2
S 172,20
Descrio Cristais ou p fno branco ou branco-
amarelados.
Solubilidade Solvel em glicerol e praticamente insolvel
em clorofrmio, ter etlico e benzeno.
Categoria Antibacteriano.
Sulfato crico
CAS [13590-82-4]
Sinonmia Dissulfato crico.
Frmula e massa molecular Ce(SO
4
)
2
332,24
Descrio Cristal ou p amarelo-alaranjado.
Conservao Proteger da luz, calor e umidade.
Segurana Txico e oxidante.
Sulfato crico amoniacal
CAS [10378-47-9]
4
)
4
Ce(SO
4
)
4
.2H
2
O
632,58
Descrio Cristais amarelo-alaranjados.
130 C.
Categoria Padro para volumetria de oxi-reduo.
Sulfato cprico, penta-hidratado
CAS [7758-99-8]
Sinonmia Sulfato de cobre penta-hidratado.
Frmula e massa molecular CuSO
4
.5H
2
O 249,68
Especifcao Contm no mnimo, 98,5% (p/p) calculado
sobre a substncia dessecada a 250 C.
Descrio Cristais, p ou grnulos azuis. Em contato
com o ar eforesce lentamente.
Caracterstica fsica Aquecido a 250 C at peso
constante, perde entre 33,0 a 36,5% de seu peso.
etanol.
Armazenagem Proteger do ar.
Segurana Irritante.
Sulfato cprico SR
Especifcao Contm 12,5 g sulfato cprico penta-
Sulfato cprico amoniacal SR
Sinonmia Sulfato de cobre amoniacal SR e reagente de
Schweitzer.
Preparao Dissolver 10 g de sulfato cprico em 100
mL de gua, adicionar quantidade sufciente de soluo
de hidrxido de sdio (1:5) para precipitar o hidrxido
de cobre. Filtrar e recolher o precipitado. Lavar com gua
fria. Dissolver o precipitado, que deve ser mantido mido
durante o processo, na menor quantidade de amnia SR
necessria para completar a soluo.
Sulfato de alumnio e potssio, dodeca-hidratado
CAS [7784-24-9]
Sinonmia Almen de potssio
Frmula e massa molecular AlK(SO
4
)
2
.12H
2
O 474,38
Descrio P granular, ou massa incolor, transparente.
Solubilidade Muito solvel em gua fervente, solvel em
glicerina, praticamente insolvel em etanol.
Sulfato de amnio
CAS [7783-20-2]
4
)
2
SO
4
132,13
Descrio Cristais incolores, inodoros.
Caracterstica fsica Decompe-se em temperaturas
acima de 280 C.
Solubilidade Muito solvel em gua, praticamente
insolvel em acetona e em etanol.
Sulfato de brio
CAS [7727-43-7]
Frmula e massa molecular BaSO
4
233,39
Descrio P branco, fno e denso. Inodoro e inspido.
a
14
Solubilidade Praticamente insolvel em gua e solventes
orgnicos, muito pouco solvel em cidos e em solues
hidrxi-alcalinas.
Categoria Contraste radiolgico para o trato
gastrintestinal.
Sulfato de cdmio
CAS [7790-84-3]
Frmula e massa molecular 3CdSO
4
.8H
2
O 769,49
Descrio P cristalino, incolor e inodoro.
Sulfato de clcio, hemi-hidratado
CAS [10034-76-1]
Frmula e massa molecular CaSO
4
.1/2H
2
O 145,14
Especifcao Contm, no mnimo, 98,0 % (p/p),
calculado sobre base seca.
Descrio P branco, fno; contm aproximadamente
7,0% de gua.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua, praticamente
insolvel em etanol. Quando misturado com metade de sua
massa em gua, rapidamente solidifcado em uma massa
porosa e dura.
Sulfato de clcio SR
Preparao Agitar 5 g de sulfato de clcio hemi-
hidratado com 100 mL de gua, durante uma hora. Filtrar
antes do uso.
Sulfato de N,N-dimetil-p-fenilenodiamina
CAS [536-47-0]
Sinonmia Sulfato de N,N-dimetil-1,4-benzenodiamina.
8
H
12
N
2
.H
2
SO
4
234,28
com decomposio.
Segurana Txico.
Sulfato de dimetila
CAS [77-78-1]
Sinonmia Dimetil sulfato, DMS.
Frmula e massa molecular (CH
3
)
2
SO
4
126,13
188 C, com decomposio. ndice de refrao (20 C):
1,3874.
Miscibilidade Miscvel em gua (com hidrlise) e em
ter etlico e acetona.
Segurana Corrosivo! Venenoso!
Sulfato de hidrazina
CAS [10034-93-2]
6
N
2
O
4
S 130,12
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua fria, solvel
em gua quente (50 C) e facilmente solvel em gua
fervendo. Praticamente insolvel em etanol.
Sulfato de ltio
CAS [10102-25-7]
Frmula e massa molecular LiSO
4
.H
2
O 127,95
insolvel em etanol.
Sulfato de magnsio, hepta-hidratado
CAS [10034-99-8]
Frmula e massa molecular MgSO
4
.7H
2
O 246,48
Descrio P branco cristalino ou cristais incolores
brilhantes, de sabor salino, solvel em gua, muito solvel
em gua fervente, praticamente insolvel em etanol.
Sulfato de mangans
CAS [10101-68-5]
Frmula e massa molecular MnSO
4
.4H
2
O 223,14
Especifcao Contm, no mnimo, 98,0% (p/p) de MnSO
4
,
calculado sobre a substncia dessecada a 450 C - 500 C
Descrio Cristais ou p cristalino de cor rsea. Inodoro.
Eforesce lentamente.
Caracterstica fsica Perde gua a aproximadamente
450 C.
em gua fervendo e praticamente insolvel em etanol.
Informao adicional O produto comercial normalmente
mistura de sulfato de mangans tetra e penta-hidratado.
Sulfato de 4-metilaminofenol
CAS [55-55-0]
14
H
20
N
2
O
6
S 344,38
C, com decomposio.
etanol.
Conservao Em recipiente bem fechados.
14
Sulfato de 4-metilaminofenol SR
Preparao Dissolver 0,35 g de sulfato de
4-metilaminofenol em 50 mL de gua. Adicionar 20 g de
bissulfto de sdio e misturar. Diluir para 100 mL com gua.
Sulfato de potssio
CAS [7778-80-5]
2
SO
4
174,25
sabor amargo.
Caractersticas fsicas Soluo aquosa com carter
neutro. Temperatura de fuso: 1067 C.
Sulfato de protamina
CAS [9009-65-8]
Especifcao Consiste em mistura de protenas simples,
obtidas de esperma e testculos de espcies adequadas de
peixes. Possui a propriedade de neutralizar a heparina.
Descrio P cristalino fno, branco ou amorfo
fracamente corado.
Conservao Em recipientes bem fechados, sob
refrigerao.
Sulfato de sdio, anidro
CAS [7757-82-6]
Massa e formula molecular Na
2
SO
4
142.0
Especifcao Preparado a partir do Na
2
SO
4
.10H
2
O
por aquecimento a aproximadamente 100 C. Contm,
no mnimo, 99,0% (p/p), calculado sobre a substncia
dessecada.
Descrio P fno, branco, inodoro, de sabor salgado
fracamente amargo. Higroscpico.
Sulfato de sdio, deca-hidratado
CAS [7727-73-3]
Sinonmia Sal de Glauber.
2
SO
4
.10H
2
O 322,19
Especifcao Contm no mnimo 99,0 % (p/p) de
Na
2
SO
4
, calculado em relao substncia dessecada.
cristalino branco, eforescente, inodoro, de sabor salgado
fracamente amargo.
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: 32,5 C.
Dissolvese em sua prpria gua de cristalizao, na
temperatura de aproximadamente 33 C.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, praticamente
insolvel em etanol.
Sulfato de tetrabutilamnio
CAS [32503-27-8]
Nome qumico Sulfato de N,N,N-tributil-1-butanamnio,
hidrogenossulfato de tetrabutilamnio
16
H
36
N.HSO
4
339,53
Solubilidade Facilmente solvel em gua e em metanol.
Sulfato de zinco, hepta-hidratado
CAS [7446-20-0]
Frmula e massa molecular ZnSO
4
.7H
2
O 287,58
ZnSO
4
.7H
2
O, ou no mnimo, 55,6 % (p/p) de ZnSO
4
.
Descrio P cristalino branco ou cristais incolores
transparentes. Inodoro, de gosto adstringente. Eforescente.
Caracterstica fsica temperatura de 280 C, torna-se
anidro.
insolvel em etanol.
Conservao Em recipientes nometlicos bem
fechados.
Sulfato de zinco 0,1 M
Descrio Contm 28,75 g de sulfato de zinco hepta-
Conservao Em recipientes no metlicos bem fechados.
Sulfato frrico
CAS [10028-22-5]
Sinonmia Persulfato frrico.
Frmula e massa molecular Fe
2
(SO
4
)
3
.xH
2
O
Especifcao O produto comercial contm normalmente
cerca de 20% (p/p) de gua.
Descrio P branco a amarelo, muito higroscpico;
decompe-se em presena do ar.
Solubilidade Pouco solvel em gua e em etanol.
Sulfato frrico amoniacal
CAS [7783-83-7]
a
14
Frmula e massa molecular FeNH
4
(SO
4
)
2
.12H
2
O
482,18.
Descrio Cristais transparentes incolores a violeta-
plido. Inodoro. Eforescente.
insolvel em etanol.
Sulfato frrico amoniacal cido SR
Preparao Dissolver 20 g de sulfato frrico amoniacal
em 70 mL de gua, adicionar 10 mL de cido sulfrico 0,05
M e completar o volume com gua para 100 mL.
Sulfato frrico amoniacal SR
Sulfato frrico amoniacal SR1
Preparao Dissolver 30 g de sulfato frrico amoniacal
em 40 mL de cido ntrico e completar o volume de 100
mL com gua.
Sulfato frrico amoniacal SR2
Preparao Dissolver 0,2 g de sulfato frrico amoniacal
em 50 mL de gua, adicionar 5 mL de cido ntrico e diluir
a 100 mL com gua.
Sulfato frricoferricianeto de potssio SR
Preparao Misturar volumes iguais da soluo de
sulfato frrico a 0,5% (p/v) em cido sulfrico 0,5 M e da
soluo de ferricianeto de potssio a 0,2% (p/v).
Sulfato ferroso acidifcado SR
Preparao Dissolver 0,45 g de sulfato ferroso hepta-
hidratado em 50 mL de cido clordrico 0,1 M e completar
o volume para 100 mL com gua livre de dixido de
carbono.
Sulfato ferroso amoniacal
CAS [7783-85-9]
Frmula e massa molecular Fe(NH
4
)
2
(SO
4
)
2
.6H
2
O
392,14
Descrio P cristalino ou cristais verde-azulados plidos.
Oxida-se lentamente ao ar, tornando-se eforescente.
Solubilidade Solvel em gua, praticamente insolvel
em etanol.
Sulfato ferroso, hepta-hidratado
CAS [7782-63-0]
Sinonmia Sulfato de ferro, hepta-hidratado.
Frmula e massa molecular FeSO
4
.7H
2
O 278,01
FeSO
4
.7H
2
O.
Descrio Cristais azulesverdeados; ou grnulos, ou
p cristalino verde. Inodoro. Eforescente. Oxidase pela
umidade e luminosidade a sulfato bsico de ferro(III) de
cor marrom.
Caracterstica fsica A partir da temperatura de 65 C,
transformase em monoidratado.
em gua fervendo e praticamente insolvel em etanol.
Armazenagem Proteger do ar e da umidade.
Informao adicional No usar quando tiver cor marrom.
Sulfato ferroso SR
Especifcao Contm 8 g de sulfato ferroso hepta-
hidratado em gua fria, recentemente fervida, a 100 mL.
Preparar no momento de uso.
Armazenagem Proteger da luz, do ar e do calor.
Sulfeto de amnio SR
Preparao Saturar 60 mL de amnia SR com sulfeto de
hidrognio e juntar 40 mL de amnia SR. Usar soluo de
preparo recente.
Conservao Em recipiente pequeno, bem cheio e
fechado.
Estabilidade Diante de precipitao abundante de
enxofre, desprezar a soluo.
Sulfeto de hidrognio
CAS [7783-06-4]
Sinonmia cido sulfdrico
2
S 34,08
Especifcao Produzido pelo tratamento de sulfeto
ferroso (ou outros sulfetos) com cidos sulfrico ou
clordrico diludos.
Descrio Gs incolor de odor caracterstico e sabor
adocicado; mais denso do que o ar.
Caractersticas fsicas Densidade relativa ao ar: 1,19.
Temperatura de ignio: 260 C.
Segurana Txico. Veneno. Infamvel.
14
Sulfeto de hidrognio SR
Especifcao A soluo aquosa saturada a 20 C, contm
em torno de 0,4 a 0,5% (p/v). Preparada pela passagem de
H
2
S em gua fria.
Caracterstica fsica O pH da soluo aquosa recm
preparada: 4,5.
Segurana Txico. Veneno. Infamvel.
Sulfeto de sdio
CAS [1313-84-4]
2
S.9H
2
O 240,18
Descrio Cristais incolores deliquescentes, que se
amarelam pela exposio ao ar, ou pela ao da luz. Odor
semelhante ao do sulfeto de hidrognio.
Conservao Recipiente bem fechado, no frio.
Armazenagem Proteger do ar, da luz e do calor.
Sulfeto de sdio SR
Estabilidade Preparar para consumo imediato.
Sulfeto de sdio SR1
Preparao Dissolver, com aquecimento, 12 g de sulfeto
de sdio em 45 mL de mistura de gua e glicerol a 85%
(v/v) (10:29). Esfriar e diluir para balo volumtrico de
100 mL com o mesmo solvente. A soluo deve ser incolor.
Preparar para consumo imediato.
Sulfto de sdio
CAS [7757-83-7]
2
SO
3
126,04
Descrio P branco, ou quase branco, inodoro.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e muito pouco
solvel em etanol.
Tanino
CAS [1401-55-4]
Sinonmia cido tnico.
Especifcao Obtido de cascas de diversas plantas,
consistindo, especialmente, de mistura de substncias
polifenlicas.
Descrio P amarelo a marrom. Odor fracamente
caracterstico e sabor adstringente.
em etanol e solvel em acetona.
Rotulagem A rotulagem deve indicar a fonte botnica.
Tartarato cido de epinefrina
CAS [51-42-3]
Sinonmia Bitartarato de epinefrina.
13
H
19
NO
9
333,29
Descrio Cristais, ou p cristalino branco, ou cinza
claro. Inodoro.
em etanol.
Estabilidade Escurece lentamente pela exposio ao ar
e luz.
Categoria Adrenrgico.
Tartarato cprico alcalino SR
Sinonmia Soluo de Fehling
Soluo A Dissolver 34,6 g de sulfato cprico penta-
hidratado em 500 mL de gua.
Soluo B Dissolver 173 g de tartarato de sdio e potssio
e 50 g de hidrxido de sdio em 400 mL de gua e aquecer
at ebulio. Resfriar e completar o volume para 500 mL
com gua isenta de dixido de carbono.
Preparao Misturar volumes iguais das Solues A e B
Tartarato de antimnio e potssio
CAS [28300-74-5]
Sinonmia Sal de antimnio e potssio.
8
H
4
K
2
O
12
Sb
2
.3H
2
O
667,85.
Descrio Cristais incolores ou p branco.
Segurana Txico.
Tartarato de sdio
CAS [6106-24-7]
4
H
4
O
6
Na
2
.2H
2
O 230,08
Especifcao Contm 84,34% de C
4
H
4
O
6
Na
2
e 15,66%
de H
2
O. Aquecido a 150 C, perde, no mnimo, 15,6% e, no
mximo, 15,7% de seu peso.
solvel em etanol.
a
14
Tartarato de sdio e potssio
CAS [6381-59-5]
Sinonmia Sal de Rochelle ou de Seignette, tartarato
duplo de potssio e sdio, trtaro emtico.
4
H
4
KNaO
6
.4H
2
O 282,22;
anidro 210,16
Especifcao Contem, no mnimo, 99,0% (p/p),
calculado em base seca de C
4
H
4
KNaO
6
.
inodoro, de sabor salgado. Eforescente ao ar quente.
insolvel em etanol.
Tartarato de sdio e potssio SR
Especifcao Contm 20% (p/v).
Tartarato ferroso SR
Preparao Dissolver 1 g de sulfato ferroso hepta-
hidratado, 2 g de tartarato de sdio e potssio e 0,1 g de
bissulfto de sdio em gua. Completar o volume para 100
mL com gua. Preparar no momento do uso.
Tetraborato sdico
CAS [1303-96-4]
Sinonmia Borato sdico, borato de sdio, brax.
2
B
4
O
7
.10H
2
O 381,37
inodoro, de sabor custico. Eforescente.
Solubilidade Solvel em gua, muito solvel em gua
fervendo e facilmente solvel em glicerol.
Conservao Em recipientes bem fechados; eforesce ao
ar seco.
Armazenagem Proteger do ar.
Tetracloreto de carbono
CAS [56-23-5]
Frmula e massa molecular CCl
4
153,82
Descrio Lquido incolor, lmpido, denso e de odor
caracterstico.
C. Densidade: 1,588 a 1,590. ndice de refrao (20 C):
1,4607.
em etanol.
Segurana Veneno (nas formas lquida e gasosa)!
Informao adicional No infamvel, porm libera
fosgnio (txico) em presena de chama.
Tetradecano
CAS [629-59-4]
14
H
30
198,39
ndice de refrao (20 C): cerca de 1,429. Temperatura
de fuso: cerca de -5 C. Temperatura de ebulio: cerca
de 252 C.
Tetrafenilborato de sdio
CAS [143-66-8]
Frmula e massa molecular NaB(C
6
H
5
)
4
342,22
Descrio P ou cristais brancos ou quase brancos.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e em acetona.
Tetraidroborato de sdio
CAS [16940-66-2]
Frmula e massa molecular NaBH
4
37,83
Descrio Cristais incolores e higroscpicos.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, solvel em
etanol absoluto.
Armazenagem Em recipientes bem fechados.
3,3-Tetraidrocloreto de diaminobenzidina
CAS [7411-49-6]
12
H
18
Cl
4
N
4
360,12
Descrio Cristais brancos ou amarelados,
ocasionalmente prpura.
C, com decomposio.
refrigerao.
Segurana Irritante.
3,3-Tetraidrocloreto de diaminobenzidina SR
Especifcao Contm 1 g de 3,3-tetraidrocloreto de
diaminobenzidina em 200 mL de gua.
refrigerao.
Segurana Irritante.
14
Tetraidrofurano
CAS [109-99-9]
4
H
8
O 72,11
Especifcao O produto adicionado de estabilizantes
(pcresol, hidroquinona) na proporo 0,05 % a 0,1 %
(p/v), para evitar a formao excessiva de perxidos.
Descrio Lquido incolor. Odor intenso e semelhante ao
do ter etlico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio: 65 C
a 66 C. Densidade: aproximadamente 0,889. ndice de
refrao (20 C): 1,4070.
Conservao Em recipientes bem fechados: pequenos e
repletos.
Armazenagem Proteger do contato com a luz.
Segurana Irritante pele, olhos e mucosas.
1,1,3,3-Tetrametilbutilamina
CAS [107-45-9]
8
H
19
N 129,24
Tetrametiletilenodiamina
CAS [110-18-9]
Sinonmia N,N,N,N-Tetrametiletilenodiamina,
TEMED.
6
H
16
N
2
. 116,21
Caractersticas fsicas Densidade (20 C):
aproximadamente 1,418. Temperatura de ebulio:
Miscibilidade Miscvel com a gua, com o etanol e com
o ter etlico.
Tetraoxalato de potssio
CAS [6100-20-5]
4
H
3
KO
8
.2H
2
O 254,20
Descrio P cristalino branco ou cristais incolores ou
brancos.
Solubilidade Ligeiramente solvel em gua e solvel em
gua fervendo, pouco solvel em etanol.
Tetrxido de smio
CAS [20816-12-0]
Frmula e massa molecular OsO
4
254,20
Descrio Massa cristalina amarela, ou agulhas amarelas
claras, higroscpicas, sensveis luz.
Solubilidade Solvel em gua, etanol e ter etlico.
Segurana Vapores venenosos.
Tetrxido de smio SR
Especifcao Contm 0,25 g de tetrxido de smio em
cido sulfrico 0,05 M para fazer 100 mL.
Timerosal
CAS [54-64-8]
9
H
9
HgNaO
2
S 404,81
Descrio P cristalino amarelo claro.
em etanol.
Timidina
CAS [50-89-5]
Sinonmia 1-(2-Desoxi--D-ribofuranosil)-5-metiluracila.
10
H
14
N
2
O
5
242,23
Descrio Cristais em forma de agulhas, ou p branco.
Solubilidade Solvel em gua, em etanol a quente e em
Timina
CAS [65-71-4]
Sinonmia 5-Metil-2,4-(1H,3H)-pirimidinodiona.
5
H
6
N
2
O
2
126,11
Descrio Placas ou cristais em forma de agulhas
pequenas.
Solubilidade Pouco solvel em gua fria, solvel em
gua quente. Dissolve em solues diludas de hidrxi-
alcalinos.
Timol
CAS [89-83-8]
Sinonmia 5-Metil-2-(1-metiletil)fenol
10
H
14
O 150,22
Descrio Cristais incolores, de odor aromtico.
50 C.
Solubilidade Muito pouco solvel em gua, muito solvel
em etanol, facilmente solvel em leos essenciais e em
leos graxos, ligeiramente solvel em glicerol. Dissolve
em solues hidrxi-alcalinas.
Tioacetamida
CAS [62-55-5]
2
H
5
NS 75,13.
Descrio Cristais ou p cristalino branco, ou quase
branco. Fraco odor de mercaptana.
a
14
Caracterstica fsica Temperatura de fuso: 113 C a 114 C.
Tioacetamida SR
Preparao Misturar 0,2 mL da soluo de tioacetamida
a 4% (p/v) e 1 mL da seguinte mistura: 1,5 mL de hidrxido
de sdio M, 0,5 mL de gua e 2 mL de glicerol a 85% (p/v).
Aquecer em banho-maria durante 20 segundos
Tiocianato de amnio
CAS [1762-95-4]
Sinonmia Sulfocianato de amnio.
4
SCN 76,12
Tiocianato de amnio SR
Tiocianato de mercrio
CAS [592-85-5]
Frmula e massa molecular Hg(SCN)
2
316,76
Solubilidade Muito solvel em gua, pouco solvel em
etanol, solvel em solues de cloreto de sdio.
Tiocianato de mercrio SR
Preparao Dissolver 0,3 g de tiocianato de mercrio em
etanol. Completar o volume para 100 mL com o mesmo
solvente.
Estabilidade Limitada em uma semana.
Tiocianato de potssio
CAS [333-20-0]
Sinonmia Sulfocianato de potssio.
Frmula e massa molecular KSCN 97,18
Segurana Pode causar erupes cutneas!
Tioglicolato de sdio
CAS [367-51-1]
2
H
3
NaO
2
S 114,09
Descrio P cristalino branco, higroscpico, de odor
fraco caracterstico. Oxida em contato com o ar.
Solubilidade Facilmente solvel em gua e em metanol,
Tionina (CI 52000)
CAS [135-59-1]
12
H
10
ClN
3
S 263,75
Descrio Agulhas verde-escuras, com brilho.
Solubilidade Facilmente solvel em gua quente.
Tionina SR
Preparao Adicionar 1 g de tionina a 2,5 g de fenol e
completar o volume de 100 mL com gua.
Tiossulfato de sdio
CAS [10102-17-7]
Sinonmia Hipossulfto de sdio R.
2
S
2
O
3
.5H
2
O 248,17
Descrio Cristais incolores, ou p cristalino branco,
facilmente eforescentes, de sabor fracamente amargo.
aproximadamente 48 C. Dissolve-se em sua prpria gua
de cristalizao a temperatura aproximadamente 49 C.
Solubilidade Muito solvel em gua, praticamente
insolvel em etanol.
Tiossulfato de sdio 0,1 M
Preparao Dissolver 2,5 g de tiossulfato de sdio e
0,02 g de carbonato de sdio em gua isenta de dixido de
carbono a 100 mL.
14
Tioureia
CAS [62-56-6]
4
N
2
S 76,12
Descrio Cristais, ou p cristalino branco, ou quase
branco.
Tirosina
CAS [60-18-4]
9
H
11
NO
3
181,19
Descrio Cristais incolores, ou brancos, ou quase
brancos, ou p cristalino branco, ou quase branco.
Solubilidade Pouco solvel em gua, praticamente
insolvel em acetona e em etanol, solvel em cido
clordrico diludo e solues hidrxi-alcalinas.
p-Tolualdedo
CAS [104-87-0]
8
H
8
O 120,15
Descrio Lquido lmpido, incolor ou amarelado.
Caracterstica fsica ndice de refrao (20 C): entre
1,544 e 1,546.
Tolueno
CAS [108-88-3]
Sinonmia Metilbenzeno, toluol.
7
H
8
92,14
Descrio Lquido incolor de odor caracterstico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebulio:110 C
a 111 C.Densidade de aproximadamente 0,87. ndice de
refrao (20 C): 1,4967.
Miscibilidade Muito pouco solvel em gua, miscvel em
etanol.
Segurana Txico! Infamvel!
p-Toluidina
CAS [106-49-0]
Sinonmia 4-Metilanilina.
7
H
9
N 107,15
Descrio Cristais ou focos brancos ou levemente
amarelados.
Caractersticas fsicas Temperatura de fuso: cerca de 44
C. Densidade (20 C): 1,046.
Solubilidade Facilmente solvel em etanol, metanol,
acetona e em cidos diludos, e pouco solvel em gua.
Torina
CAS [3688-92-4]
Sinonmia Naftarson.
16
H
11
AsN
2
Na
2
O
10
S
2
576,30
Descrio P vermelho.
Torina SR
Preparao Dissolver 0,2 g de torina em gua para 100 mL.
Estabilidade Utilizar em no mximo uma semana aps
a preparao.
Tricina
CAS [5704-04-1]
6
H
13
NO
5
179,17
1,1,1-Tricloroetano
CAS [71-55-6]
2
H
3
Cl
3
133,40
Descrio Lquido no infamvel.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua, solvel
em acetona e em metanol.
Tricloroetileno
CAS [79-01-6]
Sinonmia Tricloroeteno.
2
HCl
3
131,39
Descrio Lquido incolor, odor caracterstico.
ebulio: aproximadamente 87 C.
Miscibilidade Praticamente insolvel em gua, solvel
em acetona e em metanol.
Segurana Txico.
Trietanolamina
CAS [102-71-6]
Sinonmia 2,2,2-nitrilotrietanol
6
H
15
NO
3
149,19
Descrio Lquido incolor, viscoso, muito higroscpico,
torna-se marrom pela exposio ao ar.
a
14
Miscibilidade Miscvel com gua, acetona, etanol e
metanol.
Conservao Em recipientes bem fechados ao abrigo da
luz.
Trietilamina
CAS [121-44-8]
6
H
15
N 101,20
Descrio Lquido incolor, de odor fortemente amoniacal.
Caractersticas fsicas Densidade: cerca de 0,726. Faixa
de ebulio: 89 C a 90 C.
Trifenilmetanol
CAS [76-84-6]
19
H
16
O - 260,33
Descrio Cristais incolores, ou p branco, ou quase
branco.
solvel em etanol.
Trifuoreto de boro
CAS [7637-07-2]
Frmula e massa molecular BF
3
67,81
Descrio Gs incolor, de odor pungente e sufocante.
Trifuoreto de boro, soluo metanlica
Especifcao Soluo comercial contendo cerca de 14%
(p/v) de BF
3
em metanol.
Trinitrofenol SR
Usar cido pcrico SR1.
Trixido de arsnio
CAS [1327-53-3]
Sinonmia xido arsenioso.
Frmula e massa molecular As
2
O
3
197,84
Descrio P cristalino branco ou transparente, ou massa
amorfa.
Solubilidade Pouco solvel em gua e solvel em gua
fervendo.
Segurana Veneno!
Trixido de cromo
CAS [1333-82-0]
Sinonmia Anidrido crmico.
Frmula e massa molecular CrO
3
99,99
Descrio Cristais ou p granulado ou escamas marrom-
avermelhadas, deliquescentes.
Conservao Em recipientes de vidro hermticos.
Armazenagem Evitar proximidade com infamveis.
Segurana Oxidante enrgico. Irritante.
Trombina bovina
CAS [9002-04-4]
Especifcao Preparado biolgico obtido de plasma
bovino, contendo enzima que converte fbrinognio em
fbrina.
Descrio P branco-amarelado.
Armazenagem Em temperaturas abaixo de 0 C.
Trombina humana
CAS [9002-04-4]
Especifcao Preparado biolgico obtido de plasma
humano, por tcnicas de fracionamento apropriadas.
Descrio P amorfo de cor creme.
refrigerao, especifcando data de preparao e potncia.
Armazenagem Proteger da luz, da umidade e do oxignio.
Categoria Enzima. Hemosttico local.
Tromboplastina
CAS [9035-58-9]
Sinonmia Fator III (coagulao sangunea).
Especifcao Preparado biolgico de origem animal,
obtido por extrao de determinados rgos: crebro,
pulmo.
Descrio P ou suspenso de cor amarelada, de odor
caracterstico.
Caracterstica fsica Na presena de concentraes
apropriadas de ons clcio, apresenta atividade
tromboquinase na coagulao sangunea.
Rotulagem Especifcar na composio: ons e agentes
antimicrobianos, suas concentraes, bem como origem,
data de preparao, atividade.
Armazenagem Proteger do calor e umidade. Manter sob
refrigerao.
Categoria Preparao com atividade enzimtica.
Hemosttico local.
Tromboplastina, reagente
Preparao Agitar 1,5 g de p de crebro de boi, seco
com acetona, com 60 mL de gua a 50 C, durante 10 a
15 minutos. Centrifugar a 1500 rpm, durante 2 minutos e
decantar o lquido sobrenadante.
14
Conservao O extrato, armazenado em temperatura
menores que 0 C, conserva a atividade durante vrios
dias. Pode ser adicionado cresol, na quantidade de 3 g/L,
como antimicrobiano.
Trometamina
CAS [77-86-1]
4
H
11
NO
3
121,14
Sinonmia Trometamol, tris(hidroximetil)aminometano.
branco.
O pH da soluo 0,1 M: 10,4.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, ligeiramente
solvel em etanol e muito pouco solvel em acetato de
etila.
Tungstato de sdio
CAS [10213-10-2]
2
WO
4
.2H
2
O 329,87
quase branco.
Solubilidade Facilmente solvel em gua, formando uma
soluo lmpida, e praticamente insolvel em etanol.
Ureia
CAS [57-13-6]
Sinonmia Carbamida.
2
)
2
CO 60,06
Descrio Cristais ou p branco, odor forte.
aproximadamente 132,7 C.
Solubilidade Muito solvel em gua, solvel em etanol e
praticamente insolvel em cloreto de metileno.
Conservao Em recipientes bem fechados, em locais
ventilados.
Segurana Pode causar dano se aspirado ou inalado.
Vanadato de amnio
CAS [7803-55-6]
4
VO
3
116,98
Descrio P cristalino branco ou amarelo claro.
Solubilidade Pouco solvel em gua.
Vanilina
CAS [121-33-5]
8
H
8
O
3
152,15
Descrio Cristais em forma de agulhas, ou p cristalinos
brancos, ou amarelados.
em etanol e metanol.
Vanilina SR
Preparao Dissolver 1 g de vanilina em etanol e
completar o volume para 100 mL com o mesmo solvente.
Adicionar, cuidadosamente, 2 mL de cido sulfrico e
homogeneizar. Utilizar a soluo em 48 horas.
Vanilina sulfrica SR
Preparao Dissolver 1 g de vanilina em 100 mL de
metanol. Adicionar 4 mL de cido clordrico e 5 mL de
cido sulfrico.
Varfarina sdica
CAS [129-06-6]
19
H
15
NaO
4
330,31
Descrio P cristalino ou amorfo, de sabor fracamente
amargo.
Solubilidade Muito solvel em gua e em etanol, solvel
em acetona, muito solvel em cloreto de metileno.
Categoria Anticoagulante.
Verde de bromocresol SR
Soluo A Dissolver 0,2 g de verde de bromocresol em
30 mL de gua e 6,5 mL de hidrxido de sdio 0,1 M.
Soluo B Dissolver 38 g de fosfato de sdio monobsico
e 2 g de fosfato de sdio dibsico anidro em gua e
Preparao Diluir a Soluo A para 500 mL utilizando
a Soluo B como diluente e homogeneizar. Se necessrio,
ajustar o pH em 4,6 0,1 com cido clordrico 0,1 M.
Vermelho de fenol SR
Soluo A - Dissolver 33 mg de vermelho de fenol em 1,5
mL de hidrxido de sdio 2 M e diluir para 100 mL com
gua.
Soluo B Dissolver 25 mg de sulfato de amnio em 235
mL de gua. Adicionar 105 mL de hidrxido de sdio 2 M
e 135 mL de cido actico 2 M.
Preparao Adicionar 25 mL da Soluo A na Soluo B.
Se necessrio, ajustar o pH em 4,7.
Conservao Em recipientes pequenos e resistentes a
lcalis.
a
14
Vitexina
CAS [3681-93-4]
21
H
20
O
10
448,41
Descrio P amarelo.
Xantidrol
CAS [90-46-0]
13
H
10
O
2
198,22
Especifcao Contm, no mnimo, 90% de C
13
H
10
O
2
.
Solubilidade Muito solvel em gua, solvel em etanol e
m cido actico glacial.
Xileno
CAS [1330-20-7]
Sinonmia Xilol.
8
H
10
106,17
Especifcao Mistura de ismeros: o-, p- e m-xileno,
com o predomnio de m-xileno.
ebulio: cerca de 138C.
Zinco, ativado
Preparao Cobrir uma quantidade de zinco granulado
com soluo de cido cloroplatnico a 50 ug/mL. Deixar
em repouso durante 10 minutos. Aps lavar, escorrer e
secar imediatamente.
Zinco, granulado
CAS [7440-66-6]
Elemento e massa atmica Zn 65,38
Descrio Metal lustroso branco-azulado. Estvel ao ar
seco. Converte-se em carbonato bsico quando exposto
umidade.
Caractersticas fsicas Tornase malevel entre 100 C
e 150 C. Queima em presena do ar apresentando chama
verde-azulada.
Segurana Txico!
Zinco SRA 5 mg/mL
Especifcao Contm 2,5 g de zinco granulado em 20
mL de cido clordrico 5 M. Completar com gua a 500
mL.
polietileno).
14.3 SOLUES
VOLUMTRICAS
As solues volumtricas (SV) esto acompanhadas de
mtodo de padronizao, embora possam existir outros que
conduzam ao mesmo grau de exatido.
Os valores obtidos na padronizao so vlidos para todos
os usos farmacopeicos.
Os reagentes empregados devem possuir grau quimicamente
puro e, quando necessrio, ser submetidos dessecao.
As solues volumtricas so padronizadas e usadas
a temperaturas ao redor de 25 C. Diante de variaes
signifcativas de temperatura, a soluo volumtrica deve
ter ttulo confrmado na mesma temperatura ou ser aferida
mediante fator de correo.
cido clordrico M SV
Especifcao Contm 85 mL de cido clordrico em
gua a 1000 mL.
Padronizao Pesar exatamente cerca de 1,5 g de
carbonato de sdio anidro. Juntar 100 mL de gua e
duas gotas de vermelho de metila SI. Adicionar o cido
lentamente, a partir de bureta, at colorao rsea fraca.
Aquecer a soluo at ebulio; esfriar e continuar a
titulao. Repetir esta sequncia de operaes at que
o aquecimento no afete a colorao rsea. Calcular a
molaridade. Cada 52,99 mg de carbonato de sdio anidro
equivale a 1 mL de cido clordrico M.
Conservao - Recipientes hermticos.
Armazenagem - Proteger do calor.
cido oxlico 0,05 M SV
Especifcao Contm 6,45 g de cido oxlico em gua
a 1000 mL.
Padronizao Transferir 15 mL da amostra para
erlenmeyer de 250 mL. Adicionar 100 mL de gua e 7
mL de cido sulfrico. Aquecer a cerca de 70 C e titular
com permanganato de potssio 0,02 M SV recentemente
padronizado, adicionando lentamente, com agitao
constante, at aparecimento de cor rosa plida que persista
por 15 segundos. A temperatura ao fnal da titulao no
deve ser inferior a 60 C.
Conservao Recipientes de vidro bem fechados.
14
cido perclrico 0,1 M SV
Especifcao Contm 10 g de cido perclrico em cido
actico a 1000 mL.
Padronizao Dissolver, sob agitao, 8,5 mL de cido
perclrico em 200 a 300 mL de cido actico glacial.
Acrescentar 20 mL de anidrido actico, diluir a mistura a
1000,0 mL com cido actico glacial e deixar em repouso
por 24 horas. Determinar o teor de gua, que deve situar-se
entre 0,02% e 0,05%. Pesar exatamente cerca de 700 mg de
biftalato de potssio previamente pulverizado e dessecado a
120 C por 2 horas e dissolv-lo em 50 mL de cido actico
glacial em frasco de erlenmeyer de 250 mL de capacidade.
Adicionar 2 gotas de cloreto de metilrosanilnio e titular
com a soluo de cido. perclrico at que colorao
violeta mude para verde-esmeralda. Cada 20,422 mg de
biftalato de potssio equivale a 1 mL de cido perclrico
0,1 M.
cido sulfrico M SV
Especifcao Contm 98,07 g de cido sulfrico em
gua a 1000 mL.
Padronizao Adicionar lentamente, sob agitao, 60
mL de cido sulfrico sobre 1020 mL de gua. Esfriar
a temperatura ambiente. Determinar a molaridade por
titulao com carbonato de sdio, conforme descrito para
cido clordrico M, porm pesando exatamente cerca de 3 g
de carbonato de sdio anidro. Cada 105,98 mg de carbonato
de sdio anidro equivale a 1 mL de cido sulfrico M.
Bromato de potssio 0,1 M SV
Especifcao - Contm 16,704 g de bromato de potssio
em gua a 1000 mL.
Padronizao Medir exatamente volume em torno de
40 mL da soluo de bromato de potssio a 1,67% (p/v).
Juntar 3 g de iodeto de potssio e 3 mL de cido clordrico
SR. Aguardar 5 minutos e titular o iodo liberado com
tiossulfato de sdio 0,1 M SV, usando 3 mL de amido SI
como indicador. Preparar um branco. Corrigir e calcular a
molaridade. Cada mL de bromato de potssio corresponde
a 6 mL de tiossulfato de sdio 0,1 M SV.
Bromo 0,05 M SV
Preparao Dissolver 3 g de bromato de potssio e 15 g
de brometo de potssio em gua e completar para 1000 mL
com o mesmo solvente.
Padronizao Transferir 25 mL da soluo para
erlenmeyer de 500 mL com tampa e acrescentar 120 mL
de gua. Adicionar 5 mL de cido clordrico, tampar e
agitar suavemente. Adicionar 5 mL de iodeto de potssio
SR, tampar novamente, agitar e deixar em repouso por
5 minutos ao abrigo da luz. Titular o iodo liberado com
tiossulfato de sdio 0,1 M SV, adicionando 3 mL de amido
SI prximo ao ponto fnal. Calcular a molaridade. Cada mL
bromo 0,05 M SV equivale a 1 mL de tiossulfato de sdio
0,1 M SV.
Conservao Recipientes de vidro mbar bem fechados.
Cloreto de brio 0,1 M SV
Preparao Dissolver 24,4 g de cloreto de brio em gua
e diluir para 1000 mL com o mesmo solvente.
Padronizao Em 10 mL da soluo de cloreto de brio,
adicionar 60 mL de gua, 3 mL de soluo concentrada de
amnia e 1 mg de prpura de ftalena. Titular com edetato
dissdico 0,1 M SV. Quando a soluo descolorir, adicionar
50 mL de etanol e continuar a titulao at a colorao
azul-violeta desaparecer.
Cloreto de benzetnio 0,004 M SV
Preparao Depois de dessecar a 100 - 105C at massa
constante, dissolver 1,792 g de cloreto de benzetnio em
gua e completar a 1000 mL com o mesmo solvente.
Padronizao Dissolver 0,350 g de cloreto de benzetnio,
depois de seco a 100-105C at massa constante, em 30 mL
de cido actico anidro e adicionar 6 mL de soluo de
acetato de mercrio SR. Titular com cido perclrico 0,1 M
SV em presena de 0,05 mL cloreto de metilrosanilinio SI.
Realizar ensaio em branco. Cada mL de cido perclrico
0,1 M SV corresponde a 44,81 mg de C
27
H
42
ClNO
2
.
Diclorofenol-indofenol, soluo padro
Preparao Dissolver 50 mg de 2,6-dicloroindofenol
sdico em 50 mL de gua com 42 mg de bicarbonato de
sdio. Agitar vigorosamente. Aps dissoluo, completar
com gua a 200 mL. Filtrar.
Padronizao Pesar exatamente 50 mg de cido
ascrbico e diluir com cido metafosfrico-actico SR
a 50 mL. Para balo de 50 mL, transferir imediatamente
2 mL da soluo de cido ascrbico e adicionar 5 mL
de cido metafosfrico-actico SR. Titular rapidamente
com a soluo de diclorofenol-indofenol at persistir cor
rsea por, pelo menos, 5 segundos. Fazer determinao
em branco, titulando 7 mL de cido metafosfrico-actico
SR, adicionada de quantidade de gua igual da soluo
de diclorofenol-indofenol usada na titulao do cido
ascrbico. Expressar a concentrao da soluo padro em
termos de seu equivalente em mg de cido ascrbico.
Conservao Recipientes de vidro mbar, bem fechados.
Estabilidade Usar em no mximo 3 dias e padronizar
Edetato dissdico 0,05 M SV
Sinonmia EDTA dissdico 0,05 M,
etilenodiaminotetraacetato dissdico 0,05 M.
Especifcao Contm 18,6 g de edetato dissdico
diidratado em gua a 1000 mL.
Padronizao Pesar exatamente cerca de 200 mg de
carbonato de clcio. Transferir para copo de bquer de 400
mL e adicionar 10 mL de gua. Agitar e cobrir o copo com
vidro de relgio. Juntar 2 mL de cido clordrico diludo
e agitar at dissoluo do carbonato de clcio. Lavar as
a
14
paredes do copo de bquer e o vidro de relgio com gua
at cerca de 100 mL. Continuar agitando, magneticamente.
Adicionar 30 mL da soluo de edetato dissdico a partir
de bureta de 50,0 mL. Juntar 15 mL de hidrxido de sdio
SR e 300 mg do indicador azul de hidroxinaftol. Continuar
a titulao da soluo de edetato dissdico at cor azul.
Calcular a molaridade.
Edetato dissdico 0,1 M SV
Preparao Dissolver 37,5 g em 500 mL de gua,
adicionar 100 mL de hidrxido de sdio M e completar
Padronizao Dissolver 0,12 g de zinco em p (com
grau de pureza de 99,9%) em 10 mL de cido clordrico M.
Juntar 0,1 mL de gua de bromo SR. Eliminar o excesso
de bromo por ebulindo a soluo. Adicionar soluo de
hidrxido de sdio a 8,5% (p/v) at reao fracamente cida
ou neutra, e proceder conforme descrito em Titulaes
complexomtricas (5.3.3.4) para Zinco. Cada mL de
edetato dissdico 0,1 M SV equivale a 6,536 mg de zinco.
Hidrxido de potssio etanlico 0,5 M SV
Nome alternativo Hidrxido de potssio alcolico 0,5 M SV.
Preparao Dissolver 3 g de hidrxido de potssio em
5 mL de gua e adicionar etanol para 100 mL. Deixar a
soluo em repouso durante aproximadamente 24 horas.
Decantar o lquido lmpido, e transferir para recipientes de
material inerte e protegidos da luz.
Padronizao Titular 20 mL da soluo com cido
clordrico 0,5 M SV usando 0,5 mL de fenolftalena SI
como indicador. Cada mL de cido clordrico 0,5 M SV
equivale a 28,060 mg de hidrxido de potssio.
Hidrxido de potssio M SV
Preparao Dissolver 60 g de hidrxido de potssio em
gua a 1000 mL. Adicionar soluo saturada de hidrxido
de brio, recentemente preparada, at que no se forme
mais precipitado. Agitar e deixar em repouso durante
aproximadamente 12 horas. Decantar o lquido lmpido, ou
fltrar, e transferir para recipientes de material inerte (tipo
polietileno).
Padronizao Usar o mesmo procedimento adotado para
o hidrxido de sdio M SV.
polietileno).
Segurana Custico.
Hidrxido de sdio M SV
Preparao Preparar soluo de hidrxido de sdio a
50% (p/v) com gua isenta de dixido de carbono. Esfriar
temperatura ambiente e deixar sedimentar. Retirar 82 mL
do sobrenadante e diluir com gua a 1000 mL.
Padronizao Pesar exatamente cerca de 5 g de biftalato
de potssio dessecado e dissolver em 75 mL de gua isenta
de dixido de carbono. Juntar duas gotas de fenolftalena SI
e titular com a soluo de hidrxido de sdio at formao
permanente de cor rsea. Cada mL de hidrxido de sdio
M SV equivale a 204,220 mg de biftalato de potssio.
Conservao Recipientes bem fechados, inertes (tipo
polietileno). Rolhas providas de tubo contendo a mistura
hidrxido de sdio e xido de clcio.
Segurana Custico.
Informao adicional Conferir o ttulo com frequncia.
Hidrxido de sdio etanlico 0,1 M SV
Preparao Preparar soluo de hidrxido de sdio a
50% (p/v) em gua isenta de dixido de carbono. Resfriar
temperatura ambiente e deixar sedimentar. Transferir 2
mL do sobrenadante para balo volumtrico de 250 mL e
completar o volume com etanol.
Padronizao Pesar, exatamente, cerca de 0,2 g de cido
benzoico e dissolver em mistura de 10 mL de etanol e 2
mL de gua. Adicionar duas gotas de fenolftalena SI e
titular com a soluo de hidrxido de sdio etanlico at
colorao rsea permanente. Cada mL de hidrxido de
sdio 0,1 M SV equivale a 122,120 mg de cido benzoico.
polietileno).
Armazenagem Proteger da exposio ao dixido de
carbono.
Segurana Custico.
Hidrxido de tetrabutilamnio 0,1 M SV
Preparao Dissolver 40 g de iodeto de tetrabutilamnio
em 900 mL de metanol anidro, em frasco de erlenmeyer
provido de rolha esmerilhada. Colocar em banho de gelo,
adicionar 20 g de xido de prata pulverizado, tampar o
frasco e agitar vigorosamente por 60 minutos. Retirar
alguns mL e centrifugar. Verifcar presena de iodeto no
lquido sobrenadante. Se o teste positivo, adicionar mais
2 g de xido de prata e deixar em repouso por 30 minutos,
agitando ocasionalmente. Filtrar atravs de funil de placa
porosa, lavar o erlenmeyer e o funil com trs pores
de 50 mL de tolueno e juntar o tolueno de lavagem ao
fltrado. Completar o volume a 1000 mL com a mistura de
trs volumes de tolueno anidro e um volume de metanol
anidro. Passar sobre a soluo, por 10 minutos, corrente
de nitrognio isento de dixido de carbono. Guardar em
recipiente protegido do dixido de carbono e da umidade.
Consumir em 60 dias. Determinar a molaridade no dia
de uso, dissolvendo cerca de 400 mg de cido benzoico
exatamente pesados, em 80 mL de dimetilformamida.
Adicionar a esta soluo trs gotas de soluo de azul
de timol a 1% (p/v) em dimetilformamida e titular com
soluo de hidrxido de tetrabutilamnio at colorao
azul. Proteger a soluo do contato com o ar durante a
titulao. Utilizar bureta provida de tubo de absoro de
dixido de carbono. Efetuar ensaio em branco. Cada mL
de hidrxido de tetrabutilamnio equivale a 12,212 mg de
cido benzico.
14
ndigo carmim SV
Preparao Triturar 4 g de ndigo carmim com sucessivas
pores de gua at dissoluo, sem ultrapassar 900 mL.
Transferir para balo volumtrico de 1000 mL, adicionar
2 mL de cido sulfrico e completar o volume com gua.
Padronizao A 10 mL de soluo padro de nitrato (100
ppm NO
3
) adicionar 10 mL de gua, 0,05 mL de ndigo
carmim SV e, cuidadosamente, 30 mL de cido sulfrico.
Titular imediatamente com ndigo carmim SV at viragem
para colorao azul estvel. O volume total, em mL, de
ndigo carmim SV requerido equivalente a 1 mg de NO
3
.
Iodato de potssio 0,02 M SV
Especifcao Contm 4,28 g de iodato de potssio em
gua a 1000 mL.
Padronizao Diluir 50 mL da soluo para 100
mL com gua. A 25 mL desta soluo, adicionar 2 g de
iodeto de potssio e 10 mL de cido sulfrico M. Titular
com tiossulfato de sdio 0,1 M SV utilizando amido SI,
adicionado prximo ao ponto fnal, como indicador. Cada
de KIO
3
.
Iodato de potssio 0,1 M SV
Preparao Pesar exatamente, 21,4 g de iodato de potssio
previamente dessecado a 110 C, at peso constante, e
dissolver em gua e completar o volume para 1000 mL
com o mesmo solvente. No necessria a padronizao,
pois este reagente padro primrio.
Iodo 0,05 M SV
Preparao Dissolver 13 g de iodo em 100 mL de soluo
de iodeto de potssio a 20% (p/v). Adicionar trs gotas de
cido clordrico e diluir para 1000 mL com gua.
Padronizao Dissolver, exatamente, cerca de 0,15 g de
trixido de arsnio em 20 mL de hidrxido de sdio M.
Aquecer se necessrio. Adicionar 40 mL de gua e duas
gotas de alaranjado de metila e cido clordrico at cor
rsea. Adicionar 50 mL de carbonato de sdio a 4% (p/v),
3 mL de amido SI e titular com iodo 0,05 M SV at cor azul
permanente. Cada mL de iodo 0,05 M SV equivale a 4,946
mg de trixido de arsnio.
Conservao Em recipiente de vidro bem fechado e ao
abrigo da luz.
Iodo 0,1 M SV
Preparao Dissolver cerca de 13 g de iodo em 100 mL
de iodeto de potssio a 3,6% (p/v). Juntar trs gotas de
cido clordrico e completar com gua a 1000 mL.
trixido de arsnio. Dissolver em 20 mL de hidrxido
de sdio M, aquecendo se necessrio. Adicionar 40 mL
de gua, duas gotas de alaranjado de metila S1 e cido
clordrico diludo at cor rsea. Juntar 50 mL de carbonato
de sdio a 4% (p/v) e 3 mL de amido SI. Titular com a
soluo de iodo, a partir de bureta, at cor azul permanente.
Calcular a molaridade. Cada 4,946 mg de trixido de
arsnio equivale a 1 mL de iodo 0,1 M.
Conservao Recipientes de vidro bem fechados.
Metxido de ltio 0,1 M SV
Preparao Dissolver, cuidadosamente, em balo
volumtrico de 1000 mL, 0,694 g de ltio em 150 mL de
metanol anidro e completar o volume com tolueno.
Padronizao Padronizar sempre antes do uso. A 10 mL
de dimetilformamida adicionar 0,05 mL de azul de timol a
0,3% (p/v) em metanol e titular com metxido de ltio 0,1
M SV at colorao azul. Imediatamente, adicionar 0,2 g
de cido benzico, agitar e titular com metxido de ltio
0,1 M SV at colorao azul. Evitar a absoro de dixido
de carbono atmosfrico. O volume de titulante gasto na
segunda titulao representa a quantidade de metxido de
ltio requerido. Cada mL de metxido de ltio 0,1 M SV
equivale a 12,212 mg de C
7
H
6
O
2
.
Metxido de sdio 0,1 M SV
Especifcao Contm 5,402 g em soluo tolueno-
metanol a 1000 mL.
Preparao Esfriar em banho de gelo 150 mL de metanol,
contido em balo volumtrico de 1000 mL. Adicionar,
em pequenas pores, cerca de 2,5 g de sdio metlico
recm fragmentado. Aps a dissoluo do metal, adicionar
tolueno at completar 1000 mL e misturar. Manter esta
soluo em recipiente ao abrigo do dixido de carbono.
cido benzoico, dissolver em 80 mL de dimetilformamida,
adicionar trs gotas de soluo de azul de timol a 1% (p/v)
em dimetilformamida e titular pela soluo de metxido de
sdio at o aparecimento de colorao azul. Cada 12,212
mg de cido benzoico equivale a 1 mL de metxido de
sdio 0,1 M.
Nitrato crico amoniacal 0,01 M SV
Preparao A 100 mL de nitrato crico amoniacal 0,1 M
SV adicionar, cuidadosamente, com resfriamento, 30 mL
de cido sulfrico e diluir para 1000 mL com gua.
Nitrato crico amoniacal 0,1 M SV
Preparao Agitar soluo contendo 56 mL de cido
sulfrico e 54,82 g de nitrato crico amoniacal por 2 minutos
e, cuidadosamente, adicionar cinco pores sucessivas
de 100 mL de gua, agitando aps cada adio. Diluir a
soluo lmpida para 1000 mL com gua. Padronizar 10
dias aps o preparo.
Padronizao Adicionar a 25 mL da soluo 2 g de iodeto
de potssio e 150 mL de gua. Titular imediatamente com
tiossulfato de sdio 0,1 M SV, utilizando amido SI como
indicador. Cada mL de tiossulfato de sdio 0,1 M SV
equivale a 54,822 mg de (NH
4
)
2
[Ce(NO
3
)
6
].
a
14
Nitrato de brio 0,01 M SV
Especifcao Contm 2,614 g de nitrato de brio em
1000 mL de gua.
Padronizao Adicionar 10 mL de soluo de cido
sulfrico 0,01 M em um frasco e diluir com gua. Adicionar
duas gotas de torina a 0,2% (p/v) e duas gotas de cloreto de
metiltionnio 0,02% (p/v) e titular lentamente com soluo
de nitrato de brio at mudana de cor de amarelo para rosa.
Nitrato de chumbo 0,1 M SV
Preparao Transferir, exatamente, cerca de 8,28 g de
nitrato de chumbo para balo volumtrico de 250 mL, diluir
em gua e completar o volume com o mesmo solvente.
Homogeneizar.
Padronizao Transferir, exatamente, 5 mL de nitrato
de chumbo 0,1 M, para erlenmeyer de 125 mL, adicionar
50 mL de gua e, sob agitao magntica, acrescentar 5
gotas de alaranjado de xilenol a 0,1% (p/v) em gua e 5 g
de metenamina, at colorao violeta. Titular com edetato
dissdico 0,05 M SV at colorao amarela. Cada mL de
edetato dissdico 0,05 M SV equivale a 16,560 mg de
Pb(NO
3
)
2
.
Nitrato de mercrio(II) 0,1 M SV
Sinonmia Nitrato mercrico 0,1 M SV.
Preparao Dissolver cerca de 35 g de nitrato de
mercrio(II) em 5 mL de cido ntrico e 500 mL de gua.
Completar com gua a 1000 mL.
Padronizao A 20 mL desta soluo, adicionar 2 mL
de cido ntrico SR e 2 mL de sulfato frrico amoniacal
SR. Resfriar temperatura inferior a 20 C e titular com
tiocianato de amnio 0,1 M at aparecimento permanente
da colorao marrom. Calcular a molaridade.
Nitrato de prata 0,1 M SV
Preparao Dissolver cerca de 17,5 g de nitrato de prata
em gua a 1000 mL.
cloreto de sdio, dessecado; transferir para bquer de 150
mL e dissolver em 5 mL de gua. Juntar 5 mL de cido
actico SR, 50 mL de metanol e trs gotas de eosina Y SI.
Agitar, de preferncia com agitador magntico, e titular
com a soluo de nitrato de prata. Calcular a molaridade.
Cada mL de nitrato de prata 0,1 M SV corresponde a 5,844
mg de cloreto de sdio.
Nitrato de trio 0,005 M SV
Especifcao Contm 2,401 g de nitrato de trio anidro
em 1000 mL de gua.
Padronizao Transferir, exatamente, cerca de 0,05 g
de fuoreto de sdio, previamente dessecado, para balo
volumtrico de 250 mL e completar com gua. Em 20 mL
dessa soluo, adicionar 0,6 mL de alizarina SI e ento,
titular com hidrxido de sdio 0,1 M SV at a mudana de
cor de rosa para amarelo. Adicionar 5 mL de tampo acetato
pH 3,0 e titular com soluo de nitrato de trio 0,005 M at
a mudana de cor de amarelo para rosa-amarelado. Cada
0,8398 mg de fuoreto de sdio equivalente a 1 mL de
nitrato de trio 0,005 M SV.
Nitrito de sdio 0,1 M SV
Especifcao Contm 6,9 g de nitrito de sdio em gua
a 1000 mL.
Padronizao Dissolver 7,5 g de nitrito de sdio em gua
e completar o volume a 1000 mL. Pesar exatamente cerca
de 500 mg de sulfanilamida previamente dessecada por 3
horas a 105 C. Transferir para bquer. Adicionar 20 mL de
cido clordrico e 50 mL de gua. Agitar at dissoluo e
esfriar a 15 C. Mantendo a temperatura em torno de 15 C,
titular lentamente com soluo de nitrito de sdio usando
como indicador externo amido iodetado SI, at viragem:
Cada 17,220 mg de sulfanilamida equivalem a 1 mL de
nitrito de sdio 0,1 M.
Permanganato de potssio 0,02 M SV
Especifcao Contm 3,161 g de permanganato de
potssio em gua a 1000 mL.
Preparao Dissolver cerca de 3,2 g de permanganato de
potssio em 1000 mL de gua, aquecer ebulio por 15
minutos. Deixar em repouso em frasco mbar com tampa
de vidro, ao abrigo da luz, por dois dias, e fltrar atravs de
funil de vidro sinterizado.
Padronizao Dissolver, exatamente, cerca de 0,2 g de
oxalato de sdio, previamente dessecado a 110 C at peso
constante, em 250 mL de gua. Adicionar 7 mL de cido
sulfrico, aquecer a cerca de 70 C, e titular lentamente
com a soluo de permanganato de potssio, com agitao
constante, at colorao rsea plida, que persista por 15
segundos. A temperatura ao fnal da titulao no deve ser
inferior a 60 C. Cada mL de permanganato de potssio
0,02 M SV equivale a 6,700 mg de oxalato de sdio.
Conservao Recipientes de vidro mbar bem fechados,
com tampa de vidro.
Informao adicional Conferir o ttulo com frequncia.
Sulfato crico 0,05 M SV
Especifcao Contm 33,22 g de sulfato crico em 1000
mL de gua.
Padronizao Pesar, exatamente, cerca de 0,2 g de oxalato
de sdio, dessecado previamente, e dissolver em 75 mL
de gua. Adicionar, com agitao, 2 mL de cido sulfrico
previamente misturado com 5 mL de gua, homogeneizar.
Adicionar 10 mL de cido clordrico, e aquecer at cerca
de 75 C. Titular com sulfato crico 0,05 M at cor amarelo
claro permanente. Cada 6,700 mg de oxalato de sdio
equivalente a 1 mL de sulfato crico 0,05 M SV.
14
Sulfato crico amoniacal 0,1 M SV
Preparao Dissolver 65 g de sulfato crico amoniacal
em mistura de 30 mL de cido sulfrico e 500 mL de gua.
Esfriar e completar o volume com gua para 1000 mL.
Padronizao Dissolver 80 mg de trixido de arsnio
em 15 mL de hidrxido de sdio 0,2 M, aquecendo se
necessrio. Adicionar 50 mL de cido sulfrico M, 0,15 mL
de tetrxido de smio a 0,25% (p/v) e 0,1 mL de ferrona
SI. Titular com sulfato crico amoniacal 0,1 M at mudana
de colorao. Cada mL de sulfato crico amoniacal 0,1 M
equivalente a 4,496 mg de trixido de arsnio.
Sulfato de zinco 0,1 M SV
Especifcao Contm 16,144 g de sulfato de zinco
hepta-hidratado em gua a 1000 mL.
Preparao Dissolver 28,8 g de sulfato de zinco em gua
e completar o volume a 1000 mL. Pipetar 20 mL da soluo
de edetato dissdico 0,05 M para um erlenmeyer de 250
mL e adicionar, nesta ordem, 20 mL de soluo tampo
cido actico-acetato de amnio, 100 mL de etanol e 2 mL
de ditizona SR. Titular pela soluo de sulfato de zinco at
a colorao rosa claro. Calcular a molaridade.
Tetrafenilborato de sdio 0,02 M SV
Preparao Dissolver 6,845 g de tetrafenilborato de
sdio em gua a 1000 mL.
Padronizao Pipetar duas pores de 75 mL em dois
bqueres. A cada um deles, adicionar 1 mL de cido actico
SR, 25 mL de gua e, lentamente, sob agitao, 25 mL de
biftalato de potssio a 5% (p/v). Deixar em repouso por
duas horas. Filtrar uma das misturas em cadinho fltrante,
de vidro sinterizado (porosidade 100-160 micrmetros) e
lavar o precipitado com gua fria. Transferir o precipitado
com 50 mL de gua e agitar intermitentemente por 30
minutos. Filtrar e usar o fltrado como soluo saturada
de tetrafenilborato de potssio no seguinte procedimento
de padronizao. Filtrar a segunda mistura em cadinho
fltrante, de vidro sinterizado, tarado, e lavar com trs
pores de 5 mL da soluo saturada de tetrafenilborato
de potssio. Secar o precipitado a 105 C durante uma
hora. Cada g de tetrafenilborato de potssio equivale a
955,1 mg de tetrafenilborato de sdio. A partir do peso do
tetrafenilborato de sdio obtido, calcular a molaridade da
soluo.
Conservao - Recipientes bem fechados.
Estabilidade - Usar solues recentes.
Tiocianato de amnio 0,1 M SV
Preparao Dissolver cerca de 8 g de tiocianato de
amnio em gua a 1000 mL.
Padronizao Misturar exatamente 30 mL de nitrato de
prata 0,1 M com 50 mL de gua, 2 mL de cido ntrico
SR e 2 mL de sulfato frrico amoniacal SR. Titular com a
soluo de tiocianato de amnio at aparecimento da cor
castanho-avermelhada. Cada mL de nitrato de prata 0,1 M
equivalente a 7,612 mg de tiocianato de amnio.
Tiossulfato de sdio 0,1 M SV
Preparao Dissolver cerca de 25 g de tiossulfato de
sdio penta-hidratado e 200 mg de carbonato de sdio em
gua, recentemente fervida e resfriada, a 1000 mL.
Padronizao Pesar exatamente cerca de 210 mg
de dicromato de potssio, pulverizado e dessecado, e
dissolver em 100 mL de gua. Transferir para balo
de 500 mL e adicionar 3 g de iodeto de potssio, 2 g de
bicarbonato de sdio e 5 mL de cido clordrico SR. Agitar
e deixar em repouso por 10 minutos no escuro. Titular o
iodo liberado com a soluo de tiossulfato de sdio at cor
verde-amarelada. Adicionar 3 mL de amido SI e continuar
a titulao at desaparecimento da cor azul. Calcular a
molaridade. Cada mL de tiossulfato de sdio 0,1 M SV
corresponde a 4,903 mg de dicromato de potssio.
Informao adicional Conferir o titulo com frequncia.
14.4 TAMPES
Certos ensaios farmacopeicos exigem o ajuste ou a
manuteno de pH. Para tal, empregam-se solues
denominadas tampes, capazes de suportar variaes na
atividade de ons hidrognio. Os componentes requeridos
esto descritos no item Reagentes. Os de natureza cristalina
devem ser previamente dessecados a 110 - 120 C por
uma hora; utilizar gua isenta de dixido de carbono. A
armazenagem deve ser feita em recipientes hermticos
e apropriados. Considerar a estabilidade no preparo das
quantidades para consumo. A seguir, relacionam-se as
solues em ordem crescente de valores de pH. Outros
tampes com caractersticas particulares so descritos nos
textos dos respectivos ensaios.
Tampo cido clordrico pH 2,0
Preparao Misturar 50 mL de soluo aquosa de cloreto
de potssio 0,2 M com 13 mL de soluo aquosa de cido
clordrico 0,2 M. Completar o volume para 200 mL com
gua e ajustar o pH se necessrio.
Tampo fosfato pH 2,2
Preparao Dissolver 1,38 g de fosfato de sdio
monobsico em 800 mL de gua. Ajustar o pH com cido
fosfrico e diluir para 1000 mL com gua.
Tampo acetato pH 3,0
Preparao Dissolver 12 g de acetato de sdio em gua,
adicionar 6 mL de cido actico glacial e diluir com gua
para fazer 100 mL. Ajustar o pH se necessrio.
35 mL de gua, adicionar 38 mL de cido clordrico 7 M,
ajustar o pH para 3,5 com cido clordrico SR ou hidrxido
de amnio 6 M e completar o volume para 100 mL com
gua.
a
14
Preparao Transferir 900 mL de gua para balo
volumtrico de 1000 mL, adicionar 2,86 mL de cido
actico glacial e 1 mL de hidrxido de sdio a 50%
(p/v), completar o volume com gua e homogeneizar. Se
necessrio, ajustar o pH em 4,0 com cido actico glacial
ou hidrxido de sdio a 50% (p/v).
Preparao Dissolver 136 g de acetato de sdio e 77 g de
acetato de amnio em gua e diluir a 1000 mL. Adicionar
250 mL de cido actico glacial e homogeneizar.
Tampo biftalato pH 4,4
Preparao Dissolver 2,042 g de biftalato de potssio
em 50 mL de gua, adicionar 7,5 mL de hidrxido de
hidrognio 0,2 M e diluir para 200 mL em gua. Ajustar o
pH se necessrio.
Tampo acetato 0,05 M pH 4,5
Preparao Transferir 2,99 g de acetato de sdio tri-
hidratado e 1,66 mL de cido actico glacial para balo
volumtrico de 1000 mL. Dissolver em gua e completar o
volume com o mesmo solvente. Ajustar o pH se necessrio.
Tampo acetato de sdio pH 4,5
Preparao Diluir 2,8 mL de cido actico glacial com
gua para 1000 mL. Ajustar o pH em 4,5 0,05 com
hidrxido de sdio a 50% (p/v).
Tampo acetato de sdio 0,1 M pH 5,0
Preparao Transferir 13,61 g de acetato de sdio tri-
hidratado para balo volumtrico de 1000 mL, dissolver
em quantidade sufciente de gua e completar o volume
com o mesmo solvente. Homogeneizar. Ajustar o pH em
5,0 com cido actico 0,1 M.
Tampo citrato-fosfato pH 5,0
Soluo A Dissolver 0,8 g de fosfato de sdio dibsico
hepta-hidratado em 500 mL de gua.
Soluo B Dissolver 3,5 g de cido ctrico monoidratado
em 500 mL de gua.
Preparao Misturar, com agitao, as Solues A e B
at ajustar o pH para 5,0. Distribuir em recipientes com 50
mL cada. Autoclavar a 121 C, presso de 1 atm, por 20
minutos. Estocar a 4 C.
Soluo A Dissolver 13,61 g de fosfato de potssio
monobsico em gua e completar para 1000 mL com o
mesmo solvente.
Soluo B Dissolver 35,81 g de fosfato de sdio dibsico
dodeca-hidratado em gua e completar para 1000 mL com
o mesmo solvente.
Preparao Misturar 96,4 mL da Soluo A e 3,6 mL da
Soluo B. Ajustar o pH se necessrio.
Preparao Em balo volumtrico de 200 mL, adicionar
3,6 mL de hidrxido de sdio 0,2 M a 50 mL de fosfato
de potssio monobsico 0,2 M e completar o volume com
gua. Ajustar o pH se necessrio.
Preparao Misturar 50 mL de fosfato de potssio
monobsico 0,2 M e 5,7 mL de hidrxido de sdio 0,2 M.
Completar o volume a 200 mL com gua. Ajustar o pH se
necessrio.
Preparao Dissolver 100 g de acetato de amnia em
300 mL de gua, adicionar 4,1 mL de cido actico glacial,
se necessrio ajustar o pH, utilizando hidrxido de amnio
10 M ou cido actico glacial 5 M e completar a 500 mL
com gua.
Tampo citro-fosfato pH 6,0
Nome alternativo Tampo fosfato de sdio pH 6,0
Preparao Misturar 36,8 mL de cido ctrico a 2,1%
(p/v) com 63,2 mL de fosfato de sdio dibsico a 7,15%
(p/v). Ajustar o pH se necessrio.
Preparao Dissolver 2,75 g de fosfato de sdio dibsico
di-hidratado e 4,5 g de cloreto de sdio em 500 mL de gua.
Ajustar o pH em 6,5 com tampo fosfato pH 8,5.
e 11,45 g de fosfato de potssio tribsico em gua e
completar o volume a 1000 mL.
Tampo fosfato-laurilsulfato de sdio pH 6,8
Preparao Misturar 19 partes de cido clordrico 0,1
M com 17 partes de tampo fosfato-laurilsulfato de sdio
pH 11,0. Se necessrio, ajustar o pH para 6,8 com cido
fosfrico a 20% (v/v) ou hidrxido de sdio a 40% (p/v).
Tampo de tris-cloridrato M de pH 6,8
Preparao Dissolver 60,6 g de trometamina em 400
mL gua. Ajustar o pH para 6,8 com cido clordrico
e completar para 500 mL com gua. Ajustar o pH se
necessrio.
Tampo fosfato 0,025 M pH 6,86
e 3,39 g de fosfato de potssio monobsico em gua a
completar o volume a 1000 mL. Ajustar o pH se necessrio.
14
Preparao Dissolver 2,73 g de acetato de sdio em
aproximadamente 70 mL de gua. Ajustar o pH a 7,0
com cido actico 0,5 M. Completar com gua a 100 mL.
Ajustar o pH se necessrio.
Tampo citro-fosfato pH 7,0
Nome alternativo Tampo fosfato de sdio pH 7,0
Preparao Misturar 82,4 mL de fosfato de sdio
dibsico dodecaidratado a 7,15% (p/v) com 17,6 mL de
cido ctrico a 2,1% (p/v). Ajustar o pH se necessrio.
Soluo A Hidrxido de sdio M
Soluo B Dissolver 13,6 g de fosfato de potssio
monobsico em gua e completar o volume para 100 mL
Preparao Misturar 29,5 mL da Soluo A e 50 mL da
Soluo B. Ajustar o pH em 7,0 0,1 utilizando as Solues
A e B e completar o volume para 100 mL com gua.
Tampo fosfato M/l5 pH 7,0
monobsico em gua e diluir a 100 mL. Separadamente,
dissolver 2,38 g de fosfato de sdio dibsico em gua e
diluir a 100 mL. Misturar 38,9 mL da soluo de fosfato de
potssio monobsico com 61,1 mL de soluo de fosfato
de sdio dibsico. Ajustar o pH se necessrio.
Preparao Transferir 1 g de fosfato de potssio
monobsico e 1,8 g de fosfato de sdio dibsico anidro
para balo volumtrico de 1000 mL, adicionar 900 mL em
gua e ajustar o pH para 7,1 0,1 com cido fosfrico
ou hidrxido de sdio 10 M. Completar o volume com o
mesmo solvente.
Preparao Juntar 250 mL de fosfato de potssio
monobsico 0,2 M e 175 mL de hidrxido de sdio 0,2 M.
Completar o volume a 1000 mL. Ajustar o pH se necessrio.
Tampo albumina-fosfato pH 7,2
anidro, 7,6 g de cloreto de sdio e 10 g de albumina bovina
em gua. Completar o volume a 1000 mL e antes de usar
ajustar o pH com hidrxido de sdio 2 M ou com cido
fosfrico.
hepta-hidratado e 3,08 g de fosfato de sdio monobsico
monoidratado em 900 mL de gua, ajustar o pH em 7,3
0,1 com cido fosfrico SR ou hidrxido de sdio SR e
Tampo barbital de pH 7,4
Preparao Misturar 50 mL de uma soluo contendo
1,94% (p/v) de acetato de sdio e 2,95% (p/v) de barbital
sdico em gua com 50,5 mL de cido clordrico 0,1 M.
Juntar 20 mL de soluo a 8,5% (p/v) de cloreto de sdio e
completar a 250 mL com gua.
Tampo fosfato de potssio pH 7,4 com polissorbato 80
a 2% (v/v)
monobsico em 1000 mL de gua. Transferir 250 mL
da soluo anterior para balo volumtrico de 1000 mL,
adicionar 195,5 mL de hidrxido de sdio 0,2 M e 450
mL de gua. Ajustar o pH para 7,4 com cido fosfrico
ou hidrxido de sdio e completar o volume com gua. O
polissorbato 80 deve ser adicionado depois, devido a difcil
solubilidade do mesmo.
Tampo imidazol pH 7,4
Preparao Dissolver 3,4 g de imidazol e 5,84 g de cloreto
de sdio em gua. Adicionar 18,6 mL de cido clordrico M
e completar com gua a 1000 mL. Se necessrio, ajustar o
pH para 7,4 0,1.
Tampo de trometamina-cloreto de sdio de pH 7,4.
Preparao Dissolver 6,08 g de trometamina e 8,77 g de
cloreto de sdio em 500 mL de gua destilada. Junte 10 g
de albumina bovina. Ajustar o pH com cido clordrico e
complete 1000 mL com gua destilada.
Tampo tris-cloreto de sdio pH 7,5
Preparao - Dissolver 7,27 g de trometamina e 5,27 g de
cloreto de sdio em 950 mL de gua. Ajustar o pH em 7,5
com cido clordrico 2 M e completar com gua a 1000 mL.
Tampo borato pH 8,0
Preparao Misturar 0,619 g de cido brico e 0,746 g
cloreto de potssio em 50 mL de gua. Adicionar 3,97 mL
de hidrxido de sdio 0,2 M e diluir para 200 mL de gua.
Tampo de barbital de pH 8,4
Preparao Dissolver 8,25 g de barbital sdico em gua
e completar a 1000 mL com o mesmo solvente. Ajustar o
pH se necessrio.
Tampo de trometamina-EDTA de pH 8,4.
Preparao Dissolver 5,12 g de cloreto de sdio, 3,03 g
de trometamina e 1,40 g de iodeto de sdio em 250 mL gua
destilada. Ajuste o pH com cido clordrico e complete 500
mL com gua destilada.
a
14
Tampo de tris-EDTA ASB de pH 8,4
Preparao Dissolver 6,1 g de trometamina, 2,8
g de iodeto de sdio, 10,2 g de cloreto de sdio e 10 g
de albumina bovina em gua, ajustar o pH com cido
clordrico M e completar para 1000 mL com gua.
Tampo acetato de amnio pH 8,5
1000 mL de etanol a 20% (v/v). Ajustar o pH em 8,5 com
dibsico anidro e 4,5 g de cloreto de sdio em 500 mL
de gua. Ajustar o pH em 8,5 com uma mistura de gua e
cido fosfrico (1:1).
Tampo barbital pH 8,6
Preparao Misturar 129 mL de cido clordrico 0,1 M
adicionar volume sufciente de barbital sdico 0,1 M para
completar 1000 mL. Ajustar o pH se necessrio.
Preparao Misturar 2,3 volumes de hidrxido de sdio
0,2 M, com 2,5 volumes de fosfato de potssio monobsico
0,2 M e 2 volumes de metanol. Resfriar e misturar com gua
para obter 10 volumes de soluo. Ajustar, se necessrio, o
pH para 8,60 0,05 com hidrxido de sdio.
Tampo de tris-cloridrato 1,5 M pH 8,8
Preparao Dissolver 90,8 g de trometamina em 400 mL
de gua. Ajustar o pH para 8,8 com cido clordrico e diluir
Tampo borato pH 9,0
Preparao Dissolver 12,37 g de cido brico e 14,91
g de cloreto de potssio em gua e completar o volume
para 1000 mL com o mesmo solvente. Transferir 50 mL
da soluo obtida para balo volumtrico de 200 mL,
adicionar 20 mL de hidrxido de sdio 0,2 M e 120 mL de
gua. Ajustar o pH em 9,0 com hidrxido de sdio SR ou
cido clordrico SR e completar o volume com gua.
Tampo tris 0,05 M pH 9,0
Preparao Transferir 6,05 g de trometamina para balo
volumtrico de 1000 mL. Dissolver em gua e completar o
volume com o mesmo solvente. Ajustar o pH em 9,0 0,05
utilizando cido fosfrico. Dissolver 10 g de laurilsulfato
de sdio em cerca de 600 mL do tampo. Misturar a soluo
obtida com o restante do tampo.
Tampo borato pH 9,6
Preparao Transferir 3,093 g de cido brico e 3,728
g de cloreto de potssio para balo volumtrico de 1000
mL, adicionar 250 mL de gua e agitar at dissoluo.
Acrescentar 182 mL de hidrxido de sdio 0,2 M e
completar o volume com gua. Ajustar o pH se necessrio.
Tampo carbonato-bicarbonato de sdio pH 9,6
Preparao Dissolver 0,75 g de carbonato de sdio e 1,5
g de bicarbonato de sdio em 500 mL de gua. Distribuir
em recipientes com 50 mL cada. Autoclavar a 121 C,
presso de 1 atm, por 20 minutos. Estocar a 4 C.
Tampo cloreto de amnio pH 10,0
Preparao Dissolver 5,4 g de cloreto de amnio em 70
mL de hidrxido de amnio 5 M e diluir com gua a 100 mL.
Tampo cloreto de amnio pH 10,7
Preparao Dissolver 67,5 g de cloreto de amnio em
gua, adicionar 570 mL de soluo concentrada de amnia
e diluir para 1000 mL com gua. Ajustar o pH se necessrio.
Tampo fosfato-laurilsulfato de sdio pH 11,0
Preparao Dissolver em gua 16,35 g de fosfato de
sdio monobsico, 7,05 g de hidrxido de sdio e 3 g de
laurilsulfato de sdio e diluir com gua para 1000 mL.
Tampo cido actico-acetato de amnio
Preparao Dissolver 77,1 g de acetato de amnio em
gua, adicionar 57,0 mL de cido actico glacial e completar
com gua a 1000 mL. Ajustar o pH se necessrio.
Tampo de eletroforese DSS-EGPA
Preparao Dissolver 151,4 g de trometamina, 721 g de
glicina e 50 g laurilsulfato de sdio em gua e completar
5000 mL com o mesmo solvente. Diluir a 1:10 com gua,
imediatamente antes do uso. O pH da soluo diluda deve
estar compreendido entre 8,1 e 8,8.
Tampo concentrado para amostras DSS-EGPA.
laurilsulfato de sdio e 50 mg de azul de bromofenol em
gua; juntar 25 mL de glicerina e completar para 100 mL
com gua. Ajustar o pH para 6,8 com cido clordrico e
completar para 125 mL com gua.
Tampo concentrado para amostras DSS-EGPA em
condies redutoras
laurilsulfato de sdio, 100 mg de azul de bromofenol
e 50 mL de glicerina em 200 mL de gua. Juntar 25 mL
de 2-mercaptoetanol. Ajustar o pH para 6,8 com cido
clordrico e completar para 250 mL com gua. Em vez do
2-mercaptoetanol, pode ser usado o ditiotreitol como agente
redutor. Nesse caso, proceda como se indica: dissolva
3,78 g de trometamina, 10 g de laurilsulfato de sdio, 100
mg de azul de bromofenol e 50 mL de glicerina em 200
14
mL de gua. Ajustar o pH para 6,8 com cido clordrico
e completar para 250 mL com gua. Imediatamente antes
do emprego, adicionar o ditiotreitol, de modo a obter uma
concentrao fnal de 0,1 M.
Tampo fosfato-salina (PBS)
Preparao Dissolver, com agitao, 24 g de cloreto de
sdio, 0,6 g de cloreto de potssio, 4,3 g de fosfato de sdio
dibsico dodeca-hidratado e 0,6 g de fosfato de potssio
monobsico em 4 L de gua. Autoclavar a 121 C, presso
de 1 atm, por 20 minutos. Estocar a 4 C.
Tampo sulfato cprico
Soluo A Dissolver 15,22 g de fosfato de sdio dibsico
anidro em quantidade sufciente de gua. Adicionar 9,75 g
de cido ctrico monoidratado e diluir para 1000 mL com
gua. Ajustar o pH em 5,2 com auxlio de hidrxido de
sdio ou cido ctrico.
Soluo B Dissolver 0,313 g de sulfato cprico penta-
hidratado em gua e diluir para 100 mL com o mesmo
solvente.
Preparao No momento do uso misturar 15 mL da
Soluo B com 985 mL da Soluo A.
a
A
ANEXO A - TABELA PERIDICA DOS
ELEMENTOS QUMICOS - NOMES,
SMBOLOS E MASSAS ATMICAS
A Tabela A.1 recomendada pela International Union of Pure and Applied Chemistry IUPAC de 2007. As massas
atmicas se baseiam na massa do
12
C = 12.
Tabela A.1 - Elementos qumicos - nomes, smbolos e massas atmicas.
1
H
1,0079
Tabela Peridica dos Elementos Qumicos
2
He
4,0026
3
Li
6,941
4
Be
9,0122
5
B
10,811
6
C
12,011
7
N
14,007
8
O
15,999
9
F
18,998
10
Ne
20,180
11
Na
22,990
12
Mg
24,305
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
13
Al
26,982
14
Si
28,086
15
P
30,974
16
S
32,065
17
Cl
35,453
18
Ar
39,948
19
K
39,098
20
Ca
40,078
21
Sc
44,956
22
Ti
47,867
23
V
50,942
24
Cr
51,996
25
Mn
54,938
26
Fe
55,845
27
Co
58,933
28
Ni
58,693
29
Cu
63,546
30
Zn
65,38
31
Ga
69,723
32
Ge
72,64
33
As
74,922
34
Se
78,96
35
Br
79,904
36
Kr
83,798
37
Rb
85,468
38
Sr
87,62
39
Y
88,906
40
Zr
91,224
41
Nb
92,906
42
Mo
95,96
43
Tc
-
44
Ru
101,07
45
Rh
102,91
46
Pd
106,42
47
Ag
107,87
48
Cd
112,41
49
In
114,82
50
Sn
118,71
51
Sb
121,76
52
Te
127,60
53
I
126,90
54
Xe
131,29
55
Cs
132,91
56
Ba
137,33
57-71
72
Hf
178,49
73
Ta
180,95
74
W
183,84
75
Re
186,21
76
Os
190,23
77
Ir
192,22
78
Pt
195,08
79
Au
196,97
80
Hg
200,59
81
Tl
204,38
82
Pb
207,2
83
Bi
208,98
84
Po
-
85
At
-
86
Rn
-
87
Fr
-
88
Ra
-
89-103
104
Rf
-
105
Db
-
106
Sg
-
107
Bh
-
108
Hs
-
109
Mt
-
110
Ds
-
111
Rg
-

57
La
138,91
58
Ce
140,12
59
Pr
140,91
60
Nd
144,24
61
Pm
-
62
Sm
150,36
63
Eu
151,96
64
Gd
157,25
65
Tb
158,93
66
Dy
162,50
67
Ho
164,93
68
Er
167,26
69
Tm
168,93
70
Yb
173,05
71
Lu
174,97
89
Ac
-
90
Th
232,04
91
Pa
231,04
92
U
238,03
93
Np
-
94
Pu
-
95
Am
-
96
Cm
-
97
Bk
-
98
Cf
-
99
Es
-
100
Fm
-
101
Md
-
102
No
-
103
Lr
-
A
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B
ANEXO B - UNIDADES DO SISTEMA
INTERNACIONAL (SI) USADAS NA
FARMACOPEIA E AS EQUIVALNCIAS COM
OUTRAS UNIDADES
O sistema internacional possui sete unidades de base, utilizadas como referncia em todas as medies e relacionadas na
Tabela B.1
Tabela B.1 As sete unidades de base do SI.
Grandeza Unidade Smbolo Defnio da unidade
Comprimento
l, h, r, x
Metro m O metro o comprimento do trajeto percorrido pela luz no vcuo
durante um intervalo de tempo de 1/299792458 do segundo. Assim, a
velocidade da luz no vcuo, c
0
, exatamente igual a 299792458 m/s.
Massa
M
quilograma kg igual massa do prottipo internacional do quilograma, m(K), que
exatamente igual a 1 kg.
Tempo
T
segundo s O segundo a durao de 9.192.631.770 perodos da radiao,
correspondente transio entre os dois nveis hiperfnos do estado
fundamental do tomo de csio
133
e se refere ao tomo de csio em
repouso, a uma temperatura de 0K.
Corrente eltrica
I, i
ampere A O ampere a intensidade de uma corrente eltrica constante que,
mantida em dois condutores paralelos, retilneos, de comprimento
infnito, de seo circular desprezvel, e situados distncia de 1
metro entre si, no vcuo, produziria entre estes condutores uma fora
igual a 2 10
-7
newton por metro de comprimento.
Temperatura
termodinmica
T
kelvin K O kelvin, unidade de temperatura termodinmica, a frao 1/273,16
da temperatura termodinmica no ponto trplice da gua. Assim, a
temperatura do ponto trplice da gua, T
pta
, exatamente igual a
273,16 K.
Quantidade de
substncia
N
mol mol 1. O mol a quantidade de matria de um sistema contendo tantas
entidades elementares quantos tomos existem em 0,012 quilograma
de carbono 12.
2. Quando se utiliza o mol, as entidades elementares devem ser
especifcadas, podendo ser tomos, molculas, ons, eltrons, assim
como outras partculas, ou agrupamentos especifcados dessas
partculas.
Assim, a massa molar do carbono 12, M(
12
C), exatamente igual a
12 g/mol. Se refere aos tomos de carbono 12 livres, em repouso e no
seu estado fundamental.
Intensidade
luminosa
Iv
candela cd A candela a intensidade luminosa, numa dada direo de uma fonte
que emite uma radiao monocromtica de frequncia 540 x 10
12

hertz e cuja intensidade energtica nessa direo 1/683 watt por
esterradiano.
Assim, a efccia luminosa espectral, K, da radiao monocromtica
de frequncia 540 x 10
12
Hz exatamente igual a 683 lm/W.
B
Todas as outras grandezas so descritas como grandezas derivadas e medidas como unidades derivadas. Na Tabela B.2
esto listadas algumas grandezas derivadas.
Tabela B.2 Algumas grandezas derivadas.
Grandeza derivada Representao Unidade derivada Smbolo
rea A metro quadrado m
2
volume v metro cbico m
3
velocidade metro por segundo m/s
acelerao a metro por segundo ao quadrado m/s
2
nmero de ondas o, inverso do metro m
-1
massa especfca
quilograma por metro cbico kg/m

3
densidade superfcial
A
quilograma por metro quadrado kg/m
2
volume especfco metro cbico por quilograma m
3
/kg
densidade de corrente j ampere por metro quadrado A/m
2
campo magntico H ampere por metro A/m
concentrao c mol por metro cbico mol/m
3
densidade de massa , quilograma por metro cbico kg/m
3
luminncia Lv candela por metro quadrado cd/m
2
ndice de refrao n um 1
permeabilidade relativa
r
um 1
Note que o ndice de refrao e a permeabilidade relativa so exemplos de grandezas adimensionais, para as quais a
unidade do SI o nmero um (1), embora esta unidade no seja escrita.
Algumas unidades derivadas recebem nome especial, sendo esse simplesmente uma forma compacta de expresso de
combinaes de unidades de base que so usadas frequentemente. Ento, por exemplo, o joule, smbolo J, por defnio,
igual a m
2
kg s
-2
. Existem atualmente 22 nomes especiais para unidades aprovados para uso no SI, que esto listados na
Tabela B.3.
Tabela B.3 - Unidades derivadas com nomes especiais no SI.
Grandeza derivada
Nome da unidade
derivada
Smbolo da
unidade
Expresso em
termos de outras
unidades
ngulo plano radiano rad m/m = 1
ngulo slido esterradiano sr m
2
/m
2
= 1
Frequncia Hertz Hz s
-1
fora newton N m kg s
-2
presso, tenso pascal Pa N/m
2
= m
-1
kg s
-2
energia, trabalho, quantidade de calor Joule J N m = m
2
kg s
-2
potncia, fuxo de energia Watt W J/s = m
2
kg s
-3
carga eltrica, quantidade de eletricidade coulomb C s A
diferena de potencial eltrico Volt V W/A = m
2
kg s
-3
A
-1
Capacitncia Farad F C/V = m
-2
kg
-1
s
4
A
2
resistncia eltrica Ohm V/A = m
2
kg s
-3
A
-2
condutncia eltrica siemens S A/V = m
-2
kg
-1
s
3
A
2
fuxo de induo magntica weber Wb V s = m
2
kg s
-2
A
-1
induo magntica Tesla T Wb/m
2
= kg s
-2
A
-1
Indutncia Henry H Wb/A = m
2
kg s
-2
A
-2
temperatura Celsius grau Celsius
o
C K
fuxo luminoso lumen lm cd sr = cd
iluminncia Lux lx lm/m
2
= m
-2
cd
atividade de um radionucldio becquerel Bq s
-1
dose absorvida, energia especfca (comunicada), kerma Gray Gy J/kg = m
2
s
-2
equivalente de dose, equivalente de dose ambiente sievert Sv J/kg = m
2
s
-2
atividade cataltica Katal kat s
-1
mol
a
B
Embora o hertz e o becquerel sejam iguais ao inverso do
segundo, o hertz usado somente para fenmenos cclicos,
e o becquerel, para processos estocsticos no decaimento
radioativo.
A unidade de temperatura Celsius o grau Celsius,
o
C,
que igual em magnitude ao kelvin, K, a unidade de
temperatura termodinmica. A grandeza temperatura
Celsius t relacionada com a temperatura termodinmica
T pela equao t/
o
C = T/K 273,15.
O sievert, tambm, usado para as grandezas: equivalente
de dose direcional e equivalente de dose individual.
Os quatro ltimos nomes especiais das unidades da Tabela
B.3 foram adotados especifcamente para resguardar
medies relacionadas sade humana.
Para cada grandeza, existe somente uma unidade SI
(embora possa ser expressa frequentemente de diferentes
modos, pelo uso de nomes especiais). Contudo, a mesma
unidade SI pode ser usada para expressar os valores de
diversas grandezas diferentes (por exemplo, a unidade SI
para a relao J/K pode ser usada para expressar tanto o
valor da capacidade calorfca como da entropia). Portanto,
importante no usar a unidade sozinha para especifcar a
grandeza. Isto se aplica tanto aos textos cientfcos como
aos instrumentos de medio (isto , a leitura de sada
de um instrumento deve indicar a grandeza medida e a
unidade).
As grandezas adimensionais, tambm chamadas de
grandezas de dimenso um, so usualmente defnidas
como a razo entre duas grandezas de mesma natureza
(por exemplo, o ndice de refrao a razo entre duas
velocidades, e a permeabilidade relativa a razo entre a
permeabilidade de um meio dieltrico e a do vcuo). Ento
a unidade de uma grandeza adimensional a razo entre
duas unidades idnticas do SI, portanto sempre igual a
um (1). Contudo, ao se expressar os valores de grandezas
adimensionais, a unidade um (1) no escrita.
MLTIPLOS E SUBMLTIPLOS
DAS UNIDADES DO SI
Um conjunto de prefxos foi adotado para uso com as
unidades do SI, a fm de exprimir os valores de grandezas
que so muito maiores ou muito menores do que a unidade
SI usada sem um prefxo. Os prefxos SI esto listados na
Tabela B.4. Eles podem ser usados com qualquer unidade
de base e com as unidades derivadas com nomes especiais.
Tabela B.4 - Mltiplos e submltiplos do SI - Prefxos e smbolos.
Fator Nome Smbolo Fator Nome Smbolo
10
1
Deca Da 10
-1
deci d
10
2
hecto H 10
-2
centi c
10
3
Quilo K 10
-3
mili m
10
6
mega M 10
-6
micro
10
9
Giga G 10
-9
nano n
10
12
Tera T 10
-12
pico p
10
15
Peta P 10
-15
femto f
10
18
Exa E 10
-18
atto a
10
21
Zetta Z 10
-21
zepto z
10
24
Yotta Y 10
-24
yocto y
Quando os prefxos so usados, o nome do prefxo e o da
unidade so combinados para formar uma palavra nica e,
similarmente, o smbolo do prefxo e o smbolo da unidade
so escritos sem espaos, para formar um smbolo nico
que pode ser elevado a qualquer potncia. Por exemplo,
pode-se escrever: quilmetro, km; microvolt, V;
femtosegundo, fs; 50 V/cm = 50 V(10
-2
m)
-1
= 5000 V/m.
Quando as unidades de base e as unidades derivadas so
usadas sem qualquer prefxo, o conjunto de unidades
resultante considerado coerente. O uso de um conjunto
de unidades coerentes tem vantagens tcnicas. Contudo,
o uso dos prefxos conveniente porque ele evita a
necessidade de empregar fatores de 10
n
, para exprimir os
valores de grandezas muito grandes ou muito pequenas.
Por exemplo, o comprimento de uma ligao qumica
mais convenientemente expresso em nanmetros, nm, do
que em metros, m, e a distncia entre Londres e Paris
mais convenientemente expressa em quilmetros, km, do
que em metros, m.
O quilograma, kg, uma exceo, porque embora ele seja
uma unidade de base o nome j inclui um prefxo, por razes
histricas. Os mltiplos e os submltiplos do quilograma
so escritos combinando-se os prefxos com o grama: logo,
escreve-se miligrama, mg, e no microquilograma, kg.
UNIDADES FORA DO SI
O SI o nico sistema de unidades que reconhecido
universalmente, de modo que ele tem uma vantagem
distinta quando se estabelece um dilogo internacional.
Outras unidades, isso , unidades no SI, so geralmente
defnidas em termos de unidades SI. O uso do SI, tambm,
simplifca o ensino da cincia. Por todas essas razes
o emprego das unidades SI recomendado em todos os
campos da cincia e da tecnologia.
Embora algumas unidades no SI sejam ainda amplamente
usadas, outras, a exemplo do minuto, da hora e do dia, como
unidades de tempo, sero sempre usadas porque elas esto
arraigadas profundamente na nossa cultura. Outras so
usadas, por razes histricas, para atender s necessidades
B
Tabela B.5 Algumas unidades no SI.
Grandeza Unidade Smbolo Relao com o SI
Tempo Minuto min 1 min = 60 s
Hora h 1 h = 3600 s
Dia d 1 d = 86400 s
Volume Litro L 1 L = 1 dm
3
Massa Tonelada t 1 t = 1000 kg
Energia Eltronvolt eV 1 eV ~ 1,602 x 10
-19
J
Presso Bar bar 1 bar = 100 kPa = 750,064 mm Hg = 0,987 atm
milmetro de mercrio mm Hg 1 mm Hg = 133,322 Pa = 10
-3
bar = 10
-3
atm
760 mm Hg = 1 atm = 1, 013 bar = 101,324 kPa
Comprimento Angstrom
1
1 = 10
-10
m
milha nutica M 1 M = 1852 m
Fora Dina dyn 1 dyn = 10
-5
N
Energia Erg erg 1 erg = 10
-7
J
__________________________
1
O Dicionrio Houaiss da Lngua Portuguesa admite essa palavra grafada sem o smbolo sobre o a.
Tabela B.6 Outros exemplos de unidades fora do SI.
Nome Smbolo Valor em unidade SI Descrio
curie Ci 1 Ci = 3,7 x 10
10
Bq Expressa a atividade de
radionucldeos
roentgen R 1 R = 2,58 x 10
-4
C/kg Expressa a exposio s radiaes
X ou
rad Rad ou rd 1 rad = 1 cGy = 10
-2
Gy Expressa a dose absorvida das
radiaes ionizantes.
rem rem 1 rem = 1 cSv = 10
-2
Sv Expressa o equivalente de dose em
radioproteo
torr Torr 1 torr = (101 325/760) Pa Expressa presso. Atualmente est
em desuso.
Atmosfera normal atm 1 atm = 760 mm Hg = 1, 013 bar = 101,324 kPa Expressa a presso atmosfrica
padro. Atualmente est em desuso.
caloria cal 1 cal = 4,18 J Expressa a quantidade de calor
(energia) necessria para elevar de
14,5 C para 15,5 C a temperatura
de 1 grama de gua. Atualmente se
convencionou que 1 Cal = 1000 cal
= 1 kcal.
Os smbolos das unidades comeam com letra maiscula
quando se trata de nome prprio (por exemplo, ampere,
A; kelvin, K; hertz, Hz; coulomb, C). Nos outros casos
eles sempre comeam com letra minscula (por exemplo,
metro, m; segundo, s; mol, mol). O smbolo do litro uma
exceo: a letra maiscula usada para evitar confuso
entre a letra minscula l e o nmero um (1). O smbolo
da milha nutica apresentado aqui como M; contudo no
h um acordo geral sobre nenhum smbolo para a milha
nutica.
Na Tabela B.6 esto listados outros exemplos de unidades
fora do SI e de uso, ainda corrente, mas, que devem ser
evitadas. Quando mencionadas num documento convm
indicar sua equivalncia com a unidade SI.
de grupos com interesses especiais, ou porque no existe
alternativa SI conveniente.
Os cientistas devem ter a liberdade para utilizar unidades
no SI se eles as considerarem mais adequadas ao seu
propsito. Contudo, quando unidades no SI so utilizadas,
o fator de converso para o SI deve ser sempre includo.
Algumas unidades no SI esto listadas na Tabela B.5,
com o seu fator de converso para o SI.
a
B
Os smbolos das unidades so impressos em tipo romano
(vertical), independentemente do tipo usado no restante do
texto. Eles so entidades matemticas e no abreviaturas.
Eles nunca so seguidos por um ponto (exceto no fnal
de uma sentena) nem por um s para formar o plural.
obrigatrio o uso da forma correta para os smbolos das
unidades, conforme ilustrado pelos exemplos apresentados
na publicao completa do SI. Algumas vezes os smbolos
das unidades podem ter mais de uma letra. Eles so
escritos em letras minsculas, exceto que a primeira letra
maiscula quando o nome de uma pessoa. Contudo,
quando o nome de uma unidade escrito por extenso, deve
comear com letra minscula (exceto no incio de uma
sentena), para distinguir o nome da unidade do nome da
pessoa.
Ao se escrever o valor de uma grandeza, como o produto
de um valor numrico e uma unidade, ambos, o nmero
e a unidade devem ser tratados pelas regras ordinrias da
lgebra. Por exemplo, a equao T = 293 K pode ser escrita
igualmente T/K = 293. Esse procedimento descrito como
o uso do clculo de grandezas, ou a lgebra de grandezas.
s vezes essa notao til para identifcar o cabealho de
colunas de tabelas, ou a denominao dos eixos de grfcos,
de modo que as entradas na tabela ou a identifcao dos
pontos sobre os eixos so simples nmeros.
Na formao de produtos ou quocientes de unidades,
aplicam-se as regras normais da lgebra. Na formao de
produtos de unidades, deve-se deixar um espao entre as
unidades (alternativamente pode-se colocar um ponto na
meia altura da linha, como smbolo de multiplicao).
Na formao de nmeros o marcador decimal pode ser ou
um ponto ou uma vrgula, de acordo com as circunstncias
apropriadas. Para documentos na lngua inglesa usual
o ponto, mas no Brasil e para muitas lnguas da Europa
continental e em outros pases, a vrgula de uso mais
comum.
Quando um nmero tem muitos dgitos usual grupar-
se os algarismos em blocos de trs, antes e depois da
vrgula, para facilitar a leitura. Isso no essencial, mas
feito frequentemente, e geralmente muito til. Quando
isso feito, os grupos de trs dgitos devem ser separados
por apenas um espao estreito; no se deve usar nem um
ponto e nem uma vrgula entre eles. A incerteza do valor
numrico de uma grandeza pode ser convenientemente
expressa, explicitando-se a incerteza dos ltimos dgitos
signifcativos, entre parnteses, depois do nmero.
Exemplo: 123 456,789 0
Para informaes adicionais, ver o website do BIPM http://
www.bipm.org ou a Publicao completa do SI, 8a edio,
que est disponvel no site http://www.bipm.org/en/si.
a
C
ANEXO C SOLVENTES PARA
CROMATOGRAFIA
Os solventes para cromatografa e suas caractersticas esto listados na Tabela C. 1.
T
a
b
e
l
a

C
.
1

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1
,
8
5
a
D
ANEXO D ALCOOMETRIA
Tabela D.1 Tabela Alcoomtrica (20 C)
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
0,0 0,0 998,20 0,999997
0,1 0,08 998,05 0,999846
0,2 0,16 997,90 0,999696
0,3 0,24 997,75 0,999546
0,4 0,32 997,59 0,999386
0,5 0,40 997,44 0,999235
0,6 0,47 997,29 0,999085
0,7 0,55 997,14 0,998935
0,8 0,63 996,99 0,998785
0,9 0,71 996,85 0,998644
1,0 0,79 996,70 0,998494
1,1 0,87 996,55 0,998344
1,2 0,95 996,40 0,998194
1,3 1,03 996,25 0,998043
1,4 1,11 996,11 0,997903
1,5 1,19 995,96 0,997753
1,6 1,27 995,81 0,997602
1,7 1,35 995,67 0,997462
1,8 1,43 995,52 0,997312
1,9 1,51 995,38 0,997172
2,0 1,59 995,23 0,997021
2,1 1,67 995,09 0,996881
2,2 1,75 994,94 0,996731
2,3 1,82 994,80 0,996591
2,4 1,90 994,66 0,996450
2,5 1,98 994,51 0,996300
2,6 2,06 994,37 0,996160
2,7 2,14 994,23 0,996020
2,8 2,22 994,09 0,995879
2,9 2,30 993,95 0,995739
3,0 2,38 993,81 0,995599
3,1 2,46 993,66 0,995449
3,2 2,54 993,52 0,995308
3,3 2,62 993,38 0,995168
3,4 2,70 993,24 0,995028
3,5 2,78 993,11 0,994898
3,6 2,86 992,97 0,994757
3,7 2,94 992,83 0,994617
3,8 3,02 992,69 0,994477
3,9 3,10 992,55 0,994337
526 Farmacopeia Brasileira, 5 edio Farmacopeia Brasileira, 5 edio
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
4,0 3,18 992,41 0,994196
4,1 3,26 992,28 0,994066
4,2 3,34 992,14 0,993926
4,3 3,42 992,00 0,993786
4,4 3,50 991,87 0,993655
4,5 3,58 991,73 0,993515
4,6 3,66 991,59 0,993375
4,7 3,74 991,46 0,993245
4,8 3,82 991,32 0,993104
4,9 3,90 991,19 0,992974
5,0 3,98 991,06 0,992844
5,1 4,06 990,92 0,992704
5,2 4,14 990,79 0,992573
5,3 4,22 990,65 0,992433
5,4 4,30 990,52 0,992303
5,5 4,38 990,39 0,992173
5,6 4,46 990,26 0,992042
5,7 4,54 990,12 0,991902
5,8 4,62 989,99 0,991772
5,9 4,70 989,86 0,991642
6,0 4,78 989,73 0,991512
6,1 4,87 989,60 0,991381
6,2 4,95 989,47 0,991251
6,3 5,03 989,34 0,991121
6,4 5,11 989,21 0,990991
6,5 5,19 989,08 0,990860
6,6 5,27 988,95 0,990730
6,7 5,35 988,82 0,990600
6,8 5,43 988,69 0,990470
6,9 5,51 988,56 0,990339
7,0 5,59 988,43 0,990209
7,1 5,67 988,30 0,990079
7,2 5,75 988,18 0,989959
7,3 5,83 988,05 0,989828
7,4 5,91 987,92 0,989698
7,5 5,99 987,79 0,989568
7,6 6,07 987,67 0,989448
7,7 6,15 987,54 0,989318
7,8 6,23 987,42 0,989197
7,9 6,32 987,29 0,989067
8,0 6,40 987,16 0,988937
8,1 6,48 987,04 0,988817
8,2 6,56 986,91 0,988686
8,3 6,64 986,79 0,988566
8,4 6,72 986,66 0,988436
8,5 6,80 986,54 0,988316
8,6 6,88 986,42 0,988196
8,7 6,96 986,29 0,988065
8,8 7,04 986,17 0,987945
8,9 7,12 986,05 0,987825
Tabela D.1 (continuao)
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
9,0 7,20 985,92 0,987695
9,1 7,29 985,80 0,987574
9,2 7,37 985,68 0,987454
9,3 7,45 985,56 0,987334
9,4 7,53 985,44 0,987214
9,5 7,61 985,31 0,987084
9,6 7,69 985,19 0,986963
9,7 7,77 985,07 0,986843
9,8 7,85 984,95 0,986723
9,9 7,93 984,83 0,986603
10,0 8,01 984,71 0,986482
10,1 8,10 984,59 0,986362
10,2 8,18 984,47 0,986242
10,3 8,26 984,35 0,986122
10,4 8,34 984,23 0,986002
10,5 8,42 984,11 0,985881
10,6 8,50 983,99 0,985761
10,7 8,58 983,88 0,985651
10,8 8,66 983,76 0,985531
10,9 8,75 983,64 0,985411
11,0 8,83 983,52 0,985290
11,1 8,91 983,40 0,985170
11,2 8,99 983,29 0,985060
11,3 9,07 983,17 0,984940
11,4 9,15 983,05 0,984819
11,5 9,23 982,94 0,984709
11,6 9,32 982,82 0,984589
11,7 9,40 982,70 0,984469
11,8 9,48 982,59 0,984359
11,9 9,56 982,47 0,984238
12,0 9,64 982,35 0,984118
12,1 9,72 982,24 0,984008
12,2 9,80 982,12 0,983888
12,3 9,89 982,01 0,983778
12,4 9,97 981,89 0,983657
12,5 10,05 981,78 0,983547
12,6 10,13 981,67 0,983437
12,7 10,21 981,55 0,983317
12,8 10,29 981,44 0,983207
12,9 10,37 981,32 0,983086
13,0 10,46 981,21 0,982976
13,1 10,54 981,10 0,982866
13,2 10,62 980,98 0,982746
13,3 10,70 980,87 0,982636
13,4 10,78 980,76 0,982525
13,5 10,87 980,64 0,982405
13,6 10,95 980,53 0,982295
13,7 11,03 980,42 0,982185
13,8 11,11 980,31 0,982075
13,9 11,19 980,19 0,981954
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
14,0 11,27 980,08 0,981844
14,1 11,36 979,97 0,981734
14,2 11,44 979,86 0,981624
14,3 11,52 979,75 0,981514
14,4 11,60 979,64 0,981403
14,5 11,68 979,52 0,981283
14,6 11,77 979,41 0,981173
14,7 11,85 979,30 0,981063
14,8 11,93 979,19 0,980953
14,9 12,01 979,08 0,980842
15,0 12,09 978,97 0,980732
15,1 12,17 978,86 0,980622
15,2 12,26 978,75 0,980512
15,3 12,34 978,64 0,980402
15,4 12,42 978,53 0,980291
15,5 12,50 978,42 0,980181
15,6 12,59 978,31 0,980071
15,7 12,67 978,20 0,979961
15,8 12,75 978,09 0,979851
15,9 12,83 977,98 0,979740
16,0 12,91 977,87 0,979630
16,1 13,00 977,76 0,979520
16,2 13,08 977,65 0,979410
16,3 13,16 977,55 0,979310
16,4 13,24 977,44 0,979199
16,5 13,32 977,33 0,979089
16,6 13,41 977,22 0,978979
16,7 13,49 977,11 0,978869
16,8 13,57 977,00 0,978759
16,9 13,65 976,89 0,978648
17,0 13,74 976,79 0,978548
17,1 13,82 976,68 0,978438
17,2 13,90 976,57 0,978328
17,3 13,98 976,46 0,978218
17,4 14,07 976,35 0,978107
17,5 14,15 976,25 0,978007
17,6 14,23 976,14 0,977897
17,7 14,31 976,03 0,977787
17,8 14,40 975,92 0,977677
17,9 14,48 975,81 0,977566
18,0 14,56 975,71 0,977466
18,1 14,64 975,60 0,977356
18,2 14,73 975,49 0,977246
18,3 14,81 975,38 0,977136
18,4 14,89 975,28 0,977036
18,5 14,97 975,17 0,976925
18,6 15,06 975,06 0,976815
18,7 15,14 974,95 0,976705
18,8 15,22 974,85 0,976605
18,9 15,30 974,74 0,976495
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
19,0 15,39 974,63 0,976384
19,1 15,47 974,52 0,976274
19,2 15,55 974,42 0,976174
19,3 15,63 974,31 0,976064
19,4 15,72 974,20 0,975954
19,5 15,80 974,09 0,975843
19,6 15,88 973,99 0,975743
19,7 15,97 973,88 0,975633
19,8 16,05 973,77 0,975523
19,9 16,13 973,66 0,975413
20,0 16,21 973,56 0,975312
20,1 16,30 973,45 0,975202
20,2 16,38 973,34 0,975092
20,3 16,46 973,24 0,974992
20,4 16,55 973,13 0,974882
20,5 16,63 973,02 0,974771
20,6 16,71 972,91 0,974661
20,7 16,79 972,80 0,974551
20,8 16,88 972,70 0,974451
20,9 16,96 972,59 0,974341
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21,1 17,13 972,37 0,974120
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21,3 17,29 972,16 0,973910
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21,5 17,46 971,94 0,973689
21,6 17,54 971,83 0,973579
21,7 17,63 971,73 0,973479
21,8 17,71 971,62 0,973369
21,9 17,79 971,51 0,973259
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22,1 17,96 971,29 0,973038
22,2 18,04 971,18 0,972928
22,3 18,12 971,08 0,972828
22,4 18,21 970,97 0,972718
22,5 18,29 970,86 0,972608
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22,8 18,54 970,53 0,972277
22,9 18,62 970,42 0,972167
23,0 18,71 970,31 0,972057
23,1 18,79 970,20 0,971946
23,2 18,87 970,09 0,971836
23,3 18,96 969,98 0,971726
23,4 19,04 969,87 0,971616
23,5 19,13 969,76 0,971506
23,6 19,21 969,65 0,971395
23,7 19,29 969,54 0,971285
23,8 19,38 969,43 0,971175
23,9 19,46 969,32 0,971065
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
24,0 19,54 969,21 0,970955
24,1 19,63 969,10 0,970844
24,2 19,71 968,99 0,970734
24,3 19,79 968,88 0,970624
24,4 19,88 968,77 0,970514
24,5 19,96 968,66 0,970404
24,6 20,05 968,55 0,970293
24,7 20,13 968,43 0,970173
24,8 20,21 968,32 0,970063
24,9 20,30 968,21 0,969953
25,0 20,38 968,10 0,969843
25,1 20,47 967,99 0,969732
25,2 20,55 967,87 0,969612
25,3 20,63 967,76 0,969502
25,4 20,72 967,65 0,969392
25,5 20,80 967,53 0,969272
25,6 20,89 967,42 0,969161
25,7 20,97 967,31 0,969051
25,8 21,05 967,19 0,968931
25,9 21,14 967,08 0,968821
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26,1 21,31 966,85 0,968590
26,2 21,39 966,74 0,968480
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26,9 21,98 965,93 0,967669
27,0 22,06 965,81 0,967548
27,1 22,15 965,70 0,967438
27,2 22,23 965,58 0,967318
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27,4 22,40 965,35 0,967088
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27,9 22,82 964,76 0,966497
28,0 22,91 964,64 0,966376
28,1 22,99 964,52 0,966256
28,2 23,08 964,40 0,966136
28,3 23,16 964,28 0,966016
28,4 23,25 964,16 0,965895
28,5 23,33 964,04 0,965775
28,6 23,42 963,92 0,965655
28,7 23,50 963,80 0,965535
28,8 23,59 963,68 0,965415
28,9 23,67 963,56 0,965294
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
29,0 23,76 963,44 0,965174
29,1 23,84 963,32 0,965054
29,2 23,93 963,20 0,964934
29,3 24,01 963,07 0,964804
29,4 24,10 962,95 0,964683
29,5 24,18 962,83 0,964563
29,6 24,27 962,71 0,964443
29,7 24,35 962,58 0,964313
29,8 24,44 962,46 0,964192
29,9 24,52 962,33 0,964062
30,0 24,61 962,21 0,963942
30,1 24,69 962,09 0,963822
30,2 24,78 961,96 0,963692
30,3 24,86 961,84 0,963571
30,4 24,95 961,71 0,963441
30,5 25,03 961,59 0,963321
30,6 25,12 961,46 0,963191
30,7 25,20 961,33 0,963060
30,8 25,29 961,21 0,962940
30,9 25,38 961,08 0,962810
31,0 25,46 960,95 0,962680
31,1 25,55 960,82 0,962549
31,2 25,63 960,70 0,962429
31,3 25,72 960,57 0,962299
31,4 25,80 960,44 0,962169
31,5 25,89 960,31 0,962039
31,6 25,97 960,18 0,961908
31,7 26,06 960,05 0,961778
31,8 26,15 959,92 0,961648
31,9 26,23 959,79 0,961518
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32,1 26,40 959,53 0,961257
32,2 26,49 959,40 0,961127
32,3 26,57 959,27 0,960997
32,4 26,66 959,14 0,960866
32,5 26,75 959,01 0,960736
32,6 26,83 958,87 0,960596
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32,8 27,00 958,61 0,960335
32,9 27,09 958,47 0,960195
33,0 27,18 958,34 0,960065
33,1 27,26 958,20 0,959925
33,2 27,35 958,07 0,959795
33,3 27,44 957,94 0,959664
33,4 27,52 957,80 0,959524
33,5 27,61 957,66 0,959384
33,6 27,69 957,53 0,959254
33,7 27,78 957,39 0,959113
33,8 27,87 957,26 0,958983
33,9 27,95 957,12 0,958843
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
34,0 28,04 956,98 0,958703
34,1 28,13 956,84 0,958562
34,2 28,21 956,70 0,958422
34,3 28,30 956,57 0,958292
34,4 28,39 956,43 0,958152
34,5 28,47 956,29 0,958011
34,6 28,56 956,15 0,957871
34,7 28,65 956,01 0,957731
34,8 28,73 955,87 0,957591
34,9 28,82 955,73 0,957450
35,0 28,91 955,59 0,957310
35,1 28,99 955,45 0,957170
35,2 29,08 955,30 0,957020
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35,4 29,26 955,02 0,956739
35,5 29,34 954,88 0,956599
35,6 29,43 954,73 0,956449
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35,9 29,69 954,30 0,956018
36,0 29,78 954,15 0,955867
36,1 29,87 954,01 0,955727
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36,7 30,39 953,13 0,954846
36,8 30,48 952,98 0,954695
36,9 30,56 952,83 0,954545
37,0 30,65 952,69 0,954405
37,1 30,74 952,54 0,954255
37,2 30,83 952,39 0,954104
37,3 30,92 952,24 0,953954
37,4 31,00 952,09 0,953804
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37,8 31,35 951,48 0,953193
37,9 31,44 951,33 0,953042
38,0 31,53 951,18 0,952892
38,1 31,62 951,02 0,952732
38,2 31,71 950,87 0,952582
38,3 31,79 950,72 0,952431
38,4 31,88 950,56 0,952271
38,5 31,97 950,41 0,952121
38,6 32,06 950,25 0,951960
38,7 32,15 950,10 0,951810
38,8 32,24 949,94 0,951650
38,9 32,32 949,79 0,951500
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
39,0 32,41 949,63 0,951339
39,1 32,50 949,47 0,951179
39,2 32,59 949,32 0,951029
39,3 32,68 949,16 0,950868
39,4 32,77 949,00 0,950708
39,5 32,86 948,84 0,950548
39,6 32,94 948,68 0,950388
39,7 33,03 948,52 0,950227
39,8 33,12 948,37 0,950077
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40,0 33,30 948,05 0,949756
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40,3 33,57 947,56 0,949266
40,4 33,66 947,40 0,949105
40,5 33,74 947,24 0,948945
40,6 33,83 947,08 0,948785
40,7 33,92 946,91 0,948614
40,8 34,01 946,75 0,948454
40,9 34,10 946,58 0,948284
41,0 34,19 946,42 0,948124
41,1 34,28 946,26 0,947963
41,2 34,37 946,09 0,947793
41,3 34,46 945,93 0,947633
41,4 34,55 945,76 0,947462
41,5 34,64 945,59 0,947292
41,6 34,73 945,43 0,947132
41,7 34,82 945,26 0,946961
41,8 34,91 945,09 0,946791
41,9 35,00 944,93 0,946631
42,0 35,09 944,76 0,946461
42,1 35,18 944,59 0,946290
42,2 35,27 944,42 0,946120
42,3 35,36 944,25 0,945950
42,4 35,45 944,08 0,945779
42,5 35,54 943,91 0,945609
42,6 35,63 943,74 0,945439
42,7 35,72 943,57 0,945268
42,8 35,81 943,40 0,945098
42,9 35,90 943,23 0,944928
43,0 35,99 943,06 0,944758
43,1 36,08 942,88 0,944577
43,2 36,17 942,71 0,944407
43,3 36,26 942,54 0,944237
43,4 36,35 942,37 0,944066
43,5 36,44 942,19 0,943886
43,6 36,53 942,02 0,943716
43,7 36,62 941,84 0,943535
43,8 36,71 941,67 0,943365
43,9 36,80 941,49 0,943185
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
44,0 36,89 941,32 0,943014
44,1 36,98 941,14 0,942834
44,2 37,07 940,97 0,942664
44,3 37,16 940,79 0,942483
44,4 37,25 940,61 0,942303
44,5 37,35 940,43 0,942123
44,6 37,44 940,26 0,941952
44,7 37,53 940,08 0,941772
44,8 37,62 939,90 0,941592
44,9 37,71 939,72 0,941411
45,0 37,80 939,54 0,941231
45,1 37,89 939,36 0,941051
45,2 37,98 939,18 0,940871
45,3 38,08 939,00 0,940690
45,4 38,17 938,82 0,940510
45,5 38,26 938,64 0,940330
45,6 38,35 938,46 0,940149
45,7 38,44 938,28 0,939969
45,8 38,53 938,10 0,939789
45,9 38,62 937,91 0,939598
46,0 38,72 937,73 0,939418
46,1 38,81 937,55 0,939238
46,2 38,90 937,36 0,939047
46,3 38,99 937,18 0,938867
46,4 39,08 937,00 0,938687
46,5 39,18 936,81 0,938496
46,6 39,27 936,63 0,938316
46,7 39,36 936,44 0,938126
46,8 39,45 936,26 0,937945
46,9 39,54 936,07 0,937755
47,0 39,64 935,88 0,937565
47,1 39,73 935,70 0,937384
47,2 39,82 935,51 0,937194
47,3 39,91 935,32 0,937004
47,4 40,00 935,14 0,936823
47,5 40,10 934,95 0,936633
47,6 40,19 934,76 0,936443
47,7 40,28 934,57 0,936252
47,8 40,37 934,38 0,936062
47,9 40,47 934,19 0,935872
48,0 40,56 934,00 0,935681
48,1 40,65 933,81 0,935491
48,2 40,75 933,62 0,935301
48,3 40,84 933,43 0,935110
48,4 40,93 933,24 0,934920
48,5 41,02 933,05 0,934729
48,6 41,12 932,86 0,934539
48,7 41,21 932,67 0,934349
48,8 41,30 932,47 0,934148
48,9 41,40 932,28 0,933958
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
49,0 41,49 932,09 0,933768
49,1 41,58 931,90 0,933577
49,2 41,68 931,70 0,933377
49,3 41,77 931,51 0,933187
49,4 41,86 931,32 0,932996
49,5 41,96 931,13 0,932806
49,6 42,05 930,92 0,932596
49,7 42,14 930,73 0,932405
49,8 42,24 930,53 0,932205
49,9 42,33 930,34 0,932015
50,0 42,43 930,14 0,931814
50,1 42,52 929,95 0,931624
50,2 42,61 929,75 0,931424
50,3 42,71 929,55 0,931223
50,4 42,80 929,35 0,931023
50,5 42,90 929,16 0,930832
50,6 42,99 928,96 0,930632
50,7 43,08 928,76 0,930432
50,8 43,18 928,56 0,930231
50,9 43,27 928,36 0,930031
51,0 43,37 928,16 0,929831
51,1 43,46 927,96 0,929630
51,2 43,56 927,77 0,929440
51,3 43,65 927,57 0,929240
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51,5 43,84 927,16 0,928829
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51,7 44,03 926,76 0,928428
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51,9 44,22 926,36 0,928027
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52,1 44,41 925,95 0,927617
52,2 44,50 925,75 0,927416
52,3 44,60 925,55 0,927216
52,4 44,69 925,35 0,927016
52,5 44,79 925,14 0,926805
52,6 44,88 924,94 0,926605
52,7 44,98 924,73 0,926395
52,8 45,07 924,53 0,926194
52,9 45,17 924,32 0,925984
53,0 45,26 924,12 0,925783
53,1 45,36 923,91 0,925573
53,2 45,46 923,71 0,925373
53,3 45,55 923,50 0,925162
53,4 45,65 923,30 0,924962
53,5 45,74 923,09 0,924752
53,6 45,84 922,88 0,924541
53,7 45,93 922,68 0,924341
53,8 46,03 922,47 0,924130
53,9 46,13 922,26 0,923920
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
54,0 46,22 922,06 0,923720
54,1 46,32 921,85 0,923509
54,2 46,41 921,64 0,923299
54,3 46,51 921,43 0,923089
54,4 46,61 921,22 0,922878
54,5 46,70 921,01 0,922668
54,6 46,80 920,80 0,922457
54,7 46,90 920,59 0,922247
54,8 46,99 920,38 0,922037
54,9 47,09 920,17 0,921826
55,0 47,18 919,96 0,921616
55,1 47,28 919,75 0,921406
55,2 47,38 919,54 0,921195
55,3 47,47 919,33 0,920985
55,4 47,57 919,12 0,920774
55,5 47,67 918,91 0,920564
55,6 47,77 918,69 0,920344
55,7 47,86 918,48 0,920133
55,8 47,96 918,27 0,919923
55,9 48,06 918,06 0,919713
56,0 48,15 917,84 0,919492
56,1 48,25 917,63 0,919282
56,2 48,35 917,42 0,919071
56,3 48,45 917,22 0,918871
56,4 48,54 916,99 0,918641
56,5 48,64 916,77 0,918420
56,6 48,74 916,56 0,918210
56,7 48,84 916,35 0,917999
56,8 48,94 916,13 0,917779
56,9 49,03 915,91 0,917559
57,0 49,13 915,70 0,917348
57,1 49,23 915,48 0,917128
57,2 49,32 915,27 0,916917
57,3 49,42 915,05 0,916697
57,4 49,52 914,83 0,916477
57,5 49,62 914,62 0,916266
57,6 49,72 914,40 0,916046
57,7 49,81 914,18 0,915826
57,8 49,91 913,97 0,915615
57,9 50,01 913,75 0,915395
58,0 50,11 913,53 0,915174
58,1 50,21 913,31 0,914954
58,2 50,31 913,09 0,914734
58,3 50,40 912,87 0,914513
58,4 50,50 912,65 0,914293
58,5 50,60 912,43 0,914072
58,6 50,70 912,22 0,913862
58,7 50,80 912,00 0,913642
58,8 50,90 911,78 0,913421
58,9 51,00 911,55 0,913191
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
59,0 51,10 911,33 0,912970
59,1 51,19 911,11 0,912750
59,2 51,29 910,89 0,912530
59,3 51,39 910,67 0,912309
59,4 51,49 910,45 0,912089
59,5 51,59 910,23 0,911868
59,6 51,69 910,01 0,911648
59,7 51,79 909,78 0,911418
59,8 51,89 909,56 0,911197
59,9 51,99 909,34 0,910977
60,0 52,09 909,11 0,910746
60,1 52,19 908,89 0,910526
60,2 52,29 908,67 0,910306
60,3 52,39 908,44 0,910075
60,4 52,49 908,22 0,909855
60,5 52,59 908,00 0,909634
60,6 52,69 907,77 0,909404
60,7 52,79 907,55 0,909184
60,8 52,89 907,32 0,908953
60,9 52,99 907,10 0,908733
61,0 53,09 906,87 0,908502
61,1 53,19 906,64 0,908272
61,2 53,29 906,42 0,908052
61,3 53,39 906,19 0,907821
61,4 53,49 905,97 0,907601
61,5 53,59 905,74 0,907370
61,6 53,69 905,51 0,907140
61,7 53,79 905,29 0,906920
61,8 53,89 905,06 0,906689
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62,2 54,30 904,15 0,905777
62,3 54,40 903,92 0,905547
62,4 54,50 903,69 0,905317
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62,9 55,00 902,54 0,904165
63,0 55,11 902,31 0,903934
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63,2 55,31 901,85 0,903473
63,3 55,41 901,62 0,903243
63,4 55,51 901,39 0,903013
63,5 55,61 901,15 0,902772
63,6 55,72 900,92 0,902542
63,7 55,82 900,69 0,902311
63,8 55,92 900,46 0,902081
63,9 56,02 900,23 0,901850
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
64,0 56,12 899,99 0,901610
64,1 56,23 899,76 0,901380
64,2 56,33 899,53 0,901149
64,3 56,43 899,29 0,900909
64,4 56,53 899,06 0,900678
64,5 56,64 898,83 0,900448
64,6 56,74 898,59 0,900207
64,7 56,84 898,36 0,899977
64,8 56,94 898,12 0,899737
64,9 57,05 897,89 0,899506
65,0 57,15 897,65 0,899266
65,1 57,25 897,42 0,899035
65,2 57,36 897,18 0,898795
65,3 57,46 896,94 0,898554
65,4 57,56 896,71 0,898324
65,5 57,67 896,47 0,898084
65,6 57,77 896,23 0,897843
65,7 57,87 896,00 0,897613
65,8 57,98 895,76 0,897372
65,9 58,08 895,52 0,897132
66,0 58,18 895,28 0,896892
66,1 58,29 895,05 0,896661
66,2 58,39 894,81 0,896421
66,3 58,49 894,57 0,896180
66,4 58,60 894,33 0,895940
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66,9 59,12 893,13 0,894738
67,0 59,22 892,89 0,894497
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67,2 59,43 892,41 0,894016
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67,4 59,64 891,93 0,893535
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67,6 59,85 891,45 0,893055
67,7 59,95 891,20 0,892804
67,8 60,06 890,96 0,892564
67,9 60,16 890,72 0,892323
68,0 60,27 890,48 0,892083
68,1 60,37 890,23 0,891832
68,2 60,48 889,99 0,891592
68,3 60,58 889,75 0,891352
68,4 60,69 889,50 0,891101
68,5 60,80 889,26 0,890861
68,6 60,90 889,01 0,890610
68,7 61,01 888,77 0,890370
68,8 61,11 888,52 0,890119
68,9 61,22 888,28 0,889879
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
69,0 61,32 888,03 0,889628
69,1 61,43 887,79 0,889388
69,2 61,54 887,54 0,889138
69,3 61,64 887,29 0,888887
69,4 61,75 887,05 0,888647
69,5 61,85 886,80 0,888396
69,6 61,96 886,55 0,888146
69,7 62,07 886,31 0,887905
69,8 62,17 886,06 0,887655
69,9 62,28 885,81 0,887404
70,0 62,39 885,56 0,887154
70,1 62,49 885,31 0,886904
70,2 62,60 885,06 0,886653
70,3 62,71 884,82 0,886413
70,4 62,81 884,57 0,886162
70,5 62,92 884,32 0,885912
70,6 63,03 884,07 0,885661
70,7 63,13 883,82 0,885411
70,8 63,24 883,57 0,885160
70,9 63,35 883,32 0,884910
71,0 63,46 883,06 0,884650
71,1 63,56 882,81 0,884399
71,2 63,67 882,56 0,884149
71,3 63,78 882,31 0,883898
71,4 63,89 882,06 0,883648
71,5 63,99 881,81 0,883397
71,6 64,10 881,55 0,883137
71,7 64,21 881,30 0,882886
71,8 64,32 881,05 0,882636
71,9 64,43 880,79 0,882375
72,0 64,53 880,54 0,882125
72,1 64,64 880,29 0,881875
72,2 64,75 880,03 0,881614
72,3 64,86 879,78 0,881364
72,4 64,97 879,52 0,881103
72,5 65,08 879,27 0,880853
72,6 65,19 879,01 0,880592
72,7 65,29 878,75 0,880332
72,8 65,40 878,50 0,880081
72,9 65,51 878,24 0,879821
73,0 65,62 877,99 0,879570
73,1 65,73 877,73 0,879310
73,2 65,84 877,47 0,879049
73,3 65,95 877,21 0,878789
73,4 66,06 876,96 0,878539
73,5 66,17 876,70 0,878278
73,6 66,28 876,44 0,878018
73,7 66,39 876,18 0,877757
73,8 66,50 875,92 0,877497
73,9 66,61 875,66 0,877236
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
74,0 66,72 875,40 0,876976
74,1 66,83 875,14 0,876715
74,2 66,94 874,88 0,876455
74,3 67,05 874,62 0,876194
74,4 67,16 874,36 0,875934
74,5 67,27 874,10 0,875673
74,6 67,38 873,84 0,875413
74,7 67,49 873,58 0,875152
74,8 67,60 873,32 0,874892
74,9 67,71 873,06 0,874632
75,0 67,82 872,79 0,874361
75,1 67,93 872,53 0,874101
75,2 68,04 872,27 0,873840
75,3 68,15 872,00 0,873570
75,4 68,26 871,74 0,873309
75,5 68,38 871,48 0,873049
75,6 68,49 871,21 0,872778
75,7 68,60 870,95 0,872518
75,8 68,71 870,68 0,872247
75,9 68,82 870,42 0,871987
76,0 68,93 870,15 0,871716
76,1 69,04 869,89 0,871456
76,2 69,16 869,62 0,871185
76,3 69,27 869,35 0,870915
76,4 69,38 869,09 0,870654
76,5 69,49 868,82 0,870384
76,6 69,61 868,55 0,870113
76,7 69,72 868,28 0,869843
76,8 69,83 868,02 0,869582
76,9 69,94 867,75 0,869312
77,0 70,06 867,48 0,869041
77,1 70,17 867,21 0,868771
77,2 70,28 866,94 0,868500
77,3 70,39 866,67 0,868230
77,4 70,51 866,40 0,867960
77,5 70,62 866,13 0,867689
77,6 70,73 865,86 0,867419
77,7 70,85 865,59 0,867148
77,8 70,96 865,32 0,866878
77,9 71,07 865,05 0,866607
78,0 71,19 864,78 0,866337
78,1 71,30 864,50 0,866056
78,2 71,41 864,23 0,865786
78,3 71,53 863,96 0,865515
78,4 71,64 863,69 0,865245
78,5 71,76 863,41 0,864964
78,6 71,87 863,14 0,864694
78,7 71,98 862,86 0,864413
78,8 72,10 862,59 0,864143
78,9 72,21 862,31 0,863862
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
79,0 72,33 862,04 0,863592
79,1 72,44 861,76 0,863311
79,2 72,56 861,49 0,863041
79,3 72,67 861,21 0,862760
79,4 72,79 860,94 0,862490
79,5 72,90 860,66 0,862209
79,6 73,02 860,38 0,861929
79,7 73,13 860,10 0,861648
79,8 73,25 859,83 0,861378
79,9 73,36 859,55 0,861097
80,0 73,48 859,27 0,860817
80,1 73,60 858,99 0,860536
80,2 73,71 858,71 0,860256
80,3 73,83 858,43 0,859975
80,4 73,94 858,15 0,859695
80,5 74,06 857,87 0,859414
80,6 74,18 857,59 0,859134
80,7 74,29 857,31 0,858853
80,8 74,41 857,03 0,858573
80,9 74,53 856,75 0,858292
81,0 74,64 856,46 0,858002
81,1 74,76 856,18 0,857721
81,2 74,88 855,90 0,857441
81,3 74,99 855,62 0,857160
81,4 75,11 855,33 0,856870
81,5 75,23 855,05 0,856589
81,6 75,34 854,76 0,856299
81,7 75,46 854,48 0,856018
81,8 75,58 854,19 0,855728
81,9 75,70 853,91 0,855447
82,0 75,82 853,62 0,855157
82,1 75,93 853,34 0,854876
82,2 76,05 853,05 0,854585
82,3 76,17 852,76 0,854295
82,4 76,29 852,48 0,854014
82,5 76,41 852,19 0,853724
82,6 76,52 851,90 0,853433
82,7 76,64 851,61 0,853143
82,8 76,76 851,32 0,852852
82,9 76,88 851,03 0,852562
83,0 77,00 850,74 0,852271
83,1 77,12 850,45 0,851981
83,2 77,24 850,16 0,851690
83,3 77,36 849,87 0,851400
83,4 77,48 849,58 0,851109
83,5 77,60 849,29 0,850819
83,6 77,72 848,99 0,850518
83,7 77,84 848,70 0,850228
83,8 77,96 848,41 0,849937
83,9 78,08 848,11 0,849637
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
84,0 78,20 847,82 0,849346
84,1 78,32 847,53 0,849056
84,2 78,44 847,23 0,848755
84,3 78,56 846,93 0,848454
84,4 78,68 846,64 0,848164
84,5 78,80 846,34 0,847863
84,6 78,92 846,05 0,847573
84,7 79,04 845,75 0,847272
84,8 79,16 845,45 0,846972
84,9 79,28 845,15 0,846671
85,0 79,40 844,85 0,846371
85,1 79,53 844,55 0,846070
85,2 79,65 844,25 0,845770
85,3 79,77 843,95 0,845469
85,4 79,89 843,65 0,845169
85,5 80,01 843,35 0,844868
85,6 80,14 843,05 0,844567
85,7 80,26 842,75 0,844267
85,8 80,38 842,44 0,843956
85,9 80,50 842,14 0,843656
86,0 80,63 841,84 0,843355
86,1 80,75 841,53 0,843045
86,2 80,87 841,23 0,842744
86,3 81,00 840,92 0,842434
86,4 81,12 840,62 0,842133
86,5 81,24 840,31 0,841823
86,6 81,37 840,00 0,841512
86,7 81,49 839,70 0,841211
86,8 81,61 839,39 0,840901
86,9 81,74 839,08 0,840590
87,0 81,86 838,77 0,840280
87,1 81,99 838,46 0,839969
87,2 82,11 838,15 0,839659
87,3 82,24 837,84 0,839348
87,4 82,36 837,52 0,839028
87,5 82,49 837,21 0,838717
87,6 82,61 836,90 0,838406
87,7 82,74 836,59 0,838096
87,8 82,86 836,27 0,837775
87,9 82,99 835,96 0,837465
88,0 83,11 835,64 0,837144
88,1 83,24 835,32 0,836824
88,2 83,37 835,01 0,836513
88,3 83,49 834,69 0,836192
88,4 83,62 834,37 0,835872
88,5 83,74 834,05 0,835551
88,6 83,87 833,73 0,835231
88,7 84,00 833,41 0,834910
88,8 84,13 833,09 0,834590
88,9 84,25 832,77 0,834269
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
89,0 84,38 832,45 0,833948
89,1 84,51 832,12 0,833618
89,2 84,64 831,80 0,833297
89,3 84,76 831,48 0,832977
89,4 84,89 831,15 0,832646
89,5 85,02 830,82 0,832315
89,6 85,15 830,50 0,831995
89,7 85,28 830,17 0,831664
89,8 85,41 829,84 0,831334
89,9 85,54 829,51 0,831003
90,0 85,66 829,18 0,830673
90,1 85,79 828,85 0,830342
90,2 85,92 828,52 0,830011
90,3 86,05 828,19 0,829681
90,4 86,18 827,85 0,829340
90,5 86,31 827,52 0,829010
90,6 86,44 827,18 0,828669
90,7 86,57 826,85 0,828338
90,8 86,71 826,51 0,827998
90,9 86,84 826,17 0,827657
91,0 86,97 825,83 0,827316
91,1 87,10 825,49 0,826976
91,2 87,23 825,15 0,826635
91,3 87,36 824,81 0,826295
91,4 87,49 824,47 0,825954
91,5 87,63 824,13 0,825613
91,6 87,76 823,78 0,825263
91,7 87,90 823,44 0,824922
91,8 88,02 823,09 0,824572
91,9 88,16 822,74 0,824221
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92,1 88,42 822,04 0,823520
92,2 88,56 821,69 0,823169
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92,4 88,83 820,99 0,822468
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92,6 89,10 820,28 0,821757
92,7 89,23 819,92 0,821396
92,8 89,37 819,57 0,821045
92,9 89,50 819,21 0,820685
93,0 89,64 818,85 0,820324
93,1 89,77 818,49 0,819963
93,2 89,91 818,12 0,819593
93,3 90,05 817,76 0,819232
93,4 90,18 817,40 0,818871
93,5 90,32 817,03 0,818501
93,6 90,46 816,66 0,818130
93,7 90,59 816,30 0,817769
93,8 90,73 815,93 0,817399
93,9 90,87 815,55 0,817018
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
94,0 91,01 815,18 0,816647
94,1 91,15 814,81 0,816277
94,2 91,29 814,43 0,815896
94,3 91,43 814,06 0,815525
94,4 91,56 813,68 0,815145
94,5 91,70 813,30 0,814764
94,6 91,84 812,92 0,814383
94,7 91,98 812,54 0,814003
94,8 92,13 812,15 0,813612
94,9 92,27 811,77 0,813231
95,0 92,41 811,38 0,812840
95,1 92,55 810,99 0,812450
95,2 92,69 810,60 0,812059
95,3 92,83 810,21 0,811668
95,4 92,98 809,82 0,811278
95,5 93,12 809,42 0,810877
95,6 93,26 809,02 0,810476
95,7 93,41 808,63 0,810086
95,8 93,55 808,23 0,809685
95,9 93,69 807,82 0,809274
96,0 93,84 807,42 0,808873
96,1 93,98 807,01 0,808463
96,2 94,13 806,61 0,808062
96,3 94,27 806,20 0,807651
96,4 94,42 805,78 0,807230
96,5 94,57 805,37 0,806820
96,6 94,71 804,96 0,806409
96,7 94,86 804,54 0,805988
96,8 95,01 804,12 0,805567
96,9 95,16 803,70 0,805147
97,0 95,31 803,27 0,804716
97,1 95,45 802,85 0,804295
97,2 95,60 802,42 0,803864
97,3 95,75 801,99 0,803434
97,4 95,90 801,55 0,802993
97,5 96,05 801,12 0,802562
97,6 96,21 800,68 0,802121
97,7 96,36 800,24 0,801680
97,8 96,51 799,80 0,801240
97,9 96,66 799,35 0,800789
98,0 96,81 798,90 0,800338
98,1 96,97 798,45 0,799887
98,2 97,12 798,00 0,799436
98,3 97,28 797,54 0,798976
98,4 97,43 797,08 0,798515
98,5 97,59 796,62 0,798054
98,6 97,74 796,15 0,797583
98,7 97,90 795,68 0,797112
98,8 98,06 795,21 0,796641
98,9 98,22 794,73 0,796161
a
D
% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)
99,0 98,38 794,25 0,795680
99,1 98,53 793,77 0,795199
99,2 98,69 793,28 0,794708
99,3 98,86 792,79 0,794217
99,4 99,02 792,30 0,793726
99,5 99,18 791,80 0,793225
99,6 99,34 791,29 0,792714
99,7 99,50 790,79 0,792213
99,8 99,67 790,28 0,791703
99,9 99,83 789,76 0,791182
100,0 100,00 789,24 0,790661
Tabela D.1 (concluso)
Farmacopeia
Brasileira
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
Volume 2
5 edio
Braslia
2010
Copyright 2010 Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria / Fundao Oswaldo Cruz
Todos os direitos reservados. permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte.
5 edio
Presidente da Repblica
Luiz Incio Lula da Silva
Ministro de Estado da Sade
Jos Gomes Temporo
Diretor-Presidente
Dirceu Raposo de Mello
Adjunto do Diretor-Presidente
Pedro Ivo Sebba Ramalho
Diretores
Dirceu Aparecido Brs Barbano
Jos Agenor lvares da Silva
Maria Ceclia Martins Brito
Adjunto de Diretores
Luiz Roberto da Silva Klassmann
Neilton Araujo de Oliveira
Luiz Armando Erthal
Chefe de Gabinete
Iliana Alves Canoff
Elaborao e edio:
AGNCIA NACIONAL DE VIGILNCIA SANITRIA
SIA Trecho 5, rea Especial 57, Lote 200
71205-050, Braslia DF
Tel.: (61) 3462-6000
Home page: www.anvisa.gov.br
Brasil. Farmacopeia Brasileira, volume 2 / Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Braslia: Anvisa, 2010.
852p., 2v/il.
1. Substncias farmacuticas qumicas, vegetais e biolgicas. 2. Medicamentos e correlatos. 3. Especifcaes e mto-
dos de anlise. I Ttulo.
ISBN 978-85-88233-41-6

Fundao oswaldo Cruz
Presidente
Paulo Gadelha
Vice-Presidente de Ensino, Informao e Comunicao
Maria do Carmo Leal
Editora FioCruz
Diretora
Maria do Carmo Leal
Editor Executivo
Joo Carlos Canossa Mendes
Editores Cientfcos
Nsia Trindade Lima e Ricardo Ventura Santos
Conselho Editorial
Ana Lcia Teles Rabello
Armando de Oliveira Schubach
Carlos E. A. Coimbra Jr.
Gerson Oliveira Penna
Gilberto Hochman
Joseli Lannes Vieira
Lgia Vieira da Silva
Maria Ceclia de Souza Minayo
RESOLUO DA DIRETORIA COLEGIADA - RDC N. 49, DE 23 DE NOVEMBRO DE 2010
Aprova a Farmacopeia Brasileira, 5 edio e d outras providncias.
A Diretoria Colegiada da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria, no uso da atribuio que lhe confere o inciso IV do
art. 11 do Regulamento aprovado pelo Decreto n. 3.029, de 16 de abril de 1999, e tendo em vista o disposto no inciso
II e 1 e 3 do art. 54 do Regimento Interno aprovado nos termos do Anexo I da Portaria N 354 da ANVISA, de 11 de
agosto de 2006, republicada no DOU de 21 de agosto de 2006, e ainda o que consta do art. 7 inciso XIX da Lei n. 9.782,
de 26 de janeiro de 1999, em reunio realizada em 11 de novembro de 2010, adota a seguinte Resoluo da Diretoria
Colegiada e eu, Diretor-Presidente, determino a sua publicao:
Art. 1 Fica aprovada a Farmacopeia Brasileira, 5 edio, constituda de Volume 1 Mtodos Gerais e textos e Volume
2 Monografas.
Art. 2 Os insumos farmacuticos, os medicamentos e outros produtos sujeitos vigilncia sanitria devem atender s
normas e especifcaes estabelecidas na Farmacopeia Brasileira.
Pargrafo nico. Na ausncia de monografa ofcial de matria-prima, formas farmacuticas, correlatos e mtodos gerais
na quinta edio da Farmacopeia Brasileira, para o controle de insumos e produtos farmacuticos admitir-se- a adoo
de monografa ofcial, em sua ltima edio, de cdigos farmacuticos estrangeiros, na forma disposta em normas
especfcas.
Art. 3 vedada a impresso, distribuio, reproduo ou venda da Farmacopeia Brasileira, 5 edio sem a prvia e
expressa anuncia da ANVISA.
Pargrafo nico. Sem prejuzo do disposto no caput desse artigo, a ANVISA disponibilizar gratuitamente em seu
endereo eletrnico cpia da quinta edio e de suas atualizaes.
Art. 4 Fica autorizada a Fundao Oswaldo Cruz, por meio da Editora Fiocruz, para a comercializao dos exemplares
da quinta edio da Farmacopeia Brasileira
Art. 5 Ficam revogadas todas as monografas e mtodos gerais das edies anteriores da Farmacopeia Brasileira.
Art. 6 Esta Resoluo entrar em vigor noventa (90) dias aps a sua publicao.
Braslia, em 24 de novembro de 2010
DIRCEU RAPOSO DE MELLO
Diretor-Presidente da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
Publicada no DOU N 224, 24 de novembro de 2010
SUMRIO
Volume 1
1 PREFCIO
2 HISTRICO
3 FARMACOPEIA BRASILEIRA
4 GENERALIDADES
5 MTODOS GERAIS
5.1 Mtodos gerais aplicados a medicamentos
5.2 Mtodos fsicos e fsico-quimicos
5.3 Mtodos qumicos
5.4 Mtodos de farmacognosia
5.5 Mtodos biolgicos, ensaios biolgicos e microbiolgicos
5.6 Mtodos imunoqumicos
5.7 Mtodos fsicos aplicados a materiais cirrgicos e hospitalares
6 RECIPIENTES PARA MEDICAMENTOS E CORRELATOS
6.1 Recipientes de vidro
6.2 Recipientes plsticos
7 PREPARAO DE PRODUTOS ESTREIS
7.1 Esterilizao e garantia de esterilidade
7.2 Indicadores biolgicos
7.3 Processo assptico
7.4 Salas limpas e ambientes controlados associados
7.5 Procedimentos de liberao
8 PROCEDIMENTOS ESTATSTICOS APLICVEIS AOS ENSAIOS BIOLGICOS
8.1 Glossrio de smbolos
8.2 Fundamentos
8.3 Valores atpicos
8.4 Ensaios diretos
8.5 Ensaios indiretos quantitativos
8.6 Mdias mveis
8.7 Ensaios indiretos tudo ou nada
8.8 Combinao de estimativas de potncia
8.9 Tabelas estatsticas
8.10 Exemplos de clculos estatsticos aplicados em ensaios biolgicos
9 RADIOFRMACOS
10 EQUIVALNCIA FARMACUTICA E BIOEQUIVALNCIA DE MEDICAMENTOS
11 GUA PARA USO FARMACUTICO
12 SUBSTNCIAS QUMICAS DE REFERNCIA
13 SUBSTNCIAS CORANTES
14 REAGENTES
14.1 Indicadores e solues indicadoras
14.2 Reagentes e solues reagentes
14.3 Solues volumtricas
14.4 Tampes
ANEXO A - TABELA PERIDICA DOS ELEMENTOS QUMICOS - NOMES, SMBOLOS
E MASSAS ATMICAS
ANEXO B - UNIDADES DO SISTEMA INTERNACIONAL (SI) USADAS NA FARMACOPEIA E AS EQUIVALN-
CIAS COM OUTRAS UNIDADES
ANEXO C SOLVENTES PARA CROMATOGRAFIA
ANEXO D ALCOOMETRIA
Volume 2
ESTRUTURA GERAL DAS MONOGRAFIAS _____________________________________________________ 553
MONOGRAFIAS _____________________________________________________________________________ 555
a a
ACETAZOLAMIDA
Acetazolamidum
S
N N
N
C H
3
S
NH
2
O
H
O O
C
4
H
6
N
4
O
3
S
2
; 222,25
acetazolamida; 00063
N-[5-(Aminossulfonil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]acetamida
[59-66-5]
Contm, no mnimo, 98,0% e, no mximo, 102,0% de
C
4
H
6
N
4
O
3
S
2
, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Car acter sticas fsicas. P cristalino, branco ou quase
branco.
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, pouco
solvel em etanol, praticamente insolvel em clorofrmio,
ter etlico e tetracloreto de carbono. Solvel em solues
diludas de hidrxidos alcalinos.
IDENTIFICAO
A. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) da
amostra, dispersa em brometo de potssio, apresenta
mximos de absoro somente nos mesmos comprimentos
de onda e com as mesmas intensidades relativas daqueles
observados no espectro de acetazolamida SQR, preparado
de maneira idntica. Caso o espectro da amostra no se
apresente idntico ao do padro, dissolver, separadamente,
a amostra e o padro em etanol, evaporar at secura e
repetir o teste com os resduos.
B. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na
faixa de 230 nm a 260 nm, de soluo a 0,003% (p/v) em
hidrxido de sdio 0,01 M, exibe mximo em 240 nm e
a absorvncia de 0,49 a 0,52. O espectro de absoro
no ultravioleta, na faixa de 260 nm a 350 nm, de soluo
a 0,00075% (p/v) em hidrxido de sdio 0,01 M, exibe
mximo em 292 nm e a absorvncia de 0,43 a 0,46.
C. Em tubo de ensaio, adicionar 20 mg da amostra, 4 mL
de cido clordrico 2 M e 0,2 g de zinco em p. Colocar tira
de papel de acetato de chumbo sobre a abertura do tubo.
Ocorre desprendimento de cido sulfdrico e escurecimento
do papel.
D. Dissolver 25 mg da amostra em mistura de 0,1 mL de
hidrxido de sdio SR e 5 mL de gua. Adicionar 1 mL de
sulfato cprico SR. Produz-se precipitado azul-esverdeado.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 1 g da amostra em 10 mL
de hidrxido de sdio M. A soluo obtida no mais
opalescente que a Suspenso de referncia II (5.2.25) e no
mais intensamente corada que a Soluo de referncia de
cor (5.2.12), preparada como descrito a seguir.
Soluo de referncia de cor: misturar 4,8 mL de Soluo
base de cloreto frrico, 1,2 mL de Soluo base de cloreto
cobaltoso e 14 mL de cido clordrico a 1% (v/v). Diluir
12,5 mL dessa soluo com 87,5 mL de cido clordrico a
1% (v/v).
Substncias relacionadas. Proceder conforme descrito em
(5.2.17.1), utilizando
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de amnia,
acetato de etila e lcool isoproplico (20:30:50), como fase
mvel. Aplicar, separadamente, placa, 20 L de cada uma
das solues, recentemente preparadas, descritas a seguir.
Soluo (1): soluo a 5 mg/mL da amostra em mistura de
etanol e acetato de etila (1:1).
Soluo (2): diluir 1 mL da Soluo (1) para 100 mL com
mistura de etanol e acetato de etila (1:1).
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, deixar
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm).
Qualquer mancha secundria obtida no cromatograma com
a Soluo (1), diferente da mancha principal, no mais
intensa que aquela obtida com a Soluo (2) (1,0%).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo III. No
mximo 0,002% (20 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Dissolver 0,96 g da amostra em 20
mL de gua, aquecer ebulio at completa dissoluo.
descrito em Ensaio limite para sulfatos, utilizando 1 mL
de cido sulfrico padro. No mximo 0,05% (500 ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). Determinar em 1 g da
amostra, em estufa, entre 100 C e 105 C. No mximo
0,5%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 1 g da amostra.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Dissolver 0,2 g da amostra em 25 mL de dimetilformamida.
Titular com hidrxido de sdio etanlico 0,1 M SV,
mL de hidrxido de sdio etanlico 0,1 M SV equivale a
22,225 mg de C
4
H
6
N
4
O
3
S
2
.
Em recipientes hermticos, protegidos da luz.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Nome da monografia
Denominao Comum Internacional - DCI
(International Nonproprietary Name - INN)
Frmula molecular e massa molecular (g/mol)
Denominao Comum Brasileira - DCB
e nmero DCB
Nome qumico (segundo as regras da Iupac)
Registro CAS
Reagentes (descrio no captulo 14)
Nmero do mtodo geral
Substncia Qumica de Refrencia - SQR
(lista completa: www.anvisa.gov.br/farmacopeia)
ESTRUTURA GERAL DAS MONOGRAfIA
a a
ABACATEIRO
Persea folium
Persea americana Mill. LAURACEAE
A droga vegetal constituda pelas folhas secas contendo,
no mnimo, 0,4% de favonoides totais expressos em
apigenina e 0,14% de leo voltil.
SINONMIA CIENTFICA
Persea gratissima Gaertn. f.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A folha inodora e de
sabor fracamente adstringente.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas simples, elpticas, oblongas ou oval-acuminadas,
semi-coriceas, de margens inteiras, mais ou menos
onduladas; lmina com 8,0 cm a 20,0 cm de comprimento
e 4,0 cm a 9,0 cm de largura; pecolo de at 5 cm de
comprimento e 3 mm a 4 mm de largura na base; quando
frescas so de cor verde-escura na face adaxial, pouco
brilhantes e quase lisas, e de face abaxial de cor verde mais
clara, fosca e um tanto spera; folhas secas de colorao
at castanho-clara. Nervura principal proeminente na
face abaxial, com nervuras secundrias oblquas, tambm
proeminentes, dando origem s nervuras tercirias que se
anastomosam em fna trama.
DESCRIO MICROSCPICA
A lmina foliar hipoestomtica e de simetria dorsiventral.
A epiderme, em vista frontal, na face adaxial, formada
por clulas poligonais, com clulas de paredes levemente
sinuosas e raros tricomas tectores unicelulares, curtos a
longos, de paredes espessas; na face abaxial geralmente
formada por clulas menores, retangulares ou arredondadas,
com paredes periclinais levemente convexas. A cutcula
granulosa e os estmatos so anomocticos, com 3 a 4
clulas subsidirias. Tricomas tectores so frequentes
em folhas jovens e raros em folhas adultas. Em seco
transversal, a epiderme uniestratifcada em ambas as
faces, com cutcula espessa. Na face adaxial as clulas
so alongadas no sentido transversal. O mesoflo
formado por uma ou duas camadas de clulas palidicas,
alongadas, apresentando muitos idioblastos secretores
de mucilagem e leo voltil, volumosos e arredondados.
O parnquima esponjoso apresenta poucas camadas de
clulas irregulares, com grandes espaos intercelulares.
Pode ocorrer uma conformao diferenciada do mesoflo,
junto aos idioblastos secretores, formada por clulas
parenquimticas alongadas e achatadas tangencialmente,
de paredes espessas. A nervura principal mostra um feixe
vascular colateral desenvolvido, envolto por uma bainha
esclerenquimtica, praticamente contnua. Pequenos
cristais fusiformes, de oxalato de clcio, ocorrem em
clulas parenquimticas prximas s nervuras. Na base
da lmina foliar, dois outros feixes colaterais pequenos
ocorrem junto ao bordo, voltados para a face adaxial.
DESCRIO MICROSCPICA DO P
O p atende a todas as exigncias estabelecidas para
a espcie, menos os caracteres macroscpicos. So
caractersticas: colorao verde-escura; fragmentos
da epiderme voltada para a face adaxial com clulas
poligonais isodiamtricas, recoberta por cutcula espessa;
fragmentos da epiderme voltada para a face abaxial, com
clulas menores; fragmentos da epiderme voltada para a
face abaxial com estmatos anomocticos; fragmentos
da epiderme voltada para a face abaxial com tricomas
tectores; tricomas tectores inteiros acompanhados de
clulas da epiderme ou isolados; fragmentos de tricomas
tectores; fragmentos do mesoflo com idioblastos secretores
arredondados; fragmentos de nervura, como descrita,
acompanhados de clulas contendo cristais fusiformes.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel GF
254
, com
espessura de 250 m, como suporte, e mistura de acetato
de etila, cido frmico e gua (80:10:10) como fase mvel.
Aplicar, separadamente, placa, 10 L da Soluo (1),
recentemente preparada, descrita a seguir.
Soluo (1): preparar tintura 20% (p/v) das folhas
pulverizadas com etanol a 65% (v/v) por macerao ou
percolao.
secar ao ar. Nebulizar com anisaldedo SR. Examinar sob
luz visvel. Observar cinco manchas principais de colorao
amarelada: na parte superior do cromatograma, uma
mancha isolada e duas manchas bem prximas um pouco
abaixo; na parte mediana do cromatograma, duas outras
manchas prximas. Na parte inferior do cromatograma,
observar uma mancha de colorao rsea e outra, mais
abaixo, de colorao azulada.
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 2,0%.
gua (5.4.2.3). No mximo 12,0%.
Cinzas totais (5.4.2.4). No mximo 5,0%.
Cinzas sulfatadas (5.4.2.6). No mximo 10,0%.
DOSEAMENTO
leos volteis
Proceder conforme descrito em Determinao de leos
volteis em drogas vegetais (5.4.2.7). Utilizar balo
de 1000 mL contendo 500 mL de gua como lquido de
destilao. Utilizar planta seca rasurada e no contundida.
aa
Proceder imediatamente determinao do leo voltil a
partir de 100 g da droga rasurada. Destilar por 4 horas.
flavonoides totais
Proceder conforme descrito em Espectrofotometria de
absoro no visvel (5.2.14). Preparar as solues descritas
a seguir.
Soluo estoque: pesar, exatamente, cerca de 0,5 g da
droga pulverizada (800 m) e colocar em balo de fundo
redondo de 100 mL. Acrescentar droga 1 mL de soluo
aquosa de metenamina a 0,5% (p/v), 30 mL de soluo de
etanol a 50% (v/v) e 2 mL de cido clordrico. Aquecer em
manta de aquecimento por 30 minutos, sob refuxo. Filtrar
a mistura atravs de algodo para balo volumtrico de 100
mL. Retornar o resduo da droga e o algodo ao balo de
fundo redondo, adicionar mais 30 mL de soluo de etanol
a 50% (v/v) e aquecer novamente, sob refuxo, durante
15 minutos. Filtrar novamente atravs de algodo para o
mesmo balo volumtrico de 100 mL. Repetir a operao,
retornar novamente o resduo da droga e o algodo para o
balo de fundo redondo, adicionar 30 mL de soluo de
etanol a 50% (v/v), aquecer sob refuxo, por 15 minutos e
fltrar para o mesmo balo volumtrico de 100 mL. Aps
resfriamento, completar o volume do balo volumtrico de
100 mL com soluo de etanol a 50% (v/v).
Soluo amostra: adicionar 10 mL da Soluo estoque
em balo volumtrico de 25 mL com 2 mL de soluo de
cloreto de alumnio a 5% (p/v) em soluo de etanol a 50%
(v/v) e completar o volume com soluo de etanol 50%
(v/v). Aps 30 minutos fazer a leitura.
Soluo branco: adicionar 10 mL da Soluo estoque em
soluo de etanol a 50% (v/v).
Medir a absorvncia da Soluo amostra a 425 nm,
utilizando a Soluo branco para ajuste do zero. O teor de
favonoides totais, expressos em apigenina por 100 g de
droga seca, calculado segundo a expresso:
em que
TFT = teor de favonoides totais;
Abs = absorvncia da Soluo amostra;
250 = fator de diluio;
m = massa da droga (g);
PD = perda por dessecao;
336,5 = absortividade especfca da apigenina.
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz e do calor.
Farmacopeia Brasileira, 5 edio Farmacopeia Brasileira, 5 edio
a a
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpidos em Persea americana Mill.
______________
Complemento da legenda da figura 1.
A folha em vista frontal: lmina foliar (lf); pecolo (pl). B detalhe parcial da epiderme voltada para a face abaxial, em seco transversal: parnquima
palidico (pp); epiderme (ep); cutcula (cu); clula contendo mucilagem (cm); tricoma tector (tt). C detalhe parcial da epiderme voltada para a face
adaxial, em vista frontal. D detalhe parcial da epiderme voltada para a face abaxial, em vista frontal: estmato (es); tricoma tector (tt). E detalhe de
poro da lmina foliar, em seco transversal: cutcula (cu); epiderme (ep); parnquima palidico (pp); idioblasto secretor (is); parnquima esponjoso
(pj); estmato (es); idioblasto com cristais de oxalato de clcio (ico); feixe vascular (fv).
aa
figura 2 Aspectos da microscopia do p em Persea americana Mill.
______________
A fragmento da epiderme voltada para a face abaxial: estmato (es); tricoma tector (tt). B e C fragmentos da lmina foliar, em vista frontal, com
destaque para feixe vascular e idioblastos secretores: feixe vascular (fv); idioblasto secretor (is). D fragmento da lmina foliar em seco transversal,
mostrando idioblasto secretor acompanhado de clulas com conformao diferenciada: idioblasto secretor (is); cutcula (cu); epiderme (ep); parnquima
palidico (pp); parnquima esponjoso (pj). E fragmento da epiderme: tricoma tector (tt). f fragmentos de tricoma
a a
ACETATO DE DEXAMETASONA CREME
Contm, no mnimo, 90,0% e, no mximo, 110,0% da
quantidade declarada de C
24
H
31
FO
6
.
IDENTIFICAO
O tempo de reteno do pico principal do cromatograma
da Soluo amostra, obtida no mtodo de Doseamento,
corresponde quele do pico principal da Soluo padro.
CARACTERSTICAS
Determinao de peso (5.1.1). Cumpre o teste.
TESTES DE SEGURANA BIOLGICA
Contagem de micro-organismos viveis totais
(5.5.3.1.2). Cumpre o teste.
Pesquisa e identifcao de patgenos (5.5.3.1.3).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Cromatografa a lquido
de alta efcincia (5.2.17.4). Utilizar cromatgrafo provido
de detector ultravioleta a 240 nm; coluna de 250 mm de
comprimento e 4,6 mm de dimetro interno, empacotada
com slica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano (5
um), mantida temperatura de 40 C; fuxo da Fase mvel
de 1,2 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de metanol e gua (65:35).
Soluo padro: pesar, exatamente, cerca de 20 mg de
acetato de dexametasona SQR e transferir para balo
volumtrico de 100 mL. Adicionar 50 mL de metanol e
deixar em ultrassom para dissolver. Completar o volume
com metanol e misturar. Transferir 5 mL dessa soluo
para balo volumtrico de 50 mL, completar o volume com
Fase mvel e homogeneizar.
Soluo amostra: transferir quantidade da amostra,
cuidadosamente pesada, equivalente a 2 mg de acetato de
dexametasona. Adicionar 40 mL de metanol e deixar em
ultrassom, agitando com basto de vidro, at dissolver.
Tranferir quantitativamente para balo volumtrico de
100 mL, completar o volume com o mesmo solvente e
homogeneizar.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo padro. O desvio
padro relativo das reas de replicatas dos picos registrados
no deve ser maior que 2%.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 L das Solues
padro e amostra, registrar os cromatogramas e medir as
reas sob os picos. Calcular o teor de C
24
H
31
FO
6
na amostra
a partir das respostas obtidas para a Soluo padro e
Soluo amostra.
Em recipientes bem fechados e ao abrigo do calor
excessivo.
ROTULAGEM
ACETATO DE SDIO
Natrii acetas
C H
3
ONa
O
C
2
H
3
NaO
2
; 82,03
C
2
H
3
NaO
2
.3H
2
O; 136,08
acetato de sdio; 00087
acetato de sdio tri-hidratado; 00088
Sal de sdio do cido actico (1:1)
[127-09-3]
Sal de sdio do cido actico hidratado (1:1:3)
[6131-90-4]
C
2
H
3
NaO
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais incolores, transparentes,
ou p cristalino branco, granular, ou focos branco. Inodoro
e com leve odor acetoso, tendo sabor salino ligeiramente
amargo. Eforesce ao ar quente e seco.
Solubilidade. Muito solvel em gua, solvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. Responde s reaes do on acetato (5.3.1.1).
B. Responde s reaes do on sdio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo aquosa a 10% (p/v)
lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
pH (5.2.19). Preparar uma soluo que contenha 5%
(p/v) de C
2
H
3
NaO
2
e proceder conforme descrito em
Determinao do pH. Entre 7,5 e 9,2.
Matria insolvel. Dissolver o equivalente a 20 g de
acetato de sdio anidro, com gua a 150 mL. Preparar essa
soluo em um bquer e aquecer at ebulio. Cobrir o
bquer com vidro de relgio e deix-lo em banho-maria
por uma hora. Filtrar em um fltro previamente pesado,
lavar e secar a 105 C at peso constante. No mximo
0,05% (500 ppm).
aa
Clcio e magnsio. Pesar o equivalente a 0,2 g de acetato
de sdio anidro e dissolver em 20 mL de gua. Adicionar
2 mL dos seguintes reagentes: hidrxido de amnio 6 M,
oxalato de amnio SR e fosfato de sdio dibsico a 12%
(p/v). Nenhuma turbidez desenvolvida durante 5 minutos.
Potssio. Pesar o equivalente a 3 g de acetato de sdio
anidro e dissolver em 5 mL de gua. Acidifcar a soluo
com algumas gotas de cido actico M, e adicionar cinco
gotas de cobaltinitrito de sdio SR. Nenhum precipitado
formado.
Arsnio (5.3.2.5). Dissolver o equivalente a 1 g de acetato
de sdio anidro em 35 mL de gua e proceder conforme
Ensaio limite para arsnio. No mximo 0,0003% (3 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). O equivalente a 1 g de acetato de sdio
anidro no apresenta mais cloretos que o equivalente a 0,5
mL de cido clordrico 0,02 M SV. No mximo 0,035%
(350 ppm).
ferro (5.3.2.4). Proceder conforme descrito em Mtodo I
utilizando 10 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo.
Utilizar 1 mL de Soluo padro de ferro (10 ppm). No
mximo 0,001% (10 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Dissolver o
equivalente a 4,2 g de acetato de sdio anidro para balo
volumtrico de 50 mL. Completar o volume com gua e
proceder conforme descrito em Ensaio limite para metais
pesados utilizando Soluo padro de chumbo (2 ppm Pb).
No mximo 0,001% (10 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). O equivalente a 10 g de acetato de sdio
anidro no apresenta mais sulfatos que o equivalente a 0,50
mL de cido sulfrico 0,01 M SV. No mximo 0,005% (50
ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). Determinar em 1 g de
amostra. Dessecar em estufa a 105 C, at peso constante.
A forma hidratada perde de 38% a 41% do seu peso; a
forma anidra perde no mximo 1%.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Titulaes em meio no
aquoso (5.3.3.5). Pesar quantidade equivalente a 0,2 g
de acetato de sdio previamente dessecado e dissolver
em 25 mL de cido actico glacial, aquecer se necessrio
para completa solubilizao. Adicionar duas gotas de
1-naftolbenzena. Titular com cido perclrico 0,1 M SV.
Fazer uma determinao em branco e realizar as correes
necessrias. Cada mL de cido perclrico 0,1 M SV
2
H
3
NaO
2
.
Em recipientes bem fechados.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Adjuvante farmacutico utilizado em solues para dilise.
ACETAZOLAMIDA
Acetazolamidum
S
N N
N
C H
3
S
NH
2
O
H
O O
C
4
H
6
N
4
O
3
S
2
; 222,25
acetazolamida; 00063
N-[5-(Aminossulfonil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]acetamida
[59-66-5]
C
4
H
6
N
4
O
3
S
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco ou quase
branco.
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, pouco
solvel em etanol, praticamente insolvel em clorofrmio,
ter etlico e tetracloreto de carbono. Solvel em solues
IDENTIFICAO
observados no espectro de acetazolamida SQR, preparado
de maneira idntica. Caso o espectro da amostra no se
apresente idntico ao do padro, dissolver, separadamente,
a amostra e o padro em etanol, evaporar at secura e
repetir o teste com os resduos.
hidrxido de sdio 0,01 M, exibe mximo em 240 nm e
a absorvncia de 0,49 a 0,52. O espectro de absoro
no ultravioleta, na faixa de 260 nm a 350 nm, de soluo
a 0,00075% (p/v) em hidrxido de sdio 0,01 M, exibe
mximo em 292 nm e a absorvncia de 0,43 a 0,46.
C. Em tubo de ensaio, adicionar 20 mg da amostra, 4 mL
de cido clordrico 2 M e 0,2 g de zinco em p. Colocar tira
de papel de acetato de chumbo sobre a abertura do tubo.
Ocorre desprendimento de cido sulfdrico e escurecimento
do papel.
D. Dissolver 25 mg da amostra em mistura de 0,1 mL de
hidrxido de sdio SR e 5 mL de gua. Adicionar 1 mL de
sulfato cprico SR. Produz-se precipitado azul-esverdeado.
a a
ENSAIOS DE PUREZA
de hidrxido de sdio M. A soluo obtida no mais
opalescente que a Suspenso de referncia II (5.2.25) e no
mais intensamente corada que a Soluo de referncia de
cor (5.2.12), preparada como descrito a seguir.
Soluo de referncia de cor: misturar 4,8 mL de Soluo
base de cloreto frrico, 1,2 mL de Soluo base de cloreto
cobaltoso e 14 mL de cido clordrico a 1% (v/v). Diluir
12,5 mL dessa soluo com 87,5 mL de cido clordrico a
1% (v/v).
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de amnia,
acetato de etila e lcool isoproplico (20:30:50), como fase
etanol e acetato de etila (1:1).
mistura de etanol e acetato de etila (1:1).
mximo 0,002% (20 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Dissolver 0,96 g da amostra em 20
mL de gua, aquecer ebulio at completa dissoluo.
Resfriar com agitao e fltrar. Prosseguir conforme
descrito em Ensaio limite para sulfatos, utilizando 1 mL
de cido sulfrico padro. No mximo 0,05% (500 ppm).
amostra, em estufa, entre 100 C e 105 C. No mximo
0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Dissolver 0,2 g da amostra em 25 mL de dimetilformamida.
Titular com hidrxido de sdio etanlico 0,1 M SV,
determinando o ponto fnal potenciometricamente. Cada
mL de hidrxido de sdio etanlico 0,1 M SV equivale a
22,225 mg de C
4
H
6
N
4
O
3
S
2
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Diurtico.
ACETILCISTENA
Acetylcysteinum
COOH
N H
S H
O
CH
3
C
5
H
9
NO
3
S; 163,19
acetilcistena; 00067
N-Acetil-L-cistena
[616-91-1]
C
5
H
9
NO
3
S, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
incolor.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua e etanol,
praticamente insolvel em cloreto de metileno.
Constantes fsico-qumicas.
Faixa de fuso (5.2.2): 104 C a 110 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +21 a +27, em relao
substncia dessecada. Em balo volumtrico de 25 mL,
adicionar 1,25 g da amostra, 1 mL de edetato dissdico a
1% (p/v), 7,5 mL de hidrxido de sdio SR e homogeneizar.
Completar o volume com tampo fosfato pH 7,0.
IDENTIFICAO
amostra previamente dessecada, dispersa em brometo
de potssio, apresenta mximos de absoro somente
nos mesmos comprimentos de onda e com as mesmas
intensidades relativas daqueles observados no espectro de
acetilcistena SQR, preparado de maneira idntica.
B. Dissolver cerca de 1 g da amostra em 20 mL de gua
e adicionar 0,05 mL de nitroprusseto de sdio 5% (p/v) e
0,05 mL de hidrxido de amnio. Desenvolve-se colorao
violeta escura.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo da amostra a 5% (p/v)
pH (5.2.19). 2,0 a 2,8. Determinar em soluo a 1% (p/v)
em gua isenta de dixido de carbono.
aa
Metais pesados (5.3.2.3). Umedecer 2 g da amostra,
cuidadosamente, gota a gota, com 2 mL de cido ntrico e
prosseguir conforme descrito em Mtodo III. No mximo
0,001% (10 ppm).
amostra, em estufa a 70 C, sob presso reduzida, at peso
constante. No mximo 0,5%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 2 g de amostra.
No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
Empregar um dos mtodos descritos a seguir.
A. Pesar, exatamente, cerca de 0,14 g da amostra, diluir em
60 mL de gua e adicionar 10 mL de cido clordrico 2 M.
Resfriar em banho de gelo, adicionar 10 mL de iodeto de
potssio SR e titular com iodo 0,05 M SV, determinando o
ponto fnal potenciometricamente ou utilizando 1 mL de
amido SI como indicador. Cada mL de iodo 0,05 M SV
5
H
9
NO
3
S.
B. Proceder conforme descrito em Cromatografa a lquido
m); fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 6,8 g de fosfato de potssio
monobsico em 1000 mL de gua. Filtrar e ajustar o pH em
3,0 com cido fosfrico.
Soluo padro interno: transferir, aproximadamente, 1
g de DL-fenilalanina para balo volumtrico de 200 mL
e completar o volume com metabissulfto sdico a 0,05%
(p/v) recentemente preparado. Homogeneizar.
Soluo amostra: pesar, exatamente, cerca de 1 g da
amostra e transferir para balo volumtrico de 100 mL.
Completar o volume com metabissulfto sdico a 0,05%
(p/v) e homogeneizar. Transferir 5 mL dessa soluo e 5
mL da Soluo padro interno para balo volumtrico de
100 mL e completar o volume com metabissulfto sdico
a 0,05% (p/v).
Soluo padro: transferir, exatamente, cerca de 0,1 g de
acetilcistena SQR para balo volumtrico de 10 mL e
completar o volume com metabissulfto sdico a 0,05%
(p/v). Transferir 5 mL desta soluo e 5 mL da Soluo
padro interno para balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com metabissulfto sdico a 0,05%
(p/v), obtendo soluo a 0,5 mg/mL.
Injetar 5 L da Soluo padro. A resoluo entre os picos
correspondentes acetilcistena e DL-fenilalanina no
menor de 6. O desvio padro relativo das reas de replicatas
dos picos registrados no maior que 2,0%.
padro e da Soluo amostra, registrar os cromatogramas e
medir as reas sob os picos correspondentes acetilcistena
e DL-fenilalanina. Calcular o teor de C
5
H
9
NO
3
S na
amostra a partir das respostas obtidas para a relao
acetilcistena/DL-fenilalanina com a Soluo padro e a
Soluo amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Mucoltico.
ACETILMETIONINA
Acetylmethioninum
COOH
S
C H
3
N H
O
CH
3
C
7
H
13
NO
3
S; 191,25
acetilmetionina; 00074
N-Acetil-L-metionina
[65-82-7]
Contm, no mnimo, 98,0% de C
7
H
13
NO
3
S, em relao
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco, de leve odor
peculiar desagradvel e sabor levemente amargo.
Solubilidade. Solvel em gua, acetona e etanol fervente.
Faixa de fuso (5.2.2): 114 C a 116 C.
IDENTIFICAO
Dissolver 10 mg de amostra em 1 mL de gua destilada e
adicionar, sucessivamente, sob agitao, 1 mL de hidrxido
de sdio 5 M, 1 mL de glicerol e 0,3 mL de nitroprusseto
de sdio 5% (p/v). Aquecer entre 35 C e 40 C, durante
10 minutos, e resfriar em banho de gelo, durante 2
minutos. Adicionar 1,5 mL de cido clordrico SR e agitar.
Desenvolve-se colorao vermelho-prpura.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 0,2 g da amostra em 2 mL
de gua destilada. A soluo obtida lmpida (5.2.25).
a a
Adicionar 38 mL de gua destilada e reservar esta soluo
para os demais ensaios.
ferro (5.3.2.4). Utilizar o Mtodo I. Determinar em 10
mL da soluo obtida em Aspecto da soluo. No mximo
0,005% (50 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em 10 mL da soluo obtida
em Aspecto da soluo. No mximo 0,015% (150 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Determinar em 10 mL da soluo
obtida em Aspecto da soluo. No mximo 0,002% (20
ppm).
amostra. Dessecar em estufa a 105 C, por 4 horas, at peso
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,3 g de amostra e transferir
para um erlenmeyer com tampa. Adicionar 100 mL de
gua, 5 g de fosfato de potssio dibsico, 2 g de fosfato
de potssio monobsico e 2 g de iodeto de potssio.
Agitar at dissoluo completa. Adicionar 50 mL de iodo
0,05 M SV, agitar e deixar em repouso por 30 minutos.
Titular o excesso de iodo com tiossulfato de sdio 0,1 M
SV, adicionar 3 mL de amido SI prximo ao ponto fnal, e
prosseguir a titulao at o desaparecimento da cor azul.
Realizar ensaio em branco e fazer as correes necessrias.
Cada mL de iodo 0,05 M SV equivale a 9,562 mg de
C
7
H
13
NO
3
S.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Lipotrpico.
ACICLOVIR
Aciclovirum
N
N H
N
N
N H
2
O
O
OH
C
8
H
11
N
5
O
3
; 225,20
aciclovir; 00082
2-Amino-1,9-diidro-9-[(2-hidroxietoxi)metil]-6H-purin-6-ona
[59277-89-3]
C
8
H
11
N
5
O
3
, em relao substncia anidra.
DESCRIO
branco.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, facilmente solvel
em dimetilsulfxido e muito pouco solvel em etanol.
Solvel em solues diludas de cidos minerais e
IDENTIFICAO
observados no espectro de aciclovir SQR, preparado de
maneira idntica.
B. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa
de 200 nm a 350 nm, de soluo a 0,015% (p/v) em cido
clordrico 0,1 M, exibe mximos em 255 nm e um ombro
inclinado em torno de 274 nm, idnticos aos observados no
espectro de soluo similar de aciclovir SQR.
C. O tempo de reteno do pico principal do cromatograma
da Soluo amostra, obtida no mtodo B. de Doseamento,
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de clorofrmio,
metanol e hidrxido de amnio (80:20:2), como fase
aa
Soluo (1): transferir 0,1 g da amostra para balo
volumtrico de 10 mL, dissolver em dimetilsulfxido e
completar o volume com o mesmo solvente, de modo a
obter soluo a 10 mg/mL.
Soluo (2): soluo de aciclovir SQR a 0,2 mg/mL em
dimetilsulfxido.
dimetilsulfxido.
dimetilsulfxido.
dimetilsulfxido.
Procedimento: desenvolver o cromatograma. Remover a
placa, secar as manchas com corrente de ar seco. Examinar
sob luz ultravioleta (254 nm). Qualquer mancha secundria
obtida no cromatograma com a Soluo (1), diferente da
mancha principal, no mais intensa que aquelas obtidas
com a Soluo (2), Soluo (3), Soluo (4) e Soluo (5).
A soma das impurezas observadas no excede de 2,0%.
Limite de guanina. Proceder conforme descrito no
mtodo B. de Doseamento. Calcular o teor de guanina na
amostra a partir das respostas obtidas para o pico relativo
guanina na Soluo padro e na Soluo amostra. No
mximo 0,7%.
gua (5.2.20.1). No mximo 6,0%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito em Titulaes em meio no
aquoso (5.3.3.5). Dissolver 0,15 g da amostra em 60 mL
de cido actico glacial. Titular com cido perclrico 0,1
M SV, determinando o ponto fnal potenciometricamente.
Cada mL de cido perclrico 0,1 M SV equivale a 22,52
mg de C
8
H
11
N
5
O
3
.
m a 10 m); fuxo da Fase mvel de 3 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de gua e cido actico glacial
(100:0,1).
Soluo de guanina: transferir, exatamente, cerca de
8,75 mg de guanina para balo volumtrico de 500 mL e
dissolver em 50 mL de hidrxido de sdio 0,1 M. Completar
o volume com gua e homogeneizar.
Soluo amostra: transferir, exatamente, cerca de 0,1 g da
amostra para balo volumtrico de 200 mL com auxlio
de 20 mL de hidrxido de sdio 0,1 M. Adicionar 80 mL
de gua, deixar em ultrassom por 15 minutos e agitar
mecanicamente por 15 minutos. Completar o volume
com gua e homogeneizar. Transferir 10 mL para balo
volumtrico de 50 mL, completar o volume com hidrxido
de sdio 0,01 M e homogeneizar.
Soluo padro: transferir, exatamente, cerca de 25
mg de aciclovir SQR para balo volumtrico de 50 mL,
dissolver em 5 mL de hidrxido de sdio 0,1 M, completar
o volume com gua e homogeneizar. Transferir 10 mL
desta soluo para balo volumtrico de 50 mL, adicionar
2 mL da Soluo de guanina, completar o volume com
hidrxido de sdio 0,01 M e homogeneizar, de modo a
obter concentrao de 0,1 mg/mL de aciclovir SQR e 0,7
g/mL de guanina.
Os tempos de reteno relativo so cerca de 0,2 para
guanina e 1 para aciclovir. O fator de cauda para os
picos analisados no maior que 2,0. A resoluo entre o
aciclovir e a guanina no menor que 2,0. O desvio padro
relativo das reas de replicatas dos picos registrados no
maior que 2,0%.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 L, da Soluo
e medir as reas sob os picos. Calcular o teor de C
8
H
11
N
5
O
3

na amostra a partir das respostas obtidas com a Soluo
padro e a Soluo amostra.
Em recipientes hermticos, em temperatura inferior a 25 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiviral.
ACICLOVIR COMPRIMIDOS
8
H
11
N
5
O
3
.
IDENTIFICAO
A. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na
faixa de 230 nm a 350 nm, da soluo amostra obtida
em Doseamento, exibe mximo em 255 nm e um ombro
inclinado em torno de 274 nm.
B. Proceder conforme descrito em Limite de guanina. A
mancha principal obtida com a Soluo (2) corresponde
em posio, cor e intensidade mancha obtida com a
Soluo (3).
a a
CARACTERSTICAS
Teste de dureza (5.1.3.1). Cumpre o teste.
Teste de friabilidade (5.1.3.2). Cumpre o teste.
Teste de desintegrao (5.1.4.1). Cumpre o teste.
Uniformidade de doses unitrias (5.1.6). Cumpre o teste.
TESTE DE DISSOLUO (5.1.5)
Meio de dissoluo: cido clordrico 0,1 M, 900 mL
Aparelhagem: p, 50 rpm
Tempo: 45 minutos
Procedimento: aps o teste, retirar alquota do meio
de dissoluo, fltrar e diluir em cido clordrico 0,1 M
at concentrao adequada. Medir as absorvncias das
solues em 255 nm (5.2.14) utilizando o mesmo solvente
para ajuste do zero. Calcular a quantidade de C
8
H
11
N
5
O
3

dissolvido no meio, comparando as leituras obtidas com a
da soluo de aciclovir SQR na concentrao de 0,001 %
(p/v). Alternativamente, realizar os clculos considerando
A(1%, 1 cm) = 560, em 255 nm, em cido clordrico 0,1 M.
Tolerncia: no menos que 80% (Q) da quantidade
declarada de C
8
H
11
N
5
O
3
se dissolvem em 45 minutos.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de hidrxido de
amnio 13,5 M, metanol e cloreto de metileno (2:20:80),
como fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, 2 L de
cada uma das solues, recentemente preparadas, descritas
a seguir.
Soluo (1): pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar,
por 15 minutos, quantidade do p equivalente a 0,25 g de
aciclovir com 10 mL de dimetilsulfxido. Filtrar.
Soluo (2): diluir 0,7 volumes de Soluo (1) para 100
volumes com dimetilsulfxido.
Limite de guanina. Proceder conforme descrito em
celulose F
254
, como suporte, e mistura de lcool n-proplico,
hidrxido de amnio 13,5 M e sulfato de amnio a 5% (p/v)
(10:30:60), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, 10 L de cada uma das solues, recentemente
preparadas, descritas a seguir.
Soluo (1): pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir
quantidade do p equivalente a 0,25 g de aciclovir para
balo volumtrico de 50 mL. Adicionar 25 mL de hidrxido
de sdio 0,1 M, agitar por 10 minutos e completar o volume
com hidrxido de sdio 0,1 M. Deixar decantar o material
no dissolvido, antes da aplicao na placa.
Soluo (2): transferir 1 mL da Soluo (1) para balo
volumtrico de 10 mL e completar o volume com hidrxido
de sdio 0,1 M.
Soluo (3): dissolver 5 mg de aciclovir SQR em 10 mL de
Soluo (4): dissolver 5 mg de guanina em 100 mL de
Qualquer mancha secundria, correspondente guanina,
obtida no cromatograma com a Soluo (1) no mais
intensa que aquela obtida no cromatograma com a Soluo
(4) (1,0%). Desprezar as manchas presentes no ponto de
aplicao do solvente.
Contagem do nmero total de micro-organismos
mesoflos (5.5.3.1.2). Cumpre o teste.
Pesquisa de micro-organismos patognicos (5.5.3.1.3).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir quantidade
do p equivalente a 0,1 g de aciclovir para balo volumtrico
de 100 mL, adicionar 60 mL de hidrxido de sdio 0,1 M,
deixar em ultrassom por 15 minutos e completar o volume
com hidrxido de sdio 0,1 M. Homogeneizar e fltrar.
Transferir 15 mL do fltrado para balo volumtrico de 100
mL, adicionar 50 mL de gua, 5,8 mL de cido clordrico 2
M e completar o volume com gua. Transferir 5 mL dessa
soluo para balo volumtrico de 50 mL, completar o
volume com cido actico 0,1 M e homogeneizar, obtendo
soluo a 0,0015% (p/v). Preparar soluo padro na
mesma concentrao, utilizando o mesmo solvente. Medir
as absorvncias das solues resultantes em 255 nm
(5.2.14), utilizando cido clordrico 0,1 M para ajuste do
zero. Calcular a quantidade de C
8
H
11
N
5
O
3
nos comprimidos
a partir das leituras obtidas. Alternativamente, realizar os
clculos considerando A(1%, 1 cm) = 560, em 255 nm, em
cido clordrico 0,1 M.
Em recipientes hermticos, em temperatura inferior a 25
C.
ROTULAGEM
aa
ACICLOVIR CREME
Contm, no mnimo 90,0% e, no mximo, 110,0% da
8
H
11
N
5
O
3
.
IDENTIFICAO
em Doseamento, exibe mximo em 255 nm e um ombro
inclinado em torno de 274 nm, idnticos aos observados no
espectro de soluo similar de aciclovir SQR.
B. A mancha principal do cromatograma da Soluo (2),
obtida em Limite de guanina, corresponde em posio e
intensidade quela obtida com a Soluo (3).
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de guanina. Proceder conforme descrito em
celulose F
254
, como suporte. Aplicar, separadamente,
Soluo (1): pesar quantidade de creme equivalente a
30 mg de aciclovir, transferir para tubo de centrfuga
graduado, adicionar 3 mL de hidrxido de sdio 0,1 M e
agitar de modo a obter a disperso do creme. Adicionar 5
mL de mistura de clorofrmio e lcool n-proplico (1:2),
agitar, centrifugar e utilizar a camada superior.
volumtrico de 10 mL e completar o volume com hidrxido
de sdio 0,1 M.
Soluo (3): dissolver 6 mg de aciclovir SQR em 10 mL de
Soluo (4): dissolver 6 mg de guanina em 100 mL de
Desenvolver o cromatograma, inicialmente, utilizando
acetato de etila como fase mvel e deixar percorrer por
toda extenso da placa. Retirar a placa e deixar secar ao ar.
Desenvolver novamente o cromatograma utilizando, como
fase mvel, mistura de lcool n-proplico, hidrxido de
amnio 13,5 M e sulfato de amnio a 5% (p/v) (10:30:60).
Remover a placa, deixar secar ao ar. Examinar sob luz
ultravioleta (254 nm). Qualquer mancha secundria,
correspondente guanina, obtida no cromatograma com
a Soluo (1) no mais intensa que aquela obtida no
cromatograma com a Soluo (4) (1%). Desprezar as
manchas presentes no ponto de aplicao do solvente.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Transferir quantidade de amostra equivalente a 7,5 mg de
aciclovir para funil de separao com auxlio de 50 mL de
cido sulfrico 0,5 M e agitar. Adicionar 50 mL de acetato
de etila, agitar, esperar a separao das fases e coletar a
fase aquosa inferior. Lavar a fase orgnica com 20 mL de
cido sulfrico 0,5 M, coletar a fase aquosa e juntar ao
combinado anterior. Transferir os combinados aquosos para
cido sulfrico 0,5 M. Homogeneizar e fltrar, descartando
os primeiros mililitros do fltrado. Transferir 10 mL desta
soluo para balo volumtrico de 50 mL e completar
o volume com gua. Preparar soluo de aciclovir SQR
na mesma concentrao, utilizando o mesmo solvente.
Medir as absorvncias das solues resultantes em 255
nm (5.2.14), utilizando cido sulfrico 0,1 M para ajuste
do zero. Calcular a quantidade de C
8
H
11
N
5
O
3
no creme, a
partir das leituras obtidas.
Em recipientes bem fechados, em local seco e temperatura
entre 15 C e 25 C.
ROTULAGEM
CIDO ACETILSALICLICO
Acidum acetylsalicylicum
COOH
O CH
3
O
C
9
H
8
O
4
; 180,16
cido acetilsaliclico; 00089
cido 2-(acetiloxi)benzoico
[50-78-2]
C
9
H
8
O
4
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. P cristalino branco
ou cristais incolores, geralmente inodoro. Ponto de fuso
(5.2.2): funde em torno de 143
o
C.
a a
Solubilidade. Pouco solvel em gua, muito solvel em
etanol, solvel em ter etlico.
IDENTIFICAO
observados no espectro de cido acetilsaliclico SQR,
preparado de maneira idntica.
B. Misturar pequena quantidade da amostra com gua,
aquecer por alguns minutos. Resfriar. Adicionar uma ou
duas gotas de cloreto frrico SR. Desenvolve-se colorao
vermelho-violeta.
C. Pesar 0,2 g da amostra. Adicionar 4 mL de hidrxido
de sdio 2 M e ferver por 3 minutos. Resfriar. Adicionar 5
mL de cido sulfrico M. Produz-se precipitado cristalino.
Filtrar, lavar o precipitado com gua e secar em estufa a
105 C. O precipitado apresenta faixa de fuso (5.2.2) entre
156 C e 161 C.
D. Aquecer o fltrado obtido no teste C. de Identifcao
com 2 mL de etanol e 2 mL de cido sulfrico. Forma-se
acetato de etila, de odor caracterstico.
ENSAIOS DE PUREZA
de etanol. A soluo lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
Substncias relacionadas. Proceder conforme
Espectrofotometria de absoro no visvel (5.2.14).
Transferir 0,3 g da amostra para balo volumtrico de 100
mL e dissolver com 10 mL de hidrxido de tetrabutilamnio
0,1 M em etanol. Aps 10 minutos, adicionar 8 mL de cido
clordrico 0,1 M, 20 mL de tetraborato sdico a 1,9% (p/v)
e homogeneizar. Adicionar 2 mL de 4-aminoantipirina a
1% (p/v), agitando constantemente, e 2 mL de ferrocianeto
de potssio a 1% (p/v). Aps 2 minutos, diluir para 100
mL com gua. Deixar em repouso por 20 minutos. Medir a
absorvncia da soluo resultante em 505 nm, em cubetas
de 1 cm, utilizando gua para ajuste do zero. A absorvncia
no deve ser maior que 0,25.
cido saliclico. Pesar, exatamente, 0,1 g da amostra,
dissolver em 5 mL de etanol, adicionar 15 mL de gua
gelada e uma ou dua gotas de cloreto frrico 0,5% (p/v).
Deixar em repouso por 1 minuto. Transferir para tubo de
Nessler. Para o preparo da soluo padro, dissolver 5 mg
de cido saliclico em 100 mL de etanol. Transferir 1 mL
desta soluo para tubo de Nessler e adicionar uma ou
duas gotas de cloreto frrico 0,5% (p/v), 0,1 mL de cido
actico, 4 mL de etanol e 15 mL de gua. A cor da soluo
amostra no mais intensa que a da soluo padro. No
mximo 0,05% (500 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Dissolver 2 g da amostra em 25
mL de acetona e adicionar 1 mL de gua. Adicionar 1,2
mL de tioacetamida SR e 2 mL de tampo acetato pH 3,5.
Deixar em repouso por 5 minutos. Qualquer colorao
desenvolvida no mais escura do que a de um padro
preparado com 25 mL de acetona, 2 mL de Soluo padro
de chumbo (10 ppm Pb), 1,2 mL de tioacetamida SR e 2 mL
de tampo acetato pH 3,5. No mximo 0,001% (10 ppm).
amostra, em dessecador, temperatura ambiente, sob
presso reduzida, at peso constante. No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 1 g de amostra, transferir para
erlenmeyer de 250 mL com tampa e dissolver em 10 mL
de etanol. Adicionar 50 mL de hidrxido de sdio 0,5
M SV. Deixar em repouso por 1 hora. Adicionar 0,2 mL
de fenolftalena SI como indicador e titular com cido
clordrico 0,5 M SV. Realizar ensaio em branco e efetuar as
correes necessrias. Cada mL de hidrxido de sdio 0,5
M SV equivale a 45,040 mg de C
9
H
8
O
4
.
Em recipientes perfeitamente fechados.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Analgsico; antipirtico; anti-infamatrio no-esteroide;
antiagregante plaquetrio; utilizado tambm para alvio da
enxaqueca e em cardiopatia isqumica.
CIDO ACETILSALICLICO
COMPRIMIDOS
9
H
8
O
4
.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir quantidade
de p equivalente a 0,5 g de cido acetilsaliclico para tubo
de centrfuga e agitar com 10 mL de etanol por alguns
minutos. Centrifugar. Remover o sobrenadante lmpido e
evaporar secura em banho-maria a 60 C, por 1 hora.
Secar o resduo em estufa a vcuo a 60 C, por 1 hora. O
espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) do resduo
disperso em brometo de potssio, apresenta mximos de
absoro somente nos mesmos comprimentos de onda e
com as mesmas intensidades relativas daqueles observados
no espectro de cido acetilsaliclico SQR, preparado de
maneira idntica.
aa
B. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir quantidade
de p equivalente a 0,5 g de cido acetilsaliclico e dissolver
em 10 mL de hidrxido de sdio 5 M. Ferver por 2 ou 3
minutos. Esfriar. Adicionar um excesso de cido sulfrico
M. Produz-se precipitado cristalino e odor caracterstico
de cido actico. Adicionar cloreto frrico SR soluo.
Desenvolve-se colorao violeta intensa.
CARACTERSTICAS
Dureza (5.1.3.1). Cumpre o teste.
friabilidade (5.1.3.2). Cumpre o teste.
Teste de desintegrao (5.1.4.1). No mximo 5 minutos.
Para comprimidos de 100 mg, proceder conforme descrito
em Doseamento, empregando solues volumtricas a 0,1 M.
Meio de dissoluo: tampo acetato 0,05 M pH 4,5, 500
mL
Aparelhagem: ps, 50 rpm
Tempo: 30 minutos
Procedimento: aps o teste, retirar alquota do meio de
dissoluo, fltrar e, se necessrio, diluir em tampo
acetato 0,05 M pH 4,5 at concentrao adequada. Medir
imediatamente as absorvncias das solues em 265 nm
(5.2.14), utilizando o mesmo solvente para ajuste do zero.
Calcular a quantidade de C
9
H
8
O
4
dissolvido no meio,
comparando as leituras obtidas com a da soluo de cido
acetilsaliclico SQR na concentrao de 0,008% (p/v),
preparada no momento do uso. Pode-se usar etanol para
dissolver o padro antes da diluio em tampo acetato
0,05 M pH 4,5. O volume de etanol no pode exceder 1%
do volume total da soluo padro.
declarada de C
9
H
8
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
cido saliclico. Pesar e pulverizar os comprimidos.
Transferir quantidade de p equivalente a 0,2 g de cido
acetilsaliclico para um balo volumtrico de 100 mL.
Adicionar 4 mL de etanol e agitar. Diluir a 100 mL com
gua resfriada, mantendo a temperatura inferior a 10 C.
Filtrar imediatamente e transferir 50 mL do fltrado para
tubo de Nessler. Preparar a soluo de cido saliclico SQR
a 0,01% (p/v). Transferir 3 mL desta soluo para um tubo
de Nessler, adicionar 2 mL de etanol e gua em quantidade
sufciente para 50 mL. Adicionar 1 mL de sulfato frrico
amoniacal SR2 s solues padro e amostra. A cor violeta
produzida com a soluo amostra no deve ser mais intensa
que a obtida com a soluo padro.
DOSEAMENTO
do p equivalente a 0,5 g de cido acetilsaliclico para
erlenmeyer de 250 mL e adicionar 30 mL de hidrxido de
sdio 0,5 M SV. Ferver cuidadosamente por 10 minutos e
titular o excesso de lcali com cido clordrico 0,5 M SV,
utilizando vermelho de fenol SI como indicador. Realizar o
ensaio em branco e efetuar as correes necessrias. Cada
mL de hidrxido de sdio 0,5 M SV equivale a 45,040 mg
de C
9
H
8
O
4
.
Em recipientes perfeitamente fechados e protegidos da luz.
ROTULAGEM
CIDO ASCRBICO
Acidum ascorbicum
O
O
OH O H
H
O H OH
H
C
6
H
8
O
6
; 176,12
cido ascrbico; 00104
cido L-ascrbico
[50-81-7]
C
6
H
8
O
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, cristalino branco, ou
ligeiramente amarelado. No estado slido estvel ao ar,
mas em soluo oxida-se rapidamente. Sua soluo aquosa
lmpida.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, pouco solvel
em etanol e acetona, insolvel em ter etlico, clorofrmio,
ter de petrleo e benzeno.
Faixa de fuso (5.2.2): 189
o
C a 192
o
C, com decomposio.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +20,5
o
a +21,5
o
,
determinado em soluo a 10% (p/v) em gua isenta de
dixido de carbono.
IDENTIFICAO
a a
observados no espectro de cido ascrbico SQR, preparado
de maneira idntica.
B. A uma alquota da soluo a 2% (p/v) adicionar tartarato
cprico alcalino SR e deixar em repouso a temperatura
ambiente. Observa-se mudana de colorao devido
reduo lenta do tartarato cprico. Sob aquecimento, a
reduo mais rpida.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 2,2 a 2,5. Determinar em soluo aquosa a
5% (p/v).
Metais pesados (5.3.2.3). Dissolver 1 g em 25 mL de gua.
amostra, em dessecador a vcuo, sobre cido sulfrico, por
24 horas. No mximo 0,4%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 0,2 g da amostra em uma
mistura de 100 mL de gua e 25 mL de cido sulfrico M.
Adicionar 3 mL de amido SI e titular imediatamente com
iodo 0,05 M SV. Cada mL de iodo 0,05 M SV equivale a
8,806 mg de C
6
H
8
O
6
.
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Vitamina.
CIDO ASCRBICO COMPRIMIDOS
6
H
8
O
6.
IDENTIFICAO
Pesar e pulverizar os comprimidos. A partir do p,
preparar soluo a 2% (p/v) de cido ascrbico em etanol,
homogeneizar e fltrar. Prosseguir conforme descrito nos
testes A. e B. de Identifcao na monografa de cido
ascrbico, utilizando 2 mL da soluo obtida.
CARACTERSTICAS
Meio de dissoluo: gua, 900 mL
Tempo: 45 minutos
de dissoluo e diluir, se necessrio, com gua at
concentrao adequada. Homogeneizar e fltrar. Transferir
volume equivalente a cerca de 2 mg de cido ascrbico
para erlenmeyer de 50 mL, adicionar 5 mL de cido
metafosfrico-actico SR e titular com soluo padro de
diclorofenol indofenol at colorao rosa persistente por 5
segundos. Realizar ensaio em branco com a mistura de 5,5
mL de cido metafosfrico actico SR e 15 mL de gua.
Calcular a quantidade de cido ascrbico dissolvida, a
partir do ttulo da soluo padro de diclorofenol indofenol.
declarada de C
6
H
8
O
6
DOSEAMENTO
A. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Utilizar quantidade
do p equivalente a 0,2 g de cido ascrbico. Prosseguir
conforme descrito em Doseamento na monografa de
cido ascrbico.
B. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Utilizar quantidade
de p equivalente a 0,15 g de cido ascrbico. Dissolver em
Titular com sulfato crico amoniacal 0,1 M SV, utilizando
ferrona SI, como indicador. Cada mL de sulfato crico
amoniacal 0,1 M SV equivale a 8,806 mg de C
6
H
8
O
6
.
Em recipientes hermticos e opacos.
ROTULAGEM
aa
CIDO ASCRBICO SOLUO
INJETVEL
6
H
8
O
6
.
IDENTIFICAO
A. Proceder conforme descrito em Cromatografa em
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel GF
254
,
como suporte, e mistura de etanol e gua (120:20), como
fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, 2 L de cada
uma das solues, recentemente preparadas, descritas a
seguir.
Soluo (1): diluir a soluo injetvel em gua, de modo a
obter soluo de cido ascrbico a 5 mg/mL.
Soluo (2): soluo aquosa a 5 mg/mL de cido ascrbico
SQR.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, deixar secar
ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). A mancha
principal obtida com a Soluo (1) corresponde em posio,
cor e intensidade quela obtida com a Soluo (2).
B. Diluir a soluo injetvel em etanol, at concentrao de
2% (p/v) e fltrar. Prosseguir conforme descrito no teste B.
de Identifcao da monografa de cido ascrbico.
C. Transferir volume da soluo injetvel equivalente a 50
mg de cido ascrbico para tubo de ensaio. Adicionar 0,2
mL de cido ntrico 2 M e 0,2 mL de nitrato de prata 0,1 M.
Produz-se precipitado cinza.
D. Responde s reaes do on sdio (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
Determinao de volume (5.1.2). Cumpre o teste.
pH (5.2.19). 6,1 a 7,1.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de oxalato. Diluir volume da soluo injetvel
equivalente a 50 mg de cido ascrbico com gua para 5
mL. Adicionar 0,2 mL de cido actico glacial e 0,5 mL de
cloreto de clcio SR. No se produz turvao no intervalo
de 1 minuto.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre o teste.
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). No mximo 1,2 UE/
mg de cido ascrbico.
DOSEAMENTO
Transferir volume da soluo injetvel equivalente a cerca
de 0,2 g de cido ascrbico para erlenmeyer. Adicionar
100 mL de gua isenta de dixido de carbono e prosseguir
conforme descrito no Doseamento da monografa de cido
ascrbico a partir de e 25 mL de cido sulfrico M....
C
6
H
8
O
6
.
Em recipientes de vidro tipo I, protegidos da luz.
ROTULAGEM
CIDO BENZOICO
Acidum benzoicum
COOH
C
7
H
6
O
2
; 122,12
cido benzoico; 00115
cido benzoico
[65-85-0]
C
7
H
6
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, cristalino ou cristais
incolores, inodoro ou com ligeiro odor muito caracterstico.
Solubilidade. Ligeiramente solvel em gua, solvel em
gua fervente, facilmente solvel em etanol, ter etlico e
cidos graxos.
Constantes fsico-qumicas
Faixa de fuso (5.2.2): 121 C a 124 C.
IDENTIFICAO
A. Preparar uma soluo saturada de cido benzoico
em gua e fltrar duas vezes. A uma poro do fltrado,
adicionar soluo de cloreto frrico SR. Ocorre formao
de um precipitado alaranjado. A uma outra poro de 10
mL do fltrado, adicionar 1 mL de cido sulfrico 3 M e
resfriar a mistura. Ocorre a formao de um precipitado
branco, solvel em ter etlico, em aproximadamente 10
minutos.
B. Dissolver 5 g de amostra em 100 mL de etanol. Responde
s reaes do on benzoato (5.3.1.1).
a a
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 5 g de amostra em 100 mL
de etanol. A soluo obtida lmpida (5.2.25).
Substncias oxidveis. Dissolver 2 g de amostra em 10 mL
de gua fervente, resfriar e fltrar. Adicionar, ao fltrado, 1
mL de cido sulfrico 5% (v/v) e 0,2 mL de permanganato
de potssio 0,02 M. Forma-se colorao rosa persistente
por, pelo menos, 5 minutos.
Substncias carbonizveis. Dissolver 0,5 g de amostra
em 5 mL de cido sulfrico SR. Aps 5 minutos, a soluo
no mais intensamente colorida que a soluo preparada
pela diluio de 12,5 mL da Soluo de cor H (5.2.12) para
100 mL com cido clordrico SR.
Compostos halogenados e haletos.
Nota: toda a vidraria utilizada deve estar isenta de cloretos.
Uma maneira de se conseguir isso preencher a vidraria
com uma soluo de cido ntrico a 50% (p/v) e deix-la
em banho de ultrassom por uma noite. No dia seguinte,
lavar a vidraria com gua e guard-la preenchida com
gua. recomendado que se tenha uma vidraria reservada
para a execuo desse teste.
Soluo (1): dissolver 6,7 g de amostra em uma mistura
de 40 mL de hidrxido de sdio 0,1 M e 50 mL de etanol e
completar para o volume de 100 mL com gua. Em 10 mL
dessa soluo, adicionar 7,5 mL de soluo de hidrxido de
sdio SR, 0,125 g de liga de nquel-alumnio e aquecer em
banho-maria por 10 minutos. Deixar esfriar temperatura
ambiente, fltrar e lavar com trs pores, de 3 mL cada, de
etanol. Lavar com 25 mL de gua.
Soluo (2): preparar essa soluo de maneira similar
Soluo (1), porm, sem utilizar a amostra.
Soluo (3): soluo padro de cloreto (8 ppm Cl).
Em quatro frascos volumtricos de 25 mL, adicionar,
separadamente, 10 mL da Soluo (1), 10 mL da Soluo
(2), 10 mL da Soluo (3) e 10 mL de gua. A cada frasco,
adicionar 5 mL de sulfato frrico amoniacal SR1, 2 mL
de cido ntrico SR e 5 mL de tiocianato de mercrio SR.
Completar o volume de cada frasco para 25 mL com gua.
Deixar em repouso em banho-maria a 20 C por 15 minutos.
absoro no visvel (5.2.14). Medir a absorvncia da
Soluo (1) em 460 nm, utilizando a Soluo (2) para
ajuste do zero. Medir a absorvncia da Soluo (3) em 460
nm, utilizando a soluo obtida com 10 mL de gua para
ajuste do zero. A absorvncia da Soluo (1) no maior
do que a absorvncia da Soluo (3) (300 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo III. Pesar 5
g de amostra e dissolver em 100 mL de etanol. Preparar
a soluo padro utilizando etanol como solvente. No
mximo 0,001% (10 ppm).
gua (5.2.20.1). Dissolver a amostra em uma mistura de
metanol e piridina (1:2). No mximo 0,7%.
No mximo 0,05%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 200 mg da amostra e dissolver
em 20 mL de etanol. Titular com hidrxido de sdio 0,1
M SV, utilizando vermelho de fenol SI at formao
de colorao violeta, correspondente ao ponto fnal da
titulao. Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV
7
H
6
O
2.
Em recipientes bem fechados e opacos.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimicrobiano.
CIDO BRICO
Acidum boricum
H
3
BO
3
; 61,83
cido brico; 00116
cido brico
[10043-35-3]
H
3
BO
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco, untuoso ao
tato, ou cristais brilhantes incolores.
Solubilidade. Solvel em gua, facilmente solvel em
gua fervente e glicerol a 85% (v/v), solvel em etanol.
IDENTIFICAO
Dissolver, sob aquecimento brando, 0,1 g da amostra em
5 mL de metanol. Adicionar 0,1 mL de cido sulfrico e
levar a soluo ignio. Observa-se chama com bordas
verdes.
ENSAIOS DE PUREZA
de gua fervente. Resfriar e diluir para 100 mL com gua
isenta de dixido de carbono. A soluo obtida lmpida
(5.2.25) e incolor (5.2.12).
pH (5.2.19). 3,8 a 4,8. Determinar na soluo obtida em
Aspecto da soluo.
aa
Solubilidade em etanol. Dissolver 1 g da amostra em 10
mL de etanol fervente. A preparao incolor (5.2.12) e no
mais opalescente que a Suspenso referncia II (5.2.25).
Impurezas orgnicas. Aquecer progressivamente a
amostra ao rubro. No ocorre escurecimento.
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Dissolver 1
g da amostra em 23 mL de gua, adicionar 2 mL de cido
actico M e prosseguir conforme descrito em Ensaio limite
para metais pesados. No mximo 0,002% (20 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Determinar em 2,7 g da amostra. No
mximo 0,045% (450 ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). Dessecar sobre slica-gel
por 5 horas. No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 1 g da amostra e dissolver em
100 mL de gua contendo 15 g de manitol, sob aquecimento.
Titular com hidrxido de sdio M SV, utilizando 0,5 mL
de fenolftalena SI como indicador, at viragem para rosa.
Cada mL de hidrxido de sdio M SV equivale a 61,832
mg de H
3
BO
3
.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Antissptico e adjuvante farmacutico.
CIDO CTRICO
Acidum citricum
HOOC COOH
O H COOH
C
6
H
8
O
7
; 192,12
C
6
H
8
O
7
.H
2
O; 210,14
cido ctrico; 00134
cido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxlico
[77-92-9]
cido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxlico hidratado
(1:1)
[5949-29-1]
C
6
H
8
O
7
em relao substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. Cristais incolores
e translcidos, ou p cristalino, branco. Eforescente
ao ar quente e seco. A forma hidratada ligeiramente
deliquescente em ar mido. Ponto de fuso (5.2.2): 153 C,
com decomposio.
Solubilidade. Muito solvel em gua, facilmente solvel
em etanol.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada a 105 C por duas horas,
dispersa em brometo de potssio, apresenta mximos de
no espectro de cido ctrico SQR, preparado de maneira
idntica.
B. Dissolver 1 g da substncia em 10 mL de gua. A soluo
fortemente cida.
C. Dissolver 0,5 g da substncia em 5 mL de gua e
neutralizar com hidrxido de sdio M. Adicionar 10 mL de
cloreto de clcio SR e aquecer at ebulio. Um precipitado
branco formado.
D. Responde s reaes do on citrato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 2 g da amostra em gua e
completar o volume para 10 mL com o mesmo solvente. A
soluo obtida lmpida (5.2.24) e incolor (5.2.12).
Substncias facilmente carbonizveis. Transferir,
exatamente, cerca de 0,5 g da amostra pulverizada para um
tubo de ensaio previamente lavado com cido sulfrico,
contendo 5 mL de cido sulfrico. Aquecer durante uma hora
a 90 C. A soluo deve fcar somente amarela e no parda.
cido oxlico. Pesar o equivalente a 0,8 g de cido ctrico
e dissolver em 4 mL de gua. Adicionar 3 mL de cido
clordrico e 1 g de zinco granulado. Ferver por 1 minuto
e esfriar por 2 minutos. Transferir o sobrenadante lquido
para um tubo de ensaio contendo 0,25 mL de soluo de
cloreto de fenilidrazina a 1% (p/v) e aquecer at ebulio.
Resfriar rapidamente, transferir para um tubo graduado e
adicionar igual volume de cido clordrico e 0,25 mL de
ferricianeto de potssio SR. Agitar e deixar em repouso
por 30 minutos. A cor rosa desenvolvida na soluo no
deve ser mais intensa do que a desenvolvida pelo padro de
cido oxlico preparado da mesma maneira usando 4 mL
de uma soluo de cido oxlico a 0,01% (p/v).
Alumnio (5.3.2.10). Pesar, exatamente, cerca de 20 g da
amostra e proceder conforme descrito em Ensaio limite de
alumnio, utilizando 40 mL do padro 2 ppm. No mximo
0,2 ppm (0,00002%), quando o cido ctrico for usado em
solues para dilise.
a a
Sulfatos (5.3.2.2). Dissolver 3,2 g da amostra em 40 mL
de gua e prosseguir conforme descrito em Ensaio limite
para sulfatos, utilizando 1 mL da soluo padro de cido
sulfrico 0,005 M. No mximo 0,015% (150 ppm).
Metais Pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo I. Pesar,
exatamente, cerca de 2 g da amostra e dissolver em
hidrxido de sdio SR. Diluir para 25 mL com gua e
proceder conforme descrito em Ensaio limite para metais
pesados. Aps a adio do reagente tioacetamida e diluio
com gua, homogeneizar e aquecer a 80 C, deixando em
seguida em repouso por 2 minutos. No mximo 0,001%
(10 ppm).
gua (5.2.20). Forma anidra: determinar em 2 g da
amostra. No mximo 1%. Forma hidratada: determinar em
0,5 g da amostra. Entre 7,5 e 9,0%.
No mximo 0,1%.
cido ctrico destinado produo de preparao parenteral
cumpre com os seguintes testes adicionais.
mg de cido ctrico anidro, se o produto acabado no for
submetido a um procedimento posterior de remoo de
endotoxinas bacterianas.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,5 g da amostra e dissolver
em 50 mL de gua, aquecendo brandamente, se necessrio,
at dissoluo completa. Titular com hidrxido de sdio M
SV, usando fenolftalena SI como indicador. Cada mL de
hidrxido de sdio M SV equivale a 64,040 mg de C
6
H
8
O
7
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Acidulante.
CIDO DESIDROCLICO
Acidum dehydrocholicum
O
H
H
H
CH
3
CH
3
H
O
O
H
COOH
C H
3
C
24
H
34
O
5
; 402,52
cido desidroclico; 00157
cido (5)-3,7,12-trioxocolan-24-ico
[81-23-2]
C
24
H
34
O
5
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, inodoro e de sabor
amargo.
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua e ter
etlico, pouco solvel em cido actico glacial, etanol e
clorofrmio.
Faixa de fuso (5.2.2): 231 C a 240 C. A faixa entre o
incio e o fm da fuso no excede a 3 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +29,0 a +32,5.
Determinar em soluo a 2% (p/v) em dioxana.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada, dispersa em brometo
cido desidroclico SQR, preparado de maneira idntica.
B. Dissolver 5 mg da amostra em 1 mL de cido sulfrico
e uma gota de soluo de formaldedo. Aps cinco minutos
adicionar 5 mL de gua. A soluo adquire colorao
amarela e azul-esverdeada fuorescente.
ENSAIOS DE PUREZA
Brio. Dissolver 2 g de amostra em 100 mL de gua e
ferver por 2 minutos. Adicionar 2 mL de cido clordrico
SR e ferver por mais 2 minutos, esfriar e fltrar. Lavar o
fltro com gua e completar o volume para 100 mL com o
aa
mesmo solvente. Adicionar 1 mL de cido sulfrico M a
10 mL do fltrado. A soluo obtida no deve turvar nem
precipitar.
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo III. Utilizar 1
g da amostra, aquecendo a soluo a 80 C antes da adio
de tioacetamida SR. No mximo 0,002% (20 ppm).
amostra, em estufa, 105 C por 2 horas. No mximo 1,0%.
No mximo 0,3%.
(5.5.3.1.2). Bactrias aerbicas totais: no mximo 1000
UFC/g. Fungos e leveduras: no mximo 100 UFC/g.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,25 g da amostra previamente
dessecada e dissolver em 30 mL de etanol. Agitar at
solubilizao completa, aquecendo se necessrio, e
adicionar duas gotas de fenolftalena SI e 30 mL de gua.
Titular com hidrxido de sdio 0,1 M SV. Cada mL de
hidrxido de sdio 0,1 M SV equivale a 40,252 mg de
C
24
H
34
O
5
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Colagogo.
CIDO ESTERICO
Acidum stearicum
cido esterico; 00182
cido octadecanico
[57-11-4]
Mistura de cidos esterico (C
18
H
36
O
2
, 284,48) e palmtico
(C
16
H
32
O
2
, 256,43). Pode conter antioxidante.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco a branco-amarelado, ou
cristais brancos, foculosos e cerosos, ou massas slidas
brancas a fracamente amareladas. Odor leve, semelhante
ao de sebo no ranoso.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, facilmente
solvel em clorofrmio e ter etlico, solvel em etanol e
ter de petrleo.
Temperatura de congelamento: no inferior a 54 C.
IDENTIFICAO
Cumpre com os requerimentos do teste ndice de acidez
em Ensaios de Pureza.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez. Agitar, durante 2 minutos, 5 g da amostra fundida
com volume igual de gua quente; esfriar e fltrar. Adicionar
uma gota de alaranjado de metila SI ao fltrado. No se
desenvolve colorao avermelhada.
ndice de acidez (5.2.29.7). 194 a 212.
ndice de iodo (5.2.29.10). No mximo 4,0.
Parafna e outras substncias no saponifcveis. Ferver
em balo volumtrico cerca de 1 g da amostra com 30 mL
de gua e 0,5 g de carbonato de sdio anidro. A soluo
resultante, enquanto quente, lmpida ou, no mximo,
levemente opalescente.
mximo 0,001% (10 ppm).
No mximo 0,1%.
(5.5.3.1.2). Bactrias aerbicas totais: no mximo 1000
Cumpre o teste.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Matria-prima para preparao de estearatos de sdio,
magnsio, zinco e outros adjuvantes farmacotcnicos.
a a
CIDO fLICO
Acidum folicum
N
H
N
N
N
N
O
N COOH
COOH
N H
2
O
H
H
C
19
H
19
N
7
O
6
; 441,40
cido flico; 00194
cido N-[4-[[(2-amino-3,4-diidro-4-oxo-6-pteridinil)
metil]amino]benzoil]-L-glutmico
[59-30-3]
C
19
H
19
N
7
O
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, amarelo-alaranjado,
inodoro.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, insolvel
em etanol, acetona, clorofrmio e ter etlico. Solvel em
solues de hidrxidos alcalinos. Solvel em cido clordrico
e cido sulfrico, produzindo solues amarelo-plidas.
substncia anidra. Determinar em soluo a 1,0% (p/v)
em hidrxido de sdio 0,1 M.
IDENTIFICAO
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G, como
suporte, e mistura de etanol, lcool n-proplico e soluo
concentrada de amnia (60:20:20), como fase mvel.
Aplicar, separadamente, placa, 2 L de cada uma das
solues, recentemente preparadas, descritas a seguir.
Soluo (1): soluo a 0,5 mg/mL da amostra em mistura
de soluo concentrada de amnia e metanol (2:9).
Soluo (2): soluo a 0,5 mg/mL de cido flico SQR em
mistura de soluo concentrada de amnia e metanol (2:9).
B. O tempo de reteno do pico principal do cromatograma
da Soluo amostra, obtida em Doseamento, corresponde
quele do pico principal da Soluo padro.
ENSAIOS DE PUREZA
Pureza cromatogrfca. Proceder conforme descrito em
Doseamento. Utilizar a Soluo amostra concentrada
como Soluo teste.
Procedimento: injetar 10 L da Soluo teste. Registrar
o cromatograma por, no mnimo, duas vezes o tempo
de reteno do cido flico e medir as reas sob os
picos. A soma das reas de todos os picos, exceto aquele
correspondente ao cido flico, no maior que 2,0% da
soma das reas de todos os picos registrados, incluindo
aquele correspondente ao cido flico. No considerar
picos relativos ao solvente.
gua (5.2.20.1). No mximo 8,5%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar 1 g da amostra. No
mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
de detector ultravioleta a 280 nm; coluna de 250 nm de
m a 10 m), mantida temperatura ambiente; fuxo da
Fase mvel de 1,2 mL/minuto.
Fase mvel: transferir 2 g de fosfato de potssio monobsico
para balo volumtrico de 1000 mL. Adicionar 650 mL de
gua, 15 mL de hidrxido de tetrabutilamnio 0,5 M em
metanol, 7 mL de cido fosfrico M, 270 mL de metanol
e homogeneizar. Ajustar o pH em 5,0 com cido fosfrico
M ou hidrxido de amnio 6 M. Completar o volume com
gua, homogeneizar e fltrar.
Nota: proteger da luz direta as solues descritas a seguir.
Soluo padro interno: dissolver 50 mg de metilparabeno
em 1 mL de metanol, diluir para 25 mL com Fase mvel e
homogeneizar.
Soluo amostra concentrada: transferir, exatamente,
cerca de 0,1 g da amostra para balo volumtrico de 100
mL. Adicionar 40 mL de Fase mvel e 1 mL de hidrxido
de amnio a 10% (v/v). Completar o volume com Fase
mvel e homogeneizar.
Soluo amostra: transferir 4 mL da Soluo amostra
concentrada e 4 mL da Soluo padro interno para balo
volumtrico de 50 mL. Completar o volume com Fase
Soluo padro estoque: preparar soluo de cido flico
SQR a 1 mg/mL em Fase mvel, utilizando 1 mL de
hidrxido de amnio a 10% (v/v) para cada 100 mL de
soluo.
Soluo padro: transferir 4 mL da Soluo padro
estoque e 4 mL da Soluo padro interno para balo
aa
Injetar replicatas de 10 L da Soluo padro. A resoluo
entre metilparabeno e cido flico no menor que 2,0.
O desvio padro relativo das reas de replicatas dos picos
registrados no maior que 2,0%.
19
H
19
N
7
O
6

na amostra a partir das respostas obtidas para a relao
cido flico/metilparabeno com a Soluo padro e a
Soluo amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Hematopoitico.
CIDO fLICO COMPRIMIDOS
19
H
19
N
7
O
6
.
IDENTIFICAO
Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade do
p equivalente a 50 mg de cido flico com 100 mL de
hidrxido de sdio 0,1 M aquecido entre 40 C e 50 C.
Deixar esfriar e fltrar. Ajustar o pH do fltrado para 3,0 com
cido clordrico. Resfriar a soluo at 5 C, fltrar e lavar
o precipitado com gua fria at que as guas de lavagem
no respondam reao de cloretos (5.3.1.1). Lavar o
precipitado com acetona e secar a 80 C, durante 1 hora.
Transferir 10 mg do resduo para balo volumtrico de 100
mL, dissolver em hidrxido de sdio 0,1 M e completar
o volume com o mesmo solvente. Transferir 5 mL dessa
volume com hidrxido de sdio 0,1 M, obtendo soluo
0,001% (p/v). O espectro de absoro no ultravioleta
(5.2.14), na faixa de 230 nm a 386 nm, da soluo obtida
exibe mximos em 256 nm, 283 nm e 365 nm. A razo
entre os valores de absorvncia medidos em 256 nm e 365
nm est compreendida entre 2,80 e 3,00.
CARACTERSTICAS
Teste de friabilidade (5.1.3.2).Cumpre o teste.
Tempo: 45 minutos
dissoluo e proceder conforme descrito em Doseamento.
Tolerncia: no menos do que 75% (Q) da quantidade de-
clarada de C
19
H
19
N
7
O
6
DOSEAMENTO
com slica quimicamente ligada a grupo octilsilano (5 m),
mantida temperatura ambiente; vazo da Fase mvel de
1 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de fosfato de potssio monobsico
0,05 M e acetonitrila (93:7). Ajustar o pH da mistura para
6,0 com hidrxido de sdio 5 M.
Soluo amostra: pesar e pulverizar 20 comprimidos.
Transferir quantidade do p equivalente a 20 mg de cido
flico para balo volumtrico de 100 mL, adicionar 50 mL
de hidrxido de sdio 0,1 M e completar o volume com o
mesmo solvente. Homogeneizar. Centrifugar, transferir 5
mL do sobrenadante para balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com Fase mvel.
Soluo padro: transferir, exatamente, cerca de 20 mg
de cido flico SQR para balo volumtrico de 100 mL
e completar o volume com hidrxido de sdio 0,1 M.
Homogeneizar. Transferir 5 mL desta soluo para balo
volumtrico de 100 mL e completar o volume com Fase
mvel.
reas sob os picos. Calcular a quantidade de C
19
H
19
N
7
O
6

nos comprimidos a partir das respostas obtidas com a
Soluo padro e Soluo amostra.
ROTULAGEM
Observar legislao vigente.
a a
CIDO LCTICO
Acidum lacticum
C H
3
OH
O
OH
C
3
H
6
O
3
; 90,08
cido lctico; 00274
cido 2-hidroxipropanico
[50-21-5]
Mistura do cido 2-hidroxipropanico e seus produtos
de condensao, tais como cido lactoil-lctico, e os
polilcticos e gua. O equilbrio entre cido lctico e os
cidos polilcticos dependente da concentrao e da
temperatura. O cido lctico normalmente um racemato
((RS)-cido lctico), mas o ismero S (+) pode predominar.
C
3
H
6
O
3
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido viscoso incolor ou
levemente amarelado.
Solubilidade. Miscvel em gua, etanol e ter etlico.
Poder rotatrio (5.2.8): 0,05 a +0,05, para o cido
lctico racmico.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 1 g da amostra em gua. A soluo
fortemente cida (pH menor que 4).
B. Responde s reaes do on lactato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
de hidrxido de sdio M e diluir para 50 mL com gua. A
soluo obtida no mais corada que a Soluo padro de
cor SC F (5.2.12).
Acares e outras substncias redutoras. A 10 mL de
tartarato cprico alcalino SR quente adicionar cinco gotas
da amostra. Nenhum precipitado vermelho produzido.
Substncias facilmente carbonizveis. Lavar um tubo de
ensaio com cido sulfrico e deixar escorrer por 10 minutos.
Adicionar ao tubo de ensaio 5 mL de cido sulfrico e,
cuidadosamente, acrescentar 5 mL da amostra, de modo a
no misturar os lquidos. Manter o tubo a uma temperatura
de 15 C. Aps 15 minutos, nenhuma colorao escura se
desenvolve na interface entre os dois cidos.
Substncias insolveis em ter. Dissolver 1 g da amostra
em 25 mL de ter etlico. A soluo no mais opalescente
que o solvente utilizado para o teste.
cidos oxlico, ctrico e fosfrico. A 5 mL da soluo
obtida em Aspecto da soluo adicionar amnia SR at
pH fracamente alcalino (entre 8 e 10). Adicionar 1 mL de
soluo de cloreto de clcio SR. Aquecer em banho-maria
por 5 minutos. Qualquer opalescncia na soluo, antes ou
depois do aquecimento, no mais intensa que a de uma
mistura de 1 mL de gua e 5 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo.
Clcio (5.3.2.7). Diluir 5 mL da soluo obtida em Aspecto
da soluo para 15 mL com gua e prosseguir conforme
descrito em Ensaio limite para clcio. No mximo 0,02%
(200 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). A 10 mL de soluo da amostra a 1%
(p/v) acidifcada com cido ntrico adicionar algumas
gotas de nitrato de prata 0,1 M. Nenhuma opalescncia
produzida imediatamente.
Sulfatos (5.3.2.2). A 10 mL de soluo da amostra a 1%
(p/v) adicionar duas gotas de cido clordrico e 1 mL de
cloreto de brio SR. Nenhuma turbidez produzida.
mximo 0,001% (10 ppm).
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Transferir, exatamente, cerca de 1 g da amostra para frasco
com tampa, adicionar 10 mL de gua e 20 mL de hidrxido
de sdio M. Fechar o frasco e deixar em repouso por 30
minutos. Adicionar 0,5 mL de fenolftalena SI e titular com
cido clordrico M SV at desaparecimento da colorao
rosa. Cada mL de hidrxido de sdio M equivale a 90,080
mg de C
3
H
6
O
3
.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Agente tamponante.
aa
CIDO NALIDXICO
Acidum nalidixicum
N N C H
3
O
COOH
CH
3
C
12
H
12
N
2
O
3
; 232,24
cido nalidxico; 00294
cido 1-etil-1,4-diidro-7-metil-4-oxo-1,8-naftiridina-3-
carboxlico
[389-08-2]
C
12
H
12
N
2
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco a quase
branco ou amarelo plido.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, solvel em
cloreto de metileno, pouco solvel em acetona e etanol.
Solvel em solues diludas de hidrxidos alcalinos.
Faixa de fuso (5.2.2): 225 C a 231 C.
IDENTIFICAO
O teste de identifcao A. poder ser omitido se forem
realizados os testes B., C. e D.
cido nalidxico SQR, preparado de maneira idntica.
de 230 nm a 350 nm, de soluo resultante a 0,0005% (p/v)
em hidrxido de sdio 0,1 M, exibe mximos em 258 nm e
334 nm. A razo entre os valores de absorvncia medidos
em 258 nm e 334 nm est compreendida entre 2,2 e 2,4.
C. A mancha principal do cromatograma da Soluo
(2), obtida em Substncias relacionadas, corresponde
em posio, cor e intensidade a mancha principal no
cromatograma obtido com a Soluo (3).
D. Dissolver 0,1 g da amostra em 2 mL de cido clordrico.
Adicionar 0,5 mL de 2-naftol a 10% (p/v) em etanol.
Desenvolve-se colorao vermelha-alaranjada.
ENSAIOS DE PUREZA
Absoro de luz. Dissolver 1,5 g da amostra em balo
volumtrico de 50 mL com cloreto de metileno e completar
o volume com o mesmo solvente. Homogeneizar. A
absorvncia da soluo (5.2.14) medida em 420 nm no
maior que 0,10.
slica-gel F
254
, como suporte, e mistura de amnia SR,
cloreto de metileno e etanol (10:20:70), como fase mvel.
Soluo (1): dissolver 0,2 g da amostra em cloreto de
metileno e completar o volume para 10 mL com o mesmo
solvente. Homogeneizar.
volumtrico de 20 mL e completar o volume com cloreto
de metileno.
Soluo (3): dissolver 10 mg de cido nalidxico SQR em
cloreto de metileno e completar o volume para 10 mL com
o mesmo solvente. Homogeneizar.
de metileno.
de metileno.
de metileno.
intensa que aquela obtida com a Soluo (5) (0,1%) e no
mximo uma mancha mais intensa que a mancha obtida
com a Soluo (6) (0,04%).
mximo 0,002% (20 ppm).
amostra, em estufa entre 100 C e 105 C, por 2 horas. No
mximo 0,5 %.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 0,25 g da amostra em 30 mL
de dimetilformamida, previamente neutralizada, utilizando
timolftalena SI como indicador. Titular com metxido de
ltio 0,1 M SV, utilizando timolftalena SI como indicador.
Utilizar agitador magntico e evitar absoro de dixido de
a a
carbono atmosfrico. Cada mL de metxido de ltio 0,1 M
SV equivale a 23,224 mg de C
12
H
12
N
2
O
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibacteriano.
CIDO NALIDXICO COMPRIMIDOS
Contm, no mnimo, 95,0% e, no mximo, 105,0% das
quantidades declaradas de C
12
H
12
N
2
O
3.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Utilizar quantidade
do p equivalente a 1 g de cido nalidxico, adicionar 50
mL de clorofrmio, agitar por 15 minutos, fltrar e evaporar
o fltrado at secura. O resduo responde ao teste A. de
Identifcao da monografa de cido nalidxico.
B. Secar o resduo do teste A. de Identifcao, a 105 C por
2 horas. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na
faixa de 230 nm a 350 nm, de soluo do resduo a 0,0008%
(p/v) em hidrxido de sdio 0,1 M, exibe mximos em 258
nm e 334 nm.
C. Secar o resduo do teste A. de Identifcao, a 105 C
por 2 horas. Temperatura de Fuso (5.2.2): em torno de
228 C.
CARACTERSTICAS
Determinao de peso (5.1.1). Cumpre o teste
Teste de dureza (5.1.3.1). Cumpre o teste
Teste de friabilidade (5.1.3.2). Cumpre o teste
Teste de desintegrao (5.1.4.1). Cumpre o teste
Uniformidade de dose unitria (5.1.6). Cumpre o teste
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
como suporte, e mistura de amnia 5 M,
cloreto de metileno e etanol (20:30:50), como fase mvel.
seguintes solues recentemente preparadas.
Soluo (1): dissolver quantidade de comprimido
equivalente a 0,1 g de cido nalidxico em 50 mL de cloreto
de metileno, agitar por 15 minutos, fltrar e evaporar at
secura. Dissolver o resduo em 5 mL de cloreto de metileno.
Soluo (2): diluir a Soluo (1) para balo volumtrico
de 200 mL e completar o volume com cloreto de metileno.
Diluir a soluo resultante (1:2) com cloreto de metileno.
Soluo (3): diluir a Soluo (2) (1:2,5) com cloreto de
metileno.
Nenhuma mancha obtida no cromatograma com a Soluo
(1), alm da mancha principal, deve ser mais intensa do que
a mancha obtida com a Soluo (2) (0,25%) e no mximo
uma mancha mais intensa que a mancha obtida com a
Soluo (3) (0,1%).
TESTE DE DISSOLUO
Meio de dissoluo: tampo fosfato pH 8,6, 900 mL
Aparelhagem: p, 60 rpm
Tempo: 30 minutos
dissoluo, fltrar e diluir em hidrxido de sdio 0,01 M
at a concentrao adequada. Medir as absorvncias das
solues em 334 nm (5.2.14) utilizando uma mistura
de hidrxido de sdio 0,01 M e Meio de dissoluo na
mesma proporo da soluo teste, para o ajuste do zero.
Calcular a quantidade de cido nalidxico dissolvido no
meio, comparando as leituras obtidas com a soluo de
cido nalidxico SQR na concentrao de 0,00055% (p/v),
declarada de cido nalidxico se dissolvem em 30 minutos.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
do p equivalente a 0,1 g de cido nalidxico para balo
volumtrico de 200 mL, adicionar 150 mL de hidrxido de
sdio M, agitar por 3 minutos e completar o volume com
o mesmo solvente. Deixar a soluo em repouso por 15
minutos. Transferir 2 mL para balo volumtrico de 200 mL
e completar o volume com gua. Preparar soluo padro
nas mesmas condies. Medir a absorvncia da soluo
resultante em 334 nm, utilizando hidrxido de sdio 0,01
M para ajuste do zero. Calcular o teor de cido nalidxico
na amostra, a partir das leituras obtidas. Alternativamente,
realizar os clculos considerando A(1%, 1 cm) = 494, em
334 nm, em hidrxido de sdio 0,01 M.
aa
Em recipientes hermticos e protegidos da luz.
ROTULAGEM
CIDO NALIDXICO SUSPENSO ORAL
12
H
12
N
2
O
3
.
IDENTIFICAO
Transferir 5 mL da amostra para funil de separao,
adicionar 30 mL de gua e 20 mL de carbonato de sdio
decaidratado a 10% (p/v). Homogeneizar. Extrair com
duas pores de 30 mL de clorofrmio. Acidifcar a
soluo aquosa com cido clordrico 5 M, adicionar 40 mL
de clorofrmio e agitar. Recolher a camada clorofrmica e
transferir para funil de separao, lavar com 10 mL de gua
e adicionar 0,5 mL de cido clordrico 5 M, fltrar a camada
clorofrmica atravs de algodo e evaporar o fltrado at
secura. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14),
na faixa de 230 nm a 350 nm, da soluo do resduo a
0,0008% (p/v) em hidrxido de sdio 0,1 M, exibe dois
mximos, em 258 nm e 334 nm.
CARACTERSTICAS
Contagem de micro-organismos viveis (5.5.3.1.2).
Cumpre o teste.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Transferir volume ou
massa da suspenso oral, equivalente a 0,12 g de cido
nalidxico, para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar
hidrxido de sdio 0,01 M, agitar e completar o volume
com o mesmo solvente. Transferir 2 mL dessa soluo para
hidrxido de sdio 0,01 M. Filtrar, se necessrio. Medir a
absorvncia da soluo resultante em 334 nm, utilizando
hidrxido de sdio 0,01 M para o ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
12
H
12
N
2
O
3
na suspenso oral, considerando
A (1%,1 cm) = 494, em 334 nm, em hidrxido de sdio
0,01 M.
ROTULAGEM
CIDO PARAMINOBENZOICO
Acidum 4-aminobenzoicum
COOH
NH
2
C
7
H
7
NO
2
; 137,14
cido paraminobenzoico; 00098
cido 4-aminobenzoico
[150-13-0]
C
7
H
7
NO
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino ou agulhas brancas
ou branco-amareladas, de sabor amargo. Escurece quando
exposto ao ar e luz.
em etanol, solvel em glicerol a quente, ligeiramente
solvel em ter etlico, pouco solvel em clorofrmio.
Facilmente solvel em solues de hidrxidos e carbonatos
alcalinos e pouco solvel em solues de cido clordrico
SR.
Faixa de fuso (5.2.2): 186,0 C a 189,5C.
IDENTIFICAO
A. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa
de 200 nm a 400 nm, de soluo a 1% (p/v) em lcool
isoproplico, exibe mximo em 288 nm. A absorvncia em
288 nm de, aproximadamente, 1,370.
B. Dissolver 0,05 g da amostra em mistura de 1 mL de
hidrxido de sdio SR e 1 mL de gua destilada. Junte,
nesta, ordem, 0,5 mL de iodeto de potssio SR, 0,5 mL de
cido clordrico SR e 0,5 mL de hipoclorito de sdio SR.
Forma-se precipitado de cor castanho.
C. Dissolver 0,01 g da amostra em 2 mL de cido clordrico
SR, aquecendo, se necessrio. Resfriar a cerca de 10 C e
adicionar 1 mL de nitrito de sdio SR e, a seguir, 3 mL de
2-naftol SR. Forma-se colorao vermelha.
a a
ENSAIOS DE PUREZA
Metais pesados (5.3.2.3). Suspender 1 g da amostra em 15
mL de gua destilada e adicionar quantidade de hidrxido
de amnio 6 M at dissoluo. Adicione cido actico SR
at que a mistura fque levemente cida ao papel tornassol e
adicione mais 2 mL do mesmo cido. Prosseguir conforme
descrito em Mtodo I. No mximo 0,002% (20 ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). No mximo 0,2%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Pesar exatamente cerca de 250 mg da amostra, previamente
dessecada, e transferir para erlenmeyer. Adicionar 5 mL
de cido clordrico e 50 mL de gua destilada. Agitar at
completa dissoluo, aquecendo, se necessrio. Resfriar
a cerca de 15 C, adicionar 25 g de gelo picado e titular
lentamente com nitrito de sdio 0,1 M SV at que uma gota
produza uma colorao azul ao ser tocada, em uma placa
de porcelana, por basto de vidro umedecido pela soluo
de amido iodetado SI. A titulao estar terminada quando
a mistura estiver em repouso mais de 1 minuto e uma gota
reproduzir a colorao azul observada com a soluo de
amido iodetado SI. Cada mL de nitrito de sdio 0,1 M SV
7
H
7
NO
2
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Protetor tpico.
CIDO SALICLICO
Acidum salicylicum
COOH
OH
C
7
H
6
O
3
; 138,12
cido saliclico; 00340
cido 2-hidroxibenzoico
[69-72-7]
C
7
H
6
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P esponjoso, branco e cristalino
ou cristais brancos, geralmente em forma de agulhas fnas,
inodoro e de sabor a princpio adocicado, passando a
azedo. O produto sinttico branco e inodoro. O obtido de
substncias naturais ligeiramente corado de amarelo ou
rseo e com leve odor de salicilato de metila.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, muito solvel
em acetona, facilmente solvel em etanol e ter etlico,
ligeiramente solvel em clorofrmio e leos graxos.
Faixa de Fuso (5.2.2): 158 C a 161 C.
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao B. e C. podem ser omitidos se for
realizado o teste A.
cido saliclico SQR, preparado de maneira idntica.
B. Solubilizar 0,1 g da amostra, a frio, em cido sulfrico.
Adicionar alguns cristais de nitrato de sdio. Desenvolve-
se colorao vermelha.
C. Adicionar a uma soluo aquosa saturada da amostra
uma gota de cloreto frrico SR. Desenvolve-se colorao
roxa que, pela adio de hidrxido de amnio, se torna
pardo-esverdeada. Os cidos minerais fortes, algumas
bases e diferentes sais impedem esta reao.
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias facilmente Carbonizveis. Dissolver 0,5 g
da amostra em 5 mL de cido sulfrico. No se desenvolve
colorao nitidamente parda antes de 20 minutos.
fenol. Dissolver 0,5 g da amostra em 10 mL de carbonato
de sdio SR, agitar com 10 mL de ter etlico e deixar em
repouso at decantar a fase etrea. Dessecar a fase etrea
com sulfato de sdio anidro e fltrar. Um volume de 5 mL
do fltrado, abandonado evaporao espontnea, deixa,
no mximo, 0,001 g de resduo. Dissolver o resduo em
gua quente, adicionar hidrxido de amnio e algumas
gotas de hipoclorito de sdio SR. Desenvolve-se colorao
azul.
Cloretos (5.3.2.1). Dissolver, sob aquecimento, 1,5 g
da amostra em 75 mL de gua destilada. Deixar resfriar,
adicionar gua destilada at completar o volume inicial
e fltrar. Um volume de 25 mL do fltrado no contem
mais cloreto do que o correspondente a 0,10 mL do cido
clordrico 0,02 M. No mximo 0,014% (140 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). A 25 mL do fltrado, obtido em
Cloretos, adicionar duas gotas de cido clordrico e cinco
aa
gotas de cloreto de brio SR. A preparao obtida no
mais opalescente que 0,1 mL de cido sulfrico 0,01 M. No
mximo 0,02% (200 ppm).
mL de acetona. Adicionar 2 mL de gua, 2 mL de tampo de
acetato pH 3,5 e 1,2 mL de tioacetamida SR. Homogeneizar
e deixar em repouso por 5 minutos. A colorao produzida
no mais intensa do que a obtida na Preparao padro,
preparada com 25 mL de acetona, 2 mL de Soluo padro
de chumbo (10 ppm) e tratada da mesma maneira que a
amostra. No mximo 0,002% (20 ppm).
amostra. No mximo 0,5%.
Cinzas Sulfatadas (5.2.10). Determinar em 1 g da amostra.
No mximo 0,05%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,5 g da amostra e dissolver em
25 mL de etanol, previamente neutralizado com hidrxido
de sdio 0,1 M. Utilizar fenolftalena SI como indicador e
titular com hidrxido de sdio 0,1 M SV, at o aparecimento
de colorao rsea. Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M
7
H
6
O
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Ceratoltico.
CIDO SRBICO
Acidum sorbicum
C H
3
COOH
C
6
H
8
O
2
; 112,13
cido srbico; 00346
cido (2E,4E)-2,4-hexadienico
[110-44-1]
C
6
H
8
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou quase
branco.
em etanol e em ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 132C a 136C.
IDENTIFICAO
O teste de identifcao A. pode ser omitido se forem
realizados os testes B. e C.
A. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14)
da amostra, dispersa em brometo de potssio apresenta
observados no espectro de cido srbico SQR, preparado
de maneira idntica.
B. Dissolver 50 mg em gua e completar volume para 250
mL. Diluir 2 mL desta soluo para 200 mL com cido
clordrico 0,1 M. O espectro de absoro no ultravioleta
(5.2.14) na faixa de 230 a 350 nm da soluo obtida exibe
mximo em 264 nm ( 2 nm).A absorvncia em 264 nm
de 0,43 a 0,51.
C. Dissolver 0,2 g da amostra em 2 mL de etanol e adicionar
0,2 mL de gua de bromo. A soluo se descolore.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Soluo a 5% em etanol deve ser
Limite de aldedos. Dissolver 1 g da amostra em uma
mistura de 50 mL de lcool isoproplico e 30 mL de gua,
ajustar a soluo para pH 4,0 com cido clordrico 0,1 M
ou hidrxido de sdio 0,1 M e completar o volume para
100 mL com gua. A 10 mL da soluo, adicionar 1 mL de
fucsina descorada SR e deixar em repouso por 30 minutos.
A cor produzida no deve ser mais intensa que a obtida
em soluo preparada pela adio de 1 mL de fucsina
descorada SR em mistura de 1,5 mL de soluo padro de
acetaldedo (100 ppm C
2
H
4
O), 4 mL de lcool isoproplico
e 4,5 mL de gua. (0,15%, calculado como C
2
H
4
O).
mximo 0,001% (10 ppm).
gua (5.2.20). Determinar em 2 g de substncia. No
mximo 0,5%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 1 g de
substncia. No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
Dissolver 0,1 g da amostra em 20 mL de etanol. Titular
com hidrxido de sdio 0,1 M SV, utilizando 0,2 mL de
fenolftalena SI como indicador, at viragem para rseo.
Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV equivale a 11,213
mg de C
6
H
8
O
2
.
a a
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz e do calor
excessivo.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Conservante antimicrobiano, especialmente contra fungos
e leveduras.
CIDO TRICLOROACTICO
Acidum trichloraceticum
OH
O
Cl
Cl Cl
C
2
HCl
3
O
2
; 163,39
cido tricloroactico; 00366
cido 2,2,2-tricloroactico
[76-03-9]
Contm no mnimo 98,0% e no mximo 100,5% de cido
tricloroactico.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Massa cristalina, branca ou cristais
incolores muito deliquescentes.
Solubilidade. Muito solvel em gua, em etanol e em
cloreto de metileno.
IDENTIFICAO
A. A 0,5 mL da soluo obtida no Ensaio limite para cloretos
adicionar 2 mL de piridina e 5 mL de soluo concentrada
de hidrxido de sdio SR. Agitar energicamente e aquecer
em banho-maria a 60-70C durante 5 minutos. A fase
superior apresenta colorao vermelha intensa.
B. A soluo obtida no Ensaio limite para cloretos
fortemente cida.
ENSAIOS DE PUREZA
Cloretos (5.3.2.1). Dissolver 2,5 g da amostra em gua
e completar 25 mL com o mesmo solvente. Pipetar 5 mL
desta soluo e completar 15 mL com gua. A soluo
satisfaz ao Ensaio limite para cloretos. No mximo, 0,01%
(100 ppm).
Cinzas sulfatadas (5.2.10). No mximo, 0,1 %,
determinadas em 1,0 g da amostra.
DOSEAMENTO
Dissolver 0,150 g da amostra em 20 mL de gua. Titular
com hidrxido de sdio 0,1 M SV utilizando fenolftalena
SI como indicador. 1 mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV
corresponde a 16,339 mg de C
2
HCl
3
O
2.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Tem ao custica.
CIDO UNDECILNICO
Acidum undecylenicum
C H
2 COOH
C
11
H
20
O
2
; 184,28
cido undecilnico; 00367
cido 10-undecenico
[112-38-9]
C
11
H
20
O
2
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Massa cristalina branca ou
amarelada e plida ou, quando acima da temperatura de
congelamento, lquido incolor ou amarelo plido.
solvel em etanol, ter etlico, leos graxos e leos
essenciais.
Densidade relativa (5.2.5): 0,910 a 0,913.
IDENTIFICAO
A. A temperatura de congelamento (5.2.4) da amostra est
entre 21 C e 24 C.
B. O ndice de refrao (5.2.6) da amostra, determinado a
(25,0 0,5) C, est entre 1,447 a 1,450.
C. Dissolver 0,1 g da amostra em mistura de 2 mL de cido
sulfrico M e 5 mL de cido actico glacial. Adicionar,
gota a gota, 0,25 mL de permanganato de potssio SR. A
soluo de permanganato de potssio se descolore.
aa
ENSAIOS DE PUREZA
cidos solveis em gua. Adicionar 5 mL de gua a 5
mL de amostra, homogeneizar e fltrar a camada aquosa
em papel de fltro umedecido com gua. Adicionar uma
gota de alaranjado de metila SI e titular com hidrxido de
sdio 0,01 M SV. No mais que 1 mL de hidrxido de sdio
0,01 M SV necessrio para se obter colorao idntica
produzida por uma gota de alaranjado de metila SI em 5
mL de gua.
ndice de iodo (5.2.29.10). 131 a 138.
mximo 0,001% (10 ppm).
No mximo 0,15%.
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 0,75 g da amostra em 50
mL de etanol. Titular com hidrxido de sdio 0,1 M SV,
utilizando 0,2 mL de fenolftalena SI como indicador,
at viragem para rseo persistente por, no mnimo, 30
segundos. Realizar ensaio em branco e fazer as correes
necessrias. Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV
11
H
20
O
2
.
Em recipientes bem fechados e no metlicos, protegidos
da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antifngico tpico.
GUA PARA INJETVEIS
Aqua ad injectabilia
H
2
O; 18,02
gua para injetveis; 09320
gua
[7732-18-5]
gua para injetveis o insumo utilizado na preparao
de medicamentos para administrao parenteral, como
veculo ou na dissoluo ou diluio de substncias ou de
preparaes. Outros exemplos de aplicaes farmacuticas
so a fabricao de princpios ativos de uso parenteral, para
lavagem fnal de equipamentos, tubulao e recipientes
usados em preparaes parenterais e na limpeza de certos
equipamentos.
gua para injetveis obtida por destilao da gua
adequadamente tratada, em equipamento cujas partes em
contato com a gua so de vidro neutro, quartzo ou outro
material apropriado. Pode ser obtida tambm por processo
equivalente ou superior destilao, na remoo de
contaminantes qumicos, micro-organismos e endotoxinas
bacterianas. O processo de obteno deve ser validado.
Para assegurar que a gua atende aos requisitos de qualidade
requeridos, sua produo deve ser monitorada por meio
de procedimentos validados, quanto aos parmetros de
condutividade eltrica, carbono orgnico total, endotoxinas
e contagem microbiana.
gua esterilizada para injeo. gua esterilizada para
injeo a gua para injetveis que, aps esterilizao, foi
armazenada em recipientes inertes, como o ao inox 316L
polido, mantidos fechados, em temperatura de 80 85 C e
sob recirculao, por um perodo mximo de 24 horas, em
condies para assegurar que o produto ainda cumpre com
o teste para endotoxinas bacterianas. A gua esterilizada
livre da adio de qualquer substncia.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido lmpido, incolor, inspido
e inodoro.
ENSAIOS DE PUREZA
Cumpre com os testes descritos na monografa de gua
purifcada.
A gua esterilizada para injeo cumpre com os testes
descritos na monografa de gua purifcada e com o teste
adicional apresentado abaixo.
Contaminao por partculas: partculas sub-visveis
(5.1.7.1). Cumpre o teste A ou B, conforme o volume dos
recipientes.
mesoflos (5.5.3.1.2). Cumpre o teste. Proceder conforme
descrito para substncias solveis em gua em mtodo
de Filtrao por membrana ou outra metodologia que se
revele igual ou superior a mtodo farmacopeico validado.
Utilizar pelo menos 200 mL de amostra. No mximo 10
UFC/100 mL.
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). No mximo 0,25 UI
de endotoxinas por mL.
A gua esterilizada para injeo cumpre adicionalmente
com o teste de Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2) e com o
Teste de esterilidade (5.5.3.2.1).
Armazenada e distribuda em condies adequadas para
assegurar a manuteno das propriedades fsico-qumicas
e microbiolgicas exigidas.
a a
ROTULAGEM
GUA PURIfICADA
Aqua purifcata
H
2
O; 18,02
gua purifcada; 09879
gua
[7732-18-5]
gua purifcada a gua potvel que passou por algum
tipo de tratamento para retirar os possveis contaminantes
e atender aos requisitos de pureza estabelecidos nessa
monografa. preparada por destilao, troca inica,
osmose reversa ou por outro processo adequado. Deve
estar livre da adio de quaisquer substncias dissolvidas.
Geralmente utilizada na preparao de medicamentos que
no requeiram gua estril nem apirognica, destinados ao
uso no parenteral.
DESCRIO
e inodoro.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Adicionar 0,05 mL de vermelho
de metila SI em 10 mL da amostra recentemente fervida
e arrefecida em frasco de borossilicato. A soluo no
desenvolve colorao vermelha. Adicionar 0,1 mL de
soluo de azul de bromotimol SI em 10 mL da amostra. A
soluo no adquire colorao azul.
Substncias oxidveis. Ferver 100 mL da amostra com 10
mL cido sulfrico M. Adicionar 0,2 mL de permanganato
de potssio 0,02 M SV e deixar em ebulio durante 5
minutos. A soluo remanescente fracamente rosada.
Condutividade da gua (5.2.24). No mximo 1,3 S/
cm a 25,0C 0,5C. O usurio deve defnir o limite
mximo adequado para a aplicao especfca (11.vol.1).
Alternativamente substitui os testes para amnio, clcio e
magnsio, cloretos, nitratos e sulfatos.
Carbono orgnico total (5.2.30). Alternativamente,
substitui o teste para substncias oxidveis. No mximo
0,50 mg/L.
Amnio. Adicionar 1 mL de iodeto de potssio mercrico
alcalino SR1 em 20 mL da amostra. Aps 5 minutos,
examinar a soluo no eixo vertical do tubo. A soluo no
mais intensamente colorida do que o padro pela adio
de 1 mL de iodeto de potssio mercrico alcalino SR1
a uma mistura de 4 mL de soluo padro de amnio (1
ppm NH
4
) e 16 mL de gua isenta de amnia. No mximo
0,00002% (0,2 ppm).
Clcio e magnsio. Adicionar 2 mL de tampo de cloreto
de amnio pH 10,0, 0,5 mL de negro de eriocromo T e 5 L
de edetato de sdio 0,05 M em 100 mL da amostra. Uma
colorao azul lmpida produzida. No mximo 1 ppm.
Cloretos. Adicionar 1 mL de cido ntrico SR e 0,2 mL
de nitrato de prata 0,1 M em 10 mL da amostra. A soluo
no apresenta alteraes na aparncia por, pelo menos, 15
minutos.
Nitratos. Transferir 5 mL de amostra para tubo de
ensaio imerso em gua gelada, adicionar 0,4 mL de
soluo de cloreto de potssio a 10% (p/v) e 0,1 mL de
difenilamina 0,1% (p/v). Gotejar, sob agitao, 5 mL de
cido sulfrico livre de nitrognio. Transferir o tubo para
banho-maria a 50C. Aps 15 minutos, qualquer colorao
azul desenvolvida na soluo no mais intensa do que
a do padro, preparada concomitantemente e da mesma
maneira, utilizando uma mistura de 4,5 mL de gua livre
de nitrato e 1 mL de soluo padro de nitrato 2 ppm em
NO3, recm preparada. No mximo 0,00002% (0,2 ppm).
Sulfatos. Adicionar 0,1 mL de cido clordrico 2 M e 0,1
mL de soluo aquosa de cloreto de brio 6,1% (p/v) em
10 mL da amostra. A soluo no apresenta alteraes na
aparncia por pelo menos 1 hora.
revele igual ou superior a mtodo farmacopeico validado.
UFC/mL.
Um outro teste que pode ser realizado em substituio ao
descrito acima o da contagem de bactrias heterotrfcas.
No mximo 100 UFC/mL.
Quando a gua purifcada for coletada de reservatrio
de acondicionamento, alm da contagem do nmero
total de micro-organismos mesoflicos ou de bactrias
heterotrfcas, deve ser realizada a pesquisa de micro-
organismos patognicos (5.5.1.6.3): Ausncia de coliformes
totais, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa,
principalmente se a gua for utilizada em produtos de uso
tpico. Utilizar 100 mL de gua no teste.
A modalidade de gua purifcada estril, utilizada na
preparao de colrios e demais processos que no podem
passar por esterilizao fnal por calor ou fltrao, deve
atender adicionalmente ao teste de esterilidade.
Em recipientes inertes, tais como vidro ou ao inox 316L
polido, adequadamente identifcados, que assegurem as
propriedades fsico-qumicas e microbiolgicas exigidas.
aa
Caso seja necessrio estocar, a gua purifcada deve ser
armazenada e distribuda em condies adequadas para
prevenir o crescimento microbiano e evitar qualquer outra
contaminao.
ROTULAGEM
GUA ULTRAPURIfICADA
Aqua ultra purifcata
H
2
O; 18,02
gua ultrapurifcada; 09880
gua
[7732-18-5]
gua ultrapurifcada a gua purifcada que passou por
tratamento adicional para retirar os possveis contaminantes
e atender aos requisitos de pureza estabelecidos nessa
monografa. preparada pela complementao de um
conjunto de processos, como destilao, troca inica,
osmose reversa, dentre outros. No possui substncia
dissolvida. Geralmente utilizada em aplicaes
que requeiram gua de alta pureza ou na maioria de
procedimentos laboratoriais de ensaio, que requeiram
leituras em baixas concentraes ou que a pureza da gua
possa afetar a sensibilidade, a reprodutibilidade ou a
robustez do mtodo analtico.
DESCRIO
e inodoro.
ENSAIOS DE PUREZA
Condutividade da gua (5.2.24). No mximo 0,1 S/cm
a 25,0
o
C 0,5
o
C.
Carbono orgnico total (5.2.30). No mximo 0,050 mg/L.
Nota: Este ensaio opcional. Deve ser empregado caso a
aplicao especfca requeira esse controle.
revele igual ou superior ao mtodo farmacopeico validado.
UFC/100mL.
Em recipientes polimricos ou de vidro, conforme
a aplicao, que assegurem as propriedades fsico-
qumicas e microbiolgicas exigidas. Caso seja necessrio
estocar, a gua ultrapurifcada pode ser armazenada por
no mximo 24 horas, e em condies adequadas para
prevenir o crescimento microbiano e evitar qualquer outra
contaminao.
ROTULAGEM
Identifcar corretamente o recipiente destinado a esse tipo
de gua.
ALANINA
Alaninum
OH
C H
3
O
NH
2
C
3
H
7
NO
2
; 89,09
alanina; 00451
L-Alanina
[56-41-7]
C
3
H
7
NO
2
DESCRIO
branco ou cristais incolores.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, muito pouco
solvel em etanol, praticamente insolvel em ter etlico.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +13,7 a +15,1, em
relao substncia dessecada. Determinar em soluo a
10% (p/v) em cido clordrico 6 M.
IDENTIFICAO
alanina SQR, preparado de maneira idntica.
B. A mancha principal do cromatograma da Soluo
(2), obtida em Substncias detectveis pela ninidrina,
corresponde em posio, cor e intensidade quela obtida
com a Soluo (4).
C. A amostra responde ao teste de Poder rotatrio
especfco em Constantes fsico-qumicas.
a a
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 2,5 g da amostra em gua
e completar para 50 mL com o mesmo solvente. Diluir 10
mL desta soluo para 20 mL com gua. A soluo obtida
lmpida (5.2.25) e no mais intensamente corada que a
Soluo de referncia de cor (5.2.12), preparada como
descrito a seguir.
Soluo de referncia de cor: misturar 2,4 mL de soluo
base de cloreto frrico, 1 mL de soluo base de cloreto
cobaltoso, 0,4 mL de soluo base de sulfato cprico e 6,2
mL de soluo de cido clordrico a 1% (v/v). Misturar 5
mL da soluo obtida com 95 mL de cido clordrico a 1%
(v/v).
pH (5.2.19). 5,5 a 7,0. Determinar em soluo a 5% (p/v).
Substncias detectveis pela ninidrina. Proceder
conforme descrito em Cromatografa em camada delgada
(5.2.17.1), utilizando slica-gel G, como suporte, e mistura
de gua, cido actico glacial e 1-butanol (20:20:60), como
seguir.
Soluo (1): soluo da amostra a 10 mg/mL em gua.
gua.
gua.
Soluo (4): soluo de alanina SQR a 0,2 mg/mL em gua.
Soluo (5): dissolver 10 mg de alanina SQR e 10 mg de
glicina SQR em gua e diluir para 25 mL com o mesmo
solvente.
secar ao ar. Nebulizar com ninidrina SR. Aquecer a placa
a 105 C por 15 minutos e examinar imediatamente.
intensa que aquela obtida com a Soluo (3) (0,5%). O
teste somente vlido se o cromatograma obtido com a
Soluo (5) apresenta duas manchas principais nitidamente
separadas.
Amnio. Preparar uma pequena cmara utilizando 2 vidros
de relgio de 60 mm de dimetro, colocados bordo a bordo.
Aderir parede interior do vidro de relgio superior, por
meio de algumas gotas de gua, uma tira de papel de
tornassol vermelho de 5 mm 5 mm. No vidro inferior
suspender 50 mg da amostra, fnamente pulverizada, em
0,5 mL de gua. Adicionar 0,3 g de xido de magnsio,
misturar rapidamente com um basto de vidro e fechar
a cmara juntando os dois vidros de relgio. Aquecer
a 40 C por 15 minutos. O papel de tornassol no deve
adquirir colorao azul mais intensa que a de uma tira de
papel de tornassol vermelho de uma preparao realizada
simultaneamente, e nas mesmas condies, com 0,1 mL
de soluo de cloreto de amnio a 0,0296% (p/v), 0,5 mL
de gua e 0,3 g de xido de magnsio. No mximo 0,02%
(200 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). No mximo 0,05% (500 ppm).
ferro (5.3.2.4). Utilizar o Mtodo III. No mximo 0,003%
(30 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. No mximo
0,0015% (15 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). No mximo 0,03% (300 ppm).
amostra, em estufa a 100-105 C, por 3 horas. No mximo
0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Titulaes em meio
no aquoso (5.3.3.5). Pesar, exatamente, cerca de 80
mg da amostra e dissolver em 3 mL de cido frmico
anidro. Adicionar 30 mL de cido actico glacial anidro
e titular com cido perclrico 0,1 M SV. Determinar o
ponto fnal potenciometricamente ou utilizar 0,1 mL
de 1-naftolbenzena SI at mudana de cor para verde.
mg de C
3
H
7
NO
2
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Aminocido.
ALBENDAZOL
Albendazolum
N
H
N
N
S
C H
3
OCH
3
O
H
C
12
H
15
N
3
O
2
S; 265,33
albendazol; 00458
ster metlico do cido [6-(propiltio)-1H-benzimidazol-2-
il]carbmico
[54965-21-8]
aa
C
12
H
15
N
3
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, untuoso ao tato,
branco ou quase branco, quase inodoro.
solvel em cido frmico, solvel em cido actico glacial
e cido sulfrico, pouco solvel em clorofrmio, muito
pouco solvel em acetato de etila, acetona, lcool terc-
amlico, benzeno, cloreto de metileno, etanol, ter etlico,
lcool isoproplico, metanol e tolueno, insolvel em
n-hexano e tetracloreto de carbono. Muito pouco solvel
em cido clordrico 0,1 M e insolvel em hidrxido de
sdio 0,1 M.
Faixa de fuso (5.2.2): 208 C a 209 C.
IDENTIFICAO
albendazol SQR, preparado de maneira idntica.
B. Proceder conforme descrito em Cromatografa em
254
,
como suporte, e mistura de clorofrmio, cido actico
glacial e ter etlico (60:10:10), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa 10 L de cada uma das solues
recentemente preparadas, descritas a seguir.
Soluo (1): soluo a 1% (p/v) de amostra em cido
actico glacial.
Soluo (2): soluo a 1% (p/v) de albendazol SQR em
ao ar e examinar sob luz ultravioleta (254 nm). A mancha
cor e intensidade, quela obtida com a Soluo (2).
C. Dissolver, em tubo de ensaio, 10 mg de amostra em 5
mL de clorofrmio. Transferir 1 mL para tubo de ensaio
contendo 5 mL de cido sulfrico e quatro gotas de soluo
de formaldedo. Desenvolve-se colorao na interface.
Aps a agitao a camada sulfrica tambm desenvolve
colorao.
ENSAIOS DE PUREZA
amostra. Dessecar em estufa a 105 C, por 4 horas. No
mximo 0,5%.
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
Empregar um dos mtodos descritos a seguir
aquoso (5.3.3.5). Dissolver 0,4 g da amostra, previamente
dessecada, em 30 mL de cido actico glacial. Aquecer se
necessrio. Esfriar e adicionar cinco gotas de cloreto de
metilrosanilnio SI. Titular com cido perclrico 0,1 M
SV, at colorao verde esmeralda. Realizar ensaio em
branco e fazer as correes necessrias. Cada mL de cido
perclrico 0,1 M SV equivale a 26,533 mg de C
12
H
15
N
3
O
2
S.
B. Proceder conforme descrito em Espectrofotometria
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar, exatamente,
cerca de 25 mg de amostra e dissolver em 25 mL de cido
clordrico a 2% (p/v) em metanol. Completar o volume para
50 mL com gua. Transferir 5 mL para balo volumtrico
de 50 mL e completar o volume com cido clordrico 0,1
M. Diluir, sucessivamente, em hidrxido de sdio 0,1
M, at concentrao de 0,0005% (p/v). Preparar soluo
padro na mesma concentrao, utilizando os mesmos
solventes. Medir as absorvncias das solues resultantes
em 309 nm, utilizando hidrxido de sdio 0,1 M para ajuste
do zero. Calcular o teor de C
12
H
15
N
3
O
2
S na amostra a partir
das leituras obtidas.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-helmntico.
ALBENDAZOL COMPRIMIDOS
Contm, no mnimo 90,0% e, no mximo, 110,0% da
12
H
15
N
3
O
2
S.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir
quantidade de p equivalente a 10 mg de albendazol para
balo volumtrico de 50 mL e adicionar 25 mL de cido
clordrico a 2% (v/v) em metanol. Agitar por 10 minutos,
completar o volume com o mesmo solvente e fltrar. Diluir
o fltrado at concentrao de 0,001% (p/v) com o mesmo
solvente. Preparar soluo padro na mesma concentrao.
O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14) da soluo
amostra, na faixa de 200 nm a 400 nm, exibe mximos e
mnimos somente nos mesmos comprimentos de onda da
soluo padro.
a a
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
Procedimento: aps o teste, fltrar e retirar alquota de 10
mL do meio de dissoluo, transferir para balo volumtrico
de 250 mL e completar o volume com hidrxido de sdio
0,1 M. Transferir 90 mg de albendazol SQR para balo
volumtrico de 250 mL, adicionar 10 mL de cido clordrico
a 2% (v/v) em metanol e homogeneizar. Diluir com cido
clordrico 0,1 M at completar o volume. Transferir 5 mL
desta soluo para balo volumtrico de 200 mL e diluir
com hidrxido de sdio 0,1 M. Medir as absorvncias
em 308 nm e 350 nm, utilizando o mesmo solvente para
o ajuste do zero. Calcular a quantidade de C
12
H
15
N
3
O
2
S,
dissolvido no meio, pela expresso: 22,5C (Aa/Ap), em que
C a concentrao, em g/mL, de albendazol na soluo
padro e Aa e Ap so as diferenas entre as absorvncias a
308 nm e 350 nm, obtidas para a soluo amostra e para a
soluo padro, respectivamente.
declarada de C
12
H
15
N
3
O
2
S se dissolvem em 30 minutos.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito em Espectrofotometria de
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar e pulverizar 20
comprimidos. Transferir quantidade de p equivalente
a 10 mg de albendazol para balo volumtrico de 50
mL e adicionar 25 mL de cido clordrico a 2% (v/v)
em metanol. Agitar por 10 minutos, completar o volume
com gua destilada e fltrar. Diluir, sucessivamente, at a
concentrao de 0,0008% (p/v), utilizando hidrxido de
sdio 0,1 M como solvente. Preparar soluo padro na
mesma concentrao, utilizando os mesmos solventes.
Medir as absorvncias das solues em 308 nm, utilizando
hidrxido de sdio 0,1 M para ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
12
H
15
N
3
O
2
S nos comprimidos, a partir das
leituras obtidas.
Fase mvel: soluo de 0,5 g de fosfato de amnio
monobsico em 1000 mL de mistura de gua e metanol
(4:6).
Soluo de padro interno: pesar, exatamente, cerca de 150
mg de parbendazol SQR. Transferir para balo volumtrico
de 50 mL, adicionar 5 mL de cido sulfrico a 1% (v/v) em
metanol e completar o volume com metanol.
Transferir quantidade de p equivalente a 100 mg de
albendazol para balo volumtrico de 50 mL, adicionar 5
mL de cido sulfrico a 1% (v/v) em metanol e 20 mL de
metanol. Agitar por 15 minutos, completar o volume com
metanol e fltrar. Transferir 5 mL do fltrado e 5 mL da
Soluo de padro interno para balo volumtrico de 50
mL e completar o volume com metanol.
albendazol SQR e transferir para balo volumtrico de
50 mL, adicionar 5 mL de cido sulfrico a 1% (v/v) em
metanol e completar o volume com metanol. Transferir 5
mL desta soluo e 5 mL da Soluo de padro interno
para balo volumtrico de 50 mL e completar o volume
com metanol.
A efcincia da coluna no menor que 4000 pratos
tericos/metro. A resoluo entre albendazol e parbendazol
no menor que 2,0. O desvio padro relativo das reas
de replicatas dos picos registrados no deve ser maior que
2,0%.
e medir as reas sob os picos. Calcular a quantidade de
C
12
H
15
N
3
O
2
S na soluo amostra a partir das respostas
obtidas com a Soluo padro e a Soluo amostra em
relao Soluo de padro interno.
ROTULAGEM
aa
ALBENDAZOL SUSPENSO ORAL
Albendazol suspenso oral mistura de albendazol com
um ou mais agentes corantes, aromatizantes, tampes,
adoantes e conservantes, em veculo aquoso. Contm,
no mnimo, 90,0% e, no mximo, 110,0% da quantidade
declarada de C
12
H
15
N
3
O
2
S.
IDENTIFICAO
Diluir volume adequado da suspenso em mistura de
metanol e cido clordrico (99:1) para obter concentrao
de 1 mg/mL. Filtrar, se necessrio, transferir 1 mL do
fltrado para balo volumtrico de 100 mL, completar o
volume com hidrxido de sdio 0,1 M e homogeneizar. O
espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14) da soluo
resultante, na faixa de 200 a 400 nm, exibe mximos e
mnimos somente nos mesmos comprimentos de onda de
soluo similar de albendazol SQR.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 4,5 a 5,5.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Cromatografa a lquido de
alta efcincia (5.2.17.4), utilizando cromatgrafo provido
de detector a 308 nm, coluna de 250 mm de comprimento
e 4 mm de dimetro interno, empacotada com slica
quimicamente ligada a grupo octadecilsilano (5 m); fuxo
da Fase mvel de 2,0 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 11 g de fosfato de sdio monobsico
em 800 mL de gua e adicionar 1200 mL de metanol.
Soluo amostra: transferir para balo volumtrico de
100 mL volume da suspenso correspondente a 0,1 g de
albendazol e completar o volume com mistura de metanol
e cido clordrico (99:1). Diluir, sucessivamente, at a
concentrao de 100 ug/mL, utilizando Fase mvel como
solvente. Filtrar, se necessrio.
albendazol SQR. Transferir para balo volumtrico de
50 mL e completar o volume com a mistura de metanol
e cido clordrico (99:1). Diluir, sucessivamente, at a
concentrao de 100 ug/mL, utilizando Fase mvel como
solvente.
A efcincia da coluna no deve ser menor que 8000 pratos
tericos/metro. O desvio padro relativo das reas de
replicatas dos picos registrados no deve ser maior que 2%.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 uL das Solues
amostra e padro, registrar os cromatogramas e medir
as reas dos picos. Calcular a quantidade, em mg, de
C
12
H
15
N
3
O
2
S em cada mL da suspenso oral, a partir das
respostas obtidas para soluo padro e amostra.
Em recipientes bem fechados, a temperatura ambiente.
ROTULAGEM
LCOOL BENZLICO
Alcohol benzylicus
OH
C
7
H
8
O; 108,14
lcool benzlico; 00471
Benzenometanol
[100-51-6]
C
7
H
8
O.
DESCRIAO
Caractersticas fsicas. Lquido oleoso, lmpido e incolor.
Solubilidade. Ligeiramente solvel em gua, miscvel
com etanol, ter etlico e clorofrmio.
Densidade relativa (5.2.5): 1,042 a 1,047 g/mL.
ndice de refrao (5.2.6): 1,538 a 1,541. Determinar a 20 C.
IDENTIFICAO
O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) da
amostra, dispersa entre placas de cloreto de sdio ou
brometo de potssio, apresenta mximos de absoro
somente nos mesmos comprimentos de onda e com as
mesmas intensidades relativas daqueles observados no
espectro de lcool benzlico SQR, preparado de maneira
idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
Limpidez da soluo.
a a
Soluo de hidrazina: transferir 1 g de sulfato de hidrazina
para balo volumtrico de 100 mL, dissolver e completar o
volume com gua. Homogeneizar. Deixar em repouso por
4 a 6 horas.
Soluo de metenamina: transferir 2,5 g de metenamina
para balo volumtrico de 100 mL, adicionar 25 mL de
gua e agitar at dissolver.
Suspenso opalescente primria: transferir 25 mL da
Soluo de hidrazina para o balo volumtrico de 100 mL
contendo a Soluo de metenamina, completar o volume
com gua e homogeneizar. Deixar em repouso por 24
horas. (Esta suspenso estvel por 2 meses, se mantida
em frasco de vidro fechado e sem defeitos. A suspenso
pode aderir ao vidro e deve ser agitada antes do uso.)
Padro de opalescncia: transferir 15 mL da Suspenso
opalescente primria para balo volumtrico de 1000
mL, completar o volume com gua e homogeneizar. (Esta
soluo no deve ser utilizada aps 24 horas do preparo.)
Suspenses de referncia: transferir 5 mL do Padro de
opalescncia para balo volumtrico de 100 mL, completar
o volume com gua e homogeneizar, para obter a Suspenso
de referncia A. Transferir 10 mL do mesmo padro para
outro balo volumtrico de 100 mL, completar com gua
e homogeneizar, para obter a Suspenso de referncia B.
Soluo amostra: dissolver 2 g da amostra em 60 mL de
gua.
Procedimento: transferir, separadamente, a mesma
quantidade da Soluo amostra, Suspenso de referncia
A, Suspenso de referncia B e de gua para tubos de
vidro incolor e transparente, com dimetro interno entre
15 mm e 25 mm, de forma a obter, aproximadamente, 40
mm de profundidade. Comparar as solues, empregando
fundo escuro e luz incidente. A Soluo amostra tem a
mesma claridade da gua ou no mais opalescente que a
Suspenso de referncia A.
Cor da soluo. Transferir, separadamente, a mesma
quantidade da Soluo amostra, obtida em Limpidez da
soluo, e de gua para tubos de vidro incolor e transparente,
com dimetro interno entre 15 mm e 25 mm, de forma
a obter, aproximadamente, 40 mm de profundidade. A
Soluo amostra tem a mesma colorao da gua.
Acidez. Adicionar 1 mL de fenoltalena SI a 50 mL de etanol
e neutralizar com hidrxido de sdio 0,1 M. Dissolver 10
mL de amostra em 10 mL de etanol neutralizado e titular
com hidrxido de sdio 0,1 M, at que a colorao rsea
permanea por no menos que 30 segundos. No mais que
1 mL consumido.
ndice de perxidos. Pesar, exatamente, cerca de 5 g
de amostra e transferir para um erlenmeyer de 250 mL.
Adicionar 30 mL de uma mistura de cido actico glacial
e clorofrmio (3:2), agitar e adicionar 0,5 mL de soluo
saturada de iodeto de potssio. Agitar por 1 minuto
e adicionar 30 mL de gua. Titular lentamente com
tiossulfato de sdio 0,01 M SV, sob agitao constante,
at que a colorao amarela desaparea. Adicionar 5 mL
de amido SI e continuar a titulao, sob agitao vigorosa,
at que a colorao azul desaparea. Realizar ensaio em
branco (o volume gasto no branco no deve exceder 0,1
mL). O valor de perxidos igual a diferena entre os
volumes (mL) de tiossulfato de sdio gastos na amostra e
no branco, multiplicado por 10 e dividido pela massa (g) da
amostra. No mais que 5.
Limite de resduos no volteis. Evaporar 10 g da
amostra, em banho de gua, e secar o resduo a 105 C por
1 hora. Esfriar em dessecador e pesar. O resduo pesa no
mais que 5 mg: so encontrados no mais que 0,05% de
resduos no volteis.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,9 g de amostra, adicionar 15
mL de uma mistura recm-preparada de piridina e anidrido
actico (7:1) e ferver em refuxo por 30 minutos. Resfriar,
adicionar 25 mL de gua e 0,25 mL de fenolftalena SI
e titular com hidrxido de sdio M SV. Realizar ensaio
em branco. Calcular a porcentagem de C
7
H
8
O atravs da
frmula:
sendo que, Va o volume (mL) de titulante gasto para
a amostra, Vb o volume (mL) de titulante gasto para
o branco e Ma a massa (g) de lcool benzlico que foi
titulada.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anestsico local; antimicrobiano.
LCOOL ETLICO
Alcohol ethylicus
C H
3
OH
C
2
H
6
O; 46,07
lcool etlico; 00475
Etanol
[64-17-5]
Contm, no mnimo, 95,1% (v/v), correspondendo a
92,55% (p/p), e, no mximo, 96,9% (v/v), correspondendo
a 95,16% (p/p) de C
2
H
6
O a 20 C, calculado a partir da
densidade relativa empregando a tabela alcoomtrica
(5.2.26). Para lcool etlico absoluto, contm, no mnimo,
aa
99,5% (v/v) correspondendo a 99,18% (p/p) de C
2
H
6
O a 20
C, calculado a partir da densidade relativa empregando a
tabela alcoomtrica (5.2.26).
DESCRIAO
Caractersticas fsicas. Lquido incolor, lmpido, voltil,
infamvel e higroscpico.
Solubilidade. Miscvel com gua e com cloreto de
metileno.
Densidade relativa (5.2.5): 0,805 a 0,812, determinada a
20 C. Para lcool etlico absoluto, no mais que 0,793,
determinada a 20 C.
IDENTIFICAO
amostra apresenta mximos de absoro somente nos
mesmos comprimentos de onda e com as mesmas
etanol SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
Limpidez da soluo (5.2.25).
Soluo de hidrazina: transferir 1 g de sulfato de hidrazina
para um balo volumtrico de 100 mL, dissolver e
completar o volume com gua e agitar. Deixar em repouso
por 4 a 6 horas.
Soluo de metenamina: transferir 2,5 mg de metenamina
para um balo volumtrico de 100 mL, adicionar 25 mL de
gua e agitar at dissolver.
Suspenso opalescente primria: transferir 25 mL da
Soluo de hidrazina para o balo volumtrico de 100
mL contendo a Soluo de metenamina. Agitar e deixar
em repouso por 24 horas. (Esta suspenso estvel por
2 meses, se mantida em frasco de vidro fechado e sem
defeitos. A suspenso pode aderir ao vidro e deve ser
agitada antes do uso.)
Padro de opalescncia: transferir 15 mL da Suspenso
opalescente primria para um balo volumtrico de 1000
mL, completar o volume com gua e agitar. (Esta soluo
no deve ser utilizada aps 24 horas do preparo.)
Suspenses de referncia: transferir 5 mL do Padro
de opalescncia para um balo volumtrico de 100
mL, completar o volume com gua e agitar para obter a
Suspenso de referncia A. Transferir 10 mL para outro
balo de 100 mL, completar com gua e agitar para obter a
Suspenso de referncia B.
Soluo amostra A: amostra a ser examinada.
Soluo amostra B: diluir 1 mL da Soluo amostra A para
20 mL de gua e deixar em repouso por 5 minutos antes
do uso.
Procedimento: transferir uma poro da Soluo amostra
A e da Soluo amostra B para tubos de vidro incolor e
transparente com dimetro interno entre 15 mm e 25 mm,
de forma a obter aproximadamente 40 mm de profundidade.
Transferir para um tubo semelhante o mesmo volume de
Suspenso de referncia A, Suspenso de referncia B
e gua e para outro tubo a mesma quantidade de gua.
Comparar as Solues amostra A, Soluo amostra B,
Suspenso de referncia A, Suspenso de referncia B e
gua, empregando fundo escuro e luz. A Soluo amostra
A e Soluo amostra B tm a mesma claridade da gua
ou no apresentam maior opalescncia que a Suspenso de
referncia A.
Cor da soluo (5.2.12).
Soluo padro estoque: combinar 3 mL de Soluo base
cloreto frrico, 3 mL de Soluo base cloreto de cobalto,
2,4 mL de Soluo base sulfato cprico e 1,6 mL de cido
clordrico diludo (10 mg/mL).
Soluo padro: transferir 1 mL da Soluo padro estoque
para um balo volumtrico de 100 mL, completar o volume
com cido clordrico diludo (10 mg/mL) e agitar. Utilizar
esta soluo logo aps o preparo.
Procedimento: transferir uma poro da Soluo padro
para um tubo de vidro incolor e transparente com
dimetro interno entre 15 mm e 25 mm, de forma a obter
aproximadamente 40 mm de profundidade. Transferir
para um tubo semelhante o mesmo volume de amostra e
para outro tubo a mesma quantidade de gua. A Soluo
amostra A no tem colorao mais intensa que a Soluo
padro.
Acidez ou alcalinidade. Adicionar 20 mL de gua isenta
de dixido de carbono a 20 mL da amostra e adicionar
0,1 mL de fenolftalena SI. A soluo deve ser incolor.
Adicionar 1,0 mL de hidrxido de sdio 0,01 M. A soluo
torna-se rosa (30 ppm, expresso como cido actico).
Absoro de luz. Registrar o espectro de absoro no
ultravioleta da amostra entre 200 e 400 nm empregando
cubeta de 1 cm de caminho ptico, utilizando gua como
branco. Absorvncia mxima de 0,08 em 240 nm, 0,06
entre 250 e 260 nm e 0,02 entre 270 e 340 nm.
Limite de resduos no volteis. Evaporar 100 mL de
amostra em banho de gua e secar o resduo a 105 C por
1 hora. Esfriar em dessecador e pesar. O resduo pesa no
mais que 2,5 mg. No mximo 0,025%.
Impurezas orgnicas volteis. Proceder conforme
descrito em Cromatografa a gs (5.2.17.5). Utilizar
cromatgrafo provido de detector de ionizao de chamas;
coluna capilar de 30 m de comprimento e 0,53 mm de
dimetro interno, preenchida com fase estacionria ligada
a cianopropilfenil (6%) e dimetilpolisiloxano (94%), com
espessura de 1,8 m; temperatura da coluna de 40 C a
240 C (40 C mantida durante 12 minutos aps a injeo,
aumentada a 240 C de 12 a 32 minutos e mantida a 240
C durante o perodo de 32 a 42 minutos), temperatura do
injetor 200 C e temperatura do detector a 280 C; utilizar
a a
hlio a 35 cm/s como gs de arraste e razo de split de 1:20;
fuxo do gs de arraste de 1 mL/minuto.
Soluo amostra A: amostra de lcool etlico a ser testada.
Soluo amostra B: transferir 150 L de 4-metilpentan-2-
ol para um balo volumtrico de 100 mL e completar com
a amostra. Homogeneizar. Transferir 10 mL dessa soluo
com a amostra. Homogeinizar.
Soluo padro A: transferir 100 L de metanol para
a amostra. Homogeneizar. Transferir 5 mL dessa soluo
para um balo volumtrico de 50 mL e completar o volume
com a amostra. Homogeneizar.
Soluo padro B: transferir 50 L de metanol e 50 L de
acetaldedo para balo volumtrico de 50 mL e completar
com a amostra. Homogeneizar. Transferir 100 L dessa
volume com a amostra. Homogeneizar.
Soluo padro C: transferir 150 L de acetal para um
balo volumtrico de 50 mL e completar com a amostra.
Homogeneizar. Transferir 100 L dessa soluo para
balo volumtrico de 10 mL e completar o volume com a
amostra. Homogeneizar.
Soluo padro D: transferir 100 L de benzeno para
balo volumtrico de 100 mL e completar com a amostra.
Homogeneizar. Transferir 100 L dessa soluo para
amostra. Homogeneizar.
Injetar, separadamente, 1 L da Soluo amostra e
da Soluo padro no cromatgrafo a gs. Obter os
cromatogramas e medir as reas sob os picos. Calcular
a soma de todos as quantidades de acetaldedo e acetal,
expressos como acetaldedo, pela seguinte frmula:
Acetaldedo (ppm) = [(10 x AE)/(AT AE)] + [(30 x CE)/
(CT CE)]
em que
AE = rea sob o pico de acetaldedo obtido do cromatograma
da Soluo amostra A;
AT = rea sob o pico de acetaldedo obtido do cromatograma
da Soluo padro B;
CE = rea sob o pico de acetal obtido do cromatograma da
Soluo amostra A;
CT = rea sob o pico de acetal obtido do cromatograma da
Soluo padro C.
Calcular a quantidade de benzeno pela seguinte frmula:
Benzeno (ppm) = (2BE)/(BT BE)
em que
BE = rea sob o pico de benzeno obtido do cromatograma
da Soluo amostra A;
BT = rea sob o pico de benzeno obtido do cromatograma
da Soluo padro D.
Desconsiderar quaisquer picos com rea menor que 0,03
vezes a rea sob o pico correspondente ao 4-meitlpentan-
2-ol no cromatograma obtido da Soluo amostra B
(9 ppm). A rea sob o pico correspondente ao metanol
no cromatograma da Soluo amostra A no pode ser
maior que a metade da rea sob o pico correspondente
no cromatograma da Soluo padro A. A quantidade de
acetaldedo encontrada na Soluo amostra A no deve ser
maior que 10 ppm. A quantidade de benzeno encontrada na
Soluo amostra A no deve ser maior que 2 ppm. O total
de impurezas obtidas no cromatograma da Soluo amostra
B no pode ser maior que a rea correspondente ao pico de
4-metilpentan-2-ol, obtido no mesmo cromatograma.
DOSEAMENTO
Determinar a quantidade de C
2
H
6
O a 20 C, a partir da
densidade relativa empregando a tabela de alcoometria
(5.2.26).
ROTULAGEM
ALECRIM LEO VOLTIL
Oleum rosmarini aetheroleum
Rosmarinus offcinalis L. - LAMIACEAE
O leo voltil de alecrim obtido por arraste vapor
dgua das sumidades foridas.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Lquido incolor ou de cor
levemente amarelo-esverdeado, de odor forte caracterstico
e sabor aromtico, canforceo e amargo.
IDENTIFICAO
A. Proceder conforme descrito em Perfl cromatogrfco.
Preparar a Soluo amostra e a Soluo padro como
descrito a seguir.
Soluo amostra: dissolver 0,2 mL do leo voltil de
alecrim em 1 mL de n-hexano. Armazenar sob refrigerao,
em frasco hermeticamente fechado e ao abrigo da luz.
Soluo padro: dissolver 50 L de 1,8-cineol (eucaliptol),
30 mg de acetato de bornila e 10 mg de borneol em 10
mL de n-hexano. Armazenar sob refrigerao, em frasco
hermeticamente fechado e ao abrigo da luz.
aa
Os tempos de reteno dos picos caractersticos do
cromatograma da Soluo amostra, devero ser similares
queles obtidos com o cromatograma da Soluo padro
ou a identifcao confrmada com a cromatografa gasosa
acoplada a detector seletivo de massas (figura 1).
camada delgada (5.2.17.1), utilizando cromatoplaca de
slica-gel GF
254
, com espessura de 250 m, como suporte,
e cloreto de metileno, como fase mvel. Aplicar na
cromatoplaca, separadamente, em forma de banda, 10 L
de cada uma das solues descritas a seguir.
Soluo (1):diluir 0,5 mL da amostra a ser examinada
em acetato de etila e completar o volume com o mesmo
solvente para 10 mL.
Soluo (2): dissolver 50 mg de borneol, 50 mg de acetato
de bornila e 100 L de 1,8-cineol em acetato de etila e
completar o volume com o mesmo solvente a 10 mL.
secar ao ar. Nebulizar com uma soluo de p-anisaldeido,
seguida de aquecimento em estufa a 100 C - 105 C
durante 10 minutos. O cromatograma obtido com a Soluo
(2), dever apresentar no tero inferior da placa uma
mancha de colorao verde intenso com borda amarelada
(borneol) e no tero mediano duas manchas de intensidade
mdia, sendo uma de colorao violeta (cineol) e outra de
colorao verde com borda amarelada (acetato de bornila).
O cromatograma da Soluo (1) dever apresentar duas
manchas de colurao verde com borda amarelada, sendo
uma de intensidade mediana, correspondente ao borneol
e outra de baixa intensidade, correspondente ao acetato
de bornila. Uma mancha violeta intensa, corresponde ao
cineol. No tero superior da placa dever aparecer uma
mancha vermelha intensa.
ENSAIOS DE PUREZA
Densidade relativa (5.2.29.1). A 20, no mnimo, 0,894 e,
no mximo, 0,912.
ndice de refrao (5.2.29.4). A 20 C, no mnimo, 1,460
e, no mximo, 1,476.
Poder rotatrio (5.2.29.5). No mnimo, -5 e, no mximo,
+15.
ndice de acidez (5.2.29.7). No mximo 1%.
PERFIL CROMATOGRFICO
Proceder conforme descrito em Cromatografa a gs
(5.2.17.5). Utilizar cromatgrafo provido de detector de
ionizao de chamas, utilizando mistura de nitrognio,
hidrognio e ar sinttico (1:1:10) como gases auxiliares
chama do detector; coluna capilar de 60 m de comprimento
e 0,25 mm de dimetro interno, preenchida com
polietilenoglicol, com espessura de flme de 0,25 m. A
temperatura do injetor dever ser ajustada para 200 C,
a temperatura do detector para 240 C e a temperatura
da coluna programada para iniciar em 50 C durante 10
minutos, com incremento de 50 C a 200 C a 2 C por
minuto e manter a 200 C durante 25 minutos (total: 110
min). Usar hlio purifcado como gs de arraste (1 mL/
minuto).
Soluo amostra: dissolver 0,2 mL do leo voltil de
alecrim em 1 mL de n-hexano. Armazenar sob refrigerao,
em frasco hermeticamente fechado e ao abrigo da luz.
Soluo padro: dissolver 10 mg de canfeno, 50 L de
1,8-cineol (eucaliptol), 50 mg de cnfora, 30 mg de acetato
de bornila e 10 mg de borneol em 10 mL de n-hexano.
Armazenar sob refrigerao, em frasco hermeticamente
fechado e ao abrigo da luz.
Procedimento: injetar volume de 1 L da Soluo amostra
e da Soluo padro no cromatgrafo a gs, utilizando
diviso de fuxo de 1:50 e a concentrao relativa obtida
por integrao eletrnica pelo mtodo de normalizao.
Examinar o cromatograma obtido atravs do perfl
cromatogrfco da Soluo amostra. Os picos caractersticos
no cromatograma obtido com a Soluo amostra devero
ter tempos de reteno similares queles obtidos com
o cromatograma da Soluo padro ou a identifcao
confrmada com a cromatografa gasosa acoplada a detetor
seletivo de massas operando nas mesmas condies que a
cromatografa a gs com detetor por ionizao de chama
(figura 1).
O cromatograma, poder ainda, apresentar os seguintes
compostos: acetato de bornila, borneol, -pineno,
-mirceno, limoneno, p-cimeno, -terpineol e verbenona.
Verifcar a presena, no cromatograma obtido com a
Soluo amostra, o teor mnimo dos seguintes compostos:
-pineno: 9%; canfeno: 2,5%; cineol: 16% e cnfora: 5%.
Em recipientes de vidro hermeticamente fechados, ao
abrigo da luz e do calor.
a a
figura 1 Cromatograma ilustrativo obtido com o leo voltil de
Rosmarinus offcinalis L por cromatografa gasosa acoplada a detector de massas.
aa
ALGODO PURIfICADO E
ESTERILIZADO
Algodo hidrflo. Algodo absorvente.
O algodo purifcado constitudo por plos das sementes
de diversas variedades cultivadas do gnero Gossypium
(Malvaceae), alvejadas, bem cardados, privados (isentos)
de matrias gordurosas, resinosas e outras impurezas
capazes de absorver gua.
O algodo purifcado, quando impregnado de substncias
medicamentosas, deve apresentar concentrao
uniformemente distribuda. No deve conter substncias
ou concentraes capazes de provocar acidentes txicos ou
reacionais.
CARACTERSTICAS
Aspecto. Plos fnos e de cor branca, suave ao tato e
de consistncia frouxa, sem grumos e sem quaisquer
impurezas; o algodo purifcado inodoro e inspido.
Apresenta ao exame microscpico somente fbras fnas,
ocas, achatadas, retorcidas, estriadas, ligeiramente
espessadas nas bordas.
Comprimento da fbra. Determinar o comprimento
da fbra depois de colocar o algodo, livre (isento) de
envoltrios, durante 4 horas em atmosfera 65% 2% de
umidade relativa, na temperatura de 21 C 1 C; no
mnimo 60%, em peso, das fbras devem medir 12,5 mm ou
mais, sendo permitido at 10% em peso, de fbras medindo
6 mm ou menos.
Poder absorvente. Proceder conforme indicado na
determinao do poder absorvente do algodo, depois
de colocar o algodo, durante 4 horas, nas condies
atmosfricas acima indicadas; a absoro dever ser
completa em 10 segundos e o algodo dever reter, no
mnimo, 24 vezes seu peso de gua.
Solubilidade. insolvel nos solventes comuns e solvel
no sulfato cprico amoniacal SR.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Colocar cerca de 10 g em um
frasco de precipitao contendo 100 mL de gua destilada
recentemente fervida e resfriada sem agitao. Comprimir
o algodo com um basto de vidro, espremer e transferir
alquotas de 25 mL para duas cpsulas de porcelana.
Adicionar a uma das cpsulas uma gota de alaranjado de
metila SI e outra, 3 gotas de fenolftalena SI; no deve
produzir-se colorao rsea ou vermelha.
Determinao da perda por dessecao (5.2.9). O
algodo purifcado, dessecado a 100 C, no deve perder
mais que 8% de seu peso.
Determinao de cinzas sulfatadas (5.2.10). Colocar
cerca de 5 g, exatamente pesados, em uma cpsula
tarada, e umedecer com cido sulfrico diludo. Aquecer,
cautelosamente, at o enegrecimento e a seguir aumentar o
calor at incinerao completa; o resduo no deve exceder
0,2%.
Substncias Corantes. Colocar 10 g em um percolador de
dimetro estreito e proceder sua extrao lentamente com
etanol, at que o percolato atinja 50 mL; observando sobre
fundo branco, em uma coluna de 20 cm de altura, o lquido
poder apresentar leve colorao amarelada, porm, nunca
verde ou azul.
Substncias Gordurosas. Colocar cerca de 10 g,
exatamente pesados, em um extrator de Soxhlet e proceder
sua extrao com ter etlico, regulando o aquecimento
de modo a obter, no mnimo, 4 sifonagens por hora.
Continuar a extrao por durante 5 horas. O extrato etreo
no deve apresentar vestgios de colorao azul, verde ou
acastanhada. Evaporar o extrato at secura, aquecer a 105
C, durante uma hora, resfriar em um dessecador e pesar; o
resduo no deve exceder a 0,7%.
Substncias Hidrossolveis. Colocar cerca de 10 g,
exatamente pesados, em um frasco de precipitao com
1000 mL de gua destilada e ferver brandamente durante 30
minutos, adicionando gua destilada, quando necessrio,
para manter o volume aproximadamente constante.
Transferir o contedo para outro recipiente, retirando o
excesso de gua retido pelo algodo, comprimindo com
um basto de vidro. Lavar o algodo duas vezes, com
pores de 250 mL de gua destilada fervente, espremendo
aps cada lavagem. Filtrar os lquidos da extrao e de
lavagem, lavar o fltro com gua quente e evaporar o
fltrado at cerca de 50 mL. Transferir o concentrado para
uma cpsula de porcelana, previamente tarada, lavar o
recipiente que o conteve com gua destilada e rena nessa
cpsula os lquidos de lavagem. Evaporar at a secura; o
resduo dessecado a 105 C, at peso constante, no deve
ser superior a 0,25%.
Outras Substncias Estranhas. Pores de algodo
hidrflo retiradas da embalagem original no devem
apresentar manchas de leo, partculas metlicas ou
quaisquer outras substncias estranhas.
Esterilidade (5.5.3.2.1). O algodo hidrflo deve ser
esterilizado nas embalagens apresentadas ao consumo.
Quando expressamente declarado estril ou esterilizado,
deve satisfazer s exigncias especifcadas nas provas de
esterilidade para slidos.
Em rolos de peso no superior a 500 g, em camada
contnua, em papel apropriado, cuja largura e comprimento
possibilitem serem dobrados, no mnimo, 25 mm sobre
as margens da camada de algodo. Os rolos devem
receber um segundo envoltrio que oferea uma proteo
completa contra poeiras. O algodo purifcado quando
declarado estril ou esterilizado, dever ser acondicionado
a a
de modo que sua esterilidade seja protegida contra uma
contaminao posterior.
Poder, tambm, ser acondicionado de outra forma e em
outros tipos de embalagem, desde que sejam preservadas
as condies de esterilidade exigidas para o produto.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. O rtulo deve conter o nome
do fabricante, o peso lquido e tratando-se de algodo
impregnado de substncias medicamentosas, a frmula
empregada.
CATEGORIA
Adjuvante de uso em unidades de sade em geral.
ALOE
Aloe vera folium
Aloe vera (L.) Burm.f. - ASPHODELACEAE
A droga vegetal constituda pelas folhas frescas,
contendo gel incolor, mucilaginoso, obtido das clulas
parenquimticas, constitudo de, no mnimo, 0,3% de
carboidratos totais.
NOME POPULAR
Babosa.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga apresenta sabor
ligeiramente amargo, sendo incolor e inodora.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas suculentas, lanceoladas, agudas, verde-glaucas,
com manchas esbranquiadas quando jovens, medindo
de 15 cm a 60 cm de comprimento e cerca de 7 cm na
base na face adaxial e 10 cm na face abaxial, quando
adultas. A face adaxial vista em seco transversal,
cncava e a face abaxial convexa. Os bordos foliares so
dentado-espinhosos, apresentando acleos esbranquiados
pequenos, perpendiculares lmina.
DESCRIO MICROSCPICA
A folha, em seco transversal, mostra estrutura
isobilateral. Apresenta uma nica camada epidrmica,
recoberta externamente de espessa cutcula ondulada. As
clulas desta camada so achatadas tangencialmente, sendo
que algumas apresentam maior comprimento do que altura,
enquanto que em outras estes parmetros se aproximam. Em
vista frontal, as clulas mostram-se redondo-poligonais. A
folha anfestomtica e os estmatos numerosos, do tipo
tetractico, dispondo-se ao mesmo nvel das demais clulas
epidrmicas, com cutcula mostrando uma leve projeo na
regio do ostolo. A cmara subestomtica possui tamanho
correspondente a uma ou duas camadas de clulas do
clornquima. A seco transversal da lmina foliar mostra
duas zonas distintas, a mais externa verde e a mais interna
incolor e mucilaginosa. Abaixo da epiderme pode ocorrer
uma primeira camada distinta de clulas clorenquimticas,
em forma de paliada, e vrias camadas (13 a 18) de
clulas clorenquimticas, arredondadas ou irregularmente
polidricas (poligonais), ricas em cloroplastdeos e amido,
alm de idioblastos contendo feixes de rfdes de oxalato
de clcio. Frequentemente no se observa distino de
forma entre as camadas do clornquima. A quantidade de
cloroplastdeos e de amido diminui nas clulas prximas
ao parnquima aqufero. Na zona de contato entre o
clornquima e o parnquima aqfero ocorrem feixes
vasculares, do tipo colateral, alternados com 3 a 5 clulas
do clornquima. Na regio da margem foliar este nmero
de clulas clorenquimticas pode ser maior. Os feixes
vasculares dispem-se em linha paralela epiderme
e so separados dela por 10 a 16 camadas de clulas
clorenquimticas. A poro superior de cada feixe encontra-
se em contato com o clornquima e as pores mediana
e inferior penetram no parnquima aqfero. Os feixes
vasculares so envolvidos por uma bainha parenquimtica
formada por clulas pequenas, hexagonais, contendo
amido. Internamente a esta camada e prximo ao foema,
encontra-se uma agrupamento de 3 a 5 clulas muito
grandes, alm de outras menores, polidricas, um pouco
alongadas em direo ao eixo da folha, e de paredes fnas,
chamadas clulas aloticas ou tecido alofero, repletas de
ltex amarelo, viscoso, denominado de lquido alotico ou
suco de aloe. No momento em que a folha seccionada
transversalmente h o extravasamento do lquido alotico
proveniente de cada feixe. O foema externo e pouco
desenvolvido, e o xilema formado por 2 a 4 elementos
traqueais com algumas fbras. No bordo da lmina algumas
clulas podem apresentar paredes mais espessadas. O
parnquima fundamental do tipo aqfero, ocupando
geralmente 75% da espessura da lmina, sendo formado
por clulas muito grandes em relao s do clornquima,
incolores, de paredes fnas, cheias de mucilagem, dispostas
perpendicularmente epiderme. Clulas com rfdes de
oxalato de clcio tambm ocorrem neste parnquima.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando cromatoplaca de slica-gel
GF
254
, com espessura de 250 mm, como fase estacionria,
e mistura de tolueno e acetato de etila (90:10), como fase
mvel. Aplicar, separadamente, placa, em forma de barra,
20 L da Soluo (1) e 10 L da Soluo (2) recentemente
Soluo (1): transferir 2 mL de gel lquido de aloe para
balo volumtrico de 5 mL, completar o volume com
metanol e aquecer em banho-maria (60 C) sob agitao
durante 10 minutos.
Soluo (2): dissolver 2 mg de -sitosterol SQR em 1 mL
de metanol.
aa
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa e secar
ao ar. Nebulizar a placa com anisaldedo SR e deixar em
estufa entre 100 C e 105 C, durante 5 a 10 minutos. O
cromatograma obtido com a Soluo (1) apresenta uma
mancha principal de colorao azulada, na mesma altura
que a obtida com a Soluo (2), (Rf 0,31 aproximadamente).
DOSEAMENTO
Carboidratos totais
a seguir.
Soluo estoque: transferir 3 mL de gel lquido de aloe para
gua. Homogeneizar por turbolizao durante 5 minutos.
Soluo amostra: transferir 0,2 mL da Soluo estoque para
tubo de ensaio, completar o volume para 0,5 mL com gua
e deixar em banho de gelo. Adicionar 0,5 mL de soluo
de fenol a 5% (p/v) e 2 mL de cido sulfrico concentrado.
Agitar bem e deixar em repouso a temperatura ambiente
por 30 minutos.
Soluo branco: transferir 0,5 mL de gua para tubo de
ensaio e deixar em banho de gelo. Adicionar 0,5 mL de
soluo de fenol a 5% (p/v) e 2 mL de cido sulfrico
concentrado. Agitar bem e deixar em repouso a temperatura
ambiente por 30 minutos.
Solues para curva analtica: preparar soluo padro
de glicose 0,2 mg/mL. Transferir alquotas de 25, 50, 100,
150, 200 e 250 L desta soluo para tubos de ensaio e
completar o volume para 0,5 mL com gua, obtendo-se as
seguintes concentraes 10; 20; 40; 60; 80 e 100 g/mL, e
deixar em banho de gelo. Adicionar 0,5 mL de soluo de
fenol a 5% (p/v) e 2 mL de cido sulfrico concentrado.
Agitar bem e deixar em repouso a temperatura ambiente
por 30 minutos.
Medir a absorvncia da Soluo amostra e das Solues
para curva analtica em 490 nm (5.2.14), 30 minutos aps
o seu preparo, utilizando a Soluo branco para o ajuste
do zero. Calcular o teor de carboidratos totais da amostra
a partir da equao da reta obtida com as Solues para
curva analtica da glicose. O resultado expresso em
percentagem de carboidratos totais, calculados como
glicose, por 100 mL de droga.
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e calor.
a a
figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Aloe vera L. Burm. f.
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 6 cm, em B a 2 cm; em C, D e f a 100 m e em E 1 mm.
A - aspecto geral da planta sem a inforescncia.B - aspecto geral de uma folha.C - vista frontal da epiderme voltada para a face adaxial; estmatos
(es).D - vista frontal da epiderme voltada para a face abaxial; estmatos (es).E - aspecto geral da folha em seco transversal; clornquima (cl); cutcula
(cu); epiderme (ep); parnquima aqfero (pa); feixe vascular (fv).f - detalhe da poro assinalada em E; clula alofera (cal); clornquima (cl); cutcula
(cu); epiderme (ep); estmato (es); foema (f); feixe vascular (fv); gro de amido (ga); parnquima aqfero (pa); rfdes (r); xilema (x).
aa
a 110 C, durante cinco minutos. Desenvolve-se uma
mancha de fuorescncia violeta situada imediatamente
abaixo da mancha correspondente barbalona.
B. Dissolver a droga pulverizada em cido ntrico.
Desenvolve-se efervescncia, sendo obtida uma soluo
de colorao pardo-avermelhada a parda.
C. Num frasco com rolha, misturar 1 g da droga, fnamente
pulverizada, com 25 mL de gua e agitar, de vez em quando,
durante duas horas. Filtrar, lavar o fltrado e o resduo com
quantidade sufciente de gua de modo a obter 100 mL. A
colorao do fltrado, observado atravs do corpo de um
balo de 100 mL, amarelo-esverdeada com o aloe-do-
cabo. O fltrado escurece com o tempo.
D. A 5 mL do fltrado obtido no teste C. de Identifcao,
acrescentar 45 mL de gua e 20 mL de soluo de tetraborato
de sdio a 5% (p/v). desenvolvida fuorescncia amarelo-
esverdeada ou verde-amarelada que, com o tempo, passa a
alaranjado-amarelada (barbalona).
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias insolveis em lcool. Pesar, exatamente,
cerca de 1 g da droga vegetal e transferir para um balo
contendo 50 mL de etanol. Aquecer a mistura e mant-la,
moderadamente, em ebulio durante 15 minutos, repondo
o etanol evaporado. Deixar esfriar e agitar a mistura, de vez
em quando, durante uma hora. Filtrar com papel de fltro
pequeno, dessecado e tarado, e lavar o resduo com etanol
at que os lquidos de lavagem passem incolores. Dessecar
este resduo a 105 C, at peso constante, e pesar. O peso
encontrado deve ser inferior a 10,0%.
gua (5.4.2.3). No mximo 12,0%.
DOSEAMENTO
Derivados hidroxiantracnicos
a seguir.
Soluo estoque: adicionar 0,4 g da amostra pulverizada
em erlenmeyer de 250 mL. Umedecer com 2 mL de
metanol, adicionar 5 mL de gua previamente aquecida a
cerca de 60 C e misturar. Juntar 75 mL de gua aquecida
cerca de 60 C e agitar durante 30 minutos. Esfriar e
fltrar para balo volumtrico. Lavar o erlenmeyer e o fltro
com 20 mL de gua. Verter a gua de lavagem para balo
volumtrico e completar com gua at 1000 mL. Introduzir
10 mL desta soluo num balo de fundo redondo de 100
mL, contendo 1 mL de soluo de cloreto frrico a 60%
(p/v) e 6 mL de cido clordrico. Aquecer em banho-
maria sob refuxo durante 4 horas, mantendo o nvel de
gua acima do lquido do balo e ao abrigo da luz intensa.
Deixar esfriar e transferir a soluo para funil de separao.
Lavar sucessivamente o balo com 4 mL de gua, 4 mL de
hidrxido de sdio M e 4 mL de gua, juntar os lquidos
de lavagem ao contedo do funil de separao. Agitar trs
ALOE EXTRATO SECO
Aloe capensis extractum siccum
Aloe ferox Mill., Aloe africana Mill. e Aloe spicata Baker
ASPHODELACEAE
A droga vegetal constituda do suco espesso proveniente
das folhas, dessecado por meio de calor, e pertence s
espcies acima ou a seus hbridos interespecfcos, ou
ainda, da mistura delas. A droga seca constituda de, no
mnimo, 18% de derivados hidroxiantracnicos, expressos
em barbalona.
NOME POPULAR
Aloe-do-cabo.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga apresenta odor
acre, desagradvel, caracterstico, e sabor muito amargo,
nauseante.
Solubilidade. Parcialmente solvel em gua fervente,
solvel em etanol quente e praticamente insolvel em ter
etlico.
DESCRIO MACROSCPICA
Massas irregulares, de colorao castanho-escura,
com refexos esverdeados, de fratura lisa e vtrea. Seus
fragmentos so translcidos nos bordos, muito friveis,
originando um p amarelo.
IDENTIFICAO
254
,
com espessura de 250 m, como suporte, e mistura de gua,
metanol e acetato de etila (13:17:100), como fase mvel.
Aplicar, separadamente, placa, em forma de banda, 10
L de cada uma das solues, recentemente preparadas,
descritas a seguir.
Soluo (1): a 0,25 g do pulverizado, adicionar 20 mL de
metanol e aquecer at ebulio. Agitar por alguns minutos,
decantar a soluo e manter a cerca de 4 C. Esta soluo
pode ser utilizada at 24 horas depois.
Soluo (2): dissolver 25 mg de barbalona em 10 mL de
metanol.
ao ar. Pulverizar com soluo de hidrxido de potssio
a 10% (p/v) em metanol. Examinar sob luz ultravioleta
(365nm). A mancha principal obtida com a Soluo (1),
de fuorescncia amarela, corresponde em posio e
intensidade quela obtida com a Soluo (2), referente
barbalona. A mancha de fuorescncia azul clara obtida
com a Soluo (1), na parte inferior do cromatograma,
refere-se aloesina. Em seguida, aquecer a placa em estufa
a a
vezes com 20 mL de ter etlico de cada vez. Reunir as
camadas etreas e lavar duas vezes com 10 mL de gua
de cada vez, rejeitando as guas de lavagem. Completar a
camada orgnica at 100 mL com ter etlico.
Soluo amostra: evaporar 20 mL da Soluo estoque at
resduo em banho-maria. Ressuspender o resduo em 10
mL de acetato de magnsio a 0,5% (p/v) em metanol.
Medir a absorvncia da Soluo amostra em 512 nm,
imediatamente aps o seu preparo, utilizando metanol
para ajuste do zero. Considerar, para a barbalona, A(1%,
1 cm) = 255, em 512 nm, em metanol. Calcular o teor de
derivados hidroxiantracnicos, expressos em barbalona,
segundo a expresso:
em que
DHC = derivados hidroxiantracnicos em %;
A = absorvncia medida;
m = massa da droga (g) considerando o teor de gua
determinado.
ALTEIA
Althaeae radix
Althaea offcinalis L. MALVACEAE
A droga consiste de fragmentos de razes dessecadas,
mondados ou no, desprovidos de ramifcaes laterais.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Odor doce e inspido.
Consistncia mucilaginosa e sabor adocicado.
DESCRIO MACROSCPICA
A raiz no mondada cilndrica, ligeiramente retorcida
e sulcada longitudinalmente, com at 20,0 cm de
comprimento e at 2,0 cm de espessura. A superfcie
externa pardo-griscea e apresenta numerosas cicatrizes
das razes laterais. A fratura fbrosa na poro externa e
irregular e granulosa internamente. Na seco transversal
so visveis camadas concntricas do crtex pardacento e
sua estrutura estratifcada, separado por uma faixa cambial
bem marcada, sinuosa e escura, seguida pelo cilindro
central branco a creme-amarelado, mostrando xilema com
estrutura radial, especialmente aps hidratao em gua e
com auxlio de lente. A raiz mondada quase cilndrica e a
face externa tem cicatrizes escuras originadas pelas razes
laterais e apresenta colorao amarelo-esbranquiada.
Geralmente est fragmentada e mostra pores de fbras
dispostas longitudinalmente ou desprendidas dos restos do
crtex e, por vezes, as trs regies descritas so visveis.
DESCRIO MICROSCPICA
A raiz no mondada, em vista frontal, apresenta sber
com clulas polidricas de paredes retilneas. Em seco
transversal, so distintas trs regies: o crtex, de colorao
parda, o cmbio vascular de colorao amarelada e o
cilindro central, de colorao esbranquiada. O crtex
apresenta sber pouco desenvolvido, constitudo por
clulas geralmente tabulares e irregulares, de diferentes
tamanhos, de paredes delgadas e retilneas, dispostas em
fleiras e ricas em gros de amido. Em seco transversal, o
parnquima cortical apresenta clulas de variadas formas,
geralmente polidricas e volumosas, com paredes delgadas
e retilneas, repletas de gros de amido. O parnquima
cortical externo possui clulas de maior volume do que as
do parnquima cortical interno. Agrupamentos irregulares
de fbras do foema, com variado nmero de clulas,
mostrando paredes pouco espessadas, encontram-se
dispostos aleatoriamente, em grande quantidade na poro
mais interna do crtex. Clulas condutoras do foema
muito raramente so observadas. Os raios parenquimticos
distribuem-se desde o crtex interno at o cilindro central
e so constitudos por poucas fleiras de clulas, raramente
vrias, comumente pequenas, alongadas longitudinalmente
e de paredes retilneas. O cmbio possui vrias camadas
de clulas de reduzido tamanho, a maioria achatada
longitudinalmente, de paredes muito delgadas, dispostas
em fleiras, sendo facilmente distintas as iniciais fusiformes
e as radiais. O cilindro central muito desenvolvido,
est formado por xilema que apresenta parnquima com
clulas variadas tanto na forma quanto no volume, repletas
de gros de amido, de disposio um tanto regular, com
paredes retilneas, delgadas e com espaos intercelulares
visveis. Os elementos condutores formam agrupamentos
irregulares quanto ao nmero de elementos, so alinhados
longitudinalmente e muitas vezes esto associados a
pequenas clulas parenquimticas. Estes agrupamentos
so menos desenvolvidos e de distribuio mais irregular
junto ao cmbio. Mais internamente mostram disposio
anelar, sendo variado o nmero de anis. Agrupamentos
de fbras e, por vezes, fbras isoladas so encontrados por
todo o cilindro central em quantidade bem menor quando
comparado com o crtex. Ocorrem tambm junto ao xilema
primrio, quando presente. As razes que apresentam
medula slida possuem xilema primrio, formado por
elementos de pequeno calibre, associados a clulas
parenquimticas arredondadas e de reduzido tamanho, no
ocorrendo agrupamentos de fbras neste tecido. Algumas
razes podem apresentar a regio medular preenchida por
parnquima, composto por clulas de grande volume, com
menor quantidade de gros de amido e espaos intercelulares
mais reduzidos do que os dos demais parnquimas.
Nestas razes, os resduos de arcos de xilema so visveis
e tambm esto associados a parnquima de clulas
pequenas. Gros de amido simples, de variadas formas,
freqentemente arredondados, ovides ou reniformes,
com hilo geralmente central e ramifcado, raramente
excntrico, ou raramente gros compostos, muitas vezes
mostrando lamelao, ocorrem em grande quantidade
em todos os tecidos, exceto no parnquima medular.
Cristais de oxalato de clcio, do tipo drusa, com diferentes
tamanhos so muito comuns no crtex e no cilindro central.
aa
Clulas contendo mucilagem frequentemente ovaladas
ou arredondadas, podendo apresentar maior volume do
que as demais parenquimticas, com protoplasto denso e
escuro, tambm ocorrem no crtex e no cilindro central,
exceto no parnquima medular. Razes mondadas podem
no apresentar sber e parnquima cortical externo. Razes
em estgio de crescimento primrio caracterizam-se como
pentarcas. Com a adio de azul de toluidina os elementos
de vaso adquirem colorao azul intenso, as fbras coram
de azul-claro e as clulas contendo mucilagem, de violeta.
Devido grande quantidade de gros de amido e de clulas
contendo mucilagem h difculdade na confeco de
lminas histolgicas utilizando-se material hidratado.
O p atende a todas as exigncias estabelecidas para a
espcie, menos os caracteres macroscpicos. A observao
microscpica do p torna-se mais clara, quando utilizado
hidrato de cloral. So caractersticos: colorao branca
a branco-amarelada, quando proveniente de razes
mondadas ou pardo-acinzentada quando proveniente de
razes no mondadas; fragmentos de sber, em seco
transversal, mostrando clulas retangulares e achatadas
longitudinalmente; fragmentos de sber, em seco
transversal, mostrando clulas quadrangulares; fragmentos
de sber, em seco transversal, contendo idioblastos
cristalferos; fragmentos de sber, em seco transversal,
com clulas retangulares e achatadas longitudinalmente,
contendo idioblastos cristalferos e gros de amido;
fragmentos de sber, em vista frontal, contendo gros de
amido; fragmentos de sber, em seco transversal, com
clulas retangulares e achatadas longitudinalmente, repletas
de gros de amido; fragmentos de parnquima, em vista
frontal, contendo clulas com mucilagem e muitos gros
de amido; fragmentos de parnquima, em vista frontal,
mostrando idioblastos cristalferos e clulas repletas de gros
de amido; fragmentos de parnquima, em seco transversal,
contendo gros de amido; fragmentos de parnquima,
em seco transversal, contendo idioblastos cristalferos;
fragmentos de parnquima, em seco transversal, com
clulas contendo mucilagem e grande quantidade de gros
de amido; fragmentos de raio parenquimtico, em seco
longitudinal, mostrando clulas parenquimticas e fbras;
clulas parenquimticas isoladas, repletas de gros de amido
e/ou contendo cristais; fragmentos de raio parenquimtico,
em seco transversal, com clulas contendo gros de
amido; fragmentos de xilema, em seco longitudinal,
mostrando elemento de vaso com espessamento reticulado
associado a fbras e a parnquima; fragmentos de xilema,
em seco longitudinal, mostrando elementos de vaso com
espessamento reticulado, fbras e parnquima em seco
transversal e com gros de amido; fragmentos de xilema,
em seco longitudinal, mostrando elementos de vaso com
espessamento reticulado e com espessamento pontoado,
associados a clulas parenquimticas repletas de gros
de amido; fragmentos de xilema, em seco longitudinal,
mostrando elementos de vaso com espessamento reticulado
e com espessamento pontoado, associados a clulas
parenquimticas, repletas de gros de amido; pores de
elemento de vaso com espessamento helicoidal, em seco
longitudinal; elementos de vaso em seco transversal,
associados a clulas parenquimticas repletas de gros de
amido; pores de elementos de vaso com espessamento
reticulado, em seco longitudinal; fragmentos de fbras, em
seco longitudinal associados a clulas parenquimticas
do xilema; fragmentos de feixes de fbras, em seco
longitudinal, contendo gros de amido; fragmentos de feixe
de fbras, em seco longitudinal, associados a clulas do raio
parenquimtico; fragmentos de agrupamentos de fbras, em
seco transversal; fragmentos de agrupamentos de fbras,
em seco transversal; fbras ou pores destas, em seco
longitudinal, isoladas e/ou agrupadas; gros de amido, em
vista frontal, simples ou compostos, isolados ou agrupados
em pequeno nmero; agrupamentos formando grumos de
gros de amido, em vista frontal; mucilagem desprendida
das clulas; clulas isoladas contendo mucilagem; cristais
de oxalato de clcio do tipo drusa, isolados.
IDENTIFICAO
254
, com
espessura de 250 m, como fase estacionria e mistura
de acetato de etila, metil-etil-cetona, cido frmico e gua
(50:30:10:10), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, em forma de banda, 20 L de cada uma das solues,
Soluo (1): pesar 1 g da amostra, adicionar 10 mL de
metanol, aquecer em banho-maria durante 15 minutos.
Filtrar.
Soluo (2): dissolver 2,5 mg de rutina e 1 mg de cido
clorognico em 10 mL de metanol.
secar ao ar. Em seguida, nebulizar com difenilborato de
aminoetanol SR (Reagente Natural A) e observar sob luz
ultravioleta (365 nm). A Soluo (1), quando visualizada
sob luz ultravioleta (365 nm) apresenta trs manchas de
colorao azul fuorescente, com Rf aproximados de 0,12;
0,42 e 0,97. A mancha inferior da Soluo (1) aparece logo
abaixo da mancha correspondente rutina (Rf 0,25), de
colorao alaranjada, e a mancha mdia, abaixo do cido
clorognico (Rf 0,51), de colorao verde fuorescente.
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 2,0% de
elementos de cor castanho. No mximo 2,0% de elementos
do sber (raiz mondada).
gua (5.4.2.3). No mximo 12,0%. Determinar em 1 g da
amostra moda (710 m), em estufa de 100 C a 105 C,
durante 2 horas.
Cinzas totais (5.4.2.4). No mximo, 6,0% na raiz mondada.
No mximo, 8,0% na raiz no mondada.
Em recipiente hermeticamente fechado, protegido da luz
e do calor.
a a
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Althaea offcinalis L.
_______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A e B a 2,0 cm (rgua 1); em C e D a 100 m (rgua 2); em E e f a 1,0 mm (rgua
3); em G a 1,0 mm (rgua 4).
A - aspectos gerais de razes no mondadas; fbra (fb). B - aspectos gerais de razes mondadas; fbra (fb); raiz lateral (rzl). C - vista frontal do sber
externo de uma raiz no mondada; gro de amido (ga). D - vista frontal do sber interno de uma raiz mondada. E - representao esquemtica de uma
raiz no mondada, em seco transversal; cmbio (ca); cilindro central (cc); crtex (cx); elemento traqueal (el); elementos traqueais com disposio
anelar (ela); foema (f); fbra (fb); raio parenquimtico (rp); sber (su); xilema primrio (xp); xilema secundrio (xs). f - representao esquemtica
de uma raiz no mondada, em seco transversal; cmbio (ca); cilindro central (cc); crtex (cx); elemento traqueal (el); elementos traqueais com
disposio anelar (ela); foema (f); fbra (fb); parnquima medular (pm); raio parenquimtico (rp); sber (su); xilema secundrio (xs). G - representao
esquemtica de uma raiz mondada, em seco transversal; cmbio (ca); cilindro central (cc); crtex (cx); elemento traqueal (el); elementos traqueais
com disposio anelar (ela); foema (f); fbra (fb); parnquima medular (pm); raio parenquimtico (rp); restos de sber (rs); xilema secundrio (xs).
aa
figura 2 Aspectos microscpicos do p em Althaea offcinalis L.
______________
Complemento da legenda da figura 2. A escala corresponde a 100 m.
A - fragmentos de sber; A1 - fragmento de sber, em seco transversal, mostrando clulas retangulares e achatadas longitudinalmente; A2 - fragmento
de sber, em seco transversal, mostrando clulas quadrangulares; A3 - fragmento de sber, em seco transversal, contendo idioblastos cristalferos
a a
(ic) A4 - fragmento de sber, em seco transversal, com clulas retangulares e achatadas longitudinalmente, contendo idioblastos cristalferos e gros
de amido; gro de amido (ga); idioblasto cristalfero (ic); A5 fragmento de sber, em vista frontal, contendo gros de amido (ga); A6 - fragmento de
sber, em seco transversal, com clulas retangulares e achatadas longitudinalmente, repletas de gros de amido (ga). B - fragmentos de parnquima;
B1 - fragmento de parnquima, em vista frontal, contendo clulas com mucilagem e muitos gros de amido (ga); clula contendo mucilagem (cm);
B2 - fragmento de parnquima, em vista frontal, mostrando idioblastos cristalferos e clulas repletas de gros de amido (ga); idioblasto cristalfero
(ic); B3 fragmento de parnquima, em seco transversal, contendo gros de amido (ga); B4 - fragmento de parnquima, em seco transversal,
contendo idioblastos cristalferos (ic); B5 - fragmento de parnquima, em seco transversal, com clulas de mucilagem e com muitos gros de amido
(ga); mucilagem (um); B6 - fragmento de raio parenquimtico, em seco longitudinal, mostrando clulas parenquimticas e fbras; clula do raio
parenquimtico (crp); fbra (fb); parnquima (p); B7- clulas parenquimticas isoladas, contendo gros de amido e cristais de oxalato de clcio do tipo
drusa ou repletas de gros de amido; cristal do tipo drusa (cd); gro de amido (ga); B8 - fragmento de raio parenquimtico, em seco transversal,
com clulas contendo gros de amido (ga). C - fragmentos de xilema; C1 - fragmento de xilema, em seco longitudinal, mostrando elemento de vaso
com espessamento reticulado associado a fbras e a parnquima; elemento de vaso com espessamento reticulado (ere); fbra (fb); gro de amido (ga);
parnquima; C2 - fragmento de xilema, em seco longitudinal, mostrando elemento de vaso com espessamento reticulado, fbras e parnquima em
seco transversal e com gros de amido; elemento de vaso com espessamento reticulado (ere); fbra (fb); gro de amido (ga); parnquima (p); C3 -
fragmento de xilema, em seco longitudinal, mostrando elementos de vaso com espessamento reticulado e com espessamento pontoado, associados
a clulas parenquimticas, repletas de gros de amido; elemento de vaso com espessamento pontoado (epo); elemento de vaso com espessamento
reticulado (ere); gro de amido (ga); parnquima (p); C4 pores de elemento de vaso com espessamento helicoidal, em seco longitudinal; C5
- elementos de vaso em seco transversal, com gros de amido (ga); C6 - pores de elementos de vaso com espessamento reticulado, em seco
longitudinal. D - fragmentos de fbras; D1 - fragmento de fbras, em seco longitudinal associados a clulas parenquimticas do xilema; fbra (fb);
parnquima do xilema (px); pontoao (pto); D2 - fragmento de feixes de fbras, em seco longitudinal, contendo gros de amido (ga); D3 -fragmentos
de feixe de fbras, em seco longitudinal, associados a clulas do raio parenquimtico; clula do raio parenquimtico (crp); fbra (fb); gro de amido
(ga); D4 fbras ou pores destas, isoladas ou agrupadas, em seco longitudinal; gro de amido (ga); D5 - fragmento de agrupamento de fbras, em
seco transversal. E - gros de amido, em vista frontal, simples ou compostos, isolados ou agrupados em pequeno nmero; gro de amido composto
(gac); gro de amido (ga). f - agrupamentos formando grumos de gros de amido, em vista frontal. G - mucilagem desprendida das clulas. H - clulas
isoladas contendo mucilagem; mucilagem (mu). I - cristais de oxalato de clcio do tipo drusa, isolados.
aa
figura 3 Aspectos microscpicos em Althaea offcinalis L.
_______________
A - detalhe parcial do sber, em seco transversal, de uma raiz no mondada; gro de amido (ga). B - detalhe parcial de uma raiz mondada, em seco
transversal; B1. detalhe parcial do crtex, cmbio e poro externa do cilindro central; cmbio (ca); cilindro central (cc); clulas condutoras do foema
(cf); clula contendo mucilagem (cm); crtex (cx); espao intercelular (ei); elemento de vaso (ev); foema (f); fbra (fb); idioblasto cristalfero (ic); gro
de amido (ga); gro de amido composto (gac); raio parenquimtico (rp); parnquima (p); xilema secundrio (xs); B2. continuidade do detalhe parcial
de B1, mostrando poro interna do cilindro central; cilindro central (cc); clula contendo mucilagem (cm); espao intercelular (ei); elemento de vaso
(ev); fbra (fb); idioblasto cristalfero (ic); gro de amido (ga); raio parenquimtico (rp); parnquima (p); xilema primrio (xp); xilema secundrio (xs).
a a
AMARANTO
C
20
H
11
N
2
Na
3
O
10
S
3
; 604,47
CI 16185
Sal sdico do cido 3-hidroxi-4-[2-(4-sulfo-1-naftalenil)
diazenil]-2,7-naftalenodissulfnico (3:1)
[915-67-3]
Contm, no mnimo, 85,0% de C
20
H
11
N
2
Na
3
O
10
S
3
em
relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, castanho avermelhado,
higroscpico. Soluo aquosa cor de vinho.
Solubilidade. Solvel em gua, metanol e glicerol, pouco
solvel em etanol, insolvel em ter etlico e acetona.
IDENTIFICAO
O espectro de absoro no ultravioleta e visvel (5.2.14), na
acetato de amnio 0,02 M (pH 5,6), exibe mximos em 519,
330 e 217 nm e mnimos em 360, e 310 nm, idnticos aos
observados no espectro de soluo similar de amaranto SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
Corantes subsidirios. Proceder conforme descrito em
slica-gel G, como suporte, e mistura de 1-butanol, etanol,
gua e hidrxido de amnio (50:25:25:10), como fase
Soluo (1): soluo a 10 mg/mL da amostra em gua.
Soluo (2): soluo a 10 mg/mL de amaranto padro em
gua.
gua.
secar ao ar. Examinar sob luz ambiente e sob luz ultravioleta
(254 nm). A mancha principal obtida com a Soluo (1)
com a Soluo (2). Qualquer mancha secundria obtida
no cromatograma com a Soluo (1), diferente da mancha
principal, no mais intensa que aquela obtida com a
Soluo (3) (4%).
Chumbo, cobre, estanho, zinco. Proceder conforme
descrito em Espectrofotometria de absoro atmica
(5.2.13). Pesar 2 g da amostra, usar cadinho de slica
e queimar, brandamente, sobre tela de amianto ( 350
C); lev-lo mufa durante 12 horas, sem ultrapassar
a temperatura de 450 C. Remover o cadinho e resfriar.
Misturar o resduo com cerca de 2 mL de gua e adicionar
duas gotas de nitrato de magnsio a 50% (p/v). Secar sobre
chapa eltrica e retornar mufa durante 3 a 4 horas, ou at
que o resduo esteja branco, ou amarelado. Em seguida,
resfriar, gotejar 1 a 2 mL de cido ntrico e 1 mL de gua
e aquecer sobre chapa eltrica at quase secar. Dissolver
os nitratos metlicos com 5 mL de gua. Se necessrio,
centrifugar. Levar ao espectrofotmetro de absoro
atmica, calibrado previamente e realizar a leitura da
concentrao de cada um dos metais. No mximo 0,001%
(10 ppm) de chumbo, 0,002% (20 ppm) de cobre, 0,025%
(250 ppm) de estanho e 0,005% (50 ppm) de zinco.
Cloretos e sulfatos. Pesar 0,5 g da amostra, dissolver
em 200 mL de gua, acidifcar com 8 mL de cido ntrico
a 25% (v/v) e titular com nitrato de prata 0,1 M SV em
potencimetro com eletrodo combinado de prata. Cada mL
de nitrato de prata 0,1 M SV equivale a 5,85 mg de NaCl.
Pesar 0,5 g da amostra e dissolver com 100 mL de gua
em banho-maria. Adicionar 35 g de cloreto de sdio,
isentos de sulfatos e agitar bem. Transferir para balo
volumtrico de 200 mL e completar o volume com soluo
saturada de cloreto de sdio. Homogeneizar. Aps 1 hora,
fltrar por papel de fltro e transferir alquota de 100 mL
do fltrado para bquer de 600 mL, diluir at 300 mL com
gua e acidifcar com cido clordrico SR, adicionando
leve excesso. Aquecer fervura e gotejar, com agitao,
25 mL de cloreto de brio a 12% (p/v), ou at que no
ocorra mais precipitao. Deixar em repouso durante
quatro horas. Separar o sulfato de brio por fltrao, lavar
com gua quente, secar o papel com o resduo, transferir
para cadinho seco, previamente pesado e calcinar em mufa
a 500 C durante 1 hora. Resfriar em dessecador e pesar.
Calcular o teor de sulfatos pela expresso:
sulfatos %
p
, N
=
100 6085 0
em que
N = gramas de sulfato de brio;
p = gramas da amostra usados na precipitao.
No mximo, 5% de cloretos e sulfatos.
Substncias insolveis em gua. Dissolver 5 g da amostra
em 200 mL de gua quente (80-90 C) com agitao.
Resfriar temperatura ambiente. Filtrar por placa fltrante,
previamente seca e pesada. Lavar com gua fria at que as
guas de lavagem se tornem incolores. Secar o fltro com
o resduo em estufa a 120 C durante quatro horas e pesar.
No mximo, 0,5%.
aa
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar o Mtodo I. Determinar em 1 g
da amostra. No mximo, 0,0001% (1 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo III. Determinar
em 0,5 g da amostra. No mximo, 0,004% (40 ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). Determinar em 0,5 g da
amostra. Dessecar em estufa a 120 C por 4 horas, ou a
135 C por 3 horas. No mximo, 10%.
DOSEAMENTO
absoro no visvel (5.2.14). Preparar soluo amostra
conforme descrito na Identifcao. Preparar soluo
padro na mesma concentrao, utilizando o mesmo
solvente. Medir as absorvncias das solues resultantes
em 519 nm, utilizando acetato de amnio 0,02 M (pH 5,6)
para ajuste do zero. Calcular o teor de C
20
H
11
N
2
Na
3
O
10
S
3

na amostra a partir das leituras obtidas. Alternativamente,
481 nm, em base anidra.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Corante.
AMARANTO LACA DE ALUMNIO
Corante constitudo principalmente do sal sdico do
cido 3-hidroxi-4-[2-(4-sulfo-1-naftalenil)diazenil]-2,7-
naftalenodissulfnico (3:1) - amaranto - sobre substrato de
alumina. Contm, no mnimo, 95% e, no mximo, 105%
do teor de corante declarado no rtulo.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, vermelho. Higroscpico.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua e em
etanol. Solvel em hidrxido de sdio M, porm o corante
decompe-se lentamente em pH alcalino.
IDENTIFICAO
A. O espectro de absoro no visvel e no ultravioleta
(5.2.14), na faixa de 200 nm a 700 nm, de uma soluo
contendo a amostra a 0,001% (p/v) em acetato de amnio
0,02 M (pH 5,6), previamente solubilizada em hidrxido
de sdio M, exibe mximos em cerca de 519, 330 e 217
nm e mnimos em 360 e 310 nm, idnticos aos observados
no espectro de soluo de amaranto SQR, preparado de
mesma maneira.
B. Transferir 0,15 g da amostra para bquer de 60 mL
e dissolver com cerca de 20 mL de cido actico a 30%
(p/v) a quente, at que fque apenas opalescente. Esfriar
e dividir a soluo em dois tubos de ensaio. A um deles,
adicionar 2 mL de soluo de morina a 3 mg/mL em etanol,
recm preparada. Observar a fuorescncia verde que se
desenvolve sob luz ultravioleta (254 nm), comparando
com o tubo sem reativo.
ENSAIOS DE PUREZA
gua, soluo concentrada de amnia (50:25:25:10), como
fase mvel. Aplicar, separadamente a placa, 2 L de cada
uma das solues recentemente preparadas como descrito
a seguir:
Soluo (1): 0,25 g de amostra em 10 mL de hidrxido de
sdio 0,5 M.
Soluo (2): 0,05 g de amaranto padro em 10 mL de
Soluo (3): diluir a Soluo (2) de modo a obter uma
soluo a 0,2 mg/mL ,com o mesmo diluente.
soluo a 1 g/mL, com o mesmo diluente.
secar ao ar. Examinar sob luz ambiente e luz ultravioleta
corresponde em posio, cor e intensidade aquela obtida
com a Soluo (2). As manchas secundrias obtidas com
a Soluo (1) no devem ser mais intensas do que aquelas
obtidas com a Soluo (3) e a Soluo (4).(4%).
Alternativamente pode ser empregada mistura de 1-butanol,
gua, cido actico glacial (20:12:5) como fase mvel. Em
lugar de slica-gel G pode ser usado papel cromatogrfco,
utilizando-se as condies anteriormente descritas e
observando as manchas tambm por transparncia.
Cloretos e sulfatos. Pesar 10 g da amostra, agitar com 250
mL de gua, deixando em contato por 30 minutos. Filtrar.
Medir 50 mL do fltrado, equivalente a 2 g da amostra,
diluir para 200 mL com gua, acidifcar com 8 mL de cido
ntrico a 25% (v/v) e titular com nitrato de prata 0,1 M
SV em potencimetro com eletrodo combinado de prata.
Cada mL de nitrato de prata

0,1 M SV equivale a 5,85 mg
de NaCl.
Medir outros 50 mL do fltrado, diluir a 300 mL com
gua, acidifcar com cido clordrico SR e mais 1 mL de
excesso. Aquecer fervura e gotejar, com agitao, 25 mL
de cloreto de brio a 12% (p/v). Deixar em repouso por
a a
sulfatos %
p
, N
=
100 6085 0
em que
p = gramas da amostra usados na precipitao;
Perda por dessecao (5.2.9). Pesar cerca de 0,5 g.
Dessecar a amostra a 120 C por 4 horas ou a 135 C por 3
horas. No mximo 20%.
Resduo por incinerao (5.2.10). Pesar cerca de 0,1 g da
amostra em cadinho previamente seco e pesado e incinerar
a 800 C durante 2 horas. Deve conter entre 40 e 55%.
DOSEAMENTO
Efetuar as diluies como descrito no mtodo A. em
Identifcao, e ler a absorvncia no pico mximo em
cerca de 519 nm (5.2.14). Calcular o teor do corante pela
expresso:
p 436
100 A
= % de amaranto na amostra em 519 nm

em que
p = peso da amostra em gramas na diluio efetuada.
Alternativamente pode-se considerar A(1%, 1 cm) = 436
em 519 nm.
Em recipientes perfeitamente fechados, protegidos da luz.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Corante.
AMARELO CREPSCULO
C
16
H
10
N
2
Na
2
O
7
S
2
; 452,37
CI 15985
Sal sdico do cido 6-hidroxi-5-[2-(4-sulfofenil)diazenil]-
2-naftalenossulfnico (2:1)
[2783-94-0]
Contm, no mnimo, 85% de C
16
H
10
N
2
Na
2
O
7
S
2
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, laranja avermelhado e
higroscpico. Soluo aquosa amarelo-alaranjada
Solubilidade. Solvel em gua, etanol, metanol e glicerol,
insolvel em ter etlico, acetona e leo mineral. Pouco
estvel em presena de agentes redutores
IDENTIFICAO
O espectro de absoro no ultravioleta e visvel (5.2.14),
na faixa de 200 nm a 700 nm, de soluo a 0,001% (p/v)
em acetato de amnio 0,02 M (pH 5,6), exibe mximos em
481, 312, 234 e 211 nm e mnimos em 348, 286 e 218 nm,
idnticos aos observados no espectro de soluo similar de
amarelo crepsculo SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
Cromatografa em camada delgada (V.2.17.1), utilizando
gua, hidrxido de amnio (50:25:25:10), como fase
mvel. Aplicar, separadamente a placa, 2 L de cada uma
das solues recentemente preparadas como descrito a
seguir:
sdio 0,5 M.
Soluo (2): 0,05 g de amarelo crepsculo padro em 10
mL de hidrxido de sdio 0,5 M.
soluo a 0,25 mg/mL, com o mesmo diluente.
aa
obtidas com a Soluo (3) e a Soluo (4) (5%).
Chumbo, cobre, estanho, zinco. Proceder conforme
descrito em Espectrofotometria de absoro atmica
(5.2.13). Pesar 2 g da amostra, usar cadinho de slica
e queimar, brandamente, sobre tela de amianto ( 350
C); lev-lo mufa durante 12 horas, sem ultrapassar
a temperatura de 450 C. Remover o cadinho e resfriar.
Misturar o resduo com cerca de 2 mL de gua e adicionar
duas gotas de nitrato de magnsio a 50% (p/v). Secar sobre
chapa eltrica e retornar mufa durante 3 a 4 horas, ou at
que o resduo esteja branco, ou amarelado. Em seguida,
resfriar, gotejar 1 a 2 mL de cido ntrico e 1 mL de gua
e aquecer sobre chapa eltrica at quase secar. Dissolver
os nitratos metlicos com 5 mL de gua. Se necessrio,
centrifugar. Levar ao espectrofotmetro de absoro
atmica, calibrado previamente e realizar a leitura da
concentrao de cada um dos metais. No mximo 0,001%
(10 ppm) de chumbo, 0,002% (20 ppm) de cobre, 0,025%
(250 ppm) de estanho e 0,005% (50 ppm) de zinco.
Cloretos e sulfatos. Pesar 0,5 g da amostra, dissolver
em 200 mL de gua, acidifcar com 8 mL de cido ntrico
a 25% (v/v) e titular com nitrato de prata 0,1 M SV em
potencimetro com eletrodo combinado de prata. Cada mL
de nitrato de prata 0,1 M SV equivale a 5,85 mg de NaCl.
Pesar 0,5 g da amostra e dissolver com 100 mL de gua
em banho-maria. Adicionar 35 g de cloreto de sdio,
isentos de sulfatos e agitar bem. Transferir para balo
volumtrico de 200 mL e completar o volume com soluo
saturada de cloreto de sdio. Homogeneizar. Aps 1 hora,
fltrar por papel de fltro e transferir alquota de 100 mL
do fltrado para bquer de 600 mL, diluir at 300 mL com
gua e acidifcar com cido clordrico SR, adicionando
leve excesso. Aquecer fervura e gotejar, com agitao,
25 mL de cloreto de brio a 12% (p/v), ou at que no
ocorra mais precipitao. Deixar em repouso durante
sulfatos %
p
, N
=
100 6085 0
em que
p = gramas da amostra usados na precipitao.
Substncias insolveis em gua. Dissolver 5 g da amostra
em 200 mL de gua quente (80-90 C) com agitao.
Resfriar temperatura ambiente. Filtrar por placa fltrante,
previamente seca e pesada. Lavar com gua fria at que as
guas de lavagem se tornem incolores. Secar o fltro com
o resduo em estufa a 120 C durante quatro horas e pesar.
No mximo, 0,5%.
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar o Mtodo I. Determinar em 1 g
da amostra. No mximo, 0,0001% (1 ppm).
em 0,5 g da amostra. No mximo, 0,004% (40 ppm).
DOSEAMENTO
Efetuar as diluies como descrito em Identifcao, e ler a
absorvncia no pico mximo em cerca de 481 nm (5.2.14).
Calcular o teor do corante pela expresso:
p 564
100 A
= % de amarelo crepsculo na
amostra em 519 nm
em que
em 481 nm.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Corante
AMARELO CREPSCULO LACA DE
ALUMNIO
Corante constitudo principalmente do sal sdico
do cido 6-hidroxi-5-[2-(4-sulfofenil)diazenil]-2-
naftalenossulfnico (2:1) - amarelo crepsculo - sobre
substrato de alumina. Contm, no mnimo, 95% e, no
mximo, 105% do teor de corante declarado no rtulo.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, amarelo-alaranjado.
Higroscpico.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua e em
etanol. Solvel em hidrxido de sdio M, porm o corante
decompe-se lentamente em pH alcalino.
a a
IDENTIFICAO
A. O espectro de absoro no visvel e no ultravioleta
(5.2.14), na faixa de 700 nm a 200 nm, da soluo amostra
a 0,001% (p/v) em acetato de amnio 0,02 M (pH 5,6),
previamente solubilizada em hidrxido de sdio M, exibe
mximos em cerca de 481, 312, 234 e 211 nm e mnimos
em 348 nm, 286 nm e 218 nm, idnticos aos observados no
espectro de soluo similar de amarelo crepsculo SQR.
B. Transferir 0,15 g da amostra para bquer de 60 mL
e dissolver com cerca de 20 mL de cido actico a 30%
(p/v) a quente, at que fque apenas opalescente. Esfriar
e dividir a soluo em dois tubos de ensaio. A um deles
adicionar 2 mL de soluo de morina a 3 mg/mL e etanol,
recm preparado. Observar a fuorescncia verde que se
desenvolve sob luz ultravioleta (254 nm), comparando
com o tubo sem reativo.
ENSAIOS DE PUREZA
gua, hidrxido de amnio (50:25:25:10), como fase
mvel. Aplicar, separadamente a placa, 2 L de cada uma
das solues recentemente preparadas como descrito a
seguir:
sdio 0,5 M.
Soluo (2): 0,05 g de amarelo crepsculo padro em 10
mL de hidrxido de sdio 0,5 M.
obtidas com a Soluo (3) e a Soluo (4).(5%).
Cloretos e sulfatos. Pesar 10 g da amostra, agitar com 250
mL de gua, deixando em contato por 30 minutos. Filtrar.
Medir 50 mL do fltrado, equivalente a 2 g da amostra,
diluir para 200 mL com gua, acidifcar com 8 mL de cido
ntrico a 25% (v/v) e titular com nitrato de prata 0,1 M SV
sulfatos %
p
, N 100 6085 0
=
em potencimetro com eletrodo combinado de prata. Cada
mL de nitrato de prata 0,1 M SV equivale a 5,85 mg de
NaCl.
Medir outros 50 mL do fltrado, diluir a 300 mL com
gua, acidifcar com cido clordrico SR e mais 1 mL de
excesso. Aquecer fervura e gotejar, com agitao, 25 mL
de cloreto de brio a 12% (p/v). Deixar em repouso por
em que
p = gramas da amostra usados na precipitao;
Perda por dessecao (5.2.9). Pesar cerca de 0,5 g.
Dessecar a amostra a 120 C por 4 horas ou a 135 C por 3
horas. No mximo 20%.
Resduo por incinerao (5.2.10). Pesar cerca de 0,1 g da
amostra em cadinho previamente seco e pesado e incinerar
a 800 C durante 2 horas. Deve conter entre 40 e 55%.
DOSEAMENTO
Efetuar as diluies como descrito no mtodo A. em
Identifcao, e ler a absorvncia no pico mximo em cerca
de 481 nm. Calcular o teor do corante pela expresso:
p 564
100 A
= % de amarelo crepsculo na
amostra em 481 nm
em que
em 481 nm.
Em recipientes perfeitamente fechados, protegidos da luz.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Corante.
aa
AMIDO
Amylum
amido; 00657
Amido
[9005-25-8]
O amido obtido dos frutos, razes e outras partes de
diferentes vegetais. O amido de milho (Zea mays L.,
Poaceae), amido de arroz (Oryza sativa L., Poaceae),
amido de trigo (Triticum aestivum L., Poaceae), amido
de mandioca (Manihot utilissima Pohl, Euphorbiaceae)
e amido de batata (Solanum tuberosum L., Solanaceae)
so considerados ofcinais. Amidos obtidos de diferentes
origens botnicas podem no ter propriedades idnticas
quando usados para fns farmacuticos. Quimicamente,
o amido uma mistura de polmeros que corresponde
frmula (C
6
H
10
O
5
)
n
. O amido de milho contm cerca de
27% de amilose e 73% de amilopectina.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, branco, inodoro e inspido.
Quando examinado em camada fna, no deve apresentar
impurezas visveis ou sujidades.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua fria, etanol
e solventes orgnicos.
DESCRIO MICROSCPICA
Amido de arroz (figura 1). Gros muito pequenos,
polidricos, com ngulos agudos e arestas retas,
comumente reunidos em grupos, com dimetro de 2 m a
10 m (4 m a 6 m, em mdia). Os gros arredondados
so raros e o hilo frequentemente est ausente ou aparece
como diminuta pontuao.
Amido de batata (figura 2). Gros simples, irregularmente
ovides ou subesfricos, raramente agrupados aos pares ou
trios, caractersticos. Os gros ovides so desigualmente
alongados ou triangulares, de 30 m a 100 m de dimetro.
Os gros subesfricos medem de 10 m a 35 m. O hilo
redondo, excentricamente disposto na parte mais estreita
do gro, com estrias bem ntidas e concntricas.
Amido de mandioca (figura 3). Os gros variam de 25
m a 35 m de dimetro, irregularmente arredondados,
em forma de dedal, de esfera truncada em uma ou vrias
faces, com hilo pontuado, linear ou estrelado, central e bem
ntido.
Amido de milho (figura 4). Mistura de gros de duas
formas. Quando provenientes da periferia do albmen
so polidricos, fortemente comprimidos, mostrando hilo
arredondado, rachado ou estelar e medem, em mdia, 14
m a 20 m de dimetro. Quando oriundos da parte mais
central do albmen mostram contorno pouco anguloso,
irregularmente arredondado e so alongados, ovides ou
piriformes e com o hilo maior; e medem, em mdia, 10
m a 35 m. Os gros menores agrupam-se, por vezes,
assemelhando-se a gros compostos.
Amido de trigo (figura 5). Duas formas de gros,
nitidamente diferenciadas e quase sem formas
intermedirias: gros grandes, lenticulares, redondos,
ovais e sub-reniformes, algumas vezes fendidos nos
bordos; apresentam camadas concntricas pouco distintas,
assim como o hilo sob a forma de um ponto central ou uma
simples linha; medem, em mdia, de 28 m a 35 m de
dimetro. Vistos de perfl, so elpticos, alongados, quase
fusiformes, sulcados por uma fenda, s vezes bastante
larga. Os gros menores so arredondados, facetados pela
compresso mtua, medindo de 2 m a 9 m (5 m a 7 m,
em mdia) de dimetro. Tambm se apresentam em alguns
grupos de dois a quatro gros.
IDENTIFICAO
A. Misturar 1 g da amostra com 2 mL de gua fria. Verter
sobre 15 mL de gua fervente. Ferver, brandamente,
durante 2 minutos, sob agitao. Resfriar. Forma-se
produto gelatinoso, claro e translcido.
B. mistura gelatinosa obtida no teste A. de Identifcao,
adicionar uma gota de iodo SR. Desenvolve-se colorao
azul, que desaparece pela fervura e retorna pelo
resfriamento.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 4,5 a 7,0 para amido de milho e 5,0 a 8,0 para
amido de batata. Determinar em 20 g da amostra. Transferir
a amostra para frasco no metlico e adicionar 100 mL de
gua. Forma-se uma pasta. Agitar, continuamente, durante
5 minutos, a velocidade moderada.
Substncias oxidantes. Transferir 4 g da amostra para
erlenmeyer de 125 mL. Adicionar 50 mL de gua. Tampar
e agitar por 5 minutos. Transferir para tubo de centrfuga
com capacidade de 50 mL e centrifugar. Transferir 30 mL
do sobrenadante lmpido para erlenmeyer de 125 mL.
Adicionar 1 mL de cido actico glacial e 1 g de iodeto
de potssio. Tampar, agitar e deixar em repouso durante
30 minutos, ao abrigo da luz direta. Adicionar 1 mL de
amido SI e titular com tiossulfato de sdio 0,001 M SV at
desaparecimento da cor azul. Realizar ensaio em branco e
fazer as correes necessrias. Cada mL de tiossulfato de
sdio 0,001 M SV equivale a 17 g de oxidante, calculado
como perxido de hidrognio. No mximo 1,4 mL de
tiossulfato de sdio 0,001 M SV so consumidos (0,002%).
Dixido de enxofre. Misturar 20 g da amostra com 200
mL de gua at obteno de suspenso homognea. Filtrar.
Adicionar 100 mL do fltrado lmpido, 3 mL de amido SI e
titular com iodo 0,02 M SV at colorao azul permanente.
No mximo 5,4 mL de iodo 0,02 M SV so consumidos
(0,008%).
ferro (5.3.2.4). Dissolver o resduo obtido em Cinzas
sulfatadas em 8 mL de cido clordrico, sob aquecimento
suave. Diluir para 100 mL com gua e homogeneizar.
Transferir 25 mL para tubo de Nessler, adicionar 12 mL
a a
de gua e proceder conforme descrito em Mtodo I. No
mximo 0,002% (20 ppm).
No mximo 15,0%.
No mximo 0,6%.
Contagem do mmero total de micro-organismos
mesoflos (5.5.3.1.2). Bactrias aerbicas totais: no
mximo 100 UFC/g. Fungos e leveduras: no mximo 100
UFC/g. Contaminao acentuada por fungos pode acarretar
presena de afatoxinas no amido.
Cumpre o teste.
Em recipientes bem fechados, protegidos da umidade. O
rtulo deve indicar a procedncia botnica.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Adjuvante farmacutico.

figura 1 Amido de arroz.

figura 2 Amido de batata.

figura 3 Amido de mandioca.

figura 4 Amido de milho.
figura 5 Amido de trigo.
AMINOfILINA
Aminophyllinum
N
N
N
H
N
O
C H
3
O
CH
3
2
NH
2
N H
2 .
(C
7
H
8
N
4
O
2
)
2
.C
2
H
8
N
2
; 420,43
C
7
H
8
N
4
O
2
; 180,16
C
2
H
8
N
2
; 60,10

aminoflina; 00685
3,9-Diidro-1,3-dimetil-1H-purina-2,6-diona com
1,2-etanodiamina (2:1)
[317-34-0]
aa
Aminoflina uma combinao de teoflina e etilenodiamina,
que contm, no mnimo, 84,0% e, no mximo, 87,4%
da quantidade declarada de teoflina (C
7
H
8
N
4
O
2
) e, no
mnimo, 13,5% e, no mximo, 15,0% de etilenodiamina
(C
2
H
8
N
2
), em relao substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P ou grnulos brancos ou
levemente amarelados, com leve odor amoniacal e sabor
amargo.
Solubilidade. Muito solvel em gua, praticamente
insolvel em etanol absoluto e ter etlico.
IDENTIFICAO
A. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) do
precipitado obtido no teste B. de Identifcao, disperso
em brometo de potssio apresenta mximos de absoro
espectro da teoflina SQR, preparada de maneira idntica.
B. Dissolver 0,5 g de amostra em 20 mL de gua, adicionar
1 mL de cido clordrico 3 M, com agitao constante.
Filtrar e lavar o precipitado com pequenas pores de gua
fria. Secar a 105C por 1 hora. O precipitado obtido funde-
se entre 270C e 274C.
C.Transferir 10 mg do precipitado dessecado obtido no teste
B. de Identifcao para cpsula de porcelana, adicionar
1 mL de cido clordrico e 0,1 g de cloreto de potssio.
Evaporar em banho-maria at secura. Inverter a cpsula
sobre um recipiente contendo algumas gotas de hidrxido
de amnio 6 M. O resduo adquire colorao prpura, que
desaparece com a adio de solues alcalinas fxas.
D. O precipitado obtido no teste B. de Identifcao
responde s reaes de xantina (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel HF
254,
como suporte, e mistura de soluo
concentrada de amnia, acetona, clorofrmio e 1-butanol
(10:30:30:40), como fase mvel. Aplicar, separadamente
Soluo (1): dissolver 0,2 g da amostra pulverizada em 2
mL de gua e diluir para 10 mL com metanol.
Soluo (2): transferir 0,5 mL da Soluo (1) para balo
volumtrico de 100 mL e completar o volume com metanol.
Qualquer mancha obtida no cromatograma da Soluo (1),
diferente da mancha principal, no mais intensa que a
mancha obtida no cromatograma da Soluo (2) (0,5%).
mximo 0,002% (20 ppm)
gua (5.2.20.1). Determinar em 2 g da amostra. No
mximo 1,5%.
No mximo 0,15%.
DOSEAMENTO
Etilenodiamina
Dissolver 0,25 g de amostra em 30 mL de gua. Titular
com cido clordrico 0,1 M SV utilizando 0,1 mL de verde
de bromocresol SI como indicador, at viragem para verde.
Cada mL de cido clordrico 0,1 M SV equivale a 3,005 mg
de etilenodiamina (C
2
H
8
N
2
).
Teoflina
A. Proceder conforme descrito em Cromatografa a lquido
comprimento por 3,9 mm de dimetro interno, empacotada
m); fuxo da Fase mvel de 1 mL/minuto.
Fase mvel: misturar 200 mL de metanol, 0,96 g de
1-pentanossulfonato de sdio monoidratado e completar o
volume para 1000 mL com gua. Ajustar o pH em (2,9
0,1) com cido actico glacial.
Diluente: mistura de gua e metanol (4:1).
Soluo amostra: transferir 24 mg da amostra, exatamente
pesada, para balo volumtrico de 250 mL, completar o
volume com Diluente e misturar.
Soluo padro: dissolver quantidade, exatamente pesada,
de teoflina SQR no Diluente e diluir adequadamente de
modo a obter soluo a 80 g/mL.
Soluo de resoluo: preparar soluo de teobromina
SQR a 80 g/mL utilizando Soluo padro como
diluente. Transferir 20 mL para balo volumtrico de 25
mL, completar o volume com Diluente e homogeneizar.
Injetar replicatas de 10 L da Soluo de resoluo. Os
tempos de reteno relativos so de 0,65 para a teobromina
e 1,0 para a teoflina. A resoluo entre os picos de
teobromina e teoflina no menor que 3,0. O fator de
cauda para o pico da teoflina no maior que 2,0. O
desvio padro relativo das reas de replicatas dos picos
e medir as reas sob os picos. Calcular o teor de teoflina
(C
7
H
8
N
4
O
2
) na amostra de aminoflina a partir das respostas
obtidas para teoflina com a Soluo padro e a Soluo
amostra.
a a
B. Dessecar a amostra a 135C at peso constante. Pesar
exatamente 0,2 g da amostra, dissolver em 100 mL de
gua e aquecer, se necessrio. Resfriar. Adicionar 20 mL
de nitrato de prata 0,1 M e agitar. Titular com hidrxido de
sdio 0,1 M SV, utilizando1 mL de azul de bromotimol SI
como indicador. Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV
equivale a 18,016 mg de teoflina (C
7
H
8
N
4
O
2
).
Em recipientes fechados e protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Broncodilatador.
AMINOfILINA COMPRIMIDOS
teoflina (C
7
H
8
N
4
O
2
) e, no mnimo, 10,9% de etilenodiamina
(C
2
H
8
N
2
), da quantidade declarada de aminoflina.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade
de p equivalente a 0,5 g de aminoflina com 20 mL de
gua e fltrar. Adicionar ao fltrado, sob constante agitao,
1 mL de cido clordrico 2 M, deixar em repouso por alguns
minutos e fltrar. Reservar o fltrado para o teste C. de
Identifcao. Lavar o resduo com pequenas quantidades
de gua fria, recristalizar em gua quente e secar em estufa
a 105 C at peso constante. O espectro de absoro no
infravermelho (5.2.14) do resduo, disperso em brometo
aminoflina SQR, preparado de maneira idntica.
B. O resduo obtido do teste A. de Identifcao funde em
torno de 271 C.
C. Ao fltrado reservado no teste A. de Identifcao, adicionar
0,2 mL de cloreto de benzila, alcalinizar com hidrxido de
amnio 5 M e agitar vigorosamente. Filtrar e lavar o resduo
com gua fria, recristalizar em mistura de gua e etanol
(10:30) e secar em estufa a 100 C at peso constante. Os
cristais obtidos fundem-se em torno de 250 C.
D. Dissolver 10 mg do resduo obtido no teste A. de
Identifcao em 1 mL de cido clordrico. Adicionar 0,1
g de cloreto de potssio e evaporar at a secura. Obtm-se
resduo avermelhado, que se torna roxo sob a exposio de
vapor de amnia.
E. Pesar e pulverizar os comprimidos. Misturar quantidade
de p equivalente a 0,25 g de aminoflina com 5 mL
de gua e fltrar. A 2 mL do fltrado, adicionar 2 mL de
sulfato cprico a 1% (p/v) e homogeneizar. Desenvolve-se
colorao azul-escura.
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
de dissoluo, fltrar e diluir em gua at concentrao
adequada. Medir as absorvncias das solues em 269
nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente para o ajuste do
zero. Calcular quantidade de teoflina anidra (C
7
H
8
N
4
O
2
)
dissolvida no meio, comparando as leituras obtidas com
a da soluo de teoflina SQR na concentrao de 0,001%
(p/v), preparada no mesmo solvente.
declarada de teoflina (C
7
H
8
N
4
O
2
) se dissolvem em 45
minutos.
DOSEAMENTO
Etilenodiamina
de p equivalente a 0,3 g de aminoflina para erlenmeyer
de 150 mL, dissolver em 20 mL de gua e aquecer a 50
C por 30 minutos, agitando ocasionalmente. Titular com
cido sulfrico 0,05 M SV, utilizando soluo de verde de
bromocresol como indicador, at a mudana de colorao
para azul-esverdeado. Cada mL de cido sulfrico 0,05 M
SV equivale a 3,005 mg de etilenodiamina (C
2
H
8
N
2
).
Teoflina
A. Proceder conforme descrito em Espectrofotometria
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar e pulverizar,
a p fno, 20 comprimidos. Transferir quantidade de p
equivalente a 80 mg de aminoflina [(C
7
H
8
N
4
O
2
)
2
.C
2
H
8
N
2
]
para balo volumtrico de 200 mL. Adicionar 20 mL
de hidrxido de sdio 0,1 M e 60 mL de gua e agitar
mecanicamente por 10 minutos. Completar o volume com
gua, homogeneizar e fltrar. Transferir 5 mL do fltrado
com hidrxido de sdio 0,01 M SV, obtendo concentrao
de 0,001% (p/v). Medir a absorvncia da soluo
aa
resultante em 275 nm, utilizando hidrxido sdio 0,01 M
SV para ajuste do zero. Calcular a quantidade de teoflina
(C
7
H
8
N
4
O
2
) nos comprimidos considerando A (1% 1 cm) =
650, em 250 nm, em hidrxido sdio 0,01 M SV.
B. Pesar e pulverizar, a p fno, 20 comprimidos. Transferir
quantidade de p equivalente a 2 g de aminoflina
[(C
7
H
8
N
4
O
2
)
2
.C
2
H
8
N
2
] para balo volumtrico de 200 mL,
com o auxlio de uma mistura de 50 mL de gua e 15 mL de
hidrxido de amnio 6 M e deixar com agitao ocasional
durante 30 minutos, aquecendo a 50 C se necessrio, para
dissolver a aminoflina. Esfriar a mistura temperatura
ambiente, se tiver sido aquecida, adicionar gua, completar
o volume e homogeneizar. Centrifugar cerca de 50 mL
da mistura, pipetar a poro clara do sobrenadante,
equivalente a 250 mg de aminoflina, para um erlenmeyer
de 250 mL e diluir com gua, se necessrio, para perfazer
cerca de 40 mL. Adicionar 8 mL de hidrxido de amnio 6
M e 20 mL de nitrato de prata 0,1 M SV, aquecer ebulio
por 15 minutos. Esfriar entre 5 C e 10 C por 20 minutos
e fltrar, preferencialmente atravs de cadinho sob presso
reduzida. Lavar o precipitado com trs pores de 10 mL
de gua. Acidifcar o fltrado combinado e as lavagens com
cido ntrico e adicionar 3 mL do cido. Esfriar, adicionar
2 mL de sulfato frrico amoniacal SR e titular o excesso de
nitrato de prata com tiocianato de amnio 0,1 M SV. Cada
teoflina (C
7
H
8
N
4
O
2
).
EMBALAGEM
Em recipientes bem fechados
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente
AMINOSSALICILATO DE CLCIO
Calcii aminosalicylas
C
14
H
12
CaN
2
O
6
; 344,33
aminossalicilato de clcio; 00695
Sal de clcio do cido 4-amino-2-hidroxibenzoico (1:2)
[133-15-3]
C
14
H
12
CaN
2
O
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P ou cristais brancos a creme.
Inodoro, sabor alcalino levemente agridoce. um pouco
higroscpico. Suas solues decompem-se lentamente e
escurecem.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua. Ligeiramente
solvel em etanol.
Informao adicional. Preparar as solues de
aminossalicilato de clcio dentro de 24 horas do uso. No
usar as solues se sua cor for mais escura do que a de uma
soluo recentemente preparada.
IDENTIFICAO
A. Dissolver cerca de 3 g da amostra em 50 mL de gua,
adicionar cido actico gota a gota at que a mistura seja
nitidamente cida. Filtrar com suco, retendo o fltrado
para o teste C. de Identifcao. Lavar o precipitado com
vrias pequenas pores de gua e secar a vcuo sobre
pentxido de fsforo. Colocar cerca de 1 g do cido
aminossaliclico assim obtido em balo pequeno de fundo
redondo e adicionar 10 mL de anidrido actico. Aquecer o
balo de fundo redondo em banho-maria por 30 minutos,
adicionar 40 mL de gua, misturar, fltrar e resfriar. Deixar
em repouso at que o derivado diacetlico precipite.
Recolher o precipitado em um fltro, lavar bem com gua
e secar a 105 C por 1 hora. O derivado diacetlico obtido
funde entre 191 C e 197 C.
B. Agitar 0,1 g do cido aminossaliclico obtido no teste
A. de Identifcao com 10 mL de gua e fltrar. A 5 mL
do fltrado adicionar uma gota de cloreto frrico SR.
Desenvolve-se colorao violeta.
C. O fltrado obtido no teste A. de Identifcao responde
s reaes do on clcio (5.3.1.1).
D. Dissolver 0,25 g do cido aminossaliclico obtido
no teste A. de Identifcao em 3 mL de hidrxido de
sdio SR, transferir para balo volumtrico de 500 mL,
completar o volume com gua e misturar. Transferir 5 mL
dessa soluo para balo volumtrico de 250 mL contendo
12,5 mL de tampo fosfato pH 7,0, completar o volume
com gua e misturar. Esta soluo, quando comparada em
cubetas de 1 cm, com espectrofotmetro adequado, contra
branco do mesmo tampo e na mesma concentrao,
apresenta absorvncias mximas a (265 2) nm e a (299
2) nm e a razo entre os valores de absorvncia medidos
em 265 nm e 299 nm est compreendida entre 1,50 e 1,56.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Uma soluo de 1 g da amostra
em 50 mL de gua apresenta turbidez (5.2.25) no mais
intensa do que aquela produzida pela adio de 100 L de
cido clordrico diludo 1:600 a uma mistura de 48 mL de
gua, 1 mL de cido ntrico e 1 mL de nitrato de prata SR,
sendo as comparaes feitas em provetas de vidro iguais,
examinando horizontalmente contra um fundo branco e um
fundo preto.
a a
Aspecto da soluo em cido ntrico diludo. 1 g da
amostra dissolve-se em 50 mL de cido ntrico diludo
resultando soluo lmpida (5.2.25) que tem, no mximo,
cor leve.
pH. (5.2.19). 6,0 a 8,0. Determinar em soluo aquosa a
1:50.
Sulfeto de hidrognio e dixido de enxofre. Dissolver
cerca de 0,5 g da amostra em 5 mL de gua, adicionar 5
mL de cido clordrico diludo e agitar vigorosamente. No
perceptvel odor de sulfeto de hidrognio nem dixido de
enxofre e h, no mximo, leve odor de lcool amlico. Um
pedao de papel de fltro umedecido de acetato de chumbo
SR colocado sobre a mistura no se descora.
m-aminofenol. Pesar, exatamente, quantidade calculada
com base no Doseamento, equivalente a 0,562 g de
aminossalicilato de clcio anidro (0,5 g de cido
aminossaliclico) e colocar em balo volumtrico de 100
mL. Adicionar 1,8 mL de hidrxido de sdio SR e diluir
com gua para cerca de 80 mL. Adicionar 10 mL de cido
sulfrico diludo (1:10), completar o volume com gua e
misturar. Dentro de 2 minutos e meio a partir do tempo
em que o cido foi adicionado, transferir 5 mL dessa
soluo para um segundo balo volumtrico de 100 mL,
mergulhado em um banho de gelo e contendo 50 mL de
gua a temperatura de 0 C a 5 C e adicionar 2,5 mL de
soluo de nitrito de sdio (1:100). Misturar e deixar em
repouso em banho de gelo por 3 minutos 5 segundos.
Adicionar 25 mL de carbonato de sdio SR, misturar e
colocar o balo em banho-maria a 25 C por 15 minutos.
Completar o volume com gua, misturar e deixar a soluo
repousar a 25 C por 3 horas. Determinar a absorvncia
da soluo sobrenadante lmpida, em cubeta de 1 cm, no
mximo observado na zona do espectro entre 425 nm e
435 nm, com espectrofotmetro adequado, usando gua
como branco. Calcular a porcentagem de m-aminofenol na
amostra pela frmula:
(A - 0,320) / 1,09
em que
A = absorvncia da soluo;
0,320 = fator de correo da absorvncia que representa
a cor produzida por outros fatores e no pela reao de
m-aminofenol inicialmente presente;
1,09 = fator de converso da absorvncia em porcentagem
de m-aminofenol.
Permite-se, no mximo, 0,20% de m-aminofenol.
Cloretos (5.3.2.1). 0,5 g da amostra apresenta menos
cloreto que o correspondente a 0,3 mL de cido clordrico
0,02 M SV. No mximo 0,04% (400 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). No mximo 0,003% (30 ppm).
gua (5.2.20.1). Entre 12,5% e 14,5%.
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 0,35 g da amostra em cerca
de 25 mL de gua e deixar em repouso por 10 minutos,
com agitao ocasional. Adicionar 25 mL de cido actico
glacial e 20 mL de soluo de brometo de potssio 1:4.
Resfriar a 15 C, adicionar 5 mL de cido clordrico e
imediatamente titular com nitrito de sdio 0,1 M SV,
agitando vigorosamente. Determinar potenciometricamente
a viragem, usando sistema de eletrodos adequado. Cada
mL de nitrito de sdio 0,1 M SV equivale a 17,22 mg de
C
14
H
12
CaN
2
O
6.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibacteriano (tuberculosttico).
AMOXICILINA E CLAVULANATO DE
POTSSIO COMPRIMIDOS
quantidades declaradas de amoxicilina (C
16
H
19
N
3
O
5
S) e de
clavulanato de potssio (C
8
H
8
KNO
5
).
IDENTIFICAO
Os tempos de reteno dos picos principais do cromatograma
da Soluo amostra, obtida em Doseamento, correspondem
queles dos picos principais da Soluo padro.
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
Procedimento: imediatamente aps o teste, retirar alquota
do meio de dissoluo e diluir, se necessrio, em gua
at concentrao adequada. Proceder conforme descrito
em Doseamento. Calcular as quantidades de amoxicilina
aa
(C
16
H
19
N
3
O
5
S) e de clavulanato de potssio (C
8
H
8
KNO
5
)
dissolvidas no meio, comparando as respostas obtidas
com as da soluo de amoxicilina SQR e clavulanato de
ltio SQR nas concentraes de 0,05% (p/v) e 0,02% (p/v)
respectivamente, preparadas no mesmo solvente.
declarada de amoxicilina (C
16
H
19
N
3
O
5
S) e no menos
que 80% (Q) da quantidade declarada de clavulanato de
potssio (C
8
H
8
KNO
5
) se dissolvem em 30 minutos.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 7,5%, se a quantidade
rotulada de amoxicilina for de at 250 mg. No mximo
10,0%, se a quantidade rotulada de amoxicilina for maior
que 250 mg e menor que 500 mg. No mximo 11,0%, se a
quantidade rotulada de amoxicilina for superior a 500 mg.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
comprimento e 4 mm de dimetro interno empacotada com
slica ligada a grupo octadecilsilano (3m a 10 m); fuxo
da Fase mvel de 2,0 mL/minuto.
Tampo pH 4,4: dissolver 7,8 g de fosfato de sdio
monobsico em 900 mL de gua. Ajustar o pH para 4,4
0,1 com cido fosfrico ou hidrxido de sdio. Completar
para 1000 mL com gua e homogeneizar.
Fase mvel: mistura de Tampo pH 4,4 e metanol (95:5)
Soluo amostra: dissolver no menos que 10 comprimidos
em gua, em balo de volume que resulte em concentrao
no superior, em amoxicilina, a 3 mg/mL, com agitao
durante 30 minutos. Filtrar ou centrifugar e diluir alquota
da soluo lmpida resultante, com gua, at obter
concentrao de amoxicilina em 0,5 mg/mL. Utilizar esta
soluo em at uma hora.
Soluo padro: Dissolver quantidades exatamente
pesadas de amoxicilina SQR e clavulanato de ltio SQR
em gua de modo a obter uma soluo contendo 0,5 mg/
mL e 0,2 mg/mL, respectivamente.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo padro. A efcincia
da coluna, determinada para cada analito, no menor que
550 pratos tericos. Os tempos de reteno relativos so
cerca de 0,5 para cido clavulnico e 1,0 para amoxicilina.
O fator de cauda para o pico de cada analito no maior
que 1,5. A resoluo entre os picos de amoxicilina e cido
clavulnico no menor que 3,5. O desvio padro relativo
das reas de replicatas dos picos registrados no maior
que 2,0%.
reas sob os picos. Calcular os teores de amoxicilina e
clavulanato de potssio na amostra a partir das respostas
obtidas com as Solues padro e amostra.
ROTULAGEM
AMOXICILINA E CLAVULANATO
DE POTSSIO P PARA SOLUO
INJETVEL
16
H
19
N
3
O
5
S) e de
8
H
8
KNO
5
).
IDENTIFICAO
CARACTERSTICAS
Determinar na soluo injetvel reconstituda conforme
indicado no rtulo.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 8,0 a 10,0. Determinar na soluo reconstituda
contendo o equivalente a 10% (p/v) de amoxicilina.
gua (5.2.20.1). Determinar em 0,5 g. No mximo 3,5%.
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). Dissolver o contedo
do frasco ampola em gua para reagente LAL de modo a
obter uma soluo a 10 mg/mL de amoxicilina. No mximo
2,5 UE/mL desta soluo.
a a
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Doseamento da monografa
Amoxicilina e clavulanato de potssio comprimidos.
Preparar a Soluo amostra como descrito a seguir.
Soluo amostra: misturar os contedos de 10 unidades.
Transferir quantidade do p equivalente a 0,1 g de
amoxicilina para balo volumtrico de 200 mL, adicionar
gua at a dissoluo e completar o volume com o mesmo
solvente. Homogeneizar. Utilizar esta soluo em at uma
hora.
e medir as reas sob os picos. Calcular as quantidades de
amoxicilina e clavulanato de potssio na amostra a partir
das respostas obtidas com a Soluo padro e a Soluo
amostra.
ROTULAGEM
AMOXICILINA E CLAVULANATO DE
POTSSIO P PARA SUSPENSO ORAL
16
H
19
N
3
O
5
S) e de
8
H
8
KNO
5
).
IDENTIFICAO
CARACTERSTICAS
Determinar na suspenso oral reconstituda conforme
indicado no rtulo.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 7,5%, se a quantidade
rotulada de amoxicilina aps reconstituio for de at 40
mg/mL. No mximo 10,0%, se a quantidade rotulada de
amoxicilina aps reconstituio for maior que 40 mg/mL e
menor que 50 mg/mL. No mximo 11,0%, se a quantidade
rotulada de amoxicilina aps reconstituio for maior que
50 mg/mL e menor que 80 mg/mL. No mximo 12,0%, se a
quantidade rotulada de amoxicilina aps reconstituio for
superior a 80 mg/mL.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de Amoxicilina e clavulanato de potssio comprimidos.
Soluo amostra: reconstituir o p para suspenso oral
conforme indicado no rtulo. Diluir quantitativamente um
volume da suspenso em gua de modo a obter soluo
contendo 0,5 mg/mL de amoxicilina. Agitar mecanicamente
por 10 minutos e fltrar. Utilizar esta soluo em at uma
hora.
e medir as reas sob os picos. Calcular as quantidades de
amoxicilina e clavulanato de potssio na amostra a partir
amostra.
ROTULAGEM
AMOXICILINA TRI-HIDRATADA
Amoxicillinum trihydricum
S
N
H H
O
N
CH
3
CH
3
COOH
H
O
NH
2
O H
C
16
H
19
N
3
O
5
S; 365,40
C
16
H
19
N
3
O
5
S.3H
2
O; 419,45
amoxicilina; 00734
amoxicilina tri-hidratada; 00736
cido (2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)
acetil]amino]-3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciclo[3.2.0]
heptano-2-carboxlico
[26787-78-0]
aa
cido(2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)
acetil]amino]-3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciclo[3.2.0]
heptano-2-carboxlico hidratado (1:3)
[61336-70-7]
Apresenta potncia de, no mnimo, 900 g e, no mximo,
1050 g de amoxicilina (C
16
H
19
N
3
O
5
S) por miligrama, em
relao substncia anidra.
DESCRIO
branco.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, etanol e metanol.
Insolvel em benzeno, hexano, acetato de etila,
clorofrmio, ter etlico e acetonitrila. Solvel em solues
de hidrxidos alcalinos.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +290 a +315, em
relao substncia anidra. Determinar em soluo a 0,2%
(p/v) em gua isenta de dixido de carbono.
IDENTIFICAO
mximos de absoro somente nos mesmos comprimidos
observados no espectro de amoxicilina tri-hidratada SQR,
de 200 a 400 nm, de soluo a 0,02% (p/v), em etanol,
exibe mximos em 230 nm e em 274 nm, idnticos aos
observados em soluo similar de amoxicilina tri-hidratada
SQR.
C. Proceder conforme descrito em Cromatografa em
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G 60, como
suporte, e mistura de metanol, clorofrmio, gua e acetona
placa, 5 L de cada uma das solues descritas a seguir,
que devem ser usadas em, no mximo, 10 minutos aps
sua preparao:
Soluo (1): soluo a 4 mg/mL da amostra em cido
clordrico 0,1 M.
Soluo (2): soluo a 4 mg/mL de amoxicilina tri-
hidratada SQR em cido clordrico 0,1 M.
secar ao ar. Nebulizar com ninidrina SR. Aquecer a placa
em estufa a 110 C por 15 minutos. A mancha principal
obtida com a Soluo (1) corresponde em posio, cor e
ENSAIOS DE PUREZA
Cristalinidade. Suspender algumas partculas da amostra
em leo mineral, transferir para uma lmina de vidro e
examinar por meio de microscpio dotado de luz polarizada.
As partculas exibem birrefringncia, que se extingue ao
movimentar a amostra por meio de ajuste micromtrico.
0,2% (p/v).
gua (5.2.20.1). 11,5% a 14,5%. Determinar em 0,3 g de
amostra.
No mximo 1%.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito em Ensaio microbiolgico
de antibiticos (5.5.3.3.1) pelo mtodo de difuso em gar,
utilizando cilindros.
Micro-organismo: Micrococcus luteus ATCC 9341.
Meios de cultura: meio nmero 1, para manuteno
dos micro-organismos; soluo salina estril, para a
padronizao do inculo e meio nmero 11, para a camada
base e camada de inculo na placa.
Soluo amostra: pesar quantidade da amostra equivalente
a 100 mg de amoxicilina e transferir para um balo
volumtrico de 100 mL. Completar com gua e agitar por
cerca de 30 minutos. Transferir 1 mL desta soluo para
balo volumtrico de 100 mL, completar com soluo
tampo fosfato de potssio, estril, pH 8,0 (soluo 2) e
agitar. Diluir, sucessivamente, at as concentraes de
0,05 g/mL, 0,10 g/mL e 0,20 g/mL, utilizando soluo
tampo fosfato de potssio, estril, pH 8,0 (soluo 2)
como diluente.
Soluo padro: pesar quantidade de amoxicilina tri-
hidratada SQR equivalente a 25 mg de amoxicilina e
transferir para balo volumtrico de 50 mL. Completar
o volume com gua. Transferir 1 mL desta soluo para
soluo tampo fosfato de potssio, estril, pH 8,0 (soluo
2) e agitar. Diluir, sucessivamente, at as concentraes de
0,05 g/mL, 0,10 g/mL e 0,20 g/mL, utilizando soluo
tampo fosfato de potssio, estril, pH 8,0 (soluo 2)
como diluente.
Procedimento: adicionar 21 mL de meio de cultura nmero
11 em cada placa, esperar solidifcar, adicionar 4 mL de
inculo a 0,5% e proceder conforme descrito em Ensaio
microbiolgico de antibiticos (5.5.3.3.1), adicionando aos
cilindros, 0,2 mL das solues recentemente preparadas.
Calcular a potncia da amostra, em g de amoxicilina por
miligrama, a partir da potncia do padro e das respostas
B. Por mtodo iodomtrico. Dissolver e diluir padro
e amostra de amoxicilina tri-hidratada em gua, at
a a
concentrao de, aproximadamente, 1,25 mg/mL.
Transferir 2 mL da soluo padro para erlenmeyer com
tampa esmerilhada e adicionar 2 mL de hidrxido de sdio
M. Agitar e deixar em repouso por 15 minutos. Adicionar
2 mL de cido clordrico 1,2 M e 10 mL de iodo 0,01 M
SV. Deixar em repouso, por 15 minutos, ao abrigo da luz.
Titular com tiossulfato de sdio 0,01 M SV. Prximo ao
ponto fnal, adicionar tres gotas de amido SI e prosseguir
com a titulao at o desaparecimento da cor azul. Proceder
ao mesmo ensaio com a soluo amostra. Realizar prova
em branco, da amostra e do padro, por meio da titulao
de 2 mL de ambas solues, adicionadas de 10 mL de iodo
0,01 M SV e 0,1 mL de cido clordrico M. Prximo ao
com a titulao at o desaparecimento da cor azul. Titular
com tiossulfato de sdio 0,01 M SV. Calcular a potncia da
amostra segundo a frmula a seguir:
Em que:
P = potncia da amostra (g/mg);
Vba = volume de titulante gasto na titulao do branco da
amostra (mL);
Va = volume de titulante gasto na titulao da amostra (mL);
Vbp = volume de titulante gasto na titulao do branco do
padro (mL);
Vp = volume de titulante gasto na titulao do padro (mL);
P = potncia do padro (g/mg);
Pp = peso do padro (mg);
Pa = peso da amostra (mg).
Em recipientes perfeitamente fechados, em temperatura
entre 15 C a 25 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibitico.
AMOXICILINA TRI-HIDRATADA
CPSULAS
16
H
19
N
3
O
5
S. As cpsulas de
amoxicilina tri-hidratada so constitudas de amoxicilina
tri-hidratada com ou sem, um ou mais, agentes lubrifcantes,
diluentes e secantes adequados, includos em cpsulas de
gelatina.
IDENTIFICAO
de 200 nm a 400 nm, de soluo a 0,02% (p/v) em etanol,
exibe mximos em 230 nm e em 274 nm, idnticos aos
observados no espectro de soluo similar de amoxicilina
tri-hidratada SQR.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G 60, como
que devem ser usadas, no mximo, 10 minutos aps sua
preparao:
Soluo (1): soluo a 0,4% (p/v) da amostra em cido
clordrico 0,1 M.
Soluo (2): soluo a 0,4% (p/v) de amoxicilina tri-
secar ao ar e nebulizar com ninidrina SR. Aquecer em estufa
a 110 C por 15 minutos. A mancha principal obtida com
a Soluo (1) corresponde em posio, cor e intensidade
quela obtida com a Soluo (2).
CARACTERSTICAS
Teste de desintegrao (5.1.4.1). Cumpre o teste
Aparelhagem: cestas, 100 rpm
Tempo: 90 minutos
nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente para ajuste do
16
H
19
N
3
O
5
S dissolvida no
meio, comparando as leituras obtidas com a da soluo de
amoxicilina tri-hidratada SQR na concentrao de 0,01%
declarada de C
16
H
19
N
3
O
5
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). Determinar em 0,3 g da amostra. No
mximo 14,5%.
(5.5.3.1.2). Cumpre o teste
aa
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de antibiticos (5.5.3.3) pelo mtodo de difuso em gar,
Meios de cultura: meio de cultura nmero 1, para
manuteno do micro-organismos; soluo salina estril,
para a padronizao do inculo; meio de cultura nmero
11, para a camada base e camada de inculo na placa.
Soluo amostra: remover o contedo das cpsulas e pes-
las exatamente. Homogeneizar o contedo. Transferir
quantidade do p equivalente a 0,1 g de amoxilicina para
gua e agitar por cerca de 30 minutos. Transferir 1 mL desta
soluo para balo volumtrico de 100 mL, completar com
Tampo fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo
0,05 g/mL, 0,10 g/mL e 0,20 g/mL, utilizando Tampo
fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2) como
diluente.
hidratada SQR equivalente a 25 mg de amoxicilina,
transferir para balo volumtrico de 50 mL e completar o
volume com gua. Transferir 1 mL da soluo obtida para
0,05 g/mL, 0,10 g/mL e 0,20 g/mL, utilizando Tampo
fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2) como
diluente.
Calcular a potncia da amostra, em mg de amoxicilina
por cpsula, a partir da potncia do padro e das respostas
obtidas com a Soluo padro e com a Soluo amostra.
B. Proceder conforme descrito em Ensaio iodomtrico de
antibiticos (5.3.3.10). Remover o contedo das cpsulas
e pes-las. Homogeneizar o contedo das cpsulas.
Transferir quantidade do p, exatamente pesado, para
frasco volumtrico e diluir em gua de modo a obter
soluo de amoxicilina tri-hidratada a 1,25 mg/mL. Agitar
de 3 a 5 minutos. Preparar soluo padro nas mesmas
condies.
entre 15 C a 25 C.
ROTULAGEM
AMOXICILINA TRI-HIDRATADA P
PARA SUSPENSO ORAL
Amoxicilina tri-hidratada p para suspenso oral uma
mistura de um ou mais agentes adequados para suspenso,
contendo ou no corantes, aromatizantes, conservantes,
tampes, adoantes e estabilizantes. Contm, no mnimo
90,0% e, no mximo, 120,0% da quantidade declarada de
C
16
H
19
N
3
O
5
S. A amoxicilina tri-hidratada empregada na
produo cumpre as especifcaes descritas na monografa
Amoxicilina tri-hidratada.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G 60, como
que devem ser usadas, no mximo, 10 minutos aps sua
preparao.
Soluo (1): soluo a 0,4% (p/v) da amostra em cido
clordrico 0,1 M.
Soluo (2): soluo a 0,4% (p/v) de amoxicilina tri-
secar ao ar e nebulizar com ninidrina SR. Aquecer em estufa
a 110 C por 15 minutos. A mancha principal obtida com
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,0 a 7,5. Determinar na suspenso
reconstituda, conforme indicado no rtulo.
Determinao de volume (5.1.2). Cumpre o teste para
Produtos lquidos em recipientes para doses mltiplas.
Determinar na suspenso reconstituda conforme indicado
no rtulo.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 3,0%. Determinar em 0,3 g
da amostra.
a a
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
do micro-organismos; soluo salina estril, para a
Soluo amostra: transferir o equivalente a 250 mg de
amoxilicina para um balo volumtrico de 250 mL.
Completar com gua e agitar por cerca de 30 minutos.
Transferir 1 mL desta soluo para balo volumtrico
de 100 mL, completar com Tampo fosfato de potssio,
estril, pH 8,0 (Soluo 2) e agitar. Diluir, sucessivamente,
at as concentraes de 0,05 g/mL, 0,10 g/mL e 0,20 g/
mL, utilizando Tampo fosfato de potssio, estril, pH 8,0
(Soluo 2) como diluente.
hidratada SQR equivalente a 25 mg de amoxicilina e
transferir para balo volumtrico de 50 mL. Completar o
volume com gua. Transferir 1 mL desta soluo para balo
volumtrico de 100 mL, completar o volume com Tampo
fosfato de potssio, estril, pH 8,0 (Soluo 2) e agitar.
Diluir, sucessivamente, at as concentraes de 0,05 g/
mL, 0,10 g/mL e 0,20 g/mL, utilizando Tampo fosfato
de potssio, estril, pH 8,0 (Soluo 2) como diluente.
microbiolgico de antibiticos, adicionando aos cilindros,
0,2 mL das solues recentemente preparadas. Calcular a
potncia da amostra, em mg de amoxicilina por mililitro, a
partir da potncia do padro e das respostas obtidas com as
Solues padro e amostra.
antibiticos (5.3.3.10). Reconstituir o contedo conforme
indicado pelo produtor. Transferir quantidade do p,
exatamente pesado, para balo volumtrico e diluir em
gua de modo a obter soluo de amoxicilina tri-hidratada
a 1,25 mg/mL. Agitar de 3 a 5 minutos. Preparar soluo
padro nas mesmas condies.
entre 15 C a 25 C.
ROTULAGEM
AMPICILINA
Ampicillinum
S
N
H H
O
N
CH
3
CH
3
COOH
H
O
NH
2
C
16
H
19
N
3
O
4
S; 349,40
ampicilina; 00738
cido (2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]amino]-
3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciclo[3.2.0]heptano-2-
carboxlico
[69-53-4]
1050 g de C
16
H
19
N
3
O
4
S por miligrama, em relao
substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco a levemente
amarelado.
Solubilidade. Pouco solvel em gua e metanol,
praticamente insolvel em acetona, clorofrmio, etanol
absoluto e ter etlico, insolvel em benzeno e tetracloreto
de carbono. Solvel em solues cidas e alcalinas diludas.
Faixa de fuso (5.2.2): 199 C a 202 C.
relao substncia anidra. Determinar em soluo a
0,25% (p/v).
IDENTIFICAO
realizados os testes B. e C. Os testes de identifcao B. e
C. podem ser omitidos se for realizado o teste A.
observados no espectro de ampicilina SQR, preparado de
maneira idntica.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel H, como
suporte, e mistura de acetona e acetato de amnio a 15,4%
(p/v) com pH ajustado para 5,0 com cido actico glacial
(10:90), como fase mvel. Aplicar, separadamente, placa,
aa
2 L de cada uma das solues, recentemente preparadas,
descritas a seguir.
Soluo (1): soluo a 2,5 mg/mL da amostra em
bicarbonato de sdio a 4,2% (p/v).
Soluo (2): soluo a 2,5 mg/mL de ampicilina SQR em
secar ao ar. Expor a vapores de iodo at aparecimento das
manchas. A mancha principal obtida no cromatograma com
C. Transferir cerca de 2 mg da amostra para tubo de
ensaio. Umedecer com 0,05 mL de gua. Adicionar 2 mL
de mistura de soluo de formaldedo e cido sulfrico
(2:100) e agitar. A soluo praticamente incolor. Aquecer
em banho-maria por 1 minuto. Desenvolve-se colorao
amarela escura.
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
em leo mineral. Transferir para lmina de vidro e examinar
em microscpio dotado de luz polarizada. As partculas
exibem birrefringncia, que se extingue ao movimentar a
amostra por meio de ajuste micromtrico.
Limite de N,N-dimetilanilina. Proceder conforme
cromatgrafo provido de detector de ionizao de chamas,
coluna de vidro de 2 m de comprimento e 2 mm de
dimetro interno, empacotada com suporte de diatomceas
silanizado, impregnado com 3% (p/p) de fenilmetilsilicone
(50% fenil); temperatura da coluna de 120 C, temperatura
do injetor e detector de 150 C; nitrognio como gs de
arraste, fuxo de 30 mL/minuto.
Soluo de padro interno: soluo de naftaleno a 0,05
mg/mL em cicloexano.
hidrxido de sdio M, e adicionar 1 mL da Soluo de
padro interno. Agitar, vigorosamente, por 1 minuto,
centrifugar, se necessrio, e usar o sobrenadante.
Soluo de dimetilanilina: dissolver 50 mg de N,N-
dimetilanilina em mistura de 2 mL de cido clordrico e
20 mL de gua, sob agitao. Completar o volume para
50 mL com gua e agitar. Transferir 5 mL para balo
volumtrico de 250 mL, completar o volume com gua
e agitar. Transferir 1 mL para tubo de ensaio, adicionar 5
mL de hidrxido de sdio M, 1 mL da Soluo de padro
interno, e agitar vigorosamente por 1 minuto. Centrifugar,
se necessrio, e usar o sobrenadante.
de dimetilanilina e 1 L da Soluo amostra, registrar
os cromatogramas e medir as reas sob os picos
correspondentes dimetilanilina e ao naftaleno. A rea
sob o pico relativo dimetilanilina, obtido com a Soluo
amostra, no superior rea sob o pico principal obtido
com a Soluo de dimetilanilina (0,02%).
gua (5.2.20.1). No mximo 2,0%.
No mximo 0,5%.
Ampicilina destinada produo de preparaes parenterais
cumpre com os seguintes testes adicionais.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre o teste. Dissolver 6 g
da amostra em 800 mL de Fluido II contendo quantidade
sufciente de -lactamase para inativar a ampicilina, agitar
at total solubilizao e proceder conforme descrito em
Mtodo de fltrao em membrana.
Pirognio (5.5.2.1). Cumpre o teste. Injetar 1 mL/kg de
ampicilina a 2 mg/mL em hidrxido de sdio 0,05 M.
mg de ampicilina.
DOSEAMENTO
de antibiticos (5.5.3.3.1) pelo mtodo de difuso em gar.
Nota: as diluies das Solues padro e amostra para a
curva padro devem ser preparadas simultaneamente.
Soluo amostra: dissolver quantidade exatamente pesada
da amostra em gua estril de modo a obter soluo a 0,1
mg/mL. Diluir sucessivamente com Tampo fosfato de
potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2), de modo a
obter solues na faixa de concentrao adequada para a
curva padro.
Soluo padro: dissolver quantidade exatamente pesada
de ampicilina SQR em gua estril de modo a obter soluo
a 0,1 mg/mL. Diluir sucessivamente com Tampo fosfato
de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2), de modo a
curva padro.
Procedimento: proceder conforme descrito em Ensaio
microbiolgico por difuso em gar (5.5.3.3.1). Calcular a
potncia da amostra, em g de C
16
H
19
N
3
O
4
S por miligrama,
a partir da potncia do padro e das respostas obtidas com
as Solues padro e amostra.
B. Proceder conforme descrito em Ensaio iodomtrico
de antibiticos (5.3.3.10). Preparar a soluo padro nas
mesmas condies que a soluo amostra.
C. Proceder conforme descrito em Cromatografa a lquida
a a
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila, fosfato de potssio
monobsico 0,1 M e cido actico M (90,9:8,0:1,0:0,1).
Diluente: transferir 10 mL de fosfato de potssio
monobsico 0,1 M e 1 mL de cido actico glacial M para
gua.
de ampicilina SQR para balo volumtrico de 25 mL,
completar o volume com o Diluente e homogeneizar.
Soluo amostra: transferir, exatamente, cerca de 100 mg
da amostra, para balo volumtrico de 100 mL, completar
o volume com o Diluente e homogeneizar.
Soluo de resoluo: dissolver quantidade sufciente
de cafena, na Soluo padro, de modo a obter soluo
contendo 0,12 mg/mL.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo de resoluo. A
resoluo entre o pico de cafena e ampicilina no menor
que 2,0. O fator de cauda para o pico da ampicilina no
maior do que 1,4. O desvio padro relativo das reas de
replicatas sob os picos registrados no maior que 2,0%.
reas sob os picos. Calcular o teor em g de C
16
H
19
N
3
O
4
S
por miligrama na amostra, a partir do teor do padro e
amostra.
Em recipientes hermeticamente fechados, a temperatura
inferior a 30 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibitico.
AMPICILINA CPSULAS
16
H
19
N
3
O
4
S.
IDENTIFICAO
Proceder conforme descrito no teste B. de Identifcao da
monografa de Ampicilina. Preparar a Soluo (1) como
descrito a seguir.
Soluo (1): pesar as cpsulas, remover o contedo e pes-
las novamente. Homogeneizar o contedo das cpsulas.
Agitar quantidade de p equivalente a 0,125 g de ampicilina
com bicarbonato de sdio a 4,2% (p/v) e diluir para 50 mL
com o mesmo solvente. Filtrar.
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
dissoluo, fltrar e diluir em tampo sulfato cprico at
concentrao adequada. Transferir 10 mL para tubo de
ensaio com tampa, aquecer em banho-maria a 75 C por
30 minutos e resfriar rapidamente. Medir as absorvncias
das solues em 320 nm (5.2.14), utilizando alquota do
meio de dissoluo diluda em tampo sulfato cprico, sem
aquecimento, para ajuste do zero. Calcular a quantidade
de C
16
H
19
N
3
O
4
S dissolvida no meio, comparando as
leituras obtidas com a da soluo de ampicilina SQR na
concentrao de 0,0022% (p/v), preparada nas mesmas
condies.
declarada de C
16
H
19
N
3
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 4%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de antibiticos (5.5.3.3) pelo mtodo de difuso em gar.
Nota: as diluies da Soluo padro e da Soluo
amostra para a curva padro devem ser preparadas
simultaneamente.
Soluo amostra: pesar 20 cpsulas, remover o contedo
e pes-las novamente. Homogeneizar o contedo das
cpsulas. Transferir quantidade de p, exatamente pesado,
aa
para frasco volumtrico e diluir com gua estril de modo
a obter soluo de ampicilina a 0,1 mg/mL. Agitar por 3
a 5 minutos. Diluir sucessivamente com Tampo fosfato
curva padro.
curva padro.
microbiolgico de antibiticos por difuso em gar
(5.5.3.3.1). Calcular a quantidade em mg de C
16
H
19
N
3
O
4
S
nas cpsulas a partir da potncia do padro e das respostas
de antibiticos (5.3.3.10). Pesar 20 cpsulas, remover o
contedo e pes-las novamente. Homogeneizar o contedo
das cpsulas. Transferir quantidade de p, exatamente
pesado, para frasco volumtrico, adicionar gua, agitar por
3 a 5 minutos e completar o volume com o mesmo solvente,
de modo a obter soluo de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S) a 1,25
mg/mL. Transferir 2 mL dessa soluo para erlenmeyer de
125 mL com tampa. Preparar soluo padro nas mesmas
condies.
Em recipientes hermeticamente fechados, entre 15 C e 25 C.
ROTULAGEM
AMPICILINA COMPRIMIDOS
16
H
19
N
3
O
4
S.
IDENTIFICAO
descrito a seguir.
Soluo (1): pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar
quantidade do p equivalente a 0,125 g de ampicilina com
bicarbonato de sdio a 4,2% (p/v) e diluir para 50 mL com
o mesmo solvente. Filtrar.
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
concentrao adequada. Transferir 10 mL para tubo de
ensaio com tampa, aquecer em banho-maria a 75 C por
30 minutos e resfriar rapidamente. Medir as absorvncias
das solues em 320 nm (5.2.14), utilizando alquota do
meio de dissoluo diluda em tampo sulfato cprico, sem
aquecimento, para ajuste do zero. Calcular a quantidade
de C
16
H
19
N
3
O
4
leituras obtidas com a da soluo de ampicilina SQR na
concentrao de 0,0022% (p/v), preparada nas mesmas
condies.
declarada de C
16
H
19
N
3
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 4,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de antibiticos (5.5.3.3.1) pelo mtodo de difuso em gar.
Nota: as diluies das Solues padro e amostra para a
curva padro devem ser preparadas simultaneamente.
Transferir quantidade do p exatamente pesada para balo
volumtrico e diluir com gua estril de modo a obter
soluo de ampicilina a 0,1 mg/mL. Agitar durante 3 a 5
minutos. Diluir sucessivamente com Tampo fosfato de
potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2), de modo a
curva padro.
a a
curva padro.
microbiolgico por difuso em gar (5.5.3.3.1). Calcular
a quantidade em mg de C
16
H
19
N
3
O
4
S nos comprimidos a
partir da potncia do padro e das respostas obtidas com as
antibiticos (5.3.3.10). Pesar e pulverizar 20 comprimidos.
Transferir quantidade do p, exatamente pesada, para
balo volumtrico, adicionar gua, agitar durante 3 a 5
minutos e completar o volume com o mesmo solvente, de
modo a obter soluo de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S) a 1,25
mg/mL. Transferir 2 mL dessa soluo para erlenmeyer de
125 mL com tampa. Preparar soluo padro nas mesmas
condies.
Em recipientes hermeticamente fechados, protegidos da
umidade, em temperatura inferior a 30 C.
ROTULAGEM
AMPICILINA P PARA SUSPENSO
ORAL
Ampicilina p para suspenso oral mistura de ampicilina
com um ou mais agentes corantes, aromatizantes, tampes,
edulcorantes e conservantes. Contm, no mnimo, 90,0% e,
no mximo, 120,0% da quantidade declarada de ampicilina
(C
16
H
19
N
3
O
4
S).
IDENTIFICAO
descrito a seguir.
Soluo (1): reconstituir a suspenso oral conforme
indicado no rtulo. Agitar quantidade da suspenso
oral, equivalente a 0,125 g de ampicilina, em soluo de
bicarbonato de sdio a 4,2% (p/v) e diluir para 50 mL com
o mesmo solvente. Filtrar.
CARACTERSTICAS
Produtos lquidos em recipientes para doses mltiplas.
Determinar na suspenso reconstituda conforme indicado
no rtulo.
reconstituda conforme indicado no rtulo.
Determinao de peso (5.1.1). Cumpre o teste. Determinar
no p no reconstitudo.
Uniformidade de doses unitrias (5.1.6). Cumpre o teste
para slidos envasados em recipientes de dose-nica.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 2,5%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
por difuso em gar (5.5.3.3.1) pelo mtodo de difuso em
gar, utilizando cilindros.
Nota: as diluies da Soluo padro e da Soluo
amostra para a curva padro devem ser preparadas
simultaneamente.
Soluo amostra: reconstituir a suspenso conforme
indicado no rtulo. Transferir quantidade da suspenso
exatamente medida para frasco volumtrico e diluir com
gua estril de modo a obter soluo de ampicilina a 0,1 mg/
mL. Agitar por 3 a 5 minutos. Diluir sucessivamente com
2), de modo a obter solues na faixa de concentrao
adequada para a curva analtica.
curva analtica.
a quantidade em mg de C
16
H
19
N
3
O
4
S na suspenso oral
reconstituda a partir da potncia do padro e das respostas
obtidas com a Soluo padro e a Soluo amostra.
de antibiticos (5.3.3.10). Reconstituir o contedo de
10 unidades conforme indicado no rtulo. Misturar
e homogeneizar o contedo dos frascos. Transferir
quantidade, exatamente medida, da suspenso oral
reconstituda para frasco volumtrico, adicionar gua,
agitar por 3 a 5 minutos e completar o volume com o
mesmo solvente, de modo a obter soluo de ampicilina
(C
16
H
19
N
3
O
4
S) a 1,25 mg/mL. Transferir 2 mL desta
soluo para erlenmeyer com tampa. Preparar a soluo
padro nas mesmas condies.
aa
Em recipientes bem fechados, protegidos da umidade, em
temperatura inferior a 25C.
ROTULAGEM
AMPICILINA SDICA
Ampicillinum natricum
S
N
H H
O
N
CH
3
CH
3
COONa
H
O
NH
2
C
16
H
18
NaN
3
O
4
S; 371,39
ampicilina sdica; 00741
Sal sdico do cido (2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-amino-
2- f eni l acet i l ] ami no] - 3, 3- di met i l - 7- oxo- 4- t i a- 1-
azabiciclo[3.2.0]heptano-2-carboxlico (1:1)
[69-52-3]
988 g de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S) por miligrama,
calculado em relao substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco, higroscpico.
Solubilidade. Muito solvel em gua, solvel em acetona,
pouco solvel em clorofrmio, praticamente insolvel em
ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 203 C a 206 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +258 a + 287,
determinado em soluo a 0,25% (p/v) tendo como
solvente, soluo de biftalato de potssio a 0,4% (p/v),
calculado em relao substncia anidra.
IDENTIFICAO
C. podem ser omitidos se for realizado o teste A.
A. Dissolver 250 mg da amostra em 5 mL de gua,
adicionar 0,5 mL de cido actico 2 M, agitar e deixar em
repouso por 10 minutos em banho de gelo. Filtrar atravs
de fltro de vidro sinterizado, sob presso reduzida. Lavar
com 2 a 3 mL de mistura de 9 partes de acetona e 1 parte
de gua e secar a 60 C por 30 minutos. O espectro de
absoro no infravermelho (5.2.14) da amostra dispersa
em brometo de potssio apresenta mximos de absoro
espectro de ampicilina sdica SQR, preparado de maneira
idntica.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando como suporte,
slica-gel GF-254, e como fase mvel, mistura de acetona
e acetato de amnio a 15,4% (p/v) (90:10), com pH 5,0,
ajustado com cido actico glacial. Aplicar, separadamente,
placa 2 L de cada uma das solues, recentemente
Soluo (1): soluo a 0,5% (p/v) da amostra em soluo
de bicarbonato de sdio a 4,2% (p/v).
Soluo (2): soluo a 0,5% (p/v) de ampicilina sdica
SQR em soluo de bicarbonato de sdio a 4,2% (p/v).
secar ao ar e nebulizar com soluo alcolica de ninidrina
a 0,3% (p/v), aquecer em estufa de calor seco, a 90C,
durante 15 minutos. Examinar sob luz visvel. A mancha
principal obtida no cromatograma com a Soluo (1) deve
corresponder em posio, cor e intensidade quela obtida
com a Soluo (2).
C. Transferir cerca de 2 mg da amostra para tubo de ensaio.
Umedecer com 0,05 mL de gua e adicionar 2 mL da
mistura de 2 mL de soluo de formaldedo com 100 mL
de cido sulfrico. Agitar o tubo e observar a cor. Deve-se
apresentar quase incolor. Imergir o tubo em banho-maria
durante 1 minuto. Desenvolve-se colorao marrom-
avermelhada.
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
gua (5.2.20). No mais que 2,0%.
N,N-Dimetilanilina. No mximo 0,02% (200 ppm).
(5.2.17.5) utilizando cromatgrafo provido de detector
de ionizao de chama; coluna de vidro (2 m x 2 mm)
empacotada com suporte de diatomceas silanizado,
impregnado com 3% (p/p) de fenilmetilsilicone (50%
fenil), mantida a 120 C; injetor e detector a 150 C, gs
de arraste nitrognio para cromatografa, fuxo de 30 mL/
minuto.
a a
Soluo de padro interno: soluo de naftaleno a 0,005%
(p/v) em cicloexano.
Soluo de dimetilanilina padro: dissolver 50 mg de
N,N-dimetilanilina em mistura de 2 mL de cido clordrico
em 20 mL de gua sob agitao, completar o volume
a 50 mL com gua e agitar. Transferir 5 mL para balo
volumtrico de 250 mL, completar o volume com gua
e agitar. Transferir 1 mL para tubo de ensaio, adicionar 5
mL de hidrxido de sdio M, 1 mL da Soluo de padro
interno, agitar vigorosamente por 1 minuto, centrifugar, se
necessrio, e usar o sobrenadante.
hidrxido de sdio M, adicionar 1 mL da amostra A, agitar
vigorosamente por 1 minuto, centrifugar, se necessrio, e
usar o sobrenadante.
Procedimento: injetar, separadamente, 1L das solues
reas sob os picos principais.
Cloreto de metileno. Proceder conforme cromatografa a
gs (5.2.17.5).Utilizar cromatgrafo provido de detector
de ionizao de chama; coluna de vidro (105 m x 4 mm)
empacotada com suporte de diatomceas silanizado
(partculas de at 120 m), lavado com cido, revestido
com macrogol 1000 a 10% (p/p), mantida a 60 C; injetor
a 100 C; detector a 150 C, gs de arraste nitrognio para
cromatografa, fuxo de 40 mL/mimuto.
Soluo padro: transferir 1 mL de soluo aquosa de
cloreto de metileno a 0,2% (v/v) para balo volumtrico de
100 mL. Acrescentar 1 mL da soluo aquosa de dicloreto
de etileno a 0,2% (v/v) (padro interno), completar o
volume com gua e agitar.
Soluo amostra: dissolver 10 g da amostra em gua e
transferir para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar 1,0
mL de soluo aquosa de dicloreto de etileno a 0,2% (v/v)
(padro interno), completar o volume com gua e agitar.
padro e Soluo amostra, registrar os cromatogramas
e calcular a porcentagem (p/p) de cloreto de metileno,
considerando como 1,325 g/mL o valor da densidade a 20
C. No mais que 0,2% (p/p).
Ampicilina sdica destinada preparao parenteral deve
cumprir com os seguintes testes adicionais. Quando for
indicado no rtulo que a substncia estril, a amostra
cumpre com o teste de Pirognios ou de Endotoxinas
bacterianas, e com o teste de Esterilidade.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre o teste. Empregar mtodo
de fltrao por membranas. Dissolver 6 g da amostra em
800 mL de Fluido II contendo quantidade sufciente de
penicilinase estril para inativar a ampicilina, agitar at
total solubilizao e proceder como descrito.
Pirognios (5.5.2.1). Cumpre o teste. Injetar, 1 mL/kg,
empregando soluo de ampicilina sdica 20 mg/mL, em
gua.
mg de ampicilina.
DOSEAMENTO
de antibiticos (5.5.3.3). Dissolver, separadamente,
ampicilina sdica SQR e amostra em gua estril de modo
a obter soluo na concentrao de 0,1 mg/mL cada. Diluir
as solues obtidas, em soluo tampo fosfato de potssio
0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2), s concentraes
empregadas na curva padro.
B. Por mtodo iodomtrico. Dissolver e diluir amostra
e ampicilina sdica SQR em gua, at concentrao
de, aproximadamente, 1,25 mg/mL. Transferir 2 mL da
soluo padro para erlenmeyer com tampa esmerilhada
e adicionar 2 mL de hidrxido de sdio M. Agitar e deixar
em repouso por 15 minutos. Adicionar 2 mL de cido
clordrico 1,2 M e 10 mL de iodo 0,01 M SV. Deixar em
repouso, por 15 minutos, ao abrigo da luz. Titular com
tiossulfato de sdio 0,01 M SV. Prximo ao ponto fnal,
adicionar tres gotas de amido SI e prosseguir com a
titulao at o desaparecimento da cor azul. Proceder ao
mesmo ensaio com a soluo amostra. Realizar prova em
branco, da amostra e do padro, por meio da titulao de
2 mL de ambas as solues, adicionadas de 10 mL de iodo
0,01 M SV e 0,1 mL de cido clordrico M. Prximo ao
com a titulao at o desaparecimento da cor azul. Titular
com tiossulfato de sdio 0,01 M SV.
em que
P = potncia da amostra (g/mg);
Vba = volume de titulante gasto na titulao do branco da
amostra (mL);
Va = volume de titulante gasto na titulao da amostra (mL);
Vbp = volume de titulante gasto na titulao do branco do
padro (mL);
Vp = volume de titulante gasto na titulao do padro (mL);
P = potncia do padro (g/mg);
Pp = peso do padro (mg);
Pa = peso da amostra (mg).
inferior a 30 C. Sendo destinado produo de formas
farmacuticas injetveis, dever ser embalado em
recipientes estreis.
aa
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibitico.
AMPICILINA SDICA P PARA
SOLUO INJETVEL
Contm, no mnimo, 90,0% e, no mximo, 115,0% do
valor declarado de C
16
H
19
N
3
O
4
S.
IDENTIFICAO
Proceder conforme descrito no teste B. de Identifcao na
monografa Ampicilina sdica.
CARACTERSTICAS
1% (p/v).
Determinao do peso (5.1.1). Cumpre o teste.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 2,0%.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre o teste. Empregar mtodo
de fltrao por membranas. Dissolver 6 g da amostra em
800 mL de Fluido II contendo quantidade sufciente de
penicilinase estril para inativar a ampicilina, agitar at
total solubilizao e proceder como descrito.
Pirognios (5.5.2.1). Cumpre o teste. Injetar 1 mL/kg,
empregando soluo de ampicilina sdica a 20 mg/mL, em
gua.
mg de ampicilina.
DOSEAMENTO
Para determinao da potncia do p para soluo
injetvel de ampicilina, empregar um dos mtodos
descritos a seguir, utilizando amostragem mnima de 10
frascos.
10 frascos conforme indicado pelo produtor. Dissolver,
separadamente, padro e amostra em gua estril de modo
a obter soluo na concentrao de 0,1 mg/mL. Diluir,
separadamente, soluo padro e amostra, em Tampo
fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2), s
concentraes empregadas na obteno da curva padro.
10 frascos conforme indicado pelo produtor. Dissolver
a amostra reconstituda em gua, at concentrao de,
aproximadamente, 1,25 mg/mL. Transferir 2 mL da
soluo padro para erlenmeyer com tampa esmerilhada.
Preparar soluo padro nas mesmas condies.
inferior a 25 C.
ROTULAGEM
AMPICILINA TRI-HIDRATADA
Ampicillinum trihydricum
S
N
H H
O
N
CH
3
CH
3
COOH
H
O
NH
2
C
16
H
19
N
3
O
4
S.3H
2
O; 403,45
ampicilina tri-hidratada; 00742
cido (2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]amino]-
3,3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciclo[3.2.0]heptano-2-
carboxlico hidratado (1:3)
[7177-48-2]
1050 g de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S) por miligrama, em
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, praticamente
insolvel em clorofrmio, etanol, ter etlico e em
leos fxos. Solvel em solues diludas de cidos e de
relao substncia anidra. Determinar em soluo aquosa
a 0,25% (p/v).
a a
IDENTIFICAO
O teste de identifcao A pode ser omitido se forem
realizados os testes B e C. Os testes de identifcao B e C
podem ser omitidos se for realizado o teste A.
da amostra dispersa em brometo de potssio, apresenta
observados no espectro de ampicilina tri-hidratada SQR,
camada delgada (5.2.17.1) utilizando slica-gel H, como
(p/v) (10:90) pH 5,0 ajustado com cido actico glacial,
a seguir.
Soluo (1): soluo da amostra contendo o equivalente
a 2,5 mg de C
16
H
19
N
3
O
4
S por mililitro em bicarbonato de
sdio a 4,2% (p/v).
Soluo (2): soluo de ampicilina SQR a 2,5 mg/mL em
Soluo (3): soluo de ampicilina SQR a 2,5 mg/mL e de
amoxicilina tri-hidratada SQR a 2,5 mg/mL em bicarbonato
de sdio a 4,2% (p/v).
secar ao ar e expor a vapores de iodo at o aparecimento
das manchas. Examinar sob luz visvel. A mancha principal
obtida no cromatograma com a Soluo (1) corresponde
em posio, cor e intensidade quela obtida com a Soluo
(2). O ensaio somente vlido se o cromatograma obtido
com a soluo (3) apresenta duas manchas bem defnidas.
C. Transferir cerca de 2 mg da amostra para tubo de ensaio.
Umedecer com 0,05 mL de gua e adicionar 2 mL de mistura
de soluo de formaldedo e cido sulfrico (2:100). Agitar
o tubo e observar a cor. A soluo praticamente incolor.
Aquecer em banho-maria durante 1 minuto. Desenvolve-se
colorao amarelo-escura.
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
em leo mineral, transferir para lmina de vidro e examinar
por meio de microscpio dotado de luz polarizada. As
partculas exibem birrefringncia, que se extingue ao
Limite de N,N-dimetilanilina. Proceder conforme
coluna de vidro de 2 m de comprimento e 2 mm de
dimetro interno, empacotada com suporte de diatomceas
silanizado, impregnado com 3% (p/p) de fenilmetilsilicone
(50% fenil); temperatura da coluna de 120 C, temperatura
do injetor e detector de 150 C; nitrognio como gs de
arraste, fuxo de 30 mL/minuto.
Soluo de padro interno: soluo de naftaleno a 0,05
mg/mL em cicloexano.
hidrxido de sdio 1 M, e adicionar 1 mL da Soluo de
padro interno. Agitar, vigorosamente, por 1 minuto,
centrifugar, se necessrio, e usar o sobrenadante.
Soluo de dimetilanilina: dissolver 50 mg de N,N-
dimetilanilina em mistura de 2 mL de cido clordrico e
20 mL de gua, sob agitao. Completar o volume para
50 mL com gua e agitar. Transferir 5 mL para balo
volumtrico de 250 mL, completar o volume com gua e
agitar. Transferir 1 mL para tubo de ensaio, adicionar 5 mL
de hidrxido de sdio 1 M, 1 mL da Soluo de padro
interno, e agitar vigorosamente por 1 minuto. Centrifugar,
se necessrio, e usar o sobrenadante.
de dimetilanilina e 1 L da Soluo amostra, registrar
os cromatogramas e medir as reas sob os picos
correspondentes dimetilanilina e ao naftaleno. A rea
sob o pico relativo dimetilanilina, obtido com a Soluo
com a Soluo de dimetilanilina (0,02%).
gua (5.2.20.1). 12,0% a 15,0%.
No mximo 0,5%.
Quando for indicado no rtulo que a substncia estril,
a amostra cumpre com o teste de Pirognios ou de
Endotoxinas bacterianas, e com o teste de Esterilidade.
Quando for indicado que a sustncia deve ser esterilizada
durante a produo de preparaes estreis, a amostra
cumpre com o teste de Pirognios ou de Endotoxinas
bacterianas.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre o teste. Dissolver 6 g
da amostra em 800 mL de Fluido II contendo quantidade
sufciente de -lactamase para inativar a ampicilina, agitar
at total solubilizao e proceder conforme descrito em
Mtodo de fltrao em membrana.
Pirognios (5.5.2.1). Cumpre o teste. Injetar 1 mL/kg de
ampicilina a 2% (p/v) em hidrxido de sdio 0,05 M.
mg de ampicilina.
DOSEAMENTO
de antibiticos (5.5.3.3) para Ampicilina, pelo mtodo de
aa
difuso em gar. Dissolver, separadamente, quantidades
exatamente pesadas de ampicilina SQR e amostra em gua
estril de modo a obter solues contendo cerca de 0,1
mg de C
16
H
19
N
3
O
4
S por mililitro. Diluir solues padro
e amostra em tampo fosfato de potssio 0,1 M, estril,
pH 8,0 (Soluo 2) at as concentraes da curva padro.
Calcular a potncia da amostra, em g de ampicilina por
obtidas com as solues padro e amostra.
de antibiticos (5.3.3.10). Preparar o padro utilizando
ampicilina SQR. Preparar a amostra como descrito a seguir.
Preparao amostra: dissolver quantidade exatamente
pesada da amostra em gua e diluir com o mesmo solvente
16
H
19
N
3
O
4
S) a 1,25
mg/mL. Transferir 2 mL desta soluo para erlenmeyer de
125 mL com tampa.
Calcular a potncia da amostra, em g de C
16
H
19
N
3
O
4
S por
miligrama, segundo a expresso:
em que
B
A
= volume de titulante, em mL, consumido no Ensaio em
branco da Preparao amostra;
I
A
= volume de titulante, em mL, consumido na Inativao
e titulao da Preparao amostra;
C
A
= concentrao, em mg/mL, da Preparao amostra,
com base na quantidade de amostra pesada e na diluio
realizada.
C. Proceder conforme descrito em Cromatografa a lquido
com slica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano
(5m); fuxo da fase mvel de 2 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila, tampo fosfato
de potssio monobsico 0,1 M e cido actico 1 M
(90,9:8,0:1:0,1).
Diluente: transferir 10 mL do tampo fosfato de potssio
monobsico 0,1 M e 1 mL de cido actico glacial 1 M
para balo volumtrico de 1 000 mL e completar o volume
com gua.
de ampicilina SQR para balo volumtrico de 25 mL,
completar o volume com o Diluente e homogeneizar.
o volume com o diluente e homogeneizar.
Soluo de resoluo: dissolver quantidade sufciente
de cafena, na Soluo padro, de modo a obter soluo
contendo 0,12 mg/mL.
Injetar replicatas de 20 uL da Soluo de resoluo. A
resoluo entre o pico de cafena e ampicilina no menor
que 2,0. O fator de cauda para o pico da ampicilina no
maior do que 1,4. O desvio padro relativo das reas de
replicatas dos picos registrados no maior que 2,0%.
e medir as reas sob os picos. Calcular o teor em ug de
ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S) por miligrama na amostra, a
partir do teor do padro e das respostas obtidas com as
Solues padro e Soluo amostra.
Em recipientes hermeticamente fechados, em temperatura
inferior a 30 C. Ampicilina tri-hidratada destinada
produo de preparaes parenterais deve ser embalada em
recipientes estreis.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. Ampicilina tri-hidratada
destinada produo de preparaes estreis deve
apresentar indicao no rtulo se a substncia estril ou
se deve ser esterilizada durante o processo.
CLASSE TERAPUTICA
Antibitico.
CPSULAS
Contm ampicilina tri-hidratada equivalente a, no mnimo,
ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S).
IDENTIFICAO
A. Proceder conforme descrito no teste B. de Identifcao
da monografa de Ampicilina tri-hidratada. Preparar a
Soluo (1) como descrito a seguir.
las novamente. Homogeneizar o contedo das cpsulas.
Agitar quantidade do p em soluo de bicarbonato de
sdio a 4,2% (p/v) e diluir com o mesmo solvente de modo
a obter soluo de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S) a 2,5 mg/mL.
Filtrar.
B. Pesar as cpsulas, remover o contedo e pes-las
novamente. Homogeneizar o contedo das cpsulas.
ampicilina para bquer, adicionar 1 mL de gua e 2 mL
de mistura de tartarato cprico alcalino SR e gua (2:6).
Desenvolve-se, imediatamente, colorao violeta.
a a
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
concentrao adequada. Transferir alquota de 10 mL para
tubo de ensaio com tampa, submeter a aquecimento em
banho-maria a 75 C por 30 minutos e resfriar rapidamente.
Medir as absorvncias das solues em 320 nm (5.2.14),
utilizando Soluo amostra sem aquecimento para ajuste
16
H
19
N
3
O
4
S dissolvida
no meio, comparando as leituras obtidas com a da soluo
de ampicilina SQR na concentrao de 0,0022% (p/v),
preparada nas mesmas condies.
declarada de C
16
H
19
N
3
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). 10,0% a 15,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de antibiticos por difuso em gar (5.5.3.3.1) para
Ampicilina.
cpsulas. Transferir quantidade do p exatamente pesada
para frasco volumtrico, adicionar Tampo fosfato de
potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2), agitar por 3 a 5
minutos e completar o volume com o mesmo solvente, de
modo a obter soluo de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S) a 0,1
mg/mL. Diluir, sucessivamente, com o mesmo solvente at
as concentraes da curva analtica.
de ampicilina SQR em gua estril e diluir com o mesmo
solvente de modo a obter soluo a 0,1 mg/mL. Diluir,
sucessivamente, em Tampo fosfato de potssio 0,1 M,
estril, pH 8,0 (Soluo 2) at as concentraes da curva
analtica.
Calcular a quantidade em mg de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S)
nas cpsulas a partir da potncia do padro e das respostas
de antibiticos (5.3.3.10). Pesar 20 cpsulas, remover o
contedo e pes-las novamente. Homogeneizar o contedo
das cpsulas. Transferir quantidade do p, exatamente
pesada, para frasco volumtrico, adicionar gua, agitar por
16
H
19
N
3
O
4
S) a 1,25
mg/mL. Transferir 2 mL desta soluo para erlenmeyer de
125 mL com tampa. Preparar a soluo padro nas mesmas
condies.
inferior a 30C.
ROTULAGEM
COMPRIMIDOS
Contm ampicilina tri-hidratada equivalente a, no mnimo,
ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S).
IDENTIFICAO
A. Proceder conforme descrito no teste B. de Identifcao
da monografa de Ampicilina tri-hidratada. Preparar a
quantidade do p em soluo de bicarbonato de sdio a
4,2% (p/v) e diluir com o mesmo solvente de modo a obter
soluo de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S) a 2,5 mg/mL. Filtrar.
de p equivalente a 10 mg de ampicilina para bquer e
prosseguir conforme descrito no teste B. de Identifcao
da monografa de Ampicilina tri-hidratada cpsulas.
CARACTERSTICAS
aa
Tempo: 45 minutos
dissoluo, fltrar e diluir com tampo sulfato cprico
at concentrao adequada. Prosseguir conforme descrito
em Teste de dissoluo na monografa de Ampicilina tri-
hidratada cpsulas.
declarada de C
16
H
19
N
3
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). 9,5% a 12%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de antibiticos por difuso em gar (5.5.3.3.1) para
Ampicilina.
Transferir quantidade do p exatamente pesada para frasco
volumtrico, adicionar Tampo fosfato de potssio 0,1
M, estril, pH 8,0 (Soluo 2), agitar por 3 a 5 minutos
e completar o volume com o mesmo solvente, de modo
a obter soluo de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S) a 0,1 mg/
mL. Diluir, sucessivamente, com o mesmo solvente at as
concentraes da curva padro.
de ampicilina SQR em gua estril e diluir com o mesmo
solvente de modo a obter soluo a 0,1 mg/mL. Diluir,
sucessivamente, em Tampo fosfato de potssio 0,1 M,
estril, pH 8,0 (Soluo 2)at as concentraes da curva
padro.
Calcular a quantidade em mg de ampicilina (C
16
H
19
N
3
O
4
S)
nos comprimidos a partir da potncia do padro e das
respostas obtidas com a Soluo padro e a Soluo
amostra.
B. Proceder conforme descrito em Ensaio Ensaio
iodomtrico de antibiticos (5.3.3.10). Pesar e pulverizar
20 comprimidos. Transferir quantidade do p exatamente
pesada para frasco volumtrico, adicionar gua, agitar por
16
H
19
N
3
O
4
S)
a 1,25 mg/mL. Transferir 2 mL desta soluo para
erlenmeyer de 125 mL com tampa. Preparar o padro
utilizando ampicilina SQR. Prepara a soluo padro nas
mesmas condies.
Em recipientes perfeitamente fechados, protegidos da
umidade, em temperatura inferior a 30 C.
ROTULAGEM
AMPICILINA TRI-HIDRATADA P PARA
SUSPENSO ORAL
16
H
19
N
3
O
4
S. O p para suspenso
oral contm um ou mais agentes corantes, aromatizantes,
tampes, edulcorantes e conservantes.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica G, como suporte,
e mistura de acetona, gua, tolueno e cido actico
glacial (650:100:100:25), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, 2 L de cada uma das solues,
Soluo (1): soluo contendo 5 mg/mL de ampicilina em
mistura de acetona e cido clordrico 0,1 M (4:1).
Soluo (2): soluo a 5 mg/mL de ampicilina SQR em
mistura de acetona e cido clordrico 0,1 M (4:1).
secar ao ar. Nebulizar a placa com ninidrina 0,3% (p/v)
em etanol. Secar em estufa a 90 C durante 15 minutos. A
mancha principal obtida com a Soluo (1) corresponde em
posio, cor e intensidade quela obtida com a Soluo (2).
CARACTERSTICAS
Determinao do volume (5.1.2). Cumpre o teste.
Determinar na suspenso oral reconstituda conforme
indicado no rtulo.
pH (5.2.19). 5,0 a 7,5. Determinar na suspenso oral
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.2). No mximo 2,5% em produto contendo 50
mg/mL de ampicilina aps a reconstituio ou no mximo
5,0% em produto contendo 100 mg/mL de ampicilina.
a a
TESTE DE SEGURANA BIOLGICA
Contagem do nmero de micro-organismos mesoflos
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de detector ultravioleta a 254 nm; pr-coluna de 50 mm de
(5 m); coluna de 250 mm de comprimento e 4,6 mm de
dimetro interno, empacotada com slica quimicamente
ligada a grupo octadecilsilano (5 m); mantida
temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel de 2,0 mL/
minuto.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila, fosfato de
potssio monobsico M e cido actico M (909:80:10:1).
Diluente: misturar 10 mL de fosfato de potssio monobsico
M e 1 mL de cido actico M. Diluir com gua para 1000
mL.
Soluo amostra: reconstituir a suspenso como descrito
no rtulo do produto. Transferir volume da suspenso oral
equivalente a 0,1 g de ampicilina para balo volumtrico
de 100 mL, adicionar 75 mL de Diluente e misturar. Se
necessrio deixar em ultrassom. Completar o volume com
o mesmo solvente.
de ampicilina SQR em Diluente e diluir com o mesmo
solvente de modo a obter soluo a 1 mg/mL.
Soluo de resoluo: dissolver quantidade exatamente
pesada de cafena em Soluo padro e diluir com o
mesmo solvente de modo a obter soluo a 0,12 mg/mL.
resoluo entre a cafena e a ampicilina no menor que
2,0. Injetar replicatas de 20 L da Soluo padro. O fator
de cauda no maior que 1,4. O desvio padro relativo
que 2,0%.
C
16
H
19
N
3
O
4
S no p para suspenso oral a partir das respostas
B. Proceder conforme descrito em Ensaio microbiolgico
manuteno do micro-organismo; meio de cultura nmero
11, para a camada base e preparao do inculo.
Soluo amostra: reconstituir o contedo conforme
indicado pelo produtor. Transferir volume da suspenso
oral para balo volumtrico e diluir com Tampo fosfato de
potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2) de modo a obter
soluo a 0,1 mg/mL de ampicilina. Diluir, sucessivamente,
at as concentraes de 0,05 g/mL, 0,1 g/mL e 0,2 g/
mL, utilizando Tampo fosfato de potssio 0,1 M, estril,
pH 8,0 (Soluo 2) como diluente.
ampicilina SQR, transferir para balo volumtrico de
250 mL e completar o volume com gua estril. Diluir,
sucessivamente, at as concentraes de 0,05 g/mL, 0,1
g/mL e 0,2 g/mL, utilizando Tampo fosfato de potssio
0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2) como diluente.
Calcular a potncia da amostra, em g de ampicilina por
mililitro da suspenso reconstituda, a partir da potncia do
padro e das respostas obtidas com a Soluo padro e a
Soluo amostra.
Em recipientes bem fechados, protegidos da umidade e em
temperatura inferior a 25 C.
ROTULAGEM
ANIS-DOCE
Anisi fructus
Pimpinella anisum L. APIACEAE
A droga vegetal constituda pelos frutos, que so
diaqunios secos, contendo, no mnimo, 2,0% de leo
voltil, com, no mnimo, 87% de anetol.
NOMES POPULARES
Erva-doce.
CARACTERSTICAS
agradvel e sabor doce e anisado.
aa
DESCRIO MACROSCPICA
O fruto (diaqunio) ovide ou piriforme, comprimido
lateralmente, alargado na base e estreitado no pice,
o qual coroado por um estilopdio espesso, com 2
estiletes curtos divergentes e refexos, de cor castanho-
amarelada ou castanho-esverdeada, de 3,0 mm a 7,0 mm
de comprimento e 2,0 mm a 3,0 mm de largura, provido
de um pequeno fragmento do pedicelo, delgado, rgido e
um tanto arqueado, que se prolonga entre os mericarpos
de cada cremocarpo, pelo carpforo (flamento central),
fliforme e bifendido. Os aqunios, unidos pelo pice na
extremidade do carpforo, apresentam uma face comissural
plana e uma face dorsal convexa, esta ltima recoberta
de tricomas simples e curtos, visveis com lente. O fruto
percorrido longitudinalmente por 5 arestas primrias
fliformes, retilneas e lisas, 3 dorsais e 2 comissurais pouco
salientes e de tom mais claro. Em seco transversal, os 2
aqunios mostram-se quase sempre unidos pelas suas faces
comissurais.
DESCRIO MICROSCPICA
Em seco tranversal, cada aqunio mostra um epicarpo
de uma camada de clulas, onde se encontram numerosos
tricomas tectores curtos, geralmente unicelulares, cnicos,
com paredes espessas e cutcula verrucosa. Em vista frontal,
observam-se esparsos estmatos e uma cutcula fortemente
estriada. O mesocarpo formado por algumas camadas de
parnquima, no qual se distingue, ao longo da face dorsal,
uma srie quase contnua de canais secretores esquizgenos
ramifcados (3 a 4 entre duas arestas); ao longo da face
comissural ocorrem 2 canais secretores amplos. Na face
comissural so encontrados tambm escleredes estreitos,
alongados longitudinalmente e com numerosas pontoaes.
Cada aresta contm um estreito feixe vascular circundado
por fbras. O endocarpo composto de uma camada de
clulas, alongadas tangencialmente e de paredes fnas,
aderida testa; esta formada por uma camada de clulas
de paredes internas mais espessas, amarelas ou amarelo-
esverdeadas. O endosperma apresenta clulas poligonais
de paredes espessadas, contendo gotculas de leo, gros
de aleurona e cristais de oxalato de clcio do tipo drusa. O
carpforo e pedicelo so caracterizados pela presena de
vasos e fbras estreitas.
caractersticas: colorao castanho-amarelada ou castanho-
esverdeada; fragmentos irregulares do pericarpo, que
mostram pores de canais secretores; tricomas inteiros ou
fragmentados, unicelulares, s vezes curvados, com pontas
atenuadas e cutcula verrucosa; fragmentos do epicarpo
com cutcula estriada e escassos estmatos anomocticos;
fragmentos castanhos contendo canais secretores
ramifcados; fragmentos de tecido vascular; clulas da
testa de paredes fnas; fragmentos de endosperma contendo
gros de aleurona e cristais de oxalato de clcio; escleredes
quadrados, retangulares ou alongados de paredes espessas,
pontoadas; cordes de fbras do carpforo e do pedicelo. O
p no contm gros de amido.
IDENTIFICAO
Proceder conforme descrito em Cromatografa em
254
,
com espessura de 250 m, como suporte, e tolueno como
fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, em forma de
banda, 2 L a 3 L de cada uma das solues preparadas
como descrito a seguir.
Soluo (1): utilizar 0,1 g de frutos secos triturados,
adicionar 2 mL de cloreto de metileno. Agitar durante 15
minutos. Filtrar. Concentrar o fltrado secura, em banho-
maria, a temperatura inferior a 60 C. Ressuspender o
resduo em 2 mL de tolueno.
Soluo (2): dissolver 3 L

de anetol e 40 L de leo de
oliva em 1 mL de tolueno.
secar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). O
cromatograma apresenta uma mancha com atenuao de
fuorescncia, obtida com a Soluo (2), no tero superior
da placa, correspondente aos triacilglicerdeos do azeite de
oliva. Nebulizar a placa com anisaldedo SR e aquecer entre
100 C a 105 C, por 5 minutos. A mancha violeta-claro
obtida no tero superior do cromatograma com a Soluo
(1) corresponde em posio e intensidade mediana quela
referente ao anetol obtida com a Soluo (2). A mancha de
colorao rosa obtida no tero superior do cromatograma
com a Soluo (1) corresponde em posio e intensidade
quela referente aos triacilglicerdeos do azeite de oliva
obtida com a Soluo (2). A mancha de colorao violeta-
intenso obtida no tero central do cromatograma com
a Soluo (1) corresponde em posio e intensidade
quela referente a compostos provenientes do azeite de
oliva obtida com a Soluo (2). As manchas de colorao
variando de rosa-claro a violeta-claro obtidas no tero
inferior do cromatograma com a Soluo (1) so referentes
aos compostos graxos mais polares.
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 2%.
gua (5.4.2.3). No mximo 7%.
Cinzas totais (5.4.2.4). No mximo 12%.
DOSEAMENTO
leos volteis
destilao. Reduzir o fruto de anis a p grosseiro. Proceder
imediatamente determinao do leo voltil, a partir de
20 g da droga em p. Destilar por 4 horas.
a a
Anetol
hidrognio e ar sinttico (1:1:10) como gases auxiliares
chama do detector; coluna capilar de 60 m de
comprimento e 0,25 mm de dimetro interno, preenchida
com polietilenoglicol, com espessura do flme de 0,25 m.
Manter a temperatura da coluna a 60 C por 5 minutos e
aument-la a uma taxa de 2 C por minuto at temperatura
de 210 C, mantida por 20 minutos (total: 100 minutos).
Temperatura do injetor a 200 C e temperatura do detector
a 220 ; utilizar hlio purifcado como gs de arraste; fuxo
do gs de arraste de 1 mL/minuto.
Soluo amostra: leo voltil de anis-doce obtido em
xileno, conforme descrito em Determinao de leos
volteis em drogas vegetais (5.4.2.7), sem diluio.
Armazenar em recipiente hermeticamente fechado, sob
refrigerao e ao abrigo da luz.
Soluo padro: dissolver 60 L de anetol em 1 mL de
n-hexano. Armazenar em recipiente hermeticamente
fechado, sob refrigerao e ao abrigo da luz.
Procedimento: injetar 1 L no cromatgrafo a gs, utilizando
diviso de fuxo de 1:100 e a concentrao relativa obtida
por integrao eletrnica pelo mtodo de normalizao.
Examinar o cromatograma obtido para a Soluo amostra.
Os picos caractersticos obtidos no cromatograma com a
Soluo amostra possuem tempos de reteno similares
queles obtidos com a Soluo padro ou a identifcao
confrmada com a cromatografa a gs acoplada a detector
seletivo de massas operando nas mesmas condies que a
cromatografa a gs com detector de ionizao de chamas.
Em recipiente hermeticamente fechado, sob refrigerao e
ao abrigo da luz, por um perodo de no mximo um ano.
aa
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos de Pimpinella anisum L.
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 1 cm (rgua 1); em B a 2 cm (rgua 2); em C a 500 m (rgua 4); em D e E a
100 m (rgua 3).
A aspecto do diaqunio (esquizocarpo). B esquema da seco transversal do diaqunio segundo assinalado em A. C esquema da seco transversal
em um dos mericarpos: canal esquizgeno (e); oco (o); semente (se). D detalhe da regio comissural segundo assinalado em C. E detalhe de poro
do fruto e semente segundo assinalado em C. f seco do pericarpo do fruto: endocarpo (ed); epicarpo (ep); mesocarpo (m). S seco da poro
externa da semente: endosperma (en); tegumento (t).
a a
figura 2 Aspectos microscpicos do fruto de Pimpinella anisum L. em p.
______________
A pores irregulares do mesocarpo com canais secretores ramifcados e no ramifcados de cor castanha. B poro do epicarpo com tricomas
inteiros e fragmentados e cutcula estriada. C o mesmo, mostrando cutcula estriada e estmato anomoctico. D fragmentos de elementos de vaso
com espessamento helicoidal. E clulas da testa com paredes delgadas. f fragmentos do endosperma com clulas poligonais contendo gotas de leo
e gros de aleurona com 1-2 drusas de oxalato de clcio. G escleredes da face comissural. H cordes de fbras do carpforo e do pedicelo.
aa
ANIS - ESTRELADO
Anisi stellati fructus
Illicium verum Hook. f. - MAGNOLIACEAE
A droga constituda pelos frutos secos, contendo, no
mnimo, 7,0% de leo voltil, com, no mnimo, 80% de
anetol.
NOMES POPULARES
Badiana, badiana-da-china.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. O pericarpo da droga
possui odor aromtico agradvel e sabor doce e anisado; a
semente inodora e tem um sabor desagradvel.
DESCRIO MACROSCPICA
O fruto mltiplo, composto habitualmente de 8 folculos,
algumas vezes at 11, dispostos horizontalmente em
forma de estrela, em volta de um eixo central (columela),
ordinariamente achatado na altura dos bordos dos carpelos.
A columela continua frequentemente num pedicelo
pequeno, curvo, claviforme e frgil, que poucas vezes se
encontra ligado aos frutos. Os folculos, de 10,0 mm a
20,0 mm de comprimento, desigualmente desenvolvidos,
lenhosos, careniformes, achatados lateralmente, de cor
castanho-acinzentada, terminam em pice obtuso e curvo.
Cada folculo anguloso na base, onde se fxa ao eixo
central; o bordo inferior do folculo espesso e rugoso; o
bordo superior aberto em dois lbios delgados e lisos de
cada lado da fenda; as faces laterais rugosas apresentam,
perto da base, uma parte mais lisa, clara e semi-elptica,
pela qual os carpelos esto em contato entre si. Na poca da
maturao o folculo torna-se deiscente e abre-se no bordo
superior (sutura ventral), por uma larga fenda, que deixa ver
sua face interna lisa e brilhante, de cor castanho-amarelada,
e uma nica semente oval, castanho-avermelhada ou
castanho-amarelada, dura e brilhante, truncada na base,
onde se distinguem o hilo e a micrpila bastantes prximos
um do outro. A semente contm um invlucro frgil e um
albmen oleoso que circunda um pequeno embrio. Difere
de Illicium anisatum L. (= Illicium religiosum Sieb. et
Zucc.) por esta ltima apresentar folculos menores e mais
ovalados, sutura ventral mais larga e pednculo reto, no
claviforme.
DESCRIO MICROSCPICA
O epicarpo, em vista frontal, mostra clulas poligonais,
marrons, irregulares, de paredes pouco espessadas. A
epiderme do epicarpo apresenta estmatos grandes,
anomocticos, no muito frequentes, e cutcula com estrias
irregulares bem acentuadas. O mesocarpo constitudo,
em sua parte externa, por parnquima de clulas de
paredes castanho-avermelhadas, contendo amido, podendo
ser observados, neste tecido, idioblastos secretores-
oleferos esfricos, com paredes fnas; em sua parte
interna, o mesocarpo formado de clulas menores, de
paredes espessas; no limite dessas duas zonas, localizam-
se numerosos feixes vasculares. O endocarpo formado
por uma camada de clulas alongadas radialmente,
sob forma de paliada, de 60 m de comprimento, em
mdia; na parte correspondente deiscncia (sutura
ventral), essas clulas tornam-se menores, com paredes
desigualmente espessadas e pontoadas, e as clulas
poligonais da zona mesocrpica vizinha transformam-
se num macio esclertico. O eixo central (columela), o
pednculo (pedicelo) e o mesocarpo contem numerosas
clulas esclerticas caractersticas. Os astroescleredes do
pedicelo e do mesocarpo so muito grandes e usualmente
solitrios; eles podem ser irregularmente ramifcados
ou podem ter projees mais curtas e afladas. Outros
escleredes do mesocarpo so encontrados em grupos,
mas so alongados, com paredes espessadas e pontoadas.
O tegumento seminal formado por camadas distintas. O
tegumento externo est representado por um tecido hialino
formado por 2-3 camadas de clulas, seguido por um
tegumento constitudo por um estrato de osteoescleredes,
com clulas alongadas radialmente, de paredes espessadas
e pontoadas; seguem-se vrias camadas de clulas de
paredes lignifcadas, espessadas e pontoadas, denominadas
macroescleredes, sendo as camadas interiores de paredes
delgadas; o tegumento interno limitado por uma camada
de clulas com cristais de oxalato de clcio. Na zona
micropilar ocorrem braquiescleredes. O endosperma
compe-se de clulas poligonais com gros de aleurona
com cristalides e gotas de leo. O embrio pequeno.
Difere de Illicium anisatum L. (= Illicium religiosum Sieb.
et Zucc.) por esta ltima apresentar raros astroesclereides,
sendo estes no ramifcados; os escleredes do mesocarpo
so arredondados, nunca alongados.
caractersticas: colorao castanho-avermelhada;
fragmentos formados por clulas marrons do epicarpo,
com cutcula fortemente estriada; fragmentos de clulas
parenquimticas do mesocarpo, com clulas de leo
arredondadas; escleredes volumosos, irregularmente
ramifcados, oriundos do pedicelo; escleredes alongados,
oriundos do mesocarpo, com paredes espessadas e
pontoadas; fragmentos formados por clulas colunares do
endocarpo, com paredes levemente espessadas, lignifcadas,
com pigmentos nas paredes terminais; massas amareladas
de clulas pequenas, de paredes bastante espessadas e
pontoadas, provenientes da zona da sutura carpelar; clulas
esclerticas (osteoescleredes isolados, macroescleredes
e braquiescleredes), oriundas do tegumento da semente,
dispostas em paliada; fragmentos hialinos do tegumento
externo da semente; cristais tabulares de oxalato de
clcio; pores de albmen com gros de aleurona com
cristalides.
a a
IDENTIFICAO
camada delgada (5.2.17.1), utilizando cromatoplaca
de slica-gel GF
254
, com espessura de 250 m como
fase estacionria e tolueno como fase mvel. Aplicar,
separadamente, em forma de banda, 6 L da Soluo (1),
10 L da Soluo (2), e 4 L da Soluo (3).
Soluo (1): ferver 1g de folculos modos, sem sementes,
com 10 mL de etanol a 90% (v/v) durante 2 minutos. Filtrar.
Soluo (2): mistura de leo voltil e ter etlico (1:30).
Soluo (3): dissolver 3 L de anetol em 1 mL de tolueno.
Desenvolver o cromatograma. Aps secagem da placa,
examin-la sob luz ultravioleta (254 nm). O cromatograma
apresenta mancha de fuorescncia atenuada, na mesma
altura obtida com a Soluo (3), anetol possui Rf
aproximado de 0,6. Em seguida, nebulizar com anisaldedo
SR e colocar em estufa de 100 C a 105 C, durante 5
minutos. A mancha correspondente ao anetol apresenta
colorao levemente violcea.
B. Ferver 1g de folculos modos, sem sementes, com
10 mL de etanol a 90% (v/v) durante 2 minutos. Filtrar
e separar o fltrado em duas partes. Parte 1: em tubo de
ensaio adicionar ao fltrado 10 mL de gua destilada.
Ocorre opalescncia devido ao anetol. Parte 2: adicionar
ao fltrado 25 mL de gua destilada. Em seguida, extrair
duas vezes com 20 mL de ter de petrleo. Evaporar o ter
de petrleo e adicionar ao resduo 2 mL de cido actico.
Transferir para um tubo de ensaio e adicionar trs gotas de
cloreto frrico SR. A seguir adicionar lentamente 2 mL de
cido sulfrico. Na interface entre os dois lquidos forma-
se, imediatamente, um anel pardo devido presena de
anetol.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 7,0%.
DOSEAMENTO
leos Volteis
volteis (5.4.2.7). Usar balo de 250 mL contendo 100 mL
de gua como lquido de destilao. Reduzir o fruto a p
grosseiro. Proceder imediatamente determinao do leo
voltil, a partir de 20 g da droga pulverizada. Destilar por
2 horas.
Anetol
(5.2.17.5). Utilizar cromatgrafo equipado com coluna
capilar de 30 m de comprimento e 250 m de dimetro
interno, preenchida com polidifenildimetilsiloxano,
com espessura do flme de 0,25 m. Utilizar detector de
ionizao de chama. Como gs de arraste utilizar hlio
presso de 80 kpa e velocidade linear de 1,0 mL/minuto.
Como gases auxiliares chama do detector, utilizar
nitrognio, ar sinttico e hidrognio na razo de 1:1:10,
respectivamente. Programar a temperatura da coluna de
60 C a 300 C, a 3 C por minuto (total: 80 minutos), a
temperatura do injetor a 220 C e a temperatura do detector
a 250 C.
Soluo amostra: mistura de leo vottil e ter etlico
(2:100).
Procedimento: injetar 1 L desta soluo no cromatgrafo a
gs, utilizando diviso de fuxo de 1:50. O anetol apresenta
tempo de reteno linear (ndice de Kovats) de 1277. A
concentrao relativa obtida por integrao manual ou
eletrnica. O teor de anetol no inferior a 80,0%.
Em recipiente, bem fechado, ao abrigo da luz e do calor.
aa
figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpicos do fruto em Illicium verum Hook. f.
_______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem: em A, B, C (1) a 1 cm; em D (2) a 500 m; em E, f (3) a 500 m.
A. aspecto do fruto. B. detalhe de um folculo em vista dorsal. C. detalhe de um folculo em vista ventral. D. detalhe de trs folculos vistos em A. E.
seco transversal do pericarpo na poro indicada em D. f. fruto; ep. epicarpo. G. detalhe do endocarpo na regio comissural.
a a
figura 2 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Illicium verum Hook. f.
_______________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem: em A (1) a 1 cm; em B (2) a 100 m; em C, D (3) a 500 m.
A. semente em vista lateral. B. semente em seco longitudinal. C. braquiescleredes da zona micropilar. D. seco transversal da semente na poro
indicada em B. Outros detalhes: endosperma (e); embrio (eb); hilo (hi); micrpila (mi); tegumento (t).
aa
figura 3 - Aspectos microscpicos em p Illicium verum Hook. f.
______________
Complemento da legenda da figura 3. As escalas correspondem em: em A-K (1) a 100 m; em L-N (2) a 500 m.
A - epicarpo com estmato anomoctico e cutcula estriada. B - clulas do parnquima do mesocarpo. C - clulas da zona comissural com paredes
espessadas. D - clula do endocarpo fora da zona comissural. E - esclereide. f - idioblasto com gotas de leo. G - poro do mesocarpo com idioblastos
oleferos e esclereides. H - clulas do endosperma com glbulos lipdicos e gros de aleurona. I - osteoescleredes em seco transversal; Ia. os mesmos
em seco tangencial. J - cristais prismticos de oxalato de clcio. K - clulas da camada cristalfera. L - braquiescleredes da regio comissural. M -
macroesclerede alargado do mesocarpo, com paredes espessas e pontoadas. N - escleredes volumosos e ramifcados do pedicelo.
a a
ANTIMONIATO DE MEGLUMINA
OH
N
C H
3
OH
OH
OH
OH
H
.
HSbO
3
C
7
H
17
NO
5
.HSbO
3
; 365,98
antimoniato de meglumina; 05587
Trioxoantimonato(1-) de 1-desoxi-1-(metilamino)-D-
glicitol
[133-51-7]
Antimoniato de meglumina constitudo do sal de antimnio
pentavalente de N-metilglucamina. Contm, no mnimo,
26% e, no mximo, 28% de antimnio pentavalente (Sb
5+
)
em relao ao antimoniato de meglumina.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, levemente amarelo.
Solubilidade. Solvel em gua, praticamente insolvel em
etanol, ter etlico e clorofrmio.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 6 g da amostra em 20 mL de gua. Acidifcar
2 mL dessa soluo com cido clordrico SR e adicionar
tioacetamida SR preparada no momento de uso. Forma-se
precipitado alaranjado.
B. Dissolver 6 g da amostra em 20 mL de gua. Diluir 1
mL dessa soluo com 9 mL de gua. Acidifcar com 5 mL
de cido sulfrico a 0,3% (v/v) e adicionar 4 mL de iodeto
de potssio mercrico alcalino SR. Aps alguns segundos
desenvolve-se colorao amarela.
ENSAIOS DE PUREZA
Antimnio trivalente. Proceder conforme descrito em
Espectrometria de absoro atmica com gerao de
hidretos (5.2.13.1.2), sistema em batelada, atomizao
em cela de quartzo, comprimento de onda de 217,6 nm e
resoluo do monocromador de 0,20 0,10 nm.
Soluo amostra: preparar soluo da amostra a 0,3% (p/v)
em gua e diluir essa soluo por um fator a 500 vezes
utilizando o mesmo solvente.
Soluo padro: preparar soluo de antimnio trivalente
a 0,1% (p/v), por diluio de tartarato de potssio e
antimnio (C
4
H
4
KO
7
Sb. H
2
O) em gua.
Soluo redutora: preparar, imediatamente, a soluo de
tetraidroborato de sdio a 1% (p/v) em hidrxido de sdio
a 0,1% (p/v).
Soluo de cido ctrico: preparar soluo de cido ctrico
a 4% (p/v) em gua.
Procedimento: adaptar o frasco de reao no sistema gerador
de hidretos, esperar 30 segundos para purga do sistema e
proceder determinao conforme demais recomendaes
do fabricante, especfcas para o equipamento utilizado.
O intervalo mximo para a mistura da Soluo amostra
diluda ou da Soluo padro com a Soluo de cido
ctrico, dever ser de 5 segundos antes da introduo no
equipamento. Construir a curva analtica com alquotas
de 0,1 mL de Soluo padro de antimnio nas seguintes
concentraes: 0,1 mg/L; 0,2 mg/L; 0,3 mg/L; 0,4 mg/L e
0,5 mg/L, preparadas, diariamente, por diluio sequencial
com gua. Colocar entre 0,20 mL e 0,80 mL da Soluo
amostra diluda ou da Soluo padro de antimnio no
frasco de reao e adicionar 10 mL de Soluo de cido
ctrico. No mximo 0,04 mg de antimnio trivalente por
mililitro da soluo de antimoniato de meglumina a 0,3%
(p/v), correspondem a 1,33% de antimnio trivalente da
substncia analisada.
Metais pesados. As determinaes devero ser feitas por
Espectrometria de absoro atmica (5.2.13.1) com forno
de grafte ou gerao de hidretos, por espectrometria de
emisso ptica com plasma indutivamente acoplado ou
por espectrometria de massa com plasma indutivamente
acoplado. No mximo 9 mg/L na soluo de antimoniato
de meglumina a 30% (p/v), correspondente a 0,003% (30
ppm) de metais pesados na substncia analisada, para
o somatrio da concentrao dos seguintes elementos:
alumnio, arsnio, bismuto, cdmio, chumbo, cobre,
cromo, mangans, mercrio, nquel e zinco.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Espectrometria de absoro
atmica (5.2.13.1), utilizar o Mtodo I. Empregar as
seguintes condies: chama ar mais acetileno, comprimento
de onda 217,6 nm, resoluo do monocromador de 0,20
0,10 nm.
Soluo amostra: preparar soluo de antimoniato de
meglumina a 30% (p/v) em gua e diluir, em seguida, por
um fator de 2500 vezes com cido clordrico 6 M.
Soluo padro: preparar soluo de antimnio trivalente
a 0,1% (p/v), em gua, utilizando tartarato de potssio e
antimnio (C
4
H
4
KO
7
Sb.0,5H
2
O).
Procedimento: construir a curva analtica com a Soluo
padro de antimnio nas seguintes concentraes:
10 mg/L, 20 mg/L, 30 mg/L, 40 mg/L e 50 mg/L por
diluio sequencial em cido clordrico 6 M. A partir da
concentrao de Sb determinada, calcular o teor de Sb no
antimoniato de meglumina.
aa
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiprotozorio.
ANTIMONIATO DE MEGLUMINA
SOLUO INJETVEL
antimnio pentavalente (Sb
5+
) em relao quantidade
declarada de Sb
5+
. Cada 1,5 g de antimoniato de meglumina
contm 405 mg de Sb
5+
.
IDENTIFICAO
A. Acidifcar 2 mL da soluo injetvel com cido clordrico
SR e adicionar tioacetamida SR preparada no momento de
uso. Desenvolve-se um precipitado alaranjado.
B. Diluir 1 mL da soluo injetvel com 9 mL de gua.
Acidifcar essa soluo com 5 mL de cido sulfrico a 0,3%
(v/v) e adicionar 4 mL de iodeto de potssio mercrico
alcalino. Aps alguns segundos desenvolve-se colorao
amarela.
CARACTERSTICAS
pH (5.1.19). 5,5 a 7,5.
ENSAIOS DE PUREZA
Antimnio trivalente. Diluir a soluo injetvel com gua
por um fator de 50 000 vezes e proceder conforme descrito
em Antimnio trivalente na monografa de Antimoniato de
meglumina.
Metais pesados. Proceder conforme descrito em Metais
pesados na monografa de Antimoniato de meglumina. No
mximo 0,0009% (9 mg/L) da soluo injetvel.
mg de antimoniato de meglumina.
Toxicidade (5.5.2.3). Cumpre o teste. Injetar, via
intravenosa, o equivalente a 1 mg/g de peso do animal..
DOSEAMENTO
Diluir a soluo injetvel por um fator de 2500 vezes com
cido clordrico 6 M e proceder conforme descrito em
Doseamento na monografa de Antimoniato de meglumina.
ROTULAGEM
ARNICA
Arnicae fos
Arnica montana L. ASTERACEAE; 09894
A droga constituda pelos captulos forais secos, inteiros
ou parcialmente fragmentados. Deve conter no mnimo 0,4
% p/p de sesquiterpenos lactnicos totais expressos em
tiglato de helenalina, calculados com referncia a droga
seca.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Odor aromtico e
agradvel; sabor acre e amargo.
DESCRIO MACROSCPICA
As fores esto agrupadas em inforescncias do tipo
captulo heteromorfo, de colorao amarelo-alaranjada. O
captulo constitudo por um pednculo, um receptculo,
fores radiais liguladas e fores do disco tubulosas. O
captulo, quando fechado, mede cerca de 2 cm de dimetro
e quando com as fores radiais distendidas, mede de 5
cm a 6 cm de dimetro. O pednculo, quando presente,
mede de 2 cm a 3 cm de comprimento. O receptculo,
quando privado das fores, tem um dimetro entre 6 mm
e 10 mm e uma profundidade de 15 mm e levemente
convexo, alveolado e recoberto de tricomas brancos, curtos
e duros. O receptculo apresenta um invlucro constitudo
por 18 a 24 brcteas ovalado-lanceoladas, veludosas na
face abaxial, dispostas em 1 ou 2 sries imbricadas. Cada
brctea involucral apresenta pice agudo e bordo inteiro,
ciliado, medindo de 8 mm a 10 mm, mais raramente at 15
mm de comprimento. As brcteas internas tm cor verde
parda e so mais curtas; as brcteas externas so verdes;
ambas apresentam a face abaxial recoberta de tricomas
verde-amarelados, visveis com lente. As fores liguladas
radiais so zigomorfas e femininas, em nmero de 14 a 20,
e medem de 20 mm a 30 mm de comprimento. Cada for
ligulada apresenta um clice reduzido, denominado papus,
o qual formado por uma srie de cerdas esbranquiado-
amareladas grossas, rgidas, medindo de 4 mm a 8 mm
de comprimento. O limbo da corola oblongo, de cor
amarelo-alaranjada e apresenta de 7 a 10 nervuras paralelas,
culminando em 3 lbulos pequenos e desiguais. Os estames
no so completamente desenvolvidos, sendo, portanto,
estamindios, e apresentam anteras livres. O ovrio
nfero, estreito, de colorao parda, mede de 4 mm a 5 mm
de comprimento e apresenta 4 ou 5 arestas longitudinais
pouco evidentes, alm de um estilete bifurcado em 2
ramos estigmticos curvos e refexos. As fores tubulosas
a a
do disco so actinomorfas e perfeitas, em nmero muito
maior do que as fores liguladas, e medem at 15 mm
de comprimento. Cada for tubulosa apresenta um clice
reduzido, denominado papus, o qual formado por uma
srie de cerdas esbranquiado-amareladas rgidas, com
at 8 mm de comprimento. A corola curta, de colorao
amarelo-alaranjada, mede cerca de 8 mm de comprimento
e tem 5 lobos triangulares refexos. Os estames so 5,
frteis e esto soldados pelas anteras formando um tubo;
as tecas so elipsoidais e o conetivo prolonga-se numa
escama triangular. O ovrio nfero, estreito, de colorao
parda, mede de 4 mm a 8 mm de comprimento e apresenta
4 ou 5 arestas longitudinais visveis, alm de um estilete
bifurcado em 2 ramos estigmticos curvos e refexos. Os
frutos, quando presentes, so aqunios pardos, coroados ou
no pelo papus.
DESCRIO MICROSCPICA
As brcteas involucrais, em vista frontal, apresentam a face
abaxial da epiderme com clulas de paredes anticlinais
onduladas e estmatos do tipo anomoctico; face adaxial
com clulas alongadas, de paredes anticlinais poligonais
a pouco onduladas, sem estmatos. Na face abaxial
encontram-se diferentes tipos de tricomas: abundantes
tricomas tectores unicelulares ou bicelulares, pontiagudos,
formados por clulas de paredes pouco espessadas,
geralmente retos, sendo os tricomas bicelulares formados
por uma clula proximal curta e uma distal mais longa,
ligadas entre si por uma parede inclinada; raros tricomas
tectores pluricelulares, unisseriados, com 3 a 10 clulas,
formados por 1 a 3 clulas proximais curtas e 2 a 4 clulas
distais longas; tricomas tectores pluricelulares unisseriados,
particularmente abundantes nas margens das brcteas;
tricomas tectores pluricelulares com clulas proximais
de tamanho uniforme e clula distal mais longa; tricomas
glandulares numerosos, com pedicelo uni ou bisseriado, com
cabea glandular grande, globosa ou ovide, pluricelular,
abundantes na face abaxial; tricomas glandulares com o
mesmo aspecto descrito, porm mais curtos, com pedicelo
unisseriado, mais frequentes na face adaxial; raros tricomas
glandulares de aspecto claviforme. Em seco transversal,
a brctea apresenta um parnquima fundamental frouxo,
com feixes vasculares correspondentes s nervuras de cada
brctea. O receptculo, em vista frontal, apresenta epiderme
semelhante das brcteas, com tricomas tectores de 2 a 5
clulas. Em seco transversal, observa-se um parnquima
fundamental frouxo, com feixes vasculares e canais
secretores. As cerdas do clice, na forma de papus, so
compostas cada uma por 2 a 3 fleiras de clulas alongadas,
agudas na poro distal, e por um maior nmero de fleiras
de clulas na poro proximal; estas clulas assemelham-se
s clulas dos tricomas geminados, com suas extremidades
distais agudas, expostas e livres, orientadas em direo ao
extremo distal da cerda. A corola da for ligulada, em vista
frontal, apresenta epiderme da face adaxial com clulas de
paredes anticlinais poligonais, papilosas, principalmente
na poro distal e mediana da lgula, com papilas curtas
e arredondadas, sendo visveis estrias epicuticulares e
gotas lipdicas; a epiderme da face abaxial apresenta
clulas de paredes anticlinais alongadas, quase retas, mas
visivelmente onduladas na poro distal. Os estmatos so
anomocticos. Na face abaxial, especialmente na regio
do tubo, ocorrem tricomas de diferentes tipos: tricomas
tectores unisseriados e pluricelulares, formados por 4 ou
5 clulas, de tamanho mais ou menos igual e de paredes
pouco espessadas, com a clula distal pontiaguda; tricomas
tectores unisseriados e pluricelulares, formados por 1 a 3
clulas proximais de paredes espessadas e 2 a 4 clulas
distais de paredes delgadas; tricomas glandulares de
pedicelo unisseriado e pluricelular, com cabea globosa
unicelular a pluricelular; tricomas glandulares de pedicelo
bisseriado e pluricelular, com cabea globosa bisseriada,
bicelular a pluricelular. Em seco transversal, o mesoflo
formado por um parnquima frouxo, atravessado
longitudinalmente ao eixo da lgula por feixes vasculares
em igual nmero aos das nervuras paralelas. A corola da
for tubulosa, em vista frontal, apresenta epiderme com
clulas de paredes anticlinais levemente onduladas nas
duas faces da poro distal das ptalas, e mais poligonais na
poro mediana, as clulas da regio do tubo tm paredes
anticlinais poligonais; na poro distal e triangular de cada
ptala ocorrem papilas digitiformes. Gotas lipdicas podem
estar presentes. As fores de corola tubulosa apresentam os
mesmos tipos de tricomas que aqueles encontrados nas
fores de corola ligulada. As anteras, em seco transversal,
mostram um endotcio espessado nas paredes laterais.
A escama triangular da extremidade distal do conetivo
apresenta, em vista frontal, clulas de paredes anticlinais
retas e espessadas. Os gros de plen so triporados,
arredondados, com exina equinada, e medem cerca de 30
m. O ovrio, em vista frontal, apresenta epiderme com
clulas alongadas, recoberta de tricomas glandulares de
pedicelo curto e cabea claviforme a globosa, pluricelular,
com at 8 clulas dispostas em 2 fleiras, e de tricomas
tectores pluricelulares, bisseriados, com clulas geminadas,
cujas paredes adjacentes so pontoadas, pouco espessadas,
e com poro celular distal aguda e s vezes bfda. A
parede do ovrio pode mostrar placas reticuladas de cor
castanha ou preta, devido presena de ftomelanina. Os
ramos estigmticos do estilete apresentam em sua poro
distal tricomas unicelulares cnicos, pontiagudos. Sob o
tapete formado por estes tricomas observam-se papilas
arredondadas. O fruto, quando presente, tem as mesmas
caractersticas epidrmicas do ovrio, principalmente os
dois tipos de tricomas e as placas de ftomelanina evidentes.
espcie, menos os caracteres macroscpicos. Examinar
ao microscpio utilizando soluo de hidrato de cloral.
So caractersticas: pores de epiderme das brcteas
involucrais com estmatos e tricomas como os descritos,
mais abundantes na face abaxial; tricomas ou seus
fragmentos, conforme descritos; fragmentos de corolas
liguladas, com tricomas conforme descritos; fragmentos
da poro distal da corola ligulada cobertos de papilas
arredondadas; fragmentos de corolas tubulosas com
tricomas conforme descritos; fragmentos da poro distal
da corola tubulosa cobertos de papilas digitiformes;
fragmentos de ovrio com os dois tipos de tricomas
caractersticos, como descritos acima; pores do papus ou
aa
fragmentos de cerdas do papus conforme descritos; gros
de plen triporados, arredondados, com exina equinada.
IDENTIFICAO
254
, com
espessura de 250 m, como suporte, e mistura de cido
frmico anidro, gua, metil-etil-cetona e acetato de etila
(10:10:30:50) como fase mvel. Aplicar, separadamente
placa, em forma de bandas de 20 mm, a 1 cm de distncia,
15 L de cada uma das solues, descritas a seguir.
Soluo (1): a 2 g da amostra pulverizada, adicionar 10
mL de metanol e aquecer em banho-maria (60 C), sob
agitao, durante 5 minutos. Resfriar a soluo e, em
seguida, fltrar.
Soluo (2): dissolver 2 mg de cido cafeico, 2 mg de
cido clorognico e 5 mg de rutina em metanol e ajustar o
volume para 30 mL com metanol.
secar ao ar. Nebulizar com soluo de difenilborato de
aminoetanol SR e, depois, com soluo de macrogol
400 a 5% (p/v) em metanol. Aquecer a placa durante 5
minutos a 100-105 C. Deixar secar ao ar e examinar sob
luz ultravioleta 365 nm. O cromatograma obtido para
a Soluo (2) apresenta, na parte inferior, uma zona de
fuorescncia amarelo-alaranjada (rutina); na parte mediana
do cromatograma observa-se uma zona de fuorescncia
devido ao cido clorognico e, na parte superior, uma zona
de fuorescncia azulada (cido cafeico). O cromatograma
obtido com a Soluo (1) mostra, na parte inferior, pouco
acima da zona correspondente rutina, uma banda de
fuorescncia azul-esverdeada, uma banda de fuorescncia
azulada (cido clorognico) pode ser visualizada um pouco
mais acima; na sequncia, de baixo para cima, podem ser
observadas uma zona de fuorescncia castanho-amarelada
a amarelo-alaranjada; trs zonas de furorescncia
castanho-amarelada a amarelo-alaranjada e, pouco abaixo
da zona correspondente ao cido cafeico, uma banda de
fuorescncia azul-esverdeada.
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No superior a 5,0% de
caules com um dimetro superior a 5 mm.
Cinzas totais (5.4.2.4). No superior a 10,0%.
Perda por dessecao (5.2.9). No superior a 10,0% em
1 g da amostra pulverizada, determinada em estufa a 100
105 C, durante 2 horas.
DOSEAMENTO
Sesquiterpenos lactnicos totais
de alta efcincia (5.2.17.4) utilizando santonina como
padro interno. Utilizar cromatgrafo provido de detector
ultravioleta a 225 nm; coluna de 0,12 m de comprimento
e 4 mm de dimetro interno, empacotada com slica
octadecilsililada (4m); fuxo da Fase mvel de 1,2 mL/
min.
Eluente A: metanol.
Eluente B: gua.
Gradiente da Fase mvel: adotar o sistema de gradiente
descrito na tabela a seguir:
Tempo
(minutos)
Fase mvel
A (%)
Fase mvel
B (%)
Eluio
0-3 62 38 Isocrtico
3-20 6255 3845 Gradiente linear
20-30 55 45 Isocrtico
Soluo de padro interno: dissolver imediatamente antes
do uso 0,01 g de santonina exatamente pesado em 10 mL
de metanol.
Soluo amostra: em balo de fundo redondo de 250
mL, introduzir 1 g da amostra pulverizada. Adicionar
50 mL de uma mistura de volumes iguais de metanol e
gua isenta de dixido de carbono e aquecer, sob refuxo,
em banho-maria a 50 C - 60 C, durante 30 minutos
agitando frequentemente. Deixar esfriar e em seguida,
fltrar utilizando fltro de papel. Transferir o fltro cortado
em pedaos grandes e o resduo para o balo de fundo
redondo, adicionar 50 mL de uma msitura de volumes
iguais de metanol e gua isenta de dixido de carbono
e aquecer, sob refuxo, em banho-maria a 50 C - 60 C,
durante 30 minutos, agitando frequentemente. Repetir a
operao duas vezes. Reunir os fltrados, adicionar 3 mL da
Soluo de padro interno e evaporar, a presso reduzida,
at a obteno de um volume de 18 mL. Lavar o balo de
fundo redondo com gua isenta de dixido de carbono e
completar 20 mL com as guas de lavagem. Transferir a
soluo para uma coluna cromatogrfca com cerca de 0,15
m de comprimento e cerca de 30 mm de dimetro interno,
contendo 15 g de slica kieselguhr para cromatografa.
Deixar em repouso durante 15 minutos e, depois, eluir com
200 mL de uma mistura de volumes iguais de acetato de
etila e cloreto de metileno. Evaporar o eluato secura, num
balo de fundo redondo de 250 mL. Dissolver o resduo
em 10 mL de metanol, adicionar 10 mL de gua isenta de
dixido de carbono e, em seguida, 7 g de xido de alumnio
neutro. Agitar durante 2 minutos, centrifugar (10 min,
6.000 r/min) e fltrar utilizando fltro de papel. Evaporar
secura 10 mL do fltrado. Dissolver o resduo em 3 mL de
uma mistura de iguais volumes de metanol e gua isenta de
dixido de carbono e fltrar.
Procedimento: injetar separadamente, 20 L da Soluo
de padro interno e da Soluo amostra. Calcular a
porcentagem de sesquiterpenos lactnicos totais, expressos
em tiglato de helenalina, segundo a expresso:
a a
em que
FLS = rea total dos picos correspondentes aos
sesquiterpenos lactnicos que aparecem depois do pico da
santonina no cromatograma
FS = rea sob o pico correspondente santonia no
cromatograma obtido com a Soluo amostra
m = massa da tomada de ensaio, em gramas
C = concentrao da santonina na Soluo de padro
interno utilzada na Soluo amostra (mg/mL)
V = volume (em mL) da Soluo de padro interno
utilizado na Soluo amostra
1,187 = fator de correo entre o tiglato de helenalina e a
santonina
Em recipientes opacos, bem fechados, ao abrigo da luz e
calor.
aa
figura 1 - Aspectos macroscpicos em Arnica montana L.
______________
A aspecto de um ramo com inforescncias. B captulo foral: for tubular (ft); for ligulada (fl); pednculo (pd). C captulo foral desprovido de
fores tubulosas: for ligulada (fl); receptculo (rc); pednculo (pd). D aspecto da droga seca: for tubular (ft); for ligulada (fl); receptculo (rc);
pednculo (pd).
a a
figura 2 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Arnica montana L.
______________
A for ligulada: ovrio (ov); papus (pap); estigma bfdo (eg); lgula (l). B for tubulosa; ovrio (ov); papus (pap); estame com antera soldada (ea);
estigma bfdo (eg); corola (co). C for ligulada: lgula (l). D for tubulosa: ovrio (ov); papus (pap); estigma bfdo (eg). E detalhe de uma cerda
do papus: gro de plen (gp). f superfcie externa do ovrio: tricoma glandular (tg); tricoma tector (tt). G fragmento do papus. H detalhe de uma
cerda do papus: gro de plen (gp); papus (pap); tricoma tector (tt).
aa
figura 3 Aspectos microscpicos em Arnica montana L.
______________
A corte transversal da brctea: epiderme (ep); parnquima (p); feixe vascular (fv); tricoma gladular (tg); base do tricoma glandular (btg). B e C
detalhes dos tricomas grandular e tector: tricoma glandular (tg); tricoma tector (tt). D superfcie externa do ovrio vista de cima: tricoma glandular
com cabea bicelular (tgb), com corpo bisseriado. E aspectos dos tricomas glandulares. f e G fragmento da epiderme inferior: tricoma glandular
(tg); tricoma glandular com cabea bicelular (tgb).
a a
ARTEMTER
Artemetherum
O
O
C H
3
O
O
H
CH
3
H H
CH
3
OCH
3
C
16
H
26
O
5
; 298,37
artemter; 00885
(3R, 5aS, 6R, 8aS, 9R, 10S, 12R, 12aR)-Decai dro-10-
metoxi-3,6,9-trimetil-3,12-epoxi-12H-pirano[4,3-j]-1,2-
benzodioxepina
[71963-77-4]
C
16
H
26
O
5
,

em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, cristalino e branco.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, muito
solvel em cloreto de metileno e acetona e facilmente
solvel em etanol absoluto e acetato de etila.
Faixa de fuso (5.2.2): 86 C a 90 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +166 a +173.
Determinar em soluo a 1% em etanol absoluto.
IDENTIFICAO
observados no espectro de artemter SQR, preparado de
maneira idntica.
obtida em Substncias relacionadas, corresponde em
C. A 30 mg da amostra, adicionar 1 mL de etanol absoluto
e 0,1 g de iodeto de potssio. Aquecer em banho-maria.
Desenvolve-se colorao amarela.
D. Dissolver 10 mg da amostra em 2 mL de etanol absoluto,
em cpsula de porcelana. Adicionar tres gotas de vanilina
SR. Desenvolve-se colorao rosa.
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias relacionadas 1. Proceder conforme descrito
em Cromatografa em camada delgada (5.2.17.1),
utilizando slica-gel G, como suporte, e mistura de ter
de petrleo e acetato de etila (70:30), como fase mvel.
Soluo (1): soluo a 10 mg/mL da amostra em acetona.
Soluo (2): soluo a 0,05 mg/mL da amostra em acetona.
acetona.
Soluo (5): soluo a 0,10 mg/mL de artemter SQR em
acetona.
placa, deixar secar ao ar. Nebulizar a placa com vanilina SR
e examinar imediatamente. Qualquer mancha secundria
mancha principal, no mais intensa que aquela obtida
com a Soluo (2) (0,5%) e no mais que uma mancha
mais intensa que aquela obtida com a soluo (3) (0,25%).
em Doseamento. Preparar a Solues (1) e a Soluo (2)
Soluo (1): soluo a 10 mg/mL da amostra em fase
mvel.
Soluo (2): soluo a 0,05 mg/mL da amostra em fase
mvel.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 L de cada
soluo. Registrar os cromatogramas e medir a rea sob
os picos. A soma das reas de todos os picos secundrios
obtidos com a Soluo (1), exceto a do pico principal, no
maior que o dobro da rea sob o pico principal, obtido com
a Soluo (2) (1,0%) e a rea de nenhum pico maior que
aquela do pico principal obtido com a Soluo (2) (0,5%).
No mais que um pico obtido com a Soluo (1) apresenta
rea superior metade da rea sob o pico principal obtido
com a Soluo (2) (0,25%). Desconsiderar os picos com
rea inferior a 0,1 vezes a rea sob o pico principal obtido
com a Soluo (2).
amostra. Dessecar sob pentxido de fsforo em estufa a 60
C, sob presso reduzida, por 4 horas. No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
de detector ultravioleta a 216 nm; coluna cromatogrfca
de 250 mm de comprimento e 4 mm de dimetro interno,
empacotada com slica quimicamente ligada a grupo
aa
octadecilsilano (5 m), mantida a 30 C; fuxo da Fase
mvel de 1,5 mL/min.
Fase mvel: mistura de acetonitrila e gua (62:38).
Soluo amostra: dissolver quantidade, exatamente pesada,
da amostra em fase mvel, de modo a obter soluo a 4 mg/
mL.
de artemter SQR em fase mvel, de modo a obter soluo
a 4 mg/mL.
16
H
26
O
5

na amostra, a partir das respostas obtidas com a Soluo
CLASSE TERAPUTICA
Antimalrico.
ARTEMTER SOLUO INJETVEL
16
H
26
O
5
.
IDENTIFICAO
A. Transferir volume da soluo injetvel equivalente a 50
mg de artemter para bquer, adicionar 25 mL de acetona,
agitar e fltrar. Evaporar o fltrado a 40 C e secar o resduo
em dessecador por 24 horas. Proceder conforme descrito
no teste A. de Identifcao da monografa de Artemter.
C. Adicionar 6 mL de etanol absoluto a um volume
da soluo injetvel equivalente a 30 mg de artemter.
Transferir cinco gotas para cpsula de porcelana e adicionar
uma gota de vanilina SR. Desenvolve-se colorao rosa.
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
em Substncias relacionadas 1, por Cromatografa em
camada delgada (5.2.17.1), na monografa de Artemter.
Preparar as solues como descrito a seguir.
Soluo (1): diluir volume da soluo injetvel em acetona,
de modo a obter soluo a 10 mg/mL.
Soluo (2): diluir a Soluo (1) em acetona, de modo a
obter soluo a 0,05 mg/mL.
Soluo (5): soluo a 0,10 mg/mL de artemter SQR em
acetona.
em Substncias relacionadas 2, por Cromatografa a
lquido de alta efcincia (5.2.17.4), na monografa de
Artemter. Preparar as solues como descrito a seguir.
Soluo (1): diluir volume da soluo injetvel em fase
mvel, de modo a obter soluo a 10 mg/mL.
Soluo (2): diluir a Soluo (1) em fase mvel, de modo a
Pirognios (5.5.2.1). Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de Artemter. Preparar a Soluo amostra como descrito a
seguir.
Diluente: mistura de isopropanol e acetonitrila (75:25).
Soluo amostra: diluir volume da soluo injetvel no
diluente, de modo a obter soluo a 4 mg/mL.
16
H
26
O
5
na
soluo injetvel, a partir das respostas obtidas para as
Em recipientes de vidro tipo I, protegidos da luz, em
ROTULAGEM
a a
ARTESUNATO
Artesunatum
O
O
C H
3
O
O
H
CH
3
H H
CH
3
O
HOOC
O
C
19
H
28
O
8
; 384,42
artesunato; 09673
ster 1-[(3R,5aS,6R,8aS,9R,10S,12R,12aR)-decaidro-
3, 6, 9-t ri met i l -3, 12-epoxi -12H-pi rano[4, 3-j ]-1, 2-
benzodioxepina-10-lico] do cido butanodiico
[88495-63-0]
C
19
H
28
O
8
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, cristalino, branco ou
quase branco.
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, muito solvel
em cloreto de metileno, facilmente solvel em etanol e
acetona.
Faixa de fuso (5.2.2): 132 C a 135 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +2,5 a +3,5. Determinar
em soluo a 1% (p/v) em cloreto do metileno.
IDENTIFICAO
observados no espectro de artesunato SQR, preparado de
maneira idntica.
suporte, e mistura de tolueno e acetato de etila (95:5),
a seguir.
Soluo (1): soluo a 0,10 mg/mL da amostra em tolueno.
Soluo (2): soluo a 0,10 mg/mL de artesunato SQR em
tolueno.
secar ao ar. Nebulizar a placa com anisaldedo SR e aquecer
a 120 C por 5 minutos. Examinar sob luz ultravioleta
com a Soluo (2).
C. Dissolver 0,1 g da amostra em 40 mL de etanol absoluto,
agitar e fltrar. A 20 mL do fltrado, adicionar 0,5 mL de
cloridrato de hidroxilamina SR e 0,25 mL de hidrxido de
sdio SR. Aquecer em banho-maria at a fervura, resfriar
e adicionar duas gotas de cido clordrico SR e duas gotas
de cloreto frrico a 5% (p/v). Desenvolve-se colorao
violeta.
D. Dissolver 0,1 g da amostra em 40 mL de etanol absoluto,
agitar e fltrar. Evaporar 20 mL do fltrado em banho-maria
at volume de 5 mL. Transferir cinco gotas para cpsula de
porcelana e adicionar uma gota de vanilina SR. Aps 30
minutos, desenvolve-se colorao vermelha.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 3,5 a 4,5. Determinar em suspenso a 1%
utilizando slica-gel G, como suporte, e mistura de ter de
petrleo, acetato de etila e cido actico glacial (48:36:1),
como fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, 10
descritas a seguir.
Soluo (1): soluo a 5 mg/mL da amostra em cloreto de
metileno.
Soluo (2): soluo a 0,05 mg/mL da amostra em cloreto
de metileno.
Soluo (3): soluo a 0,025 mg/mL da amostra em cloreto
de metileno.
secar ao ar. Nebulizar a placa com vanilina SR e examinar
imediatamente. Qualquer mancha secundria obtida no
cromatograma com a Soluo (1), diferente da mancha
Soluo (2) (1,0%) e no mais que uma mancha mais
no mtodo B. de Doseamento. Preparar as solues como
descrito a seguir.
Soluo (1): soluo a 4 mg/mL da amostra em acetonitrila.
acetonitrila.
soluo. Registrar os cromatogramas e medir as reas sob
aa
os picos. A soma das reas de todos os picos secundrios
maior que o dobro da rea sob o pico principal, obtido com
a Soluo (2) (2,0%) e a rea de nenhum pico maior que
aquela do pico principal obtido com a Soluo (2) (1,0%).
No mais que um pico obtido com a Soluo (1) apresenta
rea superior metade da rea sob o pico principal obtido
com a Soluo (2) (0,5%). Desconsiderar os picos com
rea inferior a 0,1 vezes a rea sob o pico principal obtido
com a Soluo (2).
mximo 0,002% (20 ppm).
mximo 0,5%.
Cinzas sulfatadas. No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
A. Dissolver, exatamente, cerca de 0,25 g da amostra em 25
mL de etanol. Titular com hidrxido de sdio 0,05 M SV,
utilizando duas gotas de fenolftalena SI como indicador.
Cada mL de hidrxido de sdio 0,05 M SV equivale a
19,221 mg de C
19
H
28
O
8
.
comprimento e 3 mm de dimetro interno, empacotada
m), mantida a 30 C; fuxo da fase mvel de 0,6 mL/min.
Tampo pH 3,0: dissolver 1,36 g de fosfato de potssio
monobsico em 900 mL de gua. Ajustar o pH para 3,0 com
cido fosfrico, completar o volume para 1000 mL com
gua e homogeneizar.
Fase mvel: mistura de Tampo pH 3,0 e acetonitrila
(50:50).
da amostra em acetonitrila, de modo a obter soluo a 2
mg/mL.
de artesunato SQR em acetonitrila, de modo a obter
soluo a 2 mg/mL.
19
H
28
O
8

na amostra, a partir das respostas obtidas com a Soluo
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimalrico.
ARTESUNATO COMPRIMIDOS
quantidade declarada de artesunato (C
19
H
28
O
8
).
IDENTIFICAO
do p equivalente a 50 mg de artesunato para bquer,
adicionar 25 mL de acetona, agitar e fltrar. Evaporar o
fltrado em banho-maria e deixar o resduo em dessecador,
sob slica-gel, por 24 horas. O resduo obtido responde ao
teste A. de Identifcao da monografa de Artesunato.
C. Proceder conforme descrito no teste B. de Identifcao
da monografa de Artesunato. Preparar a Soluo (1) como
descrito a seguir.
quantidade do p equivalente a 5 mg de artesunato para
bquer, adicionar 50 mL de etanol absoluto, agitar e fltrar.
Evaporar 2 mL do fltrado em banho-maria e dissolver o
resduo em 2 mL de acetona.
D. Pesar e pulverizar os comprimidos. Utilizar quantidade
do p equivalente a 0,1 g de artesunato. Prosseguir conforme
descrito no teste D. de Identifcao da monografa de
Artesunato.
CARACTERSTICAS
Proceder conforme descrito no mtodo B. de Doseamento.
ENSAIOS DE PUREZA
em Substncias relacionadas 1, da monografa de
Artesunato. Preparar as solues como descrito a seguir.
quantidade do p equivalente a 0,1 g de artesunato com 20
a a
mL de cloreto de metileno e fltrar, de modo a obter soluo
a 5 mg/mL.
Soluo (2): diluir a Soluo (1) em cloreto de metileno, de
modo a obter soluo a 0,05 mg/mL.
Soluo (3): diluir a Soluo (2) em cloreto de metileno, de
em Substncias relacionadas 2, da monografa de
Artesunato. Preparar as solues como descrito a seguir.
quantidade do p equivalente a 0,4 g de artesunato para bquer
e adicionar 20 mL de etanol. Agitar vigorosamente e fltrar.
mL e completar o volume com Fase mvel.
mvel.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir,
exatamente, quantidade do p equivalente a 0,5 g de
artesunato para balo volumtrico de 50 mL e adicionar
40 mL de etanol. Agitar mecanicamente por 10 minutos,
completar o volume com o mesmo solvente e fltrar. Titular
25 mL do fltrado com hidrxido de sdio 0,05 M SV,
utilizando duas gotas de fenolftalena SI como indicador.
Cada mL de hidrxido de sdio 0,05 M SV equivale a
19,221 mg de C
19
H
28
O
8
.
B. Proceder conforme descrito no mtodo B. de Doseamento
da monografa de Artesunato. Preparar a Soluo amostra
Transferir, exatamente, quantidade do p equivalente a 0,25 g
de artesunato para balo volumtrico de 25 mL, adicionar
20 mL de etanol e agitar mecanicamente por 10 minutos.
Completar o volume com o mesmo solvente, homogeneizar
e fltrar. Transferir 5 mL do fltrado para balo volumtrico
de 25 mL e completar o volume com Fase mvel.
padro e amostra, registrar os cromatogramas e medir
as reas sob os picos. Calcular a quantidade de C
19
H
28
O
8

nos comprimidos, a partir das respostas obtidas para as
ROTULAGEM
ASCORBATO DE SDIO
Natrii ascorbas
C
6
H
7
NaO
6
; 198,11
ascorbato de sdio; 00107
Sal de sdio do cido L-ascrbico (1:1)
[134-03-2]
C
6
H
7
NaO
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou amarelado, cristalino.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, ligeiramente
solvel em etanol e praticamente insolvel em cloreto de
metileno.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +103 a +108,
determinado em uma soluo 100 mg/mL em gua.
IDENTIFICAO
amostra, dispersa em leo mineral, apresenta mximos de
no espectro de ascorbato de sdio SQR, preparado de
maneira idntica.
B. Pesar 1 g de amostra e dissolver em 50 mL de gua. A 4
mL desta soluo, adicionar 1 mL de cido clordrico 0,1
M. A soluo resultante reduz o tartarato cprico alcalino
SR lentamente temperatura ambiente e mais rapidamente
sob aquecimento.
C. Responde s reaes do on sdio (5.3.1.1).
D. Preparar uma soluo 10% (p/v) da amostra. A 1 mL
desta soluo, adicionar 0,2 mL de cido ntrico SR e 0,2
mL de nitrato de prata 1,7% (p/v). Ocorre formao de
precipitado cinza.
aa
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 5 g de amostra em gua e
completar para o volume de 50 mL com o mesmo solvente.
Essa soluo no mais intensamente colorida que a
soluo padro preparada pela diluio de 5 mL da Soluo
de referncia de cor descrita a seguir, em 95 mL de cido
clordrico 1% (p/v). Proceder conforme descrito em Cor de
lquidos (5.2.12).
Soluo de referncia de cor: misturar 1,5 partes da
soluo base de cloreto frrico, 1,2 partes da soluo base
de sulfato cprico, 1,5 partes da soluo base de cloreto
cobaltoso e 0,8 partes de cido clordrico 1% (p/v).
pH (5.2.19). 7,0 a 8,0. Determinar na soluo 10% (p/v).
descrito em Cromatografa gasosa (5.2.17.5). Utilizar
utilizando mistura de nitrognio, ar sinttico e hidrognio
(1:1:10) como gases auxiliares chama do detector; coluna
capilar de 30 m de comprimento e 0,53 mm de dimetro
interno, preenchida com fase estacionria ligada de fenil e
metilpolisiloxano (5:95), com espessura do flme de 5 m;
temperatura da coluna de 35 C a 260 C (35 C mantida
durante 5 minutos, aumentar a 175 C a 8 C por minuto,
aumentada a 260 C a 35 C e mantida a esta temperatura
por pelo menos 16 minutos), temperatura do injetor a 70 C
e temperatura do detector a 260 C; utilizar hlio como gs
de arraste; fuxo do gs de arraste de 1 mL/minuto.
Soluo amostra: Dissolver em 50 mL de gua, livre de
compostos orgnicos, exatamente, cerca de, 1 g de amostra.
Soluo padro: preparar uma soluo, em gua livre de
compostos orgnicos, contendo, em cada mL, 10 g de
cloreto de metileno, 1 g de clorofrmio, 2 g benzeno, 2
g de dioxana e 2 g de tricloroetileno.
da Soluo padro no cromatgrafo gs. Obter os
cromatogramas e medir a rea sob os picos. Identifcar,
baseado no tempo de reteno, qualquer pico presente
no cromatograma da soluo amostra. A presena e a
identifcao dos picos no cromatograma devem ser
estabelecidas comparando os cromatogramas da Soluo
amostra e Soluo padro. Limites: Benzeno 2 ppm,
clorofrmio 50 ppm, dioxana 100 ppm, cloreto de metileno
500 ppm e tricloroetileno 100 ppm. Cumpre o teste.
cido oxlico. Deixar as seguintes preparaes em
repouso por 1 hora. A opalescncia da preparao amostra
no maior que a da preparao padro.
Preparao amostra: Dissolver 0,25 g de amostra em 5
mL de gua. Adicionar 1 mL de cido actico diludo e 0,5
mL de cloreto de clcio SR. No mximo 0,3% (3000 ppm).
Preparao padro: Dissolver 70 mg de cido oxlico em
gua e completar para o volume de 500 mL com o mesmo
solvente. A 5 mL desta soluo, adicionar 1 mL de cido
actico diludo e 0,5 mL de cloreto de clcio SR.
Sulfatos (5.3.2.1). Dissolver 1,6 g da amostra em 40 mL de
gua e proceder conforme descrito em Ensaio limite para
sulfatos, utilizando 0,5 mL de soluo padro de cido
Cobre. Proceder conforme descrito em Espectrometria
atmica (5.2.13.1.1). Utilizar espectrofotmetro provido
de chama alimentada com mistura de ar-acetileno, lmpada
de ctodo oco de cobre e selecionar a linha de emisso em
324,8 nm.
Soluo amostra: Transferir 2 g da amostra para frasco
volumtrico de 25 mL e completar o volume com cido
ntrico SR. No mximo 5 ppm de cobre.
ferro. Proceder conforme descrito em Espectrometria
atmica (5.2.13.1.1).Utilizar espectrofotmetro provido de
chama alimentada com mistura de ar-acetileno, lmpada
de ctodo oco de ferro e selecionar a linha de emisso em
248,3 nm.
ntrico SR. No mximo 2 ppm de ferro.
Nquel. Proceder conforme descrito em Espectrometria
atmica (5.2.13.1.1).Utilizar espectrofotmetro provido de
chama alimentada com mistura de ar-acetileno, lmpada
de ctodo oco de nquel e selecionar a linha de emisso em
232,0 nm.
ntrico SR. No mximo 1 ppm de nquel.
Metais pesados (5.3.2.3). Dissolver 2 g de amostra em
gua e completar para o volume de 20 mL. Transferir 12
mL desta soluo e proceder conforme descrito em Mtodo
I. No mximo 0,001% (10 ppm).
amostra, em estufa a 105 C at peso constante. No mximo
0,25%.
DOSEAMENTO
uma mistura de 100 mL de gua e 25 mL de cido sulfrico
9,8% (p/v). Titular imediatamente com iodo 0,1 M SV e
adicionar 3 mL de amido I prximo ao ponto fnal. Cada
mL de iodo 0,1 M SV equivale a 9,905 mg de C
6
H
7
NaO
6
.
Em recipientes no metlicos, protegidos da luz.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Excipiente.
a a
ATADURA DE GAZE
A atadura de gaze constituda por faixa contnua de gaze
purifcada do tipo I, frmemente enrolada, de largura e
comprimento variveis, isenta de fapos e enovelamentos.
A atadura de gaze, desenrolada previamente, deve
satisfazer todas as exigncias estabelecidas para o tecido
de gaze hidrfla purifcada, determinadas de acordo com
as respectivas tcnicas e s especifcaes a seguir.
CARACTERSTICAS
Comprimento. Determinar medindo ao longo da linha
mediana da atadura, desenrolada e alisada sem trao; o
comprimento no dever ser menor que 98% do indicado
na rotulagem.
Largura. Medir a largura em trs pontos uniformemente
espalhados ao longo da atadura aberta. A mdia das trs
medidas deve apresentar variao dimensional de, no
mximo, 2% em relao ao declarado na rotulagem.
Nmero de fos. Determinar o nmero de fos da urdidura
e da trama em 5 reas de 1 cm x 1 cm, na linha central da
atadura, em pontos de intervalos regulares, pelo menos a
30 cm da extremidade e calcular o nmero de fos em uma
rea de 5 cm x 5 cm.
Peso. Determinar o peso de todo o rolo da atadura e,
utilizando os resultados das medidas anteriores, calcular o
peso por metro quadrado.
Poder absorvente. Sustente a atadura, devidamente
desenrolada horizontalmente, quase em contato com uma
superfcie de gua destilada e deixar cair, delicadamente,
sobre o lquido; a atadura deve submergir completamente
no espao de tempo de 30 segundos.
Substncias medicamentosas ou adesivas. A atadura de
gaze, quando impregnada de substncias medicamentosas
ou misturas adesivas deve apresentar concentrao
uniforme. No deve conter substncias em concentraes
capazes de provocar acidentes txicos ou reacionais.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Aplicvel quando a atadura
declarada estril. Cumpre o teste.
ROTULAGEM
ATENOLOL
Atenololum
NH
2
O
O N C H
3
OH
CH
3
H
C
14
H
22
N
2
O
3
; 266,34
atenolol; 00911
4-[2-Hidroxi-3-[(1-metiletil)amino]propoxi]benzenoacetamida
[29122-68-7]
C
14
H
22
N
2
O
3
DESCRIO
branco.
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, facilmente
solvel em metanol, solvel em cido actico glacial e
etanol, pouco solvel em cloreto de metileno, muito pouco
solvel em acetona, praticamente insolvel em acetonitrila.
Faixa de fuso (5.2.2): 152 C a 155 C.
Poder rotatrio (5.2.8): +0,10 a -0,10. Determinar em
soluo a 1 % (p/v) em gua.
IDENTIFICAO
atenolol SQR, preparado de maneira idntica.
metanol, exibe mximos e mnimos somente nos mesmos
comprimentos de onda de soluo similar de atenolol SQR.
A razo entre os valores de absorvncia medidos em 275
nm e 282 nm est compreendida entre 1,15 e 1,20.
254
,
como suporte, e mistura de hidrxido de amnio e metanol
descritas a seguir.
Soluo (1): soluo a 10 mg/mL da amostra em metanol.
Soluo (2): soluo a 10 mg/mL de atenolol SQR em
metanol.
aa
cor e intensidade aquela obtida com a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
Cloretos. Dissolver 1 g da amostra em 100 mL de cido
ntrico 0,15 M, adicionar 1 mL de nitrato de prata SR e
homogeneizar. Qualquer turbidez desenvolvida no mais
intensa que a de mistura de 1,4 mL de cido clordrico 0,02
M, 98,6 mL de cido ntrico 0,15 M e 1 mL de nitrato de
prata SR. No mximo 0,1% (1000 ppm).
Pureza cromatogrfca. Proceder conforme descrito no
mtodo B. de Doseamento. Preparar a Soluo (1) e a
Soluo(2) como descrito a seguir.
Soluo (1): dissolver quantidade exatamente pesada da
amostra em Fase mvel de modo a obter soluo a 0,1 mg/
mL.
volumtrico de 100 mL e diluir com Fase mvel, de modo
a obter soluo a 0,5 g/mL.
Procedimento: injetar, separadamente, 50 L da soluo
(1) e da Soluo (2), registrar os cromatogramas por, no
mnimo, seis vezes o tempo de reteno do pico do atenolol
e medir as reas dos os picos. Nenhum pico secundrio
obtido com a Soluo (1) deve apresentar rea superior
metade da rea sob o pico principal obtido com a Soluo
(2) (0,25%). A soma das rea sob os picos secundrios
obtidos com a Soluo (1) no deve ser superior rea sob
o pico principal obtido com a Soluo (2) (0,5%).
No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar, exatamente, cerca
de 25 mg da amostra e dissolver em metanol. Completar
o volume para 50 mL com o mesmo solvente. Diluir,
sucessivamente, em metanol, at concentrao de 0,01 %
(p/v). Preparar soluo padro na mesma concentrao,
utilizando o mesmo solvente. Medir as absorvncias das
solues em 275 nm, utilizando metanol para o ajuste do
zero. Calcular o teor de C
14
H
22
N
2
O
3
na amostra, a partir das
leituras obtidas.
B. Proceder conforme descrito em Cromatografa liquida
m), mantida temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel
de 0,6 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 1,1 g de heptanossulfonato de sdio
e 0,71 g de fosfato de sdio dibsico anidro em 700 mL
de gua. Se necessrio, ajustar o pH em 3,0 com acido
fosfrico SR. Adicionar 300 mL de metanol e 2 mL de
dibutilamina e homogeneizar.
da amostra em Fase mvel de modo a obter soluo a 10
g/mL.
de atenolol SQR em Fase mvel de modo a obter soluo
a 10 g/mL.
da coluna no menor que 5000 pratos tericos. O fator
que 2,0%.
14
H
22
N
2
O
3

ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA.
Anti-hipertensivo.
ATENOLOL COMPRIMIDOS
14
H
22
N
2
O
3
.
IDENTIFICAO
de 230 nm a 350 nm, da Soluo amostra obtida no mtodo
A. de Doseamento, exibe mximos de absoro em 275 nm
e 282 nm, idnticos aos observados no espectro da Soluo
padro.
CARACTERSTICAS
a a
Procedimento para uniformidade de contedo. Transferir
cada comprimido para balo volumtrico de 25 mL
contendo 15 mL de metanol e deixar em ultrassom at
a desintegrao do comprimido. Prosseguir conforme
descrito no mtodo A. de Doseamento a partir de Aquecer
a suspenso resultante.
Tempo: 30 minutos
dissoluo, diluir com cido fosfrico a 0,1% (v/v) at
concentrao de 10 mg/mL e proceder conforme descrito
no mtodo B. de Doseamento da monografa de Atenolol.
14
H
22
N
2
O
3
dissolvida no meio,
comparando as reas sob os picos obtidos com a de soluo
de atenolol SQR na concentrao de 10 mg/mL, preparada
no mesmo solvente.
declarada de C
14
H
22
N
2
O
3
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Por Espectrofotometria de absoro no ultravioleta
(5.2.14). Pesar e pulverizar 20 comprimidos, transferir
quantidade do p equivalente a 0,25 g de atenolol para
balo volumtrico de 250 mL e adicionar 150 mL de
metanol. Aquecer a suspenso resultante a 60 C por 10
minutos, agitando ocasionalmente. Agitar mecanicamente
por 15 minutos, resfriar e completar o volume com metanol.
Homogeneizar e fltrar. Diluir, sucessivamente, em metanol,
at concentrao de 0,01% (p/v). Preparar soluo padro
nm, utilizando metanol para o ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
14
H
22
N
2
O
3
nos comprimidos, a partir das
leituras obtidas.
B. Por Cromatografa a lquido de alta efcincia (5.2.17.4).
Proceder conforme descrito no mtodo B. de Doseamento
da monografa de Atenolol. Preparar a Soluo amostra
Soluo amostra: transferir 10 comprimidos para balo
volumtrico de 1000 mL, adicionar 500 mL de Fase
mvel e deixar em ultrassom por 15 minutos, ou at
desintegrao total dos comprimidos. Completar o volume
com o mesmo solvente, homogeneizar e centrifugar. Diluir
sucessivamente, no mesmo solvente, at concentrao de
10 mg/mL.
C
14
H
22
N
2
O
3
nos comprimidos a partir das respostas obtidas
para a Soluo padro e a Soluo amostra.
ROTULAGEM
ATENOLOL E CLORTALIDONA
COMPRIMIDOS
14
H
22
N
2
O
3
e C
14
H
11
ClN
2
O
4
S.
IDENTIFICAO
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G como
suporte, e mistura de hidrxido de amnio M e 1-butanol
descritas a seguir:
quantidade do p equivalente a 10 mg de clortalidona para
balo volumtrico de 10 mL, adicionar 8 mL de metanol.
Agitar mecanicamente por 15 minutos e completar o
volume com o mesmo solvente. Homogeneizar e fltrar.
Soluo (2): preparar soluo a 1 mg/mL de clortalidona
SQR em metanol.
Soluo (3): preparar soluo a 4 mg/mL de atenolol SQR
em metanol.
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). As
manchas referentes ao atenolol e clortalidona obtidas com
a Soluo (1) correspondem em posio, cor e intensidade
quelas obtidas com a Soluo (2) e com a Soluo (3).
B. Os tempos de reteno dos picos principais do
cromatograma da Soluo amostra, obtida em Doseamento,
aa
correspondem aqueles dos picos principais da Soluo
padro.
CARACTERSTICAS
cada comprimido para balo volumtrico, obtendo soluo
de clortalidona a concentrao de 0,025% (p/v). Adicionar
mistura de gua e acetonitrila (1:1) equivalente a 50% do
volume do balo. Agitar mecanicamente por 20 minutos at
desintegrao total do comprimido e completar o volume
com o mesmo solvente. Prosseguir conforme descrito no
mtodo de Doseamento a partir da Soluo padro.
Tempo: 45 minutos
dissoluo e proceder conforme descrito em Doseamento.
Preparar a Soluo amostra, a Soluo padro e o Diluente
Diluente: mistura de acetonitrila e cido sulfrico 1,8 M
(1000:32).
Soluo amostra: mistura de 10 mL da amostra e 3 mL do
Diluente.
Soluo padro: preparar soluo de atenolol SQR em
mistura de gua e Diluente (750:225), obtendo soluo a
0,00085 L mg de atenolol e 0,00085 L mg de clortalidona,
por mililitro, onde L e L so as quantidades declaradas, nos
comprimidos, de atenolol e clortalidona, respectivamente.
declarada de C
14
H
22
N
2
O
3
e 70% (Q) da quantidade
declarada de C
14
H
11
ClN
2
O
4
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Empregarum dos mtodos descritos a seguir:
de detector ultravioleta a 275 nm; coluna de 250 nm de
de 1,7 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila e cido sulfrico
1,8 M (740:250:8) e 930 mg de octilsulfato de sdio por
litro de mistura.
Transferir quantidades de p equivalente a 25 mg de
clortalidona para balo volumtrico de 50 mL, adicionar
40 mL da mistura de gua e acetonitrila (1:1) e agitar
mecanicamente por 20 minutos. Completar o volume com
o mesmo solvente, homogeneizar e fltrar. Transferir 25 mL
do fltrado para balo volumtrico de 50 mL e completar o
volume com gua, obtendo soluo a 0,25 mg/mL.
de atenolol SQR e clortalidona SQR em mistura de gua e
acetonitrila (3:1) para obter soluo a 1 mg/mL e 0,25 mg/
mL, respectivamente.
Injetar replicatas de 10 L da Soluo padro. Os tempos
de reteno relativos so cerca de 0,8 para atenolol e 1,0
para clortalidona. A resoluo entre atenolol e clortalidona
no deve ser menor que 3,0. O desvio padro relativo das
reas de replicatas dos picos registrados no deve ser maior
que 2,0%.
14
H
22
N
2
O
3
e C
14
H
11
ClN
2
O
4
S na amostra a partir das respostas obtidas
com a Soluo padro e a Soluo amostra.
ROTULAGEM
a a
AZATIOPRINA
Azathioprinum
C
9
H
7
N
7
O
2
S; 277,26
azatioprina; 00984
6-[(1-Metil-4-nitro-1H-imidazol-5-il)tio]-9H-purina
[446-86-6]
C
9
H
7
N
7
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P amarelo plido.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, etanol e
clorofrmio. Solvel em solues diludas de hidrxidos
alcalinos e pouco solvel em solues diludas de cidos
minerais.
IDENTIFICAO
azatioprina SQR, preparado de maneira idntica.
faixa de 230 nm a 350 nm, de soluo a 0,00075% (p/v)
preparada em cido clordrico 0,1 M, exibe mximo de
absoro em 280 nm, idntico ao observado no espectro de
soluo similar de azatioprina SQR.
C. Aquecer 20 mg da amostra com 100 mL de gua e fltrar.
A 5 mL do fltrado, adicionar 1 mL de acido clordrico e
10 mg de zinco em p e deixar em repouso por 5 minutos.
Desenvolve-se colorao amarela. Filtrar. Adicionar 0,1
mL de nitrito de sdio SR e 0,1 g de cido sulfmico.
Agitar at desaparecimento das bolhas. Adicionar 1 mL de
2-naftol SR. Produz-se precipitado rosa.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Agitar, exatamente, 2 g da
amostra com 100 mL de gua por 15 minutos. Filtrar. No
mximo 0,1 mL de hidrxido de sdio 0,02 M gasto
para neutralizar 20 mL do fltrado, utilizando vermelho de
metila SI como indicador. No mximo 0,1 mL de cido
clordrico 0,02 M gasto para neutralizar 20 mL do fltrado,
utilizando vermelho de metila SI como indicador.
Limite de mercaptopurina. Proceder conforme descrito
utilizando slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de
1-butanol, etanol e gua (4:1:1), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): soluo da amostra a 20 mg/mL em amnia SR.
Soluo (2): soluo de mecarptopurina a 0,2 mg/mL em
amnia SR.
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). Em
seguida, submeter a vapores de iodo. Qualquer mancha
secundria obtida no cromatograma com a Soluo (1),
aquela obtida com a Soluo (2) (1,0%).
amostra. Dessecar em estufa a vcuo 105 C, por 5 horas.
No mximo 1,0%.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito em Titulaes em meio
no aquoso (5.3.3.5). Pesar, exatamente, cerca de 0,25 g
da amostra e dissolver em 25 mL de dimetilformamida.
Titular com hidrxido de tetrabutilamnio 0,1 M SV,
mL de hidrxido de tetrabutilamnio 0,1 M SV equivale a
27,726 mg de C
9
H
7
N
7
O
2
S.
B. Por Espectrofotometria de absoro no ultravioleta
(5.2.14). Transferir, exatamente, cerca de 0,1 g de
azatioprina para balo volumtrico de 500 mL e acrescentar
300 mL de cido c1ordrico 0,1 M. Deixar em banho-
maria por 30 minutos. Resfriar e completar o volume
com o mesmo solvente. Homogeneizar. Realizar diluio
at concentrao de 0,001% (p/v), utilizando o mesmo
solvente. Preparar soluo padro nas mesmas condies.
Medir a absorvncia das solues em 280 nm, utilizando
cido clordrico 0,1 M para o ajuste do zero. Calcular o
teor de C
9
H
7
N
7
O
2
S na amostra, a partir das leituras obtidas.
Alternativamente, realizar os clculos considerando A
(1%, 1 cm) = 628, em 280 nm, em cido c1ordrico 0,1 M.
ROTULAGEM
aa
CLASSE TERAPUTICA
Imunossupressor.
AZITROMICINA
Azithromycinum
O
O
N
O
CH
3
OH
C H
3
OH
O H
O
C H
3
O
CH
3
CH
3
C H
3
C H
3
CH
3
CH
3
CH
3
OH
OCH
3
O CH
3
N(CH
3
)
2
OH
H
C
38
H
72
N
2
O
12
; 748,98
C
38
H
72
N
2
O
12
.2H
2
O; 785,02
azitromicina; 00997
azitromicina diidratada; 00998
(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-
Didesoxi-3-C-metil-3-O-metil--L-ribo-hexopiranosil)
oxi]-2-etil-3,4,10-triidroxi-3,5,6,8,10,12,14-heptametil-
11-[[3, 4, 6-t ri desoxi -3-(di met i l ami no)-- D-xi l o-
hexopiranosil]oxi]-1-oxa-6-azaciclopentadecan-15-ona
[83905-01-5]
(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-
Didesoxi-3-C-metil-3-O-metil--L-ribo-hexopiranosil)
oxi]-2-etil-3,4,10-triidroxi-3,5,6,8,10,12,14-heptametil-
11-[[3, 4, 6-t ri desoxi -3-(di met i l ami no)-- D-xi l o-
hexopiranosil]oxi]-1-oxa-6-azaciclopentadecan-15-ona
diidratada
[117772-70-0]
Apresenta potncia de, no mnimo 945 g e, no mximo,
1030 g de azitromicina (C
38
H
72
N
2
O
12
) por miligrama, em
DESCRIO
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, solvel em
clorofrmio, facilmente solvel em etanol e metanol.
Muito pouco solvel em solues de hidrxidos alcalinos.
Ligeiramente solvel em solues cidas.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -45 a -49, em relao
substncia anidra. Determinar em soluo a 2% (p/v) em
etanol, a 20 C.
IDENTIFICAO
observados no espectro de azitromicina SQR, preparado de
maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 9,0 a 11,0. Determinar em soluo a 0,2%
(p/v), em mistura de gua e metanol (1:1).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo IV. No
mximo 0,0025% (25 ppm).
gua (5.2.20.1). No mximo 5,0%.
Umedecer a amostra com 2 mL de cido ntrico e cinco
gotas de cido sulfrico. No mximo 0,3%.
em leo mineral, transferir para uma lmina de vidro
e examinar por meio de microscpio dotado de luz
polarizada. As partculas exibem birrefringncia, que se
extingue ao movimentar a amostra por meio de ajuste do
micromtrico.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Ensaio microbiolgico de
antibiticos (5.5.3.3.1) pelo mtodo de difuso em gar,
manuteno do micro-organismo, meio de cultura nmero
3, para padronizao do inculo e meio de cultura nmero
11, para camada base e preparao do inculo.
Soluo amostra: pesar, exatamente, cerca de 25 mg da
amostra, transferir para balo volumtrico de 25 mL com
auxlio de 10 mL de metanol. Agitar mecanicamente por 15
minutos e completar o volume com metanol. Filtrar. Diluir,
sucessivamente, a soluo resultante, em Tampo fosfato
de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (soluo 2), de modo a
obter solues a 0,1 g/mL, 0,2 g/mL e 0,4 g/mL.
azitromicina SQR, transferir para balo volumtrico
de 25 mL e completar o volume com metanol. Diluir,
sucessivamente, a soluo resultante, em Tampo fosfato
de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (soluo 2), de modo a
obter solues a 0,1 g/mL, 0,2 g/mL e 0,4 g/mL.
inculo a 1% e acrescentar, aos cilindros, 0,2 mL das
Solues amostra e padro recentemente preparadas.
Calcular a potncia da amostra, em g de azitromicina por
a a
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibacteriano.
AZITROMICINA CPSULAS
Apresenta potncia de, no mnimo, 90,0% e, no mximo,
110,0% do valor declarado de C
38
H
72
N
2
O
12
.
IDENTIFICAO
Pesar as cpsulas, remover o contedo e pes-las
novamente. Transferir o equivalente a 0,25 g de
azitromicina para balo volumtrico de 50 mL, dissolver
em metanol e completar o volume com o mesmo solvente.
Filtrar. Evaporar o fltrado em banho-maria e pesar 1,5 mg
do resduo. Proceder conforme descrito em Identifcao
da monografa de Azitromicina.
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 5,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de Azitromicina. Preparar Soluo amostra como descrito
a seguir.
Soluo amostra: pesar 20 cpsulas, remover o
contedo e pes-las novamente. Transferir quantidade
do p equivalente a 25 mg de azitromicina para balo
Agitar por 15 minutos e fltrar. Diluir, sucessivamente, a
soluo resultante, em Tampo fosfato de potssio 0,1 M,
estril, pH 8,0 (soluo 2), de modo a obter solues nas
concentraes entre 0,1 g/mL e 0,4 g/mL.
ROTULAGEM
AZITROMICINA P PARA SUSPENSO
ORAL
Azitromicina p para suspenso oral mistura de
azitromicina com um ou mais agentes aromatizantes,
tampes, adoantes e agentes suspensores. Apresenta
potncia de, no mnimo, 90,0% e, no mximo, 110,0%, do
valor declarado de azitromicina (C
38
H
72
N
2
O
12
).
IDENTIFICAO
azitromicina para balo volumtrico de 50 mL, completar
o volume com metanol. Homogeneizar e fltrar. Evaporar
o fltrado em banho-maria, at obter o resduo. Prosseguir
conforme descrito em Identifcao da monografa da
Azitromicina.
CARACTERSTICAS
Determinar no frasco do diluente.
pH (5.2.19). 8,5 a 11,0. Reconstituir a suspenso como
descrito no rtulo do produto.
Uniformidade de doses unitrias (5.1.6). Aplicado
quando o p envasado em dose nica. Cumpre o teste.
Reconstituir a suspenso como descrito no rtulo do
produto.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 1,5%.
Cumpre o teste.
aa
DOSEAMENTO
de Azitromicina. Preparar a Soluo amostra como descrito
a seguir.
no rtulo do produto. Transferir volume da suspenso
oral, recentemente homogeneizada e livre de bolhas,
contendo o equivalente a 0,2 g de azitromicina, para balo
volumtrico de 20 mL com auxlio de 10 mL de metanol.
Agitar e completar o volume com mesmo solvente. Filtrar.
Transferir 5 mL do fltrado para balo volumtrico de
50 mL e completar o volume com Tampo fosfato de
potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (soluo 2). Diluir at as
concentraes de 0,1 g/mL, 0,2 g/mL e 0,4 g/mL,
utilizando o Tampo fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH
8,0 como diluente.
ROTULAGEM
a b
667
BLSAMO DO PERU
Balsamum peruvianum
Myroxylon balsamum (L.) Harms var. pereirae (Royle)
Harms FABACEAE
A droga vegetal constituda do blsamo obtido a partir do
tronco escarifcado quente. Contm, no mnimo, 45% e,
no mximo, 70% de steres, principalmente benzoato de
benzila e cinamato de benzila.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Lquido viscoso,
lmpido, castanho-escuro a castanho-avermelhado.
Quando examinado em camada fna apresenta cor
castanho-amarelada. Possui odor caracterstico, aromtico,
que lembra o da baunilha, e sabor amargo e acre. No se
solidifca em exposio ao ar, nem por tempo prolongado
ou por aquecimento, e no produz flamentos.
solvel em etanol, solvel em clorofrmio e cido actico,
pouco solvel em ter etlico e ter de petrleo, imiscvel
nos leos graxos, exceto em leo de rcino.
IDENTIFICAO
254
,
com espessura de 250 m, como suporte, e mistura de cido
actico glacial, acetato de etila e hexano (0,5:10:90), como
fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, em forma
de banda, 10 uL de cada uma das solues, recentemente
Soluo (1): dissolver 0,5 g da amostra em 10 mL de
acetato de etila.
Soluo (2): dissolver 4 mg de timol, 30 mg de cinamato
de benzila e 80 uL de benzoato de benzila em 5 mL de
acetato de etila.
As manchas principais obtidas com a Soluo (1)
correspondem em posio, cor e intensidade quelas
obtidas com a Soluo (2). Quando examinada sob luz
ultravioleta (254 nm), o cromatograma apresenta, em seu
tero superior, duas manchas de extino de fuorescncia
obtidas com a Soluo (2), a superior correspondente ao
benzoato de benzila e a inferior ao cinamato de benzila, que
correspondem em posio quelas obtidas com a Soluo
(1). Duas outras manchas intensas, uma acima e outra
abaixo das manchas de referncia podem ser visualizadas.
Nebulizar a placa com soluo recm preparada de cido
fosfomolbdico a 20% (p/v) em etanol, utilizando 10
mL para uma placa com dimenses 20 mm x 20 mm.
Aquecer entre 100 C a 105 C, durante 5 a 10 minutos,
e examinar o cromatograma luz do dia. As manchas
correspondentes ao benzoato de benzila e ao cinamato de
benzila apresentam colorao azul sobre fundo amarelo.
O cromatograma apresenta, em sua parte mdia, uma
mancha cinza-violeta (timol) obtida com a Soluo (2).
O cromatograma apresenta uma mancha de colorao
azul (nerolidol), obtida com a Soluo (1), imediatamente
abaixo mancha correspondente ao timol, obtida com a
Soluo (2). Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). Logo
abaixo da mancha correspondente ao nerolidol, no deve
aparecer nenhuma mancha de colorao azul ou apresentar
extino de fuorescncia, quando examinada sob luz
ultravioleta (254 nm), correspondente colofnia.
B. Dissolver 0,20 g da amostra em 10 mL de etanol.
Adicionar 0,2 mL de cloreto frrico SR. Desenvolve-se
colorao verde a verde oliva.
C. Misturar duas ou trs gotas com um volume
aproximadamente 5 vezes maior de cido sulfrico
concentrado. Desenvolve-se colorao vermelho-escura
que, pela adio de 40 mL de gua, passa a violcea. No
deve aparecer qualquer matiz pardo (adulterao).
ENSAIOS DE PUREZA
Densidade relativa (5.2.5). 1,14 a 1,17.
ndice de acidez (5.2.29.7). 56 a 84. Dissolver 1 g da
amostra em 100 mL de etanol neutralizado, adicionar 1
mL de fenolftalena SI e titular com hidrxido de potssio
etanlico 0,5 M SV.
ndice de saponifcao (5.2.29.8). 230 a 255. Determinar
no resduo obtido em Doseamento.
Blsamos artifciais. Agitar, vigorosamente, 0,2 g da
amostra com 6 mL de ter de petrleo. A soluo de ter
de petrleo dever permanecer transparente e incolor e
todas as partes insolveis do blsamo estaro aderidas nas
paredes do tubo de ensaio.
Terebintina. Evaporar 4 mL da soluo obtida em
Blsamos artifciais. O resduo no apresenta odor de
terebintina.
leos graxos. Agitar 1 g da amostra com 3 mL de uma
soluo de hidrato de cloral a 1000 g/L. A soluo obtida
transparente assim como a soluo de hidrato de cloral a
1000 g/L.
DOSEAMENTO
steres
Em funil de decantao, adicionar 2,5 g da amostra, 7,5
mL de soluo de hidrxido de sdio diluda a 8,5%
(p/v) e 40 mL de ter etlico isento de perxidos. Agitar,
vigorosamente, durante 10 minutos. Separar a fase etrea
e agitar a fase bsica por 1 minuto com trs pores de
15 mL de ter etlico isento de perxidos. Reunir as fases
etreas, dessecar com 10 g de sulfato de sdio anidro e
fltrar. Lavar o resduo de sulfato de sdio duas vezes com
10 mL de ter etlico isento de perxidos. Reunir as fases
b
etreas e evaporar secura. Dessecar o resduo (steres)
entre 100 C a 105 C, durante 30 minutos, resfriar em
dessecador e pesar.
Em recipiente bem fechado e protegido da luz.
BLSAMO DE TOLU
Balsamum tolutanum
Myroxylon balsamum (L.) Harms e Myroxylon balsamum
var. pereirae (Royale) Harms FABACEAE.
O Blsamo de tolu constitudo de leo-resina obtido
de Myroxylon balsamum (L.) Harms e de Myroxylon
balsamum var. pereirae (Royale) Harms. Contm, no
mnimo, 25% e, no mximo, 50% de cidos livres ou
combinados, expressos em cido cinmico (C
9
H
8
O
2
, M
148,16).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Massa acastanhada a
castanho-avermelhada, dura, frivel e cujos fragmentos
fnos apresentam cor amarelo-acastanhada por
transparncia. Odor semelhante ao da baunilha e sabor um
pouco acre.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua e ter de
petrleo, muito solvel em etanol, solvel em acetona e
clorofrmio.
IDENTIFICAO
A. Adicionar, com cuidado, uma gota de cido sulfrico
concentrado sobre um fragmento da amostra. Desenvolve
colorao vermelho-vinho.
B. Aquecer 1 g da amostra com 5 mL de gua at a ebulio,
fltrar atravs de papel de fltro pregueado. Ferver o fltrado
com 1 mL de permanganato de potssio a 3% (p/v). Produz
forte odor de aldedo benzoico.
254
,
com espessura de 250 m, como fase estacionria e mistura
de ter de petrleo e tolueno (5:95) como fase mvel.
uL da Soluo (1) e 10 uL da Soluo (2), recentemente
Soluo (1): agitar 0,4 g da amostra fragmentada com
10 mL de cloreto de metileno durante 5 minutos. Filtrar
atravs de papel de fltro pregueado.
Soluo (2): dissolver 50 mg de cinamato de benzila em
1 mL de cloreto de metileno, juntar 50 uL de benzoato de
benzila e completar o volume para 10 mL com cloreto de
metileno.
correspondem em posio, cor e intensidade quelas
obtidas com a Soluo (2). O cromatograma obtido com a
Soluo (2), quando visualizado sob luz ultravioleta (254
nm), apresenta em seu tero superior, duas manchas de
extino de fuorescncia: a superior correspondente ao
benzoato de benzila e a inferior ao cinamato de benzila.
Na Soluo (1) tambm podem ser observadas manchas
com extino de fuorescncia: uma no fronte e duas
manchas logo abaixo da mancha correspondente ao
cinamato de metila. Em seguida, nebulizar a placa com
vanilina sulfrica SR e colocar em estufa de 100 C a
105 C, durante 5 minutos. As manchas correspondentes
ao benzoato de benzila e cinamato de benzila apresentam
colorao azul sobre fundo amarelo. Outras duas manchas
de colorao roxa so observadas acima da mancha do
benzoato de benzila. Na parte inferior do cromatograma
ocorrem diversas manchas de colorao azul e roxa, entre
estas uma mancha de colorao amarela.
ENSAIOS DE PUREZA
ndice de acidez (5.2.29.7). 100 a 160. Dissolver 1 g da
amostra fragmentada em 50 mL de etanol neutralizado.
Adicionar 1 mL de fenolftalena SI e titular com hidrxido
de potssio etanlico 0,5 M SV.
ndice de saponifcao (5.2.29.8). 154 a 220.
Limite de substncias insolveis em lcool. Aquecer
ebulio 2 g da amostra fragmentada com 25 mL de etanol
a 90% (v/v). Filtrar por fltro de vidro poroso, previamente
tarado. Lavar o recipiente e o resduo contido no funil
com etanol a 90% (v/v) quente, at a extrao completa.
Aquecer o funil de vidro e o seu contedo em estufa a 105
C, durante 2 horas. Resfriar em dessecador e pesar. No
mximo, 5,0%.
Colofnia. Triturar 1 g da amostra com 10 mL de ter de
petrleo durante 1 a 2 minutos. Filtrar para tubo de ensaio
e adicionar 10 mL de soluo de acetato de cobre a 0,5%
(p/v) recentemente preparada. Agitar energicamente, deixar
separar as fases. A camada etrea no deve apresentar
colorao verde.
gua (5.4.2.3). No mximo 5,0%. Espalhar 2 g da amostra
fragmentada na superfcie de um cristalizador plano de 9
cm de dimetro e deixar secar presso reduzida, durante
4 horas.
DOSEAMENTO
cidos livres ou combinados expressos em cido
cinmico
Aquecer sob refuxo, em banho-maria, 1,5 g da amostra
com 25 mL de hidrxido de potssio etanlico 0,5 M SV,
durante 1 hora. Evaporar o etanol e aquecer o resduo
com 50 mL de gua at que a soluo fque homognea.
a b
669
Aps o resfriamento temperatura ambiente, juntar 80
mL de gua e soluo de 1,5 g de sulfato de magnsio
em 50 mL de gua. Misturar e deixar em repouso durante
10 minutos. Filtrar, lavar o resduo com 20 mL de gua.
Reunir o fltrado e a gua de lavagem, acidifcar com cido
clordrico concentrado e extrair quatro vezes com 40 mL
de ter etlico. Desprezar a fase aquosa. Reunir os extratos
orgnicos e extrair com duas vezes de 20 mL e trs vezes
com 10 mL de soluo de bicarbonato de sdio a 5%
(p/v). Desprezar a fase etrea. Reunir os extratos aquosos,
acidifcar com cido clordrico concentrado e extrair uma
vez com 30 mL, duas vezes com 20 mL e uma vez com 10
mL de cloreto de metileno. Reunir os extratos de cloreto de
metileno e dessecar com 10 g de sulfato de sdio anidro.
Filtrar, lavar o resduo com 10 mL de cloreto de metileno.
Concentrar os extratos reunidos, sob presso reduzida,
at 10 mL e eliminar o restante do cloreto de metileno em
corrente de ar na capela. Dissolver quente o resduo com
10 mL de etanol neutralizado previamente em presena
de soluo de vermelho de fenol SI. Aps resfriamento,
titular com hidrxido de sdio 0,1 M SV, utilizando o
mesmo indicador. Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M
SV equivale a 14,816 mg de cido cinmico (C
9
H
8
O
2
).
Em recipiente bem fechado e no conservar na forma de p.
BARBATIMO
Barbadetimani cortex
Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville -
FABACEAE
A droga vegetal constituda pelas cascas caulinares secas
contendo, no mnimo, 8% de taninos totais, expressos
em pirogalol (C
6
H
6
O
3
; 126,11), dos quais no mnino 0,2
mg/g equivalem a cido glico (C
7
H
6
O
5
; 170,1) e 0,3 mg/g
correspondem a galocatequina (C
15
H
14
O
7
; 306,27), em
relao droga seca. Entende-se por casca do caule todos
os tecidos situados externamente ao cmbio vascular deste
rgo.
SINONMIA CIENTFICA
Stryphnodendron barbatimam Mart.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Cascas secas inodoras e
de sabor fortemente adstringente.
DESCRIO MACROSCPICA
As cascas caulinares, quando secas, apresentam-se em
fragmentos arqueados, com dimenses e formatos muito
variados. Em seco transversal apresentam, em mdia,
0,6 mm de espessura quando secas, e de 10 mm a 12 mm
de espessura quando hidratadas, tendo a regio foemtica,
mais interna, colorao marrom mais clara, quando
comparada regio do sber, mais externa e de intensa
colorao marrom-avermelhada. Nos caules jovens o
sber apresenta-se, em vista frontal, de colorao escura e
aspecto granuloso, homogneo, portando fssuras estreitas
e profundas no sentido transversal. Nas pores caulinares
mais velhas, apresenta colorao marrom-escura ou
marrom-acinzentada, quando da presena de lquens,
sempre com profundas fendas, predominantes no sentido
transversal, ou com cinturas consecutivas, desprendendo-
se em placas de dimenses e formatos variados, irregulares,
deixando depresses profundas no local. A fratura da
casca do tipo granulosa em relao regio do sber e
fbrosa, estriada longitudinalmente, esquirolosa, na regio
foemtica.
DESCRIO MICROSCPICA
A poro externa da casca apresenta sber com 20 a 30
estratos de clulas tabulares enfleirados radialmente,
com paredes delgadas e contedo marrom, seguidos por
muitos estratos de clulas parenquimticas de formato
isodiamtrico ou pouco alongado periclinalmente, tambm
com paredes delgadas. A maioria destas clulas possui
contedo marrom-avermelhado, que no se descora
facilmente com hipoclorito de sdio a 30% (p/v) e no
altera a cor na presena do cloreto frrico SR. Nesta
poro parenquimtica ocorrem clulas ptreas (maioria)
e macroescleredes, posicionados em diversos planos, em
grupos de vrios elementos ou isolados, com paredes muito
espessadas com lignina, apresentando lamelaes evidentes
e pontoaes simples, por vezes ramifcadas. Nas pores
mais externas do sber, tanto as clulas parenquimticas
quanto os escleredes podem ser visualizados, compactados
e deformados pela ao mecnica nos tecidos internos. Na
regio do foema ocorrem conjuntos de poucos elementos
de fbras gelatinosas, relativamente estreitas, sempre com
idioblastos adjuntos, contendo um grande cristal de oxalato
de clcio, prismtico, com variado nmero de lados, inteiro
ou superfcialmente erodido. Os conjuntos de fbras, quando
observados em seces longitudinais, acompanham os
raios parenquimticos do foema, os quais so, em geral,
unisseriados, mas tornam-se bi-multisseriados nas pores
mais externas. Os elementos de tubo crivado apresentam
placas crivadas compostas, estando colapsados nas
regies mais externas do foema. Clulas ptreas isoladas,
semelhantes s do sber, e gros de amido esfricos so
abundantes no tecido parenquimtico do foema. As clulas
ao redor dos raios parenquimticos reagem positivamente
presena do cloreto frrico SR, adquirindo colorao
verde-escura. Ainda na regio foemtica podem ser
encontradas clulas volumosas de contedo hialino,
dispostas em conjuntos de 5 a 7 elementos.
O p atende a todas as caractersticas estabelecidas para
caractersticas: fragmentos do sber com clulas tabulares;
grupos de clulas parenquimticas com contedo
marrom-avermelhado, justapostas com clulas ptreas
b
ou macroescleredes, em grupos ou isolados, de paredes
fortemente lignifcadas, com pontoaes simples, por
vezes ramifcadas; conjuntos de fbras com idioblastos
cristalferos adjuntos, delimitando fragmentos de raios
parenquimticos do foema; clulas parenquimticas com
gros de amido esfricos.
IDENTIFICAO
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel F
254
, com
de etila, cido frmico e gua (75:5:5) como fase mvel.
mL da Soluo (1) e 3 mL da Soluo (2) e da Soluo (3),
recentemente preparadas, como descrito a seguir.
Soluo (1): extrair por turblise exatamente cerca de 10
g da droga vegetal moda em 90 mL de mistura acetona
e gua (7:3) durante 15 minutos, com intervalos de 5
minutos para que a temperatura no exceda 40 C. Filtrar,
eliminar a acetona em evaporador rotatrio sob presso
reduzida. Extrair a fase aquosa resultante com trs pores
de 20 mL de acetato de etila em funil de separao (125
mL). Deixar em repousou a temperatura de -18 C durante
15 minutos, para total separao das fases. Reunir e fltrar
as fraes orgnicas com 5 g de sulfato de sdio anidro.
Evaporar a frao orgnica em evaporador rotatrio sob
presso reduzida at resduo, ressuspendendo-o em 1 mL
de metanol.
Soluo (2): pesar cerca de 1 mg de epigalocatequina SQR
e dissolver em 1 mL de metanol.
Soluo (3): pesar cerca de 1 mg de 4-O-metilgalocatequina
SQR e dissolver em 1 mL de metanol.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa e deixar
secar em capela de exausto. Examinar sob luz ultravioleta
(254 nm). O cromatograma obtido com a Soluo (1)
apresenta manchas de fuorescncia atenuada, na mesma
altura que as obtidas com a Solues (2) e a Soluo (3)
(Rf de aproximadamente 0,75 e 0,82, respectivamente).
Em seguida, nebulizar a placa com cloreto frrico a 1%
(p/v) em metanol. Aps a nebulizao, o cromatograma
da Soluo (1) dever apresentar bandas com a mesma
colorao e Rf da Solues (2) e da Soluo (3).
B. Aquecer sob refuxo cerca de 3 g da droga vegetal moda
com 60 mL de gua, durante 15 minutos. Esfriar e fltrar.
A 2 mL do extrato adicionar duas gotas de cido clordrico
SR e gotejar gelatina SR at precipitao. O aparecimento
de precipitado ntido indica reao positiva para taninos
totais.
C. A 2 mL do extrato obtido no teste B. de Identifcao,
adicionar 10 mL de gua e duas a quatro gotas de soluo de
cloreto frrico a 1% (p/v) em metanol. O desenvolvimento
de colorao cinza-escura indica reao positiva para
taninos totais.
D. A 2 mL do extrato obtido no teste B. de Identifcao,
adicionar 0,5 mL de vanilina a 1% (p/v) em metanol e 1 mL
de cido clordrico SR. O desenvolvimento de colorao
vermelha, indica reao positiva para taninos condensados.
E. A 5 mL do extrato obtido no teste B. de Identifcao,
adicionar 10 mL de cido actico 2 M e 5 mL de acetato de
chumbo SR. O aparecimento de precipitado esbranquiado,
indica presena de taninos.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 14,0%.
DOSEAMENTO
Taninos totais
Nota: efetuar todas as operaes de extrao e diluio
ao abrigo da luz.
Preparar as solues descritas a seguir.
Soluo estoque: pesar 0,750 g da droga pulverizada (250
m) e transferir para um erlenmeyer de 250 mL com boca
esmerilhada. Adicionar 150 mL de gua destilada. Aquecer
em banho-maria durante 30 minutos, temperatura de 60
C. Resfriar em gua corrente e transferir para um balo
volumtrico de 250 mL. Lavar o erlenmeyer e transferir
as guas de lavagem com todo contedo de droga vegetal
para o mesmo balo volumtrico. Completar o volume
com gua destilada. Deixar decantar e fltrar o lquido
sobrenadante em papel de fltro. Desprezar os primeiros 50
mL do fltrado.
Soluo amostra para polifenis totais: diluir 5 mL do
fltrado em balo volumtrico de 25 mL com gua destilada.
Transferir volumetricamente 2 mL desta soluo, 1 mL de
reagente fosfomolibdotngstico e 10 mL de gua destilada
para balo volumtrico de 25 mL e completar o volume com
soluo de carbonato de sdio a 29% (p/v). Determinar a
absorvncia em 760 nm (A
1
) aps 30 minutos, utilizando
gua destilada para ajuste do zero.
Soluo amostra para polifenis no adsorvidos por p
de pele: para 10 mL do fltrado adicionar 0,1 g de p de
pele SQR e agitar mecanicamente em erlenmeyer de 125
mL durante 60 minutos. Filtrar em papel de fltro. Diluir
5 mL desse fltrado em balo volumtrico de 25 mL com
gua destilada. Transferir volumetricamente 2 mL desta
soluo, 1 mL de reagente fosfomolibdotngstico e 10
mL de gua destilada para balo volumtrico de 25 mL e
completar o volume com soluo de carbonato de sdio a
29% (p/v). Determinar a absorvncia em 760 nm (A
2
) aps
30 minutos, utilizando gua destilada para ajuste do zero.
Soluo padro: dissolver imediatamente antes do uso 50
mg de pirogalol em balo volumtrico de 100 mL com gua
destilada. Transferir volumetricamente 5 mL dessa soluo
a b
671
com gua destilada. Transferir volumetricamente 2 mL
dessa soluo, 1 mL de reagente fosfomolibdotngstico e
10 mL de gua destilada para balo volumtrico de 25 mL
e completar o volume com soluo de carbonato de sdio a
3
) aps
Calcular o teor, em porcentagem, de taninos (droga seca),
expressos em pirogalol, segundo a expresso:
em que:
A
1
= absorvncia da Soluo amostra para polifenis
totais;
A
2
= absorvncia da Soluo amostra para polifenis no
adsorvidos em p de pele;
A
3
= absorvncia da Soluo padro;
m
1
= massa da amostra utilizada no ensaio, em gramas,
considerando a determinao de gua;
m
2
= massa de pirogalol, em gramas.
cido glico e galocatequina
alta efcincia (5.2.17.4). Utilizar cromatgrafo provido de
detector ultravioleta ajustado em comprimento de onda de
210 nm; pr-coluna empacotada com slica quimicamente
ligada a grupo octadecilsilano; coluna de 250 mm de
mm); fuxo da Fase mvel de 0,8 mL/minuto.
Eluente A: mistura de gua e cido trifuoractico 0,05 %
(v/v).
Eluente B: mistura de acetonitrila e cido trifuoractico
0,05% (v/v).
Gradiente da Fase mvel: adotar sistema de gradiente
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
0 - 10 95 80,7 5 19,3 gradiente linear
10 13,5 80,7 75 19,3 25 gradiente linear
13,5 - 23 75 62 25 38 gradiente linear
23 - 25 62 25 38 75 gradiente linear
28 - 32 95 5 isocrtica
Soluo amostra: extrair por turblise 10 g da droga
vegetal pulverizada (250 m) em 90 mL de acetona:gua
(7:3) durante 15 minutos, com intervalos de 5 minutos para
que a temperatura no exceda 40 C. Filtrar em algodo
e eliminar a acetona em evaporador rotatrio sob presso
reduzida. Extrair a fase aquosa resultante com trs pores
de 20 mL de acetato de etila em funil de separao (125
mL). Deixar em repousou em temperatura de -18 C
durante 15 minutos, para total separao das fases. Reunir
as fases orgnicas e fltrar atravs de papel de fltro com 5
g de sulfato de sdio anidro. Evaporar a frao orgnica
obtida em evaporador rotatrio sob presso reduzida at
resduo. Retomar o resduo com 5 mL de metanol:gua
(2:8). Extrair em cartucho de extrao em fase slida,
octadecilsilano (55 mm, 70 ), previamente acondicionada
com 10 mL de mistura de metanol e gua (2:8), para balo
de 100 mL. Eluir, em seguida, 10 mL da metanol e gua
(2:8) para o mesmo balo e completar o volume (S
1
) com
metanol e gua (2:8). Transferir volumetricamente 5 mL da
S
1
com metanol e gua (1:1) (S
2
). Filtrar a S
2
(membrana de
PTFE de porosidade 0,5 m) e injetar no cromatgrafo.
Soluo padro de galocatequina: dissolver quantidade
exatamente pesada de galocatequina SQR em mistura de
metanol e gua (1:1), para obter soluo a 0,152 mg/mL.
Soluo padro de cido glico: dissolver quantidade
exatamente pesada de cido glico SQR em mistura de
metanol e gua (1:1), para obter soluo a 0,100 mg/mL.
Solues para curva analtica da galocatequina: diluir uma
alquota de 600 L da Soluo padro de galocatequina
em balo volumtrico de 5 mL, com metanol e gua (1:1).
Proceder diluies para obter concentraes de 1,14 mg/
mL; 2,28 mg/mL; 4,56mg/mL; 9,12mg/mL; 18,24 mg/mL.
Solues para curva analtica do cido glico: diluir uma
alquota de 800 L da Soluo padro de cido glico em
balo volumtrico de 5 mL, com metanol e gua (1:1).
Proceder diluies para obter concentraes de 2 g/mL; 4
g/mL; 8 g/mL; 14 g/mL e 16 mg/mL.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 L das solues
para a construo das curvas analticas e da Soluo
amostra em quintuplicata, registrar os cromatogramas e
medir as reas sob os picos. O tempo de reteno relativo
para cido glico e galocatequina cerca de 8,4 e 10,8
minutos, respectivamente. Calcular o teor de cido glico e
galocatequina na amostra a partir da equao linear da reta
obtida com as curvas analticas dos padres. O resultado
expresso pela mdia das determinaes em mg/g de droga
vegetal, considerando o teor de gua, segundo a expresso:
m
VLR
SQR
=
1000
500
em que
SQR = substncia qumica de referncia;
VLR = valor obtido em (g/mL) de SQR/mL em S
2
, a
partir da equao da reta;
1000 = valor de converso de g para mg;
m = massa (g) de droga vegetal considerando a determinao
de gua.
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e do calor.
b
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville
_____________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A, B e C a 1 cm; em D a 2 mm e em E, f, G e H a 100 m.
A e B aspecto parcial da superfcie externa e interna da casca de ramo mais novo, respectivamente: lquens (li). C aspecto parcial da superfcie
externa de ramo mais velho. D diagrama da distribuio dos tecidos da casca: clulas tabulares (ct), clula ptrea (cp); parnquima (pa); sber (su);
foema (f). E e f detalhes parciais da regio do sber, em seces transversais: clulas tabulares (ct); macroescleredes (me); parnquima (pa); clula
ptrea (cp). G e H detalhes parciais da regio do foema, em seces transversais: fbras do foema (ff); clulas volumosas (cv); placa crivada (pc);
elemento de tubo crivado obliterado (et).
a b
673
figura 2 Aspectos microscpicos em Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville
________________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A, B e D a 100 m; em C e E a 25 m.
A e B detalhes parciais de foema, em seces longitudinais tangenciais: raio parenquimtico (ra); clula parenquimtica (pa); idioblasto cristalfero
(ic). C detalhe parcial do parnquima foemtico com gros de amido: gros de amido (am); placa crivada (pc). D detalhe parcial do foema em
seco longitudinal radial: clula volumosa (cv); idioblasto cristalfero (ic); fbras do foema (ff); raio parenquimtico (ra). E detalhe dos idioblastos
cristalferos do foema: fbras do foema (ff); idioblasto cristalfero (ic).
b
BAUNILHA
Vanillae fructus
Vanilla planifolia Andrews ORCHIDACEAE
A droga vegetal constituda pelos frutos imaturos e secos
contendo, no mnimo, 12% de extrato hidroalcolico seco.
CARACTERSTICAS
agradvel e foral que lembra a vanilina o qual, no entanto,
bem mais sutil e encorpado que a substncia isolada.
DESCRIO MACROSCPICA
Os frutos so cpsulas plurisprmicas, derivadas de
ovrio spero, tricarpelar, unilocular. O formato do fruto
em seco transversal varivel, em funo do modo
de armazenamento; o fruto maduro no comprimido
possui contorno triangular em seco transversal. O fruto
maduro castanho escuro, apresenta estrias longitudinais,
fexvel e mede de 20 cm a 25 cm de comprimento e,
aproximadamente, 1 cm a 1,5 cm de dimetro em sua
regio mediana.
DESCRIO MICROSCPICA
O pericarpo, de maneira geral, possui exocarpo com
uma nica camada celular e mesocarpo multicelular,
predominantemente parenquimtico, com regies
distintas; endocarpo com uma nica camada celular
especializada. Em funo do armazenamento, a forma
das clulas descaracterizada, sendo difcultada tambm
a contagem do nmero de camadas, principalmente da
poro interna do mesocarpo. Idioblastos com rfdes
orientadas longitudinalmente ao pericarpo so comuns;
cristais prismticos tambm so observados. O exocarpo
possui clulas alongadas tangencialmente, cujas paredes
periclinais externas so espessas e cutinizadas e as paredes
periclinais internas tambm so espessas e pcticas;
as clulas geralmente acumulam compostos fenlicos.
O exocarpo estomatfero e glabro. O mesocarpo
externo apresenta duas a quatro camadas similares a um
colnquima anguloso, no vascularizado; o mesocarpo
mdio possui clulas volumosas, com grande acmulo
de compostos fenlicos. Feixes vasculares colaterais
em grupos de dois ou trs, usualmente mais calibrosos
do que os feixes individuais de pequeno calibre; feixes
envoltos por uma bainha esclerenquimtica com duas a
cinco camadas celulares de espessura; o esclernquima
composto por clulas volumosas vacuoladas, de paredes
lignifcadas e pouco espessadas; o mesocarpo interno
possui clulas achatadas, contendo compostos fenlicos.
O endocarpo diferenciado em um estrato densamente
piloso, cuja base das clulas possui arranjo compacto e
poro locular projetada para o espao locular; as clulas
possuem paredes delgadas e pcticas, com citoplasma
denso, com aspecto secretor. Em seco transversal
possvel distinguir trs regies placentrias, com placenta
profusamente ramifcada, onde em suas terminaes se
inserem as sementes. As sementes, de colorao negra ou
castanho-escura, antropas e ligeiramente platisprmicas,
apresentam regio calazal alargada e regio micropilar
cnica com pice obtuso; possuem testa esclerenquimtica,
sendo classifcadas como testais; a testa seminal
composta por uma nica camada de braquiscleredes de
paredes muito espessas, lignifcadas, cujo lume pouco
discernvel; as paredes celulares apresentam linea lucida.
O tegumento interno ou tgmen comprimido e a estrutura
de suas clulas pouco discernvel. O endosperma possui
clulas volumosas com reservas; embries diferenciados
no so observados.
caractersticas: fragmentos com apresentao na forma
de grumos, pela prpria natureza do fruto, levando a uma
difculdade maior na observao de elementos dissociados;
grumos compostos por fragmentos amalgamados de
diferentes tecidos; elementos como cristais e esclereides,
referidos na descrio microscpica no so facilmente
visualizados; so observados apenas os cristais prismticos,
embora no seja possvel determinar, com clareza, a
natureza do tecido que os abriga; fragmentos com clulas
do exocarpo apresentam evidentes paredes espessadas;
fbras podem ser facilmente reconhecidas em grupos
de dois ou trs elementos e frequentemente aparecem
apartadas de outros tecidos; elementos de vaso do xilema
so reconhecidos facilmente graas s caractersticas
de suas clulas; reforos de lignina e pontoaes das
paredes destacam-se mesmo nos grumos mais densos,
onde as clulas que compem o tecido mantm-se juntas,
proporcionando a visualizao da estrutura do tecido. O
elemento que se destaca so as sementes, que permanecem
praticamente intactas em sua estrutura.
IDENTIFICAO
254
,
com espessura de 250 m, como suporte, e mistura de
cloreto de metileno e acetona (95:5), como fase mvel.
mL de Soluo (1) e 10 mL de Soluo (2).
Soluo (1): utilizar o extrato hidroalcolico obtido em
Doseamento.
Soluo (2): dissolver 1 mg de vanilina em 10 mL de etanol.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa e secar.
Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). A mancha de
fuorescncia azul-violeta obtida com a Soluo (1), com
Rf de aproximadamente 0,5, corresponde em posio
quela obtida com a Soluo (2), referente vanilina.
B. Colocar sobre vidro de relgio algumas sementes do
fruto, adicionar uma gota de foroglucina SR e uma gota
de cido clordrico. A soluo adquire, imediatamente,
colorao vermelha.
a b
675
ENSAIOS DE PUREZA
DOSEAMENTO
Substncias extraveis
Determinar o teor de substncias extraveis atravs do
clculo do rendimento do extrato hidroalcolico. Pesar,
exatamente, cerca de 2 g de baunilha, previamente
cortada em pequenos fragmentos ou triturada a p grosso.
Transferir o p para um erlenmeyer, de tampa esmerilhada,
e adicionar 70 mL de etanol diludo (soluo preparada
com 263 mL de etanol em 250 mL de gua destilada),
tampar bem o recipiente e agitar por 2 horas em agitador
mecnico, ou deixar em contato, durante uma noite, e
agitar, frequentemente, por mais 8 horas. Decantar a
camada lquida e fltrar, recolhendo o fltrado em um
balo volumtrico de 100 mL. Lavar o frasco e o resduo
quatro vezes sucessivas, com pores de 8 mL da soluo
de etanol diludo. Filtrar os lquidos de lavagem, atravs
do mesmo fltro, e juntar ao fltrado obtido anteriormente.
Com quantidade sufciente de etanol diludo, completar
o volume para 100 mL, homogenizar e evaporar 50 mL,
exatamente medidos, em uma cpsula de porcelana tarada,
em banho-maria. Dessecar o resduo em estufa a 105 C
por 4 horas. Resfriar a cpsula em dessecador e pesar. O
peso do resduo representa o extrato hidroalcolico seco
de 1 g da droga.
Em recipientes bem fechados e em lugar fresco e ao abrigo
da luz.
b
figura 1 Aspectos microscpicos de Vanilla planifolia Andrews
_________________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em: A a 20 mm; em B a 5 mm; em C a 100 m; em D a 160 m; em E a 74 m; em
f a 9 m; em G a 37 m.
A representao esquemtica da cpsula, em vista lateral. B representao da histologia do pericarpo e sementes, em seco transversal: endocarpo
(ed); endosperma (e); exocarpo (ep); idioblastos cristalferos com rfdes (ic); feixe vascular (fv); mesocarpo (m); tecido placentrio (pl); tegumento da
semente(t). C representao esquemtica da cpsula em seco transversal: pericarpo (f); semente (se). D semente em vista lateral. E fragmento
de elementos de vaso do xilema. f fragmento de grupo de fbras da bainha vascular. G cristais de oxalato de clcio.
a b
677
BELADONA
Belladonnae folium
Atropa belladonna L. - SOLANACEAE
A droga constituda pelas folhas secas e deve apresentar
no mnimo 0,3% de alcaloides totais, expressos em
hiosciamina com referncia ao material seco a temperatura
entre 100 C e 105 C. Entre esses alcaloides, a hiosciamina,
nitidamente preponderante, acompanhada de pequenas
quantidades de escopolamina.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga apresenta sabor
amargo e desagradvel e odor fracamente nauseoso,
lembrando o do fumo.
DESCRIO MACROSCPICA
As folhas so elpticas, oval-lanceoladas a largamente
ovaladas, inteiras, de pice acuminado, base atenuada,
simtrica e algo decurrente, e bordo inteiro. Medem 5,0
cm a 25,0 cm de comprimento e 3,0 cm a 12,0 cm de
largura, com pecolos de 0,5 cm a 4,0 cm de comprimento.
A colorao varia do verde a castanho esverdeado, sendo
mais escura na face adaxial. As folhas secas so enrugadas,
friveis e delgadas. As folhas jovens so pubescentes,
porm as mais idosas apresentam-se apenas ligeiramente
pubescentes ao longo das nervuras e do pecolo. A nervao
do tipo peninrvea, sendo que as nervuras secundrias
partem da nervura principal em um ngulo de cerca de
60 e se anastomosam prximo ao bordo. A superfcie da
lmina seca e spera ao tato, devido presena de clulas
com contedo microcristalino de oxalato de clcio no
mesoflo. Estas clulas aparecem como minsculos pontos
brilhantes quando a superfcie iluminada; as outras
clulas contraem-se mais durante a dessecao. O exame
lupa revela os mesmos pontos escuros por transparncia e
brilhantes por refexo.
DESCRIO MICROSCPICA
A lmina foliar anfestomtica e de simetria dorsiventral.
A epiderme, em vista frontal, mostra clulas fundamentais
de paredes anticlinais sinuosas e com cutcula fnamente
estriada; sobre a regio da nervura principal, as clulas so
alongadas e de paredes fnas. Tricomas tectores e glandulares
so numerosos por toda a lmina. Os tricomas tectores tm
de duas a cinco clulas, so unisseriados e cnicos, de
paredes lisas e delgadas; os tricomas glandulares possuem
pedicelo pluricelular, composto por duas a quatro clulas,
com clula terminal claviforme, ou possuem pedicelo
pluricelular e cabea pluricelular, formada por quatro a sete
clulas, de aspecto ovide a piriforme. Os estmatos, do
tipo anisoctico, so mais frequentes na epiderme abaxial.
Em seco transversal, a epiderme uniestratifcada e a
cutcula delgada. O mesoflo composto por parnquima
palidico uniestratifcado e parnquima esponjoso
com grandes idioblastos contendo cristais prismticos
de oxalato de clcio e areia microcristalina. A nervura
principal proeminente em ambas as faces e apresenta
feixes vasculares bicolaterais em arco aberto, sendo o
foema intra-axilar descontnuo. Colnquima angular
ocorre abaixo da epiderme, em ambas as faces da nervura
principal.
caractersticas: colorao verde escura; fragmentos da
lmina, em vista frontal, com clulas epidrmicas de paredes
anticlinais sinuosas e cutcula com estrias; fragmentos do
mesoflo, em seco transversal, mostrando epiderme com
poucos estmatos e parnquima palidico uniestratifcado;
fragmentos da epiderme voltada para a face abaxial, em
vista frontal, mostrando estmatos anisocticos e raros
tricomas tectores e glandulares; fragmentos da epiderme
sobre as nervuras, em vista frontal, mostrando clulas
alongadas e de paredes fnas; fragmentos do parnquima,
em seco transversal, contendo idioblastos cristalferos;
cristais prismticos isolados como os descritos; tricomas
glandulares, como os descritos, isolados, fragmentados ou
com restos da epiderme; tricomas tectores isolados ou seus
fragmentos.
IDENTIFICAO
A. Agitar 3 g de droga pulverizada com 30 mL de cido
sulfrico 0,05 M durante 2 minutos e fltrar. Alcalinizar
o fltrado com 3 mL de hidrxido de amnio e adicionar
atravs do fltro 15 mL de gua. Transferir a soluo
alcalina para funil de separao e extrair sucessivamente
com trs alquotas de 15 mL de clorofrmio. Reunir as
fases clorofrmicas e adicionar sulfato de sdio anidro.
Filtrar e dividir o fltrado em duas cpsulas de porcelana,
procedendo evaporao do solvente. Em uma das
cpsulas de porcelana, adicionar 0,5 mL de cido ntrico
fumegante e evaporar secura em banho-maria. Adicionar
ao resduo 2 mL de acetona e gotejar uma soluo de
hidrxido de potssio a 10% (p/v) em etanol, desenvolve-
se uma colorao violeta intensa. Utilizar a outra cpsula
para a execuo do teste B. de Identifcao.
254
, com
espessura de 250 m, como suporte, e mistura de tolueno,
acetato de etila e dietilamina (7:2:1) como fase mvel.
Aplicar, separadamente, placa, em forma de banda, 20 L
das solues recentemente preparadas, descritas a seguir.
Soluo (1): na cpsula reservada para esse fm, descrita
no teste A. de Identifcao, dissolver o resduo em 0,25
mL de metanol.
Soluo (2): dissolver 24 mg de sulfato de atropina em 9
mL de metanol e 7,5 mg de bromidrato de escopolamina
em 10 mL de metanol. Misturar 9 mL da soluo de
sulfato de atropina e 1 mL da soluo de bromidrato de
escopolamina.
b
Desenvolver o cromatograma. Secar a placa a temperatura
entre 100 C e 105 C durante 15 minutos. Deixar esfriar
e nebulizar sucessivamente com iodeto de potssio e
subnitrato de bismuto SR e soluo etanlica de cido
sulfrico a 5% (p/v) (ou soluo aquosa de nitrito de sdio
a 5% (p/v)) at o aparecimento de manchas vermelhas ou
vermelho alaranjadas sobre fundo amarelo cinzento. A
Soluo (2) apresenta, quando examinada sob luz visvel,
manchas com Rf variando de 0,3 a 0,45, correspondentes
hiosciamina/atropina e manchas com Rf variando de
0,55 a 0,65 correspondentes escopolamina. As manchas
da Soluo (1) devem ser semelhantes quanto posio e
colorao quelas obtidas para a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 3,0% de caules
da espcie com um dimetro superior a 5 mm. No deve
conter fragmentos de folhas com rfdes no mesoflo
(Phytolacca americana L.), nem apresentar camadas de
clulas com maclas de oxalato de clcio ao longo das
nervuras (Ailanthus altissima Swingle).
Cinzas insolveis (5.4.2.5). No mximo 4,0%.
DOSEAMENTO
Alcaloides totais
Pesar cerca de 10 g da amostra pulverizada (180 m) e
umedecer com 5 mL de hidrxido de amnio. Adicionar
10 mL de etanol e 30 mL de ter etlico isento de perxido,
misturados cuidadosamente. Transferir a mistura para um
percolador, se necessrio, com auxlio da soluo extratora.
Macerar durante quatro horas e percolar a mistura com
mistura de clorofrmio e ter etlico isento de perxidos
(1:3) at extrao completa dos alcaloides. Evaporar
secura 1 mL do percolado e dissolver o resduo em cido
sulfrico 0,25 M e verifcar a ausncia de alcaloides com
iodeto de potssio mercrio SR. Reduzir o volume do
percolado at 50 mL e transferir para um funil de separao
com auxlio de ter etlico isento de perxidos. Ao lquido
obtido, adicionar ter etlico isento de perxidos, 2,5 vezes
o volume do percolador at a obteno de um lquido
de densidade inferior a da gua. Extrair a soluo, no
mnimo trs vezes, utilizando 20 mL de soluo de cido
sulfrico 0,25 M em cada uma das vezes. Separar as fases,
por centrifugao, se necessrio, e transferir a fase cida
para outro funil de separao. Alcalinizar a fase cida com
hidrxido de amnio at pH entre 8,0 e 9,0 e extrair trs
vezes com clorofrmio, com alquotas de 30 mL. Juntar as
fases clorofrmicas e retirar a gua residual, adicionando 4
g de sulfato de sdio anidro, deixando em repouso por 30
minutos, com agitao ocasional. Retirar a fase clorofrmica
e lavar o sulfato de sdio restante com trs alquotas de
10 mL de clorofrmio. Reunir os extratos clorofrmicos
e evaporar secura em banho-maria. Aquecer o resduo
em estufa a temperatura entre 100 C e 105 C durante
15 minutos. Dissolver o resduo em 5 mL de clorofrmio,
adicionar 20 mL de soluo de cido sulfrico 0,01 M SV
e remover o clorofrmio por evaporao em banho-maria.
Titular o excesso de cido com soluo de hidrxido de
sdio 0,02 M SV utilizando vermelho de metila como
indicador. Calcular a percentagem de alcaloides totais,
expressos em hiosciamina, segundo a expresso:
em que
d = perda por dessecao, em %;
n = volume da soluo de hidrxido de sdio 0,02 M
utilizado (mL);
m = massa da droga (g).
a b
679
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Atropa belladonna L.
______________
A Representao esquemtica da folha: lmina foliar (lf); pecolo (pl). B detalhe de poro da epiderme voltada para a face adaxial em vista frontal:
tricoma glandular (tg); tricoma tector (tt); estmato (es). C detalhe da poro do mesoflo, em seco transversal: tricoma glandular (tg); cutcula (cu);
epiderme (ep); parnquima palidico (pp); idioblasto contendo microcristais de oxalato de clcio (ic); feixe vascular (fv); parnquima esponjoso (pj);
epiderme (ep); tricoma tector (tt); estmato (es). D detalhe de poro da epiderme voltada para a face abaxial, em vista frontal: tricoma glandular (tg);
estmato (es); tricoma tector (tt).
b
figura 2 Aspectos da microscopia do p em Atropa belladonna L.
______________
A e C fragmentos da epiderme voltada para a face adaxial, em vista frontal, mostrando idioblastos cristalferos por transparncia: idioblasto cristalfero
(ic); parnquima palidico (pp); feixe vascular (fv). B fragmento da epiderme voltada para a face abaxial, em vista frontal, mostrando idioblastos
cristalferos por transparncia: idioblasto cristalfero (ic); estmato (es). D fragmento da lmina foliar, em seco transversal: cutcula (cu); epiderme
(ep); parnquima palidico (pp); idioblasto cristalfero (ic); parnquima esponjoso (pj). E tricomas ou suas partes, isolados: tricoma glandular (tg);
tricoma tector (tt).
BENJOIM
Benzoe sumatranus
Styrax benzoin Dryander ou Styrax paralleloneuron
Perkins - STYRACACEAE
O benjoim uma resina balsmica, obtida por incises
no tronco de Styrax benzoin Dryander ou Styrax
paralleloneuron Perkins. Contm, no mnimo, 25% e no
mximo, 50% de cidos totais, calculados como cido
benzoico (C
7
H
6
O
2
).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Apresenta-se sob forma
de fragmentos arredondados ou ovides, irregulares, de cor
creme-esbranquiada, que podem estar revestidas de um
material resinoso de cor castanho-acinzentada ou castanho-
avermelhada. So duras e quebradias, sendo a superfcie
de fratura rugosa e irregular. Odor suave e balsmico e
sabor a princpio adocicado, passando a levemente picante
e acre.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, pouco
solvel em etanol, dissulfeto de carbono e xileno.
IDENTIFICAO
A. Aquecer lentamente 0,5 g da amostra em tubo de ensaio
seco. O material funde e emite fumaas brancas, acres e
irritantes que se condensam, na parte superior do tubo, em
lminas e pequenos cristais.
a b
681
B. Aquecer levemente 1 g da amostra moda com 10 mL
de permanganato de potssio a 3% (p/v). Um forte odor de
aldedo benzoico produzido.
C. Adicionar 0,2 g da amostra fnamente pulverizada a 10
mL de etanol. Agitar energicamente at a dissoluo quase
completa. Filtrar. Num tubo de ensaio colocar 5 mL do
fltrado e 0,5 mL de soluo de cloreto frrico a 5% (p/v)
em etanol, agitar. No desenvolve colorao verde.
D. Em 0,5 g da amostra moda e adicionar 5 mL de etanol;
colocar em ultrassom por 2 minutos. Filtrar. Adicionar ao
fltrado 10 mL de gua. Verifca-se formao de mistura
turva, com aspecto leitoso. Apresenta reao cida ao papel
de tornassol.
E. Proceder conforme descrito em Cromatografa em
254
, com
espessura de 250 m, como fase estacionria e mistura de
cido actico glacial, ter isoproplico e hexano (10:40:60)
como fase mvel. Aplicar, separadamente, em forma de
banda, 10 uL das solues, recentemente preparadas,
descritas a seguir.
Soluo (1): tomar 0,2 g da amostra, fnamente pulverizada,
adicionar 5 mL de etanol e colocar em banho de ultrassom
durante 2 minutos. Centrifugar e utilizar a soluo
sobrenadante.
Soluo (2): dissolver 20 mg de cido benzoico, 10 mg de
cido cinmico, 4 mg de vanilina e 20 mg de cinamato de
metila em 10 mL de etanol.
correspondem em posio, cor e intensidade quela obtida
com a Soluo (2). O cromatograma obtido com a Soluo
(1), quando examinado sob luz ultravioleta (254 nm),
apresenta, em seu tero superior, manchas de extino
de fuorescncia nas mesmas posies correspondentes
ao cinamato de metila (mancha escura intensa), cido
benzoico (mancha escura), cido cinmico (mancha escura
intensa) e uma mancha de intensidade muito fraca no meio
da placa referente vanilina.
ENSAIOS DE PUREZA
Goma Dammar. Proceder conforme descrito em
xido de alumnio G, com espessura de 250 m, como
suporte e mistura de ter de petrleo e ter etlico (40:60)
como fase mvel. Aplicar, separadamente, em forma de
banda, 5 uL da soluo, recentemente preparada, descrita
a seguir.
Soluo (1): aquecer 0,2 g da amostra moda com 10 mL de
etanol a 90% (v/v). Centrifugar.
secar ao ar. Nebulizar com anisaldedo SR1. Aquecer
em estufa de 100 C a 105 C durante 5 minutos. O
cromatograma no deve apresentar nenhuma mancha
ntida com Rf entre 0,4 e 1,0.
Styrax tonkinensis. Proceder conforme descrito no teste
E. de Identifcao. A Soluo (1) apresenta 2 manchas
de fraca intensidade e no apresenta manchas intensas,
respectivamente na mesma posio das manchas escuras
correspondentes ao cido benzoico e vanilina no
Colofnia. Tomar 1 g da amostra com 10 mL de xileno,
colocar em ultrassom durante 1 minuto. Filtrar. Adicionar
ao fltrado 10 mL de a acetato de cobre 1% (p/v). Agitar
bem e deixar separar as fases. A camada de xileno no deve
apresentar colorao verde.
Limite de substncias insolveis em etanol. Pesar 2 g da
amostra pulverizada e adicionar 25 mL de etanol a 90%
(v/v). Aquecer ebulio at dissoluo quase completa.
Filtrar por fltro de vidro poroso, previamente tarado, lavar
trs vezes com 5 mL de etanol a 90% (v/v) quente. Aquecer
o funil de vidro e seu contedo em estufa de 100 C a 105
C durante 2 horas. Resfriar em dessecador e pesar. No
mximo 25,0%.
amostra grosseiramente pulverizada, a presso reduzida,
durante 4 horas.
DOSEAMENTO
Em balo de boca esmerilhada de 250 mL, introduzir 0,75
g da amostra fnamente pulverizada e 15 mL de hidrxido
de potssio etanlico 0,5 M SV. Aquecer sob refuxo, em
banho-maria, durante 30 minutos. Deixar esfriar, lavar o
condensador com 20 mL de etanol. Titular o excesso de
hidrxido de potssio com cido clordrico 0,5 M SV.
Determinar o ponto fnal potenciometricamente. Realizar
ensaio em branco e fazer as correes necessrias. Cada
mL de hidrxido de potssio etanlico 0,5 M SV equivale
a 61,050 mg de cido benzoico (C
7
H
6
O
2
).
Em recipiente bem fechado, protegido da luz e do calor.
BENZNIDAZOL
Benznidazolum
N
N
O
2
N
N
O
H
C
12
H
12
N
4
O
3
; 260,25
benznidazol; 01153
2-Nitro-N-(fenilmetil)-1H-imidazol-1-acetamida
[22994-85-0]
b
C
12
H
12
N
4
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, levemente
amarelado, inodoro, inspido e estvel ao ar.
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, muito
solvel em dimetilsulfxido, facilmente solvel em
dimetilformamida, solvel em hexano, ligeiramente
solvel em etanol, metanol, acetato de etila e cloreto de
metileno, pouco solvel em acetona, muito pouco solvel
em clorofrmio, lcool isoproplico, glicerol e praticamente
insolvel em ter de petrleo. Muito pouco solvel em
hidrxido de sdio 0,1 M e cido clordrico 0,1 M.
Faixa de fuso (5.2.2): 188 C a 190 C.
IDENTIFICAO
benznidazol SQR, preparado de maneira idntica.
faixa de 200 nm a 400 nm, de soluo amostra obtida
em Doseamento, exibe mximo de absoro em 316 nm,
idntico ao observado no espectro da soluo padro. A
absorvncia em 316 nm de, aproximadamente, 0,352.
254
,
como suporte, e mistura de acetato de etila e metanol
(85:15) como fase mvel. Saturar a cuba previamente com
a fase mvel. Aplicar, separadamente, placa 5 mL de
a seguir.
Soluo (2): soluo a 10 mg/mL de benznidazol SQR em
metanol.
Nebulizar com soluo extempornea de cloreto de estanho
SR, deixar secar e colocar em recipiente com gases nitrosos,
por 10 minutos. Eliminar o excesso de gases nitrosos com
corrente de ar frio e nebulizar com dicloridrato de N-(1-
naftil)etilenodiamina SR. A mancha principal obtida com
D. Dissolver cerca de 30 mg de amostra em 3 mL de metanol
em tubo de ensaio, aquecendo ligeiramente. Adicionar 1
mL de cloridrato de hidroxilamina 2 M em gua. Aquecer,
ligeiramente, em banho-maria ajustado para temperatura
entre 70 C e 90 C, durante cerca de 1 minuto. Resfriar e
adicionar 1 mL de cido clordrico 0,1 M e 1 mL de cloreto
frrico a 5% (p/v). Produz-se colorao castanho-violeta.
ENSAIOS DE PUREZA
Cloretos. Dissolver 30 mg da amostra em 3 mL de metanol
em tubo de ensaio e adicionar 5 mL de cido ntrico a 12%
(v/v) e 5 mL de nitrato de prata SR. No ocorre turvao.
Perda por dessecao (5.2.9). Determinar em estufa a 105
C, por 2 horas. No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Transferir, exatamente,
cerca de 0,12 g da amostra, para balo volumtrico de 200
mL e adicionar 150 mL de metanol. Agitar, mecanicamente,
at completa solubilizao. Completar o volume com o
mesmo solvente e homogeneizar. Diluir, sucessivamente,
em cido clordrico 0,1 M, at concentrao de 0,0012%
(p/v). Preparar soluo padro na mesma concentrao
e utilizando os mesmos solventes. Determinar as
absorvncias das solues em 316 nm, utilizando cido
clordrico 0,1 M para ajuste do zero. Calcular o teor de
C
12
H
12
N
4
O
3
na amostra a partir das leituras obtidas.
Em recipientes hermeticamente fechados e ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antichagsico.
BENZOATO DE ESTRADIOL
Estradioli benzoas
O
H
H
H
CH
3
OH
O
C
25
H
28
O
3
; 376,49
benzoato de estradiol; 03597
3-Benzoato de (17)-estra-1,3,5(10)-trieno-3,17-diol
[50-50-0]
a b
683
C
25
H
28
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco ou branco-
amarelado, inodoro e estvel ao ar.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua,
ligeiramente solvel na acetona, pouco solvel em etanol
e leos vegetais.
Faixa de fuso (5.2.2): 191 C a 196 C
substncia dessecada. Determinar em soluo a 1,0%
(p/v) em dioxana.
IDENTIFICAO
benzoato de estradiol SQR, preparado de maneira idntica.
posio, colorao, fuorescncia e dimenso quela obtida
com a Soluo (3).
C. Dissolver 2 mg em 2 mL de cido sulfrico. A soluo
apresenta-se amarelo-esverdeada e com fuorescncia azul.
Adicionar 2 mL de gua destilada, a colorao passa para
alaranjada.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de tolueno e etanol
descritas a seguir.
Soluo (1): dissolver 0,2 g da amostra numa mistura de
metanol e clorofrmio (1:9) e completar o volume para 10
mL com a mesma mistura.
Soluo (2): diluir 2,5 mL da Soluo (1) e completar o
volume para 50 mL com mistura de metanol e clorofrmio
(1:9).
Soluo (3): dissolver 25 mg de benzoato de estradiol SQR
numa mistura de metanol e clorofrmio (1:9) e completar
o volume para 25 mL com a mesma mistura.
Soluo (4): diluir 2 mL da Soluo (3) e completar o
volume para 10 mL com mistura de metanol e clorofrmio
(1:9).
secar ao ar. Aquecer a 110 C durante 10 minutos. Nebulizar
a placa quente com soluo etanlica de cido sulfrico.
Aquecer novamente a 110 C durante 10 minutos. Examinar
sob luz ultravioleta (365 nm). Qualquer mancha secundria
com a Soluo (4) (1,0%).
amostra. Dessecar em estufa a 105 C durante 3 horas. No
mximo 0,5%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 0,5 g da
DOSEAMENTO
de 25 mg da amostra e dissolver em etanol. Diluir para 250
mL com o mesmo solvente. Transferir 10 mL da soluo
para balo volumtrico de 100 mL, diluir e completar
o volume com etanol. Medir a absorvncia da soluo
resultante em 231 nm, utilizando etanol para ajuste do
25
H
28
O
3
na amostra considerando
A (1%, 1 cm) = 500, em 231 nm, em etanol.
Em recipientes bem fechados e protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Estrognio.
BENZOILMETRONIDAZOL
Metronidazoli benzoas
N
N
O
2
N
CH
3
O
O
C
13
H
13
N
3
O
4
; 275,26
benzoilmetronidazol; 01166
1-Benzoato de 2-metil-5-nitro-1H-imidazol-1-etanol
[13182-89-3]
C
13
H
13
N
3
O
4
b
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino ou focos, branco a
branco-amarelado.
solvel em clorofrmio, solvel em acetona, pouco solvel
em etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 99 C a 102 C.
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao C. e D. podem ser omitidos se
forem realizados os testes A. e B. O teste de identifcao
A. pode ser omitido se forem realizados os testes B., C. e D.
observados no espectro de benzoilmetronidazol SQR,
clordrico 1 M, exibe mximos de absoro em 232 nm e em
275 nm, idnticos aos observados no espectro de soluo
similar de benzoilmetronidazol SQR. A absorvncia em
232 nm est compreendida entre 0,525 e 0,575.
C. A mancha principal do cromatograma da Soluo (2),
D. A 20 mg da amostra, adicionar 20 mg de zinco em p, 2
mL de gua e 1 mL de cido clordrico. Aquecer em banho-
maria por 5 minutos e resfriar a 0 C. A soluo resultante
responde reao de amina aromtica primria (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez. Dissolver 2 g da amostra em 40 mL de mistura de
dimetilformamida e gua (1:1), previamente neutralizada
com cido clordrico 0,02 M ou hidrxido de sdio 0,02
M utilizando 0,2 mL de vermelho de metila SI como
indicador. No mais que 0,25 mL de hidrxido de sdio
0,02 M SV necessrio para mudar a cor do indicador.
slica-gel GF
254
, como suporte, e acetato de etila, como fase
Soluo (1): soluo da amostra a 20 mg/mL em acetona.
Soluo (2): diluir quantitativamente a Soluo (1)
em acetona, de modo a obter soluo a 0,1 mg/mL de
benzoilmetronidazol.
Soluo (3): soluo de benzoilmetronidazol SQR a 0,1
mg/mL em acetona.
acetona.
Soluo (5): soluo contendo metronidazol SQR a 0,2
mg/mL e de 2-metil-5-nitroimidazol SQR (Impureza A) a
0,2 mg/mL em acetona.
a soluo (1), diferente da mancha principal, no mais
intensa que aquela obtida com a Soluo (3) (0,5%), e no
mais do que trs manchas secundrias so mais intensas que
aquela obtida com a Soluo (4) (0,2%). O teste somente
ser vlido se o cromatograma obtido com a Soluo (5)
apresentar duas manchas principais nitidamente separadas.
mximo 0,002% (20 ppm).
amostra, em estufa a 80 C, por 3 horas. No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
de anidrido actico. Titular com cido perclrico 0,1 M
SV, determinando o ponto fnal potenciometricamente ou
utilizando cloreto de metilrosalnio SI (cristal violeta) at
mudana de cor para verde-azulado. Cada mL de cido
13
H
13
N
3
O
4
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiprotozorio, antibacteriano.
BENZOILMETRONIDAZOL SUSPENSO
ORAL
quantidade de C
13
H
13
N
3
O
4
.
IDENTIFICAO
O teste A. pode ser omitido se forem realizados os testes B.
e C. O teste de identifcao B. pode ser omitido se forem
realizados os testes A. e C.
a b
685
de 250 nm a 400 nm, da soluo amostra obtida no mtodo
A. de Doseamento, exibe mximo de absoro em 308 nm,
idntico ao observado no espectro da soluo padro.
C. A um volume da suspenso oral equivalente a 20 mg
de benzoilmetronidazol, adicionar 20 mg de zinco em p,
1 mL de gua e 1 mL de cido clordrico. Aquecer em
banho-maria durante 5 minutos. Resfriar a 0 C. A soluo
resultante responde reao de amina aromtica primria
(5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,5 a 6,5. Determinar na suspenso oral
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Transferir volume da
suspenso oral equivalente a 0,4 g de benzoilmetronidazol
dimetilformamida e 60 mL de etanol. Deixar em ultrassom
por 15 minutos, agitar mecanicamente por 15 minutos,
completar o volume com etanol, homogeneizar e fltrar.
Diluir, sucessivamente, em etanol, at concentrao
de 0,002% (p/v). Preparar soluo padro na mesma
concentrao, utilizando os mesmos solventes. Medir
as absorvncias das solues resultantes em 308 nm,
utilizando etanol para ajuste do zero. Calcular a quantidade
de C
13
H
13
N
3
O
4
na suspenso oral a partir das leituras
obtidas.
de 1 mL/minuto.
Soluo amostra: transferir volume da suspenso oral
equivalente a 0,2 g de benzoilmetronidazol para balo
volumtrico de 50 mL, adicionar 35 mL de metanol e
deixar em ultrassom por 15 minutos. Esfriar temperatura
ambiente, completar o volume com o mesmo solvente,
homogeneizar e fltrar. Transferir 5 mL do fltrado para
Fase mvel, obtendo soluo a 0,2 mg/mL.
Soluo padro: transferir 50 mg de benzoilmetronidazol
SQR para balo volumtrico de 25 mL, adicionar 20 mL de
metanol e deixar em ultrassom por 15 minutos. Resfriar
temperatura ambiente, completar o volume com o mesmo
solvente e homogeneizar. Transferir 5 mL para balo
mvel, obtendo soluo a 0,2 mg/mL.
no maior que 2,0%.
C
13
H
13
N
3
O
4
na suspenso oral a partir das respostas obtidas
para a Soluo padro e Soluo amostra.
ROTULAGEM
BICARBONATO DE POTSSIO
Kalli hydrogenocarbonas
KHCO
3
; 100,12
bicarbonato de potssio; 01248
Sal de potssio do cido carbnico (1:1)
[298-14-6]
KHCO
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, cristalino, ou cristais
incolores. Quando aquecido, substncia seca ou em soluo,
converte-se gradualmente em carbonato de potssio.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua e praticamente
insolvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. A 5 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo,
adicionar 0,1 mL de fenolftalena SI. A soluo adquire
colorao rosa-plido. Aquecer. O gs evapora, e a
colorao torna-se vermelha.
B. Responde s reaes do on carbonato (5.3.1.1).
b
C. Responde s reaes do on bicarbonato (5.3.1.1).
D. A soluo obtida em Aspecto da soluo responde s
reaes do on potssio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 5 g da amostra em gua
isenta de dixido de carbono e completar o volume para
100 mL com o mesmo solvente. A soluo obtida lmpida
(5.2.25) e incolor (5.2.12).
pH (5.2.19). No mximo 8,6. Determinar na soluo obtida
em Aspecto da soluo.
Sdio. Proceder conforme descrito em Espectrometria
de absoro atmica com chama (5.2.13.1.1), Mtodo I.
Utilizar espectrmetro provido de chama alimentada com
mistura de ar e acetileno, com fonte emissora de luz a 589,6
nm. Preparar as solues como descrito a seguir.
Soluo (1): dissolver 1 g da amostra em gua e completar
para 100 mL com o mesmo solvente.
Soluo (2): preparar soluo a 0,1% (p/v), em gua,
utilizando cloreto de sdio grau analtico. Preparar as
solues da curva analtica por diluio sequencial em
gua.
Adicionar Soluo (1) e Soluo (2) quantidade
equivalente a 0,5% (v/v) de uma soluo de cloreto de
csio a 1% (p/v). No mximo 0,5% de sdio (5000 ppm).
Amnia (5.3.2.6). Utilizar 10 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo. No mximo 0,002% (20 ppm).
Clcio (5.3.2.7). Utilizar 10 mL da soluo obtida em
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em 2,4 g da amostra. No
mximo 0,015% (150 ppm).
ferro (5.3.2.4). Determinar em 10 g da amostra. No
mximo 0,002% (20 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Dissolver
2 g da amostra em 25 mL de gua e prosseguir conforme
descrito em Ensaio limite para metais pesados, no
havendo a necessidade de ajustar o pH. No mximo
0,001% (10 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Determinar em 8 g da amostra. No
mximo 0,015% (150 ppm).
amostra, em slica-gel, por 4 horas. No mximo 0,3%.
DOSEAMENTO
Dissolver 0,8 g da amostra em 50 mL de gua isenta de
dixido de carbono. Adicionar 0,1 mL de alaranjado
de metila SI. Titular com cido clordrico M SV at a
colorao amarela comear a mudar para rosa-amarelado.
Aquecer cuidadosamente e ferver por 2 minutos. A soluo
torna-se amarela. Resfriar e titular at obter colorao rosa-
amarelado. Cada mL de cido clordrico M SV equivale a
100,100 mg de KHCO
3
.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Adjuvante farmacotcnico.
BICARBONATO DE SDIO
Natrii hydrogenocarbonas
NaHCO
3
; 84,01
bicarbonato de sdio; 01249
Sal de sdio do cido carbnico (1:1)
[144-55-8]
NaHCO
3
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, cristalino, inodoro.
Quando aquecido, seco ou em soluo, converte-se,
gradativamente, em carbonato de sdio.
etanol.
IDENTIFICAO
A. Preparar soluo de bicarbonato de sdio a 5% (p/v)
em gua isenta de dixido de carbono. A 5 mL desta
soluo, adicionar 0,1 mL de soluo de fenolftalena SI.
Desenvolve-se colorao rsea. Sob aquecimento, ocorre
liberao de gs e a colorao da soluo muda para
vermelho.
B. Responde s reaes dos ons carbonato e bicarbonato
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 5% (p/v) em gua isenta
de dixido de carbono lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
Amnia (5.3.2.6). Diluir 10 mL da soluo descrita em
Aspecto da soluo para 15 mL com gua. Prosseguir
conforme descrito em Ensaio limite para amnia. No
mximo 0,002% (20 ppm).
Arsnio (5.3.2.5). A 0,5 g de amostra, adicionar cido
sulfrico 3,5 M at cessar a efervescncia. Prosseguir
a b
687
conforme descrito em Ensaio limite para arsnio. No
mximo 0,0002% (2 ppm).
Carbonatos. O pH (5.2.19) da soluo descrita em Aspecto
da soluo, recm-preparada, no superior a 8,6.
Clcio (5.3.2.7). Neutralizar a suspenso de 1 g em 10
mL de gua com cido clordrico e diluir para 15 mL com
gua. Prosseguir conforme descrito em Ensaio limite para
clcio. No mximo 0,01% (100 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). A 7 mL da soluo descrita em Aspecto
da soluo, adicionar 2 mL de cido ntrico e diluir para
15 mL com gua. Prosseguir conforme descrito em Ensaio
limite para cloretos. No mximo 0,015% (150 ppm).
ferro (5.3.2.4). Dissolver 0,5 g da amostra em 5 mL de
cido clordrico. Prosseguir conforme descrito em Ensaio
limite para ferro. No mximo 0,002% (20 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo III. Dissolver
2 g da amostra na mistura de 2 mL de cido clordrico e
18 mL de gua. Utilizar 12 mL da soluo e prosseguir
conforme descrito em Ensaio limite para metais pesados.
Sulfatos (5.3.2.2). Suspender 1 g da amostra em 10 mL
de gua e adicionar cido clordrico at neutralidade.
Prosseguir conforme descrito em Ensaio limite para
sulfatos. No mximo 0,015% (150 ppm).
DOSEAMENTO
Dissolver 1,5 g da amostra em 50 mL de gua isenta
de dixido de carbono. Titular com cido clordrico M
SV, utilizando 0,2 mL de alaranjado de metila SI como
indicador. Cada mL de cido clordrico M SV corresponde
a 84,010 mg de NaHCO
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticido.
BISACODIL
Bisacodylum
H
N
O
C H
3
O
O
CH
3
O
C
22
H
19
NO
4
; 361,39
bisacodil; 01287
1,1-Diacetato de 4,4-(2-piridinilmetileno)bis-fenol
[603-50-9]
C
22
H
19
NO
4
DESCRIO
branco.
acetona, pouco solvel em etanol, muito pouco solvel em
ter etlico. Solvel em cidos minerais diludos.
Faixa de fuso (5.2.2): 131 C a 135 C.
IDENTIFICAO
amostra dessecada a 105 C, at peso constante, e dispersa
em brometo de potssio, apresenta mximos de absoro
espectro de bisacodil SQR, preparado de maneira idntica.
de 200 nm a 350 nm, da soluo da amostra a 0,001% (p/v)
em hidrxido de potssio metanlico 0,6% (p/v), exibe
mximo em 248 nm e um ombro em 290 nm. A absorvncia
em 248 nm de, aproximadamente, 0,632 a 0,672.
C. Nebulizar os cromatogramas obtidos em Substncias
relacionadas com a mistura de soluo de iodo 0,05
M e cido sulfrico M (50:50). A mancha principal do
cromatograma da Soluo (2), obtida em Substncias
relacionadas, corresponde em posio, cor e intensidade
quele obtida com a Soluo (3).
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Agitar 1,0 g da amostra com 20
mL de gua isenta de dixido de carbono. Aquecer at
fervura, resfriar e fltrar. No mximo 0,2 mL de hidrxido de
sdio 0,01 M gasto para neutralizar o fltrado, utilizando
b
vermelho de metila SI como indicador. No mximo 0,4
mL de cido clordrico 0,01 M gasto para neutralizar o
fltrado, utilizando o mesmo indicador.
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de xileno e
metil-etil-cetona (50:50), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, 10 mL de cada uma das solues
Soluo (1): dissolver 0,2 g da amostra em acetona e
Soluo (2): diluir 1,0 mL da Soluo (1) para 10 mL com
acetona.
Soluo (3): dissolver 20 mg de bisacodil SQR em acetona
acetona.
acetona.
secar ao ar, se necessrio aquecer a placa a 105 C.
Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). Qualquer mancha
secundria obtida com a Soluo (1), diferente da mancha
principal, no deve ser mais intensa que a mancha obtida
com a Soluo (4) (1,0%) e nenhuma outra mancha deve
ser mais intensa que a mancha obtida no cromatograma
com a Soluo (5) (0,5%).
No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.4.5). Dissolver 0,250 g da amostra em
70 mL de cido actico glacial, adicionar duas gotas de
1-naftolbenzena SI e titular com cido perclrico 0,1 M SV.
mg de C
22
H
19
NO
4.
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz e em
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Catrtico.
BISACODIL COMPRIMIDOS
22
H
19
NO
4
. Os comprimidos
devem ser revestidos.
IDENTIFICAO
A. O tempo de reteno do pico principal do cromatograma
B. Pesar e pulverizar os comprimidos. Extrair quantidade
do p equivalente a 50 mg de bisacodil com clorofrmio,
fltrar, evaporar o fltrado at a secura e dissolver o resduo
com 10 mL de soluo de cido sulfrico a 0,5% (v/v).
A 2 mL da soluo obtida, adicionar 50 L de iodeto de
potssio mercrio SR. Um precipitado branco formado.
C. A 2 mL da soluo obtida no teste B. de Identifcao,
adicionar cido sulfrico. Desenvolve-se colorao violeta.
D. Ferver 2 mL da soluo obtida no teste B. de Identifcao
com um pouco de cido ntrico. Desenvolve-se colorao
amarela. Resfriar e adicionar hidrxido de sdio 5 M.
Desenvolve-se colorao marrom-amarelada.
CARACTERSTICAS
Teste de desintegrao (5.1.4.1). Cumpre o teste. Realizar
a etapa cida em cido clordrico 0,1 M por 120 minutos.
A segunda etapa deve ser realizada com soluo de
bicarbonato de sdio a 1,5% (p/v) por 60 minutos.
Proceder conforme descrito em Doseamento. Preparar
soluo com concentrao fnal de 0,5 mg/mL.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
Soluo (1): agitar quantidade de p equivalente a 20 mg de
bisacodil com 2 mL de acetona por 10 minutos, centrifugar
e utilizar o sobrenadante lquido.
Soluo (2): diluir 3 volumes da Soluo (1) para 100
volumes com acetona.
a Soluo (1), diferente da mancha principal, que no seja
a b
689
referente aos excipientes, no mais intensa que aquela
obtida com a Soluo (2) (3%).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
com slica-gel quimicamente ligada a grupo octadecilsilano
(4,6 m), mantida temperatura ambiente; fuxo da Fase
mvel de 2,0 mL/minuto.
Tampo acetato de sdio 0,074 M: contm 10,06 g de
acetato de sdio tri-hidratado em gua para produzir 1000
mL. Ajustar o pH a 7,4 com cido actico a 2,5% (v/v)
Fase mvel: mistura de Tampo acetato de sdio 0,074 M
e acetonitrila (50:50).
Transferir quantidade de p equivalente a 50 mg de bisacodil
para balo volumtrico de 100 mL e adicionar 12 mL de
gua. Agitar mecanicamente por 15 minutos e submeter a
banho de ultrassom, temperatura ambiente, por 15 minutos.
Adicionar 50 mL de acetonitrila, agitar mecanicamente e
sonicar por perodos de 15 minutos. Completar o volume
com acetonitrila, homogeneizar e centrifugar por 15 minutos.
Filtrar o sobrenadante e utilizar o fltrado nas determinaes.
de bisacodil SQR em acetonitrila e diluir adequadamente
de modo a obter soluo a 0,5 mg/mL.
22
H
19
NO
4

Soluo padro e a Soluo amostra.
ROTULAGEM
BISACODIL SUPOSITRIOS
22
H
19
NO
4
.
IDENTIFICAO
A. Proceder conforme descrito em Substncias
relacionadas. Aplicar na placa cromatogrfca 2 L de
cada uma das solues e utilizar bisacodil SQR a 1% (p/v)
em acetona, como Soluo (2). A mancha principal do
cromatograma da Soluo (1) corresponde quela obtida
com a Soluo (2).
C. Dissolver quantidade de supositrios contendo o
equivalente a 0,15 g de bisacodil em 150 mL de ter de
petrleo. Filtrar, lavar o resduo com ter de petrleo at
o mesmo estar livre de material oleoso e secar a 100 C.
Dissolver o resduo em quantidade mnima de clorofrmio
levemente aquecido e solubilizar em 10 mL de cido
sulfrico a 0,5% (v/v). A 2 mL da soluo obtida, adicionar
50 L de iodeto de potssio mercrio SR. Um precipitado
branco formado.
D. A 2 mL da soluo obtida no teste C. de Identifcao,
adicionar cido sulfrico. Desenvolve-se colorao violeta.
E. Ferver 2 mL da soluo obtida no teste C. de Identifcao
com um pouco de cido ntrico. Desenvolve-se colorao
amarela. Resfriar e adicionar hidrxido de sdio 5 M.
Desenvolve-se colorao marrom-amarelada.
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
Soluo (1): agitar quantidade de supositrios contendo o
equivalente a 20 mg de bisacodil com 20 mL de ter de
petrleo e fltrar. Lavar o resduo com ter de petrleo at o
mesmo estar livre do material oleoso e dissolver em 2 mL
de acetona.
Soluo (2): diluir 3 volumes da Soluo (1) para 100
volumes com acetona.
intensa que aquela obtida com a Soluo (2) (3%).
b
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver quantidade de supositrios
contendo o equivalente a 0,1 g de bisacodil em 80 mL de
cido actico glacial previamente neutralizado com cido
perclrico 0,02 M SV, utilizando 1-naftolbenzena SI para
verifcar a neutralizao. Titular com cido perclrico 0,02
mg de C
22
H
19
NO
4.
B. Proceder conforme descrito em Doseamento da
monografa de Bisacodil comprimidos. Preparar a Soluo
amostra como descrito a seguir.
Soluo amostra: transferir quantidade de supositrios
contendo o equivalente a 0,1 g de bisacodil para funil de
separao de 500 mL e adicionar 150 mL de n-hexano.
Agitar mecanicamente at que os supositrios estejam
dissolvidos. Adicionar 50 mL de acetonitrila, agitar por
1 minuto e aguardar a separao das fases. Transferir a
fase inferior para balo volumtrico de 200 mL. Extrair
o contedo remanescente no funil de separao com
duas pores de 50 mL de acetonitrila, reunir as camadas
inferiores no balo volumtrico de 200 mL e completar o
volume com acetonitrila. Agitar e fltrar.
22
H
19
NO
4

ROTULAGEM
BOLDO
Boldus folium
Peumus boldus Molina MONIMIACEAE
A droga vegetal constituda de folhas secas contendo,
no mnimo, 1,5% de leo voltil e no mnimo 0,1% de
alcaloides totais expressos em boldina.
NOMES POPULARES
Boldo-do-chile.
CARACTERSTICAS
aromtico caracterstico, canforceo e levemente acre, que se
acentua com o esmagamento. Sabor amargo e um tanto acre.
DESCRIO MACROSCPICA
Folha simples, inteira, elptica, elptico ovalada, elptico
obovada ou obovada, de pice obtuso, retuso ou agudo e
base arredondada, obtusa ou cuneada, pice e base simtricos
ou assimtricos, margem ligeiramente revoluta, lmina
coricea, quebradia, verde acinzentada a cinzento prateada,
pontuaes levemente translcidas, correspondentes a
cavidades secretoras, visveis a olho nu ou com lente de
aumento de seis vezes, de 1,2 cm a 7,0 cm de comprimento
e 0,6 cm a 5,0 cm de largura; lmina pilosa, com tricomas
estrelados visveis com lente de aumento, comumente
caducos na face adaxial, sendo essa face spera ao tato
devido s proeminncias da base dos tricomas; venao
camptdroma-bronquidrdoma. Pecolo curto, piloso,
medindo de 0,1 cm a 0,5 cm de comprimento e de 0,1 cm
a 0,2 cm de largura, cncavo na face adaxial, com duas
pequenas costelas laterais, e convexo na face abaxial, com
maior densidade de tricomas nessa face.
DESCRIO MICROSCPICA
Lmina foliar de simetria dorsiventral, hipoestomtica, com
estmatos anomocticos. Em vista frontal, a cutcula lisa
e a epiderme voltada para a face adaxial, na regio entre as
nervuras, apresenta clulas poligonais de paredes anticlinais
espessas, pouco sinuosas e, na face abaxial, clulas de
diferentes formas, com paredes sinuosas, espessas; os
estmatos situam-se acima das demais clulas epidrmicas
e so acompanhados por quatro a oito clulas; na regio da
nervura principal, as clulas voltadas para a face adaxial
apresentam diferentes formas, so pouco alongadas, de
tamanho homogneo e de paredes retilneas, enquanto que
as voltadas para a face abaxial so mais alongadas e tem
diferentes tamanhos; entre as nervuras por transparncia, so
visveis clulas secretoras; os tricomas so estrelados, mais
frequentes na face adaxial e formados por diferentes nmeros
de longas clulas de paredes espessadas; em regra as clulas
epidrmicas tm disposio radial em torno da poro basal
do tricoma. Em seco transversal, a cutcula mais espessa
na face adaxial, a epiderme uniestratifcada, com clulas
alongadas e de paredes espessas; a hipoderme, tambm
apresenta paredes espessas, uniestratifcada, raramente
biestratifcada, ocorre em ambas as faces, exclusivamente
na regio da nervura principal na face abaxial; a epiderme
e a hipoderme, em geral, so proeminentes ao redor da base
de cada tricoma; o parnquima palidico uniestratifcado
ou biestratifcado, de clulas colunares mais alongadas,
enquanto que a segunda camada mais frouxa, com clulas
menores e com maior concentrao de gros de amido; o
parnquima esponjoso possui vrias camadas de clulas de
a b
691
diferentes formas e grandes espaos intercelulares; feixes
colaterais secundrios distribuem-se no mesoflo, envolvidos
por bainha completa ou no de fbras, ou por endoderme,
ou ocorrem agrupamentos xilemticos envolvidos por
endoderme. Na nervura principal, em seco transversal,
a cutcula mais espessa, principalmente na face abaxial,
onde as clulas epidrmicas so pequenas e a hipoderme
geralmente apresenta duas camadas de clulas em ambas as
faces; o colnquima angular e mais desenvolvido junto
face abaxial; o parnquima formado por clulas poligonais
de paredes espessas; o sistema vascular formado por um
nico feixe colateral, envolvido por endoderme e bainha
de fbras muito esclerifcadas; podem ocorrer outros
dois feixes menores, voltados para a face adaxial, sendo
o conjunto envolvido por bainha de fbras. Em toda a
lmina, na hipoderme, colnquima e parnquimas ocorrem
clulas contendo compostos fenlicos; no parnquima h
maior concentrao de gros de amido e so frequentes as
clulas secretoras esfricas, unicelulares, de grande volume
e de paredes suberizadas; cristais de oxalato de clcio,
geralmente na forma de monocristais ou cristais prismticos
so encontrados na epiderme e sob a forma de bastonete,
muito pequenos, fnos e agrupados, nos parnquimas; gotas
lipdicas ocorrem em todos os tecidos. O pecolo, em vista
frontal, apresenta cutcula levemente ondulada, epiderme
formada por clulas pequenas, quadrangulares e de paredes
anticlinais espessas, muitas contendo compostos fenlicos,
e muitos tricomas estrelados, iguais aos da lmina; vrias
clulas secretoras esfricas, de grande volume e com
paredes suberizadas so visveis por transparncia. Em
seco transversal, o pecolo possui duas costelas laterais,
voltadas para a face adaxial; a cutcula espessa, as clulas
epidrmicas so pequenas, os tricomas so mais comuns na
face abaxial e sua insero pode chegar at o parnquima
cortical; a hipoderme uniestratifcada, raramente
biestratifcada, formada por clulas pequenas de paredes
espessas; o colnquima angular e o parnquima cortical
formado por clulas poligonais, de paredes muito espessas,
pequenos cristais de oxalato de clcio, normalmente
monocristais isolados ou agrupamentos em forma de
bastonete, alm de gotas lipdicas e de clulas secretoras
de grande volume e de paredes suberizadas; a endoderme
contnua, formada por clulas arredondadas a elpticas, com
grande quantidade de gros de amido; o sistema vascular
est representado por um feixe colateral aberto e central,
apresentando foema com ou sem uma calota de fbras
ou fbras esparsas, isoladas ou agrupadas; o procmbio
evidente e possui grande quantidade de gros de amido; o
xilema tem distribuio em raios e pode apresentar fbras
isoladas ou em pequenos grupos junto s suas clulas
condutoras, alm de um expressivo agrupamento de fbras
junto aos elementos protoxilemticos.
microscpica do p exige utilizao de hidrato de cloral.
So caractersticas: colorao amarelo esverdeada a amarelo
pardacenta; tricomas estrelados ntegros e isolados ou parte
destes, em vista frontal e/ou em vista lateral; pores de
epiderme da regio do mesoflo, com clulas de paredes
espessadas e com campos de pontoao visveis, em vista
frontal; pores de epiderme com estmatos, em vista frontal;
pores da epiderme com clulas de paredes espessas,
mostrando a base de tricoma estrelado, em vista frontal;
fragmentos de epiderme com pores de nervuras, em
vista frontal; pores da epiderme do pecolo, com clulas
secretoras visveis por transparncia, em vista frontal; pores
do mesoflo com clulas secretoras, em vista frontal; pores
do mesoflo com idioblasto cristalfero e clula com compostos
fenlicos, em vista frontal; agrupamentos de fbras, em seco
longitudinal; fragmentos do sistema vascular com pores de
fbras, elementos traqueais, parnquima com pores de fbras,
em seco longitudinal; fragmentos da lmina com pores
de epiderme, de hipoderme e de parnquima palidico, em
seco transversal; fragmentos de epiderme e de hipoderme,
em seco transversal; pores de parnquima palidico com
clulas secretoras e com clulas contendo cristais em forma
de bastonete, em seco transversal; fragmentos da regio do
mesoflo, em seco transversal.
IDENTIFICAO
A. Triturar algumas folhas com etanol. Evaporar o etanol
em banho-maria. Adicionar ao resduo resultante algumas
gotas da soluo de vanilina a 1% (p/v) em cido clordrico
SR. Desenvolve-se colorao castanho avermelhada ou
vermelha intensa.
B. Proceder conforme descrito em Cromatografa em camada
254
como suporte,
e mistura de metanol, dietilamina e tolueno (10:10:80) como
banda, 40 L (ou 6 L) da Soluo (1) e 20 L (ou 2 L) da
Soluo (2), recentemente preparadas, descritas a seguir.
Soluo (1): transferir 0,5 g da droga pulverizada para
balo de 50 mL, adicionar uma mistura de 1 mL de cido
clordrico 2 M e 20 mL de gua. Homogeneizar. Aquecer
em banho-maria, sob refuxo, durante 10 minutos. Resfriar
e fltrar. Adicionar ao fltrado 2 mL de hidrxido de amnio
6 M. Extrair o fltrado duas vezes em funil de separao
com 20 mL de ter etlico em cada vez, com agitao
moderada para evitar a formao de emulso. Reunir as
fases orgnicas e evaporar o solvente sob presso reduzida.
Dissolver o resduo em 1 mL de metanol.
Soluo (2): dissolver 2 mg de boldina SQR em 5 mL de
metanol.
secar ao ar. Observar a placa sob luz ultravioleta (365
nm). O cromatograma obtido com a Soluo (2) apresenta
uma mancha azul violcea. O cromatograma obtido com
a Soluo (1) apresenta mancha similar em posio e
colorao mancha obtida no cromatograma da Soluo
(2). Nebulizar a placa com iodobismutato de potssio aquo-
actico. Deixar secar ao ar por cinco minutos. Nebulizar a
placa com nitrito de sdio SR. Observar luz visvel aps
30 minutos. A boldina apresenta colorao castanha.
ENSAIOS DE PUREZA
b
gua (5.2.20.2). No mximo 10,0%.
Cinzas insolveis em cido (5.4.2.5). No mximo 6,0%.
DOSEAMENTO
Alcaloides totais
de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: mistura da Soluo A e Soluo B (16:84),
preparadas como descrito a seguir.
Soluo A: mistura de 0,2 mL de dietilamina e 99,8 mL de
acetonitrila.
Soluo B: mistura de 0,2 mL de dietilamina e 99,8 mL de
gua, ajustar o pH para 3,0 utilizando cido frmico anidro.
Soluo amostra: pesar, exatamente, cerca de 1 g da droga
pulverizada em erlenmeyer, adicionar 50 mL de cido
clordrico 2 M e aquecer em banho-maria a 80 C por 30
minutos, com agitao. Filtrar e ressuspender o resduo com
50 mL de cido clordrico 2 M e aquecer em banho-maria a
80 C por 30 minutos, com agitao. Filtrar e repetir mais
uma vez a operao com o resduo obtido. Filtrar. Combinar
os fltrados resfriados em funil de separao e agitar com
100 mL de uma mistura de n-hexano e acetato de etila (1:1).
Descartar a fase orgnica. Ajustar o pH da fase aquosa para
9,0 com hidrxido de amnio 6 M. Extrair a fase aquosa com
uma poro de 100 mL, e duas pores de 50 mL de cloreto
de metileno. Combinar as fases orgnicas e evaporar em
evaporador rotatrio at a secura. Transferir o resduo para
balo volumtrico de 10 mL utilizando a Fase mvel como
diluente. Completar o volume com a Fase mvel e misturar.
Soluo padro: pesar exatamente cerca de 12 mg de
boldina SQR. Dissolver a quantidade pesada em balo
volumtrico de 100 mL utilizando a Fase mvel como
diluente. Completar o volume com Fase mvel e misturar.
Transferir 1 mL da soluo obtida, utilizando pipeta
volumtrica, para balo volumtrico de 10 mL. Completar
o volume com a Fase mvel e misturar.
Soluo de resoluo: utilizar a Soluo amostra.
Injetar 20 L da Soluo de resoluo. Os tempos de reteno
relativos boldina, cujo tempo de reteno de cerca de seis
minutos, so cerca de 0,9 para isoboldina, 1,0 para boldina,
1,8 para N-xido de isocoridina, 2,2 para laurotetanina, 2,8
para isocoridina e 3,2 para N-metil laurotetanina. Outros
picos podem estar presentes. A resoluo entre os picos de
isoboldina e de boldina no menor que 1,0.
medir as reas sob os picos referentes ao padro de boldina
e aos seis alcaloides descritos e identifcados na Soluo
de resoluo, ou seja, na Soluo amostra. Calcular o teor,
em porcentagem, de alcaloides totais, expresso em boldina,
segundo a expresso:
em que
m
1
= massa da droga (g);
m
2
= massa de boldina SQR na Soluo padro (g);
A
1
= somatrio das rea sob os picos referentes aos seis
alcaloides identifcados no cromatograma obtido com a
Soluo amostra;
A
2
= rea sob o pico referente boldina no cromatograma
obtido com a Soluo padro.
leos volteis
volteis em drogas vegetais (5.4.2.7). Utilizar balo de 1000
mL contendo 500 mL de gua como lquido de destilao.
Utilizar 0,5 mL de xileno. A droga previamente triturada
deve ser turbolizada com 100 mL de gua. Transferir
imediatamente para o balo e proceder a hidrodestilao a
partir de 50 g da droga. Destilar durante 4 horas.
a b
693
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Peumus boldus Molina
_____________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A (a, b, c, e, f e g) a 10 mm, em A (d) a 15 mm, em B e C a 14 mm, em D a 5
mm; em E, f, G e H a 100 m.
A aspecto geral de diferentes formas foliares: base foliar assimtrica (bfa); pice foliar assimtrico (afa); pice foliar acuminado (afc); pecolo (pe);
lmina (l); pice foliar retuso (aft); pice foliar arredondado (afr). B aspecto geral da face adaxial foliar: pedculo (pe); lmina (l). C aspecto geral
da face abaxial foliar: bordo (bor). D detalhe de poro da face abaxial da lmina foliar, em vista frontal, mostrando parte da nervao da regio
da nervura principal at o bordo: bordo (bor); nervura secundria (ns); proeminncia formada pela regio basal do tricoma estrelado (pre); nervura
principal (np).E detalhe de poro da epiderme voltada para a face adaxial, na regio do mesoflo, em vista frontal: campo primrio de pontoao
(cpp); clula fundamental da epiderme (cfe). f detalhe de poro da epiderme voltada para a face abaxial, na regio do mesoflo, em vista frontal:
estmato (es); campo primrio de pontoao (cpp); clula fundamental da epiderme (cfe). G detalhe de poro da epiderme na regio da nervura
principal, voltada para a face adaxial, em vista frontal: campo primrio de pontoao (cpp); clula fundamental da epiderme (cfe). H detalhe de
poro da epiderme na regio da nervura principal, voltada para a face abaxial, em vista frontal: clula fundamental da epiderme (cfe); clula secretora
(cse); idioblasto cristalfero (ic); campo primrio de pontoao (cpp); poro basal de clula do tricoma partido (pbt); tricoma estrelado (tes).
b
figura 2 Aspectos microscpicos em Peumus boldus Molina
_____________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A, C, f, G e E a 100 m, em B a 400 m; em D e H a 400 m.
A detalhe de poro da lmina foliar em seco transversal, junto face adaxial, mostrando proeminncia da regio basal do tricoma estrelado:
cloroplastdio (clo); gota lipdica (gl); campo primrio de pontoao (cpp); cutcula (cu); face adaxial (ad); hipoderme (h); parnquima palidico (pp);
epiderme (ep). B detalhe de poro de tricoma estrelado em vista frontal. C detalhe de tricoma estrelado em vista lateral: tricoma estrelado (tes); clula
fundamental da epiderme (cfe). D esquema parcial da regio da nervura principal da lmina foliar, em seco transversal, mostrando um nico feixe
vascular: face adaxial (ad); face abaxial (ab); endoderme (end); colnquima (co); feixe vascular (fv); xilema (x); cutcula (cu); hipoderme (h); parnquima
palidico (pp); parnquima esponjoso (pe); epiderme (ep); fbras (fb); foema (f); procmbio (prc). E esquema parcial da regio da nervura principal da
lmina foliar, em seco transversal, mostrando trs feixes vasculares: face adaxial (ad); face abaxial (ab); hipoderme (h); feixe vascular (fv); parnquima
palidico (pp); parnquima esponjoso (pe); endoderme (end); fbras (fb); colnquima (co); epiderme (ep); cutcula (cu); foema (f); procmbio (prc); xilema
(x). f detalhe de poro da lmina foliar, na regio do mesoflo, em seco transversal, mostrando feixe vascular secundrio: face adaxial (ad); face abaxial
(ab); epiderme (ep); cutcula (cu); campo primrio de pontoao (cpp); hipoderme (h); parnquima palidico (pp); fbras (fb); feixe vascular (fv); idioblasto
cristalfero (ic); xilema (x); foema (f); gro de amido (ga); gota lipdica (gl); espao intercelular (ei); clula com compostos fenlicos (ccf); parnquima
esponjoso (pe); estmato (es); colnquima (co); cloroplastdio (clo); clula secretora (cse). G detalhe do bordo na regio mediana da lmina foliar, em
seco transversal: face adaxial (ad); face abaxial (ab); parnquima palidico (pp); agrupamento xilemtico (ax); espao intercelular (ei); cloroplastdio
(clo); cutcula (cu); idioblasto cristalfero (ic); clula com compostos fenlicos (ccf); parnquima esponjoso (pe); gro de amido (ga); : gota lipdica (gl);
epiderme (ep); fbras (fb); hipoderme (h). H detalhe de poro da regio mediana da lmina foliar, em seco transversal, na regio da nervura principal:
face adaxial (ad); face abaxial (ab); gro de amido (ga); espao intercelular (ei); xilema (x); gota lipdica (gl); cloroplastdio (clo); feixe vascular (fv);
idioblasto cristalfero (ic); foema (f); colnquima (co); fbras (fb); pontoao (pto); clula com compostos fenlicos (ccf); clula secretora (cse); parnquima
esponjoso (pe); parnquima palidico (pp); hipoderme (h); epiderme (ep); cutcula (cu).
a b
695
figura 3 Aspectos microscpicos e da microscopia do p em Peumus boldus Molina
_____________
Complemento da legenda da figura 3. As escalas correspondem em A, B, D e E (E
2
at E
5
) a 100 m, em C a 400 m e em E (E
1
) a 400 m.
A detalhe de poro da epiderme do pecolo, em vista frontal: gota lipdica (gl); clula com compostos fenlicos (ccf); clula secretora (cse); campo
primrio de pontoao (cpp); clula fundamental da epiderme (cfe); tricoma estrelado (tes); poro basal de clulas do tricoma estrelado(pbt). B
detalhe de poro da epiderme do pecolo, em vista lateral: tricoma estrelado (tes); clula fundamental da epiderme (cfe); cutcula (cu). C esquema
b
geral do pecolo, em seco transversal: face adaxial (ad); face abaxial (ab); costela (cst); fbras (fb); colnquima (co); procmbio (prc); endoderme
(end); epiderme (ep); xilema (x); foema (f): parnquima (p); feixe vascular (fv); tricoma estrelado (tes); hipoderme (h); cutcula (cu). D detalhe de
poro do pecolo, em seco transversal, conforme destacado em C: face abaxial (ab); hipoderme (h); cutcula (cu); epiderme (ep); colnquima (co);
parnquima (p); gota lipdica (gl); clula secretora (cse); campo primrio de pontoao (cpp); gro de amido (ga); endoderme (end); xilema (x); foema
(f); fbras do xilema (fx); foema (F); idioblasto cristalfero (ic); cloroplastdio (clo). E detalhes do p: clula fundamental da epiderme (cfe); campo
primrio de pontoao (cpp); estmato (es); base do tricoma (bt); clula secretora (cse); clula com compostos fenlicos (ccf); idioblasto cristalfero
(ic); pontoao (pto); fbras (fb); elemento de vaso com espessamento helicoidal (eh); parnquima (p); face adaxial (ad); face abaxial (ab); cloroplastdio
(clo); gota lipdica (gl); cutcula (cu); epiderme (ep); hipoderme (h); parnquima palidico (pp); espao intercelular (ei). E
1
detalhes de tricomas:
tricoma estrelado em vista frontal (a), poro de tricoma estrelado em vista lateral (b), clula isolada de tricoma estrelado, em vista lateral (c). E
2

detalhes da epiderme: poro da epiderme na regio do mesoflo, em vista frontal (a), poro da epiderme com estmato, em vista frontal (b), poro da
epiderme com clulas de paredes espessas, mostrando a base de tricoma estrelado, em vista frontal (c), fragmento da epiderme com poro de nervura,
em vista frontal (d), poro da epiderme do pecolo, em vista frontal (e). E
3
detalhes do mesoflo, em seco transversal: poro do mesoflo com
clula secretora (a), poro do mesoflo com cristais de oxalato de clcio e com clula contendo compostos fenlicos (b). E
4
detalhes de pores do
sistema vascular, em seco longitudinal: agrupamento de fbras (a), fragmento do sistema vascular com pores de fbras, de elementos traqueais e
de parnquima (b). E
5
detalhes de tecidos da lmina foliar, em seco transversal: fragmento da lmina com poro de epiderme, de hipoderme e de
parnquima palidico (a), fragmento da epiderme e da hipoderme (b); poro de parnquima palidico com clula secretora e clula contendo cristais
(c), fragmento da regio do mesoflo (d).
BOLDO TINTURA
Boldus tinctura
A tintura preparada a partir das folhas secas de Peumus
boldus Molina MONIMIACEAE, a 10,0% (p/v), por
percolao ou macerao, utilizando etanol a 60,0% (v/v)
como lquido extrator. Contm, no mnimo, 0,01% de
alcaloides totais expressos em boldina.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Lquido lmpido,
castanho esverdeado escuro, de odor e sabor caractersticos.
IDENTIFICAO
A. Evaporar 10 mL da tintura em banho-maria at a secura.
Adicionar ao resduo resultante algumas gotas da soluo
de vanilina a 1% (p/v) em cido clordrico SR. Desenvolve-
se colorao castanho avermelhada ou vermelha intensa.
254

como suporte, e mistura de metanol, dietilamina e tolueno
(10:10:80) como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, em forma de banda, 10 L da Soluo (1) e 5 L da
Soluo (1): evaporar 25 mL da tintura em banho-maria
at a consistncia de extrato mole. Triturar o resduo ainda
quente duas vezes com 10 mL de cido clordrico 2 M em
cada vez. Filtrar e alcalinizar o fltrado em pH 9,0 com
hidrxido de amnio 6 M. Extrair o fltrado duas vezes em
funil de separao com 20 mL de ter etlico em cada vez,
com agitao moderada para evitar a formao de emulso.
Reunir as fases orgnicas e evaporar o solvente em banho-
maria. Dissolver o resduo em 0,5 mL de metanol.
Soluo (2): dissolver 2 mg de boldina SQR em 5 mL de
metanol.
secar ao ar. Observar a placa sob luz ultravioleta (365
nm). O cromatograma obtido com a Soluo (2) apresenta
uma mancha azul violcea. O cromatograma obtido com
a Soluo (1) apresenta mancha similar em posio e
colorao mancha obtida no cromatograma da Soluo
(2). Nebulizar a placa com iodobismutato de potssio aquo-
actico. Deixar secar ao ar por cinco minutos. Nebulizar a
placa com nitrito de sdio SR. Observar luz visvel aps
30 minutos. A boldina apresenta colorao castanha.
ENSAIOS DE PUREZA
Etanol (5.3.3.8.1). 60 5% (p/v). Proceder conforme
descrito em Mtodo por destilao, Tratamentos especiais,
Lquidos com mais de 30% de lcool.
Resduo seco (5.4.3.2.3). No mnimo 2,0%.
DOSEAMENTO
Alcaloides totais
A. Pesar exatamente cerca de 100 g de tintura. Evaporar
em evaporador rotatrio at a consistncia de extrato mole.
Transferir quantitativamente a amostra para um funil de
separao, utilizando alguns mililitros de gua. Adicionar
6 mL de hidrxido de amnio 6 M. Agitar com sucessivas
fraes de 40 mL, 25 mL e 25 mL de cloreto de metileno.
Verifcar a completa extrao dos alcaloides pela adio de
uma gota de iodeto de potssio mercrico SR a algumas
gotas da fase aquosa. No caso de reao positiva, agitar a
fase aquosa com sucessivas fraes de 20 mL de cloreto
de metileno at reao de Mayer negativa. Reunir as fases
orgnicas em funil de separao e lavar com gua at a
neutralidade. Adicionar soluo orgnica 2 g de sulfato
de sdio anidro, deixar em contato por alguns minutos,
com agitao casual. A soluo orgnica deve estar
lmpida. Decantar e lavar o sulfato de sdio com 10 mL de
cloreto de metileno trs vezes. Reunir as fraes orgnicas
e evaporar em evaporador rotatrio. Transferir o resduo
com a menor quantidade possvel de cloreto de metileno
para um erlenmeyer, e adicionar 20 mL de cido sulfrico
0,005 M. SV. Titular o excesso de cido com hidrxido de
sdio 0,01 M SV em presena de vermelho de metila SI.
Calcular o teor, em porcentagem, de alcaloides totais,
expresso em boldina, segundo a expresso:
a b
697
em que
n = nmero de mililitros de hidrxido de sdio 0,01 M SV
gastos;
m = massa da tintura (g).
de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: mistura da Soluo A e Soluo B (16:84),
Soluo A: mistura de 0,2 mL de dietilamina e 99,8 mL de
acetonitrila.
Soluo B: mistura de 0,2 mL de dietilamina e 99,8 mL de
gua, ajustar o pH para 3,0 utilizando cido frmico anidro.
Soluo amostra: pipetar uma alquota de 10 mL da tintura,
que equivale a 1 g da droga vegetal,. Evaporar em banho-
maria a 80 C at a consistncia de extrato mole. Triturar
o resduo ainda quente com 50 mL de cido clordrico
2 M por cinco minutos. Filtrar e repetir o procedimento
mais uma vez com o resduo obtido. Filtrar. Combinar
os fltrados resfriados em funil de separao e agitar com
100 mL de uma mistura de hexano e acetato de etila (1:1).
Descartar a fase orgnica. Ajustar o pH da fase aquosa para
9,0 utilizando hidrxido de amnio 6 M. Extrair a fase
aquosa com pores de 100 mL, 50 mL e 50 mL de cloreto
de metileno. Combinar as fases orgnicas e evaporar em
evaporador rotatrio at a secura. Transferir o resduo para
balo volumtrico de 10 mL utilizando Fase mvel como
boldina SQR. Dissolver a quantidade pesada em balo
volumtrico de 100 mL utilizando Fase mvel como
Transferir 1 mL da soluo obtida, utilizando pipeta
volumtrica, para balo volumtrico de 10 mL. Completar
o volume com Fase mvel e misturar.
Soluo de resoluo: utilizar a Soluo amostra.
Injetar 20 L da Soluo de resoluo. Os tempos de
reteno relativos boldina, cujo tempo de reteno de
cerca de seis minutos, so cerca de 0,9 para isoboldina,
1,0 para boldina, 1,8 para N-xido de isocoridina, 2,2
para laurotetanina, 2,8 para isocoridina e 3,2 para N-metil
laurotetanina. Outros picos podem estar presentes. A
resoluo entre os picos de isoboldina e de boldina no
menor que 1,0.
medir as reas sob os picos referentes ao padro de boldina
e aos seis alcaloides descritos e identifcados na Soluo
de resoluo, ou seja, na Soluo amostra. Calcular o teor,
em porcentagem, de alcaloides totais, expresso em boldina,
segundo a expresso:
em que
A
1
= somatrio das rea sob os picos referentes aos seis
alcaloides identifcados no cromatograma obtido com a
Soluo amostra;
m
b
= massa de boldina SQR na Soluo padro (g);
A
2
= rea sob o pico referente boldina no cromatograma
Em recipientes de vidro mbar bem fechados, protegidos
da luz e calor.
BORATO DE SDIO
Natrii boras
Na
2
B
4
O
7
; 201,22
Na
2
B
4
O
7
.10H
2
O; 381,37
borato de sdio; 00117
xido sdico de boro
[1330-43-4]
Brax
[1303-96-4]
Na
2
B
4
O
7
.10H
2
O.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou cristais
incolores.
Solubilidade. Solvel em gua, muito solvel em gua
fervente, facilmente solvel em glicerol, insolvel em
etanol.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 0,2 g da amostra em gua isenta de dixido
de carbono e completar para 5 mL com o mesmo solvente.
Adicionar 0,1 mL de fenolftalena SI. Desenvolve-se
colorao vermelha. Adicionar 5 mL de glicerol a 85%
(v/v). A colorao desaparece.
B. A soluo preparada de maneira idntica soluo do
teste A. de Identifcao responde s reaes do on borato
(5.3.1.1).
C. A soluo preparada de maneira idntica soluo do
teste A. de Identifcao responde s reaes do on sdio
(5.3.1.1).
b
ENSAIOS DE PUREZA
(5.2.25) e incolor (5.2.12).
pH (5.2.19). 9,0 a 9,6. Determinar na soluo obtida em
Aspecto da soluo.
Carbonato e bicarbonato. Em tubo de ensaio adicionar 5
mL de soluo aquosa da amostra a 5% (p/v) e 1 mL cido
clordrico 3 M. No ocorre efervescncia.
Sulfatos (5.3.2.2). Utilizar 15 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo e prosseguir conforme descrito em
Ensaio limite para sulfatos. Preparar a soluo padro
utilizando mistura de 3 mL da soluo padro de sulfato (10
ppm SO
4
) e 12 mL de gua. No mximo 0,005% (50 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar 12 mL da soluo
obtida em Aspecto da soluo e prosseguir conforme
descrito no Mtodo I. Preparar soluo padro utilizando
Soluo padro de chumbo (1 ppm). No mximo 0,0025%
(25 ppm).
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar o Mtodo I. Utilizar 15 mL
da soluo obtida em Aspecto da soluo e prosseguir
mximo 0,0005% (5 ppm).
Amnia (5.3.2.6). Diluir 6 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo para 14 mL com gua e prosseguir
conforme descrito em Ensaio limite para amnia. Preparar
a soluo padro utilizando mistura de 2,5 mL da Soluo
padro de amnia (1 ppm) e 7,5 mL de gua. No mximo
0,001% (10 ppm).
Clcio (5.3.2.7). Utilizar 15 mL da soluo obtida em
Ensaio limite para clcio. Preparar a soluo padro
utilizando mistura de 6 mL da Soluo padro de clcio
(10 ppm) e 9 mL de gua. No mximo 0,01% (100 ppm).
DOSEAMENTO
em 50 mL de gua. Adicionar algumas gotas de vermelho
de metila SI e titular com cido clordrico 0,1 M SV. Cada
mL de cido clordrico 0,1 M SV equivale a 19,069 mg de
Na
2
B
4
O
7
.10H
2
O.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Agente antissptico, detergente, adstringente para mucosas.
BROMAZEPAM
Bromazepamum
N
H
N
N
Br
O
C
14
H
10
BrN
3
O; 316,15
bromazepam; 01366
7-Bromo-1,3-diidro-5-(2-piridinil)-2H-1,4-benzodiazepin-
2-ona
[1812-30-2]
C
14
H
10
BrN
3
O em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco ou
ligeiramente amarelado, e inodoro.
Solubilidade. Insolvel em gua, ligeiramente solvel em
etanol e cloreto de metileno.
Faixa de fuso (5.2.2): 237 C a 238,5 C, com
decomposio.
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao C. e D. podero ser omitidos se
forem realizados os testes A. e B.
amostra, previamente dessecada at peso contante, e
no espectro de bromazepam SQR, preparado de maneira
idntica.
B. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14) na faixa
de 220 nm a 350 nm, da soluo a 0,0005% (p/v) em
comprimentos de onda de soluo similar de bromazepam
SQR. A razo entre os valores de absorvncia medidos em
233 nm e 325 nm est compreendida entre 980 e 1080.
254
,
como suporte, e mistura de dietilamina e ter etlico
a b
699
descritas a seguir.
metanol e cloreto de metileno (1:9).
Soluo (2): soluo a 1 mg/mL de bromazepam SQR em
mistura de metanol e cloreto de metileno (1:9).
D. Dissolver cerca de 20 mg da amostra em 5 mL de
metanol. Adicionar 5 mL de gua e 1 mL de sulfato ferroso
amoniacal a 1% (p/v). Desenvolve-se colorao violeta.
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias relacionadas. Proceder conforme descrito
254,
como suporte, e mistura de
etanol, trietilamina, cloreto de metileno e ter de petrleo
(5:5:20:70), como fase mvel. Aplicar, separadamente
preparadas, descritas a seguir. O ensaio deve ser realizado
ao abrigo da luz.
Soluo (1): soluo a 10 mg/mL da amostra em mistura
de metanol e cloreto de metileno (1:9).
Soluo (2): diluir a Soluo (1) em mistura de metanol
e cloreto de metileno (1:9), de modo a obter soluo da
amostra a 20 mg/mL.
secar em corrente de ar por 20 minutos. Examinar sob luz
ultravioleta (254 nm). Qualquer mancha secundria obtida
Soluo (2) (0,2%).
amostra, em estufa a vcuo, a 80 C, por 4 horas. No
mximo 0,2%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,25 g de amostra, dissolver
em 20 mL de cido actico glacial e adicionar 50 mL de
anidrido actico. Titular com soluo de cido perclrico
0,1 M SV e determinar o ponto fnal potenciometricamente.
mg de C
14
H
10
BrN
3
O.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Ansioltico
BROMAZEPAM COMPRIMIDOS
14
H
10
BrN
3
O.
IDENTIFICAO
faixa de 200 nm a 400 nm, da soluo amostra obtida em
Doseamento, exibe mximos e mnimos idnticos aos
observados no espectro da soluo padro.
254
,
como suporte, e mistura de acetato de etila e hidrxido de
amnio a 25% (v/v) (100:1), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): pesar e pulverizar os comprimidos. Utilizar
quantidade do p equivalente a 25 mg de bromazepam e
adicionar 10 mL de metanol. Homogeneizar e fltrar.
Soluo (2): soluo a 2,5 mg/mL de bromazepam SQR
em metanol.
CARACTERSTICAS
Procedimento para uniformidade de contedo. Proceder
ao abrigo da luz. Pesar individualmente e transferir cada
comprimido para balo volumtrico de 100 mL. Prosseguir
conforme descrito em Doseamento, a partir de Adicionar
70 mL de cido sulfrico metanlico 0,1 M....
Meio de dissoluo: fuido gstrico simulado (sem enzima),
900 mL
b
Tempo: 20 minutos
dissoluo, fltrar, resfriar a 20 C e diluir, se necessrio,
em fuido gstrico simulado (sem enzima) at concentrao
adequada. Medir as absorvncias das solues em 239 nm
(5.2.14), utilizando fuido gstrico simulado (sem enzima)
14
H
10
BrN
3
O
a da soluo de bromazepam SQR na concentrao de
0,00033 % (p/v), preparada no mesmo solvente.
Tolerncia: no menos que 80% (Q) da quantidade decla-
rada de C
14
H
10
BrN
3
O se dissolvem em 20 minutos.
DOSEAMENTO
Nota: realizar o preparo das solues ao abrigo da luz.
comprimidos. Transferir quantidade do p, exatamente
pesada, equivalente a 0,6 g de bromazepam para balo
volumtrico de 100 mL. Adicionar 70 mL de cido
sulfrico metanlico 0,1 M e deixar em ultrassom por 20
minutos. Completar o volume com o mesmo solvente,
centrifugar e fltrar, se necessrio. Realizar diluies
sucessivas at concentrao de 0,0006% (p/v), utilizando
o mesmo solvente. Preparar soluo padro nas mesmas
condies. Medir as absorvncias das solues resultantes
em 239 nm, utilizando cido sulfrico metanlico 0,1 M
14
H
10
BrN
3
O
nos comprimidos, a partir das leituras obtidas.
ROTULAGEM
BROMETO DE NEOSTIGMINA
Neostigmini bromidum
N
+
(CH
3
)
3
O
N
CH
3
CH
3
O
Br
-
C
12
H
19
BrN
2
O
2
; 303,20
brometo de neostigmina; 06287
Brometo de 3-[[(dimetilamino)carbonil]oxi]-N,N,N-
trimetilbenzenamnio
[114-80-7]
C
12
H
19
BrN
2
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco. incolor e
tem sabor amargo. Suas solues so neutras ao papel de
tornassol.
Solubilidade. Muito solvel em gua, solvel em etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 171 C a 176 C, com decomposio.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada a 105 C por 3 horas,
no espectro de brometo de neostigmina SQR, preparado de
maneira idntica.
B. A soluo 1:50 responde s reaes do brometo (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Sulfato. Dissolver 0,25 g da amostra em 10 mL de gua,
adicionar 1 mL de cido clordrico e 1 mL de cloreto de
brio. No se produz turbidez imediatamente.
Perda por dessecao (5.2.9). Dessecar a amostra a 105 C
por 3 horas. No mximo 2,0%
a b
701
DOSEAMENTO
Dissolver exatamente, cerca de 0,75 g da amostra em
mistura de 70 mL de cido actico glacial e 20 mL de
acetato de mercrio SR. Adicionar quatro gotas de cloreto
de metilrosanilnio SI e titular com cido perclrico 0,1 M
SV ate colorao azul. Realizar ensaio em branco e fazer
as correes necessrias. Cada mL de cido perclrico 0,1
12
H
19
BrN
2
O
2.
Em recipientes hermticos.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Colinrgico.
BROMETO DE SDIO
Natrii bromidum
NaBr; 102,89
brometo de sdio; 01445
Brometo de sdio
[7647-15-6]
Contm, no mnimo, 98,0 % e, no mximo, 100,5 % de
NaBr, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou cristais incolores ou
opacos, ligeiramente higroscpico.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua e solvel em
etanol.
IDENTIFICAO
A. Responde s reaes do on brometo (5.3.1.1).
B. A soluo a 10% (p/v) responde s reaes do on sdio
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Transferir 10 g da amostra para
balo volumtrico de 100 mL, dissolver em gua isenta de
dixido de carbono e completar o volume com o mesmo
solvente. A soluo lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
Acidez ou alcalinidade. A 10 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo adicionar 0,1 mL de azul de bromotimol
SI. No necessrio mais que 0,5 mL de cido clordrico
0,01 M ou hidrxido de sdio 0,01 M para promover a
viragem do indicador.
Brometos. A 10 mL da soluo obtida em Aspecto da
soluo adicionar 1 mL de soluo de amido SI, 0,1 mL de
uma soluo de iodeto de potssio 10% (p/v) e 0,25 mL de
cido sulfrico 0,5 M. Proteger da luz por 5 minutos. No
deve ser desenvolvida colorao azul ou violeta.
Cloretos. Transferir 1 g da amostra para erlenmeyer e
dissolver em 20 mL de cido ntrico a 20% (p/v). Adicionar
5 mL de perxido de hidrognio concentrado e aquecer em
banho-maria at a soluo ser completamente descolorida.
Lavar as paredes do frasco com um pouco de gua e
aquecer em banho-maria por 15 minutos. Resfriar, diluir
para 50 mL com gua, adicionar 5 mL de nitrato de prata
0,1 M SV e 1 mL de ftalato de dibutila. Homogeneizar
e titular com soluo de tiocianato de amnio 0,1 M SV
utilizando 5 mL de soluo de sulfato frrico amoniacal SR
como indicador. No mais que 1,7 mL de soluo de nitrato
de prata 0,1 M SV so necessrios para promover viragem
do indicador (0,6%). Registrar o volume de nitrato de prata
0,1 M SV utilizado.
Iodetos. A 5 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo
adicionar 0,15 mL de cloreto frrico SR e 2 mL de
clorofrmio. Agitar e observar as fases. A fase clorofrmica
incolor.
Ensaio limite para sulfatos. No mximo 0,01% (100 ppm).
Brio. A 5 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo
adicionar 5 mL de gua destilada e 1 mL de cido sulfrico
diludo SR. Aps 15 minutos, qualquer opalescncia
observada no mais intensa do que a mistura de 5 mL
da soluo obtida em Aspecto da soluo e 6 mL de gua.
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo III. Utilizar 12
mL da soluo obtida em Aspecto da soluo e prosseguir
conforme descrito em Ensaio limite para metais pesados.
Preparar uma soluo referncia utilizando soluo de
chumbo (1 ppm Pb). No mximo 0,001% (10 ppm).
ferro (5.3.2.4). Diluir 5 mL da soluo obtida em Aspecto
da soluo para 10 mL com gua e prosseguir conforme
descrito em Ensaio limite para ferro. No mximo 0,002%
(20 ppm).
Magnsio e metais alcalinos terrosos (5.3.2.9). Utilizar
10 g de amostra e prosseguir conforme descrito em Ensaio
limite para magnsio e metais alcalinos terrosos. O volume
de edetato dissdico 0,01 M SV utilizado no excede 5 mL.
No mximo 0,02% (200 ppm), calculados como clcio.
amostra, em estufa entre 100 C e 105 C, por 3 horas. No
mximo 3,0%.
DOSEAMENTO
Transferir, exatamente, cerca de 2 g da amostra para balo
volumtrico de 100 mL, dissolver em gua e completar
b
o volume com mesmo solvente. A 10 mL desta soluo
adicionar 50 mL de gua, 5 mL de cido ntrico 20% (p/v),
25 mL de nitrato de prata 0,1 M SV, 2 mL de ftalato de
dibutila e homogeneizar. Titular com tiocianato de amnio
0,1 M SV, utilizando 2 mL de sulfato frrico amoniacal SR
como indicador, agitando vigorosamente, at a viragem
do indicador. Corrigir o volume, subtraindo o volume de
nitrato de prata 0,1 M SV gasto no teste para Cloretos em
Ensaios de pureza. Cada mL de nitrato de prata 0,1 M SV
equivale a 10,289 mg de NaBr.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Sedativo, hipntico, anticonvulsivante.
BROMIDRATO DE CITALOPRAM
Citaloprami hydrobromidum
C
20
H
21
FN
2
O.HBr; 405,30
bromidrato de citalopram; 02162
Bromidrato de 1-[3-(dimetilamino)propil]-1-(4-fuorfenil)-
1,3-diidro-5-isobenzofurancarbonitrila (1:1)
[59729-32-7]
C
20
H
21
FN
2
O.HBr, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
branco.
clorofrmio, metanol e etanol, praticamente insolvel em
ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 182 C a 189 C.
IDENTIFICAO
amostra, dessecada em dessecador sob vcuo at peso
constante, dispersa em brometo de potssio, apresenta
observados no espectro de bromidrato de citalopram SQR,
de 200 nm a 400 nm, da soluo a 0,001% (p/v) em cido
clordrico 0,1 M, exibe mximo em 239 nm, idntico ao
observado no espectro de soluo similar de bromidrato de
citalopram SQR.
254
,
como suporte, e mistura de gua, 1-butanol e cido actico
(15:12:3), como fase mvel. Preparar a fase mvel com
24 horas de antecedncia e desprezar a camada orgnica.
Soluo (2): soluo a 1 mg/mL de bromidrato de
citalopram SQR em gua.
D. O tempo de reteno do pico principal do cromatograma
E. Responde s reaes do on brometo (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
amostra.Dessecar sob vcuo, temperatura ambiente, at
peso constante. No mximo 0,5 %.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Transferir, exatamente, o
equivalente a 10 mg da amostra para balo volumtrico de
100 mL, dissolver em cido clordrico 0,1 M e completar
o volume com o mesmo solvente. Diluir, sucessivamente,
com o mesmo solvente, at concentrao de 0,001% (p/v).
Preparar soluo padro na mesma concentrao, utilizando
o mesmo solvente. Medir as absorvncias das solues
resultantes em 239 nm, utilizando cido clordrico 0,1 M
para ajuste do zero. Calcular o teor de C
20
H
21
FN
2
O.HBr na
amostra a partir das leituras obtidas.
a b
703
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de trietilamina a 0,3% (v/v), ajustar
com cido fosfrico a pH 6,6, e acetonitrila (55:45).
Soluo amostra: transferir o equivalente a 10 mg da
amostra para balo volumtrico de 50 mL e completar o
volume com gua. Transferir 5 mL para balo volumtrico
de 25 mL e completar o volume com o mesmo solvente,
obtendo soluo a 40 g/mL.
Soluo padro: transferir o equivalente a 10 mg de
bromidrato de citalopram SQR para balo volumtrico de
50 mL e completar o volume com gua. Transferir 5 mL
com o mesmo solvente, obtendo soluo a 40 g/mL.
medir as reas sob os picos. Calcular o teor de C
20
H
21
FN
2
O.
HBr na amostra a partir das respostas obtidas com a
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antidepressivo.
BROMIDRATO DE HIOSCIAMINA
Hyoscyamini hydrobromidum
N
C H
3
O
O
OH
HBr
.
NO
3
.HBr; 370,28
bromidrato de hiosciamina; 04727
Bromidrato do ster (S)-(3-endo)-8-metil-8-
azabiciclo[3.2.1]octa-3-lico do cido -(hidroximetil)-
benzenoactico
[306-03-6]
Contm no mnimo 98,5% e, no mximo, 100,5% de
C
17
H
23
NO
3
.HBr em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco, inodoro e de
sabor amargo. Deliquescente ao ar e sensvel luz.
Solubilidade. Muito solvel em gua, em etanol e em
clorofrmio. Muito pouco solvel em ter etlico.
IDENTIFICAO
A. Colocar 10 mg da amostra em cpsula de porcelana,
adicionar cinco gotas de cido ntrico e aquecer em
banho-maria at completa evaporao. Ao resduo, aps
resfriamento, adicionar algumas gotas de hidrxido de
potssio etanlico 0,5 M produzida colorao violeta.
B. A 1 mL de soluo aquosa a 5% (p/v) da amostra,
adicionar cloreto de ouro SR gota a gota, at formao
de precipitado. Adicionar pequena quantidade de cido
clordrico diludo e aquecer at dissoluo do precipitado.
Aps resfriamento, devem ser formadas pequenas
lminas lustrosas, castanho avermelhadas que podem
ser acompanhadas de agulhas com a mesma colorao
(diferenciao com atropina e escopolamina).
C. A uma soluo aquosa a 5% (p/v) da amostra, adicionar
nitrato de prata SR. formado um precipitado branco-
amarelado, insolvel em cido ntrico.
ENSAIOS DE PUREZA
Outros alcaloides. Dissolver 250 mg da amostra em 1 mL
de cido clordrico 0,1 M, diluir com gua para 15 mL e
separar em duas pores. A uma poro de 5 mL da soluo
adicionar algumas gotas de cloreto platnico SR; no deve
formar precipitado imediatamente. A outra poro de 5 mL
da soluo adicionar 2 mL de amnia SR; a mistura poder
desenvolver leve opalescncia, mas no dever apresentar
turvao nem precipitao imediata.
Perda por dessecao (5.2.9). Dessecar em estufa a 105,
DOSEAMENTO
Dissolver cerca de 700 mg da amostra, exatamente pesados,
em mistura de 50 mL de cido actico glacial e 10 mL de
acetato de mercrio SR. Adicionar uma gota de cloreto de
metilrosanilnio SI e titular com com cido perclrico 0,1 M
SV at o aparecimento de cor azul-esverdeada. Faa ensaio
branco para correo necessria. Cada mL de cido perclrico
0,1 M SV equivale a 37,028 mg de C
17
H
23
NO
3
.HBr.
b
ROTULAGEM
CATEGORIA
Anticolinrgico.
BROMOPRIDA
Bromopridum
OCH
3
N H
2
Br
N
N
CH
3
CH
3
O
H
C
14
H
22
BrN
3
O
2
; 344,25
bromoprida; 01471
4-Amino-5-bromo-N-[2-(dietilamino)etil]-2-metoxibenzamida
[4093-35-0]
C
14
H
22
BrN
3
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco a branco
marfm, praticamente inodoro.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua. Pouco
solvel em acetona, etanol e ter etlico. Ligeiramente
solvel em acetonitrila. Solvel em solues diludas de
cidos minerais.
Faixa de fuso (5.2.2): 151 C a 155 C.
IDENTIFICAO
observados no espectro de bromoprida SQR, preparado de
maneira idntica.
B. de Doseamento, exibe mximo em 274 nm, idntico ao
observado no espectro da soluo similar de bromoprida
SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 1 g da amostra em 10 mL de
cido clordrico 0,5 M. A soluo obtida lmpida (5.2.25).
mximo 0,003% (30 ppm).
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Pesar, exatamente, cerca de 0,17 g da
amostra, transferir para erlenmeyer de 150 mL e dissolver
em 80 mL de cido actico glacial. Adicionar 2 mL de
anidrido actico. Titular com cido perclrico 0,1 M SV,
mL de cido perclrico, 0,1 M SV equivale a 34,425 mg de
C
14
H
22
BrN
3
O
2
.
mL. Adicionar 50 mL de cido clordrico 0,1 M, e deixar
em ultrassom por 10 minutos, completar o volume com
o mesmo solvente. Diluir, sucessivamente, com cido
clordrico 0,1 M at concentrao de 0,001% (p/v). Preparar
soluo padro na mesma concentrao, utilizando o
mesmo solvente. Medir as absorvncias das solues em
274 nm, utilizando cido clordrico 0,1 M para ajuste do
14
H
22
BrN
3
O
2
na amostra a partir
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiemtico.
BROMOPRIDA COMPRIMIDOS
quantidade de C
14
H
22
BrN
3
O
2
.
IDENTIFICAO
O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa
de 200 nm a 400 nm, da soluo amostra obtida em
Doseamento, exibe mximos em 274 nm, idnticos aos
a b
705
CARACTERSTICAS
Procedimento para uniformidade de contedo: triturar
cada comprimido at p fno, transferir, quantitativamente,
para balo volumtrico de 100 mL, adicionar 50 mL de ci-
do clordrico 0,1 M, deixar em ultrassom por 15 minutos.
Diluir, sucessivamente, em cido clordrico 0,1 M at con-
centrao de 0,001% (p/v) e prosseguir conforme descrito
em Doseamento.
Meio de dissoluo: cido clordrico 0,1 M , 500 mL
Tempo: 30 minutos
dissoluo e fltrar. Medir as absorvncias das solues em
274 nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente para ajuste
14
H
22
BrN
3
O
2
dissolvida
de bromoprida SQR na concentrao de 0,002% (p/v),
preparada no mesmo solvente.
declarada de C
14
H
22
BrN
3
O
2
DOSEAMENTO
comprimidos. Transferir quantidade de p equivalente
a cerca de 10 mg de bromoprida para balo volumtrico
de 100 mL, adicionar 50 mL de cido clordrico 0,1 M,
deixar em ultrassom por 10 minutos. Completar o volume
com cido clordrico 0,1 M, homogeneizar e fltrar.
Diluir, sucessivamente, em cido clordrico 0,1 M at
concentrao de 0,001% (p/v). Preparar soluo padro na
as absorvncias das solues em 274 nm, utilizando cido
clordrico 0,1 M para ajuste do zero. Calcular a quantidade
de C
14
H
22
BrN
3
O
2
nos comprimidos a partir das leituras
obtidas.
ROTULAGEM
BROMOPRIDA SOLUO ORAL
14
H
22
BrN
3
O
2
.
IDENTIFICAO
da Soluo amostra, obtido em Doseamento, corresponde
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 2,8 a 3,7.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
com slica quimicamente ligada a grupo fenil (5 mm);
fuxo da Fase mvel de 1 mL/minuto.
monobsico em 900 mL de gua, adicionar 2 mL de
trietilamina, ajustar o pH em 7,0 0,05 com cido fosfrico
e diluir para 1000 mL com gua.
(60:40).
Diluente: Mistura de gua e acetonitrila (3:2).
Soluo amostra: transferir volume da amostra equivalente
a 8 mg de bromoprida para balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com Diluente.
Soluo padro: Transferir 40 mg de bromoprida SQR
para balo volumtrico de 50 mL, dissolver em acetonitrila
e completar o volume com o mesmo solvente. Transferir 1
mL para balo volumtrico de 10 mL e completar o volume
com Diluente, obtendo soluo a 80 mg/mL.
da coluna no menor que 3500 pratos tericos/metro. O
b
C
14
H
22
BrN
3
O
2
na soluo oral a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
BUTILBROMETO DE ESCOPOLAMINA
Scopolamini butylbromidum
N
+
CH
3
O
O
OH O
C H
3
Br
-
C
21
H
30
BrNO
4
; 440,37
butilbrometo de escopolamina; 03517
Brometo de (1,2,4,5,7)-9-butil-7-[(2S)-3-
hi droxi -1-oxo-2-feni l propoxi ]-9-met i l -3-oxa-9-
azoniatriciclo[3.3.1.0
2,4
]nonano
[149-64-4]
C
21
H
30
BrNO
4
DESCRIO
branco.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua e em cloreto de
metileno, pouco solvel em etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 139 C a 141 C.
Poder rotatrio (5.2.8): -18 a -20, em relao substncia
dessecada. Determinar em soluo a 10% (p/v) em gua.
IDENTIFICAO
Os testes B., C. e D. podem ser omitidos quando os testes
A. e E. forem realizados.
butilbrometo de escopolamina SQR, preparado de maneira
idntica.
B. Dissolver sob agitao1 mg da amostra com 0,2 mL
de cido ntrico e evaporar at secura em banho-maria.
Dissolver o resduo em 2 mL de acetona e acrescentar
0,1 mL de hidrxido de potssio a 3% (p/v) em metanol.
D. Dissolver sob agitao 0,5 g da amostra com 5 mL de
gua e acrescentar 2 mL de hidrxido de sdio SR. No
deve formar precipitado.
E. Responde s reaes do on brometo (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
no mtodo B. de Doseamento. Preparar as solues como
descrito a seguir:
Soluo (1): pesar, exatamente, cerca de 0,1 g da amostra e
transferir para balo volumtrico de 10 mL com auxlio da
Fase mvel. Completar o volume com o mesmo solvente.
Soluo (2): pesar, exatamente, cerca de 10 mg de
bromidrato de escopolamina SQR, transferir para balo
volumtrico de 100 mL e completar com Fase mvel.
Transferir 10 mL para balo volumtrico de 50 mL e
mvel.
Soluo de resoluo: a 10 mL da Soluo (2), adicionar
10 L da Soluo (1).
Injetar 20 L da Soluo de resoluo. A resoluo entre
escopolamina e butilescopolamina no menor que 5. O
(1), Soluo (2) e Soluo (3), registrar os cromatogramas
por, no mnimo, o dobro do tempo de reteno do pico
principal e medir as reas sob os picos. A rea sob o pico
corresponde escopolamina eventualmente presente no
cromatograma obtido com Soluo (1) no maior que a
rea sob o pico principal obtido com a Soluo (3) (0,1%).
A rea de qualquer outro pico secundrio obtido com a
Soluo (1), exceto o pico principal e o pico correspondente
escopolamina, no maior que a rea sob o pico principal
obtido com a Soluo (2) (0,2%). Desconsiderar os picos
referentes ao solvente e ao on brometo, os quais aparecem
no incio do cromatograma.
a b
707
No mximo 2,5%.
DOSEAMENTO
Empregar um dos mtodos a seguir.
A. Pesar, exatamente, cerca de 0,4 g da amostra e dissolver
em 50 mL de gua. Titular com nitrato de prata 0,1 M SV
e determinar o ponto fnal potenciometricamente. Utilizar
eletrodo indicador de prata e eletrodo de referncia de
prata-cloreto de prata. Realizar ensaio em branco e fazer as
correes necessrias. Cada mL de nitrato de prata 0,1 M
SV corresponde a 44,037 mg de C
21
H
30
BrNO
4.
com slica quimicamente ligada a octadecilsilano (5 mm
a 10 mm), mantida temperatura ambiente; fuxo da Fase
mvel de 2 mL/minuto.
Fase mvel: 2 g de laurilsulfato de sdio em mistura de
cido clordrico 0,001 M e metanol (37:68).
da amostra em cido clordrico 0,001 M para obter a 0,4
mg/mL.
butilbrometo de escopolamina SQR em cido clordrico
0,001 M para obter soluo a 0,4 mg/mL.
21
H
30
BrNO
4

ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiespasmdico.
COMPRIMIDOS
21
H
30
BrNO
4
. Os comprimidos
devem ser revestidos (revestimento aucarado).
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade do
p equivalente a 50 mg de butilbrometo de escopolamina
com 20 mL de clorofrmio. Filtrar, evaporar at secura e
ressuspender o resduo com 5 mL de acetonitrila. Evaporar
at secura, a 50 C, sob presso reduzida por 1 hora. O
espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) do resduo,
no espectro de butilbrometo de escopolamina SQR.
B. Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade de
p equivalente a 50 mg de butilbrometo de escopolamina
com 20 mL de clorofrmio. Filtrar, evaporar at secura,
ressuspender o resduo com 50 mL de gua e fltrar. O
espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa de
230 nm a 350 nm, da soluo fltrada, exibe mximos em
252 nm, 257 nm e 264 nm.
C. Utilizar 1 mg do resduo obtido no mtodo A. de
Identifcao desta monografa, e proceder conforme
descrito no mtodo B. de Identifcao da monografa de
Butilbrometo de escopolamina.
CARACTERSTICAS
cada comprimido para balo volumtrico de 25 mL e
adicionar 15 mL de cido clordrico 0,001 M. Agitar
mecanicamente por 15 minutos para desintegrar o
comprimido. Deixar em ultrassom por 15 minutos,
centrifugar por 15 minutos e completar o volume com
o mesmo solvente. Se necessrio, fltrar o sobrenadante.
Prosseguir conforme descrito no mtodo de Doseamento.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de escopolamina. Proceder conforme descrito no
mtodo B. de Doseamento da monografa de Butilbrometo
de escopolamina. Preparar as solues como descrito a
seguir.
b
Soluo (1): pesar e pulverizar 20 comprimidos. Utilizar
quantidade do p equivalente a cerca de 0,1 g de
butilbrometo de escopolamina. Adicionar 10 mL de cido
clordrico 0,001 M, deixar em ultrassom por 15 minutos
e centrifugar por 15 minutos. Se necessrio, fltrar o
sobrenadante.
bromidrato de escopolamina SQR, transferir para balo
clordrico 0,001 M. Transferir 5 mL para balo volumtrico
de 50 mL e completar o volume com o mesmo solvente.
Soluo de resoluo: a 10 mL da Soluo (2) adicionar 10
l da Soluo (1).
Injetar replicatas de 20 L da Soluo de resoluo.
A resoluo entre os picos de escopolamina e
butilescopolamina no menor que 5. O desvio padro
menor que 2,0%.
soluo, registrar os cromatogramas e medir as reas sob
os picos. A rea sob o pico correspondente a escopolamina
obtido com a Soluo (1) no deve ser maior do que a rea
sob o pico principal obtido com a Soluo (2) (0,1%).
slica-gel 60 F
254
, como suporte, e mistura de cido frmico,
gua, etanol e cloreto de metileno (0,5:1,5:9:9), como fase
mvel. Permitir que a fase mvel migre em torno de 4 cm
acima do ponto de aplicao na placa cromatogrfca e
aplicar, separadamente, 2 L de cada uma das solues,
Soluo (1): pesar e pulverizar 20 comprimidos. Utilizar
quantidade do p equivalente a cerca de 20 mg de
butilbrometo de escopolamina. Adicionar 5 mL de cido
clordrico 0,01 M deixar em ultrassom por 15 minutos
e centrifugar por 15 minutos. Se necessrio, fltrar o
sobrenadante.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, secar
em estufa a 60 C durante 15 minutos e nebulizar com
iodeto de potssio e subnitrato de bismuto SR. Deixar
a placa secar, nebulizar com nitrito de sdio a 5%
(p/v) e examinar imediatamente. A mancha principal
obtida no cromatograma da Soluo (1) apresenta Rf de
aproximadamente 0,45. Qualquer mancha secundria
obtida no cromatograma da Soluo (1) com Rf menor que
o da mancha principal no mais intensa do que a mancha
obtida com a Soluo (2) (3%), e no mais que duas
manchas so mais intensas do que a mancha obtida com a
Soluo (4) (0,25%). Qualquer mancha secundria com Rf
maior que o da mancha principal no mais intensa do que
a mancha obtida com a Soluo (3) (2%) e no mais que
uma mancha mais intensa do que a mancha obtida com a
Soluo (4) (0,25%).
DOSEAMENTO
da monografa de Butilbrometo de escopolamina. Preparar
a soluo amostra como descrito a seguir.
Transferir quantidade do p equivalente a 40 mg de
butilbrometo de escopolamina para balo volumtrico de
100 mL, acrescentar 60 mL de cido clordrico 0,001 M,
deixar em ultrassom por 15 minutos, completar o volume
com o mesmo solvente e centrifugar por 15 minutos. Se
necessrio, fltrar o sobrenadante.
21
H
30
BrNO
4

ROTULAGEM
SOLUO INJETVEL
21
H
30
BrNO
4
. Pode ser preparada
em gua para injetveis ou em outro solvente adequado.
IDENTIFICAO
A. Utilizar volume da soluo injetvel equivalente a 0,1
g de butilbrometo de escopolamina. Evaporar at secura
e ressuspender o resduo com clorofrmio. Evaporar at
secura e ressuspender o resduo com 5 mL de acetonitrila.
Evaporar at secura, a 50 C, sob presso reduzida, por 1
hora. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) do
resduo, disperso em brometo de potssio, apresenta mximos
de absoro somente nos mesmos comprimentos de onda e
com as mesmas intensidades relativas daqueles observados no
espectro de butilbrometo de escopolamina SQR.
faixa de 230 nm a 350 nm, da Soluo amostra obtida em
Doseamento, exibe mximos em 252 nm, 257 nm e 264 nm.
C. Utilizar 1 mg do resduo obtido no mtodo A. de
Identifcao desta monografa, e proceder conforme
a b
709
descrito no mtodo B. de Identifcao da monografa de
Butilbrometo de escopolamina.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,7 a 5,5.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de escopolamina. Proceder conforme descrito no
mtodo B. de Doseamento da monografa de Butilbrometo
de escopolamina. Preparar as solues como descrito a
seguir.
Soluo (1): diluir, se necessrio, volume de soluo
injetvel em cido clordrico 0,001 M para preparar
soluo a 10 mg/mL.
Soluo (2): pesar, exatamente, 10 mg de bromidrato de
escopolamina SQR, transferir para balo volumtrico de
100 mL e completar o volume com cido clordrico 0,001
M. Transferir 5 mL dessa soluo para balo volumtrico
Soluo de resoluo: a 10 mL da Soluo (2), adicionar
10 L da Soluo (1).
A resoluo entre os picos de escopolamina e
butilescopolamina no menor que 5. O desvio padro
menor que 2,0%.
soluo, registrar os cromatogramas e medir as reas sob
os picos. A rea sob o pico correspondente escopolamina
obtida com a Soluo (1) no deve ser maior do que a rea
slica-gel 60 F
254
gua, etanol e cloreto de metileno (0,5:1,5:9:9), como fase
mvel. Permitir que a fase mvel migre em torno de 4 cm
acima do ponto de aplicao na placa cromatogrfca e
aplicar, separadamente, 2 L de cada uma das solues,
Soluo (1): diluir, se necessrio, volume de amostra
para preparar soluo a 20 mg/mL de butilbrometo de
escopolamina em cido clordrico 0,01 M.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, secar com a
60 C durante 15 minutos e nebulizar com iodeto de potssio
e subnitrato de bismuto SR. Deixar a placa secar e nebulizar
com nitrito de sdio a 5% (p/v) e examinar imediatamente.
A mancha principal obtida no cromatograma da Soluo (1)
apresenta Rf de aproximadamente 0,45. Qualquer mancha
secundria obtida no cromatograma da Soluo (1) com Rf
menor que o da mancha principal no mais intensa do que
a mancha obtida com a Soluo (2) (3%) e no mais que
duas manchas so mais intensas do que a mancha obtida
com a Soluo (4) (0,25%). Qualquer mancha secundria
com Rf maior que o da mancha principal no mais intensa
do que a mancha obtida com a Soluo (3) (2%) e no mais
do que uma mancha mais intensa do que a mancha obtida
com a Soluo (4) (0,25%).
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). No mximo 555 UE/
mg de butilbrometo de escopolamina.
DOSEAMENTO
da monografa de Butilbrometo de escopolamina. Preparar
a Soluo amostra como descrito a seguir.
Soluo amostra: transferir volume de soluo injetvel
equivalente a 40 mg de butilbrometo de escopolamina para
21
H
30
BrNO
4

na soluo injetvel a partir das respostas obtidas com as
ROTULAGEM
a c
711
CAfENA
Coffeinum
N
N
N
N
O
O
C H
3
CH
3
CH
3
C
8
H
10
N
4
O
2
; 194,19
cafena; 01642
3,7-Diidro-1,3,7-trimetil-1H-purina-2,6-diona
[58-08-2]
C
8
H
10
N
4
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou cristais aciculares
brancos e brilhantes. Sublima facilmente sob a ao do
calor. Inodoro e de sabor amargo. A forma hidratada
eforescente ao ar.
Solubilidade. Ligeiramente solvel gua e etanol,
facilmente solvel em clorofrmio e pouco solvel em ter
etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 235 C a 239 C.
IDENTIFICAO
cafena SQR, preparado de maneira idntica.
B. Dissolver cerca de 5 mg da amostra em 1 mL de cido
clordrico em vidro de relgio ou cpsula de porcelana,
adicionar 50 mg de clorato de potssio e evaporar em
banho-maria at secura. Inverter o vidro de relgio sobre
outro contendo uma pequena quantidade de hidrxido de
amnio 6 M. O resduo adquire uma colorao prpura que
desaparece com a adio de hidrxido de sdio M.
C. A 2 mL de uma soluo aquosa saturada da amostra,
adicionar 0,1 mL de iodo SR. A soluo apresenta-se
lmpida. Adicionar 0,1 mL de cido clordrico diludo.
Forma-se precipitado castanho que se dissolve aps
neutralizao com soluo diluda de hidrxido de sdio.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel G
254
, como suporte, e mistura de amnia, acetona,
clorofrmio e 1-butanol (10:30:30:40), como fase mvel.
solues descritas a seguir.
Soluo (1): dissolver 0,2 g da amostra em mistura de
metanol e clorofrmio (4:6) e completar o volume para
balo volumtrico de 10 mL.
volumtrico de 100 mL e completar o volume com mistura
de metanol e clorofrmio (4:6).
Desenvolver o cromatograma, no percurso de 15 cm.
Remover a placa, deixar secar ao ar. Examinar sob luz
ultravioleta (254 nm). Se aparecerem outras manchas,
alm da mancha principal, no cromatograma obtido com
a Soluo (1), nenhuma mais intensa que a mancha do
cromatograma obtido com a Soluo (2) (0,5%).
Outros Alcalides. A 5 mL de uma soluo a 0,02% (p/v),
adicionar gotas de iodeto de potssio mercrio SR. No
deve precipitar.
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar o Mtodo 1. No mximo
0,0003% (3 ppm).
Chumbo (5.3.2.12). No mximo 0,001% (10 ppm).
Metais Pesados (5.3.2.3). Misturar 2 g da amostra com 5
mL de cido clordrico 0,1 M e 45 mL de gua e aquecer
at dissoluo. Aps o resfriamento, utilizar 25 mL desta
soluo para o ensaio de metais pesados. Prosseguir
conforme descrito em Mtodo I. No mximo 0,002% (20
ppm).
amostra. Dessecar em estufa a 115 C at peso constante,
ou pelo mtodo de Karl Fischer. No mximo 0,5% para a
cafena anidra. No mximo 8,5% para a cafena hidratada.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver 0,4 g da amostra, exatamente
pesada, com aquecimento, em 40 mL de anidrido actico.
Esfriar e adicionar 80 mL de benzeno. Titular com
cido perclrico 0,1 M SV, determinando o ponto fnal
potenciometricamente. Cada mL de cido perclrico 0,1 M
8
H
10
N
4
O
2
.
c
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Estimulante central.
CALAMINA
ZnO; 81,41
calamina; 01646
Calamina
[8011-96-9]
Calamina xido de zinco com uma pequena proporo
de xido de ferro, e contm, aps ignio, no menos que
98,0% e no mais que 100,5% de xido de zinco (ZnO).
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P amorfo, no palpvel, rseo
ou marrom avermelhado, dependendo da cor da variedade
e da quantidade do xido frrico presente, bem como do
processo pelo qual incorporado.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua. Dissolve
com efervescncia em cido clordrico.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 1 g da amostra com 10 mL de cido clordrico
3 M e fltrar. O fltrado responde s reaes do on zinco
(5.3.1.1).
B. Dissolver 1 g da amostra em 10 mL de cido clordrico 3
M, aquecer fervura, e fltrar. O fltrado assume colorao
avermelhada aps a adio de tiocianato de amnio SR.
ENSAIOS DE PUREZA
Clcio. Fazer a digesto de 1 g da amostra em 25 mL de
cido clordrico 3 M por 30 minutos. Filtrar para remover
o xido frrico insolvel, adicionar hidrxido de sdio 6 M
ao fltrado, at que o primeiro precipitado que se forma
redissolvido, em seguida adicionar mais 5 mL de hidrxido
de sdio 6 M. A 10 mL desta soluo adicionar 2 mL de
oxalato de amnio a 3,5% (p/v). No mais que uma leve
turbidez produzida.
Clcio ou Magnsio. A outra poro de 10 mL da soluo
preparada para o teste de Clcio, adicionar 2 mL de fosfato
de sdio dibsico hepta-hidratado a 12% (p/v). No mais
que uma leve turbidez produzida.
Chumbo. Para 1 g da amostra, adicionar 15 mL de gua,
agitar, adicionar ento 3 mL de cido actico glacial,
aquecer em banho-maria at dissolver. Filtrar e adicionar
cinco gotas de cromato de potssio SR. Nenhuma turvao
formada.
Substncias insolveis em cido. Pesar 2 g e adicionar
50 mL de cido clordrico 3 M. Se um resduo insolvel
remanescer, coletar em um fltro tarado, lavar com gua e
secar a 105 C por 1 hora, esfriar e pesar. O peso do resduo
no excede 40 mg (2,0%)
Substncias alcalinas. Fazer a digesto de 1 g com 20 mL
de gua em banho-maria por 15 minutos, fltrar, adicionar
duas gotas de fenoftalena SI. Se uma cor vermelha
produzida, no mais que 0,2 mL de cido sulfrico 0,05 M
requerido para remov-la.
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar o Mtodo 1. Utilizar soluo de
cido sulfrico 3,5 M e soluo de cloreto estanoso a 40%
(p/v) em cido clordrico. O limite de 0,0008% (8 ppm).
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Pesar cerca de 2 g da amostra,
calcinar a 500 C at peso constante. No mximo 2,0%.
Cumpre o teste para ausncia de Pseudomonas aeruginosa
e Staphylococcus aureus.
DOSEAMENTO
Calcinar, exatamente, cerca de 1,5 g de calamina. A esta
amostra recentemente calcinada, fazer a digesto com 50
mL de cido sulfrico 0,5 M SV, aplicando calor suave, at
no ocorrer mais solubilizao. Filtrar a mistura, e lavar o
resduo no fltro com gua quente at que a ltima lavagem
seja neutra ao papel de tornassol. Ao fltrado combinado
e lavagens, adicionar 2,5 g de cloreto de amnio, esfriar,
adicionar alaranjado de metila, e titular com hidrxido de
sdio M SV. Cada mL de cido sulfrico 0,5 M SV equivale
a 40,69 mg de xido de zinco.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Adstringente; antipruriginoso.
CALNDULA
Calendulae fos
Calendula offcinalis L. ASTERACEAE
A droga vegetal consiste de fores liguladas inteiras ou
trituradas, acompanhadas de escassas fores tubulosas,
separadas do receptculo e das brcteas involucrais, secas.
No deve conter menos que 0,4% de favonoides totais,
a c
713
calculados como hiperosdeo (C
21
H
20
O
12
, 464,4), em
relao ao material dessecado.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga possui odor
fraco e sabor levemente amargo.
DESCRIO MACROSCPICA
Flores dispostas em captulos de 3 cm a 7 cm de dimetro,
envolvidas por um invlucro de duas sries de brcteas.
As fores da periferia so liguladas, pistiladas, de 1,5 cm
a 3,0 cm de comprimento e 0,5 cm a 0,7 cm de largura
na poro mediana da lgula. Corolas amareladas ou
alaranjadas, com o limbo tridentado, apresentando quatro
ou cinco nervuras e tubo curto coberto de tricomas,
ocasionalmente acompanhadas de um estilete fliforme
e um estigma bfdo. As fores do centro so escassas,
tubulosas, pequenas, curtas, de aproximadamente 0,5 cm
de comprimento, hermafroditas, amarelas ou alaranjadas,
raro quase avermelhadas, com corola quinquedentada;
anteras sagitadas e estilete indiviso. Papus ausente.
DESCRIO MICROSCPICA
Em vista frontal, a face adaxial da epiderme da corola
ligulada mostra clulas retangulares, alongadas, de
contorno levemente sinuoso, com cutcula estriada e
destituda de estmatos. Na regio apical desta mesma face,
as clulas so menores e arranjadas menos regularmente;
no extremo basal da lgula existe uma camada de clulas
com espessamento nas paredes externas contendo prismas
e pequenos aglomerados de cristais. A face abaxial da
epiderme semelhante adaxial, diferindo desta por
apresentar poucos estmatos anomocticos, os quais so
relativamente grandes na regio apical da lgula, quando
comparados com as demais clulas epidrmicas desta
poro. Na regio basal da face abaxial ocorrem tricomas
tectores longos, multicelulares, bisseriados, cnicos, de
pice arredondado e tricomas glandulares multicelulares,
de pedicelo unisseriado, com trs a cinco clulas, ou
bisseriado, com trs ou quatro clulas em cada fleira,
ambos com cabea ovalada, multicelular, geralmente
bisseriada. As clulas do parnquima subjacente da corola
ligulada apresentam numerosas gotas de leo de colorao
amarelo-alaranjada a amarelo-claro. O parnquima da
lgula atravessado longitudinalmente por quatro ou cindo
feixes vasculares, com elementos de vaso apresentando
espessamentos anelados e helicoidais. Junto s clulas
parenquimticas das corolas tubulosas so encontrados
cinco feixes vasculares bifurcados abaixo da zona de
soldadura das ptalas. Nas brcteas involucrais, quando
presentes, ocorrem tricomas tectores longos, multicelulares,
bisseriados, cnicos, de pice arredondado, e tricomas
tectores com quaro ou cinco clulas, unisseriadas, das
quais a clula apical muito mais longa do que as demais
e frequentemente dobrada e achatada, alm de tricomas
glandulares mais raros, multicelulares, de pedicelo
bisseriado, cnico, com clulas basais mais longas e
irregulares do que as demais. Nas anteras observa-se o
endotcio, composto de clulas ligeiramente alongadas que,
em vista frontal, mostram espessamentos caractersticos,
restritos s paredes transversais (anticlinais). Associados
ao endotcio, ocorrem escleredes pequenos, alaranjados,
com paredes pouco espessadas e numerosas pontoaes.
Os gros de plen so equinados, tricolpados, medindo
em torno de 45 um de dimetro. As clulas epidrmicas
dos estigmas so poligonais a levemente alongadas em
vista frontal e mostram papilas curtas, bulbosas, enquanto
as dos ovrios so pequenas, poligonais em vista frontal,
contendo pigmentos castanhos. Nos ovrios ocorrem
tricomas glandulares iguais aos das corolas liguladas. Os
aqunios, quando presentes, tm forma navicular, com
ornamentaes dentadas na face dorsal.
O p deve atender a todas as exigncias estabelecidas
para a espcie, menos os caracteres macroscpicos. So
caractersticas: colorao castanho-amarelada; presena de
tubos das fores liguladas; partes de lgulas; fragmentos da
epiderme das lgulas com cutcula estriada; fragmentos de
parnquima subepidrmico com gotas de leo; fragmentos
de epiderme com estmatos anomocticos grandes;
clulas basais das corolas contendo cristais; fragmentos
de tecido vascular; corolas das fores tubulosas; anteras
das fores tubulosas; fragmentos de anteras na maioria das
vezes com pores de feixes condutores; gros de plen
equinados, tricolpados; fragmentos de clulas epidrmicas
dos estigmas com papilas bulbosas; fragmentos de paredes
de ovrios com clulas pigmentadas: aqunios e tricomas
iguais aos descritos acima.
IDENTIFICAO
254
, com
espessura de 250 um, como suporte, e mistura de cido
frmico anidro, gua e acetato de etila (10:10:80), como
de banda, 20 uL da Soluo (1) e 10 uL da Soluo (2),
descritas a seguir.
Soluo (1): ferver sob refuxo 1 g da droga pulverizada
com 10 mL de metanol durante 10 minutos e fltrar.
Soluo (2): dissolver 2,5 mg de rutina, 1 mg de cido
cafeico e 1 mg de cido clorognico em metanol, e
completar o volume para 10 mL utilizando o mesmo
solvente.
secar em estufa a temperatura entre 100 C e 105 C e,
ainda morna, nebulizar com uma soluo de difenilborato
de aminoetanol a 1% (p/v) em metanol, seguido de uma
soluo de macrogol 400 a 5% (p/v) em metanol. Deixar
a placa secar ao ar livre por 30 minutos. Examinar sob
luz ultravioleta (365 nm). O cromatograma obtido com
a Soluo (2), deve apresentar no tero inferior da placa
duas manchas fuorescentes, uma de colorao marrom-
amarelada (rutina) e outra de colorao azul claro (cido
clorognico); e no tero superior, uma mancha fuorescente
c
de colorao azul claro (cido cafeico). O cromatograma da
Soluo (1) deve apresentar mancha fuorescente marrom-
amarelada correspondente em posio mancha obtida
com a rutina no cromatograma da Soluo (2); manchas
fuorescentes verde amarelada e azul claro, correspondentes
em posio mancha obtida com o cido clorognico no
cromatograma da Soluo (2); manchas fuorescentes
verde amarelada e azul claro correspondente em posio
mancha obtida com o cido cafeico no cromatograma da
Soluo (2). Outras manchas podem estar presentes.
ENSAIOS DE PUREZA
Matria estranha (5.4.2.2). No mximo 3,0%.
gua (5.4.2.3). No mximo 12,0%.
DOSEAMENTO
flavonoides totais
a seguir.
Soluo estoque: pesar, exatamente, cerca de 0,4 g de
droga pulverizada (800 m), e transferir para balo de
fundo redondo de 100 mL. Acrescentar 1 mL de soluo
aquosa de metenamina a 0,5% (p/v), 20 mL de acetona e
2 mL de cido clordrico. Aquecer em banho-maria, sob
refuxo, por 30 minutos. Filtrar a mistura em algodo para
um balo volumtrico de 100 mL, retornar o resduo da
droga e o algodo ao mesmo balo de fundo redondo,
adicionar 20 mL de acetona. Colocar em refuxo, por 10
minutos. Aps resfriamento at temperatura ambiente,
fltrar a soluo para o balo volumtrico de 100 mL.
Repetir a operao. Em seguida, completar o volume do
balo volumtrico com acetona. Em funil de separao,
adicionar 20 mL dessa soluo e 20 mL de gua destilada
e, aps, extrair com 15 mL de acetato de etila, repetir trs
vezes, com pores de 10 mL de acetato de etila cada vez.
Reunir as fases de acetato de etila e lav-las em funil de
separao, com duas pores de 50 mL de gua destilada.
Transferir a fase de acetato de etila para balo volumtrico
de 50 mL e completar o volume com acetato de etila.
Soluo amostra: a 10 mL da Soluo estoque, adicionar
1 mL de soluo de cloreto de alumnio a 2% (p/v) em
soluo de cido actico 5% (v/v) em metanol. Diluir em
balo volumtrico de 25 mL com soluo de cido actico
5% (v/v) em metanol.
Soluo branco: adicionar 10 mL da Soluo estoque em
soluo de cido actico a 5% (v/v) em metanol.
Exatamente aps 30 minutos, medir a absorvncia da
Soluo amostra a 425 nm, em cubeta de 1 cm, utilizando
Soluo branco para ajuste do zero. Calcular a porcentagem
de favonoides totais segundo a expresso:
em que
A = absorvncia da Soluo amostra medida;
PD = perda por dessecao (% p/p).
O resultado fornecido em porcentagem (p/p) de
favonoides totais calculados como hiperosdeo (C
21
H
20
O
12
).
Alternativamente, realizar os clculos considerando A(1%,
1cm) = 500.
Em recipientes de vidro ou metal, bem fechados, ao abrigo
da luz e do calor.
a c
715
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Calendula offcinalis L.
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A, B, C, D, G, H e J a 100 m; em E, f e I a 500 m.
A for pistilada ligulada. B tricoma tector multicelular bisseriado do tubo da corola da for ligulada. C epiderme da lgula com cutcula estriada. D
parnquima da lgula contendo gotas de leo. E anteras da for tubulosa. f corola da for tubulosa do disco. G fruto. H gros de plen tricolpados.
I fragmento de lgula. J detalhe do parnquima com gotas de leo na poro indicada em I.
c
CANELA-DA-CHINA
Cinnamomi cortex
Cinnamomum cassia (L.) J. Presl - LAURACEAE
A droga vegetal corresponde casca seca contendo no
mnimo 1,0% de leo voltil, constitudo por 70,0% a
90,0% de trans-cinamaldedo.
SINONMIA CIENTFICA
Cinnamomum aromaticum Nees.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Possui odor aromtico
caracterstico e seu sabor menos doce, levemente
mucilaginoso e menos aromtico que o da canela-do-
ceilo.
DESCRIO MACROSCPICA
A droga apresenta a casca na forma de fragmentos com
3,0 cm a 7,0 cm de comprimento, 1,0 cm a 2,0 cm de
largura e 1,0 mm a 2,0 mm de espessura. A superfcie
externa, correspondente aos restos do sber, possui
colorao parda, castanha ou acinzentada, com manchas
ou estrias e lenticelas; a textura rugosa e no spera.
A superfcie interna, correspondente regio do foema,
possui colorao castanho-clara a castanha e textura lisa e
homognea.
DESCRIO MICROSCPICA
A casca possui tecidos de origem primria, principalmente
tecido cortical, e tecidos secundrios, derivados do
cmbio vascular e felognio. O felognio se diferencia
superfcialmente, e suas clulas so alongadas
tangencialmente, so vacuoladas e contm compostos
fenlicos. O felema, em sua poro mais interna, apresenta
clulas de paredes suberizadas, sendo as periclinais
externas espessas. Externamente ao felema recm
formado so observadas duas a trs camadas de ritidoma
em escamao. Lenticelas so comuns. Internamente
ao felognio predomina tecido parenquimtico, onde
ocorrem clulas ptreas, as quais podem ocorrer isoladas
ou agrupadas, podendo apresentar espessamento parietal
desigual. A poro mdia do tecido cortical primrio
composta por parnquima com espaos intercelulares
esquizgenos e acmulo de material mucilaginoso em
alguns destes espaos. Alguns idioblastos com leo
so observados, alm de grande quantidade de clulas
contendo gros de amido simples predominantemente,
ou compostos. Na regio cortical predominam idioblastos
fenlicos. Na regio mais interna do parnquima cortical,
proximal ao foema secundrio, ocorre uma faixa contnua
e irregular de clulas ptreas de paredes espessas com
duas a dez camadas de clulas de espessura. O foema
secundrio possui, alm dos elementos de tubo crivados e
clulas companheiras, grande quantidade de parnquima,
incluindo parnquima seriado e fbras libriformes esparsas
e usualmente isoladas. Os raios so predominantemente
heterocelulares, podendo ocorrer raios homocelulares,
com duas clulas de largura, raro trs, e cinco a 18 clulas
de altura, onde usual ocorrer idioblastos fenlicos com
grande concentrao de cristais aciculares de oxalato de
clcio similares a rfdes, alm de cristais prismticos; a
melhor observao dos cristais realizada em aumento de
1000 vezes. Tambm so observados idioblastos contendo
leos, alm de clulas mucilaginosas. O foema no
estratifcado; as placas crivadas possuem uma nica rea
crivada, so retas ou com diversos tipos de inclinao. Na
poro externa do foema a dilatao do tecido se d atravs
de proliferao dos raios e crescimento tangencial de suas
clulas, sendo que este tecido de expanso no acumula
compostos fenlicos.
caractersticas: colorao castanha; gros de amido isolados
e/ou agrupados, simples ou compostos; fragmentos de
tecido parenquimtico contendo gros de amido e gotas
lipdicas; grande quantidade de cristais dissociados,
aciculares e/ou prismticos de pice truncado; clulas
ptreas isoladas e/ou agrupadas, dissociadas ou no interior
de fragmentos de tecido parenquimtico; raros escleredes
colunares, isolados; fbras de 600 m de comprimento, em
mdia, e 35 m de largura, em mdia, com paredes espessas,
lmen estreito, isoladas ou associadas a fragmentos de
parnquima.
IDENTIFICAO
254
, com
espessura de 250 um, como suporte e mistura de metanol e
tolueno (10:90), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, em forma de banda, 10 L da Soluo (1) e da
Soluo (1): dissolver 0,5 mL do leo voltil a ser
examinado em acetona e diluir a 10 mL com o mesmo
solvente.
Soluo (2): dissolver 10 L de eugenol em acetona e
diluir a 10 mL com o mesmo solvente.
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (365 nm). Uma
mancha fuorescente azul atribuda cumarina (Rf de
aproximadamente 0,55). Nebulizar a cromatoplaca com
anisaldedo SR e deixar em estufa entre 100 C e 105 C,
por 5 minutos. O cromatograma obtido com a Soluo (2)
apresenta uma zona de colorao cinza escura (eugenol)
com Rf de aproximadamente 0,5. O cromatograma obtido
com a Soluo (1) apresenta zona violcea, logo acima da
mancha padro de eugenol, com Rf de 0,6, correspondente
ao trans-cinamaldedo. Outras zonas tnues podem estar
presentes.
a c
717
ENSAIOS DE PUREZA
DOSEAMENTO
leos volteis
destilao e 0,5 mL de xileno. Utilizar 50 g da droga moda
e destilar a velocidade de 3 mL a 4 mL por minuto, durante
4 horas. O teor de leo voltil no deve ser inferior 1,0%.
trans-cinamaldedo
(5.2.17.5). Utilizar cromatgrafo a gs provido de detector
de ionizao de chama; coluna cromatogrfca capilar de
30 m de comprimento e 0,25 mm de dimetro interno,
preenchida com polidifenildimetilsiloxano, com espessura
do flme de 0,25 um; temperatura da coluna de 60 C a 300
C, a 3 C por minuto (total de 80 minutos); temperatura
do injetor a 220 C; temperatura do detector a 250 C;
hlio a 80 kPa de presso, como gs de arraste, e fuxo de
1 mL/minuto. Utilizar mistura de nitrognio, ar sinttico e
hidrognio (1:1:10) como gases auxiliares.
Soluo amostra: diluir o leo voltil em ter etlico
(2:100).
Procedimento: injetar 1 L da Soluo amostra no
cromatgrafo a gs, utilizar diviso de fuxo de 1:50. O
trans-cinamaldedo e o cis-cinamaldedo apresentam
tempos de reteno linear (ndice de Reteno Relativo) de
1270 e 1219, respectivamente. As concentraes relativas
so obtidas por integrao manual ou eletrnica. Calcular
o ndice de Reteno Relativo (IRR), segundo a expresso:
em que
n = nmero de tomos de carbono do alcano de menor peso
molecular;
tr
x
= tempo de reteno do composto x (intermedirio a
tr
z
e tr
z+1
);
tr
z
= tempo de reteno do alcano com n carbonos;
tr
z+1
= tempo de reteno do alcano com n +1 carbonos.
c
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Cinnamomum cassia (L.) J. Presl
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 5 mm; em B a 40 m; em C a 10 m; em D a 20 m; em E a 17,5 m; em f a
3,8 m; em G a 24,5 m; em H e I a 37,5 m.
A aspecto geral de poro da casca. B aspecto histolgico de poro externa da casca atravs de seco transversal: clulas ptreas (cp); raio
parenquimtico (rp); fbra (fb); elemento de tubo crivado (etc). C detalhe de um idioblasto contendo cristais aciculares de oxalato de clcio: cristal
(cr); espao intercelular (ei). D detalhe parcial de poro do foema, em seco longitudinal: fbra (fb); parnquima (par). E, f, G e H detalhes do p.
E gros de amido. f cristais truncado e acicular. G clulas ptreas. H clulas de parnquima com gros de amido. I clulas parenquimticas
com incluso lipdica.
a c
719
CANELA-DO-CEILO
Cinnamomi cortex
Cinnamomum verum J. Presl - LAURACEAE
A droga constituda pela casca seca, isenta da periderme
e do parnquima cortical externo, proveniente do caule
principal e de ramifcaes deste, contendo, no mnimo,
1,2% de leo voltil contendo, no mnimo, 60,0% de trans-
cinamaldeido.
SINONMIA CIENTFICA
Cinnamonum zeylanicum Blume
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga apresenta
aroma caracterstico de aldedo cinmico e sabor picante
e adocicado.
DESCRIO MACROSCPICA
O material desidratado apresenta o tecido enrolado sobre
si mesmo formando tubos, com cerca de at 30,0 cm de
comprimento e 0,2 mm a 0,4 mm de espessura. A superfcie
exposta, referente periderme, lisa ou com estrias
longitudinais levemente mais escuras, podendo ou no ser
paralelas e com ondulaes que podem ser regulares. A
colorao superfcial parda no homognea. A colorao
do foema secundrio castanho escura a quase vincea.
DESCRIO MICROSCPICA
A regio peridrmica possui clulas ptreas que ocorrem
em grupos numerosos de clulas sem a formao de
uma faixa esclerenquimtica contnua; as clulas ptreas
nesta regio possuem paredes espessas. So observadas
fbras libriformes, as quais so esparsas e usualmente
ocorrem isoladas. Clulas parenquimticas tambm
so observadas na regio peridrmica, as quais podem
acumular simultaneamente cristais de oxalato de clcio,
de formato prismtico, compostos fenlicos e idioblastos
lipdicos. O raio se descaracteriza no foema secundrio
no funcional, onde ocorrem divises anticlinais radiais
e suas derivadas apresentam leve crescimento tangencial,
formando dilataes, cujas clulas se assemelham a regies
meristemticas; nem todos os raios formam dilataes. No
foema secundrio funcional, o raio possui uma a duas
clulas de largura e seis a 14 clulas de altura, podendo
ser homocelular ou heterocelular, onde predominam
clulas procumbentes. Fibras librifomes ocorrem esparsas,
podendo ser consideradas raras no tecido. Elementos
de tubo crivado, clulas companheiras e parnquima
predominam no foema funcional. semelhana do que
ocorre nos demais tecidos, clulas parenquimticas podem
acumular, simultaneamente ou no, cristais de oxalato
de clcio, prismticos, rombodricos, pequenos cristais
aciculares de pices agudos ou truncados, mas no drusas
ou rfdes, e compostos fenlicos, alm de idioblastos
lipdicos. Gros de amido simples ocorrem em todos os
tecidos da casca, exceto clulas condutoras do foema,
porm, predominam no foema no funcional e periderme.
O foema secundrio no estratifcado.
caractersticos: colorao castanha; abundantes gros de
amido, isolados e/ou agrupados; clulas parenquimticas
isodiamtricas, contendo abundantes gros de amido,
assim como gotas lipdicas; escassos fragmentos de sber;
grande quantidade de cristais de oxalato de clcio de forma
prismtica e/ou acicular, de pices truncados; numerosas
fbras de 600 m de comprimento, em mdia, e 35 m de
largura, em mdia, com paredes espessas, lmen estreito,
isoladas ou associadas a fragmentos de parnquima;
escleredes colunares e abundantes clulas ptreas, isoladas
e/ou agrupadas, dissociadas ou no interior de fragmentos
de tecido parenquimtico.
IDENTIFICAO
camada delgada (5.2.17.1), utilizando cromatoplaca
de slica-gel G, com espessura de 250 m como fase
estacionria, e cloreto de metileno como fase mvel.
Aplicar na cromatoplaca, separadamente, em forma de
banda, 10 L de cada uma das solues, recentemente
Soluo (1): utilizar cerca de 3 g do p e agitar durante
15 minutos com 15 mL de cloreto de metileno. Filtrar e
evaporar at quase secura em banho-maria. Dissolver o
resduo com 1 mL de tolueno.
Soluo (2): dissolver 10 L de eugenol em 1 mL de
tolueno.
Desenvolver o cromatograma. Remover a cromatoplaca e
deixar secar ao ar por 5 minutos. Nebulizar a placa com
vanilina sulfrica SR e colocar em estufa entre 100 C e
105 C, durante 5 minutos. O cromatograma da Soluo (1)
apresenta mancha de colorao acinzentada sob luz visvel,
localizada logo abaixo da altura da mancha originada pela
Soluo (2), de colorao acastanhada, correspondente ao
eugenol (Rf aproximadamente 0,70).
B. Proceder a identifcao do eugenol utilizando uma
alquota de 0,05 mL de leo voltil, obtida conforme
descrito no item A. de Doseamento. Adicionar 5 mL de
etanol e 0,05 mL de uma soluo de cloreto frrico a 5%
(p/v). O desenvolvimento de colorao azul caracteriza a
presena de compostos fenlicos.
ENSAIOS DE PUREZA
c
DOSEAMENTO
leos Volteis
Proceder conforme descrito em Determinao de
leos volteis em drogas vegetais (5.4.2.7). Utilizar
um balo de 1000 mL, contendo 500 mL de gua como
lquido de destilao. Reduzir a amostra a p grosseiro e
imediatamente, proceder determinao do leo voltil a
partir de 50 g da droga em p. Destilar durante 4 horas.
trans-cinamaldedo
(5.2.17.5). Utilizar cromatgrafo a gs provido de detector
de ionizao de chamas, coluna cromatogrfca capilar
de 30 m de comprimento e 0,25 mm de dimetro interno,
do flme de 0,25 m; temperatura da coluna de 60 C a 300
do injetor a 220 C; temperatura do detector a 250 C;
hlio a 80 kPa de presso, como gs de arraste; fuxo de
1,0 mL/minuto. Utilizar mistura de nitrognio, ar sinttico
e hidrognio (1:1:10) como gases auxiliares.
(2:100).
Procedimento: injetar 1 uL da Soluo amostra no
cromatgrafo a gs, utilizando diviso de fuxo de 1:50.
O aldedo cinmico apresenta tempo de reteno linear
relativo de 1266 (Z) e 1214 (E). O teor em aldedo cinmico
de, no mnimo, 60,0%. As concentraes relativas so
obtidas por integrao manual ou eletrnica. Calcular o
ndice de reteno relativo (IRR), segundo a expresso:
em que
molecular;
tr
x
tr
z
e tr
z+1
);
tr
z
tr
z+1
a c
721
figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpico em Cinnamomum verum J. Presl
_________________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 15 mm; em B a 80 m; em C e D a 10 m; em E a 12,5 m; em f e I a 37,5
m; em G a 17,5 m; em H a 125,0 m.
A aspecto geral de poro da casca; B aspecto histolgico da casca atravs de seco transversal: clulas ptreas; elemento de tubo crivado (etc);
fbra (fb); raio parenquimtico (rp); C idioblasto contendo cristais prismticos de oxalato de clcio: cristal (cr); D idioblasto contendo cristais tipo
rfde de oxalato de clcio: cristal (cr); E H detalhes do p; E gros de amido; f esclerede colunar ramifcado; G cristal acicular; H clulas
ptreas; I clulas parenquimticas com incluso lipdica.
c
CNfORA
Camphora
C H
3
CH
3
C H
3
O
(+)-cnfora
C
10
H
16
O; 152,23
cnfora; 01677
1,7,7-Trimetilbiciclo[2.2.1]heptan-2-ona
[76-22-2]
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais, brancos ou incolores,
massas cristalinas ou grnulos. Odor caracterstico
penetrante, sabor aromtico pungente. Volatiliza-se
lentamente temperatura ambiente.
Solubilidade. Pouco solvel em gua; muito solvel
em etanol, em clorofrmio e em ter etlico; facilmente
solvel em dissulfeto de carbono, hexano e em leos fxos
e volteis.
Faixa de fuso (5.2.2): 174 C a 179 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +41 a +43 para a
cnfora natural. Cnfora sinttica a forma racmica,
opticamente inativa. Determinar em soluo a 10% (p/v)
em etanol.
IDENTIFICAO
observados no espectro de cnfora padro, preparado de
maneira idntica.
de 200 nm a 400 nm, de soluo da amostra a 0,1% (p/v)
preparada com etanol, exibe mximos em 289 1 nm.
C. cnfora pulverizada (que se obtm tratando-se a
mesma com pequena quantidade de etanol) junte uma
gota de vanilina 1,0% (p/v) e uma gota de cido sulfrico;
aparecer uma cor amarela que passa gradativamente a
roxo, violeta e azul. Esta prova positiva somente para a
cnfora natural.
D. Aquecendo o p da cnfora e recobrindo o recipiente
com vidro de relgio, obtm-se um sublimado composto
por cristais periformes isotrpicos reunidos em conjuntos
radicais.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 10% (p/v) em hexano
lmpida (5.2.25).
Resduo por evaporao. Aquecer em banho-maria 2,0
g da amostra em cpsula tarada at completa sublimao.
Secar o resduo a 120 C durante 3 horas, esfriar e pesar. O
peso do resduo no deve exceder a 0,05%.
Halognios. Misturar 0,1 g de cnfora fnamente
dividida com 0,2 g de perxido de sdio em um cadinho
de porcelana seco. Aquecer lentamente at a completa
incinerao. Dissolver o resduo em 25 mL de gua morna,
acidifcar com cido ntrico e fltrar a soluo para um
tubo de comparao. Lavar o tubo e o fltro com 10 mL de
gua quente (duas vezes) e fltrar, adicionando as guas de
lavagem soluo fltrada. Ao fltrado, adicionar 0,5 mL
de nitrato de prata 0,1 M; diluir com gua para 50 mL e
misturar. A turbidez no deve exceder aquela produzida em
ensaio branco, com as mesmas quantidades dos mesmos
reagentes e 0,05 mL de cido clordrico 0,02 M (0,035%).
Em recipientes hermticos. Evitar calor excessivo.
ROTULAGEM
Observar legislao vigente. O rtulo deve indicar a
procedncia, se natural ou sinttica.
CLASSE TERAPUTICA
Antipruriginoso tpico.
CAPIM LIMO
Cymbopogonis foliae
Cymbopogon citratus (DC.) Stapf POACEAE
A droga vegetal constituda de folhas dessecadas
contendo, no mnimo, 0,5% de leo voltil. O leo voltil
constitudo de, no mnimo, 60% de citral.
NOMES POPULARES
Capim cidr, capim santo.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As folhas secas
apresentam odor caracterstico de citral e sabor ctrico.
a c
723
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas constitudas por bainha convoluta e lmina.
Bainha alargada em direo base, de 4 cm a 26 cm de
comprimento, com 0,6 cm a 6,5 cm de largura na regio
basal, 1,0 cm a 3,5 cm na regio mediana e 0,9 cm a 2,1
cm na regio apical. Lgula com 0,2 cm de altura, curta e
truncada, membranosa. Tricomas simples, localizados na
base da face adaxial da lmina foliar, menores do que a
lgula e distribudos atrs desta. Lmina de 60 cm a 85 cm
de comprimento, 0,8 cm a 1,1 cm de largura na regio basal
e 1,4 cm a 1,8 cm na regio mediana, verde-clara quando
fresca e verde-griscea quando seca, linear-lanceolada,
plana na poro expandida e canaliculada e estreitada
na poro basal, acuminada no pice, spera devido aos
tricomas curtos e silicosos; margem inteira, com tricomas
rgidos e cortantes em maior quantidade do que no restante
da lmina; nervuras paralelas, a mediana mais desenvolvida
e pronunciada na face abaxial.
DESCRIO MICROSCPICA
Folha anf-hipoestomtica. Na bainha foliar, a epiderme
em vista frontal, na face adaxial, exibe clulas de paredes
retilneas, com tricomas silicosos e raros estmatos e na
face abaxial, clulas com paredes sinuosas, dispostas em
fleiras e intercaladas com clulas esclerifcadas, localizadas
na regio correspondente aos agrupamentos de fbras
subepidrmicas, alm de escassos tricomas unicelulares
silicosos e estmatos, dispostos em fleiras, na regio entre
as nervuras. Em seco transversal, as clulas epidrmicas
so retangulares, sendo a parede periclinal externa mais
espessa; as clulas voltadas para a face abaxial so
menores. O parnquima fundamental preenche quase toda
a lmina e formado por clulas volumosas; na sua poro
mais interna ocorrem clulas secretoras de forma distinta
e junto face abaxial ocorre um clornquima formado
por clulas menores. Os feixes vasculares so do tipo
colateral; os de maior desenvolvimento esto distribudos
pelo parnquima, enquanto que os menores esto voltados
para a face abaxial, junto ao clornquima. Agrupamentos
subepidrmicos de fbras ocorrem em maior quantidade
junto face abaxial. Na lmina foliar, a epiderme em
vista frontal, na face adaxial, mostra clulas fundamentais
e clulas especializadas dispostas em fleiras: clulas-
guarda, buliformes, subsidirias, suberosas e tricomas
silicosos. As clulas buliformes so volumosas e mais ou
menos isodiamtricas; as clulas fundamentais possuem
gotas lipdicas, so retangulares, de paredes anticlinais
sinuosas e intercaladas por tricomas silicosos e por uma
a trs clulas suberosas, bem menores do que as demais
e de paredes retilneas; os tricomas so unicelulares,
curtos, de parede espessa, e possuem base alargada e pice
agudo, direcionando-se ao pice foliar. Os estmatos so
tetracticos e possuem clulas-guarda em forma de halteres,
ocorrendo em maior nmero na face abaxial. Em seco
transversal, a epiderme uniestratifcada e os estmatos, na
face adaxial, distribuem-se lateralmente ao agrupamento
das clulas fundamentais, enquanto que, na face abaxial,
distribuem-se junto ao clornquima. Os feixes vasculares
so do tipo colateral e de diferentes tamanhos; possuem
bainha especializada do tipo kranz, alm de bainha
mestomtica nos feixes mais desenvolvidos. Os cordes
de fbras ocorrem em ambas as faces, sempre opostos aos
feixes vasculares, sendo que, na face adaxial, acompanham
somente os feixes mais desenvolvidos; as clulas do
clornquima distribuem-se radialmente em torno dos
feixes. O parnquima fundamental ocorre tanto na regio
do mesoflo quanto na regio da nervura principal. Clulas
secretoras ocorrem na regio limtrofe entre o clornquima
e o parnquima fundamental, apresentando contedo denso
e forma distinta. As clulas secretoras da bainha e da lmina
so visualizadas em reao com lugol, mostrando contedo
celular denso, de colorao castanha ou vermelha, em
material fresco ou seco. Na reao com vanilina sulfrica, o
contedo das clulas secretoras mostra-se marrom e denso.
s vezes, este contedo aparece colapsado e concentrado
junto parede celular. Para a reao com vanilina sulfrica
os cortes devem ser imersos no lcool etlico, passados para
a vanilina e fambados, submersos nesta, por dois minutos.
A lmina, para observao, deve ser montada em etanol e
os cortes no devem ser passados em gua.
caractersticos: cor verde-clara; pores da epiderme,
conforme descrito; grande quantidade de fragmentos das
nervuras, com tricomas silicosos; pores do mesoflo
foliar, conforme descrito; pores do bordo com tricomas
silicosos.
IDENTIFICAO
254
,
tolueno e acetato de etila (93:7), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, em forma de banda, 10 L de cada
seguir.
Soluo (1): agitar cerca de 0,5 g da droga moda com 10
mL de cloreto de metileno, em recipiente fechado, por 10
minutos. Filtrar. Concentrar o fltrado at secura, em banho-
maria, a temperatura no superior a 60 C. Ressuspender o
resduo em 10 mL de tolueno.
Soluo (2): diluir 2 L do leo voltil, obtido em
Doseamento para leos volteis, em 1 mL de tolueno.
Soluo (3): diluir 2 L de citral em 1 mL de tolueno.
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (365 nm). As
manchas obtidas com a Soluo (1) e a Soluo (2), com
Rf de aproximadamente 0,60, correspondem em posio e
intensidade quela obtida com a Soluo (3). Nebulizar a
placa com vanilina sulfrica SR e deixar em estufa entre 100
C e 105 C, durante 5 minutos. A mancha correspondente
ao citral apresenta colorao azul escura.
c
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 11%.
DOSEAMENTO
leos volteis
volumtrico de 1000 mL contendo 500 mL de gua como
lquido de destilao e 0,5 mL de xileno. Utilizar planta
seca rasurada. Proceder imediatamente determinao do
leo voltil, a partir de 50 g da droga rasurada. Destilar por
4 horas.
Citral A e citral B
ar sinttico e hidrognio (1:1:10) como gases auxiliares
polidifenildimetilsiloxano, com espessura do flme de 0,25
m; temperatura da coluna de 60 C a 300 C, a 3 C por
minuto (total: 80 minutos), a temperatura do injetor a 220
C e a temperatura do detector a 250 C; utilizar hlio a
uma presso de 80 kPa como gs de arraste; fuxo do gs
de arraste de 1 mL/minuto.
Soluo amostra: diluir o leo voltil, obtido em
Doseamento para leos volteis, na razo de 2:100 em ter
etlico.
Procedimento: injetar 1 L da Soluo amostra no
O citral A (trans-citral) apresenta tempo de reteno linear
(ndice de Kvats) de 1263 e o citral B (cis-citral) de 1233.
As concentraes relativas so obtidas por integrao
manual ou eletrnica.
Calcular o ndice de Kvats, segundo a expresso:
em que
n = nmero de tomos de carbono do alcano de
menor peso molecular;
tr
x
= tempo de reteno do composto x (intermedirio
a tr
z
e tr
z+1
);
tr
z
tr
z+1
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e do
calor.
a c
725
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos de Cymbopogon citratus (DC.) Stapf
______________
Complemento da legenda da figura 1. As rguas correspondem em A e B a 3 cm; em C a 0,5 cm; em D at G a 100 m.
A aspecto geral da lmina foliar. B aspecto geral da bainha foliar. C detalhe da poro entre bainha e lmina foliar, mostrando a lgula e os tricomas:
bainha foliar (bf); lgula (l); lmina foliar (lf); tricomas tectores (tt). D detalhe da epiderme da face adaxial da lmina foliar: clula buliforme (cb);
clula fundamental da epiderme (cfe); clula epidrmica suberosa (ces); estmato (es); tricoma silicoso (ts). E detalhe da epiderme da face abaxial
da lmina foliar: clula epidrmica suberosa (ces); clula fundamental da epiderme (cfe); estmato (es); tricoma silicoso (ts). f detalhe da epiderme
da face adaxial da bainha foliar: clulas fundamentais da epiderme sobre uma nervura (cen); clulas fundamentais da epiderme (cfe); estmato (es).
G detalhe da epiderme da face abaxial da bainha foliar: clula epidrmica esclerifcada (cee); clula fundamental da epiderme (cfe); estmato (es).
c
figura 2 Aspectos microscpicos de Cymbopogon citratus (DC.) Stapf
______________
Complemento da legenda da figura 2. As rguas correspondem em A a 100 m; em B a 20 m; em C a 1 mm; em D at J a 100 m.
A detalhe da seco transversal da lmina foliar: bainha kranz (bk); bainha mestomtica (bm); clula buliforme (cb); clula fundamental da epiderme
(cfe); clornquima (cl); clula secretora (cse); estmato (es); foema(f); fbras (fb); feixe vascular (fv); parnquima fundamental (pf); tricoma silicoso
(ts); xilema (x). B detalhe da lmina foliar contendo um estmato: clula fundamental da epiderme (cfe); clula-guarda (cg); clornquima (cl); clula
subsidiria (csb); cmara subestomtica (csu). C aspecto geral da seco transversal de parte da bainha foliar: clornquima (cl); foema (f); cordo de
fbras (fb); feixe vascular (fv); parnquima fundamental (pf); xilema (x). D detalhe de um elemento de vaso com espessamento reticulado. E detalhes
de fragmentos observados no p: bordo foliar com tricoma silicoso. f detalhes de fragmentos observados no p: epiderme com clulas sobre a nervura
mostrando tricoma silicoso. G detalhes de fragmentos observados no p: clulas epidrmicas. H detalhes de fragmentos observados no p: epiderme
com clulas sobre a nervura. I detalhes de fragmentos observados no p: clulas epidrmicas. J detalhes de fragmentos observados no p: epiderme.
Clula suberosa (ces); clula fundamental da epiderme (cfe).
a c
727
CAPTOPRIL
Captoprilum
N S H
CH
3
COOH O
C
9
H
15
NO
3
S; 217,29
captopril; 01699
1-[(2S)-3-Mercapto-2-metil-1-oxopropil]-L-prolina
[62571-86-2]
C
9
H
15
NO
3
DESCRIO
branco.
metanol e cloreto de metileno. Solvel em solues
Faixa de fuso (5.2.2): 105 C a 108 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): 156 a 161, em
2% (p/v) em gua isenta de dixido de carbono.
IDENTIFICAO
captopril SQR, preparado de maneira idntica.
C. Dissolver cerca de 20 mg da amostra em 2 mL de gua
e adicionar 0,5 mL de iodo 0,05 M. A colorao devida ao
iodo desaparece imediatamente.
ENSAIOS DE PUREZA
da amostra em gua isenta de dixido de carbono.
Substncias relacionadas. Proceder conforme descrito no
mtodo B. de Doseamento. Preparar as
Solues teste como descrito a seguir.
Soluo (1): transferir 50 mg da amostra para balo
volumtrico de 100 mL, dissolver com Fase mvel e
completar o volume com o mesmo solvente.
mvel.
Soluo (3): dissolver 10 mg da amostra em 20 mL de Fase
mvel, adicionar 0,25 mL de iodo 0,05 M e completar o
volume para 100 mL com o mesmo solvente. Homogeneizar.
Transferir 5 mL dessa soluo para balo volumtrico de
50 mL, homogeneizar e completar o volume com o mesmo
solvente.
soluo, registrar os cromatogramas por, no mnimo, trs
vezes o tempo de reteno do captopril e medir as reas
sob os picos. O teste somente vlido se o cromatograma
obtido com a Soluo (3) apresenta trs picos e a resoluo
entre os dois picos de maior tempo de reteno no menor
que 2,0. Os trs picos correspondem, respectivamente, ao
excesso de iodo, ao captopril e ao dissulfeto de captopril
formado. A rea de qualquer pico secundrio obtido no
cromatograma com a Soluo (1) no maior que 0,5 vezes
a rea sob o pico principal obtido no cromatograma com a
Soluo (2) (1,0%). A soma das reas de todos os picos
maior que a rea sob o pico principal obtido com a Soluo
(2) (2,0%). No considerar picos referentes ao solvente ou
com rea inferior a 0,1 vezes a rea sob o pico principal
obtido no cromatograma com Soluo (2) (0,2%).
mximo 0,002% (20 ppm).
amostra. Dessecar em estufa a 60 C, sob presso reduzida,
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
A. Transferir, exatamente, cerca de 0,15 g de amostra para
erlenmeyer de 125 mL e dissolver em 50 mL de gua.
Titular com iodo 0,05 M SV determinando o ponto fnal
potenciometricamente ou utilizando 1 mL de amido SI.
C
9
H
15
NO
3
S.
de 1 mL/minuto.
c
Fase mvel: mistura de cido fosfrico a 0,11% (v/v) e
metanol (45:55).
Nota: proteger as solues descritas a seguir da exposio
ao ar e utiliz-las dentro de, no mximo, 8 horas.
da amostra em Fase mvel de modo a obter soluo a 0,5
mg/mL.
de captopril SQR em Fase mvel de modo a obter soluo
a 0,5 mg/mL.
Injetar 20 L da Soluo (3) obtida em Substncias
Relacionadas. O teste somente vlido se o cromatograma
obtido apresenta trs picos e a resoluo entre os dois picos
de maior tempo de reteno no menor que 2,0. Injetar
replicatas de 20 L da Soluo padro. O desvio padro
maior que 2,0%.
as reas sob os picos. Calcular o teor de C
9
H
15
NO
3
S na
amostra a partir das respostas obtidas com as Solues
padro e amostra
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-hipertensivo.
CAPTOPRIL COMPRIMIDOS
9
H
15
NO
3
S.
IDENTIFICAO
A. Proceder conforme descrito em Cromatografa
em camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel
G, como suporte, e mistura de tolueno, cido actico
glacial e metanol (75:25:1) como fase mvel. Aplicar
o equivalente a 0,1 g de captopril para balo volumtrico de
25 mL, adicionar 15 mL de metanol, deixar em ultrassom
por 30 minutos, agitando ocasionalmente. Completar o
volume com o mesmo solvente, homogeneizar e fltrar.
Soluo (2): preparar soluo de captopril SQR a 4 mg/mL
em metanol.
secar ao ar. Nebulizar com difenilcarbazona mercrica SR.
A mancha principal obtida com a Soluo (1) corresponde
(2).
CARACTERSTICAS
cada comprimido para balo volumtrico de capacidade
adequada contendo 5 mL de gua e aguardar desintegrao
total do comprimido. Adicionar volume de mistura de
etanol e gua (1:1) correspondente metade da capacidade
do balo. Deixar em ultrassom por 15 minutos. Agitar
mecanicamente por 15 minutos e completar o volume
com o mesmo solvente. Homogeneizar e fltrar. Diluir,
sucessivamente, com o mesmo solvente, at concentrao
concentrao, utilizando o mesmo solvente. Medir as
absorvncias das solues resultantes em 212 nm (5.2.14),
utilizando mistura de etanol e gua (1:1) para ajuste do zero.
9
H
15
NO
3
S em cada comprimido,
a partir das leituras obtidas.
Tempo: 20 minutos
do meio de dissoluo e diluir, se necessrio, com cido
clordrico 0,1 M at concentrao adequada. Medir as
absorvncias em 212 nm (5.2.14), utilizando o mesmo
solvente para o ajuste do zero. Calcular a quantidade de
C
9
H
15
NO
3
S dissolvida no meio, comparando as leituras
obtidas com a da soluo de captopril SQR na concentrao
de 0,0025% (p/v), preparada em cido clordrico 0,1 M.
declarada de C
9
H
15
NO
3
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de dissulfeto de captopril. Proceder conforme
descrito no mtodo B. de Doseamento. Injetar,
separadamente, 20 L da Soluo teste e da Soluo
amostra. A rea do pico relativo ao dissulfeto de captopril
a c
729
obtido na Soluo amostra no deve ser superior rea do
pico relativo ao dissulfeto de captopril obtido na Soluo
teste. No mximo 3,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Utilizar quantidade
do p equivalente a cerca de 0,15 g de captopril, transferir
para erlenmeyer de 125 mL e adicionar 50 mL de gua.
Deixar em ultrassom por 15 minutos e agitar mecanicamente
por 15 minutos. Prosseguir conforme descrito no mtodo
A. de Doseamento na monografa de Captopril a partir de
Titular com iodo 0,05 M SV....
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de cido fosfrico a 0,11% (v/v) e
metanol (45:55).
Soluo de dissulfeto de captopril: preparar soluo a 1
mg/mL de dissulfeto de captopril SQR em Fase mvel.
Soluo teste: transferir 3 mL da Soluo de dissulfeto
de captopril para balo de 100 mL e completar com Fase
mvel.
captopril para balo volumtrico de 50 mL, acrescentar 30
mL de Fase mvel, deixar em ultrassom por 15 minutos
e agitar mecanicamente durante 15 minutos. Completar o
Soluo padro: transferir 0,1 g de captopril SQR para
balo volumtrico de 100 mL, adicionar 3 mL da Soluo
de dissulfeto de captopril e completar o volume com Fase
mvel.
de reteno relativos so cerca de 0,5 para o captopril e 1,0
para o dissulfeto de captopril. A resoluo entre os picos de
captopril e dissulfeto de captopril no deve ser menor do
que 2. O desvio padro relativo das reas de replicatas dos
picos registrados no deve ser maior que 2,0%.
reas dos picos. Calcular a quantidade de C
9
H
15
NO
3
S nos
comprimidos a partir das respostas obtidas com a Soluo
ROTULAGEM
CARBAMAZEPINA
Carbamazepinum
N
O NH
2
C
15
H
12
N
2
O; 236,27
carbamazepina; 01710
5H-Dibenz[b,f]azepina-5-carboxamida
[298-46-4]
C
15
H
12
N
2
O, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco ou branco
amarelado, inodoro. Apresenta polimorfsmo.
solvel em cloreto de metileno, solvel em clorofrmio e
metanol, ligeiramente solvel em acetona e em etanol e
muito pouco solvel em ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 189 C a 193 C.
IDENTIFICAO
O teste de identifcao B. e C. podem ser omitidos se for
realizado o teste A.
carbamazepina SQR, preparado de maneira idntica.
de 200 nm a 400 nm, da soluo amostra obtida no mtodo A
de Doseamento, apresenta mximos de absoro em 285 nm.
c
C. Aquecer cerca de 0,1 g de amostra com 2 mL de cido
ntrico, em banho-maria, por 3 minutos. Desenvolve-se
colorao vermelho-alaranjada.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Pesar 2,5 g da amostra e transferir
para balo volumtrico de 50 mL. Adicionar 20 mL de gua.
Agitar, completar o volume com gua e homogeneizar.
Filtrar. A uma alquota de 20 mL adicionar uma gota de
fenolftalena SI. Titular com hidrxido de sdio 0,01 M.
Realizar em paralelo uma prova em branco. No mais que
1 mL requerido para cada 1 g de amostra. A outra alquota
de 20 mL adicionar uma gota de vermelho de metila SI.
Titular com cido clordrico 0,01 M. Realizar em paralelo
uma prova em branco. No mais que 1 mL requerido para
cada 1 g de amostra.
Substncias Relacionadas.
254
,
como suporte, e mistura de tolueno e metanol (70:30),
como fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, 2 L
de cada uma das solues, recentemente preparadas em
mistura de clorofrmio e etanol (1:1), descritas a seguir.
Soluo (1): soluo a 50 mg/mL da amostra.
Soluo (2): soluo a 0,05 mg/mL da amostra.
Soluo (3): soluo a 50 mg/mL de carbamazepina SQR.
Soluo (4): soluo a 0,05 mg/mL de iminodibenzila.
Soluo (5): soluo a 0,05 mg/mL de carbamazepina
substncia relacionada B SQR (iminoestilbeno).
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm e 365
nm). Nebulizar com dicromato de potssio a 0,5% (p/v) em
cido sulfrico M. Qualquer mancha secundria obtida no
cromatograma com a Soluo (1) no mais intensa que as
manchas obtidas com as Solues (4) e (5) (0,1%). Aquecer
a 140 C por 15 minutos e observar sob luz ultravioleta (254
nm e 365 nm). Qualquer mancha obtida no cromatograma
com a Soluo (1), com valor de Rf menor que a mancha
principal, no mais intensa que a obtida com a Soluo
(2) (0,1%).
B. Proceder conforme descrito no mtodo B. de
Doseamento. Preparar as seguintes solues.
Soluo amostra: pesar, exatamente, cerca de 100 mg
de amostra. Transferir para balo volumtrico de 50 mL,
dissolver e completar o volume com metanol. Transferir
25 mL dessa soluo para um balo volumtrico de 50 mL
e completar com Fase mvel.
de carbamazepina SQR, carbamazepina substncia
relacionada A SQR (10,11-diidrocarbamazepina)
e carbamazepina substncia relacionada B SQR
(iminoestilbeno) em metanol para obter concentrao de
0,02 mg/mL de cada componente. Transferir 5 mL dessa
soluo para balo volumtrico de 100 mL, completar com
Fase mvel, obtendo soluo a 1 g/mL.
Soluo de resoluo: dissolver quantidade, exatamente
pesada, de carbamazepina SQR e carbamazepina substncia
relacionada A SQR (10,11-diidrocarbamazepina) em
metanol de modo a obter soluo de 100 g/mL e 500 g/
mL, respectivamente. Transferir 5 mL dessa soluo para
Fase mvel.
Teste de Adequabilidade do Sistema: injetar replicatas de 20
L da Soluo de resoluo. A resoluo entre os picos de
carbamazepina substncia relacionada A e carbamazepina
padro no menor que 1,70. O desvio padro relativo das
reas de replicatas dos picos registrados no maior que
2,0 %.
padro e amostra. Registrar os cromatogramas e medir
as reas sob os picos. Calcular a quantidade em mg de
qualquer impureza encontrada na Soluo amostra a partir
das respostas obtidas.
Cloretos (5.3.2.1). Ferver 0,5 g da amostra com 20 mL
de gua por 10 minutos, esfriar e fltrar, quantitativamente,
para tubo de Nessler. No mximo 0,014 % (140 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo III. Aquecer,
ebulio, 1 g da amostra em 20 mL de gua por 10 min,
esfriar e fltrar, quantitativamente, para tubo de Nessler. No
mximo 0,001% (10 ppm).
amostra. Dessecar em estufa a 105
o
C, por 2 horas. No
mximo 0,5 %.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
de 50 mg da amostra. Transferir para balo volumtrico
de 50 mL, adicionar 25 mL de metanol e deixar em
ultrassom por 15 minutos. Completar o volume com o
mesmo solvente. Diluir sucessivamente, em metanol, at
concentrao de 0,001% (p/v). Preparar soluo padro,
nm, utilizando metanol para ajuste do zero. Calcular o
teor de C
15
H
12
N
2
O na amostra a partir das leituras obtidas.
Alternativamente, realizar o clculo utilizando A (1 %, 1
cm) = 490, em 285 nm, em metanol.
a c
731
de 1 mL/min.
Fase mvel: metanol e gua (70:30).
Soluo amostra: dissolver quantidade, exatamente
pesada, da amostra em metanol para obter soluo a 2 mg/
mL. Deixar em ultrassom por 15 minutos. Transferir 5 mL
dessa soluo para balo volumtrico de 50 mL e completar
o volume com fase mvel, obtendo soluo a 0,2 mg/mL.
de carbamazepina SQR em metanol para obter soluo a 1
mg/mL. Deixar em ultrassom por 15 minutos. Transferir
5 mL dessa soluo para balo volumtrico de 25 mL e
completar o volume com fase mvel, obtendo soluo a
0,2 mg/mL.
15
H
12
N
2
O na amostra
a partir das respostas obtidas com as Solues padro e
amostra.
Em recipientes hermticos, ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticonvulsivante.
CARBAMAZEPINA COMPRIMIDOS
Contm, no mnimo, 92,0 % e, no mximo, 108,0 % da
15
H
12
N
2
O.
IDENTIFICAO
Pesar e pulverizar os comprimidos. Aquecer em banho-
maria uma quantidade do p equivalente a 0,2 g de
carbamazepina, com 15 mL de acetona. Filtrar. Lavar
com duas pores de 5 mL de acetona quente. Evaporar o
fltrado at cerca de 5 mL e resfriar em banho de gelo at
cristalizao. Filtrar os cristais e lavar o fltro com 3 mL
de acetona fria. Dessecar em estufa vcuo a 70 C por 30
minutos. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14)
da amostra, previamente dessecada, dispersa em brometo
carbamazepina SQR, preparado de maneira idntica.
CARACTERSTICAS
Teste de Dureza (5.1.3.1). Cumpre o teste.
TESTE DE DISSOLUO
Meio de dissoluo: laurilsulfato de sdio a 1% (p/v) em
gua; 900 mL.
Aparelhagem: ps, 75 rpm.
Tempo: 60 minutos, com tempos de coleta em 15 e 60
minutos.
Procedimento: aps o teste, retirar alquotas do meio de
dissoluo nos tempos determinados e fltrar. Medir as
absorvncias em 285 nm (5.2.14), utilizando o Meio de
dissoluo para ajuste do zero. Calcular o contedo de
C
15
H
12
N
2
O dissolvida no meio, comparando as leituras
obtidas com a da soluo de carbamazepina SQR na
concentrao de 0,002% (p/v), preparada em laurilsulfato
de sdio a 1% (p/v), com adio prvia de metanol para
garantir a solubilizao. A concentrao de metanol na
soluo padro no pode exceder a 1% (v/v).
Tolerncia: entre 45% e 75% se dissolvem em 15 minutos;
no menos que 75% (Q) da quantidade declarada de
C
15
H
12
N
2
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 3,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
comprimidos. Transferir quantidade de p equivalente a
50 mg de carbamazepina para balo volumtrico de 100
mL, adicionar 70 mL de metanol e deixar em ultrassom por
30 minutos. Completar o volume com o mesmo solvente,
homogeneizar e fltrar. Realizar diluies sucessivas, at
concentrao de 0,001% (p/v), utilizando metanol como
solvente. Preparar soluo padro, na mesma concentrao,
solues resultantes em 285 nm, utilizando metanol para
c
ajuste do zero. Calcular quantidade de C
15
H
12
N
2
O nos
comprimidos, a partir das leituras obtidas. Alternativamente,
realizar os clculos utilizando A(1 %, 1 cm) = 490, em 285
nm, em metanol.
Doseamento da monografa de Carbamazepina. Preparar a
Soluo amostra como descrito a seguir.
carbamazepina para balo volumtrico de 50 mL, adicionar
25 mL de metanol e deixar em ultrassom por 15 minutos.
de 50 mL e completar o volume com Fase mvel, obtendo
soluo a 0,2 mg/mL.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 uL da Soluo
C
15
H
9
N
2
O nos comprimidos a partir das respostas obtidas
para a Soluo padro e a Soluo amostra.
Em recipientes hermticos, ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
CARBONATO BSICO DE BISMUTO
Bismuthi subcarbonas
(BiO)
2
CO
3
; 509,97
carbonato bsico de bismuto; 01747
xido de carbonato de bismuto
[5892-10-4]
(BiO)
2
CO
3
, em relao substncia dessecada, equivalente
a, no mnimo, 80,0% e, no mximo, 82,5% de bismuto.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, inodoro, inspido.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, etanol e
ter etlico. Dissolve-se, com efervescncia, em cidos
minerais diludos e cido actico glacial.
IDENTIFICAO
A. Responde s reaes do on bismuto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Agitar 5 g da amostra com 10 mL
de gua. Adicionar 20 mL de cido ntrico e aquecer at
dissoluo. Resfriar e diluir para 100 mL com gua. A
soluo obtida incolor (5.2.12) e menos opalescente que
uma suspenso da amostra a 10% (p/v) (5.2.25).
Cobre. A 5 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo
adicionar 2 mL de amnia, diluir para 50 mL com gua e
fltrar. A 10 mL do fltrado, adicionar 1 mL de soluo de
dietilditiocarbamato de sdio a 0,1% (p/v). A colorao da
soluo no mais intensa que a de uma soluo referncia
preparada em paralelo, nas mesmas condies, utilizando
mistura de 0,25 mL de Soluo padro de cobre (10 ppm
Cu) e gua sufciente para 10 mL no lugar do fltrado. No
mximo 0,005% (50 ppm).
Metais alcalinos e alcalinos terrosos. A 1 g da amostra
adicionar 10 mL de gua e 10 mL de cido actico SR.
Aquecer ebulio por 2 minutos, resfriar e fltrar. Lavar
o resduo com 20 mL gua destilada. Adicionar ao fltrado
2 mL de cido clordrico SR e 20 mL de gua. Aquecer
ebulio e passar sulfeto de hidrognio atravs da
soluo at que todo o bismuto seja precipitado. Filtrar,
lavar o resduo com gua, evaporar em banho-maria at
secura e adicionar 0,5 mL de cido sulfrico. Incinerar
cuidadosamente e deixar resfriar. A massa de resduo no
dever ser maior que 10 mg (1,0%).
Nitratos. Transferir 0,25 g da amostra para erlenmeyer
de 125 mL, adicionar 20 mL de gua destilada, 0,05 mL
de ndigo carmim SV e, cuidadosamente, 30 mL de cido
sulfrico. Titular imediatamente com ndigo carmim SV at
viragem para colorao azul estvel. O volume de ndigo
carmim SV gasto no maior que o volume equivalente a
1 mg de NO
3
(0,4%).
Prata. A 2 g da amostra adicionar 1 mL de gua e 4 mL
de cido ntrico. Aquecer, cuidadosamente, at dissoluo,
resfriar e diluir para 11 mL com gua. Adicionar 2 mL de
cido clordrico M, homogeneizar e deixar em repouso
por 5 minutos ao abrigo da luz. Qualquer opalescncia
desenvolvida no mais intensa do que a de um padro
preparado pela mistura de 10 mL de soluo padro de
prata (5 ppm Ag), 1 mL de cido ntrico e 2 mL de cido
clordrico M. No mximo 0,0025% (25 ppm).
Arsnio (5.3.2.5). Transferir 0,6 g da amostra para balo
de destilao. Adicionar 5 mL de gua, 7 mL de cido
sulfrico e resfriar. Adicionar 5 g de mistura redutora e
10 mL de cido clordrico. Aquecer, gradualmente, at
ebulio, durante 15 a 30 minutos, e continuar aquecendo de
modo que a destilao prossiga regularmente at o volume
do balo se reduzir metade, ou at que o condensador
se encha de vapor por 5 minutos. A destilao deve ser
interrompida antes da formao de vapores de trixido de
enxofre. Coletar o destilado em um tubo contendo 15 mL
de gua resfriada em banho de gelo. Lavar o condensador
com gua e diluir o destilado a 25 mL com mesmo solvente
e prosseguir conforme descrito em Mtodo visual. Preparar
a soluo referncia utilizando uma mistura de 3 mL de
Soluo padro de arsnio (1 ppm As) e 22 mL de gua.
a c
733
Chumbo. Proceder conforme descrito em
Espectrofotometria de absoro atmica (5.2.13.1), utilizar
o Mtodo II. Dissolver 12,5 g da amostra em 75 mL de uma
mistura de volumes iguais de gua e cido ntrico isento de
chumbo. Aquecer ebulio por 1 minuto, resfriar e diluir
para 100 mL com gua. Para o preparo das solues de
referncia de chumbo, utilizar quantidades apropriadas de
soluo padro de chumbo e de cido ntrico a 37% (v/v)
isento de chumbo. Medir as absorvncias das solues em
283,3 nm utilizando lmpada de ctodo-oco como fonte
de radiao e chama ar-acetileno. No mximo 0,002% (20
ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em 0,7 g da amostra e 1 mL
de cido clordrico 0,01 M. No mximo 0,05% (500 ppm).
amostra, em estufa, a 105 C. No mximo 1,0%.
DOSEAMENTO
Dissolver 0,25 g da amostra em 2 mL de cido ntrico e
diluir para 100 mL com gua. Proceder conforme descrito
em Titulaes complexomtricas (5.3.3.4) para Bismuto.
Cada mL de edetato dissdico 0,05 M SV equivale a
12,749 mg de (BiO)
2
CO
3
, correspondendo a 10,449 mg de
bismuto.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticido.
CARBONATO DE CLCIO
Calcii carbonas
CaCO
3
; 100,09
carbonato de clcio; 01748
Sal de clcio do cido carbnico (1:1)
[471-34-1]
CaCO
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, microcristalino branco,
inodoro e inspido.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, quando em presena
de sais amoniacais ou de dixido de carbono, praticamente
insolvel em gua e etanol. Dissolve com efervescncia em
cido actico M, cido clordrico 3 M e cido ntrico 2 M.
IDENTIFICAO
A. Introduzir, em tubo de ensaio, cerca de 0,1 g da amostra
e suspender com 2 mL de gua. Em seguida, adicionar 3
mL de cido actico 2 M, fechando o tubo imediatamente
com uma rolha conectada a um tubo de vidro em U. A
mistura efervesce. Na outra extremidade do tubo em U,
conectar um segundo tubo de ensaio, contendo hidrxido
de brio 0,1 M. Aquecer brandamente o tubo que contm
a amostra. Forma-se, no segundo tubo, um precipitado que
se dissolve em cido clordrico 6 M.
B. Responde s reaes do on clcio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias insolveis em cido. Pesar 5 g de amostra
e gotejar cido clordrico, com agitao, at cessar a
efervescncia. Em seguida, transferir para balo de 200 mL
e completar o volume com gua. Filtrar em papel de fltro
adequado. Lavar o resduo at que a ltima lavagem no
apresente reao para cloreto (5.3.1.1). Incinerar e deixar
na estufa entre 100 C e 105 C por 1 hora. O peso do
resduo de, no mximo, 10 mg (0,2%).
Magnsio e metais alcalinos. Misturar 1 g da amostra
com 35 mL de gua destilada. Adicionar, cuidadosamente,
3 mL de cido clordrico e ebulir a soluo por 1 minuto.
Rapidamente, adicionar 40 mL de cido oxlico SR.
Agitar vigorosamente at ocorrer precipitao. Aquecer
imediatamente, adicionar duas gotas de vermelho de metila
SI e acrescentar hidrxido de amnio 6 M at a mistura fcar
alcalina. Resfriar temperatura ambiente e transferir para
gua e deixar em repouso por 4 horas. Filtrar em papel de
fltro adequado. Colocar 50 mL do fltrado em uma cpsula
de porcelana, adicionar 0,5 mL de cido sulfrico e reduzir
o volume em banho-maria at pequeno volume. Aquecer
em chapa eltrica at decomposio e volatilizao dos
sais de amnio. Incinerar o resduo a 600 C, at peso
constante. O peso do resduo de, no mximo, 5 mg (1%).
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar Mtodo I. Dissolver 5 g da
amostra em 80 mL de cido actico diludo. Aps cessar
a efervescncia, ferver por 2 min, arrefecer e completar
o volume para 100 mL com cido actico diludo. Filtrar,
se necessrio, atravs de fltro de vidro sinterizado. No
mximo 0,0004% (4 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Pesar 1 g da amostra, adicionar 10 mL
de gua destilada e, cuidadosamente, adicionar 10 mL de
cido ntrico 2 M, agitando at dissoluo. No mximo
0,035% (350 ppm).
Brio. Pesar exatamente, cerca de 2,5 g da amostra,
transferir quantitativamente para bquer, adicionar cido
clordrico 3 M at cessar a efervescncia e aquecer
at ebulio para eliminar o gs carbnico dissolvido.
Transferir quantitativamente para balo volumtrico de 25
mL e completar o volume com gua. Transferir, para tubo
c
de ensaio, 5 mL da soluo da amostra e adicionar 5 mL de
sulfato de clcio SR. Aps 15 minutos a preparao no
mais opalescente que 5 mL soluo da amostra com 5 mL
de gua.
ferro. Proceder conforme descrito em Espectrofotometria
de absoro atmica (5.2.13.1) Mtodo I. No mximo
0,02% (200 ppm).
Soluo amostra: pesar, exatamente, cerca de 0,5 g da
amostra e transferir para um bquer. Adicionar 5 mL de
cido clordrico 3 M e aquecer at a ebulio para eliminar
o gs carbnico. Transferir quantitativamente para balo
volumtrico de 25 mL e completar o volume com gua.
Sulfato (5.3.2.2). Utilizar 5 mL da soluo da amostra
obtida no teste de brio. No mximo 0,25% (2500 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo I. Utilizar 5 mL
da soluo da amostra obtida no teste de brio. No mximo
0,002% (20 ppm).
Perda por dessecao. (5.2.9). Determinar em 1 g da
mximo 2%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,1 g da amostra, previamente
dessecada e transferir para um erlenmeyer de 250 mL.
Adicionar 50 mL de gua e 2 mL de cido clordrico
diludo, cobrir com vidro de relgio e agitar at dissoluo
do carbonato de clcio. Calcular o ponto de equivalncia
terico e titular com edetato dissdico 0,05 M SV at
aproximadamente 2 mL antes deste volume. Adicionar 8
mL de hidrxido de sdio SR e 150 mg do indicador azul de
hidroxinaftol. Continuar a titulao com edetato dissdico
0,05 M SV at cor azul. Cada mL de edetato dissdico 0,05
M SV equivale a 5,004 mg de CaCO
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticido, suplemento nutricional, quelante de fsforo.
CARBONATO DE MAGNSIO
Magnesii carbonas
MgCO
3
; 84,31
MgCO
3
.xH
2
O
MgO; 40,30
carbonato de magnsio; 01750
Sal de magnsio do cido carbnico (1:1)
[546-93-0]
Sal de magnsio do cido carbnico hidratado (1:1)
[23389-33-5]
O carbonato de magnsio uma mistura de carbonato de
magnsio hidratado e carbonato de magnsio hidratado
bsico. Deve conter, no mnimo 40,0% e, no mximo,
43,5% de MgO.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Apresenta-se sob duas variedades:
leve e pesado.
Carbonato de magnsio leve: massa branca, leve, frivel,
ou p branco, fnssimo, leve, inspido e inodoro.
Carbonato de magnsio pesado: p granuloso, branco,
inspido e inodoro.
Ambos, quando agitados com gua, tornam-na levemente
alcalina ao papel de tornassol.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua e etanol;
dissolve-se a frio, em quantidade aprecivel, na gua
saturada de dixido de carbono.
IDENTIFICAO
A. Quando tratado com cidos minerais diludos produz
efervescncia.
B. A soluo obtida no teste A. de Identifcao responde
s reaes do on magnsio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Arsnio (5.3.2.5). A 1 g de amostra, adicionar 10 mL de
gua e 5 mL de cido clordrico bromado SR, eliminar
o excesso de bromo com algumas gotas de cloreto de
estanho(II) SR, e prosseguir como descrito no Ensaio
limite de arsnio . Utilizar Mtodo I. No mximo 0,0005%
(5ppm).
Clcio (5.3.2.7). Pesar, exatamente, cerca de 1 g de
amostra e adicionar 22 mL de gua e 3 mL de cido
sulfrico, cautelosamente. Adicionar 50 mL de etanol e
deixar a mistura em repouso, no mnimo, durante 12 horas.
Se houver separao de cristais de sulfato de magnsio,
aquecer a mistura a cerca de 50 C para dissolv-los.
Filtrar atravs de cadinho de Gooch revestido de amianto e
previamente lavado com cido sulfrico M, gua e etanol,
calcinado e tarado. Lavar o cadinho de Gooch vrias vezes
a c
735
com mistura de dois volumes de etanol e um volume de
cido sulfrico M. Sec-lo ao vermelho vivo, resfri-lo e
pes-lo rapidamente. O peso do sulfato de clcio, assim
obtido, multiplicado por 0,4119 resulta no peso de CaO na
amostra. A amostra deve conter, no mximo, o equivalente
a 0,7% de CaO.
ferro (5.3.2.4). Pesar 2 g de amostra e dissolver em 15 mL
de cido clordrico 3 M. Quando cessar a efervescncia,
completar o volume para 20 mL com gua. Utilizar 5 mL
no Ensaio limite de ferro. No mximo 0,02% (200 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Neutralizar com soluo
concentrada de amnia, 4 mL da soluo preparada no
Ensaio limite de ferro. Adicionar 2 mL de cido actico
SR (Pb) e prosseguir como descrito no Ensaio limite para
metais pesados. No mximo 0,0025% (25 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Utilizar 10 mL da soluo preparada no
Ensaio limite de ferro. No mximo 0,12%, (1200 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Pesar, exatamente, cerca de 0,5 g de
amostra, adicionar 15 mL de cido ntrico 2 M, 25 mL
de gua e 1 mL de nitrato de prata 0,25 M. Completar o
volume para 50 mL com gua. Se produzir opalescncia,
esta no dever ser mais intensa do que a produzida por 0,1
mg de cloreto em igual volume de lquido, empregando-se
os mesmos reagentes. No mximo 0,02% (200 ppm).
Substncias insolveis em cido clordrico. Misturar 5 g
da amostra com 75 mL de gua e adicionar, sobre agitao,
cido clordrico, em pequenas pores at completa
dissoluo. Ferver durante 5 minutos. Recolher o resduo
insolvel em um fltro e lavar at que as guas de lavagem
no mais dem reao de cloreto. Incinerar, deixar esfriar
e pesar. O resduo dever pesar, no mximo, 0,0025 g
(0,05%).
Substncias solveis em gua. A 50 mL de gua
recentemente fervida, adicionar 1 g de amostra e levar
ebulio durante 5 minutos. Filtrar, evaporar o fltrado at
a secura e dessecar o resduo a 110 C, durante 1 hora.
Dever pesar, no mximo, 0,01 g (1%).
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 1 g de amostra, adicionar 50
mL de cido sulfrico 0,5 M SV, 0,5 mL de alaranjado
de metila SI e dosear o excesso de cido com hidrxido
de sdio M SV. Subtrair do volume de cido 0,5 M SV
consumido e correspondente ao CaO determinado em
Ensaios de pureza. A diferena ser o volume de cido
sulfrico 0,5 M SV que equivale ao carbonato de magnsio.
Cada mL de cido sulfrico 0,5 M SV equivale a 0,02015
g de MgO e a 0,02804 g de CaO.
Em recipientes fechados.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticido e laxativo.
CARBONATO DE POTSSIO
Kalli carbonas
K
2
CO
3
; 138,21
carbonato de potssio; 01751
Sal de potssio do cido carbnico (2:1)
[584-08-7]
Contm, no mnimo, 99,5% e, no mximo, 100,5 % de
K
2
CO
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P granuloso, branco e
higroscpico.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua e praticamente
insolvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. A soluo a 0,1% (p/v) da amostra responde s reaes
do on carbonato (5.3.1.1).
B. A soluo a 0,1% (p/v) da amostra responde s reaes
do on potssio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Matria insolvel. Dissolver 10 g da amostra em 100
mL de gua em um bquer. Aquecer o bquer coberto at
ebulio, em banho-maria, por 1 hora. Filtrar a soluo em
funil tarado de mdia porosidade (10 m a 15 m). Lavar
com gua quente. Secar a 105 C, resfriar em dessecador e
pesar. No mximo 0,01% (100 ppm).
Clcio e magnsio. A 20 mL da soluo da amostra a
10% (p/v), adicionar cido clordrico at reao cida ao
papel de tornassol, acrescentar 5 mL de oxalato de amnio
SR, 2 mL de fosfato de sdio dibsico heptaidratado SR
e 10 mL de hidrxido de amnio. Deixar em repouso, em
lugar fresco, durante 24 horas. Se ocorrer formao de
precipitado, fltrar e lavar com hidrxido de amnio a 2%
(v/v). Dessecar e calcinar at peso constante. A massa do
resduo no superior a 0,4 mg. No mximo 0,02%.
Cianeto. A 15 mL da soluo da amostra a 10% (p/v),
adicionar 0,5 mL de sulfato ferroso SR e 0,5 mL de cloreto
frrico SR. Adicionar cido clordrico SR at reao
fortemente cida. No se desenvolve colorao azul.
Cloretos (5.3.2.1). Acidifcar 10 mL da soluo da amostra
a 10% (p/v) com cido ntrico SR at reao cida ao papel
de tornassol. Adicionar 1 mL de nitrato de prata SR e
completar o volume para 50 mL com gua. Se produzir
opalescncia, no dever ser mais intensa que aquela
c
produzida por 0,02 mg do on cloreto (Cl) tratado nas
mesmas condies. No mximo 0,002% (20 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Acidifcar 20 mL da soluo da amostra
a 10% (p/v) com cido clordrico SR at reao cida ao
papel de tornassol. Adicionar 1 mL de cloreto de brio SR,
completar o volume para 50 mL com gua e aquecer em
banho-maria durante 15 minutos. Se produzir opalescncia,
no dever ser mais intensa que aquela produzida por 0,2
mg do on sulfato (SO
4
2-
) tratado nas mesmas condies.
Metais pesados (5.3.2.3). Dissolver 4 g da amostra em
10 mL de gua, adicionar 15 mL de cido clordrico SR e
aquecer at ebulio. Adicionar uma gota de fenolftalena
SI e neutralizar com hidrxido de sdio M at colorao
levemente rosa. Resfriar e diluir com gua para 25 mL.
Prosseguir conforme descrito em Mtodo I. No mximo
0,0005% (5 ppm).
ferro (5.3.2.4). Dissolver 10 g da amostra em 25 mL de
gua, adicionar, lentamente, 14 mL de cido clordrico.
Quando cessar a efervescncia, aquecer ebulio por
alguns minutos. Resfriar e diluir para 50 mL com gua.
Prosseguir conforme descrito em Mtodo I utilizando 5
mL da soluo obtida. Utilizar 1 mL de Soluo padro de
ferro (10 ppm Fe). No mximo 0,001% (10 ppm).
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar 10 mL de soluo da amostra
a 10% (p/v) e adicionar 5 mL de cido clordrico SR.
Preparar o padro com Soluo estoque padro de arsnio
(1 ppm As) e prosseguir conforme descrito em Mtodo I.
mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
Transferir, exatamente, cerca de 0,3 g da amostra
previamente dessecada para erlenmeyer. Adicionar 150 mL
de gua e quatro gotas de alaranjado de metila SI. Titular
com cido clordrico M SV. Cada mL de cido clordrico M
SV equivale a 69,105 mg de K
2
CO
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Alcalinizante e diurtico.
CARBONATO DE SDIO
Natrii carbonas
Na
2
CO
3
; 105,99
Na
2
CO
3
.H
2
O; 124,00
carbonato de sdio; 01752
Sal de sdio do cido carbnico (2:1)
[497-19-8]
Sal de sdio do cido carbnico hidratado (2:1:1)
[5968-11-6]
Na
2
CO
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais incolores ou p branco.
Inodoro e de sabor alcalino e custico. No ar mido e em
lugar fresco, absorve gua; a 100 C torna-se anidro.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, gua fervente e
glicerol. Insolvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. Responde s reaes do on sdio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Alcalinidade. A soluo aquosa da amostra fortemente
alcalina ao papel de tornassol.
Clcio e Magnsio. Determinar em 20 mL da soluo
obtida em Aspecto da soluo. Adicionar cido clordrico
at reao cida ao tornassol. Adicionar 5 mL de oxalato
de amnio 0,25 M, 2 mL de fosfato de sdio dibsico
heptaidratado 0,3 M e 10 mL de amnia. Deixar em repouso,
em lugar fresco, durante 24 horas. Se houver precipitao,
fltrar, lavar com soluo de amnia a 2% (p/v), dessecar
e calcinar at peso constante. O resduo dever pesar, no
mximo, 0,4 mg (0,02%).
Cianeto. Determinar em 15 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo. Adicionar 0,5 mL de sulfato ferroso
0,5 M e 0,5 mL de cloreto frrico 0,3 M. Adicionar cido
clordrico 3 M at reao fortemente cida. O lquido no
deve obter colorao azul.
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar o Mtodo I. Determinar em 10
mL da soluo obtida em Aspecto da soluo. No mximo
0,001% (10 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em 10 mL da soluo
obtida em Aspecto da soluo. Adicionar cido ntrico M
at reao cida ao tornassol. Adicionar em 1 mL de nitrato
de prata 0,25 M e completar o volume at 50 mL com gua.
a c
737
Se for produzida opalescncia, no dever ser mais intensa
da que for produzida por 0,1 mg de on cloreto em igual
volume de lquido, empregando-se os mesmos reagentes.
ferro (5.3.2.4). Utilizar o Mtodo I. Determinar em 20
mL da soluo obtida em Aspecto da soluo. Adicionar
cido actico at reao cida ao tornassol. Se produzir
colorao rosa ou vermelha, no deve ser mais intensa do
que a obtida com 0,02 mg de on frrico em igual volume
de lquido, empregando-se os mesmos reagentes. No
mximo 0,001% (10 ppm).
Metais Pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Determinar
em 5 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo.
Adicionar cido actico at reao cida ao tornassol. No
mximo 0,002% (20 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Determinar em 20 mL da soluo obtida
em Aspecto da soluo. Adicionar cido clordrico 3 M at
reao cida ao tornassol. Adicionar 1 mL de cloreto de
brio 0,5 M e completar o volume com gua at 50 mL.
Aquecer em banho-maria durante 10 minutos. Se for
produzida opalescncia, ela no dever ser mais intensa
da que for produzida por 0,8 mg de on sulfato em igual
volume de lquido, empregando-se os mesmos reagentes.
C, por 4 horas. No mximo 0,5% para a substncia anidra
e entre 12 e 15% para a substncia hidratada.
DOSEAMENTO
Dissolver 1 g da amostra em 25 mL de gua. Titular com
cido clordrico M, utilizando 0,2 mL de alaranjado de
metila SI. Cada mL de cido clordrico M SV equivale a
52,99 mg de Na
2
CO
3
ou a 62,0 mg de Na
2
CO
3
.H
2
O.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Adjuvante farmacotcnico (agente alcalinizante).
CARBOPLATINA SOLUO INJETVEL
6
H
12
N
2
O
4
Pt.
IDENTIFICAO
suporte, e mistura de acetona e gua (80:20), como fase
mvel. Aplicar, separadamente, placa, 10 uL de cada uma
das solues descritas a seguir.
Soluo amostra: soluo injetvel, se necessrio,
diluda em gua de forma a obter soluo a 10 mg/mL de
carboplatina.
Soluo padro: soluo de carboplatina SQR a 10 mg/
mL em gua.
Nota: utilizar a Soluo amostra e a Soluo padro em
at 2 horas.
secar ao ar durante 2 horas. Nebulizar com mistura de 5,6
g de cloreto de estanho(II) em 10 mL de cido clordrico
(a dissoluo pode no ser completa; se necessrio, fltrar)
e 90 mL de gua contendo 1 g de iodeto de potssio,
preparada imediatamente antes do uso. Aquecer a placa a
100 C por 10 minutos. A mancha obtida no cromatograma
com a Soluo amostra corresponde em tamanho, cor e
posio quela obtida com a Soluo padro.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,0 a 7,0.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de cido ciclobutano-1,1-dicarboxlico. Proceder
conforme descrito em Cromatografa a lquido de alta
efcincia (5.2.17.4). Utilizar cromatgrafo provido de
detector ultravioleta a 220 nm; coluna de 300 mm de
com slica qumicamente ligada a grupo octadecilsilano
(10 um), mantida a temperatura ambiente e fuxo de Fase
Soluo (1): dissolver 8,5 g de sulfato de tetrabutilamnio
em 80 mL de gua, adicionar 3,4 mL de cido fosfrico e
ajustar o pH para 7,55 com hidrxido de sdio.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila e Soluo (1)
(88:10:2). Desgaseifcar e fltrar.
Soluo amostra: diluir a soluo injetvel em gua de
modo a obter soluo de carboplatina a 1 mg/mL. Utilizar
esta soluo em at 2 horas.
Soluo padro: soluo de cido ciclobutano-1,1-
dicarboxlico a 0,01 mg/mL em gua.
Soluo de resoluo: mistura de Soluo amostra e
Soluo padro (1:1).
A resoluo entre os picos da carboplatina e do cido
ciclobutano-1,1-dicarboxlico no inferior a 2,5. O desvio
padro relativo das reas de replicatas dos picos relativos
c
ao cido ciclobutano-1,1-dicarboxlico no superior a
2,0%.
Procedimento: injetar separadamente, 100 uL da Soluo
amostra, da Soluo padro e da Soluo de resoluo.
Registrar os cromatogramas por, no mnimo, duas vezes
e meia o tempo de reteno do pico correspondente
carboplatina. A rea sob o pico correspondente ao cido
ciclobutano-1,1-dicarboxlico obtida no cromatograma da
Soluo amostra no maior que a rea sob o pico obtida
no cromatograma da Soluo padro (1,0%).
mg de carboplatina.
DOSEAMENTO
com slica qumicamente ligada a grupo aminopropilsilano
(5 um), mantida a temperatura ambiente; fuxo da Fase
Fase mvel: preparar mistura de acetonitrila e gua (87:13).
Desgaseifcar e fltrar.
Soluo amostra: soluo injetvel diluda em gua de
modo a obter soluo a 1 mg/mL de carboplatina.
Soluo padro: soluo de carboplatina SQR a 1 mg/mL
em gua.
Nota: utilizar a Soluo amostra e a Soluo padro em
at 2 horas.
O fator de reteno no menor que 4,0 para o pico
principal, o nmero de pratos tericos no menor que
5000 e o fator de cauda no maior que 2,0. O desvio
do padro de carboplatina no maior que 2,0%.
Procedimento: injetar separadamente, 10 uL das Solues
6
H
12
N
2
O
4
Pt
na soluo injetvel a partir das respostas obtidas para as
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e livre do
contato com metais.
ROTULAGEM
CARDAMOMO
Cardamomi semen
Elettaria cardamomum (L.) Maton ZINGIBERACEAE
A droga vegetal constituda pelas sementes,
comercializadas ainda dentro dos frutos. As sementes
devem ser utilizadas imediatamente aps a quebra dos
frutos. Contm, no mnimo, 5% de leo voltil.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As sementes, quando
trituradas, tm forte odor e sabor levemente acre e
caracterstico.
DESCRIO MACROSCPICA DO FRUTO
Fruto cpsula trilocular deiscente, com 10,0 mm a 25,0
mm de comprimento e 5,0 mm a 10,0 mm de largura, de
colorao amarelo-clara, amarelo-esverdeada a amarelo-
acinzentada, ovide ou oblonga em vista lateral, trgona
ou arredondada em seco transversal, com poro apical
estreitado-tubulosa em cerca de 1 mm a 2 mm, com ou sem
cicatriz dos rgos forais visvel e com cicatriz ou restos
de pedicelo na poro basal. Pericarpo delgado, coriceo
e inspido. Epicarpo, em vista frontal, com numerosas
estrias longitudinais salientes. Em seco transversal,
cpsula trilocular, cada lculo com duas a sete sementes de
placentao axial, aderidas entre si, formando trs fleiras
duplas, separadas pelas paredes carpelares delgadas,
membranosas e plidas. As sementes so comercializadas
dentro do fruto, o qual coletado imaturo e amadurecido
artifcialmente, ao sol ou em estufas.
DESCRIO MACROSCPICA DA SEMENTE
Sementes de placentao parietal (figura 1), antropas,
duras, ovides, triangulares ou subcilndricas,
irregularmente angulosas e enrugadas transversalmente,
com uma das faces convexa e a outra escavada, com 2,0 mm
a 4,0 mm de comprimento e 2,0 mm a 3,0 mm de largura,
pretas, cinzento-pardas ou avermelhadas, recobertas por um
arilo delgado, tnue e incolor a esbranquiado. Geralmente
as sementes esto aglutinadas em massas, correspondentes
s fleiras limitadas pelos carpelos. Com auxlio de lente,
em seco transversal, em cada semente so visveis arilo,
tegumento, perisperma, endosperma e embrio.
DESCRIO MICROSCPICA DA SEMENTE
Em vista frontal , o arilo apresenta clulas retangulares
muito estreitas, alongadas longitudinalmente e
irregularmente fusiformes, de paredes delgadas, dispostas
em fleiras, com gotas lipdicas. A epiderme possui clulas
alongadas tangencialmente, fusiformes, de paredes
anticlinais espessas e pontoadas, dispostas em ngulo
oblquo em relao ao arilo, com gotas lipdicas. Por
transparncia, o parnquima de reserva visvel, formado
a c
739
por clulas parenquimticas volumosas, de diferentes
formas, de paredes delgadas e onduladas, ricas em gotas
lipdicas. Em seco transversal, o arilo apresenta clulas
pequenas, achatadas, de paredes fnas. A epiderme
formada por clulas pequenas, quadrangulares, de paredes
espessas e apresenta algumas gotas lipdicas. A hipoderme
possui clulas geralmente retangulares, achatadas
tangencialmente, de paredes delgadas, distribudas em
poucas camadas, geralmente irregulares quanto ao nmero
de clulas. O parnquima de reserva possui algumas
camadas de clulas volumosas, de diferentes formas,
geralmente poligonais a retangulares, de paredes delgadas,
contendo gotas lipdicas. Pode ocorrer internamente
ao parnquima de reserva uma camada regular ou no,
de clulas parenquimticas de menor volume. Seguem
uma ou mais camadas de clulas esclerenquimticas
colunares, com as paredes periclinal interna e anticlinais
muito espessas e alaranjadas, com lmen em forma
de cuia e com ou sem cristais de slica. O perisperma
esbranquiado e apresenta as primeiras camadas de clulas
parenquimticas pequenas, achatadas tangencialmente,
de paredes delgadas, repletas de gros de amido, seguido
por muitas camadas de clulas parenquimticas de forma
irregular, geralmente colunares ou poligonais, volumosas,
com paredes delgadas e as anticlinais onduladas, contendo
grande quantidade de gros de amido de tamanho muito
reduzido, gotas lipdicas e cristais de oxalato de clcio.
O endosperma possui clulas parenquimticas alongadas,
de variadas formas, de paredes delgadas, distribudas em
vrias camadas paralelas, envolvendo completamente o
embrio e apresentando gotas lipdicas e gros de aleurona.
O embrio pequeno, ovide e de colorao escura e suas
clulas so arredondadas a ovides, de paredes delgadas,
apresentando gros de aleurona e gotas lipdicas.
DESCRIO MICROSCPICA DO P DA SE-
MENTE
espcie, menos os caracteres macroscpicos, no devendo
conter elementos do pericarpo. So caractersticos com a
adio de hidrato de cloral: colorao cinzento-pardacenta;
fragmentos do arilo, em vista frontal; fragmentos da
epiderme, em vista frontal; fragmentos do arilo com clulas
de parnquima de reserva, visualizadas por transparncia,
em vista frontal; fragmentos do arilo, da epiderme e do
parnquima de reserva, visualizados por transparncia,
em vista frontal; fragmentos da epiderme e do parnquima
de reserva, visualizado por transparncia, em vista
frontal; fragmentos da epiderme, em seco transversal;
fragmentos da hipoderme, em vista frontal; fragmentos
do parnquima de reserva, em vista frontal; fragmentos do
parnquima de reserva, em seco transversal; fragmentos
de esclernquima em vista frontal; fragmentos da camada
esclerenquimtica, em seco transversal; fragmentos da
camada esclerenquimtica e do perisperma em seco
transversal; fragmentos do perisperma, em vista frontal;
fragmentos do perisperma, em seco transversal;
fragmentos do endosperma, em seco transversal;
clulas parenquimticas isoladas; fbras isoladas em vista
longitudinal; gros de amido isolados e/ou agrupados;
cristais de oxalato de clcio isolados.
IDENTIFICAO
254
,
com espessura de 250 um, como suporte, e mistura
de tolueno e acetato de etila (93:7), como fase mvel.
uL da Soluo (1) e 10 uL da Soluo (2), preparadas
recentemente, como descrito a seguir.
Soluo (1): a 0,1 g da droga moda, adicionar 2 mL
de cloreto de metileno. Agitar por 15 minutos, fltrar e
concentrar at secura em banho-maria a, aproximadamente,
60 C. Ressuspender em 2 mL de tolueno.
Soluo (2): dissolver 10 ug de acetato de terpenila, 10 ug
de 1,8-cineol e 10 L de linalol em 1 mL de tolueno.
secar ao ar. Nebulizar a placa, em seguida, com soluo
de vanilina sulfrica SR e deixar em estufa entre 100 C e
105 C durante, aproximadamente, 5 minutos. As manchas
azuis obtidas com a Soluo (1) na parte superior do
cromatograma (com Rf de aproximadamente 0,7), na parte
mediana (com Rf de aproximadamente 0,5) e na poro
inferior (com Rf de aproximadamente 0,4) correspondem
em posio e colorao quelas obtidas com a Soluo (2),
referentes ao acetato de terpenila, ao 1,8-cineol e ao linalol,
respectivamente. Outras manchas podem ser observadas
na metade superior do cromatograma, uma de colorao
violcea, prxima ao fronte, com Rf de aproximadamente
0,9, correspondente ao limoneno. Entre as manchas com Rf
de aproximadamente 0,8 e de 0,9 observa-se uma mancha
de colorao azul. Na metade inferior do cromatograma
tambm podem ser observadas vrias manchas de colorao
violcea, azul e verde.
ENSAIOS DE PUREZA
DOSEAMENTO
leos volteis
Adicionar 0,5 mL de xileno pela abertura lateral k. Utilizar
a semente imediatamente aps ser removida do fruto, sem
triturar. Proceder imediatamente determinao do leo
voltil, a partir de 20 g da droga. Destilar por 5 horas.
Em recipiente bem fechado, ao abrigo da luz e calor.
c
figura 1 Aspectos macroscpicos do fruto e da semente e microscpicos da
semente de Elettaria cardamomum (L.) Maton
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 1cm (rgua 1); em B a 0,5 cm (rgua 2); em C a 0,5 cm (rgua 3); em D, E e
H a 100 m (rgua 4); em f e G a 100 m (rgua 5).
A aspecto geral do fruto, em vista lateral: pedicelo (ped). B representao esquemtica do fruto, em seco transversal: carpelo (cap); embrio
(em); endosperma (end); lculo (lo); parnquima (p); perisperma (per); semente (se). C aspecto geral de sementes, em vista lateral: arilo (ar). D
detalhe de poro do arilo, em vista frontal: gota lipdica (gl). E detalhe de poro da epiderme, em vista frontal: gota lipdica (gl); pontoao (pto).
f representao esquemtica da semente em seco longitudinal: arilo (ar); embrio (em); endosperma (end); esclernquima (esc); parnquima
(p); perisperma (per). G representao esquemtica da semente em seco transversal: arilo (ar); embrio (em); endosperma (end); epiderme (ep);
esclernquima (esc); parnquima (p); perisperma (per). H detalhe parcial de poro da semente, em seco transversal: camada amilfera (cam); cristal
de oxalato de clcio (cox); cristal de slica (csi); epiderme (ep); esclernquima (esc); idioblasto cristalfero (ic); gros de amido (ga); gota lipdica (gl);
hipoderme (h); lmen (lu); parnquima (p); perisperma (per).
a c
741
figura 2 Aspectos microscpicos do p da semente de Elettaria cardamomum (L.) Maton
_________________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A at P a 100 m (rgua 1); em Q a 100 m (rgua 2).
A fragmento da epiderme e do parnquima de reserva, observado por transparncia, em vista frontal: epiderme (ep); gota lipdica (gl); parnquima
(p); pontoao (pto). B fragmento do arilo, da epiderme e do parnquima, em vista frontal: arilo (ar); epiderme (ep); gota lipdica (gl); parnquima (p);
pontoao (pto). C fragmento do endosperma, em seco transversal: gota lipdica (gl). D fragmento do esclernquima, em vista frontal: pontoao
(pto). E fragmento do arilo, em vista frontal: gota lipdica (gl). f fragmento da epiderme, em vista frontal: gota lipdica (gl); pontoao (pto). G
fragmento do parnquima, em vista frontal. H fragmento da camada esclerenquimtica e do perisperma, em seco transversal: camada amilfera
(cam); esclernquima (esc); lmen (lu); perisperma (per). I fragmento da camada esclerenquimtica, em seco transversal: lmen (lu). J fragmento
da camada esclerenquimtica com restos do perisperma, em seco transversal: esclernquima (esc); lmen (lu); perisperma (per). L fragmento do
parnquima, em seco transversal: gota lipdica (gl). M fragmento da hipoderme, em vista frontal: gota lipdica (gl). N cristais de oxalato de clcio
isolados. O gros de amido isolados e/ou agrupados. P clulas parenquimticas e idioblastos cristalferos isolados: cristal de oxalato de clcio (cox);
gota lipdica (gl); idioblasto cristalfero (ic). Q fbra isolada, em vista longitudinal.
c
CARQUEJA
Baccharis trimerae herbae
Baccharis trimera (Less.) DC. ASTERACEAE; 09896
A droga vegetal consiste de caules alados, dessecados e
fragmentados contendo, mnimo, 1,7% de cidos cafeicos
totais, calculados como cido clorognico.
SINONMIA CIENTFICA
Baccharis genistelloides var. trimera (Less.) Baker
NOMES POPULARES
Carqueja-amarga.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As partes areas
apresentam sabor amargo.
DESCRIO MACROSCPICA
Ramos cilndricos, trialados, de at 1 m de comprimento,
flos ou com raras folhas ssseis e reduzidas nos ns. Alas
verdes, glabras a olho nu, membranosas, com 0,5 cm a 1,5
cm de largura; alas dos ramos forferos, mais estreitas do
que as demais. Plantas diicas, portanto, quando presentes
ramos foridos, estes devem ser somente pistilados ou
somente estaminados. Inforescncias, quando presentes,
do tipo captulo, branco-amareladas, numerosas, ssseis,
dispostas ao longo dos ramos superiores, formando espigas
interrompidas, com receptculo plano, no paleceo;
fores com papus presente, piloso e branco. Captulos
estaminados com brcteas involucrais de 0,4 cm a 0,5
cm de comprimento, plurisseriadas, sendo as externas
gradativamente menores, ovaladas e glabras; fores com
corola tubulosa, pentmera, com at 0,4 cm de comprimento
e limbo dividido em lacnias longas, enroladas em espiral;
estames cinco, epiptalos, sinnteros; pistilo atrofado.
Captulos pistilados com brcteas involucrais de at 0,6
cm de comprimento, plurisseriadas, lanceoladas, glabras;
fores com corola fliforme, pentadentada, com at 0,4 cm
de comprimento; estilete bifurcado, mais longo do que a
corola, linear-lanceolado, pubescente na face dorsal, com
ramos divergentes; ovrio nfero, bicarpelar, gamocarpelar,
unilocular, monosprmico; fruto do tipo aqunio, de at 0,2
cm de comprimento, com 10 estrias longitudinais.
DESCRIO MICROSCPICA
O caule apresenta trs alas ou expanses caulinares
divergentes, com as costelas pronunciadas entre cada ala.
A epiderme uniestratifcada, com clulas retangulares
cobertas por uma cutcula estriada. Em vista frontal, as
clulas epidrmicas mostram-se poligonais com paredes
sinuosas. Ocorrem poucos estmatos e alguns tricomas,
esses ltimos formados por 2 clulas basais e a cabea com
2 sries de 4 clulas cada uma. As clulas do clornquima
so elpticas a circulares, frouxamente distribudas e
dispostas radialmente em 3 ou 4 camadas, interrompidas na
regio do colnquima e dos canais secretores esquizgenos.
O colnquima, que se intercala ao clornquima, modifca-
se de acordo com a idade do caule. Nos caules jovens,
isto , at o quinto n, estende-se da epiderme at os
canais secretores, envolvendo-os parcialmente, enquanto
que nas regies entre os canais pode ocorrer sob a forma
de uma camada contnua e subepidrmica. Nos caules
maduros, ou seja, a partir do quinto n, distribui-se em
zonas opostas aos canais secretores, podendo as clulas
do colnquima transformar-se, parcial ou totalmente, em
fbras agrupadas em at 3 camadas; nas zonas afastadas
dos canais secretores, a camada de colnquima no sofre
modifcaes. Os canais secretores, sempre acompanhados
de colnquima, situam-se externamente endoderme,
ocorrendo, predominantemente, opostos s fbras do
protofoema. O nmero de canais secretores varia de 3 a
10, com epitlio de 3 a 14 clulas de paredes delgadas.
Internamente ao clornquima existe uma camada contnua
de endoderme com estrias de Caspary. O sistema vascular
colateral, apresentando carter secundrio j nos ramos
jovens. Os cordes de fbras do protofoema, em nmero
de 9 a 20, so formados por at 7 camadas de clulas de
paredes grossas e lignifcadas. Internamente ao xilema
ocorre uma faixa de fbras quase contnua e de espessura
varivel, localizada junto ao parnquima medular. A
medula relativamente ampla, com clulas grandes,
esfricas ou elpticas, de paredes pouco espessadas,
com poucos espaos intercelulares, contendo cristais
prismticos de oxalato de clcio, de formas variadas, como
cristais aciculares, retangulares e octadricos, dispostos
predominantemente em zonas prximas ao xilema. Em
seco transversal, as alas exibem estrutura dorsiventral
com parnquimas palidico e esponjoso. A epiderme
uniestratifcada, com caractersticas semelhantes quelas
descritas para o caule. Ocorrem estmatos anomocticos e
anisocticos, distribudos em ambas as faces da epiderme.
Os tricomas ocorrem predominantemente na regio dos
bordos das alas e na juno destas com o eixo do caule.
So de 4 tipos fundamentais: a: multicelular, unisseriado,
ereto, com 3 clulas no corpo e uma apical cnica, ereta ou
inclinada, b: multicelular, unisseriado, ereto, com 5 clulas
no corpo e uma clula apical cnica, com sua base dilatada,
c: multicelular, unisseriado, com 1 a 3 clulas no corpo e
clula apical arredondada, globosa, podendo s vezes ser
recurvado, d: multicelular, unisseriado, recurvado, com 3
clulas no corpo e uma clula aplical globosa, esta com
paredes espessadas. O parnquima palidico formado
por clulas elpticas, dispostas em 3 a 5 camadas na poro
mediana-superior e na mediana-inferior de cada ala, com
seus eixos maiores orientados anticlinalmente. Ocorrem
at 18 feixes condutores colaterais em cada ala, dispostos
linearmente, alternando-se em grandes e pequenos,
acompanhados de poucas fbras e rodeados por uma bainha
parenquimtica. Cada feixe est acompanhado por 1 ou 2
canais secretores esquizgenos de grande tamanho, com
epitlio de 4 a 14 clulas, de paredes no espessadas.
O colnquima est restrito a apenas uma camada
subepidrmica junto nervura do bordo da ala; abaixo
dele ocorre um grupo de fbras de paredes fortemente
a c
743
espessadas, que envolvem 3 canais secretores de diferentes
tamanhos.
caractersticos: fragmentos de epiderme com cutcula
estriada e estmatos anomocticos e anisocticos, alm
dos tricomas descritos; pores de parnquima medular
com cristais de oxalato de clcio; pores de fbras
acompanhadas de canais secretores. Podem ocorrer,
dependendo do grau de fragmentao, pores de ramos
alados com e sem captulos.
IDENTIFICAO
254
, com
espessura de 250 um, e mistura de tolueno e acetato de
etila (70:30), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, em forma de banda, de 10 uL da Soluo (1) e da
Soluo (1): agitar 2 g da amostra com 10 mL de cloreto de
metileno durante 10 minutos. Filtrar e desprezar a soluo
de cloreto de metileno. Extrair o resduo com 10 mL de
metanol sob agitao magntica em temperatura de 40 C.
Filtrar e concentrar at resduo em evaporador rotatrio (40
C). Ressuspender o resduo em 2 mL de metanol.
Soluo (2): dissolver 1 mg de quercetina SQR e 1 mg de
3-O-metilquercetina SQR em 0,1 mL de metanol.
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (365 nm). A
mancha principal obtida no cromatograma da Soluo
(1), corresponde em posio e intensidade quela
obtida com a Soluo (2). Em seguida, nebulizar a
placa com difenilborato de aminoetanol a 1% (p/v) em
metanol. As manchas correspondentes a quercetina e
3-O-metilquercetina, examinadas luz do dia, apresentam
colorao alaranjada.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 12,0%.
DOSEAMENTO
cidos cafeicos totais
de detector ultravioleta a 325 nm; pr-coluna empacotada
com slica octadecilsilanizada, coluna de 75 mm de
um), mantida a temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel
de 0,6 mL/minuto.
Eluente A: mistura de acetonitrila, gua e cido
trifuoractico (5:95:0,05).
Eluente B: acetonitrila.
linear, conforme tabela a seguir.
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
0 30 100 57 0 43 gradiente linear
36 42 100 0 isocrtica
Soluo amostra: pesar exatamente, cerca de 0,5 g da
droga seca e moda (250 m) em bquer de 50 mL.
Adicionar 10 mL de mistura de etanol e gua (50:50) e
levar ao banho-maria (40 C) por 10 minutos. Esfriar o
extrato temperatura ambiente. Filtrar o extrato atravs
de algodo, para balo volumtrico de 25 mL. Extrair
novamente o resduo da droga retida no algodo com 10
mL de mistura de etanol e gua (50:50), levar ao banho-
maria (40 C), por 10 minutos. Esfriar e fltrar para o
mesmo balo volumtrico de 25 mL. Completar o volume
com mistura de etanol e gua (50:50). Diluir 0,12 mL da
soluo resultante em 1 mL de mistura de acetonitrila, gua
e cido trifuoractico (5:95:0,05).
Soluo estoque: dissolver 5,6 mg de cido clorognico em
5 mL de metanol.
Solues para curva analtica de cido clorognico: diluir
com mistura de acetonitrila e gua (5:95) uma alquota de
0,2 mL da Soluo estoque, para 0,4 mL, de modo a obter
soluo a 0,56 mg/mL. Realizar diluies sucessivas da
soluo anterior, em mistura de acetonitrila e gua (5:95),
de modo a obter concentraes de 0,28 mg/mL, 0,14 mg/
mL, 0,07 mg/mL, 0,035 mg/mL; 0,017 mg/mL e 0,0085
mg/mL.
para curva analtica de cido clorognico e da Soluo
amostra. Registrar os cromatogramas e medir as reas sob
os picos. Os tempos de reteno relativos aproximados em
relao ao cido clorognico so: cido 3,4-dicafeoilqunico
= 1,69; 3,5-dicafeoilqunico = 1,76; 4,5-dicafeoilqunico
= 1,84. Calcule o teor da amostra a partir da equao
da reta obtida com as Solues para curva analtica de
cido clorognico. O resultado expresso pela mdia das
determinaes em gramas de cido clorognico por 100
g da droga (%), considerando a determinao de gua.
Outros picos podem estar presentes na amostra.
Em recipiente de vidro, bem fechado, ao abrigo da luz e
calor.
c
figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Baccharis trimera (Less.) DC
_____________
A - esquema representativo do caule com trs alas, em seco transversal. B - detalhe da margem da ala; endoderme (e); canal esquizgeno (sd). C
- detalhe de uma poro do caule em seco transversal, indicado em A; endoderme (e); canal esquizgeno (sd). D - detalhe da epiderme da ala com
cutcula estriada e estmatos anisocticos. E - tricoma glandular. f - cristais de oxalato de clcio em forma de prismas octadricos e prismas retangulares.
a c
745
figura 2 - Aspectos microscpicos em p Baccharis trimera (Less.) DC
________________
Complemento da legenda da figura 2. As rguas correspondem: 1 (B, C, H, E); 2 (D, f, G, I, J); 3 (A).
A - cristais de oxalato de clcio. B - captulo de fores estaminadas. C - fragmento de caule alado com captulo. D - poro de epiderme da ala. E -
fragmento do caule. f - poro de parnquima medular com cristais. G - fragmento de epiderme com tricoma glandular, em vista frontal. H - captulo
de fores pistiladas. I - detalhe de fbras. J - fragmento de parnquima palidico.
CARRAGENINA
carragenina; 01798
Carragenina
[9000-07-1]
Carragenina o colide hidrflo obtido da extrao com
gua ou com soluo aquosa alcalina de alguns membros
da classe Rhodophyceae (algas vermelhas), utilizada
como agente geleifcante, emulsionante, estabilizante,
suspensor e de aumento de viscosidade. uma mistura
de polissacardeos sulfatados, constituda normalmente
de steres sulfato de potssio, sdio, clcio, magnsio e
amnio, e copolmeros de galactose e 3,6-anidrogalactose.
As famlias estruturais so identifcadas pela posio do
grupo sulfato e a presena ou no de anidrogalactose.
Essas hexoses esto alternadas nas ligaes -1,3 e -1,4
no polmero. Os copolmeros prevalentes no colide so
designados carragenina do tipo capa, iota e lambda. A
famlia capa consiste em capa e iota. Capa-carragenina
geralmente D-galactose-4-sulfato e 3,6-anidro-D-
galactose alternados e iota-carragenina similar exceto
que a 3,6-anidrogalactose sulfatada no carbono 2. Entre
capa-carragenina e iota-carragenina existem diferentes
composies intermedirias, dependentes do grau de
sulfatao no carbono 2. Devido estrutura terciria
helicoidal, que permite geleifcao, a famlia capa a
de maior importncia comercial. Na lambda-carragenina
as unidades monomricas so geralmente D-galactose-2-
sulfato (ligao 1,3) e D-galactose-2,6-dissulfato (ligao
1,4). Esta carragenina no geleifcante. O contedo de
ster sulfato na carragenina de 18% a 40%.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou amarelado, quase
inodoro.
Solubilidade. Solvel em gua quente (80 C). Dispersa
mais facilmente se umedecida primeiramente em etanol,
glicerol e xarope.
c
Viscosidade (5.2.7): no mnimo 5 cP a 75 C. Transferir
7,5 g da amostra para um bquer de 600 mL previamente
pesado, adicionar 450 mL de gua e dispersar sob agitao
durante 15 minutos. Adicionar gua at 500 g de peso e
aquecer em banho-maria, com agitao contnua, at que a
temperatura de 80 C seja alcanada. Adicionar gua para
ajustar a perda por evaporao, resfriando at intervalo de
76 C a 77 C e manter em banho, temperatura constante
de 75 C. Utilizar um viscosmetro rotacional adequado e
adaptar um corpo rotatrio de 1,88 cm de dimetro e 6,51
cm de altura, com imerso de profundidade de 8,10 cm.
Deixar o corpo rotatrio girar na amostra a 30 rpm por
6 rotaes e efetuar leitura na escala. Converter a leitura
para centipoises, por multiplicao pela constante do corpo
rotatrio e a velocidade empregada.
IDENTIFICAO
A. Preparar uma disperso uniforme a 2% (p/v) da amostra
em gua e aquecer em banho-maria a 80 C (Preparao
A). Aps resfriamento a disperso torna-se mais viscosa e
pode formar um gel.
B. A 10 mL da Preparao A, obtida no teste A. de
Identifcao, ainda quente, adicionar quatro gotas de
cloreto de potssio a 10% (p/v), misturar e esfriar. Uma
textura frgil do gel indica predominncia da carragenina
do tipo capa; um gel elstico indica predominncia de
carragenina do tipo iota. Se a soluo no formar gel, a
carragenina predominante do tipo lambda.
C. Diluir uma poro da Preparao A, obtida no teste A.
de Identifcao, em quatro partes de gua e adicionar duas
a trs gotas de cloreto de metiltionnio a 0,05% (p/v) em
etanol. Forma-se precipitado fbroso de cor azul.
D. Obter o espectro de absoro no infravermelho
(5.2.14) das fraes geleifcantes e no-geleifcantes
pelo procedimento descrito a seguir. Dispersar 2 g da
amostra em 200 mL de cloreto de potssio a 2,5% (p/v)
e agitar durante 1 hora. Deixar em repouso durante 18
horas, agitar novamente durante 1 hora e transferir para
um tubo de centrfuga. Se a transferncia no puder ser
realizada porque a disperso muito viscosa, diluir com
200 mL de cloreto de potssio a 2,5% (p/v). Centrifugar
a aproximadamente 1000 g durante 15 minutos. Remover
o lquido sobrenadante lmpido, ressuspendendo o
resduo em 200 mL de cloreto de potssio a 2,5% (p/v)
e centrifugar novamente. Coagular os sobrenadantes
combinados, por adio de dois volumes de etanol 90%
(v/v). Recuperar o cogulo e o sedimento. Lavar o cogulo
com 250 mL de etanol 90% (v/v). Retirar o excesso de
lquido do cogulo por presso e secar a 60 C durante 2
horas. O material assim obtido a frao no-geleifcante,
carragenina do tipo lambda. Dispersar o sedimento em 250
mL de gua fria, aquecer a 90 C durante 10 minutos e
resfriar at 60 C. Coagular a mistura, com dois volumes
de etanol a 90% (v/v). Recuperar, lavar e secar o cogulo
como descrito anteriormente. O material assim obtido
a frao geleifcante, carragenina do tipo capa e iota.
Preparar, para cada frao, flmes de 5 mm de espessura
(quando seca) em uma superfcie no aderente uniforme e
obter os espectros de absoro no infravermelho de cada
flme. Carragenina apresenta larga banda de absoro,
tpica dos polissacardeos, na regio de 1000 cm
-1

a
1100 cm
-1
. Os mximos de absoro so de 1065 cm
-1

e
1020 cm
-1

para a frao geleifcante e no-geleifcante,
respectivamente. Outras bandas de absoro caractersticas
e suas intensidades relativas absorvncia em 1050 cm
-1

so mostradas na tabela a seguir.
Comprimento
de onda
(cm
-1
)
Frao molecular
Absorvncias relativas a 1 050 cm
-z
Capa Iota lambda
1220 a 1260 ster sulfato 0,7 a 1,2 1,2 a 1,6 1,4 a 2,0
928 a 933 3,6-Anidrogalactose 0,3 a 0,6 0,2 a 0,4 0 a 0,2
840 a 850 Galactose-4-sulfato 0,3 a 0,5 0,2 a 0,4 ---
825 a 830 Galactose-2-sulfato --- --- 0,2 a 0,4
810 a 820 Galactose-6-sulfato --- --- 0,1 a 0,3
800 a 805 3,6-Anidrogalactose-2-sulfato 0 a 0,2 0,2 a 0,4 ---
ENSAIOS DE PUREZA
Matria cida insolvel. Transferir 2 g da amostra
exatamente pesados para um bquer de 250 mL contendo
150 mL de gua e 1,5 mL de cido sulfrico. Tampar com
vidro de relgio e aquecer em banho de vapor durante 6
horas. Friccionar frequentemente as paredes do bquer
com basto de vidro com borracha na extremidade,
repondo alguma gua perdida por evaporao. Adicionar
500 mg, exatamente pesados, de um agente auxiliar de
fltrao. Filtrar a preparao em um funil com placa
fltrante contendo uma camada de fbra de vidro de 2,4 cm,
previamente dessecado e pesado. Lavar o resduo vrias
vezes com gua quente. Secar a 105 C durante 3 horas,
esfriar em dessecador e pesar. A diferena entre o peso fnal
e a soma dos pesos do funil, da fbra de vidro e do agente
auxiliar de fltrao o peso da matria cida insolvel. No
mximo 2%.
Arsnio (5.3.2.5). No mximo 0,0003% (3 ppm).
Chumbo (5.3.2.12). No mximo 0,001% (10 ppm).
mximo 0,004% (40 ppm).
a c
747
Perda por dessecao (5.2.9). Secar sob presso no
excedente a 10 mm Hg a 70 C, durante 18 horas. No
mximo 12,5%.
mesoflos (5.5.3.1.2). Bactrias totais: no mximo 200 UFC/g.
Ausncia de Salmonella sp e Escherichia coli.
Em recipientes hermticos, preferencialmente em local
fresco.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Excipiente.
CASTANHA-DA-NDIA
Hippocastani semen
Aesculus hippocastanum L. HIPPOCASTANACEAE
A droga vegetal constituda de sementes maduras e
dessecadas contendo, no mnimo, 3,0% de glicosdeos
triterpnicos, calculados como escina anidra.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Semente inodora, quando
partida possui odor fraco. Casca com sabor adstringente e
embrio com sabor amargo, produzindo salivao quando
mastigado.
DESCRIO MACROSCPICA
As sementes so duras e exalbuminadas, de 2,5 cm a 4,0
cm, irregularmente subesfricas, achatadas em ambos os
plos ou somente no do hilo, ou ainda achatadas de forma
irregular pela dessecao. A semente fraturada mostra
testa de cor marrom, quebradia, de 1,0 mm a 2,0 mm
de espessura, envolvendo o embrio, o qual possui uma
pequena radcula e dois grandes cotildones crneos e
amilceos, de colorao castanho-clara externamente e
quase branca na fratura. Endosperma ausente. A testa lisa,
coricea, quebradia, facilmente separvel do embrio em
algumas partes, de cor castanho-avermelhada ou castanho-
clara, geralmente lustrosa, raro opaca e com grande mancha
clara, correspondente ao hilo. A radcula curva e ocupa
uma depresso sobre a comissura dos cotildones ou sobre
a face dorsal de um dos dois cotildones e claramente
proeminente na superfcie externa.
DESCRIO MICROSCPICA
Em vista frontal, a testa da semente mostra uma epiderme
de cor castanho-amarelada, com clulas uniformes, sendo a
maioria poligonal ou arredondada. Em seco transversal,
as clulas da epiderme so colunares e compactas, com
cutcula espessa e lisa e paredes periclinais externas muito
mais espessas do que as internas. Abaixo se observam at
quatro zonas distintas. A primeira, mais externa, formada
por algumas camadas de clulas colenquimticas de cor
amarelo-acastanhada. A segunda formada por dez ou
mais camadas de clulas esclerenquimticas, achatadas
tangencialmente. A terceira formada por quatro a dez
camadas de clulas parenquimticas, incolores, de forma
mais polidrica e de paredes mais delgadas do que as das
regies anteriores, apresentando espaos intercelulares. Nas
camadas mais externas desta regio podem ser observados
os feixes vasculares. A quarta regio, quando presente,
formada por algumas camadas de clulas achatadas
tangencialmente e de paredes espessadas. Os cotildones
so constitudos de parnquima amilfero, coberto por uma
epiderme uniestratifcada. Em vista frontal, as clulas da
epiderme dos cotildones so poligonais. O parnquima
de reserva possui clulas ovaladas a elpticas, com paredes
delgadas, menores na regio mais externa e gradativamente
maiores para o interior, contendo gros de amido e gotas
lipdicas. Delicados feixes vasculares ocorrem neste
parnquima; os elementos de vaso so estreitos e tm
espessamento de parede helicoidal. Os gros de amido so
simples, podendo ser esfricos, ovalados e piriformes, e
de diferentes tamanhos, variando de 2 m a 80 m_)) de
dimetro. Os gros menores tm hilo geralmente em forma
de ponto; os outros, mais numerosos, apresentam hilo em
forma de cruz, ramifcado ou estrelado.
caractersticos: fragmentos da testa irregulares, amarelo-
dourados, com clulas de contornos irregulares, fortemente
interligadas, cujos limites no so reconhecveis, com
prolongamentos da parede celular parecendo tubiformes,
de lume estreito, semelhante ao de fbras em seco
transversal; fragmentos da testa mostrando clulas de
paredes espessadas; fragmentos da epiderme da testa,
em vista frontal, com paredes periclinais uniformemente
espessadas, e, quando em seco transversal, com paredes
radiais e periclinal externa fortemente espessadas,
lembrando uma paliada estreita, com clulas castanho-
avermelhadas; fragmentos de parnquima de reserva, com
clulas achatadas a elpticas, contendo gros de amido e
gotas lipdicas; fragmentos de parnquima de reserva com
pores de feixes vasculares; abundantes gros de amido,
isolados ou agrupados, de diferentes tamanhos e formas,
conforme descrito. Quando submetido ao hidrato de cloral
frio, o amido incha imediatamente. Nos fragmentos de
tecidos cotiledonares, submetidos a longo cozimento, o
c
amido no perde o carter pegajoso caracterstico. Nestes
tecidos, gotas lipdicas incolores so observadas tanto
no interior das clulas quanto espalhadas ao redor dos
fragmentos.
IDENTIFICAO
254
,
com espessura de 250 m, como suporte, e mistura
de 1- butanol, cido actico glacial e gua (50:10:40),
utilizando a camada superior como fase mvel. Aplicar,
separadamente, em forma de banda, 20 L da Soluo (1)
e 10 L da Soluo (2), recentemente preparadas, descritas
a seguir.
Soluo (1): aquecer 1 g da droga pulverizada com 10 mL
de etanol a 70% (v/v), sob refuxo, por 15 minutos. Esfriar
e fltrar.
Soluo (2): dissolver 10 mg de escina SQR em 1 mL de
etanol a 70% (v/v).
secar ao ar. Observar sob luz ultravioleta (254 nm). A
mancha principal obtida no cromatograma com a Soluo
(1) corresponde em posio, cor e intensidade quela obtida
com a Soluo (2). Nebulizar a placa com anisaldedo SR
e colocar em estufa entre 100 C e 105 C durante 5 a 10
minutos. A mancha correspondente a escina, apresenta
colorao violeta-azulada. O cromatograma obtido com
a Soluo (1) apresenta manchas menores e de colorao
fraca, variando de marrom a marrom avermelhado, uma
banda de colorao cinza-acastanhada presente no tero
inferior do cromatograma e logo abaixo uma banda de
colorao castanha.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 10%.
DOSEAMENTO
Escina
absoro no visvel (5.2.14). Transferir 1 g de droga
pulverizada para balo de 250 mL, e adicionar 100 mL
de metanol a 65% (v/v). Pesar exatamente o conjunto e
aquec-lo, sob refuxo, em banho-maria por 30 minutos.
Esfriar, completar at o peso inicial com metanol a 65%
(v/v). Filtrar. Evaporar 30 mL do fltrado at secura
em balo de 100 mL, sob presso reduzida. Dissolver o
resduo em 20 mL de cido clordrico 0,1 M, transferir
para funil de separao de 250 mL e lavar o balo com
duas pores de 5 mL de cido clordrico 0,1 M. Reunir
as fases cidas. Extrair com mistura de 20 mL de lcool
n-proplico e 50 mL de clorofrmio, agitar energicamente
por 2 minutos. Separar a fase orgnica inferior. Adicionar
fase remanescente no funil, 30 mL de cido clordrico 0,1
M, e extrair com mistura de 20 mL de lcool n-proplico
e 50 mL de clorofrmio. Agitar energicamente por 2
minutos. Separar a fase inferior e reuni-la fase inferior
da extrao anterior. Evaporar as solues reunidas, sob
presso reduzida, at secura. Lavar o resduo com quatro
pores de 10 mL de ter etlico isento de perxidos. Filtrar
a fase etrea. Lavar o fltro com 10 mL de ter etlico isento
de perxidos. Descartar o fltrado. Eliminar o ter etlico
remanescente no fltro e no balo. Lavar o fltro e o balo
contendo o resduo, com actico glacial transferindo para
cido actico glacial. Transferir 2 mL da soluo anterior
para tubo de ensaio e adicionar 4 mL de cloreto frrico
cido SR. Homogeneizar. Preparar o branco utilizando
2 mL de cido actico glacial e 4 mL de cloreto frrico
cido SR. Aquecer os tubos de ensaio em banho-maria a
60 C durante 25 minutos. Resfriar temperatura ambiente
e medir a absorvncia em 540 nm (5.2.14), utilizando
o branco para ajuste do zero. Calcular teor de escina,
considerando A(1%, 1 cm) = 60, segundo a expresso:
em que
Escina % = teor de escina;
A = absorvncia;
m = massa da droga considerando a determinao de gua (g).
a c
749
figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Aesculus hippocastanum L.
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A e B a 0,5 cm; em C a 300 m; em D a G a 100 m; em H a 50 m.
A - representaes esquemticas da semente, em vista abaxial e em vista adaxial, mostrando a regio do hilo; B - representao esquemtica da
semente, em seco transversal; C - detalhes da semente, em seco transversal, conforme mostrado em B; D - detalhe da epiderme do tegumento da
semente em vista frontal; E - detalhe da epiderme da testa, em seco transversal; f - clulas esclerenquimticas, em seco transversal; G - clulas
do parnquima de reserva cotiledonar; H - gros de amido; colnquima (co); esclernquima (el);. epiderme (ep); gro de amido (ga); gota lipdica (gl);
hilo (h); parnquima fundamental (pf); parnquima interno da testa (pit), com paredes celulares espessadas; parnquima de reserva do cotildone (pr).
c
CEfACLOR
Cefaclorum
N
H H
O
N
H
O
NH
2
S
COOH
Cl
C
15
H
14
ClN
3
O
4
S; 367,81
C
15
H
14
ClN
3
O
4
S.H
2
O; 385,82
cefaclor; 01824
cefaclor monoidratado; 09368
cido (6R,7R)-7-[[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]amino]-
3-cloro-8-oxo-5-tia-1-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-2-
carboxlico
[53994-73-3]
3-cloro-8-oxo-5-tia-1-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-2-
[70356-03-5]
Contm, no mnimo, 950 ug e, no mximo, 1020 ug de
C
15
H
14
ClN
3
O
4
S por miligrama, em relao substncia
anidra.
DESCRIO
branco.
insolvel em metanol, em clorofrmio e em benzeno.
relao substncia anidra. Determinar em soluo da
amostra a 1% (p/v) em cido clordrico a 1% (p/v).
IDENTIFICAO
observados no espectro de cefaclor SQR, preparado de
maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 3,0 a 4,5. Determinar em suspenso aquosa a
2,5% (p/v).
em Cromatografa a lquido de alta efcincia (5.2.17.4).
Utilizar cromatgrafo provido de detector ultravioleta a
220 nm; coluna de 250 mm de comprimento e 4,6 mm de
ligada a grupo octadecilsilano (5 um ou 10 um), mantida
minuto.
Diluente: dissolver 2,4 g de fosfato de sdio monobsico
em 1000 mL de gua e ajustar o pH para 2,5 utilizando
cido fosfrico.
Eluente A: dissolver 6,9 g de fosfato de sdio monobsico
em 1000 mL de gua e ajustar o pH para 4,0 utilizando
cido fosfrico.
Eluente B: mistura da Eluente A e acetonitrila (55:45).
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
45 - 55 0 100 isocrtica
Soluo amostra: transferir, exatamente, 50 mg da amostra
para balo volumtrico de 10 mL e sonicar se necessrio.
Completar o volume com Diluente, homogeneizar e fltrar.
Usar essa soluo em at 3 horas, se estocada temperatura
ambiente, ou em at 20 horas, se estocada sob refrigerao.
Soluo padro: dissolver quantidade sufciente de
cefaclor SQR em Diluente, de modo a obter soluo a 50
g/mL.
Soluo de resoluo: dissolver quantidade de delta-3-
cefaclor SQR em Soluo padro de modo a obter soluo
a 50 g/mL.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo de resoluo. O tempo
de reteno para o pico do cefaclor esta compreendido entre
23 minutos e 29 minutos. O fator de cauda para o pico do
cefaclor no maior do que 1,2. A resoluo entre delta-3-
cefaclor e cefaclor no menor que 2,0. Injetar o Diluente.
Desconsiderar qualquer pico referente ao Diluente.
cada substncia relacionada segundo a expresso:
em que
C = concentrao, em mg/mL, de cefaclor na Soluo
padro;
P = potncia, em ug/mg, de cefaclor SQR;
a c
751
r
i
= rea sob o pico de cada substncia relacionada no
cromatograma obtido com a Soluo amostra;
r
p
= rea sob o pico relativo ao cefaclor no cromatograma
No mximo 1,0% para qualquer substncia relacionada
e no mximo 3,0% para a soma de todas as substncias
relacionadas. Excluir qualquer pico com resultado inferior
a 0,1%.
gua (5.2.20.1). 3,0% a 6,5%.
DOSEAMENTO
(5m); fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 1 g de 1-pentanossulfonato de sdio
em uma mistura de 780 mL de gua e 10 mL de trietilamina.
Ajustar o pH para 2,5 0,1 com cido fosfrico. Adicionar
220 mL de metanol e agitar.
o volume com Fase mvel e homogeneizar. Utilizar essa
soluo em at 8 horas, se estocada temperatura ambiente,
ou em at 20 horas, se estocada sob refrigerao.
Soluo padro: transferir, exatamente, cerca de 15 mg de
cefaclor SQR para balo volumtrico de 50 mL, completar
o volume com Fase mvel e homogeneizar. Utilizar essa
Soluo de resoluo: preparar soluo, em Fase mvel,
contendo cerca de 0,3 mg de cefaclor SQR e 0,3 mg de
delta-3-cefaclor SQR por mililitro.
Injetar replicatas de 20 uL da Soluo de resoluo. O fator
de cauda para o pico do cefaclor no maior do que 1,5. A
resoluo entre cefaclor e delta-3-cefaclor no menor que
2,5. O desvio padro relativo das reas de replicatas dos
picos registrados no maior que 2,0%.
e medir as reas sob os picos. Calcular o teor em ug de
cefaclor (C
15
H
14
ClN
3
O
4
S) por miligrama na amostra,
a partir do teor do padro e das respostas obtidas com a
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibitico.
CEfACLOR CPSULAS
Contm cefaclor monoidratado equivalente a, no mnimo,
C
15
H
14
ClN
3
O
4
S.
IDENTIFICAO
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
15
H
14
ClN
3
O
4
S dissolvida no
cefaclor SQR na concentrao de 0,001% (p/v), preparada
no mesmo solvente.
declarada de C
15
H
14
ClN
3
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
em Substncias relacionadas da monografa de Cefaclor.
cpsulas. Transferir quantidade do p equivalente a 50 mg
de cefaclor para balo volumtrico de 10 mL. Completar
o volume com Diluente, homogeneizar e fltrar. Usar essa
Injetar replicatas de 20 L da Soluo de resoluo. O tempo
de reteno para o pico do cefaclor est compreendido
entre 23 minutos e 29 minutos. O fator de cauda para o
pico do cefaclor no maior do que 1,2. A resoluo entre
c
os picos de delta-3-cefaclor e cefaclor no menor que 2,0.
Injetar o Diluente. Desconsiderar qualquer pico referente
ao Diluente.
cada substncia relacionada atravs da seguinte expresso:
em que
C = concentrao, em mg/mL, de cefaclor na Soluo
padro;
P = potncia, em ug/mg, de cefaclor SQR;
r
i
= rea sob o pico de cada substncia relacionada no
cromatograma obtido com a Soluo teste;
r
p
= rea sob o pico relativo ao cefaclor no cromatograma
No mximo 1,0% para qualquer substncia relacionada. A
soma das reas de todos os picos obtidos com as substncias
relacionadas de no mximo 3,0%. No considerar picos
com rea inferior a 0,1%.
gua (5.2.20.1). No mximo 8,0%.
Cumpre o teste
DOSEAMENTO
um), mantida temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel
de 1,5 mL/minuto.
em uma mistura de 780 mL de gua e 10 mL de trietilamina
e ajustar o pH para 2,5 0,1 com cido fosfrico. Adicionar
220 mL de metanol e misturar.
cpsulas. Transferir quantidade de p equivalente a 30 mg
de cefaclor para balo volumtrico de 100 mL, adicionar
70 mL de Fase mvel e deixar em ultrassom at dissoluo.
e fltrar.
Soluo padro: dissolver quantidade, exatamente
pesada, de cefaclor SQR em Fase mvel de modo a obter
concentrao fnal de 0,3 mg/mL.
C
15
H
14
ClN
3
O
4
S nas cpsulas a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
CEfACLOR SUSPENSO ORAL
Contm, no mnimo, 80% e, no mximo, 120% da
15
H
14
ClN
3
O
4
S. A suspenso
oral pode conter agentes corantes, agentes suspensores,
aromatizantes, tampes, adoantes e conservantes em
veculo aquoso.
IDENTIFICAO
de 190 nm a 310 nm, de uma soluo da amostra a 30 g/
mL, diluda em gua e fltrada, exibe mximo em 264 nm.
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
ligada a grupo octadecilsilano (5 m); fuxo da Fase mvel
de 1,0 mL/minuto.
Diluente: dissolver 2,4 g de fosfato de sdio monobsico
em 1000 mL de gua, ajustar o pH para 2,5 com cido
fosfrico.
em 1000 mL de gua, ajustar o pH para 4,0 com cido
fosfrico.
Eluente B: preparar uma mistura de Eluente A e acetonitrila
(55:45).
a c
753
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
0-30 95 75 5 25 gradiente linear
45-55 0 100 isocrtica
60-70 95 5 isocrtica
Soluo amostra: diluir quantidade da amostra no Diluente
de modo a obter uma soluo de concentrao 5 mg/mL.
Agitar e sonicar, se necessrio. Filtrar.
de cefaclor SQR em Diluente de modo a obter uma soluo
de concentrao 0,05 mg/mL.
pesada de delta-3-cefaclor SQR na Soluo padro de
modo a obter uma soluo de concentrao 0,05 mg/mL.
Procedimento: injetar 20 L da Soluo de resoluo. A
resoluo entre os picos relativos ao delta 3-cefaclor e o
cefaclor no inferior a 2,0. Injetar, separadamente, 20
L da Soluo padro e da Soluo amostra, registrar os
cromatogramas por, no mnimo, duas vezes o tempo de
reteno do pico principal e medir as reas sob os picos.
A porcentagem mxima tolerada de 1,0% para cada
impureza individual e de, no mximo, 3,0% para a soma
de todas as impurezas presentes. No considerar picos
relativos ao solvente ou com rea inferior 0,1%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
com slica quimicamente ligada a octadecilsilano (5 um),
mantida temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel de
1,5 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 1 g de 1-pentanosulfonato sdico em
uma mistura de 780 mL de gua com 10 mL de trietilamina
e ajustar o pH para 2,5 0,1 com cido fosfrico. Adicionar
220 mL de metanol e misturar.
Soluo amostra: pesar quantidade da suspenso,
equivalente a 75 mg de cefaclor, transferir para balo
volumtrico de 250 mL. Agitar durante 30 minutos e
completar o volume com Fase mvel para obter uma
concentrao de 0,3 mg/mL. Filtrar em fltro quantitativo.
de cefaclor SQR em Fase mvel de modo a obter soluo
e medir as reas sob os picos. Calcular o teor de
C
15
H
14
ClN
3
O
4
Em recipientes bem fechados, temperatura ambiente e
protegidos da luz.
ROTULAGEM
CEfADROXILA
Cefadroxilum
N
H H
O
N
H
O
NH
2
S
COOH
CH
3
O H
C
16
H
17
N
3
O
5
S; 363,39
C
16
H
17
N
3
O
5
S.H
2
O; 381,40
cefadroxila; 01825
cido (6R,7R)-7-[[(2R)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)acetil]
amino]-3-metil-8-oxo-5-tia-1-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-
2-carboxlico
[50370-12-2]
cido (6R,7R)-7-[[(2R)-2-amino-2-(4-hidroxifenil)acetil]
amino]-3-metil-8-oxo-5-tia-1-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-
2-carboxlico hidratado (1:1)
[66592-87-8]
1050 g de C
16
H
17
N
3
O
5
S por miligrama, em relao
substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou quase branco.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, muito pouco solvel
em etanol, praticamente insolvel em clorofrmio e em
ter etlico.
relao substncia anidra. Determinar em soluo a 1%
(p/v) em gua.
c
IDENTIFICAO
observados no espectro de cefadroxila SQR, preparada de
maneira idntica.
de 235 nm a 340 nm, de soluo a 0,002% (p/v) em tampo
citro-fosfato pH 6,0, exibe mximo em 264 nm, idntico
ao observado no espectro de soluo similar de cefadroxila
SQR.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel HF
254
,
como suporte, e mistura de metanol e acetato de amnio a
15,4% (p/v) com pH 6,2 ajustado com cido actico glacial
descritas a seguir.
Soluo (1): dissolver 20 mg da amostra em 5 mL de
mistura de metanol e tampo citro-fosfato pH 7,0 (1:1).
Soluo (2): dissolver 20 mg de cefadroxila SQR em 5 mL
de mistura de metanol e tampo citro-fosfato pH 7,0 (1:1).
Soluo (3): dissolver 20 mg de cefadroxila SQR e 20
mg de cefalexina SQR em 5 mL de mistura de metanol e
tampo citro-fosfato pH 7,0 (1:1).
(2). O teste somente ser vlido se o cromatograma obtido
com a Soluo (3) apresentar duas manchas nitidamente
separadas.
da Soluo amostra, obtida no mtodo A. de Doseamento,
ENSAIOS DE PUREZA
5% (p/v).
Absoro de luz. A absoro de soluo a 0,02% (p/v)
em tampo citro-fosfato pH 6,0, medida em 330 nm, no
maior que 0,05 (5.2.14).
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de acetato de etila,
etanol, gua e cido frmico (14:5:5:1), como fase mvel.
Aplicar, separadamente, placa, 2 L das Solues (1),
(2) e (3) e 4 L da Soluo (4), recentemente preparadas,
descritas a seguir.
Diluente: mistura de etanol, gua e cido clordrico 2,4 M
(75:22:3).
Soluo (1): dissolver quantidade exatamente pesada da
amostra em Diluente de modo a obter soluo a 25 mg/mL.
volumtrico de 100 mL e completar o volume com
Diluente.
Soluo (3): dissolver quantidades exatamente pesadas
de cido 7-aminodesacetoxicefalospornico e de D--4-
hidroxifenilglicina em Diluente de modo a obter soluo a
0,25 mg/mL de cada substncia.
Soluo (4): misturar 1 mL da Soluo (1) com 1 mL da
Soluo (3).
secar ao ar. Nebulizar a placa com soluo de ninidrina a
3% (p/v) em metabissulfto sdico a 4,55% (p/v). Deixar
a placa secar ao ar. Qualquer mancha secundria obtida
no cromatograma com a Soluo (1) correspondente ao
cido 7-aminodesacetoxicefalospornico ou D--4-
hidroxifenilglicina, no mais intensa que as manchas
obtidas no cromatograma da Soluo (3) (1%). Qualquer
mancha obtida no cromatograma com a Soluo (1), com
exceo da mancha principal e das manchas correspondentes
ao cido 7-aminodesacetoxicefalospornico ou D--4-
hidroxifenilglicina, no mais intensa que a mancha obtida
no cromatograma da Soluo (2) (1%). O teste somente
ser vlido se o cromatograma obtido com a Soluo (4)
apresentar trs manchas nitidamente separadas.
Limite de dimetilanilina. Proceder conforme descrito em
Cromatografa a gs (5.2.17.5) utilizando cromatgrafo
a gs provido de detector de ionizao em chama; coluna
cromatogrfca empacotada com terra de diatomcea
silanizada para cromatografa a gs impregnada com 3%
(p/p) de polimetilfenilsiloxano, mantida a 120 C; injetor
e detector mantidos a 150 C; nitrognio como gs de
arraste; fuxo do gs de arraste de 30 mL/minuto.
Soluo amostra: transferir 1 g da amostra para um tubo
de centrfuga e adicionar 5 mL de hidrxido de sdio M
e 1 mL de Soluo de padro interno. Fechar o tubo e
agitar por 1 minuto. Centrifugar se necessrio, e usar o
sobrenadante lmpido.
Soluo de padro interno: transferir 50 mg de naftaleno,
exatamente pesado, para balo volumtrico de 50 mL
e dissolver em cicloexano. Completar o volume com o
mesmo solvente e homogeneizar. Transferir 5 mL dessa
volume com cicloexano.
Soluo padro: transferir 50 mg de N,N-dimetilanilina,
exatamente pesada, para balo volumtrico de 50 mL.
Adicionar 2 mL de cido clordrico, 20 mL de gua e
agitar para dissolver. Completar o volume com gua e
homogeneizar. Transferir 5 mL dessa soluo para balo
Transferir 1 mL dessa soluo para um tubo de centrfuga e
adicionar 5 mL de hidrxido de sdio M e 1 mL de Soluo
de padro interno. Fechar o tubo e agitar por 1 minuto.
Centrifugar se necessrio, e usar o sobrenadante lmpido.
a c
755
as reas sob os picos correspondentes dimetilanilina e
ao padro interno de naftaleno. A resposta obtida com a
relao dimetilanilina/naftaleno na Soluo amostra no
maior do que aquela obtida na Soluo padro (0,002%).
gua (5.2.20.1). Determinar em 0,2 g de amostra. Entre
4,0% e 6,0%.
No mximo 0,5 %.
DOSEAMENTO
de 1,5 mL/minuto.
Tampo pH 5,0: fosfato de potssio monobsico 0,05 M,
pH 5,0, ajustado com hidrxido de sdio 2 M.
(96:4).
Soluo amostra: transferir 0,2 g da amostra, exatamente
pesada, para balo volumtrico de 200 mL, com auxlio
de 120 mL de Tampo pH 5,0 e agitar mecanicamente por
homogeneizar e fltrar. Utilizar a soluo no mesmo dia.
cefadroxila SQR para balo volumtrico de 25 mL,
adicionar 15 mL de Tampo pH 5,0 e agitar mecanicamente
por 15 minutos. Completar o volume com o mesmo
solvente e homogeneizar. Utilizar a soluo no mesmo dia.
A efcincia da coluna no deve ser menor do que 1800
pratos tericos. O fator de cauda no superior a 2,2. O
fator de capacidade deve ser de 2 a 3,5. O desvio padro
deve ser maior que 2,0%.
Procedimento: injetar separadamente, 10 L das Solues
as reas sob os picos. Calcular a potncia, em mg/mg, de
cefadroxila (C
16
H
17
N
3
O
5
S) na amostra a partir da potncia
do padro e das respostas obtidas para as Solues padro
e amostra.
Micro-organismo: Staphylococcus aureus ATCC 6538 P.
Meios de cultura: soluo fsiolgica estril para
padronizao do inculo, meio nmero 2 para camada base
e meio nmero 1 para preparao do inculo.
Soluo amostra: pesar, exatamente, o equivalente a 50
mg de amostra e transferir quantitativamente para balo
volumtrico de 100 mL com auxlio de 60 mL de Tampo
fosfato de potssio 1%, estril, pH 6,0 (Soluo 1). Deixar
em ultrassom por 15 minutos. Agitar mecanicamente
por 20 minutos e completar o volume com o mesmo
solvente. Homogeneizar e fltrar. Diluir, sucessivamente,
at concentraes de 10 g/mL, 20 g/mL e 40 g/mL,
utilizando Tampo fosfato de potssio 1%, estril, pH 6,0
como solvente.
Soluo padro: pesar, exatamente, o equivalente a 25
mg de cefadroxila SQR e transferir quantitativamente
para balo volumtrico de 50 mL com auxlio de 30
mL de Tampo fosfato de potssio 1%, estril, pH 6,0
(Soluo 1). Deixar em ultrassom por 15 minutos. Agitar
mecanicamente por 20 minutos e completar o volume com
o mesmo solvente e homogeneizar. Diluir, sucessivamente,
at concentraes de 10 g/mL, 20 g/mL e 40 g/mL,
utilizando Tampo fosfato de potssio 1%, estril, pH 6,0
como solvente.
Procedimento: adicionar 20 mL de meio nmero 2 em cada
placa, esperar solidifcar, adicionar 5 mL de inculo a 0,5%
e proceder conforme descrito em Ensaio microbiolgico de
antibiticos (5.5.3.3).
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibitico.
CEfADROXILA CPSULAS
16
H
17
N
3
O
5
S.
IDENTIFICAO
A. Pesar as cpsulas, remover o contedo e pes-las
Utilizar quantidade de p equivalente a 20 mg de
cefadroxila e transferir para balo volumtrico de 100 mL
com auxlio de 60 mL de tampo citro-fosfato pH 6,0.
Agitar por 10 minutos e completar o volume com o tampo.
Homogeneizar e fltrar. Prosseguir conforme descrito no
teste B. de Identifcao da monografa de Cefadroxila.
B. Proceder conforme descrito no teste C. de Identifcao
da monografa de Cefadroxila. Preparar a Soluo (1)
c
Soluo (1): pesar as cpsulas, remover o contedo
cpsulas. Utilizar quantidade de p equivalente a 20 mg
de cefadroxila, dissolver em 5 mL de mistura de metanol e
tampo citro-fosfato pH 7,0 (1:1), homogeneizar e fltrar.
CARACTERSTICAS
Proceder conforme descrito no mtodo A. de Doseamento.
Aparelhagem: cesta, 100 rpm
Tempo: 30 minutos
dissoluo e diluir em gua at concentrao adequada.
Medir as absorvncias em 263 nm (5.2.14), utilizando o
mesmo solvente para ajuste do zero. Calcular a quantidade
de C
16
H
17
N
3
O
5
leituras obtidas com a da soluo de cefadroxila SQR
na concentrao de 0,002% (p/v), preparada no mesmo
solvente.
declarada de C
16
H
17
N
3
O
5
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 7,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito no mtodo A. de
Doseamento da monografa de Cefadroxila. Preparar a
cpsulas. Transferir quantidade de p equivalente a 0,2 g de
cefadroxila para balo volumtrico de 200 mL, adicionar
120 mL de Tampo pH 5,0 e agitar mecanicamente por
homogeneizar e fltrar. Utilizar a soluo no mesmo dia.
C
16
H
17
N
3
O
5
S nas cpsulas a partir das respostas obtidas
da monografa de Cefadroxila. Preparar a Soluo amostra
cpsulas. Transferir quantidade de p equivalente a 0,125
g de cefadroxila para balo volumtrico de 250 mL, com
auxlio de 150 mL de Tampo fosfato de potssio a 1%,
estril, pH 6,0 (Soluo 1). Deixar em ultrassom por 15
minutos. Agitar mecanicamente por 20 minutos e completar
o volume com o mesmo solvente. Homogeneizar e fltrar.
Diluir, sucessivamente, at concentraes de 10 g/mL, 20
g/mL e 40 g/mL, utilizando o mesmo solvente.
ROTULAGEM
CEfADROXILA COMPRIMIDOS
16
H
17
N
3
O
5
S. Os comprimidos
podem ser revestidos.
IDENTIFICAO
de p equivalente a 20 mg de cefadroxila e transferir para
balo volumtrico de 100 mL com auxlio de 60 mL de
tampo citro-fosfato pH 6,0. Agitar por 10 minutos e
completar o volume com o tampo. Homogeneizar e fltrar.
Prosseguir conforme descrito no teste B. de Identifcao
da monografa de Cefadroxila.
quantidade de p equivalente a 20 mg de cefadroxila,
dissolver em 5 mL de mistura de metanol e tampo citro-
fosfato pH 7,0 (1:1) e fltrar.
a c
757
CARACTERSTICAS
contendo 300 mL de Tampo fosfato pH 5,0 (descrito no
mtodo A. de Doseamento na monografa de Cefadroxila)
e deixar em ultrassom por 5 minutos para desintegrao
do comprimido. Agitar mecanicamente por 15 minutos e
completar o volume com o mesmo solvente. Homogeneizar
e fltrar. Transferir 10 mL dessa soluo para balo
volumtrico de 20 mL e completar o volume com Tampo
fosfato pH 5,0. Prosseguir conforme descrito no mtodo A.
de Doseamento.
Tempo: 30 minutos
dissoluo e diluir em gua, at concentrao adequada.
Medir as absorvncias em 263 nm (5.2.14), utilizando o
de C
16
H
17
N
3
O
5
leituras obtidas com a da soluo de cefadroxila SQR
solvente.
declarada de C
16
H
17
N
3
O
5
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 8,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Doseamento na monografa de Cefadroxila. Preparar a
Transferir quantidade de p equivalente a 0,2 g de
120 mL de Tampo pH 5,0 e agitar mecanicamente por 15
minutos. Completar o volume com o mesmo solvente e
fltrar. Utilizar a soluo no mesmo dia.
16
H
17
N
3
O
5
S
nos comprimidos a partir das respostas obtidas para as
na monografa de Cefadroxila. Preparar a Soluo amostra
150 mL de Tampo fosfato de potssio a 1% estril,
pH 6,0. Deixar em ultrassom por 15 minutos. Agitar
sucessivamente, at concentraes de 10 g/mL, 20 g/mL
e 40 g/mL, utilizando Tampo fosfato de potssio a 1%
estril, pH 6,0 como diluente.
ROTULAGEM
CEfADROXILA P PARA SUSPENSO
ORAL
16
H
17
N
3
O
5
S. O p para suspenso
oral uma mistura de cefadroxila monoidratada com um ou
mais agentes corantes, aromatizantes, tampes, adoantes
e conservantes.
IDENTIFICAO
A. Reconstituir o contedo de trs frascos conforme
indicado no rtulo e homogeneizar. Transferir quantidade
de suspenso oral equivalente a 50 mg de cefadroxila para
balo volumtrico de 250 mL com o auxlio de 150 mL de
tampo fosfato de sdio pH 6,0. Agitar por 10 minutos e
completar o volume com o tampo. Homogeneizar e fltrar.
da monografa de Cefadroxila.
c
Soluo (1): reconstituir o contedo de trs frascos
conforme indicado no rtulo e homogeneizar. Utilizar
quantidade de suspenso oral equivalente a 0,1 g de
cefadroxila, dissolver em 25 mL de mistura de metanol e
tampo citro-fosfato pH 7,0 (1:1) e fltrar.
CARACTERSTICAS
no p antes de reconstituir.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 2,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Doseamento da monografa de Cefadroxila. Preparar a
Soluo amostra: reconstituir o contedo de trs frascos
conforme indicado no rtulo e homogeneizar. Transferir
volume da suspenso oral equivalente a 0,25 g de
150 mL de Tampo pH 5,0 e agitar mecanicamente por
15 minutos. Completar o volume com o mesmo solvente.
Filtrar aproximadamente 25 mL dessa soluo, atravs
de fltro de porosidade de 0,8 m ou inferior, e utilizar o
fltrado lmpido como soluo amostra. Utilizar a soluo
no mesmo dia.
C
16
H
17
N
3
O
5
S na suspenso oral a partir das respostas
da monografa de Cefadroxila. Preparar a Soluo amostra
Soluo amostra: reconstituir o contedo de trs frascos
conforme indicado no rtulo e homogeneizar. Transferir
volume de suspenso oral equivalente a 0,1 g de cefadroxila
para balo volumtrico de 200 mL, com auxlio de 120 mL
de Tampo fosfato de potssio a 1%, estril, pH 6,0. Agitar
sucessivamente, at concentraes de 10 g/mL, 20 g/mL
e 40 g/mL, utilizando o mesmo solvente.
ROTULAGEM
CEfALEXINA
Cefalexinum
N
H H
O
N
H
O
NH
2
S
COOH
CH
3
C
16
H
17
N
3
O
4
S; 347,39
C
16
H
17
N
3
O
4
S.H
2
O; 365,40
cefalexina; 01826
cefalexina monoidratada; 01827
3-metil-8-oxo-5-tia-1-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-2-
carboxlico
[15686-71-2]
3-metil-8-oxo-5-tia-1-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-2-
[23325-78-2]
C
16
H
17
N
3
O
4
S, em relao substncia anidra.
DESCRIO
branco.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, ligeiramente
solvel em metanol e praticamente insolvel em etanol e
dimetilformamida.
(p/v) em tampo biftalato pH 4,4.
a c
759
IDENTIFICAO
observados no espectro de cefalexina SQR, preparado de
maneira idntica.
faixa de 200 nm a 400 nm, de soluo da amostra em gua
(1:50), exibe mximo e mnimo no mesmo comprimento
de onda de uma soluo de cefalexina SQR, preparada de
maneira idntica, concomitantemente medido, bem como
a absortividade, calculada na base anidra, no comprimento
de onda de absoro mxima cerca de 262 nm no menor
do que 95% e maior que 104% de cefalexina SQR, tendo
em vista a potncia declarada de cefalexina SQR.
suporte, e mistura de acetato de etila, gua, acetonitrila
e cido actico glacial (42:18:14:14), como fase mvel.
Soluo (1): soluo a 25 mg/mL da amostra em cido
clordrico 0,01 M.
Soluo (2): soluo a 25 mg/mL de cefalexina SQR em
Desenvolver o cromatograma at que o solvente tenha se
deslocado trs quartos da placa. Remover a placa, deixar
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 3,0 a 5,5. Determinar em suspenso aquosa
contendo 50 mg/mL.
em Cromatografa a liquido de alta efcincia (5.2.17.4.).
de 1,0 mL/minuto.
Eluente A: dissolver 1 g de 1-pentanossulfonato de sdio
numa mistura de 1000 mL de gua e 15 mL de trietilamina.
Ajustar o pH para 2,5 0,1 com cido fosfrico.
Eluente B: dissolver 1 g de 1-pentanossulfonato de sdio
numa mistura de 300 mL de gua e 15 mL de trietilamina.
Ajustar o pH para 2,5 0,1 com cido fosfrico. Adicionar
350 mL de acetonitrila, 350 mL de metanol e homogeneizar.
Fase mvel: utilizar misturas variadas do Eluente A e
Eluente B. Adotar o sistema de gradiente descrito na tabela
a seguir.
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
0
0 1
1 33,3
33,3 34,3
100
100
100 0
0
0
0
0 100
100
equilbrio
isocrtica
gradiente linear
isocrtica
Diluente: dissolver 18 g de fosfato de potssio monobsico
em 1000 mL de gua.
volume com Diluente e misturar.
Solues padro: dissolver quantidade, exatamente pesada,
de cefalexina SQR no Diluente e diluir adequadamente
de modo a obter solues a 0,08 mg/mL e 0,16 mg/mL
de cefalexina (C
16
H
17
N
3
O
4
S), tendo em vista a potncia
declarada de cefalexina SQR.
medir as reas sob todos os picos obtidos. Construir a curva
analtica a partir das respostas obtidas para a cefalexina
com as Solues padro versus as suas concentraes,
calculadas na base anidra, em mg/mL. Determinar a
concentrao C, em mg/mL, de cada substncia relacionada
cefalexina obtida com a Soluo amostra alm do pico
da cefalexina. Calcular a porcentagem de cada substncia
relacionada cefalexina pela frmula:
A
C 500
em que A a quantidade calculada da base anidra, em mg,
de cefalexina tomada para preparar a Soluo amostra.
No encontrado mais que 1,0% de qualquer substncia
relacionada cefalexina. A soma das reas de todas as
substncias relacionadas cefalexina no superior a
5,0%.
gua (5.2.20.1). Entre 4,0% e 8,0%.
DOSEAMENTO
Fase mvel: preparar 1015 mL de uma mistura de gua,
acetonitrila, metanol e trietilamina (850:100:50:15).
Dissolver 1 g de 1-pentanossulfonato de sdio nesta
mistura, ajustar com cido fosfrico para pH 3,0 0,1 e
degaseifcar. Fazer ajustes se necessrio.
Soluo amostra: transferir 0,1 g da amostra, exatamente
pesada, para balo volumtrico de 100 mL, dissolver e
completar o volume com gua e homogeneizar. Transferir
10,0 mL desta soluo para balo volumtrico de 25 mL,
completar o volume com a Fase mvel e homogeneizar.
c
de cefalexina SQR em gua e diluir adequadamente de
modo a obter uma soluo estoque a 1 mg/mL. Transferir
10 mL para balo volumtrico de 25 mL, completar o
volume com a Fase mvel e homogeneizar.
e medir as reas sob os picos principais. Calcular o teor em
g de C
16
H
17
N
3
O
4
S por mg da amostra a partir da seguinte
frmula:
em que C a concentrao, em mg/mL, de cefalexina
SQR na soluo estoque utilizada para preparar a Soluo
padro; P a potncia declarada de cefalexina, em g/
mg, da cefalexina SQR; M a quantidade, em mg, de
cefalexina tomada para preparar a Soluo amostra; Ra
e Rp, so as reas sob os picos da Soluo amostra e da
Soluo padro, respectivamente.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibacteriano.
CEfALEXINA COMPRIMIDOS
Cefalexina comprimidos so compostos de cefalexina ou
cloridrato de cefalexina com um ou mais agentes diluentes
e lubrifcantes adequados. Contm, no mnimo, 90,0%
e, no mximo, 120,0% do valor declarado de cefalexina
ou cloridrato de cefalexina. A cefalexina empregada na
produo cumpre as especifcaes descritas na monografa
de Cefalexina. Os comprimidos podem ser revestidos.
IDENTIFICAO
O teste de identifcao D. pode ser omitido se forem
realizados os testes A., B. e C. Os testes de identifcao
A., B. e C. podem ser omitidos se for realizado o teste D.
A. Remover qualquer revestimento presente nos
comprimidos. Misturar quantidade de comprimidos
fnamente pulverizados contendo o equivalente a 0,5 g de
cefalexina em 1 mL de gua e 1,4 mL de cido clordrico
M, adicionar 0,1 g de carvo ativado, agitar, fltrar e lavar o
fltro com 1 mL de gua. Adicionar lentamente ao fltrado
uma soluo saturada de acetato de sdio at que ocorra
precipitao. Adicionar 5 mL de metanol. Secar a uma
presso no excedendo 7 kPa. O espectro de absoro
no infravermelho (5.2.14) do resduo obtido, disperso
espectro de cefalexina SQR, preparado de maneira idntica.
B. Misturar 20 mg do resduo obtido no teste A. de
Identifcao com 0,25 mL de uma soluo de cido ntrico
a 1% (v/v) em cido sulfrico a 80% (v/v). Desenvolve-se
colorao amarela.
C. Misturar 20 mg do resduo obtido no teste A. de
Identifcao com 0,25 mL de uma soluo de cido actico
glacial a 1% (v/v) e adicionar 0,1 mL de uma soluo de
sulfato cprico penta-hidratado a 1% (p/v) e 0,1 mL de
hidrxido de sdio 2 M. Desenvolve-se colorao verde-
oliva.
D. Proceder conforme descrito em Cromatografa em
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel no-
ligada, como suporte, e mistura de cido ctrico 0,1 M,
fosfato de sdio dibsico 0,1 M e ninidrina a 6,25% (p/v)
em acetona (60:40:1,5) como fase mvel. Impregnar
a placa com mistura de n-hexano e tetradecano (95:5).
Aplicar, separadamente, placa, 10 uL de cada uma das
Soluo amostra: pesar e pulverizar os comprimidos.
Dissolver quantidade do p em gua de modo a obter
uma concentrao aproximada de 3 mg de cefalexina por
mililitro.
Soluo padro: preparar soluo aquosa contendo 3 mg
de cefalexina SQR por mililitro.
Desenvolver o cromatograma. Aquecer a placa a 110 C
por 10 minutos. A principal mancha obtida com a Soluo
amostra corresponde em posio, cor e intensidade quela
obtida com a Soluo padro.
CARACTERSTICAS
Cefalexina
Tempo: 30 minutos
dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, em gua, at
a c
761
concentrao adequada. Medir as absorvncias em 262
16
H
17
N
3
O
4
S dissolvida
no meio, comparando as leituras obtidas com a soluo
de cefalexina SQR na concentrao de 0,002% (p/v),
declarada de C
16
H
17
N
3
O
4
Cloridrato de cefalexina
Meio de dissoluo, Aparelhagem e Procedimento:
proceder como indicado para cefalexina.
Tempo: 45 minutos
declarada de C
16
H
17
N
3
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
em Cromatografa em camada delgada (5.2.17.1) usando
slica-gel G como fase estacionria. Impregnar a placa pelo
desenvolvimento com uma soluo de tetradecano a 5%
(v/v) em hexano. Deixar o solvente evaporar e desenvolver
a cromatografa no mesmo sentido que a impregnao.
Preparar a Soluo (1) como descrito a seguir.
Fase mvel: mistura de acetona, soluo de fosfato de
sdio dibsico dodeca-hidratado a 7,2% (p/v) e soluo de
cido ctrico 2,1% (p/v) (3:80:120).
Soluo (1): pesar e pulverizar os comprimidos. Dissolver
quantidade do p equivalente a 0,25 g de cefalexina em
cido clordrico 2 M e diluir para 10 mL com o mesmo
solvente. Homogeneizar e fltrar.
Soluo (2): diluir a Soluo (1) para 100 mL com cido
clordrico 2 M.
Soluo (3): soluo contendo 0,025% (p/v) de cido
7-aminodesacetoxicefalospornico em cido clordrico 2 M.
Soluo (4): soluo contendo 0,025% (p/v) de D--4-
hidroxifenilglicina em cido clordrico 2 M.
Soluo (5): soluo contendo 2,5% (p/v) de
cefalexina e 0,025% (p/v) de cada soluo de
cido 7-aminodesacetoxicefalospornico e D--4-
hidroxifenilglicina em cido clordrico 2 M.
Aplicar separadamente na placa previamente impregnada,
5 uL de cada soluo. Desenvolver por um percurso de
15 cm. Secar a placa a 90 C por 3 min. Borrifar a placa
quente com uma soluo de ninidrina a 0,1% (p/v) na Fase
mvel. Aquecer a placa a 90 C por 15 minutos e esfriar.
No cromatograma obtido para a Soluo (1),
nenhuma mancha correspondente ao cido
7-aminodesacetoxicefalospornico mais intensa do
que a mancha obtida com a Soluo (3); nenhuma
mancha correspondente a D--4-hidroxifenilglicina
mais intensa do que a mancha obtida com a Soluo
(4); nenhuma outra mancha secundria que aparea
entre a mancha principal e as manchas correspondentes
ao cido 7-aminodesacetoxicefalospornico e a D--4-
hidroxifenilglicina mais intensa que a mancha principal
no cromatograma obtido com a Soluo (2).
O teste no vlido a menos que o cromatograma obtido
com a Soluo (5) mostrar trs manchas claramente
separadas.
gua (5.2.20.1). No mximo 9,0% para comprimidos
de cefalexina e 8% para comprimidos de cloridrato de
cefalexina.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
comprimento e 4,6 mm de dimetro interno empacotada
(5 m), de baixa acidez; fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/
minuto.
Fase mvel: empregar mistura de gua, acetonitrila,
metanol e trietilamina (850:100:50:15). Dissolver 1 g de
1-pentanossulfonato de sdio nesta mistura, ajustar o pH
para 3,0 0,1.
cefalexina para balo volumtrico de 250 mL, acrescentar
100 mL de gua. Agitar mecanicamente por 30 minutos e
e fltrar. Transferir 25 mL dessa soluo para balo
Soluo padro: dissolver, exatamente, quantidade de
cefalexina SQR em gua para obter concentrao de 1 mg/
mL de cefalexina (C
16
H
17
N
3
O
4
S). Transferir 10 mL desta
volume com gua.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 uL das Soluo
C
16
H
17
N
3
O
4
S nos comprimidos a partir das respostas
obtidas para a Soluo padro e a Soluo amostra.
de antibiticos (5.5.3.3.1), pelo mtodo de difuso em
Micro-organismo: Staphylococcus aureus ATCC 6538P.
c
manuteno do micro-organismo; soluo salina estril,
para padronizao do inculo; meio de cultura nmero
2, para camada base; meio nmero 1 para preparao do
inculo.
cefalexina para balo de 250 mL, com auxlio de 200
mL de Tampo fosfato de potssio a 1%, estril, pH 6,0
(Soluo 1). Agitar por 15 minutos. Completar o volume
com Tampo fosfato de potssio a 1%, estril, pH 6,0
(Soluo 1) e fltrar. Diluir, sucessivamente, com o mesmo
solvente, at obter as concentraes de 2,5 g/mL; 5 g/
mL e 10 g/mL, utilizando Tampo fosfato de potssio a
1%, estril, pH 6,0 (Soluo 1) como solvente.
de cefalexina SQR em Tampo fosfato de potssio a 1%,
estril, pH 6,0 (Soluo 1), de modo a obter soluo a 1
mg/mL. Diluir, sucessivamente, com o mesmo solvente,
at obter as concentraes de 2,5 g/mL; 5 g/mL e 10 g/
mL, utilizando Tampo fosfato de potssio a 1%, estril,
pH 6,0 (Soluo 1) como solvente.
inoculo a 1% e proceder conforme descrito em Ensaio
microbiolgico por difuso em gar (5.5.3.3.1). Calcular a
potncia da amostra, em g de cefalexina por miligrama, a
partir da potncia do padro e das respostas obtidas com a
Em recipientes bem fechados, protegidos da umidade e em
ROTULAGEM
CEfALEXINA P PARA SUSPENSO
ORAL
Cefalexina p para suspenso oral uma mistura de
cefalexina com um ou mais agentes tampes, corantes,
aromatizantes, adoantes e conservantes. Apresenta
no mnimo, 90,0% e, no mximo, 120,0% da potncia
declarada de C
16
H
17
N
3
O
4
S.
IDENTIFICAO
254
, como
suporte, e mistura de cido ctrico 0,1 M, fosfato de sdio
dibsico 0,1 M e soluo de ninidrina em acetona (1:15)
(60:40:1,5), como fase mvel. Previamente, colocar a
placa em uma cuba cromatogrfca contendo uma mistura
de hexano e tetradecano (95:5) e, deixar essa mistura correr
por toda a extenso da placa. Remover a placa, deixar secar
ao ar. Aplicar, separadamente, placa, 10 uL de cada uma
Soluo (1): reconstituir o p conforme indicado no rtulo.
Preparar soluo a 3 mg/mL de cefalexina em gua.
Soluo (2): dissolver quantidade, exatamente pesada, de
cefalexina SQR em gua de modo a obter soluo a 3 mg/mL.
a 110C por 10 minutos. A mancha principal obtida com
CARACTERSTICAS
no p antes de reconstituir.
ENSAIOS DE PUREZA
Determinao de gua (5.2.20.1). No mximo 2%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Micro-organismo: Staphylococcus aureus ATCC 6538p.
para padronizao do inculo e meio de cultura nmero
2, para a camada base e meio de cultura nmero 1 para
preparao do inculo.
Soluo amostra: reconstituir a suspenso conforme
indicado no rtulo. Transferir volume de suspenso
equivalente a 200 mg de cefalexina para balo volumtrico
de 200 mL, completar o volume com Tampo fosfato
de potssio a 1%, estril, pH 6,0 (Soluo 1). Diluir,
sucessivamente, at as concentraes de 4 ug/mL, 8 ug/
mL e 16 ug/mL de cefalexina, utilizando Tampo fosfato
de potssio a 1%, estril, pH 6,0 como diluente.
de cefalexina SQR em Tampo fosfato de potssio a 1%,
estril, pH 6,0, de modo a obter soluo a 1 mg/mL. Diluir,
sucessivamente, at as concentraes de 4 ug/mL, 8 ug/mL e 16
a c
763
ug/mL de cefalexina, utilizando Tampo fosfato de potssio a
1%, estril, pH 6,0 como diluente.
Procedimento: adicionar 20 mL de meio de cultura nmero 2 em
uma placa, esperar solidifcar, juntar 5 mL de inculo a 0,05 %
em meio de cultura nmero 1 e proceder conforme descrito em
Ensaio microbiolgico de antibiticos, adicionando aos cilindros
0,1 mL da Soluo padro e da Soluo amostra recentemente
preparadas.
B. Proceder conforme descrito em Cromatografa a lquido de alta
efcincia (5.2.17.4). Utilizar cromatgrafo provido de detector
ultravioleta a 254 nm; coluna de 250 mm de comprimento e 4
mm de dimetro interno, empacotada com slica quimicamente
ligada a grupo octadecilsilano (5 um), mantida temperatura
ambiente; fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/minuto.
monoidratado em mistura de gua, acetonitrila, metanol e
trietilamina (850:100:50:15). Ajustar o pH para 3,0 com cido
fosfrico.
Soluo amostra: reconstituir o p conforme indicado no
rtulo. Transferir volume de suspenso equivalente a 200 mg
de cefalexina para balo volumtrico de 200 mL, completar o
volume com gua e homogeneizar. Transferir 10 mL dessa
soluo para balo volumtrico de 25 mL e completar o volume
com Fase mvel.
Soluo padro: dissolver quantidade, exatamente pesada, de
cefalexina SQR em gua de modo a obter soluo a 1 mg/mL.
Transferir 10 mL desta soluo para balo volumtrico de 25 mL
e completar o volume com Fase mvel.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 L da Soluo padro
e da Soluo amostra, registrar os cromatogramas e medir as
16
H
17
N
3
O
4
S na amostra
a partir das respostas obtidas com a Soluo padro e a Soluo
amostra.
protegidos da luz.
ROTULAGEM
CEfALOTINA SDICA P PARA
SOLUO INJETVEL
quantidade declarada de cefalotina sdica (C
16
H
15
N
2
NaO
6
S
2
).
IDENTIFICAO
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 6,0 a 8,5. Determinar aps reconstituio da
amostra com o diluente.
ENSAIOS DE PUREZA
Poder rotatrio especfco (5.2.8). +124 a +134, em
relao substncia anidra e livre de bicarbonato de sdio.
Determinar em soluo de cefalotina a 5 % (p/v) em gua.
Bicarbonato de sdio. Dissolver, aproximadamente, 1 g
do p para soluo injetvel, exatamente pesado, em 50
mL de gua. Adicionar alaranjado de metila a 0,1% (p/v)
dissolvido em gua e titular com cido sulfrico 0,05 M SV.
Cada mL de cido sulfrico 0,05 M SV equivale a 8,401
mg de NaHCO
3
. Calcular a porcentagem de bicarbonato de
sdio e usar o valor obtido para calcular o Poder rotatrio
especfco em relao base anidra e livre de bicarbonato
de sdio.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre o teste. Proceder
conforme descrito em Mtodo de fltrao por membrana.
mg de cefalotina sdica.
DOSEAMENTO
quantidade da amostra equivalente a 0,25 g de cefalotina
sdica. Transferir para balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com gua. Diluir no mesmo solvente
at a concentrao de 0,0025% (p/v). Preparar soluo
em 285 nm, utilizando gua para ajuste do zero. Calcular
o teor de C
16
H
15
N
2
NaO
6
S
2
no p para soluo injetvel, a
m), mantida a temperatura de 40 C; fuxo da Fase mvel
de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 17 g de acetato de sdio em 790
mL de gua, adicionar 0,6 mL de cido actico glacial e,
se necessrio, ajustar o pH a 5,9 0,1 com cido actico
glacial ou hidrxido de sdio 0,1 M. Adicionar 150 mL de
acetonitrila, 70 mL de etanol e homogeneizar.
c
Soluo amostra: reconstituir o contedo de um frasco em
gua ultrapura, agitar at completa dissoluo, transferir
todo volume para balo volumtrico de 200 mL, lavar
o frasco com gua ultrapura e transferir para balo.
Completar o volume e agitar. Transferir 5 mL desta soluo
com Fase mvel de modo a obter soluo a 0,5 mg/mL de
cefalotina sdica.
de cefalotina sdica SQR em Fase mvel de modo a obter
concentrao fnal de 0,5 mg/mL de cefalotina sdica.
C
16
H
15
N
2
NaO
6
S
2
no p para soluo injetvel a partir
amostra.
C. Proceder conforme descrito em Ensaio microbiolgico
Micro-organismo: Staphylococcus aureus ATCC 6538p.
manuteno do micro-organismo e preparao do inculo;
soluo salina estril, para padronizao do inculo e meio
de cultura nmero 2, para a camada base.
Soluo amostra: reconstituir a soluo injetvel conforme
indicado no rtulo. Transferir volume da soluo injetvel,
exatamente medido, para balo volumtrico, completar o
volume com gua e agitar. Diluir no mesmo solvente at
obter soluo a 10 g/mL. Transferir alquotas de 6,4 mL,
10 mL e 15,6 mL desta soluo para bales de 100 mL e
completar o volume com Tampo fosfato de potssio a 1 %,
estril, pH 6,0 (Soluo 1). Obtem-se solues a 0,64 g/
mL, 1,0 g/mL e 1,56 g/mL respectivamente (A
1
,

A
2
e A
3
).
Soluo padro: pesar 20 mg de cefalotina sdica SQR,
transferir para balo de 20 mL e dissolver em gua para
obter soluo a 1 mg/mL. Diluir no mesmo solvente at
obter soluo a 10 g/mL. Transferir alquotas de 6,4 mL,
10 mL e 15,6 mL desta soluo para bales de 100 mL e
completar o volume com Tampo fosfato de potssio a 1 %,
estril, pH 6,0 (Soluo 1). Obtem-se solues a 0,64 g/
mL, 1,0 g/mL e 1,56 g/mL respectivamente (P
1
,

P
2
e P
3
).
Procedimento: pipetar 20 mL de meio de cultura nmero 2
em placa, esperar solidifcar, adicionar 5 mL de inculo a
0,1% em meio de cultura nmero 1 e proceder conforme
descrito em Ensaio microbiolgico de antibiticos
(5.5.3.3.1), adicionando aos cilindros 0,1 mL da Soluo
padro e da Soluo amostra recentemente preparadas.
Calcular a potncia da amostra, em g de cefalotina sdica
por miligrama, a partir da potncia do padro e das respostas
Em recipientes bem fechados, em temperatura inferior a
25 C.
ROTULAGEM
CEfOXITINA SDICA
Cefoxitinum natricum
C
16
H
16
N
3
NaO
7
S
2
; 449,43
cefoxitina sdica; 01883
Sal de sdio do cido (6R,7S)-3-[[(aminocarbonil)oxi]
metil]-7-metoxi-8-oxo-7-[(2-tienilacetil)amino]-5-tia-1-
azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-2-carboxlico (1:1)
[33564-30-6]
970 g de cefoxitina (C
16
H
17
N
3
O
7
S
2
) por miligrama,
correspondendo a, no mnimo, 97,5% e, no mximo,
102,0% de cefoxitina sdica (C
16
H
16
N
3
NaO
7
S
2
), em relao
substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou quase branco, muito
higroscpico.
Solubilidade. Muito solvel em gua, ligeiramente solvel
em etanol e praticamente insolvel em ter etlico.
(p/v) em metanol.
IDENTIFICAO
fosfato pH 7,1, exibe mximos e mnimos idnticos aos
observados no espectro de soluo similar de cefoxitina
sdica SQR.
C. A soluo da amostra a 5% (p/v) em gua responde s
reaes do on sdio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
a c
765
slica-gel F
254
, como suporte, e mistura de cido actico
glacial, gua, acetona e acetato de etila (10:10:20:50),
a seguir.
Soluo (1): transferir, exatamente, cerca de 0,25 g da
amostra para balo volumtrico de 10 mL, dissolver em
gua e completar o volume com o mesmo solvente.
gua (5.2.20.1). No mximo 1%.
mg de cefoxitina.
DOSEAMENTO
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila e cido actico
glacial (84:16:1). Alternativamente, utilizar mistura de
gua, acetonitrila e cido trifuoractico (84:16:1).
Soluo amostra: transferir, exatamente, quantidade da
amostra equivalente a cerca de 0,15 g de cefoxitina para
balo volumtrico de 500 mL, dissolver em tampo fosfato
pH 7,1 e completar o volume com o mesmo solvente.
Utilizar essa soluo em no mximo 5 horas.
Soluo padro: pesar, exatamente, e dissolver em tampo
fosfato pH 7,1 quantidade de cefoxitina SQR sufciente
para preparar soluo a 0,3 mg/mL de cefoxitina. Utilizar
essa soluo em no mximo 5 horas.
tericos. O fator de cauda para o pico da cefoxitina no
maior que 1,5. O desvio padro relativo das reas de
e medir as reas sob os picos. Calcular o teor de cefoxitina
(C
16
H
17
N
3
O
7
S
2
) na amostra de cefoxitina sdica a partir das
respostas obtidas para cefoxitina com a Soluo padro e
a Soluo amostra.
Em recipientes bem fechados, entre 2 C e 8 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimicrobiano.
CEfOXITINA SDICA P PARA
SOLUO INJETVEL
Contm cefoxitina sdica equivalente a, no mnimo,
cefoxitina (C
16
H
17
N
3
O
7
S
2
).
IDENTIFICAO
A. O tempo de reteno do pico principal do cromatograma
B. A soluo da amostra a 5% (p/v) em gua responde s
CARACTERSTICAS
1% (p/v).
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 1%.
mg de cefoxitina.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Doseamento na monografa
de Cefoxitina sdica. Preparar a Soluo amostra como
descrito a seguir.
c
Soluo amostra: reconstituir o contedo de um frasco
ampola em volume de gua destilada, exatamente medido,
correspondente quele indicado no frasco do diluente.
Transferir quantitativamente a soluo reconstituda para
balo volumtrico de capacidade adequada e diluir com
gua de modo a obter soluo a cerca de 0,3 mg/mL de
cefoxitina (C
16
H
17
N
3
O
7
S
2
). Utilizar essa soluo em, no
mximo, 5 horas
reas sob os picos. Calcular a quantidade de cefoxitina
(C
16
H
17
N
3
O
7
S
2
) na soluo injetvel reconstituda, a partir
das respostas obtidas para as Solues padro e amostra.
Em recipientes bem fechados, entre 2 C e 8 C.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente..
CENTELA
Centellae folium
Centella asiatica (L.) Urban APIACEAE; 09898
A droga vegetal constituda pelas folhas secas. Contm,
no mnimo, 2,0% de asiaticosdeo, em relao ao material
dessecado.
DESCRIO MACROSCPICA
As lminas foliares so membranceas, raramente papircias,
verde-acinzentadas na face adaxial e verde-plidas na face
abaxial, glabras a tomentosas em ambas as faces, cobertas de
tricomas hialinos de at 2 mm, pluricelulares, unisseriados,
formados por duas a cinco clulas. A clula inferior oriunda
de uma s clula basal. Lmina ovada a orbicular-reniforme,
palminrvea, com cinco a nove nervuras, base cordada a
truncada, pice arredondado, obtuso a truncado, margem
levemente sinuada a crenado-dentada, medindo 1,5 cm a 7 cm
de comprimento e 1 cm a 6 cm de largura. A venao pouco
densa, actindroma. As nervuras de primeira ordem so,
longitudinalmente, retilneas. As nervuras de segunda ordem
apresentam ngulo de divergncia moderada. As ramifcaes
das nervuras secundrias e tercirias terminam no epitema dos
hidatdios. As arolas so pentagonais ou poligonais, com
vnula simples, curvada ou ramifcada s uma vez e disposta
ao acaso. Pecolo de at 15 cm de comprimento, alargado na
poro basal e canaliculado na face adaxial, viloso-tomentoso,
castanho-esverdeado a castanho-avermelhado.
DESCRIO MICROSCPICA
Em vista frontal, a face adaxial da epiderme mostra clulas
poligonais de paredes retas a curvas, estmatos projetados,
paracticos, raros anisocticos, ndice estomtico igual a 18,
e hidatdios; a cutcula estriada. A face abaxial apresenta
clulas tambm poligonais, de maior tamanho do que as da face
adaxial, estmatos projetados, paracticos e ndice estomtico
igual a 12; a cutcula fortemente estriada. Ambas as faces
da epiderme apresentam tricomas simples, unisseriados,
retorcidos, geralmente tricelulares (duas a cinco clulas),
bastante escassos na face adaxial. Em seco transversal,
as faces mostram-se constitudas por clulas retangulares
achatadas, alternadas com clulas quadrangulares papilosas;
a projeo dos estmatos pode ser melhor observada e a
cutcula fna. O mesoflo apresenta estrutura dorsoventral,
com uma a trs camadas de parnquima palidico frouxo e
parnquima esponjoso ocupando mais da metade do mesoflo,
formado por clulas oblongas no sentido horizontal; nestes
parnquimas encontram-se drusas de oxalato de clcio. Raros
canais secretores (ductos) encontram-se dispostos junto ao
foema. Na nervura mediana, observam-se, via de regra,
dois canais secretores, dispostos na regio do parnquima
fundamental, um voltado para a face adaxial e outro para
a abaxial, prximos ao sistema vascular e raramente no
foema; o colnquima, do tipo lacunar e presente em ambas
as faces, est representado por uma a trs camadas celulares,
especialmente na face adaxial. O sistema vascular colateral,
em arco aberto, com vrias fbras em zona externa ao foema.
O pecolo fstuloso e, em seco transversal, mostra
contorno circular, com duas arestas opostas na face adaxial,
separadas por uma pequena regio levemente cncava,
conferindo-lhe aspecto canaliculado. A epiderme apresenta
clulas quadrangulares, algo papilosas, com estmatos
paracticos e tricomas simples, pluricelulares, unisseriados,
com clula basal bem mais curta do que as demais. A cutcula
fna e estriada. Subepidermicamente ocorre um colnquima
angular, contnuo, onde se alterna uma camada predominante
de clulas com estreitas regies de duas a trs camadas, ou
nas arestas at cinco. Abaixo deste, situa-se um clornquima,
contendo sete feixes vasculares colaterais, dispostos
em crculo, separados por largas faixas de parnquima
fundamental, ocorrendo um feixe menor em cada aresta.
Ao redor do foema, no parnquima fundamental, podem
ocorrer clulas amilferas. Em cada feixe vascular h um
envoltrio de fbras, restrito ao foema. No pecolo, tambm se
observam canais secretores: um internamente ao colnquima,
geralmente e regularmente nas regies em que ocorre maior
nmero de camadas deste, um com menor frequncia disposto
por toda a estrutura, na regio aproximadamente equidistante
dos feixes vasculares e da epiderme, dois opostos entre si, em
um mesmo feixe vascular, ambos muito prximos ao xilema,
e um por feixe vascular nas arestas. O parnquima medular
inexistente, por ser o pecolo fstuloso. Nas proximidades da
fstula encontram-se drusas de oxalato de clcio, nas clulas
do parnquima fundamental.
caractersticos: tricomas ou pores deles, unisseriados;
drusas de oxalato de clcio e pores de clulas epidrmicas,
com estmatos paracticos.
a c
767
IDENTIFICAO
254
,
de clorofrmio, cido actico glacial, metanol e gua
placa, em forma de banda, 20 L da Soluo (1) e 5 L da
Soluo (2), preparadas como descrito a seguir.
Soluo (1): ferver 3 g da amostra em 30 mL de mistura de
etanol e gua (1:1). Filtrar e concentrar at secura. Retomar
em 0,5 mL de metanol.
Soluo (2): dissolver 1 mg de asiaticosdeo em 1 mL de metanol.
em capela por 5 minutos. Nebulizar com anisaldedo SR e
aquecer em estufa entre 100 C a 105 C durante 10 minutos.
Nebulizar, novamente, com anisaldedo SR e aquecer em
estufa entre 100 C a 105 C por 10 minutos. A mancha
principal de colorao acastanhada obtida com a Soluo
(1), com Rf de aproximadamente 0,50, corresponde em
posio quela obtida com a Soluo (2), referente ao
asiaticosdeo. Observa-se tambm uma mancha secundria
de colorao violeta, com Rf aproximado de 0,90.
B. Transferir 1 g da droga em p ou fragmentada para tubo
de ensaio, adicionar 10 mL de gua destilada e ferver por 2
minutos. Resfriar e agitar, vigorosamente, por 15 segundos.
Em seguida, adicionar gotas de cido clordrico a 10%
(p/v). A espuma formada persistente, o que caracteriza a
presena de saponinas.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 6%.
NDICE DE ESPUMA
Proceder conforme descrito em Determinao de ndice
de espuma (5.4.2.10). Pesar 1 g da droga pulverizada,
transferir para tubo de ensaio e ferver por 2 minutos.
Utilizar 100 mL de gua destilada. No mximo 100.
DOSEAMENTO
Asiaticosdeo
Eluente A: acetonitrila.
Eluente B: soluo aquosa de cido fosfrico a 0,5% (v/v).
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
Soluo amostra: extrair 5 g da droga seca em p com 150
mL de metanol em aparelho de Soxhlet durante 4 horas.
Evaporar o solvente em banho-maria at cerca de 50 mL.
Filtrar em funil de vidro sinterizado (G4). Transferir o
fltrado para balo volumtrico de 100 mL e completar o
volume com metanol.
Soluo de referncia (1): dissolver 30 mg de asiaticosdeo
em 5 mL de metanol.
Soluo de referncia (2): diluir a Soluo de referncia
(1) em metanol de modo a obter soluo a 80% (v/v).
amostra e das Solues de referncia (1), (2), (3), (4) e
(5). Determinar a rea sob o pico referente ao asiaticosdeo
(tempo de reteno de 30 a 40 minutos). Estabelecer uma
curva analtica com os valores obtidos com as Solues de
referncia (1), (2), (3), (4) e (5). Determinar a rea sob
o pico do asiaticosdeo na Soluo amostra e, utilizando
a curva analtica, determinar o teor de asiaticosdeo na
amostra.
c
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos de Centella asiatica (L.) Urban
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 1 cm (rgua 1); K a 500 m (rgua 2); B, f e J a 500 m (rgua 3); C, D, E,
G e H a 100 m (rgua 4); I a 50 m (rgua 5).
A aspecto da folha. B esquema da seco transversal da folha na nervura mediana. C seco transversal da folha na regio do limbo na poro
indicada em B. D detalhe de seco transversal da folha com estmato e cmara subestomtica. E aspecto do parnquima. f hidatdio na epiderme
adaxial. G epiderme adaxial. H epiderme abaxial. I detalhe de estmato paractico. J arquitetura foliar: arola. K arquitetura foliar: margem
e hidatdio.
a c
769
figura 2 Aspectos microscpicos de Centella asiatica (L.) Urban
______________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em L a 500 m (rgua 1); M a P a 100 m (rgua 2).
L esquema do pecolo em seco transversal. M detalhe de uma poro transversal do pecolo. N drusas de oxalato de clcio. O canal secretor.
P tricoma simples multicelular.
c
CETOCONAZOL COMPRIMIDOS
26
H
28
Cl
2
N
4
O
4
.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G, como suporte,
e mistura de n-hexano, acetato de etila, metanol, gua e
acido actico glacial (42:40:15:2:1), como fase mvel.
quantidade da amostra equivalente a 50 mg de cetoconazol
em clorofrmio, agitar por cerca de 2 minutos, completar o
volume para 50 mL com o mesmo solvente e fltrar.
Soluo (2): dissolver 10 mg de cetoconazol SQR em
clorofrmio e completar o volume para 10 mL com o
mesmo solvente.
Desenvolver o cromatograma em cuba no saturada.
Remover a placa e deixar secar ao ar. Examinar sob luz
ultravioleta (254 nm). A mancha principal obtida com a
Soluo (1) corresponde em posio e intensidade quela
obtida com a Soluo (2).
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
dissoluo, fltrar e diluir com cido clordrico 0,1 M
solues em 270 nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente
26
H
28
Cl
2
N
4
O
4

dissolvida no meio, comparando as leituras obtidas com a
da soluo de cetoconazol SQR na concentrao de 0,0001
% (p/v), preparada no mesmo solvente.
declarada de C
26
H
28
Cl
2
N
4
O
4
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Fase mvel: mistura de metanol e acetato de amnio a
0,5% (p/v) (95:5).
Transferir quantidade do p, exatamente pesado,
equivalente a 0,1 g de cetoconazol para balo volumtrico
de 50 mL, adicionar 30 mL de metanol e deixar em
mesmo solvente, homogeneizar e fltrar. Diluir o fltrado
at a concentrao de 0,1 mg/mL, utilizando metanol como
solvente.
de cetoconazol SQR em metanol e diluir com o mesmo
solvente de modo a obter soluo a 0,1 mg/mL.
C
26
H
28
Cl
2
N
4
O
4
nos comprimidos a partir das repostas
ROTULAGEM
CETOCONAZOL XAMPU
26
H
28
Cl
2
N
4
O
4
.
IDENTIFICAO
a c
771
CARACTERSTICAS
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
m), mantida temperatura de 40 C; fuxo da Fase mvel
de 1,5 mL/minuto.
Tampo fosfato pH 7,0: dissolver 2,8 g de fosfato de sdio
dibsico anidro, em 1000 mL de gua. Ajustar o pH para
7,0 com cido fosfrico.
Fase mvel: preparar uma mistura de acetonitrila, metanol,
tetraidrofurano e Tampo fosfato pH 7,0 (390:95:15:500),
acrescentando 2,5 mL de hidrxido de tetrametilamnio a
25% (p/v) em metanol, fltrada e degaseifcada.
Soluo amostra: transferir uma quantidade cuidadosamente
pesada de xampu, equivalente a 20 mg de cetoconazol para
um balo volumtrico de 100 mL. Adicionar ao balo 70
mL de metanol e agitar em ultrassom por 30 minutos para
dissolver. Completar o volume com metanol e fltrar em
papel de fltro. Transferir 2,5 mL dessa preparao para um
balo volumtrico de 10 mL, acresentar 1,5 mL de metanol.
Completar o volume com gua e misturar.
Soluo padro: pesar exatamente, cerca de 10 mg de
cetoconazol SQR e transferir para um balo volumtrico de
100 mL. Adicionar ao balo 70 mL de metanol e agitar para
dissolver. Completar o volume com metanol e misturar.
Transferir uma alquota de 5 mL para balo volumtrico
de 10 mL. Acrescentar 1 mL de metanol e completar o
volume com gua.
registrados no maior que 2%.
26
H
28
Cl
2
N
4
O
4

na amostra a partir das respostas obtidas com as Solues
padro e amostra.
Em recipientes hermeticamente fechados e ao abrigo do
calor excessivo.
ROTULAGEM
CETOPROfENO
Ketoprofenum
O
COOH
CH
3
C
16
H
14
O
3
; 254,28
cetoprofeno; 01960
cido 3-benzoil--metilbenzenoactico
[22071-15-4]
C
16
H
14
O
3
DESCRIO
branco.
solvel em acetona, em etanol e cloreto de metileno.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +1 a -1, em relao
substncia dessecada. Determinar em soluo a 1% (p/v)
em etanol.
IDENTIFICAO
intensidades relativas daqueles observados no espectro da
cetoprofeno SQR, preparado de maneira idntica.
exibe mximos de absoro em 255 nm. A absorvncia em
255 nm de 0,615 a 0,680.
ENSAIOS DE PUREZA
Pureza cromatogrfca. Proceder conforme descrito
233 nm, coluna de 150 mm de comprimento e 4,6 mm de
de 1 mL/minuto.
c
monobsico em 1000 mL de gua e ajustar o pH para 3,5
0,1, com cido fosfrico.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila e Tampo pH 3,5
(55:43:2).
Soluo amostra: dissolver uma quantidade exatamente
pesada da amostra em Fase mvel para obter soluo a 200
ug/mL. Proteger esta soluo da luz.
Soluo padro: dissolver uma quantidade exatamente
pesada de cetoprofeno SQR em Fase mvel para obter
soluo a 200 ug/mL. Proteger esta soluo da luz.
da coluna no menor que 2250 pratos tericos. O fator de
cauda para o pico do cetoprofeno no deve ser maior que
amostra e da Soluo padro, registrar os cromatogramas
por, no mnimo, trs vezes o tempo de reteno do
cetoprofeno, e medir as reas correspondentes aos picos
de impurezas. Calcular a porcentagem de cada impureza
presente. No mais que 0,2% de cada impureza individual
encontrada, e a soma de todas as impurezas no
superior a 1,0% da rea do cetoprofeno obtida com
a Soluo amostra.
0,002% (20 ppm).
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
dessecada, transferir para erlenmeyer de 250 mL e
dissolver em 25 mL de etanol. Adicionar 25 mL de gua e
0,5 mL de vermelho de fenol SI. Titular com hidrxido de
sdio 0,1 M SV. Alternativamente, determinar o ponto fnal
potenciometricamente. Realizar ensaio em branco e fazer
as correes necessrias. Cada mL de hidrxido de sdio
16
H
14
O
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infamatrio.
CHAPU-DE-COURO
Echinodorus folium
Echinodorus grandiforus (Cham. & Schltdl.) Micheli
ALISMATACEAE
no mnino, 2,8% de derivados do cido o-hidroxicinmico,
expressos em verbascosdeo (C
29
H
36
O
15
, 624,6).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As folhas secas possuem
odor caracterstico e sabor amargo.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas simples, coriceas, cordiformes, com base cordada
e pice agudo a arredondado. Lmina foliar de dimenses
variadas, dependendo da condio ambiental, de 10 cm
a 35 cm de comprimento e 20 cm a 25 cm de largura na
poro mediana; pecolo longo de seco transversal
circular a ovalada, com expanses aladas curtas e estriaes
longitudinais. A nervao do tipo campildroma, com 12
a 14 nervuras de calibres semelhantes, que partem de um
nico ponto na base do limbo, proeminentes na face abaxial.
Destas partem nervuras de menor calibre, paralelas entre si,
e destas as tercirias, culminando na formao de arolas
fechadas com terminaes pouco ramifcadas. Tanto a
lmina quanto o pecolo so pubescentes, relativamente
speros pela presena de tricomas estrelados. Ductos
secretores translcidos so abundantes por toda a lmina
foliar, por vezes visualizados sem auxlio de lentes.
DESCRIO MICROSCPICA
Lmina foliar com epiderme uniestratifcada recoberta
por cutcula delgada dotada de pequenas papilas que
aparecem como pontos brilhantes na microscopia ptica,
tambm presentes no pecolo. Lmina anfestomtica,
com estmatos no mesmo nvel que as demais clulas
epidrmicas, paralelocticos, com clulas-guarda
alongadas, contando com dois pares de clulas subsidirias
adjacentes, sendo a mais proximal alongada e esguia,
por vezes visualizadas com certa difculdade devido ao
pouco contraste obtido em suas paredes. Em vista frontal,
em ambas as faces da lmina, esto clulas epidrmicas
comuns com formatos e dimenses variadas, cujas paredes
anticlinais podem ser relativamente retas at sinuosas,
embora este ltimo formato seja mais comum na face
abaxial. Sobre as nervuras no ocorrem estmatos e as
clulas epidrmicas so retangulares, por vezes muito
alongadas em relao ao maior eixo da folha. Tambm sobre
as nervuras esto tricomas pluricelulares, estrelados. Em
seces transversais verifca-se que as clulas epidrmicas
so volumosas e as cmaras sub-estomticas so amplas.
O mesoflo est composto por apenas uma camada de
parnquima palidico, com clulas pouco alongadas, e
parnquima esponjoso, cujas clulas apresentam pequenas
expanses braciformes. As nervuras de maior calibre
a c
773
so biconvexas, com curvatura mais expressiva junto
face abaxial, contando com aernquima em abundncia,
o qual forma amplas lacunas por toda a extenso da
estrutura. Nestas lacunas, dispostas transversalmente,
esto trabculas de clulas braciformes com reentrncias
espessadas, permitindo a formao de espaos intercelulares
triangulares. Por todo o aernquima esto dispostos
ductos secretores. Na nervura principal esto trs feixes
vasculares de maior calibre, colaterais, em arco aberto com
bordos elevados, com pequena lacuna no protoxilema,
parcialmente envoltos por calotas de fbroescleredes,
longas e com paredes lignifcadas. Dispostos
concentricamente, esto entre 8 a 11 feixes vasculares
menos calibrosos, tambm em arco aberto, mas contando
com esclernquima apenas junto ao foema. As nervuras de
menor calibre, dispostas no mesoflo, so colaterais com
calota de poucos elementos esclerenquimticos em ambos
os plos de tecidos condutores. Uma nica camada de
clulas parenquimticas, volumosas e delgadas, compe a
bainha dos feixes vasculares. O pecolo apresenta clulas
epidrmicas polidricas, alongadas longitudinalmente. Em
seco transversal verifca-se que esta poro foliar est
preenchida por aernquima, com as mesmas caractersticas
da nervura principal, inclusive os ductos secretores e
trabculas com clulas braciformes. Diversas clulas deste
aernquima esto repletas de gros de amido. Os feixes
vasculares mais calibrosos (de um a dois) esto dispostos na
regio central do pecolo, com trs grupos concntricos de
feixes vasculares, menos calibrosos em direo periferia,
semelhantes ao da nervura principal, mas contando com
uma lacuna de protoxilema de grandes dimenses. Como
na nervura principal, os feixes de menor calibre apresentam
esclernquima apenas junto ao plo foemtico. Tanto
nos tecidos da lmina foliar quanto do pecolo no foram
detectadas reaes positivas para polifenis (cloreto frrico
a 10% (p/v)) ou substncias lipdicas (Sudan IV).
caractersticas: fragmentos de epiderme da lmina foliar,
com estmatos paralelocticos e clulas epidrmicas de
contornos sinuosos, recobertas por cutcula ornamentada;
feixes de fbroescleredes associados a clulas com
pequenas expanses braciformes, do parnquima
esponjoso; conjuntos de clulas tabulares, alongadas
longitudinalmente; clulas braciformes com reentrncias
espessadas, que compem as trabculas da nervura
principal e pecolo, ocorrem em abundncia.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel F
254
, com espessura
de 250 um, como suporte, e mistura de acetato de etila,
tolueno, cido frmico e gua (100:10:10:1), como fase
mvel. Aplicar, separadamente, placa, em forma de
banda, 10 uL da Soluo (1) e 5 uL das Solues (2),
(3) e (4), separadamente, preparadas antes do uso, como
descrito a seguir.
Soluo (1): turbolisar, exatamente, cerca de 10 g da droga
vegetal moda em 100 mL de etanol a 70% (v/v) durante
15 minutos, com intervalos de 5 minutos, de forma que a
temperatura no exceda 40 C. Filtrar, eliminar o etanol em
evaporador rotatrio sob presso reduzida. Extrair a fase
aquosa resultante com trs pores de 25 mL de acetato de
etila em funil de separao (125 mL). Deixar em repouso
em freezer (-18 C) por 15 minutos, para total separao
das fases. Reunir as fraes orgnicas e lavar com 50 mL
de gua. Evaporar a frao obtida em evaporador rotatrio
sob presso reduzida at resduo. Retomar o resduo com
1 mL de metanol.
Soluo (2): pesar cerca de 1 mg de cido cafeico e
dissolver em 1 mL de metanol.
Soluo (3): pesar cerca de 1 mg de isorientina e dissolver
em 1 mL de metanol.
secar em capela de exausto. Nebulizar a placa com
difenilborato de aminoetanol SR e deixar secar em capela
de exausto. A mancha de colorao acastanhada obtida
com a Soluo (1), com Rf de aproximadamente 0,90,
corresponde em posio quela obtida com a Soluo (2).
Logo abaixo dessa, obtida uma mancha esverdeada, com
Rf de aproximadamente 0,82, na regio do cromatograma
da Soluo (1). No quadrante inferior do cromatograma, a
mancha de colorao amarela intensa obtida com a Soluo
(1), com Rf de 0,28, corresponde em posio quela obtida
com a Soluo (3), referente isorientina. Imediatamente
abaixo dela, obtida na regio do cromatograma da
Soluo (1) outra mancha de colorao amarela intensa,
com Rf de 0,22, que corresponde swertia-japonina.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 9,0%.
DOSEAMENTO
Derivados do cido o-hidroxicinmico
a seguir.
droga pulverizada (210 m) e adicionar 90 mL de etanol
a 50% (v/v) em balo de fundo redondo de 250 mL.
Levar a refuxo por 30 minutos. Esfriar e fltrar para balo
volumtrico de 100 mL. Lavar o balo de fundo redondo
e o fltro com 10 mL de etanol a 50% (v/v) para o balo
volumtrico. Completar o volume com etanol 50% (v/v).
Soluo amostra: adicionar, volumetricamente, em balo
volumtrico de 10 mL, 1 mL da Soluo estoque, 2 mL
de cido clordrico 0,5 M, 2 mL da mistura de nitrito de
c
sdio a 20% (p/v) e molibdato de sdio a 20% (p/v) (1:1).
Adicionar 2 mL de soluo de hidrxido de sdio a 8%
(p/v) e completar o volume com etanol 50% (v/v).
Soluo branco: adicionar, volumetricamente, em balo
volumtrico de 10 mL, 1 mL da Soluo estoque, 2 mL de
cido clordrico 0,5 M, 2 mL de soluo de hidrxido de
sdio a 8% (p/v) e completar o volume com etanol 50%
(v/v).
Medir a absorvncia da Soluo amostra, imediatamente
aps o seu preparo, no comprimento de onda de 525
nm, utilizando a Soluo branco para o ajuste do zero.
Calcular o teor de derivados do cido o-hidroxicinmico,
expresso em porcentagem de verbascosdeo, segundo a
expresso a seguir. Considerar a absortividade especfca
do verbascosdeo igual a 185.
em que
TA = teor de derivados do cido o-hidroxicinmico,
expresso em verbascosdeo (%);
A = absorvncia da Soluo amostra;
m = massa da amostra utilizada no ensaio, em gramas,
considerando a determinao de gua.
a c
775
figura 1: Echinodorus grandiflorus (Cham. & Schltdl.) Micheli - A. aspecto geral da
folha; B. detalhes parciais das nervuras secundrias e tercirias destacadas em A; C.
detalhes de algumas arolas e terminaes vasculares da lmina foliar; D e E. detalhes
parciais da face adaxial e abaxial da lmina foliar, em vista frontal, respectivamente; F.
detalhe de um tricoma estrelado. ar: arola, csb: clulas subsidirias, dc: ducto secretor,
es: estmato, ns: nervura secundria, nt: nervura terciria, tr: tricoma estrelado. Escalas e
correspondncias: 8 cm (A), 5 mm (B), 1 mm (C), 100 m (D e E), 50 m (F).
A
D
E
es
f
B
ns
nt
C
dc
tr
ar
csb
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos
em Echinodorus grandiforus (Cham. & Schltdl.) Micheli
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 8 cm, em B a 5 mm, em C a 1 mm, em D e E a 100 m, em f a 50 m.
A aspecto geral da folha, em vista frontal. B detalhe parcial de nervura secundria (ns) e de nervuras tercirias (nt) destacadas em A. C detalhe de
algumas arolas e terminaes vasculares da lmina foliar: arola (ar); ducto secretor (dc); tricoma estrelado (tr). D detalhe de poro da epiderme da
lmina foliar voltada para a face adaxial, em vista frontal: estmato (es). E detalhe de poro da epiderme da lmina foliar voltada para a face abaxial,
em vista frontal: clulas subsidirias (csb); estmato (es). f detalhe de um tricoma estrelado.
c
figura 2: Echinodorus grandiflorus (Cham. & Schltdl.) Micheli - Seces transversais
da lmina foliar. A. detalhe parcial do mesofilo e feixe vascular secundrio da regio
mediana; B. detalhe de um feixe tercirio da regio mediana; C e D. aspecto geral da
distribuio dos tecidos na nervura principal e em uma nervura secundria,
respectivamente; E e F. detalhe de um feixe vascular calibroso da nervura principal e do
aernquima adjacente, respectivamente. ab: face abaxial, ad: face adaxial, bp: bainha
parenquimtica, cf: calota de fibras, ds: ducto secretor, ei: espao intercelular, ep:
epiderme, f: floema, fb: fibroescleredes, fv: feixe vascular, lp: lacuna do protoxilema,
pe: parnquima esponjoso, pp: parnquima palidico, tr: tricoma estrelado, x: xilema.
Escalas e correspondncias: 50 m (A, B e D), 500 m (C), 100 m (E e F).
E
lp
f
x
fb
f
ds
ei
C
D
tr
fv
fv
ei
ab
ad
ep
ep
cf
cf
x
f
A
ep
pp
pe
bp
cf
ab
ad
ep
cf
bp
ad
ab
ep
ep
B
figura 2 Aspectos microscpicos de Echinodorus grandiforus (Cham. & Schltdl.) Micheli
______________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A, B e D a 50 m, em C a 500 m, em E e f a 100 m.
A detalhe de poro do mesoflo na regio mediana da lmina foliar, em seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial (ad); bainha parenquimtica
(bp); calota de fbras (cf); epiderme (ep); parnquima esponjoso (pe); parnquima palidico (pp). B detalhe de poro do mesoflo na regio mediana
da lmina foliar, evidenciando feixe tercirio, em seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial (ad); bainha parenquimtica (bp); calota de fbras
(cf); epiderme (ep); parnquima esponjoso (pe); parnquima palidico (pp). C detalhe da regio da nervura principal, em seco transversal: espao
intercelular (ei); feixe vascular (fv); tricoma estrelado (tr). D detalhe de poro do mesoflo, evidenciando um feixe vascular, em seco transversal:
face abaxial (ab); face adaxial (ad); calota de fbras (cf); epiderme (ep); foema (f); xilema (x). E detalhe de um feixe vascular da nervura principal, em
seco transversal: foema (f); fbroescleredes (fb); lacuna do protoxilema (lp); xilema (x). f detalhe de poro do aernquima na regio da nervura
principal, em seco transversal: ducto secretor (ds); espao intercelular (ei).
a c
777
figura 3: Echinodorus grandiflorus (Cham. & Schltdl.) Micheli - A a D. seces
transversais do pecolo. A e B. detalhe parcial dos tecidos perifricos e de um feixe
vascular de calibre mediano, respectivamente; C. feixe vascular da regio central do
pecolo; D. detalhe das trabculas do pecolo; E. detalhe parcial do aernquima em
seco longitudinal. ae: aernquima, cb: clula braciforme, ds: ducto secretor, ei: espao
intercelular, ep: epiderme, f: floema, fb: fibroescleredes, fv: feixe vascular, lp: lacuna do
protoxilema, x: xilema. Escalas e correspondncias: 200 m (A e B), 100 m (C, D e E).
B
A
ep
fv
fv
ae
ds lp
C
ds
lp
x
f
fb
E
D
cb
ep
fv
ei
figura 3 Aspectos microscpicos de Echinodorus grandiforus (Cham. & Schltdl.) Micheli
______________
Complemento da legenda da figura 3. As escalas correspondem em A e B a 200 m; em C, D e E a 100 m.
A a D seces transversais do pecolo. A detalhe de poro do pecolo: aernquima (ae); espao intercelular (ei); epiderme (ep); feixe vascular (fv).
B detalhe de poro do pecolo, na regio do aernquima, evidenciando um feixe vascular: ducto secretor (ds); lacuna do protoxilema (lp). C detalhe
de um feixe vascular, na regio central do pecolo: ducto secretor (ds); foema (f); fbroesclerede (fb); lacuna do protoxilema (lp); xilema (x). D detalhe
das trabculas do pecolo: clula braciforme (cb). E detalhe parcial do aernquima em seco longitudinal: epiderme (ep); feixe vascular (fv).
c
CIANOCBALAMINA SOLUO
INJETVEL
63
H
88
CoN
14
O
14
P.
IDENTIFICAO
O espectro de absoro no ultravioleta e no visvel (5.2.14),
na faixa de 300 nm a 550 nm, da soluo amostra obtida
no Doseamento, exibe mximos de absoro idnticos aos
observados no espectro da soluo padro. A razo entre os
valores de absorvncia medidos em 361 nm e 550 nm est
compreendida entre 3,15 e 3,40.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 4,5 a 7,0.
Endotoxinas Bacterianas (5.5.2.2). No mximo 0,4 UE/
mg de cianocobalamina.
DOSEAMENTO
soluo injetvel equivalente a 0,3 mg de cianocobalamina
para balo volumtrico e diluir em gua at concentrao
de 0,003% (p/v). Preparar soluo padro nas mesmas
condies. Medir as absorvncias das solues em 361 nm,
utilizando gua para ajuste do zero. Calcular a quantidade
de C
63
H
88
CoN
14
O
14
P na soluo injetvel a partir das
leituras obtidas.
Em recipiente de dose simples de vidro tipo I, temperatura
ambiente e protegido da luz.
ROTULAGEM
CICLOPIROX OLAMINA
Ciclopirox olaminum
N
CH
3
O
OH
.
N H
2
OH
C
12
H
17
NO
2
.C
2
H
7
NO; 268,35
ciclopirox olamina; 09336
6-Cicloexil-1-hidroxi-4-metil-2(1H)-piridinona com
2-aminoetanol (1:1)
[41621-49-2]
C
12
H
17
NO
2
.C
2
H
7
NO, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou amarelo
plido.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, muito solvel em
etanol e cloreto de metileno, levemente solvel em acetato
de etila, praticamente insolvel em cicloexano.
IDENTIFICAO
observados no espectro de ciclopirox olamina SQR,
254

como suporte, e mistura de amnia 13,5 M, gua e etanol
(10:15:75) como fase mvel. Preparar duas placas. Aplicar,
separadamente, cada placa, 10 L de cada uma das
Soluo (1): dissolver 25 mg da amostra em metanol e
diluir em balo volumtrico de 10 mL utilizando o mesmo
solvente.
Soluo (2): dissolver 25 mg de ciclopirox olamina SQR
em metanol e diluir em balo volumtrico de 10 mL
utilizando o mesmo solvente.
Antes de desenvolver o cromatograma, lavar as placas
pela passagem da mistura de 10 volumes de amnia 13,5
M, 15 volumes de gua e 75 volumes de etanol. A mistura
deve migrar at o topo da placa. Deixar as placas secarem
em temperatura ambiente durante 5 minutos. Desenvolver
os cromatogramas. Remover a placa, deixar secar ao ar
durante 10 minutos. Para uma das placas, examinar sob
a c
779
luz ultravioleta (254 nm). A mancha principal obtida com
quela obtida com a Soluo (2). Nebulizar a placa com
cloreto frrico a 1% (p/v) em metanol. A mancha principal
intensidade quela obtida com a Soluo (2). Para a outra
placa, nebulizar com ninidrina SR e aquecer at 110 C
at o aparecimento das manchas. A mancha principal
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
mximo 0,001% (10 ppm).
amostra Dessecar em estufa sob forte vcuo. No mximo
1,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Empregar um dos mtodos a seguir descritos.
A. Dissolver 0,2 g da amostra, previamente dessecada,
em 2 mL de metanol. Adicionar 38 mL de gua, agitar e
titular com hidrxido de sdio 0,1 M SV. Determinar o
ponto potenciometricamente. Fazer o branco e efetuar as
correes necessrias. Determinar o fator de correo do
hidrxido de sdio 0,1 M SV, utilizando 0,1 g de cido
benzoico, previamente pesado e titular nas condies
descritas acima. Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV
equivale a 26,84 mg de ciclopirox olamina (C
12
H
17
NO
2
.
C
2
H
7
NO).
de antibiticos por difuso em gar (5.5.3.3.1), utilizando
cilindros.
Micro-organismo: Candida albicans ATCC 10231.
padronizao do inculo e meio de cultura nmero 19 para
a camada inoculada.
Soluo amostra: pesar, exatamente, o equivalente a 25 mg
da amostra e transferir para balo volumtrico de 25 mL
com auxlio de dimetilsulfxido. Completar o volume com
o mesmo solvente e homogeneizar. Diluir, sucessivamente,
at as concentraes de 56 g/mL, 84 g/mL e 126 g/mL,
utilizando tampo fosfato pH 7,2, estril, como solvente.
Soluo padro: pesar, exatamente, o equivalente a 25 mg de
ciclopirox olamina SQR e transferir para balo volumtrico
de 25 mL com auxlio de dimetilsulfxido. Completar o
volume com o mesmo solvente e homogeneizar. Diluir,
sucessivamente, at as concentraes de 56 g/mL, 84 g/
mL e 126 g/mL, utilizando tampo fosfato pH 7,2, estril,
como solvente.
19, inoculado 1% com a suspenso padronizada do micro-
organismo, em cada placa, esperar solidifcar e proceder
conforme descrito em Ensaio microbiolgico por difuso
em gar (5.5.3.3.1). Calcular a potncia da amostra em g
de ciclopirox olamina por miligrama, a partir da potncia
do padro e das respostas obtidas com a Soluo padro e
com a Soluo amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antifngico.
CICLOPIROX OLAMINA SOLUO
TPICA
12
H
17
NO
2
.C
2
H
7
NO.
IDENTIFICAO
de 200 nm a 400 nm, de soluo concentrada a 0,0008%
(p/v) em metanol, exibe mximos e mnimos, idnticos aos
observados no espectro de soluo similar de ciclopirox
olamina SQR.
CARACTERSTICAS
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Micro-organismo: Candida albicans ATCC 10231.
c
padronizao do inculo e meio nmero 19 para a camada
inoculada.
Tampo fosfato pH 7,2, estril: juntar 250 mL de fosfato
de potssio monobsico 0,2 M e 175 mL de hidrxido de
sdio 0,2 M. Completar o volume a 1000 mL. Esterilizar a
soluo por 20 minutos em autoclave a 121 C.
Soluo amostra: transferir, com auxlio de pipeta
volumtrica, o equivalente a 25 mg de ciclopirox
olamina para balo volumtrico de 25 mL com auxlio
de dimetilsulfxido. Completar o volume com o mesmo
solvente e homogeneizar. Diluir, sucessivamente, at
as concentraes de 56 g/mL, 84 g/mL e 126 g/mL,
utilizando Tampo fosfato pH 7,2, estril como diluente.
Soluo padro: pesar, exatamente, o equivalente a 25 mg de
ciclopirox olamina SQR e transferir para balo volumtrico
de 25 mL com auxlio de dimetilsulfxido. Completar o
sucessivamente, at as concentraes de 56 g/mL, 84 g/
mL e 126 g/mL, utilizando Tampo fosfato pH 7,2, estril
como diluente.
Procedimento: adicionar 8 mL de meio nmero 19,
inoculado a 1% com a suspenso padronizada do micro-
organismo, em cada placa, esperar solidifcar e proceder
conforme descrito em Ensaio microbiolgico por difuso
em gar (5.5.3.3.1). Calcular a quantidade, em g de
ciclopirox olamina na amostra, a partir da potncia do
padro e das respostas obtidas para as Solues padro e
amostra.
capeada (5 m), mantida a temperatura de 30 C; fuxo da
cilopirox olamina para balo volumtrico de 25 mL. Diluir
com dimetilsulfxido e completar o volume com o mesmo
solvente.
Soluo padro: transferir 25 mg de ciclopirox olamina
SQR para balo volumtrico de 25 mL. Diluir com
dimetilsulfxido e completar o volume com o mesmo
solvente.
Procedimento de derivatizao: transferir, separadamente,
2 mL de Soluo padro para tubo de ensaio de 10 mL.
Adicionar 1 mL de hidrxido de sdio 0,1 M e 0,2 mL de
sulfato de dimetila. Agitar em vrtex. Colocar em banho-
maria a 37 C, por 15 minutos. Acrescentar 0,2 mL de
trietilamina. Agitar em vrtex. Diluir a soluo resultante
com Fase mvel, at a concentrao de 40 g/mL. Repetir
o mesmo procedimento para 2 mL de Soluo amostra.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 L das
Solues amostra e padro resultantes aps o processo
de derivatizao, registrar os cromatogramas e medir as
12
H
17
NO
2
.C
2
H
7
NO
ROTULAGEM
CIMETIDINA
Cimetidinum
C
10
H
16
N
6
S; 252,34
cimetidina; 02073
N-Ciano-N-metil-N-[2-[[(4-metil-1H-imidazol-5-il)
metil]tio]etil]guanidina
[51481-61-9]
C
10
H
16
N
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou quase branco.
etanol e praticamente insolvel em cloreto de metileno e
em ter etlico. Solvel em cidos minerais diludos.
Faixa de fuso (5.2.2): 139 C a 144 C. Se necessrio,
dissolver a substncia em lcool isoproplico, evaporar at
secura e determinar novamente a faixa de fuso.
IDENTIFICAO
amostra, dessecada a 105 C, at peso constante, e dispersa
espectro de cimetidina SQR, preparada de maneira idntica.
a c
781
de 200 nm a 400 nm, de uma soluo 0,0005% (p/v) em
cido clordrico 0,1 M exibe mximo em 221 nm, idntico
ao observado no espectro de soluo similar de cimetidina
SQR.
C. Proceder conforme descrito em Substncias
Relacionadas. A mancha principal obtida com a Soluo
(2) similar em posio, cor e tamanho quela obtida com
a Soluo (6).
D. Dissolver cerca de 1 mg da amostra em mistura de 1
mL de etanol absoluto e 5 mL de soluo de cido ctrico
a 2% (p/v) em anidrido actico, recentemente preparada.
Aquecer em banho-maria durante 10 a 15 minutos.
Desenvolve-se colorao violeta-avermelhada.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de amnia 13,5
M, metanol e acetato de etila (15:20:65), como fase mvel.
Saturar a cuba, por 15 minutos, com o vapor da fase mvel.
Aplicar separadamente, placa, 5 L de cada uma das
Soluo (1): dissolver 0,5 g da amostra em 10 mL de
metanol.
metanol.
metanol e diluir 20 mL desta soluo para 100 mL com
metanol.
metanol.
metanol.
Soluo (6): dissolver 10 mg de cimetidina SQR em 2 mL
de metanol.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, secar em
corrente de ar, deixar sob vapor de iodo at obter o mximo
contraste das manchas e examinar sob luz ultravioleta (254
nm). Qualquer mancha secundria obtida com a Soluo
(1) (5%) no mais intensa que a mancha principal obtida
com a Soluo (3) (0,001%) e, no mximo, duas manchas
podem ser mais intensas que a mancha principal obtida com
a Soluo (4) (0,0005%). Para que o ensaio seja vlido, o
cromatograma obtido com a Soluo (5) deve apresentar
mancha nitidamente visvel.
mximo 0,002% (20 ppm).
No mximo 0,5%.
No mximo 0,2 %.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Dissolver, exatamente, cerca de 0,2
g da amostra em 60 mL de anidrido actico. Titular com
10
H
16
N
6
S.
m), fuxo da Fase mvel de 1,2 mL/minuto.
Fase Mvel: misturar 200 mL de metanol, 0,3 mL de cido
fosfrico e completar o volume para 1000 mL com gua.
da amostra em uma parte de metanol e quatro partes de gua,
obtendo soluo a 0,4 mg/mL. Deixar no ultrassom por 15
minutos. Realizar diluies sucessivas at concentrao de
8 g/mL, utilizando Fase mvel como diluente.
de cimetidina SQR em uma parte de metanol e quatro
partes de gua, de modo a obter uma soluo a 0,1 mg/
mL. Diluir com Fase mvel, de modo a obter soluo a 8
g/mL.
tericos/metro. O desvio padro relativo das reas de
e medir a rea sob os picos. Calcular a quantidade de
C
10
H
16
N
6
S na amostra a partir das respostas obtidas para a
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-histamnico H
2
.
c
CIMETIDINA COMPRIMIDOS
10
H
16
N
6
S.
IDENTIFICAO
A. de Doseamento, exibe mximo em 221 nm, idntico ao
observado no espectro de soluo similar de cimetidina
SQR.
CARACTERSTICAS
Tempo: 15 minutos
Procedimento: retirar alquota do meio de dissoluo,
fltrar e, se necessrio, diluir com cido sulfrico 0,1 M
solues em 218 nm (5.2.14), utilizando cido sulfrico
0,1 M para ajuste do zero. Calcular a quantidade de
cimetidina (C
10
H
16
N
6
S) dissolvida no meio, comparando
com as leituras obtidas com a da soluo de cimetidina
SQR, na concentrao de 0,0005% (p/v) preparada no
mesmo solvente.
declarada de C
10
H
16
N
6
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
0,1 g de cimetidina para balo volumtrico de 200 mL,
adicionar 50 mL de cido clordrico 0,1 M. Agitar por 30
minutos e completar o volume com o mesmo solvente.
Filtrar. Realizar diluies sucessivas at concentrao de
0,0005% (p/v), utilizando cido clordrico 0,1 M como
cido clordrico 0,1 M para ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
10
H
16
N
6
S nos comprimidos, a partir das
leituras obtidas.
da monografa de Cimetidina. Preparar a Soluo amostra
cimetidina para balo volumtrico de 100 mL, adicionar
Completar o volume com gua, homogeneizar e fltrar.
Realizar diluies sucessivas at concentrao de 8 g/mL,
utilizando Fase mvel como solvente.
C
10
H
16
N
6
S nos comprimidos a partir das respostas obtidas
protegidos da luz.
ROTULAGEM
CIMETIDINA SOLUO INJETVEL
10
H
16
N
6
S. Cimetidina soluo
injetvel uma soluo estril de cloridrato de cimetidina
em gua para injetveis.
IDENTIFICAO
A. Diluir a soluo injetvel, sucessivamente, em cido
clordrico 0,1 M, de modo a obter concentrao de 0,0005%
(p/v) de cimetidina. Utilizar cloridrato de cimetidina SQR
e o mesmo solvente, para preparar soluo na mesma
concentrao de cimetidina. O espectro de absoro no
ultravioleta (5.2.14), na faixa de 200 nm a 400 nm, exibe
mximos e mnimos somente nos mesmos comprimentos
de onda observados no espectro da soluo de cloridrato
de cimetidina SQR.
a c
783
C. A soluo injetvel responde s reaes do on cloreto
(5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,8 a 6,0.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre o teste. Utilizar o Mtodo
de fltrao em membrana ou o Mtodo de inoculao
direta em meio de cultura.
Endotoxinas Bacterianas (5.5.2.2). No mximo 0,5 EU/
mg de cloridrato de cimetidina.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Transferir um volume
da soluo injetvel equivalente a 0,1 g de cimetidina
para balo volumtrico de 200 mL, completar o volume
com cido clordrico 0,1 M e homogeneizar. Diluir
sucessivamente com o mesmo solvente at concentrao
concentrao e no mesmo solvente, utilizando cloridrato
de cimetidina SQR. Medir as absorvncias das solues
em 221 nm, utilizando cido clordrico 0,1 M para ajuste
10
H
16
N
6
S na soluo
injetvel a partir das leituras obtidas.
m a 10 m); fuxo da Fase mvel de 2,0 mL/minuto.
Fase mvel: transferir 200 mL de metanol e 0,3 mL de cido
fosfrico para balo volumtrico de 1000 mL, completar
com gua, homogeneizar e fltrar.
Soluo amostra: transferir volume da soluo injetvel
equivalente a 0,25 g de cloridrato de cimetidina para balo
volumtrico de 100 mL, completar o volume com Fase
mvel e homogeneizar. Transferir 1 mL dessa soluo para
de cloridrato de cimetidina SQR em mistura de gua e
metanol (80:20) para obter soluo a 0,5 mg/mL. Transferir
2,5 mL dessa soluo para balo volumtrico de 100 mL,
completar o volume com Fase mvel e homogeneizar.
A efcincia da coluna determinada para o pico do analito
no menor que 1000 pratos tericos. O fator de reteno
de replicatas dos picos registrados no maior que 2,0%.
10
H
16
N
6
S
Em recipiente de dose simples de vidro tipo I, temperatura
ambiente e protegido da luz.
ROTULAGEM
CIPROfLOXACINO SOLUO
INJETVEL
17
H
18
FN
3
O
3.
Ciprofoxacino
soluo injetvel uma soluo de ciprofoxacino em gua
para injetveis, em soluo de glicose a 5% (p/v) ou de
cloreto de sdio a 0,9% (p/v), preparada com cido lctico.
IDENTIFICAO
254
,
como suporte, e mistura de cloreto de metileno, metanol,
hidrxido de amnio e acetonitrila (4:4:2:1), como fase
mvel. Aplicar, separadamente, placa, previamente
saturada por 15 minutos em atmosfera de amnia, 10 uL de
cada uma das solues recentemente preparadas, descritas
a seguir.
Soluo (1): diluir volume da soluo injetvel em gua
de forma a obter concentrao de cerca de 0,05% (p/v) de
ciprofoxacino.
Soluo (2): soluo de cloridrato de ciprofoxacino SQR
em gua na concentrao de 0,05% (p/v) de ciprofoxacino.
secar ao ar e examinar sob luz ultravioleta (254 nm e
336 nm). A mancha principal obtida com a Soluo (1)
com a Soluo (2).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,5 a 4,6.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de impureza ciprofoxacino etilenodiamina.
c
Calcular a porcentagem de impureza, a partir do
cromatograma obtido com a Soluo amostra, segundo a
expresso:
em que
0,7 = fator de resposta entre a impureza e o ciprofoxacino;
Ri = resposta do pico da impureza;
Rc = resposta do pico de ciprofoxacino.
No mximo 0,5%.
Limite de cido lctico. Proceder conforme descrito em
Cromatografa a lquido de alta efcincia (5.2.17.4).
dimetro interno, empacotada com resina de troca inica
constituda de copolmero de estireno-divinilbenzeno
sulfonado na forma hidrogenada (7 m a 11 um), mantida
a 40 C; fuxo da Fase mvel de 0,6 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de cido sulfrico 0,0025 M e
acetonitrila (85:15).
Soluo amostra: utilizar a soluo injetvel no diluda.
Soluo padro: soluo a 0,8 mg/mL de lactato de sdio
SQR em gua.
A efcincia da coluna no deve ser menor que 5000
pratos tericos/metro. O desvio padro relativo das reas
2,0%.
e medir as reas sob os picos. Calcular a quantidade, em
miligramas, de cido lctico (C
3
H
6
O
3
) por mililitros da
soluo injetvel, segundo a expresso:
em que
90,08 e 112,07 = massas moleculares do cido lctico e do
lactato de sdio, respectivamente;
C = concentrao, em mg/mL, do lactato de sdio SQR;
Ra e Rp = respostas dos picos obtidos com a Soluo
amostra e a Soluo padro, respectivamente.
O valor obtido est entre 0,288 mg e 0,352 mg de C
3
H
6
O
3

por mg de ciprofoxacino rotulado.
Limite de dextrose. Transferir 50 mL da soluo injetvel
para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar 0,2 mL de
hidrxido de amnio 6 M, completar o volume com gua e
agitar. Determinar o ngulo de rotao (), em tubo de 200
mm a 25 C (5.2.8). A quantidade, em gramas, de dextrose
(C
6
H
12
O
6
.H
2
O) em 100 mL de soluo injetvel calculada
segundo a expresso:
O valor obtido esta entre 4,75 e 5,25 g de C
6
H
12
O
6
.H
2
O por
100 mL de soluo injetvel.
Limite de cloreto de sdio. Transferir 10 mL da
soluo injetvel para erlenmeyer, diluir com gua at
aproximadamente 150 mL, adicionar 1,5 mL de cromato
de potssio SR, e titular com nitrato de prata 0,1 M SV.
Cada mL de nitrato de prata equivale a 5,844 mg de cloreto
de sdio. O valor obtido esta entre 85,5 mg e 94,5 mg.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre com o teste. Usar o
mtodo de fltrao por membrana.
mL de ciprofoxacino.
DOSEAMENTO
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Diluir a soluo
injetvel, em gua, de modo a obter concentrao de cerca
de 0,0004% (p/v) de ciprofoxacino. Utilizar cloridrato
de ciprofoxacino SQR para preparar soluo padro,
utilizando o mesmo solvente. As solues devem ser
mantidas ao abrigo da luz. Medir as absorvncias das
solues resultantes em 272 nm, utilizando gua para
ajuste do zero. Calcular o teor de C
17
H
18
FN
3
O
3
na amostra
com slica quimicamente ligada a octadecilsilano (3 um a
10 um), mantida a temperatura de 30 C; fuxo da Fase
Fase mvel: mistura de cido fosfrico 0,025 M, com pH
previamente ajustado com trietilamina para 3,0 0,1 e
equivalente a 25 mg de ciprofoxacino para balo
mvel.
cloridrato de ciprofoxacino SQR e transferir para balo
volumtrico de 100 mL, utilizando Fase mvel como
solvente, para obter concentrao de 0,25 mg/mL de
ciprofoxacino.
Soluo de resoluo: dissolver na Soluo padro
quantidade da impureza ciprofoxacino etileno-diamina
SQR (cloridrato do cido 1-ciclopropil-6-for-1,4-diidro-
4-oxo-7-2[2-(amino]-3-quinolino carboxlico) para obter
soluo a 0,25 mg/mL.
A efcincia da coluna no deve ser menor do que 10 000
pratos tericos/metro. Os tempos de reteno relativos so
a c
785
cerca de 0,7 para a impureza da Soluo de resoluo e 1,0
para o ciprofoxacino. A resoluo entre o pico da impureza
e o do ciprofoxacino no menor que 6. O desvio padro
maior que 1,5%.
C
17
H
18
FN
3
O
3
na amostra a partir das respostas obtidas com
a Soluo padro e a Soluo amostra.
Micro-organismo: Staphylococcus epidermidis ATCC
12228.
contendo o equivalente a 20 mg de ciprofoxacino para
balo volumtrico de 50 mL, completar o volume com gua
e agitar. Diluir, sucessivamente, at as concentraes de 2
ug/mL, 4 ug/mL e 8 ug/mL, utilizando Tampo fosfato de
potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2) como diluente.
Soluo padro: pesar, o equivalente a 20 mg de
ciprofoxacino SQR, transferir para balo volumtrico
de 50 mL e completar o volume com gua. Diluir,
mL e 8 ug/mL, utilizando Tampo fosfato de potssio 0,1
M, estril, pH 8,0 (Soluo 2) como diluente.
11 em uma placa, esperar solidifcar, adicionar 5 mL de
inculo a 1% e proceder conforme descrito em Ensaio
cilindros 0,1 mL das solues recentemente preparadas.
Calcular a potncia da amostra, em g de ciprofoxacino por
protegidos da luz.
ROTULAGEM
CISPLATINA SOLUO INJETVEL
quantidade declarada de Cl
2
H
6
N
2
Pt.
IDENTIFICAO
de 230 nm a 350 nm, da soluo amostra a 0,1% (p/v) em
gua exibe mximo em 300 nm, idntico ao observado
no espectro de soluo de cisplatina SQR preparada nas
mesmas condies.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,5 a 6,5.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de tricloroaminoplatinato. Proceder conforme
descrito em Cromatografa a lquido de alta efcincia
(5.2.17.4). Utilizar cromatgrafo provido de detector
ultravioleta a 209 nm; coluna de 250 mm de comprimento
e 4,6 mm de dimetro interno, empacotada com slica
quimicamente ligada a grupos de amnio quaternrio para
troca aninica, bases fortes, (10 um), mantida temperatura
ambiente; fuxo de Fase mvel de 2 mL/minuto.
Fase mvel: preparar soluo de sulfato de amnio a 0,04%
(p/v) em gua e, se necessrio, ajustar pH entre 5,8 e 6,0.
Soluo (1): diluir, se necessrio, a soluo injetvel em
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) de modo a obter
soluo de cisplatina a 0,05% (p/v).
Soluo (2): diluir quantidade exatamente pesada de
tricloroaminoplatinato de potssio SQR em soluo de
cloreto de sdio a 0,9% (p/v) de modo a obter uma soluo
de tricloroaminoplatinato a 0,0015% (p/v).
Injetar replicatas de 20 uL da Soluo (2). A resoluo entre
o pico de cloreto de sdio e o pico de tricloroaminoplatinato
no inferior a 2,0. O desvio padro relativo das reas de
replicatas dos picos obtidos no superior a 2,0%.
(1) e da Soluo (2) e registrar os cromatogramas. A rea
sob o pico correspondente ao tricloroaminoplatinato obtida
no cromatograma da Soluo (1) no maior que a rea
sob o pico principal obtido no cromatograma da Soluo
(2) (3%).
Limite de transplatina. Proceder conforme descrito em
ligada a grupos de troca catinica, cidos fortes, (10 um),
mantida a temperatura de 45 C e fuxo da Fase mvel a 2
mL/minuto por 30 minutos, a 0,5 mL/minuto por mais 30
minutos e novamente a 2 mL/minuto por 30 minutos.
c
Fase mvel: preparar soluo de fosfato de potssio
monobsico a 2,5% (p/v) em gua e ajustar o pH a 3,2 com
cido fosfrico. Desgaseifcar e fltrar.
Soluo (1): soluo de transplatina SQR a 0,005% (p/v)
em soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v).
Soluo (2): soluo de tioureia a 0,5% (p/v) em gua.
Soluo (3): soluo de cisplatina SQR a 0,005% (p/v) em
Soluo (5): transferir 10 mL de Soluo (1) para um
balo volumtrico de 50 mL. Adicionar uma quantidade,
exatamente pesada, de 25 mg de cisplatina SQR. Adicionar
25 mL de soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v), agitar
solvente.
Soluo (6): misturar 5 mL de Soluo (2) com 5 mL de
cido clordrico M e 10 mL de Soluo (4). Aquecer a 60
C por uma hora e resfriar.
cido clordrico M e 10 mL de Soluo (5). Aquecer a 60
C por uma hora e resfriar.
Soluo (3). Aquecer a 60 C por uma hora e resfriar.
Injetar replicatas de 10 uL da Soluo (7) e da Soluo
(8). A efcincia da coluna, determinada para o pico
correspondente a transplatina no cromatograma da Soluo
(7), no menor que 2500 pratos tericos. Os tempos
de reteno para transplatina e cisplatina, obtidos no
cromatograma da Soluo (8), so de aproximadamente 5
minutos e 9 minutos, respectivamente. Se necessrio, fazer
ajustes na composio da Fase mvel e re-condicionar
a coluna. A resoluo entre cisplatina e transplatina, no
cromatograma da Soluo (8), no inferior a 1,7. O desvio
padro relativo das reas de replicatas dos picos obtidos
do padro de transplatina no cromatograma da Soluo (7)
no superior a 2,0%.
(6) e da Soluo (7) e registrar os cromatogramas. A
rea sob o pico correspondente a transplatina obtida no
cromatograma da Soluo (6) no maior que a rea sob o
pico obtida no cromatograma da Soluo (7) (2%).
mg de cisplatina.
DOSEAMENTO
com slica quimicamente ligada a grupos amina (10 um),
1,5 mL/minuto.
Soluo (2): soluo de cisplatina SQR a 0,1% (p/v) em
Soluo (3): soluo de cisplatina SQR a 0,05% (p/v) e de
transplatina SQR a 0,005% (p/v) em soluo de cloreto de
sdio a 0,9% (p/v).
Injetar 10 uL da Soluo (3). A resoluo entre cisplatina
e transplatina no inferior a 3,5. Injetar replicatas de 10
uL da Soluo (2). O desvio padro relativo das reas no
superior a 2,0%.
(1) e da Soluo (2), registrar os cromatogramas e medir
as reas sob os picos. Calcular a quantidade de Cl
2
H
6
N
2
Pt
na soluo injetvel a partir das respostas obtidas para a
Soluo (1) e a Soluo (2).
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz. No deve
ser refrigerado.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente..
CITRATO DE LTIO
Lithii citras
C
6
H
5
Li
3
O
7
; 209,92
C
6
H
5
Li
3
O
7
.4H
2
O; 281,98
citrato de ltio; 09575
Sal de ltio do cido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxlico
(3:1)
[919-16-4]
Sal de ltio do cido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxlico
hidratado (3:1:4)
[6080-58-6]
C
6
H
5
Li
3
O
7
a c
787
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno cristalino branco ou quase
branco.
em etanol.
IDENTIFICAO
A. Responde s reaes do on citrato (5.3.1.1).
B. Diluir 3 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo
em 10 mL de gua. Adicionar 3 mL de periodato frrico de
potssio SR. Deve ser formado um precipitado branco ou
branco-amarelado.
C. Quando umedecido com cido clordrico e submetido
chama no luminosa, desenvolve colorao vermelha.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Pesar 10 g da amostra e dissolver em
gua isenta de dixido de carbono. Diluir para 100 mL com
o mesmo solvente. A soluo obtida lmpida (5.2.25) e
incolor (5.2.12).
Aspecto da soluo adicionar 0,1 mL de fenolftalena SI.
No necessrio mais que 0,2 mL de cido clordrico 0,1
M ou 0,2 mL de hidrxido de sdio 0,1 M para promover a
Carbonatos. Adicionar, exatamente, cerca de 0,5 g da
amostra em 5 mL de cido actico 6 M. produzida uma
leve efervescncia.
Oxalatos. Pesar 0,5 g da amostra e dissolver em 4 mL de
gua, adicionar 3 mL de cido clordrico e 1 g de zinco
granulado e aquecer em banho-maria por 1 minuto. Deixar
em repouso por 2 minutos, decantar o lquido para um tubo
de ensaio contendo 0,25 mL de cloridrato de fenilidrazina
a 1% (p/v) e aquecer at ebulio. Resfriar rapidamente,
transferir para uma proveta e adicionar igual volume de
cido clordrico e 0,25 mL de ferricianeto de potssio SR.
Agitar e deixar em repouso durante 30 minutos. Nenhuma
colorao rosa desenvolvida mais intensa que a do padro
preparado em paralelo da mesma maneira utilizando 4 mL de
cido oxlico 0,005% (p/v). No mximo 0,03% (300 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Pesar 3,55 g de amostra e completar o
volume para 40 mL com gua. Proceder conforme descrito
em Ensaio limite para cloretos. No mximo 0,01% (100
ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Pesar 2,4 g de amostra e completar o
volume para 40 mL com gua. Proceder conforme descrito
em Ensaio limite para sulfatos. No mximo 0,05% (500
ppm).
mL de cido clordrico 0,1 M e diluir para 25 mL com gua.
gua (5.2.20.1). Determinar em 0,1 g da amostra, deixando
em agitao por 15 minutos antes de iniciar a titulao. De
24,0% a 27,0%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Pesar, exatamente, cerca de 80 mg da
amostra em 50 mL de cido actico glacial, aquecer at
aproximadamente 50 C e esfriar. Adicionar 0,25 mL de
1-naftolbenzena SI e titular com cido perclrico 0,1 M
SV at viragem do indicador de amarelo para verde. Cada
mL de cido perclrico 0,1 M SV equivale a 6,997 mg de
C
6
H
5
Li
3
O
7
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antidepressivo
CITRATO DE POTSSIO
Kalli citras
C
6
H
5
K
3
O
7
; 306,39
C
6
H
5
K
3
O
7
.H
2
O; 324,41
citrato de potssio; 02181
citrato de potssio monoidratado; 09373
Sal de potssio do cido 2-hidroxi-1,2,3-
propanotricarboxlico (3:1)
[866-84-2]
Sal de potssio do cido 2-hidroxi-1,2,3-
propanotricarboxlico hidratado (3:1:1)
[6100-05-6]
C
6
H
5
K
3
O
7
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P granuloso, branco ou cristais
incolores.
insolvel em etanol.
c
IDENTIFICAO
A. A soluo obtida em Aspecto da soluo responde s
B. A soluo obtida em Aspecto da soluo responde s
reaes do on citrato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
isenta de dixido de carbono e completar para 100 mL com
incolor (5.2.12).
Alcalinidade. A soluo, de 1 g da amostra em 20 mL
de gua, alcalina ao papel de tornassol. Adicionar
soluo 0,2 mL de cido sulfrico 0,05 M e uma gota de
fenolftalena SI. A soluo no adquire colorao rosa.
Oxalatos. Dissolver 0,5 g da amostra em 4 mL de gua,
adicionar 3 mL de cido clordrico, 1 g de zinco granulado e
aquecer em banho-maria por 1 minuto. Deixar em repouso
por 2 minutos, transferir o sobrenadante para tubo contendo
0,25 mL de cloreto de fenilidrazina a 1% (p/v) e aquecer
at ebulio. Resfriar rapidamente, transferir para frasco
graduado, adicionar o mesmo volume de cido clordrico
e 0,25 mL de ferricianeto de potssio SR. Homogeneizar e
deixar em repouso por 30 minutos. Qualquer colorao rosa
produzida no mais intensa do que a de preparao padro
obtida nas mesmas condies, utilizando 4 mL de cido
oxlico a 0,005% (p/v). No mximo 0,03% (300 ppm).
Sdio. Proceder conforme descrito em Espectrometria de
emisso atmica (5.2.13.2). Dissolver 1 g da amostra em
gua e diluir para 100 mL com o mesmo solvente. Preparar
a soluo padro utilizando soluo padro de sdio (200
ppm Na). Diluir se necessrio. Medir a intensidade de
emisso em 589 nm. No mximo 0,3% (3000 ppm).
Tartarato. Em tubo de ensaio, adicionar 1 g de amostra,
1,5 mL de gua e 1 mL de cido actico 6 M. Arranhar a
parede do tubo com basto de vidro. No ocorre formao
de precipitado cristalino.
Clcio (5.3.2.7). Diluir 5 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo para 15 mL com cido actico diludo
e prosseguir conforme descrito em Ensaio limite para
clcio. Preparar a soluo padro utilizando mistura de
5 mL da Soluo padro de clcio (10 ppm) e 10 mL de
gua. No mximo 0,01% (100 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em 7 g da amostra. No
mximo 0,005% (50 ppm).
ferro (5.3.2.4). Utilizar 10 mL da soluo obtida em
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Dissolver
2 g em 25 mL de gua e prosseguir conforme descrito
em Ensaio limite para metais pesados, no havendo a
necessidade de ajustar o pH. No mximo 0,001% (10 ppm).
Substncias facilmente carbonizveis. A 0,2 g da amostra
pulverizada, adicionar 10 mL de cido sulfrico e aquecer
em banho-maria a 90 C por 1 hora. Resfriar rapidamente.
A colorao da soluo no mais intensa do que a da
mistura de 75 mL da Soluo padro de cor SC F (5.2.12)
e 25 mL de cido clordrico a 1% (p/v) ou a mistura de
15 mL da Soluo padro de cor SC O e 85 mL de cido
clordrico a 1% (p/v).
amostra. Dessecar em estufa a 180 C por 4 horas. Entre
3% e 6%.
DOSEAMENTO
Dissolver, aproximadamente, 0,2 g da amostra, exatamente
pesada, em 25 mL de cido actico glacial. Titular com
cido perclrico 0,1 M SV, utilizando duas gotas de cloreto
de metilrosanilnio SI (cristal violeta) como indicador, at
viragem para verde. Realizar ensaio em branco e fazer as
correes necessrias. Cada mL de cido perclrico 0,1 M
6
H
5
K
3
O
7
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiuroltico, anticido.
CITRATO DE SDIO
Natrii citras
C
6
H
5
Na
3
O
7
; 258,07
C
6
H
5
Na
3
O
7
.2H
2
O; 294,10
citrato de sdio; 02182
citrato de sdio di-hidratado; 02183
Sal de sdio do cido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxlico
(3:1)
[68-04-2]
Sal de sdio do cido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxlico
hidratado (3:1:2)
[6132-04-3]
C
6
H
5
Na
3
O
7
DESCRIO
brancos inodoros.
a c
789
Solubilidade. A forma hidratada facilmente solvel
em gua e muito solvel em gua fervente; insolvel em
etanol.
IDENTIFICAO
A. Uma soluo 1:20 responde ao teste para o on sdio
(5.3.1.1).
B. Uma soluo 1:20 responde ao teste para o on citrato
(5.3.1.1).
C. Aps incinerao, resulta em resduo alcalino que
efervesce quando tratado com cido clordrico diludo.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Uma soluo de 1 g da amostra
em 20 mL de gua alcalina ao papel de tornassol, mas
aps a adio de 0,2 mL de cido sulfrico 0,05 M, no se
produz cor rosa por uma gota de fenolftalena SI.
mL de gua. No mximo 0,001% (10 ppm).
Tartarato (5.3.1.1). Dissolver 1 g da amostra em 2 mL de
gua, adicionar 1 mL de acetato de potssio SR e 1 mL de
cido actico 6 M. Atritar a parede do tubo com um basto
de vidro; no se forma precipitado cristalino.
Perda por dessecao (5.2.9). Dessecar a 180 C por 18
horas. Para a forma anidra, no mximo, 1% e, para a forma
hidratada, no mximo entre 10% e 13%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Pesar, exatamente, cerca de 350 mg de
amostra, previamente dessecados, transferir para bquer
de 250 mL e dissolver em 100 mL de cido actico
glacial. Agitar at dissolver completamente. Titular com
potenciometricamente. Fazer branco para a correo
necessria. Cada mL de cido perclrico 0,1 M SV equivale
a 8,602 mg de C
6
H
5
Na
3
O
7
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Alcalinizante sistmico.
CLARITROMICINA
Clarithromycinum
O
O
O
CH
3
OCH
3
C H
3
OH
O H
O
C H
3
O
CH
3
CH
3
C H
3
CH
3
CH
3
CH
3
OH
OCH
3
O CH
3
N(CH
3
)
2
OH
H
O
C
38
H
69
NO
13
; 747,95
claritromicina; 02200
6-O-Metileritromicina
[81103-11-9]
C
38
H
69
NO
13
DESCRIO
branco, inodoro.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, solvel
em acetona, ligeiramente solvel em acetonitrila e pouco
solvel em etanol absoluto e metanol. Pouco solvel em
tampes fosfato com pH entre 2,0 e 5,0.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): entre -87 e -97, em
relao substncia anidra. Determinar em soluo a 1 %
(p/v) em clorofrmio, a 20 C.
IDENTIFICAO
observados no espectro de claritromicina SQR, preparado
de maneira idntica.
c
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 7,5 a 10,0. Determinar em suspenso a 0,2%
(p/v) em mistura de gua e metanol (19:1).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo II. No mximo
0,002% (20 ppm).
gua (5.2.20). No mximo 2,0%.
Umedecer a amostra com 2 mL de cido ntrico e cinco
gotas de cido sulfrico. No mximo 0,3%.
DOSEAMENTO
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de metanol e fosfato de potssio
monobsico 0,067 M (65:35). Ajustar o pH para 4,0
utilizando cido fosfrico, se necessrio.
Soluo amostra: transferir 50 mg da amostra para balo
volumtrico de 50 mL, acrescentar 35 mL de metanol,
com o mesmo solvente. Homogeneizar. Transferir 5 mL
o volume com a Fase mvel, obtendo soluo a 0,2 mg/mL.
Soluo padro: transferir 50 mg de claritromicina SQR
para balo volumtrico de 50 mL, acrescentar 35 mL de
metanol, deixar em ultrassom por 30 minutos e completar o
volume com o mesmo solvente. Homogeneizar. Transferir
completar o volume com Fase mvel, obtendo soluo a
0,2 mg/mL.
medir as reas sob os picos. Calcular o teor de claritromicina
(C
38
H
69
NO
13
) por miligrama na amostra a partir do teor do
Soluo amostra.
Em recipientes opacos, bem fechados e ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimicrobiano.
CLARITROMICINA COMPRIMIDOS
38
H
69
NO
13.
Os comprimidos
IDENTIFICAO
CARACTERSTICAS
Procedimento para a uniformidade de contedo. Proceder
conforme descrito em Doseamento, utilizando a soluo
descrita a seguir como Soluo amostra. Transferir cada
comprimido para balo volumtrico de 250 mL, adicionar
100 mL de fosfato de potssio monobsico 0,067 M (se
necessrio, ajustar com cido fosfrico, o pH para 4,0) e
aguardar desintegrao total do comprimido. Acrescentar
130 mL de metanol, deixar em ultrassom por 30 minutos.
Agitar, mecanicamente, por 30 minutos. Completar o
volume com metanol, homogeneizar e fltrar. Transferir
volume equivalente a 5 mg da amostra para balo
volumtrico de 25 mL e completar o volume com fase
mvel.
Meio de dissoluo: tampo acetato de sdio 0,1 M pH 5,0,
900 mL
Tempo: 30 minutos
dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, em Fase mvel,
de modo a obter concentrao de aproximadamente 0,02%
(p/v). Prosseguir conforme descrito em Doseamento.
38
H
69
NO
13
dissolvida no meio,
a partir da potncia da claritromicina SQR e das respostas
obtidas com a Soluo padro e Soluo amostra.
declarada de C
38
H
69
NO
13
a c
791
ENSAIOS DE PUREZA
amostra. Dessecar em estufa vcuo a 10 C, por 3 horas.
No mximo 6%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de Claritromicina. Preparar a Soluo amostra como
descrito a seguir.
claritromicina para balo volumtrico de 50 mL, adicionar
volume com metanol. Homogeneizar e fltrar. Transferir
completar o volume com Fase mvel, obtendo soluo a
200 g/mL.
38
H
69
NO
13

nos comprimidos a partir da potncia da claritromicina
SQR e das respostas obtidas com a Soluo padro e
Soluo amostra.
ROTULAGEM
CLARITROMICINA P PARA
SUSPENSO ORAL
38
H
69
NO
13
. Pode conter agentes
dispersantes, diluentes, conservantes e aromatizantes.
IDENTIFICAO
da Soluo amostra, obtida no Doseamento, corresponde
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
amostra. Dessecar em estufa a vcuo a 60 C, por 3 horas.
No mximo 2%.
DOSEAMENTO
(5 m), mantida a 50 C; fuxo da Fase mvel de 1 mL/
minuto.
monobsico 0,067 M (60:40). Ajustar o pH para 3,5 com
cido fosfrico, se necessrio.
no rtulo do produto. Transferir volume da suspenso
equivalente a 0,5 g de claritromicina para balo
volumtrico de 250 mL contendo 100 mL de fosfato de
potssio monobsico 0,067 M. Agitar mecanicamente por
30 minutos. Acrescentar 130 mL de metanol e deixar em
ultrassom por 60 minutos, agitando regularmente. Esfriar
temperatura ambiente. Completar o volume com metanol,
Fase mvel.
Soluo padro estoque: transferir 50 mg de claritromicina
SQR para balo volumtrico de 25 mL, acrescentar 20
mL de metanol, deixar em ultrassom por 30 minutos e
obter soluo a 2 mg/mL. Homogeneizar.
Soluo padro: transferir 5 mL da Soluo padro
estoque para balo volumtrico de 25 mL e completar o
volume com a Fase mvel. Homogeneizar.
A efcincia da coluna, determinada a partir das respostas
obtidas para a claritromicina, no menor que 750 pratos
tericos/coluna. O fator de cauda est compreendido entre
1,0 e 1,7 e o fator de capacidade est compreendido entre
2,5 e 6,0. O desvio padro relativo das reas de replicatas
dos picos registrados no deve ser maior que 2,0%.
38
H
69
NO
13
na
c
suspenso oral reconstituda a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
CLAVULANATO DE POTSSIO
Kalli clavulanas
N
O
O
H
COOK
OH
C
8
H
8
KNO
5
; 237,25
clavulanato de potssio; 00137
Sal de potssio do cido (2R,3Z,5R)-3-(2-hidroxietilideno)-
7-oxo-4-oxa-1-azabiciclo[3.2.0]heptano-2-carboxlico
(1:1)
[61177-45-5]
Contm, no mnimo, 75,5% e, no mximo, 92,0% de cido
clavulnico (C
8
H
9
NO
5
),

DESCRIO
branco, higroscpico.
Solubilidade. Muito solvel em gua, ligeiramente solvel
em etanol e pouco solvel em acetona.
substncia anidra. Determinar em soluo a 2% (p/v) em
gua isenta de dixido de carbono.
IDENTIFICAO
observados no espectro de clavulanato de potssio SQR,
fosfato pH 7,0, exibe mximo em 278 nm. A absorvncia
em 278 nm de aproximadamente 0,40.
C. Responde s reaes do on potssio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 5,5 a 8,0. Determinar em soluo a 1% em
gua isenta de dixido de carbono.
ligada a grupo octadecilsilano (5 m), mantida a
temperatura 40 C; fuxo da Fase mvel de 1 mL/minuto.
em 900 mL de gua. Ajustar o pH em 4,0 com cido
fosfrico, completar o volume para 1000 mL com gua e
homogeneizar.
Eluente B: mistura de metanol e Eluente A (50:50).
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
0 4 100 0 isocrtica
Soluo (1): soluo da amostra a 10 mg/mL, em Eluente A.
Eluente A.
Soluo (3): dissolver 10 mg de clavulanato de ltio SQR
e 10 mg de amoxicilina tri-hidratada SQR em Eluente A e
soluo. Registrar os cromatogramas e medir as reas sob
os picos. A soma das reas sob todos os picos secundrios
maior que o dobro da rea sob o pico principal, obtido
com a Soluo (2) (2,0%) e a rea sob nenhum pico
maior que aquela do pico principal obtido com a Soluo
(2) (1,0%). Desconsiderar os picos com rea inferior a 0,05
vezes a rea sob o pico principal obtido com a Soluo (2)
(0,05%). O teste somente ser vlido se o cromatograma
obtido com a Soluo (3) apresentar resoluo entre os
picos de clavulanato e amoxicilina de, no mnimo, 13.
Limite de aminas alifticas. Proceder conforme descrito
em Cromatografa a gs (5.2.17.5). Utilizar cromatgrafo
provido de detector de ionizao de chamas; coluna
capilar de 50 m de comprimento e 0,53 mm de dimetro
interno, preenchida com polidifenildimetilsiloxano, com
espessura do flme de 5 m; temperatura da coluna de 35
C nos primeiros 7 minutos, 35 C a 150 C de 7 minutos
a 10,8 minutos, e 150 C de 10,8 minutos a 25,8 minutos;
temperatura do injetor 200 C; temperatura do detector
250 C; utilizar hlio como gs de arraste; fuxo do gs de
arraste de 8,0 mL/minuto.
a c
793
Soluo de padro interno: dissolver 50 L de 3-metil-2-
pentanona em gua e diluir para 100 mL com o mesmo
solvente.
Soluo amostra: transferir 1 g da amostra para tubo de
centrfuga e adicionar 5 mL de Soluo de padro interno,
5 mL de hidrxido de sdio 2 M, 10 mL de gua, 5 mL
de lcool isoproplico e 5 g de cloreto de sdio. Agitar
vigorosamente durante 1 minuto e centrifugar para
separao das camadas.
Soluo padro: dissolver 80 mg de cada uma
das aminas: 1,1-dimetiletilamina, dietilamina,
tetrametiletilenodiamina, 1,1,3,3-tetrametilbutilamina,
N,N-diisopropiletilenodiamina e 2,2-oxibis(N,N-
dimetiletilamina) em cido clordrico 2 M e diluir para 200
mL com o mesmo solvente. Transferir 5 mL da soluo
obtida para tubo de centrfuga e adicionar 5 mL de Soluo
de padro interno, 10 mL de hidrxido de sdio 2 M,
5 mL de lcool isoproplico e 5 g de cloreto de sdio.
Agitar vigorosamente durante 1 minuto e centrifugar para
separao das camadas.
Injetar, separadamente, 1 L das camadas superiores
da Soluo padro e da Soluo amostra. O tempo de
reteno de 3-metil-2-pentanona de aproximadamente
11,4 minutos. Os tempos de reteno relativos
das aminas em relao a 3-metil-2-pentanona so
cerca de 0,55 para 1,1-dimetiletilamina, 0,76 para
dietilamina, 1,07 para tetrametiletilenodiamina, 1,13
para 1,1,3,3-tetrametilbutilamina, 1,33 para N,N-
diisopropiletilenodiamina e 1,57 para 2,2-oxibis(N,N-
dimetiletilamina).
Procedimento: injetar, separadamente, 1 L das camadas
superiores da Soluo padro e da Soluo amostra,
registrar os cromatogramas e medir as reas sob os picos.
No mximo 0,2% de aminas alifticas.
mximo 1,5%.
Quando for indicado no rtulo que a substncia estril ou
quando essa for destinada para a produo de preparaes
parenterais, a amostra cumpre com o teste.
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). No mximo 0,03 UI/
mg de clavulanato de potssio.
DOSEAMENTO
m), mantida a temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel
de 1,6 mL/minuto.
Tampo pH 4,4: dissolver 7,8 g de fosfato de sdio
monobsico em 900 mL de gua. Ajustar o pH para 4,4 0,1
com cido fosfrico ou hidrxido de sdio 10 M, completar
o volume para 1000 mL com gua e homogeneizar.
Fase mvel: mistura de Tampo pH 4,4 e metanol (95:5).
Dissolver em gua e completar o volume com o mesmo
solvente.
Soluo padro: soluo de clavulanato de ltio SQR a
0,25 mg/mL em gua.
Soluo de resoluo: soluo contendo clavulanato de
ltio SQR a 0,25 mg/mL e amoxicilina tri-hidratada SQR
a 0,5 mg/mL em gua.
efcincia da coluna no menor que 550 pratos tericos.
Os tempos de reteno relativos so cerca de 0,5 para cido
clavulnico e 1,0 para amoxicilina. O fator de cauda no
maior que 1,5. A resoluo entre cido clavulncio e
amoxicilina no menor que 3,5. O desvio padro relativo
que 2,0%.
e medir a rea sob os picos. Calcular o teor de cido
clavulnico (C
8
H
9
NO
5
) na amostra a partir das respostas
Em recipientes hermticos, protegidos da luz, em
temperatura entre 2 C e 8 C.
CLASSE TERAPUTICA
Inibidor de beta-lactamase.
CLOfAZIMINA
Clofaziminum
N
N
N
N
Cl
H
CH
3
C H
3
Cl
C
27
H
22
Cl
2
N
4
; 473,40
clofazimina; 02268
c
N,5-Bis(4-clorofenil)-3,5-diidro-3-[(1-metiletil)imino]-2-
fenazinamina
[2030-63-9]
C
27
H
22
Cl
2
N
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino vermelho escuro,
inodoro.
Solubilidade. Insolvel em gua, solvel em acetona,
clorofrmio, ter etlico e pouco solvel em etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 217 C a 219 C.
IDENTIFICAO
soluo da amostra a 5% (p/v) em cloreto de metileno,
no espectro de clofazimina SQR, preparado de maneira
idntica.
clordrico metanlico 0,1 M exibe mximos e mnimos
somente nos mesmos comprimentos de onda de soluo
similar de clofazimina SQR.
posio e cor quela obtida com a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel HF
254
, como suporte, e mistura de cloreto de
metileno e n-propanol (10:1), como fase mvel. Expor a
placa a vapores de amnia por 30 minutos imediatamente
antes do uso, suspendendo a placa numa cuba contendo
camada superfcial de aproximadamente 25 mL de soluo
recm-preparada de amnia a 1% (v/v), impedindo
que a placa entre em contato com o lquido. Aplicar,
Soluo (1): dissolver quantidade, exatamente pesada, da
amostra em cloreto de metileno de modo a obter soluo
a 50 mg/mL.
Soluo (2): dissolver quantidade, exatamente pesada,
de clofazimina SQR em cloreto de metileno, para obter
soluo a 0,5 mg/mL.
Soluo (3): diluir a Soluo (2) em cloreto de metileno de
Soluo (4): diluir a Soluo (2) em cloreto de metileno de
com a Soluo (1), diferente da mancha principal, no
mais intensa que aquela obtida com a Soluo (2) (1,0%).
O somatrio das intensidades das manchas secundrias
obtidas no cromatograma com a Soluo (1) no ultrapassa
2,0%.
Metais pesados (5.3.2.3). Proceder conforme descrito em
Mtodo IV. No mximo 0,001% (10 ppm).
mximo 0,5 %.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver, exatamente, cerca de 0,3 g da
amostra, previamente dessecada, em 5 mL de clorofrmio.
Aquecer com cuidado, se necessrio. Adicionar 20 mL
de acetona e 5 mL de cido actico glacial. Titular com
cido perclrico 0,1 M SV e determinar o ponto fnal
27
H
22
Cl
2
N
4
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Hansenosttico.
CLONAZEPAM COMPRIMIDOS
15
H
10
ClN
3
O
3.
IDENTIFICAO
quantidade do p equivalente a 10 mg de clonazepam para
funil de separao de 125 mL. Adicionar 25 mL de gua,
agitar por 2 minutos e extrair com duas pores de 40 mL
de clorofrmio. Filtrar os extratos orgnicos utilizando
sulfato de sdio anidro, combin-los e evaporar a
temperatura ambiente, com auxlio de fuxo de nitrognio.
a c
795
Lavar o resduo em trs pores de 10 mL de hexano. O
no espectro de clonazepam SQR, preparado de maneira
idntica.
da Soluo amostra, obtido no Doseamento, corresponde
CARACTERSTICAS
Tempo: 60 minutos
de 1,0 mL/min.
Fase mvel: mistura de gua, metanol e acetonitrila
(40:30:30)
Soluo amostra: aps realizao do teste, utilizar alquotas
do meio de dissoluo.
de clonazepam SQR em metanol, de modo a obter soluo
a 0,05 mg/mL. Diluir sucessivamente com meio de
dissoluo de modo a obter concentrao similar quela
obtida nas cubas de dissoluo aps o teste.
Procedimento: injetar, separadamente, 100 uL das
Solues padro e amostra, registrar os cromatogramas
C
15
H
10
ClN
3
O
3
dissolvida no meio a partir das respostas
declarada de C
15
H
10
ClN
3
O
3
ENSAIO DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de acetato de etila
e tetracloreto de carbono (1:1) como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, 25 uL de cada uma das solues,
por 1 minuto, quantidade de p equivalente a 10 mg de
clonazepam em 20 mL de acetona. Filtrar e evaporar at a
secura. Dissolver o resduo em 0,5 mL de acetona.
Soluo (2): preparar soluo de 3-amino-4-(2-clorofenil)-
6-nitroquinolin-2(1H)-ona SQR a 0,2 mg/mL em acetona.
Soluo (3): preparar soluo de (2-amino-5-nitrofenil)
(2-clorofenil) metanona SQR a 0,2 mg/mL em acetona.
secar em corrente de ar seco e observar sob a luz ultravioleta
(254 nm). Nebulizar a placa com cido sulfrico a 10% (v/v)
e aquecer a 105 C por 15 minutos. Nebulizar com nitrito
de sdio a 0,1% (p/v) e secar sob corrente de ar quente.
Nebulizar com sulfamato de amnio a 0,5% (p/v) e secar
sob corrente de ar quente. Quaisquer manchas obtidas no
cromatograma com a Soluo (1), diferente da principal,
no so mais intensas que quelas obtidas com a Soluo
(2). A diminuio da intensidade da fuorescncia na placa
observada. A mancha principal obtida com a Soluo (1)
com as Solues (2) e (3).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
(5um); fuxo da Fase mvel de 0,6 mL/minuto.
Tampo fosfato de amnia: transferir 6,6 g de fosfato de
amnio dibsico para balo volumtrico de 1000 mL e
acrescentar 950 mL de gua, ajustar pH para 8,0 com cido
fosfrico 0,33 M ou hidrxido de sdio M e completar o
volume com gua.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato de amnia, metanol
e tetraidrofurano (60:52:13). Filtrar e degaseifcar.
Diluente: mistura de gua, metanol e tetraidrofurano
(60:52:13)
Transferir quantidade de p equivalente 5 mg de
clonazepam para balo volumtrico de 50 mL. Dissolver,
inicialmente, em 20 mL de metanol. Deixar em ultrassom
c
por 15 minutos e completar o volume com Diluente.
Homogeneizar e fltrar.
Soluo padro: transferir quantidade equivalente a 10 mg
de clonazepam SQR para um balo volumtrico de 100 mL.
Dissolver, inicialmente, em 75 mL de metanol. Deixar em
ultrassom por aproximadamente 15 minutos. Completar o
volume com Diluente de modo a obter soluo a 0,1 mg/
mL. Homogeneizar e fltrar.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 uL das Soluo
15
H
10
ClN
3
O
3
Em recipientes bem fechados, de vidro mbar e em
ROTULAGEM
CLONAZEPAM SOLUO ORAL
15
H
10
ClN
3
O
3.
IDENTIFICAO
254
,
como suporte, e mistura de tolueno, acetato de etila e
cido frmico anidro (60:40:5) como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, 10 uL de cada uma das solues,
Soluo (1): em tubo de centrfuga, diluir 2 mL da
amostra com 10 mL de cido clordrico 0,1 M. Adicionar
1 g de cloreto de sdio e agitar at a dissoluo, por
aproximadamente 2 minutos. Adicionar 5 mL de acetato
de etila, agitar 3 minutos e centrifugar por mais 3 minutos.
Utilizar a fase orgnica.
Soluo (2): dissolver 20 mg de clonazepam SQR em 20
mL de acetato de etila.
secar em corrente de ar seco por 10 minutos e observar sob
a luz ultravioleta (254 nm). A diminuio da intensidade
da fuorescncia na placa observada. A mancha principal
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,6 a 4,1. Determinar em soluo a 50% (v/v)
da amostra em gua.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de Clonazepam comprimidos. Preparar a Soluo amostra
Soluo amostra: transferir para balo volumtrico de 50
mL, volume de soluo oral contendo o equivalente a 5 mg
de clonazepam de modo a obter soluo de 100 ug/mL.
Solubilizar, inicialmente, em 20 mL de metanol, levar em
banho de ultrassom por 15 minutos e completar o volume
com Diluente. Homogeneizar e fltrar.
Procedimento: injetar, separadamente 20 uL da Soluo
padro e Soluo amostra, registrar os cromatogramas e
15
H
10
ClN
3
O
3
na soluo oral a partir das respostas obtidas com a Soluo
padro e Soluo amostra.
Em recipientes bem fechados, de vidro mbar e em
ROTULAGEM
CLOPIDOGREL COMPRIMIDOS
Comprimidos de bissulfato de clopidogrel contm o
equivalente a, no mnimo, 90,0% e, no mximo, 110,0% da
16
H
16
ClNO
2
S.
IDENTIFICAO
em Procedimento para uniformidade de contedo, exibe
mximos de absoro no mesmo comprimento de onda da
soluo padro.
CARACTERSTICAS
a c
797
cada comprimido para balo volumtrico de 50 mL.
Adicionar 30 mL de cido clordrico 0,1 M e deixar
em ultrassom durante 5 minutos, completar o volume
com o mesmo solvente e fltrar. Transferir 5 mL dessa
volume com o mesmo solvente. Filtrar com fltro de 0,45
m de porosidade. Preparar soluo padro na mesma
utilizando cido clordrico 0,1 M para ajuste do zero.
Meio de dissoluo: tampo de cido clordrico pH 2,0,
1000 mL
Tempo: 30 minutos
dissoluo, fltrar imediatamente e diluir em tampo
de cido clordrico pH 2,0 at concentrao adequada.
Medir as absorvncias das solues em 240 nm (5.2.14),
utilizando tampo de cido clordrico pH 2,0 para ajuste do
16
H
16
ClNO
2
S dissolvido
de bissulfato de clopidogrel SQR contendo o equivalente a
0,003% (p/v) de clopidogrel, preparada no mesmo solvente.
declarada de C
16
H
16
ClNO
2
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de detector ultravioleta a 220 nm; coluna ovomucide, de
150 mm de comprimento e 4,6 mm de dimetro interno,
empacotada com slica, mantida temperatura ambiente;
fuxo da Fase mvel de 1,0 mL/min.
Fase mvel: mistura de fosfato monobsico de potssio 0,1
M e acetonitrila (75:25).
clopidogrel para balo volumtrico de 50 mL. Adicionar
cerca de 30 mL de metanol. Deixar em ultrassom por 5
o volume com metanol. Homogeneizar e fltrar. Transferir
completar o volume com metanol. Homogeneizar.
Soluo padro: pesar, exatamente, o equivalente a 25 mg
de clopidogrel, transferir para balo volumtrico de 25 mL.
Dissolver em 5 mL de metanol, com auxlio de banho de
ultrassom, se necessrio. Completar o volume com metanol
e homogeneizar. Transferir 5 mL dessa soluo para balo
Homogeneizar.
C
16
H
16
ClNO
2
Em recipientes bem fechados, temperatura ambiente.
ROTULAGEM
CLORETO DE AMNIO
Ammonii chloridum
NH
4
Cl; 53,49
cloreto de amnio; 02362
Cloreto de amnio
[12125-02-9]
NH
4
Cl, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
incolores.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, solvel em
glicerol, ligeiramente solvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. A soluo a 0,1% (p/v) da amostra responde s reaes
do on amnio (5.3.1.1).
B. A soluo a 0,1% (p/v) da amostra responde s reaes
do on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
completar para 100 mL com o mesmo solvente. A soluo
obtida lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
c
Aspecto da soluo, adicionar 0,05 mL de vermelho de
metila SI. No mais do que 0,5 mL de cido clordrico 0,01
M ou 0,5 mL de hidrxido de sdio 0,01 M necessrio
para promover a viragem do indicador.
Brometos e iodetos. A 10 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo adicionar 0,1 mL de cido clordrico
e 0,05 mL de cloramina-T a 2% (p/v). Aps 1 minuto,
adicionar 2 mL de clorofrmio e misturar vigorosamente.
A fase clorofrmica permanece incolor.
Tiocianato. Acidifcar 10 mL da soluo obtida em Aspecto
da soluo com cido clordrico e adicionar algumas gotas
de cloreto frrico a 9% (p/v). No se desenvolve colorao
vermelho-alaranjada.
Clcio (5.3.2.7). Diluir 5 mL da soluo obtida em Aspecto da
soluo com 10 mL de gua. No mximo 0,02% (200 ppm).
ferro (5.3.2.4). Utilizar Mtodo I. Diluir 5 mL de soluo
obtida em Aspecto da soluo com 5 mL de gua. Utilizar
Soluo padro de ferro (1 ppm Fe). No mximo 0,002%
(20 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Determinar
em 20 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo. No
mximo 0,001% (10 ppm).
mximo 0,015% (150 ppm).
mximo 1,0%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 1 g da amostra, dissolver em
20 mL de gua e adicionar mistura de 20 mL de gua e 5
mL de soluo de formaldedo, previamente neutralizada
em presena de fenolftalena SI. Aps 1 a 2 minutos, titular
com hidrxido de sdio M SV, utilizando fenolftalena SI
como indicador. Cada mL de hidrxido de sdio M SV
equivale a 53,490 mg de NH
4
Cl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Acidifcante sistmico.
CLORETO DE CLCIO
Calcii chloridum
CaCl
2
; 110,98
CaCl
2
.2H
2
O; 147,01
cloreto de clcio; 02369
cloreto de clcio di-hidratado; 02370
Cloreto de clcio
[10043-52-4]
Cloreto de clcio di-hidratado
[10035-04-8]
CaCl
2
.2H
2
O.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco, higroscpico.
etanol.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 1 g da amostra em gua isenta de dixido de
carbono e completar para 10 mL com o mesmo solvente. A
soluo obtida responde s reaes do on clcio (5.3.1.1).
B. Dissolver 1 g da amostra em gua isenta de dixido de
carbono e completar para 10 mL com o mesmo solvente. A
soluo obtida responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
isenta de dixido de carbono e completar para 100 mL com
no mais corada que mistura de 5 mL da Soluo padro
de cor SC F (5.2.12) e 95 mL de cido clordrico a 1%
(p/v).
Aspecto da soluo, recentemente preparada, adicionar 0,1
mL de fenolftalena SI. Se a soluo adquirir colorao
rosa, deve tornar-se incolor pela adio de, no mximo,
0,2 mL de cido clordrico 0,01 M. Se nenhuma colorao
aparecer, deve tornar-se rosa pela adio de, no mximo,
0,2 mL de hidrxido de sdio 0,01 M.
5% (p/v).
adicionar 1 mL de sulfato de clcio SR. Aps 15 minutos,
qualquer opalescncia observada no mais intensa do
que a mistura de 10 mL da soluo obtida em Aspecto da
soluo e 1 mL de gua.
ferro, alumnio e fosfato. Dissolver 1 g da amostra em
20 mL de gua. Adicionar duas gotas de cido clordrico
3 M e uma gota de fenolftalena SI. Adicionar, gota a
a c
799
gota, cloreto de amnio-hidrxido de amnio SR, at
leve colorao rsea e adicionar duas gotas em excesso.
Aquecer a ebulio. No ocorre turvao ou precipitao.
Magnsio e metais alcalinos. Misturar 20 mL da soluo
obtida em Aspecto da soluo e 80 mL de gua. Adicionar
2 g da amostra e 2 mL de amnia SR. Aquecer a ebulio e
adicionar soluo a quente de 5 g de oxalato de amnio em
75 mL de gua. Deixar em repouso por 4 horas, completar
para 200 mL com gua e fltrar. A 100 mL do fltrado,
adicionar 0,5 mL de cido sulfrico. Evaporar a secura em
banho-maria e incinerar a 600 C at peso constante. O
peso do resduo no deve ser superior a 5 mg. No mximo
0,5%.
Alumnio (5.3.2.10). A 10 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo, adicionar 2 mL de cloreto de amnio
SR, 1 mL de amnia SR e ferver a soluo. No ocorre
turvao ou precipitao. Se utilizado para a preparao
de solues para dilise, dissolver 4 g da amostra em
100 mL de gua. Adicionar 10 mL de tampo acetato pH
6,0 e proceder conforme descrito em Ensaio limite para
alumnio. Utilizar como soluo padro mistura de 2 mL
de Soluo padro de alumnio (2 ppm Al), 10 mL de
tampo acetato pH 6,0 e 98 mL de gua. Para o branco
utilizar mistura de 10 mL de tampo acetato pH 6,0 e 100
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar Mtodo I. Determinar em 1 g da
amostra. No mximo 0,0003% (3 ppm).
ferro (5.3.2.4). Utilizar Mtodo I. Utilizar 10 mL da
soluo obtida em Aspecto da soluo. Utilizar soluo
padro de ferro (1 ppm Fe). No mximo 0,001% (10 ppm).
mximo 0,03% (300 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo I. Utilizar 10
mL da soluo obtida em Aspecto da soluo. Preparar a
soluo padro utilizando soluo padro de chumbo (2
ppm Pb). No mximo 0,002% (20 ppm).
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,28 g da amostra, dissolver em
100 mL de gua e proceder conforme descrito em Titulao
complexomtrica para clcio (5.3.3.4), utilizando 4 mL de
hidrxido de sdio 2 M. Cada mL de edetato dissdico 0,1
M SV equivale a 14,702 mg de CaCl
2
.2H
2
O.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. O rtulo deve indicar se
pode ser utilizado na preparao de solues para dilise.
CLASSE TERAPUTICA
Repositor eletroltico. Pode ser usado como diurtico,
acidifcante urinrio e antialrgico.
CLORETO DE CLCIO HEXAIDRATADO
Calcii chloridum hexahydricum
CaCl
2
.6H
2
O; 219,08
cloreto de clcio hexaidratado; 02371
Cloreto de clcio hexaidratado
[7774-34-7]
CaCl
2
.6H
2
O.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais incolores ou massa
cristalina incolor.
Solubilidade. Muito solvel em gua e etanol.
Temperatura de fuso (5.2.2): 30 C.
IDENTIFICAO
carbono e completar o volume para 100 mL com o mesmo
solvente. A soluo obtida responde s reaes do on
clcio (5.3.1.1).
B. A soluo preparada de maneira idntica soluo do
teste A. de Identifcao responde s reaes do on cloreto
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
(5.2.25) e apresenta colorao menos intensa que a mistura
de 5 mL da Soluo padro de cor SC F descrita em Cor
de lquidos (5.2.12).
Aspecto da soluo, recentemente preparada, adicionar 0,1
mL de fenolftalena SI. Se a soluo adquirir colorao
rosa, deve tornar-se incolor pela adio de, no mximo,
0,2 mL de cido clordrico 0,01 M. Se nenhuma colorao
aparecer, deve tornar-se rosa pela adio de, no mximo,
0,2 mL de hidrxido de sdio 0,01 M.
Alumnio. A 10 mL da soluo obtida em Aspecto da
soluo, adicionar 2 mL de cloreto de amnio SR, 1 mL
de hidrxido de amnio 6 M e ferver a soluo, no ocorre
turvao ou precipitao. Se utilizado para a preparao
de solues para dilise, dissolver 6 g da amostra em
100 mL de gua, adicionar 10 mL de tampo acetato pH
c
6,0 e proceder conforme descrito em Ensaio limite pata
alumnio. Utilizar como soluo padro mistura de 2 mL
de Soluo padro de alumnio (2 ppm), 10 mL de tampo
acetato pH 6,0 e 98 mL de gua. Para o branco utilizar
mistura de 10 mL de tampo acetato pH 6,0 e 100 mL de
adicionar 1 mL de sulfato de clcio SR. Aps 15 minutos,
qualquer opalescncia observada no mais intensa do
que a mistura de 10 mL da soluo obtida em Aspecto da
soluo e 1 mL de gua.
Sulfatos (5.3.2.2). Determinar em 6 g da amostra e
proceder conforme descrito em Ensaio limite para sulfatos.
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Utilizar 10
mL da soluo obtida em Aspecto da soluo. Preparar a
soluo padro utilizando Soluo padro de chumbo (2
ppm). No mximo 0,002% (20 ppm).
DOSEAMENTO
100 mL de gua e proceder conforme descrito em Titulao
complexomtrica para clcio (5.3.3.4), utilizando 4 mL de
hidrxido de sdio 2 M. Cada mL de edetato dissdico 0,1
M SV equivale a 21,908 mg de CaCl
2
.6H
2
O.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. O rtulo deve indicar se
pode ser utilizado na preparao de solues para dilise.
CLASSE TERAPUTICA
Repositor eletroltico. Pode ser usado como diurtico,
acidifcante urinrio e antialrgico.
CLORETO DE METACOLINA
Methacholini chloridum
O
N
+
(CH
3
)
3
C H
3
O CH
3
Cl
-
C
8
H
18
ClNO
2
; 195,69
cloreto de metacolina; 02401
Cloreto de 2-(acetiloxi)-N,N,N-trimetil-1-propanamnio
(1:1)
[62-51-1]
C
8
H
18
ClNO
2
DESCRIO
brancos ou incolores; inodoro ou com leve odor; muito
higroscpico.
clorofrmio e etanol, insolvel em ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): Transferir 0,1 g da amostra para
um bquer de vidro e dissolver em 3 mL de clorofrmio.
Aquecer a 110 C por 1 hora. Determinar a faixa de fuso
no p aderido s paredes do bquer. Entre 170 C e 173 C.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 0,1 g da amostra em 2 mL de gua e adicionar
3 mL de cloreto platnico SR. Ocorre formao de cristais
rombodricos com faixa de fuso entre 220 C e 225 C.
B. Dissolver 10 mg da amostra em 100 mL de gua. Para
cada 1 mL dessa soluo, adicionar 1 mL de etanol e 1 mL
de cido sulfrico. Aquecer lentamente at a percepo de
odor caracterstico de acetato de etila.
C. Preparar uma soluo 10% (p/v) da amostra. Em 5 mL
dessa soluo, adicionar 2 g de hidrxido de potssio.
Aquecer lentamente at a percepo de odor caracterstico
de trimetilamina.
D. Preparar uma soluo 2% (p/v) da amostra. Responde s
reaes do on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Cloreto de acetilcolina. Dissolver 10 mg da amostra em
100 mL de gua. Para cada 2 mL dessa soluo, adicionar
3 mL de soluo de perclorato de sdio 20% (p/v), agitar
e colocar sob banho de gelo por 5 minutos. No ocorre
formao de precipitado.
mximo 0,002% (20 ppm).
mximo 1,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
dessecada, e dissolver em uma mistura de cido actico
glacial e acetato de mercrio SR (50:10). Titular com cido
perclrico 0,1 M SV, utilizando cloreto de metilrosanilnio
SI como indicador, at colorao verde. Realizar ensaio em
a c
801
8
H
18
ClNO
2
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Colinrgico.
CLORETO DE SDIO
Natrii chloridum
NaCl; 58,44
cloreto de sdio; 02421
Cloreto de sdio
[7647-14-5]
NaCl, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, cristalino branco ou
cristais incolores.
insolvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. Responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 20% (p/v) em gua isenta
de dixido de carbono lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
Acidez ou alcalinidade. No mximo 0,5 mL de cido
clordrico 0,01 M ou de hidrxido de sdio 0,01 M gasto
para neutralizar 20 mL da soluo descrita em Aspecto da
soluo, utilizando azul de bromotimol SI como indicador.
Brio. Adicionar a 5 mL da soluo descrita em Aspecto
da soluo, 5 mL de gua e 1 mL de cido sulfrico M .
Aps 15 minutos, qualquer opalescncia observada no
mais intensa que a mistura de 5 mL da soluo descrita em
Aspecto da soluo e 7 mL de gua.
Brometos. Adicionar a 0,5 mL da soluo descrita em
Aspecto da soluo, 4 mL de gua, 2 mL de vermelho
de fenol SR e 1 mL de cloramina-T a 0,01% (p/v),
recentemente preparada. Homogeneizar e deixar em
repouso por 2 minutos. Adicionar 0,15 mL de tiossulfato
de sdio 0,1 M, homogeneizar e completar volume para 10
mL com gua. A absorvncia desta soluo (5.2.14), em
590 nm, utilizando gua para ajuste do zero, no maior
que da soluo padro, preparada da mesma maneira,
utilizando 5 mL de brometo de potssio a 0,3% (p/v). No
mximo 0,005% (50 ppm).
ferrocianetos. Dissolver 2 g da amostra em 6 mL de gua.
Adicionar 0,5 mL da mistura de 5 mL de sulfato ferroso
amoniacal a 1% (p/v) em soluo de cido sulfrico 0,05 M
e 95 mL de sulfato ferroso heptaidratado a 1% (p/v). No
se desenvolve colorao azul.
Iodetos. Umedecer 5 g da amostra pela adio, gota a gota,
de mistura recm-preparada de 0,15 mL de nitrito de sdio
SR, 2 mL de cido sulfrico 0,05 M , 25 mL de amido
SI e 25 mL de gua. Aps 5 minutos, no se desenvolve
colorao azul.
Nitritos. Adicionar 10 mL de gua a 10 mL da soluo
descrita em Aspecto da soluo. Medir a absorvncia
(5.2.14) da soluo a 354 nm. A absorvncia no maior
que 0,01.
Potssio. Exigido para cloreto de sdio destinado
preparao de solues para uso parenteral ou solues
para hemodilise. Proceder conforme descrito em
Espectrometria de absoro atmica (5.2.13.1). Preparar
as solues como descrito a seguir.
Soluo amostra: dissolver 1 g da amostra em gua e diluir
de cloreto de potssio, previamente dessecado entre 100 C
e 105 C, por 3 horas, para obter soluo a 0,1144% (p/v)
em gua. Diluir se necessrio.
Medir a intensidade de emisso a 766,5 nm. No mximo
0,05% (500 ppm).
Alumnio (5.3.2.10). Exigido para cloreto de sdio
destinado preparao de solues para hemodilise.
Dissolver 20 g da amostra em 100 mL de gua e adicionar
10 mL de tampo acetato pH 6,0. Prosseguir conforme
descrito em Ensaio limite para alumnio. Utilizar mistura
de 2 mL da Soluo padro de alumnio (2 ppm), 10 mL
de tampo acetato pH 6,0 e 98 mL de gua como soluo
padro. Utilizar mistura de 10 mL de tampo acetato pH
6,0 e 100 mL de gua como branco. No mximo 0,00002%
(0,2 ppm).
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar 5 mL da soluo descrita em
ferro (5.3.2.4). Utilizar 10 mL da soluo descrita em
fosfatos (5.3.2.11). Utilizar 2 mL da soluo descrita em
Aspecto da soluo e diluir com gua para 100 mL com
Magnsio e metais alcalino terrosos (5.3.2.9). Utilizar 10
g da amostra. O volume de edetato dissdico 0,01 M SV
c
utilizado no maior que 2,5 mL. No mximo 0,01% (100
ppm), calculados como clcio.
em 12 mL da soluo descrita em Aspecto da soluo. No
mximo 0,0005% (5 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Utilizar 3 mL da soluo descrita em
mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 50 mg da amostra em gua
Titular com nitrato de prata 0,1 M SV, determinando o
ponto fnal potenciometricamente. Cada mL de nitrato de
prata 0,1 M SV equivale a 5,844 mg de NaCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Repositor eletroltico.
CLORETO DE SDIO SOLUO
INJETVEL
quantidade declarada de NaCl. A soluo no contm
agentes antimicrobianos.
IDENTIFICAO
B. Responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 4,5 a 7,0.
ENSAIOS DE PUREZA
ferro (5.3.2.4). Utilizar o Mtodo III. Diluir 5 mL da
soluo injetvel para 45 mL com gua, adicionar 2 mL de
cido clordrico. No mximo 0,0002% (2 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Transferir volume da soluo
injetvel equivalente a 1 g de cloreto de sdio para recipiente
adequado, se necessrio evaporar para volume de 20 mL.
Adicionar 2 mL de cido actico M e completar o volume
para 25 mL com gua. Prosseguir conforme descrito no
Mtodo I, porm, utilizar apenas 1 mL da Soluo padro
de chumbo (10 ppm Pb) em Preparo do padro e em
Preparo do tubo controle. No mximo 0,001% (10 ppm).
mL se a quantidade declarada de cloreto de sdio for entre
0,5% e 0,9%, e no mximo 3,6 UE/mL se a quantidade
declarada de cloreto de sdio for entre 3,0% e 24,3%.
DOSEAMENTO
Transferir volume da soluo injetvel contendo o
equivalente a 90 mg de cloreto de sdio para erlenmeyer.
Adicionar gua, se necessrio, para obter volume de 10
mL. Adicionar 10 mL de cido actico glacial e 75 mL de
metanol. Titular com nitrato de prata 0,1 M SV. Determinar
o ponto fnal utilizando eosina Y SI como indicador, at
aparecimento de colorao rosa. Cada mL de nitrato de
prata 0,1 M SV equivale a 5,844 de NaCl.
Em recipientes de plstico ou vidro preferencialmente tipo
I ou tipo II.
ROTULAGEM
CLORETO DE ZINCO
Zinci chloridum
ZnCl
2
; 136,32
cloreto de zinco; 02433
Cloreto de zinco
[7646-85-7]
ZnCl
2
.
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. P cristalino, branco ou
quase branco. Temperatura de fuso (5.2.2): em torno de
318 C.
em etanol e glicerol.
a c
803
IDENTIFICAO
A. Dissolver 0,5 g da amostra em cido ntrico SR e diluir
para 10 mL com o mesmo solvente. Responde s reaes
B. A 2 g da amostra adicionar 38 mL de gua isenta de
dixido de carbono. Gotejar cido clordrico SR at
solubilizao completa e diluir para 40 mL com gua isenta
de dixido de carbono. Responde s reaes do on zinco
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 4,6 a 5,5. Determinar em soluo contendo 1 g
da amostra em 9 mL de gua isenta de dixido de carbono.
Alumnio, clcio, metais pesados, ferro, magnsio. A 8
mL da soluo obtida no teste B. de Identifcao adicionar
2 mL de soluo concentrada de amnia e homogeneizar.
A soluo lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12). Adicionar
1 mL de fosfato de sdio dibsico dodecaidratado SR. A
soluo permanece lmpida por, no mnimo, 5 minutos.
Adicionar 0,2 mL de sulfeto de sdio SR. Produz-se
precipitado branco. O sobrenadante permanece incolor.
Sais de amnio. A 5 mL de soluo da amostra a 10%
(p/v), adicionar hidrxido de sdio M at iniciar formao
de precipitado. Aquecer levemente. No ocorre liberao
de odor de amnia.
Sulfatos (5.3.2.2). Dissolver 0,8 g da amostra em 10 mL de
gua e prosseguir conforme descrito em Ensaio limite para
DOSEAMENTO
Dissolver 0,25 g da amostra em 5 mL de cido actico
diludo. Proceder conforme descrito em Titulaes
complexomtricas (5.3.3.4) para Zinco. Cada mL de edetato
dissdico 0,1 M SV equivale a 13,632 mg de ZnCl
2
.
Em recipientes no metlicos bem fechados.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Suplemento nutricional.
CLORIDRATO DE AMILORIDA E
HIDROCLOROTIAZIDA COMPRIMIDOS
6
H
8
ClN
7
O.HCl e C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
.
IDENTIFICAO
do p equivalente a 0,1 g de hidroclorotiazida para bquer
e dissolver em 50 mL de acetona. Filtrar e evaporar o
fltrado at secura. Secar o resduo a 105 C por 1 hora. O
espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) do resduo
seco, disperso em brometo de potssio, apresenta mximos
no espectro de hidroclorotiazida SQR.
B. O tempo de reteno dos picos principais do
correspondem queles dos picos principais da Soluo
padro.
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, com Meio de dissoluo,
solues em 363 nm para o cloridrato de amilorida e em 270
nm para a hidroclorotiazida (5.2.14), utilizando o mesmo
solvente para o ajuste do zero. Calcular a quantidade de
C
6
H
8
ClN
7
O.HCl e de C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
dissolvidas no meio,
comparando as leituras obtidas com as das solues de
cloridrato de amilorida SQR e hidroclorotiazida SQR de
concentraes conhecidas preparadas no mesmo solvente.
declarada de C
6
H
8
ClN
7
OHCl e 75% (Q) da quantidade
declarada de C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de metil 3,5-diamino-6-cloropirazina-2-
carboxilato. Proceder conforme descrito em Cromatografa
em camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel F
254
,
como suporte, e mistura de dioxana e hidrxido de amnia
3 M (90:12), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, 10 L de cada uma das solues recentemente
preparadas, descritas a seguir:
c
Soluo (1): pulverizar os comprimidos e dissolver
quantidade do p equivalente a 17,5 mg de cloridrato de
amilorida anidra em 10 mL de metanol e centrifugar.
Soluo (2): dissolver 1 mg de metil 3,5-diamino-6-
cloropirazina-2-carboxilato SQR em metanol e diluir para
100 mL com o mesmo solvente.
Qualquer mancha correspondente ao metil 3,5-diamino-6-
cloropirazina-2-carboxilato obtida no cromatograma com
a Soluo (1) no mais intensa que aquela obtida com a
Soluo (2).
Limite de 4-amino-6-cloro-1,3-benzenodissulfonamida.
Proceder conforme descrito em Doseamento. Preparar a
Soluo teste como descrito a seguir.
Soluo teste: dissolver 1 mg de 4-amino-6-cloro-1,3-
benzenodissulfonamida SQR na fase mvel e diluir para
Injetar, separadamente, 20 L da Soluo teste e 20 L da
Soluo amostra, registrar os cromatogramas e medir as
reas sob os picos. A rea sob o pico relativo 4-amino-
6-cloro-1,3-benzenodissulfonamida obtido com a Soluo
com a Soluo teste. No mximo 1,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de 1,0 mL/minuto.
Tampo fosfato: dissolver 136 g de fosfato de potssio
monobsico em 800 mL de gua, ajustar o pH para 3,0 com
cido fosfrico e completar o volume para 1000 mL com
gua.
Fase mvel: mistura de gua, metanol e Tampo fosfato
(71:25:4).
cloridrato de amilorida para balo volumtrico de 50 mL.
Adicionar 15 mL de metanol e 2 mL de cido clordrico
M. Deixar em ultrassom por 10 minutos, homogeneizar e
fltrar.
Soluo padro: dissolver 20 mg de cloridrato de
amilorida SQR em metanol e diluir para 20 mL com o
mesmo solvente. Transferir 10 mL dessa soluo para
balo volumtrico de 100 mL contendo, exatamente, cerca
de 100 mg de hidroclorotiazida SQR e 20 mL de metanol.
Adicionar 4 mL de cido clordrico M, completar o volume
com gua e homogeneizar.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo padro. Os
tempos de reteno relativos so cerca de 0,7 para a
hidroclorotiazida e 1 para o cloridrato de amilorida. A
resoluo entre hidroclorotiazida e cloridrato de amilorida
no deve ser menor que 2,0. O desvio padro relativo das
que 2,0%.
6
H
8
ClN
7
O.
HCl e C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
na amostra a partir das respostas
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE AMIODARONA
Amiodaroni hydrochloridum
I
I
O
N CH
3
O
O
CH
3
CH
3
.
HCl
C
25
H
29
I
2
NO
3
.HCl; 681,77
cloridrato de amiodarona; 00700
Cloridrato de (2-butil-3-benzofuranil)-[4-[2-(dietilamino)
etoxi]-3,5-diiodofenil]-metanona (1:1)
[19774-82-4]
C
25
H
29
I
2
NO
3
.HCl, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, cristalino, branco ou
quase branco.
solvel em cloreto de metileno, solvel em metanol,
ligeiramente solvel em etanol, muito pouco solvel em
n-hexano.
a c
805
IDENTIFICAO
observados no espectro de cloridrato de amiodarona SQR,
comprimentos de onda de soluo similar de cloridrato de
amiodarona SQR.
D. Responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 5% (p/v) em metanol
pH (5.2.19). 3,2 a 3,8. Determinar em soluo preparada
como descrito a seguir. Dissolver 1,25 g da amostra em
gua aquecida a 80 C. Resfriar e completar o volume para
25 mL com gua.
Absoro de luz. A absorvncia da soluo a 0,002% (p/v)
em metanol, medida em 242 nm, est compreendida entre
1,03 e 1,05.
slica-gel GF
254
metanol e cloreto de metileno (5:10:85), como fase mvel.
solues, recentemente preparadas e mantidas ao abrigo de
luz direta, descritas a seguir.
Soluo (1): dissolver 1 g da amostra em cloreto de
metileno e completar para 10 mL com o mesmo solvente,
obtendo soluo a 100 mg/mL.
cloreto de metileno, obtendo soluo a 5 mg/mL.
Soluo (3): dissolver 25 mg de cloridrato de amiodarona
SQR em cloreto de metileno e completar para 5 mL com o
mesmo solvente, obtendo soluo a 5 mg/mL.
cloreto de metileno, obtendo soluo a 0,5 mg/mL.
cloreto de metileno, obtendo soluo a 0,25 mg/mL.
Soluo (6): dissolver 10 mg de cloridrato de (2-cloroetil)
dietilamina em 50 mL de cloreto de metileno, obtendo
soluo a 0,2 mg/mL.
mximo uma mancha mais intensa que aquela obtida
no cromatograma com a Soluo (5) (0,25%). Nebulizar
a placa com iodobismutato de potssio SR, em seguida
com perxido de hidrognio a 3% (p/v) SR e examinar
imediatamente. Qualquer mancha correspondente
ao cloridrato de (2-cloroetil)dietilamina obtida no
cromatograma com a Soluo (1) no mais intensa que
Impurezas orgnicas volteis. Proceder conforme descrito
provido de detector de ionizao de chamas; coluna de 30 m
de comprimento e 0,25 mm de dimetro interno, com fase
estacionria de 35% de difenilpolissiloxano (0,25 m de
espessura); coluna operada com a seguinte programao:
40 C por minuto, rampa de 40 C a 200 C com taxa de
aquecimento de 15 C por minuto. Manter as temperaturas
do injetor e do detector a 250 C, respectivamente; utilizar
hidrognio como gs de arraste, com presso de 85 kPa na
cabea da coluna.
Soluo (1): transferir 0,3 g da amostra e 5 mL de
dimetilsulfxido para frasco de amostragem tipo headspace
de 10 mL contendo 1 g de sulfato de sdio anidro.
Soluo (2): pesar 1 g de cloreto de metileno e diluir a
0,02% (p/v) (200 ppm) com dimetilsulfxido. Transferir
5 mL desta soluo para frasco de amostragem tipo
headspace contendo 1 g de sulfato de sdio anidro.
Soluo (3): pesar 1 g de tolueno e diluir a 0,02% (p/v)
com dimetilsulfxido. Transferir 5 mL desta soluo para
frasco de amostragem tipo headspace contendo 1 g de
sulfato de sdio anidro.
Tampar os frascos de amostragem tipo headspace com
tampa de politetrafuoretileno e lacre de alumnio. Aquecer
as amostras a 80 C por 60 minutos.
Procedimento: injetar 1 L da fase vapor de cada soluo,
registrar as reas de cada pico. O tempo de reteno do
tolueno de aproximadamente 2,5 minutos; a resoluo
entre os picos relativos ao cloreto de metileno e ao tolueno
superior a 2; o desvio padro relativo das reas de
replicatas dos picos registrados, para ambos solventes,
inferior a 15%. As reas relativas ao cloreto de metileno e
tolueno na Soluo (1) no so superiores s reas para os
padres de cloreto de metileno da Soluo (2) e tolueno da
Soluo (3).
Iodetos. Preparar, simultaneamente, as solues descritas
a seguir.
c
Soluo (1): adicionar 1,5 g da amostra a 40 mL de gua
aquecida a 80 C e agitar at completa dissoluo. Esfriar
temperatura ambiente e diluir para 50 mL com gua.
Soluo (2): a 15 mL da Soluo (1), adicionar 1 mL de
cido clordrico 0,1 M, 1 mL de iodato de potssio 0,05 M e
diluir para 25 mL com gua. Deixar em repouso, ao abrigo
da luz, por 4 horas.
Soluo (3): a 15 mL da Soluo (1), adicionar 1 mL
de cido clordrico 0,1 M, 1 mL de iodeto de potssio a
0,00882% (p/v), 1 mL de iodato de potssio 0,05 M e diluir
para 25 mL com gua. Deixar em repouso, ao abrigo da
luz, por 4 horas.
Medir as absorvncias da Soluo (2) e da Soluo (3) em
420 nm (V.2.14), utilizando, para o ajuste do zero, mistura
de 15 mL da Soluo (1) e 1 mL de cido clordrico 0,1 M,
diluda para 25 mL com gua. A absorvncia da Soluo (2)
no maior que a metade da absorvncia da Soluo(3).
No mximo 0,015% (150 ppm).
mximo 0,002% (20 ppm).
amostra. Dessecar, sob pentxido de fsforo, em estufa a
50 C, sob presso no superior a 0,3 kPa, por 4 horas. No
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Dissolver, exatamente, cerca de
0,5 g da amostra em 40 mL de cido actico glacial.
Adicionar 10 mL de acetato mercrico a 5% (p/v) em
cido actico glacial. Titular com cido perclrico 0,1 M
SV, determinando o ponto fnal potenciometricamente.
mg de C
25
H
29
I
2
NO
3
.HCl.
B. Proceder conforme descrito em Espectrofotometria de
sucessivamente, em metanol, at concentrao de 0,0008%
(p/v). Preparar soluo de cloridrato de amiodarona SQR
na mesma concentrao utilizando o mesmo solvente.
Medir as absorvncias das solues resultantes em 242 nm,
utilizando metanol para ajuste do zero. Calcular o teor de
C
25
H
29
I
2
NO
3
.HCl na amostra a partir das leituras obtidas.
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz, em
temperatura no superior a 30 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiarrtmico e antianginoso.
CLORIDRATO DE AMITRIPTILINA
Amitriptylini hydrochloridum
N
CH
3
CH
3
.
HCl
C
20
H
23
N.HCl; 313,86
cloridrato de amitriptilina; 00712
Cloridrato de 3-(10,11-diidro-5H-dibenzo[a,d]ciclohepten-
5-ilideno)-N,N-dimetil-1-propanamina (1:1)
[549-18-8]
C
20
H
23
N.HCl, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou quase branco ou
cristais incolores.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, cloreto de
metileno e etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 195 C a 199 C.
IDENTIFICAO
intensidades relativas daqueles observados no espectro
de cloridrato de amitriptilina SQR, preparado de maneira
idntica.
de absoro no ultravioleta. O espectro de absoro no
ultravioleta (5.2.14), na faixa de 200 nm a 400 nm, de
soluo a 0,001% (p/v) em metanol, exibe mximo de
absoro em 239 nm, idntico ao observado no espectro de
soluo similar de cloridrato de amitriptilina SQR.
a c
807
C. Responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
slica-gel GF
254
metanol e hidrxido de amnio (135:15:1), como fase
Soluo (1): soluo da amostra a 40 mg/mL em metanol.
Soluo (2): soluo de cloridrato de amitriptilina SQR a
0,8 mg/mL em metanol.
Soluo (3): diluir a Soluo (2) em metanol de modo a
obter soluo a 80 g/mL.
Soluo (7): diluir a Soluo (2) em metanol at
concentrao de 40 g/mL.
intensa que aquela obtida com a Soluo (4) (0,5%). A soma
das intensidades de todas as manchas secundrias obtidas
com a Soluo (1) corresponde a, no mximo, aquela obtida
com a Soluo (3) (1%). Desconsiderar qualquer mancha
obtida no cromatograma com a Soluo (1) que seja menos
intensa que a mancha principal obtida com a Soluo (7)
(0,1%). Desconsiderar quaisquer manchas observadas nos
pontos de aplicao das solues.
descrito em Cromatografa a gs (5.2.17.5), utilizando
cromatgrafo provido de detector de ionizao de chama;
coluna de slica fundida, de 30 m de comprimento e 0,53
mm de dimetro interno, preenchida com fenil (5%) metil
(95%) polisiloxano, e pr-coluna de slica de 5 m de
comprimento e 0,53 mm de dimetro interno, desativada
com fenilmetilsiloxano. Manter a coluna a 35 C por 5
minutos, aumentar para 175 C a 8 C por minuto, em
seguida para 260 C a 35 C por minuto, e manter por pelo
menos 16 minutos. Manter as temperaturas do injetor e do
detector a 70 C e 260 C, respectivamente; utilizar hlio a
velocidade linear de 35 cm/s como gs de arraste.
Soluo amostra: dissolver, em gua livre de material
orgnico, quantidade exatamente pesada da amostra, de
modo a obter soluo a 20 mg/mL.
Soluo padro: preparar soluo, em gua livre de
material orgnico, contendo em cada mililitro, 12 g de
cloreto de metileno, 1,2 g de clorofrmio, 7,6 g de
dioxana e 1,6 g de tricloroetileno. Preparar no dia do uso.
entre quaisquer dois componentes no deve ser menor que
padro e da Soluo amostra. Registrar os cromatogramas
e medir as reas sob os picos. A identidade e a resposta de
cada pico presente no cromatograma da Soluo amostra
podem ser relacionadas com a identidade e a resposta das
impurezas orgnicas volteis presentes no cromatograma
da Soluo padro. A quantidade de cada impureza
orgnica voltil presente no cromatograma da Soluo
amostra no excede o limite prescrito na tabela a seguir.
Impureza orgnica voltil Limite (ppm)
Clorofrmio 60
Dioxana 380
Cloreto de metileno 600
Tricloroetileno 80
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo III. No mximo
0,001% (10 ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). Determinar em 1 g
da amostra. Dessecar em estufa a 60 C, sob presso
reduzida, at peso constante. No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver 1 g da amostra em 30 mL de
cido actico glacial, aquecendo levemente, se necessrio,
e resfriar. Adicionar 10 mL de acetato mercrico SR.
Titular com cido perclrico 0,1 M SV, utilizando cloreto
de metilrosanilnio SI como indicador, at colorao verde.
mg de C
20
H
23
N.HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antidepressivo.
c
CPSULAS
20
H
23
N.HCl.
IDENTIFICAO
de 200 nm a 400 nm, da Soluo amostra obtida no mtodo
A. de Doseamento, exibe mximos e mnimos idnticos
aos observados no espectro da Soluo padro.
D. Pesar as cpsulas, remover o contedo e pes-las
novamente. Agitar quantidade do p equivalente a 10 mg
de cloridrato de amitriptilina com 5 mL de gua. Filtrar.
Responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
E. Pesar as cpsulas, remover o contedo e pes-las
novamente. Agitar quantidade do p equivalente a 0,1 g
de cloridrato de amitriptilina com 10 mL de clorofrmio.
Filtrar e reduzir o volume de fltrado por evaporao.
Precipitar adicionando ter etlico at produzir turbidez.
Deixar em repouso e fltrar. Dissolver 50 mg do precipitado
em 3 mL de gua. Adicionar 50 mL de quinidrona a 2,5%
(p/v) em metanol. No se desenvolve colorao vermelha
por 15 minutos.
CARACTERSTICAS
Teste de desintegrao (5.1.4.1). Cumpre o teste. No
mximo 15 minutos.
cada cpsula para balo volumtrico de 50 mL e acrescentar
35 mL de cido clordrico 0,1 M. Deixar em ultrassom por
20 minutos, agitando ocasionalmente. Homogeneizar e
fltrar. Transferir 5 mL do fltrado para balo volumtrico
de 25 mL e completar o volume com cido clordrico
0,1 M. Transferir 5 mL da soluo resultante para balo
volumtrico de 50 mL e completar o volume com o mesmo
solvente, obtendo soluo a 0,001% (p/v). Prosseguir
conforme descrito no mtodo A. de Doseamento a partir
de Preparar soluo padro na mesma concentrao....
Tempo: 45 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, em cido clordrico 0,1
M, at concentrao adequada. Medir as absorvncias em
20
H
23
N.HCl dissolvida
de cloridrato de amitriptilina SQR, na concentrao de
0,001% (p/v), preparada no mesmo solvente.
declarada de C
20
H
23
N.HCl se dissolvem em 45 minutos.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de dietilamina,
acetato de etila e cicloexano (3:15:85), como fase mvel.
las novamente. Transferir quantidade do p equivalente a
20 mg de cloridrato de amitriptilina para balo volumtrico
de 5 mL e completar o volume com etanol absoluto. Agitar
por 10 minutos. Homogeneizar e fltrar.
Soluo (2): transferir 20 mg de cloridrato de amitriptilina
SQR para balo volumtrico de 5 mL e completar o volume
com etanol absoluto, obtendo soluo a 4 mg/mL.
volumtrico de 100 mL e completar o volume com etanol
absoluto, obtendo soluo a 40 g/mL.
absoluto, obtendo soluo a 10 g/mL.
secar ao ar. Examinar sobre luz ultravioleta (254 nm).
mais intensa que as obtidas com as Solues (3) ou (4)
(1% e 0,25%). Nebulizar a placa com iodeto de potssio
e subnitrato de bismuto SR. Qualquer mancha obtida no
cromatograma com a Soluo (1), diferente da principal e
corada pelo revelador, no mais intensa que aquela obtida
com a soluo (3) (1%).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
a c
809
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar 20 cpsulas,
remover o contedo e pes-las novamente. Transferir
quantidade do p equivalente a 10 mg de cloridrato de
amitriptilina para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar
75 mL de cido clordrico 0,1 M, agitar mecanicamente
por 15 minutos e deixar em ultrassom por 15 minutos.
Completar o volume com o mesmo solvente. Filtrar.
Transferir 5 mL do fltrado para balo volumtrico de
50 mL e completar o volume com o mesmo solvente,
obtendo soluo a 0,001% (p/v). Preparar soluo padro
Determinar as absorvncias das solues resultantes em
20
H
23
N.HCl nas cpsulas,
B. Por Cromatografa a lquido de alta efcincia
quimicamente ligada a grupo octadecilsilano (5 m),
2 mL/minuto.
Tampo fosfato-trietilamina: transferir 11,04 g de fosfato
de sdio monobsico e 3 mL de trietilamina para balo
volumtrico de 1000 mL, dissolver em 900 mL de gua.
Ajustar o pH para 2,5 0,5 com cido fosfrico e completar
o volume com gua.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato-trietilamina e
e pes-las novamente. Transferir quantidade do p
equivalente a 50 mg de cloridrato de amitriptilina para
balo volumtrico de 50 mL, adicionar 35 mL de Fase
mvel, agitar mecanicamente por 15 minutos e deixar em
mesmo solvente, homogeneizar e fltrar. Transferir 10 mL
do fltrado para balo volumtrico de 50 mL e completar o
Soluo padro: transferir 50 mg de cloridrato de
amitriptilina SQR para balo volumtrico de 50 mL, diluir
em 35 mL de Fase mvel e completar o volume com o
mesmo solvente. Transferir 10 mL da soluo para balo
volumtrico de 50 mL e completar o volume com o
mesmo solvente, de modo a obter soluo de cloridrato de
amitriptilina a 0,2 mg/mL.
tericos. O fator de cauda no superior a 2,5. O desvio
no deve ser maior que 2,0%.
20
H
23
N.HCl
nas cpsulas a partir das respostas obtidas com a Soluo
ROTULAGEM
COMPRIMIDOS
20
H
23
N.HCl. Os comprimidos
IDENTIFICAO
aos observados no espectro da soluo padro.
D. Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade
do p equivalente a 10 mg de cloridrato de amitriptilina
com 5 mL de gua. Filtrar. Responde s reaes do on
cloreto (5.3.1.1).
E. Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade
do p equivalente a 0,1 g de cloridrato de amitriptilina
com 10 mL de clorofrmio. Filtrar e reduzir o volume de
fltrado por evaporao. Precipitar adicionando ter etlico
at produzir turbidez. Deixar em repouso e fltrar. Dissolver
50 mg do precipitado em 3 mL de gua. Adicionar 50 mL
de quinidrona a 2,5% (p/v) em metanol. No desenvolve-se
colorao vermelha por 15 minutos.
CARACTERSTICAS
mximo 15 minutos.
acrescentar 35 mL de cido clordrico 0,1 M. Deixar em
ultrassom por 20 minutos, agitando ocasionalmente.
c
0,1 M. Transferir 5 mL da soluo resultante para balo
solvente, obtendo soluo a 0,001% (p/v). Prosseguir
conforme descrito no mtodo A. de Doseamento a partir de
Preparar soluo padro na mesma concentrao....
Tempo: 45 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, em cido clordrico 0,1
20
H
23
N.HCl dissolvida
de cloridrato de amitriptilina SQR, na concentrao de
declarada de C
20
H
23
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de dietilamina,
acetato de etila e cicloexano (3:15:85), como fase mvel.
Aplicar, separadamente, placa, 20 L das solues,
amitriptilina para balo volumtrico de 5 mL e completar
o volume com etanol absoluto. Agitar por 10 minutos.
Soluo (2): transferir 20 mg de cloridrato de amitriptilina
SQR para balo volumtrico de 5 mL e completar o volume
com etanol absoluto, obtendo soluo a 4 mg/mL.
absoluto, obtendo soluo a 40 mg/mL.
absoluto, obtendo soluo a 10 mg/mL.
secar ao ar. Examinar sobre luz ultravioleta (254 nm).
mais intensa que as obtidas com as Solues (3) ou (4)
(1% e 0,25%). Nebulizar a placa com iodeto de potssio
e subnitrato de bismuto SR. Qualquer mancha obtida no
cromatograma com a Soluo (1), diferente da principal e
corada pelo revelador, no mais intensa que aquela obtida
com a Soluo (3) (1%).
DOSEAMENTO
comprimidos. Transferir quantidade do p equivalente a 10
mg de cloridrato de amitriptilina para balo volumtrico de
100 mL. Adicionar 75 mL de cido clordrico 0,1 M, agitar
mecanicamente por 15 minutos e deixar em ultrassom por
Filtrar. Transferir 5 mL do fltrado para balo volumtrico
de 50 mL e completar o volume com o mesmo solvente,
obtendo soluo a 0,001% (p/v). Preparar soluo padro
Determinar as absorvncias das solues resultantes em 239
nm, utilizando cido clordrico 0,1 M para ajuste do zero.
20
H
23
N.HCl nos comprimidos, a
B. Por Cromatografa a lquido de alta efcincia (5.2.17.4).
da monografa de Cloridrato de amitriptilina cpsulas.
cloridrato de amitriptilina para balo volumtrico
de 50 mL, adicionar 35 mL de Fase mvel, agitar
mecanicamente por 15 minutos e deixar em ultrassom por
Fase mvel. Homogeneizar.
20
H
23
N.
HCl nos comprimidos a partir das respostas obtidas com a
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE BIPERIDENO
COMPRIMIDOS
Comprimidos de cloridrato de biperideno contm o
equivalente a, no mnimo, 93,0% e, no mximo, 107,0%
da quantidade declarada de C
21
H
29
NO.HCl.
a c
811
IDENTIFICAO
camada delgada (5.2.17.1) utilizando slica-gel GF
254
,
como suporte, e mistura de lcool isoproplico-hidrxido
de amnio a 25% (v/v) (95:5), como fase mvel. Aplicar
separadamente, placa, 20 L de cada uma das solues
descritas a seguir.
Soluo (1): pulverizar os comprimidos. Pesar do p o
equivalente a 10 mg de cloridrato de biperideno, adicionar
5 mL de cloreto de metileno e agitar. Filtrar e lavar o
resduo com 5 mL de cloreto de metileno. Evaporar o
fltrado. Dissolver o resduo com 1 mL de metanol.
Soluo (2): soluo a 1% (p/v) de cloridrato de biperideno
SQR em metanol.
secar ao ar e examinar sob luz ultravioleta (254 nm). Expor
a placa por 10 minutos a vapores de iodo em cuba fechada,
previamente saturada, tendo ao fundo cristais de iodo. A
B. Pesar e pulverizar os comprimidos. Utilizar quantidade
do p equivalente a 10 mg de cloridrato de biperideno,
adicionar 10 mL de gua e aquecer por 15 minutos. Filtrar.
O fltrado responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
de cloridrato de biperideno SQR em metanol e diluir com
o mesmo solvente de modo a obter concentrao de cerca
de 1,0 mg/mL. Diluir sucessivamente com cido clordrico
0,01 M de modo a obter concentrao de 4 g/mL.
Soluo amostra: aps realizao do teste, utilizar alquotas
do meio de dissoluo.
dissoluo e proceder conforme descrito no mtodo de
Doseamento. Injetar, separadamente, 50 L da Soluo
C
21
H
29
NO.HCl dissolvida no meio a partir das respostas
declarada de C
21
H
29
NO.HCl se dissolvem em 45 minutos.
DOSEAMENTO
mantida 25C; fuxo da Fase mvel de 1,2 mL/min.
Tampo fosfato de sdio pH 2,5: dissolver 6,9 g de fosfato
de sdio monobsico em 500 mL de gua. Adicionar 1,011
g de heptanossulfonato de sdio e completar o volume para
1000 mL com o mesmo solvente. Se necessrio, ajustar o
pH para 2,5 com cido fosfrico.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato de sdio pH 2,5 e
metanol (50:50).
cloridrato de biperideno para balo volumtrico de 20 mL.
Adicionar 10 mL de metanol e deixar em ultrassom por 20
Transferir 2 mL da soluo anterior para balo volumtrico
Soluo padro: pesar, exatamente, o equivalente a 10
mg de cloridrato de biperideno SQR, transferir para balo
volumtrico de 10 mL. Completar o volume com metanol e
homogeneizar. Transferir 0,2 mL desta soluo para balo
mvel. Homogeneizar.
21
H
29
NO.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE BUPIVACANA E
GLICOSE SOLUO INJETVEL
18
H
28
N
2
O.HCl e C
6
H
12
O
6
.
c
A soluo injetvel pode ser preparada em gua para
injetveis ou em outro solvente adequado.
IDENTIFICAO
254
,
como suporte, e mistura de 1-butanol, gua, etanol e
cido actico glacial (6:2:1:1), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa 10 L da Soluo (1), da Soluo
(2) e da Soluo (4), e 1 L da amostra e da Soluo (3),
recentemente preparadas, como segue.
Soluo (1): soluo injetvel de cloridrato de bupivacana
e glicose.
Soluo (2): soluo de cloridrato de bupivacana SQR
em gua, na concentrao correspondente da soluo
injetvel.
Soluo (3): soluo de glicose SQR em gua na
concentrao correspondente da soluo injetvel.
Soluo (4): diluir soluo de cloridrato de bupivacana
SQR em Soluo (3), de modo a obter concentrao
correspondente da soluo injetvel.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa e secar ao
ar quente circulante. Examinar a placa sob luz ultravioleta
(254 nm). A posio da mancha principal obtida com a
Soluo (1) corresponde quela das manchas da Soluo
(2) e da Soluo (4). Nebulizar com reagente naftalenodiol,
aquecer a 90 C por 5 minutos e examinar a placa. A posio
da mancha principal marrom, obtida com a amostra,
corresponde quela obtida com a Soluo (3). Esfriar a
placa, nebulizar com reagente iodoplatinado e examinar
a placa. A bupivacana visualizada como mancha azul-
violeta em fundo laranja e a mancha correspondente
glicose desaparece gradativamente. A posio da mancha
de bupivacana obtida com a Soluo (1) corresponde
quelas obtidas com a Soluo (2) e com a Soluo (4).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 4,0 a 6,5.
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). No mximo 2,5 UE/mL.
DOSEAMENTO
Cloridrato de bupivacana. Proceder conforme descrito
ligada a grupo octadecilsilano (5 m), mantida
temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel de 2,0 mL/min.
Tampo fosfato pH 6,8: dissolver 1,94 g de fosfato de
potssio monobsico e 2,48 g de fosfato de potssio
dibsico em 1000 mL de gua. Ajustar o pH, se necessrio,
para 6,8 0,05 com hidrxido de potssio M ou cido
fosfrico M.
Fase mvel: mistura de acetonitrila e Tampo fosfato pH
6,8 (65:35). Ajustar o pH, se necessrio, para 7,7 0,02
com cido fosfrico M.
equivalente a 25 mg de cloridrato de bupivacana para
metanol e homogeneizar.
cloridrato de bupivacana SQR e transferir para balo
volumtrico de 50 mL. Dissolver em 5 mL de gua, com
auxilio de banho de ultrassom, se necessrio. Completar o
volume com metanol e homogeneizar.
no maior que 2,0%.
18
H
28
N
2
O.
HCl na amostra a partir das respostas obtidas com a Soluo
Glicose. Medir o ngulo de rotao da amostra, em tubo
adequado (5.2.8), utilizando gua destilada para o ajuste do
6
H
12
O
6
, em cada mL da amostra,
utilizando a frmula:
9,452A
em que a leitura mdia obtida e A a diviso de 200
pelo comprimento do tubo, em mm.
Em recipientes de dose nica, preferencialmente em vidro
tipo I, protegidos da luz.
ROTULAGEM
a c
813
CLORIDRATO DE CICLOBENZAPRINA
Cyclobenzaprini hydrochloridum
N
CH
3
CH
3
.
HCl
C
20
H
21
N.HCl; 311,85
cloridrato de ciclobenzaprina; 02013
Cloridrato de 3-(5H-dibenzo[a,d]ciclohepten-5-ilideno)-
N,N-dimetil-1-propanamina (1:1)
[6202-23-9]
Contm, no mnimo, 99,0% e, no mximo 101,0% de,
C
20
H
21
N.HCl em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, etanol e
metanol, ligeiramente solvel em lcool isoproplico,
muito pouco solvel em clorofrmio, insolvel em
hidrocarbonetos.
Faixa de fuso (5.2.2): 215 C a 219 C, sendo que a faixa
entre o incio e o fnal da fuso no deve exceder 2 C.
IDENTIFICAO
O teste de identifcao B. pode ser omitido se forem
amostra, dessecada, e dispersa em brometo de potssio,
apresenta mximo de absoro somente nos mesmos
comprimentos de onda e com as mesmas intensidades
relativas daqueles observados no espectro de cloridrato de
ciclobenzaprina SQR, preparado de maneira idntica.
de 250 nm a 350 nm, de soluo da amostra a 0,0015%
(p/v) preparada em metanol, exibe mximo de absoro em
290 nm, idntico ao observado no espectro de cloridrato de
ciclobenzaprina SQR, preparado de maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de acetona,
tolueno e hidrxido de amnio (75:25:1) como fase mvel.
solues recentemente preparadas descritas a seguir.
Soluo (2): soluo a 20 mg/mL de cloridrato de
ciclobenzaprina SQR em metanol.
Soluo (3): diluir 0,1 mL da Soluo (1) em 20 mL em
metanol.
secar ao ar por 15 minutos e observar sob luz ultravioleta
(254 nm). A mancha principal da Soluo (1) corresponde
(2), e qualquer outra mancha obtida a partir da Soluo (1)
no excede em tamanho ou intensidade a mancha principal
obtida a partir da Soluo (3)(0,5%).
Metais Pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo III. Determinar
em 1 g da amostra. No mximo 0,001% (10 ppm).
amostra em estufa a 105 C at peso constante. No mximo
1,0%.
Cinzas Sulfatadas (5.2.10). Determinar em 1 g de amostra.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
amostra, dessecada. Dissolver em 80 mL de cido actico
glacial e 15 mL de acetato de mercrio SR. Titular com
20
H
21
N.HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Relaxante muscular.
CLORIDRATO DE CICLOBENZAPRINA
COMPRIMIDOS
20
H
21
N.HCl.
c
IDENTIFICAO
do p equivalente a 50 mg de cloridrato de ciclobenzaprina,
adicionar 20 mL de cloreto de metileno. Filtrar e evaporar
cerca de 5 mL do fltrado. Transferir para tubo de centrfuga
com 2 mL de ter etlico. Evaporar por corrente de ar e
agitar at ocorrer cristalizao. Lavar os cristais com
pores de ter etlico e secar temperatura ambiente. O
no espectro de cloridrato de ciclobenzaprina SQR.
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
dissoluo, fltrar e, se necessrio, diluir em cido clordrico
0,1 M at concentrao adequada. Medir as absorvncias
das solues em 290 nm (5.2.14), utilizando o mesmo
solvente para ajuste do zero. Calcular a quantidade de
C
20
H
21
N.HCl dissolvida no meio, comparando as leituras
obtidas com a da soluo de cloridrato de ciclobenzaprina
SQR na concentrao de 0,00001% (p/v), preparada em
declarada de C
20
H
21
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila, metanol e cido
metanossulfnico (48:28:24:0,2). Ajustar o pH para 3,6
com dietilamina.
cloridrato de ciclobenzaprina para balo volumtrico
de 200 mL e adicionar 150 mL de cido clordrico 0,1
M. Agitar mecanicamente por 30 minutos. Completar o
volume com o mesmo solvente, obtendo soluo a 50 g/
mL. Homogeneizar e fltrar.
de cloridrato de ciclobenzaprina SQR em cido clordrico
0,1 M, para obter soluo a 50 g/mL.
Injetar replicatas de 20 uL da Soluo padro. A efcincia
da coluna no menor que 1000 pratos tericos/metro. O
registrados no maior que 2,0%. O fator de cauda do pico
principal no maior que 2.
C
20
H
21
N.HCl nos comprimidos a partir das respostas
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE CIPROfLOXACINO
COMPRIMIDOS
Comprimidos de cloridrato de ciprofoxacino contm o
equivalente a, no mnimo, 90,0% e, no mximo, 110,0% da
17
H
18
FN
3
O
3
.
IDENTIFICAO
254
,
para balo volumtrico de 100 mL, quantidade de p
equivalente a 0,15 g de ciprofoxacino. Adicionar 70 mL de
gua, agitar por cerca de 20 minutos e completar o volume
a c
815
com o mesmo solvente. Centrifugar e utilizar poro
lmpida do sobrenadante.
Soluo (2): soluo aquosa de cloridrato de ciprofoxacino
SQR contendo o equivalente a 0,15% (p/v) de
ciprofoxacino.
secar ao ar por 15 minutos. Examinar sob luz ultravioleta
(254 nm e 336 nm). A mancha principal obtida com a
Soluo (1) corresponde em posio, cor e intensidade
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
de dissoluo, fltrar imediatamente e diluir em gua
solues em 272 nm (5.2.14), utilizando gua para ajuste do
17
H
18
FN
3
O
3
dissolvida no
cloridrato de ciprofoxacino SQR, contendo o equivalente
a 0,0004% (p/v) de ciprofoxacino, preparada no mesmo
solvente.
Tolerncia: no menos que 80 % (Q) da quantidade
declarada de C
17
H
18
FN
3
O
3
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
comprimidos. Transferir para balo volumtrico de 500 mL,
quantidade do p equivalente a 1,25 g de ciprofoxacino,
com auxlio de 400 mL de gua. Agitar por 30 minutos,
completar o volume e fltrar. Diluir, sucessivamente, at
a concentrao de 0,0004% (p/v), utilizando gua como
solvente. Preparar soluo de cloridrato de ciprofoxacino
SQR em gua contendo a mesma concentrao de
ciprofoxacino. Medir as absorvncias das solues
resultantes em 272 nm, utilizando gua para ajuste do zero.
Calcular o teor de C
17
H
18
FN
3
O
3
nos comprimidos, a partir
um a 10 um), mantida a 30 C; o fuxo da Fase mvel de
1,5 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de cido fosfrico 0,025 M
(previamente ajustar o pH com trietilamina para 3,0 0,1)
e acetonitrila (85:15).
Soluo amostra: transferir cinco comprimidos para balo
de 500 mL. Adicionar cerca de 400 mL de gua e deixar
em ultrassom por aproximadamente 20 minutos, completar
o volume com gua e agitar. Diluir, sucessivamente, at
concentrao de 0,25 mg/mL de ciprofoxacino, utilizando
gua como solvente e fltrar.
Soluo padro: pesar quantidade de cloridrato de
ciprofoxacino SQR equivalente a 25 mg de ciprofoxacino,
volume com gua. Diluir sucessivamente em gua de modo
a obter soluo a 0,25 mg/mL de ciprofoxacino.
C
17
H
18
FN
3
O
3
nos comprimidos a partir das respostas
12228.
Soluo amostra: transferir cinco comprimidos para balo
de 500 mL. Adicionar cerca de 400 mL de gua e deixar em
ultrassom por aproximadamente 20 minutos, completar o
volume com gua e agitar. Diluir, sucessivamente em gua,
at as concentraes de 4 ug/mL, 8 ug/mL e 16 ug/mL de
ciprofoxacino, utilizando Tampo fosfato de potssio 0,1
ciprofoxacino SQR, equivalente a 20 mg de ciprofoxacino,
c
volume com gua. Diluir, sucessivamente em gua, at
as concentraes de 4 ug/mL, 8 ug/mL e 16 ug/mL de
Procedimento: adicionar 20 mL de meio de cultura
nmero 11 em uma placa, esperar solidifcar, juntar 5 mL
de inculo a 1% e proceder conforme descrito em Ensaio
Calcular a potncia da amostra, em g de ciprofoxacino por
protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE CIPROfLOXACINO
SOLUO OfTLMICA
quantidade declarada de ciprofoxacino (C
17
H
18
FN
3
O
3
).
IDENTIFICAO
254
,
Soluo (1): diluir volume da amostra em gua, de modo a
obter soluo de ciprofoxacino a 0,3% (p/v).
Soluo (2): soluo de cloridrato de ciprofoxacino SQR
a 0,3% (p/v) em gua.
secar ao ar por 15 minutos. Examinar sob luz ultravioleta
(254 nm e 336 nm). A mancha principal obtida com a
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,5 a 5,5.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre com o teste. Utilizar o
Mtodo de fltrao por membrana.
DOSEAMENTO
um a 10 um), mantida a 30 C; fuxo da Fase mvel de 1,5
mL/minuto.
Tampo fosfato de tetrabutilamnio: preparar soluo de
fosfato de tetrabutilamnio 0,005 M, com pH ajustado
previamente com cido fosfrico para 2,0 0,1.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato de tetrabutilamnio
e metanol (75:25).
Soluo amostra: transferir volume da soluo oftlmica
equivalente a 6 mg de ciprofoxacino para balo volumtrico
de 50 mL. Completar o volume com gua e agitar.
de cloridrato de ciprofoxacino SQR em gua e diluir
adequadamente de modo a obter soluo a 0,12 mg/mL de
ciprofoxacino.
ciprofoxacino (C
17
H
18
FN
3
O
3
) na soluo oftlmica a partir
amostra.
de antibiticos (5.5.3.3), pelo mtodo de difuso em gar,
12228.
Soluo amostra: transferir volume da soluo oftlmica
equivalente a 40 mg de ciprofoxacino para balo
volumtrico de 100 mL, completar o volume com gua e
agitar. Diluir, sucessivamente, at as concentraes de 2
ug/mL, 4 ug/mL e 8 ug/mL de ciprofoxacino, utilizando
2) como diluente.
ciprofoxacino equivalente a 20 mg de ciprofoxacino,
transferir para balo volumtrico de 50 mL e completar
o volume com gua. Diluir, sucessivamente, at as
concentraes de 2 ug/mL, 4 ug/mL e 8 ug/mL de
a c
817
Procedimento: adicionar 20 mL de meio de cultura
nmero 11 em uma placa, esperar solidifcar, juntar 5 mL
de inculo a 1% e proceder conforme descrito em Ensaio
Calcular a potncia da soluo oftlmica, em g de
ciprofoxacino por miligrama, a partir da potncia do
Soluo amostra.
protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE CLINDAMICINA
CPSULAS
Contm cloridrato de clindamicina equivalente a, no
mnimo, 90,0% e, no mximo, 110% da quantidade
declarada de clindamicina (C
18
H
33
ClN
2
O
5
S).
IDENTIFICAO
da Soluo amostra, obtida no mtodo no Doseamento,
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
de 1,5 mL/minuto.
Tampo fosfato: dissolver 6,8 g de fosfato de potssio
monobsico em 950 mL de gua, ajustar o pH em 7,5 com
hidrxido de potssio a 25% (p/v) e diluir para 1000 mL
com gua.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato e acetonitrila
(55:45). Fazer ajustes, se necessrio.
Nota: a reduo da proporo de acetonitrila na Fase
mvel aumenta a resoluo entre os picos relativos
7-epiclindamicina e clindamicina.
Soluo (1): pesar as cpsulas, remover o contedo e
pes-las novamente. Transferir, exatamente, quantidade
do p equivalente a 50 mg de clindamicina para balo
mvel. Agitar por 15 minutos. Homogeneizar e fltrar.
Soluo (2): soluo de cloridrato de clindamicina SQR a
1 mg/mL em Fase mvel.
Fase mvel.
Injetar 20 L da Soluo (2) e registrar o cromatograma
por, no mnimo, duas vezes o tempo de reteno do pico
principal. Os tempos de reteno relativos so cerca de
0,4 para lincomicina, 0,65 para clindamicina B, 0,8 para
7-epiclindamicina e 1,0 para clindamicina. A resoluo entre
os picos relativos clindamicina B e 7-epiclindamicina
no inferior a 2,4. A resoluo entre os picos relativos
7-epiclindamicina e clindamicina no inferior a 3,0.
(1) e (3), registrar os cromatogramas por, no mnimo, duas
vezes do tempo de reteno do pico principal e medir as
reas sob os picos. A rea de qualquer pico secundrio
correspondente clindamicina B no cromatograma obtido
com a Soluo (1) no maior que a rea sob o pico principal
obtido com a Soluo (3) (2,0%). A rea de qualquer
pico secundrio correspondente 7-epiclindamicina no
cromatograma obtido com a Soluo (1) no maior
que duas vezes a rea sob o pico principal obtido com a
Soluo (3) (4,0%). A soma das reas de todos os picos
secundrios obtidos no cromatograma com a Soluo (1),
exceto o pico principal, no maior que trs vezes a rea
sob o pico principal obtido com a Soluo (3) (6,0%). No
considerar picos relativos ao solvente ou com rea inferior
a 0,025 vezes a rea sob o pico principal obtido com a
Soluo (3) (0,05%).
gua (5.2.20.1). No mximo 7,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
monobsico em 950 mL de gua, ajustar o pH em 7,5 com
c
hidrxido de potssio a 25% (p/v) e diluir para 1000 mL
com gua.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato e acetonitrila
(55:45). Fazer ajustes, se necessrio.
de cloridrato de clindamicina SQR em Fase mvel de
Soluo amostra: pesar 20 cpsulas, remover o
contedo e pes-las novamente. Transferir quantidade
do p equivalente a 50 mg de clindamicina para balo
volumtrico de 50 mL e completar com Fase mvel. Agitar
por 15 minutos. Homogeneizar e fltrar.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo padro e registrar
os picos por, no mnimo, duas vezes o tempo de reteno
do pico principal. A resoluo entre os picos relativos
clindamicina B e 7-epiclindamicina no inferior a 2,4.
A resoluo entre os picos relativos 7-epiclindamicina e
clindamicina no inferior a 3,0. O desvio padro relativo
das reas de replicatas dos picos relativos clindamicina
Procedimento: injetar, separadamente, 20 L das
Solues padro e amostra, registrar os cromatogramas
por, no mnimo, duas vezes o tempo de reteno do pico
principal e medir as reas sob os picos. Calcular o teor de
C
18
H
33
ClN
2
O
5
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE DIfENIDRAMINA
Diphenhydramini hydrochloridum
O
N
CH
3
CH
3
.
HCl
C
17
H
21
NO.HCl; 291,82
cloridrato de difenidramina; 02979
Cloridrato de 2-difenilmetoxi-N,N-dimetiletanamina (1:1)
[147-24-0]
C
17
H
21
NO.HCl, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
branco, inodoro.
clorofrmio, praticamente insolvel em ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 167 C a 172 C.
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao B. e C. podero ser omitidos se
forem realizados os testes A. e D. Os testes de identifcao
A. e D. podero ser omitido se forem realizados os testes
B. e C.
amostra dessecada e dispersa em brometo de potssio,
apresenta mximos de absoro somente nos mesmos
difenidramina SQR, preparado de maneira idntica.
de 230 nm a 350 nm, da soluo com a amostra a 0,05%
(p/v) em etanol, exibe mximo em 253 nm.
C. Dissolver 0,05 g da amostra em 100 mL de gua. Em 0,05
mL da soluo anterior, adicionar 2 mL de cido sulfrico.
Desenvolve-se colorao amarela que passa para vermelha
pela adio de 0,5 mL de cido ntrico. Adicionar 15 mL
de gua, esfriar, adicionar 5 mL de clorofrmio e agitar.
Desenvolve-se colorao violeta na camada clorofrmica.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo aquosa a 0,2% (p/v), e uma
soluo cinco vezes mais diluda, so incolores (5.2.12).
A soluo aquosa a 0,2% (p/v) no mais corada que a
Soluo padro de cor SC G (5.2.12).
5% (p/v).
Acidez ou alcalinidade. Dissolver 2,5 g da amostra em 50
mL de gua. No mximo 0,25 mL de cido clordrico 0,01
M gasto para neutralizar 10 mL da amostra, utilizando
vermelho de metila SI como indicador. No mximo 0,5 mL
de hidrxido de sdio 0,01 M so necessrios para mudar a
cor da soluo de rosa para amarelo.
slica-gel H, como suporte, e mistura de dietilamina,
metanol e clorofrmio (1:20:80), como fase mvel. Ativar
a placa a 105
o
C, por 1 hora. Aplicar, separadamente,
placa, 5 L de cada uma das solues, descritas a seguir.
Soluo (1): soluo da amostra a 2% (p/v), em metanol
a c
819
Soluo (2): soluo da amostra a 0,02% (p/v), em metanol.
corrente de ar e nebulizar com cido sulfrico. Aquecer a
120
o
C, por 10 minutos, at o aparecimento das manchas.
Nenhuma mancha obtida com a Soluo (1), com exceo
da mancha principal, mais intensa que quela obtida com
a Soluo (2) (1,0%) e no mais corada que a Soluo
padro de cor SC F (5.2.12).
amostra. Dessecar em estufa, a 105 C, por 3 horas. No
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 0,25 g da amostra,
previamente dessecada, em 20 mL de cido actico
glacial e 10 mL de acetato de mercrio SR. Adicionar
uma gota de cloreto de metilrosanilnio SI e titular com
cido perclrico 0,1 M SV, at mudana de cor para azul-
esverdeado. Realizar ensaio em branco e fazer as correes
necessrias. Alternativamente determinar o ponto fnal
17
H
21
NO.HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-histamnico.
COMPRIMIDOS
17
H
21
NO.HCl.
IDENTIFICAO
do p equivalente a 0,1 g de cloridrato de difenidramina.
Adicionar 1 mL de cido sulfrico 0,1 M e agitar com
trs pores de 20 mL de ter etlico. Descartar a camada
etrea. Alcalinizar a fase aquosa com hidrxido de sdio
5 M e extrair com duas pores de 50 mL de n-heptano.
Reunir os extratos orgnicos, lav-los com 10 mL de gua,
fltrar sobre sulfato de sdio anidro e evaporar o fltrado
at a secura. Dissolver o resduo em 1 mL de dissulfeto
de carbono. O espectro de absoro no infravermelho do
resduo (5.2.14) apresenta mximos de absoro somente
cloridrato de difenidramina SQR, preparado de maneira
idntica.
B. Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade
do p equivalente a 0,1 g de cloridrato de difenidramina
com duas pores de 15 mL de clorofrmio, fltrando cada
poro. Evaporar o fltrado at secura em banho-maria.
Dessecar o resduo em estufa a 80 C, por 1 hora. O resduo
funde em torno de 168 C.
C. O resduo obtido no teste B. de Identifcao responde
s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
de dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, com cido
clordrico 0,1 M, at concentrao adequada. Medir as
C
17
H
21
NO.HCl dissolvida no meio, comparando as leituras
obtidas com a da soluo de cloridrato de difenidramina
SQR, na mesma concentrao e preparada no mesmo
solvente.
Tolerncia: no mesmo que 75% (Q) da quantidade
declarada de C
17
H
21
NO.HCl se dissolvem em 45 minutos.
ENSAIOS DE PUREZA
em Substncias relacionadas na monografa de Cloridrato
de difenidramina. Preparar a Soluo (1) e a Soluo (2)
quantidade de p equivalente a 50 mg de cloridrato de
difenidramina e extrair com trs pores de 10 mL de
clorofrmio. Filtrar, evaporar os extratos combinados at
secura e dissolver o resduo em 5 mL de clorofrmio.
clorofrmio.
c
mximo 1,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Pesar e pulverizar 20 comprimidos.
Pesar quantidade do p equivalente a 0,2 g de cloridrato de
difenidramina, adicionar 20 mL de cido actico anidro e
10 mL de acetato de mercrio a 6% (p/v) em cido actico
glacial. Titular com cido perclrico 0,1 M SV, utilizando
cloreto de metilrosanilnio SI como indicador. Cada mL
de cido perclrico 0,1 M SV equivale a 29,180 mg de
C
17
H
21
NO.HCl.
Em recipientes bem fechados, protegido da luz.
ROTULAGEM
SOLUO ORAL
17
H
21
NO.HCl.
IDENTIFICAO
A. Transferir uma quantidade de soluo oral contendo
50 mg de cloridrato de difenidramina para um funil
de separao. Adicionar 0,5 mL de cido sulfrico 2
M e extrair com trs pores de 15 mL de ter etlico,
descartando as fases etreas. Em um segundo funil de
separao, dissolver 50 mg de cloridrato de difenidramina
SQR em 25 mL de gua. Tratar as solues como segue:
adicionar 2 mL de hidrxido de sdio M e extrair com 75
mL de n-heptano. Lavar o extrato de n-heptano com 10
mL de gua, evaporar at secura e dissolver o resduo em
4 mL de clorofrmio. Filtrar se necessrio para clarifcar a
soluo. Determinar rapidamente o espectro de absoro
no infravermelho das Solues padro e amostra fltradas,
usando clorofrmio como branco, em cela de 0,1 mm ou
1 mm e entre 7 m a 15 m. O espectro de absoro no
infravermelho (5.2.14) da amostra apresenta mximos de
no espectro de difenidramina SQR preparado de maneira
idntica.
B. Evaporar secura 1 mL da Soluo (1). Dissolver o
resduo em 0,15 mL de gua e adicionar 2 mL de cido
sulfrico. Produz-se cor amarela, que, pela adio de 0,5
mL de cido ntrico, muda para vermelha. Adicionar 15 mL
de gua, esfriar, adicionar 5 mL de clorofrmio e agitar. A
camada clorofrmica adquire a colorao violeta.
Soluo (1): acidifcar volume de soluo oral contendo
50 mg de cloridrato de difenidramina com cido clordrico
2 M, agitar com trs pores de 20 mL de ter etlico.
Descartar a frao etrea. Extrair com duas pores de
20 mL de clorofrmio, secar os extratos combinados sob
sulfato de sdio anidro, fltrar, evaporar o clorofrmio e
dissolver o resduo em 5 mL de clorofrmio.
C. Adicionar um excesso de hidrxido de sdio M.
Ocorre desprendimento de vapores de amnio com
odor caracterstico, que pode ser reconhecido com o
desenvolvimento de colorao vermelha quando um papel
fltro fca exposto aos vapores desprendidos.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 4,0 a 6,0.
ENSAIOS DE PUREZA
utilizando slica-gel H
,
como suporte, e mistura de
metanol e clorofrmio (20:80), como fase mvel. Aplicar,
separadamente placa, 5 uL de cada uma das solues,
Soluo (1): utilizar a Soluo (1) descrita no teste B. de
Identifcao.
Soluo (2): diluir 1 volume da Soluo (1) para 100
volumes com clorofrmio.
secar ao ar, nebulizar com iodobismutato de potssio diludo
SR. Nenhuma mancha secundria obtida na Soluo (1)
mais intensa que aquela obtida na Soluo (2).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Cloridrato de difenidramina
Acidifcar volume da soluo oral contendo exatamente
cerca de 0,1 g de cloridrato de difenidramina com cido
clordrico 2 M, agitar e extrair com trs pores de 20 mL
de ter etlico. Descartar as fraes etreas. Alcalinizar a
frao aquosa com hidrxido de sdio 5 M e extrair com
a c
821
quatro pores de 25 mL de ter etlico. Lavar os extratos
etreos combinados com duas pores de 5 mL de gua.
Extrair as guas de lavagem com 15 mL de ter etlico,
reunir os extratos etreos e evaporar secura. Dissolver o
resduo em 15 mL de cido sulfrico 0,05 M SV e titular o
excesso de cido com hidrxido de sdio 0,1 M SV, usando
vermelho de metila SI. Cada mL de cido sulfrico 0,05 M
17
H
21
NO.HCl
Cloreto de Amnio
Realizar o doseamento do cloreto de amnio quando estiver
presente na formulao. Contm, no mnimo, 95,0% e, no
mximo, 105,0% da quantidade declarada de NH
4
Cl.
Dissolver um volume da soluo oral contendo exatamente
cerca de 1 g de cloreto de amnio em 20 mL de gua.
Adicionar mistura de 5 mL de formaldedo neutralizado
previamente em presena de fenolftalena SI e 20 mL de
gua. Aps 1 a 2 minutos, titular lentamente com hidrxido
de sdio M SV em presena de 0,2 mL do mesmo indicador.
Cada mL de hidrxido de sdio M SV corresponde a 53,490
mg de NH
4
Cl. Se a amostra for colorida, tratar previamente
com carvo ativo para remoo do corante.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE EPINASTINA
Epinastini hydrochloridum
N
N
NH
2
.
HCl
C
16
H
15
N
3
.HCl; 285,77
cloridrato de epinastina; 03440
Cloridrato de 9,13b-diidro-1H-dibenz[c,f]imidazo[1,5-a]
azepin-3-amina (1:1)
[80012-44-8]
C
16
H
15
N
3
.HCl

DESCRIO
plido.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua.
Faixa de fuso (5.2.2): 273 C a 275 C.
IDENTIFICAO
amostra dessecada e dispersa em brometo de potssio,
epinastina SQR, preparado de maneira idntica.
clordrico 0,1 M, exibe mximos em 210 nm, idntico
ao observado no espectro de soluo de cloridrato de
epinastina SQR, preparada de maneira idntica.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel GF254,
glacial (50:40:10), como fase mvel. Preparar a fase mvel
com 24 horas de antecedncia. Em seguida, desprezar a
camada inferior. Aplicar, separadamente, a placa 5 uL de
a seguir.
Soluo (1): preparar soluo a 1 mg/mL da amostra em
metanol.
Soluo (2): preparar soluo a 1 mg/mL de cloridrato de
epinastina SQR em metanol.
ENSAIOS DE PUREZA
No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
um) com base desativada, mantida temperatura ambiente;
fuxo da Fase mvel de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de trietilamina a 0,3% (v/v), ajustar o
pH para 4,0 com cido fosfrico, e metanol (60:40).
c
volume com Fase mvel. Transferir 4 mL dessa soluo
com Fase mvel, de modo a obter uma soluo a 20 ug/
mL.
cloridrato de epinastina SQR para balo volumtrico de
50 mL e completar o volume com Fase mvel. Transferir
completar o volume com Fase mvel, de modo a obter uma
soluo a 20 ug/mL.
16
H
15
N
3
.
HCl na amostra a partir das respostas obtidas com a
Soluo padro e com a Soluo amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-histamnico.
CLORIDRATO DE EPINASTINA
COMPRIMIDOS
16
H
15
N
3
.HCl. Os comprimidos
IDENTIFICAO
254
,
glacial (50:40:10), como fase mvel. Preparar a fase mvel
com 24 horas de antecedncia. Em seguida, desprezar a
camada inferior. Aplicar, separadamente placa, 10 uL de
a seguir.
Soluo (1): pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir
o equivalente a 10 mg de cloridrato de epinastina para
balo volumtrico de 10 mL com auxlio de 5 mL de
metanol. Agitar mecanicamente por 10 minutos, completar
o volume com o mesmo solvente e fltrar.
Soluo (2): preparar a soluo a 1 mg/mL de cloridrato de
epinastina SQR em metanol.
CARACTERSTICAS
Uniformidade de dose unitria (5.1.6). Cumpre o teste.
Preparar soluo fnal contendo 20 ug/mL de cloridrato de
epinastina.
Meio de dissoluo: cido clordrico 0,1 M, 900 mL.
Tempo: 45 minutos.
Proceder conforme descrito no mtodo de Doseamento da
monografa de Cloridrato de Epinastina.
Soluo padro: dissolver em cido clordrico 0,1 M
quantidade exatamente pesada de cloridrato de epinastina
SQR de modo a obter soluo cuja concentrao seja
(L/900) mg/mL, em que L a quantidade declarada, em
miligramas, de cloridrato de epinastina por comprimido.
dissoluo e fltrar. Injetar, separadamente, 20 L das
Solues padro e amostra. Registrar os cromatogramas
16
H
15
N
3
.
Tolerncia: no menos do que 75% (Q) da quantidade
declarada de C
16
H
15
N
3
.HCl se dissolvem em 45 minutos.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito no mtodo de Doseamento
da monografa de Cloridrato de Epinastina. Preparar as
Solues amostra e padro como descrito a seguir.
Transferir quantidade de p equivalente a 25 mg de cloridrato
de epinastina para balo volumtrico de 50 mL e adicionar
30 mL de metanol. Deixar em ultrassom a temperatura
ambiente por 15 minutos e agitar mecanicamente por 15
a c
823
agitar e fltrar. Transferir alquota equivalente a 4 mL para
Fase mvel.
cloridrato de epinastina SQR para balo volumtrico de 50
mL e adicionar 30 mL de metanol. Agitar mecanicamente
solvente. Transferir alquota equivalente a 4 mL para balo
mvel.
16
H
15
N
3
.
HCl, nos comprimidos, a partir das respostas obtidas com
a Soluo padro e Soluo amostra.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE ETAMBUTOL
Ethambutoli hydrochloridum
C H
3
N
N
CH
3
H
H
OH
O H
.
2HCl
C
10
H
24
N
2
O
2
.2HCl; 277,23
cloridrato de etambutol; 03642
Cloridrato de (2S,2S)-2,2-(1,2-etanodiildiimino)bis-1-
butanol (2:1)
[1070-11-7]
C
10
H
24
N
2
O
2
.2HCl em relao substncia dessecada.
DESCRICO
Caractersticas fsicas. P branco, cristalino, inodoro,
sabor amargo e higroscpico.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, solvel
em etanol e metanol, pouco solvel em clorofrmio e
praticamente insolvel em ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 199 C a 204 C.
(p/v).
IDENTIFICACO
realizados os testes B., C. e D. Os testes de identifcao
B. e C. podem ser omitidos se forem realizados os testes
A. e D.
intensidades relativas daqueles observado no espectro
de cloridrato de etambutol SQR preparado de maneira
idntica.
B. A mancha principal do cromatograma da Soluo
(2), obtida em Limite de aminobutanol, corresponde em
posio, cor e intensidade aquela obtida com a Soluo (4).
C. Dissolver 0,1 g da amostra em 10 mL de gua e adicionar
0,2 mL de sulfato cprico SR. Adicionar 1 mL de hidrxido
de sdio M. Desenvolve-se colorao azul.
D. A soluo aquosa a 10% (p/v) responde s reaes do
on cloreto (5.3.l.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de aminobutanol. Proceder conforme descrito em
slica-gel G, como suporte, e mistura de hidrxido de
amnio, gua e metanol (10:15:75), como fase mvel.
Soluo (3): soluo de aminobutanol SQR a 0,5 mg/mL
em metanol.
Soluo (4): soluo de cloridrato de etambutol SQR a 5
mg/mL em metanol.
secar ao ar e aquecer a 110 C por 10 minutos. Resfriar e
nebulizar com ninidrina SR. Aquecer a placa a 110 C por
5 minutos. Qualquer mancha secundria correspondente ao
aminobutanol obtida no cromatograma com a Soluo (1)
no mais intensa que aquela obtida com a Soluo (3)
(1,0%).
mximo 0,001% (10 ppm).
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
c
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Dissolver 0,2 g da amostra em 100
mL de cido actico glacial e adicionar 5 mL de acetato
de mercrio SR. Titular com acido perclrico 0,1 M SV,
utilizando cloreto de metilrosanilnio SI como indicador.
mg de C
10
H
24
N
2
O
2
.2HCl.
B. Dissolver 0,1 g da amostra em 20 mL de uma soluo
preparada da seguinte maneira: mistura de 4 mL de sulfato
cprico SR com 70 mL de hidrxido de amnio 2 M, adio
de 10 mL de hidrxido de sdio M e diluio para 100 mL
com gua. Aps a dissoluo, completar o volume para
25 mL com o mesmo solvente. Preparar soluo padro
Medir o ngulo de rotao das solues em tubo adequado
10
H
24
N
2
O
2
.2HCl na amostra a partir das
leituras dos ngulos obtidos.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPEUTICA
Agente antibacteriano (tuberculosttico).
CLORIDRATO DE ETAMBUTOL
COMPRIMIDOS
Contm, no mnimo, 95,0% e, no mximo, 105,0%
da quantidade declarada de cloridrato de etambutol
(C
10
H
24
N
2
O
2
.2HCl). Os comprimidos devem ser revestidos.
IDENTIFICAO
do p equivalente a 0,1 g de cloridrato de etambutol e
misturar com 3 mL de metanol em gral de vidro. Adicionar
5 mL de metanol, homogeneizar e fltrar. Recolher o fltrado
em bquer contendo 100 mL de acetona. Agitar a mistura
e deixar ocorrer cristalizao por 15 minutos. Remover
o sobrenadante e secar os cristais com ar comprimido.
Proceder conforme descrito no teste A. de Identifcao da
monografa de Cloridrato de etambutol.
de p equivalente a 0,1 g de cloridrato de etambutol e agitar
com 10 mL de gua. Adicionar 2 mL de sulfato cprico a
1 % (p/v) e 1 mL de hidrxido de sdio M. Desenvolve-se
colorao azul.
C. Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade
de p equivalente a 1 g de cloridrato de etambutol com 10
mL de gua. A soluo obtida responde s reaes do on
cloreto (5.3.1.1).
correspondente quele do pico principal da Soluo
padro.
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
de dissoluo e fltrar, desprezando os 10 mL iniciais.
Determinar a quantidade de etambutol dissolvido conforme
descrito no mtodo A. em Doseamento. Preparar a Soluo
padro como descrito a seguir.
Soluo padro: pesar com exatido, 22,2 mg de cloridrato
de etambutol SQR e transferir para balo volumtrico de
50 mL. Dissolver e completar o volume com o meio de
dissoluo. Homogeneizar e fltrar.
declarada de C
10
H
24
N
2
O
2
.2HCl se dissolvem em 45
minutos.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de aminobutanol. Proceder conforme descrito em
amnio concentrado, gua e metanol (10:15:75), como fase
das solues, recentemente preparada, descritas a seguir.
quantidade do p equivalente a 0,5 g de cloridrato de
etambutol, adicionar 7 mL metanol e agitar por 5 minutos.
Completar o volume para 10 mL com o mesmo solvente e
fltrar, de modo a obter soluo a 50 mg/mL.
Soluo (2): soluo de aminobutanol SQR a 0,5 mg/mL
em metanol.
secar ao ar e aquecer a 110 C por 10 minutos. Resfriar
e nebulizar com ninidrina SR. Aquecer a 110 C por 5
minutos. Qualquer mancha secundria corresponde ao
a c
825
aminobutanol obtida no cromatograma com a Soluo (1)
(1%).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
m); mantida a temperatura de 40 C; fuxo da Fase mvel
de 2,0 mL/minuto.
Tampo acetato de amnio pH 5,0: transferir
quantitativamente 50 g de acetato de amnio e 0,2 g de
acetato de cobre para balo volumtrico de 1000 mL.
Completar o volume com gua, homogeneizar e ajustar a
pH 5,0 com cido actico glacial.
Fase mvel: mistura de Tampo acetato de amnio pH
5,0e metanol (94:6).
Diluente: gua e metanol (94:6).
Transferir 20 mg de cloridrato de etambutol, exatamente
pesada, para balo volumtrico de 50 mL. Adicionar
Diluente, agitar, completar o volume com o Diluente e
fltrar. Diluir o fltrado quantitativamente com a Fase
mvel at obter soluo de concentrao semelhante da
Soluo padro.
de cloridrato de etambutol SQR no Diluente, de modo a
obter soluo a 0,4 mg/mL. Homogeneizar e fltrar.
da coluna maior ou igual a 2000 pratos tericos. O fator
de cauda menor que 2,5. O desvio padro relativo das
que 2,0%.
e medir a rea sob os picos. Calcular o teor de
C
10
H
24
N
2
O
2
.2HCl nos comprimidos a partir das respostas
obtidas com as Soluo padro e Soluo amostra.
B. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Usar o equivalente
a 0,2 g de cloridrato de etambutol e transferir para funil
de separao. Adicionar 20 mL de soluo de hidrxido
de sdio 2 M e agitar durante 5 minutos. Extrair com
cinco pores de 25 mL de clorofrmio. Reunir os estratos
clorofrmicos em bquer e evaporar em banho-maria
at volume de aproximadamente 25 mL. Filtrar atravs
de papel para um erlenmeyer. Lavar o bquer e o papel
de fltro com 100 mL de cido actico glacial anidro.
Proceder conforme descrito em Titulao em meio no
aquoso (5.3.3.5), utilizando como indicador 10 gotas
de 1-naftolbenzena SI e como agente titulante cido
perclrico 0,1 M SV. Preparar branco e titular de modo
anlogo. Cada mL de cido perclrico 0,1 M SV equivale a
13,862 mg de cloridrato de C
10
H
24
N
2
O
2
.2HCl.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE fEXOfENADINA
fexofenadini hydrochloridum
N
COOH
C H
3
CH
3
OH
OH
HCl
.
C
32
H
39
NO
4
.HCl; 538,12
cloridrato de fexofenadina; 04038
Cloridrato do cido 4-[1-hidroxi-4-[4-(hidroxidifenilmetil)-
1-piperidinil]butil]-,-dimetil-benzenoactico (1:1)
[153439-40-8]
C
32
H
39
NO
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou branco
plido.
Solubilidade. Ligeiramente solvel em gua, muito solvel
em etanol e metanol, ligeiramente solvel em clorofrmio,
insolvel em hexano.
Faixa de fuso (5.2.2): 195 C a 197 C.
IDENTIFICAO
c
observados no espectro de cloridrato de fexofenadina SQR,
de 200 a 370 nm, de soluo a 0,0014% (p/v) em etanol,
exibe um ombro caracterstico em 220 nm, idntico ao
observado no espectro de soluo similar de cloridrato de
fexofenadina SQR.
254
,
como suporte, e mistura de 1-butanol, cido actico glacial
e gua (6:3:1), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
fexofenadina SQR em metanol.
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm) ou
expor a placa a vapores de iodo. A mancha principal
intensidade quele obtida com a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
Cloretos. Dissolver 0,3 g da amostra em 50 mL de metanol.
Titular potenciometricamente com nitrato de prata 0,1 M
SV. Cada mL de nitrato de prata 0,1 M SV equivale a 3,545
mg de cloreto. Deve apresentar teor entre 6,45% a 6,75%
de cloreto, calculado sobre a base anidra.
mximo 0,002% (20 ppm).
gua (5.2.20.1). No mximo 0,5%.
mximo 1,0%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de acetato de amnio 0,05 M e
acetonitrila (50:50). Ajustar o pH em 3,2 com cido
clordrico M.
volume com Fase mvel e homogeneizar. Transferir 5 mL
o volume com Fase mvel, de modo a obter soluo a 40
g/mL.
de cloridrato de fexofenadina SQR em Fase mvel de
da coluna no menor do que 2500 pratos tericos. O fator
que 2,0%.
Procedimento: injetar separadamente, 20 L das Solues
32
H
39
NO
4
.HCl
ROTULAGEM
CLASSE TERAPEUTICA
Anti-histamnico.
CLORIDRATO DE fEXOfENADINA
COMPRIMIDOS
32
H
39
NO
4
.HCl.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar quantidade sufciente de
comprimidos. Transferir, exatamente, quantidade de p
equivalente a cerca de 60 mg de cloridrato de fexofenadina
para um tubo com tampa. Adicionar 10 mL da mistura de
acetonitrila e metanol (10:1), e agitar em vrtex por 1 a
2 minutos at disperso da amostra. Deixar a soluo em
repouso por 10 minutos ou centrifugar por 2 a 3 minutos.
Filtrar para um frasco de 50 mL usando um fltro de 0,45
m politetrafuoretileno. Evaporar o solvente at cerca de
0,5 mL usando fuxo de nitrognio com suave aquecimento
(no exceder a 75 C). Adicionar 5 mL de gua e cinco
gotas de cido clordrico diludo, agitar e induzir a
precipitao. Introduzir em banho de gelo por 30 minutos.
Filtrar a soluo para cadinho de vidro sinterizado de 10
a 15 m. Secar o precipitado em estufa a 105 C por 1
hora. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) do
resduo obtido, disperso em brometo de potssio, apresenta
a c
827
observados no espectro de fexofenadina SQR, preparado de
maneira idntica. Para preparar a disperso de brometo de
potssio com a fexofenadina SQR, deve-se transferir cerca
de 60 mg do padro para um tubo com tampa e proceder
a partir de Adicionar 10 mL da mistura de acetonitrila e
metanol (10:1)....
B. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir
fexofenadina para balo volumtrico de 100 mL com auxlio
de 60 mL de etanol. Agitar por 10 minutos e completar o
da monografa de Cloridrato de fexofenadina.
C. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Agitar quantidade
de p equivalente a 10 mg de cloridrato de fexofenadina
com 10 mL de metanol, homogeneizar e fltrar. Prosseguir
conforme descrito no teste C. de Identifcao da
monografa de Cloridrato de fexofenadina.
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
Procedimento: proceder conforme descrito em Doseamento
na monografa de Cloridrato de fexofenadina. Preparar a
Soluo amostra: aps o teste, retirar alquota de dissoluo
e diluir at concentrao prxima a da Soluo padro,
utilizando Fase mvel como diluente.
declarada de C
32
H
39
NO
4
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de Cloridrato de fexofenadina. Preparar a Soluo amostra
cloridrato de fexofenadina para balo volumtrico de 200
mL, adicionar 120 mL de Fase mvel e deixar em ultrassom
por 15 minutos. Agitar mecanicamente por 30 minutos,
completar o volume com o mesmo solvente, homogeneizar
e fltrar. Transferir 5 mL para balo volumtrico de 25 mL,
padro e amostra, registrar os cromatogramas e medir a
rea sob os picos. Calcular o teor de C
32
H
39
NO
4
.HCl nos
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE fLUOXETINA
fluoxetini hydrochloridum
F
3
C
O
N
CH
3
H
.
HCl
C
17
H
18
F
3
NO.HCl; 345,79
cloridrato de fuoxetina; 04177
Cloridrato de N-metil--[4-(trifuormetil)fenoxi]
benzenopropanamina (1:1)
[56296-78-7]
C
17
H
18
F
3
NO.HCl, em relao substncia anidra.
DESCRIO
branco.
Solubilidade. Ligeiramente solvel em gua, facilmente
solvel em etanol e metanol, praticamente insolvel em
ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 158,4 C a 158,9 C.
c
Poder rotatrio (5.2.8): -0,05 a +0,05. Determinar em
soluo a 2% (p/v) em mistura de gua e metanol (15:85).
IDENTIFICAO
amostra no dessecada e dispersa em brometo de potssio
fuoxetina SQR, preparado de maneira idntica.
A. de Doseamento, exibe mximos e mnimos somente nos
mesmos comprimentos de onda observados no espectro de
soluo similar de cloridrato de fuoxetina SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 4,5 a 6,5. Determinar em soluo aquosa a 1%
215 nm; coluna de 250 mm de comprimento e 4,6 mmde
ligada a grupo octilsilano (5 m), mantida a temperatura
de 30 C; fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/minuto.
Tampo fosfato pH 3,6: transferir 3,395 g de sulfato
de tetrabutilamnio e 1,361 g de fosfato de potssio
monobsico para balo volumtrico de 1000 mL, dissolver
em 900 mL de gua, ajustar o pH para 3,6 com hidrxido
de amnio e completar o volume com gua.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato pH 3,6 e acetonitrila
(78:22).
Soluo (1): transferir, exatamente, cerca de 30 mg de
cloridrato de fuoxetina SQR para balo volumtrico de 250
mL, dissolver na Fase mvel e completar o volume com
o mesmo solvente. Transferir 5 mL da soluo resultante
com o mesmo solvente. Transferir 5 mL dessa soluo para
o mesmo solvente, de modo a obter soluo a 1,2 g/mL.
Soluo (2): transferir, exatamente, cerca de 30 mg da
Injetar replicatas de 20 L da Soluo (1). O fator de cauda
no maior que 1,7. O desvio padro relativo das reas de
(1) e Soluo (2) e registrar os cromatogramas por, no
mnimo, o dobro do tempo de reteno do pico principal.
Calcular a porcentagem de cada impureza da Soluo
(2) a partir da frmula: 0,1(r
i
/r
p
), onde r
i
a resposta do
pico de impureza na Soluo (2) e r
p
a resposta do pico
referente fuoxetina na Soluo (1). No mximo 0,15%
de impureza com tempo de reteno relativo de 0,88 e no
mximo 0,1% de outra impureza individual. No mximo
0,5% de impurezas totais.
em 0,67 g da amostra. Utilizar soluo padro de chumbo 2
ppm.. No mximo 0,003% (30 ppm).
gua (5.2.20.1). No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
de 75 mg da amostra, transferir para balo volumtrico
de 100 mL e dissolver em cido clordrico 0,1 M.
Completar o volume com o mesmo solvente. Diluir,
sucessivamente, utilizando cido clordrico 0,1 M, at
concentrao de 0,0015% (p/v). Preparar soluo padro
17
H
18
F
3
NO.HCl na amostra a partir das
leituras obtidas.
com slica quimicamente ligada a octilsilano (5 m),
1,0 mL/minuto.
Tampo trietilamina pH 6,0: transferir 10 mL de trietilamina
para balo volumtrico de 1000 mL, adicionar cerca de 980
mL de gua, ajustar o pH para 6,0 com cido fosfrico e
completar o volume com gua.
Fase mvel: mistura de Tampo trietilamina pH 6,0,
tetraidrofurano e metanol (6:3:1).
Soluo amostra: pesar, exatamente, cerca de 27,5 mg
da amostra e transferir para balo volumtrico de 25 mL.
Dissolver com Fase mvel e completar o volume com
o mesmo solvente. Homogeneizar. Transferir 5 mL da
soluo resultante para balo volumtrico de 50 mL e
completar o volume com Fase mvel. Homogeneizar.
Soluo padro: pesar, exatamente, cerca de 27,5 mg
de cloridrato de fuoxetina SQR e transferir para balo
volumtrico de 25 mL. Dissolver em Fase mvel e
completar o volume com o mesmo solvente. Homogeneizar.
a c
829
Transferir 50 mL e completar o volume com Fase mvel.
Homogeneizar.
Injetar replicatas de 10 L da Soluo padro. O fator de
cauda no maior que 2,0. O desvio padro relativo das
que 2,0%.
17
H
18
F
3
NO.HCl

na amostra a partir das respostas obtidas com a Solues
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antidepressivo.
CLORIDRATO DE fLUOXETINA
COMPRIMIDOS
Contm cloridrato de fuoxetina equivalente a, no mnimo,
fuoxetina (C
17
H
18
F
3
NO).
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao B. e C. podem ser omitidos se
forem realizados os testes A. e D.
do p equivalente a 10 mg de fuoxetina para bquer,
dissolver em 10 mL de etanol e fltrar. Lavar o recipiente
com 5 mL do mesmo solvente e evaporar o fltrado em
banho-maria at resduo. O resduo obtido, dessecado a 60
C, em estufa a vcuo, por 3 horas responde ao teste A. de
Identifcao da monografa de Cloridrato de fuoxetina.
A. de Doseamento, exibe mximos e mnimos somente nos
mesmos comprimentos de onda observados no espectro da
soluo padro.
D. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir
quantidade do p equivalente a 20 mg de fuoxetina para
gua. Homogeneizar e fltrar. A soluo resultante responde
CARACTERSTICAS
Procedimento para uniformidade de contedo. Tansferir
Adicionar 70 mL de cido clordrico 0,1 M. Deixar em
ultrassom por 5 minutos. Agitar mecanicamente por 15
minutos, completar o volume com o mesmo solvente,
homogeneizar e fltrar. Diluir, sucessivamente, no mesmo
solvente, at concentrao de 0,0015% (p/v) de fuoxetina.
Preparar soluo padro na mesma concentrao de
fuoxetina (C
12
H
18
F
3
NO), utilizando cloridrato de fuoxetina
SQR e o mesmo solvente. Medir as absorvncias das
solues resultantes em 227 nm (5.2.14), utilizando cido
de fuoxetina (C
12
H
18
F
3
NO) em cada comprimido a partir
Tempo: 45 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, com cido clordrico 0,1
M at concentrao adequada. Medir as absorvncias em
do zero. Calcular a quantidade de fuoxetina (C
12
H
18
F
3
NO)
da soluo de cloridrato de fuoxetina SQR na concentrao
de 0,0015% (p/v) de fuoxetina (C
12
H
18
F
3
NO), preparada
declarada de fuoxetina (C
12
H
18
F
3
NO) se dissolvem em 45
minutos.
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias relacionadas da monografa de Cloridrato de
fuoxetina. Preparar a Soluo (2) como descrito a seguir.
Soluo (2): pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir,
exatamente, quantidade do p equivalente a 20 mg de
fuoxetina para balo volumtrico de 10 mL, acrescentar 8
mL de Fase mvel, deixar em ultrassom por 15 minutos e
e fltrar.
Procedimento: injetar replicatas de 20 L da Soluo
(2), registrar os cromatogramas e medir as reas sob
os picos. Calcular a porcentagem de cada impureza no
c
cromatograma da Soluo (2), utilizando a frmula: 100
(r
i
/r
t
) em que r
i
a resposta de cada pico, excluindo o
pico relativo fuoxetina, e r
t
a soma das respostas de
todos os picos, incluindo o pico relativo fuoxetina. No
considerar os picos relativos aos solventes. No mnimo,
0,25% de impureza individual e, no mximo, 0,40% de
impureza total.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar e pulverizar os
mg de fuoxetina (C
17
H
18
F
3
NO) para balo volumtrico de
100 mL. Adicionar 70 mL de cido clordrico 0,1 M. Deixar
em ultrassom por 5 minutos. Agitar mecanicamente por
15 minutos, completar o volume com o mesmo solvente,
solvente, at concentrao de 0,0015% (p/v) de fuoxetina.
Preparar soluo padro na mesma concentrao de
fuoxetina (C
17
H
18
F
3
NO), utilizando cloridrato de
fuoxetina SQR e o mesmo solvente. Medir as absorvncias
das solues resultantes em 227 nm, utilizando cido
de fuoxetina (C
17
H
18
F
3
NO) nos comprimidos a partir das
leituras obtidas.
de alta efcincia (5.2.17.4). Proceder conforme descrito
no mtodo B. de Doseamento da monografa de Cloridrato
de fuoxetina. Preparar a Soluo amostra como descrito
a seguir.
fuoxetina (C
17
H
18
F
3
NO) para balo volumtrico de
100 mL, acrescentar 70 mL de Fase mvel. Deixar em
ultrassom por 15 minutos. Agitar mecanicamente por 15
reas sob os picos. Calcular a quantidade de fuoxetina
(C
17
H
18
F
3
NO)

ROTULAGEM
CLORIDRATO DE fLURAZEPAM
COMPRIMIDOS
21
H
23
ClFN
3
O.HCl.
IDENTIFICAO
254
, como
suporte e mistura de tolueno, acetona e hidrxido de
amnio a 25% (v/v) (50:50:2), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, 10 uL de cada uma das solues
Soluo (1): pulverizar os comprimidos. Transferir
furazepam para bquer, adicionar 10 mL de metanol,
agitar por 5 minutos e fltrar.
Soluo (2): soluo de cloridrato de furazepam SQR a 2
mg/mL em metanol.
CARACTERSTICAS
ao abrigo da luz. Pesar individualmente e transferir cada
comprimido para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar
2 mL de gua e deixar em ultrassom por 5 minutos.
Adicionar 80 mL de metanol e submeter a ultrassom por
mais 5 minutos. Agitar por 10 minutos e completar o
volume com metanol. Centrifugar e fltrar, se necessrio.
Diluir sucessivamente com cido sulfrico metanlico
0,1 M de modo a obter concentrao de 0,003% (p/v) de
cloridrato de furazepam. Preparar soluo padro conforme
descrito no Doseamento. Medir as absorvncias das
solues resultantes em 284 nm (5.2.14), utilizando cido
sulfrico metanlico 0,1 M para ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
21
H
23
ClFN
3
O.HCl nos comprimidos, a
partir das leituras obtidas. Alternativamente, realizar os
clculos considerando A(1%, 1 cm) = 319, em 284 nm, em
cido sulfrico metanlico 0,1 M.
a c
831
Tempo: 20 minutos
dissoluo, fltrar com auxlio de membrana com porosidade
de 0,45 um. Medir as absorvncias das solues em 270
nm (5. 2.14), utilizando gua para ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
21
H
23
ClFN
3
O.HCl dissolvida no meio,
comparando as leituras obtidas com a da soluo de cloridrato
de furazepam SQR na concentrao de 0,0033% (p/v).
declarada de C
21
H
23
ClFN
3
O.HCl se dissolvem em 20
minutos.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Realizar o doseamento ao abrigo da luz. Pesar e pulverizar
20 comprimidos. Transferir quantidade do p equivalente a
0,3 g de cloridrato de furazepam para balo volumtrico de
100 mL. Adicionar 2 mL de gua e deixar em ultrassom por 5
minutos. Adicionar 80 mL de metanol e deixar em ultrassom
por mais 5 minutos. Agitar por 10 minutos e completar o
volume com metanol. Centrifugar e fltrar, se necessrio.
Diluir sucessivamente com cido sulfrico metanlico
0,1 M de modo a obter concentrao de 0,003% (p/v) de
cloridrato de furazepam. Pesar, exatamente, cerca de 30
mg de cloridrato de furazepam SQR e transferir para balo
volumtrico de 100 mL. Dissolver com 80 mL de metanol
e deixar em ultrassom por 5 minutos. Completar o volume
com o mesmo solvente e diluir sucessivamente com cido
sulfrico metanlico 0,1 M de modo a obter concentrao
de 0,003% (p/v) de cloridrato de furazepam. Medir as
utilizando cido sulfrico metanlico 0,1 M para ajuste
21
H
23
ClFN
3
O.HCl nos
comprimidos a partir das leituras obtidas. Alternativamente,
284 nm, em cido sulfrico metanlico 0,1 M.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE HIDRALAZINA
Hydralazini hydrochloridum
N
N
N H
NH
2
.
HCl
C
8
H
8
N
4
.HCl; 196,64
cloridrato de hidralazina; 04647
Cloridrato de 1-hidrazinilftalazina (1:1)
[304-20-1]
C
8
H
8
N
4
DESCRIO
branco, inodoro ou quase inodoro.
Solubilidade. Solvel em gua, pouco solvel em etanol,
praticamente insolvel em clorofrmio e ter etlico.
Temperatura de fuso (5.2.2): 275 C, com decomposio.
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao B., C. e D. podem ser omitidos se
forem realizados os testes A. e E.
da amostra, dispersa em cloreto de potssio, apresenta
observados no espectro de cloridrato de hidralazina SQR,
B. O espectrode absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa
de 230 nm a 350 nm, de soluo a 0,002% (p/v) em gua,
exibe mximos de absoro em 240, 260, 305 e 315 nm.
Os valores das absorvncias so de, aproximadamente, 1,1,
1,1, 0,53 e 0,43, respectivamente.
D. Dissolver 0,1 g da amostra em 10 mL de gua. A 5 mL
da soluo obtida, adicionar 5 mL de 2-nitrobenzaldedo a
2% (p/v) em etanol. Produz-se precipitado laranja.
E. A soluo aquosa da amostra a 0,025% (p/v) responde
c
ENSAIOS DE PUREZA
2% (p/v).
mtodo B. de Doseamento. Preparar a Soluo teste como
descrito a seguir.
Soluo teste: transferir, exatamente, cerca de 25 mg da
30 mL de cido actico 0,1 M e completar o volume com o
mesmo solvente.
Procedimento: injetar 20 L da Soluo teste, registrar os
cromatogramas e medir as reas de todos os picos obtidos.
A soma das rea sob os picos secundrios, exceto a do pico
principal, no superior a 1,0% da rea total dos picos
obtidos, incluindo a do pico principal. No incluir nos
clculos os picos relativos ao solvente.
Metais pesados (5.3.2.3). Umedecer o resduo obtido em
Cinzas sulfatadas com 2 mL de cido clordrico, evaporar,
secar e adicionar 20 mL de gua. Proceder conforme
descrito em Ensaio limite para metais pesados, Mtodo I.
amostra. Dessecar em estufa a 110 C, por 15 horas, at
peso constante. No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
A. Pesar, exatamente, cerca de 0,1 g da amostra, transferir
para erlenmeyer de 250 mL com tampa e dissolver em
25 mL de gua. Adicionar 35 mL de cido clordrico
e resfriar temperatura ambiente. Adicionar 5 mL de
clorofrmio e titular com iodato de potssio 0,02 M SV.
Prximo ao ponto fnal, adicionar o titulante gota a gota,
agitando continuamente at desaparecimento da colorao
prpura da camada de clorofrmio. Alternativamente,
determinar o ponto fnal potenciometricamente, excluindo
o clorofrmio. Cada mL de iodato de potssio 0,02 M SV
8
H
8
N
4
.HCl.
com slica quimicamente ligada a grupo nitrila (10 m),
1 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 1,44 g de laurilsulfato de sdio e 0,75 g
de brometo de tetrabutilamnio em 770 mL de gua, adicionar
230 mL de acetonitrila e homogeneizar. Se necessrio, ajustar
o pH para 3,0 com cido sulfrico 0,05 M.
pesada, da amostra em cido actico 0,1 M de modo a obter
soluo a 0,4 mg/mL. Transferir 5 mL dessa soluo para
cido actico 0,1 M, obtendo soluo a 40 g/mL.
Soluo padro: dissolver quantidade, exatamente pesada, de
cloridrato de hidralazina SQR em cido actico 0,1 M de modo
a obter soluo a 0,4 mg/mL. Transferir 5 mL dessa soluo
Soluo de resoluo: preparar soluo em cido actico
0,1 M contendo aproximadamente 0,25 mg de cloridrato
de hidralazina SQR e 50 g de ftalazina por mililitro.
50 mL, completar o volume com cido actico 0,1 M e
homogeneizar.
tempos de reteno relativos so cerca de 0,65 para a
ftalazina e 1,0 para o cloridrato de hidralazina. A resoluo
entre os picos de ftalazina e de cloridrato de hidralazina
8
H
8
N
4
.HCl
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Vasodilatador.
COMPRIMIDOS
8
H
8
N
4
.HCl.
IDENTIFICAO
de p equivalente a 0,1 g de cloridrato de hidralazina para
funil de separao, adicionar 2 mL de hidrxido de amnio
6 M e 10 mL de gua. Extrair com duas pores de 10 mL
de clorofrmio. Reunir os extratos orgnicos e evaporar at
secura. O resduo responde ao teste A. de Identifcao da
monografa de Cloridrato de hidralazina.
a c
833
B. de Doseamento, exibe mximos de absoro em 240
nm, 260 nm, 305 nm e 315 nm, idnticos aos observados
no espectro da soluo padro.
da Soluo amostra, obtida no mtodo C. de Doseamento,
padro.
D. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir quantidade
bquer, adicionar 50 mL de mistura de metanol e gua
(1:2), misturar e fltrar. Concentrar o fltrado em banho-
maria at 10 mL e deixar esfriar. A 5 mL da soluo
concentrada, adicionar 5 mL de 2-nitrobenzaldedo a 2%
(p/v) em etanol. Produz-se precipitado laranja.
CARACTERSITCAS
Procedimento para uniformidade de contedo. Triturar
cada comprimido at p fno, transferir, quantitativamente,
mistura de metanol e gua (1:2). Prosseguir conforme
descrito no mtodo B. de Doseamento, a partir de Agitar
mecanicamente....
Tempo: 30 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, com cido clordrico
0,01 M, at concentrao adequada. Medir as absorvncias
das solues em 260 nm (5.2.14), utilizando o mesmo
C
8
H
8
N
4
.HCl dissolvida no meio, comparando as leituras
obtidas com a da soluo de cloridrato de hidralazina SQR
na concentrao de 0,001 % (p/v), preparada em cido
clordrico 0,01 M.
declarada de C
8
H
8
N
4
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir quantidade
bquer e acrescentar 25 mL de gua. Adicionar 35 mL de
cido clordrico e resfriar temperatura ambiente. Agitar,
mecanicamente, por 15 minutos. Titular com iodato de
potssio 0,02 M SV, com agitao contnua. Determinar o
ponto fnal potenciometricamente. Cada mL de iodato de
potssio 0,02 M SV equivale a 3,933 mg de C
8
H
8
N
4
.HCl.
comprimidos. Transferir quantidade de p equivalente a 50
mg de cloridrato de hidralazina para balo volumtrico de
50 mL e adicionar 25 mL de mistura de metanol e gua
(1:2). Agitar, mecanicamente, por 10 minutos e completar
o volume com o mesmo solvente. Filtrar. Realizar diluies
gua como solvente. Preparar a soluo padro nas mesmas
condies. Medir as absorvncias das solues resultantes
a quantidade de C
8
H
8
N
4
.HCl nos comprimidos a partir das
leituras obtidas.
C. Proceder conforme descrito no mtodo B. de
Doseamento da monografa de Cloridrato de hidralazina.
cloridrato de hidralazina para balo volumtrico de 50
mL, adicionar 40 mL de cido actico 0,1 M e deixar em
ultrassom por 15 minutos. Agitar, mecanicamente, por 15
C
8
H
8
N
4
.HCl nos comprimidos a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
SOLUO INJETVEL
8
H
8
N
4
.HCl.
c
IDENTIFICAO
A. Transferir volume da soluo injetvel equivalente a
0,1 g de cloridrato de hidralazina para funil de separao.
Adicionar 2 mL de hidrxido de amnio 6 M e 10 mL de
gua. Extrair com duas pores de 10 mL de clorofrmio.
Reunir os extratos orgnicos e evaporar at secura. O
resduo responde ao teste A. de Identifcao da monografa
de Cloridrato de hidralazina.
B. Diluir a soluo injetvel em gua, at concentrao
de 0,002% (p/v). O espectro de absoro no ultravioleta
(5.2.14) da soluo obtida, na faixa de 230 nm a 350 nm,
exibe mximos de absoro em 240 nm, 260 nm, 305 nm
e 315 nm.
D. Transferir volume da soluo injetvel equivalente a 0,1
g de cloridrato de hidralazina para um bquer e adicionar
gua, se necessrio, para obter volume fnal de 10 mL.
Adicionar a 5 mL da soluo, 5 mL de 2-nitrobenzaldedo
a 2% (p/v) em etanol. Produz-se precipitado laranja.
E. Diluir a soluo injetvel em gua, at concentrao de
0,025% (p/v). A soluo obtida responde s reaes do on
cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,4 a 4,4.
DOSEAMENTO
A. Transferir volume da soluo injetvel equivalente
a cerca de 0,1 g de cloridrato de hidralazina para
erlenmeyer de 250 mL com tampa. Adicionar 25 mL de
gua e prosseguir conforme descrito no mtodo A. de
Doseamento da monografa de Cloridrato de hidralazina
a partir de Adicionar 35 mL de cido clordrico.... Cada
mL de iodato de potssio 0,02 M SV equivale a 3,933 mg
de C
8
H
8
N
4
.HCl.
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Transferir volume
da soluo equivalente a cerca de 0,1 g de cloridrato de
hidralazina para balo volumtrico de 100 mL e completar
o volume com mistura de metanol e gua (1:2). Realizar
diluies sucessivas at concentrao de 0,001% (p/v),
utilizando gua como solvente. Preparar soluo padro
nas mesmas condies. Medir as absorvncias das solues
em 260 nm, utilizando gua para ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
8
H
8
N
4
.HCl na soluo injetvel a partir das
leituras obtidas.
C. Proceder conforme descrito no mtodo B. de
Doseamento da monografa de Cloridrato de hidralazina.
equivalente a 20 mg de cloridrato de hidralazina para balo
volumtrico de 50 mL, completar o volume com cido actico
0,1 M e homogeneizar. Transferir 5 mL da soluo obtida para
balo volumtrico de 50 mL e completar o volume com cido
actico 0,1 M, obtendo soluo a 40 g/mL.
C
8
H
8
N
4
.HCl na soluo injetvel a partir das respostas
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE IMIPRAMINA
Imipramini hydrochloridum
N
N
CH
3
CH
3
.
HCl
C
19
H
24
N
2
.HCl; 316,87
cloridrato de imipramina; 04837
Cloridrato de 10,11-diidro-N,N-dimetil-5H-dibenz[b,f]
azepina-5-propanamina (1:1)
[113-52-0]
C
19
H
24
N
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco a levemente
amarelado.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua e etanol.
a c
835
Faixa de fuso (5.2.2): 170 C a 174 C.
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao B. e D. podem ser omitidos se
forem realizados os testes A., C. e E. O teste de identifcao
A. pode ser omitido se forem realizados os testes B., C., D.
e E.
observados no espectro de cloridrato de imipramina SQR,
C. Cumpre com a exigncia da Faixa de fuso.
D. Dissolver 5 mg da amostra em 2 mL de cido ntrico.
Desenvolve-se colorao azul intensa.
E. Responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de cido
clordrico, gua, cido actico glacial e acetato de etila
Soluo (1): dissolver 0,25 g da amostra em metanol e
completar para 10 mL com o mesmo solvente.
metanol. Diluir 1 mL da soluo resultante para 50 mL
Soluo (3): dissolver 5 mg de iminodibenzila em metanol
secar ao ar. Nebulizar com soluo de dicromato de
potssio a 0,5% (p/v) em mistura de gua e cido sulfrico
(4:1). Qualquer mancha secundria, correspondente ao
iminodibenzila, obtida no cromatograma com a Soluo
(1), no mais intensa que aquela obtida com a Soluo
(3) (0,2%). Qualquer mancha secundria obtida no
principal e do iminodibenzila, no mais intensa que
Metais pesados (5.3.2.3). Prosseguir conforme descrito
em Mtodos de reao com tiocetamida, Mtodo III. No
mximo 0,002% (20 ppm).
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
em 50 mL de etanol. Adicionar 5 mL de cido clordrico
0,01 M e homogeneizar. Titular com hidrxido de sdio
0,1 M SV. Determinar o ponto fnal potenciometricamente
entre os dois pontos de infexo. Realizar ensaio em branco
e fazer as correes necessrias. Cada mL de hidrxido de
sdio 0,1 M SV equivale a 31,687 mg de C
19
H
24
N
2
.HCl.
de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de perclorato de sdio 0,06 M,
acetonitrila e trietilamina (625:375:1). Ajustar o pH para
2,0 com cido perclrico.
pesada, da amostra em mistura de gua e acetonitrila (5:3)
de cloridrato de imipramina SQR em mistura de gua e
acetonitrila (5:3) para obter soluo a 0,3 mg/mL.
Soluo de resoluo: preparar soluo contendo cloridrato
de imipramina SQR e cloridrato de desipramina SQR a 0,3
mg/mL, cada, em mistura de gua e acetonitrila (5:3).
resoluo entre os picos do cloridrato de imipramina e do
cloridrato de desipramina no menor que 1,3. O desvio
padro relativo das reas de replicatas dos picos registrado
para o cloridrato de imipramina no maior que 2,0%.
19
H
24
N
2
.
c
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antidepressivo.
CLORIDRATO DE IMIPRAMINA
COMPRIMIDOS
Contm cloridrato de imipramina equivalente a, no mnimo,
C
19
H
24
N
2
.HCl.
IDENTIFICAO
do p equivalente a 250 mg de cloridrato de imipramina,
adicionar 10 mL de clorofrmio. Filtrar e evaporar para
reduzir o volume. Adicionar ter etlico at que se produza
uma soluo turva. Deixar em repouso. O precipitado, aps
fltrao seguida de recristalizao em acetona, apresenta
ponto de fuso em torno de 172 C.
B. Dissolver 5 mg dos cristais obtidos no teste A. de
Identifcao em 2 mL de cido ntrico. Desenvolve-se
colorao azul.
C. Os cristais obtidos no teste A. de Identifcao
respondem as reaes do on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
Teste de dureza (5.1.3.1). Cumpre o teste
Teste de Desintegrao (5.1.4.1). Cumpre o teste
Uniformidade de doses unitrias (5.1.6). Cumpre o teste
Tempo: 45 minutos
250 nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente para o ajuste
19
H
24
N
2
.HCl dissolvida
de cloridrato de imipramina SQR de concentrao
conhecida, preparada no mesmo solvente.
declarada de C
19
H
24
N
2
ENSAIOS DE PUREZA
em Substncias relacionadas da monografa de Cloridrato
de imipramina. Preparar as Solues (1), (2) e (3) como
descrito a seguir.
Soluo (1): pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir,
exatamente, quantidade do p equivalente a 0,2 g de
cloridrato de imipramina, adicionar 30 mL de clorofrmio.
Filtrar. Evaporar o fltrado at secura. Dissolver o resduo
em 10 mL de metanol.
metanol. Diluir 1 mL da soluo resultante para 10 mL
Soluo (3): preparar soluo a 60 g/mL de iminodibenzila
em metanol.
secar ao ar. Nebulizar com soluo dicromato de
potssio a 0,5% (p/v) em cido sulfrico (1:4). A mancha
principal obtida com a Soluo (1) apresenta colorao
azul. Qualquer mancha secundria, correspondente ao
iminodibenzil, obtida no cromatograma com a Soluo
(1), diferente da mancha principal no mais intensa
que a mancha principal obtida com a Soluo (3) (0,2%).
Qualquer mancha secundria obtida diferente da mancha
principal, no mais intensa que a mancha principal obtida
com a Soluo (2) (0,2%).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
do p equivalente a 50 mg de cloridrato de imipramina
cido clordrico 0,1 M. Agitar, mecanicamente, por 40
Filtrar. Transferir 5 mL para balo volumtrico de 100 mL
e completar o volume com cido clordrico 0,1 M. Preparar
soluo de padro na mesma concentrao, utilizando o
mesmo solvente. Medir as absorvncias das solues em
zero. Calcular o contedo de C
19
H
24
N
2
.
HCl nos comprimidos
a partir das leituras obtidas. Alternativamente, realizar o
clculo utilizando A (1%, 1 cm) = 264, em 250 nm.
a c
837
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE LIDOCANA
Lidocaini hydrochloridum
CH
3
CH
3
N
N
H
O
CH
3
CH
3
.
HCl
C
14
H
22
N
2
O; 234,34
C
14
H
22
N
2
O.HCl; 270,80
C
14
H
22
N
2
O.HCl.H
2
O; 288,81
lidocana; 05313
cloridrato de lidocana; 05314
2-(Dietilamino)-N-(2,6-dimetilfenil)acetamida
[137-58-6]
Cloridrato de 2-(dietilamino)-N-(2,6-dimetilfenil)
acetamida (1:1)
[73-78-9]
Cloridrato de 2-(dietilamino)-N-(2,6-dimetilfenil)
acetamida hidratado (1:1:1)
[6108-05-0]
C
14
H
22
N
2
O.HCl, em relao substncia anidra.
DESCRIO
em etanol, solvel em clorofrmio e insolvel em ter
etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 74 C a 79 C, determinada sem
prvia dessecao.
IDENTIFICAO
O ensaio B. pode ser omitido se forem realizados os ensaios
A. e C. O ensaio A. pode ser omitido se forem realizados
os ensaios B. e C.
A. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14),
da amostra dispersa em brometo de potssio, apresenta
observados no espectro de cloridrato de lidocana SQR,
ENSAIOS DE PUREZA
0,5% (p/v).
Limite de 2,6-dimetilanilina
Soluo teste: transferir 0,25 g da amostra para balo
Soluo de 2,6-dimetilanilina: transferir 50 mg de
2,6-dimetilanilina para balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com metanol. Transferir 1 mL dessa
volume com metanol.
Procedimento: utilizar trs tubos de Nessler e realizar o
ensaio da seguinte maneira: no primeiro tubo colocar 2
mL da Soluo teste, no segundo tubo 1 mL da Soluo
de 2,6-dimetilanilina e 1 mL de metanol e no terceiro
tubo 2 mL de metanol (branco). Adicionar em cada tubo
1 mL de soluo de p-dimetilaminobenzaldedo 1% (p/v)
em metanol, recentemente preparada e 2 mL de cido
actico glacial. Deixar em repouso durante 10 minutos
temperatura ambiente. A intensidade da colorao amarela
obtida no tubo da Soluo teste deve estar entre o branco e a
colorao amarela obtida na Soluo de 2,6-dimetilanilina
(100 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar 1 g da amostra.
Prosseguir conforme descrito em Ensaios-limite para
metais pesados, Mtodo III. No mximo 0,002% (20 ppm).
Sulfatos. Dissolver aproximadamente 0,2 g da amostra em
20 mL de gua e adicionar 2 mL de cido clordrico 3 M.
Homogeneizar e dividir em duas partes. Adicionar em uma
das partes 1 mL de cloreto de brio 12% (p/v). A turbidez
obtida por essa preparao no mais intensa do que a
turbidez obtida pela preparao sem adio do cloreto de
brio.
gua (5.2.20.1). 5,0% a 7,0%.
No mximo 0,1%.
mg de cloridrato de lidocana.
DOSEAMENTO
para erlenmeyer de 125 mL e dissolver em 50 mL de etanol.
Adicionar 5,0 mL de cido clordrico 0,01 M e titular com
hidrxido de sdio 0,1 M SV, determinando o ponto fnal
potenciometricamente entre os dois pontos de infexo.
c
mg de C
14
H
22
N
2
O.HCl.
de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: misturar 50 mL de cido actico glacial e 930
mL de gua. Ajustar o pH para 3,4 com hidrxido de sdio
1 M. Misturar 4 volumes dessa soluo com 1 volume de
acetonitrila. O tempo de reteno da lidocana deve ser de
4 a 6 minutos.
volume com a Fase mvel e misturar.
Soluo padro: transferir 42,5 mg de lidocana SQR,
exatamente pesada, para balo volumtrico de 25 mL e
dissolver, com aquecimento se necessrio, em 0,5 mL
cido clordrico 1 M. Completar o volume com a Fase
mvel de modo a obter soluo a 1,7 mg/mL de lidocana.
Soluo de resoluo: preparar soluo de metilparabeno
a 220 ug/mL utilizando a Fase mvel como diluente.
Misturar 2 mL dessa soluo e 20 mL da Soluo padro.
resoluo entre os picos de lidocana e metilparabeno
no menor que 3. Injetar replicatas de 20 uL da Soluo
padro. O desvio padro relativo das reas de replicatas
sob os picos registrados no deve ser maior que 1,5%.
14
H
22
N
2
O.
HCl na amostra de acordo com a seguinte frmula:
em que
270,80 = peso molecular de cloridrato de lidocana;
234,34 = peso molecular de lidocana;
C = concentrao (mg/mL) de lidocana na Soluo padro;
A
a
= rea sob o pico de lidocana na Soluo amostra;
A
p
= rea sob o pico de lidocana na Soluo padro.
ROTULAGEM
Quando a matria-prima utilizada no processo de
fabricao de injetveis ou outras formas farmacuticas
estreis, o rtulo deve indicar se o produto estril ou se
deve ser esterilizado durante o processo.
Quando o rtulo indicar que a substncia estril, ela deve
cumprir os testes de esterilidade e endotoxinas bacterianas.
Quando o rtulo indicar que a substncia deve ser
esterilizada durante a produo ou a substncia destinada
a produo de preparaes estreis no-parenterais, ela
deve cumprir o teste de endotoxinas bacterianas.
CLASSE TERAPUTICA
Anestsico local.
CLORIDRATO DE LIDOCANA GEL
Contm, no mnimo, 95,0% e, no mximo, 105,0%
da quantidade declarada de C
14
H
22
N
2
O.HCl em base
hidroflica, viscosa e estril.
IDENTIFICAO
A. Transferir uma quantidade de gel equivalente a 80
mg de cloridrato de lidocana para um tubo de ensaio,
adicionar 4 mL de cido clordrico e aquecer em banho de
gua por 10 minutos. Deixar esfriar, transferir para funil
de separao com auxlio de 20 mL de gua, adicionar
hidrxido de sdio 5 M at ocorrer a completa precipitao
do frmaco e extrair com duas pores de 20 mL de
clorofrmio. Juntar as fases orgnicas e fltrar com sulfato
de sdio anidro. Evaporar o fltrado em banho de gua at
secura, sob corrente de nitrognio. O espectro de absoro
espectro de lidocana SQR, preparado de maneira idntica.
B. Dissolver 20 mg do resduo obtido no teste A. de
Identifcao em 1 mL de etanol, adicionar 0,5 mL de
cloreto cobaltoso a 10% (p/v), 0,5 mL de hidrxido de
sdio 5 M e agitar por 2 minutos. Produz-se precipitado
verde-azulado.
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 6,0 a 7,0.
Limite de 2,6-dimetilanilina. Misturar quantidade
exatamente pesada de gel equivalente a 25 mg de
cloridrato de lidocana anidra com gua sufciente para
produzir 5 mL e agitar em agitador de vrtex. A 2 mL
dessa mistura, adicionar 1 mL de soluo, recentemente
preparada, de p-dimetilaminobenzaldedo 1% (p/v) em
metanol. Agitar em agitador de vrtex e adicionar 2 mL
de cido actico glacial. Deixar em repouso durante 10
a c
839
minutos temperatura ambiente. Preparar soluo padro
de 2,6-dimetilanilina nas mesmas condies, utilizando 2
mL de uma 2,6-dimetilanilina a 0,0002% (v/v) em metanol,
ao invs da soluo do gel. A intensidade da colorao
amarela obtida no tubo da soluo teste no mais intensa
do que a obtida na soluo padro de 2,6-dimetilanilina.
DOSEAMENTO
Transferir quantidade de gel equivalente a 20 mg de
cloridrato de lidocana para funil de separao contendo 10
mL de gua. Agitar para diluir, adicionar 1 mL de hidrxido
de amnio 6 M e extrair com quatro pores de 20 mL
de clorofrmio. Juntar as fases orgnicas e evaporar em
corrente de ar quente. Adicionar 25 mL de cido sulfrico
0,005 M SV antes que o ltimo trao de clorofrmio seja
evaporado. Completar a evaporao do clorofrmio e
titular o excesso de cido com hidrxido de sdio 0,01 M
SV. Determinar o ponto fnal potenciometricamente. Cada
mL de cido sulfrico 0,005 M SV equivale a 2,708 mg de
C
14
H
22
N
2
O.HCl.
Em recipientes bem fechados. A tampa, devido
esterilidade, deve apresentar dispositivo indicativo de
abertura do tubo.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE LIDOCANA POMADA
14
H
22
N
2
O em pomada base
hidroflica.
IDENTIFICAO
Para extrair o frmaco, transferir quantidade de pomada
equivalente a 300 mg de lidocana para funil de separao
contendo 20 mL de gua. Agitar para diluir e extrair com
duas pores de 30 mL de hexano. Lavar o combinado
dos extratos orgnicos com 10 mL de gua e evaporar em
corrente de ar quente. Secar o resduo em vcuo sob slica-
gel por 24 horas. O espectro de absoro no infravermelho
(5.2.14) do resduo cristalino obtido na extrao do
frmaco, disperso em brometo de potssio, apresenta
observados no espectro de lidocana padro, preparado de
maneira idntica.
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de 2,6-dimetilanilina. Proceder conforme descrito
ligada a grupo octadecilsilano (5 um), mantida
minuto.
Tampo pH 8,0: adicionar a uma soluo de fosfato de
potssio dibsico a 0,685% (p/v), quantidade sufciente de
fosfato de potssio monobsico a 0,408% (p/v) at pH 8,0.
Soluo (1): transferir quantidade, exatamente pesada,
de pomada equivalente a 50 mg de lidocana, para balo
mvel e misturar. Transferir 2 mL dessa soluo para balo
mvel.
Soluo de (2): dissolver quantidade exatamente pesada
de 2,6-dimetilanilina em metanol para obter soluo a
1 mg/mL. Diluir, sucessivamente, em Fase mvel at
concentrao de 0,04 ug/mL.
Soluo (3): misturar iguais volumes de soluo de
lidocana SQR 0,1 mg/mL em Fase mvel e soluo de
2,6-dimetilanilina 0,05 g/mL em Fase mvel.
Injetar replicatas de 20 uL da Soluo (3). Os tempos de
reteno relativos so cerca de 1 para a 2,6-dimetilanilina
e de 0,5 para lidocana.
(1) e 20 uL da Soluo (2), registrar os cromatogramas
e medir as reas sob os picos. A rea sob o pico relativo
2,6-dimetilanilina, obtido com a Soluo (1), no
superior rea sob o pico principal obtido com a Soluo
(2). No mximo 0,04% (400 ppm) em relao ao contedo
de lidocana.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de Cloridrato de Lidocana Gel. Cada mL de cido
sulfrico 0,005 M SV equivale a 2,343 mg de C
14
H
22
N
2
O.
c
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE LIDOCANA
SOLUO INJETVEL
14
H
22
N
2
O.HCl. Soluo estril
de cloridrato de lidocana em gua para injetvel.
IDENTIFICAO
O teste B. pode ser omitido se forem realizados os testes
A. e C.
A. Transferir volume de soluo injetvel equivalente a 0,1
g de cloridrato de lidocana para bquer e adicionar volume
de hidrxido de sdio 5 M at alcalinizar a soluo. Filtrar
e lavar o resduo com gua. Dissolver o resduo em 1 mL
de etanol, adicionar 0,5 mL de cloreto cobaltoso a10%
(p/v) e agitar por 2 minutos. Produz-se precipitado azul-
esverdeado.
B. Para volume de soluo injetvel equivalente a 0,1 g de
cloridrato de lidocana, adicionar 10 mL de cido pcrico
SR. O ponto de fuso do precipitado obtido, aps lavar
com gua e secar a 105 C, em torno de 229 C.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,0 a 7,0.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de 2,6-dimetilanilina. Em um volume de soluo
injetvel equivalente a 25 mg de cloridrato de lidocana,
adicionar, se necessrio, gua sufciente para produzir 10
mL. Adicionar hidrxido de sdio 2 M at alcalinizar a
soluo e extrair com trs pores de 5 mL de clorofrmio.
Filtrar os combinados dos extratos orgnicos sob sulfato
de sdio anidro e lavar o fltro com 5 mL de clorofrmio.
Evaporar o fltrado at secura sob presso de 2 kPa.
Dissolver o resduo em 2 mL de metanol, adicionar 1 mL
de p-dimetilaminobenzaldedo a 1% (p/v) em metanol,
recentemente preparada, e 2 mL de cido actico glacial.
Preparar soluo de 2,6-dimetilanilina da mesma maneira
utilizando 10 mL de uma soluo de 2,6-dimetilanilina a
0,0001% (p/v) em metanol, ao invs da soluo injetvel.
A intensidade da colorao amarela obtida no tubo da
soluo contendo a amostra no deve ser mais intensa do
que a obtida na soluo de 2,6-dimetilanilina.
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). No mximo 1,1 EU/
mg de cloridrato de lidocana.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Em um volume da soluo injetvel
equivalente a 0,1 g de cloridrato de lidocana, adicionar
hidrxido de sdio 2 M at alcalinizar a soluo, e extrair
com trs pores de 20 mL de clorofrmio. Lavar cada
extrato orgnico com 10 mL de gua (utilizar sempre os
mesmos 10 mL de gua). Filtrar os combinados orgnicos
extrados atravs de fltro umedecido com clorofrmio
e lavar o fltro com 10 mL de clorofrmio. Juntar os
combinados orgnicos fltrados e os de lavagem. Titular
com cido perclrico 0,02 M SV. Determinar o ponto
fnal potenciometricamente ou utilizando cloreto de
metilrosanilnico SI como indicador. Cada mL de cido
14
H
22
N
2
O.
HCl.
(5 m), mantida entre 20C a 25C 1C da temperatura
selecionada; fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: misturar 50 mL de cido actico glacial e
930 mL de gua. Ajustar o pH para 3,4 com hidrxido de
sdio M. Misturar quatro volumes dessa soluo com um
volume de acetonitrila. A composio da Fase mvel pode
ser ajustada para que o pico da lidocana tenha tempo de
reteno entre 4 e 6 minutos.
equivalente a 0,1 mg de cloridrato de lidocana para balo
mvel e misturar.
Soluo padro: transferir 42,5 mg de lidocana SQR,
exatamente pesada, para balo volumtrico de 25 mL e
dissolver com aquecimento, se necessrio, em 0,5 mL de
cido clordrico 1 M. Completar o volume com Fase mvel
de modo a obter soluo a 1,7 mg/mL de lidocana.
Soluo de resoluo: preparar soluo de metilparabeno a
0,22 mg/mL utilizando Fase mvel como diluente. Misturar
2 mL dessa soluo e 20 mL da Soluo padro.
resoluo entre lidocana e metilparabeno no menor que
3. Injetar replicatas de 20 L da Soluo padro. O desvio
a c
841
C
14
H
22
N
2
O.HCl na amostra a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE MEfLOQUINA
Mefoquini hydrochloridum
C
17
H
16
F
6
N
2
O.HCl; 414,77
cloridrato de mefoquina; 05577
Cloridrato de (S)-rel--(2R)-2-piperidinil-2,8-bis-
(trifuormetil)-4-quinolinametanol (1:1)
[51773-92-3]
C
17
H
16
F
6
N
2
O.HCl, em relao substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco ou amarelado.
Apresenta polimorfsmo.
em metanol, solvel em acetato de etila e etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 259 C a 260 C.
Poder rotatrio (5.2.8): -0,2 a +0,2. Determinar em
soluo a 5% (p/v) em metanol.
IDENTIFICAO
observados no espectro de cloridrato de mefoquina SQR,
preparado de maneira idntica. Se os espectros obtidos
no forem idnticos, dissolver, separadamente, padro e
amostra em metanol e evaporar at a secura. Obter novos
espectros com os resduos.
B. A 20 mg da amostra, acrescentar 0,2 mL de cido
sulfrico. Desenvolve-se fuorescncia azul sob luz
ultravioleta (365 nm).
ENSAIOS DE PUREZA
280 nm; coluna de 250 mm de comprimento e 4 mm de
ligada a grupo octadecilsilano (3m a 10m), capeada;
fuxo da Fase mvel de 0,8 mL/minuto. Equilibrar a coluna
por 30 minutos com fuxo de 2 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 1 g de brometo de tetraeptilamnio
em mistura de metanol, bissulfato de sdio a 0,15% (p/v) e
acetonitrila (2:4:4).
Soluo (1): soluo da amostra a 4 mg/mL em Fase mvel.
mvel.
Soluo (3): transferir cerca de 8 mg de cloridrato de
mefoquina SQR e 8 mg de sulfato de quinidina para balo
volumtrico de 50 mL. Dissolver e completar o volume
com Fase mvel. Transferir 5 mL para balo volumtrico
Homogeneizar.
Injetar 20 L da Soluo (3). Os tempos de reteno
relativos so cerca de 0,5 para quinidina e 1,0 para
mefoquina. A resoluo entre os picos de mefoquina e
quinidina no menor que 8,5.
Procedimento: injetar 20 L das Solues (1) e (2) e
registrar o cromatograma por, no mnimo, 10 vezes o
tempo de reteno do pico principal. A rea sob qualquer
pico com tempo de reteno relativo de cerca de 0,7 obtido
com a Soluo (1) no maior que duas vezes a rea sob
o pico principal obtido com a Soluo (2) (0,2%). A rea
sob qualquer pico obtido com a Soluo (1), exceto o pico
principal e o pico com tempo de reteno relativo de cerca
de 0,7 no maior que a rea sob o pico principal obtido
com a Soluo (2) (0,1%). A soma das reas sob todos os
picos obtidos com a Soluo (1), exceto o pico principal
no maior que cinco vezes a rea sob o pico principal
obtido com a Soluo (2) (0,5%). No considerar picos
com rea inferior a 0,2 vezes a rea sob o pico principal
obtido com a Soluo (2).
Metais pesados (5.3.2.3). Determinar em 1 g da amostra.
mximo 3,0%.
c
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
15 mL de cido frmico anidro. Acrescentar 40 mL de
anidrido actico. Titular com cido perclrico 0,1 M SV
C
17
H
16
F
6
N
2
O.HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimalrico.
CLORIDRATO DE MEfLOQUINA
COMPRIMIDOS
17
H
16
F
6
N
2
O.HCl.
IDENTIFICAO
do p equivalente a 0,25 g de cloridrato de mefoquina para
bquer e adicionar cinco gotas de cido ntrico. Agitar com
50 mL de gua e fltrar em papel de fltro para fltrao
lenta. Adicionar ao fltrado nitrato de prata SR. Forma-se
precipitado branco caseoso, insolvel em cido ntrico mas
solvel em ligeiro excesso de hidrxido de amnio 6 M.
CARACTERSTICAS
Tempo: 60 minutos
de dissoluo, fltrar e diluir com Meio de dissoluo
solues em 283 nm (5.2.14) utilizando Meio de dissoluo
17
H
16
F
6
N
2
O.
HCl dissolvida no meio, comparando as leituras obtidas
com a da soluo de cloridrato de mefoquina SQR na
concentrao de 0,006% (p/v), preparada no mesmo
solvente. Pode-se utilizar at 5% (v/v) de metanol na
primeira diluio para assegurar a completa solubilizao
do cloridrato de mefoquina SQR.
declarada de C
17
H
16
F
6
N
2
O.HCl se dissolvem em 60
minutos.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
comprimidos. Transferir quantidade do p equivalente a
0,1 g de cloridrato de mefoquina para balo volumtrico
de 100 mL e adicionar 70 mL de metanol. Deixar em banho
de ultrassom durante 10 minutos e completar o volume
com metanol. Filtrar. Diluir, sucessivamente, em metanol,
nm, utilizando metanol para ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
17
H
16
F
6
N
2
O.HCl nos comprimidos a partir
de 1,0 mL/min.
Tampo pH 3,5: transferir cerca de 6,80 g de fosfato de
potssio monobsico para balo volumtrico de 1000 mL.
Dissolver e completar o volume com gua. Ajustar o pH
para 3,5 com cido fosfrico.
a c
843
cloridrato de mefoquina para balo volumtrico de 100
mL, adicionar cerca de 80 mL de metanol e deixar em
ultrassom durante 10 minutos. Completar o volume com
o mesmo solvente e fltrar, descartando os primeiros 10
mL do fltrado. Transferir 5 mL do fltrado para balo
Soluo padro: pesar exatamente cerca de 10 mg de
cloridrato de mefoquina SQR e transferir para balo
volumtrico de 100 mL. Adicionar cerca de 80 mL de Fase
mvel e deixar em ultrassom durante 10 minutos. Completar
o volume com o mesmo solvente e homogeneizar.
cauda no maior que 1,5. O desvio padro de reas de
17
H
16
F
6
N
2
O.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE METfORMINA
Metformini hydrochloridum
C H
3
N N NH
2
CH
3
NH NH
H
.
HCl
C
4
H
11
N
5
.HCl; 165,62
cloridrato de metformina; 05782
Cloridrato de N,N-dimetilimidodicarbonimdico diamida
(1:1)
[1115-70-4]
C
4
H
11
N
5
DESCRIO
branco.
em etanol, praticamente insolvel em acetona, cloreto de
metileno, ter etlico e clorofrmio.
Faixa de fuso (5.2.2): 222 C a 226 C.
IDENTIFICAO
de cloridrato de metformina SQR, preparado de maneira
idntica.
B. Responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
ligada a grupo octadecilsilano (3 m a 10 m), mantida
minuto.
Fase mvel: dissolver 17 g de fosfato de amnio
monobsico em 1000 mL de gua e ajustar o pH para 3,0
0,1, com cido fosfrico.
Soluo (1): dissolver, exatamente, cerca de 20 mg de
cianoguanidina SQR em gua e completar o volume para
100 mL. Transferir 1 mL para um balo volumtrico de 200
mL, completar o volume com Fase mvel e homogeneizar.
Soluo (2): dissolver, exatamente, cerca de 50 mg da
amostra em Fase mvel e diluir para 100 mL com o mesmo
solvente.
Fase mvel. Transferir 1 mL para balo volumtrico de 100
melamina em 90 mL de gua. Adicionar 5 mL da Soluo
(2) e completar o volume para 100 mL, com o mesmo
solvente. Dissolver 1 mL para 50 mL com Fase mvel.
Injetar 20 L da Soluo (4). A resoluo entre melamina e
cloridrato de metformina deve ser maior que 10. O desvio
(1), da Soluo (2) e da Soluo (3) e registrar os
cromatogramas por, no mnimo, o dobro do tempo de
reteno do pico principal. O pico obtido na Soluo (2),
correspondente a cianoguanidina, no pode ser maior que
0,02%, comparado ao pico obtido com a Soluo (1).
Nenhuma impureza individual obtida com a Soluo (2)
poder ser superior a 0,1%, comparada ao pico obtido
com a Soluo (3). A soma das reas de todos os picos
obtidos com a Soluo (2), exceto a do pico do solvente,
c
no maior que a rea sob o pico principal, obtido com a
Soluo (3) (0,5%). No considerar picos com rea inferior
quela apresentada pelo pico principal no cromatograma
obtido com a Soluo (4) (0,2%).
Mtodo I. No mximo 0,001% (10 ppm).
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver 60 mg da amostra previamente
dessecada em 4 mL de cido frmico anidro e adicionar
50 mL de anidrido actico. Titular com cido perclrico
0,1 M SV. Determinar o ponto fnal potenciometricamente.
Cada mL de cido perclrico 0,1 M SV equivale a 8,281 mg
de C
4
H
11
N
5
.HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Hipoglicemiante.
CLORIDRATO DE METfORMINA
COMPRIMIDOS
4
H
11
N
5
.HCl. Os comprimidos
so revestidos.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Dissolver quantidade
do p equivalente a 20 mg de cloridrato de metformina em
20 mL de etanol e agitar. Filtrar, evaporar o fltrado at
secura em banho-maria e dessecar o resduo a 105C por
1 hora. O resduo responde ao teste A. de Identifcao da
monografa de Cloridrato de metformina.
de p equivalente a 50 mg de cloridrato de metformina para
tubo de ensaio, adicionar 10 mL de gua, misturar e fltrar.
O fltrado responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
Procedimento para uniformidade do contedo. Transferir
cada comprimido para balo volumtrico de 250 mL,
adicionar 150 mL de gua e agitar, mecanicamente,
solvente. Filtrar. Transferir 5 mL do fltrado para balo
Realizar diluies sucessivas at concentrao de 0,001%
(p/v), utilizando gua como solvente. Preparar soluo
padro nas mesmas condies. Medir as absorvncias das
solues em 232 nm (5.2.14), utilizando gua para ajuste
4
H
11
N
5
.HCl em cada
comprimido, a partir das leituras obtidas.
Tempo: 45 minutos
de dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, com gua,
at concentrao adequada. Medir as absorvncias em
233 nm (5.2.14), utilizando gua para ajuste do zero.
4
H
11
N
5
.HCl dissolvida no
cloridrato de metformina SQR na concentrao de 0,001%
declarada de C
4
H
11
N
5
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias relacionadas na monografa de Cloridrato de
metformina. Preparar a Soluo (2) como descrito a seguir.
Soluo (2): Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir
quantidade do p equivalente a 500 mg da amostra para
balo volumtrico de 100 mL, dissolver com 60 mL de
Fase mvel, agitar por 15 minutos e completar o volume
com o mesmo solvente. Filtrar.
Procedimento: injetar 20 L da Soluo (2) e da Soluo
(3), registrar os cromatogramas e medir as reas de todos
os picos obtidos. Nenhum cromatograma pode ter o
tempo de reteno duas vezes superior ao da metformina.
No mximo 0,1% de impureza individual e, no mximo
0,6% de impureza total. No incluir nos clculos os picos
relativos ao solvente.
a c
845
DOSEAMENTO
Por Espectrofotometria de absoro no ultravioleta
(5.2.14). Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir
metformina para balo volumtrico de 100 mL e adicionar
70 mL de gua. Agitar, mecanicamente, por 15 minutos,
completar o volume com o mesmo solvente e fltrar.
mL e completar o volume com gua. Realizar diluies
gua como solvente. Preparar soluo padro nas mesmas
de C
4
H
11
N
5
.HCl nos comprimidos, a partir das leituras
obtidas.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE METOCLOPRAMIDA
COMPRIMIDOS
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl.
IDENTIFICAO
realizados os testes B., C., D. e E.. O teste de identifcao
B. pode ser omitido se forem realizados os testes A., C.,
D. e E..
A. de Doseamento, exibe mximos de absoro idnticos
C. Pesar e pulverizar os comprimidos. Utilizar quantidade
de p equivalente a 10 mg de cloridrato de metoclopramida.
Adicionar 1 mL de gua, agitar mecanicamente e fltrar.
Adicionar ao fltrado 1 mL de p-dimetilaminobenzaldedo
1% (p/v) em cido clordrico M. Desenvolve-se colorao
amarelo-alaranjada.
D. Pesar e pulverizar os comprimidos. Utilizar quantidade
do p equivalente a 10 mg de cloridrato de metoclopramida.
Adicionar 10 mL de cido clordrico SR, resfriar a 0 C e
adicionar 1 mL de nitrito de sdio a 1% (p/v). Desenvolve-
se precipitado amarelo. Adicionar 1 mL de 2-naftol SR.
Produz-se precipitado vermelho-alaranjado.
E. Pesar e pulverizar os comprimidos. Utilizar quantidade
do p equivalente a 10 mg de cloridrato de metoclopramida.
Adicionar 10 mL de gua, agitar e fltrar. O fltrado
responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
prosseguir conforme descrito no mtodo A. de Doseamento,
a partir de ...adicionar 70 mL de cido clordrico 0,1 M.
Tempo: 30 minutos
dissoluo e diluir em gua at concentrao adequada.
Medir as absorvncias em 309 nm (5.2.14), utilizando
gua para o ajuste do zero. Calcular a quantidade de
C
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl dissolvida no meio, comparando
as leituras obtidas com a da soluo de cloridrato de
metoclopramida SQR na concentrao de 0,001% (p/v),
declarada de C
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl se dissolvem em 30
minutos.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 3,0%.
DOSEAMENTO
mg de cloridrato de metoclopramida para balo volumtrico
de 100 mL e adicionar 70 mL de cido clordrico 0,1 M.
Deixar em ultrassom por 15 minutos. Agitar mecanicamente
por 15 minutos, completar o volume com o mesmo solvente,
solvente, at concentrao de 0,002% (p/v). Preparar
soluo padro na mesma concentrao utilizando o mesmo
c
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl nos
comprimidos, a partir das leituras obtidas.
de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 2,7 g de acetato de sdio em 500
mL de gua. Adicionar 500 mL de acetonitrila e 2 mL de
hidrxido de tetrametilamnio a 20% (p/v) em metanol.
Homogeneizar. Ajustar o pH em 6,5 com cido actico
glacial.
cloridrato de metoclopramida para balo volumtrico de 50
mL e acrescentar 35 mL de cido fosfrico 0,01 M. Deixar
em ultrassom por 15 minutos. Agitar mecanicamente por
balo volumtrico de 100 mL e completar o volume com o
mesmo solvente.
Soluo padro estoque: transferir 40 mg de cloridrato de
metoclopramida SQR para balo volumtrico de 50 mL.
Dissolver em cido fosfrico 0,01 M e completar o volume com
o mesmo solvente, de modo a obter soluo a 0,8 mg/mL.
com cido fosfrico 0,01 M, de modo a obter soluo a 40
g/mL.
Soluo de resoluo: transferir 12,5 mg de
benzenossulfonamida para balo volumtrico de 25 mL,
dissolver em 15 mL de metanol e completar o volume
com cido fosfrico 0,01 M. Transferir 5 mL da soluo
resultante para balo volumtrico de 100 mL, adicionar 5
mL da Soluo padro estoque e completar o volume com
cido fosfrico 0,01 M.
Os tempos de reteno relativos so cerca de 0,2
para benzenossulfonamida e 1,0 para cloridrato de
metoclopramida. O desvio padro relativo das reas de
C
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl nos comprimidos a partir das respostas
ROTULAGEM
SOLUO INJETVEL
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl.
IDENTIFICAO
D. e E..
A. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa de
200 nm a 400 nm, da soluo amostra obtida no mtodo A.
de Doseamento, exibe mximos de absoro idnticos aos
C. Utilizar volume da soluo injetvel equivalente a 10 mg
de cloridrato de metoclopramida. Adicionar 1 mL de gua
e agitar. Adicionar 1 mL de p-dimetilaminobenzaldedo a
amarelo-alaranjada.
D. Utilizar volume da soluo injetvel equivalente a 10
mg de cloridrato de metoclopramida. Adicionar 10 mL de
cido clordrico SR, resfriar a 0 C e adicionar 1 mL de
nitrito de sdio a 1% (p/v). Produz-se precipitado amarelo.
Adicionar 1 mL de 2-naftol SR. Produz-se precipitado
E. Utilizar volume da soluo injetvel equivalente a 10
mg de cloridrato de metoclopramida. Adicionar 10 mL de
gua e agitar. A soluo resultante responde s reaes do
on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 2,5 a 6,5.
Pirognios (5.5.2.1). Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
da soluo injetvel equivalente a 10 mg de cloridrato
de metoclopramida para balo volumtrico de 100
mL e completar o volume com cido clordrico 0,1 M.
Homogeneizar. Diluir, sucessivamente, com o mesmo
a c
847
solvente, at concentrao de 0,002% (p/v). Preparar
soluo padro na mesma concentrao utilizando o mesmo
em 309 nm, utilizando cido clordrico 0,1 M para o ajuste
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl na
soluo injetvel, a partir das leituras obtidas.
da monografa de Cloridrato de metoclopramida
comprimidos. Preparar a Soluo amostra como descrito
a seguir.
equivalente a 40 mg de cloridrato de metoclopramida para
cido fosfrico 0,01 M. Homogeneizar. Transferir 5 mL
Procedimento: injetar, separadamente, 20 l da Soluo
C
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl na soluo injetvel a partir das
amostra.
ROTULAGEM
SOLUO ORAL
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl.
IDENTIFICAO
D. e E..
A. O espectro de absoro no visvel (5.2.14), na faixa de
400 nm a 800 nm, da soluo amostra obtida no mtodo A.
de Doseamento, exibe mximos de absoro idnticos aos
C. Utilizar volume da soluo oral equivalente a 10 mg
de cloridrato de metoclopramida. Adicionar 1 mL de gua
e agitar. Adicionar 1 mL de p-dimetilaminobenzaldedo a
amarelo-alaranjada.
D. Utilizar volume da soluo oral equivalente a 10 mg de
cloridrato de metoclopramida. Adicionar 10 mL de cido
clordrico SR, resfriar a 0 C e adicionar 1 mL de nitrito
de sdio a 1% (p/v). Desenvolve-se precipitado amarelo.
Adicionar 1 mL de 2-naftol SR. Desenvolve-se precipitado
E. Utilizar volume da soluo oral equivalente a 10 mg de
cloridrato de metoclopramida. Adicionar 10 mL de gua
e agitar. A soluo resultante responde s reaes do on
cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 2,0 a 5,5.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de absoro no visvel (5.2.14). Proceder ao abrigo da
luz direta. Transferir volume da soluo oral equivalente
a 10 mg de cloridrato de metoclopramida para balo
Homogeneizar. Transferir 5 mL para balo volumtrico de
100 mL, acrescentar 5 mL de cido clordrico M e misturar.
Acrescentar 5 mL de nitrito de sdio a 1% (p/v), preparado
extemporaneamente. Misturar e deixar em repouso por
10 minutos. Acrescentar 5 mL de sulfamato de amnio
a 5% (p/v), preparado extemporaneamente. Misturar e
deixar em repouso por 25 minutos. Acrescentar 5 mL de
dicloridrato de N-(1-naftil)etilenodiamina a 0,5% (p/v)
em cido clordrico M, preparado extemporaneamente,
misturar. Completar o volume com gua e deixar em
repouso por cinco minutos, obtendo soluo a 0,0005%
(p/v). Preparar soluo padro nas mesmas condies.
utilizando gua para o ajuste do zero. Calcular a quantidade
de C
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl na soluo oral a partir das leituras
obtidas.
de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 2,7 g de acetato de sdio em 600
mL de gua. Adicionar 400 mL de acetonitrila e 5 mL de
hidrxido de tetrametilamnio a 20% (p/v) em metanol.
c
Homogeneizar. Ajustar o pH para 6,5 com cido actico
glacial.
Soluo amostra: transferir volume da soluo oral
equivalente a 4 mg de cloridrato de metoclopramida para
cido fosfrico 0,01 M. Homogeneizar.
Soluo padro estoque: transferir 40 mg de cloridrato de
metoclopramida SQR para balo volumtrico de 50 mL.
Dissolver em cido fosfrico 0,01 M e completar o volume
com o mesmo solvente, de modo a obter soluo a 0,8 mg/
mL.
com cido fosfrico 0,01 M, de modo a obter soluo
padro de cloridrato de metoclopramida a 0,16 mg/mL.
Soluo de resoluo: transferir 0,125 g de
benzenossulfonamida para balo volumtrico de 25 mL.
Dissolver em 15 mL de metanol. Completar o volume
com cido fosfrico 0,01 M. Transferir 15 mL da soluo
anterior e 5 mL da Soluo padro estoque para balo
fosfrico 0,01 M. Homogeneizar.
O tempo de reteno relativo cerca de 0,2 para
a benzenossulfonamida e 1,0 para o cloridrato de
metoclopramida. O desvio padro relativo das reas de
padro e amostra, registrar os cromatogramas e medir as reas
sob os picos. Calcular a quantidade de C
14
H
22
ClN
3
O
2
.HCl na
soluo oral a partir das respostas obtidas com as Solues
padro e amostra.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE PILOCARPINA
Pilocarpini hydrochloridum
O
O
C H
3
N
N
C H
3
.
HCl
C
11
H
16
N
2
O
2.
HCl; 244,72
cloridrato de pilocarpina; 07050
Cloridrato de (3S,4S)-3-etildiidro-4-[(1-metil-1H-
imidazol-5-il)metil]-2(3H)-furanona (1:1)
[54-71-7]
C
11
H
16
N
2
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco cristalino ou cristais
incolores, higroscpico.
Solubilidade. Solvel em gua e em etanol, pouco solvel
em clorofrmio, insolvel em ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 199 C a 205 C. O intervalo entre
o incio e o fm da fuso no deve exceder a 3 C.
em gua.
IDENTIFICAO
realizados os testes B.,C. e D. Os testes de identifcao
B. e C. podem ser omitidos se forem realizados os testes
A. e D.
amostra, previamente dessecada, dispersa em leo mineral,
pilocarpina SQR, preparado de maneira idntica.
C. Dissolver 2,5 g da amostra em gua isenta de dixido de
carbono e completar para 50 mL com o mesmo solvente.
Diluir 0,2 mL dessa soluo para 2 mL com gua e
adicionar 0,05 mL de dicromato de potssio SR, 1 mL de
perxido de hidrognioa 3% (p/v) e 2 mL de clorofrmio.
Homogeneizar. Desenvolve-se colorao violeta na
camada clorofrmica.
ENSAIOS DE PUREZA
amnio concentrado, metanol e cloreto de metileno
a c
849
Soluo (1): dissolver 0,25 g da amostra em metanol e
metanol.
Soluo (3): dissolver 10 mg de cloridrato de pilocarpina
SQR em metanol e completar para 2 mL com o mesmo
solvente.
metanol.
Desenvolver o cromatograma por 15 cm. Secar a placa
entre 100 C e 105 C por 10 minutos, deixar esfriar e
nebulizar com iodobismutato de potssio SR e, em seguida,
com perxido de hidrognio a 3% (p/v). Qualquer mancha
aquela obtida com a Soluo (4) (1%).
ferro (5.3.2.4). Determinar em 10 mL de soluo a 5%
(p/v) em gua isenta de dixido de carbono. Preparar o
padro utilizando 5 mL de Soluo padro de ferro (1 ppm
Fe) e 5 mL de gua. No mximo 0,001% (10 ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). Dessecar em estufa a100-
105 C por 2 horas. No mximo 3%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 2 g de amostra e dissolver em
60 mL de gua. Titular com hidrxido de sdio M SV e
determinar o ponto fnal potenciometricamente. Cada mL
de hidrxido de sdio M SV equivale a 244,720 mg de
C
11
H
16
N
2
O
2
.HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiglaucomatoso.
CLORIDRATO DE PIRIDOXINA
Pyridoxini hydrochloridum
N CH
3
OH
OH
O H .
HCl
C
8
H
11
NO
3
.HCl; 205,64
cloridrato de piridoxina; 07167
Cloridrato de 5-hidroxi-6-metil-3,4-piridinodimetanol
(1:1)
[58-56-0]
C
8
H
11
NO
3
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. P cristalino, branco ou
quase branco. Ponto de fuso (5.2.2): em torno de 205
o
C,
com decomposio.
em etanol, praticamente insolvel em clorofrmio e ter
etlico.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +28 a +30, determinado
em soluo a 2% (p/v) em cido clordrico 0,1 M.
IDENTIFICAO
de cloridrato de piridoxina SQR, preparado de maneira
idntica.
clordrico 0,1 M, exibe mximos entre 288 nm e 296 nm,
com absorvncia de 0,420 a 0,445. Na faixa de 220 nm
a 350 nm, uma soluo preparada pela diluio de 1 mL
de soluo a 0,1% (p/v) em cido clordrico 0,1 M para
100 mL com tampo fosfato equimolar 0,025 M, exibe
mximos entre 248 nm e 256 nm e entre 320 nm e 327 nm.
As absorvncias em cada mximo so de, respectivamente,
0,175 a 0,195 e 0,345 a 0,365.
c
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 2,4 a 3,0. Determinar em soluo da amostra a
utilizando slica-gel G, como suporte, e mistura de acetona,
tetracloreto de carbono, tetraidrofurano e amnia 13,5 M
Soluo (1): soluo aquosa da amostra a 100 mg/mL.
Soluo (2): soluo aquosa da amostra a 10 mg/mL.
Soluo (3): soluo aquosa da amostra a 0,25 mg/mL.
Soluo (4): soluo aquosa de cloridrato de piridoxina
SQR a 10 mg/mL.
Procedimento: desenvolver o cromatograma. Remover
a placa, deixar secar ao ar. Nebulizar com soluo de
carbonato de sdio a 5% (p/v) em mistura de gua e etanol
(70:30). Secar em corrente de ar e nebulizar com soluo
de 2,6-dicloroquinona-4-clorimida a 0,1% (p/v) em etanol.
Desconsiderar manchas remanescentes na linha de base.
Compostos fenlicos. Em tubo de ensaio adicionar 5 mg
da amostra, 0,05 mL de cido clordrico 3 M, 1 mL de gua
e 1 mL de cloreto frrico SR. Homogeneizar e adicionar 1
mL de ferricianeto de potssio SR. Aps 2 minutos no se
desenvolve colorao verde azulada.
Limite de N,N-dimetilanilina. Transferir, exatamente,
mL, adicionar 20 mL de gua e dissolver com auxlio de
aquecimento. Resfriar e adicionar 2 mL de cido actico M
e 1 mL de nitrito de sdio a 1% (p/v). Completar o volume
com gua e homogeneizar. A soluo no deve apresentar
colorao mais intensa que soluo de N,N-dimetilanilina a
0,001% (p/v) (10 ppm) preparada de maneira similar.
em 20 mL de soluo da amostra a 5% (p/v). No mximo
0,002% (20 ppm).
amostra. Dessecar em estufa a 105 C. No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). A 0,4 g da amostra, exatamente
pesada, adicionar 30 mL de cido actico glacial e 10
mL de acetato de mercrio SR. Se necessrio, deixar em
ultrassom at completar a dissoluo. Titular com cido
perclrico 0,1 M SV, utilizando cloreto de metilrosanilnio
SI como indicador. Realizar ensaio em branco e fazer as
8
H
11
NO
3
.HCl.
a 10 m), mantida a 25 C; fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/
minuto.
Fase mvel: transferir para balo volumtrico de 2000 mL,
20 mL de cido actico glacial, 1,2 g de 1-hexanossulfonato
de sdio, diluir com 1400 mL de gua. Ajustar o pH para
3,0 com cido actico glacial ou hidrxido de sdio M.
Adicionar 470 mL de metanol, homogeneizar e completar
o volume com gua. Fazer ajustes, se necessrio.
Soluo padro interno: dissolver quantidade de cido
p-hidroxibenzoico em Fase mvel de modo a obter
concentrao de 5 mg/mL.
pesada, para balo volumtrico de 100 mL, dissolver e
completar o volume com Fase mvel. Homogeneizar.
Transferir 10 mL para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 1 mL de Soluo padro interno, completar o
volume com Fase mvel e homogeneizar.
Soluo de padro: transferir, exatamente, cerca de 50 mg
de cloridrato de piridoxina SQR para balo volumtrico de
100 mL, dissolver com fase mvel, completar o volume
com o mesmo solvente e homogeneizar. Transferir 10 mL
Soluo de padro interno, completar o volume com Fase
entre os picos correspondentes ao cloridrato de piridoxina
e ao cido p-hidroxibenzoico no menor que 2,5. O
e medir as reas sob os picos correspondentes ao cloridrato
de piridoxina e ao cido p-hidroxibenzoico. Calcular o
teor de C
8
H
11
NO
3
.HCl na amostra a partir das respostas
obtidas para a relao cloridrato de piridoxina/cido
p-hidroxibenzoico com a Soluo padro e a Soluo
amostra.
ROTULAGEM
a c
851
CLASSE TERAPUTICA
Suplemento vitamnico.
CLORIDRATO DE PIRIDOXINA
COMPRIMIDOS
8
H
11
NO
3
.HCl.
IDENTIFICAO
do p equivalente a 0,1 g de cloridrato de piridoxina em 50
mL de metanol agitando, mecanicamente, por 15 minutos.
Filtrar, adicionar amnia 13,5 M sufciente para alcalinizar
o fltrado e evaporar at secura. Retomar o resduo com
15 mL de clorofrmio e fltrar. Ao fltrado gotejar 2 mL de
cloreto de acetila, adicionar 8 mL de metanol e evaporar at
secura. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14)
do resduo, disperso em brometo de potssio, apresenta
observados no espectro de cloridrato de piridoxina SQR,
B. Pesar e pulverizar os comprimidos. Dissolver quantidade
do p equivalente a 20 mg de cloridrato de piridoxina em
50 mL de tampo fosfato 0,025 M e agitar por 15 minutos.
Transferir para balo volumtrico de 100 mL e completar
o volume com tampo fosfato 0,025 M. O espectro de
absoro no ultravioleta (5.2.14) dessa soluo, na faixa
de 230 nm a 350 nm, exibe mximos de absoro em 254
nm e 324 nm.
do p equivalente a 0,1 g de cloridrato de piridoxina com
5 mL de gua e fltrar para tubo de ensaio. Adicionar duas
a trs gotas de cloreto frrico SR. Desenvolve-se colorao
laranja-avermelhada.
D. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir quantidade
do p equivalente a 20 mg de cloridrato de piridoxina para
bquer, adicionar 50 mL de gua e deixar em repouso at
decantao. A 1 mL do sobrenadante, adicionar 10 mL
de acetato de sdio a 5% (p/v), 1 mL de gua, 1 mL de
2-6-dicloroquinona-4-clorimida a 0,5% (p/v) em etanol e
homogeneizar. Desenvolve-se colorao azul, com rpida
passagem para marrom. Repetir a operao adicionando 1
mL de cido brico a 0,3% (p/v) no lugar da gua. No
produz colorao azul.
CARACTERSTICAS
Desintegrao (5.1.4.1). Cumpre o teste.
contendo 300 mL de gua, aguardar desintegrao e
completar o volume com o mesmo solvente. Filtrar
descartando os primeiros 25 mL do fltrado. A partir do
fltrado, fazer diluies adequadas com cido clordrico a
1% (v/v) de modo a obter concentrao de 0,001% (p/v).
Preparar soluo de cloridrato de piridoxina SQR na
mesma concentrao da soluo amostra, usando o mesmo
solvente. Determinar as absorvncias das solues em 290
nm (5.2.14), utilizando cido clordrico a 1% (v/v) para
ajuste do zero. Calcular a quantidade de C
8
H
11
NO
3
.HCl em
cada comprimido, a partir das leituras obtidas.
Tempo: 45 minutos
8
H
11
NO
3
.
HCl dissolvida no meio, comparando as leituras obtidas
com a de soluo de cloridrato de piridoxina SQR na
solvente.
declarada de C
8
H
11
NO
3
ENSAIOS DE PUREZA
utilizando slica-gel G, como suporte, e mistura de acetona,
tetracloreto de carbono, tetraidrofurano e amnia 13,5 M
piridoxina com 10 mL de gua por 15 minutos, fltrar e
usar o fltrado.
gua.
secar ao ar. Nebulizar com carbonato de sdio decaidratado
a 5% (p/v) em mistura de etanol e gua (30:70). Secar
em corrente de ar e nebulizar com 2-6-dicloroquinona-
4-clorimida a 0,1% (p/v) em etanol. Qualquer mancha
c
DOSEAMENTO
do p equivalente a 25 mg de cloridrato de piridoxina e
acrescentar 50 mL de cido clordrico 0,1 M. Aquecer em
banho-maria por 15 minutos, agitando ocasionalmente.
Resfriar, diluir para 100 mL com cido clordrico 0,1
M e fltrar, descartando os primeiros 20 mL. Diluir 5
mL do fltrado para 100 mL com cido clordrico 0,1
M. Preparar soluo padro na mesma concentrao,
utilizando o mesmo solvente. Medir as absorvncias
das solues resultantes em 290 nm (5.2.14), utilizando
quantidade de C
8
H
11
NO
3
.HCl nos comprimidos, a partir
das leituras obtidas. Alternativamente, realizar os clculos
considerando A (1%, 1 cm) = 430, em 290 nm.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE PROMETAZINA
Promethazini hydrochloridum
S
N
N
CH
3
CH
3
CH
3
.
HCl
C
17
H
20
N
2
S.HCl; 320,88
cloridrato de prometazina; 07431
Cloridrato de N,N,-trimetil-10H-fenotiazina-10-
etanamina (1:1)
[58-33-3]
C
17
H
20
N
2
S.HCl em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. P cristalino, branco a
levemente amarelado, inodoro, sabor amargo. Funde em
torno de 222 C, com decomposio (5.2.2).
clorofrmio; praticamente insolvel em ter etlico.
IDENTIFICAO
de cloridrato de prometazina SQR, preparado de maneira
idntica.
B. Responde s reaes de identifcao de fenotiazinas
(5.3.1.5).
C. Dissolver 0,1 g de amostra em 3 mL de gua purifcada
e adicionar 1 mL de cido ntrico gota a gota. Forma-se
precipitado que se dissolve rapidamente, desenvolvendo
colorao vermelha que passa a alaranjada e, em seguida,
amarela. Aquecer at fervura. A soluo passa alaranjada
e a seguir forma-se precipitado vermelho-alaranjado.
ENSAIOS DE PUREZA
recm-preparada.
Substncias relacionadas. Proceder ao teste para
Substncias relacionadas fenotiazinas (5.3.1.6), usando
Fase mvel B e aplicar separadamente placa 10 uL de
cada uma das trs solues, recentemente preparadas,
descritas a seguir.
Soluo (1): soluo a 2% (p/v) da amostra em mistura de
dietilamina e metanol (5:95).
Soluo (2): soluo a 0,02% (p/v) de cloridrato de
isoprometazina SQR no mesmo solvente.
prometazina SQR no mesmo solvente.
secar ao ar. Nenhuma mancha de isoprometazina no
cromatograma obtida com a Soluo (1) mais intensa
que aquelas obtidas com a Soluo (2) (1%). Nenhuma
outra mancha secundria obtida com a Soluo (1) mais
intensa que aquelas obtidas com a Soluo (3) (0,5%).
amostra. Dessecar em estufa de 100 C a 105 C, at peso
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
A. Dissolver 0,25 g, exatamente pesados, em mistura de 5
mL de cido clordrico 0,01 M e 50 mL de etanol. Titular com
hidrxido de sdio 0,1 M SV, determinando o volume gasto
entre os dois pontos de infexo potenciometricamente.
a c
853
Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV corresponde a
32,088 mg de C
17
H
20
N
2
S.HCl.
B. Dissolver, exatamente, cerca de 700 mg da amostra
em uma mistura de 75 mL de cido actico glacial e 10
mL de soluo de acetato de mercrio SR. Adicionar uma
gota de soluo de cristal violeta SI e titular com cido
perclrico 0,1 M SV at colorao azul. Realizar ensaio em
17
H
20
N
2
S.
HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiemtico, anti-histamnico.
COMPRIMIDOS
17
H
20
N
2
S.HCl. Os comprimidos
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Pesar quantidade
do p equivalente a 40 mg de cloridrato de prometazina,
adicionar 10 mL de gua e 2 mL de hidrxido de sdio
M, agitar e extrair com 15 mL de ter etlico. Lavar o
extrato etreo com 5 mL de gua, secar com sulfato de
sdio anidro, evaporar secura e dissolver o resduo
em 0,4 mL de clorofrmio. O espectro de absoro no
infravermelho (5.2.14) apresenta mximos de absoro
espectro de cloridrato de prometazina SQR, preparado de
maneira idntica.
B. quantidade de p de comprimidos, contendo 5 mg
de cloridrato de prometazina, adicionar 5 mL de cido
sulfrico. Deixar em repouso por 5 minutos. Desenvolve-
se colorao vermelha.
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
absorvncias das solues em 249 nm, utilizando o mesmo
C
17
H
20
N
2
S.HCl dissolvida no meio, comparando as leituras
obtidas com a soluo de cloridrato de prometazina SQR,
declarada de C
17
H
20
N
2
S.HCl

ENSAIOS DE PUREZA
em Pesquisa de impurezas relacionadas a fenotiazinas por
cromatografa em camada delgada (5.3.1.6), utilizando
a Fase mvel B e aplicando, separadamente, placa
20 L de cada uma das seguintes solues, preparadas
imediatamente antes do uso. Desnecessria a operao em
atmosfera de nitrognio.
Soluo (1): extrair quantidade do p de comprimidos,
equivalente a 0,1 g de cloridrato de prometazina com 10
mL de mistura dietilamina e metanol (5:95) e fltrar.
isoprometazina SQR em mistura de dietilamina e metanol
(5:95).
Soluo (3): diluir 1 volume da Soluo (1) para 200
volumes com mistura dietilamina e metanol (5:95).
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa,
deixar secar ao ar. Nenhuma mancha correspondente a
isoprometazina no cromatograma obtido com a Soluo (1)
mais intensa que qualquer outra obtida com a Soluo (2)
(1%). Nenhuma outra mancha secundria mais intensa
que a mancha obtida no cromatograma com a Soluo (3)
(0,5%).
DOSEAMENTO
Realizar o doseamento ao abrigo da luz. Pulverizar 20
comprimidos. Pesar quantidade do p equivalente a 50
mg de cloridrato de prometazina, adicionar 10 mL de
cido clordrico 2 M, 200 mL de gua purifcada, agitar
por 15 minutos, completar o volume para 500 mL com
gua purifcada e centrifugar 50 mL da mistura. A 5 mL
do sobrenadante claro e lmpido, adicionar 10 mL de cido
clordrico 0,1 M e completar o volume para 100 mL com gua
purifcada. Preparar soluo de cloridrato de prometazina
SQR na mesma concentrao, em cido clordrico 0,01 M.
c
Medir as absorvncias (5.2.14) das solues resultantes
17
H
20
N
2
S.HCl nos
comprimidos a partir das leituras obtidas, com as solues
padro e amostra.
ROTULAGEM
SOLUO INJETVEL
17
H
20
N
2
S.HCl.
IDENTIFICAO
O teste B. pode ser omitido se forem realizados os testes
A. e C.
A. Medir o volume da soluo injetvel equivalente a 25
mg de cloridrato de prometazina e completar para 50 mL
com cido sulfrico 0,5 M. Diluir 5 mL para 100 mL com
o mesmo solvente. O espectro de absoro no ultravioleta
(5.2.14) exibe mximos e mnimos nos mesmos
comprimentos de onda que a soluo similar de cloridrato
de prometazina SQR.
B. Adicionar, lentamente, 2 mL de cido sulfrico ao
volume da soluo contendo 5 mg de cloridrato de
prometazina e deixar em repouso por 5 minutos. Produz-se
cor vermelha.
C. Responde s reaes de on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,0 a 6,0.
ENSAIOS DE PUREZA
em Cromatografa em camada delgada (5.2.17.1).
Desenvolver o cromatograma, protegido da luz, sob uma
atmosfera de nitrognio utilizando slica-gel GF
254
, como
suporte, e uma mistura de dietilamina, hexano e acetona
(15:45:50) como fase mvel. Aplicar, separadamente,
Soluo (1): diluir volume da soluo injetvel com
mistura dietilamina e metanol (5:95) at obter soluo de
cloridrato de prometazina a 1,0 % (v/v).
a mistura de dietilamina e metanol (5:95).
Soluo (3): preparar soluo de cloridrato de
isoprometazina SQR a 0,01% (v/v) com a mistura
dietilamina e metanol (5:95).
Soluo (4): preparar soluo de sulfxido de prometazina
SQR a 0,025% (v/v) com a mistura de dietilamina e
metanol (5:95)
secar ao ar. Nebulizar com cido perclrico a 20% (v/v).
Aquecer a placa a 100 C por 5 minutos. No cromatograma
obtido com a Soluo (1), qualquer mancha correspondente
isoprometazina no mais intensa do que a mancha
principal no cromatograma obtido com a Soluo (3)
(1,0%). Qualquer mancha correspondente ao sulfxido
de prometazina no mais intensa do que a mancha
no cromatograma obtido com a Soluo (4) (2,5%), e
qualquer outra mancha secundria no mais intensa do
que a mancha no cromatograma obtido com a Soluo (2)
(0,5%). Desconsiderar qualquer mancha restante na linha
de aplicao.
mg de cloridrato de prometazina.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14), protegendo da luz.
Transferir volume da soluo injetvel equivalente a,
cerca de, 25 mg de cloridrato de prometazina para balo
clordrico 0,01 M. Diluir 10 mL para 100 mL com cido
clordrico 0,01 M e, em seguida, diluir 10 mL para 50 mL
com o mesmo solvente, obtendo concentrao de 0,0005%
Medir as absorvncias da soluo em 249 nm, utilizando
quantidade de C
17
H
20
N
2
S.HCl na soluo injetvel a partir
Em recipiente de vidro tipo I, protegido da luz.
ROTULAGEM
a c
855
CLORIDRATO DE PROPRANOLOL
Propranololi hydrochloridum
O
N
CH
3
OH
H
CH
3
.
HCl
C
16
H
21
NO
2
.HCl; 295,80
cloridrato de propranolol; 07482
Cloridrato de 1-[(1-metiletil)amino]-3-(1-naftaleniloxi)-2-
propanol (1:1)
[318-98-9]
C
16
H
21
NO
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou quase branco,
inodoro, de sabor amargo e aspecto cristalino ou amorfo.
Solubilidade. Solvel em gua e etanol, pouco solvel em
clorofrmio, insolvel em ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 163 C a 166 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): 1,0 a +1,0. Determinar
em soluo aquosa a 4% (p/v) da substncia dessecada.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada, e dispersa em brometo
de cloridrato de propranolol SQR, preparado de maneira
idntica.
metanol, exibe mximos de absoro em 290 nm, 306 nm
e 319 nm. As absorvncias so de, aproximadamente, 0,84,
0,50 e 0,30, respectivamente.
254
,
como suporte, e mistura de metanol e soluo concentrada
de amnia (99:1) como fase mvel. Aplicar, separadamente,
propranolol SQR em metanol.
Nebulizar a placa com uma mistura de anisaldedo, cido
actico glacial, metanol e cido sulfrico (0,5:10:85:5).
Secar entre 100 C e 105 C. A mancha principal obtida no
cromatograma da Soluo (1) corresponde em posio, cor
e intensidade quela obtida com a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
Acidez e alcalinidade. Dissolver 0,2 g da amostra em
gua livre de dixido de carbono e completar para 20 mL
com o mesmo solvente. Adicionar 0,2 mL de vermelho de
metila SI e 0,2 mL de cido clordrico 0,01 M. A soluo
vermelha. Adicionar 0,4 mL de hidrxido de sdio 0,01 M.
A soluo amarela.
254
tolueno e metanol (90:10), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (2): soluo a 0,2 mg/mL da amostra em metanol.
Nebulizar a placa com uma mistura de anisaldedo, cido
actico glacial, metanol e cido sulfrico (0,5:10:85:5).
Secar entre 100 C e 105 C. Qualquer mancha secundria
com a Soluo (2) (0,2%).
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver 0,5 g da amostra em mistura
de 50 mL de cido actico glacial e 10 mL de acetato
de mercrio SR. Titular com cido perclrico 0,1 M SV,
determinando o ponto fnal potenciometricamente ou
utilizando cloreto de metilrosanilnio SI como indicador.
Cada mL do cido perclrico 0,1 M SV equivale a 29,580
mg de C
16
H
21
NO
2
.HCl.
c
1,5 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 0,5 g de laurilsulfato de sdio em 18 mL
de cido fosfrico 0,15 M, adicionar 90 mL de acetonitrila, 90
mL de metanol e diluir com gua para 250 mL.
da amostra para balo volumtrico de 50 mL, adicionar
completar o volume com metanol e homogeneizar.
de cloridrato de propranolol SQR para balo volumtrico
de 50 mL, dissolver com metanol e completar o volume
com o mesmo solvente, de modo a obter soluo a 1 mg/
mL. Transferir 5 mL para balo volumtrico de 25 mL,
completar o volume com metanol e homogeneizar.
Soluo de resoluo: preparar soluo a 0,25 mg/mL
de cloridrato de procainamida em metanol. Transferir 5
mL desta soluo e 5 mL da Soluo padro para balo
volumtrico de 25 mL. Completar o volume com metanol
e homogeneizar.
resoluo entre os picos correspondentes procainamida e
ao cloridrato de propranolol no menor que 2,0. O fator de
cauda do pico correspondente ao cloridrato de propranolol
16
H
21
NO
2
.HCl
na amostra a partir das respostas obtidas com a Soluo padro
e a Soluo amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-hipertensivo, antiarrtmico, antianginoso.
CLORIDRATO DE PROPRANOLOL
COMPRIMIDOS
16
H
21
NO
2
.HCl.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Suspender em
gua quantidade do p equivalente a 0,1 g de cloridrato
de propranolol e fltrar. Transferir o fltrado para funil
de separao, alcalinizar com hidrxido de sdio M e
extrair com trs volumes de 10 mL de ter etlico. Lavar
os extratos combinados com gua at neutralizar. Filtrar
sobre sulfato de sdio anidro, evaporar o fltrado e secar
o resduo presso reduzida a 50 C por uma hora. O
com as mesmas intensidades relativas daqueles obtidos
no espectro do resduo obtido aps tratamento idntico
realizado com 0,1 g do cloridrato de propranolol SQR.
B. O ponto de fuso do resduo obtido no teste A. de
Identifcao de, aproximadamente, 94 C (5.2.2).
C. A soluo a 0,004% (p/v) obtida no mtodo A. do
Doseamento responde ao teste C. de Identifcao na
monografa de Cloridrato de propranolol.
D. Proceder conforme descrito em Substncias
relacionadas. A mancha principal obtida no cromatograma
com a Soluo (1) corresponde em posio, cor e
E. Suspender em gua quantidade de p dos comprimidos
equivalente a 0,1 g de cloridrato de propranolol. Agitar e
fltrar em papel de fltro adequado. O fltrado responde s
CARACTERSTICAS
Procedimento para uniformidade de contedo. Pesar,
individualmente, e transferir cada comprimido para balo
volumtrico de 100 mL, adicionar 5 mL de cido clordrico
a 1% (v/v), agitar at desintegrao do comprimido.
Adicionar 70 mL de metanol e submeter ao ultrassom por 1
minuto. Completar o volume com metanol, homogeneizar
e fltrar em papel de fltro adequado, desprezando os
primeiros mililitros. Diluir o fltrado at concentrao de
0,004% (p/v). Preparar soluo metanlica a 0,004% (p/v)
de cloridrato de propranolol SQR e medir as absorvncias
a c
857
das solues resultantes em 290 nm (5.2.14), utilizando
metanol para ajuste do zero. Calcular o teor individual
de C
16
H
21
NO
2
.HCl nos comprimidos a partir das leituras
obtidas.
Meio de dissoluo: cido clordrico a 1% (v/v), 1000 mL
Tempo: 30 minutos
Procedimento: aps o teste, retirar alquotas do meio de
dissoluo e diluir, se necessrio, com cido clordrico a 1%
(v/v), at concentrao adequada. Medir as absorvncias
em 289 nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente para
16
H
21
NO
2
.HCl
dissolvido no meio, comparando as leituras obtidas com a da
soluo de cloridrato de propranolol SQR na concentrao
de 0,004% (p/v), preparada no mesmo solvente.
declarada de C
16
H
21
NO
2
ENSAIOS DE PUREZA
Cromatografa em camada delgada (5.2.17.1) utilizando
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de tolueno,
metanol e amnia concentrada (80:20:01) como fase
mvel. Aplicar, separadamente, placa, respectivamente,
100 L, 20 L e 100 L de cada uma das solues descritas
a seguir.
Soluo (1): soluo a 1% (p/v) de cloridrato de propranolol
SQR em metanol.
Soluo (2): soluo a 0,02% (p/v) cloridrato de propranolol
SQR em metanol.
Soluo (3): pesar e pulverizar os comprimidos. Pesar
propranolol, transferir para balo volumtrico de 5 mL,
completar com metanol, homogeneizar e fltrar, obtendo
soluo a 1% (p/v).
secar ao ar, examinar sub luz ultravioleta (254 nm) e
marcar as manchas. Nebulizar com soluo contendo
anisaldedo, acido actico glacial, metanol e cido
sulfrico (0,5:10:85:5). Secar entre 100 C e 105 C.
a Soluo (3) no maior ou mais intensa que a mancha
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
mg de cloridrato de propranolol, para balo volumtrico de
100 mL, adicionar 20 mL de gua e agitar mecanicamente
por 10 minutos. Adicionar 50 mL de metanol e agitar por 10
minutos, completar o volume com metanol, homogeneizar
e fltrar. Transferir, quantitativamente, 10 mL do fltrado
para balo volumtrico de 50 mL, completando o volume
com metanol. Preparar soluo a 0,004% (p/v) de cloridrato
de propranolol SQR em metanol e medir as absorvncias
das solues em 290 nm, utilizando metanol como branco.
16
H
21
NO
2
.HCl nos comprimidos
de alta efcincia (5.2.17.4). Prosseguir conforme descrito
no mtodo B. de Doseamento na monografa de Cloridrato
de propranolol. Preparar a soluo amostra como descrito
a seguir.
Soluo amostra: pesar e pulverizar no menos que 20
comprimidos. Transferir, exatamente, quantidade do p
equivalente a 50 mg de cloridrato de propranolol para balo
volumtrico de 50 mL, adicionar 40 mL de metanol, agitar
e deixar em banho de ultrassom por 5 minutos. Completar
o volume com metanol, homogeneizar e fltrar. Transferir 5
mL da soluo anterior para balo volumtrico de 25 mL,
completar o volume com metanol, homogeneizar e fltrar
em membrana de 0,45 m.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE RANITIDINA
Ranitidini hydrochloridum
C
13
H
22
N
4
O
3
S.HCl; 350,86
cloridrato de ranitidina; 07639
Cloridrato de N-[2-[[[5-[(dimetilamino)metil]-2-furanil]
metil]tio]etil]-N-metil-2-nitro-1,1-etenodiamina (1:1)
[66357-59-3]
C
13
H
22
N
4
O
3
S.HCl, em relao substncia dessecada.
c
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco a
amarelo plido, inodoro, sensvel umidade. Apresenta
polimorfsmo.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua e metanol,
ligeiramente solvel em etanol, muito pouco solvel
em cloreto de metileno, praticamente insolvel em
clorofrmio. Facilmente solvel cido actico.
Faixa de fuso (5.2.2): 133 C a 134 C.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada a 60 C a vcuo, dispersa
espectro de cloridrato de ranitidina SQR, preparado de
maneira idntica.
de 200 nm a 400 nm, de soluo a 0,001% (p/v) em gua
destilada, exibe mximos em 229 nm e 315 nm. A razo
entre os valores de absorvncia medidos em 229 nm e em
315 nm est compreendida entre 1,01 e 1,07.
ENSAIOS DE PUREZA
mximo 0,002% (20 ppm).
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
em 35 mL de gua. Titular com hidrxido de sdio 0,1 M
SV determinando o ponto fnal potenciometricamente.
mg de C
13
H
22
N
4
O
3
S.HCl.
cerca de 50 mg da amostra para balo volumtrico de 100
mL. Adicionar 40 mL de gua, agitar e completar o volume
com o mesmo solvente. Diluir, sucessivamente, em gua,
at concentrao de 0,00125% (p/v). Preparar soluo
solues resultantes em 314 nm, utilizando gua para ajuste
13
H
22
N
4
O
3
S.HCl na amostra, a
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-secretor.
CLORIDRATO DE RANITIDINA
COMPRIMIDOS
13
H
22
N
4
O
3
S.
IDENTIFICAO
A. de Doseamento, exibe mximos de absoro em 229 nm
e 315 nm idnticos aos observados no espectro da soluo
padro.
B. O tempo de reteno do pico principal obtido com a
Soluo amostra obtida no mtodo B. de Doseamento
do p equivalente a 0,1 g de ranitidina com 2 mL de gua
e fltrar. O fltrado responde s reaes do on cloreto
(5.3.1.1).
CARACTERSITCAS
Tempo: 45 minutos
a c
859
13
H
22
N
4
O
3
S dissolvida no
cloridrato de ranitidina SQR na concentrao de 0,00125%
(p/v), preparada com o mesmo solvente.
declarada de C
13
H
22
N
4
O
3
DOSEAMENTO
quantidade de p equivalente a 0,125 g de ranitidina, para
balo volumtrico de 250 mL, diluir com 150 mL de gua,
agitar mecanicamente por 30 minutos e completar o volume
com o mesmo solvente. Filtrar. Diluir sucessivamente, at
concentrao de 0,00125% (p/v). Preparar a soluo padro
nm, utilizando gua para ajuste do zero. Calcular o teor de
C
13
H
22
N
4
O
3
S nos comprimidos a partir das leituras obtidas.
quimicamente ligada a grupo octadecilsilano (5 m);
mantida a temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel de
1,7 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de metanol e acetato de amnio 0,1
M (85:15).
Transferir quantidade do p, exatamente pesada, para balo
volumtrico adequado. Adicionar a Fase mvel, agitar,
completar o volume com o mesmo solvente e fltrar. Diluir
o fltrado quantitativamente com a Fase mvel at obter
soluo de concentrao semelhante da Soluo padro.
de cloridrato de ranitidina SQR na Fase mvel, de modo
a obter soluo a 0,112 mg/mL, equivalente a 0,1 mg/mL
de ranitidina.
e medir a rea sob os picos. Calcular o teor de C
13
H
22
N
4
O
3
S
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE SERTRALINA
Sertralini hydrochloridum
N
Cl
Cl
CH
3
H
.
HCl
C
17
H
17
Cl
2
N.HCl; 342,69
cloridrato de sertralina; 07964
Cloridrato de (1S,4S)-4-(3,4-diclorofenil)-1,2,3,4-
tetraidro-N-metil-1-naftalenamina (1:1)
[79559-97-0]
C
17
H
17
Cl
2
N.HCl, em relao substncia dessecada.
DESCRIO
branco e inodoro. Apresenta polimorfsmo.
Solubilidade. Solvel em gua, acetonitrila, lcool
isoproplico e metanol, muito pouco solvel em etanol,
insolvel em tolueno, cicloexano e n-hexano.
Faixa de fuso (5.2.2): 243 C a 245 C.
2% (p/v) em metanol.
IDENTIFICAO
de cloridrato de sertralina SQR, preparado de maneira
idntica.
B. de Doseamento, exibe mximos em 266 nm, 274 nm e
282 nm, idnticos aos observados no espectro da soluo
padro.
c
ENSAIOS DE PUREZA
0,002% (20 ppm).
DOSEAMENTO
no-aquoso (5.3.3.5). Transferir, cerca de 0,4 g da amostra,
exatamente pesados, para erlenmeyer de 250 mL e dissolver
com 80 mL de cido actico glacial. Acrescentar 10 mL
de acetato de mercrio SR. Titular com cido perclrico
0,1 M SV, utilizando cloreto de metilrosanilnio SI como
indicador, at mudana de cor para verde-azulado. Cada
C
17
H
17
Cl
2
N.HCl.
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar cerca de 0,5
g da amostra, exatamente pesados, e transferir para balo
com o mesmo solvente, homogeneizar e fltrar. Diluir,
em metanol, at concentrao de 0,025% (p/v). Preparar
mesmo solvente. Medir as absorbncias das solues
resultantes em 274 nm, utilizando metanol para ajuste do
17
H
17
Cl
2
N.HCl na amostra a partir
C. Proceder conforme descrito em Cromatografa lquida
m), mantida a 30 C; fuxo da Fase mvel de 1,2 mL/
minuto.
Tampo fosfato pH 3,0: dissolver 2,27 g de fosfato de sdio
monobsico em 950 mL de gua, ajustar o pH em 3,0 0,1
com cido fosfrico e completar o volume para 1000 mL
com gua.
Fase mvel: mistura de acetonitrila, metanol e Tampo
fosfato pH 3,0 (30:60:10).
da amostra para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar
Completar o volume com metanol, obtendo soluo a 0,5
mg/mL.
de cloridrato de sertralina SQR em metanol e diluir com
o mesmo solvente de modo a obter uma soluo a 0,5 mg/
mL.
cauda no superior a 2,0. O desvio padro relativo das
2,0%.
e medir as reas dos picos. Calcular o teor de C
17
H
17
Cl
2
N.
Em recipientes bem-fechados, ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antidepressivo.
CLORIDRATO DE SERTRALINA
COMPRIMIDOS
17
H
17
Cl
2
N.HCl.
IDENTIFICAO
faixa de 200 nm a 400 nm, da soluo amostra obtida no
mtodo A. de Doseamento, exibe mximos de absoro em
266 nm, 274 nm e 282 nm, idnticos aos observados no
espectro da soluo padro.
CARACTERSTICAS
dissolver em 60 mL de metanol. Deixar em ultrassom por
20 minutos. Aps a desintegrao total do comprimido,
completar o volume com metanol, homogeneizar e fltrar.
Realizar diluies sucessivas at concentrao aproximada
de 0,02% (p/v) de cloridrato de sertralina. Preparar soluo
a c
861
em 274 nm (5.2.14), utilizando metanol para o ajuste
17
H
17
Cl
2
N.HCl em cada
comprimido a partir das respostas obtidas para as solues
padro e amostra.
Meio de dissoluo: tampo acetato de sdio pH 4,5; 900 mL
Aparelhagem: ps; 75 rpm
Tempo: 45 minutos
dissoluo e fltrar. Medir as absorvncias em 274 nm
17
H
17
Cl
2
N.HCl dissolvida no
cloridrato de sertralina SQR na concentrao de 0,005%
declarada de C
17
H
17
Cl
2
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
0,5 g de cloridrato de sertralina para balo volumtrico de
200 mL. Prosseguir conforme descrito no mtodo B. de
Doseamento da monografa de Cloridrato de sertralina,
a partir de Adicionar 100 mL de metanol e deixar em
ultrassom....
B. Proceder conforme descrito no mtodo C. de
Doseamento da monografa de Cloridrato de sertralina.
cloridrato de sertralina para balo volumtrico de 100 mL.
Adicionar 50 mL de metanol e deixar em ultrassom por
homogeneizar e fltrar.
C
17
H
17
Cl
2
N.HCl nos comprimidos a partir das respostas
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE TETRACICLINA
Tetracyclini hydrochloridum
OH O OH O
OH
O
NH
2
CH
3
H
H
N(CH
3
)
2
OH
O H
.
HCl
C
22
H
24
N
2
O
8
.HCl; 480,90
cloridrato de tetraciclina; 08465
Cloridrato de (4S,4aS,5aS,6S,12aS)-4-(dimetilamino)-
1,4,4a,5,5a,6,11,12a-octaidro-3,6,10,12,12a-pentaidroxi-
6-metil-1,11-dioxo-2-naftacenocarboxamida (1:1)
[64-75-5]
C
22
H
24
N
2
O
8
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, amarelo, inodoro e
levemente higroscpico.
Solubilidade. Solvel em gua, pouco solvel em etanol e
praticamente insolvel em clorofrmio e ter etlico.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -240 a -255.
Determinar em soluo a 1% (p/v) em cido clordrico
0,01 M.
IDENTIFICAO
amostra no dessecada, dispersa em brometo de potssio,
tetraciclina SQR, preparado de maneira idntica.
hidrxido de sdio 0,25 M, exibe mximo em 380 nm. A
absorvncia em 380 nm, em relao substncia dessecada,
de 96% a 104% da absorvncia obtida com soluo
padro preparada nas mesmas condies. A determinao
c
deve ser feita seis minutos aps a preparao da soluo
fnal.
D. Adicionar a 2 mg da amostra, 5 mL de cido sulfrico.
Desenvolve-se colorao violeta-avermelhada. Adicionar
2,5 mL de gua. Desenvolve-se colorao amarela.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de cloridrato de 4-epianidrotetraciclina.
Proceder conforme descrito no mtodo C. de Doseamento.
Soluo (1): utilizar a Soluo amostra descrita no mtodo
C. de Doseamento.
Soluo (2): soluo de cloridrato de 4-epianidrotetraciclina
SQR a 10 g/mL em Fase mvel.
Injetar, separadamente 20 L das Solues (1) e (2), registrar
os cromatogramas e medir as reas sob os picos. A rea de
qualquer pico correspondente 4-epianidrotetraciclina no
cromatograma obtido com a Soluo (1) no superior
rea sob o pico principal obtido com a Soluo (2). No
mximo 2,0 %.
mximo 0,005% (50 ppm).
amostra. Dessecar em estufa a 60 C, sob presso reduzida
de no mais que 5 mm de Hg, por 3 horas, at peso
DOSEAMENTO
12228.
Meios de cultura: meio de cultura nmero 1 para
manuteno do micro-organismo, soluo salina estril
para padronizao do inculo, meio de cultura nmero 1
para camada base e para preparao do inculo.
da amostra para balo volumtrico de 100 mL com auxlio
de 70 mL de cido clordrico 0,01 M. Agitar, completar
o volume da soluo com o mesmo solvente. Diluir,
sucessivamente, at concentraes de 2 ug/mL, 4 ug/mL
e 8 ug/mL, utilizando gua estril.
cloridrato de tetraciclina SQR para balo volumtrico de
100 mL com auxlio de 70 mL de cido clordrico 0,01
M. Agitar, completar o volume da soluo com o mesmo
solvente. Diluir, sucessivamente, at concentraes de 2
ug/mL, 4 ug/mL e 8 ug/mL, utilizando gua estril.
placa, esperar solidifcar, adicionar 5 mL de inculo a 2%
e proceder conforme descrito em Ensaio microbiolgico
de antibiticos, adicionando aos cilindros, 0,2 mL das
solues recentemente preparadas.
absoro no ultravioleta (5.2.14). Preparar soluo a 0,05%
(p/v) da amostra em cido clordrico 0,01 M. Preparar
mesmo solvente. Diluir 3 mL de cada soluo para 100 mL
com hidrxido de sdio 0,25 M. Homogeneizar e deixar
em repouso por seis minutos. Preparar branco em paralelo
diluindo 3 mL de cido clordrico 0,01 M para 100 mL
com hidrxido de sdio 0,25 M. Medir as absorvncias das
solues em 380 nm, utilizando o branco para ajuste do
22
H
24
N
2
O
8
.HCl na amostra a partir
0,8 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de cido oxlico 0,01 M, metanol e
volumtrico de 100 mL, adicionar 70 mL de Fase mvel,
com o mesmo solvente. Transferir alquota equivalente a 5,0
com o mesmo solvente, obtendo soluo a 0,1 mg/mL.
tetraciclina SQR para balo volumtrico de 50 mL,
adicionar 35 mL de Fase mvel, deixar em ultrassom
solvente, obtendo soluo a 0,1 mg/mL.
Soluo de resoluo: preparar soluo contendo
cloridrato de tetraciclina SQR a 100 g/mL e cloridrato de
4-epianidrotetraciclina SQR a 25 g/mL utilizando Fase
mvel como solvente.
4-epianidrotetraciclina e tetraciclina no menor que 2.
padro relativo das reas de replicatas sob os picos
a c
863
22
H
24
N
2
O
8
.HCl
na amostra a partir das respostas obtidas com a Solues
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimicrobiano.
CLORIDRATO DE TETRACICLINA
CPSULAS
22
H
24
N
2
O
8
.HCl.
IDENTIFICAO
A. Pesar e homogeneizar o contedo das cpsulas. Utilizar
tetraciclina, adicionar 25 mL de metanol e deixar em
repouso por 20 minutos. Filtrar e evaporar o fltrado em
banho-maria at resduo. O espectro de absoro no
infravermelho (5.2.14) do resduo obtido, dessecado em
estufa a 60 C, sob presso reduzida, at peso constante
e disperso em brometo de potssio, apresenta mximos de
no espectro de cloridrato de tetraciclina SQR, preparado de
maneira idntica.
C. Adicionar a 2 mg do resduo obtido no teste A. de
Identifcao, 5 mL de cido sulfrico. Produz-se colorao
violeta avermelhada. A adio de 2,5 mL de gua a essa
soluo torna a colorao amarela.
D. O resduo obtido no teste A. de Identifcao responde
CARACTERSTICAS
Tempo: 60 minutos (90 minutos para cpsulas de 500 mg).
(5.2.14), utilizando gua para o ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
22
H
24
N
2
O
8
.HCl dissolvida no meio,
comparando as leituras obtidas com a da soluo de
cloridrato de tetraciclina SQR na concentrao de 0,0015%
declarada de C
22
H
24
N
2
O
8
.HCl se dissolvem em 60 minutos
(90 minutos para cpsulas de 500 mg).
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de cloridrato de 4-epianidrotetraciclina.
Proceder conforme descrito no mtodo C. de Doseamento.
Preparar as solues como descrito a seguir
Soluo (1): utilizar a soluo amostra descrita no mtodo
C. de Doseamento.
Soluo (2): soluo de cloridrato de 4-epianidrotetraciclina
SQR a 10 g/mL em Fase mvel.
Injetar, separadamente, 20 L das Solues (1) e (2), registrar
os cromatogramas e medir as reas sob os picos. A rea de
qualquer pico correspondente 4-epianidrotetraciclina no
cromatograma obtido com a Soluo (1) no superior
rea sob o pico principal obtido com a Soluo (2). No
mximo 3,0%.
amostra. Dessecar em estufa a 60 C, sob presso reduzida
de no mais que 5 mm de Hg, por 3 horas, at peso
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de antibiticos (5.5.3.3), pelo mtodo de difuso em gar,
12228.
c
da amostra para balo volumtrico de 100 mL com auxlio
de 70 mL de cido clordrico 0,01 M. Agitar, completar o
volume com o mesmo solvente. Diluir, sucessivamente, at
concentraes de 2 ug/mL, 4 ug/mL e 8 ug/mL, utilizando
gua estril.
cloridrato de tetraciclina SQR para balo volumtrico de
100 mL com auxlio de 70 mL de cido clordrico 0,01 M.
Agitar, completar o volume com o mesmo solvente. Diluir,
sucessivamente, at concentraes de 2 ug/mL, 4 ug/mL e
8 ug/mL, utilizando gua estril.
placa, esperar solidifcar, adicionar 5 mL de inculo a 2% e
proceder conforme descrito em Ensaio microbiolgico de
antibiticos (5.5.3.3), adicionando aos cilindros, 0,2 mL das
solues recentemente preparadas. Calcular a potncia da
amostra, em ug de cloridrato de tetraciclina por miligrama,
a partir da potncia do padro e das respostas obtidas com
a Soluo padro e com a Soluo amostra. Acrescentei.
absoro no ultravioleta (5.2.14). Preparar soluo a 0,05%
(p/v) da amostra em cido clordrico 0,01 M. Preparar
mesmo solvente. Diluir 3 mL de cada soluo para 100 mL
com hidrxido de sdio 0,25 M. Homogeneizar e deixar
em repouso por seis minutos. Preparar branco em paralelo
diluindo 3 mL de cido clordrico 0,01 M para 100 mL
com hidrxido de sdio 0,25 M. Medir as absorvncias
das solues em 380 nm, utilizando o branco para ajuste
22
H
24
N
2
O
8
.HCl nas
cpsulas, em g por miligrama, a partir da potncia do
padro e das leituras obtidas.
de alta efcincia (5.2.17.4) Utilizar cromatgrafo provido
0,8 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de cido oxlico 0,01 M, metanol e
volumtrico de 100 mL, adicionar 70 mL de Fase mvel,
com o mesmo solvente. Transferir alquota equivalente a 5
tetraciclina SQR para balo volumtrico de 50 mL,
adicionar 35 mL de Fase mvel, deixar em ultrassom
solvente, obtendo soluo a 0,1 mg/mL.
Soluo de resoluo: preparar soluo contendo
cloridrato de tetraciclina SQR a 100 g/mL e cloridrato
de 4-epianidrotetraciclina a 25 g/mL utilizando como
solvente a Fase mvel.
4-epianidrotetraciclina e tetraciclina no menor que 2.
no maior que 2,0%.
22
H
24
N
2
O
8
.HCl
nas cpsulas a partir das respostas obtidas com a Solues
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE TETRIZOLINA
Tetryzolini hydrochloridum
N
N
H
H
.
HCl
C
13
H
16
N
2
.HCl; 236,74
cloridrato de tetrizolina; 08484
Cloridrato de 4,5-diidro-2-(1,2,3,4-tetraidro-1-naftalenil)-
1H-imidazol (1:1)
[522-48-5]
C
13
H
16
N
2
DESCRIO
branco, inodoro.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua e em etanol,
muito pouco solvel em clorofrmio, praticamente
insolvel em ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 253 C a 259 C.
a c
865
IDENTIFICAO
de cloridrato de tetrizolina SQR, preparado de maneira
idntica.
gua, exibe mximos em 264 nm e 271 nm, idnticos aos
observados no espectro de soluo similar de cloridrato de
tetrizolina SQR.
C. A soluo aquosa a 0,5% (p/v) responde s reaes do
on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Metais Pesados (5.3.2.3). Dissolver 0,4 g da amostra em
23 mL de gua e adicionar 2 mL de cido actico diludo.
mximo 1,0%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,4 g de amostra, transferir
para erlenmeyer de 250 mL e dissolver em 60 mL de cido
actico glacial, com aquecimento, se necessrio. Adicionar
5 mL de anidrido actico, 5 mL de acetato de mercrio SR
e 1 gota de vermelho de quinaldina SI. Titular com cido
perclrico 0,1 M SV. Realizar ensaio em branco e fazer a
correo necessria. Cada mL de cido perclrico 0,1 M
13
H
16
N
2
.HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Adrenrgico (nasal).
CLORIDRATO DE TIAMINA
Thiamini hydrochloridum
N
N C H
3
NH
2
N
+
S
CH
3
OH
Cl
-
.
HCl
C
12
H
17
ClN
4
OS.HCl; 337,27
cloridrato de tiamina; 08511
Cloridrato do cloreto de 3-[(4-amino-2-metil-5-pirimidinil)
metil]-5-(2-hidroxietil)-4-metil-tiazlio (1:1:1)
[67-03-8]
C
12
H
17
ClN
4
OS.HCl, em relao substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino ou cristais brancos
com odor caracterstico. Quando exposto ao ar, absorve
rapidamente cerca de 4% de gua.
glicerol, pouco solvel em etanol, insolvel em ter etlico
e benzeno.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada a 105 C por 2 horas,
no espectro de cloridrato de tiamina SQR, preparado de
maneira idntica.
B. Dissolver 5 mg da amostra em 4 mL de gua, adicionar
2 mL de hidrxido de sdio SR, 1 mL de ferrocianeto
de potssio SR e 5 mL de lcool isobutlico. Agitar
vigorosamente durante 2 minutos e deixar em repouso
por 30 minutos. A camada alcolica apresenta intensa
fuorescncia azul, mais ntida quando observada sob luz
ultravioleta. A fuorescncia desaparece pela acidifcao,
reaparecendo com a alcalinizao da mistura.
C. Dissolver 5 mg da amostra em 1 mL de gua, adicionar 1
mL de acetato de chumbo SR e 1 mL de hidrxido de sdio
SR. A mistura desenvolve colorao amarela. Aquecer em
banho-maria durante alguns minutos. A colorao escurece
gradualmente, transformando-se em precipitado negro, de
sulfeto de chumbo.
D. Dissolver 0,1 g da amostra em 10 mL de gua e dividir
em 4 fraes. Reagir, separadamente, cada frao com
0,5 mL das seguintes solues: a) cloreto mercrico SR
(produz-se precipitado branco); b) iodo SR (produz-se
precipitado vermelho-acastanhado); c) iodeto de potssio-
c
mercrio SR (produz-se precipitado amarelo-claro); d)
trinitrofenol SR (produz-se precipitado amarelo). Filtrar o
precipitado produzido com trinitrofenol SR, lavar o resduo
com gua e dessecar a 105 C, durante 30 minutos. O slido
obtido funde entre 206 C e 208 C, com escurecimento e
decomposio, aps aglomerao a 200 C.
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
Absoro de luz. A absorvncia da soluo aquosa a 10%
(p/v), aps fltrao em funil sinterizado de porosidade
fna, medida em 400 nm, no excede a 0,025.
no mtodo B. de Doseamento, exceto por utilizar fuxo
da Fase mvel de 0,75 mL/minuto. Preparar a Soluo
Soluo amostra: dissolver 10 mg da amostra em Fase
mvel e completar o volume para 10 mL com o mesmo
solvente, de modo a obter soluo a 1,0 mg/mL.
Procedimento: injetar 10 L da Soluo amostra e registrar
o cromatograma por, no mnimo, trs vezes o tempo de
reteno do pico principal. Medir as reas sob os picos. A
soma das rea sob os picos secundrios no maior que
1,0% do total das reas de todos os picos presentes no
cromatograma. No considerar picos relativos ao solvente.
Nitrato. A 2 mL de soluo a 2% (p/v), adicionar 2 mL de
cido sulfrico, resfriar e adicionar 2 mL de sulfato ferroso
SR. Nenhum anel castanho produzido na juno das duas
camadas.
mximo 0,03% (300 ppm).
mximo 5,0%.
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
5 mL de cido frmico anidro. Adicionar 65 mL de
cido actico anidro e, com agitao, 10 mL de acetato
mercrico SR. Titular com cido perclrico 0,1 M SV,
C
12
H
17
ClN
4
OS.HCl.
Fase mvel de 1 mL/minuto.
Soluo A: soluo de 1-octanossulfonato de sdio a 0,005
M em cido actico 1% (v/v).
Soluo B: mistura de metanol e acetonitrila (3:2).
Fase mvel: mistura de Soluo A e Soluo B (60:40).
Soluo padro interno: transferir 2 mL de benzoato de
metila para balo volumtrico de 100 mL, completar o
volume com metanol e homogeneizar.
Soluo amostra: pesar cerca de 0,2 g da amostra,
exatamente pesados, transferir para balo volumtrico
de 100 mL, completar o volume com Fase mvel e
homogeneizar. Transferir 10 mL para balo volumtrico
de 50 mL, adicionar 5 mL da Soluo padro interno,
completar o volume com fase mvel e homogeneizar.
de cloridrato de tiamina SQR em Fase mvel de modo
a obter soluo a 1 mg/mL. Transferir 20 mL para balo
volumtrico de 50 mL, adicionar 5 mL da Soluo de
padro interno, completar o volume com Fase mvel e
homogeneizar.
A efcincia da coluna para o pico correspondente tiamina
no menor que 1500 pratos tericos/coluna. O fator de
cauda do pico correspondente tiamina no maior que
2,0. A resoluo entre os picos correspondentes tiamina
e ao benzoato de metila no menor que 4,0. O desvio
no maior que 2,0%.
e medir as reas sob os picos correspondentes tiamina e
ao benzoato de metila. Calcular o teor de C
12
H
17
ClN
4
OS.
HCl na amostra, a partir das respostas obtidas para a
relao tiamina/benzoato de metila com a Soluo padro
e com a Soluo amostra.
Em recipientes no metlicos, bem fechados, ao abrigo da
luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Vitamina do complexo B.
a c
867
CLORIDRATO DE TIAMINA
COMPRIMIDOS
12
H
17
ClN
4
OS.HCl.
IDENTIFICAO
A. O tempo de reteno do pico principal obtido com a
Soluo amostra, obtida no mtodo de Doseamento,
B. Pesar e pulverizar os comprimidos. Dissolver quantidade
de p equivalente a 10 mg de cloridrato de tiamina em 10
mL de gua e fltrar. Separar duas pores de 2 mL do
fltrado. Adicionar soluo de iodo a 1,27% (p/v) primeira
poro do fltrado. Produz-se um precipitado marrom-
avermelhado. Adicionar cloreto mercrico SR segunda
poro do fltrado. Produz-se um precipitado branco que
responde ao teste para cloretos (5.3.1.1.).
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, com o Meio de dissoluo,
at concentrao adequada. Medir as absorvncias em 246
nm (5.2.14.), utilizando o mesmo solvente para ajuste
12
H
17
ClN
4
OS.HCl
dissolvido no meio, comparando as leituras obtidas com a
soluo de cloridrato de tiamina SQR na concentrao de
0,002% (p/v), preparada com o mesmo solvente.
declarada de C
12
H
17
ClN
4
OS.HCl se dissolvem em 45
minutos.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Pesar e pulverizar 20 comprimidos.
Utilizar quantidade do p equivalente a 150 mg de tiamina.
Adicionar, com agitao, 5 mL de cido frmico anidro,
65 mL de cido actico glacial e 10 mL de acetato de
mercrio a 6% (p/v) em cido actico glacial. Titular
com cido perclrico 0,1 M SV. Determinar o ponto fnal
12
H
17
ClN
4
OSHCl.
com slica quimicamente ligada a octadecilsilano (5 um);
Fase mvel: dissolver 1 g de heptanossulfonato de sdio
em uma mistura de 180 mL de metanol e 10 mL de
trietilamina. Completar o volume para 1000 mL com gua
e ajustar o pH para 3,2 com cido fosfrico.
Soluo padro: contm cloridrato de tiamina SQR a 0,06
mg/mL em cido clordrico 0,005 M.
Soluo amostra: para comprimidos contendo menos
de 10 mg de cloridrato de tiamina. Pesar e pulverizar os
comprimidos. Dissolver quantidade equivalente a 6 mg de
cloridrato de tiamina em 5 mL de cido clordrico 0,1 M e
50 mL de gua. Agitar por 20 minutos, diluir a 100 mL com
gua e fltrar.
Soluo amostra: para comprimidos contendo 10 mg
ou mais de cloridrato de tiamina. Pesar e pulverizar os
comprimidos. Dissolver quantidade equivalente a 30 mg
de cloridrato de tiamina em 25 mL de cido clordrico 0,1
M e 250 mL de gua. Agitar por 20 minutos, diluir a 500
mL com gua e fltrar.
amostra e padro, registrar os cromatogramas e medir as
12
H
17
ClN
4
OS.
HCl nos comprimidos a partir das respostas obtidas para a
Manter em recipientes no metlicos e ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
c
CLORIDRATO DE TIAMINA SOLUO
INJETVEL
12
H
17
ClN
4
OS.HCl. Soluo
estril de cloridrato de tiamina em gua para injetvel.
IDENTIFICAO
A. Dissolver volume da soluo injetvel equivalente a 0,1
g de cloridrato de tiamina em 10 mL de gua destilada e
dividir em quatro pores. Fazer reagir, separadamente,
cada frao com 0,5 mL de cloreto mercrico SR, iodo
SR, iodeto de potssio mercrio SR e trinitrofenol SR,
produzindo-se, respectivamente, precipitados de colorao
branco, vermelho-acastanhado, amarelo claro e amarelo.
B. Diluir poro da soluo injetvel com gua para
concentrao de 10 mg/mL de cloridrato de tiamina. A 0,5
mL dessa soluo, adicionar 5 mL de hidrxido de sdio
0,5 M, ento adicionar 0,5 mL de ferrocianeto de potssio
e 5 mL de lcool isobutlico, agitar vigorosamente durante
2 minutos e deixar em repouso por 30 minutos. A camada
alcolica deve apresentar fuorescncia azul, mais ntida
quando observada sob luz ultravioleta. Esta fuorescncia
desaparece pela acidifcao, voltando pela alcalinizao
da mistura.
C. Responde s reaes de on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 2,5 a 4,5.
mg de cloridrato de tiamina.
DOSEAMENTO
Fase mvel: preparar uma mistura fltrada e desgaseifcada
de fosfato de potssio monobsico 0,04 M e metanol
(55:45).
Soluo de padro interno: preparar uma soluo de
metilparabeno em Fase mvel com concentrao de 0,1
mg/mL.
equivalente para obter soluo contendo 0,5 mg/mL de
cloridrato de tiamina. Pipetar 10 mL da soluo resultante e
10 mL da Soluo de padro interno para balo volumtrico
de 100 mL, completar o volume com Fase mvel e agitar.
Soluo padro: preparar uma soluo de cloridrato de
tiamina SQR em Fase mvel com concentrao de 0,5
mg/mL. Pipetar 10 mL da soluo resultante e 10 mL da
Soluo de padro interno para balo volumtrico de 100
mL, completar o volume com Fase mvel e agitar para
obter soluo com concentrao de 50 ug/mL.
de reteno relativo so cerca de 0,3 para tiamina e 1,0
para metilparabeno. A resoluo entre os picos de tiamina
e metilparabeno no menor que 6,0. O desvio padro
maior que 2,0%.
medir as reas sob os picos. Calcular a quantidade, em mg,
de cloridrato de tiamina em cada mL do injetvel.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE TRAMADOL
Tramadoli hydrochloridum
C
16
H
25
NO
2
.HCl; 299,84
cloridrato de tramadol; 08807
Cloridrato de (1R,2R)-rel-2-[(dimetilamino)metil]-1-(3-
metoxifenil)ciclohexanol (1:1)
[36282-47-0]
C
16
H
25
NO
2
.HCl em relao a substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco, inodoro.
Solubilidade. Solvel em gua, etanol e metanol e muito
pouco solvel em acetona.
a c
869
Faixa de fuso (5.2.2): 180 C a 184 C.
Poder rotatrio (5.2.8): - 0,10 a + 0,10. Determinar em
soluo aquosa a 5% (p/v).
IDENTIFICAO
mximo de absoro somente nos mesmos comprimentos
observados no espectro de cloridrato de tramadol SQR,
faixa de 250 nm a 300 nm, da soluo a 0,1 mg/mL, exibe
mximo de absoro em 270 nm, idntico ao observado no
espectro de cloridrato de tramadol SQR.
C. Responde as reaes do on cloreto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 5% (p/v) em gua
Acidez ou Alcalinidade. Dissolver 1 g da amostra em
20 mL de gua e adicionar 0,2 mL de vermelho de metila
SI e 0,2 mL de cido clordrico 0,01 M. Desenvolve-se
colorao vermelha. Adicionar 0,4 mL de hidrxido de
sdio 0,01 M. Desenvolve-se colorao amarela.
em Cromatografa a lquido de alta efcincia (5.2.17.4),
utilizar cromatgrafo provido de detector ultravioleta a
270 nm; coluna de base 250 mm e 4,6 mm de dimetro
interno, empacotada com slica quimicamente ligada a
grupo octilsilano (3 m a 10 m); fuxo da Fase mvel de
1,0 mL/minuto.
Fase mvel: utilizar mistura de cido tricloroactico a
0,2% (p/v) e acetonitrila (705:295).
da amostra na Fase mvel, de modo a obter soluo
contendo 1,5 mg/mL.
de cloridrato de tramadol SQR na Fase mvel, de modo a
obter soluo contendo 0,003 mg/mL.
Soluo de resoluo: transferir, exatamente, cerca de
5 mg de cloridrato de tramadol substncia relacionada
A SQR ((1RS, 2SR)-2-[(dimetilamino)metil)]-1-(3-
metoxifenil) cicloexanol) e 4 mL da Soluo amostra para
a Fase mvel.
amostra e da Soluo padro e registrar os cromatogramas.
O tempo de reteno relativo de 1,0 para o cloridrato de
tramadol (tempo de reteno: em torno de 5 minutos) e
de cerca de 0,85 para o cloridrato de tramadol substncia
relacionada A. A resoluo entre os picos do cloridrato de
tramadol e do cloridrato de tramadol substncia relacionada
A de, no mnimo, 2,0. No cromatograma obtido com
a Soluo amostra, a rea sob o pico do cloridrato de
tramadol substncia relacionada A no maior que a rea
obtida com o pico principal da Soluo padro (0,2%).
Qualquer outra impureza registrada no cromatograma da
Soluo amostra no possui rea maior que 0,5 vezes a rea
obtida com o pico principal da Soluo padro (0,1%).
Metais Pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Dissolver
2 g da amostra em 20 mL de gua. Determinar em 12 mL
da soluo obtida e proceder conforme descrito em Ensaio
limite para metais pesados. No mximo 0,002% (20 ppm).
mximo 0,5%.
Cinzas Sulfatadas (5.2.10). Determinar em 1g de amostra.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
80 mL de anidrido actico. Titular com cido perclrico 0,1
mg de C
16
H
25
NO
2
.HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Analgsico.
CLORIDRATO DE TRAMADOL
SOLUO INJETVEL
16
H
25
NO
2
.HCl. Soluo estril
em gua para injetveis.
IDENTIFICAO
A. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14) na
idntico ao observado no espetro da soluo padro.
B. Responde s reaes de on cloreto (5.3.1.1).
c
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,5 a 6,3.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre o teste. Utilizar o mtodo
de inoculao direta ou fltrao em membrana.
mL de cloridrato de tramadol.
DOSEAMENTO
soluo injetvel equivalente a 50 mg de cloridrato de
tramadol para balo volumtrico de 100 mL e completar o
volume com gua. Transferir 10 mL para balo volumtrico
de 50 mL e completar o volume com gua, obtendo
de C
16
H
25
NO
2.
HCl na soluo injetvel, a partir das leituras
obtidas.
Em recipientes de vidro tipo I, em local fresco e protegido
da luz.
ROTULAGEM
CLORIDRATO DE VERAPAMIL
Verapamili hydrochloridum
C
27
H
38
N
2
O
4
.HCl; 491,06
cloridrato de verapamil; 09119
Cloridrato de -[3-[[2-(3,4-dimetoxifenil)etil]metilamino]
propil]-3,4-dimetoxi--(1-metiletil)-benzenoacetonitrila
(1:1)
[152-11-4]
C
27
H
38
N
2
O
4.
HCl em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Solubilidade. Solvel em gua, muito solvel em
clorofrmio e pouco solvel em etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 140 C a 144 C.
IDENTIFICAO
de cloridrato de verapamil SQR, preparado de maneira
idntica.
clordrico 0,01 M, exibe mximos em 229 nm e 278 nm. A
razo entre os valores de absorvncia medidos em 278 nm
e 229 nm de 0,35 a 0,39.
C. A 2 mL da soluo aquosa da amostra a 15% (p/v)
adicionar 0,2 mL de cloreto de mercrio(II) a 5% (p/v).
Produz-se precipitado branco.
D. A 2 mL da soluo aquosa da amostra a 1% (p/v)
adicionar 0,5 mL de cido sulfrico 3 M e 0,2 mL
de permanganato de potssio a 1,0% (p/v). Produz-
se precipitado violeta, que se dissolve rapidamente,
resultando em soluo de colorao amarelo plido.
ENSAIOS DE PUREZA
ligada a grupo octadecilsilano (3 m a 5 m), mantida
minuto.
Tampo acetato: soluo aquosa de acetato de sdio 0,015
M, contendo cido actico glacial a 3,3% (v/v).
Fase mvel: mistura de Tampo acetato, acetonitrila e
2-aminoeptano (70:30:0,5).
Soluo (1): soluo a 1,9 mg/mL da amostra em Fase
mvel.
Soluo (2): soluo de cloridrato de verapamil SQR a 5,6
g/mL em Fase mvel.
a c
871
Soluo (3): soluo de cloridrato de verapamil SQR a 9,4
g/mL em Fase mvel.
Soluo de Resoluo: dissolver quantidade sufciente de
cloridrato de verapamil SQR e monocloridrato de -[2-
[[2-(3,4-dimetoxifenil)etil]metilamino]etil]-3,4-dimetoxi-
-(1-metiletil)benzenoacetonitrila (verapamil composto
relacionado B) SQR em Fase mvel obtendo soluo de
resoluo com concentrao conhecida de 1,9 e 1,5 mg/
mL, respectivamente.
Os tempos de reteno so cerca de 0,88 para verapamil
composto relacionado B e 1,0 para verapamil. A resoluo
entre o pico de verapamil composto relacionado B e
verapamil no menor que 1,5. O desvio padro relativo
para replicatas das injees no maior que 2,0%.
soluo e registrar os cromatogramas por, no mnimo,
quatro vezes o tempo de reteno do pico principal e medir
as reas sob os picos. A soma das reas sob os picos, exceto
o pico de verapamil, obtido com a Soluo (1), no maior
que a rea sob o pico principal obtido com a Soluo (3)
(0,5%). A rea de qualquer pico individual obtido com a
Soluo (1), exceto o pico principal, no maior que a rea
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
de cido actico glacial, adicionar 5 mL de anidrido
actico e 10 mL de acetato de mercrio a 6% (p/v) em
cido actico glacial. Titular com cido perclrico 0,1 M
SV determinando o ponto fnal potenciometricamente.
mg de C
27
H
38
N
2
O
4.
HCl.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiarrtmico.
COMPRIMIDOS
27
H
38
N
2
O
4
.HCl.
IDENTIFICAO
verapamil para funil de separao. Adicionar 25 mL de
gua e agitar por 30 minutos. Adicionar 1 mL de hidrxido
de sdio M e extrair com 25 mL de clorofrmio, agitando
por 10 minutos. Filtrar atravs de fltro contendo sulfato de
sdio anidro e evaporar at a secura. Secar a 105 C por 2
horas. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14)
observados no espectro de cloridrato de verapamil SQR,
C. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir
quantidade de p equivalente a 0,1 g de cloridrato de
verapamil para um bquer. Adicionar 10 mL de cloreto de
metileno e homogeneizar. Filtrar, evaporar o fltrado at a
secura e dissolver o resduo em 10 mL de gua. A 2 mL da
soluo resultante, adicionar 0,2 mL de soluo de cloreto
de mercrio(II) a 5% (p/v). Produz-se precipitado branco.
D. A 2 mL da soluo obtida no teste C. de Identifcao,
adicionar 0,5 mL de cido sulfrico 3 M e 0,2 mL de
permanganato de potssio a 1,0% (p/v). Produz-se
precipitado violeta que se dissolve rapidamente produzindo
uma soluo amarelo plido.
CARACTERSTICAS
Teste de desintegrao (5.1.4.1). Utilizar 900 mL de cido
clordrico 0,1 M como meio de desintegrao. No mximo
30 minutos.
Meio de dissoluo: 900 mL de cido clordrico 0,1 M.
c
Tempo: 30 minutos
dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, em cido clordrico
0,1 M at concentrao adequada. Medir as absorvncias em
278 nm e em 300 nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente
27
H
38
N
2
O
4
.
HCl dissolvida no meio, por meio da diferena entre as
medidas em 278 nm e em 300 nm, comparando as leituras
obtidas com a da soluo de cloridrato de verapamil SQR
na mesma concentrao, preparada no mesmo solvente.
declarada de C
27
H
38
N
2
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
Pureza Cromatogrfca. Proceder conforme descrito no
mtodo B. de Doseamento. Preparar as solues como
descrito a seguir.
para balo volumtrico de 25 mL uma quantidade de p
sufciente para se preparar uma soluo de 1,9 mg/mL.
Adicionar 15 mL de Fase mvel e agitar mecanicamente
por 15 minutos. Completar o volume com Fase mvel,
cloridrato de verapamil SQR em Fase mvel de modo a
obter soluo a 5,6 g/mL.
obter soluo a 9,4 g/mL.
soluo. Registrar os cromatogramas e medir as reas
sob os picos. A soma das rea sob os picos obtidos com
a Soluo (1), exceto a do cloridrato de verapamil, no
maior que a rea sob o pico obtido com a Soluo (3)
(0,5%). Nenhum pico apresenta rea maior que a do pico
obtido com a Soluo (2) (0,3%).
gua (5.2.20.1). No mximo 4,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
100 mg de cloridrato de verapamil para balo volumtrico
de 250 mL e dissolver em cido clordrico 0,01 M, com
agitao. Completar o volume com o mesmo solvente.
Filtrar. Transferir 10 mL do fltrado para balo volumtrico
0,01 M. Preparar soluo padro nas mesmas condies.
quantidade de C
27
H
38
N
2
O
4
.HCl nos comprimidos a partir
de 0,8 mL/minuto.
M contendo cido actico glacial a 3,3% (v/v).
Fase mvel: mistura de Tampo acetato, acetonitrila e
dietilamina (65:35:1). Filtrar e desgaseifcar.
cloridrato de verapamil para balo volumtrico de 50 mL
e adicionar 30 mL de Fase mvel. Agitar, mecanicamente,
por 15 minutos. Completar o volume com Fase mvel,
homogeneizar e fltrar, de modo a obter soluo a 70 g/mL.
de cloridrato de verapamil SQR em Fase mvel de modo a
Soluo de resoluo: dissolver quantidade de cloridrato
de verapamil SQR e monocloridrato de -[2-[[2-(3,4-
dimetoxifenil)etil]metilamino]etil]-3,4-dimetoxi--
(1-metiletil)benzenoacetonitrila (verapamil composto
relacionado B) SQR em Fase mvel de modo a obter
soluo a 70 g/mL para cada composto.
Os tempos de reteno relativos so cerca de 0,88 para
verapamil composto relacionado B e 1,0 para cloridrato
de verapamil. A resoluo entre os picos de verapamil
composto relacionado B e de cloridrato de verapamil no
menor que 1,5. O desvio padro entre as replicatas de
injeo no maior que 2,0%.
C
27
H
38
N
2
O
4
.HCl nos comprimidos a partir das respostas
ROTULAGEM
a c
873
SOLUO INJETVEL
27
H
38
N
2
O
4.
HCl.
IDENTIFICAO
A. Diluir um volume da amostra contendo o equivalente a
10 mg de cloridrato de verapamil em 5 mL cido clordrico
0,1 M, extrair com 5 mL de ter etlico, descartar o extrato
e alcalinizar a fase aquosa utilizando carbonato de potssio
sesqui-hidratado. Extrair com 5 mL de ter etlico, fltrar a
fase etrea atravs de sulfato de sdio anidro e evaporar at
da amostra apresenta mximos de absoro somente
de cloridrato de verapamil SQR preparado de maneira
idntica.
C. Em volume da soluo injetvel contendo 5 mg de
cloridrato de verapamil, adicionar 0,2 mL de cloreto de
mercrio(II) a 5% (p/v). Produz-se precipitado branco.
D. Em volume da soluo injetvel contendo 5 mg de
cloridrato de verapamil, adicionar 0,5 mL de cido sulfrico
3 M e 0,2 mL de permanganato de potssio a 1,0% (p/v).
Produz-se precipitado violeta que dissolve-se rapidamente
para formao de uma soluo amarelo plido intenso.
CARACTERSTICAS
injetveis de pequenos volumes.
pH (5.2.19). 4,0 a 6,5.
ENSAIO DE PUREZA
no mtodo B. de Doseamento. Preparar as Solues como
descrito a seguir:
Soluo (1): soluo da amostra contendo 2,5 mg/mL de
cloridrato de verapamil.
obter uma soluo de concentrao conhecida de 5,6 g/mL.
obter uma soluo de concentrao conhecida de 9,4 g/mL.
(1), 10 L da Soluo (2) e 10 L da Soluo (3). Registrar
os cromatogramas e medir as respostas dos picos. A soma
das respostas dos picos, exceto a do cloridrato de verapamil
obtido na Soluo (1), no maior que a resposta do pico
obtido com a Soluo (3) (0,5%); e nenhum pico maior
que a resposta do pico obtido com a Soluo (2) (0,3%).
mg de cloridrato de verapamil.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Transferir um volume
de soluo contendo 5 mg de cloridrato de verapamil
para balo volumtrico de 100 mL e dissolver com cido
clordrico 0,01 M. Preparar soluo padro nas mesmas
utilizando cido clordrico 0,01 M para o ajuste do zero.
27
H
38
N
2
O
4
.HCl nos comprimidos
clculos considerando A(1%, 1 cm) = 118, em 278, em
de alta efcincia (5.2.17.4), utilizando cromatgrafo
provido de detector 278 nm, coluna de 150 mm de
m), mantida temperatura ambiente, fuxo da Fase mvel
de 0,8 mL/min.
M, contendo cido actico glacial a 3,3% (v/v)
Fase mvel: preparar uma mistura de Tampo acetato,
acetonitrila e dietilamina (65:35:1,0). Filtrar e desgaseifcar
a mistura.
Soluo amostra: diluir a soluo injetvel,
quantitativamente, se necessrio, com Fase mvel, de
modo a obter uma soluo de 70 g/mL.
de cloridrato de verapamil SQR em Fase mvel de modo a
obter concentrao conhecida de 70 g/mL.
Soluo de resoluo: dissolver quantidade de cloridrato
de verapamil SQR e monocloridrato de -[2-[[2-(3,4-
dimetoxifenil)etil]metilamino]etil]-3,4-dimetoxi--
(1-metiletil)benzenoacetonitrila (verapamil composto
relacionado B) SQR em Fase mvel, de modo a obter uma
soluo de concentrao conhecida de 70 g/mL para cada
composto.
Injetar 10 L da Soluo de resoluo e registrar as
respostas dos picos. Os tempos relativos de reteno
c
so de aproximadamente 0,88 para verapamil composto
relacionado B e 1,0 para cloridrato de verapamil SQR.
A resoluo entre o verapamil composto relacionado B e
o cloridrato de verapamil SQR no menor que 1,5 e o
desvio padro entre as replicatas de injeo no maior
que 2,0%.
padro e da Soluo amostra. Calcular a quantidade de
C
27
H
38
N
2
O
4
.HCl na soluo injetvel a partir das respostas
ROTULAGEM
CLORPROPAMIDA
Chlorpropamidum
Cl
S
N N
CH
3
O O
O
H H
C
10
H
13
ClN
2
O
3
S; 276,74
clorpropamida; 02505
4-Cloro-N-[(propilamino)carbonil]benzenossulfonamida
[94-20-2]
C
10
H
13
ClN
2
O
3
S em relao substncia dessecada.
DESCRIO
solvel em acetona e cloreto de metileno, solvel em
etanol. Solvel em solues de hidrxidos alcalinos.
Faixa de fuso (5.2.2): 126 C a 130 C.
IDENTIFICAO
clorpropamida SQR, preparado de maneira idntica. Caso
o espectro obtido mostre-se diferente, dissolver o padro e
a amostra em cloreto de metileno, evaporar at a secura e
realizar um novo espectro utilizando o resduo.
B. Preparar uma soluo da amostra a 0,01% (p/v) em
metanol e diluir 10 mL desta soluo em 100 mL de cido
clordrico 0,01 M. O espectro de absoro no ultravioleta
(5.2.14), na faixa de 220 nm a 350 nm, da soluo amostra
exibe mximo de absoro em 232 nm e a absorvncia em
232 nm de 0,57 a 0,63.
C. Misturar 0,1 g da amostra com 2 g de carbonato de
sdio anidro e aquecer at aparecer uma forte colorao
vermelho rubro que permanea durante 10 minutos. Deixar
esfriar e extrair o resduo com aproximadamente 5 mL de
gua. Diluir para 10 mL com gua e fltrar. Acidifcar 2
mL da soluo obtida com cido ntrico e adicionar 0,4
mL de nitrato de prata SR. Misturar e deixar em repouso.
Um precipitado branco caseoso deve ser formado. Deixar
o precipitado decantar e lav-lo trs vezes com 1 mL de
gua. Proteger da incidncia da luz, descartando a soluo
sobrenadante por no se encontrar perfeitamente lmpida.
Suspender o precipitado em 2 mL de gua e adicionar
1,5 mL de amnia. O precipitado dissolve-se facilmente
com possvel presena de algumas partculas de tamanhos
maiores que se dissolvem vagarosamente.
ENSAIOS DE PUREZA
placa de slica-gel GF
254
como suporte e mistura de amnia,
cicloexano, metanol e cloreto de metileno (11,5:30:50:100)
como fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, 5 uL de
a seguir.
Soluo (1): dissolver 0,5 g da amostra em acetona e diluir
Soluo (2): dissolver 15 mg de 4-clorobenzenosulfonamida
(clorpropamida impureza A) SQR em acetona e diluir para
Soluo (3): dissolver 15 mg de clorpropamida impureza
B SQR em acetona e diluir para 100 mL com o mesmo
solvente.
acetona.
acetona.
Soluo (6): dissolver 0,1 g da amostra, 5 mg de
4-clorobenzenosulfonamida (clorpropamida impureza
A) SQR e 5 mg de clorpropamida impureza B SQR em
acetona e diluir para 10 mL com o mesmo solvente.
Desenvolver o cromatograma em 15 cm da placa. Secar
a placa em estufa a 110 C durante 10 minutos. No fundo
da cuba cromatogrfca colocar uma mistura contendo um
volume de cido clordrico, um volume de gua e dois
volumes de uma soluo 5% (p/v) de permanganato de
potssio. Fechar a cuba e esperar por 15 minutos. Colocar a
placa em contato com vapor de cloro por 2 minutos. Retirar
a placa e coloc-la em local de corrente de ar frio at que
o excesso de cloro seja removido e a rea de cobertura
a c
875
abaixo dos pontos de aplicao no apresente colorao
azul com uma gota de amido iodetado SR1. Nebulizar
com amido iodetado SR1. No cromatograma obtido com a
Soluo (1), qualquer mancha correspondente impureza
A no mais intensa que a mancha obtida com a Soluo
(2) (0,3%), qualquer mancha correspondente impureza
B no mais intensa que a obtida no cromatograma da
Soluo (3) (0,3%), qualquer mancha, alm da mancha
principal, e qualquer mancha correspondente s impurezas
A e B no mais intensa que a mancha do cromatograma
obtido com a Soluo (4) (0,3%); no mais que duas
manchas so mais intensas que a mancha obtida no
cromatograma da Soluo (5) (0,1%). O teste no vlido
a menos que o cromatograma obtido com a Soluo (6)
mostre trs manchas separadas claramente com valores
de R
f
aproximados de 0,4 para clorpropamida, 0,6 para
impureza A e 0,9 para impureza B.
Metais pesados (5.3.2.3). Preparar uma soluo a 10%
(p/v) da amostra em acetona ou dioxana contendo, no
mnimo, 15% (v/v) de gua. Proceder conforme descrito
em Mtodo III. Utilizar Soluo padro de chumbo (2 ppm
Pb). No mximo 0,002% (20 ppm).
amostra. Dessecar em estufa a 100 C a 105 C, at peso
No mximo 0,4%.
DOSEAMENTO
A. Dissolver 0,25 g em 50 mL de etanol, previamente
neutralizado em presena de soluo de fenolftalena SI, e
adicionar 25 mL de gua. Titular com hidrxido de sdio
0,1 M SV at a obteno da colorao rosa. Cada mL de
C
10
H
13
ClN
2
O
3
S.
de 1,5 mL/minuto.
Fase Mvel: preparar uma mistura de igual volume de
cido actico glacial diludo (1:100) e acetonitrila. Filtrar e
desgaseifcar a mistura.
Nota: no exceder a quantidade de 50% de acetonitrila.
Proceder com ajustes se necessrio.
pesada, para um balo volumtrico de 100 mL, completar o
volume com Fase mvel e misturar. Transferir 10 mL dessa
soluo para um segundo balo volumtrico de 100 mL,
completar o volume com Fase mvel e misturar.
Soluo padro: pesar e dissolver precisamente uma
quantidade de clorpropamida SQR na Fase mvel, e diluir
adequadamente, com Fase mvel, de modo a obter soluo
a 0,05 mg/mL.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo padro. O tempo
de reteno cerca de 2,2 minutos para a clorpropamida.
O fator de cauda no maior que 1,5 e o desvio padro
relativo para as replicatas de injeo no maior que 2,0%.
C
10
H
13
ClN
2
O
3
com a Soluo amostra e a Soluo padro.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Hipoglicemiante.
CLORPROPAMIDA COMPRIMIDOS
10
H
13
ClN
2
O
3
S.
IDENTIFICAO
de p equivalente a 1 g de clorpropamida, adicionar 4 mL
de acetona, fltrar e evaporar at a secura. O espectro de
absoro no infravermelho (5.2.14) do resduo obtido,
no espectro de clorpropamida SQR, preparado de maneira
idntica.
254

cicloexano e hidrxido de amnio (100:50:30:10), como
seguir.
Soluo (1): misturar uma quantidade de p do comprimido,
equivalente a 100 mg de clorpropamida, com 20 mL de
cido clordrico M e extrair com 50 mL de clorofrmio.
Filtrar a soluo e lavar o algodo com clorofrmio em um
bquer. Evaporar o clorofrmio em um banho-maria at a
secura. Secar o resduo a 105 C por uma hora. A partir do
resduo obtido, preparar uma soluo 1 mg/mL em acetona.
c
Soluo (2): preparar uma soluo a 1 mg/mL de
clorpropamida SQR em acetona.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa da cuba
cromatogrfca e deixar secar ao ar. Examinar sob luz
ultravioleta (254 nm). A mancha principal obtida com a
CARACTERSTICAS
Tempo: 60 minutos
absorvncias em 230 nm, utilizando o mesmo solvente para
10
H
13
ClN
2
O
3
S
soluo de clorpropamida SQR de concentrao conhecida,
preparada em cido clordrico 0,1 M.
Nota: um volume de etanol que no exceda 10% (v/v)
pode ser adicionado no preparo da soluo padro para
dissolver a clorpropamida SQR.
declarada de C
10
H
13
ClN
2
O
3
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
0,25 g de clorpropamida, agitar com 40 mL de metanol por
20 minutos, completar o volume para balo volumtrico
de 50 mL com o mesmo solvente. Filtrar e diluir a amostra
at a concentrao de 0,001% (p/v), com cido clordrico
0,1 M. Preparar soluo de clorpropamida SQR na mesma
concentrao. Medir as absorvncias das solues em
232 nm. Calcular a quantidade de C
10
H
13
ClN
2
O
3
S nos
comprimidos a partir das leituras obtidas. Alternativamente,
pode-se utilizar A(1%, 1 cm) = 598, em 232 nm.
Doseamento da monografa Clorpropamida. Preparar a
Soluo amostra: pesar e triturar 20 comprimidos.
Transferir uma quantidade do p equivalente a 50 mg
de clorpropamida para balo volumtrico de 100 mL.
Adicionar 75 mL de Fase mvel, misturar durante 10
minutos e completar o volume com a Fase mvel. Filtrar,
descartando os primeiros 10 mL do fltrado. Pipetar 10 mL
do fltrado e colocar em um segundo balo volumtrico de
100 mL, completar o volume com Fase mvel e misturar.
C
10
H
13
ClN
2
O
3
com a Soluo amostra e a Soluo padro.
ROTULAGEM
CLORTALIDONA
Chlortalidonum
NH
O
O H
S
Cl
NH
2
O O
C
14
H
11
ClN
2
O
4
S; 338,77
clortalidona; 02510
2-Cloro-5-(2,3-diidro-1-hidroxi-3-oxo-1H-isoindol-1-il)-
benzenossulfonamida
[77-36-1]
Contm, no mnimo, 98,0 % e, no mximo, 102,0% de
C
14
H
11
ClN
2
O
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou branco-amarelado.
em acetona e em metanol, pouco solvel em etanol e
praticamente insolvel em cloreto de metileno. Solvel em
a c
877
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -0,15 a +0,15.
Determinar em soluo a 1% (p/v) em metanol.
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao B., C., D. e E. podem ser omitidos
se for realizado o teste A.
mximos de absoro somente nos mesmos nmeros de
onda e com as mesmas intensidades relativas daqueles
observados no espectro de clortalidona SQR, preparado de
maneira idntica.
etanol, exibe mximos e mnimos somente nos mesmos
comprimentos de onda de soluo similar de clortalidona
SQR. A razo entre os valores de absorvncia medidos em
284 nm e 275 nm est compreendida entre 0,73 e 0,88.
254
,
como suporte, e mistura de gua e acetato de etila (1,5:98,5),
a seguir.
gua e acetato de etila (1,5:98,5).
Soluo (2): dissolver 10 mg de clortalidona SQR em
acetona e diluir para 10 mL em mistura de gua e acetato
de etila (1,5:98,5).
Soluo (3): dissolver 10 mg de clortalidona SQR e 10 mg
de hidroclorotiazida SQR em acetona e diluir para 10 mL
em mistura de gua e acetato de etila (1,5:98,5).
separadas.
D. Dissolver cerca de 10 mg da amostra em 1 mL de cido
sulfrico. Desenvolve-se colorao amarela intensa.
E. Proceder conforme descrito em Poder rotatrio
especfco.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez. Agitar 1 g da amostra em 50 mL da mistura de
acetona e gua livre de dixido de carbono (1:1) com o
auxlio de aquecimento. Deixar esfriar. No mximo 0,75
mL de hidrxido de sdio 0,1 M gasto para neutralizar,
determinando o ponto fnal potenciometricamente.
254
tolueno, xileno, hidrxido de amnio, dioxana e lcool
isoproplico (5:10:20:30:30), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): dissolver 200 mg da amostra em mistura de
gua e acetona (1:4) e diluir para 5 mL com a fase mvel.
Soluo (2): dissolver 20 mg do cido 2-(4-cloro-3-
sulfamoilbenzoil)-benzoico SQR e 20 mg de clortalidona
SQR em mistura de gua e acetona (1:4) e diluir para 50
mL com a fase mvel.
Soluo (3): Transferir 1 mL da Soluo (1) para balo
de gua e acetona (1:4).
Qualquer mancha correspondente ao cido 2-(4-cloro-3-
sulfamoilbenzoil)-benzoico obtida no cromatograma com
a Soluo (1), no mais intensa que aquela obtida com a
Soluo (2) (1%). Qualquer mancha secundria, diferente
da mancha principal e da mancha do cido 2-(4-cloro-3-
a Soluo (1), no mais intensa que aquela obtida com
a Soluo (3) (0,5%). O teste somente ser vlido se o
cromatograma obtido com a Soluo (2) apresentar duas
manchas nitidamente separadas.
Cloretos (5.3.2.1). Pulverizar 0,3 g da amostra. Adicionar
30 mL de gua, agitar por 5 minutos e fltrar. Utilizar 15
mL do fltrado para realizar Ensaio limite para cloretos.
Preparar o padro utilizando 10 mL de soluo a 5 ppm de
cloretos. No mximo 350 ppm (0,035%).
mximo 0,001% (10 ppm).
mximo 0,4%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
A. Dissolver cerca de 0,2 g, exatamente pesados, da
amostra em 50 mL de acetona. Titular com hidrxido de
tetrabutilamnio 0,1 M SV em atmosfera de nitrognio.
Determinar o ponto fnal potenciometricamente. Realizar
mL de hidrxido de tetrabutilamnio 0,1 M SV equivale a
33,877 mg de C
14
H
11
ClN
2
O
4
S.
c
com slica quimicamente ligada a grupo octilsilano(5 um),
mantida temperatura ambiente, fuxo da Fase mvel de 1
mL/minuto.
Fase mvel: mistura de fosfato dibsico de amnia 0,01
M e metanol (3:2). Ajustar o pH para 5,5 0,1, com cido
fosfrico.
Soluo de padro interno: dissolver quantidade
exatamente pesada de 2,7-naftalenodiol em metanol e
diluir quantitativamente para obter soluo a 1 mg/mL.
Soluo de cido 2-(4-cloro-3-sulfamoilbenzoil)-benzoico:
dissolver quantidade exatamente pesada de cido
2-(4-cloro-3-sulfamoilbenzoil)-benzoico SQR em metanol
e diluir quantitativamente para obter soluo a 5 g/mL.
Soluo amostra: dissolver 50 mg da amostra em metanol
e diluir para 50 mL com o mesmo o solvente. Transferir
5 mL desta soluo para balo volumtrico de 50 mL.
Adicionar 5 mL da soluo de padro interno e 10 mL de
metanol. Completar o volume com gua e homogeneizar.
de clortalidona SQR em metanol e diluir quantitativamente
para obter soluo a 1 mg/mL. Transferir 5 mL desta
soluo para balo volumtrico de 50 mL. Adicionar 5
mL da Soluo de padro interno e 10 mL da Soluo de
cido 2-(4-cloro-3-sulfamoilbenzoil)-benzoico. Completar
o volume com gua e homogeneizar.
Injetar replicatas de 25 uL da Soluo padro. Os
tempos de reteno relativos so cerca de 0,5 para o
cido 2-(4-cloro-3-sulfamoilbenzoil)-benzoico, 0,8 para
a clortalidona e 1,0 para o 2,7-naftalenodiol. A resoluo
entre os picos da clortalidona e do cido 2-(4-cloro-3-
sulfamoilbenzoil)-benzoico e entre os picos da clortalidona
e do 2,7-naftalenodiol no menor que 1,5. O fator de
cauda para os picos da clortalidona e do cido 2-(4-cloro-
3-sulfamoilbenzoil)-benzoico no maior que 2,0. O
C
14
H
11
ClN
2
O
4
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Diurtico.
CLORTALIDONA COMPRIMIDOS
14
H
11
ClN
2
O
4
S.
IDENTIFICAO
do p equivalente a 0,1 g de clortalidona para bquer e
dissolver em 10 mL de acetona. Aquecer em banho-maria
por 5 minutos. Deixar esfriar e fltrar. Adicionar 20 mL de
gua ao fltrado e aquecer em banho-maria por 5 minutos.
Aplicar, gentilmente, corrente de ar sobre a soluo para
remover a acetona. Deixar esfriar em banho de gelo, fltrar
e secar os cristais a 105 C por 4 horas. O resduo seco
responde ao teste A. de Identifcao da monografa de
Clortalidona.
da Soluo amostra, obtida no mtodo B. em Doseamento,
corresponde quele do pico principal da Soluo de padro.
CARACTERSTICAS
Tempo: 60 minutos
de dissoluo e diluir, se necessrio, com gua, at
concentrao adequada. Medir as absorvncias das solues
em 275 nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente para o
14
H
11
ClN
2
O
4
S
da soluo de clortalidona SQR na concentrao de 0,5%
(p/v) em metanol. Realizar diluies sucessivas dessa
soluo em gua at concentrao adequada.
declarada de C
14
H
11
ClN
2
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
utilizando slica-gel 60 F
254
tolueno, xileno, hidrxido de amnio, dioxana e lcool
isoproplico (5:10:20:30:30), como fase mvel. Aplicar,
a c
879
quantidade do p equivalente a 100 mg de clortalidona
em 5 mL de etanol. Deixar em ultrassom por 15 minutos e
centrifugar. Utilizar o sobrenadante lmpido.
Soluo (2): Transferir 1 mL da Soluo (1) para balo
volumtrico de 200 mL e completar o volume com etanol.
Soluo (3): dissolver quantidade, exatamente pesada, do
cido 2-(4-cloro-3-sulfamoilbenzoil)-benzoico SQR em
etanol e diluir para obter soluo a 0,02% (p/v) no mesmo
solvente.
Qualquer mancha correspondente ao cido 2-(4-cloro-3-
a Soluo (1) no mais intensa que aquela obtida com
a Soluo (3) (1%). Qualquer outra mancha secundria
obtida no cromatograma com a Soluo (1) no mais
DOSEAMENTO
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar e pulverizar
20 comprimidos. Ferver, sob refuxo, quantidade do
p equivalente a 100 mg de clortalidona em 30 mL de
metanol por 5 minutos. Agitar mecanicamente por 15
minutos. Deixar esfriar e fltrar. Lavar o resduo com
metanol, juntar as lavagens ao fltrado e diluir para 100
mL com o mesmo solvente. Transferir 5 mL dessa soluo
cido clordrico M e completar o volume com metanol.
Medir a absorvncia da soluo resultante em 275 nm,
utilizando metanol para o ajuste do zero. Calcular o teor
de C
14
H
11
ClN
2
O
4
S nos comprimidos, a partir das leituras
obtidas. Alternativamente, realizar o clculo utilizando A
(1%, 1cm) = 57,4, em 275 nm.
de alta efcincia (5.2.17.4), de acordo com o mtodo B. de
Doseamento da monografa de Clortalidona. Preparar as
Solues padro e amostra como descrito a seguir.
clortalidona para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar
50 mL de metanol e agitar mecanicamente por 30 minutos.
de 50 mL, contendo 5 mL da Soluo de padro interno
e 10 mL de metanol. Completar o volume com gua e
homogeneizar.
Soluo padro: preparar como indicado na monografa de
Clortalidona. Substituir a Soluo de cido 2-(4-cloro-3-
sulfamoilbenzoil)-benzoico por 10 mL de metanol.
Injetar replicatas de 25 uL da Soluo padro. A resoluo
entre os picos da clortalidona e do 2,7-naftalenodiol no
deve ser menor que 1,5. O fator de cauda para os picos da
clortalidona e do 2,7-naftalenodiol no maior que 2,0.
14
H
11
ClN
2
O
4
S nos
ROTULAGEM
CLOZAPINA
Clozapinum
N
N
H
N
N
CH
3
Cl
C
18
H
19
ClN
4
; 326,82
clozapina; 02540
8-Cloro-11-(4-metil-1-piperazinil)-5H-dibenzo[b,e][1,4]
diazepina
[5786-21-0]
C
18
H
19
ClN
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino amarelo.
solvel em cloreto de metileno, solvel em etanol. Solvel
em cido actico diludo.
Faixa de fuso (5.2.2): 182 C a 186 C.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada, apresenta mximos de
c
no espectro da clozapina SQR, preparado de maneira
idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel 0,25 mm, como suporte, e mistura de clorofrmio
e metanol (3:1), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, 20 uL de cada uma das solues, recentemente
Soluo (1): dissolver 0,1 g da amostra em etanol e
completar para 10 mL com clorofrmio.
Soluo (2): transferir 2,5 mg de clozapina SQR para um
balo volumtrico de 25 mL. Dissolver em clorofrmio e
Soluo (3): transferir 3 mL da Soluo (2) para um
clorofrmio. Porcentagem para comparao com a amostra
0,3%.
0,2%.
0,1%.
0,05%.
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm), e
comparar a intensidade de alguma mancha secundria
observada no cromatograma da Soluo (1) com aquela
da mancha principal do cromatograma da Soluo (2).
Qualquer mancha do cromatograma da Soluo (1) com
valor de R
f
de 0,82 no corresponde a 11,11- (piperazina-
1,4-diil)bis(8-cloro-5H-dibenzo[b,e][1,4]diazepina);
R
f
de 0,67 no corresponde a 8-cloro-5,10-di-hidro-
11H-dibenzo[b,e][1,4]diazepina-11-ona e R
f
de 0,10
no corresponde a 8-cloro-11-(1-piperazina-1-il)-5H-
dibenzo[b,e][1,4]-diazepina) ou mais intensa do que a
Soluo (3), Soluo (4) e Soluo (5), respectivamente.
Qualquer outra mancha secundria do cromatograma
da Soluo (1) no mais larga ou mais intensa do que
a mancha principal obtida da Soluo (5). A soma da
intensidade de todas as manchas secundrias obtidas da
Soluo (1) corresponde no mais do que 0,6%
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo III. Preparar
o padro com 2 mL de soluo a 10 ppm de chumbo (Pb).
amostra. Dessecar em estufa entre 100 C a 105 C, por 4
horas, at peso constante. No mximo 0,5 %.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Pesar, exatamente, cerca de 0,1
g da amostra, transferir para erlenmeyer de 250 mL e
dissolver em 50 mL de cido actico glacial. Titular com
cido perclrico 0,1 M SV. Determinar o ponto fnal
18
H
19
ClN
4
.
EMBALAGEM E DOSEAMENTO
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antipsictico
CLOZAPINA COMPRIMIDOS
18
H
19
ClN
4
.
IDENTIFICAO
A. A mancha principal do cromatograma da Soluo (2),
CARACTERSTICAS
a c
881
Adicionar 640 mL de metanol, deixar em ultrassom por
10 minutos, completar o volume com gua. Prosseguir
conforme descrito no mtodo de Doseamento a partir de
Homogeneizar....
Meio de dissoluo: tampo acetato pH 4,0, 900 mL.
Aparelhagem: cestas, 100 rpm.
Tempo: 45 minutos.
de dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, com Meio
de dissoluo at concentrao adequada. Medir as
absorvncias das solues em 290 nm (5.2.14), utilizando
o mesmo solvente para o ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
18
H
19
ClN
4
dissolvida no meio, comparando
as leituras obtidas com a da soluo de clozapina SQR
solvente.
declarada de C
18
H
19
ClN
4
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel 0,25 mm, e mistura de n-heptano, clorofrmio,
etanol absoluto e hidrxido de amnio (30:30:30:1), como
fase mvel. Aplicar, separadamente, a placa, 20 uL de cada
seguir.
Soluo diluente: preparar mistura de clorofrmio e
metanol (4:1).
Soluo (1): pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir
o equivalente a 125 mg de clozapina para balo volumtrico
de 25 mL e dissolver utilizando 20 mL de Soluo diluente.
Agitar, mecanicamente, por 15 minutos e completar o
volume com Soluo diluente. Filtrar e homogeneizar.
Soluo (2): soluo a 5 mg/mL de clozapina SQR amostra
em Soluo diluente.
Soluo (3): transferir 1 mL da Soluo (2) para um balo
0,5%.
0,4%.
0,3%.
0,2%.
0,1%.
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta no comprimento
de onda curto, e comparar a intensidade de qualquer
mancha secundria observada no cromatograma da Soluo
(1) com aquela da mancha principal do cromatograma
das Solues (2), (3), (4), (5), (6) e (7). Nenhuma outra
mancha secundria do cromatograma da Soluo (1) mais
larga ou mais intensa do que a mancha principal obtida
no cromatograma da Soluo (3) (0,5%); e a soma das
intensidades de todas as manchas secundrias obtidas da
Soluo (1) corresponde a no mais do que 2,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Por Cromatografa a lquido de alta efcincia (5.2.17.4).
Utilizar cromatgrafo provido de detector de ultravioleta
a 257 nm; coluna de 250 mm de comprimento e 4,6 mm
de dimetro interno, empacotada com slica quimicamente
ligada a grupo octilsilano (5 m), mantida a temperatura
Fase mvel: mistura de metanol, gua e trietilamina
(800:200:0,75).
Soluo amostra: pesar e pulverizar no menos que 20
comprimidos. Transferir quantidade do p, exatamente
pesado, equivalente a 125 mg de clozapina, para balo
volumtrico de 1000 mL, dissolver em 640 mL de metanol,
deixar em ultrassom por 10 minutos, completar o volume
com gua e homogeneizar, obtendo soluo a 0,125 mg/mL.
de clozapina SQR em metanol, de modo a obter soluo a
0,125 mg/mL. A composio fnal do solvente metanol:gua
deve ser de cerca de 8:2.
Soluo de resoluo: transferir cerca de 10 mg de clozapina,
exatamente , para um recipiente adequado. Adicione 5 mL
de cido clordrico 0,1 M, aquecer por 2 horas a 90 C.
Transferir essa soluo para balo volumtrico de 100
mL, adicionar 15 mL de gua e completar o volume com
metanol. Homogeneizar. Transferir 10 mL dessa preparao
para um recipiente adequado e adicionar 10 mL da Soluo
padro e misturar.
c
da coluna no deve ser menor que 1500 pratos tericos,
o desvio padro relativo para replicatas no maior que
2,0%. Injetar 10 L da Soluo de resoluo. A resoluo
entre a clozapina e qualquer outro pico no deve ser menor
que 1,5.
reas sob os picos. Calcular o teor de clozapina C
18
H
19
ClN
4

ROTULAGEM
COLCHICINA
Colchicinum
C
22
H
25
NO
6
; 399,44
colchicina; 02567
N-[(7S)-5, 6, 7, 9-Tetraidro-1, 2, 3, 10-tetrametoxi-9-
oxobenzo[a]heptalen-7-il]acetamida
[64-86-8]
C
22
H
25
NO
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P amorfo ou cristalino amarelo-
plido, inodoro.
em etanol e clorofrmio, ligeiramente solvel em ter de
petrleo.
Faixa de fuso (5.2.2): 142 C a 150 C (p); 157 C
(cristal).
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -240 a -250,
determinado em soluo a 1% (p/v) em etanol, em relao
substncia anidra.
IDENTIFICAO
A. Dissolver a amostra em 0,5 mL de clorofrmio,
dispersar em brometo de potssio, misturar e evaporar
o solvente primeiramente numa corrente de ar e depois
por aquecimento a 80 C por 60 minutos. O espectro de
absoro no infravermelho (5.2.14) da amostra apresenta
observados no espectro de colchicina SQR, preparado de
maneira idntica.
etanol, exibe mximos em 243 nm e 350 nm, idnticos aos
observados no espectro de soluo similar de colchicina
SQR.
C. Dissolver 30 mg de amostra em 1 mL de etanol e
adicionar 0,15 mL de cloreto frrico SR. Produz-se
colorao marrom-avermelhada.
D. Misturar 1 mg de colchicina com aproximadamente 0,2
mL de cido sulfrico SR. Produz-se colorao amarela.
Adicionar 0,1 mL de cido ntrico SR. A soluo torna-se
azul-esverdeada, passando rapidamente para vermelho e,
fnalmente, amarelo quase incolor. Adicionar algumas gotas
de hidrxido de sdio SR. A soluo torna-se vermelha.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 0,5% (p/v) em gua
lmpida (5.2.25), no apresentando colorao mais intensa
(5.2.12) que uma soluo preparada pela diluio de 8,5
mL da Soluo de referncia de cor SC O em 91,5 mL de
cido clordrico a 1% (p/v).
Acidez ou alcalinidade. Adicionar a 10 mL de soluo
amostra a 0,5% (p/v) em gua, 0,1 mL de azul de
bromotimol SI. No ocorre alterao de cor nem produo
de colorao verde. No mais que 0,1 mL de hidrxido de
sdio 0,01 M necessrio para a viragem do indicador para
colorao azul.
slica-gel HF
254
, como suporte, e mistura de amnia
concentrada, clorofrmio e acetona (1:25:50), como fase
Soluo (1): soluo a 10 mg/mL da amostra em
clorofrmio.
clorofrmio.
clorofrmio.
Qualquer mancha secundria obtida com a Soluo (1),
a c
883
diferente da mancha principal, no mais intensa do que
aquela obtida no cromatograma da Soluo (2) (2%) e no
mais que uma mancha mais intensa do que aquela obtida
no cromatograma da Soluo (3) (1%).
gua (5.2.20.1). Determinar em 0,5 g de amostra. No
mximo 2,0%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 0,5 g de
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito em Titulao em meio no
amostra, dissolver em uma mistura de 10 mL de anidrido
actico e 20 mL de tolueno e aquecer, se necessrio. Titular
com cido perclrico 0,1 M SV e determinar o ponto fnal
22
H
25
NO
6
.
com slica quimicamente ligada a grupo octilsilano (3 m
a 10 m), mantida temperatura ambiente; fuxo da Fase
Fase mvel: mistura de fosfato de potssio monobsico 0,5
M, gua e metanol (4,5:45:53). Ajustar o pH para (5,50
0,05) com cido fosfrico.
Soluo amostra: soluo a 6 g/mL da amostra em
mistura de metanol e gua (1:1). Preparar imediatamente
antes de usar.
Soluo padro: soluo a 6 g/mL de colchicina SQR em
mistura de metanol e gua (1:1). Preparar imediatamente
antes de usar.
tericos/metro. O tempo de reteno para colchicina est
entre 5,5 e 9,5. O desvio padro relativo das reas de
replicatas dos picos registrados no deve ser maior que
2,0%.
amostra e padro, registrar os cromatogramas e medir as
22
H
25
NO
6
a partir
das respostas obtidas para a Soluo padro e a Soluo
amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Agente antigotoso.
COLCHICINA COMPRIMIDOS
22
H
25
NO
6
.
IDENTIFICAO
Pesar e pulverizar os comprimidos. Triturar quantidade de
p equivalente a 20 mg de colchicina com 20 mL de gua.
Filtrar. Transferir o fltrado para funil de separao. Extrair
com 30 mL de clorofrmio. Evaporar o clorofrmio, at
resduo, sob calor brando. Proceder conforme descrito
no teste A. de Identifcao na monografa de Colchicina
utilizando o resduo obtido.
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
Procedimento: realizar o teste, sem muita demora, sob
pouca luz, utilizando vidraria de baixo actinismo. Aps
o teste, proceder conforme descrito no mtodo B. de
Doseamento na monografa de Colchicina.
declarada de C
22
H
25
NO
6
DOSEAMENTO
na monografa de Colchicina. Preparar a Soluo amostra
Transferir quantidade do p equivalente a 0,6 mg de
colchicina para balo volumtrico de 100 mL com
auxlio de 50 mL de mistura metanol e gua (1:1). Agitar
o mesmo solvente. Preparar imediatamente antes de usar.
c
22
H
25
NO
6
nos
ROTULAGEM
CRATEGO
Crataegi folium cum fore
Crataegus spp. ROSACEAE
A droga vegetal constituda por ramos foridos, secos,
inteiros ou rasurados de Crataegus monogyna Jacq.,
Crataegus oxyacantha L., Crataegus laevigata (Poir.)
DC., Crataegus pentagyna Waldst. et Kit., Crataegus
nigra Waldst. et Kit., Crataegus azarolus L., incluindo
folhas e fores, contendo no mnimo 1,5% de favonoides
totais expressos como hiperosdeo (C
21
H
20
O
12
; 464,4), em
relao droga seca.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As folhas secas possuem
odor caracterstico e so inspidas.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas simples, com trs ou mais lbulos, partidas a lobadas,
alternas, pilosas e com pecolo longo. Lmina com base e
pice agudos, bordo serrilhado irregularmente, peninrvea,
com nervuras secundrias partindo em ngulo agudo
em relao principal e terminando no bordo do limbo;
nervuras de ordens superiores formam arolas fechadas
com poucas ramifcaes terminais. Flores pentmeras,
pequenas, longamente pedunculadas. Clice com lacnios
de pice agudo, formando com o hipanto uma estrutura
pilosa e de colorao pardo esverdeada nas amostras secas.
Corola com ptalas alvas, levemente pardas nas amostras
desidratadas; ptalas livres, de contorno arredondado e
unha curta. Estames numerosos, com anteras visveis.
DESCRIO MICROSCPICA
Folhas hipoestomticas, de mesoflo dorsiventral. Em
vista frontal, a epiderme recoberta por cutcula mais
espessada na face adaxial e apresenta clulas fundamentais
de dimenses variadas e paredes anticlinais sinuosas,
com sinuosidade mais pronunciada na face abaxial. Em
seco transversal, a epiderme uniestratifcada, com
clulas mais volumosas na face adaxial; os estmatos so
do tipo cicloctico, com clulas-guarda reniformes tpicas
e com pronunciado espessamento na parede anticlinal
interna; sobre as clulas subsidirias a cutcula estriada
concentricamente s clulas-guarda. Em ambas as faces
ocorrem tricomas unicelulares, pontiagudos, longos e com
parede muito espessada; em sua base ocorrem sete ou oito
clulas epidrmicas dispostas em roseta, recobertas por
pronunciado acmulo de cutcula. O mesoflo apresenta
dois, ou mais raramente, trs estratos de parnquima
palidico; o parnquima esponjoso apresenta clulas
alongadas com braos curtos, mas que permitem a
formao de amplos espaos intercelulares. Drusas com
arestas erodidas e/ou disformes, de oxalato de clcio, so
comuns por todo o clornquima, enquanto que cristais
prismticos (cbicos e rmbicos) de tamanhos variados
localizam-se nas proximidades dos feixes vasculares. A
nervura principal, de seco transversal plano-convexa a
cncavo-convexa, mostra-se proeminente na face abaxial,
contando com trs ou quatro estratos de colnquima anelar
nessa regio. O feixe vascular da nervura principal do
tipo colateral em arco aberto, com fbras lignifcadas em
ambos os plos de tecidos condutores, estando o conjunto
envolto por uma bainha de clulas parenquimticas.
Tal feixe pode ser nico, ou em nmero de dois ou trs,
dependendo da folha analisada. Os feixes vasculares de
menor calibre tambm so colaterais, com calotas de fbras
em ambos os plos de tecidos condutores, envoltos por uma
bainha parenquimtica. O pecolo, em seco transversal,
apresenta contorno plano-convexo a cncavo-convexo,
com epiderme uniestratifcada recoberta por cutcula
espessada, seguida de cinco ou seis estratos de colnquima
anelar, e tecidos condutores organizados em um nico
feixe vascular em arco aberto com bordos pouco elevados.
Em algumas amostras verifca-se uma pequena fexo nos
bordos do arco, composta apenas pelo foema. As ptalas
apresentam epiderme papilosa, recoberta por cutcula
ornamentada com pequenas projees, tambm presentes
nas spalas e anteras. O mesoflo das ptalas homogneo,
composto por 10 a 12 estratos na regio central-mediana
e dois ou trs estratos nos bordos e tero superior. Nas
anteras, o endotcio apresenta espessamentos anticlinais
paralelos entre si, s vezes entrelaados na diagonal.
Os gros de plen so tricolpados e ornamentados com
pequenas papilas esfricas. Na face interna da base das
spalas est o nectrio foral.
O p atende a todas as caractersticas estabelecidas
para a espcie, menos os caracteres macroscpicos.
So caractersticas: tricomas unicelulares com paredes
espessadas, fragmentados ou ntegros; fragmentos de
epiderme foliar com clulas dispostas em roseta na base dos
tricomas; estmatos ciclocticos com clulas subsidirias
com cutcula estriada; clulas fundamentais da epiderme
com paredes sinuosas, com sinuosidade mais ou menos
pronunciada, dependendo da amostra e da face foliar;
fragmentos de mesoflo dorsiventral com drusas disformes
e cristais prismticos acompanhando os feixes vasculares.
IDENTIFICAO
a c
885
slica-gel F
254
, com espessura de 250 m, como suporte e
mistura de cido frmico anidro, gua, metil-etil-cetona e
acetato de etila (10:10:30:50), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, em forma de banda, 20 uL da
Soluo (1), Soluo (2) e da Soluo (3), recentemente
Soluo (1): pesar, exatamente, cerca de 1 g da droga
moda (355 m), acrescentar 10 mL de metanol, aquecer
sob refuxo por cinco minutos, temperatura de 65 C.
Aps resfriamento temperatura ambiente, fltrar a soluo
obtida em papel fltro, sob presso reduzida.
Soluo (2): dissolver 1 mg de cido clorognico em 10
mL de metanol.
Soluo (3): dissolver 1 mg de hiperosdeo em 5 mL de
metanol.
em estufa a temperatura entre 100 C a 105 C por 15
minutos, e, ainda morna, nebulizar com difenilborato de
aminoetanol SR, seguido de uma soluo de macrogol 400
a 5% (p/v) em metanol. Deixar a placa secar ao ar livre
por 30 minutos e examin-la sob luz ultravioleta (365 nm).
Observa-se a presena de quatro manchas fuorescentes na
Soluo (1), sendo a superior uma mancha de colorao
verde amarelada; abaixo uma mancha de colorao amarelo
alaranjada com Rf de 0,65, correspondente ao hiperosdeo;
uma mancha de colorao azul, correspondente ao cido
clorognico com Rf de 0,53; e a mancha inferior de
colorao verde amarelada.
B. Aquecer, sob refuxo, cerca de 3 g da droga pulverizada
com 60 mL de gua destilada durante 15 minutos. Esfriar
e fltrar. A 2 mL do extrato adicionar duas gotas de cido
clordrico SR e gotejar gelatina SR. O aparecimento de
precipitado ntido indica reao positiva para taninos totais.
C. A 2 mL do extrato obtido do teste B. de Identifcao,
adicionar 10 mL de gua destilada e duas a quatro gotas
de soluo de cloreto frrico a 1% (p/v) em etanol. O
desenvolvimento de colorao cinza-escuro, indica reao
positiva para taninos.
adicionar 0,5 mL de vanilina a 1% (p/v) em metanol e 1
mL de cido clordrico. O desenvolvimento de colorao
vermelha, indica reao positiva para taninos condensados.
f. A 5 mL do extrato obtido no teste B. de Identifcao,
adicionar pequenos fragmentos de magnsio metlico e
1 mL de cido cloridrco. O aparecimento de colorao
vermelha indica a presena de agliconas favonodicas.
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 8,0% de ramos
lignifcados e 2,0% de outros materiais estanhos.
gua (5.4.2.3). No mximo 11,0%.
DETERMINAO DO NDICE DE ESPUMA (IE)
Transferir exatamente cerca de 1 g da droga vegetal moda
(180 m), para erlenmeyer contendo 50 mL de gua
fervente. Manter sob fervura moderada durante 15 minutos.
Resfriar, fltrar em algodo para balo volumtrico de
100 mL. Completar o volume, atravs do fltro, at 100
mL. Distribuir o decocto obtido em 10 tubos de ensaio
com tampa (16 mm de dimetro por 16 cm de altura), em
uma srie sucessiva de 1 mL, 2 mL, 3 mL, at 10 mL, e
ajustar o volume do lquido, em cada tubo, a 10 mL com
gua. Tampar os tubos e agit-los vigorosamente com
movimentos verticais por 15 segundos, com duas agitaes
por segundo. Deixar em repouso por 15 minutos e medir a
altura da espuma. Em seguida, adicionar em cada tubo 1
mL de cido clordrico 2 M. Se a altura da espuma de todos
os tubos for inferior a 1 cm, o ndice de espuma menor do
que 100. Se, em qualquer um dos tubos, a altura da espuma
medida permanecer, aps 10 minutos, igual ou superior a
1 cm, a diluio do material vegetal nesse tubo (A) o
ndice observado. Calcular o ndice de espuma segundo a
expresso:
em que
IE = ndice de espuma;
A = volume (mL) do decocto utilizado para preparao da
diluio no tubo o qual a espuma foi observada.
O IE para o decocto deve ser no mnimo de 100.
DOSEAMENTO
flavonoides totais
a seguir.
droga pulverizada (250 m) e transferir para erlenmeyer
de 200 mL e adicionar 40 mL de etanol a 60% (v/v).
Colocar em banho-maria 60 C por 10 minutos com
agitao frequente. Resfriar e fltrar em algodo para balo
volumtrico de 100 mL. Retornar o resduo insolvel e o
algodo para o mesmo erlenmeyer, adicionar 40 mL de
etanol a 60% (v/v) e levar, novamente ao banho-maria
por 10 minutos com agitao frequente. Filtrar a soluo
em algodo para o balo volumtrico como previamente
descrito. Completar o volume com etanol a 60% (v/v).
Soluo amostra: transferir volumetricamente 5 mL
da Soluo estoque para balo de fundo redondo de
100 mL e evaporar at secura em evaporador rotatrio.
Solubilizar o resduo em 8 mL de mistura de soluo
c
metanol com cido actico glacial (10:100) e transferir
para balo volumtrico de 25 mL. Lavar o balo de fundo
redondo com 3 mL da mistura de soluo metanol com
cido actico glacial (10:100) e transferir para o balo
volumtrico como previamente descrito. Adicionar 10 mL
da Soluo reagente. Levar ao banho de gelo para resfriar,
por 10 minutos. No permitir o congelamento. Completar o
volume com cido actico anidro. Colocar imediatamente
em banho de gelo. Retirar 10 minutos antes da leitura em
espectrofotmetro.
Soluo branco: transferir volumetricamente 5 mL da
Soluo estoque para balo de fundo redondo de 100 mL
e evaporar at secura em evaporador rotatrio. Solubilizar
o resduo em 8 mL da mistura de soluo metanol com
cido actico glacial (10:100) e transferir para balo
volumtrico de 25 mL. Lavar o balo de fundo redondo
com 3 mL da mistura de soluo metanol com cido actico
glacial (10:100) e transferir para o balo volumtrico
como previamente descrito. Adicionar 10 mL de cido
frmico anidro. Levar ao banho de gelo para resfriar por
10 minutos. No permitir o congelamento. Completar o
volume com cido actico anidro. Colocar imediatamente
em banho de gelo. Retirar 10 minutos antes da leitura em
espectrofotmetro.
Soluo reagente: cido brico a 2,5% (p/v) e cido
oxlico a 2% (p/v) em cido frmico anidro. Solubilizar
com aquecimento, em capela de exausto.
Medir a absorvncia da Soluo amostra aps 30
minutos, no comprimento de onda de 410 nm. Calcular a
porcentagem do teor de favonoides totais expressos em
hiperosdeo. Considerar, a absortividade especfca do
hiperosdeo igual a 405. Calcular a porcentagem do teor de
favonoides totais segundo a expresso:
m
1,235 Abs
H

=
em que
H = teor de favonoides totais expressos em hiperosdeos;
m = massa da droga (g) considerando a determinao de
gua.
a c
887
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Crataegus spp.
_________________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A, B, C a 0,5 cm; em D a 1 mm; em E a 0,5 mm; em f, G, I e J a 50 m; em H
e K a 25 m.
A aspecto geral de um ramo na fase de pr-antese: hipanto (hip); boto foral (bo). B detalhe parcial de um ramo aps a queda das corolas: clice
(cl); estames (est). C aspecto geral de uma folha: pecolo (pc); nervura principal (np); nervura secundria (ns). D detalhe parcial da nervao foliar
em destaque em C: nervura secundria (ns). E detalhe parcial das arolas e terminaes vasculares: arola (ar). f e G vista frontal das faces adaxial
e abaxial foliar, respectivamente: clula epidrmica comum (ce); estmato (es). H detalhe dos estmatos: clula-guarda (cg); clula subsidiria (cs).
I tricoma tector foliar: tricoma (tr). J e K - detalhes da insero do tricoma em vista frontal e transversal, respectivamente: tricoma (tr); clulas em
roseta (cr); epiderme (ep); cutcula (cu); face adaxial (ad); parnquima palidico (pp).
c

A
ep
ba
pj
ic
es
pp
ad
ab
ep
B
ep
pj
fx
ff
ad
ab
ep
f
x
C
ff
fx
f
x
ba
E
dr
D
dr
cr
ic
fv
figura 2 Seces transversais da lmina foliar em Crataegus spp.
_________________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A, B, C e D a 50 m; em E a 25 m.
A detalhe do mesoflo mediano com um feixe vascular tercirio: face abaxial (ab); face adaxial (ad); feixe vascular (fv); bainha do feixe vascular
(ba); parnquima esponjoso (pj); idioblasto cristalfero (ic); epiderme (ep); parnquima palidico (pp); estmato (es). B detalhe de um feixe vascular
secundrio nas proximidades do bordo foliar: face abaxial (ab); face adaxial (ad); epiderme (ep); parnquima palidico (pp); fbras do foema (ff);
fbra do xilema (fx); xilema (x); foema (f); parnquima esponjoso (pj); epiderme (ep). C detalhe parcial do feixe vascular da nervura principal: fbra
do xilema (fx); xilema (x); foema (f); fbras do foema (ff); idioblasto cristalfero (ic); bainha do feixe vascular (ba). D fragmento do p mostrando
cristais prximos aos feixes vasculares: idioblasto cristalfero (ic); drusa (dr); cristal prismtico (cr). E detalhe de uma drusa em um fragmento do p:
drusa (dr).
a c
889
figura 3 Diagramas da distribuio dos tecidos na folha e no pecolo,
em seces transversais, em Crataegus spp.
_________________
Complemento da legenda da figura 3. As escalas correspondem em A, B, C e D a .250 m.
A regio apical da nervura principal: parnquima palidico (pp); feixe vascular (fv); tricoma (tr). B regio mediana da nervura principal: xilema
(x); foema (f); colnquima (co); parnquima palidico (pp); parnquima esponjoso (pj); fbras do foema (ff); tricoma (tr). C regio basal da nervura
principal: epiderme (ep); feixe vascular (fv); xilema (x); foema (f); colnquima (co); fbras do foema (ff); tricoma (tr). D regio mediana do pecolo:
colnquima (co); epiderme (ep).
c
figura 4 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Crataegus spp.
_________________
Complemento da legenda da figura 4. As escalas correspondem em A, B e C a 1 mm; em D e E a 50 m; em f a 25 m.
A aspecto geral do hipanto, pednculo foral, algumas spalas e anteras: antera (at); spala (sp); hipanto (hi); pednculo foral (pd). B aspecto geral
de uma ptala. C aspecto geral de uma for em seco longitudinal mediana: antera (at); ptala (pt); spala (sp); nectrio (ne); hipanto (hi); vulo
(ov); tricoma (tr). D detalhe parcial da base da ptala em seco transversal: epiderme (ep); parnquima homogneo (ph); feixe vascular (fv). E e f
detalhes parciais da antera e parede da teca, respectivamente, em seces transversais: endotcio (en); epiderme (ep); gro de plen (gp).
a c
891
CRCUMA
Curcumae longae rhizoma
Curcuma longa L. - ZINGIBERACEAE
A droga vegetal constituda pelos rizomas secos. Contm,
no mnimo, 2,5% de leo voltil e, no mnimo, 2,5% de
derivados do dicinamoilmetano expressos em curcumina
(C
21
H
20
O
6
, 368,4).
SINONMIA CIENTFICA
Curcuma domestica Valeton
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga tem odor
fracamente aromtico, lembrando o do gengibre; sabor
picante e levemente amargo.
DESCRIO MACROSCPICA
Rizomas principais ovalados, oblongos ou arredondados,
medindo at 12 cm de comprimento e at 5 cm de dimetro;
rizomas laterais cilndricos e alongados, arredondados nas
extremidades, medindo de 6 cm a 15 cm de comprimento
e de 1 cm a 4 cm de dimetro, geralmente portando
pequenas ramifcaes. Os rizomas possuem colorao
amarelo-parda a amarelo-acastanhada, superfcie lisa,
com cicatrizes anelares provenientes das bases das
bainhas foliares, cicatrizes irregulares provenientes das
ramifcaes laterais e pequenas cicatrizes arredondadas,
de razes. Razes laterais amarronzadas, paleceas,
estriadas, partem dos rizomas. Pelos longos so visveis
com auxlio de lente. Bainhas fbrosas podem acompanhar
o rizoma principal. A fratura lisa, ntida e gelatinosa,
amarelo-alaranjada a alaranjada, com pontos mais claros
dispersos, correspondentes aos feixes vasculares. Em
seco transversal so claras duas zonas: o crtex e o
cilindro central, separados pela endoderme. A regio
cortical estreita e mais clara e a medula bem desenvolvida
e alaranjada.
DESCRIO MICROSCPICA
Em vista frontal, a epiderme apresenta clulas de variadas
formas e de paredes retilneas e espessas, com algumas gotas
lipdicas. Os estmatos so anomocticos. Os pelos so
simples, uni a tricelulares, longos, de paredes espessadas,
muitas vezes caducos e de base ntida, arredondada e
espessa. O sber, visualizado por transparncia, apresenta
clulas quadrangulares a retangulares, de paredes espessas,
com gotas lipdicas. Em seco transversal, a cutcula
delgada e lisa. A epiderme formada por clulas achatadas
tangencialmente, a maioria tabular, de paredes fnas e
os estmatos localizam-se um pouco acima das demais
clulas epidrmicas. O sber constitudo por poucas
camadas de clulas retangulares, muito maiores do que
as da epiderme, compactas, de paredes suberizadas,
enfleiradas radialmente e com gotas lipdicas. As ltimas
camadas do sber podem se apresentar colapsadas. O
parnquima cortical constitudo por clulas de vrias
formas e tamanhos, geralmente poligonais, volumosas,
com espaos intercelulares evidentes. Gros de amido
grandes, de variadas formas, com lamelao bem defnida e
hilo excntrico ocorrem no parnquima cortical em grande
quantidade. Dispersos no crtex ocorrem idioblastos
secretores de leo, cada um deles comumente constitudo
por uma clula secretora geralmente circular, com uma
grande gota amarela, e com clulas parenquimticas
dispostas radialmente em torno desta clula. Pequenos
feixes vasculares colaterais, clulas contendo compostos
fenlicos e pequenas gotas lipdicas tambm so comuns
nesta regio. A endoderme praticamente contnua e
formada por clulas pequenas e achatadas, de diferentes
formas, com paredes delgadas. O cilindro central bastante
desenvolvido, apresentando clulas parenquimticas e
clulas contendo compostos fenlicos e gotas lipdicas.
Nas clulas do cilindro central ocorre menor quantidade
de gros de amido e maior quantidade de idioblastos
secretores. Pequenos feixes vasculares de distribuio
anelar ocorrem junto endoderme e feixes de maior
desenvolvimento, de distribuio aleatria e em grande
nmero, ocorrem mais internamente.
microscpica do p torna-se mais clara, quando utilizado
hidrato de cloral. So caractersticas: colorao amarelo-
escura; fragmentos da epiderme com pelos, em vista frontal;
pelos isolados ou parte destes; fragmentos da epiderme com
estmatos, em vista frontal; fragmentos da epiderme com
clulas mostrando gotas lipdicas; fragmentos da epiderme
mostrando a cicatriz de pelos, em vista frontal; fragmentos
da epiderme e do crtex, visualizado por transparncia,
em vista frontal; fragmentos de epiderme e de sber, em
seco transversal; fragmentos de sber, em vista oblqua;
fragmentos de sber, em seco transversal; fragmentos
de sber e de parnquima cortical, em seco transversal;
clulas parenquimticas isoladas ou agrupadas; fragmentos
de parnquima, em seco transversal; fragmentos de
parnquima de reserva com clulas repletas de gros de
amido, em seco transversal; clulas parenquimticas
isoladas, repletas de gros de amido, em seco
transversal; massas de gros de amido; gros de amido
isolados e/ou agrupados; pores de elementos de vaso
agrupados, com espessamento escalariforme, em seco
longitudinal; pores de elementos de vaso isolados, com
espessamento reticulado, em seco longitudinal; pores
de elementos de vaso com espessamento reticulado, em
seco longitudinal, associado a clulas parenquimticas,
em seco transversal; pores de elementos de vaso
com espessamento reticulado e com espessamento
helicoidal, em seco longitudinal; pores de elementos
c
de vaso isolados, com espessamento helicoidal, em seco
longitudinal; gotas lipdicas isoladas.
IDENTIFICAO
A. Agitar 0,5 g da amostra recentemente pulverizada
com 5 mL de etanol durante 5 minutos e fltrar. Colocar
gotas do fltrado sobre papel de fltro, que deve corar-se
de amarelo. Em seguida, umedecer o papel com gotas de
soluo saturada de cido brico. A cor passa a vermelho-
alaranjada. A adio posterior de hidrxido de amnio leva
ao desenvolvimento de colorao azul-escura.
254
,
clorofrmio, etanol e cido actico glacial (95:5:0,5) como
fase mvel. Aplicar placa, em forma de banda, 10 uL
de cada uma das solues descritas a seguir, recentemente
preparadas.
Soluo (1): agitar 0,5 g da amostra recentemente
pulverizada com 5 mL de metanol, por 30 minutos,
centrifugar durante 10 minutos a 2500 rpm. Filtrar.
Soluo (2): dissolver 5 mg de curcumina SQR,
demetoxicurcumina SQR e bisdemetoxicurcumina SQR
em 5 mL de metanol.
regio do cromatograma obtido com a Soluo (2), quando
examinado sob luz ultravioleta (365 nm), apresenta na parte
mediana, uma mancha verde fuorescente, correspondente
demetoxicurcumina (Rf de aproximadamente 0,6);
no tero superior observa-se uma mancha referente
curcumina, tambm de colorao verde fuorescente (Rf
de aproximadamente 0,7); e, no tero inferior, observa-
se mancha com a mesma colorao daquelas verifcadas
em Rf 0,7 e 0,6, referente bisdemetoxicurcumina (Rf
de aproximadamente 0,4). As mesmas manchas devem
ser visualizadas na regio do cromatograma obtida com
a Soluo (1), devendo corresponder em posio quelas
obtidas com a Soluo (2).
254
,
tolueno e acetato de etila (97:3) como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1) descrita no teste B. de Identifcao e 10 L
da Soluo (3), recentemente preparada, descrita a seguir.
Soluo (3): dissolver 10 mg de timol em 10 mL de
metanol.
secar ao ar. Nebulizar a placa com vanilina sulfrica SR.
A regio do cromatograma obtido com a Soluo (3), aps
revelao com vanilina sulfrica SR, apresenta na parte
mediana da placa, uma mancha de colorao avermelhada,
correspondente ao timol (Rf de aproximadamente 0,6). Na
Soluo (1) no se observa mancha com Rf correspondente
ao verifcado para a Soluo (3). No cromatograma obtido
para a Soluo (1) tambm possvel verifcar mancha de
colorao violcea, correspondente ao zingibereno (Rf de
aproximadamente 0,8). Na parte inferior do cromatograma,
podem ser visualizadas outras manchas de colorao
violcea (superior) e vermelha (inferior), prximo ao ponto
de aplicao.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 12,0%.
DOSEAMENTO
leos volteis
volteis em drogas vegetais (5.4.2.7). Utilizar balo de
fundo redondo de 500 mL contendo 200 mL de gua como
lquido de destilao e 0,5 mL de xileno (que devem ser
inseridos no tubo graduado). Reduzir a amostra a p (500
m) e proceder imediatamente determinao em 5 g da
droga em p. Destilar por 4 horas.
Derivados do dicinamoilmetano
Introduzir 10 mg da amostra em bquer de 50 mL, adicionar
6 mL de cido actico glacial e aquecer em banho-maria a
90 C por 60 minutos. Adicionar 0,2 g de cido brico e
0,2 g de cido oxlico, aquecer em banho-maria (90 C)
durante 10 minutos. Esfriar e diluir com cido actico
glacial em balo volumtrico de 10 mL. Transferir 1 mL
o volume com cido actico glacial. Medir a absorvncia
em 530 nm, logo aps o seu preparo utilizando cido
actico glacial para ajuste do zero. Utilizar como valor
de absorvncia especfca da curcumina 2350. Calcular o
teor de derivados de dicinamoilmetano, expresso como
curcumina, segundo a expresso:
em que
DC % = teor de derivados de dicinamoilmetano (%, p/p);
m

= massa da amostra (g), considerando o teor de gua.
a c
893
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Curcuma longa L.
_____________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 5 cm (rgua 1); em B, C e E a 100 m (rgua 2); em D a 1,0 mm (rgua 3).
A aspectos gerais de rizomas: bainha foliar (bf); cicatriz anelar proveniente da base da bainha foliar (cia); cicatriz de ramifcao lateral (crl); cicatriz
de raiz (cra); rizoma lateral (ril); rizoma principal (rip); raiz lateral (rlt). B detalhe de poro da epiderme, em vista frontal: clula fundamental
da epiderme (cfe); estmato (es); plo (pel). C detalhe de poro do sber, em vista frontal: gota lipdica (gl). D esquema do rizoma em seco
transversal: cilindro central (cc); cutcula (cu); crtex (cx); endoderme (end); epiderme (ep); feixe vascular (fv); parnquima cortical (pc); parnquima
medular (pm); sber (s). E detalhe de poro do rizoma em seco transversal: cilindro central (cc); clula contendo composto fenlico (ccf); cutcula
(cu); crtex (cx); espao intercelular (ei); endoderme (end); epiderme (ep); foema (f); feixe vascular (fv); gro de amido (ga); gota lipdica (gl);
idioblasto secretor (is); ncleo (nu); plo (pel); parnquima cortical (pc); parnquima medular (pm); sber (s); xilema (x).
c
figura 2 Aspectos microscpicos do p em Curcuma longa L.
_____________
A fragmento de epiderme, com plo, em vista frontal: plo (pel). B plos isolados. C fragmento de epiderme com estmato, em vista frontal:
estmato (es); gota lipdica (gl). D fragmento de epiderme, em vista frontal: gota lipdica (gl). E fragmento de epiderme com cicatrizes de plos,
em vista frontal: cicatriz de plo (cpe). f fragmento de epiderme e do crtex, visto por transparncia, em vista frontal: epiderme (ep); sber (s).
G fragmento de epiderme e de sber, em seco transversal: cutcula (cu); epiderme (ep); gota lipdica (gl); sber (s). H fragmento de sber, em
vista oblqua: gro de amido (ga); gota lipdica (gl). I fragmentos de sber, em seco transversal: gota lipdica (gl). J clulas parenquimticas
a c
895
isoladas ou agrupadas: gota lipdica (gl). L fragmento de sber e de parnquima cortical, em seco transversal: gota lipdica (gl); parnquima cortical
(pc); sber (s). M fragmento de parnquima, em seco transversal: clula contendo composto fenlico (ccf); gota lipdica (gl). N fragmento de
parnquima de reserva com clulas repletas de gros de amido, em seco transversal: gro de amido (ga). O clulas parenquimticas isoladas,
repletas de gros de amido, em seco transversal: gro de amido (ga). P massa de gros de amido. Q gros de amido isolados e/ou agrupados.
R pores de elementos de vaso agrupados, com espessamento escalariforme, em seco longitudinal. S poro de elemento de vaso isolado, com
espessamento reticulado, em seco longitudinal. T - poro de elemento de vaso com espessamento reticulado em seco longitudinal, associado a
clulas parenquimticas, em seco transversal: elemento de vaso com espessamento reticulado (ere); parnquima (p). U pores de elementos de vaso
com espessamento reticulado e com espessamento helicoidal, em seco longitudinal: elemento de vaso com espessamento helicoidal (eh); elemento
de vaso com espessamento reticulado (ere). V poro de elemento de vaso isolado, com espessamento helicoidal, em seco longitudinal. X gotas
lipdicas isoladas.
a
d
897
DAPSONA
Dapsonum
N H
2
S
NH
2
O O
C
12
H
12
N
2
O
2
S; 248,30
dapsona; 02686
4,4-Sulfonilbisbenzenamina
[80-08-0]
C
12
H
12
N
2
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco ou levemente
amarelado, inodoro e com leve sabor amargo.
solvel em acetona e ligeiramente solvel em etanol.
Facilmente solvel em cidos minerais diludos.
Faixa de fuso (5.2.2): 175
o
C a 181
o
C.
IDENTIFICAO
amostra previamente dessecada e dispersa em brometo
de potssio apresenta mximos de absoro somente
dapsona SQR, preparado de maneira idntica.
de 200 nm a 400 nm, de uma soluo a 0,0005% (p/v), em
metanol, exibe mximos em 260 nm e 295 nm e mnimos
em 232 nm e 268 nm, idnticos aos observados no espectro
de soluo similar de dapsona SQR.
C. Proceder conforme descrito em Substncias
relacionadas. A mancha principal obtida no cromatograma
com a Soluo (4) corresponde em posio, cor e
D. Responde s reaes de aminas aromticas primrias
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel G, como suporte, e mistura de clorofrmio-
acetona (1:1), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa 10 L de cada uma das seguintes solues, preparadas
em metanol.
Soluo (1): soluo a 1% (p/v) da amostra.
Soluo (2): soluo a 0,01% (p/v) da amostra.
Soluo (5): soluo a 0,1% (p/v) de dapsona SQR.
temperatura ambiente e nebulizar primeiramente com
soluo de nitrito de sdio a 0,5% (p/v) em cido clordrico
0,1 M. Aguardar por 5 minutos e nebulizar com dicloridrato
de N-(1-naftil)etilenodiamina SR. Qualquer mancha obtida
principal, no mais intensa do que a mancha obtida no
cromatograma com a Soluo (2)(1,0%) e no mais que
duas quaisquer dessas manchas so mais intensas do que
a mancha obtida no cromatograma com a Soluo (3)
(0,2%).
amostra. Dessecar em estufa em temperatura entre 100
o
C
e 105
o
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito em Titulaes por
diazotao (5.3.3.1), utilizar o Mtodo 1 ou o Mtodo 2.
Utilizar 0,25 g da amostra. Cada mL de nitrito de sdio 0,1
12
H
12
N
2
O
2
S.
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar 50 mg da amostra,
adicionar 40 mL de etanol e submeter ao ultrassom por 10
minutos. Agitar durante 30 minutos e completar o volume
para 100 mL com o mesmo solvente. Filtrar em papel de
fltro adequado. Diluir, sucessivamente, em etanol, at
de dapsona SQR na mesma concentrao, utilizando o
mesmo solvente. Medir as absorvncias das solues
resultantes em 295 nm utilizando etanol para ajuste do
12
H
12
N
2
O
2
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Quimioterpico.
d
DEXAMETASONA
Dexamethasonum
O
CH
3
H
O H
C H
3
F H
OH
CH
3
O
OH
C
22
H
29
FO
5
; 392,46
dexametasona; 02817
(11,16)-9-Fluor-11,17,21-triidroxi-16-metilpregna-1,4-
dieno-3,20-diona
[50-02-2]
C
22
H
29
FO
5
DESCRIO
branco.
ligeiramente solvel em etanol e pouco solvel em cloreto
de metileno.
Temperatura de fuso (5.2.2): 255 C, com decomposio.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +72 a 80, em relao
em dioxana.
IDENTIFICAO
observados no espectro de dexametasona SQR, preparado
de maneira idntica.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel contendo
um indicador de fuorescncia de intensidade mxima em
254 nm, como suporte, e mistura de butanol saturado com
gua, tolueno e ter etlico (5:10:85), como fase mvel.
Aplicar separadamente, placa, 5 L de cada uma das
Soluo (1): dissolver 10 mg da amostra numa mistura
de metanol e cloreto de metileno (1:9), em um balo
solvente.
Soluo (2): dissolver 25 mg de dexametasona SQR numa
mistura de metanol e cloreto de metileno (1:9), em um
mesmo solvente.
Soluo (3): dissolver 10 mg de betametasona SQR em
Soluo (2) e completar 10 mL com a mesma soluo.
secar ao ar. Examine a luz ultravioleta (254 nm). A
em posio, cor e intensidade quela obtida Soluo
(2). Nebulizar com soluo etanlica de cido sulfrico.
Aquecer a 120 C durante 10 minutos ou at aparecimento
de manchas e deixar arrefecer. Examinar luz do dia e
luz ultravioleta de 365 nm. A mancha principal, obtida com
a Soluo (1), corresponde em posio, cor luz do dia,
fuorescncia luz ultravioleta de 365 nm e dimenses,
mancha principal obtido com a Soluo (2). O ensaio s
vlido se a Soluo (3), apresentar duas manchas que
podem no estar totalmente separadas.
C. Solubilizar 2 mg da amostra em 2 mL de cido sulfrico.
Dentro de 5 minutos desenvolve-se colorao vermelha
acastanhada fraca. Adicionar a soluo a 10 mL de gua e
misturar. A colorao desaparece.
ENSAIOS DE PUREZA
Utilizar cromatgrafo provido de detector ultravioleta
a 254 nm; coluna de 250 mm de comprimento e 4,6
mm de dimetro interno, empacotada com grupo fenila
quimicamente ligada a partcula de slica porosa (5 a 10
de 1 mL/minuto.
Tampo formato pH 3,6: transferir 1,32 g de formato de
amnio para um balo volumtrico de 1000 mL, adicionar
gua e agitar at dissoluo. Ajustar com acido frmico
para o pH de 3,6.
Fase mvel: mistura de Tampo formato pH 3,6 e
acetonitrila (67:33). Fazer os ajustes se necessrios.
Soluo (1): dissolver 180 mg de amostra, e diluir com
acetonitrila para 100 mL. Transferir 33 mL da soluo para
Tampo formato pH 3,6 e misturar.
Procedimento: injetar 10 L da Soluo (1). Calcular a
percentagem de cada impureza na poro da dexametasona
pela frmula:
100(ri/rs)
ri a resposta do pico para cada impureza, e rs a soma
da resposta de todos os picos: no mais do que 1,0% de
alguma impureza individual achado, e no mais do que
2% de impurezas totais so achados. A efcincia da coluna
no menor do que 5000 pratos tericos.
a
d
899
amostra. Dessecar em estufa, a 105 C por 3 horas. No
mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
A. Por Espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14).
Pesar exatamente, cerca de 0,1 g da amostra e dissolver em
etanol. Completar o volume para 100 mL com o mesmo
solvente. Transferir 2,0 mL dessa soluo para balo
volumtrico de 100 mL e completar o volume com etanol.
Preparar soluo padro de dexametasona em etanol, na
mesma concentrao fnal. Medir as absorvncias das
solues resultantes em 238,5 nm, utilizando etanol para
22
H
29
FO
5
na amostra
clculos considerando A (1%, 1 cm) = 394, em 238,5 nm,
em etanol.
1,0 mL/minuto.
Fase mvel: preparar adequadamente soluo metanol e
gua (75:25).
volume com Fase mvel e misturar.
Soluo padro: dissolver uma quantidade exatamente
pesada de dexametasona SQR em metanol para obter
soluo a 1 mg/mL. Transferir 3 mL dessa soluo para
Fase mvel, obtendo soluo a 0,3 mg/mL.
Procedimento: injetar, separadamente, entre 10 L
da Soluo padro e da Soluo amostra, registrar os
cromatogramas e medir as reas sob os picos. Calcular o
teor de C
22
H
29
FO
5
, na amostra a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infamatrio
DEXAMETASONA ELIXIR
22
H
29
FO
5.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel, como suporte,
e mistura de clorofrmio, acetona e acido actico glacial
a placa, 5 L de cada uma das solues, recentemente
Soluo (1): soluo a 0,1 mg/mL de dexametasona na
amostra.
Soluo (2): soluo a 0,1 mg/mL de dexametasona SQR
em mistura de cloreto de metileno e metanol (1:1).
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa. Evaporar o
solvente. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). A mancha
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 2,7 a 4,0.
Determinao do lcool (5.3.3.8). Entre 3,8% e 5,7%.
lcool n-propilco como padro interno.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de detector ultravioleta 254 nm; coluna de 250 mm de
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: preparar adequadamente soluo de metanol
e gua (75:25).
Soluo amostra: soluo equivalente a 0,1 mg/mL de
dexametasona, caso necessrio diluir com a Fase mvel.
de dexametasona SQR na Fase mvel, de modo a obter
uma concentrao 0,1 mg/mL.
d
22
H
29
FO
5
na amostra, a partir das respostas obtidas para a Soluo
ROTULAGEM
DIAZEPAM COMPRIMIDOS
16
H
13
ClN
2
O.
IDENTIFICAO
A. de Doseamento, exibe mximos de absoro em 242 e
padro.
254
,
como suporte, e mistura de acetato de etila e hexano
2 L das solues descritas a seguir.
Soluo (1): agitar com etanol, quantidade do p de
comprimidos sufciente para preparar soluo contendo
0,02% (p/v) de diazepam e fltrar.
Soluo (2): preparar soluo de diazepam SQR a 0,02%
(p/v) em etanol.
temperatura ambiente e examinar sob luz ultravioleta
com a Soluo (2).
CARACTERSTICAS
cada comprimido para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 5 mL de gua, agitar e aguardar 15 minutos
at sua desintegrao. Prosseguir conforme descrito no
mtodo A. de Doseamento, a partir de Adicionar 70 mL
de cido clordrico 0,1 M....
Tempo: 45 minutos
16
H
13
ClN
2
O dissolvida
de diazepam SQR na concentrao de 0,002% (p/v),
declarada de C
16
H
13
ClN
2
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de acetato
de etila e hexano (50:50), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, 20 L da Soluo (1) e 5 L da
Soluo (1): agitar quantidade do p de comprimidos
correspondente a 50 mg de diazepam com 5 mL de etanol
e fltrar.
Soluo (2): diluir um volume da Soluo (1) para 50
volumes com etanol.
temperatura ambiente e examinar sob luz ultravioleta (254
nm). Nenhuma mancha secundria obtida com a Soluo
(1) mais intensa que a mancha principal obtida com a
Soluo (2) (2%).
DOSEAMENTO
comprimidos. Transferir quantidade do p equivalente
a 10 mg de diazepam para balo volumtrico de 100 mL
e adicionar 5 mL de gua, misturar e deixar em repouso
por 15 minutos. Adicionar 70 mL de cido clordrico 0,1
M, agitar, mecanicamente, por 15 minutos e completar o
volume com o mesmo solvente. Filtrar. Realizar diluies
cido clordrico 0,1 M como solvente. Preparar soluo
a
d
901
solues em 284 nm, utilizando cido clordrico 0,1 M para
ajuste do zero. Realizar a leitura das solues em no mximo
30 minutos. Calcular a quantidade de C
16
H
13
ClN
2
O nos
m), mantida temperatura de 30C; fuxo da Fase mvel
de 0,8 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila e metanol (4:4:2).
diazepam para balo volumtrico de 50 mL, adicionar 40
mL de Fase mvel e deixar em ultrassom por 5 minutos.
Agitar, mecanicamente, por 5 minutos. Completar o volume
com o mesmo solvente, homogeneizar e fltrar. Transferir 5
mL do fltrado para balo volumtrico de 50 mL e completar
o volume com a Fase mvel, obtendo soluo a 20 g/mL.
Soluo padro: dissolver quantidade exatamente pesada de
diazepam SQR em Fase mvel para obter soluo a 0,2 mg/
mL. Transferir 5 mL dessa soluo para balo volumtrico
de 50 mL e completar o volume com a Fase mvel, obtendo
soluo a 20 g/mL.
da coluna no menor que 5000 pratos tericos. O fator de
2,0%.
16
H
13
ClN
2
O
ROTULAGEM
DIAZEPAM SOLUAO INJETVEL
16
H
13
Cl N
2
O.
IDENTIFICAO
O teste de identifcao C. pode ser omitido se forem
realizados os testes A. e B. O teste de identifcao A. pode
ser omitido se forem realizados os testes B. e C.
mtodo A. de Doseamento, apresenta mximo de absoro
em 368 nm e com a mesma intensidade relativa daqueles
suporte, e mistura de clorofrmio e metanol (10:1), como
fase mvel. Aplicar separadamente, placa, 10 L de cada
seguir.
Soluo (1): diluir a soluo injetvel em metanol de modo
a obter soluo a 1 mg/mL.
diazepam SQR em metanol, de modo a obter soluo de
concentrao 1 mg/mL.
ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (365 nm). Nebulizar
com cido sulfrico a 10% (p/v) em etanol absoluto, aquecer
a placa a 105 C por 10 minutos. A mancha principal obtida
com a Soluo (1) corresponde em posio, cor e intensidade
de alta efcincia (5.2.17.4). O tempo de reteno do pico
principal do cromatograma da Soluo amostra, obtido no
mtodo B. de Doseamento, corresponde quele do pico
principal da Soluo padro.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 6,2 e 7,0.
mg de diazepam.
DOSEAMENTO
soluo injetvel equivalente a 10 mg de diazepam para
funil de separao e adicionar 20 mL de tampo fosfato pH
7,0. Extrair com quatro pores de 20 mL de clorofrmio,
passando os extratos em 5 g de sulfato de sdio anidro.
Reunir os extratos em balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com clorofrmio. Homogeneizar.
Evaporar alquota de 10 mL, sob corrente de nitrognio, at
secura. Dissolver o resduo com 25 mL de cido sulfrico
metanlico 0,05 M. Preparar soluo padro nas mesmas
condies da soluo amostra. Medir a absorvncia da
soluo amostra e soluo padro em 368 nm, utilizando
d
cido sulfrico metanlico 0,05 M para o ajuste do zero.
16
H
13
ClN
2
O na soluo injetvel
clculos considerando A( 1% 1 cm)=151, em 368 nm.
Fase mvel: preparar uma soluo fltrada e desgaseifcada
de metanol e gua (65:35).
Soluo padro interno: preparar uma soluo de
p-tolualdedo contendo cerca de 0,3 L/mL em metanol.
Soluo amostra: transferir, exatamente, um volume da
soluo injetvel, equivalente a 10 mg de diazepam, para
um balo volumtrico de 50 mL. Transferir 10 mL da
Soluo padro interno para a Soluo da amostra e diluir
com metanol para o volume fnal e homogeneizar.
Soluo padro: dissolver uma quantidade, exatamente
pesada, de diazepam SQR em metanol e diluir com o
mesmo solvente para obter uma soluo a 1 mg/mL.
Transferir 5,0 mL dessa soluo para um balo volumtrico
de 25 mL, adicionar 5 mL da Soluo padro interno, diluir
com metanol ao volume fnal e homogeneizar obtendo uma
soluo de diazepam SQR de concentrao de 0,2 mg/mL.
Injetar replicatas de 10 L da Soluo padro. O fator
de cauda para o pico do diazepam no mais que 2,5 e a
resoluo entre os picos de p-tolualdedo e diazepam no
menor que 3,5 e o desvio padro para as replicatas das
injees no mais que 2,0%.
as reas sob os picos principais. Os tempos de reteno
relativos so cerca de 0,5 para p-tolualdedo e 1,0 para
o diazepam. Calcular a quantidade de C
16
H
13
Cl N
2
O na
soluo injetvel a partir das respostas obtidas com a
Soluo padro e a Soluo amostra atravs da frmula:
50C/V(Ru/Rs)
em que C a concentrao em mg/mL de diazepam SQR na
Soluo padro, V o volume em mL da soluo injetvel
tomada e Ru e Rs so as razes das respostas dos picos de
diazepam para o p-tolualdedo obtido da Soluo amostra
e da Solues padro, respectivamente.
Em recipientes de vidro tipo I protegidos da luz.
ROTULAGEM
DICLOfENACO POTSSICO
Diclofenacum kalicum
N
Cl
Cl
H
KOOC
C
14
H
10
Cl
2
KNO
2
; 334,24
diclofenaco potssico; 02929
Sal de potssio do cido 2-[(2,6-diclorofenil)amino]
benzenoactico (1:1)
[15307-81-0]
C
14
H
10
Cl
2
KNO
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou levemente
amarelado, ligeiramente higroscpico.
solvel em metanol, solvel em etanol, muito pouco
solvel em acetona.
IDENTIFICAO
forem realizados os testes A. e E. O teste de identifcao
A. pode ser omitido se forem realizados os testes B., C.,
D. e E.
A. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14), da
amostra, dessecada e dispersa em brometo de potssio,
relativas daqueles observados no espectro de diclofenaco
potssico SQR, preparado de maneira idntica.
de 200 a 350 nm, de soluo a 0,001% (p/v) em hidrxido
de potssio 0,1 M, exibe mximos em 218 e 275 nm,
diclofenaco potssico SQR.
254

como suporte, e mistura de hidrxido de amnio, metanol
e acetato de etila (10:10:80), como fase mvel. Aplicar,
a
d
903
Soluo (1): diluir 25 mg de amostra em metanol e
Soluo (2): diluir 25 mg de diclofenaco potssico SQR
em metanol e completar o volume para 5 mL com o mesmo
solvente.
Soluo (3): diluir 10 mg de indometacina SQR com a
Soluo (2) e completar o volume para 2 mL com metanol.
separadas.
D. Dissolver cerca de 10 mg de amostra em 10 mL de
etanol. A 1 mL desta soluo adicionar 0,2 mL de mistura
de ferricianeto de potssio 0,6% (p/v) e cloreto frrico
a 0,9% (p/v) (1:1), recentemente preparada. Deixar em
repouso, protegido da luz, por 5 minutos. Adicionar 3 mL
de cido clordrico 0,1 M. Deixar em repouso, protegido
da luz, por 15 minutos. Desenvolve-se colorao azul e
produz-se precipitado.
E. Dissolver 0,5 g da amostra em 10 mL de gua. Adicionar
2 mL de cido clordrico diludo, agitar por uma hora e
fltrar a vcuo. Neutralizar com hidrxido de sdio 5 M.
Responde reao 2 do on potssio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12) e a absorvncia da
soluo no ultravioleta, determinada em 440 nm, no
superior a 0,05.
1% (p/v).
mtodo B. de Doseamento. Preparar as Solues (1) e (2)
Soluo (1): transferir 50 mg de amostra para balo
volumtrico de 100 mL, diluir com Diluente e completar o
volume com o mesmo solvente.
volumtrico de 100 mL, completar o volume com Diluente.
10 mL e completar o volume com o mesmo solvente.
(1) e (2), registrar os cromatogramas e medir as reas sob
os picos. Nenhum pico secundrio, obtido com a Soluo
(1) apresenta rea superior rea sob o pico principal
obtido no cromatograma da Soluo (2) (0,2%). A soma de
todas as reas, de todos os picos, exceto o pico principal,
no cromatograma da Soluo (1) no superior a 2,5 vezes
a rea sob o pico principal, obtido no cromatograma da
Soluo (2) (0,5%). No cromatograma da Soluo (1),
desprezar qualquer pico cuja rea seja menor que 0,25
vezes a rea sob o pico principal obtido no cromatograma
da Soluo (2).
Metais pesados (5.3.2.3). Pesar 2 g da amostra. Incinerar
entre 500 C e 600 C. Se o resduo no se apresentar
completamente branco aps a incinerao, adicionar
quantidade sufciente de perxido de hidrognio para
solubilizar. Aquecer at completa evaporao. Repetir o
procedimento at obter resduo completamente branco e
prosseguir conforme descrito no Mtodo III. No mximo
0,001% (10 ppm).
amostra. Dessecar em estufa, entre 100 C e 105 C, por 3
horas. No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Dissolver, exatamente, cerca de 0,3
g de amostra em 30 mL de cido actico glacial. Titular
com cido perclrico 0,1 M SV, determinar o ponto fnal
14
H
10
Cl
2
KNO
2
.
mm); fuxo da Fase mvel de 1,0 mL/minuto.
Tampo fosfato pH 2,5: misturar iguais volumes de cido
fosfrico a 0,05% (p/v) e fosfato de sdio monobsico a
0,08% (p/v). Se necessrio ajustar o pH para 2,5 com cido
fosfrico.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato pH 2,5 e metanol
(30:70).
da amostra em Diluente de modo a obter soluo a 40 g/
mL.
da diclofenaco potssico SQR em Diluente de modo a
Soluo de resoluo: transferir 2,0 mg de dietilftalato,
10,0 mg de diclofenaco potssico SQR e 1,0 mg de
1-(2,6-diclorofenil)-1,3-diidro-2H-indol-2-ona (Impureza
A) para balo volumtrico de 200 mL, completando volume
com Diluente e homogeneizar.
tempos de reteno relativos so cerca de 0,5 para o
dietilftalato, 0,7 para a Impureza A e 1 para o diclofenaco
potssico. A resoluo entre dietilftalato e a Impureza A
no menor que 4,0; e entre a Impureza A e o diclofenaco
d
potssico no menor que 6,5. O desvio padro relativo
das reas de replicatas sob os picos registrados no maior
que 2,0%.
C
14
H
10
Cl
2
KNO
2
na amostra a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infamatrio.
DICLOfENACO POTSSICO
COMPRIMIDOS
14
H
10
Cl
2
KNO
2
. Os comprimidos
podem ter revestimento aucarado ou flme, neste caso no
devem cumprir com os testes de friabilidade e dureza.
IDENTIFICAO
de p equivalente a 0,15 g de diclofenaco potssico,
adicionar 0,5 mL de cido actico glacial e 15 mL de
metanol. Deixar em ultrassom por 15 minutos e agitar por
mais 1 minuto. Filtrar e recolher o fltrado com 15 mL de
gua. Filtrar o slido formado sob presso reduzida, lavar
com quatro pores de 5 mL de gua e secar a 105 C por 2
a 3 horas. Solubilizar 50 mg de diclofenaco potssico SQR
em 5 mL de metanol, adicionar 0,5 mL de cido actico
glacial, 15 mL de gua e agitar. Filtrar o slido formado
sob presso reduzida, lavar com quatro pores de 5 mL
de gua e secar a 105 C por 2 a 3 horas. O espectro de
absoro no infravermelho (5.2.14) do resduo obtido,
com as mesmas intensidades relativas daqueles observadas
no espectro de diclofenaco potssico SQR, preparado de
maneira idntica.
de 200 a 350 nm, da soluo amostra obtida no mtodo
A. de Doseamento, exibe mximos em 218 e 275 nm,
idnticos aos observados no espectro da soluo padro.
C. Proceder conforme descrito no teste C. de Identifcao
na monografa de Diclofenaco potssico. Preparar a
quantidade de p equivalente a 50 mg de diclofenaco
potssico para balo volumtrico de 10 mL, adicionar 7
mL de metanol. Deixar em ultrassom por 15 minutos e
e fltrar;
CARACTERSTICAS
Meio de dissoluo: tampo fosfato pH 6,8 0,05, 900 mL
Tempo: 60 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, com tampo fosfato pH 6,8
0,05, at concentrao adequada. Medir as absorvncias
em 276 nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente para
14
H
10
Cl
2
KNO
2

da soluo de diclofenaco potssico SQR na concentrao
de 0,005% (p/v), preparada em tampo fosfato pH 6,8
0,05.
declarada de C
14
H
10
Cl
2
KNO
2
ENSAIOS DE PUREZA
mtodo B. de Doseamento na monografa de Diclofenaco
potssico. Preparar as Solues (1) e (2) como descrito a
seguir.
quantidade de p equivalente a 50 mg de diclofenaco
potssico para balo volumtrico de 50 mL e adicionar 30
mL de Diluente. Deixar em ultrassom por 15 minutos e
obter uma soluo a 1 mg/mL. Homogeneizar e fltrar.
volumtrico de 100 mL e completar o volume com Diluente.
Transferir 1 mL desta soluo para balo volumtrico de 10
a
d
905
mL e completar o volume com o Diluente, de modo a obter
uma soluo a 2 g/mL. Homogeneizar.
(1) e (2), registrar os cromatogramas e medir as reas dos
picos. Nenhum pico secundrio, obtido com a Soluo
(1) deve apresentar rea superior rea do pico principal
obtido no cromatograma da Soluo (2) (0,2%). A soma de
todas as reas, de todos os picos, exceto o pico principal,
no cromatograma da Soluo (1) no deve ser superior a
2,5 vezes a rea do pico principal, obtido no cromatograma
da Soluo (2) (0,5%). No cromatograma da Soluo (1),
desprezar qualquer pico cuja rea seja menor que 0,25
vezes a rea do pico principal obtido no cromatograma da
Soluo (2).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar e pulverizar os
50 mg de diclofenaco potssico para balo volumtrico de
100 mL, adicionar 70 mL de hidrxido de sdio 0,1 M.
Deixar em ultrassom por 15 minutos e completar o volume
com o mesmo solvente. Filtrar. Transferir 5 mL do fltrado
para um balo volumtrico de 50 mL, completar o volume
com o mesmo solvente e homogeneizar, a fm de obter uma
soluo a 50 g/mL. Preparar soluo padro nas mesmas
utilizando hidrxido de sdio 0,1 M para ajuste do zero.
14
H
10
Cl
2
KNO
2
nos comprimidos,
Doseamento na monografa de Diclofenaco potssico.
Preparar a Soluo amostra como descrito a seguir:
diclofenaco potssico para balo volumtrico de 25 mL,
adicionar 15 mL de Diluente. Deixar em ultrassom por
15 minutos e completar o volume com o mesmo solvente.
mL e completar o volume com o Diluente, de modo a obter
uma soluo a 40 ug/mL. Homogeneizar.
reas dos picos. Calcular a quantidade de C
14
H
10
Cl
2
KNO
2

nos comprimidos a partir das respostas obtidas com as
ROTULAGEM
DIfOSfATO DE CLOROQUINA
COMPRIMIDOS
18
H
26
ClN
3
.2H
3
PO
4
.
IDENTIFICAO
equivalente a 0,1 g de difosfato de cloroquina para funil de
separao e dissolver em 10 mL de gua. Adicionar 2 mL
de hidrxido de sdio 2 M e extrair com duas pores de 20
mL de clorofrmio. Combinar os extratos orgnicos, lavar
com gua, secar com sulfato de sdio anidro e evaporar at
do resduo, dissolvido em 2 mL de clorofrmio, apresenta
observados no espectro de difosfato de cloroquina SQR,
do p equivalente a 0,1 g de difosfato de cloroquina para
balo volumtrico de 100 mL. Acrescentar 70 mL de
gua, deixar em ultrassom por 10 minutos e completar
o volume com o mesmo solvente (usar essa soluo,
tambm, nos testes B. e C. de Identifcao). Filtrar. Diluir,
sucessivamente, com gua at concentrao de 0,001%
(p/v). O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na
faixa de 200 nm a 400 nm, da soluo resultante exibe
de onda de soluo similar de difosfato de cloroquina SQR.
A razo entre os valores de absorvncia medidos em 343
nm e 329 nm est compreendida entre 1,00 e 1,15.
C. Acrescentar 5 mL de cido pcrico SR1 20 mL da
primeira soluo obtida no teste B. de Identifcao.
Forma-se precipitado amarelo. Filtrar e lavar o precipitado
com gua at que a ltima gua de lavagem seja incolor.
Secar sobre slica-gel. O resduo obtido funde entre 205
C e 210 C.
D. A soluo obtida no teste B. de Identifcao responde
s reaes do on fosfato (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
d
Tempo: 45 minutos
dissoluo, fltrar e diluir com gua at concentrao
18
H
26
ClN
3
.2H
3
PO
4
dissolvida no
difosfato de cloroquina SQR na concentrao de 0,002%
declarada de C
18
H
26
ClN
3
.2H
3
PO
4
se dissolvem em 45
minutos.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Pesar e pulverizar 20 comprimidos.
Dissolver quantidade do p equivalente a 0,5 g de
difosfato de cloroquina em 20 mL de hidrxido de sdio
M. Transferir, quantitativamente, para funil de separao
de 250 mL e extrair com quatro pores de 25 mL de
clorofrmio. Reunir os extratos clorofrmicos e evaporar
em banho-maria at o volume de 10 mL. Acrescentar 40
mL de anidrido actico e titular com cido perclrico 0,1
M SV determinando o ponto fnal potenciometricamente.
mg de C
18
H
26
ClN
3
.2H
3
PO
4
.
comprimidos. Transferir quantidade do p equivalente a 0,8
g de difosfato de cloroquina para balo volumtrico de 200
mL e adicionar 100 mL de gua. Agitar mecanicamente por
Homogeneizar. Filtrar, descartando os primeiros 50 mL do
fltrado. Transferir 50 mL do fltrado para funil de separao
e acrescentar 5 mL de hidrxido de amnio 6 M. Agitar
e extrair com cinco pores de 25 mL de clorofrmio.
Reunir os extratos clorofrmicos e lavar com 10 mL de
gua. Lavar a fase aquosa com 10 mL de clorofrmio.
Evaporar os extratos clorofrmicos combinados em banho-
maria at o volume de 10 mL. Adicionar 50 mL de cido
clordrico a 0,1% (v/v) e continuar a evaporar at que o
odor do clorofrmio no seja mais perceptvel. Transferir
a soluo resultante para balo volumtrico de 200 mL,
lavando as paredes do frasco com cido clordrico a 0,1%
(v/v) e completar o volume com o mesmo solvente. Diluir,
sucessivamente, em cido clordrico a 0,1% (v/v), at
mesma concentrao, utilizando cido clordrico a 0,1%
(v/v) como solvente. Medir as absorvncias das solues
resultantes em 343 nm, utilizando o mesmo solvente para
18
H
26
ClN
3
.2H
3
PO
4

nos comprimidos a partir das leituras obtidas.
temperatura controlada.
ROTULAGEM
DIfOSfATO DE PRIMAQUINA
Primaquini diphosphas
C
15
H
21
N
3
O.2H
3
PO
4
; 455,34
difosfato de primaquina; 07367
Fosfato de N
4
-(6-metoxi-8-quinolinil)-1,4-pentanodiamina
(2:1)
[63-45-6]
C
15
H
21
N
3
.2H
3
PO
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino alaranjado, inodoro.
clorofrmio, etanol e ter etlico.
Caractersticas fsico-qumicas.
Faixa de fuso (5.2.2): 197 C a 198 C.
IDENTIFICAO
a
d
907
de difosfato de primaquina SQR, preparado de maneira
idntica.
B. O resduo obtido por ignio da amostra responde s
reaes do on fosfato (5.3.1.1), porm, o precipitado
obtido com a adio de nitrato de prata SR branco e o
obtido com a adio de molibdato de amnio SR amarelo.
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
de dimetro interno, empacotada com slica-gel (10 m),
3 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de n-hexano, clorofrmio, metanol e
soluo concentrada de amnia (45:45:10:0,1).
difosfato de primaquina SQR em gua e diluir para 5 mL
com o mesmo solvente. A 1 mL dessa soluo, adicionar
0,2 mL de soluo concentrada de amnia e misturar com
10 mL da Fase mvel. Utilizar a camada lmpida inferior.
amostra em gua e diluir para 5 mL com o mesmo solvente.
A 1 mL dessa soluo, adicionar 0,2 mL de soluo
concentrada de amnia e misturar com 10 mL da Fase
mvel. Utilizar a camada lmpida inferior.
a Fase mvel.
Soluo (4): diluir 1 mL da Soluo (2) para 10 mL com a
Fase mvel. Diluir 1 mL da soluo resultante para 50 mL
com a Fase mvel.
soluo e registrar os cromatogramas por, no mnimo, o
dobro do tempo de reteno do pico principal. A soma
das reas de todos os picos obtidos com a Soluo (2),
exceto a do pico do solvente, no maior que a rea sob
o pico principal, obtido com a Soluo (3) (3%). No
considerar picos com rea inferior quela apresentada pelo
pico principal no cromatograma obtido com a Soluo
(4) (0,2%). O teste somente vlido se o cromatograma
obtido com a Soluo (1) apresenta, antes do pico
principal, um pico com rea de aproximadamente 6% do
pico da primaquina; a resoluo entre os dois picos de,
no mnimo, 2,0 e, no cromatograma obtido com a Soluo
(4), a relao sinal/rudo superior a 5.
mximo 1,0%.
DOSEAMENTO
amostra e dissolver em 40 mL de cido actico glacial,
aquecendo moderadamente. Titular com cido perclrico
0,1 M SV, determinando o ponto fnal potenciometricamente.
mg de C
15
H
21
N
3
O.2H
3
PO
4
.
Em frascos mbar, hermeticamente fechados, ao abrigo da
luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimalrico.
DIfOSfATO DE PRIMAQUINA
COMPRIMIDOS
15
H
21
N
3
O.2H
3
PO
4
.
IDENTIFICAO
A. Pulverizar os comprimidos e transferir, aproximadamente,
60 mg de primaquina para funil de separao. Adicionar 10
mL de gua, 2 mL de hidrxido de sdio 2 M e extrair com
duas pores de 20 mL de clorofrmio, agitando por 10
minutos. Filtrar atravs de fltro contendo sulfato de sdio
anidro, evaporar, at a secura, e dissolver o resduo em 2 mL
de clorofrmio. O espectro de absoro no infravermelho
(5.2.14) da soluo obtida apresenta mximos de absoro
espectro de difosfato de primaquina SQR, preparado de
maneira idntica.
B. Dissolver quantidade de comprimidos, fnamente
pulverizados, contendo equivalente a 25 mg de difosfato
de primaquina, em 10 mL de gua e fltrar. O fltrado, aps
neutralizao com 2 mL de cido ntrico 2 M, responde s
reaes do on fosfato (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
d
Tempo: 45 minutos
de dissoluo, fltrar e proceder conforme descrito em
Cromatografa a lquido de alta efcincia (5.2.17.4),
utilizando cromatgrafo provido de detector ultravioleta a
dimetro interno, empacotada com grupos octadecilsilano
quimicamente ligados a slica porosa ou partculas de
cermica (3 mm a 10 mm); fuxo da Fase mvel de 2,0 mL/
minuto.
Soluo aquosa de 1-pentanossulfonato de sdio: adicionar
aproximadamente 961 mg de 1-pentanossulfonato de
sdio e 1 mL de cido actico glacial a 400 mL de gua e
homogeneizar.
Fase mvel: mistura fltrada e desgaseifcada de metanol e
Soluo aquosa de 1-pentanossulfonato de sdio (60:40).
de difosfato de primaquina SQR em cido clordrico 0,1 M
para obter soluo a 0,003% (p/v).
Soluo amostra: aps o teste, retirar alquota do meio
de dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, com meio de
dissoluo, at concentrao adequada.
Procedimento: Injetar, separadamente, 20 mL das
Solues padro e amostra, fltradas, de concentraes
conhecidas e dissolvidas no meio de dissoluo, registrar
os cromatogramas e medir as reas sob os picos. Calcular
a quantidade de C
15
H
21
N
3
O.2H
3
PO
4
dissolvida no meio
amostra.
declarada de C
15
H
21
N
3
O.2H
3
PO
4
se dissolvem em 45
minutos.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 4%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Pesar e pulverizar fnamente 20
comprimidos. Dissolver quantidade do p equivalente
a 0,15 g de difosfato de primaquina em 20 mL de gua.
Transferir, quantitativamente, para funil de separao de
250 mL. Adicionar 5 mL de hidrxido de sdio 2 M e
extrair com quatro pores de clorofrmio de 25 mL cada.
Combinar os extratos clorofrmicos e evaporar at volume
de aproximadamente 10 mL. Adicionar 40 mL de cido
actico glacial e titular com cido perclrico 0,1 M SV
C
15
H
21
N
3
O.2H
3
PO
4
.
Em recipientes hermeticamente fechados e ao abrigo da
luz.
ROTULAGEM
DIGOXINA COMPRIMIDOS
41
H
64
O
14
.
IDENTIFICAO
A. Proceder conforme descrito em Substncias
relacionadas na monografa de Digoxina, utilizando as
seguintes solues.
quantidade do p equivalente a 0,5 mg de digoxina para
um tubo de centrfuga e adicionar 2 mL de mistura de
clorofrmio e metanol (2:1). Agitar por 10 minutos e
centrifugar. Decantar e usar o sobrenadante lmpido.
Soluo (2): soluo de digoxina SQR a 0,25 mg/mL em
mistura de clorofrmio e metanol (2:1).
Desenvolver o cromatograma. A mancha principal
CARACTERSTICAS
a
d
909
contendo 7 mL de mistura de etanol e gua (1:1) e aguardar
a desintegrao total do comprimido. Deixar em ultrassom
diluente. Homogeneizar e fltrar. Prosseguir conforme
descrito no mtodo B. de Doseamento. Preparar Soluo
padro na mesma concentrao da Soluo amostra.
Meio de dissoluo: cido clordrico 0,1 M; 500 mL
Tempo: 60 minutos
Soluo padro: transferir, o equivalente a 25 mg de
digoxina SQR para balo volumtrico de 500 mL e dissolver
com pequena quantidade de etanol. Completar o volume
com etanol a 80% (v/v) e homogeneizar. Transferir uma
alquota de 10 mL dessa soluo para balo volumtrico
de 100 mL e completar o volume com etanol a 80% (v/v).
Transferir alquotas dessa soluo para balo volumtrico
de 50 mL para preparar curva padro equivalente a 20%,
40%, 60%, 80% e 100% da quantidade declarada de
digoxina em 500 mL e completar o volume com o Meio
de dissoluo.
dissoluo, fltrar atravs de fltro de porosidade inferior
a 0,8 mm e descartar os primeiros 10 mL. Transferir,
para frascos individuais com tampa, em duplicata, 1 mL
da soluo amostra, 1 mL da soluo da curva padro e
1 mL do Meio de dissoluo para o preparo do branco e
adicionar, rapidamente, os seguintes reagentes: 1 mL de
soluo de cido ascrbico a 0,2% (p/v) em metanol, 5
mL de cido clordrico e 1 mL de perxido de hidrognio
metanlico. Agitar aps a adio de cada reagente. Fechar
os frascos e aps 2 horas medir a fuorescncia das
solues em comprimento de onda de excitao de 372 nm
e de emisso de 485 nm. Para verifcar a estabilidade do
fuormetro, repetir a leitura de fuorescncia nas solues
da curva padro. Corrigir as leituras pelo branco e analisar
os resultados plotando curva padro de fuorescncia em
funo da porcentagem de dissoluo.
declarada de C
41
H
64
O
14
se dissolvem em 60 minutos. Se
existir a necessidade de realizao do estgio E
2
(5.1.5) o
critrio de aceitao da mdia de 12 unidades igual ou
maior do que Q e nenhuma unidade apresenta resultados
inferiores a Q - 5%.
Ateno. As cubas de dissoluo devem ser lavadas,
sucessivamente, antes do teste, com cido clordrico,
gua e etanol e cuidadosamente secas. Estas precaues
so tomadas para prevenir contaminaes por partculas
metlicas provenientes de materiais de limpeza.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de absoro no visvel (5.2.14). Pesar e pulverizar 20
comprimidos. Utilizar quantidade do p equivalente a 1,25
mg de digoxina, adicionar 3 mL de gua e agitar. Deixar em
repouso por 10 minutos e agitar ocasionalmente. Adicionar
25 mL de cido actico glacial, agitar por 1 hora e fltrar.
mL e adicionar 1 mL de dimetilsulfxido. Completar o
volume com reagente de xantidrol, homogeneizar e deixar
em repouso, ao abrigo da luz, por 4 horas. Preparar soluo
padro nas mesmas condies, utilizando os mesmos
solventes. Preparar o branco utilizando os mesmos
em 545 nm, utilizando o branco para o ajuste do zero.
41
H
64
O
14
nos comprimidos, a
no mtodo B. de Doseamento na monografa de Digoxina.
Preparar Soluo amostra como descrito a seguir.
Transferir quantidade do p equivalente a 1 mg de digoxina
para balo volumtrico de 25 mL. Adicionar 15 mL da
mistura de etanol e gua (1:1) e deixar em ultrassom por 30
minutos. Completar o volume e homogeneizar, de modo a
obter soluo a 40 mL/mL.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 mL das Solues
41
H
64
O
14
nos
comprimidos a partir das respostas obtidas para a Soluo
ROTULAGEM
d
DIXIDO DE SILCIO
Silica
SiO
2
; 60,08
dixido de silcio; 09428
Slica
[7631-86-9]
SiO
2
, em relao substncia incinerada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, amorfo, fno e
higroscpico.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua e cidos
minerais, exceto cido fuordrico. Insolvel em etanol,
e outros solventes orgnicos. Solvel em solues de
hidrxidos alcalinos a quente.
IDENTIFICAO
Transferir, aproximadamente, 5 mg da amostra para
cadinho de platina. Misturar com cerca de 200 mg de
carbonato de potssio anidro. Incinerar at incandescncia
por 10 minutos e resfriar. Dissolver a substncia fundida
em 2 mL de gua destilada, aquecer se necessrio, e
adicionar, lentamente, 2 mL de molibdato de amnio SR.
Desenvolve-se colorao amarela intensa.
ENSAIOS DE PUREZA
(p/v).
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar o Mtodo I. Transferir 4 g da
amostra para cadinho de platina, adicionar 5 mL de cido
ntrico, 35 mL de cido fuordrico e evaporar em banho-
maria. Resfriar. Adicionar 5 mL de cido perclrico, 10 mL
de cido fuordrico, 10 mL de cido sulfrico e evaporar
em chapa de aquecimento. Observa-se fumaa intensa.
Resfriar cuidadosamente e transferir para bquer de 100
mL com auxlio de alguns mililitros de cido clordrico.
Evaporar at a secura e resfriar. Adicionar 5 mL de cido
clordrico, diluir com gua para aproximadamente 40 mL, e
aquecer para dissolver qualquer resduo presente. Resfriar,
volume com gua. Utilizar 25 mL desta soluo e proceder
mximo 0,0003% (3 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Ferver 5 g da amostra em 50 mL de
gua sob refuxo por 2 horas, resfriar e fltrar. Utilizar 7
mL do fltrado e 2 mL de cido clordrico padro 0,01 M.
Proceder conforme Ensaio limite para cloreto. No mximo
0,1% (1000 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Transferir
16,7 mL da soluo obtida no ensaio para Arsnio, para
bquer de 100 mL e neutralizar com hidrxido de amnio
utilizando papel de tornassol como indicador. Ajustar o pH
entre 3 e 4 utilizando cido actico 6 M. Filtrar, utilizando
papel de fltrao rpida. Lavar com gua at o volume
do fltrado alcanar 40 mL. Proceder conforme descrito
em Ensaio limite para metais pesados, utilizando 2 mL
de Soluo padro de chumbo (10 ppm Pb). No mximo
0,003% (30 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Utilizar 10 mL do fltrado obtido no
ensaio para Cloretos e 10 mL de cido sulfrico padro
0,005 M. Proceder conforme Ensaio limite para sulfatos.
mximo 5%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Incinerar, exatamente, cerca
de 1 g da amostra, previamente dessecada, a 1000 C por 1
hora. No mximo 8,5%.
DOSEAMENTO
Transferir, exatamente, cerca de 1 g da amostra para
cadinho de platina, incinerar a 900 C, por 1 hora, resfriar
em dessecador e pesar. Umedecer, cuidadosamente, com
gua e adicionar, em pequenas quantidades, cerca de 10
mL de cido fuordrico. Evaporar em banho-maria at a
secura e resfriar. Adicionar 10 mL de cido fuordrico, 0,5
mL de cido sulfrico e evaporar at a secura. Aumentar
lentamente a temperatura at volatilizao dos cidos.
Incinerar a 900 C. Resfriar em dessecador e pesar. Cada 1
g do resduo equivale a 1 g de SiO
2
.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Adjuvante farmacotcnico
DIPIRONA COMPRIMIDOS
13
H
16
N
3
NaO
4
S.H
2
O.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Adicionar a 0,5 g do
p, algumas gotas de perxido de hidrognio concentrado.
Desenvolve-se uma colorao azul, que desaparecer
rapidamente passando a vermelha intensa (reao
fortemente exotrmica).
a
d
911
B. Misturar 0,5 g do p dos comprimidos com algumas
gotas de persulfato de potssio a 10% (p/v). Desenvolve
colorao amarelo intensa aps 5 minutos de reao.
CARACTERSTICAS
Meio de dissoluo: cido clordrico 0,1 M, 500 mL.
Tempo: 45 minutos
de dissoluo, fltrar e diluir em cido clordrico 0,1 M,
solues em 258 nm, utilizando o mesmo solvente para
13
H
16
N
3
NaO
4
S.
H
2
O dissolvida no meio, comparando as leituras obtidas
com a soluo de dipirona SQR em concentrao
conhecida, preparada no mesmo solvente.
declarada de C
13
H
16
N
3
NaO
4
S.H
2
O se dissolvem em 45
minutos.
DOSEAMENTO
Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Pesar quantidade do p
equivalente a 0,35 g de C
13
H
16
N
3
NaO
4
S.H
2
O e transferir,
quantitativamente, para erlenmeyer. Adicionar 25 mL de
gua, 5 mL de cido actico glacial e agitar at disperso
homognea. Titular com iodo 0,05 M SV, em temperatura
abaixo de 15 C, utilizando 1 mL de amido SI, como
indicador. Cada mL de iodo 0,05 M SV equivale a 17,570
mg de C
13
H
16
N
3
NaO
4
S.H
2
O.
ROTULAGEM
DIPIRONA SDICA MONOIDRATADA
Dipyronum natricum monohydricum
N
N
O
N
NaO
3
S
C H
3
CH
3
C H
3
C
13
H
16
N
3
NaO
4
S.H
2
O; 351,35
dipirona sdica monoidratada; 09564
Sal de sdio do cido 1-[(2,3-diidro-1,5-dimetil-3-oxo-
2-fenil-1H-pirazol-4-il)metilamino]metanossulfnico
hidratado (1:1:1)
[5907-38-0]
C
13
H
16
N
3
NaO
4
S em relao substncia dessecada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, quase branco e
inodoro.
Solubilidade. Solvel em gua e metanol, pouco solvel
em etanol, praticamente insolvel em ter etlico, acetona,
benzeno e clorofrmio.
IDENTIFICAO
A. A 2 mL da soluo oral, adicionar 2 mL de perxido de
hidrognio 30 % (p/p). Desenvolve-se colorao azul, que
desaparece rapidamente, passando a vermelho intenso.
B. A 2 mL da soluo oral, adicionar 2 mL de persulfato
de potssio 10% (p/v). Desenvolve-se colorao amarela
intensa.
ENSAIOS DE PUREZA
isenta de dixido de carbono e completar o volume para 50
mL com o mesmo solvente. A soluo apresenta-se lmpida
(5.2.25). Imediatamente aps a preparao, comparar 5 mL
da soluo da amostra com 5 mL da Soluo padro de
cor, descrita a seguir. A cor no mais intensa que a da
soluo padro de cor (5.2.12).
Soluo padro de cor: misturar 0,75 mL da Soluo (1),
0,25 mL da Soluo (2), 0,25 mL da Soluo (3) e 48,75
mL da Soluo (4).
Soluo (1): dissolver 4,51 g de cloreto frrico com 3,2
mL de cido clordrico M e completar o volume com gua
para 100 mL.
Soluo (2): dissolver 6,5 g de cloreto cobaltoso com 3 mL
de cido clordrico 6 M e completar o volume com gua
para 100 mL.
d
Soluo (3): dissolver 6,242 g de sulfato cprico
pentaidratado com gua e completar o volume para 100
mL.
Soluo (4): cido clordrico 1% (p/v).
Acidez ou alcalinidade. Adicionar 0,1 mL de fenolftalena
SI a 5 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo. A
cor da soluo no sofre alterao. A viragem do indicador
para rosa consome no mximo 0,1 mL de hidrxido de
sdio 0,02 M em relao ao branco.
Impurezas solveis em clorofrmio. Pesar 1 g de amostra,
adicionar 10 mL de clorofrmio, deixar em repouso
durante 30 minutos. Filtrar e lavar duas vezes com 5 mL de
clorofrmio. Evaporar em banho-maria e secar a 105 C at
Mtodo I. No mximo 0,002% (20 ppm).
No mnimo 4,9% e no mximo 5,3%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente cerca de 0,35 g da amostra e dissolver
em 50 mL de gua. Adicionar 3 mL de cido actico 6%
(v/v) e titular com iodo 0,05 M SV em temperatura abaixo
de 20 C, utilizando amido SI. Cada mL de iodo 0,05 M SV
13
H
16
N
3
NaO
4
S.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Analgsico e antipirtico.
DIPIRONA SOLUO ORAL
Contm, no mnimo, 95,0% e, no mximo 110,0% da
13
H
16
N
3
NaO
4
S.H
2
O.
IDENTIFICAO
A. A 2 mL da soluo oral, adicionar 2 mL de perxido de
hidrognio 30% (p/p). Desenvolve-se colorao azul, que
desaparece rapidamente, passando a vermelho intenso.
B. A 2 mL da soluo oral, adicionar 2 mL de persulfato
de potssio 10% (p/v). Desenvolve-se colorao amarela
intensa.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,5 a 7,0.
Teste de gotejamento (5.1.8). Dipirona soluo oral
acondicionada em recipientes com dispositivo dosador
integrado cumpre o teste.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Transferir volume da soluo oral correspondente a 5 g de
C
13
H
16
N
3
NaO
4
S.H
2
O para balo volumtrico de 200 mL.
Completar o volume com gua e homogeneizar. Transferir
10 mL da soluo para erlenmeyer, adicionar 50 mL de
gua, 5 mL de cido actico glacial e homogeneizar. Titular
com iodo 0,05 M SV, em temperatura abaixo de 15C,
utilizando amido SI como indicador. Cada mL de iodo 0,05
13
H
16
N
3
NaO
4
S.H
2
O.
ROTULAGEM
a e
913
EfAVIRENZ
Efavirenzum
O
N
Cl
H
O
F
3
C
C
14
H
9
ClF
3
NO
2
; 315,67
efavirenz; 03308
(4S)-6-Cloro-4-(2-ciclopropiletinil)-1, 4-diidro-4-
(trifuormetil)-2H-3,1-benzoxazin-2-ona
[154598-52-4]
C
14
H
9
ClF
3
NO
2
DESCRIO
branco, inodoro.
metanol e diclorometano.
Faixa de fuso (5.2.2): 136 C a 141 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -86 a -98, em relao
substncia dessecada. Determinar em soluo a 0,3% (p/v)
em metanol.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada e dispersa em brometo
efavirenz SQR, preparado de maneira idntica.
faixa de 200 nm a 350 nm, da soluo a 0,001% (p/v) em
metanol, exibe mximos em 206 nm, 247 nm e 293 nm,
efavirenz SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
ligada a grupo ciano (5 um), mantida a 30C; fuxo da Fase
Eluente (A): mistura de gua, metanol e cido trifuoractico
(90:10:0,05).
Eluente (B): mistura de gua, metanol e cido trifuoractico
(10:90:0,05).
Fase mvel: utilizar o gradiente de eluio descrito a seguir
Tempo
(minutos)
Eluente A
(% v/v)
Eluente B
(% v/v)
Condio
0-16 60 50 40 50 Gradiente linear
Equilibrar a coluna nas condies iniciais por 30 minutos.
Proceder corrida em branco utilizando o gradiente descrito,
antes de injetar a Soluo (1),a Soluo (2) e a Soluo (3).
Ao fnal de cada corrida, reequilibrar a coluna por, pelo
menos 8 minutos antes de iniciar nova corrida.
Diluente: mistura de gua e acetonitrila (1:1).
Soluo (1): soluo a 500 g/mL da amostra em Diluente.
Soluo (2): soluo a 500 g/mL de efavirenz SQR em
Diluente.
Soluo (3): diluir a Soluo (2) com Diluente de modo a
obter soluo de efavirenz SQR a 1,25 g/mL.
Injetar replicatas de 35 L da Soluo (2). A efcincia
da coluna no menor que 30000 pratos tericos/metro.
Injetar replicatas de 35 L da Soluo (3). O desvio padro
maior que 5,0%. Injetar replicatas de 35 L da Soluo
(1). Os tempos de reteno relativos so cerca de 0,93
para (4S)-6-cloro-4-[(1-E)-ciclopropiletenil]-1,4-diidro-
4-(trifuorometil)-2H-3,1-benzoxazin-2-ona (impureza
trans-alqueno), se presente, e 1,0 para efavirenz. A
resoluo entre os picos no menor que 1,7.
soluo, registrar os cromatogramas e medir as reas sob os
picos. Calcular a porcentagem de Impureza trans-alqueno,
se presente, na amostra, segundo a expresso:
1,1 x 100 x (C
S3
. At / C
S1
. Ae)
em que
1,1 = fator de quantifcao para Impureza trans-alqueno;
C
S1
= concentrao da amostra, em mg/mL, na Soluo (1);
e
C
S3
= concentrao do efavirenz SQR, em mg/mL, na
Soluo (2);
A
t
= rea sob o pico correspondente impureza trans-
alqueno no cromatograma obtido com a Soluo (1);
A
e
= rea sob o pico correspondente ao efavirenz no
No mximo 0,15% de Impureza trans-alqueno. A soma das
reas de todos os picos obtidos com a Soluo (1), exceto os
correspondentes ao efavirenz e impureza trans-alqueno,
no maior que a rea sob o pico principal obtido com a
Soluo (3) (0,5% de outras impurezas). No considerar os
picos relativos ao solvente.
0,002% (20 ppm).
gua (5.2.20). No mximo 0,5%.
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar exatamente, cerca
de 50 mg de amostra e dissolver em metanol. Completar
utilizando o mesmo solvente. Medir as absorvncias
das solues amostra e padro resultantes, em 247 nm,
C
14
H
9
ClF
3
NO
2
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: preparar um sistema isocrtico com fase
mvel composta por acetonitrila, gua e cido ortofosfrico
(70:30:0,1).
Diluente: mistura de acetinitrila, gua e cido ortofosfrico
(70:30:0,1).
da amostra para balo volumtrico de 100 mL. Completar
o volume com Diluente e homogeneizar. Transferir 5
mL dessa soluo para balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com Diluente, obtendo uma soluo
a 20 g/mL.
de efavirenz SQR para balo volumtrico de 100 mL.
Completar o volume com Diluente e homogeneizar.
100 mL e completar o volume com Diluente, obtendo uma
soluo a 20 g/mL.
C
14
H
9
ClF
3
NO
2
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antirretroviral
EfAVIRENZ COMPRIMIDOS
14
H
9
ClF
3
NO
2.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Triturar quantidade
de p equivalente a 0,3 g de efavirenz com 10 mL de ter
etlico por 1 minuto. Filtrar em funil de vidro sinterizado,
aplicando vcuo, se necessrio. Lavar com duas pores
de 5 mL de ter etlico e combinar os extratos etreos em
bquer de 50 mL. Evaporar sob corrente de ar temperatura
ambiente. Dessecar o resduo em estufa a 60 C por 30
minutos e resfriar temperatura ambiente. Adicionar 3 mL
de heptano, aquecer em banho-maria a 70 C e dissolver o
resduo com auxlio de esptula. Cobrir a boca do bquer
com vidro de relgio, resfriar em banho de gelo a -10 C
por 5 minutos e deixar em repouso temperatura ambiente
por 25 minutos. Filtrar sob vcuo, lavar o resduo com trs
pores de 2 mL de heptano e dividir fnamente o resduo
com auxlio de esptula, mantendo vcuo por 10 minutos.
Dessecar em estufa a 80 C, sob presso reduzida, por 6
horas. O resduo responde ao teste A. de Identifcao da
monografa de Efavirenz.
B. O resduo obtido no teste A. de Identifcao funde em
torno de 138 C.
C. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir
quantidade de p equivalente a 0,1 g de efavirenz para
balo volumtrico de 100 mL. Adicionar 70 mL de metanol,
com o mesmo solvente. Filtrar, desprezando os primeiros
mililitros do fltrado, e diluir com metanol at concentrao
de 0,002% (p/v). O espectro de absoro no ultravioleta
(5.2.14), na faixa de 200 nm a 350 nm, exibe mximos em
a e
915
206 nm, 247 nm e 293 nm, idnticos aos observados no
espectro de soluo similar de efavirenz SQR.
CARACTERSTICAS
mximo 60 minutos.
Meio de dissoluo: laurilsulfato de sdio a 1% (p/v), 900
mL
Tempo: 45 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, com meio de dissoluo
at concentrao adequada. Medir as absorvncias em 247
nm (5.2.14), utilizando Meio de dissoluo para ajuste do
14
H
9
ClF
3
NO
2
dissolvida
de efavirenz SQR na concentrao de 0,0012% (p/v) com
Meio de dissoluo.
declarada de C
14
H
9
ClF
3
NO
2
ENSAIO DE PUREZA
em Substncias relacionadas na monografa de Efavirenz.
Preparar a Soluo (1) como descrito a seguir.
quantidade de p equivalente a 0,25 g de efavirenz para
balo volumtrico de 100 mL. Adicionar 70 mL de
Diluente, deixar em ultrassom por 5 minutos. Completar o
volume com o mesmo solvente, homogeneizar e deixar em
repouso por 15 minutos. Filtrar, se necessrio, e diluir com
o mesmo solvente de modo a obter soluo a 250 g/mL.
No mximo 0,15% de Impureza trans-alqueno e 1,0% de
outras impurezas.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
a 0,15 g de efavirenz para balo volumtrico de 100
mL e adicionar 70 mL de etanol absoluto. Deixar em
ultrassom por 5 minutos. Filtrar, se necessrio, e diluir
at concentrao de 0,0075% (p/v) utilizando o mesmo
Medir as absorvncias das solues resultantes a 293 nm
utilizando etanol absoluto para ajuste do zero. Calcular
o teor de C
14
H
9
ClF
3
NO
2
na amostra a partir das leituras
obtidas.
no mtodo B. de Doseamento da monografa de Efavirenz.
Preparar a Soluo amostra como descrito a seguir:
efavirenz para balo volumtrico de 100 mL, adicionar
40 mL de Diluente e deixar em ultrassom por 15 minutos.
e fltrar. Transferir 5 mL para balo volumtrico de 100 mL
e completar o volume com Diluente, obtendo soluo a 20
ug/mL.
Procedimento: injetar separadamente, 20 uL das Solues
14
H
9
ClF
3
NO
2

ROTULAGEM
EMBONATO DE PIRVNIO
Pyrvinii embonas
N
+
N
C H
3
CH
3
N
CH
3
C H
3
CH
3
2
OH
O O
-
O H
O
-
O
(C
26
H
28
N
3
)
2
.C
23
H
14
O
6
; 1151,40
embonato de pirvnio; 03346
4,4-Metilenobis[3-hidroxi-2-naftalenocarboxilato] de
6-(dimetilamino)-2-[2-(2,5-dimetil-1-fenil-1H-pirrol-3-il)
etenil]-1-metil-quinolnio (1:2)
[3546-41-6]
e
(C
26
H
28
N
3
)
2
.C
23
H
14
O
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, alaranjado claro ou
vermelho-alaranjado a quase negro.
solvel em clorofrmio e em metoxietanol, muito pouco
solvel em metanol, praticamente insolvel em ter etlico.
Facilmente solvel em cido actico glacial.
IDENTIFICAO
observados no espectro de embonato de pirvnio SQR,
B. O espectro de absoro no ultravioleta e visvel (5.2.14),
na faixa de 200 nm a 800 nm, da soluo amostra obtida em
Doseamento, exibe mximos de absorvncia em torno de
358 nm e em torno de 505 nm. A razo entre os valores de
absorvncia medidos est compreendida entre 1,93 e 2,07.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20). Determinar em 0,2 g da amostra,
empregando mistura de 10 mL de metanol e 10 mL de
clorofrmio como solvente. No mximo 6,0%.
No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
Nota: utilizar frascos de baixo actinismo para as solues,
bem como proteger as solues de exposio desnecessria
luz forte. Fazer o doseamento sem interrupes
prolongadas.
absoro no visvel (5.2.14). Pesar, exatamente, cerca de
0,25 g da amostra e dissolver em 125 mL de cido actico
glacial. Completar o volume para 250 mL com metanol
e homogeneizar. Diluir, sucessivamente, em metanol, at
na mesma concentrao, utilizando os mesmos solventes.
nm, utilizando metanol para ajuste do zero. Calcular o teor
de (C
26
H
28
N
3
)
2
.C
23
H
14
O
6
obtidas.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-helmntico (oxiurose).
ENDRO
Anethi fructus
Anethum graveolens L. APIACEAE
A droga vegetal constituda pelos frutos, que so
diaqunios (esquizocarpos), contendo, no mnimo, 2,0%
de leo voltil.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Possui odor aromtico e
sabor caracterstico.
DESCRIO MACROSCPICA
O fruto um diaqunio ovalado, dividido em dois
mericarpos comprimidos dorsalmente, de 0,30 cm a 0,60
cm de comprimento e 0,12 cm a 0,30 cm de largura,
castanho a castanho-claro, com dois estilopdios e pice
dos estiletes retrorsos. Na dessecao, os mericarpos esto
usualmente separados e, em regra, no esto acompanhados
pelos carpforos; restos do estilopdio e do clice podem
ocorrer. Cada mericarpo apresenta duas arestas marginais
prolongadas em uma ala circundante, larga, membrancea,
mais clara, amarelada e trs arestas dorsais, longitudinais,
fliformes, castanho-claras a amareladas, pouco elevadas,
mas evidentes, todas primrias. A face comissural
achatada e um pouco cncava pela dessecao, mostrando
nitidamente a linha do carpforo. A cutcula de cada
mericarpo recoberta por uma cera epicuticular formada
por curtos flamentos distribudos ao acaso. Esses
flamentos so bem mais densos na face comissural, o que
a torna esbranquiada. O mericarpo, em seco transversal,
plano-convexo, deixando visveis seis canais secretores
elpticos, quatro deles grandes e estreitos, distribudos na
poro dorsal e dois, raramente mais, grandes, na face
comissural ou ventral. Em cada aresta dorsal ocorrem
feixes vasculares. Aqueles correspondentes s alas so
levemente maiores do que os demais. O endosperma
oleoso e cncavo na face comissural.
DESCRIO MICROSCPICA
Em seco transversal, o mericarpo, achatado dorsalmente,
mostra trs arestas primrias dorsais, estreitas, e duas
arestas primrias laterais, alongadas. O epicarpo
constitudo por cutcula estriada, formada por flamentos
de cera dispostos ao acaso e por uma camada incolor de
clulas epidrmicas achatadas e de paredes fnas, exceto
a periclinal externa, que mais espessa. O mesocarpo
a e
917
formado externamente por algumas camadas de clulas
parenquimticas achatadas, de paredes mais fnas, quando
comparadas com as das camadas mais internas, que
mostram evidentes pontoaes. Na regio do mesocarpo,
correspondente s arestas primrias, tanto marginais
quanto dorsais, localizam-se cordes de fbras, com alguns
elementos vasculares, nem sempre visveis. Os cordes
de fbras correspondentes s arestas dorsais so menos
desenvolvidos do que aqueles correspondentes s arestas
marginais aladas. Na regio entre as arestas e na regio
comissural, ocorrem os canais secretores, esquizgenos,
de forma elptica e estreito-alongada no sentido tangencial.
O epitlio secretor formado por clulas achatadas
tangencialmente e de paredes espessas. Na poro do
canal secretor voltado para o epicarpo e logo abaixo desse,
ocorrem escleredes de paredes espessas, quadrados ou
retangulares, com numerosas e conspcuas pontoaes. A
poro mais interna do mesocarpo composta por duas
a trs camadas de clulas amarelo acastanhadas, muito
achatadas tangencialmente, de paredes espessas, quando
comparadas com as do epicarpo. O endocarpo composto
por uma camada de clulas lignifcadas. Entre o pericarpo
e a semente, na face comissural, h uma cmara ao lado
da rafe. Usualmente associada ao endocarpo, ocorre a
testa, formada por uma nica camada de clulas, em regra
colapsadas, de cor castanha e paredes fnas. O endosperma
abundante, composto por clulas de paredes espessas,
as mais externas mais alongadas e completamente
preenchidas por gros de amido. Gotas de leo esfricas e
inmeros cristais de oxalato de clcio de diferentes formas,
tambm esto presentes. As camadas mais internas desse
tecido possuem forma mais polidrica e geralmente menor
quantidade de gros de amido. As clulas com gros de
amido, quando submetidas ao lugol, fcam avermelhadas e
as gotas de leo, isoladas no material, coram-se de amarelo
a alaranjado. As gotas de leo podem ocupar grande parte
do volume celular.
caractersticas: cor castanha; pores da epiderme do
epicarpo, cujas clulas tm cutcula coberta por flamentos
de cera dispostos ao acaso; pores do mesocarpo
com clulas poligonais a retangulares de paredes com
pontoaes evidentes; pores do endocarpo com clulas
de paredes sinuosas; cristais diminutos de diferentes
formas, principalmente drusas, ocorrem abundantemente
e agregados; cristais isolados em forma de prismas,
principalmente rombodricos, em geral maiores do que os
cristais agregados; agrupamentos de fbras associados aos
feixes vasculares; elementos traqueais de espessamento
helicoidal e/ou anelado, ou ocasionalmente, reticulado ou
pontoado; pores do endosperma constitudo por tecido
parenquimtico de paredes espessas, com clulas repletas
de gros de amido; escleredes como descritos; canais
secretores, ou pores destes, com clulas do epitlio
secretor.
IDENTIFICAO
254
,
tolueno e acetato de etila (93:7), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1), da Soluo (2) e da Soluo (3), recentemente
Soluo (1): agitar, por 10 minutos, 0,5 g da droga
pulverizada com 10 mL de cloreto de metileno. Filtrar.
Concentrar o fltrado em banho-maria, at resduo, em
temperatura no superior a 60 C. Ressuspender o resduo
em 10 mL de tolueno.
Soluo (2): diluir 2 uL do leo voltil, obtido em
Doseamento de leos volteis, em 1 mL de tolueno.
Soluo (3): diluir 2 uL de carvona em 1 mL de tolueno.
Uma das manchas principais obtidas com a Soluo (1)
corresponde em posio e intensidade quela obtida com a
Soluo (3), atribuda carvona (Rf de aproximadamente
0,60). O cromatograma tambm apresenta uma mancha
intensa com Rf em torno de 0,80, correspondente ao
dilapiol. Nebulizar a placa com vanilina sulfrica SR
e deixar em estufa entre 100 C e 105 C, durante cinco
minutos. A mancha correspondente carvona apresenta
colorao rosa, e a correspondente ao dilapiol apresenta
colorao marrom.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 11,0%.
DOSEAMENTO
leos volteis
mL contendo 100 mL de gua como lquido de destilao
e 0,5 mL de xileno. Reduzir os frutos dessecados a p
grosseiro. Proceder imediatamente determinao do leo
voltil, a partir de 25 g da droga em p. Destilar durante 4
horas.
Carvona
A. Preparar as solues descritas a seguir.
Soluo (1): transferir para frasco de vidro fechado, de
aproximadamente, 150 mm x 25 mm, 1,5 g do leo voltil
logo aps sua extrao e adicionar 10 mL da Soluo (2),
previamente preparada, descrita a seguir.
e
Soluo (2): dissolver 7 g de cloridrato de hidroxilamina
em 90 mL de etanol a 90% (v/v), aquecer brandamente
se necessrio. Adicionar 1,6 mL de amarelo de dimetila
SI e hidrxido de potssio M em etanol a 90% (v/v), em
quantidade sufciente somente at produzir cor amarela
sem formar precipitado no fundo do frasco, e diluir com
etanol a 90% (v/v) para a obteno de 100 mL.
Titular a Soluo (1) com hidrxido de potssio M
diludo em etanol a 90% (v/v), at que a cor rsea mude
para amarela intensa. Colocar o tubo em banho-maria
a temperatura entre 70 C e 80 C e, em intervalos de
cinco minutos, neutralizar com hidrxido de potssio
M em etanol a 90% (v/v). Aps 40 minutos, completar a
titulao at atingir a mesma cor amarela da Soluo (2).
Repetir o procedimento utilizando como cor padro para a
determinao do ponto fnal da titulao, a soluo titulada
na primeira determinao, com adio de 0,5 mL de
hidrxido de potssio M em etanol a 90% (v/v). Calcular
o contedo de carvona da segunda determinao. Cada mL
de hidrxido de potssio M em etanol 90% (v/v), equivale
a 151,4 mg de carvona, C
10
H
14
O.
O leo voltil deve apresentar, no mnimo, 43,0% de
carvona.
B. Proceder conforme descrito em Cromatografa a gs
chama do detector; coluna cromatogrfca capilar de
30 m de comprimento e 0,25 mm de dimetro interno,
do flme de 0,25 um; temperatura da coluna de 60 C a 300
do injetor a 220 C; temperatura do detector a 250 C; hlio
a 80 kPa de presso, como gs de arraste; fuxo do gs de
arraste de 1 mL/minuto.
Soluo amostra: diluir o leo voltil obtido em
Doseamento de leos volteis em ter etlico (2:100).
cromatgrafo a gs, utilizando diviso de fuxo de 1:50. A
carvona e o dilapiol apresentam tempos de reteno linear
(ndice de Kvats) de 1236 e 1615, respectivamente. As
concentraes relativas so obtidas por integrao manual
ou eletrnica.
Calcular o ndice de Kvats (IK), segundo a expresso:
em que
molecular;
tr
x
tr
z
e tr
z+1
);
tr
z
tr
z+1
O leo voltil deve apresentar, no mnimo, 30,0% de
carvona e 30,0% de dilapiol.
Em recipientes, bem fechados, ao abrigo da luz e calor.
a e
919
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Anethum graveolens L.
_____________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem: em A, B, C, D. a 1 mm; em E, f, I a 100 m; em G e H a 50 m.
A diaqunio em vista lateral: carpforo (car); estilopdio (est). B mericarpo em vista frontal. C vista da face comissural do mericarpo. D aspecto
geral de um mericarpo em seco transversal: fbras (fb); canal secretor (cns); embrio (em); endosperma (en). E . detalhe da seco transversal
do mericarpo, como assinalado em D: mesocarpo (me); endosperma (en); cristais (cr); gota lipdica (gl); gro de amido (ga); epitlio secretor (eps);
canal secretor (cns); esclereide (ec); cutcula (cu); epicarpo (epi). f detalhe da seco transversal do mericarpo na regio de uma aresta dorsal, como
assinalado em D: feixe vascular (fv); fbras (fb); cutcula (cu); epicarpo (epi); mesocarpo (me); endosperma (en). G detalhe de clulas do endosperma:
gota lipdica (gl); gro de amido (ga); cristais (cr). H cristais de diferentes formas. I detalhes do p: cordo de fbras (cf); detalhe de elementos
traqueais em vista longitudinal (el); detalhe de clulas do mesocarpo com paredes espessas (cme).
e
ESPARADRAPO
Consiste em tecido de diversas origens uniformemente
revestido em uma das faces, por uma camada adesiva
sensvel presso.
O esparadrapo tem a superfcie adesiva plana, uniforme
e isenta de grumos; apresenta reao neutra e isento
de substncias txicas ou irritantes. O lado oposto ao da
mistura adesiva pode ser revestido por uma camada fna de
substncias impermeveis gua. Em geral apresentado
enrolado em faixas contnuas de diversas dimenses. O
esparadrapo deve estar isento de impurezas e contaminao.
CARACTERSTICAS
Dimenso. Determinar o comprimento do esparadrapo.
O resultado obtido no deve ser inferior a 98% do
comprimento inscrito na rotulagem. Determinar a largura
do esparadrapo em 5 pontos diferentes ao longo de seu
comprimento. A mdia dos resultados no deve apresentar
diferena superior 1,6 mm da largura inscrita na rotulagem.
Resistncia trao (5.7.1). Determinar a resistncia
trao da fta aps desenrolar e condicionar durante um
perodo mnimo de quatro horas em atmosfera padro de
65 2% de umidade relativa, a 21 C 1,1 C, usando um
dispositivo tipo pndulo. Prosseguir conforme descrito em
Resistncia trao. A mdia com trs determinaes em
tiras de 2,5 cm de largura no deve ser inferior a 20 kg.
Adeso superfcie. A partir da amostra fabricada
em tecido, cortar uma faixa de 2,54 cm de largura e,
aproximadamente, 15 cm de comprimento. A uma das
extremidades da fta, de superfcie igual a 12,90 cm
2
, 2,54
cm de largura por 5,08 cm de comprimento, aplicar presso
equivalente a 850 g contra uma superfcie limpa de vidro,
plstico ou ao inoxidvel. Exercer a presso com auxlio
de um rolo de borracha, por duas vezes consecutivas a uma
velocidade de 30 cm por minuto. Ajustar a temperatura
da superfcie e da fta em 37 C (5.7.1) e conduzir o teste
imediatamente conforme descrito em Resistncia trao.
Usar um dispositivo tipo pndulo, sendo a ruptura efetuada
paralelamente ao urdume e superfcie. O valor mdio de
pelo menos 10 testes dever ser, no mnimo, 18 kg
Esterilidade (5.5.3.2.1). Aplicvel quando o esparadrapo
declarado estril. Cumpre o teste.
EMBALAGEM E ACONDICIONAMENTO
Em embalagens bem fechadas, protegidas da luz e calor
excessivo.
O esparadrapo, quando declarado estril ou esterilizado,
dever ser acondicionado de modo que sua esterilidade
seja mantida contra contaminao posterior.
ROTULAGEM
ESPINHEIRA SANTA
Mayteni folium
Maytenus ilicifolia Mart. ex Reissek CELASTRACEAE ;
09912
A droga vegetal constituda pelas folhas secas da espcie,
contendo no mnimo, 2,0 % de taninos totais, expressos em
pirogalol (C
6
H
6
O
3
; 126,11), dos quais no mnino 2,8 mg/g
equivalem a epicatequina (C
15
H
14
O
6
; 290,3).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As folhas secas so
inodoras, levemente amargas e adstringentes.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas simples, inteiras, de formato oval-lanceolado
quando jovens, passando a elptico-lanceolado com o
amadurecimento. Lmina com 2,1 cm a 9,0 cm (raramente
at 15,0 cm) de comprimento, e 1,0 cm a 3,1 cm (raramente
at 7,0 cm) de largura, coriceas a subcoriceas, glabras,
com pice mucronado, base aguda a obtusa, peninrvias,
com nervura principal proeminente na face abaxial. A
nervao do tipo craspeddroma mista, com nervuras
secundrias partindo em ngulo agudo em relao
principal, terminando na margem da lmina, ou ramifcando-
se nas proximidades dela, ou ainda seguindo em direo
margem, onde se renem com a superior subsequente,
formando arcos. Na margem foliar, tanto as nervuras
secundrias quanto as que delas partem, unem-se com a
nervura marginal, formando projees pontiagudas, de 9 a
14 unidades por folha, dispostas mais frequentemente, na
metade apical da lmina. As arolas so predominantemente
retangulares, com terminaes ramifcadas. Pecolo curto,
com 0,2 cm a 0,5 cm de comprimento. Nas amostras secas,
a face adaxial do limbo mostra-se relativamente mais
escura que a abaxial, esbranquiada.
DESCRIO MICROSCPICA
A folha hipoestomtica e de mesoflo dorsiventral.
Os estmatos so do tipo lateroctico, com 1 a 3 clulas
subsidirias para cada clula-guarda, situados pouco
acima, ou na mesma altura das demais clulas epidrmicas.
O espessamento interno das clulas-guardas proeminente
e, devido espessa cutcula foliar, sobre o poro estomtico,
formam-se projees, originando um trio supra-
estomtico. As demais clulas epidrmicas, em ambas as
faces da lmina, so poligonais, de dimenses variadas,
com paredes anticlinais retas, maiores na face adaxial. Em
seco transversal observa-se epiderme uniestratifcada,
com paredes espessadas, recoberta por camada de cutcula
tambm espessada, formando fange cuticular, alcanando,
em mdia, 7,8 m na face adaxial e 4,8 m na face oposta,
a e
921
sempre mais proeminente na regio da nervura principal,
onde ocorrem ornamentaes cuticulares na forma de
estrias e papilas. Nas clulas epidrmicas esto presentes
estilides de pequenas dimenses (folhas jovens) ou
cristais prismticos retangulares (folhas maduras), ambos
de oxalato de clcio. O parnquima palidico formado
por 2 estratos de clulas longas e fnas, em paliada
tpica, ou ainda, por 2 a 3 estratos de clulas cbicas ou
pouco alongadas, dependendo da amostra analisada. O
parnquima esponjoso formado por 6 a 9 estratos de
clulas com expanses braciformes curtas, com formao
de amplos espaos intercelulares, mais compactado em
direo regio abaxial. No mesoflo so comuns clulas
contendo compostos fenlicos, isoladas ou em grupos,
com destaque para aquelas pertencentes ao parnquima
palidico, alm de estilides e cristais prismticos de
pequenas dimenses. Na nervura principal, biconvexa em
seco transversal, ocorrem 3 a 4 camadas de colnquima
angular junto face adaxial e 2 a 3 na face oposta, as quais
reagem positivamente ao cloreto frrico SR (substncias
fenlicas). O feixe vascular da nervura principal nico,
do tipo colateral em arco aberto, circundado por uma
bainha de clulas parenquimticas de paredes delgadas,
e com calotas de fbras sobre ambos os plos de tecidos
condutores, tambm presentes nos feixes de menor ordem.
A distribuio dos tecidos nos feixes vasculares no
constante, podendo variar de acordo com a poro da lmina
e o grau de amadurecimento do rgo. O foema apresenta
cristais rmbicos de oxalato de clcio, escleredes e clulas
contendo compostos fenlicos. As fbras que o acompanham
apresentam parede celular espessa, com pontoaes
simples. Folhas maduras podem apresentar feixe vascular
bicolateral ou concntrico (anfcrival), sempre circundado
por esclernquima. Na regio da margem foliar, o feixe
vascular, que constitui a nervura marginal, encontra-se
envolto por 250 a 280 fbras de paredes muito espessadas.
O pecolo apresenta contorno circular a plano-convexo,
em seco transversal e, em direo poro distal da
folha, ocorrem aletas laterais e uma leve convexidade na
poro adaxial. A epiderme do pecolo uniestratifcada,
coberta por espessa camada de cutcula. Tanto as clulas
epidrmicas, quanto dos estratos subjacentes, apresentam
pequenos cristais de oxalato de clcio e contedo denso,
de colorao marrom, que reage positivamente ao cloreto
frrico SR. O parnquima possui espessamentos em
celulose, colenquimatoso, podendo conter estilides,
semelhantes aos da lmina, e cristais prismticos de
pequenas dimenses. Braquiescleredes isolados, com
parede muito espessada e pontoaes simples, ocorrem
ao acaso no parnquima fundamental. O feixe vascular
nico, concntrico, cilndrico a levemente cncavo-
convexo, circundado por uma bainha esclerenquimtica
composta por fbras isoladas ou em grupos de 2 a muitos
elementos. Algumas clulas parenquimticas do foema
e as dos raios parenquimticos reagem positivamente ao
cloreto frrico SR.
caractersticas: p inodoro, levemente refrescante;
colorao verde-amarelada; fragmentos de epiderme com
paredes periclinais retas, recobertas por cutcula espessa
e contendo pequenos estilides ou cristais prismticos
em abundncia; fragmentos de epiderme com estmatos
laterocticos; fragmentos de parnquima palidico com 2
ou 3 estratos celulares, completamente distendidos ou no;
fragmentos de fbras de grosso calibre com pontoaes
simples.
IDENTIFICAO
254
, com
de etila, cido frmico e gua (90:5:5), como fase mvel.
uL da Soluo (1) e 3 uL da Soluo (2), recentemente
Soluo (1): pesar exatamente cerca de 5 g da droga moda,
acrescentar 50 mL de gua e aquecer sob refuxo durante
15 minutos. Aps resfriamento temperatura ambiente,
fltrar a soluo obtida em algodo, sob presso reduzida,
volume com gua destilada.
Soluo (2): pesar cerca de 1 mg de epicatequina SQR e
dissolver em 1 mL de metanol.
secar em capela de exausto. Examinar sob luz ultravioleta
(254 nm). O cromatograma obtido com a Soluo (1)
apresenta uma mancha de colorao bord, na mesma
altura que a obtida no cromatograma da Soluo (2) (R
f
de
aproximadamente 0,82). Em seguida, nebulizar a placa com
vanilina sulfrica SR e deixar em estufa a 110 C, durante
10 minutos. Aps a visualizao devero ser observadas
na Soluo (1) duas manchas de colorao bord com R
f

de aproximadamente 0,82 para equicatequina e 0,72 para
banda bord que aparece logo abaixo.
B. A 2 mL do extrato obtido no preparo da Soluo (1)
no teste A. de Identifcao, adicionar duas gotas de cido
clordrico SR e gotejar gelatina SR at precipitao. O
aparecimento de um precipitado ntido indica reao
positiva para taninos totais.
C. A 2 mL do extrato obtido no preparo da Soluo (1)
no teste A. de Identifcao, adicionar 10 mL de gua e
duas a quatro gotas de soluo de cloreto frrico a 1% (p/v)
em etanol. O desenvolvimento de colorao cinza-escura,
indica reao positiva para taninos totais.
D. A 2 mL do extrato obtido no preparo da Soluo (1)
no teste A. de Identifcao, adicionar 0,5 mL de vanilina
a 1% (p/v) em metanol e 1 mL de cido clordrico. O
desenvolvimento de colorao vermelha, indica reao
positiva para taninos condensados.
E. A 5 mL do extrato obtido no preparo da Soluo (1) no
teste A. de Identifcao, adicionar 10 mL de cido actico
2 M e 5 mL de acetato de chumbo SR. O aparecimento de
precipitado esbranquiado, indica presena de taninos.
e
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 12%.
Cinzas sulfatadas (5.4.2.6). No mximo 12%.
Transferir exatamente cerca de 1 g da droga vegetal
moda (180 m), para erlenmeyer contendo 50 mL de
gua fervente. Manter sob fervura moderada durante
15 minutos. Resfriar, fltrar em algodo para balo
volumtrico de 100 mL. Completar o volume, atravs do
fltro, at 100 mL. Distribuir o decocto obtido em 10 tubos
de ensaio com tampa (16 mm de dimetro por 16 cm de
altura), em uma srie sucessiva de 1 mL, 2 mL, 3 mL, at
10 mL, e ajustar o volume do lquido em cada tubo a 10
mL com gua. Tampar os tubos e agit-los vigorosamente
com movimentos verticais durante 15 segundos, com 2
agitaes por segundo. Deixar em repouso por 15 minutos
e medir a altura da espuma. Aps, adicionar em cada tubo 1
mL de cido clordrico 2 M, se a altura da espuma de todos
os tubos for inferior a 1 cm, o ndice de espuma menor
medida permanecer igual ou superior a 1 cm, a diluio
do material vegetal nesse tubo (A) o ndice observado.
Calcular o ndice de espuma segundo a expresso:
em que
A = volume (mL), do decocto usado para preparao da
diluio no tubo no qual a espuma foi observada.
O ndice de espuma de no mnimo 250.
DOSEAMENTO
Taninos totais
Nota: efetuar todas as operaes de extrao e diluio
ao abrigo da luz.
Soluo estoque: pesar 0,750 g da droga pulverizada (250
m) e transferir para um erlenmeyer de 250 mL com boca
esmerilhada. Adicionar 150 mL de gua destilada. Aquecer
em banho-maria durante 30 minutos temperatura de 60
C. Resfriar em gua corrente e transferir para um balo
volumtrico de 250 mL. Lavar o erlenmeyer e transferir
as guas de lavagem com todo contedo de droga vegetal
para o mesmo balo volumtrico. Completar o volume
com gua destilada. Deixar decantar e fltrar o lquido
sobrenadante em papel de fltro. Desprezar os primeiros 50
mL do fltrado.
Transferir volumetricamente 2 mL dessa soluo, 1 mL de
em balo volumtrico de 25 mL e completar o volume com
1
de pele: para 10 mL do fltrado, adicionar 0,1 g de p de
gua destilada. Transferir volumetricamente 2 mL desta
mL de gua destilada em balo volumtrico de 25 mL e
2
) aps
Soluo padro: dissolver imediatamente antes do uso
50 mg de pirogalol em balo volumtrico de 100 mL
da soluo para balo volumtrico de 100 mL e completar
10 mL de gua destilada em balo volumtrico de 25 mL e
3
) aps
Calcular o teor em porcentagem de taninos (droga seca),
em que
A
1
totais;
A
2
A
3
m
1
= massa da amostra utilizada no ensaio (g), considerando
a determinao de gua;
m
2
= massa de pirogalol (g).
Epicatequina
com slica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano;
coluna de 250 mm de comprimento e 4,6 mm de dimetro
grupo octadecilsilano (5 um); fuxo da Fase mvel de 0,8
mL/minuto.
Eluente A: mistura de gua e cido trifuoractico a 0,05
% (v/v).
Eluente B: mistura de acetonitrila e cido trifuoractico a
0,05% (v/v).
a e
923
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
25 - 28 82 18 isocrtica
Soluo amostra: pesar exatamente cerca de 5 g da droga
vegetal pulverizada (250 m) em balo de fundo redondo
de 100 mL e boca esmerilhada, acrescentar 50 mL de
gua destilada, levar a refuxo durante 15 minutos. Aps
resfriamento temperatura ambiente, fltrar a soluo obtida
sob presso reduzida. Extrair o fltrado com trs pores de
50 mL de acetato de etila em funil de separao de 250
mL. Para total separao das fases, deixar em repouso
temperatura de -18 C durante 5 minutos. Reunir as fases
orgnicas. Filtrar atravs de papel de fltro contendo 5 g de
sulfato de sdio anidro, sob presso reduzida. Evaporar a
fase orgnica em evaporador rotatrio sob presso reduzida
at resduo. Ressuspender o resduo com 5 mL de mistura
de metanol e gua (2:8). Extrair em cartucho de extrao
em fase slida, empacotada com slica quimicamente
ligada a grupo octadecilsilano (55 um, 70 ), previamente
acondicionada com 8 mL de mistura de metanol e gua
(2:8), para balo de 100 mL. Eluir 10 mL de metanol e gua
(2:8) para o mesmo balo e completar o volume (S
1
) com
metanol e gua (2:8). Transferir volumetricamente 5 mL
da S
1
para balo volumtrico 25 mL e completar o volume
com metanol e gua (1:1) (S
2
). Filtrar a S
2
(membrana de
PTFE de porosidade 0,5 m) e injetar no cromatgrafo.
Soluo padro de epicatequina: dissolver quantidade
exatamente pesada de epicatequina SQR em metanol e
gua (1:1), para obter soluo a 0,4 mg/mL.
Soluo para curva analtica de epicatequina: diluir
alquotas de 50 L, 200 L, 350 L, 500 L e 600 L da
Soluo padro de epicatequina em balo volumtrico de
2 mL, com metanol e gua (1:1), para obter concentraes
de 10 g/mL; 40 g/mL; 70 g/mL; 100 g/mL e 120 g/
mL.
Procedimento: injetar, separadamente, 20 uL das solues
para curva analtica e da Soluo amostra em quintuplicata,
registrar os cromatogramas e medir as reas sob os picos.
O tempo de reteno relativo cerca de 8,0 minutos para
epicatequina. Calcular o teor de epicatequina na amostra
a partir da equao linear da reta obtida com a curva
analtica do padro. O resultado expresso pela mdia
das determinaes em mg/g de droga vegetal, seguindo a
expresso:
em que
EC = epicatequina;
VLR = valor obtido (g/mL) de epicatequina/mL em S
2
, a
partir da equao da reta;
1000 = valor de converso de g para mg;
m = massa (g) de droga vegetal considerando a determinao
de gua.
e

D E
pj
cu
csb
at
F
ic
csb
csb
es
ic
C
B
A
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Maytenus ilicifolia Mart. ex Reissek
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A e B a 5 mm; em C a 1 mm; em D, E e f a 30 m.
A aspecto geral da lmina foliar. B detalhe da nervao foliar na face adaxial, em vista frontal. C detalhe de poro da lmina foliar, na face
adaxial, em vista frontal, mostrando as arolas e terminaes xilemticas: arola (ar). D e E detalhe parcial da epiderme voltada para a face adaxial
e abaxial, respectivamente, em vista frontal: idioblasto cristalfero (ic); clula subsidiria (csb); estmato (es). f detalhe parcial da lmina foliar, em
seco transversal, mostrando um estmato: parnquima esponjoso (pj); cutcula (cu); trio supra-estomtico (at); clula-guarda (cg); clula subsidiria
(csb); idioblasto cristalfero (ic).
a e
925
figura 2 Aspectos microscpicos em Maytenus ilicifolia Mart. ex Reissek
_____________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A e B a 50 m; em C e D a 75 m; em E a 35 m; em f a 120 m; em G a 180
m; em H e I a 200m; em J a 50 m.
A e B detalhes parciais do mesoflo de amostras distintas, em seces transversais: face adaxial (ad); face abaxial (ab); epiderme (ep); cutcula (cu);
idioblasto cristalfero (ic); parnquima palidico (pp); parnquima esponjoso (pj); xilema (x); foema (f); bainha parenquimtica (bp); fbras (fb);
estmato (es). C e D detalhe de um feixe vascular secundrio na poro basal e na poro mediana da lmina foliar, respectivamente, em seco
transversal: fbras (fb); bainha parenquimtica (bp); parnquima esponjoso (pj); parnquima palidico (pp); xilema (x); foema (f). E detalhe do bordo
foliar, em seco transversal, mostrando a nervura marginal: face adaxial (ad); face abaxial (ab); epiderme (ep); parnquima palidico (pp); parnquima
esponjoso (pj); fbras (fb); estmato (es). f, G e H esquemas do aspecto geral das da poro mediana da nervura principal, em seces transversais,
mostrando variaes na distribuio do foema, xilema e fbras: face adaxial (ad); face abaxial (ab); colnquima (co); epiderme (ep); parnquima
palidico (pp); xilema (x); foema (f); fbras (fb). I esquema do aspecto geral do pecolo, em seco transversal: epiderme (ep); fbras (fb); xilema (x);
foema (f). J detalhe de um braquiesclerede do pecolo, em seco transversal: braquiesclerede (br).
e
ESPIRONOLACTONA
Spironolactonum
O
H
H H
S
C H
3
O
O
CH
3
O
C H
3
C
24
H
32
O
4
S; 416,57
espironolactona; 03561
-Lactona do cido (7,17)-7-(acetiltio)-17-hidroxi-3-
oxopregn-4-eno-21-carboxlico
[52-01-7]
C
24
H
32
O
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, bege claro a
castanho-amarelado. Estvel ao ar.
solvel em benzeno e clorofrmio, solvel em acetato de
etila e em etanol absoluto, pouco solvel em metanol.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): entre -33 e -37, em
1% (p/v) em clorofrmio.
Ocasionalmente pode apresentar fuso preliminar em cerca
de 135 C seguida por re-solidifcao.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada, em soluo a 5% (p/v)
em clorofrmio, apresenta mximos de absoro somente
espironolactona SQR, preparado de maneira idntica.
A. de Doseamento, exibe mximos e mnimos somente
nos mesmos comprimentos de onda de soluo similar
de espironolactona SQR. As absortividades respectivas,
calculadas no comprimento de onda de absorvncia
mxima em torno de 238 nm, no diferem mais que 3%.
C. Dissolver 100 mg da amostra em uma mistura de 10
mL de gua e 2 mL de hidrxido de sdio SR. Ferver a
mistura por 3 minutos, resfriar, adicionar 1 mL de cido
actico glacial e 1 mL de acetato de chumbo SR. Forma-se
precipitado de sulfeto de chumbo de cor castanha a negro.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e acetato de butila como
fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, 5 uL de cada
seguir.
Soluo (1): dissolver 0,2 g da amostra em clorofrmio e
clorofrmio.
secar ao ar. Nebulizar com cido sulfrico/metanol SR,
aquecer a placa a 105 C por 10 minutos e examinar
imediatamente. Qualquer mancha secundria obtida no
cromatograma com a Soluo (1) (2%), diferente da
com a Soluo (2) (1 %).
Compostos mercapto. Agitar 2 g da amostra com 30 mL
de gua, fltrar, em seguida adicionar 3 mL de amido SI a
15 mL do fltrado, e titular com iodo 0,005 M SV. Fazer
ensaio em branco para a correo necessria. consumido
no mximo 0,10 mL de iodo 0,005 M SV.
mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
sucessivamente, com metanol at concentrao de 0,001%
24
H
32
O
4
S na amostra a
um), mantida a temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel
de 1 mL/minuto.
a e
927
Fase mvel: mistura de metanol e gua (60:40), fltrada e
desgaseifcada.
Soluo amostra: transferir aproximadamente 50 mg da
volume com uma mistura de acetonitrila e gua (50:50).
Homogeneizar. Transferir 2 mL dessa soluo para
uma mistura de acetonitrila e gua (50:50), obtendo
concentrao de 100 ug/mL.
de espironolactona SQR em mistura de acetonitrila e
gua (50:50), para obter soluo a 500 ug/mL. Diluir,
sucessivamente, mistura de acetonitrila e gua (50:50),
para obter soluo a 100 ug/mL
Procedimento: Injetar, separadamente, 20 uL das Solues
24
H
32
O
4
S
na amostra a partir das respostas obtidas para a Soluo
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Diurtico.
ESQUALANO
Squalanum
C H
3
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
C
30
H
62
; 422,81
esqualano; 09701
2,6,10,15,19,23-Hexametiltetracosano
[111-01-3]
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido oleoso lmpido e incolor.
acetona, facilmente solvel em hexano e pouco solvel em
etanol. Miscvel com leos.
ndice de refrao (5.2.6): 1,4510 a 1,4525.
IDENTIFICAO
amostra, dispersa em cloreto de potssio, apresenta
observados no espectro de esqualano SQR, preparado de
maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
ndice de acidez (5.2.29.7). No mximo 0,2.
ndice de saponifcao (5.2.29.8). No mximo 2,0.
Pureza cromatogrfca. Proceder conforme descrito em
Cromatografa a gs (5.2.17.5). Utilizar cromatgrafo
provido de detector de ionizao de chamas; coluna capilar
preenchida com polidimetilsiloxano, com espessura do
flme de 0,25 m; a temperatura da coluna dever ser
mantida em 60 C durante 3 minutos e ento programar o
incremento de temperatura da ordem de 6 C por minuto
at 290 C; temperatura do injetor de 280 C e temperatura
do detector de 300 C; utilizar nitrognio como gs de
arraste; fuxo do gs de arraste de 2 mL/minuto.
Soluo amostra: preparar soluo amostra a 1,5% (p/v).
Soluo padro: preparar soluo de esqualano SQR a
1,5% (p/v).
as reas sob os picos. A soma das reas sob os picos
secundrios, exceto a do pico principal, no superior
a 3,0% da rea total dos picos obtidos. No incluir nos
clculos os picos relativos ao solvente.
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e
temperatura de 8 C a 15 C.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente, especifcando no rtulo a
origem (vegetal ou animal).
CATEGORIA
Adjuvante.
e
ESTEARATO DE MACROGOL 40
Macrogoli stearas 40
C H
3
O
O
OH
n
C
18
H
36
O
2
.(C
2
H
4
O)
n;
09890
-(1-Oxooctadecil)--hidroxipoli(oxi-1,2-etanodiil)
[9004-99-3]
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Slido branco escamoso.
Solubilidade. Ligeiramente solvel na gua, solvel em
etanol, em ter etlico e em acetona e insolvel em leos
minerais e vegetais.
IDENTIFICAO
no espectro do estearato de polioxila 40 SQR, preparado de
maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
Temperatura de congelamento (5.2.4). No mnimo 37 C
e no mximo 47 C.
ndice de saponifcao (5.2.29.8). Entre 25 e 35.
ndice de hidroxila (5.2.29.12). Entre 25 e 40.
gua (5.2.20). No mximo 3,0%.
0,001%.
Polietilenoglicis livres. Pesar, exatamente, 6 g de amostra
e transferir para funil de separao de 500 mL, contendo
50 mL de acetato de etila. Dissolver completamente e
adicionar 50 mL de soluo de cloreto de sdio a 29%
(p/v), agitar vigorosamente por 2 minutos e deixar em
repouso por 15 minutos. Se a separao for incompleta,
inserir cuidadosamente o funil de separao em banho
de vapor, em pequenos intervalos de tempo. Repetir
esse procedimento quantas vezes forem necessrias para
assegurar a completa separao de fases. Resfriar e separar
a fase inferior, aquosa, para um segundo funil de separao
de 500 mL, extrair a fase superior novamente com 50 mL
de soluo de cloreto de sdio a 29% (p/v), repetindo o
procedimento descrito anteriormente. Ao segundo funil de
separao contendo as fases aquosas adicionar 50 mL de
acetato de etila, agitar vigorosamente por 2 minutos e deixar
em repouso por 15 minutos. Separar a fase inferior, aquosa,
para um terceiro funil de separao de 500 mL, e extrair
com duas pores de 50 mL de clorofrmio, agitando por
2 minutos cada vez. Repetir o procedimento do banho de
vapor para obter a completa separao de fases. Transferir
as pores de clorofrmio para um copo de bquer de 150
mL e evaporar no banho de vapor at aparente secura.
Adicionar ao resduo 15 mL de clorofrmio e fltrar,
coletando o fltrado em um bquer de 150 mL. Lavar o
fltro com pequenas pores de clorofrmio, coletando
no mesmo bquer de 150 mL que foi coletado o fltrado e
evaporar at que no se perceba mais odor de clorofrmio
ou acetato de etila. Dessecar a temperatura de 60 C em
estufa a vcuo por 1 hora. Arrefecer em dessecador e pesar.
No mnimo 17% e no mximo 27% de polietileno glicis
livres.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Adjuvante farmacotcnico, tensoativo.
ESTVIA
Steviae folium
Stevia rebaudiana (Bertoni) Bertoni ASTERACEAE
A droga vegetal constituda pelas folhas secas, contendo,
no mnimo, 12,0% de carboidratos totais e 4,0% de
esteviosdeo (C
38
H
60
O
18
; M 804,87).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Odor fraco, sabor
adocicado no incio da mastigao, amargo no fnal.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas simples, com at 6,0 cm de comprimento e at
2,5 cm de largura, verde escuras na face adaxial e mais
claras na abaxial, quebradias quando secas, de disposio
oposta, alternas apenas quando junto inforescncia,
membranosas, espatuladas a lanceoladas, ssseis, de
pice agudo, base atenuada e margem serrilhada a partir
do tero basal em direo ao pice foliar, com 3 nervuras
longitudinais, a principal mais desenvolvida. Venao
actindroma. A folha recoberta por tricomas tectores
em ambas as faces. Flores, quando presentes, alvas, todas
iguais, reunidas em captulos e protegidas por um invlucro
de 5 ou 6 brcteas. Os captulos so agrupados em panculas
terminais corimbiformes. Fruto, quando presente, do tipo
aqunio, com 4 ou 5 ngulos longitudinais e superfcie
pilosa, acompanhado do papus formado por uma s fleira
de cerdas.
a e
929
DESCRIO MICROSCPICA
A epiderme foliar, em vista frontal, exibe clulas de
paredes sinuosas, com sinuosidade mais acentuada na face
abaxial. Na regio das nervuras, as clulas so alongadas
e de paredes periclinais retilneas. Estmatos do tipo
anomoctico, em maior nmero na face abaxial. Tricomas
tectores pluricelulares unisseriados, de dois tipos, so
encontrados em toda a superfcie da lmina foliar, em
ambas as faces, os maiores com base alargada e pice
agudo, sendo as clulas basais mais volumosas, os menores
com dimetro uniforme da base at o pice, sendo esse,
menos aflado. Tricomas glandulares ocorrem em toda
a extenso da lmina, nas duas faces; localizam-se em
pequenas depresses da epiderme, tm pedicelo pluricelular
e unisseriado e cabea arredondada e unicelular. Em alguns
locais da epiderme so visveis estrias epicuticulares. Em
seco transversal, a lmina tem organizao dorsiventral e
anfestomtica, com estmatos situados no mesmo nvel
ou ligeiramente acima das demais clulas epidrmicas. As
paredes periclinais internas e anticlinais que delimitam
o poro estomtico so espessadas. O parnquima
palidico formado por uma ou duas camadas. Quando
duas camadas, estas abrangem a metade da espessura
da lmina. O parnquima esponjoso apresenta vrios
estratos, dispostos irregularmente. Os feixes vasculares
secundrios so colaterais, circundados por uma bainha
parenquimtica cloroflada. A nervura principal, em seco
transversal, mostra-se mais proeminente na face abaxial.
As clulas da epiderme, nessa regio, so isodiamtricas, e
o colnquima lacunar. O sistema vascular representado
por um feixe vascular colateral, envolvido parcialmente
por fbras esclerenquimticas junto ao xilema e ao foema,
em forma de calotas. Em seco transversal, a base foliar
mostra forma semicircular aberta, ligeiramente cncava na
face adaxial e convexa na abaxial. A epiderme apresenta
clulas polidricas a quadrangulares, com cutcula
ornamentada. Os estmatos esto localizados acima do
nvel das demais clulas epidrmicas e ocorrem apenas nos
bordos. O colnquima formado por uma ou duas camadas
de clulas, em ambas as faces. O parnquima fundamental
preenche a maior parte desta regio e o clornquima os
bordos. O sistema vascular constitudo de cinco a sete
feixes vasculares colaterais, sendo o central o maior e os
demais diminuem gradualmente at os mais perifricos.
caractersticas: fragmentos de epiderme com clulas de
paredes anticlinais sinuosas e estmatos anomocticos;
fragmentos de regies das nervuras com clulas epidrmicas
alongadas; tricomas tectores e glandulares como descritos
acima.
IDENTIFICAO
254
, com espessura
de 250 m, como suporte, e acetato de etila, metanol e
cido actico glacial (60:40:5), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, em forma de banda, 10 L da Soluo (1)
e 5L da Soluo (2), preparadas como descrito a seguir.
Soluo (1): pesar cerca de 0,25 g de folhas modas e
colocar em balo de fundo redondo. Adicionar 10 mL de
mistura de gua e etanol (1:1). Aquecer, sob refuxo, por 1
hora. Filtrar atravs de papel de fltro. Transferir o fltrado
para balo volumtrico de 10 mL, resfriar e completar o
volume com mistura de gua e etanol (1:1). Diluir 50 mL
da soluo obtida com 150 mL de metanol.
esteviosdeo em metanol, de modo a obter soluo a 1 mg/
mL.
secar ao ar. Nebulizar com anisaldedo SR e deixar em
estufa entre 100 C e 110 C durante 5 minutos. A mancha
cor e intensidade quela obtida com a Soluo (2), de Rf
de aproximadamente 0,50. A mancha correspondente ao
esteviosdeo apresenta colorao verde fugaz.
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mais que 2,0%.
gua (5.4.2.3). No mximo 13,0%.
DOSEAMENTO
Carboidratos totais
Soluo amostra concentrada: pesar 2 g de folha de estvia
moda. Extrair, por infuso, com 80 mL de gua quente,
por trs vezes e fltrar. Reunir os fltrados e completar o
volume para 250 mL. Transferir 5 mL do extrato para balo
Soluo amostra: transferir 0,6 mL da Soluo amostra
concentrada para tubo de ensaio, adicionar 0,6 mL de fenol
a 5% (p/v) e 3 mL de cido sulfrico. Deixar em repouso
por 10 minutos.
Soluo branco: transferir 0,6 mL de gua para tubo de
ensaio, adicionar 0,6 mL de fenol a 5% (p/v) e 3 mL de
cido sulfrico. Deixar em repouso por 10 minutos.
Soluo padro: transferir 0,6 mL de glicose padro a
0,01% (p/v) em gua, para tubo de ensaio, adicionar 0,6
mL de fenol a 5% (p/v) e 3 mL de cido sulfrico. Deixar
em repouso por 10 minutos.
Medir a absorvncia da soluo amostra e da soluo
padro em 490 nm (5.2.14), utilizando a Soluo branco
para ajuste do zero. Calcular o teor de carboidratos totais
na amostra a partir da expresso:
e
em que
TC = teor de carboidratos em %;
D = 10;
As = absorvncia medida da soluo amostra;
Ap = absorvncia medida da soluo padro.
Esteviosdeo
alta efcincia (5.2.17.4). Utilizar cromatgrafo provido de
detector ultravioleta a 206 nm; pr-coluna empacotada com
slica ligada a grupo octadecilsilano; coluna de 150 mm de
com slica ligada a grupo octadecilsilano (5 m), mantida
temperatura ambiente; fuxo do Fase mvel de 1,0 mL/
minuto.
Eluente A: mistura de acetonitrila e gua (20:80).
Gradiente de fase mvel: adotar sistema de gradiente
Tempo (minutos) Eluente A (%) Eluente B (%)
0 100 0
4 70 30
7 0 100
droga seca e moda para balo de fundo redondo. Adicionar
10 mL de mistura de gua e etanol (1:1), e aquecer a cerca
de 100 C sob refuxo, por 60 minutos. Resfriar o extrato
temperatura ambiente com corrente de gua fria. Filtrar
o extrato atravs de papel de fltro, sob vcuo, lavando o
marco com pequeno volume de gua. Transferir o fltrado
com mistura de gua e etanol (1:1). Diluir 50 L da soluo
resultante em 950 L de mistura de acetonitrila e gua
(20:80).
Soluo padro estoque: dissolver quantidade exatamente
pesada de esteviosdeo em metanol de modo a obter
soluo a 1 mg/mL. Aquecer, brandamente, se necessrio.
Curva analtica: diluir 500 L da Soluo padro estoque,
metade, de modo a obter soluo a 0,50 mg/mL. Realizar
diluies sucessivas da soluo anterior, em metanol, de
modo a obter concentraes de 0,25 mg/mL, 0,125 mg/mL,
0,0625 mg/mL, 0,032 mg/mL e 0,016 mg/mL. Injetar as 6
concentraes obtidas.
da Curva analtica e da Soluo amostra. Registrar os
cromatogramas e medir as reas sob os picos. O tempo
de reteno de aproximadamente 4,6 minutos para o
esteviosdeo. Calcular o teor de esteviosdeo na amostra a
partir da equao da reta obtida com a curva analtica.
a e
931
figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Stevia rebaudiana (Bertoni) Bertoni
_________________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 1 cm; em B, E e H a 250 m; em C, D, G, f e I a 50 m.
A aspecto geral da folha; B detalhe da nervao foliar; C detalhe da epiderme da face adaxial em vista frontal, mostrando estmatos; D - detalhe
da epiderme da face abaxial em vista frontal, mostrando estmatos e clulas com paredes altamente sinuosas; E esquema da seco transversal da
lmina foliar na regio da nervura principal, evidenciando feixe do tipo colateral: foema (f); fbras (f); feixe vascular (fv); parnquima fundamental
(pf); parquima palidico (pp); parnquima esponjoso (pj); xilema (x). f detalhe do feixe vascular da nervura principal em seco transversal como
mostrado em E: foema (f); fbras (f); parnquima fundamental (pf); xilema (x). G detalhe da epiderme e do colnquima na regio da nervura principal
voltada para a face adaxial e detalhe da epiderme e do colnquima na regio da nervura principal voltada para a face abaxial: colnquima (co); epiderme
(ep). H esquema da seco transversal da base da lmina foliar na regio da nervura principal, evidenciando feixe do tipo colateral: clornquima
(cl); colnquima (co); foema (f); feixe vascular (fv); xilema (x). I detalhe do feixe vascular da regio basal da lmina foliar: foema (f); parnquima
fundamental (pf); xilema (x).
e
figura 2 - Aspectos microscpicos em Stevia rebaudiana (Bertoni) Bertoni
_________________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A a H a 50 m.
A detalhe da lmina foliar, em seco transversal: epiderme (ep); bainha vascular com cloroplastdeos (bc); feixe vascular (fv); parnquima esponjoso
(pj); parnquima palidico (pp); tricoma glandular (tg). B detalhe da lmina foliar, em seco transversal: estmato (es); epiderme (ep); bainha
vascular com cloroplastdeos (bc); feixe vascular (fv); parnquima esponjoso (pj); parnquima palidico (pp). C fragmento da poro basal da
lmina foliar em seco transversal ao nvel da nervura principal, mostrando estrias epicuticulares: epiderme (ep); clornquima (cl); colnquima (co);
parnquima fundamental (pf); D fragmento de epiderme em vista frontal, evidenciando estmatos e a variabilidade morfolgica das clulas; E
fragmento da epiderme, em vista frontal, evidenciando estmatos e tricomas tectores; f tricoma tector e clulas epidrmicas fundamentais mostrando
estrias epicuticulares; G tricoma tector com clulas basais alargadas; H fragmento da epiderme, em vista frontal, destacando estmatos e tricoma
glandular.
a e
933
ESTOLATO DE ERITROMICINA
Erythromycini estolas
O
O
O
CH
3
OH
C H
3
OH
O H
O
C H
3
O
CH
3
CH
3
C H
3
CH
3
CH
3
CH
3
OH
OCH
3
O CH
3
N(CH
3
)
2
O
H
O
O
C H
3
C H
3 O
S
OH
O
O
.
C
40
H
71
NO
14
.C
12
H
26
O
4
S; 1056,39
estolato de eritromicina; 03494
Sulfato de dodecila de 2-propanoato de eritromicina (1:1)
[3521-62-8]
Apresenta potncia de, no mnimo, 610 UI de estolato de
eritromicina (C
40
H
71
NO
14
.C
12
H
26
O
4
S) por miligrama em
DESCRIO
etanol, acetona e clorofrmio. Praticamente insolvel em
cido clordrico diludo.
IDENTIFICAO
observados no espectro de estolato de eritromicina SQR,
O teste somente vlido se o cromatograma obtido com a
Soluo (4) apresentar duas manchas nitidamente separadas.
C. Suspender 3 mg de amostra em 2 mL de cido
sulfrico M. Adicionar 0,1 mL de cloreto de metiltionnio
a 10% (p/v), 2 mL de clorofrmio e misturar. A camada
clorofrmica torna-se azul.
D. Dissolver 10 mg de amostra em 5 mL de cido clordrico.
Deixar em repouso por 20 minutos. Desenvolve-se
colorao amarela.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 4,5 a 7,0. Determinar na suspenso aquosa a
1% (p/v).
Sustncias Relacionadas. Proceder conforme descrito em
slica-gel G, como suporte, e mistura de acetato de amnio
a 15% (p/v) com pH ajustado para 7,0, etanol e clorofrmio
Soluo (2): diluir 2,5 mL da Soluo (1) em 10 mL de
acetona.
Soluo (3): soluo a 1 mg/mL de estolato de eritromicina
SQR em acetona.
Soluo (4): dissolver 10 mg de estolato de eritromicina
SQR e 10 mg de etilsuccinato de eritromicina em 10 mL
de acetona.
Soluo (5): soluo a 80 mg/mL de eritromicina SQR em
acetona.
secar ao ar. Nebulizar com anisaldedo SR e aquecer a 110
C por 5 minutos. Qualquer mancha secundria obtida no
Soluo (5) (2,0%).
gua (5.2.20.1). Utilizar 20 mL de metanol contendo 10%
de imidazol no frasco de titulao. No mximo 4,0%.
DOSEAMENTO
cilindros em placa.
Soluo amostra: dissolver quantidade de amostra
equivalente a 50 mg de eritromicina em 20 mL de metanol.
Diluir a 50 mL com Tampo fosfato de potssio 0,1 M,
estril, pH 8,0 (Soluo 2). Manter a 60 C por 3 horas.
Filtrar. Diluir, sucessivamente, at concentraes de 0,30
g/mL, 0,60 g/mL e 1,2 g/mL, utilizando Tampo
fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2).
e
estolato de eritromicina SQR e transferir quantitativamente
para balo volumtrico de 50 mL com auxlio de 20 mL de
metanol. Agitar, completar o volume com Tampo fosfato
de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2). Diluir,
sucessivamente, at concentraes de 0,30 g/mL, 0,6 g/
mL e 1,2 g/mL, utilizando Tampo fosfato de potssio 0,1
M, estril, pH 8,0 (Soluo 2).
placa, esperar solidifcar, adicionar 5 mL de inculo a 1,5%
e proceder conforme descrito em Ensaio microbiolgico
de antibiticos (5.5.3.3.1), adicionando aos cilindros, 0,2
mL das solues recentemente preparadas. Calcular a
potncia da amostra, em UI de estolato de eritromicina por
luz e em temperatura inferior a 30 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimicrobiano.
COMPRIMIDOS
Contm estolato de eritromicina equivalente a, no mnimo,
eritromicina (C
37
H
67
NO
13
). Os comprimidos devem ser
revestidos.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel (0,25 mm), como
suporte, e mistura de metanol e clorofrmio (85:15), como
uma das solues recentemente preparadas, descritas a
seguir.
Soluo (1): pesar e pulverizar os comprimidos. A partir
do p, preparar soluo equivalente a 20 mg/mL de
eritromicina em metanol.
Soluo (2): utilizar estolato de eritromicina SQR de modo
a obter soluo a 20 mg/mL de eritromicina em metanol.
secar ao ar. Nebulizar com mistura de etanol, anisaldedo
e cido sulfrico (90:5:5). Aquecer a placa a 100 C por
10 minutos. A mancha principal obtida com a Soluo (1)
com a Soluo (2). A eritromicina aparece como mancha
de cor preta a roxa.
CARACTERSTICAS
Utilizar fuido gstrico simulado no lugar de gua.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). Utilizar 20 mL de metanol contendo 10%
de imidazol no frasco de titulao. No mximo 5,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
utilizando cilindros. Preparar Soluo amostra como
descrito a seguir.
Utilizar quantidade do p equivalente a 0,5 g de eritromicina
e transferir para balo volumtrico de 500 mL. Diluir
em 200 mL de metanol e agitar mecanicamente por 10
minutos. Adicionar 100 mL de Tampo fosfato de potssio
0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2) e agitar mecanicamente
por 10 minutos. Completar o volume com mesmo solvente
e fltrar.
ROTULAGEM
SUSPENSO ORAL
Estolato de eritromicina suspenso oral a mistura de
estolato de eritromicina com um ou mais agentes corantes,
aromatizantes, tampes, adoantes e conservantes.
Contm estolato de eritromicina equivalente a, no mnimo,
eritromicina (C
37
H
67
NO
13
).
a e
935
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel 0,25 mm, como
suporte, e mistura de metanol e clorofrmio (85:15), como
uma das solues recentemente preparadas, descritas a
seguir.
Soluo (1): transferir volume de suspenso oral equivalente
a 20 mg de eritromicina para funil de separao. Adicionar
15 mL de hidrxido de sdio 0,02 M e misturar. Adicionar
2 g de cloreto de sdio e 25 mL de clorofrmio e agitar
por 3 minutos. Separar a fase clorofrmica passando-a
atravs de pequena quantidade de sulfato de sdio anidro,
previamente lavado com clorofrmio. Coletar o extrato
clorofrmico. Lavar o sulfato de sdio com mais 5 mL
de clorofrmio. Evaporar a fase orgnica at secura em
evaporador rotatrio. Dissolver o resduo em 1 mL de
metanol.
Soluo (2): transferir quantidade de estolato de
eritromicina SQR equivalente a 20 mg de eritromicina
para um funil de separao e proceder a extrao conforme
descrito para Soluo (1).
secar ao ar e nebulizar com mistura de etanol, anisaldedo
e cido sulfrico (90:5:5). Aquecer a placa a 100 C por
10 minutos. A mancha principal obtida com a Soluo (1)
com a Soluo (2). A eritromicina aparece como uma
mancha de cor preta a roxa.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,5 a 6,5.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Ensaio microbiolgico por
difuso em gar (5.5.3.3.1), utilizando cilindros.
de eritromicina SQR em metanol de modo a obter soluo
a 10 mg/mL. Diluir quantitativamente com Tampo
fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2) at
concentrao de 1 mg/mL. Diluir sucessivamente com o
2) de modo a obter solues na faixa de concentrao
adequada curva padro.
Soluo amostra: transferir volume da suspenso oral, livre
de bolhas, equivalente a 0,25 g de eritromicina, para balo
agitar por 10 minutos. Completar o volume com a Tampo
fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2)
e aquecer at 60 C por trs horas, esfriar e fltrar. Diluir
sucessivamente com Tampo fosfato de potssio 0,1 M,
estril, pH 8,0 (Soluo 2) de modo a obter solues na
faixa de concentrao adequada curva padro.
Procedimento: adicionar 20 mL de meio base nmero
meio semeado nmero 11 e proceder conforme descrito
em Ensaio microbiolgico por difuso em gar. Calcular
a quantidade, em mg de eritromicina (C
37
H
67
NO
13
) na
suspenso oral, a partir da potncia do padro e das
respostas obtidas para a Soluo padro e a Soluo
amostra.
ROTULAGEM
ESTRADIOL
Estradiolum
O H
H
H
H
CH
3
OH
C
18
H
24
O
2
; 272,38
estradiol; 03595
(17)-Estra-1,3,5(10)-trieno-3,17-diol
[50-28-2]
C
18
H
24
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco a branco-amarelado.
em acetona e dioxana, facilmente solvel em etanol,
ligeiramente solvel em leo vegetal e pouco solvel em
cloreto de metileno. Solvel em solues de hidrxidos
alcalinos.
Faixa de fuso (5.2.2): 173 C a 179 C.
e
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +76 a +83. Determinar
em soluo a 1% (p/v).
IDENTIFICAO
estradiol SQR, preparado de maneira idntica.
etanol, exibe mximo em 280 nm, idntico ao observado
no espectro de soluo similar de estradiol SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
No mximo 0,5%.
gua (5.2.20.1). No mximo 3,5%.
DOSEAMENTO
de 1 mL/minuto.
Fase mvel: acetonitrila e gua (55:45).
pesada, para balo volumtrico de 250 mL e completar
o volume com metanol. Transferir 10 mL para balo
volumtrico de 200 mL e adicionar 5 mL da Soluo padro
interno, completar o volume com gua e homogeneizar.
de estradiol SQR e estrona SQR em metanol, de modo a
obter soluo a 0,4 mg/mL e 0,24 mg/mL, respectivamente.
Transferir 10 mL dessa soluo e 5 mL da Soluo padro
interno para balo volumtrico de 200 mL. Adicionar 100
mL de metanol e completar o volume com gua, obtendo
soluo a 20 g/mL de estradiol SQR.
Soluo padro interno: transferir 300 mg de etilparabeno
metanol e homogeneizar.
de reteno so cerca de 0,7 para o padro interno, 1,3 para
estrona e 1,0 para o estradiol. A resoluo entre estradiol
e estrona no menor que 2,0. O desvio padro relativo
que 2,0%.
18
H
24
O
2

ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Hormnio.
ESTRAMNIO
Stramonii folium
Datura stramonium L. SOLANACEAE
A droga constituda pelas folhas de Datura stramonium
L. e das suas variedades. Contm no mnimo 0,25% de
alcaloides totais calculados em hiosciamina (C
17
H
23
NO
3
,
289,37) em relao a droga seca.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A folha tem odor
desagradvel, sabor nauseoso e levemente salgado.
DESCRIO MACROSCPICA
Lmina foliar ovalada ou ovalado-triangular, lobado-
dentada, de pice acuminado e base assimtrica, de
colorao verde acastanhada escura a verde acinzentada
escura, torcidas e encolhidas devido secagem, fnas e
frgeis, com 15,0 cm a 20,0 cm de comprimento e 8,0 cm
a 10,0 cm de largura. Venao pinada, com 4-5 nervuras
secundrias alternadas, cncavas na face adaxial e
proeminentes na face abaxial. Pecolo curto. Folhas jovens
pubescentes sobre as nervuras.
DESCRIO MICROSCPICA
A lmina foliar anfhipoestomtica e de simetria
dorsiventral. A epiderme, em vista frontal, apresenta clulas
poligonais, de paredes anticlinais sinuosas e espessas, e
estmatos do tipo anisoctico, raramente anomoctico,
mais abundantes na face abaxial. Os tricomas tectores e
glandulares so mais abundantes na face abaxial e sobre
as nervuras. Os tricomas tectores so pluricelulares,
unisseriados, cnicos, formados por 2-5 clulas alongadas
de paredes fnamente verrucosas; os tricomas glandulares
so, em geral, curtamente pedicelados, com glndula apical
ovoide ou claviforme, formada por 2-7 clulas. A epiderme,
em seco transversal, apresenta-se uniestratifcada e
recoberta por uma cutcula lisa e delgada. O mesoflo
consiste de parnquima palidico composto de uma
a e
937
camada de clulas e de parnquima esponjoso. Entre os
dois parnquimas encontram-se uma ou mais camadas de
idioblastos contendo cristais de oxalato de clcio na forma
de drusas. Os feixes vasculares so bicolaterais.
caractersticos: fragmentos de epiderme com clulas de
paredes anticlinais ligeiramente sinuosas e com cutcula
lisa; fragmentos de epiderme com estmatos anisocticos
e anomocticos mais frequentes na epiderme abaxial;
tricomas tectores cnicos pluricelulares unisseriados e
tricomas glandulares curtos e claviformes; fragmentos do
mesoflo em seco transversal; fragmentos de elementos
de vaso anelados e espiralados; fragmentos de parnquima
com numerosos idioblastos contendo cristais do tipo drusa.
IDENTIFICAO
A. Agitar 1 g da amostra pulverizada com 10 mL de cido
sulfrico 0,05 M, durante 2 minutos e fltrar. Aos fltrados
juntar 1 mL de soluo concentrada de amnia e 5 mL de
gua. Agitar com 15 mL de ter etlico isento de perxidos,
com precauo, para evitar a formao de emulso. Secar a
fase etrea sobre sulfato de sdio anidro. Filtrar para uma
cpsula de porcelana e evaporar o solvente secura em
banho-maria. Juntar 2 mL de acetona e, gota a gota, de
hidrxido de potssio a 3% (p/v) em etanol a 96% (v/v).
Desenvolve colorao violeta intensa.
254
,
como suporte, e mistura de soluo concentrada de
amnia, gua e acetona (3:7:90) como fase mvel. Aplicar,
separadamente, na placa, na forma de banda, 10 L e 20 L
das solues a seguir, respectivamente:
Soluo (1): a 1 g da amostra pulverizada juntar 10 mL de
cido sulfrico 0,05 M, agitar durante 15 minutos e fltrar.
Lavar o fltro com cido sulfrico 0,05 M, at a obteno
de 25 mL de fltrado. Ao fltrado juntar 1 mL de soluo
concentrada de amnia e agitar duas vezes com 10 mL de
ter etlico isento de perxido de cada vez. Separar por
centrifugao, se necessrio. Reunir as camadas etreas,
secar sobre sulfato de sdio anidro, fltrar e evaporar
secura em banho-maria. Dissolver o resduo em 0,5 mL de
metanol.
Soluo (2): dissolver 50 mg de sulfato de hiosciamina
em 9 mL de metanol. Dissolver 15 mg de bromidrato de
escopolamina em 10 mL de metanol. Misturar 3,8 mL de
soluo de sulfato de hiosciamina, 4,2 mL de soluo de
bromidrato de escopolamina e completar com 10 mL de
metanol.
Desenvolver o cromatograma. Secar a placa a 100 C -
105 C durante 15 minutos. Deixar esfriar e pulverizar
com cerca de 10 mL de iodobismutato de potssio SR2,
para uma placa de 200 mm de lado at aparecimento de
bandas alaranjadas ou castanhas sobre o fundo amarelo.
As bandas dos cromatogramas obtidos coma a Soluo
(1) so semelhantes, quanto a posio (hiosciamina
no tero inferior, escopolamina no tero superior dos
cromatogramas) e colorao, s dos cromatogramas
obtidos com a Soluo (2). A dimenso das bandas dos
cromatogramas obtidos com a Soluo (1) no inferior
a das bandas correspondentes dos cromatogramas obtidos
com o mesmo volume da Soluo (2). Podem aparecer
fracas bandas secundrias, em particular no centro do
cromatograma obtido com 20 L da Soluo (1), ou perto
do ponto de aplicao do cromatograma obtido com 10
L da Soluo (1). Pulverizar com nitrito de sdio SR
at que a camada se torne transparente. Examinar aps
15 minutos. A colorao das bandas correspondentes
hiosciamina nos cromatogramas obtidos com a Soluo (2)
e nos cromatogramas obtidos com a Soluo (1) passa de
castanho para castanho avermelhado, mas no passa para
azul acinzentado (atropina).
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 3% de caules
com um dimetro superior a 5 mm.
gua (5.2.20.2). No mximo 12,0%.
Cinzas insolveis (5.4.2.5). No mximo 4%.
DOSEAMENTO
Alcaloides totais
umedecer com 5 mL de hidrxido de amnio. Adicionar 10
mL de etanol a 96% (v/v) e 30 mL de ter etlico isento de
perxido, misturados cuidadosamente. Transferir a mistura
para um percolador, se necessrio, com auxlio da soluo
extratora. Macerar durante 4 horas e percolar a mistura
com clorofrmio e ter etlico isento de perxidos (1:3)
at extrao completa dos alcaloides. Evaporar secura 1
mL do percolado e dissolver o resduo em cido sulfrico
0,25 M e verifcar a ausncia de alcaloides com iodeto de
potssio mercrico SR. Reduzir o volume do percolado at
50 mL e transferir para um funil de separao com auxlio
de ter etlico isento de perxidos. Ao lquido assim obtido
juntar ter etlico isento de perxidos, 2,5 vezes o volume
do percolador at a obteno de um lquido de densidade
inferior a da gua. Extrair a soluo, no mnimo trs vezes,
com 20 mL de soluo de cido sulfrico 0,25 M cada
vez. Separar as fases, por centrifugao, se necessrio,
e transferir a fase cida para outro funil de separao.
Alcalinizar a fase cida com hidrxido de amnio at
pH 8,0 - 9,0 e extrair trs vezes com clorofrmio, com
alquotas de 30 mL. Juntar as fases clorofrmicas e retirar
a gua residual, adicionando 4 g de sulfato de sdio anidro,
deixando em repouso por 30 minutos, com agitao
ocasional. Retirar a fase clorofrmica e lavar o sulfato de
sdio restante com trs alquotas de 10 mL de clorofrmio.
Reunir os extratos clorofrmicos e evaporar secura em
banho-maria. Aquecer o resduo em estufa a 100 C - 105
C durante 15 minutos. Dissolver o resduo em 5 mL de
clorofrmio, adicionar 20 mL de soluo de cido sulfrico
e
0,01 M SV e remover o clorofrmio por evaporao em
banho-maria. Titular o excesso de cido com soluo de
hidrxido de sdio 0,02 M SV usando vermelho de metila
SI como indicador. Calcular a porcentagem de alcaloides
totais, expressos em hiosciamina, segundo a expresso:
em que
d = perda por secagem expressa em porcentagem;
n = nmero de mililitros de hidrxido de sdio 0,02 M
gastos;
m = massa da tomada de ensaio, em gramas.
a e
939
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos de Datura stramonium L.
_________________
A representao esquemtica da folha, em vista frontal: lmina (la); pecolo (pe). B detalhe de poro da lmina foliar, em seco transversal:
cutcula (cu); epiderme (ep); idioblasto contendo drusas de oxalato de clcio (ic); parnquima esponjoso (pj); tricoma glandular (tg); tricoma tector (tt).
C detalhe de poro da epiderme voltada para a face adaxial, em vistra frontal: estmato (es); tricoma tector (tt). D detalhe de poro da epiderme
voltada para a face abaxial, em vistra frontal: estmato (es); tricoma tector.
e
figura 2 Aspectos microscpicos de Datura stramonium L.
_________________
A a D Representao esquemtica do p. A fragmento da epiderme em vista frontal, na face adaxial, mostrando cristais por transparncia: cristal do
tipo drusa. B fragmento da epiderme em vista frontal, na face abaxial, mostrando cristais e pores de elementos de vaso por transparncia: cristal do
tipo drusa (cd); feixe vascular (fv). C fragmento de poro do mesoflo, em seco transversal: cutcula (cu); epiderme (ep); idioblasto cristalfero (ic);
parnquima esponjoso (pj); parnquima palidico (pp). D tricomas ou pores destes, isolados: tricoma glandular (tg); tricoma tector (tt).
ESTRONA
Estronum
O H
H
H
H
CH
3
O
C
18
H
22
O
2
; 270,37
estrona; 03630
3-Hidroxiestra-1,3,5(10)-trien-17-ona
[53-16-7]
C
18
H
22
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco a branco-amarelado ou
pequenos cristais brancos a branco-amarelados.
etanol, metanol, acetona e leos vegetais. Pouco solvel
em solues de hidrxidos alcalinos fxos.
1% (p/v) em dioxana.
IDENTIFICAO
a e
941
estrona SQR, preparado de maneira idntica.
etanol aquecido em banho-maria e esfriado a temperatura
ambiente, exibe mximos, idnticos ao observado no
espectro de soluo similar de estrona SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
amostra, em estufa, a 105 C, por 3 horas. No mximo
0,5%.
No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
de 1 mL/minuto.
Fase mvel: acetonitrila e fosfato de potssio monobsico
0,05 M (50:50).
da amostra em metanol de modo a obter soluo a 0,2 mg/
mL. Transferir 5 mL desta soluo para balo volumtrico
de 25 mL e completar o volume com Fase mvel, obtendo
soluo a 40 g/mL.
de estrona SQR em metanol, de modo a obter soluo a
0,2 mg/mL. Transferir 5 mL desta soluo para balo
mvel, obtendo soluo a 40 g/mL.
da coluna no deve ser menor que 1500 pratos tericos/
metro. O fator de cauda no maior que 2. O desvio padro
maior que 2,0%.
18
H
22
O
2

ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Hormnio.
TER ETLICO
Aether ethylicus
CH
3
O C H
3
C
4
H
10
O; 74,12
ter etlico; 03663
1,1-Oxibisetano
[60-29-7]
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido lmpido, incolor, voltil,
muito infamvel.
Solubilidade. Solvel em gua, miscvel com etanol, com
cloreto de metileno e com leos graxos.
IDENTIFICAO
A. Satisfaz ensaio de Densidade relativa (5.2.5).
B. Satisfaz o ensaio de Determinao da faixa de destilao
(5.2.3).
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez. Num frasco de tampa esmerilhada introduzir
10 mL de etanol, 2 mL de gua destilada, 0,5 mL de
fenolftalena SI e juntar a soluo de hidrxido de sdio
0,02 M at obteno de colorao rsea persistente, aps
agitao durante 30 segundos. Adicionar, exatamente, 25
mL da amostra, fechar e agitar cuidadosamente, adicionar
a soluo de hidrxido de sdio 0,02 M at colorao rsea
persistente, aps agitao durante 30 segundos. No devem
ser gastos mais de 0,4 mL de hidrxido de sdio 0,02 M
para neutralizar o ter etlico.
Perxidos. Numa proveta com tampa esmerilhada de 25
mL, introduzir 10 mL da amostra e 1 mL de uma soluo
recentemente preparada de iodeto de potssio 10% (p/v)
e agitar. A mistura dever ser protegida da luz durante 1
hora. Os lquidos no devem apresentar colorao.
faixa de destilao (5.2.3). No destilar se a amostra
no satisfzer o ensaio de perxidos. A amostra destila
completamente entre 34 C e 35 C. Realizar o ensaio
utilizando dispositivo de aquecimento apropriado.
Proceder com precauo, evitar aquecer o balo acima do
nvel do lquido.
e
Resduo no voltil. Evaporar 50 mL, espontaneamente,
em cpsula de porcelana previamente tarada. Dessecar o
resduo em estufa a 105 C, durante 1 hora, deixar arrefecer
e pesar. O peso do resduo no deve exceder 1 mg (0,003 %).
Aldedos. Num funil de separao colocar 20 mL de ter
etlico e adicionar 7 mL da mistura de 1 mL de iodeto
de potssio mercrico alcalino SR e 17 mL de soluo
saturada de cloreto de sdio. Fechar e agitar vigorosamente
por 10 segundos. Deixar repousar por 1 minuto. A camada
aquosa no deve apresentar turvao.
Odor estranho. Sobre um disco de papel de fltro de 80
cm de dimetro, aplicar 5 mL da amostra. Deixar evaporar
espontaneamente. Aps a volatilizao da amostra no
deve ser observado odor estranho ao ter etlico.
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e
temperatura de 8 C a 15 C.
ROTULAGEM
O rtulo dever indicar o nome e a concentrao do
antioxidante no voltil, eventualmente utilizado.
CATEGORIA
Solvente.
ETINILESTRADIOL
Ethinylestradiolum
O H
H
H
H
CH
3
OH
CH
C
20
H
24
O
2
; 296,40
etinilestradiol; 03699
(17)-19-Norpregna-1,3,5(10)-trien-20-ino-3,17-diol
[57-63-6]
C
20
H
24
O
2
DESCRIO
amarelado, inodoro.
acetona, clorofrmio, dioxana, etanol e ter etlico. Solvel
em solues alcalinas diludas.
Faixa de fuso (5.2.2): 180 C a 186 C. Apresenta forma
polimorfa com faixa de fuso de 142 C a 146 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): 28,0 a 29,5, em
0,4% (p/v) em piridina.
IDENTIFICAO
etinilestradiol SQR, preparado de maneira idntica.
etanol, exibe mximo em 281 nm, idntico ao observado
no espectro de soluo similar de etinilestradiol SQR. Os
valores de A (1%, 1 cm) em 281 nm, calculados em relao
substncia dessecada, no diferem mais do que 3,0%.
D. Em tubo de ensaio, dissolver 1 mg da amostra em 1
mL de cido sulfrico. Desenvolve-se colorao vermelho-
alaranjada, que, sob a luz ultravioleta a 365 nm, apresenta
fuorescncia esverdeada. Adicionar 10 mL de gua.
Desenvolve-se colorao violeta e produz-se precipitado
de cor similar.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 2% (p/v) em etanol
lmpida (5.2.25).
slica-gel G, como suporte, e mistura de etanol e tolueno
descritas a seguir.
metanol e clorofrmio (10:90). Diluir para 10 mL com o
mesmo solvente, de modo a obter soluo a 20 mg/mL.
metanol e clorofrmio (10:90).
Soluo (3): dissolver 25 mg de etinilestradiol SQR em
mistura de metanol e clorofrmio (10:90). Diluir para 25
mL com o mesmo diluente, obtendo soluo a 1 mg/mL.
Soluo (4): dissolver 10 mg de estrona SQR em mistura
de metanol e clorofrmio (10:90) e diluir para 10 mL com
o mesmo solvente. Diluir 2 mL desta soluo para 10 mL
a e
943
mistura de metanol e clorofrmio (10:90), obtendo soluo
a 0,2 mg/mL.
secar ao ar e aquecer a 110 C por 10 minutos. Nebulizar a
placa quente com cido sulfrico metanlico SR. Aquecer
a placa novamente a 110 C por 10 minutos e examinar sob
luz ultravioleta (365 nm). Qualquer mancha correspondente
estrona no cromatograma obtido com a Soluo (1) no
mais intensa que aquela obtida no cromatograma com
a Soluo (4) (1%). Qualquer mancha secundria obtida
principal e da mancha correspondente estrona, no mais
intensa que aquela obtida no cromatograma com a Soluo
(5) (1%).
amostra, em estufa a 105 C, por 3 horas. No mximo
1,0%.
DOSEAMENTO
A. Pesar, exatamente, cerca de 0,2 g da amostra. Dissolver
em 40 mL de tetraidrofurano e adicionar 5 mL de nitrato
de prata a 10% (p/v). Titular com hidrxido de sdio 0,1
mg de C
20
H
24
O
2
.
de 50 mg da amostra, dissolver em etanol e completar o
volume para 100 mL com o mesmo solvente. Diluir com
etanol at concentrao de 0,01% (p/v). Preparar soluo
em 281 nm, utilizando etanol para ajuste do zero. Calcular
o teor de C
20
H
24
O
2
da amostra para balo volumtrico de 25 mL, dissolver e
completar o volume com Fase mvel. Transferir 10 mL
para balo volumtrico de 50 mL, diluir e completar o
volume com Fase mvel, obtendo soluo a 0,2 mg/mL.
Soluo padro: dissolver, exatamente, cerca de 10 mg de
etinilestradiol SQR em Fase mvel e diluir para 50 mL,
obtendo soluo a 0,2 mg/mL.
20
H
24
O
2

ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Contraceptivo.
ETIONAMIDA
Ethionamidum
N
NH
2
S
CH
3
C
8
H
10
N
2
S; 166,24
etionamida; 03704
2-Etil-4-piridinacarbotioamida
[536-33-4]
C
8
H
10
N
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino amarelo ou pequenos
cristais amarelos, com odor de sulfeto leve a moderado.
metanol, ligeiramente solvel em etanol, pouco solvel em
propilenoglicol, clorofrmio e ter etlico
Faixa de fuso (5.2.2): 158 C a 164 C.
IDENTIFICAO
da amostra, dessecada por 18 horas sobre slica-gel e
sob presso reduzida, dispersa em brometo de potssio,
relativas daqueles observados no espectro de etionamida
SQR, preparado de maneira idntica.
e
B. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa de
220 nm a 350 nm, da soluo amostra obtida no mtodo B. do
Doseamento exibe mximos e mnimos somente nos mesmos
comprimentos de onda da soluo similar de etionamida SQR.
C. Dissolver 10 mg da amostra em 5 mL de metanol
e adicionar 5 mL de nitrato de prata 0,1 M. Forma-se
precipitado marrom escuro.
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de clorofrmio e
metanol (90:10), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, 10 L de cada uma das solues, descritas a seguir.
secar ao ar, examinar sob luz ultravioleta (254 nm).
mais que uma mancha secundria obtida com a Soluo (1)
mximo 0,5%.
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
de cido actico glacial e titular com cido perclrico 0,1
mg de C
8
H
10
N
2
S.
(p/v). Preparar soluo padro de etionamida SQR na
C
8
H
10
N
2
S na amostra a partir das leituras obtidas.
Em recipientes bem fechados, em local fresco.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibacteriano (tuberculosttico).
ETIONAMIDA COMPRIMIDOS
8
H
10
N
2
S. Os comprimidos
devem ser revestidos (revestimento aucarado).
IDENTIFICAO
do p equivalente a 0,125 g de etionamida com 25 mL de
ter etlico por 2 ou 3 minutos. Filtrar e evaporar o fltrado a
temperatura ambiente. Secar o resduo sobre slica-gel, sob
presso reduzida. O espectro de absoro no infravermelho
(5.2.14) do resduo, disperso em brometo de potssio,
relativas daqueles observados no espectro da etionamida
C. Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade do
p equivalente a 1 g de etionamida com 50 mL de metanol
e fltrar utilizando papel de fltrao lenta. Evaporar o
fltrado em banho de vapor at secura. O resduo obtido
CARACTERSTICAS
Teste de desintegrao (5.1.4.1). Utilizar cido clordrico
0,1 M. No mximo 30 minutos.
contendo 60 mL de metanol e aguardar desintegrao total
do comprimido. Deixar em ultrassom por 10 minutos, agitar
o mesmo solvente. Filtrar, desprezando os primeiros 20 mL.
Realizar diluies sucessivas at concentrao de 0,001%
(p/v), utilizando metanol como solvente. Preparar soluo
padro nas mesmas condies. Medir as absorvncias em
290 nm (5.2.14), utilizando metanol para ajuste do zero.
a e
945
8
H
10
N
2
S nos comprimidos a
Tempo: 45 minutos
M at concentrao adequada. Medir as absorvncias em
8
H
10
N
2
S dissolvida no
meio, comparando as leituras obtidas com a de soluo
de etionamida padro na concentrao de 0,001% (p/v),
declarada de C
8
H
10
N
2
DOSEAMENTO
50 mg de etionamida para balo volumtrico de 100 mL e
adicionar 80 mL de metanol. Deixar em ultrassom por 10
minutos, agitar mecanicamente por 15 minutos e completar
o volume com o mesmo solvente. Filtrar, desprezando os
primeiros 20 mL. Transferir 2 mL do fltrado para balo
volumtrico de 100 mL, completar o volume com metanol
e homogeneizar. Preparar soluo padro nas mesmas
condies. Medir as absorvncias das solues em 290
quantidade de C
8
H
10
N
2
S nos comprimidos a partir das
leituras obtidas.
ROTULAGEM
a
f
947
fATOR IX DA COAGULAO
SANGUNEA HUMANA LIOfILIZADO
fator IX Coagulationis Sanguinis Humanus
Cryodesiccatus
O Fator IX da coagulao sangunea de origem humana
lioflizado a frao proteica do plasma que contm o Fator
IX da coagulao sangunea de origem humana, obtido por
um mtodo que permite a separao do Fator IX dos outros
Fatores do Complexo Protrombnico Humano (Fatores II,
VII e X). preparado a partir de plasma humano, de acordo
com a monografa Plasma Humano para Fracionamento.
A atividade da preparao, reconstituda de acordo com as
indicaes que fguram no rtulo, no inferior a 20 UI de
Fator IX por mililitro.
PRODUO
O mtodo de preparao deve ser desenvolvido de modo
a manter a integridade funcional do Fator IX, minimizar
a ativao de qualquer Fator de coagulao (para limitar
o potencial trombognico) e deve incluir uma ou vrias
etapas que demonstrem eliminar ou inativar os agentes
infecciosos conhecidos e no conhecidos. Se forem
acrescentadas substncias para inativao viral na etapa
de produo, um procedimento de purifcao deve ser
validado de modo a demonstrar que a concentrao dessas
substncias foram reduzidas a um nvel aceitvel, e que tais
resduos no comprometem a segurana da preparao. A
atividade especfca no deve ser inferior a 50 U.I. de Fator
IX por miligrama de protenas totais, antes de eventual
adio de um estabilizante protico.
A frao que contm o Fator IX solubilizada em diluente
apropriado. Pode ser adicionado heparina, antitrombina e
outras substncias auxiliares, como um estabilizante. No
devem ser adicionados conservantes antimicrobianos.
A soluo fltrada atravs de um fltro esterilizante
e distribuda assepticamente nos frascos fnais, e
imediatamente congelada. Em seguida, so lioflizados
sendo os frascos fechados a vcuo ou sob gs inerte.
A regularidade do mtodo de produo avaliada por
procedimentos analticos apropriados durante os estudos
de desenvolvimento entre os quais fguram habitualmente
os seguintes:
determinao do Fator IX;
determinao dos Fatores de Coagulao Ativados;
determinao da atividade dos Fatores de coagulao
II, VII e X que no superior a 5% da atividade do
Fator IX.
IDENTIFICAO
A preparao a ser examinada deve ser reconstituda
conforme declarado no rtulo, imediatamente antes da
identifcao (exceto teste de solubilidade e gua) testes
e ensaio.
A. Proceder aos ensaios de precipitao com a amostra,
usando uma gama apropriada de soros especfcos
de espcies animais. O ensaio realizado com soros
especfcos que contenham protenas plasmticas das
espcies animais que normalmente se usam no pas para
a preparao de produtos de origem biolgica. A amostra
contm protenas de origem humana e no precipita com os
soros especfcos que contenham protenas plasmticas de
outras espcies animais.
B. A determinao da atividade coagulante do Fator IX
contribui para identifcar a amostra.
CARACTERSTICAS
Aspecto. P ou slido frivel, branco ou amarelo claro.
pH (5.2.19). O pH da amostra est compreendido entre 6,5
e 7,5.
Osmolalidade (5.2.28). No mnimo 240 mosmol/kg.
Solubilidade. Ao contedo de um recipiente da amostra
juntar o volume de diluente indicado no rtulo e agitar
suavemente durante 10 minutos, temperatura ambiente.
H dissoluo total, formando-se uma soluo lmpida ou
ligeiramente opalescente e incolor.
ENSAIOS FSICO-QUMICOS
gua. Determinar por um mtodo apropriado, como
Determinao da gua pelo mtodo semimicro (5.2.20.3),
a Perda por dessecao (5.2.9) ou por Espectrofotometria
de absoro no infravermelho (5.2.14.). No mais que
2,0%.
Pirognios (5.5.2.1). A amostra cumpre o teste. Injetar em
cada coelho por quilograma de massa corporal, um volume
de soluo da amostra reconstituda que corresponda a no
mnimo 30 UI do Fator IX e no mximo 50 UI do Fator IX.
Esterilidade (5.5.3.2.1). A amostra cumpre o teste.
Toxicidade (5.5.2.3). A amostra cumpre o teste.
DOSEAMENTO
fator IX de Coagulao Sangunea
Proceder conforme descrito em Determinao do Fator
IX de coagulao sangunea (5.5.1.4). A atividade
determinada no inferior a 80% nem superior a 125% da
atividade declarada. O intervalo de confana (P = 0,95) da
atividade determinada no ultrapassa 80% a 125%.
fatores de Coagulao Ativados
Proceder conforme descrito em Determinao de fatores
de coagulao ativados (5.5.1.8). Se necessrio, dilua a
amostra para obter uma soluo contendo 20 UI do Fator
IX por mililitro. Para cada uma das diluies, o tempo de
coagulao no inferior a 150 segundos.
e
Heparina
Caso tenha sido adicionada heparina durante a produo,
determinar sua quantidade de acordo com a monografa
Determinao da heparina nos fatores de coagulao
(5.5.1.1). A amostra no contm mais do que a quantidade
de heparina indicada no rtulo e no superior a 0,5 UI de
heparina por unidade internacional de Fator IX.
Protenas totais
Se necessrio, deve-se diluir a preparao reconstituda
com uma soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) de
forma a obter-se uma soluo que contenha cerca de 15 mg
de protenas em 2 mL. Num tubo de centrifuga de fundo
redondo deve-se introduzir 2,0 mL desta soluo. Adicionar
2 mL de soluo de molibdato de sdio a 7,5% (p/v) e 2
mL de uma mistura de cido sulfrico isento de nitrognio
e gua (1:30). Agitar e centrifugar durante 5 minutos. O
lquido sobrenadante deve ser decantado permitindo-se
que o tubo seja enxuto sobre um papel de fltro. Determinar
o nitrognio no resduo pelo mtodo de Determinao de
nitrognio pelo mtodo de Kjeldahl (5.3.3.2). Calcular o
teor em protenas devendo ser o resultado multiplicado por
6,25. Este mtodo pode no ser aplicvel a certos produtos,
notadamente aos que no contm estabilizante proteico
como a albumina, sendo utilizado outro mtodo validado
para o doseamento da protena.
ARMAZENAMENTO
Ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
No rtulo indica-se no mnimo: o nmero de unidades
internacionais do Fator IX em cada frasco; a quantidade de
protenas em cada frasco; o nome e a quantidade de qualquer
substncia adicionada, incluindo a heparina, quando
aplicvel; o nome e o volume do diluente necessrio para
reconstituir a preparao; as condies de conservao; o
prazo de validade; que a transmisso de agentes infecciosos
no pode ser totalmente excluda quando se administram
medicamentos derivados do sangue ou do plasma humanos
(este ltimo pode ser indicado alternativamente no texto
de bula).
fATOR VII DA COAGULAO
SANGUNEA HUMANA LIOfILIZADA
fator VII Coagulationis Humanus
Cryodesiccatus
O Fator VII da coagulao sangunea de origem humana
lioflizado uma frao proteica do plasma que contm o
Fator VII (um derivado glicoprotico de cadeia simples),
podendo igualmente conter pequenas quantidades da sua
forma ativada (o derivado de 2 cadeias ou Fator VIIa),
assim como os Fatores II, IX, e X, a Protena C e a Protena
S. preparado a partir de plasma humano de acordo com
a monografa Plasma Humano para Fracionamento. A
atividade da preparao, reconstituda de acordo com as
indicaes que fguram no rtulo, no inferior a 15 UI de
Fator VII por mililitro.
O mtodo de preparao deve ser desenvolvido de modo
a manter a integridade funcional do Fator VII, minimizar
a ativao de qualquer fator de coagulao (para limitar
o potencial trombognico) e deve incluir uma ou vrias
etapas que demonstrem eliminar ou inativar os agentes
infecciosos conhecidos e no conhecidos. Se forem
acrescentadas substncias para inativao viral na etapa
de produo, um procedimento de purifcao deve ser
validado de modo a demonstrar que as concentraes dessas
substncias foram reduzidas a um nvel aceitvel, e que tais
resduos no comprometem a segurana da preparao. A
atividade especifca no inferior a 2 UI de Fator VII por
miligrama de protenas totais, antes da eventual adio de
um estabilizante protico.
A frao que contm o Fator VII dissolvida em um diluente
apropriado. Pode ser adicionado heparina, antitrombina e
outras substncias auxiliares, como um estabilizante.
No se adiciona qualquer conservante antimicrobiano.
A soluo fltrada atravs de um fltro esterilizante e
depois distribuda assepticamente nos frascos fnais e
imediatamente congelada. Em seguida lioflizada e os
frascos so fechados sob vcuo ou sob gs inerte.
demonstrada a regularidade do mtodo de produo, no
que diz respeito s atividades dos Fatores II, IX e X da
preparao, expressas em unidades internacionais e em
relao atividade do Fator VII.
demonstrada a regularidade do mtodo de produo, no
que diz respeito atividade do Fator VIIa da preparao.
A atividade do Fator VIIa pode ser determinada, com
um Fator Tissular recombinante solvel que no ativa o
Fator VII em Fator VIIa, mas que tem funo de cofator
especfco do Fator VIIa: aps incubao da mistura do
Fator Tissular recombinante solvel e fosfolipdios com
uma diluio da amostra e do plasma defciente em Fator
VII, junta-se cloreto de clcio e determina-se o tempo,
de coagulao; o tempo de coagulao inversamente
proporcional atividade do Fator VIIa da amostra.
IDENTIFICAO
Reconstituir a amostra como indicado no rtulo,
imediatamente antes de realizar a identifcao, o ensaio
(com exceo da solubilidade e da gua) e o doseamento.
A. Realizar com a amostra, ensaios de precipitao com
uma srie adequada de soros especfcos para as vrias
espcies. Recomenda-se que o ensaio seja realizado com
soros especfcos de protenas plasmticas de cada uma das
espcies domsticas normalmente utilizadas na preparao
de produtos biolgicos. Demonstra-se que a preparao
contm protenas de origem humana e apresenta resultados
negativos com soros especfcos para as protenas
plasmticas de outras espcies.
B. A determinao do Fator VII contribui para identifcar
a preparao.
a e
949
CARACTERSTICAS
Aspecto. P ou slido frivel, podendo ser branco, amarelo
claro, verde ou azul.
pH (5.2.19). O pH da amostra est compreendido entre 6,5
e 7,5.
Osmolalidade (5.2.28). A osmolalidade da amostra no
inferior a 240 mosmol/kg.
Solubilidade. Ao contedo de um frasco da amostra juntar
o volume do diluente indicado no rtulo, temperatura
recomendada, e agitar suavemente por no mximo 10
minutos. A amostra dissolve-se completamente formando
uma soluo lmpida ou ligeiramente opalescente que pode
ser corada.
gua. Determinar por um mtodo apropriado, como
a Perda por dessecao (5.2.9) ou por Espectrofotometria
de absoro no infravermelho (5.2.14.). No mais que 2%.
Pirognios (5.5.2.1). Injetar, em cada coelho, por
quilograma de massa corporal, um volume da amostra
correspondente a, pelo menos, 30 UI do Fator VII. Cumpre
o teste.
Toxicidade (5.5.2.3). Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
fator VII de Coagulao Sangunea
VII de coagulao sangunea (5.5.1.5). A atividade
determinada no inferior a 80% nem superior a 125% da
atividade declarada. O intervalo de confana (P = 0,95) da
atividade determinada no ultrapassa 80% a 125%.
fatores de Coagulao Ativados
de coagulao ativados (5.5.1.8). Para cada uma das
diluies, o tempo de coagulao no inferior a 150
segundos.
Heparina
Se tiver sido adicionada heparina durante a produo,
determinar a sua quantidade de acordo com a monografa
Determinao da heparina nos fatores de coagulao
(5.5.1.1). A amostra no contm mais do que a quantidade
de heparina indicada no rtulo e no superior a 0,5 UI de
heparina por unidade internacional de Fator VII.
Protenas totais
Se necessrio, deve-se diluir a preparao reconstituda
com uma soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) de
forma a obter-se uma soluo que contenha cerca de 15 mg
de protenas em 2 mL. Num tubo de centrifuga de fundo
redondo deve-se introduzir 2 mL desta soluo. Adicionar
2 mL de soluo de molibdato de sdio a 7,5% (p/v) e 2
que o tubo seja enxuto sobre um papel de fltro. Determinar
o nitrognio no resduo pelo mtodo de Determinao de
nitrognio pelo mtodo de Kjeldahl (5.3.3.2). Calcular o
teor em protenas devendo ser o resultado multiplicado por
6,25.
Trombina
Se a amostra contiver heparina, determinar a quantidade
presente, como se indica na Determinao da heparina nos
fatores de coagulao (5.5.1.1), e neutralize-a, juntando
sulfato de protamina (10 g de sulfato de protamina
neutralizam 1 UI de heparina). Utilizar 2 tubos de ensaio
e em cada um misturar volumes iguais da amostra
reconstituda e de soluo de fbrinognio a 0,3% (p/v).
Mantenha um dos tubos a 37 C durante 6 horas e o outro
temperatura ambiente durante 24 horas. Num terceiro
tubo, misturar um volume da soluo de fbrinognio com
um volume de soluo de trombina humana contendo 1 UI
por mililitro e colocar o tubo num banho-maria a 37 C.
No se produz coagulao nos tubos da amostra. Produz-se
coagulao em 30 segundos no tubo que contm trombina.
ARMAZENAMENTO
Ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
No rtulo indica-se no mnimo: o nmero de unidades
internacionais do Fator VII em cada frasco; a quantidade
de protenas em cada frasco; o nome e a quantidade de
qualquer substncia adicionada, incluindo a heparina,
quando aplicvel; o nome e o volume do diluente
necessrio para reconstituir a preparao; as condies
de conservao; o prazo de validade; que a transmisso
de agentes infecciosos no pode ser totalmente excluda
quando se administram medicamentos derivados do sangue
ou do plasma humanos (este ltimo pode ser indicado
alternativamente no texto de bula).
fATOR VIII DA COAGULAO
SANGUNEA HUMANA LIOfILIZADO
factor VIII Coagulationis Sanguinis Humanus
Cryodesiccatus
O Fator VIII da coagulao sangunea de origem humana
lioflizado uma frao proteica do plasma que contm
uma glicoprotena chamada Fator VIII da coagulao e,
f
em funo do mtodo de purifcao, quantidades variveis
do Fator de Von Willebrand. preparado a partir de uma
mistura de plasma obtida de doadores sadios.
A atividade da preparao, reconstituda de acordo com
as indicaes que fguram no rtulo do fabricante, no
inferior a 20 UI de Fator VIII:C por mililitro.
O mtodo de preparao inclui duas ou mais etapas
de inativao viral que demonstrem a eliminao ou
inativao dos agentes infecciosos virais conhecidos. Se
forem utilizadas substncias para inativar os vrus durante
a produo, o processo de purifcao posterior deve
demonstrar, mediante validao, que a concentrao das
substncias inativadoras foi eliminada ou reduzida a nveis
aceitveis pelas normas e que tais eventuais resduos no
possam vir a trazer riscos aos pacientes.
A atividade especfca no inferior a 1 UI de Fator VIII:C
por miligrama de protenas totais, antes de eventual adio
de um estabilizante proteico. O Fator VIII lioflizado
dissolvido em diluente especifcado pelo fabricante. Podem
ser adicionadas substncias auxiliares, como por exemplo
um estabilizante. No so adicionados conservantes
antimicrobianos. A soluo fltrada de modo a
proporcionar reteno de bactrias, sendo ento distribuda
assepticamente nos recipientes fnais e imediatamente
congelada. A mesma lioflizada e os recipientes so
fechados sob vcuo ou sob gs inerte.
Validao aplicada aos produtos com indicao
de possurem uma atividade do tipo fator de Von
Willebrand. Nos produtos destinados ao tratamento da
doena de Von Willebrand, tem sido demonstrado que o
processo de fabricao d origem a um produto com uma
composio constante no que diz respeito ao Fator de Von
Willebrand. Esta composio pode ser demonstrada de vrias
maneiras. Por exemplo, o nmero e os vrios multmeros
do Fator de Von Willebrand pode ser determinado por
eletroforese em gel de agarose (aproximadamente 1% de
agarose) em presena de dodecilsulfato de sdio (DSS),
com ou sem anlise de Western Blot, utilizando uma
mistura de plasma humano normal como referncia. A
visualizao do perfl multimrico pode ser realizada por
uma tcnica imunoenzimtica e a avaliao quantitativa
por densitometria ou outros mtodos apropriados.
Produtos que apresentam focos ou partculas depois da
reconstituio para uso. Se nfmas partculas ou focos
permanecem aps a preparao reconstituda, durante o
estudo de validao deve ser demonstrado que a potncia
no signifcativamente infuenciada aps a fltrao da
preparao.
IDENTIFICAO
Atende ao teste Fator VIII da coagulao sangunea
humana lioflizado descrito em Doseamento.
CARACTERSTICAS
Aspecto. P ou slido frivel branco ou ligeiramente
amarelo e higroscpico.
pH (5.2.19). 6,5 a 7,5.
Osmolalidade (5.2.28). No mnimo 240 mosmol/kg.
Solubilidade. Ao contedo de um frasco contendo a
amostra, adicionar um volume do diluente indicado no rtulo
temperatura recomendada e agitar suavemente por no
mximo 10 minutos. A amostra dissolve-se completamente
formando uma soluo lmpida ou ligeiramente opalescente
e incolor ou ligeiramente amarelada. Quando o frasco do
produto apresentar nfmas partculas ou focos aps a
reconstituio, deve-se reconstituir e fltrar a preparao,
como descrito no rtulo. A soluo fltrada clara ou
ligeiramente opalescente.
gua. Determinar por um dos mtodos a seguir:
Perda por dessecao (5.2.9) ou por Espectrofotometria
de absoro no infravermelho (5.2.14). No mximo 2,0%.
Pirognios (5.5.2.1). Cumpre o teste. Injetar, em cada
coelho, por quilograma de massa corporal, um volume
correspondente a, no mnimo, 30 UI do Fator VIII:C.
DOSEAMENTO
Antgenos de superfcie da Hepatite B
Proceder conforme descrito em Mtodos imunoqumicos
(5.6). Examinar a amostra reconstituda. No se detecta o
antgeno de superfcie da Hepatite B.
fator de Von Willebrand Humano
A. Proceder conforme descrito em Determinao do Fator
de Von Willebrand Humano (5.5.1.2).
B. Determinar a atividade do cofator da ristocetina.
Preparar diluies apropriadas da amostra reconstituda
e da preparao de referncia, utilizando como diluente
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) e albumina humana
a 5% (p/v). Adicionar, a cada preparao, uma quantidade
apropriada de uma mistura contendo plaquetas humanas
estabilizadas e ristocetina A. Misturar numa lmina de
vidro com movimentos circulares suaves durante 1 minuto.
Deixar em repouso durante 1 minuto e efetuar a leitura do
resultado em fundo escuro e iluminao lateral. A ltima
diluio que apresentar uma aglutinao nitidamente visvel
indicar o titulo da amostra. Como testemunho negativo
deve ser utilizado o diluente. A atividade determinada de
no mnimo 60% e no mximo 140% da atividade aprovada
para o produto.
a
f
951
Fator VIII da coagulao sangunea humana lioflizado
VIII da coagulao sangunea humana lioflizado (5.5.1.7).
A atividade determinada no inferior a 80% nem superior
a 120% da atividade indicada. Cumpre o teste.
Hemaglutininas anti-A e anti-B
Proceder conforme descrito em Determinao de ttulos de
hemaglutininas Anti-A e Anti-B (5.5.1.9). Diluir a amostra
reconstituda com uma soluo de cloreto de sdio a 0,9%
(p/v) at uma concentrao de 3 UI/mL. As diluies a
1/64 no apresentam sinais de aglutinao. Cumpre o teste.
Protenas totais
Proceder conforme descrito em Determinao de nitrognio
pelo mtodo de Kjeldahl (5.3.3.2). Se necessrio, diluir a
preparao reconstituda com uma soluo de cloreto de
sdio a 0,9% (p/v) de forma a obter uma soluo contendo
cerca de 15 mg de protenas em 2 mL. A um tubo de
centrifuga de fundo redondo, adicionar 2 mL desta soluo,
2 mL de soluo de molibdato de sdio a 7,5% (p/v) e
2 mL de mistura de cido sulfrico isento de nitrognio
que o tubo seja enxuto sobre um papel de fltro. Calcular
o teor em protenas multiplicando o resultado por 6,25.
Este mtodo pode no ser aplicvel a certos produtos,
notadamente aos que no contm estabilizante proteico
como a albumina, sendo utilizado outro mtodo validado
para este doseamento.
ARMAZENAMENTO
Ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. No rtulo indica-se: o
nmero de unidades internacionais do Fator VIII:C e,
nos casos apropriados, do Fator de Von Willebrand; a
quantidade de protenas em cada recipiente; o nome e a
quantidade de qualquer substncia adicionada; o nome e o
volume do liquido necessrio para reconstituir a preparao;
as condies de conservao; o prazo de validade; que a
transmisso de agentes infecciosos no pode ser totalmente
excluda quando se administram medicamentos derivados
do sangue ou do plasma humanos (este ltimo pode ser
indicado alternativamente no texto de bula).
fENINDIONA
Phenindionum
O
O
C
15
H
10
O
2
; 222,24
fenindiona; 03938
2-Fenil-1H-indeno-1,3(2H)-diona
[83-12-5]
C
15
H
10
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, quase inodoro
e inspido, ou cristais sedosos, brancos ou levemente
amarelados.
Solubilidade. Insolvel em gua, facilmente solvel em
clorofrmio, pouco solvel em etanol e ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2). 148
o
C a 151
o
C, com decomposio.
IDENTIFICAO
observados no espectro de fenindiona SQR, preparado de
maneira idntica.
B. Dissolver 0,1 g da amostra em 30 mL de etanol, com
auxlio de aquecimento, se necessrio. Resfriar, transferir
com o mesmo solvente. Diluir sucessivamente at
0,0004% (p/v) com hidrxido de sdio 0,1 M. O espectro
de absoro no ultravioleta (5.2.14) desta soluo, na faixa
de 200 a 400 nm, exibe mximos em 278 nm e 330 nm. A
absorvncia em 278 nm de 0,54 e em 330 nm de 0,16.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel F
254
, como suporte, e hidroxitolueno butilado a
0,02% (p/v) em mistura de acetato de etila-cido actico
glacial (20:4) como fase mvel. Aplicar, separadamente,
Soluo (1): soluo da amostra a 10 mg/mL em cloreto
de metileno.
f
intensa que a mancha principal obtida com a Soluo (2)
(2,0%). No mais do que uma mancha secundria obtida
no cromatograma com a Soluo (1) mais intensa que a
mancha principal obtida com a Soluo (3) (0,5%).
o
C, por 2 horas. No
mximo 1,0%.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar, exatamente,
cerca de 50 mg da amostra, dissolver em hidrxido de
sdio 0,1 M e diluir para 250 mL com o mesmo solvente.
Diluir, sucessivamente, em hidrxido de sdio 0,1 M at
concentrao de 0,0004% (p/v). Medir as absorvncias das
solues resultantes em 278 nm, utilizando hidrxido de
sdio 0,1 M para ajuste do zero. Calcular o teor de C
15
H
10
O
2

na amostra considerando A (1%, 1 cm) = 1310, em 278 nm,
em hidrxido de sdio 0,1 M.
CLASSE TERAPUTICA
Anticoagulante.
fENITONA
Phenytoinum
N
NH
H
O O
C
15
H
12
N
2
O
2
; 252,27
fenitona; 03953
5,5-Difenil-2,4-imidazolidinadiona
[57-41-0]
C
15
H
12
N
2
O
2
DESCRIO
branco.
etanol quente, pouco solvel em etanol frio, clorofrmio e
ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 295 C a 298 C.
IDENTIFICAO
fenitona SQR, preparado de maneira idntica.
D. Solubilizar 10 mg da amostra em 1 mL de gua e 50 L
de soluo concentrada de amnia. Aquecer at incio de
ebulio. Adicionar 50 L de sulfato cprico pentaidratado
a 5% (p/v) em amnia 2 M. Agitar. Produz-se precipitado
rseo.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Pesar, exatamente, cerca de 1 g
da amostra. Adicionar 45 mL de gua e aquecer ebulio
durante 2 minutos. Resfriar e fltrar. Lavar o fltro com gua
isenta de dixido de carbono. Reunir as guas de lavagem
gua isenta de dixido de carbono. Homogeneizar. Pipetar
10 mL da soluo obtida para erlenmeyer. Adicionar 0,15
mL de vermelho de metila SI. Titular com cido clordrico
0,01 M at colorao vermelha. No mximo 0,5 mL do
titulante gasto para viragem do indicador. Pipetar 10 mL
da soluo inicial para erlenmeyer. Adicionar 0,15 mL de
azul de bromotimol SI. Titular com hidrxido de sdio
0,01 M at colorao azul. No mximo 0,5 mL do titulante
gasto para viragem do indicador.
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de dioxana e
hexano (30:75), como fase mvel. Antes do teste, lavar
a placa com a fase mvel e deixar secar ao ar. Aplicar,
Soluo (1): soluo da amostra a 40 mg/mL em mistura de
acetona e metanol (50:50).
a
f
953
Soluo (2): soluo da amostra a 2 mg/mL em mistura de
Soluo (3): soluo de fenitona SQR a 2 mg/mL em
mistura de acetona e metanol (50:50).
Soluo (4): soluo de benzofenona a 80 g/mL em
mistura de acetona e metanol (50:50).
Soluo (5): soluo de benzil a 80 g/mL em mistura de
Soluo (6): soluo da amostra a 0,4 mg/mL em mistura
de acetona e metanol (50:50).
Soluo (7): mistura de 1 mL da Soluo (4) e 1 mL da
Soluo (5).
Procedimento: desenvolver o cromatograma. Remover
a placa, deixar secar sob corrente de ar frio durante 2
minutos. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). Qualquer
mancha correspondente benzofenona ou ao benzil obtida
no cromatograma com a Soluo (1) no mais intensa
que as manchas obtidas com a Soluo (4) e a Soluo (5)
(0,2%). Qualquer outra mancha obtida no cromatograma
com a Soluo (1), diferente das manchas correspondentes
fenitona, benzofenona ou benzil, no mais intensa que
aquela obtida com a Soluo (6) (1%). O teste somente
vlido se o cromatograma obtido com a Soluo (7)
apresenta duas manchas principais nitidamente separadas.
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo III. Determinar
em 2 g da amostra. Utilizar 2 mL da soluo padro de
No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
g da amostra, transferir para erlenmeyer de 250 mL e
dissolver em 50 mL de dimetilformamida. Titular com
metxido de sdio 0,1 M SV, determinando o ponto fnal
as correes necessrias. Cada mL de metxido de sdio
15
H
12
N
2
O
2
.
de 1,5 mL/minuto.
Dissolver em metanol, completar o volume com o mesmo
solvente e homogeneizar. Transferir 10 mL da soluo
obtida para balo volumtrico de 100 mL, completar o
volume com Fase mvel e homogeneizar.
Soluo padro: dissolver quantidade. exatamente pesada,
de fenitona SQR em Fase mvel, com auxlio de ultrassom,
Soluo de resoluo: preparar soluo contendo,
aproximadamente, 1,5 mg/mL de benzona em Fase mvel.
Misturar 1 mL da soluo obtida com 9 mL da Soluo
padro e homogeneizar.
Injetar 20 L da Soluo de resoluo. Os tempos de
reteno relativos so cerca de 0,75 para a fenitona e 1,0
para a benzona, e a resoluo entre os picos de fenitona e
benzona no menor que 1,5. Injetar replicatas de 20 L
da Soluo padro. O desvio padro relativo das reas de
replicatas dos picos registrados no maior que 1,0%, e o
fator de cauda para o pico de fenitona no maior que 1,5.
15
H
12
N
2
O
2

ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticonvulsivante.
fENITONA COMPRIMIDOS
15
H
12
N
2
O
2
.
IDENTIFICAO
CARACTERSTICAS
Testes de dureza (5.1.3.1). Cumpre o teste.
f
Meio de dissoluo: tampo tris 0,05 M pH 9,0, 900 mL
Tempo: 120 minutos
do meio de dissoluo e fltrar, descartando os primeiros
mililitros. Pipetar 10 mL do fltrado e transferir para balo
mvel, obtida em Doseamento, e homogeneizar. Preparar
a soluo padro pesando, exatamente, cerca de 75 mg de
fenitona SQR. Transferir para balo volumtrico de 25 mL,
dissolver em metanol e completar o volume com o mesmo
solvente. Pipetar 1 mL da soluo obtida, transferir para
o Meio de dissoluo. Pipetar 10 mL da soluo anterior
e diluir para 25 mL com Fase mvel. Proceder conforme
descrito em Doseamento.
declarada de C
15
H
12
N
2
O
2
DOSEAMENTO
de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de gua, metanol, acetonitrila,
trietilamina a 1% (v/v) e cido actico (500:270:230:5:1).
Transferir quantidade do p equivalente a 50 mg de fenitona
para balo volumtrico de 100 mL, adicionar cerca de 70
mL da Fase mvel e deixar em ultrassom por 10 minutos.
Completar o volume com o mesmo solvente e homogeneizar.
fenitona SQR e transferir para balo volumtrico de 100
mL. Dissolver em, no mximo, 5 mL de metanol com
auxlio de ultrassom. Completar o volume com a Fase mvel
e homogeneizar.
da coluna no deve ser menor que 6500 pratos tericos/
metro. O fator de cauda no maior que 1,5. O desvio
no maior que 2,0%.
C
15
H
12
N
2
O
2
ROTULAGEM
fENITONA SDICA SOLUO
INJETVEL
15
H
11
N
2
NaO
2
.
IDENTIFICAO
A. A mancha principal do cromatograma da Soluo (1),
CARACTERISTICAS
pH (5.2.19). 10,0 a 12,3.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de dioxana e
hexano (30:75), como fase mvel. Antes do teste, lavar
a placa com a fase mvel e deixar secar ao ar. Aplicar,
Soluo (1): diluir volume da soluo injetvel em metanol
de modo a obter soluo de fenitona sdica a 20 mg/mL.
Soluo (2): soluo a 20 mg/mL de fenitona sdica SQR
em metanol.
Soluo (3): soluo a 0,1 mg/mL de benzofenona em
etanol.
Soluo (4): soluo a 0,1 mg/mL de benzil em etanol.
Qualquer mancha correspondente benzofenona ou ao
benzil obtida no cromatograma com a Soluo (1) no
a
f
955
mais intensa que as manchas obtidas nos cromatogramas
com a Soluo (3) e a Soluo (4) (0,5%).
mg de fenitona sdica.
DOSEAMENTO
de 1,5 mL/minuto.
equivalente a 0,25 g de fenitona sdica para balo
mvel e homogeneizar. Transferir 5 mL para balo
de fenitona sdica SQR na Fase mvel e diluir de modo a
2,0%.
C
15
H
11
N
2
NaO
2
na soluo injetvel a partir das respostas
ROTULAGEM
fENOBARBITAL
Phenobarbitalum
N
N O
O
C H
3
O
H
H
C
12
H
12
N
2
O
3
; 232,24
fenobarbital; 03960
5-Etil-5-fenil-2,4,6(1H,3H,5H)-pirimidinatriona
[50-06-6]
C
12
H
12
N
2
O
3
DESCRIO
incolores inodoros.
solvel em etanol, ligeiramente solvel em ter etlico.
Solvel em carbonatos e hidrxidos diludos.
Faixa de fuso (5.2.2): 174 C a 178 C.
IDENTIFICAO
realizados os testes B., C., D., E. e F. Os testes de
identifcao C. e D. podem ser omitidos se forem
realizados os testes A., B., E. e F.
amostra, dessecada e dispersa em brometo de potssio,
relativas daqueles observados no espectro de fenobarbital
faixa de 200 a 400 nm, de soluo obtida no mtodo B.
de Doseamento, exibe mximos e mnimos idnticos aos
254

como suporte, e mistura de amnia 13,5 M, etanol
e clorofrmio (5:15:80), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): soluo a 1 mg/mL da amostra em etanol.
f
Soluo (2): soluo a 1 mg/mL de fenobarbital SQR em
etanol.
D. A relao entre os tempos de reteno do pico principal
e do pico do padro interno no cromatograma da soluo
amostra, obtida no mtodo C. de Doseamento, corresponde
relao entre os tempos de reteno do pico principal e
do pico do padro interno no cromatograma da soluo
padro.
E. Responde reao de barbitrico sem substituinte
no nitrognio (5.3.1.1). Utilizar soluo a 1 mg/mL em
metanol.
f. Agitar 0,1 g da amostra com 4 mL de hidrxido de
sdio 0,1 M e 1 mL de gua e fltrar. Adicionar a 2 mL do
fltrado, 0,25 mL de cloreto de mercrio 0,2 M. Produz-se
precipitado branco que se dissolve pela adio de 5 mL de
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 10% (p/v) em mistura de
hidrxido de sdio 2 M e gua (2:3) mantem-se lmpida
(5.2.25).
Acidez. Ebulir, durante 2 minutos, 1 g da amostra em 50 mL
de gua. Resfriar e fltrar. Adicionar, a 10 mL do fltrado,
0,15 mL de vermelho de metila SI. A soluo torna-se
amarelo-alaranjada. Titular com hidrxido de sdio 0,1 M
SV. No mais que 0,1 mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV
necessrio para produzir colorao amarela ntida.
slica-gel GF
254
como suporte, e mistura de amnia 13,5 M,
etanol e clorofrmio (5:15:80), como fase mvel. Aplicar,
recentemente preparadas, descritas a seguir:
Soluo (2): diluir 0,5 mL da Soluo (1) para 100 mL
com etanol.
Nebulizar com difenilcarbazona mercrica SR, deixar secar
ao ar e nebulizar com hidrxido de potssio etanlico SR
recm preparada. Aquecer a placa a 105 C por 5 minutos
e examinar imediatamente. Qualquer mancha secundria
obtida com a Soluo (1) diferente da mancha principal,
(0,5%).
Perda por dessecao. (5.2.9). Dessecar em estufa, a 105
C, por 2 horas. No mximo 1%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
A. Pesar, exatamente, cerca de 0,4 g de amostra, transferir
para erlenmeyer de 125 mL e dissolver em 50 mL de
etanol, previamente neutralizado com hidrxido de sdio
0,1 M SV, utilizando seis gotas de timolftalena SI. Titular
com hidrxido de sdio 0,1 M SV. Cada mL de hidrxido
de sdio 0,1 M SV equivale a 23,220 mg de C
12
H
12
N
2
O
3
.
de 50 mg de amostra, transferir para balo volumtrico de
50 mL, dissolver em 5 mL de etanol e completar o volume
com tampo borato pH 9,6. Diluir, sucessivamente,
solvente. Preparar soluo padro na mesma concentrao,
utilizando o mesmo solvente e fenobarbital SQR ao invs
da amostra. Medir a absorvncia das solues resultantes
em 240 nm, utilizando tampo borato pH 9,6 para o ajuste
12
H
12
N
2
O
3
na amostra, a partir
comprimento e 4,6 mm de dimetro interno, empacotada com
slica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano (5 m);
fuxo de Fase mvel de 1,2 mL/minuto.
Tampo acetato pH 4,5: dissolver cerca de 6,6 g de acetato
de sdio tri-hidratado e 3 mL de cido actico glacial em
1000 mL de gua e ajustar, se necessrio, com cido actico
glacial para pH de 4,5 0,1.
Fase mvel: mistura de Tampo acetato pH 4,5 e metanol
(56:44).
Diluente: misturar Tampo acetato pH 4,5 e metanol (1:2)
Soluo padro interno: dissolver quantidade exatamente
pesada da cafena SQR em Diluente de modo a obter
soluo a 0,6 mg/mL.
da amostra para balo volumtrico de 100 mL. Acrescentar
10 mL de Soluo padro interno e cerca de 60 mL de
Diluente. Levar a banho de ultrassom por 15 minutos.
Completar o volume com Diluente.
de fenobarbital SQR para balo volumtrico de 100 mL.
Acrescentar 10 mL de Soluo padro interno e cerca de
60 mL de Diluente. Levar a banho de ultrassom por 15
minutos e completar o volume com Diluente, de modo a
obter soluo contendo 0,6 mg/mL de fenobarbital.
de reteno relativos so cerca de 0,4 para a cafena e 1,0
para o fenobarbital. O fator de cauda no maior que 2,0. A
a
f
957
resoluo entre fenobarbital e cafena no deve ser menor
que 1,2. O desvio padro relativo das reas de replicatas
medir as reas sob os picos correspondentes fenobarbital
e cafena. Calcular o teor de C
12
H
12
N
2
O
3
na amostra a partir
das respostas obtidas para a relao fenobarbital/cafena
com a Soluo padro e com a Soluo amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticonvulsivante, hipntico, sedativo.
fENOBARBITAL COMPRIMIDOS
12
H
12
N
2
O
3
.
IDENTIFICAO
quantidade de p equivalente a 60 mg de fenobarbital para
bquer, adicionar 50 mL de clorofrmio, homogeneizar
e fltrar. Evaporar at secura. Secar o resduo em estufa
a 105 C por 2 horas. O resduo responde ao teste A. de
Identifcao da monografa de Fenobarbital.
B. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14) na
no mtodo A. de Doseamento, exibe mximos e mnimos
C. A relao entre os tempos de reteno do pico principal
e do pico do padro interno no cromatograma da Soluo
amostra, obtida no mtodo B. de Doseamento, corresponde
relao entre os tempos de reteno do pico principal e
do pico do padro interno no cromatograma da Soluo
padro.
D. O resduo obtido no teste A. de Identifcao funde
entre 174 C e 178 C.
CARACTERSTICAS
contendo 5 mL de gua e aguardar desintegrao total do
comprimido. Acrescentar 5 mL de etanol e 60 mL de tampo
borato pH 9,6. Deixar em ultrassom por 15 minutos. Agitar,
mecanicamente, por 15 minutos, completar o volume com
o tampo. Prosseguir conforme descrito no mtodo A. de
Doseamento a partir de Homogeneizar e fltrar.
Tempo: 45 minutos
de dissoluo e diluir com tampo borato pH 9,6 at
nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente para o ajuste
12
H
12
N
2
O
3
dissolvida
de fenobarbital SQR na concentrao de 0,001% (p/v),
preparada em tampo borato pH 9,6.
declarada de C
12
H
12
N
2
O
3
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
quantidade do p equivalente a 50 mg de fenobarbital para
balo volumtrico de 50 mL, dissolver em 5 mL de etanol
e acrescentar 35 mL de tampo borato pH 9,6. Deixar em
ultrassom por 15 minutos, completar o volume com o
tampo. Homogeneizar e fltrar. Diluir, sucessivamente,
com o mesmo solvente, at concentrao de 0,001%
utilizando o mesmo solvente. Medir a absorvncia das
solues resultantes no comprimento de onda de 240 nm,
utilizando tampo borato pH 9,6 para o ajuste do zero.
12
H
12
N
2
O
3
nos comprimidos, a
(5.2.17.4). Proceder conforme descrito no mtodo C. de
Doseamento da monografa de Fenobarbital. Preparar a
f
fenobarbital para balo volumtrico de 50 mL, acrescentar
4 mL de Soluo de padro interno e 30 mL de Diluente.
Deixar em ultrassom por 15 minutos. Agitar mecanicamente
por 15 minutos, completar o volume com o Diluente,
medir as reas sob os picos correspondentes ao fenobarbital
e cafena. Calcular a quantidade de C
12
H
12
N
2
O
3
nos
comprimidos a partir das respostas obtidas para a relao
fenobarbital/cafena, com a Soluo padro e a Soluo
amostra.
ROTULAGEM
fENOBARBITAL SOLUO ORAL
12
H
12
N
2
O
3
. Contm agentes
estabilizantes e alcalinizantes apropriados.
IDENTIFICAO
A. Transferir volume da soluo oral, equivalente a 0,4 g de
fenobarbital, para funil de separao de 125 mL contendo
20 mL de gua, adicionar 5 mL de hidrxido de sdio M,
homogeneizar e extrair com duas pores de 10 mL de
clorofrmio, descartando a camada orgnica. Adicionar 5
mL de cido clordrico 3 M e extrair com duas pores
de 25 mL de clorofrmio, fltrar, recolhendo os extratos
orgnicos em bquer. Evaporar at secura. Secar o resduo
em estufa a 105 C por 2 horas. O resduo responde ao teste
A. de Identifcao da monografa de Fenobarbital.
B. A relao entre os tempos de reteno do pico principal
amostra, obtida em Doseamento, corresponde relao
entre os tempos de reteno do pico principal e do pico do
padro interno no cromatograma da Soluo padro.
C. O resduo obtido no teste A. de Identifcao funde
entre 174 C e 178 C (5.2.2).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 9,2 a 10,2.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito no mtodo C. de Doseamento
da monografa de Fenobarbital. Preparar a Soluo
Soluo amostra: transferir volume da soluo oral,
equivalente a 0,6 g de fenobarbital, para balo volumtrico
de 100 mL e completar o volume com o Diluente. Transferir
10 mL para balo volumtrico de 50 mL, acrescentar 4 mL
de Soluo de padro interno e completar o volume com
o Diluente.
medir as reas sob os picos correspondentes ao fenobarbital
e cafena. Calcular a quantidade de C
12
H
12
N
2
O
3
na
soluo oral a partir das respostas obtidas para a relao
fenobarbital/cafena, com a Soluo padro e a Soluo
amostra.
ROTULAGEM
fENOL
Phenolum
OH
C
6
H
6
O; 94,11
fenol; 03968
Fenol
[108-95-2]
C
6
H
6
O, em relao substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais aciculares incolores ou
massa cristalina branca, odor caracterstico, corrosivo,
a
f
959
irritante para mucosas e pele, deliquescente. Escurece
quando exposto ao ar e luz.
Solubilidade. Solvel em gua, muito solvel em etanol,
ter etlico, clorofrmio, glicerol e leos fxos e volteis,
insolvel em ter de petrleo.
Temperatura de congelamento (5.2.4): no mnimo 39 C.
IDENTIFICAO
A. A 5 mL de uma soluo aquosa da amostra a 2% (p/v),
adicionar uma gota de soluo aquosa de cloreto frrico a
5% (p/v). Desenvolve-se colorao violeta. Adicionar 10
mL de etanol a 90% (v/v). A colorao se torna amarela.
B. Adicionar gua de bromo SR a uma soluo aquosa da
amostra a 1% (p/v). Produz-se um precipitado branco que
se dissolve imediatamente, mas que se torna permanente
aps adio de excesso de reagente.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo de 1 g da amostra em 15
mL de gua lmpida (5.2.25).
Acidez. A 5 mL de uma soluo de 1 g da amostra em 15
mL de gua, adicionar uma gota de alaranjado de metila SI.
Produz-se colorao amarela.
gua (5.2.20.1). No mximo 0,5%.
Resduo por evaporao. Pesar, exatamente, cerca de 5 g
da amostra, evaporar em banho-maria e secar a 105 C por
1 hora. A massa do resduo no deve ser superior a 2,5 mg.
DOSEAMENTO
gua e completar o volume para 100 mL com o mesmo
solvente. Transferir 25 mL da soluo para um erlenmeyer
com tampa e adicionar 50 mL de bromo 0,05 M SV e 5 mL
de cido clordrico. Tampar, agitar ocasionalmente durante
20 minutos e deixar ao abrigo da luz por 15 minutos.
Adicionar 5 mL de soluo de iodeto de potssio a 20%
(p/v) e agitar suavemente. Titular com tiossulfato de sdio
0,1 M SV. Adicionar 3 mL de soluo de amido SI e 10 mL
de clorofrmio quando a colorao da soluo permanecer
levemente amarelada. Continuar a titulao com agitao
vigorosa at o desaparecimento da cor azul. Realizar
mL de bromo 0,05 M SV equivale a 1,569 mg de C
6
H
6
O.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Antissptico, conservante e antipruriginoso.
fENOXIMETILPENICILINA POTSSICA
Phenoxymethylpenicillinum kalicum
S
N
H H
O
N
CH
3
CH
3
COOK
O
H
O
C
16
H
17
KN
2
O
5
S; 388,48
fenoximetilpenicilina potssica; 03996
Sal de potssio do cido (2S,5R,6R)-3,3-dimetil-7-oxo-6-
[(fenoxiacetil)amino]-4-tia-1-azabiciclo[3.2.0]heptano-2-
carboxlico (1:1)
[132-98-9]
Apresenta teor de, no mnimo, 1380 UI e, no mximo, 1610
UI de fenoximetilpenicilina (C
16
H
18
N
2
O
5
S) por miligrama,
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco, inodoro.
Solubilidade. Muito solvel em gua, pouco solvel em
etanol e insolvel em acetona.
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao B. e C. podem ser omitidos se
forem realizados os testes A. e D. O teste de identifcao
A. pode ser omitido se forem realizados os testes B., C. e D.
observados no espectro de fenoximetilpenicilina potssica
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel H, como
(p/v) com o pH ajustado para 5,0 com cido actico glacial
descritas a seguir.
f
Soluo (2): soluo a 5 mg/mL de fenoximetilpenicilina
potssica SQR em gua.
Soluo (3): soluo contendo 5 mg/mL de benzilpenicilina
potssica SQR e 5 mg/mL de fenoximetilpeniclina
potssica SQR em gua.
secar ao ar e expor a vapores de iodo at o aparecimento
das manchas. Examinar sob luz visvel. A mancha principal
intensidade quela obtida com a Soluo (2). O teste no
vlido a menos que o cromatograma da Soluo (3)
apresente duas manchas nitidamente separadas.
C. Transferir 2 mg da amostra para um tubo de ensaio.
Umedecer com 0,05 mL de gua e adicionar 2 mL da
mistura de 2 mL de soluo de formaldedo com 100 mL
de cido sulfrico. Agitar o tubo. Desenvolve-se colorao
marrom avermelhada. Imergir o tubo em banho-maria
durante 1 minuto. A colorao marrom-avermelhada torna-
se mais escura.
D. Responde s reaes do on potssio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
3% (p/v).
Limite de cido fenoxiactico. Proceder conforme
mantido temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel de
1,0 mL/minuto.
Tampo fosfato pH 6,6: transferir 250 mL de fosfato de
potssio monobsico 0,2 M e 82 mL de hidrxido de sdio
0,2 M para balo volumtrico de 1000 mL. Completar
volume com gua e homogeneizar.
glacial (65:35:1). Fazer os ajustes necessrios.
Soluo padro: soluo de cido fenoxiactico a 0,1 mg/
mL em Tampo fosfato pH 6,6.
Soluo amostra: soluo da amostra a 20 mg/mL em
Tampo fosfato pH 6,6. Utilizar a soluo no mesmo dia.
cauda no maior que 1,5 e o desvio padro relativo das
reas de replicatas sob os picos registrados no maior
que 2,0%.
reas sob os picos. No mximo 0,5% de cido fenoxiactico.
Limite de 4-hidroxifenoximetilpenicilina. Utilizar
o cromatograma obtido no Doseamento e calcular a
porcentagem de 4-hidroxifenoximetilpeniclina na amostra
empregando a frmula: 100r
h
/r
s
, onde r
h
a rea sob o
pico de 4-hidroxifenoximetilpenicilina e r
s
a soma das
reas sob os picos de 4-hidroxifenoximetilpenicilina e
fenoximetilpenicilina. No mximo 5,0%.
amostra. Dessecara em estufa a 105 C. No mximo 1,5%.
DOSEAMENTO
de antibiticos (5.5.3.3.1) pelo mtodo de difuso em agar,
Micro-organismo: Staphylococcus aureus ATCC 6538P.
manuteno do micro-organismo e preparo do inculo;
meio de cultura nmero 2, para a camada base.
da amostra em Tampo fosfato de potssio a 1%, estril,
pH 6,0 (Soluo 1) para obter soluo a 100 UI/mL. Diluir,
sucessivamente, at as concentraes 0,2 UI/mL, 0,4 UI/
mL e 0,8 UI/mL, utilizando Tampo fosfato de potssio a
1%, estril, pH 6,0 (Soluo 1) para completar o volume.
de fenoximetilpenicilina potssica em Tampo fosfato de
potssio a 1%, estril, pH 6,0 (Soluo 1) para obter soluo
a 100 UI/mL. Diluir, sucessivamente, at as concentraes
0,2 UI/mL, 0,4 UI/mL e 0,8 UI/mL, utilizando Tampo
fosfato de potssio a 1%, estril, pH 6,0 (Soluo 1) para
completar o volume.
inculo a 1% e proceder conforme descrito em Ensaio
microbiolgico de antibiticos (5.5.3.3.1), adicionando
aos cilindros, 0,2 mL das solues recentemente
preparadas. Calcular a potncia da amostra, em UI de
fenoximetilpenicilina por miligrama, a partir da potncia
do padro e das respostas obtidas com as solues padro
e amostra.
m), mantido temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel
de 1,0 mL/minuto.
glacial (650:350:5,75). Fazer os ajustes necessrios.
da amostra em Fase mvel para obter soluo a 2,5 mg/mL.
de fenoximetilpenicilina potssica SQR em Fase mvel
para obter soluo a 2,5 mg/mL.
a
f
961
Soluo de resoluo: preparar soluo em Fase mvel
contendo aproximadamente 2,5 mg de benzilpenicilina
potssica e 2,5 mg de fenoximetilpenicilina por mililitro.
benzilpenicilina e 1,0 para fenoximetilpenicilina.
A resoluo entre os picos de benzilpenicilina e
fenoximetilpenicilina no menor que 3,0. O desvio padro
maior que 1,0%.
as reas sob o maior pico de fenoximetilpenicilina e de
qualquer pico com tempo de reteno relativo ao pico
principal de fenoximetilpenicilina de aproximadamente
0,4. Calcular o teor em UI de fenoximetilpenicilina
(C
16
H
18
N
2
O
5
S) por miligrama da amostra a partir das
respostas obtidas para a soma das reas sob os picos com a
Em recipientes hermticos e protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibitico.
fIBRINOGNIO HUMANO LIOfILIZADO
fibrinogenum Humanum Cryodesiccatus
O fbrinognio humano lioflizado contm a frao
solvel do plasma humano que, por adio da trombina
transformado em fbrina. O fbrinognio deve ser obtido
a partir do Plasma Humano para Fracionamento. A
preparao pode conter aditivos, como sais, tampes ou
estabilizantes. A preparao reconstituda com o volume
de diluente indicado no rtulo deve conter no mnimo, 10
g/L de fbrinognio.
O mtodo de preparao compreende uma ou vrias
etapas que demonstraram eliminar agentes infecciosos
conhecidos; tem sido demonstrado que os resduos, no
produto fnal das substncias eventualmente utilizadas nos
processos destinados inativao viral ou nos processos
de purifcao devidamente validados posteriores no tm
qualquer efeito indesejvel nos pacientes.
No se deve adicionar ao plasma nenhum antibitico
e a preparao no deve conter nenhum conservante
antimicrobiano.
O mtodo de preparao deve ser tal que a atividade
especfca (teor em fbrinognio em relao ao teor em
protenas totais) no inferior a 80%. Se for adicionado
preparao um estabilizante proteico (por exemplo, a
albumina humana) essa deve satisfazer s exigncias para
a atividade especfca do fbrinognio antes da adio do
estabilizante.
Durante o fracionamento do plasma humano, poder ser
obtido ao mesmo tempo o fbrinognio e a albumina. A
determinao da atividade especfca da albumina deve
ser ento, determinada por um mtodo imunoqumico
apropriado e a quantidade determinada deve ser subtrada
da quantidade de protenas totais para o clculo de atividade
especfca.
IDENTIFICAO
Reconstituir a amostra, segundo as indicaes que constam
no rtulo, realizar ensaios de precipitao com vrios soros
especfcos de diferentes espcies. recomendvel que o
ensaio seja realizado com soros especfcos das protenas
plasmticas de cada espcie de animal domstico,
correntemente, utilizado para a preparao de produtos
de origem biolgica. A amostra deve conter protenas de
origem humana e d resultados negativos com os soros
especfcos das protenas plasmticas de outras espcies.
O doseamento da amostra contribui para identifcao da
preparao.
CARACTERSTICAS
Aspecto. P ou slido frivel, branco, ou amarelo plido.
pH (5.2.19). 6,5 a 7,5.
Osmolalidade (5.2.28). A Osmolalidade da amostra
reconstituda no inferior a 240 mosmol/kg.
Solubilidade. Adicionar o volume de diluente, indicado no
rtulo, ao contedo do frasco. temperatura de 20 C a 25
C, o fbrinognio dissolve-se em 30 minutos, originando
uma preparao quase incolor e ligeiramente turva.
Estabilidade da preparao. Aps reconstituio da
preparao temperatura de 20 C a 25 C, deixar em
repouso. No deve aparecer qualquer sinal de gelifcao
no decurso dos 60 minutos que seguem reconstituio.
gua. Determinar por um dos mtodos: Determinao
da gua pelo mtodo semimicro (5.2.20.3), Perda por
dessecao (5.2.9) ou por Espectrofotometria de absoro
no infravermelho (5.2.14). No mximo 2,0%.
Pirognios (5.5.2.1). Injetar, por quilograma de massa
corporal, em cada coelho, um volume correspondente a
30 mg, no mnimo, de fbrinognio calculado em relao
quantidade indicada no rtulo. Cumpre o teste.
Toxicidade (5.5.2.3). Cumpre o teste.
f
DOSEAMENTO
Antgenos de superfcie da Hepatite B
Examinar a amostra reconstituda conforme descrito em
Mtodos Imunoqumicos (5.6). No deve ser detectado o
antgeno de superfcie da Hepatite B.
fibrinognio
Misturar 0,2 mL da amostra reconstituda com 2 mL de
tampo apropriado (pH 6,6 a 6,8) contendo uma quantidade
sufciente de trombina (cerca de 3 UI/mL) e clcio (0,05
mol/L). Manter a mistura temperatura de 37 C durante
20 minutos, separar o precipitado por centrifugao (5000
g por 20 minutos) e lavar, cuidadosamente, com uma
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v). Determinar o teor
de nitrognio pelo mtodo Determinao de nitrognio
pelo mtodo de Kjeldahl (5.3.3.2) e calcular a quantidade
de fbrinognio (protenas coagulveis) multiplicando o
resultado por 6,0. O teor , no mnimo, 70,0% e, no mximo,
130,0% da quantidade indicada no rtulo. Tambm,
esto disponveis no mercado, conjuntos destinados s
determinaes quantitativas, manuais ou automatizadas,
de fbrinognio em plasma citratado por mtodo de
formao do cogulo. Esses conjuntos baseiam-se numa
quantidade tima de trombina bovina que adicionada a
um plasma diludo a 1:10. O tempo de coagulao medido
deve ser inversamente relacionado concentrao de
fbrinognio na amostra testada. Esses conjuntos devem
estar registrados no rgo competente e devidamente
validados em conformidade com os padres do National
Committee for Clinical Standards: Collection Transport
and Processing of Blood Specimens for Coagulation
Testing and Performance of Coagulation Assays. 1991.
NCCLS Document H21 - A2 podem ser utilizados em
unidades hemoterpicas que produzam crioprecipitados a
partir do plasma fresco congelado e tenham necessidade de
quantifcar o fbrinognio plasmtico.
ARMAZENAMENTO
Ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
No rtulo, deve indicar-se a quantidade de fbrinognio
contida no frasco, o nome e o volume do diluente a
ser utilizado para reconstituir a preparao, nos casos
apropriados, o nome e a quantidade de estabilizante
proteico utilizado na preparao.
fITA ADESIVA
Consiste em tecido e/ou flme uniformemente revestido em
uma das faces, por uma camada adesiva sensvel presso.
CARACTERSTICAS
Dimenses. Determinar o comprimento da fta adesiva. No
mnimo 98,0% do valor declarado. Determinar a largura
em cinco pontos uniformemente espaados ao longo da
linha central da fta e calcular a mdia. No mnimo, 95,0%
do valor declarado.
Resistncia trao (5.7.1). Determinar a resistncia
trao da fta aps desenrolar e condicionar durante um
perodo mnimo de quatro horas em atmosfera padro de
65% 2% de umidade relativa, a 21 C 1,1 C, utilizando
um dispositivo tipo pndulo. Prosseguir conforme descrito
em Resistncia trao. A fta fabricada a partir de tecido
dever apresentar resistncia trao de, no mnimo, 20,41
kg por 2,54 cm de largura. A fta fabricada a partir de flme
polimrico dever apresentar resistncia trao de, no
mnimo, 3 kg por 2,54cm de largura.
Adeso superfcie. A partir da amostra fabricada em tecido,
cortar uma faixa de 2,54 cm de largura e aproximadamente
15 cm de comprimento. A uma das extremidades da fta, de
superfcie igual a 12,90 cm
2
, 2,54 cm de largura por 5,08 cm
de comprimento, aplicar presso equivalente a 850 g contra
uma superfcie limpa de vidro, plstico ou ao inoxidvel.
Exercer a presso com auxlio de um rolo de borracha, por
duas vezes consecutivas a uma velocidade de 30 cm por
minuto. Ajustar a temperatura da superfcie e da fta em
37 C (5.7.1) e conduzir o teste imediatamente conforme
descrito em Resistncia trao. Utilizar um dispositivo
tipo pndulo, sendo a ruptura efetuada paralelamente ao
urdume e superfcie. O valor mdio de pelo menos 10
testes dever ser, no mnimo, 18 kg.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Aplicvel quando a fta
declarada estril. Cumpre o teste.
Em embalagens bem fechadas, protegidas da luz e do calor
excessivo.
A fta adesiva, quando declarada estril ou esterilizada,
dever ser acondicionada de modo que sua esterilidade seja
mantida contra contaminao posterior.
ROTULAGEM
a
f
963
fITOMENADIONA
Phytomenadionum
O
O
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
C
31
H
46
O
2
; 450,70
ftomenadiona; 04060
2- Met i l - 3- [ ( 2E, 7R, 11R) - 3, 7, 11, 15- t et r amet i l - 2-
hexadecen-1-il]-1,4-naftalenodiona
[84-80-0]
Fitomenadiona uma mistura dos ismeros E e Z que
contm, no mnimo, 97,0% e, no mximo, 103,0% de
C
31
H
46
O
2
. Contm, no mximo, 21,0% do ismero Z.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido lmpido, amarelo a mbar,
muito viscoso, oleoso, inodoro ou quase inodoro. estvel
ao ar, mas decompe-se pela exposio luz.
com etanol absoluto, benzeno, clorofrmio, ter etlico e
leos vegetais, ligeiramente solvel em etanol.
ndice de refrao (5.2.6): 1,523 a 1,526.
IDENTIFICAO
A. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) do flme
fno da amostra apresenta mximos de absoro somente
ftomenadiona SQR, preparado de maneira idntica.
n-hexano, exibe mximos e mnimos somente nos mesmos
comprimentos de onda de soluo de ftomenadiona SQR,
preparada de maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. A soluo a 5% (v/v) em etanol
absoluto neutra ao papel tornassol.
Menadiona. Misturar cerca de 20 mg da amostra com 0,5
mL de mistura de volumes iguais de amnia SR e metanol.
Adicionar uma gota de cianoacetato de etila e agitar
levemente. No se desenvolve colorao prpura ou azul.
Limite de (Z)-ftomenadiona. Proceder conforme descrito
em Doseamento. Calcular o teor de (Z)-ftomenadiona na
amostra a partir da frmula:
100 a
z
/ (a
z
+a
e
),
em que
a
z
= rea sob o pico de (Z)-ftomenadiona obtida com a
Soluo amostra;
a
e
= rea sob o pico de (E)-ftomenadiona obtida com a
Soluo amostra.
No mximo 21,0%.
DOSEAMENTO
de alta efcincia (5.2.17.4). Proteger as solues da
exposio luz direta. Utilizar cromatgrafo provido
com slica (5 m), mantida a 30 C; fuxo da Fase mvel
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de n-hexano e lcool n-amlico
(2000:1,5).
Soluo de padro interno: dissolver quantidade,
exatamente pesada, de benzoato de colesterila em Fase
mvel, de modo a obter soluo a 2,5 mg/mL.
Soluo amostra: transferir, exatamente, cerca de 60 mg da
amostra para balo volumtrico de 50 mL e dissolver em
20 mL de Fase mvel. Completar o volume com o mesmo
solvente e homogeneizar. Transferir 4 mL da soluo para
Fase mvel e homogeneizar. Transferir 10 mL da soluo
obtida e 7 mL da Soluo padro interno para balo
de ftomenadiona SQR para balo volumtrico de 50 mL
e dissolver em 20 mL de Fase mvel. Completar o volume
com o mesmo solvente e homogeneizar. Transferir 4 mL
da soluo para balo volumtrico de 50 mL, completar
o volume com Fase mvel e homogeneizar. Transferir 10
mL da soluo obtida e 7 mL da Soluo de padro interno
de reteno relativos so cerca de 0,7 para benzoato de
colesterila, 0,9 para (Z)-ftomenadiona e 1,0 para (E)-
ftomenadiona. A resoluo entre (Z)-ftomenadiona e
(E)-ftomenadiona no menor que 1,5. O desvio padro
maior que 2,0%.
31
H
46
O
2

na amostra a partir das respostas obtidas para a relao
(rea de (Z)-ftomenadiona + rea de (E)-ftomenadiona)
/ rea de benzoato de colesterol, com a Soluo padro e
Soluo amostra.
f
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-hemorrgico.
fLUCONAZOL
fluconazolum
N
N
N
O H
F
F
N
N
N
C
13
H
12
F
2
N
6
O; 306,27
fuconazol; 04109
-(2,4-Difluorfenil)--(1H-1,2,4-triazol-1-ilmetil)-1H-
1,2,4-triazol-1-etanol
[86386-73-4]
C
13
H
12
F
2
N
6
DESCRIO
inodoro.
em metanol, solvel em etanol e acetona, ligeiramente
solvel em lcool isoproplico e clorofrmio, pouco
solvel em tolueno. Solvel em solues diludas de cidos
minerais e hidrxidos alcalinos.
Faixa de fuso (5.2.2): 138 C a 140 C.
IDENTIFICAO
fuconazol SQR, preparado de maneira idntica.
de 200 nm a 400 nm, de soluo a 0,02% (p/v) da amostra
em hidrxido de sdio 0,1 M, exibe mximo em 261 nm,
idntico ao observado no espectro de soluo similar de
fuconazol SQR.
C. Dissolver 50 mg da amostra em 1 mL de acetona.
Adicionar, sob agitao, cinco a oito gotas de cido crmico
a 5% (p/v). Produz-se precipitado em cinco segundos.
D. Adicionar a 50 mg da amostra, 3 mL de cloreto frrico
a 1% (p/v) em cido actico glacial e agitar. Adicionar
cido sulfrico M cuidadosamente pelas paredes do tubo.
A colorao deve passar a alaranjado e amarelo.
ENSAIOS DE PUREZA
etanol. Adicionar 5 mL de gua, homogeneizar e proceder
conforme descrito em Ensaio limite para ferro, Mtodo III.
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o resduo obtido no
teste de Cinzas sulfatadas e proceder conforme descrito no
Mtodo III, a partir de adicionar 4 mL de cido clordrico
6 M.... Utilizar 2,5 mL de Soluo padro de chumbo (10
ppm Pb) para Preparao padro. No mximo 0,0025%
(25 ppm).
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
amostra e dissolver em 50 mL de cido actico glacial.
Titular com cido perclrico 0,1 M SV. Determinar o
ponto fnal potenciometricamente ou utilizando cloreto
de metilrosanilnio SI como indicador. Realizar ensaio em
13
H
12
F
2
N
6
O.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antifngico.
a
f
965
fLUCONAZOL CPSULAS
13
H
12
F
2
N
6
O.
IDENTIFICAO
A. Agitar quantidade do p equivalente a 10 mg de
fuconazol com 20 mL de metanol. Filtrar e evaporar
o fltrado at secura. O resduo responde ao teste A. de
Identifcao da monografa de Fluconazol.
B. Transferir quantidade do p equivalente a 0,1 g de
fuconazol para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar
70 mL de cido clordrico 0,1 M. Deixar em ultrassom por
homogeneizar e fltrar. Diluir com cido clordrico 0,1 M,
at concentrao de 0,02% (p/v). O espectro de absoro
no ultravioleta (5.2.14), na faixa de 200 nm a 400 nm, de
soluo a 0,02% (p/v) em cido clordrico 0,1 M, exibe
mximo em 261 nm, idntico ao observado no espectro de
soluo similar de fuconazol SQR.
C. Dissolver quantidade do p equivalente a 0,25 g da
amostra em 5 mL de acetona e fltrar. Adicionar, sob
agitao, cinco a oito gotas de cido crmico a 5% (p/v).
Produz-se precipitado em cinco segundos.
D. Adicionar 3 mL de cloreto frrico a 1% (p/v) em cido
actico glacial a uma quantidade do p equivalente a 50
mg de fuconazol e agitar. Adicionar cido sulfrico M
cuidadosamente pelas paredes do tubo. A colorao deve
passar a alaranjado e amarelo.
CARACTERSTICAS
TESTE DE DISSOLUO
Tempo: 30 minutos
dissoluo, fltrar e medir as absorvncias das solues
em 261 nm (5.2.14), utilizando cido clordrico 0,1 M para
o ajuste do zero. Calcular a quantidade de C
13
H
12
F
2
N
6
O
da soluo de fuconazol SQR na concentrao de 0,02%
declarada de C
13
H
12
F
2
N
6
DOSEAMENTO
remover o contedo e pes-las novamente. Homogeneizar
o contedo das cpsulas. Transferir quantidade do p
equivalente a 0,1 g de fuconazol para balo volumtrico
de 100 mL. Adicionar 70 mL de cido clordrico 0,1 M.
Deixar em ultrassom por 10 minutos, completar o volume
com o mesmo solvente, homogeneizar e fltrar. Diluir com
cido clordrico 0,1 M, at concentrao de 0,02% (p/v).
o mesmo solvente. Medir as absorvncias das solues
resultantes em 261 nm, utilizando cido clordrico 0,1 M
13
H
12
F
2
N
6
O
nas cpsulas a partir das leituras obtidas.
m), mantida a 30 C; fuxo da Fase mvel de 0,8 mL/
minuto.
Fase mvel: mistura de gua e acetonitrila (78:22).
Soluo amostra: pesar as cpsulas, remover o contedo
cpsulas. Transferir, exatamente, quantidade do p
equivalente a 50 mg de fuconazol para balo volumtrico
de 100 mL. Adicionar 70 mL de Fase mvel e deixar em
mesmo solvente, homogeneizar e fltrar.
de fuconazol SQR em Fase mvel de modo a obter soluo
a 0,5 mg/mL.
no maior que 2,0%.
C
13
H
12
F
2
N
6
O nas cpsulas a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
f
fLUNITRAZEPAM COMPRIMIDOS
16
H
12
FN
3
O
3
.
IDENTIFICAO
faixa de 200 nm a 400 nm, da soluo amostra obtida em
Doseamento, exibe mximos e mnimos idnticos aos
254
,
como suporte, e mistura de nitrometano, ter etlico,
n-heptano e amnia a 25% (v/v) (30:60:15:2,5), como fase
mvel. Aplicar, separadamente, a placa, 10 L de cada uma
quantidade do p equivalente a 20 mg de funitrazepam e
adicionar 20 mL de metanol, agitar e fltrar.
Soluo (2): soluo de funitrazepam SQR a 1 mg/mL em
metanol.
ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). Nebulizar
com soluo de hidrxido de sdio a 10% (p/v). A mancha
CARACTERSTICAS
Teste de dureza (5.1.3.1). Cumpre o test
individualmente, e transferir cada comprimido para tubo
de centrifugao, adicionar 5 mL de gua e deixar em
ultrassom at desintegrao do comprimido. Adicionar
25 mL de metanol, deixar em ultrassom por 3 minutos
e agitar por 10 minutos. Centrifugar por 10 minutos,
fltrar o sobrenadante em membrana com porosidade
de 0,45 m. Diluir, sucessivamente em metanol at a
concentrao de 0,0016% (p/v). Proceder conforme
descrito em Doseamento, a partir de Preparar soluo
padro.... Calcular a quantidade de C
16
H
12
FN
3
O
3
em cada
comprimido a partir das leituras obtidas.
Meio de dissoluo: fuido gstrico simulado, 900 mL
Tempo: 45 minutos
com slica quimicamente ligada a grupo octilsilano (5 m);
Fase mvel: transferir 670 mL de fosfato de potssio
monobsico 0,05 M para balo volumtrico de 1000 mL
e completar o volume com acetonitrila. Ajustar o pH da
soluo para 6,2 com soluo de hidrxido de potssio
0,25 M.
Soluo amostra: aps o teste, retirar alquota sufciente do
meio de dissoluo, fltrar, atravs de membrana 0,45 m,
resfriar e diluir no Meio de dissoluo, se necessrio, at a
concentrao de 1,1 g/mL.
funitrazepam SQR, transferir para balo volumtrico
de 250 mL, adicionar 100 mL de metanol e deixar
em ultrassom at completa dissoluo. Completar o
sucessivamente, no Meio de dissoluo de modo a obter
soluo a 1,1 g/mL.
padro e amostra, registrar os cromatogramas e medir a
rea sob os picos. Calcular a quantidade de C
16
H
12
FN
3
O
3
dissolvida no meio, a partir das respostas obtidas com a
declarada de C
16
H
12
FN
3
O
3
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir, exatamente,
para balo volumtrico de 100 mL, quantidade do p
equivalente a 16 mg de funitrazepam. Adicionar 10 mL
de gua e agitar at completa dissoluo. Completar o
volume com metanol, agitar, em agitador magntico,
por 20 minutos e fltrar, atravs de membrana 0,45 m.
Diluir, sucessivamente, em metanol, at a concentrao
concentrao, utilizando metanol como solvente. Medir
as absorvncias das solues resultantes em 309 nm
(5.2.14), utilizando metanol para ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
16
H
12
FN
3
O
3
nos comprimidos a partir das
leituras obtidas.
a
f
967
ROTULAGEM
fLUNITRAZEPAM SOLUO
INJETVEL
16
H
12
FN
3
O
3
. Soluo estril em
gua para injetveis ou em outro solvente adequado.
IDENTIFICAO
em Doseamento, exibe mximos e mnimos idnticos ao
observado no espectro da soluo padro.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel 60
GF
254
, como suporte, e mistura de clorofrmio, metanol
e hidrxido de amnio a 25% (v/v) (90:10:1), como fase
mvel. Aplicar, separadamente placa, 10 L de cada uma
Proceder ao abrigo da luz direta.
Soluo (1): diluir volume da soluo injetvel em etanol
de modo a obter concentrao de aproximadamente 0,5
mg/mL.
Soluo (2): soluo de funitrazepam SQR a 0,5 mg/mL
em etanol.
Nebulizar com iodeto de potssio e subnitrato de bismuto
SR. A mancha principal obtida com a Soluo (1)
com a Soluo (2). Podem aparecer outras manchas devido
presena dos excipientes.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3.9 a 4,7.
Teste de esterilidade (5.5.3..2.1). Cumpre o teste.
Pirognios (5.5.2.1). Cumpre o teste. Injetar 0,5 mL/
kg, empregando funitrazepam a 0,2 mg/mL em soluo
fsiolgica.
DOSEAMENTO
Transferir volume da soluo injetvel, equivalente
0,2 g de funitrazepam para balo volumtrico de 200
mL, dissolver e completar o volume com metanol.
Diluir, sucessivamente, com metanol at a concentrao
C
16
H
12
FN
3
O
3
na amostra, a partir das leituras obtidas.
ROTULAGEM
fLUOCINOLONA ACETONIDA
fluocinoloni acetonidum
O
O
O
CH
3
CH
3
CH
3
H
O H
C H
3
H F
F
O
OH
C
24
H
30
F
2
O
6
; 452,49
fuocinolona acetonida; 04159
(6,11,16)-6,9-Difluor-11,21-diidroxi-16,17-[(1-
metiletilideno)bis(oxi)]-pregna-1,4-dieno-3,20-diona
[67-73-2]
C
24
H
30
F
2
O
6
DESCRIO
branco. Apresenta polimorfsmo.
em acetona, etanol e metanol e ligeiramente solvel em
clorofrmio.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +98
o
a +108
o
, em relao
em metanol.
IDENTIFICAO
f
de fuocinolona acetonida SQR, preparado de maneira
idntica. Caso sejam observadas diferenas, dissolver a
amostra e o padro, separadamente, em etanol, evaporar o
solvente e traar novos espectros com os resduos.
254
,
como suporte, e mistura de nitrometano, cloreto de
metileno e metanol (50:50:1) como fase mvel. Aplicar,
Soluo (2): soluo a 5 mg/mL de fuocinolona acetonida
SQR em acetona.
ENSAIOS DE PUREZA
o
C, por 3 horas. No
mximo 1,0% para a forma anidra e no mximo 8,5% para
a forma hidratada.
DOSEAMENTO
de detector ultravioleta a 254 nm, coluna de 100 mm de
de 1 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila e tetraidrofurano
(77:13:10).
pesada, para balo volumtrico de 100 mL, dissolver em
23 mL de mistura de acetonitrila e tetraidrofurano (13:10),
completar o volume com gua e homogeneizar.
Soluo padro: transferir 20 mg de fuocinolona acetonida
SQR, exatamente pesada, para balo volumtrico de 100
mL, dissolver em 23 mL de mistura de acetonitrila e
tetraidrofurano (13:10), completar o volume com gua e
homogeneizar.
da coluna no menor que 3000 pratos tericos. O
registrados no maior que 3,0%. O fuxo da Fase mvel
pode ser ajustado para que o tempo de reteno do pico de
fuocinolona acetonida esteja entre 9 e 13 minutos.
24
H
30
F
2
O
6
na amostra
Soluo amostra.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. O rtulo deve indicar se a
forma da fuocinolona acetonida a anidra ou a hidratada.
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infamatrio esteroide.
fLUORESCENA SDICA
fluoresceinum natricum
O NaO ONa
O
O
C
20
H
10
Na
2
O
5
; 376,27
fuorescena sdica; 04167
Sal de sdio de 3,6-diidroxiespiro[isobenzofuran-
1(3H),9-[9H]xanten]-3-ona (2:1)
[518-47-8]
C
20
H
10
Na
2
O
5
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, vermelho-alaranjado,
inodoro e higroscpico.
solvel em etanol, praticamente insolvel em hexano e
IDENTIFICAO
A. A soluo aquosa a 0,05% (p/v) apresenta fuorescncia
verde-amarelada. A fuorescncia desaparece com a adio
de 0,1 mL de cido clordrico 2 M e reaparece com a adio
de 0,2 mL de hidrxido de sdio 2 M.
B. Adicionar uma gota de soluo a 0,05% (p/v) em papel
de fltro. Produz-se mancha amarela que, quando exposta
a vapores de bromo por 1 minuto e, em seguida, a vapores
de amnia, adquire colorao rosa intensa.
a
f
969
C. Calcinar 0,1 g da amostra em cadinho de porcelana.
Dissolver o resduo em 5 mL de gua e fltrar. A soluo
responde s reaes do on sdio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
2% (p/v).
Acrifavina. Dissolver 10 mg da amostra em 5 mL de gua
e adicionar algumas gotas de soluo aquosa de salicilato
de sdio a 10% (p/v). No ocorre formao de precipitado.
Zinco. Dissolver 0,1 g da amostra em 10 mL de soluo
saturada de cloreto de sdio. Adicionar 2 mL de cido
clordrico 3 M, agitar vigorosamente e fltrar. Adicionar
1 mL de ferrocianeto de potssio SR. No produzida
turbidez.
gua (5.2.20.1). No mximo 17,0%.
DOSEAMENTO
fuorescncia (5.2.15). Pesar, exatamente, cerca de 0,1 g da
amostra e dissolver em gua. Diluir quantitativamente com
o mesmo solvente, para obter soluo a 1 g/mL. Transferir
3 mL para balo volumtrico de 100 mL, adicionar 20 mL
de tampo borato pH 9,0 e completar o volume com gua,
de modo a obter soluo a 0,03 g/mL. Para preparo da
soluo padro, dissolver quantidade exatamente pesada
de diacetilfuorescena SQR em 10 mL de etanol, em balo
volumtrico de 100 mL. Adicionar 2 mL de hidrxido de
sdio 2,5 M e aquecer em banho-maria fervente por 20
minutos, com agitao. Resfriar e completar o volume com
gua. Diluir quantitativamente em gua, de modo a obter
soluo de fuorescena sdica a 1 g/mL. Transferir 3 mL
tampo borato pH 9,0 e completar o volume com gua,
de modo a obter soluo padro a 0,03 g/mL. Medir as
intensidades de fuorescncia das solues resultantes em
fuormetro, em comprimento de onde de excitao a 485
nm e emisso a 515 nm. Calcular o teor de C
20
H
10
Na
2
O
5

na amostra a partir das leituras obtidas. Cada mg de
diacetilfuorescena equivale a 0,9037 mg de fuorescena
sdica (C
20
H
10
Na
2
O
5
).
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Agente diagnstico.
fLUORETO DE SDIO
Natrii fuoridum
NaF; 41,99
fuoreto de sdio; 04170
Fluoreto de sdio
[7681-49-4]
Contm, no mnimo, 98,0% e, no mximo, 102,0% de NaF,
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, inodoro.
etanol.
IDENTIFICAO
A. Transferir 1 g da amostra para cadinho de platina, em
capela, e adicionar 15 mL de cido sulfrico. Cobrir com
uma pea de vidro lmpida e polida e aquecer em banho-
maria por 1 hora. Retirar a tampa de vidro, lavar com gua
e secar. A superfcie do vidro fca marcada.
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Dissolver 2 g da amostra em
40 mL de gua em cpsula de platina, adicionar 10 mL
de soluo saturada de nitrato de potssio, resfriar a
soluo a 0 C e adicionar 3 gotas de fenolftalena SI. Se
a soluo adquire colorao rosa, no mais que 0,5 mL
de cido sulfrico 0,05 M necessrio para viragem do
indicador. Se a soluo permanece incolor, no mais que
2 mL de hidrxido de sdio 0,1 M so necessrios para
desenvolvimento de colorao rosa persistente por 15
segundos.
fluorossilicato. Aquecer at ebulio a soluo
neutralizada obtida em Acidez ou alcalinidade e titular,
ainda quente, com hidrxido de sdio 0,1 M SV at
colorao rosa permanente. So necessrios, no mximo,
1,5 mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV.
Cloretos (5.3.2.1). Dissolver 0,3 g da amostra em 20 mL
de gua e adicionar 0,2 g de cido brico, 1 mL de cido
ntrico SR e 1 mL de nitrato de prata 0,1 M. Qualquer
turvao resultante no mais intensa do que a de um
padro preparado com 1 mL de cido clordrico 0,001 M,
utilizando os mesmos reagentes. No mximo 0,012% (120
ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Transferir 1 g da amostra para
cpsula ou cadinho de platina, adicionar 1 mL de gua
e 3 mL de cido sulfrico. Aquecer, em capela, a uma
temperatura to baixa quanto possvel, at que todo cido
f
sulfrico tenha sido expelido. Dissolver o resduo em 20 mL
de gua e neutralizar com hidrxido de amnio utilizando
fenolftalena SI. Adicionar 1 mL de cido actico glacial,
diluir com gua para 45 mL e fltrar. Prosseguir conforme
descrito em Mtodo I utilizando 30 mL do fltrado. No
mximo 0,003% (30 ppm).
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Pesar, exatamente, cerca de 80 mg da
amostra, adicionar 5 mL de anidrido actico, 20 mL de
cido actico glacial e aquecer brandamente at completa
dissoluo. Deixar esfriar e adicionar 20 mL de dioxana.
Adicionar 3 gotas de cloreto de metilrosanilnio SI e
titular com cido perclrico 0,1 M SV at colorao verde
esmeralda. Realizar ensaio em branco e fazer as correes
equivale a 4,199 mg de NaF.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Profltico dental.
fLUORETO DE SDIO SOLUO ORAL
quantidade declarada de NaF.
IDENTIFICAO
A. Transferir 0,1 mL da soluo oral para tubo de ensaio,
adicionar 0,1 mL de mistura de alizarina SI e nitrato de
zirconila a 0,1% (p/v) em cido clordrico 7 M (1:1).
Desenvolve-se colorao amarela.
B. S necessrio, reduzir o volume da soluo oral por
aquecimento em banho-maria at volume contendo
aproximadamente 10 mg de sdio por mililitro. A soluo
resultante responde s reaes do on sdio (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,5 a 7,0.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Proceder a uma determinao potenciomtrica com
eletrodo on-seletivo para fuoreto.
Tampo de fuoreto: a 500 mL de gua, adicionar 57 mL
de cido actico glacial, 58 g de cloreto de sdio e 4 g de
cido 1,2-cicloexileno-dinitrilo-tetractico (CDTA). Em
um banho de gua fria, adicionar lentamente, sob agitao,
soluo concentrada de hidrxido de sdio SR at pH entre
5,3 e 5,5. Transferir para um balo volumtrico de 1000
mL, completar o volume com gua e homogeneizar.
Soluo amostra: diluir a soluo oral em gua por um
fator de 100 vezes.
Soluo padro: preparar a soluo estoque de referncia
de fuoreto a 100 mg/L em gua, utilizando fuoreto de sdio
grau analtico. Construir a curva analtica com as solues
de referncia de fuoreto nas seguintes concentraes: 0,25
mg/L, 0,5 mg/L, 1,0 mg/L, 2,5 mg/L e 5,0 mg/L.
Procedimento: para cada 10 mL da Soluo amostra ou da
Soluo padro, adicionar 10 mL de Tampo de fuoreto.
Sob agitao magntica, medir os potenciais das solues.
Construir um grfco relacionando as concentraes de
fuoreto dos padres na ordenada (em escala logartmica,
log
10
) com as medies das diferenas de potencial na
abscissa (em escala normal). Determinar a concentrao
de fuoreto em mg/L. Cada mg de fuoreto equivale a 2,21
mg de NaF.
ROTULAGEM
fLUORETO ESTANOSO
Stannosi fuoridum
SnF
2
; 156,71
fuoreto estanoso; 09827
Fluoreto de estanho
[7783-47-3]
Contm, no mnimo, 71,2% do on estanho (Sn
2+
), no
mnimo 22,3% e no mximo, 25,5% de fuoreto em relao
a
f
971
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 0,25 g de amostra em 25 mL de gua. Em
um tubo de ensaio, adicionar 2 mL de cloreto de clcio SR
sobre 5 mL da soluo amostra. Ocorre formao de um
precipitado branco de fuoreto de clcio.
B. Utilizar a mesma soluo amostra do teste A de
Identifcao. Adicionar duas gotas de nitrato de prata 0,1
M em duas gotas da soluo amostra. Ocorre formao de
um precipitado preto.
C. Adicionar duas gotas de cloreto mercrico SR em
uma gota da soluo amostra. Ocorre formao de um
precipitado branco. Com a adio de um excesso da
soluo amostra ocorre formao de um precipitado preto.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 2,8 a 3,5. Determinar na soluo 0,4% (p/v)
recentemente preparada.
Substncias insolveis em gua. Transferir 5 g de amostra
para um bquer, adicionar 100 mL de gua e agitar a
soluo por 3 minutos ou at ocorrer completa dissoluo.
Filtrar em cadinho de massa conhecida e previamente
tarado, lavar com soluo fuoreto de amnio a 1% (p/v) e
gua. Secar o resduo por 4 horas a 105 C, resfriar e pesar.
O peso do resduo no excede 0,2%.
Antimnio.
Soluo amostra: transferir 1 g de fuoreto estanoso para um
balo volumtrico com capacidade para 50 mL, dissolver
em cido clordrico 6 M e completar para o volume de 50
mL com o mesmo solvente.
Soluo padro: transferir 55 mg de tartarato de antimnio
e potssio para um balo volumtrico de 200 mL, dissolver
em gua e completar para o volume de 200 mL com o
mesmo solvente. Transferir 5 mL dessa soluo para um
balo volumtrico de 500 mL, dissolver em cido clordrico
6 M e completar o volume com o mesmo solvente.
Soluo de rodamina B: dissolver 20 mg de rodamina B
em 200 mL de cido clordrico 0,5 M.
Pipetar 5 mL da Soluo amostra e da Soluo padro
para funis de separao distintos, adicionar 15 mL de
cido clordrico, 1 g de sulfato crico e deixar em repouso
por 5 minutos, agitando ocasionalmente. Adicionar 500
mg de cloridrato de hidroxilamina e agitar por 1 minuto.
Transferir 15 mL de ter isoproplico para a soluo,
agitar por 30 segundos, adicionar 7 mL de gua e agitar
novamente. Resfriar em banho-maria temperatura
ambiente por 10 minutos, agitar por 30 segundos, deixar
em repouso at ocorrer separao das fases e descartar a
fase aquosa. Adicionar 20 mL da Soluo de rodamina B,
agitar por 30 segundos e descartar a fase aquosa. Decantar
a fase etrea ou centrifugar se necessrio para obter uma
soluo lmpida. Determinar a absorvncia das solues
obtidas a partir da Soluo amostra e Soluo padro em
comprimento de onda mximo de 550 nm. A absorvncia
da Soluo amostra no excede a absorvncia da Soluo
padro (0,005%). Realizar prova em branco.
mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
on estanoso
Soluo de iodeto de potssio-iodato 0,1 M: em um frasco
volumtrico de 1000 mL, dissolver 3,567 g de iodato
de potssio, previamente dessecado a 110 C at peso
constante, em 200 mL de gua contendo 1 g de hidrxido
de sdio e 10 g de iodeto de potssio. Completar para o
volume de 1000 mL com gua. Padronizar essa soluo por
titulao utilizando estanho metlico grau analtico (99,5%
de pureza) e dissolver em cido clordrico. Cada mL de
iodeto de potssio-iodato 0,1 M equivale a 5,936 mg de Sn.
Pesar, exatamente, cerca de 250 mg de fuoreto estanoso
e dissolver em 300 mL de cido clordrico 3 M aquecido
(recentemente fervido). Girar o frasco contendo a amostra,
enquanto passa fuxo de gs inerte (livre de oxignio) pela
superfcie do lquido. Arrefecer temperatura ambiente.
Adicionar 5 mL de iodeto de potssio SR, 3 mL de amido
SI e titular com Soluo de iodeto de potssio-iodato 0,1 M
em atmosfera inerte. Cada mL de iodeto de potssio-iodato
0,1 M equivale a 5,936 mg de Sn
2+
.
on fuoreto
Soluo tamponante: dissolver 57 mL de cido
actico glacial, 58 g de cloreto de sdio e 4 g de cido
1,2-cicloexileno-dinitrilo-tetractico em 500 mL de gua.
Ajustar o pH para 5,25 0,25 com hidrxido de sdio e
completar para o volume de 1000 mL com gua.
Soluo amostra: transferir 100 mg de fuoreto estanoso
para um balo volumtrico de 250 mL. Adicionar 50 mL de
gua, agitar vigorosamente por 5 minutos e completar para
o volume de 250 mL com gua. Transferir 10 mL dessa
soluo para um balo volumtrico de 50 mL e completar
o volume com gua.
Soluo padro: dissolver uma quantidade exata de
fuoreto de sdio SQR em gua para obter uma soluo
de 0,42 mg/mL. Cada mL dessa soluo (Soluo padro
A) contm 0,19 mg do on fuoreto (10
-2
M). Transferir 25
mL desta soluo para um balo volumtrico de 250 mL,
completando o volume com gua. Esta soluo, Soluo
padro B, contm 19 g do on fuoreto por mL (10
-2
M).
Transferir 25 mL desta soluo para um balo volumtrico
de 250 mL e completar o volume com gua. Esta soluo,
Soluo padro C, contm 1,9 g do on fuoreto por mL
(10
-4
M).
f
Pipetar 20 mL de cada Soluo padro A, B e C, transferir
para bqueres de plstico distintos e acrescentar, em cada
frasco, 20 mL da Soluo tamponante. Determinar o
potencial de cada Soluo padro e da Soluo amostra,
em mV, utilizando um eletrodo on seletivo para fuoreto.
Durante a realizao das medidas, imergir o eletrodo
na soluo sob agitao magntica e aguardar at o
equilbrio ser atingido para registrar o valor de potencial.
Lavar o eletrodo com gua entre as medidas e secar
cuidadosamente para evitar danos membrana slida do
eletrodo. Elaborar uma curva analtica, plotando um grfco
do logaritmo da concentrao do on fuoreto (em g/mL)
versus o potencial (em mV). Calcular a concentrao do
on fuoreto na soluo amostra interceptando o valor de
potencial registrado na curva analtica. A porcentagem do
on fuoreto calculada pela frmula: 125C/W, onde C a
concentrao do on fuoreto determinada na amostra em
g/mL e W a massa da amostra, em mg, utilizada.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Profltico crie dentria.
fLUTAMIDA
flutamidum
C
11
H
11
F
3
N
2
O
3
; 276,21
futamida; 04220
2-Metil-N-[4-nitro-3-(trifuormetil)fenil]propanamida
[13311-84-7]
Contm, no mnimo, 98,0% e, no mximo 101,0% de
C
11
H
11
F
3
N
2
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino amarelo.
solvel em acetona e etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 110 C a 114 C.
IDENTIFICAO
no espectro de futamida SQR, preparado de maneira
idntica.
da Soluo amostra obtida no mtodo de Doseamento,
corresponde aquele do pico principal da Soluo padro.
ENSAIOS DE PUREZA
0,001 % (10 ppm).
amostra. Dessecar em estufa vcuo a 60 C por 3 horas.
No mximo 1,0%.
Cinzas Sulfatadas (5.2.10). Determinar em 1 g de amostra.
No mximo 0,1 %.
DOSEAMENTO
alta efcincia (5.2.17.4). Utilizar um cromatgrafo provido
1,0 mL/minuto.
da amostra na Fase mvel, de modo a obter soluo a 0,5
mg/mL.
de futamida SQR na Fase mvel, de modo a obter soluo
a 0,5 mg/mL.
contendo aproximadamente 0,5 mg de o-futamida SQR por
mililitro. Transferir 1 mL dessa soluo e 1 mL da Soluo
padro para balo volumtrico de 50 mL e completar com
Fase mvel, obtendo soluo a 0,01 mg/mL de o-futamida
e futamida.
Injetar replicatas de 20 uL da Soluo de resoluo. Os
tempos de reteno relativos so cerca de 1,0 para futamida
e 1,4 para o-futamida. O fator de cauda no maior que
2,0. A resoluo entre futamida e o-futamida no menor
dos picos registrados no deve ser maior que 1,5 %.
amostra e da Soluo padro, registrar os cromatogramas e
11
H
11
F
3
N
2
O
3

a
f
973
Em recipientes protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPEUTICA
Antiandrognio.
fLUTAMIDA COMPRIMIDOS
11
H
11
F
3
N
2
O
3
.
IDENTIFICAO
suporte, e mistura de clorofrmio e acetato de etila (3:1),
descritas a seguir.
quantidade do p equivalente a 15 mg de futamida para
Soluo (2): dissolver cerca de 15 mg de futamida SQR
em 10 mL de uma mistura de clorofrmio e metanol (5:1).
mancha referente futamida obtida com a Soluo (1)
com a Soluo (2).
CARACTERSTICAS
Meio de dissoluo: soluo aquosa de laurilsulfato de
sdio a 3% (p/v), 900 mL
Tempo: 45 minutos
de dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, em
soluo aquosa de laurilsulfato de sdio a 3% (p/v) at
11
H
11
F
3
N
2
O
3
dissolvida
de futamida SQR na concentrao de 0,0025% (p/v),
declarada de C
11
H
11
F
3
N
2
O
3
DOSEAMENTO
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de fosfato de potssio monobsico
0,05 M e metanol (30:70).
futamida para balo volumtrico de 100 mL e adicionar
60 mL de uma mistura de metanol e gua (95:5). Agitar
com metanol, homogeneizar e fltrar. Transferir 10 mL
do fltrado para balo volumtrico de 50 mL e diluir em
metanol de modo a obter soluo de futamida a 0,25 mg/
mL.
Soluo padro: diluir quantidade exatamente pesada de
futamida SQR em metanol de modo a obter soluo a 0,25
mg/mL.
C
11
H
11
F
3
N
2
O
3
ROTULAGEM
f
fOLINATO DE CLCIO
Calcii folinas
N
N
H
N
N
H
O
N H
2
O H
N
O
N COO
-
COO
-
H
H
Ca
2+
*
e epmero no C*
C
20
H
21
CaN
7
O
7
; 511,50
folinato de clcio; 00197
Sal de clcio do cido N-[4-[[(2-amino-5-formil-
1,4,5,6,7,8-hexaidro-4-oxo-6-pteridinil)metil]amino]
benzoil]-L-glutmico (1:1)
[1492-18-8]
C
20
H
21
CaN
7
O
7
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P amorfo ou cristalino, branco ou
amarelado, inodoro.
acetona e etanol.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +14,4 a +18,0 em
(p/v) em gua livre de dixido de carbono.
IDENTIFICAO
observados no espectro de folinato de clcio SQR,
B. Responde reao 2 do on clcio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo aquosa a 2,5% (p/v)
lmpida (5.2.25) e amarela. Medir a absorvncia da
soluo a 420 nm, utilizando gua para ajuste do zero. A
absorvncia no deve ser maior que 0,60.
2,5% (p/v).
0,005% (50 ppm).
mximo 17%.
DOSEAMENTO
Proceder ao abrigo da luz direta. Realizar o doseamento
sem interrupo prolongada.
de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: misturar 835 mL de gua, 125 mL de acetonitrila
e 15 mL de soluo de hidrxido de tetrabutilamnio a 25%
(p/v) em metanol. Ajustar pH para 7,5 0,1 com fosfato de
sdio monobsico 2 M e completar o volume para 1000
mL com gua.
Diluente: misturar 900 mL de gua e 15 mL de soluo
de hidrxido de tetrabutilamnio a 25% (p/v) em metanol.
Ajustar pH para 7,5 0,1 com fosfato de sdio monobsico
2 M e completar o volume para 1000 mL com gua.
pesada, da amostra em Diluente para obter soluo a 0,2
mg/mL.
de folinato de clcio SQR em Diluente para obter soluo
a 0,2 mg/mL.
Soluo de resoluo: transferir 17,5 mg de cido flico
para balo volumtrico de 100 mL, dissolver em Diluente
e completar o volume com mesmo solvente. Transferir 5
com Soluo padro. Homogeneizar.
tempos de reteno relativos so cerca de 1,0 para folinato
de clcio e 1,6 para cido flico. A resoluo entre folinato
de clcio e cido flico no menor que 3,6. O desvio
no maior que 2,0%.
20
H
21
CaN
7
O
7

ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antdoto aos antagonistas do cido flico.
a
f
975
fOSfATO DE ALUMNIO
Aluminii phophas
AlPO
4
; 121,95
AlPO
4
.H
2
O; 127,96
fosfato de alumnio; 00200
Sal de alumnio do cido fosfrico (1:1)
[7784-30-7]
Sal de alumnio do cido fosfrico hidratado (3:3:1)
[1117729-44-8]
AlPO
4
, em relao substncia incinerada.
DESCRIO
contendo alguns agregados friveis.
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, praticamente
insolvel em etanol. Solvel em hidrxidos alcalinos e em
solues diludas de cidos.
IDENTIFICAO
reaes do on alumnio (5.3.1.1).
B. A soluo obtida em Aspecto da soluo responde s
reaes do on fosfato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Transferir 2 g da amostra para balo
volumtrico de 100

mL, dissolver em 50 mL de cido
clordrico SR e completar o volume com o mesmo solvente.
A soluo obtida lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
pH (5.2.19). Pesar 2,0 g da amostra e adicionar 50 mL
de gua, agitando vigorosamente por 5 minutos. O pH da
soluo obtida entre 5,5 e 7,2.
Capacidade neutralizante. Passar quantidade sufciente
da amostra por um tamis de abertura de 75 um. A 0,5 g da
amostra peneirada, adicionar 30 mL de cido clordrico M,
previamente aquecido a 37 C. Manter essa mistura a 37 C
por 30 minutos, agitando continuamente. Aps 30 minutos,
o pH (5.2.19) da mistura, a 37 C, entre 2,0 e 2,5.
Cloretos (5.3.2.1). Dissolver 54,4 mg da amostra em 30 mL
de cido ntrico a 20% (p/v) e fltrar. Utilizar 15 mL dessa
soluo e 1 mL da Soluo padro de cido clordrico 0,01
M. No mximo 1,3% (13000 ppm).
fosfatos solveis. Proceder conforme descrito em
Espectrofotometria de absoro no visvel (5.2.14). Pesar,
exatamente, cerca de 5 g da amostra e misturar com 150
mL de gua. Agitar por 2 horas. Filtrar e lavar com 50
mL de gua. Recolher o fltrado em balo volumtrico
de 250 mL e completar o volume com gua. Transferir
10 mL dessa soluo para balo volumtrico de 100 mL
e completar o volume com gua, obtendo a Soluo (1).
Paralelamente, transferir 2,86 g de fosfato de potssio
em gua e completar o volume com o mesmo solvente,
obtendo Soluo (2). Transferir 1 mL da Soluo (2) para
gua, obtendo Soluo (3). Transferir 3 mL da Soluo
(2) para balo volumtrico de 5 mL e completar o volume
com gua, obtendo a Soluo (4). Transferir 5 mL de cada
soluo obtida para balo volumtrico de 25 mL, adicionar
4 mL de cido sulfrico M, 1 mL de molibdato de amnio a
1% (p/v) em cido sulfrico M, 5 mL de gua e 2 mL de uma
soluo contendo 0,1 g de sulfato de 4-metilaminofenol,
0,5 g de sulfto de sdio anidro, 20 g de metabissulfto de
sdio em 100 mL com gua. Agitar e deixar sob repouso
por 15 minutos. Completar o volume com gua. Medir a
absorvncia das solues resultantes em 730 nm. Calcular
a concentrao de PO
4
3-
na Soluo (1) a partir da curva
de calibrao preparada com as Solues (2), (3) e (4). No
mximo 1,0%.
de cido clordrico diludo e fltrar. Utilizar 15 mL dessa
soluo e 2,5 mL da Soluo padro de cido sulfrico
0,005 M. No mximo 0,6% (6000 ppm).
Arsnio (5.3.2.5). Determinar em 1 g da amostra. Proceder
conforme descrito em Mtodo espectrofotomtrico, Mtodo
I. No mximo 0,0001% (1 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Dissolver 2
g da amostra em 20 mL de cido clordrico SR. Utilizar 10
mL dessa soluo. No mximo 0,002% (20 ppm).
Incinerar entre 800 C e 1000 C, at peso constante. Entre
10% e 20%.
DOSEAMENTO
incinerada, dissolver em 10 mL de cido clordrico diludo
e diluir a 100 mL com gua. A 10 mL dessa soluo,
adicionar 10 mL de edetato de sdio 0,1 M SV e 30 mL de
mistura de acetato de amnio SR e acido actico diludo
(1:1). Ferver por 3 minutos, deixar esfriar. Adicionar 25
mL de etanol e 1 mL de ditizona a 0,025% (p/v) em etanol,
recm-preparada. Titular o excesso de edetato de sdio 0,1
M SV com sulfato de zinco 0,1 M SV at mudana para
rosa. Cada mL de edetato dissdico 0,1 M SV equivale a
12,195 mg de AlPO
4
.
ROTULAGEM
f
CLASSE TERAPUTICA
Anticido.
fOSfATO DE AMNIO DIBSICO
Ammonii hydrogenophosphas
(NH
4
)
2
HPO
4
; 132,06
fosfato de amnio dibsico; 04277
Sal de amnio do cido fosfrico (2:1)
[7783-28-0]
(NH
4
)
2
HPO
4
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino ou cristais, brancos
ou quase brancos.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, praticamente
insolvel em acetona e etanol.
IDENTIFICAO
A. A soluo a 5% (p/v) responde s reaes do on amnio
(5.3.1.1).
B. A soluo a 5% (p/v) responde s reaes do on fosfato
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.9). 7,6 a 8,2. Determinar em soluo aquosa a 1%
(p/v).
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar Mtodo espectrofotomtrico,
Mtodo I. Determinar em 1 g da amostra. No mximo
0,0003% (3 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em 1,22 g da amostra. No
mximo 0,03% (300 ppm).
mximo 0,15% (1500 ppm).
DOSEAMENTO
Dissolver 0,6 g da amostra em 40 mL de gua. Titular
com cido sulfrico 0,05 M SV at pH 4,6 determinado
potenciometricamente. Cada mL de cido sulfrico 0,05 M
SV equivale a 13,206 mg de (NH
4
)
2
HPO
4
.
Em recipientes bem fechados, no metlicos.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Agente tamponante, agente sequestrante.
fOSfATO DE CLCIO DIBSICO DI-
HIDRATADO
Calcii hydrogenophosphas dihydricus
CaHPO
4
.2H
2
O; 172,09
fosfato de clcio dibsico di-hidratado; 04278
Sal de clcio do cido fosfrico hidratado (1:1:2)
[7789-77-7]
CaHPO
4
.2H
2
O.
DESCRIO
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua e em etanol.
Solvel em solues diludas de cido clordrico e cido
ntrico, pouco solvel em cido actico diludo.
IDENTIFICAO
A. Dissolver aproximadamente 0,1 g da amostra por
aquecimento com mistura de 5 mL de cido clordrico 3
M e 5 mL de gua. Adicionar, gota a gota, sob agitao,
2,5 mL de hidrxido de amnio 6 M e adicionar 5 mL de
oxalato de amnio SR. Produz-se precipitado branco.
B. Em 10 mL de soluo a 1% (p/v) da amostra aquecida
com pequeno excesso de cido ntrico adicionar 10 mL de
molibdato de amnio SR. Produz-se precipitado amarelo
de fosfomolibdato de amnio.
ENSAIOS DE PUREZA
Brio. Dissolver 2,5 g da amostra em 20 mL de cido
clordrico SR, fltrar se necessrio e adicionar amnia SR
at formao de precipitado. Adicionar cido clordrico
SR at dissoluo do precipitado e completar o volume
para 50 mL com gua. A 10 mL desta soluo adicionar
0,5 mL de cido sulfrico diludo. A outra alquota de 10
mL adicionar 0,5 mL de gua. Aps 15 minutos, qualquer
opalescncia na alquota adicionada de cido no mais
intensa que a obtida com a alquota adicionada de gua.
Carbonatos. Misturar 0,5 g da amostra com 5 mL de gua
isenta de dixido de carbono e adicionar 1 mL de cido
clordrico. No se observa efervescncia.
fosfatos monoclcico e triclcico. Dissolver 2 g da
amostra em 30 mL de cido clordrico M SV, adicionar 20
mL de gua e 0,05 mL de alaranjado de metila SI. Titular o
a
f
977
excesso de cido clordrico M SV com hidrxido de sdio
M SV. O consumo de cido clordrico M SV est entre 11
mL e 12,5 mL.
Substncias insolveis em cido. Aquecer 5 g da amostra
com mistura de 40 mL de gua e 10 mL de cido clordrico,
at mxima solubilizao, e completar o volume para 100
mL com gua. Se um resduo insolvel aparecer, fltrar,
lavar com gua quente, at a reao para cloretos ser
negativa. Secar o resduo a 105 C, por 1 hora. No mximo
0,2%.
Arsnio (5.3.2.5). Dissolver 2,5 g da amostra em 20 mL
de cido clordrico SR. Filtrar, se necessrio, e adicionar
amnia SR at formao de precipitado. Adicionar cido
clordrico SR at dissoluo do precipitado e completar o
volume para 50 mL com gua. Utilizar 2 mL desta soluo
e prosseguir conforme descrito em Mtodo visual. No
mximo 0,001% (10 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Dissolver 3,58 g da amostra em mistura
de 7 mL de cido ntrico e 20 mL de gua. Diluir para 50
mL com gua. Utilizar 15 mL desta soluo. No mximo
0,033% (330 ppm).
ferro (5.3.2.4). Dissolver 2,5 g da amostra em 20 mL
clordrico SR at dissoluo do precipitado e completar o
volume para 50 mL com gua. Utilizar 5 mL desta soluo
e prosseguir conforme descrito em Mtodo I. Utilizar 1
mL de Soluo padro de ferro (100 ppm Fe). No mximo
0,04% (400 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Dissolver, tanto quanto possvel,
por meio de aquecimento, 1,3 g da amostra em 3 mL de
cido clordrico 3 M, resfriar e diluir para 50 mL com gua.
Determinar em 25 mL desta soluo. No mximo 0,003%
(30 ppm).
clordrico SR at dissoluo do precipitado e completar
o volume para 50 mL com gua. Utilizar 15 mL desta
soluo. No mximo 0,5% (5 000 ppm).
Incinerar entre 800 C e 825 C, at peso constante. Entre
24,5% e 26,5%.
DOSEAMENTO
mistura de 1 mL de cido clordrico a 0,3% (v/v) e 5 mL
de gua. Adicionar 25 mL de edetato dissdico 0,1 M SV
e diluir a 200 mL com gua. Neutralizar com hidrxido de
amnio e adicionar 10 mL de soluo tampo cloreto de
amnio pH 10,0 e aproximadamente 50 mg de negro de
eriocromo T. Titular o excesso de edetato dissdico com
sulfato de zinco 0,1 M SV at colorao violeta. Realizar
ensaio em branco. Cada mL de edetato dissdico 0,1 M SV
equivale a 17,209 mg de CaHPO
4
.2H
2
O.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Suplemento de clcio.
fOSfATO DE CLCIO TRIBSICO
Tricalcii phosphas
Ca
5
(OH)(PO
4
)
3
; 502,31
fosfato de clcio tribsico; 00203
Fosfato de clcio hidrxido
[12167-74-7]
Fosfato de clcio tribsico consiste de uma mistura varivel
de fosfatos de clcio. Contm, no mnimo, 35,0% e, no
mximo, 40,0% de Ca (40,08).
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, inodoro e inspido.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua e etanol.
Solvel em solues diludas de cido clordrico e cido
ntrico. Praticamente insolvel em cido actico.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 0,1 g da amostra em 5 mL de soluo de cido
ntrico a 25% (v/v). A soluo responde s reaes do on
fosfato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias insolveis em cido. Dissolver 5 g da amostra
em uma mistura de 10 mL de cido clordrico e 30 mL de
gua. Filtrar, lavar o resduo com gua e secar em estufa
a 105 C, at peso constante. A massa do resduo no
superior a 10 mg (0,2 %).
Arsnio (5.3.2.5). Adicionar 0,25 g da amostra a 20 mL de
gua. Adicionar cido clordrico at completa dissoluo
e prosseguir conforme descrito em Mtodo visual. No
mximo 0,0004% (4 ppm).
Brio. Pesar 0,5 g da amostra. Adicionar 10 mL de gua
e 1 mL de cido ntrico, com agitao. A soluo obtida
deve permanecer lmpida aps adio de 1 mL de sulfato
de clcio SR.
de cido clordrico diludo. Filtrar, se a soluo no se
f
apresentar lmpida. Adicionar amnia diluda, lentamente,
at formao de precipitado. Dissolver o precipitado em
cido clordrico diludo e completar o volume para 50
mL com gua. Utilizar 5 mL da soluo obtida e proceder
conforme descrito em Mtodo I. Utilizar 1 mL de Soluo
padro de ferro (100 ppm Fe). No mximo 0,04% (400
ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Dissolver 0,6667 g da amostra
em 10 mL de cido clordrico a 10% (p/v) e aquecer em
banho-maria durante 5 minutos. Diluir com gua para 25
mL e proceder conforme descrito em Mtodo I. No mximo
0,003% (30 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Adicionar 0,1 g da amostra a 10 mL de
gua. Adicionar 1 mL de cido ntrico, agitar at dissoluo
e diluir para 40 mL com gua. Proceder conforme descrito
em Ensaio limite para cloretos. No mximo 0,35%.
Sulfatos (5.3.2.2). Adicionar 0,15 g da amostra a 10 mL
de gua. Adicionar 1 mL de cido clordrico at completa
dissoluo e diluir para 40 mL com gua. No mximo
0,8%.
amostra. Dessecar em mufa a 800 C, por 30 minutos. No
mximo 8,0 %.
DOSEAMENTO
Dissolver 0,2 g da amostra em mistura de 1 mL de cido
clordrico SR e 5 mL de gua. Adicionar 25 mL de edetato
dissdico 0,1 M e completar o volume para 200 mL com
gua. Ajustar o pH da soluo para 10,0 com amnia e
adicionar 10 mL de tampo cloreto de amnio pH 10,0.
Utilizar negro de eriocromo T SI como indicador. Titular
o excesso de edetato dissdico 0,1 M com sulfato de zinco
0,1 M SV at viragem do indicador de azul para violeta.
Cada mL de edetato dissdico 0,1 M equivale a 4,008 mg
de Ca.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Suplemento e adjuvante farmacotcnico.
fOSfATO DE CLINDAMICINA
Clindamycini phosphas
SCH
3
O
OH
O H
P
O
O H
OH
O
C H
3 Cl
N
O
N
CH
3
C H
3
H
C
18
H
33
ClN
2
O
5
S; 424,98
C
18
H
34
ClN
2
O
8
PS; 504,96
clindamicina; 02229
fosfato de clindamicina; 02232
7-Cloro-6,7,8-tridesoxi-6-[[[(2S,4R)-1-metil-4-propil-2-
pirrolidinil]carbonil]amino]-1-tio-L-treo--D-galacto-
octopiranosdeo de metila
[18323-44-9]
2-(Diidrogenofosfato) de 7-cloro-6,7,8-tridesoxi-6-
[[[(2S,4R)-1-metil-4-propil-2-pirrolidinil]carbonil]
amino]-1-tio-L-treo--D-galacto-octopiranosdeo de
metila
[24729-96-2]
C
18
H
34
ClN
2
O
8
PS, em relao substncia anidra.
DESCRIO
ligeiramente higroscpico. Apresenta polimorfsmo.
solvel em etanol, praticamente insolvel em cloreto de
metileno.
(p/v) em gua.
IDENTIFICAO
observados no espectro de fosfato de clindamicina SQR,
B. Aquecer, sob refuxo, 0,1 g da amostra com mistura de
5 mL de soluo concentrada de hidrxido de sdio SR e 5
mL de gua, por 90 minutos. Resfriar. Acrescentar 5 mL de
cido ntrico. Extrair com tres pores de 15 mL de cloreto
de metileno. Filtrar a camada aquosa. O fltrado responde
s reaes do on fosfato (5.3.1.1).
a
f
979
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 1 g da amostra em gua.
Aquecer, ligeiramente, se necessrio. Resfriar e completar
o volume para 25 mL com gua. A soluo obtida lmpida
(5.2.25) e incolor (5.2.12).
1% (p/v).
Doseamento. Preparar as solues como descrito a seguir.
Soluo (1): transferir 75 mg da amostra, exatamente pesada,
a Fase mvel e misturar.
Soluo (2): diluir 1 mL da Soluo padro para 100 mL
com a Fase mvel.
soluo, registrar os cromatogramas e medir as reas de
todos os picos obtidos. A rea de todos os picos obtidos
com a Soluo (1), exceto a do pico principal e a do pico
do solvente, no superior a 2,5 vezes a rea sob o pico
principal obtido com a Soluo (2) (2,5%). A soma das
reas de todos os picos obtidos com a Soluo (1), exceto a
do pico principal e a do pico do solvente, no superior a 4
vezes a rea sob o pico principal obtido com a Soluo (2)
(4,0%). Desconsiderar qualquer pico com rea inferior a
10% da rea sob o pico principal obtido com a Soluo (2).
mximo 6,0%.
Quando for indicado no rtulo que a substncia
estril, a amostra cumpre com os testes de Esterilidade
e Endotoxinas bacterianas. Quando for indicado que a
substncia deve ser esterilizada durante a produo de
preparaes estreis, a amostra cumpre com o teste de
Endotoxinas bacterianas.
de fltrao por membrana.
mg de fosfato de clindamicina.
DOSEAMENTO
Fase mvel: misturar 200 mL de acetonitrila e 800 mL de
fosfato de potssio monobsico a 1,36% (p/v), previamente
ajustado para pH 2,5 com cido fosfrico.
volume com a Fase mvel e misturar.
de fosfato de clindamicina SQR na Fase mvel e diluir
adequadamente de modo a obter soluo a 3 mg/mL.
Soluo de resoluo: dissolver 5 mg de cloridrato de
lincomicina SQR e 15 mg de cloridrato de clindamicina
SQR em 5 mL da Soluo padro e completar o volume
para 100 mL com a Fase mvel.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo de resoluo. O
doseamento ser vlido somente se o pico de cloridrato
de lincomicina estiver separado do pico do solvente. A
resoluo entre os picos de fosfato de clindamicina e
cloridrato de clindamicina no menor que 6,0. Ajustar a
proporo de acetonitrila na Fase mvel, se necessrio. O
fator de cauda para o pico de fosfato de clindamicina no
maior que 1,5.
no maior que 1,0%. Ajustar os parmetros do integrador,
se necessrio.
C
18
H
34
ClN
2
O
8
PS na amostra a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. Quando a substncia
destinada produo de preparaes parenterais, o rtulo
deve indicar se o produto estril ou se deve ser esterilizado
durante o processo.
CLASSE TERAPUTICA
Antibacteriano; antiprotozorio.
fOSfATO DE CLINDAMICINA SOLUO
INJETVEL
18
H
33
ClN
2
O
5
S.
IDENTIFICAO
254
,
como suporte, e mistura de metanol, tolueno e amnia 18
M (70:30:1,5), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
f
Soluo (1): transferir volume da soluo injetvel
equivalente a 50 mg de fosfato de clindamicina para balo
volumtrico de 10 mL, completar o volume com metanol
e homogeneizar.
Soluo (2): soluo a 5 mg/mL de fosfato de clindamicina
SQR, em metanol.
secar ao ar. Nebulizar a placa com iodobismutato de
potssio diludo SR. Examinar sob luz ultravioleta
com a Soluo (2).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,5 a 7,0.
mg de fosfato de clindamicina.
DOSEAMENTO
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de 250 mL de acetonitrila e 750 mL de
fosfato de potssio monobsico 1,36% (p/v), previamente
ajustado para pH 2,5 com cido fosfrico.
Soluo amostra: diluir volume da soluo injetvel na
Fase mvel de modo a obter soluo a 0,15 mg/mL de
clindamicina.
Soluo padro: soluo a 0,18 mg/mL de fosfato de
clindamicina SQR na Fase mvel.
Soluo resoluo: soluo contendo 0,12 mg/mL de
cloridrato de lincomicina SQR e 0,24 mg/mL de fosfato de
clindamicina SQR na Fase mvel.
resoluo entre os picos de cloridrato de lincomicina e
fosfato de clindamicina no menor que 7,7. O desvio
no maior que 2,0%.
C
18
H
33
ClN
2
O
5
S na soluo injetvel a partir das respostas
Cada mg de C
18
H
34
ClN
2
O
8
PS equivale a 0,8416 mg de
C
18
H
33
ClN
2
O
5
S.
temperaturas entre 8 C e 30 C.
ROTULAGEM
fOSfATO DE SDIO DIBSICO
Natrii hydrogenophosphas
Na
2
HPO
4
; 141,96
Na
2
HPO
4
.H
2
O; 159,97
Na
2
HPO
4
.2H
2
O; 177,99
Na
2
HPO
4
.7H
2
O; 268,07
Na
2
HPO
4
.12H
2
O; 358,14
fosfato de sdio dibsico; 00207
fosfato de sdio dibsico di-hidratado; 00209
fosfato de sdio dibsico heptaidratado; 00211
fosfato de sdio dibsico dodecaidratado; 00210
Sal de sdio do cido fosfrico (2:1)
[7558-79-4]
Sal dissdico do cido fosfrico monoidratado
[118830-14-1]
Sal dissdico do cido fosfrico di-hidratado
[10028-24-7]
Sal dissdico do cido fosfrico heptaidratado
[7782-85-6]
Sal de sdio do cido fosfrico hidratado (2:1:12)
[10039-32-4]
Fosfato de sdio dibsico anidro ou contm uma, duas,
sete ou doze molculas de gua de hidratao. Contm, no
mnimo, 98,0% e, no mximo, 100,5% de Na
2
HPO
4
, em
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P incolor ou branco, inodoro,
sabor salino.
solvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. A soluo aquosa a 3% (p/v) responde s reaes do on
fosfato (5.3.1.1).
a
f
981
B. A soluo aquosa a 3% (p/v) responde s reaes do on
sdio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias insolveis. Dissolver quantidade da amostra
equivalente a 5 g de Na
2
HPO
4
em 100 mL de gua quente,
fltrar em cadinho de Gooch tarado, lavar o resduo com
gua quente e dessecar a 105 C por 2 horas. O peso do
resduo no maior que 20 mg (0,4%).
Mtodo I. Determinar em soluo contendo o equivalente
a 187,5 mg de Na
2
HPO
4
em 35 mL de gua. No mximo
0,0016% (16 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em quantidade da amostra
equivalente a 0,6 g de Na
2
HPO
4
. No mximo 0,06% (600
ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo I. Dissolver
quantidade da amostra equivalente a 2,1 g de Na
2
HPO
4
em
50 mL de gua e utilizar 12 mL da soluo obtida para
Preparao amostra. No mximo 0,002% (20 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Determinar em quantidade da amostra
equivalente a 0,6 g de Na
2
HPO
4
. No mximo 0,2% (2000
ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). Dessecar em estufa a 130
C, at peso constante. No mximo 5,0% para a forma
anidra, entre 10,3% e 12,0% para a forma monoidratada,
entre 18,5% e 21,5% para a forma di-hidratada, entre
43,0% e 50,0% para a forma hepta-hidratada e entre 55,0%
e 64,0% para a forma dodeca-hidratada.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, quantidade da amostra equivalente a 1 g
de Na
2
HPO
4
e dissolver em 40 mL de gua. Adicionar, com
auxlio de pipeta volumtrica, 15 mL de cido clordrico
M. Titular potenciometricamente com hidrxido de sdio
M SV, at ponto de infexo prximo a pH 4,0 e anotar o
volume gasto. Continuar a titulao at o segundo ponto
de infexo, prximo a pH 8,8. Realizar ensaio em branco,
transferindo 15 mL de cido clordrico M com pipeta
volumtrica e 40 mL de gua para erlenmeyer e titulando
potenciometricamente com hidrxido de sdio M SV.
A diferena entre o volume de hidrxido de sdio M SV
gasto no ensaio em branco e o volume gasto na titulao
da amostra at o ponto de infexo pH 4,0 considerado
Volume A. A diferena entre o volume de hidrxido de
sdio M SV gasto entre os pontos de infexo pH 4,0 e
pH 8,8 considerado Volume B. Se o Volume A for igual
ou menor do que o Volume B, cada mL do Volume A de
hidrxido de sdio M SV equivale a 141,960 mg de
Na
2
HPO
4
. Se o Volume A for maior do que o Volume B,
cada mL de (2 Volume B) Volume A de hidrxido de sdio
M SV equivale a 141,960 mg de Na
2
HPO
4
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Adjuvante.
fOSfATO DE SDIO MONOBSICO
Natrii dihydrogenophosphas
NaH
2
PO
4
; 119,98
NaH
2
PO
4
.H
2
O; 138,00
NaH
2
PO
4
.2H
2
O; 156,01
fosfato de sdio monobsico; 00212
fosfato de sdio monobsico monoidratado; 09331
fosfato de sdio monobsico di-hidratado; 00213
Sal de sdio do cido fosfrico (1:1)
[7558-80-7]
Sal monossdico do cido fosfrico monoidratado
[10049-21-5]
Sal de sdio do cido fosfrico hidratado (1:1:2)
[13472-35-0]
Fosfato de sdio monobsico anidro ou contm uma ou
duas molculas de gua de hidratao. Contm, no mnimo,
98,0% e, no mximo, 103,0% de NaH
2
PO
4
, em relao
substncia anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino ou cristais incolores
ou brancos, inodoro e levemente deliquescente.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, praticamente
insolvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. A soluo aquosa a 5% (p/v) responde s reaes do on
fosfato (5.3.1.1).
B. A soluo aquosa a 5% (p/v) responde s reaes do on
sdio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 4,1 a 4,5. Determinar em soluo contendo
o equivalente a 1 g de NaH
2
PO
4
.H
2
O em 20 mL de gua.
Substncias insolveis. Dissolver quantidade da amostra
equivalente a 10 g de NaH
2
PO
4
.H
2
O em 100 mL de gua
quente, fltrar em cadinho de Gooch tarado, lavar o resduo
com gua quente e dessecar a 105 C por 2 horas. O peso
do resduo no maior que 20 mg (0,2%).
Alumnio, clcio e elementos relacionados. A soluo
contendo o equivalente a 1 g de NaH
2
PO
4
.H
2
O em 10 mL
de gua no apresenta turbidez quando o meio levemente
f
alcalinizado com hidrxido de amnio 6 M, utilizando
papel tornassol rosa.
Mtodo I. Determinar em soluo contendo o equivalente a
0,375 g de NaH
2
PO
4
.H
2
O em 35 mL de gua. No mximo
0,0008% (8 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em quantidade da amostra
equivalente a 2,5 g de NaH
2
PO
4
.H
2
O. No mximo 0,014%
(140 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo I. Dissolver
quantidade da amostra equivalente a 1 g de NaH
2
PO
4
.H
2
O
em 20 mL de gua, adicionar 1 mL de cido clordrico 3 M
e completar o volume para 25 mL com gua. No mximo
0,002% (20 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Determinar em quantidade da amostra
equivalente a 0,8 g de NaH
2
PO
4
.H
2
O. No mximo 0,15%
(1500 ppm).
gua (5.2.20.1). No mximo 2,0% para a forma anidra,
entre 10,0% e 15,0% para a forma monoidratada e entre
18,0% e 26,5% para a forma di-hidratada.
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 2,5 g da amostra em 10
mL de gua fria e adicionar 20 mL de soluo saturada de
cloreto de sdio fria. Titular com hidrxido de sdio M SV,
utilizando fenolftalena SI como indicador e mantendo a
temperatura da soluo entre 10 e 15 C durante a titulao.
Cada mL de hidrxido de sdio M SV equivale a 119,98
mg de NaH
2
PO
4
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Adjuvante.
fOSfATO DE SDIO SOLUO ORAL
Soluo oral de fosfato de sdio uma soluo contendo
fosfato de sdio dibsico e fosfato de sdio monobsico
ou fosfato de sdio dibsico e cido fosfrico em gua
purifcada. Contm, em 100 mL, no mnimo, 16,2
g e no mximo, 19,8 g de fosfato de sdio dibsico
(Na
2
HPO
4
.7H
2
O) e no mnimo 43,2 g e no mximo, 52,8 g
de fosfato de sdio monobsico (NaH
2
PO
4
.H
2
O).
IDENTIFICAO
B. Responde s reaes do on fosfato (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). Entre 4,4 e 5,2.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Pipetar 25 mL de amostra e transferir para um balo
Transferir 25 mL dessa soluo para um bquer de 250 mL,
adicionar 15 mL de hidrxido de sdio 0,5 M e 75 mL de
gua. Titular o excesso de base, potenciometricamente, com
cido clordrico 0,5 M SV at o primeiro ponto de infexo
(em pH prximo a 9,2). Registrar o volume de titulante
gasto (A). Continuar a titulao at o segundo ponto de
infexo (pH prximo a 4,4) e registrar o volume (B). Para
a determinao do branco, transferir 15 mL de hidrxido
de sdio 0,5 M para um bquer de 250 mL, adicionar 100
mL de gua, e titular imediatamente com cido clordrico
0,5 M SV. Registrar o volume do cido clordrico 0,5 M
SV consumido (C), em mL. Cada mL do volume (C-A) de
cido clordrico 0,5 M equivale a 69 mg de fosfato de sdio
monobsico (NaH
2
PO
4
.H
2
O) e cada mL do volume de (B-
C) de cido clordrico 0,5 M SV equivale a 134,0 mg de
fosfato de sdio dibsico (Na
2
HPO
4
.7H
2
O).
ROTULAGEM
a
f
983
fOSfATO DISSDICO DE
DEXAMETASONA
Dexamethasoni natrii phosphas
O
CH
3
H
O H
C H
3
F H
OH
CH
3
O
O
P
O
ONa
ONa
C
22
H
28
FNa
2
O
8
P; 516,40
fosfato dissdico de dexametasona; 02821
Sal de sdio de (11,16)-9-fuor-11,17-diidroxi-16-metil-
21-(fosfonooxi)-pregna-1,4-dieno-3,20-diona (2:1)
[2392-39-4]
C
22
H
28
FNa
2
O
8
P, em relao substncia anidra, livre de
etanol.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, muito higroscpico.
solvel em etanol, dioxana e insolvel em clorofrmio.
substncia anidra e livre de etanol. Determinado em
soluo a 1% (p/v) em gua.
IDENTIFICAO
de onda e com as mesmas intensidades relativas
daqueles observados no espectro de fosfato dissdico de
dexametasona SQR, preparado de maneira idntica. Se
o espectro obtido no estado slido mostrar diferenas,
dissolver a substncia a ser examinada e o fosfato dissdico
de dexametasona SQR, separadamente, em um mnimo
volume de etanol, evaporar e secar em banho-maria.
Registrar novos espectros usando os resduos.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel HF
254
,
como suporte, e mistura de clorofrmio, metanol e gua
Soluo (1): pesar 20 mg da amostra em um tubo de
centrfuga. Adicionar 5 mL de soluo de fosfatase alcalina,
agitar vigorosamente e deixar em repouso por 30 minutos.
Adicionar 5 mL de acetato de etila, agitar vigorosamente,
centrifugar e utilizar a camada superior.
Soluo (2): soluo a 3 mg/mL de dexametasona SQR em
acetato de etila.
(2).
C. Dissolver 2 mg em 2 mL de cido sulfrico e misturar.
Desenvolve-se colorao marrom amarelado em 5
minutos. Adicionar 10 mL de gua e misturar. A colorao
desaparece e a preparao permanece lmpida.
D. O resduo obtido conforme descrito em Cinzas
sulfatadas (5.2.10) responde s reaes do on sdio e on
fosfato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 5% (p/v) em gua livre de
dixido de carbono lmpida (5.2.25).
em gua livre de dixido de carbono.
temperatura ambiente, fuxo da Fase mvel de 1 mL/min.
Fase mvel: misturar 1,36 g de fosfato de potssio
monobsico e 0,6 g de hexilamina e deixar em repouso por
10 minutos. Dissolver em 182,5 mL de gua e adicionar
67,5 mL de acetonitrila. Fazer os ajustes necessrios.
amostra em Fase mvel para obter soluo a 2,5 mg/mL.
Soluo (2): dissolver 2 mg de fosfato dissdico
de dexametasona SQR e 2 mg de fosfato sdico de
betametasona em Fase mvel e diluir para 100 mL com o
mesmo solvente.
mvel.
Injetar 20 L da Soluo (2). A resoluo entre fosfato sdico
de betametasona e fosfato dissdico de dexametasona no
menor que 2,2.
(1) e da Soluo (3) e registrar os cromatogramas por, no
mnimo, o dobro do tempo de reteno do pico principal.
A rea sob qualquer pico a partir do pico principal obtido
f
com a Soluo (1) no maior que a metade da rea sob
o pico principal obtido com a Soluo (3) (0,5%). A soma
das reas sob todos os picos obtidos com a Soluo (1),
exceto a do pico do solvente, no maior que a rea sob
o pico principal obtido com a Soluo (3) (1%). No
considerar picos com rea inferior 0,05 vezes a rea sob o
pico principal obtido com a Soluo (3).
Limite de etanol. Proceder conforme descrito em
Cromatografa a gs (5.2.17.5). Utilizar cromatgrafo
a gs provido de detector de ionizao de chamas,
utilizando coluna capilar de 1 m de comprimento e 3,2
mm de dimetro interno, preenchida com copolmero
etilvinilbenzeno e divinilbenzeno com espessura de flme
de 150 m a 180 m; temperatura da coluna de 150 C,
temperatura do injetor a 250 C e temperatura do detector
a 280 C. Utilizar nitrognio como gs de arraste; fuxo de
30 mL/minuto
Soluo de padro interno: diluir 1 mL de lcool n-proplico
para 100 mL de gua.
Soluo amostra: dissolver 0,5 g da amostra em 5 mL de
Soluo de padro interno e diluir para 10 mL com gua.
Soluo padro: diluir 1 mL etanol para 100 mL com gua.
10 mL, adicionar 5 mL de Soluo de padro interno e
e medir as reas sob os picos. Calcular a porcentagem de
etanol na amostra. No mximo 3,0% (p/p) de etanol.
Limite de ons fosfato. Proceder conforme descrito
em Espectrofotometria de absoro no visvel (5.2.14).
Dissolver, exatamente, cerca de 50 mg da amostra em
Aquecer se necessrio. Adicionar 1 mL de soluo de
molibdato de amnio a 5% (p/v) em cido sulfrico 0,05
M e 1 mL de sulfato de 4-metilaminofenol SR. Completar
o volume para 25 mL com gua, homogeneizar e deixar
em repouso por 30 minutos. Preparar soluo padro na
mesma concentrao, utilizando 5 mL da soluo de
fosfato de potssio monobsico a 0,01433% (p/v), ao invs
da amostra, e os mesmos solventes. Medir as absorvncias
das solues resultantes em 730 nm, utilizando gua para
ajuste do zero. A absorvncia da soluo da amostra no
maior que da soluo padro. No mximo 1,0%.
gua (5.2.20.1). A soma das porcentagens do contedo de
gua e de etanol, determinado em Limite de etanol, no
maior que 16,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Proceder conforme Espectrofotometria de absoro no
ultravioleta (5.2.14). Pesar, exatamente, cerca de 0,1 g da
amostra e dissolver em gua. Completar o volume para
100 mL com o mesmo solvente. Diluir, sucessivamente,
em gua, at a concentrao de 0,002% (p/v). Preparar
mesmo solvente e fosfato dissdico de dexametasona SQR
ao invs da amostra. Medir as absorvncias das solues
resultantes em 241,5 nm, utilizando gua para ajuste do
22
H
28
FNa
2
O
8
P na amostra a partir
considerando A(1%, 1 cm) = 303, em 241,5 nm, em gua.
Em recipientes hermeticamente fechados, protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiinfamatrios esteroides.
fOSfATO SDICO DE RIBOfLAVINA
Ribofavini natrii phosphas
N
N
N
H
N
O
O
C H
3
O
OH
OH
P
O
ONa
OH
OH
CH
3
C
17
H
20
N
4
NaO
9
P; 478,33
C
17
H
20
N
4
NaO
9
P.2H
2
O; 514,36
fosfato sdico de ribofavina; 07703
Sal de sdio de 5-(dihidrogenofosfato) de ribofavina (1:1)
[130-40-5]
Sal monossdico de 5-(dihidrogenofosfato) de ribofavina
di-hidratado
[6184-17-4]
Mistura contendo ribofavina 5-(hidrogenofosfato de
sdio) como principal componente e outros monofosfatos
sdicos de ribofavina. Contm, no mnimo, 73,0% e, no
mximo, 79,0% de ribofavina (C
17
H
20
N
4
O
6
), em relao
a
f
985
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, amarelo ou laranja-
amarelado, higroscpico.
Solubilidade. Solvel em gua, muito pouco solvel em
etanol, praticamente insolvel em ter etlico.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +37 a +42. Determinar
em soluo a 1,2% (p/v) em cido clordrico 5 M.
IDENTIFICAO
tampo citro-fosfato pH 7,0 exibe mximo em 266 nm. A
absorvncia em 266 nm de 0,58 a 0,64.
da Soluo (1), obtida em Substncias relacionadas,
corresponde quele do pico principal da Soluo (3).
C. Transferir 10 mg da amostra para balo volumtrico de
100 mL, dissolver com hidrxido de sdio SR e completar
o volume com o mesmo solvente. Examinar 1 mL desta
soluo sob luz ultravioleta (254 nm) por 5 minutos.
Adicionar cido actico sufciente para acidifcar a soluo,
utilizando papel de tornassol azul como indicador. Agitar
com 2 mL de cloreto de metileno. A fase inferior da mistura
apresenta fuorescncia amarela.
D. A 0,5 g da amostra, adicionar 10 mL de cido ntrico e
evaporar, em banho-maria, at secura. Aquecer o resduo
at adquirir colorao branca, dissolver em 5 mL de gua e
fltrar. O fltrado responde s reaes do on sdio (5.3.1.1)
e s reaes do on fosfato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
ligada a grupo octadecilsilano (5 m), mantida temperatura
ambiente; fuxo da fase mvel de 2 mL/minuto.
monobsico a 0,735% (p/v) (15:85).
50 mL de gua e completar o volume com Fase mvel.
Transferir 4 mL desta soluo para balo volumtrico de
25 mL e completar o volume com Fase mvel.
ribofavina SQR em 1 mL de cido clordrico e diluir para
250 mL com gua. Transferir 4 mL desta soluo para
Fase mvel.
Soluo (3): dissolver, exatamente, cerca de 0,1 g de
fosfato sdico de ribofavina SQR em 50 mL de gua e
diluir para 100 mL com Fase mvel. Transferir 4 mL desta
volume com Fase mvel.
Injetar replicatas de 100 L das Solues (1) e (3).
Registrar o cromatograma at a completa eluio do
pico correspondente ribofavina. Nas condies
cromatogrfcas prescritas os tempos de reteno relativos
so cerca de 0,2 para ribofavina 3,4-difosfato; 0,3
para ribofavina 3,5-difosfato; 0,5 para ribofavina
4,5-difosfato; 0,7 para ribofavina 3-monofosfato; 0,9
para ribofavina 4-monofosfato; 1,0 para ribofavina
5-monofosfato; e 2,0 para ribofavina. A resoluo entre
ribofavina 4-monofosfato e ribofavina e 5-monofosfato
no cromatograma obtido com a Soluo (3) no inferior
a 1,5. O desvio padro relativo das reas de replicatas do
pico referente a ribofavina 5-monofosfato no maior
que 1,5%
(1), Soluo (2) e Soluo (3), registrar os cromatogramas
e medir as reas sob os picos. Calcular o teor de ribofavina
livre e de difosfatos de ribofavina na amostra a partir das
rea sob os picos no cromatograma obtido com as Solues
(1), (2) e (3). No mximo 6,0% de ribofavina livre e, no
mximo, 6,0% de difosfatos de ribofavina, em relao
Limite de lumifavina. Agitar 35 mg da amostra com
10 mL de clorofrmio isento de lcool, recentemente
preparado, por 5 minutos e fltrar. A absorvncia (5.2.14)
da soluo resultante em 440 nm, utilizando clorofrmio
isento de lcool para ajuste do zero, de, no mximo,
0,025.
Limite de fosfato livre. Dissolver 0,3 g da amostra em
gua, diluir para 100 mL com o mesmo solvente. Transferir
10 mL desta soluo para balo volumtrico de 50 mL.
Adicionar 10 mL de soluo cida de molibdato de amnio
e 5 mL de sulfato ferroso a 10% (p/v) em cido sulfrico
0,075 M. Homogeneizar. Preparar soluo padro de
maneira similar utilizando 10 mL de fosfato de potssio
monobsico a 0,004% (p/v), 10 mL de soluo cida de
molibdato de amnio e 5 mL de sulfato ferroso a 10% (p/v)
em cido sulfrico 0,075 M. Medir as absorvncias das
solues resultantes em 700 nm (5.2.14). Utilizar mistura
de 10 mL de gua, 10 mL de soluo cida de molibdato
de amnio e 5 mL de sulfato ferroso a 10% (p/v) em cido
sulfrico 0,075 M para ajuste do zero. A absorvncia da
soluo amostra no superior da soluo padro. No
mximo 1,0%.
Metais pesados (5.3.2.3). Transferir 2 g da amostra
para cadinho de slica, adicionar, gota a gota, 2 mL de
cido ntrico e 0,25 mL de cido sulfrico. Aquecer,
cuidadosamente, at aparecimento de fumaa branca e
ignio da amostra. Resfriar. Extrair o resduo com duas
pores de 2 mL de cido clordrico. Evaporar os extratos
at secura. Dissolver o resduo com 2 mL de cido actico
f
diludo e diluir para 20 mL com gua. Prosseguir conforme
descrito em Mtodo I. No mximo 0,001% (10 ppm).
amostra, em estufa a 105 C, sob presso reduzida, por 5
No mximo 25,0%.
DOSEAMENTO
0,1 g da amostra e dissolver em 150 mL de gua. Adicionar
2 mL de cido actico glacial e diluir para 1000 mL com
gua. Transferir 10 mL desta soluo para balo volumtrico
de 50 mL, adicionar 3,5 mL de acetato de sdio a 1,4%
(p/v) e completar o volume com gua. Medir a absorvncia
da soluo em 444 nm. Utilizar mistura de gua e acetato
de sdio a 1,4% (p/v) (93:7) para ajuste do zero. Calcular o
teor de C
17
H
20
N
4
O
6
na amostra considerando A (1%, 1 cm)
= 328, em 444 nm.
fuorescncia (5.2.15). Dissolver, exatamente, cerca de 50
mg da amostra em 20 mL de piridina e 75 mL de gua, e
diluir para 1000 mL com gua. Preparar soluo padro
Transferir 10 mL de cada soluo para bales volumtricos
de 1000 mL. Adicionar cido sulfrico 0,05 M at ajuste de
pH entre 5,9 e 6,1 (aproximadamente 4 mL) e completar o
volume com gua. Medir as intensidades de fuorescncia
das solues resultantes em fuormetro, em comprimento
de onda de excitao de 440 nm e emisso de 530 nm.
17
H
20
N
4
O
6
na amostra, a partir das
leituras obtidas.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Componente da vitamina B.
fTALATO DE ETILA
Ethylis phthalas
O CH
3
O
O CH
3
O
C
12
H
14
O
4
; 222,24
ftalato de etila; 09828
ster 1,2-dietlico do cido 1,2-benzenodicarboxlico
[84-66-2]
C
12
H
14
O
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido oleoso, incolor ou
ligeiramente amarelado.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, miscvel
com etanol e com ter etlico.
Densidade relativa (5.2.5): 1,117 a 1,121. Determinar a 20 C.
Temperatura de ebulio (5.2.3): 295 C.
IDENTIFICAO
amostra, dispersa entre placas de cloreto de sdio, apresenta
observados no espectro de ftalato de etila SQR, preparado
de maneira idntica.
254
,
como suporte, e mistura de heptano e ter etlico (30:70),
uL de cada uma das solues, recentemente preparadas,
descritas a seguir.
Soluo (1): soluo a 5 mg/mL da amostra em ter etlico.
Soluo (2): soluo a 5 mg/mL de ftalato de etila SQR em
ter etlico.
a
f
987
C. A 0,1 mL da amostra, adicionar 0,25 mL de cido
sulfrico e 50 mg de resorcinol. Aquecer em banho-maria
por 5 minutos. Deixar esfriar, adicionar 10 mL de gua e
1 mL de soluo concentrada de hidrxido de sdio SR.
Desenvolve-se colorao amarela ou marrom-amarelada e
fuorescncia verde.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo examinada lmpida
(5.2.25) e no mais corada que a soluo descrita a
seguir (5.2.12). Misturar 24 mL da Soluo base de cloreto
frrico, 6 mL da Soluo base de cloreto cobaltoso e 70 mL
de cido clordrico a 1% (p/v). Transferir 12,5 mL dessa
volume com cido clordrico a 1% (p/v).
Acidez. Dissolver 20 g da amostra em 50 mL de
etanol previamente neutralizado. Adicionar 0,2 mL de
fenolftalena SI e titular com hidrxido de sdio 0,1 M. No
mximo 0,1 mL de hidrxido de sdio 0,1 M gasto para
neutralizar a soluo.
mximo 0,2%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,75 g da amostra e transferir
para erlenmeyer de 250 mL. Adicionar 25 mL de hidrxido
de potssio etanlico 0,5 M SV e algumas prolas de vidro.
Aquecer em banho-maria, sob refuxo, por uma hora.
Adicionar 1 mL de fenolftalena SI e titular imediatamente
com cido clordrico 0,5 M SV. Realizar ensaio em branco
e fazer as correes necessrias. Calcular o volume de
hidrxido de potssio etanlico 0,5 M SV utilizado na
saponifcao. Cada mL de hidrxido de potssio etanlico
12
H
14
O
4
.
Em recipientes bem fechados, completamente cheios,
protegidos da luz.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Adjuvante farmacutico.
fUROSEMIDA
furosemidum
S
N H
2
O O
N
O
COOH
Cl
H
C
12
H
11
ClN
2
O
5
S; 330,74
furosemida; 04361
cido 5-(aminossulfonil)-4-cloro-2-[(2-furanilmetil)
amino]-benzoico
[54-31-9]
C
12
H
11
ClN
2
O
5
DESCRIO
branco, inodoro.
solvel em acetona e dimetilformamida, solvel em
metanol, ligeiramente solvel em etanol, pouco solvel
em ter etlico e praticamente insolvel em clorofrmio.
Facilmente solvel em solues aquosas de hidrxidos
alcalinos.
IDENTIFICAO
de absoro no infravermelho (5.2.14). O espectro de
absoro no infravermelho da amostra, dispersa em brometo
furosemida SQR, preparado de maneira idntica.
hidrxido de sdio 0,1 M, exibe mximos em 228, 271 e
333 nm, idnticos aos observados no espectro de soluo
similar de furosemida SQR. As absorvncias das solues
em 271 nm, no diferem mais que 3%, quando calculadas
C. Dissolver cerca de 5 mg da amostra em 10 mL de
metanol. Transferir 1 mL desta soluo para balo de
refuxo, adicionar 10 mL de cido clordrico 2 M e submeter
a refuxo por 15 minutos. Esfriar e adicionar 15 mL de
hidrxido de sdio M e 5 mL de nitrito de sdio 0,1%
(p/v). Homogeneizar e aguardar por 3 minutos. Adicionar
5 mL de sulfamato de amnio 2,5% (p/v), homogeneizar e
adicionar 1 mL de soluo recm preparada de dicloridrato
f
de N-(1-naftil)etilenodiamina 0,5% (p/v). Desenvolve-se
colorao vermelho-violeta.
ENSAIOS DE PUREZA
Aminas primrias aromticas livres. Transferir 0,1 g da
amostra para balo volumtrico de 25 mL, com auxlio
de metanol. Agitar, completar o volume com o mesmo
solvente, homogeneizar e fltrar. Pipetar 1 mL do fltrado,
transferir para balo volumtrico de 25 mL, adicionar,
com agitao, 3 mL de dimetilformamida, 12 mL de gua
destilada e 1 mL de cido clordrico M. Esfriar e adicionar
1 mL de nitrito de sdio 0,5% (p/v), com agitao. Deixar
em repouso durante 5 minutos. Adicionar 1 mL de cido
sulfmico 2,5% (p/v) com agitao e deixar em repouso
por 3 minutos. Em seguida, adicionar 1 mL de soluo
de dicloridrato de N-(1-naftil)etilenodiamina 0,5% (p/v)
e diluir para 25 mL com gua destilada. Paralelamente,
realizar ensaio em branco, substituindo 1 mL do fltrado
por 1 mL de metanol. Realizar imediatamente a leitura
da absorvncia, em 530 nm. A absorvncia obtida no
superior a 0,20.
Cloretos (5.3.2.1). A 1 g da amostra, adicionar uma mistura
de 0,2 mL de cido ntrico e 30 mL de gua. Agitar durante
5 minutos, deixar em repouso durante 15 minutos e fltrar.
Utilizar 15 mL do fltrado. No mximo 0,02% (200 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). A 2 g da amostra, adicionar uma mistura
de 0,2 mL de cido actico e 30 mL de gua. Agitar durante
5 minutos, deixar em repouso por 15 minutos e fltrar.
Utilizar 15 mL do fltrado. No mximo 0,03% (300 ppm).
em 1 g de amostra. No mximo 0,002% (20 ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). Dessecar a 105
o
C, por 3
DOSEAMENTO
Dissolver 0,25 g da amostra em 20 mL de dimetilformamida,
adicionar 0,2 mL de soluo de azul de bromotimol a 1%
(p/v) em dimetilformamida e titular com hidrxido de sdio
0,1 M SV at colorao azul. Realizar ensaio em branco e
fazer as correes necessrias. Cada mL de hidrxido de
12
H
11
ClN
2
O
5
S.
Em recipientes opacos bem fechados.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Diurtico.
fUROSEMIDA COMPRIMIDOS
12
H
11
ClN
2
O
5
S.
IDENTIFICAO
O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa de
220 nm a 320 nm, da soluo fnal obtida no Doseamento
exibe mximos de absoro em 228 nm e 271 nm.
CARACTERSTICAS
separadamente, cada comprimido, e triturar. Transferir,
quantitativamente, para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar hidrxido de sdio 0,1 M, agitar, completar o
volume com o mesmo solvente e homogeneizar. Filtrar,
transferir 1 mL do fltrado para balo volumtrico de 50
mL e completar o volume com o mesmo solvente. Preparar
soluo padro na mesma concentrao, utilizando o mesmo
solvente. Medir as absorvncias em 271 nm (5.2.14),
12
H
11
ClN
2
O
5
S no comprimido,
clculo utilizando A(1%,1cm) = 580, em 271 nm.
Tempo: 60 minutos
dissoluo, fltrar e diluir com tampo fosfato pH 5,8 at
concentrao adequada. Medir as absorvncias das solues
em 271 nm (5.2.14), utilizando o mesmo solvente, para
12
H
11
ClN
2
O
5
S
a da soluo de furosemida SQR na concentrao de
0,0008% (p/v) preparada com o mesmo solvente.
declarada de C
12
H
11
ClN
2
O
5
ENSAIOS DE PUREZA
Aminas aromticas primrias livres. Pulverizar os
comprimidos e pesar do p o equivalente a 0,1 g de
furosemida. Transferir para balo volumtrico de 25 mL,
a
f
989
com auxlio de metanol. Agitar, completar o volume com
metanol, homogeneizar e fltrar. Prosseguir como descrito
em Aminas aromticas primrias livres, na monografa de
Furosemida, a partir de Pipetar 1 mL do fltrado.... A
absorvncia obtida no superior a 0,20.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de p, equivalente a 0,2 g de furosemida, para balo
volumtrico de 500 mL com auxlio de 300 mL de hidrxido
de sdio 0,1 M. Agitar por 10 minutos. Completar o volume
com o mesmo solvente, homogeneizar e fltrar. Diluir 5
mL do fltrado para 250 mL com hidrxido de sdio 0,1
M e homogeneizar. Preparar soluo padro na mesma
Calcular o contedo de C
12
H
11
ClN
2
O
5
S nos comprimidos
clculo utilizando A(1%,1cm) = 580, em 271 nm.
Em recipientes opacos bem fechados.
ROTULAGEM
fUROSEMIDA SOLUO INJETVEL
12
H
11
ClN
2
O
5
S.
IDENTIFICAO
A. Transferir volume da soluo injetvel contendo o
equivalente a 20 mg de furosemida para balo volumtrico
de 100 mL, completar o volume com gua e homogeneizar.
Diluir 5 mL da soluo para 100 mL com hidrxido de
sdio 0,1 M. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14)
da soluo obtida, na faixa de 220 nm a 340 nm, exibe
mximos em 228 nm e 271 nm, idnticos aos observados
no espectro de soluo similar de furosemida SQR.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 8,0 a 9,3.
ENSAIOS DE PUREZA
Aminas primrias aromticas livres. Transferir volume
da soluo injetvel contendo o equivalente a 40 mg de
furosemida para balo volumtrico de 10 mL, completar
o volume com metanol, homogeneizar e fltrar. Prosseguir
conforme descrito no ensaio de Aminas primrias
aromticas livres da monografa de Furosemida, a partir
de Pipetar 1 mL do fltrado.... A absorvncia obtida no
superior a 0,20.
mg de furosemida.
DOSEAMENTO
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Pipetar volume
da soluo injetvel contendo o equivalente a 20 mg de
furosemida, transferir para balo volumtrico de 100
mL, completar o volume com gua e homogeneizar.
Diluir 5 mL para 100 mL com hidrxido de sdio 0,1
M e homogeneizar. Preparar soluo padro na mesma
12
H
11
ClN
2
O
5
S na soluo
injetvel a partir das leituras obtidas. Alternativamente,
realizar os clculos considerando A (1%, 1 cm) = 580, em
271 nm, em hidrxido de sdio 0,1 M.
de alta efcincia (5.2.17.4). Proteger as solues da
exposio luz. Utilizar cromatgrafo provido de detector
mantida a 30 C; fuxo da Fase mvel de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de gua, tetraidrofurano e cido
actico glacial (70:30:1).
Diluente: diluir 22 mL de cido actico glacial em mistura
de gua e acetonitrila (50:50), completar o volume para
contendo o equivalente a 20 mg de furosemida para balo
volumtrico de 50 mL, completar o volume com Diluente
e homogeneizar. Transferir 5 mL da soluo para balo
f
volumtrico de 50 mL, completar o volume com o mesmo
solvente e homogeneizar.
de furosemida SQR no Diluente e diluir sucessivamente de
no maior que 2,0%.
C
12
H
11
ClN
2
O
5
S na soluo injetvel a partir das respostas
ROTULAGEM
a
g
991
GAZE DE PETROLATO
A gaze de petrolato a gaze hidrfla purifcada saturada
com petrolato branco. estril e pode ser preparada, sob
condies asspticas, na proporo de 60 g de petrolato
para cada 20 g de gaze, por adio de petrolato branco
derretido gaze hidrfla purifcada seca e previamente
cortada no tamanho fnal. O peso do petrolato na gaze , no
mnimo 70% e, no mximo, 80% e relao ao peso total da
gaze de petrolato.
O petrolato recuperado por drenagem em Doseamento
apresenta as mesmas caractersticas e cumpre os testes de
Descrio e Ensaios de Pureza descritos na monografa de
Petrolato branco.
CARACTERSTICAS
A gaze condicionada obtida em Doseamento cumpre os
testes de Contagem dos fos, Comprimento, Largura e
Gramatura descritos na monografa de Tecido de gaze
hidrfla purifcada.
DOSEAMENTO
Pesar, no mnimo, 20 unidades da amostra e transferir,
separadamente, para funil de vidro aquecido, mantendo
a temperatura em aproximadamente 75 C. Deixar que
o petrolato derreta e drene atravs do funil. A drenagem
pode ser facilitada pressionando a gaze com um basto de
vidro ou uma esptula de porcelana. Lavar a gaze sobre o
funil ou uma esptula de porcelana. Lavar a gaze sobre o
funil com pores sucessivas de 1,1,1-tricloroetano quente
at que a ela fque isenta de petrolato. Deixar o solvente
residual evaporar espontaneamente. Manter a gaze em
atmosfera padro de 65% 2% de umidade relativa e 21
C 1,1 C por, no mnimo, 4 h e pesar. A diferena entre
as duas pesagens representa o peso de petrolato.
Cada unidade de gaze de petrolato embalada
individualmente de forma a manter a esterilidade at que a
embalagem seja aberta para uso.
ROTULAGEM
Deve atender ao estipulado na legislao especfca.
GENCIANA
Gentianae rhizoma et radix
Gentiana lutea L. GENTIANACEAE
A droga vegetal constituda de rizomas e razes,
dessecados e fragmentados.
CARACTERSTICAS
forte e sabor amargo e persistente.
DESCRIO MACROSCPICA
Rizomas e razes apresentam-se em fragmentos cilndricos
de diferentes tamanhos. Em regra, os rizomas so maiores do
que as razes, atingindo at 6 cm de dimetro. As razes so
torcidas ou arqueadas, com profundas estrias longitudinais
e cicatrizes pequenas e ovais, oriundas de ramifcaes
secundrias. Os rizomas so robustos; externamente tm
cor castanho-amarelada a cinza-amarelada e apresentam
fendas longitudinais e numerosos sulcos anelares,
marcados por fleiras de pequenas cicatrizes. Rizomas e
razes entumescem consideravelmente em contato com a
umidade, tornando-se fexveis. A fratura no farincea,
nem fbrosa, e possui cor amarelada com manchas
avermelhadas. Em seco transversal, o rizoma apresenta
a zona cortical nitidamente demarcada por uma regio
externa suberosa, com linhas mais escuras, a qual ocupa 1/3
da seco. O cilindro central, de cor castanho-amarelada,
poroso e exibe fnas estrias radialmente.
DESCRIO MICROSCPICA
As clulas do felema (sber), em seco transversal,
possuem paredes delgadas, castanho-amareladas e esto
dispostas em 4 a 8 camadas. A feloderme composta
por vrias camadas, externamente com colnquima e
internamente com parnquima de clulas tangencialmente
alongadas, contendo cristais de oxalato de clcio na
forma de rfdes e gotas lipdicas. Esta regio se confunde
gradualmente com o parnquima cortical. O sistema
vascular separado da zona cortical por um cmbio bem
desenvolvido. No foema, destacam-se pequenos grupos de
tubos crivados, alm de clulas de parnquima. O xilema
predominantemente parenquimtico e apresenta elementos
de vaso dispersos, com paredes mostrando espessamentos
anelado, helicoidal ou reticulado. Os elementos de vaso
ocorrem isoladamente ou em pequenos grupos; o foema
interxilemtico (foema incluso) apresenta-se disperso em
pequenos grupos. A medula do rizoma parenquimtica e
bem desenvolvida. Nas clulas do parnquima encontram-
se gotas de leo e cristais aciculares ou prismas delgados
de oxalato de clcio. O amido quase completamente
ausente. Em estrutura secundria, a anatomia da raiz
semelhante do rizoma. A casca (incluindo o foema
secundrio) e o xilema secundrio so separados por ntido
g
cmbio e apresentam uma estrutura porosa com poucos
raios parenquimticos.
caractersticas: cor amarelada a amarelo-castanho;
fragmentos de clulas com gotas lipdicas; cristais
prismticos ou na forma de rfdes e gotas lipdicas livres;
fragmentos contendo cmbio; fragmentos contendo clulas
parenquimticas; so raramente visveis vasos lignifcados
reticulados, espiralados ou escalariformes. Fibras e
escleredes ausentes.
IDENTIFICAO
254
como
suporte, com espessura de 250 um, como fase estacionria,
e a mistura de acetona, cloreto de metileno, gua (70:30:2)
como fase mvel. Aplicar na cromatoplaca, separadamente,
em forma de banda, 15 a 20 uL da Soluo amostra e 5 a
10 uL da Soluo referncia, preparadas como descrito a
seguir:
Soluo amostra: Adicionar 20 mL de metanol a 2 g da
droga pulverizada e agitar durante 20 minutos. Filtrar
e evaporar o fltrado a secura sob presso reduzida
temperatura no superior a 50 C. Dissolver o resduo em 5
mL metanol, o qual pode conter um sedimento.
Soluo referncia: soluo de amarogentina 0,5% (p/v) e
de gentiopicrosdeo 0,12% (p/v) em metanol.
Desenvolver o cromatograma. Remover a cromatoplaca
e deixar secar ao ar por 15 minutos. Observar sob luz
ultravioleta (254 nm). Nebulizar a placa com vanilina
sulfrica SR, aquecer entre 100 C e 105 C, durante
5 minutos e visualizar sob luz visvel. A mancha
correspondente amarogentina apresenta colorao
marrom, com um valor de Rf em torno de 0,50. Na Soluo
amostra, observa-se, tambm, manchas castanhas na parte
inferior e manchas azul-violceas na parte superior do
cromatograma.
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 2 %.
gua (5.4.2.3). No mximo 8 %.
ndice de Amargor (5.4.2.12). No mnimo 10 000.
Pesar 1 g da droga pulverizada e adicionar 1000 mL de
gua fervente e deixar em banho-maria durante 30 minutos,
agitando ocasionalmente. Deixar esfriar e completar at
1000 mL com gua destilada. Agitar vigorosamente e
fltrar, descartando os primeiros 20 mL do fltrado.
Matria Extravel Com gua
Pesar 5 g da droga pulverizada, adicionar 200 mL de
gua fervente e manter sob agitao constante durante 10
minutos. Deixar esfriar e completar o volume para 200 mL
com gua destilada. Filtrar. Evaporar 20 mL do fltrado
secura. Secar o resduo em estufa a 100 C - 105 C at
peso constante. O resduo dever pesar no mnimo 0,165 g.
Em recipiente bem fechado e ao abrigo da luz e calor.
a
g
993
figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Gentiana lutea L.
_____________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A, B e C a 2 cm; em D a 150m; em E e f a 50 m.
A e B - aspecto geral dos rizomas; C - aspecto geral do rizoma em seco transversal; D - detalhe de uma poro do rizoma em seco transversal:
cmbio (ca), colnquima (co), elementos de vaso (ev), parnquima cortical (pc), periderme (pe), parnquima medular (pm), parnquima do xilema
(px); E - detalhe evidenciando a regio do felema e do felognio com sua poro colenquimtica e parenquimtica: colnquima (co) gotas lipdicas
(gl), parnquima cortical (pc), periderme (pe) sber (su); F. detalhe do xilema evidenciando vasos xilemticos: cmbio (ca), elementos de vaso (ev),
parnquima do xilema (px);
g
figura 2 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Gentiana lutea L.
_____________
Complemento da legenda da figura 2. A escala corresponde a 50 um.
Aspecto geral da droga em p: colnquima (co); clulas de parnquima (cp); elementos de vaso (ev); gotas lipdicas (gl); pores de periderme (pe);
pores de sber (su).
a
g
995
GENfIBROZILA
Gemfbrozilum
CH
3
C H
3
O
COOH
C H
3
CH
3
C
15
H
22
O
3
; 250,33
genfbrozila; 04421
cido 5-(2,5-dimetilfenoxi)-2,2-dimetilpentanico
[25812-30-0]
C
15
H
22
O
3
DESCRIO
branco, ceroso.
solvel em metanol.
IDENTIFICAO
amostra dispersa em brometo de potssio apresenta
observados no espectro de genfbrozila SQR, preparado de
maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: transferir 10 mL de cido actico glacial e
750 mL de metanol para balo volumtrico de 1000 mL.
Completar o volume com gua e homogeneizar.
Soluo (1): dissolver quantidades exatamente pesadas
de genfbrozila SQR, cido 5-[2,5-dimetil-4-(1-propenil)
fenoxi]-2,2-dimetilpentanico (Impureza A) SQR e
2,5-dimetilfenol em Fase mvel, de modo a obter soluo
com concentraes em torno de 0,2 mg/mL, 0,05 mg/mL e
0,05 mg/mL, respectivamente.
genfbrozila SQR e 10 mg de Impureza A SQR para balo
volumtrico de 100 mL, dissolver em 50 mL de metanol,
completar o volume com o mesmo solvente e homogeneizar.
mL, completar o volume com Fase mvel e homogeneizar.
amostra para balo volumtrico de 10 mL. Dissolver em
Fase mvel, completar o volume com o mesmo solvente e
homogeneizar.
Injetar replicatas de 100 L da Soluo (1). Os tempos de
reteno relativos so cerca de 0,35 para 2,5-dimetilfenol,
1,0 para genfbrozila e 2,1 para Impureza A. O desvio
no maior que 3,0%.
(2) e (3), registrar os cromatogramas por, no mnimo, trs
vezes o tempo de reteno do pico referente genfbrozila
e medir as reas sob os picos. Calcular a porcentagem de
Impureza A na amostra segundo a equao:
1000(C / W)(r
u
/ r
s
)
em que
C = concentrao, em mg/mL, de Impureza A SQR na
Soluo (2);
W = massa, em mg, de amostra pesada para o preparo da
Soluo (3);
r
u
e r
s
= rea sob os picos referentes Impureza A obtidos
com as Solues (3) e (2), respectivamente.
No mximo 0,1% de Impureza A. Calcular a porcentagem
de outras impurezas presentes na amostra segundo a
equao:
1000(C
G
/ W)(r
i
/ r
G
)
em que
C
G
= concentrao, em mg/mL, de genfbrozila SQR na
Soluo (2);
r
i
= rea sob o pico de cada impureza individual obtida na
Soluo (3);
r
G
=rea sob o pico de genfbrozila obtida na Soluo (2);
W = massa, em mg, de amostra pesada para o preparo da
Soluo (3)
No mximo 0,1% de qualquer outra impureza individual.
No mximo 0,5% de impurezas totais.
Metais pesados (5.3.2.3). Determinar em 1 g de amostra
utilizando o Mtodo III. No mximo 0,002% (20 ppm).
mximo 0,25%.
No mximo 0,1%.
g
DOSEAMENTO
comprimento e 3,9 de dimetro interno, empacotada com
slica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano (5 m),
mantida temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel 0,8
mL/minuto.
Fase mvel: transferir 10 mL de cido actico glacial e
800 mL de metanol para balo volumtrico de 1000 mL.
Completar o volume com gua e homogeneizar.
Dissolver em metanol e completar o volume com o mesmo
solvente. Homogeneizar. Transferir 5 mL desta soluo
com Fase mvel. Homogeneizar.
genfbrozila SQR e transferir para balo volumtrico de
25 mL. Dissolver em metanol e completar o volume com
o mesmo solvente. Homogeneizar. Transferir 5 mL desta
volume com Fase mvel. Homogeneizar.
Soluo de resoluo: preparar soluo a 0,2 mg/mL de
genfbrozila e 0,05 mg/mL de 2,5-dimetilfenol em Fase
mvel.
genfbrozila e 2,5-dimetilfenol no menor que 8,0. Injetar
replicatas de 10 L da Soluo padro. O desvio padro
maior que 2,0%.
15
H
22
O
3
na amostra
amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antilipmico.
GLIBENCLAMIDA
Glibenclamidum
Cl
OCH
3
N
S
N N O
H
O O O
H H
C
23
H
28
ClN
3
O
5
S; 494,00
glibenclamida; 04451
5-Cloro-N-[2-[4-[[[(cicloexilamino)carbonil]amino]
sulfonil]fenil]etil]-2-metoxibenzamida
[10238-21-8]
C
23
H
28
ClN
3
O
5
DESCRIO
em dimetilformamida, ligeiramente solvel em cloreto de
metileno, pouco solvel em etanol, metanol e clorofrmio,
praticamente insolvel em ter etlico.
Constantes fsico-qumicos.
Faixa de fuso (5.2.2): 169 C a 174 C.
IDENTIFICAO
de absoro no infravermelho (5.2.14). O espectro de
absoro no infravermelho da amostra, previamente
dessecada, dispersa em brometo de potssio, apresenta
observados no espectro de glibenclamida SQR, preparado
de maneira idntica.
B. Dissolver cerca de 50 mg da amostra em metanol,
utilizando banho de ultrassom, se necessrio, e completar
o volume para 50 mL com o mesmo solvente. Transferir
10 mL para balo volumtrico de 100 mL, adicionar 1 mL
de cido clordrico M e completar o volume com metanol.
O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14) da soluo
obtida, na faixa de 230 nm a 350 nm, exibe mximos em
300 nm e em 275 nm. A absorvncia a 300 nm de 0,61 a
0,65 e a 275 nm de 0,27 a 0,32.
posio quela obtida com a Soluo (3).
D. Aquecer ebulio cerca de 50 mg da amostra com 1
mL de hidrxido de sdio 6 M. O papel tornassol muda
a
g
997
de vermelho para azul quando umedecido pelos vapores
que se desprendem com a evaporao da gua, os quais
apresentam odor irritante, caracterstico das aminas.
E. Misturar 0,2 g da amostra com 0,25 g de carbonato de
sdio anidro e 0,25 g de carbonato de potssio anidro.
Incinerar a mistura por 10 minutos, esfriar, adicionar ao
resduo 10 mL de gua quente, agitar por 1 minuto e fltrar.
O fltrado responde s reaes dos ons cloreto e sulfato
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 1% (p/v) da amostra em
etanol, preparada com aquecimento, lmpida (5.2.25) e
incolor (5.2.12).
slica-gel GF
254
cicloexano, etanol e cido actico glacial (45:45:5:5),
descritas a seguir.
clorofrmio e metanol (1:1) e completar para 5 mL com o
mesmo solvente.
Soluo (2): dissolver 20 mg da amostra em mistura de
clorofrmio e metanol (1:1) e completar para 100 mL com
o mesmo solvente. Diluir 2 mL para 10 mL com o mesmo
solvente.
Soluo (3): dissolver 0,2 g de glibenclamida SQR em 10
mL de metanol e aquecer sob refuxo por 10 minutos.
Qualquer mancha secundria no cromatograma obtido
com a Soluo (1) no mais intensa que aquela obtida
com a Soluo (2) (0,2%). O teste somente vlido se o
cromatograma obtido com a Soluo (3) apresenta duas
manchas nitidamente separadas.
0,002% (20 ppm).
mximo 1,0%.
No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
A. Pesar cerca de 0,5 g da amostra, exatamente pesados,
e dissolver em 100 mL de etanol aquecido, previamente
neutralizado com hidrxido de sdio 0,1 M SV. Titular com
hidrxido de sdio 0,1 M SV utilizando fenolftalena SI
como indicador. Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV
23
H
28
ClN
3
O
5
S.
fuxo da Fase mvel 1,5 mL/minuto.
potssio monobsico em 900 mL de gua, ajustar o pH em
3,0 0,1 com cido fosfrico SR e diluir para 1000 mL
com gua.
(45:55).
Soluo amostra: transferir, exatamente, cerca de 22
mg da amostra para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 70 mL de metanol e deixar em ultrassom por 20
homogeneizar. Diluir, sucessivamente, com tampo fosfato
pH 7,3 at concentrao de 5,5 g/mL.
glibenclamida SQR para balo volumtrico de 100 mL,
C
23
H
28
ClN
3
O
5
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz e em local
fresco.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Hipoglicemiante oral.
GLIBENCLAMIDA COMPRIMIDOS
23
H
28
ClN
3
O
5
S.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Misturar em gral
quantidade do p equivalente a 20 mg de glibenclamida
com 20 mL de mistura de cloreto de metileno e acetona
g
(2:1). Filtrar, evaporar o fltrado at secura, temperatura
ambiente, e dessecar em estufa a 105 C, por 2 horas. O
no espectro de glibenclamida SQR, preparado de maneira
idntica.
B. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir
quantidade do p equivalente a 20 mg de glibenclamida
cido clordrico 0,5 M e agitar. Adicionar 100 mL de
metanol, deixar em ultrassom por 15 minutos e agitar
mecanicamente por mais 15 minutos. Completar o volume
com metanol e homogeneizar. Filtrar. O espectro de
absoro no ultravioleta (5.2.14) da soluo obtida, na
faixa de 230 nm a 350 nm, exibe mximos em 275 nm e
300 nm.
CARACTERSTICAS
Adicionar 2,5 mL de gua e aguardar desintegrao total
do comprimido. Adicionar 15 mL de metanol, deixar
em ultrassom por 20 minutos. Completar o volume com
metanol e homogeneizar. Filtrar. Proseguir conforme
Nota: antes do teste, o meio de dissoluo deve ser
aquecido a 41 C e desaerado, utilizando sistema de
fltrao sob vcuo, com agitao vigorosa. Manter a
agitao por cerca de 5 minutos aps o trmino da fltrao
no sistema, ainda sob vcuo. Filtrar as alquotas do meio
de dissoluo utilizando membrana com porosidade de
0,45 m compatvel com o meio de dissoluo.
Meio de dissoluo: tampo fosfato pH 7,3; 900 mL
Tempo: 60 minutos
3,0 0,1 com cido fosfrico e diluir para 1000 mL com
gua.
(45:55).
Soluo amostra: aps o teste, retirar alquota do meio de
dissoluo e fltrar.
C
23
H
28
ClN
3
O
5
S dissolvida no meio a partir das respostas
declarada C
23
H
28
ClN
3
O
5
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
cicloexano, etanol e cido actico glacial (45:45:5:5),
descritas a seguir.
Soluo (1): pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar em
gral quantidade do p equivalente a 40 mg de glibenclamida
com 20 mL de mistura de cloreto de metileno e acetona (2:1)
e fltrar. Evaporar o fltrado at secura, em temperatura no
excedente a 40 C, sob vcuo. Dissolver o resduo em 4 mL
de mistura de clorofrmio e metanol (1:1).
Soluo (2): soluo a 0,24 mg/mL de glibenclamida SQR
em mistura de clorofrmio e metanol (1:1).
Soluo (3): soluo a 10 mg/mL de glibenclamida SQR
em mistura de clorofrmio e metanol (1:1).
DOSEAMENTO
a
g
999
3,0 0,1 com cido fosfrico e diluir para 1000 mL com
gua.
(47:53).
Transferir, exatamente, quantidade do p equivalente a
cerca de 5 mg de glibenclamida para balo volumtrico
de 25 mL, adicionar 15 mL de mistura de metanol e gua
(10:1) e deixar em ultrassom por 20 minutos. Completar
o volume com o mesmo solvente, homogeneizar e fltrar.
adicionar 70 mL de mistura de metanol e gua (10:1) e
com o mesmo solvente e homogeneizar.
C
23
H
28
ClN
3
O
5
ROTULAGEM
GLICEROL
Glycerolum
C
3
H
8
O
3
; 92,09
glicerol; 04469
1,2,3-Propanotriol
[56-81-5]
C
3
H
8
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido xaroposo, incolor ou
quase incolor, lmpido, higroscpico.
Solubilidade. Miscvel com gua e etanol, praticamente
insolvel em benzeno, clorofrmio, ter de petrleo, leos
graxos e leos essenciais.
IDENTIFICAO
Misturar 1 mL da amostra e 0,5 mL de cido ntrico.
Acrescentar 0,5 mL de dicromato de potssio a 10,6%
(p/v). Na superfcie de contato desenvolve-se um anel azul
que, por 10 minutos, no se difunde na camada inferior.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Diluir 25 g da amostra para 50 mL
com gua isenta de dixido de carbono. A soluo lmpida
(5.2.25). Diluir 10 mL da soluo obtida para 25 mL com
gua. A soluo incolor (5.2.12).
Compostos clorados. Em balo de fundo redondo
adaptado a condensador acrescentar 5 g da amostra e 15
mL de morfolina. Aquecer, suavemente, sob refuxo, por 3
horas. Lavar o condensador com 10 mL de gua. Recolher
a gua de lavagem no balo. Transferir para tubo de
Nessler. Acidifcar com cido ntrico SR, acrescentar 0,5
mL de nitrato de prata 0,5 M e diluir para 50 mL com gua.
Agitar. Preparar padro, em tubo de Nessler, utilizando
15 mL de morfolina, 10 mL de gua e 0,2 mL de cido
clordrico 0,02 M. Prosseguir conforme descrito para a
preparao amostra a partir de Acidifcar.... Qualquer
turvao desenvolvida na preparao amostra no mais
intensa que aquela obtida com a preparao padro No
mximo 0,003% (30 ppm).
Acrolena, glicose e compostos amoniacais. Misturar
5 mL da amostra e 5 mL de hidrxido de potssio 10%
(p/v). Aquecer a 60 C por 5 minutos. No se desprendem
vapores de amnia. No se desenvolve colorao amarela.
Outras substncias redutoras. Misturar 5 mL de amostra
com 5 mL de hidrxido de amnio 10% (p/v) e aquecer
a 60 C por 5 minutos. Adicionar, rapidamente, 0,5 mL
de nitrato de prata 0,1 M, mantendo a ponta da pipeta
acima do tubo, fazendo a soluo cair diretamente sobre a
soluo sem tocar as paredes do tubo. Agitar e manter em
local escuro por 5 minutos. No ocorre escurecimento da
soluo.
cidos graxos e steres. Misturar 50 g da amostra com 100
mL de gua quente, recentemente fervida. Adicionar 1 mL
de fenolftalena SI e neutralizar com cido sulfrico 0,1 M.
Adicionar 15 mL de hidrxido de sdio 0,2 M. Aquecer sob
refuxo, por 5 minutos, esfriar e titular com cido sulfrico
0,1 M SV. Realizar ensaio em branco utilizando 140 mL de
gua, recentemente fervida. A diferena entre as titulaes
no maior que 1,6 mL.
Sacarose. A 4 mL da amostra adicionar 6 mL de cido
sulfrico 0,5 M. Aquecer por 1 minuto, esfriar e neutralizar
com hidrxido de sdio SR, utilizando papel de tornassol.
g
Adicionar 5 mL de tartarato cprico alcalino SR e aquecer
ebulio por 1 minuto. No ocorre formao de precipitado
Arsnio (5.3.2.5). Proceder conforme descrito em Mtodo
visual. No mximo 0,00015% (1,5 ppm).
Cloretos. A 10 mL de soluo da amostra a 10% (p/v)
adicionar 0,25 mL de cido ntrico SR e 0,5 mL de nitrato
de prata 0,1 M. Agitar. No ocorre turvao.
Metais pesados (5.3.2.3). Misturar 4 g da amostra com 2
mL de cido clordrico 0,1 M e diluir com gua para 25
mL. No mximo 0,0005% (5 ppm).
Sulfatos. A 10 mL de soluo da amostra a 10 % (p/v)
adicionar tres gotas de cido clordrico SR e cinco gotas de
cloreto de brio SR. No ocorre turvao.
mximo 2,0%.
No mximo 0,01%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,1 g da amostra, transferir
para erlenmeyer de 250 mL e dissolver em 45 mL de
gua. Adicionar 25 mL de mistura de cido sulfrico 0,1
M e periodato de sdio 2,14% (p/v) (1:20) e deixar em
repouso por 15 minutos, protegido da luz. Adicionar 5 mL
de etilenoglicol a 50% (p/v) e deixar em repouso por 20
minutos, protegido da luz. Titular com hidrxido de sdio
0,1 M SV utilizando 0,5 mL de fenolftalena SI. Realizar
mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV equivale a 9,210 mg
de C
3
H
8
O
3
.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Umectante, solvente.
GLICEROL SUPOSITRIOS
3
H
8
O
3
. Contm estearato de
sdio.
IDENTIFICAO
A. Dissolver sob aquecimento 12 supositrios em 125
mL de gua. Esfriar, adicionar 1,5 mL de cido clordrico
e transferir a mistura para funil de separao de 250
mL. Extrair com 75 mL de hexano, descartar a camada
aquosa e recolher a camada orgnica em um bquer.
Evaporar em banho-maria at secura. O espectro de
absoro no infravermelho (5.2.14) do resduo disperso
em leo mineral apresenta mximos de absoro somente
cido esterico SQR preparado de maneira idntica.
B. Dissolver 1 g de borato de sdio decaidratado em
100 mL de gua, adicionar 25 gotas de fenolftalena SI e
homogeneizar. Em um tubo de ensaio contendo 0,5 mL
dessa soluo adicionar duas gotas de um supositrio
previamente fundido. A cor rosa intensa completamente
descorada. Quando a soluo aquecida a colorao rosa
reaparece.
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 15,0%.
DOSEAMENTO
Pesar quantidade de supositrios equivalente a 0,25 g de
glicerina, dissolver em gua, completar o volume para 250
mL e fltrar. Transferir 5 mL desta soluo para erlenmeyer,
adicionar 50 mL de um reagente preparado pela mistura de
40 mL cido sulfrico a 5% (v/v) e 60 mL de periodato de
potssio a 0,1% (p/v) acidifcado com trs a cinco gotas
de cido sulfrico. Aquecer a soluo em banho-maria
durante 15 minutos, resfriar temperatura ambiente e
adicionar 1 g de iodeto de potssio. Deixar em repouso
durante 5 minutos. Titular com o tiossulfato de sdio
0,02 M SV, utilizando amido SI como indicador. Realizar
ensaio em branco e efetuar as correes necessrias. Cada
mL de tiossulfato de sdio 0,02 M SV equivale a 0,4604
mg de C
3
H
8
O
3
.
ROTULAGEM
a
g
1001
GLICINA
Glycinum
N H
2
O
OH
C
2
H
5
NO
2
; 75,07
glicina; 04472
Glicina
[56-40-6]
C
2
H
5
NO
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco, inodoro e de
sabor adocicado.
em etanol e muito pouco solvel em ter etlico.
IDENTIFICAO
amostra dessecada a 105 C, por 2 horas, dispersa em
leo mineral, apresenta mximos de absoro somente
glicina SQR, preparado de maneira idntica.
B. Preparar 2 mL de uma soluo a 10% (p/v) em gua
e adicionar 1 mL de cloreto frrico SR. Uma colorao
vermelho intensa observada, a qual desaparece pela
adio de um excesso de cido clordrico e reaparece pela
adio de um excesso de soluo concentrada de amnia.
C. Preparar 5 mL de uma soluo a 0,1% (p/v) em gua e
adicionar 1 mL de sulfato cprico SR. Uma colorao azul
intensa observada.
D. Preparar 5 mL de uma soluo a 10% (p/v) em gua e
adicionar cinco gotas de cido clordrico SR e cinco gotas
de nitrito de sdio 50% (p/v). Um intenso desprendimento
de gs incolor observado.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Ferver 10 mL de uma soluo 10%
(p/v) por 1 minuto e deixar em repouso durante 2 horas. A
Cloretos (5.3.2.1). Proceder conforme descrito em Ensaio
limite para cloretos. Determinar em 5 g de amostra. No
mximo 0,007% (70 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Preparar
12 mL de uma soluo a 10% (p/v) da amostra em gua
e proceder conforme Ensaio limite para metais pesados.
Utilizar Soluo padro de chumbo (1 ppm Pb). No
mximo 0,001% (10 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2.). Dissolver 4 g da amostra em 40 mL de
sulfatos, utilizando 0,5 mL da soluo padro de cido
Substncias facilmente carbonizveis. Dissolver 0,5 g de
glicina em 5 mL de cido sulfrico. A soluo deve ser
incolor.
amostra. Dessecar em estufa a 105C, por 2 horas. No
mximo 0,2%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
100 mL de cido actico glacial, aquecer brandamente para
facilitar a solubilizao. Adicionar duas gotas de cloreto de
metilrosanilnio SI e titular com cido perclrico 0,1 M SV
at mudana de cor de azul para azul-esverdeado. Proceder
a um ensaio em branco e fazer as correes necessrias.
mg de C
2
H
5
NO
2
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Aminocido no essencial.
GLICLAZIDA
Gliclazidum
S
N N
O O
C H
3
O
N
H H
C
15
H
21
N
3
O
3
S; 323,41
gliclazida; 04474
N-[[(Hexaidrociclopenta[c]pirrol-2(1H)-il)amino]
carbonil]-4-metilbenzenossulfonamida
[21187-98-4]
g
C
15
H
21
N
3
O
3
DESCRIO
branco.
solvel em cloreto de metileno, ligeiramente solvel em
acetona e pouco solvel em etanol.
IDENTIFICAO
observados no espectro de gliclazida SQR, preparado de
maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
Preparar as solues no momento do uso. Utilizar
cromatgrafo provido de detector ultravioleta a 235 nm;
coluna de 250 mm de comprimento e 4 mm de dimetro
grupo octilsilano (5 m), mantida temperatura ambiente;
Fase mvel: mistura de trietanolamina, cido trifuoractico,
acetonitrila e gua (0,1:0,1:45:55).
amostra em 23 mL de acetonitrila e diluir para 50 mL com
gua.
mistura de acetonitrila e gua (45:55). Diluir 10 mL da
soluo resultante para 100 mL com o mesmo diluente.
amostra e 15 mg de 1-(hexahidrociclopenta[c]pirol-2(1H)-
il)-3-[(2-metilfenil)sulfonil]ureia SQR em 23 mL de
acetonitrila e diluir para 50 mL com gua. Diluir 5 mL da
soluo resultante para 100 mL com mistura de acetonitrila
e gua (45:55).
1-(hexahidrociclopenta[c]pirol-2(1H)-il)-3-[(2-metilfenil)
sulfonil]ureia SQR em 45 mL de acetonitrila e diluir para
100 mL com gua. Diluir 1 mL da soluo resultante para
100 mL com mistura de acetonitrila e gua (45:55).
Injetar 20 L da Soluo (3). A resoluo entre os picos de
sulfonil]ureia e de gliclazida no menor que 1,8.
(1), (2) e (4). Correr o cromatograma da Soluo (1) at
o dobro do tempo de reteno da gliclazida, registrar
os cromatogramas e medir as reas sob os picos. No
cromatograma obtido com a Soluo (1), a rea de todos
os picos correspondentes a 1-(hexahidrociclopenta[c]
pirol-2(1H)-il)-3-[(2-metilfenil)sulfonil]ureia no maior
do que a rea sob o pico obtido com a Soluo (4) (0,1%).
A rea de todos os picos obtidos com a Soluo (1),
exceto a do pico principal e a do pico correspondente a
sulfonil]ureia, no maior do que a rea sob o pico
principal obtido com a Soluo (2) (0,1%). A soma das
reas de todos os picos obtidos com a Soluo (1) no
superior a duas vezes a rea sob o pico principal obtido
com a Soluo (2) (0,2%). Desconsiderar todos os picos
com rea inferior a 0,2 vezes a do pico principal obtido
com a Soluo (2) (0,02%).
mximo 0,001% (10 ppm). Preparar a soluo padro de
chumbo na concentrao de 10 ppm de Pb.
amostra. Dessecar em estufa a 100-105 C, por 2 horas. No
mximo 0,25%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
dessecada, e dissolver em 50 mL de cido actico glacial.
Titular com cido perclrico 0,1 M SV e determinar o ponto
fnal potenciometricamente. Cada mL de cido perclrico
15
H
21
N
3
O
3
S.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antidiabtico oral.
a
g
1003
GLICONATO DE COBRE
Cupri gluconas
C
12
H
22
CuO
14
; 453,84
gliconato de cobre; 04479
Bis(D-gliconato-O
1
,O
2
)-cobre
[527-09-3]
C
12
H
22
CuO
14
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, azul esverdeado.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, insolvel em
etanol e em benzeno.
Faixa de fuso (5.2.2): 155 C a 157 C.
IDENTIFICAO
A. Responde s reaes do on cobre (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias redutoras. Pesar 1 g da amostra, dissolver
em 10 mL de gua e adicionar 25 mL de citrato cprico
alcalino SR. Tampar o frasco, ferver suavemente por 5
minutos e resfriar rapidamente temperatura ambiente.
Adicionar 25 mL de cido actico 0,6 M, 10 mL de iodo
0,1 M SV e 10 mL de cido clordrico 3 M. Titular com
tiossulfato de sdio 0,1 M SV, adicionar 3 mL de amido
SI prximo ao ponto fnal. Fazer prova em branco e
anotar a diferena, em volumes, necessria. Cada mL da
diferena em volume da tiossulfato de sdio 0,1 M SV
equivalente a 2,7 mg de substncias redutoras (expressas
como dextrose). No mximo 1%.
de gua fervente e prosseguir conforme descrito em Ensaio
limite para cloretos. No mximo 0,07% (700 ppm).
limite para sulfatos. No mximo 0,05% (500 ppm).
Arsnio (5.3.2.5). Pesar 1 g de amostra e proceder
conforme o Mtodo I do Ensaio limite para arsnio. No
mximo 0,0003% (3 ppm).
Chumbo. Proceder conforme descrito no Mtodo II de
Espectrometria de absoro atmica (5.2.13.1). Utilizar
espectrofotmetro provido de forno de grafte, lmpada de
ctodo oco de chumbo e selecionar a linha de emisso em
283,3 nm. Utilizar a seguinte programao de temperatura,
utilizando a vazo de argnio de 3 litros por minuto, exceto
quando indicado: 70 C por 10 segundos, 90 C por 60
segundos, 120 C por 15 segundos, 250 C por 5 segundos
(sem fuxo de gs), 250 C por 10 segundos, 250 C por 2
segundos (sem fuxo de gs), e 2000 C por 3,2 segundos.
Nesta ltima temperatura, determinar a absorvncia.
Soluo padro: transferir 10 mL de chumbo SRA para um
balo volumtrico de 100 mL. Adicionar 40 mL de gua
e 5 mL de cido ntrico. Completar o volume com gua e
misturar. Transferir 0,4 mL desta soluo para um segundo
balo volumtrico. Adicionar 50 mL de gua e 1 mL de
cido ntrico. Completar o volume com gua e misturar.
Esta soluo contm 0,04 g/mL de chumbo.
Soluo amostra: transferir, exatamente, cerca de 4 g de
gliconato de cobre para um balo volumtrico de 100
mL. Adicionar 50 mL de gua e 5 mL de cido ntrico.
Colocar em banho de ultrassom at dissolver a substncia.
Completar o volume com gua e misturar. Transferir 4 mL
desta soluo para um segundo balo volumtrico de 100
mL. Adicionar 50 mL de gua e 1 mL de cido ntrico.
Completar o volume com gua e misturar.
Soluo branco: transferir 1,2 mL de cido ntrico para um
gua e misturar.
Preparar solues analticas a partir da Soluo padro,
da Soluo amostra e da Soluo branco nas seguintes
propores, em volume: 10:0:10; 10:4:6; 10:7:3 e 10:10:0.
Essas solues contm, respectivamente, 0; 0,008; 0,014
e 0,020 g/mL de chumbo. Injetar, separadamente, 20 L
da soluo branco e de cada uma das solues analticas.
Transferir os resultados de absorvncia e as concentraes
correspondentes para um grfco e calcular a concentrao
da Soluo amostra.
DOSEAMENTO
100 mL de gua. Adicionar 2 mL de cido actico glacial e 5
g de iodeto de potssio. Titular com tiossulfato de sdio 0,1
M SV at formao de colorao amarelo-clara. Adicionar
2 g de tiocianato de amnio. Misturar e adicionar 3 mL de
amido SI. Continuar a titulao at mudana de cor. Cada
de C
12
H
22
O
14
Cu.
g
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Suplemento alimentar.
GLICONATO DE MAGNSIO
Magnesii gluconas
O H
O
-
O OH
OH
OH
O H
Mg
2+
2
C
12
H
22
MgO
14
; 414,60
C
12
H
22
MgO
14
.2H
2
O; 450,63
gliconato de magnsio; 04480
Sal de magnsio do cido D-glicnico (1:2)
[3632-91-5]
Sal de magnsio do cido D-glicnico hidratado (1:2:2)
[59625-89-7]
C
12
H
22
MgO
14
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco.
Solubilidade. Solvel em gua, ligeiramente solvel em
etanol e insolvel em ter etlico.
IDENTIFICAO
A. Responde s reaes do on magnsio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19.). 6,0 a 7,8. Determinar em soluo a 5% (p/v).
Substncias redutoras. Pesar 1 g da amostra, dissolver em
20 mL de gua quente, resfriar e adicionar 25 mL de citrato
cprico alcalino SR. Tampar o frasco, ferver suavemente
por 5 minutos e resfriar rapidamente temperatura
ambiente. Adicionar 25 mL de cido actico 2 M, 10 mL
de iodo 0,1 M SV e 10 mL de cido clordrico 3 M. Titular
com tiossulfato de sdio 0,1 M SV, adicionando 3 mL de
amido SR prximo ao ponto fnal. Fazer prova em branco
e anotar a diferena em volumes necessria. Cada mL da
diferena em volume da soluo de tiossulfato de sdio
equivalente a 2,7 mg de substncias redutoras (expressas
como dextrose). No mximo 1%.
(1:1:10) como gases auxiliares chama do detector;
a 5% de fenilpolisiloxano e 95% a metilpolisiloxano, com
C a 260 C (35 C mantida durante 5 minutos, aumentada
a 175 C a 8 C por minuto, aumentada a 260 C a 35 C
e mantida a esta temperatura por pelo menos 16 minutos),
temperatura do injetor a 70 C e temperatura do detector a
compostos orgnicos, contendo em cada mL, 10 g de
da Soluo padro no cromatgrafo gs. Obter os
cromatogramas e medir a rea sob os picos. Identifcar,
baseado no tempo de reteno, qualquer pico presente
no cromatograma da soluo amostra. A presena e a
identifcao dos picos no cromatograma devem ser
estabelecidas comparando os cromatogramas da soluo
amostra e soluo padro. Limite: Benzeno 2 ppm,
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar Mtodo II. Dissolver 1,0 g de
amostra em 35 mL de gua. Proceder conforme Ensaio
limite para arsnio. No mximo 0,0003% (3 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Pesar 0,7 g de amostra e proceder
conforme descrito em Ensaio limite para cloretos. No
mximo 0,05% (500 ppm)
limite para sulfatos. No mximo 0,05% (500 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo I. Dissolver 1,0
g da amostra em 10 mL de gua, adicionar 6 mL de cido
clordrico 3,0 M e completar com gua para o volume
de 25 mL. Proceder conforme Ensaio limite para metais
pesados. No mximo 0,002% (20 ppm).
gua (5.2.20.1). Utilizar Mtodo indireto. No mximo
12,0%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 800 mg da amostra e dissolver
em 20 mL de gua. Adicionar 5 mL de cloreto de amnio
SR e 0,1 mL de negro de eriocromo T SI. Titular com
edetato dissdico 0,05 M SV at mudana de colorao
a
g
1005
para azul. Cada mL de edetato dissdico 0,05 M equivale a
20,730 mg de C
12
H
22
MgO
14
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Suplemento alimentar.
GLICOSE
Glucosum
O
OH
OH
O H
O H
OH
C
6
H
12
O
6
; 180,16
C
6
H
12
O
6
.H
2
O; 198,17
glicose; 04485
glicose monoidratada; 04486
D-Glicose
[50-99-7]
D-Glicose hidratada (1:1)
[77938-63-7]
C
6
H
12
O
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais incolores ou p cristalino
branco, inodoro, de sabor adocicado.
solvel em etanol.
10% (p/v) em hidrxido de amnio 0,012 M.
IDENTIFICAO
suporte, e mistura de lcool n-proplico, acetato de etila e
gua (70:20:10), como fase mvel. Preparar as seguintes
solues:
Soluo (1): dissolver 0,1 g de amostra em gua e completar
o volume para 10 mL.
Soluo (2): dissolver 0,1 g de glicose SQR em gua e
completar o volume para 10 mL.
Aplicar, separadamente, 2 l da Soluo (1) e da Soluo
(2) na placa cromatogrfca. Desenvolver o cromatograma,
permitindo que a frente do solvente ascenda 17 cm acima
da linha de aplicao, remover a placa da cuba e secar ao
ar. Nebulizar com soluo de periodato de sdio a 0,2%
(p/v). Secar a placa ao ar por 15 minutos e nebulizar
com soluo de 4,4-metilenobis-N,N-dimetilanilina a 2%
(p/v) em mistura de 20 volumes de cido actico glacial
e 80 volumes de acetona. A mancha principal obtida no
cromatograma da Soluo (1) corresponde em posio, cor
e intensidade quela obtida no cromatograma da Soluo
(2).
B. Dissolver 0,1 g da amostra em 10 mL de gua. Adicionar
3 mL de tartarato cprico alcalino SR e aquecer. Produz-se
precipitado vermelho.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 12,5 g da amostra em
gua e completar o volume para 25 mL. A soluo obtida
no mais intensamente colorida (5.2.12) que soluo
preparada pela mistura de 1 mL de cloreto cobaltoso SR,
3 mL de cloreto frrico SR e 2 mL de sulfato cprico SR
em gua sufciente para 10 mL, diluindo-se, em seguida,
1,5 mL desta soluo com gua para obter 25 mL. Fazer a
comparao sobre fundo branco em tubos de Nessler.
Acidez. Dissolver 5 g da amostra em 50 mL de gua isenta
de dixido de carbono, adicionar fenolftalena SI e titular
com hidrxido de sdio 0,02 M SV at colorao rsea.
No mximo 0,3 mL do titulante gasto para neutralizao.
Dextrinas e acares menos solveis. Dissolver 1 g da
amostra pulverizada em 30 mL de etanol a 90% (v/v) e
aquecer, sob agitao, em balo provido de coluna de
refuxo. Aps resfriamento, a soluo permanece lmpida.
Amido solvel e sulftos. Dissolver 1 g da amostra em
10 mL de gua e adicionar uma gota de iodo 0,1 M SV.
A soluo torna-se amarelada e no desenvolve colorao
azul.
Arsnio (5.3.2.5). Determinar em 1 g de amostra. No
mximo 0,0001% (1 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em 2 g de amostra. No
mximo 0,018% (180 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Determinar em 2 g de amostra. Para a
Preparao padro utilizar 1 mL de cido sulfrico 0,005
M. No mximo 0,025% (250 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Proceder ao ensaio em soluo
preparada pela dissoluo de 4 g em gua e completando o
volume para 25 mL. No mximo 0,0005% (5 ppm).
g
mximo 1,0% para glicose anidra e de 7,0% a 9,5% para
glicose monoidratada.
Nota: Quando a substncia destinada produo
de preparaes parenterais sem qualquer tratamento
adequado para remoo de endotoxinas bacterianas, a
amostra cumpre com o seguinte teste adicional.
Pirognios (5.5.2.1). Cumpre o teste. Injetar 10 mL/kg,
empregando soluo de glicose a 50 mg/mL em gua para
injetveis.
DOSEAMENTO
50 mL de gua, em erlenmeyer com tampa esmerilhada.
Adicionar 25 mL de iodo 0,05 M SV e 10 mL de soluo
de carbonato de sdio a 5% (p/v). Homogeneizar e deixar
em repouso por 20 minutos, protegido da luz. Adicionar 15
mL de cido clordrico diludo e titular o excesso de iodo
com tiossulfato de sdio 0,1 M SV, usando amido SI como
indicador. Realizar ensaio em branco e fazer as correes
necessrias. Cada mL de iodo 0,05 M SV equivale a 9,008
mg de C
6
H
12
O
6
e a 9,909 mg de C
6
H
12
O
6
.H
2
O.
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz,
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Adoante, energtico, excipiente.
GLICOSE SOLUO INJETVEL
6
H
12
O
6
. A soluo injetvel de
glicose uma soluo estril e incolor de glicose anidra
ou de glicose monoidratada em gua para injetveis. No
contm agentes antimicrobianos.
IDENTIFICAO
A. Aquecer uma poro da soluo injetvel com tartarato
cprico alcalino SR. Forma-se precipitado vermelho.
B. A soluo obtida em Doseamento dextrgira (5.2.8).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,2 a 6,5. Determinar em soluo contendo o
equivalente a 5% (p/v) de C
6
H
12
O
6
. Diluir a amostra com
gua para injetveis, se necessrio. Adicionar 0,3 mL de
soluo saturada de cloreto de potssio para cada 100 mL
de soluo.
ENSAIOS DE PUREZA
5-Hidroximetilfurfural e substncias relacionadas.
absoro no ultravioleta (5.2.14). Diluir volume da
soluo injetvel contendo o equivalente a 1 g de C
6
H
12
O
6

para 250 mL com gua. A absorvncia em 284 nm no
maior que 0,25.
Contaminao por partculas (5.1.7). Utilizar o Mtodo I
de Partculas sub-visveis (5.1.7.1). Cumpre o Teste A ou o
Teste B, conforme o volume dos recipientes.
Metais pesados (5.3.2.3). Transferir volume da soluo
injetvel equivalente a 4 g de glicose para um recipiente
adequado e ajustar o volume para 25 mL por evaporao
ou adio de gua, conforme necessrio. No mximo
0,0005% (5 ppm).
mL de soluo injetvel. Diluir em gua para injetveis, se
necessrio, at concentrao de 5% (p/v) de C
6
H
12
O
6
.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Determinao do poder
rotatrio e do poder rotatrio especfco (5.2.8). Transferir,
exatamente, volume da soluo injetvel contendo entre
2 g e 5 g de C
6
H
12
O
6
para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 0,2 mL de amnia 5 M e completar o volume com
gua. Homogeneizar e deixar em repouso por 30 minutos.
Determinar a rotao ptica em tubo de 2 dm. O ngulo
de rotao obtido, multiplicado por 0,9477, representa a
massa de C
6
H
12
O
6
presente no volume utilizado.
Em recipientes bem fechados, de dose nica, de plstico ou
de vidro, preferencialmente do tipo I ou II.
ROTULAGEM
a
g
1007
GUARAN
Paulliniae semen
Paullinia cupana Kunth SAPINDACEAE
A droga vegetal constituda pelas sementes desprovidas
de arilo e tegumento (casquilho), contendo, no mnimo,
5% de metilxantinas, calculadas como cafena (C
8
H
10
N
4
O
2
;
194,19) e, no mnimo, 4% de taninos.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga inodora, de
sabor amargo e fracamente adstringente.
DESCRIO MACROSCPICA
A semente globosa, quando nica no fruto, ou subesfrica
a elipside e levemente comprimida lateralmente, quando
2 ou 3, desigualmente convexa nos dois lados, geralmente
apresentando uma curta projeo apical. Em regra, tem 0,6
cm a 0,8 cm de dimetro, sendo coberta por um tegumento,
denominado de casquilho ou cascarilho, que deve ser
descartado. A semente sem o tegumento exalbuminada
e apresenta dois grandes cotildones carnosos, espessos e
frmes, desiguais, plano-convexos, de colorao castanho-
escura. A cicatriz do arilo mantm-se nos cotildones,
porm, enegrecida. O embrio pouco desenvolvido e
possui um curto eixo radculo-caulinar inferior.
DESCRIO MICROSCPICA
Os cotildones so constitudos por uma epiderme
unisseriada, formada por clulas alongadas tangencialmente
e por um parnquima cotiledonar de clulas arredondadas
ou arredondado-polidricas, de 40 m a 80 m de dimetro.
Contm gros de amido simples e compostos, de formas
variadas, globosos, poligonais, ovalados ou elpticos, de
10 m a 25 m de dimetro. O hilo central e por vezes
ramifcado. A maioria dos gros encontra-se aglutinada e
deformada devido ao aquecimento durante a torrefao.
caractersticos: cor castanho clara a castanho-avermelhada,
pores de clulas do parnquima cotiledonar, em geral
isodiamtricas, amareladas, com ou sem massas de
gros de amido aglutinados, massas de gros de amido
aglutinados, gros de amido isolados, com hilo central.
Fragmentos do tegumento, quando presentes at o limite
permitido, formados por clulas em paliada de paredes
muito espessas e pouco pontoadas, sinuosas em vista
frontal; clulas ptreas agrupadas ou isoladas.
DESCRIO MACROSCPICA DAS
IMPUREZAS
O tegumento, se presente como impureza, denominado
de casquilho ou cascarilho, apresenta testa brilhante,
glabra, castanho-avermelhada ou pardo-negra, com um
largo hilo guarnecido de um arilo carnoso, membranoso
e esbranquiado, que cobre a semente at no mximo da
sua poro mediana. Na ocasio da coleta ou dessecao, o
arilo retirado, deixando uma cicatriz de colorao pardo-
creme opaca, em forma de cpula, que ocupa at 1/3 do
eixo longitudinal da semente. Na dessecao, o tegumento
torna-se quebradio e separa-se facilmente dos cotildones.
DESCRIO MICROSCPICA DAS
IMPUREZAS
O tegumento, se presente como impureza, apresenta, em
seco transversal, uma epiderme formada por grandes
clulas, dispostas em paliada, de paredes espessas, com
poucas pontuaes. Estas apresentam paredes sinuosas,
em vista frontal. Abaixo da epiderme encontram-se vrias
camadas de um parnquima com clulas irregularmente
espessadas, de aparncia parda. Ocorrem numerosas
clulas ptreas, de paredes nitidamente pontoadas.
IDENTIFICAO
A. Caracterizao da presena de taninos. Proceder
(5.2.17.1), utilizando slica-gel GF
254
, com espessura
de 250 m, como suporte, e mistura de acetato de etila,
cido frmico e gua (90:5:5), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): pesar 1 g da droga pulverizada e transferir
para balo de fundo redondo. Adicionar 20 mL de gua e
aquecer sob refuxo durante 15 minutos. Filtrar atravs de
algodo e concentrar 4 mL do fltrado secura em banho-
maria. Ressuspender o resduo em 1 mL de metanol.
Soluo (2): soluo a 1 mg/mL de catequina em metanol.
mancha principal, obtida com a Soluo (1) corresponde
em posio, cor e intensidade de fuorescncia quela
obtida com a Soluo (2). Em seguida, nebulizar a placa
com vanilina sulfrica SR. A mancha correspondente
catequina (Rf 0,72 aproximadamente) apresenta colorao
vermelho fugaz.
B. Caracterizao da presena de metilxantinas. Proceder
(5.2.17.1), utilizando slica-gel GF
254
, como suporte, e
mistura de clorofrmio, etanol e cido frmico (90:8:2),
L da Soluo (1) e 5 L da Soluo (2), recentemente
Soluo (1): pesar 1 g da droga pulverizada e transferir para
erlenmeyer com tampa. Adicionar 3 mL de hidrxido de
g
amnio a 25% (v/v) e 40 mL de cloreto de metileno. Agitar
por 15 minutos em agitador magntico. Filtrar atravs de
algodo e concentrar 5 mL do fltrado secura em banho-
maria. Ressuspender o resduo em 1 mL de metanol.
Soluo (2): soluo a 1 mg/mL de cafena SQR em
metanol.
Soluo (3): soluo a 1 mg/mL de teoflina SQR em
metanol.
O cromatograma, obtido com a Soluo (1), apresenta
duas manchas principais, que correspondem em posio,
cor e intensidade de fuorescncia quelas obtidas com
as Solues (2) e (3). Em seguida, nebulizar a placa
com iodo SR. A mancha correspondente teoflina (Rf
0,50 aproximadamente) apresenta colorao violcea
fugaz e a mancha correspondente cafena (Rf 0,70
aproximadamente) apresenta colorao castanho-
avermelhada.
C. Pesar 3 g da droga pulverizada e transferir para balo
de fundo redondo. Adicionar 60 mL de gua e aquecer sob
refuxo por 15 minutos. Deixar esfriar e fltrar. A 2 mL do
extrato obtido, adicionar duas gotas de cido clordrico
diludo e gotejar gelatina SR. Produz precipitado ntido.
D. A 2 mL do extrato obtido no mtodo C. de Identifcao,
adicionar 10 mL de gua e quatro gotas de cloreto frrico
metanlico. Desenvolve colorao cinza escuro.
E. A 2 mL do extrato obtido no mtodo C. de Identifcao,
adicionar 0,5 mL de vanilina a 1% (p/v) e 1 mL de cido
clordrico. Desenvolve colorao vermelha.
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 3%, incluindo o
casquilho.
gua (5.4.2.3). No mximo 9,5%.
DOSEAMENTO
Taninos totais
Nota: Proteger as amostras da luz durante a extrao e a
diluio. Utilizar gua isenta de dixido de carbono em
todas as operaes.
absoro no visvel (5.2.14). Preparar solues como
descritas a seguir.
Soluo estoque: pesar, exatamente, 0,75 g da droga
moda, transferir para erlenmeyer e adicionar 150 mL de
gua. Aquecer at fervura e manter em banho-maria
temperatura de 80 C a 90 C por 30 minutos. Resfriar em
gua corrente, transferir a mistura para balo volumtrico
de 250 mL e completar o volume com gua. Deixar decantar
o sedimento e fltrar atravs de papel de fltro. Desprezar os
primeiros 50 mL do fltrado.
Soluo amostra para polifenis totais: transferir 5 mL
da Soluo estoque para balo volumtrico de 25 mL e
completar o volume com gua. Misturar 5 mL desta soluo
com 2 mL de cido fosfotngstico SR e diluir a 50 mL com
carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da soluo
(A
1
) em 691 nm (5.2.14), exatamente 3 minutos aps a
adio do ltimo reagente, utilizando gua como branco.
Soluo amostra para polifenis no adsorvidos pelo p
de pele: adicionar 0,2 g de p de pele SQR a 20 mL da
Soluo estoque e agitar mecanicamente por 60 minutos.
Filtrar. Diluir 5 mL dessa soluo para 25 mL com gua.
Misturar 5 mL da soluo anterior com 2 mL de cido
fosfotngstico SR e diluir a 50 mL com carbonato de
sdio SR. Medir a absorvncia da soluo (A
2
) em 691 nm
(5.2.14), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo
reagente, utilizando gua como branco.
Soluo referncia: dissolver 50 mg de pirogalol em gua
e diluir a 100 mL. Diluir 5 mL desta soluo a 100 mL
com gua. Misturar 5 mL desta soluo com 2 mL de
cido fosfotngstico SR e diluir a 50 mL com carbonato
de sdio SR. Medir a absorvncia da soluo (A
3
) em 691
nm (5.2.14), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo
reagente e dentro de 15 minutos contados da dissoluo do
pirogalol, utilizando gua como branco.
Calcular o teor de taninos pela expresso:
em que
TT = taninos totais;
A
1
= absorvncia medida da Soluo amostra para
polifenis totais;
A
2
polifenis no adsorvidos pelo p de pele;
A
3
= absorvncia medida da Soluo padro;
m = massa da droga vegetal considerando a determinao
de gua.
Metilxantinas
absoro no ultravioleta (5.2.14). Preparar solues como
descrito a seguir.
Soluo amostra: Pesar, exatamente, cerca de 0,25 g da
droga pulverizada e extrair com 20 mL de cido sulfrico
a 2,5% (v/v), com agitao mecnica, durante 15 minutos,
por quatro vezes. Filtrar as pores para balo volumtrico
de 100 mL. Completar o volume com o mesmo solvente.
Transferir uma alquota de 10 mL desta soluo para balo
sulfrico a 2,5% (v/v).
Solues para curva analtica: Preparar a curva analtica
de cafena dissolvendo, exatamente, 50 mg de cafena
SQR em 100 mL de cido sulfrico a 2,5% (v/v), obtendo
soluo estoque a 0,05% (p/v). Preparar as solues de
a
g
1009
referncia transferindo alquotas de 1 mL; 2 mL; 3 mL;
4 mL e 5 mL da soluo estoque, separadamente, para
bales volumtricos de 100 mL. Completar o volume com
cido sulfrico a 2,5% (v/v), de forma a obter solues a
5 g/mL, 10 g/mL, 15 g/mL, 20 g/mL e 25 g/mL,
respectivamente.
Medir a absorvncia da Soluo amostra e das Solues
para curva analtica em 271 nm (5.2.14), utilizando
soluo de cido sulfrico a 2,5% (v/v) para ajuste do
zero. Calcular o teor de cafena (metilxantinas) na amostra
a partir da equao da reta obtida com as Solues para
curva analtica da cafena.
g
figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Paullinia cupana Kunth
______________
Legenda da figura 1. As escalas correspondem: em A e B (4 cm), em C at H (100 m).
A aspecto geral da semente. B aspecto geral dos cotildones. C seco transversal da poro externa de um cotildone; epiderme cotiledonar (epc);
clula contendo gros de amido (ga); parnquima cotiledonar (pct). D detalhe dos gros de amido. E clulas epidrmicas dos cotildones em vista
frontal. f clulas parenquimticas dos cotildones. G detalhe da seco transversal do tegumento da semente; clulas ptreas (cp); epiderme do
tegumento (ep); parnquima (p). H clulas epidrmicas do tegumento em vista frontal.
a
h
1011
HALOPERIDOL
Haloperidolum
N
F
O
OH
Cl
C
21
H
23
ClFNO
2
; 375,86
haloperidol; 04589
4-[4-(4-Clorofenil)-4-hidroxi-1-piperidinil]-1-(4-
fuorfenil)-1-butanona
[52-86-8]
C
21
H
23
ClFNO
2
DESCRIO
microcristalino ou amorfo.
acetona, benzeno, clorofrmio e metanol, pouco solvel
em etanol e cloreto de metileno. Facilmente solvel em
cidos diludos.
Faixa de fuso (5.2.2): 148 C a 151 C. Determinar em
amostra dessecada em estufa a 105 C, por 1 hora.
IDENTIFICAO
da amostra dessecada a 105 C e dispersa em brometo
haloperidol SQR, preparado de maneira idntica.
em mistura de cido clordrico 0,1 M e lcool isoproplico
(1:9), exibe mximo em 245 nm. A absorvncia em 245 nm
no difere mais que 3,0% da leitura de soluo similar de
haloperidol SQR.
E. Dissolver 10 mg da amostra em 5 mL de etanol, adicionar
0,5 mL de 1,3-dinitrobenzeno SR e 0,5 mL de hidrxido de
potssio etanlico 2 M. Desenvolve-se colorao violeta,
passando para vermelha-acastanhada aps 20 minutos.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 0,2 g da amostra em 20
mL de cido lctico a 1% (v/v). Deixar em ultrassom, se
necessrio, at completa dissoluo. A soluo lmpida
(5.2.25) e no mais corada que a Soluo padro de cor
SC F (5.2.12) diluda a 2,5% (v/v) em gua.
slica-gel GF
254
cido actico glacial e metanol (80:10:10), como fase
Soluo (1): soluo da amostra a 10 mg/mL em cloreto
de metileno.
Soluo (3): soluo de haloperidol SQR a 1 mg/mL em
placa, deixar secar sob corrente de ar durante 15 minutos.
Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). Qualquer mancha
No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver, exatamente, cerca de 0,3 g
da amostra em 30 mL de cido actico glacial. Adicionar
cinco gotas de 1-naftolbenzena SI e titular com cido
perclrico 0,1 M SV at mudana de cor de amarelo-
alaranjado para verde. Realizar ensaio em branco e fazer as
21
H
23
ClFNO
2
.
m), mantida a 30 C; fuxo da fase mvel de 1 mL/minuto.
h
Fase mvel: mistura de metanol, fosfato de potssio
monobsico 0,05 M, tetraidrofurano e trietilamina
(50:47:3:0,3). Ajustar o pH em 3,5 0,1 com cido
fosfrico SR.
da amostra em Fase mvel de modo a obter soluo a 10
g/mL.
de haloperidol SQR em Fase mvel de modo a obter
soluo a 10 g/mL.
2,0%.
C
21
H
23
ClFNO
2
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antipsictico.
HALOPERIDOL COMPRIMIDOS
21
H
23
ClFNO
2
.
IDENTIFICAO
quantidade do p equivalente a 10 mg de haloperidol para
funil de separao, adicionar 10 mL de gua e 1 mL de
hidrxido de sdio M. Extrair com 10 mL de clorofrmio
saturado de gua. Filtrar e evaporar at secura. O espectro
de absoro no infravermelho (5.2.14) do resduo, disperso
haloperidol SQR, preparado de maneira idntica.
CARACTERSTICAS
Adicionar 30 mL de metanol a quente e deixar em
ultrassom por 15 minutos. Agitar, mecanicamente, por 15
minutos, completar o volume com metanol e fltrar. Diluir
se necessrio, em metanol, de modo a obter concentrao
de 0,002% (p/v). Preparar soluo de haloperidol SQR
Medir as absorvncias das solues resultantes em 245 nm
(5.2.14), utilizar metanol para ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
21
H
23
ClFNO
2
em cada comprimido, a partir
Meio de dissoluo: fuido gstrico simulado (sem enzima),
900 mL
Tempo: 60 minutos
Procedimento: proceder conforme descrito em
ligada a grupo octadecilsilano (5 um), mantida a 30 C;
monobsico 0,05 M (60:40). Ajustar o pH da mistura
para 4,0 0,1 com cido fosfrico ou hidrxido de sdio
diludo.
Soluo amostra: aps o teste, retirar alquota do meio
de dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, com meio de
dissoluo, de modo a obter concentrao aproximada de
1,11 ug/mL.
Soluo padro: transferir, exatamente, cerca de 27,75 mg
de haloperidol SQR para balo volumtrico de 250 mL.
Dissolver com 5 mL de metanol, completar o volume com
meio de dissoluo e homogeneizar. Diluir sucessivamente
esta soluo, com meio de dissoluo, de modo a obter
concentrao aproximada de 1,11 ug/mL.
Injetar replicatas de 100 uL da Soluo padro. O fator de
cauda no superior a 2. O desvio padro relativo no deve
ser maior que 3,0%.
21
H
23
ClFNO
2

a
h
1013
dissolvida no meio a partir das respostas obtidas com a
declarada de C
21
H
23
ClFNO
2
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel G, como suporte, e mistura de clorofrmio, cido
actico glacial e metanol (80:10:10), como fase mvel.
Aplicar separadamente, placa, 10 uL de cada uma das
quantidade do p equivalente a 10 mg de haloperidol com
10 mL de clorofrmio. Filtrar e evaporar o resduo at
secura. Dissolver o resduo com 1 mL de clorofrmio.
clorofrmio.
clorofrmio.
secar ao ar e nebulizar com iodobismutato de potssio
SR. Qualquer mancha secundria obtida no cromatograma
da Soluo (1), diferente da mancha principal, no
mais intensa que aquela obtida com a Soluo (2) (1%),
e somente uma mais intensa que aquela obtida com a
Soluo (3) (0,5%).
DOSEAMENTO
um), mantida a 30C; fuxo da Fase mvel de 1 mL/minuto.
monobsico 0,05 M (60:40). Ajustar o pH da mistura
para 4,0 0,1 com cido fosfrico ou hidrxido de sdio
diludo.
Transferir quantidade da amostra equivalente a 5 mg de
haloperidol para balo volumtrico de 50 mL. Adicionar 30
volume com Fase mvel, homogeneizar e fltrar. Transferir
5 mL para balo volumtrico de 50 mL e completar o
volume com Fase mvel.
de haloperidol SQR para balo volumtrico de 250 mL.
Dissolver com 5 mL de metanol, completar o volume com
Fase mvel e homogeneizar. Diluir sucessivamente essa
soluo, com Fase mvel, de modo a obter concentrao
aproximada de 10 ug/mL.
cauda no superior a 2. O desvio padro relativo das reas
21
H
23
ClFNO
2

ROTULAGEM
HALOPERIDOL SOLUO INJETVEL
21
H
23
ClFNO
2
. A soluo injetvel
pode conter cido lctico e conservantes adequados.
IDENTIFICAO
200 a 400 nm, da soluo amostra obtida em Doseamento,
exibe mximos de absoro em 245 nm, idnticos aos
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,0 a 3,8.
mg de haloperidol.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Espectrofotometria
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Transferir
quantitativamente volume de amostra equivalente a 10
mg de haloperidol para um funil de separao e adicionar
20 mL de cido clordrico a 5% (v/v). Extrair com quatro
pores de 25 mL de ter etlico. Juntar as fases etlicas e
adicionar 3 pores de 5 mL de cido clordrico diludo
(1 em 20). Adicionar as pores do cido clordrico fase
aquosa. Transferir para um balo volumtrico de 50 mL,
completar o volume com cido clordrico a 5% (v/v) e
agitar. Transferir 5 mL dessa soluo para balo volumtrico
de 50 mL e completar o volume com metanol. Preparar
soluo de haloperidol SQR na mesma concentrao,
utilizando os mesmos solventes. Medir as absorvncias das
h
solues resultantes em 245 nm, utilizando 5 mL de cido
clordrico a 5% (v/v) em 50 mL de metanol para ajuste
21
H
23
ClFO
2
na soluo
injetvel a partir das leituras obtidas.
ROTULAGEM
HALOPERIDOL SOLUO ORAL
21
H
23
ClFNO
2
. A soluo oral
pode conter cido lctico e conservantes adequados.
IDENTIFICAO
A. Transferir volume da soluo oral equivalente a 10 mg
de haloperidol para funil de separao. Adicionar 1 mL de
hidrxido de sdio M, homogeneizar e extrair com uma
poro de 10 mL de clorofrmio. Descartar a fase aquosa.
Evaporar o extrato at secura. O resduo responde ao teste
A. de Identifcao da monografa de Haloperidol.
CARACTERSTICAS
pH (5.1.19). 2,5 a 3,5.
ENSAIOS DE PUREZA
utilizando slica-gel G como suporte e mistura de cloreto
de metileno, metanol e amnia 13,5 M (92:8:1) como fase
Soluo (1): diluir a soluo oral, se necessrio, com
metanol, de modo a obter soluo de haloperidol a 1 mg/mL.
metanol.
metanol.
secar ao ar. Nebulizar com iodobismutato de potssio
diludo SR. Qualquer mancha secundria obtida no
Soluo (2) (1%) e somente uma mais intensa que aquela
obtida com a Soluo (3) (0,5%).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Transferir
quantitativamente volume de amostra equivalente a 10
mg de haloperidol para um funil de separao e adicionar
20 mL de cido clordrico diludo (1 em 20). Extrair com
quatro pores de 25 mL de ter etlico. Juntar as fases
etlicas e adicionar trs pores de 5 mL de cido clordrico
diludo (1 em 20). Adicionar as pores do cido clordrico
fase aquosa. Transferir para balo volumtrico de 50
mL, completar o volume com cido clordrico diludo
(1 em 20) e agitar. Transferir 5 mL dessa soluo para
metanol. Preparar soluo de haloperidol SQR na mesma
utilizando 5 mL de cido clordrico diludo (1 em 20) em 50
mL de metanol para ajuste do zero. Calcular a quantidade
de C
21
H
23
ClFNO
2
na soluo injetvel a partir das leituras
obtidas.
da monografa de Haloperidol. Preparar Soluo amostra e
Soluo de resoluo como descrito a seguir.
equivalente a 10 mg de haloperidol para balo volumtrico
contendo, aproximadamente, 10 mg de haloperidol SQR,
3 mg de metilparabeno e 3 mg de propilparabeno por
mililitro.
Injetar, separadamente, replicatas de 20 L das Solues
padro e de resoluo e registrar os cromatogramas. Medir
a rea sob o pico correspondente ao haloperidol. O fator
de cauda no superior a 2. O desvio padro relativo das
reas de replicatas dos picos registrados para o haloperidol
no deve ser maior que 2,0%. A resoluo entre o pico
correspondente ao haloperidol e os picos correspondentes
ao metilparabeno e ao propilparabeno no menor que 2.
21
H
23
ClFNO
2

a
h
1015
na soluo oral a partir das respostas obtidas para a Soluo
ROTULAGEM
HALOTANO
Halothanum
F
Cl
F F
Br
C
2
HBrClF
3
; 197,38
halotano; 04596
2-Bromo-2-cloro-1,1,1-trifuoretano
[151-67-7]
timol, em peso, como estabilizador.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido denso, incolor, mvel, no
infamvel, de odor caracterstico que se assemelha ao do
clorofrmio, sabor doce e produz sensao de queimadura.
Solubilidade. Levemente solvel em gua, miscvel em
etanol, clorofrmio, ter etlico e em leos fxos.
IDENTIFICAO
A. Adicionar 5 mL de cido sulfrico a 5 mL da amostra.
O cido forma uma camada sobre a amostra (diferenciao
do clorofrmio e do tricloroetileno).
B. Em 0,3 mL da amostra contidos num tubo de ensaio de
vidro de borossilicato 12 x 75 mm, adicionar um fragmento
de sdio limpo de cerca de 8 mm de dimetro e deixe
repousar por alguns minutos. Prenda o tubo em posio
vertical e aquea brandamente com um microqueimador
at que o metal funda e a reao comece. Em seguida retire
a fonte de calor e resfrie o tubo. Adicionar cautelosamente
2 mL de gua e deixar a reao se completar. Filtrar a
soluo e adicionar 0,5 mL de cido actico glacial ao
fltrado. Adicionar duas gotas dessa soluo a uma mistura
de 0,1 mL de alizarina SI, recentemente preparada, e 0,1
mL de nitrato de zirconila SR. H mudana de colorao
de vermelho para amarela.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Agitar 20 mL da amostra em 20
mL de gua isenta de dixido de carbono por 3 minutos
e deixar as camadas se separarem. A camada aquosa
requer, no mximo, 0,1 mL de hidrxido de sdio 0,01
M ou no mximo 0,6 mL de cido clordrico 0,01 M para
neutralizao, utilizando-se prpura de bromocresol SI
como indicador.
Cloreto e brometo. Agitar 25 mL da amostra em 25 mL
de gua por 5 minutos e deixar os lquidos se separarem
completamente. Retirar a camada aquosa e a 10 mL da
mesma, adicionar uma gota de cido ntrico e cinco gotas
de nitrato de prata SR. No deve produzir opalescncia.
Timol.
Soluo padro de timol: preparar soluo de timol a 0,1
mg/mL em hidrxido de sdio 0,25 M.
Soluo tampo: utilizar tampo de borato pH 8,0.
Soluo de clorimida: dissolver 100 mg de
2,6-dibromoquinona-4-clorimida em 25 mL de etanol
absoluto. A soluo deve ser recentemente preparada.
Curva padro de timol: pipetar 1 mL, 3 mL e 5 mL de
Soluo padro de timol respectivamente em trs bales
volumtricos de 100 mL, e adicionar, se necessrio,
hidrxido de sdio 0,25 M, para perfazer o volume de 5
mL. Adicionar 5 mL de hidrxido de sdio 0,25 M em um
quarto balo para preparao do branco. Adicionar 10 mL
de Soluo tampo em cada balo, agitar brandamente e
adicionar 1 mL de Soluo de clorimida. Deixar repousar
exatamente por 15 minutos, adicionar 3 mL de soluo de
hidrxido de sdio 0,25 M e completar o volume com gua.
Com espectrofotmetro adequado, medir as absorvncias
das solues contendo timol e a do branco a 590 nm.
Faa um grfco das leituras e trace a curva da melhor
concordncia.
Procedimento: colocar 2 mL da amostra, exatamente
medidos, em balo volumtrico de 100 mL contendo
5 mL de soluo de hidrxido de sdio 0,25 M e agitar
brandamente. Evaporar o halotano sob uma corrente de
nitrognio e adicionar 10 mL de Soluo tampo e 1 mL
de Soluo de clorimida. Agitar brandamente e deixar
repousar exatamente por 15 minutos, adicionar 3 mL de
hidrxido de sdio 0,25 M e completar volume com gua.
Ler a absorvncia da soluo resultante e por referncia a
Curva padro de timol, calcular a porcentagem de timol no
peso de halotano utilizado.
Resduo por evaporao. Evaporar 50 mL da amostra,
numa cpsula tarada, em banho-maria at secura. Dessecar
o resduo em estufa a 105 C por 2 horas. O peso do resduo
no deve exceder 1 mg.
h
ROTULAGEM
De acordo com legislao vigente.
CLASSE TERAPUTICA
Anestsico geral (inalao)
HAMAMLIS TINTURA
Hamamelidis tinctura
Hamamelis virginiana L. HAMAMELIDACEAE
A tintura obtida a partir das folhas contendo, no mnimo,
0,6% de taninos totais, expressos em pirogalol (C
6
H
6
O
3
,
126,1), (p/p).
PREPARAO
A tintura de hamamlis obtida a partir de 1 parte da
droga vegetal em 10 partes de etanol a 65% (v/v), por um
procedimento adequado.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Lquido de colorao
castanho-amarelada e sabor adstringente.
IDENTIFICAO
254
, com espessura
de 250 m, como suporte, e mistura de acetato de etila,
tolueno, cido frmico e gua (60:20:15:15), como fase
mvel. Aplicar, separadamente, placa, em forma de
banda, 20 uL da Soluo (1) e 10 uL da Soluo (2) e da
Soluo (3), recentemente preparadas, como descrito a
seguir.
Soluo (1): reduzir 5 mL da tintura de hamamlis a resduo
seco em banho-maria. Retomar o resduo em 10,0 mL de
gua. Extrair a fase aquosa resultante com trs pores de
10 mL de acetato de etila em funil de separao de 125 mL.
Deixar em repouso em freezer a -18 C por 15 minutos,
para total separao das fases. Reunir as fases orgnicas e
lavar com 20 mL de gua.
Soluo (2): pesar cerca de 1 mg de cido glico e dissolver
Soluo (3): pesar cerca de 1 mg de catequina e dissolver
secar em capela de exausto. Em seguida, nebulizar a placa
com cloreto frrico a 1% (p/v) em metanol. Uma mancha de
colorao amarela e duas manchas inferiores de colorao
azul-acinzentada mais intensa obtidas com a Soluo (1),
no tero superior do cromatograma, correspondem em
posio quelas obtidas com a Soluo (2) e a Soluo (3).
Observar duas manchas de colorao castanho-amarelada
no tero central do cromatograma e uma no tero inferior,
com Rf de aproximadamente 0,35, correspondente a
hamamelitaninos.
ENSAIOS DE PUREZA
Determinao de lcool (5.3.3.8). 58% (v/v) a 62% (v/v).
Resduo seco (5.4.3.2.2). No mnino 1,2%.
DOSEAMENTO
Taninos totais
Preparar as solues descritas a seguir. Efetuar todas as
operaes de extrao e diluio ao abrigo da luz.
tintura de hamamlis em um balo volumtrico de 250 mL
e completar o volume com gua destilada. Filtrar a mistura
por papel de fltro. Rejeitar os primeiros 50 mL do fltrado.
Soluo amostra para polifenis totais: transferir,
volumetricamente, 5 mL da Soluo estoque para balo
volumtrico de 25 mL e completar o volume com gua
destilada. Transferir, volumetricamente, 2 mL dessa
29% (p/v). Determinar a absorvncia 760 nm (A
1
) aps
30 minutos, utilizando gua destilada como lquido de
compensao.
de pele: a 10 mL da Soluo estoque, adicionar 0,100 g de
p de pele SQR e agitar, mecanicamente, em erlenmeyer
de 125 mL durante 60 minutos. Filtrar em papel de fltro.
Diluir 5 mL do fltrado em balo volumtrico de 25 mL
com gua destilada. Transferir, volumetricamente, 2 mL
dessa soluo, 1 mL de reagente fosfomolibdotngstico
e 10 mL de gua destilada para balo volumtrico de 25
mL e completar o volume com soluo de carbonato de
sdio a 29% (p/v). Determinar a absorvncia 760 nm (A
2
)
aps 30 minutos, utilizando gua destilada como lquido
de compensao.
Soluo padro: dissolver, imediatamente antes do uso,
50 mg de pirogalol em balo volumtrico de 100 mL com
gua destilada. Transferir, volumetricamente, 5 mL da
soluo para balo volumtrico de 100 mL e completar
com gua destilada. Transferir, volumetricamente, 2 mL
e completar o volume com soluo de carbonato de sdio
a 29% (p/v). Determinar a absorvncia em 760 nm (A
3
)
de compensao.
a
h
1017
Calcular o teor em porcentagem de taninos, expressos em
pirogalol, usando a expresso:
em que
A
1
totais;
A
2
adsorvidos por p de pele;
A
3
m
1
= massa da amostra utilizada no ensaio, em gramas;
m
2
HEPARINA CLCICA
Heparinum calcicum
A heparina clcica uma preparao contendo o sal clcico
de uma mistura de glicosaminoglicanos sulfatados, de peso
varivel, presente em tecidos de mamferos. Normalmente
obtida a partir do pulmo bovino ou a partir da mucosa
intestinal suna. composta de polmeros com unidades
de D-glicosamina (N-sulfatada ou N-acetilada) e cido
urnico (cido L-idurnico ou D-glicurnico) que se
alternam unidos por ligaes glicosdicas. Possui a
propriedade de prolongar o tempo de coagulao sangunea
principalmente pela formao de complexo de alguns dos
componentes da mistura com protenas especfcas do
plasma potencializando a inativao da trombina (fator IIa).
Outras proteases envolvidas no processo de coagulao,
como o fator X ativado (fator Xa), tambm so inibidas.
A razo da atividade anti-fator Xa pela potncia do anti-
fator IIa deve estar entre 0,9 e 1,1. A potncia da heparina
clcica no deve ser inferior a 180 UI/mg, em relao
substncia dessecada. Os animais dos quais a heparina
derivada devem preencher os requisitos sanitrios para a
espcie em questo e o processo de produo deve garantir
a remoo ou inativao de agentes infecciosos.
IDENTIFICAO
A. Cumpre com as exigncias do Doseamento, conforme
o mtodo de Determinao da potncia ou o mtodo de
Potncia anti-fator IIa.
B. Utilizar a tcnica de espectroscopia de ressonncia
magntica nuclear. Preparar as solues conforme descrito
a seguir:
Soluo amostra: no menos que 20 mg/mL da amostra
em xido de deutrio 99,9% com 0,02% (p/v) de
trimetilsililpropinico de sdio.
Soluo padro: no menos que 20 mg/mL de heparina
clcica SQR em xido de deutrio 99,9% com 0,02% (p/v)
de trimetilsililpropinico de sdio.
Procedimento: na anlise das amostras deve-se utilizar
um espectrmetro de ressonncia magntica nuclear de
no menos que 500 MHz operando o pulso (Transformada
de Fourier) para aquisio de
1
H sob decaimento livre
utilizando 16 scans em pulso de 90. O ensaio deve ser
realizado sob a temperatura constante de 25 C. A janela
espectral dever ser no mnimo de 10 a -2 ppm. Para todas
as amostras o metil do composto trimetilsililpropinico
deve ser referenciado em 0,00 ppm. Os deslocamentos
qumicos de quatro regies tpicas da heparina suna so;
H1 da glucosamina N-acetilada/glucosamina N-sulfatada
(sinal 1) em 5,40 ppm, H1 do cido idurnico 2-sulfatado
(sinal 2) em 5,21 ppm, H2 da glucosamina N-sulfatada em
3,28 ppm e metil da glucosamina N-acetilada em 2,05 ppm.
Os valores de ppm observados para cada sinal no devem
variar 0,03 ppm.
Os critrios de aceitao so baseados no valor mdio da
altura dos sinais 1 e 2. Qualquer sinal identifcado, nos
seguintes campos: 0,10 - 2,00, 2,10 - 3,20 e 5,70 - 8,00
ppm, no devem ultrapassar 4% da mdia do valor da
altura dos dois sinais citados acima. Da mesma forma no
devem ser encontrado sinais 200% maiores que este valor
entre 3,35 - 4,55 ppm.
Impurezas: sulfato de condroitina sobre-sulfatado. O
deslocamento qumico da regio N-acetil do sulfato de
condroitina sobre-sulfatado deve ser observada em 2,16
0,03 ppm.
Sulfato de dermatam: O deslocamento qumico da regio
N-acetil do sulfato de condroitina sobre-sulfatado deve ser
observada em 2,10 0,03 ppm.
h
Sinal 200% maior que os valores 3,35 4,55
C. Utilizar a tcnica de cromatografa lquida de troca
inica. A cromatografa de troca inica um ensaio para
determinao de pureza das preparaes de heparina,
principalmente para deteco e separao de sulfato de
dermatam, sulfato de condroitina e sulfato de condroitina
sobre-sulfatado. Utilizar cromatgrafo provido de
detector ultravioleta a 202 nm; pr-coluna de 50 mm de
comprimento e 2 mm de dimetro interno, empacotada com
resina trocadora de nions (13 mm); coluna de 250 mm
de comprimento e 2 mm de dimetro interno, empacotada
com resina trocadora de nions (9 mm), mantida a 40 C;
Padres de referncias: Soluo para ensaio (a) e Soluo
de referncia (a), reteno relativa da heparina referncia
(tempo de reteno = cerca de 26 min); dermatam e sulfato
de condroitina = cerca de 0,9; sulfato de condroitina sobre-
sulfatado = 1,3, em relao a heparina.
Nota: as solues de referncia devem ser estabilizadas
por 24 horas a temperatura ambiente.
Sistema de adequao: Soluo de referncia; relao de
pico e vale: mnimo de 1,3, onde Hp = altura acima da
linha de base do pico devido ao dermatam e o sulfato de
condroitina; Hv = altura acima da linha de base o ponto
mais baixo da curva que separa este cume do pico devido
heparina.
O pico principal no cromatograma obtido com a Soluo
de ensaio (a) deve ser semelhante em forma e tempo de
reteno do pico principal no cromatograma obtido com a
Soluo de referncia (a).
Preparar as solues para o teste como descrito a seguir.
Soluo para ensaio (a): dissolver cerca de 50 mg da
substncia para ser examinada pesada com preciso em 5
mL de gua para cromatografa (gua deionizada com uma
resistividade no menos que 0,18 Mohms). Misturar com
um vrtice at completa dissoluo.
Soluo para ensaio (b): dissolver cerca de 0,1 g da
substncia para ser examinada, pesada com preciso em 1
mL de gua para cromatografa. Misturar com um vrtice
at completa dissoluo. Misturar 0,5 mL da soluo e
0,25 mL de cido clordrico M, em seguida, adicionar 50
uL de soluo de nitrito de sdio a 250 mg/mL. Misture
delicadamente e deixe repousar temperatura ambiente
por 40 min antes de adicionar 0,2 mL de hidrxido de sdio
M para parar a reao.
Soluo de referncia (a): dissolver 250 mg de heparina
SQR em gua por cromatografa e diluir para 2 mL com o
mesmo solvente. Misturar usando um vrtice at completa
dissoluo.
Soluo de referncia (b): adicionar 1,2 mL de Soluo de
referncia (a) e 0,3 mL de sulfato de dermatam e sulfato de
condroitina sobre-sulfatado. Misturar com um vrtice para
homogeneizar.
Soluo de referncia (c): adicionam-se 0,1 mL de Soluo
de referncia (b) e 0,9 mL de gua para cromatografa.
Misturar com um vrtice para homogeneizar.
Soluo de referncia (d): adicionar 0,4 mL de Soluo
de referncia (a) para 0,1 mL de gua para cromatografa
e misture com um vrtice. Adicionar 0,25 mL de cido
clordrico M, em seguida, adicionar 50 uL de soluo
de nitrito de sdio a 250 mg/mL. Misture delicadamente
e deixe repousar temperatura ambiente por 40 minutos
antes de adicionar 0,2 mL de hidrxido de sdio M para
parar a reao.
Soluo de referncia (e): a 0,5 mL de Soluo de
referncia (b), adicionar 250 uL de cido clordrico M, em
seguida, adicionar 50 uL de soluo de nitrito de sdio a
250 mg/mL. Misturar suavemente e deixar repousar em
temperatura ambiente por 40 minutos antes de adicionar
0,2 mL de hidrxido de sdio M para parar a reao.
a
h
1019
Fase mvel A: dissolver 0,4 g de fosfato de sdio monobsico
em 1000 mL de gua para cromatografa e ajustar o pH
para 3,0 com soluo diluda de cido fosfrico;
Fase mvel B: dissolver 0,4 g de fosfato de sdio
monobsico em 1000 mL de gua para cromatografa,
adicione 140 g de perclorato de sdio e ajustar ao pH 3,0
com cido fosfrico diludo, fltrar e desgaseifcar.
Tempo
(minutos)
Fase mvel
A% (v/v)
Fase mvel
B% (v/v)
Eluio
35 - 40 0 100 isocrtica
Procedimento: injetar 20 uL de Soluo de teste (b) e
Solues de referncia (d) e (e). A reteno relativa com
referncia heparina (tempo de reteno = cerca de 26
minutos): sulfato de dermatam e sulfato de condroitina
= cerca de 0,9; sulfato de condroitina sobre-sulfatado =
1,3. Equilbrio: pelo menos 15 min. A resoluo de no
mnimo 3,0 entre os picos relativo ao sulfato de dermatam
mais sulfato de condroitina e sulfato de condroitina sobre-
sulfatado no cromatograma obtido com referncia. Soma
das reas de slfato de dermatam e sulfato de condroitina
no maior do que a rea sob o pico correspondente
no cromatograma obtido com a Soluo de referncia
(e) 2,0%. No podem existir outros picos alm do pico
relativo sulfato de dermatam mais sulfato de condroitina
e heparina, ou seja, no devem haver impurezas.
Adequao do sistema: o cromatograma obtido com a
Soluo de referncia (d) no apresenta picos no tempo de
reteno da heparina. Exemplo:
A Cromatograma da soluo de heparina SQR (Hep).
B Cromatograma da soluo padro das misturas (DS - dermatam
Sulfato 12%; Hep - Heparina 44% e OSC sulfato de condroitina
sobre-sulfatado 54%).
C Cromatograma de uma amostra reprovada pela presena de sulfato de
condroitina sobre-sulfatado (OSC).
D. Responde s reaes do on clcio (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
moderadamente higroscpico.
Solubilidade. Solvel em gua.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 5,0 a 8.0. Determinar em soluo aquosa a
1% (p/v).
Protenas. Adicionar cinco gotas de cido tricloroactico
a 20% (p/v) em 1 mL de soluo aquosa da amostra a 1%
(p/v). No deve haver formao de precipitado ou turbidez.
0,003%.
Nitrognio (5.3.3.2). Utilizar o Mtodo I, macrodeterminao.
No mnimo 1,3% e, no mximo, 2,5% de nitrognio, calculado
Clcio (5.3.2.7). No mnimo 9,5% e, no mximo, 11,5%
de clcio, calculado em relao substncia dessecada,
determinado em 0,2 g por Titulao complexomtrica (5.3.3.4).
Perda por dessecao (5.2.9). Determinar em estufa, sob
vcuo, a 60 C, por 3 horas. No mximo 5%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). No mnimo 28% e, no mximo, 41%.
Impurezas nucleotdicas: Dissolver 40 mg em 10 mL de
gua. A absorvncia medida a 260 nm e o resultado no
deve ser superior a 0,2.
UI de heparina.
h
DOSEAMENTO
Determinao da potncia.
A atividade anticoagulante da heparina determinada in
vitro, comparando sua habilidade em condies especfcas
para retardar a coagulao, de um plasma ovino de referncia
ou plasma humano de referncia, citratado e recalcifcado
com a mesma capacidade de uma preparao de referncia
de heparina, calibrado em unidades internacionais.
Uma Unidade Internacional a atividade contida em um
montante indicado na norma internacional, que consiste de
uma quantidade de heparina clcica lioflizada obtida de
mucosa intestinal de sunos. A equivalncia em unidades
internacionais do Padro Internacional de Referncia
indicado pela Organizao Mundial de Sade.
A heparina clcica padro de referncia calibrada em
unidades internacionais, em comparao com um Padro
Internacional por meio do ensaio a seguir.
Realizar o ensaio utilizando registro mecnico da alterao
da fuidez na agitao, tendo o cuidado de perturbar o
mnimo da soluo durante a fase inicial de coagulao
(coagulometro).
Procedimento: Os volumes descritos no texto so
apresentados como exemplos e pode ser adaptado para o
aparelho utilizado, desde que a relao entre os diferentes
volumes seja respeitada. Diluir a heparina clcica padro
de referncia em uma soluo de cloreto de sdio a 0,9%
(p/v) de modo a conter um nmero precisamente conhecido
de Unidades Internacionais por mililitro e preparar
uma soluo da amostra similar preparao para ser
examinada, que dever ter a mesma atividade. Usando uma
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v), preparar uma srie
de diluies em progresso geomtrica de tal forma que o
tempo de coagulao obtido com a menor concentrao
no seja inferior a 1,5 vezes o tempo de recalcifcao
em branco, e que sendo obtida a maior concentrao seja
dada uma curva em logaritmo dose-resposta satisfatria.
Colocar 12 tubos em um banho-maria com gua gelada,
rotulando-os em duplicado: A1, A2 e A3 para as diluies
das preparaes a serem examinadas e P1, P2 e P3 para
as diluies de preparao de referncia. Para cada tubo
adicionar 1 mL de plasma descongelado substrato e 1 mL
de uma diluio adequada da preparao a ser examinada
ou a preparao de referncia. Aps cada adio, misturar,
mas no permitir a formao de bolhas. Tratar os tubos na
ordem P1, P2, P3, A1, A2, A3, a transferncia de cada tubo
para um banho-maria a 37 C, permite equilibrar a 37 C
por aproximadamente 15 minutos e adicionar a cada tubo
1 mL de uma diluio de cefalina ao qual foi adicionado
um ativador adequado, tais como caolim de modo que um
tempo de recalcifcao adequado obtido no branco no
superior a 60 segundos. Quando o caolim utilizado, deve
ser preparado imediatamente antes do uso, uma mistura
de volumes iguais de cefalina e de suspenso de caolim
a 0,4% (p/v) protegido da luz em uma soluo de cloreto
de sdio a 0,9% (p/v). Exatamente depois de 2 minutos
adicionar 1 mL de uma soluo de cloreto de clcio a 3,7
g/mL e registrar o tempo de coagulao e o intervalo em
segundos entre esta ltima adio e o incio da coagulao
determinado pela tcnica escolhida. Determinar o tempo
de recalcifcao do branco no incio e no fnal do processo
de uma forma similar, utilizando 1 mL de uma soluo de
cloreto de sdio a 0,9% (p/v) no lugar de uma das diluies
da heparina, os dois valores obtidos no branco no deve
diferenciar signifcativamente. Transforme o tempo de
coagulao em logaritmos, utilizando o valor mdio
para os tubos em duplicatas. Repita o procedimento com
diluies a fresco e realizar a incubao na ordem A1, A2,
A3, P1, P2, P3. Calcular os resultados atravs dos mtodos
estatsticos habituais. Realizar de no menos de trs
ensaios independentes. Para cada ensaio preparar novas
solues de referncia e a preparao para ser examinada e
usar outro, recentemente descongelada poro de plasma.
Realizar o ensaio de heparina. A potncia estimada deve
ser de no menos de 90% e no mais de 111% da potncia
declarada. Os limites de confana da potncia estimada
devem ser no inferiores a 80% e no superiores a 125%
da potncia declarada (P = 0,95).
Tampo pH 8,4: dissolver 6,1 g de trometamina, 10,2
g de cloreto de sdio, 2,8 g de edetato dissdico e, se
necessrio, entre 0 e 10 g de polietilenoglicol 6000 e/ou 2 g
de albumina bovina em 800 mL de gua. Ajuste com cido
clordrico a um pH de 8,4, e diluir com gua at 1000 mL.
Nota: 2 g de albumina humana podem ser substitudos por
2 g de albumina bovina.
Soluo Antitrombina: reconstituir um frasco de
antitrombina em gua at obter uma soluo de 5 UI/
mL antitrombnica. Diluir com Tampo pH 8,4 para
obter uma soluo a uma concentrao de 0,125 UI/mL
antitrombnica.
Soluo de trombina humana: reconstituir a trombina
humana (Fator IIa) em gua para dar 20 UI/mL de trombina,
e diluir com Tampo pH 8,4 para obter uma soluo com
uma concentrao de 5 UI/mL de trombina.
Nota: a trombina deve ter uma atividade especfca no
menor que 750 UI/mg.
Soluo de substrato cromognico: preparar uma
soluo de um substrato da trombina adequado para o
ensaio cromognico amidoltico em gua para obter uma
concentrao de 1,25 mM.
Soluo de parada: preparar uma soluo de cido actico
a 20% (v/v) em gua.
Solues padro: reconstituir o contedo total do uma
ampola de heparina de clcio SQR em gua e diluir com
Tampo pH 8,4 para obter pelo menos quatro diluies
entre o intervalo de concentrao de 0,005 e 0,03 unidade/
mL de heparina.
Solues de amostra: proceder como indicado nas solues
para obter as concentraes de heparina de clcio similar
aos obtidos para as Solues padro.
Para cada diluio da Soluo padro ou da Soluo da
amostra devem ser realizadas em duplicatas. Rtulos
a
h
1021
numricos devem ser colocados dependendo do nmero de
repeties a serem testadas. Por exemplo: se houver cinco
brancos a serem usados B1, B2, B3, B4 e B5; A1, A2, A3
e A4 para cada duplicada das amostras em testes e P1,
P2, P3 e P4 para cada duplicada das solues padres em
teste. Distribuir os espaos em branco sobre a srie de tal
maneira que representam com preciso o comportamento
dos reagentes durante os experimentos.
Nota: Os tubos devem ser tratados na ordem B1, P1, P2,
P3, P4, B2, A1, A2, A3, A4, B3, A1, A2, A3, A4, B4, P1, P2,
P3, P4, B5.
Notar que, aps cada adio de reagente, a soluo
incubada deve ser misturada sem permitir a formao
de bolhas. Adicione duas vezes o volume (100 - 200
uL) de soluo Antitrombina a cada tubo contendo um
volume (50-100 uL), de Tampo pH 8,4 ou uma diluio
apropriada das solues de amostra ou o padro. Agitar,
mas no permitir a formao de bolhas, incubar a 37 C por
pelo menos 1 minuto. Adicionar a cada tubo de 25-50 uL
de Soluo de trombina humana, e incubar por pelo menos
1 minuto. Adicionar 50 - 100 uL de Soluo de substrato
cromognico. Notar que todos os reagentes, solues
padro, e solues de amostra devem ser pr-aquecidas a
37 C pouco antes de usar.
Dois diferentes tipos de medies podem ser registrados:
Medio endpoint: Parar a reao pelo menos aps
1 minuto com 5-10 L de Soluo de parada. Medir a
absorvncia de cada soluo a 405 nm atravs de um
espectrofotmetro adequado. Um desvio padro relativo
sobre as leituras em branco tem que ser menor que 10%.
Medio Cintica: Seguindo a mudana na absorvncia
para cada soluo sobre 1 minuto a 405 nm atravs de um
espectrofotmetro. Calcular a variao de absorvncia/
minuto (OD/minuto). Os brancos para a medio cintica
tambm expressa como OD/minuto e deve dar valores
maiores em que so realizadas na ausncia de heparina. O
desvio padro relativo sobre as leituras em branco deve ser
inferior a 10%.
Os modelos estatsticos para anlise da relao ente
inclinao das retas ou sobre paralelismo podem ser usados
dependendo do melhor modelo que descreva a correlao
entre a concentrao e a resposta.
Ensaio sobre paralelismo: Para cada srie, calcular a
regresso da absorvncia ou mudana de absorvncia/
minuto contra as concentraes em logaritmo das solues
de amostra e das solues padres e calcular a potncia
da heparina de clcio de referncia em Unidades/mL
utilizando mtodos estatsticos para ensaios linha paralela.
Exprimir a potncia de heparina clcica UI/mg de base
seca.
Relao entre Inclinao das Retas: Para cada srie, calcular
a regresso da absorvncia em logaritmo ou o logaritmo
das alteraes na absoro/minuto contra as concentraes
das solues de amostra e das solues padres e calcular a
potncia da heparina de clcio de referncia Unidades/mL
utilizando mtodos estatsticos para ensaios de relaes
entre inclinaes. Exprimir a potncia de heparina clcica
em UI/mg, de base seca.
Critrios de aceitao: A potncia da heparina clcica,
calculada em base seca, no inferior a 180 unidades de
heparina por mg.
Atividade anti-fator Xa.
Tampo pH 8,4: dissolver 10,24 g de cloreto de sdio, 6,6
g de trometamina e 2,8 g de edetato dissdico em gua. Se
necessrio, ajustar o pH para 8,4 com soluo diluda de
cido clordrico ou hidrxido de sdio.
Soluo antitrombina : reconstituir o contedo de uma
ampola contendo antitrombina com gua (ou conforme
recomendado pelo fabricante). Diluir com Tampo pH 8,4
de modo a obter soluo a 1 UI de antitrombina por mL.
Soluo de fator Xa bovino: reconstituir o contedo de uma
ampola contendo fator Xa bovino com gua (ou conforme
recomendado pelo fabricante). Diluir a soluo obtida em
Tampo pH 8,4, de modo a obter uma soluo com valores
de absorvncia entre 0,65 e 1,25 medidas em 405 nm,
quando testadas conforme descrito abaixo, mas utilizando
30 uL de Tampo pH 8,4 ao invs de 30 uL de Soluo
padro ou Soluo amostra.
A soluo de fator Xa contem trs unidades nano catalticas
por mL, mas pode variar dependendo do fabricante do
factor Xa, ou o substrato utilizado.
Soluo de substrato cromognico: preparar uma soluo
cromognica adequada para o teste amidoltico especfco
para fator Xa em gua para obter uma concentrao de
cerca de 1 mM.
Soluo de parada: preparar uma soluo de cido actico
a 20% (v/v) em gua.
Soluo amostra: dissolver quantidade exata da amostra de
heparina clcica em Tampo pH 8,4 e diluir com o mesmo
para obter solues contendo atividades aproximadamente
iguais Soluo Padro.
Soluo padro: utilizar padro ofcial de heparina. Pode
ser utilizada outra preparao, cuja potncia tenha sido
calibrada frente ao padro ofcial. Reconstituir o contedo
da ampola de heparina padro ofcial em gua e misturar
levemente at completa dissoluo. Preparar diluies em
Tampo pH 8,4, de forma a obter de cinco at sete solues
contendo atividades conhecidas de 0,375; 0,3125; 0,25;
0,188; 0,125; 0,0625 e 0,0313 em unidades de heparina
por mL.
Procedimento: os volumes descritos podem ser adaptados
para realizao do ensaio em tubos ou microplacas,
mantendo a relao entre os volumes. Executar o teste com
cada Soluo padro e Soluo amostra em duplicata.
Para cada srie de tubos plsticos em banho-maria a 37
C, transferir 120 uL de Tampo pH 8,4. Separadamente
transferir 30uL de diferentes diluies de solues padro
ou de solues amostra aos tubos. Adicionar 150 uL, para
cada tubo, misturar e incubar por dois minutos. Adicionar
300 uL de Soluo substrato cromognico, pr aquecido
h
a 37 C por 15 minutos. Adicionar 150 uL de Soluo de
parada em cada tubo e misturar. Preparar o branco para
zerar o espectrofotmetro adicionando os reagentes em
ordem inversa, comeando com Soluo de parada e
terminando com a adio de 150 uL de Tampo pH 8,4,
e excluindo as solues padro ou as solues amostra.
Registrar a absorvncia medida em 405 nm contra o branco.
Construir um grfco dos valores das absorvncias
das solues padro e as solues amostra contra as
concentraes de heparina em unidades. Construir retas
separadas de melhor ajuste utilizando anlise de regresso
linear dos mnimos quadrados para as solues padro e
as solues amostra e determinar a inclinao de cada reta
de regresso. Calcular a potncia da heparina clcica pela
formula.
em que
P = potncia do padro de referncia da heparina clcica;
SA e SP = so as inclinaes das retas a partir das Solues
amostra e das Solues padro, respectivamente.
Expressar a potncia do Anti- Fator Xa da soluo amostra
como uma porcentagem da concentrao de heparina
determinada no Ensaio. Calcular a razo do anti-fator Xa
contra potncia do fator IIa pela formula.A razo entre
atividade do anti-fator Xa com potncia anti-fator IIa deve
ser no mnimo, 0,9 e no mximo 1,1.
Conforme legislao vigente.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticoagulante.
HEPARINA SDICA
Heparinum natricum
A heparina sdica uma preparao contendo o sal sdico
de uma mistura de glicosaminoglicanos sulfatados, de peso
varivel, presente em tecidos de mamferos. Normalmente
obtida a partir do pulmo bovino ou a partir da mucosa
intestinal suna. composta de polmeros com unidades
de D-glicosamina (N-sulfatada ou N-acetilada) e cido
urnico (cido L-idurnico ou D-glicurnico) que se
alternam unidas por ligaes glicosdicas. Possui a
propriedade de prolongar o tempo de coagulao sangunea
principalmente pela formao de complexo de alguns dos
componentes da mistura com protenas especfcas do
plasma potencializando a inativao da trombina (fator IIa).
Outras proteases envolvidas no processo de coagulao,
como o fator X ativado (fator Xa), tambm so inibidas.
A razo da atividade anti-fator Xa pela potncia do anti-
fator IIa deve estar entre 0,9 e 1,1. A potncia da heparina
sdica no deve ser inferior a 180 UI por mg, em relao
substncia dessecada. Os animais dos quais a heparina
derivada devem preencher os requisitos sanitrios para
espcie em questo e o processo de produo deve garantir
a remoo ou inativao de agentes infecciosos.
IDENTIFICAO
A. Cumpre as exigncias do Doseamento, conforme
o mtodo Determinao de potncia ou o mtodo de
Potncia Anti-fator IIa.
B. Utilizar a tcnica de espectroscopia de ressonncia
magntica nuclear. Preparar as solues conforme descrito
a seguir.
Soluo padro: no menos que 20 mg/mL de Heparina
sdica SQR em xido de deutrio 99,9% com 0,02% (p/v)
de cido trimetilsililpropionico de sdio.
Soluo amostra: no menos que 20 mg/mL da amostra
em xido de deutrio 99,9% com 0,02% (p/v) de cido
trimetilsililpropionico de sdio.
Procedimento: na anlise das amostras: deve-se utilizar
um espectrmetro de ressonncia magntica nuclear de
no menos que 500 MHz operando o pulso (Transformada
de Fourier) para aquisio de
1
H sob decaimento livre
utilizando 16 scans em pulso de 90. O ensaio deve ser
realizado sob a temperatura constante de 25 C. A janela
espectral dever ser no mnimo de 10 a -2 ppm. Para todas
as amostras o metil do composto trimetilsililpropionico
deve ser referenciado em 0,00 ppm. Os deslocamentos
qumicos de quatro regies tpicas da heparina suna so;
H1 da glucosamina N-acetilada/glucosamina N -sulfatada
(sinal 1) em 5,40 ppm, H1 do cido idurnico 2-sulfatado
(sinal 2) em 5,21 ppm, H2 da glucosamina N-sulfatada
em 3,28 ppm e metil da glucosamina N -acetilada em 2,05
ppm. Os valores de ppm observados para cada sinal no
devem variar 0,03 ppm.
Os critrios de aceitao so baseados no valor mdio da
altura dos sinais 1 e 2. Qualquer sinal identifcado, nos
seguintes campos: 0,10 2,00, 2,10 3,20 e 5,70 8,00
ppm, no devem ultrapassar 4% da mdia do valor da
altura dos dois sinais citados acima. Da mesma forma no
devem ser encontrado sinais 200% maiores que este valor
entre 3,35 4,55 ppm.
Impurezas: condroitina sulfato sobre-sulfatado. O
deslocamento qumico da regio N-acetil do sulfato de
condroitina sobre-sulfatado deve ser observada em 2,16
0,03 ppm.
Sulfato de dermatam: O deslocamento qumico da regio
N-acetil do sulfato de condroitina sobre-sulfatado deve ser
observada em 2,10 0,03 ppm.
a
h
1023
C. Utilizar a tcnica de cromatografa lquida de troca
inica. A cromatografa de troca inica um ensaio para
determinao de pureza das preparaes de heparina,
principalmente para deteco e separao de sulfato de
dermatam, sulfato de condroitina e sulfato de condroitina
sobre-sulfatado. Utilizar cromatgrafo provido de
detector ultravioleta a 202 nm; pr-coluna de 50 mm de
comprimento e 2 mm de dimetro interno, empacotada com
resina trocadora de nions (13 mm); coluna de 250 mm
de comprimento e 2 mm de dimetro interno, empacotada
com resina trocadora de nions (9 mm), mantida a 40 C;
Padres de referncias: Soluo para ensaio (a) e Soluo
de referncia, reteno relativa da heparina referncia
(tempo de reteno = cerca de 26 min): dermatam e sulfato
de condroitina = cerca de 0,9; condroitina sulfato sobre-
sulfatado = 1,3, em relao a heparina.
Nota: as solues de referncia devem ser estabilizadas
por 24h a temperatura ambiente.
Sistema de adequao: Soluo de referncia: relao de
pico e vale: mnimo de 1,3, onde Hp = altura acima da
linha de base do pico devido dermatam mais sulfato de
condroitina; Hv = altura acima da linha de base o ponto
mais baixo da curva que separa este cume do pico devido
heparina.
O pico principal no cromatograma obtido com a Soluo
de ensaio (a) deve ser semelhante em forma e tempo de
reteno do pico principal no cromatograma obtido com a
Soluo de referncia (a).
Preparar as solues para o teste como descrito a seguir.
Soluo para ensaio (a): dissolver cerca de 50 mg da
substncia para ser examinado pesada com preciso em 5,0
mL de gua para cromatografa (gua deionizada com uma
resistividade no menos que 0,18Mohms). Misturar com
um vrtice at completa dissoluo.
Soluo para ensaio (b): dissolver cerca de 0,1 g da
substncia para ser examinada, pesada com preciso em 1,0
mL de gua para cromatografa. Misturar com um vrtice
at completa dissoluo. Misturar 500 L da soluo e
250 uL de cido clordrico M, em seguida, adicione 50
uL de 250 mg/mL de soluo de nitrito de sdio. Misture
delicadamente e deixe repousar temperatura ambiente por
40 min antes de adicionar 200 uL de hidrxido de sdio M
para parar a reao.
Soluo de referncia (a): Dissolver 250 mg de heparina
SQR em gua por cromatografa e diluir para 2,0 mL com o
mesmo solvente. Misture usando um vrtice at completa
dissoluo.
Soluo de referncia (b): adicionar 1200 uL de Soluo
de referncia (a) e 300 L de sulfato de dermatam e
condroitim sulfato sobre-sulfatado. Misturar com um
vrtice para homogeneizar.
Soluo de referncia (c): adicionam-se 100 uL de Soluo
de referncia (b) e 900 uL de gua para cromatografa.
Misturar com um vrtice para homogeneizar.
Soluo de referncia (d): adicionar 400 uL de Soluo
de referncia (a) para 100 uL de gua para cromatografa
e misture com um vrtice. Adicionar 250 uL de cido
clordrico M, em seguida, adicione 50 uL de 250 mg/mL
de soluo de nitrito de sdio. Misture delicadamente e
deixe repousar temperatura ambiente por 40 minutos
antes de adicionar 200 uL de hidrxido de sdio M para
parar a reao.
Soluo de referncia (e): a 500 uL de Soluo de
referncia (b), adicionar 250 uL de cido clordrico M,
em seguida, adicione 50 uL de 250 mg/mL de soluo de
nitrito de sdio. Misturar suavemente e deixar repousar em
temperatura ambiente por 40 minutos antes de adicionar
200 uL de hidrxido de sdio M para parar a reao.
Fase mvel A: dissolver 0,40 g de dihidrogeno fosfato de
sdio em 1000 mL de gua para cromatografa e ajustar o
pH para 3,0 com soluo diluda de cido fosfrico.
h
Fase mvel B: dissolver 0,40 g de dihidrogeno fosfato de
sdio em 1000 mL de gua para cromatografa, adicione
140 g de perclorato de sdio e ajustar ao pH 3.0 com cido
fosfrico diludo, fltrar e desgaseifcar.
Tempo (minutos)
Fase mvel A%
(v/v)
Fase mvel B%
(v/v)
0 - 10 75 25
10 - 35 75 0 25 100
35 - 40 0 100
Procedimento: injetar 20 uL de Soluo de teste (b)
e Solues de referncia (d) e (e). A reteno relativa
com referncia heparina (tempo de reteno = cerca
de 26 minutos): dermatan sulfato e condroitina sulfato
= cerca de 0,9; sulfato de condroitina sobre-sulfatado =
1,3. Equilbrio: pelo menos 15 min. A resoluo de 3,0
mnimo entre os picos devido ao dermatam sulfato mais
condroitina sulfato e condroitina sulfato sobre-sulfatado o
no cromatograma obtido com referncia. Soma das reas
de dermatam sulfato e condroitina sulfato no maior do
que a rea sob o pico correspondente no cromatograma
obtido com a Soluo de referncia (e) 2,0%. No podem
existir outros picos alm do pico devido dermatam mais
sulfato de condroitina e heparina, ou seja, no devem haver
impurezas.
Adequao do sistema: o cromatograma obtido com a
Soluo de referncia (d) no apresenta picos na reteno
tempo de heparina.
Exemplo:
A Cromatograma da Soluo de Hep - Heparina de Referncia.
B Cromatograma da Soluo Padro das Misturas (DS - Dermatam
Sulfato 12%; Hep - Heparina 44% e OSC - sulfato de condroitina
sobre-sulfatado 54%).
C Cromatograma de uma amostra reprovada pela presena de OSC
sulfato de condroitina sobre-sulfatado.
CARACTERSTICAS
moderadamente higroscpico.
Solubilidade. Solvel em gua.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 5,0 a 8.0. Determinar em soluo aquosa a
1% (p/v).
Protenas. Adicionar cinco gotas de cido tricloroactico
a 20% (p/v) em 1 mL de soluo aquosa da amostra a 1%
(p/v). No deve haver formao de precipitado ou turbidez.
Metais pesados. Utilizar o Mtodo I. No mximo 0,003%.
Nitrognio (5.3.3.2). Utilizar o Mtodo I,
macrodeterminao. No mnimo 1,3% e, no mximo,
2,5% de nitrognio, calculado em relao substncia
dessecada.
Sdio (5.2.13.1). 9,5% a 12,5% de sdio determinado
conforme descrito em Espectrofotometria de absoro
atmica.
Perda por dessecao (5.2.9). Determinar em estufa a
vcuo a 60 C, por 3 horas. No mximo 5%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). No mnimo 28% e, no mximo,
41%.
Impurezas nucleotidicas. Dissolver 40 mg em 10 mL de
gua. A absorvncia medida a 260 nm e o resultado no
deve ser superior a 0,2.
UI de heparina.
a
h
1025
DOSEAMENTO
Determinao da potncia.
A atividade anticoagulante da heparina determinada in
vitro, comparando sua habilidade em condies especfcas
para retardar a coagulao, de um plasma ovino de referncia
ou plasma humano de referncia, citratado e recalcifcado
com a mesma capacidade de uma preparao de referncia
de heparina, calibrado em unidades internacionais.
Uma Unidade Internacional a atividade contida em um
montante indicado na norma internacional, que consiste
de uma quantidade de heparina sdica lioflizada obtida de
mucosa intestinal de sunos. A equivalncia em unidades
internacionais do Padro Internacional de Referncia
indicado pela Organizao Mundial de Sade.
A heparina sdica padro de referncia calibrado em
unidades internacionais, em comparao com um Padro
Internacional por meio do ensaio a seguir.
Realizar o ensaio utilizando registro mecnico da alterao
da fuidez na agitao, tendo o cuidado de perturbar o
mnimo da soluo durante a fase inicial de coagulao
(coagulometro).
Procedimento: os volumes descritos no texto so
apresentados como exemplos e pode ser adaptado para o
aparelho utilizado, desde que a relao entre os diferentes
volumes sejam respeitados. Diluir a heparina sdica
padro de referncia em uma soluo de 9 g/L de cloreto
de sdio de modo a conter um nmero precisamente
conhecido de Unidades Internacionais por mililitro e
preparar uma soluo da amostra similar preparao para
ser examinada, que dever ter a mesma atividade. Usando
uma soluo de cloreto de sdio na concentrao de 9 g/L,
preparar uma srie de diluies em progresso geomtrica
de tal forma que o tempo de coagulao obtido com a
menor concentrao no seja inferior a 1,5 vezes o tempo
de recalcifcao em branco, e que sendo obtida a maior
concentrao seja dada uma curva em logaritmo dose-
resposta satisfatria. Colocar 12 tubos em um banho-maria
com de gua gelada, rotulando-os em duplicado: A1, A2 e
A3 para as diluies das preparaes a serem examinadas
e P1, P2 e P3 para as diluies de preparao de referncia.
Para cada tubo adicionar 1,0 mL de plasma descongelado
substrato R1 e 1,0 mL de uma diluio adequada da
preparao a ser examinada ou a preparao de referncia.
Aps cada adio, misturar, mas no permitir a formao
de bolhas. Tratar os tubos na ordem P1, P2, P3, A1, A2, A3,
a transferncia de cada tubo para um banho de gua a 37 C,
permite equilibrar a 37 C por aproximadamente 15 minutos
e adicionar a cada tubo 1 mL de uma diluio de cefalina
ao qual foi adicionado um ativador adequado, tais como
caulim de modo que um tempo de recalcifcao adequado
obtido no branco no superior a 60 segundos. Quando o
caulim utilizado, deve ser preparado imediatamente antes
do uso, uma mistura de volumes iguais de cefalina e 4 g/L
de suspenso de caulim protegido da luz em uma soluo de
9 g/L de cloreto de sdio. Exatamente depois de 2 minutos
adicionar 1 mL de uma soluo a 3,7 g/mL de cloreto de
clcio e registrar o tempo de coagulao e o intervalo em
segundos entre esta ltima adio e o incio da coagulao
determinado pela tcnica escolhida. Determinar o tempo
de recalcifcao do branco no incio e no fnal do processo
de uma forma similar, utilizando 1 mL de uma soluo de
9 g/L de cloreto de sdio no lugar de uma das diluies
da heparina, os dois valores obtidos no branco no deve
difereciar signifcativamente. Transforme o tempo de
coagulao em logaritmos, utilizando o valor mdio
para os tubos em duplicatas. Repita o procedimento com
diluies a fresco e realizar a incubao na ordem A1, A2,
A3, P1, P2, P3. Calcular os resultados atravs dos mtodos
estatsticos habituais. Realizar de no menos de trs ensaios
independentes. Para cada ensaio preparar novas solues de
referncia e a preparao para ser examinada e usar outro,
recentemente descongelada poro de plasma. Realizar o
ensaio de heparina. A potncia estimada deve ser de no
menos de 90% e no mais de 111% da potncia declarada.
Os limites de confana da potncia estimada devem ser
no inferiores a 80% e no superiores a 125% da potncia
declarada (P=0,95).
Tampo pH 8,4: dissolver 6,10 g de tris (hidroximetil)
aminometano, 10,20 g de cloreto de sdio, 2,80 g de edetato
sdio e, se adequado, entre 0 e 10,00 g de polietileno Glicol
6000 e/ou 2,00 g de albumina bovina em 800 mL de gua.
Ajuste com cido clordrico a um pH de 8,4, e diluir com
gua at 1000 mL.
Nota: 2,00 g de albumina humana podem ser substitudos
por 2,00 g de albumina bovina. Ajuste com cido clordrico
a um pH de 8,4, e diluir com gua at 1000 mL.
Soluo Antitrombina: reconstituir um frasco de
antitrombina em gua at obter uma soluo de 5 UI/mL
antitrombnica. Diluir esta soluo tampo com pH 8,4
para obter uma soluo com uma concentrao de 0,125
UI/mL antitrombnica.
Soluo de trombina humana: reconstituir a trombina
humana (Fator IIa) em gua para dar 20 UI/mL de trombina,
e diluir com tampo pH 8,4 para obter uma soluo com
um concentrao de 5 UI/mL de trombina.
Nota: a trombina deve ter uma atividade especfca no
menor que 750 UI/mg.
Soluo de substrato cromognico: Prepare uma soluo
de um substrato da trombina adequado para o ensaio
cromognico amidoltico em gua para obter uma
concentrao de 1,25 mM.
Soluo de parada: 20% (v/v) de cido actico.
Solues padro: Reconstituir o contedo total do uma
ampola de heparina de sdio SR em gua e diluir com
tampo pH 8,4 para obter pelo menos quatro diluies
entre o intervalo de concentrao de 0,005 e 0,03 unidade/
mL de heparina.
Solues de amostra: Proceder como indicado nas solues
para obter as concentraes de heparina de sdio similar
aos obtidos para as solues padro.
h
Para cada diluio da soluo; padro ou da soluo da
amostra devem ser realizadas em duplicatas. Rtulos
numricos devem ser colocados dependendo do nmero de
repeties a serem testadas. Por exemplo: se houver cinco
brancos a serem usados B1, B2, B3, B4 e B5 para branco;
A1, A2, A3 e A4 para cada duplicada das amostras em
testes e P1, P2, P3 e P4 para cada duplicada das solues
padres em teste. Distribuir os espaos em branco sobre
a srie de tal maneira que representam com preciso o
comportamento dos reagentes durante os experimentos.
Nota: Os tubos devem ser tratados na ordem B1, P1, P2,
P3, P4, B2, A1, A2, A3, A4, B3, A1, A2, A3, A4, B4, P1, P2,
P3, P4, B5.
Notar que, aps cada adio de reagente, a soluo incubada
deve ser misturada sem permitir a formao de bolhas.
Adicione duas vezes o volume (100 - 200 uL) de soluo
Antitrombina a cada tubo contendo um volume (50-100
uL), de tampo de pH 8,4 ou uma diluio apropriada das
solues de amostra ou o padro solues. Agitar, mas no
permitir a formao de bolhas, incubar a 37 C por pelo
menos 1 minuto. Adicionar a cada tubo de 25-50 uL de
soluo de trombina humana, e incubar por pelo menos
1 minuto. Adicionar 50 - 100 uL de soluo de substrato
cromognico. Notar que todos os reagentes, solues
padro, e solues de amostra devem ser pr-aquecida a 37
C pouco antes de usar.
Dois diferentes tipos de medies podem ser registrados:
Medio endpoint: Parar a reao pelo menos aps
1 minuto com 5-10 L de soluo de parada. Medir a
absorvncia de cada soluo a 405 nm atravs de um
espectrofotmetro adequado. Um desvio padro relativo
sobre as leituras em branco tem que ser menor que 10%.
Medio Cintica: Seguindo a mudana na absorvncia
para cada soluo sobre 1 minuto a 405 nm atravs de um
espectrofotmetro. Calcular a variao de absorvncia/
minuto (OD/minuto). Os brancos para a medio cintica
tambm expressa como OD/minuto e deve dar valores
maiores em que so realizadas na ausncia de heparina. O
desvio padro relativo sobre as leituras em branco deve ser
inferior a 10%.
Os modelos estatsticos para anlise da relao ente
inclinao das retas ou sobre paralelismo podem ser usados
dependendo do melhor modelo que descreva a correlao
entre a concentrao e a resposta.
Ensaio sobre paralelismo: Para cada srie, calcular a
regresso da absorvncia ou mudana de absorvncia/
minuto contra as concentraes em logaritmo das solues
de amostra e das solues padres e calcular a potncia da
heparina de sdio de referncia em Unidades/mL utilizando
mtodos estatsticos para ensaios linha paralela. Exprimir a
potncia de heparina sdica UI/mg de base seca.
Relao entre Inclinao das Retas: Para cada srie, calcular
a regresso da absorvncia em logaritmo ou o logaritmo
das alteraes na absoro/minuto contra as concentraes
das solues de amostra e das solues padres e calcular
a potncia da heparina de sdio de referncia Unidades/mL
utilizando mtodos estatsticos para ensaios de relaes
entre inclinaes. Exprimir a potncia de heparina sdica
em UI/mg, de base seca.
Critrios de aceitao: a potncia da heparina sdica,
calculado em base seca, no inferior a 180 unidades de
heparina por cada mg.
Atividade anti-fator Xa.
Tampo tris (hidroximetil) aminometano e EDTA pH
8,4: dissolver 10,24 g de cloreto de sdio, 6,6 g de
tris(hidroximetil)aminometano e 2,8 g de EDTA dissdico
em gua. Se necessrio, ajustar o pH para 8,4 com soluo
diluda de cido clordrico ou hidrxido de sdio.
Soluo antitrombina SR: reconstituir o contedo de uma
ampola contendo antitrombina com gua (ou conforme
recomendado pelo fabricante). Diluir com tampo
tris(hidroximetil)aminometano e EDTA pH 8,4 de modo a
obter soluo a 1 UI de antitrombina por mL.
Soluo de fator Xa bovino: reconstituir o contedo de uma
ampola contendo fator Xa bovino com gua (ou conforme
recomendado pelo fabricante). Diluir a soluo obtida em
tampo pH 8,4, de modo a obter uma soluo com valores
de absorvncia entre 0,65 e 1,25 medidas em 405 nm,
quando testadas conforme descrito abaixo, mas utilizando
30 L de tampo pH 8,4 ao invs de 30 L de Soluo
padro ou Soluo amostra.
A soluo de fator Xa contem trs unidades nano catalticas
por mL, mas pode variar dependendo do fabricante do
factor Xa, ou o substrato utilizado.
Soluo de substrato cromognico: Preparar uma soluo
cromognica adequada para o teste amidoltico (ver
Especifcaes de reagentes em reagentes, indicadores e
Solues) especfco para fator Xa em gua para obter uma
concentrao de cerca de 1 mM.
Soluo de parada: Preparar uma soluo 20% (v/v) de
cido actico em gua.
Soluo amostra: dissolver quantidade exata da amostra de
heparina sdica em tampo pH 8,4 e diluir com o mesmo
para obter solues contendo atividades aproximadamente
iguais s Solues Padro.
Soluo padro: utilizar padro ofcial de heparina. Pode
ser utilizada outra preparao, cuja potncia tenha sido
calibrada frente ao padro ofcial. Reconstituir o contedo
da ampola de heparina padro ofcial em gua e misturar
levemente at completa dissoluo. Preparar diluies
em soluo tampo pH 8,4, de forma a obter de cinco at
sete solues contendo atividades conhecidas de 0,375;
0,3125; 0,25; 0,188; 0,125; 0,0625 e 0,0313 em unidades
de heparina por mL.
Procedimento: os volumes descritos podem ser adaptados
para realizao do ensaio em tubos ou microplacas,
mantendo a relao entre os volumes. Executar o teste
com cada soluo padro e soluo teste em duplicata.
Para cada srie de tubos plsticos em banho-maria a 37 C,
transferir 120 uL de tampo 8,4. Separadamente transferir
a
h
1027
30 uL de diferentes diluies de solues padro ou de
solues amostra aos tubos. Adicionar 150uL, para cada
tubo, misturar e incubar por dois minutos. Adicionar 300
uL de soluo substrato cromognico, pr aquecido a 37
C por 15 minutos. Adicionar 150 uL de soluo de parada
em cada tubo e misturar. Preparar o branco para zerar o
espectrofotmetro adicionando os reagentes em ordem
inversa, comeando com soluo de parada e terminando
com a adio de 150 uL de Tampo pH 8,4, e excluindo
as solues padro ou as solues amostra. Registrar a
absorvncia medida em 405 nm contra o branco.
Construir um grfco dos valores das absorvncias
das solues padro e as solues amostra contra as
concentraes de heparina em unidades. Construir retas
separadas de melhor ajuste utilizando anlise de regresso
linear dos mnimos quadrados para as solues padro e
as solues amostra e determinar a inclinao de cada reta
de regresso. Calcular a potncia da heparina sdica pela
formula:
em que
P = potncia do Padro de referncia da heparina clcica;
SA e SP = so as inclinaes das retas a partir das Solues
amostra e das Solues padro, respectivamente.
Expressar a potncia do anti- fator Xa da soluo amostra
como uma porcentagem da concentrao de heparina
determinada no Ensaio. Calcular a razo do anti-fator Xa
contra potncia do fator IIa pela formula.A razo entre
atividade do anti-fator Xa com potncia anti-fator IIa deve
ser no mnimo, 0,9 e no mximo 1,1.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticoagulante.
HEXILRESORCINOL
Hexylresorcinolum
CH
3
OH
O H
C
12
H
18
O
2
; 194,27
hexilresorcinol; 04636
4-Hexil-1,3-benzenodiol
[136-77-6]
C
12
H
18
O
2
,
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais aciculares brancos e
levemente amarelados ou placas ou aglomerados de massas
aciculares ou p cristalino, de odor e de sabor pronunciado
e estptico, produzindo insensibilizao da lngua.
solvel em benzeno, clorofrmio, etanol, ter etlico,
glicerol, metanol e em leos fxos, praticamente insolvel
em ter de petrleo.
IDENTIFICAO
A. A 10 mL de soluo de hexilresorcinol, a 1% (p/v) em
etanol, adicionar duas gotas de cloreto frrico SR, forma-se
colorao verde.
B. A 1 mL de soluo saturada de hexilresorcinol adicionar
1 mL de cido ntrico SR, forma-se leve colorao
vermelha.
C. A 1 mL de soluo saturada de hexilresorcinol adicionar
1 mL de bromo 0,1 M. Produz-se precipitado focoso
amarelo que se dissolve pela adio de 2 mL de amnia SR
e forma soluo amarela.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez. Dissolver 0,25 g da amostra em 500 mL de gua
destilada. No mximo 1 mL de hidrxido de sdio 0,02 M
gasto para neutralizar, utilizando vermelho de metila SI
como indicador.
Resorcinol e outros fenis. Agitar cerca de 1 g da amostra
com 50 mL de gua durante alguns minutos. Filtrar.
Adicionar ao fltrado trs gotas de cloreto frrico SR. No
deve desenvolver colorao vermelha nem azul.
h
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 70 a 100 mg da amostra,
previamente dessecada sobre slica-gel por 4 horas, em 10
mL de metanol, num frasco de iodo de 250 mL. Adicionar
30 mL de bromo 0,1 M SV e, em seguida, adicionar
rapidamente 5 mL de cido clordrico, arrolhando-o
imediatamente. Resfriar sob gua corrente temperatura
ambiente. Agitar vigorosamente por 5 minutos e deixar
em repouso por 5 minutos. Adicionar 6 mL de iodeto de
potssio SR ao redor da rolha e, cautelosamente, afrouxar
a rolha. Em seguida, fechar hermeticamente e agitar
levemente. Adicionar 1 mL de clorofrmio, e titular o iodo
desprendido com tiossulfato de sdio 0,05 M SV, adicionar
3 mL de amido SI quando o ponto fnal aproximar-se.
Realizar ensaio em branco. Cada mL de bromo 0,1 M SV
12
H
18
O
2
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-helmntico (nematides e trematides).
HICLATO DE DOXICICLINA
Doxycyclini hyclas
OH O OH O
OH
O
NH
2
C H
3
H
OH
H
N(CH
3
)
2
OH
.
HCl
C
22
H
24
N
2
O
8
; 444,43
C
22
H
24
N
2
O
8
.HCl.C
2
H
6
O.H
2
O; 512,94
doxiciclina; 03217
hiclato de doxiciclina; 03222
( 4S, 4a R, 5S, 5a R, 6R, 12a S) - 4- ( Di me t i l a mi no) -
6-metil-1,11-dioxo-2-naftacenocarboxamida
[564-25-0]
Cloridrato de (4S,4aR,5S,5aR,6R,12aS)-4-(dimetilamino)-
6-metil-1,11-dioxo-2-naftacenocarboxamida etanolado
hidratado (2:2:1:1)
[24390-14-5]
Contm o equivalente a, no mnimo, 800 g e, no mximo,
920 g de doxiciclina (C
22
H
24
N
2
O
8
) por miligrama.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, amarelo,
higroscpico; odor levemente alcolico; sabor amargo.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua e em metanol,
ligeiramente solvel em etanol. Solvel em solues de
IDENTIFICAO
hiclato de doxiciclina SQR, preparado de maneira idntica.
C. Pesar 2 mg da amostra e adicionar 5 mL de cido
sulfrico. Produz-se colorao amarela.
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
Poder rotatrio (5.2.8). -105 a -120. Dissolver 0,25 g da
amostra em uma mistura de cido clordrico M e metanol
(1:99) e diluir para 25 mL com o mesmo solvente. Realizar
a leitura dentro de 5 minutos aps a preparao.
Absoro de luz. Dissolver 25 mg em uma mistura de
cido clordrico M e metanol (1:99) e diluir para 25 mL
com a mesma mistura de solventes. Diluir 1 mL dessa
soluo para 100 mL com a mistura de cido clordrico M e
metanol (1:99). Proceder a medida 1 hora aps a preparao
da soluo. A absorvncia da soluo, medida em 349 nm,
da substncia anidra e livre de etanol, est compreendida
entre 0,300 e 0,335.
Impurezas que absorvem luz. Dissolver 0,10 g da amostra
em uma mistura de cido clordrico M e metanol (1:99)
e diluir para 10 mL com a mesma mistura de solventes.
Proceder a medida 1 hora aps a preparao da soluo. A
absorvncia da soluo, medida em 490 nm, da substncia
anidra e livre de etanol, de no mximo 0,7.
Doseamento. Preparar as solues como descrito a seguir:
Soluo (1): usar a Soluo amostra, preparada conforme
de cloridrato de metaciclina SQR com Diluente e
diluir, quantitativamente, para obter uma soluo com
concentrao conhecida de 1,2 mg/mL.
a
h
1029
Soluo (3): preparar como descrito para Soluo padro
em Doseamento.
Soluo (4): transferir 2 mL da Soluo (3) e 2 mL da
Soluo (2) para balo volumtrico de 100 mL, diluir com
Diluente at completar o volume e homogeneizar. Essa
soluo contm cerca de 0,024 mg de hiclato de doxiciclina
SQR e de cloridrato de metaciclina SQR por mL.
Soluo (5): preparar como descrito para Soluo de
resoluo em Doseamento.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo de resoluo,
conforme descrito em Doseamento. Os tempos de reteno
relativos so cerca de 0,4 para 4-epidoxiciclina (o principal
produto de degradao), 0,6 para metaciclina e 1,0 para
doxiciclina. A resoluo entre os picos de 4-epidoxiciclina
e doxiciclina no menor que 3,0. O fator de cauda no
(4) e da Soluo (1) registrar os cromatogramas por
tempo correspondente a 1,7 vezes o tempo de reteno
da doxiciclina e medir as reas sob os picos. Calcular a
porcentagem de metaciclina, segundo a equao.
em que
C
S
= concentrao, em mg/mL, de cloridrato de metaciclina
SQR na Soluo (4);
W = peso, em mg, de hiclato de doxiciclina na Soluo (1);
r
u
= resposta do pico de metaciclina no cromatograma da
Soluo (1);
r
M
= resposta do pico de metaciclina no cromatograma da
Soluo (4).
No mais que 2% de metaciclina encontrada. Calcular as
porcentagens de outras substncias relacionadas presentes
na amostra segundo a equao:
em que
C
S
= concentrao, em mg/mL, de hiclato de doxiciclina
SQR na Soluo (4);
W = peso, em mg, de hiclato de doxiciclina na Soluo (1);
r
i
= resposta do pico de cada substncia relacionada no
cromatograma na Soluo (1);
r
s
= resposta do pico de doxiciclina no cromatograma na
Soluo (4).
No mais que 0,5% de alguma impureza eluda antes
da metaciclina encontrada; no mais que 2% de
6-epidoxiciclina encontrada e no mais que 0,5% de
alguma impureza eluda depois do pico principal da
doxiciclina encontrada.
gua (5.2.20.1). 1,4% a 2,8%.
Metais pesados (5.3.2.3). Proceder conforme descrito
em Mtodos de reao com tioacetamida, Mtodo IV. No
mximo 0,005% (50 ppm).
No mximo 0,4%.
de fltrao em membrana.
mg de doxiciclina.
DOSEAMENTO
com copolmero esfrico estireno divinilbenzeno (5 m),
mantida a 60 C 1 C; fuxo da Fase mvel de 1,0 mL/min.
Fase mvel: dissolver 2,72 g de fosfato de potssio
monobsico, 0,74 g de hidrxido de sdio, 0,5 g de
sulfato de tetrabutilamnio, e 0,4 g de edetato dissdico
em 850 mL de gua em balo volumtrico de 1000 mL.
Adicionar 60 g de lcool tert-butlico com auxlio de gua,
completar o volume com gua e ajustar o pH em 8,0 0,1
com hidrxido de sdio M. Filtrar e desaerar a soluo
antes do uso. A diminuio na proporo de lcool tert-
butlico resulta em prolongamento do tempo de reteno
da doxiciclina e melhora a separao da doxiciclina de suas
substncias relacionadas.
Diluente: cido clordrico 0,01 M.
da amostra para balo volumtrico de 100 mL. Dissolver e
completar o volume com Diluente. Homogeneizar e fltrar.
de hiclato de doxiciclina SQR para balo volumtrico de
10 mL. Adicionar 6 mL de Diluente, agitar por 5 minutos
ou at dissolver, completar o volume com Diluente e
homogeneizar.
Soluo de resoluo: preparar soluo de hiclato de
doxiciclina SQR a 6 mg/mL utilizando Diluente. Transferir
5 mL para balo volumtrico de 25 mL, aquecer em banho
de vapor por 60 minutos e evaporar at secura em chapa
aquecedora, tomando cuidado para no incinerar o resduo.
Dissolver o resduo e completar o volume com o Diluente.
Homogeneizar e fltrar. Essa soluo contm uma mistura
de 4-epidoxiciclina, 6-epidoxiciclina e doxiciclina. Quando
h
estocada em refrigerador, essa soluo pode ser usada por
14 dias.
4-epidoxiciclina (o principal produto de degradao), 0,7
para 6-epidoxiciclina e 1,0 para doxiciclina. A resoluo
entre os picos de 4-epidoxiciclina e doxiciclina no
menor que 3,0. O fator de cauda para o pico da doxiciclina
padro e amostra, registrar os cromatogramas por tempo
correspondente a 1,7 vezes o tempo de reteno da
doxiciclina e medir as reas sob os picos. Calcular o teor de
doxiciclina (C
22
H
24
N
2
O
8
) na amostra, em g por miligrama,
a partir do teor do padro e das respostas obtidas com a
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. Quando a substncia
destinada produo de preparaes parenterais, o rtulo
deve indicar se o produto estril ou se deve ser esterilizado
durante o processo.
CLASSE TERAPUTICA
Antibacteriano. Antiparasitrio (peste, tracoma e malria).
HIDRASTE
Hydrastidis radix
Hydrastis canadensis L. RANUNCULACEAE
A droga vegetal consiste de rizomas e razes, dessecados
e fragmentados, contendo, no mnimo, 2,5% de hidrastina
(C
21
H
21
NO
6
, 383,4) base seca e, no mnimo, 3,0% de
berberina (C
20
H
18
NO
4
, 336,4) base seca.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga tem odor fraco e
sabor fortemente amargo.
DESCRIO MACROSCPICA
O rizoma cresce horizontal ou obliquamente e sustenta
numerosas e pequenas ramifcaes, alm das razes
adventcias. O rizoma cilndrico, tortuoso, muitas vezes
dilatado, enrugado longitudinalmente, com 1 cm a 6 cm de
comprimento e 0,2 cm a 1,0 cm de dimetro; externamente
castanho-amarelado ou castanho-acinzentado e
internamente amarelo claro no centro a amarelo esverdeado
prximo margem. Externamente marcado por numerosas
cicatrizes, mais ou menos circulares, provenientes da queda
dos caules, e outras menores, da queda dos brotos e razes.
As razes, originadas nas superfcies ventral e lateral, so
numerosas, fliformes, com 0,1 cm de dimetro e 3,5 cm
de comprimento, curvadas, retorcidas, frgeis, facilmente
separveis e destacveis, de colorao semelhante do
rizoma.
DESCRIO MICROSCPICA
O rizoma mostra, da periferia para o centro, os seguintes
tecidos: fragmentos de sber castanho-amarelados,
compostos de clulas poligonais em vista frontal, com
paredes fnas e lignifcadas; fragmentos, em seco
transversal, freqentemente com massa irregular de
material castanho granular, que na sua parte externa
pode obscurecer as clulas do sber. Parnquima cortical
com cerca de 25 camadas de clulas, de paredes fnas,
poligonais a arredondadas, em seco transversal e
alongadas em seco longitudinal, contendo gros de
amido e massas amareladas. Os gros de amido so, na
maioria, simples, podendo tambm apresentar dois, trs
ou quatro componentes. As clulas da regio externa deste
parnquima tm paredes espessadas com aparncia das de
um colnquima. A seguir, observa-se um crculo de 12 a 20
feixes vasculares colaterais, separados por largas fleiras
de clulas parenquimticas de colorao alaranjado-
amarelada a amarelo-esverdeada. O xilema constitudo
de elementos de vaso pequenos, dos tipos helicoidal,
pontoado e reticulado (mais raro), com placa de perfurao
em paredes terminais oblquas. A parte central ocupada
por um amplo parnquima medular. O corte transversal da
raiz mostra uma epiderme formada por uma nica camada
de clulas, castanho-amareladas, com paredes externas
suberifcadas. Essas em vista frontal so mais alongadas e
irregulares do que aquelas do rizoma, algumas do origem
a tricomas. O parnquima cortical, de clulas de paredes
espessadas, contm amido. A endoderme possui clulas de
paredes ligeiramente lignifcadas; nas razes jovens, em
seco tangencial, as clulas mostram-se alongadas, de
paredes fnas e marcadamente sinuosas. O sistema vascular
apresenta de duas a seis arestas do xilema, alternadas com
o foema. A medula consiste de uma pequena rea central
de clulas parenquimticas, pouco evidentes.
caractersticas: cor amarelada a amarelo-esverdeada;
abundantes gros de amido esfricos, isolados ou
reunidos em grupos de dois, trs ou quatro componentes;
fragmentos de parnquima contendo gros de amido;
poucos fragmentos do sber castanho-amarelado,
composto de clulas poligonais em vista frontal, e, em vista
transversal, mostrando massas irregulares de substncia
granular castanho-escuro sobre o lado externo do sber;
fragmentos de tecido vascular, contendo elementos de
vaso com pontoaes areoladas, alguns com espessamento
helicoidal, infreqentes fbras do xilema, de 200 m a 300
m de comprimento, de paredes delgadas e poros simples;
a
h
1031
fragmentos ocasionais da endoderme; numerosas massas
esfricas a ovides, de substncia granular castanho-
alaranjada, dispersas por todo o p. O p no contm
cristais de oxalato de clcio nem clulas esclerifcadas
(escleredes).
IDENTIFICAAO
254
,
lcool n-proplico, cido frmico e gua (90:1:9), como
banda, 15 L a 20 L da Soluo amostra e 3 L a 5 L
da Soluo referncia, preparadas como descrito a seguir.
Soluo (1): extrair 0,5 g da droga pulverizada com 15 mL
de etanol a 60% (v/v) sob agitao magntica durante 15
minutos. Filtrar. Repetir a operao duas vezes e reunir os
extratos. Concentrar sob vcuo at volume de cerca de 5
mL. Ajustar o resduo a 10 mL.
Soluo (2): soluo recentemente preparada de cloridrato
de hidrastina e cloridrato de berberina a 0,l% (p/v) em
etanol a 60% (v/v).
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa e secar ao
ar. Examinar sob luz ultravioleta (365 nm). Em seguida,
revelar com iodeto de potssio e subnitrato de bismuto
SR e examin-la novamente. A mancha de fuorescncia
amarelo vivo obtida com a Soluo (1), na parte inferior da
cromatoplaca, corresponde em posio quela obtida com
a Soluo (2), referente berberina. Abaixo dela obtida
uma segunda mancha com a Soluo (1) de fuorescncia
azul-escuro, que corresponde em posio quela obtida com
a Soluo (2), referente hidrastina. Podem ser observadas
ainda, uma mancha de fuorescncia azul-escuro e outra de
colorao azul-claro vivo. Aps revelao com iodeto de
potssio e subnitrato de bismuto SR, manchas de colorao
amarelada so observadas.
B. Adicionar 5 mL de cloreto de metileno a 1 g da droga
pulverizada e deixar em macerao durante 1 hora, com
agitao ocasional. Filtrar. Evaporar o fltrado. Adicionar
ao resduo 1 mL de cido sulfrico e um cristal de molibdato
de amnio, que se cora de azul intenso, caracterizando a
presena de hidrastina.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 10%.
DOSEAMENTO
com slica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano e
coluna analtica de 75 mm de comprimento e 4,6 mm de
ligada a grupo octadecilsilano (3,5 m); fuxo da Fase
Fase mvel: mistura de fosfato monobsico de potssio
0,05 M e acetonitrila (73:27).
Soluo amostra: a um balo de fundo redondo de 100 mL
contendo 1000 g da amostra pulverizada, adicionar 50 mL
de soluo alcolica de amnia a 1% (v/v). Aquecer at
ebulio, sob refuxo, durante 30 minutos. Deixar esfriar
temperatura ambiente e fltrar em algodo hidrflo,
recolhendo o fltrado em um erlenmeyer. Juntar o algodo
hidrflo ao resduo contido no balo de fundo redondo e
repetir a extrao por duas vezes com 30 mL da soluo
alcolica de amnia a 1% (v/v), aquecendo com refuxo
durante 10 minutos e fltrando em algodo para o mesmo
erlenmeyer utilizado anteriormente. Filtrar em papel de
fltro os fltrados reunidos no erlenmeyer para um balo
de fundo redondo de 250 mL, lavar o balo e o papel de
fltro com 20 mL de soluo alcolica de amnia a 1%
(v/v). Evaporar o fltrado at secura sob presso reduzida
em banho-maria a 55 C. Dissolver o resduo em 50 mL
da Fase mvel. Diluir 1 mL da soluo obtida para 50 mL,
utilizando a Fase mvel. Filtrar em membrana de 0,45 m
e injetar no cromatgrafo.
Soluo padro A: dissolver 10 mg de cloridrato de
hidrastina e 10 mg de cloreto de berberina em metanol e
Soluo padro B: diluir 1 mL da Soluo padro A para
25 mL utilizando metanol como solvente.
Solues para curva analtica: diluir 2,0 mL da Soluo
padro A em balo volumtrico de 25 mL e completar o
volume com Fase mvel. Diluir alquotas de 1 mL, 2 mL,
3 mL, 5 mL e 7 mL com Fase mvel para 10 mL, obtendo
solues com concentraes de 3,2 g/mL, 6,4 g/mL,
9,6 g/mL, 16,0 g/mL e 22,4 g/mL para cloridrato de
hidrastina e cloreto de berberina. Filtrar as solues em
membrana de 0,45 m e injetar no cromatgrafo.
Injetar 10 L da Soluo padro B. A hidrastina tem tempo
de reteno menor que a berberina. A resoluo entre os
picos de hidrastina e berberina de no mnimo 1,5.
padro A, da Soluo padro B e da Soluo amostra,
registrar os cromatogramas e medir as reas sob os picos
correspondentes hidrastina e berberina. O tempo de
reteno relativo cerca de 8,2 minutos para a hidrastina e
10,8 minutos para a berberina. Calcular o teor de hidrastina
e berberina na amostra a partir da equao da reta obtida
com as curvas analticas do cloridrato de hidrastina e
cloreto de berberina. O resultado expresso pela mdia
das determinaes em gramas de hidrastina e berberina,
separadamente, por 100 gramas da droga considerando a
determinao de gua.
h
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos de Hydrastis canadensis L.
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 100 mm, em B a f a 100 m.
A aspecto geral do rizoma. B esquema da seco transversal do rizoma: foema primrio (fp), regio do foema secundrio (fs), parnquima cortical
(pc), periderme (pe), parnquima medular (pm), xilema primrio (xp), xilema secundrio (xs). C detalhe de periderme (pe) e parnquima cortical
(pc) em seco transversal, os numerosos gros de amido (ga) esto representados apenas nas clulas esquerda. D detalhe de seco transversal das
seguintes regies, de cima para baixo: xilema secundrio (xs) apresentando raios parenquimticos multisseriados, fbras e elementos de vaso dispostos
em sries radiais; xilema primrio (xp) com fbras, meta e protoxilema envolto por parnquima medular; os abundantes gros de amido presentes no
parnquima medular e nos raios parenquimticos no foram representados. E detalhe de seco transversal do parnquima medular (pm) apresentando
numerosos gros de amido (ga) na maioria das clulas. f aspecto geral do p do rizoma, com fragmentos do sber (acima, esquerda), de vasos
(acima, direita), de fbras (abaixo, direita), de gros de amido, isolados ou agregados.
a
h
1033
HIDROCLOROTIAZIDA
Hydrochlorothiazidum
N
H
S
NH
O O
S
O
N H
2
O
Cl
C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
; 297,74
hidroclorotiazida; 04652
1,1-Dixido de 6-cloro-3,4-diidro-2H-1,2,4-
benzotiadiazina-7-sulfonamida
[58-93-5]
C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
DESCRIAO
branco, inodoro.
acetona e pouco solvel em etanol. Solvel em solues
IDENTIFICAO
observados no espectro de hidroclorotiazida SQR,
B. Determinar a absorvncia (5.2.14) das seguintes
solues:
Soluo (1): dissolver 50 mg da amostra em 10 mL de
soluo de hidrxido de sdio 0,1 M e completar o volume
para 100 mL de gua. Diluir 10 mL dessa soluo para 100
mL com soluo de hidrxido de sdio 0,01 M. O espectro
de absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa de 200 a 400
nm, exibe mximo em 323 nm. A absoro em 323 nm
de 0,45 a 0,475.
Soluo (2): diluir 2 mL da Soluo (1) para 100 mL
com hidrxido de sdio 0,01 M. O espectro de absoro
no ultravioleta (5.2.14), na faixa de 200 a 400 nm, exibe
mximo em 273 nm. A absoro em 273 nm 0,0505 a
0,053.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Agitar 0,5 g da amostra com 25
mL de gua por 2 minutos e fltrar. A 10 mL desta soluo
adicionar 0,2 mL de hidrxido de sdio 0,01 M e cinco
gotas de vermelho de metila SI. A soluo apresenta
colorao amarela. No mximo 0,4 mL de cido clordrico
0,01 M so gastos para a viragem da colorao do indicador
para rsea.
Cloretos (5.3.2.1). Utilizar o Mtodo II. Dissolver 1 g da
amostra em 25 mL de acetona e completar o volume para
30 mL com gua. 15 mL dessa soluo devem satisfazer ao
Ensaio limite para cloretos. Empregar como Preparao
padro 10 mL de soluo padro de cloreto (5 ppm Cl)
adicionada de 5 mL de soluo de acetona em gua (85:15).
mximo 0,001%.
amostra. Dessecar em estufa a 105 C, por 1 hora. No
mximo 0,1%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
com slica ligada a grupo octadecilsilano (5 m), mantida
temperatura ambiente; fuxo de Fase mvel de 2,0 mL/
minuto.
Fase mvel: mistura de soluo de fosfato de potssio 0,1
M e acetonitrila (9:1). Degaseifcar, ajustar o pH para 3,0
e fltrar.
Soluo amostra: transferir exatamente cerca de 30 mg de
volume de acetonitrila que no exceda 10% da capacidade
do balo e adicionar Fase mvel at completar o volume e
misturar.
Soluo padro: dissolver quantidade de hidroclorotiazida
SQR, exatamente pesada, na Fase mvel, de modo a obter
soluo de concentrao prxima a 0,15 mg/mL. Pode-
se utilizar volume de acetonitrila no excedendo 10% do
volume total da soluo para dissolver o padro.
Soluo de resoluo: dissolver quantidade de
hidroclorotiazida SQR e clorotiazida, exatamente pesadas,
em Fase mvel de modo a obter soluo com concentraes
prximas de 1,5 mg/mL.
Injetar replicadas de 20 L de Soluo padro. O desvio
padro das reas sob os picos registrados no deve ser
h
maior que 1,5%. Os tempos de reteno relativos so de
cerca de 0,8 para clorotiazida e 1 para hidroclorotiazida e
a resoluo entre clorotiazida e hidroclorotiazida no deve
ser menor que 2.
e mediar as reas sob os picos. Calcular a quantidade de
C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
a partir das respostas obtidas para a Soluo
padro e para a Soluo amostra.
entre 15 C a 25 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Diurtico.
HIDROCLOROTIAZIDA COMPRIMIDOS
Contm no mnimo, 93,0% e, no mximo, 107,0% da
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
.
IDENTIFICAO
do p, equivalente a 10 mg de hidroclorotiazida, com 20
mL de acetona. Filtrar e evaporar o fltrado at secura. O
resduo responde ao teste A. de Identifcao da monografa
de Hidroclorotiazida.
B. Proceder conforme descrito em Cromatografa
GF
254
, como suporte, e mistura de acetato de etila e
lcool isoproplico (85:15), como fase mvel. Aplicar,
quantidade do p, equivalente a 10 mg de hidroclorotiazida,
com 10 mL de acetona. Filtrar.
Soluo (2): soluo de hidroclorotiazida SQR a 1 mg/mL
em acetona.
em posio e intensidade quela obtida com a Soluo (2).
CARACTERSTICAS
Aparelhagem: cestas, 100 rpm.
Tempo: 30 minutos
C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
dissolvida no meio, comparando as leituras
obtidas com a da soluo de hidroclorotiazida SQR na
solvente.
declarada de C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar e pulverizar
20 comprimidos. Agitar quantidade do p, equivalente
a 30 mg de hidroclorotiazida, com 50 mL de hidrxido
de sdio 0,1 M durante 20 minutos. Diluir para 100 mL
com o mesmo solvente. Homogeneizar e fltrar. Diluir
com gua at concentrao de 0,0015% (p/v). Preparar
soluo padro nas mesmas condies, utilizando os
mesmos solventes. Medir as absorvncias das solues
a quantidade de C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
nos comprimidos a partir
considerando A(1%, 1 cm) = 520, em 273 nm.
B. Proceder conforme descrito em Doseamento da
monografa de Hidroclorotiazida. Preparar a soluo
hidroclorotiazida para balo volumtrico de 200 mL,
adicionar 20 mL de Fase mvel e deixar em ultrassom
durante 5 minutos. Adicionar 20 mL de acetonitrila e deixar
em ultrassom durante 5 minutos. Adicionar 50 mL de
Fase mvel e agitar, mecanicamente, durante 10 minutos.
a
h
1035
Completar o volume com Fase mvel, homogeneizar e
fltrar, descartando os primeiros 10 mL do fltrado.
C
7
H
8
ClN
3
O
4
S
2
ROTULAGEM
HIDROCORTISONA
Hydrocortisonum
O
CH
3
H
O H
C H
3
H H
OH
O
OH
C
21
H
30
O
5
; 362,46
hidrocortisona; 04664
(11)-11,17,21-Triidroxipregn-4-eno-3,20-diona
[50-23-7]
C
21
H
30
O
5,
DESCRIO
branco, inodoro.
Faixa de fuso (5.2.2): 214 - 215 C, com decomposio.
Poder rotatrio (5.2.8): De +150 a +156, em relao
em dioxana.
IDENTIFICAO
A. O Espectro de absoro no infravermelho (5.2.14)
da amostra dessecada, dispersa em brometo de potssio,
relativas daqueles observados no espectro de hidrocortisona
faixa de 200 a 400 nm, de uma soluo a 0,0002% (p/v)
em etanol, exibe mximos idnticos aos observados no
espectro da soluo preparada de maneira similar de
hidrocortisona SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel G 60, como suporte, e mistura de clorofrmio e
etanol (85:15), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, 10 uL de cada uma das solues descritas a seguir:
Soluo (1): dissolver cerca de 20 mg da amostra em 10
mL de mistura de clorofrmio-metanol (9:1).
Soluo (2): pipetar 1 mL da Soluo (1) para um balo
de clorofrmio e metanol (9:1).
secar ao ar e examinar a placa a sob luz ultravioleta (254
nm). Nenhuma mancha secundria obtida com a Soluo
(1) apresenta intensidade maior que a mancha principal
mximo 1,0%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 100 mg de
DOSEAMENTO
20 mg de amostra para um balo volumtrico de 100 mL,
completar o volume com etanol e agitar. Transferir 5 mL
dessa soluo para um balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com etanol. Preparar soluo de
hidrocortisona SQR na mesma concentrao, utilizando
os mesmos solventes. Medir as absorvncias das solues
resultantes em 242 nm, utilizando etanol para ajuste do
21
H
30
O
5
a partir das leituras
obtidas.
comprimido e 4,6 mm de dimetro interno, empacotada
um) e fuxo da Fase mvel de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila e metanol
(50:25:25).
Diluente: mistura de metanol e gua (1;1).
Soluo padro interno: preparar soluo de propilparabeno
em metanol em concentrao cerca de 1 mg/mL.
h
Soluo padro estoque: pesar, exatamente, cerca de 25
mg hidrocortisona SQR para balo volumtrico de 25 mL.
Dissolver em metanol, completar o volume e homogeneizar
de modo a obter uma soluo com concentrao aproximada
de 1 mg/mL.
Soluo padro: transferir 2,0 mL da Soluo padro
estoque e 2,0 mL de Soluo padro interno para balo
volumtrico de 50 mL. Completar o volume com Diluente
e homogeneizar.
Soluo amostra: pesar exatamente cerca de 50 mg de
Dissolver e diluir com metanol at completar o volume e
homogeneizar. Transferir 2,0 mL dessa soluo e 2,0 mL
de Soluo padro interno para um balo volumtrico de
50 mL. Completar o volume com Diluente e homogeneizar.
Injetar replicatas de 10 uL da Soluo padro. A
efcincia da coluna maior que 3000 pratos tericos para
hidrocortisona. Os tempos de reteno relativos so cerca
de 1,8 para propilparabeno e 1,0 para hidrocortisona. O fator
de cauda menor que 1,2. A resoluo entre hidrocortisona
e propilparabeno maior que 9,0. O desvio padro relativo
das reas de replicatas dos picos registrados no deve ser
maior que 2,0%.
Procedimento: injetar, separadamente, cerca de 10 uL
da Soluo padro e Soluo amostra, registrar os
cromatogramas e medir as reas sob os picos. Calcular a
quantidade de C
21
H
30
O
5
a partir das respostas obtidas com
a Soluo padro e a Soluo amostra pela frmula:
1250.C (A
A
/A
P
)
em que
C a concentrao em mg/mL da Soluo padro;
A
A ,
A
P
so as razes das reas de hidrocortisona e do
propilparabeno obtido da Soluo padro e da Soluo
amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infamatrio.
HIDROQUINONA
OH
OH
C
6
H
6
O
2
; 110,11
hidroquinona; 09457
1,4-Benzenodiol
[123-31-9]
Contm, no mnimo, 99,0 % e, no mximo 100,5 % de
C
6
H
6
O
2
, em relao base anidra.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais brancos e cristalinos que
se tornam escuros exposio ao ar.
etanol e ter etlico, praticamente solvel em clorofrmio e
praticamente insolvel em benzeno.
Faixa de fuso (5.2.2): 170 C a 171 C.
IDENTIFICAO
da amostra dispersa em brometo de potssio apresenta
observados no espectro de hidroquinona SQR, preparado
de maneira idntica.
(p/v) preparada em metanol, exibe mximos de absoro
idnticos aos observados no espectro de soluo de
hidroquinona SQR na mesma concentrao.
ENSAIOS DE PUREZA
mximo 0,5 %.
No mximo 0,5 %.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,25 g da amostra, dissolver
em 100 mL de uma mistura de gua e cido sulfrico 0,05
M. (10:1) e adicionar 3 mL de difenilamina SR. Titular
com sulfato crico 0,05 M SV at o aparecimento da cor
a
h
1037
vermelha. Cada mL de sulfato crico 0,05 M SV equivale a
5,506 mg de C
6
H
6
O
2
.
Em recipientes protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Despigmentante.
HIDROXICOBALAMINA SOLUO
INJETVEL
Hidroxicobalamina soluo injetvel contm, no mnimo,
95% e, no mximo, 115% da quantidade declarada de
C
62
H
89
CoN
13
O
15
P.
IDENTIFICAO
Diluir 3 mL da soluo injetvel para 100 mL utilizando
Tampo pH 4,0, descrito a seguir. O espectro de absoro no
ultravioleta e visvel (5.2.14) exibe mximo em 352 1 nm
e em 528 2 nm. A razo entre os valores de absorvncia
medidos em 352 nm e 528 nm esta compreendida entre 2,7
e 3,3.
Tampo pH 4,0: dissolver 2,61 g de acetato de sdio e 20,5
g de cloreto de sdio em 5,25 mL de cido actico glacial e
gua sufciente para perfazer 1500 mL de soluo. Ajustar
o pH se necessrio.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,5 a 5,0.
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). No mximo 0,4 EU/
g de hidroxicobalamina.
Esterilidade (5.5.3.2.1). Cumpre o teste. Empregar o
mtodo de fltrao por membrana.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14).
Tampo borato pH 9,3: dissolver 28,3 g de tetraborato
sdico e 402 mg de cido brico em gua sufciente para
perfazer 1500 mL de soluo e homogeneizar. Ajustar o pH
se necessrio.
Soluo amostra: transferir um volume exatamente
medido da soluo injetvel, equivalente a cerca de 5 mg
de hidroxicobalamina, para um balo volumtrico de 50
mL, contendo 25mL de Tampo borato pH 9,3. Adicionar
5 mL de soluo de cianeto de potssio (1:10 000). Deixar
em repouso durante 30 minutos temperatura ambiente e
diluir com Tampo borato pH 9,3 at o volume indicado
e homogeneizar. Transferir 15 mL dessa soluo para um
segundo balo volumtrico de 50 mL, diluir com Tampo
borato pH 9,3 at o volume indicado e homogeneizar.
Soluo padro: dissolver em Tampo borato pH 9,3
uma quantidade sufciente de cianocobalamina SQR,
exatamente pesada e diluir quantitativamente, passo a passo
se necessrio, para obter uma soluo com concentrao
conhecida de cerca de 30 g/mL.
Procedimento: concomitantemente, determinar as
absorvncias das solues em cubetas de 1 cm no
comprimento de onda de mxima absoro em cerca de 361
nm, com espectrofotmetro apropriado, utilizando Tampo
borato pH 9,3 como branco. Calcular a quantidade em
mg de C
62
H
89
CoN
13
O
15
P em cada mL da soluo injetvel
segundo a expresso:
em que
1346,38 e 1355,39 = so os pesos moleculares de
hidroxicobalamina e cianocobalamina respectivamente;
C = concentrao em g/mL da soluo de SQR de
cianocobalamina na preparao da Soluo padro;
V = volume em mL, da soluo injetvel tomada;
Au e As = absorvncias da Soluo amostra e da Soluo
padro, respectivamente.
Em recipientes de doses nicas ou mltiplas de vidro tipo I
protegidos da luz.
ROTULAGEM
HIDRXIDO DE ALUMNIO
Aluminii hydroxidum
Al(OH)
3
; 78,00
Al
2
O
3
; 101,96
hidrxido de alumnio; 04694
Hidrxido de alumnio
[21645-51-2]
h
Contm o equivalente a, no mnimo, 47,0% e, no mximo,
60,0% de Al
2
O
3
.
DESCRIO
amorfo.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua. Solvel em
solues de cidos e hidrxidos alcalinos.
IDENTIFICAO
reaes do on alumnio (5.3.1.1).
B. Misturar 15 mg da amostra em 2 mL de gua e 0,5
mL de cido clordrico 2 M. Filtrar. Acrescentar 0,5 mL
de tioacetamida SR. No ocorre formao de precipitado.
Adicionar hidrxido de sdio 2 M, gota a gota. Forma-se
precipitado branco gelatinoso que dissolve em excesso de
hidrxido de sdio 2 M. Adicionar, gradualmente, cloreto
de amnio SR. Produz-se precipitado branco gelatinoso.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 2,5 g da amostra em 15
mL de cido clordrico SR, aquecer em banho-maria e
completar o volume para 100 mL com gua. A soluo
obtida no mais opalescente que a Suspenso de
referncia II (5.2.25) e no mais corada que a Soluo de
referncia de cor (5.2.12) descrita a seguir.
Soluo de referncia de cor: preparar mistura de Soluo
base de cloreto frrico, Soluo base de cloreto cobaltoso
e Soluo base de sulfato cprico (96:2:2) (5.2.12).
Transferir 1,5 mL da soluo obtida para balo volumtrico
de 100 mL e completar o volume com cido clordrico a
1% (p/v).
Alcalinidade. Agitar, exatamente, cerca de 1 g da amostra
em 20 mL de gua isenta de dixido de carbono, durante 1
minuto. Filtrar. Adicionar 0,1 mL de fenolftalena SI a 10
mL do fltrado. Se desenvolver colorao rosa, no mximo
0,3 mL de cido clordrico 0,1 M gasto para neutralizar
10 mL do fltrado.
Capacidade neutralizante. Agitar 0,5 g da amostra em
100 mL de gua mantida a 37 C durante todo o tempo do
teste. Adicionar 100 mL de cido clordrico 0,1 M a 37 C
e agitar continuamente. O pH da soluo aps 10 minutos,
15 minutos e 20 minutos, no inferior a 1,8, 2,3 e 3,0,
respectivamente. Em nenhum momento superior a 4,5.
Adicionar 10 mL de cido clordrico 0,5 M a 37 C e agitar
continuamente por 1 hora. Adicionar hidrxido de sdio
0,1 M a 37 C at pH 3,5. No mximo 35 mL de hidrxido
de sdio 0,1 M so gastos.
Cloretos (5.3.2.1). Prosseguir conforme descrito em
Ensaio limite para cloretos, exceto que a Preparao
padro e Preparao amostra no devem ser diludas para
50 mL. No mximo 1,0% (10 000 ppm).
Preparao amostra: dissolver 0,106 g da amostra, sob
aquecimento, em 10 mL de cido ntrico 2 M e completar
o volume para 100 mL com gua. Transferir 10 mL da
soluo obtida para tubo adequado e diluir para 25 mL com
gua
Preparao padro: Transferir 0,3 mL de cido clordrico
0,01 M para tubo adequado e diluir para 25 mL com gua.
Sulfatos (5.3.2.2). Diluir 4 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo para 100 mL com gua. Utilizar 15
mL desta soluo. Para a Preparao padro, utilizar 0,3
mL de cido sulfrico 0,005 M. No mximo 1,0% (10 000
ppm).
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar Mtodo visual. Utilizar 10 mL
da soluo obtida em Aspecto da soluo. No mximo
0,0004% (4 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Dissolver 0,33 g da amostra em
10 mL de cido clordrico 3 M com auxlio de aquecimento,
fltrar, se necessrio e diluir para 25 mL com gua. No
mximo 0,006% (60 ppm).
mximo 1000 UFC/g.
Cumpre o teste para enterobactrias e Escherichia coli.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Titulaes
complexomtricas (5.3.3.4) para Alumnio. Dissolver,
exatamente, cerca de 0,8 g da amostra em 10 mL de cido
clordrico SR aquecendo em banho-maria. Deixar esfriar
e diluir para 50 mL com gua. A 10 mL desta soluo,
adicionar amnia SR at iniciar a formao de precipitado.
Adicionar volume sufciente de cido clordrico SR
necessrio para dissolver o precipitado e diluir para 20
mL com gua. Cada mL de edetato dissdico 0,1 M SV
equivale a 5,098 mg de Al
2
O
3
.
Em recipientes bem fechados, em temperatura inferior a
30 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticido.
a
h
1039
HIDRXIDO DE ALUMNIO
COMPRIMIDOS MASTIGVEIS
quantidade declarada de Al(OH)
3
. Os comprimidos
mastigveis podem conter agentes edulcorantes.
IDENTIFICAO
do p equivalente a 15 mg de hidrxido de alumnio em 2
mL de gua. Responde s reaes do on alumnio (5.3.1.1).
do p equivalente a cerca de 15 mg de hidrxido de alumnio,
adicionar 2 mL de gua e 0,5 mL de cido clordrico 2 M.
Filtrar. Acrescentar 0,5 mL de tioacetamida SR. No ocorre
formao de precipitado. Adicionar hidrxido de sdio 2
M, gota a gota. Forma-se precipitado branco gelatinoso que
dissolve em excesso de hidrxido de sdio 2 M. Adicionar,
gradualmente, cloreto de amnio SR. Forma-se precipitado
branco gelatinoso.
CARACTERSTICAS
CAPACIDADE DE NEUTRALIZAO DA
ACIDEZ
Transferir uma quantidade equivalente a um comprimido
para um bquer de 250 mL. Adicionar 70 mL de gua e
misturar com agitador magntico por aproximadamente 1
minuto. Transferir 25 mL de cido clordrico M SV e agitar
por 15 minutos. Titular o excesso de cido imediatamente
e, em um perodo adicional que no exceda 5 minutos
com hidrxido de sdio 0,5 M SV para obter um pH
estvel de 3,5 (por 10 a 15 segundos). Conduzir o teste
temperatura de (37 3) C. No menos que 5 mEq de cido
consumido, e no menos que 55,0% do valor esperado
de mEq, a partir da quantidade declarada de hidrxido de
alumnio, obtido. Cada mg de Al(OH)
3
tem capacidade de
neutralizao de 0,0385 mEq.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Pesar uma quantidade
do p equivalente a 1,2 g de Al(OH)
3
, adicionar 15 mL
de cido clordrico concentrado e aquecer at dissolver.
Diluir com gua para cerca de 100 mL, agitar, fltrar
quantitativamente para balo volumtrico de 500 mL,
lavando com gua. Completar o volume com gua e agitar.
Transferir 20 mL dessa soluo para um erlenmeyer de 250
mL, adicionar 25 mL de edetato dissdico 0,05 M SV e 20
mL de tampo cido actico-acetato de amnio e aquecer
at fervura por 5 minutos. Esfriar, adicionar 50 mL de etanol
e 2 mL de ditizona a 0,025% (p/v). Titular a soluo com
sulfato de zinco 0,05 M SV at colorao rsea. Realizar
prova em branco, empregando 20 mL de gua ao invs de
20 mL de soluo amostra. Cada mL de edetato dissdico
0,05 M SV equivale a 3,900 mg de Al(OH)
3
.
ROTULAGEM
HIDRXIDO DE ALUMNIO GEL
Gel de hidrxido de alumnio uma suspenso de hidrxido
de alumnio amorfo na qual h substituio parcial de
carbonato por hidrxido. Contm, no mnimo, 90,0% e, no
mximo, 110,0% da quantidade declarada de Al(OH)
3
.
IDENTIFICAO
A. A 1 g da amostra, adicionar 4 mL de cido clordrico
concentrado. Aquecer a 60 C por 1 hora, resfriar, diluir
para 50 mL com gua e fltrar se necessrio. A 10 mL
da soluo obtida, adicionar 0,5 mL de cido clordrico
2 M e 0,5 de tioacetamida SR. No ocorre formao de
precipitado. Adicionar, lentamente, 5 mL de hidrxido
de sdio 2 M e deixar em repouso por 1 hora. Produz-se
precipitado branco gelatinoso que se dissolve pela adio
de 5 mL de hidrxido de sdio 2 M. Adicionar, lentamente,
5 mL de cloreto de amnio SR e deixar em repouso por
30 minutos. Produz-se novamente precipitado branco
gelatinoso.
B. A 1 g da amostra, adicionar 4 mL de cido clordrico
concentrado. Aquecer a 60 C por 1 hora, resfriar, diluir
para 50 mL com gua e fltrar se necessrio. A soluo
obtida responde s reaes do on alumnio (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 5,5 a 8,0.
h
ENSAIOS DE PUREZA
Arsnio (5.3.2.5). Dissolver quantidade exatamente
pesada da amostra, equivalente a 0,3 g de Al(OH)
3
, em 20
mL de cido sulfrico 10 M. Proceder conforme descrito
em Mtodo espectrofotomtrico, Mtodo I. No mximo
0,001% (10 ppm).
Cloretos. Transferir quantidade exatamente pesada da
amostra, equivalente a 0,6 g de Al(OH)
3
, para cpsula de
porcelana. Adicionar 0,1 mL de cromato de potssio SR e
25 mL de gua. Agitar. Gotejar nitrato de prata 0,1 M at
colorao rosa persistente. No mximo 8 mL de nitrato de
prata 0,1 M so gastos (4,7%).
Metais pesados (5.3.2.3). Dissolver 2,3 g da amostra em
20 mL de cido clordrico M e 10 mL de gua. Adicionar
0,5 mL de cido ntrico e deixar em ebulio por 30
segundos. Esfriar, adicionar 2 g de cloreto de amnio e 2
g de tiocianato de amnio e extrair com duas pores de
10 mL de mistura de lcool isoamlico e ter etlico (1:1).
Adicionar fase aquosa 2 g de cido ctrico e diluir para
40 mL com gua. Utilizar 18 mL da soluo resultante
e proceder conforme descrito em Mtodo I. No mximo
0,002% (20 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Dissolver quantidade exatamente
pesada da amostra, equivalente a 0,15 g de Al(OH)
3
, em
5 mL de cido clordrico 3 M, aquecendo se necessrio.
Filtrar e prosseguir conforme descrito em Ensaio limite
para sulfatos. No mximo 0,8% (8000 ppm).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Transferir quantidade exatamente pesada da amostra,
equivalente a 1,5 g de Al(OH)
3
, para bquer e adicionar
15 mL de cido clordrico concentrado, aquecendo para
completa solubilizao. Resfriar, transferir para balo
Transferir 20 mL da soluo para erlenmeyer de 250 mL
e adicionar, com agitao constante, 25 mL de edetato
dissdico 0,05 M SV e 20 mL de tampo cido actico-
acetato de amnio. Aquecer por 5 minutos. Resfriar,
adicionar 50 mL de etanol e 2 mL de ditizona a 0,025%
(p/v) em etanol. Titular com sulfato de zinco 0,05 M SV at
mudana de cor de violeta esverdeado para rosa. Realizar
ensaio em branco, utilizando 20 mL de gua, e fazer as
correes necessrias. Cada mL de edetato dissdico 0,05
M SV equivalente a 3,900 mg de Al(OH)
3
.
ROTULAGEM
HIDRXIDO DE CLCIO
Calcii hydroxidum
Ca(OH)
2
; 74,09
hidrxido de clcio; 04696
Hidrxido de clcio
[1305-62-0]
Ca(OH)
2
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, branco ou quase branco.
glicerol. Solvel em cidos, com liberao de calor.
IDENTIFICAO
A. Transferir 0,8 g da amostra para gral de vidro, adicionar
10 mL de gua, 0,5 mL de fenolftalena SI e homogeneizar.
Desenvolve-se colorao vermelha. Adicionar 17,5 mL
de cido clordrico M. A suspenso torna-se incolor, sem
efervescncia. Triturar a mistura por 1 minuto. A cor
vermelha aparece novamente. Adicionar 6 mL de cido
clordrico M e triturar. A soluo torna-se incolor.
B. Dissolver 0,1g da amostra em cido clordrico SR e
diluir para 10 mL com gua. A soluo responde s reaes
do on clcio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Alcalinidade e metais alcalinos terrosos. Dissolver 1 g da
amostra em mistura de 10 mL de cido clordrico e 40 mL
de gua. Aquecer at ebulio e adicionar 50 mL de cido
oxlico SR. Neutralizar com amnia e completar o volume
para 200 mL com gua. Deixar em repouso por 1 hora e
fltrar com fltro adequado. A 100 mL do fltrado, adicionar
0,5 mL de cido sulfrico, cuidadosamente. Evaporar at
secura e incinerar. No mximo 20 mg de resduos (4,0%
de sulfatos).
Carbonatos. Adicionar 5 mL de cido clordrico M SV
soluo obtida em Doseamento. Titular com hidrxido
de sdio M SV utilizando 0,5 mL de alaranjado de metila
SI como indicador. Cada mL de cido clordrico M SV
equivale a 50,05 mg de carbonato de clcio. No mximo
5% de CaCO
3
.
Arsnio (5.3.2.5). Dissolver 0,75 g da amostra em 15
mL de cido clordrico. Prosseguir conforme descrito em
Mtodo espectrofotomtrico, Mtodo I. A adio de 20 mL
de cido sulfrico 3,5 M especifcada no procedimento
pode ser omitida. No mximo 0,0004% (4 ppm).
a
h
1041
de cido ntrico. Diluir para 40 mL com gua e prosseguir
mximo 0,033% (330 ppm).
de cido clordrico SR e prosseguir conforme descrito em
Ensaio limite para sulfatos. No mximo 0,4% (4 000 ppm).
mL de cido clordrico 3 M e evaporar em banho-maria
at secura. Dissolver o resduo em 20 mL de gua. Filtrar.
0,002% (20 ppm).
Substncias insolveis em cidos. Dissolver 2 g da
amostra em 30 mL de cido clordrico. Aquecer ebulio
e fltrar. Lavar o resduo com gua quente e incinerar. O
peso do resduo no maior que 10 mg. No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
Transferir, exatamente, cerca de 1,5 g da amostra para
gral de vidro. Adicionar 20 mL a 30 mL de gua e 0,5
mL de fenolftalena SI. Titular com cido clordrico M
SV, triturando a substncia at desaparecimento da cor
vermelha. Cada mL de cido clordrico M SV equivale a
37,045 mg de Ca(OH)
2
.
Em recipientes bem fechados e no metlicos.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Adstringente.
HIDRXIDO DE MAGNSIO
Magnesii hydroxidum
Mg(OH)
2
; 58,32
hidrxido de magnsio; 04697
Hidrxido de magnsio
[1309-42-8]
Mg(OH)
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou quase branco, fno,
amorfo, inodoro.
solues de cidos diludos.
IDENTIFICAO
A. Preparar suspenso aquosa da amostra e adicionar
fenolftalena SI. Desenvolve-se colorao rsea.
B. Dissolver cerca de 15 mg da amostra em 2 mL de cido
ntrico SR e neutralizar com soluo de hidrxido de sdio
8,5% (p/v). A soluo responde s reaes do on magnsio
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 5 g da amostra em mistura
de 50 mL de cido actico SR e 50 mL de gua. Desenvolve-
se leve efervescncia. Ferver por 2 minutos e diluir para
100 mL com cido actico 2 M. Filtrar em cadinho-fltro
de porcelana ou slica, previamente calcinado e tarado,
de porosidade adequada para obter um fltrado lmpido.
A soluo obtida no mais intensamente corada que a
Soluo de referncia de cor (5.2.12).
Soluo de referncia de cor: preparar mistura de 3
partes da Soluo base de cloreto cobaltoso, 2,4 partes
da Soluo base de sulfato cprico, 3 partes da Soluo
base de cloreto frrico e 1,6 partes de cido clordrico a
1% (p/v). No momento do uso, diluir 3,75 volumes desta
soluo com 6,25 volumes de cido clordrico a 1% (p/v).
Substncias solveis. Misturar 2 g da amostra com 100
mL de gua e ferver por 5 minutos. Filtrar ainda quente,
em funil de vidro sinterizado, resfriar e diluir para 100 mL
com gua. Evaporar 50 mL da soluo obtida secura e
dessecar entre 100 C e 105 C. O peso do resduo no
maior que 20 mg. No mximo 2,0%.
Substncias insolveis em cido actico. O peso do
resduo obtido em Aspecto da soluo, aps lavagem com
cido actico 2 M, dessecao e incinerao a 600 C, no
maior que 5 mg. No mximo 0,1%.
Arsnio (5.3.2.5). Determinar em 5 mL da soluo obtida
em Aspecto da soluo. Proceder conforme descrito em
Mtodo visual. No mximo 0,0004% (4 ppm).
Clcio (5.3.2.7). Diluir 1,3 mL da soluo obtida em
Aspecto da soluo para 150 mL com gua. Determinar
em 15 mL desta soluo. No mximo 1,5%.
Cloretos (5.3.2.1). Determinar em 7 mL da soluo obtida
em Aspecto da soluo. Para a Preparao padro, utilizar
1 mL de cido clordrico 0,01 M. No mximo 0,1% (1000
ppm).
de cido clordrico 2 M e diluir para 10 mL com gua
destilada. Utilizar 1 mL da soluo obtida e proceder
conforme descrito em Mtodo I. Utilizar 10 mL de Soluo
padro de ferro (1 ppm Fe). No mximo 0,07% (700 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Determinar em 2 mL da soluo obtida
em Aspecto da soluo. Para a Preparao padro, utilizar
1 mL de cido sulfrico 0,005 M. No mximo 0,5% (5000
ppm).
h
mL de cido clordrico 3 M e evaporar em banho-maria at
secura. Prximo ao fnal da evaporao, agitar o resduo
com freqncia para desintegr-lo, de modo a obter um p
fno seco. Dissolver o resduo em 20 mL de gua e fltrar.
Adicionar ao fltrado 2 mL de cido actico M e diluir com
gua para 25 mL. No mximo 0,002% (20 ppm).
Perda por dessecao (5.2.9). Determinar em estufa a 105 C,
amostra. Aquecer, gradativamente, at 900 C e calcinar
at peso constante. Entre 29,0% e 32,5%.
DOSEAMENTO
Dissolver 0,1 g da amostra em 2 mL de cido clordrico
2 M e proceder conforme descrito em Titulaes
complexomtricas (5.3.3.4) para magnsio. Cada mL
de edetato dissdico 0,1 M SV equivale a 5,832 mg de
Mg(OH)
2
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticido.
HIDRXIDO DE POTSSIO
Kalli hydroxidum
KOH; 56,11
hidrxido de potssio; 04698
Hidrxido de potssio
[1310-58-3]
KOH.
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. Partculas brancas ou
levemente amareladas, cristalinas, fornecidas como esferas,
raspas, bastes ou pedaos irregulares. Higroscpico e
deliquescente, absorve rapidamente dixido de carbono
atmosfrico. Ponto de fuso (5.2.2): funde em torno de 360 C.
em etanol.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 0,1 g da amostra em 10 mL de gua. Diluir 1
mL para 100 mL com o mesmo solvente. O pH (5.2.19) da
soluo resultante no inferior a 10,5.
B. A soluo aquosa da amostra a 1% (p/v) responde s
ENSAIOS DE PUREZA
isenta de dixido de carbono e diluir para 50 mL com o
mesmo solvente. A soluo obtida lmpida (5.2.25) e
incolor (5.2.12).
Cloretos (5.3.2.1). Pesar, exatamente, cerca de 8,75 g da
Dissolver em 10 mL de gua. Adicionar, lentamente, 2
mL de cido ntrico, resfriar e completar o volume com
cido ntrico SR. Utilizar 20 mL desta soluo e proceder
mximo 0,005% (50 ppm).
Carbonatos. Proceder conforme descrito em Doseamento.
Cada mL de cido clordrico M necessrio para a viragem
da soluo de azul de bromofenol SI equivale a 69,103 mg
de K
2
CO
3
. No mximo 2%.
Sulfatos (5.3.2.2). Pesar, exatamente, cerca de 15 g da
Dissolver em 15 mL de gua. Adicionar, lentamente, 12 mL
de cido clordrico, resfriar, e diluir para 50 mL com cido
clordrico diludo. Utilizar 30 mL da soluo obtida e 1 mL
de soluo padro de cido sulfrico 0,005 M. Proceder
conforme descrito em Ensaio limite para sulfatos. No
mximo 0,005% (50 ppm).
atmica (5.2.13.1.1), mtodo da calibrao direta.
Dissolver 1 g da amostra em 50 mL de gua, adicionar 5
mL de cido sulfrico e completar a 100 mL com gua.
Diluir 1 mL desta soluo para 10 mL com gua. Preparar
a soluo de referncia dissolvendo, em gua, 0,5084 g de
cloreto de sdio, previamente dessecado a 105 C por 3
horas, e diluir para 1000 mL com mesmo solvente (0,2 mg/
mL de sdio). Diluir com gua para o preparo das solues
padro, conforme necessrio. Efetuar a leitura em 589 nm
usando como fonte de radiao lmpada de ctodo oco de
sdio e chama do tipo ar-acetileno. No mximo 1,0% (10
000 ppm).
ferro (5.3.2.4). Utilizar o Mtodo III. Disssolver 10 g da
amostra em 15 mL de gua. Cuidadosamente, adicionar 12
mL de cido clordrico, resfriar, diluir com cido clordrico
7,3 % (p/v) e completar a 50 mL com o mesmo solvente.
Utilizar 5 mL dessa soluo. No mximo 0,001% (10 ppm).
Alumnio (5.3.2.10). Exigido para hidrxido de potssio
destinado preparao de solues de hemodilise.
Dissolver 20 g da amostra em 100 mL de gua e adicionar
a
h
1043
10 mL de tampo de acetato pH 6,0. Proceder conforme
descrito em Ensaio limite para alumnio. Utilizar, como
soluo de referncia, mistura de 2 mL de Soluo padro
de alumnio (2 ppm Al), 10 mL de tampo acetato pH 6,0
e 98 mL de gua. Para o branco utilizar mistura de 10 mL
de soluo tampo acetato pH 6,0 e 100 mL de gua. No
mximo 0,00002% (0,2 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Diluir 10
mL da soluo obtida no teste para Ferro a 20 mL com
gua. Utilizar, como referncia, Soluo padro de chumbo
(1 ppm Pb). No mximo 0,001% (10 ppm).
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 2 g da amostra e dissolver em
25 mL de gua isenta de dixido de carbono. Adicionar 25
mL de cloreto de brio 0,025 M, recentemente preparado,
e 0,3 mL de fenolftalena SI. Adicionar, lentamente, sob
agitao, 25 mL de cido clordrico M SV. Continuar
a titulao com cido clordrico M SV at a viragem do
indicador de rosa para incolor. Adicionar 0,3 mL de
soluo de azul de bromofenol SI e continuar a titulao
com cido clordrico M SV at a viragem do indicador de
violeta-azulado para amarelo. Cada mL de cido clordrico
M SV utilizado na segunda parte da titulao equivale a
69,103 mg de K
2
CO
3
. Cada mL de cido clordrico M SV
utilizado na combinao das titulaes equivale a 56,110
mg de alcalinidade total, calculada como KOH.
Em recipientes bem fechados e no metlicos.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Agente alcalinizante.
HIPOCLORITO DE SDIO SOLUO
DILUDA
Soluo aquosa de hipoclorito de sdio. Contm, no
mnimo, 2,0% (p/v) e, no mximo, 3,0% (p/v) de NaClO,
equivalente a, no mnimo, 1,9% (p/v) e, no mximo, 2,9%
(p/v) de cloro ativo.
IDENTIFICAO
A. Misturar 5 mL da amostra com 1 mL de iodeto
de potssio a 15% (p/v). Desenvolve-se rapidamente
colorao alaranjada que logo desaparece. Adicionar, em
seguida, cinco gotas de cido clordrico 2 M e gotas de
amido SR. A soluo adquire cor azul.
B. Misturar 1 mL da amostra com 50 mg de fenolftalena.
O lquido torna-se avermelhado.
C. A 5 mL da amostra adicionar cinco gotas de cido
clordrico 2 M. Ocorre aumento da intensidade da colorao
esverdeada e formam-se bolhas de cloro gasoso.
D. Imergir, em 1 mL da amostra, papel de tornassol
vermelho. A colorao do papel passa para azul,
descorando-se em seguida.
E. A soluo acidifcada obtida no teste C. de Identifcao
responde ao teste de chama para ons sdio (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
Descrio. Lquido lmpido de cor amarelo-plida
esverdeada com odor de cloro. suscetvel luz e deteriora
gradualmente.
pH (5.2.19). Acima de 11,0.
ENSAIOS DE PUREZA
Clcio. Transferir 10 g da amostra para bquer de 150 mL,
adicionar 10 mL de gua, 5 mL de cido clordrico e 1 g
de iodeto de potssio. Aquecer por 5 minutos, resfriar e
adicionar 2 mL de perxido de hidrognio a 30% (v/v).
Evaporar at secura, resfriar, adicionar 2 mL de cido
clordrico e 2 mL de perxido de hidrognio a 30% (v/v).
Lavar as paredes internas do bquer com poucos mililitros
de gua e fltrar, se necessrio. Adicionar ao fltrado 3 mL
de hidrxido de amnio e 5 mL de oxalato de amnio a
3,5% (p/v). Transferir quantitativamente para tubo de
Nessler, completar o volume para 25 mL e homogeneizar.
Nenhuma turbidez produzida dentro 15 minutos excede
da preparao padro obtida submetendo-se 10 mL de
soluo padro de clcio (10 ppm Ca) ao mesmo tratamento
dado amostra. No mximo 0,001% (10 ppm).
DOSEAMENTO
Transferir, exatamente, 3 mL da amostra ou volume
contendo entre 60 mg e 90 mg de NaClO ou entre 57 mg
e 87 mg de cloro ativo para erlenmeyer de 250 mL com
tampa. Adicionar cerca de 50 mL de gua, 1 g de iodeto
de potssio e 10 mL de cido actico 6 M. Tampar, agitar
e deixar em repouso, ao abrigo da luz, por 15 minutos.
Lavar as paredes do frasco com poucos mililitros de gua
e titular o iodo formado com tiossulfato de sdio 0,1 M
SV. Adicionar 1 mL de amido SR quando a colorao da
soluo se tornar amarelo esverdeada. Continuar a titulao
at desaparecimento da cor azul. Cada mL de tiossulfato de
sdio 0,1 M SV equivale a 3,723 mg de NaClO e a 3,545
mg de cloro ativo.
Em recipientes bem fechados e opacos, preferencialmente
em temperatura abaixo de 25 C.
h
ROTULAGEM
HORTEL PIMENTA
Menthae piperitae folium
Mentha x piperita L. LAMIACEAE; 09914
A droga vegetal constituda de folhas secas, inteiras,
quebradas, cortadas ou pulverizadas da espcie e de suas
variedades, contendo, no mnimo, 1,2% de leo voltil
em folhas inteiras e, no mnimo, 0,9% de leo voltil em
folhas rasuradas.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga tem odor forte,
aromtico, penetrante, semelhante ao mentol e sabor
aromtico picante, com sensao de frescor agradvel.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas inteiras, membranosas, rugosas, quebradias,
oposto-cruzadas, pecioladas, verdes a verde-amarronzadas
quando secas, com numerosos tricomas glandulares na
face abaxial da lmina, visveis no aumento de seis vezes
ou contra a luz, como pontos claros, amarelos, brilhantes
e tricomas tectores distribudos sobre as nervuras; venao
camptdroma-broquiddroma, nervura principal espessa
e pronunciada em ambas as faces, nervuras secundrias
em ngulo aproximado de 45, depressas na face adaxial
e salientes na face abaxial. Lmina ovalada a ovalado-
lanceolada, pice agudo, base irregularmente arredondada
e assimtrica, margem irregularmente serreada, com dentes
agudos, medindo de 3,0 cm a 9,0 cm de comprimento e
1,0 cm a 5,0 cm de largura. Pecolo de 0,5 cm a 1,0 cm
de comprimento, verde, quando seco vinoso-acastanhado,
cncavo na face adaxial, convexo na face abaxial e com
costelas laterais, com tricomas iguais aos da lmina
DESCRIO MICROSCPICA
Lmina foliar de simetria dorsiventral, hipo-anfestomtica,
com estmatos diacticos. Em vista frontal, a cutcula lisa
e as clulas da epiderme tm paredes anticlinais de contorno
ondulado na regio entre as nervuras e paredes retilneas
sobre as nervuras. Ocorrem cinco tipos de tricomas em
ambas as faces: (1) tricoma tector pluricelular, longo,
delgado, agudo, unisseriado, com duas a quatorze clulas,
a clula basal de maior comprimento e a apical de pice
obtuso; alguns destes tricomas quando com maior nmero
de clulas apresentam coroa de clulas basais; cutcula
espessa e marcadamente estriada; (2) tricoma tector
pluricelular, com duas a seis clulas, bisseriado na base,
com cutcula espessa e estriada; (3) tricoma glandular com
pedicelo unicelular, curto e cabea unicelular, arredondada,
com cutcula delgada; (4) tricoma glandular com pedicelo
unicelular, bicelular ou tricelular, curto e cabea unicelular
elptica, com cutcula delgada; (5) tricoma glandular
peltado, de pedicelo curto, formado por uma ou duas
clulas na poro basal e cabea pluricelular com oito
clulas de disposio radial, geralmente com cutcula
dilatada e de colorao parda. Em seco transversal, a
cutcula delgada e a epiderme uniestratifcada, com
clulas achatadas tangencialmente, ricas em gotas de leo;
os estmatos so projetados; tricomas tectores do tipo 1
ocorrem em maior nmero na face abaxial e sobre a regio
da nervura principal e os do tipo 2 so raros; tricomas
glandulares, dos tipos 3 e 4, esto distribudos por toda
a lmina; tricomas glandulares peltados, do tipo 5, so
depressos na epiderme e mais frequentes na face abaxial da
regio intercostal; parnquima palidico uniestratifcado,
com clulas compactas e curtas; parnquima esponjoso
triestratifcado ou mais, preenchendo em torno de 60%
da seco; gotas de leo abundantes; cristais de oxalato
de clcio ausentes. A nervura principal, em seco
transversal, apresenta cutcula espessa na face abaxial, as
clulas epidrmicas so poligonais, ovaladas, pequenas
e com parede periclinal externa espessa, o colnquima
angular, uniestratifcado ou com mais camadas junto face
adaxial, seguido nesta face por um clornquima com at
cinco camadas de clulas poligonais e pelo parnquima.
Este ltimo, junto a face abaxial, formado por at dez
camadas de clulas isodiamtricas com grandes espaos
intercelulares. O sistema vascular formado por um ou
mais feixes colaterais abertos ou no, apresentando foema
bem desenvolvido com calota de fbras voltada para a
face abaxial, ou com algumas fbras isoladas localizadas
externamente. O pecolo, em seco transversal, apresenta
cutcula espessa e lisa, epiderme uniestratifcada, de
clulas polidricas, estmatos projetados, com maior
frequncia de tricomas do tipo 1, o crtex apresenta
colnquima angular com at oito camadas na regio das
costelas e uniestratifcado na face abaxial; clornquima
mais compactado na regio das costelas; parnquima
cortical formado por clulas ovaladas, de grande volume,
com maiores espaos intercelulares junto face abaxial;
endoderme rica em gros de amido; sistema vascular com
trs ou mais feixes colaterais, o central amplamente aberto,
com foema expressivo, com ou sem fbras. Gotas de leo
ocorrem no clornquima, no parnquima cortical e na
endoderme.
espcie, menos os caracteres macroscpicos. Examinar
ao microscpio, utilizando soluo de hidrato de cloral.
So caractersticas: folhas quebradas ou cortadas,
frequentemente amassadas, de cor verde-acastanhada;
fragmentos da lmina com clulas epidrmicas de paredes
sinuosas e estmatos diacticos numerosos, principalmente
na face abaxial; tricomas como os descritos, principalmente
os do tipo 1; fragmentos do mesoflo heterogneo
assimtrico, como descrito; fbras; elementos traqueais de
espessamento helicoidal; cristais amarelos de mentol sob
a cutcula dos tricomas peltados podem ser observados;
cristais de oxalato de clcio ausentes.
a
h
1045
DESCRIO MACROSCPICA DAS
IMPUREZAS
Os caules, ramos, fores, frutos e sementes da prpria
espcie, se presentes como impureza, caracterizam-se por
apresentar: caule quadrandular com costelas bem defnidas
at o quarto n, ramifcado, na maioria das variedades
vinoso quando adulto, verde-claro quando jovem e
esbranquiado nos ns basais; tricomas no visveis a
olho nu; fores reunidas em inforescncias espigadas;
clice glabro, com cinco dentes; corola rosado-violcea
ou branca, com quatro lobos, o superior alargado; estames
quatro, didnamos, inclusos na corola; ovrio spero,
tetralobado, estilete ginobsico; sementes raras e estreis.
DESCRIO MICROSCPICA DA IMPUREZA
CORRESPONDENTE AO CAULE
Os caules da prpria espcie, se presentes como impureza,
apresentam, em estrutura secundria e em seco transversal,
cutcula espessa e estriada, epiderme uniestratifcada,
de clulas poligonais, com ou sem idioblastos de areia
cristalina e com ou sem clulas contendo antocianinas;
tricomas e estmatos raros; colnquima angular, formado
por uma a muitas camadas na regio das costelas;
clornquima com at dez camadas, com escleredes
isolados e com idioblastos de areia cristalina; endoderme
com estrias de Caspary evidentes e sem gros de amido;
foema com ou sem fbras isoladas ou em pequenos grupos;
zona cambial evidente de at quatro camadas; xilema
totalmente esclerifcado ou no; gotas de leo em todos
os tecidos, exceto no cmbio e no xilema; parnquima
medular desenvolvido. Quando em estrutura primria,
clulas da epiderme repletas de antocianinas; tricomas
iguais aos descritos para a folha; colnquima formado por
uma camada nas regies intercostais e at nove camadas
nas costelas; clornquima rico em cloroplastdios e gros
de amido; endoderme evidente e rica em gros de amido;
sistema vascular com feixes colaterais mais desenvolvidos
nas costelas; cmbio fascicular e interfascicular evidente;
parnquima medular com clulas isodiamtricas de grande
volume.
Adulterao: Mentha crispa L. apresenta tricomas
glandulares com cabea de doze clulas e tricomas tectores
de paredes fnas e de uma a seis clulas.
IDENTIFICAO
254
,
com espessura de 250 um, como fase estacionria e
tolueno e acetato de etila (95:5) como fase mvel. Aplicar,
separadamente, em forma de banda, 20 uL da Soluo (1)
e 10 uL da Soluo (2), recentemente preparadas, descritas
a seguir.
Soluo (1): agitar 0,2 g da droga recentemente pulverizada
com 2 mL de cloreto de metileno. Filtrar. Evaporar secura
(40 C) e dissolver o resduo em 0,1 mL de tolueno.
Soluo (2): diluir 50 mg de mentol SQR, 20 uL de
1,8-cineol, 10 mg de timol e 10 uL de acetato de mentila
em tolueno e completar a 10 mL com o mesmo solvente.
secar ao ar. Observar sob luz ultravioleta (254 nm). O
cromatograma, obtido com a Soluo (1), apresenta, na
parte superior da cromatoplaca, quatro manchas principais,
que correspondem em posio, cor e intensidade de
fuorescncia quelas obtidas com a Soluo (2).
Em seguida, nebulizar a placa com anisaldedo SR e
deixar em estufa entre 100 C e 105 C, durante 5 a 10
minutos. A mancha correspondente ao acetato de mentila
(Rf 0,81 aproximadamente) apresenta colorao azul-
violeta, a mancha correspondente ao timol (Rf 0,65
aproximadamente) apresenta colorao rsea, a mancha
correspondente ao 1,8-cineol (Rf 0,60 aproximadamente)
apresenta colorao de azul a violeta-castanho e a mancha
correspondente ao mentol (Rf 0,55 aproximadamente)
apresenta colorao de azul a violeta.
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 10% de caules
quadrangulares, glabros ou com tricomas tectores; escassos
fragmentos de caules reconhecidos pelas fbras, alm de
numerosos elementos de vaso, fragmentos de fores como
os descritos.
gua (5.4.2.3). No mximo 12,0%.
DOSEAMENTO
leo voltil
Adicionar 0,5 mL de xileno pela abertura k. Utilizar planta
seca rasurada. Proceder imediatamente determinao do
leo voltil, a partir de 20 g da droga. Destilar por 4 horas.
Em recipientes de vidro bem fechados, ao abrigo da luz e
calor.
h
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Mentha piperita L.
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 2,5 cm; em B e C a 1 cm; em D, E, f, G e H a 100m.
A aspecto geral de um ramo: caule (c); lmina foliar (lf). B vista da face adaxial de uma folha: lmina foliar (lf); pecolo (pl). C vista da face abaxial
de uma folha: lmina foliar (lf); pecolo (pl). D detalhe de uma poro da face adaxial da epiderme da lmina foliar, na regio intercostal, em vista
frontal: estmato (es); tricoma glandular com cabea unicelular (tgu). E detalhe de uma poro da face abaxial da epiderme da lmina foliar, na regio
intercostal, em vista frontal: estmato (es); tricoma glandular com cabea octacelular (tgo); tricoma glandular com cabea unicelular (tgu). f detalhe
de uma poro da face adaxial da epiderme da lmina foliar, sobre a nervura principal, em vista frontal: cicatriz do tricoma tector (ct); tricoma glandular
com cabea unicelular (tgu). G detalhe de uma poro da face abaxial da epiderme da lmina foliar, sobre a nervura principal, em vista frontal: cicatriz
do tricoma tector (ct); tricoma glandular com cabea octacelular (tgo); tricoma glandular com cabea unicelular (tgu); tricoma tector (tt). H tricomas:
detalhe de um tricoma tector pluricelular unisseriado, com coroa de clulas basais, em vista lateral (a); detalhe de um tricoma tector pluricelular
unisseriado, com a base bisseriada, em vista lateral (b); detalhe de um tricoma tector tetracelular unisseriado, em vista lateral (c); detalhe de um tricoma
tector bicelular unisseriado, em vista lateral (d); detalhe de tricoma glandular de cabea arredondada e pedicelo unicelular, em vista lateral (e); detalhe de
tricomas glandulares de cabea unicelular elptica, pedicelo unicelular ou bicelular e unisseriado, em vista lateral (f); detalhe de tricoma glandular, com
cabea secretora octacelular, em vista lateral (g); detalhe de tricoma glandular de cabea unicelular, pedicelo tricelular e unisseriado, em vista lateral (h).
a
h
1047
figura 2 Aspectos microscpicos em Mentha piperita L.
_____________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A a 400 m; em B, C e E a 100m; em D a 1000 m.
A representao esquemtica do aspecto geral da regio da nervura principal e de poro da regio intercostal, em seco transversal: face abaxial (ab);
face adaxial (ad); parnquima esponjoso (pj); tricoma tector (tt); colnquima (co); parnquima palidico (pp); parnquima do xilema (px); endoderme
(end); epiderme (ep); xilema (x); foema (f); parnquima fundamental (pf). B detalhe da regio da nervura principal e de poro da regio intercostal,
em seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial (ad); parnquima palidico (pp); tricomas glandulares com cabea unicelular (tgu); parnquima
esponjoso (pj); foema (f); xilema (x); tricoma tector (tt); estmato (es); parnquima do xilema (px); parnquima fundamental (pf); endoderme (end);
h
colnquima (co); epiderme (ep); cutcula (cu); gro de amido (ga). C detalhe da lmina foliar na regio intercostal, em seco transversal: face
abaxial (ab); face adaxial (ad); tricomas glandulares com cabea unicelular (tgu); parnquima palidico (pp); epiderme (ep); cutcula (cu); estmato
(es); parnquima esponjoso (pj); tricoma glandular com cabea octacelular (tgo). D representao esquemtica do aspecto geral do pecolo, em
seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial (ad); foema (f); xilema (x); epiderme (ep); endoderme (end); colnquima (co); feixe vascular (fv);
clornquima (cl); parnquima fundamental (pf). E detalhe de poro do pecolo, em seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial (ad); tricomas
glandulares com cabea unicelular (tgu); colnquima (co); epiderme (ep); cutcula (cu); clornquima (cl); parnquima fundamental (pf); gro de amido
(ga); foema (f); xilema (x); parnquima do xilema (px); endoderme (end).
HORTEL PIMENTA LEO VOLTIL
Menthae piperitae aetheroleum
Mentha x piperita L. LAMIACEAE
leo voltil obtido por arraste de vapor dgua das partes
areas, recm coletadas, da espcie vegetal. O leo voltil
constitudo de, no mnimo, 35,0% de mentol.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Lquido incolor, amarelo
plido ou amarelo esverdeado plido, com odor e sabor
caractersticos, seguido de sensao de frescor.
IDENTIFICAO
254
,
de tolueno e acetato de etila (95:5), como fase mvel.
uL da Soluo (1) e 10 uL da Soluo (2), preparadas
recentemente, como descrito a seguir.
Soluo (1): dissolver 0,1 mL do leo voltil em 1 mL de
tolueno.
Soluo (2): diluir 50 mg de mentol SQR, 20 uL de
1,8-cineol, 10 mg de timol e 10 uL de acetato de mentila
em tolueno e completar o volume para 10 mL com o
mesmo solvente.
secar ao ar. Observar sob luz ultravioleta (254 nm). As
quatro manchas principais obtidas com a Soluo (1),
na parte superior do cromatograma, correspondem em
posio, cor e atenuao de fuorescncia quelas obtidas
com a Soluo (2). Em seguida, nebulizar a placa com
anisaldedo SR e deixar em estufa entre 100 C e 105 C,
durante 5 a 10 minutos. Examinar imediatamente luz
visvel. As manchas principais correspondem a acetato de
mentila (com Rf de aproximadamente 0,81 e colorao
azul-violeta), timol (com Rf de aproximadamente 0,65 e
colorao rsea), 1,8-cineol (com Rf de aproximadamente
0,60 e colorao de azul a violeta-castanho) e mentol (com
Rf de aproximadamente 0,55 e colorao de azul a violeta).
ENSAIOS DE PUREZA
ndice de refrao (5.2.6). 1,457 a 1,467.
Poder rotatrio (5.2.8). 10 a 30.
ndice de acidez (5.2.29.7). No mximo, 1,4. Determinar
em 5 g de leo voltil, diludos em 50 mL de mistura de
solventes.
um; temperatura da coluna de 60 C a 300 C, a 3 C por
minuto (total: 80 minutos), temperatura do injetor a 220
C e temperatura do detector a 250 C; utilizar hlio a uma
presso de 80 kPa como gs de arraste; fuxo do gs de 1
mL/minuto.
Soluo amostra: diluir o leo voltil na razo de 2:100
em ter etlico.
Os ndices de reteno relativo dos constituintes do leo
so calculados em relao a uma srie homloga de
hidrocarbonetos e comparados com amostras de referncia.
A concentrao relativa obtida por normalizao
(integrao manual ou eletrnica).
Calcular o ndice de Reteno Relativo, segundo a
expresso:
em que
n = nmero de tomos de carbono do alcano com tempo de
reteno imediatamente anterior ao constituinte x a ser
caracterizado;
tr
x
= tempo de reteno do constituinte x (intermedirio
a tr
z
e tr
z+1
);
tr
z
= tempo de reteno do alcano imediatamente anterior
ao constituinte x;
tr
z+1
= tempo de reteno do alcano com n +1 carbonos
(imediatamente posterior ao constituinte x).
Observar figura 1 a seguir.
a
h
1049
figura 1 Cromatograma ilustrativo, obtido com o leo voltil de Mentha x piperita
As porcentagens dos principais constituintes esto dentro dos seguintes intervalos:
Pico ndice de Reteno Constituinte Teor (%)
1 1023 Limoneno 0,5 5,0
2 1025 1,8-Cineol 0,5 13,0
3 1147 Mentona 6,0 30,0
4 1156 Isomentona 2,0 10,0
5 1160 Neo-mentol 2,0 3,5
6 1165 Mentol 35,0 79,0
7 1230 Pulegona mximo 2,0
8 1237 Carvona mximo 1,0
9 1290 Acetato de mentila 3,0- 10,0
Em recipientes de vidro, hermeticamente fechados, ao abrigo da luz, oxignio e calor.
a
i
1051
IBUPROfENO
Ibuprofenum
C H
3
CH
3
COOH
CH
3
C
13
H
18
O
2
; 206,28
ibuprofeno; 04766
cido -metil-4-(2-metilpropil)benzenoactico
[15687-27-1]
C
13
H
18
O
2
DESCRIO
branco, odor caracterstico.
solvel em etanol, acetona, metanol e clorofrmio,
ligeiramente solvel em acetato de etila. Solvel em
solues aquosas de hidrxidos alcalinos.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +0,05 a 0,05.
Determinar em soluo a 2,5% (p/v) em metanol.
IDENTIFICAO
observados no espectro de ibuprofeno SQR, preparado de
maneira idntica.
de 240 a 300 nm, da soluo a 0,025% (p/v) em hidrxido
de sdio 0,1 M, exibe mximos e mnimos somente nos
mesmos comprimentos de onda da soluo similar de
ibuprofeno SQR. As respectivas absorvncias, calculadas
em relao substncia anidra, nos comprimidos de onda
de 264 e 273 nm, no diferem mais que 3%.
ENSAIOS DE PUREZA
lmpida (5.2.25).
slica-gel G como suporte, e mistura de n-hexano, acetato
de etila e cido actico glacial (15:5:1), como fase mvel.
Soluo (1): soluo a 100 mg/mL da amostra em cloreto
de metileno.
Soluo (2): soluo a 1 mg/mL da amostra em cloreto de
metileno.
secar ao ar. Nebulizar com p-dimetilaminobenzaldedo a
1% (p/v) em mistura de etanol e cido clordrico (10:1),
aquecer em estufa a 100 C por 5 minutos e nebulizar com
cloreto frrico a 5% (p/v). Qualquer mancha secundria
com a Soluo (2) (1%).
mximo 0,002% (20 ppm).
gua (5.2.20.1). No mximo 1%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 1 g da
substncia. No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
em 100 mL de etanol. Adicionar 3 mL de fenolftalena SI
e titular com hidrxido de sdio 0,1 M SV at a viragem
para rosa. Realizar ensaio em branco e fazer as correes
necessrias. Cada mL de hidrxido de sdio 0,1 M SV
13
H
18
O
2
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Analgsico, anti-infamatrio.
IBUPROfENO COMPRIMIDOS
13
H
18
O
2
.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Misturar quantidade
de p equivalente a 0,5 g de ibuprofeno com 20 mL de
acetona, agitar, fltrar e evaporar o fltrado at secura em
corrente de ar, sem aquecimento. O espectro de absoro
i
mesmas intensidades relativas daqueles observadas no
espectro de ibuprofeno SQR, preparado de maneira
idntica.
B. Recristalizar o resduo obtido no teste A. de Identifcao
com ter de petrleo. A temperatura de fuso (5.2.2) do
resduo de 75 C.
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, com tampo fosfato pH
7,2, at concentrao adequada. Medir as absorvncias em
13
H
18
O
2
dissolvida no
meio, comparando as leituras obtidas com a da soluo
de ibuprofeno SQR na concentrao de 0,002% (p/v),
declarada de C
13
H
18
O
2
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel como suporte, e uma mistura de n-hexano,
acetato de etila e cido actico glacial (15:5:1), como
fase mvel. Aplicar separadamente 5 L de cada uma das
solues descritas seguir.
Soluo (1): agitar quantidade de p equivalente a 0,2 g de
ibuprofeno com 10 mL de clorofrmio, fltrar e reservar o
fltrado. Repetir o procedimento com mais duas pores de
10 mL de clorofrmio e reunir os extratos clorofrmicos.
Evaporar o fltrado at cerca de 1 mL e adicionar quantidade
sufciente de clorofrmio para 2 mL.
Soluo (2): diluir um volume da Soluo (1) para 100
volumes com clorofrmio.
secar ao ar, nebulizar com p-dimetilaminobenzaldedo a
1% (p/v) em mistura de etanol e cido clordrico (10:1),
aquecer em estufa a 100 C por 5 minutos e nebulizar com
soluo aquosa de cloreto frrico a 5% (p/v). Nenhuma
mancha secundria obtida no cromatograma com a Soluo
(1) mais intensa que mancha obtida com a Soluo (2)
(1%).
gua (5.2.20.1). No mximo 5,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de p equivalente a 0,5 g de ibuprofeno com 20 mL de
clorofrmio. Filtrar em funil de vidro sinterizado e lavar
o resduo obtido com 50 mL de etanol, previamente
neutralizado com hidrxido de sdio 0,1 M SV, utilizando
fenolftalena SI como indicador.Titular com hidrxido
de sdio 0,1 M SV at viragem para rosa. Cada mL de
C
13
H
18
O
2.
.
m); fuxo de Fase mvel de 1,2 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de cido fosfrico, gua e metanol
(3:247:750).
ibuprofeno para balo volumtrico de 100 mL, adicionar
70 mL de Fase mvel, agitar por 30 minutos, completar o
volume com a Fase mvel e homogeneizar. Centrifugar uma
poro da suspenso obtida e usar o lquido sobrenadante.
de ibuprofeno SQR na Fase mvel de modo a obter soluo
a 1 mg/mL.
Injetar replicatas de 20 L das Soluo padro. O fator de
cauda no maior que 2,0 e o desvio padro relativo das
reas de replicatas dos picos registrados maior que 2,0%.
13
H
18
O
2
nos
comprimidos a partir das respostas obtidas com as Solues
padro e amostra.
a
i
1053
ROTULAGEM
IMUNOGLOBULINA HUMANA CONTRA
O ANTGENO D
Immunoglobulinum Humanum anti-D
A imunoglobulina humana contra o antgeno D uma
preparao estril, lquida ou lioflizada contendo
A preparao destinada a ser administrada por via
intramuscular. obtida a partir do plasma proveniente
de doadores D-negativos, contendo ttulos elevados de
imunoglobulinas contra o antgeno D especfco e pequenas
quantidades de anticorpos contra outros grupos sanguneos.
Pode ser adicionada a ela imunoglobulina humana normal.
A imunoglobulina humana anti-D satisfaz s exigncias
estabelecidas na monografa Imunoglobulina Humana
Normal, exceto no que se refere ao nmero mnimo de
doadores e ao teor mnimo em protenas totais.
Estabilidade. Para a preparao lquida, realizar ensaio
de degradao acelerada, realizado por aquecimento a 37
C durante quatro semanas no produto fnal; a perda de
atividade anti-D no superior a 20% do valor inicial.
Para limitar a carga viral do vrus B19 em pools de plasma
utilizados por fabricantes da imunoglobulina anti D, o
pool de plasma testado quanto presena do vrus B19
mediante o emprego de tcnicas de amplifcao de cidos
nucleicos devidamente validadas. No mximo 10 UI por
microlitro.
Um controle positivo com 10 UI do DNA do vrus B19
por microlitro e um controle interno preparado por meio
da adio de um marcador apropriado a uma amostra do
pool de plasma a ser usado no teste. O teste invlido se o
controle positivo for no reagente ou se o resultado obtido
com o controle interno indicar a presena de inibidores.
Se for adicionada preparao imunoglobulina humana
e ou soluo de albumina humana o pool de plasma ou
pools de origem devem cumprir os requisitos apresentados
anteriormente para o DNA de vrus B19.
DOSEAMENTO
Proceder conforme em Determinao da imunoglobulina
humana anti-D (5.5.1.15). A potncia estimada no
inferior a 90% da potncia declarada. Os limites de
confana (P = 0,95) no so inferiores a 80% e nem
superiores a 120% da potncia estimada.
Ver a monografa Imunoglobulina Humana Normal.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. Ver a monografa
Imunoglobulina Humana Normal. No rtulo indica-se o
nmero de Unidades Internacionais por recipiente.
A HEPATITE A
Immunoglobulinum Humanum Hepatitidis A
A imunoglobulina humana contra a hepatite A uma
intramuscular. obtida a partir do plasma proveniente de
doadores selecionados contendo anticorpos contra o vrus
da hepatite A. Pode ser adicionada a ela a imunoglobulina
humana normal.
A imunoglobulina humana contra o vrus da hepatite
A satisfaz s exigncias estabelecidas na monografa
Imunoglobulina Humana Normal, exceto no que se refere
ao nmero mnimo de doadores e ao teor mnimo em
protenas totais.
DOSEAMENTO
A atividade da imunoglobulina humana contra a
hepatite A avaliada por comparao com a atividade
de uma preparao de referncia aferida em unidades
internacionais, por meio de um ensaio com sensibilidade e
especifcidade apropriadas (Proceder conforme descrito em
Mtodos imunoqumicos (5.6)). A Unidade Internacional
corresponde atividade de uma determinada quantidade da
preparao de referncia internacional da imunoglobulina
humana contra a hepatite A. A correspondncia entre
a Unidade Internacional e a preparao de referncia
internacional indicada pela Organizao Mundial de
Sade.
A atividade indicada no inferior a 600 UI por mililitro e
nem inferior atividade indicada. Os limites de confana
(P = 0,95) da atividade determinada no so inferiores a
80%, nem superiores a 125%.
Ver a monografa de Imunoglobulina Humana Normal.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. Ver a monografa de
nmero de Unidades Internacionais por mililitro.
i
A HEPATITE B
Immunoglobulinum Humanum Hepatitidis B
A imunoglobulina humana contra a hepatite B uma
intramuscular. obtida a partir do plasma proveniente de
doadores selecionados contendo anticorpos contra o vrus
da hepatite B. Pode ser adicionada a ela imunoglobulina
humana normal. A imunoglobulina humana contra o
vrus da hepatite B satisfaz s exigncias estabelecidas
na monografa Imunoglobulina Humana Normal, exceto
no que se refere ao nmero mnimo de doadores e ao teor
mnimo em protenas totais.
DOSEAMENTO
hepatite B avaliada por comparao com a atividade
Internacionais, por meio de um ensaio com sensibilidade e
humana contra a hepatite B. A correspondncia entre
a Unidade Internacional e a preparao de referncia
A atividade indicada no inferior a 100 UI por mililitro,
nem inferior atividade indicada. Os limites de confana
(P = 0,95) da atividade determinada no so inferiores a
80%, nem superiores a 125%.
Cumpre o estabelecido na monografa de Vacinas para uso
humano.
ROTULAGEM
IMUNOGLOBULINA HUMANA
CONTRA A HEPATITE B PARA USO
INTRAVENOSO
Immunoglobulinum Humanum Hepatitidis B ad
Usum Intravenosum
A imunoglobulina humana contra a hepatite B para
uso intravenoso uma preparao estril, lquida ou
lioflizada contendo imunoglobulinas, principalmente a
imunoglobulina G. obtida a partir do plasma proveniente
de doadores portadores de anticorpos especfcos contra o
antgeno de superfcie da hepatite B. Pode ser adicionada
de imunoglobulina humana normal para administrao
por via intravenosa. A imunoglobulina humana contra
a hepatite B para uso intravenoso satisfaz as exigncias
estabelecidas na monografa Imunoglobulina Humana
Normal para Administrao por Via Intravenosa exceto
no que se refere ao nmero mnimo de doadores, ao teor
mnimo em protenas totais e ao limite de osmolalidade.
DOSEAMENTO
A atividade da imunoglobulina humana contra a hepatite
B para administrao por via intravenosa avaliada por
comparao do ttulo em anticorpos da amostra com a
atividade de uma preparao de referncia aferida em
Unidades Internacionais, por meio de um imunodoseamento
com sensibilidade e especifcidade apropriadas (Proceder
conforme descrito em Mtodos imunoqumicos (5.6)). A
Unidade Internacional corresponde atividade de uma
determinada quantidade da preparao internacional
de referncia da imunoglobulina da hepatite B. A
correspondncia entre a Unidade Internacional e a
preparao de referncia internacional indicada pela
A atividade indicada no inferior a 50 UI por mililitro. A
atividade determinada no inferior atividade indicada.
Os limites de confana (P = 0,95) da atividade determinada
no so inferiores a 80%, nem superiores a 125%.
Ver a monografa de Imunoglobulina Humana Normal para
Administrao por Via Intravenosa.
ROTULAGEM
Imunoglobulina Humana Normal para Administrao por
Via Intravenosa. No rtulo indica-se o nmero mnimo de
Unidades Internacionais por recipiente.
A RAIVA
Immunoglobulinum Humanum Rabicum
A imunoglobulina humana contra a raiva uma preparao
estril, lquida ou lioflizada contendo imunoglobulinas,
principalmente a imunoglobulina G. A preparao
destinada a ser administrada por via intramuscular. obtida
a partir do plasma proveniente de doadores portadores de
anticorpos especfcos contra a raiva. Pode ser adicionada
a ela a imunoglobulina humana normal. A imunoglobulina
humana contra a raiva satisfaz s exigncias estabelecidas
na monografa Imunoglobulina Humanas Normal exceto
no que se refere ao nmero mnimo de doadores e ao teor
mnimo em protenas totais.
a
i
1055
DOSEAMENTO
A atividade da imunoglobulina humana contra a raiva
avaliada por comparao entre a dose necessria para
neutralizar o poder infeccioso do vrus da raiva e a dose
Internacionais necessria para assegurar o mesmo grau de
neutralizao (Mtodos imunoqumicos (5.6)). Realizar
a aferio em culturas celulares sensveis e revelar a
presena do vrus no neutralizado por imunofuorescncia.
A Unidade Internacional corresponde atividade
neutralizante especfca para o vrus da raiva de uma
determinada quantidade de uma preparao de referncia
internacional de imunoglobulina humana contra a raiva.
A correspondncia entre a Unidade Internacional e a
Realizar a aferio em clulas sensveis apropriadas.
Utilizar a linha celular BHK 21, multiplicada no meio de
cultura descrita a seguir, e submeter entre 18 a 30 passagens
a partir do lote semente do ATCC. Recolha as clulas aps
uma incubao de 2 a 4 dias. Tratar as clulas com tripsina.
Preparar uma suspenso de 500 000 clulas por mililitro
(suspenso de clulas). Para aumentar a sensibilidade das
clulas junte, se necessrio, 10 minutos antes da utilizao
desta suspenso, 10 g de dietilaminoetildextrano por
mililitro.
Utilizar uma cepa de vrus fxa multiplicada em clulas
sensveis, por exemplo, a cepa CVS adaptada cultura na
linha celular BHK 21 (suspenso-me do vrus). Titular a
suspenso-me do vrus do seguinte modo:
Preparar uma srie de diluies da suspenso do vrus. Em
placas com cmaras para culturas celulares (8 cmaras por
placa), distribuir 0,1 mL de cada diluio. Adicionar 0,1
mL do meio de cultura e 0,2 mL da suspenso de clulas.
Incubar a 37 C em atmosfera de dixido de carbono,
durante 24 horas. Fixar, core por imunofuorescncia e
realizar os clculos segundo as indicaes descritas a
seguir. Determinar o ttulo da suspenso-me do vrus e
preparar uma diluio de trabalho do vrus correspondente
a 100 DICC
50
por 0,1 mL.
Em cada ensaio verifcar a quantidade do vrus realizando
uma titulao controle: a partir da diluio correspondente
a 100 DICC
50
por 0,1 mL, realizar trs diluies sucessivas
de razo 10. Distribuir respectivamente 0,1 mL de cada
diluio em quatro cmaras contendo 0,1 mL do meio
de cultura e acrescentar 0,2 mL da suspenso de clulas.
O ensaio s vlido se o ttulo se situar entre 30 e 300
DICC
50
.
Diluir a preparao de referncia com meio de cultura
no suplementar at concentrao de 2 UI por mililitro
(diluio-me de referncia e conservar a uma temperatura
inferior a -80 C). Preparar duas pr-diluies apropriadas
(1/8 e 1/10) da diluio-me de referncia de modo que a
diluio da preparao de referncia que reduz de 50% o
nmero de campos fuorescentes na placa de cultura celular
se encontre entre as quatro diluies. Adicionar 0,1 mL de
meio a cada cmara, exceto na 1 de cada uma de duas flas
s quais se junta, respectivamente, 0,2 mL das duas pr-
diluies da diluio-me de referncia e a seguir transferir
0,1 mL sucessivamente para as outras cmaras.
Diluir a amostra a 1/100 com meio de cultura no
suplementado (diluio-me de imunoglobulina) para
reduzir ao mnimo os erros devidos viscosidade da
preparao no diluda. Prepare trs pr-diluies
apropriadas da diluio-me de imunoglobulina de modo
que a diluio da amostra que reduz de 50% o nmero
de campos fuorescentes na placa de cultura celular se
encontre entre as quatro diluies.
Adicionar 0,1 mL de meio a cada cmara, exceto na 1 de
cada uma de trs flas s quais se adiciona respectivamente
0,2 mL das trs pr-diluies da diluio-me de
imunoglobulina. Preparar uma srie de diluies de razo
2 transferindo 0,1 mL sucessivamente para as outras
cmaras.
A todas as cmaras contendo as diluies da preparao
de referncia e as diluies da amostra, adicionar 0,1 mL
da suspenso de vrus correspondente a 100 DICC
50
por
0,1 mL (diluio de trabalho), agitar manualmente e deixar
em repouso a 37 C em atmosfera de dixido de carbono
durante 90 minutos, acrescentar 0,2 mL da suspenso de
clulas agitar manualmente e deixe em repouso a 37 C em
atmosfera de dixido de carbono durante 24 horas. Aps
24 horas eliminar o meio e retirar as paredes de plstico.
Lavar as cmaras monocelulares com tampo fosfato-
salina de pH 7,4, e depois com uma mistura de 20 volumes
de gua e 80 volumes de acetona e fxe durante 3 minutos
com uma mistura de 20 volumes de gua e 80 volumes
de acetona a -20 C. Espalhar nas lminas o conjugado
fuorescente de soro anti-rbico pronto a ser utilizado.
Deixar em repouso durante 30 minutos a 37 C numa
atmosfera com uma umidade muito elevada. Lavar com
tampo fosfato-salina de pH 7,4 e secar. Examinar 20
campos de cada cmara com uma ampliao de 250
vezes com um microscpio equipado para leitura com
fuorescncia. Registrar o nmero de campos contendo,
no mnimo, uma clula fuorescente. Verifcar a dose
do vrus de prova utilizado na placa para a titulao do
vrus e determinar a diluio da preparao de referncia
e da amostra que reduz de 50% o nmero de campos
fuorescentes realizando os clculos para o conjunto
das duas ou trs diluies, por meio de uma anlise de
probabilidade iterativa. O ensaio s vlido quando a
anlise estatstica demonstrar uma inclinao signifcativa
da curva dose/efeito e no revelar desvio da linearidade ou
do paralelismo.
A atividade indicada , no mnimo, de 150 UI por mililitro.
A atividade determinada no inferior, nem superior a 2
vezes atividade indicada. Os limites de confana (P =
0,95) da atividade determinada no so inferiores a 80%,
nem superiores a 125%.
i
MEIO DE CULTURA PARA O CRESCIMENTO
DAS CLULAS BHK 21
Os meios comercializados com uma composio
ligeiramente diferente daquela que se indica podem
igualmente ser utilizado.
Cloreto de potssio 0,40 g
Cloreto de clcio anidro 0,20 g
Sulfato de magnsio hepta-hidratado 0,20 g
Fosfato de sdio monoidratado 0,124 g
Nitrato frrico monoidratado 0,10 mg
Cloridrato de L-arginina 42,0 mg
L-cistina 24,0 mg
L-histidina 16,0 mg
L-isoleucina 52,0 mg
L-leucina 52,0 mg
Cloridrato de L-lisina 74,0 mg
L-fenilalanina 33,0 mg
L-treonina 48,0 mg
L-triptofano 8,0 mg
L-tirosina 36,0 mg
L-valina 47,0 mg
L-metionina 15,0 mg
L-glutamina 0,292 g
I-inositol 3,60 mg
Cloreto de colina 2,0 mg
cido flico 2,0 mg
Nicotinamida 2,0 mg
Pantotenato de clcio 2,0 mg
Cloridrato de piridoxal 2,0 mg
Cloridrato de tiamina 2,0 mg
Ribofavina 2,0 mg
Vermelho de fenol 15,0 mg
Bicarbonato de sdio 2,75 g
gua q.s.p. 1000 mL
Adicione ao meio o seguinte suplemento:
Soro fetal de vitela
(aquecido durante 30 minutos a 56 C) 10%
Caldo triptose fosfato 10%
Benzilpenicilina sdica 60 mg/L
Estreptomicina 0,1 g/L
ROTULAGEM
Ver a monografa Imunoglobulina Humana Normal. No
rtulo indica-se o nmero de Unidades Internacionais por
recipiente.
A RUBOLA
Immunoglobulinum Humanum Rubellae
A imunoglobulina humana contra a rubola uma
imunoglobulinas, principalmente a imunoglobulina
G. A preparao destinada a ser administrada por via
intramuscular. obtida a partir do plasma contendo
anticorpos especfcos contra o vrus da rubola. Pode
ser adicionada de imunoglobulina humana normal. A
imunoglobulina humana contra a rubola satisfaz s
exigncias estabelecidas na monografa Imunoglobulina
Humana Normal, exceto no que se refere ao nmero
mnimo de doadores e ao teor mnimo em protenas totais.
DOSEAMENTO
rubola avaliada por comparao com a atividade
Internacionais, por meio de um ensaio apropriado de
inibio de hemaglutinao. A Unidade Internacional
corresponde atividade de uma determinada quantidade
da preparao de referncia internacional de soro humano
contra a rubola. A correspondncia entre a Unidade
Internacional e a preparao de referncia internacional
A atividade indicada no inferior a 4500 UI por mililitro.
ROTULAGEM
O SARAMPO
lmmunoglobulinum Humanum Morbillicum
A imunoglobulina humana contra o sarampo uma
preparao estril; lquida, ou lioflizada contendo
a
i
1057
anticorpos especfcos contra o vrus do sarampo. Pode
ser adicionada de imunoglobulina humana normal. A
imunoglobulina humana contra o sarampo satisfaz s
mnimo de doadores e ao teor mnimo em protenas totais.
DOSEAMENTO
A atividade da preparao lquida, ou da preparao
lioflizada reconstituda segundo as indicaes contidas no
rtulo , no mnimo, de 50 UI de anticorpos neutralizantes
do vrus do sarampo por mililitro.
A atividade avaliada por comparao entre o ttulo em
anticorpos da amostra e de uma preparao de referncia
aferida em unidades internacionais, utilizando uma dose de
prova de vrus do sarampo em cultura celular apropriada.
A Unidade Internacional corresponde atividade
neutralizante especfca para o vrus do sarampo de uma
determinada quantidade da preparao internacional de
referncia do soro humano do sarampo.
Preparar diluies seriadas da amostra e da preparao
de referncia. Misturar volumes iguais de cada diluio e
de uma suspenso de vrus do sarampo contendo cerca de
100 DICC
50
em 0,1 mL. Incubar essas misturas ao abrigo
da luz a 37 C durante 2 horas. Utilizar, no mnimo, seis
culturas celulares para cada mistura e inocular 0,2 mL da
mistura por cultura. Incubar, pelo menos, durante 10 dias.
Examinar as culturas quanto ao desenvolvimento do vrus.
Determinar a atividade comparando a diluio que contm
a menor quantidade da amostra que tenha neutralizado o
vrus com a da preparao de referncia que manifeste
idntica atividade. Calcular a atividade da amostra em
unidades internacionais de anticorpos neutralizantes do
vrus do sarampo por mililitro.
ROTULAGEM
Ver a monografa Imunoglobulina Humana Normal. No
rtulo indica-se o nmero de Unidades Internacionais por
recipiente.
O TTANO
Immunoglobulinum Humanum Tetanicum
A imunoglobulina humana contra o ttano uma preparao
estril; lquida, ou lioflizada contendo imunoglobulinas,
principalmente a imunoglobulina G. obtida a partir do
plasma contendo anticorpos especfcos contra a toxina do
Clostridium tetani. Pode ser adicionada de imunoglobulina
humana normal. A imunoglobulina humana contra o
ttano satisfaz s exigncias estabelecidas na monografa
Imunoglobulina Humana Normal, exceto no que se refere
ao nmero mnimo de doadores e ao teor mnimo em
protenas totais.
Durante a produo conveniente ser estabelecida uma
relao satisfatria entre a atividade determinada por
imunodoseamento pelo mtodo Determinao da atividade
humana contra o ttano e a atividade determinada
pelo mtodo Atividade antitxica em camundongos em
Doseamento.
DOSEAMENTO
Atividade antitxica em camundongos
Avaliar a atividade pela determinao da dose que
permite assegurar a proteo de camundongos contra os
efeitos paralisantes de uma determinada dose de toxina
tetnica. Essa dose comparada com uma preparao
de referncia de uma imunoglobulina humana tetnica
aferida em unidades internacionais, necessria para
assegurar a mesma proteo. A Unidade Internacional de
antitoxina corresponde atividade neutralizante especfca
relativamente toxina tetnica contida numa determinada
quantidade do padro internacional constitudo pela
imunoglobulina humana lioflizada. A correspondncia
entre a Unidade Internacional e o Padro Internacional
indicada pela Organizao Mundial de Sade. A
imunoglobulina humana contra o ttano aferida em
unidades internacionais por comparao com o padro
internacional.
Escolha dos animais. Utilizar camundongos com peso
compreendido entre 16 e 20 g.
Preparao da toxina de teste. Preparar a toxina de teste
por um mtodo apropriado a partir do fltrado estril de
uma cultura de C. tetani em meio lquido. Os dois mtodos
a seguir referidos so dados a ttulo de exemplo, mas
qualquer outro mtodo apropriado pode ser utilizado.
(1) Ao fltrado de uma cultura de cerca de nove dias,
adicionar 1 a 2 volumes de glicerina e conservar a mistura
no estado lquido a uma temperatura ligeiramente inferior
a 0 C.
(2) Precipitar a toxina por adio cultura de sulfato de
amnio, secar o precipitado sob vcuo em presena de
pentxido de fsforo, pulveriz-lo e conserv-lo seco em
i
ampolas fechadas sob vcuo em presena de pentxido de
fsforo.
Determinao da dose da toxina de teste (dose Lp/10).
Preparar uma soluo da preparao de referncia em
lquido apropriado de modo que contenha 0,5 UI de
antitoxina por mililitro. Se a toxina for conservada no
estado seco, reconstituir usando um lquido apropriado.
Preparar uma srie de misturas da soluo da preparao
de referncia e da amostra de modo que cada uma contenha
2 mL da soluo da preparao de referncia e uma
quantidade varivel da amostra. Completar cada mistura
com o mesmo volume fnal de 5 mL utilizando um lquido
apropriado. Deixar em repouso e ao abrigo da luz, durante
60 minutos. Utilizar um grupo de seis camundongos para
cada mistura. Injetar a cada um deles, por via subcutnea,
0,5 mL da mistura atribuda ao seu grupo. Manter os
camundongos em observao durante 96 horas. Os que
forem atingidos por paralisia podem ser sacrifcados. A
dose de teste da toxina corresponde quantidade presente
em 0,5 mL da mistura contendo a menor quantidade de
toxina que provoca, durante o perodo de observao, a
paralisia nos 6 camundongos aos quais foi administrada,
apesar da neutralizao parcial devido a preparao de
referncia.
Determinao da atividade da imunoglobulina
Preparar uma soluo da preparao de referncia em
lquido apropriado de modo que contenha 0,5 UI de
antitoxina por mililitro. Preparar uma soluo da toxina de
teste em lquido apropriado de modo que contenha 5 doses/
mL. Preparar uma srie de misturas da soluo da toxina de
prova e da amostra de modo que contenham cada uma 2 mL
da soluo da toxina de prova e uma quantidade varivel
da amostra. Completar cada mistura com o mesmo volume
fnal de 5 mL com lquido apropriado. Preparar uma segunda
srie de misturas da soluo da toxina de teste e da soluo
da preparao de referncia de modo que contenha cada
uma 2 mL da soluo da toxina de teste e uma quantidade
varivel da preparao de referncia. Nessa segunda srie,
a diluio mdia da preparao de referncia corresponde
mistura que contm 1 UI de antitoxina (2 mL da soluo
da preparao de referncia). Completar cada mistura com
o mesmo volume fnal de 5 mL, utilizando um lquido
apropriado. Deixar em repouso as misturas das duas sries
ao abrigo da luz, durante 60 minutos. Utilizar um grupo
de seis camundongos para cada mistura. Injetar a cada um
deles por via subcutnea, 0,5 mL da mistura atribuda ao
seu grupo. Manter os camundongos em observao durante
96 horas. Os que forem atingidos por paralisia podem ser
sacrifcados. A mistura contendo a quantidade mxima de
imunoglobulina que no protege nenhum camundongo
da paralisia corresponde a 1 UI. Essa quantidade serve
para calcular a atividade da imunoglobulina em unidades
internacionais por mililitro.
O ensaio s vlido se todos os camundongos inoculados
com a mistura contendo, at, 2 mL da soluo da preparao
de referncia forem atingidos por paralisia e se todos
os camundongos inoculados com as misturas contendo
maiores volumes dessa soluo no apresentarem sintomas
de paralisia.
Determinao da atividade da imunoglobulina humana
contra o ttano
A atividade da imunoglobulina humana contra o ttano
avaliada por comparao do ttulo de anticorpos da
amostra e o de uma preparao de referncia, aferida em
unidades internacionais, com o auxlio de um ensaio de
imunodoseamento com sensibilidade e especifcidade
apropriadas (Mtodos imunoqumicos). A imunoglobulina
humana contra o ttano aferida em unidades internacionais
por comparao com o padro internacional. A atividade
indicada no inferior a 100 UI de antitoxina tetnica por
mililitro. A atividade determinada no inferior atividade
indicada. Os limites de confana (P = 0,95) da atividade
determinada no so inferiores a 80%, nem superiores a
125%.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. Ver a monografa
Imunoglobulina Humana Normal. O rtulo deve indicar o
nmero de unidades internacionais contido no frasco.
A VARICELA
Immunoglobulinum Humanum Varicellae
A imunoglobulina humana contra a varicela uma
anticorpos especfcos contra o Herpesvrus varicellae.
Pode ser adicionada de imunoglobulina humana normal.
A imunoglobulina humana contra varicela satisfaz s
mnimo de doadores, ao teor mnimo em protenas totais
e, nos casos autorizados, ao ensaio dos anticorpos contra o
antgeno de superfcie da hepatite B.
DOSEAMENTO
A atividade da imunoglobulina humana contra a varicela
avaliada por comparao com a atividade de uma preparao
de referncia aferida em Unidades Internacionais, por meio
de um ensaio com sensibilidade e especifcidade apropriadas
(Proceder conforme descrito em Mtodos imunoqumicos
(5.6)). A Unidade Internacional corresponde atividade de
uma determinada quantidade da preparao de referncia
internacional da imunoglobulina humana contra a varicela.
a
i
1059
A atividade determinada no inferior a 100 UI por
mililitro, nem inferior atividade indicada. Os limites
de confana (P = 0,95) da atividade determinada no so
inferiores a 80%, nem superiores a 125%.
ROTULAGEM
A VARICELA PARA USO INTRAVENOSO
Immunoglobulinum Humanum Varicellae ad
Usum Intravenosum
A imunoglobulina humana contra a varicela para
uso intravenoso uma preparao estril, lquida ou
imunoglobulina G. obtida a partir do plasma contendo
anticorpos especfcos contra o herpes vrus humano
3 (vrus da varicela-zoster 1). Pode ser adicionada de
imunoglobulina humana normal para administrao por via
endovenosa. A imunoglobulina humana contra a varicela
para uso intravenoso satisfaz s exigncias estabelecidas
na monografa Imunoglobulina Humana Normal para
Administrao por Via Intravenosa exceto no que se
refere ao nmero mnimo de doadores, ao teor mnimo em
protenas totais e ao limite de osmolalidade.
DOSEAMENTO
A atividade da imunoglobulina humana contra a varicela
para uso intravenoso avaliada por comparao do ttulo de
anticorpos da amostra com a atividade de uma preparao
de referncia aferida em Unidades Internacionais, por
meio de um imunodoseamento com sensibilidade e
humana contra a varicela. A correspondncia entre a
Unidade Internacional e a preparao de referncia
internacional indicada pela Organizao Mundial de
Sade.
A atividade indicada no inferior a 25 UI por mililitro. A
atividade determinada no inferior atividade indicada.
Ver a monografa Imunoglobulina Humana Normal para
Administrao por Via Intravenosa.
ROTULAGEM
Imunoglobulina Humana Normal para Administrao por
Via Intravenosa. No rtulo indica-se o nmero de Unidades
Internacionais por mililitro.
IMUNOGLOBULINA HUMANA NORMAL
Immunoglobulinum Humanum Normale
Imunoglobulina humana normal uma preparao
estril, lquida ou lioflizada, contendo principalmente
IgG. Outras protenas tambm podem estar presentes. A
imunoglobulina humana normal contendo anticorpos IgG
pode ser administrada via intramuscular ou via subcutnea.
A imunoglobulina humana normal obtida do plasma
humano, o qual cumpre os requisitos da monografa de
Plasma Humano para Fracionamento. No deve ser
adicionado antibitico na preparao.
O mtodo de preparao deve incluir uma ou mais etapas
que demonstrem remover ou inativar agentes infecciosos
conhecidos. Se substncias so usadas para inativao
viral, dever demonstrar que no h nenhum resduo
na preparao fnal que apresente efeitos adversos nos
pacientes tratados com a imunoglobulina. necessrio
demonstrar, por meio de testes adequados em animais e
avaliao durante os ensaios clnicos, que o produto bem
tolerado quando administrado por via intramuscular, ou
subcutnea. A imunoglobulina humana normal preparada
com pool de plasma de no mnimo 1000 doadores, por um
mtodo conhecido que proporciona um produto fnal estril
e com concentrao de protenas de 160 g/L, contendo
anticorpos de, no mnimo, dois agentes (dos quais um viral
e um bacteriano) disponveis na Preparao de Referencia,
ou Padro Internacional. A concentrao de cada anticorpo
deve ser, no mnimo, dez vezes maior que no pool de
plasma inicial.
Se a imunoglobulina humana normal for preparada para
a administrao subcutnea, o mtodo de produo deve
ser adequado para um rendimento consistente do produto
que cumpre com o teste de funo F
c
da imunoglobulina.
A imunoglobulina humana normal preparada como
uma soluo estabilizada, por exemplo, em uma soluo
de cloreto de sdio a 0,9% (p/v); em soluo de glicina
2,25% (p/v); ou, se a preparao lioflizada, em soluo
de glicina 6% (p/v). Preparaes multidoses devem conter
um agente antimicrobiano. Preparaes dose nica no
devem conter agentes antimicrobianos. No produto fnal a
quantidade de agentes antimicrobianos ou estabilizadores
usados no deve apresentar efeitos nocivos sade. A
substncia deve ser fltrada atravs de fltro de reteno
das bactrias (fltrao esterilizante). A preparao pode
subsequentemente ser lioflizada e os frascos vedados sob
vcuo, ou um gs inerte.
A estabilidade da preparao deve ser demonstrada, por
meio de testes adequados, durante o desenvolvimento do
estudo de estabilidade.
i
IDENTIFICAO
A. Realizar na amostra ensaios de precipitao com uma
gama apropriada de soros especfcos de diferentes espcies
de animais domsticos. recomendvel que o ensaio seja
realizado com soros especfcos das protenas plasmticas
de cada espcie de animal domstico correntemente
utilizado para a preparao de produtos de origem
biolgica. A imunoglobulina humana normal contm
protenas de origem humana e d resultados negativos com
os soros especfcos das protenas plasmticas de outras
espcies.
B. Realizar na amostra um ensaio de imunoeletroforese
segundo tcnica apropriada. Usando um antissoro humano
normal, comparar o soro humano normal com a amostra
diluda de modo a conter 10 g/L de protenas. O componente
principal da amostra corresponde ao componente IgG do
soro humano normal, podendo existir outras protenas
plasmticas em pequenas quantidades. Se a albumina
humana foi adicionada como estabilizante, pode ser visto
como um composto importante.
CARACTERSTICAS
Aspecto. A preparao lquida clara ou amarelo plido
ou ligeiramente marrom durante a estocagem, podendo
apresentar uma leve turbidez ou uma pequena quantidade
de formao de partculas. A preparao lioflizada um
p ou slido de massa frivel, branco ou ligeiramente
amarelado. Para a preparao lioflizada, a reconstituio
deve ser de acordo com a rotulagem, imediatamente antes
da Identifcao e outros testes, exceto para Solubilidade
e gua.
pH (5.2.19). 5,0 a 7,2. Diluir a preparao a ser examinada
em uma soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) a uma
concentrao de protenas de 1% (p/v).
Osmolalidade (5.2.28). No inferior a 240 mosmol/kg.
Solubilidade. Para a preparao lioflizada, adicionar o
volume do diluente de acordo com o rtulo. A preparao
dissolve completamente dentro de 20 minutos temperatura
de 20 C a 25 C.
Composio proteica. Proceder conforme descrito em
Eletroforese (5.2.22), utilizar a tcnica Eletroforese de
zona. Utilizar tiras adequadas de gel de acetato de celulose
ou de agarose, como meio suporte, e tampo barbital pH
8,6 como soluo eletroltica. Se o acetato de celulose
o material suporte, utilizar o mtodo descrito a seguir.
Se o gel de agarose, e porque ele normalmente parte
do sistema automtico, utilizar o manual de instruo do
fabricante.
Soluo da amostra: diluir a amostra com soluo de
cloreto de sdio a 0,9% (p/v) at uma concentrao de 50
g/L em protenas.
Soluo de referncia: reconstituir um padro de referncia
para eletroforese de imunoglobulina humana e diluir com
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) at a concentrao
de 5% (p/v) em protenas.
Adequabilidade do sistema: no eletroforetograma obtido
com a Soluo de referncia, em gel de acetato de celulose
ou de agarose, a proporo de protenas na banda principal
est de acordo com os limites estabelecidos na bula que
acompanha a preparao de referncia.
Procedimento: aplicar na tira 2,5 L da Soluo amostra ou
0,25 L por mililitro se for utilizada uma tira mais estreita.
Para outras tiras, aplicar da mesma maneira o mesmo
volume da Soluo de referncia. Aplicar um campo
eltrico adequado de forma que a banda de albumina do
soro humano, aplicada na tira controle, migre, no mnimo,
30 mm. Corar a tira com negro de amido 10B SR por 5
minutos. Descolorar com uma mistura de cido actico
glacial e metanol (10:90) de forma que o fundo esteja livre
de colorao. Desenvolver a transparncia das tiras com
uma mistura de cido actico glacial e metanol (19:81).
Medir a absorvncia da banda em instrumentos de resposta
linear e comprimento de onde 600 nm. Calcular o resultado
como a mdia de trs medidas de cada banda.
A mobilidade da protena no maior que 10% da banda
proteica principal.
Distribuio do tamanho molecular. Proceder conforme
ultravioleta a 280 nm; coluna de 600 mm de comprimento e
7,5 mm de dimetro interno ou de 300 mm de comprimento
e 7,8 mm de dimetro interno, empacotada com slica-gel
hidroflica (de um grau adequado para fracionamento de
protenas globulares com massa molecular relativa entre
10 000 e 500 000); fuxo da Fase mvel de 0,5 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 4,873 g de fosfato de sdio dibsico
di-hidratado, 1,741 g de fosfato de sdio monobsico
monoidratado, 11,688 g de cloreto de sdio e 50 mg de
azida sdica em 1000 mL de gua.
Soluo amostra: diluir a amostra com soluo de cloreto
de sdio a 0,9% (p/v) at concentrao apropriada ao
sistema cromatogrfco utilizado. A faixa de concentrao
de 4 g/L a 12 g/L e a injeo de 50 g a 600 g de protenas
normalmente adequada.
Soluo padro: diluir o padro de imunoglobulina humana
com soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) at obter uma
concentrao em protenas igual da Soluo amostra.
No cromatograma obtido com a Soluo padro, o pico
principal corresponde ao monmero de IgG e h um pico
correspondente ao dmero com reteno relativa do pico
principal de 0,85. Identifcar os picos no cromatograma
obtido com a Soluo amostra por comparao com o
cromatograma da Soluo padro; nenhum pico com o
tempo de reteno menor que o do dmero corresponde
aos polmeros e agregados. A preparao a ser examinada
cumpre com o teste se no cromatograma obtido com a
Soluo amostra atender os seguintes itens:
o tempo de reteno relativa, em relao ao pico
correspondente do cromatograma obtido com a Soluo
padro, for de 1 0,02 para o monmero e o dmero;
a
i
1061
rea sob o pico: a soma das rea sob os picos do
monmero e dmero representa no menos que 85% da
rea total do cromatograma e a soma das rea sob os
picos dos polmeros e agregados representa no mais
que 10% da rea total do cromatograma. Essa exigncia
no se aplica s preparaes a que se adicionou
albumina como estabilizante; no caso de preparaes
estabilizadas com albumina, realiza-se um ensaio de
distribuio do tamanho molecular durante a fabricao
antes da adio do estabilizante.
gua. Determinada por um mtodo apropriado como
o Mtodo semimicro (5.2.20.3), a Perda por dessecao
(5.2.9) ou a Espectrofotometria de absoro no
infravermelho (5.2.14). No mais que 2%.
Pirognios (5.5.2.1). Cumpre o teste. Injetar em cada
correspondente a 1 mL de imunoglobulina.
DOSEAMENTO
Anticorpo anti-D
Se a imunoglobulina normal para administrao
subcutnea, deve cumprir com a Determinao
da imunoglobulina humana anti-D (5.5.1.15) na
imunoglobulina normal para administrao intravenosa.
Anticorpo para o antgeno de superfcie da Hepatite B
Determinar por um Mtodo Imunoqumico (5.6) apropriado.
No inferior a 0,5 UI/g de imunoglobulina.
Anticorpo para Vrus da Hepatite A
Se a inteno for usar para a proflaxia da Hepatite A,
deve cumprir com os seguintes requerimentos adicionais.
Determinar o contedo de anticorpos por comparao com
a preparao de um padro de referncia calibrado em
UI, usando um Mtodo Imunoqumico (5.6) apropriado,
especfco e sensvel.
A Unidade Internacional a quantidade de atividade do
padro internacional de imunoglobulina anti-hepatite A.
O equivalente na Unidade do padro internacional est
declarado pela Organizao Mundial de Sade.
O padro de referncia da Imunoglobulina Humana contra
a Hepatite A calibrado em unidades internacionais em
comparao com o padro internacional. A potncia
declarada no menor que 100 UI/mL. A potncia estimada
no menor que a potncia declarada. O intervalo de
confana (P = 0,95) da potncia estimada no menor que
80% e nem maior que 125%.
Realizar o teste se a imunoglobulina humana normal
para a preparao subcutnea. Proceder conforme descrito
em Determinao de ttulos de hemaglutininas Anti-A
e Anti-B (5.5.1.9). Diluir a preparao a ser examinada
na concentrao de 30 g/L de imunoglobulina antes da
preparao da serie de diluies a serem usadas no teste. A
aglutinao inferior diluio de 1:64.
Protenas totais
Proceder conforme descrito em Determinao de nitrognio
pelo mtodo de Kjeldahl (5.3.3.2). Diluir a amostra com
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) at obter uma
concentrao de cerca de 15 mg de protenas em 2 mL. A
um tubo de centrfuga de fundo redondo, adicionar 2 mL
dessa soluo, 2 mL de molibdato de sdio a 7,5% (p/v) e 2
lquido sobrenadante deve ser decantado possibilitando
que o tubo seja enxuto sobre um papel de fltro. Calcular o
teor em protenas multiplicando a quantidade de nitrognio
por 6,25. O teor em protenas no inferior a 100 g/L e
no superior a 180 g/L. Contm, no mnimo, 90% e, no
mximo, 100% da quantidade indicada no rtulo.
Conservar a preparao lquida em recipiente de vidro
incolor, ao abrigo da luz e temperatura indicada no rtulo.
Conservar a preparao lioflizada em recipiente de vidro
incolor, presso reduzida ou sob gs inerte, ao abrigo da
luz e a uma temperatura que no ultrapasse 25 C.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. O rtulo deve declarar:
para a preparao lquida, o volume da preparao e o
contedo proteico devem ser expressos em g/L;
para a preparao lioflizada, a quantidade de protenas
no frasco;
a via de administrao;
para a preparao lioflizada, o nome ou composio
e o volume do diluente para reconstituio a ser
adicionado;
quando aplicvel, que a preparao adequada para o
uso na proflaxia da infeco da Hepatite A;
quando aplicvel, a atividade da imunoglobulina anti-
Hepatite A em UI/mL;
nas preparaes multidose, o nome e a concentrao do
agente antimicrobiano.
i
IMUNOGLOBULINA HUMANA NORMAL
PARA ADMINISTRAO POR VIA
INTRAVENOSA
Immunoglobulinum Humanum Normale ad
Usum Intravenosum
A imunoglobulina humana normal para administrao
por via intravenosa uma preparao estril, lquida ou
imunoglobulina G (IgG). Podem estar presentes outras
protenas. Contm anticorpos IgG de indivduos normais.
Essa monografa no se aplica s preparaes produzidas
por um processo que tenha por fm obter uma preparao
contendo fragmentos ou quimicamente modifcada. A
imunoglobulina humana normal para administrao por
via intravenosa obtida a partir de plasma que satisfaz
s exigncias da monografa Plasma Humano para
Fracionamento. No adicionado ao plasma utilizado
nenhum antimicrobiano.
O mtodo de preparao compreende uma ou vrias etapas
que demonstraram que eliminam ou inativam os agentes
infecciosos conhecidos. Tem sido demonstrado que os
resduos no produto fnal das substncias eventualmente
utilizadas nos processos destinados a inativar os vrus no
tenham qualquer efeito indesejvel nos pacientes tratados
com a imunoglobulina. A inocuidade da preparao
pronta para administrao por via intravenosa ter sido
demonstrada por ensaios apropriados em animais e por
um estudo durante os ensaios clnicos. A imunoglobulina
humana normal para administrao por via intravenosa
preparada a partir do plasma recolhido de, no mnimo,
1000 doadores, segundo um mtodo por meio do qual se
saiba ser possvel obter uma preparao que:
no transmitir infeco;
na concentrao em imunoglobulina de 5% (p/v)
contm, pelo menos, dois anticorpos (um viral e
outro bacteriano) para os quais existe um padro
internacional, ou uma preparao de referncia; a
concentrao de tais anticorpos , pelo menos, trs
vezes superior da matria-prima inicial; tem uma
distribuio defnida em subclasses da imunoglobulina
G e satisfaz ao teste de Determinao da funo F
c
da
imunoglobulina (5.5.1.16).
A imunoglobulina humana normal para administrao
por via intravenosa preparada quer na forma de soluo
estabilizada, quer lioflizada. Pode adicionar-se um
estabilizante. Nos dois casos, a preparao submetida
a uma fltrao esterilizante. Nenhum conservante
antimicrobiano adicionado durante o fracionamento do
plasma e no pool de plasma fnal. A estabilidade do produto
fnal demonstrada por ensaios realizados durante os
estudos de desenvolvimento.
IDENTIFICAO
A. Realizar na amostra ensaios de precipitao com uma
gama apropriada de soros especfcos de diferentes espcies
de animais domsticos. recomendvel que o ensaio seja
realizado com soros especfcos das protenas plasmticas
de cada espcie de animal domstico correntemente
utilizado para a preparao de produtos de origem
biolgica. A imunoglobulina humana normal contm
protenas de origem humana e d resultados negativos com
os soros especfcos das protenas plasmticas de outras
espcies.
B. Realizar na amostra um ensaio de imunoeletroforese
segundo tcnica apropriada descrita em Mtodos
Imunoqumicos (5.6). Utilizar um antisoro humano normal,
comparar o soro humano normal com a amostra diluda
de modo a conter 10 g/L de protenas. O componente
principal da amostra corresponde ao componente IgG do
soro humano normal, podendo existir outras protenas
plasmticas em pequenas quantidades. Se a albumina
humana foi adicionada como estabilizante, pode ser visvel
como um composto importante.
CARACTERSTICAS
Aspecto. A preparao lquida lmpida, ou ligeiramente
opalescente e incolor, ou amarela clara. A preparao
lioflizada um p branco, ou ligeiramente amarelado, ou
uma massa slida e frivel. No caso de uma preparao
lioflizada, a sua reconstituio feita segundo as indicaes
do rtulo imediatamente antes de realizar a identifcao e
os ensaios, salvo os de solubilidade e de teor em gua.
pH (5.2.19). O pH da soluo est compreendido entre 4,0
e 7,4. Diluir a amostra com soluo de cloreto de sdio a
0,9% (p/v) at a concentrao de 1% (p/v) em protenas.
Osmolalidade (5.2.28). No inferior a 240 mosmol/kg.
Solubilidade. No caso de uma amostra lioflizada, adicionar
o volume do diluente indicado no rtulo. temperatura de
20 C a 25 C, a amostra dissolve-se, completamente, em
30 minutos.
Composio em protenas. Proceder conforme descrito
em Eletroforese (5.2.22), utilizar a tcnica Eletroforese
de zona. Utilizar tiras de gel de acetato de celulose
apropriadas, como suporte e tampo barbital pH 8,6, como
soluo de eletrlito.
Soluo amostra: diluir a amostra com soluo de cloreto
de sdio a 0,9% (p/v) at uma concentrao de 3% (p/v) em
imunoglobulina.
Soluo padro: reconstituir um padro de referncia
para eletroforese de imunoglobulina humana e diluir com
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) at a concentrao
de 3% (p/v) em protenas.
Aplicar numa tira 4 L da Soluo amostra em spot de
10 mm ou aplicar 0,4 L por milmetro se utilizar uma
tira mais estreita. Numa outra tira aplicar, nas mesmas
condies, o mesmo volume da Soluo padro. Aplicar
um campo eltrico apropriado de modo que a banda da
albumina do soro humano normal num eletroforetograma
padro migre, pelo menos, 30 mm. Tratar as tiras com negro
de amido 10B SR durante 5 minutos e com uma mistura
a
i
1063
de 10 volumes de cido actico glacial com 90 volumes
de metanol durante o tempo estritamente necessrio para
obter a descolorao da moldura. Provocar a transparncia
da moldura com uma mistura de 19 volumes de cido
actico glacial com 81 volumes de metanol. Determinar
a absorvncia das bandas em 600 nm com auxlio de um
aparelho que nesse comprimento de onda d resposta
linear no intervalo de medida. Realizar trs determinaes
sobre cada tira e calcular a mdia das leituras em cada
tira. No eletroforetograma da amostra, no mximo 5%
das protenas podem ter mobilidade diferente da banda
principal. Esse limite no aplicvel se foi adicionada
albumina preparao como estabilizante; no caso de
preparaes estabilizadas com albumina, realiza-se um
ensaio de composio em protenas durante a produo
antes de adicionar o estabilizante. O ensaio s vlido
se no eletroforetograma obtido com a Soluo padro, a
proporo de protenas contidas na banda principal estiver
compreendida entre os limites indicados na literatura que
acompanha a preparao do padro de referncia.
Distribuio do tamanho molecular. Proceder conforme
e 7,8 mm de dimetro interno, empacotada com slica-gel
hidrfla para cromatografa. Fluxo da Fase mvel de 0,5
mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 4,873 g de fosfato de sdio dibsico
di-hidratado, 1,741 g de fosfato de sdio monobsico
monoidratado, 11,688 g de cloreto de sdio e 50 mg de
azida sdica em 1000 mL de gua.
Soluo amostra: diluir quantidade da amostra em soluo
de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) at concentrao apropriada
ao sistema cromatogrfco utilizado. Geralmente, so
convenientes uma concentrao entre 4 g/L e 12 g/L e a
injeo de 500 g a 600 g de protena.
Soluo padro: diluir o padro de imunoglobulina
humana com soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) at
obter uma concentrao em protenas igual da Soluo
amostra.
Injetar a Soluo amostra e a Soluo padro. No
cromatograma obtido com a Soluo padro, o pico
principal corresponde ao monmero IgG e aparece um
pico correspondente ao dmero com um tempo de reteno
em relao ao monmero de cerca de 0,85. Identifque os
picos no cromatograma obtido com a Soluo amostra por
comparao com o cromatograma obtido com a Soluo
padro; os picos com tempos de retenes menores que o
do dmero correspondem aos polmeros e aos agregados.
A amostra satisfaz ao ensaio se no cromatograma obtido
com a Soluo amostra o tempo de reteno, em relao
ao pico correspondente do cromatograma obtido com
a Soluo padro, for de 1 0,02 para o monmero e o
dmero; e se a soma do monmero e do dmero representar,
no mnimo, 90,0% da rea total do cromatograma e os
polmeros e agregados representarem, no mximo, 3,0%
da rea total. Essa exigncia no se aplica s preparaes
a que se adicionou albumina como estabilizante; no caso
de preparaes estabilizadas com albumina, realizar um
ensaio de distribuio do tamanho molecular durante a
fabricao antes da adio do estabilizante.
gua. Determinar por um dos mtodos: Determinao
da gua pelo mtodo semimicro (5.2.20.3), Perda por
dessecao (5.2.9) ou por Espectrofotometria de absoro
no infravermelho (5.2.14). No mximo 2,0%.
Ativador da pr-calicrena. Proceder conforme
descrito em Determinao do ttulo do ativador da pr-
calicrena (5.5.1.11). No mximo, 35 UI/mL, calculado
em relao a uma diluio da amostra contendo 30 g/L de
imunoglobulina.
correspondente a 1 mL de imunoglobulina.
DOSEAMENTO
Anticorpos contra o antgeno de superfcie da hepatite-B
O teor da amostra em anticorpos contra o antgeno de
superfcie da hepatite-B, determinado por um Mtodo
Imunoqumico (5.6) apropriado, no inferior a 0,5 UI/g
de imunoglobulina.
Atividade anticomplementar
atividade anticomplementar da imunoglobulina (5.5.1.13).
A proporo de complemento consumido de, no mximo,
50,0% (1 CH
50
por miligrama de imunoglobulina).
Proceder conforme descrito em Determinao de ttulos
de hemaglutininas anti-A e anti-B (5.5.1.9). Realizar os
ensaios das Hemaglutininas anti-A e anti-B. Se a amostra
contiver um teor de imunoglobulinas superior a 30 g/L,
diluir at essa concentrao antes de preparar as diluies
para o ensaio. As diluies a 1/64 no apresentam sinais de
aglutinao.
Imunoglobulina A
Como determinado em Mtodos Imunoqumicos (5.6)
apropriado, o contedo de imunoglobulina A no superior
ao indicado no contedo do rtulo.
Protenas totais
Diluir a amostra com soluo de cloreto de sdio a 0,9%
(p/v) at obter uma concentrao de cerca de 15 mg de
protenas em 2 mL. Num tubo de centrfuga de fundo
redondo introduzir 2 mL dessa soluo. Adicionar 2 mL
de soluo de molibdato de sdio a 7,5% (p/v) e 2 mL
i
de uma mistura de 1 volume de cido sulfrico isento de
nitrognio com 30 volumes de gua. Agitar, centrifugar
durante 5 minutos. O lquido sobrenadante deve ser
decantado possibilitando que o tubo seja enxuto sobre um
papel de fltro. Dosar o nitrognio no resduo pelo mtodo
de Determinao de nitrognio pelo mtodo de Kjeldahl
(5.3.3.2). Calcular o teor em protenas multiplicando a
quantidade de nitrognio por 6,25. O teor em protenas
no inferior a 30 g/L e contm, no mnimo, 90,0% e, no
mximo, 110,0% da quantidade indicada no rtulo.
Conservar a preparao lquida em recipiente de vidro
incolor, ao abrigo da luz e temperatura indicada no rtulo.
Conservar a preparao lioflizada em recipiente de vidro
incolor, a presso reduzida ou sob gs inerte, ao abrigo da
luz e a uma temperatura que no ultrapasse 25 C.
ROTULAGEM
No rtulo indica-se:
no caso de um produto lquido, o volume da preparao
no recipiente e o teor em protenas expresso em gramas
por litro;
no caso de um produto lioflizado, a quantidade de
protenas no frasco;
a quantidade de imunoglobulina no frasco;
a via de administrao;
as condies de conservao;
o prazo de validade;
no caso do produto lioflizado, o nome ou a composio
e o volume do diluente;
a distribuio das subclasses da imunoglobulina G na
preparao;
nos casos apropriados, a quantidade de albumina
adicionada como estabilizante;
o teor mximo de imunoglobulina A.
INDOMETACINA
Indometacinum
C
19
H
16
ClNO
4
; 357,79
indometacina; 04889
cido 1-(4-clorobenzoil)-5-metoxi-2-metil-1H-indol-3-
actico
[53-86-1]
C
19
H
16
ClNO
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou amarelo.
Apresenta polimorfsmo.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, pouco solvel
em etanol, clorofrmio e ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 158 C a 162 C.
IDENTIFICAO
Os testes B., C. e D. podem ser omitidos se for realizado
o teste A.
observados no espectro de indometacina SQR, preparado
de maneira idntica. Se os espectros obtidos no forem
idnticos, dissolver as substncias, separadamente, em
metanol e evaporar at secura. Obter novos espectros com
os resduos.
mistura de metanol e cido clordrico (9:1), exibe mximo
em 318 nm. A absorvncia em 318 nm est compreendida
entre 0,425 e 0,475.
C. Adicionar, a 0,1 mL de soluo da amostra a 1% (p/v) em
etanol, 2 mL de mistura, recm preparada, de cloridrato de
hidroxilamina a 25% (p/v) e hidrxido de sdio SR (1:3).
Adicionar 2 mL de cido clordrico a 20% (p/v), 1 mL de
cloreto frrico a 1,3% (p/v) e homogeneizar. Desenvolve-
se colorao rosa-violeta.
D. Adicionar, a 0,5 mL de soluo da amostra a 1% (p/v)
em etanol, 0,5 mL de p-dimetilaminobenzaldedo SR.
Solubilizar o precipitado formado, sob agitao. Aquecer
em banho-maria. Produz-se colorao verde-azulada.
Aquecer por 5 minutos e resfriar em banho de gelo por
2 minutos. Forma-se precipitado e a colorao muda para
verde-acinzentada. Adicionar 3 mL de etanol. A soluo
torna-se clara e de colorao rosa-violeta.
ENSAIOS DE PUREZA
utilizando suspenso de slica-gel HF
254
em fosfato de
sdio monobsico a 4,68% (p/v) para preparar o suporte
da cromatoplaca, e mistura de ter de petrleo e ter etlico
10 uL de cada uma das solues, recentemente preparadas,
descritas a seguir.
a
i
1065
Preparar imediatamente antes do uso.
Soluo (2): diluir 1 mL da Soluo (1) a 200 mL com metanol,
a Soluo (1), diferente da principal, no mais intensa
que aquela obtida com a Soluo (2) (0,5%).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar 2 g da amostra e
proceder conforme descrito em Mtodo IV. Preparar a
soluo padro utilizando 4 mL de Soluo padro de
amostra, em estufa a 105 C, at peso constante. No
mximo 0,5%.
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
A. Dissolver, exatamente, cerca de 0,3 g da amostra em 75
mL de acetona. Borbulhar nitrognio livre de dixido de
carbono, por 15 minutos. Adicionar 0,1 mL de fenolftalena
SI e titular com hidrxido de sdio 0,1 M SV, mantendo
o fuxo de nitrognio constante. Titular com hidrxido
de sdio 0,1 M SV at colorao rsea. Realizar
ensaio em branco e fazer correes necessrias. Cada mL
de hidrxido de sdio 0,1 M SV equivale a 35,779 mg de
C
19
H
16
ClNO
4
.
m); fuxo de Fase mvel de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: soluo de fosfato de sdio monobsico 0,01
M e fosfato de sdio dibsico 0,01 M , preparada utilizando
mistura de acetonitrila e gua (1:1) como solvente.
Fase mvel e completar o volume com o mesmo solvente.
Homogeneizar. Transferir 10 mL dessa soluo para balo
volumtrico de 100 mL, completar o volume com a Fase
mvel. Homogeneizar.
Soluo padro: soluo de indometacina SQR a 0,1 mg/
mL em Fase mvel.
A efcincia da coluna no menor que 500 pratos tericos/
coluna. O desvio padro relativo das reas de replicatas dos
19
H
16
ClNO
4

ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infamatrio, analgsico.
INDOMETACINA CPSULAS
19
H
16
ClNO
4.
IDENTIFICAO
A. Pesar as cpsulas, remover os contedos e pes-las
Misturar quantidade do p equivalente a 50 mg de
indometacina com 10 mL de acetona durante 2 minutos
e fltrar. Transferir 5 mL do fltrado para erlenmeyer
com tampa, adicionar 20 mL de gua e agitar durante 2
minutos at formao de precipitado cristalino. Filtrar
e recolher os cristais. Secar os cristais em temperatura
ambiente e dessecar em estufa vcuo a 100 C, por 2
horas. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14)
dos cristais, dispersos em brometo de potssio, apresenta
observados no espectro de indometacina SQR, preparado
de maneira idntica.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel como
seguir.
Soluo (1): pesar as cpsulas, remover os contedos
cpsulas. Misturar quantidade do p equivalente a 25 mg de
indometacina com 25 mL de metanol, obtendo soluo a 1
mg/mL. Filtrar.
Soluo (2): soluo a 1 mg/mL de indometacina SQR em
metanol.
i
C. O espectro de absoro no ultravioleta (5.2.14), na
no Doseamento, exibe mximo em 320 nm, idntico ao
D. Pesar as cpsulas, remover os contedos e pes-las
Misturar quantidade do p equivalente a 25 mg de
indometacina com 2 mL de gua e adicionar 2 mL de
hidrxido de sdio 2 M. Desenvolve-se colorao amarelo
clara que enfraquece rapidamente.
CARACTERSTICAS
o contedo de cada cpsula para balo volumtrico de 100
mL. Adicionar 10 mL de gua, deixar em repouso por 10
minutos, agitando ocasionalmente. Acrescentar 75 mL de
metanol, agitar mecanicamente por 10 minutos, completar
o volume com metanol, homogeneizar e fltrar. Diluir,
sucessivamente, com mistura de metanol e tampo fosfato
pH 7,2 (1:1) at concentrao de 0,0025% (p/v). Prosseguir
conforme descrito no Doseamento.
Meio de dissoluo: mistura de tampo fosfato pH 7,2 e
gua (1:4), 750 mL
Tempo: 20 minutos
dissoluo, fltrar e diluir, se necessrio, em mistura de
tampo fosfato pH 7,2 e gua (1:4), at concentrao
adequada. Medir as absorvncias em 318 nm (5.2.14),
utilizando o mesmo solvente para ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
19
H
16
ClNO
4
dissolvida no meio,
comparando as leituras obtidas com a da soluo de
indometacina SQR na concentrao de 0,0025% (p/v),
declarada de C
19
H
16
ClNO
4
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias relacionadas na monografa de Indometacina.
Preparar as Solues (1) e (2) como descrito a seguir.
Soluo (1): pesar as cpsulas, remover os contedos
cpsulas. Misturar quantidade do p equivalente a 0,1 g de
indometacina com 5 mL de clorofrmio e fltrar, obtendo
soluo a 20 mg/mL.
clorofrmio, obtendo soluo a 0,1 mg/mL.
que aquela obtida com a Soluo (2) (0,5%).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar 20 cpsulas,
remover os contedos e pes-las novamente. Homogeneizar
o contedo das cpsulas. Transferir, exatamente, quantidade
de p equivalente a cerca de 50 mg de indometacina para
balo volumtrico de 100 mL, adicionar 10 mL de gua e
deixar em repouso por 10 minutos, agitando ocasionalmente.
Acrescentar 75 mL de metanol, homogeneizar, completar
o volume com metanol e fltrar. Transferir 5 mL do fltrado
com mistura de tampo fosfato pH 7,2 e metanol (1:1), de
modo a obter soluo a 0,0025% (p/v). Preparar soluo
em 320 nm, utilizando mistura de tampo fosfato pH 7,2
e metanol (1:1) para ajuste do zero. Calcular a quantidade
de C
19
H
16
ClNO
4
nas cpsulas a partir das leituras obtidas.
1 cm) = 193, em 320 nm, em mistura de tampo fosfato pH
7,2 e metanol (1:1).
ROTULAGEM
INDOMETACINA SUPOSITRIOS
19
H
16
ClNO
4.
IDENTIFICAO
A. Pesar os supositrios, triturar ou cortar em pequenos
pedaos e misturar at obter massa homognea. Dissolver
quantidade equivalente a 0,1 g de indometacina em 50
a
i
1067
mL de gua quente e fltrar. Lavar o resduo com gua
quente, deixar secar ao ar. Dissolver o resduo em 5 mL de
clorofrmio e evaporar at secura. O espectro de absoro
no infravermelho (5.2.14) do resduo, disperso em brometo
indometacina SQR, preparado de maneira idntica.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel, como
suporte, e mistura de clorofrmio e cido actico glacial
10 L das solues, recentemente preparadas, descritas a
seguir.
Soluo (1): pesar os supositrios, triturar ou cortar em
pequenos pedaos e misturar at obter massa homognea.
Transferir quantidade equivalente a 25 mg de indometacina
para funil de separao de 125 mL, adicionar 15 mL de gua
e 50 mL de ter etlico e agitar at dissoluo. Transferir a
camada etrea para balo volumtrico de 200 mL e extrair
a camada aquosa com mais duas pores de 50 mL de ter
etlico. Combinar os extratos etreos e completar o volume
com ter etlico.
Soluo (2): soluo a 0,125 mg/mL de indometacina SQR
em mistura de metanol e ter etlico (1:100). Dissolver
previamente em metanol.
C. Pesar os supositrios, triturar ou cortar em pequenos
pedaos e misturar at obter massa homognea. Agitar
quantidade equivalente a 25 mg de indometacina com 5
mL de gua at que uma suspenso branca seja produzida.
Adicionar 2 mL de hidrxido de sdio 2 M. Desenvolve-se
colorao amarelo clara que enfraquece rapidamente.
CARACTERSTICAS
Teste de desintegrao (5.1.4.2). Realizar o teste por
90 minutos em tampo fosfato pH 6,8 utilizando trs
supositrios exatamente pesados. Aps o teste, remover
cada supositrio, secar em papel de fltro e pesar. No
menos que 75% de cada supositrio so dissolvidos.
conforme descrito em Espectrofotometria de absoro
no ultravioleta (5.2.14). Transferir cada supositrio
para balo volumtrico de 100 mL contendo 80 mL de
mistura de metanol e cido actico glacial (199:1), agitar
mecanicamente at dissoluo do supositrio e completar
Diluir, sucessivamente, com mistura de metanol e cido
actico glacial (199:1) at concentrao de 0,0025%
solues resultantes em 320 nm, utilizando metanol e
cido actico glacial (199:1) para ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
19
H
16
ClNO
4
nos supositrios a partir das
leituras obtidas.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar 10 supositrios,
triturar ou cortar em pequenos pedaos e misturar at
obter massa homognea. Pesar, exatamente, quantidade
equivalente a cerca de 0,1 g de indometacina, transferir
para balo volumtrico de 50 mL com auxlio de 40 mL
de metanol e agitar at completa disperso. Completar o
volume com metanol e fltrar. Transferir 2 mL do fltrado
com mistura de tampo fosfato pH 7,2 e metanol (1:1).
os mesmos solventes. Medir as absorvncias das solues
em 318 nm, utilizando mistura de tampo fosfato pH 7,2 e
metanol (1:1) para ajuste do zero. Calcular a quantidade de
C
19
H
16
ClNO
4
nos supositrios a partir das leituras obtidas.
Alternativamente, realizar os clculos considerando A (1%,
1 cm) = 193, em 318 nm, em mistura de tampo fosfato pH
7,2 e metanol (1:1).
ROTULAGEM
IODETO DE POTSSIO
Kalii iodidum
KI; 166,00
iodeto de potssio; 04965
Iodeto de potssio
[7681-11-0]
Contm, no mnimo, 99,0% e, no mximo, 100,5% de KI,
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou cristais incolores.
em glicerol e solvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. A soluo a 10% (p/v) em gua isenta de dixido de
carbono responde s reaes do on iodeto (5.3.1.1).
B. A soluo a 10% (p/v) em gua isenta de dixido de
carbono responde s reaes do on potssio (5.3.1.1).
i
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo utilizada no teste A. de
Identifcao lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
Alcalinidade. A 12,5 mL da soluo utilizada no teste A.
de Identifcao, adicionar 0,1 mL de azul bromotimol SI e
titular com cido clordrico 0,01 M at colorao amarela.
No mximo 0,5 mL de cido clordrico 0,01 M.
Iodatos. A 10 mL da soluo utilizada no teste A. de
Identifcao, adicionar 0,25 mL de amido isento de iodeto
SI e 0,2 mL de cido sulfrico M. Deixar em repouso,
protegido da luz, por 2 minutos. No desenvolve colorao
azul.
Tiossulfato. A 10 mL da soluo utilizada no teste A. de
Identifcao, adicionar 0,1 mL de amido iodetado SI e 0,1
mL de iodo 0,005 M. Desenvolve-se colorao azul.
ferro (5.3.2.4). Diluir 5 mL da soluo obtida no teste A.
de Identifcao para 10 mL com gua. Proceder conforme
descrito em Ensaio limite para ferro, Mtodo I. No mximo
0,002% (20 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Usar 20 mL
da soluo obtida no teste A. de Identifcao. No mximo
0,001% (10 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Dissolver 8 g da amostra em 15 mL com
gua. Proceder conforme descrito em Ensaio limite para
mximo 1%.
DOSEAMENTO
gua e completar para 100 mL com o mesmo solvente. A
20 mL dessa soluo, adicionar 40 mL de cido clordrico
concentrado e titular com iodato de potssio 0,05 M SV
at mudana de cor de marrom para amarelo. Adicionar
5 mL de clorofrmio. Continuar a titulao, agitando
vigorosamente, at descolorao da camada clorofrmica.
Cada mL de iodato de potssio 0,05 M SV equivale a
16,600 mg de KI.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antitireoidiano.
IODETO DE SDIO
Natrii iodidum
NaI; 149,89
iodeto de sdio; 04969
Iodeto de sdio
[7681-82-5]
Contm, no mnimo, 99,0% e, no mximo, 101,5% de NaI,
DESCRIO
incolores higroscpicos.
Solubilidade. Muito solvel em gua e facilmente solvel
em etanol.
IDENTIFICAO
carbono e completar o volume para 100 mL com o mesmo
solvente. A soluo resultante responde s reaes do on
iodeto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
100 mL com o mesmo solvente. A soluo lmpida
(5.2.25) e incolor (5.2.12).
Alcalinidade. A 12,5 mL da soluo obtida em Aspecto da
soluo adicionar 0,1 mL de azul de bromotimol SI. No
mximo 0,7 mL de cido clordrico 0,01 M gasto para a
Brio. Uma soluo da amostra a 20% (p/v), acidifcada
com cido clordrico, no deve se turvar com a adio de
sulfato de potssio a 1% (p/v).
Iodetos. A 10 mL da soluo obtida em Aspecto da
soluo adicionar 0,25 mL de amido isento de iodeto
SI e 0,2 mL de cido sulfrico M. Deixar em repouso,
ao abrigo da luz, durante 2 minutos. No se desenvolve
colorao azul.
Nitrato, nitrito e amnia. Adicionar 5 mL de hidrxido
de sdio M e cerca de 0,2 g de alumnio metlico a uma
soluo de 1 g da amostra em 5 mL de gua, em um tubo
de ensaio com capacidade para 40 mL. Introduzir um
chumao de algodo na parte superior do tubo e colocar
um pedao de papel tornassol vermelho na boca do tubo de
ensaio. Aquecer em banho-maria por 15 minutos. Nenhuma
colorao azul no papel observada.
Potssio. Uma soluo de 1 g da amostra em 2 mL de gua
no deve precipitar com 1 mL de bitartarato de sdio SR.
a
i
1069
Tiossulfatos. A 10 mL da soluo obtida em Aspecto da
soluo adicionar 0,1 mL de amido iodetado SR e 0,1 mL
de iodo 0,005 M. Desenvolve-se colorao azul.
ferro (5.3.2.4). Utilizar o Mtodo I. Utilizar 5 mL
da soluo obtida em Aspecto da soluo e proceder
conforme descrito em Ensaio limite para ferro. Utilizar 1
mL de Soluo padro de ferro (1 ppm de Fe). No mximo
0,002% (20 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Pesar 2 g da
amostra, solubilizar em 2 mL de gua e proceder conforme
descrito em Ensaio limite para metais pesados. No mximo
0,001% (10 ppm).
Aspecto da soluo e diluir para 15 mL com gua. Proceder
conforme descrito em Ensaio limite para sulfatos. No
mximo 0,015% (150 ppm).
mximo 3,0%.
DOSEAMENTO
dessecada e solubilizar em 10 mL de gua. Adicionar 15
mL de cido clordrico e titular com iodato de potssio
0,1 M SV at mudana de cor de vermelho para amarelo.
Adicionar 5 mL de clorofrmio e continuar a titulao,
agitando vigorosamente at a descolorao da camada
clorofrmica. Cada mL de iodato de potssio 0,1 M SV
equivale a 29,978 mg de NaI.
Em recipientes fechados e ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Expectorante e anti-hipertiroidiano.
IODO
Iodum
I
2
; 253,81
iodo; 04983
Iodo
[7553-56-2]
Contm, no mnimo, 99,5% e, no mximo, 100,5% de I.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais fnos, violceos e com
brilho metlico.
etanol, pouco solvel em glicerina. Muito solvel em
solues concentradas de iodetos.
IDENTIFICAO
A. Em um tubo de ensaio aquecer uma pequena poro
da amostra. Vapores violceos so liberados, os quais
condensam sobre as paredes do tubo na forma de cristais
azulados.
B. A uma soluo saturada da amostra, adicionar soluo
de amido SR. Uma colorao azul produzida. Aquecer
at descolorao. Com resfriamento, a colorao azul
reaparece.
ENSAIOS DE PUREZA
Cianeto. Agitar vigorosamente 1 g da amostra com 30 mL
de gua e fltrar. A 5 mL do fltrado, juntar dez gotas de
tiossulfato de sdio 0,1 M, um cristal de sulfato ferroso,
uma gota de cloreto frrico SR e ferver. Deixar esfriar.
Acidifcar com cido clordrico. No se desenvolve
colorao azul.
Brometo e cloreto. Triturar 3 g da amostra e misturar com
20 mL de gua. Filtrar, lavar o fltro com gua e diluir para
30 mL com o mesmo solvente. Adicionar 1 g de zinco em
p. Aps descolorao da soluo, fltrar, lavar o fltro
com gua e completar o volume para 40 mL com o mesmo
solvente. A 10 mL da soluo, adicionar 3 mL de amnia
e 6 mL de soluo de nitrato de prata 0,1 M. Em seguida,
fltrar novamente, lavar o fltro com gua e completar o
volume para 20 mL com o mesmo solvente. Tratar 10 mL
da soluo com 1,5 mL de cido ntrico. Aps 1 minuto,
a opalescncia apresentada pela proparao no deve ser
mais intensa que a de uma preparao padro preparada
simultaneamente com uma mistura de 10,75 mL de gua,
0,25 mL de cido clordrico 0,01 M, 0,2 mL de cido ntrico
a 20% (p/v) e 0,3 mL de soluo de nitrato de prata 0,1 M.
No mximo 0,025% (250 ppm).
Sulfato. Diluir 3 mL do fltrado obtido em Cianeto para
5 mL com gua, adicionar uma gota de cido clordrico
e cinco gotas de cloreto de brio SR. No se observa
turvao.
Resduo por evaporao. Transferir, exatamente, cerca de
5 g da amostra para uma cpsula de porcelana, aquecer em
banho-maria at todo o iodo ser sublimado e, em seguida,
secar em estufa a 105 C por uma hora. No mximo 0,05%.
DOSEAMENTO
Transferir, exatamente, cerca 0,2 g de iodo para erlenmeyer
contendo 1 g de iodeto de potssio e 2 mL de gua. Adicionar
1 mL de cido actico diludo e, aps a dissoluo, adicionar
50 mL de gua. Titular com tiossulfato de sdio 0,1 M SV,
i
em temperatura inferior a 15 C, at a descolorao da
cor amarelo escura para a cor amarelo plida. Adicionar
algumas gotas de amido SI e continuar a titulao at o
desaparecimento da cor azul. Cada mL de tiossulfato de
sdio 0,1 M SV equivale a 12,691 mg de I.
luz e do calor.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infeccioso, anti-hipertireoidiano.
ISONIAZIDA
Isoniazidum
N
O
N
NH
2
H
C
6
H
7
N
3
O; 137,14
isoniazida; 05092
Hidrazida do cido 4-piridinacarboxlico
[54-85-3]
Contm, no mnimo 98,0% e, no mximo, 102,0% de
C
6
H
7
N
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou incolor.
Solubilidade: Facilmente solvel em gua, ligeiramente
solvel em etanol, pouco solvel em clorofrmio,
praticamente insolvel em benzeno e ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 170 C a 174 C.
IDENTIFICAO
amostra, previamente dessecada e dispersa em brometo
isoniazida SQR, preparado de maneira idntica.
de 200 nm a 350 nm, da soluo da amostra obtida no
mtodo B. de Doseamento, exibe mximos em 212 nm e
padro.
ENSAIOS DE PUREZA
5% (p/v).
Substncias relacionadas: Proceder conforme descrito em
slica-gel GF
254
como suporte, e mistura de gua, acetona,
metanol e acetato de etila (5:20:10:75) como fase mvel.
Soluo (1): dissolver 1 g da amostra em mistura de gua
e acetona (1:1) e completar para 10 mL com o mesmo
solvente.
Soluo (2): dissolver 50 mg de sulfato de hidrazina em
50 mL de gua e completar para 100 mL com acetona.
Transferir 10 mL desta soluo para balo volumtrico de
100 mL, adicionar 0,2 mL da Soluo (1) e completar o
volume com mistura de gua e acetona (1:1).
intensa que a obtida com a Soluo (2) (0,2%). Nebulizar
as placas com p-dimetilaminobenzaldedo SR1. Uma
mancha adicional, correspondente hidrazina, aparece
no cromatograma. Qualquer mancha correspondente a
hidrazina obtida no cromatograma com a Soluo (1) no
mais intensa que aquela obtida no cromatograma com a
Soluo (2) (0,05%).
mximo 0,001% (10 ppm).
amostra. Dessecar em estufa por 105
o
C, por 4 horas. No
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
A. Pesar exatamente cerca de 250 mg da amostra.
Transferir para balo volumtrico de 100 mL e completar
o volume com gua. Transferir volumetricamente 20 mL
desta soluo para Erlenmeyer de 250 mL. Adicione 100
mL de gua destilada, 20 mL de cido clordrico SR, 0,2 g
de brometo de potssio e 0,05 mL de vermelho de metila
SI. Titular com bromato de potssio 0,0167 M SV at o
desaparecimento da colorao vermelha do indicador.
a
i
1071
Cada mL de bromato de potssio 0,0167 M SV equivale a
3,429 mg de isoniazida (C
6
H
7
N
3
O).
cerca de 25 mg da amostra e dissolver em cido clordrico
0,01 M. Deixar em ultrassom se necessrio, e completar o
volume para 250 mL com o mesmo solvente. Diluir com
cido clordrico 0,01 M at a concentrao de 0,001%
solues em 265 nm, utilizando cido clordrico para
6
H
7
N
3
O na amostra, a
de 1,5 mL / minuto.
Tampo fosfato pH 6,9: preparar soluo de fosfato de
potssio monobsico a 0,1 M e ajustar o pH em 6,9 com
soluo concentrada de hidrxido de sdio SR. Adicionar
cinco gotas de trietanolamina por litro de tampo preparado
e homogeneizar.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato pH 6,9 e metanol
(95:5).
Soluo amostra: transferir, exatamente, 32 mg da amostra
de Fase mvel e deixar em ultrassom por 10 minutos.
Completar o volume com o mesmo solvente, de modo a
de isoniazida SQR em Fase mvel para obter soluo a
0,32 mg/mL.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo amostra. A efcincia
de reteno no inferior a 2,35. O fator de cauda no
superior a 2,0. O desvio padro relativo das reas de
6
H
7
N
3
O
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Tuberculosttico
ISONIAZIDA COMPRIMIDOS
6
H
7
N
3
O.
IDENTIFICAO
B. de Doseamento, exibe mximos de absoro em 212 nm
e 265 nm, idnticos aos observados no espectro da soluo
padro.
C. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir quantidade
de p equivalente a 1 mg de isoniazida para erlenmeyer,
adicionar 50 mL de etanol e agitar. A 5 mL da soluo
resultante, adicionar 0,1 g de tetraborato sdico e 5 mL de
1-cloro-2,4-dinitrobenzeno a 5% (p/v) em etanol. Evaporar
em banho-maria at a secura e aquecer por mais 10 minutos.
Adicionar 10 mL de metanol ao resduo e homogeneizar.
Desenvolve-se colorao prpura-avermelhada.
CARACTERSTICAS
Tempo: 45 min
dissoluo, fltrar e diluir em cido clordrico 0,01 M
6
H
7
N
3
O
a soluo de isoniazida SQR na concentrao de 0,001%
declarada de C
6
H
7
N
3
i
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Dissolver quantidade
de p equivalente a 0,4 g de isoniazida em gua, transferir
com gua e agitar. Filtrar. Transferir 50 mL da soluo
obtida para erlenmeyer. Adicionar 50 mL de gua, 20 mL
de cido clordrico SR e 0,2 g de brometo de potssio e
titular com soluo de bromato de potssio 0,0167 M SV,
mL de bromato de potssio 0,0167 M equivale a 3,429 mg
de C
6
H
7
N
3
O.
0,1 g de isoniazida para balo volumtrico de 100 mL e
adicionar 50 mL de cido clordrico 0,01 M. Deixar em
ultrassom por 15 minutos, agitar mecanicamente por 15
Homogeneizar e fltrar. Realizar diluies sucessivas
quantidade de C
6
H
7
N
3
O nos comprimidos, a partir das
leituras obtidas.
C. Proceder conforme descrito no mtodo C. de Doseamento
da monografa de Isoniazida. Preparar a Soluo amostra
isoniazida para balo volumtrico de 100 mL, adicionar 40
Resfriar temperatura ambiente, completar o volume com
Fase mvel e centrifugar por 5 minutos, de modo a obter
soluo a 0,32 mg/mL.
isoniazida (C
6
H
7
N
3
O) nos comprimidos a partir das
amostra.
ROTULAGEM
ISOTIOCIANATO DE ALILA
C H
2
N
C
S
C
4
H
5
NS; 99,15
3-Isotiocianato-1-propeno; 09889
[57-06-7]
C
4
H
5
NS.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido viscoso, variando
de incolor a levemente amarelo. agente fortemente
lacrimejante, possui odor irritante e durante sua
manipulao, deve-se utilizar protetor de olhos.
Faixa de destilao (5.2.3): 148 C a 154 C.
ndice de refrao (5.2.6): 1,527 a 1,531, determinado a
20 C.
IDENTIFICAO
amostra, dispersa em cloreto de sdio, apresenta bandas de
absoro em 700 cm
-1
, 950 cm
-1
, 980 cm
-1
, 1300 cm
-1
, 1340
cm
-1
, 1350 cm
-1
, 1410 cm
-1
, 1420 cm
-1
, 1650 cm
-1
, 2100
cm
-1
e 2200 cm
-1
.
ENSAIOS DE PUREZA
fenis. Diluir 1 mL de amostra em 5 mL de etanol e
adicionar uma gota de cloreto frrico SR. No ocorre
formao de colorao azul.
DOSEAMENTO
Transferir, exatamente, cerca de 4 mL da amostra para
um balo volumtrico de 100 mL e completar o volume
com etanol. Transferir 5 mL desta soluo para um balo
de destilao, juntamente, com 50 mL de nitrato de prata
0,1 M SV e 5 mL de soluo de amnia a 10% (v/v).
Conectar o balo em um condensador de refuxo, aquecer
em banho-maria por 1 hora e arrefecer a temperatura
ambiente. Desconectar o balo do condensador de refuxo,
transferir o contedo para um balo volumtrico de 100
mL e completar o volume com gua. Filtrar a soluo,
descartando 10 mL do volume inicial do fltrado. Para
a
i
1073
cada 50 mL do fltrado, adicionar 5 mL de cido ntrico,
2 mL de sulfato frrico amoniacal SR e titular o excesso
de nitrato de prata com tiocianato de amnio 0,1 M SV.
Realizar prova em branco utilizando 5 mL de etanol ao
invs da soluo amostra. Cada mL de nitrato de prata 0,1
M equivale a 4,958 mg de C
4
H
5
NS.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antissecretora.
ISOTRETINONA CPSULAS
20
H
28
O
2
.
IDENTIFICAO
quele do pico principal do cromatograma da Soluo
padro.
CARACTERSTICAS
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
(10 um), mantida temperatura ambiente; fuxo da Fase
Fase mvel: mistura de metanol e gua (77:23) com 0,5%
(v/v) de cido actico glacial.
cpsulas. Transferir quantidade de p equivalente a 20 mg
de isotretinona para balo volumtrico mbar de 100 mL.
Adicionar 80 mL de metanol e agitar mecanicamente por
balo volumtrico mbar de 25 mL e completar o volume
com metanol, obtendo soluo a 40 g/mL.
Soluo padro: transferir 20 mg de isotretinona SQR
exatamente pesados, para balo volumtrico mbar de 50
mL. Dissolver em metanol e completar o volume com o
mesmo solvente. Transferir 5 mL da soluo anterior para
balo volumtrico mbar de 50 mL e completar o volume
com metanol.
reas sob os picos. Calcular a quantidade de isotretinona
(C
20
H
28
O
2
) nas cpsulas a partir das respostas obtidas com
a Solues padro e a Soluo amostra.
ROTULAGEM
a j
1075
JABORANDI TINTURA
Jaborandi tinctura
A tintura preparada a partir das folhas secas de Pilocarpus
microphyllus Stapf - RUTACEAE a 10% (p/v), por
macerao ou percolao utilizando etanol a 65% (v/v)
alcaloides totais expressos como pilocarpina (C
11
H
16
N
2
O
2
;
M 208,26).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A tintura de cor
amarelo-parda esverdeada, de cheiro aromtico agradvel
e sabor amargo.
IDENTIFICAO
A. Evaporar 50 mL da tintura de jaborandi, tratar o resduo
com 10 mL de gua e cinco gotas de cido clordrico.
Filtrar e lavar o fltrado com ter etlico. Alcalinizar com
hidrxido de amnio 6 M e agitar duas vezes com 5 mL de
clorofrmio. Reunir as fraes clorofrmicas com 5 mL de
gua destilada e adicionar uma gota de cido ntrico. Agitar
e separar as fases. Juntar soluo cida um pequeno cristal
de dicromato de potssio, 2 mL de clorofrmio e 1 mL de
perxido de hidrognio a 3% (p/v). O clorofrmio ter
colorao azul arroxeado ou azul anilado, evidenciando a
presena de ncleo imidazlico ou glioxlico.
254

como fase estacionria e mistura de cloreto de metileno,
metanol e hidrxido de amnio (85:14:1) como fase mvel.
Aplicar placa, separadamente, 40 L da Soluo (1) e 2
L da Soluo (2).
Soluo (1): tintura de jaborandi.
Soluo (2): dissolver 10 mg de cloridrato de pilocarpina
SQR em metanol e completar o volume para 2 mL com o
mesmo solvente.
Desenvolver o cromatograma em percurso de 15 cm.
Remover a cromatoplaca, secar em estufa entre 100 C e
105 C por 10 minutos, deixar esfriar. A mancha principal
intensidade quela obtida com a Soluo (2). Nebulizar
com iodobismutato de potssio aquo-actico SR e, em
seguida, com soluo de nitrito de sdio SR. A mancha no
cromatograma correspondente pilocarpina, apresenta-se
com colorao castanho-avermelhada.
ENSAIOS DE PUREZA
Etanol (5.3.3.8.1). 65 5% (v/v). Proceder conforme
descrito em Mtodo por destilao, Lquidos com mais de
30% de lcool.
Resduo seco (5.4.3.2.2). No mnimo 0,8%.
DOSEAMENTO
Evaporar sob vcuo 100 g da tintura de jaborandi a baixa
temperatura, at reduzir cerca de 20 g. Transferir o
resduo completamente para um funil de separao, usando
alguns mililitros de cloreto de metileno. Adicionar 10
mL de hidrxido de amnio 6 M. Extrair sucessivamente
com fraes de 20 mL de cloreto de metileno at que os
alcaloides sejam totalmente extrados, ou seja, quando
algumas gotas da fase aquosa no apresentarem mais
turvao pela adio de uma gota do soluo de iodeto
de potssio mercrio SR. Juntar as camadas orgnicas e
ento extrair vrias vezes utilizando cido sulfrico 0,05
M. Alcalinizar lentamente usando hidrxido de amnio 6
M at pH 9 e ento extrair com cloreto de metileno at que
os alcaloides sejam totalmente retirados. Lavar as solues
orgnicas reunidas com 20 mL de gua. Evaporar a poro
orgnica at cerca de 5 mL. Dissolver o resduo com 20
mL de cido clordrico 0,02 M SV e secar o restante de
cloreto de metileno em banho-maria a 40 C. Titular o
excesso de cido clordrico com hidrxido de sdio 0,02
M SV. Utilizar 5 gotas de vermelho de metila SI, at a cor
mudar de rosa para amarelo. Calcular a porcentagem (p/p)
de alcaloides totais expressos em pilocarpina, segundo a
expresso:
em que
AT = alcaloides totais em %;
V
cido
= volume de cido clordrico 0,02 M usado em mL;
n = volume de hidrxido de sdio 0,02 M usado em mL;
m = massa da amostra em g.
Em recipientes de vidro mbar bem fechados, protegidos
da luz e calor.
l
1077
LACTATO DE CLCIO
Calcii lactas
C
6
H
10
CaO
6
; 218,22
C
6
H
10
CaO
6
.xH
2
O
lactato de clcio; 00275
Sal de clcio do cido 2-hidroxipropanico (1:2)
[814-80-2]
C
6
H
10
CaO
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P ou grnulos brancos,
praticamente inodoros. O penta-hidrato eforescente e
torna-se anidro a 120 C.
Solubilidade. O penta-hidrato solvel em gua e
praticamente insolvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. Responde s reaes do on clcio (5.3.1.1).
B. Responde s reaes do lactato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
cidos graxos volteis. Agitar cerca de 0,5 g com 1 mL de
cido sulfrico e aquecer. No h desprendimento de odor
de cidos graxos volteis.
Acidez. Titular 20 mL de uma soluo da amostra (1:20)
com hidrxido de sdio 0,1 M, utilizar fenolftalena SI
como indicador. A neutralizao atingida utilizando no
mais que 0,5 mL de hidrxido de sdio (0,45% como cido
lctico).
Perda por dessecao (5.2.9). Distribuir 1 a 2 g da amostra
uniformemente em camada, de no mximo 3 mm, em um
pesa-fltro adequado. Dessecar a 120 C, por 4 horas. A
perda de gua a seguinte: penta-hidratado, 20% a 30%;
tri-hidrato, 15% a 20%; monoidrato 5% a 8%; forma
anidra, no mximo 3%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, uma quantidade da amostra que contenha
cerca de 0,35 g de lactato anidro. Dissolver em 150 mL de
gua acidulada com 2 mL de cido clordrico diludo. Sob
agitao (de preferncia em agitador magntico), adicionar
cerca de 30 mL de edetato dissdico 0,05 M SV. Adicionar
15 mL de hidrxido de sdio SR, 0,3 g de indicador azul de
hidroxinaftol e continuar a titulao at a viragem ao azul.
Cada mL de edetato dissdico 0,05 M SV equivale a 10,91
mg de C
6
H
10
CaO
6
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Repositor de clcio e repositror eletroltico.
LAMIVUDINA
Lamivudinum
O
S
O H
N
N
O
NH
2
C
8
H
11
N
3
O
3
S; 229,26
lamivudina; 05152
4-Amino-1-[(2R,5S)-2-(hidroximetil)-1,3-oxatiolan-5-il]-
2(1H)-pirimidona
[134678-17-4]
C
8
H
11
N
3
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco a branco-
amarelado.
solvel em metanol e etanol, insolvel em acetona.
Facilmente solvel em cido clordrico 0,1 M e hidrxido
de sdio 0,1 M.
Faixa de fuso (5.2.2): 176 C a 178 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): 135 a 146, em
(p/v) em metanol.
IDENTIFICAO
l
observados no espectro de lamivudina SQR, preparado de
maneira idntica.
de 200 nm a 400 nm, da soluo amostra, obtida no mtodo
A. de Doseamento, exibe mximo em 270 nm, idntico ao
ENSAIOS DE PUREZA
utilizando cromatgrafo provido de detector ultravioleta a
dimetro interno, empacotada com -ciclodextrina ligada
a hidroxipropil ter (5 m); fuxo da fase mvel de 1 mL/
minuto.
Fase mvel: mistura de acetato de amnio 0,1 M e metanol
(95:5).
Soluo (1): dissolver 15 mg da amostra em Fase mvel e
Procedimento: injetar 20 L da Soluo (1), registrar os
cromatogramas e medir as reas sob os picos. A soma das
reas obtidas para os picos secundrios, exceto a rea sob
o pico principal, no representa mais do que 1,0% da rea
total dos picos obtidos. No considerar picos relativos ao
solvente.
gua (5.2.20.1). No mximo 2,0%.
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo I. No mximo
0,001% (10 ppm).
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
cerca de 50 mg de amostra e dissolver em gua. Completar
o volume para 100 mL com o mesmo solvente. Diluir
sucessivamente em gua at concentrao de 0,0015%
solues resultantes em 270 nm, utilizando gua para
8
H
11
N
3
O
3
S na amostra a
1 mL/minuto.
Tampo acetato pH 3,8: dissolver 1,9 g de acetato de
amnio em 900 mL de gua, ajustar o pH em (3,8 0,2)
com cido actico glacial e completar o volume para 1000
mL.
Fase mvel: mistura de Tampo acetato pH 3,8 e metanol
(95:5)
volumtrico de 50 mL. Dissolver com Fase mvel e
Soluo padro: transferir 20 mg de lamivudina SQR para
balo volumtrico de 50 mL. Dissolver com Fase mvel e
no maior que 2,0%.
8
H
11
N
3
O
3
S
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antirretroviral.
LAMIVUDINA COMPRIMIDOS
8
H
11
N
3
O
3
S. Os comprimidos
IDENTIFICAO
quantidade do p equivalente a 0,15 g de lamivudina
para gral, adicionar 10 mL de metanol, misturar e fltrar.
Evaporar o fltrado at resduo e dessecar em estufa, a 40
C, durante 2 horas. O resduo responde ao teste A. de
Identifcao da monografa de Lamivudina.
de 200 nm a 400 nm, da soluo amostra, obtida no mtodo
l
1079
CARACTERSTICAS
contendo 70 mL de gua e agitar at desintegrao total
do comprimido. Deixar em ultrassom por 15 minutos,
completar o volume com o mesmo solvente, homogeneizar
e fltrar. Prosseguir conforme descrito no mtodo A. de
Doseamento a partir de Diluir at concentrao....
Meio de dissoluo: gua; 900 mL
Tempo: 30 minutos
de C
8
H
11
N
3
O
3
leituras obtidas com a leitura da soluo de lamivudina
SQR a 0,0015% (p/v), preparada no mesmo solvente.
declarada de C
8
H
11
N
3
O
3
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.1). No mximo 3,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
0,15 g de lamivudina para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 70 mL de gua, deixar em ultrassom por 15
Homogeneizar e fltrar. Diluir at concentrao de 0,0015%
(p/v) utilizando gua como solvente. Preparar soluo
em 270 nm, utilizando gua para ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
8
H
11
N
3
O
3
S nos comprimidos a partir das
leituras obtidas.
de alta efcincia (5.2.17.4). Proceder conforme descrito no
mtodo B. de Doseamento da monografa de Lamivudina.
lamivudina para balo volumtrico de 100 mL e adicionar
50 mL da Fase mvel. Agitar mecanicamente por 10 minutos
e completar o volume com a Fase mvel. Homogeneizar e
fltrar. Transferir 10 mL para balo volumtrico de 50 mL,
8
H
11
N
3
O
3
S
nos comprimidos a partir das respostas obtidas para as
ROTULAGEM
LAMOTRIGINA
Lamotriginum
N
N
N NH
2
H
2
N
Cl
Cl
C
9
H
7
Cl
2
N
5
; 256,09
lamotrigina; 05153
6-(2,3-Diclorofenil)-1,2,4-triazina-3,5-diamina
[84057-84-1]
C
9
H
7
NCl
2
N
5
l
DESCRIO
branco.
Solubilidade. Facilmente solvel em dimetilformamida,
ligeiramente solvel em metanol, pouco solvel em
benzeno e acetona.
Faixa de fuso (5.2.2): 216 C a 218 C.
IDENTIFICAO
lamotrigina SQR, preparado de maneira idntica.
de 200 a 370 nm, de soluo a 0,002% (p/v) em cido
observado no espectro de soluo similar de lamotrigina
SQR.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel 60
F
254
, como suporte, e mistura de clorofrmio, metanol e
dimetilformamida (16:3,5:0,5), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): soluo da amostra a 1,0 mg/mL em metanol.
Soluo (2): soluo de lamotrigina SQR a 1,0 mg/mL em
metanol.
intensidade quele obtida com a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
amostra. Dessecar em estufa, a 60 C, sob presso reduzida,
DOSEAMENTO
comprimento e 4,6 mm de dimetro interno empacotada
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de trietilamina a 0,3% (v/v), com
pH ajustado para 4,0 com cido fosfrico a 10% (v/v), e
metanol (62:38).
da amostra em metanol para obter soluo a 0,5 mg/mL.
50 mL e completar o volume com Fase mvel, obtendo
soluo a 40 ug/mL.
de lamotrigina SQR em metanol para obter soluo a
0,5 mg/mL. Transferir 4 mL dessa soluo para balo
mvel, obtendo soluo a 40 ug/mL.
A efcincia da coluna no deve ser menor do que 5000
pratos tericos para o pico de lamotrigina. O fator de cauda
para o pico de lamotrigina no maior que 2,0. O desvio
e medir as reas sob os picos. Calcular a quantidade, em
mg, de C
9
H
7
NCl
2
N
5
na amostra a partir das respostas
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticonvulsivante.
LAMOTRIGINA COMPRIMIDOS
9
H
7
Cl
2
N
5
.
IDENTIFICAO
do p equivalente a 10 mg de lamotrigina. Prosseguir
conforme descrito no teste B. de Identifcao da
monografa de Lamotrigina.
CARACTERSTICAS
l
1081
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito no mtodo de Doseamento
da monografa de Lamotrigina. Preparar a Soluo amostra
Utilizar quantidade de p equivalente a 25 mg de
lamotrigina e transferir para balo volumtrico de 50 mL
com auxlio de 30 mL de metanol. Deixar em ultrassom por
fltrar e homogeneizar. Transferir 4 mL dessa soluo para
9
H
7
Cl
2
N
5
nos comprimidos, a partir das respostas obtidas com a
Soluo padro e com a Soluo amostra.
Em recipientes bem fechados e temperatura ambiente.
ROTULAGEM
LANATOSDEO C
Lanatosidum C
O
O
O
O
OH
O H
OH
OH
O
O
C H
3
O
O
O
OH
O H
O
O
O
CH
3
H
H
CH
3
OH
H
OH
C H
3
C H
3
C H
3
C
49
H
76
O
20
; 985,12
lanatosdeo C; 05156
(3, 5, 12)-3-[(O--D-Gl i copi ranosi l -(14)-O-
3-O-acet i l -2, 6-di desoxi --D-ri bo-hexopi ranosi l -
( 14) - O- 2, 6- di desoxi - - D- r i bo- hexopi r anosi l -
( 14) - 2, 6- di des oxi - - D- r i bo- hexopi r anos i l )
oxi]-12,14-diidroxi-card-20(22)-enoldeo
[17575-22-3]
C
49
H
76
O
20
DESCRIO
amarelo, higroscpico e inodoro.
l
em metanol, dioxana e piridina anidra, insolvel em
2% (p/v) em metanol.
IDENTIFICAO
lanatosdeo C SQR, preparado de maneira idntica.
C. Dissolver 0,5 mg da amostra em 0,2 mL de etanol a
60% (v/v). Adicionar 0,1 mL de cido 3,5-dinitrobenzoico
a 2% (p/v) em etanol e 0,1 mL de hidrxido de sdio 2 M.
D. Dissolver 5 mg da amostra em 5 mL de cido actico
glacial e adicionar 0,05 mL de cloreto frrico SR. Adicionar,
cuidadosamente, sem agitao, 2 mL de cido sulfrico.
Deixar em repouso. Um anel castanho no-avermelhado se
desenvolve na interface e uma colorao verde-amarelada
que muda para azul-esverdeada se difunde a partir do anel.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel G, como suporte, e mistura de tolueno, etanol,
cloreto de metileno e gua (60:30:20:1), como fase mvel.
Soluo (3): soluo de lanatosdeo C SQR a 2 mg/mL em
metanol.
Soluo (4): soluo de lanatosdeo C SQR a 0,3 mg/mL
em metanol.
em metanol.
em metanol.
secar ao ar. Nebulizar com cido sulfrico a 5% (v/v)
em etanol. No cromatograma obtido com a Soluo (1),
nenhuma mancha secundria mais intensa do que a
mancha principal obtida no cromatograma com a Soluo
(4) (1,5%), no mais que trs manchas secundrias
so mais intensas do que a mancha principal obtida no
cromatograma com a Soluo (6) (0,5%); e no mais
que uma destas manchas mais intensa do que a mancha
principal obtida com a Soluo (5) (1,0%).
amostra, em estufa a 105 C, sob presso reduzida, sobre
pentxido de fsforo, at peso constante. No mximo 7,5%.
DOSEAMENTO
50 mg de amostra e dissolver em etanol. Diluir para 50 mL
com o mesmo solvente. Diluir, sucessivamente, em etanol
na mesma concentrao, utilizando o mesmo solvente. A
5 mL de cada soluo diluda, adicionar 3 mL de picrato
de sdio alcalino SR e deixar em repouso, em banho de
gua, em temperatura entre 19 C e 21 C, por 40 minutos,
ao abrigo da luz. Medir as absorvncias das solues em
484 nm, utilizando mistura de 5 mL de etanol e 3 mL de
soluo de picrato de sdio alcalino SR para ajuste do zero.
49
H
76
O
20
obtidas.
Em recipientes de vidro bem fechados, protegidos da luz e
estocados em temperatura inferior a 10 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Glicosdeo cardiotnico.
LARANJA-AMARGA
Aurantii amari exocarpium
Citrus aurantium L. subsp. aurantium RUTACEAE
A droga vegetal constituda por pores secas do
exocarpo, correspondente ao favedo do fruto maduro,
isenta da maior parte do mesocarpo, que o tecido branco
esponjoso, correspondente ao albedo. Contm, no mnimo,
2,0% de leo voltil.
SINONMIA CIENTFICA
Citrus aurantium L. subsp. amara (L.) Engler
l
1083
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga tem odor forte,
aromtico, caracterstico, e sabor aromtico e muito
amargo.
DESCRIO MACROSCPICA
O exocarpo consiste em pores irregulares de at 8,0
cm de comprimento e at 4,0 cm de largura. A superfcie
externa, em vista frontal, amarelada, pardo-amarelada a
castanho-amarelada, grosseiramente ondulada e pontuada
por numerosas glndulas secretoras translcidas. A
superfcie interna, em vista frontal, branco-amarelada a
pardo-esbranquiada, rugosa e esponjosa. Em vista lateral
as glndulas so visveis na forma de cavidades.
DESCRIO MICROSCPICA
O favedo composto pela epiderme e pelos tecidos
parenquimticos adjacentes. O albedo formado pelo
parnquima esponjoso. O favedo, em vista frontal,
apresenta epiderme com clulas pequenas, de diferentes
formas, de paredes anticlinais retilneas, contendo gotas
lipdicas. Os estmatos so ciclocticos e situados um pouco
acima das demais clulas. Glndulas secretoras so visveis
por transparncia. Em seco transversal, a cutcula
espessa e lisa. A epiderme formada por clulas pequenas,
poligonais, com protoplasto denso, contendo cromoplastos
e gotas lipdicas. Subepidermicamente ocorrem quatro a
cinco camadas amarelo-ocre, colenquimatosas, compactas,
formadas por clulas pequenas, com contedo denso,
apresentando cromoplastos e gotas lipdicas. Abaixo
destas, ocorrem clulas parenquimticas maiores, de
paredes mais delgadas, com espaos intercelulares visveis,
grande quantidade de gotas lipdicas e de monocristais
prismticos de oxalato de clcio, de diferentes formas
e tamanhos. Nas primeiras camadas deste parnquima
ocorrem glndulas esquizolisgenas, circulares a ovides,
com at 1,0 mm de dimetro, em diferentes fases de
desenvolvimento e dispostas irregularmente. O parnquima
localizado lateralmente s glndulas formado por clulas
alongadas, compactas, com grande quantidade de gotas
lipdicas e cristais. Pequenos feixes vasculares colaterais
esto distribudos neste tecido. Elementos de vaso com
espessamento helicoidal so visveis longitudinalmente. O
parnquima mais interno frouxo e constitudo por clulas
hialinas de paredes delgadas e de diferentes formas e
tamanhos, contendo monocristais. O parnquima prximo
ao albedo apresenta clulas de maior volume, de paredes
mais espessas e menor quantidade de cristais. Cristais
de hesperidina so comuns em todos os parnquimas.
O albedo constitudo por parnquima esponjoso, com
clulas braciformes, com amplos espaos intercelulares e
com poucos cristais e gotas lipdicas.
a subespcie, menos os caracteres macroscpicos. P
de colorao pardo-clara. Com a adio de hidrato de
cloral so caractersticos: fragmentos de epiderme do
favedo com clulas conforme descritas, em vista frontal;
fragmentos de epiderme do favedo com estmatos, em
vista frontal; fragmentos do favedo, em seco transversal,
apresentando epiderme e parnquima colenquimatoso;
fragmentos de parnquima colenquimatoso, em seco
transversal; fragmentos do parnquima do favedo, com
clulas contendo gotas lipdicas, em seco transversal;
fragmentos do parnquima do favedo, em seco
transversal, contendo gotas lipdicas, monocristais de
oxalato de clcio e cristais de hesperidina; fragmentos
do parnquima do favedo, em seco transversal, com
pores de feixes vasculares, observados em vista
longitudinal; fragmentos do parnquima do favedo, em
seco transversal, contendo gotas lipdicas e cristais
de hesperidina; fragmentos do favedo com pores de
glndulas secretoras, em seco transversal; fragmentos
do parnquima do favedo, em seco transversal, com
poro de feixe vascular, observado em vista longitudinal;
fragmentos de parnquima com cristais de hesperidina;
idioblastos cristalferos do favedo, com monocristais
de oxalato de clcio, em seco transversal; cristais de
oxalato de clcio isolados; cristais de hesperidina isolados,
em forma de agulha, somente observados com adio de
lugol; pores de elementos traqueais com espessamento
helicoidal, em vista longitudinal; fragmentos do albedo, em
pequena quantidade, em seco transversal ou longitudinal.
IDENTIFICAO
254
,
gua, cido frmico e acetato de etila (10:15:75), como
preparadas recentemente, como descrito a seguir.
Soluo (1): adicionar a 1 g da droga moda (710 m), 10 mL
de metanol. Aquecer em banho-maria a, aproximadamente,
60 C, por 10 minutos, agitando frequentemente. Esfriar e
fltrar.
Soluo (2): dissolver 1 ug de naringina e 10,0 ug de cido
cafeico em 1 mL de metanol.
deixar secar ao ar. Em seguida, nebulizar a placa com
difenilborato de aminoetanol SR (Reagente Natural A)
a 1% (p/v) em metanol e observar sob luz ultravioleta
(365 nm). A mancha amarelo fuorescente obtida na parte
mediana do cromatograma com a Soluo (1), com Rf de
aproximadamente 0,6, corresponde em posio e colorao
quela obtida com a Soluo (2), referente naringina. A
mancha azul fuorescente claro obtida na parte superior
prxima do fronte do cromatograma com a Soluo (1),
com Rf de aproximadamente 0,9, corresponde em posio
e colorao quela obtida com a Soluo (2), referente ao
cido cafeico. Entre as manchas referentes naringina e
ao cido cafeico, so obtidas duas manchas fuorescentes
claras com a Soluo (1), sendo a mais prxima
naringina correspondente hesperidina. Outras manchas
l
so observadas na metade inferior do cromatograma: de
colorao amarelo fuorescente (Rf de aproximadamente
0,58), vermelho fuorescente (Rf de aproximadamente
0,5), e outras mais abaixo de colorao azul e laranja
fuorescente.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.2.20.2). Determinar em 20,0 g da amostra
pulverizada (355 m). No mnimo 10%.
DOSEAMENTO
leos volteis
destilao. Adicionar 0,5 mL de xileno pela abertura lateral
k. Utilizar planta seca reduzida a p (710 um). Proceder
15 g da droga em p. Destilar por 90 minutos.
Em recipiente bem fechado, ao abrigo da luz, calor e
umidade.
l
1085
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Citrus aurantium L. subsp. aurantium
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 1 cm (rgua 1); em B a 0,5 cm (rgua 2); em C a 100 m (rgua 3); em D a
100 m (rgua 4).
A representao esquemtica da superfcie externa da droga, em vista frontal. B representao esquemtica da droga, em seco transversal: albedo
(alb); favedo (fa); glndula secretora (gla). C detalhe de uma poro da epiderme do favedo, em vista frontal: clula fundamental da epiderme (cfe);
estmato (es); gota lipdica (gl). D detalhe de poro da droga, em seco transversal: albedo (alb); cristal de hesperidina (ch); cristal de oxalato de
clcio (cox); cutcula (cu); elemento de vaso com espessamento helicoidal (eh); espao intercelular (ei); epiderme (ep); epitlio secretor (eps); estmato
(es); foema (f); favedo (fa); feixe vascular (fv); gota lipdica (gl); glndula secretora (gla); idioblasto cristalfero (ic); parnquima (p); parnquima
colenquimatoso (pco); parnquima esponjoso (pj); xilema (x).
l
figura 2 Aspectos microscpicos do p em Citrus aurantium L. subsp. aurantium
______________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A at G, I at O e R at T a 100 m (rgua 1); em H e P a 100 m (rgua 2); em
Q a 100 m (rgua 3).
A fragmento do favedo com epiderme, parnquimas e restos de epitlio secretor, em seco transversal: cristal de hesperidina (ch); cutcula (cu);
epiderme (ep); epitlio secretor (eps); gota lipdica (gl); glndula secretora (gla); idioblasto cristalfero (ic); parnquima (p); parnquima colenquimatoso
(pco). B fragmento de parnquima do favedo, em seco transversal: cristal de hesperidina (ch); cristal de oxalato de clcio (cox); gota lipdica (gl);
idioblasto cristalfero (ic). C poro de elementos traqueais com espessamento helicoidal, em vista longitudinal.D cristais de oxalato de clcio
isolados. E fragmento do favedo, em seco transversal: cristal de hesperidina (ch); cristal de oxalato de clcio (cox); cutcula (cu); epiderme (ep);
gota lipdica (gl); idioblasto cristalfero (ic); parnquima (p); parnquima colenquimatoso (pco). f fragmento de parnquima do favedo, em seco
transversal, com poro de feixe vascular, observado em vista longitudinal: elemento de vaso com espessamento helicoidal (eh); fbra (fb); gota
lipdica (gl); parnquima (p). G cristal de hesperidina, somente observado com adio de lugol. H fragmento de parnquima do favedo, em seco
transversal: espao intercelular (ei); gota lipdica (gl). I fragmento de parnquima do favedo em seco transversal, contendo gotas lipdicas: gota
lipdica (gl); ncleo (nu). J fragmento da epiderme, em vista frontal: gota lipdica (gl). L fragmento do albedo, em vista frontal: cristal de hesperidina
(ch); espao intercelular (ei); parnquima esponjoso (pj). M fragmento de parnquima do favedo, em seco transversal: cristal de hesperidina (ch);
l
1087
cristal de oxalato de clcio (cox); gota lipdica (gl); idioblasto cristalfero (ic). N fragmento de parnquima do favedo, em seco transversal: cristal de
oxalato de clcio (cox); gota lipdica (gl); idioblasto cristalfero (ic). O fragmento do favedo e do albedo, em seco transversal: albedo (alb); espao
intercelular (ei); favedo (fa); gota lipdica (gl); parnquima (p); parnquima esponjoso (pj). P fragmento de epiderme do favedo com estmato, em
vista frontal: estmato(es). Q fragmento do parnquima colenquimatoso, em seco transversal. R fragmento do albedo, em seco transversal:
espao intercelular (ei); gota lipdica (gl); parnquima esponjoso (pj). S idioblastos cristalferos do favedo, em seco transversal: cristal de oxalato
de clcio (cox). T fragmento do favedo, com clulas parenquimticas de paredes espessadas, em seco transversal.
LAURILSULfATO DE SDIO
Natrii laurilsulfas
C H
3
O
S
ONa
O O
C
12
H
25
NaO
4
S; 288,38
laurilsulfato de sdio; 05178
Sal de sdio do ster monododeclico do cido sulfrico
(1:1)
[151-21-3]
O laurilsulfato de sdio uma mistura de alquilsulfatos de
sdio constituda principalmente pelo sal de sdio do ster
monododeclico do cido sulfrico (1:1) - laurilsulfato de
sdio. Contm, no mnimo, 85,0 % de alquilsulfatos de
sdio, expressos em C
12
H
25
NaO
4
S, em relao substncia
dessecada. O teor total de cloreto de sdio e de sulfato de
sdio , no mximo, 8,0%.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P ou cristal, branco ou
ligeiramente amarelado. Leve odor caracterstico.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua formando
soluo ou mistura opalescente, pouco solvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 0,1 g da amostra em 10 mL de gua e agitar.
Forma-se espuma abundante.
B. Misturar 0,1 mL da soluo obtida no teste A. de
Identifcao com 0,1 mL de cloreto de metiltionnio a
0,1% (p/v) e 2 mL de cido sulfrico diludo. Acrescentar
2 mL de cloreto de metileno e agitar. Desenvolve-se
colorao azul intensa na camada do cloreto de metileno.
C. Misturar cerca de 10 mg da amostra com 10 mL de
etanol. Aquecer at ebulio em banho-maria, agitando
frequentemente. Filtrar imediatamente e evaporar o etanol.
Dissolver o resduo em 8 mL de gua, acrescentar 3 mL
de cido clordrico SR, evaporar a soluo at metade do
seu volume e deixar esfriar. Separar por fltrao os lcoois
graxos solidifcados. Ao fltrado acrescentar 1 mL de
cloreto de brio a 6,1% (p/v). Forma-se precipitado branco
cristalino.
D. Uma soluo da amostra a 10% (p/v) responde s
E. Uma soluo da amostra a 10% (p/v) acidifcada com
cido clordrico e fervida brandamente durante 20 minutos
responde s reaes do on sulfato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Alcalinidade. Pesar exatamente, cerca de 1 g da amostra e
dissolver em 100 mL de gua isenta de dixido de carbono.
Adicionar 0,1 mL de vermelho de fenol SI e titular com
cido clordrico 0,1 M. Devem ser gastos, no mximo, 0,6
mL de cido clordrico 0,1 M.
lcoois no esterifcados. Pesar, exatamente, cerca de 10
g da amostra e dissolver em 100 mL de gua, acrescentar
100 mL de etanol e extrair a soluo trs vezes com 50 mL
de lcool n-amlico, de cada vez. Se necessrio, adicionar
cloreto de sdio para facilitar a separao das duas fases.
Reunir as fases orgnicas e lavar trs vezes com 50 mL de
gua, de cada vez. Eliminar a gua da soluo orgnica
com sulfato de sdio anidro, fltrar e evaporar em banho de
gua at eliminar todo o solvente. Aquecer o resduo a 105
C durante 15 min e arrefecer. A massa do resduo deve ser
de, no mximo, 4%.
lcoois totais. Pesar, exatamente, cerca de 5g da amostra
para um frasco de Kjeldahl de 800 mL. Adicionar 150 mL
de gua, 50 mL de cido clordrico e algumas prolas de
ebulio. Acoplar o frasco de Kjeldahl em um condensador
de refuxo. Aquecer cuidadosamente para evitar formao
excessiva de espuma e ferver por 4 horas. Arrefecer, lavar o
condensador com ter etlico, coletando o ter etlico para o
frasco, e transferir o contedo para um funil de separao.
Lavar o frasco duas vezes com ter etlico e adicionar as
lavagens ao funil de separao. Extrair a soluo com
duas pores de 75 mL de ter etlico. Em um bquer
previamente pesado, reunir os extratos combinados de ter,
evaporar em banho-maria e secar o resduo a 105 C por 30
minutos. Resfriar e pesar. O resduo representa o total de
lcoois. A massa do resduo deve ser de, no mnimo, 59,0%
da massa de amostra utilizada.
Cloreto de sdio. Pesar exatamente, cerca de 0,5 g da
amostra e dissolver em 50 mL de gua. Adicionar cido
ntrico diludo (1:20), gota a gota, at a soluo apresentar-
se neutra ao papel tornassol. Adicionar 2 mL de cromato de
potssio SR e titular com nitrato de prata 0,1 M SV. Cada
cloreto de sdio.
Sulfato de sdio. Pesar, exatamente, cerca de 1 g de
amostra e transferir para um bquer de 250 mL. Adicionar
35 mL de gua, aquecer para dissolver. Acrescentar
soluo aquecida 2 mL de cido ntrico M, misturar e
adicionar 50 mL de etanol. Aquecer a soluo at a fervura.
Adicionar lentamente, sob agitao, 10 mL de soluo de
nitrato de chumbo a 3,31% (p/v). Cobrir o bquer com
vidro de relgio, ferver brandamente por 5 minutos e
l
deixar em repouso. Se o sobrenadante estiver turvo, deixar
em repouso mais 10 minutos, aquecer at fervura e deixar
novamente em repouso. Quando a soluo estiver quase
fervendo, decantar o mximo de lquido possvel atravs
de papel fltro quantitativo de 9 cm de dimetro, faixa
preta, fltrao rpida, isento de cinzas. Lavar quatro vezes
por decantao, utilizando cada vez 50 mL de etanol a 50%
(v/v) e levar a mistura fervura. Transferir o papel fltro
para o bquer original, e imediatamente adicionar 30 mL
de gua, 20 mL de edetato dissdico 0,05 M SV, e 1 mL de
tampo cloreto de amnio pH 10,7. Aquecer at dissolver
o precipitado. Aguardar resfriamento. Adicionar 0,2 mL de
negro de eriocromo T SI e titular com sulfato de zinco 0,05
M SV. Cada mL de edetato dissdico 0,05 M equivale a
7,102 mg de sulfato de sdio.
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo III. Pesar
exatamente, cerca de 1g de amostra. No mximo 0,002%
(20 ppm).
amostra em estufa a 105 C, por 2 horas. No mximo 3%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 0,115 g da amostra, dissolver
em 20 mL gua, aquecer se necessrio. Transferir para
mesmo solvente. Retirar alquota de 20 mL dessa soluo
e transferir para erlenmeyer de 125 mL, adicionar 15 mL
de clorofrmio e 10 mL de brometo de dimdio-azul de
sulfano SR. Titular com cloreto de benzetnio 0,004 M
SV, com agitao enrgica, at mudana da cor rosa para
azul-acinzentado da camada clorofrmica. Antes de cada
adio do titulante, verifcar a completa separao das
camadas. Cada mL de cloreto de benzetnio 0,004 M SV
equivale a 1,154 mg de alquilsulfatos de sdio, calculados
em C
12
H
25
NaO
4
S.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Tensoativo aninico
LEfLUNOMIDA
Lefunomidum
F
3
C
N
O
N
O
CH
3
H
C
12
H
9
F
3
N
2
O
2
; 270,21
lefunomida; 05192
5-Metil-N-[4-(trifuormetil)fenil]-4-isoxazolcarboxamida
[75706-12-6]
C
12
H
9
F
3
N
2
O
2,
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco. Apresenta
polimorfsmo.
metanol, etanol, lcool isoproplico e acetato de etila.
Faixa de fuso (5.2.2): 165 C a 167 C.
IDENTIFICAO
da amostra dispersa em brometo de potssio apresenta
observados no espectro de lefunomida SQR.
de 200 a 370 nm, da soluo amostra a 0,001% (p/v) em
mistura de acetonitrila e gua (50:50), exibe mximo em
260 nm, idntico ao observado no espectro de soluo
similar de lefunomida SQR.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel 60 F
254
,
como suporte, e mistura de cloreto de metileno e acetato
de etila (97:3), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
Soluo (1): soluo a 0,1 mg/mL de amostra em acetato
de etila.
Soluo (2): soluo a 0,1 mg/mL de lefunomida SQR em
acetato de etila.
l
1089
ENSAIOS DE PUREZA
por 2 horas. No mximo 1%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
comprimento e 4,6 mm de dimetro interno compactada
um), mantida temperatura de 25 C, fuxo da Fase mvel
de 1,0 mL/minuto.
pesada, para balo volumtrico de 100 mL com auxlio de
60 mL de Fase mvel. Agitar se necessrio, completar o
volume com o mesmo solvente e homogeneizar. Transferir
completar o volume com Fase mvel (injetar essa soluo
imediatamente ou, no mximo, 24 horas aps a preparao
se a mesma for mantida sob refrigerao).
de lefunomida SQR em Fase mvel para obter soluo a 40
ug/mL (injetar essa soluo imediatamente ou, no mximo,
24 horas aps a preparao se a mesma for mantida sob
refrigerao).
da coluna no deve ser menor do que 3000 pratos tericos
para o pico da lefunomida. O fator de cauda no superior
a 2. O desvio padro relativo das reas de replicatas dos
picos registrados no deve ser maior que 2,0%.
12
H
9
F
3
N
2
O
2

Em recipientes hermticos, protegidos da luz e em
refrigerador.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antirreumtico.
LEfLUNOMIDA COMPRIMIDOS
12
H
9
F
3
N
2
O
2
. Os comprimidos
IDENTIFICAO
de p equivalente a 10 mg de lefunomida e transferir
de mistura de acetonitrila e gua (50:50). Agitar por 10
Homogeneizar e fltrar. Transferir 5 mL dessa soluo
com mistura de acetonitrila e gua (50:50). O espectro de
absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa de 200 nm a 370
nm, dessa soluo, exibe mximo em 260 nm, idntico ao
observado no espectro de lefunomida SQR, preparado de
maneira idntica.
de p equivalente a 5 mg de lefunomida, dissolver em 50
mL de acetato de etila, homogeneizar e fltrar. Prosseguir
conforme descrito no teste C. de Identifcao da
monografa de Lefunomida.
CARACTERSTICAS
Meio de dissoluo: gua desaerada, 1000 mL, para
comprimidos contendo 10 ou 20 mg.
Tempo: 30 minutos
de dissoluo e fltrar imediatamente atravs de fltro
com porosidade 0,45 um e diluir, se necessrio, com o
Meio de dissoluo, at concentrao adequada. Medir
as absorvncias das solues em 260 nm (5.2.14),
de C
12
H
9
F
3
N
2
O
2
dissolvida no meio, comparando as
leituras obtidas com a da soluo de lefunomida SQR na
l
concentrao de 10 ug/mL, preparada no mesmo solvente
(acetonitrila pode ser utilizada para dissolver a lefunomida
em volume que no ultrapasse 2% na soluo fnal).
declarada de C
12
H
9
F
3
N
2
O
2
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito no mtodo de Doseamento da
monografa de Lefunomida. Preparar a Soluo amostra
lefunomida para balo volumtrico de 50 mL com auxlio
de 30 mL de Fase mvel. Agitar mecanicamente por 15
minutos, completar o volume com o mesmo solvente,
homogeneizar e fltrar. Transferir 5 mL dessa soluo para
e medir as reas dos picos. Calcular a quantidade de
C
12
H
9
F
3
N
2
O
2
ROTULAGEM
LEVODOPA
Levodopum
COOH
O H
O H
NH
2
C
9
H
11
NO
4
; 197,19
levodopa; 05249
3-Hidroxi-L-tirosina
[59-92-7]
C
9
H
11
NO
4
DESCRIO
branco.
insolvel em etanol e ter etlico. Facilmente solvel
em cido clordrico M e ligeiramente solvel em cido
clordrico 0,1 M.
Poder rotatrio (5.2.8): -1,27 a -1,34, em relao
substncia dessecada. Dissolver 0,2 g da amostra e 5 g
de metenamina em 10 mL de cido clordrico M. Diluir
para 25 mL com o mesmo cido e homogeneizar. Deixar a
soluo ao abrigo da luz (25 C) por 3 horas.
IDENTIFICAO
observados no espectro de levodopa SQR, preparado de
maneira idntica.
observado no espectro de soluo similar de levodopa
SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
(p/v) em gua livre de dixido de carbono, obtida aps 15
minutos de agitao da amostra no solvente.
Absoro de luz. O espectro de absoro no ultravioleta
(5.2.14), na faixa de 230 nm a 350 nm, de soluo a 0,003%
(p/v) em cido clordrico 0,1 M, exibe mximo em 280 nm.
A absortividade especfca, A(1%, 1 cm), de 137 a 147,
em 280 nm, em cido clordrico 0,1 M.
placa de celulose, como suporte, e mistura de cido actico
glacial, gua e 1-butanol, (25:25:50), como fase mvel.
Soluo (1): dissolver 0,1 g da amostra em 5 mL de cido
frmico anidro e diluir para 10 mL com metanol. Preparar
extemporaneamente.
Soluo (3): dissolver 30 mg de tirosina em 1 mL de cido
frmico anidro e diluir para 100 mL com metanol. Misturar
1 mL desta soluo com 1 mL da Soluo (1).
deixar secar sob ar quente. Nebulizar com uma mistura
recentemente preparada de cloreto frrico SR e ferricianeto
de potssio SR (1:1). Examinar imediatamente. Qualquer
l
1091
mancha secundria, diferente da mancha principal, obtida
no cromatograma com a Soluo (1), no mais intensa que
aquela obtida com a Soluo (2) (0,5%). O teste somente
ser vlido se o cromatograma obtido com a Soluo
(3) apresentar, acima da mancha principal, uma mancha
distinta, mais intensa que a mancha do cromatograma
obtido com a Soluo (2).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo III. Preparar o
padro utilizando 2 mL de Soluo padro de chumbo (10
ppm Pb). No mximo 0,001% (10 ppm).
mximo 1%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Pesar, exatamente, cerca de 0,18 g
da amostra e dissolver em 5 mL de cido frmico anidro.
Aquecer se necessrio. Deixar esfriar e acrescentar 25 mL
de cido actico glacial e 25 mL de dioxana. Titular com
cido perclrico 0,1 M SV, utilizando 0,1 mL de cloreto
de metilrosanilnio SI, at mudana de cor para verde.
mg de C
9
H
11
NO
4
.
de alta efcincia (5.2.17.4). Realizar o procedimento ao
abrigo da luz e manter as solues temperatura de 10 C
at a injeo. Utilizar cromatgrafo provido de detector
quimicamente ligada a grupo octadecilsilano (5 um),
mantida temperatura ambiente, fuxo da Fase mvel de
1,0 mL/minuto.
Diluente: mistura de cido trifuoractico e gua (1:1000).
Fase mvel: mistura do Diluente e tetraidrofurano (97:3).
da amostra em Diluente obtendo soluo a 0,4 mg/mL
de levodopa SQR em Diluente obtendo soluo a 0,4 mg/
mL.
pesada de levodopa SQR e L-tirosina SQR em Diluente
para obter soluo a 10 g/mL de cada substncia.
Injetar replicatas de 20 uL da Soluo de resoluo.
Os tempos de reteno relativos so cerca de 1,0 para a
levodopa e 1,3 para a L-tirosina. A resoluo entre os picos
da levodopa e da L-tirosina no deve ser menor que 3,0. O
fator de cauda para o pico da levodopa no maior que 2,0.
9
H
11
NO
4
na amostra
amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antiparkinsoniano.
LEVONORGESTREL
Levonorgestrelum
O
H
H
H
OH
CH
H
C H
3
C
21
H
28
O
2
; 312,45
levonorgestrel; 05279
(17)-13-Etil-17-hidroxi-18,19-dinorpregn-4-en-20-in-3-
ona
[797-63-7]
C
21
H
28
O
2
DESCRIO
branco.
ligeiramente solvel em cloreto de metileno, pouco solvel
em etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 232 C a 239 C. A faixa entre o
incio e o fm da fuso no excede 4 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -30 a -35. Determinar
em soluo a 2% (p/v) em clorofrmio.
IDENTIFICAO
l
observados no espectro de levonorgestrel SQR, preparado
de maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
utilizando slica-gel G, como suporte, e mistura de
acetona e clorofrmio (20:80), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, 10 mL de cada uma das solues,
Soluo (1): dissolver 0,5 g da amostra em clorofrmio e
Soluo (2): transferir 2,5 mL da Soluo (1) para
clorofrmio. Transferir 2,5 mL da soluo anterior para
mesmo solvente.
clorofrmio.
Soluo (4): dissolver 5 mg de levonorgestrel SQR e 5 mg
de etinilestradiol SQR em clorofrmio e diluir para 50 mL
secar ao ar. Nebulizar com cido fosfomolbdico a 10%
(p/v) em lcool n-proplico. Aquecer a placa entre 100
C e 105 C por 15 minutos e examinar imediatamente.
que aquela obtida com a Soluo (2) (0,5%) e, no mximo,
duas destas manchas so mais intensas que aquela obtida
com a Soluo (3) (0,2%). O teste somente ser vlido se
o cromatograma obtido com a Soluo (4) apresentar duas
manchas principais nitidamente separadas.
Limite do grupo etinila. Proceder conforme descrito no
mtodo A. de Doseamento. Cada mililitro de hidrxido de
sdio 0,1 M SV equivale a 2,503 mg de etinila. No mnimo,
7,81% e, no mximo, 8,18%.
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
em 45 mL de tetraidrofurano. Adicionar 10 mL de nitrato
de prata a 10% (p/v) em gua. Aps 1 minuto, titular com
hidrxido de sdio 0,1 M SV determinando o ponto fnal
as correes necessrias. Cada mL de hidrxido de sdio
21
H
28
O
2
.
B. Por Espectrofotometria de absoro no ultravioleta
(5.2.14). Pesar, exatamente, cerca de 100 mg da amostra
e dissolver em etanol. Diluir, sucessivamente, em etanol,
utilizando etanol para o ajuste do zero. Calcular o teor de
C
21
H
28
O
2
na amostra, a partir das leituras obtidas.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticoncepcional.
LEVONORGESTREL E
ETINILESTRADIOL COMPRIMIDOS
quantidade declarada de levonorgestrel (C
21
H
28
O
2
) e
etinilestradiol (C
20
H
24
O
2
).
IDENTIFICAO
254
,
como suporte, e mistura de metanol e clorofrmio (1:99),
descritas a seguir.
Soluo (1): pesar e pulverizar 15 comprimidos e extrair
com 30 mL de acetona. Filtrar e evaporar at secura.
Dissolver o resduo obtido em 1 mL de clorofrmio.
Soluo (2): preparar soluo a 0,75 mg/mL de
levonorgestrel SQR em clorofrmio.
Soluo (3): preparar soluo a 0,45 mg/mL de
etinilestradiol SQR em clorofrmio.
ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm). As manchas
referentes ao levonorgestrel e ao etinilestradiol obtidas
com a Soluo (1) correspondem em posio e cor quelas
principais obtidas com as Solues (2) e (3). Nebulizar com
l
1093
cido p-toluenossulfnico a 2% (p/v) em gua. Aquecer a 110
C por 10 minutos. Examinar sob luz ultravioleta (365 nm).
As manchas referentes ao levonorgestrel e etinilestradiol
aparecem com colorao azul.
B. Os tempos de reteno dos picos principais do
correspondem queles dos picos principais da Soluo
padro.
CARACTERSTICAS
Meio de dissoluo: soluo de polissorbato 80 a 0,0005%
(p/v) em gua, 500 mL
Tempo: 60 minutos
de detector ultravioleta a 247 nm (para determinao de
levonorgestrel), e de detector espectrofuoromtrico (para
determinao de etinilestradiol) com comprimentos de
onda de excitao a 285 nm e de emisso a 310 nm; coluna
de 150 mm de comprimento e 4,0 mm de dimetro interno,
octadecilsilano (5 m a 10 m), mantida temperatura
Soluo amostra: aps o teste, retirar alquota do meio de
dissoluo, fltrar em fltro de polivinilideno, descartando
os primeiros mililitros. Para comprimidos no revestidos
retirar alquotas do meio de dissoluo nos tempos de 30
minutos (tomando o cuidado de repor o volume de cada
cuba) e 60 minutos. Para drgeas realizar este procedimento
somente no tempo de 60 minutos.
Soluo padro: preparar soluo contendo norgestrel
padro e etinilestradiol SQR em Meio de dissoluo,
de modo a obter concentraes prximas quelas de
levonorgestrel e etinilestradiol, respectivamente, da
Soluo amostra.
Injetar replicatas de 100 mL da Soluo padro. Os tempos
de reteno relativos so cerca de 0,7 para etinilestradiol e
1,0 para levonorgestrel. O desvio padro relativo das reas
3,0%.
Procedimento: injetar, separadamente, 100 mL das Solues
reas sob os picos. Calcular a quantidade de levonorgestrel
(C
21
H
28
O
2
) e etinilestradiol (C
20
H
24
O
2
) dissolvida no meio
Soluo amostra.
Tolerncia: para comprimidos no revestidos, no menos
que 80% (Q) da quantidade declarada de levonorgestrel
(C
21
H
28
O
2
) e 75% (Q) da quantidade declarada de
etinilestradiol (C
20
H
24
O
2
) se dissolvem em 60 minutos. Para
drgeas, no menos que 60% (Q) da quantidade declarada
de levonorgestrel (C
21
H
28
O
2
) e 60% (Q) da quantidade
declarada de etinilestradiol (C
20
H
24
O
2
) se dissolvem em 60
minutos.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
com slica quimicamente ligada a octadecilsilano (5 m),
1,5 mL/minuto.
Diluente: mistura de gua e acetonitrila (40:60).
levonorgestrel para tubo de centrfuga e adicionar 4 mL do
Diluente. Aquecer a 60 C por 25 minutos, agitar e deixar
em ultrassom por mais 25 minutos. Esfriar, centrifugar e
usar o sobrenadante lmpido.
Soluo padro: preparar soluo de levonorgestrel SQR e
etinilestradiol SQR no Diluente contendo, respectivamente,
0,625 mg e 0,125 mg por mililitro. Transferir 5 mL dessa
volume com o Diluente, obtendo soluo contendo 62,5 mg
de levonorgestrel e 12,5 mg de etinilestradiol por mililitro.
reas sob os picos. Calcular a quantidade de levonorgestrel
(C
21
H
28
O
2
) e etinilestradiol (C
20
H
24
O
2
) nos comprimidos
Soluo amostra.
l
ROTULAGEM
LIDOCANA
Lidocainum
CH
3
CH
3
N
N
H
O
CH
3
CH
3
C
14
H
22
N
2
O; 234,34
lidocana; 05313
2-(Dietilamino)-N-(2,6-dimetilfenil)acetamida
[137-58-6]
C
14
H
22
N
2
DESCRIO
branco.
solvel em etanol e em cloreto de metileno, solvel em
ter etlico. Solvel em cido clordrico diludo.
IDENTIFICAO
for realizado o teste A.
observados no espectro de lidocana SQR, preparado de
maneira idntica.
B. Dissolver, aquecendo, 0,2 g da amostra em mistura de 0,5
mL de cido clordrico diludo e 10 mL de gua. Adicionar
10 mL de cido pcrico a 1 % (p/v). O precipitado lavado
com gua e dessecado apresenta temperatura de fuso
(5.2.2) prximo a 230
o
C, com decomposio.
C. Em cerca de 5 mg da amostra, adicionar 0,5 mL de
cido ntrico fumegante. Evaporar at secura em banho-
maria, esfriar e dissolver o resduo em 5 mL de acetona.
Adicionar 0,2 mL de hidrxido de potssio etanlico 0,5
M. Desenvolve-se colorao verde.
D. Dissolver cerca de 0,1 g da amostra em 1 mL de etanol
e adicionar 0,5 mL de soluo a 10 % (p/v) de nitrato de
cobalto. Forma-se precipitado verde-azulado.
ENSAIOS DE PUREZA
cido clordrico diludo e diluir para 10 mL com gua. A
2,6 dimetilanilina. Dissolver 0,25 g da amostra em metanol
e diluir para 10 mL com o mesmo solvente. A 2 mL da soluo
anterior, adicionar 1 mL de p-dimetilaminobenzaldedo a 1
% (p/v) em metanol e 2 mL de cido actico glacial. Deixar
em repouso por 10 minutos. Qualquer colorao amarela
na soluo em exame no mais intensa do que a de uma
soluo referncia, preparada simultaneamente, utilizando
2 mL de 2,6-dimetilanilina a 0,00025 % (p/v) em metanol.
Cloretos (5.3.2.1). Dissolver 1,4 g da amostra em mistura
de 3 mL de cido ntrico e 12 mL de gua e proceder
mximo 0,0035 % (35 ppm).
Sulfato (5.3.2.2). Dissolver 0,5 g da amostra em 5 mL de
etanol e diluir para 25 mL com gua. No mximo 0,1 %
(1000 ppm).
No mximo 0,1%.
gua (5.2.20.1). Determinar em 1 g de amostra. No
mximo 1,0 %.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Titulao em meio no
aquoso (5.3.3.5). Dissolver 0,2 g da amostra, dessecada
a vcuo sob slica-gel por 24 horas, em 50 mL de cido
actico glacial e agitar at completa dissoluo. Titular
com cido perclrico 0,1 M SV, determinando o ponto fnal
M equivale a 23,434 mg de C
14
H
22
N
2
O.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anestsico local.
l
1095
LORATADINA
Loratadinum
N
N
O CH
3
O
Cl
C
22
H
23
ClN
2
O
2
; 382,88
loratadina; 05416
ster etlico do cido 4-(8-cloro-5,6-diidro-11H-
benzo[5, 6]ciclohepta[1, 2-b]piridin-11-ilideno)-1-
piperidinacarboxlico
[79794-75-5]
C
22
H
23
ClN
2
O
2
DESCRIO
acetona, clorofrmio, metanol e tolueno.
Faixa de fuso (5.2.2): 132 C a 137 C.
IDENTIFICAO
observados no espectro de loratadina SQR, preparado
de maneira idntica. Se os espectros obtidos no forem
idnticos, dissolver as substncias, separadamente, em
acetona e evaporar at secura. Obter novos espectros com
os resduos.
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias relacionadas.
Nota: de acordo com a rota de sntese, realizar o Teste 1 ou
o Teste 2. O Teste 2 recomendado se o 4,8-dicloro-6,11-
diidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]piridin-11-ona
uma substncia relacionada potencial.
Teste 1. Proceder conforme descrito em Cromatografa a
lquido de alta efcincia (5.2.17.4). Utilizar cromatgrafo
provido de detector ultravioleta a 254 nm, coluna de
empacotada com slica ligada a grupos octilsilano (5 m),
mantida a temperatura entre 25 C e 35 C, fuxo da Fase
Fase mvel: mistura de fosfato de potssio dibsico anidro
0,01 M, preparado conforme descrito no mtodo B. de
Doseamento, metanol e acetonitrila (7:6:6). Ajustar com
cido fosfrico para um pH de 7,2.
Diluente: transferir 400 mL de cido clordrico 0,05 M e 80
mL de fosfato de potssio dibsico anidro 0,6 M, preparado
conforme descrito no mtodo B. de Doseamento, para
mistura de metanol e acetonitrila (1:1). Homogeneizar.
Soluo (1): soluo a 0,8 g/mL de loratadina SQR em
Diluente.
Soluo (2): transferir, exatamente, cerca de 40 mg da
amostra para balo volumtrico de 100 mL. Dissolver,
com Diluente.
para 4-(8-cloro-11-fuoro-6,11-diidro-5H-benzo[5,6]
ciclohepta[1,2-b]piridin-11-il)-1-piperidinacarboxilato de
etila e 1,00 para loratadina. O desvio padro relativo das
4,0%.
soluo, registrar os cromatogramas e medir as reas
de todos os picos da Soluo (2) e do pico principal da
Soluo (1). Calcular a porcentagem de cada impureza
em relao rea sob o pico principal da Soluo (1) e os
fatores de resposta para as impurezas (o fator de resposta
para 4-(8-cloro-11-fuoro-6,11-diidro-5H-benzo[5,6]
ciclohepta[1,2-b]piridin-11-il)-1-piperidinacarboxilato de
etila 0,25). No mximo 0,2% de 4-(8-cloro-11-fuoro-
6,11-diidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]piridin-11-
il)-1-piperidinacarboxilato de etila, 0,1% de impurezas
individuais e 0,3% de impurezas totais.
Teste 2. Proceder conforme descrito em Cromatografa a
provido de detector ultravioleta a 254 nm e coluna de
empacotada com slica ligada a grupos octadecilsilano (5
m), fuxo da Fase mvel de 1,2 mL/min.
Eluente A: dissolver 0,96 g de 1-pentanossulfonato de
sdio monoidratado em 900 mL de gua. Ajustar com
cido fosfrico a 10% (v/v) para pH 3,00 0,05 e diluir
com gua para 1000 mL.
Eluente B: utilizar acetonitrila.
l
descrito na tabela a seguir.
Tempo
(min)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
0 75 25 Isocrtica
35-45 30 70 Isocrtica
Soluo (1): dissolver quantidades exatamente pesadas de
loratadina SQR, 8-cloro-6,11-diidro-11-(4-piperidilideno)-
5H-benzo[5,6]cicloepta[1,2-b]piridina SQR (loratadina
composto relacionado A SQR) e 8-cloro-6,11-diidro-11-
(N-metil-4-piperinilideno)-5H-benzo[5,6]cicloepta[1,2-b]
piridina SQR (loratadina composto relacionado B SQR)
em metanol a fm de obter soluo a 0,1 mg/mL de cada
composto. Transferir 1 mL dessa soluo para balo
volumtrico de 10 mL, acrescentar 2 mL do Eluente A e
completar o volume com metanol.
Soluo (2): pesar exatamente cerca de 0,1 g da amostra e
transferir para balo volumtrico de 10 mL. Acrescentar 2
mL de metanol e agitar at dissoluo. Acrescentar 2 mL
do Eluente A e completar o volume com metanol.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo (1). A resoluo
entre o pico de loratadina composto relacionado A e
loratadina composto relacionado B no menor que 1,5.
O desvio padro relativo das reas do pico de loratadina
nas replicatas no maior que 10%. Os tempos de reteno
relativos e fatores de resposta esto descritos na tabela a
seguir. Para impurezas desconhecidas, o fator de resposta
1,00.
Composto relacionado
Tempo de
reteno
relativo
Fator de
resposta
Loratadina composto relacionado A 0,50 1,00
Loratadina composto relacionado B 0,53 0,89
8-Cloro-6,11-diidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]piridin-11-ona 0,70 0,60
8-Cloro-6,11-diidro-11-[N-metil-4-piperidinil]11-hidroxi-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]
piridina
0,75 0,46
4,8-Dicloro-6,11-diidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]piridin-11-ona 1,23 0,92
8-Cloro-6,11-diidro-11-[N-etoxicarbonil-4-piperidinil]-11-hidroxi-5H-benzo[5,6]
ciclohepta[1,2-b]piridina
1,60 0,42
4,8-Dicloro-6, 11-diidro-11-[N-etoxicarbonil-4-piperidilideno]-5H-benzo[5,6]
ciclohepta[1,2-b]piridina
1,83 1,08
Loratadina 1,00 1,00
soluo e registrar os cromatogramas. No mximo 0,1%
de loratadina composto relacionado A, 0,1% de loratadina
composto relacionado B, 0,1% de cada impureza individual
e 0,3% de impurezas totais.
Mtodo III. No mximo 0,001% (10 ppm).
No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
de cido actico glacial. Titular com cido perclrico 0,1
mg de C
22
H
23
ClN
2
O
2
.
mantida temperatura entre 25 C e 35 C, fuxo da Fase
Fase mvel: mistura de fosfato de potssio dibsico anidro
0,01 M, metanol e acetonitrila (7:6:6). Ajustar com cido
fosfrico para um pH de 7,2.
Diluente: transferir 400 mL de cido clordrico 0,05 M e
80 mL de fosfato de potssio dibsico anidro 0,6 M para
mistura de metanol e acetonitrila (1:1). Homogeneizar.
da amostra para balo volumtrico de 100 mL. Dissolver,
com Diluente. Homogeneizar.
l
1097
Soluo padro: soluo de loratadina SQR a 0,4 mg/mL
em Diluente.
Procedimento: injetar, separadamente, 15 L da Solues
22
H
23
ClN
2
O
2

padro e a Soluo amostra. O desvio padro relativo das
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-histamnico.
LORATADINA COMPRIMIDOS
quantidade declarada de loratadina (C
22
H
23
ClN
2
O
2
).
IDENTIFICAO
suporte, e mistura de ter etlico e dietilamina (40:1), como
seguir.
Soluo (1): transferir quantidade do p dos comprimidos
equivalente a cerca de 20 mg de loratadina para um tubo de
centrfuga. Adicionar 5 mL de uma mistura de clorofrmio
e metanol (1:1), agitar por 30 minutos e centrifugar.
Soluo (2): soluo a 4 mg/mL de loratadina SQR em
mistura de clorofrmio e metanol (1:1)
CARACTERSTICAS
Tempo: 60 minutos
22
H
23
ClN
2
O
2

da soluo de loratadina SQR na concentrao de 0,001%
(p/v) preparada no mesmo solvente.
declarada de C
22
H
23
ClN
2
O
2
ENSAIOS DE PUREZA
no mtodo B. de Doseamento da monografa Loratadina.
Soluo (1): utilizar a Soluo amostra descrita no
Doseamento desta monografa.
Soluo (2): transferir 5 mL da Soluo padro para balo
volumtrico de 100 mL, completar o volume com Diluente
e homogeneizar. Diluir esta soluo at obter concentrao
de 0,8 g/mL de loratadina SQR.
reteno relativos so 0,79 para 4-(8-cloro-11-fuoro-
6,11-diidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]piridin-11-il)-
1-piperidinacarboxilato de etila e 1,0 para loratadina. O
desvio padro relativo das reas de replicatas do pico de
loratadina no maior que 4,0%.
Procedimento: injetar, separadamente, 50 L da Solues
as reas sob os picos. No mximo 0,2% de 4-(8-cloro-
11-fluoro-6,11-diidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]
piridin-11-il)-1-piperidinacarboxilato de etila. No mximo
0,1% de qualquer outra impureza individual. A soma de
todas as impurezas exceto 4-(8-cloro-11-fuoro-6,11-
diidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]piridin-11-il)-1-
piperidinacarboxilato de etila no excede 0,1%.
Cumpre o teste.
l
DOSEAMENTO
da monografa Loratadina. Preparar a Soluo amostra
loratadina para balo volumtrico de 250 mL. Acrescentar
100 mL de cido clordrico 0,05 M e agitar por 40 minutos.
Acrescentar 75 mL de uma mistura de metanol e acetonitrila
(1:1) e homogeneizar. Acrescentar 20 mL de fosfato de
potssio dibsico anidro 0,6 M e homogeneizar por 5
minutos. Completar o volume com mistura de metanol e
acetonitrila (1:1) e homogeneizar.
reteno no inferior a 3,5. O fator de cauda no maior
C
22
H
23
ClN
2
O
2
Em recipientes bem fechados temperatura de 2 C a 30 C.
ROTULAGEM
LORATADINA SOLUO ORAL
quantidade declarada de loratadina (C
22
H
23
ClN
2
O
2
).
IDENTIFICAO
suporte, e mistura de ter etlico e dietilamina (40:1), como
seguir.
Soluo (1): transferir volume da soluo oral contendo o
equivalente a cerca de 10 mg de loratadina para um tubo
de centrfuga. Adicionar 10 mL de hidrxido de sdio 0,2
M e 2 mL de cloreto de metileno. Agitar por 10 minutos.
Centrifugar. Utilizar a fase orgnica.
Soluo (2): soluo de loratadina SQR a 5 mg/mL em
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 2,5 a 3,1.
ENSAIOS DE PUREZA
dimetro interno, empacotada com slica ligada a grupos
octilsilano (5 m), mantida a temperatura entre 30 C e 40
C; fuxo da Fase mvel de 2,0 mL/minuto.
Fase mvel: soluo de laurilsulfato de sdio a 0,015 M em
uma mistura de gua e acetonitrila (1:1). Ajustar o pH em
2,6 0,1 com cido fosfrico.
Diluente: mistura de Fase mvel e gua (2:1).
Soluo de adequabilidade do sistema (1): soluo de
loratadina SQR a 0,002 mg/mL em Diluente.
Soluo de adequabilidade do sistema (2): transferir 5 mL
da Soluo de adequabilidade do sistema (1) para balo
Soluo de resoluo: transferir volume da soluo oral
contendo o equivalente a 20 mg de loratadina para um
frasco de vidro com tampa. Adicionar 1 mL de uma soluo
de perxido de hidrognio a 3% (p/v) e homogeneizar.
Tampar o frasco e aquecer a 65 C por 18 a 24 horas.
Resfriar at temperatura ambiente. Transferir 5 mL para
Diluente.
contendo o equivalente a 5 mg de loratadina para balo
Homogeneizar.
para 4-(8-cloro-5,6-diidro-4-(hidroximetil)-11H-
benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]piridina-11-ilideno)-1-
piperidinacarboxilato de etila, 0,84 para 4-[8-cloro-5,6-
diidro-2-(hidroximetil)-11H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]
piridina-11-ilideno]-1-piperidinacarboxilato de etila
e 1,0 para loratadina. A resoluo entre os picos de
loratadina e 4-[8-cloro-5,6-diidro-2-(hidroximetil)-
11H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]piridina-11-ilideno]-1-
piperidinacarboxilato de etila no inferior a 3,0. Injetar
replicatas de 50 L da Soluo de adequabilidade do
sistema (1). O fator de cauda para o pico de loratadina est
compreendido entre 0,7 e 1,1. Injetar replicatas de 50 L
l
1099
da Soluo de adequabilidade do sistema (2). O desvio
padro relativo das reas de replicatas do pico de loratadina
no maior que 10,0%.
Procedimento: injetar 50 L da Soluo amostra,
registrar os cromatogramas e medir as reas sob os
picos. No mximo 0,3% de 4-(8-cloro-5,6-diidro-
4-(hidroximetil)-11H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]
piridina-11-ilideno)-1-piperidinacarboxilato de etila. No
mximo 0,3% de 4-(8-cloro-5,6-diidro-2-(hidroximetil)-
11H-benzo[5,6]ciclohepta[1,2-b]piridina-11-ilideno)-
1-piperidinacarboxilato de etila. No mximo 0,2% de
qualquer outra impureza individual, e a soma de todas as
impurezas no excede 0,5%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
com slica ligada a grupo fenila (10 m), mantida a
temperatura entre 20 C e 30 C; fuxo da Fase mvel de
2,0 mL/minuto.
Fosfato de potssio monobsico 0,05 M: transferir cerca
de 6,8 g de fosfato de potssio monobsico para balo
volumtrico de 1000 mL. Dissolver e completar o volume
com gua e homogeneizar. Ajustar o pH em 3,0 0,1 com
cido fosfrico.
Fase mvel: mistura de Fosfato de potssio monobsico
0,05 M e acetonitrila (7:3).
Soluo de padro interno: soluo de butilparabeno a 0,3
mg/mL em mistura de gua e acetonitrila (7:3).
contendo o equivalente a 5 mg de loratadina para balo
volumtrico de 50 mL. Acrescentar 5 mL da Soluo de
padro interno e completar o volume com mistura de gua
e acetonitrila (7:3). Homogeneizar.
Soluo padro: preparar soluo de loratadina SQR a 1
mg/mL em acetonitrila. Transferir 5 mL desta soluo para
balo volumtrico de 50 mL e acrescentar 5 mL da Soluo
de padro interno e 12 mL de gua. Completar o volume
com mistura de gua e acetonitrila (7:3). Homogeneizar.
de reteno relativos so cerca de 0,78 para o butilparabeno
e 1,0 para loratadina. A resoluo entre butilparabeno
e loratadina no menor que 1,9. O fator de cauda no
e medir as reas sob os picos correspondentes loratadina
e ao butilparabeno. Calcular a quantidade de C
22
H
23
ClN
2
O
2

na soluo oral a partir das respostas obtidas para a relao
loratadina/butilparabeno com a Soluo padro e a Soluo
amostra.
ROTULAGEM
LORATADINA E SULfATO DE
PSEUDOEfEDRINA SOLUO ORAL
quantidades declaradas de loratadina (C
22
H
23
ClN
2
O
2
) e
sulfato de pseudoefedrina ((C
10
H
15
NO)
2
.H
2
SO
4
).
IDENTIFICAO
A relao entre os tempos de reteno dos picos principais
amostra, obtida em Doseamento, corresponde relao
entre os tempos de reteno dos picos principais e do pico
do padro interno no cromatograma da Soluo padro.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 4,5 a 5,5.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
(10 m), mantida em temperatura entre 20
o
C e 30
o
C; fuxo
da Fase mvel de 2 mL/minuto.
Soluo A: dissolver 3 g de fosfato de amnio monobsico
em uma mistura de gua, metanol e cido fosfrico
(150:110:1).
Fase mvel: mistura de Soluo A e acetonitrila (60:40).
l
Soluo de padro interno: soluo de butilparabeno a 0,1
mg/mL em Fase mvel.
equivalente a 5 mg de loratadina para balo volumtrico
de 50 mL, completar o volume com Fase mvel e
homogeneizar. Transferir 2 mL da soluo obtida para
balo volumtrico de 10 mL, acrescentar 1 mL de Soluo
de padro interno e completar o volume com Fase mvel.
Homogeneizar.
sulfato de pseudoefedrina SQR e transferir para balo
volumtrico de 100 mL. Acrescentar 10 mL de soluo de
loratadina SQR a 0,2 mg/mL em Fase mvel e 10 mL da
Soluo de padro interno. Completar o volume com Fase
Injetar replicatas de 20 L da Soluo padro. Os
tempos de reteno relativos so cerca de 0,4 para sulfato
de pseudoefedrina, 0,6 para butilparabeno e 1,0 para
loratadina. A resoluo entre os picos de butilparabeno
e loratadina no menor que 2,0. O fator de cauda no
e medir as reas sob os picos correspondentes a sulfato
de pseudoefedrina, butilparabeno e loratadina. Calcular
as quantidades de (C
10
H
15
NO)
2
.H
2
SO
4
e C
22
H
23
ClN
2
O
2
na
soluo oral a partir das respostas obtidas para as relaes
sulfato de pseudoefedrina/butilparabeno e loratadina/
butilparabeno com a Soluo padro e a Soluo amostra.
ROTULAGEM
LOSARTANA POTSSICA
Losartanum kalicum
N
N
C H
3
Cl
N
N
N
N
OH
K
C
22
H
22
ClKN
6
O; 461,00
losartana potssica; 05432
Sal de potssio de 2-butil-4-cloro-1-[[2-(2H-tetrazol-5-il)
[1,1-bifenil]-4-il]metil]-1H-imidazol-5-metanol (1:1)
[124750-99-8]
C
22
H
22
ClKN
6
DESCRIO
branco.
Solubilidade. Solvel em gua e etanol, praticamente
insolvel em acetato de etila, clorofrmio e cloreto de
metileno.
IDENTIFICAO
observados no espectro de losartana potssica SQR,
(p/v) em metanol, exibe mximo de absoro idntico
ao observado no espectro de soluo similar de losartana
potssica SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de cicloexano e lcool isoproplico. Proceder
conforme descrito em Cromatografa a gs (5.2.17.5).
Utilizar cromatgrafo a gs provido de detector de
ionizao de chamas; coluna capilar de 30 m de
comprimento e 0,53 mm de dimetro interno, preenchida
com fenil-metilpolisiloxano (5:95), com espessura do
flme de 1,5 m; temperatura da coluna de acordo com os
seguintes parmetros: deixar a 50 C durante 5 minutos e
aumentar para 200 C a 30 C por minuto e manter durante
5 minutos. Manter as temperaturas do injetor e do detector
a 220 C. Utilizar hlio como gs de arraste a velocidade
linear de cerca de 6 mL/minuto.
da amostra em dimetilformamida para obter soluo 50
mg/mL.
Soluo padro: preparar soluo, em dimetilformamida,
contendo 0,05 mg/mL de cicloexano e 0,05 mg/mL de
lcool isoproplico.
Injetar replicatas de 1 L da Soluo padro. Os tempos de
reteno so cerca de 2 minutos para o lcool isoproplico e
de 4 minutos para o cicloexano. A resoluo entre os picos
do cicloexano e do lcool isoproplico no deve ser menor
dos picos registrados no deve ser maior que 8,0%.
l
1101
e medir as reas sob os picos. As reas sob os picos
relativos ao cicloexano e lcool isoproplico obtidos para
a Soluo amostra no devem ser superiores s rea sob os
picos relativos ao cicloexano e lcool isoproplico obtidos
para a Soluo padro. No mximo 0,1% de cicloexano e
0,2% de lcool isoproplico.
220 nm; coluna cromatogrfca de 250 mm de comprimento
1 mL/minuto.
Eluente A: soluo de cido fosfrico a 0,1% (v/v) em
gua.
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
Soluo amostra: dissolver 30 mg da amostra em metanol
e diluir para 100 mL com o mesmo solvente, obtendo
soluo a 300 g/mL.
pesada de losrtana potssica SQR e trifenilmetanol em
metanol e diluir quantitativamente para obter soluo a 0,3
mg/mL e 0,002 mg/mL respectivamente.
tempos de reteno relativos so cerca de 1,0 para a losartana
e 1,9 (cerca de 20 minutos) para o trifenilmetanol. O fator de
cauda para o pico da losartana no maior que 1,6.
Procedimento: injetar 10 L da Soluo amostra, registrar
os cromatogramas e medir as reas de todos os picos
obtidos. A rea de qualquer pico secundrio no superior
a 0,2% da rea total dos picos obtidos. A soma das rea
sob os picos secundrios, exceto a do pico principal, no
superior a 0,5% da rea total dos picos obtidos. No incluir
nos clculos os picos relativos ao solvente.
Metais pesados (5.3.2.3). Prosseguir conforme descrito
em Mtodos de reao com tioacetamida, Mtodo III. No
mximo 0,001% (10 ppm).
gua (5.2.20.1). No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
Titular com cido perclrico 0,1 M SV. Determinar o ponto
fnal potenciometricamente ou utilizando 1-naftolbenzena
SI como indicador. Realizar ensaio em branco e fazer as
22
H
22
ClKN
6
O.
de detector ultravioleta a 254 nm, coluna cromatogrfca
de 250 mm de comprimento e 4,0 mm de dimetro interno,
octadecilsilano (5 m), mantida temperatura de 35 C,
Fase mvel: mistura de soluo de cido fosfrico a 0,1%
(v/v) em gua e acetonitrila (60:40). Realizar os ajustes
necessrios.
da amostra em metanol para obter soluo a 250 g/mL.
Soluo padro: dissolver quantidade exatamente
pesada de losartana potssica SQR em metanol e diluir
quantitativamente para obter soluo a 250 g/mL.
da coluna no deve ser menor que 4000 pratos tericos.
O fator de cauda no maior que 2,0. O desvio padro
maior que 2,0%.
C
22
H
22
ClKN
6
O na amostra a partir das respostas obtidas
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-hipertensivo.
a
m
1103
MACROGOL
Macrogolum
H
O
OH
n
H(OCH
2
CH
2
)
n
OH
macrogol; 05474
-Hidro--hidroxipoli(oxi-1,2-etanodiil)
[25322-68-3]
Macrogol um polmero de adio do xido de etileno e
gua, representado pela frmula acima em que n o nmero
mdio de grupos de xido de etileno. O peso molecular
mdio , no mnimo, 95,0% e, no mximo, 105,0% do
valor nominal rotulado quando esse for inferior a 1000; no
mnimo, 90,0% e, no mximo, 110,0% do valor nominal
rotulado quando esse se encontrar entre 1000 e 7000; e, no
mnimo, 87,5% e, no mximo, 112,5% do valor nominal
rotulado quando este for superior a 7000.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido lmpido ou levemente
turvo, viscoso, incolor, levemente higroscpico e com
leve odor caracterstico, ou slido branco inodoro, de
consistncia cremosa, em forma de p ou focos que se
dissolvem em gua.
Solubilidade. Solvel em gua, acetona, etanol, miscvel
com outros glicis e com hidrocarbonetos aromticos,
insolvel em ter etlico e hidrocarbonetos alifticos.
Viscosidade (5.2.7): determinar em viscosmetro capilar
com tempo de escoamento de, no mnimo, 200 segundos
e em temperatura mantida a 98,9 0,3 C. A viscosidade
deve estar dentro dos limites estabelecidos na Tabela 1,
de acordo com o peso molecular mdio da amostra. Para
amostras cujo peso molecular mdio no esteja listado na
tabela, calcular os limites por interpolao.
Tabela 1 Limite de viscosidade para amostras de macrogol.
Peso
Molecular
Mdio
Faixa de
Viscosidade
em
Centistokes
Peso
Molecular
Mdio
Faixa de
Viscosidade
em
Centistokes
200 3,9 a 4,8 2200 43,0 a 56,0
300 5,4 a 6,4 2300 46,0 a 60,0
400 6,8 a 8,0 2400 49,0 a 65,0
500 8,3 a 9,6 2500 51,0 a 70,0
600 9,9 a 11,3 2600 54,0 a 74,0
700 11,5 a 13,0 2700 57,0 a 78,0
800 12,5 a 14,5 2800 60,0 a 83,0
900 15,0 a 17,0 2900 64,0 a 88,0
1000 16,0 a 19,0 3000 67,0 a 93,0
1100 18,0 a 22,0 3250 73,0 a 105,0
1200 20,0 a 24,5 3350 76,0 a 110,0
1300 22,0 a 27,5 3500 87,0 a 123,0
1400 24,0 a 30,0 3750 99,0 a 140,0
1450 25,0 a 32,0 4000 110,0 a 140,0
1500 26,0 a 33,0 4250 123,0 a 177,0
1600 28,0 a 36,0 4500 140,0 a 200,0
1700 31,0 a 39,0 4750 155,0 a 228,0
1800 33,0 a 42,0 5000 170,0 a 250,0
1900 35,0 a 45,0 5500 206,0 a 315,0
2000 38,0 a 49,0 6000 250,0 a 390,0
2100 40,0 a 53,0 6500 295,0 a 480,0
7000 350,0 a 590,0
7500 405,0 a 735,0
8000 470,0 a 900,0
IDENTIFICAO
Determinao do peso molecular mdio.
Soluo de anidrido ftlico: adicionar 49 g de anidrido
ftlico num erlenmeyer mbar e dissolver em 300 mL de
piridina recentemente destilada em presena de anidrido
ftlico. Agitar o erlenmeyer vigorosamente at completa
dissoluo. Adicionar 7 g de imidazol e misturar,
cuidadosamente, para dissolver inteiramente. Deixar a
soluo em repouso por 16 horas antes do uso.
Preparo da amostra para macrogis lquidos: introduzir,
cuidadosamente, 25 mL da Soluo de anidrido ftlico num
erlenmeyer seco, resistente a presso e calor. Adicionar, ao
erlenmeyer, quantidade de amostra, exatamente pesada,
equivalente ao seu peso nominal dividido por 160. Tampar
o frasco e envolv-lo com uma capa ou rede de segurana.
Preparo da amostra para macrogis slidos: introduzir,
cuidadosamente, 25 mL da Soluo de anidrido ftlico
num erlenmeyer seco, resistente a presso e calor.
Adicionar, ao frasco, quantidade de amostra, exatamente
pesada, equivalente ao seu peso nominal divido por 160
(devido ao limite de solubilidade, no usar mais do que
25 g). Adicionar 25 mL de piridina recentemente destilada
em presena de anidrido ftlico. Agitar at efetiva soluo.
Tampar o erlenmeyer e envolv-lo com uma capa de
segurana.
a
m
Procedimento: transferir o erlenmeyer para banho-maria
com temperatura entre 96 C e 100 C, de modo que a
altura da gua do banho corresponda altura do lquido
dentro do erlenmeyer. Remover o erlenmeyer do banho
aps 5 minutos, sem retirar a capa de segurana, agitar por
30 segundos para assegurar a homogeneidade. Aquecer
por mais 30 minutos (60 minutos para macrogol de peso
molecular acima de 3000). Remover o erlenmeyer do
banho e deixar esfriar at temperatura ambiente. Destampar
o frasco cuidadosamente para eliminar qualquer presso.
Remover a capa de segurana. Adicionar 10 mL de gua
e agitar. Aguardar 2 minutos, adicionar 0,5 mL de mistura
de fenolftalena SI e piridina (1:99). Titular com hidrxido
de sdio 0,5 M SV at que a colorao rosa persista por
15 segundos. Realizar ensaio em branco utilizando mistura
de 25 mL de Soluo de anidrido ftlico e quantidade de
piridina equivalente quela adicionada amostra.
Calcular o peso molecular mdio segundo a expresso:
[ ]
[ ]
(M)
S - B
m
P =
2000
em que
P = peso molecular mdio em g/mol;
m = massa da amostra em gramas;
B = volume de hidrxido de sdio 0,5 M SV consumido
pelo branco;
S = volume de hidrxido de sdio 0,5 M SV consumido
pela amostra;
M = molaridade da soluo de hidrxido de sdio.
ENSAIOS DE PUREZA
lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12) para as amostras lquidas
e no mais que levemente turva para as amostras slidas.
pH (5.2.19). 4,5 a 7,5. Determinar em soluo preparada
pela dissoluo de 5 g da amostra em 100 mL de gua
isenta de dixido de carbono e adio de 0,3 mL de soluo
saturada de cloreto de potssio.
Arsnio (5.3.2.5). Proceder conforme descrito em Mtodo
espectrofotomtrico, Mtodo II. No mximo 0,0003% (3
ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Misturar 4 g da amostra com 5
mL de cido clordrico 0,1 M e diluir com gua para 25 mL.
0,0005% (5 ppm).
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 25 g da
amostra, em cadinho de platina. No mximo 0,1%.
Em recipientes bem fechados. Alguns plsticos sofrem
amolecimento pelo macrogol.
ROTULAGEM
CATEGORIA
MALEATO DE CLORfENIRAMINA
Chlorphenamini maleas
COOH
COOH
.
N
CH
3
N
CH
3
Cl
C
16
H
19
ClN
2
.C
4
H
4
O
4
; 390,86
maleato de clorfeniramina; 02442
(2Z)-2-Butenodioato de -(4-clorofenil)-N,N-dimetil-2-
piridinapropamina (1:1)
[113-92-8]
C
16
H
19
ClN
2
.C
4
H
4
O
4
DESCRIO
branco, inodoro.
etanol e clorofrmio, praticamente insolvel em ter
etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 130 C a 135 C.
IDENTIFICAO
de maleato de clorfeniramina SQR, preparado de maneira
idntica.
de 230 nm a 350 nm, da soluo amostra a 0,003% (p/v)
em cido clordrico 0,1 M, exibe mximo em 265 nm.
ENSAIOS DE PUREZA
2% (p/v).
a
m
1105
slica-gel HF
254
, como suporte, e mistura de acetato de
etila, metanol e cido actico M (50:30:20), como fase
Soluo (1): soluo da amostra a 5% (p/v) em clorofrmio.
Soluo (2): soluo da amostra a 0,01% (p/v) em
clorofrmio.
com a Soluo (1), com exceo das duas principais,
correspondentes a clorfeniramina e cido malico, no
mximo 0,5%.
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 0,4 g da amostra,
previamente dessecada, em 20 mL de cido actico glacial.
Adicionar duas gotas de cloreto de metilrosanilnio SI e
titular com cido perclrico 0,1 M SV at mudana de cor
para azul-esverdeado. Realizar ensaio em branco e fazer
as correes necessrias. Alternativamente, determinar
o ponto fnal potenciometricamente. Cada mL de cido
perclrico 0,1 M equivale a 19,543 mg de C
16
H
19
ClN
2
.
C
4
H
4
O
4.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-histamnico.
MALEATO DE DEXCLORfENIRAMINA
Dexchlorpheniramini maleas
N
CH
3
N
Cl
CH
3
COOH
COOH
.
C
16
H
19
ClN
2
.C
4
H
4
O
4
; 390,86
maleato de dexclorfeniramina; 02839
(2Z)-2-Butenodioato de (S)--(4-clorofenil)-N,N-dimetil-
2-piridinapropamina (1:1)
[2438-32-6]
C
16
H
19
ClN
2
.C
4
H
4
O
4
DESCRIO
clorofrmio.
Faixa de fuso (5.2.2): 110 C a 115 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +39,5 a +43, em
5% (p/v) em dimetilformamida.
IDENTIFICAO
observados no espectro de maleato de dexclorfeniramina
gua, exibe mximos e mnimos somente nos mesmos
relativas daqueles observados no espectro de soluo
similar de maleato de dexclorfeniramina SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
0,01% (p/v), utilizando gua isenta de dixido de carbono.
a
m
mximo 0,5%.
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
amostra, previamente dessecada, e dissolver em 50 mL de
cido actico glacial anidro. Titular com cido perclrico
0,1 M SV determinando o ponto fnal potenciometricamente
ou utilizando 0,1 mL de cloreto de metilrosanilneo SI at
mudana de cor de azul para verde. Realizar ensaio em
16
H
19
ClN
2
.
C
4
H
4
O
4
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antialrgico.
COMPRIMIDOS
16
H
19
ClN
2
.C
4
H
4
O
4
.
IDENTIFICAO
A. Pulverizar, a p fno, quantidade de comprimidos
equivalente a 150 mg de maleato de dexclorfeniramina.
Adicionar 100 mL de cido actico M e agitar
mecanicamente por 10 minutos. Filtrar atravs de funil
sinterizado de vidro. Ajustar o pH do fltrado em 11,0 com
hidrxido de sdio a 0,1% (p/v). Transferir para funil de
separao e extrair com seis pores de 100 mL de hexano.
Filtrar cada extrato obtido utilizando meio adequado para
permitir a efciente separao entre a fase orgnica e a fase
aquosa. Reunir os extratos e concentrar em banho aquecido
at volume reduzido. Transferir para recipiente menor e
evaporar at o ponto em que os vapores de hexano no
sejam mais perceptveis. Transferir o resduo oleoso com
o auxlio de quatro pores de 3 mL de dimetilformamida
para proveta de 15 mL com tampa, completar o volume
com o mesmo solvente e agitar. Centrifugar se necessrio.
O poder rotatrio (5.2.8) est compreendido entre +0,24
e +0,35.
CARACTERSTICAS
Teste de friabilidade (5.1.3.2). No mximo 1%.
Teste de desintegrao (5.1.4.1). At 15 minutos em gua
a 37 C.
Procedimento para uniformidade de contedo. Triturar
cada comprimido a p fno, transferir quantitativamente
mistura de gua e cido trifuoractico (100:0,8). Prosseguir
conforme descrito em Doseamento a partir de Agitar
mecanicamente....
Tempo: 45 minutos
de dissoluo e fltrar. Prosseguir conforme condies
cromatogrfcas descritas em Doseamento. Preparar a
Soluo padro como descrito a seguir.
de maleato de dexclorfeniramina SQR em gua e diluir
adequadamente de modo a obter soluo a 4 g/mL.
no maior que 2,0%.
C
16
H
19
ClN
2
.C
4
H
4
O
4
a partir das respostas obtidas com a
declarada de C
16
H
19
ClN
2
.C
4
H
4
O
4
se dissolvem em 45
minutos
Cumpre o teste.
a
m
1107
DOSEAMENTO
m) capeado, mantida temperatura ambiente; fuxo da
Eluente A: mistura de gua e cido trifuoractico
(100:0,05).
Eluente B: mistura de acetonitrila e cido trifuoractico
(100:0,05).
Tempo
(minutos)
Eluente A (%) Eluente B (%)
0 100 0
10 50 50
11 0 100
16 0 100
maleato de dexclorfeniramina para balo volumtrico
de 50 mL. Adicionar 40 mL de mistura de gua e cido
trifuoractico (100:0,8). Agitar mecanicamente por 15
homogeneizar e fltrar. Diluir com gua de modo a obter
soluo a 40 g/mL.
de maleato de dexclorfeniramina SQR em gua e diluir
adequadamente de modo a obter soluo a 40 g/mL.
no maior que 2,0%.
C
16
H
19
ClN
2
.C
4
H
4
O
4
ROTULAGEM
SOLUO ORAL
quantidade declarada de maleato de dexclorfeniramina.
IDENTIFICAO
A. Diluir o equivalente a 20 mg de maleato de
dexclorfeniramina para 100 mL com cido clordrico
(1:120). Diluir 10 mL para 100 mL com o mesmo solvente.
200 a 400 nm, da soluo amostra, obtida no mtodo A. de
Doseamento exibe mximos idnticos aos observados no
espectro da soluo padro.
padro.
CARACTERSTICAS
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Transferir quantitativamente volume da soluo oral
equivalente a 8 mg de maleato de dexclorfeniramina para
funil de separao de 250 mL e ajustar o pH da soluo para
11,0 com hidrxido de sdio M. Extrair com duas pores
de 75 mL de hexano e combinar os extratos num segundo
funil de separao. Repetir a extrao com trs pores de 50
mL de cido clordrico (1:20), completando o volume para
200 mL com o mesmo solvente. Em outro recipiente, pesar
40 mg de maleato de dexclorfeniramina SQR, dissolver
em gua e completar para 100 mL com o mesmo solvente.
Transferir 10 mL desta soluo para funil de separao e
ajustar o pH para 11,0 com hidrxido de sdio M. Extrair
com duas pores de 50 mL de hexano, agitando 2 minutos
cada poro, antes da separao das fases. Combinar os
extratos num segundo funil de separao, extrair com duas
pores de 40 mL de cido clordrico (1:20). Combinar
os extratos em balo volumtrico e completar o volume
para 100 mL com o mesmo solvente. Filtrar a soluo,
desprezando as primeiras pores do fltrado. Calcular o
teor de C
16
H
19
ClN
2
.C
4
H
4
N
4
pelas absorvncias medidas,
relacionando-as com as concentraes das solues.
a
m
m); mantida a temperatura ambiente; fuxo da Fase mvel
de 1,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila e cido
trifuoractico (70:30:0,5).
Soluo amostra: transferir volume conhecido da amostra
para balo volumtrico. Adicionar gua, homogeneizar, de
modo a obter soluo a 40 g/mL. Filtrar.
de maleato de dexclorfeniramina SQR em gua, de modo a
obter soluo a 0,4 g/mL. Homogeneizar e fltrar.
padro relativo das reas de replicatas sob os picos
registrados no deve ser maior que 2,0%.
16
H
19
ClN
2
.
C
4
H
4
O
4
ROTULAGEM
MALEATO DE ENALAPRIL
Enalaprili maleas
N
N
CH
3
HOOC
O
C H
3
O
O
H
COOH
COOH
.
C
20
H
28
N
2
O
5
.C
4
H
4
O
4
; 492,52
maleato de enalapril; 03370
(2Z)-2-Butenodioato de N-[(1S)-1-(etoxicarbonil)-3-
fenilpropil]-L-alanil-L-prolina (1:1)
[76095-16-4]
C
20
H
28
N
2
O
5
.C
4
H
4
O
4
DESCRIO
branco.
solvel em metanol e ligeiramente solvel em cloreto
de metileno. Solvel em solues diludas de hidrxidos
alcalinos.
Faixa de fuso (5.2.2): 143 C a 145 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -41 a -43,5, em relao
em gua livre de dixido de carbono.
IDENTIFICAO
maleato de enalapril SQR, preparado de maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
no mtodo B. de Doseamento. Injetar 50 L da Soluo
amostra. Calcular a percentagem de cada pico obtido
no cromatograma da Soluo amostra, excluindo o pico
relativo ao maleato de enalapril. No incluir nos clculos os
picos relativos ao solvente. No mximo 2,0% de impurezas
totais.
em 2 g de amostra. No mximo 0,001% (10 ppm).
no superior a 5 mmHg, por 2 horas. No mximo 1,0%.
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
para erlenmeyer de 250 mL e dissolver em 30 mL de gua
livre de dixido de carbono. Titular com hidrxido de sdio
0,1 M SV e determinar o ponto fnal potenciometricamente,
at o segundo ponto de infexo. Cada mL de hidrxido de
20
H
28
N
2
O
5
.C
4
H
4
O
4
.
B. Proceder conforme descrito em Cromatografa a liquido
de alta efcincia (5.2.17.4.). Utilizar cromatgrafo provido
a
m
1109
de detector de ultravioleta a 215 nm; coluna de 250 mm de
com slica quimicamente ligada a grupo octilsilano (5 um),
mantida a temperatura de 50 C; fuxo da Fase mvel de
2,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de tampo fosfato pH 2,2 e acetonitrila
(75:25).
Soluo de enalaprilato: dissolver quantidade exatamente
pesada da enalaprilato SQR em gua para obter soluo a
0,4 mg/mL.
Soluo de dicetopiperazina de enalapril: fundir cerca
de 20 mg de maleato de enalapril SQR no centro de um
bquer de 100 mL sobre chapa de aquecimento (cerca de 5
a10 minutos de aquecimento). Imediatamente aps, retirar
o bquer da chapa e deixar esfriar. Adicionar 50 mL de
acetonitrila ao resduo e deixar em ultrassom por poucos
minutos para dissolver. A soluo contm, em geral, entre
0,2 e 0,4 mg/mL de dicetopiperazina de enalapril.
da amostra em tampo fosfato pH 2,2 para obter soluo a
0,3 mg/mL. Deixar em ultrassom por 15 minutos. Completar
o volume com o mesmo solvente. Homogeneizar.
de maleato de enalapril SQR em tampo fosfato pH 2,2
para obter soluo a 0,3 mg/mL. Deixar em ultrassom por
Homogeneizar.
Soluo de resoluo: preparar soluo de maleato de
enalapril SQR a 0,3 mg/mL em tampo fosfato pH 2,2 e
adicionar volume adequado da Soluo de enalaprilato
para obter soluo de enalaprilato SQR a 0,003 mg/mL.
Transferir 0,75 mL da Soluo de dicetopiperazina de
enalapril para balo volumtrico de 25 mL e completar o
volume com a soluo anteriormente preparada.
efcincia da coluna no deve ser menor que 1000 pratos
tericos/metro para o enalaprilato, no menos que 300
pratos tericos/metro para o enalapril e no menos que
2500 pratos tericos/metro para a dicetopiperazina de
enalapril. Os tempos de reteno relativos so cerca de
0,3 para o cido malico, 0,5 para o enalaprilato, 1 para
o enalapril e maior que 1,5 para a dicetopiperazina de
enalapril. O fator de cauda do enalapril no superior a
2,0. A resoluo no menor que 2,0 entre o cido malico
e o enalaprilato, entre o enalaprilato e o enalapril e entre o
enalpril e a dicetopiperazina de enalapril. O desvio padro
maior que 2,0% para o enalapril e 5,0% para o enalaprilato.
20
H
28
N
2
O
5
.
C
4
H
4
O
4
CLASSE TERAPUTICA
Anti-hipertensivo.
MALEATO DE ENALAPRIL
COMPRIMIDOS
20
H
28
N
2
O
5
.C
4
H
4
O
4
.
IDENTIFICAO
quele do pico principal da Soluo de referncia.
CARACTERSTICAS
Procedimento para uniformidade de contedo: transferir
cada comprimido para balo volumtrico correspondente
para obter soluo a 0,1 mg/mL. Adicionar tampo
fosfato pH 2,2 e deixar no ultrassom at desintegrao
total do comprimido. Prosseguir conforme descrito em
Doseamento a partir de Agitar mecanicamente por 30
minutos.... Preparar Soluo de referncia em tampo
fosfato pH 2,2 para obter soluo de maleato de enalapril
SQR a 0,1 mg/mL.
Tempo: 30 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, com tampo fosfato pH
6,8, at concentrao adequada. Calcular a quantidade
de C
20
H
28
N
2
O
5
.C
4
H
4
O
4
dissolvida no meio, procedendo
conforme Uniformidade de doses unitrias.
declarada de C
20
H
28
N
2
O
5
.C
4
H
4
O
4
se dissolvem em 30
minutos.
a
m
ENSAIOS DE PUREZA
Doseamento. Injetar 50 L da Soluo amostra. Calcular
a porcentagem de cada pico obtido no cromatograma da
Soluo amostra, excluindo o pico relativo ao maleato de
enalapril. No incluir nos clculos os picos relativos ao
solvente. No mximo 5,0% de impurezas totais.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
no mtodo B. de Doseamento da monografa de Maleato
de enalapril. Preparar as solues como descrito a seguir.
maleato de enalapril para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar tampo fosfato pH 2,2 e deixar no ultrassom
por 15 minutos. Agitar mecanicamente por 30 minutos.
Completar o volume com o mesmo solvente obtendo
soluo a 0,2 mg/mL. Homogeneizar e fltrar, desprezando
os primeiros 5 mL do fltrado.
Soluo de referncia: dissolver quantidade exatamente
pesada de maleato de enalapril SQR em tampo fosfato pH
2,2 para obter soluo a 0,2 mg/mL. Deixar em ultrassom
por 15 minutos. Completar o volume com o mesmo
solvente. Homogeneizar.
Soluo de resoluo: preparar soluo de maleato de
enalapril SQR a 0,2 mg/mL em tampo fosfato pH 2,2 e
adicionar volume adequado da Soluo de enalaprilato
para obter soluo de enalaprilato SQR a 0,002 mg/mL.
Transferir 0,5 mL da Soluo de dicetopiperazina de
enalapril para balo volumtrico de 25 mL e completar o
volume com a soluo anteriormente preparada.
de referncia e amostra, registrar os cromatogramas
C
20
H
28
N
2
O
5.
C
4
H
4
O
4
obtidas com as Solues de referncia e amostra.
ROTULAGEM
MALEATO DE LEVOMEPROMAZINA
Levomepromazini maleas
S
N N
CH
3
CH
3
CH
3
OCH
3
COOH
COOH
.
C
19
H
24
N
2
OS.C
4
H
4
O
4
; 444,54
maleato de levomepromazina; 05265
(2Z)-2-Butenodioato de (R)-2-metoxi-N,N,-trimetil-
10H-fenotiazina-10-propanamina (1:1)
[7104-38-3]
C
19
H
24
N
2
OS.C
4
H
4
O
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco ou
ligeiramente amarelado. Deteriora-se quando exposto ao
ar e luz.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, ligeiramente solvel
em cloreto de metileno, pouco solvel em etanol.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -7,0 a -8,5, em relao
em dimetilformamida.
IDENTIFICAO
observados no espectro do maleato de levomepromazina
em metanol, exibe mximos em 254 nm e 308 nm. Os
valores de absorvncia so de, aproximadamente, 0,6 e 0,1,
respectivamente.
254
,
como suporte, e mistura de gua, cido frmico anidro
e ter isoproplico (3:7:90), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, em banda de 10 mm por 2 mm,
a
m
1111
descritas a seguir.
gua e acetona (1:9).
Soluo (2): soluo a 5 mg/mL de cido malico SQR em
mistura de gua e acetona (1:9).
Desenvolver o cromatograma (12 cm). Remover a placa,
secar a 120 C durante 10 minutos. Examinar luz
ultravioleta 254 nm. A Soluo (1) apresenta uma mancha
sobre o ponto de aplicao e outra mancha principal que
com a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 3,5 a 5,5. Proceder ao abrigo da luz intensa.
Pesar 0,5 g da amostra e adicionar 25 mL de gua isenta de
dixido de carbono. Agitar e deixar sedimentar. Verifcar o
pH do sobrenadante.
Substncias relacionadas. Proceder ao abrigo da luz
intensa. Proceder conforme descrito em Cromatografa
GF
254
, como suporte, e mistura de acetona, dietilamina
e cicloexano (10:10:80), como fase mvel. Aplicar,
gua e acetona (1:9).
mistura de gua e acetona (1:9).
Desenvolver o cromatograma (15 cm). Remover a placa,
deixar secar ao ar. Examinar luz ultravioleta 254 nm.
a Soluo (1), no mais intensa que aquela obtida com a
Soluo (2) (0,5%).
amostra. Dessecar em estufa de 100 a 105 C, por 3 horas.
No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
amostra e dissolver em 50 mL de cido actico glacial
anidro. Titular com cido perclrico 0,1 M SV determinando
o ponto fnal potenciometricamente. Realizar ensaio em
19
H
24
N
2
OS.
C
4
H
4
O
4
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antipsictico. Neurolptico.
MARACUJ AZEDO
Passiforae acetum folium
Passifora edulis Sims PASSIFLORACEAE
no mnimo, 1,0% de favonides totais, expressos em
apigenina (C
15
H
10
O
5
, 270,24).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As folhas possuem sabor
adocicado e odor caracterstico.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas simples, glabras, sub-coriceas, de cor verde
clara. Lminas profundamente divididas em trs lobos,
muito raramente bilobadas ou sem lobos, com 7,0 cm a
16,0 cm de comprimento e 6,0 cm a 20,0 cm de largura;
base reentrante, pice acuminado e margem serrilhada.
Nervao palmatinrvea, nervuras principal e secundrias
mais salientes na face abaxial. Pecolo com 1,0 cm a 4,0
cm, canaliculado na parte superior, com um par de nectrios
extraforais. comum a ocorrncia de gavinhas no pecolo.
Difere de Passifora alata, pois esta apresenta folha inteira,
margem lisa, nervao peninrvia e desprovida de
tricomas tectores na regio da nervura principal.
DESCRIO MICROSCPICA
Folhas hipoestomticas e de simetria dorsiventral. A
epiderme, em vista frontal, apresenta clulas de formato
polidrico, com paredes anticlinais levemente sinuosas em
ambas as faces. A cutcula lisa. Os estmatos so dos tipos
paractico, anisoctico e anomoctico. Tricomas tectores
unicelulares ocorrem na regio da nervura principal, na
face abaxial. Em seco transversal, a cutcula espessa,
a epiderme uniestratifcada e o mesoflo est constitudo
por uma a trs camadas de parnquima palidico e vrias
camadas de parnquima esponjoso. Cristais de oxalato
de clcio do tipo drusa ocorrem nos parnquimas. Na
nervura principal, em seco transversal, a face adaxial
apresenta uma protuberncia e a face abaxial convexa.
A epiderme, na regio da protuberncia, apresenta
tricomas tectores unicelulares de parede lisa. Sob ambas
as epidermes, clulas de colnquima interrompem o
parnquima clorofliano. O sistema vascular compe-se
de quatro feixes vasculares dispostos centralmente. Em
cada feixe vascular h presena de cmbio fascicular e
os idioblastos com drusas ocorrem na poro interna do
a
m
foema. O pecolo, em seco transversal, apresenta na
face adaxial dois lobos pouco proeminentes, sendo a face
abaxial pouco convexa na regio central. Internamente
epiderme ocorre preenchimento por colnquima e o
restante por parnquima. O sistema vascular formado por
um feixe vascular em cada lobo da face adaxial e por um
grupo de feixes centrais, de disposio anelar. Idioblastos
com drusas ocorrem internamente ao foema, em menor
nmero, no parnquima e no colnquima.
caractersticas: colorao verde-amarelada; fragmentos de
epiderme da face adaxial com clulas como as descritas,
sem estmatos; fragmentos de epiderme da face abaxial
com clulas como as descritas, com estmatos, como
descritos; fragmentos de epiderme sobre a nervura
apresentando tricomas tectores unicelulares; fragmentos de
tecido vascular em seces transversal ou longitudinal, com
idioblastos contendo drusas; drusas isoladas; fragmentos
de tecido palidico e esponjoso com raras drusas.
IDENTIFICAO
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G,
como suporte, e mistura de acetato de etila, gua e cido
frmico anidro (80:10:10), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, em forma de banda, 10 L da
Soluo (1) e 5 L da Soluo (2), recentemente preparadas,
descritas a seguir.
Soluo (1): agitar, em ultrassom, durante 10 minutos,
uma disperso a 50 mg/mL do p fno da droga vegetal em
mistura de etanol e gua (1:1). Filtrar.
Soluo (2): soluo a 100 g/mL de vitexina e rutina em
mistura de etanol e gua (1:1).
secar ao ar. Nebulizar a placa com difenilborato de
aminoetanol SR, seguido de polietilenoglicol 4000 a
5% (p/v) em metanol. Examinar sob luz ultravioleta
(365 nm). As manchas obtidas com a Soluo (1) com
Rf de aproximadamente 0,75 e 0,45 correspondem em
posio quelas obtidas com a Soluo (2), referentes
vitexina e rutina, respectivamente. Entre elas, a regio
do cromatograma obtida com a Soluo (1) apresenta
duas manchas fuorescentes, uma alaranjada, com Rf de
aproximadamente 0,62, e outra amarelo-esverdeada, com
Rf de aproximadamente 0,53. Acima da mancha referente
vitexina, so obtidas trs manchas amarelo-esverdeadas
com a Soluo (1), com Rf de aproximadamente 0,8, 0,85
e 1,0. A regio do cromatograma obtida com Soluo (1)
apresenta tambm uma srie de manchas fuorescentes
bem defnidas, entre o ponto de aplicao e o de Rf de
aproximadamente 0,25. A espcie P. alata no apresenta as
manchas fuorescentes amarelo-esverdeadas, com Rf de 0,8
e 0,85, acima da mancha referente vitexina, observadas
na P. edulis.
um); fuxo da Fase mvel de 0,8 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de soluo aquosa de cido fosfrico a
0,05% (v/v), tetraidrofurano e lcool isoproplico (80:17:3).
droga seca e pulverizada (180 m) e colocar em balo
volumtrico de 50 mL. Adicionar aproximadamente 30 mL
de soluo de etanol e gua (1:1), agitar por ultrassom por
Agitar manualmente por mais cinco minutos e fltrar o
extrato com papel fltro.
Soluo de referncia (1): transferir, exatamente, 1 mg de
isovitexina para balo volumtrico de 10 mL e adicionar
cerca de 7 mL de soluo de etanol e gua (1:1). Agitar por
ultrassom por 10 minutos.
vitexina 4-ramnosil para balo volumtrico de 10 mL e
adicionar cerca de 7 mL de soluo de etanol e gua (1:1).
Agitar por ultrassom por 10 minutos. Completar o volume
com a mesma soluo.
Soluo de referncia e da Soluo amostra. Os tempos
de reteno relativos so cerca de 0,75 e 1 para vitexina
4-ramnosil e isovitexina, respectivamente. Apresenta
ainda picos adicionais caractersticos de favonide que
no correspondem saponarina, orientina, isorientina ou
vitexina. Diferencia-se da Passifora alata pela ausncia
de isorientina.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 11%.
NDICE DE ESPUMA
Proceder conforme descrito em Determinao do ndice
de espuma (5.4.2.10), utilizando 1 g da droga pulverizada
(180 m). Calcular o ndice de espuma conforme a seguinte
expresso:
V P
IE
=
1000
em que
a
m
1113
P = percentual da droga utilizada no preparo do decocto;
V = volume, em mililitros, do decocto usado para
preparao da diluio no tubo de ensaio com espuma de
1 cm de altura.
O IE de no mximo 100.
DOSEAMENTO
flavonides totais
a seguir.
redondo de 50 mL. Adicionar 20 mL de etanol a 50% (v/v)
e aquecer sob refuxo por 30 minutos. Filtrar a mistura para
balo volumtrico de 50 mL utilizando algodo. Retornar
o algodo para o mesmo balo de refuxo e adicionar
20 mL de etanol a 50% (v/v), mantendo em refuxo por
mais 30 minutos. Filtrar, usando papel fltro, para o balo
volumtrico de 50 mL, completando o volume com etanol
a 50% (v/v).
Soluo amostra: transferir 0,8 mL da Soluo estoque
para balo volumtrico de 10 mL. Adicionar 0,8 mL de
cloreto de alumnio a 2% (p/v) em etanol a 50% (v/v),
completando o volume com o mesmo solvente.
Soluo branco: transferir 0,8 mL da Soluo estoque para
etanol a 50% (v/v).
Medir a absorvncia da Soluo amostra em 397 nm, em
cubeta de 1 cm, 30 minutos aps seu preparo, utilizando
a Soluo branco para o ajuste do zero. Calcular o teor
de favonides totais, calculado como apigenina, em
porcentual (p/p), segundo a expresso:
em que
A = absorvncia;
FD = fator de diluio (625);
=
% 1
1cm
E absortividade especfca (365,3);
PD = perda por dessecao (%; p/p).
do calor.
a
m
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos de Passifora edulis Sims
______________
Complemento da legenda da figura 1. As rguas correspondem em A e C a 3 cm; em B e D a 1 cm; em E e f a 50 m.
A aspecto geral da folha, mostrando a nervao digitinrvea, pice acuminado, base reentrante e margem serrilhada. B detalhe do pecolo com
um par de nectrios extraforais. C detalhe do ramo mostrando heteroflia e gavinha aderida ao pecolo. D detalhe da margem foliar serrilhada.
E epiderme voltada para a face adaxial da lmina foliar, em vista frontal. f epiderme voltada para a face abaxial da lmina foliar, em vista frontal:
estmato anomoctico (ea); estmato anisoctico (ei); estmato paractico (esp).
a
m
1115
figura 2 Aspectos microscpicos de Passifora edulis Sims
________________
Complemento da legenda da figura 2. As rguas correspondem em A a 100 m; em B, C e D a 500 m; em E a 50 m.
A seco transversal do mesoflo: face abaxial (ab); face adaxial (ad); cutcula (cu); drusa (d); feixe vascular (fv); parnquima esponjoso (pj);
parnquima palidico (pp). B esquema de poro da lmina foliar na nervura principal, em seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial
(ad); cmbio (ca); colnquima (co); epiderme (ep); foema (f); feixe vascular (fv); incluso celular (ic); parnquima (p); parnquima esponjoso (pj);
parnquima palidico (pp); tricoma tector (tt); xilema (x). C detalhe da seco transversal do pecolo mostrando drusas no feixe vascular: incluso
celular (ic). D detalhe da face adaxial da poro da lmina foliar na nervura principal, em seco transversal, mostrando o tricoma tector unicelular:
face adaxial (ad); colnquima (co); cutcula (cu); epiderme (ep); tricoma tector (tt). E esquema do aspecto geral da seco transversal do pecolo:
face abaxial (ab); face adaxial (ad); colnquima (co); epiderme (ep); foema (f); feixe vascular (fv); incluso celular (ic); parnquima (p); xilema (x).
a
m
MARACUJ DOCE
Passiforae dulcis folium
Passifora alata Curtis PASSIFLORACEAE
no mnimo, 1,0% de favonides totais, expressos em
apigenina (C
15
H
10
O
5
, 270,24).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As folhas possuem sabor
fortemente amargo e odor caracterstico.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas simples, glabras, sub-coriceas, de cor verde
clara. Lminas ovaladas ou oblongas, de 7,0 cm a 20,0
cm de comprimento e 4,0 cm a 15,0 cm de largura, base
arredondada ou ligeiramente reentrante, pice acuminado
e margem lisa. Nervao peninrvea, nervuras salientes na
face abaxial. Pecolo com 2,0 cm a 7,0 cm de comprimento,
profundamente canaliculado na parte superior, com um ou
geralmente dois pares de nectrios extraforais. comum
a ocorrncia de gavinhas no pecolo. Difere de Passifora
edulis, pois esta apresenta folha trilobada, margem
serrilhada, nervao palminrvea e apresenta tricomas
tectores na regio da nervura principal.
DESCRIO MICROSCPICA
Folhas hipoestomticas e de simetria dorsiventral. A
epiderme, em vista frontal, apresenta clulas de formato
polidrico, com paredes anticlinais levemente sinuosas
em ambas as faces. A cutcula lisa. Estmatos so
dos tipos paractico, anisoctico e anomoctico. Em
seco transversal, a cutcula espessa, a epiderme
uniestratifcada e o mesoflo est constitudo por uma a
trs camadas de parnquima palidico e vrias camadas
de parnquima esponjoso. Cristais de oxalato de clcio
do tipo drusa ocorrem nos parnquimas e especialmente
na regio das nervuras. Na regio da nervura principal,
em seco transversal, a face adaxial apresenta pouca
convexidade e a face abaxial possui uma convexidade
bastante angulosa. Sob ambas as epidermes, clulas de
colnquima interrompem o parnquima clorofliano,
ocorrendo um anel vascular central circundado por clulas
de esclernquima ou um anel vascular contnuo. O cmbio
fascicular visvel e idioblastos contendo drusas ocorrem
em todo o tecido fundamental, no colnquima e tambm no
foema. O pecolo, em seco transversal, apresenta face
adaxial cncava, com duas projees laterais. A face abaxial
convexa, com uma nica projeo central. Internamente
epiderme ocorre preenchimento por colnquima e o
restante por parnquima. O sistema vascular formado
por feixes centrais e dois outros localizados nas projees
laterais da face adaxial. Grande quantidade de idioblastos
com drusas ocorre em todo o colnquima, parnquima e
feixes vasculares.
caractersticas: colorao verde-amarelada; fragmentos de
epiderme da face adaxial com clulas como as descritas,
sem estmatos; fragmentos de epiderme da face abaxial
com clulas como as descritas, com estmatos, como
descritos; fragmentos de mesoflo em seco transversal,
com idioblastos contendo drusas; drusas isoladas;
fragmentos de tecido vascular.
IDENTIFICAO
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G,
como suporte, e mistura de acetato de etila, gua e cido
frmico anidro (80:10:10), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, em forma de banda, 10 L da
Soluo (1) e 5 L da Soluo (2), recentemente preparadas,
descritas a seguir.
Soluo (1): agitar, em ultrassom, durante 10 minutos,
uma disperso a 50 mg/mL do p fno da droga vegetal em
mistura de etanol e gua (1:1). Filtrar.
Soluo (2): soluo a 100 g/mL de vitexina e rutina em
mistura de etanol e gua (1:1).
secar ao ar. Nebulizar a placa com difenilborato de
aminoetanol SR seguido de polietilenoglicol 4000 a 5%
(p/v) em metanol. Examinar sob luz ultravioleta (365
nm). A regio do cromatograma obtida com Soluo (1)
apresenta fuorescncia alaranjada na linha de chegada
do solvente, com Rf de 1,0. As manchas obtidas com a
Soluo (1) com Rf de 0,75 e de 0,45 correspondem em
posio quelas obtidas com a Soluo (2), referentes
vitexina e rutina, respectivamente. Entre elas, a regio
do cromatograma obtida com a Soluo (1) apresenta duas
manchas fuorescentes, uma alaranjada, com Rf de 0,62,
e outra amarelo-esverdeada, com Rf de 0,53. A regio do
cromatograma obtida com Soluo (1) apresenta tambm
mais duas manchas fuorescentes bem defnidas, uma
amarelo-esverdeada, com Rf de 0,29, e outra alaranjada,
com Rf de 0,22. Diferencia-se da P. edulis pela ausncia
de manchas fuorescentes amarelo-esverdeadas, com Rf de
0,8 e 0,85, acima da mancha referente vitexina.
um); fuxo da Fase mvel de 0,8 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de soluo aquosa de cido fosfrico a
0,05% (v/v), tetraidrofurano e lcool isoproplico (80:17:3).
droga seca e pulverizada (180 m) e colocar em balo
volumtrico de 50 mL. Adicionar aproximadamente 30 mL
de soluo de etanol e gua (1:1), agitar por ultrassom por
a
m
1117
Agitar manualmente por mais cinco minutos e fltrar o
extrato com papel fltro.
isovitexina para balo volumtrico de 10 mL e adicionar
vitexina 4-ramnosil para balo volumtrico de 10 mL e
adicionar cerca de 7 mL de soluo de etanol e gua (1:1).
Agitar por ultrassom por 10 minutos. Completar o volume
com mesma soluo.
isorientina para balo volumtrico de 10 mL e adicionar
Soluo de referncia e da Soluo amostra. Os tempos de
reteno relativos so cerca de 0,75, 0,79 e 1 para vitexina
4-ramnosil, isorientina e isovitexina, respectivamente.
Apresenta ainda dois picos bem defnidos caractersticos
de favonide com tempos de reteno relativos inferior
a 0,75. Estes picos desconhecidos no correspondem
saponarina, orientina ou vitexina. Diferencia-se de
Passifora edulis pela presena de isorientina.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 11,0%.
NDICE DE ESPUMA
Proceder conforme descrito em Determinao do ndice de
espuma (5.4.2.10), utilizando 0,1 g da droga pulverizada
(180 m). Calcular o ndice de espuma conforme a seguinte
expresso:
V P
IE
=
1000
em que
P = percentual da droga utilizada no preparo do decocto;
V = volume, em mililitros, do decocto usado para
preparao da diluio no tubo de ensaio com espuma de
1 cm de altura.
O IE de no mnimo 5000.
DOSEAMENTO
flavonides totais
a seguir.
redondo de 50 mL. Adicionar 20 mL de etanol a 50% (v/v)
e aquecer sob refuxo por 30 minutos. Filtrar a mistura para
balo volumtrico de 50 mL utilizando algodo. Retornar
o algodo para o mesmo balo de refuxo e adicionar
20 mL de etanol a 50% (v/v), mantendo em refuxo por
mais 30 minutos. Filtrar, usando papel fltro, para o balo
volumtrico de 50 mL, completando o volume com etanol
a 50% (v/v).
balo volumtrico de 10 mL. Adicionar 0,8 mL de cloreto
de alumnio a 2% (p/v) em etanol 50% (v/v), completando
o volume com o mesmo solvente.
Soluo branco: transferir 0,8 mL da Soluo estoque para
etanol 50% (v/v).
Medir a absorvncia da Soluo amostra em 397 nm, em
cubeta de 1 cm, 30 minutos aps seu preparo, utilizando
a Soluo branco para o ajuste do zero. Calcular o teor
de favonides totais, calculado como apigenina, em
porcentual (p/p), segundo a expresso:
) 100 (
100
% 1
1
PD m E
FD A
TFT
cm

=
em que
A = absorvncia;
FD = fator de diluio (625);
=
%
cm
E
1
1
absortividade especfca (365,3);
PD = perda por dessecao (%; p/p).
do calor.
a
m
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos de Passifora alata Curtis
______________
Complemento da legenda da figura 1. As rguas correspondem em A a 3 cm; em B e C a 1 cm; em D e E a 50 m.
A aspecto geral da folha, mostrando a nervao peninrvea, pice acuminado, base reentrante e margem lisa. B detalhe do pecolo com dois pares
de nectrios extraforais. C detalhe do pecolo com gavinha aderida. D epiderme voltada para a face adaxial da lmina foliar, em vista frontal. E
epiderme voltada para a face abaxial da lmina foliar, em vista frontal: estmato anisoctico (ei); estmato paractico (esp).
a
m
1119
figura 2 Aspectos microscpicos de Passifora alata Curtis
________________
Complemento da legenda da figura 2. As rguas correspondem em A a 100 m; em B, C e D a 500 m; em E a 50 m.
A seco transversal do mesoflo: face abaxial (ab); face adaxial (ad); cutcula (cu); drusa (d); feixe vascular (fv); parnquima palidico (pp);
parnquima esponjoso (pj). B e C esquema de poro da lmina foliar na nervura principal, em seco transversal, mostrando variao do feixe
vascular: face abaxial (ab); face adaxial (ad); cmbio (ca); colnquima (co); epiderme (ep); foema (f); fbras do foema (ff); feixe vascular (fv); incluso
celular (ic); parnquima (p); parnquima esponjoso (pj); parnquima palidico (pp); xilema (x). D esquema do aspecto geral da seco transversal
do pecolo: face abaxial (ab); face adaxial (ad); cmbio (ca); colnquima (co); epiderme (ep); foema (f); feixe vascular (fv); incluso celular (ic);
parnquima (p); xilema (x). E detalhe da seco transversal do pecolo mostrando drusa em clula parenquimtica: incluso celular (ic).
a
m
MEBENDAZOL
Mebendazolum
N
H
N
O
N
OCH
3
O
H
C
16
H
13
N
3
O
3
; 295,29
mebendazol; 05515
ster metlico do cido N-(6-benzoil-1H-benzimidazol-2-
il)carbmico
[31431-39-7]
C
16
H
13
N
3
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno branco a ligeiramente
amarelo e inodoro.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, clorofrmio,
cloreto de metileno, etanol e ter etlico. Solvel em cido
frmico e praticamente insolvel em cidos minerais.
IDENTIFICAO
mebendazol SQR, preparado de maneira idntica.
B. Dissolver 30 mg da amostra em 2 mL de cido frmico
anidro e diluir, sucessivamente, em lcool isoproplico, at
concentrao de 0,00075% (p/v). O espectro de absoro
no ultravioleta (5.2.14), na faixa de 230 nm a 320 nm, exibe
mximos em 247 nm e 312 nm, idnticos aos observados
no espectro de soluo similar de mebendazol SQR.
C. Dissolver 40 mg da amostra em 2 mL de cido frmico
anidro e adicionar 5 mL de etanol acidifcado com algumas
gotas de cido clordrico. Agitar vigorosamente e fltrar.
Adicionar ao fltrado cerca de 3 mg de cloridrato de
p-fenilenodiamina e agitar. Adicionar cerca de 0,1 g de
zinco em p e deixar em repouso por 2 minutos. Adicionar
5 mL de sulfato frrico amoniacal cido SR. Desenvolve-
se colorao violeta.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
metanol e cido frmico anidro (90:5:5), como fase mvel.
Soluo (1): dissolver 50 mg da amostra em 1 mL de cido
frmico anidro e completar o volume para 10 mL com
clorofrmio.
Soluo (2): dissolver 50 mg de mebendazol SQR em 1 mL
de cido frmico anidro e completar o volume para 10 mL
com clorofrmio.
de clorofrmio e cido frmico anidro (9:1). Homogeneizar.
A mancha principal do cromatograma da Soluo (1),
com a Soluo (2). Qualquer mancha secundria obtida
Soluo (3) (0,5%).
mximo 0,002% (20 ppm).
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
Titular com cido perclrico 0,1 M SV, determinando o
ponto fnal potenciometricamente. Realizar ensaio em
16
H
13
N
3
O
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-helmntico.
MEBENDAZOL COMPRIMIDOS
16
H
13
N
3
O
3
.
a
m
1121
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G

como suporte,
e mistura de clorofrmio, metanol e cido frmico a 96%
(p/p) (90:5:5), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
Soluo (1): triturar at p fno no mnimo 10 comprimidos,
pesar o equivalente a 0,2 g de mebendazol, adicionar 20
mL de mistura de clorofrmio e cido frmico a 96% (p/p)
(19:1), deixar em banho-maria durante 1 a 2 minutos,
esfriar e fltrar.
Soluo (2): preparar soluo de mebendazol SQR a 10
mg/mL em mistura de clorofrmio e cido frmico a 96%
(p/p) (19:1).
CARACTERSTICAS
Procedimento para uniformidade de contedo: transferir
cada comprimido para um balo volumtrico de 100
mL, adicionar 20 mL de cido frmico e aguardar total
desintegrao do comprimido. Aquecer em banho-
maria por 15 minutos. Esfriar, completar o volume
com lcool isoproplico. Homogeneizar e fltrar. Diluir,
sucessivamente, em lcool isoproplico, at a concentrao
concentrao, utilizando as mesmas condies. Medir as
utilizando mistura de cido frmico a 96% (p/p) e lcool
isoproplico (1:500) para ajuste do zero. Calcular o teor de
C
16
H
13
N
3
O
3
nos comprimidos a partir das leituras obtidas.
Meio de dissoluo: laurilsulfato de sdio a 1,0% (p/v) em
cido clordrico 0,1 M, 900 mL
Tempo: 120 minutos
dissoluo, fltrar e diluir com Meio de dissoluo at
nm (5.2.14), utilizando o Meio de dissoluo para ajuste
16
H
13
N
3
O
3
dissolvida
de mebendazol SQR na concentrao de 0,0005% (p/v),
declarada de C
16
H
13
N
3
O
3
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
50 mg de mebendazol para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 10 mL de cido frmico e agitar mecanicamente
por 15 minutos. Completar o volume com lcool
isoproplico. Homogeneizar e fltrar. Transferir 1 mL do
fltrado para balo volumtrico de 100 mL, adicionar 5
mL de cido clordrico 0,1 M, completar o volume com
lcool isoproplico e homogeneizar. Preparar soluo
em 290 nm, utilizando mistura de cido clordrico 0,1 M
e lcool isoproplico (5:95) para ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
16
H
13
N
3
O
3
leituras obtidas.
absoro no ultravioleta (5.2.14).
mebendazol para balo volumtrico de 100 mL, adicionar
50 mL de cido frmico e aquecer em banho-maria a 50
C por 15 minutos. Esfriar e completar o volume com
gua. Homogeneizar e fltrar atravs de fltro de vidro de
mdia porosidade. Transferir 10 mL do fltrado para funil
de separao, adicionar 50 mL de clorofrmio e 50 mL de
gua. Agitar durante 2 minutos, deixar separar as fases e
transferir a camada clorofrmica para um segundo funil de
separao. Lavar a camada aquosa com duas pores de 10
mL de clorofrmio, reunindo os extratos clorofrmicos no
segundo funil de separao. Descartar a camada aquosa.
Lavar os extratos clorofrmicos combinados, com mistura
de cido clordrico 0,1 M e cido frmico a 10% (v/v) (4:50).
Transferir a camada clorofrmica para balo volumtrico
de 100 mL. Lavar a camada aquosa com duas pores de
10 mL de clorofrmio reunindo os extratos clorofrmicos
no mesmo balo volumtrico. Completar o volume com
lcool isoproplico e homogeneizar. Transferir 5 mL da
volume com lcool isoproplico e homogeneizar.
Soluo padro: transferir 20 mg de mebendazol SQR
a
m
clorofrmio, 7 mL de lcool isoproplico e 2 mL cido
frmico a 10% (v/v). Agitar at completa dissoluo e
completar o volume com lcool isoproplico. Transferir
5 mL desta soluo para balo volumtrico de 200
mL. Completar o volume com lcool isoproplico e
homogeneizar.
Soluo branco: transferir 45 mL de clorofrmio para
balo volumtrico de 100 mL, adicionar 1 mL de cido
frmico a 10% (v/v), completar com lcool isoproplico
e homogeneizar. Transferir 5 mL da soluo para balo
volumtrico de 100 mL, completar com lcool isoproplico
e homogeneizar.
utilizando a Soluo branco para o ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
16
H
13
N
3
O
3
nos comprimidos, a partir das
leituras obtidas.
C. Por Cromatografa a lquido de alta efcincia (5.2.17.4).
ligada a grupo octadecilsilano (3 a 10 m), mantida
temperatura de 30 C, fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/
minuto.
monobsico 0,05 M (60:40). Ajustar o pH para 5,5 com
cido fosfrico 0,1 M ou hidrxido de sdio M.
mebendazol, para balo volumtrico de 100 mL, adicionar
50 mL de acido frmico e aquecer em banho-maria a 50
C por 15 minutos. Agitar mecanicamente por uma hora,
completar o volume com gua, homogeneizar e fltrar.
mL, completar o volume com mistura de cido frmico
e metanol (1:9) e homogeneizar. Transferir 5 mL dessa
volume com Fase mvel, homogeneizar e fltrar.
Soluo padro: transferir 25 mg de mebendazol SQR,
exatamente pesados, para balo volumtrico de 100 mL.
Adicionar 10 mL de cido frmico e aquecer em banho-
maria 50 C por 15 minutos. Agitar mecanicamente
por 5 minutos, acrescentar 80 mL de metanol e
resfriar. Completar o volume com o mesmo solvente e
homogeneneizar. Transferir 5 mL dessa soluo para balo
volumtrico de 25 mL, completar o volume com a Fase
mvel, homogeneizar e fltrar.
tericos. O fator de cauda no deve ser maior de 2,0. O
C
16
H
13
N
3
O
3
com a Soluo padro e a Soluo amostra
ROTULAGEM
MEBENDAZOL SUSPENSO ORAL
Contm, no mnimo, 90,0% e, no mximo, 110,0%, da
16
H
13
N
3
O
3
.
IDENTIFICAO
CARACTERSTICAS
Aspecto. Esvaziar completamente o contedo de 10 frascos,
previamente agitados, em provetas correspondentes, limpas
e secas, providas de tampa, e observar imediatamente sob
condies adequadas de visibilidade. O contedo escorre
com fuidez, a suspenso se apresenta homognea, viscosa,
livre de grumos e partculas estranhas. Aps 24 horas
de repouso, pode apresentar ligeira sedimentao que
ressuspende aps agitao.
pH (5.2.19). 4,0 a 7,5.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
metanol e cido frmico (90:5:5), como fase mvel.
Soluo (1): a uma alquota equivalente a 10 mg de
mebendazol, adicionar 1 mL de cido frmico, agitar
at dissoluo, completar o volume para 10 mL com
clorofrmio, homogeneizar e fltrar.
a
m
1123
Soluo (2): pesar 10 mg de mebendazol SQR, adicionar
1 mL de cido frmico, agitar at dissoluo, completar o
volume para 10 mL com clorofrmio e homogeneizar.
uma mistura de clorofrmio e cido frmico (9:1) e
homogeneizar.
a Soluo (1), diferente da mancha principal, no maior
nem mais intensa que aquela obtida com a Soluo (3)
(0,5%).
mximo 1000 UFC/mL. Fungos e leveduras: no mximo
100 UFC/mL.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
da suspenso oral equivalente a 100 mg de mebendazol
cido frmico e agitar at completa dissoluo. Completar
o volume com cido frmico e misturar. Transferir 5 mL
desta soluo para balo volumtrico de 50 mL, adicionar
5 mL de cido clordrico 0,1 M, agitar e completar o
volume com lcool isoproplico. Aquecer at leve fervura
e fltrar. Esfriar e diluir em lcool isoproplico at a
utilizando cido clordrico 0,1 M e lcool isoproplico (1:9)
para o ajuste do zero. Calcular a quantidade de C
16
H
13
N
3
O
3

na suspenso oral a partir das leituras obtidas.
da suspenso oral equivalente a 100 mg de mebendazol
cido frmico e colocar em banho-maria a 50 C durante
15 minutos. Esfriar, completar o volume com gua,
homogeneizar e fltrar atravs de um fltro de vidro de
mdia porosidade. Transferir 10 mL do fltrado para um
funil de separao, adicionar 50 mL de clorofrmio, 50
mL de gua e agitar durante 2 minutos. Deixar separar
as fases e transferir a camada clorofrmica para um
segundo funil de separao. Lavar a camada aquosa
com duas pores de 10 mL de clorofrmio e adicionar
os lavados clorofrmicos ao segundo funil de separao.
Lavar os extratos clorofrmicos combinados com uma
mistura de cido clordrico M e cido frmico a 10% (v/v)
(4:50). Transferir a camada clorofrmica para um balo
volumtrico de 100 mL. Lavar a camada aquosa com duas
pores de 10 mL de clorofrmio, adicionar o extrato ao
balo volumtrico, completar com lcool isoproplico e
misturar. Diluir, sucessivamente, em lcool isoproplico at
a concentrao de 0,0005% (p/v). Preparar soluo padro
Preparar o branco como descrito a seguir. Transferir 45
mL de clorofrmio para um balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 1 mL de cido frmico a 10% (v/v), completar
com lcool isoproplico, homogeneizar, transferir 5 mL
desta soluo para um balo volumtrico de 100 mL,
completar com lcool isoproplico e homogeneizar. Medir
utilizando o branco para ajuste do zero. Calcular o teor de
C
16
H
13
N
3
O
3
na suspenso oral a partir das leituras obtidas.
Em recipientes de vidro mbar, bem fechados.
ROTULAGEM
MEIMENDRO
Hyoscyami folium
Hyoscyamus niger L. SOLANACEAE; 09910
A droga consiste de folhas secas e deve apresentar no mnimo
0,05% de alcaloides totais expressos em hiosciamina
(C
17
H
23
NO
3
; 289,4). Os alcaloides so principalmente a
hiosciamina acompanhada de escopolamina (hioscina) em
propores variadas.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Odor ligeiramente
nauseoso.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas inteiras, de at 30 cm de comprimento e 10 cm
de largura, ovaladas a ovalado-oblongas, de pice agudo
e base cordada nas folhas ssseis e atenuada nas folhas
pecioladas, de bordo lobado, irregularmente dentado;
colorao verde amarelada a verde acastanhada; nervura
principal larga e muito desenvolvida, nervuras secundrias
formando ngulo pronunciado com a nervura principal,
terminando na extremidade dos lobos. Lminas foliares
fortemente pubescentes e viscosas nas duas faces. Folhas
friveis e frequentemente partidas.
a
m
DESCRIO MICROSCPICA
Folha anfestomtica e de simetria dorsiventral. A
epiderme, em vista frontal, apresenta clulas de paredes
sinuosas, com sinuosidade mais evidente na face abaxial.
Os tricomas so tectores e glandulares. Os tricomas
tectores so lisos, de paredes espessas, longos, cnicos e
pluricelulares, geralmente com 2 a 4 clulas. Os tricomas
glandulares podem apresentar pedicelo longo, unicelular
ou pluricelular e unisseriado, com uma pequena cabea
glandular bicelular, que exsuda uma substncia viscosa
ou com uma grande cabea glandular pluricelular
elptica e outras vezes, so muito curtos e formados por
um pequeno pedicelo que sustenta uma grande glndula
claviforme e pluricelular. Os estmatos so anisocticos,
elpticos e acompanhados por 3 a 4 clulas subsidirias,
das quais uma sempre menor do que as outras; ocorrem
em maior quantidade na face abaxial. A epiderme, em
seco transversal, se apresenta recoberta por uma cutcula
lisa e uniestratifcada. O mesoflo formado por uma
nica camada de parnquima palidico, seguida por um
parnquima esponjoso onde ocorrem, principalmente na
regio mais prxima ao parnquima palidico, idioblastos
com cristais de oxalato de clcio, geralmente prismticos.
A nervura principal biconvexa e o feixe vascular
principal apresenta feixes vasculares bicolaterais; os feixes
secundrios tambm so bicolaterais e envoltos por um
periciclo pouco lignifcado.
espcie, menos as caractersticas macroscpicas. So
caractersticos: cor verde acinzentado; fragmentos da
epiderme mostrando clulas de paredes sinuosas e cutcula
lisa; estmatos anisocticos mais abundantes na face
abaxial; tricomas tectores pluricelulares, unisseriados e
tricomas glandulares conforme descritos; fragmentos do
mesoflo, conforme descrito; uma s camada de clulas
em paliada e um parnquima esponjoso contendo prismas
simples ou duplos de oxalato de clcio; elementos de vaso
com espessamento anelado ou helicoidal.
DESCRIO MICROSCPICA DE IMPUREZAS
NO P
O p pode igualmente apresentar fbras e elementos de vaso
reticulados do caule; gros de plen subesfricos, com um
dimetro que pode atingir 60 m, trs poros germinativos,
trs sulcos e uma exina praticamente lisa; fragmentos de
corola de epiderme papilosa; fragmentos de sementes
contendo escleredes do tegumento de paredes espessas,
sinuosos, de cor castanho-amarelada e cristais cuneiformes
de oxalato de clcio.
IDENTIFICAO
254
, como
suporte, e mistura de soluo concentrada de amnia,
gua e acetona (3:7:90) como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, em forma de banda de 20 mm por
3 m, a 1 cm de distncia, 10 L da Soluo amostra e 20
L da Soluo padro, descritas a seguir.
Soluo amostra: a 2 g da amostra pulverizada, adicionar
20 mL de cido sulfrico 0,05 M. Agitar durante 15
minutos e fltrar. Lavar o fltro com cido sulfrico 0,05 M
at obteno de 25 mL de fltrado. Adicionar, ao fltrado, 1
mL de amnia concentrada e agitar duas vezes com 10 mL
de ter etlico isento de perxidos de cada vez. Separar, se
necessrio, por centrifugao. Renir as camadas etreas e
sec-las com sulfato de sdio anidro. Filtrar e evaporar o
fltrado secura em banho-maria. Dissolver o resduo em
0,5 mL de metanol.
Soluo padro: dissolver 50 mg de sulfato de hiosciamina
SQR em 9 mL de metanol. Dissolver 15 mg de bromidrato
de escopolamina SQR em 10 mL de metanol. A 3,8 mL
da soluo de sulfato de hiosciamina, adicionar 4,2 mL
da soluo de bromidrato de escopolamina e completar o
volume para 10 mL com metanol.
secar ao ar. Nebulizar com iodeto de potssio e subnitrato
de bismuto SR e observar as manchas alaranjadas. Em
seguida, nebulizar a placa com nitrito de sdio a 5% (p/v)
at que o gel se torne transparente e examinar depois de
15 minutos. A colorao das bandas correspondentes
hiosciamina nos cromatogramas obtidos com a Soluo
amostra, mudam de castanho para castanho avermelhado,
mas no para azul acinzentado (atropina) e as bandas
secundrias desaparecem, eventualmente. A sequncia
das bandas presentes nos cromatogramas obtidos com a
Soluo padro e com a Soluo amostra semelhante
das bandas correspondentes dos cromatogramas obtidos
com o mesmo volume da Soluo padro. Podem aparecer
bandas secundrias fracas, particularmente no centro do
cromatograma obtido com 20 L da Soluo padro, ou
perto da linha de aplicao, no cromatograma obtido com
10 L da Soluo amostra.
B. Agitar 3 g de droga pulverizada com 30 mL de cido
sulfrico 0,05 M SR durante 2 minutos e fltrar. Alcalinizar
o fltrado com 3 mL de amnia SR e adicionar atravs do
fltro 15 mL de gua. Transferir a soluo alcalina para
funil de separao e extrair sucessivamente utilizando
trs alquotas de 15 mL de clorofrmio. Reunir as fases
clorofrmicas e adicionar sulfato de sdio anidro. Filtrar e
dividir o fltrado em trs cpsulas de porcelana (A, B e C),
procedendo evaporao do solvente.
Reao de Vitali-Morin
Na primeira cpsula adicionar 0,5 mL de cido ntrico
fumegante e evaporar secura em banho-maria. Adicionar
ao resduo 2 mL de acetona e gotejar uma soluo de
hidrxido de potssio 3% (p/v) em etanol. Desenvolve-se
colorao violeta, caracterizando presena de atropina e/
ou hisciamina.
Reao de Wasicky
Adicionar uma gota do p-dimetilaminobenzaldedo SR2
(Reagente de Wasicky) na segunda cpsula e aquecer
a
m
1125
ligeiramente. Forma-se uma colorao roxo-avermelhada,
a princpio nas bordas e, posteriormente, em toda a gota,
caracterizando a presena de atropina e/ou hiosciamina.
ENSAIOS DE PUREZA
com mais de 7 mm de dimetro.
gua (5.4.2.3). No mximo 12,0%.
DOSEAMENTO
Alcalides totais
umedecer com 5 mL de amnia. Adicionar 10 mL de etanol
e 30 mL de ter etlico isento de perxido, misturados
cuidadosamente. Transferir a mistura para um percolador,
se necessrio, com auxlio da soluo extratora. Macerar
durante 4 horas e percolar com mistura de clorofrmio e ter
etlico isento de perxidos (1:3), at extrao completa dos
alcaloides. Evaporar secura 1 mL do percolado e dissolver
o resduo em cido sulfrico 0,25 M e verifcar a ausncia de
alcaloides com iodeto de potssio mercrio SR. Reduzir o
volume do percolado at 50 mL e transferir para um funil de
separao com auxlio de ter isento de perxidos. Ao lquido
assim obtido adicionar ter etlico isento de perxidos, 2,5
vezes o volume do percolador at a obteno de um lquido
de densidade inferior a da gua. Extrair a soluo, no mnimo
trs vezes, com 20 mL de soluo de cido sulfrico 0,25 M
cada vez. Separar as fases, por centrifugao, se necessrio,
e transferir a fase cida para outro funil de separao.
Alcalinizar a fase cida com hidrxido de amnio at pH 8-9
e extrair trs vezes com clorofrmio, com alquotas de 30
mL. Juntar as fases clorofrmicas e retirar a gua residual,
adicionando 4 g de sulfato de sdio anidro, deixando em
repouso por 30 minutos, com agitao ocasional. Retirar a
fase clorofrmica e lavar o sulfato de sdio restante com
trs alquotas de 10 mL de clorofrmio. Reunir os extratos
clorofrmicos e evaporar secura em banho-maria. Aquecer
o resduo em estufa a 100 C-105 C durante 15 minutos.
Dissolver o resduo em 5 mL de clorofrmio, adicionar 20
mL de soluo de cido sulfrico 0,01 M SV e remover o
clorofrmio por evaporao em banho-maria. Titular o
excesso de cido com soluo de hidrxido de sdio 0,02 M
SV utilizando vermelho de metila SI como indicador.
Calcular o teor em porcentagem de alcaloides totais,
expressos em hiosciamina, segundo a expresso:
em que
d = perda por secagem (%);
n = nmero de mililitros de hidrxido de sdio 0,02 M
gastos;
m = massa da tomada de ensaio, em gramas.
a
m
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Hyoscyamus niger L.
_________________
A representao esquemtica da folha: lmina foliar (lf). B detalhe de poro da epiderme voltada para a face adaxial, em vista frontal: estmato
(es); tricoma tector (tt). C detalhe da poro do mesoflo, em seco transversal: eatmato (es); tricoma tector (tt). D detalhe de poro da epiderme
voltada para a face abaxial, em vista frontal: tricoma glandular (tg); tricoma tector (tt); cutcula (cu); epiderme (ep); parnquima palidico (pp);
idioblasto contendo cristais prismticos de oxalato de clcio (ic); parnquima esponjoso (pj); estmato (es).
a
m
1127
figura 2 Aspectos da microscopia do p em Hyoscyamus niger L.
______________
A, B, C, D e E representao esquemtica do p. A fragmento da epiderme em vista frontal, na face adaxial: estmato do tipo anisoctico (es);
parnquima palidico (pp). B fragmento da epiderme em vista frontal, na face abaxial: estmato do tipo anisoctico (es); tricoma tector (tt). C
fragmento da epiderme mostrando cristais e pores de elementos de vaso por transparncia: idioblasto cristalfero (ic); feixe vascular (fv). D
fragmento de poro do mesoflo, em seco transversal: cutcula (cu); epiderme (ep); idioblasto cristalfero (ic); parnquima esponjoso (pj); parnquima
palicdico (pp). E tricomas ou pores destes, isolados: tricoma glandular (tg); tricoma tector (tt).
MELISSA
Melissae folium
Melissa offcinalis L. LAMIACEAE; 09913A droga
vegetal constituda de folhas secas contendo, no mnimo,
4,0% de derivados hidroxicinmicos totais e, no mnimo
2,0% de cido rosmarnico e, no mnimo, 0,6% de leo
voltil.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As folhas amassadas
tm odor forte, aromtico, semelhante ao citral e sabor
aromtico agradvel e ligeiramente amargo, um pouco
adstringente.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas inteiras, membranosas, rugosas, opostas-cruzadas,
quebradias, pecioladas, verde-escuras e brilhantes na face
adaxial e verde-claras na face abaxial, quando secas s
vezes vinosas, principalmente na regio prxima ao pecolo
e sobre as nervuras da face abaxial, com tricomas tectores e
raros glandulares na face adaxial e com numerosos tricomas
tectores e glandulares na face abaxial, estes ltimos
parecendo pequenos pontos, visveis com lente de aumento
de seis vezes; venao camptdroma-reticuldroma,
nervuras depressas na face adaxial e proeminentes na
face abaxial, nervuras de menor ordem formando malhas
caractersticas. Lmina ovalada a ovalado-cordiforme, com
base ovalada, arredondada ou cordiforme, pice obtuso
e margem irregularmente crenado-serrada, fnamente
ciliada, medindo de 4,0 cm a 8,0 cm de comprimento e
3,0 cm a 5,0 cm de largura. Pecolo de 0,3 cm a 5,0 cm de
a
m
comprimento, verde ou vinoso quando seco, cncavo na
face adaxial, convexo na face abaxial e com duas costelas
laterais; face adaxial coberta por longos tricomas tectores,
os das costelas visveis a olho nu.
DESCRIO MICROSCPICA
Lmina foliar com simetria dorsiventral, anf-
hipoestomtica, com estmatos diacticos. Em vista
frontal, a cutcula estriada e as clulas da epiderme
apresentam paredes anticlinais de contorno sinuoso na
face adaxial e muito sinuosas na face abaxial na regio
entre as nervuras, e paredes retilneas sobre as nervuras.
A epiderme da lmina foliar apresenta at seis tipos de
tricomas: (1) tectores cnicos a triangulares, dentiformes,
unicelulares, raramente bicelulares, curtos, de paredes
verrucosas e cutcula espessa; (2) tectores pluricelulares
unisseriados, de trs a cinco clulas, sendo a apical de
pice agudo, de aspecto uncinado, de paredes espessas
e cutcula spera, verrucosa ou estriada; (3) tectores
pluricelulares unisseriados, de trs a nove clulas, muito
longos, de paredes espessas e cutcula spera, verrucosa ou
estriada; (4) tectores, pluricelulares unisseriados, de trs a
nove clulas, muito longos e de base alargada, formada por
uma coroa de clulas; (5) glandulares de cabea unicelular
ou bicelular, arredondada e pedicelo unicelular, bicelular
ou tricelular; (6) glandulares peltados, quase ssseis, com
pedicelo unicelular e localizado abaixo das demais clulas
epidrmicas e com cabea secretora octocelular, capitada,
com cutcula dilatada, apresentando colorao geralmente
parda. Em seco transversal, a cutcula espessa, rugosa
e estriada e a epiderme uniestratifcada, com clulas
achatadas transversalmente na face adaxial, maiores
do que as da face abaxial; so visveis antocianinas,
principalmente nas clulas da face abaxial das folhas
jovens; os estmatos so projetados; tricomas tectores do
tipo 1 ocorrem em maior nmero na face abaxial e os do
tipo 2 so mais comuns sobre as nervuras da face adaxial;
tricomas tectores do tipo 3 ocorrem principalmente na face
adaxial e so mais comuns sobre as nervuras; tricomas
tectores do tipo 4 so ocorrentes na face abaxial na regio
das nervuras e na regio intercostal da face adaxial;
tricomas glandulares dos tipos 5 e 6 so mais comuns
na face abaxial. O parnquima palidico compacto e
uniestratifcado, ocupando quase a metade da seco e o
parnquima esponjoso pouco frouxo e biestratifcado
ou triestratifcado; na regio do bordo foliar estes tecidos
so mais compactos; gros de amido presentes em todos
os tecidos; gotas de leo ausentes; cristais de oxalato de
clcio ausentes. A nervura principal, em seco transversal,
apresenta cutcula lisa na face adaxial e estriada na abaxial,
as clulas epidrmicas so isodiamtricas, o colnquima
angular, uniestratifcado junto face abaxial e com
trs a quatro camadas junto face adaxial, seguido por
clornquima de clulas isodiamtricas, com uma a duas
camadas junto face abaxial e por at seis camadas junto
face adaxial, e por um parnquima tambm com clulas
isodiamtricas, de paredes fnas, com maiores espaos
intercelulares e maior desenvolvimento junto face
abaxial. O sistema vascular formado em regra por um
nico feixe colateral, raro dois ou trs, envolvido por uma
endoderme contnua ou no; o cmbio fascicular evidente.
O pecolo, em seco transversal, apresenta cutcula
espessa, rugosa e estriada, epiderme uniestratifcada de
clulas isodiamtricas, que podem conter antocianinas,
os estmatos so projetados; os tricomas so os mesmos
citados para a lmina; nas regies das proeminncias
laterais, bastante comum a ocorrncia de tricomas
tectores, longos e de base alargada, (tipo 4 citado para a
lmina foliar), raros na face abaxial. Os tricomas tectores,
unisseriados e longos (tipo 3), ocorrem principalmente na
face adaxial e os tricomas tectores cnicos, dentiformes
(tipo 1), ocorrem em maior nmero na face abaxial. Os
tricomas glandulares octocelulares (tipo 6) so mais
comum na face abaxial. O colnquima angular, possui
cloroplastdios e esta distribudo em toda a extenso do
pecolo, uniestratifcado ou biestratifcado na face adaxial
e triestratifcado na face abaxial; na regio das costelas
ocorrem at sete camadas. seguido por um clornquima
mais compacto e com mais cloroplastdios junto s costelas
e por um parnquima formado por clulas isodiamtricas,
de paredes delgadas, com espaos intercelulares pequenos
e poucos cloroplastdios. O sistema vascular formado
por trs a cinco feixes colaterais, cada um deles envolvido
por endoderme; o foema pode apresentar clulas ptreas
junto s fbras e o xilema tem distribuio radial; o cmbio
fascicular evidente. Gros de amido ocorrem em todos
os tecidos, em maior densidade no clornquima e na
endoderme.
caractersticas: odor de citral; colorao esverdeada;
fragmentos de epiderme foliar com clulas de paredes
anticlinais sinuosas e estmatos diacticos e com cicatrizes
dos tricomas tectores do tipo dentiforme; grande quantidade
de tricomas conforme os descritos; fragmentos de mesoflo
como descrito; cristais de oxalato de clcio ausentes.
DESCRIO MACROSCPICA DAS IMPURE-
ZAS
Os caules, ramos, fores e frutos da prpria espcie,
se presentes como impureza, caracterizam-se: caule
quandrangular, piloso quando jovem; fores pequenas,
estipitadas e protegidas por brcteas foliceas, semelhantes
s demais folhas; clice pubescente, tubuloso-campanulado,
bilabiado, lbio superior tridentado e inferior bfdo; corola
branca a amarelada ou rosada, com tubo recurvado e limbo
com dois lobos desiguais, o superior ereto, bfdo e o inferior
estendido, trilobado, com lobos obtusos, sendo o mediano
o mais longo; estames quatro, didnamos, coniventes sob
o lbio superior da corola, anteras com tecas divergentes;
ovrio spero, tetralobado, com lculos monosprmicos;
estilete ginobsico, bfdo; fruto tetraqunio, de colorao
marrom.
a
m
1129
DESCRIO MICROSCPICA DA IMPUREZA
CORRESPONDENTE AO CAULE
Os caules da prpria espcie, se presentes como impureza,
apresentam, em estrutura primria, cutcula espessa e
estriada, epiderme uniestratifcada com clulas polidricas,
estmatos distribudos prximos s costelas e localizados
muito acima das demais clulas epidrmicas, muitos
tricomas, mais comumente o tipo 6, alm dos tipos 2 e 5 e
os do tipo 4 distribuem-se nas costelas. O crtex apresenta
colnquima angular distribudo por toda a extenso e mais
desenvolvido nas costelas, clornquima e parnquima
cortical formado por clulas isodiamtricas com grandes
espaos intercelulares. A endoderme possui grande
quantidade de gros de amido e envolve os quatro feixes
colaterais. O parnquima medular formado por clulas
isodiamtricas de grande volume e de paredes delgadas.
Em estrutura secundria, a epiderme e o crtex mantm
suas caractersticas, exceto a clara reduo de tricomas
e a comum ocorrncia de clulas ptreas no parnquima
cortical. O foema possui grande quantidade de fbras, o
cmbio vascular evidente e o xilema apresenta grande
quantidade de gros de amido. Estes gros ocorrem em
todos os tecidos, exceto na epiderme e em maior quantidade
quando em estrutura secundria.
IDENTIFICAO
254
, com
espessura de 250 um, como suporte e uma mistura de
hexano e acetato de etila (90:10) como fase mvel. Aplicar,
e 10 uL da soluo (2), recentemente preparadas, como
descrito a seguir.
Soluo (1): transferir cerca de 2 g da droga moda
para balo de fundo redondo de 250 mL, adicionar 100
mL de gua. Adicionar 0,5 mL de xileno pela abertura
lateral k e destilar durante uma hora conforme descrito
em Determinao de leos volteis em drogas vegetais
(5.4.2.6). Aps a destilao, transferir a fase orgnica
para um balo aferido de 1 mL, lavar o tubo graduado do
aparelho com um pouco de xileno e completar 1 mL com
o mesmo solvente.
Soluo (2): dissolver 1 ug de citronelal e 10 ug de citral
em 25 mL de xileno.
secar ao ar. Em seguida, nebulizar a placa com soluo
de anisaldedo e deixar em estufa entre 100 C e 105 C,
durante 10 a 15 minutos. O cromatograma obtido com
a Soluo (2) apresenta, no tero inferior, uma mancha
dupla de colorao violeta-acinzentada a violeta-azulada
(citral) e, acima desta, uma mancha de colorao cinzenta
a violeta-acinzentada (citronelal). O cromatograma obtido
com a Soluo (1) apresenta manchas similares na posio
e colorao s manchas obtidas no cromatograma da
Soluo (2) e, entre estas manchas, uma mancha violeta-
avermelhada (epoxicariofleno). Outras manchas podem
ser observadas.
ENSAIOS DE PUREZA
e fores.
amostra moda (355 um), em estufa entre 100 C e 105C,
durante 2 h.
DOSEAMENTO
Derivados hidroxicinmicos totais
a seguir.
Soluo (1): transferir, exatamente, 0,2 g da droga
pulverizada para balo de fundo redondo. Acrescentar 190
mL de etanol a 50% (v/v) e aquecer em banho-maria, sob
refuxo, durante 30 minutos. Esfriar e fltrar. Lavar o fltro
com 10 mL de etanol a 50% (v/v). Transferir o fltrado e a
soluo de lavagem para balo volumtrico de 200 mL e
completar o volume com etanol a 50% (v/v).
Soluo (2): em um tubo de ensaio, adicionar 1 mL da
Soluo (1), 2 mL de cido clordrico 0,5 M, 2 mL de uma
soluo preparada dissolvendo 10 g de nitrito de sdio e 10
g de molibdato de sdio em 100 mL de gua e, aps, 2 mL
de hidrxido de sdio 2 M e completar o volume para 10
mL com gua e misturar.
Soluo branco: em outro tubo de ensaio, adicionar 1 mL
da Soluo (1), 2 mL de cido clordrico 0,5 M, 2 mL de
hidrxido de sdio 2 M e completar o volume para 10 mL
com gua.
Medir a absorvncia da Soluo (2) em 505 nm, aps o
seu preparo. Utilizar a Soluo branco para o ajuste do
zero. Calcular o teor, em percentagem, de derivados
hidroxicinmicos totais, expresso em cido rosmarnico,
considerando 400 como valor de absorvncia especifca do
cido rosmarnico em 505 nm, segundo a expresso:
m
x A
DHC
5
=
em que
DHC = derivados hidroxicinmicos totais, expresso em
cido rosmarnico (%);
A = absorvncia da Soluo (2);
de gua.
cido rosmarnico
com slica octadecilsilanizada, coluna de 150 mm de
a
m
com slica octadecilsilanizada (4 um), mantida a
temperatura ambiente; fuxo da fase mvel de 0,6 mL/
minuto.
Eluente A: gua e cido trifuoractico (100:0,1).
Eluente B: acetonitrila e cido trifuoractico (100:0,1).
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
Soluo amostra: pesar exatamente, cerca de 0,1 g da droga
seca e moda (800 um) e colocar em tubo de centrfuga
fechado. Adicionar 5 mL de etanol 40% (v/v) e levar ao
banho de ultrassom durante 10 minutos. Centrifugar por 5
minutos a 1500 rpm. Separar o sobrenadante transferindo-o
para balo volumtrico de 10 mL. Extrair novamente o
resduo da droga com 4 mL de etanol 40% (v/v) em banho
de ultrassom durante 5 minutos. Centrifugar e transferir o
sobrenadante para o mesmo balo volumtrico e completar
o volume para 10 mL com etanol 40% (v/v). Diluir 50 uL
da soluo resultante em 0,3 mL de gua.
Soluo padro estoque: dissolver 10 mg de cido
rosmarnico em 10 mL de metanol.
Soluoes para curva analtica: diluir uma alquota de
200 uL da Soluo padro estoque, metade, de modo a
obter soluo a 0,25 mg/mL. Realizar diluies sucessivas
da diluio anterior, em metanol, de modo a obter
concentraes de 7,80 ug/mL, 15,60 ug/mL, 31,25 ug/mL,
62,50 ug/mL, 125 ug/mL e 250 ug/mL.
para curva analtica e da Soluo amostra. Registrar
os cromatogramas e medir as reas dos picos. O tempo
de reteno de aproximadamente 10,3 minutos para o
cido rosmarnico. Calcular o teor de cido rosmarnico
na amostra a partir da equao da reta obtida com a curva
de calibrao. O resultado expresso pela mdia das
determinaes em gramas de cido rosmarnico por 100
gramas da droga (%), considerando o teor de gua
leos volteis
destilao. Adicionar 0,5 de xilol pela abertura lateral k.
Utilizar planta seca rasurada e no contundida. Proceder
20 g da droga rasurada. Destilar por 4 horas.
um; temperatura da coluna de 60 C a 300 C, a 3 C por
minuto (total: 80 minutos), temperatura do injetor a 220
C e temperatura do detector a 250 C; utilizar hlio a uma
presso de 80 kpa como gs de arraste; fuxo do gs de
Soluo amostra: diluir o leo voltil na razo de 2:100
em ter etlico.
Procedimento: injetar 1 uL desta soluo no cromatgrafo
a gs, utilizando diviso de fuxo de 1:50. Os ndices de
reteno linear dos constituintes do leo so calculados
em relao a uma srie homloga de hidrocarbonetos e
comparados com amostras referncia. A concentrao
relativa obtida por normalizao (integrao manual ou
eletrnica).
Calcular o ndice de Reteno Relativo, segundo a
expresso:
) (
) ( 100
100
1 z z
z x
tr tr
tr tr
n IK

+ =
+
em que
n = nmero de tomos de carbono do alcano com tempo de
reteno imediatamente anterior ao constituinte x a ser
caracterizado.
tr
x
= tempo de reteno do constituinte x (intermedirio
a tr
z
e tr
z+1
);
tr
z
= tempo de reteno do alcano imediatamente anterior
ao constituinte x;
tr
z+1
= tempo de reteno do alcano com n +1 carbonos
(imediatamente posterior ao constituinte x).
a
m
1131
figura 1 Cromatograma ilustrativo obtido com o leo voltil de Melissa offcinalis L.
As porcentagens dos principais compostos esto dentro dos seguintes intervalos:
Pico ndice de Reteno Constituinte Teor (%)
1 1234 Neral (citral b) 30,4 - 32,9
2 1265 Geranial (citral a) 49,0 - 53,3
3 1404 Beta-cariofleno 2,6 -3,1
4 1579 xido de cariofleno 3,9 - 6,4
Em recipiente de vidro bem fechado, ao abrigo da luz, calor e umidade.
a
m
figura 2 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Melissa offcinalis L.
_____________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A e B a 3 cm; em C, D, E,f, G, H, I, J, L, M e N a 100 um.
A aspecto geral de um ramo: caule (c); lmina foliar (lf); pecolo (pl). B detalhe da face adaxial de uma folha: lmina foliar (lf); pecolo (pl).
C detalhe de uma poro da face adaxial da lmina foliar, na regio do intercostal, em vista frontal: cicatriz do tricoma tector do tipo dentiforme
(ct); estmato (es); tricoma glandular com cabea bicelular, tipo 5 (tgb); tricoma glandular com cabea unicelular, tipo 5 (tgu); tricoma tector do tipo
a
m
1133
dentiforme, tipo 1 (ttd). D detalhe de uma poro da face adaxial da lmina foliar, sobre a nervura principal, em vista frontal: cicatriz do tricoma tector
do tipo dentiforme, tipo 1 (ct); tricoma glandular com cabea bicelular, tipo 5 (tgb); tricoma tector do tipo dentiforme, tipo 1 (ttd). E detalhe de uma
poro da face abaxial da lmina foliar, na regio intercostal, em vista frontal: cicatriz do tricoma tector do tipo dentiforme, tipo 1 (ct); estmato (es);
tricoma glandular com cabea bicelular, tipo 5 (tgb); tricoma glandular com cabea octacelular, tipo 6 (tgo); tricoma glandular com cabea unicelular,
tipo 5 (tgu); tricoma tector do tipo dentiforme, tipo 1 (ttd). f detalhe de uma poro da face abaxial da lmina foliar, sobre a nervura principal, em
vista frontal: cicatriz do tricoma tector do tipo dentiforme, tipo 1 (ct); tricoma glandular com cabea unicelular, tipo 5 (tgu); tricoma tector do tipo
dentiformde, tipo 1 (ttd). G detalhe de um tricoma tector pluricelular unisseriado, com coroa de clulas basais, tipo 4, em vista lateral. H detalhe
de um tricoma tector pluricelular unisseriado, de aspecto uncinado, tipo 2, em vista lateral. I detalhe de um tricoma tector pluricelular unisseriado,
tipo 3, em vista lateral. J detalhe de um tricoma tector dentiforme, unicelular, tipo 1, em vista lateral. L detalhe de um tricoma glandular de cabea
unicelular, tipo 5 , em vista lateral. M detalhe de um tricoma glandular de cabea bicelular, tipo 5, em vista lateral. N detalhe de um tricoma
glandular, com cabea secretora octocelular, tipo 6, em vista lateral.
a
m
figura 3 Aspectos microscpicos em Melissa offcinalis L.
_____________
Complemento da legenda da figura 3. As escalas correspondem em A, B, C e E a 100 m; em D a 400 um.
A detalhe de uma poro da regio do mesoflo, em seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial (ad); cutcula (cu); epiderme (ep); estmato (es);
parnquima esponjoso (pj); parnquima palidico (pp); tricoma tector do tipo dentiforme, tipo 1 (ttd); tricoma glandular com cabea octocelular, tipo
6 (tgo). B detalhe da regio da nervura principal e de poro do mesoflo, em seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial (ad); clornquima(cl);
colnquima (co); cutcula (cu); endoderme (end); epiderme (ep); estmato (es); foema (f); parnquima esponjoso (pj); parnquima (p); parnquima
palidico (pp); parnquima do xilema (px); tricoma tector do tipo dentiforme, tipo 1 (ttd); xilema (x). C detalhe de uma poro do bordo foliar, em
seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial (ad); cutcula (cu); epiderme (ep); estmato (es); parnquima esponjoso (pj); parnquima palidico
(pp); tricoma glandular com cabea unicelular, tipo 5 (tgu); tricoma tector do tipo dentiforme, tipo 1 (ttd). D representao esquemtica do aspecto
geral do pecolo, em seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial (ad); clornquima (cl); colnquima (co); endoderme (end); epiderme (ep); foema
(f); feixe vascular (fv); parnquima fundamental (pf); parnquima do xilema (px); tricoma tector pluricelular unisseriado, tipo 3 (ttp); xilema (x). E
a
m
1135
detalhe de poro do pecolo, em seco transversal: face abaxial (ab); face adaxial(ad); clornquima (cl); colnquima (co); cutcula (cu); endoderme
(end); epiderme (ep); estmato (es); foema (f); parnquima fundamental (pf); parnquima do xilema (px); tricoma glandular com cabea bicelular, tipo
5 (tgu); tricoma tector do tipo dentiforme, tipo 1 (ttd); tricoma tector pluricelular unisseriado, tipo 3 (ttp), xilema (x).
MERBROMINA
Merbrominum
C
20
H
8
Br
2
HgNa
2
O
6
; 750,65
merbromina; 05676
Sal de sdio do (27-dibromo-3,6-diidroxi-3-
oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9-[9H]xanten]-4-il)
hidroximercrio (2:1)
[129-16-8]
mercrio (Hg = 200,59) e, no mnimo, 18,0% e, no
mximo, 22,4% de bromo (Br = 79,90), em relao
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Escama ou grnulo verde-metlico
a castanho-avermelhado.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua, porm, algumas
vezes deixa pequena quantidade de matrias insolveis,
praticamente insolvel em etanol, acetona, ter etlico e
em clorofrmio.
IDENTIFICAO
A. A soluo a 0,05% (p/v) apresenta cor vermelha e
fuorescncia verde amarelada.
B. A 5 mL de soluo a 0,4% (p/v) adicionar trs gotas
de cido sulfrico SR. Produz-se precipitado laranja-
avermelhado.
C. Aquecer 0,1 g da amostra com pequenos cristais de
iodo em tubo de ensaio. Cristais vermelhos so sublimados
na parte superior do tubo. Se forem produzidos cristais
amarelos, atritar com basto de vidro. A cor dos cristais
passa para vermelho.
D. Pesar 0,1 g da amostra e adicionar 12 mL de soluo
de hidrxido de sdio a 16,67% (p/v). Evaporar at secura
com agitao e incinerar a 600 C por 1 hora. Dissolver o
resduo em 5 mL de gua e acidifcar com cido clordrico.
Adicionar tres gotas de cloro SR, 2 mL de clorofrmio e
agitar; na camada clorofrmica produz-se cor castanho-
amarelada.
ENSAIOS DE PUREZA
de gua, adicionar 3 mL de cido sulfrico SR e fltrar. A
colorao do fltrado no mais intensa que a da Soluo
padro de cor SC C (5.2.12).
Halognios solveis
Preparao amostra: dissolver 5 g da amostra em 80 mL
de gua, adicionar 10 mL de cido ntrico a 10 % (p/v)
e diluir para 100 mL com gua. Homogeneizar e fltrar.
Transferir 40 mL do fltrado para tubo de Nessler, adicionar
6 mL de cido ntrico 10% (p/v) e diluir para 50 mL com
gua.
Preparao padro: em tubo de Nessler adicionar 0,25 mL
de cido clordrico 0,01 M, 6 mL de cido ntrico 10% (p/v)
Procedimento: adicionar aos tubos 1 mL de nitrato de
prata 0,1 M, misturar bem e deixar em repouso por 5
minutos ao abrigo da luz. Qualquer turvao produzida na
Preparao amostra no mais intensa que aquela obtida
na Preparao padro.
Sais de mercrio solveis
Preparao amostra: transferir para tubo de ensaio 5 mL
do fltrado obtido em Aspecto da soluo e adicionar 5 mL
de gua.
Preparao padro: dissolver 40 mg de cloreto de mercrio
(II), exatamente pesados, em gua e diluir para 1000 mL
com o mesmo solvente. A 20 mL dessa soluo adicionar 3
mL de cido sulfrico SR. Transferir para tubo de ensaio 5
mL da soluo precedente e adicionar 5 mL de gua.
Procedimento: adicionar aos tubos 1 gota de sulfeto de
sdio SR. Qualquer colorao desenvolvida na Preparao
amostra no mais intensa que aquela obtida com a
Preparao padro.
Compostos de mercrio insolveis. Dissolver 2,5 g da
amostra em 50 mL de gua e deixar em repouso por 24
horas, ao abrigo da luz. Centrifugar e lavar o precipitado
com pequenas pores de gua at que a ltima lavagem
seja incolor. Transferir o precipitado para frasco com
rolha esmerilhada, adicionar, exatamente, 5 mL de iodo
0,05 M SV e deixar em repouso por 1 hora, agitando
freqentemente. Adicionar, gota a gota, 4,3 mL de
tiossulfato de sdio 0,1 M SV, com agitao. Adicionar 1
mL de amido SI. Desenvolve-se colorao azul.
mximo 5,0%.
a
m
DOSEAMENTO
Mercrio
pulverizada e dessecada, transferir para frasco com rolha e
dissolver com 50 mL de gua. Acrescentar 8 mL de cido
actico glacial, 20 mL de clorofrmio e, exatamente, 30 mL
de iodo 0,05 M SV. Tampar hermeticamente e deixar em
repouso por 1 hora agitando, frequentemente, com vigor.
Titular o excesso de iodo com tiossulfato de sdio 0,1 M
SV, com agitao vigorosa, utilizando 1 mL de amido SI.
Cada mL de iodo 0,05 M SV equivale a 10,030 mg de Hg.
Bromo
Pesar, exatamente em cadinho de porcelana, cerca de
0,5 g de amostra previamente pulverizada e dessecada,
acrescentar 2 g de nitrato de potssio, 3 g de carbonato
de potssio anidro, 3 g de carbonato de sdio anidro e
homogeneizar. Cobrir a superfcie da mistura com 3 g de
partes iguais de carbonato de potssio anidro e carbonato
de sdio anidro e calcinar entre 400 C e 500 C por 1 hora.
Resfriar, dissolver e transferir quantitativamente a mistura
calcinada para erlenmeyer, com o auxlio de 80 mL de
gua quente, e acidifcar com cido ntrico. Adicionar 25
mL de nitrato de prata 0,1 M SV e agitar. Titular o excesso
de nitrato de prata com tiocianato de amnio 0,1 M SV
utilizando 2 mL de sulfato frrico amoniacal SR como
indicador. Realizar ensaio em branco e fazer as correes
necessrias. Cada mL de nitrato de prata 0,1 M SV equivale
a 7,990 mg de Br.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Conservante.
MEROPENM
Meropenmum
N
H
N
C H
3
O H
O
H
CH
3
H
COOH
S
N
O
C H
3
CH
3
C
17
H
25
N
3
O
5
S; 383,46
C
17
H
25
N
3
O
5
S.3H
2
O; 437,51
meropenm; 05688
meropenm tri-hidratado; 09494
cido (4R,5S,6S)-3-[[(3S,5S)-5-[(dimetilamino)carbonil]-
3-pirrolidinil]tio]-6-[(1R)-1-hidroxietil]-4-metil-7-oxo-1-
azabiciclo[3.2.0]hept-2-eno-2-carboxlico
[96036-03-2]
cido (4R,5S,6S)-3-[[(3S,5S)-5-[(dimetilamino)carbonil]-
3-pirrolidinil]tio]-6-[(1R)-1-hidroxietil]-4-metil-7-oxo-1-
azabiciclo[3.2.0]hept-2-eno-2-carboxlico hidratado (1:3)
[119478-56-7]
C
17
H
25
N
3
O
5
DESCRIO
plido.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, solvel em
dimetilformamida, muito pouco solvel em etanol,
praticamente insolvel em acetona e ter etlico. Solvel
em fosfato de potssio monobsico a 5% (p/v).
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -17 a -21. Determinar
em soluo aquosa a 0,5% (p/v), a 20 C.
IDENTIFICAO
observados no espectro de meropenm SQR, preparado de
maneira idntica.
de 200 a 400 nm, de soluo a 0,003% (p/v) em gua, exibe
de onda de soluo similar de meropenm SQR.
a
m
1137
ENSAIOS DE PUREZA
1% (p/v).
ligada a grupo octadecilsilano (5 um), mantida a
temperatura de 40 C; fuxo da Fase mvel de 1,6 mL/
minuto. Se necessrio, ajustar o fuxo da Fase mvel para
que o tempo de reteno do meropenm seja de 5 a 7
minutos.
Fase mvel: mistura de Diluente e acetonitrila (1000:70).
Diluente: adicionar 1 mL de trietilamina a 900 mL de gua,
ajustar o pH em 5,0 0,1 com cido fosfrico a 10% (v/v)
amostra no Diluente e diluir quantitativamente de modo
a obter soluo a 5 mg/mL. Injetar imediatamente aps o
preparo.
meropenm SQR no Diluente e diluir quantitativamente de
modo a obter soluo a 25 ug/mL. Injetar imediatamente
aps o preparo ou conservar sob refrigerao por no mais
que 24 horas.
tericos. O fator de cauda no superior a 1,5. O desvio
no maior que 2,0%.
(1) e da Soluo (2) e registrar os cromatogramas por, no
mnimo, trs vezes o tempo de reteno do pico referente
ao meropenm. As principais impurezas so observadas
nos tempos de reteno de 0,45 e 1,9 relativos ao pico de
meropenm. Calcular a porcentagem de cada impureza
presente na amostra a partir da seguinte equao:
em que
Cp = concentrao, em mg/mL, de meropenm SQR na
soluo padro;
Ca = concentrao, em mg/mL, de meropenm na soluo
amostra;
P = potncia declarada, em base anidra, de meropenm
na substncia qumica de referncia;
Ai = rea sob o pico correspondente a qualquer impureza
individual obtida na soluo amostra;
Ap = rea sob o pico correspondente ao meropenm obtido
na soluo padro.
No mximo 0,3% de qualquer uma das duas principais
impurezas, em relao substncia anidra. No mximo
0,1% de qualquer outra impureza individual, em relao
substncia anidra. Calculado em base anidra, a soma de
todas as outras impurezas, com exceo das impurezas
principais, no deve ser maior do que 0,3%.
gua (5.2.20.1). 11,4% a 13,4%.
Incinerar a (500 50) C. No mximo 0,1%.
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). No mximo 0,125
UE/mg de meropenm.
DOSEAMENTO
Tampo pH 3,0: preparar soluo de fosfato de potssio
monobsico 0,03 M. Ajustar o pH em 3,0 0,1 com cido
fosfrico.
Fase Mvel: mistura de Tampo pH 3,0 e acetonitrila
(90:10).
Nota: injetar as solues, descritas a seguir, imediatamente
aps o preparo ou manter sob refrigerao por, no mximo,
24 horas.
da amostra em gua e diluir de modo a obter soluo de
meropenm (C
17
H
25
N
3
O
5
S) a 0,2 mg/mL. Transferir 5 mL
com gua, obtendo soluo a 40 ug/mL.
pesada, de meropenm SQR em gua e diluir de modo
a obter soluo de meropenm (C
17
H
25
N
3
O
5
S) a 0,2 mg/
mL. Transferir 5 mL para balo volumtrico de 25 mL e
completar o volume com gua, obtendo soluo a 40 ug/
mL.
A efcincia da coluna no menor que 4000 pratos tericos
para o pico de meropenm. O fator de cauda no superior
a 2,0. O desvio padro relativo das reas de replicatas dos
a
m
Procedimento: injetar, separadamente, 20 uL de Soluo
17
H
25
N
3
O
5
S
para a padronizao do inculo; meio de cultura nmero
Soluo amostra: pesar quantidade da amostra equivalente
a 30 mg de meropenm, transferir para balo volumtrico
de 100 mL e completar com gua estril. Diluir,
sucessivamente, at as concentraes de 1,5 ug/mL, 3,0
ug/mL e 6,0 ug/mL, utilizando gua estril como diluente.
Soluo padro: pesar quantidade de meropenm SQR
equivalente a 30 mg de meropenm, transferir para balo
volumtrico de 100 mL e completar com gua estril.
Diluir, sucessivamente, at as concentraes de 1,5 ug/
mL, 3,0 ug/mL e 6,0 ug/mL, utilizando gua estril como
diluente.
Calcular a potncia da amostra, em ug de meropenm por
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibitico.
MEROPENM TRIIDRATADO P PARA
SOLUO INJETVEL
quantidade declarada de meropenm (C
17
H
25
N
3
O
5
S).
Meropenm p para soluo injetvel uma mistura seca
estril de meropenm tri-hidratado e carbonato de sdio.
IDENTIFICAO
A. Pesar, individualmente, trs unidades, remover o
contedo, lavar os respectivos frascos, sec-los e pes-los
novamente. Homogeneizar o contedo dos frascos. Agitar
quantidade de p com gua e diluir, quantitativamente,
com o mesmo solvente at concentrao de 0,002% (p/v).
Filtrar, se necessrio. O espectro de absoro no ultravioleta
(5.2.14) da soluo amostra, na faixa de 200 nm a 400
nm, exibe mximo em 298 nm, idntico ao observado no
espectro de soluo similar de meropenm SQR.
CARACTERSTICAS
5% (p/v).
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias Relacionadas. Proceder conforme descrito
ligada a grupo octadecilsilano (5 um), mantida a 40 C;
fuxo da Fase mvel de 1,6 mL/minuto. Se necessrio,
ajustar o fuxo da Fase mvel para que o tempo de reteno
de meropenm seja de 5 a 7 minutos.
Diluente: adicionar 1 mL de trietilamina a 900 mL de gua,
ajustar o pH em 5,0 0,1 com cido fosfrico a 10% (v/v)
Fase mvel: mistura de Diluente e acetonitrila (1000:70).
Soluo amostra: pesar, individualmente, trs unidades,
remover o contedo, lavar os respectivos frascos, sec-
los e pes-los novamente. Homogeneizar o contedo dos
frascos. Agitar quantidade, exatamente pesada, de p com
Diluente e diluir quantitativamente com o mesmo solvente
de modo a obter soluo a 5 mg/mL. Injetar imediatamente
aps o preparo.
de meropenm SQR em Diluente e diluir quantitativamente
com o mesmo solvente de modo a obter soluo a 29 ug/
mL. Injetar imediatamente aps o preparo ou conservar
sob refrigerao por no mais que 24 horas.
de cauda no superior a 1,5. O desvio padro relativo
que 2,0%.
a
m
1139
padro e da Soluo amostra e registrar os cromatogramas
por, no mnimo, trs vezes o tempo de reteno do pico
referente ao meropenm. As principais impurezas so
observadas nos tempos de reteno de 0,45 e 1,9 relativos
ao pico de meropenm. Calcular a porcentagem de cada
impureza presente na amostra segundo a expresso:
|
|
.
|
\
|
|
.
|
\
|
p
i
A
A
m
P C
10
em que
C = concentrao, em mg/mL, de meropenm SQR na
Soluo padro;
P = potncia declarada, em base anidra, de meropenm
SQR;
m = quantidade de meropenm, em mg, na massa de p
pesada para o preparo da Soluo amostra;
A
i
= rea do pico correspondente a qualquer impureza
individual obtida na Soluo amostra;
A
p
= rea do pico correspondente ao meropenm obtido
na Soluo padro.
No mximo 0,8% de impureza com tempo de reteno
relativo de 0,45 em relao ao pico de meropenm. No
mximo 0,6% de impureza com tempo de reteno de 1,9
em relao ao pico de meropenm.
de absoro atmica com chama (5.2.13.1.1). Utilizar
espectrmetro provido de chama alimentada com mistura
de ar e acetileno, lmpada de ctodo oco de sdio e com
fonte emissora de luz a 589,6 nm.
Soluo de cloreto de potssio: dissolver 38,1 g de cloreto
de potssio em gua e diluir para 1000 mL com o mesmo
solvente.
Soluo amostra: pesar, individualmente, trs unidades,
los e pes-los novamente. Homogeneizar o contedo dos
frascos. Transferir quantidade de p equivalente a 25
mg de meropenm para balo volumtrico de 200 mL e
completar o volume com gua. Transferir 5 mL para balo
volumtrico de 50 mL, adicionar 5 mL de Soluo de
cloreto de potssio e completar o volume com gua.
Soluo padro de sdio: dissolver em gua 28,67 mg de
cloreto de sdio, previamente dessecado a 105 C por 2
horas, de modo a obter soluo de cloreto de sdio a 28,67
ug/mL. Transferir 5 mL para balo volumtrico de 50
mL, adicionar 5 mL de Soluo de cloreto de potssio e
Branco: transferir 5 mL de Soluo de cloreto de potssio
com gua.
Procedimento: medir as absorvncias da Soluo padro
de sdio e da Soluo amostra, utilizando Branco para
ajuste do zero. Calcular a quantidade de sdio, em mg,
no p para soluo injetvel de meropenm, a partir das
leituras obtidas. Contm entre 80% e 120% da quantidade
declarada de sdio.
por 6 horas. Entre 9,0% e 12,0%.
Endotoxinas bacterianas (5.5.2.2). No mximo 0,125
UE/mg de meropenm.
DOSEAMENTO
Tampo pH 3,0: preparar soluo de fosfato de potssio
monobsico 0,03 M. Ajustar o pH em 3,0 0,1 com cido
fosfrico.
(90:10).
Nota: injetar as solues, descritas a seguir, imediatamente
aps o preparo ou manter sob refrigerao por, no mximo,
24 horas.
Soluo amostra: pesar, individualmente, 20 unidades,
los e pes-los novamente. Homogeneizar o contedo
dos frascos. Dissolver quantidade, exatamente pesada,
de p em gua de modo a obter soluo de meropenm
(C
17
H
25
N
3
O
5
S) a 0,2 mg/mL. Transferir 5 mL para balo
volumtrico de 25 mL e completar o volume com gua,
obtendo soluo a 40 ug/mL.
de meropenm SQR em gua de modo a obter soluo de
meropenm (C
17
H
25
N
3
O
5
S) a 0,2 mg/mL. Transferir 5 mL
com gua, obtendo soluo a 40 ug/mL.
da coluna no menor que 4000 pratos tericos para o pico
de meropenm. O fator de cauda no superior a 2,0. O
e mediar as reas dos picos. Calcular a quantidade de
a
m
C
17
H
25
N
3
O
5
S no produto a partir das respostas obtidas com
ROTULAGEM
METABISSULfITO DE SDIO
Natrii metabisulfs
Na
2
S
2
O
5
; 190,11
SO
2
; 64,06
metabissulfto de sdio; 05711
Sal de sdio do cido dissulfuroso (2:1)
[7681-57-4]
O metabissulfto de sdio contm uma quantidade de
Na
2
S
2
O
5
equivalente, no mnimo a 65,0%, e no mximo a
67,4% de SO
2.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais brancos, quase brancos ou
transparentes, sem cheiro, ou com leve odor de enxofre.
eforescente.
Solubilidade. Pouco solvel em gua e levemente solvel
em etanol.
IDENTIFICAO
A soluo a 5% (p/v) responde s reaes do on sdio e do
on sulfto (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Tiossulfatos. Misturar 2,2 g da amostra com 10 mL de
cido clordrico M. Aquecer levemente por 5 minutos,
resfriar , e transferir para um pequeno tubo de ensaio. Se
houver turbidez, esta no maior que a produzida por
0,1 mL de tiossulfato de sdio 0,1 M tratado nas mesmas
condies (0,05%).
Arsnio (5.3.2.5). Misturar 0,2 g da amostra com 2 mL
de gua em uma bquer. Adicionar, gota a gota, 1,5 mL de
cido ntrico. Evaporar secura em banho-maria. Aquecer
sobre a chama at no haver mais produo de vapores.
Transferir o resduo e completar para 25 mL. Prosseguir
conforme descrito em Mtodo I. No mximo 0,0005% (5
ppm).
mL de gua, adicionar 5 mL de cido clordrico e evaporar
secura em banho-maria. Dissolver o resduo em 25 mL de
gua. No mximo 0,002%.(20 ppm).
de cido clordrico diludo (2 em 7), e evaporar secura
em banho-maria. Dissolver o resduo em 7 mL de cido
clordrico diludo (2 em 7), e novamente evaporar secura.
Dissolver o resduo em uma mistura de 2 mL de cido
clordrico e 20 mL de gua, adicionar tres gotas de gua
de bromo SR. Aquecer ebulio para expelir o bromo.
Resfriar. Diluir com gua a 40 mL. No mximo 0,002%
(20 ppm).
DOSEAMENTO
Dissolver 0,2 g da amostra em 50 mL de iodo 0,05 M
SV. Deixar em repouso ao abrigo da luz por 5 minutos.
Adicionar 1 mL de cido clordrico e titular o iodo em
excesso com tiossulfato de sdio 0,1 M SV usando como
indicador 3 mL de soluo de amido iodetado SI, que deve
ser adicionado prximo ao fnal da titulao. Cada mL de
iodo 0,05 M SV equivale a 3,203 mg de SO
2
.
EMBALAGEM E ARMAZENAMENTO.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Antioxidante.
METAfOSfATO DE POTSSIO
Kalli metaphosphas
(KPO
3
)
x
metafosfato de potssio; 05721
Sal de potssio do cido metafosfrico (1:1)
[7790-53-6]
Metafosfato de potssio um polmero de cadeia linear
com alto grau de polimerizao. Contm o equivalente a,
no mnimo, 59,0% e, no mximo, 61,0% de P
2
O
5
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, inodoro.
Solubilidade. Insolvel em gua. Solvel em solues
aquosas diludas de sais de metais alcalinos (exceto
potssio).
a
m
1141
Viscosidade (5.2.7): misturar 0,3 g da amostra com 200
mL de pirofosfato de sdio a 0,35% (p/v), usando agitador
magntico. Determinar a viscosidade da soluo lmpida
obtida ou da fase lquida da mistura obtida aps 30 minutos
de agitao contnua. Entre 6,5 cP e 15 cP.
IDENTIFICAO
A. Adicionar 1 g da amostra fnamente pulverizada,
lentamente e com agitao vigorosa, a 100 mL de cloreto
de sdio a 2% (p/v). Forma-se massa gelatinosa.
B. Aquecer ebulio, por 30 minutos, mistura de 0,5 g
da amostra, 10 mL de cido ntrico e 50 mL de gua, e
resfriar. A soluo resultante responde s reaes do on
fosfato (5.3.1.1) e s reaes do on potssio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de fuoretos. Transferir 5 g da amostra, 25 mL de
gua, 50 mL de cido perclrico, cinco gotas de nitrato de
prata a 50% (p/v) e algumas prolas de vidro para frasco de
destilao de 250 mL conectado a condensador contendo
termmetro e tubo capilar, ambos em contato com o
lquido. Conectar funil de adio pequeno, preenchido
com gua, ou gerador de vapor ao tubo capilar. Adaptar o
frasco a sistema de destilao com 1/3 do fundo do frasco
na chama. Destilar para frasco volumtrico de 250 mL at
a temperatura atingir 135 C. Adicionar gua atravs do
funil de adio ou introduzir vapor atravs de um capilar
para manter a temperatura entre 135 C e 140 C. Continuar
a destilao at recolher de 225 mL a 240 mL, e ento
completar o volume com gua e homogeneizar. Transferir
50 mL desta soluo para tubo de Nessler e, para o tubo de
Nessler padro, transferir 50 mL de gua. Adicionar a cada
um dos tubos 0,1 mL de soluo fltrada de alizarina SI e
1 mL de soluo recentemente preparada de cloridrato de
hidroxilamina a 0,025% (p/v) e homogeneizar. Adicionar,
gota a gota, e sob agitao, hidrxido de sdio 0,05 M
para o tubo contendo a amostra at que a cor corresponda
do tubo padro (levemente rsea). A seguir, adicionar a
cada tubo 1 mL de cido clordrico 0,1 M e homogeneizar.
Utilizando bureta com graduao de 0,05 mL, adicionar,
vagarosamente, ao tubo contendo a amostra, quantidade
sufciente de nitrato de trio a 0,025% (p/v), de maneira
que, aps a homogeneizao, a cor do lquido alterada
para rosa. Registrar o volume de soluo adicionada,
adicionar o mesmo volume, exatamente medido, para
o tubo padro e homogeneizar. A seguir, com auxilio da
bureta, adicionar fuoreto de sdio SR (10 g de F/mL), para
tornar similar a colorao dos dois tubos, aps a diluio
para um mesmo volume. Homogeneizar e permitir que as
bolhas de ar escapem antes de proceder comparao fnal
de cor. Verifcar o ponto fnal, adicionando uma ou duas
gotas de fuoreto de sdio SR para o tubo padro. Uma
colorao distinta observada. O volume de fuoreto de
sdio requerido para a soluo de referncia no dever
exceder 1 mL (0,001%).
Arsnio (5.3.2.5). Dissolver 1 g da amostra em 15 mL
de cido clordrico 3 M e prosseguir conforme descrito
em Mtodo espectrofotomtrico, Mtodo I. No mximo
0,0003% (3 ppm).
Chumbo (5.3.2.12). Dissolver 1 g da amostra em 10 mL
de cido clordrico 3 M. e prosseguir conforme descrito em
Ensaio limite para chumbo. No mximo 0,0005% (5 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Adicionar
10 mL de cido clordrico 3 M a 1 g da amostra e aquecer
at que no se dissolva mais. Adicionar 15 mL de gua,
homogeneizar e fltrar. No mximo 0,002% (20 ppm).
DOSEAMENTO
Misturar 0,2 g da amostra com 15 mL de cido ntrico e
30 mL de gua, ferver por 30 minutos, resfriar e diluir
com gua a aproximadamente 100 mL. Aquecer a 60 C,
adicionar excesso de molibdato de amnio SR1 e aquecer a
50 C por 30 minutos. Filtrar e lavar o precipitado, primeiro
com cido ntrico 0,5 M e em seguida com nitrato de
potssio a 1% (p/v) at que no fltrado no seja detectado
resduo cido (utilizar papel tornassol). Adicionar 25 mL
de gua ao precipitado, dissolver com 50 mL de hidrxido
de sdio M SV, adicionar fenolftalena SI e titular o excesso
de hidrxido de sdio M SV com cido sulfrico 0,5 M SV.
Cada mL de hidrxido de sdio M SV equivale a 3,086 mg
de P
2
O
5
.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Agente tamponante.
METILBROMETO DE HOMATROPINA
Homatropini methylbromidum
N
+
C H
3
O
O
C H
3
OH
Br
-
e enantimero
C
17
H
24
BrNO
3
; 370,28
metilbrometo de homatropina; 04747
Brometo de (3-endo)-3-[(2-hidroxi-2-fenilacetil)oxi]-8,8-
dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano (1:1)
[80-49-9]
a
m
C
17
H
24
BrNO
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, branco ou cristais
incolores. Ponto de fuso (5.2.2): em torno de 190 C.
etanol, praticamente insolvel em ter etlico.
IDENTIFICAO
metilbrometo de homatropina SQR, preparado de maneira
idntica. Caso sejam observadas diferenas nos espectros,
dissolver a amostra e o padro, separadamente, em metanol
e recristalizar pela adio de dioxana a cada soluo.
faixa de 200 nm a 400 nm, da soluo amostra a 0,1%
(p/v) em etanol, exibe mximo em 258 nm, idntico ao
observado no espectro de soluo similar de metilbrometo
de homatropina SQR.
C. Dissolver 0,1 g da amostra em 5 mL de gua e adicionar
iodeto de potssio mercrico SR. Produz-se precipitado
branco ou levemente amarelado. No se produz precipitado
pela adio de solues de hidrxidos alcalinos ou
carbonatos, mesmo em solues concentradas da amostra
(distino da maioria dos alcaloides).
D. Dissolver 0,1 g da amostra em 5 mL de gua e adicionar
reineckato de amnio SR. Produz-se precipitado vermelho.
E. A soluo aquosa da amostra a 5% (p/v) responde s
reaes do on brometo (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo da amostra a 5% (p/v) em
gua isenta de dixido de carbono lmpida (5.2.25) e
incolor (5.2.12).
slica-gel G, como suporte, e mistura de cido frmico
anidro, gua e acetato de etila (16,5:16,5:67), como fase
Soluo (1): dissolver 0,2 g da amostra em mistura de gua
e metanol (1:9) e diluir para 5 mL com o mesmo solvente.
mistura de gua e metanol (1:9).
estufa a 100-105 C at que o odor de solvente no seja
perceptvel. Deixar esfriar. Nebulizar com iodobismutato
de potssio diludo SR e, em seguida, com perxido de
hidrognio 3% (p/v) SR. Qualquer mancha secundria
com a Soluo (2) (0,5%).
descrito em Cromatografa gasosa (5.2.17.5). Utilizar
cromatgrafo a gs provido de detector de ionizao de
chamas; coluna cromatogrfca de slica fundida (30 m
de comprimento e 0,53 mm de dimetro interno), coberta
com slica quimicamente ligada a fenilmetilpolisiloxano
(5:95) (5 m); pr-coluna de 5 m de comprimento e
0,53 mm de dimetro interno com slica desativada com
fenilmetilsiloxano. Programar a temperatura da coluna
de acordo com os seguintes parmetros: deixar a 35 C
por 5 minutos e aumentar para 175 C na razo de 8 C
por minuto; aumentar at 260 C na razo de 35 C por
minuto e manter por pelo menos 16 minutos. Manter as
temperaturas do injetor e do detector a 70 C e a 260 C,
respectivamente. Utilizar hlio como gs de arraste a
velocidade linear de cerca de 35 cm/segundo.
Soluo amostra: dissolver, em gua livre de material
orgnico, quantidade da amostra, exatamente pesada, de
modo a obter soluo a 20 mg/mL.
Soluo padro: preparar soluo, em gua livre de
material orgnico, contendo 0,04 g/mL de benzeno, 12,0
g/mL de cloreto de metileno, 1,2 g/mL de clorofrmio,
7,6 g/mL de dioxana e 1,6 g/mL de tricloroetileno.
Injetar replicatas de 1 L da Soluo de referncia. A
resoluo entre quaisquer dos componentes no menor
e medir as reas sob os picos. As reas sob os picos relativas
ao benzeno, cloreto de metileno, clorofrmio, dioxana e
tricloroetileno obtidos com a Soluo amostra no devem
ser superiores as reas sob os picos relativos ao benzeno,
cloreto de metileno, clorofrmio, dioxana e tricloroetileno
obtidos com a Soluo padro, correspondendo a, no
mximo, 2 ppm, 600 ppm, 60 ppm, 380 ppm e 80 ppm,
respectivamente.
No mximo 0,2%.
DOSEAMENTO
A. Dissolver 0,3 g da amostra em 10 mL de gua. Titular
com nitrato de prata 0,1 M SV. Determinar o ponto fnal
potenciometricamente, usando eletrodo indicador de prata
a
m
1143
e eletrodo de referncia de prata/cloreto de prata. Cada
C
17
H
24
BrNO
3
.
B. Proceder conforme descrito em Titulaes em meio
no aquoso (5.3.3.5). Pesar, exatamente, cerca de 0,7 g da
amostra e dissolver em mistura de 50 mL de cido actico
glacial e 10 mL de acetato de mercrio SR. Adicionar 1
gota de cloreto de metilrosanilnio SI e titular com cido
perclrico 0,1 M SV at mudana de cor de azul para verde
azulado. Realizar ensaio em branco e fazer as correes
17
H
24
BrNO
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anticolinrgico.
METILDOPA
Methyldopum
COOH O H
O H
N H
2
CH
3
C
10
H
13
NO
4
; 211,21
C
10
H
13
NO
4
.1H
2
O; 238,24
metildopa; 05799
metildopa sesqui-hidratada; 09496
3-Hidroxi--metil-L-tirosina
[555-30-6]
3-Hidroxi--metil-L-tirosina hidratada (2:3)
[41372-08-1]
C
10
H
13
NO
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou branco
amarelado, ou cristais incolores ou quase incolores.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, cido actico glacial
e metanol, muito pouco solvel em etanol, praticamente
insolvel em ter etlico. Solvel em solues diludas de
cidos minerais.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): 25 a 28, em relao
substncia anidra. Determinar em soluo a 4,4% (p/v)
em cloreto de alumnio SR.
IDENTIFICAO
observados no espectro de metildopa SQR, preparado de
maneira idntica.
clordrico 0,1 M, exibe mximo em 280 nm, calculado em
relao base anidra. A absorvncia no difere mais do que
3% em relao da metildopa SQR, preparada de maneira
idntica.
C. Adicionar a 10 mg da amostra tres gotas de ninidrina
a 0,4% (p/v) em cido sulfrico. Aps 10 a 15 minutos,
desenvolve-se colorao violeta escura. Adicionar tres
gotas de gua. A colorao muda para castanho-amarelada
plida.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez. Dissolver 1 g da amostra, sob aquecimento, em
gua isenta de dixido de carbono. Adicionar uma gota
de vermelho de metila SI e titular com hidrxido de sdio
0,1 M at o desenvolvimento de colorao amarela. No
mximo 0,5 mL de titulante so gastos para viragem do
indicador.
Limite de 3-O-metilmetildopa. Proceder conforme
descrito em Cromatografa em camada delgada (5.2.17.1),
utilizando celulose cromatogrfca, com espessura de 0,25
mm, como suporte, e mistura de 1-butanol, cido actico
glacial e gua (65:15:25), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): dissolver 0,1 g da amostra em metanol e diluir
para 10 mL com o mesmo solvente, obtendo soluo a 10
mg/mL.
Soluo (2): dissolver 5 mg de 3-O-metilmetildopa SQR
em metanol e diluir para 50 mL com o mesmo solvente,
sob ar aquecido. Nebulizar com p-nitroanilina e nitrito
de sdio SR e secar sob ar aquecido. Nebulizar com
carbonato de sdio decaidratado a 20% (p/v). Qualquer
mancha correspondente 3-O-metilmetildopa obtida no
cromatograma com a Soluo (1) no mais intensa que
mximo 0,001% (10 ppm).
gua (5.2.20.1). Determinar em 0,2 g da amostra. Entre
10,0% e 13,0%.
No mximo 0,1%.
a
m
DOSEAMENTO
amostra e dissolver em 25 mL de cido actico glacial,
aquecendo se necessrio. Adicionar 50 mL de acetonitrila,
0,1 mL de cloreto de metilrosanilnio SI e titular com cido
perclrico 0,1 M SV at viragem do indicador para azul.
mg de C
10
H
13
NO
4
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-hipertensivo.
METILDOPA COMPRIMIDOS
10
H
13
NO
4
. Os comprimidos
IDENTIFICAO
do p equivalente a 10 mg de metildopa. Adicionar trs
gotas de ninidrina a 0,4% (p/v) em cido sulfrico. Aps
10 a 15 minutos, desenvolve-se colorao violeta escura.
Adicionar trs gotas de gua. A colorao muda para
castanho-amarelada plida.
do p equivalente a 10 mg de metildopa, adicionar 2 mL de
cido sulfrico 0,05 M, 2 mL de tartarato ferroso SR e 0,25
mL de hidrxido de amnio 6 M. Desenvolve-se colorao
violeta escura.
CARACTERSTICAS
Tempo: 20 minutos
10
H
13
NO
4

da soluo de metildopa SQR na concentrao de 0,005%
declarada de C
10
H
13
NO
4
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de absoro no visvel (5.2.14). Pesar e pulverizar 20
a 0,1 g de metildopa para balo volumtrico de 100
mL, adicionar 50 mL de cido sulfrico 0,05 M e agitar
mecanicamente por 15 minutos. Completar o volume
com o mesmo solvente. Homogeneizar e fltrar. Pesar,
exatamente, cerca de 50 mg de metildopa SQR, transferir
para balo volumtrico de 50 mL, dissolver e completar
o volume com cido sulfrico 0,05 M e homogeneizar.
Transferir, separadamente, 5 mL das solues padro e
amostra para bales volumtricos de 100 mL. Preparar
branco em paralelo utilizando 5 mL de cido sulfrico 0,05
M. Adicionar, a cada balo, 5 mL de tartarato ferroso SR
e completar o volume com tampo acetato de amnio pH
8,5. Medir as absorvncias das solues resultantes em
520 nm, utilizando o branco para ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
10
H
13
NO
4
leituras obtidas.
ROTULAGEM
a
m
1145
METILPARABENO
Methylis parahydroxybenzoas
O H
OCH
3
O
C
8
H
8
O
3
; 152,15
metilparabeno; 05809
ster metlico do cido 4-hidroxibenzoico
[99-76-3]
C
8
H
8
O
3
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou incolor.
em acetona, etanol e ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 125 C a 128 C.
IDENTIFICAO
observados no espectro de metilparabeno SQR, preparado
de maneira idntica.
etanol, exibe mximo em 258 nm. A absorvncia em 258
nm de 0,52 a 0,56.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 1 g da amostra em etanol e
diluir para 10 mL com o mesmo solvente. A soluo obtida
Acidez. A 2 mL da soluo obtida em Aspecto da soluo,
adicionar 3 mL de etanol, 5 mL de gua isenta de dixido
de carbono e 0,1 mL de verde de bromocresol SI. No
mximo 0,1 mL de hidrxido de sdio 0,1 M gasto para
promover a viragem do indicador.
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de cido frmico
anidro, acetato de etila e cloreto de metileno (2:10:88),
como fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, 5 uL de
a seguir.
metanol.
secar sob corrente de ar quente. Examinar sob luz
no cromatograma com a Soluo (1), diferente da principal,
(1%).
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
erlenmeyer provido de rolha esmerilhada e adicionar 20
mL de hidrxido de sdio M SV. Adaptar condensador de
refuxo e aquecer a 70 C por 1 hora. Resfriar a temperatura
ambiente. Titular o excesso de hidrxido de sdio M SV
com cido sulfrico 0,5 M SV. Determinar o ponto fnal
potenciometricamente, continuando a titulao at o
segundo ponto de infexo. Realizar ensaio em branco e
sdio M SV equivale a 152,1 mg de C
8
H
8
O
3
.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Conservante
METRONIDAZOL
Metronidazolum
N
N
OH
CH
3
O
2
N
C
6
H
9
N
3
O
3
; 171,15
metronidazol; 05902
2-Metil-5-nitro-1H-imidazol-1-etanol
[443-48-1]
a
m
C
6
H
9
N
3
O
3
DESCRIO
amarelado.
Solubilidade. Ligeiramente solvel em gua e etanol,
pouco solvel em ter etlico e cloreto de metileno.
Faixa de fuso (5.2.2): 159 C a 163 C.
IDENTIFICAO
metronidazol SQR, preparado de maneira idntica.
faixa de 230 nm a 350 nm, da soluo amostra a 0,002%
(p/v) em cido clordrico 0,1 M, exibe mximo em 277
nm e mnimo em 240 nm. A absorvncia em 277 nm de,
aproximadamente, 0,76.
C. Pesar cerca de 10 mg da amostra e aquecer em banho-
maria com 10 mg de zinco granulado, 1 mL de gua e
0,25 mL de cido clordrico, durante 5 minutos. Resfriar
em banho de gelo e adicionar 0,5 mL de cido ntrico
SR. Remover o excesso de nitrito com cido sulfmico.
Adicionar 0,5 mL de 2-naftol SR e 2 mL de hidrxido
de sdio 0,5 M. Desenvolve-se colorao vermelho-
alaranjada.
ENSAIOS DE PUREZA
254
clorofrmio e dietilamina (90:10), como fase mvel.
solues, descritas a seguir.
Soluo (1): soluo da amostra a 2% (p/v) em acetona.
Soluo (2): soluo da amostra a 0,01% (p/v) em acetona.
a Soluo (1), com exceo da mancha principal, no
Substncias no-bsicas. 1 g da amostra se dissolve
completamente em 10 mL de cido clordrico 50% (v/v).
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver, exatamente, cerca de 0,3 g da
amostra, previamente dessecada, em 20 mL de anidrido
actico e aquecer lentamente se necessrio. Resfriar,
adicionar uma gota de verde malaquita SI e titular com cido
perclrico 0,1 M SV, utilizando microbureta, at mudana
de cor para amarelo-esverdeado. Realizar ensaio em
branco e fazer as correes necessrias. Alternativamente,
determinar o ponto fnal potenciometricamente. Cada mL
de cido perclrico 0,1 M SV equivale a 17,115 mg de
C
6
H
9
N
3
O
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimicrobiano.
METRONIDAZOL COMPRIMIDOS
6
H
9
N
3
O
3
. Os comprimidos
IDENTIFICAO
realizados os testes A., C. e D. Os testes de identifcao
C. e D. podem ser omitidos se forem realizados os testes
A. e B.
do p equivalente a 0,1 g de metronidazol com 40 mL de
clorofrmio por 15 minutos. Filtrar e evaporar o fltrado
at secura. Prosseguir conforme descrito no teste A. de
Identifcao da monografa de Metronidazol.
C. Pesar e pulverizar os comprimidos. Utilizar quantidade
do p equivalente a 0,1 g de metronidazol, aquecer em
banho-maria com 10 mg de zinco em p, 1 mL de gua
e 0,25 mL de cido clordrico durante 5 minutos. Resfriar
em banho de gelo e adicionar 0,5 mL de nitrito de sdio
SR. Remover o excesso de nitrito com cido sulfmico.
Adicionar 0,5 mL de 2-naftol SR1 e 2 mL de hidrxido
a
m
1147
de sdio 0,5 M. Desenvolve-se colorao vermelho-
alaranjada.
D. Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade
do p equivalente a 0,2 g de metronidazol com 4 mL de
cido sulfrico 0,5 M. Filtrar. Ao fltrado, adicionar 10 mL
de cido pcrico SR e deixar em repouso. O ponto de fuso
do precipitado, aps ser lavado com gua e secado a 105
C, de aproximadamente 150 C.
CARACTERSTICAS
Adicionar 100 mL de cido clordrico a 1% (v/v) e agitar
durante 30 minutos. Completar o volume com o mesmo
solvente e homogeneizar. Filtrar, descartando os primeiros
15 mL do fltrado. Prosseguir conforme descrito no
mtodo A. de Doseamento, a partir de Realizar diluies
sucessivas....
Tempo: 60 minutos
dissoluo, fltrar e diluir em cido clordrico 0,1 M at
concentrao adequada. Medir as absorvncias em 274 nm
6
H
9
N
3
O
3
dissolvida no meio,
comparando as leituras obtidas com a da soluo padro
solvente.
declarada de C
6
H
9
N
3
O
3
ENSAIOS DE PUREZA
Limite de 2-metil-5-nitroimidazol. Proceder conforme
descrito em Cromatografa em camada delgada (5.2.17.1),
utilizando slica-gel F
254
clorofrmio, dimetilformamida e cido frmico a 90%
(v/v) (80:25:5), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
Soluo (1): pesar e pulverizar 20 comprimidos. Agitar
quantidade do p equivalente a 0,2 g de metronidazol
com 5 mL de mistura de clorofrmio e metanol (1:1) por 5
minutos. Filtrar.
Soluo (2): soluo de 2-metil-5-nitroimidazol SQR a 0,2
mg/mL em mistura de clorofrmio e metanol (1:1).
Qualquer mancha correspondente a 2-metil-5-nitroimidazol
com a Soluo (2) (0,5%).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
0,2 g de metronidazol para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 70 mL de cido clordrico a 1% (v/v). Agitar,
mecanicamente, por 15 minutos e completar o volume com
o mesmo solvente. Filtrar. Realizar diluies sucessivas at
concentrao de 0,002% (p/v), utilizando cido clordrico
a 1% (v/v) como solvente. Preparar soluo padro nas
mesmas condies. Medir as absorvncias das solues
em 278 nm, utilizando cido clordrico a 1% (v/v) para
6
H
9
N
3
O
3
nos
comprimidos a partir das leituras obtidas.
Fase mvel: mistura de gua e metanol (80:20).
metronidazol para balo volumtrico de 50 mL, adicionar
30 mL de metanol e agitar mecanicamente por 30 minutos.
Completar o volume com metanol e esperar decantar.
Transferir 5 mL do sobrenadante para balo volumtrico
Soluo padro: soluo a 0,5 mg/mL de metronidazol
SQR em Fase mvel.
reas de replicas dos picos registrados no maior que
2,0%.
a
m
C
6
H
9
N
3
O
3
ROTULAGEM
METRONIDAZOL SOLUO INJETVEL
6
H
9
N
3
O
3
.
IDENTIFICAO
A. Transferir volume da soluo injetvel equivalente a
cerca de 0,1 g de metronidazol para funil de separao e
agitar com 9 g de cloreto de sdio por 5 minutos. Extrair com
20 mL de acetona. Separar a camada superior e evaporar at
a secura. O espectro de absoro no infravermelho (5.2.14)
observados no espectro de metronidazol SQR, preparado
de maneira idntica.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 4,5 a 7,0.
mg de metronidazol.
DOSEAMENTO
soluo injetvel equivalente a 50 mg de metronidazol
com cido clordrico 0,1 M. Diluir, sucessivamente,
em cido clordrico 0,1 M, at concentrao de 0,002%
6
H
9
N
3
O
3
na soluo injetvel a
um a 10 um); fuxo da Fase mvel de 2,0 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de fosfato de potssio monobsico a
0,073% (p/v) e metanol (93:7). Ajustar o pH em 4,0 0,5
com cido fosfrico 0,1 M.
equivalente a 25 mg de metronidazol para balo
Transferir 2 mL da soluo obtida para balo volumtrico
de 10 mL contendo 2 mL de metanol e completar o volume
com Fase mvel.
de metronidazol SQR para balo volumtrico de 25 mL,
dissolver em metanol e completar o volume com o mesmo
solvente. Transferir 2 mL da soluo obtida para balo
volumtrico de 10 mL contendo 2 mL de gua e completar
o volume com Fase mvel.
2,0%.
C
6
H
9
N
3
O
3
na soluo injetvel a partir das respostas
ROTULAGEM
MISTURAS DE PLASMA HUMANO
EXCEDENTE TRATADO POR
INATIVAO VIRAL
Plasma Humanum Collectum Excederem Deinde
Conditum ad Viros Exstinguendos
obtida a partir de plasma humano excedente proveniente
de doadores do mesmo grupo sanguneo ABO e Rh(D
u
).
A preparao descongelada ou reconstituda antes
de seu uso de modo a obter uma soluo injetvel. O
a
m
1149
plasma humano utilizado deve satisfazer s exigncias da
monografa Plasma Humano para Fracionamento.
As unidades de plasma destinadas produo so
congeladas a uma temperatura igual ou inferior a -30 C
dentro das primeiras 6 horas seguintes separao das
fraes celulares sanguneas e no mximo, nas 24 horas
que se seguem coleta. A mistura preparada a partir
de unidades de plasma pertencentes ao mesmo grupo
sanguneo ABO e Rh(D
u
).
A mistura de plasma examinada a partir de mtodos
de sensibilidade e especifcidade apropriados quanto a
presena do antgeno de superfcie do vrus da hepatite
B (HBsAg), de anticorpos contra o vrus da hepatite C e
de anticorpos contra o HIV. Nestes ensaios, a mistura do
plasma deve fornecer resultados negativos.
A mistura de plasma tambm deve ser submetida pesquisa
do RNA do vrus da hepatite C conforme descrito em
Tcnicas de Amplifcao de cidos Nuclicos (5.5.1.10),
devidamente validada. O ensaio inclui um padro positivo
com 100 UI de RNA do vrus da hepatite C por mililitro
e, para identifcar a presena eventual de inibidores, um
padro interno preparado por adio de um marcador
apropriado amostra da mistura de plasma. O ensaio s
vlido se o padro positivo for reativo ou se o resultado
obtido com o padro interno no indicar a presena de
inibidores.
A mistura satisfaz ao ensaio se no for reativa para o RNA
do vrus da hepatite C.
A mistura de plasma tambm deve ser submetida
pesquisa do DNA do vrus B19 conforme descrito em
devidamente validada. O pool deve conter no mximo 10
UI por microlitro. Um controle positivo 10 UI de DNA
por microlitro do vrus B19, e para identifcar a presena
eventual de inibidores, um padro interno preparado por
adio de um marcador apropriado amostra da mistura
de plasma. O ensaio s vlido se o padro positivo for
reativo ou se o resultado obtido com o padro interno no
indicar a presena de inibidores.
O mtodo de preparao realizado de modo a evitar a
ativao de qualquer fator de coagulao e assim, limitar
o seu potencial de ao trombognico. Compreende uma
ou vrias etapas para as quais se tenha demonstrado a
eliminao ou inativao de agentes infecciosos conhecidos.
No caso de serem utilizadas substncias para inativao
viral durante a produo, o processo de purifcao
subseqente deve ser validado de modo a demonstrar que
a concentrao destas substncias encontra-se em um nvel
apropriado e que os eventuais resduos no comprometem
a inocuidade da preparao.
O mtodo tpico utilizado para a inativao de vrus
envelopados o processo solvente-detergente, que consiste
no tratamento com uma mistura de fosfato de tributila e de
octoxinol 10; em seguida, esses reagentes so removidos
por extrao em fase oleosa ou slida, de modo a que o
teor residual no produto fnal seja inferior a 2 g/mL para
fosfato de tributila e a 5 g/mL para o octoxinol 10. No
deve ser adicionado nenhum conservante antimicrobiano.
A soluo fltrada atravs de uma membrana
esterilizante, distribuda assepticamente nos recipientes
fnais e imediatamente congelada. Os recipientes fnais so
compostos por material plstico, satisfazendo s exigncias
para Recipientes de plstico (6.2); ou vidro, satisfazendo
s exigncias para os Recipientes de vidro (6.1). Pode, em
seguida, ser lioflizada.
IDENTIFICAO
Reconstituir ou descongelar a amostra como indicado no
rtulo, imediatamente antes de realizar a identifcao,
testes e ensaios.
A. Examinar a amostra por eletroforese comparando com o
plasma humano normal. Os eletroforetogramas apresentam
as mesmas bandas.
B. Realizar ensaios de precipitao a partir de uma gama
apropriada de soros especfcos de espcies de animais
domsticos. aconselhvel que o ensaio seja realizado
com soros especfcos de protenas plasmticas de cada
uma das espcies domsticas normalmente utilizadas no
pas para a preparao de produtos de origem biolgica. A
amostra contm protenas de origem humana e d resultado
negativo para as protenas especfcas plasmticas de outras
espcies.
C. A mistura satisfaz a Determinao do Ttulo de
Hemaglutininas anti-A e anti-B (ver Doseamento).
CARACTERSTICAS
Aspecto. Aps o seu descongelamento, a soluo apresenta-
se como lquido lmpido ou ligeiramente opalescente,
isenta de partculas slidas e gelatinosas. A preparao
lioflizada apresenta-se como p branco ou amarelo claro
ou slido frivel.
pH (5.2.19). 6,5 a 7,6.
Osmolalidade (5.2.28). No mnimo, 240 mosmol/kg.
Determinao da perda por dessecao (5.2.9) ou por
O teor est compreendido dentro dos limites aprovados
pelas autoridades competentes.
Citrato. No mximo, 25 mmol/L. Proceder conforme
e 7,8 mm de dimetro interno, empacotada com resina
trocadora de ctions (9 m); fuxo da Fase mvel de 0,5
mL/minuto.
Fase mvel: soluo de cido sulfrico a 0,051% (p/v).
a
m
Soluo amostra: diluir a amostra com um volume igual de
uma soluo de cloreto de sdio a 0,9 % (p/v). Filtrar com
fltro de porosidade 0,45 m.
Soluo padro: dissolver 0,3 g de citrato de sdio em
gua e diluir a 100 mL com o mesmo solvente.
padro e da Soluo amostra. O tempo de reteno do
citrato cerca de 10 minutos. Tempo de equilbrio da
coluna: 15 minutos.
Clcio. Proceder conforme descrito em Espectrometria de
absoro atmica (5.2.13.1). Determinar no comprimento
de onda de 622 nm. No mximo, 5 mmol/L.
Potssio. Proceder conforme descrito em Espectrometria
de emisso atmica (5.2.13.2). Determinar no comprimento
de onda: 766,5 nm. No mximo, 5 mmol/L.
emisso atmica (5.2.13.2). Determinar no comprimento
coelho 3 mL da amostra por quilograma de massa corporal.
DOSEAMENTO
Anticorpos contra eritrcitos irregulares.
Quando examinada por exame indireto de antiglobulinas,
a amostra no diluda no revela sinais de presena de
anticorpos contra eritrcitos irregulares.
Anticorpos contra o vrus da hepatite A.
No mnimo 2 UI/mL, determinado de acordo com
Mtodos Imunoqumico (5.6) apropriado. O padro de
imunoglobulina humana da hepatite A adequado para uso
como uma preparao de referncia
Hemaglutininas anti-A e anti-B.
hemaglutininas Anti-A e Anti-B (5.5.1.9). A presena das
Hemaglutininas (anti-A ou anti-B) corresponde ao grupo
sanguneo indicado no rtulo.
fatores de Coagulao Ativados.
da coagulao ativados (5.5.1.8). Realizar o ensaio com
0,1 mL da amostra em vez de diluies a 1/10 e 1/100. O
tempo de coagulao para o tubo que contem a amostra no
inferior a 150 segundos. Cumpre o teste.
fator V.
Com tampo de imidazol pH 7,4, preparar, de preferncia
em duplicata, trs diluies a 1/10 e a 1/40 da amostra. Para
cada diluio proceder do seguinte modo: misturar 0,1 mL
de substrato de plasma defciente em Fator V, 0,1 mL da
diluio da amostra, 0,1 mL de reagente de tromboplastina
e 0,1 mL de soluo de cloreto de clcio a 0,35% (p/v).
Registrar o tempo de coagulao, ou seja, o intervalo
entre o momento da adio da soluo de cloreto de clcio
e os primeiros sinais de formao de fbrina. Observar
mediante aparelho apropriado. Determinar, em duplicata e
nas mesmas condies, os tempos de coagulao de quatro
diluies entre 1/10 e 1/80 de plasma humano normal
na tampo de imidazol pH 7,4. Uma unidade de Fator
V corresponde atividade de 1 mL de plasma humano
normal. O plasma humano normal preparado a partir
de mistura de unidades de plasma provenientes de pelo
menos 30 doadores e conservado a uma temperatura
igual ou inferior a -30 C. Verifcar a validade do ensaio e
calcular a atividade da amostra atravs de Procedimentos
estatsticos aplicveis aos ensaios biolgicos (8). A
atividade determinada no inferior a 0,5 unidades/mL. O
intervalo de confana (P = 0,95) da atividade determinada
no ultrapassa os 80% a 120%.
fator VIII.
VIII de coagulao humana lioflizado (5.5.1.7) utilizando
um plasma padro calibrado em relao ao Padro
Internacional do Fator VIII da coagulao sangunea
humana. A atividade determinada no inferior a 0,5
UI/mL. O intervalo de confana (P = 0,95) da atividade
determinada no ultrapassa 80% a 120%.
Protenas totais
Diluir a amostra em uma soluo de cloreto de sdio a 0,9
% (p/v), de modo a obter uma soluo que contenha cerca
de 15 mg de protenas em 2 mL. Num tubo de centrfuga
de fundo redondo, introduza 2 mL desta soluo. Adicionar
2 mL de uma soluo de molibdato de sdio a 7,5% (p/v)
e 2 mL de uma mistura de cido sulfrico 1 volume, isento
de nitrognio, e 30 volumes de gua. Agitar, centrifugar
durante 5 minutos, decantar o lquido sobrenadante e
deixar escoar com o tubo invertido sobre um papel de fltro.
Realizar o doseamento do nitrognio no resduo atravs do
mtodo de digesto com cido sulfrico, conforme descrito
em Determinao de nitrognio pelo mtodo de Kjeldahl
(5.3.3.2) e calcular o teor de protenas multiplicando o
resultado por 6,25. O teor em protenas totais no inferior
a 45 g/L.
ROTULAGEM
O rtulo deve indicar o grupo sanguneo ABO e Rh(D
u
)
e o mtodo utilizado para a inativao viral. Observar a
legislao vigente.
MISTURAS DE PLASMA HUMANO
TRATADO POR INATIVAO VIRAL
Plasma Humanum Collectum Deinde Conditum
ad Viros Exstinguendos
obtida a partir de plasma humano proveniente de doadores
do mesmo grupo sanguneo ABO e Rh(D
u
). A preparao
a
m
1151
descongelada ou reconstituda antes de seu uso de modo
a obter uma soluo injetvel. O plasma humano utilizado
deve satisfazer s exigncias da monografa Plasma
Humano para Fracionamento.
As unidades de plasma destinadas produo so
congeladas a uma temperatura igual ou inferior a -30 C
dentro das primeiras 6 horas seguintes separao das
fraes celulares sanguneas e no mximo, nas 24 horas
que se seguem coleta. A mistura preparada a partir
de unidades de plasma pertencentes ao mesmo grupo
sanguneo ABO e Rh(D
u
).
A mistura de plasma examinada a partir de mtodos
de sensibilidade e especifcidade apropriados quanto a
presena do antgeno de superfcie do vrus da hepatite
B (HBsAg), de anticorpos contra o vrus da hepatite C e
de anticorpos contra o HIV. Nestes ensaios, a mistura do
plasma deve fornecer resultados negativos.
do RNA do vrus da hepatite C de acordo com a monografa
devidamente validada. O ensaio inclui um padro positivo
com 100 UI de RNA do vrus da hepatite C por mililitro
e, para identifcar a presena eventual de inibidores, um
padro interno preparado por adio de um marcador
apropriado amostra da mistura de plasma. O ensaio s
vlido se o padro positivo for reativo ou se o resultado
obtido com o padro interno no indicar a presena de
inibidores.
A mistura satisfaz ao ensaio se no for reativa para o RNA
do vrus da hepatite C.
do DNA do vrus B19 de acordo com a monografa
devidamente validada. O pool deve conter no mximo 10
UI por microlitro. Um controle positivo 10 UI de DNA
por microlitro do vrus B19, e para identifcar a presena
eventual de inibidores, um padro interno preparado por
adio de um marcador apropriado amostra da mistura
de plasma. O ensaio s vlido se o padro positivo for
reativo ou se o resultado obtido com o padro interno no
O mtodo de preparao realizado de modo a evitar a
ativao de qualquer fator de coagulao e assim, limitar
o seu potencial de ao trombognico. Compreende uma
ou vrias etapas para as quais se tenha demonstrado a
eliminao ou inativao de agentes infecciosos conhecidos.
No caso de serem utilizadas substncias para inativao
viral durante a produo, o processo de purifcao
subseqente deve ser validado de modo a demonstrar que
a concentrao destas substncias encontra-se em um nvel
apropriado e que os eventuais resduos no comprometem
a inocuidade da preparao.
O mtodo tpico utilizado para a inativao de vrus
envelopados o processo solvente-detergente, que consiste
no tratamento com uma mistura de fosfato de tributila e de
octoxinol 10; em seguida, esses reagentes so removidos
por extrao em fase oleosa ou slida, de modo a que o
teor residual no produto fnal seja inferior a 2 g/mL para
fosfato de tributila e a 5 g/mL para o octoxinol 10. No
deve ser adicionado nenhum conservante antimicrobiano.
A soluo fltrada atravs de uma membrana
esterilizante, distribuda assepticamente nos recipientes
fnais e imediatamente congelada. Os recipientes fnais so
compostos por material plstico, satisfazendo s exigncias
para Recipientes de plstico (6.2); ou vidro, satisfazendo
s exigncias para os Recipientes de vidro (6.1). Pode, em
seguida, ser lioflizada.
IDENTIFICAO
Reconstituir ou descongelar a amostra como indicado no
rtulo, imediatamente antes de realizar a identifcao,
testes e ensaios.
A. Examinar a amostra por eletroforese comparando com o
plasma humano normal. Os eletroforetogramas apresentam
as mesmas bandas.
B. Realizar ensaios de precipitao a partir de uma gama
apropriada de soros especfcos de espcies de animais
domsticos. aconselhvel que o ensaio seja realizado
com soros especfcos de protenas plasmticas de cada
uma das espcies domsticas normalmente utilizadas no
pas para a preparao de produtos de origem biolgica. A
amostra contm protenas de origem humana e d resultado
negativo para as protenas especfcas plasmticas de outras
espcies.
C. A mistura satisfaz a Determinao do Ttulo de
Hemaglutininas anti-A e anti-B (ver Doseamento).
CARACTERSTICAS
Aspecto. Aps o seu descongelamento, a soluo apresenta-
se como lquido lmpido ou ligeiramente opalescente,
isenta de partculas slidas e gelatinosas. A preparao
lioflizada apresenta-se como p branco ou amarelo claro
ou slido frivel.
pH (5.2.19.). 6,5 a 7,6.
Osmolalidade (5.2.28). No mnimo, 240 mosmol/kg.
Determinao da perda por dessecao (5.2.9) ou por
O teor est compreendido dentro dos limites aprovados
pelas autoridades competentes.
Citrato. No mximo, 25 mmol/L. Proceder conforme
e 7,8 mm de dimetro interno, empacotada com resina
trocadora de ctions (9 m); fuxo da Fase mvel de 0,5
mL/minuto.
a
m
Fase mvel: soluo de cido sulfrico a 0,051% (p/v).
Soluo amostra: diluir a amostra com um volume igual de
uma soluo de cloreto de sdio 0,9 % (p/v). Filtrar com
fltro de porosidade 0,45 m.
Soluo padro: dissolver 0,3 g de citrato de sdio em
gua e diluir a 100 mL com o mesmo solvente.
padro e da Soluo amostra. O tempo de reteno do
citrato cerca de 10 minutos. O tempo de equilbrio da
coluna cerca de 15 minutos.
Clcio. Proceder conforme descrito em Espectrometria de
absoro atmica (5.2.13.1). Determinar no comprimento
Potssio. Proceder conforme descrito em Espectrometria
de emisso atmica (5.2.13.2). Determinar no comprimento
de onda de 766,5 nm. No mximo, 5 mmol/L.
emisso atmica (5.2.13.2). Determinar no comprimento
Pirognios (5.5.2.1). Injetar em cada coelho 3 mL da
amostra por quilograma de massa corporal. Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Anticorpos contra eritrcitos irregulares.
Quando examinada por exame indireto de antiglobulinas,
a amostra no diluda no revela sinais de presena de
anticorpos contra eritrcitos irregulares.
Anticorpos contra o vrus da hepatite A.
No mnimo 2 UI/mL, determinado de acordo com o
Mtodo Imunoqumico (5.6) apropriado. O padro de
imunoglobulina humana da hepatite A adequado para uso
como uma preparao de referncia
Hemaglutininas anti-A e anti-B.
hemaglutininas Anti-A e Anti-B (5.5.1.9). A presena das
Hemaglutininas (anti-A ou anti-B) corresponde ao grupo
sanguneo indicado no rtulo.
fatores de Coagulao Ativados.
da coagulao ativados (5.5.1.8). Realizar o ensaio com
0,1 mL da amostra em vez de diluies a 1/10 e 1/100. O
tempo de coagulao para o tubo que contem a amostra no
inferior a 150 segundos. Cumpre o teste.
fator V.
Com tampo imidazol pH 7,4, preparar, de preferncia em
duplicata, trs diluies a 1/10 e a 1/40 da amostra. Para
cada diluio proceder do seguinte modo: misturar 0,1 mL
de substrato de plasma defciente em Fator V, 0,1 mL da
diluio da amostra, 0,1 mL de reagente de tromboplastina
e 0,1 mL de soluo de cloreto de clcio a 0,35% (p/v).
Registrar o tempo de coagulao, ou seja, o intervalo
entre o momento da adio da soluo de cloreto de clcio
e os primeiros sinais de formao de fbrina. Observar
mediante aparelho apropriado. Determinar, em duplicata
e nas mesmas condies, os tempos de coagulao de
quatro diluies entre 1/10 e 1/80 de plasma humano
normal no tampo imidazol pH 7,4. Uma unidade de Fator
V corresponde atividade de 1 mL de plasma humano
normal. O plasma humano normal preparado a partir
de mistura de unidades de plasma provenientes de pelo
menos 30 doadores e conservado a uma temperatura
igual ou inferior a -30 C. Verifcar a validade do ensaio e
calcular a atividade da amostra atravs de Procedimentos
estatsticos aplicveis aos ensaios biolgicos (8). A
atividade determinada no inferior a 0,5 unidades/mL. O
intervalo de confana (P = 0,95) da atividade determinada
no ultrapassa os 80% a 120%.
fator VIII.
VIII de coagulao humana lioflizado (5.5.1.7) utilizando
um plasma padro calibrado em relao ao Padro
Internacional do Fator VIII da coagulao sangunea
humana. A atividade determinada no inferior a 0,5
UI/mL. O intervalo de confana (P = 0,95) da atividade
determinada no ultrapassa 80% a 120%.
Protenas totais.
Diluir a amostra em uma soluo de cloreto de sdio a 0,9
% (p/v), de modo a obter uma soluo que contenha cerca
de 15 mg de protenas em 2 mL. Num tubo de centrfuga de
fundo redondo, introduza 2 mL dessa soluo. Adicionar 2
mL de uma soluo de molibdato de sdio a 7,5% (p/v) e
2 mL de uma mistura de cido sulfrico 1 volume, isento
de nitrognio, e 30 volumes de gua. Agitar, centrifugar
durante 5 minutos, decantar o lquido sobrenadante e
deixar escoar com o tubo invertido sobre um papel de fltro.
Realizar o doseamento do nitrognio no resduo atravs do
mtodo de digesto com cido sulfrico, conforme descrito
em Determinao de nitrognio pelo mtodo de Kjeldahl
(5.3.3.2), e calcular o teor de protenas multiplicando o
resultado por 6,25. O teor em protenas totais no inferior
a 45 g/L.
ROTULAGEM
O rtulo deve indicar o grupo sanguneo ABO e Rh(D
u
)
e o mtodo utilizado para a inativao viral. Observar a
legislao vigente.
a
m
1153
MITOTANO
Mitotanum
Cl
Cl
Cl Cl
C
14
H
10
Cl
4
; 320,04
mitotano; 06020
1-Cloro-2-[2,2-dicloro-1-(4-clorofenil)etil]benzeno
[53-19-0]
C
14
H
10
Cl
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais de pentano ou metanol.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua. Solvel
em etanol, ter etlico, metanol, isooctano, tetracloreto de
carbono, hexano e em leos fxos e graxos.
IDENTIFICAO
observados no espectro de mitotano SQR, preparado de
maneira idntica.
comprimentos de onda de soluo similar de mitotano
SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
No mximo 0,5%.
No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
cerca de 0,1 g da amostra e dissolver em metanol. Diluir,
concentrao, utilizando o mesmo solvente. Medir
utilizando metanol para o ajuste do zero. Calcular o teor de
C
14
H
10
Cl
4
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. Manusear com excepcional
ateno.
CLASSE TERAPUTICA
Antineoplsico.
MITOTANO COMPRIMIDOS
14
H
10
Cl
4
.
IDENTIFICAO
Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar quantidade do p
equivalente a 0,5 g de mitotano em 10 mL de gua. Filtrar
em funil de vidro sinterizado e lavar o resduo com duas
pores de 5 mL de gua. Transferir o resduo para bquer
pequeno, adicionar 4 mL de etanol, aquecer at fervura e
fltrar imediatamente. Resfriar, fltrar os cristais de mitotano,
lavar uma vez com 2 mL de etanol, e secar a vcuo a 60
C por 2 horas. O espectro de absoro no infravermelho
(5.2.14) do resduo, disperso em leo mineral, apresenta
observados no espectro de mitotano SQR, preparado de
maneira idntica.
CARACTERSTICAS
Cumpre o teste.
a
m
DOSEAMENTO
de p equivalente a, exatamente, cerca de 0,1 g de mitotano
metanol, agitar por 5 minutos, completar o volume com
metanol, homogeneizar e fltrar. Transferir 25 mL do fltrado
metanol e homogeneizar, de modo a obter soluo a 0,02%
14
H
10
Cl
4
nos
comprimidos a partir das leituras obtidas.
ROTULAGEM
a
n
1155
NIfEDIPINO
Nifedipinum
C
17
H
18
N
2
O
6
; 346,34
nifedipino; 06352
ster 3,5-dimetlico do cido 1,4-diidro-2,6-dimetil-4-(2-
nitrofenil)-3,5-piridinadicarboxilico
[21829-25-4]
C
17
H
18
N
2
O
6
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais amarelos, inodoros e
inspidos.
em acetato de etila, ligeiramente solvel em etanol, muito
pouco solvel em clorofrmio e acetona.
Faixa de fuso (5.2.2): 171 C a 175 C.
IDENTIFICAO
observados no espectro de nifedipino SQR, preparado de
maneira idntica.
B. Dissolver 50 mg de nifedipino em 1 mL de
dimetilsulfxido. Desenvolve-se colorao amarela,
com absoro mxima em 330 nm. Esta cor passa para
vermelha com a adio de 5 gotas de hidrxido de sdio
SR, absorvendo em 451 nm.
C. Adicionar soluo cida de 30 mg de nifedipino mistura
de 2 mL de cido actico glacial, 2 mL de dimetilsulfxido,
5 gotas de soluo 2% de xido de cromo (0,2 g de xido
de cromo em 10 mL de cido actico). A soluo adquire
cor verde-amarelada.
D. Dissolver 25 mg da amostra em 1 mL de etanol a 90%
(v/v), 5 mL de cloreto de clcio a 1% (p/v) e 19 mg de
zinco em p. Agitar vigorosamente e, em seguida, aquecer
por 10 minutos a 80 C em banho-maria. Filtrar e adicionar
a 3 mL do fltrado cinco gotas de soluo de cloridrato de
benzola. Agitar por 1 minuto e, em seguida, adicionar dez
gotas de cloreto frrico SR, sob agitao. Desenvolve-se
colorao vermelha alternada com amarela aps adio de
cido clordrico.
ENSAIOS DE PUREZA
254
como suporte e uma mistura
de cicloexano e acetato de etila (6:4) como fase mvel.
Soluo (1): soluo a 1 mg/mL de amostra em metanol.
Soluo (2): soluo a 1 mg/mL de nifedipino SQR em
metanol.
Soluo (3): soluo a 10 ug/mL de amostra em metanol.
Cloretos (5.3.2.1). No mximo 0,02% (200 ppm).
DOSEAMENTO
B. Proceder ao abrigo da luz direta, conforme descrito
utilizando cromatgrafo provido de detector 235 nm,
coluna de 250 mm de comprimento e 4,0 mm de dimetro
interno, empacotada com slica quimicamente ligada
a grupo octadecilsilano (5 m), mantida temperatura
ambiente, fuxo da Fase mvel de 1,0 mL/min.
Fase mvel: preparar uma mistura de gua, acetonitrila e
metanol (50:25:25).
Soluo amostra: transferir, exatamente, cerca de 25 mg de
25 mL de metanol, completar com Fase mvel e misturar
de modo a obter concentrao conhecida de 0,1 mg/mL.
de nifedipino SQR em Fase mvel de modo a obter
concentrao conhecida de 0,1 mg/mL.
a
n
Injetar replicatas da Soluo padro. A efcincia da coluna
no menor que 16 000 pratos tericos/metro; o fator de
cauda no maior que 1,5 e o desvio padro da resposta do
pico principal no superior a 1%.
Procedimento: injetar, separadamente, cerca de 25 uL das
Solues padro e amostra. Registrar os cromatogramas
C
17
H
18
N
2
O
6
a partir das respostas com a Soluo padro e
a Soluo amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Vasodilatador.
NIfEDIPINO CPSULAS
Contm, no mnimo, 90,0% e, no mximo 110,0% da
17
H
18
N
2
O
6
.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G, com espessura
de 0,5 mm, como suporte, e mistura de acetato de etila e
cicloexano (1:1), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
placa, 0,5 mL de cada uma das solues, recentemente
Soluo (1): soluo a 1,2 mg/mL de nifedipino SQR em
diclorometano.
Soluo (2): transferir o contedo de trs cpsulas para tubo
de centrfuga e lavar o interior das cpsulas com 20 mL de
hidrxido de sdio 0,1 M. Adicionar, volumetricamente, 20
mL de diclorometano ao tubo e tampar. Agitar suavemente
e liberar a presso no tubo. Tampar hermeticamente e
agitar por uma hora. Centrifugar por 10 minutos a 2000
a 2500 rpm. Remover a fase aquosa sobrenadante com
seringa e transferir 5 mL da camada transparente inferior
para bquer.
Soluo reveladora: dissolver 3 g de subnitrato de bismuto
e 30 g de iodeto de potssio em 10 mL de cido clordrico
3 M e transferir para balo volumtrico de 100 mL.
Completar o volume com gua e homogeneizar. Transferir
10 mL para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar 10
mL de cido clordrico 3 M e completar o volume com
gua. Homogeneizar.
Desenvolver o cromatograma ao abrigo da luz direta.
Remover a placa, deixar secar ao ar. Examinar
imediatamente sob luz ultravioleta (254 nm). A mancha
principal obtida com a Soluo (1) corresponde em cor,
intensidade e posio quela obtida com a Soluo
(2). Nebulizar a placa com a Soluo reveladora. Cada
cromatograma apresenta banda alaranjado-clara sobre
fundo amarelo.
CARACTERSTICAS
o contedo de cada cpsula para balo volumtrico de
200 mL. Lavar o interior das cpsulas com pequenas
pores de metanol, reunindo os lquidos de lavagem no
balo. Completar o volume com metanol e homogeneizar.
completar o volume com metanol. Preparar soluo padro
Medir as absorvncias das solues resultantes em 350 nm
(5.2.14), utilizando metanol para ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
17
H
18
N
2
O
6
nas cpsulas a partir das leituras
obtidas.
Meio de dissoluo: fuido gstrico simulado (sem
pepsina), 900 mL
Tempo: 20 minutos
de dissoluo, fltrar e diluir com Meio de dissoluo
solues em 340 nm (5.2.14), utilizando Meio de dissoluo
17
H
18
N
2
O
6

da soluo de nifedipino SQR na concentrao de 0,005%
declarada de C
17
H
18
N
2
O
6
ENSAIOS DE PUREZA
mtodo B. de Doseamento da monografa de Nifedipino.
Preparar as solues teste como descrito a seguir.
Nota: proceder ao ensaio imediatamente aps o preparo
da Soluo (1) e da Soluo (5), protegendo-as da luz
direta.
nifedipino SQR em metanol, de modo a obter soluo a 1
mg/mL. Diluir com Fase mvel, de modo a obter soluo
a 0,3 mg/mL.
de nitrofenilpiridina SQR em metanol, de modo a obter
a
n
1157
soluo a 1 mg/mL. Diluir com Fase mvel, de modo a
de nitrosofenilpiridina SQR em metanol, de modo a obter
soluo a 1 mg/mL. Diluir com Fase mvel, de modo a obter
soluo a 1,5 g/mL.
Soluo (4): misturar 5 mL da Soluo (2), 5 mL da Soluo
(3) e 5 mL de Fase mvel. Homogeneizar.
Soluo (5): proceder como descrito para Soluo amostra
no mtodo B. de Doseamento.
Soluo (6): misturar volumes iguais da Soluo (1),
Soluo (2) e da Soluo (3).
reteno relativos so cerca de 0,8 para nitrofenilpiridina,
0,9 para nitrosofenilpiridina e 1,0 para nifedipino. A
resoluo entre nitrofenilpiridina e nitrosofenilpiridina no
menor que 1,5. A resoluo entre nitrosofenilpiridina e
nifedipino no menor que 1,0. O desvio padro relativo das
reas de replicatas dos picos registrados correspondentes
nitrofenilpiridina e nitrosofenilpiridina no maior que
10,0%.
as reas sob os picos principais. Calcular a quantidade, em
mg, das impurezas nitrofenilpiridina e nitrosofenilpiridina
nas cpsulas, segundo a expresso:
|
|
.
|
\
|

4
5
r
r
C
5
V
em que
V = volume total, em mL, da Soluo (5);
C = concentrao de nitrofenilpiridina ou de
nitrosofenilpiridina, em mg/mL, na Soluo (4);
r
5
= resposta do pico referente nitrofenilpiridina ou
nitrosofenilpiridina no cromatograma obtido com a
Soluo (5);
r
4
= reposta do pico referente nitrofenilpiridina ou
nitrosofenilpiridina no cromatograma obtido com a
Soluo (4).
No mximo 2,0% de nitrofenilpiridina e 0,5% de
nitrosofenilpiridina, em relao ao contedo de nifedipino.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de absoro no ultravioleta (5.2.14). Proceder ao abrigo
da luz direta. Transferir o contedo de 10 cpsulas para
balo volumtrico de 100 mL. Lavar o interior das
cpsulas com pequenas pores de metanol, reunindo os
lquidos de lavagem no balo. Completar o volume com o
mesmo solvente e homogeneizar. Diluir com metanol at
quantidade de C
17
H
18
N
2
O
6
nas cpsulas a partir das leituras
obtidas.
da monografa de Nifedipino. Preparar a Soluo amostra
Soluo amostra: transferir o contedo de cinco cpsulas
para balo volumtrico de 100 mL, com auxlio de
pequenas pores de metanol. Completar o volume com o
mesmo solvente e homogeneizar. Diluir, sucessivamente,
em Fase mvel, de modo a obter soluo a 0,1 mg/mL de
nifedipino.
medir as reas sob os picos principais. Calcular a quantidade
de C
17
H
l8
N
2
O
6
nas cpsulas a partir das respostas obtidas
luz, em temperatura entre 15 C e 25 C.
ROTULAGEM
NIMESULIDA
Nimesulidum
O
NO
2
NH
S
O
C H
3
O
C
13
H
12
N
2
O
5
S; 308,31
nimesulida; 06391
N-(4-Nitro-2-fenoxifenil)metanossulfonamida
[51803-78-2]
C
13
H
12
N
2
O
5
a
n
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P amarelo plido, cristalino,
levemente untuoso ao tato, inodoro. No higroscpico.
solvel em etanol e metanol, muito solvel em acetona,
clorofrmio, acetonitrila e dimetilformamida. Solvel em
solues de hidrxidos alcalinos. Insolvel em solues
cidas.
Faixa de fuso (5.2.2): 143,3 C a 144,5 C.
IDENTIFICAO
O teste de Identifcao C. poder ser omitido se forem
realizados os testes A. e B. O teste de Identifcao B.
poder ser omitido se forem realizados os testes A. e C.
amostra dessecada a 105 C, at peso constante, e dispersa
nimesulida SQR, preparado de maneira idntica.
254
,
ativada em estufa por 30 minutos a 105 C, como suporte, e
mistura de metanol e acetonitrila (80:20), como fase mvel.
Soluo (1): pesar, exatamente, cerca de 75 mg da amostra,
volume com acetona. Transferir 1 mL dessa soluo para
mesmo solvente.
nimesulida SQR, transferir para balo volumtrico de 100
mL e completar o volume com acetona. Transferir 1 mL
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta (254 nm e
365 nm). A mancha principal obtida com a Soluo (1)
com a Soluo (2).
corresponde ao tempo de reteno do pico principal da
Soluo padro.
ENSAIOS DE PUREZA
mximo 0,002% (20 ppm).
mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
A. Pesar, exatamente, cerca de 0,24 g da amostra, dissolver
em 30 mL de acetona previamente neutralizada e adicionar
20 mL de gua. Titular com hidrxido de sdio 0,1 M SV
e determinar o ponto fnal potenciometricamente. Cada mL
de hidrxido de sdio 0,1 M SV equivale a 30,831 mg de
C
13
H
12
N
2
O
5
S.
cerca de 0,1 g da amostra, para balo volumtrico de 100
mL, dissolver e completar o volume com hidrxido de sdio
0,01 M. Diluir, sucessivamente, com o mesmo solvente, at
nm, utilizando hidrxido de sdio 0,01 M para ajuste do
13
H
12
N
2
O
5
de 1,8 mL/minuto.
da amostra para balo volumtrico de 100 mL, dissolver na
Fase mvel e completar o volume com o mesmo solvente.
Diluir sucessivamente, na Fase mvel, de modo a obter
soluo a 20 ug/mL.
de nimesulida SQR, na Fase mvel, de modo a obter
soluo a 20 ug/mL.
13
H
12
N
2
O
5
S
na amostra a partir das respostas obtidas para a Soluo
ROTULAGEM
a
n
1159
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infamatrio.
NIMESULIDA COMPRIMIDOS
13
H
12
N
2
O
5
S.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Preparar soluo de
nimesulida a 0,01% (p/v) em clorofrmio. Filtrar. Evaporar
o fltrado em banho-maria at secura. Dessecar o resduo
a 105 C at peso constante. Proceder conforme descrito
no teste A. de Identifcao da monografa de Nimesulida.
A. de Doseamento, exibe mximos em 212 nm e 392 nm,
CARACTERSTICAS
Meio de dissoluo: tampo fosfato de potssio pH 7,4
com polissorbato 80 a 2% (v/v), 900 mL
Tempo: 45 minutos
utilizando o mesmo solvente para ajuste do zero. Calcular a
quantidade de C
13
H
12
N
2
O
5
S

dissolvida no meio, comparando
as leituras obtidas com a da soluo de nimesulida SQR
na concentrao de 0,0015% (p/v), preparada nas mesmas
condies que as amostras.
declarada de C
13
H
12
N
2
O
5
S

Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Empregar uns dos mtodos descritos a seguir.
a 0,1 g de nimesulida para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 60 mL de hidrxido de sdio 0,01 M e agitar por
40 minutos. Completar o volume com o mesmo solvente e
fltrar. Diluir, sucessivamente, at concentrao de 0,002%
(p/v), utilizando hidrxido de sdio 0,01 M. Preparar
soluo padro na mesma concentrao, utilizando o mesmo
em 392 nm, utilizando hidrxido de sdio 0,01 M para
13
H
12
N
2
O
5
S nos
B. Proceder conforme descrito no mtodo C. de Doseamento
da monografa de Nimesulida. Preparar a Soluo amostra
nimesulida para balo volumtrico de 100 mL, adicionar
60 mL da Fase mvel e agitar mecanicamente por 40
minutos. Completar o volume com Fase mvel e fltrar.
Diluir, sucessivamente, em Fase mvel, de modo a obter
soluo a 20 g/mL.
13
H
12
N
2
O
5
S
Solues padro e a Soluo amostra.
ROTULAGEM
a
n
NISTATINA
Nystatinum
O
O
OH
COOH
O H
O
O
CH
3
N H
2
O H
OH
C H
3
O H
CH
3
C H
3
O O H O H O H
OH
O H
H
C
47
H
75
NO
17
; 926,09
nistatina; 06410
Nistatina
[1400-61-9]
Nistatina uma substncia ou a mistura de duas ou mais
substncias produzidas por Streptomyces noursei Brown
et al. (Streptomycetaceae). Apresenta potncia de, no
mnimo, 4400 UI de nistatina por miligrama, ou 5000 UI
de nistatina por miligrama, se destinada produo de p
para suspenso oral.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P higroscpico, fno, amarelo ou
castanho.
solvel em dimetilformamida, pouco solvel em metanol
e praticamente insolvel em etanol, clorofrmio e ter
etlico.
IDENTIFICAO
A. Pesar, exatamente, o equivalente a 100 000 UI da
amostra e dissolver em mistura de 5 mL de cido actico
glacial e 50 mL de metanol. Completar o volume para 100
mL com metanol. Diluir, sucessivamente, em metanol,
at concentrao de 40 UI/mL. O espectro de absoro
no ultravioleta (5.2.14), na faixa de 220 nm a 350 nm, da
soluo obtida, exibe mximos em 230, 291, 305 e 319
nm. A razo entre os valores de absorvncia em 291 nm
e 319 nm, em relao absorvncia mxima a 305 nm
est compreendida entre 0,61 e 0,73 e entre 0,83 e 0,96,
respectivamente. A razo entre os valores de absorvncia
medidos em 230 nm e 280 nm est compreendida entre
0,83 e 1,25.
B. Adicionar 0,1 mL de cido clordrico a 2 mg da amostra.
Produz-se colorao castanha.
C. Adicionar 0,1 mL de cido sulfrico a 2 mg da amostra.
Produz-se colorao castanha, desenvolvendo para violeta
com repouso.
ENSAIOS DE PUREZA
3% (p/v).
Nistatina A. Proceder conforme descrito em Cromatografa
a lquido de alta efcincia (5.2.17.4). Proteger da luz direta.
de dimetro interno, empacotada com slica desativada,
mantida a temperatura de 30 C; fuxo da Fase mvel de
1,0 mL/minuto.
Eluente A: acetato de amnio 0,05 M e acetonitrila (71:29).
Eluente B: acetato de amnio 0,05 M e acetonitrila (40:60).
Gradiente de fase mvel: adotar o sistema de gradiente
Tempo
(min)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
45-60 100 0 equilibrio
da amostra em dimetilsulfxido para obter soluo a 0,4
mg/mL. Utilize por, no mximo, 24 horas aps o preparo,
mantida sob refrigerao.
de nistatina SQR em dimetilsulfxido para obter soluo
a 0,4 mg/mL. Utilize por, no mximo, 24 horas aps o
preparo, mantida sob refrigerao.
Soluo de resoluo: dissolver 20 mg de nistatina SQR
em metanol, diluir com gua para 50 mL e homogeneizar.
Adicionar 2 mL de cido clordrico, em 10 mL da soluo
anteriormente preparada e esperar por 1 hora, a temperatura
ambiente, antes do uso.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo de resoluo. O
tempo de reteno mdio para a nistatina A de 14 minutos.
A resoluo entre os dois maiores picos no menor que
as reas sob os picos. Desconsiderar os picos obtidos
antes dos 2 minutos. No mnimo, 85% de nistatina A. No
mximo, 4% de qualquer outro componente.
Metais pesados (5.3.2.3). Preparar soluo padro
utilizando 2 mL da Soluo padro de chumbo (10 ppm
a
n
1161
Pb). Proceder conforme descrito em Mtodo IV. No
mximo 0,002% (20 ppm).
por 3 horas, no excedendo a 5 mmHg. No mximo 5,0%.
No mximo 3,5%.
Nistatina destinada produo de p para suspenso oral,
cumpre com o seguinte teste adicional.
Dispersibilidade. Transferir, exatamente, cerca de 0,2 g da
amostra para bquer contendo 200 mL de gua e dispersar
lentamente com basto de vidro. Deixar em repouso por
dois minutos. O material dever estar suspenso e haver, no
mximo, um pequeno sedimento. Se houver sedimentao,
proceder determinao da potncia, da parte suspensa,
conforme descrito em Ensaio microbiolgico de antibiticos
(5.5.3.3). Transferir, volumetricamente, a amostra suspensa
para o liquidifcador de alta velocidade, adicionar
dimetilformamida, de modo a obter concentrao de 400
UI/mL e agitar de 3 a 5 minutos. Diluir essa soluo com
Tampo fosfato de potssio a 1%, estril, pH 6,0 (Soluo
1) de modo a obter soluo com concentrao equivalente
a do padro. No mnimo, 90,0% da potncia esperada de
nistatina.
Nistatina destinada produo de p para suspenso oral,
cumpre com o seguinte teste adicional.
Toxicidade (5.5.2.3). Injetar via intraperitonial, quantidade
equivalente a 600 UI, suspensa em 0,5 mL de soluo de
accia a 0,5% (p/v), em gua.
DOSEAMENTO
antibiticos (5.5.3.3), pelo mtodo de difuso em gar.
Soluo amostra: proceder ao abrigo da luz direta.
Dissolver quantidade exatamente pesada da amostra em
dimetilformamida. Diluir, sucessivamente, com mistura
de dimetilformamida e Tampo fosfato de potssio a 1%,
estril, pH 6,0 (Soluo 1) (5:95), de modo a obter solues
nas concentraes entre 10 a 40 UI/mg.
Soluo padro: proceder ao abrigo da luz direta.
Dissolver quantidade exatamente pesada de nistatina
SQR em dimetilformamida. Diluir, sucessivamente, com
mistura de dimetilformamida e Tampo fosfato de potssio
a 1%, estril, pH 6,0 (Soluo 1) (5:95), de modo a obter
solues nas concentraes entre 10 a 40 UI/mg.
a potncia da amostra, em g de nistatina por miligrama, a
partir da potncia do padro e das respostas obtidas com a
temperatura entre 2 C e 8 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antifngico.
NISTATINA COMPRIMIDOS VAGINAIS
quantidade declarada de nistatina. Os comprimidos vaginais
contm agentes aglutinantes, diluentes e lubrifcantes.
IDENTIFICAO
Pesar e pulverizar os comprimidos vaginais. Transferir
quantidade de p equivalente a 300 000 UI de nistatina
cido actico glacial e 50 mL de metanol. Homogeneizar.
Adicionar quantidade sufciente de metanol para produzir
100 mL. Filtrar. Transferir 1 mL dessa soluo para balo
Preparar ensaio em branco utilizando os mesmos solvente
e omitindo a adio da amostra. O espectro de absoro
soluo obtida, exibe mximos em 291 nm, 305 nm e 319
nm. A razo entre os valores de absorvncia a 291 nm e 319
nm para aquela a 305 nm est compreendida entre 0,61 e
0,73 e entre 0,83 e 0,96, respectivamente.
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
Perda por dessecao (5.2.9). Pesar e pulverizar os
comprimidos vaginais. Determinar em 0,1 g da amostra,
em estufa vcuo, a 60 C, por 3 horas. No mximo 5,0%.
DETERMINAO DE POTNCIA
Proceder ao abrigo da luz direta. Pesar e pulverizar
20 comprimidos vaginais. Misturar quantidade do p
equivalente a 200 000 UI com 50 mL de dimetilformamida
por uma hora. Centrifugar. Transferir 10 mL do sobrenadante
a
n
com soluo de fosfato de potssio monobsico a 9,56%
(p/v) e hidrxido de potssio M a 11,5% (v/v). Proceder
conforme Ensaio microbiolgico por difuso em gar
(5.5.3.3.1). A preciso do ensaio tal que o limite inferior
de 95,0%, e o limite superior de 105,0% da potncia
estimada. O limite inferior de 97,0% e o limite superior
de 110,0% do nmero prescrito ou declarado de UI.
ROTULAGEM
NISTATINA CREME VAGINAL
47
H
75
NO
17
.
CARACTERSTICAS
mesoflos (5.5.3.1.2). Bactrias totais: no mximo 100
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de Nistatina. Preparar Soluo amostra como descrito a
seguir.
Soluo amostra: misturar, exatamente, em liquidifcador
de alta velocidade, quantidade de creme vaginal com
dimetilformamida, de modo a obter concentrao a cerca
de 400 UI de nistatina por mililitro. Diluir, sucessivamente,
essa soluo em Tampo fosfato de potssio a 1%, estril,
pH 6,0 (Soluo 1) de modo a obter solues na faixa de
concentrao adequada para a curva padro.
ROTULAGEM
NISTATINA SUSPENSO ORAL
quantidade declarada de nistatina. A suspenso oral contm
agentes aromatizantes, conservantes e dispersantes.
IDENTIFICAO
Transferir quantidade da soluo oral contendo 300
000 UI de nistatina para balo volumtrico de 100 mL e
adicionar mistura de cido actico glacial e metanol (5:50).
Homogeneizar. Completar o volume com metanol e fltrar.
100 mL e completar o volume com metanol. Preparar ensaio
em branco utilizando os mesmos solventes e omitindo a
adio da amostra. O espectro de absoro no ultravioleta
(5.2.14), na faixa de 250 nm a 350 nm, da soluo obtida,
exibe mximos em 291 nm, 305 nm e 319 nm. A razo
entre os valores de absorvncia a 291 nm e 319 nm para
aquela a 305 nm est compreendida entre 0,61 e 0,73 e
entre 0,83 e 0,96, respectivamente.
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 4,5 a 6,0. Se o produto contm glicerina, o pH
deve estar compreendido entre 6,0 e 7,5.
Deve ser realizado caso o medicamento seja acondicionado
em doses unitrias.
conforme descrito em Espectrofotometria de absoro no
ultravioleta (5.2.14). Transferir o contedo de um frasco
de suspenso oral para balo volumtrico de 100 mL,
completar o volume com metanol e homogeneizar. Diluir,
quantitativamente, essa soluo, com metanol, de modo a
obter soluo a 25 UI de nistatina por mL. Paralelamente,
preparar soluo de nistatina SQR, em metanol, a 25 UI de
nistatina por mL. Medir as absorvncias das solues em
304 nm, utilizando metanol para ajuste do zero. Calcular
o teor de nistatina na suspenso oral a partir das leituras
obtidas.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito em Doseamento na
monografa de Nistatina. Preparar Soluo amostra como
descrito a seguir.
a
n
1163
Soluo amostra: proceder ao abrigo da luz direta.
Transferir, exatamente, volume da suspenso oral para
balo volumtrico e diluir com dimetilformamida at
concentrao conveniente. Misturar por 3 a 5 minutos.
Diluir volume dessa soluo com dimetilformamida de
modo a obter soluo contendo 400 UI de nistatina por
mililitro. Diluir, sucessivamente, com Tampo fosfato de
potssio a 1%, estril, pH 6,0 (Soluo 1), de modo a obter
solues na faixa de concentrao adequada para a curva
padro.
B. Proteger a soluo da luz durante o doseamento.
Dissolver uma quantidade contendo 200.000 UI de
nistatina em quantidade sufciente de dimetilformamida
para produzir 50 mL, diluir 10 mL para 200 mL com uma
soluo contendo fosfato de potssio monobsico a 9,56%
(p/v) e hidrxido de potssio M a 11,5% (v/v) e proceder
conforme Ensaio microbiolgico de antibiticos
por difuso em gar (5.5.3.3.1). A preciso do ensaio
tal que o limite de erro de no menos que 95% e no
mais que 105% da potncia estimada. O limite inferior
no menos que 95% e o superior no mais que 120% em
relao ao nmero de UI.
ROTULAGEM
NITRATO DE MICONAZOL
Miconazoli nitras
Cl
Cl
O
Cl Cl
N
N
.
HNO
3
C
18
H
14
Cl
4
N
2
O.HNO
3
; 479,14
nitrato de miconazol; 05929
Nitrato de 1-[2-(2,4-diclorofenil)-2-[(2,4-diclorofenil)
metoxi]etil]-1H-imidazol (1:1)
[22832-87-7]
C
18
H
14
Cl
4
N
2
O.HNO
3
DESCRIO
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, ligeiramente
solvel em metanol e pouco solvel em etanol.
Faixa de fuso (5.2.2): 178 C a 184 C.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): -0,10 a +0,10, em
1% (p/v).
IDENTIFICAO
O teste A. poder ser omitido se forem realizados os
testes B., C. e D. O teste B. poder ser omitido se forem
realizados os testes A., C. e D.
observados no espectro de nitrato de miconazol SQR,
de 200 nm a 400 nm, de soluo a 0,04% (p/v) em mistura
de cido clordrico 0,1 M e lcool isoproplico (1:10), exibe
de onda de soluo similar de nitrato de miconazol SQR.
C. Proceder conforme descrito em Cromatografa
octadecilsilano, como suporte, e mistura de acetato de
amnio SR, dioxana e metanol (20:40:40), como fase
Soluo (1): soluo amostra na concentrao de 6 mg/mL,
em fase mvel.
Soluo (2): soluo de nitrato de miconazol SQR na
concentrao de 6 mg/mL, em fase mvel.
Soluo (3): dissolver 30 mg de nitrato de miconazol SQR
e 30 mg de nitrato de econazol SQR em 5 mL de fase
mvel.
secar ao ar e vaporizar com iodo. Examinar sob luz visvel.
A mancha principal obtida com a Soluo (1) similar em
posio, cor e intensidade quela produzida com a Soluo
(2). O teste vlido se o cromatograma obtido com a
Soluo (3) mostrar duas manchas nitidamente separadas.
D. Responde s reaes para nitrato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
ligada a grupo octilsilano (3 m), mantida temperatura
a
n
Fase mvel: pesar 6 g de acetato de amnio e transferir
acetonitrila, 320 mL de metanol e completar o volume com
gua.
nitrato de miconazol SQR e 25 mg de nitrato de econazol
SQR para balo volumtrico de 25 mL e completar o
volume com Fase mvel. Homogeneizar. Diluir 2,5 mL
com o mesmo diluente.
Soluo (3): diluir 1 mL da Soluo (1) para balo
mvel.
Equilibrar o sistema cromatogrfco por 30 minutos. Injetar
10 L da Soluo (3). Ajustar o sistema cromatogrfco de
modo que a altura do pico principal obtida no cromatograma
com a Soluo (3), seja menor que 50% da escala total.
Injetar 10 L da Soluo (2). O tempo de reteno do
nitrato de miconazol de aproximadamente 20 minutos e
do nitrato de econazol de 10 minutos. A resoluo entre os
picos obtidos com a Soluo (3) no menor que 10, se
necessrio ajustar a composio da Fase mvel.
(1) e (3). Registrar os cromatogramas e medir as reas sob
os picos. No cromatograma obtido com a Soluo (1), a
rea de todos os picos, exceto o pico principal, no maior
do que a rea sob o pico principal obtida com a Soluo
(3). A soma das reas de todos os picos obtidos no
superior a duas vezes a rea sob o pico principal obtido
com a Soluo (3). Desconsiderar todos os picos com
rea inferior a 0,2 tempos do pico principal, obtido com a
Soluo (3) e os picos relativos ao on nitrato.
amostra. Dessecar em estufa a 100-105 C, por 2 horas. No
mximo 0,25%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
amostra previamente dessecada e dissolver em 50 mL de
cido actico glacial, aquecendo levemente se necessrio,
e titular potenciometricamente com cido perclico 0,1 M
SV. Proceder a determinao em branco para as correes
consumido corresponde a 47,914 mg de C
18
H
14
Cl
4
N
2
O.
HNO
3
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antifngico.
NITRATO DE PRATA
Argenti nitras
AgNO
3
; 169,87
nitrato de prata; 06427
Sal de prata(1+) do cido ntrico (1:1)
[7761-88-8]
AgNO
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais grandes incolores,
transparentes ou pequenos cristais brancos.
Solubilidade. Muito solvel em gua, solvel em etanol,
ligeiramente solvel em gua amoniacal e ter etlico,
pouco solvel em acetona.
IDENTIFICAO
A. A 10 mL de soluo a 10% (p/v), adicionar uma gota de
difenilamina SR e homogeneizar. Cuidadosamente, verter
a soluo para tubo de ensaio contendo 2 mL de cido
sulfrico. Desenvolve-se colorao azul na interface.
B. A soluo a 2% (p/v) responde s reaes do on prata
(5.3.1.1).
C. A soluo a 2% (p/v) responde s reaes do on nitrato
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez e alcalinidade. A 2 mL de soluo a 4% (p/v),
adicionar 0,1 mL de verde de bromocresol SI. Desenvolve-
se colorao azul. A 2 mL de soluo a 10% (p/v), adicionar
0,1 mL de vermelho de fenol SI. Desenvolve-se colorao
amarela.
Alumnio, cobre, chumbo e bismuto. Dissolver 1 g da
amostra em mistura de 4 mL de amnia 13,5 M e 6 mL de
gua. A soluo lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
Resduo por evaporao. A 30 mL de soluo a 4%
(p/v), adicionar 7,5 mL de cido clordrico diludo, agitar
vigorosamente, aquecer por 5 minutos em banho-maria
e fltrar. Evaporar 20 mL do fltrado em banho-maria e
a
n
1165
dessecar o resduo em estufa, entre 100 C e 105 C. No
mximo 2 mg (0,3%).
DOSEAMENTO
Dessecar previamente a amostra, sobre slica, por 4
horas, ao abrigo da luz. Pesar, exatamente, cerca de 0,3
g da amostra dessecada e dissolver em 50 mL de gua.
Adicionar 2 mL de cido ntrico e 2 mL de sulfato frrico
amoniacal SR e homogeneizar. Titular com tiocianato de
amnio 0,1 M SV at colorao amarelo-avermelhada.
Cada mL de tiocianato de amnio 0,1 M SV equivale a
16,987 mg de AgNO
3
.
Em recipientes no metlicos bem fechados, protegidos da
luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infeccioso.
NITRATO DE PRATA SOLUO
OfTLMICA
AgNO
3
. A soluo oftlmica tamponada pela adio de
acetato de sdio.
IDENTIFICAO
A. A soluo oftlmica responde s reaes do on prata
(5.3.1.1).
B. A soluo oftlmica responde s reaes do on nitrato
(5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 4,5 a 6,0.
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo oftlmica lmpida (5.2.25)
e incolor (5.2.12).
DOSEAMENTO
Transferir volume da soluo oftlmica equivalente a 50
mg de nitrato de prata para erlenmeyer, diluir com 20
mL de gua, adicionar 1 mL de cido ntrico, 1 mL de
sulfato frrico amoniacal SR e homogeneizar. Titular com
tiocianato de amnio 0,02 M SV at colorao amarelo-
avermelhada. Cada mL de tiocianato de amnio 0,02 M SV
equivale a 3,397 mg de AgNO
3
.
Em recipientes bem fechados, inertes, protegidos da luz.
ROTULAGEM
NITRITO DE SDIO
Natrii nitris
NaNO
2
; 69,00
nitrito de sdio; 06433
Sal de sdio do cido nitroso (1:1)
[7632-00-0]
NaNO
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P granuloso, ou cristais
hexagonais transparentes, incolores, ou ainda, massa
branca, opaca e deliquescente. Inodoro e de sabor
levemente salino.
em etanol, insolvel em ter etlico.
IDENTIFICAO
A. A soluo a 10% (p/v) responde s reaes do on nitrito
(5.3.1.1).
(5.3.1.1).
ENSAIO DE PUREZA
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 1 g da amostra, transferir
para balo volumtrico de 100 mL, dissolver em gua e
a
n
completar o volume com o mesmo solvente. Transferir 15
mL dessa soluo para frasco contendo mistura de 50 mL
de permanganato de potssio 0,02 M SV, 100 mL de gua
e 5 mL de cido sulfrico. Ao adicionar a soluo amostra,
imergir a ponta da pipeta sob a superfcie da mistura de
permanganato. Aquecer a mistura a 40 C, deixar em
repouso por 5 minutos e adicionar 25 mL de cido oxlico
0,05 M SV. Aquecer a mistura at 80 C e titular a quente
com permanganato de potssio 0,02 M SV. Cada mL de
permanganato de potssio 0,02 M SV equivale a 3,450 mg
de NaNO
2
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Vasodilatador; antdoto para envenenamento por cianeto.
NITROfURANTONA
Nitrofurantoinum
O
O
2
N
N
N
N
H
O
O
C
8
H
6
N
4
O
5
; 238,16
C
8
H
6
N
4
O
5
.H
2
O; 256,17
nitrofurantona; 06438
1- [ [ ( 5- Ni t r o- 2- f ur a ni l ) me t i l e no] a mi no] - 2, 4-
imidazolidinadiona
[67-20-9]
1- [ [ ( 5- Ni t r o- 2- f ur a ni l ) me t i l e no] a mi no] - 2, 4-
imidazolidinadiona hidratada (1:1)
[17140-81-7]
C
8
H
6
N
4
O
5
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P amarelo cristalino ou
cristais amarelos. Na forma slida ou em soluo,
sofre descoramento por lcalis e por exposio luz,
e decomposio pelo contato com metais, exceto ao
inoxidvel e alumnio.
dimetilformamida, muito pouco solvel em etanol.
IDENTIFICAO
Os testes de identifcao B., C. e E. podero ser omitidos se
forem realizados os testes A. e D. Os teste de identifcao
A. e D. podero ser omitido se forem realizados os testes
B., C. e D.
amostra dessecada a 140 C por 30 minutos, at peso
constante e dispersa em leo mineral, apresenta mximos
no espectro de nitrofurantona SQR, preparado de maneira
idntica.
B. Proceder ao abrigo de luz intensa. O espectro de absoro
soluo amostra obtida no mtodo A. de Doseamento,
exibe mximos em 266 nm e em 367 nm. A razo entre os
valores de absorvncia medidos em 367 nm e em 266 nm
est compreendida entre 1,36 e 1,42.
D. Dissolver 10 mg da amostra em 10 mL de
dimetilformamida. Transferir 1 mL da soluo para tubo
de ensaio e adicionar 0,1 mL de hidrxido de potssio
etanlico 0,5 M. Desenvolve-se colorao marrom.
E. Dissolver 5 mg da amostra em 5 mL de hidrxido de
sdio 0,1 M. Uma soluo de colorao amarelo intensa
produzida, que passa em seguida a laranja-avermelhada.
ENSAIOS DE PUREZA
slica GF
254
, como suporte, e mistura de nitrometano e
metanol (9:1) como fase mvel. Aplicar, separadamente,
Soluo (1): dissolver 0,25 g da amostra em
dimetilformamida e completar o volume para 10 mL com
acetona.
Soluo (2): diluir 1 ml da Soluo (1) para 100 mL com
acetona.
secar ao ar, aquecer entre 100 C e 105 C por 5 minutos.
Examinar sob luz ultravioleta de 254 nm. Nebulizar com
cloridrato de fenilidrazina SR. Aquecer novamente a placa
entre 100 C e 105 C por 10 minutos. Qualquer mancha
aquela obtida com a Soluo (2) (1%).
gua (5.2.20). Dessecar a 140 C por 30 minutos. No
mximo 1%, para a forma anidra, e entre 6,5% e 7,5%,
para a forma monoidratada.
a
n
1167
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme escrito em Espectrofotometria de
absoro no ultravioleta (5.2.14) ao abrigo de luz intensa.
em 25 mL de dimetilformamida. Completar o volume para
500 mL com gua. Transferir para balo volumtrico de
100 mL, 2,5 mL da soluo e completar o volume com uma
soluo contendo acetato de sdio a 1,8% (p/v) e cido
actico glacial a 0,14% (v/v). Preparar soluo padro na
a absorvncia da soluo resultante em 367 nm, utilizando
a soluo de acetato de sdio e cido actico, anteriormente
descrita, para o ajuste do zero. Calcular o teor de C
8
H
6
N
4
O
5

mantida temperatura ambiente, ajustar os parmetros
operacionais para que o tempo de reteno do pico da
nitrofurantona seja de 8 minutos.
potssio monobsico em 500 mL de gua, e ajustar at
pH 7,0, hidrxido de amnio M. Completar o volume para
1000 mL com gua e homogeneizar.
Fase mvel: mistura de Tampo fosfato pH 7,0 e
tetraidrofurano (9:1). Filtrar e degaseifcar.
Soluo de padro interno: dissolver quantidade,
exatamente pesada, de acetanilida em gua, e diluir
adequadamente de modo a obter soluo a 1 mg/mL.
Soluo amostra: dissolver, exatamente, cerca de 25 mg da
amostra em 20 mL de dimetilformamida. Adicionar 25 mL
de Soluo padro interno, completar o volume para 50
mL, com dimetilformamida e homogeneizar.
Soluo padro: dissolver, exatamente, cerca de 25 mg
de nitrofurantona SQR em 20 mL de dimetilformamida.
Adicionar 25 mL de Soluo padro interno, completar
o volume para 50 mL, com dimetilformamida e
homogeneizar.
O fator de resoluo entre acetanilida e nitrofurantona no
deve ser menor que 3. O desvio padro relativo das reas de
Procedimento: injetar, separadamente, volumes iguais (5
uL ou 10 uL) das Solues padro e amostra, registrar os
cromatogramas e medir as reas sob os picos. Calcular o
teor de C
8
H
6
N
4
O
5
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antibacteriano.
NITROfURANTONA COMPRIMIDOS
8
H
6
N
4
O
5
. Os comprimidos
IDENTIFICAO
O teste de identifcao A. poder ser omitido se forem
C. podero ser omitidos se for realizado o teste A.
A. Pesar e pulverizar os comprimidos revestidos. Agitar
quantidade do p equivalente a 0,1 g de nitrofurantona com
10 mL de cido actico 6 M. Aquecer por alguns minutos
e fltrar a quente. Esfriar temperatura ambiente, recolher
o precipitado e dessecar a 105 C por 1 hora at peso
constante. O resduo responde ao teste A. de Identifcao
da monografa de Nitrofurantona.
de 220 nm a 400 nm, da soluo obtida no mtodo A. de
Doseamento, exibe mximos em 266 nm e em 367 nm. A
razo entre os valores de absorvncia medidos em 367 nm
e em 266 nm est compreendida entre 1,36 e 1,42.
CARACTERSTICAS
Tempo: 60 minutos e 120 minutos
de dissoluo, fltrar e diluir com meio de dissoluo
a
n
8
H
6
N
4
O
5

dissolvido no meio, comparando as leituras obtidas com
a da soluo de nitrofurantona SQR na concentrao de
declarada de C
8
H
6
N
4
O
5
se dissolvem em 60 minutos, e no
menos que 85% (Q) da quantidade declarada de C
8
H
6
N
4
O
5

ENSAIOS DE PUREZA
no teste Substncias relacionadas da monografa de
Nitrofurantona. Preparar a Soluo (1) como descrito a
seguir.
Soluo (1): pesar e pulverizar os comprimidos
revestidos. Dissolver quantidade do p equivalente a
0,1 g de nitrofurantona em 10 mL de mistura fltrada de
dimetilformamida e acetona (1:9).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Pesar e pulverizar 20 comprimidos revestidos. Proceder
conforme descrito no mtodo A. de Doseamento da
monografa de Nitrofurantona, utilizando quantidade
do p equivalente a 0,12 g de nitrofurantona. Calcular a
quantidade de C
8
H
6
N
4
O
5
nos comprimidos revestidos, a
partir da leitura obtida.
da monografa de Nitrofurantona. Preparar a Soluo
Soluo amostra: pesar e pulverizar 20 comprimidos
revestidos. Transferir quantidade do p equivalente a
50 mg de nitrofurantona para balo volumtrico de
100 mL, adicionar 40 mL de dimetilformamida e agitar,
mecanicamente, por 15 minutos. Adicionar 50 mL de
Soluo padro interno, homogeneizar e deixar esfriar
temperatura ambiente. Completar o volume com
dimetilformamida e homogeneizar. Filtrar atravs de fltro
de nylon de porosidade 0,45 m.
Procedimento: injetar, separadamente, volumes iguais
(5 L ou 10 L) das Solues padro e amostra,
registrar os cromatogramas e medir as reas sob os picos
correspondentes nitrofurantona e acetanilida. Calcular
a quantidade de C
8
H
6
N
4
O
5
nos comprimidos revestidos a
partir das respostas obtidas para a relao nitrofurantona/
acetanilida, na Soluo padro e na Soluo amostra.
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz, em
ROTULAGEM
NOZ-DE-COLA
Colae semen
Cola ntida (Vent.) A.Chev. STERCULIACEAE; 09902
A droga vegetal consiste dos cotildones dessecados,
contendo, no mnimo, 1,7% de taninos totais e 2,0% de
cafena.
SINONMIA CIENTFICA
Cola vera K.Schum.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Os cotildones apresentam
sabor adstringente e algo amargo e odor quase nulo.
DESCRIO MACROSCPICA
Os cotildones so em nmero de dois, normalmente
encontrados no comrcio j separados. So duros
e desiguais, slidos, irregulares, de cor castanho-
avermelhada, de tamanho muito varivel, com 2 cm a 5
cm de comprimento por cerca de 2 cm de largura e at 1
cm de espessura. O pice do cotildone mais largo do
que a sua base e ambos so arredondados. A margem
inteira. A superfcie externa de cada cotildone convexa
ou ligeiramente deprimida, rugosa, de colorao castanha
a castanho-avermelhada. A superfcie interna plana
ou deprimida, mais ou menos lisa, geralmente irregular,
apresentando na base pequena cavidade contendo, s vezes,
a radcula e a plmula, ou vestgios destas. A superfcie de
fratura uniforme e castanha brilhante.
DESCRIO MICROSCPICA
Os cotildones esto envoltos por uma epiderme formada
por clulas retangulares, pequenas ou ligeiramente
alongadas no sentido radial e so constitudos por um
parnquima homogneo de clulas poligonais, s vezes de
contorno irregular. As clulas mais internas so maiores,
com paredes espessas e pontoadas, de colorao castanha,
contendo compostos fenlicos, matria graxa e abundantes
gros de amido. Esses ltimos, esto principalmente
distribudos nas clulas centrais e so desiguais, esfricos,
ovais, ovais-arredondados, oblongos, reniformes,
elipsides ou piriformes, com hilo ramifcado, centralizado
ou excntrico, quase sempre fundido, em forma de estrela
ou de cruz e suas estrias concntricas so pouco visveis.
a
n
1169
O tamanho dos gros varia de 5 um a 35 um, raramente
45 um.
caractersticas: cor castanho-avermelhada a moderadamente
amarelado-acastanhada; fragmentos de epiderme e de
parnquima com clulas poligonais, de paredes pardas ou
castanho-avermelhadas, contendo numerosos e variados
gros de amido, como os descritos; escassos fragmentos
de pequenos feixes fbrovasculares. Os gros de amido,
quando observados em luz polarizada, exibem uma cruz
na regio do hilo.
IDENTIFICAO
254
,
como suporte,

e mistura de acetato de etila, metanol e gua
(100:13,5:10), como fase mvel. Aplicar, separadamente,
em forma de banda, 5 L a 10 uL da Soluo amostra e
2L a 3 uL da Soluo padro, preparadas como descrito
a seguir.
Soluo amostra: extrair a droga previamente pulverizada,
sob refuxo durante 15 minutos, em concentrao igual a
2% (p/v), utilizando etanol como lquido extrator. Filtrar e
aplicar na cromatoplaca.
Soluo padro: dissolver 10 mg de cafena SQR em 2 mL
de etanol absoluto.
Desenvolver o cromatograma. Remover a cromatoplaca e
deixar secar ao ar por alguns minutos. Observar sob luz
ultravioleta (254 nm). A mancha com Rf prximo a 0,50,
corresponde a cafena. Nebulizar com o iodeto de potssio
e subnitrato de bismuto SR. Adicionalmente nebulizar com
soluo aquosa de nitrito de sdio a 5% (p/v). A mancha
correspondente a cafena apresenta colorao vermelho
tijolo.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 15,0%.
DOSEAMENTO
Metilxantinas
absoro no ultravioleta (5.2.14). Preparar as solues
descritas a seguir.
amostra pulverizada. Extrair com 20 mL de soluo de
cido sulfrico a 2,5% (v/v) sob agitao magntica durante
15 minutos, por quatro vezes. Filtrar as pores para balo
volumtrico de 100 mL. Completar o volume com soluo
de cido sulfrico a 2,5% (v/v) e transferir 10 mL desta
soluo para balo volumtrico de 100 mL. Completar o
volume com a mesma soluo de cido sulfrico a 2,5%
(v/v), obtendo-se, assim, concentrao terica em torno de
15 ug/mL.
Soluo padro: pesar exatamente, cerca de 25 mg do
cafena SQR e transferir para balo volumtrico de 100
mL. Completar o volume com soluo de cido sulfrico
2,5% (v/v), obtendo-se soluo estoque de cafena a 250
g/mL.
Solues para curva analtica: diluir alquotas da Soluo
padro para obteno das seguintes concentraes: 2,5 g/
mL; 5,0 g/mL; 10,0 g/mL; 15,0 g/mL e 20,0 g/mL
utilizando soluo de cido sulfrico a 2,5% (v/v) para
completar o volume.
Medir a absorvncia das solues em 271 nm, empregar
cubetas de 1 cm. Utilizar soluo de cido sulfrico a
2,5% (v/v) para ajuste do zero. Calcular o teor de cafena
(metilxantinas) na amostra a partir da equao da reta
obtida com a curva analtica da cafena.
Taninos totais
Nota: proteger as amostras da luz durante a extrao e a
diluio. Utilizar gua isenta de dixido de carbono em
todas as operaes.
Soluo estoque: pesar 0,75 g da droga pulverizada,
transferir para erlenmeyer e adicionar 150 mL de gua.
Aquecer at fervura e manter em banho-maria temperatura
de 80 C a 90 C durante 30 minutos. Resfriar em gua
corrente, transferir a mistura para balo volumtrico e
diluir a 250 mL com gua. Deixar decantar o sedimento
e fltrar atravs de papel fltro. Desprezar os primeiros 50
mL do fltrado.
fltrado para 25 mL com gua. Misturar 5 mL desta soluo
com 2 mL de cido fosfotngstico SR e diluir a 50 mL com
(A
1
) a 715 nm (5.2.14), exatamente 3 minutos aps a adio
do ltimo reagente, utilizando gua como branco.
Soluo amostra para polifenis no adsorvidos pelo p
de pele: adicionar a 20 mL do fltrado 0,2 g de p de pele
SQR e agitar vigorosamente durante 60 minutos. Filtrar.
Diluir 5 mL do fltrado a 25 mL com gua. Misturar 5 mL
desta soluo com 2 mL de cido fosfotngstico SR e diluir
50 mL com carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da
soluo a 715 nm (A
2
) (5.2.14), exatamente 3 minutos aps
a adio do ltimo reagente, utilizando gua como branco.
Soluo padro: dissolver 50 mg de pirogalol em gua
e diluir a 100 mL. Diluir 5 mL desta soluo a 100 mL
com gua. Misturar 5 mL desta soluo com 2 mL de cido
fosfotngstico SR e diluir a 50 mL com carbonato de sdio
SR. Medir a absorvncia desta soluo a 715 nm (A
3
)
(5.2.14),exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo
reagente e dentro de 15 minutos contados da dissoluo do
pirogalol, utilizando gua como branco.
a
n
Calcular o teor, segundo a expresso:
em que
m = massa da amostra em gramas.
A
1
polifenis totais;
A
2
polifenis no adsorvidos em p de pele;
A
3
= absorvncia medida para a Soluo padro.
a
n
1171
figura 1 Aspectos macroscpicos, microscpidos e da microscopia do p em Cola nitida (Vent.) A. Chev.
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A, B e C a 2 cm; em D, E e f a 100 m; em G a 50 m.
A aspecto da face externa do cotildone. B aspecto da face interna do cotildone. C cotildone em vista equatorial. D, E, f e G detalhes do p.
D, E e f fragmentos de parnquima, evidenciando tamanhos variveis de clulas e paredes pontoadas. G detalhe de gros de amido, mostrando
variabilidade quanto a forma, tamanho dos gros e aspectos do hilo.
a
o
1173
OCTACLORIDRATO DE ALUMNIO E
ZIRCNIO
Al
y
Zr(OH)
3y+4-x
Cl
x
.nH
2
O
octacloridrato de alumnio e zircnio; 09831
Hidrxido cloreto de zircnio e alumnio
[57158-29-9]
Octacloridrato de alumnio e zircnio um complexo
polimrico hidratado de cloreto bsico de alumnio e
zircnio. Contm, no mnimo, 90,0% e, no mximo,
110,0% de octacloridrato de alumnio e zircnio em relao
substncia anidra.
IDENTIFICAO
A. A soluo aquosa da amostra a 10% (p/v), responde s
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 3,0 a 5,0. Determinar em soluo aquosa 15%
(p/v).
Contedo de alumnio. Pesar 0,15 g da amostra, transferir
para bquer de 150 mL, adicionar 5 mL de gua e 15 mL
de cido clordrico. Manter em ebulio durante 5 minutos.
Em seguida, adicionar 40 mL de gua e 30 mL de edetato
dissdico 0,05 M SV. Novamente, ebulir durante 5 minutos.
Deixar arrefecer, adicionar 15 mL do tampo cido actico-
acetato de amnio, e ajustar com soluo concentrada
de amnia at pH 4,5. Acrescentar 20 mL de etanol e
ajustar o pH a 4,6 com soluo concentrada de amnia.
Adicionar 10 gotas de ditizona a 0,025% (p/v) em etanol.
Titular com sulfato de zinco 0,1 M SV at surgimento de
colorao rosa-prpura. Fazer prova em branco. Calcular a
porcentagem de alumnio pela frmula:
em que
Me = molaridade da soluo volumtrica de edetato de
dissdico;
z = volume consumido da soluo volumtrica de sulfato
de zinco em mL;
Mz = molaridade de soluo volumtrica de sulfato de
zinco;
W = quantidade em g da amostra e
Ze= volume equivalente de edetato de dissdico consumido
pela quantidade de zircnio calculado de acordo com a
frmula:
em que
Zr = porcentagem de zircnio determinada no teste
Contedo de zircnio e
92,97 = massa atmica do zircnio corrigida para o
contedo de 2% de hfnio.
Usar o resultado obtido para calcular a razo atmica
de alumnio/zircnio e a razo atmica de (alumnio +
zircnio)/cloreto.
Contedo de zircnio. Pesar 250 mg da amostra, transferir
para bquer de 150 mL, adicionar 5 mL de gua e 15 mL de
cido clordrico. Manter em ebulio durante 6 a 8 minutos.
Em seguida, adicionar de 30 a 40 mL de gua e 5 mL de
cido clordrico e aquecer at ebulio. Adicionar uma
gota de soluo de alaranjado de xilenol de 0,1% (p/v), e
titular a soluo, ainda quente, com edetato dissdico 0,05
M SV at a mudana da colorao rsea para amarela.
Fazer prova em branco. Cada mL de edetato de dissdico
0,05 M SV equivale a 46,48 mg de zircnio. No mnimo
12,8% e no mximo 15,4% de zircnio. Usar o resultado
obtido para calcular a razo atmica de alumnio/zircnio e
a razo atmica de (alumnio + zircnio)/cloreto.
Razo atmica alumnio/zircnio. Dividir o porcentual
de alumnio encontrado no teste para Contedo de
alumnio pelo porcentual de zircnio encontrado no teste
para Contedo de zircnio e multiplicar por 92,97/26,98.
Onde, 92,97 a massa atmica do zircnio corrigida para
2% de hfnio e 26,98 a massa atmica do alumnio. No
mnimo 6:1 e no mximo 10:1.
Contedo de cloreto. Pesar 250 mg da amostra, transferir
para bquer de 250 mL, adicionar 120 mL de gua e 20
mL de cido ntrico M. Agitar at a solubilizao e titular
com nitrato de prata 0,1 M, determinando o ponto fnal
potenciometricamente. Cada mL de nitrato de prata 0,1 M
equivale a 3,546 mg de cloreto. No mnimo 16,5% e no
mximo 19,0% de cloreto.
Usar o resultado obtido para calcular a razo atmica
de alumnio/zircnio e a razo atmica de (alumnio +
zircnio)/cloreto.
Razo atmica (alumnio + zircnio)/cloreto. Calcular a
razo atmica (alumnio + zircnio)/cloreto de acordo com
a frmula:
em que
Al, Zr e Cl = porcentagens de alumnio, zircnio e
cloreto, determinados nos testes para Contedo de
alumnio, Contedo de zircnio e Contedo de cloreto,
respectivamente;
26,98 = massa atmica do alumnio;
92,97 = massa atmica de zircnio corrigida para 2% de
hfnio e
35,453 = massa atmica do cloro.
A razo est entre 1,5:1 e 0,9:1.
Arsnio (5.3.2.5). Determinar em 1,5 g de amostra.
Proceder conforme descrito em Ensaio limite para arsnio.
a
o
ferro (5.3.2.4). Utilizar Mtodo I. Pesar 0,667 g da
amostra e acrescentar 40 mL de gua. Proceder conforme
descrito em Ensaio limite para ferro. No mximo 0,015%
(150 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo I. Pesar 1 g da
amostra e adicionar 40 mL de gua. Se a preparao no
se apresentar lmpida aquecer a 80 C por alguns minutos,
em seguida, deixar arrefecer. Caso a preparao, ainda,
permanea turva, repetir o processo adicionando 3 mL de
cido clordrico. Ajustar o pH entre 3 e 4 com hidrxido de
amnio 6 M. Proceder conforme descrito em Ensaio limite
para metais pesados usando 1 mL da soluo padro de
chumbo de 20 ppm. No mximo 0,002% (20 ppm).
DOSEAMENTO
Calcular a porcentagem do octacloridrato de
alumnio e zircnio anidro e no octacloridrato de
alumnio e zircnio, de acordo com a frmula:
em que
Al = percentual de alumnio encontrado no teste para
Contedo de alumnio;
y = razo atmica alumnio/zircnio encontrada no teste
para Razo atmica alumnio/zircnio;
z = razo atmica (alumnio + zircnio)/cloreto encontrada
no teste para Razo atmica (alumnio + zircnio)/cloreto;
26,98 = massa atmica do alumnio;
92,97 = massa atmica de zircnio corrigida para 2% de
hfnio;
17,01 = massa molecular do nion hidrxido (OH) e
35,453 = massa atmica do cloro (Cl).
ROTULAGEM
OCTACLORIDRATO DE ALUMNIO E
ZIRCNIO SOLUO
quantidade declarada de octacloridrato de alumnio
anidro. Octacloridrato de alumnio e zircnio um
complexo polimrico bsico de cloreto de alumnio.
Possui razo atmica de alumnio/zircnio entre 6:1
e 10:1, e de (alumnio+zircnio)/cloreto entre 1,5:1 e
0,9:1. Os seguintes solventes podem ser utilizados: gua,
propilenoglicol ou dipropilenoglicol.
IDENTIFICAO
A. Quando a soluo for preparada em propilenoglicol,
adicionar cerca de 10 mL de lcool isoproplico a 2 g
da soluo. Misturar e fltrar. Evaporar o fltrado em
banho-maria at reduzir o volume a 1 mL. O espectro de
absoro no infravermelho (5.2.14) de um flme dessa
soluo, dispersa em cloreto de prata, apresenta mximos
de absoro somente nos mesmos comprimentos de
onda daqueles observados no espectro de um flme de
propilenoglicol, preparado de maneira idntica.
B. Quando a soluo for preparada em dipropilenoglicol,
adicionar cerca de 10 mL de lcool isoproplico a 2 g
da soluo. Misturar e fltrar. Evaporar o fltrado em
banho-maria at reduzir o volume a 1 mL. O espectro
de absoro no infravermelho (5.2.14) de um flme desta
soluo, dispersa em cloreto de prata, apresenta mximos
de absoro somente nos mesmos comprimentos de
onda daqueles observados no espectro de um flme de
dipropilenoglicol, preparado de maneira idntica.
C. A soluo contendo o equivalente a cerca de 100 mg
de octacloridrato de alumnio e zircnio anidro por mL
responde s reaes do on cloreto (5.3.1.1).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 3,0 a 5,0. Determinar em uma soluo
preparada pela diluio de 3 g da soluo com gua at
completar o volume para 10 mL.
ENSAIOS DE PUREZA
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar o Mtodo I. Determinar em 1,5
g de amostra. No mximo 0,0002% (2 ppm).
ferro (5.3.2.4). Utilizar o Mtodo III. Transferir 5,3 g de
soluo de octacloridrato de alumnio e zircnio para balo
Transferir 5 mL da soluo amostra e 2 mL da soluo
padro para bqueres distintos e, a cada bquer, adicionar
5 mL de cido ntrico 6 M. Cobrir com vidro de relgio e
ferver as solues por 3 a 5 minutos. Arrefecer. No mximo
0,0075% (75 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo I. Pesar 2
g de soluo de octacloridrato de alumnio e zircnio e
adicionar 40 mL de gua. Se a soluo no se apresentar
lmpida, aquecer a 80 C por alguns minutos e, em seguida,
deixar arrefecer. Caso a soluo ainda permanea turva,
repetir o processo adicionando 3 mL de cido clordrico.
Ajustar o pH entre 3 e 4 com hidrxido de amnio 6 M.
Utilizar 1 mL da Soluo padro de chumbo (10 ppm). No
mximo 0,001% (10 ppm).
Contedo de alumnio. Pesar 0,15 g da amostra, transferir
para bquer de 150 mL, adicionar 5 mL de gua e 15 mL
de cido clordrico. Manter em ebulio durante 5 minutos.
Em seguida, adicionar 40 mL de gua e 30 mL de edetato
a
o
1175
dissdico 0,05 M SV. Novamente, manter em ebulio
durante 5 minutos. Arrefecer, adicionar 15 mL de tampo
cido actico-acetato de amnio e ajustar com soluo
concentrada de amnia at pH 4,5. Acrescentar 20 mL de
etanol e ajustar o pH a 4,6 com soluo concentrada de
amnia. Adicionar 10 gotas de ditizona a 0,025% (p/v)
em etanol. Titular com sulfato de zinco 0,1 M SV at
surgimento de colorao rosa-prpura. Realizar ensaio em
branco. Calcular a porcentagem de alumnio pela frmula:
em que, M
e
a molaridade do edetato de sdio 0,05 M SV,
z o volume consumido de sulfato de zinco 0,1 M SV em
mL, M
z
a molaridade do sulfato de zinco 0,1 M SV, W a
quantidade em g da amostra e Z
e
o volume equivalente de
edetato de sdio, consumido pela quantidade de zircnio,
calculado de acordo com a seguinte frmula:
em que, Zr a porcentagem de zircnio determinada no
ensaio Contedo de zircnio, 92,97 a massa atmica do
zircnio corrigida para o contedo de 2% de hfnio. Usar o
resultado obtido para calcular a razo atmica de alumnio/
zircnio e a razo atmica de (alumnio+zircnio)/cloreto.
Contedo de zircnio. Pesar 500 mg da amostra, transferir
mL de cido clordrico. Manter em ebulio durante 6 a
8 minutos. Em seguida, adicionar de 30 mL a 40 mL de
gua e 5 mL de cido clordrico e aquecer at ebulio.
Adicionar uma gota de alaranjado de xilenol SI e titular a
soluo, ainda quente, com edetato dissdico 0,05 M SV
at a mudana de colorao rsea para amarela. Realizar
ensaio em branco. Cada mL de edetato de sdio 0,05 M SV
equivale a 46,48 mg de zircnio. No mnimo 12,8% e no
mximo 15,4% de zircnio. Usar o resultado obtido para
calcular a razo atmica de alumnio/zircnio e a razo
atmica de (alumnio+zircnio)/cloreto.
Razo atmica alumnio/zircnio. Dividir o percentual
de alumnio encontrado no ensaio Contedo de alumnio
pelo percentual de zircnio encontrado no ensaio Contedo
de zircnio e multiplicar por 92,97/26,98. Em que, 92,97
a massa atmica do zircnio corrigida para 2% de hfnio e
26,98 a massa atmica do alumnio. No mnimo 6:1 e no
mximo 10:1.
Contedo de cloreto. Pesar 500 mg da amostra, transferir
mL de cido ntrico M. Agitar at a solubilizao e titular
com nitrato de prata 0,1 M SV, determinando o ponto fnal
potenciometricamente. Cada mL de nitrato de prata 0,1 M
SV equivale a 3,546 mg de cloreto. No mnimo 16,5% e no
mximo 19,0% de cloreto. Utilizar o resultado obtido para
calcular a razo atmica de alumnio/zircnio e a razo
atmica de (alumnio+zircnio)/cloreto.
Razo atmica (alumnio+zircnio)/cloreto. Calcular a
razo atmica (alumnio+zircnio)/cloreto de acordo com
a seguinte frmula:
em que, Al, Zr e Cl correspondem s porcentagens de
alumnio, zircnio e cloreto, determinados nos ensaios
Contedo de alumnio, Contedo de zircnio e Contedo
de cloreto, respectivamente. 26,98 a massa atmica do
alumnio, 92,97 a massa atmica de zircnio corrigida
para 2% de hfnio e 35,453 a massa atmica do cloro. A
razo est entre 1,5:1 e 0,9:1.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
Calcular a porcentagem de octacloridrato de alumnio e
zircnio anidro e na soluo, de acordo com a seguinte
frmula:
em que, Al o percentual de alumnio encontrado no ensaio
Contedo de alumnio, y a razo atmica alumnio/zircnio
encontrada no ensaio Razo atmica alumnio/zircnio, z
a razo atmica (alumnio+zircnio)/cloreto encontrada no
ensaio Razo atmica (alumnio+zircnio)/cloreto, 26,98
a massa atmica do alumnio, 92,97 a massa atmica
de zircnio corrigida para 2% de hfnio, 17,01 a massa
molecular do nion hidrxido (OH) e 35,453 massa
atmica do cloro (Cl).
ROTULAGEM
a
o
OfLOXACINO
Ofoxacinum
N
O
O
COOH F
N
N
C H
3
CH
3
C
18
H
20
FN
3
O
4
; 361,37
ofoxacino; 06574
cido 9-fuor-2,3-diidro-3-metil-10-(4-metil-1-
piperazinil)-7-oxo-7H-pirido[1,2,3-de]-1,4-benzoxazina-
6-carboxlico
[83380-47-6]
C
18
H
20
FN
3
O
4
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. Cristais em forma de
agulhas incolores. Temperatura de fuso (5.2.2): 250 C,
com decomposio.
Poder rotatrio (5.2.8): 1,0 a +1,0, em relao
em clorofrmio.
IDENTIFICAO
espectro de absoro no infravermelho (5.2.14) da amostra
dessecada, dispersa em brometo de potssio, apresenta
observados no espectro de ofoxacino SQR, preparado de
maneira idntica.
de 200 a 400 nm, de soluo a 0,00067% (p/v) em cido
clordrico 0,1 M exibe mximos idnticos aos observados
no espectro de soluo similar de ofoxacino SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
Arsnio (5.3.2.5). Utilizar o Mtodo II. No mximo
0,0001% (1 ppm).
mximo 0,001% (10 ppm).
amostra Dessecar em estufa, a 105 C, por 4 horas. No
mximo 0,2%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
no aquoso (5.3.3.5). Transferir cerca de 0,1 g da amostra
previamente dessecada para bquer de 400 mL, adicionar
275 mL de anidrido actico e agitar at dissolver. Titular
com cido perclrico 0,1 M SV, determinando o ponto
fnal potenciometricamente. Usar o primeiro dos dois
pontos de infexo. Realizar ensaio em branco e fazer as
18
H
20
FN
3
O
4.
de antibiticos pelo mtodo difuso em gar (5.5.3.3.1),
Micro-organismos: Micrococcus luteus ATCC 9341.
do micro-organismo; soluo salina estril, para a
Soluo amostra: pesar, exatamente, cerca de 0,25 g de
amostra, transferir para balo volumtrico de 250 mL
com auxlio de 100 mL de Tampo fosfato de potssio
0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2), agitar por 30 minutos
e completar o volume com o mesmo diluente. Diluir,
mL e 45 ug/mL, utilizando Tampo fosfato de potssio 0,1
M, estril, pH 8,0 (Soluo 2), como diluente.
ofoxacino SQR, transferir para balo volumtrico de 50
mL e completar o volume com Tampo fosfato de potssio
0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2). Diluir, sucessivamente,
at as concentraes de 20 ug/mL, 30 ug/mL e 45 ug/mL,
utilizando Tampo fosfato de potssio 0,1 M, estril, pH
8,0 (Soluo 2), como diluente.
Calcular a potncia da amostra, em ug de ofoxacino por
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimicrobiano.
a
o
1177
OfLOXACINO COMPRIMIDOS
18
H
20
FN
3
O
4
.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Preparar soluo
a 0,00067% (p/v) em cido clordrico 0,1 M, agitar
mecanicamente por 20 minutos e fltrar. O espectro de
absoro no ultravioleta (5.2.14), na faixa de 200 nm a 400
nm, exibe mximos idnticos aos observados no espectro
de soluo similar de ofoxacino SQR.
CARACTERSTICAS
ENSAIOS DE PUREZA
294 nm, coluna de 100 mm de comprimento e 4,6 mm de
ligada a grupo octadecilsilano, mantida temperatura
ambiente; fuxo da Fase mvel de 1 mL/minuto.
Soluo tampo: dissolver 2,72 g de fosfato de potssio
monobsico em 1000 mL de gua, e ajustar o pH em 3,3
0,1 com cido fosfrico SR.
Eluente A: mistura de Soluo tampo e acetonitrila
(88:12). Desgaseifcar e fltrar.
Eluente B: mistura de acetonitrila e Soluo tampo
Fase mvel: utilizar misturas variveis das Eluentes A e B,
conforme indicado a seguir.
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
0-8 100 0 Isocrtica
25-26 40 100 600 Gradiente linear
Soluo amostra: pesar e triturar quantidade no inferior a
20 comprimidos. Transferir quantidade de p equivalente a
100 mg de ofoxacino para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar cerca de 70 mL de metanol e deixar o balo em
banho de ultrassom por 20 minutos. Completar o volume
com metanol e fltrar em fltro 0,45 um, descartando os
de ofoxacino SQR em metanol e diluir de modo a obter
soluo a 4 ug/mL.
Injetar replicatas de 10 uL de Soluo padro. O fator de
cauda para o pico de ofoxacino no maior que 2,0. O
desvio padro relativo das replicatas dos picos registrados
no maior que 5,0%.
Procedimento: injetar, separadamente, 10 uL de Soluo
medir as reas sob os picos. Calcular a porcentagem de
cada impureza presente na amostra segundo a equao:
100 (1/F) (A
i
/A
p
) (C
p
/C
a
)
em que
F = fator de resposta relativo para cada impureza;
A
i
= rea sob o pico correspondente a qualquer impureza
individual obtida na soluo amostra;
A
p
= rea sob o pico correspondente ao ofoxacino obtido
na soluo padro;
C
p
= concentrao, em mg/mL, de ofoxacino na soluo
padro;
C
a
= concentrao, em mg/mL, de ofoxacino na soluo
amostra, baseado no valor declarado.
Os limites das impurezas so apresentados a seguir:
Impureza
Tempo de
Reteno
Relativo
Fator de
Resposta
Relativo
Limite (%)
Impureza A (cido 2,3-diidro-3-metil-10-(4-metil-1-piperazinil)-7-oxo-7H-
pirido[1,2,3-de]-1,4-benzoxazina-6-carboxlico)
0,5 1 0,3
Impureza B (cido 9,10-difuoro-3-metil-7-oxo-2,3-diidro-7H-pirido[1,2,3-
de]-1,4-benzoxazina-6-carboxlico)
3,6 0,22 0,3
Outras impurezas individuais - 1 0,2
Total de impurezas - - 1,0
a
o
DOSEAMENTO
Empregar um dos mtodos a seguir:
A. Proceder conforme descrito em Dosagem microbiolgica
de antibiticos pelo mtodo de Difuso em gar (5.5.3.3.1),
Micro-organismo: Kocuria rhizophila ATCC 9341.
Utilizar quantidade do p equivalente a 0,25 g de ofoxacino,
transferir quantitativamente para balo volumtrico de 250
mL com auxlio de 100 mL de tampo fosfato de potssio
0,1 M, estril, pH 8,0 (Soluo 2). Agitar por 30 minutos e
completar o volume com o mesmo diluente e fltrar. Diluir,
ug/mL e 0,20 ug/mL, utilizando soluo tampo fosfato de
potssio, estril, pH 8,0 (Soluo 2) como diluente.
mL e completar o volume com soluo tampo fosfato
de potssio, estril, pH 8,0 (Soluo 2) e agitar. Diluir,
ug/mL e 0,20 ug/mL, utilizando soluo tampo fosfato de
inculo a 0,5% e proceder conforme descrito em Dosagem
microbiolgica de antibiticos (5.5.3.3), adicionando aos
Calcular a quantidade em mg de ofoxacino nos
comprimidos a partir da potncia do padro e das respostas
com slica ligada a grupo octadecilsilano, mantida
temperatura ambiente; fuxo de Fase mvel de 1 mL/
minuto.
Soluo tampo: dissolver 2,72 g de fosfato de potssio
monobsico em 1000 mL de gua, e ajustar o pH em 3,3
0,1 com cido fosfrico SR.
Fase mvel: mistura de soluo tampo e acetonitrila
Diluente 1: mistura de metanol e cido actico glacial
(75:25).
Diluente 2: mistura de gua e acetonitrila (90:10).
Soluo padro: transferir cerca de 25 mg de ofoxacino
SQR para balo volumtrico de 25 mL e dissolver em
Diluente 1 (1 mg/mL). Transferir 2 mL desta soluo para
Diluente 2 (20 ug/mL).
Soluo amostra: pesar e triturar quantidade no inferior a
20 comprimidos. Transferir quantidade de p equivalente a
100 mg de ofoxacino para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar cerca de 70 mL de Diluente 1 e deixar o balo em
banho de ultrassom por 20 minutos. Completar o volume
com Diluente 1 e fltrar esta soluo em fltro 0,45 um.
Transferir 2 mL da soluo fltrada para balo volumtrico
de 100 mL, completar o volume com Diluente 2 e agitar.
Injetar replicatas de 20 uL de Soluo padro. O fator de
cauda para o pico de ofoxacino no maior que 2,0. O
desvio padro relativo das replicatas dos picos registrados
no maior que 2,0%.
Procedimento: Injetar, separadamente, 20 uL de Soluo
C
18
H
20
FN
3
O
4
ROTULAGEM
OfLOXACINO SOLUO OfTLMICA
18
H
20
FN
3
O
4
.
IDENTIFICAO
254
,
como suporte, e mistura de clorofrmio, metanol e soluo
(1 em 30) de hidrxido de amnio (150:75:15), como fase
Soluo (1): diluir quantidade exatamente medida da
soluo oftlmica em mistura de clorofrmio e metanol
(1:1) de modo a obter soluo de ofoxacino a 0,3 mg/mL.
Soluo (2): dissolver quantidade de ofoxacino SQR em
mistura de clorofrmio e metanol (1:1) de modo a obter
soluo de ofoxacino a 0,3 mg/mL.
a
o
1179
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 6,0 a 6,8.
DOSEAMENTO
Empregar um dos mtodos descritos a seguir:
A. Proceder conforme descrito em Dosagem microbiolgica
de antibiticos pelo mtodo de Difuso em gar (5.5.3.3.1),
Micro-organismo: Kocuria rhizophila ATCC 9341.
Soluo amostra: diluir a soluo oftlmica at as
concentraes de 0,05 ug/mL, 0,10 ug/mL e 0,20 ug/mL,
utilizando Soluo tampo fosfato de potssio, estril, pH
8,0 (Soluo 2) como diluente.
mL e completar o volume com Soluo tampo fosfato
de potssio, estril, pH 8,0 (Soluo 2) e agitar. Diluir,
ug/mL e 0,20 ug/mL, utilizando Soluo tampo fosfato de
inculo a 0,5% e proceder conforme descrito em Dosagem
microbiolgica de antibiticos (5.5.3.3), adicionando aos
Calcular a quantidade de ofoxacino por mililitro da soluo
oftlmica a partir da potncia do padro e das respostas
com slica ligada a grupo octadecilsilano (5 um), mantida
a 35 C; fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/minuto.
Fase mvel: mistura de lauril sulfato de sdio a 0,24%
(p/v), acetonitrila e cido actico glacial (580:400:20).
Soluo amostra: transferir quantidade da soluo
oftlmica equivalente a 3 mg de ofoxacino para balo
volumtrico de 50 mL, diluir com cido clordrico 0,05 M
e agitar.
de ofoxacino SQR e diluir com cido clordrico 0,05 M de
modo a obter soluo a 60 ug/mL.
Soluo de resoluo: preparar soluo contendo cerca
de 0,1 mg de ofoxacino SQR e cerca de 2,4 mg de
propilparabeno em cada mL de acetonitrila.
Injetar 20 uL de Soluo de resoluo. A resoluo entre
os picos de propilparabeno e do ofoxacino no inferior
a 2. Injetar replicatas de 20 uL de Soluo padro. O fator
de cauda para o pico de ofoxacino no deve ser maior
que 3. O desvio padro relativo das replicatas dos picos
Procedimento: Injetar, separadamente, 20 uL de Soluo
padro e de Soluo amostra, registrar os cromatogramas
e mediar as reas sob os picos. Calcular a quantidade de
C
18
H
20
FN
3
O
4
na soluo oftlmica a partir das respostas
ROTULAGEM
LEO DE AMENDOIM
Arachidis oleum
leo de amendoim; 09887
[8002-03-7]
leo fxo refnado obtido das sementes de uma ou
mais variedades cultivadas de Arachis hypogaea L.
LEGUMINOSAE.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. leo quase incolor ou levemente
amarelado, viscoso, inodoro ou com leve odor agradvel.
Solubilidade. Insolvel em gua, solvel em benzeno,
tetracloreto de carbono e leos minerais, pouco solvel
em etanol, miscvel com ter etlico, ter de petrleo,
clorofrmio e dissulfeto de carbono.
Temperatura de solidifcao (5.2.29.3): 26 C a 33 C.
Determinar na mistura seca de cidos graxos.
a
o
IDENTIFICAO
Saponifcar 5 g da amostra com 2,5 mL de hidrxido de
sdio 7,5 M e 12,5 mL de etanol, por aquecimento, at
ebulio. Evaporar o etanol, dissolver o sabo em 50 mL
de gua quente e adicionar cido clordrico at que os
cidos graxos livres se separem como uma camada oleosa.
Resfriar a mistura, remover os cidos graxos separados e
dissolv-los em 75 mL de ter etlico. soluo de ter,
adicionar soluo aquecida de acetato de chumbo a 10%
(p/v) em etanol. Deixar em repouso por 18 horas. Filtrar
o lquido sobrenadante e transferir o precipitado para o
fltro com auxlio de ter etlico. Colocar o precipitado em
mistura de 40 mL de cido clordrico 3 M e 20 mL de gua.
Aquecer at que a camada oleosa torne-se completamente
clara. Resfriar, decantar a soluo aquosa e ferver os cidos
graxos com gua acidifcada com cido clordrico, at que
o chumbo seja eliminado. [Os cidos graxos esto livres
do chumbo quando 100 mg, dissolvidos em 10 mL de
etanol, no escurecem pela adio de 2 gotas de sulfato de
sdio a 10% (p/v)]. Deixar os cidos graxos solidifcarem e
pression-los entre papis de fltro em uma superfcie fria,
para secarem. Dissolver os cidos graxos slidos em 25 mL
de etanol a 90% (v/v), aquecer moderadamente, resfriar a 15
C e manter nesta temperatura at que os cidos graxos se
cristalizem. Filtrar os cidos graxos obtidos. Recristaliz-
los com etanol a 90% (v/v) a quente, e secar em dessecador
a vcuo, por 4 horas. O cido aracdnico assim obtido se
ENSAIOS DE PUREZA
ndice de acidez (5.2.29.7). No mais que 2 mL de
hidrxido de sdio 0,02 M SV so gastos para neutralizar
os cidos graxos livres presentes em 10 g da amostra
ndice de iodo (5.2.29.10). 84 a 100.
ndice de saponifcao (5.2.29.8.). 185 a 195.
Matria insaponifcvel (5.2.29.14.). No mximo 1,5%.
leo de algodo. Em tubo de ensaio, agitar 5 mL da
amostra com 5 mL de mistura de lcool n-amlico e enxofre
a 1% (p/v) em dissulfeto de carbono (1:1). Aquecer,
cuidadosamente, at evaporao do dissulfeto de carbono.
Submergir o tubo at um tero de sua profundidade em
soluo saturada de cloreto de sdio fervente. No se
desenvolve colorao avermelhada por 15 minutos.
leo de gergelim. Agitar a amostra com igual volume de
uma mistura de etanol a 90% (v/v) e hidrxido de amnio
(9:1). Aquecer em banho-maria at eliminao do etanol e
da amnia. Misturar 2 mL do resduo com 1 mL de sacarose
a 1% (p/v) em cido clordrico e deixar em repouso por 5
minutos. A camada cida no deve se colorir de rosa, ou se
a cor rosa aparecer, deve ser no mximo igual obtida pela
repetio do ensaio com sacarose.
Outros leos vegetais. Num frasco com condensador de
refuxo, saponifcar 1 mL da amostra com 5 mL de hidrxido
de potssio etanlico 2 M, por 5 minutos. Adicionar 1,5 mL
de cido actico glacial e 50 mL de etanol a 70% (v/v).
Aquecer at que a soluo se torne lmpida. Resfriar,
lentamente, e medir a temperatura do lquido. Ocorre
turvao em temperatura no inferior a 39 C.
Rano. Misturar 1 mL da amostra a 10% (v/v) em ter
etlico com 1 mL de cido clordrico e adicionar 1 mL de
foroglucinol a 0,1% (p/v) em ter etlico. Nenhuma cor
vermelha ou rosa se desenvolve.
mximo 0,001% (10 ppm).
Em recipientes hermticos, resistentes luz, evitar
exposio ao calor excessivo.
ROTULAGEM
CATEGORIA
LEO DE GERGELIM
Sesami oleum
leos glicerdicos e graxos de ssamo; 09888
[8008-74-0]
o leo fxo refnado obtido da semente de uma ou
mais variedades cultivadas de Sesamum indicum L.
PEDALIACEAE.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. leo amarelo plido, quase
inodoro, de sabor suave. Composto, principalmente, pelos
cidos linolico e olico.
Solubilidade. Insolvel em gua, solvel em clorofrmio,
ter etlico e ter de petrleo, pouco solvel em etanol.
Temperatura de solidifcao (5.2.29.3): 20 C e 25 C.
Utilizar a mistura seca de cidos graxos.
IDENTIFICAO
Agitar 1 mL da amostra e 10 mL de sacarose a 1% (p/v) em
cido clordrico por 30 segundos. A camada cida torna-se
rosa e passa a vermelho em repouso (distino da maioria
dos outros leos fxos).
ENSAIOS DE PUREZA
ndice de iodo (5.2.29.10). 103 a 116.
a
o
1181
ndice de saponifcao (5.2.29.8). 188 a 195.
Matria insaponifcvel (5.2.29.14). No mximo 1,5%.
ndice de acidez (5.2.29.7). No mais que 2 ml de
hidrxido de sdio 0,02 M SV so gastos para neutralizar
os cidos graxos livres presentes em 10 g da amostra.
leo de algodo. Em tubo de ensaio agitar 5 mL da amostra
e 5 mL de mistura de lcool n-amlico e enxofre a 1% (p/v)
em dissulfeto de carbono (1:1). Aquecer, cuidadosamente,
at evaporao do dissulfeto de carbono. Submergir o tubo
at um tero de sua profundidade em soluo saturada de
cloreto de sdio em ebulio. No se desenvolve colorao
avermelhada por 15 minutos.
mximo 0,001% (10 ppm).
Composio de triglicerdeos. Proceder conforme
ndice de refrao; duas colunas em srie de 250 mm de
comprimento e 4,6 mm de dimetro interno, empacotadas
(5 m), mantidas a 30 C; fuxo da Fase mvel de 1 mL/
minuto.
Fase mvel: mistura de acetonitrila e cloreto de metileno
(60:40).
amostra, para balo volumtrico de 10 mL e completar o
volume com Fase mvel. Os cidos graxos presentes na
amostra so: cido linolico (L), cido olico (O), cido
palmtico (P) e cido esterico (S). Os triglicerdeos presentes
na amostra so: trilinolena (LLL), 1,2-dilinoleola-3-
olela-rac-glicerol (OLL), 1,2-dilinoleola-3-palmitola-
rac-glicerol (PLL), 1,2-dioleola-3-linoleola-rac-glicerol
(OOL), 1-palmitola-2-olela-3-linoleola-rac-glicerol
(POL), triolena (OOO), 1-linoleola-2-oleola-3-
estearola-rac-glicerol (SOL) e 1,2-dioleola-3-palmitola-
rac-glicerol (POO).
Soluo de resoluo: transferir 30 mg de OLL e 30 mg de
PLL, exatamente pesados, para balo volumtrico de 10
tempos de reteno relativos so cerca de 0,93 para OLL
e 1,0 para PLL. A resoluo entre os picos de OLL e PLL
Procedimento: injetar 20 L da Soluo amostra, registrar
os cromatogramas e medir as reas sob os picos de
triglicerdeos. Calcular a porcentagem de cada triglicerdeo
na amostra de leo de gergelim, em relao soma dos
picos observados. No considerar os picos relativos aos
solventes. A tabela a seguir indica os tempos de reteno
relativos e a composio percentual dos triglicerdeos.
Triglicerdeo
Tempo de
reteno relativo
Composio (%)
LLL 0,55 7,0 a 19,0%
OLL 0,65 13,0 a 30,0%
PLL 0,69 5,0 a 9,0%
OOL 0,77 14,0 a 25,0%
POL 0,82 8,0 a 16,0%
OOO 0,93 5,0 a 14,0%
SOL 0,97 2,0 a 8,0%
POO 1,0 2,0 a 8,0%
Em recipientes hermticos, resistentes luz, evitando
exposio ao calor excessivo.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Excipiente farmacotcnico.
OMEPRAZOL
Omeprazolum
C
17
H
19
N
3
O
3
S; 345,42
omeprazol; 06602
6-Metoxi-2-[[(4-metoxi-3,5-dimetil-2-piridinil)metil]
sulfnil]-1H-benzimidazol
[73590-58-6]
C
17
H
19
N
3
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou quase brando.
Apresenta polimorfsmo
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, solvel
em cloreto de metileno, ligeiramente solvel em etanol
e metanol. Solvel em solues diludas de hidrxidos
alcalinos.
IDENTIFICAO
a
o
observados no espectro de omeprazol SQR. Se houver
diferenas entre os espectros, dissolver amostra e
omeprazol SQR, separadamente, em metanol e evaporar
at secura. Obter novos espectros com os resduos.
hidrxido de sdio 0,1 M, exibe mximos de absoro em
276 nm e 305 nm. A razo entre os valores de absorvncia
medidos em 305 nm e 276 nm est compreendida entre 1,6
e 1,8.
obtida em Substncias relacionadas 1, corresponde em
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 2% (p/v) em cloreto de
metileno lmpida (5.2.25) e incolor (5.2.12).
Absoro de luz. A absorvncia da soluo a 2% (p/v) em
cloreto de metileno, medida em 440 nm, no maior que
0,10.
utilizando-se slica-gel F
254
, como suporte, e mistura
de lcool isoproplico, cloreto de metileno e cloreto de
metileno saturado com amnia (1:2:2), como fase mvel.
solues recentemente preparadas, descritas a seguir:
Soluo (1): dissolver 100 mg da amostra em 2 mL da
mistura de metanol e cloreto de metileno (1:1).
metanol.
Soluo (3): dissolver 10 mg de omeprazol SQR em 2 mL
de metanol.
Soluo (4): diluir 1 mL da Soluo (1) para 10 mL com a
mistura de metanol e cloreto de metileno (1:1). Diluir 1 mL
da soluo resultante para 100 mL com o mesmo solvente.
no mtodo B. de Doseamento. Preparar a soluo amostra
como descrito a seguir:
Soluo teste: dissolver 16 mg da amostra na Fase mvel e
diluir para 10 mL com o mesmo solvente. Diluir 1 mL da
soluo resultante para 10 mL com Fase mvel.
Procedimento: Injetar 40 L da Soluo teste e registrar
os cromatogramas por, no mnimo, o dobro do tempo de
reteno do pico principal. Medir as reas de todos os picos
obtidos. A rea de qualquer pico secundrio, exceto a do
pico principal, no superior a 0,3% da rea total dos picos
obtidos com a Soluo teste. A soma das rea sob os picos
secundrios, exceto a do pico principal, no superior a
1,0% da rea total dos picos obtidos com a Soluo teste.
No incluir nos clculos os picos relativos ao solvente.
Impurezas orgnicas volteis. Proceder conforme descrito
provido de detector de ionizao de chamas, utilizando
hlio, como gs de arraste; coluna capilar de slica fundida,
preenchida com policianopropilfenildimetilsiloxano, com
espessura do flme de 1,8 m; temperatura da coluna a
40 C por 20 minutos, rapidamente elevada a 240 C e
mantida por 20 minutos; temperatura do injetor a 140 C e
temperatura do detector a 260 C.
Soluo amostra: Transferir 100 mg da amostra para um
frasco de 10 mL, adicionar 5 mL de dimetilacetamida e 1
g de sulfato de sdio anidro, tampar e aquecer a 80 C por
1 hora.
Soluo de referncia: preparar a soluo, em
dimetilacetamida, contendo 12,0 g/mL de cloreto de
metileno, 1,2 g/mL de clorofrmio, 7,6 g/mL de dioxana
e 1,6 g/mL de tricloroetileno. Transferir 5 mL da soluo
resultante para balo volumtrico de 10 mL, adicionar 1 g
de sulfato de sdio anidro, tampar e aquecer a 80 C por 1
hora.
Injetar replicatas da Soluo de referncia atravs de
headspace apropriado. A resoluo entre quaisquer dos
componentes no deve ser menor que 3. O desvio padro
deve ser maior que 15%.
Procedimento: injetar, separadamente, atravs de
headspace apropriado, a Soluo de referncia e a
Soluo amostra. Registrar os cromatogramas e medir
as reas sob os picos. As reas sob os picos relativos ao
cloreto de metileno, clorofrmio, dioxana e tricloroetileno
obtidos para a Soluo amostra no devem ser superiores
s rea sob os picos relativos ao cloreto de metileno,
clorofrmio, dioxana e tricloroetileno obtidos para a
Soluo de referncia, correspondendo , no mximo, 600
ppm, 60 ppm, 380 ppm e 80 ppm, respectivamente.
0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
em 50 mL da mistura de gua e etanol (1:4). Titular com
hidrxido de sdio 0,5 M SV. Determinar o ponto fnal
potenciometricamente. Cada mL de hidrxido de sdio 0,5
M SV equivale a 0,1727 g de C
17
H
19
N
3
O
3
S.
a
o
1183
0,8 mL/minuto.
sdio monobsico e 4,472 g de fosfato de sdio dibsico
anidro em 300 mL de gua, diluir para 1000 mL com o
mesmo solvente e homogeneizar. Transferir 250 mL da
soluo resultante para balo volumtrico de 1000 mL,
adicionar cerca de 980 mL de gua, ajustar o pH para 7,6
com cido fosfrico e completar o volume com gua.
(3:1).
Soluo de referncia (a): dissolver quantidade exatamente
pesada de omeprazol SQR em mistura de borato de sdio
0,01 M e acetonitrila (3:1) e diluir com o mesmo solvente
para obter soluo a 200 g/mL.
Soluo de referncia (b): transferir 5 mL da Soluo de
referncia (a) para balo volumtrico de 10 mL, completar
o volume com a mesma mistura de borato de sdio 0,01 M
e acetonitrila (3:1), obtendo soluo a 100 g/mL.
da amostra em mistura de borato de sdio 0,01 M e
acetonitrila (3:1) e diluir com o mesmo solvente para obter
soluo a 200 g/mL.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo de referncia (b). A
efcincia da coluna no deve ser menor que 3000 pratos
tericos. O fator de capacidade no menor que 6,0.
O fator de cauda no maior que 1,5. O desvio padro
deve ser maior que 1,0%.
de referncia (a) e Soluo amostra, registrar os
cromatogramas e medir as reas sob os picos. Calcular
o teor de C
17
H
19
N
3
O
3
S na amostra a partir das respostas
obtidas com a Soluo de referncia (a) e a Soluo
amostra.
Em recipientes hermticos, protegidos da luz e da umidade,
entre 2 C e 8 C.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antissecretor
XIDO DE MAGNSIO
Magnesii oxidum
MgO; 40,30
xido de magnsio; 06728
xido de magnsio
[1309-48-4]
Contm, no mnimo, 96,0 % e, no mximo, 100,5% de
MgO, em relao substncia incinerada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P amorfo, fno e branco.
cidos diludos, produzindo ligeira efervescncia.
IDENTIFICAO
Dissolver cerca de 15 mg da amostra em 2 mL de cido
ntrico a 20% (p/v) e neutralizar com hidrxido de sdio a
8,5% (p/v). A soluo responde reao do on magnsio
(5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 5 g da amostra em mistura
de 70 mL de cido actico SR e 30 mL de gua. Aquecer
ebulio durante 2 minutos, resfriar e completar o
volume para 100 mL com cido actico 0,045 M. Filtrar,
se necessrio, atravs de fltro de porcelana ou slica,
previamente calcinado e tarado, cuja porosidade permita
obter um fltrado lmpido. Guardar o resduo eventualmente
presente. A soluo de referncia uma mistura (1:1) da
soluo descrita a seguir e cido clordrico a 1% (p/v):
misturar 3 mL da Soluo base de cloreto de cobalto II, 3
mL da Soluo base de cloreto frrico, 2,4 mL da Soluo
base de sulfato cprico, preparadas conforme descrito em
Cor de lquidos (5.2.12), e 1,6 mL de cido clordrico a 1%
(p/v). 10 mL da soluo da amostra no mais corada que
10 mL da soluo de referncia.
Substncias insolveis no cido actico. Lavar, secar e
calcinar a 600 C o resduo eventualmente recolhido no
decorrer da preparao da soluo da amostra em Aspecto
da soluo. A massa do resduo no superior a 5 mg, o
que representa no mximo 0,1%.
Substncias solveis e lcalis livres. A 2 g da amostra
adicionar 100 mL de gua e aquecer ebulio durante 5
minutos. Filtrar a quente por um fltro de vidro poroso. A 50
mL do fltrado, adicionar duas gotas de vermelho de metila
SI e titular com cido sulfrico 0,05 M SV. No mximo
2 mL de cido sulfrico 0,05 M SV so consumidos.
Evaporar secura 25 mL do fltrado e secar entre 100 e
105 C. A massa do resduo no superior a 10 mg. No
mximo 2,0%.
a
o
Arsnio (5.3.2.5). Determinar em 5 mL da soluo amostra
obtida em Aspecto da soluo. Proceder conforme descrito
em Mtodo visual. No mximo 0,0004% (4 ppm).
Clcio (5.3.2.7). Diluir 1,3 mL da soluo amostra obtida
em Aspecto da soluo para 150 mL com gua. Proceder
conforme descrito em Ensaio limite para clcio utilizando
15 mL desta soluo. No mximo 1,5%.
ferro (5.3.2.4). Dissolver 40 mg da amostra em 5 mL de
cido ntrico 2 M, aquecer ebulio por 1 minuto e diluir
para 50 mL com gua. Diluir 25 mL da soluo obtida para
45 mL com gua, adicionar 2 mL de cido clordrico e
prosseguir conforme descrito em Mtodo I. Utilizar 1 mL
de Soluo padro de ferro (1 ppm Fe). No mximo 0,05%
(500 ppm).
35 mL de cido clordrico 3 M e evaporar em banho-
maria at secura. Prximo ao fnal da evaporao, agitar
frequentemente para desintegrar o resduo, de modo a
obter um p seco. Dissolver o resduo em 20 mL de gua e
evaporar at secura. Dissolver novamente o resduo em 20
mL de gua, fltrar, se necessrio, e diluir com gua para 40
mL. Diluir 20 mL da soluo obtida para 25 mL com gua
e prosseguir conforme descrito em Mtodo I. No mximo
0,002% (20 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Pesar 2 g da amostra e adicionar 30 mL
de cido clordrico SR. Filtrar, se necessrio, adicionar
1 mL de cloreto de brio SR, completar o volume para
50 mL com gua e aquecer em banho-maria durante 10
minutos. Qualquer opalescncia obtida no mais intensa
que aquela apresentada por 0,2 mg de on sulfato, em igual
volume de lquido, contendo as mesmas quantidades dos
reagentes. No mximo 0,01% (100 ppm).
No mximo 10,0%.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Titulaes
complexomtricas para magnsio (5.3.3.4). Incinerar a
amostra a 800 C por 1 hora. Pesar, exatamente, cerca de
0,32 g da amostra, dissolver em 7 mL de cido clordrico 3
M e diluir para 100 mL com gua. Titular 20 mL da soluo
obtida utilizando edetato dissdico 0,1 M SV. Cada mL de
edetato dissdico 0,1 M SV equivale a 4,030 mg de MgO.
Em recipientes bem fechados
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. Deve informar se o xido
de magnsio leve ou pesado.
CATEGORIA
Adjuvante farmacotcnico, anticido, laxante hiperosmtico
salino.
XIDO DE ZINCO
Zinci oxidum
ZnO; 81,41
xido de zinco; 06730
xido de zinco
[1314-13-2]
ZnO, em relao substncia incinerada.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P fno, amorfo, branco ou
levemente amarelado.
Solubilidade. Insolvel em gua e etanol. Solvel em cido
actico e amnia. Solvel em cidos minerais diludos.
IDENTIFICAO
A. Adquire colorao amarela quando submetido a forte
aquecimento, que desaparece aps o resfriamento.
B. Dissolver 0,1 g da amostra em 1,5 mL de cido clordrico
SR e diluir para 5 mL com gua. A soluo responde s
reaes do on zinco (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
cido clordrico SR. No se observa efervescncia durante
a dissoluo. A soluo obtida incolor (5.2.12) e no
mais opalescente que a Suspenso de referncia II (5.2.25).
Alcalinidade. Agitar 1 g da amostra com 10 mL de gua
fervente. Adicionar duas gotas de fenolftalena SI e fltrar.
Se o fltrado for vermelho, no necessrio mais que 0,3
mL de cido clordrico 0,1 M para promover a viragem do
indicador.
Cdmio. Proceder conforme descrito em Espectrofotometria
de absoro atmica (5.2.13.1). Preparar as Solues
padro e amostra como descrito a seguir.
mistura de gua e cido ntrico isento de cdmio e chumbo
(1:1). Ferver por 1 minuto, resfriar e diluir para 100 mL
com gua.
Solues padro: preparar as solues padro utilizando
soluo padro de cdmio (0,1% Cd) e diluindo com cido
ntrico a 3,5% (v/v) isento de cdmio e chumbo.
Medir as absorvncias das solues resultantes em 228,8
nm, utilizando lmpada de ctodo oco de cdmio como fonte
de radiao e chama de acetileno ou propano. No mximo
0,001 % (10 ppm).
Chumbo. Dissolver 2 g da amostra em 20 mL de gua, e
adicionar 5 mL de cido actico glacial em banho-maria
a
o
1185
at total dissoluo. Adicionar cinco gotas de cromato de
potssio SR. A soluo obtida no produz nenhuma turvao
ou precipitado.
Arsnio (5.3.2.5). Determinar em 0,6 g da amostra. Proceder
conforme descrito em Mtodo espectrofotomtrico, Mtodo
I. No mximo 0,0005% (5 ppm).
cido clordrico SR e diluir para 10 mL com gua. Prosseguir
conforme descrito no Mtodo I. Utilizar Soluo padro de
ferro (100 ppm Fe). No mximo 0,02% (200 ppm).
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 1 g de amostra,
a 500 C. No mximo 1,0%.
DOSEAMENTO
Dissolver, exatamente, cerca de 0,8 g da amostra
previamente calcinada a 850 C por 1 hora, em 2 mL de
gua e 3 mL de cido clordrico, transferir para balo
Pipetar 10 mL desta soluo, adicionar 80 mL de gua e
em seguida adicionar uma soluo de hidrxido de sdio
(1 em 50) at aparecer partculas slidas em suspenso.
Adicionar 5 mL de tampo cloreto de amnia pH 10,7,
duas gotas de negro de eriocromo T SI e titular com edetato
dissdico 0,05 M SV. Cada mL de edetato dissdico 0,05 M
SV equivale a 4,071 mg de ZnO.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Protetores dermatolgicos.
a
p
1187
PANTOPRAZOL SDICO
Pantoprazoli natricum
N
N
O
F
F
S
O
Na
N
OCH
3
OCH
3
C
16
H
14
F
2
N
3
NaO
4
S; 405,35
C
16
H
14
F
2
N
3
NaO
4
S.1,5H
2
O; 432,37
pantoprazol sdico; 06819
pantoprazol sdico sesquiidratado; 09514
Sal de sdio do 6-(difuormetoxi)-2-[[(3,4-dimetoxi-2-
piridinil)metil]sulfnil]-1H-benzimidazol (1:1)
[138786-67-1]
Sal de sdio do 6-(difuormetoxi)-2-[[(3,4-dimetoxi-2-
piridinil)metil]sulfnil]-1H-benzimidazol hidratado (2:2:3)
[164579-32-2]
C
16
H
14
F
2
N
3
NaO
4
DESCRIO
branco, higroscpico.
metanol e etanol.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): 1,0 a +1,0, em relao
substncia anidra. Determinar em soluo aquosa a 5% (p/v).
IDENTIFICAO
observados no espectro de pantoprazol sdico SQR,
metanol, exibe mximo em 289 nm.
C. Solubilizar 20 mg da amostra em 1 mL de gua. A
soluo responde s reaes do on sdio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
lmpida (5.2.25) e levemente amarelada (5.2.12).
2% (p/v).
Absoro de luz. A absorvncia mxima da soluo aquosa
a 2% (p/v), medida a 440 nm, de 0,025 e a transmitncia
mnima, medida em 650 nm, de 97%. A absorvncia
mxima da soluo aquosa a 10% (p/v), medida a 440 nm,
de 0,1 e a transmitncia mnima, medida em 650 nm,
de 95%.
em 1 g de amostra, em estufa a vcuo a 60 C, por 4 horas.
gua (5.2.20.1). Entre 4,5% e 8,0%.
No mximo 1,0%.
DOSEAMENTO
A. Dissolver, exatamente, cerca de 0,35 g da amostra em
50 mL de etanol. Titular com cido clordrico 0,1 M SV.
Determinar o ponto fnal potenciometricamente ou utilizar
azul de bromofenol SI como indicador, com viragem
para a cor verde. Realizar ensaio em branco e efetuar as
correes necessrias. Cada mL de cido clordrico 0,1 M
16
H
14
F
2
N
3
NaO
4
S.
da amostra em hidrxido de sdio 0,1 M de modo a obter
soluo de C
16
H
14
F
2
N
3
NaO
4
S a 1 mg/mL. Diluir em tampo
fosfato-laurilsulfato de sdio pH 6,8 at concentrao
de 0,1 mg/mL. Diluir a soluo obtida, em mistura de
acetonitrila e gua (50:50) at concentrao de 10 g/mL.
de pantoprazol sdico SQR em hidrxido de sdio 0,1 M
de modo a obter soluo de C
16
H
14
F
2
N
3
NaO
4
S a 1 mg/mL.
Diluir em tampo fosfato-laurilsulfato de sdio pH 6,8 at
concentrao de 0,1 mg/mL. Diluir a soluo obtida em
mistura de acetonitrila e gua (50:50) at concentrao de
10 g/mL.
no maior que 2,0%.
as reas sob os picos principais. Calcular o teor de
C
16
H
14
F
2
N
3
NaO
4
com as Solues padro e amostra.
a
p
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz e sob
refrigerao.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antissecretor
PANTOTENATO DE CLCIO
Calcii pantothenas
OH
N
O
O
-
H
O
C H
3
CH
3
OH
2
Ca
2+
C
18
H
32
CaN
2
O
10
; 476,53
pantotenato de clcio; 00317
Sal de clcio da N-[(2R)-2,4-diidroxi-3,3-dimetil-1-
oxobutil]--alanina (1:2)
[137-08-6]
C
18
H
32
CaN
2
O
10
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, levemente
higroscpico.
glicerol, pouco solvel em acetona e etanol e praticamente
insolvel em ter etlico.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +25,0 a + 27,5, em
IDENTIFICAO
observados no espectro de pantotenato de clcio SQR,
suporte, e mistura de gua, cido actico glacial e etanol
Soluo (1): dissolver 0,2 g da amostra em gua e completar
o volume para 5 mL com o mesmo solvente.
Soluo (2): diluir 1 mL da Soluo (1) a 10 mL com gua.
Soluo (3): dissolver 20 mg de pantotenato de clcio SQR
em gua e diluir para 5 mL com o mesmo solvente.
secar ao ar, nebulizar a placa com ninidrina SR. Aquecer
a 110 C por 10 minutos. A mancha principal no
cromatograma obtido com a Soluo (2) corresponde em
C. Dissolver 2,5 g da amostra em 50 mL de gua. Transferir
1 mL dessa soluo para tubo de ensaio e adicionar 1 mL
de hidrxido de sdio SR e 0,1 mL de sulfato cprico SR.
D. Responde s reaes do on clcio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo a 5% (p/v) em gua
lmpida e incolor.
pH (5.2.19). 6,8 a 8,0. Determinar em uma soluo a 5%
(p/v).
cido 3-aminopropinico. Proceder conforme descrito
no item B. de Identifcao. Preparar a Soluo (4) como
descrito a seguir.
Soluo (4): dissolver 10 mg de cido 3-aminopropinico
SQR em gua e diluir para 50 mL com o mesmo solvente.
secar ao ar, nebulizar a placa com ninidrina SR. Aquecer a
110 C por 10 minutos. A mancha correspondente ao cido
3-aminopropinico no cromatograma obtido com a Soluo
(1) no mais intensa que a mancha no cromatograma
obtido com a Soluo (4). No mximo 0,5%.
descrito em Cromatografa a gs (5.2.17.5) Utilizar
arraste de 1,0 mL/minuto.
Soluo amostra: dissolver em 50 mL de gua, livre de
a
p
1189
amostra e da Soluo padro no cromatgrafo a gs.
Obter os cromatogramas e medir a rea sob os picos.
Identifcar, baseado no tempo de reteno, qualquer pico
presente no cromatograma da Soluo amostra. A presena
e a identifcao dos picos no cromatograma devem ser
amostra e Soluo padro. Limite: benzeno 2 ppm,
para cloretos. No mximo 0,02% (200 ppm).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar Mtodo I. Dissolver 0,5
g de amostra em 10 mL de gua e utilizar 1mL de Soluo
padro de chumbo (10 ppm Pb). No mximo 0,002% (20
ppm).
mximo 3%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver 180 mg da amostra em 50 mL
de cido actico glacial. Titular com cido perclrico 0,1 M
SV. Determinar o ponto fnal potenciometricamente. Cada
C
18
H
32
CaN
2
O
10
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Suplemento alimentar
PARACETAMOL
Paracetamolum
O H
N CH
3
O
H
C
8
H
9
NO
2
; 151,16
paracetamol; 06827
N-(4-Hidroxifenil)acetamida
[103-90-2]
C
8
H
9
NO
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco, inodoro, com
leve sabor amargo.
gua fervente, facilmente solvel em etanol, praticamente
insolvel em clorofrmio e ter etlico. Solvel em
hidrxido de sdio M.
Faixa de fuso (5.2.2): 168 C a 172 C.
IDENTIFICAO
realizados os testes A. e C. O teste de identifcao A. pode
ser omitido se forem realizados os testes B. e C.
paracetamol SQR, preparado de maneira idntica.
em mistura de cido clordrico 0,1 M e metanol (1:100), exibe
mximos e mnimos somente nos mesmos comprimentos de
onda de soluo similar de paracetamol SQR.
C. A 10 mL de uma soluo a 1% (p/v) da amostra,
adicionar uma gota de cloreto frrico SR. Desenvolve-se
colorao azul-violcea.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 5,3 a 6,5. Determinar na soluo saturada.
Aminofenol livre. Dissolver 0,5 g da amostra numa
mistura de metanol e gua (1:1) e completar o volume
para 10 mL com a mesma mistura de solventes. Preparar
a
p
10 mL de soluo padro a partir de 0,5 g de paracetamol
SQR, isento de 4-aminofenol, e 0,5 mL de soluo de
4-aminofenol a 0,005% (p/v), na mesma mistura de
solventes. Adicionar, simultaneamente, soluo amostra e
soluo padro, 0,2 mL de soluo de carbonato de sdio
anidro a 1% (p/v), recentemente preparada. Homogeneizar
e deixar em repouso durante 30 minutos. A colorao azul
desenvolvida na soluo amostra no mais intensa que a
soluo padro.
Cloroacetanilida. Proceder conforme descrito em
Cromatografa em camada delgada (5.2.17.1). Preparar
a fase estacionria dissolvendo 8 mg de acetato de sdio
em 50 mL de gua, adicionando, em seguida, 20 g de
slica-gel GF
254
. Preparar placas com 0,5 mm de espessura.
Utilizar como fase mvel mistura de clorofrmio, benzeno
e acetona (65:10:25). Aplicar, separadamente, placa,
100 L da Soluo (1) e 20 L da Soluo (2), descritas
a seguir.
Soluo (1): transferir 1 g da amostra para um tubo de
centrfuga de 15 mL com tampa, adicionar 5 mL de ter
etlico, agitar mecanicamente, por 30 minutos, e centrifugar
a 1000 rpm, por 15 minutos ou at obter separao ntida.
Soluo (2): soluo de p-cloroacetanilida a 10 g/mL em
etanol.
Desenvolver o cromatograma em sistema aberto at a fase
mvel atingir, pelo menos, 12 cm da origem. Remover a
placa, deixar secar ao ar e manter, por 30 minutos, sob luz
ultravioleta (254 nm) a uma distncia de 4 cm. Localizar as
manchas sob luz ultravioleta de 365 nm. Qualquer mancha
fuorescente azul produzida pela Soluo (1), com Rf entre
0,5 e 0,6, no maior ou mais intensa que aquela produzida
pela Soluo (2). No mximo 0,001%.
Substncias facilmente carbonizveis. Dissolver 0,5 g
da amostra em 5 mL de cido sulfrico. A colorao da
soluo obtida no mais intensa que a da Soluo padro
de cor SC A (5.2.12).
Cloretos (5.3.2.1). Agitar 1 g da amostra com 25 mL de
gua, fltrar e adicionar 1 mL de cido ntrico 2 M. No
mximo 0,014% (140 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Agitar 1 g da amostra com 25 mL de
gua, fltrar quantitativamente para tubo de Nessler. No
mximo 0,02% (200 ppm).
Sulfetos. Pesar cerca de 2,5 g da amostra em bquer de 50
mL. Adicionar 5 mL de etanol e 1 mL de cido clordrico M.
Umedecer, com gua, um papel de fltro impregnado com
acetato de chumbo e colocar sobre vidro de relgio. Cobrir
o bquer com o vidro de relgio de tal forma que uma das
pontas do papel fque na abertura do frasco. Aquecer em
chapa eltrica at ebulio. Nenhuma mancha ou colorao
aparece no papel com acetato de chumbo.
mistura de acetona e gua (85:15) e diluir para 20 mL com
a mesma mistura de solventes. Transferir 12 mL da soluo
obtida para tubo de Nessler e proceder conforme descrito
no Mtodo III. No mximo 0,002% (20 ppm).
gua (5.2.20.1). No mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
cerca de 0,15 g de amostra, dissolver em 50 mL de
hidrxido de sdio 0,1 M, adicionar 100 mL de gua,
agitar mecanicamente por 15 minutos e adicionar gua
sufciente para 200 mL. Homogeneizar e fltrar. Diluir 10
mL do fltrado para 100 mL com gua. Transferir 10 mL
da soluo resultante para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 10 mL de hidrxido de sdio 0,1 M e completar
o volume com gua. Preparar a soluo padro na mesma
concentrao, utilizando hidrxido de sdio 0,01 M como
em 257 nm, utilizando hidrxido de sdio 0,01 M para
8
H
9
NO
2
na amostra a
clculos considerando A(1%, 1 cm) = 715, em 257 nm.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Analgsico e antipirtico.
PARACETAMOL COMPRIMIDOS
8
H
9
NO
2
.
IDENTIFICAO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Extrair quantidade
do p equivalente a 0,5 g de paracetamol com 20 mL de
acetona. Filtrar, evaporar o fltrado e secar a 105 C. O
com as mesmas intensidades relativas daqueles obtidos
no espectro de paracetamol SQR, preparado de maneira
idntica.
B. Aquecer at ebulio 0,1 g do resduo obtido no teste
A. de Identifcao com 1 mL de cido clordrico por trs
minutos, adicionar 10 mL de gua e resfriar. Nenhum
precipitado produzido. Adicionar 0,05 mL de dicromato
de potssio 0,0167 M. Desenvolve-se colorao violeta,
que no muda para vermelha.
a
p
1191
C. A temperatura de fuso (5.2.2) do resduo obtido no
teste A. de Identifcao de, aproximadamente, 169 C.
CARACTERSTICAS
Tempo: 30 minutos
de dissoluo, fltrar e diluir em tampo fosfato pH 5,8
solues resultantes em 243 nm (5.2.14), em comparao
com uma soluo de paracetamol SQR a 0,0017% (p/v)
em tampo fosfato pH 5,8. Utilizar o mesmo solvente
para o ajuste do zero. Calcular a quantidade de C
8
H
9
NO
2

dissolvido no meio a partir das leituras obtidas.
declarada de C
8
H
9
NO
2
ENSAIOS DE PUREZA
4-Aminofenol. Proceder conforme descrito em
ligada a octadecilsilano (10 m); fuxo da Fase mvel de
2 mL/minuto.
Fase mvel: preparar soluo de butanossulfonato de sdio
0,01 M utilizando como solvente mistura de gua, metanol
e cido frmico (85:15:0,4).
quantidade do p equivalente a 1 g de paracetamol para balo
volumtrico de 100 mL, adicionar 15 mL de metanol e agitar.
Completar o volume com gua, homogeneizar e fltrar.
Soluo (2): preparar soluo a 0,001% (p/v) de
4-aminofenol em metanol 15% (v/v).
as reas sob os picos. A rea sob o pico correspondente ao
4-aminofenol obtido no cromatograma com a Soluo (1)
no maior que o pico principal obtido no cromatograma
com a Soluo (2).
em Cromatografa em camada delgada, utilizando
slica-gel GF
254
, como suporte e mistura de clorofrmio,
acetona e tolueno (65:25:10) como fase mvel. Aplicar,
separadamente, placa, 200 L da Soluo (1) e 40 L
de cada uma das Solues (2), (3) e (4), descritas a seguir.
quantidade do p equivalente a 1 g de paracetamol para
um tubo de centrfuga de 15 mL com tampa de vidro
esmerilhada. Adicionar 5 mL de ter etlico e agitar
mecanicamente por 30 minutos. Centrifugar a 1000
rotaes por minuto, durante 15 minutos ou at obter
sobrenadante lmpido. Utilizar o sobrenadante.
etanol.
Soluo (3): preparar soluo a 0,005% (p/v) de
p-cloroacetanilida em etanol.
Soluo (4): dissolver 0,25 g de p-cloroacetanilida e 0,1 g de
paracetamol em etanol e completar o volume para 100 mL.
Desenvolver o cromatograma em cuba no saturada, at a
fase mvel atingir 14 cm da origem. Remover a placa, secar
com o auxlio de corrente de ar quente e examinar sob luz
ultravioleta (254 nm). Qualquer mancha correspondente
p-cloroacetanilida obtida no cromatograma com a Soluo
(1) no mais intensa que a mancha obtida no cromatograma
com a Soluo (3). Qualquer mancha secundria obtida no
cromatograma com a Soluo (2) com valor de Rf inferior
ao da p-cloroacetanilida no mais intensa que a mancha
obtida no cromatograma com a Soluo (3). O teste s
vlido se o cromatograma obtido com a Soluo (4)
mostrar duas manchas principais nitidamente separadas,
sendo que a mancha correspondente a p-cloroacetanilida
apresenta Rf de maior valor.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir
quantidade do p equivalente a 0,15 g de paracetamol
para balo volumtrico de 200 mL. Adicionar 50 mL
de hidrxido de sdio 0,1 M, 100 mL de gua, agitar
gua. Homogeneizar, fltrar e diluir 10 mL do fltrado para
100 mL com gua. Transferir 10 mL da soluo resultante
hidrxido de sdio 0,1 M e completar o volume com gua.
Preparar soluo padro de paracetamol em hidrxido
de sdio 0,01 M, na mesma concentrao fnal. Medir as
a
p
8
H
9
NO
2
nos comprimidos a
clculos considerando A(1%, 1cm) = 715, em 257 nm, em
B. Proceder conforme descrito em Cromatografa a
provido de detector ultravioleta a 243 nm; coluna de 300
mm e 3,9 mm de dimetro interno, empacotada com slica
quimicamente ligada a grupo octadecilsilano, mantida
minuto.
da amostra na Fase mvel. Agitar mecanicamente por 10
minutos e deixar em ultrassom por 5 minutos. Diluir com o
mesmo solvente at a concentrao de 10 g/mL.
de paracetamol SQR na Fase mvel para obter soluo a
10 g/mL.
A efcincia da coluna no deve ser inferior a 1000 pratos
tericos/metro. O fator de cauda no maior que 2. O
desvio padro relativo para as reas de replicatas dos picos
registrados para a Soluo padro no maior que 2,0%.
a rea mdia dos picos. Calcular o teor de C
8
H
9
NO
2
na
amostra a partir das respostas obtidas para a Soluo
ROTULAGEM
PARACETAMOL SOLUO ORAL
8
H
9
NO
2
.
IDENTIFICAO
realizados os testes B. e C. O teste de identifcao C. pode
ser omitido se forem realizados os testes A. e B.
254
,
como suporte, e mistura de cloreto de metileno e metanol
20 uL de cada uma das solues, recentemente preparadas,
descritas a seguir:
Soluo (1): diluir a soluo oral em metanol at
concentrao de 1 mg/mL.
Soluo (2): dissolver 10 mg de paracetamol SQR em
metanol e completar o volume para 10 mL com o mesmo
solvente.
secar ao ar. Examinar sob luz ultravioleta. A mancha
principal obtida com a Soluo (1) corresponde em posio
CARACTERSTICAS
Teste de gotejamento (5.1.8). Cumpre o teste.
pH (5.2.19). 3,8 a 6,5.
ENSAIOS DE PUREZA
4-Aminofenol. Proceder conforme descrito em
minuto.
Fase mvel: preparar soluo de butanossulfonato de sdio
0,01 M, utilizando como solvente mistura de gua, metanol
e cido frmico (85:15:0,4).
Soluo (1): preparar soluo a 4,8 mg/mL da amostra em
Fase mvel. Filtrar se necessrio.
Soluo (2): preparar soluo a 24 g/mL de 4-aminofenol
SQR em Fase mvel.
as reas sob os picos. A rea sob o pico correspondente ao
4-aminofenol obtido no cromatograma com a Soluo (1)
no maior que o pico principal obtido no cromatograma
com a Soluo (2) (0,5%). No cromatograma obtido com a
Soluo (1), picos com um longo tempo de reteno podem
ocorrer devido a presena de conservantes na formulao.
a
p
1193
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
soluo oral para balo volumtrico e diluir em metanol
de modo a obter soluo a 1 mg/mL. Transferir 1 mL da
soluo resultante para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 1 mL de cido clordrico 0,1 M, completar o
volume com metanol e homogeneizar. Preparar soluo
em 249 nm, utilizando soluo metanlica de cido
de C
8
H
9
NO
2
na soluo oral, a partir das leituras obtidas.
1cm) = 880, em 249 nm.
de 1,0 mL/minuto.
Soluo amostra: transferir volume, precisamente medido,
de soluo oral equivalente a 200 mg de paracetamol para
Fase mvel e homogeneizar. Transferir 1 mL dessa soluo
com Fase mvel, homogeneizar e fltrar.
de paracetamol SQR em Fase mvel de modo a obter
C
8
H
9
NO
2
na soluo oral a partir das respostas obtidas com
Conservar ao abrigo da luz.
ROTULAGEM
PARAMINOBENZOATO DE POTSSIO
Kalli 4-aminobenzoas
COO
NH
2
K
C
7
H
6
KNO
2
; 175,23
Sal de potssio do cido 4-aminobenzoico (1:1)
[138-84-1]
C
7
H
6
KNO
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, cristalino.
em etanol e praticamente insolvel em ter etlico.
IDENTIFICAO
hidrxido de sdio 0,001 M, exibe mximos e mnimos
somente nos mesmos comprimentos de onda de soluo
similar de paraminobenzoato de potssio SQR.
B. Dissolver cerca de 400 mg da amostra em 10 mL de
gua. Adicionar 1 mL de cido clordrico 3 M, fltrar e
lavar o precipitado com duas alquotas de 5 mL de gua
fria. Lavar com etanol e deixar recristalizar. Dessecar
o precipitado obtido a 110 C por uma hora. O ponto de
fuso (5.2.2) do cido paraminobenzoico assim obtido
entre 186,0 C e 189,5 C.
C. A soluo a 1% (p/v) da amostra responde s reaes do
on potssio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 8,0 a 9,0. Determinar na soluo 5% (p/v).
Substncias volteis diazotadas.
Soluo (1): dissolver 10 mg de p-toluidina em 5 mL de
metanol em balo volumtrico de 100 mL. Completar o
volume com gua e homogeneizar. Transferir 1 mL desta
volume com o mesmo solvente e homogeneizar.
Soluo (2): transferir 5 g de aminobenzoato de potssio
para um frasco volumtrico de 50 mL. Adicionar uma
quantidade de hidrxido de sdio M sufciente para
dissolver a amostra e tornar o meio alcalino em relao
fenolftalena. Completar o volume para 50 mL. Destilar em
a
p
sistema de destilao com arraste de vapor e coletar cerca
de 95 mL do destilado em um frasco de 100 mL. Completar
com gua at o volume e misturar.
Procedimento: transferir 20 mL da Soluo (1) e 20 mL da
Soluo (2), separadamente, para bales volumtricos de
100 mL. Realizar ensaio em branco, transferindo 20 mL
de gua para um terceiro balo volumtrico de 100 mL.
Adicionar 5 mL de cido clordrico M a cada um dos bales
volumtricos e resfriar em banho de gelo. Adicionar, gota
a gota, sob agitao, 2 mL de nitrito de sdio 0,1 M SV.
Deixar em repouso durante 5 minutos para que a reao de
diazotao se complete. Adicionar, rapidamente, 10 mL de
soluo de guaiacol resfriada, preparada recentemente pela
dissoluo de 0,2 g de guaiacol em 100 mL de hidrxido
de sdio M. Homogeneizar e deixar em repouso por 30
minutos. Determinar a absorvncia (5.2.14) das solues
em 405 nm, utilizando o ensaio em branco para ajuste do
zero. A absorvncia da Soluo (2) no deve ser maior que
a apresentada pela Soluo (1) (0,002%).
Metais pesados (5.3.2.3). Utilizar o Mtodo IV. Utilizar
1 g da amostra em cadinho de slica. No mximo 0,002%
(20 ppm).
para cloretos. No mximo 0,02% (200 ppm).
Sulfatos (5.3.2.2). Dissolver 6 g da amostra em 40 mL de
Perda por dessecao (5.2.9). Pesar, exatamente, cerca de
1 g a 2 g de amostra e secar vcuo a 105 C por 2 horas.
No mximo 1,0%.
DOSEAMENTO
Pesar, exatamente, cerca de 500 mg da amostra e transferir
para um bquer. Adicionar 25 mL de gua e 25 mL de
cido clordrico 3 M. Misturar e resfriar em banho de
gelo. Titular com nitrito de sdio 0,1 M SV. Determinar o
ponto fnal potenciometricamente, utilizando um eletrodo
platina-calomelano. Cada mL de nitrito de sdio 0,1 M SV
7
H
6
KNO
2.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Analgsico
PERCLORATO DE POTSSIO
Kalli perchloras
KClO
4
; 138,55
perclorato de potssio; 09834
Sal de potssio do cido perclrico (1:1)
[7778-74-7]
KClO
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco, cristalino ou cristais
incolores.
Solubilidade. Ligeiramente solvel em gua, praticamente
insolvel em etanol.
IDENTIFICAO
A. Preparar soluo a 10% (p/v) da amostra em gua e
adicionar algumas gotas de cloreto de metiltionnio SR.
Produz-se precipitado violeta.
B. Dissolver 0,1 g da amostra em 5 mL de gua. Adicionar
5 mL de ndigo carmim SR e aquecer at ebulio. A cor da
soluo no desaparece.
E. Responde s reaes do on clorato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. A soluo aquosa a 1% (p/v) lmpida
(5.2.25) e incolor (5.2.12).
1,4% (p/v).
Acidez ou alcalinidade. Pesar, exatamente, cerca de 5 g da
amostra e adicionar 90 mL de gua. Aquecer at ebulio.
Deixar esfriar e fltrar. Diluir o fltrado para 100 mL com
gua livre de dixido de carbono. A 5 mL desta soluo,
adicionar 5 mL de gua e 0,1 mL de fenolftalena SI.
No mais que 0,25 mL de hidrxido de sdio 0,01 M so
necessrios para a mudana de cor do indicador. A outros
5 mL dessa soluo, adicionar 5 mL de gua e 0,1 mL de
soluo de verde de bromocresol SI. No mais que 0,25
mL de cido clordrico 0,01 M so necessrios para mudar
a cor do indicador.
a
p
1195
compostos orgnicos, exatamente, cerca de 1 g da amostra.
amostra e da Soluo padro no cromatgrafo a gs.
Obter os cromatogramas e medir a rea sob os picos.
Identifcar, baseado no tempo de reteno, qualquer pico
presente no cromatograma da Soluo amostra. A presena
e a identifcao dos picos no cromatograma devem ser
amostra e Soluo padro. Limite: benzeno 2 ppm,
Substncias Insolveis. Dissolver 20 g da amostra em
150 mL de gua morna. Filtrar em um fltro de mdia
porosidade, previamente pesado. Lavar com trs pores
de 50 mL de gua morna. Secar o resduo a 105 C por 3
horas. O peso do resduo no excede 0,005% (50 ppm).
Cloretos (5.3.2.1). Pesar 10 g da amostra e proceder
mximo 0,003% (30 ppm).
Cloretos e cloratos (5.3.2.1). Pesar, exatamente, cerca de
3,5 g da amostra, adicionar 30 mL de gua, 1 mL de cido
ntrico e 0,1 g de nitrito de sdio. Deixar esfriar e proceder
conforme Ensaio limite para cloretos. No mximo 0,01%
(100 ppm) (calculado como cloretos).
Sdio. Preparar uma soluo a 10% da amostra. Mergulhar
uma ala de platina nesta soluo e levar chama. No
aparece colorao amarela pronunciada na chama.
Sulfatos (5.3.2.2). Pesar, exatamente, cerca de 1 g da
amostra e dissolver em 40 mL de gua. Proceder conforme
Ensaio limite para sulfatos. Utilizar 0,25 mL da soluo
padro. No mximo 0,012% (120 ppm).
Clcio. A opalescncia desenvolvida na Preparao
amostra aps 15 minutos no mais intensa do que na
Preparao padro, preparada de maneira semelhante. No
mximo 100 ppm.
Preparao amostra: pesar, exatamente, cerca de 5 g da
amostra transferir para um bquer e adicionar 90 mL de
gua. Aquecer at a ebulio. Deixar esfriar, fltrar para
gua destilada livre de dixido de carbono. Em um tubo
de Nessler, misturar 0,2 mL de soluo padro etanlica
de clcio (100 ppm Ca) e 1 mL de oxalato de amnio SR.
Depois de 1 minuto, adicionar 1 mL de cido actico 2
M e 15 mL da soluo contendo a amostra anteriormente
preparada.
Preparao padro: transferir para um tubo de Nessler
(capacidade de 50 mL e 22 mm de dimetro interno) 0,2
mL de soluo padro etanlica de clcio (100 ppm Ca) e
misturar com 1 mL de oxalato de amnio SR. Aguardar 1
minuto, adicionar 7,5 mL da soluo padro de clcio (10
ppm Ca), 1 mL de cido actico diludo e 7,5 mL de gua
destilada.
mL de gua, ajustar o pH para a faixa entre 3,0 e 4,0 com
cido actico M ou hidrxido de amnio 6 M. diluir com
gua e homogeneizar. Proceder conforme Ensaio limite
para metais pesados, Mtodo I. No mximo 0,001% (10
ppm).
amostra, em slica-gel. Dessecar por 12 horas. No mximo
0,5%.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Cromatografa em coluna
por troca inica (5.2.17.3). Utilizar cromatgrafo provido
de detector por condutividade, coluna cromatogrfca
de 7,5 cm de comprimento e 4,6 mm de dimetro
interno, empacotada com gel poroso de poliacrilato ou
polimetacrilato com grupos de amnia quaternria com,
cerca de, 10 m; fuxo da Fase mvel de 1,2 mL/minuto.
Fase mvel: dissolver 1,66 g de cido ftlico em 1000 mL
de gua. Ajustar o pH para 4,5 com, aproximadamente,
0,45 g de hidrxido de ltio. Filtrar.
da amostra em gua para obter soluo a 0,5 mg/mL.
100 mL e completar o volume com gua, obtendo soluo
a 0,1 mg/mL.
de perclorato de potssio SQR em gua para obter soluo
a 0,5 mg/mL. Transferir 20 mL dessa soluo para balo
volumtrico de 100 mL e completar o volume com gua,
e medir as reas sob os picos. Calcular o teor de KClO
4

ROTULAGEM
a
p
CLASSE TERAPUTICA
Antitireoidiano
PERMANGANATO DE POTSSIO
Kalli permanganas
KMnO
4
; 158,03
permanganato de potssio; 07000
Sal de potssio do cido permangnico (1:1)
[7722-64-7]
KMnO
4
Cuidado: exploses perigosas podem ocorrer se colocado
em contato com substncias orgnicas ou facilmente
oxidveis, tanto em soluo como no estado seco.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Cristais violeta escuro, com brilho
metlico, inodoros, inalterveis ao ar.
Solubilidade. Facilmente solvel em gua fervente e
solvel em gua fria.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 50 mg da amostra em 5 mL de gua.
Adicionar 1 mL de etanol e 0,3 mL de hidrxido de sdio
SR. Desenvolve-se colorao verde. Aquecer at ebulio.
Forma-se um precipitado castanho escuro.
B. Responde s reaes do on permanganato (5.3.1.1).
C. Filtrar a mistura obtida no teste A. de Identifcao. O
fltrado responde s reaes do on potssio (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
Aspecto da soluo. Dissolver 0,75 g da amostra em
25 mL de gua e adicionar 3 mL de etanol. Aquecer at
ebulio durante 2 minutos. Esfriar e completar o volume
para 30 mL com gua. Filtrar. A soluo obtida incolor
(5.2.12).
Substncias insolveis na gua. Dissolver, sob
aquecimento, 0,5 g da amostra em 50 mL de gua. Filtrar
com fltro de vidro de mdia porosidade, previamente
tarado e lavado com gua, at obter um fltrado incolor.
Recolher o resduo e secar em estufa (102,5 2,5) C. A
massa do resduo no superior a 5 mg (1,0%).
Cloretos (5.3.2.1). A 10 mL da soluo resultante do
Aspecto da soluo, completar o volume para 15 mL com
Sulfatos (5.3.2.2). A 12 mL da soluo resultante do
Aspecto da soluo, completar o volume para 15 mL com
amostra. Dessecar, sob presso reduzida, sobre slica-gel,
DOSEAMENTO
em 25 mL de gua. Adicionar uma soluo previamente
preparada de 2 mL de cido sulfrico em 5 mL de gua,
e 50 mL de cido oxlico 0,05 M SV. Aquecer a soluo
a cerca de 80 C. Titular o excesso de cido oxlico com
permanganato de potssio 0,02 M SV at que seja produzida
colorao rosa plida, persistente por 15 segundos. Cada
mL de cido oxlico 0,05 M SV equivale a 3,161 mg de
KMnO
4
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antissptico tpico.
PETROLATO BRANCO
petrolato branco; 09104
Mistura purifcada de hidrocarbonetos semi-slidos obtidos
do petrleo. Pode conter estabilizante adequado.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Massa untuosa, semi-slida, branca
ou levemente amarelada, praticamente inodora e inspida.
em benzeno, clorofrmio, ter etlico, ter de petrleo,
dissulfeto de carbono, leos, praticamente insolvel em
glicerol e etanol.
Densidade relativa (5.2.5): 0,815 a 0,880. Determinar a 60 C.
ENSAIOS DE PUREZA
Cor de lquidos (5.2.12). Fundir cerca de 10 g da amostra
em banho-maria e transferir 5 mL do lquido para um tubo
de ensaio de vidro transparente, de aproximadamente 16
mm de dimetro e 150 mm de comprimento. O lquido
derretido e quente no deve ser mais escuro do que uma
soluo preparada pela mistura de 1,6 mL de Soluo base
a
p
1197
de cloreto frrico e 3,4 mL de gua num tubo semelhante.
Realizar a comparao contra um fundo branco, sendo que
os tubos devem ser segurados diretamente contra o fundo
num ngulo tal qual no haja fuorescncia.
Acidez ou alcalinidade. Pesar 35 g da amostra num bquer
e adicionar 100 mL de gua fervente. Cobrir, colocar
numa placa de aquecimento e manter a temperatura de
ebulio da gua durante 5 minutos. Em seguida, deixar
em repouso at separao das fases. Retirar a camada
aquosa e transferi-la para erlenmeyer. Lavar a amostra com
duas pores adicionais de 50 mL de gua fervente. Reunir
as trs camadas aquosas (a primeira, mais as guas de
lavagem), adicionar 0,1 mL de fenolftalena SI e aquecer
a ebulio. A soluo no deve tornar-se rsea. Caso a
soluo permanea incolor, adicionar 0,1 mL de alaranjado
de metila SI. A soluo no se torna vermelha ou rsea.
Consistncia
Aparelhagem. Determinar a consistncia utilizando um
penetrmetro, o qual deve possuir um pisto metlico
polido, de 150 g, em forma de cone e uma ponta de ao
destacvel. A ponta do cone deve ter um ngulo de 30 e a
extremidade truncada um dimetro de (0,381 0,025) mm.
O dimetro da base da ponta deve ser de (8,38 0,05) mm
e o comprimento da ponta deve ser de (14,94 0,05) mm.
A poro restante do cone deve ter um ngulo de 90, altura
de cerca de 28 mm e dimetro mximo na base de cerca
de 65 mm. Os recipientes para o teste devem ser cilindros
metlicos de fundo chato, cujo dimetro deve ser de (100
6) mm e altura de, no mnimo, 65 mm. Eles devem
ser fabricados com metal de 1,6 mm e devem apresentar
tampas bem vedadas e impermeveis gua.
Procedimento: aquecer, em forno, quantidade sufciente
da amostra a (82 2,5) C e transferir para os cilindros
previamente aquecidos mesma temperatura, preenchendo
at 6 mm da borda. Resfriar a (25 2,5) C por um perodo
de, no mnimo, 16 horas, protegendo da exposio ao
ambiente. Duas horas antes do teste, colocar os cilindros
num banho-maria a (25 0,5) C. Se a temperatura
ambiente estiver abaixo de 23,5 C ou acima de 26,5 C,
ajustar a temperatura do cone a (25 0,5) C, colocando-o
num banho-maria. Sem provocar distrbios na superfcie
da amostra, colocar o cilindro na mesa do penetrmetro
e abaixar o cone at que a ponta toque a superfcie da
amostra num ponto de 25 mm a 38 mm abaixo da borda do
cilindro. Zerar a escala do aparelho e liberar rapidamente o
pisto, ento deix-lo livre por 5 segundos. Fixar o pisto
e realizar a leitura. Fazer trs ou mais leituras, cada uma
espaada da outra, de modo que no haja sobreposio das
reas de penetrao. Quando a penetrao exceder 20 mm,
usar um recipiente separado com a amostra para cada teste.
Ler a penetrao at dcimos de milmetro. Calcular a
mdia de trs ou mais leituras e realizar mais testes at um
total de 10 se os resultados individuais diferirem da mdia
por mais do que 3%. A mdia de todos os testes deve ser,
no mnimo, 10 mm e, no mximo, 30 mm, indicando um
valor de consistncia entre 100 e 300.
cidos orgnicos. Pesar 20 g da amostra e adicionar 100
mL de uma mistura de etanol previamente neutralizado
com hidrxido de sdio 0,1 M e gua (1:2). Agitar a soluo
e aquecer at a ebulio. Adicionar 1 mL de fenolftalena
SI e titular rapidamente com hidrxido de sdio 0,1 M SV,
sob agitao vigorosa, at colorao rsea observada na
camada hidroalcolica. No mximo 0,4 mL de hidrxido
de sdio 0,1 M SV necessrio para promover a viragem
do indicador.
leos fxos, gorduras e rosina. Aquecer 10 g da amostra
com 50 mL de hidrxido de sdio 5 M a 100 C por 30
minutos. Separar a camada aquosa e acidifc-la com cido
sulfrico 2,5 M. No deve ocorrer separao de nenhum
material oleoso ou slido.
No deve ocorrer liberao de odor irritante durante o
aquecimento. No mximo 0,05%.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Excipiente.
PETROLATO LQUIDO
Paraffnum liquidum
petrolato lquido; 09388
leos da parafna
[8012-95-1]
Mistura de hidrocarbonetos lquidos obtidos do petrleo.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido oleoso, lmpido, incolor e
no fuorescente luz do dia.
solvel em etanol e miscvel com hidrocarbonetos.
Densidade Relativa (5.2.5): 0,827 a 0,890.
Viscosidade (5.2.7): 110 mPa.s a 230 mPa.s.
IDENTIFICAO
da amostra apresenta mximos de absoro somente
intensidades relativas daquelas observados no espectro de
petrolato lquido SQR, preparado de maneira idntica.
a
p
B. Em um tubo de ensaio, ferver cuidadosamente 1 mL da
amostra, juntamente com 1 mL de hidrxido de sdio 0,1
M, com agitao contnua por em torno de 30 segundos.
Deixar esfriar a temperatura ambiente, formando duas
fases. Adicionar a fase aquosa 0,1 mL de fenolftalena SI.
Produz-se colorao rosa.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Agitar vigorosamente 10 mL de
amostra com 20 mL de gua fervente por 1 minuto. Separar
a fase aquosa e fltrar. A 10 mL de fltrado, adicionar 0,1
mL de fenolftalena SI. A soluo incolor. No mais que
0,1 mL de hidrxido de sdio 0,1 M so necessrios para
mudar a cor do indicador para rosa.
Hidrocarbonetos aromticos policclicos. Usar reagentes
para espectrofotometria. Introduzir 25 mL num funil de
separao com rolha esmerilhada de 125 mL. Adicionar
25 mL de hexano previamente agitado duas vezes com
5 mL de dimetilsulfxido. Misturar e adicionar 5 mL de
dimetilsulfxido. Agitar vigorosamente por 1 minuto e
deixar de repouso para formao de duas fases. Transferir
a camada de baixo para um segundo funil de separao e
adicionar mais 2 mL de hexano e agitar vigorosamente.
Deixar de repouso para formao de duas fases. Separar
a camada de baixo e medir a absorvncia (5.2.14) entre
260 nm a 420 nm Preparar branco em paralelo utilizando
a camada de baixo obtida na agitao vigorosa em funil de
separao de 5 mL de dimetilsulfxido com 25,0 mL de
hexano. Preparar uma soluo padro de naftaleno a 7 mg/L
em isooctano e medir a absorvncia a 275 nm, utilizando
isooctano como branco. Em nenhum comprimento de
onda entre 260 nm e 420 nm a absorvncia da soluo
teste excede um tero da absorvncia da soluo padro
a 275nm.
Substncias carbonizveis. Usar um tubo com rolha
esmerilhada de aproximadamente 125 mm de comprimento
e 18 mm de dimetro interno, graduado em 5 mL e 10
mL; lavar com soluo de limpeza cido crmico, rinsar
com gua e secar. Introduzir 5 mL da amostra e 5 mL de
cido sulfrico livre de nitrognio. Inserir a rolha e agitar
o mais vigorosamente possvel na direo longitudinal do
tubo por 5 segundos. Aps a retirada da tampa, colocar
imediatamente o tubo num banho de gua, evitando o
contato do tubo com o fundo ou lateral do banho, e aquecer.
Aps 2 minutos, 4 minutos, 6 minutos e 8 minutos remover
o tubo do banho e agitar o mais vigorosamente possvel na
direo longitudinal do tubo por cinco segundos. No fnal
de 10 minutos de aquecimento, remover o tubo do banho
de gua e deixar em repouso por 10 minutos. Centrifugar a
2000 g por 5 minutos. Transferir 4 mL da camada superior
para um tubo de ensaio limpo. A colorao no mais
intensa (5.2.12) que 4 mL de uma mistura de 0,6 mL de
uma soluo padro marrom e 9,4 mL de uma soluo
de cido clordrico a 1% (p/v). A camada inferior no
de colorao mais intensa que uma mistura de 0,5 mL de
Soluo base de sulfato cprico, 1,5 mL de Soluo base
de cloreto cobaltoso, 3 mL de Soluo base de cloreto
frrico e 2 mL de cido clordrico a 1% (p/v).
Parafnas slidas. Secar quantidade sufciente de amostra
por aquecimento a 100 C por 2 horas e resfriar num
dessecador com cido sulfrico. Acondicionar num tubo
de vidro com dimetro interno de 25 mm, fechar o tubo e
colocar em banho de gua gelada. Aps 4 horas, o lquido
sufcientemente translcido para se ver facilmente uma
linha preta de largura 0,5 mm num fundo branco, quando
posto verticalmente atrs do tubo.
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz
ROTULAGEM
CATEGORIA
PIPERAZINA
Piperazinum
N
H
N
H
C
4
H
10
N
2
; 86,14
piperazina; 07099
Piperazina
[110-85-0]
C
4
H
10
N
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Grumos ou focos brancos ou
esbranquiados, odor amoniacal.
Solubilidade. Solvel em gua e em etanol, insolvel em
ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): entre 109 C e 113 C.
IDENTIFICAO
A. Dissolver cerca de 0,2 g da amostra em 5 mL de
cido clordrico diludo e adicionar, com agitao, 1 mL
de soluo de nitrito de sdio a 50% (p/v). Resfriar em
banho de gelo por 15 minutos, agitar, se necessrio, para
induzir a cristalizao. Filtrar o precipitado em funil de
fundo poroso, lavar o precipitado com 10 mL de gua fria
a
p
1199
e dessecar a 105 C: a N,N-dinitrosopiperazina assim
obtida, funde entre 156 C e 160 C.
B. Responde s reaes do on citrato (5.3.1.1).
ENSAIOS DE PUREZA
diluir para 50 mL utilizando o mesmo solvente. A soluo
obtida no mais corada (5.2.12) que a soluo referncia
preparada pela adio de 2 mL de Soluo base de cloreto
frrico em gua e diluda para 50 mL com o mesmo
solvente, quando comparadas em tubos de Nessler.
Aminas Primrias e Amnia. Dissolver 0,2 g da amostra
em 10 mL de gua, adicionar 1 mL de acetona e 0,5 mL
de soluo recentemente preparada de nitroprusseto de
sdio a 10% (p/v). Misturar e deixar em repouso por 10
minutos. Medir a absorvncia (5.2.14) desta soluo a 520
nm e a 600 nm, preparando o branco da mesma maneira
que a soluo anteriormente descrita, exceto pela amostra.
A razo entre a absorvncia a 600 nm e a absorvncia a 520
nm no mximo 0,5 (equivale a cerca de 0,7% de aminas
primrias e amnia).
gua (5.2.20.1). No mximo 2%.
DOSEAMENTO
Titular potenciometricamente com cido perclrico 0,1 M
SV, utilizar o sistema eletrodo prata-vidro. Ao aproximar-
se o ponto de viragem, aquecer a soluo a 68-70 C, em
seguida completar a titulao. Realizar ensaio em branco e
fazer as correes necessrias. Cada mL de cido perclrico
0,1 M equivale a 4,307 mg de C
4
H
10
N
2.
Em recipientes hermticos protegidos da luz.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-helmntico.
PIRAZINAMIDA
Pyrazinamidum
N
N
NH
2
O
C
5
H
5
N
3
O; 123,11
pirazinamida; 07141
2-Pirazinacarboxamida
[98-96-4]
C
5
H
5
N
3
DESCRIO
branco. Inodoro ou praticamente inodoro.
Solubilidade. Ligeiramente solvel em gua, pouco solvel
em etanol, ter etlico e clorofrmio.
Faixa de fuso (5.2.2): 188 C a 191 C.
IDENTIFICAO
O teste A. poder ser omitido se forem realizados os testes
B.,C. e D. Os testes B. e C. podero ser omitidos se forem
realizados os testes A. e D.
observados no espectro de pirazinamida SQR, preparado
de maneira idntica.
de 200 nm a 400 nm, de soluo a 0,001% (p/v) em gua,
exibe mximos e mnimos idnticos aos observados no
espectro de soluo similar de pirazinamida SQR.
C. Dissolver 0,1 g da amostra em 5 mL de gua. Adicionar
1 mL de sulfato ferroso acidifcado SR. Desenvolve-se
colorao alaranjada. Adicionar 1 mL de hidrxido de
sdio SR. A soluo torna-se azul-escura.
D. Aquecer ebulio 20 mg da amostra com 5 mL de
hidrxido de sdio 5 M. Desprende-se odor caracterstico
de amnia.
ENSAIOS DE PUREZA
livre de dixido de carbono e diluir para 50 mL no mesmo
a
p
solvente. A soluo obtida lmpida (5.2.25) e incolor
(5.2.12).
Aspecto da soluo adicionar 0,5 mL de fenoftalena SI
e 0,2 mL de hidrxido de sdio 0,01 M. A soluo torna-
se rsea. Adicionar 1,0 mL de cido clordrico 0,01 M. A
soluo torna-se incolor. Adicionar 0,12 mL de vermelho
de metila SI. A soluo torna-se vermelha.
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de cido actico
glacial, gua e 1-butanol (20:20:60), como fase mvel.
Soluo (1): transferir 0,1 g da amostra para balo
volumtrico de 10 mL, diluir em mistura de metanol e
cloreto de metileno (1:9) e completar o volume com o
mesmo solvente.
de metanol e cloreto de metileno (1:9). Transferir 1 mL
desta soluo para balo volumtrico de 10 mL e completar
Soluo (3): transferir 10 mg de cido nicotnico SQR
para balo volumtrico de 10 mL, dissolver em mistura
de metanol e cloreto de metileno (1:9), adicionar 1 mL da
Soluo (1) e completar o volume com o mesmo solvente.
intensa que aquela obtida com a Soluo (2) (0,2%). O
teste somente vlido se o cromatograma obtido com a
Soluo (3) apresenta duas manchas principais nitidamente
separadas.
mximo 0,001% (10 ppm).
gua (5.2.20.1). No mximo 0,5%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
aquoso (5.3.3.5). Dissolver, exatamente, cerca de 0,1 g
da amostra em 50 mL de anidrido actico. Titular com
5
H
5
N
3
O.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Tuberculosttico.
PIRAZINAMIDA COMPRIMIDOS
5
H
5
N
3
O.
IDENTIFICAO
realizados os testes B., C. e D. O teste de identifcao B.
poder ser omitido se forem realizados os testes A., C. e D.
de p equivalente a 50 mg de pirazinamida com 50 mL
de etanol absoluto. Filtrar e evaporar o fltrado at secura.
Secar o resduo em estufa a 105 C por 30 minutos. O
resduo responde ao teste A. de Identifcao na monografa
de Pirazinamida.
de 200 nm a 400 nm da soluo amostra, obtida no mtodo
A. de Doseamento, exibe mximos de absoro idnticos
da Soluo amostra, obtida no mtodo B. do Doseamento,
D. Pesar e pulverizar os comprimidos. Ferver quantidade
do p equivalente a 20 mg de pirazinamida com 5 mL de
hidrxido de sdio 5 M. Desprende-se odor caracterstico
de amnia.
CARACTERSTICAS
contendo 350 mL de gua e aguardar desintegrao total
do comprimido. Prosseguir conforme descrito no mtodo
A. de Doseamento a partir de Deixar em ultrassom por
15 minutos....
a
p
1201
Tempo: 45 minutos
dissoluo e diluir, se necessrio, em gua at concentrao
utilizando o mesmo solvente para ajuste do zero. Calcular
a quantidade de C
5
H
5
N
3
O dissolvida no meio, comparando
as leituras obtidas com a da soluo de pirazinamida SQR
solvente. Alternativamente, realizar os clculos utilizando
A (1%, 1cm) = 650, em 268 nm, em gua.
declarada de C
5
H
5
N
3
ENSAIOS DE PUREZA
Substncias relacionadas na monografa de Pirazinamida.
quantidade do p equivalente a 0,1 g de pirazinamida em 50
mL de mistura de metanol e clorofrmio (1:9), agitar por 15
minutos. Filtrar, evaporar o fltrado at secura e dissolver o
resduo com o mesmo solvente, at completar 10 mL.
de metanol e clorofrmio (1:9). Transferir 1 mL desta
volume com o mesmo solvente.
Qualquer mancha obtida no cromatograma da Soluo (1),
diferente da mancha principal, no mais intensa do que
gua (5.2.20.1). No mximo 3,0%.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
a 0,1 g de pirazinamida para balo volumtrico de 500
mL contendo 350 mL de gua. Deixar em ultrassom
por 15 minutos e agitar mecanicamente por 15 minutos.
Completar o volume com o mesmo solvente. Homogeneizar
e fltrar. Diluir, em gua, at concentrao de 0,001%
(p/v). Preparar soluo padro na mesma concentrao
solues resultantes no comprimento de onda de 268 nm,
de C
5
H
5
N
3
O nos comprimidos a partir das leituras obtidas.
Alternativamente, realizar os clculos considerando A
(1%, 1cm) = 650, em 268 nm, em gua.
1,0 mL/minuto.
Fase mvel: transferir 0,6805 g de fosfato de potssio
em gua e completar o volume com o mesmo solvente.
Transferir a soluo obtida para balo volumtrico de
1000 mL. Adicionar 18 mL de hidrxido de sdio 0,2 M e
completar o volume com gua. Ajustar o pH para 3,0 0,2
com cido fosfrico. Misturar 10 mL de acetonitrila com
1000 mL dessa soluo, fltrar e desgaseifcar.
pirazinamida para balo volumtrico de 100 mL,
acrescentar 70 mL de gua. Deixar em ultrassom por 15
minutos e agitar mecanicamente por 15 minutos. Completar
mL e completar o volume com gua.
Soluo padro: transferir 50 mg de pirazinamida SQR para
balo volumtrico de 50 mL, dissolver em gua e completar
o volume com o mesmo solvente. Transferir 1 mL desta
volume com gua, obtendo soluo a 40 ug/mL.
Soluo de resoluo: transferir 1 mL de cido clordrico
com a Soluo padro. Deixar esta soluo em banho
de gua fervente por 5 minutos, para formao do cido
pirazinico. Resfriar.
da coluna no deve ser menor que 2500 pratos tericos. O
fator de cauda no deve ser superior a 1,3. Injetar replicatas
de 20 uL da Soluo de resoluo. Os tempos de reteno
relativos so cerca de 0,45 para o cido pirazinico e 1,0
para a pirazinamida. A resoluo entre o cido pirazinico
e a pirazinamida no deve ser menor que 6,0.
5
H
5
N
3
O nos
comprimidos a partir das respostas obtidas para as Solues
padro e amostra.
a
p
ROTULAGEM
PIRIMETAMINA
Pyrimethaminum
N
N
Cl
NH
2
NH
2
CH
3
C
12
H
13
ClN
4
; 248,71
pirimetamina; 07170
5-(4-Clorofenil)-6-etil-2,4-pirimidinodiamina
[58-14-0]
C
12
H
13
ClN
4
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino quase branco ou
cristais incolores.
Solubilidade. Praticamente insolvel em gua, ligeiramente
solvel em etanol, muito pouco solvel em ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 239 C a 243 C.
IDENTIFICAO
pirimetamina SQR.
em cido clordrico 0,1 M, preparada com aquecimento,
se necessrio, exibe mximos e mnimos somente nos
mesmos comprimentos de onda de soluo similar de
pirimetamina SQR.
posio e intensidade quela obtida com a Soluo (3).
D. Transferir para cadinho, cerca de 1 g de amostra e 5
g de carbonato de sdio anidro. Misturar e aquecer at a
ignio. Resfriar, adicionar 5 mL de gua quente, deixar
em ultrassom por 5 minutos, fltrar e neutralizar o fltrado
com cido ntrico. A soluo resultante responde s reaes
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez ou alcalinidade. Transferir 1 g da amostra para
balo volumtrico de 50 mL, adicionar 30 mL de gua,
agitar por 2 minutos, completar o volume com o mesmo
solvente e fltrar. A 10 mL da soluo, adicionar 0,5 mL de
fenolftaleina SI. No mximo 0,2 mL de hidrxido de sdio
0,01 M gasto para promover a viragem do indicador.
Adicionar 0,05 mL de vermelho de metila SI e 0,4 mL
de cido clordrico 0,01 M. Desenvolve-se colorao
vermelha ou alaranjada.
slica-gel GF
254
lcool n-proplico, cido actico glacial e tolueno
metanol e clorofrmio (1:9).
de metanol e clorofrmio (1:9).
Soluo (3): soluo a 1 mg/mL de pirimetamina SQR em
mistura de metanol e clorofrmio (1:9).
de metanol e clorofrmio (1:9). Transferir 1 mL dessa
volume com a mesma mistura de solventes.
Sulfatos (5.3.2.2). Transferir 1 g da amostra para balo
volumtrico de 50 mL, adicionar 30 mL de gua, agitar por
2 minutos, completar o volume com o mesmo solvente e
fltrar. Utilizar 15 mL do fltrado. Preparar soluo padro
de sulfato na concentrao de 0,001% (10 ppm). No
mximo 0,008% (80 ppm).
amostra. Dessecar em estufa entre 100 C e 105 C, por 4
No mximo 0,1%.
a
p
1203
DOSEAMENTO
g da amostra e dissolver em 25 mL de cido actico
glacial, aquecendo suavemente. Resfriar e titular com
potenciometricamente. Realizar ensaio em branco e efetuar
12
H
13
ClN
4
.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Antimalrico e antitoxoplasmose.
PIRIMETAMINA COMPRIMIDOS
12
H
13
ClN
4
.
IDENTIFICAO
quantidade do p equivalente a 0,2 g de pirimetamina
para bquer e adicionar 25 mL de acetona, aquecer
ebulio por 2 minutos e fltrar atravs de cadinho de vidro
sinterizado. Repetir este tratamento trs vezes com pores
de 25 mL de acetona. Evaporar os fltrados combinados
em banho-maria secura, com auxlio de corrente de ar. O
no espectro de pirimetamina SQR, preparado de maneira
idntica.
de Doseamento, apresenta mximos de absoro somente
soluo padro, preparada de maneira idntica.
CARACTERSTICAS
Teste de Dureza (5.1.3.1). Cumpre o teste
Tempo: 45 minutos
dissoluo, fltrar e diluir com cido clordrico 0,1 M at
12
H
13
ClN
4
dissolvida no
de pirimetamina SQR na concentrao de 0,001% (p/v),
declarada de C
12
H
13
ClN
4
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
25 mg de pirimetamina para balo volumtrico de 100 mL
e adicionar 50 mL de cido clordrico 0,1 M. Aquecer em
banho-maria por 10 minutos e deixar em ultrassom por
30 minutos. Resfriar, completar o volume com o mesmo
solvente. Filtrar. Transferir 5 mL do fltrado para balo
clordrico 0,1 M, obtendo soluo a 12,5 g/mL. Preparar
soluo de pirimetamina padro nas mesmas condies.
cido clordrico 0,1 M para ajuste do zero. Calcular o teor de
C
12
H
13
ClN
4
nos comprimidos, a partir das leituras obtidas.
Alternativamente, realizar os clculos considerando A (1%,
1 cm) = 316, em 272 nm, em cido clordrico 0,1 M.
ROTULAGEM
a
p
PIROXICAM CPSULAS
15
H
13
N
3
O
4
S.
IDENTIFICAO
A. A mancha principal do cromatrograma da Soluo (2),
de 200 a 400 nm, da Soluo amostra obtida no mtodo A.
de Doseamento, exibe mximo de absoro em 354 nm,
idntico ao observado no espectro da Soluo padro.
CARACTERSTICAS
Proceder conforme mtodo B. de Doseamento.
Tempo: 45 minutos
Procedimento: aps o teste, retirar alquota de 10 mL do
meio de dissoluo, fltrar e diluir em cido clordrico 0,1
M at a concentrao adequada. Medir as absorvncias das
15
H
13
N
3
O
4
S
dissolvida no meio usando o valor de A(1%, 1 cm) = 352,
em 242 nm, em cido clordrico 0,1 M.
Tolerncia: No menos que 70% (Q) da quantidade
declarada de C
15
H
13
N
3
O
4
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de tolueno e
cido actico glacial (90:10), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): misturar quantidade do p contendo 80 mg de
piroxicam com 25 mL de cloreto de metileno, fltrar e levar
o fltrado a secura usando evaporador rotatrio. Dissolver
o resduo em 2 mL de cloreto de metileno.
Soluo (2): diluir 1 mL da Soluo (1) em 20 mL de
Soluo (3). preparar soluo de piroxicam SQR a 2 mg/
mL em cloreto de metileno.
Soluo (4). diluir 2 mL da Soluo (2) em 50 mL de
com a Soluo (1) no mais intensa que aquela obtida no
cromatograma com a Soluo (4). Desconsiderar qualquer
mancha remanescente na linha de aplicao.
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
(10 m), mantidas a temperatura ambiente, fuxo da Fase
mvel de 2 mL/minuto. Preparar as solues como descrito
a seguir:
Tampo fosfato de sdio dibsico: dissolver 5,35 g de
fosfato de sdio dibsico dodecaidratado em 100 mL de
gua. Dissolver 7,72 g de cido ctrico em 400 mL de gua.
Transferir as duas solues para balo volumtrico de 1000
mL e completar o volume com gua.
Fase mvel: mistura de metanol e Tampo fosfato de sdio
dibsico (60:40).
cpsulas. Transferir quantidade de p equivalente a 10
mg de piroxicam para balo volumtrico de 200 mL,
adicionar 150 mL de cido clordrico metanlico 0,01 M,
agitar e deixar em ultrassom a temperatura ambiente por
30 minutos. Resfriar e completar o volume com o mesmo
solvente. Filtrar a soluo com fltro quantitativo.
Soluo padro: preparar soluo a 0,005% (p/v) de
piroxicam SQR em cido clordrico metanlico 0,01 M.
Submeter a soluo, se necessrio, a banho de ultrassom a
15
H
13
N
3
O
4
S,
a
p
1205
remover o contedo e pes-las novamente. Homogeneizar
o contedo das cpsulas. Transferir quantidade de p
equivalente a 25 mg de piroxicam para balo volumtrico
de 250 mL e completar o volume com hidrxido de sdio
0,1 M. Diluir, sucessivamente, com o mesmo solvente, at
concentrao fnal de 10 g/mL. Preparar a soluo padro
na mesma concentrao utilizando o mesmo solvente.
hidrxido de sdio 0,1 M para ajuste do zero. Calcular o
teor de C
15
H
13
N
3
O
4
S nas cpsulas, a partir das respostas
obtidas para a Solues padro e a Soluo amostra.
ROTULAGEM
PIROXICAM GEL
15
H
13
N
3
O
4
S.
IDENTIFICAO
254
,
como suporte, e mistura de acetato de etila, metanol e
cido actico glacial (80: 10: 1), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): misturar quantidade de gel contendo 10 mg
de piroxicam com 0,1 mL da soluo saturada de cido
clordrico at que a soluo fque turva. Diluir para 5 mL
com cido clordrico metanlico 0,01 M. Agitar bem,
centrifugar e utilizar a soluo sobrenadante lmpida.
Filtrar a soluo sobrenadante se necessrio.
Soluo (2): preparar soluo com concentrao
equivalente a 0,2% (p/v) de piroxicam SQR com cido
clordrico metanlico 0,01 M.
mancha principal obtida com a Soluo (1) similar em
posio e em tamanho quela obtida no cromatograma da
Soluo (2).
CARACTERSTICAS
pH (5.2.19). 7,2 a 8,2. Determinar em soluo do gel a
10% (p/v).
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
com slica quimicamente ligada a grupo octilsilano (3 m a
10 m), e pr-coluna de 100 mm de comprimento e 4,6 mm
de dimetro interno quimicamente ligada a octilsilano (5
m), mantidas a temperatura de 40 C, fuxo da Fase mvel
de 1,0 mL/minuto. Preparar as solues como descrito a
seguir:
Fase mvel: mistura de fosfato de sdio dibsico di-
hidratado 0,05 M, com o pH ajustado para 3,5 com cido
fosfrico, acetonitrila e metanol (55:30:15).
Soluo amostra: transferir quantidade de gel equivalente
a 5 mg de piroxicam para balo volumtrico de 100 mL,
adicionar 5 mL de cido clordrico metanlico 0,01 M e
agitar por 30 minutos. Adicionar 50 mL de Fase mvel e
agitar vigorosamente por 30 minutos. Completar o volume
com a Fase mvel e agitar. Filtrar a soluo com fltro de
microfbra de vidro de 1,0 m de dimetro de poro.
Soluo padro: preparar uma soluo a 0,10% (p/v) de
piroxicam SQR em cido clordrico metanlico 0,01 M.
Submeter a soluo, se necessrio, a banho de ultrassom
a temperatura ambiente. Retirar alquota de 5 mL dessa
soluo, transferir para balo volumtrico de 100 mL e
15
H
13
N
3
O
4
S,
ROTULAGEM
a
p
PITANGUEIRA
Eugeniae folium
Eugenia unifora L. MYRTACEAE
A droga vegetal constituda pelas folhas secas da espcie,
contendo no mnimo, 5,0% de taninos, 1,0% de favonoides
totais, expressos em quercetina; e, 0,8% de leos volteis.
O leo voltil constitudo de, no mnimo, 27,0% de
curzerenos (cis e trans).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. As folhas secas
apresentam odor ctrico e sabor picante.
DESCRIO MACROSCPICA
Folhas simples, ovais laceoladas, em geral com 4,5 cm
a 6,2 cm de comprimento e 2,0 cm a 2,7 cm de largura,
glabras, membranceas a levemente coriceas, com pice
agudo a acuminado, por vezes levemente falcado, base
aguda a obtusa, margem inteira, peninrveas, com nervura
principal mais proeminente na regio mediano basal da
face abaxial. Nervao camptdromo-broquiddroma,
cada nervura secundria partindo em ngulo agudo em
relao principal, anastomosando-se com sua superior
subsequente, de modo a formar uma srie de arcos nas
proximidades do bordo foliar; as nervuras secundrias e
de ordem superior determinam arolas incompletas, com
terminaes vasculares livres. Pecolo com 0,3 cm a 0,6
cm de comprimento. No material seco, a face adaxial da
lmina verde escura e a abaxial mais clara. As glndulas,
presentes na lmina, difcilmente so visualizadas sem
auxlio de lentes.
DESCRIO MICROSCPICA
Folhas hipoestomticas, de mesoflo dorsiventral. Em
seco transversal, a lmina foliar apresenta epiderme
uniestratifcada, recoberta por espessa camada de cutcula.
Os estmatos so do tipo paractico, ocorrendo na mesma
altura que as clulas epidrmicas fundamentais. Estas, em
ambas as faces, mostram dimenses variadas e paredes
anticlinais sinuosas. Nas clulas-guarda o espessamento
da face interna proeminente, sendo visualizado na forma
de alteres. O parnquima palidico uniestratifcado e
acompanhado por clulas coletoras. As clulas em paliada
ocupam de 25,0% a 30,0% do mesoflo, sendo em geral,
de dimenses menores na poro basal da lmina. O
parnquima esponjoso possui de sete a nove estratos de
clulas com projees braciformes relativamente longas, o
que permite a formao de amplos espaos intercelulares.
No mesoflo so comuns idioblastos cristalferos contendo
cristais rmbicos de oxalato de clcio e drusas, sendo
estas mais abundantes especialmente junto aos feixes
vasculares. Cavidades secretoras esquizolisgenas, em
mdia com 60 m de dimetro, contendo gotas de leo,
so comuns subjacentes epiderme, em ambas as faces
foliares, embora mais abundantes na face adaxial. As duas
a quatro clulas epidrmicas que recobrem externamente
a cavidade secretora apresentam paredes internas retas. O
epitlio destas cavidades, em seco transversal, formado
por cinco a oito clulas. Na regio da nervura principal,
de contorno plano-convexo, ou raramente levemente
cncavo-convexo ou biconvexo, ocorrem subjacentes
epiderme uma a trs camadas de colnquima anelar com
espessamentos tnues. O feixe vascular principal do tipo
bicolateral, em arco aberto, envolto por dois a trs estratos
de clulas parenquimticas de paredes espessadas, e uma
bainha de fbras, exceto nas extremidades do arco. O foema
apresenta abundncia de cristais rmbicos de pequenas
dimenses. As nervuras secundrias e as de menor calibre
so colaterais, com calotas de fbras em ambos os plos
dos tecidos condutores. O pecolo, de contorno cncavo-
convexo, apresenta pequenas expanses laterais. A epiderme
uniestratifcada, contendo substncias de colorao
castanha, tambm presente nas clulas do parnquima
fundamental subjacente, colenquimatoso, o qual apresenta
todas as suas clulas com tnues espessamentos em
celulose. Cavidades secretoras, semelhantes s da lmina,
tambm esto presentes subepidermicamente. Gros de
amido, drusas e cristais ocorrem em abundncia por todo
o parnquima fundamental. O feixe vascular confgura-se
em arco aberto, bicolateral, com abundncia de cristais
rmbicos no foema, envolto por quatro a oito camadas de
tecido parenquimtico de paredes espessadas, formando
uma bainha perivascular. Fibras, isoladas ou em grupos de
dois a trs elementos, raramente esto presentes ao redor
do feixe vascular.
caractersticas: fragmentos de epiderme da lmina com
paredes anticlinais sinuosas (face adaxial); fragmentos de
epiderme com estmatos paracticos; fragmentos da lmina
que, por transparncia, permitem a visualizao de cristais
rmbicos, drusas em abundncia e cavidades secretoras de
aspecto brilhante devido presena de gotas de leo.
IDENTIFICAO
254
, com
espessura de 250 um, como fase estacionria e mistura
de acetato de etila, cido frmico e gua (75:5:5), como
banda, 20 uL da Soluo (1) e 10 uL da Solues (2) e da
moda, acrescentar 100 mL de gua e aquecer sob refuxo
por 15 minutos. Aps resfriamento temperatura ambiente,
fltrar a soluo obtida em algodo, sob presso reduzida.
Extrair a fase aquosa resultante com trs pores de 25 mL
de acetato de etila em funil de separao de 125 mL. Deixar
em repousou em freezer a temperatura de -18 C durante
15 minutos, para total separao das fases. Reunir e fltrar
as fraes orgnicas com 5 g de sulfato de sdio anidro.
a
p
1207
Evaporar a frao orgnica em evaporador rotatrio sob
presso reduzida at resduo. Ressuspender o resduo com
1 mL de metanol.
Soluo (2): pesar cerca de 1 mg de epicatequina e dissolver
em 2 mL de metanol.
Soluo (3): pesar cerca de 1 mg de 4-O-metilgalocatequina
e dissolver em 1 mL de metanol.
secar em capela de exausto. Nebulizar a placa com
soluo de cloreto frrico a 1% (p/v) em metanol. O
cromatograma obtido com a Soluo (1) apresenta duas
manchas de colorao cinza azulada, na mesma altura que
as verifcadas nos cromatogramas obtidos com a Soluo
(2) e a Soluo (3) (Rf de aproximadamente 0,85 e 0,87,
respectivamente), no quadrante central so observadas
duas manchas de colorao castanho azulada.
B. Para a identifcao de curzerenos, proceder conforme
cromatgrafo provido de detector de espectrometria de
massas; coluna capilar de 30 m de comprimento e 0,25 mm
de dimetro interno, preenchida com propilenoglicol, com
espessura do flme de 0,25 um; temperatura da coluna de
60 C a 250 C, a 3 C por minuto (total de 80 minutos),
temperatura do injetor a 220 C e temperatura do detector
a 230 C; utilizar hlio a uma presso de 80 kpa como gs
de arraste com fuxo de 1 mL/minuto. Utilizar mistura de
nitrognio, ar sinttico e hidrognio (1:1:10) como gases
auxiliares.
(2:100).
Os ismeros do curzereno devem apresentar tempo de
reteno relativo de aproximadamente 1845.
Calcular o ndice de Reteno (IK), segundo a expresso:
em que
molecular;
tr
x
tr
z
e tr
z+1
);
tr
z
tr
z+1
C. Aquecer, sob refuxo, cerca de 3 g da droga pulverizada
com 60 mL de gua destilada durante 15 minutos. Esfriar
e fltrar. A 2 mL do extrato adicionar duas gotas de cido
clordrico SR e gotejar gelatina SR. O aparecimento de
precipitado ntido indica reao positiva para taninos.
adicionar 10 mL de gua e duas a quatro gotas de soluo de
cloreto frrico a 1% (p/v) em etanol. O desenvolvimento de
colorao cinza-escura indica reao positiva para taninos.
vermelha indica reao positiva para taninos.
f. A 5 mL do extrato obtido no teste B. de Identifcao,
G. A 5 mL do extrato obtido no teste B. de Identifcao,
adicionar pequenos fragmentos de magnsio metlico e
1 mL de cido cloridrco. O aparecimento de colorao
vermelha indica a presena de agliconas favonodicas.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 10,0%.
Transferir exatamente cerca de 1 g da droga vegetal moda
(180 um), para erlenmeyer contendo 50 mL de gua
fervente. Manter sob fervura moderada durante 15 minutos.
Resfriar, fltrar em algodo para balo volumtrico de
100 mL. Completar o volume, atravs do fltro, at 100
mL. Distribuir o decocto obtido em 10 tubos de ensaio
com tampa (16 mm de dimetro por 16 cm de altura), em
uma srie sucessiva de 1 mL, 2 mL, 3 mL, at 10 mL, e
ajustar o volume do lquido em cada tubo a 10 mL com
gua. Tampar os tubos e agit-los vigorosamente com
movimentos verticais por 15 segundos, com duas agitaes
por segundo. Deixar em repouso por 15 minutos e medir a
altura da espuma. Aps, adicionar em cada tubo 1 mL de
cido clordrico 2 M. Se a altura da espuma de todos os
tubos for inferior a 1 cm, o ndice de espuma menor do
medida permanecer igual ou superior a 1 cm, a diluio
do material vegetal nesse tubo (A) o ndice observado.
Calcular o ndice de espuma (IE), segundo a expresso:
em que
A = volume (mL), do decocto usado para preparao da
diluio no tubo o qual a espuma foi observada.
O IE para o decocto deve ser no mnimo de 125.
a
p
DOSEAMENTO
Taninos totais
a seguir.
Soluo estoque: pesar exatamente cerca de 0,75 g da droga
pulverizada (250 um) e transferir para um erlenmeyer de
250 mL com boca esmerilhada. Adicionar 150 mL de gua
destilada. Aquecer em banho-maria durante 30 minutos
temperatura de 60 C. Resfriar em gua corrente e transferir
para um balo volumtrico de 250 mL. Lavar o erlenmeyer
e transferir as guas de lavagem com todo contedo de
droga vegetal para o mesmo balo volumtrico. Completar
o volume com gua destilada. Deixar decantar e fltrar o
lquido sobrenadante em papel de fltro. Desprezar os
1
gua destilada. Transferir volumetricamente 2 mL dessa
2
) aps
Soluo padro: dissolver imediatamente antes do uso 50
mg de pirogalol em balo volumtrico de 100 mL com gua
destilada. Transferir volumetricamente 5 mL da soluo
3
) aps
em que
A
1
totais;
A
2
A
3
m
1
= massa da amostra utilizada no ensaio (g), considerando
a determinao de gua;
m
2
flavonoides totais
a seguir.
droga moda (240 um), e transferir para um balo de
fundo redondo de 100 mL. Adicionar 1 mL de soluo de
metenamina a 0,5% (p/v) em gua, 20 mL de acetona e 2 mL
de cido clordrico. Aquecer sobre manta de aquecimento,
mantendo sob refuxo, por 30 minutos. Filtrar atravs de
pequena quantidade de algodo para um balo volumtrico
de 100 mL. Lavar o resduo da droga e o algodo, no
mesmo balo de fundo redondo, com 20 mL acetona.
Manter sob refuxo, por 10 minutos, e fltrar em algodo
para o mesmo balo volumtrico de 10 mL. Repetir essa
operao mais uma vez. Resfriar temperatura ambiente,
e completar o volume com acetona. Transferir 20 mL de
soluo acetnica, para funil de separao (125 mL), 20
mL de gua destilada e extrair com uma poro de 15 mL
de acetato de etila, repetir a extrao por trs vezes, com
pores de 10 mL de acetato de etila. Reunir as fases acetato
de etila e lavar em funil de separao com duas pores de
50 mL de gua destilada. Transferir a fase acetato de etila
com acetato de etila.
Soluo amostra: transferir volumetricamente 10 mL
da Soluo estoque para balo volumtrico de 25 mL,
adicionar 1 mL da soluo de cloreto de alumnio a 2%
(p/v) em metanol, completar o volume com soluo
metanlica de cido actico a 5% (v/v).
Soluo branco: transferir 10 mL da Soluo estoque para
soluo metanlica de cido actico a 5% (v/v).
Medir a absorvncia da Soluo amostra a 425 nm, em
cubeta com 1 cm de espessura, 30 minutos aps seu preparo,
utilizando a Soluo branco para ajuste do zero. Calcular
o teor favonoides totais, expressos em quercetina, na
amostra segundo a expresso. Considerar a absortividade
especfca da quercetina como A(1%, 1 cm) = 500.
em que
Pd = perda por dessecao (%; p/p).
a
p
1209
leos volteis
volteis em drogas vegetais (5.4.2.7). Utilizar balo de
1000 mL contendo 500 mL de gua destilada como lquido
de destilao e 0,5 mL de xileno, que deve ser introduzido
pela abertura lateral K. Utilizar planta seca rasurada e no
contundida. Proceder determinao de leo voltil, a
partir de 100 g da droga rasurada. Destilar durante quatro
horas.
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e do calor
a
p
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos em Eugenia unifora L.
_____________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 1 cm; em B a 5 mm; em C a 1 mm; em D, E, f e G a 50 m.
A representao esquemtica da folha, em vista frontal: nervura principal (np). B detalhe esquemtico de poro da lmina mostrando a nervao
foliar: nervura principal (np); nervura secundria (ns). C detalhe esquemtico de arolas e terminaes vasculares: cavidade secretora (cs). D e
E detalhes parciais da face adaxial e abaxial da lmina foliar, respectivamente, em vista frontal: cavidade secretora (cs); clula-guarda (cg); clula
subsidiria (csb); estmato (es). f detalhe parcial da face adaxial da lmina foliar, em vista frontal, mostrando uma cavidade secretora visualizada
por transparncia: estmato (es). G detalhe parcial da lmina, em seco transversal, mostrando complexos estomticos geminados: parnquima
esponjoso (pj); cmara subestomtica (csu); face abaxial (ab); clula subsidiria (csb); estmato (es); clula-guarda (cg); epiderme (ep).

a
p
1211
ic
H
cs
I
G
co
f
cs
ep
ic
x
ab
ad
ff
pp
E
f
x
ff
fx
f
D
pj
fv
ic
pj
fx
ff
J
cs
ep
ic
f
x
ad
ab
ad
B
ic
ab
ep
ep
C
fv
pj
ei
A
cs
cu
ep
ep
ad
ab
pj
pp
ei
ic
pp
figura 2: Eugenia uniflora L. - A e B. detalhes parciais do mesofilo de diferentes
amostra, em seces transversais; C e D. fragmentos do p mostrando detalhes do
parnquima esponjoso; E e F. detalhes parciais, em seces transversais, de uma nervura
secundria e uma terciria, respectivamente; G a I. diagramas da nervura principal, em
seces transversais, nas regies mediana (G) e basal de diferentes amostras (H e I); J.
diagrama, em seco transversal, do pecolo. ab: face abaxial, ad: face adaxial, co:
colnquima, cs: cavidade secretora, cu: cutcula, ei: espao intercelular, ep: epiderme, f:
floema, ff: fibras do floema, fv: feixe vascular, fx: fibras do xilema, ic: idioblasto
cristalfero, pj: parnquima esponjoso, pp: parnquima palidico, x: xilema. Escalas e
correspondncias: (A e B) 100 m, 50 m (C, D, E e F), 100 m (G, H e I), 200 m (J).
figura 2 Aspectos microscpicos em Eugenia unifora L.
_____________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A e B a 100 m; em C, D, E e f a 50 m; em G, H e I a 100 m; em J a 200 m.
A e B detalhes parciais do mesoflo de diferentes amostras, em seces transversais: face abaxial (ab); face adaxial (ad); epiderme (ep); cutcula (cu);
cavidade secretora (cs); idioblasto cristalfero (ic); parnquima esponjoso (pj); parnquima palidico (pp); espao intercelular (ei). C e D fragmentos
do p mostrando detalhes do parnquima esponjoso: parnquima esponjoso (pj); espao intercelular (ei); feixe vascular (fv); idioblasto cristalfero (ic).
E e f detalhes parciais, em seces transversais, de um nervura secundria e uma terciria, respectivamente: parnquima palidico (pp); fbras do
xilema (fx); xilema (x); foema (f); fbras do foema (ff); parnquima esponjoso (pj). G, H e I diagramas da nervura principal, em seces transversais,
nas regioes mediana (G) e basal de diferentes amostras (H e I): face abaxial (ab); face adaxial (ad); epiderme (ep); xilema (x); colnquima (co); foema
(f); parnquima palidico (pp); fbras do foema (ff); idioblasto cristalfero (ic); cavidade secretora (cs). J diagrama, em seco transversal, do
peciolo: face abaxial (ab); face adaxial (ad); cavidade secretora (cs); epiderme (ep);foema (f); idioblasto cristalfero (ic); xilema (x).
PLASMA HUMANO PARA
fRACIONAMENTO
Plasma Humanum ad Separationem
Plasma humano para fracionamento a parte lquida
remanescente do sangue total aps separao das fraes
celulares sanguneas, utilizando sistema fechado de coleta
de sangue apropriado que cumpra os requisitos exigidos
para os recipientes de plsticos utilizados na coleta do
sangue humano, contendo uma soluo anticoagulante
conservadora e preservadora ou separada por fltrao
contnua ou por centrifugao do sangue anticoagulado
no procedimento de afrese para obteno de produtos
derivados do plasma humano.
DOADORES
Somente o plasma de um doador saudvel e cuidadosamente
selecionado que, aps exames mdicos, testes sanguneos
laboratoriais, estudo de sua histria mdica e isento de
agentes infecciosos transmissveis pelo plasma, pode
ser aceito para coleta de seu plasma para fracionamento.
Reportar-se legislao vigente para produtos
hemoterpicos.
Imunizao dos doadores. Plasma proveniente de
imunizao deliberada de doadores para a obteno de
gamaglobulinas hiperimunes pode ser utilizado para
a
p
fracionamento, quando quantidades sufcientes desse
material no puderem ser obtidas de doadores naturalmente
imunizados. Recomenda-se que a imunizao dos doadores
seja realizada em conformidade com os procedimentos
adotados pela Organizao Mundial de Sade (OMS).
Registro. Dados e informaes sobre os doadores e doaes
realizadas devem ser mantidos de forma que possibilite
a confdencialidade da identidade do doador, a origem
de cada doao no pool de plasma e a rastreabilidade
correspondente aos testes laboratoriais.
Testes laboratoriais. Testes laboratoriais devidamente
validados so realizados a cada doao para detectar
marcadores virais e outros agentes infecciosos, como os
descritos a seguir.
A. Anticorpos contra o vrus tipo 1 e tipo 2 da
imunodefcincia humana (anti-HIV-1 e anti-HIV-2).
B. Antgeno de superfcie do vrus da Hepatite B (HBsAg).
C. Anticorpos contra o vrus da Hepatite C (anti-HCV).
Os mtodos analticos utilizados devem apresentar
sensibilidade e especifcidade adequadas. Se um resultado
positivo repetido for encontrado em qualquer um dos testes
a doao deve ser rejeitada.
UNIDADES INDIVIDUAIS DE PLASMA
O plasma deve ser preparado por um mtodo que remova
completamente, tanto quanto possvel, as demais fraes
celulares por centrifugao do sangue total. Seja obtido a
partir do sangue total ou por afrese. O plasma deve ser
separado de suas clulas por um mtodo desenvolvido
para prevenir a introduo de micro-organismos. Nenhum
agente antibacteriano ou antifngico pode ser adicionado ao
plasma. Os sistemas de envase para coleta e processamento
do sangue humano devem satisfazer s exigncias para os
sistemas fechados de coleta de sangue humano, devendo
prevenir qualquer possibilidade de contaminao.
Se duas ou mais unidades forem misturadas antes do
congelamento, a operao deve ser feita utilizando-se
conectores estreis ou sob condies asspticas, com
recipientes que no tenham sido previamente utilizados.
Quando obtido por plasmafrese ou sangue total (aps
a separao dos elementos celulares), o plasma pode
ser destinado recuperao de protenas lbeis quando
congelado dentro das 24 horas desde a coleta, com
resfriamento rpido, sob condies validadas para
assegurar que a temperatura de -25 C ou inferior seja
atingida no interior de cada unidade de plasma dentro de
12 horas do incio da insero no congelador.
Quando obtido por plasmafrese, o plasma destinado
somente para a recuperao de protenas no-lbeis deve
ser congelado por resfriamento rpido em cmara fria a -20
C ou inferior, to logo quanto possvel, no ultrapassando
24 horas aps a coleta.
Quando obtido por sangue total, separado dos elementos
celulares, o plasma destinado somente para a recuperao
de protenas no-lbeis deve ser congelado por resfriamento
rpido em cmara fria a -20 C ou inferior, to logo quanto
possvel, no ultrapassando 72 horas aps a coleta.
No necessrio determinar o teor de protenas totais e
fator VIII, descritos em Doseamento, em cada unidade
de plasma. Essas determinaes so parmetros das boas
prticas de fabricao, sendo o teste Fator VIII relevante
para uso nas preparaes de concentrados de protenas
lbeis.
O contedo proteico total em cada unidade de plasma
depende do contedo de protenas no soro do doador e do
grau de diluio inerente ao procedimento de doao.
Quando o plasma obtido de um doador selecionado
e utilizando uma proporo adequada da soluo
anticoagulante conservadora e preservadora, o contedo
proteico total obtido se encontra no limite mnimo de 50
g/L. Se o volume de sangue ou plasma coletado junto com
a soluo anticoagulante conservadora e preservadora for
menor do que o estabelecido, o plasma resultante no
necessariamente inadequado para o fracionamento. O
objetivo pretendido com as boas prticas de fabricao
deve ser atingir o limite prescrito para todas as doaes
normais.
A preservao do fator VIII da coagulao humana
depende do procedimento da coleta e, subsequentemente,
do manuseio da unidade de plasma. Com boas prticas,
0,7 UI/mL pode ser usualmente alcanada nas unidades
de plasma, no entanto unidades de plasma com atividades
de fator VIII inferior ainda podem ser adequadas para a
produo de concentrados de fatores de coagulao. O
objetivo pretendido com as boas prticas de fabricao
preservar, no mximo possvel, as protenas lbeis.
MISTURAS DE PLASMA (POOL DE PLASMA)
Durante a fabricao de derivados plasmticos, a primeira
mistura do pool de plasma (por exemplo, depois da
remoo do crioprecipitado) deve ser testada para o
antgeno de superfcie do vrus B da Hepatite (HBsAg)
e para anticorpos contra HIV utilizando mtodos de
sensibilidade e especifcidade adequados. Os resultados
devem ser negativos em todos os ensaios.
Tambm, deve ser realizado um ensaio para RNA do vrus
da Hepatite C utilizando uma tcnica de amplifcao
de cidos nuclicos validada. No ensaio incluem-se um
controle positivo com 100 UI/mL de RNA do vrus da
Hepatite C e, para testar inibidores, um controle interno
preparado pela adio do marcador adequado a uma
amostra de pool de plasma. O ensaio no valido se o
controle positivo no for reativo ou se o resultado obtido
A mistura de plasma satisfaz o ensaio se no for reativa para
o RNA do vrus da Hepatite C. O teste deve ser realizado
comparando com um padro internacional reconhecido
pela OMS.
a
p
1213
CARACTERSTICAS
Aspecto. Antes do congelamento, o plasma para
fracionamento, um lquido claro ou levemente turvo sem
sinais de hemlise visveis, pode variar em cor de um tom
levemente amarelo a esverdeado.
DOSEAMENTO
fator VIII:C
VIII da coagulao sangunea humana lioflizado
(5.5.1.7). Realizar o teste utilizando um pool de plasma
com no menos que 10 unidades da amostra de plasma. Se
necessrio, descongelar as amostras a serem examinadas
a uma temperatura que no exceda a 37 C. Utilizar
um plasma de referncia calibrado contra um Padro
Internacional de Fator VIII. A atividade no menor que
0,7 UI/mL.
Protenas totais
Proceder conforme descrito em Determinao de
nitrognio pelo mtodo de Kjeldahl (5.3.3.2). Realizar
o teste utilizando uma mistura com no menos que 10
unidades de plasma. Diluir a mistura de plasma com uma
soluo de cloreto de sdio a 0,9% (p/v) de forma a obter
uma soluo contendo cerca de 15 mg de protena em 2 mL.
A um tubo de centrfuga de fundo arredondado, adicionar 2
mL dessa soluo, 2 mL de soluo de molibdato de sdio
a 7,5% (p/v) e 2 mL de mistura de cido sulfrico livre
de nitrognio e gua (1:30). Agitar, centrifugar durante 5
minutos, decantar o lquido sobrenadante e inverter o tubo,
possibilitando que o seu contedo escorra sobre papel de
fltro. Determinar o teor de nitrognio no resduo aps
mineralizao e calcular o teor de protenas multiplicando a
quantidade de nitrognio por 6,25. O teor total de protenas
no menor que 50 g/L.
ARMAZENAMENIO E TRANSPORTE
O plasma congelado deve ser armazenado e transportado
em condies desenvolvidas para manter a temperatura a
-20 C ou inferior; por razes acidentais, a temperatura
de armazenamento pode subir acima de -20 C em uma
ou mais ocasies durante o armazenamento e transporte,
todavia, o plasma aceitvel para fracionamento se todas
as condies abaixo forem preenchidas:
perodo de tempo total durante o qual a temperatura
exceder a -20 C no pode ser maior do que 72 horas;
a temperatura no deve exceder a -15 C em mais de
uma ocasio;
em nenhuma ocasio a temperatura pode exceder a -5 C.
ROTULAGEM
Observar a legislao vigente. O rtulo deve possibilitar
que cada unidade individual seja rastrevel ao seu doador
especfco.
POLGALA
Senegae radix
Polygala senega L. POLYGALACEAE
A droga vegetal constituda pelas razes e curto rizoma
nodoso de Polygala senega L. e de seus cultivares contendo,
no mnimo, 6% de saponinas expressos em derivados do
cido oleanlico (C
30
H
48
O
3
, 456,70).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A raiz tem odor suave,
adocicado, lembrando salicilato de metila, levemente
ranoso. O sabor inicialmente adocicado e aps acre. O
p da raiz irritante e esternutatrio; quando agitado com
gua produz espuma abundante.
DESCRIO MACROSCPICA
A raiz axial e fusiforme, um pouco tortuosa, s vezes
ramifcada ou bifurcada, apresentando na regio apical um
curto rizoma nodoso, subgloboso, fortemente alargado,
com at 4 cm de largura, verrucoso, de cor castanho-
avermelhada, exibindo numerosos vestgios de caules
areos, cuja presena no pode exceder 2% do peso total,
cobertos ao nvel de sua insero por folhas rudimentares,
escamosas, ovaladas, obtusas, com 2 mm a 3 mm de
comprimento, frequentemente rosadas a arroxeadas,
com bordos ciliados. Lateralmente, a raiz apresenta um
apndice em forma de quilha, disposto em toda a sua
extenso, distribudo, geralmente, de maneira helicoidal.
A raiz, abaixo do rizoma apical nodoso, tem em regra, de
5 cm a 20 cm de comprimento e de 0,5 cm a 1,2 cm de
largura, podendo apresentar um pequeno nmero de razes
laterais. Sua superfcie, de colorao castanho-amarelada
e pardacenta na regio superior e amarelada na inferior,
estriada, tanto longitudinal quanto transversalmente.
Em seco transversal, observa-se o crtex amarelo-
acastanhado, de espessura variada, circundando uma rea
central lenhosa, de colorao amarelo-clara, opaca, de forma
mais ou menos circular, at irregular. Esta seco mostra
uma estrutura predominantemente excntrica, geralmente
de forma oval ou piriforme, em virtude da presena da
quilha. A forma da seco transversal varivel, inclusive
em diferentes alturas no mesmo indivduo. A fratura lisa
e ntida.
DESCRIO MICROSCPICA
Pelo exame microscpico da seco transversal da raiz,
utilizando soluo aquosa de hipoclorito de sdio a 3% (p/v),
evidencia-se um sber de duas a seis camadas de clulas
pardo-amareladas claras, alongadas tangencialmente, com
paredes fnas. A regio cortical formada por cerca de
dez ou mais camadas de clulas, sendo as mais externas
colenquimticas e as demais parenquimticas, as quais
apresentam uma substncia amorfa, incolor ou amarelo-
clara, que se separa sob a forma de grandes gotas de
a
p
leo pela adio de uma gota de soluto de hidrxido de
potssio. O cmbio forma um anel contnuo, produzindo
tecidos de crescimento secundrio anmalo, na maioria das
vezes de disposio excntrica. O foema apresenta clulas
parenquimticas que se distribuem de maneira radial
e em seus elementos condutores tambm se verifca a
presena da substncia amorfa. O xilema forma um macio
de lenho secundrio, geralmente disposto em forma de
leque, constitudo de traquedes com dimetro de at 65
mm e elementos de vaso de paredes com espessamento
reticulado e placas de perfurao laterais, associados
a poucas clulas parenquimticas lignifcadas. Mais
internamente, verifca-se a presena do xilema primrio,
que permite a classifcao do rgo como diarco. No
existe parnquima medular. A regio da quilha, cuja forma
varivel, de proeminente a quase circular, originada por
uma atividade irregular do cmbio, a qual pode promover
um desenvolvimento anmalo do xilema e/ou do foema,
resultando na formao de um ou dois, raramente trs,
grandes raios parenquimticos cuneiformes, na regio
destes tecidos. As anomalias observadas em seco
transversal correspondem a modifcaes profundas na
estrutura anatmica da casca e do lenho, tornando-se
muito evidentes quando tratadas com foroglucinol e cido
clordrico. Em nenhum dos tecidos verifca-se a presena
de cristais ou amido. Restos de caules, quando presentes,
mostram, em seco transversal, epiderme com clulas
sub-retangulares e alongadas, crtex parenquimatoso,
bainha de fbras pericclicas no lignifcadas, foema
com elementos de pequeno dimetro, xilema formado
por traquedes e elementos de vaso com paredes de
espessamento reticulado, helicoidal ou pontoado e medula
parenquimtica. Folhas escamosas, quando presentes,
exibem epiderme com paredes anticlinais sinuosas,
tricomas unicelulares arredondados no pice e estmatos
anomocticos.
caractersticos: colorao castanho-clara; fragmentos
de sber; fragmentos de parnquima cortical de cor
amarelada, com gotas de leo; clulas do colnquima com
gotas de leo; fragmentos de traquedes curtos; clulas
dos raios parenquimticos lignifcadas e com grandes
poros simples; eventualmente, ocorrem fragmentos de
epiderme originrios de folhas escamosas dos caules
areos, apresentando tricomas unicelulares e estmatos
anomocticos; ausncia de escleredes, de cristais e de
gros de amido.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G, com espessura
de 250 m, como suporte, e a fase superior da mistura de
cido actico glacial, gua e 1-butanol (10:40:50), como
banda, 10 L da Soluo (1) e 10 L e 40 L da Soluo
(2), recentemente preparadas, descritas a seguir.
Soluo (1): pesar 1 g da droga em p, adicionar 10 mL de
etanol a 70% (v/v) e deixar em ebulio por 15 minutos,
sob refuxo. Filtrar e resfriar.
Soluo (2): preparar uma soluo de escina a 1 mg/mL em
etanol a 70% (v/v).
secar ao ar. Nebulizar com anisaldedo SR1. Deixar
em estufa entre 100 C a 105 C, at o aparecimento de
manchas vermelhas correspondentes aos saponosdeos.
A regio do cromatograma obtida com a Soluo (1)
apresenta entre trs e cinco manchas vermelhas nas
regies central e inferior, com Rfs semelhantes aos das
manchas violeta-acinzentadas obtidas com a Soluo (2).
Nebulizar a placa com cido fosfomolbdico a 20% (p/v)
em etanol, deixar em estufa entre 100 C a 105 C, at que
as manchas correspondentes aos saponosdeos tornem-se
azuis. A intensidade e o tamanho das manchas obtidas no
cromatograma da Soluo (1) esto entre as duas manchas
correspondentes escina, obtidas pela aplicao de 10 L
e 40 L da Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 2%. Referentes
aos vestgios de caules areos.
gua (5.4.2.3). No mximo 10%.
DOSEAMENTO
Saponinas
a seguir.
Soluo estoque: pesar, exatamente, cerca de 1 g da planta
pulverizada e transferir para balo de fundo redondo de
250 mL. Adicionar 70 g de etanol a 50% (v/v), 0,1 mL
de silicone antiespumante e algumas prolas de vidro.
Pesar, exatamente, o conjunto e aquec-lo, sob refuxo,
em banho-maria, por 60 minutos. Esfriar e completar at
peso inicial com etanol a 50% (v/v). Centrifugar, separar
o resduo e a soluo decantada, que pesada e reduzida
a resduo em rota vapor, a uma temperatura mxima de 60
C. Ressuspender o resduo em 10 mL de cido clordrico
0,1 M, transferir para funil de separao de 250 mL e lavar
o balo com duas pores de 5 mL de cido clordrico 0,1
M. Reunir as fases cidas e extrair com trs pores de
70 mL da fase superior de mistura de clorofrmio, cido
clordrico 0,1 M e 1-butanol (30:90:180). Aps agitao, as
duas fases devem permanecer em repouso por 15 minutos,
no mnimo, antes da sua separao. As fases orgnicas so
reunidas e lavadas com duas pores da fase inferior da
mistura de clorofrmio, cido clordrico 0,1 M e 1-butanol
(30:90:180). A fase inferior desprezada. Evaporar a
fase orgnica a resduo em evaporador rotatrio, em
temperatura mxima de 60 C. Ressuspender o resduo
com cido actico glacial a 98% (v/v) transferindo para
a
p
1215
cido actico glacial. Filtrar a soluo, desprezando os
tubo de ensaio, acrescentar 4 mL do reagente de colorao.
Homogeneizar e aquecer o tubo de ensaio em banho-maria
a 60 C 1 C durante 25 minutos. Resfriar em banho de
gelo por 30 segundos e realizar a leitura imediatamente.
Soluo branco: transferir 0,5 mL de cido actico glacial
para tubo de ensaio e adicionar 4 mL do reagente de
colorao. Homogeneizar e aquecer o tubo de ensaio em
banho-maria a 60 C 1 C durante 25 minutos. Resfriar
em banho de gelo por 30 segundos e realizar a leitura
imediatamente.
Medir a absorvncia da Soluo amostra em 520 nm,
utilizando a Soluo branco para o ajuste do zero. Calcular
o teor de saponinas, como derivados do cido oleanlico,
segundo a expresso:
em que
AO% = teor de derivados do cido oleanlico (%);
m
1
= massa da soluo aps centrifugao (g);
m
2
= massa da droga (g) considerando o teor de gua
determinado.
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e umidade.
a
p
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos da raiz de Polygala senega L.
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 7 mm; em B, C, D, E e f a 1 mm; em G, H, I e J a 100 m.
A aspecto geral da raiz com rizoma apical nodoso. B, D, E e f aspectos gerais de seces transversais da raiz: anomalia dos raios parenquimticos
(a); crtex (cx); crtex suberizado (cxs); foema (f); periderme (pe); xilema (x). C aspecto geral da seco transversal da raiz com estrutura normal.
G clulas do parnquima cortical da regio mais interna. H detalhe de elementos de vasos. I clulas do parnquima cortical da regio mais externa.
J detalhe de uma poro da raiz em seco transversal, conforme indicado em C: crtex (cx); crtex suberizado (cxs); foema (f); periderme (pe);
xilema (x).
a
p
1217
POLISSORBATO 20
Polysorbatum 20
O
O
O
O
O
O
OH
OH O H
O
CH
3
z
y
x
w
*
*
e epmeros nos C*
w+x+y+z=20
polissorbato 20; 07272
Derivados de poli(oxi-1,2-etanodiil) do monododecanoato
de sorbitana
[9005-64-5]
Mistura de steres luricos parciais de sorbitol e seus
anidridos copolimerizados com aproximadamente 20
moles de xido de etileno para cada mol de sorbitol e seus
anidridos. O cido lurico usado na esterifcao pode
conter quantidades variveis de outros cidos graxos.
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. Lquido oleoso, lmpido
ou ligeiramente opalescente, de cor amarelada ou mbar.
Densidade relativa (5.2.5): cerca de 1,1.
Solubilidade. Miscvel com gua, etanol absoluto, acetato
de etila e metanol. Praticamente insolvel em leos fxos e
parafna lquida.
IDENTIFICAO
A. Dissolver 0,5 g da amostra em gua, a aproximadamente
50 C, e diluir para 10 mL com o mesmo solvente. A soluo
produz espuma abundante aps agitao. Adicionar 0,5
g de cloreto de sdio e aquecer at ebulio. A turvao
formada desaparece com o resfriamento a cerca de 50 C.
B. Aquecer, sob refuxo, 4 g da amostra em banho-maria
por 30 minutos com 40 mL de hidrxido de potssio a 5%
(p/v). Resfriar at cerca de 80 C, acidifcar com 20 mL de
cido ntrico 2 M e aquecer, sob refuxo, por cerca de 10
minutos, de forma a separar a emulso. Os cidos graxos
permanecem na superfcie como lquido oleoso. Resfriar
temperatura ambiente e extrair com 50 mL de ter de
petrleo (faixa de destilao entre 40-60 C), evitando
agitao vigorosa. Lavar a fase orgnica com trs pores
de 5 mL de gua e evaporar em banho-maria at secura.
O ndice de acidez (5.2.29.7), determinado em 0,3 g do
resduo com 50 mL do solvente, de 245 a 300.
C. Dissolver 0,1 g da amostra em 5 mL de clorofrmio,
adicionar 0,1 g de tiocianato de potssio e 0,1 g de nitrato
de cobalto (II) e misturar com basto de vidro. Desenvolve-
se colorao azul.
ENSAIOS DE PUREZA
ndice de acidez (5.2.29.7). Determinar em 5 g da amostra.
No mximo 2,0.
ndice de hidroxila (5.2.29.12). 96 a 108. Determinar em
2 g da amostra.
ndice de saponifcao (5.2.29.8). 40 a 50. Usar 15 mL
de hidrxido de potssio alcolico 0,5 M SV e diluir com
50 mL de gua antes da titulao.
Impurezas redutoras. Dissolver 2 g da amostra em 25 mL
de gua quente, adicionar 25 mL de cido sulfrico M e
0,1 mL de ferrona SI. Titular com nitrato crico amoniacal
0,01 M SV, agitando continuamente at que a colorao
mude de vermelha para azul-esverdeada persistente por 30
necessrias. No mais que 2 mL de nitrato crico amoniacal
0,01 M SV so gastos.
mximo 0,001% (10 ppm).
gua (5.2.20). No mximo 3,0%, determinada em 1 g.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Transferir 2 g da amostra para
cadinho de platina ou de slica, adicionar 0,5 mL de cido
sulfrico e aquecer em banho-maria por 2 horas. Aquecer
cuidadosamente em bico de gs at carbonizao completa.
Adicionar massa carbonizada 2 mL de cido ntrico e
0,25 mL de cido sulfrico, aquecer cuidadosamente at
desenvolvimento de fumaa branca e incinerar a 600 C at
ROTULAGEM
CATEGORIA
Agente tensoativo no inico. Emulsionante, solubilizante
e umectante.
a
p
POLISSORBATO 40
Polysorbatum 40
O
O
O
O
O
O
OH
OH O H
O
C H
3
z y
x
w
*
*
e epmeros nos C*
w+x+y+z=20
Derivados de poli(oxi-1,2-etanodiil) do monoexadecanoato
de sorbitana
[9005-66-7]
ster palmtico de sorbitol e seus anidridos copolimerizados
com aproximadamente 20 mols de xido de etileno para
cada mol de sorbitol e seus anidridos.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. Lquido amarelo com forte odor
caracterstico.
Solubilidade. Solvel em gua e etanol. Insolvel em leo
mineral e leos vegetais.
IDENTIFICAO
A. A 5 mL da soluo da amostra (1:20) adicionar 5 mL
de hidrxido de sdio M. Aquecer ebulio por alguns
minutos, resfriar e acidifcar com cido clordrico 3 M. A
preparao torna-se fortemente opalescente.
B. A 2 mL da soluo da amostra (1:20) adicionar, gota
a gota, 0,5 mL de gua de bromo SR. O bromo no sofre
descolorao (ao contrrio do polissorbato 80).
ENSAIOS DE PUREZA
ndice de hidroxila (5.2.29.12). 89 a 105. Determinar em
2 g da amostra.
ndice de saponifcao (5.2.29.8). 41 a 52. Utilizar 15
mL de hidrxido de potssio etanlico 0,5 M SV e diluir
com 50 mL de gua antes da titulao.
mximo 0,001% (10 ppm).
gua (5.2.20). Determinar em 1 g. No mximo 3,0%.
ROTULAGEM
CATEGORIA
e umectante.
POLISSORBATO 60
Polysorbatum 60
O
O
O
O
O
O
OH
OH O H
O
C H
3
z
y
x
w
*
*
e epmeros nos C*
w+x+y+z=20
Derivados de poli(oxi-1,2-etanodiil) do monooctadecanoato
de sorbitana
[9005-67-8]
Mistura de steres estericos parciais de sorbitol e seus
anidridos copolimerizados com aproximadamente 20
mols de xido de etileno para cada mol de sorbitol e seus
anidridos. O cido esterico usado para a esterifcao
pode conter outros cidos graxos, especialmente cido
palmtico.
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. Massa gelatinosa de cor
marrom-amarelada. Apresenta-se como lquido lmpido em
temperatura acima de 25 C. Densidade relativa (5.2.5):
cerca de 1,1.
parafna lquida.
IDENTIFICAO
50 C, e completar o volume para 10 mL com o mesmo
solvente. A soluo produz espuma abundante aps
agitao. Adicionar 0,5 g de cloreto de sdio e aquecer
at a fervura. A turvao formada desaparece com o
resfriamento a cerca de 50 C.
B. Aquecer, sob refuxo, 4 g da amostra em banho-maria
por 30 minutos com 40 mL de hidrxido de potssio a 5%
(p/v). Resfriar at cerca de 80 C, acidifcar com 20 mL
de cido ntrico 2 M e ferver por cerca de 10 minutos sob
a
p
1219
refuxo de forma a separar a emulso. Os cidos graxos
at a temperatura ambiente e extrair com 50 mL de ter
de petrleo (faixa de destilao entre 40-60 C), evitando
O ndice de acidez (5.2.29.7), determinado em 0,5 g do
resduo com 50 mL do solvente, de 190 a 220.
se colorao azul.
D. A 5 mL da soluo da amostra (1:20) adicionar 5 mL de
hidrxido de sdio M. Ferver por alguns minutos, resfriar,
e acidifcar com cido clordrico 3 M. A preparao torna-
se fortemente opalescente.
ENSAIOS DE PUREZA
ndice de acidez (5.2.29.7). Determinar em 5 g da amostra.
No mximo 2,0.
ndice de hidroxila (5.2.29.12). 81 a 96. Determinar em 2
g da amostra.
de hidrxido de potssio etanlico 0,5 M SV e diluir com
mximo 0,001% (10 ppm).
gua (5.2.20). Determinar em 1 g da amostra. No mximo 3,0%.
ROTULAGEM
CATEGORIA
e umectante.
POLISSORBATO 80
Polysorbatum 80
O
O
O
O
O
O
OH
OH O H
O
C H
3
z y
x
w
*
*
e epmeros nos C*
w+x+y+z=20
Derivados de poli(oxi-1,2-etanodiil) do mono-(9Z)-9-
octadecenoato de sorbitana
[9005-65-6]
Mistura de steres olicos parciais de sorbitol e seus anidridos
copolimerizados com aproximadamente 20 mols de xido
de etileno para cada mol de sorbitol e seus anidridos.
DESCRIO
Caractersticas fsico-qumicas. Lquido oleoso, lmpido,
de cor amarela ou marrom clara, com odor caracterstico
e sabor ligeiramente amargo. Densidade relativa (5.2.5):
cerca de 1,1. Viscosidade (5.2.7): cerca de 400 mPa.
parafna lquida.
IDENTIFICAO
50 C, e completar o volume para 10 mL com o mesmo
solvente. A soluo produz espuma abundante aps
agitao. Adicionar 0,5 g de cloreto de sdio e aquecer
at a fervura. A turvao formada desaparece com o
resfriamento a cerca de 50 C.
B. Aquecer, sob refuxo, 4 g da amostra em banho-maria por
30 minutos com 40 mL de hidrxido de potssio a 5% (p/v).
Resfriar at cerca de 80 C, acidifcar com 20 mL de cido
ntrico 2 M e aquecer ebulio por cerca de 10 minutos
sob refuxo de forma a separar a emulso. Os cidos graxos
at a temperatura ambiente e extrair com 50 mL de ter
de petrleo (faixa de destilao entre 40-60 C), evitando
Ressuspender o resduo obtido com mistura de 2 mL de
cido ntrico e 3 mL de gua. Adicionar cuidadosamente,
em pequenas pores, 0,5 g de nitrito de sdio e deixar em
repouso temperatura ambiente. A camada de cido graxo
se solidifca em 4 horas.
se colorao azul.
a
p
D. A 5 mL da soluo da amostra (1:20) adicionar 5 mL
de hidrxido de sdio M. Aquecer ebulio por alguns
minutos, resfriar e acidifcar com cido clordrico 3 M. A
preparao torna-se fortemente opalescente..
E. A 2 mL da soluo da amostra (1:20) adicionar, gota
a gota, 0,5 mL de gua de bromo SR. O bromo sofre
descolorao (ao contrrio do polissorbato 40).
ENSAIOS DE PUREZA
ndice de hidroxila (5.2.29.12). 65 a 80. Determinar em 2
g da amostra.
ndice de iodo (5.2.29.10). 18 a 24.
de hidrxido de potssio etanlico 0,5 M SV e diluir com
Impurezas redutoras. Dissolver 2 g da amostra em 25 mL
de gua quente, adicionar 25 mL de cido sulfrico M e
0,1 mL de ferrona SI. Titular com nitrato crico amoniacal
0,01 M SV, agitando continuamente at que a colorao
mude de vermelha para azul-esverdeada persistente por 30
necessrias. No mximo 5 mL de nitrato crico amoniacal
0,01 M SV so gastos.
mximo 0,001% (10 ppm).
gua (5.2.20). Determinar em 1 g da amostra. No mximo
3,0%.
ROTULAGEM
CATEGORIA
e umectante.
PRAZIQUANTEL
Praziquantelum
N
N
O
O
H
C
19
H
24
N
2
O
2
; 312,41
praziquantel; 07321
2-(Cicloexilcarbonil)-1, 2, 3, 6, 7, 11b-hexaidro-4H-
pirazino[2,1-a]isoquinolin-4-ona
[55268-74-1]
C
19
H
24
N
2
O
2
DESCRIO
solvel em etanol e cloreto de metileno.
IDENTIFICAO
praziquantel SQR, preparado de maneira idntica.
ENSAIOS DE PUREZA
ligada a grupo octadecilsilano (5 um); fuxo da Fase mvel
de 1,0 mL/minuto.
Soluo (1): dissolver 40 mg da amostra em Fase mvel e
diluir para 10 mL com o mesmo solvente, obtendo soluo
a 4 mg/mL.
Fase mvel. Diluir 5 mL desta soluo para 10 mL com
Fase mvel, obtendo soluo a 20 ug/mL.
a
p
1221
Soluo (3): soluo de praziquantel SQR a 0,2 mg/mL em
Fase mvel.
Soluo (4): dissolver 5 mg de 2-benzoil-1,2,3,6,7,11b-
hexaidro-4H-pirazino[2,1-a]isoquinolin-4-ona (Impureza
A) SQR em Soluo (3) e diluir para 5 mL com o mesmo
solvente. Diluir 1 mL desta soluo para 10 mL com Fase
mvel, obtendo soluo de Impureza A e de praziquantel a
20 ug/mL.
Injetar 20 uL da Soluo (4). A resoluo entre os picos
correspondentes Impureza A e ao praziquantel no
inferior a 3,0.
(1) e (2), registrar os cromatogramas por, no mnimo,
cinco vezes o tempo de reteno do praziquantel e medir
as reas sob os picos. A rea de qualquer pico obtido no
cromatograma com a Soluo (1), exceto o pico principal,
no maior que a rea sob o pico principal obtido com a
Soluo (2) (0,5%). A rea de no mais que um dos picos
secundrios obtidos no cromatograma com a Soluo (1),
exceto o pico principal, maior que 0,4 vezes a rea sob
o pico principal obtido com a Soluo (2) (0,2%). A soma
das reas de todos os picos obtidos no cromatograma com a
Soluo (1), exceto o pico principal, no maior que a rea
sob o pico principal obtido com a Soluo (2) (0,5%). No
considerar picos com a rea inferior a 0,1 vezes a rea sob
o pico principal obtido com a Soluo (2) (0,05%).
mximo 0,002% (20 ppm).
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
um a 10 um); fuxo da Fase mvel de 1,5 mL/minuto.
ostra: transferir, exatamente, cerca de 45 mg da amostra
para balo volumtrico de 25 mL. Completar o volume
com Fase mvel e homogeneizar. Transferir 5 mL desta
soluo para balo volumtrico de 50 mL e completar com
Fase mvel.
Soluo padro: dissolver quantidade exatamente pesada de
praziquantel SQR em Fase mvel e diluir adequadamente com
o mesmo solvente de modo a obter soluo a 0,18 mg/mL.
1,0%.
19
H
24
N
2
O
2
na
amostra a partir das respostas obtidas com as Solues
padro e amostra.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-helmntico.
PRAZIQUANTEL COMPRIMIDOS
19
H
24
N
2
O
2
.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel G, como suporte, e
acetato de etila, como fase mvel. Aplicar, separadamente,
quantidade de p equivalente a 30 mg de praziquantel para
tubo de centrfuga e adicionar 5 mL de metanol. Agitar por
5 minutos e centrifugar. Utilizar o sobrenadante lmpido.
Soluo (2): soluo a 6 mg/mL de praziquantel SQR em
metanol.
(2).
CARACTERSTICAS
mximo 15 minutos.
a
p
Meio de dissoluo: laurilsulfato de sdio a 0,2% (p/v) em
cido clordrico 0,1 M, 900 mL
Tempo: 60 minutos
dissoluo e fltrar. Medir as absorvncias em 263 nm
(5.2.14), utilizando Meio de dissoluo para ajuste do zero.
19
H
24
N
2
O
2
dissolvida no meio,
comparando as leituras obtidas com a da Soluo padro,
preparada como descrito a seguir.
pesada, de praziquantel SQR de modo a obter soluo
cuja concentrao seja L/90 mg por mL, em que L a
quantidade declarada, em miligramas, de praziquantel por
comprimido. Transferir 5 mL da soluo obtida para balo
volumtrico de 50 mL, diluir e completar o volume com
Meio de dissoluo.
declarada de C
19
H
24
N
2
O
2
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
de Praziquantel. Preparar a Soluo amostra e a Soluo
padro como descrito a seguir.
praziquantel para balo volumtrico de 100 mL. Adicionar
70 mL de Fase mvel e deixar em ultrassom por 15 minutos.
completar o volume com a Fase mvel e homogeneizar.
Soluo padro: soluo de praziquantel SQR a 0,18 mg/
mL em Fase mvel.
C
19
H
24
N
2
O
2
ROTULAGEM
PREDNISONA
Prednisonum
O
H
H
H
CH
3
CH
3
O
O
OH
OH
C
21
H
26
O
5
; 358,43
prednisona; 07341
17,21-Diidroxipregna-1,4-dieno-3,11,20-triona
[53-03-2]
C
21
H
26
O
5
DESCRIO
branco, inodoro. Apresenta polimorfsmo.
Solubilidade. Muito pouco solvel em gua, pouco solvel
em etanol, clorofrmio, dioxana e metanol.
Poder rotatrio especfco (5.2.8): +167 a +175.
Determinar em soluo a 0,5% (p/v) em dioxana.
IDENTIFICAO
Os testes de Identifcao B. e D. podem ser omitidos se
forem realizados os testes A. e C. O teste de Identifcao
A. pode ser omitido se forem realizados os testes B., C. e
D.
de prednisona SQR, preparado de maneira idntica.
Se os espectros obtidos no forem idnticos, dissolver,
separadamente, prednisona SQR e amostra em acetona e
evaporar at secura. Obter novos espectros com os resduos.
em etanol, exibe mximo de absoro em 239 nm, idntico
a
p
1223
ao observado no espectro de soluo similar de prednisona
SQR. A absorvncia em 239 nm de 0,405 a 0,435.
camada delgada (5.2.17.1), utilizando placa de slica-gel
GF
254
como suporte e mistura de cloreto de metileno, ter
etlico, metanol e gua (77:15:8:1,2), como fase mvel.
Aplicar, separadamente, placa 5 L de cada uma das
clorofrmio e metanol (9:1).
Soluo (2):soluo a 1 mg/mL de prednisona SQR em
Nebulizar com cido sulfrico a 20% (v/v) em etanol.
Aquecer a placa a 120 C por 10 minutos. Resfriar.
Examinar sob luz ultravioleta (365 nm). A mancha obtida
no cromatograma com a Soluo (1) corresponde em
D. Dissolver cerca de 6 mg da amostra em 2 mL de cido
sulfrico concentrado. Deixar em repouso por cinco
minutos. Desenvolve-se colorao alaranjada. Verter a
soluo, gota a gota e sob agitao, em 10 mL de gua.
A cor muda para amarelo e gradativamente, para verde-
azulado.
ENSAIOS DE PUREZA
minuto.
Soluo (1): dissolver 25 mg da amostra em metanol e
Soluo (2): dissolver 2 mg de prednisona SQR e 2 mg de
prednisolona SQR em metanol e diluir para 100 mL com o
mesmo solvente.
metanol.
Eluente A: em um balo volumtrico de 1000 mL, adicionar
100 mL de acetonitrila com 200 mL de metanol e 650 mL
de gua. Homogeneizar. Ajustar o volume para 1000 mL
com gua e misturar novamente.
Tempo
(minutos)
Eluente A
(% v/v)
Eluente B
(% v/v)
Eluio
0 100 0 estabilizar
0-25 100 0 isocrtico
25-40 100 g 40 0 g 60 gradiente linear
41-46 0 100 isocrtico
47-52 100 0 estabilizar
Equilibrar a coluna por 30 minutos com a Eluente B em
fuxo de 2,5 mL/minuto e, em seguida com Eluente A
por 5 minutos. Proceder nas condies descritas de 40 a
52 minutos. Ajustar a sensibilidade do sistema para que a
altura do pico principal do cromatograma obtido com 20 L
da Soluo (3) no seja menor que 50 por cento do total da
escala completa. Injetar 20 L da Soluo (2). Os tempos
de reteno so cerca de 19 minutos para prednisona e 23
minutos para prednisolona. A resoluo entre prednisona e
prednisolona no menor que 2,7; se necessrio, ajustar a
concentrao de acetonitrila no Eluente A.
Procedimento: Injetar, separadamente, 20 L de metanol
como branco, 20 L da Soluo (1) e 20 L da Soluo
(3). No cromatograma obtido com a Soluo (1), a rea de
nenhum pico exceto a rea sob o pico principal no maior
que 0,25 vezes a rea sob o pico principal do cromatograma
obtido com a Soluo (3) (0,25%); a soma das reas de
todos os picos, exceto a do pico principal, no maior que
0,75 vezes a rea sob o pico principal com o cromatograma
obtido com a Soluo (3) (0,75%). Descartar qualquer
pico obtido na corrida do branco e qualquer pico com
rea menor que 0,05 vezes a rea sob o pico principal do
gua (5.2.20.1). No mximo 1,0% para a substncia anidra
e 5,0% para a substncia monoidratada.
amostra. Dessecar em estufa a 105 C. No mximo 1,0%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). Determinar em 0,1 g de
DOSEAMENTO
de detector de ultravioleta a 240 nm; coluna de 250 mm de
de 1,0 mL/minuto.
Fase Mvel: mistura de gua, tetraidrofurano e metanol
(69:25:6,2).
Soluo de padro interno: dissolver quantidade
exatamente pesada de acetanilida em 33 mL de metanol.
Completar o volume para 100 mL com gua purifcada de
modo a obter uma soluo a 110 g/mL.
a
p
da amostra em 33 mL de metanol. Completar o volume
para 100 mL com gua purifcada de modo a obter uma
soluo a 0,2 mg/mL. Transferir 5 mL dessa soluo e 5
mL da Soluo padro interno para balo volumtrico
de 50 mL. Completar o volume com mistura de metanol
e gua (1:2) e homogeneizar, obtendo uma soluo de
prednisona a 20 ug/mL.
de prednisona SQR em 33 mL de metanol. Completar o
volume para 100 mL com gua purifcada de modo a obter
uma soluo a 0,2 mg/mL. Transferir 5 mL desta soluo e
5 mL da Soluo de padro interno para balo volumtrico
de 50 mL. Completar o volume com mistura de metanol
e gua (1:2) e homogeneizar, obtendo uma soluo de
prednisona a 20 ug/mL.
Injetar replicatas de 20 L da Soluo de padro interno.
A resoluo entre prednisona e acetanilida no menor que
picos registrados no maior que 2,0%
21
H
26
O
5

ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Anti-infamatrio esteroide.
PREDNISONA COMPRIMIDOS
13
H
16
N
3
NaO
4
S.H
2
O.
IDENTIFICAO
de p equivalente a 20 mg de prednisona com cerca de 100
mL de clorofrmio. Filtrar e evaporar at secura. Secar
o resduo em estufa 105 C por 3 horas. O espectro de
absoro no infravermelho (5.2.14) do resduo, disperso
mesmas intensidades relativas daqueles observados
no espectro de prednisona SQR, preparado de maneira
idntica.
B. A cerca de 6 mg do resduo obtido no mtodo A. de
Identifcao adicionar 2 mL de cido sulfrico. Deixar
em repouso por 5 minutos. Desenvolve-se colorao
alaranjada. Verter a soluo, gota a gota e sob agitao, em
10 mL de gua. A cor alaranjada muda primeiramente para
amarelo e em seguida, gradualmente, para verde-azulado.
CARACTERSTICAS
Meio de dissoluo: gua, 500 mL (comprimidos contendo
10 mg ou menos de prednisona) ou 900 mL (comprimidos
contendo mais de 10 mg de prednisona).
Tempo: 30 minutos
adequada. Medir as absorvncias em 242 nm, utilizando o
de C
12
H
26
O
5
dissolvida no meio, comparando as leituras
obtidas com a soluo de prednisona SQR na concentrao
de 0,001% (p/v), preparada no mesmo solvente, mas com
adio prvia de etanol para garantir a solubilizao. A
quantidade de etanol no deve exceder 5% do volume total.
declarada de C
12
H
26
O
5
Cumpre o teste.
DOSEAMENTO
A. Proceder conforme descrito em Espectrometria de
5 mg de prednisona para balo volumtrico de 50 mL e
adicionar 30 mL de etanol. Agitar, mecanicamente, por
Homogeneizar e fltrar. Diluir, sucessivamente, com etanol
at uma concentrao de 0,001% (p/v). Preparar soluo
a
p
1225
solues em 239 nm, utilizando o etanol para ajuste do
12
H
26
O
5
nos comprimidos
clculos considerando A(1%, 1 cm) = 420, em 239, em
etanol.
em Doseamento da monografa de Prednisona. Preparar a
soluo amostra como descrito a seguir:
prednisona para balo volumtrico de 100 mL e acrescentar
5 mL de gua. Deixar em ultrassom por 1 minuto. Adicionar
50 mL de etanol e deixar em ultrassom por mais 1 minuto.
Completar o volume com gua purifcada e homogeneizar.
Transferir 5 mL desta soluo e 5 mL da Soluo padro
interno para um balo volumtrico de 50 mL e completar
o volume com mistura de etanol e gua (1:2), de modo a
obter uma soluo de prednisona 20 ug/mL. Homogeneizar
e fltrar.
12
H
26
O
5

nos comprimidos a partir das respostas com as Solues
padro e amostra.
ROTULAGEM
PROGESTERONA
Progesteronum
O
H
H
H
CH
3
CH
3
CH
3
O
C
21
H
30
O
2
; 314,46
progesterona; 07413
Pregn-4-eno-3,20-diona
[57-83-0]
C
21
H
30
O
2
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino branco ou
ligeiramente amarelado, inodoro e inspido. Estvel ao ar.
etanol, acetona e dioxana, pouco solvel em leos vegetais.
Faixa de fuso (5.2.2): 126 C a 131 C. Apresenta um
polimorfo com ponto de fuso em torno de 121 C.
2,0% (p/v) em dioxana.
IDENTIFICAO
progesterona SQR, preparado de maneira idntica.
exibe mximos e mnimos nos mesmos comprimentos
de onda observados no espectro de soluo similar de
progesterona SQR.
ENSAIOS DE PUREZA
slica-gel GF
254
, como suporte, e mistura de clorofrmio
e acetato de etila (2:1), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (2): diluir 1 mL da Soluo (1) para 100 mL de
etanol.
mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
a
p
cerca de 20 mg da amostra para balo volumtrico de 100
mL, dissolver e completar o volume com etanol. Diluir,
concentrao, utilizando o mesmo solvente. Medir
utilizando etanol para ajuste do zero. Calcular o teor de
C
21
H
30
O
2
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Progestagnio.
PROPILPARABENO
Propylis parahydroxybenzoas
O
CH
3
O H
O
C
10
H
12
O
3
; 180,20
propilparabeno; 07461
ster proplico do cido 4-hidroxibenzoico
[94-13-3]
C
10
H
12
O
3
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco e cristalino.
solvel em metanol, etanol e ter etlico.
Faixa de fuso (5.2.2): 96,0 C a 99,0 C.
IDENTIFICAO
observados no espectro de propilparabeno SQR, preparado
de maneira idntica.
etanol, exibe mximo em 258 nm. A absorvncia em 258
nm de 0,440 a 0,475.
ENSAIOS DE PUREZA
Acidez. A 2 mL da soluo descrita em Aspecto da
soluo, adicionar 3 mL de etanol, 5 mL de gua isenta de
dixido de carbono e 0,1 mL de verde de bromocresol SI.
No mximo 0,1 mL de hidrxido de sdio 0,1 M gasto
para promover a viragem do indicador.
slica-gel GF
254
como suporte, e cido frmico anidro,
acetato de etila e cloreto de metileno (2:10:88), como fase
com o mesmo solvente para 5 mL.
metanol.
secar sob corrente de ar quente e examinar sob luz
no cromatograma com a Soluo (1), diferente da principal,
(1,0%).
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
erlenmeyer provido de rolha esmerilhada e adicionar 20
mL de hidrxido de sdio M SV. Adaptar condensador de
refuxo e aquecer a 70 C por 1 hora. Resfriar a temperatura
ambiente. Titular o excesso de hidrxido de sdio M SV
com cido sulfrico 0,5 M SV. Determinar o ponto fnal
potenciometricamente, continuando a titulao at o
segundo ponto de infexo. Realizar ensaio em branco e
sdio M SV equivale a 180,200 mg de C
10
H
12
O
3
.
ROTULAGEM
CATEGORIA
Conservante.
a
p
1227
PROPIONATO DE TESTOSTERONA
Testosteroni propionas
O
H
H
H
CH
3
O
CH
3
CH
3
O
C
22
H
32
O
3
; 344,49
propionato de testosterona; 08458
(17)-17-(1-Oxopropoxi)androst-4-en-3-ona
[57-85-2]
C
22
H
32
O
3
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P branco ou quase branco, ou
cristais incolores.
solvel em acetona e etanol, solvel em leos vegetais.
Faixa de fuso (5.2.2): 118 C a 123 C.
em etanol absoluto.
IDENTIFICAO
de propionato de testosterona SQR, preparado de maneira
idntica.
etanol, exibe mximos e mnimos somente nos mesmos
comprimentos de onda de soluo similar de propionato de
testosterona SQR. Os valores de absorvncia medidos em
241 nm no diferem mais de 3,0%.
ENSAIOS DE PUREZA
utilizando slica-gel HF
254
clorofrmio e dietilamina (19:1), como fase mvel. Aplicar,
Soluo (1): dissolver 40 mg da amostra em 2 mL de etanol.
etanol.
mximo 0,5%.
DOSEAMENTO
cerca de 25 mg da amostra e dissolver em etanol absoluto.
Completar o volume para 250 mL com o mesmo solvente.
Diluir 10 mL da soluo para 100 mL com etanol absoluto,
de modo a obter soluo a 0,001% (p/v). Preparar soluo
em 240 nm, utilizando etanol absoluto para ajuste do
22
H
32
O
3
na amostra a partir das
leituras obtidas. Alternativamente, realizar os clculos
considerando A(1%, 1 cm) = 490, em 240 nm, em etanol
absoluto.
ROTULAGEM
CLASSE TERAPUTICA
Hormnio andrognico.
q
Farmacopeia Brasileira, 5 edio 1229
QUEBRA-PEDRA
Phyllanthus niruri herbae
Phyllanthus niruri L. PHYLLANTHACEAE
A droga vegetal constituda pelas partes areas secas de
Phyllanthus niruri e suas subespcies, Phyllanthus niruri
ssp. niruri L. e Phyllanthus niruri ssp. lathyroides (Kunth)
G.L. Webster, contendo, no mnimo, 6,5% de taninos totais
e 0,15% de cido glico.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Droga inodora; sabor
amargo no incio da mastigao, tornando-se suave
posteriormente.
DESCRIO MACROSCPICA
Planta herbcea, glabra, com at 80 cm de altura, caules
simples ou ramifcados, os principais delgados e sem
folhas, com ramos ou rmulos laterais fliformes, estes
portando folhas. Folhas alternas, dsticas, simples,
membranceas, glabras, oblongo-elpticas, de pice
atenuado, s vezes mucronado e base assimtrica, margem
lisa; lminas discolores, face adaxial de cor verde-oliva
e face abaxial verde-plida a cinza-plida. As folhas,
quando observadas em conjunto, tm o aspecto de folhas
compostas de pequenas leguminosas. Lminas com 0,5 cm
a 1,4 cm de comprimento e 0,3 cm a 0,6 cm de largura.
Nervuras visveis, no proeminentes, com exceo da
nervura principal na face abaxial. Venao broquiddroma.
Pecolo de 0,05 cm a 0,1 cm de comprimento. Estpula
interpeciolar, triangular-lanceolada, de 0,1 cm a 0,2 cm
de comprimento, com pice longo e estreitamente agudo
a acicular, de base inteira e margem lisa. Flores femininas
com at 0,4 cm de dimetro, isoladas e axilares nos ns
apicais, com cinco tpalas elpticas e disco inteiro, carnoso;
ovrio tricarpelar, trilocular, cada lculo bisprmico; trs
estiletes, bfdos, com estigmas globosos; pedicelo com 0,1
cm a 0,4 cm de comprimento. Flores masculinas com at
0,3 cm de dimetro, em fascculos de uma a duas fores,
dispostas nos ns basais, com cinco tpalas largo-ovaladas,
disco pentalobado, lobos carnosos e papilosos, e trs
estames com fletes conatos na base; pedicelos com cerca
de 0,2 cm de comprimento. Frutos esquizocrpicos, do
tipo tricoca, com 0,1 cm a 0,25 cm de dimetro, depresso-
globosos, expostos para a regio abaxial dos ramos,
separando-se em carpdios (cocas); exocarpo verde-oliva,
membranceo e endocarpo verrucoso; duas sementes por
lculo, triangulares, com as duas faces ventrais retas e a
face dorsal arredondada, verrucosa, verrugas proeminentes,
com pice agudo a arredondado; pedicelos cilndricos, com
cerca de 0,4 cm a 0,5 cm de comprimento na maturao;
clice persistente, membranceo, desenvolvido, atingindo
2/3 da altura do fruto. As caractersticas macroscpicas das
duas espcies, Phyllanthus niruri e Phyllanthus tenellus,
so determinantes para distingu-las, uma vez que so
muito similares quanto s caractersticas anatmicas para
alguns rgos vegetativos.
DESCRIO MICROSCPICA
Em seco transversal, o caule em desenvolvimento
secundrio exibe epiderme uniestratifcada, com estmatos.
Subepidermicamente encontram-se uma ou mais
camadas de clulas colenquimticas com espessamento
angular, interrompidas somente nas regies das cmaras
subestomticas. Clornquima formado por duas a
quatro camadas de clulas isodiamtricas, com espaos
intercelulares evidentes ou no e com gros de amido.
Mais internamente, ocorrem uma ou mais camadas de
parnquima cortical, cujas clulas apresentam maior eixo
no sentido periclinal. O foema constitudo externamente
por agrupamentos de fbras de paredes muito espessas e
lume reduzido. Drusas de oxalato de clcio esto presentes
no clornquima, parnquima cortical, parnquima medular
e em maior abundncia no foema, sempre em clulas de
maior tamanho do que as demais, abrangendo quase todo o
volume da clula. Elementos de vaso, com disposio radial,
alternam-se com uma ou mais fleiras de fbras xilemticas
e clulas parenquimticas esclerifcadas. O parnquima
medular constitudo por clulas isodiamtricas, de grande
volume, com grandes espaos intercelulares. Em caules de
maior dimetro pode ocorrer periderme, seguida de duas a
trs camadas clorenquimticas, com grande quantidade de
gros de amido. O parnquima cortical mantm as mesmas
caractersticas encontradas nos caules mais jovens. O foema
apresenta pequena quantidade de gros de amido, no se
observando diferenas quanto ao seu desenvolvimento,
comparando-se caules jovens e mais desenvolvidos. O
maior desenvolvimento do xilema, comparado ao dos
ramos mais jovens, muito evidente, com consequente
reduo da rea ocupada pelo parnquima medular. Nos
raios parenquimticos, observa-se a presena de gros de
amido e de compostos fenlicos. A folha geralmente
hipoestomtica. Raramente so encontrados estmatos
tambm na face adaxial, onde ocorrem sobre as nervuras
de menor ordem. Os estmatos so do tipo paractico e,
menos frequentemente, anomoctico. Em vista frontal, as
clulas da epiderme da face adaxial mostram contornos
irregulares e paredes onduladas, podendo a ondulao
ser mais expressiva nessa face do que na face abaxial. As
ceras epicuticulares apresentam granulaes. A cutcula
fna, tornando-se mais espessa na nervura principal. A
epiderme uniestratifcada em ambas as faces e possui
clulas fundamentais achatadas e algumas papilosas.
As clulas fundamentais da face adaxial so de maiores
dimenses do que as da face abaxial. Ocorrem cristais nesta
camada celular. A simetria do mesoflo dorsiventral. O
parnquima palidico uniestratifcado, ocupando cerca
de 2/3 da espessura do mesoflo, apresentando idioblastos
cristalferos do tipo drusas, em sua maioria. Cristais
pequenos e de diferentes formas so comuns e raramente
encontram-se cristais rombodricos. O parnquima
esponjoso constitudo por duas a trs camadas,
apresentando clulas de contornos irregulares, cujo maior
comprimento corresponde ao sentido periclinal. Cristais
pequenos agregados e/ou isolados so comuns. Em seco
paradrmica, evidencia-se o carter braciforme dessas
clulas. Na nervura principal, o parnquima palidico
pode distribuir-se continuamente ou ser interrompido
por pequeno nmero de clulas clorenquimticas ou
q
ainda, por clulas colenquimticas isodiamtricas. Nesta
regio, junto a epiderme abaxial, ocorre uma camada de
colnquima angular, de paredes pouco espessas, podendo
conter cloroplastos, seguido de tecido clorenquimtico de
clulas isodiamtricas, com poucos cloroplastos. O sistema
vascular do tipo colateral e formado por dois a seis raios.
O foema possui pequeno nmero de clulas. O padro de
venao broquiddromo.
caractersticas: presena de frutos depressoglobosos,
carpdios (cocas) isolados e sementes como descritos;
fores como descritas; cristais de oxalato de clcio do tipo
drusas; fragmentos de tecido epidrmico como descritos;
fragmentos de tecidos foliares e caulinares como descritos;
fragmentos de tecido vascular com elementos de vaso
apresentando espessamento anelado, espiralado ou
pontoado, e fbras.
DESCRIO MICROSCPICA DAS IMPUREZAS
A raiz em crescimento secundrio apresenta periderme
formada por trs a quatro camadas de clulas suberifcadas,
felognio e feloderme. Abaixo deste tecido encontra-
se o parnquima cortical, formado por trs a seis
estratos celulares. O foema apresenta fbras dispostas
perifericamente. O xilema apresenta duas a quatro fleiras
de fbras dispostas radialmente. Os raios parenquimticos
so ricos em gros de amido. A regio medular
frequentemente ocupada pelo tecido xilemtico, ou mais
raramente por parnquima. Cristais so comuns em todos
os tecidos, sendo mais abundantes na regio cortical e no
parnquima medular; comumente so pequenos, isolados
e/ou agregados, ocorrendo sob diferentes tipos, geralmente
drusas.
IDENTIFICAO
254
, com
espessura de 250 um como suporte, e mistura de acetato de
etila, cido frmico, cido actico e gua (100:11:11:26),
como fase mvel. Aplicar, separadamente, em forma
Soluo (1): transferir cerca de 1 g da droga moda para
balo de fundo redondo, adicionar 10 mL de metanol e
aquecer sob refuxo durante 30 minutos em banho-maria.
Resfriar temperatura ambiente e fltrar sob presso
reduzida. Extrair novamente com mais 10 mL de metanol
durante 30 minutos. Filtrar o extrato lavando o resduo com
5 mL de metanol agrupando-o ao primeiro. Completar o
volume para 25 mL com metanol e fltrar em membrana
de 0,45 m.
Soluo (2): dissolver 10 mg e vitexina-2-ramnosdeo
SQR em 2 mL de metanol.
Desenvolver o cromatograma. Deixar a placa secar
em estufa a temperatura entre 100 C e 105 C e, ainda
morna, nebulizar com uma soluo de difenilborato de
aminoetanol a 1% (p/v) em metanol, seguido de uma
soluo de macrogol 400 a 5% (p/v) em metanol. Deixar a
placa secar ao ar livre durante 30 minutos e examin-la sob
luz ultravioleta (365 nm). O cromatograma obtido com a
Soluo (1), deve apresentar no tero inferior da placa uma
mancha amarelo-esverdeado fuorescente correspondente a
vitexina-2-ramnosdeo e imediatamente abaixo dessa, uma
mancha amarelo fuorescente.
254
,
com espessura de 250 um como suporte, e mistura de
hexano e acetato de etila (70:30), como fase mvel. Aplicar,
a seguir.
reduzida. Extrair novamente com mais 10 mL de metanol
durante 30 minutos. Filtrar o extrato lavando o resduo com
5 mL de metanol agrupando-o ao primeiro. Completar o
volume para 25 mL com metanol e fltrar em membrana
de 0,45 m.
Soluo (2): dissolver separadamente 10 mg flantina SQR e
nirantina SQR em 2 mL de metanol.
secar ao ar e examin-la sob luz ultravioleta (254 nm).
Nebulizar a placa com soluo de anisaldeido, cido
sulfrico e cido actico (1:2:97) seguida de aquecimento
em estufa. O cromatograma obtido com a Soluo (1)
no deve apresentar as manchas respectivas flantina e
nirantina obtidas com a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 2,0%,
correspondente s razes.
gua (5.4.2.3). No mximo 10,0%.
DOSEAMENTO
Taninos totais
droga moda, transferir para balo de fundo redondo e
adicionar 150 mL de gua. Aquecer em banho-maria, sob
refuxo, durante 30 minutos, em temperatura entre 80 C e
90 C. Resfriar em gua corrente, transferir a mistura para
gua. Deixar decantar o sedimento e fltrar, desprezando os
q
Soluo amostra para polifenis totais: transferir 5 mL
da Soluo estoque para balo volumtrico de 25 mL
e completar o volume com gua. A 5 mL desta soluo,
adicionar 2 mL de reagente de Folin-Denis e diluir para 50
mL com carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da
soluo (A
1
) em 715 nm (5.2.14), exatamente 3 minutos
aps a adio do ltimo reagente, utilizando gua para
ajuste do zero.
Soluo amostra para polifenis no adsorvidos pelo
p de pele: adicionar 0,2 g de p de pele SQR a 20 mL
da Soluo estoque e agitar, mecanicamente, durante 60
minutos. Filtrar. Diluir 5 mL desta soluo para 25 mL com
gua. A 5 mL desta soluo, adicionar 2 mL do reagente
de Folin-Denis e diluir para 50 mL com carbonato de
sdio SR. Medir a absorvncia da soluo (A
2
) em 715
nm (5.2.l4), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo
reagente, utilizando gua para ajuste do zero.
Soluo padro: dissolver 50 mg de pirogalol em gua e
diluir a 100 mL com o mesmo solvente. Diluir 5 mL desta
soluo para 100 mL com gua. A 5 mL desta soluo,
soluo (A
3
aps a adio do ltimo reagente e dentro de 15 minutos
contados da dissoluo do pirogalol, utilizando gua
como branco. Calcular o teor de taninos totais segundo a
expresso:
em que
A
1
polifenis totais;
A
2
polifenis no adsorvidos pelo p de pele;
A
3
= absorvncia medida da Soluo padro;
de gua.
cido glico
de detector de ultravioleta a 275 nm; pr-coluna contendo
fase reversa C-18 hidroflica e coluna de 100 mm de
com C-18 hidroflica (3 m); fuxo da Fase mvel de 0,25
mL/minuto.
Eluente A: gua contendo 0,05 % de cido trifuoractico;
Eluente B: metanol contendo 0,05 % de cido trifuoractico.
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
Soluo amostra: pesar analiticamente cerca de 0,75 g
da droga seca e moda (800 m) e transferir para balo
de fundo redondo. Adicionar 10 mL de gua, adaptar em
condensador de refuxo e aquecer em manta ebulio
durante 15 minutos. Esfriar sob gua corrente e fltrar o
extrato sob presso reduzida. Lavar o resduo com gua.
Transferir o fltrado para balo volumtrico de 250 mL e
completar o volume com gua. Filtrar em membrana de
0,45 m e injetar no cromatgrafo.
de cido glico SQR no Eluente A para obter soluo a 1
mg/mL.
Solues para curva analtica: diluir 1 mL da Soluo
padro em balo volumtrico de 50 mL completando o
volume com Eluente A. Diluir alquotas de 1 mL, 2 mL, 3
mL, 5 mL e 7 mL dessa soluo a 10 mL utilizando Eluente
A obtendo assim, solues com concentraes de 2,0 g/
mL; 4,0 g/mL; 6,0 g/mL; 10,0 g/mL e 14,0 g/mL.
Filtrar as solues em membrana de 0,45 m e injetar no
cromatgrafo.
Procedimento: injetar, separadamente 5 L da
Soluo padro e da Soluo amostra e obter as reas
correspondentes ao pico de cido glico. O tempo de
reteno relativo cerca de 4,6 minutos para o cido
glico. Calcular o teor de cido glico na amostra a
partir da equao da reta obtida com a curva analtica
do cido glico. O resultado expresso pela mdia das
determinaes em gramas de cido glico por 100 gramas
da droga considerando a determinao de gua (%).
q
figura 1a Aspectos macroscpicos em Phyllanthus niruri L.
______________
Complemento da legenda da figura 1a.
A hbito. B for masculina com 5 nectrios e trs estames. C for feminina com ovrio e disco nectarfero. D fruto, tpalas persistentes. E folhas
de base assimtrica. f aspecto geral da semente.
q
figura 1b Aspectos macroscpicos e microscpicos em Phyllanthus niruri L.
________________
Complemento da legenda da figura 1b. As escalas correspondem em A e D a 0,05 cm; em B, C e J a 0,1 cm; em E, f, G, H e I a 50 um
A aspecto geral da folha. B aspecto geral da estpula na regio do n: ramo (ra); estpula (e); base da folha (b). C aspecto geral do fruto. D aspecto
geral da semente. E vista frontal da epiderme da face adaxial: estmato (es). f vista frontal da epiderme da face abaxial: estmato (es). G lmina
foliar na regio do mesoflo, em seco transversal: epiderme (ep); parnquima palidico (pp); parnquima esponjoso (pj); idioblasto cristalfero (ic).
H regio do mesoflo ao nvel do parnquima palidico, em seco paradrmica, evidenciando idioblastos com drusas: idioblasto cristalfero (ic);
estmato (es). I lmina foliar na regio da nervura principal em seco transversal: epiderme (ep); parnquima palidico (pp); parnquima esponjoso
(pj); xilema (x); foema (f); colnquima (co). J detalhe da nervao broquiddroma de um segmento da lmina foliar em vista frontal.
q
figura 2 Aspectos microscpicos em Phyllanthus niruri L.
______________
Complemento da figura 2. As escalas correspondem em A, B e H a 50 um; em C, D, E, f e G a 100 um.
A detalhe do caule em seco transversal: epidermem (ep); colnquima (co); clornquima (cl); parnquima cortical (pc); fbras do foema (ff);
foema (f); xilema (x); parnquima medular (pm); idioblasto cristalfero (ic). B detalhe da raiz em seco transversal: periderme (pe); parnquima
cortical (pc); fbgas do foema (ff); foema (f); xilema (x). C elemento de vaso com espessamento pontoado em vista longitudinal. D clulas
parenquimticas esclerifcadas. E fbras do foema em vista longitudinal. f clulas clorenquimticas junto s fbras do foema. G fbra em vista
longitudinal. H detalhe de um fragmento da epiderme caulinar em vista frontal, mostrando estmato (es).
q
QUEBRA-PEDRA
Phyllanthus tenellus herbae
Phyllanthus tenellus Roxb. PHYLLANTHACEAE
A droga vegetal constituda pelas partes areas secas
contendo, no mnimo, 9,0% de taninos totais e 0,12% de
cido glico.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Droga inodora; sabor
amargo no incio da mastigao, tornando-se suave
posteriormente.
DESCRIO MACROSCPICA
Planta herbcea, glabra, com at 60 cm de altura, caules
simples ou ramifcados, os principais delgados e sem
folhas, com ramos ou rmulos laterais fliformes, estes
portando folhas. Folhas alternas, dsticas, simples,
membranceas, glabras, elpticas a elptico-obovaladas, de
pice obtuso e base obtusa a aguda, margem lisa; lminas
discolores, face adaxial de cor verde e face abaxial verde-
plida. As folhas, quando observadas em conjunto, tem o
aspecto de folhas compostas de pequenas leguminosas.
Lminas com 0,8 cm a 2,5 cm de comprimento e 0,5 cm
a 1,2 cm de largura. Nervuras visveis, no proeminentes,
com exceo da nervura principal na face abaxial. Venao
broquiddroma. Pecolo curto-cilndrico, de at 0,1 cm
de comprimento. Estpula interpeciolar membrancea
a escariosa, estreito-triangular, com pice agudo e base
inteira, de at 0,15 cm de comprimento. Flores unissexuais,
reunidas em fascculos axilares pauciforos, as femininas
desenvolvendo-se primeiro, com pedicelos muito mais
longos do que os das fores masculinas. Na regio distal
dos ramos podem ocorrer fores femininas isoladas.
Flores femininas com at 0,3 cm de dimetro, com cinco
tpalas obovaladas, de margem escarioso-esbranquiada
e disco inteiro; ovrio tricarpelar, trilocular, cada lculo
bisprmico; trs estiletes, cada um bfdo na poro apical;
pedicelo com 0,1 cm a 0,8 cm de comprimento. Flores
masculinas com cinco tpalas suborbiculares, de margem
escariosa e disco pentalobado, cada lobo reniforme; cinco
estames com fletes livres entre si; pedicelos com 0,05 cm
a 0,15 cm de comprimento. Frutos esquizocrpicos, do
tipo tricoca, com 0,1 cm a 0,2 cm de dimetro, depresso-
globosos, expostos para a regio adaxial dos ramos,
separando-se em carpdios (cocas); exocarpo verde-oliva,
membranceo e endocarpo verrucoso; duas sementes por
lculo, triangulares, com as duas faces ventrais retas e a
face dorsal arredondada, verrucosa, verrugas proeminentes,
com pice arredondado, com ou sem papilas; pedicelos
cilndricos, com at 0,9 cm de comprimento na maturao;
clice persistente, membranceo, desenvolvido, atingindo
metade da altura do fruto. As caractersticas macroscpicas
das duas espcies, Phyllanthus tenellus e Phyllanthus
niruri, so determinantes para distingu-las, uma vez que
so muito similares quanto s caractersticas anatmicas
para alguns rgos vegetativos.
DESCRIO MICROSCPICA
Em seco transversal, o caule em desenvolvimento
secundrio exibe epiderme uniestratifcada, com estmatos.
Subepidermicamente encontram-se uma ou duas camadas
de clulas colenquimticas com espessamento angular,
podendo conter cloroplastdios, interrompidas somente nas
regies das cmaras subestomticas. Clornquima formado
por duas a quatro camadas de clulas isodiamtricas, com
espaos intercelulares evidentes ou no e com gros de
amido. Mais internamente, ocorrem uma ou mais camadas
de parnquima cortical, cujas clulas apresentam maior
eixo no sentido periclinal, podendo conter gros de
amido. O foema constitudo externamente por densos
agrupamentos de fbras de paredes muito espessas e
lume reduzido, isoladas ou geralmente agrupadas, com
escleredes dispersos e os agrupamentos intercalados por
clulas parenquimticas. Cristais rombodricos de oxalato
de clcio ocorrem no clornquima, parnquima cortical e
no foema, presentes sempre em clulas de maior tamanho
do que as demais. Elementos de vaso, com disposio
radial, alternam-se com uma ou mais fleiras de fbras
xilemticas e clulas parenquimticas esclerifcadas.
O parnquima medular constitudo por clulas
isodiamtricas, de grande volume, com grandes espaos
intercelulares e muitos cristais rombodricos e drusas. Em
caules de maior dimetro, pode ocorrer periderme, seguida
de duas ou mais camadas clorenquimticas, com grande
quantidade de gros de amido e cristais. O parnquima
cortical mantm as mesmas caractersticas encontradas
nos caules mais jovens. O foema apresenta pequena
quantidade de gros de amido, com um maior grau de
desenvolvimento em relao aos caules mais jovens e as
fbras distribuem-se perifericamente formando um anel.
O maior desenvolvimento do xilema, comparado ao dos
caules mais jovens, muito evidente, com consequente
reduo da rea ocupada pelo parnquima medular. Nos
raios parenquimticos, os gros de amido tambm esto
presentes. A folha hipoestomtica. Os estmatos so do
tipo paractico e, menos frequentemente, anomoctico. Em
vista frontal, as clulas da epiderme voltadas para a face
adaxial mostram contornos irregulares e paredes onduladas.
As ceras epicuticulares apresentam granulaes. A cutcula
fna, tornando-se mais espessa na nervura principal. A
epiderme uniestratifcada em ambas as faces e possui
clulas fundamentais achatadas e algumas papilosas.
As clulas fundamentais da face adaxial so de maiores
dimenses do que as da face abaxial. A simetria do mesoflo
dorsiventral. O parnquima palidico uniestratifcado,
ocupando cerca da metade da espessura do mesoflo,
apresentando idioblastos com cristais rombodricos de
oxalato de clcio. O parnquima esponjoso constitudo
por duas a trs camadas de clulas de contornos irregulares,
cujo maior comprimento corresponde ao sentido periclinal.
Em seco paradrmica, evidencia-se o carter braciforme
dessas clulas. Na nervura principal, o parnquima
palidico interrompido por pequeno nmero de clulas
colenquimticas de espessamento angular. Na regio
adaxial, abaixo do colnquima, so observadas uma ou
duas camadas de clulas isodiamtricas clorofladas. Nesta
regio, junto epiderme abaxial, ocorre uma camada de
colnquima angular, de paredes pouco espessas, destitudas
q
de cloroplastdios, seguida de um tecido clorenquimtico
com clulas isodiamtricas, com poucos cloroplastdios
ou um parnquima fundamental. O sistema vascular do
tipo colateral e formado por trs a seis raios. O foema
possui pequeno nmero de clulas. O padro de venao
broquiddromo.
caractersticas: presena de frutos depresso-globosos,
carpdios (cocas) isolados e sementes como descritos;
fores como descritas; cristais piramidais e drusas de
oxalato de clcio; fragmentos de fbras; fragmentos de
tecido epidrmico como descritos; fragmentos de tecidos
caulinares e foliares como descritos; fragmentos de
tecido vascular com elementos de vaso apresentando
espessamentos anelado, espiralado e mais frequentemente
pontoado, e fbras.
DESCRIO MICROSCPICA DAS
IMPUREZAS
A raiz em crescimento secundrio apresenta periderme
formada por duas a trs camadas suberifcadas, felognio e
feloderme. Abaixo deste tecido encontra-se o parnquima
cortical, formado por trs a quatro estratos celulares.
O foema apresenta fbras dispostas perifericamente. O
xilema apresenta fbras entre os elementos de vaso ou duas
a quatro fleiras de fbras dispostas radialmente, alm de
raios parenquimticos formados por uma ou duas fleiras
de clulas de paredes espessadas, contendo gros de amido.
Os cristais so comuns nos tecidos parenquimticos,
inclusive dos sistemas vasculares, e apresentam-se sob
diferentes tipos, isolados ou agrupados.
IDENTIFICAO
254
, com
espessura de 250 um como suporte, e mistura de acetato de
etila, cido frmico, cido actico e gua (100:11:11:26),
como fase mvel. Aplicar, separadamente, em forma
reduzida. Reextrair com mais 10 mL de metanol durante
30 minutos. Filtrar o extrato lavando o resduo com 5 mL
de metanol agrupando-o ao primeiro. Completar o volume
para 25 mL com metanol e fltrar em membrana de 0,45
m.
Soluo (2): dissolver 10 mg de rutina em 2 mL de metanol.
Desenvolver o cromatograma. Deixar a placa secar em
estufa a temperatura entre 100 C e 105 C e, ainda morna,
nebulizar com difenilborato de aminoetanol SR, seguido de
uma soluo de macrogol 400 a 5% (p/v) em metanol. Deixar
a placa secar ao ar livre durante 30 minutos e examin-
la sob luz ultravioleta (365 nm).O cromatograma obtido
com a Soluo (1), dever apresentar no tero superior da
placa uma mancha amarelo-esverdeada fuorescente. No
tero inferior da placa, a espcie pode apresentar traos
de rutina, caracterizado por uma mancha fuorescente de
colorao alaranjada correspondente em posio mancha
obtida com o padro de rutina da Soluo (2).
254
,
com espessura de 250 um como suporte, e mistura de
hexano e acetato de etila (70:30), como fase mvel. Aplicar,
a seguir
reduzida. Reextrair com mais 10 mL de metanol durante
30 minutos. Filtrar o extrato lavando o resduo com 5 mL
de metanol agrupando-o ao primeiro. Completar o volume
para 25 mL com metanol e fltrar em membrana de 0,45
m.
Soluo (2): dissolver separadamente 10 mg de flantina
SQR e nirantina SQR em 2 mL de metanol.
Nebulizar com mistura de soluo de anisaldeido, cido
sulfrico e cido actico (1:2:97) seguida de aquecimento
em estufa. O cromatograma obtido com a Soluo (1)
no deve apresentar as manchas respectivas flantina e
nirantina obtidas com a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 2,0%,
correspondente s razes.
gua (5.4.2.3). No mximo 9,5%.
DOSEAMENTO
Taninos totais
droga moda, transferir para balo de fundo redondo e
adicionar 150 mL de gua. Aquecer em banho-maria, sob
refuxo, durante 30 minutos, em temperatura entre 80
0
C e
90
0
C. Resfriar em gua corrente, transferir a mistura para
gua. Deixar decantar o sedimento e fltrar, desprezando os
q
Soluo amostra para polifenis totais: transferir 5 mL da
Soluo estoque para balo volumtrico 25 mL e completar
o volume com gua. A 5 mL desta soluo, adicionar 2
mL de reagente de Folin-Denis e diluir para 50 mL com
(A
1
) em 715 nm (5.2.14), exatamente 3 minutos aps a
adio do ltimo reagente, utilizando gua para ajuste do
zero.
Soluo amostra para polifenis no adsorvidos em p de
pele: adicionar 0,2 g de p de pele SQR a 20 mL da Soluo
estoque e agitar, mecanicamente, durante 60 minutos.
Filtrar. Diluir 5 mL desta soluo para 25 mL com gua. A
5 mL desta soluo, adicionar 2 mL do reagente de Folin-
Denis e diluir para 50 mL com carbonato de sdio SR.
Medir a absorvncia da soluo (A
2
) em 715 nm (5.2.14),
exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo reagente,
utilizando gua para ajuste do zero.
Soluo padro: dissolver 50 mg de pirogalol em gua e
diluir a 100 mL com o mesmo solvente. Diluir 5 mL desta
soluo para 100 mL com gua. A 5 mL desta soluo,
soluo (A
3
aps a adio do ltimo reagente e dentro de 15 minutos
contados da dissoluo do pirogalol, utilizando gua
como branco. Calcular o teor de taninos totais segundo a
expresso:
em que
A
1
polifenis totais;
A
2
polifenis no adsorvidos em p de pele;
A
3
= absorvncia medida para a Soluo padro;
de gua.
cido glico
de detector de ultravioleta a 275 nm; pr-coluna contendo
fase reversa C-18 hidroflica e coluna de 10 cm de
com C-18 hidroflica (3 m); fuxo da Fase mvel de 0,25
mL/minutos.
Eluente A: gua contendo 0,05 % de cido trifuoractico.
Eluente B: metanol contendo 0,05 % de cido trifuoractico.
Tempo
(minutos)
Eluente A
(%)
Eluente B
(%)
Eluio
15 - 20 50 50 isocrtica
Soluo amostra: pesar analiticamente cerca de 0,75 g
da droga seca e moda (800 m) e transferir para balo
de fundo redondo. Adicionar 30 mL de gua, adaptar em
condensador de refuxo e aquecer em manta ebulio
durante 15 minutos sob agitao magntica. Esfriar sob
gua corrente e fltrar o extrato sob presso reduzida.
Lavar o resduo com gua. Transferir o fltrado para balo
Filtrar em membrana de 0,45 m e injetar no cromatgrafo.
de cido glico SQR no Eluente A para obter soluo a 400
g/mL.
Soluo para curva analtica: diluir 2 mL da Soluo
padro em balo volumtrico de 25 mL completando o
volume com Eluente A. Diluir alquotas de 2 mL e 5 mL
desta soluo a 25 mL utilizando Eluente A obtendo assim,
solues com concentraes de 2,6 g/mL e 6,4 g/mL.
Adicionalmente, diluir alquotas de 3 mL, 5 mL e 7 mL
a 10 mL utilizando Eluente A, obtendo solues com
concentraes de 9,6 g/mL, 16,0 g/mL e 22,4 g/mL.
Utilizar as cinco solues preparadas (2,6 g/mL; 6,4 g/
mL; 9,6 g/mL; 16,0 g/mL e 22,4 g/mL) na construo
da curva analtica, aps fltrao em membrana de 0,45 m
e injeo no cromatgrafo.
Procedimento: injetar, separadamente 5 L da
Solues padro e da Soluo amostra e obter as reas
correspondentes ao pico de cido glico. O tempo de
reteno relativo cerca de 5,3 minutos para o cido
glico. Calcular o teor de cido glico na amostra a
partir da equao da reta obtida com a curva analtica
do cido glico. O resultado expresso pela mdia das
determinaes em gramas de cido glico por 100 gramas
da droga considerando a determinao de gua (%).
Em recipientes hermeticamente fechados, ao abrigo da luz
e do calor.
q
figura 1a Aspectos macroscpios em Phyllanthus tenellus Roxb.
______________
Complemento da legenda da figura 1a.
A hbito. B for masculina com cinco nectrios e cinco estames. C for feminina com ovrio e disco nectarfero. D fruto, tpalas persistentes.
E folha de base simtrica. f aspecto geral da semente.
q
figura 1b Aspectos macroscpicos e microscpicos em Phyllanthus tenellus Roxb.
______________
Complemento da legenda da figura 1b. As escalas correspondem em A a 0,5 mm; em B a 2 mm; em C, D e L a 1 mm; em E, f, G, H, I e J a 50 m.
A aspectogeral da folha. B detalhe da estpula na regio do n: ramo (ra); estpula (e); base da folha (b). C aspecto geral do fruto. D aspecto
geral da semente. E vista frontal da epiderme da face adaxial. f vista frontal da epiderme da face abaxial: estmato (es). G lmina foliar na regio
do mesoflo em seco transversal: epiderme (ep); parnquima palidico (pp); parnquima esponjoso (pj); idioblasto cristalfero (ic). H regio do
mesoflo ao nvel do parnquima palidico, em seco paradrmica, evidenciando os idioblastos cristalferos: idioblasto cristalfero (ic); parnquima
palidico (pp). I regio do mesoflo ao nvel do parnquima esponjoso, em seco paradrmica, evidenciando as clulas braciformes. J lmina foliar
na regio da nervura principal em seco transversal: epiderme (ep); parnquima palidico (pp); parnquima esponjoso (pj); colnquima (co); xilema
(x); foema (f). L detalhe da nervao broquiddroma de um segmento da lmina foliar em vista frontal.
q
figura 2 Aspectos microscpicos em Phyllanthus tenellus Roxb.
______________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A e B a 50 m; em C, D, E e f a 100 m.
A detalhe do caule em seco transversal: epiderme (ep); colnquima angular (co); clornquima (cl); parnquima cortical (pc); fbras do foema (ff);
foema (f); xilema (x). B detalhe da raiz em seco transversal: xilema (x); foema (f); fbras do foema (ff); parnquima cortical (pc). C elementos
de vaso com espessamento helicoidal e pontoado em vista longitudinal. D elementos de vaso com espessamento pontoado, em vista longitudinal. E
vista parcial de uma fbra septada. f fbras em vista longitudinal.
q
QUILAIA
Quillaiae cortex
Quillaja saponaria Mol. QUILLAJACEAE
A droga vegetal constituda por cascas dos ramos
destitudas de periderme, dessecadas e fragmentadas.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga praticamente
inodora, provoca efeito esternutatrio e possui sabor acre
a adstringente.
DESCRIO MACROSCPICA
A droga comercializada em peas planas ou pouco
recurvadas, formando placas de aproximadamente 1 cm de
comprimento, 10 cm de largura e 1 mm a 5 mm de espessura.
A superfcie externa apresenta cor esbranquiada, com
pequenas manchas de cor parda, geralmente lisa ou
fnamente estriada longitudinalmente. Aderida a esta casca
frequentemente so encontradas partes do ritidoma de
colorao amarronzada a pardo-escuro. A superfcie interna
branco-amarelada e lisa. A fratura lisa a ligeiramente
fbrosa. Em seco transversal, a fratura apresenta uma
estrutura regularmente quadriculada por faixas tangenciais
escuras e linhas radiais claras.
DESCRIO MICROSCPICA
O lber, que constitui sozinho a espessura das cascas
comerciais, exibe de forma caracterstica um aspecto
quadriculado, o que se deve pelo cruzamento sucessivo
dos raios parenquimticos com zonas de parnquima, que
se alternam com feixes de fbras. Em toda esta regio, as
clulas encontram-se justapostas, caracterizando espaos
intercelulares do tipo meato. Os raios parenquimticos
constam de duas a seis camadas de clulas de 60 m a
100 m de comprimento por, aproximadamente, 20 m de
largura. As fbras liberianas so tortuosas e, frequentemente,
encontram-se acompanhadas por pequenos grupos de
escleredes. O parnquima contm clulas de 20 m a 40
m de comprimento por 60 m a 200 m, geralmente, 90
m de largura. Possui numerosas clulas de mucilagem,
clulas amilferas com gros de amido de 5 m a 20 m
de dimetro e inmeras clulas contendo monocristais de
oxalato de clcio, que podem atingir 50 m a 170 m de
comprimento e at 30 m de largura.
caractersticas: p muito fno e de colorao amarelo-palha,
com fragmentos das estruturas descritas anteriormente;
fbras esclerenquimticas; grande quantidade de cristais
prismticos de oxalato de clcio em fragmentos do
parnquima ou livres; pores de parnquima com gros
de amido; algumas clulas ptreas alongadas com poros
oblquos; fragmentos de tubos crivados; ocasionalmente,
fragmentos suberosos.
IDENTIFICAO
254
,
com espessura de 250 um, como suporte, e mistura de
clorofrmio, etanol e gua (30:40:5), como fase mvel.
uL a 20 uL da Soluo (1) e 5 uL a 10 uL da Soluo (2),
Soluo (1): a 1 g da droga pulverizada, adicionar 20
mL de etanol a 50% (v/v) e agitar durante 20 minutos.
Filtrar e concentrar o fltrado secura em banho de gua
temperatura no superior a 50 C. Dissolver o resduo em
5 mL de metanol.
Soluo (2): pesar 0,1 g de saponina purifcada SQR e
dissolver em 5 mL de metanol, de modo a obter soluo a
2,0%. Filtrar.
secar ao ar por 15 minutos. Nebulizar a placa com
anisaldedo SR e colocar em estufa entre 100 C a 105 C,
durante 5 minutos. Visualizar sob luz visvel. As saponinas
da quilaia apresentam-se como manchas azul-esverdeadas
com Rf sequenciais em torno de 0,23 e 0,33.
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 8,0%.
ndice de espuma (5.4.2.10). Pesar 0,1 g de quilaia em
p e adicionar 100 mL de gua destilada. Ferver por 5
minutos. Filtrar e completar o volume para 100 mL com
gua destilada. No mnimo 1000.
Substncias extraveis por lcool (5.4.2.11). Macerar 5
g da droga pulverizada em 100 mL de etanol a 45% (v/v)
em um recipiente hermeticamente fechado por 24 horas,
mantendo sob agitao constante durante as primeiras 6
horas, e deixar em repouso por 18 horas. Filtrar e completar
o volume para 100 mL com etanol a 45% (v/v). Evaporar 20
mL do fltrado secura, em pesa-fltro previamente tarado
105 C, at peso constante. Calcular a porcentagem do
extrativo solvel em etanol com referncia a droga seca.
No mnimo 22,0%.
Em recipiente hermeticamente fechado, ao abrigo da luz
e calor.
q
figura 1 Aspectos macroscpicos e microscpicos de Quillaja saponaria Mol.
______________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem em A a 1 cm; em B e C a 50 m; em D a 150 um; em E a 50 um.
A aspecto geral em vista frontal da casca do caule evidenciando a face interna. B e C aspecto geral em vista frontal da casca do caule evidenciando
a face externa. D detalhe de uma poro da casca do caule em seco transversal: clula amilfera (ca); clulas condutoras do foema (ccf); clula
parenquimtica (cp); fbra liberiana (f); idioblasto cristalfero (ic); periderme (pe); raio parenquimtico (rp). E detalhe parcial da regio foemtica
com clulas de parnquima e raio parenquimtico evidenciando o entrecruzamento entre estas clulas e a presena de idioblastos cristalferos: clula
parenquimtica (cp); idioblasto cristalfero (ic); raio parenquimtico (rp).
q
figura 2 Aspectos microscpicos do p de Quillaja saponaria Mol.
______________
c cristais prismticos. cp clula parenquimtica. ic idioblasto cristalfero. f fbras.
q
QUINA-AMARELA
Cinchonae cortex
Cinchona calisaya Weddell RUBIACEAE
A droga constituda pelas cascas de ramos da espcie e de
suas variedades, contendo no mnimo 6,0% de alcaloides
totais, dos quais 60% so do tipo quinina.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga possui odor
fracamente aromtico e sabor amargo.
DESCRIO MACROSCPICA
A casca apresenta-se em tubos ou pedaos curvos, de
comprimento e largura variveis e com 3,0 mm a 7,0 mm
de espessura. A superfcie externa cinzento-acastanhada,
frequentemente acompanhada de liquens, e apresenta
numerosas fssuras transversais e longitudinais e por vezes
destacam-se gretas transversais de poucos milmetros. A
face interna castanho-amarelada e fnamente estriada,
apresentando depresses ovoides marcadas de forma mais
ou menos intensa. Em seco transversal destacam-se trs
regies distintas: a regio mais externa fna e apresenta
cor castanho-acinzentada, a regio mediana exibe mculas
arredondadas e cor amarelada e a regio interna sulcada
radialmente por numerosas linhas amarelas.
DESCRIO MICROSCPICA
O sber, em seco transversal, constitudo por
aproximadamente 15 camadas de clulas ricas em contedo
de cor acastanhada que se dispe de forma regular em
fleiras radiais. A feloderme apresenta inmeras camadas
de clulas regulares, com paredes celulares escuras. O
parnquima cortical formado por clulas com parede
tnue, destacando-se idioblastos que contm areia cristalina
distribudos, de forma esparsa, por todo o parnquima
cortical. Mais internamente e tambm de forma esparsa,
nesta mesma regio cortical, ocorrem clulas de forma oval,
que atingem um grande dimetro em relao s demais
clulas. O foema muito desenvolvido, destacando-se
elementos de tubo crivado estreitos e raios parenquimticos
que se distribuem em um parnquima desenvolvido. A
largura dos raios parenquimticos corresponde, geralmente,
a fleiras de trs clulas. As demais clulas do parnquima
foemtico encerram gros de amido esfricos ou plano-
convexos dispostos isoladamente ou em trade. No foema
destacam-se fbras que se assemelham a clulas ptreas
e apresentam parede muito espessa e claramente estriada,
atravessada por pontoaes do tipo infundibuliforme. As
fbras foemticas encontram-se dispostas radialmente de
forma isolada, reunidas em pequenos grupos ou formando
fleiras curtas e irregulares, por toda a regio do foema.
a espcie, exceto os caracteres macroscpicos. So
caractersticas: fraturas maiores de cor acastanhada e
fraturas menores de cor castanho-avermelhada; fragmentos
de sber de cor amarelado a pardo-avermelhado; fragmentos
de parnquima cortical contendo gros de amido esfricos
e idioblastos com cristais de oxalato de clcio na forma
de areia cristalina; fragmentos de fbras foemticas,
de paredes espessadas, lignifcadas, com pontoaes
infundibuliformes; fragmentos de parnquima foemtico
e de raios parenquimticos, associados s fbras, contendo
gros de amido esfricos; clulas grandes e ovais; gros de
amido esfricos ou plano-convexos simples ou associaes
de dois ou trs gros.
IDENTIFICAO
A. Reao de Grahe: Adicionar 500 mg de casca de quina-
amarela pulverizada em um tubo de ensaio e aquecer
diretamente na chama. Observar o desprendimento de
vapores de colorao prpura e sua condensao nas
paredes do tubo. Este destilado solvel em etanol.
254
,
com espessura de 250 um, como suporte, e mistura de
clorofrmio e dietilamina (90:10), como fase mvel.
Aplicar, separadamente, em forma de banda, 15 uL a 20
uL da Soluo (1) e 3 uL a 5 uL da Soluo (2), preparadas
como descritas a seguir.
Soluo (1): adicionar 0,1 mL de hidrxido de amnio a
25% (p/v) e 5 mL de cloreto de metileno a 0,1 g da droga
pulverizada. Deixar em repouso durante 30 minutos,
agitando ocasionalmente. Filtrar e evaporar o fltrado at
secura em banho-maria. Dissolver o resduo em 1 mL de
etanol absoluto.
Soluo (2): dissolver, separadamente, 17,5 mg de quinina,
0,5 mg de quinidina e 10 mg de cinchonina em 5 mL de
etanol absoluto.
secar em estufa de 100 C a 105 C por aproximadamente
10 minutos. Deixar a placa esfriar e nebulizar com soluo
etanlica de cido sulfrico a 50% (p/v). Examinar sob
luz ultravioleta (365 nm). As manchas obtidas com a
Soluo (1) correspondem em posio, cor e intensidade
quelas obtidas com a Soluo (2). Essas manchas so
correspondentes quinina (Rf aproximadamente 0,15),
quinidina (Rf aproximadamente 0,30) e cinchonina (Rf
aproximadamente 0,45).
ENSAIOS DE PUREZA
Matria estranha (5.4.2.2). No mximo 2 %.
gua (5.4.2.3). No mximo 8 %.
Cinzas totais (5.4.2.4). No mximo 12,5 %.
q
DOSEAMENTO
Alcaloides
Proceder conforme Espectrofotometria de absoro no
ultravioleta (5.2.14). Pesar, exatamente, 1 g da droga
pulverizada, transferir para erlenmeyer de 250 mL e
adicionar 10 mL de gua e 7 mL de cido clordrico 2
M. Aquecer em banho-maria durante 30 minutos. Deixar
esfriar e adicionar 25 mL de cloreto de metileno, 50
mL de ter etlico e 5 mL de hidrxido de sdio a 20%
(p/v). Agitar a mistura durante 30 minutos. Adicionar
3 g de goma adraganta em p e agitar at a preparao
se tornar clara. Filtrar atravs de papel de fltro e lavar o
erlenmayer e o papel de fltro com 100 mL de mistura de
cloreto de metileno e ter etlico (1:2). Reunir os fltrados
das lavagens, evaporar at a secura e dissolver o resduo
em 10 mL de etanol absoluto. Evaporar 5,0 mL da soluo
at a secura. Dissolver o resduo em cido clordrico
0,1 M, transferir para balo volumtrico e completar o
volume para 1000 mL com o mesmo solvente. Preparar
duas solues de referncia dissolvendo 30 mg de quinina
ou 30 mg de cinchonina em cido clordrico 0,1 M,
completando o volume para 100 mL. Medir a absorvncia
das trs solues em 316 nm e 348 nm, utilizando como
branco cido clordrico 0,1 M. Calcular a porcentagem de
alcaloides do grupo quinina (x) e de alcaloides do grupo
cinchonina (y), mediante as expresses:
em que
m = peso da amostra em g;
x = porcentagem de alcaloides tipo quinina;
y = porcentagem de alcaloides tipo cinchonina;
A
316
= absorvncia da soluo amostra em 316 nm;
A
348
= absorvncia da soluo amostra em 348 nm;
Aq
316
= absorvncia da soluo referncia contendo quinina
em 316 nm, corrigida para concentrao de 1 mg em 1000
mL;
Aq
348
= absorvncia da soluo referncia contendo quinina
em 348 nm, corrigida para concentrao de 1 mg em 1000
mL;
Ac
316
= absorvncia da soluo referncia contendo
cinchonina em 316 nm, corrigida para concentrao de 1
mg em 1000 mL;
Ac
348
= absorvncia da soluo referncia contendo
cinchonina em 348 nm, corrigida para concentrao de 1
mg em 1000 mL.
Calcular o contedo de alcaloides totais, (x + y) e determinar
o contedo relativo de alcaloides tipo quinina, a partir da
seguinte equao: (100x) + (x + y).
Em recipiente de vidro ou metal, bem fechado, ao abrigo
da luz e do calor.
q

figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Cinchona calisaya Weddell
_________________
Complemento da legenda da figura 1. As escalas correspondem: em A e B a 1 cm; em C a 500 um.
A - aspecto geral em vista frontal da casca do caule evidenciando a face externa; B - aspecto geral em vista frontal da casca do caule evidenciando a face
interna; C - seco transversal evidenciando o aspecto geral das cascas dos ramos; cac: clulas com areia cristalina; cg: clulas gigantes; fe: feloderme;
f: fbra; pc: clula do parnquima cortical; rp: raio parenquimtico na regio foemtica; su: sber.
q

_________________
Complemento da legenda da figura 2. As escalas correspondem em A e C a 500 um; em B a 200 um e em D a 350 um.
A seco transversal evidenciando um detalhe da regio externa da casca prximo a lenticelas; B seco transversal evidenciando um detalhe ao
nvel de parnquima cortical evidenciando clulas com areia cristalina; C seco transversal evidenciando um detalhe da regio do parnquima
cortical com clulas gigantes. D seco transversal evidenciando um detalhe da regio foemtica; cac: clulas com areia cristalina; cg: clulas
gigantes; fe: feloderme; f: fbra; pc: clula do parnquima cortical; rp: raio parenquimtico na regio foemtica; su; sber.
q
_________________
Aspecto geral da droga em p; ac: areia cristalina; cac: clulas com areia cristalina; cg: clulas gigantes; f: fbra; pc: clula do parnquima cortical; su;
sber.
RATNIA
Ratanhiae radix
Krameria triandra Ruiz & Pav. KRAMERIACEAE
A droga vegetal constituda por pores secas da raiz,
contendo no mnimo 5% de taninos totais, expressos em
pirogalol (C
6
H
6
O
3
; M 126,1), em relao droga seca.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A droga inodora, quase
inspida, e a casca possui sabor fortemente adstringente.
DESCRIO MACROSCPICA
As razes, tanto desidratadas quanto fxadas em lcool
etlico, apresentam-se recobertas por sber muito
escurecido, marrom avermelhado, sulcado irregularmente,
o que permite a formao de pequenas placas de formato
irregular e que se desprendem com certa facilidade, o
ritidoma. Subjacentes, esto o crtex amilceo e o foema,
compondo uma camada de colorao castanho clara. A casca,
formada pelos estratos acima, facilmente se desprende do
cilindro central, lenhoso e tambm de colorao castanho
clara externamente e marrom avermelhada na poro mais
central. Amostras fragmentadas e desidratadas apresentam-
se com formas curvadas de comprimentos diversos,
torcidas, s vezes fbrosas.
DESCRIO MICROSCPICA
Nas razes com crescimento secundrio estabelecido,
o sber formado por diversos estratos de clulas de
dimenses uniformes, com paredes pouco espessadas,
tabulares, enfleiradas, e que reagem positivamente, para
polifenis, na presena do cloreto frrico 10%. Mais
internamente forma-se nova periderme, cujas clulas
encontram-se deformadas ou rompidas pela ao mecnica
exercida pelos tecidos em formao internamente. Na
regio cortical, as clulas apresentam dimenses variadas
e paredes espessadas, sempre alongadas longitudinalmente
nas pores mais prximas ao foema e so repletas
de gros de amido de grandes dimenses e de formato
esfrico, simples ou compostos por 2-3 pores. O foema
apresenta raios parenquimticos unisseriados formados por
clulas volumosas, abundncia de idioblastos com cristais
prismticos de formas e tamanhos variados e parnquima
r
apresentar colorao castanho acinzentada. Uma segunda
mancha castanho acinzentada de Rf 0,60 corresponde
epiafzelequina-(4|8)-epicatequina. Acima da banda de
valor de Rf 0,75 dever aparecer uma mancha de colorao
azul intensa.
B. Aquecer sob refuxo cerca de 3 g da droga vegetal moda
com 60 mL de gua, durante 15 minutos. Esfriar e fltrar.
A 2 mL do extrato adicionar duas gotas de cido clordrico
SR e gotejar gelatina SR at precipitao. O aparecimento
de um precipitado ntido indica reao positiva para taninos
totais.
C. A 2 mL do extrato obtido no teste B. em Identifcao,
adicionar 10 mL de gua e 2 a 4 gotas de soluo de cloreto
frrico a 1% (p/v) em etanol. O desenvolvimento de
colorao cinza escura indica reao positiva para taninos
totais.
D. A 2 mL do extrato obtido no teste B. em Identifcao,
vermelha indica reao positiva para taninos condensados.
E. A 5 mL do extrato obtido no teste B. em Identifcao,
ENSAIOS DE PUREZA
gua (5.4.2.3). No mximo 12%.
Cinzas sulfatadas (5.2.10). No mximo 7%.
Cinzas insolveis em cido (5.4.2.5). No mximo 2%.
DOSEAMENTO
Taninos totais
Efetuar todas as operaes de extrao e diluio ao abrigo
da luz.
droga pulverizada (180 m) e transferir para erlenmeyer de
250 mL com boca esmerilhada. Adicionar 150 mL de gua
destilada. Aquecer em banho-maria durante 30 minutos
temperatura de 60 C. Resfriar em gua corrente e transferir
para um balo volumtrico de 250 mL. Lavar o erlenmeyer
e transferir as guas de lavagem com todo contedo de
droga vegetal para o mesmo balo volumtrico. Completar
o volume com gua destilada. Deixar decantar e fltrar o
lquido sobrenadante em papel de fltro. Desprezar os
de reserva com gros de amido, como os do crtex.
Tanto no crtex amilceo quanto no foema ocorrem
fbras isoladas ou agrupamentos de 5-15 elementos, cujas
paredes so relativamente delgadas, sofrendo deformaes
por compresso mecnica, em suas pores mais externas,
confgurando um arranjo ramifcado em relao s clulas
adjacentes. O xilema formado por grande quantidade de
fbras relativamente largas, lignifcadas e com pontoaes
areoladas em abundncia. Este tipo de pontoao tambm
est presente nos elementos de vaso, os quais so em geral
isolados, raramente em duplas, sempre associados com o
parnquima axial, paratraqueal. A placa de perfurao
do tipo simples. Os raios xilemticos so unisseriados e
frequentes.
caractersticas: p inspido; fragmentos do sber com
colorao marrom avermelhada, com tpicas clulas
tabulares de formato uniforme; fragmentos do tecido
cortical com gros de amido esfricos, simples ou
compostos, de grandes dimenses, associados com fbras
arranjadas de modo ramifcado; fragmentos do lenho com
clulas dotadas de pontoaes areoladas.
IDENTIFICAO
slica-gel F
254
, com espessura de 250 um, como suporte, e
mistura de acetato de etila, tolueno, cido frmico e gua
placa, em forma de banda, 20 uL da Soluo (1) e 10
uL das Solues (2) e (3), preparadas antes do uso, como
descrito a seguir.
moda, acrescentar 100 mL de etanol a 70% (v/v),
aquecer sob refuxo por 10 minutos. Aps resfriamento
temperatura ambiente, fltrar, eliminar o etanol em
evaporador rotatrio sob presso reduzida. Extrair a fase
aquosa resultante com trs pores de 25 mL de acetato de
etila em funil de separao (125 mL). Deixar em repousou
em freezer (-18 C) por 15 minutos, para total separao
das fases. Reunir as fraes orgnicas e fltrar em papel de
fltro com 2 g de sulfato de sdio anidro. Evaporar a frao
obtida em evaporador rotatrio sob presso reduzida at
resduo. Retomar o resduo com 5 mL de metanol.
em 2 mL de metanol.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa e
deixar secar em capela de exausto. Examinar sob luz
ultravioleta (254 nm). O cromatograma obtido com a
Soluo (1) apresenta mancha de fuorescncia atenuada,
na mesma altura que a obtida com a Soluo (2) (Rf de
aproximadamente 0,75). Em seguida, nebulizar a placa
com cloreto frrico a 1% (p/v) em metanol. Aps a
nebulizao a banda correspondente catequina dever
r
1
gua destilada como lquido de compensao.
completar o volume com soluo de carbonato de sdio
2
)
de compensao.
Soluo padro: dissolver imediatamente antes do uso
50,0 mg de pirogalol em balo volumtrico de 100 mL
com gua destilada. Transferir volumetricamente 5 mL da
soluo em balo volumtrico de 100 mL e completar com
completar o volume com soluo de carbonato de sdio
3
)
de compensao.
expressos em pirogalol, usando a expresso:

1 3
2 2 1
m A
m ) A 62,5(A

= TT
em que
A
1
= absorvncia da soluo amostra para polifenis totais;
A
2
= absorvncia da soluo amostra para polifenis no
A
3
= absorvncia da soluo padro;
m
1
= massa da amostra utilizada no ensaio, em gramas,
considerando a determinao de gua;
m
2
r
figura 1 Aspectos microscpicos em Krameria triandra Ruiz & Pav.
_____________
Complemento da legenda da figura 1. Escalas e correspondncias: 250 m (A), 100 m (B), 50 m (C), 25 m (D).
A - aspecto geral da distribuio dos tecidos da raiz, em seco transversal: crtex amilceo (ca); elemento de vaso (ev); foema (f); periderme (pe);
ritidoma (ri); raio parenquimtico; xilema (x). B - detalhe parcial da casca com periderme (pe) recm formada e crtex amilceo (am), em seco
transversal; C e D - detalhe parcial do crtex amilceo em seco transversal e longitudinal radial, respectivamente: gros de amido (am), espao
intercelular (ei); fbra do foema (ff).
r
figura 2 Aspectos microscpicos em Krameria triandra Ruiz & Pav.
_____________
Complemento da legenda da figura 2. Escalas e correspondncias: 50 m (A e B), 100 m (C).
A - detalhe parcial da regio cambial e dos tecidos condutores, em seco transversal: cmbio vascular (cv); elemento de vaso (ev); idioblasto cristalfero
(ic); fbras do foema (ff); fbra do xilema (fx); parnquima de reserva. B - detalhe parcial do foema, em seco transversal, mostrando parnquima
de reserva e fbras do foema: gros de amido (am); fbras do foema (ff). C - detalhe parcial do foema, em seco longitudinal radial: gros de amido
(am); fbras do foema (ff).
RATNIA TINTURA
Ratanhiae tinctura
A tintura preparada a partir das razes de Krameria
triandra Ruiz & Pav. - KRAMERIACEAE, a 10% (p/v)
por macerao ou percolao utilizando etanol 70% (v/v)
taninos, expressos em pirogalol (C
6
H
6
O
3
; M 126,1).
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. A tintura de cor
marrom-avermelhada.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando cromatoplaca de slica-
gel F
254
, com espessura de 250 um, como suporte, e
mistura de acetato de etila, tolueno, cido frmico e gua
a placa, em forma de banda, 20 uL da Soluo (1) e 10 uL
da Soluo (2), separadamente, preparadas antes do uso,
Soluo (1): aquecer 5,0 mL da tintura a resduo seco em
banho-maria. Retomar o resduo em 10,0 mL de gua.
Extrair a fase aquosa resultante com trs pores de 10,0
mL de acetato de etila em funil de separao. Deixar em
repouso em freezer (-18 C) por 15 minutos, para total
separao das fases. Reunir as fraes orgnicas e lavar
com 20,0 ml de gua.
r
em 2 mL de metanol.
secar em capela de exausto. Em seguida, nebulizar a
placa com cloreto frrico 1% em metanol (p/v). Aps
a visualizao devero ser observadas na regio do
cromatograma da Soluo (1), quatro bandas de colorao
castanho-avermelhada no quadrante superior, a banda
correspondente catequina, apresenta colorao castanho-
azulada de (Rf) 0,71.
ENSAIOS DE PUREZA
Determinao de lcool (5.3.3.8). 63,0% a 67,0%.
Resduo seco (5.4.3.2.2). No mnino 1,9%.
DOSEAMENTO
Taninos totais
Nota: Efetuar todas as operaes de extrao e diluio
ao abrigo da luz.
de absoro no visvel (5.2.14). Utilizar as solues,
Soluo estoque: transferir exatamente cerca de 1,5 g de
tintura para um balo volumtrico de 250 mL e completar
o volume com gua destilada. Filtrar a mistura por papel de
fltro. Rejeitar os primeiros 50,0 mL do fltrado.
Soluo amostra para polifenis totais: transferir
volumetricamente 5 mL do fltrado da Soluo estoque
desta soluo, 1 mL de reagente fosfomolibdotngstico e
a 29% (p/v).
Soluo amostra para polifenis no adsorvidos por p de
pele: para 10 mL do fltrado da Soluo estoque adicionar
0,1 g de p de pele e agitar mecanicamente em erlenmeyer
de 125,0 mL durante 60 minutos. Filtrar em papel de fltro.
Diluir 5 mL desse fltrado em balo volumtrico de 25 mL
desta soluo, 1 mL de reagente fosfomolibdotngstico e
29% (p/v).
Soluo padro: transferir 50,0 mg de pirogalol para balo
volumtrico de 100 mL e completar com gua destilada.
Transferir volumetricamente 5 mL desta soluo para balo
volumtrico de 100 mL e completar o volume com gua
destilada. Transferir volumetricamente 2 mL desta soluo,
1 mL de reagente fosfomolibdotngstico e 10 mL de gua
destilada para balo volumtrico de 25 mL e completar o
volume com soluo de carbonato de sdio 29% (p/v).
Medir a absorvncia das Solues amostra para polifenis
totais, amostra para polifenis no adsorvidos por p de
pele e padro em 760 nm (5.2.14) 30 minutos aps seus
preparos, utilizando gua destilada para ajuste do zero.
Calcular o teor em porcentagem de taninos, expressos em
pirogalol, usando a expresso:
em que
A
1
totais;
A
2
A
3
m
1
= massa da amostra utilizada no ensaio (g);
m
2
RAUVOLfIA
Rauvolfae radix
Rauvolfa serpentina (L.) Benth. ex Kurz
APOCYNACEAE
A droga constituda pela raiz e deve conter no mnimo
0,15% de alcaloides do grupo reserpina-rescinamina, em
relao ao material dessecado.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. quase inodora e possui
sabor muito amargo.
DESCRIO MACROSCPICA
Raiz cilndrica, frequentemente adelgaada na
extremidade distal, tortuosa; raiz inteira ou suas pores
de 1 cm a 10 cm de comprimento e de 3 mm a 22 mm de
dimetro; superfcie externa longitudinalmente enrugada
a sulcada irregularmente, de colorao cinzento-castanha
clara; podem ocorrer restos das razes secundrias ou
principalmente cicatrizes arredondadas oriundas da queda
das mesmas, com 0,5 mm a 1,0 mm de dimetro; a casca
pode faltar parcialmente e observam-se nestas falhas as
camadas internas, de cor castanho-amarelada. Lenticelas
so frequentemente observadas. A seco transversal
mostra trs regies distintas, o crtex, a faixa cambial
e o cilindro central. O crtex tem colorao castanho-
amarelada e o cilindro central amarelo-claro, com 2 a 8
anis concntricos, exibindo uma fna estriao radial; o
cilindro central ocupa cerca de quatro quintos do dimetro
da raiz. Raramente podem estar presentes restos do rizoma,
caracterizados por apresentar medula.
r
Falsifcaes e confuses so possveis, primeiramente
com razes de outras espcies de Rauvolfa originadas da
ndia, como, por exemplo, Rauvolfa heterophylla Wild.
ex Roem. & Schult. Ao contrrio dessas outras espcies,
no entanto, na raiz de Rauvolfa serpentina faltam fbras
e clulas ptreas na parte externa ao cmbio. til para a
diferenciao a distribuio de amido no corte transversal
das razes: ao contrrio de outras espcies, a raiz de R.
serpentina mostra uma distribuio quase homognea de
amido por toda a seco transversal (menos no sber e no
xilema primrio). Falsifcaes de drogas da R. serpentina
tambm so feitas com razes de Withania somnifera (L.)
Dunal (Solanaceae). Caracteres teis para identifcar essa
falsifcao incluem: o lenho de Rauvolfa amarelo-claro
e mostra estrias fnas radiais (microscopicamente verifca-
se a presena de raios parenquimticos e elementos de
vaso com disposio radial), sendo branco e formando um
anel fechado em Withania (microscopicamente mostrando
elementos de vaso dispersos no parenquima).
DESCRIO MICROSCPICA
A periderme tem at 20 camadas de clulas achatadas
tangencialmente, com arranjo radial. O sber homogneo
e constitudo por cerca de 15 camadas de clulas suberosas
de paredes delgadas. A feloderme possui at quatro camadas
de clulas com paredes delgadas, compostas por celulose,
hemicelulose e compostos pcticos. O parnquima cortical
amilfero, com vrias camadas de clulas de paredes
no lignifcadas; os gros de amido, evidenciados pelo
reagente de Lugol, podem ser pequenos e numerosos ou
volumosos, de formato arredondado ou ovide. Laticferos
ramifcados, de crescimento intrusivo, permeiam o
parnquima cortical. O foema constitudo apenas por
elementos de tubo crivado e clulas parenquimticas; fbras
e escleredes esto ausentes. Os raios parenquimticos
so multisseriados, podendo ser estreitos ou largos;
suas clulas apresentam gros de amido e/ou cristais de
formatos variados. O xilema secundrio tambm possui
arranjo radial. Os elementos traqueais e as fbras esto
dispostos em sries radiais uni ou bisseriadas e alternam-
se aos raios parenquimticos multisseriados. Os elementos
traqueais so estreitos (cerca de 40 m de dimetro), com
placa de perfurao simples ou escalariforme; as fbras
so libriformes e tm paredes lignifcadas espessadas. Os
raios parenquimticos so multisseriados, suas clulas
possuem paredes lignifcadas e os gros de amido so mais
volumosos do que aqueles encontrados no foema e no
parnquima cortical. O xilema primrio, com seis a oito
polos de protoxilema, ocupa posio medular; os elementos
traqueais tambm so estreitos e de calibre semelhante ao
das clulas parenquimticas adjacentes.
DESCRIO DO P
caractersticas: colorao acinzentada clara ou castanho-
amarelada clara; fragmentos do sber, de colorao
amarelada, com paredes delgadas suberifcadas; fragmentos
de elementos de vaso de paredes espessas, com pontoaes
areoladas; fragmentos de clulas parenquimticas do
xilema com paredes espessas e pontoaes simples;
fragmentos de clulas parenquimticas do crtex com
paredes delgadas; numerosos gros de amido arredondados,
s vezes agregados, com a regio central na forma de y ou
de estrela.
IDENTIFICAO
delgada (5.2.17.1), utilizando cromatoplaca de slica-
gel GF
254
, como fase estacionria, e mistura de butanol,
cido actico e gua (40:10:10), como fase mvel. Aplicar
na cromatoplaca, separadamente, em forma de banda 10
uL da Soluo amostra e 5 uL da Soluo de referncia,
preparados como segue.
Soluo amostra: ferver sob refuxo 1 g da droga seca e
pulverizada com 5 mL de metanol e 1 mL de uma soluo
de carbonato de sdio a 10% (p/v), durante 10 minutos,
resfriar e fltrar.
Soluo referncia: preparar uma soluo de reserpina a
10 mg/mL em metanol.
Desenvolver o cromatograma. Deixar a placa secar em
estufa entre 100 C e 105 C e em seguida nebulizar com
iodeto de potssio e subnitrato de bismuto SR. Deixar a
placa secar ao ar livre por 10 minutos e examin-la a olho
n e em seguida sob luz ultravioleta (365 nm). olho n, a
regio do cromatograma obtido com a Soluo referncia,
dever apresentar no tero mediano da placa, quase superior,
uma mancha de colorao alaranjada (reserpina). A regio
do cromatograma da Soluo amostra dever apresentar
mancha de colorao alaranjada correspondente em
posio mancha obtida com a reserpina no cromatograma
da Soluo referncia. Outras manchas alaranjadas,
abaixo da reserpina, ainda no tero mediano, podero
estar presentes. A mancha de reserpina aps exposio
luz ultravioleta (365 nm), dever ter colorao azulada
fuorescente. O cromatograma da Soluo amostra dever
apresentar mancha de colorao azulada fuorescente
correspondente em posio mancha obtida com a
reserpina no cromatograma da Soluo referncia. Outras
manchas azuladas fuorescentes, abaixo da reserpina, ainda
no tero mediano, podero estar presentes.
ENSAIOS DE PUREZA
Matria estranha (5.4.2.2). No mximo 5%.
gua (5.4.2.3). No mximo 12%.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Pesar exatamente 2,5g
da planta seca e moda e realizar extrao com 100 mL
de etanol, sob refuxo durante 4 horas, protegendo sempre
da luz. Aps a extrao, completar o volume com etanol,
em balo volumtrico de 100 mL. Transferir uma alquota
r
volumtrica de 20 mL para funil de separao. Adicionar
com proveta, 200 mL de cido sulfrico 0,25 M e extrair
quatro vezes com 60 mL de clorofrmio, descartando a
fase contendo cido sulfrico, e reservando a fase contendo
o clorofrmio. Extrair quatro vezes a fase contendo
clorofrmio com 60 mL de bicarbonato de sdio a 2% (p/v),
e fltrar a fase orgnica em balo volumtrico de 250 mL.
Aps a fltrao, completar o volume com etanol. Transferir,
em duplicata, uma alquota volumtrica de 25 mL da soluo
para balo de fundo redondo, e levar a secura em rotavapor
(banho a cerca de 40 C). As duas solues secas sero
denominadas Soluo amostra (1) e (2).
Soluo amostra (1): adicionar volumetricamente 5 mL de
etanol e 2 mL de cido sulfrico 0,25 M.
Soluo amostra (2): adicionar volumetricamente 5 mL de
etanol, 1 mL de cido sulfrico 0,25 M e 1 mL de nitrito de
sdio a 0,3% (p/v).
Soluo padro de reserpina: pesar analiticamente
e transferir 20 mg de reserpina SQR para um balo
volumtrico de 50 mL. Adicionar 25 mL de etanol e levar ao
ultrassom. Aquecer se necessrio. Aguardar o resfriamento
da soluo e completar o volume com etanol. Pipetar uma
alquota de 5 mL desta soluo em balo volumtrico de
100 mL e completar o volume com etanol, resultando na
concentrao de 20 g/mL.
Soluo padro (1): adicionar volumetricamente 5 mL de
Soluo padro de reserpina e 2 mL de cido sulfrico
0,25 M.
Soluo padro (2): adicionar volumetricamente 5 mL de
Soluo padro de reserpina, 1 mL de cido sulfrico 0,25
M e 1 mL de nitrito de sdio a 0,3% (p/v).
Nota: No empregar Solues padres (1) e (2) de dias
anteriores.
Aquecer as quatro solues, Solues amostras (1) e
(2) e Solues padres (1) e (2), concomitantemente em
banho-maria a 50 C a 60 C, por exatos 20 minutos.
Resfriar as solues at temperatura ambiente e adicionar
volumetricamente 0,5 mL de cido sulfmico a 5% (p/v)
em cada uma delas e aguardar 20 minutos exatos. Aps o
tempo de espera, medir as absorvncias das solues em
390 nm, utilizando uma mistura de etanol e gua (2:1) para
ajuste do zero. Calcular a quantidade em mg de alcaloides
do grupo reserpina-rescinamina, como reserpina, utilizando
a seguinte frmula.
) (
) (
5
2 1
2 1
S S
A A
MAL
=
em que
MAL = massa de alcaloides (mg);
A
1
= leitura da Soluo amostra (1);
A
2
= leitura da Soluo amostra (2);
S
1
= leitura com a Soluo padro (1);
S
2
= leitura com a Soluo padro (2).
Calcular o teor de alcaloides como reserpina-rescinamina,
em base seca, pela frmula.
em que
AL = teor de alcaloides (% p/p);
MAL = massa de alcaloides (mg);
M = massa da amostra seca (mg).
Em recipientes de vidro, bem fechados, ao abrigo da luz e
do calor.
r
figura 1 - Aspectos macroscpicos e microscpicos em Rauvolfa serpentina (L.) Benth. ex Kurz
_________________
Complemento da legenda da Figura 1. As escalas correspondem: em A a 100 mm, em B e G a 100 m, e de C a F a 50 m.
A - aspecto geral da raiz; B - esquema da seco transversal da raiz; C - detalhe de poro da periderme e parnquima cortical, em seco transversal;
D - detalhe de poro do parnquima cortical em seco transversal; E - detalhe de poro do xilema secundrio apresentando raios parenquimticos
multisseriados com abundantes gros de amido, fbras e vasos dispostos em sries radiais, em seco transversal; F - detalhe de poro do xilema
primrio em seco transversal; G - aspecto geral do p da raiz, com fragmentos do sber (acima, esquerda), de fbras e vasos (acima, direita e abaixo,
na regio central), de clulas parenquimticas do xilema secundrio (abaixo, esquerda) e numerosos gros de amido, isolados ou agregados; regio do
foema primrio e secundrio (f); gro de amido (ga); laticfero ramifcado de crescimento intrusivo (lt); parnquima cortical (pc); periderme (pe); raio
parenquimtico (rp); xilema primrio (xp); xilema secundrio (xs).
r
RIfAMPICINA
Rifampicinum
O
N
O
CH
3
O
OCH
3
C H
3
CH
3
C H
3
OH OH
O
C H
3
O H
CH
3
OH
O
H
OH
CH
3
O
C H
3
N
N
N
C H
3
C
43
H
58
N
4
O
12
; 822,94
rifampicina; 07719
3-[[(4-Metil-1-piperazinil)imino]metil]rifamicina
[13292-46-1]
Contm, no mnimo, 97% e, no mximo, 102% de
C
43
H
58
N
4
O
12
.
DESCRIO
Caractersticas fsicas. P cristalino, de cor castanho-
avermelhado a vermelho-acastanhado.
Solubilidade. Pouco solvel em gua, solvel em metanol,
pouco solvel em acetona e etanol.
IDENTIFICAO
da amostra previamente dessecada, dispersa em pasta
base de parafna lquida, apresenta mximos de absoro
rifampicina SQR, preparado de maneira idntica.
Doseamento, exibe mximos em 237 nm, 254 nm, 334 nm
e 475 nm. A razo entre as absorvncias determinadas em
334 nm e em 475 nm cerca de 1,75.
C. Suspender cerca de 25 mg da amostra em 25 mL de
gua purifcada. Agitar durante 5 minutos e fltrar. A 5 mL
do fltrado adicionar 1 mL de persulfato de amnio a 10%
(p/v) em soluo de tampo fosfato pH 7,4 e agitar durante
alguns minutos. A soluo modifca de amarelo-alaranjada
para vermelho-violeta, sem formao de precipitado.
ENSAIOS DE PUREZA
pH (5.2.19). 4,5 a 6,5. Determinar em 0,1% (p/v) da
suspenso da amostra em gua isenta de dixido de
carbono.
dimetro interno, empacotada com slica-gel quimicamente
ligada a grupo octilsilano (5 m); fuxo da Fase mvel de
1,5 mL/min.
Tampo Fosfato: dissolver 136,1 g de fosfato de potssio
monobsico em cerca de 500 mL de gua, adicionar 6,3
mL de cido fosfrico, diluir com gua para 1000 mL, e
homogeneizar.
Fase mvel: preparar mistura de gua, acetonitrila,
Tampo fosfato, cido ctrico M, e perclorato de sdio 0,5
M (510:350:100:20:20), fltrar em fltro de membrana 0,7
m ou menos, e degaseifcar. Fazer ajustes se necessrio.
Diluente: preparar mistura de gua, acetonitrila, fosfato de
potssio dibsico M, fosfato de potssio monobsico M, e
cido ctrico M (640:250:77:23:10).
Soluo (1): transferir cerca de 0,2 g da amostra para um
balo volumtrico de 100 mL, dissolver com acetonitrila,
diluir e completar o volume. Deixar em banho de ultrassom
por cerca de 30 segundos, se necessrio, para garantir
completa dissoluo. Utilizar essa soluo em um perodo
mximo de 2 horas.
balo volumtrico de 50 mL, diluir com o Diluente,
completar o volume e homogeneizar. Preparar essa soluo
imediatamente antes da utilizao.
volumtrico de 100 mL, diluir com acetonitrila, completar
o volume e homogeneizar. Transferir 5 mL dessa soluo
para balo volumtrico de 50 mL, diluir com o Diluente,
completar o volume e homogeneizar. Preparar essa diluio
fnal imediatamente antes da utilizao.
Soluo de resoluo: dissolver quantidade previamente
pesada de rifampicina SQR e rifampicina quinona SQR
em acetonitrila para obter uma soluo contendo cerca
de 0,1 mg/mL. Transferir 1 mL dessa soluo para balo
volumtrico de 10 mL, diluir com o Diluente, completar o
volume e homogeneizar.
rifampicina quinona e 1,0 para rifampicina. A resoluo
entre os picos de rifampicina quinona e de rifampicina no
menor que 4,0.
Procedimento: injetar cerca de 50 L da Soluo(2) e da
Soluo (3), registrar os cromatogramas e medir as reas
sob os picos. Calcular a percentagem de cada substncia
relacionada pela frmula:
r
Ti
/(r
D
+ 0,01r
Ti
)
em que r
Ti
a rea sob o pico de cada substncia relacionada
no cromatograma obtido com a Soluo (2), r
D
a rea
sob o pico da rifampicina no cromatograma obtido com
a Soluo (3), e r
Ti
a soma das reas de todos os picos
r
das substncias relacionadas obtida no cromatograma da
Soluo (2): no mais que 1,5% de rifampicina quinona
encontrada, no mais que 1% de qualquer outra substncia
relacionada encontrada, e um total de no mais que 3,5%
do total das substncias relacionadas individuais, alm da
rifampicina quinona, tendo um tempo de reteno acima
de 3 em relao ao tempo de reteno da rifampicina
encontrada.
amostra. Dessecar em estufa a 80 C, a uma presso
mxima de 670 Pa, por 4 horas. No mximo 1,0%.
No mximo 0,1%.
DOSEAMENTO
absoro no ultravioleta (5.2.14). Dissolver 0,1 g da
amostra em metanol e completar o volume para 100 mL
com o mesmo solvente. Diluir 2 mL da soluo para
100 mL com tampo de fosfato pH 7,4. Determinar a
absorvncia no mximo em 475 nm, usando como lquido
de compensao o tampo fosfato pH 7,4.Calcular o teor
em C
43
H
58
N
4
O
12
tomando 187 como valor da absorvncia
especfca.
Em recipientes bem fechados, protegidos da luz e a uma
temperatura mxima de 25 C.
ROTULAGEM
CLASSE TEREPUTICA
Antibacteriano; tuberculosttico.
RIfAMPICINA CPSULAS
43
H
58
N
4
O
12
.
IDENTIFICAO
fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, 3 uL de cada
uma das solues descritas a seguir.
Soluo (1): dissolver uma quantidade de p, equivalente
a cerca de 50 mg de rifampicina, com 5 mL de clorofrmio
e fltrar.
Soluo (2): soluo a 0,1% (p/v) da amostra em clorofrmio.
secar ao ar. A mancha principal obtida com a Soluo (1)
com a Soluo (2).
CARACTERSTICAS
o contedo de uma cpsula para um balo volumtrico de
100 mL. Lavar o corpo e a tampa da cpsula com mistura
de acetonitrila e metanol (1:1) e transferir para o balo
volumtrico. Diluir de forma a obter uma soluo com
concentrao de 1,5 mg/mL. Deixar em banho de ultrassom
por cerca de 5 minutos e esfriar a temperatura ambiente.
Transferir 10 mL dessa soluo para balo volumtrico
de 50 mL, completar o volume com Diluente e agitar.
Proceder conforme descrito em Doseamento.
Tempo: 45 minutos
dissoluo, fltrar e diluir em cido clordrico 0,1 M at
43
H
58
N
4
O
12
dissolvida no
de rifampicina SQR na concentrao de 0,0032% (p/v),
declarada de C
43
H
58
N
4
O
12
ENSAIOS DE PUREZA
Perda por dessecao (5.2.9). Determinar em 100 mg de
Cumpre o teste.
r
DOSEAMENTO
com slica ligada a grupo octilsilano (5 um), mantida
temperatura ambiente; fuxo de Fase mvel de 1,5 mL/
minuto.
monobsico em cerca de 500 mL de gua, adicionar 6,3 mL
de cido fosfrico, diluir com gua para 1000 mL e agitar.
Ajustar o pH a 3,1 0,1.
Fase mvel: mistura de gua, acetonitrila, tampo
fosfato, cido ctrico M e perclorato de sdio 0,5 M
(510:350:100:20:20). Desgaseifcar e fltrar.
Diluente: mistura de gua, acetonitrila, fosfato de sdio
dibssico M, fosfato de potssio monobssico e cido
ctrico M (640:250:77:23:10).
Soluo padro: transferir cerca de 37,5 mg de rifampicina
SQR para balo volumtrico de 25 mL e completar o
volume com uma mistura de acetonitrila e metanol (1:1).
de 50 mL, completar o volume com acetonitrila e agitar.
de 50 mL, completar o volume com Diluente e agitar.
Cada mL da Soluo padro contm cerca de 0,03 mg de
rifampicina SQR.
cpsulas. Transferir quantidade de p equivalente a 300
mg de rifampicina para um balo volumtrico de 200 mL,
adicionar cerca de 180 mL de uma mistura de acetonitrila
e metanol (1:1) e deixar em ultrassom por 5 minutos.
de 50 mL, completar o volume com acetonitrila e agitar.
50 mL, completar o volume com Diluente e agitar.
Soluo de resoluo: dissolver uma quantidade exatamente
pesada de rifampicina quinona SQR, em uma mistura de
acetonitrila e metanol (1:1), de forma a obter uma soluo
com concentrao de 0,1 mg/mL. Transferir 1,5 mL dessa
soluo e 5 mL de soluo de rifampicina SQR a 0,3 mg/
mL para balo volumtrico de 50 mL, completar o volume
com Diluente e agitar.
Injetar 50 uL de Soluo de resoluo. O t

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Sinonmia Gel de slica HF

quilograma por metro cbico kg/m

= % de amaranto na amostra em 519 nm

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