Ministrio da Educao Secretaria de Educao Profissional e Tecnolgica Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia de Gois Pr-Reitoria de Pesquisa e Ps-Graduao

Departamento de Pesquisa e Inovao

Sensor Multivariado para a Identificao de Compostos Orgnicos

NOME DO BOLSISTA: Ana Luiza Fernandes da Costa NOME DO ORIENTADOR: Fernando Schimidt DATA DE INGRESSO COMO BOLSISTA (MS/ANO): setembro/2011 NOME DO CURSO: Licenciatura em Qumica PERIODO QUE EST CURSANDO: 7 BOLSISTA DE RENOVAO: (X) SIM ( ) NO

INHUMAS, AGOSTO DE 2012

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Identificao do Projeto e Componentes

Ttulo do Projeto: Sensor Multivariado para Identificao de Compostos Orgnicos Bolsistas: Ana Luiza Fernandes da Costa/ Sarah Lorrany Trindade Ferreira Orientador: Fernando Schimidt Local de execuo: Instituto Federal de Gois Cmpus Inhumas Vigncia: 01/09/2011 at 31/08/2012

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Introduo A lngua eletrnica um sistema analtico de baixo custo elaborado para

identificao dos componentes presentes em soluo podendo assim, identificar, classificar as substncias de acordo com variaes especficas da mesma, relacionado sensibilidade sensorial, identificando as substncias atravs de um painel de fcil diferenciao (LEGIN, 2011). Assim, o sensor multivariado baseado na lngua eletrnica e elaborado para a identificao de compostos orgnicos atravs da variao de cor e tonalidade, atravs de reagentes selecionados que correspondem s variaes das reaes para assim, diferenciar as substncias desejadas. Para a identificao de substncias orgnicas, muitas especificidades devem ser consideradas, j que essas podem formar diversas reaes, atravs de oxidao, matrias-primas ou produtos de decomposio (CEOLIN, 2009). Ento, as substncias orgnicas podem formar produtos diferentes de acordo com os grupos funcionais, sendo que isso pode ocorrer pela variao de cor ou tonalidade das mesmas, sendo o foco da pesquisa. Atravs disso, as reaes formam cor ou tonalidade variada, especificando assim, os grupos funcionais e consequentemente os compostos orgnicos. As variaes de cor podem ser analisadas na regio do espectro podendo assim, relacionar as variaes aos grupos orgnicos sensveis a partir das reaes de oxidao com os reagentes: Permanganato de potssio (KMnO4), Cloreto frrico (FeCl3) e Dinitrofenilhidrazina ou DNF (C6H6N4O4), juntamente com dez aminocidos, sendo estes: cistina; arginina; prolina; fenilalanina; tirosina; glicina; histidina; cistena; triptofano e alanina, alm de amostras de caf. Foram utilizados dez aminocidos para a anlise, esses so codificados pelo cdigo gentico, sendo, portanto componentes das protenas dos seres vivos, alm de apresentarem um grupo amino e um carboxlico ligado ao mesmo carbono. A Prolina um dos aminocidos cclicos alifticos que so componentes primrios da protena colgeno, o tecido do conectivo que liga e sustenta todos os outros tecidos. A prolina tem uma cadeia lateral aliftica com frmula molecular C5H9NO2, mas difere dos demais aminicidos pela sua cadeia lateral que est ligada a um tomo de

azoto e a um tomo de carbono. O triptofano possui um anel indlico ligado a um grupo metileno com frmula molecular C11H12N2O2. A poro aromtica do triptofano serve como um marcador ultravioleta para a deteco deste aminocido tanto de forma separada, ou incorporado em protenas e enzimas, atravs de espectrofotometria ultravioleta. A arginina com frmula molecular C6H14N4O2 em protenas tem um carcter anfiptico, j que parte da sua cadeia lateral que hidrofbica, mas termina num grupo guanidina, que possui carga positiva na maioria das situaes fisiolgicas. A histidina um dos aminocidos bsicos (em relao ao pH) devido sua cadeia lateral aromtica de azoto heterocclico com frmula molecular C6H9N3O2. A Glicina bastante solvel em gua e cido frmico e praticamente insolvel em etanol e fabricada pela sntese qumica a partir de formaldedo ou cido monocloroactico e amonaco com frmula molecular C2H5NO2. A Tirosina metabolicamente sintetizada a partir da fenilalanina com frmula molecular C9H11NO3, tornando-se seu derivado para-hidrxi, embora seja menos hidrfoba, sendo que muitas reaes qumicas colocam em evidencia a sua funo servindo para dosear as protenas nos lquidos biolgicos (s.a., 2011). J a fenilalanina um aminocido que faz parte da composio de todas as protenas (animal e vegetal) com frmula molecular C9H11NO2. A cistena possui um grupo tiol na sua cadeia lateral com frmula molecular C3H7NO2S e principalmente encontrado em protenas e no tripptido glutationa. J a cistina um aminocido natural com frmula molecular C6H12N2O4S2, formado pela dimerizao da cistena em condies oxidantes, que contm uma ligao entre dois tomos de enxofre, presente na urina e em clculos biliares e renais e, sob forma combinada, em protenas. A alanina o nome comum para o cido 2-aminopropanico, com frmula molecular C3H7NO2. O grupo varivel ligado ao carbono , que distingue um aminocido de outro, neste caso um grupo metilo. Este grupo confere um carcter hidrofbico alanina, classificando-se esta como aminocido aliftico. Pela mesma razo,

estruturalmente um dos aminocidos mais simples (s.a., 2011). A analise de amostras de caf se deve ao fato deste gro possuir alm de uma grande variedade de minerais potssio (K), magnsio (Mg), clcio (Ca), sdio (Na), ferro (Fe), mangans (Mn) e vrios outros, aminocidos como alanina, arginina, asparagina, cistena, cido glutmico, glicina, histidina, isoleucina,

lisina,metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, tirosina, valina; lipdeos como triglicerdeos e cidos graxos livres, acares como sucrose, glicose, frutose, arabinose, galactose, maltose e polissacardeos. A cafena uma substancia termoestvel, isto , no destruda com a torrefao excessiva. As demais substncias, como aminocidos, acares, lipdeos, niacina e os cidos clorognicos, so preservadas, formadas ou mesmo destrudas durante o processo de torra (LIMA, s.d.). Devido a essa variedade fizemos a anlise das amostras de caf comerciais e orgnicas. O caf pode ainda possuir variaes devido ao tempo de torrefao, produzindo diferentes tons de p, dependendo das substncia presentes. Os reagentes utilizados com as amostras possuem caractersticas que variam de cor e tonalidade atravs de reaes, que diferenciam as amostras. Assim, o permanganato de potssio um agente oxidante forte que possuem variaes de cor e tonalidade diferenciada, sendo que as anlises consistem na reao da soluo de permanganato de potssio em meio aquoso com a ligao mltipla de um alqueno ou alquino. O teste positivo se a soluo violeta do on permanganato se descora imediatamente com formao de precipitado marrom (MnO2). J o Cloreto frrico formam complexos coloridos com on Fe3+ e a colorao varia do azul ao vermelho. O teste do cloreto frrico pode ser efetuado em gua, metanol ou diclorometano. Entretanto, o teste no positivo para todos os fenis. Certos enis tambm reagem positivamente. O Teste com 2,4-dinitrofenil-hidrazina as reaes ocorrem em meio cido e formam 2,4-dinitrofenil-hidrazonas, usualmente como um precipitado de colorao amarelo-avermelhada. O produto tem, na maior parte dos casos, um ponto de fuso ntido, podendo facilitar a identificao a presena de aldedo ou cetona, formando um complexo nesses casos (CEOLIN, 2009). As variaes de cor das reaes podem ser medidas por meio do tratamento de imagens obtidas com um scanner. Cada imagem possui pontos ou pixels em funo da sua resoluo que na definio de cores RGB, em que a cor possui trs canais: R (vermelho), G (verde) e B (azul) e podem variar com ndices inteiros entre 0 e 255, permitindo uma combinao de 256 3 (= 16.777.216) tonalidades em cada pixel. Assim, todas as variaes de cor podem ser armazenadas como matrizes e tratadas matematicamente, demonstrando a sensibilidade do scanner e a importncia de sua utilizao (GODINHO, et. al., 2008).

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Material e Mtodos

3.1. Materiais cido clordrico (HCl). 3.2. Amostras Cistina; Arginina; Prolina; Fenilalanina; Tirosina; Glicina; Histidina; Cistena; Triptofano; Alanina; Caf de diversas marcas. 3.3. Reagentes 2,4 Dinitrofenilhidrazina (2,4 DNF); Cloreto frrico (FeCl3); Permaganato de potssio (KMnO4). 3.4. Equipamentos e vidrarias Um Bquer (50 mL); Um Bquer (250 mL); Trs Pipetas volumtricas (10 mL); Pipeta graduada; Trs placas de petri;

 Erlemeyer; Proveta (100 mL); Chapa eltrica; Pra; Balo volumtrico; Scanner; Colocou-se em torno de 5 mL a 10 mL dos reagentes nas amostras e observou-se as variaes de cor e tonalidade, analisando e identificando as substncias atravs dessas variaes, no qual baseou-se em referncias bibliogrficas e estudou-se os compostos orgnicos referentes as variaes de acordo com os grupos funcionais, sendo esses fundamentais na identificao dos compostos orgnicos. Realizou-se diversas anlises com as amostras estando essas enumeradas para falicitar a difereciao dos aminocidos, tais como: 1 Prolina; 2 Alanina; 3 Cistina; 4 Triptofano; 5 Tirosina; 6 Arginina; 7 Histidina; 8 Glicina; 9 Cistena; 10 Fenilalanina e amostras de caf, e colocouse os reagentes, onde preparou-se os trs segmentos das amostras para os trs reagentes. Preparou-se as amostras diludas em gua com excesso do caf sendo analisado sem alterao de como foi produzido. Atravs disso, as variaes de cor e tonalidade eram colocadas em placas de petri e observou-se no scanner as variaes, sendo essas especficas para os compostos de acordo com a presena do grupo funcional ou da composio orgnica especfica como tambm no caso das amostras de caf. Dilu-se o reagente do cloreto frrico porque em muitos casos que esse no diludo em gua isso tem que ser feito pois esse totalmente diludo reage totalmente com as amostras obtendo assim, as variaes de cor e tonalidade. Foram coletadas 14 amostras de caf atravs de doaes, sendo amostras de caf lquido (infuso do p) sem aucar (sacarose). As amostras eram diferenciadas atravs do lote ou marca orgnica, podendo analisar as

especificidades quanto a composio, diferenciando sensitivamente as amostras de acordo com as variaes.

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Resultados A figura 1 mostra a capacidade do mtodo de diferenciar as amostras. Ento

as reaes demonstradas com as amostras especificam os testes feitos com o reagente KMnO4 observando que esse era adequado para realizar os demais testes devido a variao de cor e tonalidade, definindo assim, as amostras com as caractersticas.

Figura 1 Reao das amostras 1 Aspirina, 2 Acar, 3 Trigo, 4 Gelatina e C Controle com o reagente KMnO4.

Assim as reaes podem proporcionar variaes especficas de acordo com a amostra que podem ser definidas pelas seguintes equaes:

Reagente KMnO4:
H2O

C=C

MnO4
(violceo)

MnO2
(precipitado marron)

OH OH

Reagente 2,4 DNF:

NO 2 R (H)R C=O + NO 2 NHNH2
2,4-dinitrofenilidrazina
H 2 SO 4

NO 2

NO 2 NH N=C

R R(H)

2,4-dinitrofenilidrazona
( ppt amarelo-avermelhado)

Reagente FeCl3: 3 ArOH + [Fe(H2O)6]3+ Fe(H2O)3(OAr)3 +

Composto colorido

3H3O+

Ento as variaes obtidas dependem do produto que define a colorao e assim o composto orgnico. Ao colocar os reagentes as amostras demonstravam variaes de colorao e tonalidade especfica, correspondente amostra, definindo-a. Com isso, quanto se colocou o KMnO4 nas amostras de aminocidos (fig. 2) essas demonstraram variaes no momento que era colocado o reagente e apresentava mudana conforme o tempo devido a oxidao do KMnO4.

Figura 2 Amostras de aminocidos quanto se colocou o reagente Permanganato de potssio (KMnO4), as variaes de cor e tonalidade ocorreram conforme o tempo. (1) Cistina; (2) Arginina; (3) Prolina; (4) Fenilalanina; (5) Tirosina; (6) Glicina; (7) Histidina; (8) Cistena; (9) Triptofano; (10) Alanina e (C) controle.

J quando colocou-se o reagente 2,4 DNF, as amostras variaram mais de tonalidade (fig. 3) diferenciando assim, as amostras de aminocidos baseados no controle. Para realizar o teste das amostras com o reagente, adicionou-se no mesmo cido clordrico, pois esse apresenta variao de colorao e tonalidade, ou seja, oxida, se for colocado em meio cido, pois isso influencia na sua diluio evitando a formao de precipitado (CEOLIN, 2009).

Figura 3 Reao dos aminocidos com o reagente 2,4 DNF.

Com o reagente FeCl3 as amostras de aminocido demonstraram uma variao de colorao e tonalidade (fig. 4) especificando assim, as amostras que possuem caractersticas com produtos que definem a cor da reao com as amostras. A diferena de colorao pode ser observada com o controle, sendo esse constitudo apenas por uma soluo do reagente com gua destilada.

Figura 4 Reao das amostras de aminocidos com o Cloreto frrico.

Assim realizaram-se testes das amostras de caf coletadas com os trs reagentes e observaram-se as variaes definindo e diferenciando as amostras orgnicas e de lote. Ento, dilu-se o KMnO4 em 400 mL de gua: C1 . V1 = C2 . V2 Onde: C1 = concentrao de KMnO4 da soluo inicial = 0,1 mol.L-1 V1 = volume de KMnO4 da soluo inicial = 100 mL = 100.10-3 L C2 = concentrao da soluo de KMnO4 = ? V2 = volume final da soluo de KMnO4 = 400 mL = 400.10-3 L Sendo C2: 0,1 (100.10-3) = C2 . 400.10-3 0,01 = 400.10-3 C2 C2 = 0,01 400.10-3 C2 = 0,025 mol.L-1 Ento a concentrao da soluo do reagente KMnO 4 que foi utilizado para aos testes das amostras de caf passou a ser 0,025 mol.L-1.

Figura 5 Exemplo da aquisio da imagem de uma amostra de caf.

As imagens das amostras foram tratadas atraves do modelo de Anlise de Componentes Principais, podendo demonstrar variaes, e assim pode-se observar dentro da elipse (grafico 1) todas as marcas comerciais adquiridas em supermercado. Cada smbolo e cor representa uma mesma marca comercial sendo que existe uma grande variao entre as marcas comerciais. Fora da elipse podemos observar as marcas orgnicas.

10000

5000

CP7
-5000 -10000 -15000 -10000 -5000 0 5000 10000 15000 20000

CP3

Grfico 1 - Anlise das amostras de caf por PCA

5.

Concluso As variaes de cor ocorrem conforme as reaes entre amostras e

reagentes acontecem, ou seja, medida que reaes orgnicas (oxidao ou substituio) acontecem havendo a mudana de colorao e tonalidade (mais claro e mais escuro). Assim, observou-se que as variaes definem as amostras, j que cada uma demonstrou colorao ou tonalidade especfica identificando assim os compostos orgnicos. As variaes podem no ser percebidas visualmente devido limitao do olho humano, porm podem ser identificadas com um scanner, facilitando a identificao das amostras, principalmente as reaes que mudaram apenas de tonalidade. Alm disso, o scanner facilita a identificao de mudanas de colorao nas amostras, devido deteco de impurezas, misturas de variedades, diferentes nveis de torrefao, nas amostras de caf que devido a esses fatores possuem variaes de lote. O tratamento de imagens com o scanner permitiu uma sensibilidade na anlise das amostras, pois principalmente as pequenas variaes das reaes puderam ser trabalhadas e detalhadas, proporcionando uma preciso analtica. Essa preciso bastante favorvel, j que identificou pequenas variaes em amostras com os mesmos reagentes. As amostras de caf apresentaram variaes entre as orgnicas e as de lote demonstrando como a origem significativa. No entanto, para a realizao dos testes foi necessrio selecionar os reagentes usados, pois esses so decisivos nas variaes de colorao e tonalidade para identificar os compostos orgnicos.

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Perspectivas de continuidade ou desdobramento do trabalho Como continuidade do projeto, pretendemos continuar as anlises das

amostras de caf para compreender melhor os motivos das variaes e as diferenas entre os diversos tipos das amostras coletadas. Assim testar tambm outros reagentes e ainda analisar a possibilidade de trabalhar diferenciadamente os j usados, como por exemplo, diluir mais os reagentes, pretendendo aperfeioar e observar as mudanas com os mesmos que mais se adquam para os testes com as amostras. Para tanto, observar as mudanas das imagens no scanner e assim analisar o motivo das variaes de colorao em relao aos compostos orgnicos que proporcionam essas variaes. Alm disso, comparar os resultados para buscar entender os motivos da variao, aproveitando a sensibilidade e a especificidade do scanner e das reaes de distinguir os resultados.

7.

Apoio e Agradecimentos O projeto teve financiamento pelo CNPq. Aos alunos e servidores do

Instituto Federal que nos forneceram as amostras de caf para realizar as anlises. 8. Referncias Bibliogrficas

CEOLIN, M., P. (2009) Anlise Orgnica Qualitativa II Classificao de Grupos Funcionais Preparao de Derivados. Disponvel em: <http://www.ebah.com.br/content/ABAAAAjjsAB/apostila-relatorio-final-organica-iv> Acesso em: 24 jul. 2012. GODINHO, M. S. et al. Classificao de Refrigerantes atravs de Anlise de Imagens e Anlise de Componentes Principais (PCA). In: Qumica Nova, vol. 31, n. 6, p. 1485-1489, ago. 2008. LEGIN, A. (2011) Electronic Tongue http://www.electronictongue.com/ Acesso em: 21 jul. 2012. LIMA, D. R. (s.d.) Caf e composio <http://www.abic.com.br>. Acesso em: 15 ago. 2012. team. Disponvel: em:

qumica.

Disponvel

s.a. [2011?] Aminocidos: Prolina, Alanina, Triptofano, Tirosina, Arginina, Histidina, Glicina. Disponvel em: <www.explicatorium.com/quimica> Acesso em: 24 jul. 2012. s.a. [2011?] Aminocidos: Cistena, Cistina e Fenilalanina. Disponvel em: <http://pt.wikipedia.org/wiki> Acesso em: 24 jul. 2012.

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Bibliografia

s.a. (2010) Titulao de oxi-reduo de KMnO4. Disponvel em: < http://www.ebah.com.br/content/ABAAAA93sAC/relatorio-quimica-analitica>. Acesso em: 20 jul. 2012