E

DIRETORIA DE ENSINO NORTE 2

Reunio:

Palestra do Prof. Dr. Bayardo Baptista Torres As bases bioqumicas do

metabolismo
Planejamento do uso do material instrucional e de aulas prticas
Uma viagem sem volta (contrato pedaggico)
Construo coletiva de jogos como instrumento para uma aprendizagem
significativa.

PROJETO CELULAR
17/abril/2007

Oficina Pedaggica - Diretoria de Ensino Norte 2

Rua Plnio Pasqui, 217
Parada Inglesa

As bases bioqumicas do metabolismo

Bayardo Baptista Torres
Depto. de Bioqumica, Instituto de Qumica, Universidade de So Paulo

Para que sejam discutidos alguns princpios bioqumicos que regem o metabolismo,
responda as questes listadas abaixo; redija, sem identificar-se, todas as dvidas e
informaes que gostaria de ver discutidas.
Questes
1. A adenosina trifosfato (ATP) o composto que fornece energia para todos os
processos celulares. Esta informao correta?
2. O ATP necessrio para a manuteno de todas as clulas vivas. Certo ou
errado?
3. O ATP pode ser classificado como aminocido, protena, base nitrogenada,
nucleotdio, enzima, coenzima, todos eles, alguns deles ou nenhum deles?
4. Os animais obtm ATP a partir da oxidao de alimentos. As bactrias tambm
oxidam compostos com a mesma finalidade? E os vegetais superiores?
5. Assinale, entre os processos a seguir, os que s podem ocorrer com a
participao do ATP.
a. Converso de amido a glicose, no trato digestrio.
b. Sntese celular de protenas.
c. Contrao muscular.
d. Transporte de ons ou molculas de uma soluo mais concentrada
para outra, menos concentrada, separada da primeira por uma
membrana permevel ao on ou molcula.
e. Transporte de ons ou molculas de uma soluo menos concentrada
para outra, mais concentrada, separada da primeira por uma membrana
permevel ao on ou molcula.
6.

necessrio ingerir diariamente carboidratos, lipdios e protenas? Por que?

7. As tabelas de composio nutricional, encontradas nas embalagens de

alimentos, registram o nmero de calorias contidas no alimento.
a. Como se faz para medir a quantidade de calorias presente em um
alimento?
b. De que adianta saber a quantidade de calorias dos alimentos, se os
seres vivos no podem utilizar o calor como fonte de energia? Ou
podem?
8. conhecida a reao de glicose com oxignio:
C6 H12 O6 + 6 O2

6 CO2 + 6 H2O

Analogamente, poder-se-ia escrever a reao, tambm possvel de sacarose

com oxignio:
C12 H22 O11 + 12 O2

12 CO2 + 11 H2O

Por que o acar no se transforma em gs carbnico e gua?

UMA VIAGEM SEM VOLTA Maria Ligia Coutinho Carvalhal

(Depto. Microbiol./Inst. Cinc. Biomd./USP) mlcarval@ajato.com.br

&
Maria Silvia Coutinho Carvalhal
(Lab. Comunicao e Educao em Sade/Depto. Med. Prev. e
Social/FCM/Unicamp) mariasilviaccarvalhal@yahoo.com.br

Objetivo da atividade:
Apresentar uma atividade didtico-pedaggica capaz de favorecer o processo de
ensino/aprendizagem significativo, pela construo coletiva de uma ferramenta
contratual da relao: professor aluno grupo contedos -mtodo

Justificativa:
Estar em sala de aula tem sido um exaustivo exerccio de pacincia e esforo criativo
para professores e alunos. Freqentemente resulta em desgaste da relao entre
esses sujeitos submetidos rigidez curricular. A dificuldade em abrir mo das
tradicionais formas de ensinar proporcional dificuldade de incorporar novos
paradigmas de ensino/ aprendizagem e novas formas de ser e estar em sala de aula.
A atividade didtica/pedaggica VIAGEM SEM VOLTA insere-se na metodologia de
OFICINA e foi criada a partir da necessidade de trabalhar com educadores e
cuidadores da rea de sade pblica, responsveis por grupos de pessoas com
problemas de sade.
Condies necessrias:
Participao ativa de todo o grupo: professores (incluindo o coordenador de
disciplina), monitores, tcnicos, alunos e outros elementos que participaro do
curso.
Tempo aproximado para um grupo de 40 alunos: Aproximadamente 2 horas.
Metodologia
Etapas de construo coletiva do nibus:
1. O desenho esquemtico: O professor traz o desenho esquemtico de um
nibus ou outro veculo e inicia a montagem do mesmo (figura abaixo).

2. Destino: Identificao do curso. - Para onde queremos ir? Onde queremos

chegar?
3. Peas do Motor: Mtodos a serem utilizados durante o curso ou temas do
contedo do mesmo;
4. Parafusos: que unem as peas do motor: atitudes e valores necessrios para
que o motor funcione;
5. Combustvel: Energia Afetiva que permeia o aprendizado. Medos e desejos =
expectativas em relao ao curso/viagem que ter incio;
6. Carcaa: Regras de funcionamento do grupo durante o processo = Limites;
7. Lubrificante das Rodas: Disposies e intenes esperadas que contribuem
para o bom andamento das rodas;

8. Espelhos retrovisores e faris: Avaliao contnua. Como ser a avaliao?;

9. Pedras no caminho: possveis problemas a serem resolvidos durante a
disciplina;
10. Bagagem: Vivncias pessoais de cada passageiro. Exemplo: vivncia em
grupo, conhecimento sobre determinado tema, etc;
11. Passageiros: os passageiros tomam os seus lugares e se identificam ao
subirem no nibus;
12. Motorista: Definio de papeis e funes.

Resultados:
A atividade didtico-pedaggica A Viagem sem Volta permite:
1. O favorecimento aos participantes da tomada de conscincia e o
fortalecimento do papel de sujeito histrico, de cidado com seus direitos e
deveres, enquanto participantes de um processo;
2. A construo coletiva de um contrato pedaggico envolvendo todos os
elementos participantes do curso a ser iniciado;
3. O estabelecimento de um compromisso entre todas as partes envolvidas no
processo e legitimao das condies estabelecidas proveniente da
construo coletiva do nibus;
4. A sistematizao dos contedos e possveis processos emergentes;
5. A possibilidade de mudanas afetivas e cognitivas e, portanto mudanas na
ao;
6. Uma anlise do contexto psico-social do grupo sem prejuzo das diferenas
individuais;
7. Trabalhar o acolhimento, a apresentao e a integrao grupal;
8. Definir diferentes papeis e funes dos integrantes;
9. .Uma avaliao permanente do processo de ensino e aprendizagem, pois o
painel construdo permanece, durante todo o curso ao alcance de todos. Desta
forma o painel constitui, para todos os passageiros referncia do planejamento,
das regras, do compromisso, das prioridades, dos medos e das necessidades
e obstculos a serem contornados.

CONSTRUO COLETIVA DE JOGOS COMO INSTRUMENTO PARA UMA

APRENDIZAGEM SIGNIFICATIVA.
M. Ligia Coutinho Carvalhal
(Depto. Microbiologia. Instituto Cincias Biomdicas/ USP)

... muitas vezes os educadores se

perdem e no conseguem mais atrair a
ateno, motivar seus alunos, pois se o
educando mudou, o educador tambm
precisa mudar. Os mtodos tradicionais
de ensino esto cada vez menos
atraentes para a criana, ela quer
participar, questionar, atuar e no
consegue ficar horas a fio sentada
ouvindo uma aula expositiva.....
(Maria da Glria Lopes - Jogos na
educao: criar, fazer, jogar. Ed. Cortez,
2000)

O objetivo da proposta de construo de jogos em sala de aula proporcionar

ao aluno a possibilidade de relacionar contedos e vivncias pessoais e, ao mesmo
tempo, desenvolver potencialidades e descobrir aplicaes para o que precisam
aprender de forma significativa.
Sugerimos algumas etapas a serem seguidas para o processo de construo de
jogos em sala de aula (Todas as etapas do trabalho estavam apresentadas no
calendrio e cronograma da disciplina.).
1.
Oficina preparatria para sensibilizao dos alunos para o processo ser
iniciado. Nesta atividade dever ser tambm definido qual o objetivo principal
da criao do jogo.
2.
Pesquisa e definio do pblico alvo. Discusso sobre a necessidade de
conhecermos o pblico alvo.
3.
Sugesto de modelos de jogos a serem utilizados. Trabalhar com alguns
jogos e discutir com os alunos possibilidades de utilizao dos modelos e
regras apresentadas.
4.
Definir grupos de trabalho e contedo.
5.
Definir, o material necessrio e sugestes para a confeco.
6.
Disponibilizar tempo e material necessrio para a realizao do trabalho.
7.
Acompanhar em perodos seguidos a construo da idia, do tema e da
dinmica.
8.
Marcar dia e horrio para a aplicao do jogo em sala de aula ou no pblico
alvo.
9.
Construir planilha com questes para avaliao do jogo pelo grupo que
construiu e pelos demais grupos.
Porque Jogos?
O jogo em si possui componentes do cotidiano capazes de despertar o
interesse do aprendiz que, desta forma, se torna sujeito ativo do processo de
aprendizagem sendo que a confeco dos prprios jogos ainda mais
emocionante do que o prprio jogar.
O professor tem sempre a possibilidade de adaptar o contedo programtico
ao jogo.
O jogo valido para todas as idades, desde o maternal at o adulto.
O jogo, na medida em que visa um desenvolvimento globalizado, pode
interligar diversas reas do conhecimento atendendo demanda do aprendiz.

Como um trabalho em grupo ele atende algumas necessidades sociais de interrelao de respeito a regras, competio e cooperao tanto nos domnios afetivos
como cognitivos e muitas vezes motores. No respeito s regras pode desenvolver
o autocontrole, a capacidade criativa, o autoconceito, a auto-estima e a valorizao
pelo desenvolvimento da capacidade de realizao.
Objetivos Pedaggicos no Contexto escolar:
1. Trabalhar a ansiedade.
2. Rever limites.
3. Reduzir a descrena na autocapacidade de realizao.
4. Diminuir a dependncia; desenvolvimento de autonomia.
5. Aprimorar a coordenao motora (quando o caso).
6. Desenvolver a organizao espacial.
7. Aumentar a ateno e a concentrao.
8. Desenvolver antecipao e estratgia. Resoluo de problemas
9. Ampliar o raciocnio lgico.
10. Desenvolver a criatividade
11. Perceber e ler imagens e textos.
12. Saber jogar cada vez melhor! Ser cada vez um melhor jogador.

Avaliao a ser feita pelo professor:

Verificar se o material preencheu o objetivo inicial que deve ter relao com a
aprendizagem significativa:
Para tanto o material deve:
1. Suscitar modificaes no comportamento e na relao do aprendiz com o
mundo que o cerca.
2. Ter relao com o universo de conhecimentos, experincias e vivncias
dos alunos.
3. Permitir que o aluno formule problemas e questes que, de algum modo
lhe interessem e o envolvam.
4. Permitir que o aluno entre em confronto experimental com problemas
prticos de natureza social, tica, profissional que lhes sejam relevantes.
5. Permitir que o aluno participe, com responsabilidade do processo de
aprendizagem.
Bibliografia:
Aprendendo com jogos e situaes problema: Lino de Macedo.
Jogos na Educao; criar, fazer, jogar. Maria da Glria Lopes, 2000.
Ensaios pedaggicos. Lino de Macedo
Almanaque de criao pedaggica. A aventura da explicao: cincia e
linguagem. Hercilia T. de Miranda e L. C. de Menezes (orgs). Vozes, 2002.

OPES PARA AULAS PRTICAS

A seguir esto apresentadas vrias possibilidades de aulas prticas com a
utilizao de microscopia ptica. O professor pode optar por uma ou mais delas, ou
ainda por outras que julgar conveniente. Porm, importante levar em considerao
que o aluno se envolve muito mais em procedimentos dos quais ele participa
ativamente. Assim sendo, recomendvel que numa primeira aula o aluno tenha
contato com o instrumento de anlise das clulas o microscpio ptico tomando
conhecimento de suas partes, funcionamento e cuidados no seu uso (ver protocolo na
pgina 8: Conhecendo o microscpio)
Esto apresentados, nas pginas 8 a 16, vrios protocolos de aula prtica.
Cada um deles pode constituir uma aula prtica, ou ento, segmentos de protocolos
podem ser misturados para compor uma aula.
Os alunos que se mostrarem mais interessados e se distinguirem no preparo
do material biolgico podero, por exemplo, serem convidados a desenvolver outras
prticas para a Feira de Cincia que ocorrer no segundo semestre.
Informaes adicionais para o professor e repostas para as perguntas
realizadas nas aulas prticas encontram-se, respectivamente, nos anexos I e II, no
final da apostila.

UNIDADES DE MEDIDA DA CLULA

1 mm (milmetro) = 10-3 metro
1 m (micrometro) = 10-6 metro
1 nm (nanmetro) = 10-9 metro
1 A (angstrm) = 10-10 metro

(10-3 mm)
(10-3 m )
(10-4 m)

TAMANHOS MDIOS DE CLULAS E ORGANELAS CELULARES

dimetro clula eucaritica animal tpica 10 a 100 m, a maioria de 10 a
30 m. Algumas clulas nervosas podem ter quase 1 metro de comprimento.
Os vulos geralmente so clulas grandes o humano, por exemplo, tem mais
do 100 m. (Obs. As clulas epiteliais geralmente tem grande dimetro porque
so clulas achatadas)
dimetro do ncleo eucaritico 3 a 10 m
dimetro de uma clula vegetal 40 m
Paramecium 200 m
Menor objeto visvel a olho nu 100 m
dimetro de um fio de cabelo bem fino 30 m
clula procaritica tpica 1 a 10 m de comprimento e 1 m de dimetro
mitocndria tamanho de uma bactria pequena, cerca de 2 m de
comprimento e 1 m de dimetro
cloroplastos 5 m
dimetro do menor objeto visvel em microscopia ptica 0,2 m
dimetro mdio do ribossomo cerca de 20nm
espessura mdia da membrana celular 7nm
dimetro da molcula de DNA 2 nm
menor objeto visvel em microscopia eletrnica 0,5 nm
tomos 0,05 a 0,15 nm

I. Conhecendo o microscpio
(protocolo do aluno)

A vista humana no pode perceber objetos com dimetros inferiores a um dcimo do

milmetro. Esto abaixo dessa medida as clulas dos organismos eucariticos, as
bactrias, ovos de vermes e muitas estruturas dos seres vivos. O microscpio ptico
utilizado para a observao de clulas vivas ou mortas (coradas e fixadas).

Lente ocular

Tubo ou canho

r
e
r
e
r
Revlver eou tambor

Lente
objetiva

Charrio
t

Platina ou
mesa

Parafuso
macromtrico

Diafragma e
condensador

Espelho ou
fonte de
luz

Parafuso
micromtric
o

P ou
base

O microscpio ptico tem duas partes:

1. Parte mecnica
P ou base - o local de apoio do aparelho feito de ligas de metais pesados;
Estativa, brao ou coluna suporte pesado que sustenta os tubos, a mesa, o
porta-condensador, os parafusos micro e macromtrico;
Platina ou mesa redonda ou quadrangular, pode ser fixa, mvel ou giratria
no plano horizontal. Sobre ela fica a lmina com o material a ser observado.
Apresenta uma abertura no seu centro permitindo a passagem dos raios
luminosos, coletados pelo espelho e convergindo sobre o material da lmina
pelo condensador e diafragma. Os raios chegam atravs da lente objetiva do
tubo e da ocular at o globo ocular (retina) do observador;
Tubo ou canho nos microscpios monoculares (que possuem uma s
ocular), o tubo representa um cilindro metlico que pode ser reto ou oblquo.
Os microscpios binoculares (que possuem duas oculares) podem ser
inclinados, com ajuste para as distncias entre os olhos de cada observador;
Parafusos: macromtrico com eles pode-se fazer a focalizao grosseira do
material. Possui um percurso vertical com cerca de 7,5cm, e micromtrico
focalizao mais limitada, permitindo o deslocamento do tubo a apenas dois
milsimos de milmetro ou menos;
Revlver ou tambor fica acima da platina. As objetivas se encaixam numa
pea rotatria e giram sempre no sentido do menor para o maior aumento;
Charriot pea opcional localizada na mesa e que serve para movimentar a
lmina no campo
2. Parte ptica
Lente ocular encaixada na extremidade superior do tubo, sua funo
aumentar a imagem formada pela objetiva. As oculares fornecem, geralmente,
ampliaes iguais s obtidas por lentes ou lupas manuais. O aumento
fornecido pela ocular est, geralmente, gravado nela prpria. Por exemplo: 5x,
8x, 10x, etc.
Lente objetiva fornece a imagem ampliada de um objeto qualquer. Pode
tambm corrigir os defeitos das cores dos raios luminosos. Em todas as
objetivas h sistemas secos e de imerso. Para se aproveitar a maior
quantidade de luz possvel, coloca-se entre a objetiva e a lamnula uma gota de
leo de cedro. Quanto maior for a ampliao, menor a quantidade de raios
luminosos que atravessa o tubo do microscpio. Com esse processo, captamse os feixes luminosos que com as objetivas secas so desviados. O aumento
fornecido por cada uma das objetivas est nelas gravado.
Condensador ou diafragma localizado abaixo da platina, sua funo principal
fornecer bastante luz, indispensvel nas grandes ampliaes do material a
ser observado. Fecha-se o diafragma quando se usam objetivas de pouco
aumento, para eliminar os raios laterais. Abre-se o diafragma na medida em
que se aumenta as ampliaes.
Espelho ou fonte de luz encaixado por baixo do condensador, num vo do
p do microscpio. redondo e possui duas faces: uma plana e outra cncava.
A face plana colhe e projeta os raios paralelos e divergentes. usado nas
grandes ampliaes e na imerso. A face cncava colhe e projeta os raios
convergentes e usado nas pequenas ampliaes.
Usando o microscpio responda:
1. Que pea se move quando giramos o parafuso macromtrico?
2. O que ocorre quando se gira o parafuso micromtrico? O movimento to
ntido quanto o anterior? Para que serve?

3. Eleve o canho girando o macromtrico e observe as objetivas. So todas

iguais e do mesmo tamanho? Verifique os nmeros gravados nas objetivas.
4. Qual o procedimento para se calcular o aumento que o microscpio fornece?
5. Qual a funo do espelho?
6. Onde se coloca a lmina preparada para a observao do material e qual
objetiva deve ser inicialmente usada?
7. A que distncia da lmina deve focar a objetiva antes de ser focalizado o
material desejado?
8. Que parafuso deve ser usado inicialmente para focalizar o material?
9. Para que serve o micromtrico?
10. Que outras partes do microscpio voc dever controlar para obter maiores
aumentos?
11. Para ter certeza de que a preparao est em cima do foco de luz voc
observa por fora do microscpio ou diretamente atravs da ocular?
12. Qual o procedimento para saber de quantas vezes o material observado tem
a sua imagem aumentada?
13. Acoplado ao condensador existe um diafragma. Mova a alavanca do diafragma
e verifique o que ocorre.
14. Colocar a objetiva de menor aumento, abaixar o canho girando o
macromtrico. Procurar achar uma posio do espelho que ilumine o interior do
tubo. Tanto melhor ser a focalizao quanto mais claro estiver o crculo que
voc est vendo. Este crculo o campo do microscpio. Quando voc quiser
mostrar qualquer coisa que estiver observando dever coloca-la no centro
geomtrico do campo iluminado. Na ocular h uma pestana (que funciona
como uma seta). Girando-se a ocular a pestana se move e voc pode usa-la
para indicar uma estrutura que esteja querendo mostrar para algum.
15. Colocar um pedao de jornal com aproximadamente 1cm 2 e preparar uma
lmina procedendo da seguinte maneira:
a. limpar bem a lmina e, com um conta-gotas, pingar uma gota de gua;
b. sobre a gota colocar o pedao de jornal e esperar alguns segundos;
c. sobre o jornal colocar uma lamnula limpa;
d. se houver bolhas de ar pressionar levemente uma pina sobre a
lamnula;
e. levar a preparao ao microscpio;
f. observar em menor aumento (100x, sendo 10x da objetiva e 10x da
ocular)
16. Se voc precisar transportar um microscpio, qual a melhor maneira de
segura-lo?
Precaues no uso do microscpio
1. Ao transporta-lo, use as duas mos, segurando com uma delas o brao e com
a outra a base do aparelho.
2. durante o trabalho seguir as seguintes instrues:
a. no gire indefinidamente o micromtrico para mover o canho. Ele
usado girando-o para frente e para trs para ajustar o foco e para
observaes de profundidade
b. no passe o dedo nas lentes para limpa-las. Se elas estiverem sujas
chame o professor
c. no molhe o microscpio quando estiver usando preparaes feitas
com gua; se isso ocorrer chame o professor;
d. no usaremos a objetiva de maior aumento (100x)
e. no desmonte qualquer parte do microscpio
3. Quando acabar o trabalho com o microscpio desligar a lmpada, retirar a
lmina que voc terminou de observar, colocar a objetiva de menor aumento e
abaixar o canho.

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II. Observao de clulas vegetais

Material necessrio
Lminas e lamnulas
Soluo de azul de metileno a 0,3% e gua
Conta gotas
Cebola, tomate maduro, folhas de Elodea e flor de Tradescantia
Pina e lmina de barbear
Papel de filtro
microscpio

Procedimento para visualizar epiderme de tomate

Preparar uma lmina colocando, sobre ela, uma gota de gua.
Com o auxlio de uma lmina de barbear recortar um tringulo, de cerca de
1cm de lado, na superfcie de um tomate maduro.
Com um pina de ponta fina retirar a epiderme (1 a camada externa) do pedao
recortado e colocla sobre a gota de gua na lmina.
Cobrir a epiderme com uma lamnula.
Retirar as bolhas de ar pressionando levemente a lamnula com a pina.
Colocar a preparao entre dois pedaos de papel de filtro e pressionar
levemente para retirar o excesso de lquido.
Observar ao microscpio ptico. Inicialmente, focalizar o material usando a
objetiva de 10x e em seguida a de 40x. Mexer vagarosamente o micromtrico
do microscpio para obter o melhor foco.
Fazer um desenho das clulas observadas.

Procedimento para visualizar epiderme de cebola

Retirar a casca de uma cebola.
Com o auxlio de um conta-gotas pingar uma gota de azul de metileno sobre
uma lmina.
Com o auxlio de uma lmina de barbear recortar um tringulo, de cerca de
1cm de lado, na parte inferior de uma das camadas da cebola.
Com um pina de ponta fina retirar a epiderme inferior do pedao recortado e
coloca-la sobre o azul de metileno na lmina.
Com um conta-gotas pingar uma gota de azul de metileno sobre a epiderme da
cebola e em seguida cobrir a preparao com uma lamnula.
Retirar as bolhas de ar pressionando levemente a lamnula com a pina.
Colocar a preparao entre dois pedaos de papel de filtro e pressionar
levemente para retirar o excesso de lquido.
Observar ao microscpio ptico. Inicialmente, focalizar o material usando a
objetiva de 10x e em seguida a de 40x. Mexer vagarosamente o micromtrico
do microscpio para obter o melhor foco.
Fazer um desenho das clulas observadas.

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Procedimento para visualizar folhas de Elodea

Com um conta-gotas pingar sobre uma lmina uma gota de gua.
Com o auxlio de uma lmina de barbear cortar um pedao, com cerca de 1cm,
de uma folha de Elodea.
Com uma pina de ponta fina colocar o pedao de folha sobre a lmina
contendo a gota de gua.
Cobrir a folha com uma lamnula.
Retirar as bolhas de ar pressionando levemente a lamnula com a pina.
Observar ao microscpio ptico. Inicialmente, focalizar o material usando a
objetiva de 10x e em seguida a de 40x. Mexer vagarosamente o micromtrico
do microscpio para obter foco.
Aps alguns minutos observe a movimentao do citoplasma (ciclose) nas
clulas (utilize aumento de 100x)
Fazer um desenho das clulas.
Descrever, por escrito, a ciclose.

Procedimento para visualizar plo estaminal de Tradescantia

Com o auxilio de um conta-gotas, pingar uma gota de gua numa lmina.
Com uma pina retirar um plo do estame de uma flor de manto-de-viva e
coloca-lo sobre a lmina com uma gota de gua.
Cobrir a preparao com uma lamnula
Observar ao microscpio.
Fazer um desenho das clulas.
Aps alguns minutos observe a movimentao do citoplasma (ciclose) nas
clulas de Elodea e no plo estaminal de Tradescantia (utilize aumento de
100x)
Descrever a ciclose.

Responder as questes:
1. Porque no necessrio corar a epiderme de tomate e a folha de Elodea para
visualizar as clulas ao microscpio?
2. Qual a funo do azul de metileno?
3. As clulas observadas so do mesmo tamanho?
4. Como voc faria para medir o tamanho dessas clulas?
5. Quais as estruturas das clulas possveis de serem observadas em cada uma
das preparaes?
6. Sugira uma explicao para o fato de podermos ver facilmente os cloroplastos,
mas no outros componentes como o complexo de Golgi, o retculo
endoplasmtico ou as mitocndrias.

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III. Observao de clulas humanas

Esfregao de mucosa bucal (adaptado de Atividades Experimentais e Didticas de Biologia
Molcula e Celular Elgion L.S.Loreto e Lenira M.N.Sepel. Sociedade Brasileira de Gentica, 2002.)

Material necessrio
lminas e lamnulas
palitos de fsforo
lamparina
lcool 70%
azul de metileno 0,5%
papel de filtro
frasco com capacidade de 250 mL (Becker ou outro vidro de uso domstico)
microscpio

Procedimento
1. Com um palito de fsforo, raspar a parte interna da bochecha e, depois,
esfregar o palito sobre uma lmina de vidro.
2. Colocar o etanol 70% no recipiente plstico para tratamento de lminas.
3. Mergulhar a lmina com as clulas no etanol 70%. Aguardar 2 minutos.
4. Colocar uma gota de azul de metileno sobre o material e aguardar 2 minutos
5. Com o auxlio de uma pisceta remover o excesso de azul de metileno jogando
sobre a lmina um jato de gua.
6. Cobrir a preparao com uma lamnula. Secar a parte inferior da lmina e
observar ao microscpio com aumento de 100x e, em seguida, com 400x.
7. Desenhar as clulas observadas em aumento de 400x.

Responder as questes:
1. Ao raspar a bochecha com um palito de fsforo que tipo de tecido est sendo
coletado?
2. Voc pode pensar em uma explicao do porqu tratar as clulas com etanol
70%?
3. Qual a funo do azul de metileno?
4. Quais so as estruturas da clula de bochecha que podem ser visualizadas?
5. Por que as clulas da preparao de bochecha aparecem isoladas umas das
outras e no unidas como em um tecido?

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IV. Observao de osmose em clulas vegetais

Material necessrio
Lminas e lamnulas
soluo de azul de metileno (0,5%)
folhas de Elodea
lmina de barbear e pina
Conta-gotas
gua destilada
Soluo saturada de NaCl (cloreto de sdio = sal de cozinha)

Procedimento
Com o auxlio de uma lmina de barbear cortar um pedao, com cerca de
0,5cm, de folha de Elodea.
Com um pina de ponta fina colocar o pedao de folha sobre uma lmina.
Usando um conta-gotas pingar sobre a folha uma gota de gua.
Cobrir a folha com uma lamnula.
Retirar as bolhas de ar pressionando levemente a lamnula com a pina.
Observar ao microscpio e desenhar as clulas.
Com o auxlio de um conta-gotas pingar, em um dos lados da lamnula, uma
gota de uma soluo saturada de NaCl. Do lado oposto ao que foi colocada a
gota de cloreto de sdio, encostar um papel-filtro de forma a substituir a gua
pela soluo de cloreto de sdio.
Aguardar 1 minuto.
Observar ao microscpio e desenhar novamente as clulas.
Descrever o que aconteceu com as clulas aps a colocao do cloreto de
sdio.

Responder as questes
1. Quais as estruturas das clulas que foram observadas?
2. Por que podemos ver facilmente os cloroplastos, mas no o complexo de
Golgi, o retculo endoplasmtico ou as mitocndrias?
3. Qual a evidncia observvel de que ocorreu perda de gua do interior da clula
para o meio quando a Elodea foi colocada em uma soluo concentrada de
cloreto de sdio?
4. A soluo de NaCl hipotnica ou hipertnica em relao ao meio interno da
clula?
5. possvel prever o que vai ocorrer com as clulas da Elodea se elas forem
retiradas da soluo de cloreto de sdio e colocadas novamente em gua?
Explicar.
6. Se voc quiser testar a sua explicao (hiptese) realize o experimento.
7. O que osmose? Quando ela ocorre?

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V. RECEITA CASEIRA PARA EXTRAO DE DNA DO TOMATE

Material necessrio
1 tomate bem maduro
2 copos de vidro transparente (pode ser copo de requeijo)
1 colher
sal de cozinha
detergente de lavar loua transparente
filtro de papel para coar caf com seu suporte
1 peneira
lcool Zulu 95%
Procedimento
1. Picar um tomate grande em pequenos pedaos e colocar os pedaos em um
copo grande.
2. Num outro copo misturar 150 mL de gua, uma colher de sopa de detergente e
uma colher de ch de sal de cozinha. Mexer bem, porm cuidadosamente para
no fazer muita espuma. Colocar essa mistura sobre os pedaos de tomate.
3. Colocar em banho-maria a 65oC por 30 minutos. Caso no haja um banhomaria disponvel pode se usar gua norma e incubar a temperatura ambiente
por 30 minutos. Mexer de vez em quando.
4. Resfriar a mistura colocando o recipiente em uma bacia de gelo ou em gua a
temperatura ambiente.
5. Coar a mistura em uma peneira para retirar os pedaos e em seguida coar a
soluo aquosa em um filtro para caf. Colocar o lquido resultante em um
copo ou outro recipiente transparente (apenas cerca de 3 dedos no fundo de
um copo)
6. Despejar delicadamente sobre a soluo dois volumes de lcool comum. No
misturar o lcool com a soluo. Aguardar cerca de 3 minutos para o DNA
comear a precipitar na interfase.
7. Passo opcional. Usar um palito de madeira (usado para comer comida chinesa)
para enrolar as molculas de DNA. Gire o palito na interface entre a soluo e
o lcool.
Responder as questes:
1. Por que necessrio cortar o tomate em pequenos pedaos ou ento
amassa-lo bem?
2. O rompimento das membranas das clulas do tomate ocorre em que passo
do protocolo? Explique.
3. Qual a funo do sal?
4. Qual o papel do lcool?
5. Por que voc no pode ver a dupla hlice?
6. Considerando os procedimentos de extrao do DNA genmico voc
espera obt-lo sem quebras mecnicas e/ou qumicas?
Observaes:
O mesmo protocolo pode ser usado para a extrao de DNA de uma cebola grande,
descascada, ou ainda para uma banana. A banana pode ser amassada com o garfo, em
vez de cortada. No caso de se desejar extrair DNA de morango, ao invs de cortar em
pequenos pedaos coloque-o dentro de um saquinho zip, feche-o, e amasse o tecido do
morango com os dedos. Dois morangos so suficientes. O mesmo procedimento de
amassar entre os dedos pode ser usado para o tomate caso ele esteja bem maduro.

15

VI. RECEITA CASEIRA PARA EXTRAO DE DNA DE FGADO

http://www.odnavaiaescola.com/bifedefigado.html

Material Necessrio
Um bife de fgado de aproximadamente 300 g
-Liquidificador domstico
Sal
Detergente de lavar loua transparente
gua morna
Copos de vidro transparente
Palitos
lcool (isopropanol)
Um coador

Procedimento
1.
2.
3.
4.

Cortar o bife em pequenos pedaos e coloca-los no liquidificador

Adicionar gua morna com sal (aproximadamente 5 pitadas)
Bater por uns 10 segundos
Despejar a mistura batida num coador de papel apoiado em um copo. Encher o
copo at mais ou menos a metade.
5. Acrescentar mistura coada, lentamente para no fazer bolhas, 2 a 3 colheres
de ch de detergente.
6. Lentamente adicionar o isopropanol ao copo at encher. No misturar o lcool
com a soluo, deixar o lcool permanecer como uma camada isolada no topo
da soluo. Esperar 5 minutos. O DNA dever surgir na superfcie da soluo.
Pesque o DNA com um palito!
7. Parabns! Voc extraiu DNA!
Responder as questes:
1. Qual a funo do sal?
2. O que o faz o liquidificador?
3. O que acontece quando se adiciona o detergente?
4. Qual o papel do lcool?
5. Por que voc no pode ver a dupla hlice?
Observao:
Este protocolo precisa ser testado antes de ser aplicado em sala de aula.

16

ANEXO 1
INFORMAES ADICIONAIS PARA O PROFESSOR
NOVIDADES NO SITE DO O DNA VAI A ESCOLA
http://www.odnavaiaescola.com/dna

I. MICROSCPIO E DE SUA UTILIZAO

Cuidados com o microscpio
A boa conservao depender em grande parte dos cuidados que se tiver com o
microscpio que se est utilizando. extremamente necessrio que se deixe o microscpio
perfeitamente limpo. Esse procedimento contribuir para a conservao e durabilidade do
aparelho. Assim:
transporte o microscpio segurando-o pela estativa e pelo p;
para focalizar a preparao mova o tubo sempre de baixo para cima
no guarde substncias lquidas ou slidas na mesma caixa do microscpio, exceto a
slica que serve para retirar a umidade do ar;
no retire nenhuma das peas do aparelho;
conserve-o sempre limpo e em ordem
aps o uso, proteja-o com uma caixa, plstico ou pano, para que no se encha de
poeira.
Precaues no uso do microscpio
Ao transporta-lo, use as duas mos, segurando com uma delas o brao e com a outra a base
do aparelho.
durante o trabalho seguir as seguintes instrues:
no gire indefinidamente o micromtrico para mover o canho. Ele usado girando-o
para frente e para trs para ajustar o foco e para observaes de profundidade
no passe o dedo nas lentes para limpa-las. Se elas estiverem sujas chame o
professor
no molhe o microscpio quando estiver usando preparaes feitas com gua; se isso
ocorrer chame o professor;
no usaremos a objetiva de maior aumento (100x)
no desmonte qualquer parte do microscpio
Quando acabar o trabalho com o microscpio desligar a lmpada, retirar a lmina que
voc terminou de observar, colocar a objetiva de menor aumento e abaixar o canho.
Manejo do microscpio
A intensidade luminosa regulvel: aumenta-se a intensidade luminosa subindo-se o
condensador e abre-se o diafragma ou diminui-se a intensidade luminosa descendo o
condensador e baixa-se o diafragma.
A ampliao consiste no grau de aumento da imagem em relao ao objeto. A
ampliao total obtida com o microscpio ptico consiste no produto da ampliao da objetiva
pela ampliao da ocular. Esta, sem distoro, no ultrapassa as 1200x.
O fator mais significativo para a obteno de uma boa imagem , contudo, o poder de
resoluo, que corresponde distncia mnima que necessrio existir entre dois pontos para
que possam ser distinguidos ao microscpio. Para o microscpio ptico essa distncia de 0,2
m devido ao comprimento de onda das radiaes visveis. Com efeito, a propriedade da
ampliao s tem interesse prtico se for acompanhada de um aumento do poder de
resoluo.
Se a lmina no est corada (exame a fresco): a observao feita apenas com
objetivas secas, do seguinte modo:
1. Desce-se o condensador e sobe-se o diafragma para que a iluminao no seja muito
intensa, j que as lminas no esto coradas.
2. Com a objetiva de 10x escolhe-se o pormenor a observar.

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3. Seguidamente foca-se com a objetiva de 40x, fazendo uma primeira aproximao da

objetiva lmina por controlo visual externo, e s depois a focagem por afastamento
usando o parafuso macromtrico e posteriormente o micromtrico para focagem final.
Se a lmina est corada a preparao pode tambm ser analisada com objetiva de imerso
procedendo do seguinte modo.
1. Sobe-se o condensador, abre-se o diafragma e regula-se a iluminao da fonte
luminosa no mximo, de modo a conseguir-se uma iluminao intensa, apropriada para
a observao de lminas coradas.
2. Coloca-se na lmina uma gota de leo de imerso e procede-se focagem. Primeiro
aproximando a objetiva lmina com controlo visual externo, seguidamente a focagem
propriamente dita com o parafuso macromtrico e finalmente o aperfeioamento da
focagem com o parafuso micromtrico.
3. Alguns microorganismos esto no limiar do poder de resoluo do microscpio ptico.
A sua observao pode ser facilitada com o emprego de tcnicas especiais de
microscopia ptica.

Para a correta observao do material citolgico seguir o seguinte procedimento:

1. Ligar a fonte luminosa.
2. Colocar a preparao a observar a mesa ou platinado.
3. Com o auxlio do condensador e do diafragma obter uma boa iluminao
4. Rodando a cremalheira aproximar a objetiva de 10x o mais perto possvel da
preparao (cerca de 0,5 cm).
5. Rodando novamente a cremalheira, puxar a objetiva de 10x para cima at obter uma
imagem ntida do espcime.
6. Depois da preparao estar focada com a objetiva de 10x focar com a objetiva de 40x.
Com o auxlio do parafuso micromtrico podem-se obter diferentes planos das
estruturas a observar.
7. Caso seja necessrio recorrer a uma ampliao mais elevada (objetiva de 100x)
proceder do seguinte modo: afastar a objetiva de 40x e, sobre a preparao, colocar
uma gota de leo de imerso. Em seguida, com o auxlio do parafuso micromtrico,
focar com a objetiva de 100x. Quando se utiliza o leo de imerso deve evitar-se o seu
contacto com as objetivas de 10 e 40x.

II. OBSERVAO DE CLULAS VEGETAIS

A Elodea uma planta ornamental usada em aqurios facilmente adquirida em lojas
especializadas. uma monocotilednea pertencente a famlia Hydrochatitaceae. As folhas so
timas para observao de ciclose, uma vez que os cloroplastos so grandes e possuem
apenas duas camadas de clulas.
A Tradescantia, conhecida como manto-de-viva, facilmente encontrada em jardins
ou em reas com ervas daninhas.
A ciclose um movimento do hialoplasma, principalmente em estado de sol, formando
uma corrente que carrega as diversas organelas e distribui substncias ao longo do citoplasma.
Nesse movimento, so arrastados os cloroplastos para um local de maior intensidade luminosa
da clula. A ciclose pode ser bem observada no endoplasma de muitas clulas vegetais.
Vdeo com ciclose - http://azolla.fc.ul.pt/aulas/Elodea2.mov
Cebola Allium cepa
Para observar com detalhes das clulas vegetais necessrio a utilizao de corantes
especficos como, por exemplo, verde iodo e carmim aluminado para parede celular; vermelho
de Sudo III para cutcula e vermelho neutro para vacolo.
O azul de metileno um composto aromtico heterocclico solvel em gua, com
frmula molecular: C16H18ClN3S. O azul de metileno usado como um corante e como
indicador. Tem muitas aplicaes nos mais variados campos como a biologia e da qumica.
Azul de Metileno um remdio de cor azul, vendido em farmcias comuns, o azul de metileno
um antdoto especfico e est indicado a qualquer paciente com sintomas e/ou sinais de
hipxia (mudanas mentais, taquicardia, dispnia, dor torcica).

18

III. OBSERVAO DE CLULAS HUMANAS

Fixao o processo de preservao dos componentes estruturais dos tecidos. A
maior parte dos tecidos no pode ser observada in vivo. Devido a esse fato, eles devem ser
submetidos a processos de fixao para que suas estruturas morfolgicas se mantenham
preservadas. Vrios processos degenerativos de autlise celular, denominados degenerao
post-mortem, ocorrem logo aps a morte dos tecidos. A fixao a primeira etapa para a
obteno de uma preparao citolgica permanente e tem as seguintes finalidades: (i) evitar a
autlise, que a destruio da clula pelas suas prprias enzimas; (ii) impedir a atividade e a
proliferao de bactrias; (iii) endurecer as clulas, para que possam resistir melhor s etapas
seguintes da tcnica citolgica; (iv) aumentar a afinidade das estruturas celulares pelos
corantes citolgicos, tornando-as assim mais facilmente corveis. Para evitar a autlise que se
inicia logo aps a morte dos tecidos e a prpria digesto do material por bactrias, deve se
empregar substncias que, ao ligarem-se aos principais componentes estruturais do tecido
(geralmente protenas), mantenham a estrutura do material a ser estudado. As substncias que
executam o processo de fixao so chamadas fixadores. Os fixadores so substncias
qumicas que matam rapidamente as clulas, conservando a morfologia e composio. A
fixao pode ser realizada por agentes fsicos, como o calor, que muito utilizado para as
fixaes de bactrias e leveduras. O outro mtodo consiste na utilizao de agentes qumicos.
Os principais fixadores so tetrxido de smio, bicromato de potssio, formol, lcool, cido
actico, etc. Nos diferentes mtodos de fixao devemos distinguir entre fixao de material
biolgico para observao ao microscpio ptico e fixao para microscopia eletrnica, dado
que a capacidade de resoluo em microscopia ptica no vai alm da estrutura celular,
enquanto a microscopia eletrnica consegue mostrar imagens ao nvel da ultraestrutura celular.
O mecanismo de ao dos fixadores pouco conhecido. Alguns fixadores precipitam as
protenas, como o cloreto de mercrio e o cido pcrico, enquanto outros apenas provocam a
sua coagulao, como o aldedo frmico, o tetrxido de smio e o cido glutrico ou
glutaraldedo. Substncias como o formol e o aldedo glutrico fixam as clulas por se
combinarem com os grupos amnicos das protenas, estabelecendo pontes entre aminocidos
da mesma cadeia polipetdica ou de cadeias polipeptdicas diferentes.
Colorao a tcnica que permite evidenciar as diferentes estruturas celulares e
tissulares. A grande maioria de estruturas celular e tissular transparente, incolor e com um
ndice de refrao muito prximo, o que dificulta a sua observao. Da a necessidade da
utilizao de corantes histolgicos que evidenciem tais estruturas. As tcnicas procuram
associar o carter bsico ou cido do corante a ser utilizado ao do material a ser evidenciado.
Desta maneira cria-se o agrupamento qumico responsvel pela cor, ou agrupamento
cromforo. As estruturas ricas em agrupamentos bsicos, como o caso das protenas, so
acidfilas, por terem afinidade para corantes cidos. Por seu lado, as molculas cidas como o
DNA e o RNA, por exemplo, so estruturas basfilas por terem afinidade por corantes cidos.
Os corantes usados em histologia so substncias qumicas orgnicas que podem classificarse de acordo com vrios critrios. O mais simples baseia-se nos componentes tissulares e
celulares. Os corantes podem ser de uso geral, para corar o ncleo ou o citoplasma, ou podem
ser mais especficos relativamente a determinados componentes ou estruturas. Os principais
corantes so: vermelho-neutro (para vacolos); verde-janus B (para mitocndrias); azul de
metileno (para citoplasma); eosina (corante cido) e hematoxilina (corante bsico).
Deve ser referido que muitos corantes necessitam de mtodos especiais de fixao e
preparao dos tecidos. Considera-se que os corantes de uso geral podem ser cidos ou
bases, mas, de fato, so sais neutros que apresentam radicais cidos ou bsicos. Quando a
propriedade tintorial do corante est nos radicais bsicos diz-se que o corante bsico e as
estruturas por ele coradas dizem-se basfilas. Os corantes bsicos tm carga positiva. Na
maior parte dos casos as substncias basfilas que atraem os corantes so, elas mesmas,
cidas, como por exemplo, os cidos nuclicos do ncleo e os componentes cidos do
citoplasma, como o cido ribonuclico (RNA). De modo semelhante, quando a propriedade
tintorial est nos radicais cidos falamos de um corante cido, o qual tem carga negativa. As
estruturas ou componentes da clula que coram com os corantes cidos, como caso do
citoplasma, dizem-se acidfilas. O corante bsico de uso mais freqente a hematoxilina, cuja
propriedade colorante depende da presena em soluo do produto da sua oxidao, a
hematena. A hematoxilina no cora diretamente os tecidos, mas necessita de um elemento de
ligao (chamado mordente) a estes. Esta tarefa levada a cabo por um ction metlico como
o ferro, o alumnio ou o tungstnio. Existe uma grande variedade de hematoxilinas disponveis,

19

as quais variam na intensidade e/ou na tonalidade de colorao, baseando-se escolha,

parcialmente, no on metlico usado. Quando se aplica este corante os ncleos aparecem
corados de azul. As coloraes pelas hematoxilinas podem ser "regressiva" ou "progressivas".
Com uma colorao regressiva, as seces so colocadas na soluo de hematoxilina durante
um determinado perodo de tempo, aps o que so colocadas numa soluo cida-alcolica, a
qual vai remover parte do corante. Este mtodo funciona melhor em grandes tinas de
colorao e os resultados devem ser avaliados dia a dia. Com as coloraes progressivas o
corante colocado sobre a seco at a intensidade de colorao pretendida ser atingida.
Outros corantes bsicos muito utilizados so os corantes bsicos de anilina, e incluem o azul
de toluidina e o azul de metileno. Estes corantes so tambm utilizados na identificao de
proteoglicanos os quais sofrem uma colorao metacromtica, ou seja, apresentam uma cor
diferente da do corante utilizado. Parece que as substncias que apresentam propriedades
metacromticas conseguem concentrar o corante, por acumulao de molculas do mesmo,
cujas propriedades de absoro so diferentes das que apresentam as molculas individuais
do corante. A mucina, a matriz cartilagnosa e os grnulos das clulas adiposas, por exemplo,
so facilmente demonstradas devido sua colorao metacromtica. Outros corantes bsicos
de anilina de uso freqente so o azul brilhante de cresilo, o vermelho neutro e o verde de
Janus, os quais, por no serem txicos podem igualmente ser usados em coloraes vitais no
estudo de tecidos vivos. Os corantes cidos, usados habitualmente para corar o citoplasma,
incluem a eosina, o cido pcrico, corantes cidos azicos, como o cromotropo, e corantes
cidos diazicos como o azul de trpano e o vermelho de trpano. Estes dois ltimos podem
tambm ser usados como corantes vitais. Existe igualmente uma grande quantidade de
eosinas as quais variam na tonalidade de colorao. Quando se aplica a eosina, as estruturas
citoplasmticas e as substncias intercelulares aparecem com uma colorao rosa. A maior
parte dos cortes histolgicos corada pela combinao de um corante bsico com um corante
cido. A combinao mais freqente a hematoxilina e eosina (H&E), resultando as estruturas
nucleares coradas de azul ou prpura escuro, e praticamente todas as estruturas
citoplasmticas e as substncias intercelulares de rosa. Os mtodos tricrmicos, como o de
Mallor, para tecido conjuntivo, e o de Mallory-Azan, tm a vantagem de diferenciar as
estruturas citoplasmticas dos materiais intercelulares. O tricrmico de Masson outro mtodo
muito utilizado resultando em fibras do tecido conjuntivo coradas de verde, as estruturas
citoplasmticas de vermelho e os ncleos de azul ou de prpura. Embora no haja corantes
verdadeiramente especficos para o colgeno, este se demonstra melhor com os corantes
cidos de anilina dos mtodos tricrmicos. As fibras elsticas, por seu lado, apresentam uma
intensa acidofilia e podem ser coradas de forma seletiva com orcena ou com resorcina. Por
outro lado, as fibras reticulares podem evidenciar-se de modo especfico atravs da
precipitao de prata duma soluo alcalina. Deve ainda ser referido que para evidenciar
alguns constituintes das clulas e as fibras extracelulares so necessrios mtodos especiais e
que um mtodo de colorao apenas pode no ser suficiente par demonstrar tudo aquilo que
se encontra num corte histolgico.

IV. OBSERVAO DE OSMOSE EM CLULA VEGETAL

As clulas de qualquer organismo so envoltas pela membrana celular. Essa estrutura
permite a passagem controlada de substncias para dentro e para fora da clula.
gua, gazes ou alguns ons pequenos podem passar pela membrana sem gasto de
energia (transporte passivo). Uma das formas de transporte passivo a osmose, ou seja, a
passagem do solvente de uma soluo menos concentrada para a soluo mais concentrada,
atravs de uma membrana semipermevel.
A observao ao microscpio do fenmeno osmtico permite uma boa discusso com
os alunos sobre a organizao da membrana celular sua permeabilidade e importncia para a
viabilidade da clula.

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V. EXTRAO DE DNA
Informaes adicionais na apostila no site http://www.odnavaiaescola.com/modulo1.pdf
aconselhvel que o professor, antes de realizar a prtica com seus alunos, faa os
experimentos previamente para ajustar as quantidades relativas dos tecidos a partir dos quais o
DNA ser extrado e a relao entre o macerado contendo tecido e o lcool utilizado na
precipitao.
Antes da aula prtica cuja atividade a extrao de DNA, no importa a partir de qual tecido,
importante que os alunos j tenham desenvolvido os seguintes conceitos:
O DNA est no ncleo da clula
As membranas celulares so formadas por uma dupla camada lipdica
Enzimas so catalisadores que aceleram as reaes qumicas
Nesta atividade as clulas sero lisadas, liberando todo o contedo celular. O DNA
ser separado da mistura contendo as organelas e protenas e poder se observado a
olho nu.
Os protocolos para extrao de DNA, apesar de apresentarem pequenas diferenas
dependendo do material biolgico do qual ele ser extrado, consistem basicamente de duas
etapas. Na primeira etapa, provoca-se o rompimento das membranas celulares, o que permite
a liberao do DNA. Na segunda, realiza-se um ou mais tratamentos enzimticos ou qumicos
para purificar a preparao de contaminantes. Esse passo realizado em laboratrio, mas no
em sala de aula para o ensino mdio, pois os compostos qumicos utilizados para a purificao
(fenol ou clorofrmio) so de manuseio perigoso.

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ANEXO 2
RESPOSTAS DOS PROTOCOLOS DE AULA PRTICA
I. Conhecendo o microscpio
Respostas para as questes:
1. Quando se gira o parafuso macromtrico a mesa ou platinado se movimenta.
2. Quando se gira o micromtrico a mesa de movimenta, porm muito pouco.
3. Geralmente as objetivas no so uma vez que possuem poder de ampliao
diferentes. O nmero gravado em cada uma delas indica o nmero de vezes de
ampliao da imagem observada.
4. Para calcular o aumento basta multiplicar o nmero gravado na ocular pelo nmero
gravado na objetiva em uso. Por exemplo, 10 (da ocular) x 40 (da objetiva) = 400x
5. A face plana do espelho colhe e projeta os raios paralelos e divergentes. usado nas
grandes ampliaes e na imerso. A face cncava colhe e projeta os raios
convergentes e usado nas pequenas ampliaes.
6. A lamina colocada na abertura da platina, local por onde passa a luz proveniente da
fonte luminosa (lmpada ou espelho)
7. A lmina deve ser colocada a cerca de 0,5 cm da objetiva de menor aumento.
8. O parafuso inicialmente usado para focalizar o material o macromtrico.
9. O micromtrico serve para o ajuste fino do foco e para observaes de profundidade.
10. As objetivas e oculares.
11. Observa-se pela ocular.
12. Para se saber qual o aumento em uso basta verificar os nmeros gravados na ocular e
na objetiva em uso.
13. Movendo-se a alavanca do diafragma a intensidade luminosa que atravessa a
preparao citolgica aumenta ou diminui.
14. Observar o campo do microscpio
15. Fazer a preparao para praticar o manuseio da lmina, lamnula e do microscpio.
16. A melhor maneira de segurar um microscpio para transport-lo usar as duas mos.
Uma no canho e outra na base ou p.

II. Observao de clulas vegetais:

Respostas para as questes:
1. No necessrio corar, pois ambos possuem pigmentos naturais: no tomate, as clulas da
epiderme possuem licopeno (um carotenide) e na Elodea, os cloroplastos so de um verde
intenso.
2. O azul de metileno um corante que permite a visualizao de algumas estruturas das
clulas.
3. No. Por ordem de tamanho, da menor para a maior epiderme de tomate, epiderme de
cebola, Elodea.
4. Uma possibilidade para estimar grosseiramente o tamanho das clulas compara-la com
1mm observada ao microscpio. Para isso, pode-se colocar um pedao de papel milimetrado
numa lmina e observa-lo ao microscpio para comparao. Lembrar que as comparaes
devem ser feitas usando-se o mesmo aumento.
5. Na epiderme de tomate, apenas a parede; na epiderme de cebola: parede, citoplasma,
ncleo e nuclolo; na Elodea, parede celular, cloroplastos, citoplasma.
6. Duas hipteses podem ser levantadas: (a) as estruturas no podem ser observadas porque
so muito pequenas para serem observadas com os aumentos de 100x e 400x (o que no o
caso, pelo menos para o aumento de 400x), ou (b) porque as estruturas so transparentes e,
portanto, necessria colorao especfica para serem visualizadas (que o caso).

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III.Observao de clulas humanas

Respostas para as questes:
1. O epitlio de revestimento, portanto, tecido epitelial.
2. O etanol 70% um fixador de material biolgico, isto , ele preserva os componentes
estruturais dos tecidos.
3. O azul de metileno cora o citoplasma em azul claro e o ncleo em azul escuro.
4. Citoplasma e ncleo.
5. As clulas da bochecha aparecem isoladas, pois o processo de raspagem do epitlio desfez
a associao entre as clulas.

IV. Observao de osmose em clulas vegetais

Respostas para as questes
1. Podem ser observados a parede celular e os cloroplastos.
2. Os cloroplastos so verdes e, assim sendo, no necessitam serem previamente corados. As
organelas membranosas como o complexo de Golgi, retculo endoplasmtico e mitocndria so
incolores e parem serem visualizados necessrio que se faa colorao especfica.
3. A perda de gua pode ser deduzida pela diminuio do volume do citoplasma, visualizada
pela aproximao de todos os cloroplastos.
4. Hipertnica.
5. possvel prever que haver entrada de gua na clula, uma vez que ela perdeu gua
quando em contato com a soluo saturada de cloreto de sdio.
6. Para realizar esse experimento pingar gua em uma das extremidades da lamnula e, com o
auxlio de papel de filtro colocado na extremidade oposta, substituir a soluo de cloreto de
sdio por gua.
7. Osmose a passagem do solvente de uma soluo atravs de membrana impermevel ao
soluto. As clulas contem em seu interior uma soluo aquosa e, geralmente, esto imersas
em outra soluo aquosa. Como a membrana plasmtica permevel gua, as molculas de
gua podem passar para dentro e para fora da clula. A difuso da gua atravs da membrana
celular semipermevel um caso especial de transporte passivo denominado osmose. Ela
ocorre toda vez que a clula for colocada em um meio hipertnico ou hipotnico em relao ao
meio interno da clula.

V. EXTRAO DE DNA DE TOMATE

Respostas para as questes:
1. O tomate precisa ser cortado em pequenos pedaos para que os produtos qumicos usados
na extrao (detergente e sal) cheguem at as clulas.
2. No passo 3. Os agentes mais empregados para a lise ou solubilizao das membranas so
os detergentes. Diferentes detergentes extraem diferentes tipos e quantidades de lipdeos da
membrana, juntamente com protenas. Os detergentes solubilizam ou dispersam material
insolvel em gua por meio da formao de agregados microscpicos (micelas).
3. O sal proporciona um ambiente favorvel para o processo de extrao, pois contribui com
ons positivos (NA+) que neutralizam a carga negativa do DNA.
4. Papel do etanol - O DNA contido na fase aquosa est dissolvido em gua. Na presena de
concentraes relativamente altas de ctions monovalentes (Na +), o etanol induz uma mudana
estrutural transitria na molcula dos cidos nuclicos ocasionando sua agregao e
precipitao. Em outras palavras, o DNA sai de soluo e precipita. Como o DNA tem tambm
menor densidade que os outros constituintes celulares, por isso surge na superfcie da soluo.
5. A estrutura de dupla hlice s pode ser visualizada de modo indireto e atravs de aparelhos
sofisticados. O que voc est observando so milhares de fitas de DNA juntas.
6. Como o DNA genmico formado por molculas muito longas (lembre-se que cada
cromossomo formado por uma nica molcula de DNA) inmeras quebras mecnicas so
originadas nos procedimentos de extrao. As maiores molculas apresentam tamanho de
cerca de 30.000 pares de bases. Por outro lado, como as drogas utilizadas na extrao no
eram puras (detergente com corantes, por exemplo) elas ocasionam quebras adicionais nas
molculas de DNA.

23

24