Epigentica e Cncer

Monitores: Daniel F. S. Pires Marcelo R. Vilas Boas Epigentica so as alteraes da cromatina e do DNA que so estveis nas divises celulares e no alteram a seqncia de nucleotdeos. Alguns de seus mecanismos so a metilao do DNA e a modificao de histonas. Nos processos de oncognese, existe uma grande influncia dos mecanismos epigenticos, os quais parecem ser importantes por alterarem a expresso de genes chave na oncognese. Atualmente se questiona quais eventos seriam os primeiros a ocorrer no desenvolvimento de um tumor, j que vrias etapas so necessrias at a formao de uma clula maligna, e alteraes epigenticas so presenciadas em praticamente todos os tumores conhecidos. H possibilidade de que o mecanismo deflagrador do desenvolvimento de um cncer seja uma mutao epigentica, que causaria uma instabilidade do genoma permitindo outras mutaes necessrias na formao de um tumor.

Metilao do DNA: a adio de um grupo metil citosina. Esse processo feito pelas metiltransferases do DNA (DNMT) que adicionam o grupo metil ao carbono 5 da citosina, gerando a 5-metilcitosina. Ocorre quase que exclusivamente nas repeties de C ao lado de G, que muito freqentemente formam as chamadas ilhas CpG (ver adiante). Cerca de 3% das citosinas do DNA humano esto metiladas, sendo a maior parte delas localizadas nas ilhas CpG e um percentual muito menor localizado nas seqncias CpNpG (N = qualquer nucleotdeo). A 5 metilcitosina quimicamente instvel, e pode sofrer desaminao espontnea resultando em timina. O padro de metilao apagado no incio da embriognese e restabelecido no desenvolvimento. Esse processo se acentua com o envelhecimento. Nos vertebrados, a seqncia CpG um sinal para a metilao pelas metiltransferases de DNA. A principal funo da metilao nestes organismos a represso da expresso gnica. Seqncias de DNA no devem estar metiladas para serem transcritas (ao menos na regio promotora). Por reduzir

a expresso de genes desnecessrios, a metilao pode ter permitido o aumento do nmero de genes e, conseqentemente da complexidade que caracteriza esses organismos. Ilhas CpG: So regies ricas em citosina e guanina (geralmente acima de 50% dos nucleotdeos da regio), diferenciando-se do resto do genoma. Genes que so grandemente expressados tm ilhas CpG associadas que ficam localizadas quase sempre na ponta 5 do gene, geralmente na regio do promotor e, algumas vezes, se estendendo ao primeiro exon. Entretanto, nos genes com padro de expresso restrito, a ilha CpG associada est localizada abaixo do stio de iniciao da transcrio. Recebem este nome porque, embora tenham tendncia metilao, so normalmente protegidas deste evento.

Exemplos de genes com alteraes epigenticas relacionadas a cncer.

H19/IGF2: Nesse caso, existe a ocorrncia de perda de imprinting. Acredita-se que o H19 seja um gene supressor de tumor. Somente o seu alelo materno costuma ser expresso. J o IGF2 codifica um fator de crescimento e s expressa a sua cpia paterna O silenciamento do H19 materno por hipermetilao, induz a ocorrncia de transcrio mais abaixo no mesmo cromossomo, levando a uma expresso biallica do gene IGF2. IGF2: Em clulas normais, um dos alelos do gene IGF2 est sempre silenciado por metilao. Em casos em que no ocorre o silenciamento de um dos alelos, o IGF2 passa a sofrer transcrio exagerada, levando a uma produo aumentada desse potente fator de crescimento. A hipometilao do IGF2 encontrada no epitlio aparentemente normal de pacientes portadores de tumores colorretais e pode ser associada a risco aumentado de desenvolver esse tipo de cncer, alm de tumor de Wilms. P16ink4A: um gene supressor de tumor cujo silenciamento por hipermetilao pode estar presente em tumores de pulmo. A perda de funo do P16ink4A parece facilitar a oncognese por permitir o surgimento de instabilidade genmica, que pode resultar no silenciamento de outros genes supressores de tumor. Outros exemplos do papel do silenciamento epientico de genes da oncognese referem-se a genes supressores de tumor clssicos. Mutaes desses genes em linhagens germinativas resultam em formas familiares de cncer. No silencimento epigentico desses genes, surgem casos de tumores no familiares de comportamento semelhante aos da forma familiar. Podem ser citados os genes VHL (cncer renal), APC, (cncer de clon) e BRCA1 (cncer de mama). SIRT 1: SIRT1 uma protena de mltiplas funes sensvel ao estresse. um membro do grupo das histonas desacetilases de classe 3. A atividade desacetilase da SIRT1 pode modificar em nvel de ps traduo a atividade da p53, reduzindo a sua atividade de fator de transcrio. A resposta tecidual normal ao estresse e a leso transitria e deve coordenar renovao celular, reparo tecidual e apoptose. A resposta apopttica depende de um checkpoint mediado pela p53 para evitar sobrevivncia celular aps exposio a citocinas e aumento de espcies reativas de oxignio que podem causar dano ao DNA. Essa resposta normal inflamao aguda usa um circuito de feedback para modular a resistncia ao

estresse, permitindo que ocorra a repopulao adequada de clulas. Uma sobrevida celular anormalmente longa durante exposio crnica a tal estresse pode ser o evento primordial na expanso clonal que promove risco de tumor no clon. O primeiro ponto do circuito epigentico que liga SIRT1 a essas respostas anormais de sobrevivncia envolve o silenciamento do gene HIC1, que ocorre no incio da progresso de tumores. HIC1 um gene repressor de transcrio, cuja expresso ativada pela p53. As protenas SIRT1 e HIC1 se ligam e formam um complexo que suprime a transcrio do gene SIRT1. Em condies normais de resposta ao estresse, a expresso do SIRT1 induzida, sendo suprimida no momento adequado pelo complexo HIC1-SIRT1. Na ausncia da protena HIC1, o acmulo da protena SIRT1 impede a cessao adequada da resposta ao estresse, alm de suprimir a funo da p53, favorecer o silenciamento epigentico de outros genes e ativar a rota de desenvolvimento Wnt (reposio celular no intestino).

Modificao de Histonas Acetilao de Histonas: a mais investigada das modificaes de histonas, sendo um mecanismo de estmulo transcrio. Vrias acetiltransferases de histonas (HATs) foram descritas como catalizadores da adio de um grupo acetil (CH3CO) aos resduos lisina das cadeias laterais dos octmeros de histonas. As HATs funcionam como coativadores da transcrio, sendo o seu efeito final a facilitao do acesso as regies promotoras da transcrio. Desacetilao de Histonas: As desacetilases de histonas (HDACs) tem funo oposta as HATs, removendo os grupos acetil e causando represso da transcrio. Acreditase que as HDACs so recrutadas como parte do complexo de represso por metilao do DNA. Metilao de Histonas: promovida por algumas metiltransferases que tem como alvo determinados resduos de arginina e de lisina nas histonas, particularmente a histona 3. A metilao de arginina nas histonas relacionada ativao da transcrio; entretanto, a metilao de lisina relacionada represso da transcrio. O padro de metilao das histonas influencia a metilao do DNA, contribuindo para uma menor ou maior compactao da cromatina, respectivamente.

Medicamentos
Com os grandes avanos no conhecimento sobre a influncia da epigentica na oncognese, passou-se a considerar o uso de medicamentos que atuem nessa rea para impedir a progresso de tumores. Entre os medicamentos que atuam sobre mecanismos epigenticos esto: 5-azaCitidina: nucleosdeo com ao inibidora da metilao do DNA por inibir as DNA metiltransferases. Tem ao antineoplsica comprovada. Apresenta srios efeitos colaterais como trombocitopenia, neutropenia e, em altas doses, mielosupresso. Procainamida: J foi usado como antiarrtimo cardaco. um inibidor no competitivo das DNA metiltransferases. Se mostrou eficaz no tratamento de cncer de prstata, que se caracteriza por uma grande quantidade de ilhas CpG hipermetiladas. Procana: Composto semelhante a procainamida. Provoca hipometilao global do DNA, restaurando a expresso de genes supressores de tumor e inibindo a progresso de tumores. Esta droga aumenta a eficcia de diversos quimioterpicos, alm de aumentar a suscetibilidade das clulas malignas radioterapia. Alm disso, por no ser incorporada ao DNA, produz consideravelmente menos efeitos colaterais do que os nucleosdeos. Hidralazina: Comumente usada como antihipertensivo, pois um vasodilatador. Usada como droga antineoplsica por sua inibio da metilao em linfcitos T. Assim como outros agentes inibidores da metilao, podem produzir uma sndrome chamada lupus like, pois induzem a auto reatividade de linfcitos T. Existem ainda medicamentos que atuam sobre mecanismos epigenticos que esto em fase de desenvolvimento, como Pivanex, FK 228, PXD 101, NVP LAQ 824, SAHA, MS 275, MGCD 0103.

Bibliografia:
- The cancer epigenome - components and functional correlates. fAngela H. Ting, Kelly M.. McGarvey and Stephen B. Baylin (2006). - Histone Deacetylase Inhibitors: Latest Developments,, Trends and Prospects. Oscar Moradei, Christiane R. Maroun, Isabelle Paquin and Arkadii Vaisburg (2005).

(2005).