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COMO PREPARAR SOLUES QUMICAS

Porcentagem (%)
o modo mais simples de expressar a concentrao qumica de uma soluo, a qual pode ser feita de trs maneiras: a)% Peso/Volume (P/V) - gramas de soluto em 100mL de soluo. Expressa quantas gramas de soluto h em 100mL de soluo. Assim, por exemplo uma soluo de NaCl a 0,9 % contm, 0,9 gramas de NaCl em 100mL de soluo, cujo solvente, quando no explicito, a gua. A gua usada no preparo de solues pode ser desde a gua destilada ou dependendo da pesquisa uma gua altamente purificada indo desde a livre de ons minerais at aquela livre de DNAse, RNAse. Quando uma soluo porcentual expressa em p/v fica implcito que se refere a g %, isto , gramas de soluto em 100 mL de soluo. Portanto no necessrio colocar a unidade de medida,NaCL 0,9 g%, basta NaCL a 0,9 %. Entretanto, quando a porcentagem do soluto no est em gramas necessrio especificar, por exemplo, soluo de glicose a 100 mg%. Embora possa parecer simples preparar uma soluo em %, um cuidado especial deve ser tomado com relao aos solutos na forma cristalina (slida, P). Assim, algumas substncias possuem na sua estrutura qumica, gua de cristalizao enquanto outras so slidos cristalinos anidros. Isso consta dos rtulos dos frascos dos produtos e o primeiro detalhe para o qual devemos estar alertas quando do preparo de soluo em %. Por exemplo, NaCL geralmente um slido cristalino anidro (sem molculas de gua de cristalizao em sua estrutura molecular. Assim, para ser preparado 100 mL de NaCl a 0,9% bastaria pesar 0,9 g do produto, dissolver e completar para 100 mL com gua, no mnimo destilada. Por outro lado, sulfato de cobre um sal que geralmente contm em sua estrutura 5 molculas de gua de cristalizao (CuSO4.5H2O) e isso precisa ser levado em considerao nos clculos quando do preparo de solues. Assim, se por exemplo for preciso preparar 250 mL de sulfato de cobre a 5% essa soluo dever conter 5 g de CuSO4 em 100 mL de soluo. Como preciso de 250 mL a soluo dever conter 12,5 g de CuSO4 nesse volume. Entretanto, se for pesado 12,5 g do CuSO4.5H2O ser pesado menos do necessrio porque h gua na molcula. Desse modo, deve ser feito um clculo para compensar as molculas de gua de cristalizao, o que daria um peso final de 19,5 g de CuSO4.5H2O. Alm do clculo de compensao das guas de cristalizao, tambm devem ser feitas as correes quanto a pureza do soluto, pois nem todos so 100% puros. Exemplo: Se o teor do composto for de 90%, e voc pesou 5 g ; para corrigi-lo a 100% se realiza a seguinte conta. Se 5 g 90%, Xg para 100% . O resultado ser 5,55 g b) % Peso por Peso ( p/p) - gramas de soluto em 100 g de soluo. Expressa quantas gramas de soluto h em 100 gramas de soluo e se o solvente gua (d=1,0) equivale a % em (p/v) descritas antes. Essa no uma maneira usual de expressar a concentrao de solues preparadas em laboratrios, mas se assim for feita deve fica explicito que a % um p/p. Por outro lado, deve ser alertado que a concentrao dos cidos comprados (estoque) a partir dos quais so preparadas solues est sempre expressa % p/p. Assim, no almoxarifado dos laboratrios h HCL a 36% H2SO4 a 98% ou H3PO4 a 85% e em todos a % se refere a p/p. Assim, a partir da densidade desses cidos, a qual est sempre expressa em g/mL podemos calcular qual o volume de cido concentrado que desejamos pipetar para conter a massa (g )de cido necessria para preparar uma soluo de determinada concentrao desejvel.

Peso.Soluto

ConcentraoMolarxMassaMolarxVol.Soluo % EnsaioxDensidade

Exemplo: 0,005 mol.L-1 de HCl

Peso.Soluto

0,005molL1 x36,46gx1Litro 0,414g 0,38x1,19g.mL1

Logo, ser pipetado 0,414 mL de HCl e diludo com gua em um balo volumtrico de 1 Litro at a linha de aferio.
c) % Volume/Volume (v/v) - mL (ou L) de soluto em mL de soluo. Expressa quantos mL de um soluto numa forma lquida h em 100ml de soluo. Assim, por exemplo, quando digo etanol a 75%(v/v), significa que foi misturado a proporo de 75 mL de etanol puro com 25mL de gua. Essa no uma maneira usual de preparar solues e geralmente usada quando da mistura de vrios solvente. Portanto, precisa ficar implcito que se refere a % em v/v para evitar erros. Passo a Passo no Preparo de Soluo em Molaridade 1- Pegar no almoxarifado o frasco do soluto 2- Se o soluto for slido verificar pela frmula molecular contida no rtulo se ele contm gua de cristalizao 3- Se o soluto tiver gua de cristalizao anotar do rtulo: a) O peso molecular do produto b) Nmero de molculas de gua de cristalizao 4- Se o soluto for liquido, anotar sua densidade (g/mL) 5- Anotar a pureza do soluto, como informado no rtulo 6- Anotar o peso (soluto slido) ou volume (soluto liquido) obtido 7- Pesar ou pipetar o calculado e preparar a soluo de acordo com o volume desejado informado e os princpios laboratoriais de preparo de solues

Vol.Soluto

ConcentraoMolarxMassaMolarxVol.Soluo % EnsaioxDensidade

Exemplo: 0,005 mol.L-1 de HCl

Vol.Soluto

0,005molL1 x36,46gx1Litro 0,414mL 0,38x1,19g.mL1

Molaridade
Comparado com %, trata-se de um modo mais avanado de expressar a concentrao de solues. Assim, por exemplo, embora as solues de glicose e sacarose ambas a 1% sejam iguais em termos de massas de solutos pelos volumes de solues, elas so totalmente diferentes em termos de numero de molculas em soluo e isso tem tremendas implicaes bioqumicas ou fisiolgicas.

Ao contrrio da porcentagem que no diferencia de fato quantas molculas h em soluo com a mesma concentrao porcentual, por exemplo, glicose a 1% versus sacarose a 1%, a molaridade expressa o n de mols de soluto em 1 litro (L) de soluo. Assim, embora glicose e sacarose a 1% contenham a mesma quantidade desses aucares em 100 mL de soluo, em termos de molaridade a soluo de glicose a 1% so soluo totalmente diferentes com relao ao nmero de molculas em soluo e isso tem tremendas implicaes bioqumicas ou fisiolgicas. Isso refora a importncia de conhecer e expressar a concentrao de solues em molaridade a qual simbolizada pela letra maiscula M. Matematicamente M = n = m (g) , portanto m = M x Mol x V(l) = g V Mol x V(L) M = Concentrao Molar desejada n = no de mols V = Volume desejado de soluo em litros (L) Mol= Peso Molecular do soluto m = massa em gramas (g) do soluto Os clculos necessrios para determinar calcular a massa (ou volume) de um soluto para preparar determinada soluo de concentrao molar desejada esto embutidos na ferramenta de clculos a seguir. Deve ser enfatizado, que no caso de preparo de solues em molaridade, no h como no caso de %, preocupao de saber se o soluto tem ou no gua de cristalizao, pois isso j est compensado no peso molecular do mesmo. Passo a Passo no Preparo de Soluo em Molaridade 1- Pegar no almoxarifado o frasco do soluto 2- Anotar o peso molecular do soluto (no se preocupe com gua de cristalizao) 3- Anotar a pureza do soluto 4- Se lquido, anotar a densidade do soluto 5- Pesar (g) ou pipetar (mL) o valor calculado 6- Preparar a soluo como j descrito no passo a passo em porcentagem(%).

Normalidade
Embora solues expressas em molaridade atendam os requisitos da maioria das pesquisas, ela tambm tem suas limitaes quando o comportamento cido/base de determinado soluto precisa ser considerado. Assim, por exemplo, solues de cido clordrico (HCL)e cido sulfrico (H2SO4) ambas na concentrao molar por exemplo 1,0 M, embora sejam iguais em termos do nmero de molculas em soluo, elas so totalmente diferentes em termos de poder cida-base. Isso devido ao fato que enquanto o HCL tem apenas 1H ionizvel [libera 1H + (prtons para a soluo)] o H2SO4 possui 2H ionizveis, isto , libera 2H+ para a soluo. Desse modo, a concentrao de H+ numa soluo 1,0 M de H2SO4 2x maior do que a da soluo de HCL na mesma concentrao molar. Em outras palavras, so solues totalmente diferentes quanto ao comportamento cido. Esse mesmo raciocnio valido para bases em termos de nmeros de ons hidroxilas (OH -) ionizveis, que podem ser liberados para a soluo,por exemplo, NaOH vs Ca(OH) 2. Logo, para contemplar essa diferena da capacidade de diferentes solutos liberarem H- ou OHpara a soluo usada a unidade de concentrao chamada de Normalidade que matematicamente simplesmente a concentrao em Molaridade normalizada pelo nmero de H+ ou OH- ionizveis de um soluto. Normalidade expressa pela letra N maiscula e matematicamente pela frmula : N = n. Eq -q = m(g) = m(g) = ml x X V(l) Eq g x V(l) Mol x V(l) Mol x V(l), X

de tal modo que a massa m em gramas de determinado soluto para preparar um certo volume V(L) de uma soluo de determinada concentrao N dado pela frmula: m = N x Mol x V (L) X Frmula essa que matematicamente s difere da molaridade com relao ao X do denominador, o qual significa quantos H + ou OH - ionizveis h na frmula molecular do soluto cido ou base, respectivamente. Essa frmula foi embutida no sistema operacional de clculos disponvel possibilitando determinar a massa de um soluto slido ou o volume de um soluto lquido necessrios para preparar na normalidade desejada. Passo a Passo no Preparo de Solues em Normalidade 1-Pegar no almoxarifado o frasco do soluto 2-Anotar o peso molecular especificado no rtulo 3-Anotar a pureza descrita no rtulo 4-Anotar a densidade, se o soluto for liquido 5-Certificar quantos H+ ou OH- ionizveis h na estrutura qumica do soluto. 6-Informar o solicitado a) Concentrao desejada de soluo b) Volume desejado de soluo c) Peso Molecular do soluto d) N. de H+ ou OHe) Densidade, se o soluto for ligado 7-Pesar ou pipetar a quantidade calculada dissolver em gua destilada e completar o volume desejado de soluo; transferir para o frasco de armazenamento e rotular devidamente como ilustrado em %.

Soluo Tampes
So solues usadas para tentar manter o pH dentro de uma faixa adequada para determinado procedimento laboratorial. Embora no presente haja disponvel no mercado solues tampes, na maioria das vezes essas so preparadas pelo usurio. Para tal necessrio um conhecimento terico sobre tampes e familiaridade com operaes matemticas. Assim, uma soluo tampo composta de um par cido fraco (cido conjugado) e seu sal (base conjugada), mas um tampo pode tambm ser composto de uma base fraca(base conjugada)e seu respectivo par (cido conjugado). Exemplificando, tampo acetato composto de cido actico (H 3CCOOH)e on acetato (H3CCOO-). Ele pode ser preparado a partir do cido actico e um dos seus sais (acetato de sdio ou potssio). Entretanto,mesmo no havendo no laboratrio o sal acetato possvel preparar tampo acetato s a partir de cido actico adicionando-se NaOH ou KOH para gerar o sal correspondente. . Com relao aos tampes tendo bases como seus componente o mais comum o tampo Tris (tris-hidroximetilaminometano). Atualmente os componentes aciso/base conjugados do tampo Tris pode ser encontradas comercialmente, isto , o Tris- base (base conjugada) e o tris Cloridrato de Tris (Tris-cido, cido conjugado) para o preparo do tampo. Entretanto na maioria das vezes s encontrado no almoxarifado o Tris-base, de tal modo que para preparar esse tampo, ser necessrio gerar o tris-cido pela adio de HCL. Devido a dificuldade com os clculos e da disponibilidade no laboratrio dos componentes do tampo, uma planilha Excel foi idealizada e partir dessa a ferramenta de clculos aqui disponibilizada foi desenvolvida, facilitando o processo. Entretanto para o seu bom uso um conhecimento tericos requerido e alguns conceitos so relevantes:

1- Concentrao do tampo: expressa em molaridade e representa a soma das concentraes dos dois componentes do tampo(cido+base). Exemplificando, tampo acetato 0,1 M significa que a soma do nmero de mols do cido mais a do sal igual a 0,1. 2- pH do tampo : dado pela relao do n. de mols do sal pelo cido e matematicamente expressa pela frmula: pH = pka + log [sal] (1) [cido] pka = -log Keq Sendo que pka uma constante para determinado cido, valor esse encontrado em manuais de laboratrio, e Keq a constante de equilbrio de dissocio do cido fraco. Para o preparo de um tampo necessrio: 1 Calcular pela equao (1) a relao do n de mols de acido pelo de sal para fornecer o pH desejado. 2 Como a soma do n mols de sal mais cido igual ao n de mols(n) total do tampo. [ n= M x V (L)], calcula-se o n de mols de sal e de cido necessrios para fornecer a concentrao e o pH final do tampo. Essas frmulas foram embutidas no sistema de clculos mostrados a seguir, possibilitando o clculo da massa ou volume do soluto necessrios para o preparo de um tampo e para tal as seguintes etapas devem ser seguidas para cada sistema em particular. Passo a Passo no Preparo de Soluo Tampo a) Disponho no laboratrio dos dois componentes do tampo. 1- Selecionar na janela "tenho cido e base (sal)" 2- Selecionar no sistema de calcular o cido componente do tampo, se ele um slido ou lquido. 3- Selecionar a planilha correspondente. 4- Informar a) o pH desejado do tampo b) A concentrao molar desejada c) O volume (em litros) do tampo d) Os pesos moleculares e as purezas dos componentes cidos e base (sal) do tampo. e) O pka do cido componente do tampo f) Se o cido do tampo for um lquido informar a densidade 5- Pesar ou pipetar os valores obtidos para o sal e cido. 6- Dissolver e completar para o volume final desejado de soluo 7- Checar o pH e se necessrio acertar. 8- Completar o volume e armazenar em frascos devidamente rotulados, como ilustrado em %. b) H no laboratrio somente o componente cido do tampo Exemplo: a) Tenho s cido lctico e preciso de tampo lactato de Na, i.e, no tenho o sal lactato de Na, ou b) S tenho NaH2PO4, preciso de tampo fosfato pH 7,4 mas no tenho o sal (Na2HPO4) Nesses casos o n mols de sal ser gerado por uma soluo de NaOH 1,0 M a qual dever ser preparada pelo usurio. Passo a Passo para o Clculo

1- Selecionar na janela "tenho somente o cido" 2- selecionar a forma fsica do cido 3- informar a) O pH desejado do tampo b) A concentrao desejada para o tampo c) O volume (em litros) da soluo tampo d) O pka do cido componente do tampo e) O peso molecular e a pureza do componente cido do tampo f) Se o cido for lquido, digite a sua densidade 4- Pesar ou pipetar a quantidade de cido calculado 5- Dissolver o cido em volume de gua menos (75% menor que o volume final desejado de soluo) 6- Adicionar o volume calculado de NaOH 1,0 M 7- Verificar o pH e acertar se necessrio 8- Completar o volume e armazenar em frascos devidamente rotulados, como ilustrado em %. c)H no laboratrio smente a Base Conjugada Exemplo: a)Tenho s Tris-base e preciso de tampo Tris 0,1M pH 7,0 b)Assim o componente cido do tampo ser gerado por uma soluo de HCl 1,0 M, o qual dever ser preparado pelo usurio Passo a passo para o calculo 1. Selecionar na janela "tenho somente a base" 2. Selecionar a forma fsica da base 3. Informar a) O pH desejado do tampo b) A concentrao desejada para o tampo c) O volume (em litros) da soluo tampo d) O pka do cido componente do tampo e) O peso molecular e a pureza do componente cido do tampo f) Se o cido for lquido, digite a sua densidade 4. Pesar ou pipetar a quantidade de cido calculado 5. Dissolver o cido em volume de gua (75% menor que o volume final desejado de soluo) 6. Adicionar o volume calculado de HCL 1,0 M 7. Verificar o pH e acertar se necessrio Completar o volume e armazenar em frascos devidamente rotulados, como ilustrado em %. Dvidas entrem no site indicado abaixo:

http://www.fop.unicamp.br/dcf/areas/bioquimica/bioq_calculos/