UNIVERSIDADE CASTELO BRANCO INSTITUTO QUALITTAS DE PS-GRADUAO CURSO LATU-SENSO DE CLNICA MDICA E CIRRGICA DE PEQUENOS ANIMAIS - 2 SEMESTRE 2006.

ASPECTOS HEMATOLGICOS DAS RICKETTSIOSES CANINAS

Guilherme Senra Santos

Rio de Janeiro, julho. 2010

GUILHERME SENRA SANTOS Aluno do Curso Qualittas de Clnica Mdica e Cirrgica de Pequenos Animais

ASPECTOS HEMATOLGICOS DAS RICKETTSIOSES CANINAS

Trabalho concluso

monogrfico do curso de

de Ps-

graduao em Clnica Mdica e Cirrgica de Pequenos Animais, apresentado UCB como requisito parcial para a obteno do ttulo de Ps graduado Clnica Mdica e Cirrgica de Pequenos Animais, sob a orientao do Prof. Jorge Luiz Costa Castro.

Rio de Janeiro, julho. 2010

ASPECTOS HEMATOLGICOS DAS RICKETTSIOSES CANINAS

Elaborado por Guilherme Senra Santos Aluno do Curso Qualittas de Ps-graduao em Clnica Mdica e Cirrgica de Pequenos Animais

Foi analisado e aprovado com grau: ....................................

Rio de Janeiro,

de

de

____________________________ Membro ____________________________ Membro ____________________________ Pro. M.Sc. Jorge Luiz Costa Castro (Orientador) Presidente

Rio de Janeiro, julho. 2010

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Dedico essa monografia, aos meus pais por tudo que representam pra mim. minha filha Maria

Eduarda a quem amo muito, fonte de toda a minha fora. Aos meus irmos, familiares, amigos e a minha namorada Manoella por serem base de tudo.

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Agradeo, em primeiro lugar, a Deus por me abenoar em todos os dias de minha vida. Aos meus pais por todo amor, carinho, dedicao e esforos incondicionais para minha formao. Aos meus irmos e parentes, pelo companheirismo. A minha namorada Manoella, por todo o apoio. Ao meu scio e amigo Hugo pela convivncia profissional e pessoal. Ao meu orientador e amigo Jorge Castro, pela pacincia e ateno. Aos meus professores e colegas de curso pelos conhecimentos

adquiridos.

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SANTOS, Guilherme Senra Aspectos Hematolgicos das Rickettsioses caninas A rickettsiose canina uma importante doena infecciosa cuja prevalncia tem aumentado significativamente em vrias regies do Brasil. usualmente transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus, tem como agentes etiolgicos bactrias pertencentes famlia das Rickettsiales, sendo a Erhlichia canis e o Anaplasma platys as espcies mais comumente encontradas. De acordo com os sinais clnicos, a doena pode ser dividida em trs fases: aguda, sub-aguda e crnica. A eficcia do tratamento depende de um diagnstico precoce. O diagnstico embasado e reforado pela suspeita clnica, confirmado pela identificao microscpica do agente etiolgico em lmina, ou atravs de imunofluorescncia indireta, ELISA e tambm PCR. Vrios frmacos so utilizados no tratamento da Rickettsiose canina, sendo a doxiciclina o antibitico de escolha. O prognstico da doena varivel, sabe-se que quanto mais precocemente for feito o diagnstico, maiores so as chances de xito no tratamento.

SANTOS, Guilherme Senra Hematologics aspects of the canine rickettsioses. The canine rickettsiosis is an important infectious disease whose prevalence has increased significantly in some regions of Brazil. Usually it is transmitted by the tick Rhipicephalus sanguineus, and has as etimologics agents of the family of Rickettsiales more commonly spread for this region the Erhlichia canis and the Anaplasma platys. In accordance with the clinical signs, the illness can be divided in three phases: acute, subacute and chronic. The effectiveness of the treatment depends on a precosious diagnostic. The diagnostic is embased and reinforced by the clinical suspect, confirmed by the microscopic identification of the etiologic agent on a sheet, through the indirect imunofluorescense, ELISA and PCR. Many drugs are used in treatment of the canine rickettsiosis, being the doxicicline the antibiotic of choice. The Diseases prognostic is variable, is known that how earlier the diagnostic was realized, bigger are the chances of the treatments success.

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SUMRIO Pgina Resumo ......................................................................................................................... v Abstract ......................................................................................................................... vi Parte 1. Introduo ................................................................................................................. 1 2. Reviso de literatura .............................................................................. .................. 4 2.1. Nova Taxionomia................................................................................................. 4 2.2.Principais Agentes Etiolgicos .................................................... ..................... 4 2.2.1. Ehrlichia canis ............................................................................................. 5 2.2.2. Anaplasma platys ......................................................................................... 6 2.2.3. Outros agentes etiolgicos ............................................................................ 7 2.3. Infeco e Doena .......................................................................................... 8 2.4. Diagnstico ........................................................................................................ 11 2.5. Tratamento e Profilaxia ..................................................................................... 13 2.6. Prognstico ........................................................................................................ 15 3. Concluso ................................................................................................................. 16 Referncias bibliogrficas ............................................................................................ 17

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1 INTRODUO

A Rickettsiose canina foi relatada pela primeira vez na Arglia em 1935, quando os pesquisadores, Donatien e Lestoquard observaram organismos nas clulas mononucleares circulantes de ces infestados por carrapato, na ocasio denominaram-no Rickettsia canis (McDADE, 1990; ALMOSNY, 2002). Posteriormente foram descritos casos de erliquiose canina em Uganda no antigo Congo Belga (Repblica do Congo) e na Nigria (RIKIHISA, 1991). Segundo EWING et. al. (1996), o primeiro caso descrito de erliquiose canina nas Amricas foi regio das Antilhas Holandesas por Bool & Stmoller em 1957, em infeco associada Babesia canis. Segundo BIRCHARD & SHERDING (2003), os sinnimos usados na literatura para esse distrbio incluem Doena do Co Rastreador, Pancitopenia canina tropical, Febre hemorrgica canina e Tifo canino. O papel da Ehrlichia. canis (E. canis) como Rickettsia significativamente patognica veio luz no final da dcada de 60 (durante a Guerra do Vietnam), quando ficou estabelecido que ela era o agente etiolgico da pancitopenia tropical canina (HUXSOLL, 1969). A erliquiose se distribuiu mundialmente e alcanou destaque durante esta guerra, quando uma grande proporo de ces militares contraiu essa doena (BIRCHARD & SHERDING, 2003). Este achado causou grande dvida, visto

que a E. canis havia sido relatada como causa relativa de doena branda, exceto em filhotes. Este fato estimulou novas pesquisas sobre este agente e a doena por ele causada (ALMOSNY, 1998). O primeiro relato no Brasil foi feito em Belo Horizonte, posteriormente em 1976, foi descrita, a referida rickettsiose, em ces da Polcia Militar RJ no municpio do Rio de Janeiro (COSTA et. al., 1973; CARRILLO et. al, 1976). A erliquiose uma doena que se encontra amplamente distribuda em todo territrio nacional (PAES, 1995). Em 1986 foi descrito um caso de infeco por Ehrlichia canis em um co de Santa Catarina, Rio Grande do Sul, e em 1988 um caso em Curitiba, Paran. (SILVA et. al., 1986; KAVINSKI et al., 1988). De acordo com MIRANDA et al. (2004), em 557 candeos suspeitos de erliquiose na cidade de Campos dos Goytacazes, RJ, 69 apresentaram-se positivos a partir de avaliao hematoscpica em esfregao sanguneo, o que corresponde ocorrncia de 12,4% na citada regio. Segundo ALMOSNY (2002), as anormalidades hematolgicas mais freqentemente observadas nessa infeco so anemia no regenerativa,

trombocitopenia e leucopenia. Geralmente ocorre anemia arregenerativa, porm a anemia pode ser regenerativa quando houver hemlise concomitante com Babesia canis ou ocorrncia de hemorragia (HOSKINS, 1991). A trombocitopenia que se desenvolve durante a fase aguda atribuda ao decrscimo da meia vida das plaquetas circulantes, o que pode ser um mecanismo imunomediado. Na fase crnica, a trombocitopenia est associada ao decrscimo da

hematopoiese, que evidenciada pela presena de megacaricitos e outros precursores hematopoiticos na medula (ALMOSNY, 2002). Trombocitopenia, leucopenia, e anemia desenvolvem-se durante a fase aguda da doena, mas a diminuio na contagem celular aproxima-se gradualmente dos valores normais durante o perodo subclnico. Estudos indicaram que a anemia regride e a contagem de plaquetas retorna ao valor normal em aproximadamente 50% dos ces que desenvolveram fase subclnica (CODNER & FARRIS SMITH, 1986). Segundo LOPES et al. (1996), o hemograma est entre os exames mais prticos, econmicos e de maior utilidade na rotina clnica, ao utilizarmos dessa importante ferramenta diagnstica, podemos relatar as principais variaes

hematolgicas que ocorrem na infeco provocada por esses agentes da ordem das Rickettsiales. O objetivo do presente trabalho revisar os aspectos hematolgicos das rickettioses caninas ressaltando a importncia da realizao do hemograma como mtodo de diagnstico.

2. REVISO DE LITERATURA

2.1 - Nova Taxionomia

Os parasitos pertencentes gnero Ehrlichia, exceto as espcies E. ewingii e E. ruminantium, so capazes de infectar monocitos e macrfagos. A espcie E. ewingii por sua vez infecta granulcitos, ao passo que a Cowdria ruminantium parasita tanto as clulas endoteliais vasculares quanto os neutrfilos. O gnero Anaplasma infecta granulcitos, plaquetas e clulas vermelhas (DUMLER et. al. 2001). Segundo os mesmos autores houve uma reorganizao na ordem Rickettsiales e todos os membros das tribos Ehrlichiae e Wolbachieae foram transferidos para a famlia Anaplasmatacea, que contm quatro gneros: Ehrlichia, Anaplasma, Neorickettsia, e Wolbachia. Posio taxionmica da Ehrlichia canis. Ordem: Rickettsiales, Famlia: Anaplasmatacea, Gnero: Ehrlichia, Espcie: Ehrlichia canis. Posio taxionmica da Anaplasma platys, Ordem: Rickettsiales, Famlia: Anaplasmatacea, Gnero: Anaplasma, Espcie: Anaplasma platys.

2.2 - Principais Agentes Etiolgicos

WOODY & HOSKINS (1991) e INOKUMA et al. (2003), relataram que a Erliquiose uma doena transmitida por carrapato que acomete tanto humanos quanto animais. Anaplasma platys e Ehrlichia canis so os dois mais conhecidos patgenos que causam a Erliquiose canina, ambos tm uma distribuio global, assim como o seu transmissor o Rhipicephalus sanguineus A Erliquiose canina uma patologia rickettsial causada por Ehrlichia spp e transmitida por qualquer tipo de carrapato. Todas as Ehrlichia spp so microorganismos intracelulares que infectam leuccitos (SAINZ et al, 2000). O gnero Ehrlichia, pertence famlia das Rickettsiaceae, constitui bactrias intracelulares obrigatrias dos leuccitos (moncitos e polimorfonucleares) ou trombcitos (DAVOUST et. al., 1993), esses organismos foram classificados de acordo com RIKIHISA (1991) na Ordem Rickettsiales; Famlia Rickettsiaceae; Tribo Ehrlichiae; Gnero Ehrlichia. Seu desenvolvimento inclui trs estgios de desenvolvimento: corpsculo elementar, corpsculo inicial e mrula. Individualmente a ehrlichia denominada corpsculo elementar, que geralmente tem aspecto cocide ou elipside, porm, o pleomorfismo notado com frequncia (MCDADE, 1990 ). Segundo HOSKINS (1991), a espcie E. canis a causa mais comum de infeco natural e considerada a mais severa. Outras espcies como E. platys, E. equi, E. risticii e E. ewingii tambm foram descritas causando infeco natural em ces. (RIKIHISA, 1991; HOSKINS, 1991).

2.2.1. Ehrlichia canis

ELIAS (1991) e ALMOSNY (2002) descreveram que so caracterizadas trs formas para a Ehrlichia canis: mrula, descrita como uma colnia arredondada com grnulos corados em azul escuro nos preparados corados pelo Giemsa; corpsculos elementares, estruturas amorfas, arredondadas de vrios tamanhos, podendo ser visualizadas em vacolos de citoplasma de moncitos e os corpsculos iniciais, forma granular composta de mltiplos grnulos, estes grnulos precisam ser diferenciados das granulaes azurfilas que podem ocorrer no citoplasma de mononucleares sanguneos de ces sadios. Os autores consideram a presena destas incluses como suficientes para um diagnstico positivo da doena. A E. canis parasita primria de artrpodes, sendo os vertebrados seus hospedeiros secundrios (CORRA & CORRA, 1992). HUXSOLL (1976) classifica a erliquiose canina como uma severa doena hemorrgica, s vezes caracterizada como pancitopenia tropical e associada anemia aplsica, que ocorre em alguns ces cerca de 60 dias apos infeco.

2.2.2. Anaplasma platys

E. platys, um microoganismo antigenicamente no relacionado com E. canis ou E. equi, consiste no agente causador da Trombocitopenia clclica infecciosa dos ces (SWANGO et al., 1989). Estes organismos foram observados apenas em plaquetas, podendo ocorrer com uma, duas ou trs incluses. (WOODY & HOSKINS, 1991).

O Bergeys Manual of Systematic Bacterology, reconhece a E. platys como tendo sido descrita por FRENCH & HARVEY (1983) como um parasito especfico de plaquetas de ces. Suspeita-se que E. platys seja transmitida entre ces, principalmente pelo carrapato vermelho, Rhipicephalus sanguineus (HOSKINS, 1991) De colorao basoflica em esfregaos corados pelo Giemsa, mede entre 0.4 a 1.2 m, podendo ser arredondada, oval ou achatada. rodeada por membrana dupla e se reproduz por fisso binria.(RISTIC et. al.,1989). A infeco aguda pela E. platys caracteriza-se pela parasitemia cclica dos trombcitos seguida de trombocitopenia e linfadenopatia generalizada. Aps um perodo de trombocitopenia as plaquetas tendem a retornar a valores normais aps 3 a 4 dias e estas fases acontecem em intervalos de uma a duas semanas. Os ces infectados no apresentam enfermidade clnica e raramente mostram sinais de hemorragia significativa, mesmo tendo plaquetopenias pronunciadas. As infeces associadas de E. platys e E. canis so comuns (HOSKINS, 1991; HARRUS et. al., 1997). GAUNT et. al (1990) observaram reduo da agregao plaquetria associada a E. platys. Afirmaram eles, aps observao da medula ssea, haver hiperplasia megacarioctica, caracterizando uma trombocitopenia regenerativa. Existem dificuldades no diagnstico de E. platys atravs da observao de mrulas devido ao carter cclico da trombocitopenia e o teste de imunofluorescncia indireta detecta anticorpos para E. platys durante um curto perodo aps o aparecimento de plaquetas parasitadas (FRENCH & HARVEY, 1983; WOODY & HOSKINS, 1991).

A primeira alterao uma severa trombocitopenia, onde se podem observar valores mnimos inferiores a 10 000 plaquetas por milmetros cbicos (HOSKINS, 1991). Quando os trombcitos parasitados desaparecem da circulao, a contagem se eleva rapidamente, alcanando valores normais entre 3 a 4 dias (ibid). HARRUS et al. (1997b) descreveram o primeiro caso de E. platys em ces nativos de Israel e observaram, alm das manifestaes clnicas conhecidas, a presena de macroplaquetas que tambm haviam sido observadas por HARRUS et al. (1997 a) em um caso de erliquiose granuloctica. Os autores afirmaram que a cepa de E. platys encontrada em Israel era mais virulenta que a Americana. Consideraram, tambm, que infeces associadas a E. canis ou outras patologias podem agravar o quadro.

2.2.3 Outros Agentes Etiolgicos

A espcie E. equi foi pela primeira vez reconhecida como forma pouco usual de E. canis, devido reproduo e formao de mrula primariamente no citoplasma de neutrfilos, e no primariamente em linfcitos (EWING & BUCHNER, 1971). As infeces em ces pela E. equi so leves ou inaparentes (HOSKINS, 1991). O modo de transmisso da E. equi desconhecido, suspeita-se que carrapatos sejam vetores (RIKIHISA, 1991). A espcie E. risticii produz infeces leves ou inaparentes, podendo os ces ficarem como portadores assintomticos. Seu vetor tambm desconhecido, porm suspeita-se que seja o carrapato (HOSKINS, 1991).

A E. ewingii foi relatada inicialmente em 1985 como causadora da erliquiose granuloctica canina, devido a observao da mrula em granulcitos e clulas mononucleares de ces com poliartrite aguda (PAES, 1995). Produz uma infeco sub-clnica, causando febre e muitas anormalidades hematolgicas como neutropenia, linfocitose e trombocitopenia entre 18 e 24 dias de infeco. Tem, supostamente, como vetor o carrapato Amblyomma americanus e possivelmente o carrapato Rhipicephalus sanguineus (PAES, 1995). A erliquiose granuloctica em ces, causada por E. ewingii ou E. equi , associada a sinais neurolgicos com diagnostico de meningite foi descrita por MARETZKI et al. (1994). Os autores relataram que o animal apresentava perda de peso, epistaxe, rigidez de pescoo e cabea, moderada atrofia muscular, hiperestesia cervical e com alta infestao por carrapato Dermacentor variabilis. Avaliaes laboratoriais revelaram anemia no regenerativa , neutrofilia, linfocitopenia com discreto desvio nuclear de neutrfilos esquerda (DNNE), trombocitopenia e hipergamaglobulinemia policlonal (IGM,IGG e C3). A anlise da Medula ssea revelou suave hipoplasia eritride e leve plamocitose. A anlise do liquor revelou acentuada pleocitose e observou-se em poucos neutrfilos, mrulas de Ehrlichia Sp enquanto que ao esfregao sanguneo, apenas um moncito parasitado foi detectado. Os autores relataram no existir teste especfico para E. ewingii E. chaffensis e E. sennetsu infectam experimentalmente os ces. A primeira responsvel pela erliquiose humana e a segunda tem tropismo pelas clulas mononucleares e provoca a febre sennetsu em humanos que so possivelmente seus hospedeiros naturais (PAES, 1995). RIKIHISA (1991) relatou reao cruzada entre E. sennetsu, E. canis e E. risticii.

Aps a infeco atravs de seu vetor, ocorre um perodo de incubao que dura de 1 a 3 semanas. Nos animais mais jovens, aparece normalmente aos 11 dias ps-infeco uma febre recorrente de 41C (ALMOSNY, 2002). Aps esse perodo podem ser isoladas mrulas do sangue.

2.3 - Infeco e Doena

O carrapato Rhipicephalus sanguineus o vetor reconhecido para a erliquiose canina, doena que se refere a uma variedade de sndromes clnicas que acometem candeos silvestres e ces (RIKIHISA, 1991; HOSKINS,1991). A trombocitopenia cclica infecciosa dos ces pode ser transmitida por injeo de sangue contendo E. platys obtido durante o perodo parasitmico e em naturais condies pode ser transmitido pela picada de um carrapato infectado (Rhipicephalus sanguineus) ou outro artrpode hematfago (ALVARADO et. al., 2003). Segundo WOODY & HOSKINS (1991), a transmisso ocorre de maneira mais efetiva, no perodo de 2 a 3 semanas aps o co ser infectado pelo carrapato devido ao maior nmero de clulas parasitadas nesta fase. As diferentes espcies da ordem Rickettsiales, parecem apresentar um tropismo caracterstico por determinados tecidos que acarreta uma doena stio especfica. Assim, enquanto que a E. risticii infecta predominantemente clulas ao longo da parede intestinal, especialmente no clon de equinos, onde provocam uma diarria aquosa, a E. canis possui uma predileo por clulas encontradas na micro

vascularizao dos pulmes, rins e meninges de ces (HOSKINS, 1991; HARRUS et al, 1997a; HARRUS et al, 1997b), sendo a epistaxe causada por hemorragias caractersticas dos pulmes ou da mucosa nasal (RIKIHISA ,1991), enquanto que a E. sennetsu est, predominantemente, localizada nos linfonodos, onde causa

linfadenopatia (RIKIHISA ,1991; HOSKINS, 1991). Aps o perodo de incubao que pode durar de uma a trs semanas, mrulas j podem ser isoladas no sangue (SWANGO et al.,1989; RIKIHISA, 1991; DAVOUST, 1993). A doena apresenta trs formas clnicas: aguda, subaguda e crnica (CORRA & CORRA, 1992). Segundo SMITH & RISTIC (1977) a infeco em ces ocorre em trs estgios: aguda, sub-clnica e terminal. A fase aguda inicia-se com processo febril, aps incubao de 10 a 15 dias, podem-se observar temperaturas superiores a 40,5C, nesta fase ocorrem anorexia, perda de peso, edema de membros, vmitos e linfadenopatia (TROY & FORRESTER, 1990). A fase aguda da E. canis dura de 2 a 4 semanas e a replicao do parasito ocorre dentro das clulas mononucleares infectadas, espalhando-se pelo organismo dentro dos fagcitos mononucleares, instala-se nas clulas reticuloendoteliais do fgado, bao e linfonodos, onde se multiplicam primariamente em macrfagos e linfcitos resultando em hiperplasia linforeticular, podendo conseqentemente causar aumento dos rgos (TROY & FORRESTER, 1990). Na fase sub-clnica a contagem global de clulas sanguneas poder estar moderadamente reduzida, especialmente as plaquetas. Os animais, entretanto, estaro assintomticos (SMITH & RISTIC, 1977). A fase sub-clnica da erliquiose associada a persistncia do organismo e aumento do ttulo de anticorpos sricos, que comeam a aparecer 7 a 21 dias aps a infeco inicial (HOSKINS, 1991). Os achados

hematolgicos similares ao da fase aguda, que consistem em trombocitopenia, anemia arregenerativa e respostas leucocitrias variveis, desde leucopenia, linfocitose e monocitose, podem persistir durante este estgio, no se observando sinais clnicos (TROY & FORRESTER, 1990). A fase sub-clnica pode persistir por um perodo de 4 a 5 anos (HOSKINS,1991). As manifestaes clnicas tardias incluem febre, anorexia, drstica perda de peso, acentuada pancitopenia, anemia e edema perifrico. comum observar equimoses e petquias em mltiplos locais (SMITH & RISTIC, 1977). Nesta fase h pancitopenia como achado laboratorial predominante (McDADE, 1990). Segundo observao de SWANGO et al. (1989), na fase crnica ocorre uma hipergamaglobulinemia pela persistente estimulao antignica. Os mesmos autores relataram que a perda de peso crnica, hiporexia, anorexia, anemia e astenia so os sinais mais comuns da erliquiose crnica, h tambm hipoplasia medular ssea, levando a pancitopenia e ao aumento na destruio das plaquetas. Nesta etapa pode ocorrer epistaxe, petquias, hematria ou hematoquesia. As anormalidades hematolgicas mais frequentemente observadas so anemia arregenerativa, trombocitopenia e leucopenia (TROY & FORRESTER, 1990; HOSKINS, 1991). A monocitose um achado frequente (HARRUS et al., 1997). A trombocitopenia aparece como resultado da hipoplasia megacarioctica e da reduo da vida das plaquetas, que ocorrem por alteraes imunomediadas, inflamatrias e perturbao nos mecanismos da coagulao (CODNER et. al, 1985; TROY & FORRESTER, 1990; JAIN, 1993; HOSKINS, 1991; DAVOUST, 1993). Como resultado da hiperplasia linforeticular, pode ocorrer aumento de rgos e, as clulas infectadas aparentemente atacam a microcirculao ou migram para

a superfcie subendotelial dos rgos alvo produzindo vasculite ou provocando inflamaes (TROY & FORRESTER, 1990). A mortalidade geralmente ocorre devido a hemorragias ou infeces secundrias (CODNER et al., 1985; WANER et al., 1995; WANER et al., 1997). De acordo com CODNER (1986) a persistncia da E. canis no interior da clula hospedeira conduz a uma reao de hipersensibilidade ou a uma resposta imunomediada, podendo acarretar, principalmente uma pancitopenia. A estimulao antignica crnica favorece a persistncia da infeco, possibilitando o surgimento de uma doena glomerular imunomediada. Segundo IMMELMAN & BUTTON (1973) a morte pode ser provocada por anemia, uremia, infeco bacteriana secundria ou uma combinao destas.

2.4 - Diagnstico

O diagnstico dado pela suspeitas e achados clnicos, e hematolgicos que incluem trombocitopenia, anemia e leucopenia (SWANGO et al., 1989; McDADE ,1990; BONNARD & DRALEZ, 1990; HOSKINS, 1991; ELIAS, 1991), e tambm deve ser baseado na identificao microscpica de rickettsias nos esfregaos de sangue e imunofluorescncia indireta (CORRA & CORRA, 1992). Os sinais clnicos indicam uma suspeita de Erliquiose. O diagnstico, porm, dever ser efetuado atravs da observao de mrulas em esfregao de sangue perifrico, coletado da veia marginal da orelha, ou da capa leucocitria (BONNARD & DRALEZ, 1990; EWING et. al., 1996). Estas incluses de colorao basoflica a

prpura contendo nmero variado de indivduos, so observadas no citoplasma de leuccitos, em esfregaos corados em mtodo de Romanovsky (MC DADE, 1990). NEITZ & THOMAS (1938) e ALMOSNY (1998) relataram que o aparecimento de mrulas no sangue ocorre cerca de trs a cinco dias aps o aumento da temperatura, (que pode ultrapassar 41o c) e deve ser efetuado esfregao da primeira gota de sangue porque nesta existem mais clulas que nas gotas subsequentes. Os autores ressaltaram a necessidade de saber distinguir morfologicamente E. canis de Leishmania donnovani, Hepatozoon canis, fagocitose, plaquetas e artefatos sobrepondo os leuccitos. Segundo ELIAS (1991) o mtodo de observao da mrula em esfregaos sanguneos consiste, numa forma especialmente adequada a prtica veterinria, no necessitando laboratrios sofisticados. Porm, a mrula dificilmente observada no esfregao sanguneo, isto porque o parasita est presente em pequeno nmero e a proporo de clulas infectadas pode ser inferior a 1 %. Assim, a observao de mrulas em leuccitos circulantes rara, exceto durante a fase aguda da infeco, que se inicia entre 14 e 20 dias aps a infeco e termina em aproximadamente 1 ms depois (HOSKINS et al., 1991; ELIAS, 1991). Apesar das chances de visualizao de mrulas serem reduzidas, a observao dos esfregaos corados pelo Giemsa revela-se eficiente quando so observados corpsculos elementares, conforme relatou ELIAS (1991) que comparou estas incluses a determinaes imunolgicas. Segundo SWANGO et. al. (1989), o diagnstico baseado na combinao de histria, achados clnicos, testes laboratoriais e exames ps-mortem.

BONNARD & DRALEZ (1990) afirmam que o diagnstico ps-mortem deve ser baseado apenas na observao de mrulas em tecidos. Segundo RISTIC et al. (1989), a tcnica de cultivo in vitro e a imunofluorescncia indireta, prova que detecta anticorpos para E. canis, so duas tcnicas comumente utilizadas na deteco da erliquiose canina. A desvantagem destas duas tcnicas que no so praticadas facilmente pela clnica de pequenos animais e pelo fato de que os ttulos no aparecem na fase aguda (ELIAS, 1991; HARRUS et al. ,1997 a; HARRUS et al. ,1997b). Segundo DAVOUST et al. (1986) e PERILLE & MATUS (1991) os ttulos permanecem por 6 meses aps tratamento. Entretanto a imunofluorescncia indireta mostra-se til na fase crnica mostrando excelente especificidade e grande sensibilidade (HUXSOLL,1976 ; TROY & FORRESTER, 1990; EGENVALL et al. , 1997 e HARRUS et al. ,1997 a). Para VAN HEERDEN et al. (1983); HARRUS et al. (1997a) e MATTHEWMAN et al. (1993) a imunofluorescncia indireta mostrou-se no confivel uma vez que ela persiste aps eliminao do parasito. Nos testes de imunofluorescncia indireta, a soropositividade comea de 7 a 21 dias aps a infeco e chega a nveis mximos aps 80 dias e persiste, a menos que se efetue o tratamento. Entretanto, os ttulos podem aumentar com o incio do tratamento e declinar aps 3 a 6 meses. A persistncia do ttulo aps este perodo assinala a presena de E.canis em fase sub clnica ou reinfeco. (SWANGO et. al., 1989). A tcnica de PCR (polymerase chain reaction-reao em cadeia de polimerase), permite um diagnstico rpido e com sensibilidade semelhante a outras

tcnicas, o que o torna uma pea til para a elaborao do diagnstico (IQBAL et al., 1994; WEN et al., 1997). HARRUS et. al. (1997a) afirmaram que testes de imunofluorescncia indireta, P.C.R., cultura e Western Immunoblot precisam de 14 a 34 dias de infeco para apresentarem-se positivos.

2.5 - Tratamento e Profilaxia

O objetivo do tratamento prevenir a manuteno da doena pelos portadores sos (DAVOUST, 1993). Para tanto, diversos frmacos podem ser utilizados no tratamento da erliquiose, entre eles esto: a oxitetraciclina, o cloranfenicol, o imidocarb, a tetraciclina e a doxiciclina. (Quadro 1) Destas, a doxiciclina constitui a droga de eleio no tratamento da erliquiose em todas as suas fases (VIGNARD-ROSEZ et al., 2000). A droga bem absorvida e com rapidez quando administrada por via oral. A distribuio ampla pelo corao, rins, pulmes, msculo, fluido pleural, secrees brnquicas, bile, saliva, lquido sinovial, lquido asctico e humores vtreo e aquoso. A doxiciclina mais lipossolvel e penetra nos tecidos e fluidos corporais melhor que o cloridrato de tetraciclina e a oxitetraciclina. A eliminao da doxiciclina se d primariamente atravs das fezes por vias no biliares, na forma ativa. A vida mdia da doxiciclina no soro em ces de 10-12 horas e a "clearence" de cerca de 1,7 mL/kg/min. A droga no se acumula em pacientes com disfuno renal e por isso pode ser usada nesses animais sem maiores restries. Existem vrias indicaes de dosagens

e tempo de durao do tratamento da erliquiose utilizando-se a doxiciclina. Os critrios para o tratamento variam de acordo com a precocidade do diagnstico, da severidade dos sinais clnicos e da fase da doena que o paciente se encontra quando do incio da terapia. (VIGNARD-ROSEZ et al., 2000). BARTSCH & GREENE (1996), recomendam nas fases agudas, a dosagem de 5 mg/kg ao dia durante 7 a 10 dias e nos casos crnicos 10 mg/kg ao dia durante 7 a 21 dias. A eficcia da doxiciclina no tratamento da erliquiose na dose de 10 mg/Kg/dia em dose nica foi demonstrada por vrios autores (HOSKINS et al., 1991). O tratamento pode durar de 3 a 4 semanas nos casos agudos e at 8 semanas nos casos crnicos. A doxiciclina dever ser fornecida 2 a 3 horas antes ou aps a alimentao para que no ocorram alteraes na absoro (WOODY & HOSKINS, 1991). Alguns autores recomendam prolongar o tratamento por mais de seis semanas nos casos de erliquiose sub-clnica (HARRUS et al., 1997), caso contrrio existe a possibilidade da permanncia do agente no animal (IQBAL et al., 1994). Freqentemente dever ser fornecido um tratamento de suporte, principalmente nos casos crnicos. Assim, deve-se corrigir a desidratao com fluidoterapia, e as hemorragias devem ser compensadas pela transfuso sangnea (PASSOS et al., 1999). Terapia a base de glicocorticides e antibiticos pode tambm ser utilizada nos casos em que a trombocitopenia for severa e nos casos de infeces bacterianas secundrias, respectivamente (ibid).

A seguir, no quadro 1, so demonstradas as opes teraputicas para a referida doena.

Quadro 1 Opes teraputicas para o tratamento das rickettsioses . Base teraputica Via de administrao Antibiticos de 1a Linha 22 mg/Kg Oral Dose Freqncia

Cloridrato de tetraciclina Oxitetraciclina Doxiciclina Minociclina

Imidocarb

Cloranfenicol

Trs vezes ao dia por 21 dias 25 mg/Kg Oral Trs vezes ao dia por 21 dias 5 a 10 mg/Kg Oral ou Intravenosa Uma a duas vezes ao dia por 14 dias 20 mg/Kg Oral Duas vezes ao dia por 14 dias Antibiticos de 2a Linha 5 mg/Kg Intramuscular ou Dose nica com Subcutnea repetio aps 2 ou 3 semanas. 50 mg/Kg Oral Trs vezes ao dia por 21 dias

A preveno da doena tem um carter de suma importncia nos canis e nos locais de grande concentrao de animais. Devido a inexistncia de vacina contra esta enfermidade (WOODY et al., 1991), a preveno realizada atravs do controle do vetor da doena: o carrapato. Para tanto, produtos acaricidas ambientais e de uso tpico so eficazes desde que seja realizado o manejo correto. O controle de carrapatos constitui o esteio da preveno contra a erliquiose. Alm disso, pode-se usar doses baixas de doxiciclina (2mg/kg, V.O, a cada 24h) ou tetraciclinas (6,6mg/kg,V.O, a cada 24h) nas reas endmicas durante a estao de carrapatos (BIRCHARD & SHERDING 2003).

Deve se instaurar um sistema de identificao sorolgica dos animais positivos, com o intuito de trat-los o mais rpido possvel, minimizando a amplitude das fontes de infeco, que correspondem aos animais assintomticos (DAVOUST, 1993).

2.6 Prognstico

O prognstico para a erliquiose canina excelente com um tratamento apropriado, a menos que a medula ssea fique severamente hipoplsica. A resposta clnica comea geralmente 48hs aps a iniciao da doxiciclina, mas na forma crnica pode levar at 3 a 4 semanas. A forma crnica da doena parece ser mais severa nas raas pastor alemo e dobermann (BIRCHARD & SHERDING 2003). Segundo (WOODY & HOSKINS, 1991), o prognstico depende da fase em que a doena for diagnosticada e do incio da terapia. Quanto antes se inicia o tratamento na fase aguda, melhor o prognstico. Nos ces no incio da doena observase melhora do quadro em 24 a 48 horas, aps o incio da terapia. TILLEY & SMITH JR. (2003) citaram que na fase aguda o prognstico excelente, contanto que o tratamento seja o apropriado; e na fase crnica pode-se levar at quatro semanas para uma resposta clnica, e que o prognstico ruim em caso de hipoplasia medular.

3 - CONCLUSO

A rickettsiose canina uma importante doena de carter infeccioso e progressivo cuja prevalncia tem aumentado significativamente, nos ltimos anos, em vrias regies do Brasil. Esta doena transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus, que tem a Erhlichia canis e o Anaplasma platys, bactrias pertencentes famlia das Rickettsiales, como os principais agentes etiolgicos. importante para o mdico veterinrio conhecer todos os sinais e sintomatologia clnica apresentados pela doena, pois s assim conseguir diagnosticla precocemente e obter xito no tratamento. O prognstico da doena varivel, sendo que quanto mais cedo for descoberta a doena, maiores so as chances de sucesso no tratamento. A presente reviso de literatura visa principalmente alertar o clnico para a importncia da utilizao de exames laboratoriais, hematolgicos e sorolgicos, como auxlio ao diagnstico clnico, para uma deteco precoce da doena, visando um melhor e mais eficaz tratamento, melhorando assim as condies do paciente e a perspectiva de um prognstico favorvel.

4 - REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

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