Espectroscopia de Absoro Molecular UV/vis

Bases tericas
Absoro de radiao eletromagntica na regio espectral do ultravioleta e visvel
transfere a quantidade de energia necessria para que ocorram transies nos nveis de
energia eletrnicos de valncia da molcula. Esta absoro resulta em excitao de electres
do estado fundamental (em geral do nvel ocupado de mais baixa energia) para um outro
nvel de energia que se denomina estado excitado (usualmente o nvel de energia no
ocupado de menor energia). Na figura seguinte apresenta-se um diagrama de algumas das
transies electrnicas que podem ocorrer numa molcula considerando as diferenas de
energia entre esses nveis.
Estas transies s so possveis quando a energia do foto coincide com a diferena
de energia entre o nvel fundamental e um possvel nvel excitado. Na Figura 34 claro que so
necessrias energias mais elevadas, radiao com comprimento de onda menores, para
promover transies da orbital (e para orbitais anti-ligantes) do que das orbitais (e para
orbitais anti-ligantes), isto porque a diferena de energia entre nveis e os restantes mais
elevada. Em espectroscopia usual designar por cromforo a parte da molcula (grupo ou
grupos de tomos) responsvel pela absoro de radiao UV/vis
A espectroscopia UV/vis fornece duas informaes importantes:
A posio do mximo de absoro (max) - que corresponde energia (E ) da
excitao electrnica, e como resultado de algumas correlaes empricas,
informao sobre o cromforo responsvel pela absoro.
O coeficiente de absortividade molar ou coeficiente de extino () - este
parmetro, como j foi referido, especfico cada molcula e dependente do
comprimento de onda. De um modo geral est associado com a maior ou
menor probabilidade uma transio ocorrer. Quando o coeficiente de extino
tem um valor muito baixo, a probabilidade dessa transio ocorrer pequena.
Se o valor for zero, ou prximo de zero, estas transies designam-se por
transies proibidas, embora mais correctamente devam ser associadas a
transies estas sejam as fortemente desfavorecidas, ou seja, com pouca
probabilidade de ocorrer.
Os solventes nos quais o analito (ou espcie absorvente) se encontra dissolvido pode ter um
efeito importante no espectro de absoro do analito, dependendo da polaridade de ambos. O
efeito pode ser um alargamento da banda de absoro, ou uma perda de resoluo estrutural
(por exemplo diminuio da resoluo vibracional), ou ainda diminuio do coeficiente de
absortividade. Outro efeito importante a alterao da posio do mximo de absoro.
Bandas resultantes de uma transio n* desviam-se para menores comprimentos de onda
(desvio para o azul ) com o aumento da polaridade do solvente. Este desvio devido ao
aumento da solvatao do par isolado, o qual provoca uma diminuio da energia da orbital n.
Outro efeito, embora nem sempre observado, o desvio para maiores comprimentos de onda
(desvio para o vermelho) da transio *. Neste caso existe uma fora atractiva de
polarizao que baixa a energia dos nveis excitado e no excitado, sendo a diminuio da
energia maior para o estado excitado a diferena de energia entre os dois nveis diminui. Esta
diminuio de energia tambm afecta a transio n*, contudo o efeito da solvatao
mais importante sobrepondo-se ao segundo. No caso de solventes apolares e molculas
apolares o efeito de solvente pouco significativo nos espectros de absoro UV/vis.
Muitas molculas inorgnicas apresentam absoro por transferncia de carga, sendo
denominados complexos de transferncia de carga. Para que um complexo apresente este
comportamento, um dos componentes deve apresentar propriedades de doao e outro deve
ser capaz de aceitar electres. A absoro de radiao, nestes casos, envolve a passagem de
um electro do doador para uma orbital associada com o aceitante. Os coeficientes de
absortividade molar para absoro associados com transferncia de carga so muito elevados,
em geral maiores que 1x10
4
M
-1
.cm
-1
.
Instrumentao
Existem vrias combinaes de componentes que podem ser reunidos de forma a
constiturem um espectrofotmetro integrado, com vrios graus de preciso e adequado para
aplicaes particulares. Os espectrofotmetros tipicamente contm cinco componentes base:
(i) fonte estvel de energia radiante, (ii) um contentor transparente radiao para colocar a
amostra (porta-amostras), (iii)dispositivo que isola a regio do espectro electromagntico para
efectuar as medidas, (iv) detector deradiao, que converte a energia radiante num sinal
adequado, e (v) processador de sinal. O arranjo espacial de todos os componentes de um
espectrofotmetro varivel, por exemplo o selector de comprimentos de onda pode estar
antes ou depois da amostra, sem que hajam vantagens significativas de uma ou outra
configurao instrumental.
Tipos de Espectrofotmetros
Os espectrofotmetros podem ser classificados pelo percurso da radiao, e os
principais tipos so: feixe simples, com apenas um percurso e feixe duplo, em que a radiao
pode seguir dois percursos distintos, e espectrofotmetros de multi-canais. Feixe simples
utiliza apenas um percurso para a radiao, pelo que necessrio ter em conta variaes na
resposta do detector e na fonte de radiao a cada , pois no h compensao para qualquer
alterao em qualquer dos componentes dos espectrofotmetros. Um modo de diminuir este
efeito acertar em cada medida os limites da transmisso: 100 % (branco) e o zero (qualquer
superfcie que impea completamente a radiao de chegar ao detector). As vantagens
principais dos espectrofotmetros de feixe simples o seu baixo custo e facilidade de
utilizao. Este tipo de espectrofotmetro e til para mtodos de anlises, a apenas um
comprimento de onda, de sistemas com apenas um composto a analisar. Na Figura 36
apresentada o esquema de um espectrofotmetro de feixe simples.






Feixe duplo
Nos espectrofotmetros de feixe duplo a radiao pode seguir dois percursos distintos,
um passando pela amostra e outro em que a radiao passa pela clula que contem a
referencia (branco). A principal vantagem a rapidez, pois no tem necessidade de acertar o
zero e o 100 %.Os espectrofotmetros podem ser de feixe duplo em espao ou feixe duplo em
tempo, tal como esquematizado nas figuras seguintes.



Nos espectrofotmetros de feixe duplo em tempo a radiao segue para os dois
percursos sendo dividida por um disco em intervalos de tempo regulares. O disco que separa
a radiao um espelho com parte transparente radiao, sendo que quando esta zona se
encontra no percurso da radiao esta segue directamente para a amostra. Por outro lado, se
no percurso da radiao se encontra a zona espelhada a radiao reflectida e segue para a
referncia. Assim, a radiao passa atravs da amostra e atravs da referncia
alternadamente. De notar que a distncia percorrida pela radiao at ao detector
semelhante quer seja devida amostra, quer seja proveniente da referncia. A razo da
radiao amostra/referncia a medida da absorvncia.



Nos espectrofotmetros de feixe duplo em espao a radiao dividida dois percursos
iguais, num divisor de feixe e ~50% da radiao segue para a amostra enquanto os restantes
50 % so dirigidos para a referncia (em geral o branco). Neste caso podem ser observados
dois processos independentes, pois em todo o tempo de anlise a radiao atravessa sempre a
amostra e a referncia. So utilizados dois detectores, estes encontram-se em posies
equivalentes de modo a tornar o percurso da radiao idntico para a amostra e a referncia.
O espectrmetro de feixe duplo em espao tem maior rudo que o de feixe duplo em tempo,
contudo permite efectuar estudos cinticos relativamente rpidos, enquanto que com um
espectrofotmetro de feixe duplo em tempo no possvel ser observada nenhuma alterao
mais rpida que a alternncia da radiao. As desvantagens dos espectrofotmetros de feixe
duplo esto relacionadas com um rudo espectral mais elevado. Este aumento de rudo pode
ser associado com a necessidade de maior amplificao do sinal, uma vez que podem existir
perdas de radiao significativas nas lentes, espelhos e clula adicionais.
Fontes de Radiao
Para uma utilizao mais geral de um espectrofotmetro importante que a fonte de
radiao tenha como principais caractersticas: permita obter uma gama vasta de
comprimentos de onda, e que a radiao tenha intensidade razovel e uniforme, em toda essa
gama. Fontes mais utilizadas podem ser divididas em dois grupos, as fontes contnuas
(policromticas) deque so exemplo as lmpadas de tungstnio, de deutrio; e as fontes de
riscas (monocromticas) lmpadas de ctodo oco e de descarga, e lasers.