TEMAS DE BIOLOGIA

PROPOSTAS PARA DESENVOLVER EM SALA DE AULA

NMERO 1 JULHO DE 1995 EDITORA MODERNA

IDENTIFICANDO PESSOAS PELO DNA: UMA SIMULAO

J. M. Amabis * e G. R. Martho

1 a. identifi
ca o foi na In

E
m maio de 1995, nos Estados Unidos, os promotores do O primeiro
ames de D caso de id
entificao
glater ra
julgamento de O. J. Simpson, ex-astro do futebol americano NA ocorre criminal at
condado, u em 1985 ravs
, na Inglat
acusado de assassinar a esposa, pediram bioqumica Robin acesso, um
rodeado de
montanhas erra. Em um de ex -
a mulher fo e com um pequeno
Cotton que desse aos jurados uma aula sobre DNA, o material i estuprad a nica es
"L havia a e assass trada de
um genetic in ad a.
hereditrio dos seres vivos. A anlise do sangue encontrado no ma encontra ista, Alec
do na vtim Jeffreys, qu
outro crim a e fez o ex e colheu o
local do crime havia revelado a presena de DNA supostamente e similar. N ame de DN esper-
trado na v ovamente Je A. Mais ta
tima. Era do ffreys anal rde houve
pertencente a Simpson. crime", co mesmo ho isou o sm
nta Jos M mem que en encon-
USP. aria Marle cometera o
O exemplo acima ilustra como conhecimentos antes restritos aos t, professo primeiro
r de medic
As autorida ina legal da
especialistas tornam-se hoje acessveis ao grande pblico. As de sangue de s locais fo
rjaram um
cuja finalid a campanh
pessoas querem saber o que DNA e por que ele comparvel a habitantes ade era id a de doa
fo ram doar entificar o o
igual ao do sangue, m ag ressor. T
uma impresso digital que identifica seu portador. estuprador as nenhum odos os
. deles poss
"A polcia ua DNA
Desenvolver e aproveitar temas como esse pode tornar mais havia um vi prosseguiu
com as inve
ajante no co stigaes e
interessante e produtivo o trabalho do professor em sala de aula. Neste vidado a do ndado. Qua descobriu
ar sangue. ndo o suje que
Jeffreys co Feito o test ito voltou,
nmero apresentamos uma proposta de atividade cujo principal nc luiu que e de DNA foi con-
mo do estu o cdigo ge no sangue
prador", co ntico do colhido,
objetivo levar os estudantes a compreender a importncia prtica nta Marlet. viajante er
a o mes-
da Engenharia Gentica na identificao de pessoas. Fonte: Fo
lha de So
Paulo 28/0
5/95

As tcnicas da Engenharia Gentica permitem identificar Neste nmero sugerimos a simulao de experimentos nos
pessoas pela anlise de suas molculas de DNA (cido desoxir- quais amostras de DNA de diferentes pessoas so tratadas
ribonuclico), a substncia que constitui os genes. Com exce- com uma enzima de restrio hipottica, que corta as mol-
o dos gmeos univitelinos, cada pessoa possui um conjunto culas onde houver dois pares de bases C-G/C-G em seqncia.
de genes, e portanto de molculas de DNA, nico e particular. O preenchimento dos grficos, onde os fragmentos do
O processo mais simples para caracterizar um DNA DNA cortado so dispostos por ordem de tamanho, simula a
consiste em cortar as molculas dessa substncia com o auxlio separao eletrofortica.
de "tesouras moleculares", as chamadas enzimas de restrio, Apresentamos, ainda, um processo simples e prtico para
analisando em seguida o tamanho dos fragmentos que se for- extrair DNA de uma amostra, no caso, de clulas de cebola.
maram. Uma enzima de restrio corta a molcula de DNA
em pontos especficos, somente onde ocorre determinada
seqncia de bases nitrogenadas. Como cada pessoa tem
seqncias tpicas de bases nitrogenadas, o nmero e os
tamanhos dos fragmentos obtidos pelo corte enzimtico acaba
por caracterizar seu DNA.
O tamanho dos "fragmentos de restrio", como so chama-
dos os fragmentos obtidos aps o corte enzimtico, determi-
nado atravs da tcnica de eletroforese. A mistura de frag-
mentos de DNA aplicada em uma camada de gelatina (gel)
e submetida a um campo eltrico. Nessas condies, os frag-
mentos se movem a velocidades inversamente proporcionais
ao seu tamanho, isto , os fragmentos menores deslocam-se
mais rapidamente que os maiores.
Quando o campo eltrico desligado, fragmentos de mes-
mo tamanho estacionam juntos em determinada posio do
gel, formando uma faixa. O padro de faixas que surge Foto de um gel de eletroforese iluminado com luz ultravio-
leta. Sob essa luz, o DNA previamente tratado fluoresce,
caracterstico para cada pessoa, e corresponde sua
revelando um padro de faixas tpico do DNA analisado.
"impresso digital" gentica.
*
Professor do Departamento de Biologia do Instituto de Biocincias da Universidade de SoPROPOSTAS
Paulo PARA DESENVOLVER EM SALA DE AULA 1
 SUGESTES E PR-REQUISITOS
Na pgina direita apresentamos um modelo para a folha de
atividades dirigida ao estudante. Nela se encontram todas as
informaes objetivas para resolver s duas questes formuladas:
"Quem o criminoso? Quem o pai da criana?". As respostas a
essas questes encontram-se no verso da folha de atividades.
Sugerimos que o professor oriente verbalmente o estudante
sobre a diferena de procedimentos entre a deteco do crimi-
noso e a do pai da criana. No primeiro caso basta encontrar,
entre os suspeitos, um padro eletrofortico idntico ao da
amostra de pele sob as unhas da vtima. J no segundo caso
preciso, inicialmente, identificar na criana as faixas eletrofo-
rticas correspondentes me, para em seguida procurar, nos
pretendentes a pai, aquele que possui as faixas que faltam.
Essas faixas devem estar necessariamente presentes no pai,
uma vez que a criana recebe um cromossomo materno e um
homlogo paterno.
No quadro abaixo fornecemos informaes prticas
para executar, na prpria sala de aula, um experimento simples
de extrao de DNA. Apesar de simplificados, os procedi-
bioqumicos, e permitem ao estudante visualizar, ainda que
macroscopicamente, o aspecto do material hereditrio.
O tema ser mais bem aproveitado se o estudante j
dominar os conceitos bsicos relativos s estruturas do DNA
e dos cromossomos. Em nossas obras de Biologia esses
assuntos podem ser encontrados nos seguintes volumes:
AMABIS, J. M. & MARTHO, G. R. Fundamentos da Biologia moderna,
So Paulo, Ed. Moderna, 1997:
Estrutura dos cidos nuclicos (pgs. 102-103);
Genes: estrutura qumica e duplicao (pgs. 152-153);
Engenharia gentica (pgs. 540-545).
Biologia das clulas (vol. 1), So Paulo, Ed. Moderna, 1994:
A estrutura dos cromossomos (pgs. 178-180);
Cromossomos e genes (pgs. 182-185);
A estrutura do gene (pgs. 311-313).
Biologia das populaes (vol. 3), So Paulo, Ed. Moderna, 1995:

mentos so muito parecidos aos utilizados nos laboratrios A base celular da hereditariedade (pgs. 7-9).

DE A ULA
EXTRAINDO DNA EM SALA
CNICAS
INFORMAES T te de trs etapas
:
nt es co ns ta fundamentalmen
MATERIAL NA de clulas eu
cario omossomos
A extrao de D bramento dos cr
g) o do s n cleos; b) desmem s demais
ande ( 200 lulas para libera o do DNA do
uma cebola gr a) ruptura das c , D NA e pr ot enas; c) separa
a nentes bsicos
faca de cozinh em seus compo mpem
s tip o americano lulares. des, que se ro
dois copo componentes ce po r ap re se nt ar clulas gran
60C) bola foi usado
banho-mar ia ( O bulbo de ce
gua fil tra da do a cebola pi
cada. cebola, liberando
facilmente quan os cr om os som os das clulas da ra
sal de cozinha uas sintegra os ncle
os e de sdio, desnatu
O detergente de e, o do de cil (ou lauril) sulfato
lo detergent
detergente para gelado (a cerca o DNA. Um dos
componentes do
li co 95 % NA cromossmico. de DNA se
lcool et
as protenas, se
parando-as do D
e as molculas
lin o, faz com qu
de 10C) eira do, em am bi en te sa
ada.
vidro ou mad O lcool gela sa e esbranqui
basto fino de l an do um a m assa filamento
f, de pape aglutinem, form
coador de ca
gelo modo
S
PROCEDIMENTO ver
bem at dissol
meio copo d'gua, mexendo
s de 0,5 cm. de ch de sal em
er das
bola em pedao ente e uma colh
1. Pique a ce sopa de deterg minutos.
at ro co lh er es de por cerca de 15
2. Coloque qu
te e sal, e le ve ao banho-maria de 5 m in utos.
o de detergen a
completamente
.
po co m a so lu o co po no ge lo durante cerc
cebola picada no
co , colocando
3. Coloque a -a rapidamente a. Formam-se du
as fases, a
maria e resfrie um copo limpo
.
Re tir e a m ist ur a do ba nh o-
co lh en do o fil tra do em
rre r va ga ro sa mente pela bord
4. de caf, re ando-o esco
ura no coador ol gelado, deix erados
5. Coe a mist o copo de lco que so aglom
ci on e ao fil tra do ce rc a de m ei
am -s e fios esbranquiados,
6. Adi r, aquosa. as fases. Form
superior, alcol
ica, e a inferio ulares, mistur e
po e, co m movimentos circ
o basto no co
7. Mergulhe
de mol c ul as de DNA.
Tcnica modificada de J. Schollar e D. Madden
Centro de Educao Biotecnolgica da Universi-
dade de Reading Inglaterra

2 PROPOSTAS PARA DESENVOLVER EM SALA DE AULA

 ATIVIDADE: I DENTIFICANDO PESSOAS PELO DNA
Nome: Srie:

P-1 P-2 P-3 P-4 P-5

CA CB CA CB CA CB CA CB CA CB
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
1 C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
1
Nesta atividade voc aplicar os princpi-
os da identificao de pessoas pelo DNA na
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A soluo de duas questes judiciais. Em uma
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T delas identificar um criminoso entre trs sus-
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A peitos, e em outra descobrir quem o pai de
C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C uma criana.
C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A Ao lado esto representados segmentos
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C de DNA de cinco pessoas (P-1 a P-5). Cada
C-G C-G C-G T-A T-A T-A C-G T-A T-A C-G 15 uma tem dois segmentos, correspondentes a
C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A
um par de cromossomos homlogos (CA e CB).
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
C-G
T-A
C-G
C-G
19 C-G
C-G
C-G
C-G
4
As seqncias de bases dos homlogos
T-A
A-T
T-A
A-T
T-A
A-T
T-A
A-T
T-A
A-T
T-A
A-T A-T
T-A
A-T
T-A
A-T
T-A
A-T
podem ser ligeiramente diferentes em funo
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C
A-T
G-C G-C G-C da diferena entre os genes alelos.
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
G-C A-T A-T G-C A-T G-C A-T A-T A-T A-T O primeiro passo para a anlise do DNA
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T cort-lo com uma enzima de restrio hipo-
A-T A-T A-T A-T G-C A-T A-T A-T A-T A-T
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C ttica que, neste exemplo, reconhece a se-
C-G T-A T-A T-A T-A T-A C-G T-A T-A T-A
C-G
T-A
A-T
C-G
T-A
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
T-A
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
T-A
A-T
C-G
C-G
A-T

12 C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
12
qncia de dois pares de bases C-G adja-
centes (dois C em uma cadeia e dois G na
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C 4 outra). Para facilitar, essas "seqncias de
G-C G-C G-C A-T G-C G-C G-C G-C A-T G-C
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T corte" esto destacadas no DNA. Localize,
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
nos dois segmentos de DNA de cada pessoa,
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A
C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G
todas as seqncias de corte. Marque-as
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
lpis com um trao horizontal, de modo a se-
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T parar um par C-G do par C-G adjacente.
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C O passo seguinte organizar os fragmen-
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
C-G
C-G
A-T
T-A
C-G
A-T
T-A
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
T-A
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T
C-G
C-G
A-T

17 C-G
C-G
A-T
T-A
C-G
A-T
tos obtidos por ordem de tamanho. Para isso,
conte o nmero de pares de bases de cada
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C fragmento e complete o preenchimento do
C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T grfico localizado na parte inferior esquerda
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A
C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G 21 da figura. Cada coluna do grfico simula o
C-G C-G C-G T-A C-G T-A C-G T-A T-A C-G
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A padro eletrofortico de uma pessoa, onde os
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G fragmentos de DNA se distribuem em faixas
T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A
A-T G-C G-C A-T G-C G-C A-T G-C G-C G-C
por ordem de tamanho. A ttulo de exemplo, a
C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G C-G
A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T A-T
coluna correspondente ao padro da pessoa

T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A T-A P-5 j est preenchida.
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C 18 G-C G-C 10
G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C G-C
A seguir, responda s questes abaixo.
1 1
P-1 P-2 P-3 P-4 P-5
 Quem o criminoso?

Restos de pele encontrados sob as unhas de uma pessoa assassinada foram
Nmero de pares de bases por fragmento

'
& submetidos ao teste de DNA, revelando o padro eletrofortico P-5.
%
$ Trs pessoas, P-1, P-2 e P-3, suspeitas do crime, tambm foram
#
"
submetidas ao teste de DNA. Qual delas a provvel culpada?
!



'
&
%
Quem o pai da criana?
$ Dois homens, P-1 e P-2, disputam a paternidade de uma criana, P-4, filha
#
" da mulher P-3. Com base no teste de DNA dos quatro implicados, quem
!
o provvel pai da criana?


PROPOSTAS PARA DESENVOLVER EM SALA DE AULA 3

 P-1 P-2 P-3 P-4 P-5 RESPOSTAS

 Quem o criminoso?
Nmero de pares de bases por fragmento

' P-2. O padro eletrofortico do DNA deste suspeito idntico ao da

&
% amostra de pele encontrada sob as unhas da vtima (P-5).
$
#
" Quem o pai da criana?
!
 P-1. A criana P-4 pode ter recebido da me (P-3) DNA relativo s


faixas de nmeros 1, 4, 10, 12, 13, 18 e 19. As faixas 5, 8, 11 e 15 de P-
' 4 provm necessariamente do pai. P-2, o outro postulante, no apresen-
&
%
ta as faixas 5, 8 e 11.
$
# A identificao positiva do DNA de um suspeito pela tcnica mostrada na atividade, particular-
"
!
mente se forem utilizados diferentes tipos de enzimas de restrio, atinge a mais de 99% de acerto.
H uma probabilidade nfima de duas pessoas no-gmeas idnticas apresentarem o mesmo padro
 eletrofortico do DNA.

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