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MANUAL DE
PATOLOGIA CLNICA
VETERINRIA
Sonia Terezinha dos Anjos Lopes
Alexander Welker Biondo
Andrea Pires dos Santos
3 edio
Santa Maria, 2007
Manual de Patologia Clnica Veterinria
MANUAL DE
PATOLOGIA CLNICA
VETERINRIA
Autores:
Dra. Sonia Terezinha dos Anjos Lopes
Professora Adjunta - Depto de Clnica de Pequenos Animais
UFSM - Santa Maria, RS
(55) 3220-8814 sonia@ufsm.br
Dr. Alexander Welker Biondo
Professor Adjunto - Depto de Medicina Veterinria
UFPR - Curitiba, PR
(41) 3350-5661 abiondo@uiuc.edu
MSc. Andrea Pires dos Santos
Doutoranda - Depto de Patologia Clnica Veterinria
UFRGS - Porto Alegre, RS
(51) 3308-6099 deasantos@ufrgs.br
Colaboradores:
MSc. Mauren Picada Emanuelli
Professora Substituta Depto de Clnica de Pequenos Animais
UFSM Santa Maria, RS
(55) 3220 8814 maurenvet@hotmail.com
Dra. Patrcia Mendes Pereira
Professora Adjunta Depto de Clnicas Veterinrias
UEL Londrina, PR
(43) 3371-4559 pmendes@uel.br
MSc. Alfredo Quites Antoniazzi
Doutorando PPGMV
UFSM Santa Maria, RS
(55) 3220 8752 alfredo.antoniazzi@biorep.ufsm.br
MSc. Stella de Faria Valle
Professora Assistente Departamento de Medicina Veterinria
UPF Passo Fundo, RS
(54) 3316-8444 stellavalle@upf.br
i
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA
CENTRO DE CINCIAS RURAIS
CDU: 619:636.7/.8
ii
Manual de Patologia Clnica Veterinria
APRESENTAO
Os Editores
i
Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
ii
Manual de Patologia Clnica Veterinria
SUMRIO
MDULO I: HEMATOLOGIA......................................................................................... 1
PARTE 1. INTRODUO .......................................................................................... 1
1. 1. Sangue ........................................................................................................... 1
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 1: colheita de sangue....................................... 2
1. 2. Colheita de sangue venoso perifrico............................................................. 2
1. 3. Anticoagulantes .............................................................................................. 3
PARTE 2: ERITROGRAMA I ..................................................................................... 5
2. 1. Hematopoiese................................................................................................. 5
2. 2. rgos envolvidos na hematopoiese.............................................................. 5
2. 3. Eritropoiese..................................................................................................... 6
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 2: hematcrito .................................................. 7
2. 4. Eritrograma ..................................................................................................... 7
2. 5. Valores Normais ............................................................................................. 7
2. 6. Hematcrito ou Volume Globular (%) ............................................................. 8
2. 7. Atividade extra: interferncias no hematcrito.............................................. 10
PARTE 3: ERITROGRAMA II .................................................................................. 11
3. 1. Reticulcitos ................................................................................................. 11
3. 2. Regulao da Eritropoiese: eritropoietina..................................................... 12
3. 3. Destruio Eritrocitria.................................................................................. 13
3. 4. Hemoglobina................................................................................................. 14
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 3: esfregao sangneo ................................. 15
3. 5. Preparo do esfregao e colorao................................................................ 15
3. 6. Morfologia dos Eritrcitos ............................................................................. 16
3. 7. Contagem de Reticulcitos ........................................................................... 17
3. 8. Atividade extra: hemcias nas aves, peixes, rpteis e anfbios.................... 17
PARTE 4: ANEMIAS E POLICITEMIAS .................................................................. 18
4. 1. Anemias ........................................................................................................ 18
4. 2. Classificao das anemias ........................................................................... 18
4. 3. Policitemias................................................................................................... 22
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 4: Contagem de hemcias ............................. 23
4. 4. Modificaes eritrocitrias ............................................................................ 23
4. 5. Concentrao de Hemoglobina .................................................................... 24
4. 6. Determinao de hemoglobina ..................................................................... 25
4. 7. Determinao do nmero total de hemcias ................................................ 25
4. 8. Atividade extra: medula ssea...................................................................... 26
PARTE 5: LEUCOGRAMA I .................................................................................... 28
5. 1. Classificao dos leuccitos ......................................................................... 28
5. 2. Granulopoiese .............................................................................................. 28
5. 3. Regulao da granulopoiese ........................................................................ 28
5. 4. Granulocintica............................................................................................. 29
5. 5. Neutrfilos..................................................................................................... 29
5. 6. Eosinfilos .................................................................................................... 31
5. 7. Basfilos ....................................................................................................... 32
5. 8. Moncitos ..................................................................................................... 33
5. 9. Linfcitos....................................................................................................... 33
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 5: Contagem de leuccitos ............................ 35
5. 10. Contagem total de leuccitos...................................................................... 35
PARTE 6: LEUCOGRAMA II ................................................................................... 38
6. 1. Interpretao dos parmetros leucocitrios.................................................. 38
6. 2. Fibrinognio .................................................................................................. 38
iii
Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
6. 3. Leucocitose................................................................................................... 38
6. 4. Leucopenia ................................................................................................... 40
6. 5. Classificao dos desvios de Neutrfilos...................................................... 41
6. 6. Alteraes leucocitrias quantitativas........................................................... 42
6. 7. Alteraes leucocitrias qualitativas ............................................................. 44
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 6: diferencial leucocitrio ............................... 45
PARTE 7: HEMOSTASIA ........................................................................................ 48
7. 1. Introduo ..................................................................................................... 48
7. 2. Vasos sanguneos ........................................................................................ 48
7. 3. Hemostasia primria: vasos e plaquetas ...................................................... 48
7. 4. Hemostasia secundria: fatores de coagulao ........................................... 49
A. Cascata de coagulao .................................................................................... 49
7. 5. Hemostasia terciria: fibrinlise .................................................................... 51
7. 6. Testes laboratoriais para desordens hemostticas ...................................... 51
7. 7. Distrbios hemostticos................................................................................ 53
7.8. Hemostasia Aves ........................................................................................ 57
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 7: testes de hemostasia ................................. 57
7. 9. Atividade extra: coagulograma ..................................................................... 59
MDULO 2: BIOQUMICA CLNICA ........................................................................... 60
PARTE 8: FUNO RENAL.................................................................................... 60
8. 1. Funes dos rins .......................................................................................... 60
8. 2. O nfron ........................................................................................................ 60
8. 3. Filtrao glomerular ...................................................................................... 61
8. 4. Reabsoro e secreo tubular .................................................................... 62
8. 5. Fatores que afetam a filtrao glomerular .................................................... 62
8. 6. Urinlise ........................................................................................................ 63
8. 7. Provas de funo renal ................................................................................. 71
8. 8. Uremias ........................................................................................................ 72
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 8: colheita e exame da urina.......................... 72
8.9. Atividade extra: diferenciar hemoglobina de mioglobina ............................... 73
PARTE 9: FUNO HEPTICA.............................................................................. 75
9. 1. Anatomia do fgado....................................................................................... 75
9. 2. Funes do fgado ........................................................................................ 75
9. 3. Avaliao de funo e leso hepticas......................................................... 76
9. 4. Indicaes para exames hepticos especficos............................................ 77
9. 5. Protenas plasmticas .................................................................................. 79
9. 6. Bilirrubinas .................................................................................................... 83
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 9: dosagem de bilirrubinas............................. 85
PARTE 10: FUNO PANCRETICA .................................................................... 87
10. 1. Pncreas excrino ...................................................................................... 87
10. 2. Pncreas endcrino .................................................................................... 88
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 10: funo pancretica................................... 89
MDULO 3: CITOLOGIA............................................................................................. 92
PARTE 11: DERRAMES CAVITRIOS................................................................... 92
11. 1. Fisiologia dos lquidos corpreos................................................................ 92
11. 2. Alteraes nas trocas de fludos................................................................. 93
11. 3. Classificao dos derrames cavitrios........................................................ 94
ROTEIRO DE AULA PRTICA N. 11: exame de lquido abdominal .................... 95
11. 4. Abdominocentese ....................................................................................... 95
11. 5. Atividade extra: colheita e anlise do lquor ............................................... 96
MDULO 4: HEMOTERAPIA ...................................................................................... 98
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
v
Manual de Patologia Clnica Veterinria
MDULO I: HEMATOLOGIA
PARTE 1. INTRODUO
1. 1. Sangue
O sangue composto de uma parte lquida e outra celular. A parte lquida, denominada
plasma, obtida aps centrifugao quando colhemos o sangue com anticoagulante, e contm
o fibrinognio e o soro quando sem anticoagulante, o fibrinognio coagula e restam no soro
os mais variados solutos orgnicos, como minerais, enzimas, hormnios, etc. Portanto o soro
constitudo do plasma sem o fibrinognio.
A parte celular composta pelos eritrcitos, leuccitos e plaquetas. Nas aves,
rpteis, anfbios e peixes, todas as clulas possuem ncleo, e as plaquetas so deste modo,
chamadas de trombcitos. Nos mamferos, apenas os leuccitos possuem ncleo; as hemcias
os perdem durante sua formao, e as plaquetas so fragmentos de citoplasma da clula
progenitora, os megacaricitos.
A principal funo do sangue o transporte, quer de substncias essenciais para a
vida das clulas do corpo, tais como oxignio, dixido de carbono, nutrientes e hormnios, quer
de produtos oriundos do metabolismo, indesejveis ao organismo, os quais so levados aos
rgos de excreo.
O volume sangneo normal nas espcies domsticas varia em torno de 6 a 10% do
peso corpreo, com grande variedade intra e interespcies, que apresentada de forma
resumida dos volumes sangneos de acordo com o peso corpreo para as principais espcies
animais (tabela 1.1).
O hemograma o exame de sangue mais solicitado na rotina laboratorial devido sua
praticidade, economia e utilidade na prtica clnica. Est dividido em trs partes: 1.
Eritrograma, que compreende o hematcrito, dosagem de hemoglobina e a avaliao
morfolgica e contagem total de eritrcitos; 2. Leucograma, composto pela avaliao
morfolgica e contagem total e diferencial de leuccitos; 3. Plaquetas, que se compe de
avaliao morfolgica e contagem de paquetas auxiliando a interpretao da hemostasia.
Ainda, aps a realizao do microhematcrito, pode-se mensurar por refratometria as
protenas totais plasmticas, que auxiliam na interpretao de diversas situaes fisiolgicas
e patolgicas.
Sendo o sangue responsvel pela homeostasia do organismo, e o hemograma um
exame geral do animal, raramente o hemograma apresenta um diagnstico definitivo de
determinada patologia ou doena. Ao invs disso, o hemograma oferece informaes que
podem ser utilizadas como ferramenta pelo clnico para, em associao a outros sinais e
exames, realizar a busca diagnstica.
Assim sendo, o hemograma solicitado por vrias razes, entre elas em um
procedimento de triagem para avaliar a sade do animal, na busca do diagnstico ou
prognstico do animal, e ainda para verificar a habilidade corporal s infeces e para
monitoramento do progresso de certas doenas. No entanto, a histria e o exame clnico
so essenciais para a interpretao dos dados hematolgicos e outros testes laboratoriais que
sero objetos de investigao.
Apenas quando descartadas as alteraes ocasionadas por interferncia na colheita de
amostras que podemos com segurana interpretar seus resultados de modo claro e
representativo. Isso porque alteraes causadas pela excitao (adrenalina) e ou estresse
(corticides) durante a colheita podem desencadear processos mediados por estes
hormnios. Alm disso, drogas administradas exgenamente tambm podem interferir nos
resultados de um hemograma como, por exemplo, o uso de glicocorticides. Resultados
anormais em um hemograma so inespecficos, podendo estar associados a vrias doenas
ou condies que provocam respostas similares; no entanto, como mencionado anteriormente,
o hemograma pode ser diagnstico em certas patologias, como hemoparasitas ou leucemias.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
TABELA 1.1. Volume sangneo nas diversas espcies animais segundo o peso
corpreo
PESO CORPREO
ESPCIE mL/Kg %
Ces 77 - 78 8-9
Gatos 62 - 66 6-7
Vacas lactantes, bovino em crescimento 66 - 77 7-8
Vacas leiteiras jovens, cavalos de sangue quente 88 - 110 10 - 11
Vacas no-lactantes, cavalos de sangue frio 62 - 66 6-7
Ovelhas, cabras, 62 - 66 6-7
Sunos adultos 55 5-6
Animais de laboratrio - 6-7
O ideal na prtica veterinria que a amostra laboratorial seja colhida no mesmo local
do seu processamento. No entanto, na maioria das vezes, este procedimento realizado pelo
clnico em seu ambulatrio, e enviado ao laboratrio para a realizao do exame. Deste modo,
para se obter resultados confiveis, uma colheita adequada constitui etapa to importante
quanto a prpria realizao do exame e sua posterior interpretao.
Uma colheita e acondicionamento adequados devem seguir rigidamente os mtodos
preconizados pela tcnica, bem como estarem condizentes com o procedimento do laboratrio
que ir processar o material. Mesmo com a diversidade de amostras a serem colhidas,
algumas regras bsicas so comuns a todas. A mais importante delas talvez seja a adequada
identificao da amostra, tanto junto ao frasco ou embalagem do material, como na guia de
requisio do exame.
A identificao da amostra deve ser feita de modo a no se destacar ou sair durante o
acondicionamento, principalmente quando a amostra estiver sob refrigerao ou com cubos de
gelo em caixa de isopor. O nmero ou nome do animal deve ser claro, escrito em letras ntidas,
se possvel com a data de colheita. A guia ou ficha de requisio tambm de suma
importncia na realizao do exame laboratorial.
Exame N : ______________
Proprietrio: RG: Data: / /
Espcie: Raa: Sexo Idade: Horrio da colheita
Diagnstico Provisrio: Tratamento? SIM NO Qual?
Histria Clnica Resumida
Observaes:
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
em lcool iodado;
Retirar a agulha e transferir o sangue colhido da seringa, com suave compresso do
mbolo para evitar hemlise, dentro de vidro estril contendo anticoagulante EDTA (2,0
mg/mL de sangue). Este anticoagulante diludo a 10% na proporo de 0,1mL para cada
5mL de sangue. A amostra pode ser utilizada para a realizao do hemograma,
fibrinognio e contagem de plaquetas.
1. 3. Anticoagulantes
EDTA (Etileno diamino tetra acetato de sdio ou de potssio)
Modo de ao: reage atravs de seus dois radicais cidos com clcio plasmtico, formando
um quelato com os elementos alcalino-terrosos, tornando-se insolvel.
Uso: Recomendado para a rotina hematolgica porque no interfere na morfologia celular,
preservando-a por at 24 horas quando refrigerado adequadamente. pouco solvel, e o sal
de potssio o mais solvel e mais caro. A diluio realizada a 10%, e toma-se 0,1mL de
EDTA para 5mL de sangue.
Fluoreto de sdio
Modo de ao: quelante de clcio, com a formao de sais insolveis.
Uso: Como impede a gliclise sangunea, realizada in vitro principalmente pelos eritrcitos,
indicado para determinao da glicose. H produto comercial pronto para uso, na medida de 1
gota para cada 3mL de sangue.
Heparina
Modo de ao: atividade como inibidor da trombina e tromboplastina
Uso: Alguns bioqumicos. Como interfere na colorao do esfregao sanguneo, no
recomendado para hemograma. A diluio de 0,1mL de soluo a 1% para no coagular
5,0mL de sangue. A heparina retarda a coagulao do sangue por apenas 8 horas.
Citrato de sdio
Modo de ao: quelante de clcio, com a formao de sais insolveis.
Uso: Provas de coagulao (tempo de protrombina, tempo de tromboplastina parcial ativada).
Seu emprego se faz em solues 1,34g%, na proporo de 10%, ou seja, 0,5mL para 4,5mL de
sangue.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
cinza);
Abra os tubos. Raspe um giz de lousa (carbonato de clcio) na borda de cada tubo, de modo
que um pouco do p de gis caia dentro de cada tubo;
Cronometre o tempo que cada tubo leva para que ocorra a coagulao, movimentando o
tubo em ngulo. Acondicione os frascos em temperatura ambiente por 12-24 horas.
O sangue dos frascos com EDTA e fluoreto de sdio (ambos quelantes de clcio)
coagulam aps um perodo de 8-12 minutos, visto que o gis oferece mais clcio que a
capacidade quelante no tubo. Grosseiramente, voc acabou de realizar o tempo de
coagulao.
O frasco com heparina no deve coagular com a adio do gis, pois sua atividade
anticoagulante no depende do clcio. No entanto, decorridas 8-12 horas, o efeito
anticoagulante cessa, e o sangue do tubo com heparina deve coagular aps este perodo.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
PARTE 2: ERITROGRAMA I
2. 1. Hematopoiese
A hematopoiese normal ocorre extravascularmente na medula ssea dos mamferos,
mas pode acontecer em outros rgos que participaram da hematopoiese na vida fetal e
recm-natal. Em aves, embora a granulopoiese ocorra extravascularmente, a eritropoiese e os
trombcitos so produzidos intravascularmente.
Na vida embrionria a hematopoiese inicia-se no saco vitelino, estgio em que h o
incio da formao vascular. Com o desenvolvimento fetal o fgado, o bao e a medula ssea
so os maiores rgos hematopoiticos (figura 2.1). Durante a segunda metade do
desenvolvimento do feto a medula ssea e os rgos linfides perifricos (para os linfcitos)
so os maiores locais de produo de clulas sangneas.
Aps o nascimento a hematopoiese passa a ocorrer somente na medula ssea nos
mamferos. Inicialmente a medula ssea de todos os ossos participa desta atividade, mas
com a idade esta funo vai limitando-se medula ssea dos ossos chatos e epfises dos
ossos longos, isto porque a demanda por eritrcitos decresce com a maturidade. No animal
adulto, os principais ossos envolvidos no processo so: o esterno, o crnio, o lio, as costelas e
as extremidades do fmur e do mero.
A medula vermelha ou ativa com o tempo vai desaparecendo e deixa de ser
hematopoitica, sendo substituda por tecido gorduroso, o qual forma a medula amarela ou
inativa. Em casos de necessidade ocorre regenerao e a medula amarela passa a ser
vermelha. Nestes casos, a hematopoiese pode voltar a ser realizada pelo fgado, bao e
linfonodos. Na fase senil a medula ssea amarela se torna medula fibrosada e de difcil e
vagarosa expanso, o que dificulta a rpida resposta anemia nestes animais.
Deste modo, podemos facilmente associar a hematopoiese vida do indivduo. A fase
de rpido crescimento do jovem est associada expanso do volume sanguneo, com pesada
demanda na medula por eritrcitos, portanto todos os ossos so capazes de hematopoiese.
100
90
80
Hematopoiese (%)
70 saco vitelnico
60 fgado
50 bao
40 medula ssea
30
20
10
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Dias aps concepo
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
O fgado, responsvel pelo estoque de vitamina B12, folato e ferro, produz muitos dos
fatores de coagulao, albumina e algumas globulinas, converte a bilirrubina livre conjugada
para excret-la pela bile, participa da circulao entero-heptica do urobilinognio, produz um
precursor (-globulina) da eritropoietina ou alguma eritropoietina e retm seu potencial
embrionrio para hematopoiese.
O estmago produz HCl para liberao do ferro do complexo de molculas orgnicas e
o fator intrnseco para facilitar a absoro da vitamina B12. A mucosa intestinal est envolvida
na absoro da vitamina B12 e folato e controla a taxa de absoro de ferro em relao as
necessidades corporais. Os rins produzem eritropoietina, trombopoietina e degradam
excessivamente a hemoglobina filtrada do ferro e bilirrubina para excreo na urina.
O timo consiste em um rgo linfide central responsvel pela diferenciao das clulas
precursoras, derivadas da medula ssea, em linfcitos T imunologicamente competentes,
envolvidos na imunidade celular e produo de linfocinas. Os linfonodos e folculos produzem
linfcitos que sob estimulao antignica se transformam em plasmcitos, estando engajados
ativamente na sntese de anticorpos.
O sistema monoctico-fagocitrio (sistema reticuloendotelial) consiste no maior
sistema fagoctico do organismo encarregado da defesa celular na infeco microbiana, destri
vrias clulas sangneas, degrada hemoglobina em ferro, globina e bilirrubina livre, estoca o
ferro e secreta macromolculas de importncia biolgica, por exemplo, fatores estimulantes de
colnia e complemento.
2. 3. Eritropoiese
O processo de eritrognese que resulta na formao de eritrcitos maturos conhecido
como eritropoiese, levando em torno de sete a oito dias para se completar. O ncleo
eritrocitrio expulso no decorrer do processo de desenvolvimento nos mamferos e fagocitado
por macrfagos locais. Enquanto nas aves, peixes, anfbios e rpteis as hemcias so
nucleadas.
As clulas ficam na medula ssea at a fase de metarrubrcito, e nas fases finais de
maturao, como o reticulcito, podem ser encontrados no sangue perifrico em algumas
espcies. Os reticulcitos no so encontrados no sangue em condies de normalidade nos
eqinos, bovinos, sunos e caprinos. A fase de proliferao, compreendida entre a clula
pluripotencial at o metarrubrcito, leva de dois a trs dias, enquanto o restante consiste na
fase de maturao, levando em torno de cinco dias.
A eritropoiese formada na medula ssea a partir de uma clula pluripotencial de
origem mesenquimal chamada clula tronco ou clula me que estimulada a proliferar e
diferenciar-se em burst de unidade formadora eritride (BUF-E) pela IL-3 e fator estimulante
de colnia granuloctica-monoctica na presena da eritropoietina (EPO).
Esta diferenciao ocorre sob influncia do microambiente medular local e por
citocinas produzidas por macrfagos e linfcitos T ativados. A proliferao e diferenciao da
BUF-E para unidade formadora de colnia eritride (UFC-E) resulta da presena destes
mesmos fatores e pode ser potencializado por fatores de crescimento adicional. A EPO o
fator de crescimento primrio envolvido na proliferao e diferenciao de UFC-E para
rubriblasto, a primeira clula morfologicamente reconhecvel das clulas eritrides. A seguir
seguem as divises/maturaes em que sero formados: pr-rubrcito, rubrcito, metarrubrcito,
reticulcito e eritrcito. Os eritrcitos so clulas encarregadas de transportar oxignio dos
pulmes aos tecidos e dixido de carbono no sentido inverso.
A eritropoiese normal envolve um mnimo de quatro mitoses: uma na fase de
rubriblasto, outra no estgio de pr-rubrcito e duas no estgio de rubrcito basoflico. O
rubrcito basoflico matura-se em rubrcito policromtico, que se transformar em metarrubrcito.
Ocasionalmente o rubrcito policromtico pode se dividir. A denucleao do metarrubrcito leva
formao de reticulcito, o qual finalmente matura-se, dando origem ao eritrcito (figura 2.2).
A nomenclatura recomendada para as clulas eritrides morfologicamente
identificveis : Rubriblasto pr-rubrcito rubrcito basoflico rubrcito policromtico
metarrubrcito reticulcito eritrcito.
6
Manual de Patologia Clnica Veterinria
2. 4. Eritrograma
Como j comentado no captulo 1 o hemograma o exame realizado com o sangue
perifrico colhido com anticoagulante, com o objetivo de se obter informaes gerais sobre o
animal no momento da colheita. Ele composto de trs partes: o Eritrograma, o Leucograma,
e as Plaquetas.
Na solicitao do exame necessrio adequada identificao da amostra: rtulo no
frasco de colheita, ficha contendo nome do proprietrio, data, espcie animal, raa, sexo,
idade, hora da colheita, diagnstico provisrio, tratamento, histria clnica resumida, nome,
assinatura e CRMV do requisitante e do examinador.
O eritrograma compreende o nmero total de hemcias/l, concentrao de
hemoglobina (g/dl), volume globular (%), VCM (fl), CHCM (%), protenas plasmticas (g/dl),
reticulcitos (%), metarrubrcitos/100 leuccitos. Observaes no esfregao sangneo:
anisocitose, policromasia, hemoparasitas, etc.
2. 5. Valores Normais
H que se entender que os valores de tabela ou de referncia so frutos da mdia de
exames realizados numa populao clinicamente sadia e, portanto obedecem a uma curva
normal de distribuio. Deste modo pode existir um pequeno percentual de animais da
populao sadia com resultados laboratoriais prximos aos extremos (border line), ou fora
deles; e o inverso tambm, ou seja, animais doentes com valores dentro da faixa de referncia.
Por isso estes exames devem ser interpretados clinicamente (figura 2.3).
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
100
80
Sadios
Populao (%)
60 Doentes
Adrenalina
40
20
0
0 40 80 120 160 200 240
Glicose (g / dL)
Determinao
Princpio
Sedimentao dos elementos figurados do sangue, obtendo-se a proporo destes elementos
em relao ao plasma.
Tomar o frasco com sangue mais anticoagulante e homogeneizar;
Pegar o tubo capilar (75mm x 1mm ) e por capilaridade deixar o sangue preencher 2/3 do
tubo;
Fechar a extremidade seca em chama de bico de Bunsen, girando-se o tubo;
Centrifugar o tubo a 1.200rpm (aproximadamente 1580G) por 5 minutos;
Ler em tabela que acompanha centrfuga, obtendo-se o resultado em %.
8
Manual de Patologia Clnica Veterinria
incolor : co/gato/homem
Cor normal amarela : herbvoros (caroteno)
NORMAL NORMAL
ANEMIAS
Anemia Relativa DIMINUDO
POLICITEMIAS
Policitemia Relativa AUMENTADO
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
1
Verifique antes se o uso de animais para esta aula possui aprovao no Comit de tica da sua
Instituio. As doses de adrenalina e cortisol foram baseadas em prescrio teraputica das mesmas.
10
Manual de Patologia Clnica Veterinria
PARTE 3: ERITROGRAMA II
3. 1. Reticulcitos
Os reticulcitos apresentam um grau varivel de dobras membranosas e invaginaes
de superfcie. Eles contm ribossomos, polirribossomos e mitocndrias, que os capacitam
a sintetizar mais de 20% do contedo final de hemoglobina. Estas estruturas contribuem
para a policromasia dos reticulcitos.
Aps colorao com corantes supravitais, como o novo azul de metileno ou azul
cresil brilhante, utilizado na contagem de reticulcitos, um arroxeado de ribossomos,
mitocndrias e outras organelas citoplasmticas aparecem nos reticulcitos como precipitados
em forma de cordes (reticulcitos agregados) ou esparsos (pontilhados).
Os reticulcitos permanecem na medula ssea por dois a trs dias antes de entrar no
sangue por diapedese atravs de clulas endoteliais que contornam os sinusides medulares.
A sua liberao para o sangue controlada por um nmero de fatores que agem em conjunto,
incluindo a concentrao de eritropoietina, deformabilidade capilar e carga de superfcie.
Variaes interespcies podem ocorrer em considerao ao nmero de reticulcitos
liberado no sangue sob condies fisiolgicas e patolgicas. Por exemplo, o eqino no libera
reticulcitos para o sangue perifrico, mesmo em anemia severa. Ces e gatos respondem
vigorosamente com reticulocitose no sangue durante anemia regenerativa, porm os
ruminantes geralmente apresentam uma resposta leve (tabela 3.1).
Os reticulcitos maturam-se em eritrcitos 24-48 horas na circulao ou no bao,
onde podem ser seqestrados temporariamente. O processo de maturao envolve a perda de
algumas superfcies de membranas, receptores para transferrina e fibronectina, ribossomos e
outras organelas, obteno da concentrao normal de hemoglobina, organizao final do
esqueleto submembranoso, reduo do tamanho celular e mudana de forma para o aspecto
bicncavo.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
3. 3. Destruio Eritrocitria
A durao mdia da vida do eritrcito varia com a espcie animal. Abaixo esto
representados o nmero, o tamanho e a vida mdia das hemcias, de acordo com a espcie
animal (tabela 3.2).
TABELA 3. 2. Nmero total, tamanho e vida mdia das hemcias nas diferentes espcies
animais
ESPCIE NMERO TOTAL TAMANHO VIDA MDIA
(milhes/mm3 ou L) (m de dimetro) (dias)
Canino 6-8 7,0 120
Felino 5-10 5,8 70
Eqino 9-12 5,7 150
Bovino 5-10 5,5 160
Ovino 9-15 4,5 100
Caprino 8-18 4,0 100
Suno 5-8 6,0 65
No estado de sade normal, o eritrcito deixa a circulao por duas vias: fagocitose por
macrfagos, que a principal e a lise intravascular, com liberao de hemoglobina.
A deformabilidade importante na sobrevida da hemcia e depende da manuteno da
sua forma, fluidez normal interna da hemoglobina e propriedades visco-elsticas intrnsecas da
membrana. Qualquer mudana nestas caractersticas pode ativar a destruio fagocitria por
macrfagos, o que ocorre primariamente no bao e fgado, podendo tambm ocorrer na medula
ssea. Os macrfagos iniciam a fagocitose aps reconhecerem anticorpos IgG aderidos a
antgenos de membrana em eritrcitos danificados e/ou envelhecidos. A perda de eritrcitos
continuamente balanceada por uma liberao de reticulcitos ou clulas jovens da medula
ssea para o sangue perifrico. Neste caso, os reticulcitos so importantes em casos de
anemia, para que se classifiquem as anemias em regenerativa ou arregenerativa. Em casos de
babesiose, no quarto ou quinto dia estas clulas comeam a aparecer no sangue perifrico.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
3. 4. Hemoglobina
Trata-se de uma protena conjugada formada de 96% de protenas (globinas) e por um
grupo prosttico de colorao vermelho chamado heme (4%), o qual formado por ferro e
grupamentos porfirnicos.
A produo hemoglobnica ocorre no citoplasma das clulas nucleadas precursoras de
eritrcitos. O ferro obtido pelas clulas eritrides no processo normal de eritropoiese provm
dos macrfagos adjacentes que, por sua vez, recebem o ferro por endocitose da ferritina, uma
protena transportadora, por meio de um processo chamado rofeocitose. As molculas de
ferritina consistem em milhares de tomos de ferro envolvidos por uma protena (apoferritina).
A ferritina pode ser visualizada como partculas densas, localizadas na membrana celular ou no
citoplasma de clulas eritrides e macrfagos. A ferritina degradada e convertida a
hemossiderina pela ao das enzimas lisossomais intracelulares nos macrfagos. A ferritina
hidrossolvel enquanto que a hemossiderina no, porm ambas servem como estoques de
ferro que so mobilizados para a sntese da heme. Em anemias ocasionadas por doenas
crnicas, os estoques de ferro esto aumentados, pois h um seqestro nos macrfagos do
SMF.
Na formao deficiente de hemoglobina, intervm fundamentalmente trs fatores:
1. deficincia de ferro por ingesto deficiente ou absoro anormal deste elemento;
2. interferncia na atividade normal das clulas macrofgicas (SRE) que produzem
normalmente a hemoglobina. Isto ocorre nos envenenamentos por metais,
toxemias, neoplasias e nefrites, entre outras causas;
3. Anormalidades renais que interferem na formao da eritropoietina.
A hemoglobina liberada na forma livre quando ocorre hemlise, onde a unio entre a
hemoglobina e o estroma eritrocitrio quebram-se pela ao do agente hemoltico. A
hemoglobina livre no plasma rapidamente decomposta por oxidao, liga-se a haptoglobina e
rapidamente excretada pelos rins, observando-se hemoglobinria, ou ainda destruda pelo
sistema fagocitrio mononuclear (SMF). A hemoglobina confere a cor avermelhada do plasma
e esta condio chamada de hemoglobinemia. O excesso livre oxidado em meta-
hemoglobina, que se dissocia, liberando hematina. A hematina liga-se a hemopexina e
albumina sucessivamente, e estes complexos so removidos pelos hepatcitos.
Nos macrfagos, o ferro da frao heme e os aminocidos da frao globina so
reciclados para uso. A protoporfirina degradada em biliverdina pela heme microssomal
oxigenase; a biliverdina ento convertida bilirrubina pela bilirrubina redutase. As aves
excretam somente biliverdina, pois no possuem bilirrubina redutase.
A bilirrubina liberada no plasma ligada albumina para o transporte at as clulas
hepticas, onde conjugada em cido glicurnico pela enzima UDP-glucuronil transferase. A
bilirrubina conjugada normalmente secretada atravs dos canalculos biliares e excretada
pela bile na luz intestinal. No trato intestinal a bilirrubina degrada a urobilinognio para a sua
excreo nas fezes, com reabsoro parcial para a circulao geral e re-excreo biliar no ciclo
entero-heptico da bile. Uma pequena quantidade de bilirrubina conjugada e urobilinognio
normalmente escapam re-excreo heptica e so eliminados na urina (figura 3.2) e
quantidades aumentadas so muitas vezes excretadas naqueles animais com doena
heptica.
As duas formas de bilirrubina no plasma so chamadas de bilirrubina livre ou indireta,
ligada albumina e bilirrubina conjugada ou direta. A bilirrubina no conjugada no filtrada
pelo rim, somente a conjugada. O acmulo de bilirrubina no sangue leva a ictercia. Na anemia
hemoltica a maioria da bilirrubina no sangue est na forma no conjugada, sendo que, na
obstruo extra-heptica do ducto biliar esta amplamente conjugada e, ambas as formas em
doena hepatocelular.
A concentrao de bilirrubina no plasma do cavalo alta, comparada com outras
espcies, e a maior parte est na forma no conjugada. A concentrao de bilirrubina, no
cavalo, aumenta durante anorexia e condies febris por causa da estrutura heptica. Tambm
alta a concentrao de bilirrubina, nesta espcie, ao nascimento, assim permanecendo nos
potros. No entanto, a causa precisa da hiperbilirrubinemia neonatal em animais
desconhecida, observao semelhante em neonato humano indica que vrios mecanismos
esto envolvidos. Estes incluem a perda do mecanismo excretrio placentrio da bilirrubina, um
nvel baixo da atividade de UDP-glucoroniltransferase no fgado do neonato e uma maior
concentrao de -glucuronidase no intestino, o qual degrada a bilirrubina conjugada
bilirrubina livre que reabsorvida.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Gota
de sangue
Aproximar
30 - 40
Adeso
Avanar
Corantes
A. Leishmann
- Preparo:
Diluir 1,5g de Eosina-Azul de Metileno segundo Leishmann em 1 litro de metanol;
Colocar em banho-maria a 37 C por 24 horas. Acondicionar em frasco mbar;
Maturar o corante deixando-o em repouso por 1 semana, ao abrigo da luz;
Corrigir o pH, se necessrio, para 7,6;
Filtrar e usar.
- Uso:
Colocar 20 gotas do corante e deixar agir por 3 minutos;
Acrescentar 20 a 25 gotas de gua destilada tamponada (pH 7,2);
Deixar agir por 15 minutos;
Lavar em gua corrente e secar.
B. Pantico
Soluo comercial pronta para uso com trs corantes em srie.
Forma
Bicncava: normal.
Esfercitos: hemcias com formas esfricas, com intensa colorao pela perda de contedo
de membrana sem perda de hemoglobina devido a eritrofagocitose parcial dos anticorpos
e/ ou complemento dos eritrcitos pelos macrfagos do sistema fagocitrio mononuclear.
Presente em anemia hemoltica auto-imune primria ou induzida por drogas ou transfuso
incompatvel.
Poiquilcitos: so alteraes na forma das hemcias. No bao, devido a microcirculao
esplnica, a hemcia muda de forma o que ocorre pela existncia de glicoprotenas na
membrana do eritrcito. Podem ser removidos prematuramente da circulao, levando a
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Colorao
Vermelho-claro: normal ao microscpio ptico (1000x).
Policromasia: algumas hemcias apresentam-se mais coradas que outras (RNA residual),
representando os reticulcitos. O aumento est associado a atividade eritropoitica
aumentada e resposta anemia regenerativa. A ocorrncia de algumas clulas
policromticas comum no co e no gato.
Hipocromia: hemcias com intensidade de colorao reduzida e rea central plida
aumentada, causada por insuficiente hemoglobina na clula, sendo a etiologia mais comum
deficincia de ferro.
3. 7. Contagem de Reticulcitos
Colher amostra de sangue com EDTA, homogeneizar adequadamente;
Colocar em tubo de ensaio 0,5mL de sangue fresco;
Adicionar 0,5mL do corante (Azul de Cresil Brilhante ou Novo Azul de Metileno);
Homogeneizar a soluo;
Levar ao banho-maria por 15 minutos (37C);
Retirar o tubo do banho-maria, agitar e fazer o esfregao em lmina;
Contar os reticulcitos em no mnimo dez campos e realizar a leitura em % dos demais
eritrcitos. Caso necessrio fixar em lamnula;
Pode-se contra-corar a lmina com corantes de rotina (ex: pantico), para se obter uma
melhor visualizao dos reticulcitos.
2
Verifique antes se o uso de animais para esta aula possui aprovao no Comit de tica da sua
Instituio.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
4. 1. Anemias
A anemia definida como a presena de eritrcitos, concentrao de hemoglobina e/ou
hematcrito abaixo dos valores normais de referncia.
Constitui-se raramente em uma doena primria; geralmente o resultado de um
processo (doena) generalizado. Portanto, necessrio que se conhea a causa da anemia
para que o tratamento racional seja empregado, pois ele no direcionado, por si s, para a
anemia, exceto como uma medida de emergncia.
Sinais Clnicos
Os sinais clnicos da anemia resultam da reduzida capacidade de o sangue carrear
oxignio e de certos ajustes fisiolgicos para aumentar a eficincia da reduzida massa de
eritrcitos circulantes e reduzido trabalho do corao. Assim, o desenvolvimento de vrios
sinais clnicos depende do grau e da causa da anemia. Os mais comuns so dispnia,
intolerncia ao exerccio, palidez das mucosas, aumento da freqncia cardaca, algumas
vezes acompanhada de murmrios (sopro sistlico), aumento da freqncia respiratria e
depresso. Na anemia hemoltica aguda incluem-se ainda ictercia, hemoglobinemia,
hemoglobinria e febre. Na perda crnica de sangue, o organismo consegue manter a
homeostase circulatria e em alguns casos, mesmo com menos de 50% da hemoglobina
normal, o animal pode no apresentar sinais clnicos.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
B. Classificao patofisiolgica
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
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MACROCTICA
Anemias no regenerativas (diminuio do CHCM ainda no est
NORMOCRMICA presente)
Def. c. flico, FeLV (sem nenhuma reticulocitose),
eritroleucemia, def. Vitamina B12
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
txica da medula (radiao, qumicos, intoxicao por samambaia, infeco por vrus e
ricketsias como a Ehrlichia canis). So anemias normocticas normocrmicas. Na anemia
arregenerativa no existem reticulcitos e nem policromasia.
4. 3. Policitemias
o aumento do nmero de eritrcitos circulantes acima dos valores normais. Est
classificada em policitemia absoluta (primria ou secundria) e relativa.
Quando o hematcrito alcana 60%, suspeita-se de policitemia absoluta ou relativa.
Quando alcana 70%, suspeita-se de policitemia primria.
A. Policitemia Absoluta
Ocorre uma elevao do nmero de eritrcitos circulantes, causado pelo aumento da
massa total de eritrcitos, mas a concentrao de protena plasmtica est normal. A cianose e
a congesto caractersticas das membranas mucosas so causadas pelo fluxo lento de sangue
desoxigenado que exorbitantemente rico em clulas vermelhas. O excesso de massa de
eritrcitos aumenta a viscosidade sangnea e a resistncia vascular pulmonar e diminui o
dbito cardaco. Estas anormalidades levam a um fluxo sangneo reduzido, oxigenao
tecidual reduzida, distrbios neurolgicos e aumento do risco de trombose. A viscosidade
sangnea e o grau de transporte de oxignio alteram-se desproporcionalmente com aumentos
do hematcrito acima de 50%. A policitemia absoluta est classificada em primria e
secundria.
A policitemia primria, verdadeira ou Vera consiste em uma desordem
mieloproliferativa, caracterizada por uma proliferao anormal das clulas eritrides, dos
leuccitos e dos megacaricitos, levando a um aumento absoluto da massa de eritrcitos,
contagem de leuccitos e de plaquetas.
A policitemia secundria ocorre pelo aumento da taxa de eritropoietina, no
acompanhada de aumento nas contagens de leuccitos e plaquetas nem de reduo
significante no volume plasmtico. Os nveis de eritropoietina aumentam como uma resposta
fisiolgica compensatria pelos rins hipxia tecidual, ou como resultado de produo
autnoma independente de suprimento de oxignio tecidual. vista em animais levados a
grandes altitudes, doena cardaca e pulmonar crnica, tetralogia de Fallot (provoca mistura
dos sangues arterial e venoso, diminuindo a oxigenao dos tecidos). Pode ocorrer tambm
devido elaborao inadequada de eritropoietina, encontrada em alguns casos de
hidronefrose, cistos renais, tumores secretantes de eritropoietina (nefroma embrionrio) e
certas doenas endcrinas como o hiperadrenocorticismo.
B. Policitemia Relativa
comumente encontrada nos animais como resultado da reduo do volume
plasmtico causado pela desidratao. O consumo hdrico, por animais enfermos, geralmente
inadequado para manter o contedo de gua corporal normal. Doenas acompanhadas por
excessiva perda de gua (diarria, vmito, poliria) podem rapidamente produzir desidratao.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
4. 4. Modificaes eritrocitrias
Tamanho
Anisocitose: diferena patolgica de tamanho das hemcias. Quanto mais grave a anemia,
maior a ocorrncia de anisocitose.
Macrocitose: predominncia de hemcias grandes. Geralmente hemcias jovens, recm
produzidas. Ocorrem nas reticulocitoses, hipertireoidismo, deficincia de fatores de
multiplicao (vit. B12, cido flico e cobalto), em ces da raa poodle, mas sem anemia e ces
jovens.
Microcitose: predominncia de hemcias pequenas. Ocorre em anemia crnica,
principalmente ferropriva. fisiolgica em animais idosos e ces da raa Akita.
Forma
Bicncava: normal.
Poiquilcitos: so alteraes morfolgicas indistintas da forma das hemcias.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
4. 5. Concentrao de Hemoglobina
O mtodo mais usado para determinar a concentrao de hemoglobina o cianometa-
hemoglobina, onde a margem de erro est prxima dos 5%. Para que esta tcnica seja
realizada, necessrio um fotocolormetro ou espectrofotmetro.
Aparelhos automticos medem diretamente a densidade tica da oxi-hemoglobina,
sendo bastante utilizados.
Outro mtodo existente o da hematina cida, bastante simples e barato, porm a
margem de erro est dentro dos 12%. Para a sua realizao utiliza-se o hemoglobinmetro de
Sahli. A hemoglobina corresponde, em mdia, a 1/3 do hematcrito.
24
Manual de Patologia Clnica Veterinria
4. 6. Determinao de hemoglobina
Mtodo Cianometa-hemoglobina
Princpio: diluio do sangue em soluo contendo cianeto de potssio e ferrocianeto de
potssio (Reativo de Drabkin), que convertem a hemoglobina em cianometahemoglobina.
Soluo de Drabkin: Ferrocianeto de Potssio (20mg), Cianeto de Potssio (50mg) e gua
(destilada ou deionizada) 1000mL.
Mtodo:
Tomar o frasco com sangue mais anticoagulante e homogeneizar;
Preencher pipeta de Sahli com 20L do sangue;
Limpar o sangue da parte externa da pipeta com gaze, adicionar a 4mL de reativo de Drabkin
e agitar por inverso;
Repousar por um mnimo de 10 minutos temperatura ambiente;
Ler em espectrofotmetro a 546 nanmetros, usando-se tubos especficos;
Obtm-se o resultado visualmente no aparelho na unidade de g%.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
FIGURA 4.3. Esquema da cmara de Newbauer para contagem de hemcias. Utilize a rea
central para contar as hemcias na sua aula prtica, escrevendo os respectivos nmeros das
contagens parciais nos respectivos quadrados.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Tcnica de puno
Introduzir a agulha rotacionando-a at que esta esteja firmemente fixada ao osso;
Inserir a seringa de 20mL molhada com EDTA 3% na agulha e aspirar a medula ssea.
Um volume total de 0,5 a 1,0mL suficiente para adequada avaliao;
Soltar o mbulo da seringa assim que surgir medula ssea no interior da mesma;
A medula ssea possui gotculas de gordura que facilitam sua identificao. A
aspirao de maior quantidade de medula pode diluir a amostra (hemodiluio).
Confeccionar imediatamente cinco esfregaos e usar corantes de rotina;
Caso seja necessrio, colocar material medular em placa de Petri, e com auxlio do
capilar de microhematcrito, recolher os grumos medulares para a confeco dos
esfregaos. A vantagem deste processo uma correta avaliao nos casos de
suspeita de hipoplasia ou aplasia medular.
3
Verifique antes se o uso de animais para esta aula possui aprovao no Comit de tica da sua
Instituio.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
PARTE 5: LEUCOGRAMA I
5. 2. Granulopoiese
A granulopoiese ou granulocitopoiese envolve a produo de neutrfilos, eosinfilos
e basfilos, atravs de um processo ordenado. O tradicional conceito de granulopoiese
determina a formao de neutrfilos, eosinfilos e basfilos com origem em um precursor
celular, o pr-mielcito. Recentes estudos, no entanto, tm demonstrado que cada um
destes trs tipos de granulcitos possui um pr-mielcito jovem especfico e com
caractersticas ultra-estruturais e citoqumicas prprias.
Na medula ssea, sob estmulos apropriados, a clula pluripotencial origina clulas
progenitoras confinadas que produzem os vrios granulcitos. Esta clula com potencial de
produo de neutrfilos e moncitos conhecida como Unidade Formadora de Colnia
Granuloctica-Monoctica (UFC-GM), pois em seu estgio inicial bipotencial. Em seguida,
sob estmulo apropriado, a UFC-GM diferencia-se em clulas unipotenciais, UFC-G e UFC-
M. Similarmente h tambm a existncia de progenitores celulares distintos para eosinfilos
(UFC-Eos) e basfilos (UFC-Bas).
As clulas unipotenciais so morfologicamente identificveis e so precursores
conhecidos como mieloblastos, que se dividem, diferenciam-se e maturam-se nos
granulcitos sanguneos especficos.
5. 3. Regulao da granulopoiese
O nmero de leuccitos especficos que adentram e deixam o sangue mantido
constante mediante diversos mecanismos e condies, ver tabela 5.1.:
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
5. 4. Granulocintica
a informao quantitativa sobre a produo de granulcitos na medula ssea e
suas fases intravascular e tecidual. Em estudos dos granulcitos, no sangue e medula
ssea, marcados com radioistopos, foi possvel determinar os compartimentos dos
neutrfilos em humanos. Tambm alguns estudos foram realizados em animais.
Trs compartimentos funcionais de granulcitos so reconhecidos na medula ssea:
1. Compartimento proliferativo ou mittico, consistindo de mieloblastos, pr-mielcitos e
mielcitos; 2. Compartimento de maturao ou ps-mittico, consistindo de
metamielcitos e bastonetes; 3. Compartimento de reserva ou estoque, primariamente
composto de neutrfilos maturo e alguns bastonetes.
Um precursor neutroflico no compartimento de multiplicao geralmente sofre 4
mitoses, uma no estgio de mieloblasto, outra no de pr-mielcito e duas na fase de
mielcito. Sob certas circunstncias, a mitose pode se manter ou mitoses adicionais podem
ocorrer, numa taxa de 3 a 7 mitoses (figura 5.1).
5. 5. Neutrfilos
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
superfcie da clula.
Anormalidades morfolgica
As anormalidades morfolgicas nos neutrfilos geralmente incluem aberraes de
maturao, tamanho da clula, forma nuclear, caractersticas dos grnulos e citoplasma. Estas
anormalidades so chamadas de mudanas txicas. So vistas em pacientes com severa
infeco bacteriana, septicemia, condio inflamatria aguda e extensiva destruio tecidual.
Os efeitos txicos durante a granulopoiese so refletidos como basofilia citoplasmtica,
presena de grnulos txicos e corpsculo de Dhle, ncleo hipersegmentado e a produo
de neutrfilos gigantes e bizarros. A basofilia o resultado da reteno de ribossomos e RER.
Os grnulos txicos tornam-se visveis nos neutrfilos mielcitos txicos e entre os neutrfilos
maturos pela reteno do cido mucopolissacardeo. Corpsculo de Dhle so incluses
citoplasmticas que resultam da agregao lamelar do RER. So mais comuns em gatos do
que em outras espcies animais.
5. 6. Eosinfilos
Local de produo
O maior stio de produo de eosinfilos a medula ssea, embora tambm ocorra
em menor grau em outros tecidos como bao, timo e linfonodos cervicais. Em geral, os
eosinfilos so produzidos em torno de 2 a 6 dias e adentram no sangue perifrico
aproximadamente 2 dias aps. Sua meia vida intravascular de 4 a 6 horas em humanos e
menos de 1 hora nos ces; a seguir entram tecidualmente e normalmente no retornam
para a circulao sangunea.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
5. 7. Basfilos
So clulas pouco estudadas porque so raras no sangue e medula ssea. Os
basfilos so freqentemente comparados com os mastcitos por causa de algumas
similaridades morfolgicas e funcionais.
A produo dos basfilos na medula ssea semelhante aos demais granulcitos, no
entanto os mastcitos so produzidos de clulas mesenquimais indiferenciadas no tecido
conectivo da medula ssea.
Os basfilos e os mastcitos contm vrias substncias de importncia biolgica, e
podem sintetizar inmeras substncias imunolgicas e no imunolgicas. A composio dos
grnulos varia entre espcies. Seus grnulos so particularmente ricos em histamina, heparina
e em algumas espcies serotonina. Quando estimulado antigenicamente sintetiza importantes
fatores como Fator ativador plaquetrio (FAP), substncias de reao anafilaxia (SRA) e
tromboxano A2 (TxA2). Os mastcitos contm um fator chamado Fator quimiottico eosinoflico
de anafilaxia (FQE-A) e os basfilos sintetizam-os quando estimulados.
A basofilia e eosinofilia algumas vezes ocorrem simultaneamente, devido a interao
dos dois tipos de clulas.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
5. 8. Moncitos
Cintica dos moncitos
O moncito um descendente da clula progenitora bipotencial, a UFC-GM, que
pode produzir tanto neutrfilos como moncitos. A diferenciao de UFC-GM em UFC-M e
a proliferao dos precursores monocticos (monoblastos e pr-moncitos) em moncitos
so influenciados por um fator especfico chamado fator estimulador de colnia monoctica
(FEC-M).
O monoblasto divide-se uma vez e o pr-moncito uma ou duas, mas o moncito
normalmente no se divide na medula ssea. Os moncitos aparecem em pequena
quantidade na medula ssea, mas os monoblastos e pr-moncitos so raros de se
observar. O tempo mdio de liberao dos moncitos na medula ssea em torno de 2 a
2,5 dias. No h reserva de moncitos na medula ssea, como para os neutrfilos; no
entanto moncitos jovens so rapidamente liberados, num perodo de at 6 horas. Os
moncitos so distribudos no sistema vascular entre os compartimentos circulatrio e
marginal na proporo de 1:3,5. A meia vida de sobrevida na circulao sangunea
estimada em torno de 8 a 71 horas. Os moncitos geralmente deixam o sangue para
adentrar aos tecidos.
Os macrfagos teciduais so originados dos moncitos, mas so mais numerosos
que os moncitos circulantes; aproximadamente uma proporo de 50:1. Os moncitos
migram para os tecidos atravs de regies interendoteliais das paredes vasculares; no
entanto a demanda mais suprida pela proliferao local de macrfagos que se dividem
que pelos moncitos sanguneos (figura 5.2).
5. 9. Linfcitos
Linfopoiese e cintica linfocitria
Os linfcitos representam um grupo heterogneo de clulas tanto morfolgica como
funcionalmente. Eles so a base no desencadeamento e execuo da resposta imune. Os
linfcitos so produzidos na medula ssea, nos rgos linfides como o timo, linfonodos e
bao, alm dos tecidos linfides viscerais, que incluem as placas de Peyer, tonsilas e
apndices. A medula ssea nos mamferos o maior rgo linfopoitico; no entanto exceto no
suprimento de precursores linfides para colonizao dos rgos linfides perifricos, a
linfopoiese na medula ssea e timo ineficaz.
Durante a vida intra-uterina clula tronco pluripotencial indiferenciada origina-se
primeiro do saco vitelno e depois do fgado, bao e medula ssea fetais. Sob influncia de
apropriado micro-ambiente e outros estmulos, estes progenitores linfides originados na
medula ssea continuamente colonizam os rgos linfides primrios - Bursa de Fabrcius nas
aves ou medula ssea nos mamferos, e o timo. Nestes stios duas populaes funcionais e
fenotipicamente distintas de precursores linfocticos desenvolvem-se. Estas clulas ento
migram para os rgos linfides secundrios ou perifricos (como linfonodos e bao), onde se
tornam preferencialmente localizadas em pores tpicas e do incio, em resposta a estmulo
antignico apropriado, proliferao de subsries imunocompetentes de linfcitos T ou B.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Subpopulaes
A populao total de clulas B e T no sangue da maioria das espcies animais est em
torno de 70% de clulas T, 20% de clulas B e o restante provavelmente composto por clulas
nulas, de funo e origem desconhecidas. Dentre os tecidos linfides, as clulas T
predominam no timo, linfonodos e ducto linftico torcico; as clulas B predominam na medula
ssea e bao. No sangue e vrios tecidos a maior parte das clulas T so de vida longa, e a
maioria dos linfcitos B so de vida curta; as clulas T e B de memria so de vida longa. A
mdia de meia vida dos linfcitos humanos de vida longa estimada em 4,3 anos e em torno
de 1% sobrevivem at 20 anos. A sobrevida de linfcitos de vida curta se situa entre poucas
horas a 5 dias.
Recirculao
Em contraste com os granulcitos, em torno de 70% dos linfcitos do sangue perifrico
que saem atravs do tecido retornam ao sistema vascular para recirculao. Esta propriedade
dos linfcitos torna difcil e imprecisa a estimativa da meia vida dos linfcitos. A populao
recirculante demora em torno de 15 a 48 horas para recircular e consiste primariamente de
linfcitos T e linfcitos B, exceto os de memria que so considerados no circulantes.
O fenmeno de recirculao de suma importncia biolgica porque proporciona um
mecanismo de distribuio generalizada de clulas linfides ocupadas com a resposta imune
sistmica. Como resultado, um grande nmero de linfcitos podem ser expostos a um antgeno
depositado localmente no tecido. Estas clulas antigenicamente expostas podem ser
transportadas por vrios lugares no corpo para propagar e montar uma vigorosa resposta
imune.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Funes
Os linfcitos T e B exercem diferentes funes e possuem receptores de membrana
para o reconhecimento de antgenos. Existe uma terceira populao de linfcitos que no
expressam receptores de antgenos em suas membranas, as clulas exterminadoras naturais
(Natural Killer), so derivadas da medula ssea e so funcionalmente distintas das clulas T e
B pela sua habilidade de lisar certas linhagens de clulas tumorais sem prvia sensibilizao.
Do ponto de vista morfolgico estas clulas so linfcitos grandes granulares. Estes linfcitos
apresentam grnulos no seu citoplasma que constituem os lisossomas primrios e aparelho de
Golgi bem desenvolvidos.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Clculo
Clculo da Cmara de Newbauer para contagem de leuccitos
rea lateral: 4 x 1mm2 Volume de cada quadrado lateral: 1/10mm3
Profundidade: 1/10mm Volume total dos 4 quadrados laterais: 4/10mm3
Diluio da pipeta: 1/20 Nmeros de quadrados mdios centrais contados: 5
Portanto: 4 x 1 = 4 = 1 Ou seja,
10 20 200 50 o fator x 50
Observao: 1l = 1mm3
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
PARTE 6: LEUCOGRAMA II
6. 2. Fibrinognio
O fibrinognio uma protena de fase aguda produzida no fgado. Nos processos
inflamatrios de vrias causas, a concentrao do fibrognio pode elevar-se entre 3-4 dias e
permanecer alto por vrios dias ou semanas como nas doenas crnicas. Geralmente a
resposta do fibrinognio inicia-se com a resposta dos leuccitos, persistindo por mais tempo
que os leuccitos.
Em bovinos o fibrinognio um importante parmetro a ser avaliado, porque pode ser
a nica indicao de uma resposta inflamatria ativa. Nas doenas que ocorrem excessivo
depsito de fibrinognio tecidual sua concentrao no sangue pode no estar elevada, ficando
entre os valores de referncia ou at mesmo abaixo destes valores.
6. 3. Leucocitose
A contagem total de leuccitos varia com a espcie animal e tambm influenciada
pela idade. Esta alta ao nascimento e diminui gradualmente para atingir valores de adulto
entre 2 a 12 meses de idade. A contagem total de leuccitos definida pelo aumento, acima
dos valores de referncia, como leucocitose ou pela diminuio, como leucopenia. Os sufixos
citose e filia denotam um aumento na contagem de leuccitos, entretanto, penia indica uma
diminuio comparada com os valores de referncia. As leucocitoses so muito mais comuns
que as leucopenias e no so um sinal de mau prognstico como a leucopenia.
Tipos de leucocitose
A leucocitose pode ser fisiolgica, reativa e proliferativa (autnoma). As mudanas na
contagem total de leuccitos podem envolver anormalidades de produo, liberao,
distribuio intravascular, vida mdia e ingresso tecidual de vrios leuccitos. Por exemplo: os
neutrfilos circulantes esto num equilbrio dinmico com os neutrfilos no compartimento
marginal e de reserva da medula ssea. Uma demanda funcional imediata de neutrfilos
feita primeiro pela mobilizao das clulas do pool marginal e circulante, seguida pela reserva
da medula ssea e finalmente pelo aumento da granulopoiese e liberao acelerada. O
aumento de liberao de clulas observado no sangue perifrico como um desvio
esquerda. Assim o tamanho dos compartimentos marginal, circulante, reserva e capacidade
proliferativa da medula ssea, so determinantes importantes na resposta dos leuccitos s
doenas (figura 6.1).
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
A. Leucocitose fisiolgica
A leucocitose fisiolgica ocorre como uma resposta a adrenalina, no qual o
compartimento marginal de neutrfilos e/ou linfcitos so mobilizados para a circulao geral,
aumentando a contagem total de leuccitos e o nmero de neutrfilo absoluto e/ou linfcitos.
Assim uma neutrofilia ou linfocitose transitria, ou ambas, podem se manifestar. Esta condio
comum em animais jovens e geralmente desencadeada por distrbios emocionais e fsicos.
Raramente o nmero de moncitos e eosinfilos aumenta.
Leucocitose induzida por corticosteride ou estresse a leucocitose pode ocorrer em
condio de sade (fisiolgica) ou nas doenas (patolgica). A liberao de glicocorticide
endgeno ou administrado terapeuticamente causa considerveis mudanas hematolgicas.
Tipicamente produz leucocitose causada por neutrofilia, usualmente sem desvio esquerda,
linfopenia e eosinopenia. Monocitose ocorre no co. A neutrofilia ocorre pela mobilizao dos
neutrfilos segmentados do compartimento de reserva da medula ssea e pela diminuio da
diapedese das clulas para os tecidos. A linfopenia ocorre principalmente pela linflise dos
linfcitos T sensveis a esterides no sangue e tecido linfide, ou pela marginao e seqestro
dos linfcitos nos locais extravasculares. Eosinopenia ocorre principalmente pela diminuio da
sada destas clulas da medula ssea, devido interferncia com o efeito quimiottico da
histamina nos eosinfilos. A causa de monocitose permanece desconhecida. A resposta dos
basfilos, ao corticide, similar a dos eosinfilos, mas no reconhecida usualmente, porque
os basfilos so raros no sangue.
B. Leucocitose reativa
A leucocitose reativa ocorre em resposta s doenas. Certas doenas podem induzir
uma resposta especfica, mas usualmente um padro geral de resposta dos leuccitos
evidente, independente da doena. A leucocitose reativa pode ocorrer com ou sem desvio
esquerda. O grau de leucocitose varia com as espcies e usualmente relativa para a relao
neutrfilos: linfcitos (N:L). Animais com alta relao N:L, como o co e o gato, apresentam
uma maior resposta que animais com baixa relao N:L como eqinos e bovinos.
Uma resposta induzida por corticosteride ou, menos comumente, por adrenalina pode
ocorrer simultaneamente com uma leucocitose reativa. A diferenciao da leucocitose reativa
da leucocitose por corticosteride ou epinefrina pode ser feita pois a leucocitose considerada
reativa quando um ou mais dos seguintes itens so encontrados: Leucocitose com desvio
esquerda; Hiperfibrinogenemia; Monocitose em outras espcies que no o co; Ausncia de
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
linfopenia ou eosinopenia.
No co a monocitose acompanhada de um ou mais dos outros quatro critrios,
ou o valor da contagem absoluta de moncitos deve ser duas vezes maior que o normal.
C. Leucocitose proliferativa
A leucocitose proliferativa ou autnoma resulta de uma mudana neoplstica da clula
pluripotencial. As formas mais comuns de leucemias so: linfocticas, mielgenas,
mielomonoctica e monoctica. As leucemias eosinoflicas e basoflicas so raras. importante
observar que muitas vezes o cncer das clulas sangneas no manifesta uma leucocitose,
portanto, a contagem de leuccitos pode estar normal ou mesmo diminuda e a populao de
clulas na medula ssea pode estar alterada com pequena ou nenhuma evidncia no sangue
perifrico.
6. 4. Leucopenia
A leucopenia, em muitos animais, ocorre por neutropenia e linfopenia. A neutropenia
causa primria de leucopenia em animais com uma relao N:L maior que 1, e linfopenia em
animais que a relao N:L menor que 1. A neutropenia mais comum em infeces
bacterianas e linfopenia em infeces virais. Severas infeces bacterianas e virais podem
causar leucopenia associada com neutropenia e linfopenia, ou ambas e tambm podem reduzir
o nmero de outros leuccitos. Salmonelose no cavalo e mastitis coliformes so exemplos
clssicos de infeco bacteriana que leva a neutropenia e linfopenia e a infeco do vrus da
panleucopenia felina um exemplo de infeco viral. O retorno dos linfcitos e dos eosinfilos
no sangue, determinado por hemogramas sequenciais, indica convalescncia e geralmente
um sinal de bom prognstico. A leucopenia ocorre freqentemente durante o estgio precoce
da cinomose e seguida de leucocitose por uma infeco bacteriana secundria. Uma
marcada linfopenia um quadro consistente na cinomose, devido a atrofia e necrose do tecido
linfide, produzido pelo vrus. Ambos os linfcitos T e B esto reduzidos e a imunidade humoral
e celular esto suprimidas em animais sobreviventes. Em ces sobreviventes, o nmero de
linfcitos no sangue permanece baixo por um perodo prolongado.
Tipos de leucopenia
As leucopenias ocorrem principalmente por neutropenias, que podem ser agrupadas em
sobrevivncia reduzida de neutrfilos maturos, produo reduzida pela medula ssea,
produo ineficaz de neutrfilos e seqestro de neutrfilos.
C. Produo ineficaz
Neutropenia imuno-mediada, resultando em sobrevivncia reduzida. Ocorre em
animais, mas no tem sido bem documentada. No h desvio para a esquerda e o
compartimento de estoque na medula ssea aparece normal ao exame.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Diferencial de Leuccitos
O diferencial leucocitrio realizado no exame do esfregao sanguneo, em contagem
percentual de 100 leuccitos. H uma tcnica padro para a confeco do esfregao
sanguneo e leitura diferencial leucocitria, para que se tenha homogeneidade dos resultados.
Um esfregao com sangue mal homogeneizado, principalmente em cavalos, poder trazer
diferenas diagnsticas pela desuniformidade na distribuio dos leuccitos na lmina.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
B. Desvio direita
a presena no sangue circulante de vrios neutrfilos hipersegmentados, isto ;
neutrfilos com mais de 5 lbulos. A hipersegmentao nuclear ocorre devido a presena
circulante de corticosterides, tanto endgenos como exgenos. A deficincia da Vitamina B12
tambm pode levar a hipersegmentao, mas uma condio muito rara.
C. Reao leucemide
A reao leucemide geralmente uma leucocitose reativa, consistindo de uma alta
contagem de leuccitos com uma contagem absoluta de um tipo de leuccito, ou tambm um
acentuado a extremo desvio esquerda sugestivo de leucemia. Portanto, um processo
patolgico benigno, embora se assemelhe a leucemia granuloctica. Geralmente a reao
leucemide envolvendo os neutrfilos similar ao desvio esquerda regenerativo e,
infreqentemente, um severo desvio esquerda degenerativo pode dar esta indicao.
Ocasionalmente, o quadro sangneo leucemide pode envolver outros tipos de leuccitos,
como os linfcitos ou eosinfilos. Os resultados laboratoriais e a avaliao do paciente revelam
que a doena no uma leucemia. Exemplos de reaes leucemides:
extremo desvio esquerda regenerativo visto na piometra e peritonite ativa
crnica em ces;
acentuada linfocitose em condies supurativas crnicas como, por exemplo,
reticulite traumtica.
A. Neutrfilos Segmentados
Normal do co: Ausncia de Mielcitos e Metamielcitos
Bastonetes: 0 -3% (0 - 300/l)
Neutrfilos: 60 - 77 (3 a 11.500/l)
Depleo ou exausto: causada geralmente por consumo agudo, pelo grande afluxo de
neutrfilos para o local de inflamao. Ocorre na mastite bovina e clica eqina. A leucopenia
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Neutrofilia a. Fisiolgica
Adrenalina (medo, excitao)
Glicocorticides endgenos e exgenos (trauma, dor, hiperadrenocorticismo,
estresse crnico severo)
b. Reativa
Infeces estabelecidas local ou sistmica (bacteriana, viral, fngica,
parasitria)
Necrose tecidual
Doenas imuno-mediadas (inflamatria: artrite reumatide e no inflamatria:
anemia hemoltica autoimune)
Tumores
Toxicidade por estrgeno (inicial)
c. Proliferativas
Leucemia mielide aguda ou crnica
Neutropenia a. Sobrevivncia diminuda
Infeco bacteriana aguda
Septicemia
Toxemia
Anafilaxia
Esplenomegalia
b. Produo diminuda
Infeces agudas (Bacteriana, viral e riqutsias como Ehrlichia)
Drogas e qumicos txicos (estrgeno)
Radiao
Leucemia mielide ou linfide
Hematopoiese cclica canina
c. Granulopoiese ineficaz aumentada
Vrus da leucemia felina
Mieloptise
Leucemia mielide ou linfide
B. Eosinfilos
Normal do co: 2 - 10% (100 a 1.250/l)
C. Basfilos
Causas de Basofilia: dermatites alrgicas, eczemas e reaes de hipersensibilidade.
D. Moncitos
Normal do co: 3 10% (150 a 1.350/l) gato: 1 - 4 (0 a 850/l)
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Causas de Monocitose
Efeitos esterides Inflamao/ infeco aguda ou crnica
Hiperadrenocorticismo Outras doenas causando dano e necrose tecidual
Administrao de esterides/ACTH Produo reduzida de granulcitos
Estresse severo piometra Animais idosos
Doenas imunomediadas Leucemia monoctica ou mielomonoctica
E. Linfcitos
Normal do co: 12 - 30% (1.000 a 4.800/l)
A. Granulao txica
Granulao txica e/ou difusa basofilia citoplasmtica acontece quando h continuado
estmulo granulopoiese, pela extenso e/ou durao de um processo inflamatrio, h
diminuio dos prazos de maturao das clulas precursoras, e os neutrfilos chegam ao
sangue com persistncia da granulao primria, prpria dos pr-mielcitos, normalmente
substituda pela granulao secundria, tnue e caracterstica. Os grnulos primrios so ricos
em enzimas e coram-se em pardo escuro com os corantes usuais, e impropriamente
denominados de granulaes txicas. A verdade que a presena destes grnulos exprime a
durao e gravidade de um processo inflamatrio, mas exagero atribuir a esta ocorrncia um
significado prognstico.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
B. Corpsculos de Dhle
So reas, na periferia dos neutrfilos, nas quais houve liquefao do retculo
endoplasmtico. So de rara ocorrncia, mas possuem interesse diagnstico por refletirem
infeces graves e/ou sistmicas.
C. Neutrfilos multisegmentados
No sangue normalmente predominam os neutrfilos com 2 a 4 lbulos nucleares,
havendo poucos com cinco ou mais. O aumento ou predomnio de neutrfilos com mais de
cinco lbulos - multisegmentados - visto quando h uma maior permanncia destes na
circulao. Esta sobrevida intravascular prolongada caracteriza o desvio direita. Isto
acontece na insuficincia renal crnica, neutrofilias de longa durao, tratamentos com
corticides ou estresse, defeitos genticos raros ou em sndromes mieloproliferativas,
degenerao em amostras envelhecidas.
D. Linfcitos ativados
A ocorrncia de linfcitos ativados acontece quando h um estmulo da srie
linfocitria, com o aparecimento de linfcitos com citoplasma aumentado e basoflico, em parte
seguindo a diferenciao para plasmcitos, cuja presena rara na circulao. A ativao de
linfcitos na circulao deve-se principalmente a uma exacerbada resposta humoral ou a uma
leucemia de clulas plasmocitrias (Mieloma Mltiplo).
DIFERENCIAL LEUCOCITRIO
Esfregao sangneo
Corante de Leishmann
Corante: diluir 1,5g de Eosina-Azul de Metileno segundo Leishmann em 1 litro de
metanol. Colocar em banho-maria a 37 C por 24 horas.Acondicionar em frasco mbar.
Maturar o corante deixando-o em repouso por 1 semana, ao abrigo da luz. Corrigir o
pH, se necessrio, para 7,6. Filtrar e usar.
Colorao: colocar 20 gotas do corante e deixar agir por 3 minutos. Acrescentar 20 a
25 gotas de gua destilada tamponada (pH 7,2). Deixar agir por 15 minutos. Lavar em
gua corrente e secar.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Contagem
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
PARTE 7: HEMOSTASIA
7. 1. Introduo
A hemostasia o mecanismo que mantm a fluidez do sangue pelos vasos. Inclui o
controle da hemorragia e a dissoluo do cogulo por meio de eventos mecnicos e
bioqumicos. Didaticamente pode-se dividir a hemostasia em primria, secundria e terciria,
embora os trs processos estejam inter-relacionados. Na hemostasia primria, tem-se
vasoconstrio local, adeso e agregao plaquetria com conseqente formao de um
tampo plaquetrio inicial. A hemostasia secundria compreende uma srie de reaes em
cascata cujo resultado final a formao de fibrina a partir do fibrinognio que confere
estabilidade ao cogulo. A hemostasia terciria ou fibrinlise ativada na mesma ocasio da
coagulao, existindo um equilbrio fisiolgico entre as mesmas, onde a plasmina atua
degradando a fibrina e desfazendo o cogulo formado. Os vasos sanguneos tambm
participam ativamente no processo de coagulao.
7. 2. Vasos sanguneos
O endotlio inerte, mas quando o sangue exposto ao colgeno sub-endotelial, os
mecanismos hemostticos so ativados com conseqente adeso e agregao plaquetria,
liberao de mediadores e em seguida a ativao do fator XII (hemostasia secundria). Alm
disso, as clulas endoteliais so ricas em tromboplastina que tambm ativam o sistema de
coagulao.
Desordens vasculares podem ocorrer por problemas congnitos (raro) como a
deficincia de colgeno ou adquiridos como em uma extensa leso por desordens
inflamatrias, imunes ou tumores. Dentre as causas adquiridas destacam-se as desordens
inflamatrias como as causadas por bactria, vrus, etc; desordem imune e tumores, trauma.
O diagnstico de desordem vascular feito quando os problemas plaquetrios e de
coagulao so descartados. No existe tcnica laboratorial que mea o status funcional dos
vasos sanguneos diretamente, suspeita-se de distrbios vasculares em animais com
hemorragias superficiais em que os demais testes da coagulao esto normais.
A. Cintica plaquetria
As plaquetas so formadas na medula ssea, a partir da clula pluripotencial (steam
cell), que vai dar origem a linha megacarioctica. A primeira clula da linha dos megacaricitos
o megacarioblasto que vai formar o pr-megacaricito e megacaricito. A diviso celular
cessa, mas a diviso nuclear continua. Pode-se encontrar clulas de 4 a 64 ncleos. Este
processo chamado endomitose. As plaquetas so pequenos fragmentos do citoplasma do
megacaricito liberados na corrente sangnea. O citoplasma do megacaricito formado por
longos pseudopodes que penetram nos sinusides das clulas endoteliais, liberando as
plaquetas que so observadas como pequenos discos com grnulos vermelhos com 2 a 5 m
de dimetro (em gatos o tamanho varivel) na circulao sangunea.
Aps o estmulo, as plaquetas aparecem entre 3 e 5 dias, e so controladas pela
trombopoetina e tambm pela eritropoetina, possuem uma vida mdia em torno de 8 dias,
sendo que cerca de um tero das plaquetas so seqestradas pelo bao. O valor normal de
plaquetas em torno de 300.000/L, sendo que menos que 100.000/L claramente uma
trombocitopenia, at 50.000/L suficiente para prevenir hemorragia e com 30.000/L ou
menos espera-se observar inclusive hemorragia espontnea.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
B. Funo plaquetria
A funo primria das plaquetas a manuteno da hemostasia por meio da interao
com as clulas endoteliais mantendo a integridade vascular. Adeso, agregao e liberao
plaquetria so eventos que podem ocorrer simultaneamente ou independentemente,
dependendo das condies de estmulos e circunstncias. O transtorno de qualquer um destes
processos pode levar a desordens hemorrgicas. A adeso a aderncia das plaquetas no
local da leso. Esta adeso plaquetria ao endotlio efetuada por meio de seus receptores
de superfcie para o colgeno e Fator de von Willebrand que o liga plaqueta ao colgeno do
subendotlio. A agregao uma resposta bsica para a liberao de ADP (adenosina
difosfato) na presena do clcio e mediada pelo fibrinognio presente no plasma. A
compactao do agregado se d pela contrao dos filamentos de actinomiosina presentes no
citoplasma plaquetrio. A reao de liberao promove a agregao de agrupamentos
plaquetrios e o acmulo de mais plaquetas e assim uma srie de reaes em cadeia para
formar uma capa para deter a hemorragia.
As plaquetas se aderem ao colgeno do subendotlio e liberam aminas vasoativas
(serotonina, catecolaminas, adrenalina e outras) que promovem a vasoconstrio local com
liberao de ADP. O vaso contrai-se diminuindo o fluxo de sangue no local, causando a
agregao das plaquetas em resposta liberao de ADP na presena dos ons clcio,
formando a primeira camada de plaquetas. Estas plaquetas agregadas liberam ATP (adenosina
trifosfato) que degradado a ADP por ATPase que facilita a maior agregao das plaquetas no
local da parede do vaso lesionado, sendo o suficiente para deter a hemorragia, constituindo a
primeira fase da coagulao.
As plaquetas tambm so importantes na coagulao sangnea por fornecer
fosfolipdio plaquetrio (fator III plaquetrio que atua como um acelerador dos processos de
coagulao) e por carrear vrios fatores de coagulao em suas superfcies.
Aps a formao da primeira camada, inicia-se um depsito dos fatores de coagulao,
culminando com a transformao do fibrinognio em fibrina, havendo um depsito sobre as
plaquetas, formando um trombo que constitui a fase terminal da coagulao sangunea.
Aps a formao do tampo hemosttico, iniciam-se os mecanismos fibrinolticos, que
promovem a degradao enzimtica do fibrinognio e da fibrina e outros fatores da coagulao
ativados, permitindo o reparo definitivo da leso vascular e o controle sobre os eventos
trombticos. A manuteno do sangue dentro dos vasos e a sua fluidez por dentro dos mesmos
mantida pelo equilbrio entre a coagulao e a fibrinlise.
Funo resumo
Adeso a aderncia das plaquetas no local da leso. efetuada por meio de seus
receptores de superfcie para o colgeno e facilitada pelo FvW que liga a plaqueta ao
colgeno do subendotlio.
Liberao promove vasoconstrio local e agregao plaquetria.
Agregao Significa a ligao entre as plaquetas e uma resposta liberao de
ADP na presena do clcio.
A. Cascata de coagulao
A cascata de coagulao um mecanismo complexo de reaes seqenciais que
culmina na formao de fibrina a partir do fibrinognio. O conjunto de fatores que atuam na
coagulao, a maioria proteases, est representado na tabela 7.1. Os fatores de coagulao
so ativados predominantemente por exposio tromboplastina tecidual, expressada na
superfcie das clulas edoteliais ou fibroblastos extravasculares. Logo aps a ativao inicial,
os fatores vo se ativando seqencialmente e amplificando o estmulo inicial por feedback. A
cascata de coagulao tradicionalmente se divide em sistema intrnseco, extrnseco e comum
(figura 7.1).
O sistema intrnseco a via que se inicia pelo contado do sangue com o colgeno do
subendotlio da parede vascular traumatizada ou corpo estranho. Neste momento ocorre a
ativao plaquetria e do fator XII que se ativa e subseqentemente ativa o fator XI (para essa
reao necessria presena de cininognio de alto peso molecular, calicrena e
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
CASCATA DE COAGULAO
A. Contagem de plaquetas
a avaliao quantitativa das plaquetas. Valores acima da referncia da espcie
conferem uma trombocitose e valores abaixo, uma trombocitopenia. A contagem pode ser
automtica ou em um hemocitmetro. A amostra deve ser coletada de forma no traumtica,
pois o trauma pode causar a ativao plaquetria com formao de agregados que podem
falsamente diminuir o nmero de plaquetas. Requer amostra com EDTA (etileno diamino-
tetraacetato de sdio ou potssio). A contagem em hemocitmetro possui alto coeficiente de
erro (20 a 25%). A contagem em gatos difcil devido ao grande tamanho das plaquetas.
As plaquetas podem ser estimadas pela observao no esfregao sanguneo com
objetiva de 100x. Deve-se contar no mnimo 10 campos e fazer uma mdia:
10 a 20 plaquetas/campo = normal
4 a 10 plaquetas/campo = trombocitopenia
< que 4 plaquetas/campo = severa trombocitopenia
1 plaqueta/campo = 15.000 a 20.000 plaquetas/L
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
D. Tempos de coagulao
Tempo de coagulao ativado (TCa)
um teste bastante utilizado na clnica veterinria por ser rpido e de fcil execuo.
baseado na ativao da coagulao pelo contato do sangue venoso com ativadores de contato,
portanto avalia o sistema intrnseco e comum da coagulao.
O mtodo consiste em adicionar 2mL de sangue venoso em um tubo estril, pr
aquecido a 37C contendo protenas de contato. Aps a adio do sangue deve-se colocar o
tubo em banho-maria observando-o a cada 5 a 10 segundos at a formao do cogulo. O
resultado do teste consiste no tempo decorrido da adio do sangue a formao do cogulo e
medido em segundos. pouco sensvel, necessita muita ateno e ausncia de contaminao
com tromboplastina tecidual. Animais com trombocitopenia severa tambm podem alterar o
TCa. Anticoagulantes, alguns antibiticos, salicilatos e barbitricos tambm podem prolongar o
teste. Valores normais de TCa (segundos): Co: 60 a 90, Eqino: 145 a 181 e Bovino: 127 a
163.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
teste mede a deficincia de fatores abaixo de 30%. Valores normais de TTPa (segundos): Co:
6 a 16; Gato: 9 a 20; Eqino: 27 a 45 e Bovino: 20 a 35.
Muitos tipos de ativadores de contato so usados comercialmente para o TTPa, deve-
se, portanto, proceder este teste em duplicata e de preferncia concomitantemente com um
animal normal. Alm de se estabelecer valores de referncia locais. A coleta no traumtica
extremamente importante, pois a contaminao com tromboplastina tecidual pode prolongar o
resultado do teste pela ativao do sistema extrnseco. A atividade do fator XIII da coagulao
no avaliada neste teste.
Esperam-se valores de TTPa prolongados em hemoflicos, deficincia de fatores XII,
coagulao intravascular disseminada (CID), venenos cumarnicos e doena de von Willebrand
(dependendo da severidade).
E. Fibrinlise
Produtos de degradao da fibrina (PDF)
A fibrina quebrada pela plasmina em fragmentos. O aumento de PDFs indicam
excessiva fibrinlise. O mtodo utiliza aglutinao em ltex por kits comercias, principalmente
utilizado para diagnstico de CID, mas tambm pode estar aumentado aps cirurgia. Os
valores normais so Co: < 40g/mL; Gato: < 8g/mL e Eqino: < 16g/mL.
Fibrinognio
O fibrinognio uma protena de coagulao (fator I da coagulao) produzida pelo
fgado. Tambm chamado de protena de fase aguda porque sua concentrao no sangue
aumenta rapidamente em resposta a processos inflamatrios. A amostra de sangue deve ser
coletada com EDTA a 10%. O mtodo consiste no aquecimento do plasma a 56-58C por 3
minutos e posterior centrifugao. O aquecimento do plasma precipita o fibrinognio e a
centrifugao o separa dos demais constituintes plasmticos. Faz-se ento a leitura das
protenas plasmticas totais por refratometria e posteriormente a leitura do plasma com o
fibrinognio precipitado. A diferena dos valores obtidos refere-se a concentrao de
fibrinognio plasmtico. Est diminudo na CID. Valores normais de fibrinognio (g/L): Co: 1 a
5; Gato: 0,5 a 3; Cavalo: 1 a 4; Bovinos: 2 a 7.
7. 7. Distrbios hemostticos
A. Desordens plaquetrias
A avaliao das plaquetas realizada em dois nveis: quantitativos e qualitativos. Para
avaliao quantitativa faz-se a contagem de plaquetas e para a quantitativa o TSMO. A
trombocitopenia (nmero reduzido de plaquetas) a anormalidade mais comum das plaquetas.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Trombocitopenia
a diminuio do nmero de plaquetas abaixo do valor de referncia para a espcie A
trombocitopenia a anormalidade mais comum encontrada nas plaquetas e provavelmente a
causa mais comum de ditese hemorrgica. So cinco os mecanismos que podem levar a uma
trombocitopenia:
Desordens congnitas
1. Doena de von Willebrand (DvW): pode afetar vrias espcies animais e o homem. O
Fator de von Willebrand uma glicoprotena multimrica produzida por megacaricitos e
clulas endoteliais que facilita a adeso da plaqueta ao colgeno e vaso sanguneo, a
agregao plaquetria no plasma se associa com fator VIII estabilizando este fator e
aumentando seu tempo de circulao. a mais comum das desordens de sangramento
hereditrias, sendo reconhecidas em mais de 54 raas de ces. Existem trs tipos da doena
de acordo com o tipo de defeito na molcula ou funo:
Tipo I: multmeros normais, mas diminudos. Severidade varivel a forma mais comum,
comum em Dobermanns; Tipo II: multmeros com defeito de funo, de severidade varivel,
comum em Pointer Alemo; Tipo III: forma mais severa, comum no Scottish Terrier.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
terriers, foxhounds.
Desordens adquiridas
So multifatoriais, mas essencialmente envolvem defeitos de ativao, aderncia,
agregao e reao de liberao por causa de substncias anormais no plasma ou
anormalidade estrutural adquirida.
1. Doena renal com uremia: adesividade reduzida ao endotlio. Esta anormalidade das
plaquetas se deve aos metablitos da uria como o cido guanidino succnico e fenlico.
4. Drogas
4.1. Antiinflamatrios no esteroidais: A. cido acetilsaliclico: Inibe Tromboxano A2 (iniciador
da agregao plaquetria). A inibio irreversvel, portanto a funo plaquetria fica
dependente de uma nova produo. B. Ibuprofeno, fenilbutazona e indometacina causam
inibio plaquetria reversvel.
4.2. Outras drogas: Sulfonamidas, penicilinas, tranqilizantes prozamnicos causam respostas
variveis.
B. Coagulopatias
O termo coagulopatia refere-se deficincia ou defeito de um ou mais fatores da
coagulao. Estas podem ser congnitas ou adquiridas e geralmente esto associadas falha
na sntese dos fatores de coagulao
Coagulopatias hereditrias
So causadas por problemas de contedo gentico. Sempre suspeitar quando frente a
animais jovens, com raa definida que apresentem ditese hemorrgica.
Hemofilia B Fator IX
tambm conhecida como doena de Christmas e se caracteriza pela ausncia do fator
hemoflico B ou fator IX. Assim como na hemofilia A ligada ao sexo e afeta somente machos,
com ocorrncia rara em ces e gatos. O perfil de diagnstico semelhante a hemofilia A, para
diferencia-las e necessrio testes especficos em laboiratrios especializados. O diagnstico
laboratorial feito com Tempo de sangramento: normal, TP: normal e TTPa: prolongado.
55
Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Outros fatores:
Deficincia de fator VII - sistema extrnseco: Afeta vrias raas de ces, principalmente os
Beagles. No diagnstico observa-se TP: prolongado e TTPa: normal.
Deficincia de fator XII - sistema intrnseco: as principais raas de ces afetadas so:
poodle, pointer alemo e sharpei. Tambm afeta gatos. Diagnstico com TP: normal e TTPa:
prolongado.
Deficincia de fator XI - sistema intrnseco: Afeta ces e cabras. Diagnstico com TP:
normal e TTPa: prolongado.
Deficincia de fator X - Sistema comum: Afeta Cocker Spaniel e Jack Russel Terrier.
Diagnstico com TP: prolongado e TTPa: prolongado.
Coagulopatias adquiridas
Deficincia de Vitamina K
A vitamina K essencial na formao de vrias protenas da coagulao. Os fatores
vitamina K-dependentes so: II, VII, IX e X, portanto um problema relacionado com a vitamina
K afeta os trs sistemas. Esses fatores so sintetizados em uma forma afuncional
(acarboxiladas) e sofrem uma reao de carboxilao em que a vitamina K participa como
cofator, produzindo centro de ligao para o clcio, necessrio para sua funo normal.
Durante esta reao a vitamina K convertida num metablito inativo (vitamina K-epxido). A
enzima epxido-redutase responsvel pela reciclagem deste metablito, convertendo-o para
a forma ativa, razo pela qual a necessidade diria de vitamina K pequena. Dentre as
principais causas de problemas hemostticos relacionados com a vitamina K esto:
Ingesto de rodenticidas anticoagulantes que levam inibio desta enzima, e rpida
depleo dos estoques de vitamina K do organismo (ex: warfarina e cumarnicos).
Deficincia de sais biliares no intestino: impede a absoro da vitamina K que lipossolvel.
Doena heptica pode resultar na falta de utilizao da vitamina.
O diagnstico laboratorial tpico inclui TP: prolongado e TTPa: prolongado.
Doena heptica
O fgado o local de sntese de protenas da coagulao (fatores proticos).
Problemas de coagulao causados por doena heptica s acontecem em casos severos,
nestes casos todos os sistemas da coagulao so afetados, pois todos os sistemas possuem
fatores produzidos pelo fgado. Cerca de 50% dos gatos com lipidose heptica podem
apresentar problema. O diagnstico da doena heptica deve ser feito com uma boa avaliao
clnico-laboratorial e previamente aos testes de coagulao deve-se utilizar os testes leso e
funo heptica, bipsia e puno por agulha fina, diagnstico por imagem, etc. Devido a meia
vida do fator VII ser curta, a determinao da atividade deste fator utilizada como auxlio
diagnstico de doena heptica aguda ou crnica.
O diagnstico laboratorial pode incluir TP: prolongado e TTPa: prolongado.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Acidente ofdico
O veneno das serpentes do gnero Bothrops possui ao anticoagulante, proteoltica e
vasculotxica, afetando todas as fases da hemostasia principalmente pelo consumo de
fibrinognio que gera incoagulabilidade sangunea.
Avaliao clnico-laboratorial
A avaliao para as desordens hemostticas depende de uma histria clnica detalhada
e de um bom exame fsico. Na histria clnica deve-se destacar histria de sangramentos,
trauma, cirurgia e levar em considerao idade, sexo, raa e terapia com drogas. No exame
fsico deve-se observar o tipo de sangramento. Hemorragias superficiais como petquias e
equimoses so sinais de problemas na hemostasia primria (trombocitopenia ou
trombocitopatia) ou leso vascular. Hemorragias, hematomas e hemartroses so provveis
sinais de problemas na hemostasia secundria, ou seja, nos fatores de coagulao.
Quando um animal apresentar quadro de hemorragias superficiais, aconselha-se a
seguir os seguintes passos:
1. Contagem de plaquetas: no caso de uma trombocitopenia, procurar a causa. Os possveis
mecanismos para a trombocitopenia so: produo diminuda, destruio, consumo, seqestro
ou perda. Para diferenciar problemas de produo pode-se fazer aspirado de medula ssea e
observar o nmero e morfologia dos megacaricitos. No caso das plaquetas estarem em
nmero normal, seguir o passo 2.
2. Tempo de sangramento na mucosa oral: no caso do tempo estar prolongado, tem-se uma
trombocitopatia, deve-se, portanto diferencia-la em congnita ou adquirida. No caso do tempo
de sangramento estar normal, deve-se suspeitar de desordem vascular.
3. Testes de coagulao: so indicados quando na suspeita de coagulopatias. Coagulopatias
congnitas e ou hereditrias so mais freqentes em animais jovens e de raa definida. Os
sinais mais comuns so hemorragias e hematomas. Deficincias de fatores de coagulao no
tendem a formar petquias e equimoses, porm os testes plaquetrios devem ser realizados
previamente, pois trombocitopenias severas podem causar sangramentos confundindo o
diagnstico e deve-se estar atendo a coagulopatias adquiridas como CID que afeta as trs
fases da coagulao e com a DvW que apesar de ser uma trombocitopatia pode gerar
sangramento pela interferncia no fator VIII da cascata.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Contagem de plaquetas
Contagem na cmara de Neubauer
Tomar o frasco com sangue mais anticoagulante e homogeneizar;
Com a pipeta de Thoma para glbulos vermelhos, aspirar o sangue at a marca 1;
Limpar o sangue da parte externa da pipeta com gaze;
Diluir em seguida com soluo de oxalato de amnio a 1% (lquido de Brecher) at a marca
101;
Agitar por aproximadamente 5 minutos;
Desprezar as primeiras gotas e encher a cmara de Neubauer por capilaridade;
Deixar a cmara em repouso por 20 minutos;
Contar as plaquetas dos 5 quadrados pequenos centrais de cada lado da cmara
totalizando 10 quadrados (figura 7.2) e multiplicar por 2500.
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Clculo do fator
Clculo da Cmara de Neubauer para contagem de plaquetas
2
rea central: 1mm Volume da rea central: 1/10mm3
Profundidade: 1/10mm Volume de cada quadrado mdio central: 1/250mm3
Diluio da pipeta: 1/100 Nmeros de quadrados mdios centrais contados: 10
Portanto: 10 x 1 = 10 = 1 Ou seja,
252,5 100 25250 2525 o fator x 2525
3
Observao: 1l = 1mm
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
8. 2. O nfron
A unidade funcional do rim o nfron, o conhecimento da sua funo essencial para
entender a funo renal. O nmero de nfrons varia consideravelmente entre as espcies, de
190.000 nfrons/rim no gato 4.000.000 nfrons/rim no bovino. Ele composto por vrios tipos
celulares incumbidos de efetuar funes individuais, e preparados para responder, quando
necessrio, a uma srie de sinais diretos e indiretos. O nfron formado pelo glomrulo que
responsvel pela filtrao e pelo sistema tubular que dividido em vrios segmentos, onde o
lquido filtrado transformado em urina durante o seu trajeto at a pelve renal.
Os dois rins juntos recebem aproximadamente 25% do dbito cardaco. O sangue entra no
glomrulo pela arterola aferente e sai pela arterola eferente. O glomrulo uma rede de at
50 capilares paralelos, ramificados e anastomosados, recobertos por clulas epiteliais e
envoltos pela cpsula de Bowman. A presso do sangue no glomrulo acarreta a filtrao do
lquido para o interior da cpsula de Bowman, e a partir da, o lquido flui para o tbulo
proximal, localizado no crtex renal juntamente com o glomrulo.
Do tbulo proximal, o lquido passa para a Ala de Henle, que mergulha na massa
renal, com algumas das alas atingindo a parte inferior da medula renal. Cada ala dividida
em ramo descendente e ascendente. A poro descendente e a extremidade inferior da
ascendente so extremamente finas, sendo chamadas segmento delgado da ala de Henle.
A outra poro da ala ascendente possui mesma espessura das outras pores tubulares, e
denominada de segmento espesso do ramo ascendente. Aps passar pela ala de henle o
lquido atinge o tbulo distal, no crtex renal. At 8 tbulos distais formam o tbulo coletor,
que volta a mergulhar na medula e sua extremidade passa a constituir o canal coletor. Os
canais coletores unem-se para formar canais coletores maiores. Estes iro se lanar na
pelve renal pelas papilas renais que so projees da medula que fazem protuses para
dentro dos clices renais (recessos da pelve renal).
A medida que o filtrado glomerular flui atravs dos tbulos, mais de 99% de sua gua e
quantidades variveis de seus solutos so reabsorvidos normalmente para o sistema vascular,
e pequenas quantidades de algumas substncias so tambm secretadas para os tbulos. O
restante da gua tubular e das substncias dissolvidas passa a constituir a urina (Figura 8.1).
Uma rede de capilares peritubulares responsabiliza-se pela irrigao sangunea do rim.
Esta rede recebe o sangue proveniente das arterolas aferentes aps passagem pelo
glomrulo.
A funo bsica do nfron consiste em depurar o plasma sangneo de substncias
indesejveis como os produtos finais do metabolismo proteico (uria), muscular (creatinina),
cido rico e uratos. Os ons sdio, potssio, cloro e hidrognio que tendem a acumular-se em
quantidades excessivas tambm so filtrados pelos nfrons. Os mecanismos bsicos da funo
renal so filtrao, reabsoro de substncias necessrias para o metabolismo e secreo
(tabela 8.1).
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Tabela 8.1. Estruturas renais e suas funes de acordo com os segmentos celulares
ESTRUTURA FUNO
Glomrulo Filtrao do sangue
8. 3. Filtrao glomerular
O glomrulo constitui uma rede de capilares especificamente designado para reter
componentes celulares e protenas de alto e mdio peso molecular no sistema vascular
enquanto provem um fluido tubular que inicialmente possui uma composio eletroltica e
aquosa idntica a do plasma. O fluido tubular inicial chamado de filtrado glomerular e o seu
processo de formao conhecido como filtrao glomerular. A taxa de filtrao glomerular
(TFG) um parmetro para avaliao da funo renal.
O tufo glomerular coberto por uma camada de clulas epiteliais denominada Cpsula
de Bowman. A rea entre o glomrulo e a cpsula de Bowman denominada espao de
Bowman onde o stio da coleo de filtrado glomerular que vai desembocar no primeiro
segmento tubular, o tbulo proximal.
A estrutura dos capilares glomerulares importante para determinar a taxa e
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
8. 6. Urinlise
A. Colheita
A colheita da urina de fundamental importncia e varia de acordo com a espcie. A
urina pode ser obtida das seguintes formas:
Mico natural
A amostra de urina pode ser obtida no momento da mico natural, por meio de
recipiente direcionado oportunamente. Mais indicado para grandes animais, principalmente
pela dificuldade de cateterizao. A mico pode ser estimulada em bovinos e eqinos por leve
massagem perigenital. Em ces pode-se estimular a mico realizando um breve passeio.
Deve-se desprezar a poro inicial da amostra de urina colhida por mico natural, pois poder
conter detritos celulares, leuccitos e exsudato provenientes da uretra, prepcio e trato genital.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Cateterismo
A amostra de urina pode ser obtida por cateterismo vesical, utilizando-se sondas
apropriadas para a espcie, sexo e tamanho do animal. Indicado quando h necessidade
rpida de colheita, ou quando teraputico, como em urolitases ou cirurgias.
Deve-se tomar cuidado para evitar contaminao com substncias que possam
interferir na urinlise, a exemplo das substncias lubrificantes; evitar a traumatizao da uretra.
Cistocentese
Constitui a tcnica de colheita de urina mais adequada para animais de pequeno porte
pela facilidade, baixo custo e confiabilidade no resultado do exame. Especificamente indicada
para obteno de amostras destinadas cultura bacteriana e antibiograma.
A cistocentese s praticvel quando a bexiga estiver com volume de urina suficiente,
permitindo a puno sem riscos de injrias aos rgos abdominais. O paciente deve ser
preparado com tricotomia e antissepsia local e o procedimento deve ser realizado com auxlio
de uma seringa estril de 10 ou 20mL e agulha hipodrmica 25x7/30x8. Para facilitar a
identificao do rgo, pode-se fazer a puno com auxlio da ultrassonografia.
B. Acondicionamento
A urina deve ser colhida em recipiente limpo, podendo ser de vidro ou plstico e
obrigatoriamente estril se a amostra for submetida a isolamento bacteriano e antibiograma. Se
a amostra de urina no for analisada imediatamente aps a colheita, os frascos escuros so
preferveis pois a luz ambiental pode ocasionar a degradao de certos constituintes da urina,
tais como bilirrubina e urobilinognio, em menos de uma hora.
A primeira urina da manh prefervel, pois provavelmente contm os elementos de
significado diagnstico, enquanto a ingesto de lquidos durante o dia dilui a urina.
Sempre que possvel, a amostra deve ser processada imediatamente aps a colheita,
pois aps 2 horas j ocorrem alteraes dos componentes iniciais. Podem ser verificadas
alteraes qumicas e fsicas em um breve espao de tempo quando a amostra for deixada
temperatura ambiente. Nesse caso, as bactrias, quando presentes, proliferam rapidamente e
se forem redutoras de uria iro alcalinizar a amostra. A urina alcalina, por sua vez, tende a
dissolver os cilindros e ocasionar a cristalizao dos solutos alterando o aspecto macro e
microscpico da urina.
Uma boa maneira de conservar a urina mant-la em temperatura de refrigerao (1 a
4C) por at 12 horas ps colheita, tomando-se o cuidado de deixar a urina retomar a
temperatura ambiente previamente ao exame. Temperaturas inferiores de refrigerao
podem elevar a densidade especfica da amostra e podem degradar os constituintes celulares.
Quando no for possvel a realizao imediata da urinlise, ou quando no houver
condio de acondicion-la adequadamente, pode-se utilizar substncias conservantes de
ao antibacteriana, tais como o tolueno, o timol e a formalina. A formalina deve ser utilizada
na diluio de uma gota a 40% para cada 30mL de urina. Este modo de conservao torna
inviveis as provas qumicas da urina.
O frasco contendo a urina deve ser identificado, e enviado junto com a requisio
devidamente preenchida.
Exame n : _________
Proprietrio : RG : Data: / /
Espcie : Raa : Sexo : Idade : Horrio colheita :
Diagnstico provisrio: Sob Tratamento? Qual?
Histria Clnica resumida :
Colheita: ( ) Cistocentese ( ) Cateterismo ( ) Mico natural
C. Exame da urina
O exame de urina deve ser realizado e interpretado segundo estas informaes:
Exame Fsico
O exame fsico da urina de simples realizao, e pode fornecer informaes
importantes.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Volume (mL)
A quantidade de urina excretada por dia por animais normais depende de alguns
fatores, a saber: dieta, ingesto de lquidos, temperatura ambiente e umidade relativa do ar,
atividade, tamanho e peso do animal. Como em animais a obteno de urina padro de 24
horas muito difcil, o volume na verdade a quantidade de urina recebida pelo laboratrio. O
volume mnimo para a realizao adequada do exame de 10mL.
Em condies de sade, o volume urinrio inversamente proporcional densidade
urinria especfica; portanto, o aumento da quantidade de urina excretada, ou poliria, est
associada densidade especfica baixa; e a oligria, diminuio do volume urinrio est
associada densidade especfica elevada (quadro 8.1).
Cor
A cor da urina deve sempre ser considerada associada densidade especfica e volume
urinrio. A intensidade da colorao urinria depende da concentrao de urocromos, e varia
inversamente com o volume urinrio. A colorao normal da urina pode variar do amarelo-palha
ao mbar claro, e em eqinos at a tonalidade amarronzada. Entre as cores mais importantes:
- Plida ou amarelo-clara: geralmente uma urina diluida com densidade baixa e associada
poliria. Pode ser observada na doena renal terminal, ingesto excessiva de lquidos,
Diabetes insipidus, hiperadrenocorticismo, piometra, fase polirica da nefrose txica.
- Amarelo-escura ao mbar: urina concentrada com densidade elevada e associada oligria.
Pode ser associada febre, desidratao, diminuio de ingesto hdrica, nefrite aguda
(fase oligrica), nefrose txica.
- Alaranjado-mbar a amarelo-esverdeada: forma uma espuma alaranjada ou esverdeada
quando agitada e se relaciona com a presena de bilirrubina.
- Avermelhada: pode indicar presena de hemoglobina e/ou hemcias. Aps a centrifugao ou
sedimentao a hematria simples apresenta-se com sobrenadante lmpido.
- Marron: pode indicar presena de hemoglobina, mioglobina, ou urina normal de eqinos aps
certo tempo (oxidao por pirocatequina).
- Azul-esverdeada: pode ser devido ao azul de metileno, que comumente encontrada na
composio de antisspticos urinrios.
A urina normal quando agitada forma uma certa quantidade de espuma branca, tpica.
Na proteinria, a quantidade de espuma abundante e demora a desaparecer. Na bilirrubinria
a espuma frequentemente apresenta-se esverdeada ou acastanhada; na hemoglobinria, a
espuma apresenta-se avermelhada.
Odor
A urina Sui generis ou normal dos herbvoros tem um odor aromtico, mais intenso nos
ruminantes, enquanto que nos carnvoros picante e aliceo. O odor da urina dos machos de
certas espcies pronunciado, e s vezes at repugnante (suno, felino e caprino). O odor
normal da urina conferido pela presena de cidos orgnicos volteis. Entre os odores mais
importantes:
Aspecto
A maioria das espcies domsticas apresenta normalmente urina transparente ou
lmpida; a nica exceo o eqino, cuja urina turva devido presena de cristais de
carbonato de clcio e muco. Apresenta-se turva quando alterada e pode representar uma
grande quantidade de leuccitos, eritrcitos, clulas epiteliais de descamao, muco e
bactrias do trato urinrio. A contaminao da urina por exsudato de trato genital tambm pode
ser a causa da turvao da urina colhida sem cateterizao. A melhor forma de detectar a
causa da turvao da urina atravs do exame do sedimento.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Sedimento
Avaliado aps a centrifugao de no mnimo 5mL de amostra e em animais normais
apresenta-se discreto. Quando abundante pode ser devido alta concentrao urinria de
cristais, leuccitos ou outros componentes. A cor do sobrenadante tambm importante, em
especial para diferenciar hemoglobinria (avermelhado) de hematria (lmpido).
Consistncia
Normalmente lquida, e levemente viscosa em eqinos. Altera-se na leucocitria ou
piria, cristalria, etc.
Densidade
Representa a concentrao dos slidos em soluo urinria e retrata o grau de
reabsoro tubular ou da concentrao renal. Preferencialmente obtida por refratometria uma
vez que as tiras urinrias no so eficazes para determinar a densidade em caninos. Para
determinao, prefere-se o uso do sobrenadante aps a centrifugao.
A densidade urinria influenciada por fatores como peso corporal, dieta, exerccio,
idade, condies climticas e metabolismo.
Os valores normais de densidade especfica urinria variam entre limites muito amplos.
De um modo geral, pode-se considerar uma variao entre 1015 e 1045, sendo que uma nica
determinao fora destes limites no significa, obrigatoriamente, alterao renal. Portanto, deve
ser interpretada junto ao grau de hidratao e ingesto hdrica recente do animal.
Quanto classificao, a urina pode ser denominada de hipostenrica (menor ou igual
a 1007), isostenrica (entre 1008 a 1012) e de elevada densidade urinria (acima de 1030 para
ces e 1035 para gatos). Em algumas doenas renais, observa-se h perda da capacidade
renal de concentrar a urina, reduzindo a densidade. As causas mais freqentes de alteraes
na densidade especfica urinria esto representadas no quadro 8.1.
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Exame Qumico
O exame qumico da urina realizado com o auxlio de fitas reagentes de qumica
seca, obtidas comercialmente para laboratrios humanos. importante lembrar que uma baixa
densidade urinria significa diluio dos constituintes qumicos urinrios.
pH
A concentrao hidrogeninica da urina particularmente influenciada pela dieta.
Animais mantidos com dieta predominantemente vegetal apresentam urina alcalina, devido
presena de bicarbonato de clcio solvel; por outro lado, os animais cuja alimentao rica
em protenas e cereais apresentam urina cida, devido presena de fosfatos cidos de sdio
e clcio.
O pH urinrio , portanto cido nos carnvoros (5,5 a 7,0) e alcalino (7,5 a 8,5) nos
herbvoros. Animais novos, em fase de amamentao, apresentam pH urinrio cido, mesmo
que o adulto da mesma espcie tenha predominantemente pH urinrio alcalino. As alteraes
do pH urinrio geralmente indicam mais uma alterao sistmica do que um processo
localizado em nvel de sistema urinrio.
So causas de urina alcalina: atraso no processamento e m conservao da amostra,
cistite associada a bactrias produtoras de urease (Staphylococcus sp. e Proteus sp.),
administrao de alcalinizantes (bicarbonato de sdio, lactato de sdio, citrato de sdio),
reteno urinria vesical e alcalose metablica ou respiratria.
No caso de urina cida, dentre as causas podem ser mencionadas: dieta hiperproteica,
administrao de acidificantes (cloreto de amnio, cloreto de clcio, DL-metionina, fosfato cido
de sdio), catabolismo de protenas orgnicas (febre, jejum, Diabetes melito), acidose
metablica ou respiratria, principalmente uremia e Diabetes melito.
Protenas (mg/dl)
A proteinria deve ser sempre interpretada em associao com a densidade especfica
e outros dados clnicos e laboratoriais. Em condies normais a quantidade de protena na
urina muito pequena e geralmente as tiras urinrias no detectam.
As tiras de urinlise so sensveis para albumina e no para protenas Bence-Jones.
Geralmente o pH urinrio elevado pode interferir o resultado desse mtodo e nesse caso (pH
urinrio acima de 7,5) recomenda-se os testes de precipitao cida (cido sulfosaliclico) para
deteco semiquantitativa de protena na urina. Essa tcnica detecta albumina e demais tipos
de protena. O grau de proteinria no necessariamente proporcional severidade da doena
principalmente na proteinria renal. As causas de proteinria so relacionadas no quadro 8.2.
Glicose (mg/dl)
A urina normal isenta de glicose, pois a glicose filtrada pelo glomrulo totalmente
reabsorvida pelos tbulos contorcidos proximais. A glicosria ocorre sempre que a glicemia
exceder a capacidade de reabsoro renal (tabela 8.2)
A glicosria pode estar associada a hiperglicemia na Diabetes melito, no
Hiperadrenocorticismo, no tratamento parenteral com glicose e frutose, na pancreatite necrtica
aguda, na ingesto excessiva de aucares e administrao parenteral de adrenalina. Nos
casos em que se observa glicosria no associada a hiperglicemia pode-se relacionar a
nefropatias congnitas ou hereditrias e a doenas renais com comprometimento da poro
tubular proximal.
A glicosria falso-positiva pode ocorrer por reao qumica cruzada aps administrao
de certos antibiticos, substncias redutoras de acar e outros medicamentos.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Bilirrubina
A bilirrubinria deve sempre ser interpretada em associao a densidade especfica
urinria. A urina obtida de ces sadios normalmente contm alguma quantidade de bilirrubina,
principalmente quando a amostra possui elevada densidade especfica. O limiar de excreo
de bilirrubina no co baixo em condies normais e por isso, normalmente, no se observa.
A bilirrubinria est relacionada a hepatopatias (hepatite infecciosa canina,
Leptospirose e neoplasias) e a obstruo das vias biliares com colestase intra e extra-heptica.
Urobilinognio
O urobilinognio um cromgeno formado no intestino por ao bacteriana redutora de
bilirrubina. Uma parte do urobilinognio excretada atravs das fezes, mas outra absorvida
pela circulao porta, retornando ao fgado e sendo eliminada pela bile. Pequena quantidade
de urobilinognio atinge os rins atravs da circulao, sendo excretado pela urina.
O kit comercial de fitas reagentes geralmente insensvel ao urobilinognio. Para
melhor interpretao deve-se realizar a prova de Ehrlich. A urina de ces e gatos geralmente
possui reao positiva de urobilinognio at diluio de 1:32.
A ausncia ou diminuio do urobilinognio urinrio est relacionado a distrbios
intestinais de reabsoro (diarria) enquanto que o aumento pode ser associado a hepatite por
incapacidade funcional de remoo do urobilinognio da circulao, cirrose heptica e ictercia
hemoltica.
Sangue oculto
Normal quando ausente. Os testes laboratoriais de rotina no diferenciam hematria de
hemoglobinria e para isso, deve-se centrifugar a amostra e observar sedimento e
sobrenadante. Na hematria verdadeira o sobrenadante fica lmpido enquanto na
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Exame do Sedimento
O exame do sedimento deve ser padronizado e para um exame representativo, deve-
se utilizar 5 a 10mL de urina fresca e centrifug-la a 1500rpm por 5 a 10 minutos. O sedimento
obtido desprezando-se o sobrenadante e ressuspendendo-o em aproximadamente 1mL. Uma
gota colocada sobre uma lmina e coberta por uma lamnula.
A leitura deve ser realizada em microscpio ptico em objetiva de 40x e para aumentar
o contraste, deve-se abaixar o condensador. No entanto, uma observao em menor aumento
(100 ou 200x) deve ser realizada previamente leitura, para verificar-se homogeneidade do
sedimento e macroestruturas como cogulos e pus. Observar a densidade urinria, pois pode
haver diluio do sedimento.
Hemcias
As hemcias so menores que os leuccitos e normal quando na quantidade de 1 a
2/campo de observao no microscpio e quando superior a 5/campo pode ser considerado
hematria.
A hematria, que pode ser macro ou microscpica est relacionada a Inflamaes do
trato urinrio (pielonefrite, ureterite, cistite, pielite, prostatite), traumas (cateterizao,
cistocentese, neoplasias renais vesicais ou prostticas), congesto passiva renal, infarto renal,
certos parasitas (Dioctophima renale, Sthefanurus sp, Dirofilariose), intoxicao (cobre e
mercrio), distrbios hemostticos, estro e ps-parto.
Leuccitos
Apresentam-se como clulas granulares maiores que as hemcias, porm menores
que as clulas epiteliais. Normal quando 1 a 2/campo e quando maior que 5/campo
considerado leucocitria ou piria. Em pH alcalino, os leuccitos tendem a apresentar-se sob a
forma de grumos.
As causas de leucocitria podem ser inflamaes renais (nefrite, glomerulonefrite,
pielonefrite), inflamaes do trato urinrio inferior (uretrite, cistite) e inflamaes do trato genital
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Cilindros
So constitudos primariamente de mucoprotena e protena que aderem-se ou no a
outras estruturas; normal quando ausentes. Representam moldes dos tbulos onde so
formados, como nos ductos coletores, tbulos contorcidos e ala de Henle.
A formao dos cilindros d-se na poro renal tubular, onde a urina atinge
concentrao mxima e acidez, o que favorece a precipitao de protenas e mucoprotenas.
Qualquer leso tubular presente no momento da formao dos cilindros pode refletir na
composio dos mesmos. Deste modo os cilindros so classificados conforme o material que
contm (quadro 8.3). IMPORTANTE: os cilindros no se formam em baixas densidades ou em
pH alcalino.
Bactrias
Normal quando quantidade discreta e deve ser interpretado considerando o mtodo de
colheita. Normalmente a urina estril at atingir o plo distal da bexiga e observa-se em ces
que h uma populao bacteriana normal maior na extremidade distal. Cuidado com falsa
bacteriria por tempo prolongado de exposio da amostra de urina previamente ao exame.
Uma grande quantidade de bactrias em amostra de urina fresca sugere infeco
bacteriana em algum ponto do trato urinrio, especialmente quando associada a outros sinais
de inflamao como piria, hematria e proteinria.
Cristais
So produtos finais da alimentao do animal e dependem para sua formao do pH
urinrio. A grande quantidade pode indicar urolitase, embora possa haver clculos sem
cristalria e vice-versa. Exemplos de cristalria em pH alcalino e cido no quadro 8.4.
Outros achados:
Espermatozides: Normal no co. Em outras espcies, como no bovino, pode indicar distrbio
reprodutivo.
Muco: So filamentos mucides, normal quando em quantidade discreta. Aumentam em
processos inflamatrios.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Provas bioqumicas
As principais provas bioqumicas de funo renal incluem a determinao da uria e
creatinina sricas/plasmticas. Outras provas como sdio, potssio e fsforo sricos podem ser
teis no diagnstico de doenas renais uma vez que so elementos excretados normalmente
pela urina.
Uria ( BUN )
A uria produzida no fgado atravs da arginase e o principal produto final do
catabolismo protico.
Arginase
Arginina Ornitina + Uria
Por ser de baixo peso molecular, a uria difunde-se igualmente pelos fludos orgnicos.
A uria excretada atravs do filtrado glomerular, em concentrao igual do sangue. Parte,
em torno de 25 a 40%, reabsorvida atravs dos tbulos, na dependncia do fluxo urinrio e
60% eliminada atravs da urina. Quando h maior velocidade de fluxo h menor absoro de
uria e vice-versa. Em situaes em que ocorre diminuio da filtrao glomerular, observa-se
maior reteno da uria. Isso ocasiona um aumento da concentrao sangnea, mas somente
ser considerada azotemia renal primria quando 75% dos nefrons de ambos os rins esto
afuncionais.
A concentrao de uria afetada por fatores extra-renais como ingesta protica
elevada e jejum prolongado. Devido a essas interferncias, a uria no um bom indicador do
funcionamento renal quando analisada unicamente. Para se analisar a funo renal, esse
parmetro deve ser interpretado juntamente aos nveis de creatinina, protena e densidade
urinrias. Os fatores que interferem nos nveis de uria esto relacionados no quadro 8.5.
A reduo dos nveis de uria pode ocorrer pela diminuio da produo como em
casos de Insuficincia heptica, na cirrose, no Shunt porto-sistmico e em casos de reduo da
protena diettica e hipoproteinemia.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Creatinina
A creatinina formada atravs do metabolismo da creatina e fosfocreatina muscular. O
nvel sanguneo no afetado pela dieta, idade e sexo embora elevado metabolismo muscular
possa aumentar os nveis de creatinina na circulao. A creatinina totalmente excretada pelos
glomrulos, no havendo a reabsoro tubular. Devido a isso, pode ser usada como ndice de
filtrao glomerular. Alm disso, por ser facilmente eliminada (4 horas), a elevao na
circulao ocorre mais tardiamente nos estados de insuficincia renal, quando comparado com
a uria sangunea (1,5 horas).
A creatinina pode estar elevada no soro devido a fatores pr-renais como diminuio
do fluxo sangneo, renais como a diminuio da filtrao glomerular e ps-renais como a
ruptura e/ou obstruo do trato urinrio.
Eletrlitos
Sdio
Normalmente o sdio filtrado e reabsorvido, dependendo da quantidade na dieta. Na
nefropatia crnica generalizada h perda de sdio, pois este acompanha a gua na depleo
hdrica para manter a isotonicidade. A reduo de sdio a hiponatremia.
Potssio
O potssio fisiologicamente filtrado nos glomrulos, reabsorvido nos tbulos
contorcidos proximais e excretado pelos tbulos distais. A concentrao srica de potssio
varia com a dieta. Na nefropatia com oligria ou anria h perda de funo excretora renal e
reteno de potssio, levando hipercalemia.
Clcio
Na nefropatia aguda no h alterao nos nveis sricos de clcio. Na nefropatia
crnica generalizada h perda da capacidade de reabsoro, com conseqente hipocalcemia.
Quando perdura, esta hipocalcemia estimula a paratireide a mobilizar clcio sseo para
manter a homeostase, levando ao hiperparatireoidismo secundrio renal.
Fsforo
Na nefropatia crnica progressiva e na doena renal generalizada h reduo na
velocidade da filtrao e perda na capacidade de excreo de fsforo, levando
hiperfosfatemia em ces e gatos. Em grandes animais este aumento no uma constante.
Quando perdura a hiperfosfatemia h um estmulo paratireide, no sentido de
mobilizar clcio sseo para manter a homeostase sangunea. Este processo leva ao
hiperparatireoidismo secundrio renal.
8. 8. Uremias
Realizados os exames de funo renal, outro passo importante a interpretao
destes resultados. Na presena de concentraes sricas ou plasmticas aumentadas de uria
e creatinina, mas ainda sem os sinais clnicos caractersticos deste acmulo, tem-se a
chamada azotemia.
Quando h evoluo do processo surgem os sinais clnicos caractersticos, tais como
hlito urmico, lceras na cavidade bucal e lngua, diarria profusa at sanguinolenta e
vmitos. Nesta fase a concentrao de uria e creatinina maior no sangue que na urina. A
associao destes sinais clnicos com o aumento sanguneo de uria e creatinina so
denominadas de uremia.
Devido a diversidade da funo renal, as interpretaes dos testes determinadores da
funo renal devem ser sempre realizadas em conjunto considerando todas as alteraes
(quadro 8.6).
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Exame de urina:
Transferir 5mL de amostra para um tubo cnico
1. Exame fsico
- Mensurar a quantidade de amostra em cada frasco.
- Determinar a colorao de cada amostra.
- Classificar a amostra atravs do grau de turvao. Avaliar colocando o tubo contra uma folha
com escritas em preto. Amostras lmpidas permitem que seja feita a leitura do escrito quando
colocado contra o papel.
2. Exame qumico:
- Com o auxlio de uma pipeta Pasteur plstica, pipetar uma gota de amostra em cada
almofada reagente. Aps o tempo sugerido, fazer a leitura comparando com a graduao
fornecida pelo fabricante.
3. Sedimento
- Colocar 5mL (no mnimo 2mL) de urina em um tupo cnico, fechar e centrifugar a 1500rpm
por 5 minutos. Aps, observar a presena ou ausncia de sedimento e gordura que deve ser
removida da camada superior do sobrenadante.
- Analisar a densidade urinria. Pipetar 1 gota na lente do refratmetro e fazer a leitura. Se a
densidade for superior a escala, diluir a urina 1:1 com gua destilada e duplicar os 2 ltimos
dgitos da leitura (ex. 1024=1048) ou usar o urodensmetro.
- Retirar cuidadosamente o sobrenadante com pipeta Pasteur e deixar 1mL para ressuspender
o pellet. Em amostras de reduzido volume, usar 20% da quantidade total.
- Aps ressuspender o sedimento: Adicionar 1 gota em uma lmina limpa, cobrir com lamnula;
e em outra lmina, pipetar 1 gota do sedimento em uma lmina e 1 gota do corante azul de
metileno.
- Exame no microscpio:
Abaixar o condensador para melhor visualizao das estruturas. Usar a objetiva de 10x para
verificar a presena de cilindros e clulas epiteliais. Anotar os nmeros em campos de pequeno
aumento (CPA). Usa-se a objetiva de 40x para observar as seguintes estruturas:
- Bactrias: descrever morfologia e quantidade (+,++,+++); - Cristais: tipo e quantidade
(+,++,+++); - Eritrcitos/CGA (normal=0-5); - Leuccitos/CGA (normal=0-5); - Muco (positivo ou
negativo); - Gotculas de gordura (positivo ou negativo); - Parasitas e fungos (tipo e morfologia);
- Espermatozides (+,++,+++); - Cristais e cilindros pode ser visualizados em sedimento no
corado enquanto clulas e microrganismos, em sedimento corado.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
9. 1. Anatomia do fgado
O fgado a maior glndula isolada do corpo, e corresponde a 2-5% do peso corporal
no organismo. As numerosas e variadas funes hepticas so desempenhadas por dois tipos
celulares: o hepatcito e a clula de Kupffer. A clula de von Kupffer, um componente do
sistema macrofgico, reveste regies dos sinusides hepticos, estando intimamente
associada ao hepatcito. A atividade fagocitria do fgado explicada pela funo dessa
clula.
O potencial mittico dos hepatcitos mantido durante toda a vida do organismo. Esta
propriedade, somada hipertrofia, so os principais responsveis pela restaurao do rgo
lesado. Embora a leso aguda por substncias txicas possa ser seguida pela completa
recuperao do rgo, a exposio crnica geralmente resulta na alterao da funo
orgnica, na diminuio do tamanho do rgo e no aumento do tecido conjuntivo fibroso intra-
heptico (cirrose).
O fgado composto de lobos recobertos por uma cpsula fibrosa de tecido conjuntivo
que se continua com o tecido conjuntivo intersticial (interlobular). O tecido conjuntivo intersticial
proeminente naquelas regies interlobulares chamado espao porta. Os lbulos hepticos,
delineados pelo tecido conjuntivo interlobular, so a unidade morfolgica do fgado. Essas
massas prismticas e poligonais so formadas por placas ou lminas de hepatcitos
interdigitadas entre os capilares sinusides anastomosados. As placas celulares e de
sinusides parecem irradiar-se a partir de um vaso centralmente posicionado, a veia
centrolobular. Os sinusides hepticos formam o leito vascular intralobular. O sangue dos
vasos interlobulares transportado pelos sinusides para as veias centrolobulares.
O sistema de ductos biliares do fgado formado pelos canalculos biliares, pelos
ductos intra-hepticos e pelos ductos extra-hepticos, para a conduo da bile dos hepatcitos
para o duodeno. Os sistemas de clulas secretoras e de tbulos condutores formam os
componentes glandulares excrinos do fgado.
9. 2. Funes do fgado
As funes hepticas diretamente relacionadas com os hepatcitos so as seguintes:
Sntese e armazenamento
Alm de sintetizar substncias necessrias para a integridade funcional e estrutural das
clulas componentes, os hepatcitos sintetizam albumina, fibrinognio, e -globulinas,
lipoprotenas e colesterol. O glicognio sintetizado a partir da glicose (glicognese) e
armazenado nos hepatcitos sendo que a liberao de glicose dos estoques (glicogenlise)
ocorre em casos de demanda somtica. Da mesma forma, ocorre com os estoques lipdicos do
fgado. Vitaminas como A, D, K e complexo B tambm so armazenadas e sintetizadas no
fgado. Embora a sntese e a secreo de protenas correspondam s principais funes dos
hepatcitos, no parece haver armazenamento de protenas no fgado. Elas so secretadas
para o sangue medida que so sintetizadas. O fgado produz ainda todos os fatores de
coagulao, com exceo do fator VIII e do Clcio.
Secreo e excreo
As funes excretoras do fgado esto relacionadas sntese e secreo de
substncias que so lanadas bile (funo excrina do fgado). Os constituintes primrios da
bile so os sais biliares, compostos basicamente de sais de sdio e potssio, do cido
glicoclico e cido tauroclico. O cido clico, formado a partir do colesterol, conjugado com
a glicina e a taurina para a formao dos sais biliares. Estes emulsificam as gorduras do
intestino delgado, formando complexos hidrossolveis com os lipdios de modo a facilitar a
absoro lipdica e a ativar as lipases intestinais.
A bilirrubina um pigmento biliar derivado do metabolismo da hemoglobina. Ela
conjugada a um cido glicurnico pela glicuronil-transferase nos hepatcitos. Embora a
bilirrubina forme a poro pigmentada das secrees excrinas dos hepatcitos, a conjugao
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
da bilirrubina com o cido glucurnico uma importante funo detoxificante das clulas
hepticas. O colesterol, as gorduras, os fosfolipdios, os eletrlitos e outros compostos
orgnicos tambm so componentes da bile. A reabsoro seletiva de alguns componentes da
bile e a sua ressecreo posterior pelo fgado so realizadas atravs da circulao entero-
heptica.
Biotransformao
O organismo produz (hormnios, metablitos), absorve (toxinas) ou recebe a
inoculao (drogas) de muitos compostos biologicamente ativos e/ou txicos. Muitos destes
compostos sofrem a ao do fgado, que altera sua toxicidade, reduz sua atividade e os
elimina. Esses processos, considerados de forma geral como detoxificao, nem sempre
resultam na neutralizao das substncias selecionadas. Em consequncia de alguns tipos de
atividades hepticas, algumas drogas se tornam mais txicas para o organismo aps sua
metabolizao.
A biotransformao de muitos compostos qumicos ocorre no retculo endoplasmtico
liso, na mitocndria e no citosol dos hepatcitos. As reaes biotransformadoras podem ser
divididas em reaes de sntese e no-sintticas. A reao de sntese ou conjugao envolve a
unio de substncias a vrios compostos reativos endgenos - glicuronato, cido actico,
sulfatos ou aminocidos. As reaes no-sintticas envolvem as reaes oxidativas, redutoras
e hidrolticas. O fgado produz diversas enzimas envolvidas no ciclo de excreo de resduos
protecos (amnia) na forma de uria.
A funo fagocitria das clulas de Kupffer complementa a atividade biotransformadora
do hepatcito.
Metabolismo
O fgado est envolvido em todos os aspectos do metabolismo dos carboidratos, das
protenas e dos lipdios. A gliconeognese, a sntese de glicose a partir dos aminocidos
glicognicos, os intermedirios do ciclo do cido lctico, so aspectos significantes do
metabolismo dos carboidratos nos hepatcitos.
A maior parte da oxidao das gorduras ocorre nos hepatcitos. A formao de corpos
cetnicos tambm ocorre no fgado.
O metabolismo proteico inclui diversas reaes. A desaminao e a produo de
acetocidos so importantes na sntese de lipdios (aminocidos cetognicos) e de
carboidratos (aminocidos glicognicos). O fgado tem a capacidade de sintetizar aminocidos
no-essenciais, sendo que o fgado e outros tecidos podem converter um aminocido em outro,
atravs das reaes de transaminao. A alanina amino transferase (ALT) uma transaminase
hepato-especfica dos carnvoros e utilizada para avaliao de leso heptica, pois liberada
por hepatcitos lesados. A formao de uria nos hepatcitos o meio pelo qual o organismo
excreta os produtos residuais nitrogenados. A uria tambm contribui para o mecanismo de
contra-corrente do rim; ela influencia portanto a concentrao de urina.
Embora o fgado assuma um papel passivo no armazenamento de vitaminas, a funo
heptica e a secreo da bile so essenciais para a absoro de vitaminas lipossolveis
(A,D,E,K) no trato intestinal. O fgado tambm assume um papel ativo no metabolismo da
vitamina D.
Hematopoiese
Embora a hematopoiese seja uma funo heptica durante o desenvolvimento fetal, o
potencial para a produo de clulas sanguneas mantido no adulto.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
A. Provas enzimticas
A utilizao de dosagens enzimticas como mtodo auxiliar nos problemas hepticos
largamente utilizada na medicina veterinria. Estas enzimas aumentam na circulao medida
que so liberadas pelas clulas de origem. Esta liberao pelos hepatcitos pode ocorrer por:
- Alterao na permeabilidade celular: reaes inflamatrias, degenerao celular;
- Necrose celular: ingesto de drogas hepatotxicas, cirrose crnica (pode possuir valores
normais de ALT ou diminudos).
Dependendo da espcie, as enzimas podem ser localizadas em maior ou menor
quantidade no hepatcito ou em outros rgos alm do fgado. Dessa maneira, a ALT est em
maior quantidade nos hepatcitos de pequenos animais enquanto que em ruminantes e
eqinos a AST predominante. Alm dos hepatcitos, a FA pode estar localizada em
quantidades significativas no tecido sseo, mucosa intestinal, placenta e rins. A GGT est
localizada tambm em ductos biliares, rins, pncreas e intestinos. Devido a essa diversidade de
locais impretervel que a interpretao seja feita aliada histria clnica do paciente.
Enzimas hepatocelulares
Aminotransferases
As aminotransferases (ALT e AST) so enzimas intracelulares que tm por funo a
transferncia de grupos amino durante a converso de aminocidos a -oxo-cidos. Ambas
so encontradas no citosol celular enquanto a AST tambm possui uma isoenzima
mitocondrial.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
gravidade da doena primria, aumentos marcantes na atividade da ALT (trs vezes o normal)
so observados em hepatites txicas ou infecciosas, necrose celular, congesto heptica,
colangites e colangiohepatites, obstruo de ducto biliar e determinadas neoplasias
(carcinoma). Devido a proximidade do pncreas ao fgado, eventualmente as pancreatites
podem induzir um dano mecnico no fgado promovendo a elevao da ALT srica. Um
aumento significativo da ALT pode ser observado na cirrose heptica, porm valores normais
so relatados devido a substituio dos hepatcitos por tecido fibroso.
Outras causas de aumento da atividade da ALT so: hemlise da amostra e
administrao de determinadas drogas como acetominofen (em gatos), nitrofurantona,
penicilinas, fenilbutazona e sulfonamidas. A reduo da ALT no possui significado clnico.
Enzimas colestticas
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B. Provas funcionais
Prova de excreo de bromossufalena (BSP)
Aps a aplicao intravenosa de BSP, a substncia rapidamente eliminada do
organismo, pelo sistema hepato-biliar. A velocidade de excreo um ndice da massa
heptica funcional, embora esteja tambm na dependncia da velocidade do fluxo sanguneo e
da permeabilidade normal das vias biliares. Causas de aumento nos valores de BSP incluem
problemas hepato-celulares, e ainda o infarto do miocrdio e necrose do msculo esqueltico,
e a pancreatite aguda e necrose renal. Esta prova foi abandonada na rotina laboratorial
humana e veterinria h pelo menos uma dcada.
Urinlise
Nas ictercias e leses hepticas pode ocorrer bilirrubinria e presena de cristais de
amnia.
9. 5. Protenas plasmticas
As protenas plasmticas so sintetizadas principalmente no fgado e so constituidas
de aminocidos obtidos aps quebra e absoro intestinais. Na interpretao da
hipoproteinemia deve-se buscar as causas bsicas desta fisiologia:
falha na ingesto, falha na absoro, falha na sntese ou perda protica
Sua classificao quanto forma qumica a seguinte:
1. Protenas simples contendo os elementos bsicos dos aminocidos: carbono, hidrognio,
oxignio, nitrognio e enxofre.
2. Protenas conjugadas a outros elementos ou compostos: metaloprotenas - ferritina (ferro);
glicoprotenas - glicohemoglobina; fosfoprotenas - casena (fosfato); lipoprotenas -
colesterol, triglicrides; nucleoprotenas - ribossomais.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
sendo constitudo pelo sistema imune e seus tecidos como o sistema retculo endotelial,
linfcitos e plasmcitos; outras protenas sintetizadas nos tecidos e clulas somticas esto
presentes em menor quantidade. Em geral, o plasma contm em torno de 5 a 7g/dl de
protenas totais; se a hemoglobina for incluida este valor chega a 20g/dl.
Importante: o aumento ou diminuio das protenas plasmticas totais deve ser interpretado de
modo a se individualizar o mximo possvel as fraes responsveis por esta alterao. A
generalizao diagnstica na hiper ou hipoproteinemia invariavelmente induz ao erro.
Pr-albumina
A pr-albumina possui a mais rpida migrao eletrofortica, sendo que pode no
existir em algumas espcies animais. A nica funo conhecida a de ligao e transporte da
tiroxina.
Albumina
A albumina a mais abundante das protenas sricas eletroforticas. Nos animais faz
parte de 35 a 50% do total de protenas sricas.
A albumina sintetizada no fgado, como as demais protenas exceto as
imunoglobulinas, e catabolizada por tecidos metabolicamente ativos. Ela a maior reserva
orgnica de protenas e transporte de aminocidos.
Tambm, devido sua abundncia, a protena mais osmoticamente ativa,
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Globulinas
-globulinas: constituem a frao que mais rapidamente migra das globulinas, por isso o
nome alfa. Possui duas fraes: a rpida (1) e a lenta (2). A grande maioria destas
protenas sintetizada no fgado, e cada um dos diversos tipos possui atividade especfica.
Atuam no transporte de tiroxina, lipdios, insulina, cobre, hemoglobina, na inibio da tripsina,
quimiotripsina, trombina, como anticoagulante, proteases, etc. O seu decrscimo ocorre nas
hepatopatias, malnutrio, sndrome nefrtica; o seu aumento principalmente nas doenas
inflamatrias agudas.
-globulinas: compem-se das imunoglobulinas e suas fraes IgA, IgG, IgM, IgE. A
identificao e quantificao especfica destas imunoglobulinas requerem o uso de tcnica
imunoqumica sofisticada. A fonte das imunoglobulinas os plasmcitos, diferenciados a partir
de linfcitos sensibilizados por estimulao antignica, parte do processo imunolgico da
resposta humoral.
Influncias fisiolgicas
Idade e desenvolvimento
No feto, a concentrao de protenas totais e albumina progressivamente aumentam
com uma ligeira mudana nas globulinas e quase ausncia da frao de protenas -globulinas.
Nos ruminantes e eqinos ao nascimento normal, portanto esta ausncia ser suprida pela
ingesto do colostro materno; aps esta ingesto haver um aumento transitrio das protenas
totais. Em quase todos os animais h um aumento nas protenas totais, um decrscimo na
albumina e um aumento nas globulinas com o avanar da idade, e nos idosos as protenas
totais tornam a declinar.
Hormnios
Efeitos hormonais agem nas protenas sricas quando atuam no anabolismo ou
catabolismo protico. A testosterona, estrgeno e o hormnio do crescimento so geralmente
anablicos, aumentando as protenas. Do contrrio, a tiroxina e os corticides (tenuamente)
promovem uma reduo nas protenas.
Gestao e lactao
Geralmente durante a gestao h um decrscimo da albumina e um aumento das
globulinas, seguido de queda ps-parto nas espcies que possuem colostro. A lactao
promove mudanas semelhantes, devido ao consumo das reservas proticas e alta atividade
metablica.
Nutrio
As protenas do plasma so sensveis s influncias nutricionais, mas na maioria dos
casos torna-se difcil sua interpretao. Quando h depleo da dieta protica dos animais
ocorre hipoproteinemia e hipoalbuminemia.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
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9. 6. Bilirrubinas
Funo normal
As bilirrubinas so formadas atravs da degradao da hemoglobina. A hemoglobina
essencial para a manuteno da vida pois carreia e libera oxignio para os tecidos. Em torno
de 400 milhes de molculas de hemoglobina esto presentes num eritrcito. A hemoglobina
uma protena conjugada composta das fraes heme e globina. A frao heme sintetizada na
mitocndria eritrocitria, e somente produzida em clulas eritrides imaturas, at o estgio de
reticulcito. A sntese da frao globina ocorre em ribossomos no citoplasma de eritrcitos
nucleados. As diferenas nas sequncias de aminocidos das cadeias globina define a
variao morfolgica intra e inter-espcie.
A sntese final de hemoglobina na hemcia acontece com a penetrao do ferro a partir
da transferrina, com sua associao protoporfirina que sintetizada em grande parte da
glicina e succinil CoA nas mitocndrias, para formar o heme. Uma molcula de heme est
fixada a uma das cadeias do polipeptdeo globina e uma molcula final de hemoglobina
composta de quatro unidades heme/globina.
A hemoglobina liberada na forma livre quando ocorre hemlise, onde a unio entre a
hemoglobina e o estroma eritrocitrio quebra-se por este agente hemoltico. A hemoglobina
livre no plasma rapidamente decomposta (meia vida de 4 horas) por oxidao, liga-se
haptoglobina e rapidamente excretada pelos rins com hemoglobinria, ou destruida pelo SRE
(sistema retculo endotelial). O excesso livre oxidado em meta-hemoglobina, que se dissocia
e libera hematina. A hematina liga-se hemopexina e albumina sucessivamente, e estes
complexos so removidos pelos hepatcitos.
Nos macrfagos o ferro da frao heme e os aminocidos da frao globina so
reciclados para uso. A protoporfirina degradada em biliverdina pela heme microssomal
oxigenase, na presena de oxignio e NADPH. A biliverdina ento convertida a bilirrubina
pela bilirrubina redutase, na presena de NADPH. As aves excretam somente biliverdina, pois
no possuem bilirrubina redutase.
A bilirrubina liberada no plasma ligada albumina para o transporte at as clulas
hepticas, onde conjugada em cido glicurnico pela enzima UDP - glicuronil transferase. A
bilirrubina conjugada normalmente secretada atravs dos canalculos biliares e excretada
pela bile na luz intestinal. No trato intestinal a bilirrubina degradada por bactrias (a
antibioticoterapia pode mat-las) a urobilinognio para sua excreo via fezes, com reabsoro
parcial para a circulao geral e re-excreo biliar, no ciclo entero-heptico da bile. Pequenas
quantidades de bilirrubina conjugada e urobilinognio normalmente escapam re-excreo
heptica e so eliminadas na urina. A bilirrubina indireta no passa em condies normais para
a urina, devido ao alto peso molecular do complexo bilirrubina-albumina (carreador), mas so
circulantes e portanto tambm responsveis pela ictercia.
Ictercia
A ictercia pode ser detectada no exame fsico ou quando o plasma ou soro
examinado no laboratrio, e nestas condies h um valor de bilirrubina total acima de 1mg/dL.
A hiperbilirrubinemia sempre indica doena hepatobiliar ou hematopoitica. Entretanto, h
doenas hepticas e hematopoiticas no relacionadas com a ictercia, e as doenas nestes
sistemas podem ser ainda secundrias a outras doenas. A presena ou ausncia de ictercia
no pode ser avaliada com sentido diagnstico ou prognstico. Septicemia, ruptura vesical e
enterites algumas vezes podem causar disfuno heptica secundria, podendo ocorrer
ictercia.
Hiperbilirrubinemia
O aumento de bilirrubina, caracterizado pela ictercia, pode ser classificado quanto
sua origem de trs formas. Liberao de bilirrubina em grande quantidade na circulao: pr-
heptica; falha de conjugao: heptica e deficincia na secreo: ps-heptica.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Pr-heptica
Este tipo de ictercia causado quando h aumento de aporte de bilirrubina ao fgado,
causando uma sobrecarga conjugao heptica (figura 9.2). Os sinais clnicos mais
observados so urina e fezes escuras. O principal cuidado neste caso retirar a causa
hemoltica e deter bastante ateno ao quadro hematolgico do animal.
A causa principal a hemlise intravascular, que leva hemoglobinemia (plasma
avermelhado), gerando :
- bilirrubina no conjugada - hematcrito ou volume globular
- urobilinognio sanguneo e urinrio
- ou no da bilirrubina conjugada
Heptica
A ictercia heptica causada por uma disfuno heptica, com conjugao parcial da
bilirrubina pelos hepatcitos devido reduo na capacidade enzimtica (figura 9.3). Esta
leso acaba obstruindo os canalculos biliares, levando secundariamente colestase.
A causa principal a leso txica ou infecciosa, que leva ao comprometimento da
funo heptica, gerando:
- bilirrubina no conjugada devido disfuno
- da bilirrubina conjugada
- do urobilinognio circulatrio e urinrio. Pode no haver este aumento por
comprometimento do ciclo enteroheptico.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Ps-heptica
A ictercia ps-heptica ocorre por obstruo das vias biliares gerando uma colestase,
isto , um acmulo de bilirrubina conjugada (figura 9.4). Os sinais observados so esteatorria,
fezes claras e bilirrubinria acentuada.
A causa principal a leso dos canais biliares, que leva ao aumento acentuadoda:
- bilirrubina conjugada devido obstruo
- ou no da bilirrubina no conjugada, dependendo da leso hepatocelular causada pela
colestase compressiva.
- Na obstruo total o urobilinognio estar ausente.
- Observar sempre a histria e clnica do animal, para tentar diferenciar a etiologia ps-heptica
da heptica.
Anlise
A bilirrubina pode ser mensurada no soro ou plasma sanguneo por espectrofotometria.
A bilirrubina estvel a 4C por at 7 dias se no for exposta luz; cuidado fundamental no
acondicionamento desta amostra portanto envolver o tubo de colheita em papel alumnio. H
diferentes tcnicas para separar-se a bilirrubina indireta (no conjugada) da direta (conjugada),
variando segundo o kit de dosagem utilizado.
Severa hemlise pode atrapalhar as dosagens espectrofotomtricas, aumentando seus
valores. Um falso decrscimo ocorre quando h exposio luz (em torno de 50% em 1 hora),
e um falso aumento em amostras com lipemia. Valor normal em ces: 1,0 mg/dL.
No cavalo um fenmeno fisiolgico causa um problema na interpretao das
bilirrubinas. A anorexia ou jejum por 24 horas ou mais podem resultar em ictercia, que
causada em parte por metablitos (como cidos biliares) competindo com a bilirrubina pela
demanda dos hepatcitos.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
C. Pancreatite aguda
A pancreatite aguda nas espcies pode ser de varivel intensidade, causando desde
discreto edema at necrose do tecido pancretico. As causas desta patologia ainda no so
completamente conhecidas, e provavelmente sejam multifatoriais. Dentre os fatores incluem-
se obesidade, dieta desbalanceada e rica em gorduras, isquemia tecidual, refluxo biliar,
traumas abdominais, hipercalcemia e clculos pancreticos, hiperlipemia obstrutiva e agentes
infecciosos.
A liberao de enzimas proteolticas, glicolticas e lipolticas ativadas dos constituintes
pancreticos so o mecanismo principal da patognese da pancreatite aguda. Este processo
ativa diversas vias inflamatrias, como a via de complemento, cininas, coagulao, e sistema
fibrinoltico.
O diagnstico de pancreatite aguda feito pelos sinais de dor abdominal aguda,
vmitos, apatia e anorexia. Em associao ao hemograma, podem ser realizados exames
bioqumicos mais especficos. A hiperamilasemia ocorre somente aps 12 horas do incio do
processo, e pode ser um indicativo da injria das clulas acinares e da obstruo do ducto
pancretico. Entretanto as concentraes sricas de amilase no co podem aumentar por
causas extrapancreticas, devido as isoenzimas localizadas nos intestinos, rins, tero, ovrios
e testculos. Assim admite-se que somente um aumento de 3 a 4 vezes nos valores desta
enzima pode ser diagnstico para a pancreatite aguda.
As concentraes de lipase perduram por mais tempo elevadas, quando comparado
amilase. No entanto tambm h problemas na utilizao isolada desta enzima como recurso
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
diagnstico, j que o tecido renal e heptico tambm possuem estas isoenzimas. Deste modo
deve ser avaliado o aumento conjunto de lipase e amilase, e excluir ao mximo as causas
extrapancreticas deste aumento srico. Isto pode ser obtido com exames de funo renal e
heptica, associado a exame clnico criterioso. Como o pncreas produz um fator clarificador
do plasma, a lipoprotena lipase, na sua ausncia pode haver lipemia plasmtica evidente, que
pode ser relacionada necrose do tecido pancretico. Pode-se observar ainda na pancreatite
aguda, aumento de TGP ou ALT, fosfatase alcalina e colesterol.
D. Insuficincia pancretica
A pancreatite crnica resultado de repetidos ataques de pancreatite aguda com
destruio progressiva do tecido acinar e reposio com tecido conectivo fibroso, e pode levar
insuficincia funcional do pncreas, que se caracteriza por perda de peso, polifagia e
esteatorria. Estes sinais so decorrentes da insuficincia na produo de enzimas
pancreticas, devido destruio do tecido secretrio.
A amilase e lipase sricas podem estar aumentadas numa exacerbao inflamatria do
processo. No entanto, com a completa destruio do tecido acinar e conseqente fibrose,
provavelmente as enzimas estaro nos valores normais, ou mesmo reduzidas.
O exame das fezes constitui exame de triagem importante. O encontro de gorduras por
meio de colorao de Sudam e visualizao microscpica de fibras musculares mal digeridas
so indcios de disfuno pancretica.
H teste de funo pancretica de fcil realizao que podem fornecer importantes
informaes a cerca deste rgo.
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Teste de absoro
Avalia funo de liplise e absoro de lipdios. Deve ser realizado em animal sadio
paralelamente ao teste. Aps jejum de 12 a 24 horas, colher sangue com heparina e
centrifugar. Administrar ao animal 3mL/kg PV de leo de milho, colhendo amostras sanguneas
seriadas com heparina, aps 30 minutos, uma, duas e trs horas. Observar turbidez do plasma
aps centrifugao (figura 10.1):
Mantendo-se lmpido o plasma do animal teste, repetir a prova com administrao conjunta de
pancreatina (composto enzimtico pancretico com lipase).
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
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MDULO 3: CITOLOGIA
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
A. Obstruo linftica
A obstruo linftica influencia este processo em duas vias. Inicialmente a obstruo
linftica impede o retorno do lquido tissular para a circulao, resultando no aumento gradual e
contnuo de lquidos no tecido conjuntivo. Isto aumenta a presso hidrosttica do lquido
tissular. Ocorre tambm uma acumulao progressiva de protenas no tecido conjuntivo. As
protenas elevam a presso coloidosmtica do tecido conjuntivo, resultando numa tendncia
para atrair e reter mais gua. As causas podem incluir linfangite e linfadenoma, tumores e/ou
metstases, abcessos e extirpao cirrgica de cadeia linftica.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
perda excessiva de protenas na urina (distrbios renais), desnutrio protica, perda excessiva
de protenas pelo tubo digestivo e parasitismo.
A. Transudato puro
Caractersticas: lmpidos e incolores (ces e gatos), amarelados (herbvoros), pequena
quantidade de protena total (<2,5g/dL), poucas clulas nucleadas (CTCN<1.500/lL), pH
alcalino, densidade (<1.017), clulas predominantes: mesoteliais, poucos linfcitos e neutrfilos
ntegros e raros macrfagos e hemcias.
TABELA 11.2. Nomenclatura dos lquidos cavitrias de acordo com o local de formao
Cavidade abdominal Hidroperitnio ou ascite
Cavidade pleural ou torcica Hidrotrax
Pericrdio Hidropericrdio
Cavidade articular Hidroartrose
Bolsa escrotal Hidrocele
Espao subaracnide nervoso Hidrocfalo,lquor ou lquido cfalorraquidiano
Tecido conjuntivo Edema
B. Transudato modificado
A citologia do transudato modificado depende da sua origem, mas geralmente
apresenta neutrfilos no degenerados em pequena quantidade, clulas mesoteliais reativas,
pequenas quantidades de linfcitos e macrfagos, poucas hemcias. Pode ser denominado de
acordo com o local de formao (tabela 11.3).
Caractersticas: leve a moderadamente turvo, quantidade de protena total moderada (2,5 a
7,0g/dL), baixa a moderada celularidade (CTCN 1.0007.000/L), clulas predominantes:
mesoteliais, poucos linfcitos e neutrfilos ntegros, macrfagos e hemcias.
Causas: aumento da pressso hidrosttica capilar: estase venosa portal, ruptura de bexiga,
ureter e uretra, insuficincia cardaca, ruptura do ducto biliar, neoplasias, hemorragias intra-
cavitrias, bloqueio das veias que drenam os tecidos, toro pulmonar. Bloqueio do sistema
linftico: massas, tumores e outros.
QUADRO 11.3. Nomenclatura dos transudatos modificados de acordo com o local de formao
Cavidade abdominal Hemoperitnio, uroperitnio, quiloperitnio
Cavidade pleural ou torcica Hemotrax, quilotrax
Pericrdio Hemopericrdio
Cavidade articular Hemartrose
Bolsa escrotal Hemocele
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Peritonite Infecciosa Felina (PIF): aguda: pouco quimiotactante - fludo com poucas clulas,
alta protena, incolor, viscoso, neutrfilos degenerados, macrfagos, plasmcitos, cls.
mesoteliais e linfcitos; crnica: menor quantidade de neutrfilos, maior de outras clulas
C. Exsudato
O exsudato possui formao ativa e origem inflamatria, com presena de substncias
vasoativas e quimiotticas, que aumentam respectivamente o contedo de protenas e clulas
do lquido que so as substncias vasoativas - aumento da permeabilidade vascular (
protena), e substncias quimiotactantes - aumento de clulas.
Caractersticas: turvos, cor: branca, rosa, mbar, vermelha, etc, protena total (>3,0g/dL),
densidade (>1020), pH cido, clulas nucleadas (CTCN>7.000/L), geralmente coagulam,
citologia: predominncia de neutrfilos, macrfagos e clulas mesoteliais; bactrias podem
estar presentes. Exsudatos podem ser divididos em:
A - Spticos: agentes bacterianos, fngicos, etc.
B - Asspticos: uroperitnio, peritonite biliar, pancreatite necrtica e neoplasias.
11. 4. Abdominocentese
A Abdominocentese um exame clnico complementar, de grande valia para
estabelecimento de um diagnstico. Porm, assim como outros exames, no deve ser
executada sem prvio exame clnico completo, pois o insucesso em uma colheita no significa
ausncia de anormalidades, e, ao contrrio, pode ser um sinal para a realizao de outros
exames clnicos complementares.
Por se tratar de um exame relativamente fcil de ser efetuado, o clnico veterinrio
deve se habituar sua realizao e ter sempre mo os equipamentos necessrios colheita
e acondicionamento do contedo abdominal, para encaminhamento laboratorial.
Por meio de uma abdominocentese possvel diagnosticar vrios tipos de alteraes
do lquido abdominal, podendo ser de origem traumtica (sangue, contedos digestivos, urina),
infecciosa (contedo purulento), inflamatria (fibrina), entre outras. Este exame mais
comumente utilizado para confirmao do diagnstico de peritonite, contribuindo tambm para
o estabelecimento do prognstico. Para a execuo de uma abdominocentese, necessrio
que se tenha uma boa conteno do animal pois o local de eleio para a colheita a regio
xifide, podendo ocorrer acidentes tanto para o veterinrio e seus auxiliares, quanto para o
animal.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
Pequenos animais
A paracentese abdominal em pequenos animais com propsito diagnstico tem sido
muito utilizada, e possui uma taxa de sucesso em torno de 50%. Freqentemente a agulha
entope com o contato de vsceras ou omento. Assim, somente grandes volumes de fludo
abdominal (5 a 7mL) podem ser detectados por este mtodo. Para otimizar este meio
diagnstico, utilizado a dilise ou lavagem abdominal com auxlio de um cateter especial.
Com esta tcnica, o ndice de sucesso em detectar o fludo aumenta para em torno de 80%,
podendo detectar volumes de 1,0mL/kg PV. Alm do aumento de volume de trabalho, o cateter
tem vantagem na retirada do lquido porque possui calibre maior, e com fenestraes laterais
na poro final.
A parede abdominal do paciente deve ser tricotomizada, e pode ser aplicado
anestsico local. Com o paciente em decbito dorsal, realiza-se uma inciso na linha alba com
auxlio de bisturi, caudalmente ao umbigo uns 2 a 3cm, aproximadamente. O cateter ento
introduzido atravs da parede abdominal, na direo caudal, utilizando-se uma seringa de
20mL para retirada do material. Se no for obtido aspirado com este procedimento, 22 mLl/kg
de soluo fisiolgica pode ser infundido para o abdome. O paciente pode ser levemente
movimentado para os decbidos laterais para que o fludo se disperse. O lavado final colhido
por drenagem gravitacional, no sendo necessrio a colheita do total de lquido infundido.
Grandes animais
Deve-se ter em mente que os bovinos tem uma capacidade muito acentuada de
restringir processos inflamatrios a nvel abdominal, levando, na maioria das vezes, a quadros
circunscritos de peritonite, dificultando a colheita deste material. Ao contrrio, nos eqinos a
peritonite tende a ser difusa, mas mesmo assim a grande deposio de fibrina pode impedir a
sada de contedo representativo. Aps a conteno, deve-se efetuar tricotomia ( 20 x 20cm)
e aps antissepsia do local, com tintura de iodo, iodo povidine ou outro desinfetante disponvel.
Pode ser feita uma anestesia local ao redor da regio, porm dependendo da ndole do animal
pode no ser preciso.
Durante a colheita, use sempre luvas cirrgicas, pois alm de proteo pessoal, este
procedimento invasivo e pode levar a uma infeco iatrognica. Use tambm agulha e
trocarter estreis, pelo mesmo motivo. As agulhas devem ser longas e de calibre grosso (40x15
ou 40x20), podendo tambm ser usado trocarter ou mesmo uma sonda de teto (com ponta
romba e aberturas laterais), sendo necessrio neste caso a perfurao da pele por meio de um
bisturi. Tenha em mos uma seringa para suco, pois muitas vezes s assim se recuperar
algum contedo. Separe tambm pelo menos dois vidros pequenos identificados com etiqueta
(um sem anticoagulante e outro com EDTA), para que se possa visualizar se ocorre ou no
coagulao do contedo, e tambm para poder enviar o material ao laboratrio (dentro de
isopor com gelo). Se necessrio, pode-se efetuar esfregao em lmina, dependendo do
aspecto do contedo coletado. No esquecer de referir o uso de antimicrobianos, caso o
material seja enviado para cultivo.
O local exato de colheita dever ser escolhido em funo da observao do animal (por
exemplo: pode haver irregularidades no aspecto do abdome, sugerindo presena de contedo
abdominal). Geralmente a colheita feita tomando-se como referncia a cicatriz umbilical,
adiantando-se 4 a 5 dedos e desviando-se para a direita 4 a 5 dedos. Nesta regio as chances
de sucesso na colheita so maiores ( a regio mais baixa do abdome).
O sucesso da colheita ocorre quando se recupera o contedo abdominal. Porm sabe-
se que nos bovinos e eqinos sadios a quantidade de lquido existente de apenas alguns
mililitros, sendo, portanto muito frequente a ausncia de lquido abdominal no ato da colheita,
sem que isso seja considerado um insucesso.
Colheita do lquor
Finalidade do exame: Recurso complementar na avaliao do sistema nervoso central (SNC).
4
Verifique antes se o uso de animais para esta aula possui aprovao no Comit de tica da
sua Instituio.
96
Manual de Patologia Clnica Veterinria
Material necessrio: Agulha hipodrmica - tamanho 25x7 ou 30x7 (ces), *agulha especfica
para puno liqurica, Agulha metlica com mandril - tamanho 80x10 a 100x10 (bovinos),
anestsicos para a pr-anestesia e anestesia geral, material para tricotomia, cool iodado, trs
frascos para o acondicionamento do lquor.
1. Atingida a cisterna magna o lquor fluir pela agulha e ser acondicionado em trs frascos
separadamente. A quantidade de lquor colhida dever ser aproximadamente de 1mL
para cada 5Kg de peso vivo. Em grandes animais cerca de 5mL so suficientes para o
exame. Remeter o material imediatamente ao laboratrio.
2. A colheita do lquor deve ser realizada por profissional experiente, e aps adequada sedao
ou tranquilizao do animal. Como em parte das vezes, principalmente em grandes
animais, o animal em questo apresenta-se em decbito e depresso, normalmente
nestes casos uma boa conteno pode ser mais adequada que os riscos anestsicos.
3. O local de puno medida importante e deve ser escolhido previamente segundo a espcie
animal e a indicao clnica (tabela 11.5), ou seja, se a localizao do processo
patolgico raquiana, meningo-enceflica ou craniana. Colheitas em diferentes locais
de puno podem fornecer diferentes amostras.
4. Os cuidados gerais envolvem o preparo do animal na sedao, se necessrio, conteno,
tricotomia local e antissepcia. O lquor deve ser colhido com agulha apropriada para a
espcie e porte do animal, e a colheita realizada em trs frascos identificados e
numerados, se possvel um deles com anticoagulante. Como a quantidade de lquor
obtida pequena e o risco de contaminao com sangue durante a colheita alto, a
colheita sequencial em trs frascos minimiza estes riscos.
5. O lquor, por conter clulas e outras estruturas de rpida degenerao, deve ser processado
imediatamente aps a colheita, num perodo mximo em torno de trinta minutos.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
MDULO 4: HEMOTERAPIA
12.1. Introduo
Desde os primeiros relatos de transfuses sangneas no sculo XVII, quando se
transfundia sangue heterlogo na tentativa de se alterar o comportamento de quem o recebia,
a medicina transfusional tem evoludo muito. Hoje as indicaes para a transfuso de sangue
total ou de um de seus componentes so a necessidade do restabelecimento da capacidade de
transporte de oxignio pelo sangue, deficincias na hemostasia, transferncia de imunidade
passiva e hipoproteinemia, alm da hipovolemia no responsiva ao tratamento convencional.
Atualmente, a teraputica transfusional com componentes especficos do sangue preferida ao
uso rotineiro de transfuso com sangue total. Esta atitude no apenas conserva os estoques de
sangue, uma vez que, cada unidade doada pode beneficiar diversos pacientes, mas tambm
permite que sejam transfundidas grandes quantidades de um determinado componente que o
paciente necessite, diminuindo o risco de sobrecarga circulatria.
Ces
Foram identificados vrios tipos sangneos em ces. Estes compreendem os AEC
(antgeno eritrocitrio canino) 1 (1.1, 1.2, 1.3), 3, 4, 5, 6, 7, 8. Os tipos sangneos que tm o
maior potencial antignico so o AEC 1.1, 1.2 e 7. Transfuso de sangue tipo AEC 1.1 positivo
em um paciente com AEC 1 negativo resulta na formao de aloanticorpos anti-AEC 1.1,
diminuindo a sobrevida das hemcias transfundidas. Alm disso, uma segunda transfuso com
AEC 1 positivo, resultar em reao transfusional hemoltica imuno-mediada aguda severa.
Similar a incompatibilidade do AEC 1.1, a transfuso de AEC 1.2 em um co negativo para
AEC 1, mas que apresenta aloanticorpos contra AEC 1.2, causa uma diminuio da meia vida
das hemcias transfundidas para 12 horas. Em contraste, ces que so negativos para AEC 7
podem possuir anticorpos naturais contra AEC 7, porm a sua importncia ainda discutida.
Por essas razes o doador ideal seria o co negativo para AEC 1.1, 1.2 e 7.
Gatos
Os gatos possuem apenas trs grupos sangneos: A, B e AB, porm, possuem altos
ttulos de anticorpos naturais, sendo estes responsveis por reaes transfusionais hemolticas
severas na primeira transfuso ou em filhotes de fmeas primparas. A freqncia dos tipos de
sangue em gatos varia de acordo com a raa e localizao geogrfica, mas a maioria dos
animais (>95%) so do tipo A. O tipo sanguneo B tem uma prevalncia de aproximadamente
5% da populao total, porm essa incidncia aumenta em animais de raa pura, sendo que na
raa British shorthair h uma prevalncia de 77%. A maioria dos gatos tipo B apresenta grande
quantidade de anticorpos contra o sangue tipo A, sendo que uma transfuso de tipos
sanguneos diferentes nestes animais pode acarretar uma severa reao hemoltica aguda e
irreversvel. A meia-vida das hemcias transfundidas neste caso de uma hora. J nos gatos
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
tipo A recebendo sangue tipo B, a meia-vida dessas clulas de dois dias, sendo a transfuso
inefetiva. Gatos AB aparentemente, no possuem anticorpos contra os tipos sanguneos A e B.
importante lembrar que com o aumento de gatos de raas a incidncia de reaes
transfusionais imuno-mediadas nesta espcie tende a aumentar. Desta forma, a tipificao
sangnea e/ou a prova de reao cruzada constituem procedimentos indispensveis antes de
qualquer transfuso sangunea nesta espcie.
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Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Plasma
A quantidade de plasma requerido para tratamento de hipoproteinemia/
hipoalbuminemia pode ser calculada atravs da frmula descrita no quadro que segue abaixo.
Porm, este tratamento considerado uma soluo emergencial, no dispensando o suporte
nutricional ao paciente. Ainda, o volume aplicado seguindo-se a frmula acima pode resultar em
sobrecarga circulatria, uma vez que o lquido aplicado, devido a sua presso coloidosmtica,
sofre redistribuio para o leito extravascular. Em emergncias ou quando o paciente no
responde bem a diurticos na diminuio do edema perifrico pode-se fazer o uso de 10
15mL/kg do plasma, havendo em ces uma resposta imediata satisfatria. Ces que no
ingeriram o colostro podem-se beneficiar com a aplicao de plasma para aumentar a imunidade
passiva na dose de 6 a 10mL/kg em uma nica aplicao.
Em pacientes com distrbios hemostticos, o objetivo controlar o sangramento. O
plasma fresco congelado e o plasma congelado so administrados em ces e gatos na dose de
6 a 10mL/kg, devendo ser repetido a cada 8 a 12 horas at o trmino do tratamento. O
concentrado de plaquetas deve ser administrado na dose de 5mL/kg. Este volume aumenta a
3
contagem plaquetria em 5.000 a 10.000 plaquetas/mm .
no sangue = 0,6 ces e gatos. OBS: a mesma frmula pode ser utilizada substituindo-se o valor da PTP (protena total
101
Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
70% o risco de contaminao bacteriana da bolsa exposta, alm de perda funcional dos
elementos sangneos. Em ces e gatos a velocidade de administrao deve ser muito lenta
nos primeiros 30 minutos (0,25 a 0,50mL/kg). Caso o paciente no apresente nenhuma reao,
pode-se aumentar a velocidade para 4 a 5mL/kg/hora, se o animal estiver desidratado at 10 a
15mL/kg/hora. Em animais cardiopatas ou nefropatas deve-se respeitar a velocidade de 1 a
2mL/kg/hora. J em hemorragias severas a velocidade de infuso pode chegar a 22mL/kg/hora.
102
Manual de Patologia Clnica Veterinria
leuccitos e plaquetas.
A prova de reao cruzada dividida em maior e menor. Na reao cruzada maior, as
hemcias do doador so testadas com o plasma do receptor para verificar a presena de
anticorpos no receptor contra as hemcias do doador. Esta prova a mais importante, devendo
ser sempre compatvel, pois em uma reao incompatvel todas as hemcias transfundidas
sero destrudas. J na prova menor testa-se as hemcias do receptor com o plasma do
doador para verificar a existncia de anticorpos no plasma do doador contra as hemcias do
receptor. usada concomitantemente com a anterior, principalmente na segunda transfuso,
porm menos importante quando se utiliza papa de hemcias, devido pequena quantidade
de plasma do doador no receptor (paciente). Porm, se a transfuso for de plasma ou sangue
total importante a realizao da prova de reao cruzada.
A incompatibilidade manifesta-se por hemlise ou aglutinao, sendo que a aglutinao
deve ser avaliada macro e microscopicamente.
103
Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
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Manual de Patologia Clnica Veterinria
Fibrinognio Plasmtico 200 400 50 300 300 700 100 400 100 500 100 400 100 500
(mg/dL)
Protena Total 6.0 8.0 6.0 8.0 7.0 8.5 5.8 8.7 6.0 7.5 6.0 7.5 6.0 8.0
(g/dL)
Plaquetas 200 500 300 800 100 800 100 350 300 600 300 600 100 900
(x103)
Reticulcitos 0 1.5 0 0.4 (Ag)
(%) 1.4 10.8 (P)
Fonte: SCHALMs Veterinary Hematology (2000).
105
Lopes, Biondo e Santos. Santa Maria, 2007
BISTNER, S.I., FORD, R.B. Terapia com componentes sanguneos, In: Manual de
Procedimentos Veterinrios e Tratamento de Emergncias. 6. ed. So Paulo: Roca, 1996.
p. 535-546.
COLES, E.H. Veterinary pathology. 4th ed. Philadelphia: W.B. Saunders, 1986. 486 p.
COUTO, C.G. Anemia In: NELSON, R.W., COUTO, C.G. Small Animal Internal Medicine. 2nd
ed. St. Louis: Mosby, 1998. p. 1160-1173.
CUNNINGHAM, J.G. Tratado de fisiologia veterinria. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan,1993. 454 p.
DUNCAN, J.R., PRASSE, K.W., MAHAFFEY, E. Veterinary laboratory medicine. 4th ed.
Iowa: Ames, 2003. 450 p.
FELDMAN, B.F., SINK, C.A. Practical Transfusion Medicine for the Small Animal Practitioner.
In: ______. Practical Transfusion Medicine for the Small Animal Practitioner. Jackson:
Teton NewMedia, 2006, p. 1-111.
FELDMAN, B.F., ZINKL, J.G., JAIN, C.N. Schalms veterinary hematology. 5th ed.
Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 2000.1344 p.
HARRELL, K., PARROW, J., KRISTENSEN, A. Canine transfusion reactions - Part II:
Prevention and treatment. Comp Contin Educ Pract Vet, v.19, n.2, p.193-199, 1997.
______. Canine transfusion reactions. Part I: Causes and consequences. Comp Contin Educ
Pract Vet, v.19, n.2, p.181-190, 1997.
HOSKINS, J.D. Pharmacologic Principles. In: ______. Geriatrics & Gerontology of the dos
and cat. 2nd ed., Missouri: Saunders, 2004. p.415.
HOWARD, A. et al. Transfusion practices and costs in dogs. J Am Vet Med Assoc, v.201, n.11,
p.1697-1701, 1992.
HUMPHRIES, J.E. Transfusion therapy in acquired coagulopathies. Hematol Oncol Clin North
Am, v.8, n.6, p.1181-1196, 1994.
HUNT, E., MOORE, J.S. Use of blood and blood products. Vet Clin North Am Food Anim
Pract, v.6, n.1, p.133-147, 1990.
JAIN, C.N. Essential of veterinary hematology. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. 417 p.
th
______. Schalms veterinary hematology. 4 ed. Philadelphia: Lea & Febiger, 1986. 1221 p.
KANEKO, J.J., HARVEY, D.W., BRUSS, W.L. Clinical biochemistry of domestic animals. 5th
ed. San Diego: Academic Press, 1997. 932 p.
KRISTENSEN, A.T., FELDMAN, B.F. Transfusion medicine. Vet Clin North Am Small Anim
Pract, v.25, n.6, p.1231-1487, 1995.
LUNDBERG, G.D. Practice parameter for the use of fresh-frozen plasma, cryoprecipitate and
platelets. J Am Med Assoc, v.271, n.10, p.777-781, 1994.
MEYER, D.J., COLES, E., RICH, L.J. Veterinary laboratory medicine. Philadelphia: W.B.
Saunders, 1992. 350 p.
nd
MEYER, D.J., HARVEY, J.W. Veterinary laboratory medicine. 2 ed. Philadelphia: W.B.
106
Manual de Patologia Clnica Veterinria
107