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517-Texto Do Artigo-1605-4-10-20170827 PDF
517-Texto Do Artigo-1605-4-10-20170827 PDF
Journal homepage: Scire Salutis, Aquidabã, v.3, n.1,
www.arvore.org.br/seer
Out, Nov, Dez 2012, Jan, Fev, Mar
2013.
ESTUDO COMPARATIVO DE TÉCNICAS
PARASITOLÓGICAS BASEADA NO PRINCÍPIO DE ISSN 2236‐9600
SEDIMENTAÇÃO ESPONTÂNEA (HOFFMAN) E
PARASITOKIT® SECTION: Articles
RESUMO TOPIC: Biomedicina
As parasitoses, entre as quais se destacam as enteroparasitoses, são mais
frequentes na população mais carente. Diante de várias metodologias conhecidas
para realização do exame parasitológico de fezes para identificação de cistos,
protozoários, ovos e larvas de helmintos dos parasitos intestinais, e do surgimento
DOI: 10.6008/ESS2236‐9600.2013.001.0001
de novas técnicas, o presente trabalho tem como objetivo avaliar o grau de
concordância de um novo teste (Parasitokit®) com base em uma metodologia de
reconhecida eficiência para o diagnóstico de helmintos e protozoários, em relação a
outro método tradicionalmente utilizado em Análises Clínicas (Hoffman, Pons e
Janner - HPJ). A técnica do Parasitokit® tem como vantagem o dinamismo na
confecção e a organização no que diz respeito ao menor espaço utilizado para a Lorena Mota Lopes Sant'Anna
preparação e leitura do exame; o método de HPJ requer maior volume de vidraria Universidade Tiradentes, Brasil
na bancada para a confecção e leitura dos exames. Foram avaliadas quatrocentas http://lattes.cnpq.br/7135441400640283
amostras no período de doze meses e a análise dos dados foi feita por meio de lorenamotalopes@hotmail.com
estatística descritiva. O método do Parasitokit® demonstra fácil manuseio, custo
baixo e pequena demanda no espaço físico, apresentando um grau de não Fernanda de Jesus Oliveira
conformidade insignificante já que ocorreu concordância em 99,5% em relação ao Universidade Tiradentes, Brasil
método de HPJ que utiliza o cálice de sedimentação. http://lattes.cnpq.br/2064553152351510
feh.nanda.oliver@gmail.com
PALAVRAS-CHAVE: Diagnóstico; Fezes; Parasitokit®.
Cláudia Moura de Melo
Universidade Tiradentes, Brasil
http://lattes.cnpq.br/0905716723973397
COMPARATIVE STUDY OF PARASITOLOGICAL claudiamouramelo@hotmail.com
TECHNIQUES BASED ON THE PRINCIPLE
SPONTANEOUS SEDIMENTATION (HOFFMAN) E
PARASITOKIT®
ABSTRACT
The parasites, among which stand out the parasitic infections, are more common
among the poor population. In front of many known methodologies in making the
parasitological examination of feces for identification of cysts, protozoa, eggs and
helminth larvae of the intestinal parasites, and the emergence of new techniques,
the present work aims at evaluating the agreement degree of a new test
(Parasitokit®) based in a methodology recognized efficiency to the diagnosis of Received: 12/09/2012
protozoa and helminths, compared to another method traditionally used in Clinical Approved: 20/02/2013
Analysis (Hoffman, Pons and Janner - HPJ). The Parasitokit® technique has as an Reviewed anonymously in the process of blind peer.
advantage the dynamism in the making and organization with respect to the smaller
space used for the preparation and reading exam; HPJ method requires a larger
volume of glassware on the bench for making and reading tests. Four hundred
samples were evaluated in twelve months and the data analysis took place by
means of descriptive statistics. The Parasitokit® method demonstrates easy
handling, low cost and demand in the physical space, presenting a negligible degree
of non-compliance, because agreement occurred in 99.5% compared to the HPJ
method that uses the cup of sedimentation.
KEYWORDS: Diagnostic; Feces; Parasitokit®.
Referencing this:
SANT'ANNA, L. M. L.; OLIVEIRA, F. J.; MELO, C. M..
Estudo comparativo de técnicas parasitológicas
baseada no princípio de sedimentação espontânea
(Hoffman) e Parasitokit®. Scire Salutis, Aquidabã, v.3,
n.1, p.6‐15, 2013. DOI:
http://dx.doi.org/10.6008/ESS2236‐
9600.2013.001.0001
Scire Salutis (ISSN 2236‐9600)
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Estudo comparativo de técnicas parasitológicas baseada no princípio de sedimentação espontânea (Hoffman) e Parasitokit®
INTRODUÇÃO
REVISÃO TEÓRICA
Parasitos intestinais apresentam ampla distribuição geográfica tanto no Brasil quanto nos
demais países em desenvolvimento, sofrendo variações de acordo com as condições de
saneamento básico, nível socioeconômico, grau de escolaridade, idade e hábitos higiênicos
(SATURNINO et al., 2003). Métodos laboratoriais para diagnosticar doenças transmitidas por
parasitas são de grande importância pela grande frequência de infecções enteroparasitárias que
comprometem a saúde humana mundial (MARIANO et al., 2005).
Os mais prevalentes agravos infecciosos são causados por infecções enteroparasitárias e
o número de infectados a nível mundial é de aproximadamente 3,5 bilhões de pessoas. No Brasil,
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130 milhões de habitantes são acometidos por alguma espécie de parasito (SHIMIZU et al., 2003).
Desta forma, o exame parasitológico de fezes é um dos exames de rotinas mais realizado em
Laboratório de Análises Clínicas. O presente trabalho propõe-se analisar qualitativamente o grau
de concordância entre o Parasitokit® e a técnica de sedimentação espontânea de Hoffman, Pons e
Janer (1934), enfocando a eficácia diagnóstica e operacionalidade.
O estudo coprológico ou exame de fezes visa o estudo das funções digestivas;
abrangendo as provas de digestibilidade macroscópico e microscópico, exame químico, pesquisa
de sangue oculto e outras provas, cujos resultados permitem estabelecer determinadas síndromes
coprológicas. Como exames complementares, ainda restam os protoparasitológicos e a
coprocultura, aliados aos exames radiográficos, bioquímica do sangue, tubagem gástrica,
duodenal e todo o arsenal da moderna propedêutica armada ao alcance do clínico especializado.
A principal função do trato alimentar é prover o organismo de um contínuo suprimento de água,
eletrólitos e nutrientes, devendo o alimento ser conduzido ao longo do tubo digestivo a uma
velocidade apropriada para que as funções digestivas e absortivas se realizem. Sofrendo
influência poderosa do psiquismo e comandada pelo sistema nervoso, desempenha suas funções
juntamente com o sistema endócrino (VALLADA, 1998).
Em análises coproparasitológicas, a recuperação e a identificação de parasitos em
diferentes estágios de desenvolvimento podem ser viáveis com a utilização de alguns métodos de
concentração, tais como Sedimentação Espontânea, Ritchie e Coprotest. Existem também os
específicos, sendo esses destinados à pesquisa e levantamentos epidemiológicos, como os
métodos de Baermann-Moraes, Faust, Graham e Kato-Katz (GRAEFF et al., 1997).
Dentre os métodos listados acima, os mais solicitados na prática médica para diagnóstico
clínico na rotina laboratorial são os de Sedimentação Espontânea e a Baermann-Moraes que têm
como objetivo principal a pesquisa de ovos/larvas de helmintos e cistos de protozoários (DE
CARLI, 2007). A maioria dos serviços de saúde voltados para diagnósticos, no entanto, adota
apenas a Sedimentação espontânea como metodologia, devido ao seu amplo espectro na
observação/identificação de espécies parasitas e ao seu baixo custo quando comparada com a de
Baermann-Moraes. Porém, apesar da técnica de Sedimentação Espontânea não necessitar de
centrifugação, dispensar reagentes e ainda economizar nas vidrarias, a água fria envolvida no
método não proporciona uma boa migração das larvas, exceto em infecções maciças (DE CARLI,
2007).
Geralmente a concentração de ovos e cistos das fezes visa o seu achado, de modo mais
rápido, nas infecções, mesmo ligeiras, em que o exame direto é negativo. Só o fato da existência
de numerosas técnicas de enriquecimento de ovos e cistos prova que nenhuma delas é de todo
eficiente. Via de regra, estas técnicas servem para concentrar os cistos de protozoários, e vice-
versa. O método de sedimentação espontânea por Hoffman, Pons e Janner (1934) é indicado
principalmente para pesquisa de ovos de Schistosoma mansoni, serve também para a de ovos e
larvas de outros vermes, sendo o mesmo de fácil execução e baixo custo.
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ocorra a infecção, a clássica tríade epidemiológica das doenças parasitárias, que são: as
condições do hospedeiro apresentando fatores predisponentes como idades, condição nutricional,
fatores genéticos, culturais, comportamentais e profissionais, o parasito quando apresentando
resistência ao sistema imune do hospedeiro e os mecanismos de escape vinculado a
transformação bioquímicas e biológicas verificada ao longo do ciclo do parasito, e o meio
ambiente quando associado as condições do hospedeiro e do parasito.
METODOLOGIA
Uma fração de cada amostra fecal foi submetida a processamento pelo Parasitokit®. Cada
unidade do referido Kit contêm: sistema de filtragem, tubo cônico, bastões de vidro (Figura 1), uma
estante que comporta 36 Parasitokit®. O tubo cônico tem capacidade para 11 ml de volume. Deste
sedimento foi retirada uma alíquota de 700 µl, para subsequente observação em microscopia ótica
(100X). Uma segunda fração de cada amostra fecal foi submetida à técnica coproparasitológica de
Hoffman, Pons e Janer (1934) (Figura 2), considerada padrão ouro por ser a técnica mais utilizada
nos laboratórios de parasitologia pelo fato de apresentar fácil manuseio, custo baixo e detectar
cisto de protozoários, larva e ovos de helmintos em amostras formada, pastosa e semi-pastosa.
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Estudo comparativo de técnicas parasitológicas baseada no princípio de sedimentação espontânea (Hoffman) e Parasitokit®
Figura 2: Cálice de Sedimentação - 150 ml; Tamis. Fonte: Laboratório Bio Saúde
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Foi avaliado o espaço físico para o experimento, onde houve simulação de ocupação deste
aplicado às duas técnicas em bancada do setor de Parasitologia do Bio Saúde Laboratório de
Análises Clínicas. A bancada de trabalho com 1m de comprimento por 0,40 m de profundidade
comportou um microscópio de luz e cinco taças com capacidade de 150 ml para Sedimentação
Espontânea, enquanto no caso do Parasitokit®, houve espaço para abrigar uma galeria contendo
até 36 aparelhos (Figura 3).
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SANT'ANNA, L. M. L.; OLIVEIRA, F. J.; MELO, C. M.
trinta e seis aparelhos de Parasitokit®. Com a otimização espacial da bancada para manipulação,
diminuem as chances de acidentes de trabalho, pois os tubos cônicos são acondicionados em
galerias contendo tampas bem vedadas, podendo até serem utilizados em trabalhos de campo
para estudos epidemiológicos ou preparados em Unidades de coletas distantes do laboratório-
sede. O Parasitokit®, de acordo com levantamento de custo, apresentou vantagem sobre os
materiais utilizados na técnica de Hoffman em 42% (Tabela 1).
Tabela 1: Levantamento de custos dos materiais utilizados nas Técnicas de Hoffman, Pons e Janer e no
Parasitokit®.
MATERIAIS CUSTO POR UNIDADE (R$) HOFFMAN PARASITOKIT®
Bastão de vidro 1,40 X X
Cálice de plástico (200 ml) 1,80 X
Tamis 0,50 X
Parasitokit® 1,20 X
CUSTO TOTAL 3,70 2,60
Fonte: Labovida: Materiais para laboratório.
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Estudo comparativo de técnicas parasitológicas baseada no princípio de sedimentação espontânea (Hoffman) e Parasitokit®
100%
90%
80%
70% 64% 64%
60%
50%
40% 36% 36%
30%
20%
10%
0%
Hoffman Parasitokit
Positivas Negativas
Figura 4: Percentagem das amostras negativas e positivas para ambas as técnicas: Hoffman, Pons e Janer
e Parasitokit®.
Para ovos de helmintos na técnica de Hoffman, Pons e Janner, das 400 amostras
analisadas, 22 apresentaram ovos de Ascaris lumbricoides (5,5%), 18 apresentaram ovos de
Ancylostomidae (5%), 3 apresentaram ovos de Trichuris trichiura (0,75%), 2 apresentaram ovos
de Schistosoma mansoni e Enterobius vermiculares (0,5%). Apenas houve não conformidade em
duas amostras, onde uma apresentou positiva para ovo de Ascaris lumbricoides no Hoffman e
negativo no Parasitokit® e a outra, ao contrário, apresentou positiva para ovo de Ascaris
lumbricoides no Parasitokit® e negativo no Hoffman, mostrando que o nível de discordância entre
as técnicas não foi estatisticamente significativo (Figura 5).
4,00%
3,00%
2,00%
0,00%
Ascaris lumbricoides Ancylostomatidae Schistosoma Trichuris trichiura Enterobius
mansoni vermiculares
Hoffman Parasitokit
Figura 5: Percentagem de positividade para ovos de helmintos nas técnicas de Hoffman e Parasitokit®.
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SANT'ANNA, L. M. L.; OLIVEIRA, F. J.; MELO, C. M.
10%
8%
6%
4%
2,3% 2,3%
2% 1,0% 1,0%
0%
Entamoeba coli Endolimax nana Entamoeba Giardia lamblia Iodamoeba buchilli
histolytica/dispar
Hoffman Parasitokit
Figura 5: Percentagem de positividade para cisto de protozoários nas técnicas de Hoffmann, Pons e Janer
e Parasitokit®.
CONCLUSÕES
Diante dos dados coletados, conclui-se que os métodos de Hoffman, Pons e Janer e do
Parasitokit® apresentam um alto grau de concordância, sendo que a vantagem deste último é a
otimização do espaço físico para manuseio das amostras e para a leitura das mesmas, podendo
até mesmo ser transportados. Outra vantagem reside no descarte de equipamentos utilizados
uma vez que ambos são provenientes da mesma matéria prima, porém o Parasitokit® possui um
volume menor que o cálice e o tamis, causando assim um menor impacto ambiental.
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