HISTOLOGIA 

● O​ ​que​ ​é​ ​Histologia?

Estudo​ ​das​ ​células​ ​que​ ​constituem​ ​os​ ​tecidos​ ​e​ ​como​ ​essas​ ​estruturas​ ​se​ ​organizam​ ​para
formar​ ​os​ ​respectivos​ ​órgãos.

Métodos​ ​de​ ​Estudo​ ​De​ ​Microscopia 

● 1595​ ​:​ ​Primeiro​ ​projeto​ ​de​ ​microscópio​ ​criado​ ​(Zacharias​ ​Jansen​ ​e​ ​seu​ ​pai);

● 1663-1665​ ​:​ ​Robert​ ​Hooke​ ​observou​ ​estruturas​ ​ocas​ ​e​ ​as​ ​nomeou
“células”-cavidade-​ ​(na​ ​realidade​ ​eram​ ​mortas);

● 1674​:​ ​Antony​ ​Leeuwenhoek​ ​consegue​ ​a​ ​partir​ ​de​ ​modelos​ ​microscópicos​ ​estruturas
humanas​ ​(pele,​ ​espermatozoides…);

● Microscópio​ ​de​ ​Luz​ ​(Óptico​ ​ou​ ​Fotônico)​ :​ ​ ​realizado​ ​atualmente​ ​em​ ​diversos​ ​tipos
de​ ​exames,​ ​pelo​ ​processo​ ​de​ ​transiluminação.​ ​O​ ​Micrótomo​ ​é​ ​utilizado​ ​para​ ​que​ ​o
tecido​ ​seja​ ​cortado​ ​em​ ​finíssimas​ ​lâminas​ ​propiciando​ ​a​ ​passagem​ ​de​ ​luz​ ​e​ ​desta
forma​ ​o​ ​estudo​ ​das​ ​células;

● Coloração​ ​:​ ​Ajuda​ ​o​ ​estudo​ ​e​ ​melhor​ ​observação​ ​das​ ​estruturas;

● Resolução​ ​:​ ​Permite​ ​a​ ​capacidade​ ​de​ ​aumentar​ ​e​ ​manter​ ​a​ ​nitidez​ ​da​ ​estrutura.​ ​(0,2
µm​ ​capacita​ ​boas​ ​imagens​ ​se​ ​aumentadas​ ​de​ ​1000​ ​a​ ​1500​ ​vezes);

● Ps.​:​ ​Estruturas​ ​menores​ ​que​ ​0,2​ ​µm​ ​não​ ​há​ ​como​ ​observar​ ​ou​ ​separá-las.

Microscópio​ ​Óptico 

● Lentes:​ ​Objetivas​ ​(várias),​ ​Ocular​ ​e​ ​Condensador;

● Mecânica:

● Outros​ ​tipos​ ​de​ ​MO:

○ Contraste​ ​de​ ​fase:​ ​diferença​ ​de​ ​iluminação​ ​entre​ ​amostras,​ ​arredores​ ​ou​ ​o
plano​ ​de​ ​fundo;
 ○ Contraste​ ​diferencial​ ​de​ ​interferências​:​ ​imagem​ ​aparentemente
tridimensional;

Microscópio​ ​de​ ​Fluorescência 

● Luz:​ ​adquirida​ ​através​ ​do​ ​mercúrio​ ​de​ ​alta​ ​pressão;

● Filtros:​ ​selecionam​ ​a​ ​luz​ ​que​ ​entra​ ​por​ ​seu​ ​comprimento​ ​de​ ​onda;

● Coloração​ ​:​ ​specimen​ ​é​ ​colorido​ ​com​ ​tons​ ​fluorescentes​ ​que​ ​devolvem​ ​a​ ​nossa
retina​ ​com​ ​um​ ​comp​ ​de​ ​onda​ ​que​ ​somos​ ​capazes​ ​de​ ​enxergar​ ​(através​ ​da​ ​excitação
da​ ​espécime​ ​-​ ​fluorocromos-​ ​por​ ​isso​ ​deve​ ​ser​ ​feito​ ​no​ ​escuro).

● Ex.​ ​de​ ​subst.​ ​fluorescentes​:​ ​alaranjado​ ​de​ ​acridina​ ​(para​ ​observar​ ​DNA​ ​e​ ​RNA​ ​).
Quando​ ​há​ ​RNA​ ​a​ ​coloração​ ​refletida​ ​é​ ​laranja​ ​avermelhada,​ ​enquanto​ ​a​ ​coloração
refletida​ ​pelo​ ​DNA​ ​sao​ ​tons​ ​de​ ​verde.​ ​Utilizado​ ​em​ ​exames​ ​para​ ​saber​ ​se​ ​há
presença​ ​de​ ​mais​ ​de​ ​2​ ​cromossomos​ ​21​ ​-​ ​para​ ​detectar​ ​síndrome​ ​de​ ​Down.

Microscopia​ ​Confocal
● Foco​:​ ​focaliza​ ​um​ ​plano​ ​muito​ ​delgado​ ​como​ ​se​ ​estivesse​ ​em​ ​3D.

● Luz​:​ ​utiliza​ ​o​ ​laser​ ​para​ ​iluminar​ ​a​ ​espécime​ ​estudada.

Microscopia​ ​Eletrônica 
● Feixes​:​ ​de​ ​elétrons-​ ​obtido​ ​através​ ​de​ ​um​ ​cátodo​ ​e​ ​então​ ​sao​ ​acelerados​ ​-​ ​(e​ ​não
mais​ ​de​ ​luz)​ ​e​ ​portanto​ ​qualidade​ ​muito​ ​maior;

● Microscopia​ ​Eletrônica​ ​De​ ​Transmissão:​ ​sem​ ​cores​ ​(​ ​Elétron-lucentes:​ ​regiões

claras​ ​//​ ​Elétron-densas:​ ​regiões​ ​escuras)​ ​obtendo​ ​micrografia​ ​eletrônica.

● Microscopia​ ​Eletrônica​ ​De​ ​Varredura:​ ​um​ ​pouco​ ​menor,​ ​material​ ​é​ ​metalizado​ ​em
ouro​ ​ou​ ​platina,​ ​como​ ​o​ ​material​ ​é​ ​previamente​ ​metalizado​ ​o​ ​feixe​ ​de​ ​elétrons​ ​reflete
obtendo-se​ ​assim​ ​a​ ​imagem​ ​(portanto​ ​superficial)​ ​que​ ​é​ ​aparentemente
tridimensional​ ​com​ ​diferentes​ ​tons​ ​de​ ​coloração.

● Resolução:​ ​3​ ​nm​ ​(capacitando​ ​um​ ​aumento​ ​de​ ​até​ ​120.000​ ​vezes);