Lopes, Luis N.º 17125; Suissas, Claudia N.

º17355 alunos de Biologia da Universidade de Évora

O tubarão e o cancro
Objectivo: Extrair e isolar o gene que codifica a proteína que confere ao tubarão imunidade ao cancro, com vista à sua utilização para a terapêutica do cancro.
Introdução:
O cancro (ou neoplasia, ou tumor maligno) é uma classe de doenças caracterizadas pelo crescimento descontrolado de células aberrantes. O cancro pode matar devido à invasão destrutiva de órgãos
normais por estas células, por extensão directa ou por disseminação à distância (metastização).
Os tubarões têm uma taxa de incidência de doenças relativamente baixa. Em estudos realizados para avaliar o efeito de substâncias carcinogénicas potentes não foram observadas quaisquer alterações
nos tecidos alvo ou nos seus materiais genéticos que conduzissem à formação de tumores cancerígenos. Uma proteína presente na cartilagem destes animais parece afectar a angiogénese – formação
dos vasos sanguíneos que irrigam o tumor – parecendo ser a causa desta resistência.

Importância do trabalho: Este trabalho é de extrema importância para a terapêutica do cancro uma vez que a incidência do cancro na
população humana é muito alta, sendo a segunda causa de morte nos Estados Unidos e na Europa, apenas superada pelos problemas cardiovasculares.
Na União Europeia o número de mortes por cancro em 1998 foi de 925.146, sendo esperado para 2020 cerca de 20 milhões de novos diagnósticos de
cancro nos países industrializados. As terapêuticas até hoje usadas, como a cirurgia, quimioterapia e radioterapia, têm diversos efeitos secundários
(aparecimento de cancros secundários e mal formações nos ossos), e baixas taxas de sucesso, sendo, por vezes, dolorosos e devastadores para o ser
humano. Actualmente começam a estar disponíveis novas terapêuticas contra o cancro com mecanismos de acção inovadora que actuam directamente
nas células cancerosas, reduzindo o sofrimento dos pacientes. Este trabalho pode ser incluído nestas terapêuticas, tornando-o ainda mais necessário.

Gráfico 1- Cancros mais frequentes na União Europeia (1998)

Metodologia:
A - Para obter o conteúdo celular: Cronograma:
1. Com um bisturi raspar a cartilagem do tubarão.

B - Para obter a proteína:

1. Isolamento das proteínas por Western Blotting; 1 2 3 4 5 Anos

Conteúdo celular Gene Testes Pré-Clínicos Testes Pré-Clínicos Testes Clínicos
2. Identificação da proteína com base na sua actividade; Proteína Testes Clínicos
3. Sequenciação parcial da proteína.

C - Para obter o gene: Financiamento:

1. Construção de Biblioteca Genómica;
Despesas Financiamento ( para 5 anos) (€)
2. Com base na sequência parcial da proteína procede-se à síntese de oligonucleótidos;
Pessoal 1) 240000
3. Hibridação;
Material2) 45000
4. Isolamento do clone;
Reagentes 200000
5. Sequenciação de DNA ( método de Sanger);
Material Biológico3) 30000
6. Clonagem.
Outras despesas4) 13350
D – Testes:
Total 528350
1.Ensaios pré-clínicos em animais (OncoMouse);
2.Ensaios clínicos no Homem, primeiramente em indivíduos saudáveis e posteriormente em Quadro 1 – Despesas previstas efectuadas durante o procedimento.
indivíduos afectados. 1) Inclui uma equipa formada por quatro elementos, recebendo cada um 1000 € mensais.
2) Inclui bisturis, pinças, provetas, centrifugadoras, etc.
Resultados esperados: 3) Inclui material utilizado para os ensaios pré-clínicos.

Através destes processos obter-se-á a proteína que confere resistência ao cancro, extraída
4) Inclui pagamentos ao estado como: facturas de luz, água, gás e contribuições autárquicas.
das células da sua cartilagem, em condições de utilização no tratamento do cancro em
Humanos. Sites:
 http://europa.eu.int/comm/research/leaflets/health/pt/02.html
Bibliografia:  http://www.roche.pt/her2/her2.cfm?tema=sitepub1
 Azevedo, C.; Biologia Celular e Molecular; 3.ª edição; 1999; Lidel; Lisboa; Portugal.  http://www.mercksa-cancro.htm
 Lima, N., Mota, M.; Biotecnologia: Fundamentos e Aplicações; 2003; Lidel; Lisboa;  http://brazil.skepdic.com/tubarao.html
Portugal.
 http://www.pcd.pt/noticias/ver.php?id=1726
 Videira, A.; Engenharia Genética: Princípios e Aplicações; 2001; Lidel; Lisboa; Portugal.
 http://www.esmtc.pt/artigos/frtmar.htm#tubarao4
 http://homepage.ntlworld.com/markhewitson/ntlup.swf
 http://www.icb.ufmg.br/~pat/apopt.htm
 www.chc.min-saude.pt/hp/ hemaonco/cancro1.gif

Biotecnologia 2003/2004