N Antisoro Fibrinogeneo Humano

N AS FIB

N Antisoro Antitrombina III Humana

N AS ATIII

N Antisoro Plasminogeneo Humano

N AS PLS

N Antisoro contra o Inibidor de C1‑humano

N AS C1IN

A barra de revisão indica a actualização da versão anterior.

Sistema Atellica® NEPH 630 / Sistema BN II / Sistema BN ProSpec®

Campo de aplicação
Reagentes de diagnóstico in vitro para a determinação quantitativa de factores de coagulação
(fibrinogénio, antitrombina III e plasminogénio) e inibidor de C1 (inativador de C1, inibidor de
esterase C1) no plasma e soro humanos utilizando o Sistema Atellica® NEPH 630, Sistema BN II
e Sistema BN ProSpec®.

Sumário e Explicação
Podem aparecer concentrações elevadas de fibrinogénio em processos inflamatórios, depois
de traumatismos ou intervenções cirúrgicas importantes ("proteína da fase aguda"), assim
como em tumores metastizantes. Uma diminuição dos níveis plasmáticos de fibrinogénio é
ocasionada por coagulopatías de consumo, como por exemplo DIC (coagulação intravascular
disseminada), em hiperfibrinólisis primária, insuficiências hepáticas e deficiências de origem
genética. Estudos epidemiológicos revelaram que concentrações elevadas de fibrinogénio no
plasma, estão associadas a um risco elevado de arteriosclerose1. Observa-se uma diminuição
das taxas de antitrombina III em caso de DIC, trombose venosa reincidente da perna,
insuficiência hepática, nefroses, deficiências de origem genética e durante tratamentos com
anticorpos à base de estrogéneos. Concentrações reduzidas de antitrombina III indicam um
risco mais elevado de complicações tromboembólicas2. Níveis elevados de plasminogénio
podem aparecer no carcinoma da próstata, assim como os valores diminuídos destes níveis
são indicativos de insuficiências hepáticas, síndrome de asfixia nos recém-nascidos e durante
tratamentos fibrinóliticos terapêuticos.
De uma maneira geral, as determinações imunoquímicas, complementadas com a
determinação da actividade de diferentes factores de coagulação, podem fornecer
informações preciosas (por exemplo por tratamentos de substituição ou utilizando
anticoagulantes orais). A determinação de fibrinogénio para avaliar o risco de arteriosclerose
pode ser efectuada por método imunoquímico3.

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O C1-inibidor é um regulador importante da via clássica de activação do complemento, o qual

inibe a actividade das serina proteases C1s e C1r4. A determinação do inibidor de C1 ajuda no
diagnóstico de edemas angioneuróticos hereditários (permeabilidade elevada dos vasos
sanguíneos e por conseguinte, inflamação do tecido), assim como também, de casos raros de
edemas angioneuróticos associados a linfomas (carcinoma dos gânglios linfáticos). Uma
deficiência de origem genética do Inibidor de C1 conduz à revelação do edema
anglioneurótico (HANE)5,6. Uma deficiência adquirida do inibidor de C1, revela doenças do
sistema celular B, as quais podem ter lugar simultaneamente com uma diminuição do inibidor
de C1, por exemplo, em leucemia linfática crónica B, mieloma múltiplo e outros linfomas
malignos5.

Princípio do método
As proteínas contidas no plasma ou no soro humano formam imunocomplexos com
anticorpos específicos numa reacção imunoquímica, que dispersam um feixe de luz incidente.
A intensidade da luz dispersa depende da concentração da respectiva proteína na amostra. A
determinação é realizada por comparação com um padrão de concentração conhecida.

Reagentes
Material fornecido
N AS FIB , REFOSCA
1 x 2 mL N AS FIB ,
N Antisoro Fibrinogeneo Humano ou
N AS ATIII , REF OSAY

1 x 2 mL N AS ATIII , N Antisoro Antitrombina III Humana ou

N AS PLS , REF OSCB

1 x 2 mL N AS PLS , N Antisoro Plasminogeneo Humano ou

N AS C1IN , REF OQEY

1 x 2 mL N AS C1IN , N Antisoro contra o Inibidor de C1-humano

Composição
Os N Antisoros são soros líquidos de origem animal, produzidos mediante imunização de
coelhos com fibrinogénio, antitrombina III, plasminogénio ou inibidor de C1 altamente
purificados. A concentração de anticorpos activos é < 16,5 g/L para fibrinogénio humano,
plasminogénio humano, respectivamente, < 2,8 g/L para antitrombina humana III e < 3 g/L
para Inibidor de C1 humano.
Conservante
Azida de sódio < 1 g/L
Advertências e medidas de precaução
Para utilização em diagnóstico in vitro.
Contém azida de sódio (< 1 g/L) como conservante. A azida de sódio pode reagir com
os tubos de cobre ou de chumbo das canalizações de esgotos formando compostos
explosivos. Elimine este produto de forma correcta e de acordo com as
regulamentações locais.

Preparação dos reagentes

Os N Antisoros estão prontos para utilização e podem ser utilizados sem tratamento
preliminar.
Estabilidade e condições de armazenamento
Conservação entre 2 a 8 °C:
A estabilidade está indicada no rótulo;
Estabilidade depois de aberto:

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 N Antisoros contra os Factores de Coagulação e Inibidores C1 Humanos

4 semanas desde que os frascos, imediatamente após o uso, sejam firmemente fechados e
conservados entre 2 a 8 °C para evitar a contaminação (p. ex., através de microorganismos);
Em caso de armazenagem, os N antisoros podem apresentar floculações ou turvações que não
são provocadas por contaminação microbiana e não prejudicam, de nenhum modo, a
actividade. Nesses casos, os antisoros deverão ser filtrados antes de serem usados. Para esse
efeito, são adequados os filtros descartáveis com um diâmetro de poros de 0,45 µm.
Não congelar.
Estabilidade nos sistemas BN:
Um mínimo de cinco dias a oito horas por dia ou período de tempo comparável.
Nota: A estabilidade no sistema poderá variar consoante o sistema utilizado e as condições
laboratoriais. Para obter mais informação, consulte o Manual de Instruções do respectivo
sistema.
Materiais necessários mas não fornecidos
Sistema Atellica® NEPH 630, Sistema BN II ou Sistema BN ProSpec®
N Standard de proteínas PY (humanas), REF OUID
N/T Controlo de proteínas PY (humanas), REF OWSY
N Tampão de Reacção, REF OUMS
N Diluente, REF OUMT
N reagente adicional/precipitação, REF OUMU
BN II Evaporation Stoppers (opcionais), REF OVLE
Materiais e suplementos adicionais conforme descrito no Manual de Instruções do respectivo
sistema.

Amostras
Para a determinação dos factores de coagulação podem utilizar-se tanto plasmas EDTA, como
plasmas citratados. O inibidor de C1pode ser determinado em plasmas citratados e em soros
humanos. Para a medição, deverão ser utilizadas, de preferência, amostras frescas (conservar
no máx. 8 dias, entre 2 a 8 °C). Se as amostras forem congeladas nas 24 horas subsequentes à
colheita, a conservação é possível até 1 ano, a uma temperatura inferior a −20 °C, se se evitar
a repetição da descongelação e da congelação. As amostras lipémicas ou as amostras
congeladas que apresentem turbidez após descongelação, têm de ser clarificadas por
centrifugação (10 minutos a aprox. 15 000 x g). Devido à solução de citrato, os plasmas
citratados são diluídos em aprox. 17 %, em média. Não é de esperar qualquer perturbação nos
plasmas de pacientes sob terapia de heparina.

Procedimento
Notas
1. Consulte o Manual de Instruções do respectivo sistema para obter mais informação acerca
do funcionamento do instrumento.
2. Para o Sistema Atellica® NEPH 630, Sistema BN II ou Sistema BN ProSpec®, os reagentes e
as amostras conservados a uma temperatura entre 2 a 8 °C podem ser utilizados
imediatamente.

Protocolos de ensaio no Sistema Atellica® NEPH 630 e nos Sistemas BN

Os protocolos de ensaio estão contidos nas instruções de serviço e no Software do aparelho
respectivo. Todos os passos são executados automaticamente pelo sistema.
Definição da curva de referência
A curva de calibração é efectuada segundo uma calibração de vários pontos. As séries de
diluições do N Soro Padrão proteínas PY são efectuadas automaticamente com o N Diluente.
As diluições do padrão devem utilizar-se num prazo de quatro horas. As curvas de referência
podem utilizar-se enquanto os controlos com os valores-alvo correspondentes, consoante o

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N Antisoros contra os Factores de Coagulação e Inibidores C1 Humanos

método, por exemplo, com o N/T Controlo de proteínas PY se encontrem dentro dos valores de
intervalo de confiança. Deve ser estabelecida uma nova curva de calibração por cada novo lote
de antisoro.
Medição de amostras de pacientes
As amostras são automaticamente diluídas a 1:5 (antitrombina III, plasminogénio e inibidor de
C1) ou a 1:20 (fibrinogénio) com N Diluent e medidas. As amostras diluídas têm de ser
medidas num prazo de quatro horas. Caso as leituras obtidas se encontrem fora do intervalo
de medição, o ensaio pode repetir-se utilizando uma diluição maior (antitrombina III,
plasminogénio, inibidor de C1 e fibrinogénio) ou menor (fibrinogénio) da amostra. Consulte o
Manual de Instruções do respectivo sistema para obter mais informação acerca da repetição de
medições utilizando outras diluições.
Controlo interno de qualidade
O N/T Controlo de proteína deverá ser utilizado após a preparação de uma curva de referência,
após a primeira abertura de um frasco de antisoro ou em cada série de amostras de plasma ou
de soro. Na preparação e na avaliação do teste, o controlo é tratado como amostras de
paciente. Os valores teóricos e os escalões de confiança deverão ser retirados da tabela de
valores teóricos do controlo respectivo.
Seguir as normas governamentais ou os requisitos de validação quanto à frequência do
controlo de qualidade.
Caso um valor de controlo se encontre fora do intervalo de confiança, tem de repetir-se a
determinação. Caso a determinação repetida confirme o desvio, deve definir-se uma nova
curva de referência. Não divulgue os resultados do doente até que a causa do desvio tenha
sido identificada e corrigida.

Cálculo dos resultados

A avaliação é efetuada automaticamente em g/L ou numa unidade seleccionada pelo
utilizador.

Limitações do procedimento
As turvações e as partículas nas amostras podem perturbar a determinação. Por isso, as
amostras que contêm partículas deverão ser centrifugadas antes da determinação. As
amostras lipémicas ou turvas que não consigam ser clarificadas por centrifugação (10 minutos
a cerca de 15 000 x g) não podem ser utilizadas. O N antisoro contra os fibrinogénios humanos
também abrange os produtos de dissociação dos fibrinogénios, de modo que não deverá
fazer-se uso da determinação imunoquímica dos fibrinogénios nas amostras que contêm tais
produtos de dissociação, como por exemplo, as dos pacientes sob terapia fibrinolítica7.
A Siemens Healthcare Diagnostics validou a utilização destes reagentes em vários
analisadores, com o intuito de optimizar o desempenho do produto e satisfazer as
especificações do produto. As modificações definidas pelo utilizador não são suportadas pela
Siemens, na medida em que podem afectar o desempenho do sistema e os resultados do
ensaio. Constitui responsabilidade do utilizador validar as modificações efectuadas nestas
instruções ou em relação ao uso dos reagentes noutros analisadores que não os incluídos nas
folhas de instruções de aplicação da Siemens ou nestas instruções de utilização.
Os resultados deste teste devem sempre ser interpretados em conjunto com o histórico
médico do doente, estado clínico e outros dados de interesse.
Devido a efeitos de matriz, as amostras de estudos inter-laboratoriais e as amostras de
controlo podem apresentar resultados que diferem daqueles obtidos com outros métodos. Por
conseguinte, poderá ser necessário avaliar estes resultados em relação a valores-alvo
específicos do método.

Valores esperados
Para amostras de plasma de adultos sãos, são válidos os seguintes escalões de referência:

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Proteína 2,5. - 97,5. percentil

Fibrinogénio8 1,80 - 3,50 g/L

Antitrombina III9 0,19 - 0,31 g/L
Plasminogénio10 0,06 - 0,25 g/L

Inibidor de C1: Foram avaliadas amostras de plasma citratado de 399 dadores sãos, na Europa
Central. O escalão de referência (2,5. bis 97,5 percentil) situou-se entre os 0,18 a 0,32 g/L. A
avaliação de 370 amostras de soro, revelou um escalão de referência (2,5 a 97,5 percentil) de
0,21 a 0,39 g/L para o N Antisoro, em comparação com o inibidor de C1.
Além disso, cada laboratório deverá determinar os seus escalões de referência próprios, já que
estes dependem de muitos factores que podem variar consoante a população examinada.

Características do teste
Sensibilidade e intervalo de medição
A sensibilidade do ensaio é estabelecida pelo limite inferior da curva de referência e depende,
portanto, das concentrações de proteínas no N Standard de proteínas PY. Os intervalos típicos
de medição são fornecidos no Manual de Instruções do respectivo sistema.
Especifidade
Os N antisoros contra a antitrombina III, o plasminogénio e o inibidor de C1 humanos são
específicos para a respectiva proteína. O N Antisoro contra o fibrinogénio humano engloba
igualmente os produtos de degradação do fibrinogénio7.
Precisão
Com os N Antisoros contra os factores de coagulação humanos e o inibidor de C1 foram
determinados os seguintes coeficientes de variação (CV) no sistema BN:

Intra-série Inter-série

Proteína n Valor médio VK n Valor médio VK

[g/L] [%] [g/L] [%]

Fibrinogénio 30 2,03 2,7 10 2,06 2,6

Antitrombina III 29 0,22 1,5 10 0,21 1,3
Plasminogénio 30 0,094 1,5 10 0,095 3,5
Inibidor de C1 30 0,23 1,5 10 0,24 1,6

A equivalência para o Sistema Atellica® NEPH 630 foi confirmada.

Comparação de métodos
Foram medidas amostras de plasma com os N Antisoros contra os factores de coagulação
humanos e o inibidor de C1 e amostras séricas com o N antisoro contra o inibidor de C1
humano no sistema BN (y) e determinadas, comparativamente, com a imunodifusão radial (x)
(Partigen®). A correlação dos resultados apresenta os seguintes dados:

Proteína N° de Amostras Regressão linear Coeficiente de

correlação

Fibrinogénio 28 y (BN) = 1,04 x (RID) + 0,07 g/L 0,99

Antitrombina III 30 y (BN) = 0,88 x (RID) + 0,03 g/L 0,90
Plasminogénio 29 y (BN) = 0,79 x (RID) + 0,03 g/L 0,92

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Proteína N° de Amostras Regressão linear Coeficiente de

correlação

Inibidor de C1 50 Plasmas y (BN) = 0,89 x (RID) + 0,03 g/L 0,95

Inibidor de C1 50 A. séricas y (BN) = 0,98 x (RID) + 0,02 g/L 0,96

A equivalência para o Sistema Atellica® NEPH 630 com um Sistema BN foi confirmada.
Notas
Os valores indicados para as características dos testes representam resultados típicos e não
devem ser considerados como especificação para o N Antisoro contra o fibrinogénio, a
antitrombina III, o plasminogénio ou o inibidor de C1 humanos.

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Definição de símbolos

Não reutilizar YYYY-MM-DD Prazo de validade

LOT Código do lote REF Referência de catálogo

Atenção, consulte a documentação
Fabricante
incluída
Representante autorizado na
EC REP Conteúdo suficiente para "n" ensaios
Comunidade Europeia
Dispositivo médico para diagnóstico
Riscos biológicos IVD
in vitro

Limites de temperatura Consulte as instruções de utilização

Não estéril Marca CE

CONTENTS Conteúdo Volume de reconstituição

LEVEL Nível Manter protegido da luz solar e do calor

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