Princípios de Citogenética

• A Citogenética faz uma ponte de conhecimento entre os fundamentos microscópicos da Citologia

e os princípios das mutações, da variabilidade, da permuta e da segregação Genética, tendo
como paradigma os cromossomos como estrutura física no transporte dos genes na mitose, na
meiose e na reprodução;

• Ela é importante para a genética médica, melhoramento animal/vegetal e a genética evolutiva;

Como os cromossomos estão organizados?

• Os cromossomos são longos os de DNA associados a proteínas histonas em um arranjo

complexo que pode ser visto no microscópio ótico em células na fase de metáfase da divisão
celular. Essas estruturas cam localizadas no núcleo e variam de uma espécie para outra. No
homem, existem 46 cromossomos em cada célula somática.

• Para todo o DNA caber dentro do núcleo ~2m (46 cromossomos) é necessário que a cromatina
se condense;

Estudo do cromossomo

• Complemento cromossômico característico de cada organismo -> CARIÓTIPO -> Número,

tamanho e morfologia (forma) dos cromossomos;

• CADA CROMOSSOMO EUCARIÓTICO

REPLICADO CONTÉM DUAS MOLÉCULAS
DE DNA EMPACOTADA!!!

• Importância dos centrômeros

Integridade e estabilidade dos cromossomos durante ciclo celular;

• Região importante do centrômero

Cinetócoro -> complexo de proteínas, movimenta os cromossomos e controla o ciclo celular

Os cromossomos são divididos em 7 grupos de A - G; Cromossomos sexuais X – grupo C

Y – grupo G;

• Regiões dos cromossomos

1) Telômeros

• Contêm sequências especí cas conservadas em várias espécies

Repetição em tandem do hexanucleotídeo (TTAGGG)n (maioria eucariotos);

• Enzima telomerase evita encurtamento dos telômeros;

Adição de molde de RNA não codi cante à ponta 3’ da dupla hélice;

• Desempenham funções vitais: manutenção estrutura física dos cromossomos e prevenção do

encurtamento com perda genes ativos;

• Encurtamento dos telômeros causam doenças degenerativas, cânceres, hiperatividade (TDAH) e

estresse;

• Organizadores Nucleolares (RON)

• Papel importante na siologia e organização do nucléolo

• Na interfase: região que corresponde à cromatina associada

ao nucléolo

* RONs podem ocorrer em constrições secundárias

• Bandeamento cromossômico

• Identi cação precisa de cromossomos homólogos;

• Identi cação de regiões especí cas dos cromossomos;

• identi cação de rearranjos cromossômicos;

mutações em grande escala: inversão, deleção, translocação, duplicação;

• Comparar cariótipos entre espécies: evolução cromossômica; relações de parentesco;

Estudo dirigido Citogenética

1) Assista os dois vídeos que você encontra em https://youtu.be/q51Dk-JfwJo (DNA ao

Cromossomo) e https://youtu.be/1iFsb2f7bLs. Com base nesses vídeos e no texto "A Citogenética"
(Kavalco, 2003), descreva, em etapas, como a dupla hélice do DNA, que tem 2nm de largura,
origina um cromossomo metafásico que tem cerca de 1400nm de largura?

A dupla hélice do DNA passa por diversos processos de compactação através da associação com
proteínas histônicas e não-histônicas. É por esse motivo que uma molécula com 2 nm de largura
origina um cromossomo com cerca de 1400 nm. A primeira etapa envolve o empacotamento do
DNA como uma espiral em nucleossomos (octâmero de histonas) de aproximadamente 10nm de
diâmetro. O segundo passo envolve a estrutura de solenóide, um segundo nível de espiralamento,
produzindo uma bra de 30 nm. Em seguida são formados os "loops" de solenóides, ligados a um
esqueleto central protéico. Esta estrutura tem aproximadamente 300 nm de diâmetro. A quarta
etapa consiste nos "loops" do esqueleto protéico, formando uma estrutura gigante, super enrolada,
com 700 nm, e por m, na sua máxima condensação, a cromátide cromossômica conta com cerca
de 1400 nm de diâmetro.

2) Descreva as estruturas (e respectivas funções) que podem ser encontradas em um cromossomo

metafásico.

Cromátide é cada molécula ( lamento) de DNA + proteínas associadas altamente empacotadas do

cromossomo metafásico, essas são unidas pelo centrômero.

Centrômero é a parte do cromossomo onde as cromátides estão unidas, também é onde o

cinetócoro está localizado. Ele tem a função de manter juntas as cromátides irmãs e age como um
sítio de ligação para o cinetócoro.

Cinetócoro é um complexo proteico presente no centrômero, onde as bras do fuso são ancoradas
para que os cromossomos homólogos ou cromátides migrem durante a divisão.

Braços cromossômicos são as regiões das cromátides separadas pelo centrômero, o braço pode
ser curto (p) ou longo (q).

Telômero constituído por sequências repetitivas e conservadas que são encontradas nas
extremidades dos cromossomos (braços curto e longo) que contribuem na proteção do
cromossomo de possíveis deleções durante a divisão celular e manutenção da integridade e
estabilidade do cromossomo.

3) Considerando os cromossomos mitóticos organizados no cariograma abaixo, determine:

a) O número diploide e a morfologia de cada par de cromossomos;

O número diploide é 2n = 16.

1, 2 e 3 são submetacêntricos. 4, 5 e 7 são metacêntricos. 6 e XY são acrocêntricos.

b) Supondo que uma célula em metáfase contendo os cromossomos representados no cariograma

abaixo completasse o processo de divisão mitótica, quantos cromossomos (autossomos e sexuais)
seriam observados nas células lhas?

Seriam observados nas células lhas 7 pares de cromossomos autossomos e 1 par de sexuais.

c) Quantas moléculas de DNA existem por cromossomo na fase da metáfase e nas células- lhas
em telófase?

Na metáfase há duas moléculas de DNA por cromossomo (o cromossomo está duplicado, sendo
formado por 2 cromátides), na telófase há uma molécula de DNA por cromossomo (formado por 1
cromátide). Nesse cariótipo há 32 moléculas de DNA na fase de metáfase e 16 moléculas de DNA
em telófase.

4) Quais são as características cromossômicas utilizadas para descrição de um cariótipo quando se

utiliza a coloração convencional (Giemsa)?

A coloração Giemsa deixa mais escuras as áreas do DNA ricas nas bases timina e adenina. As
áreas mais claras são ricas em citosina e guanina. Assim se formam as bandas G. Com esse tipo
de coloração pode-se identi car modi cações cromossômicas como inversões, deleções e
duplicações.

5) Qual o papel das regiões organizadoras de nucléolos? E como essas regiões podem ser
identi cadas em cromossomos metafásicos (consulte página 120 de Brasileiro-Vidal & col., 2017).

Armazenar os genes codi cadores de RNAr, para a formação de ribossomos pelo nucléolo a m de
sintetizar proteínas posteriormente. Essas regiões também são responsáveis por re-constituir o
nucléolo ao nal da fase de telófase. Pode-se identi car essas regiões utilizando o nitrato de prata
(Bandas RONs

6) Comente brevemente a relação entre tamanho dos telômeros, envelhecimento e câncer.

Os telômeros são estruturas terminais do cromossomo, constituídos por segmentos repetidos de

DNA não codi cante e proteínas, apresentando como principal função manter a estabilidade do
cromossomo. O envelhecimento celular está diretamente ligado com os telômeros, já que a cada
duplicação celular há a perda de alguns pares de bases de DNA telomérico, causando seu
encurtamento. Isto leva a célula a ser incapaz de realizar divisão somática, perdendo sua função, e
então apoptose. Além disso, a ausência da enzima telomerase, que atua recuperando os
segmentos de DNA perdidos, também está ligada ao envelhecimento. Entretanto, a presença desta
enzima, telomerase, é comum na maioria das células cancerígenas, já que sua síntese é aumentada
a m de evitar a apoptose destas células.

7) Diferencie eucromatina de heterocromatina quanto à natureza e função. Consulte a página 17 de

Brasileiro-Vidal & col. (2017).

A eucromatina é menos condensada, nela estão as sequências gênicas que serão traduzidas, por
isso, é ativa durante a interfase, passa por replicação precoce e atinge sua maior condensação na
metáfase. A heterocromatina é mais condensada, di cilmente tem as sequências gênicas
transcritas, por isso é inativa, passa por replicação tardia e permanece condensada durante todo
ciclo celular.

8) Comente brevemente como técnicas de bandeamento cromossômico podem auxiliar na

resolução de problemas práticos de diferentes áreas da genética.

As técnicas de bandeamento cromossômico são importantes em diferentes áreas da genética, uma

vez que permitem a identi cação precisa de cromossomos homólogos e de regiões cromossômicas
especí cas como as RONs e de heterocromatina constitutiva (banda C). Além disso, elas também
são capazes de mostrar a ocorrência de mutações cromossômicas de grandes escalas como a
inversão, a deleção, a duplicação e a translocação. Por meio delas, é possível, também, fazer uma
comparação dos cariótipos entre espécies diferentes para entender a evolução cromossômica de
diferentes grupos.

9) Após a análise das a rmativas abaixo, marque a alternativa INCORRETA

No cariótipo humano, os cromossomos portadores de constrições secundárias

formando satélites são os submetacêntricos do grupo F.

10) Por quê a técnica de pintura cromossômica trouxe importantes avanços para os estudos
citogenéticos?

A pintura cromossômica trouxe diversos benefícios para a citogenética, sendo possível identi car
rearranjos cromossômicos não detectados com técnica de bandeamento G, por exemplo,, devido a
troca de pedaços muito pequenos em determinado local dos cromossomos A técnica de FISH
permite a localização de genes especí cos, reconhecendo e hibridizando sequências (sondas) que
são complementares, com isso é capaz de identi car doenças humanas.

O entendimento da evolução cromossômica em animais também ganhou maior poder de resolução