NOME:VIVEN LOPES

PROFESSOR:Dr: ISABELA LAGREGA

DISCIPLINA:RECUPERAÇÃO DE BIOPRODUTOS
ATIVIDADE:RESUMO CAPITULO 13

Cromatografia de adsorção em coluna monolítica

RESUMO

A tendência de crescimento de bioprodutos faz com que muitas vezes, tais

produtos requerem purificação e/ou separação entre biomoléculas complexas e
de elevada massa molar. As colunas cromatográficas convencionais,
preenchidas com partículas porosas devidamente empacotadas, foram
desenvolvidas para a purificação de proteínas e moléculas de baixa massa molar
e, apesar dos recentes avanços, não são ideais para moléculas complexas de
alta massa molar como vírus e DNA, pois o transporte de massa entre a fase
móvel e a fase estacionária é governado pela difusão, um processo lento,
especialmente para moléculas grandes que têm baixa mobilidade.A coluna
cromatográfica monolítica tecnologia introduzida em 1998, representa uma das
alternativas capazes de transpor tais dificuldades
As colunas monolíticas são fases estacionárias de comprimento e diâmetro
curtos,moldadas como uma peça única e homogênea formando uma rede de
poros interligados.O diâmetro médio dos poros é de 1,35 μmou 2,0 μm, o que
permite que as biomoléculas tenham facilidade de acessar todos os sítios ativos
que se encontram ao longo da superfície dos poros. Como o transporte de
massa é regido pela convecção, a fase móvel é forçada a passar pelos poros do
monólito, possibilitando a aplicação de diferentes fluxos sem o comprometimento
da resolução , e, portanto, maior produtividade na purificação de biomoléculas de
alto peso molecular.
As colunas que são operadas em fluxo axial e dedicadas à análise e controle de
qualidade de processos e/ou produtos.
No fluxo radial os monólitos de maiores volumes têm formato de tubo e a fase
móvel passa pela matriz radialmente.
As principais aplicações da cromatografia de adsorção em coluna monolítica são
purificação, concentração, remoção e análise de biomoléculas de alto peso
molar como vírus, partículas pseudo virais, DNA plasmidial, endotoxinas,
proteínas pegiladas, dissociação de complexos de DNA genômico e
imunoglobulina M.

Para a análise de vírus as colunas monolíticas têm se mostrado muito versáteis

na purificação de vírus devido à velocidade de processamento, resolução, alta
recuperação com manutenção da atividade biológica e alta capacidade de
ligação.Bem como tem demonstrado alto recuperação acima de 80% em DNA
Plasmidial.
A tecnologia analítica de processo é um sistema de análise e controle de
processos de produção cujo objetivo é medir os parâmetros críticos e
propriedades da matéria-prima ou do material utilizado na produção. Reduzindo
significativamente a necessidade de testes do produto final o que resulta em
melhora do tempo e da qualidade de produção,permitindo que os dados dos
processos sejam usados para assegurar a qualidade do produto final. As rápidas
análises permitem a produção de um produto final de alto grau de pureza com
altos níveis.A coluna cromatográfica é uma ferramenta que auxilia tanto na
análise da purificação quanto da fermentação, permitindo a obtenção de
informações em minutos, evitando métodos dispendiosos como SDS PAGE ou
ELISA.

REFERÊNCIAS

Kilikian, Pessoa 2a ed anotado 0311.pdf