EFEITOS DA IRRADIAO ULTRAVIOLETA TIPO C SOBRE TECIDOS E VINHO DA UVA CABERNET SAUVIGNON

ABSTRACT
The grape Cabernet Sauvignon, originating from the Bordeaux region in France,is one of the cultivars of Vitis vinifera in the world most famous and largest deployment of new vineyards. In order to meet the demand for food preservation technologies, researched the hormetic effect by ultraviolet irradiation type C on stems, berries, whole bunch and wine from grapes irradiated. In this study no effect was observed on stems and wine, however, there was protection of the berry polyphenols and total anthocyanins front of the irradiation.

INTRODUO
A uva Cabernet Sauvignon, originria da regio de Bordeaux na Frana sem dvida a cultivar tinta mais conhecida. Est associada a um dos vinhos tintos mais conhecidos da Europa e sua utilizao para vinhos igualmente excelente em muitas partes do mundo. uma cultivar de brotao e de maturao tardia, relativamente vigorosa, com ramos novos de porte ereto, de mdia produo e elevada qualidade para vinificao (FREGONI, 1998; HIDALGO, 1993). Essa cultivar caracteriza-se por apresentar cacho de formato cnico, com pednculo comprido, geralmente alado, solto, de tamanho mdio (GALET, 1976). A cultivar altamente suscetvel a vrias doenas fngicas. As bagas so pequenas, cidas, duras, com muitas sementes e possuem pigmentao escura. Devido conformao do cacho compacto (bagas pequenas), a colheita mecnica facilitada, isso incentiva a grande produo de vinhos. Atualmente, uma das cultivares de Vitis vinfera com maior demanda para a implantao de novos vinhedos. Deve-se considerar que nas condies da Serra Gacha um dos fatores determinantes da poca da colheita a precipitao pluviomtrica. A demanda pelo consumo de produtos minimamente processados e alimentos in natura tem crescido na ordem de 2,5 a 5,0% ao ano (ROMBALDI, 2007). Para atender a ela, algumas tecnologias emergentes de conservao de alimentos foram implementadas e esto sendo exaustivamente estudadas. Um mtodo de conservao o tratamento do vegetal com elicitores abiticos, podendo ser esses de natureza fsica ou qumica. A irradiao com luz ultravioleta um elicitor que tem sido estudado desde a dcada de setenta. Vrios estudos tm demonstrado que a radiao ultravioleta, um tipo de radiao no-ionizante com comprimento de onda entre 100 a 280 nm, constitui-se num mtodo de conservao que contribui para a preservao de alimentos (BAKA, 1999; STEVENS, 2005; LPEZ, 2005; GONZLES, 2007). A radiao ultravioleta age como um estressor abitico, gerador de espcies reativas de oxignio que so capazes de ativar mecanismos de defesa dos tecidos vegetais (MERCIER, 1997). Isso inclui a sntese e acmulo de compostos antimicrobianos (fitoalexinas), modificaes na parede celular, aumento na atividade de enzimas antioxidantes, assim como aumento da sntese de molculas antioxidantes, proporcionando proteo deteriorao e inclusive melhorando o potencial funcional do alimento (BAKA,1999; GONZLES, 2007; ALOTHMAN,
2009).

A radiao UV-C induz a sntese de compostos fenlicos totais (CFT) e dentre esses os flavonides (FROHNMEYER, 2003; GITZ, 2004), que so mecanismos de defesa contra a radiao. Esses compostos fenlicos dos frutos so relevantes em termos de qualidade, participam em atributos como aparncia (pigmentao e escurecimento), sabor (adstringncia) e propriedades nutracuticas (antioxidantes, preveno de doenas cardiovasculares, anticarcinognicos, entre outros). Um mtodo qumico de conservao muito utilizado o 1-metilciclopropeno (1-MCP ou C4H6), composto voltil que tem demonstrado ser um potente inibidor da ao do etileno (SEREK, 1995) que um fitormnio responsvel pelo amadurecimento dos frutos. O efeito hormtico desses mtodos fsicos e qumicos pode ser definido como o efeito benfico gerado pela aplicao, em baixas doses, de agentes potencialmente prejudiciais a organismos vivos, com o objetivo de induzir respostas a estresses (SHAMA, 2005). Quando os frutos so expostos a baixas doses de UV-C, vrias mudanas so induzidas, incluindo a produo de compostos antifngicos e o atraso no amadurecimento. No entanto, a inativao pode ser limitada pela superfcie do fruto, j que a UV-C tem poder de penetrao extremamente limitado em slidos
(GARDNER, 2000).

No presente trabalho pesquisamos o efeito da irradiao ultravioleta tipo C sobre o engace, baga, cacho inteiro e no vinho proveniente de uvas irradiadas.

METODOLOGIA
As amostras da cultivar Cabernet Sauvignon provenientes da cidade de Dom Pedrito RS. As amostras foram armazenadas em cmaras com atmosfera refrigerada 20C afim de reduzir a temperatura dos frutos que estavam no campo. As bagas foram desengaadas com auxlio de uma tesoura junto ao pedicelo evitando danos mecnicos baga. Posteriormente foram homogeneizadas e separadas em 52 unidades amostrais com aproximadamente 800g cada. Os engaces tambm separados em 24 unidades amostrais em que cada repetio apresentou aproximadamente 18g cada e as amostras dos cachos em 9 unidades amostrais com 3,5 kg cada. As amostras das bagas e dos cachos receberam 7 tratamentos (tabela 1) e do engace 6 tratamentos (tabela 2).
TABELA 1- Tratamentos e descrio das bagas e cachos
Tratamentos Descrio T1 Baga Controle T2 Baga irradiada com 1 kJ m-2* T3 Baga irradiada com 2 kJ m-2 T4 Baga irradiada com 3 kJ m-2 T5 Cacho controle T6 Cacho irradiado com 3 kJ m-2 T7 Cacho irradiado com 6 kJ m-2 * Irradiao ultravioleta do tipo C (254nm)

TABELA 2 Tratamentos e descrio dos engaces

Tratamentos Descrio T1 Controle T2 Engace com 1-MCP* T3 Engace com 1-MCP e 2kJ m-2 T4 Engace irradiado com 1kj m-2** T5 Engace irradiado com 2kJ m-2 T6 Engace irradiado com 3kJm-2 *1-Metilciclopropeno (1-MCP) **Irradiao ultravioleta do tipo C (254nm)

As unidades amostrais das bagas, do cacho e do engace destinadas ao tratamento irradiado foram dispostas lado a lado em uma calha de alumnio polido. Posteriormente as bagas foram irradiadas em cmara de irradiao dotada de fontes ultravioleta, UV-C (modelo, TUV15W/ G15T8 Longe Life, marca Phillips, com potncia 15 W), com distncia de 49 cm uma irradincia de 0,787 W m -2, sendo o comprimento de onda empregado de 254 nm, o espectroradimetro (modelo RPS900, marca International Light). Nos engaces, os tratamentos T2 e T3 receberam 1-metilciclopropeno (1-MCP), onde utilizou-se o produto Smartfresh (0,14%) na formulao em p, em uma concentrao de 1.000 L L-1 durante 24 horas na temperatura de 20C. Em seguida, a minicmara foi transferida para um ambiente externo antes de ser aberta e os engaces foram retirados e acondicionados juntamente com os demais tratamentos na temperatura de 20C, para o acompanhamento da produo de etileno. Os tratamentos, T1 T4 das amostras das bagas foram acondicionadas em frascos de erlenmeyer de 500 mL com tampas de silicone com duas entradas para avaliar a respirao dos frutos. Os engaces foram acomodados em frascos de polietileno de 790 mL com tampas tambm dotadas de duas entradas com septos de silicone. As amostras permaneceram 20C para desenvolvimento da resposta fisiolgica. Ambas as amostras das bagas e dos engaces foram avaliadas quanto ao etileno com auxlio de um cromatgrafo GC/FID (marca VARIAN), MODELO 3.400, equipado com coluna de ao inox 70cm 1/8 de 70 cm de comprimento preparada com Porapark N 80/100, com nitrognio como gs de arraste. As temperaturas de cmara de injeo, coluna e detector foram 90, 140, 100C respectivamente. Posteriormente, avaliou-se a concentrao de CO2 no analisador de gases (modelo, AGRI-DATALOG, marca Schele, com fluxo de 0,4 L min-1), sendo mensurado em mL CO2 kg-1 h-1. As amostras de engace baga e pednculo foram congeladas em nitrognio lquido e armazenados em freezer -20C. Os tratamentos T5, T6 e T7 dos cachos logo aps a irradiao permaneceram a 20C por 3 dias e em seguida foram vinificados. A extrao dos compostos fenlicos do engace foi atravs de triturao (1 minuto) em liquidificador (marca Philips, 600W) na proporo de (1:10) (m/V) em soluo extratora de etanol/cido clordrico/gua na proporo de 70/1/30 (V/V/V), seguido de centrifugao 2.372,3 g , por 15 minutos. No pednculo e nas bagas a extrao dos compostos fenlicos foi triturao (1 minuto) em Ultra Turrax T 18 Basic S1 da marca IKA 24000 rpm na proporo de 1:10 (m/V) nas amostras de pednculo e 1:2 (m/V) nas amostras das bagas, em soluo extratora de etanol/cido clordrico/gua na proporo de 70/1/30 (V/V/V), seguido de centrifugao 2.372,3 g , por 15 minutos. A determinao de antocianinas totais foi realizada por espectrofotometria descrita por Di Stefano (1989). O mtodo utiliza um espectrofotmetro Femto modelo 600S (mono feixe) com leitura da absorbncia em 540 nm. Em tubo de ensaio foi adicionado 100 L de amostra diluda (1:10) em uma soluo extratora de etanol/ cido clordrico/ gua na proporo de 70/1/30 (V/V/V). A determinao de polifenis totais pelo mtodo Singleton & Rossi (1965) ambos adaptados por Sautter et al. (2008). A medida experimental foi feita atravs da curva de calibrao e realizada a leitura da absorbncia a 765 nm em espectrofotmetro da marca Femto modelo 600S (mono feixe). A curva de calibrao foi feita com um padro de soluo de cido glico nas seguintes concentraes: 0, 10, 20, 30, 40, 50 mg L-1.

RESULTADOS E DISCUSSES
Garca-Robles e colaboradores (2003) em um estudo fisiolgico associado desidratao da rquis de uva de mesa estudaram a respirao e produo de etileno durante o armazenamento. Esses dados demonstram que o engace, sendo um tecido vegetativo herbceo, se comporta como tecido climatrico em uvas de mesa. No engace no foi observado o efeito da irradiao UV-C sobre a produo de etileno ou na respirao, nem na composio fenlica (Tabela 3). Porm, as doses de irradiao ultravioleta interferiram na composio fenlica Tabela 4.

TABELA 3 Parmetros de respirao e produo de etileno de engace de uva Cabernet Sauvignon tratada com trs doses de irradiao UV-C, 1-metil-ciclopropeno (1-MCP) e controle. Santa Maria, 2011.
Tratamentos Etileno (L kg h ) 3 dias a 20C Controle 1-MCP 1-MCP + 2kJ m 1 kJ m-2 2 kJ m
-2 -2 -1 -1

Respirao (mL kg-1 h-1) 5 dias a 20C 0,99 0,90 1,54 0,86 1,16 0,60 a a a a a a 3 dias a 20C 31,2 31,3 32,4 33,3 31,9 32,2 a a a a a a 5 dias a 20C 37,4 28,2 32,4 33,5 33,8 33,6 a a a a a a

0,14 0,31 0,27 0,15 0,57 0,18

a a a a a a

3 kJ m-2
a b

m.s. gramas de glicose por grama de matria seca mdias seguidas pela mesma letra na vertical, no diferem entre si pelo Teste Tukey a 5% de probabilidade de erro

TABELA 4 Parmetros fsico-qumicos de engace de uva Cabernet Sauvignon tratada com trs doses de irradiao UV-C, 1-metil-ciclopropeno (1-MCP) e controle armazenados a 20C por 5 dias. Santa Maria, 2011.
Acares Redutores Tratamentos (g g-1 m.s.)a Controle 1-MCP 1-MCP + 2kJ m 1 kJ m-2 2 kJ m
-2 -2

Acares No-Redutores (g g-1 m.s.)

Etileno

Respirao

Polifenis Totais

(L kg-1 h-1) a a a a a a 0,99 0,90 1,55 0,87 1,16 0,60 a a a a a a

(mL kg-1 h-1) 37,4 28,2 32,4 33,5 33,8 33,6 a a a a a a

(mg L-1) 920,9 911,2 890,9 914,0 910,3 911,7 a a a a a a

129,28 137,33 123,92 111,25 99,71 131,43

ab a a a a a

58,7 34,0 46,4 42,3 37,7 53,9

3 kJ m-2
a b

m.s. gramas de glicose por grama de matria seca mdias seguidas pela mesma letra na vertical, no diferem entre si pelo Teste Tukey a 5% de probabilidade de erro

Na baga foi observado que a irradiao UV-C no foi suficiente para estimular a produo de polifenis totais, havendo um declnio na concentrao desses. Mas, a dose de 1 kJ m-2 no diferiu do controle no teor de antocianinas totais. Isso demonstra que apesar da proteo conferida pelas antocianinas, as mesmas foram estimuladas nessa dose. Portanto, essa dose encontra-se prxima a uma dose hormtica, a qual estimula mecanismo de biossntese sem causar prejuzo ao fruto. A irradiao ultravioleta tem a capacidade de atuar sobre as primeiras camadas celulares. Este fato observado no vinho produzido de uvas irradiadas que tambm no apresentou alterao na composio fenlica (Tabela 5), essa resposta fisiolgica tambm foi observada por Bertagnolli e colaboradores (2007).

TABELA 5 - Parmetros fsico-qumicos de vinho de uva Cabernet Sauvignon 3d tratada com duas doses de irradiao UV-C, e controle. Santa Maria, 2011.
Polifenis Totais Antocianinas -1 -1 (mg L ) (mg L ) (3) Controle 1748,0 a 329,3 a -2 3 kJ m-2 1720,4 a 339,6 a 6 kJ m 1730,0 a 350,8 a (1) (2) Polifenis totais em miligrama de cido glico por litro de vinho. Antocinaninas totais em miligrama de malvidina (3) por litro de vinho. Mdias seguidas pela mesma letra na vertical, no diferem entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro. Tratamento
(1) (2)

A metodologia empregada, no presente trabalho, para a irradiao das bagas foi uniformizada, expondo todas as bagas no mesmo plano, conforme o estudo de Cantos e colaboradores (2001). No entanto, a irradiao dos cachos proporcionou a sobreposio de bagas diminuindo assim, o efeito da irradiao sobre a massa total, como pode ser observado nos polifenis totais e antocianinas totais da Tabela 6. Adrian e colaboradores (2000) estudando contedo de estilbenos durante a maturao em resposta a elicitora com UV-C observaram que h diferenas em trs zonas do cacho de uva, sendo elas bagas superiores e externas, bagas intermedirias e internas ao cacho e bagas inferiores (na extremidade do cacho).
TABELA 6 - Parmetros fsico-qumicos de cascas de uva Cabernet Sauvignon 5d tratada com trs doses de irradiao UV-C, e controle. Santa Maria, 2011.
Tratamento Polifenis Totais(1) (mg g-1m.f.c.) Antocianinas(2) (mg g-1 m.f.c.) Controle a(3) 1,873 a 3,685 1 kJ m-2 3,476 b 1,811 a -2 2 kJ m 3,205 b 1,463 b -2 3 kJ m 3,02 b 1,415 b (1) (2) Polifenis totais em miligrama de cido glico por grama de massa fresca de casca. Antocinaninas totais em miligrama (3) de soluo extratora de massa fresca de casca. Mdias seguidas pela mesma letra na vertical, no diferem entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro.

Outros estudos mostraram que a irradiao ultravioleta tem sido efetiva em outras cultivares como Trebbiano (BERTAGNOLLI, 2007), Isabel (GINDRI, 2010), Itlia, Nigara Rosada (COUTO, 2010), principalmente estimulando determinados polifenis de interesse para sade como, por exemplo, resveratrol, quercitina, catequina, entre outros.

CONCLUSO
No foram observadas alteraes fisiolgicas na composio fenlica e nem na composio de acar nos engaces irradiados, entretanto nas bagas houve declnio de polifenis totais. As antocianinas e polifenis totais protegeram o fruto da irradiao, sendo que foi observado efeito hormtico na dose de 1 kJ m-2. A irradiao em cachos no foi efetiva para a vinificao nas doses apresentadas.

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