DNA Forense
Profa Maria Helena Menezes
GENE 1 GENE 1
GENE 2 GENE 2
GENE 3 GENE 3
GENE 4 GENE 4
GENE 1
GENE 2
GENE 3 GENE 1
GENE 4 GENE 2
GENE 3
GENE 4
DNA fingerprinting e os polimorfismos
DNA fingerprinting e os polimorfismos
● RFLP - Restriction Fragment
Length Polymorphism
● Se baseia nas diferenças de
sítio de clivagem do DNA por
enzimas de restrição.
● Foi a primeira técnica utilizada
para análise de DNA.
● Utilizada no mapeamento do
genoma humano e em testes
de paternidade.
Alec Jeffrey
polimorfismos
● Polimorfismos de Sequência- Substituição, Deleção, Adição de
Bases
● SNPs – Single Nucleotide Polymorphism
● ATCT C CCAT – Alelo 1
● ATCT G CCAT – Alelo 2
● Polimorfismos de tamanho
● STRs – Short Tandem Repeats
ACCT ACCT ACCT – 3 repetições
ACCT ACCT ACCT ACCT – 4 repetições
Primeiro caso criminal ao usar o exame de dna
● Dois casos de estupro seguido de
homicídio: um Dawn Ashworth e Lynda
Mann, ambas de 15 anos de idade.
● Um principal suspeito foi interrogado
mas liberado por falta de provas. Seu
nome era Colin Pitchfork.
● Um homem foi preso e confessou um
dos assassinatos.
● Resolveram realizar o teste de DNA que
acabou inocentando o rapaz preso.
● Decidiram coletar amostras de toda a
população masculina. Cerca de 4500
pessoas foram submetidas a coleta de
sangue.
Primeiro caso criminal ao usar o exame de dna
● Pithfork trocou sua amostra
de sangue o que o deixou
livre de ser pego.
● Entretanto uma denuncia
anônima dizia ter ouvido em
um PUB que Pitchfork teria
trocado a amostra.
● Foi o suficiente para ser
preso e o teste de DNA foi
refeito, dando resultado
positivo.
Popularização do exame de dna
● As Séries televisivas
Popularização do exame de dna
● Casos de repercussão
● O.J. SIMPSON
● Acusado de ter assassinado sua
ex mulher Nicole Brown e seu
amigo Ronald Goldman em
1994.
● Mais de 20 milhões de pessoas
assistiram o julgamento pela TV.
● 45 amostras de sangue no total
ligavam O.J. à cena do crime.
Popularização do exame de dna
POPULARIZAÇÃO DO EXAME DE DNA – CASO O.J.
SIMPSON
● Luvas encontradas na
casa de O. J. Simpson
continha perfil genético
de Nicole.
● Manchas de sangue
encontradas no carro de
Simpson continha perfil
genético de Nicole.
● Fibras e cabelos
POPULARIZAÇÃO DO EXAME DE DNA – CASO O.J.
SIMPSON
● Porque houve a absolvissão
mesmo com a evidência do
DNA forense incriminando O. J.
Simpson?
● O Exame era novidade nos
tribunais.
● Falta de prática na coleta e
manuseio do vestígio
biológico.
● Falta de padronização dos
exames. Simpson após receber o veridicto.
● Resultados estatísticos muitas
vezes difíceis de entender.
Perícia Criminal em Local do Crime – COLETA E
PRESERVAÇÂO DE AMOSTRAS
● A resolução de
crimes depende
da associação
dos vestígios
materiais
encontrados no
local de crime.
Materiais biológicos que podem conter DNA
Fluídos corporais –
• Suor, sangue,
• saliva, sêmen,
• urina, secreção
vaginal.
Restos mortais
• Dentes e ossos.
Fios de
cabelos, pelos,
unhas.
Vestígios potenciais para busca de DNA
Objetos pessoais
• óculos, boné, sapato, sandálias,
escova, etc...
Objetos descartados
• Guardanapo, Garrafas plásticas,
Palito de dente, cigarro, etc...
Armas manuseadas
• Barra de ferro, porrete, faca, espeto
de churrasco, etc...
Métodos gerais de busca – Como encontrar?
● Vestígios latentes
● Necessitam de técnicas específicas para torná-las visíveis.
● Testes preliminares
● Indicam ou classificam a natureza de um vestígio biológico.
● Testes confirmatórios
● Confirmam a natureza de um vestigio.
MÉTODOS DE BUSCA – Testes preliminares para sangue
● Vestígio comum em crimes
contra a vida e relativamente
frequente em crimes contra o
patrimônio.
● A presença de sangue pode ser
de muito valor em determinadas
ocasiões.
● A análise do padrão de dispersão
de sangue pode fornecer indícios
sobre a dinâmica do ocorrido.
● Tendência em ocultar tal vestígio.
Teste de Fluorescência/Luminescência
Testes
Imunocromatográficos
Fatores que afetam a análise do DNA.
● Coletar de maneira correta afim de minimizar a degradação do
DNA:
○ Sangue Líquido: Suabe, Seringa
Degradação
Calor
Umidade
Luz Solar
Substâncias
químicas
Fatores que afetam a análise do DNA.
● Coletar de maneira correta afim de minimizar a degradação do
DNA:
○ Sangue Líquido: Suabe, Seringa
Degradação
Calor
Umidade
Luz Solar
Substâncias
químicas
Fatores que afetam a análise do DNA.
● Coletar de maneira correta afim de minimizar a degradação do
DNA:
○ Sangue em objetos removíveis: Acondicionamento em sacos plástico ou de
papel.
Degradação
Calor
Umidade
Luz Solar
Substâncias
químicas
Fatores que afetam a análise do DNA.
● Coletar de maneira correta afim de minimizar a degradação do
DNA:
○ Sangue Seco: Suabe ou raspagem.
Degradação
Calor
Umidade
Luz Solar
Substâncias
químicas
Fatores que afetam a análise do DNA.
● Coletar de maneira correta afim de minimizar a degradação do
DNA:
○ Sêmen em camisinha: Acondicionamento ou suabe.
Degradação
Calor
Umidade
Luz Solar
Substâncias
químicas
Os marcadores STRs
● São extremamente populares em
análises de DNA forense devido a sua
análise ser baseada em PCR e a
funcionarem com pouca quantidade
de DNA molde ou mesmo com
amostras degradadas.
● Os métodos de análise de
microssatélites são facilmente
automatizados, e envolvem detecção
por fluorescência, o que permite que
o analista colete dados destes
marcadores rapidamente.
● Os STRs são altamente
discriminativos entre indivíduos não
relacionados e mesmo entre
estreitamente aparentados.
Etapas do Exame de DNA
● AMOSTRAGEM
● O vestígio é analisado no Contexto do Local do Crime.
EXTRAÇÃO
As Amostras são submetidas a processos químico e
físico que permitem o isolamento do DNA dos demais
componentes.
QUANTIFICAÇÃO
Uma Reação de PCR em tempo real permite estimar a
quantidade de DNA presente.
Dúvidas?
