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MICROBIOLOGIA
BactEriologia
Prof. Eude de S. Campos
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Objetivos:
- Caracterizar as bactérias;
a – Características bacterianas;
b – Morfologia e arranjos de uma
bactéria;
c – A técnica de coloração de Gram
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BACTERIOLOGIA
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BACTERIOLOGIA
1) Conceito
BACTÉRIAS são micro-organismos unicelulares, procariontes(
desprovidos de envoltório nuclear e organelas membranosas)e em geral
possuem um só cromossomo.
2) Características
A palavra bactéria vem do Grego, onde “bakteria” significa
bastão.
As bactérias são encontradas em todos os ambientes da Terra.
As bactérias são seres microscópicos. A maioria apresenta
reprodução assexuada.
Características Bacterianas
1. São unicelulares (unidade de medida é o micrômetro);
2. Procariontes;
3. Célula desprovida de organelas membranosas;
4. Única organela encontrada é o ribossomo;
5. Podem ser encontradas na forma isolada ou em colônias,
podendo viver na presença de ar( aeróbias) ou na ausência
de ar( anaeróbias) ou ainda serem anaeróbias facultativas;
6. São classificadas quanto a forma, grau de agregação e
parede celular.
CITOLOGIA BACTERIANA
•Parede celular;
•Membrana Plasmática;
•Cápsula;
•Cromossomo (nucleóide);
•Plasmídeo;
•Ribossomos;
•Grânulos de reserva;
•Flagelo;
•Fímbrias;
•Pili;
•Esporos.
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Célula bacteriana
Membrana plasmática
Citoplasma Parede celular
Ribossomos Mesossomo Cápsula
Fímbrias
Enzimas relacionadas
com a respiração,
ligadas à face
interna da membrana
plasmática Plasmídeos
Nucleóide
Flagelo DNA associado
ao mesossomo
CITOLOGIA BACTERIANA
A) Parede celular
Funções:
proteção – controle da pressão osmótica;
Forma celular;
Transporte de nutrientes;
Sítio de fixação de flagelos;
Sítio de reação com anticorpos e complementos;
Sítio de ação dos antibióticos.
*** Dependerá do tipo de bactéria;
***Explica o método de Gram;
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O Método de Gram
Gram + Gram –
*PC mais espessa e rígida; *PC mais complexa; várias
*Grande presença de camadas que diferem na sua
peptidoglicano; composição química;
*Presença do ácido teicóico *Membrana externa :
(antígeno O) que permite o lipoproteínas (estrutural) e
reconhecimento sorológico lipopolissacarídeos
da bactéria; (antígenos O);
*Ácido lipoteicóico - regula a *Delgada camada de
entrada e saída de íons da peptidoglicano.
célula.
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CITOLOGIA BACTERIANA
Bactérias que não se coram pelo método de Gram
apresentam outra composição de parede celular;
Arqueobactérias: não possuem peptidoglicano na
parede celular;
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CITOLOGIA BACTERIANA
B) Membrana Citoplasmática (80% proteína, 20% lipídios)
Funções:
Secreção de enzimas hidrolíticas, bacteriocinas e toxinas;
Obtenção de energia;
Biossíntese;
Divisão celular;
Quimiotaxia;
Permeabilidade seletiva (transportes de membrana).
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CITOLOGIA BACTERIANA
C) Cápsula
Envoltório externo viscoso presente em algumas bactérias;
Composta de polissacarídeos;
Dependendo da concentração:
Espirilo
Estafilococos
Sarcina – Forma cúbica Estreptobacilo
Membrana plasmática
Parede
celular
Proteína semelhante à membrana
plasmática, com
lipopolissacarídeos
Camada de peptidoglicano
Lipoproteínas
Membrana plasmática
Esquema de parte da parede celular e da
membrana plasmática de bactéria gram-negativa.
Método de Coloração de Gram
A técnica de coloração de Gram consiste em expor as células
bacterianas à seguinte sequência:
Corante primário – violeta de cristal: cora o citoplasma de
púrpura, independentemente do tipo de célula.
Mordente – solução de iodo: aumenta a afinidade entre o violeta
de cristal e a célula e forma com o corante um complexo
insolúvel dentro da célula.
Agente descolorante – álcool, acetona ou ambos: solvente
lipídico.
Contrastante – safranina ou fucsina básica: cora o citoplasma de
vermelho.
Método de Coloração de Gram
O que se verifica, quando se observam as diferentes bactérias sujeitas a esta
coloração ao microscópio, é que estas têm um comportamento diferente face
à coloração de Gram, o que permite classificá-las em:
Bactérias Gram-positivo(apresentam cor púrpura)
Bactérias Gram-negativo(apresentam cor vermelha)
Método de Coloração de Gram
• parede celular bacteriana é a estrutura responsável pelo diferente
comportamento das bactérias à coloração de Gram.
As bactérias Gram +
Parede espessa, homogênea, geralmente não
estratificada e predominantemente constituída por
peptidoglicano;
Precipitado insolúvel que se forma por ação do
mordente, fica retido no interior da célula pela camada
espessa de peptidoglicano, logo, estas células não são
descoradas permanecendo com a coloração conferida
pelo corante primário (púrpura).
As bactérias Gram -
Apresentam uma parede estratificada constituída por uma
membrana externa e por uma camada mais interna que
contém peptidoglicano e que é mais fina;
Precipitado insolúvel, que se forma por ação do mordente,
é removido (camada de peptidoglicano é mais fina que a
das Gram-positivo e a membrana externa é parcial ou
totalmente solubilizada pelo agente descolorante), pelo
que as células ficam descoloradas, corando de vermelho
pelo contrastante.
Conclusões finais sobre a técnica
de coloração de Gram
A diferente estrutura da parede celular bacteriana e, em
particular a espessura da camada de peptidoglicano, é a
responsável pelo diferente comportamento das bactérias
face à coloração de Gram.
O peptidoglicano é um heteropolímero rígido e insolúvel
na água, constituído por cadeias lineares de dois açúcares
aminados – NAG (ácido n-acetilglucosamina) e NAM
(ácido n-acetilmurâmico) – ligados entre si por ligações
glicosídicas. As cadeias lineares ligam-se entre si através
de cadeias de quatro aminoácidos.
Este critério de identificação auxilia, por exemplo, o
tratamento a estes agentes etiológicos (as
bactérias): as Gram-negativas são mais tolerantes e
as Gram-positivas são mais sensíveis a antibióticos
(penicilina).