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Cinética dos Processos Fermentativos

______________________________________CINÉTICA DE FERMENTAÇÃO

Nomenclatura Usual:

Yx/s: Fator de Conversão de Substrato em Células (ex: gx/gs).

Yp/s: Fator de Conversão de Substrato em Produto (ex: gp/gs).

Yx/p: Fator de Conversão de Produto em Células (ex: gx/gp).

Y’x/s: F. C. Verdadeiro de Substrato em Células (ex: gx/gs).

rx; rs e rp: Velocidades Instantâneas de Consumo de Substrato; Crescimento


Celular e Formação de Produto (ex: g/L.h).

µx; µs; µp: Velocidades Específicas de Crescimento Celular (ex: h-1); Consumo
de Substrato (ex: gs/gx.h) e Formação de Produto (ex: gp/gx.h).

Qp: Produtividade Volumétrica do Produto (ex: g/L.h).

m: Consumo Específico para a Manutenção (ex: h-1).

Tg: Tempo de Geração do Microrganismo (ex: h).

M.O.: Microrganismo.
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Introdução:

Componentes do sistema de cultivo { [biomassa] = X; [produdo] = P e


o [substrato] = S } em função do tempo de fermentação: X= X
(t), P= P (t) e S= S (t).
1,08
200 60

3 1,07

160

Densidade do mosto (g/mL)


1,06

40
Extrato aparente (g/L)

1,05

Células (g/L)
120 2

Etanol (g/L)
1,04

80 20 1,03

1
1,02
40
1,01
0
0 0 1,00
0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100

Tempo (h) Tempo (h)

Figura 1 - Consumo de Extrato Figura 2 - Células Totais em


Aparente - S () e Produção de Suspensão - X (), da levedura S.
Etanol - P (), pela Levedura S. cerevisiae 308 tipo lager, e
cerevisiae 308 tipo lager, durante Densidade do mosto com adjunto de
a fermentação do mosto com banana () durante a fermentação a
adjunto de banana a 17,50 0P e 15 17,50 0P e 15 0C, no ponto
0C, no ponto otimizado da adição otimizado da adição de nutriente
de nutriente (Carvalho, 2009). (Carvalho, 2009).
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Modelos Simplórios Utilizados Para Descrever o Crescimento


Microbiano:

Os modelos matemáticos mais simples e mais utilizados para descrever


o crescimento microbiano são os modelos “não-segregados” e “ não-
extruturados”:

Modelos “não-estruturados”: são aqueles que consideram a população


celular homogênea, tanto de ponto de vista metabólico, como
estrutural.

Modelos “não-segregados”: são aqueles que consideram as células


razuavelmente idênticas entre si de modo a poderem ser
indistintamente agrupadas em numa “biofase”.
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Parâmetros de Transformação:

-Velocidades Instantâneas de consumo de substrato (rs), de


crescimento celular (rx) e de formação de produto (rp).

rx = dx/dt

rs = -ds/dt

rp = dp/dt

-Velocidades Específicas de consumo de substrato (µs), de


crescimento celular (µx) e de formação de produto (µp).

µx = (1/x) / (dx/dt)

µs = (1/x) / (-ds/dt)

µp = (1/x) / (dp/dt)
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-Fatores de Conversão.

Em um tempo (t) de fermentação podemos correlacionar X, S e P através


dos fatores de conversão:

Yx/s = (X-Xo) / (So-S)

Yx/p = (X-Xo) / (P-Po)

Yp/s = (P-Po) / (So-S)

Como na maioria dos cultivos Yx/s, Yx/p ou Yp/s não são constantes,
então somente seus valores instantâneos deverão ser levados em conta:

Yx/s = dx/-ds

Yx/p = dx/dp

Yp/s = dp/-ds
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Das definições resultam as seguintes relações:

Yx/s = rx/rs = µx/µs

Yx/p = rx/rp = µx/µp

Yp/s = rx/rs = µx/µs

E tem-se ainda que:

Yx/s = Yx/p . Yp/s

- Produtividade volumétrica do produto (Qp):

Qp = Pf – Pi / tf – ti
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Modelo de Monod

• Em 1942, Jaques Monod propôs uma relação


matemática para descrever o efeito do crescimento
limitante em função da taxa específica de
crescimento.
• O crescimento da biomassa é dependente da
disponibilidade do nutriente.
• Quando estamos em condições de limitação do
nutriente a mx reduz-se até cessar completamente o
crescimento, em condições de exaustão do nutriente.
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Modelo de Monod

where

µm taxa específica de crescimento máxima


Ks constante de saturação ou de Monod
S concentração do substrato limitante .
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Modelo de Monod
V max[ S ]
V=
Km  [ S ]
A taxa específica de crescimento máxima é a taxa máxima de crescimento
obtida para condições não limitantes.

A constante de Monod (Ks) é a concentração do nutriente limitante para a qual


a taxa de crescimento é metade da taxa de crescimento máxima;
Representa a afinidade do organismo para o nutriente.
Os valores de µm e Ks dependem do organismo do nutriente limitante do meio
de fermentação e de fatores como temperatura e pH
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A linearização do modelo de MONOD:

1 ks
m m max

1
m max
1
S
1 ks 1 1
 * 
m mmax S mmax
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Coeficiente de Rendimento

Rendimento define-se como a quantidade de produto


obtida para determinado substrato.

• Por exemplo, se 0.6 g de ácido cítrico é produzido a


partir de 1 g de glicose , então o rendimento de
ácido citrico de glicose é 0.6 g/g.
• O rendimento pode variar consideravelmente
durante a fermentação. Por isto, o rendimento
médio é frequentemente expresso como eficiência
da produção.
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Coeficiente de Rendimento

Diferentes tipos de coeficientes de

• Rendimento de Biomassa (Yxs)

• Rendimento do produto (Yps).

• O rendimento à biomassa é a biomassa (média) produzida por


unidade de massa de substrato consumido
• X0 and S0 são as concentrações iniciais de biomassa e de substrato .

• X1 and S1 são as concentrações de biomassa e de substrato no final da


fermentação.
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Coeficiente de Rendimento
O rendimento do produto :

Po and So são as concentrações iniciais.


EXEMPLO DE APLICAÇÃO
• Avaliação do modelo de Monod na produção de
biomassa de Pleurotus ostreatus DSM 1833 em
cultivo submerso. Zanotelli, C.T., Medeiros, R. Furlan, S.A.,
Wisbeck E.
Revista Saúde e Ambiente, 8-2:14-18
Microrganismo: Pleutotus ostreatus
Meio de Cultivo: Glicose (20 g/L)
Suplementação:NH4SO4 (5 g/L)
MgSO4 (0,2 g/L)
K2HPO4 (1 g/L)
Extrato de Levedura (2 g/L)
Peptona (1 g/L)
CaCO3 (1 g/L)
EXEMPLO DE APLICAÇÃO
Condições de Cultivo:
Bioreator: Modelo B. Braun
Volume: 4 Litros
Temperatura: 30 oC
Agitação: 300 rpm
Aeração: 0,25 ou 1 L/min
KLA: 15 ou 27 h-1
pH: 4,0
Pé de cuba: 10%
EXEMPLO DE APLICAÇÃO
Mode Cinético:
Velocidade Específica de Crescimento: (1)

dx/dt: variação entre a concentração final (X)


e inicial (Xo ) de biomassa em função da variação de tempo (g.L-1.h-
1);
µm: máxima velocidade específica de crescimento (h-1);
X: concentração de biomassa celular no instante t (g.L-1);
S: Concentração de glicose no instante t (g.L-1);;
Ks Constante de saturação de glicose do modelo de Monod (g.L-1);
Aeração: 0,25 ou 1 L/min
EXEMPLO DE APLICAÇÃO
Velocidade de consumo de glicose sem formação de produto:
(2)

em que: ds/dt é a variação da concentração inicial (So)


e final (S) de glicose em função do tempo (g.L-1.h-1).
Yx/s: fator de conversão de glicose em biomassa (g.g-1)
EXEMPLO DE APLICAÇÃO
Yx/s = rx/rs

( x0  x f )
Yx / s 
(S0  S )
• X = X0 + Yx/s (So – S)
• então da equação 2, vem:

(k s  S ) m max
(4) ds  
S ( X o  Yx / s ( S o  S ) Yx / s
EXEMPLO DE APLICAÇÃO
Integrando a equação 4, tem-se:

Z = bU – d (equação da reta)

S
ln
So
z
t
EXEMPLO DE APLICAÇÃO
ln 1  ( S o  S )
yx / s
xo
U 
t
m max ( X o  Yx / s So )
d
Yx / s K s
X o  Yx / s So
b  1
Yx / s K s
Os parâmetros
Ks e mmax
Foram estimados a partir de dados
experimentais:
Valores de m max e Ks
Parâmetros KLa inicial (15 h-1) KLa Inicial (27 h-1)
S0 (g/L) 22,19 20,36
KLa (h-1) 15,0 27,0
Xo (g/L) 0,10 0,19
Yx/s (g/g) 0,355 0,344
µmax (h-1) 0,041 0,033
Ks (g/L) 13,03 6,15
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A linearização do modelo de MONOD:

1 ks
m m max

1
m max
1
S
1 ks 1 1
 * 
m mmax S mmax
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Exercício:

4) Os dados obtidos de uma fermentação descontínua estão ilustrados na tabela


abaixo. Determine:
a) A forma linear do modelo matemático de Monod, demonstrando graficamente
os coeficientes linear e angular.
b) Os parâmetros cinéticos Ks e µm.

T (h) X (g/L) S (g/L) dx/dt


0,00 15,50 74,00 12,24
0,52 22,50 61,00 15,90
0,86 28,60 49,00 19,63
1,18 35,30 37,00 22,29
1,43 41,10 26,00 23,92
1,74 48,20 11,00 20,20
2,06 53,00 3,00 9,12

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