UNIVERSIDADE EDUARDO MONDLANE

Ordem de Apresentao
1. Objectivos

2. Isolamento
3. Purificao 4. Caracterizao 5. Exemplos Concretos

1. Objectivos
Fazer levantamento bibliogrfico concernente s tcnicas de isolamento, purificao e caracterizao de alcalides; Apresentar a aplicao dessas tcnicas em exemplos concretos.

2. Isolamento
Os mtodos gerais de extraco dos alcalides se baseiam nas diferenas de solubilidade entres as bases alcalidicas e seus sais em gua e em solventes orgnicos.

Existem dois mtodos de extraco:

1) Extraco com solventes orgnicos em meio alcalino O material contendo o alcalide pulverizado e misturado com uma soluo alcalina que desprende os alcalides das suas combinaes salinas; as bases libertadas se solubilizam em um solvente orgnico.
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Figura 1: extraco em meio alcalino

Bases: amnia, carbonatos, mistura de hidrxido de sdio e hidrxido de clcio.

Solventes: solventes clorados, benzeno, ter dietlico, etc.

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A fase orgnica depois submetido a processos continuos de

extraco. A separao da fase aquosa da orgnica pode ser feita por

decantao.

2.

Extraco com solventes orgnicos em meio cido

Na extraco dos alcalides em meio cido podem ser observados

dois casos, nomeadamente:

a) O alcalide pulverizado e extrado com gua acidificada;

b) O alcalide tratado com uma soluo alcolica ou hidroalcolica. Neste caso, a soluo extrada se concentra por

destilao a vcuo para eliminar o lcool.

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Figura 2: extraco em meio cido

Nos dois casos se obtm uma soluo aquosa de sais de alcalide que

podem ser tratados com um lcali.

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Existem tcnicas especficas para se extrair alcalides volteis (destilao em corrente de vapor de gua); alcalides de fraca

basicidade e alcalides que so bastante solveis em gua.

3. Purificao
A purificao consiste nos procedimentos que tem como finalidade a eliminao de impurezas que possam mascarar

resultados.
Os alcalides isolados podem ser submetidos diversas tcnicas comatogrficas e a vrias recristalizaes com o mesmo eluente,

onde so depois desidratados.

Podem depois disto, se submeter anlise espectroscpica para

avaliar o seu grau de pureza.

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4. Caracterizao
Dependendo da anlise a se efectuar, em funo dos resultados, se aplica uma tcnica de confirmao. A caracterizao pode se levar a cabo mediante diversas tcnicas cromatogrficas (como por exemplo: cromatografia em coluna, em papel, em camada fina e gasosa), ensaios biolgicos ou reaces qumicos, tcnicas espectromtricas como UV, IR, RMN
1H,

RMN

13C,

MS, etc, no obstante aplicam-se tambm tcnicas

acopladas como o caso de GC-MS.

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5. Exemplos Concretos
5.1. Tcnicas de Isolamento
O extracto EtOH dos bulbos de Amacrinum (uma espcie de planta para fins ornamentais) so submetidos a aco cido-base, direccionados para o isolamento de seus alcalides, fornecendo segundo o Esquema abaixo os extractos CHCl3 e AcOEt (Amacrinum 1 e Amacrinum 2 respectivamente)

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Esquema 1: Fracionamento cido-base, dirigido obteno de extractos ricos em alcalides dos bulbos de Amacrinum.

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5.2. Purificao
Extracto de CHCl3 de Amacrinum 1
CCF - 40 fraces aps CCDA agrupadas em 8

Vrias Fraces de Amacrinum

CCDP heptano: AcOEt (80%) atm. NH3 4 fraces

Beladina
CCF cromatografia em coluna a mdia presso, tipo Flash. CCDA cromatografia em camada delgada analtica. CCDP cromatografia em camada delgada Preparativa.
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Extracto de CHCl3 de Amacrinum 1

CCDP CHCl3:MeOH (2%) atm. NH3

Fraco 1
CCDSP heptano: AcOEt (75%)

Fraco 2
CCDP heptano: AcOEt (75%)

Fraco 3
CCDP heptano: AcOEt (75%)

11-O-acetil-ambelina

undulatina

Fraco 3'
CCDSP heptano: AcOEt (75%)

N-desmetilbeladina
CCDP cromatografia em camada delgada Preparativa.

CCDSP cromatografia em camada delgada semi-preparativa.

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11-O-acetil-ambelina

undulatina

N-desmetilbeladina Figura 3: estrutura dos alcalides 11-O-acetil-ambelina, undulatina e N-desmetilbeladina

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5.3. Caracterizao
Como exemplo para a caracterizao dos alcalides se pode
citar o exemplo desenvolvido no isolamento e na purificao, a beladina.

Figura 3: estrutura da beladina

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RMN 1H

Dupletos de hidrognios aromticos: 7,76 e 6,82

Singuleto largo em 6,88 Dupleto em d 6,79, integrados a um e dois hidrognios.

3 grupos metilnicos (CH2) em 3,66; 2,69 e 2,67 4 singuletos de metila (CH3): trs em 2,50 e um em 2,26.

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RMN 13C

O sinal de CH3 em d 44,4 indica a presena de grupo metila

ligado ao nitrognio; Os sinais de CH3 em d 29,3 (2 carbonos), 26,6, o de CH2 em d

33,1 e os de CH em d 128,7 (3carbonos), 127,6 (2carbonos),

128,4 e 133,1 indicam a presena de dois anis aromticos; Os sinais de CH2 (em d 62,3 e 65,2) indicam a presena de grupos metoxilas.
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Espectro de Massa
O espectro de massas do alcalide beladina, no apresenta o io molecular m/z 315 [C19H25NO3]+, apenas outros ies caractersticos, sendo os principais: m/z 194 [C11H16NO2]+ (21%) e m/z 151 [C9H11O2]+ (100%), como mostra a figura abaixo:

Figura 4: Fragmentao proposta para o alcalide beladina

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Espectro 3: Espectro de Massas (IE; 70 eV) de beladina

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KHANIMAMBO!!!!

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