Paralelamente, h relao inversa entre os nveis de colesterol HDL e DCI.

Atravs desses estudos epidemiolgicos foram caracterizados os chamados fatores de risco: 1 - Histria familiar de DCI prematuro (infarto do miocrdio ou morte sbita antes dos 55 anos em parentes prximos). 2 - Fumante (consumo superior a 10 cigarros dirios). 3 - Hipertenso arterial. 4 - Diabete melitus. 5 - Histria de acidente vascular perifrico ou doena vascular oclusiva perifrica. 6 - Obesidade severa (aumento de 30% ou mais no peso, em relao ao valor terico). 7 - Colesterol HDL inferior a 40mg/dL (repetidas dosagens). CARACTERSTICAS DE DESEMPENHO Sensibilidade Clnica e Especificidade Foram realizados 52 testes em amostras cujo teor de Colesterol HDL situava-se no intervalo de 33 a 133mg/dL. A comparao entre os produtos deu origem seguinte equao de regresso linear: Y= 0,99X + 2,81mg/dL. O coeficiente de correlao foi de 0,996. Repetitividade Foram realizadas 20 dosagens sucessivas, com 03 amostras , obteve-se os seguintes resultados:
Parmetro Mdia DP CV% Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 32,9 0,3 0,8 50,1 0,2 0,5 101,4 0,7 0,7

2000mg/dL, Hemoglobina at 1000mg/dL e Gama Globulina at 5000mg/dL no produzem interferncia significativas.

COLESTEROL HDL DIRETO SC

FINALIDADE Sistema para determinao quantitativa de Colesterol HDL em amostras de soro ou plasma. Somente para uso diagnstico in vitro. PRINCPIO A quantificao de Colesterol HDL feita em duas etapas. Na primeira fase da reao um detergente especfico solubiliza as lipoprotenas de baixa densidade ( LDL , VLDL ) e Quilomicrons , permanecendo intacta a lipoprotena HDL. O Colesterol livre de QM, LDL e VLDL consumido por ao da enzima Colesterol Oxidase (CO), com liberao de H202. O Perxido de Hidrognio consumido atravs de reaes com Peroxidase (POD) e N, N disulfobutilmetatoluidina (DBSmT) resultando numa reao no corada, devido ausncia de Aminoantipirina.

(SEM CALIBRADOR)

BIBLIOGRAFIA CONSULTADA Vikani J. Scand J.: Clin. lab. invest. 36, 205268, 1976. Castelli W.P. Doyle J.T. Gordon T. e cols.: Circulation 55, 762-772, 1977. Izzo C.Griclo F, Mirador E.: Clin. chem. 27, 371-374, 1981. Warnick G.R., Nguyen T. e Albers : Clin. chem.31, 217-222, 1985. Methods for clinical laboratory measurement of lipid and lipoprotein risk factors AACC. Press, 1991. Pagana K.D.: Morbys diagnostic and laboratory test reference, 464-466, 1992. Tibrcio, H.M.: Controle interno da qualidade analtica, 1aed. maro/1995. III Diretrizes Brasileiras sobre dislipidemias Sociedade Brasileira de Cardiologia. Doles: Dados de Arquivo. TERMOS E CONDIES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO As garantias do fabricante ao consumidor seguem estritamente as relacionadas na Lei no 8.078, de 11 de setembro de 1.990 - Cdigo de Defesa do Consumidor. Os reagentes que compem este sistema para diagnstico so garantidos na sua performance, reprodutibilidade e qualidade at a data de vencimento. Os produtos que apresentarem problemas tcnicos comprovados sero substitudos sem nus para o consumidor. Doles Reagentes e Equipamentos para Laboratrios Ltda. CNPJ: 01.085.513/0001-05 Rodovia BR 153, Km 493, Lt. 07, Chcara Retiro Conjunto Palmares CEP: 74.775-027 Goinia - GO - Brasil e-mail: doles@doles.com.br M.S.: 10231810117

enzimas CE e CO oxidado com liberao de Perxido de hidrognio (H2O2). Este frente Aminoantipirina e o cromgeno DBSmT sob ao da Peroxidase presente, gera um novo produto de colorao avermelhada, diretamente proporcional concentrao do Colesterol HDL.

PARTICULARIDADES DO SISTEMA O kit de Colesterol HDL Direto SC Doles permite quantificar de forma rpida, simples e dispensa a precipitao. METODOLOGIA Enzimtico colorimtrico direto. REAGENTES Reagente 1: Tampo pH 6,0, Colesterol oxidase _ 1300U/L, DSBmT 1mmol/L, _ 1000U/L, Peroxidase < < Detergente 1 1mmol/L e Azida sdica 0,06%. Reagente 2: Tampo pH 6,0, Colesterol _ 1500U/L, 4-Aminoantipirina 1mmol/L, esterase < _ 3000U/L, Detergente 2 2% Ascorbato oxidase < Adio do reagente 2 contendo Colesterol e Azida sdica 0,06%. Esterase (CE), Aminoantipirina e um segundo detergente solubiliza a lipoprotena HDL , APRESENTAO imobilizando as demais lipo e quilomicrons. Ref. A 3 x 15mL Com a solubilizao da lipoprotena HDL , Reagente 1 3 x 5mL seu colesterol livre e esterificado sob ao das Reagente 2

Reprodutibilidade Foram realizadas 40 dosagens, em cada amostra, durante 10 dias consecutivos, obteve-se os seguintes resultados:
Parmetro Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 Estatstico Mdia DP CV% 32,8 0,4 1,3 50,0 0,7 1,5 100,1 1,1 1,1

Reviso: 01 (08/2011)

Interferentes Concentraes de Bilirrubina at 60mg/dL, cido ascrbico at 100mg/dL, triglicrides at

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SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goinia) SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)

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Ref. B Reagente 1 Reagente 2 Ref. C Reagente 1 Reagente 2 Ref. D Reagente 1 Reagente 2 NMERO DE TESTES REF. A Manual Automao REF. B Manual Automao REF. C Manual Automao REF. D Manual Automao

3 x 20mL 3 x 6,7mL

2 x 45mL 2 x 15mL

2 x 120mL 2 x 40mL

CUIDADOS E PRECAUES COM O USO DOS REAGENTES Todos os reagentes so somente para uso diagnstico in vitro. Seu manuseio deve ser cuidadoso, evitando-se o contato com pele e mucosas. Os reagentes 1 e 2 contm Azida sdica (irritante). No pipetar o reagente com a boca. O descarte do material utilizado dever ser feito obedecendo-se aos critrios de biossegurana estabelecidos pelo laboratrio, de acordo com as normas locais, estaduais ou federais.
Observar ainda a simbologia constante nos rtulos do produto: Irritante

CLCULOS

Concentr. Colesterol HDL = x Calibrador (CC) (mg/dL) (A2 - A1) calibrador

(A2 - A1) teste

Exemplo:

Teste A2 - A1 = 0,074 - 0,025 = 0,049 Calibrador A2 - A1 = 0,090 - 0,014 = 0,076 Concentr. calibrador = 45mg/dL Teste (Concentr.) = 0,049 0,076 x 45 = 29,01

No substituir componentes deste kit com o de outros fabricantes, nem usar componentes de lotes e cdigos diferentes. O uso de amostra controle de referncia deve ser uma prtica rotineira do laboratrio. Recomendase utilizar uma amostra controle com valor na faixa de normalidade (Soro Controle N Doles) e outra amostra controle de valor elevado (Soro Controle P Doles). VALORES DE REFERNCIA Estudos epidemiolgicos mostram relao entre colesterol sanguneo e prevalncia de doena coronariana isqumica (DCI). Tratamento estatstico dos valores de Colesterol total e fraes correlacionados com DCI sugerem valores ditos desejveis e explicitados abaixo:
Crianas e adolescentes Lpides
Colesterol Total (idade 2 a 19 anos) Colesterol LDL (idade 2 a 19 anos) Colesterol HDL (<10 anos de idade) Colesterol HDL (10 a 19 anos de idade)

A reao segue lei de Beer, podendo se trabalhar com Fator (F) Fator F = 45 0,076 = 592,1

60 testes 150 testes

80 testes 200 testes

AMOSTRA Soro ou plasma (EDTA ou Heparina). Estvel por 7 dias sob refrigerao (2-8C). O paciente deve estar em jejum obrigatrio de 12hs. Todas as amostras biolgicas devem ser consideradas como potencialmente infectantes. PROCEDIMENTO TCNICO Protocolos para equipamentos automticos, esto disponveis no site Doles ou atravs do Servio de Atendimento ao Consumidor. Ateno: para calibraes em sistemas manuais ou automticos utilize o Calibrador, do kit Colesterol HDL Direto. ENSAIO Pipetar em tubo de ensaio:

Ex. Concentr. Teste = 0,049 x 592,1 = 29,01 mg/dL

LINEARIDADE O mtodo possui intervalo de medio de 2,5 a 200mg/dL. RESULTADOS EM UNIDADES DO SISTEMA INTERNACIONAL (S.I.) Colesterol HDL mmol/L = Colesterol HDL mg/dL x 0,0259 LIMITAES DO SISTEMA Para se obter timo desempenho do sistema, necessrio que o procedimento tcnico seja rigorosamente seguido conforme instrues de uso. Qualquer alterao poder levar a resultados errneos. A amostra no deve permanecer por mais de 14 horas temperatura ambiente (15 a 30)C. Anticoagulante contendo citrato no deve ser utilizado. Proteger os reagentes da exposio direta luz solar. No congelar os reagentes. Lipemia no interfere at 1800mg/dL. CONTROLE DA QUALIDADE DO SISTEMA A limpeza e a secagem adequada do material a ser utilizado so de fundamental importncia para a estabilidade dos reagentes e obteno de resultados corretos. Ler cuidadosamente as instrues de uso antes de realizar o teste. A data de validade do kit fechado corresponde ao ltimo dia do ms assinalado na etiqueta da caixa do kit. No usar componentes do kit aps a data de validade. Utilizar as Boas Prticas de Laboratrio (BPLs) na conservao, manuseio e descarte dos materiais.

Valores (mg/dL) Classificao <170 Desejvel 170 a 199 Limtrofe >200 Alto <100 100 a 129 >130 >40 >35 Desejvel Limtrofe Alto Desejvel Desejvel

120 testes 300 testes

320 testes 800 testes

Adultos (maiores de 20 anos de idade) Lpides

Colesterol Total

Valores (mg/dL) Classificao <200 timo 200 a 239 >240 <100 100 a 129 130 a 159 160 a 189 >190 <40 >60 Limtrofe Alto timo Desejvel Limtrofe Alto Muito Alto Baixo Alto (desejvel)

Protocolos para equipamentos semiautomticos e automticos, esto disponveis no site Doles ou atravs do Servio de Atendimento ao Consumidor. EQUIPAMENTOS E MATERIAIS NECESSRIOS NO FORNECIDOS Analisador capaz de medir a absorvncia em 600nm. gua reagente tipo II. Tubos de ensaio. Pipetas graduadas. Pipeta semiautomtica. Ponteiras descartveis. Pera para pipetagem. Calibrador (componente do kit Colesterol HDL Direto) ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE DOS REAGENTES Conservar o kit entre 2 e 8C. Estvel at a data de vencimento indicada no rtulo do produto, obedecidas as condies de armazenamento. No congelar.

Colesterol LDL

Amostra Calibrador Reagente 01

Calibrador *** 10mL 0,75mL

Teste 10mL *** 0,75mL

Colesterol HDL

Homogeneizar e incubar em banho maria a 37C por 5 minutos. Selecionar o comprimento de onda de 600nm, zerar o aparelho com gua destilada/ deionizada e ler a absorvncia A1 do teste e calibrador.

Reagente 02

0,25mL

0,25mL

Homogeneizar e incubar em banho maria a 37C por 5 minutos. Selecionar o comprimento de onda de 600nm, zerar o aparelho com gua destilada/ deionizada e ler a absorvncia A2 do teste e calibrador.

SIGNIFICADO CLNICO Desde a dcada de 60, sabe-se que nos indivduos em que o nvel de colesterol ligado s lipoprotenas de alta densidade (Colesterol HDL) baixo, a incidncia de coronariopatias mais elevada. Inversamente, os indivduos com teores elevados de Colesterol HDL apresentam, estatisticamente, incidncia menor de cardiopatias coronarianas. Tais fatores so explicados por pesquisas, as quais demonstram que as lipoprotenas de alta densidade (HDL) mobilizam o colesterol depositado ao nvel da ntima das artrias, transportando-o para o fgado, onde ser metabolizado. Estudos epidemiolgicos realizados em comunidades (destacam-se os estudos em Framinghan) mostram relao direta entre nveis de colesterol total e doena coronariana isqumica (DCI).

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SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goinia) SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)

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