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Curso Intensivo de Viveiros e Produção de Mudas
Curso Intensivo de Viveiros e Produção de Mudas
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria Centro Nacional de Pesquisa de Florestas Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento
Documentos 79
Exemplares desta publicao podem ser adquiridos na: Embrapa Florestas Estrada da Ribeira, km 111 Caixa Postal 319 Fone: (41) 666-1313 Fax: (41) 666-1276 Home page: hhtp://www.cnpf.embrapa.br E-mail: sac@cnpf.embrapa.br Comit de Publicaes da Unidade Presidente: Moacir Jos Sales Medrado Secretrio-Executivo: Guiomar Moreira de Souza Braguinia Membros: Antnio Carlos de S. Medeiros, Edilson B. de Oliveira, Erich G. Schaitza, Honorino R. Rodigheri, Jarbas Y. Shimizu, Jos Alfredo Sturion, Patricia P. de Mattos, Srgio Ahrens, Susete do Rocio C. Penteado Supervisor editorial: Moacir Jos Sales Medrado Revisor de texto: Ralph D. M. de Souza Normalizao bibliogrfica: Lidia Woronkoff Foto(s) da capa: Ivar Wendling Editorao eletrnica: Marta de Ftima Vencato 1a edio 1a impresso (2002): 500 exemplares Todos os direitos reservados. A reproduo no-autorizada desta publicao, no todo ou em parte, constitui violao dos direitos autorais (Lei no 9.610). CIP-Brasil. Catalogao-na-publicao.
Wendling, Ivar Curso intensivo de viveiros e produo de mudas / Ivar Wendling, Mrcio Pinheiro Ferrari e Fernando Grossi. - Colombo : Embrapa Florestas, 2002. 48 p. (Embrapa Florestas. Documentos, 79). ISSN 1517-536X 1. Viveiro florestal - curso. 2. Muda - produo. I. Ferrari, Mrcio Pinheiro. II. Grossi, Fernando. III. Ttulo. IV. Srie. CDD 634.9564
Embrapa 2002
Autores
Ivar Wendling Engenheiro Florestal, Doutor, Pesquisador da Embrapa Florestas. ivar@cnpf.embrapa.br Mrcio Pinheiro Ferrari Engenheiro Florestal, Mestre, Pesquisador da Embrapa Florestas. marcio@cnpf.embrapa.br Fernando Grossi Engenheiro Florestal, Doutor, Professor na Universidade Federal do Paran. fgrossi@floresta.ufpr.br
Apresentao
A vida moderna afasta o ser humano cada vez mais da natureza, criando a necessidade de se levar plantas para mais prximo do seu convvio, nos lares, escritrios, jardins, praas pblicas, reas de lazer etc, promovendo-se, dessa forma, um sentimento de unidade entre o ser humano e a natureza, mantendo uma relao ntima entre si. Esses fatores, aliados produo de alimentos (frutos, razes, folhas), sombra, flores e utenslios (madeira, papel, energia, etc.) promovem uma demanda cada vez maior de mudas de plantas arbreas. O xito de um empreendimento com plantas arbreas depende da escolha da espcie ideal para cada local de plantio, do objetivo e, principalmente, da qualidade das mudas a serem plantadas. Essas, alm de resistirem s condies adversas encontradas, como secas, elevada insolao, baixa fertilidade do solo, pragas, doenas etc, devem ser capazes de se desenvolver e poder mostrar todo seu potencial em relao aos objetivos para os quais foram produzidas. O presente curso tem o objetivo de fornecer subsdios tericos e prticos, alm de esclarecer dvidas relacionadas implantao de viveiros e produo de mudas de espcies arbreas, frutferas e ornamentais.
Sumrio
Apresentao
................................................................................................... 5
Semeadura direta nos recipientes ................................................ 2 4 Desbaste, repicagem, irrigao e dana ...................................... 2 5 Rustificao, seleo e podas de formao ................................ 2 6
2.2 Tratamentos com fitoreguladores de enraizamento ................... 2 7 2.3 Propagao vegetativa ................................................................ 2 7
2.3.1 Estaquia .......................................................................................... 2.3.2 Miniestaquia ................................................................................... 2.3.2.1 Medidas para aumentar o enraizamento em plantas .......... 2.3.3 Mergulhia ........................................................................................ 2.3.4 Enxertia ........................................................................................... 2.3.4.1 Borbulhia ou enxerto de gema ............................................. 2.3.4.2 Garfagem ............................................................................... 2.3.5 Micropropagao ......................................................................... 2.3.5.1 Etapas da Micropropagao ................................................. 2.3.5.2 Preparo do meio de cultura ................................................... 2.3.5.3 Equipamentos e materiais ...................................................... 2.3.5.4 Estrutura fsica ....................................................................... 28 30 29 31 32 33 33 37 38 42 43 45
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Os viveiros temporrios destinam-se produo de mudas em determinado local durante apenas certo perodo e, cumprindo as finalidades a que se destinaram, so desativados. Esses viveiros so de instalaes simples, geralmente dentro da rea de plantio, visando a reduo de custos de transporte das mudas e melhor adaptao das mesmas s condies climticas do local. Os viveiros permanentes tm por finalidade produzir mudas durante muitos anos, e por isso requerem planejamento muito mais cuidadoso, uma vez que suas instalaes so mais sofisticadas e onerosas, para suportar o maior perodo de produo de mudas. Geralmente, esse tipo de viveiro instalado prximo aos centros consumidores de mudas. A rea fsica dividida em benfeitorias, rea de produo de mudas e rea de crescimento ou viveiro de espera, que objetiva conduzir as mudas at maiores tamanhos para objetivos especficos (arborizao urbana, praas, jardins, pomares, florestas etc.). As mudas de razes nuas so aquelas que no possuem proteo para o sistema radicular no momento do plantio. A semeadura feita diretamente nos canteiros e as mudas so retiradas para o plantio, tendo-se apenas o cuidado de evitar danos s razes, insolao direta, vento, evitando-se o ressecamento das razes e posterior morte das mudas. As mudas produzidas em recipientes apresentam o sistema radicular protegido, ou seja, envolto em um substrato que o recipiente contm. Os recipientes, quando biodegradveis (palha, papel, embalagens hidrossolveis), podem ser plantados com as mudas. Porm, para embalagens no biodegradveis, o procedimento correto para o plantio o de retirar a muda da embalagem para liberar as razes e facilitar o pegamento.
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4) ausncia de ventos fortes; 5) boa disponibilidade de mo-de-obra; 6) local bem arejado e ensolarado; 7) solo com boa drenagem; 8) localizao meia encosta; 9) a rea do viveiro deve ser plana ou com at 3% de declividade; 10) rea deve ser livre de ervas daninhas de difcil controle e de plantas que promovam o sombreamento das mudas.
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tanque ou caixa dgua para irrigao; depsito para insumos; almoxarifado para ferramentas e equipamentos; local de produo (sementeiras e/ou embalagens); casa de vegetao e casa de sombra.
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rvores decompostas, moinha de carvo, etc. Atualmente, encontram-se no mercado substratos esterilizados, livres de pragas e doenas, formulados especialmente para a produo de mudas, tais como: composto orgnico, hmus, espuma fenlica (para enraizamento de estacas e cultivo hidropnico), fibra de coco, entre outros. Recomenda-se que seja feita a mistura de dois ou mais materiais para a formulao do substrato, visando uma boa aerao, drenagem e fornecimento de nutrientes de forma adequada. O tipo de material e a proporo de cada um na composio do substrato variam de acordo com a disponibilidade local, custo e tipo de muda a ser produzida. Abaixo se encontram exemplos de formulao de substratos. Porm, ressalta-se que cada formulao dever ser testada nas condies especficas de cada local de produo, e devidamente ajustada, caso haja necessidade. Para mudas de semente em geral:
- 80% de composto orgnico - 20% de moinha de carvo (1 a 3 mm) - 33% de casca de pinus semi-decomposta e moda - 33% de humus - 34% de casca de arroz carbonizada
No Quadro 1 so apresentados alguns grupos de substratos, com suas vantagens e desvantagens, possibilitando a tomada de deciso sobre qual substrato usar, de forma isolada e/ou, preferencialmente em misturas. De modo geral, pode-se recomendar que sejam feitas misturas de materiais de grupos diferentes, o que resulta em maiores alteraes das caractersticas e, ou propriedades do substrato final obtido. O tipo de mistura, bem como a proporo de componentes dos diferentes grupos, deve ser feita objetivando o ajuste das caractersticas e, ou propriedades fsicas, uma vez que as qumicas (fertilidade), normalmente, podem ser facilmente modificadas somente com prticas de adubao e manejo.
Quadro 1 - Classificao em grupos, vantagens e desvantagens de tipos de substratos comumente utilizados na produo de mudas, baseadas em suas caractersticas fsicas e qumicas, origem e forma de produo, compatibilidade e funes nas misturas de substratos.
D esvant agens -
Gr upo
Exem pl os
C om post o or gni co de: est er co bovi no casca de eucal i pto casca de pi nus bagao de cana r es duos sl i dos ur banos outr os r es duos
bai xa por osi dade e aer ao, quando pur os; necessi t am de adubaes bal anceadas de N e S, pr i nci pal m ente em cober t ur a; com posi o qu mi ca var i ada em f uno da or i gem do m at er i al ; podem cont er sem ent es de pl ant as i ndesej vei s, nem at i des, pequenos i nset os, dependendo da f or m a de pr oduo e exposi o.
Tur f as
apr esent am car act er st i cas f si cas e qu mi cas m ui t o var i vei s; podem sof r er gr andes osci l aes de vol um e; pr odut o no r enovvel .
C asca de ar r oz car boni zada Ci nza de cal dei r a de bi om assa Bagao de cana car boni zado
r eduzem a capaci dade de r et eno de gua do subst r at o; possuem pH m ui t o el evado ( > 6, 5) , podendo pr ovocar def i ci nci as de m i cr onut r i ent es; bai xas concent r aes de N e S; r el ao C / N m ui to al t a.
V er mi cul i t a com er ci al
Ter r a de subsol o
V antagens pr oduzi do a par ti r de pr ocessos nat ur ai s; boa consi stnci a dent r o dos r eci pi ent es; m di a a al ta por osi dade e dr enagem ; m di a a al ta capaci dade de r et eno de gua e nutr i ent es; el evada f er t i l i dade ( m acr oemi cr onut r i ent es) ; f ci lobteno e pr ocessam ent o; bai xo cust o; per mi t e boa f or m ao e agr egao do si st em a r adi cul ar das m udas f or m adas a par t i r de pr ocessos nat ur ai s; el evada capaci dade de r et eno de gua e nut r i ent es, quando bem decom post as; m di as a al t as concent r aes de N , P e K; al t a C TC efeti va, equi val ent e ou super i or ao gr upo A . bai xa densi dade gl obale al t a por osi dade; apr esent am boa hom ogenei dade no t am anho das par t cul as; f ci lobteno e pr ocessam ent o; bai xo cust o; pr at i cam ent ei sent os de i ncul os de doenas, pl ant as i ndesej vei sei nset os. bai xa densi dade e par t cul as gr andes, el evando a aer ao e dr enagem ; el evada por osi dade; bem padr oni zada quant o s car act er st i cas qu mi cas e f si cas; pr at i cam ent ei sent a de i ncul os de doenas, pl ant as i ndesej vei sei nset os; m di a a al ta capaci dade de r et eno de gua e nutr i ent es, quando no m ui t o ar enosa; bai xo cust o; f ci lobteno e pr ocessam ent o; pr at i cam ent ei sent a de i ncul os de doenas, pl ant as i ndesej vei sei nset os.
quando pr edom i na no substr at o, pr om ove a f or m ao de si st em a r adi cul ar pouco ader i do; cont r ai se no uso, aps vr i os ci cl os de um edeci m ento e secagem ; bai xas concent r aes de N , P, K, C a, S, Fe, Zn, B; apr esent am def i ci nci as e r el aes i nadequadas entr e al guns nutr i ent es; bai xa por osi dade e aer ao, quando m ai s ar gi l osas; bai xa capaci dade de r et eno de gua, quando m ai s ar enosas; bai xas concent r aes de nut r i entes; pr odut o no r enovvel ; al t a densi dade.
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As caractersticas e, ou propriedades fsicas e qumicas dos substratos so variveis em funo de sua origem, mtodo de produo/obteno, propores de seus componentes, entre outras caractersticas. No Quadro 2, apresentada uma relao das caractersticas e, ou propriedades fsicas e qumicas de alguns substratos para produo de mudas. Caso haja possibilidade, todo substrato utilizado no viveiro dever ter suas caractersticas e/ou propriedades fsicas e qumicas analisadas, o que embasa melhor a formulao de misturas e adubaes. Estudos resultaram em uma escala de valores para interpretao das principais caractersticas e/ou propriedades fsicas e qumicas de substratos para produo de mudas florestais (Quadro 3). De maneira geral, estas recomendaes tambm podem ser adotadas para a produo de mudas de plantas ornamentais. Recomenda-se a adio de nutrientes no substrato para promover o suprimento dos elementos necessrios, economizando-se tempo no processo de produo das mudas. Sua formulao e dosagem so variveis em funo do tipo de substrato utilizado e da espcie a ser produzida; recomendada a realizao de uma anlise qumica do substrato, e caso haja necessidade de se proceder a correo da acidez do substrato (pH < 5,0) e elevar o nvel de fertilidade podese consultar as tabelas de recomendao de adubao e calagem, elaboradas por institutos de pesquisas, para a planta que se deseja produzir.
Quadro 2. Caractersticas e, ou propriedades fsicas e qumicas de alguns substratos usados para produo de mudas. Onde: TS = terra de subsolo; CAC = casca de arroz carbonizada; CED = casca de eucalipto decomposta; VF = vermiculita fina; HM = hmus de minhoca; COG = composto orgnico de gado.
C ar act er st i cas
( 1) ( 2)
Tur f a CO G
TS
CAC
C ED
VF
HM
80% H M 20% CA C 0, 40 1, 7 77 11 66 33 1, 7 257 8, 0 18 6, 5 1000 36 156 148 12 361 320 7, 6 23 6, 6 784 34 124 114 10 291 218 6, 3 19 6, 5 761 29 126 126 9 300 205 11 10 6 780 117 144 54 6 321 0, 36 1, 6 79 22 57 29 1, 6 0, 34 1, 6 79 16 63 32 1, 9 0, 50 1, 9 74 13 61 31 1, 3 0, 43 1, 8 76 13 63 32 1, 5 266 10, 1 15 6, 3 651 99 121 45 5 234
60% H M 40% CA C
F si cas D ensi dade gl obal( g cm -3) D ensi dade r eal( g cm -3) Por osi dade t ot al( % ) - m acr opor osi dade ( % ) -m i cr opor osi dade ( % ) Ret eno m xi m a de gua ( m l50 cm -3) Ret eno m xi m a de gua ( m lg-1) 5 0, 24 12 4, 2 2 0, 2 10 2 3 15 510 6, 5 44 6, 5 135 28 28 10 3 69 552 10 27 6, 1 120 22 273 64 3 362 194 8, 4 13 6, 4 1216 38 188 183 14 423 5, 9 23 1, 8 37 69 1 109 1, 2 2, 5 52 10 42 21 0, 4 0, 25 1, 4 82 44 38 19 1, 6 0, 4 1, 3 69 39 30 15 0, 8 0, 12 1, 2 90 44 46 23 3, 9 0, 45 1, 8 75 7 68 34 1, 6
Q u mi cas M at r i a or gni ca t ot al( g kg-1) N t ot al( g kg-1) Rel ao C t ot al/ N t ot al 01 M pH em CaC l 2 0, Pr esi na ( m g dm -3) 3 Kt r ocvel( m m ol c dm ) 3 Ca t r ocvel( m m ol c dm ) 3 Mgt ot al( m m ol c dm ) 3 A lt r ocvel( m m ol c dm ) 3 C. T. C . ef et i va ( m m ol c dm )
773 31 14 4 15 -
Fonte: Gonalves e Poggiani (1996). (1) dimetro mdio entre 0,7 e 2 mm; (2) Produzidos a partir de esterco de bovino de corte.
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Q uadr o 3 . Escal a de val or es par a i nt er pr etao de car acter sti cas e/ ou pr opr i edades f si cas e qu mi cas de substr atos usados par a pr oduo de m udas fl or estai s. N vei s Bai xo < < < < 0, 25 55 20 25 M di o 0, 25 55 20 25 - 0, 50 - 75 - 40 - 50 Al to > > > > 0, 50 75 40 50 A dequado 0, 45 75 35 45 - 0, 55 - 85 - 45 - 55
C ar acter sti cas F si cas D ensi dade gl obal( g cm -3 ) Por osi dade t otal( % ) - m acr opor osi dade ( % ) - mi cr opor osi dade ( % ) C apaci dade m x. de r eteno de gua ( m L 50 cm -3 ) Q u mi cas R el ao C t otal/ N t otal 01 M pH em C aC l 2 0, P r esi na ( m g dm -3 ) 3 K t r ocvel( m m ol ) c dm 3 ) Ca t r ocvel( m m ol c dm 3 Mg t otal( m m ol ) c dm 3 ) C. T. C . efeti va ( m m ol c dm
Font e: G onal ves e Poggi ani ( 1 99 6 ) .
< 15 8 a 12 / 1 < 5, 0 < 200 < 15 < 100 < 50 < 100
> 25 > > > > > > > 18/ 1 6, 0 400 30 150 100 200
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Dentre as pragas mais comuns encontram-se a lagarta-rosca, formiga cortadeira, grilos, besouros, cochonilhas, paquinhas, pulges e formigas. Contudo, no manejo adequado do viveiro, normalmente no se verifica muitos danos; entretanto, se o nvel de infestao for elevado, torna-se necessrio o combate. As doenas que mais comumente ocorrem nos viveiros so: tombamento, podrido de razes, ferrugens e manchas foliares. Quando o nvel de danos se mostrar significativo, torna-se necessrio o controle pela aplicao de fungicidas, utilizando-se dosagem de acordo com recomendaes dos fabricantes. Tanto em termos de pragas quanto de doenas, recomenda-se consultar um profissional capacitado quando da sua ocorrncia, visando o adequado controle, caso haja necessidade.
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Como medidas preventivas ao aparecimento do tombamento pode-se recomendar: a escolha adequada do local; a desinfestao do solo com fungicidas; tratamento da semente com produtos registrados para essa finalidade; seleo do substrato e material de cobertura.
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2. Produo de mudas
A produo de mudas de espcies ornamentais, frutferas e arbreas em geral pode ser realizada pelos mtodos sexuado e assexuado. O primeiro refere-se produo de mudas por meio de sementes, e o segundo, por propagao vegetativa (partes da planta), tais como: estaquia, enxertia, mergulhia, encostia, diviso de rizomas, bulbos e touceiras. Atualmente, com o avano da tecnologia, muitas espcies j podem ser propagadas por meio da micropropagao, que a propagao vegetativa das plantas, feita em laboratrio sob condies controladas.
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de sementes pode ser feita em canteiros para posterior repicagem, em canteiros para plantio com raiz nua e em recipientes por meio de semeadura direta.
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canteiros sombreamento para as mudas recm-repicadas; reduo do prazo para produo das mudas; formao de mudas mais vigorosas; diminuio das perdas por doenas e produo de mudas com sistema radicular de melhor qualidade. Nesse processo tambm recomendada a proteo das sementes com cobertura morta (serragem, capim etc.) e sombrite para evitar a exposio das mudas ao excesso de insolao, aos impactos das gotas de chuva, principalmente nos primeiros dias aps a germinao.
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A escolha do equipamento adequado associa-se ao manejo do sistema como um todo, onde devem ser considerados, dentre outros fatores, o tipo de substrato e recipientes utilizados pelo produtor, a espcie escolhida para a produo de mudas, a fase em que a muda se encontra (germinao, incluindo repicagem, crescimento ou rustificao), a poca do ano em que se est produzindo e a regio onde est instalado o viveiro (temperatura e regime de chuvas). Assim, em regies de calor intenso, normalmente, a exigncia das mudas por gua em qualquer fase de desenvolvimento maior que em regies de clima mais frio. Por outro lado, alguns tipos de substratos, por terem menor capacidade de reteno de gua, exigem que se aplique mais gua a cada irrigao, ou que se aumente a freqncia da mesma. importante ressaltar que para cada etapa de formao das mudas, e para diferentes tipos de recipientes, existem diferentes sistemas de irrigao, com bicos de diferentes vazes, presso de trabalho e rea de recobrimento. Existem no mercado empresas especializadas que prestam assessoria e ajudam o produtor a determinar o melhor equipamento para o seu sistema de produo. A dana das mudas consiste na mudana de lugar para evitar que as razes penetrem no solo, no caso de mudas produzidas em recipientes em contato com o solo.
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radicular bem desenvolvido e agregado ao substrato, rigidez da haste, nmero de pares de folhas, aspecto nutricional (sem sintomas de deficincia) e boa sanidade (ausncia de pragas e doenas) so essenciais para todas as espcies. As podas de formao so necessrias para mudas destinadas a formao de pomares frutferos, arborizao, reflorestamentos etc. Nas mudas frutferas, a poda deve seguir os padres de cada espcie, definidos em normas tcnicas para conduo da cultura; para o caso de mudas destinadas arborizao urbana, necessita-se realizar podas de conduo que visem a formao de uma muda retilnea com a copa de, pelo menos 1,8 m acima do solo.
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penetrao do hormnio. Existem no mercado hormnios enraizadores prontos para o uso, em concentraes pr-definidas, na forma de cidos ou sais em p, como: Hormex, Rootone, Hormodin, Seradix etc. Assim que as estacas estiverem preparadas, devem ser tratadas com hormnios e, logo em seguida, colocadas nos recipientes ou canteiros de enraizamento.
2.3.1 Estaquia
A estaquia o processo de propagao no qual pores das hastes (caules, ramos), folhas ou razes so colocadas sob condies propcias ao enraizamento (leitos de enraizamento), dando origem a uma nova planta.
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O tipo de estaca a ser usado varia de espcie para espcie e, s vezes, em funo da poca. Diversas plantas apresentam folhas com capacidade de originarem plantas completas, tais como: begnia, gloxnia, lngua-de-sogra, violeta africana, pepermia, sedum, camlia, ficus, etc. As estacas de razes so um tipo pouco comum, sendo as razes seccionadas aps a colheita, em pedaos de 5 a 15 cm de comprimento e enterradas no substrato a uma profundidade de 2,5 a 5 cm. A dificuldade do processo est na coleta das razes e nos danos causados planta-me. A propagao vegetativa por estaca radicular pode ser feita em cerejeira, pessegueiro, goiabeira, caquizeiro, ip, manac, quiri, etc. As estacas caulinares podem ser herbceas, lenhosas ou semi-lenhosas, o que varia em funo do local de coleta e do tipo de planta. Dentre os tipos de caule, o que possui maior capacidade de enraizamento o herbceo, e quanto mais herbcea e nova for a estaca maior ser sua capacidade de enraizamento. Em alguns casos, a poca do ano em que se procede a coleta das estacas de grande importncia sobre o enraizamento. Para as espcies de difcil enraizamento, a poca indicada para a coleta das estacas aquela que coincide com o repouso vegetativo ou com a estao de crescimento (dependendo da espcie) j para as espcies de fcil enraizamento, as estacas podem ser colhidas em qualquer poca do ano. As estacas lenhosas so, normalmente, coletadas aps a queda das folhas, ou no incio da nova brotao, que compreende o perodo de menor atividade metablica da planta. Existem porm plantas lenhosas que so facilmente propagadas por estaquia em qualquer poca do ano, como por exemplo, o crton, o hibisco e o ficus. Para realizar a estaquia, corta-se um ramo novo, de 7 a 15 cm de comprimento, retirando-se as folhas da metade inferior e cortando-se o restante das folhas pela metade. No caso de estacas lenhosas coletadas no perodo de repouso, todas as folhas so removidas. O corte da base dever ser feito em forma de bisel (cunha), para facilitar o enraizamento. Aps a preparao da estaca, promove-se a estaquia em recipiente ou canteiro em local adequado.
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2.3.2 Miniestaquia
A tcnica da miniestaquia uma variao da estaquia convencional. Consiste na utilizao de brotaes de plantas propagadas pelo mtodo de estaquia convencional como fontes de propgulos vegetativos. Numa seqncia esquemtica desta tcnica, inicialmente, faz-se a poda do pice da brotao da estaca enraizada, e em intervalos variveis em funo da poca do ano, do clone/espcie, das condies nutricionais, entre outras, h emisso de novas brotaes, que so coletadas e colocadas para enraizar. A coleta de miniestacas nas mudas podadas realizada de forma seletiva, em perodos a serem definidos conforme o vigor das brotaes, colhendo-se todas aquelas que se enquadram nos padres de miniestaca, ou seja, de 3 a 5 cm de comprimento, contendo de um a trs pares de folhas, recortadas pela metade. Aps serem coletadas, as miniestacas so acondicionadas em recipientes com gua, para que possam chegar ao local de enraizamento em perfeitas condies de turgor. As miniestacas so colocadas para enraizamento em casa de vegetao com umidade relativa acima de 80 %, seguindo posteriormente para a casa de sombra, para uma pr-adaptao s condies de menor umidade relativa e, finalmente transferidas para pleno sol para rustificao e posterior plantio. Os perodos de permanncia das miniestacas em casa de vegetao dependem da poca do ano, do clone/espcie envolvido e do seu estado nutricional.
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tratamentos na planta-me que vai fornecer as estacas a serem enraizadas. Ex.: adubaes e irrigaes adequadas, sombreamento, anelamento, toro etc.; coleta de estacas mais prximas base e ao tronco da planta quanto possvel; melhoria das condies de enraizamento: usar substrato poroso, manter a umidade relativa do ar acima de 80%, promover sombreamento, manter a temperatura entre 20 e 30 0C; aplicao de fitoreguladores para enraizamento; deixar de 1 a 3 pares de folhas recortadas ao meio nas estacas; diminuir ao mximo o tempo entre a coleta das estacas e sua colocao no substrato, bem como realizar seu transporte em caixas de isopor, panos ou embalagens umedecidas; enterrar, pelo menos, um entren (espao entre 2 ns consecutivos) no substrato; no usar estacas muito velhas e duras; fazer subcultivos (estaquia e enxertia consecutiva). Se aps estes tratamentos e cuidados os resultados forem insatisfatrios, devese utilizar outros mtodos de propagao.
2.3.3 Mergulhia
A mergulhia um processo de propagao vegetativa no qual um ramo posto a enraizar quando ainda faz parte da planta-me, sendo destacado desta somente aps o enraizamento. Por ser um processo rpido de propagao e por fornecer mudas enfolhadas, utilizado com bons resultados na obteno de plantas. Por ser um processo de baixo rendimento e necessitar de muita mode-obra, recomendado para a propagao de plantas de alto valor ou interesse, difceis de propagar por outros mtodos. Como regra geral, recomenda-se a utilizao de ramos com menos de um ano para fazer a mergulhia. A poca indicada para a sua realizao o princpio da primavera.
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Na mergulhia area ou alporquia, com o objetivo de facilitar o enraizamento, so feitas incises, anelamentos, estrangulamentos ou tores no ramo a ser propagado. O ponto lesionado coberto com um substrato umedecido, que pode ser musgo, substrato orgnico ou qualquer outro formado pela mistura de materiais que proporcionem uma boa aerao, umidade e temperatura moderada, envolto por tecidos ou plsticos. recomendada a realizao da mergulhia area em ramos de at um ano, no qual eliminam-se as brotaes laterais em cerca de 15-30 cm antes da gema terminal. A mergulhia deve ser feita na poca em que as plantas estejam em plena atividade de crescimento. No ponto lesionado pode-se aplicar fitoregulador de enraizamento. Cuidado especial deve ser tomado para manter uma boa umidade do substrato envolto no galho, por meio de irrigaes. O tempo necessrio para realizar a separao da planta-me do ramo que sofreu mergulhia depende da espcie, sendo de aproximadamente dois a trs meses. A melhor forma de determinar a poca de remoo do ramo que sofreu mergulhia observar a formao de razes atravs do plstico transparente utilizado para envolver o substrato.
2.3.4 Enxertia
A enxertia obtida por meio da unio entre duas plantas (enxerto ou cavaleiro e porta-enxerto ou cavalo). O enxerto sempre representado por uma parte da planta que se pretende multiplicar, ao passo que o porta-enxerto que recebe o enxerto e geralmente uma planta jovem, com boa taxa de crescimento, proveniente de sementes ou de estacas, bastante rstica e resistente a pragas e doenas. A enxertia um mtodo muito empregado na propagao de plantas; no entanto, para se ter xito, torna-se necessrio respeitar alguns princpios bsicos, tais como: utilizao de plantas da mesma famlia ou gnero; observar a poca ideal de enxertia, varivel em funo da espcie e tipo de enxerto empregado; promover um contato ntimo entre as cascas vivas; utilizar fitilho para promover o contato entre enxerto e porta-enxerto; o tipo de enxertia (varivel em funo da planta envolvida), a experincia e cuidados do operador.
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Para fazer a ligadura da parte enxertada recomendvel usar uma fita de polietileno de 1,2 cm de largura, denomidada fitilho, que de fcil aquisio e praticidade de uso, alm de possuir as caractersticas de elasticidade e evitar o ressecamento da parte enxertada. Durante a enxertia deve-se cuidar para que os enxertos no ressequem, deixando-os em gua limpa ou panos midos. As operaes devem ser efetuadas rapidamente, realizando-se um nico corte, evitando o acmulo de resduos na lmina. A amarrao deve ser realizada ao longo de todo o comprimento de unio, certificando-se de que no haja deslocamento das partes envolvidas. Em torno de 20 - 40 dias aps a enxertia, dependendo das condies locais e da espcie, retira-se o fitilho. Dever-se efetuar a poda dos ramos do porta-enxerto para promover a dominncia apical no enxerto, deixando-se somente o broto do enxerto crescer. Vrios so os processos de enxertia, os quais podem ser agrupados em trs grupos ou categorias distintas: borbulhia, garfagem e encostia.
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dorso da lmina e introduz-se a borbulha, cortando-se o excesso e, posteriormente, procede-se a amarrao. No T invertido procede-se de modo semelhante ao anterior, diferindo-se, principalmente, apenas na forma de colocao da borbulha, que invertida (Figura 1).
2.3.4.2 Garfagem
o processo que consiste em se soldar um pedao de ramo destacado (enxerto ou garfo) sobre outro vegetal (porta-enxerto) de maneira a permitir a unio dos tecidos e o seu desenvolvimento. O garfo difere da borbulha por possuir normalmente mais de uma gema. A poca normal da garfagem para as plantas de folhas caducas se d no perodo de repouso vegetativo (inverno) e nas folhas persistentes, dependendo da espcie, na primavera, vero e outono. Principalmente para espcies lenhosas, recomendada a colocao de um saco plstico amarrado com barbante na base do porta-enxerto, o que permite maior umidade relativa do ar e temperatura at o pegamento do enxerto. Como na borbulhia, tambm existem diversos tipos de garfagem, sendo a garfagem em fenda cheia a mais comumente empregada. Essa consiste em decepar o porta-enxerto a uma altura determinada do colo (em torno de 10 a 20 cm) e, com um canivete, faz-se uma fenda de 2 a 4 cm, perpendicular ao sentido do dimetro, justapondo o enxerto (com forma de cunha) com o cavalo, de forma que haja coincidncia dos dimetros ou que pelo menos um dos lados sejam coincidentes. Por fim, amarra-se com fitilho (Figura 2). A minigarfagem realizada com material mais jovem (enxerto e porta-enxerto). A proteo no ponto de unio do enxerto com o porta-enxerto realizada com o uso de pequenos pedaos de canundinho de diferentes dimetros, sendo o restante das atividades de manuteno similares a enxertia comun. As principais vantagens da minigarfagem em relao a enxertia convencional referem-se ao ganho de tempo no pegamento dos minienxertos, na menor rea ocupada, principalmente se os mesmos forem realizados sobre porta-enxertos de mudas obtidas em tubetes.
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15 - 30 di as aps, cur vase a pont a do caval o ou cor t ase aci m a do l ocal enxer t ado, par a que o enxer t o cr esa r et o. M ant m se apenas o enxer t o no caval o
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C om um a l m i na bem afi ada, cor tase o r am o a ser enxer tado em bi sel , r esul tando no enxer to
C om um fi ti l ho de pl sti co .. .
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2.3.5 Micropropagao
A micropropagao de espcimes vegetais consiste na multiplicao em grande escala, e em pequeno espao de tempo, de tecidos e/ou rgos vegetais em condies asspticas e controladas, e pode ser dividida nas seguintes fases: Fase 0 Preparo da planta matriz; Fase 1- Introduo; Fase 2 Multiplicao; Fase 3 Alongamento; Fase 4 Enraizamento. Sua aplicabilidade, como a da estaquia, est baseada na teoria da totipotncia, a qual estabelece que qualquer parte do vegetal, por menor que seja, tem capacidade de regenerar a parte que lhe falta, desde que sejam fornecidas as condies adequadas para tal. Com base nesta teoria, portanto, pode-se inferir que qualquer espcie vegetal tem a capacidade de ser micropropagada a partir de qualquer parte da planta. Contudo, na prtica muitas espcies so difceis de se micropropagar e so chamadas de recalcitrantes. As respostas das plantas s tcnicas de micropropagao so variveis em funo da espcie, variedade e/ou cultivar, poca de coleta, tipo de explante utilizado e condies de cultivo. Portanto, cabe ao tcnico descobrir qual a poca mais adequada para coleta dos explantes e as condies que devem ser oferecidas para que venham a expressar seu potencial de regenerao de novas plantas. A tarefa exige experimentao intensa, at que se possa obter resultados satisfatrios. Porm, uma vez estabelecida, permite o desenvolvimento de protocolos que tem por objetivo tornar a operao prtica e rotineira para um dado material. Portanto, um protocolo nada mais do que uma seqncia de etapas prdeterminadas que indicaro, passo a passo, quais os procedimentos mais adequados a serem aplicados para que de uma determinada espcie e/ou cultivar obtenha-se um mximo aproveitamento do material vegetal disponvel. Dentre as diferentes tcnicas de cultivo in vitro, a micropropagao a partir de parte de segmentos de rgos ou tecidos meiristemticos, com induo direta de gemas (organognese direta) e ou estmulo de gemas pr-existentes pela
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quebra da dominncia apical , at hoje, a mais indicada comercialmente, pelo fato de permitir menor ocorrncia de variaes genticas em relao ao explante original. A induo da multiplicao de explantes cultivados in vitro se d atravs da interao entre o potencial inerente do explante utilizado e os fitorreguladores. Quando nesta multiplicao ocorre a formao direta de uma ou mais gemas esta chamada de organognese direta. E quando antes da formao de uma nova gema ocorre a formao de calo esta chamada de organogse indireta. Num sistema comercial de micropropagao o objetivo a multiplicao o mais fiel possvel do material original (clonagem), a fim de que sejam mantidas as caractersticas comerciais deste material. Assim, para a manuteno desta fidelidade importante que se evite a organognese indireta, pois a formao de calo pode dar origem a instabilidades genticas indesejveis que viro a se multiplicar durante o processo de micropropagao, vindo a produzir indivduos com caractersticas diferentes do original (off types). Fato comum, principalmente, em indivduos com nvel de ploidia elevada como no caso dos cultivares de banana. Portanto, a partir desta rpida e genrica introduo sobre o tema, ser abordada a micropropagao com nfase nos mtodos de organognese direta, por sua maior aplicabilidade prtica.
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Os tratamentos fitossanitrios a serem adotados tm por objetivo manter os agentes microbianos externos, fitopatognicos ou no, nos nveis mais baixos possveis, enquanto os internos (endofticos) devem ser totalmente eliminados. Para tal, so utilizados agentes antimicrobianos de contato e sistmicos, respectivamente. Uma vez reduzida a carga exgena, e eliminada a carga endgena de agentes microbianos, as chances de estabelecimento dos explantes introduzidos no meio de cultivo in vitro aps a desinfestao no laboratrio, aumentam bastante. No caso de plantas de grande porte, onde seu cultivo direto sob condies controladas difcil, podem ser adotados mtodos intermedirios de propagao vegetativa antes da introduo do material in vitro. Estas tcnicas tm por objetivo reduzir o porte do material a ser micropropagado para que este possa vir a receber o devido tratamento nutricional e fitossanitrio. Para as espcies arbreas, a prtica normalmente adotada consiste em induzir a produo de brotos rejuvenescidos atravs de podas drsticas da copa, os quais sero posteriormente enraizados ou atravs do resgate e rejuvenescimento pela enxertia seriada. A primeira pode ser aplicada para espcies que apresentam boa capacidade de brotao, e a segunda para aquelas que no apresentam esta caracterstica. No caso de musceas de grande porte, como as bananeiras por exemplo, pode ser utilizado a diviso de rizomas e seu plantio em vasos de grande volume, permitindo assim seu cultivo sob condies controladas. Quanto nutrio das matrizes, deve-se procurar formulaes que venham a favorecer o crescimento e vigor vegetativo, mantendo-se adequadas as relaes NPK de acordo com as caractersticas de cultivo de cada espcie e/ou cultivar. Uma planta adequadamente nutrida apresentar um melhor desempenho durante as etapas da micropropagao, em funo de um melhor balano hormonal endgeno. b) Desinfestao e introduo dos explantes in vitro - Fase 1 A desinfestao dos explantes deve levar em considerao as caractersticas
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dos tecidos que os compem, a fim de adequar o tipo e a concentrao do agente desinfestante a ser utilizado e o tempo mais adequado em que o explante dever permanecer sob tratamento. A escolha do mtodo normalmente se baseia em experincias prvias divulgadas atravs de literatura ou outros veculos de comunicao especializados. Contudo, os ajustes finais devem ser feitos de forma emprica para cada material e tcnica a ser adotada. O processo de desinfestao superficial no laboratrio tem por objetivo eliminar apenas a carga exgena de contaminantes, no tendo portanto efeito algum sobre contaminantes endofticos. Os agentes desinfestantes mais comumente utilizados so o hipoclorito de sdio ou clcio, lcool etlico e o bicloreto de mercrio. No entanto, este ltimo deve ser utilizado somente quando os demais no forem eficientes, em funo de seu alto grau de toxicidade e problemas de descarte. Como mencionado anteriormente, os ajustes quanto concentrao desses agentes desinfestantes podem variar em funo do tipo de explante e de seu grau de contaminao. Em geral, as solues mais comumente utilizadas trabalham com concentraes variando de 1 a 5 % de Cl ativo, que o elemento desinfestante no caso do hipoclorito, com lcool 70 %, e com solues de at 500 mg L-1 no caso do bicloreto de mercrio. Quanto maior a concentrao do agente desinfestante, menor o tempo necessrio para que ocorra a desinfestao. Em geral, varia de 10 a 20 minutos no caso do hipoclorito e bicloreto de mercrio e de apenas alguns minutos no caso do lcool 70%, em funo de seu dano aos tecidos. Na prtica, muitas vezes so utilizadas combinaes desses agentes desinfestantes. Finalizado o processo de desinfestao, os explantes devem ser lavados, em abundncia, com gua destilada autoclavada, a fim de remover o excesso do agente desinfestante que poderia vir a prejudicar seu desenvolvimento. Esta etapa realizada dentro da cmara de fluxo laminar. Aps a lavagem, os explantes so transferidos para o meio de cultura de induo, onde permanecero at que se inicie a emisso de novas gemas, o que pode se dar no escuro no caso de plantas com problemas de oxidao dos tecidos. Neste estgio, normalmente s se utilizam fontes de citocininas em concentraes moderadas (0,1 a 1 mg L-1, conforme a cultura), para estmulo
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do desenvolvimento das gemas pr-formadas ou para induo de novas gemas. Em alguns casos, pode ser necessria a aplicao de uma fonte de auxina, porm em concentraes bem inferiores (0,01 a 0,1 mg/L). Normalmente, so necessrios de 2 a 3 subcultivos neste meio de cultura at que o material entre em estgio de multiplicao estvel. A intesidade luminosa varia de acordo com as caractersticas do material, de 1000 a 3000 lux. c) Multiplicao e subcultivo - Fase 2 Decorrido o estabelecimento da cultura, de trs a quatro meses, o material entra numa fase estvel, onde possvel predizer sua taxa de multiplicao. Nesta fase, as concentraes utilizadas de citocinina podem sem mais elevadas (de 0,5 a 3 mg L-1, conforme a cultura) e o material subcultivado a intervalos que podem variar de 28 a 40 dias. Para algumas plantas, como as bananas, por exemplo, o nmero de subcultivos em meio de cultura contendo citocinina deve ser limitado, a fim de reduzir o risco de ocorrncia de variao somaclonal. Neste caso, o nmero de subcultivos no deve exceder a seis. d) Alongamento - Fase 3 Esta fase nem sempre necessria no processo da micropropagao. Em geral, para as espcies herbceas, concomitante com a multiplicao ocorre o alongamento das gemas. Contudo, no caso de espcies lenhosas, normalmente necessrio que os explantes sejam transferidos para um meio de cultura que estimule o alongamento das gemas produzidas na fase da multiplicao, para que seja possvel na fase posterior a induo de razes. No meio de cultura normalmente utilizado na fase de alongamento a simples remoo da fonte de citocinica suficiente ou em alguns casos, substituda por uma fonte de giberilina. Geralmente a mais eficiente o GA3, e as concentraes mais adequadas devem ser estabelecidas de acordo com as caractersticas de cada material. Em geral, apenas uma passagem no meio de cultura para alongamento suficiente para se obter o efeito desejado. Contudo, em determinados cados, devido ao efeito de memria das citocininas, pode ser necessria mais de uma passagem.
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e) Enraizamento - Fase 4 Inicialmente, a fase de enraizamento dos explantes era conduzida tambm in vitro. Contudo, com o avano do manejo das condies ambientais em casa de vegetao, mais prtico e econmico que este seja conduzido nestas condies. Para espcies que necessitam de fitoreguladores para o enraizamento ex vitro, o mais utilizado o AIB, em concentraes que variam de 500 a 6000 ppm. In vitro, esta concentrao bem inferior. No enraizamento ex vitro, primordial que a umidade relativa seja mantida em nveis acima de 85% para que no ocorra dessecamento dos explantes. Para isso necessrio que a casa de vegetao seja dotada de sistema de nebulizao.
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O Fitagel um produto importado e de custo mais elevado do que o Agar-Agar. Contudo, a quantidade necessria para geleificao bem menor, e a transparncia obtida no meio de cultura maior. Em geral, a partir de fontes comerciais de agar-agar, so necessrios de 6 a 8 g L-1 de meio de cultura, enquanto que para o Fitagel, apenas 2 g L-1. Embora para a maior parte das culturas comercialmente micropropagadas seja necessrio a utilizao de um agente geleificante, outras como o abacaxi podem ser cultivadas em meio lquido sem agitao. Mas, para a grande maioria, o cultivo em meio lquido exige a utilizao de mecanismos que permitam sua aerao.
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1 1 . Uma estufa: para esterilizao do material que no pode ou no necessita ser autoclavado. 1 2 . Um recipiente grande (aprox. 10 L), preferencialmente de inox: para mistura e preparo do meio de cultura. 1 3 . Um microscpio estereoscpio (aumento mnimo final de 40 x): para o caso de isolamento de meristemas (orqudeas, por exemplo). 1 4 . Filtros estreis ou esterilizveis: para filtragem de compostos termodegradveis. 1 5 . Bomba de vcuo: para acoplamento aos filtros estreis. 1 6 . Uma cmara de fluxo laminar horizontal: para manipulao assptica do material.
Alm dos equipamentos, um laboratrio comercial de micropropagao necessita de provetas de 10, 100, 250, 500, 1000 e 2000 mL e Beckers de 50, 100, 500, 1000, 2000 e 4000 mL. Tanto um como outro, recomenda-se que sejam de plstico para evitar acidentes e prejuzo financeiro. Alm destes, so necessrios bales volumtricos de 100, 500 e 1000 mL para preparo das solues estoque. Para a introduo do material in vitro, podem ser utilizados tubos de ensaio de 150 x 25 mm ou placas de petri. A quantidade necessria deve levar em conta o cronograma de produo a ser estabelecido, considerando para tal o tempo de permanncia do material nesta fase. Os tubos podem ser tampados com tampas plsticas autoclavveis, tipo Belco, ou com bonecas de gase e algodo. Para as demais etapas da micropropagao, recomenda-se a utilizao de frascos de 250 mL, do tipo comida de beb (baby food jar) ou vidros de maionese, ambos reutilizveis. Diferentes tipos de tampa podem ser utilizadas para estes recipientes, sendo recomendada aquela conhecida no mercado como tipo bioplanta, em funo da praticidade de manejo, transparncia e melhor capacidade de troca de ar com o meio externo.
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M at er i al
A c cul as de pi nus
C asca de pi nus
Anlise de substrato
pH H 2O 6, 20 5, 90 5, 30 7, 20 6, 10 0, 32 25, 92 6, 24 1, 15 30, 77 3, 26 0, 80 2, 33 2, 32 0, 14 0, 74 0, 86 1, 60 4, 65 34, 03 32, 34 0, 10 5, 47 2, 41 7, 88 K+ Ca2+ M g2+ Ca2+ + M g2+ cm ol cm 3 c/
3+ Al 3 H 2+ + A l
M at er i al
CaCl 2
A c cul as de pi nus
5, 40
5, 20
Casca de pi nus
5, 00
6, 10
5, 30
Onde:
cmolc cm 3 = meq/100mL
mg dm 3 = ppm
Ca : Mg : K 3 : 2 : 1