J o u r n a l o f C l i n i c a l I n v e s t i g a t i o n

V o l . 4 5 , N o . 1 1 , 1 9 6 6
H o r m o n e - F u e l I n t e r r e l a t i o n s h i p s d u r i n g F a s t i n g *
G . F . C A H I L L , J R . , t M. G . H E R R E R A , A . P . MOR G A N , J . S . S OE L D N E R , J . S T E I N K E ,
P . L . L E V Y , G . A . R E I C H A R D , J R . , 4 A N D D . M. K I P N I S
( F r o m t h e E l l i o t t P . J o s l i n R e s e a r c h L a b o r a t o r y , t h e D e p a r t m e n t s o f Me d i c i n e a n d S u r g e r y ,
H a r v a r d Me d i c a l S c h o o l a n d t h e P e t e r B e n t B r i g h a m H o s p i t a l , a n d t h e D i a b e t e s
F o u n d a t i o n , I n c . , B o s t o n , Ma s s . )
Ov e r 5 0 y e a r s a g o , B e n e d i c t ( 2 ) p u b l i s h e d h i s
e x t e n s i v e m o n o g r a p h o n t h e m e t a b o l i s m o f f a s t i n g
i n m a n , i n w h i c h h e d e m o n s t r a t e d t h a t c a r b o -
h y d r a t e s t o r e s p r o v i d e a s m a l l b u t s i g n i f i c a n t
c o m p o n e n t o f t h e b o d y ' s f u e l f o r o n l y t h e f i r s t
f e w d a y s . T h e r e a f t e r , p r o t e i n a n d f a t a r e t h e
s o l e s o u r c e s o f f u e l , t h e f o r m e r c o n t r i b u t i n g 1 5
%
o f t h e c a l o r i e s a n d t h e l a t t e r t h e b a l a n c e .
T h e p r i m a r y r o l e o f f a t a s f u e l w a s a p p a r e n t
t o B e n e d i c t a n d h i s c o n t e m p o r a r i e s ; i t i s p l e n t i f u l
a n d e x p e n d a b l e . T h e s i g n i f i c a n c e o f t h e p r o t e i n
r e q u i r e m e n t , h o w e v e r , w a s l e s s c l e a r ; i n f a c t ,
i t w a s n o t f u l l y u n d e r s t o o d u n t i l n e a r l y 2 0 y e a r s
l a t e r w h e n t h e o b l i g a t o r y d e p e n d e n c e o f t h e c e n -
t r a l n e r v o u s s y s t e m o n g l u c o s e w a s f i r m l y e s t a b -
l i s h e d ( 3 ) . S i n c e g l y c o g e n s t o r e s i n m a n w e r e
k n o w n t o a p p r o x i m a t e o n l y 2 0 0 g , i t w a s r e a d i l y
a p p a r e n t t h a t g l u c o s e h a s t o b e d e r i v e d f r o m
p r o t e i n i n o r d e r t o m a i n t a i n c e r e b r a l m e t a b o l i s m
d u r i n g a p r o l o n g e d f a s t . Mo r e r e c e n t l y , o u r
u n d e r s t a n d i n g o f t h e f a s t e d s t a t e h a s b e e n f u r t h e r
c l a r i f i e d b y t h e d e m o n s t r a t i o n t h a t f r e e f a t t y a c i d
i s b o t h t h e m a j o r t r a n s p o r t f o r m o f l i p i d l e a v i n g
a d i p o s e t i s s u e ( 4 , 5 ) a n d a s u b s t r a t e t h a t i s
*
S u b m i t t e d f o r p u b l i c a t i o n J a n u a r y 2 6 , 1 9 6 6 ; a c c e p t e d
A u g u s t 4 , 1 9 6 6 .
S u p p o r t e d i n p a r t b y g r a n t s f r o m t h e U . S . P u b l i c
H e a l t h S e r v i c e ( A M- 9 5 8 4 - 0 1 , A M- 0 9 7 4 8 - 0 1 , 8 MOI - F R -
3 1 - 0 5 , T I - A M- 5 0 7 7 - 1 0 , a n d 5 - R OI - A MO- 2 6 5 7 ) ; t h e
A d l e r F o u n d a t i o n , I n c . , R y e , N . Y . ; t h e J o h n A . H a r t -
f o r d F o u n d a t i o n , N e w Y o r k , N . Y . ; a n d U . S . A r m y
Me d i c a l R e s e a r c h a n d D e v e l o p m e n t C o m m a n d ( D A - 4 9 -
1 9 3 - MD - 2 3 3 7 ) .
A p r e l i m i n a r y a b s t r a c t h a s b e e n p u b l i s h e d ( 1 ) .
t I n v e s t i g a t o r , H o w a r d H u g h e s Me d i c a l I n s t i t u t e .
A d d r e s s r e q u e s t s f o r r e p r i n t s t o D r . G . F . C a h i l l , J r . ,
D i a b e t e s F o u n d a t i o n , I n c . , 1 7 0 P i l g r i m R d . , B o s t o n ,
Ma s s .
: 1 P r e s e n t a d d r e s s : S m i t h K l i n e a n d F r e n c h L a b o r a -
t o r i e s , P h i l a d e l p h i a , P a .
P r e s e n t a d d r e s s : W a s h i n g t o n U n i v e r s i t y S c h o o l o f
Me d i c i n e , S t . L o u i s , Mo .
r e a d i l y u t i l i z e d b y l i v e r , m u s c l e , a n d m a n y o t h e r
t i s s u e s .
A l t h o u g h t h e a b o v e f i n d i n g s p r o v i d e a b a s i s
f o r u n d e r s t a n d i n g t h e m e t a b o l i s m o f f a s t i n g , c e r -
t a i n a r e a s s u c h a s t h e p h y s i o l o g i c r o l e o f h o r -
m o n e s a n d t h e m e c h a n i s m s c o n t r o l l i n g g l u c o s e
p r o d u c t i o n a n d u t i l i z a t i o n r e m a i n p o o r l y d e f i n e d .
I n a d d i t i o n , e s t i m a t e s o f g l u c o s e t u r n o v e r ( 6 - 1 2 )
o r s p l a n c h n i c g l u c o s e p r o d u c t i o n ( 1 3 - 1 5 ) d u r i n g
a s h o r t f a s t a l l g r e a t l y e x c e e d t h e a m o u n t t h a t c a n
b e c o n t r i b u t e d b y g l u c o n e o g e n e s i s ( a s r e f l e c t e d
b y u r i n a r y n i t r o g e n l o s s ) . T h i s s t u d y w a s , t h e r e -
f o r e , d e s i g n e d t o o b t a i n b a s e - l i n e i n f o r m a t i o n c o n -
c e r n i n g t h e m e t a b o l i c a n d h o r m o n a l r e s p o n s e t o
f a s t i n g i n n o r m a l s u b j e c t s a n d i n t w o s u b j e c t s
w i t h m i l d d i a b e t e s i n t h e h o p e t h a t s u c h i n f o r m a -
t i o n w o u l d p r o v i d e a t l e a s t p a r t i a l i n s i g h t i n t o
s o m e o f t h e s e p r o b l e m s . I n b r i e f , w e f o u n d i n
t h e n o r m a l s u b j e c t s t h a t t h e w e l l - i n t e g r a t e d r e -
l e a s e o f p e r i p h e r a l f u e l s a n d t h e m a i n t e n a n c e o f
b l o o d g l u c o s e c o n c e n t r a t i o n s w e r e p r o b a b l y r e -
l a t e d t o i n s u l i n c o n c e n t r a t i o n s , s u g g e s t i n g b u t
n o t n e c e s s a r i l y p r o v i n g t h a t i n s u l i n i s t h e p r i -
m a r y s i g n a l r e s p o n s i b l e f o r f u e l c o n t r o l d u r i n g
s t a r v a t i o n . T h e s t u d i e s a l s o s u g g e s t e d t h a t g l u - ,
c o s e m e t a b o l i s m , p a r t i c u l a r l y b y b r a i n , m u s t b e
d e c r e a s e d i n o r d e r f o r m a n t o s u r v i v e p r o l o n g e d
p e r i o d s o f c a l o r i c d e p r i v a t i o n .
Me t h o d s
S u b j e c t s . S i x n o r m a l m a l e s u b j e c t s w e r e s e l e c t e d t o
p r o v i d e a d i v e r s e s p e c t r u m o f b o d y s i z e a n d s h a p e ( T a b l e
I ) . F i v e ( N 1 , N s , N 4 , N 5 , a n d N . ) w e r e d i v i n i t y s t u -
d e n t s , a n d t h e s i x t h ( N 2 ) w a s a s p o r t i n g - g o o d s s a l e s m a n .
A l l w e r e i n p e r f e c t h e a l t h a n d h a d b e e n c o n s u m i n g a n
a v e r a g e d i e t e s t i m a t e d t o c o n t a i n o v e r 2 5 0 g o f c a r b o h y -
d r a t e a n d 8 0 g o f p r o t e i n w i t h v a r i a b l e a m o u n t s o f f a t .
S u b j e c t s N 2 a n d N 4 w e r e i n t e n t i o n a l l y s e l e c t e d b e c a u s e
o f a f a m i l y h i s t o r y o f d i a b e t e s ; t h e i r m o t h e r s h a d m a -
t u r i t y - o n s e t d i a b e t e s a n d r e q u i r e d i n s u l i n . S i n c e b o t h o f
t h e s e s u b j e c t s w e r e i n d i s t i n g u i s h a b l e i n a l l r e s p e c t s f r o m
1 7 5 1
C A H I L L A N D C O- W OR K E R S
T A B L E I
C l i n i c a l d a t a f o r n o r m a l a n d d i a b e t i c s u b j e c t s
P e r c e n t
d e v i a t i o n
W e i g h t B S A f r o m p o p u -
F i g u r e l a t i o n m e a n
S u b j e c t s y m b o l A g e I n i t i a l F i n a l H e i g h t I n i t i a l F i n a l K e * w e i g h t t
y e a r s k g c m m 2 m E q
N o r m a l s
N 1 0 2 6 7 7 . 5 7 2 . 0 1 6 9 1 . 8 7 1 . 8 1 3 , 3 9 1 +1 7
N 2 x 3 9 8 7 . 0 7 8 . 8 1 8 1 2 . 0 8 2 . 0 0 +1 0
N 3 L I 2 4 7 5 . 4 6 8 . 5 1 8 1 1 . 9 7 1 . 8 8 3 , 9 8 9 - 4
N 4 A 2 2 9 4 . 6 8 8 . 8 1 8 1 2 . 1 8 2 . 1 0 4 , 3 3 0 +2 4
N 5 * 2 5 6 3 . 5 5 8 . 2 1 6 6 1 . 7 2 1 . 6 6 3 , 1 6 2 - 5
N 6 ( 2 5 7 2 . 7 6 7 . 2 1 7 4 1 . 8 9 1 . 8 2 3 , 4 0 2 0
D i a b e t i c s
D i + 3 7 7 5 . 6 7 0 . 9 1 8 5 2 . 0 0 1 . 9 5 - 1 2
D 2 A 3 9 9 4 . 0 8 9 . 3 1 7 4 2 . 0 9 2 . 0 5 +2 0
*
E q u i l i b r a t i o n p o o l o f 4 2 K , 4 8 h o u r s .
t F r o m Me t r o p o l i t a n L i f e I n s u r a n c e t a b l e s , 1 9 5 9 .
t h e o t h e r f o u r i n d i v i d u a l s , t h e y w e r e i n c l u d e d i n t h e
n o r m a l g r o u p .
T h e t w o d i a b e t i c s u b j e c t s w e r e c h o s e n f o r t h e i r r e l a -
t i v e l y y o u n g a g e , t h e i r w i l l i n g n e s s t o u n d e r g o t h e s t u d y ,
a n d f o r t h e i r t y p e o f d i a b e t e s , w h i c h w a s m a t u r i t y - o n s e t
b u t s t i l l s u f f i c i e n t i n d e g r e e t o m a k e t h e d i a g n o s i s i n -
d u b i t a b l e . On e y e a r b e f o r e t h e s t u d y , s u b j e c t D 1 , a
b u s i n e s s m a n a g e r , h a d e x p e r i e n c e d 2 m o n t h s o f f a t i g u e
a n d a 2 5 - p o u n d w e i g h t l o s s a s s o c i a t e d w i t h p o l y d y p s i a a n d
p o l y u r i a . H e r e c e i v e d i n s u l i n , 2 0 t o 4 0 U N P H , f o r 3
w e e k s a n d w a s t h e n g i v e n t o l b u t a m i d e , 0 . 5 g b y m o u t h
t w i c e d a i l y , u n t i l 4 d a y s b e f o r e t h i s s t u d y , w h e n t r e a t m e n t
w a s t e r m i n a t e d . S u b j e c t D 2 , a c o n t r a c t o r , h a d e x p e r i -
e n c e d p o l y d y p s i a a n d p o l y u r i a 8 m o n t h s b e f o r e t h e s t u d y
a n d r e c e i v e d o n e s i n g l e i n j e c t i o n o f 2 0 U o f 4 0 U p e r m l
L e n t e i n s u l i n , f o l l o w e d b y 1 g o f t o l b u t a m i d e b y m o u t h
f o r 1 m o n t h . T h e n , l i k e s u b j e c t D 1 , h e f o l l o w e d a d i e t
o f 2 0 0 g c a r b o h y d r a t e , 9 0 g p r o t e i n , a n d 7 0 g f a t . B o t h
d i a b e t i c s u b j e c t s h a d e x p e r i e n c e d t r a n s i e n t g l y c o s u r i a
b u t o n l y a f t e r i n g e s t i n g a m o u n t s o f c a r b o h y d r a t e b e y o n d
t h e i r d i e t a r y a l l o w a n c e s .
A l l s u b j e c t s h a d n o r m a l h e m a t o l o g i c a l a n d u r i n e
a n a l y s e s i n a d d i t i o n t o n o r m a l c h e s t a n d a b d o m i n a l r a -
d i o g r a p h i c e x a m i n a t i o n s , e l e c t r o c a r d i o g r a m s , t h y r o i d i n -
d e x e s , s e r u m e n z y m e s ( a l k a l i n e p h o s p h a t a s e , l a c t i c d e h y -
d r o g e n a s e , g l u t a m i c - o x a l o a c e t i c t r a n s a m i n a s e ) , s e r u m
p r o t e i n s ( e l e c t r o p h o r e s i s ) , a n d s e r u m l i p i d s a n d l i p o -
p r o t e i n s ( e l e c t r o p h o r e s i s a n d c h e m i c a l a n a l y s e s f o r t o t a l
l i p i d s , t r i g l y c e r i d e s , p h o s p h o l i p i d s , c h o l e s t e r o l , a n d c h o -
l e s t e r o l e s t e r s ) .
B l o o d a n d u r i n e c o l l e c t i o n . S a m p l e s w e r e c o l l e c t e d
a c c o r d i n g t o t h e s c h e d u l e g i v e n i n T a b l e I I .
E a c h m o r n i n g a t 8 : 0 0 a . m . , a f t e r t h e s u b j e c t h a d b e e n
r e s t i n g f o r 3 0 m i n u t e s , b l o o d w a s o b t a i n e d f r o m e i t h e r o f
t h e t w o m a j o r a n t e c u b i t a l v e i n s ( c e p h a l i c o r m e d i a n
c u b i t a l ) w i t h o u t s t a s i s , a n d w h e n , o n o c c a s i o n , a t o u r n i -
q u e t w a s n e e d e d , i t w a s r e l e a s e d f o r 1 0 t o 2 0 s e c o n d s
b e f o r e t a k i n g t h e s a m p l e . T h e n e e d l e w a s p l a c e d w e l l
u p t h e v e i n p r o x i m a l l y , a n d t h e s a m p l e s t h u s r e p r e s e n t e d
m i x e d d e e p a n d s u p e r f i c i a l v e n o u s d r a i n a g e . T h i r t y - f i v e
m l o f b l o o d w a s w i t h d r a w n , p o r t i o n s w e r e a d d e d t o o x a -
l a t e - f l u o r i d e f o r g l u c o s e a n d f r e e f a t t y a c i d a n a l y s e s , a n d
t h e r e m a i n d e r w a s a l l o w e d t o c l o t . F i f t e e n m l o f b l o o d
w a s t h e n r a p i d l y d r a w n i n t o a s y r i n g e f r o m w h i c h i t w a s
i m m e d i a t e l y i n j e c t e d i n t o 1 5 m l o f i c e d 1 M p e r c h l o r i c
a c i d . T h e d e p r o t e i n i z e d s u p e r n a t a n t f l u i d w a s f r o z e n
a n d l a t e r u s e d f o r a c e t o a c e t a t e , 8 - h y d r o x y b u t y r a t e , g l y c -
e r o l , p y r u v a t e , a n d l a c t a t e a n a l y s e s . W h o l e b l o o d s a m -
p l e s i n o x a l a t e - f l u o r i d e a n d p l a s m a a n d s e r u m s p e c i m e n s
w e r e f r o z e n a n d s t o r e d a t - 2 0 0 C f o r l a t e r a n a l y s i s .
U r i n e w a s c o l l e c t e d i n p l a s t i c c o n t a i n e r s i m m e r s e d i n
i c e . A t 8 a . m . , t h e e n d o f e a c h 2 4 - h o u r p e r i o d , t h e s u b -
j e c t v o i d e d , t h e t o t a l v o l u m e w a s m e a s u r e d , a n d i c e d
T A B L E I I
S c h e d u l e o f b l o o d a n d u r i n e c o l l e c t i o n
U r i n e
B l o o d c o l l e c - I n t a k e
D a y s a m p l e * t i o n C a l o r i e s H 2 O N a C l
m l m E q
0
1 1
i v G T T t A d l i b i t u m A d l i b i t u m
1 L u n c h
S u p p e r
2 2 0 1 , 5 0 0 0
2
3 3 0 1 , 5 0 0 0
3
4 4 0 1 , 5 0 0 0
4
5 5 0 1 , 5 0 0 0
S
6 6 0 1 , 5 0 0 1 7
6
7 7 0 1 , 5 0 0 1 7
7
8 8 0 1 , 5 0 0 1 7
8
9 i v G T T A d l i b i t u m A d l i b i t u m
L u n c h
S u p p e r
*
A l l b l o o d s a m p l e s w e r e t a k e n a t 8 a . m .
t i v G T T = i n t r a v e n o u s g l u c o s e t o l e r a n c e t e s t .
1 7 5 2
H OR MON E - F U E L I N T E R R E L A T I ON S H I P S D U R I N G F A S T I N G
d i s t i l l e d w a t e r w a s a d d e d t o m a k e 2 L . P o r t i o n s o f t h i s
w e r e r e m o v e d a n d f r o z e n f o r l a t e r a n a l y s e s . T o i n -
c r e a s e t h e a c c u r a c y o f t h e t e r m i n a l v o i d i n e a c h c o l l e c -
t i o n , w e g a v e s u b j e c t s t h e l a s t 2 0 0 t o 4 0 0 m l o f t h e i r
2 4 - h o u r w a t e r r a t i o n 1 t o 2 h o u r s b e f o r e t h e 8 a . m . c o l -
l e c t i o n t i m e . G l u c o s e t o l e r a n c e t e s t s w e r e p e r f o r m e d b y
t h e r a p i d i v i n j e c t i o n o f g l u c o s e ( 0 . 5 g p e r k g b o d y
w e i g h t ) i n 2 t o 4 m i n u t e s w i t h b l o o d s a m p l e s a t a p -
p r o p r i a t e i n t e r v a l s t i m e d f r o m t h e e n d o f t h e i n f u s i o n .
C h e m i c a l a n a l y s e s . G l u c o s e w a s m e a s u r e d i n b o t h
b l o o d a n d p l a s m a b y t h e S o m o g y i - N e l s o n t e c h n i q u e i n
d u p l i c a t e ( 1 6 , 1 7 ) , b y g l u c o s e o x i d a s e ( 1 8 ) , a n d b y t h e
T e c h n i c o n A u t o a n a l y z e r f e r r i c y a n i d e m e t h o d . A p p r o p r i -
a t e c o r r e c t i o n s w e r e m a d e f o r r e d c e l l s t r o m a l a n d p r o t e i n
v o l u m e s ( 1 9 , 2 0 ) . E a c h v a l u e i n t h e F i g u r e s a n d T a b l e s
r e p r e s e n t s t h e m e a n o f a l l f o u r d e t e r m i n a t i o n s . I n t h o s e
i n s t a n c e s i n w h i c h a v a l u e v a r i e d b y 5 % o r m o r e o f t h e
m e a n , a l l t h e a n a l y s e s w e r e r e p e a t e d . F r e e f a t t y a c i d s i n
p l a s m a w e r e m e a s u r e d b y t h e T r o u t , E s t e s , a n d F r i e d -
b e r g m o d i f i c a t i o n ( 2 1 ) o f t h e m e t h o d o f D o l e ( 5 ) .
G l y c e r o l a n d p y r u v i c a n d l a c t i c a c i d s i n t h e p o t a s s i u m
b i c a r b o n a t e - n e u t r a l i z e d p e r c h l o r a t e s u p e r n a t a n t f l u i d
w e r e a n a l y z e d b y e n z y m a t i c t e c h n i q u e s ( 2 2 ) . A l l e n -
z y m e s a n d c o f a c t o r s w e r e o b t a i n e d c o m m e r c i a l l y . ' C r e -
a t i n i n e , u r i c a c i d , a n d u r e a i n s e r u m w e r e d e t e r m i n e d b y
t h e T e c h n i c o n A u t o a n a l y z e r a n d s e r u m C 0 2 b y t h e V a n
S l y k e s t a n d a r d m a n o m e t r i c a n a l y s i s .
, p - H y d r o x y b u t y r a t e
a n d a c e t o a c e t a t e w e r e m e a s u r e d
e n z y m a t i c a l l y b y t h e m e t h o d o f W i l l i a m s o n , Me l l a n b y ,
a n d K r e b s ( 2 3 ) p a r t i a l l y f o l l o w i n g t h e m o d i f i c a t i o n s s u g -
g e s t e d i n t h e B o e h r i n g e r c o m m e r c i a l p a m p h l e t o f 1 9 6 4 .
T h e s u p e r n a t a n t f l u i d o f t h e p e r c h l o r i c a c i d - t r e a t e d b l o o d
w a s f i l t e r e d i n t h e c o l d a n d 5 m l u s e d f o r B - h y d r o x y -
b u t y r a t e d e t e r m i n a t i o n a f t e r a p p r o p r i a t e d i l u t i o n . T h i s
w a s m i x e d w i t h 0 . 6 5 m l o f a s o l u t i o n c o n t a i n i n g 3 M
K OH a n d 1 M K 2 C Os , a n d t o t h i s w a s a d d e d 0 . 3 m l o f
0 . 0 2 5 M
# - N A D .
A f t e r s t a n d i n g a t 2 0 0 t o 2 5 0 C f o r 3 0
m i n u t e s , t h e m i x t u r e w a s c e n t r i f u g e d a n d 3 . 5 m l o f t h e
s u p e r n a t a n t f l u i d ( p H 9 . 5 ) p l a c e d i n a c u v e t t e . T h e
i n i t i a l o p t i c a l d e n s i t y w a s d e t e r m i n e d a t 3 4 0
m j u ;
t h e n
0 . 0 2 m l o f a s u s p e n s i o n o f 8 - h y d r o x y b u t y r i c d e h y d r o g e n -
a s e ( 5 m g p e r m l ) w a s a d d e d a n d t h e r e a c t i o n a l l o w e d
t o g o t o c o m p l e t i o n i n a w a t e r b a t h a t 3 7 0 C . T h e o p -
t i c a l d e n s i t y w a s r e d e t e r m i n e d a t 4 5 m i n u t e s , a n d a p p r o -
p r i a t e c a l c u l a t i o n s w e r e a p p l i e d t o d e t e r m i n e t h e c o n -
c e n t r a t i o n o f p - h y d r o x y b u t y r a t e p r e s e n t i n t h e o r i g i n a l
s a m p l e . F o r t h e a c e t o a c e t a t e d e t e r m i n a t i o n s , 5 m l o f t h e
d e p r o t e i n i z e d b l o o d f i l t r a t e , a p p r o p r i a t e l y d i l u t e d , w a s
m i x e d w i t h 0 . 4 5 m l o f 3 M K . 3 P O4 . A f t e r 3 0 m i n u t e s a t
2 0 t o 2 5 0 C t h e m i x t u r e w a s c e n t r i f u g e d a n d 3 . 5 m l ( p H
7 ) p l a c e d i n a c u v e t t e . T o t h i s , 0 . 1 m l o f
j # - N A D H
w a s
a d d e d a n d t h e i n i t i a l o p t i c a l d e n s i t y d e t e r m i n e d a t 3 4 0
m u ; t h e n 0 . 0 2 m l o f p - h y d r o x y b u t y r i c d e h y d r o g e n a s e
s u s p e n s i o n ( 5 m g p e r m l ) w a s a d d e d a n d t h e o p t i c a l d e n -
s i t y r e d e t e r m i n e d a f t e r 2 5 m i n u t e s a t 2 0 t o 2 5 0 C , a t
w h i c h t i m e t h e r e a c t i o n h a d g o n e t o c o m p l e t i o n . A p -
p r o p r i a t e b l a n k s a n d s t a n d a r d s w e r e r u n f o r b o t h s u b -
s t r a t e s w i t h e a c h s e t o f d e t e r m i n a t i o n s . Me a n r e c o v e r y
1
B o e h r i n g e r , Ma n n h e i m , G e r m a n y .
o f f i - h y d r o x y b u t y r a t e a d d e d t o b l o o d a n d c a r r i e d t h r o u g h
t h e e n t i r e p r o c e d u r e w a s 9 1 . 4
5 . 4 ( S D ) . S i m i l a r l y , r e -
c o v e r y o f a c e t o a c e t a t e w a s 8 4 %7 o

5 . 5 ( S D ) . T h e v a l u e s
p r e s e n t e d i n t h e T a b l e s w e r e n o t c o r r e c t e d f o r t h i s l o s s .
S e r u m i m m u n o r e a c t i v e i n s u l i n w a s m e a s u r e d b y a
m o d i f i c a t i o n ( 2 4 ) o f t h e d o u b l e a n t i b o d y t e c h n i q u e o f
Mo r g a n a n d L a z a r o w ( 2 5 ) a n d g r o w t h h o r m o n e b y b o t h
a d o u b l e a n t i b o d y t e c h n i q u e ( 2 6 ) a n d b y t h e m e t h o d o f
G l i c k , R o t h , Y a l o w , a n d B e r s o n ( 2 7 ) . I n s u l i n v a l u e s
a r e t h e m e a n s o f d u p l i c a t e a n a l y s e s t h a t a g r e e d w i t h i n
1 0 %. G r o w t h h o r m o n e w a s i n i t i a l l y a s s a y e d i n d u p l i -
c a t e b y t h e d o u b l e a n t i b o d y s y s t e m o f S c h a l c h a n d
P a r k e r ( 2 6 ) a n d , i f t h e s e v a l u e s w e r e l e s s t h a n 2
m / A g
p e r m l , w e r e r u n i n t r i p l i c a t e w i t h t h e c h r o m a t o e l e c t r o -
p h o r e t i c m e t h o d ( 2 7 ) . F o r b o t h s y s t e m s , t h e v a l u e s r e -
p o r t e d a r e t h e m e a n s o f d u p l i c a t e o r t r i p l i c a t e a n a l y s e s
t h a t a g r e e d w i t h i n 1 0 %. S e r u m i n s u l i n - l i k e a c t i v i t y w a s
d e t e r m i n e d b y t h e m e t h o d o f R e n o l d a n d c o - w o r k e r s
( 2 8 ) , i n w h i c h o x i d a t i o n o f g l u c o s e - l - ' 4 C t o ' C O2 i n t h e
p r e s e n c e o f s u r v i v i n g i s o l a t e d r a t e p i d i d y m a l a d i p o s e t i s -
s u e i s u s e d a s a n i n d e x o f a c t i v i t y . E a c h a s s a y w a s
m o n i t o r e d s t a t i s t i c a l l y ( 2 9 ) a n d t h e i n d e x o f p r e c i s i o n
d e t e r m i n e d ; t h e c o r r e s p o n d i n g l a m b d a v a l u e s w e r e 0 . 1 0 ,
0 . 1 1 , 0 . 1 6 , a n d 0 . 2 1 . S e r u m w a s d i l u t e d b e f o r e a s s a y t o
a 2 5 % c o n c e n t r a t i o n w i t h b u f f e r , a n d t h e r e s u l t s a r e
c o r r e c t e d f o r t h i s d i l u t i o n .
N i t r o g e n i n u r i n e w a s d e t e r m i n e d i n d u p l i c a t e b y t h e
s t a n d a r d K j e l d a h l t e c h n i q u e i n t w o l a b o r a t o r i e s . I t w a s
r e p e a t e d i f a n y s i n g l e v a l u e v a r i e d b y g r e a t e r t h a n 1 0 %
o f t h e m e a n . U r i n a r y a c e t o a c e t a t e a n d p - h y d r o x y b u t y -
r a t e c o n c e n t r a t i o n s w e r e m e a s u r e d i n t h e s a m e m a n n e r
a s i n w h o l e b l o o d . C r e a t i n i n e a n d u r i c a c i d i n u r i n e
w e r e d e t e r m i n e d b y t h e T e c h n i c o n A u t o a n a l y z e r a n d s o -
d i u m a n d p o t a s s i u m b y i n d i r e c t f l a m e p h o t o m e t r y . U r i -
n a r y 1 7 - h y d r o x y c o r t i c o i d s w e r e d e t e r m i n e d b y t h e m e t h o d
o f R e d d y ( 3 0 ) a n d k e t o s t e r o i d s b y t h a t o f D r e k t e r a n d
a s s o c i a t e s ( 3 1 ) .
G l u c o s e t u r n o v e r s t u d i e s . T h e g l u c o s e t u r n o v e r s t u d -
i e s , p e r f o r m e d a t t h e e n d o f t h e f a s t i n a l l e i g h t s u b j e c t s
a n d a l s o a t t h e b e g i n n i n g i n t h e t w o d i a b e t i c s , w e r e d o n e
a c c o r d i n g t o m e t h o d s a n d c a l c u l a t i o n s p r e v i o u s l y d e -
s c r i b e d ( 1 1 , 1 2 ) . T w e n t y , * c ( 1 . 7 1 m g ) o f g l u c o s e - l - " C '
i n 2 m l o f s a l i n e w a s i n j e c t e d i n t o t h e t u b i n g o f a n
i s o t o n i c s a l i n e i n f u s i o n w i t h i n 6 0 s e c o n d s . A t i n t e r v a l s
o f 3 0 m i n u t e s f o r 3 h o u r s , b l o o d s a m p l e s w e r e w i t h d r a w n
a n d i m m e d i a t e l y d e p r o t e i n i z e d a c c o r d i n g t o t h e m e t h o d
o f S o m o g y i ( 1 7 ) . S e p a r a t i o n o f g l u c o s e f r o m a c i d i c
c o m p o n e n t s o f t h e p r o t e i n - f r e e f i l t r a t e a n d o x i d a t i o n w i t h
p e r i o d i c a c i d w e r e a c c o m p l i s h e d a s p r e v i o u s l y d e s c r i b e d
( 1 1 , 1 2 ) . T h e C O2 d e r i v e d f r o m c a r b o n s 1 t o 5 o f t h e
g l u c o s e w a s i s o l a t e d a s B a C O2 a n d c o u n t e d a s a s u s -
p e n s i o n i n a s t a n d a r d 1 , 4 - b i s - 2 - ( 5 - p h e n y l o x a z o l y l )
b e n -
z e n e ( P OP OP ) - t o l u e n e p h o s p h o r s o l u t i o n c o n t a i n i n g
t h y x i n i n a c o n c e n t r a t i o n o f 3 0 g p e r L . T h e f o r m a l d e -
h y d e , d e r i v e d f r o m c a r b o n 6 o f t h e g l u c o s e , w a s i s o l a t e d
a s t h e f o r m a l d i m e d o n e a n d c o u n t e d a s s u c h i n t h e
P OP OP - t o l u e n e p h o s p h o r s o l u t i o n , i n w h i c h i t i s c o m -
p l e t e l y s o l u b l e . A l l c o u n t i n g w a s d o n e i n a P a c k a r d
2
N e w E n g l a n d N u c l e a r C o r p . , B o s t o n , Ma s s .
1 7 5 3
C A H I L L A N D C O- W OR K E R S
l i q u i d s c i n t i l l a t i o n s p e c t r o m e t e r , m o d e l 3 1 4 - D C . C a l c u -
l a t i o n s w e r e p e r f o r m e d o n a n I B M 1 4 1 0 c o m p u t e r ( 1 2 ) .
C a l o r i m e t r y . T o t a l e n e r g y b a l a n c e w a s d e t e r m i n e d
d u r i n g t h e e n t i r e f a s t i n g p e r i o d i n s u b j e c t s N : a n d N 6
a n d i n t h e t w o d i a b e t i c s u b j e c t s , D 1 a n d D 2 . I n t h e o t h e r
f o u r s u b j e c t s ( N 2 t o N 5 ) , t h i s p r o c e d u r e w a s p e r f o r m e d
o n l y o n d a y s 6 , 7 , a n d 8 . T h e t e c h n i q u e w a s c o n v e n -
t i o n a l i n d i r e c t c a l o r i m e t r y , a s m o d i f i e d f o r c l i n i c a l a p p l i -
c a t i o n b y K i n n e y ( 3 2 ) . E x p i r e d a i r w a s c o l l e c t e d f o r
5 - m i n u t e p e r i o d s e v e r y h o u r o f t h e w a k i n g d a y w i t h t h e
s u b j e c t r e c l i n i n g i n b e d w i t h o u t s p e c i f i e d p r e v i o u s r e -
s t r i c t i o n o f a c t i v i t y . S a m p l e s , s t o r e d t e m p o r a r i l y f o r
5 t o 1 5 m i n u t e s i n a l u m i n i z e d p l a s t i c b a g s , w e r e r u n
t h r o u g h a n a n a l y s i s t r a i n c o m p o s e d o f a n A m e r i c a n
Me t e r C o . w e t t e s t f l o w m e t e r ( m o d e l 8 0 4 ) , a m o d i f i e d
L i s t o n - B e c k e r c a r b o n d i o x i d e a n a l y z e r ( m o d e l 1 6 ) , a n d
a B e c k m a n E 2 o x y g e n a n a l y z e r . A n a l y z e r s w e r e s t a n d -
a r d i z e d w i t h k n o w n g a s m i x t u r e s b e f o r e e a c h r u n .
T h e r e s p i r a t o r y a r t i f a c t a s s o c i a t e d w i t h s a m p l i n g , u s u -
a l l y h y p e r v e n t i l a t i o n , i s r e c o g n i z a b l e b y R Q v a r i a t i o n s
f r o m s a m p l e t o s a m p l e ; a p r e l i m i n a r y 2 4 - h o u r p e r i o d
w a s a l l o w e d f o r a c c l i m a t i z a t i o n t o t h e m a s k , a n d t h e
r e s u l t s w e r e d i s c a r d e d . A f t e r t h i s p e r i o d , a s K i n n e y h a s
s h o w n ( 3 2 ) , m e a n c a l o r i c e x p e n d i t u r e s o d e t e r m i n e d a c -
c o u n t s f o r 9 0 % o r m o r e o f t h e m e a s u r e d c a l o r i c i n t a k e
i n a s u b j e c t u n d e r r e l a t i v e l y s t e a d y s t a t e c o n d i t i o n s .
T h e p a t i e n t s ' a c t i v i t i e s w e r e n o t i n t e n t i o n a l l y r e s t r i c t e d
a t a n y t i m e e x c e p t b e f o r e t h e m o r n i n g p h l e b o t o m y ; h o w -
e v e r , i t w a s n o t e d t h a t t h e y r e s t r i c t e d t h e i r a c t i v i t i e s t o
d r e s s i n g i n c a s u a l c l o t h e s e a c h m o r n i n g a f t e r t h e i r w e i g h t
h a d b e e n t a k e n a n d t o m e e t i n g u s u a l h y g i e n i c n e e d s i n a d -
d i t i o n t o l i m i t e d a m b u l a t i o n a b o u t t h e C l i n i c a l R e s e a r c h
C e n t e r . F l u i d i n t a k e w a s 1 , 5 0 0 m l w a t e r p e r d a y , a n d
f o r t h e l a s t 3 d a y s o f t h e s t u d y , t h e s u b j e c t s r e c e i v e d 1 7
m E q o f N a C l t o c o m p e n s a t e p a r t l y f o r t h e v o l u m e d e -
p l e t i o n f r o m b l o o d s a m p l i n g .
E a c h s u b j e c t w a s f u l l y a d v i s e d a s t o t h e n a t u r e a n d
e x t e n t o f t h e s t u d y b e f o r e g i v i n g c o n s e n t a n d b e i n g a c -
c e p t e d .
R e s u l t s
N o r m a l b a s e - l i n e f a s t i n g v a l u e s . I n T a b l e I I I
a r e s u m m a r i z e d t h e m e a n v a l u e s o f a l l c o n s t i t u -
e n t s m e a s u r e d i n p l a s m a ( o r s e r u m ) . S a m p l e s 0
a n d 1 a r e v a l u e s a f t e r a r o u t i n e o v e r n i g h t f a s t .
S a m p l e s 2 t o 8 a r e f o r e a c h s u c c e e d i n g d a y o f
t o t a l f a s t ( 1 8 0 h o u r s ) . G l u c o s e c o n c e n t r a t i o n s
r e a c h e d a p l a t e a u b y t h e t h i r d d a y o f f a s t a n d
r e m a i n e d e x t r e m e l y s t a b l e t h e r e a f t e r ( F i g u r e 1 )
a s d i d t h e l e v e l s o f i m m u n o r e a c t i v e i n s u l i n ( F i g -
u r e 2 ) . T h e c o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n t s o f t h e n i n e
p a i r e d v a l u e s o f i n s u l i n a n d g l u c o s e f o r e a c h n o r -
m a l s u b j e c t s h o w e d p r o b a b i l i t y v a l u e s l e s s t h a n
0 . 0 1 i n t h r e e , a n d l e s s t h a n 0 . 0 0 1 i n t h r e e . A l l
p a i r e d v a l u e s o f i n s u l i n a n d g l u c o s e w h e n c o m -
b i n e d f o r a l l n o r m a l s u b j e c t s h a d a c o r r e l a t i o n
c o e f f i c i e n t o f 0 . 6 0 4 ( p < 0 . 0 0 1 ) . A l i n e a r r e g r e s -
s i o n w a s d e r i v e d ( y
= 5 7 . 2 + 1 . 2 2 x ) w i t h t h e y
i n t e r c e p t , 5 7 . 2 m g p e r 1 0 0 m l , a n d t h e 9 5 %o c o n -
f i d e n c e l i m i t s o f t h i s v a l u e w e r e + 4 . 6 4 .
I n c o n t r a s t t o s e r u m i n s u l i n m e a s u r e d b y t h e
i m m u n o a s s a y , s e r u m i n s u l i n - l i k e a c t i v i t y , a s d e -
t e r m i n e d o n r a t a d i p o s e t i s s u e ,
e x h i b i t e d a d i f -
T A B L E I I I
S e r u m o r p l a s m a c o n c e n t r a t i o n s i n t h e s i x n o r m a l s u b j e c t s
D a y s o f s t u d y
0 1 2 3 4 5 6 7 8
G l u c o s e , m g / 1 OO m l 7 7 2 * 8 4 1 7 3 2 6 8 2 6 5 4 1 6 6 4 1 6 2 + 2 6 4 4 1 6 3 i 1
F F A , m m o l e s / L 0 . 5 3 0 . 4 2 0 . 8 2 1 . 0 4 1 . 1 5 1 . 2 7 1 . 1 8 1 . 1 9 1 . 8 8
4 0 . 0 2 4 0 . 0 4 0 . 0 8 : 4 0 . 0 7 - 0 . 1 1 : +0 . 0 7 4 0 . 0 5 4 0 . 0 5 4 0 . 0 5
A c e t o a c e t a t e , m m o l e s / L 0 . 0 1 3 0 . 1 6 0 . 5 1 0 . 6 5 0 . 7 7 0 . 8 5 0 . 9 5 1 . 0 9
4 0 . 0 0 3 0 . 0 3 0 . 0 7 4 0 . 1 0 4 0 . 0 9 0 . 0 8 4 0 . 0 8 0 . 1 1
P - H y d r o x y b u t y r a t e , m m o l e s / L 0 . 0 1 6 0 . 3 9 1 . 6 4 2 . 2 4 2 . 8 7 3 . 1 3 3 . 5 8 4 . 2 3
4 0 . 0 0 1 4 0 . 1 1 4 0 . 1 4 4 0 . 1 2 0 . 2 3 4 0 . 2 4 4 0 . 2 6 4 0 . 3 4
G l y c e r o l , p m o l e s / L 6 2 6 8 6 1 2 9 5 1 4 9 1 1 0 1 0 0 1 5 7 6 1 0 8 0 1 0 1 6 4 4 1
C 0 2 c o n t e n t , m m o l e s / L 2 3 . 8 2 5 . 5 2 3 . 7 2 0 . 5 2 0 . 7 2 0 . 2 1 9 . 4 2 0 . 7 1 8 . 0
0 . 8 4 1 . 0 1 . 1 1 . 3 1 . 3 1 . 1 1 . 1 1 . 0 +1 . 1
U r e a n i t r o g e n , m g / 1 0 0 m l 1 2 . 2 1 3 . 0 1 4 . 0 1 6 . 2 1 6 . 2 1 4 . 3 1 3 . 2 1 3 . 0 1 3 . 3
0 . 7 +1 . 1 1 . 4 +1 . 4 +1 . 6 t 1 . 0 1 . 1 t 1 . 3 4 1 . 6
U r i c a c i d , m g / 1 0 0 m l 6 . 2 6 . 2 7 . 7 9 . 2 1 1 . 6 1 2 . 1 1 3 . 5 1 3 . 8 1 5 . 0
4 0 . 4 0 . 7 4 0 . 5 0 . 9 1 . 2 0 . 9 0 . 9 1 . 1 0 . 5
C r e a t i n i n e , m g / 1 0 0 m l 1 . 0 2 0 . 9 0 1 . 0 5 1 . 1 0 1 . 2 0 1 . 1 0 1 . 1 3 1 . 0 2 1 . 2 0
4 0 . 1 0 4 0 4 0 . 1 6 0 . 2 0 4 0 . 1 5 4 0 . 0 8 4 0 . 0 8 4 0 . 1 0 0 . 0 7
I n s u l i n , p U / m l
1 4 . 0 1 5 . 2 9 . 2 8 . 0 7 . 7 8 . 6 7 . 7 7 . 7 8 . 3
1 . 8 2 . 3
4 0 . 8
0 . 7
4 0 . 4
0 . 8 0 . 6
4 0 . 5 4 1 . 0
G r o w t h h o r m o n e , m p g / m l 0 . 3 1 . 9 3 . 1 5 . 8 3 . 7 8 . 8 6 . 0 2 . 5 3 . 4
4 0 . 3 4 1 . 2
1 . 9
4 1 . 6 4 1 . 0
2 . 9 2 . 9 1 . 2
4 1 . 3
*

S t a n d a r d e r r o r o f t h e m e a n .
1 7 5 4
H OR MON E - F U E L I N T E R R E L A T I ON S H I P S D U R I N G F A S T I N G
f e r e n t b e h a v i o r . Ov e r t h e f a s t i n g p e r i o d , f o u r
s u b j e c t s s h o w e d a n i n c r e a s e , o n e n o c h a n g e , a n d
o n e a d e c r e a s e i n a c t i v i t y . T h e m e a n v a l u e , c o r -
r e c t e d f o r t h e 1 : 4 d i l u t i o n i n t h e a s s a y , i n c r e a s e d
f r o m 3 7 2 t o 4 3 2 u U p e r m l , a n d t h i s d i f f e r e n c e
w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t ( p < 0 . 0 5 ) b y t h e
p a i r e d t t e s t . T h e i n i t i a l v a l u e a f t e r a n o v e r n i g h t
f a s t w a s w e l l w i t h i n t h e r a n g e o b s e r v e d i n 5 6
c o n t r o l s u b j e c t s : m e a n
+
S E M = 3 6 4
+
2 8 1 A U
p e r m l ( 3 3 ) .
F r e e f a t t y a c i d s a c h i e v e d a p l a t e a u b y t h e t h i r d
d a y , e x c e p t f o r a s i g n i f i c a n t i n c r e a s e o n t h e l a s t
d a y , p r o b a b l y d u e t o a s u b j e c t i v e r e s p o n s e t o
i n s e r t i o n o f a n i n d w e l l i n g n e e d l e f o r t h e g l u c o s e
t u r n o v e r s t u d y . T h a t t h i s i n c r e a s e i n f a t t y a c i d
c o n c e n t r a t i o n w a s d u e t o a n i n c r e a s e d l i p o l y s i s i n
a d i p o s e t i s s u e , p r o b a b l y a s a r e s u l t o f a d r e n e r g i c
s t i m u l a t i o n , i s s u p p o r t e d b y t h e p a r a l l e l i n c r e a s e
i n b l o o d g l y c e r o l . A c e t o a c e t a t e a n d 8 3 - h y d r o x y -
b u t y r a t e r o s e g r a d u a l l y t h r o u g h o u t t h e s t u d y a s
d i d u r i c a c i d . T h e r a t i o o f / 3 - h y d r o x y b u t y r a t e t o
a c e t o a c e t a t e r e m a i n e d r e l a t i v e l y c o n s t a n t a f t e r
t h e s e c o n d d a y o f f a s t . H o w e v e r , w h e n t h e l e v e l s
w e r e s o l o w a s t o b e b a r e l y d e t e c t a b l e ( f i r s t 2
d a y s o f t h e s t u d y ) , t h e r a t i o a p p r o a c h e d u n i t y . A s
e x p e c t e d , t h e i n c r e a s e i n o r g a n i c a c i d s ( a c e t o -
a c e t i c , / 8 - h y d r o x y b u t y r i c , a n d f r e e f a t t y a c i d s )
w a s a c c o m p a n i e d b y a c o r r e s p o n d i n g d e c r e a s e i n
[ H C Oi - ]
w i t h t h e i r s u m r e m a i n i n g c o n s t a n t
w i t h i n t h e e r r o r s o f t h e m e t h o d s ( F i g u r e 3 ) .
1 0 0 r
7 5
m g m / I OOm I
5 0 -
2 5 S
0 I 2 3 4 5 6 7 8
D A Y S
F I G . 1 . I N D I V I D U A L V A L U E S F OR P L A S MA G L U C OS E
F OR E A C H N OR MA L S U B J E C T OV E R 8 - D A Y P E R I OD OF
F A S T .
S e r u m u r e a n i t r o g e n e x h i b i t e d a p r o g r e s s i v e
r i s e a n d f a l l . A s w i l l b e s h o w n l a t e r , t h i s w a s
n o t d u e t o a l t e r e d r e n a l f u n c t i o n b u t t o a r i s e a n d
f a l l i n n i t r o g e n p r o d u c t i o n a n d e x c r e t i o n . V e n o u s
l a c t i c a n d p y r u v i c a c i d c o n c e n t r a t i o n s w e r e m e a -
s u r e d t h r o u g h o u t t h e s t u d y i n s u b j e c t s N 1 a n d
N 6 a n d o n t h e l a s t 2 d a y s o f t h e s t u d y i n a l l s u b -
j e c t s . N o c h a n g e w a s n o t e d t h r o u g h o u t t h e f a s t
( F i g u r e 3 ) , a n d t h e f i n a l m e a n l a c t a t e t o p y r u -
3 0
[
A U / m i
2 0 1 .
1 0
0
0 /
. * 4
0 0
0
c
_
%P
0 I 2 3 4 5 6 7 8
D A Y S
F I G . 2 . I N D I V I D U A L V A L U E S F OR S E R U M I MMU N OR E A C T I V E I N S U L I N F OR E A C H
N OR MA L S U B J E C T ON E A C H D A Y OF F A S T .
1 7 5 5
C A H I L L A N D C O- W OR K E R S
2 6 -
2 5 -
8 -
m M 6 -
4 -
2 -
I -
D A Y S OF F A S T
F I G . 3 . T H E S U M OF L A C T I C , P Y R U V I C , F R E E F A T T Y ,
A C E T OA C E T I C , A N D
P - H Y D R OX Y B U T Y R I C
A C I D C ON C E N T R A -
T I ON S A N D T H E R E C I P R OC A L D E C R E A S E I N [ H C O3 - ] .
Me a n
o f v a l u e s f r o m s i x n o r m a l s u b j e c t s .
v a t e r a t i o w a s 9 . 1
+
S E M 0 . 2 ( n = 1 8 ) . A r -
t e r i a l v a l u e s , a l t h o u g h f a r m o r e s i g n i f i c a n t , w e r e
i n t e n t i o n a l l y n o t o b t a i n e d t o m i n i m i z e t r a u m a
a n d b l o o d l o s s .
F i n a l l y , t h e m e a n v a l u e s f o r g r o w t h h o r m o n e
D A Y S
F I G . 4 . S E R U M G R OW T H H OR MON E C ON C E N T R A T I ON S
I N S I X N OR MA L S U B J E C T S D U R I N G 8 S U C C E S S I V E D A Y S OF
F A S T I N G .
e x h i b i t e d a r i s e a n d f a l l ; h o w e v e r , t h e i n d i v i d u a l
v a l u e s ( F i g u r e 4 ) w e r e e x t r e m e l y v a r i a b l e . N o
c o r r e l a t i o n b e t w e e n g r o w t h h o r m o n e l e v e l s a n d
f r e e f a t t y a c i d s , g l u c o s e , o r i n s u l i n c o u l d b e m a d e .
L i k e w i s e , t h e r e w a s n o c o r r e l a t i o n b e t w e e n a n y
o f t h e s e p a r a m e t e r s a n d t h e h a b i t u s o f t h e i n -
d i v i d u a l o r t h e p r e s e n c e o r a b s e n c e o f a f a m i l y
h i s t o r y o f d i a b e t e s ( N 2 a n d N 4 ) .
B a s e - l i n e f a s t i n g v a l u e s i n d i a b e t e s . I n T a b l e
I V a r e s u m m a r i z e d t h e v a l u e s d e r i v e d f r o m t h e
t w o d i a b e t i c s u b j e c t s . V a l u e s t h a t a r e g r e a t e r
t h a n 2 o r 3 S D f r o m t h e m e a n o f t h e n o r m a l s
a r e a p p r o p r i a t e l y m a r k e d . T h e d i a b e t i c s , a s e x -
p e c t e d , s h o w e d h i g h f a s t i n g g l u c o s e v a l u e s e a r l y
i n t h e s t u d y . S u b j e c t D 1 h a d a b n o r m a l l y l o w
v a l u e s o n d a y s 3 t h r o u g h 7 ; h o w e v e r , D 2 h a d a b -
n o r m a l l y e l e v a t e d v a l u e s o n a l l b u t d a y 6 . B o t h
T A B L E I V
P l a s m a o r s e r u m c o n c e n t r a t i o n s
S u b j e c t D i : d a y s o f s t u d y
0 1 2 3 4 5 6 7 8
G l u c o s e , m g / 1 0 0 m l 9 8 * 9 6 * 6 9 5 7 t 5 3 t 4 7 * 5 0 * 5 5 * 5 9
F F A , m m o l e s / L 1 . 0 9 * 0 . 8 4 * 1 . 1 3 1 . 8 4 * 1 . 6 7 t
1 . 4 0 1 . 4 2 1 . 9 0 * 2 . 2 4 t
A c e t o a c e t a t e , m m o l e s / L 0 . 0 3 6 * 0 . 0 4 0 * 0 . 2 0 0 . 4 9 0 . 6 6 0 . 8 0 0 . 9 7 0 . 9 5 1 . 1 1
, B - H y d r o x y b u t y r a t e , m m o l e s / L 0 . 0 6 6 * 0 . 0 5 4 * 0 . 3 9 1 . 8 9 2 . 4 8 3 . 0 7 4 . 1 8 4 . 3 0 4 . 7 2
G l y c e r o l ,
g m o l e s / L
6 2 3 9 5 5 1 1 1 9 6 5 1 1 1 2 1 0 3 1 4 4
C O2 c o n t e n t , m m o l e s / L 2 5 2 8 2 5 2 4 2 2 2 2 2 1 2 1
U r e a n i t r o g e n , m g / 1 0 0 m l 1 3 1 4 1 5 2 0 1 6 1 3 1 1 1 2
U r i c a c i d , m g / 1 0 0 m l 4 . 5 5 . 4 6 . 8 8 . 2 9 . 6 1 0 . 1 1 0 . 5 1 0 . 7 *
C r e a t i n i n e , m g / 1 0 0 m l 1 . 0 1 . 0 1 . 0 1 . 0 1 . 1 1 . 1 1 . 1 1 . 1
I n s u l i n ,
1 g U / m l
3 0 * 3 3 * 3 0 * 2 7 * 2 4 * 2 4 * 2 9 * 2 6 * 2 4 *
G r o w t h h o r m o n e , m l u g / m l
3 . 3 * 1 . 4 2 5 . 0 * 1 4 . 8 t 1 1 . 8 * 1 2 . 0 2 1 . 0 t 8 . 0 4 . 4
*
> 3 S D f r o m m e a n o f n o r m a l s .
t
> 2 S D f r o m m e a n o f n o r m a l s .
1 7 5 6
H OR MON E - F U E L I N T E R R E L A T I ON S H I P S D U R I N G F A S T I N G
d i a b e t i c s s h o w e d h i g h e r l e v e l s o f a c e t o a c e t i c a n d
, 8 - h y d r o x y b u t y r i c
a c i d s d u r i n g t h e f i r s t 2 d a y s .
Ot h e r s p o r a d i c a l l y a b n o r m a l v a l u e s a r e n o t e d ,
b e s i d e s t h o s e f o r i n s u l i n a n d g r o w t h h o r m o n e .
C h r o m a t o g r a p h y o f t h e s e r a a f t e r i n c u b a t i o n w i t h
i n s u l i n - " 8 " I f a i l e d t o d e t e c t a n t i b o d y ( 3 4 ) . T h i s
w a s c a r e f u l l y e x c l u d e d s i n c e b o t h s u b j e c t s h a d
r e c e i v e d i n s u l i n m a n y m o n t h s p r e v i o u s l y , a n d
p e r s i s t e n c e o f i n s u l i n a n t i b o d y c o u l d h a v e c o n -
t r i b u t e d t o t h e i r h i g h s e r u m i m m u n o r e a c t i v e i n -
s u l i n l e v e l s . B o t h s u b j e c t s a l s o h a d a b n o r m a l l y
e l e v a t e d l e v e l s o f g r o w t h h o r m o n e , b u t n o t p e r -
s i s t e n t l y .
I n t r a v e n o u s g l u c o s e t o l e r a n c e t e s t s . T a b l e V
s u m m a r i z e s t h e d a t a o n g l u c o s e a n d f r e e f a t t y a c i d
l e v e l s i n a l l s u b j e c t s d u r i n g i v g l u c o s e t o l e r a n c e
t e s t s b o t h b e f o r e a n d a f t e r t h e f a s t . T h e w e l l -
k n o w n g r o s s l y a b n o r m a l t o l e r a n c e i s n o t e d i n
a l l t h e n o r m a l s u b j e c t s a f t e r t h e f a s t , w h e r e a s
t h e d i a b e t i c s u b j e c t s s h o w e d n o c h a n g e i n t o l e r -
a n c e , a n d a f t e r t h e f a s t w e r e g e n e r a l l y i n d i s -
t i n g u i s h a b l e f r o m t h e n o r m a l s . T h e c o e f f i c i e n t
o f g l u c o s e d i s a p p e a r a n c e ( K ) w a s a l s o c a l c u l a t e d
( 3 5 ) a n d i s l i s t e d . I f w e e x t r a p o l a t e t o t i m e 0
t h e p l o t d e r i v e d f r o m t h e l o g a r i t h m o f g l u c o s e
c o n c e n t r a t i o n a g a i n s t t i m e , t h e c a l c u l a t e d g l u c o s e
s p a c e f o r t h e n o r m a l s u b j e c t s b e f o r e t h e f a s t
w a s 2 5 . 5 0 . 9 %o o f b o d y w e i g h t a n d a f t e r t h e
f a s t 2 7 . 4 1 . 3 %o , a n i n s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e .
I n T a b l e V I a r e l i s t e d t h e c o n c e n t r a t i o n s o f i n -
s u l i n a n d g r o w t h h o r m o n e d u r i n g t h e t o l e r a n c e
t e s t s b e f o r e a n d a f t e r t h e f a s t . T h e n o r m a l s u b -
j e c t s e x h i b i t e d a b r i s k i n s u l i n r e s p o n s e , a c h i e v -
i n g p e a k v a l u e s a t 1 m i n u t e a f t e r t h e e n d o f t h e
g l u c o s e i n f u s i o n b o t h b e f o r e a n d , s u r p r i s i n g l y ,
a f t e r t h e f a s t , b u t t h e m a g n i t u d e o f t h e r e s p o n s e
w a s m u c h l e s s i n t h e l a t t e r . T h e i n d i v i d u a l
v a l u e s , p l o t t e d i n F i g u r e 5 , s h o w a f a i r l y c o n -
s i s t e n t p a t t e r n o f r e s p o n s e f o r e a c h i n d i v i d u a l .
T h e g l u c o s e l o a d f a i l e d t o e l i c i t a d e f i n i t e i n s u l i n
r e s p o n s e b o t h b e f o r e a n d a f t e r t h e f a s t i n s u b -
j e c t D 1 . D 2 s h o w e d a d e l a y e d a n d h y p e r a c t i v e
r e s p o n s e b e f o r e t h e f a s t a n d a n e a r l i e r b u t d i -
m i n i s h e d r e s p o n s e a f t e r t h e f a s t .
T h e c o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n t o f a l l p a i r e d v a l u e s
o f s e r u m i m m u n o r e a c t i v e i n s u l i n a n d p l a s m a g l u -
c o s e d u r i n g t h e t o l e r a n c e t e s t s i n t h e n o r m a l s u b -
j e c t s b e f o r e t h e f a s t w a s 0 . 6 8 5 ( p < 0 . 0 0 1 )
a n d
a f t e r f a s t w a s 0 . 6 3 4 ( p < 0 . 0 0 1 ) . L i n e a r r e -
g r e s s i o n e q u a t i o n s w e r e c a l c u l a t e d f o r t h e t e s t s
b e f o r e a n d a f t e r t h e f a s t a n d a r e p l o t t e d
i n F i g -
u r e 6 . T h e b a r s i n d i c a t e t h e 9 5 %o c o n f i d e n c e
l i m i t s o f t h e r e s p e c t i v e i n t e r c e p t s o n t h e p l a s m a
g l u c o s e a x i s . T h e r e w a s n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e
i n m e a n s l o p e s ; h o w e v e r , t h e r e w a s a s i g n i f i c a n t
d i f f e r e n c e ( p < 0 . 0 1 ) b e t w e e n t h e g l u c o s e
i n t e r -
c e p t s b e f o r e ( 6 1 m g p e r 1 0 0 m l ) a n d a f t e r ( 1 2 9
m g p e r 1 0 0 m l ) t h e f a s t .
A s n o t e d i n t h e d a i l y f a s t i n g r e s u l t s , g r o w t h
h o r m o n e r e s p o n s e s d u r i n g t h e t o l e r a n c e t e s t s
w e r e m a r k e d l y v a r i a b l e . I n d i v i d u a l v a l u e s a r e
i l l u s t r a t e d i n F i g u r e 7 . N o c o n s i s t e n t p a t t e r n
w a s f o u n d a m o n g i n d i v i d u a l s , o r b e f o r e a n d a f t e r
t h e f a s t , e x c e p t f o r t h e s p o r a d i c a l l y h i g h e r
v a l u e s
o f t h e d i a b e t i c s , p a r t i c u l a r l y D 1 ( T a b l e V I ) .
A l s o , a n o b v i o u s c o r r e l a t i o n b e t w e e n p a t i e n t
d i s -
c o m f o r t a n d t h e g r o w t h h o r m o n e r e s p o n s e
c o u l d
n o t b e m a d e .
T A B L E I V
i n t h e t w o d i a b e t i c s u b j e c t s
S u b j e c t D 2 : d a y s o f s t u d y
0 1 2 3 4 5 6 7 8
1 0 7 * 1 1 0 * 1 0 0 * 9 0 * 8 0 * 7 5 * 7 0 7 2 * 7 2 t
0 . 9 5 * 0 . 9 0 * 0 . 9 5 1 . 2 0 1 . 3 7 1 . 4 4 1 . 4 2 1 . 5 4 t 2 . 0 3 t
0 . 0 2 9 t 0 . 0 2 9 t 0 . 0 8 2 0 . 2 2 0 . 4 6 0 . 4 0 0 . 7 8 0 . 7 1 0 . 7 7
0 . 0 5 8 * 0 . 0 5 8 * 0 . 2 1 0 . 8 1 t 1 . 5 8 t 1 . 5 5 t 2 . 7 8 2 . 6 4 3 . 1 8
6 2 3 6 t
3 6 5 4 4 1 t
4 8 7 0 6 8 9 6
2 6 2 7 2 6 2 4 2 4 2 3 2 3 2 3 1 9
1 4 1 4 1 7 1 7 2 0 1 7 1 6 1 4 1 4
6 . 4 7 . 3 8 . 1 9 . 0 1 0 . 5 1 2 . 6 1 4 . 2 1 5 . 6 1 6 . 6
1 . 1 1 . 2 1 . 1 1 . 1 1 . 1 1 . 2 1 . 2 1 . 2 1 . 3
5 1 * 5 5 * 4 4 * 3 6 * 4 2 * 4 6 * 5 3 * 4 5 * 4 0 *
< 1 . 0 < 1 . 0 < 1 . 0 2 0 1 6 . 1 * 3 2 * 8 1 5 . 6 * 2 . 0
1 7 5 7
C A H I L L A N D C O- W OR K E R S
*
U ) t )
C ; c
0 o 0 N
4 -
o
0 _-
a ,
_ Z -
' 0 e t e q
\0 .
U . * 0
O m - d 4 _E U ) _
* . * 1 S
t o - O
U I _ _' -
4 -
*
- 4
O. * * C '
0 0 0 0 ( N
_- 4 _- N
0 0 0 I 4 t - -
o o 0 O 0 % N
- - - N
0 0 0 N 0 U )
4 - * -
0 0 0 ~ '
0 0 0 _ U )
_ N N C 4
4
0 0
0 %
- *
U 0 0 4 -
. 4 4 4 ' t +-4 - 4
0 0 _ 0 0 0 I n N
0 U ) , 0 0
C S 4 C S e
* 1 -
r
- 4 -
* o U ) 4 - 4 - U )
o i ,
e l ! . * .
U )
U 0 4%4
0 - 0 0
C S
N 1 t - _4
4 4
N
. 4 -
U ) 0 0 _ U )
U 4 4 4 - N
C 4 4 4 N
)
U ) o o N S
C 4 4 4 4
' 4 0 -
N -
- 4 0
* *
G o o o U_ r o
U ) 0
_ - 4
0 S
o
0 0 0 0 0 c
r S 8 0 8 8 0 t
v
E 8
m . 0
1 7 5 8
0 ' 4 ) o
.
v
a 8 u
4 ) 0
0 0
U n
0
*
U 4
t o
* U )
- d
N 0
0 0 0
0 0
.
' 0
0 0 0
0
C 4
*
U )
0 % 0
%0
0
- H
U U )
- ' 0
- H
- H
0
C D
- H
- H
o o
' 0
- -
_0
0 0 0 0 -
_ o 4
o 0 %
- H -
- o -
0 0
_
c o
0 4 0 0
- H - H
8
C S
0 0
- - H - H
N q _
U ) _
- H - H
. ' ~~~~~~'
0 0 o
- H - H
' 0 0 0
0 %
- H - H
0 0 t -
-
H ~N o
-
o
. _
0
w
. o
0
0
. _
c 4
E
4 . )
0 t w
0
0 0
0
0 %
0
' 0
C S
0
U )
0
k o
0
U )
0
m
o
N
0
0
4 - I
0 0
N
9 4
4 -
0
c o
e q C O
t -
0
0
0
. .
0
0
( U
0 0 6
z E
0 0 g
i i 4 )
0 0 0
r .
s
r Q.
4 - ' - 0
E l Va B
( 4 i ) U 2
a
a t m -
A A t
*
I
4
I
I I
t
H OR MON E - F U E L I N T E R R E L A T I ON S H I P S D U R I N G F A S T I N G
1 o o L
P U / m l
0
0 6
I
0 6 0 1 2 0 I S 0 0 6 0 e o S o
MI N U T E S
F I G . 5 . I N D I V I D U A L L E V E L S OF S E R U M I MMU N OR E A C T I V E I N S U L I N D U R I N G
I V G L U C OS E T OL E R A N C E I N E A C H N OR MA L S U B J E C T B E F OR E ( L E F r ) A N D A F T E R
( R I G H T ) F A S T I N G .
G l u c o s e t u r n o v e r . I n T a b l e V I I a r e l i s t e d
t h e v a l u e s f r o m g l u c o s e t u r n o v e r s t u d i e s i n t h e
s i x n o r m a l s u b j e c t s a f t e r t h e f a s t a n d i n t h e t w o
d i a b e t i c s b o t h b e f o r e a n d a f t e r . A l s o i n c l u d e d
f o r c o m p a r i s o n a r e t h e g l u c o s e s p a c e s a n d p o o l
s i z e s c a l c u l a t e d w i t h b o t h g l u c o s e - G 4 C a n d t h e i v
g l u c o s e t o l e r a n c e t e s t . T h e m e a n p o o l s i z e o f
t h e n o r m a l s , b y i s o t o p e d i l u t i o n , w a s 6 . 6 g p e r
m 2 b o d y s u r f a c e ; b y t h e i v g l u c o s e t o l e r a n c e , i t
w a s 6 . 7 g p e r m 2 b o d y s u r f a c e , a s u r p r i s i n g l y
0 5 0 1 0 0
I R I y v U / m l
F I G . 6 . L I N E A R R E G R E S S I ON OF P L A S MA G L U C OS E A N D
S E R U M I MMU N OR E A C T I V E I N S U L I N ( I R I ) F OR , A L L S I X I V
G L U C OS E T OL E R A N C E T E S T S I N N OR MA L S U B J E C T S B E F OR E
A N D A F T E R F A S T I N G . B a r s i n d i c a t e t h e 9 5 % c o n f i d e n c e
l i m i t s o f r e s p e c t i v e i n t e r c e p t s o n g l u c o s e a x i s .
g o o d a g r e e m e n t . G l u c o s e t u r n o v e r w a s q u i t e
v a r i a b l e , s u b j e c t N 3 h a v i n g t h e h i g h e s t a n d N 1
t h e l o w e s t . S u b j e c t N 3 l i k e w i s e h a d t h e h i g h e s t
r a t e o f r e c y c l i n g o f 3 3 % o r 4 1 . 2 g p e r m 2 p e r
d a y ( 1 2 ) . T h i s s a m e i n d i v i d u a l e x h i b i t e d t h e
h i g h e s t a b s o l u t e g l u c o s e t u r n o v e r a f t e r s u b t r a c -
t i o n o f t h e a m o u n t r e c y c l e d , 8 4 g p e r m 2 p e r
d a y , a n d , a s e x p e c t e d , t h e h i g h e s t n i t r o g e n l o s s
( F i g u r e 8 ) .
T h e t w o d i a b e t i c s u b j e c t s w e r e i n d i s t i n g u i s h -
a b l e f r o m t h e n o r m a l s a f t e r t h e f a s t e x c e p t f o r
t h e l a r g e r g l u c o s e p o o l i n s u b j e c t D 2 . T h e i r
v a l u e s b e f o r e f a s t i n g c o m p a r e t o t h o s e d e s c r i b e d
i n m i l d d i a b e t i c s w i t h t h i s t e c h n i q u e ( 1 1 ) . .
T o t a l e n e r g y b a l a n c e . T a b l e V I I I s u m m a r i z e s
t h e e x t e n s i v e a n a l y s e s o f m e t a b o l i c b a l a n c e o n
t h e l a s t d a y i n a l l e i g h t s u b j e c t s . I n t h e t w o
n o r m a l s u b j e c t s w h o w e r e f o l l o w e d t h r o u g h o u t
t h e s t u d y , 4 d a y s w a s r e q u i r e d f o r t h e n o n p r o t e i n
R Q t o f a l l t o 0 . 7 0 , i n a g r e e m e n t w i t h t h e o b -
s e r v a t i o n s o f B e n e d i c t o n h i s s i n g l e s u b j e c t ( 2 ) .
I n t h e t w o d i a b e t i c s , t h e n o n p r o t e i n R Q f e l l t o
0 . 7 0 o n t h e f i r s t d a y o f t h e f a s t a n d r e m a i n e d
a t o r b e l o w t h i s l e v e l t h r o u g h o u t t h e s u c c e e d i n g
d a y s .
T h e s u r p r i s i n g a g r e e m e n t o f t o t a l c a l o r i e s c o n -
s u m e d b a s e d o n s u r f a c e a r e a b y t h e s i x n o r m a l
s u b j e c t s i s p r o b a b l y f o r t u i t o u s . T h e s l i g h t l y
h i g h e r e n e r g y c o n s u m e d b y D 1 a n d D 2 w a s p e r -
1 7 5 9
s o [
1 7 6 0 C A H I L L A N D C O- W OR K E R S
C
T A B L E V I
S e r u m i n s u l i n a n d g r o w t h h o r m o n e
Mi n u t e s
0 1 3 S 1 0
B e f o r e f a s t ( d a y 0 )
N o r m a l s ( n =6 ) I n s u l i n , MA U / m l 1 4 i 2 7 8 : 1 : 1 3 6 8 =1 1 2 6 1 d 1 0 5 8 i 8
i S E
G H , m p t g / m i 0 . 3 0 . 3 0 i 0 0 . 2 3 i : 0 . 2 3 0 . 2 i 0 . 2 1 . 4 1 . 1
D i a b e t i c s
D 1 I n s u l i n , u U / m l 3 0 * 2 6 2 5 2 3 2 7
G H , m u g / m l 3 . 3 4 . 3 * 2 . 8 * 3 . 2 * 3 . 1
D 2 I n s u l i n , MuU / m l 5 1 * 5 1 5 2 5 1 6 9
G H , m p z g / m l < 1 . 0 < 1 . 0 < 1 . 0 < 1 . 0 2 . 0
A f t e r f a s t ( d a y 8 )
N o r m a l s ( n =6 ) I n s u l i n , , u U / m l 8 i 1 5 4 t 8 4 8 7 4 3 6 4 1 i 7
S E
G H , m p g / m l 3 . 4 1 . 3 2 . 6 4 : 0 . 5 2 . 0 0 . 7 0 . 9 0 . 4 1 . 6 0 . 7
D i a b e t i c s
D i
I n s u l i n , MU / m l 2 4 * 3 9 3 5 3 3 3 4
G H , m p g / m l 4 . 4 2 . 0 2 . 0 1 . 6 2 . 2
D 2 I n s u l i n , M& U / m l 4 0 * 6 4 6 8 6 7 9 6 *
G H , m p g / m l 2 . 0 < 1 . 0 < 1 . 0 < 1 . 0 < 1 . 0
*
> 3 S D f r o m m e a n o f n o r m a l s .
t > 2 S D f r o m m e a n o f n o r m a l s .
h a p s d u e t o a g r e a t e r d e g r e e o f a c t i v i t y a n d ,
a l t h o u g h s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e n o r m a l s ,
i s p r o b a b l y o f l i t t l e i m p o r t . T h e s a m e i s t r u e
o f t h e l o w e r R Q o n t h e l a s t d a y o f s t u d y . I f
t h e d i s t r i b u t i o n o f c a l o r i e s i s c a l c u l a t e d f r o m t h e
n i t r o g e n l o s s a n d t h e n o n p r o t e i n R Q, o n l y N 5
e x p e n d e d a n y c a r b o h y d r a t e , a n d a g a i n , t h e e r r o r
o f t h e m e t h o d p r e c l u d e s a n y s i g n i f i c a n c e t o t h i s
a f t e r f a s t
b e f o r e f a s t
m u e s
1 2 D 1 s o
F I G . 7 . C ON C E N T R A T I ON S OF G R OW T H H OR MON E I N S E R U M I N E A C H N OR MA L S U B J E C T
D U R I N G G L U C OS E T OL E R A N C E T E S T S B E F OR E A N D A F T E R T H E P R OL ON G E D F A S T .
H OR MON E - F U E L I N T E R R E L A T I ON S H I P S D U R I N G F A S T I N G
T A B L E V I
( G H ) l e v e l s : i v G T T b e f o r e a n d a f t e r f a s t
Mi n u t e s
2 0 3 0 4 0 5 0
5 2 - 1 0 4 8 1 0 4 2 1 0 3 9 - 7
6 0
3 6 4 t 9
9 0
2 1 6
1 2 0
1 6 4
1 8 0
1 5 3
2 . 9 2 . 6 3 . 1 2 . 8 2 . 5 2 . 1 1 . 5 : 1 . 2 3 . 1 A 2 . 0 4 . 7 3 . 5 2 . 1 A 1 . 3 2 . 6 0 . 9
3 0
1 . 4
9 8
1 7 . o t
3 1
< 1 . 0
1 0 2
1 0 . 0
3 1
4 . 4
l o o t
7 . 6 t
3 3
1 3 . 6 *
1 0 0 *
6 . 4
3 1
1 8 . 4 *
1 0 6 *
2 . 0
3 1
1 8 . 4
1 1 5 *
< 1 . 0
3 4
1 5 . 0 *
1 0 2 *
< 1 . 0
3 8 t
1 . 0
6 8 *
< 1 . 0
3 0 t 6 2 3 3 2 1 2 2 1 3
1 . 6 1 . 2 3 . 7 3 . 0 4 . 7 3 . 7 7 . 2 4 . 6
3 1
3 . 8
8 0 *
< 1 . 0
2 7
2 5 . 4 t
7 1 *
< 1 . 0
2 9
3 2 . 2 *
7 0 *
< 1 . 0
3 0
3 9 . 0 t
6 3 *
< 1 . 0
o b s e r v a t i o n . N e v e r t h e l e s s , k n o w i n g t h e a p p r o x i -
m a t e c o n t r i b u t i o n o f l i p i d t o t h e f u e l c o n s u m e d
a n d a s s u m i n g t h a t g l y c e r o l c o m p r i s e s a b o u t 1 0 %o
o f l i p i d w e i g h t , o n e c a n c a l c u l a t e t h e g l y c e r o l
m o b i l i z e d f r o m a d i p o s e d e p o t s . S i n c e t h i s i t o i e t y
c a n b e r e a d i l y i n c o r p o r a t e d i n t o g l u c o s e , t h e
n o n g l y c e r o l s y n t h e s i s o f g l u c o s e c a n b e c a l c u l a t e d
f r o m t h e v a l u e o b t a i n e d f r o m T a b l e V I I , n a m e l y ,
t h e g l u c o s e t u r n o v e r m i n u s t h e a m o u n t r e c y c l e d .
2 2 2
1 0 . 9 [ 4 . 4
2 8
2 2 . 0
6 4 *
< 1 . 0
2 0 t 3 2 0 3 1 7 1
9 . 7 3 . 0 6 . 1 2 . 0 j 1 . 2 0 . 7
3 1
1 6 . 0
8 6 *
< 1 . 0
3 2
8 . 4
7 1 *
< 1 . 0
3 3 *
0
8 2 *
< 1 . 0
T h e m e a n i s 5 5
+
6 g p e r m 2 p e r d a y , a n d t h e
t w o d i a b e t i c s u b j e c t s f a l l w e l l w i t h i n t h e n o r m a l
r a n g e .
U r i n a r y e x c r e t i o n . C o m p o n e n t s m e a s u r e d i n
t h e u r i n e a r e s u m m a r i z e d i n T a b l e I X . N i t r o -
g e n e x c r e t i o n ( F i g u r e 8 ) r o s e f r o m t h e s e c o n d
o r t h i r d d a y , p e a k e d o n t h e f o u r t h d a y , a n d t h e n
d e c l i n e d , p a r a l l e l t o t h e r i s e a n d f a l l i n s e r u m
u r e a n i t r o g e n ( T a b l e I I I ) . C r e a t i n i n e e x c r e t i o n
T A B L E V I I
G l u c o s e m e t a b o l i s m ( d a y 8 )
G l u c o s e p o o l G l u c o s e s p a c e [ T u r n -
o v e r -
1 C i v G T T 1 4 C i v G T T 1 4 C i v G T T T u r n o v e r R e c y c l e r e c y c l e ]
g g / m 2 % b o d y w t %/ m i n m g / k g / h r g / m 2 / % m g / k g / h r g / m 2 / g / m /
9
~~~ ~~~~~~~~~d a y d a y d a y
N o r m a l s ( a f t e r f a s t )
N i 9 . 9 1 2 . 3 5 . 5 6 . 8 2 4 . 6 2 7 . 0 0 . 7 9 9 6 7 . 1 6 3 1 0 . 0 6 . 7 6 . 3 5 7
N i 1 1 . 1 1 1 . 3 5 . 5 5 . 6 2 4 . 7 2 3 . 0 0 . 9 7 8 8 2 . 2 7 8 1 6 . 0 1 3 . 2 1 2 . 5 6 6
N a 1 4 . 4 1 3 . 7 7 . 7 7 . 7 3 9 . 6 3 0 . 5 1 . 1 3 6 1 4 3 . 0 1 2 5 3 3 . 0 4 7 . 2 4 1 . 2 8 4
N 4 i 1 6 . 8 1 3 . 6 8 . 0 6 . 5 3 5 . 0 2 6 . 4 0 . 7 9 5 9 0 . 6 8 2 3 2 . 0 2 9 . 0 2 9 . 5 6 3
N 6 1 1 . 3 1 1 . 6 6 . 8 7 . 0 3 2 . 8 3 1 . 6 0 . 8 4 9 9 6 . 8 8 3 1 9 . 0 1 8 . 4 1 5 . 8 6 7
N s 1 1 . 3 1 1 . 8 6 . 2 6 . 5 3 3 . 6 2 5 . 6 0 . 7 6 0 7 7 . 5 6 8 2 6 . 0 2 0 . 2 1 7 . 7 5 0
Me a n 6 . 6 6 . 7 3 1 . 7 2 7 . 4 0 . 8 8 6 9 2 . 9 8 5 2 2 . 7 2 2 . 5 2 0 . 5 6 4
S E 4 1 0 . 5 4 0 . 2 4 2 . 5 4 1 . 3 0 . 0 5 9 4 1 0 . 9 4 9 3 . 7 5 . 8 5 . 2 4 . 7
D i a b e t i c s
D i ( b e f o r e f a s t ) 3 3 . 1 2 1 . 8 1 6 . 5 1 0 . 9 4 5 . 6 3 4 . 4 0 . 7 2 6 1 9 2 . 9 1 7 3 1 5 . 0 2 8 . 8 2 6 . 0 1 4 7
D i ( a f t e r f a s t ) 1 5 . 5 1 3 . 0 8 . 0 6 . 7 3 5 . 8 3 1 . 2 0 . 7 8 7 1 0 3 . 9 9 0 2 2 . 0 2 2 . 9 1 9 . 8 7 0
D 2 ( b e f o r e f a s t ) 3 6 . 8 2 2 . 6 1 7 . 5 1 0 . 8 3 2 . 3 2 6 . 6 0 . 7 1 3 1 6 7 . 0 1 8 0 2 8 . 0 4 6 . 8 5 0 . 3 1 3 0
D 2 ( a f t e r f a s t ) 2 1 . 0 1 3 . 5 1 1 . 3 * 6 . 6 3 1 . 4 2 1 . 2 0 . 6 1 6 8 8 . 7 9 1 3 2 . 0 2 8 . 4 2 9 . 1 6 2
*
> 3 S D f r o m m e a n o f n o r m a l s ( a f t e r f a s t ) . N o v a l u e s w e r e f o u n d b e t w e e n 2 a n d 3 S D f r o m t h e m e a n o f n o r m a l s .
1 7 6 1
C A H I L L A N D C O- W OR K E R S
8
g m & * 6
4
2
A
0
0
0 o
1 2 3 4 5 6 7 8
D A Y S
F I G . 8 . U R I N A R Y N I T R OG E N E X C R E T I ON I N N OR MA L S U B J E C T S D U R I N G T OT A L
F A S T I N G . T h e r e i s a s i g n i f i c a n t i n c r e a s e o n d a y s 4 a n d 5 i n a l l s u b j e c t s
w h e n c o m p a r e d t o d a y s 2 a n d 8 .
T A B L E V I I I
E n e r g y m e t a b o l i s m ( d a y 8 )
C a l o r i c d i s t r i b u t i o n
N o n p r o t e i n G l u c o s e N o n g l y c e r o l
T o t a l r e s p i r a t o r y C a r b o - E s t i m a t e d [ t u r n o v e r - g l u c o s e
c a l o r i e s q u o t i e n t F a t h y d r a t e P r o t e i n g l y c e r o l r e c y c l e J s y n t h e s i s
g / m 2 / d a y g / m ' / d a y g / m 2 / d a y
N o r m a l s
N i 1 , 1 6 0 0 . 7 0 5 1 , 0 0 3 0 1 3 7 1 0 . 7 5 7 4 6
N 2 1 , 1 1 0 0 . 7 0 0 9 2 2 0 1 8 0 9 . 8 6 6 5 6
N a 1 , 1 0 0 0 . 6 5 6 9 4 0 0 1 7 8 1 0 . 0 8 4 7 4
N 4 1 , 1 0 0 0 . 7 0 5 9 7 5 0 1 3 5 1 0 . 4 6 3 5 3
N a 1 , 0 4 0 0 . 7 3 0 8 1 0 7 4 1 3 9 8 . 6 6 7 5 8
N o 1 , 1 0 0 0 . 7 0 6 9 8 0 0 1 3 4 1 0 . 4 5 0 4 0
Me a n 1 S E 1 , 1 0 0 1 1 6 0 . 7 0 0 4 0 . 0 0 9 9 3 8 1 2 7 1 2 4 1 1 1 5 0 4 9 1 0 . 0 4 0 . 3 6 4 : 5 5 5 1 6
D i a b e t i c s
D i 1 , 2 1 0 0 . 6 4 1 , 0 7 0 0 1 3 6 1 1 . 4 7 0 5 9
D 2 1 , 2 0 0 0 . 6 4 1 , 0 6 0 0 1 4 5 1 1 . 3 6 2 5 1
T A B L E I X
U r i n a r y e x c r e t i o n i n t h e s i x n o r m a l s u b j e c t s
D a y s
1 2 3 4 5 6 7 8
/ m 2 / d a y
N i t r o g e n , g 6 . 4
1 :
0 . 3 2 5 . 9 4 0 . 2 5 6 . 1
: 1
0 . 4 3 7 . 2 4 1 0 . 2 8 6 . 6
: 1
0 . 3 5 6 . 3 4 0 . 3 7 5 . 7 4 : 0 . 3 5 5 . 5 4 1 0 . 3 0
C r e a t i n i n e , m g 9 4 8 4 : 4 3 9 3 5 4 1 6 8 7 5 4 4 4 9 4 2 1 : 1 8 9 0 2 1 1 8 9 1 2 4 1 5 8 9 8 A : 2 5 8 8 5 4 2 4
U r i c a c i d , m g 4 2 2 4 2 3 3 1 8 4 1 9 1 7 6 4 - 3 2 1 1 2 1 2 0 1 0 2 4 1 6 1 3 4 1 1 6 1 5 3 4 2 0 1 3 6 L 1 6
p - H y d r o x y b u t y r a t e , m m o l e s 0 . 0 1 4 4 0 . 0 1 0 0 . 1 2 + 0 . 0 7 6 . 6 4 1 2 . 5 1 9 . 3 4 . 9 3 0 . 2 - 4 - 6 . 7 3 7 . 8 + 6 . 7 3 8 . 8 + 7 . 8 4 1 . 0 + 5 . 9
A c e t o a c e t a t e , m m o l e s 0 . 0 2 5 4 : 0 0 . 2 7 1 : 0 . 0 9 1 . 6 7 4 1 0 . 2 8 5 . 4 : 1 : 0 . 9 7 5 . 4
1 :
0 . 8 5 . 9 4 1 0 . 7 5 . 3 4 1 0 . 9 5 . 8 : 4 1 0 . 4
S o d i u m , m m o l e s 8 2
:
1 1 4 9 + 9 3 7
:
7 3 0 4 9 1 9 + 4 1 1 + 2 7 :
1 6 4 1
P o t a s s i u m , m m o l e s 3 7 4 5 3 2 +1 2 0 4 1 2 5 1 1 2 7 : 2 2 5 + 1 2 2 4 1 2 1 1 1
1 7 - H y d r o x y c o r t i c o i d s , m g 3 . 3 4 1 0 . 0 6 3 . 2 + 0 . 0 4 3 . 7 4 1 0 . 5 3 . 6 4 1 0 . 3 3 . 6 - 4 : 0 . 3 3 . 3 + 0 . 2 3 . 2 4 1 0 . 4 2 . 8 : 0 . 2
1 7 - K e t o s t e r o i d s , m g 8 . 9 : 4 : 1 . 7 1 0 . 2
: 1 :
2 . 5 7 . 6 4 : 1 . 4 6 . 1 4 1 1 . 1 5 . 8 + 1 . 1 5 . 5 + 1 . 3 5 . 1 4 - 1 . 2 4 . 6 + 1 . 0
1 7 6 2
H OR MON E - F U E L I N T E R R E L A T I ON S H I P S D U R I N G F A S T I N G
T A B L E X
U r i n a r y c l e a r a n c e s i n t h e s i x n o r m a l s u b j e c t s
D a y s
1 2 3 4 5 6 7 8
L p l a s m a / m ' / d a y
U r e a 4 8 i 5 4 2 2 4 3 2 4 6 2 4 2 3 4 4 1 4 2 1 3 7 1
C r e a t i n i n e 9 4 6 9 3 4 8 7 7 8 9 6 8 2 6 8 3 6 8 7 1 0 7 6 t 7
U r i c a c i d 6 . 7 0 . 4 4 . 4 0 . 2 2 . 1 0 . 3 1 . 0 0 . 1 0 . 9 0 . 1 1 . 1 0 . 1 1 . 1 0 . 1 1 . 0 0 . 1
0 - H y d r o x y b u t y r a t e 1 . 0 1 . 2 0 . 8 0 . 4 5 . 8 0 . 2 9 . 3 t 2 . 0 1 1 . 0 2 . 0 1 2 . 4 2 . 0 1 1 . 3 2 . 0 1 1 . 0 1 . 4
A c e t o a c e t a t e 0 . 7 0 . 5 3 . 0 1 . 0 5 . 2 0 . 9 9 . 3 1 . 2 7 . 3 0 . 9 7 . 2 0 . 5 5 . 8 0 . 8 5 . 7 0 . 6
d e c l i n e d s l i g h t l y . f i - H y d r o x y b u t y r a t e a n d a c e t o -
a c e t a t e i n c r e a s e d a s e x p e c t e d . I t i s n o t e w o r t h y
t h a t t h e f i n a l r a t i o o f 1 8 - h y d r o x y b u t y r a t e t o a c e t o -
a c e t a t e w a s g r e a t e r t h a n t h a t i n s e r u m . S o d i u m
a n d p o t a s s i u m e x c r e t i o n , p a r t i c u l a r l y t h e f o r m e r ,
d e c r e a s e d i n s p i t e o f r e p l a c e m e n t o f 8 t o 9 m E q
s o d i u m p e r m 2 p e r d a y d u r i n g t h e l a s t 3 d a y s .
T h i s d e c r e a s e w a s u n d o u b t e d l y d u e t o v o l u m e d e -
p l e t i o n a c c e n t u a t e d b y t h e d a i l y p h l e b o t o m y . U r i -
n a r y p o t a s s i u m s h o w e d a t r a n s i e n t i n c r e a s e
p a r a l l e l t o t h e r i s e a n d f a l l i n n i t r o g e n l o s s , b u t
1 d a y l a t e r .
T a b l e X s u m m a r i z e s c l e a r a n c e d a t a f o r e a c h
2 4 - h o u r p e r i o d u s i n g t h e m e a n o f t h e i n i t i a l a n d
1 0
g / m 2 *
6
4 1
2
f i n a l p l a s m a l e v e l f o r c a l c u l a t i o n . U r e a a n d
c r e a t i n i n e c l e a r a n c e s w e r e e s s e n t i a l l y u n c h a n g e d ,
e x c e p t f o r t h e f i n a l d a y w h e n t h e r e w a s a d e -
c r e a s e i n b o t h . A s m e n t i o n e d a b o v e , t h i s w a s
p r o b a b l y d u e t o v o l u m e d e p l e t i o n s e c o n d a r y t o
b l o o d s a m p l i n g . U r i c a c i d c l e a r a n c e f e l l f o r 3
d a y s t h e n r e m a i n e d s t a b l e . T h e s e d a t a a g r e e
c l o s e l y w i t h t h o s e o f G o l d f i n g e r , K l i n e n b e r g , a n d
S e e g m i l l e r ( 3 6 ) , w h o m e a s u r e d u r a t e c l e a r a n c e
a f t e r i n f u s i o n o f a c e t o a c e t a t e o r
P - h y d r o x y b u t y -
r a t e .
E x c r e t i o n d a t a o n t h e t w o d i a b e t i c s u b j e c t s a r e
6 0 c
D I A B E T I C S * , A
1
2 s o
I
4 0
m r w m 2 / d o y
2 0
O 2 3 4 5 6 7 8
D A Y S
D I A B E T I C S - # , A
A
A
A
2 S D
o 1 2 3 4 5 6 7 8
D A Y S
F I G . 9 . U R I N A R Y N I T R OG E N E X C R E T I ON OF T H E T W O
D I A B E T I C S U B J E C T S ( A A N D +) S U P E R I MP OS E D ON T H E F I G . 1 0 . U R I N A R Y P OT A S S I U M E X C R E T I ON OF T H E T W O
ME A N V A L U E S OF T H E S I X N OR MA L S U B J E C T S +2 S D OF D I A B E T I C S U B J E C T S S U P E R I MP OS E D ON T H E ME A N V A L U E S
T H E ME A N . OF S I X N OR MA L S U B J E C T S
2 S D OF T H E ME A N .
1 7 6 3
C A H I L L A N D C O- W OR K E R S
e s s e n t i a l l y i n d i s t i n g u i s h a b l e f r o m t h e n o r m a l s u b -
j e c t s e x c e p t f o r a s l i g h t l y g r e a t e r d e g r e e o f k e -
t o n u r i a o n d a y 1 , i n a g r e e m e n t w i t h t h e h i g h e r
b l o o d k e t o n e l e v e l s . I n F i g u r e s 9 a n d 1 0 a r e
p l o t t e d m e a n u r i n a r y n i t r o g e n a n d p o t a s s i u m d a t a
+
2 S D f o r t h e n o r m a l s w i t h v a l u e s f o r D 1 a n d
D 2 . T h e d i a b e t i c s a p p e a r e d t o c o n s e r v e t h e s e
t w o m o i e t i e s t o a g r e a t e r d e g r e e t h a n d i d t h e
n o r m a l s , b u t t h e s a m e i n c r e a s e s a n d d e c r e a s e s
w e r e n o t e d a s i n t h e n o r m a l s u b j e c t s . N o s i g -
n i f i c a n c e c a n b e p r e s e n t l y a t t a c h e d t o t h e s e d i f -
f e r e n c e s d u e t o t h e f e w s u b j e c t s s t u d i e d .
D i s c u s s i o n
3
I n s u l i n a n d g l u c o s e . S e v e r a l s t u d i e s h a v e i n -
d i c a t e d t h a t i m m u n o r e a c t i v e i n s u l i n i s e i t h e r u n -
c h a n g e d , u n m e a s u r a b l e , o r p r e s e n t i n v e r y l o w
c o n c e n t r a t i o n s i n t h e c i r c u l a t i o n o f f a s t i n g m a n
( 3 7 - 4 1 ) . T h a t l o w , b u t p h y s i o l o g i c a l l y s i g n i f i -
c a n t , c o n c e n t r a t i o n s o f i n s u l i n a r e p r e s e n t i s s u g -
g e s t e d b y e x p e r i m e n t s i n a n i m a l s i n w h i c h t h e
a d m i n i s t r a t i o n o f i n s u l i n a n t i b o d y ( 4 2 , 4 3 ) o r
a c u t e p a n c r e a t e c t o m y ( 4 4 ) i n d u c e d m a r k e d h y -
p e r g l y c e m i a , k e t o a c i d o s i s , a n d d e a t h . I n t h e
p r e s e n t s t u d y , t h e a s s a y w a s s p e c i f i c a l l y m a n i p u -
l a t e d t o p r o d u c e o p t i m a l d i s c r i m i n a t i o n a t i n -
s u l i n c o n c e n t r a t i o n s i n t h e v i c i n i t y o f 1 0
/ A U
p e r m l ; h e n c e , t h e l o w b u t s t r i k i n g l y u n i f o r m i n -
s u l i n l e v e l s i n t h e s i x s u b j e c t s a n d t h e c l o s e c o r -
r e l a t i o n b e t w e e n i n s u l i n a n d g l u c o s e l e v e l s
s t r o n g l y s u g g e s t t h e e x i s t e n c e o f a f i n e l y r e g u -
l a t e d m e t a b o l i c s y s t e m . On e m a y a l s o c o n c l u d e
t h a t t h e l o w l e v e l o f i n s u l i n i n a l l l i k e l i h o o d d o e s
n o t m o d u l a t e g l u c o s e c o n c e n t r a t i o n b y r e g u l a t i n g
o u t f l o w t o t h e t i s s u e s , s i n c e g l u c o s e t u r n o v e r
s t u d i e s i n d i c a t e t h a t n e a r l y a l l t h e g l u c o s e p r o -
d u c e d i s p r o b a b l y u t i l i z e d b y t i s s u e s n o t s e n s i t i v e
t o i n s u l i n , v i z . , b r a i n ( 4 5 , 4 6 ) .
I f w e , t h e r e f o r e , a c c e p t t h e v i e w t h a t t h e r o l e
o f i n s u l i n d u r i n g a f a s t i s t o m o d u l a t e t h e i n f l o w
o f g l u c o s e i n t o t h e b l o o d s t r e a m , w e m u s t t h e n a s k
h o w i n s u l i n a c c o m p l i s h e s t h i s . I t h a s b e e n d e m -
o n s t r a t e d i n b o t h e x p e r i m e n t a l a n i m a l s a n d m a n
t h a t t h e c o n t i n u o u s i n v i v o i n f u s i o n o f s m a l l
p h y s i o l o g i c a m o u n t s o f i n s u l i n c a u s e s a d i m i n i s h e d
i n f l o w o f g l u c o s e i n t o t h e b l o o d ( 4 7 - 5 1 ) .
3
T h e a u t h o r s h a v e c h o s e n t o d i s c u s s o n l y s o m e a s p e c t s
o f t h i s s t u d y i n o r d e r t o c o n s e r v e s p a c e a n d t o l i m i t t h e
a l r e a d y l e n g t h y b i b l i o g r a p h y .
W h e t h e r t h i s r e p r e s e n t s a d i r e c t o r i n d i r e c t e f -
f e c t o n t h e l i v e r i s a n o t h e r p r o b l e m . E x p e r i -
m e n t s u s i n g p e r f u s e d l i v e r p r e p a r a t i o n s o r s l i c e s
h a v e b e e n i n c o n s i s t e n t i n d e m o n s t r a t i n g a n e f f e c t
o f i n s u l i n o n g l u c o s e u t i l i z a t i o n o r p r o d u c t i o n a t
p h y s i o l o g i c a l i n s u l i n c o n c e n t r a t i o n s ( 4 7 ) . T h e
r e c e n t f i n d i n g o f a h e p a t i c g l u c o s e p h o s p h o t r a n s -
f e r a s e , g l u c o k i n a s e , w h o s e a c t i v i t y i n c r e a s e s a f t e r
i n s u l i n a d m i n i s t r a t i o n o r c a r b o h y d r a t e f e e d i n g
a n d d e c r e a s e s w h e n i n s u l i n i s d e f i c i e n t o r l a c k -
i n g ( 5 2 - 5 4 ) a l s o s u g g e s t s t h a t i n s u l i n m a y d i -
r e c t l y a f f e c t t h e l i v e r . T h i s e n z y m e , h o w e v e r ,
s e e m s t o h a v e n e g l i g i b l e a c t i v i t y i n c e r t a i n s p e c i e s ,
i n c l u d i n g h u m a n s ( 5 5 ) .
T h e e v i d e n c e p o i n t i n g t o a n i n d i r e c t e f f e c t o f
i n s u l i n o n ' t h e l i v e r h a s b e e n m o r e s u b s t a n t i a l .
S e v e r a l i n v e s t i g a t o r s h a v e s h o w n t h a t i n c r e a s i n g
t h e c o n c e n t r a t i o n o f e i t h e r a m i n o a c i d o r l a c t i c
a c i d t o l e v e l s w e l l a b o v e t h o s e a c h i e v e d i n v i v o
( 5 6 , 5 7 ) o r i n c r e a s i n g f r e e f a t t y a c i d ( 5 8 - 6 0 )
i n t h e m e d i u m p e r f u s i n g a n i s o l a t e d r a t l i v e r
c a u s e s a n a l m o s t i m m e d i a t e i n c r e a s e i n n e t g l u c o s e
p r o d u c t i o n . T h i s s u g g e s t s t h a t f u e l p r e s e n t a t i o n
r a t h e r t h a n a d i r e c t e f f e c t o f i n s u l i n m a y b e a
m o r e i m p o r t a n t f a c t o r i n m i n u t e - t o - m i n u t e g l u -
c o s e p r o d u c t i o n . T h i s h y p o t h e s i s w a s c l e a r l y
r e v i e w e d a n d e n f o r c e d b y L e v i n e a n d F r i t z 1 0
y e a r s a g o ( 6 1 ) .
E v i d e n c e t h a t i n s u l i n , i n t h e c o n c e n t r a t i o n s
f o u n d d u r i n g a p r o l o n g e d f a s t , m a y c o n t r o l t h e
f l o w o f t h e s e p e r i p h e r a l l y s t o r e d f u e l s t o t h e l i v e r
i s q u i t e s t r o n g . F a i n , K o v a c e v , a n d S c o w ( 6 2 )
a n d K i p n i s ( 6 3 ) h a v e r e c e n t l y d e m o n s t r a t e d t h e
e x q u i s i t e s e n s i t i v i t y o f a d i p o s e t i s s u e l i p o l y t i c a c -
t i v i t y t o i n s u l i n b y s h o w i n g t h a t c o n c e n t r a t i o n s
i n t h e r a n g e o f 1
j u U
p e r m l c a n i n h i b i t t h e r e -
l e a s e o f f r e e f a t t y a c i d s a n d g l y c e r o l f r o m a d i p o s e
t i s s u e s t i m u l a t e d b y v a r i o u s h o r m o n e s . I n a d d i -
t i o n , R e i c h a r d h a s o b t a i n e d t h i s e f f e c t w i t h c o n -
c e n t r a t i o n s o f i n s u l i n e v e n b e l o w t h i s s u b p h y s i o -
l o g i c l e v e l ( 6 4 ) . I n a s i m i l a r w a y , Ma n c h e s t e r
a n d Y o u n g ( 6 5 ) d e m o n s t r a t e d t h a t t h e b a l a n c e
o f a m i n o a c i d a n d m u s c l e p r o t e i n i s a l t e r e d b y
a c o n c e n t r a t i o n o f i n s u l i n c l o s e t o t h a t f o u n d
i n m a n b y t h e i m m u n o a s s a y t e c h n i q u e . Mo r e
r e c e n t l y S m i t h a n d L o n g ( 6 6 ) h a v e d i r e c t e d
a t t e n t i o n t o t h e r o l e o f t h e i n t e r p l a y o f i n s u l i n
a n d g l u c o c o r t i c o i d s i n t h e c o n t r o l o f l e v e l s o f
c i r c u l a t i n g a m i n o a c i d s . I n s u m m a r y , i t a p p e a r s
t h a t d u r i n g f a s t i n g a l o w b u t f i n e l y r e g u l a t e d
1 7 6 4
H OR MON E - F U E L I N T E R R E L A T I ON S H I P S D U R I N G F A S T I N G
c o n c e n t r a t i o n o f i n s u l i n m a y m o d u l a t e s u b s t r a t e
d e l i v e r y t o t h e l i v e r a n d t h u s i n d i r e c t l y t h e c o n -
c e n t r a t i o n o f g l u c o s e i n c i r c u l a t i n g f l u i d s . T h e
s i g n i f i c a n t c o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n t s a n d t h e l i n e a r
r e g r e s s i o n o f g l u c o s e a n d i n s u l i n c o n c e n t r a t i o n s
s u p p o r t t h i s h y p o t h e s i s . S i m p l y , a f a l l i n b l o o d
g l u c o s e d u e t o u t i l i z a t i o n b y g l u c o s e - d e p e n d e n t
t i s s u e s w o u l d b e a s s o c i a t e d w i t h a d e c r e a s e i n
i n s u l i n , a n d t h i s , i n t u r n , w o u l d r e s u l t i n r e l e a s e
o f f r e e f a t t y a c i d f r o m a d i p o s e t i s s u e a n d p e r h a p s
a m i n o a c i d f r o m m u s c l e . I n c r e a s e d g l u c o n e o g e n e -
s i s b y l i v e r w o u l d r e s u l t , f o l l o w e d b y r e p l e n i s h -
m e n t o f b l o o d g l u c o s e a n d t h e n a n i n c r e a s e i n i n -
s u l i n . F i n a l l y , t h e d e c r e a s e i n i n s u l i n w o u l d s h u t
o f f t h e r e l e a s e o f f u e l f r o m t h e p e r i p h e r a l d e p o t s ,
a n d t h e f e e d b a c k l o o p w o u l d t h u s b e c o m p l e t e d .
G r o w t h h o r m o n e . T h e f i n d i n g o f a n i n c r e a s e d
l e v e l o f g r o w t h h o r m o n e d u r i n g f a s t i n g h a s b e e n
w e l l d o c u m e n t e d ( 4 1 , 6 7 - 7 0 ) a n d w a s a g a i n
c o r r o b o r a t e d b y t h i s s t u d y . Of i n t e r e s t , h o w -
e v e r , w a s t h e g r e a t v a r i a b i l i t y i n g r o w t h h o r m o n e
l e v e l s , s o m e s u b j e c t s s h o w i n g n o e l e v a t i o n a n d
o t h e r s a m a r k e d e l e v a t i o n d u r i n g t h e f a s t . T h e
i n d i v i d u a l r e s p o n s e s a f t e r a n i v g l u c o s e i n f u s i o n
b o t h b e f o r e a n d a f t e r t h e t e s t a r e s i m i l a r l y d i f f i -
c u l t t o i n t e r p r e t . T h i s m a r k e d i n c o n s i s t e n c y i n
g r o w t h h o r m o n e l e v e l s c a s t s s o m e d o u b t o n i t s
i m p o r t a n c e a s a m e t a b o l i c r e g u l a t o r d u r i n g f a s t -
i n g . Ot h e r s t u d i e s h a v e s h o w n t h e f a s t i n g r e -
s p o n s e o f g r o w t h h o r m o n e i n p i g s t o b e m i n i m a l
a n d i n s h e e p t o b e a b s e n t ( 7 1 ) .
G l u c o s e t o l e r a n c e t e s t s . I n t h e g l u c o s e t o l e r -
a n c e t e s t s b e f o r e t h e f a s t , t h e r e w a s a p r o m p t
i n s u l i n r e s p o n s e , t h e h i g h e s t l e v e l s o c c u r r i n g
w i t h i n 1 m i n u t e o f t h e e n d o f t h e g l u c o s e i n -
f u s i o n . A f t e r t h e f a s t , t h e r e w a s s t i l l a p r o m p t
i n s u l i n r e s p o n s e b u t o f a l e s s e r m a g n i t u d e . T h e
r e g r e s s i o n s o f i n s u l i n a n d g l u c o s e d e m o n s t r a t e a
d i m i n i s h e d t h r e s h o l d o f s e n s i t i v i t y t o g l u c o s e w i t h
a n i n c r e a s e d t h e o r e t i c a l i n t e r c e p t o f g l u c o s e c o n -
c e n t r a t i o n a t w h i c h i n s u l i n c o n c e n t r a t i o n i s 0
( F i g u r e 6 ) . H o w e v e r , t h e s e n s i t i v i t y o f i n s u l i n
r e l e a s e t o g l u c o s e a b o v e t h i s e l e v a t e d t h r e s h o l d
d o e s n o t a p p e a r t o b e l e s s i n t h i s s m a l l s e r i e s o f
s u b j e c t s . F a t t y a c i d s d e c r e a s e d f r o m t h e i r h i g h
l e v e l s , b u t r e m a i n e d m a r k e d l y e l e v a t e d f o r e a c h
l e v e l o f g l u c o s e o r i n s u l i n c o n c e n t r a t i o n , s u g g e s t -
i n g a d i m i n i s h e d s e n s i t i v i t y o f a d i p o s e t i s s u e a ,
a ' t r i g l y c e r i d e l i p a s e t o i n s u l i n [ a s s u m i n g t h i s t o
b e t h e r a t e - l i m i t i n g e n z y m e i n t r i g l y c e r i d e l i p o -
l y s i s a n d f a t t y a c i d r e l e a s e ( 7 2 ) ] . On e a l s o
c o u l d e x p l a i n t h i s f i n d i n g b y a r e l a t i v e d e c r e a s e i n
a d i p o s e t i s s u e r e - e s t e r i f i c a t i o n r a t e o r f r e e
f a t t y
a c i d r e m o v a l b y p e r i p h e r a l t i s s u e s ; t h e s e p r o c -
e s s e s c a n n o t b e i n c l u d e d o r e x c l u d e d b y t h e
d a t a a t h a n d , b u t a p p e a r l e s s l i k e l y .
A s e x p e c t e d , t h e g l u c o s e l o a d w a s r e m o v e d a t
a g r e a t l y d i m i n i s h e d r a t e a f t e r t h e f a s t . Ou r
d a t a d o n o t p e r m i t u s t o d i s c e r n c l e a r l y b e t w e e n
f a i l u r e o f g l u c o s e u p t a k e a n d f a i l u r e t o i n h i b i t
g l u c o s e o u t f l o w i n t o t h e c i r c u l a t i o n ; h o w e v e r ,
r o u g h c a l c u l a t i o n s i n d i c a t e t h a t t h e e n t i r e f a l l i n
b l o o d g l u c o s e b e t w e e n 2 0 a n d 6 0 m i n u t e s w a s
d u e t o g l u c o s u r i a . T h i s ' m u s t b e r e g a r d e d a s
o n l y a c r u d e a p p r o x i m a t i o n , h o w e v e r , a s a c c u -
r a t e s e q u e n t i a l u r i n e c o l l e c t i o n s w e r e n o t m a d e
d u r i n g t h i s s h o r t p e r i o d . I n a n y e v e n t , t h e e f -
f e c t i v e n e s s o f t h e r e l e a s e d i n s u l i n o n g l u c o s e
m e t a b o l i s m w a s m a r k e d l y d e c r e a s e d a f t e r t h e
f a s t . C o n c e i v a b l y , t h i s m i g h t b e s e c o n d a r y t o
t h e h i g h e r l e v e l s o f f r e e f a t t y a c i d b l o c k i n g t h e
p e r i p h e r a l u p t a k e o f g l u c o s e ( 7 3 ) , o r c o n t i n u i n g
t o a u g m e n t g l u c o n e o g e n e s i s a n d g l u c o s e r e l e a s e b y
t h e l i v e r , o r b o t h . U n f o r t u n a t e l y , g l u c o s e s p e -
c i f i c a c t i v i t y w a s n o t s e q u e n t i a l l y f o l l o w e d d u r i n g
t h e g l u c o s e t o l e r a n c e t e s t . W h a t e v e r t h e c a u s e ,
h o w e v e r , i t i s e v i d e n t t h a t t h e r a p i d p h y s i o l o g i c
m e c h a n i s m f o r r e c o g n i z i n g a n d c o r r e c t i n g h y p e r -
g l y c e m i a i s i n e f f e c t i v e a f t e r a p r o l o n g e d f a s t .
G l u c o s e t u r n o v e r . A t t h e e n d o f t h e f a s t ,
c a l c u l a t e d g l u c o s e t u r n o v e r a c c o u n t e d f o r o n l y
o n e - f o u r t h o f t h e t o t a l c a l o r i e s e x p e n d e d , a n d
e v e n t h i s l o w f i g u r e a s s u m e s t h a t a l l t h e g l u c o s e
n o t r e c y c l e d w a s o x i d i z e d t o C O2 . I f o n e a c c e p t s
t h e p u b l i s h e d d a t a o n c e r e b r a l g l u c o s e u t i l i z a t i o n
( 4 5 , 4 6 ) , t h i s t h e o r e t i c a l q u a n t i t y i s b a r e l y a d e -
q u a t e t o s u p p l y t h e c e n t r a l n e r v o u s s y s t e m . S i n c e
e r y t h r o c y t e s ( 7 4 ) , r e n a l m e d u l l a ( 7 5 ) , a n d p r o b -
a b l y c e r t a i n o t h e r t i s s u e s s u c h a s b o n e m a r r o w
a r e a l s o p r e d o m i n a n t l y g l y c o l y t i c a n d m a y a c -
c o u n t f o r t h e 2 0 g p e r m 2 p e r 2 4 h o u r s r e c y c l e d
v i a l a c t a t e a n d p y r u v a t e , i t w o u l d a p p e a r t h a t
v e r y l i t t l e i f a n y g l u c o s e i s a v a i l a b l e f o r o t h e r
t i s s u e s . T h i s o n c e a g a i n - e m p h a s i z e s t h e r o l e o f
f a t t y a c i d s a n d a c e t o a c e t i c a n d / 3 - h y d r o x y b u t y r i c
a c i d s a s t h e p r e d o m i n a n t f u e l s i n t h e f a s t i n g
s t a t e , p e r h a p s e v e n f o r b r a i n ( s e e b e l o w ) .
T h e s e s t u d i e s a l s o p o i n t o u t s e v e r a l d i s c r e p a n -
c i e s i n o u r p r e s e n t c o n c e p t s o f g l u c o s e m e t a b -
o l i s m d u r i n g f a s t i n g . F o r o n e , e v e n i f a l l t h e
1 7 6 5
C A H I L L A N D C O- W OR K E R S
n i t r o g e n i n t h e u r i n e o r i g i n a t e d f r o m g l u c o g e n i c
a m i n o a c i d s , t h e s e w o u l d a c c o u n t f o r a t h e o -
r e t i c a l m a x i m u m i n o u r s u b j e c t s o f a p p r o x i -
m a t e l y 2 5 g p e r m 2 p e r d a y o f g l u c o s e , w h i c h ,
a d d e d t o t h e r e c y c l e d m o i e t y o f 2 0 . 9 g p e r m 2 p e r
d a y a n d t h e a m o u n t d e r i v e d f r o m g l y c e r o l ( 1 0
g p e r m 2 p e r d a y ) , w o u l d p r o v i d e a t o t a l o f 5 5
g p e r m 2 p e r d a y , f a r s h o r t o f t h e 8 5 g p e r m 2
p e r d a y c a l c u l a t e d f r o m t h e i s o t o p e s t u d i e s . T h i s
d i s a g r e e m e n t o r f a c t i t i o u s l y h i g h t u r n o v e r i s c o m -
p a t i b l e w i t h e x c h a n g e o f l a b e l e d g l u c o s e w i t h
c a r b o h y d r a t e i n g l y c o p r o t e i n ( 7 6 ) o r i n g l y c o g e n
e n d g r o u p s ( 7 7 ) . T h e g l u c o s e c o m b u s t e d w o u l d
t h e n b e f a r l e s s t h a n t h a t c a l c u l a t e d b y t h e t u r n -
o v e r d a t a . Ot h e r s t u d i e s , u s i n g g l u c o s e - 1 4 C
t u r n o v e r , a r e a c c o r d i n g l y s u s p e c t .
S u b j e c t s f a s t e d f o r m o r e p r o l o n g e d p e r i o d s
o f t i m e e x h i b i t e v e n a f u r t h e r r e d u c t i o n i n n i t r o -
g e n l o s s t o v a l u e s a p p r o x i m a t i n g 1 g p e r d a y
( 7 8 ) , t h e r e b y p r o v i d i n g e v e n l e s s p r e c u r s o r f o r
g l u c o n e o g e n e s i s . A l o s s o f n i t r o g e n b y r o u t e s
o t h e r t h a n u r i n e i s a p o s s i b i l i t y , a n d r e c e n t s t u d -
i e s o f r e s p i r a t o r y n i t r o g e n e x c h a n g e h a v e b e e n
s u g g e s t i v e ( 7 9 ) ; h o w e v e r , t h e d e t a i l e d a n d c o m -
p l e t e b a l a n c e s t u d i e s p e r f o r m e d o n e x p e r i m e n t a l
a n i m a l s a t t h e t u r n o f t h e c e n t u r y s e e m i n g l y e x -
c l u d e n o n u r i n a r y a n d n o n f e c a l l o s s o f n i t r o g e n
o t h e r t h a n a v e r y s m a l l q u a n t i t y i n d e s q u a m a t e d
i n t e g u m e n t ( 8 0 ) . I n a d d i t i o n , t o t a l b o d y n i t r o -
g e n a p p r o x i m a t e s 1 k g , a n d s u r v i v a l f o r m o r e
t h a n 5 o r 6 m o n t h s w o u l d n e c e s s i t a t e a d a i l y l o s s
o f l e s s t h a n 2 o r 3 g . T h e u r i n a r y l o s s i s t h e r e -
f o r e o b v i o u s l y r e p r e s e n t a t i v e o f t o t a l l o s s o f n i t r o -
g e n f r o m t h e b o d y .
T h i s o p t i m a l n i t r o g e n s p a r i n g a n d i t s a s s o c i -
a t e d m i n i m a l g l u c o s e s y n t h e s i s w o u l d b e i n c o m -
p a t i b l e w i t h l i f e s h o u l d t h e b r a i n c o n t i n u e t o
r e q u i r e i t s 1 0 0 t o 1 5 0 g o f g l u c o s e ( 4 5 , 4 6 ) e a c h
d a y . T h r e e a l t e r n a t i v e s a r e p o s s i b l e . G l u c o -
n e o g e n e s i s f r o m f a t t y a c i d c a n o c c u r v i a g l y o x a -
l a t e i n l o w e r f o r m s , b u t t h i s p a t h w a y h a s n o t b e e n
d e m o n s t r a t e d i n m a m m a l i a n s y s t e m s . A n o t h e r
p o s s i b i l i t y i s a d i m i n u t i o n o f c e r e b r a l o x y g e n
c o n s u m p t i o n ( m e t a b o l i c n e e d ) , a n d a t h i r d i s
u t i l i z a t i o n o f n o n g l u c o s e s u b s t r a t e . R e c e n t s t u d -
i e s ( 8 1 ) h a v e s h o w n o n l y t h e l a s t t o b e t r u e ,
n a m e l y , c e r e b r a l c o n s u m p t i o n o f / 8 - h y d r o x y b u t y -
r a t e a n d a c e t o a c e t a t e a s a m e a n s o f s p a r i n g g l u -
c o s e u t i l i z a t i o n a n d s y n t h e s i s a n d , p a r i p a s s u ,
n i t r o g e n l o s s o r i t s e q u i v a l e n t , m u s c l e m a s s .
I n s u m m a r y , g l u c o s e - ' 4 C t u r n o v e r d a t a a p p e a r
t o b e f a c t i t i o u s l y h i g h a n d n o t i n a g r e e m e n t w i t h
t o t a l b a l a n c e d a t a . T h e l a t t e r d e m o n s t r a t e m a r k -
e d l y d i m i n i s h e d g l u c o s e s y n t h e s i s , w h i c h , a c c o r d -
i n g l y , m u s t b e a s s o c i a t e d w i t h m a r k e d l y d i m i n -
i s h e d g l u c o s e m e t a b o l i s m b y e v e n t h o s e t i s s u e s ,
s u c h a s b r a i n , w h i c h f o r m e r l y w e r e t h o u g h t t o
b e u n i q u e l y d e p e n d e n t o n g l u c o s e a s f u e l . T h e
s u r v i v a l v a l u e o f t h e s e p r o g r e s s i v e a d a p t a t i o n s a n d
t h e n e e d f o r m a x i m a l e f f i c i e n c y i n r e a c t i o n s u t i l i z -
i n g n i t r o g e n o u s m a t e r i a l p l a c e e x t r e m e e m p h a s i s
o n t h e h o r m o n a l - a n d m e t a b o l i t e - m o d u l a t e d c o n -
t r o l m e c h a n i s m s . I n s u l i n , f o r e x a m p l e , m a y p l a y
a m o r e s i g n i f i c a n t r o l e i n r e g u l a t i n g f a s t i n g t h a n
i t d o e s d u r i n g t h e i m m e d i a t e p o s t a b s o r p t i v e s t a t e .
S u m m a r y
L e v e l s o f i n s u l i n , g r o w t h h o r m o n e , a n d v a r i -
o u s m e t a b o l i c f u e l s w e r e f o l l o w e d t h r o u g h o u t a
1 - w e e k f a s t i n s i x n o r m a l s u b j e c t s a n d t w o p a -
t i e n t s w i t h m a t u r i t y - o n s e t d i a b e t e s . T h e d a t a
f r o m t h e n o r m a l i n d i v i d u a l s a r e c o m p a t i b l e w i t h
t h e h y p o t h e s i s t h a t t h e g l u c o s e - i n s u l i n f e e d b a c k
m e c h a n i s m m a y b e t h e p r i m a r y c o n t r o l p r o c e s s
r e g u l a t i n g t h e r e l e a s e o f p e r i p h e r a l f u e l t o p r o -
v i d e e n e r g y f o r m e t a b o l i s m d u r i n g f a s t i n g .
Ma r k e d v a r i a b i l i t i e s i n g r o w t h h o r m o n e l e v e l s
a n d l a c k o f c o r r e l a t i o n o f g r o w t h h o r m o n e w i t h
o t h e r p a r a m e t e r s d i m i n i s h i t s a p p a r e n t i m p o r t a n c e
i n t h e f a s t i n g p r o c e s s .
Me t a b o l i c b a l a n c e s a n d g l u c o s e t u r n o v e r s t u d -
i e s w e r e p e r f o r m e d a n d d e m o n s t r a t e a g a i n t h e
p r e d o m i n a n c e o f l i p i d a s f u e l a n d e m p h a s i z e t h e
d i m i n u t i o n o f g l u c o s e m e t a b o l i s m , w h i c h , i n t u r n ,
s p a r e s n i t r o g e n s t o r e s a s g l u c o n e o g e n e s i s d e -
c r e a s e s .
A d d e n d u m
S i n c e s u b m i s s i o n o f t h i s m a n u s c r i p t E x t o n ,
J e f f e r s o n , B u t c h e r , a n d P a r k ( 8 2 ) h a v e p u b -
l i s h e d e v i d e n c e o f a c o n s i s t e n t e f f e c t o f i n s u l i n i n
d i m i n i s h i n g g l u c o s e r e l e a s e b y t h e i s o l a t e d p e r -
f u s e d r a t l i v e r . A s h a s b e e n r e v i e w e d i n r e f e r -
e n c e 4 7 , o t h e r s h a v e o b t a i n e d s i m i l a r r e s u l t s b o t h
i n v i v o a n d i n v i t r o . Ou r d a t a a n d d i s c u s s i o n
d e a l o n l y w i t h e v e n t s d u r i n g p r o l o n g e d f a s t i n g
a n d , a s h a s b e e n e m p h a s i z e d , a r e c o m p a t i b l e w i t h
t h e i n s u l i n - r e g u l a t e d r e l e a s e o f p e r i p h e r a l f u e l s
a s t h e p r i m a r y c o n t r o l l i n g e v e n t . D u r i n g f e e d -
i n g , i t i s p r o b a b l e a n d l o g i c a l t h a t t h e i n c r e a s e i n
1 7 6 6
H OR MON E - F U E L I N T E R R E L A T I ON S H I P S D U R I N G F A S T I N G
i n s u l i n m a y s u p p r e s s h e p a t i c g l u c o s e o u t p u t b o t h
b y i n h i b i t i n g r e l e a s e o f p e r i p h e r a l f u e l a n d a l s o
b y a d i r e c t e f f e c t o n t h e l i v e r i t s e l f .
A c k n o w l e d g m e n t s
T h e a u t h o r s a r e i n d e b t e d t o t h e t e c h n i c i a n s , t h e h o u s e
s t a f f , a n d n u r s i n g s t a f f o f t h e P e t e r B e n t B r i g h a m H o s -
p i t a l a n d t o t h e t e c h n i c i a n s a n d s e c r e t a r i a l s t a f f a t t h e
J o s l i n R e s e a r c h L a b o r a t o r y f o r t h e i r i n t e r e s t a n d a s s i s t -
a n c e i n t h e s e s t u d i e s .
R e f e r e n c e s
1 . C a h i l l , G . F . , J r . , M. G . H e r r e r a , A . P . Mo r g a n , a n d
G . A . R e i c h a r d , J r . Me t a b o l i s m i n s t a r v a t i o n d i a -
b e t e s a n d d i a b e t e s m e l l i t u s ( a b s t r a c t ) . J . c l i n .
I n v e s t . 1 9 6 5 , 4 4 , 1 0 3 2 .
2 . B e n e d i c t , F . G . A s t u d y o f p r o l o n g e d f a s t i n g . C a r -
n e g i e I n s t i t u t e o f W a s h i n g t o n , p u b l i c a t i o n 2 0 3 ,
1 9 1 5 .
3 . Mc I l w a i n , H . B i o c h e m i s t r y a n d t h e C e n t r a l N e r v -
o u s S y s t e m , 2 n d e d . L o n d o n , J . & A . C h u r c h i l l ,
1 9 5 9 .
4 . G o r d o n , R . S . , J r . , a n d A . C h e r k e s . U n e s t e r i f i e d
f a t t y a c i d i n h u m a n b l o o d p l a s m a . J . c l i n . I n v e s t .
1 9 5 6 , 3 5 , 2 0 6 .
5 . D o l e , V . P . A r e l a t i o n b e t w e e n n o n - e s t e r i f i e d f a t t y
a c i d s i n p l a s m a a n d t h e m e t a b o l i s m o f g l u c o s e .
J . c l i n . I n v e s t . 1 9 5 6 , 3 5 , 1 5 0 .
6 . B a k e r , N . , W . W . S h r e e v e , R . A . S h i p l e y , G . E .
I n c e f y , a n d M. Mi l l e r . C 1 ' s t u d i e s i n c a r b o h y d r a t e
m e t a b o l i s m . I . T h e o x i d a t i o n o f g l u c o s e i n n o r -
m a l h u m a n s u b j e c t s . J . b i o l . C h e m . 1 9 5 4 , 2 1 1 ,
5 7 5 .
7 . S h r e e v e , W . W . , N . B a k e r , M. Mi l l e r , R . A . S h i p -
l e y , G . E . I n c e f y , a n d J . W . C r a i g . C 1 ' s t u d i e s i n
c a r b o h y d r a t e m e t a b o l i s m . I I . T h e o x i d a t i o n o f
g l u c o s e i n d i a b e t i c h u m a n s u b j e c t s . Me t a b o l i s m
1 9 5 6 , 5 , 2 2 .
8 . S e a r l e , G . L . , G . E . Mo r t i m o r e , R . E . B u c k l e y , a n d
W . A . R e i l l y . P l a s m a g l u c o s e t u r n o v e r i n h u -
m a n s a s s t u d i e d w i t h C 1 ' g l u c o s e . I n f l u e n c e o f i n -
s u l i n a n d t o l b u t a m i d e . D i a b e t e s 1 9 5 9 , 8 , 1 6 7 .
9 . P o l l y c o v e , M. G l u c o s e k i n e t i c s a n d o x i d a t i o n a n d
t h e e f f e c t s o f i n s u l i n , t o l b u t a m i d e a n d p h e n e t h y l -
b i g u a n i d e ( D B I ) i n n o r m a l h u m a n s u b j e c t s .
U n i v . C a l i f . R a d i a t e L a b . 1 9 6 1 , 9 8 9 7 , 1 8 8 .
1 0 . R e i c h a r d , G . A . , J r . , A . G . J a c o b s , P . K i m b e l , N . J .
H o c h e l l a , a n d S . W e i n h o u s e . B l o o d g l u c o s e r e -
p l a c e m e n t r a t e s i n n o r m a l a n d d i a b e t i c h u m a n s .
J . a p p l . P h y s i o l . 1 9 6 1 , 1 6 , 7 8 9 .
1 1 . R e i c h a r d , G . A . , J r . , N . F . Mo u r y , J r . , N . J . H o c h e l l a ,
A . L . P a t t e r s o n , a n d S . W e i n h o u s e . Qu a n t i t a t i v e
e s t i m a t i o n o f t h e C o r i c y c l e i n t h e h u m a n . J .
b i o l . C h e m . 1 9 6 3 , 2 3 8 , 4 9 5 .
1 2 . R e i c h a r d , G . A . , J r . , N . F . Mo u r y , J r . , N . J . H o c h e l l a ,
R . C . P u t n a m , a n d S . W e i n h o u s e . Me t a b o l i s m o f
n e o p l a s t i c t i s s u e . X V I I . B l o o d g l u c o s e r e p l a c e -
m e n t r a t e s i n h u m a n c a n c e r p a t i e n t s . C a n c e r R e s .
1 9 6 4 , 2 4 , 7 1 .
1 3 . B o n d y , P . K . , D . F . J a m e s , a n d B . W . F a r r a r .
S t u d i e s o f t h e r o l e o f t h e l i v e r i n h u m a n c a r b o h y -
d r a t e m e t a b o l i s m b y t h e v e n o u s c a t h e t e r t e c h -
n i q u e . I . N o r m a l s u b j e c t s u n d e r f a s t i n g c o n d i -
t i o n s a n d f o l l o w i n g t h e i n j e c t i o n o f g l u c o s e . J .
c l i n . I n v e s t . 1 9 4 9 , 2 8 , 2 3 8 .
1 4 . My e r s , J . D . N e t s p l a n c h n i c g l u c o s e p r o d u c t i o n i n
n o r m a l m a n a n d i n v a r i o u s d i s e a s e s t a t e s . J . c l i n .
I n v e s t . 1 9 5 0 , 2 9 , 1 4 2 1 .
1 5 . B e a m , A . G . , B . H . B i l l i n g , a n d S . S h e r l o c k .
H e p a t i c g l u c o s e o u t p u t a n d h e p a t i c i n s u l i n s e n -
s i t i v i t y i n d i a b e t e s m e l l i t u s . L a n c e t 1 9 5 1 , 2 , 6 9 8 .
1 6 . N e l s o n , N . A p h o t o m e t r i c a d a p t a t i o n o f t h e S o -
m o g y i m e t h o d f o r t h e d e t e r m i n a t i o n o f g l u c o s e .
J . b i o l . C h e m . 1 9 4 4 , 1 5 3 , 3 7 5 .
1 7 . S o m o g y i , M. D e t e r m i n a t i o n o f b l o o d s u g a r . J . b i o l .
C h e m . 1 9 4 5 , 1 6 0 , 6 9 .
1 8 . H u g g e t t , A . S t . G . , a n d D . A . N i x o n . U s e o f g l u -
c o s e o x i d a s e , p e r o x i d a s e , a n d o - d i a n i s i d i n e i n d e -
t e r m i n a t i o n o f b l o o d a n d u r i n a r y g l u c o s e . L a n c e t
1 9 5 7 , 2 , 3 6 8 .
1 9 . Z a l m e , E . , a n d H . C . K n o w l e s , J r . A p l e a f o r p l a s m a
s u g a r . D i a b e t e s 1 9 6 5 , 1 4 , 1 6 5 .
2 0 . D i l l o n , R . S . I m p o r t a n c e o f t h e h e m a t o c r i t i n t h e
i n t e r p r e t a t i o n o f b l o o d s u g a r . D i a b e t e s 1 9 6 5 , 1 4 ,
6 7 2 .
2 1 . T r o u t , D . L . , E . H . E s t e s , J r . , a n d S . J . F r i e d b e r g .
T i t r a t i o n o f f r e e f a t t y a c i d s o f p l a s m a : a s t u d y
o f c u r r e n t m e t h o d s a n d a n e w m o d i f i c a t i o n . J .
L i p i d R e s . 1 9 5 9 , 1 , 1 9 9 .
2 2 . B e r g m e y e r , H . U . Me t h o d s o f E n z y m a t i c A n a l y s i s .
N e w Y o r k a n d L o n d o n , A c a d e m i c P r e s s , 1 9 6 3 .
2 3 . W i l l i a m s o n , D . H . , J . Me l l a n b y , a n d H . A . K r e b s .
E n z y m i c d e t e r m i n a t i o n o f D ( - ) - B - h y d r o x y b u t y r i c
a c i d a n d a c e t o a c e t i c a c i d i n b l o o d . B i o c h e m . J .
1 9 6 2 , 8 2 , 9 0 .
2 4 . S o e l d n e r , J . S . , a n d D . S l o n e . C r i t i c a l v a r i a b l e s i n
t h e r a d i o i m m u n o a s s a y o f s e r u m i n s u l i n u s i n g t h e
d o u b l e a n t i b o d y t e c h n i c . D i a b e t e s 1 9 6 5 , 1 4 , 7 7 1 .
2 5 . Mo r g a n , C . R . , a n d A . L a z a r o w . I m m u n o a s s a y o f i n -
s u l i n : t w o a n t i b o d y s y s t e m . P l a s m a i n s u l i n l e v e l s
o f n o r m a l , s u b d i a b e t i c a n d d i a b e t i c r a t s . D i a -
b e t e s 1 9 6 3 , 1 2 , 1 1 5 .
2 6 . S c h a l c h , D . S . , a n d M. L . P a r k e r . A s e n s i t i v e
d o u b l e a n t i b o d y i m m u n o a s s a y f o r h u m a n g r o w t h
h o r m o n e i n p l a s m a . N a t u r e ( L o n d . ) 1 9 6 4 , 2 0 3 ,
1 1 4 1 .
2 7 . G l i c k , S . M. , J . R o t h , R . S . Y a l o w , a n d S . A . B e r -
s o n . I m m u n o a s s a y o f h u m a n g r o w t h h o r m o n e i n
p l a s m a . N a t u r e ( L o n d . ) 1 9 6 3 , 1 9 9 , 7 8 4 .
2 8 . R e n o l d , A . E . , D . B . Ma r t i n , Y . M. D a g e n a i s , J .
S t e i n k e , R . J . N i c k e r s o n , a n d M. C . S h e p s . Me a -
s u r e m e n t o f s m a l l q u a n t i t i e s o f i n s u l i n - l i k e a c t i v i t y
u s i n g r a t a d i p o s e t i s s u e . I . A p r o p o s e d p r o c e d u r e .
J . c l i n . I n v e s t . 1 9 6 0 , 3 9 , 1 4 8 7 .
2 9 . S h e p s , M. C . , R . J . N i c k e r s o n , Y . M. D a g e n a i s , J .
S t e i n k e , D . B . Ma r t i n , a n d A . E . R e n o l d . Me a -
s u r e m e n t o f s m a l l q u a n t i t i e s o f i n s u l i n - l i k e a c -
1 7 6 7
C A H I L L A N D C O- W OR K E R S
t i v i t y u s i n g r a t a d i p o s e t i s s u e . I I . E v a l u a t i o n o f
p e r f o r m a n c e . J . c l i n . I n v e s t . 1 9 6 0 , 3 9 , 1 4 9 9 .
3 0 . R e d d y , W . J . Mo d i f i c a t i o n o f t h e R e d d y - J e n k i n s -
T h o r n m e t h o d f o r t h e e s t i m a t i o n o f 1 7 - h y d r o x y -
c o r t i c o i d s i n u r i n e . Me t a b o l i s m 1 9 5 4 , 3 , 4 8 9 .
3 1 . D r e k t e r , I . J . , A . H e i s l e r , G . R . S c i s m , S . S t e r n , S .
P e a r s o n , a n d T . H . Mc G a v a c k . T h e d e t e r m i n a -
t i o n o f u r i n a r y s t e r o i d s . I . T h e p r e p a r a t i o n o f
p i g m e n t - f r e e e x t r a c t s a n d a s i m p l i f i e d p r o c e d u r e f o r
t h e e s t i m a t i o n o f t o t a l 1 7 - k e t o s t e r o i d s . J . c l i n .
E n d o c r . 1 9 5 2 , 1 2 , 5 5 .
3 2 . K i n n e y , J . M. A c o n s i d e r a t i o n o f e n e r g y e x c h a n g e
i n h u m a n t r a u m a . B u l l . N . Y . A c a d . Me d . 1 9 6 0 ,
3 6 , 6 1 7 .
3 3 . S t e i n k e , J . , J . S . S o e l d n e r , R . A . C a m e r i n i - D a ' v a l o s ,
a n d A . E . R e n o l d . S t u d i e s o n s e r u m i n s u l i n - l i k e
a c t i v i t y ( I L A ) i n p r e d i a b e t e s a n d e a r l y o v e r t
d i a b e t e s . D i a b e t e s 1 9 6 3 , 1 2 , 5 0 2 .
3 4 . B e r s o n , S . A . , R . S . Y a l o w , A . B a u m a n , M. A .
R o t h s c h i l d , a n d K . N e w e r l y . I n s u l i n - I ' m e t a b o -
l i s m i n h u m a n s u b j e c t s : d e m o n s t r a t i o n o f i n s u l i n
b i n d i n g g l o b u l i n i n t h e c i r c u l a t i o n o f i n s u l i n
t r e a t e d s u b j e c t s . J . c l i n . I n v e s t . 1 9 5 6 , 3 5 , 1 7 0 .
3 5 . F r a n c k s o n , J . R . M. , H . - A . Oo m s , R . B e l l e n s , V .
C o n a r d , a n d P . A . B a s t e n i e . P h y s i o l o g i c s i g -
n i f i c a n c e o f t h e i n t r a v e n o u s g l u c o s e t o l e r a n c e t e s t .
Me t a b o l i s m 1 9 6 2 , 1 1 , 4 8 2 .
3 6 . G o l d f i n g e r , S . , J . R . K l i n e n b e r g , a n d J . E . S e e g m i l l e r .
R e n a l r e t e n t i o n o f u r i c a c i d i n d u c e d b y i n f u s i o n
o f b e t a - h y d r o x y b u t y r a t e a n d a c e t o a c e t a t e . N e w
E n g l . J . Me d . 1 9 6 5 , 2 7 2 , 3 5 1 .
3 7 . Y a l o w , R . S . , a n d S . A . B e r s o n . I m m u n o a s s a y o f
e n d o g e n o u s p l a s m a i n s u l i n i n m a n . J . c l i n . I n v e s t .
1 9 6 0 , 3 9 , 1 1 5 7 .
3 8 . B e r s o n , S . A . , a n d R . S . Y a l o w . S o m e c u r r e n t c o n -
t r o v e r s i e s i n d i a b e t e s r e s e a r c h . D i a b e t e s 1 9 6 5 , 1 4 ,
5 4 9 .
3 9 . Y a l o w , R . S . , S . M. G l i c k , J . R o t h , a n d S . A . B e r s o n .
P l a s m a i n s u l i n a n d g r o w t h h o r m o n e l e v e l s i n
o b e s i t y a n d d i a b e t e s . A n n . N . Y . A c a d . S c i . 1 9 6 5 ,
1 3 1 , 3 5 7 .
4 0 . U n g e r , R . H . , A . M. E i s e n t r a u t , a n d L . L . Ma d i s o n .
T h e e f f e c t s o f t o t a l s t a r v a t i o n u p o n t h e l e v e l s o f
c i r c u l a t i n g g l u c a g o n a n d i n s u l i n i n m a n . J . c l i n .
I n v e s t . 1 9 6 3 , 4 2 , 1 0 3 1 .
4 1 . B e c k , P . , J . H . T . K o u m a n s , C . A . W i n t e r l i n g , M.
F . S t e i n , W . H . D a u g h a d a y , a n d D . M. K i p n i s .
S t u d i e s o f i n s u l i n a n d g r o w t h h o r m o n e s e c r e t i o n
i n h u m a n o b e s i t y . J . L a b . c l i n . Me d . 1 9 6 4 , 6 4 ,
6 5 4 .
4 2 . Mo l o n e y , P . J . , a n d M. C o v a l . A n t i g e n i c i t y o f i n -
s u l i n : d i a b e t e s i n d u c e d b y s p e c i f i c a n t i b o d i e s . B i o -
c h e m . J . 1 9 5 5 , 5 9 , 1 7 9 .
4 3 . W r i g h t , P . H . P r o d u c t i o n o f a c u t e i n s u l i n d e f i c i e n c y
b y a d m i n i s t r a t i o n o f i n s u l i n a n t i s e r u m . N a t u r e
( L o n d . ) 1 9 5 9 , 1 8 3 , 8 2 9 .
4 4 . S c o w , R . 0 . " T o t a l " p a n c r e a t e c t o m y i n t h e r a t : o p -
e r a t i o n , e f f e c t s a n d p o s t o p e r a t i v e c a r e . E n d o c r i n -
o l o g y 1 9 5 7 , 6 0 , 3 5 9 .
4 5 . S o k o l o f f , L . Me t a b o l i s m o f t h e c e n t r a l n e r v o u s s y s -
t e m i n v i v o i n H a n d b o o k o f P h y s i o l o g y , S e c t i o n I ,
N e u r o p h y s i o l o g y . B a l t i m o r e , W a v e r l y , 1 9 5 9 , p .
1 8 4 3 .
4 6 . S c h e i n b e r g , P . Ob s e r v a t i o n s o n c e r e b r a l c a r b o h y -
d r a t e m e t a b o l i s m i n m a n . A n n . i n t e r n . Me d . 1 9 6 5 ,
6 2 , 3 6 7 .
4 7 . S t e e l e , R . T h e i n f l u e n c e s o f i n s u l i n o n t h e h e p a t i c
m e t a b o l i s m o f g l u c o s e . E r g e b n . P h y s i o l . 1 9 6 6 , 5 7 ,
9 1 .
4 8 . Ma d i s o n , L . L . , a n d R . H . U n g e r . T h e p h y s i o l o g i c
s i g n i f i c a n c e o f t h e s e c r e t i o n o f e n d o g e n o u s i n s u l i n
i n t o t h e p o r t a l c i r c u l a t i o n . I . C o m p a r i s o n o f t h e
e f f e c t s o f g l u c a g o n - f r e e i n s u l i n a d m i n i s t e r e d v i a
t h e p o r t a l v e i n a n d v i a a p e r i p h e r a l v e i n o n t h e
m a g n i t u d e o f h y p o g l y c e m i a a n d p e r i p h e r a l g l u -
c o s e u t i l i z a t i o n . J . c l i n . I n v e s t . 1 9 5 8 , 3 7 , 6 3 1 .
4 9 . Ma d i s o n , L . L . , B . C o m b e s , W . S t r i c k l a n d , R . U n g e r ,
a n d R . A d a m s . E v i d e n c e f o r a d i r e c t e f f e c t o f
i n s u l i n o n h e p a t i c g l u c o s e o u t p u t . Me t a b o l i s m
1 9 5 9 , 8 , 4 6 9 .
5 0 . W e i n h o u s e , S . , B . F r i e d m a n n , a n d G . A . R e i c h a r d ,
J r . E f f e c t s o f i n s u l i n o n h e p a t i c g l u c o s e p r o d u c -
t i o n a n d u t i l i z a t i o n . D i a b e t e s 1 9 6 3 , 1 2 , 1 .
5 1 . S t e e l e , R . , J . S . B i s h o p , A . D u n n , N . A l t s z u l e r , I .
R a t h g e b , a n d R . C . d e B o d o . I n h i b i t i o n b y i n s u l i n
o f h e p a t i c g l u c o s e p r o d u c t i o n i n t h e n o r m a l d o g .
A m e r . J . P h y s i o l . 1 9 6 5 , 2 0 8 , 3 0 1 .
5 2 . D i P i e t r o , D . L . , a n d S . W e i n h o u s e . H e p a t i c g l u c o -
k i n a s e i n t h e f e d , f a s t e d , a n d a l l o x a n - d i a b e t i c r a t .
J . b i o l . C h e m . 1 9 6 3 , 2 3 5 , 2 5 4 2 .
5 3 . V i f i u e l a , E . , M. S a l a s , a n d A . S o l s . G l u c o k i n a s e a n d
h e x o k i n a s e i n l i v e r i n r e l a t i o n t o g l y c o g e n s y n -
t h e s i s . J . b i o l . C h e m . 1 9 6 3 , 2 3 8 , 1 1 7 5 .
5 4 . W a l k e r , D . G . On t h e p r e s e n c e o f t w o s o l u b l e g l u -
c o s e - p h o s p h o r y l a t i n g e n z y m e s i n a d u l t l i v e r a n d t h e
d e v e l o p m e n t o f o n e o f t h e s e a f t e r b i r t h . B i o c h i m .
b i o p h y s . A c t a ( A m s t . ) 1 9 6 3 , 7 7 , 2 0 9 .
5 5 . L a u r i s , V . , a n d G . F . C a h i l l , J r . H e p a t i c g l u c o s e
p h o s p h o t r a n s f e r a s e s . V a r i a t i o n s a m o n g s p e c i e s .
D i a b e t e s 1 9 6 6 , 1 5 , 4 7 5 .
5 6 . E x t o n , J . H . , a n d C . R . P a r k . C o n t r o l o f g l u c o -
n e o g e n e s i s i n t h e p e r f u s e d l i v e r o f n o r m a l a n d
a d r e n a l e c t o m i z e d r a t s . J . b i o l . C h e m . 1 9 6 5 , 2 4 0 ,
9 5 5 .
5 7 . G a r c i a , A . , J . R . W i l l i a m s o n , a n d G . F . C a h i l l , J r .
S t u d i e s o n t h e p e r f u s e d r a t l i v e r . I I . E f f e c t o f g l u -
c a g o n o n g l u c o n e o g e n e s i s . D i a b e t e s 1 9 6 6 , 1 5 , 1 8 8 .
5 8 . K r u g e r , F . A . , J . M. C a r h a r t , a n d R . A . A u s t a d .
T h e g l u c o s e - f a t t y a c i d c y c l e a n d t h e l i v e r ( a b -
s t r a c t ) . J . L a b . c l i n . Me d . 1 9 6 4 , 6 4 , 8 7 6 .
5 9 . H e r r e r a , M. G . , D . K a m m , N . R u d e r m a n , a n d G . F .
C a h i l l , J r . N o n - h o r m o n a l f a c t o r s i n t h e c o n t r o l
o f g l u c o n e o g e n e s i s i n A d v a n c e s i n E n z y m e R e g u -
l a t i o n . I V . , G . W e b e r , E d . N e w Y o r k a n d Ox -
f o r d , P e r g a m o n , 1 9 6 6 , p . 2 2 5 .
6 0 . S t r u c k , E . , J . A s h m o r e , a n d 0 . W i e l a n d . S t i m u -
l i e r u n g d e r G l u c o n e o g e n e s e d u r c h l a n g k e t t i g e F e t t -
s a u r e n u n d G l u c a g o n . B i o c h e m . Z . 1 9 6 5 , 3 4 3 , 1 0 7 .
1 7 6 8
H OR MON E - F U E L I N T E R R E L A T I ON S H I P S D U R I N G F A S T I N G
6 1 . L e v i n e , R . , a n d I . B . F r i t z . T h e r e l a t i o n o f i n s u l i n
t o l i v e r m e t a b o l i s m . D i a b e t e s 1 9 5 6 , 5 , 2 0 9 .
6 2 . F a i n , J . N . , V . P . K o v a c e v , a n d R . 0 . S c o w . E f f e c t
o f g r o w t h h o r m o n e a n d d e x a m e t h a s o n e o n l i p o l y -
s i s a n d m e t a b o l i s m i n i s o l a t e d f a t c e l l s o f t h e r a t .
J . b i o l . C h e m . 1 9 6 5 , 2 4 0 , 3 5 2 2 .
6 3 . K i p n i s , D . M. G r o w t h h o r m o n e a n d i n s u l i n a n t a g -
o n i s m i n On t h e N a t u r e a n d T r e a t m e n t o f D i a -
b e t e s , B . S . L e i b e l a n d G . A . W r e n s h a l l , E d s .
E x c e r p t a Me d i c a I n t e r n a t i o n a l C o n g r e s s S e r i e s
N o . 8 4 . A m s t e r d a m , E x c e r p t a Me d i c a F o u n d a t i o n ,
1 9 6 5 , p . 2 5 8 .
6 4 . R e i c h a r d , G . A . , J r . U n p u b l i s h e d o b s e r v a t i o n .
6 5 . Ma n c h e s t e r , K . L . , a n d F . G . Y o u n g . H o r m o n e s a n d
p r o t e i n b i o s y n t h e s i s i n i s o l a t e d r a t d i a p h r a g m . J .
E n d o c r . 1 9 5 9 , 1 8 , 3 8 1 .
6 6 . S m i t h , 0 . K . , a n d C . N . H . L o n g . T h e e f f e c t s o f
c o r t i s o l o n t h e e v i s c e r a t e d a d r e n a l e c t o m i z e d - d i a -
b e t i c r a t ( a b s t r a c t ) . P r o g r a m o f t h e E n d o c r i n e
S o c i e t y , 4 7 t h Me e t i n g , N e w Y o r k , 1 9 6 5 .
6 7 . R o t h , J . , S . M. G l i c k , R . S . Y a l o w , a n d S . A . B e r s o n .
S e c r e t i o n o f h u m a n g r o w t h h o r m o n e : p h y s i o l o g i c
a n d e x p e r i m e n t a l m o d i f i c a t i o n . Me t a b o l i s m 1 9 6 3 ,
1 2 , 5 7 7 .
6 8 . H u n t e r , W . M. , a n d F . C . G r e e n w o o d . S t u d i e s o n
t h e s e c r e t i o n o f h u m a n - p i t u i t a r y - g r o w t h h o r m o n e .
B r i t . m e d . J . 1 9 6 4 , 1 , 8 0 4 .
6 9 . G l i c k , S . M. , J . R o t h , R . S . Y a l o w , a n d S . A . B e r s o n .
T h e r e g u l a t i o n o f g r o w t h h o r m o n e s e c r e t i o n . R e -
c e n t P r o g r . H o r m o n e R e s . 1 9 6 5 , 2 1 , 2 4 1 .
7 0 . Ma r k s , V . , N . H o w o r t h , a n d F . C . G r e e n w o o d .
P l a s m a g r o w t h - h o r m o n e l e v e l s i n c h r o n i c s t a r v a -
t i o n i n m a n . N a t u r e ( L o n d . ) 1 9 6 5 , 2 0 8 , 6 8 6 .
7 1 . Ma c h l i n , L . J . , M. H o r i n o , B . S m i t h , D . K i p n i s , a n d
W . H . D a u g h a d a y . R a d i o i m m u n o a s s a y o f p o r c i n e
g r o w t h h o r m o n e i n p l a s m a ( a b s t r a c t ) . P r o g r a m
o f t h e E n d o c r i n e S o c i e t y , 4 7 t h Me e t i n g , N e w Y o r k ,
1 9 6 5 .
7 2 . V a u g h a n , M. , J . E . B e r g e r , a n d D . S t e i n b e r g . H o r -
m o n e - s e n s i t i v e l i p a s e a n d m o n o g l y c e r i d e l i p a s e a c -
t i v i t i e s i n a d i p o s e t i s s u e . J . b i o l . C h e m . 1 9 6 4 , 2 3 9 ,
4 0 1 .
7 3 . R a n d l e , P . J . , P . B . G a r l a n d , C . N . H a l e s , a n d E . A .
N e w s h o l m e . T h e g l u c o s e - f a t t y a c i d c y c l e . I t s
r o l e i n i n s u l i n s e n s i t i v i t y a n d t h e m e t a b o l i c d i s -
t u r b a n c e s o f d i a b e t e s m e l l i t u s . L a n c e t 1 9 6 3 , 1 ,
7 8 5 .
7 4 . Mu r p h y , J . R . E r y t h r o c y t e m e t a b o l i s m . I I . G l u -
c o s e m e t a b o l i s m a n d p a t h w a y s . J . L a b . c l i n . Me d .
1 9 6 0 , 5 5 , 2 8 6 .
7 5 . L e e , J . B . , V . K . V a n c e , a n d G . F . C a h i l l , J r . Me -
t a b o l i s m o f C " 4 - l a b e l e d s u b s t r a t e s b y r a b b i t k i d n e y
c o r t e x a n d m e d u l l a . A m e r . J . P h y s i o l . 1 9 6 2 , 2 0 3 ,
2 7 .
7 6 . S p i r o , R . G . A m i n o s u g a r s a n d m a c r o m o l e c u l e s
c o n t a i n i n g a m i n o s u g a r s i n l i v e r i n T h e A m i n o
S u g a r s , R . W . J e a n l o z a n d E . A . B a l a z s , E d s .
N e w Y o r k , A c a d e m i c P r e s s , 1 9 6 5 , p p . 4 7 - 7 8 .
7 7 . S t e t t e n , M. R . , a n d D . S t e t t e n , J r . G l y c o g e n r e -
g e n e r a t i o n i n v i v o . J . b i o l . C h e m . 1 9 5 5 , 2 1 3 , 7 2 3 .
7 8 . H e n n e m a n , P . P e r s o n a l c o m m u n i c a t i o n .
7 9 . C o s t a , G . , L . U l l r i c h , F . K a n t o r , a n d J . F . H o l l a n d .
T h e c o n v e r s i o n o f p r o t e i n n i t r o g e n i n t o N 2 b y c e r -
t a i n m a m m a l s i n c l u d i n g m a n . C l i n . R e s . 1 9 6 5 , 1 3 ,
3 2 0 .
8 0 . L u s k , G . T h e S c i e n c e o f N u t r i t i o n , 9 t h e d . P h i l a -
d e l p h i a , W . B . S a u n d e r s , 1 9 2 8 .
8 1 . Ow e n , 0 . E . , J . M. S u l l i v a n , a n d G . F . C a h i l l , J r .
B r a i n m e t a b o l i s m d u r i n g s t a r v a t i o n . C l i n . R e s .
1 9 6 6 , 1 4 , 3 5 1 .
8 2 . E x t o n , J . H . , L . S . J e f f e r s o n , J r . , R . W . B u t c h e r , a n d
C . R . P a r k . G l u c o n e o g e n e s i s i n t h e p e r f u s e d l i v e r .
T h e e f f e c t s o f f a s t i n g , a l l o x a n d i a b e t e s , g l u c a g o n ,
e p i n e p h r i n e , a d e n o s i n e 3 ' , 5 ' - m o n o p h o s p h a t e a n d i n -
s u l i n . A m e r . J . Me d . 1 9 6 6 , 4 0 , 7 0 9 .
1 7 6 9