UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA CENTRO TECNOLGICO PS-GRADUAO EM ENGENHARIA AMBIENTAL

MARINA ELLER QUADROS

QUALIDADE DO AR EM AMBIENTES INTERNOS HOSPITALARES: PARMETROS FSICO-QUMICOS E MICROBIOLGICOS

Florianpolis SC 2008

MARINA ELLER QUADROS

QUALIDADE DO AR EM AMBIENTES INTERNOS HOSPITALARES: PARMETROS FSICO-QUMICOS E MICROBIOLGICOS

Dissertao apresentada ao Programa de Ps-Graduao em Engenharia Ambiental da Universidade Federal de Santa Catarina, como requisito parcial para a obteno do ttulo de Mestre em Engenharia Ambiental.

Orientador: Prof. Henrique de Melo Lisboa, Dr. Co-orientador: Prof. Veturia Lopes de Oliveira, Dra.

Florianpolis-SC 2008

FICHA CATALOGRFICA QUADROS, Marina Eller Qualidade do ar em ambientes internos hospitalares: parmetros fsico-qumicos e microbiolgicos. 134p. Ambiente Hospitalar, Qualidade do Ar Interno, Bioaerossol, Dixido de Carbono, COV Dissertao de Mestrado Universidade Federal de Santa Catarina Programa de PsGraduao em Engenharia Ambiental Florianpolis SC Junho, 2008.

REFERNCIA BIBLIOGRFICA QUADROS, Marina Eller. Qualidade do ar em ambientes internos hospitalares: parmetros fsico-qumicos e microbiolgicos. 2008. 134p. Dissertao (Mestrado em Engenharia Ambiental) Universidade Federal de Santa Catarina, Florianpolis, 2008.

MARINA ELLER QUADROS

QUALIDADE DO AR EM AMBIENTES INTERNOS HOSPITALARES: PARMETROS FSICO-QUMICOS E MICROBIOLGICOS Dissertao aprovada como requisito parcial para obteno do grau de Mestre no programa de ps-graduao em Engenharia Ambiental na Universidade Federal de Santa Catarina UFSC. Florianpolis, 20 de junho de 2008.

_____________________________________________ Prof Dr. Sebastio Roberto Soares Coordenador do Curso de Ps-Graduao em Engenharia Ambiental

_____________________________________________ Prof Dr. Henrique de Melo Lisboa (orientador)

_____________________________________________ Profo Dr. Veturia Lopes de Oliveira (Co-orientadora)

BANCA EXAMINADORA (membros)

______________________________ Prof Dr. Paulo Belli Filho

______________________________ Prof Dr. Catia Regina Silva de Carvalho Pinto

______________________________ Prof Dr. Margarida Matos de Mendona

______________________________ Prof Dr. Alexandre Verzani Nogueira

Conforme a linha da vida se transcorre, amigos, colegas, pessoas maravilhosas, se aproximam e se afastam. Nossas linhas se cruzam, se transpassam, correm em paralelo e, eventualmente, seguem novas direes. Dedico este trabalho minha famlia, cuja linha da vida e a minha so uma s.

AGRADECIMENTOS Agradeo a professor Henrique de Melo Lisboa pela confiana a mim depositada nestes anos de trabalho conjunto, por sempre acreditar no meu potencial e ceder todos os recursos necessrios para a realizao deste e de outros trabalhos. professora Veturia Lopes de Oliveira, pela enorme dedicao e excelente orientao. Ao Laboratrio de Controle da Qualidade do Ar (ENS/UFSC), pelo financiamento integral da parte experimental deste trabalho, que incluiu a aquisio de novos equipamentos e materiais, a partir de recursos prprios. Ao Laboratrio de Ectomicorrizas (MIP/UFSC), ao Laboratrio Integrado do Meio Ambiente (ENS/UFSC) e ao Laboratrio de Toxicologia Ambiental (ENS/UFSC) e s suas equipes, por disponibilizarem as suas estruturas laboratoriais. Ao Hospital Universitrio da Universidade Federal de Santa Catarina, em especial s equipes dos setores: CCIH (Enfermeira Zulmira), UTI, UTN, Centro Cirrgico, DMSG e Lab. de Anlises Clnicas (Cleta), por permitirem a realizao desta pesquisa. Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES) pelo apoio financeiro na forma de bolsa do Programa de Fomento Ps-Graduao. Aos colegas de laboratrio: Gilson Miranda, pelos ensinamentos em qumica e treinamentos sobre a tcnica analtica empregada, Waldir, Isabel, Valria, Priscila, e Bianca Lucchesi pelo apoio na parte experimental do trabalho. Aos membros da banca, pelas suas estimadas contribuies para o melhoramento do trabalho. Aos demais colegas, docentes e discentes, do Programa de Ps-Graduao em Engenharia Ambiental, pelas trocas acadmicas que influenciaram positivamente neste trabalho.

Happyness is only real when shared (Christopher McCandless )

RESUMO A qualidade de vida das pessoas grandemente influenciada pela qualidade do ar que respiram. Em centros urbanos, mais de 80% do tempo passado em ambientes internos. No caso especfico de unidades de sade, a qualidade do ar pode exercer influncia direta no tempo de recuperao dos pacientes e na ocorrncia de infeces hospitalares. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade do ar interno em trs categorias de ambientes hospitalares: UTI neonatal, UTI e centro cirrgico do Hospital Universitrio (HU/UFSC) em Florianpolis (SC). Foram avaliados os seguintes parmetros de conforto e indicadores de renovao do ar nos ambientes: temperatura, umidade relativa, concentrao de dixido de carbono, velocidade mdia das correntes de ar e vazo de ar de renovao. Esses parmetros permitiram estabelecer a taxa de ocupao mxima aceitvel em cada sala do centro cirrgico. Foi realizada uma avaliao qualitativa dos compostos orgnicos volteis (COV) nos ambientes internos atravs de cromatografia gasosa e espectrometria de massas, e seus resultados permitiram afirmar que existe acmulo de COV em alguns dos ambientes estudados. Avaliou-se a tcnica de amostragem passiva de bioaerossis em um dos ambientes de estudo, onde se observou uma fraca relao entre o tempo de exposio das placas e a contagem de bioaerossis. A concentrao de bioaerossis nos ambientes foi estudada atravs da amostragem ativa, utilizando-se um impactador em meio slido com meios de cultura seletivos para fungos e bactrias. Estudou-se o comportamento da concentrao de bioaerossis no decorrer do dia, havendo relao com a taxa de ocupao do local. O tempo de uso das salas de cirurgia no acarretou em um aumento da concentrao de bioaerossis. Os resultados obtidos permitiram identificar fungos filamentosos dos gneros Aspergillus e Penicillium como os mais freqentes nos ambientes estudados. A eficincia dos filtros de um sistema de ar condicionado foi determinada quanto remoo de fungos filamentosos do ar. Obteve-se 40,9% de eficincia para o filtro-bolsa e 100% para o filtro absoluto. A concentrao mdia de bioaerossis observada foi de 231 UFC/m3 para fungos e 187 UFC/m3 para bactrias. Foram identificados COV apenas nas salas do centro cirrgico e na UTI, onde o nmero de compostos identificados no ultrapassou 15. Todos os ambientes avaliados atendiam aos valores recomendados pela legislao vigente. Entretanto, os resultados permitiram sugerir adequaes a essa legislao para a qualidade do ar interno em ambientes de uso comum e dar sugestes para o estabelecimento de uma futura resoluo especfica para a qualidade do ar interno em ambientes hospitalares.

PALAVRAS-CHAVE: ambiente hospitalar, qualidade do ar interno, bioaerossol, dixido de carbono, COV

ABSTRACT People's quality of life is greatly influenced by the quality of the air they breathe. In urban centers, more than 80% of the time is spent indoors. Specifically in health centers, air quality may exert a direct influence in the patient's recovery time and in the occurrence of nosocomial infections. This work's objective was to evaluate the indoor air quality of three categories of hospital environments: a neonatal ICU, an ICU and a surgical ward inside the University Hospital at the Federal University of Santa Catarina (HU/UFSC), in Florianpolis (SC), Brazil. The following comfort parameters and indicators of indoor air exchange were evaluated: temperature, relative humidity, carbon dioxide concentration, average air speed and exchange flow rate. These parameters allowed for the establishment of the maximum occupation accepted in each operating room. A qualitative evaluation of the volatile organic compounds (VOC) was also performed, using gas chromatography and mass spectrometry. The results showed a slight accumulation of VOC in some of the indoor environments. The passive bioaerossol sampling technique was evaluated in one of the environments, and a weak relationship was observed between the agar plate exposure times and the bioaerosol counts. Bioaerosol concentrations were also measured through active sampling, using an agar plate impactor (Andersen sampler) with selective culture medias for fungi and bacteria. This parameter's behavior was studied throughout one work day, and this permitted to visualize a slight relationship between bioaerosol counts and indoor occupation rates. Time of usage did not cause a direct increase in the bioaerosol concentrations. Filamentous fungus of the Aspergillus and Penicillium genera were the most frequent. The filters of a fan-coil unit were tested for the removal of filamentous fungi. Values of 41% and 100% were obtained for fungi removal efficiencies of bag and HEPA filters, respectively. All studied environments were in compliance with the current indoor air regulations. The results allowed for the suggestion of improvements in the Brazilian indoor air quality legislation and for the establishment of a future regulation, specific for hospital's indoor air quality.

KEYWORDS: hospital environment, indoor air quality, bioaerosol, carbon dioxide, VOC

LISTA DE FIGURAS

Figura 1: Principais fontes de reclamao na qualidade do ar interno (HESS-KOSA, 2002). 46 Figura 2: Esquema ilustrativo do impactador de fenda ou orifcio ____________________ 49 Figura 3: Esquema ilustrativo do amostrador de Andersen __________________________ 50 Figura 4: Esquema representativo do sistema de refrigerao do tipo fan-coil ___________ 55 Figura 5: Termo-anemmetro utilizado neste estudo_______________________________ 57 Figura 6: Localizao dos insufladores de ar na sala no 3 do centro cirrgico. ___________ 58 Figura 7: Aparelho medidor de CO2, temperatura e umidade utilizado neste trabalho._____ 59 Figura 8: Esquema representativo dos cartuchos de amostragem utilizados _____________ 59 Figura 9: Esquema de amostragem ativa de COV _________________________________ 60 Figura 10: Componentes do sistema ATD/GC-MS.________________________________ 61 Figura 11: Amostragem passiva na UTN. _______________________________________ 64 Figura 12: Amostrador de Andersen ___________________________________________ 65 Figura 13: Aspecto dos fungos isolados em tubos de ensaio _________________________ 66 Figura 14: Conjunto usado para microcultivo ____________________________________ 67 Figura 15: Lmina com microcultura j desenvolvida ______________________________ 67 Figura 16: -Hemlise observada ao redor de algumas colnias______________________ 68 Figura 17: Painel de controle de temperatura e umidade da UTI______________________ 70 Figura 18: Local de amostragem na UTI ________________________________________ 71 Figura 19: Local de amostragem na UTN _______________________________________ 73 Figura 20: Momento da amostragem na sala de cirurgia no1 _________________________ 75 Figura 21: Croquis simplificado da sala de cirurgia no1, mostrando o local da amostragem e sua posio em relao mesa de cirurgia posicionado no centro da sala. __________ 76 Figura 22: Retirada da amostra no5 de COV da sala de cirurgia no1 ___________________ 77 Figura 23: Amostragem na sala de cirurgia n3 ___________________________________ 79 Figura 24: Croquis da sala de cirurgia n3. ______________________________________ 80 Figura 25: Pontos de amostragem (1,2,3) no sistema de ar condicionado e ponto 4 (no ambiente externo). _____________________________________________________ 82 Figura 26: Amostragem no sistema de ar condicionado ____________________________ 83 Figura 27: Ponto externo de amostragem________________________________________ 85 Figura 28: As fotos mostram a mesma placa com gar Sabouraud Dextrose, fotografada na mesma posio, apresentando o crescimento de fungos filamentosos em diferentes tempos de avaliao.___________________________________________________ 106 Figura 29: Fotomicrografias dos conidiforos e condios de alguns isolados do gnero Aspergillus __________________________________________________________ 108 Figura 30: Placa de amostragem contendo gar sangue, mostrando colnias de alguns isolados ___________________________________________________________________ 110 Figura 31: Placas com isolados de bactrias em ASD (esquerda) e ASC (direita). _______ 110 Figura 32: Fotomicrografias dos isolados 1 e 8, mostrando bacilo longos em cadeia (estreptobacilos) e bacilos fracamente corados e de menor dimenso, respectivamente. ___________________________________________________________________ 112 Figura 33: Fotomicrografias dos isolados 15 e 17, mostrando estreptobacilos e estafilococos, respectivamente. ______________________________________________________ 112

LISTA DE GRFICOS Grfico 1: Diagrama de caixas das medies de CO2 nos trs ambientes _______________ 88 Grfico 2: Concentrao de CO2 e grau de ocupao na sala de cirurgia no 1 ___________ 90 Grfico 3: Relao entre a concentrao de CO2 e o grau de ocupao da sala de cirurgia no 1 ____________________________________________________________________ 90 Grfico 4: Concentrao de CO2 e grau de ocupao na sala de cirurgia no 3 ___________ 91 Grfico 5: Relao entre a concentrao de CO2 e o grau de ocupao da sala de cirurgia no 3 ____________________________________________________________________ 91 Grfico 6: Cromatogramas das amostras coletadas na UTI__________________________ 93 Grfico 7: Cromatogramas das amostras coletadas na UTN _________________________ 94 Grfico 8: Cromatogramas das amostras coletadas na sala no 1 do centro cirrgico_______ 95 Grfico 9: Cromatograma da amostra coletada na sada do sistema de respirao artificial_ 96 Grfico 10: Cromatogramas das amostras coletadas na sala no 3 do centro cirrgico______ 97 Grfico 11: Cromatogramas das amostras coletadas no ponto externo _________________ 98 Grfico 12: Diagrama de pontos da concentrao de fungos atravs da amostragem passiva ___________________________________________________________________ 100 Grfico 13: Relao entre a concentrao de fungos e bactrias e a ocupao das salas do centro cirrgico ______________________________________________________ 103 Grfico 14: Freqncia de gneros fngicos encontrados em amostras do ar do HU/UFSC. 107

LISTA DE TABELAS Tabela 1: Parmetros referenciais microbiolgicos de QAI, segundo a CP n 109 _______ 56 Tabela 2: Detalhes da amostragem de COV na UTI _______________________________ 71 Tabela 3: Detalhes da amostragem de bioaerossis na UTI _________________________ 72 Tabela 4: Detalhes da amostragem de COV na UTN ______________________________ 72 Tabela 5: Detalhes da amostragem de bioaerossis na UTN_________________________ 73 Tabela 6: Detalhes da amostragem passiva de fungos na UTN_______________________ 74 Tabela 7: Detalhes da amostragem de COV na Sala de cirurgia n 1 __________________ 77 Tabela 8: Detalhes da amostragem de bioaerossis na sala de cirurgia n1 _____________ 78 Tabela 9: Detalhes da amostragem de COV na Sala de cirurgia n 3 __________________ 80 Tabela 10: Detalhes da amostragem de bioaerossis na sala de cirurgia no 3 ____________ 81 Tabela 11: Detalhes da amostragem de bioaerossis no sistema de ar-condicionado______ 84 Tabela 12: Detalhes da amostragem de COV no ponto externo ______________________ 85 Tabela 13: Detalhes da amostragem de bioaerossis no ponto externo_________________ 85 Tabela 14: Velocidade das correntes de ar_______________________________________ 86 Tabela 15: Vazo de insuflamento no centro cirrgico _____________________________ 86 Tabela 16: Taxa de renovao de ar____________________________________________ 87 Tabela 17: Concentrao de CO2, temperatura e umidade nos ambientes ______________ 88 Tabela 18: Detalhes da amostragem passiva de fungos na UTN______________________ 99 Tabela 19: Concentrao de bioaerossis nos ambientes __________________________ 101 Tabela 20: Concentrao total de bioaerossis coletados com ASD __________________ 102 Tabela 21: Relao I/E_____________________________________________________ 102 Tabela 22: Concentrao de CO2 dentro do sistema de ar condicionado ______________ 104 Tabela 23: Concentrao de bioaerossis no sistema de ar-condicionado _____________ 105 Tabela 24: Eficincia dos filtros no sistema de ar condicionado_____________________ 105 Tabela 25: Fungos filamentosos identificados nos ambientes_______________________ 108 Tabela 26: Caractersticas das bactrias e leveduras isoladas _______________________ 111

LISTA DE QUADROS Quadro 1: Matriz de relevncia do tema ..................................................................................18 Quadro 2: Principais poluentes do ar interno e suas fontes......................................................21 Quadro 3: Classificao dos filtros e sua eficincia de filtrao..............................................53 Quadro 4: Caractersticas dos adsorventes empregados........................................................... 60 Quadro 5: Parmetros das anlises em GC/MS........................................................................62 Quadro 6: Informaes sobre os sedativos utilizados via area no centro cirrgico...............77 Quadro 7: Compostos orgnicos volteis identificados em cada ambiente de estudo. ............ 92 Quadro 8: Principais doenas associadas aos diferentes gneros de fungos filamentosos isolados. ..........................................................................................................................109

LISTA DE ABREVIATURAS E SMBOLOS AC AIDS ASHRAE ASD ATD CC CO CO2 COV ETS FMC GC/MS H2CO HPA IH IUPAC IVR LT m2 m3 MP MP2,5 MP10 NO NO2 NOX O3 PE PM P ppm ppb ppt PVC QAI Ra Rn RN SO2 TR UFC UTI UTN Ar-condicionado Sndrome da Imunodeficincia Adquirida (Acquired Immunodeficiency Syndrome) Sociedade Norte-Americana de Engenheiros de Aquecimento e Ventilao gar Sabouraud Dextrose Dessoro Trmica Automtica Centro Cirrgico Monxido de Carbono Dixido de Carbono Composto(s) Orgnico(s) Voltil(eis) Fumaa de Cigarro (environmental tobacco smoke) Fumaa Cromatografia Gasosa acoplada Espectrometria de Massas Formaldedo Hidrocarboneto(s) policclico(s) aromtico(s) Infeco Hospitalar International Union of Pure and Applied Chemistry Infeco viral respiratria Limite de tolerncia Metro quadrado Metro cbico Material Particulado Material particulado de dimetro inferior a 2,5 m Material particulado de dimetro inferior a 10 m xido de Nitrognio Dixido de Nitrognio xidos de Nitrognio Oznio Ponto de Ebulio Peso Molecular Polnio (elemento qumico) Parte por Milho Parte por Bilho Parte por Trilho Policloreto de vinila Qualidade do Ar Interno Rdio (elemento qumico) Radnio Recm-Nascido Dixido de Enxofre Medida de potncia de refrigerao Unidade Formadora de Colnia Unidade de Tratamento Intensivo Unidade de Tratamento Intensivo Neonatal

SUMRIO

1.

INTRODUO...............................................................................................................15 1.1. Antecedentes do Tema.............................................................................................. 16 1.2. Justificativas .............................................................................................................17 1.3. Estudo de Relevncia ...............................................................................................18 1.4. Organizao do Trabalho..........................................................................................19 2. OBJETIVOS....................................................................................................................19 2.1. Objetivo Geral .......................................................................................................... 19 2.2. Objetivos Especficos ............................................................................................... 19 3. REVISO BIBLIOGRFICA ........................................................................................20 3.1. Condies de conforto trmico, circulao e renovao do ar .................................21 3.2. Contaminantes fsico-qumicos do ar interno e efeitos sade ............................... 23 3.2.1. Material Particulado (MP) ................................................................................ 23 3.2.2. Fibra de Amianto ..............................................................................................24 3.2.3. Compostos Orgnicos Volteis (COV) ............................................................ 25 3.2.4. Compostos Inorgnicos ....................................................................................28 3.2.5. Fumaa de Cigarro (ETS - Environmental Tobacco Smoke)........................... 31 3.3. Contaminantes microbiolgicos do ar interno e efeitos sade ..............................32 3.3.1. Vrus .................................................................................................................32 3.3.2. Bactrias ...........................................................................................................34 3.3.3. Fungos .............................................................................................................. 38 3.3.4. Alergnicos Biolgicos e hipersensibilidade.................................................... 39 3.4. Odores.......................................................................................................................40 3.5. Infeco hospitalar (IH)............................................................................................41 3.5.1. Particularidades de UTI.................................................................................... 42 3.5.2. Particularidades do ambiente neonatal .............................................................43 3.5.3. Infeco de stio cirrgico (ISC) ...................................................................... 44 3.6. Sndrome do edifcio doente (SED) ......................................................................... 44 3.6.1. Doena relacionada ao edifcio.........................................................................46 3.6.2. Intolerncia qumica mltipla........................................................................... 46 3.7. Amostragem de ar interno ........................................................................................47 3.7.1. Amostragem de material particulado (MP) ......................................................47 3.7.2. Amostragem de compostos para anlise fsico-qumica...................................48 3.7.3. Amostragem de microorganismos....................................................................48 3.8. Os sistemas de climatizao .....................................................................................52 3.8.1. Unidades de janela............................................................................................ 54 3.8.2. Sistema tipo fan-coil .........................................................................................54 3.9. Legislao e normalizao........................................................................................55 4. MATERIAIS E MTODOS............................................................................................57 4.1. Determinao das condies de conforto .................................................................57 4.1.1. Velocidade das correntes de ar ......................................................................... 57 4.1.2. Vazo de insuflamento do sistema de ar-condicionado....................................58 4.1.3. Determinao da concentrao de Dixido de Carbono (CO2)........................58 4.2. Determinao dos Compostos Orgnicos Volteis (COV) ...................................... 59 4.2.1. Amostragem de compostos orgnicos volteis (COV) ....................................59 4.2.2. Anlise qualitativa de COV..............................................................................61 4.3. Determinao dos parmetros microbiolgicos .......................................................63 4.3.1. Meios de Cultura .............................................................................................. 63

4.3.2. Amostragem Passiva ........................................................................................ 64 4.3.3. Amostragem Ativa ........................................................................................... 65 4.3.4. Anlise Laboratorial......................................................................................... 65 4.4. Anlise Estatstica dos Dados .................................................................................. 69 4.5. Seleo dos Ambientes de Estudo ........................................................................... 69 4.5.1. Unidade de Terapia Intensiva Adulto (UTI) .................................................... 70 4.5.2. Unidade de Terapia Intensiva Neonatal (UTN) ............................................... 72 4.5.3. Centro cirrgico (CC) ...................................................................................... 74 4.5.4. Sistema de Ar Condicionado............................................................................ 82 4.5.5. Ponto Externo (PE) .......................................................................................... 84 5. RESULTADOS E DISCUSSO .................................................................................... 86 5.1. Velocidade das correntes e renovao de ar nos ambientes..................................... 86 5.2. Concentrao de CO2, temperatura e umidade relativa do ar nos ambientes .......... 87 5.3. Avaliao qualitativa de COV nos ambientes.......................................................... 91 5.4. Concentrao de bioaerossis nos ambientes .......................................................... 99 5.4.1. Amostragem Passiva ........................................................................................ 99 5.4.2. Amostragem Ativa ......................................................................................... 100 5.4.3. Concentrao de microorganismos e grau de ocupao dos ambientes......... 102 5.5. Eficincia de tratamento no sistema de ar condicionado ....................................... 104 5.6. Perodo de incubao dos fungos........................................................................... 105 5.7. Microorganismos isolados ..................................................................................... 106 5.7.1. Fungos filamentosos ...................................................................................... 106 5.7.2. Bactrias e leveduras...................................................................................... 109 6. CONCLUSES ............................................................................................................ 113 7. RECOMENDAES ................................................................................................... 114 8. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS.......................................................................... 116 APNDICE DESCRIO DOS FUNGOS IDENTIFICADOS....................................... 126

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1. INTRODUO
O homem busca abrigo, proteo e segurana nos ambientes artificiais onde vive. As caractersticas atuais das sociedades desenvolvidas e em desenvolvimento fazem com que um elevado nmero de indivduos passe a maior parte do seu dia em ambientes fechados. Com o desenvolvimento social e a urbanizao, as formas de trabalho sedentrias tomam o lugar do trabalho ao ar livre nas cidades urbanizadas, podendo-se afirmar que passamos a maior parte do tempo em ambientes fechados. A natureza evidente da poluio do ar externo, nos aspectos visuais e sensoriais, pode ser contrastada com a caracterstica um tanto quanto invisvel da poluio nos ambientes internos. Este pode ser um fator que influencia o julgamento das pessoas quanto qualidade do ar nos ambientes internos e os seus efeitos sade. Numerosos estudos sugerem que a maioria das populaes estudadas acredita que os riscos da inexistncia de qualidade do ar em ambientes externos so substancialmente superiores aos riscos oferecidos pela m qualidade do ar em ambientes internos (LHEA, 1997 apud JONES, 1999, traduo minha). Essa opinio formada em desconsiderao frao do tempo que se passa em ambientes internos versus externos. Sabe-se que h prejuzo para a sade em ambientes com altas concentraes de fumaa de cigarro, por exemplo, e que o monxido de carbono (CO), vindo da combusto incompleta em ambientes fechados, um composto asfixiante. Alm destes riscos, j se tem conhecimento que exposies prolongadas a concentraes mais sutis de alguns poluentes, como o radnio, microorganismos alergnicos e compostos orgnicos volteis (COV) tambm acarretam prejuzos sade humana. Este trabalho foi desenvolvido no Laboratrio de Controle da Qualidade do Ar (LCQAr/ENS/UFSC), com apoio do Laboratrio de Ectomicorrizas (LabEcto/MIP/UFSC). O LCQAr iniciou as atividades em 1982 em estudos sobre odores como forma de poluio do ar. Desde ento, o grupo de pesquisa tem dado nfase pesquisa da qualidade do ar atmosfrico, estudos de disperso, tratamento de correntes gasosas e, a partir de 2005, a estudos da qualidade do ar interno. Este o terceiro trabalho realizado pelo LCQAr na linha de pesquisa da qualidade do ar interno, e o segundo realizado na rea microbiolgica, entretanto, o primeiro a estudar a microbiologia do ar em nvel de mestrado.

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1.1. Antecedentes do Tema A histria das pesquisas sobre a qualidade do ar interno esto ligadas evoluo da pesquisa cientfica sobre a qualidade do ar externo. Devido similaridade entre as duas reas, percebese que o conhecimento adquirido em uma migra para a outra, bem como alguns de seus pesquisadores. Embora se saiba da importncia da qualidade do ar e da sua relao com a sade humana h sculos, foram alguns episdios mais marcantes, ocorridos no sculo XIX, que despertaram a ateno da populao em geral para este tema. Spengler, Samet e McCarthy (2004) afirmam que a era moderna dos estudos sobre poluio do ar se iniciou com o episdio do London Fog. Nesta poca surgiram as primeiras pesquisas epidemiolgicas e cientficas traando a ligao potencial entre a qualidade do ar externo e a sade humana. Assim, surgiu a preocupao em se separar os ambientes internos das numerosas fontes de poluio no ar externo. O conceito de qualidade do ar interno no recente. H publicaes do incio do sculo XIV que discutem o assunto e j sugerem que a soluo para problemas de qualidade do ar interno a ventilao adequada dos ambientes (HAINES e WILSON, 1998). Entretanto, at recentemente, os efeitos da poluio do ar interno sade humana tm recebido pouca ateno da comunidade cientfica. Diversos autores (STOLWIJK, 1992 apud JONES, 1999; ADDINGTON, 2004; ZHANG, 2004) afirmam que, antes da dcada de setenta, os problemas com a qualidade do ar em residncias e ambientes de trabalho no-industriais eram investigados ocasionalmente, mas o nvel de interesse era baixo. A partir da dcada de setenta observou-se um aumento do uso de sistemas de ar condicionado em edificaes. Esta tendncia influenciou no projeto de edifcios onde a comunicao com o ar externo minimizada, o que pode acarretar em uma concentrao dos poluentes gerados no ambiente interno. Ento se observaram as primeiras reclamaes de trabalhadores em ambientes internos, e estudos revelaram que as concentrao de poluentes nestes locais poderiam ser de 2 a 5 vezes superiores quelas no ar externo (ADDINGTON, 2004; ZHANG, 2004). Em 1995, na cidade de Cleveland (EUA) houve um caso associando a inadequada qualidade do ar interno a casos de mortalidade infantil, causada especificamente pelo fungo Stachybotrys chartarum (SPENGLER, CHEN e DILWALI, 2004). Episdios crticos como esse, associados ao nmero crescente de reclamaes relativas ao conforto humano dentro das edificaes, vm incentivando as pesquisas em qualidade do ar interno.

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1.2. Justificativas O grande nmero de horas despendido por pessoas em ambientes internos, especialmente em centros urbanos, uma justificativa social para a realizao deste trabalho. A qualidade de vida das pessoas grandemente influenciada pela qualidade do ar que respiram na maior parte do tempo. Pode-se afirmar que as pessoas nas reas urbanas passam, geralmente, mais de 80% de seu tempo em ambientes fechados, como residncias, escritrios, veculos e shopping centers (ZHANG, 2004; STATHOLOUPOU et al., 2008; WANG, ANG e TADE, 2007). Segundo estes autores, o nvel de poluentes no ar de ambientes internos freqentemente maior do que no ar externo. Sndromes complexas surgiram ligadas qualidade do ar interno, como a Sndrome do Edifcio Doente (SED), e a Doena Relacionada ao Edifcio (DRE). A inadequada qualidade do ar em ambientes internos est tambm associada perda de produtividade e absteno no ambiente de trabalho (JONES, 1999; SPENGLER, SAMET e MCCARTHY, 2004). Portnoy, Flappan e Barnes (2001) associam a exposio a poluentes do ar interno a um aumento da incidncia e prevalncia mundial de asma. No caso especfico de uma unidade de sade, a qualidade do ar pode exercer uma influncia direta e de grande significncia na velocidade de recuperao dos pacientes e na ocorrncia de infeces hospitalares. Em unidades de atendimento de portadores de cncer e doenas imunodepressoras, como a AIDIS, estudos desta natureza ganham ainda maior importncia, pois os usurios dessas unidades encontram-se com seus sistemas imunolgicos comprometidos. As doenas causadas pelo ar interno insalubre j esto entre as principais causas de pedidos de afastamento do trabalho, tanto nos Estados Unidos quanto na Europa. A OMS contabilizou a contribuio de uma variedade de fatores de riscos a doenas e determinou que a poluio do ar interno o 8 fator de risco mais importante, e que este responsvel por 2,7% do conjunto de casos de doenas no mundo (WHO, 2008). Indivduos de terceira idade, passam at 90% do seu tempo em ambientes fechados (ZHANG, 2004; USEPA, 2005), e os poluentes contidos no ar desses ambientes podem ser txicos, principalmente para indivduos suscetveis a derrame cerebral e doenas cardacas. Existem no Brasil normas reguladoras da qualidade do ar, em especial aquelas estabelecidas pela ANVISA (Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria). Uma destas a resoluo RE n 9

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de 16 de janeiro de 2003, que estabelece padres de referncia de qualidade do ar interior, em ambientes climatizados artificialmente de uso pblico e coletivo (BRASIL, 2003). As unidades de sade se enquadram no escopo desta resoluo. Neste contexto, este trabalho pretende avaliar a qualidade do ar dessas unidades, sob a perspectiva dessa resoluo. Outro aspecto importante deste trabalho, que est ligado a essa resoluo, a sugesto de melhorias ou adaptaes para avaliar as unidades de sade. Em 2003, a ANVISA fez uma consulta pblica para a introduo de uma resoluo especfica para a qualidade do ar em unidades de sade, sem que at a presente data ela tenha sido publicada. Esta situao abre a possibilidade de serem acatadas sugestes advindas de resultados de pesquisa na rea, como no caso do presente trabalho. 1.3. Estudo de Relevncia Dando incio reviso bibliogrfica deste trabalho, foi realizado um estudo de relevncia sobre o tema em bases de dados cientficas conhecidas na rea de conhecimento das cincias exatas. A matriz a seguir apresenta o nmero de publicaes cientficas encontrados em diferentes portais, no nvel local (bancos de teses da biblioteca universitria da UFSC e da USP), nacional (banco de teses do CAPES, Repidisca, e Google Acadmico em portugus) e internacional (ScienceDirect, Google Acadmico em ingls). A pesquisa foi realizada inicialmente usando trs palavras-chave e ento com combinaes das palavras-chave (Quadro 1).
Quadro 1: Matriz de relevncia do tema
1 palavrachave portal ScienceDirect (ingls) Google Acadmico (ingls) Google Acadmico (portugus) REPIDISCA (portugus) infeco hospitalar Nosocomial infection 2 Qualidade do ar interno indoor air quality 3 microbiologia do ar air microbiology 1+2 1+3 2+3 1+2+3

2.777 65.300 9.270 4 1275 1 29

675 72.200 18.200 2 120 1 62

73 142.000 7.050 7 118 0 91

27

1 232 172 0 1 0 0

480 6.120 2.740 621 0 2 0 0 465 0 3 0 1 725 0 7 0 0

(portugus)

Banco de Teses

CAPES UFSC USP

Observando-se o quadro, verifica-se que h um nmero elevado de trabalhos lidando com a qualidade do ar interno e a microbiologia do ar, bem como a infeco hospitalar e a

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microbiologia do ar e h um nmero menor de trabalhos realizados nesta temtica no Brasil. Finalmente, no se observou nenhum trabalho realizado em nvel local (na Universidade Federal de Santa Catarina) que inclusse as trs palavras-chave. 1.4. Organizao do Trabalho O trabalho est dividido em seis partes. No primeiro captulo feita uma introduo ao tema e so apresentados um estudo da relevncia do tema e as justificativas para a realizao do trabalho. A segunda parte do trabalho apresenta os objetivos. O captulo trs compreende a reviso bibliogrfica. Esta reviso trata sobre a qualidade do ar em ambientes internos, seus aspectos fsico-qumicos e biolgicos; e tambm sobre a sua relao com a sade humana e os aspectos legais. Na reviso, deu-se maior nfase aos poluentes avaliados nos estudos de caso desta dissertao. No captulo quatro, as metodologias de avaliao dos diferentes parmetros da qualidade do ar interno so apresentadas. Estas metodologias envolveram a coleta de amostras, anlises laboratoriais e medies in loco com instrumentos portteis de medio. Tambm so apresentados os trs ambientes de estudo de caso. No captulo cinco, so apresentados os resultados obtidos e, simultaneamente a discusso. Finalmente, no captulo seis, podem-se encontrar concluses estabelecidas por via de uma anlise dos resultados, sugestes de adequaes da legislao brasileira atual e recomendaes para trabalhos futuros a serem realizados na mesma temtica.

2. OBJETIVOS
2.1. Objetivo Geral Avaliar a qualidade do ar interno em trs categorias de ambientes hospitalares: UTI neonatal, UTI e centro cirrgico do Hospital Universitrio da Universidade Federal de Santa Catarina, visando estabelecer a relao entre o uso dos ambientes e a qualidade do ar interno, envolvendo uma anlise crtica da legislao brasileira atual especfica nessa rea. 2.2. Objetivos Especficos Avaliar os parmetros de conforto e os indicadores de renovao do ar nos ambientes: temperatura, umidade relativa, concentrao de CO2, velocidade mdia das correntes de ar e vazo de ar de renovao;

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Caracterizar os COV (compostos orgnicos volteis) nos ambientes internos e em um ponto externo, por meio de cromatografia gasosa e espectrometria de massas, comparando-se os resultados; Avaliar a tcnica de amostragem passiva de bioaerossis em um dos ambientes de estudo; Avaliar, atravs de amostragem ativa, a concentrao de fungos e bactrias nos ambientes internos, para escolher entre os dois grupos, o melhor indicador das condies locais; Estudar as variaes da concentrao de bioaerossis no decorrer do dia em duas salas de cirurgia e estabelecer uma possvel relao entre o grau de contaminao dos ambientes e sua taxa de ocupao ou o tempo de uso. Comparar a concentrao de fungos filamentosos no ambiente interno e em um ponto externo edificao; Caracterizar e/ou identificar os fungos filamentosos e as bactrias isoladas; Determinar a eficincia dos filtros de um sistema de ar condicionado quanto remoo de fungos filamentosos do ar.

3.

REVISO BIBLIOGRFICA

A qualidade do ar em ambientes internos est relacionada aos componentes e s caractersticas do ar que podem afetar a sade e o conforto dos ocupantes de uma edificao. Embora haja inmeros contaminantes do ar, estes podem ser facilmente distinguveis quanto sua natureza, sendo classificados como qumicos, fsicos ou biolgicos ou, ainda, como sendo de origem biolgica e no-biolgica. Os principais poluentes do ar so apresentados a seguir (Quadro 2), onde tambm so indicadas suas principais fontes. As caractersticas do ar interno dependem diretamente da qualidade do ar no ambiente externo, mas, tambm, podem ser afetadas pelas atividades realizadas dentro das edificaes, como o fumo e a coco de alimentos, o aquecimento de ar e gua, e at mesmo os materiais de construo e moblia (STATHOLOUPOU et al., 2008).

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Quadro 2: Principais poluentes do ar interno e suas fontes

Poluente Principais fontes Compostos orgnicos volteis Adesivos, tintas, solventes, materiais de (COV) construo, combusto, fumaa de tabaco. Atividade metablica, combusto, motores Dixido de carbono (CO2) veiculares em garagens. Queima de combustveis, aquecedores de gua, Monxido de carbono (CO) fornos, foges, aquecedores a gs ou a querosene, fumaa de tabaco. Ar externo, queima de combustveis, motores Dixido de Enxofre (SO2) veiculares (garagens). Ar externo, queima de combustveis, motores xido de Nitrognio (NO) veiculares (garagens). Ar externo, queima de combustveis, motores Dixido de nitrognio (NO2) veiculares (garagens). Materiais de isolamento, mveis, madeira Formaldedo (H2CO) compensada. Hidrocarbonetos policclicos Queima de combustveis, fumaa de cigarro. aromticos (HPA) Reaes fotoqumicas, campos eletrostticos Oznio (O3) (equipamentos eletrnicos). Solo, materiais de construo (pedras, Radnio (Rn) concreto). Material Particulado Re-suspenso, fumaa de tabaco, combusto. Fibra de asbesto ou amianto Insulao, materiais anti-chama. Metabolismo humano, sistema de ar Calor condicionado, cozinhas. Alergnicos Poeira, animais domsticos, insetos. Plen Plantas de exterior e de interior. Microorganismos (fungos, Pessoas, animais, plantas e vasos, sistemas de ar bactrias, vrus) condicionado. Esporos de Fungos Solo, plantas, alimentos, superfcies internas.

Fonte: Adaptado de Jones et al., 1999.

Os principais fatores que determinam a qualidade do ar em um dado ambiente interno so apresentados em duas categorias neste trabalho, contaminantes de origem no biolgica e contaminantes de origem biolgica. A descrio detalhada de cada categoria de poluente, suas principais fontes no contexto da qualidade do ar e a sua relao com a sade humana so apresentados a seguir. 3.1. Condies de conforto trmico, circulao e renovao do ar Os fatores fsicos, como temperatura, umidade, taxa de circulao e renovao do ar no somente afetam o desenvolvimento de microorganismos no ambiente interno, mas tambm a forma de disperso e a diluio dos contaminantes no ar. Ambientes com elevada taxa de umidade relativa do ar e temperatura favorecem o desenvolvimento de fungos. Locais com

Origem biolgica

Poluentes de origem no biolgica

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elevada taxa de ocupao e com circulao do ar insuficiente dificultam a diluio dos contaminantes introduzidos pelos prprios usurios, principalmente quando entre eles encontram-se fumantes. Kwoc (2004) afirma que o conforto trmico afetado por quatro fatores ambientais: temperatura do ar, temperatura radiante, umidade relativa e velocidade do ar. Os fatores fsicos de importncia no ambiente interno climatizado de uso comum, conforme estabelecidos pela resoluo RE n 9 (BRASIL, 2003), compreendem: temperatura, umidade, velocidade e taxa de renovao do ar e grau de pureza do ar. A faixa recomendvel de operao da temperatura, nas condies internas1 para vero, de 23oC a 26oC. A faixa mxima de operao dever estar entre 26,5oC e 27oC, com exceo das reas de acesso, que podero operar at 28oC. Durante o inverno, a faixa recomendvel de operao de 20oC a 22oC. A resoluo RE n 9 da ANVISA estabelece que a faixa recomendvel de operao da umidade relativa do ar, nas condies internas durante o vero, so de 40% a 65%, com exceo das reas de acesso, que podero operar com umidade de at 70%. Para condies internas durante o inverno, a faixa recomendvel de operao de 35% a 65% (BRASIL, 2003). A umidade relativa do ar influencia a forma como a gua evapora da pele afetando, assim, o balano de calor no corpo humano. Nos Estados Unidos, a norma no 55-1994 da ASHRAE (Sociedade Norte-Americana de Engenheiros de Aquecimento e Ventilao) estabelece a faixa aceitvel de 20 a 60% de umidade relativa do ar (KWOC, 2004). A mesma resoluo estabelece o Valor Mximo Recomendvel (VMR) de operao da velocidade do ar, no nvel de 1,5 m do piso, na regio de influncia da distribuio do ar, de 0,25 m/s (BRASIL, 2003). Kwoc (2004) afirma que em ambientes climatizados a velocidade mxima aceita para o conforto dos usurios pode chegar a 0,5 m/s; valores superiores so aceitos em ambientes ventilados naturalmente. A norma no 55-1994 da ASHRAE limita a velocidade do ar em 0,15 m/s durante o inverno e 0,25 m/s no vero (KWOC, 2004). De acordo com a ANVISA, a taxa de renovao do ar adequada em ambientes climatizados ser, no mnimo, de 27 m3/hora.pessoa, exceto no caso especfico de ambientes com alta rotatividade de pessoas. Nestes casos a taxa de renovao do ar mnima ser de

Em ambiente interno de uso comum, com medio realizada em posio central no ambiente e a 1,50m de altura do cho.

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17 m3/hora.pessoa (BRASIL, 2003). A portaria n 3.523, de 28 de agosto de 1998, do Ministrio da Sade, tambm estabelece o valor de 27 m3/hora.pessoa para ambientes climatizados. O Centro de Controle de Doenas (CDC) e a Associao Americana de Hospitais (AHA), dos Estados Unidos, recomendam, para salas cirrgicas, 25 trocas de ar/hora, com 5 trocas de ar externo ou 15 trocas de ar/hora com 100% de ar externo. A entrada de ar deve estar localizada em posio o mais alta possvel e o mais distante possvel da exausto do sistema. Alm disso, a sala de cirurgia deve ser mantida em presso positiva em relao aos corredores de acesso (LIMA DE PAULA, 2003). 3.2. Contaminantes fsico-qumicos do ar interno e efeitos sade
3.2.1. Material Particulado (MP)

Tambm conhecido pelo termo "aerodisperside", o material particulado em suspenso no ar tem grande influncia na qualidade do ar em ambientes internos, bem como externos. Esta categoria de poluentes constituda de uma mistura fsica e qumica de poeiras, fumaas e todo tipo de material slido ou lquido (gotculas, aerossol, nvoas, fumaa, entre outros) que se encontra suspenso na atmosfera devido s suas dimenses diminutas ou temperatura elevada (SO PAULO, 2007). As principais fontes de emisso de particulado para a atmosfera so: veculos automotores, processos industriais, queima de biomassa, ressuspenso de poeira do solo, entre outros (SO PAULO, 2007). A CETESB classifica os materiais particulados em trs categorias (SO PAULO, 2007): - Partculas Totais em Suspenso (PTS): definidas como aquelas cujo dimetro aerodinmico menor do que 50 m. Uma parcela dessas partculas inalvel e pode causar problemas sade. Outra parte pode afetar desfavoravelmente a qualidade de vida da populao, interferindo nas condies estticas do ambiente e prejudicando as atividades normais da comunidade. - Fumaa (FMC): recebe essa classificao o material particulado suspenso na atmosfera proveniente de processos de combusto, tambm conhecido como fuligem. - Partculas Inalveis (MP10): so definidas como aquelas cujo dimetro aerodinmico menor do que 10 m. Esta categoria ainda pode ser subdividida em outras duas: as partculas inalveis finas, ou MP2,5, que so aquelas com dimetro aerodinmico inferior a 2,5m, e as

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partculas inalveis grossas, que so aquelas cujo dimetro est entre 2,5 e 10m. As partculas inalveis finas podem atingir os alvolos pulmonares, j as grossas ficam retidas na parte superior do sistema respiratrio. As fontes de MP em um ambiente interno podem ser externas ou internas. As principais fontes em residncias so o fumo e o cozimento de alimentos. Embora nos escritrios o fumo ainda seja uma fonte substancial de MP em determinados pases, os equipamentos de escritrio tambm so considerados fontes importantes (CARMO e PRADO, 1999; KILDESO et al., 1999). Os materiais particulados produzidos internamente so, em geral, menores que os externos, e contm uma quantidade maior de compostos orgnicos devido s caractersticas da sua fonte (fogo, cigarro etc.) e natureza das atividades realizadas dentro do edifcio. Essas caractersticas fazem dos particulados internos potencialmente mais perigosos sade. O material particulado no nocivo somente sade humana, mas , tambm, o grande responsvel pela deteriorao de materiais de preciso e obras de arte (CARMO e PRADO, 1999). o tamanho do particulado que vai determinar seu destino, podendo este se depositar em superfcies, ficar suspenso no ar, ser retirados pelo sistema de ventilao ou, ainda, ser inalado pelos ocupantes, acumulando-se nas vias areas superiores ou mesmo nos alvolos (BRICKUS e AQUINO NETO, 1999) Thatcher e Layton, apud Kildeso et al. (1999), descobriram que o MP com dimetro menor de 1 m tem pouca probabilidade de entrar em suspenso novamente. Esses autores testaram diversas atividades normalmente realizadas em uma residncia e concluram que as operaes de limpeza so responsveis pela ressuspenso da maior quantidade de MP. A resoluo RE no9 da ANVISA estabelece o valor mximo permitido para a concentrao de material particulado com dimetro superior a 5 80 g/m3 (BRASIL, 2003).
3.2.2. Fibra de Amianto

m em

A fibra de amianto uma categoria especial dos materiais particulados em suspenso. Asbesto e amianto so nomes comerciais de um grupo heterogneo de minerais silicatos hidratados que ocorrem em vrias formas incombustveis e que podem se separar em filamentos (MARONI et al., 1995 apud JONES, 1999; MENDES, 2001). Segundo Brown (2004), so

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duas as principais enfermidades associadas ao asbesto disperso no ar: a asbestose e o cncer de pulmo.
Asbestose

Em 1927, Cooke relacionou a exposio fibra de amianto ao quadro de pneumocomiose aguda, que foi por ele denominada fibrose pulmonar e hoje conhecido como asbestose (COOKE, 1927, apud MENDES, 2001). Este quadro se caracteriza por uma fibrose difusa intersticial do tecido pulmonar causada por danos inflamatrios na regio alveolar, onde o oxignio transferido do ar para o sangue.
Cncer de pulmo

A capacidade carcinognica das diferentes categorias de fibra de amianto tem gerado polmica no meio acadmico e na indstria, devido dificuldade de se comprovar o verdadeiro causador do cncer. Entretanto, estudos apontam para a confirmao do asbestocrisotila como causador de cncer do pulmo (MENDES, 2001; NIKLINSKI et al., 2004). Segundo Landrigan (1998), apud Vallarino (2004), todos os tipos de asbestos so vistos como potencialmente carcinognicos. As partculas do poluente que possuem dimetro menor que 1 m so as mais perigosas.

Acredita-se que o tempo entre a primeira exposio aos asbestos e a manifestao de tumores de 20 a 50 anos (DOLL e PETO, 1985, apud JONES, 1999).
3.2.3. Compostos Orgnicos Volteis (COV)

O termo COV definido pela agncia de proteo ambiental norte-americana (USEPA) como
qualquer composto que participa de reaes fotoqumicas ou que possui reatividade fotoqumica, excluindo-se os seguintes compostos: CO, CO2, cido carbnico, carbonetos e carbonatos metlicos, carbonato de amnia, metano, etano, acetona, metil-acetato ... [e inmeros hidrocarbonetos halogenados e perfluorcarbonos] (TUCKER, 2004).

O sistema de registro de substncias qumicas desta mesma agncia possui cadastro de 231 compostos pertencentes a esta classe (USEPA, 2008). Em ambientes internos, os COV tm uma definio menos rigorosa, pois os pesquisadores em qualidade do ar interno (QAI) geralmente consideram como COV aqueles compostos orgnicos que se encontram no estado gasoso ou em vapor que podem ser medidos pelos mtodos analticos aplicados a esta classe (TUCKER, 2004).

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Estudos confirmaram que os COV so encontrados em maior nmero nos ambientes internos do que no ar externo (WANG, ANG e TADE, 2007). Por este motivo, esta a classe de compostos mais freqente e mais estudada nos ambientes internos (TUCKER, 2004). Embora exista uma grande variedade de compostos em um dado ambiente, os mais freqentemente encontrados so: formaldedo, benzeno, tolueno, etilbenzeno, xileno e acetaldedo. Entretanto, estes raramente esto em concentrao superior aos seus limites individuais de toxicidade (WHO, 1989; WOLKOFF e NIELSEN, 2001; TUCKER, 2004). Segundo Wang, Ang e Tade (2007), a concentrao mdia de cada COV varia de local para local e, geralmente, est entre 5 e 50 g/m3 em edificaes com alguns meses ou anos de uso (no recm-construdas).
Principais Fontes de COV

Uma parcela dos COV encontrados no ambiente interno vem do ar externo, uma vez que a combusto de combustveis fsseis por veculos automotivos uma fonte expressiva desses compostos. Os nveis de alguns COV so maiores internamente do que externamente pois, apesar de a entrada de COV a partir do ar externo ser, tambm, significativa, as fontes internas so mais importantes, principalmente em edifcios novos onde os materiais de construo apresentam taxas mais altas de emisso, que vo diminuindo com o tempo. Fatores como estao do ano, temperatura e umidade relativa alteram as concentraes de COV (BROWN et al., 1994; WANG, ANG e TADE, 2007). Suas principais fontes em ambientes internos so materiais de construo, acabamento, decorao, mobilirio, combusto, processos metablicos, e fotocopiadoras. Alm de mveis, pisos, colas e tintas, os produtos de limpeza e desinfeco, como desinfetantes, desengordurantes e inseticidas usados no dia-a-dia tambm so responsveis por uma parcela dos poluentes qumicos, notadamente COV, encontrados no ar interno (WHO, 1989; WOLKOFF e NIELSEN, 2001; TUCKER, 2004). Uma fonte de COV praticamente onipresente em escritrios e residncias a maquina fotocopiadora ou impressora de papel. Segundo Lee et al. (2006), so mais de 60 os COV tipicamente liberados durante a operao de uma fotocopiadora. Existem casos em que a proximidade entre residncias e indstrias ou o comrcio permite a contaminao do ar interno por compostos emitidos pelas suas atividades. Schreiber, Prohonic e Smead (2004) relatam a deteco de nveis elevados de tetracloroeteno, um solvente usado em lavagem a seco, em residncias localizadas no mesmo edifcio onde existiam lavanderias,

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com concentraes chegando a 200.000

g/m3. O mesmo foi observado com o hexano

(1.030 g/m3) e tolueno (1.500 g/m3) em residncias prximas a uma sapataria. O formaldedo o COV mais encontrado em ambientes internos, chegando a ser considerado por certos autores como um dos mais importantes (USEPA, 1995; CARMO e PRADO, 1999; JONES, 1999). Este composto est presente em grande parte das colas de madeira aplicadas em MDF, compensados e aglomerados; usado como conservante em tintas e cosmticos; faz parte da formulao em estampas de tecidos, vernizes de papel e, ainda, de materiais de isolamento trmico e acstico, como a fibra de vidro (USEPA, 1997a).
Efeitos do COV sade humana

Embora as concentraes de cada COV encontrado nos ambientes internos normalmente sejam consideravelmente inferiores a seus limites de tolerncia (LT), Molhave (2004) afirma que a maioria dos COV causa algum tipo de reao mesmo em baixa concentrao. Em ambientes internos, este autor define que os usurios esto sob ao de baixa exposio de contaminantes e que seus efeitos so geralmente reversveis e os sintomas no so especficos. Constata-se que a exposio aos produtos da reao entre COV mais perigosa do que a exposio isolada a estes. Assim, diversos autores ressaltam que os COV esto diretamente relacionados aos sintomas da SED - sndrome de edifcios doentes (WOLKOFF et al., 1997; JONES, 1999; WOLKOFF e NIELSEN 2001; MOLHAVE, 2004; WANG, ANG e TADE, 2007). Muitos COV so txicos e considerados carcinognicos, mutagnicos e teratognicos (ALBERICI e JARDIM, 1997, apud WANG, ANG e TADE, 2007). Segundo Maroni et al. (1995), apud Jones (1999), a maioria dos COV formada por narcticos e depressores do sistema nervoso central. So tambm causadores de irritaes nos olhos, nas vias respiratrias e na pele, nuseas, diminuio da capacidade respiratria e reaes alrgicas em geral. Exposio a alguns COV, em concentraes muito elevadas, podem alterar as funes neurocomportamentais e, tambm, levar ao desenvolvimento de cncer (USEPA, 1997b; BURTON, 1997, apud JONES, 1999; SCHIRMER, 2004). Podem tambm ser txicos aos rins e ao fgado, danosos aos componentes do sangue e ao sistema cardiovascular e provocar distrbios gastrointestinais (LESLIE, 2000, apud GIODA e AQUINO NETO, 2003).

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3.2.4. Compostos Inorgnicos Dixido de Carbono (CO2)

O dixido de carbono um metablico expelido naturalmente como subproduto da respirao humana. Alm disso, o CO2 tambm gerado em processos de combusto e em veculos automotores (GIODA, 2003). Este um gs incolor e inodoro, cuja concentrao tpica em ambientes internos varia entre 700 e 2.000 ppm. O CO2 um asfixiante, que tambm pode atuar como irritante no sistema respiratrio. Entretanto, necessria exposio a concentraes extremamente altas (acima de 30.000 ppm) para que ocorram danos significantes sade humana. Em concentraes moderadas, o CO2 pode causar a sensao de desconforto e de que o ambiente est abafado. Acima de 30.000 ppm, os efeitos da sua presena so dores de cabea, tontura e nuseas (JONES, 1999). Notcias veiculadas na mdia do importncia s altas concentraes de CO2 em escritrios, relacionando-as reduo no nvel de concentrao no trabalho, dores de cabea, problemas na viso e uma sensao geral de cansao (JB ONLINE, 2007). A resoluo RE no 9, da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria - ANVISA (BRASIL, 2003) recomenda determinados padres referenciais de qualidade do ar interior em ambientes climatizados artificialmente de uso pblico e coletivo. Dentre outros parmetros, o dixido de carbono tem seu valor mximo de concentrao definido nesta resoluo em 1000 ppm e definido como indicador de renovao de ar externo, recomendado para conforto e bem-estar.
Monxido de Carbono (CO)

O CO tambm um gs incolor, inodoro e com toxicidade considervel. formado atravs da combusto incompleta de materiais que contenham carbono em locais com baixos nveis de oxignio. A concentrao de CO tende a ser maior em edifcios que possuam acesso para veculos, como garagens. Outra fonte de CO a fumaa de tabaco (CARMO e PRADO, 1999; GOLD, 1992, apud JONES, 1999). Em baixas concentraes, esse poluente produz sintomas no especficos, que podem ser confundidos com os da gripe (USEPA, 1991a; CARMO e PRADO, 1999). A afinidade do CO pela hemoglobina leva formao de carboxihemoglobina, substituindo o oxignio e ocasionando uma diminuio de seus nveis no sangue. Sendo assim, seus efeitos mais txicos so observados em rgos como crebro e corao, que demandam mais oxignio (ROUGHTON e DARLING, 1994; USEPA, 1991b).

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xidos de Nitrognio (NOx)

O monxido de nitrognio (NO) e o dixido de nitrognio (NO2) so formados em ambientes onde existam condies de alta temperatura e presso, que podem oxidar parcialmente ou completamente molculas de nitrognio atmosfrico (N2) ou do nitrognio presente na composio dos combustveis eventualmente utilizados. A formao do NO mais provvel na queima de combustveis em motores veiculares, enquanto que a produo de NO2 est associada ao uso de equipamentos que queimam gs, querosene, madeira, bem como a fumaa de tabaco (LAMBERT, 1997, apud JONES 1999). De acordo com Carmo e Prado (1999), o NO2 extremamente reativo com superfcies internas, como paredes e mobilirio. O NO pode interferir no transporte de oxignio para os tecidos, produzindo efeitos parecidos como os do CO. Pode, ainda, provocar edema pulmonar quando em elevadas concentraes (CARMO e PRADO, 1999). O NO2 um agente oxidante que compromete a funo pulmonar, podendo causar inflamaes respiratrias e, em casos mais graves, enfisema pulmonar (FRAMPTON et al., 1991 apud JONES, 1999; USEPA, 1995).
Dixido de Enxofre (SO2)

O SO2 o formado atravs da queima de combustveis fsseis que contenham impurezas ou compostos base de enxofre. altamente solvel em gua, formando cido sulfrico e sulfuroso. Os efeitos do SO2 no so restritos somente aos ocupantes do edifcio, mas tambm, aos equipamentos e mveis, pois os compostos formados quando em contato com gua so corrosivos (CARMO e PRADO 1999; BURR, 1997, apud JONES 1999). As concentraes internas deste composto so usualmente menores do que as externas e a razo ambiente interno/externo encontra-se entre 0,1 e 0,6 (LEADERER et al., 1993, apud JONES, 1999). Sua inalao em doses elevadas causa danos ao sistema respiratrio inferior e exposies crnicas podem levar a uma diminuio da funo pulmonar (USEPA, 1994; CARMO e PRADO, 1999).
Radnio (222Rn)

O radnio um gs altamente radioativo (possui meia-vida de ~ 3,5 dias) e produzido pelo decaimento do elemento qumico rdio (Ra). Acredita-se que exposies ao radnio causem

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cncer de pulmo em seres humanos e, tambm, leucemia linfoblstica aguda (JONES, 1999; SAMET, 2004). Este elemento ocorre naturalmente em quase todos os solos e rochas, principalmente aqueles que contm urnio, em regies ricas em granito ou xisto, e entra nos edifcios atravs de rachaduras no concreto das paredes e pisos, de tubulaes posicionadas no cho, fendas e aberturas em suas fundaes. Materiais de construo tambm podem liber-lo (USEPA, 1992; CARMO e PRADO, 1999). Em ambientes externos, o radnio dificilmente ultrapassa valores que possam pr em risco a sade humana. No entanto, em ambientes internos sem ventilao adequada, este pode vir a se tornar um problema, principalmente pela formao de elementos (como Polnio: Po-218 e Po214) a partir do seu decaimento (COHEN, 1998; WANNER, 1993, apud JONES, 1999). Descobriu-se o papel do radnio como poluente de ambientes internos nos anos 50, mas o conhecimento de suas implicaes sade s ocorreu nas dcadas de 70 e 80, no norte europeu. Sabe-se hoje de sua onipresena em casas por todo o mundo. O principal efeito da exposio ao radnio o cncer associado radiao. Nos EUA, a exposio ao radnio causa 21.000 mortes por cncer de pulmo por ano e o risco mais elevado em crianas e fumantes (USEPA, 2007). A agncia de proteo ambiental americana (USEPA) recomenda a medio dos nveis de radnio em todas as residncias, e indica medidas mitigadoras para as residncias com nveis acima do limite considerado seguro. Essas medidas, como selamento das fundaes, pressurizao da residncia, despressurizao do solo e at a remoo da fonte, podem atuar para evitar a entrada do radnio na residncia. Taxas de ventilao apropriada e o uso de tcnicas de tratamento do ar interno tambm contribuem para reduzir a sua concentrao no ambiente interno (USEPA, 1992; SAMET, 2004).
Oznio (O3)

O oznio um composto altamente reativo, gerado facilmente quando o ar passa por um campo eletrosttico. Normalmente, a fonte mais importante de oznio o ar externo, mas alguns equipamentos eletrnicos tambm o produzem, como fotocopiadoras e impressoras a laser (GIODA, 2003; UNDERHILL, 2004).

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Em ambientes internos, o O3 reage com hidrocarbonetos insaturados e NOX (xidos de nitrognio), o que acarreta uma diminuio na sua concentrao. Porm, h gerao de radicais ainda mais reativos, entre eles o radical hidroxila (OH-). A formao de oznio depende de alguns fatores como: velocidade da troca de ar; concentrao de reagentes; temperatura; umidade relativa e luz. O oznio um agente oxidante que pode causar forte irritao nos pulmes, garganta e olhos (WOLKOFF e NIELSEN, 2001; GIODA, 2003; GIODA e AQUINO NETO, 2003).
3.2.5. Fumaa de Cigarro (ETS - Environmental Tobacco Smoke)

Formada por material particulado, compostos orgnicos volteis e semi-volteis e compostos inorgnicos, a fumaa de cigarro ainda considerada o principal poluente de ambientes internos. A ETS um aerossol formado pela mistura complexa de diversas substncias distribudas em particulados, vapores e gases, sendo responsvel pela emisso de MP, nicotina, HPA (hidrocarbonetos policclicos aromticos), COV, CO, acrolena, NO2, entre outras. Vrios desses compostos j foram usados como elementos trao da ETS (JONES, 1999; SAMET e WANG, 2004). Mesmo com a proibio do fumo em ambientes internos de uso pblico e comum em diversos pases, a ETS ainda considerada o principal poluente de ambientes internos, principalmente pela quantidade de pessoas expostas. Em casos extremos, a ETS pode ser a maior fonte de material particulado em ambientes internos. Nos Estados Unidos, o cncer causado por cigarro a maior causa de morbidade e mortalidade dentre aquelas que podem ser evitadas (CARMO e PRADO, 1999; JONES, 1999; SAMET e WANG, 2004). A ETS afeta tambm no fumantes que convivem com fumantes, os chamados fumantes passivos. Em alguns casos, os nveis de exposio a certos compostos so maiores em no fumantes do que em fumantes, como a N-nitrosodimetilamina, um potente cancergeno que se encontra em concentraes de 20 a 100 vezes maiores para fumantes passivos do que para fumantes ativos (RANDO et al., 1997 e GUERIN et al., 1992, apud JONES, 1999).
Efeitos da ETS sade

Os efeitos mais imediatos percebidos pela fumaa de cigarro em fumantes passivos so o odor e irritao nos olhos e vias areas superiores. Os principais sintomas da exposio ETS em indivduos adultos so: rinite, faringite, tosse, dor de cabea, irritao dos olhos e constrio dos brnquios. Evidncias mostram que a ETS tem potencial carcinognico (JONES, 1999),

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apresentando, principalmente, cncer de pulmo, sendo a nicotina a responsvel pela elevao desse potencial. A ETS est associada, ainda, doena arterial coronariana, ou doena cardaca (EATOUGH et al., 1987, apud BRICKUS e AQUINO NETO, 1999; SAMET e WANG, 2004). 3.3. Contaminantes microbiolgicos do ar interno e efeitos sade Os bioaerossis so a microbiota dispersa no ar (fungos, bactrias, algas, vrus, entre outros). Quando presentes no ar interno, esses microorganismos podem causar irritaes, alergias, doenas e outros efeitos txicos (GRIGOREVSKI-LIMA et al., 2006; LIMA DE PAULA, 2003). O indivduo contaminado por via area quando o agente microbiano inalado e retido no trato respiratrio em local propcio ao seu desenvolvimento. Fatores como a imunidade do indivduo, a dimenso das partculas, a profundidade da penetrao e a dosagem mnima do agente capaz de provocar a doena so fatores ligados infectividade (ROSA e DE MELO LISBOA, 2005). Nunes (2005) avaliou a qualidade microbiolgica do ar em ambientes internos climatizados. O ambiente hospitalar foi escolhido para a pesquisa qualitativa de microrganismos com o objetivo de isolar espcies do gnero Aspergillus, bem como Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e enterobactrias. Segundo Kenny et al. (1999), a exposio a microorganismos areos ou outros bioaerosis pode resultar em uma sensibilizao respiratria (asma ou aoveolite) e em efeitos toxicolgicos no pulmo, como a febre de inalao ou sndrome da poeira orgnica txica. Isto pode contribuir para uma debilitao progressiva da sade. O principal efeito da inadequada qualidade do ar em ambientes internos ou externos se d no sistema respiratrio humano. Assim, as doenas no sistema respiratrio so aquelas de maior importncia no estudo da qualidade do ar interno. A seguir so descritos os principais microorganismos de importncia para a sade humana no contexto da qualidade do ar em ambientes internos, bem como os seus efeitos no organismo humano.
3.3.1. Vrus

As infeces virais respiratrias (IVR) so as doenas mais comuns que afetam o homem, sendo uma causa de morbidade elevada, queda da qualidade de vida e de produtividade. Segundo Bertino (2003), ocorrem aproximadamente 500 milhes de episdios de IVR

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anualmente nos Estados Unidos, acarretando em 25 bilhes de dlares em custos diretos e indiretos. As IVR mais comuns so: gripe, resfriado, faringite, sinusite, bronquite e otite A principal fonte de vrus no ambiente interno o prprio ser humano. Os vrus se propagam pelas correntes de ar, ressuspenso de material particulado ou em gotculas de aerossis dispersadas pela saliva (LIMA DE PAULA, 2003). Os principais vrus patognicos de espalhamento atravs do trato respiratrio so descritos a seguir:
Rhinovirus

O Rhinovrus pertence famlia Picornaviridae. Causador de 50% dos casos de resfriado comum, este o vrus com maior morbidade dentre os pacientes com doenas respiratrias (MYATT et al., 2004; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Em algumas crianas, causador de bronquiolite, sendo responsvel por um elevado nmero de internaes hospitalares no inverno de acordo com Sgala et al. (2008). Estes autores encontraram uma correlao significativa entre a qualidade do ar na cidade de Paris, em termos de SO2, NO2 e PM10, e o nmero de internaes por bronquiolite, o que sugere que os poluentes tm um efeito debilitante no organismo, facilitando a replicao do vrus.
Influenzavirus

Causador da gripe comum, o influenza pertence famlia viral Orthomixoviridae e subdividido nas estirpes A, B e C. As estirpes A e B so aquelas com maior potencial epidmico e a estirpe A a causadora da verso mais grave de gripe. A vacina contra a gripe protege apenas contra o vrus influenza A e B (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005; WEISBERG, 2007).
Vrus Respiratrio Sincicial

Da famlia Paramixoviridae, um dos vrus de manifestao mais comum em lactentes, podendo, ainda causar um tipo de pneumonia potencialmente letal em pessoas mais velhas (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Infecta o trato respiratrio superior e inferior, sendo causador de bronquite e pneumonia em crianas, principalmente menores de 4 anos (SGALA et al., 2008).
Adenoviridae

Os vrus da famlia Adenoviridae tambm so causadores de infeces nas vias areas superiores, como otite, faringite, amigdalite (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Podem

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tambm afetar outros rgos, causando conjuntivite, gastroenterite, infeco urinria e irritaes na pele (CDC, 2005).
3.3.2. Bactrias

So inmeras as bactrias patognicas veiculadas atravs de sistemas centrais de condicionamento de ar e de pessoas no ambiente. A seguir so descritos os principais organismos, onde crescem, e as doenas causadas por cada um deles. So apresentadas, primeiramente, algumas bactrias gram-negativas e, em seguida, algumas bactrias gram-positivas. Entre outras diferenas, as bactrias gram-positivas possuem uma parece celular mais espessa de peptdeoglicana do que as bactrias gram-negativas. Alm disso, as bactrias gram-negativas contm uma camada de lipopolissacardeo como parte da sua parede celular (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005).
Bactrias Gram-negativas

Pseudomonas sp. O gnero das Pseudomonas se refere a bacilos retos ou levemente curvos, que apresentam um ou mais flagelos2 e que so aerbios. Especificamente, P. aeruginosa est freqentemente associada a infeces respiratrias e do trato urinrio, podendo tambm causar infeces sistmicas em pessoas imunocomprometidas e com extensas leses na pele. Esta espcie apresenta uma resistncia natural a agentes antimicrobianos, sendo comum em ambientes hospitalares (MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004). Klebsiella pneumoniae Esta bactria pode ocasionalmente causar pneumonia. Bactrias do gnero Klebsiella so freqentemente encontradas na gua e no solo (MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004). Legionella pneumophila As bactrias do gnero Legionella, bacilos gram-negativos aerbios, causam uma espcie de pneumonia conhecida como legionelose ou doena dos legionrios. Os principais sintomas so febre alta, dores de cabea, fraqueza e dores musculares. Outro quadro causado pela Legionella a febre de Pontiac, uma doena febril sistmica autolimitante, muito rara e com

Estruturas locomotoras de organismos microscpicos unicelulares.

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perodo de incubao entre 12 e 36 horas. Tambm foi associada a casos de infeco do stio cirrgico (MANGRAM, 1999). Indivduos desse gnero habitam crregos e colonizam tipos de hbitat como linhas de gua quente, bandejas de condensao e torres de resfriamento em sistemas de ar-condicionado. A habilidade de viver e se reproduzir dentro de amebas aquticas torna sua erradicao difcil em sistemas de gua (GORBACH, BARLETT e BLACKLOW, 2003; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Haemophilus influenzae Esta bactria um bacilo gram-negativo que provoca meningite, infeces do ouvido mdio e, mais raramente, pneumonia. Este patgeno oportunista tambm responsvel, juntamente com Staphylococcus pneumoniae, pela sinusite e pela epiglotite, uma inflamao da epiglote que pode resultar em morte dentro de poucas horas (GORBACH, BARLETT e BLACKLOW, 2003; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005).
Bactrias Gram-positivas com baixo contedo G + C3

Vrias espcies deste grupo so de grande importncia mdica (MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). A seguir so descritos trs gneros de bactrias desse filo que podem ser transmitidos por via area. Staphylococcus Estes microorganismos anaerbicos facultativos crescem bem sob condies de alta presso osmtica e baixa umidade, o que explica parcialmente seu crescimento e sobrevivncia nas secrees nasais e na pele humana. Essas bactrias produzem vrias toxinas que contribuem para sua patogenicidade, sendo responsveis por infeces comuns em cortes cirrgicos. S. aureus produz a toxina responsvel pela sndrome do choque txico, uma infeco grave caracterizada por febre alta e vmitos, algumas vezes ocasionando a morte. Esta bactria tambm pode causar infeces na pele,como furnculos e acne, alm de pneumonia, meningite e artrite. Sua habilidade de adquirir rapidamente resistncia aos antibiticos, como penicilina, representa um perigo para pacientes em ambientes hospitalares (MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005).

ndice G + C: Proporo de base GC (guanina-citosina) no DNA.

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Streptococcus Essas bactrias crescem em arranjos de diplococos ou em cadeias de vrios indivduos, apresentam cpsula4 e produzem uma reao Gram positiva. Os organismos do gnero Streptococcus so um grupo complexo, provavelmente responsveis por um maior nmero e diversidade de doenas do que qualquer outro grupo de bactrias. Entre as doenas causadas por S. pyogenes, o principal patgeno deste gnero, esto a febre escarlatina, a faringite e a laringite. Outra espcie patognica de importncia na qualidade do ar S. pneumoniae, tambm causadora de laringite, freqentemente em combinao com vrus, e, provavelmente, a causa mais comum de pneumonia (pneumonia pneumoccica) (GORBACH, BARLETT e BLACKLOW, 2003; MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004; BURTON e ENGELKIRK, 2005; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Mycoplasma Mycoplasma spp. so bactrias aerbias facultativas, patognicas em sua maioria. Suas clulas so muito pequenas, apresentando apenas cerca de 5% do volume celular de um bacilo tpico e suas colnias tm menos de 1mm de dimetro. Mycoplasma pneumoniae o patgeno humano mais significativo entre os micoplasmas. Esta espcie responsvel por uma forma comum de pneumonia branda, ou atpica (GORBACH, BARLETT e BLACKLOW, 2003; MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004; BURTON e ENGELKIRK, 2005; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005).
Bactrias Gram-positivas com alto contedo G + C: Actinomicetos

Este grupo inclui as bactrias gram-positivas de alto ndice G + C, entre eles, os gneros Streptomyces, Frankia, Actinomyces e Nocardia. Muitas espcies apresentam filamentos abundantes e freqentemente ramificados e sua morfologia se assemelha dos fungos filamentosos, apresentando, no entanto, filamentos formados por clulas procariticas com dimetro muito inferior ao dos fungos (MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Grigorevski-Lima et al. (2006) descrevem os esporos desses microorganismos como contaminantes importantes do ar interno e externo. Estes mesmo autores coletaram amostras de ar interno usando um amostrador de Andersen de 6 estgios e encontraram actinomicetos em 90% das amostras, nos ltimos 3 estgios do amostrador.
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Camada externa clula, geralmente em material mucilaginoso, que d maior proteo ao microorganismo.

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Actinomyces Bactrias deste gnero so anaerbias facultativas, geralmente encontradas na boca e na garganta de seres humanos e de animais. A espcie Actinomyces israelii causa a actinomicose, uma doena que afeta, geralmente, a cabea, pescoo e pulmes (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Nocardia As espcies do gnero Nocardia assemelham-se s espcies do gnero Actinomyces, sendo, entretanto, aerbios obrigatrios. Bactrias deste gnero possuem filamentos de elementos cocides ou alongados, ocasionalmente produzindo esporos areos (MADIGAN,

MARTINKO e PARKER, 2004). Algumas espcies, como a N. asteroides, eventualmente causam uma infeco pulmonar de difcil tratamento (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Mycobacterium A tuberculose pulmonar uma doena infecciosa de grande importncia. Estima-se que um tero da populao do mundo seja infectado anualmente por Mycobacterium tuberculosis (MTb), uma bactria fracamente gram-positiva que faz parte do grupo dos actinomicetos (COCHI, 1991 apud GWON, SHU e YING, 2004; MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Entretanto, o nmero de casos diagnosticados de tuberculose em 2004 foi de 8 milhes (GWON, SHU e YING, 2004). Os aerossis contendo clulas de MTb apresentam-se nas dimenso que variam de 1 a 5 m e podem se manter suspensos no ar por um longo perodo de tempo. Estudos mostraram que a tuberculose pulmonar pode ser transmitida de pessoa para pessoa pela inalao de gotculas que contm ao menos duas clulas do bacilo de MTb. Os ambientes que possuem risco superior de tuberculose so aqueles que possuem pessoas sintomticas da doena e incluem hospitais, unidades penitencirias, abrigos para pessoas desabrigadas, centros de reabilitao, e asilos (GWON, SHU e YING, 2004).
Bactrias do gnero Chlamydia

Estas bactrias pertencem ao filo de mesmo nome e so parasitas obrigatrias. H trs espcies conhecidas entre as clamdias: C. psittaci, que causa a psitacose atravs do contato por via respiratria com dejetos de aves; C. trachomatis, que causa o tracoma (doena oftlmica extremamente contagiosa), conjuntivite de incluso e outras doenas nos seres

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humanos; e C. pneumoniae, causador de uma variedade de sndromes respiratrias, como bronquite, pneumonia e sinusite (MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004; BURTON e ENGELKIRK, 2005).
3.3.3. Fungos

Os fungos so os indicadores biolgicos da qualidade do ar escolhidos pela resoluo RE n 09 da ANVISA (BRASIL, 2003). Esta norma especifica o valor mximo recomendado em 750 ufc/m3 (unidades formadoras de colnia por metro cbico de ar) de fungos, para amostragem ativa. Alm disso, a mesma resoluo tambm define uma relao I/E < 1,5, onde I a quantidade de fungos no ambiente interior e E a quantidade de fungos no ambiente exterior. Esta resoluo no especifica, entretanto, se deve ser feita a contagem de todos os fungos ou somente dos fungos filamentosos. Quase todos os fungos filamentosos so aerbicos, enquanto a maioria das leveduras anaerbica facultativa. Segundo Tortora, Funke e Case (2005), a incidncia de infeces importantes causadas por fungos tem aumentado nas ltimas dcadas. Essas infeces tm ocorrido na forma de infeces hospitalares e em indivduos com sistema imunolgico comprometido (MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004). Burge (2004) afirma que os fungos esto entre os poluentes do ar interno mais importantes e menos compreendidos (traduo do autor deste trabalho), sendo praticamente onipresentes nos ambientes urbanos. Falvey e Streifel (2007) monitoraram os fungos do gnero Aspergillus em um hospital universitrio durante 10 anos, e afirmaram ser impossvel, sem a aplicao de medidas pouco prticas, manter um ambiente interno completamente desprovido de Aspergillus spp. (traduo do autor deste trabalho). Diversas espcies deste gnero tambm foram isoladas e identificadas por Nunes (2005) em um hospital do Rio de Janeiro. Qualquer infeco de origem fngica chamada de micose e , geralmente, de longa durao (crnica). Esta pode ser: superficial, cutnea, subcutnea ou sistmica (BURTON e ENGELKIRK, 2005). As micoses oportunistas so aquelas em que um patgeno geralmente inofensivo em seu hbitat normal torna-se patognico em um hospedeiro que se encontra debilitado ou traumatizado (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Alguns exemplos de fungos oportunistas so citados a seguir:

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Candida albicans o fungo mais freqentemente isolado de amostras clnicas de seres humanos (BURTON e ENGELKIRK, 2005). Entretanto, Pneumocystis spp. o gnero responsvel pelas infeces mais freqente em pacientes com AIDS (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Stachybotrys chartarum pode causar hemorragia pulmonar fatal em lactentes, e espcies dos gneros Rhizopus e Mucor, que geralmente afetam pacientes com diabete melito, leucemia, ou sob tratamento com drogas imunossupressoras, podem causar zigomicose ou mucormicose, respectivamente (BROOKS et al., 2004; BURTON e ENGELKIRK, 2005; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Infeces oportunistas causadas por espcies de Cryptococcus e Penicillium podem ser fatais para pacientes com AIDS (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). Candida albicans uma levedura que apresenta obrigatoriamente uma fase filamentosa. Esta espcie capaz de causar infeces vaginais, orais ou pulmonares e, em pacientes com AIDS, danos teciduais

sistmicos (MADIGAN, MARTINKO e PARKER, 2004; BURTON e ENGELKIRK, 2005). A seguir so citados alguns exemplos de doenas fngicas do sistema respiratrio inferior (BROOKS et al., 2004; BURTON e ENGELKIRK, 2005; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005): Aspergilose: Infeco pulmonar e/ou sistmica, causada por espcies do gnero Aspergillus, que ocorre em indivduos que esto debilitados devido a doenas nos pulmes ou ao cncer. Coccidioidomicose ou reumatismo do deserto: uma doena pulmonar causada por um fungo dimrfico, Coccidioides immitis, que apresenta morfologia leveduriforme nos tecidos humanos e miceliana quando cresce no solo ou em meio de cultura. Histoplasmose: Esta doena lembra superficialmente a tuberculose, mas causado por Hystoplasma capsulatum, outro fungo dimrfico. Pneumocistose ou pneumonia por Pneumocystis: Causada pelo Pneumocystis jiroveci, uma levedura presente nos pulmes de pessoas saudveis que pode causar pneumonia em indivduos imunocomprometidos ou crianas mal-nutridas.
3.3.4. Alergnicos Biolgicos e hipersensibilidade

A alergia uma resposta exagerada do sistema imunolgico a uma substncia estranha ao organismo, uma hipersensibilidade imunolgica a um estmulo externo especfico. O termo

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hipersensibilidade refere-se a uma resposta antignica mais intensa do que aquela considerada normal, e considerada sinnimo de alergia (BROOKS et al., 2004; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). H quatro tipos de reaes de hipersensibilidade, dos quais o tipo I (anafiltica) considerado o principal no contexto da qualidade do ar. Esse tipo de alergia inclui condies alrgicas comuns e a asma. A importncia dos alergnicos est no fato de grande parte da populao sofrer de alguma doena alrgica. caros, plen, plos e poeira de origem biolgica so os principais alergnicos encontrados em ambientes internos, onde os animais domsticos e as baratas constituem as principais fontes (IEH, 1996 e KUSTER, 1996, apud JONES, 1999). A asma uma reao alrgica que afeta principalmente o sistema respiratrio inferior. Por razes desconhecidas, a asma est se tornando quase uma epidemia, afetando cerca de 10% das crianas nas sociedades ocidentais, mas que tende a diminuir medida que elas crescem. Especula-se que a falta de exposio infeco seja uma das causas da asma em pases desenvolvidos, mas o estresse mental ou emocional tambm pode ser um fator contribuinte. 3.4. Odores A sensao de odor uma resposta sensorial presena de um composto ou uma mistura de compostos odorantes no ar. O odor ambiental no local de trabalho e convvio pode ser uma causa da irritao psicolgica e distrao no trabalho. Em altas concentraes, tambm pode causar nuseas, dores de cabea e alergias. Os odores so uma causa freqente de incmodo em ambientes internos. A capacidade olfativa humana geralmente superior ao limite de deteco de instrumentos analticos na deteco individual dos compostos, pois percebemos alguns compostos em concentraes na ordem de algumas partes por trilho (ppt) em volume, enquanto as tcnicas analticas mais avanadas possuem o limite de deteco na ordem de 0,1 ppb (parte por bilho). Outro fator importante que o nariz humano detecta os odores unicamente em uma mistura de compostos (ou buqu odorante) e a maioria dos mtodos analticos clssicos (como a cromatografia gasosa ou lquida) quantificam compostos separadamente (DUFFEE e OBRIEN, 2004). Os odores so formados principalmente pela presena de compostos orgnicos e inorgnicos volteis no ar, que so captados pela mucosa olfativa do homem e reconhecidos sensorialmente pelo crebro humano como odorantes (BELLI FILHO e DE MELO LISBOA,

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1998). Em ambientes hospitalares, odores podem ser gerados diretamente de infeces nos pacientes, em muitos casos sendo independente do seu estado de higiene. Os odores em ambientes internos raramente so fortes o suficiente para permitir o uso de olfatometria de diluio dinmica para medir a sua concentrao (DUFFEE e OBRIEN, 2004). Entretanto, tcnicas olfatomtricas complementares permitem determinar a magnitude o impacto odorante em termos de intensidade, carter (ou tipo de odor) e hedonicidade (agradabilidade). Estas tcnicas poderiam vir a ser utilizadas para avaliao de odores em ambientes internos. 3.5. Infeco hospitalar (IH) A Organizao Panamericana da Sade define a infeco hospitalar (ou nosocomial) da seguinte forma:
Infeco hospitalar toda infeco adquirida durante a internao hospitalar e geralmente provocada pela prpria flora bacteriana humana, que se desequilibra com os mecanismos de defesa antiinfecciosa em decorrncia da doena, dos procedimentos invasivos (soros, cateteres e cirurgias) e do contato com a flora hospitalar (OPAS, 2000).

A infeco hospitalar o agravo de causa infecciosa adquirido pelo paciente aps sua admisso em hospital ou unidade de sade e deve ser secundria condio de sade original do paciente. Pode se manifestar durante a internao ou aps a alta, desde que relacionada internao ou a procedimentos hospitalares (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005; ANDRADE, 2006) . O Centro de Controle e Preveno de Doenas nos EUA (CDC, 2008) estima que, somente no territrio norte-americano, a infeco hospitalar responsvel por 1,7 milhes de infeces e 99 mil mortes por ano. Dessas infeces, estima-se que 15% sejam na forma de pneumonia. Embora esforos sejam feitos para impedir o crescimento de microorganismos em hospitais, esse tipo de ambiente um importante reservatrio para uma variedade de patgenos. A infeco hospitalar resulta da interao de vrios fatores: (1) os microorganismos no ambiente hospitalar, (2) o estado comprometido (ou enfraquecido) do hospedeiro, e (3) a cadeia de transmisso no hospital (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005; CALIL, 2006). Bactrias como Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Enterococcus spp. se apresentam como as principais responsveis por infeces hospitalares desde as dcadas de 40

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e 50 (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). O hospedeiro comprometido aquele cuja resistncia infeco est reduzida pela doena ou terapia e duas condies importantes podem compromet-lo: a ruptura da pele ou membranas mucosas e o sistema imunolgico suprimido. Exemplos de hospedeiros susceptveis so pacientes imunossuprimidos como recm-nascidos, pacientes em quimioterapia, ou submetidos a transplantes de rgos (GORBACH, BARLETT e BLACKLOW, 2003; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005; CALIL, 2006). As principais vias de transmisso das infeces so o contato direto com a equipe hospitalar, de um paciente a outro, atravs de fmites5 e do sistema de ventilao do hospital. Esta ltima a via de principal importncia neste trabalho. A contaminao pelo ar pode ocorrer atravs da gerao de gotculas (tosse, espirro, aspirao de secrees, procedimentos como broncoscopia e mesmo pela conversao habitual) ou por transmisso area por partculas dispersas no ar. Calil (2006) e Gorbach, Barlett e Blacklow (2003) afirmam que a transmisso por gotculas ocorre em uma distncia mxima de um metro e a transmisso area ocorre quando as partculas possuem menos de 5 m de dimetro (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005; CALIL, 2006). Os principais tipos de infeco hospitalar so: infeco do trato urinrio, infeco do stio cirrgico, bacteremia6, infeco do trato respiratrio superior e infeco cutnea (GORBACH, BARLETT e BLACKLOW, 2003; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005).
3.5.1. Particularidades de UTI

Os pacientes de unidades de terapia intensiva (UTI) apresentam maior risco de adquirir infeco hospitalar devido aos seguintes fatores: severidade da doena de base, muitas vezes ocasionando deficincia da imunidade humoral7, celular e/ou inespecfica; procedimentos invasivos a que so submetidos, antes e aps admisso em UTI, como cateteres venosos centrais, cateterismo vesical e ventilao mecnica, com quebra das barreiras naturais de defesa; tempo de internao prolongado; uso de antibioticoterapia de amplo espectro; alta densidade populacional e alta relao paciente-enfermeiro (GORBACH, BARLETT e BLACKLOW, 2003; ABRAMCZYK e RICHMANN, 2006).
5

Fmite: Objeto inanimado potencialmente contaminado por organismos contagiantes ou infecciosos (como luvas, sapatos, roupas, ferramentas e utenslios). 6 Infeco bacteriana na corrente sangunea. 7 Imunidade Humoral: aquela onde a resposta imunolgica se d por anticorpos produzidos pelos linfcitos B do sangue.

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Gorbach, Barlett e Blacklow (2003) afirmam que pacientes em ventilao mecnica contnua apresentam um risco at 21 vezes maior de desenvolver pneumonia do que pacientes sem suporte para respirao, o que coloca muitos pacientes de UTI no grupo de risco de IH.
3.5.2. Particularidades do ambiente neonatal

De acordo com o CDC (2004), apud Calil, Rola e Richmann (2006), todas as infeces no perodo neonatal so consideradas IH, com exceo das transmitidas via transplacentria. Dentro deste conceito, so consideradas IH de origem materna as infeces cujas manifestaes clnicas ocorram at 48 horas de vida e IH de adquiridas na unidade neonatal aquelas com manifestao aps este perodo. As infeces hospitalares em neonatologia so mais comuns nas UTI neonatais (UTN), podendo tambm ocorrer em unidades de tratamento intermedirio e alojamento conjunto (CALIL, ROLA e RICHMANN, 2006). As taxas de IH em UTI peditrica variam de 3 a 27%. Estudos demonstram que at 9% dos pacientes menores de 1 ano contraem IH, comparados a 1 a 4 % dos pacientes maiores de 10 anos (MACHADO, 2006). Do ponto de vista topogrfico, a IH mais comum nas UTN a infeco primria da corrente sangunea (bacteremia), seguida pelas pneumonias, infeces gastrointestinais e nas vias areas superiores e infeces tegumentares (GORBACH, BARLETT e BLACKLOW, 2003; CALIL, ROLA e RICHMANN, 2006). Machado (2006) afirma que a pneumonia e as infeces da corrente sangunea constituem as IH mais graves em pediatria, diferentemente do que ocorre em UTI de pacientes adultos, em que a infeco do trato urinrio o principal stio de infeco observado (ABRAMCZYK, 2006). A maioria das infeces de origem bacteriana. Infeces virais, apesar de apresentarem importncia, so menos freqentes em pacientes peditricos internados em enfermarias, possivelmente devido maior restrio de visitantes e do fluxo local, presena de equipamentos individuais e ausncia de contato criana-criana. Infeces por leveduras apresentam importncia crescente, representando 14% a 24% dos agentes identificados, principalmente em infeces da corrente sangnea (ABRAMCZYK, 2006). Dentre os fatores de risco para IH inerentes ao recm-nascido (RN), Calil, Rola e Richmann (2006) destacam o peso ao nascimento (relao inversa de peso X risco de IH) e a defesa imunolgica diminuda, pois quanto mais prematuro, menor a imunidade humoral e celular do RN.

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3.5.3. Infeco de stio cirrgico (ISC)

A infeco de stio cirrgico um caso especfico de infeco hospitalar causada pela exposio do paciente no momento da cirurgia. Estas ocorrem at o 30 dia de ps-operatrio ou at um ano, na presena de prtese (MACHADO, 2006). A infeco adquirida em centro cirrgico tem sido apontada como uma das principais causas de complicaes ps-operatrias, levando a um aumento mdio de 60% no perodo de internao. A ISC uma complicao relevante, por contribuir para o aumento da mortalidade e morbidade dos pacientes pscirrgicos (OLIVEIRA e CIOSAK, 2007). A principal causa da ISC a contaminao bacteriolgica por via area (MANGRAM et al., 1999; RUI, GUANGBEI e JIHONG, 2008). Entretanto, Machado (2006) afirma que o ar das salas de cirurgia, antigamente muito valorizado, considerado hoje um fator de menor importncia na contaminao do campo operatrio. Oliveira e Ciosak (2007) realizaram um estudo em 357 pacientes sujeitos a cirurgias do aparelho digestivo (CAD), no estado de So Paulo, e observaram 64 casos de ISC (18% dos pacientes). Estes dados corroboram a afirmao de Tortora, Funke e Case (2005), que indicam a ISC como segunda forma mais incidente de IH (cerca de 17%). Os principais microorganismos responsveis pelas ISC so: Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa, enterobactrias como Klebsiella spp., Escherichia coli e Enterobacter spp., microorganismos no fermentadores, como Acinetobacter spp., Pseudomonas spp. Entre fungos, espcies de Candida so mais freqentes e infeces por Rhizopus sp. j foram documentadas (TABLAN et al., 2003; TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). 3.6. Sndrome do edifcio doente (SED) Sndrome do edifcio doente um termo que comeou a ser usado na dcada de 70, com a introduo dos edifcios climatizados selados ao ar externo e com as primeiras reclamaes dos seus usurios quanto qualidade do ar interno. A sndrome do edifcio doente uma condio onde existe um conjunto inespecfico de sintomas cronologicamente relacionado qualidade do ar em uma edificao no-industrial. Esses sintomas afetam um percentual de ocupantes do edifcio durante o tempo de ocupao e tendem a diminuir ou desaparecer quando essas pessoas deixam de ocupar o local (USEPA, 1994 e 1995; BRIGHTMAN e MOSS, 2004; COHEN, 2004; MOLHAVE, 2004; PERDRIX et al., 2005).

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Segundo a Organizao Mundial de Sade (OMS), a sndrome do edifcio doente (SED) descreve uma condio mdica em que os ocupantes de um determinado edifcio sofrem de sintomas de doenas ou se sentem mal sem haver um motivo aparente para isto. Os sintomas tendem a se tornar mais fortes enquanto a pessoa est dentro do edifcio e tendem a diminuir e at desaparecer quando esta pessoa est longe deste ambiente. A SED resulta numa diminuio substancial do desempenho no trabalho e nas relaes interpessoais, alm de uma perda considervel de produtividade (COHEN, 2004). Estes efeitos sade so freqentemente medidos de forma subjetiva e so difceis de se quantificar clinicamente. Perdrix et al. (2005) citam os seguintes sintomas como os mais facilmente ligados SED: rinite, congestionamento nasal, garganta seca, lacrimejar, irritao ou ressecamento ocular, irritao na pele, eritema, sonolncia e cefalia. Este mesmo autor cita, ainda, que mulheres apresentam uma susceptibilidade maior SED. Segundo Lima de Paula (2003), as causas da SED podem ser explicadas por um conjunto de fatores, dentre eles a insuficincia do ar exterior, m distribuio do ar, controle deficiente de temperatura, projeto inadequado, modificaes inadequadas aps construo e manuteno inadequada do sistema de climatizao. Admite-se que os principais fatores relacionados SED sejam: aerodispersides (poeira, fibras); bioaerossis (fungos, bactrias, vrus); contaminantes qumicos (COV, formaldedo); contaminantes gerados pelo metabolismo humano; fumaa de cigarro, entre outros (HOPPE, 1999, apud GIODA e AQUINO NETO, 2003; PEDRIX et al., 2005). Assim, no somente difcil se caracterizar a SED em uma determinada edificao mas, tambm, se identificar a sua principal causa o que permitiria dar soluo ao problema. Diversos autores citam a realizao de enquetes com os usurios da edificao como uma maneira eficaz de se identificar a SED (GIODA, 2003; CARTAXO, 2007; GUPTA, KHARE e GOYAL, 2007). Nesta enquete so feitas perguntas sobre a sade e estado mental dos usurios e pergunta-se se estes sintomas tendem a diminuir ou desaparecer quando os usurios se ausentam da edificao. A presena de sintomas similares entre os ocupantes do prdio crucial na deteco da SED (REDLICH, SPARER e CULLEN, 1997). Entretanto, a SED confirmada apenas se a presena desses sintomas ocorre em um nmero de pessoas significativamente superior ao que considerado normal em condies saudveis do edifcio (HESS-KOSA, 2002). Lima de

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Paula (2003) considera um caso positivo de SED em uma edificao se 20% dos ocupantes apresentarem queixas. A figura a seguir mostra as principais fontes de reclamao em relao QAI (Figura 1).

Figura 1: Principais fontes de reclamao na qualidade do ar interno (HESS-KOSA, 2002).

3.6.1. Doena relacionada ao edifcio

Em contraposio doena do edifcio doente, a doena relacionada ao edifcio relaciona os sintomas observados com um poluente especfico de uma fonte especfica dentro de uma edificao que causa uma doena ou efeitos discretos sade humana (USEPA, 1995; PERDRIX et al., 2005).
3.6.2. Intolerncia qumica mltipla

Em casos de sndrome do edifcio doente, pode acontecer que alguns ocupantes, com o passar do tempo, apresentem uma sensibilidade extrema a determinados componentes da edificao, como, por exemplo, um novo carpete ou ainda o odor de tinta ou produto de limpeza. Segundo Miller e Ashford (2004), essas pessoas sofrem de uma condio enigmtica chamada de sensibilidade qumica mltipla ou intolerncia qumica mltipla8. A exposio repetida a baixas concentraes de substncias qumicas presentes no ar interno pode levar a este quadro, onde o indivduo afetado passa a reagir a concentraes cada vez mais baixas de poluentes (COHEN, 2004)

Alguns mdicos alergistas preferem usar o termo intolerncia sensibilidade neste caso, para que esta condio mdica no seja erroneamente entendida como um tipo de alergia (MILLER e ASHFORD, 2004).

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Os sintomas desta condio variam muito de pessoa para pessoa e incluem: dores de cabea, fadiga, dores musculares, dificuldades de concentrao, falhas na memria, diversos problemas de pele, dificuldades respiratrias, e uma variedade de problemas gastrointestinais. Estes sintomas so causados pela exposio a baixos nveis de poluentes qumicos, alm de alimentos e bebidas. Se estes contaminantes causam tais sintomas apenas em pessoas prdispostas ou se a exposio prolongada causaria a prpria doena, resta a determinar (MILLER e ASHFORD, 2004). 3.7. Amostragem de ar interno A amostragem de ar interno deve ser planejada com antecedncia para que alguns aspectos sejam considerados, como a presena de sintomas de intoxicaes nos ocupantes da edificao, a localizao da edificao, o tipo de ventilao interna, a umidade relativa do ar, a idade da edificao, existncia de informaes sobre estudos realizados anteriormente e a identidade dos contaminantes encontrados (PATNAIK, 1997). Assim, possvel antecipar a natureza da principal forma de contaminao do ambiente, fsico-qumica ou biolgica, e proceder aos mtodos apropriados de amostragem e anlise. O local de amostragem tambm deve ser escolhido com antecedncia e planejamento. Segundo Hess-Kosa (2002), o investigador da QAI deve determinar o motivo da avaliao da qualidade do ar e, a partir da, determinar os locais de amostragem. Esses locais podem se enquadrar em uma ou mais das seguintes categorias: (1) local onde se percebe o pior caso de QAI; (2) reas com maior representatividade em tamanho ou ocupao; (3) locais de preocupao especial (ex: creches e berrios).
3.7.1. Amostragem de material particulado (MP)

A amostragem de material particulado pode ser usada para posterior anlise qumica ou biolgica dos poluentes presentes neste material. A avaliao da concentrao de MP pode ser feita atravs de mtodo ptico (como um turbidmetro) ou mtodo gravimtrico. No mtodo gravimtrico, uma membrana filtrante essencial, com abertura de malha apropriada ao tamanho de partcula a ser avaliada. O mtodo consiste em fazer passar pela membrana, ou conjuntos de membranas, um volume conhecido de ar, pesando-se as membranas em balana de preciso antes e aps amostragem. O resultado desta anlise expresso em unidade de massa por unidade de volume de ar (ex: g/m3) da frao de material particulado retido nas membranas (PATNAIK, 1997; SO PAULO, 2001; NAGDA e RECTOR, 2004).

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3.7.2. Amostragem de compostos para anlise fsico-qumica

A amostragem de ar para anlises fsico-qumicas pode ser feita de duas formas: (1) isolandose uma parcela do ar local e levando ao laboratrio ou (2) adsorvendo-se ou solubilizando-se os compostos de interesse em meio slido ou lquido (PATNAIK, 1997; NAGDA e RECTOR, 2004). No primeiro mtodo, esse isolamento pode ser feito em um canister de ao inoxidvel, garrafa de vidro ou um saco de plstico como o PVF (fluoreto de polivinila), conhecido como Tedlar. No segundo mtodo, comum a adsoro em carvo ativado ou polmero sinttico como meios slidos, ou absoro atravs de borbulhamento do ar em uma soluo lquida. Na tcnica da absoro, o pH da soluo deve ser ajustado para permitir maior afinidade entre o absorvente e o absorvido. Este mtodo pode ser usado para amostragem de diversos compostos solveis em gua, tanto orgnicos como inorgnicos (PATNAIK, 1997). No caso da adsoro, busca-se um adsorvente que tenha afinidade qumica com os compostos a capturar em termos de polaridade (NAGDA e RECTOR, 2004). Tubos de vidro ou de ao inox preenchidos com material adsorvente so comumente usados para amostragem de compostos orgnicos volteis, COV (TUCKER, 2004). A amostragem por adsoro em conjunto com a anlise por cromatografia gasosa acoplada espectrometria de massas uma tcnica muito recomendada para pesquisas em poluio atmosfrica (MIRANDA, 2007). O carvo ativado uma das substncias mais usadas para este propsito, embora outras substncias como o Tenax ou outros materiais polimricos porosos sejam, tambm, utilizados. A slica gel usada comumente para adsoro de compostos polares como lcoois (PATNAIK, 1997; NAGDA e RECTOR, 2004; TUCKER, 2004).
3.7.3. Amostragem de microorganismos

Considera-se que os microorganismos dispersos no ar (geralmente esporos de fungos e bactrias) encontram-se agregados ao material particulado em suspenso. Assim, a amostragem de microorganismos envolve, necessariamente, a captura desse material particulado do ar. A amostragem pode ser feita utilizando-se uma das seguintes tcnicas: amostragem global de bioaerossis (viveis e no-viveis9) ou a coleta de organismos viveis. Quanto amostragem de bioaerossis viveis, esta pode ser feita atravs da impactao sobre
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Organismos viveis so aqueles capazes de se reproduzir e formar colnias no meio de cultura escolhido.

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meio de cultura (lquido ou slido), caracterizando uma amostragem ativa; ou atravs da sedimentao sobre meio de cultura slido, caracterizando-se como amostragem passiva.
Impactador de fenda ou orifcio

Para a amostragem de organismos viveis ou no-viveis, pode-se utilizar o impactador de fenda ou orifcio (MAY, 1945). Nele, a amostra de ar passa por uma fenda do tipo Venturi, ou orifcio, que direciona o jato de ar sobre uma lmina de vidro auto-adesiva (Figura 2). Essa lmina ento levada diretamente ao microscpio, procedendo-se contagem dos esporos presentes no momento da amostragem, sem considerar a viabilidade destes (PORTNOY, FLAPPAN e BARNES, 2001). Podem-se acoplar diversos amostradores em srie, criando diferentes estgios, sendo chamado, neste caso, de impactador de cascata. Assim, o material particulado de dimetro maior fica retido nos primeiros estgios e os estgios posteriores contm material cada vez mais fino (MAY, 1945). As principais vantagens deste mtodo so a rapidez de anlise e o custo reduzido (PORTNOY, FLAPPAN e BARNES, 2001). As principais desvantagens so a possvel dificuldade de se observarem as estruturas dos microorganismos em meio ao material particulado e outros poluentes, como pedaos de insetos e plen, e a impossibilidade de identificar os organismos, j que este mtodo apenas quantitativo (NAGDA e RECTOR, 2004).

Figura 2: Esquema ilustrativo do impactador de fenda ou orifcio

Este mesmo esquema pode ser usado para amostragem de organismos viveis, acoplando-se uma placa de Petri com meio de cultura sob a fenda, ao invs de uma lmina, e incubando-se

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este material para observar o aparecimento de colnias e, determinar o nmero unidades formadoras de colnias (UFC).
Impactador de Andersen

A amostragem ativa usando o impactador de Andersen a metodologia recomendada pela resoluo RE no 9 da ANVISA (BRASIL, 2003). A taxa de vazo recomendada pela mesma resoluo de 25 a 35 l/min, e o tempo de amostragem de 5 a 15 minutos, para que o volume amostrado seja de 140 a 500 litros de ar. Na amostragem de organismos viveis, utiliza-se geralmente o impactador de Andersen (NAGDA e RECTOR, 2004). Neste, um volume de ar passa por uma chapa metlica com 400 orifcios sobre uma placa de Petri com meio de cultura, o que permite o crescimento de culturas de microorganismos a partir dos propgulos que se fixarem ao meio (ANDERSEN, 1958). Assim, avaliam-se somente os organismos viveis, aqueles capazes de se reproduzir e formar colnias. Neste mtodo, tambm possvel acoplar diversos estgios de amostradores de forma a coletar material em diferentes faixas de dimetros, funcionando como um amostrador de cascata. Diz-se que este mtodo permite simular os diferentes estgios do sistema respiratrio humano (ANDERSEN, 1958). Segundo Nagda e Rector (2004), o impactador de fenda uma variao deste equipamento, embora seja pouco conhecido e menos aceito que o amostrador de Andersen. A Figura 3 mostra um esquema ilustrativo do funcionamento do amostrador de Andersen.

Figura 3: Esquema ilustrativo do amostrador de Andersen

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Uma desvantagem deste mtodo consiste na perturbao ao fluxo natural do ar, que geralmente laminar, causada pela suco deste pelo amostrador ativo, que cria regies de turbulncia nas suas imediaes. Entretanto, todas as normas oficiais sobre o controle microbiolgico do ar so baseadas na contagem de UFC/m3. Apesar de no se especificar o tipo de amostrador a ser usado, o nico mtodo de amostragem que relaciona o seu resultado uma concentrao volumtrica o ativo (PASQUARELLA, PITZURRA e SAVINO, 2000). Certos autores citam, ainda, como desvantagens dos mtodos de impactao para

amostragem de microorganismos viveis, o tempo requerido para o crescimento das colnias e a possvel ocorrncia de sobreposio destas, o que resulta na subestimao do nmero de microorganismos na amostra (PORTNOY, FLAPPAN e BARNES, 2001; NAGDA e RECTOR, 2004). Entretanto, o mtodo de contagem em placa considerado a tcnica mais utilizada para determinar o tamanho de uma populao bacteriana ou fngica. A grande vantagem deste mtodo que as clulas viveis so quantificadas (TORTORA, FUNKE E CASE, 2005). Neste mtodo, considera-se que cada colnia foi gerada a partir de um organismo individual ou conjunto de organismos, definidos como unidade formadora de colnias (UFC). Alm disso, essa metodologia permite o posterior isolamento dos microorganismos para sua identificao.
Amostrador do tipo Impinger

Neste tipo de amostragem, o ar impactado sobre uma superfcie lquida, que pode ser composta por uma soluo estril de gua, leo mineral ou glicerol (NAGDA e RECTOR, 2004). Depois, o lquido diludo e distribudo sobre placas de Petri com meio de cultura adequado (mtodo da semeadura) e incubado para o desenvolvimento das colnias e contagem das mesmas em placa. A principal vantagem deste mtodo a possibilidade de se homogeneizar a amostra antes de se distribuir em placas, possibilitando uma melhor contagem dos indivduos. Uma desvantagem deste mtodo reside na dificuldade de se coletar amostras consecutivas, necessitando, para cada uma delas, um novo recipiente com soluo lquida, o que o torna pouco prtico para uso em campo.

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Amostragem por sedimentao

Esta se d atravs da simples exposio de placas de Petri, para a coleta de microorganismos viveis que sedimentam sobre a mesma (amostragem passiva). Os resultados no podem ser expressos na forma de concentrao, pois no h medio de fluxo de ar. Alm disso, Nagda e Rector (2004) citam como principal desvantagem a grande variabilidade dos resultados, j que mesmo pequenas alteraes no fluxo de ar no entorno das placas podem interferir na sedimentao das partculas. possvel que partculas de dimetro inferior a 5 m, por exemplo, no sedimentem nas placas, embora sejam inaladas pelo homem, o que inviabiliza o emprego desse mtodo para avaliar o risco de contaminao do sistema respiratrio humano (NAGDA e RECTOR, 2004). Pasquarella, Pitzurra e Savino (2000) defendem o uso da amostragem passiva por sedimentao para avaliao de salas de cirurgia, afirmando que a placa de Petri simula a exposio do corte cirrgico sedimentao de microorganismos. MONTACUTELLI et al. (2000) tambm obtiveram bons resultados para a amostragem passiva. 3.8. Os sistemas de climatizao Segundo a portaria no 3523 do Ministrio da Sade (BRASIL, 1998), o conceito de climatizao definido como:
O conjunto de processos empregados para se obter por meio de equipamentos em recintos fechados, condies especficas de conforto e boa qualidade do ar, adequadas ao bem-estar dos ocupantes.

Microorganismos podem se alojar e desenvolver nos dutos do sistema de ar condicionado, e em locais como: reservatrios com gua estagnada, torres de resfriamento, bandejas de condensado, desumidificadores, umidificadores, serpentinas. Como os sistemas funcionam em presso positiva, esses microorganismos podem ser insuflados no ambiente interno (LIMA DE PAULA, 2003). Em geral, trs tipos de sistemas de ar condicionado podem ser encontrados em relao ao tipo de tratamento dado ao ar: Ar condicionado comum, sem filtros de alta eficincia ou controle de trocas de ar;

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Sistema central com plenum (do ingls conventional plenum mixing), com filtros HEPA10, realizando 16 a 20 trocas de ar/hora, com presso positiva de entrada de ar, regulagem de temperatura e umidade. Nesse sistema, a contagem de bactrias geralmente se encontra entre 50 e 150 UFC/m3, podendo ser maior dependendo do nmero de pessoas e a atividade realizada no ambiente (Lacerda et al., 2003 apud LIMA DE PAULA, 2003). Ar ultra limpo ou fluxo laminar, que re-circula volumes excessivos de ar estril atravs de filtros HEPA, promovendo 400 a 500 trocas de ar/hora. Assim, se mantm um ambiente com contagem de bactrias geralmente menor do que 10 UFC/m3 (Lacerda et al., 2003 apud LIMA DE PAULA, 2003) Tanto a portaria no 3.523, de 28 de agosto de 1998, do Ministrio da Sade, como a resoluo RE no 09 da ANVISA, exigem o uso de filtros grossos do tipo G1 (Quadro 3) na entrada de sistemas de ar condicionado (BRASIL, 1998 e 2003). Para ambientes considerados limpos ou restritos, estes filtros devem ser usados em conjunto a um filtro HEPA, que apresentam 99,97% de eficincia na filtrao de materiais particulados. O Quadro 3 descreve a eficincia esperada para cada classe de filtro.
Quadro 3: Classificao dos filtros e sua eficincia de filtrao

Classe de filtro G1 G2 Grossos G3 G4 F5 F6 Finos F7 F8 F9 A1 Absolutos A2 A3 (ou HEPA)

Fonte: ASHRAE, 1999; ABNT, 2005.

Eficincia esperada (%) 50 Eg < 65 65 Eg < 80 80 Eg < 90 90 Eg 40 Ef < 60 60 Ef < 80 80 Ef < 90 90 Ef < 95 95 Ef 85 EDOP < 94,9 95 EDOP < 99,96 99,97 EDOP

Segundo ABNT (2005), a classificao dos filtros grossos e finos definida atravs da norma EN 779:2002. A eficincia dos filtros grossos avaliada atravs de testes gravimtricos que utilizam p sinttico padro ASHRAE 52.1, composto de 72% de p sinttico com dimetro mdio de 7,7 m, 23% de carvo em p e 5% de fibra de algodo (ASHRAE, 1992a). Para os
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Filtro HEPA (do ingls High Efficiency Particulate Arresting) referente a um filtro absoluto do tipo A3 no Brasil.

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filtros finos, a eficincia referente remoo de partculas de 0,4 m de dimetro. J a eficincia dos filtros absolutos determinada atravs do teste DOP da norma U.S. Military Standard 282. O teste DOP avalia a eficincia de um filtro na reteno de partculas de 0,3 m de dioctilftalato (dioctyl phtalate - DOP). Lima de Paula (2003) discute sobre a necessidade de um sistema de ventilao especfico para algumas especialidades cirrgicas, como a ortopdica, considerando o elevado potencial de infeco existente. A seguir so descritos dois tipos de sistema de climatizao:
3.8.1. Unidades de janela

So as unidades de pequeno porte, baixo custo e baixa capacidade de refrigerao (at 2,5 TR11). Utilizadas principalmente em escritrios e residncias, ou outros locais com poucos requisitos de climatizao. Geralmente no possuem a funo de renovao do ar do ambiente (BASTO, 2005).
3.8.2. Sistema tipo fan-coil

Este sistema do tipo central com plenum, e inclui uma unidade de refrigerao, um ventilador e uma tubulao para insero e retirada do ar do ambiente climatizado (Figura 4). A unidade de resfriamento possui serpentinas por onde circula gua fria, capaz de absorver o calor do ar que passa pelo sistema. Nesse sistema, possvel controlar a temperatura, umidade do ar, taxa de renovao e filtragem do ar. A capacidade destes equipamentos varia entre 20 a 220 TR para compressores alternativos e de 250 a 1000 TR para compressores centrfugos (BASTO, 2005).

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Medida de potncia de refrigerao, onde 1 TR a quantidade de calor necessria para derreter uma tonelada de gelo em 24 horas.

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Figura 4: Esquema representativo do sistema de refrigerao do tipo fan-coil

3.9. Legislao e normalizao No Brasil, a resoluo RE n 9, da ANVISA (BRASIL, 2003) estabelece padres de referncia para a qualidade do ar interior, em ambientes climatizados artificialmente, de uso pblico e coletivo. Nela, so listados valores mximos recomendados (VMR) para os seguintes parmetros: contaminao microbiolgica, dixido de carbono, aerodispersides (MP), alm dos parmetros fsicos de temperatura, umidade, velocidade, taxa de renovao e grau de pureza do ar. Alm disso, essa resoluo traz, em seus anexos, quatro normas tcnicas especificando as metodologias de coleta e anlise para os parmetros supracitados. Segundo Nunes (2005), a ANVISA promoveu a redao da consulta pblica CP no 109 de 11 de dezembro de 2003, que trata sobre esse mesmo tema, mais especificamente em ambientes de sade. At o momento a resoluo pertinente a esta consulta ainda no foi oficializada. O documento gerado na CP no 109 classifica os ambientes hospitalares em quatro nveis de riscos e estabelece que os padres de referncia para a contaminao microbiolgica so diferenciados para os ambientes enquadrados nesses nveis de riscos (Tabela 1). Outra diferena desse documento em relao RE no 09 o estabelecimento de limites de concentrao para alguns compostos no ar, sendo eles: fenol (15mg/m3), formaldedo (2,3mg/m3) e etanol (1480mg/m3). Os valores estabelecidos para os parmetros fsicos, bem como a concentrao de material particulado, permaneceriam os mesmo do que os da RE no 09. Entretanto, a CP no 109 no estabelece padres para a concentrao de CO2 no ar interno (BRASIL, 2003 apud NUNES, 2005).

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Tabela 1: Parmetros referenciais microbiolgicos de QAI, segundo a CP n 109

Nvel 0 Partculas microbiolgicas 750 UFC/m3 totais no ar

Nvel 1 500 UFC/m3

Nvel 2 200 UFC/m3

Nvel 3 50 UFC/m3

Um ambiente de nvel 0 corresponde rea onde o risco no excede aquele encontrado em ambientes de uso pblico e coletivo. Uma UTN, a rea coletiva de uma UTI e salas de cirurgia se enquadrariam no nvel 2. Quartos de internao de imunodeprimidos e salas de cirurgia especializada (ortopedia, neurologia, cardiologia, transplante) se enquadrariam no nvel 3. Em nenhum ambiente aceita a presena de microorganismos potencialmente agressores com transmisso comprovada por via ambiental, exceto por locais onde esto isolados pacientes que sofrem infeco por estes organismos (BRASIL, 2003, apud NUNES, 2005). Segundo esta mesma consulta pblica, os COV devem ser avaliados nos ambientes apenas caso ocorram evidncias de contaminao de COV pacientes ou profissionais, determinado o grau de comprometimento ambiental, com objetivo de orientar e controlar as aes de preveno e/ou correo (BRASIL, 2003, apud NUNES, 2005). A consulta pblica CP no 109 no define padres para a concentrao de dixido de carbono (CO2) no ar. A portaria no 3.523, de 28 de agosto de 1998, do Ministrio da Sade, tem como objetivo estabelecer medidas bsicas referentes manuteno dos sistemas de climatizao, para garantir a "Qualidade do Ar de Interiores" e a preveno de riscos sade dos ocupantes de ambientes climatizados. Essa portaria regulamenta parmetros fsicos, qumicos e biolgicos, bem como os mtodos de controle e pr-requisitos do projeto de instalao e de execuo de sistemas de climatizao (BRASIL, 1998). Em relao ao ambiente hospitalar, a portaria do Ministrio da Sade no 930, de 27 de agosto de 1992, determina que todos os hospitais do pas devem manter uma Comisso de Controle de Infeco Hospitalar (CCIH) independentemente da natureza da entidade mantenedora. Em 6 de janeiro de 1997, foi sancionada a Lei no 9.431, que dispe sobre a obrigatoriedade de manuteno do programa de controle de infeces hospitalares pelos hospitais do Pas (BRASIL, 1992 e 1997). Observou-se que a maioria dessas regulamentaes foi elaborada com base nos parmetros estabelecidos pela ASHRAE, dos Estados Unidos. Esse rgo estabelece os padres de

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qualidade para ambientes internos climatizados. A norma ASHRAE 55-1992 (ASHRAE, 1992b) estabelece os padres de temperatura e umidade relativa do ar, enquanto a norma ASHRAE 62-1999 (ASHRAE, 1999), estabelece as taxas de ventilao do ar e alguns parmetros fsico-qumicos, como a concentrao de formaldedo e monxido de carbono.

4. MATERIAIS E MTODOS
Primeiramente, so apresentados instrumentos e metodologias usados para a avaliao dos parmetros escolhidos na avaliao de cada ambiente. Em seguida, so apresentados dos trs ambientes de estudo e os detalhes das amostragens em cada ambiente. 4.1. Determinao das condies de conforto
4.1.1. Velocidade das correntes de ar

Para medio deste parmetro utilizou-se um anemmetro fio quente, marca AIRFLOW, modelo TA45 (Figura 5). Este aparelho fornece dados de velocidade e temperatura do ar atravs de sensor de fio quente. O sensor est fixado em uma haste que o torna ideal para medio na sada de dutos e difusores, especialmente em sistemas de ar condicionado.

Figura 5: Termo-anemmetro utilizado neste estudo

Os dados so medidos em intervalos de aproximadamente 0,5seg. Utilizou-se a funo mdia do aparelho, onde se estabelece o incio e fim das medies (usou-se um perodo de aproximadamente 1 minuto), e o equipamento fornece o valor mdio dos dados coletados no perodo. As especificaes do aparelho so as seguintes (AIRFLOW, 2001): Velocidade do ar: (0,00 a 30,00 m/s Temperatura do ar: (0,0 a 80,0 C
o

0,01 m/s) 0,1 C )

o o

3% do valor medido;

1 C.

Este aparelho foi usado em dois momentos:

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para aferir a velocidade do ar nos ambientes, medida a aproximadamente 1,50m do cho, onde se posicionou a sonda para captar a velocidade mxima das correntes de ar; para aferir a vazo de insuflamento de ar condicionado nas salas do centro cirrgico.

4.1.2. Vazo de insuflamento do sistema de ar-condicionado

Este mesmo equipamento foi usado para medir a velocidade do ar insuflado nas salas de cirurgia no 1 e no 3, no centro cirrgico. Cada sala possui dois insufladores de dimenses iguais (2,0m x 0,15m), dispostos um ao lado do outro (Figura 6).

Figura 6: Localizao dos insufladores de ar na sala n o 3 do centro cirrgico.

Foram feitas medies diretamente na sada dos insufladores. Foram eleitos 10 pontos ao longo de cada insuflador, seguindo-se as recomendaes do mtodo Log-Tchebycheff, que recomenda que a distncia entre os pontos de medio no deve exceder 20cm para dutos com largura superior a 1,40m (AIRFLOW, 2001; ZHANG, 2004).
4.1.3. Determinao da concentrao de Dixido de Carbono (CO2)

Foram realizadas medies da concentrao de dixido de carbono utilizando um aparelho porttil de leitura direta por meio de sensor infravermelho no dispersivo, modelo CO-2, marca Instrutherm (Figura 7). O aparelho segue as recomendaes tcnicas para faixa de leitura e exatido estabelecidas pela resoluo RE n 9 da ANVISA (BRASIL, 2003). Tambm capaz de realizar medies de temperatura em bulbo seco e bulbo mido, fornecendo, assim, o valor da umidade relativa do ar, nas seguintes especificaes tcnicas:

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Concentrao de CO2: (0 a 5.000 ppm Temperatura: (-20,0oC a 60,0oC

1ppm) + 3% do valor medido ou 50ppm; 1o C; 5%.

0,1o C) 1%)

Umidade relativa do ar: (10 a 95%

Em cada aferio, o aparelho foi ajustado para coletar e armazenar os dados a cada 60 segundos.

Figura 7: Aparelho medidor de CO2, temperatura e umidade utilizado neste trabalho.

4.2. Determinao dos Compostos Orgnicos Volteis (COV)

4.2.1. Amostragem de compostos orgnicos volteis (COV)

Foi utilizada a tcnica de adsoro ativa para concentrar os COV, na qual passado um volume conhecido do ar atravs de material slido adsorvente prprio natureza desses gases. Cada cartucho consiste em um tubo em ao inox (fabricados pela PerkinElmer) preenchido com uma combinao de dois materiais adsorventes, Carbotrap e Tenax TA, com 150 mg de cada material no mesmo tubo, separados entre si por l de vidro (Figura 8).

Figura 8: Esquema representativo dos cartuchos de amostragem utilizados

Esses adsorventes foram utilizados com sucesso por Piceli (2005), para amostragem de COV do ar interno, e por Miranda (2007), para amostragem de COV resultantes da combusto

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veicular de diferentes combustveis. O Quadro 4 apresenta as caractersticas dos materiais adsorventes empregados.
Quadro 4: Caractersticas dos adsorventes empregados

Adsorvente Composio Compostos adsorvidos Temperatura mxima (oC) rea superficial especfica (m2/g)

Carbotrap C Carvo ativado Hidrocarbonetos do C8 at o C30 400 12 Polares na faixa de volatilidade. Alcenos, lcoois, aldedos, alquilbenzenos (P.E. > 75oC).

Tenax TA 2,6-difenil-p-fenilenoxido (resina polimrica porosa) n-C5 (ou menos) at n-C26 com PE entre 100oC e 400oC 350 35 Apolares (PE > 100oC). Aromticos exceto benzeno, como HC alifticos a partir do n-C7 e compostos polares menos volteis (PE < 150oC).

Afinidade

Fonte: Piceli (2005), Miranda (2007), PerkinElmer (2007).

A amostragem se deu segundo o Mtodo TO-17, da USEPA (1997b), utilizando-se uma bomba de vcuo porttil, modelo 224-PCXR8 (marca SKC), com vazo entre 10 e 200mL/min, regulada e calibrada atravs de um calibrador eletrnico, modelo DC Lite (marca Drycal) para realizar a passagem do ar ambiente por dentro de cada cartucho. Cada amostra foi coletada em duplicata, onde dois cartuchos foram simultaneamente utilizados (com duas bombas portteis ou uma bomba com duas entradas de ar). Passou-se por cada cartucho um volume de ar de aproximadamente 5000mL, e as vazes aplicadas variaram entre 90 e 167 mL/min. A Figura 9 mostra os elementos que participam deste tipo de amostragem.

Figura 9: Esquema de amostragem ativa de COV

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4.2.2. Anlise qualitativa de COV

Os cartuchos contendo o suporte adsorvente para a amostragem so especficos para o uso em equipamentos de dessoro trmica automtica (ATD)12. Este equipamento, no modelo Thermodesorber, foi acoplado a um cromatgrafo gasoso (GC)12, modelo Autosystem XL, e a um espectrmetro de massa (MS)13, modelo TurboMass, todos da marca Perkin-Elmer (Figura 10).

Figura 10: Componentes do sistema ATD/GC-MS.

Os cartuchos foram acoplados ao carrossel do ATD e, um a um, inseridos no aparelho. Primeiramente, foi passado um gs de arraste (Hlio) pelo adsorvente, em temperaturas de at 300 oC, que dessorve os compostos e os leva armadilha fria (cold trap), em temperatura de -30 oC, para depois serem novamente dessorvidos, mediante um flash trmico temperatura de 300 oC, e transportados ao cromatgrafo gasoso, via uma linha de transferncia aquecida a 200 oC. Na coluna, os compostos passam por uma rampa crescente de temperatura, e so separados fisicamente conforme a sua volatilidade. O cromatograma representa, assim, os sinais emitidos por cada composto, separados entre si pelo tempo decorrido at a transferncia de cada composto da fase mvel (gasosa) para a fase estacionria (coluna). Aps serem separados no cromatgrafo, os compostos so levados ao detector, situado na sada da coluna cromatogrfica. Na presente configurao, o detector foi um espectrmetro de massa. Portanto, ao sarem da coluna, os compostos separados sofrem uma descarga de
12 13

Do ingls Automatic Thermal Desorber. Do ingls Gas Chromatography and Mass Spectrometry.

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eltrons no espectrmetro de massa e so fragmentados de forma caracterstica sua espcie qumica. Assim, cada composto se fragmenta conforme um espectro de massa prprio, que comparado com a biblioteca de espectros do aparelho (biblioteca Nist), possibilitando a sua identificao (MIRANDA, 2007; PERKIN-ELMER, 2007). Com este equipamento foi feita a anlise qualitativa, indicando quais so os COV presentes no ambiente interno, com cadeia carbnica superior a 3 carbonos e com ponto de ebulio entre -30oC e 350oC. No Quadro 5 so apresentados os parmetros usados nas anlises fsicoqumicas.
Quadro 5: Parmetros das anlises em GC/MS

Temperaturas

Tempos

Pneumtica

Cromatgrafo gasoso

Coluna Cromatogrfica Programa de Temperatura Presso Modo de ionizao Faixa de massa Velocidade do Scan Temperatura da fonte Temperatura da interface

Vlvula 200oC Dessoro primria 330 oC Inicial armadilha fria -30 oC Final armadilha fria 250 oC Linha de Transfncia 260oC Taxa de aquecimento da armadilha fria 40oC.s-1 Purga inicial 1 min Dessoro primria 10 min Hold da armadilha fria 5 min Tempo do ciclo analtico 46 min Dessoro primria 100 ml.min-1 Inlet split 15 ml.min-1 Outlet split 15 ml.min-1 Fluxo de gs He na coluna 1,30 ml.min-1 Ciola 5MS (5% fenil-dimetilpolisiloxano) 30m de comprimento 0,25mm de dimetro externo e 0,25 m de espessura do filme. Inicial 30oC durante 10 min. Aquecimento a 5oC.min-1 at 130oC. Tempo total de 30min. 15psi EI+ (70eV) 33 350 uma 1 Scan.S-1 210oC 230oC

Espectrmetro de massas

ATD (two-stage desorption)

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Cada cartucho foi condicionado no ATD durante 15 minutos a 350oC. Depois foram feitas anlises de branco com estes mesmos cartuchos para certificar quanto ausncia de compostos em quantidades significativas. Foram usados trs requisitos para o reconhecimento de um composto no cromatograma: (1) a probabilidade de reconhecimento pela biblioteca de espectros superior a 75%; (2) a ausncia de pico da mesma magnitude na anlise de branco do mesmo cartucho; (2) a rea do pico ao menos trs vezes superior rea dos rudos (picos vizinhos a este no cromatograma). 4.3. Determinao dos parmetros microbiolgicos
4.3.1. Meios de Cultura

Para o cultivo dos fungos foi usado o meio de cultura gar Sabouraud dextrose (ASD) 4%. Esse meio foi proposto por Raymond Sabouraud (1864-1938) e apresenta pH em torno de 5,6 e elevada concentrao de acar, sendo utilizado para o crescimento seletivo de fungos (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005). O meio de cultura foi preparado a partir de p desidratado (Himedia), esterilizado em autoclave durante 20 minutos a 121oC e 15psi, e vertido em placas de Petri descartveis estreis sob condies asspticas de fluxo laminar. Para o cultivo de bactrias, foi usado o meio de cultura gar Sangue de Carneiro a 5% (ASC). O meio base (Himedia) foi, tambm, esterilizado em autoclave sob as mesmas condies de temperatura e presso. Aps esterilizao, quando a temperatura reduziu-se a 50oC, foram adicionados 45mL (5% em volume) de sangue de carneiro desfibrinado estril (adquirido junto ao laboratrio Newprov). Esse meio foi vertido em placas de Petri descartveis estreis sob condies asspticas de fluxo laminar. Depois de preparadas, as placas foram seladas com filme de PVC e acondicionadas em sacos plsticos selados para serem levadas a campo. As placas contendo ASC foram mantidas em geladeira at o momento do uso e as placas com ASD foram mantidas sob temperatura ambiente. Todas as vidrarias usadas foram esterilizadas em autoclave a 121oC e 15psi, durante 20 minutos. Em cada campanha de amostragem, foi utilizada uma placa de meio de cultura ASD como testemunha das condies de transporte ao local de amostragem e ao laboratrio. Essa placa era mantida fechada no local de amostragem, e era posteriormente incubada com as demais culturas.

64

4.3.2. Amostragem Passiva

Realizou-se um estudo sobre a sedimentao de fungos em meio slido em placas de Petri. A amostragem passiva, ou por sedimentao, consiste na exposio ao ambiente do meio de cultura em placas de petri, de 9 cm de dimetro, por perodos de tempo previamente definidos. Atravs da amostragem passiva, avaliaram-se os bioaerossis que sedimentaram sobre o meio de cultura, simulando, assim, a exposio de uma superfcie (como um ferimento, por exemplo) a esses contaminantes (PASQUARELLA, PITZURRA e SAVINO, 2000; SILVA FILHO e OLIVEIRA, 2007). O resultado deste tipo de anlise expresso em UFC/m2.h e, portanto, depende do tempo de exposio da placa e da rea coberta pela mesma. Pasquarella, Pitzurra e Savino (2000) informam que uma concentrao de bioaerossis em um ambiente ultralimpo, de at 10 UFC/m3 medidos por amostragem ativa corresponderia a um valor de at 350 UFC/m2.h. Para tanto, um conjunto de placas com meio de cultura ASD esterilizado foi exposto ao ar sobre incubadoras da UTN (UTI Neonatal), em diferentes datas (independente da ocupao ou no das incubadoras). Realizaram-se 5 campanhas de amostragem. Nas duas primeiras campanhas, trs amostras foram abertas simultaneamente e os tempos de exposio foram de 10, 30 e 60 minutos. Nas ltimas trs campanhas, nove placas foram abertas simultaneamente e conjuntos de 3 placas foram fechados aps 10, 30 e 60 minutos. As placas foram levadas ao Laboratrio de Ectomicorrizas, do Departamento de Microbiologia (MIP/UFSC), incubadas a 25 1 oC e monitoradas diariamente quanto ao crescimento de fungos. Durante este perodo, realizou-se a contagem de colnias em cada placa. A Figura 11, mostra as placas expostas sobre incubadoras na UTI neonatal, em diferentes campanhas de amostragem.

Figura 11: Amostragem passiva na UTN.

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4.3.3. Amostragem Ativa

Utilizou-se um amostrador de ar por impactao atravs de peneiras, tambm conhecido como amostrador de Andersen, de um estgio (marca SKC, modelo BIOSTAGE 1, Figura 12). Em cada ponto de amostragem, foram coletados 280 litros de ar, com a vazo mantida fixa em 28,0 L/min, durante 10 minutos. Essa metodologia foi usada para a amostragem de fungos (com ASD) e bactrias (com ASC). Cada amostragem foi feita atravs da coleta de, no mnimo, 2 placas de Petri subseqentes com o mesmo tipo de meio de cultura. Os detalhes sobre cada amostragem esto descritos no item 4.5 deste trabalho.

Figura 12: Amostrador de Andersen

A pea de ao inox onde se acopla a placa de Petri com meio de cultura foi esterilizada em autoclave, a 121oC e 15psi durante 20 minutos antes de cada dia de amostragem. Entre as amostragens de um mesmo dia, a pea foi desinfetada com lcool etlico 98GL com algodo e a entrada do amostrador foi selada com algumas camadas de filme de PVC. Entre amostragens consecutivas, passou-se um pedao de gaze estril na entrada do amostrador.
4.3.4. Anlise Laboratorial Fungos filamentosos

As placas de Petri com meio de cultura expostas ao ar, seja pelo mtodo ativo ou passivo, foram analisadas da mesma maneira. As placas com meio para crescimento de fungos foram incubadas durante 2 a 3 dias temperatura de 25 1oC. Aps o perodo de incubao, procedeu-se contagem das colnias em cada placa utilizando-se lupa binocular (3X a 30X), efetuando-se duas contagens: a de fungos filamentosos e a de colnias de aparncia cremosa (possivelmente leveduras).

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Em cada placa, foram selecionadas colnias de fungos filamentosos com aparncias macroscpicas diferentes para isolamento. Tais colnias foram repicadas para meio de cultura slido inclinado, de mesma composio, em tubos contendo 10mL (Figura 13). Aps o crescimento da cultura (2 a 3 dias), os tubos foram armazenados em geladeira (a ~ 4oC).

Figura 13: Aspecto dos fungos isolados em tubos de ensaio

Sempre que possvel, dependendo do seu tamanho e posio em relao s demais colnias, foram preparadas lminas dessas colnias de aparncia cremosa, para, sob microscopia ptica, verificar sua natureza, se levedura ou bactria. Algumas dessas colnias tambm foram isoladas em tubos para posterior observao. As placas de fungos foram incubadas durante 3 dias antes de se proceder a contagem das colnias, que foram expressas em unidades formadoras de colnias por metro cbico (UFC/m3) de ar. Depois de isolados, os fungos filamentosos foram submetidos tcnica de microcultivo, para permitir uma melhor observao de suas estruturas reprodutivas e, assim, poder identific-los (MOBIN e SALMITO, 2006; SILVA FILHO e OLIVEIRA, 2007). Esse procedimento consistiu na inoculao do fungo sobre uma pequena quantidade de meio de cultura slido (aproximadamente 0,1 mL) colocado na superfcie de uma lmina de vidro para microscopia, previamente esterilizada. Aps a inoculao, o meio de cultura era coberto por uma lamnula, tambm esterilizada, e o sistema era depositado sobre uma folha de papel de filtro estril umidificada, no interior de uma placa de Petri estril. O conjunto foi, ento, incubado, em incubadora tipo BOD, temperatura de 25 1C. Assim, foi possvel observar toda a cultura em microscopia ptica, sem alterar a integridade das estruturas do fungo (Figura 14).

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Figura 14: Conjunto usado para microcultivo

A Figura 15 mostra a aparncia de uma microcultura aps um perodo de incubao de dois dias, e pronta para observao em microscopia ptica.

Figura 15: Lmina com microcultura j desenvolvida

O perodo de incubao em microcultivo foi varivel de acordo com o tipo de fungo. Alguns, em apenas 18hs de incubao, j haviam produzido esporos e estes j se encontravam em fase de germinao. Em outros casos, foi necessrio aguardar mais de 7 dias para o aparecimento de esporos. O material observado foi comparado com descries disponveis na literatura especializada (livros e pginas da Internet) das estruturas reprodutivas ou outras estruturas fngicas caractersticas (como clamidsporos), caractersticas da hifa (presena ou ausncia de septos) e da colnia (formato e textura da colnia, colorao da hifa, dos esporos e da parte inferior da colnia) (KENDRICK, 1979; WEBSTER, 1985; SILVEIRA, 1995; ALEXOPOULOS, MIMS e BLACKWELL, 1996; KONEMAN et al., 1997; KENDRICK, 2000; BENNY, 2008; DR FUNGUS, 2008; FUNGAL RESEARCH TRUST, 2008; THE UNIVERSITY OF ADELAIDE, 2008).

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Bactrias

As culturas de bactrias (em gar sangue de carneiro) foram incubadas durante 36-48 horas em estufa a 35oC 1oC, de acordo com a metodologia recomendada por Pasquarella, Pitzurra

e Savino (2000). Aps o perodo de incubao, procedeu-se contagem das colnias em cada placa. O meio de cultura utilizado permitiu a observao a olho nu de zonas de hemlise (hemo ~ sangue e lise ~ quebra) produzidas por certas colnias (Figura 16). A hemlise causada pelo rompimento dos eritrcitos do sangue, pela ao de hemolisinas produzidas pelas bactrias, especialmente por alguns grupos de Staphylococcus spp. (SEGEN, 1992). Quanto a esta caracterstica, as bactrias podem ser subdivididas em trs grupos (BROOKS et al., 2004): -hemolticas: aquelas que promovem a formao de uma zona de aparncia esverdeada ou marrom ao redor da colnia, proveniente da descolorao e perda de potssio por parte das hemcias; -hemolticas: promovem a hemlise completa dos eritrcitos, levando ao aparecimento de uma zona transparente no meio de cultura no redor da colnia; -hemolticas: so aquelas bactrias que no provocam hemlise.

Figura 16: -Hemlise observada ao redor de algumas colnias

Posteriormente, algumas colnias com aparncia distinta foram selecionadas e repicadas para novas placas com meio de cultura de mesma composio. Aps o crescimento, as culturas foram armazenadas em geladeira. Para visualizao das bactrias sob microscopia ptica, os isolados bacterianos foram submetidos tcnica de colorao de Gram. Para isso, foi feito o esfregao em uma lmina de

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vidro transferindo-se, com o auxlio de uma ala de platina esterilizada, uma pequena poro da colnia para uma gota de gua destilada colocada no centro da lmina. Em seguida, espalhou-se essa suspenso numa rea maior e deixou-se secar em temperatura ambiente. Aps secagem, procedeu-se fixao do esfregao, passando-se o lado oposto da lmina, trs a quatro vezes na chama do bico de Bunsen. Essas preparaes foram, ento, coradas pelo mtodo de colorao diferencial de Gram. Esse mtodo de colorao foi desenvolvido em 1884 e um dos procedimentos de colorao mais teis e comumente aplicados para identificao das bactrias. A cor das clulas bacterianas, depois de coradas pelo mtodo, permite classificar as bactrias em dois grandes grupos: gram-positivas e gram-negativas (TORTORA, FUNKE E CASE, 2005). A colorao de Gram mais consistente quando usada em bactrias jovens, em crescimento. Assim, todas as lminas foram preparadas e coradas aps 24 horas de incubao da cultura. 4.4. Anlise Estatstica dos Dados Neste trabalho, utilizaram-se os mtodos estatsticos recomendados por Barbetta, Reis e Bornia (2008) para estimar o intervalo de 95% de confiana para a mdia dos conjuntos de dados amostrados. Para construir os diagramas de pontos e de caixas utilizou-se o programa estatstico Minitab. 4.5. Seleo dos Ambientes de Estudo Para atingir os objetivos deste trabalho, foram selecionados trs ambientes do Hospital Universitrio Professor Polydoro Hernani de So Thiago, da Universidade Federal de Santa Catarina (HU/UFSC), em Florianpolis (SC), onde se realizou os estudos de caso na aferio da qualidade do ar. O HU atua em quatro reas bsicas: clnica mdica, cirrgica, pediatria e tocoginecologia, sendo que o centro obsttrico e a unidade de neonatologia foram implantados em 1995. Atuando nos trs nveis de assistncia, o bsico, o secundrio e o tercirio, o HU , tambm, referncia estadual em patologias complexas, clnicas e cirrgicas, com grande demanda na rea de cncer e cirurgia de grande porte, nas diversas especialidades. Escolheram-se setores onde os pacientes apresentam um estado de sade comprometido ou enfraquecido, reduzindo a sua resistncia infeco hospitalar. Seguindo este critrio, foram selecionados trs ambientes dentro do Hospital Universitrio da UFSC: Unidade de Terapia Intensiva (UTI); Unidade de Terapia Intensiva Neonatal (UTN); Centro Cirrgico (CC).

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Segundo a resoluo RE n 9 da ANVISA (BRASIL, 2003), deve-se estabelecer um ponto de amostragem para cada 1.000 m2 de rea construda. Assim, foi estabelecido um ponto de amostragem em cada um dos locais citados, que possuem reas bem inferiores a 1.000 m2. Realizou-se um cronograma de amostragens diferente para cada um destes ambientes, conforme as particularidades de uso de cada um, e os mesmos parmetros foram avaliados nos trs ambientes.
4.5.1. Unidade de Terapia Intensiva Adulto (UTI)

O HU/UFSC possui uma UTI inteiramente nova, construda em uma nova ala do hospital, inaugurada no dia 25 de fevereiro de 2008. Com 20 leitos, a nova UTI substituiu a antiga UTI, com capacidade de 7 leitos, que foi desativada. Apesar de possuir 20 vagas, a nova UTI apresentava ocupao de apenas 7 leitos nas datas das amostragens, pois os demais leitos ainda no tinham sido ativados. Como esta rea foi instalada em um bloco recm-construdo do hospital, o sistema de ventilao tambm de instalao recente. O sistema do tipo fan-coil e possui termostato e controle de temperatura e umidade no prprio ambiente (Figura 17). O sistema contm um filtro grosso (classe G3) na entrada do sistema de ventilao, dois filtros bolsa (classe F7) e dois filtros absolutos (classe A3), em paralelo. Utilizou-se o termo-anemmetro Airflow para a medio da velocidade mdia das correntes de ar no ambiente. Os demais parmetros avaliados esto descritos a seguir.

Figura 17: Painel de controle de temperatura e umidade da UTI

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Amostragem para anlise qualitativa de COV

As amostragens de COV foram feitas em uma campanha, onde dois cartuchos foram amostrados simultaneamente. A amostragem foi feita a 1,50m de altura do cho, em posio central na UTI. A Tabela 2 mostra os detalhes desta amostragem.
Tabela 2: Detalhes da amostragem de COV na UTI

Amostra 1 2

Data 22/04/2008

Hora 15:05 16:06

Vazo de amostragem 83 mL/min 86 mL/min

Tempo de amostragem 61 min 61 min

Volume amostrado 5075 mL 5252 mL

Amostragem de bioaerossis

Foram retiradas dez amostras, com as amostragens feitas em dois dias distintos, uma no perodo matutino e outra no perodo vespertino. As amostragens foram feitas a 1,20m de altura do cho, entre os leitos 4 e 5 (Figura 18). Infelizmente, no foi possvel realizar a amostragem distante de qualquer parede para no atrapalhar o trnsito da equipe mdica da UTI. Durante estas amostragens, foram feitas medies da concentrao de CO2, temperatura e umidade relativa do ar.

Figura 18: Local de amostragem na UTI

No primeiro dia de amostragem, foram utilizadas trs placas de cada meio de cultura e, no segundo dia de amostragem, apenas duas placas com cada meio de cultura foram empregadas. A Tabela 3 mostra detalhes destas amostragens.

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Tabela 3: Detalhes da amostragem de bioaerossis na UTI

Amostra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Data

25/03/08

31/03/08

Hora 16:10 16:20 16:22 16:32 16: 35 16:45 16:50 17:00 17:00 17:10 17:15 17:25 8:40 8:50 8:50 9:00 9:00 9:10 9:10 9:20

Meio de Cultura* ASD ASD ASD ASC ASC ASC ASD ASD ASC ASC

* ASD: gar Sabouraud dextrose; ASC: gar sangue de carneiro

4.5.2. Unidade de Terapia Intensiva Neonatal (UTN)

Localizada dentro da unidade de neonatologia do HU, a UTN tem capacidade para 6 leitos e recebe os pacientes recm-nascidos que esto em estado crtico, necessitando de observao e cuidados intensivos. A sala tem 45m2 de rea. O sistema de ar condicionado tambm do tipo fan-coil, mas esse sistema existe desde 1982. Assim como na UTI adulto, o sistema tambm contm um filtro grosso (classe G3) na entrada do sistema de ventilao, dois filtros bolsa (classe F7) e dois filtros absolutos (classe A3, ou HEPA). Utilizou-se o termo-anemmetro Airflow para a medio da velocidade mdia das correntes de ar no ambiente. Os demais parmetros avaliados esto descritos a seguir.
Amostragem de COV

As amostragens de COV foram feitas em uma campanha, onde dois cartuchos foram amostrados simultaneamente. A amostragem foi feita a 1,50m de altura do cho, em posio central na UTN. A Tabela 4, a seguir, mostra os detalhes desta amostragem.
Tabela 4: Detalhes da amostragem de COV na UTN

Amostra 1 2

Data 08/03/2008

Hora 15:30 - 16:05

Vazo de amostragem 147 mL/min 143 mL/min

Tempo de amostragem 35min 35 min

Volume amostrado 5145 mL 5005 mL

Amostragem de bioaerossis

Assim como na UTI adulto, as amostragens de fungos e bactrias foram feitas em dois dias distintos, uma no perodo matutino e outra no perodo vespertino. Tanto no primeiro quanto

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no segundo dia de amostragens haviam de 0 a 5 pessoas na sala, entre pais e pessoas da equipe mdica. No total, foram retiradas 12 amostras desse ambiente. As amostragens foram feitas a 1,20m de altura do cho, no centro da sala. Durante essas amostragens, foram feitas medies da concentrao de CO2, temperatura e umidade relativa do ar. A Tabela 5, a seguir, mostra os detalhes dessas amostragens e a Figura 19 mostra o local onde foram feitas as amostragens.
Tabela 5: Detalhes da amostragem de bioaerossis na UTN

Amostra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Data

08/03/08

25/03/08

Hora 9:30 9:40 9:44 9:54 9:55 10:05 10:10 10:20 10:25 10:35 10:35 10:45 14:40 14:50 14:52 15:02 15:05 15:15 15:20 15:30 15:35 15:45 15:50 16:00

Meio de Cultura* ASD ASD ASD ASC ASC ASC ASD ASD ASD ASC ASC ASC

* ASD: gar Sabouraud dextrose; ASC: gar sangue de carneiro

Figura 19: Local de amostragem na UTN

Neste ambiente tambm foi realizado o estudo da sedimentao de fungos em meio de cultura (amostragem passiva). A Tabela 6 descreve as campanhas de amostragem realizadas, onde somente Placas de petri com o meio ASD (agar Sabouraud dextrose) foram utilizadas.

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Tabela 6: Detalhes da amostragem passiva de fungos na UTN

Data 03/01/08

09/01/08

15/01/08

25/01/08

08/03/08*

Nmero de amostras 1 1 1 1 1 1 3 3 3 3 3 3 3 3 3

Tempo de exposio 10 min 30 min 60 min 10 min 30 min 60 min 10 min 30 min 60 min 10 min 30 min 60 min 10 min 30 min 60 min

*Amostragem realizada em paralelo com a amostragem ativa

4.5.3. Centro cirrgico (CC)

O centro cirrgico possui 5 salas de cirurgias e uma sala de recuperao ps-cirrgica. Em cada sala so realizadas cirurgias agendadas ou emergenciais. As cirurgias agendadas se iniciam s 8:00 h da manh e, medida que vo sendo feitas, a sala limpa e recebe novas cirurgias agendadas ou emergenciais. As atividades agendadas so encerradas ao final da tarde, em torno das 19 h. Aps esse horrio, somente cirurgias emergenciais so realizadas. O centro cirrgico funciona de forma ininterrupta, 24 horas por dia. Em cada sala de cirurgia existe, alm do sistema de ar condicionado central, uma unidade de ar condicionado de janela. A manuteno dessas unidades de pequeno porte feita quinzenalmente, conforme planilhas localizadas ao lado de cada aparelho. O sistema de ar condicionado central do tipo fan-coil, havendo unidades independentes para cada sala de cirurgia. Assim, o sistema pode ser ligado ou desligado em cada sala de cirurgia de forma independente, atravs de um painel central de controle. Portanto, cabe equipe que trabalha em cada sala ligar ou desligar o sistema de ar condicionado conforme a necessidade de climatizao. Cada sistema de ar condicionado provido com um filtro grosso (classe G3) na entrada de ar, um filtro bolsa (classe F7) e um filtro absoluto (classe A3, ou HEPA). As amostragens foram feitas em duas salas de cirurgia, a sala n01 e a sala n03. Cada sala de cirurgia foi amostrada no decorrer de um dia de funcionamento, do incio ao fim da utilizao

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da sala. Utilizou-se o termo-anemmetro Airflow para a medio da velocidade mdia das correntes de ar em cada sala de cirurgia e tambm para medir a vazo da entrada de ar do sistema de ar condicionado. Os demais parmetros analisados esto descritos nos itens a seguir.
Sala de cirurgia n 01

A sala de cirurgia n 01 geralmente a sala mais utilizada, por apresentar rea ligeiramente maior do que as demais e por ser mais bem-equipada. Essa sala foi amostrada no dia 31 de maro de 2008. Durante esse dia, ocorreu uma cirurgia com durao aproximada de 7 horas, incluindo a reconstruo do trnsito intestinal do paciente. A temperatura mdia externa era de 29oC e o tempo era ensolarado, com vento fraco, soprando da direo nordeste. O aparelho amostrador foi colocado sobre uma mesa em ao inoxidvel com 1,20m de altura, localizada a 1m da equipe mdica, que ocupava o entorno da mesa de cirurgia (Figura 20; Figura 21). A sala de cirurgia no 1 possui 27,5 m2 de rea e nela havia 0 a 12 pessoas no decorrer do dia.

Figura 20: Momento da amostragem na sala de cirurgia no1

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Figura 21: Croquis simplificado da sala de cirurgia no1, mostrando o local da amostragem e sua posio em relao mesa de cirurgia posicionado no centro da sala.

Amostragem de COV

As amostragens de COV foram feitas em trs momentos no decorrer do dia, durante a cirurgia. Em cada momento dois cartuchos foram amostrados simultaneamente, exceto no ltimo momento, em que apenas um cartucho foi amostrado. A amostra no5 a nica que diferiu das demais em termos da sua posio no momento da amostragem. Para averiguar a qualidade do ar expelido pelo aparelho de respirao do paciente, que era mantido sedado por medicao intravenosa e tambm por medicao via area, coletou-se essa amostra diretamente na sada do sistema de purga (Figura 22).

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Figura 22: Retirada da amostra no5 de COV da sala de cirurgia no1

O Quadro 6 apresenta alguns detalhes sobre os dois compostos mais usualmente administrados como sedativo os pacientes do centro cirrgico do HU.
Quadro 6: Informaes sobre os sedativos utilizados via area no centro cirrgico

Nomenclatura usual Nomenclatura UIPAC Frmula qumica Peso molecular (PM) Ponto de ebulio (PE)

Isoflurano 2-cloro-2-(difluorometoxi)1,1,1-trifluoretano C3H2ClF5O 184,5 g/mol 48,5 C

o

Sevoflurano 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2(fluorometoxi)propano C4H3F7O 200g/mol 58,6oC

A Tabela 7 mostra a data, hora e os parmetros usados na amostragem de COV.

Tabela 7: Detalhes da amostragem de COV na Sala de cirurgia n 1

Amostra 1 2 3 4 5

Data

Hora 10:15 11:00

31/03/2008

14:20 15:16 16:55 17:30

Vazo de amostragem 117 mL/min 118 mL/min 90 mL/min 90 mL/min 143 mL/min

Tempo de amostragem 45min 45 min 56min 56 min 35min

Volume amostrado 5265 mL 5310 mL 5040 mL 5040 mL 5005 mL

Amostragem de bioaerossis

Foram retiradas 18 amostras no decorrer do dia, das quais 10 foram feitas com meio de cultura seletivo para fungos e 8 com meio de cultura seletivo para bactrias. Durante estas amostragens, foram feitas medies da concentrao de CO2, temperatura e umidade relativa do ar. A Tabela 8 mostra os detalhes dessas amostragens bem como a cronologia do funcionamento da sala de cirurgia neste dia.

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Tabela 8: Detalhes da amostragem de bioaerossis na sala de cirurgia n1

Amostra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 -

Hora 7:00 7:20 7:30 7:35 7:45 7:50 8:00 8:03 8:13 10:15 10:45 11:05 11:15 11:16 11:26 11:30 11:40 11:40 11:50 13:10 13:20 13:24 13:34 13:38 13:48 13:50 14:00 15:20 15:30 15:32 15:42 15:45 15:55 15:58 16: 08 17:35 17:40 17:50 17:53 17:53 17:56

Meio de Cultura* ASD ASD ASC ASC ASD ASD ASC ASC ASD ASD ASC ASC ASD ASD ASC ASC ASD ASD -

Atividade na sala14 Ligou-se o ar condicionado central Ningum na sala 2 enfermeiras preparando a sala Sala preparada, enfermeiras sentadas aguardando a chegada do paciente Paciente sendo preparado e anestesiado, 10 a 12 pessoas na sala Incio da cirurgia

Durante a cirurgia: 6 a 10 pessoas na sala, com pouca movimentao entorno do paciente. As portas foram abertas e fechadas conforme a entrada e sada de pessoas. Tanto o sistema de ar condicionado central como a unidade de janela permanecem ligados.

Trmino da cirurgia Desligou-se o AC, a equipe de 3 pessoas acordou e preparou o paciente para transferncia da sala O paciente foi retirado da sala

* ASD: gar Sabouraud dextrose; ASC: gar sangue de carneiro

Sala de cirurgia n 03

No dia 26 de maro de 2008, escolheu-se a sala de cirurgia n 3 para exame da qualidade do ar no decorrer do dia. Essa sala foi escolhida por que apresentava a escala de cirurgias mais longa para aquele dia, pois a sala de cirurgia n1 estava desativada. O motivo para isto era um problema de infiltrao na laje do hospital, que provocava um vazamento de gua para dentro do sistema de ar condicionado do fan-coil da sala n1. Esta sala voltou a operar alguns dias depois, aps a retirada da gua do sistema. Foram realizadas duas cirurgias na sala n 3 nesse dia. Primeiramente uma histerectomia15 e, depois, uma cirurgia incluindo colecistectomia16 e gastroplastia17. Nesse dia, a temperatura
14 15

A contagem de pessoas na sala exclui o paciente e a responsvel pela amostragem. Cirurgia de remoo do tero 16 Cirurgia de remoo da vescula

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mdia externa era de 27oC e o tempo era nublado, com vento fraco da direo nordeste. A Figura 23 ilustra o momento da amostragem e a Figura 24 mostra um croquis simplificado dessa sala de cirurgia, indicando a posio da mesa onde foram colocados todos os amostradores e medidores. Essa mesa a mesma usada para a amostragem na sala no1 e ficou localizada a aproximadamente 1m da equipe mdica, que ocupava o entorno da mesa de cirurgia. A sala de cirurgia no 3 possui 22,5 m2 e foi ocupada com 0 a 8 pessoas no decorrer do dia.

Figura 23: Amostragem na sala de cirurgia n3

17

Cirurgia de reduo de estmago

80

Figura 24: Croquis da sala de cirurgia n3.

Amostragem de COV

A retirada de amostras para anlise de COV foi feita em trs momentos no decorrer do dia e, em cada momento, dois cartuchos foram amostrados. A Tabela 9, a seguir, apresenta os detalhes da amostragem de COV neste ambiente.
Tabela 9: Detalhes da amostragem de COV na Sala de cirurgia n 3

Data

Amostra 1 2 3 4 5 6

Hora 08:00 11:00 13:20 15:16 18:35 17:30

26/03/2008

Vazo de amostragem 90 mL/min 110 mL/min 164 mL/min 167 mL/min 100 mL/min 102 mL/min

Tempo de amostragem 56 min 46 min 31 min 30 min 50 min 50 min

Volume amostrado 5040 mL 5060 mL 5084 mL 5010 mL 5000 mL 5100 mL

Amostragem de bioaerossis

Foram coletadas 24 amostras no decorrer do dia, 12 delas utilizaram meio de cultura seletivo para fungos e 12, meio de cultura seletivo para bactrias. A primeira amostragem do dia teve incio s 7:15 h, antes da chegada do primeiro paciente, e a ltima amostragem do dia foi finalizada s 20:50 h, aps a limpeza da sala depois da ltima cirurgia do dia.

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Durante as amostragens, foram feitas medies da concentrao de CO2, temperatura e umidade relativa do ar. A Tabela 10 mostra os detalhes dessas amostragens e, tambm, do funcionamento da sala de cirurgia neste dia.
Tabela 10: Detalhes da amostragem de bioaerossis na sala de cirurgia no 3

Amostra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

Hora 6:55 7:15 7:25 7:30 7:40 7:52 8:02 8:05 8:15 9:30 10:10 10:20 10:25 - 10:35 10:40 - 10:50 10:55 - 11:05 12:40 13:10 13:20 13:20 13:30 13:35 13:45 13:45 13:55 14:20 15:00 - 15:10 15:18 - 15:28 15:30 - 15:40 15:42 - 15:52 17:40 - 17:50 17:53 - 18:03 18:05 - 18:15 18:18 - 18:28 18:40 20:05 - 20:15 20:16 - 20:26 20:28 - 20:38 20:40 - 20:50

Meio de Cultura ASC ASC ASD ASD ASD ASD ASC ASC ASC ASC ASD ASD ASC ASC ASD ASD ASC ASC ASD ASD ASC ASC ASD ASD

Atividade na sala Ligou-se o ar condicionado central Ningum na sala Preparo da sala, e entrada do paciente (2 enfermeiras e anestesista). Incio da cirurgia. Ligou-se o AC de janela Durante a cirurgia: equipe mdica de 5 pessoas. Portas foram abertas e fechadas conforme a entrada e sada de pessoas. Tanto o sistema de ar condicionado central como a unidade de janela permanecem ligados. Trmino da primeira cirurgia Aps a limpeza da sala18, durante o preparo da mesma para a prxima cirurgia (2 enfermeiras) Incio da segunda cirurgia Durante a cirurgia: equipe mdica de 8 pessoas. Portas foram abertas e fechadas conforme a entrada e sada de pessoas. Tanto o sistema de ar condicionado central como a unidade de janela permanecem ligados. Trmino da segunda cirurgia. Aps a limpeza da sala.

* ASD: gar Sabouraud dextrose; ASC: gar sangue de carneiro

18

A limpeza da sala foi feita com pano mido e gua com pequena quantidade de hipoclorito de sdio.

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4.5.4. Sistema de Ar Condicionado

Realizou-se, tambm, uma amostragem de bioaerossis dentro da unidade FC-4 (fan-coil n4) do sistema de ar condicionado do hospital. Essa unidade promove a climatizao exclusiva da sala de cirurgia n 3 do centro cirrgico. Juntamente com a equipe de manuteno do hospital, retiraram-se chapas dos dutos de ventilao e posicionou-se o amostrador de bioaerossis em diferentes pontos do sistema, para avaliar a eficincia de seus filtros. A Figura 25 apresenta uma representao esquemtica dos locais amostrados e a Figura 26 mostra o momento da abertura do duto e da insero do amostrador.

Figura 25: Pontos de amostragem (1,2,3) no sistema de ar condicionado e ponto 4 (no ambiente externo).

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Figura 26: Amostragem no sistema de ar condicionado

Segundo a prpria equipe de manuteno, os filtros haviam sido trocados dois meses antes da data da amostragem. Foram retiradas duas amostras de cada posio, totalizando 8 amostras, no meio de cultura gar Sabouraud Dextrose (para observar o crescimento de fungos). Iniciou-se a amostragem no ponto mais jusante do sistema, para evitar que uma possvel contaminao do amostrador de Andersen, devido ao uso em condies mais concentradas, interferisse nos resultados, amostrando assim, na ordem numrica dos pontos: 1, 2, 3 e, finalmente, o ponto 4. Verificou-se que s era possvel ligar o amostrador aps o fechamento do duto. Assim, o amostrador era ligado e s depois o filtro era colocado de volta no duto; depois o duto era fechado e o ventilador do ar condicionado era ligado. Este procedimento levava em torno de 30 segundos. Foi observado, ento, que estava sendo amostrado o ar deste local externo, e, alm disso, as placas de Petri tiveram que ser manuseadas nesse ambiente. Portanto, foi necessrio, usar mais duas placas para amostragem durante um perodo de 30 segundos, para servir como testemunhas das condies do ambiente. A Tabela 11 mostra os detalhes dessas amostragens.

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Tabela 11: Detalhes da amostragem de bioaerossis no sistema de ar-condicionado

Data

27/03/2008

Amostra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Hora 15:20 15:21 15: 25 15:26 15:30 15:40 15:45 15:55 16:05 16:15 16:20 16:30 16:35 16:45 16:50 17:00 17:15 17:25 17:27 17:37

Ponto de amostragem 0. Branco do local 1. A jusante do filtro absoluto 2. Entre o filtro-bolsa e o filtro absoluto 3. A montante do filtro-bolsa 4. Ponto externo

Para o clculo da eficincia ( ) de cada filtro se utilizou a seguinte equao: 100

(%)

Equao 1

Onde: : Eficincia do equipamento (%) A: Concentrao mdia de bioaerossis montante do filtro B: Concentrao mdia de bioaerossis jusante do filtro
4.5.5. Ponto Externo (PE)

Para fins comparativos, realizaram-se amostras em um ponto externo ao hospital universitrio, em uma clarabia no 5 andar do prdio, pelo lado externo (Figura 27). Esse local permite o acesso ao telhado do hospital pela equipe de manuteno. Assim, o local mais prximo de onde feita a captao de ar para os sistemas fan-coil de ar condicionado central. Ele foi escolhido devido dificuldade operacional de acesso ao ponto de tomada de ar.

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Figura 27: Ponto externo de amostragem

Nesse local foi feita uma campanha de amostragens de COV e diversas campanhas de amostragens de fungos e CO2. A Tabela 12 mostra os detalhes da amostragem de COV.
Tabela 12: Detalhes da amostragem de COV no ponto externo

Amostra 1 2

Data 22/04/2008

Hora 15:25 16:56

Vazo de amostragem 160 mL/min 161 mL/min

Tempo de amostragem 31min 31 min

Volume amostrado 4966 mL 4991 mL

Quanto s anlises microbiolgicas, coletaram-se amostras apenas com o meio gar Sabouraud dextrose, para comparar a concentrao de fungos quela dos ambientes internos. Foram coletadas 7 amostras no total, em 3 dias diferentes. Nas ltimas trs amostras coletadas, o volume amostrado foi de apenas 140L, e nas demais amostras foram coletados 280L. A Tabela 13, a seguir, mostra os detalhes das amostragens de fungos no ponto externo.
Tabela 13: Detalhes da amostragem de bioaerossis no ponto externo

Data 08/03/08 25/03/08 22/04/08

Amostra 1 2 3 4 5 6 7

Hora 11:08 - 11:18 11:21 - 11:31 11:31 - 11:41 17:40 - 17:50 15:30 - 15:35 15:37 - 15:42 15: 43 15:48

Vazo de amostragem 28 L/min 28 L/min 28 L/min 28 L/min 28 L/min 28 L/min 28 L/min

Tempo de amostragem 10 min 10 min 10 min 10 min 5 min 5 min 5 min

Volume amostrado 280L 280L 280L 280L 140L 140L 140L

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5. RESULTADOS E DISCUSSO
Neste captulo, os resultados obtidos para a avaliao da qualidade do ar no Hospital Universitrio da UFSC so apresentados e discutidos. Os resultados foram agrupados considerando os parmetros de medio, para facilitar a sua visualizao e a discusso, permitindo uma comparao entre os trs ambientes estudados. 5.1. Velocidade das correntes e renovao de ar nos ambientes Ao medir a velocidade das correntes e a renovao de ar nos diferentes ambientes estudados, observou-se que em nenhum momento a velocidade excedeu o valor mximo recomendado pela resoluo RE no9 da ANVISA (BRASIL, 2003), e pela ASHRAE, nos Estados Unidos (KWOC, 2004), de 0,25 m/s (Tabela 14). Isso significa que este parmetro de conforto est sendo respeitado nos ambientes estudados, garantindo a movimentao do ar no ambiente interno sem causar incmodo ou afetar a produtividade dos usurios do ambiente.
Tabela 14: Velocidade das correntes de ar

Local UTI UTN CC Sala 1 CC Sala 3

* **

n* 5 5 5 5

Velocidade [m/s]** 0,16 0,09 0,15 0,10

Tamanho da amostra (ou nmero de medies). Valor mximo medido.

Tambm foi feita uma aferio das vazes insufladas nas salas 1 e 3 do centro cirrgico. Os resultados da velocidade e de vazo medidos nos locais esto descritos na Tabela 15.
Tabela 15: Vazo de insuflamento no centro cirrgico

Local CC Sala 1 CC Sala 3

n* 10 10

Velocidade mdia [m/s]** Insuflador 1 2,88 3,06 Insuflador 2 2,90 2,05

rea da seo retangular [m2] 0,15 0,15

Vazo Total [m3/h] 3.120 2.755

*Tamanho da amostra (ou nmero de medies) por insuflador. **H dois insufladores de dimenses idnticas em cada sala.

A vazo de projeto de cada sistema a mesma, de 2.516m3/h, dos quais 460 m3/h vem do ar externo, o que d uma taxa de recirculao de aproximadamente 82%. Assim, considerandose esses valores de projeto e as vazes efetivamente medidas (Tabela 15), verificou-se uma taxa de renovao do ar suficiente para uma ocupao de 10 pessoas em cada sala de cirurgia, o que corresponde ocupao mxima observada (Tabela 16).

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Tabela 16: Taxa de renovao de ar

Local CC Sala 1 CC Sala 3

ocupao mxima observada 10 10

Vazo do ar de renovao [m3/h] 570,4 503,7

Taxa de renovao do ar [m3/h.pessoa] 57,0 50,4

Trocas Ocupao mxima de ar por calculada [pessoas] hora 44 21 47 19

Considerando-se 10 pessoas em cada sala, observou-se que a taxa de renovao medida para cada sala foi superior a 27m3/h.pessoa, valor recomendado pela resoluo RE no 09 da ANVISA (BRASIL, 2003). Calculou-se, tambm, qual seria a ocupao mxima de cada sala obedecendo a este requisito. Observou-se que, ainda com 21 e 19 pessoas nas salas de cirurgia no 01 e 02, respectivamente, seria obedecida a legislao. O nmero de trocas de ar por hora, 44 para a Sala 1 e 47 para a Sala 2, foi superior quele recomendado pelo Centro de Controle de Doenas (CDC) e pela Associao Americana de Hospitais, dos Estados Unidos, que indicam 25 trocas de ar por hora com 20% de renovao do ar (LIMA DE PAULA, 2003). Este resultado confirmou que o sistema de ar condicionado dos ambientes estudados se encontra operando de maneira apropriada em relao sua vazo. O correto grau de troca do ar de ambientes hospitalares fundamental para garantir que no esteja ocorrendo acmulo de possveis contaminantes do ar interno, que poderiam prejudicar no somente a sade do paciente mas tambm da equipe mdica. 5.2. Concentrao de CO2, temperatura e umidade relativa do ar nos ambientes Os resultados da concentrao de CO2, temperatura (T) e umidade relativa do ar (UR) obtidos para cada ambiente foram apresentados na Tabela 17. Os valores de temperatura e umidade apresentaram uma variao ligeira, o que pode ser observado pela magnitude do intervalo de confiana da mdia.

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Tabela 17: Concentrao de CO2, temperatura e umidade nos ambientes

Local UTI UTI UTN UTN CC Sala 1 CC Sala 3

Data 25/03/08 31/03/08 08/03/08 25/03/08 31/03/08 26/03/08

Hora

n*

16:10 16:30 21 08:35 09:25 51 11:40 11:53 14 14:40 15:11 32 07:20 18:24 422 07:20 20:31 163

CO2 [ppm] mdia mximo 567 10 635 608 6 631 484 3 495 417 2 685 321 19 729 618 30 917

T [oC] 24,6 0,1 25,0 0,0 28,4 0,2 26,1 0,1 23,8 0,1 25,7 0,1

UR [%] 64,6 0,2 64,7 0,2 51,1 0,1 51,1 0,2 59,1 0,2 51,7 0,7

*Tamanho da amostra (ou nmero de medies). Os valores representam as mdias de cada conjunto de dados juntamente com o seu intervalo de 95% de confiana. Para o CO2 tambm apresentado o valor mximo observado.

Em relao temperatura dos ambientes, apenas a UTN apresentava-se acima da faixa recomendada (de 20 a 27oC) pela resoluo RE no 9 da ANVISA (BRASIL, 2003). Esse fato ocorreu no dia 08/03/2008 e a diferena foi de 1,4oC, provavelmente por que que as medies foram efetuadas na estao mais quente do ano. Quanto umidade relativa do ar, todos os ambientes operavam dentro da faixa recomendada (de 40% a 65%) pela ANVISA. KWOC (2004) cita a temperatura e a umidade relativa, juntamente com a velocidade das correntes de ar, como fatores determinantes no conforto trmico dos usurios de uma edificao. Assim, considerando-se os resultados obtidos possvel afirmar que as condies de conforto dentro do hospital universitrio esto sendo satisfeitas. Observou-se que em nenhum momento a concentrao de CO2 ultrapassou o limite de 1000 ppm recomendado pela ANVISA. O Grfico 1 apresenta os valores da concentrao de CO2 nos diferentes locais de estudo.

Grfico 1: Diagrama de caixas das medies de CO2 nos trs ambientes

Como o nmero de medies foi diferente em cada dia de amostragem, so compreensveis as diferenas visuais entre os diagramas de caixas de cada medio. Foram feitas medies em

89

cada ambiente em dois dias diferentes, e cada um destes representado por uma coluna no diagrama (ex: UTN1 e UTN2 representam, respectivamente, as duas medies realizadas na UTI neonatal). Observaram-se diferenas significativas entre os valores medidos, o que pode ser explicado pelo fato de a concentrao de CO2 ser diretamente dependente do grau de ocupao do ambiente. Em quase todos os ambientes avaliados, excluindo-se apenas as salas do centro cirrgico, observou-se que a equipe mdica, as visitas e os pacientes entravam e saam dos ambientes freqentemente. Em relao s salas de cirurgia, uma anlise visual do diagrama de caixas permite observar diferenas significativas nas concentraes de CO2 de uma sala de cirurgia em relao outra. Na sala de cirurgia no1, observaram-se valores mais baixos para a concentrao de CO2, com um valor mnimo observado de 146ppm. possvel que a ocorrncia de uma cirurgia nessa sala, com mais de 7 horas de durao, tenha contribudo para esse resultado. Durante a cirurgia, o paciente foi mantido inconsciente atravs de sedativo por via intravenosa e tambm por via area, porm em menor intensidade. Observou-se que o equipamento de respirao artificial insuflava ar sinttico com 50% de oxignio para o paciente. Por sua vez, o ar expirado pelo paciente era filtrado por um material adsorvente, para remover o CO2 e qualquer sedativo remanescente. O sistema funcionava a uma vazo de 1L/min e o efluente gasoso era lanado na sala de cirurgia. Assim, verificou-se que houve introduo de 500mL/min de oxignio na sala e mais 500mL/min de ar sinttico sem CO2, o que pode ter contribudo para a queda da concentrao deste gs. Depois do trmino da cirurgia se observa um aumento na concentrao de CO2 no ambiente, provavelmente devido ao desligamento desse aparelho. Quando se observam as mdias horrias da concentrao de CO2 e do grau de ocupao da sala de cirurgia no 1 (Grfico 2), percebe-se que o perodo com maior concentrao de CO 2 foi tambm o perodo com maior ocupao da sala. Observou-se, tambm, um decrscimo na taxa de ocupao da sala no perodo das 13 s 17 horas, o que, juntamente com a insero de ar desprovido de CO2 no ambiente, acarretou uma reduo da concentrao de CO2 abaixo do nvel mdio no ambiente externo (de 321ppm).

90

600 500 400 300 200 100 0

07:00 08:00 09:00 10:00 11:00 12:00 13:00 14:00 15:00 16:00 17:00 18:00

12 10 8 6 4 2 0

Concentrao de CO2

Ocupao da sala

Grfico 2: Concentrao de CO2 e grau de ocupao na sala de cirurgia no 1

Considerando-se apenas os dados obtidos durante as cirurgias (das 10:00 s 17:00h), observou-se uma excelente correlao (R= 0,99) entre a concentrao de CO2 e o grau de ocupao da sala (Grfico 3). As concentraes de CO2 mais altas no incio e no fim do dia devem-se, provavelmente, abertura de portas, movimentao da equipe para dentro e fora da sala e ao desligamento do sistema de ar condicionado.

700 600 500 400 300 200 100 0 0 2 4 6 8 10 12 14 Nmero de ocupantes y = 65,389x - 158,73 R2 = 0,9789

Grfico 3: Relao entre a concentrao de CO2 e o grau de ocupao da sala de cirurgia no 1

Grficos foram obtidos para a sala de cirurgia no 3, onde so apresentadas as mdias horrias de concentrao de CO2 e o grau de ocupao da sala (Grfico 4).

91

900 800 700 600 500 400 300 200 100 0

9 8 7 6 5 4 3 2 1 0

Concentrao de CO2

Ocupao da sala

Grfico 4: Concentrao de CO2 e grau de ocupao na sala de cirurgia no 3

O Grfico 5 apresenta a correlao entre estes mesmos dados, medidos na sala de cirurgia n 3. Nesse ambiente, tambm observou-se uma boa relao entre a concentrao de CO2 e o nmero de pessoas no ambiente.

900 800 700 600 500 400 300 200 100 0 0 2 4 6 8 10 Nmero de ocupantes y = 61,994x + 307,76 R2 = 0,9537

Grfico 5: Relao entre a concentrao de CO2 e o grau de ocupao da sala de cirurgia no 3

5.3. Avaliao qualitativa de COV nos ambientes A anlise exploratria da presena de COV nos ambientes internos hospitalares estudados foi feita utilizando-se 17 amostras. Como pode ser observado no Quadro 7, foram detectados COV apenas na UTI e nas duas salas avaliadas no centro cirrgico. O nico composto identificado simultaneamente nesses trs locais foi um composto orgnico de funo mista lcool-alceno (4-penten-2-ol). Na sala de cirurgia n1, o nico composto aromtico

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identificado foi o etilbenzeno, em apenas uma amostra retirada dessa sala. Spengler, Chen e Dilwali (2004) citam, como principais fontes de etilbenzeno no ar interno: cola de papel de parede, espuma de insulamento, madeira aglomerada e compensada, materiais selantes, produtos desengordurantes e de limpeza. Como no h materiais de madeira na sala (exceto as prprias portas), pois toda a moblia metlica, a hiptese mais plausvel que este composto fosse oriundo de algum produto de limpeza aplicado anteriormente. A famlia de COV mais freqente foi a dos alcanos, encontrada em 24% das amostras analisadas.
Quadro 7: Compostos orgnicos volteis identificados em cada ambiente de estudo.

Composto Isobutano 2-penteno 2-metilbutano 1,5-hexadiino 2-etil-1-buteno 1-hexeno 4-metil-1-penteno 4-penten-2-ol 2-metilpentano cido-2-oxo-propanico 2-nitropropano 1,6-heptadiino 1-cloro-2-metilpropano 3-hexenal heptano etilbenzeno 1,6 heptanien-4-ol bis(1,1-dimetiletil) nitrxido hexafluor-dimetilsulfeto 2,3-dimetilpentano pentadecafluoroctanal

Ambiente* CC1; CC3 CC1 CC1 UTI CC1 CC1 CC3 CC1; CC3; UTI CC1 CC3 CC3 CC1 CC3 CC1 CC1 CC1 CC3 CC1 CC1; CC3 CC1 CC1

PM** [g/mol] 58 70 72 78 84 84 84 86 86 88 89 92 92 98 100 106 112 144 170 206 398

Frmula qumica C4H10 C5H10 C5H12 C6H6 C6H12 C6H12 C6H12 C5H10O C6H14 C3H4O3 C3H7O2N C7H8 C4H9Cl C6H10O C7H16 C8H10 C7H12O C8H18N C2F6S C7H16 C8HOF15

Famlia alcano alceno alcano alcino alceno alceno lcool alcano c. carboxlico alcano alcino alcano aldedo/alceno alcano aromtico lcool nitrxido haleto orgnico/sulfurado alcano haleto orgnico/lcool

*CC1: Sala no 1 do centro cirrgico; CC3: Sala no 3 do centro cirrgico; UTN: UTI neonatal. ** Peso molecular.

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Os dois compostos identificados na UTI tm seus picos indicados em ambos os cromatogramas (Grfico 6). Os demais picos que podem ser observados no puderam ser identificados pelo equipamento, ou tiveram uma probabilidade de identificao inferior a 75%, sendo, assim, caracterizados como rudos de anlise ou sangramento19 da coluna cromatogrfica.

Grfico 6: Cromatogramas das amostras coletadas na UTI

19

Sangramento: Desprendimento de compostos da fase fixa (coluna) ou de outras partes do processo de amostragem e separao dos compostos de interesse, que so depois detectados pelo equipamento como rudos da anlise ou como pertencentes amostra.

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O Grfico 7 mostra os cromatogramas das amostras coletadas na UTI neonatal (UTN) do HU/UFSC. Nenhum pico foi identificado com mais de 75% de certeza, comparando-se os seus espectros de massa com os da biblioteca NIST.

Grfico 7: Cromatogramas das amostras coletadas na UTN

J no Grfico 8, so apresentados os cromatogramas de cada amostra coletada na sala 1 do centro cirrgico. Primeiramente so mostrados os quatro cromatogramas das quatro primeiras amostras, coletadas de duas em duas no decorrer do dia. Os picos foram numerados e os nomes dos compostos referentes a cada pico identificado esto na legenda, logo abaixo do grfico. Em seguida, exibido o cromatograma da amostra retirada diretamente na sada do sistema de respirao artificial do paciente.

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Legenda 1 4-penten-2-ol 2 2-metilpentano 3 1-hexeno 4 bis(1,1-dimetiletil) nitrxido 5 heptano 6 3-hexenal 7 1,6-heptadiino

8 9 10 11 12 13 14

2-penteno 2,3-dimetilpentano 2-etil-1-buteno etilbenzeno Isobutano hexafluor-dimetilsulfeto 2-metilbutano

Grfico 8: Cromatogramas das amostras coletadas na sala no 1 do centro cirrgico

Neste mesmo local (sala n 1 do centro cirrgico), uma amostra foi coletada diretamente da sada do sistema de respirao artificial, para verificar a presena de algum composto remanescente do processo de sedao do paciente. O nico composto identificado nessa amostra foi o pentadecafluoroctanal, um hidrocarboneto de funo mista (haleto orgnico e lcool), com alto peso molecular (Grfico 9). Esse composto apresenta a mesma funo qumica dos sedativos usados, o isoflurano e o sevoflurano, que tambm so HC de funo mista, (haleto orgnico fluorados e lcool).

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Grfico 9: Cromatograma da amostra coletada na sada do sistema de respirao artificial

possvel que este pico seja, na realidade, a soma dos dois compostos (isoflurano e sevoflurano), j que a soma das massas moleculares dos dois compostos (384,5g/mol) se aproxima bastante da massa molecular deste pico (398g/mol). Os dois compostos tm funes orgnicas muito similares e pontos de ebulio prximos e, assim, possvel que com a ionizao eles tenham se combinado durante a anlise, formando um s pico no cromatograma. O aparelho ento gera, ento, um espectro de massas para cada pico, quer este seja de um composto ou de uma mistura de compostos.

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A seguir so apresentados os cromatogramas das amostras coletadas na sala no 3 do centro cirrgico (Grfico 10). Da mesma forma que no caso anterior, os compostos referentes a cada pico identificado so apresentados na legenda, logo abaixo do grfico.

Legenda 1 hexafluor-dimetilsulfeto 2 4-penten-2-ol 3 cido-2-oxo-propanico 4 Isobutano 5 4-metil-1-penteno

6 7 8 9

1,6 heptanien-4-ol Isobutano 1-cloro-2-metilpropano 2-nitropropano

Grfico 10: Cromatogramas das amostras coletadas na sala no 3 do centro cirrgico

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A seguir so apresentados os cromatogramas dos dois cartuchos coletados no ponto externo ao Hospital Universitrio (Grfico 11). Nenhum dos picos observados foi identificado com sucesso pelo espectrmetro de massa, sendo todos, ento, anlise. qualificados como rudos de

Grfico 11: Cromatogramas das amostras coletadas no ponto externo

O nmero de compostos orgnicos volteis (COV) identificados em todos os ambientes pequeno se comparado aos resultados de outros estudos disponveis em literatura. Nenhum COV foi obtido nas amostras retiradas da UTN, nem no ponto externo, em quantidade suficiente para permitir sua identificao. possvel que esse resultado deva-se ao fato de que no Brasil, com temperaturas mais amenas, os edifcios sejam menos selados ao ar externo, e as janelas sejam abertas com maior freqncia do que em pases no hemisfrio norte (de onde vem a maioria das publicaes no assunto). Desta forma, com a maior troca de ar com o ambiente externo, diminui o acmulo de COV provenientes da evaporao de produtos qumicos (produtos de limpeza, tintas e vernizes) ou mquinas e processos do ambiente interno.

99

5.4. Concentrao de bioaerossis nos ambientes

5.4.1. Amostragem Passiva

Quando se observam os resultados obtidos para a amostragem passiva de fungos filamentosos, na UTI neonatal (Tabela 18), possvel perceber a grande variabilidade de resultados obtidos para um mesmo dia de amostragem e a grande quantidade de dados nulos, que correspondem a 21,2% das amostras.
Tabela 18: Detalhes da amostragem passiva de fungos na UTN

Data

Nmero de amostras 1 1 1 1 1 1 3 3 3 3 3 3 3 3 3

Tempo de exposio 10 min 30 min 60 min 10 min 30 min 60 min 10 min 30 min 60 min 10 min 30 min 60 min 10 min 30 min 60 min

No de colnias observadas (mdia)** 2 3 5 0 1 6 1,5 2,3 4 1 3 3,3 1 1 1

03/01/08

09/01/08

15/01/08

25/01/08

08/03/08

Concentrao UFC/m2.h* ( media)** por tempo de por data exposio 1.886 1205 943 786 0 419 314 943 1415 734 629 629 943 803 943 524 943 192 314 157

* Unidades Formadoras de Colnia por hora e por metro quadrado. ** Os dados nulos (placas sem crescimento de fungos) no foram considerados no clculo da mdia.

Esse comportamento pode ser melhor observado num diagrama de pontos, onde cada ponto representa um dado coletado, conforme apresentado no Grfico 12.

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Grfico 12: Diagrama de pontos da concentrao de fungos atravs da amostragem passiva

Houve uma grande variabilidade nos resultados obtidos para cada campanha de amostragem, sendo o dia 25/01/2008 aquele que produziu os melhores resultados, com 6 dos 9 resultados numricos coincidindo entre si. Assim, possvel visualizar somente uma fraca relao entre o tempo de exposio das placas e o nmero de unidades formadoras de colnias, confirmando a baixa confiabilidade do mtodo de amostragem passiva para avaliao dos bioaerossis j relatada por outros autores (NAGDA e RECTOR, 2004).
5.4.2. Amostragem Ativa

Os resultados de amostragem ativa so apresentados na Tabela 19, obtidos para os dois meios de cultura, gar Sabouraud dextrose (ASD) e gar sangue de carneiro (ASC). Observou-se que em nenhum ambiente a concentrao mdia de fungos filamentosos desenvolvidos em ASD ultrapassou o valor mximo recomendado pela resoluo RE no 9 da ANVISA, de 750 UFC/m3 (BRASIL, 2003). O valor mximo no ambiente interno foi observado na UTN, com 351 UFC/m3. Nem mesmo no ambiente externo atingiu-se o valor mximo estabelecido. Entretanto, cabe salientar que a consulta pblica no 109 (que ainda no entrou em vigor), prope o valor mximo de somente 200 UFC/m3 para a contagem total de bactrias e fungos. Considerando-se esse valor, apenas a UTI Neonatal (no perodo da manh) e a sala no 01 do centro cirrgico estariam dentro dos padres recomendados.

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Tabela 19: Concentrao de bioaerossis nos ambientes

Local UTI UTI UTN UTN CC Sala 1 CC Sala 3 PE** PE PE

Data 25/03/08 (tarde) 31/03/08 (manh) 08/03/08 (manh) 25/03/08 (tarde) 31/03/08 26/03/08 08/03/08 (manh) 25/03/08 (tarde) 22/04/08 (tarde)

Concentrao mdia [UFC/m3] Fungos Bactrias Total (ASD)* (ASC)* (ASC+ASD) 191 162 353 86 843 929 62 54 116 351 337 688 133 38 171 160 189 349 436 *** 650 *** 726 ***

*ASD: amostras coletadas com gar Sabouraud Dextrose, contando-se somente os fungos filamentosos; ASC: amostras coletadas com gar Sangue de Carneiro, contando-se somente as colnias de bactrias. ** PE: Ponto externo *** Dado faltante (no foi amostrado)

Percebeu-se que tanto na UTI quanto na UTN, a concentrao de fungos foi maior no perodo da tarde. Entretanto, a concentrao de bactrias na UTI, foi maior no perodo da manh. Neste caso, de forma contraditria, o valor obtido para a alta concentrao de bactrias no ar no estava acompanhada de uma alta concentrao de fungos ou de uma alta taxa de ocupao no local. Embora os meios de cultura utilizados, gar Sabouraud dextrose e gar sangue de carneiro, apresentem um certo grau de seletividade, e favoream o crescimento de fungos e bactrias, respectivamente, observou-se um crescimento elevado de colnias de aparncia cremosa no ASD. Tais colnias poderiam ser de leveduras (fungos no filamentosos) mas poderiam, tambm, ser de natureza bacteriana. J nas 31 placas coletadas com ASC, quatro apresentaram o crescimento de fungos, correspondendo a 12,9% das amostras. A contagem total de microorganismos em ASD pode ser visualizada na Tabela 20.

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Tabela 20: Concentrao total de bioaerossis coletados com ASD

Local UTI UTI UTN UTN CC Sala 1 CC Sala 3

Data 25/03/08 (tarde) 31/03/08 (manh) 08/03/08 (manh) 25/03/08 (tarde) 31/03/08 26/03/08

Concentrao mdia [UFC/m3] fungos bactrias e contagem total filamentosos leveduras 120 191 311 134 86 220 50 62 112 329 351 680 20 133 153 160 -

Mesmo levando em considerao a contagem total de microorganismos em gar Sabouraud dextrose (ASD), e no apenas fungos filamentosos (Tabela 20), os valores observados em todos os ambientes estudados no ultrapassaram o valor mximo recomendado pela resoluo RE n 9 da ANVISA, de 750 UFC/m3 (BRASIL, 2003). A relao entre a concentrao de fungos filamentosos observada nos ambientes internos e no ambiente externo (I/E) encontrava-se muito abaixo do valor mximo recomendado pela resoluo RE n 9 da ANVISA, que de 1,5 (BRASIL, 2003). Para este clculo, utilizou-se a mdia dos resultados obtidos no ambiente externo, de 591 UFC/m3 (Tabela 21).
Tabela 21: Relao I/E

Local UTI UTI UTN UTN CC Sala 1 CC Sala 3

Data 25/03/08 (tarde) 31/03/08 (manh) 08/03/08 (manh) 25/03/08 (tarde) 31/03/08 26/03/08

Relao I/E 0,3 0,1 0,1 0,6 0,2 0,3

Um resultado superior a 1,0 para esta relao permitiria assumir que h acmulo de contaminantes biolgicos no ambiente interno. Nos ambientes avaliados, a concentrao de fungos filamentosos foi substancialmente inferior concentrao do ambiente externo. Kim e Kim (2007) tambm obtiveram resultados similares para a relao I/E em edifcios pblicos na Coria.
5.4.3. Concentrao de microorganismos e grau de ocupao dos ambientes

Para determinar o parmetro microbiolgico (concentrao de fungos ou de bactrias) que melhor representasse o grau de ocupao do ambiente, escolheram-se os resultados obtidos para as salas do centro cirrgico. A escolha das salas do centro cirrgico para determinao

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desse indicador baseou-se no fato de haver nessas salas maior quantidade de dados ao longo de um mesmo dia e, alm disso, foram determinantes a baixa intensidade de movimentao de pessoas para dentro e fora do ambiente assim como menor a movimentao de equipamentos pesados (como na UTI e na UTN). A concentrao mdia horria de fungos filamentosos e de bactrias e o nmero de ocupantes no ambiente, medidos nas salas de cirurgia no 1 e no 3 do centro cirrgico so apresentadas no Grfico 13.

Grfico 13: Relao entre a concentrao de fungos e bactrias e a ocupao das salas do centro cirrgico20

Deve-se salientar que a sala no 3 foi limpa duas vezes, em torno das 13:00hs e s 19:00hs, enquanto que a sala no 1 no foi limpa no passar do dia. Assim, cada grfico mostra uma realidade diferente, a de uma sala com uso contnuo durante o dia (sala no 1) e uma sala onde se realizaram duas cirurgias. A limpeza da sala n 3 pode ter acarretado em um decrscimo da concentrao de fungos e, apesar de ter havido um aumento da ocupao da sala no perodo da tarde, esse no foi acompanhado de um aumento da concentrao de fungos. Nunes (2005) observou, em seus resultados, que maiores concentraes de fungos so obtidas quando h maior concentrao de pessoas no ambiente. Entretanto, os grficos aqui apresentados no permitem afirmar se as diferenas observadas so estatisticamente significativas. No possvel afirmar que houve acmulo na concentrao de bioaerossis com o passar do tempo nos ambientes, refletindo mais as condies de uso dos locais. Observa-se, alm disso, que a concentrao de fungos aparenta refletir melhor as condies de ocupao da sala do que a concentrao de bactrias.
20

A concentrao de bactrias s 17hs na sala no 1 do centro cirrgico um dado faltante e no nulo.

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Entretanto, em nenhum dos dois casos foi possvel estabelecer uma relao matemtica entre os parmetros concentrao de microorganismos (fungos ou bactrias) e o grau de ocupao da sala, pois os coeficientes de correlao (R) foram muito baixos. possvel que outros fatores, alm do nmero de pessoas nas salas, possam ter contribudo para a maior ou menor concentrao de microrganismos nesses ambientes. Um dos fatores a ser considerado seria a intensidade de movimentao das pessoas no centro cirrgico, e a freqncia de desinfeco dos ambientes no decorrer do dia. 5.5. Eficincia de tratamento no sistema de ar condicionado Durante a coleta das amostras para anlise microbiolgica, tambm mediu-se a concentrao de CO2, a temperatura e a umidade relativa do ar dentro da tubulao do sistema de ar condicionado (Tabela 22). Observam-se valores coerentes para o local onde estes foram coletados (temperatura baixa e concentrao de CO2 similar aos nveis do ar externo). A umidade relativa do ar apresentou, entretanto, valores acima do esperado para um sistema de ar condicionado, provavelmente por que o sistema havia sido ligado a pouco tempo e no houve tempo suficiente para estabilizao do sistema.
Tabela 22: Concentrao de CO2 dentro do sistema de ar condicionado

Local Fan-coil no 4

Data

Hora

n* 28

27/03/08 15:38 16:05

CO2 [ppm] mdia mximo 237 17 375

T [oC] 22,0 0,0

UR [%] 73,0 1,8

*Tamanho da amostra (ou nmero de medies).

A Tabela 23 mostra os resultados da contagem de fungos filamentosos dentro da tubulao. As amostras coletadas para servir de testemunhas quanto limpeza do local externo tubulao do ar-condicionado e do procedimento de fechamento do duto (branco de amostragem) proporcionaram 12 colnias de fungos filamentosos, o que representou 43 UFC/m3. Os resultados foram, ento, apresentados em duas colunas, uma com a concentrao absoluta observada e a outra subtraindo-se o valor obtido na amostra denominada branco de amostragem, que foi de 43 UFC/m3, assumindo-se que essas colnias surgiram por contaminao do processo de amostragem.

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Tabela 23: Concentrao de bioaerossis no sistema de ar-condicionado

Local
Ponto 1: A jusante do filtro absoluto Ponto 2: Entre o filtro-bolsa e o filtro absoluto Ponto 3: A montante do filtro-bolsa Ponto 4: Ponto externo**

Concentrao mdia de fungos filamentosos[UFC/m3]* valor absoluto - branco 43 0 205 163 318 275 363 363

*Os valores representam a mdia das duas amostras coletadas para cada condio. **Neste local o branco de amostragem no se aplica

Considerando-se os resultados corrigidos, calculou-se a eficincia de cada filtro do sistema e os dados so apresentados na Tabela 24.
Tabela 24: Eficincia dos filtros no sistema de ar condicionado

Filtro
Filtro absoluto Filtro-bolsa Filtro grosso Sistema

Eficincia ( ) 100% 40,9% 78,8% 100%

A eficincia mostrada como sendo do filtro grosso , na realidade, de todo o sistema de captao do ar-condicionado, j que a amostra coletada no ambiente externo no foi retirada de dentro da tubulao e nem mesmo da entrada da tubulao de captao, mas das redondezas desse local. Comparando as eficincias obtidas com aquelas esperadas para a remoo de material particulado, a do filtro absoluto est de acordo com o esperado. A eficincia do filtro bolsa (categoria F7), porm, est abaixo dos 80 a 90% esperados para a remoo de partculas menores de 0,4 m (ASHRAE, 1999; ABNT, 2005). Isto indica que, possivelmente, uma parcela representativa dos microorganismos amostrados (de 40 a 50%) possui dimetro inferior a 0,4 m. 5.6. Perodo de incubao dos fungos A resoluo RE no 09 estabelece que os fungos sejam incubados por um perodo mnimo de 7 dias, permitindo o total crescimento dos fungos (BRASIL, 2003). Isto no pde ser obedecido na prtica pois as placas de quase todas as amostras coletadas ficaram cobertas de colnias fngicas em um tempo bem menor. Se fosse observado esse prazo, a contagem seria

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dificultada ou mesmo impossibilitada. Alm disso, o isolamento dos fungos teria sido inviabilizado. Para ilustrar esse fato, a Figura 28 mostra a evoluo do crescimento fngico numa mesma placa de Petri com ASD, coletada atravs da tcnica de amostragem ativa. Aps 48 horas de incubao, temperatura de 251oC, contaram-se 66 colnias de fungos filamentosos. No dia seguinte, foi possvel observar o surgimento de novas colnias, totalizando 108 colnias. Nos dias subseqentes no se observou o surgimento de novas colnias mas percebeu-se que alguns fungos comeavam a crescer sobre os demais, o que impossibilitaria a contagem caso ela fosse feita aps o 3 dia de incubao.

Figura 28: As fotos mostram a mesma placa com gar Sabouraud Dextrose, fotografada na mesma posio, apresentando o crescimento de fungos filamentosos em diferentes tempos de avaliao.

5.7. Microorganismos isolados Das 33 amostras de ar obtidas pela amostragem dinmica, com os meios de cultura ASD e ASC no ambiente interno do HU/UFSC, foi possvel isolar 59 fungos filamentosos e 28 colnias de bactrias ou leveduras.
5.7.1. Fungos filamentosos

Dos fungos filamentosos coletados, 49 foram identificados em relao a seu gnero.O apndice A, ao final trabalho, apresenta uma descrio detalhada de cada isolado. Dez gneros de fungos filamentosos foram identificados dentre os isolados (Grfico 14). Os gneros mais freqentes foram Aspergillus e Penicillium, seguidos por Cladosporium, Trichoderma, Acremonium e Fusarium. Os demais gneros foram identificados em apenas um isolado cada.

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Pithomyces Verticillium Curvularia Circinella Fusarium Acremonium Trichoderma Cladosporium Penicilium Aspergillus

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Fre q ncia de isolados

Grfico 14: Freqncia de gneros fngicos encontrados em amostras do ar do HU/UFSC.

Este resultado bastante semelhante ao encontrado por outros pesquisadores em amostras de ar interno. Foi observada uma grande freqncia de fungos do gnero Aspergillus nos hospitais e edifcios pblicos avaliados por Portnoy, Flappan e Barnes (2001), Nunes (2005) e Kim e Kim (2007). Portnoy, Flappan e Barnes (2001) tambm detectaram representantes do gnero Penicillium como o segundo grupo mais freqente, seguidos pelos do gnero Cladosporium. Zorman e Jersek (2008) encontraram o gnero Penicillium com maior freqncia. Das 59 colnias de fungos filamentosos isoladas, apenas 3 foram retirados de amostras coletadas com ASC, todas as 3 foram identificadas como pertencentes ao gnero Aspergillus. Este resultado interessante do ponto de vista mdico, uma vez que h uma grande variedade de efeitos da exposio a este gnero para a sade humana (Quadro 8). Dentre os isolados de Aspergillus isolados observou-se uma grande diversidade morfolgica, considerando-se a cor das colnias e tambm do formato e tamanho dos conidiforos (Figura 29), o que pode indicar uma grande diversidade de espcies desse gnero. Dentre os isolados do gnero Penicillium, esta variao no foi to grande, j que os conidiforos apresentavam formatos similares na maioria dos isolados, e a colorao da colnia tambm variou pouco.

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Figura 29: Fotomicrografias dos conidiforos e condios de alguns isolados do gnero Aspergillus

A seguir apresentada a distribuio dos fungos filamentosos em cada ambiente (Tabela 25). possvel observar que os ambientes no apresentaram discrepncias quanto variedade de gneros presente. Espcies do gnero Aspergillus foram observadas em todos os ambientes estudados.

Tabela 25: Fungos filamentosos identificados nos ambientes

Local UTI UTI UTN UTN CC Sala 1 CC Sala 3

Data 25/03/08 (tarde) 31/03/08 (manh) 08/03/08 (manh) 25/03/08 (tarde) 31/03/08 26/03/08

Fungos filamentosos observados Aspergillus spp.; Cladosporium spp.; Penicillium spp.; Pithomyces sp.; Trichoderma sp. Acremonium sp.; Aspergillus spp.; Cladosporium spp.; Penicillium spp. Aspergillus spp.; Cladosporium sp.; Fusarium sp.; Penicillium spp.; Trichoderma sp. Aspergillus spp.; Circinella sp.; Cladosporium spp.; Penicillium spp. Aspergillus spp.; Curvularia sp.; Penicillium spp. Trichoderma spp.; Verticillium sp.

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Quadro 8: Principais doenas associadas aos diferentes gneros de fungos filamentosos isolados.

Gnero Acremonium

Aspergillus

Circinella Cladosporium

Curvularia Fusarium

Penicillium

Pithomyces Trichoderma

Verticillium

Doenas associadas Raramente patognico, pode causar ceratite mictica21, onicomicose22, endoftalmite23, meningite, peritonite e osteomielite em pacientes imunossuprimidos (como transplantados de medula ssea) Aspergilose: Pneumonia invasiva ou alrgica em imunossuprimidos; Aspergilose pulmonar alrgica em pacientes com asma; aspergiloma em pacientes com histrico de tuberculose ou sarcoidose24 (mais comum no pulmo e menos freqente no crebro, rins ou outros rgos) No foram encontradas informaes sobre a patogenicidade desse gnero Raramente patognico, pode causar ceratite mictica, onicomicose, infeces na pele, trato respiratrio (podendo levar sinusite ou pneumonia) Trs das 35 espcies existentes so causadoras de infeces no homem: ceratite mictica, sinusite, endocardite, peritonite e septicemias Causador de infeces superficiais e sistmicas, causa especialmente infeces oportunistas disseminadas em indivduos submetidos a transplantes (imunossuprimidos). Tambm causador de infeces localizadas em pacientes de transplantes de rgos slidos Peniciliose: podendo estar associado ceratite mictica, endoftalmite, otomicose, esofagite, pneumonia, endocardite, peritonite, e infeces do trato urinrio em indivduos imunossuprimidos. Algumas espcies produzem micotoxinas Potencialmente alergnico, produtor de micotoxinas. Infeces raras e oportunistas em indivduos imunossuprimidos, submetidos a transplantes, ocasionando falncia nos rins, doena pulmonar crnica, pacientes com amiloidose25 Possvel causador de ceratite mictica.

Fonte: Dr Fungus (2008), Fungal Research Trust (2008), The University of Adelaide (2008).

Diversos gneros isolados, como Trichoderma, Curvularia e Fusarium, por exemplo, so patgenos de plantas e quase todos so tambm citados como agentes oportunistas de infeces em seres humanos, afetando, sobretudo, indivduos imunossuprimidos (Quadro 8).
5.7.2. Bactrias e leveduras

Foram retirados 28 isolados das amostras coletadas nos ambientes internos. Destas, 14 foram retiradas de placas de amostragem com gar sangue de carneiro (Figura 30) e 9 foram retiradas de placas com gar Sabouraud dextrose (ASD). Cada colnia foi, ento, repicada para placas contendo o mesmo meio de cultura usado no isolamento (Figura 31).

21 22

Inflamao microbiana da crnea. Infeco fngica nas unhas. 23 Inflamao nos tecidos que envolvem os olhos. 24 Doena inflamatria caracterizada pela formao de granulomas em diversos rgos do corpo. 25 Doena rara associada ao acmulo de protena em regies especficas ou disseminado pelo organismo.

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Figura 30: Placa de amostragem contendo gar sangue, mostrando colnias de alguns isolados

Figura 31: Placas com isolados de bactrias em ASD (esquerda) e ASC (direita).

No foram observadas bactrias -hemolticas dentre os isolados obtidos (Tabela 26). Entre os cinco isolados -hemolticos, observaram-se estafilococos gram-positivos e gram-

negativos e bacilos gram-positivos e gram-negativos. Embora a maioria dos microorganismos com ao hemoltica apresente algum grau de patogenicidade ao homem ou aos animais, nem todos os hemolticos se enquadram nessa categoria. Existem diversas bactrias -hemolticas do gnero Staphylococcus, como as espcies S. aureus e S intermedius, reconhecidamente causadores de infeco hospitalar e infeco do stio cirrgico. Trs tipos de colnias de bactrias foram as mais freqentemente encontradas, em praticamente todas as placas amostrais. Estas tinham as caractersticas dos isolados 1, 2 e 3. Dentre as colnias com aspecto cremoso, isoladas do meio ASD, apenas duas eram de leveduras. As demais eram colnias de bactrias. Dentre os isolados, percebeu-se uma grande freqncia de possveis integrantes do gnero Staphylococcus, um gnero gram-positivo, cosmopolita e praticamente onipresente (MANGRAM, 1999; NUNES, 2005). Este gnero tambm foi encontrado com freqncia dominante por Kim e Kim (2007), em edifcios de uso pblico na Coria, e por Nunes (2005), em hospitais do Rio de Janeiro. Mangram (1999) associa infeces do stio cirrgico predominantemente a estafilococos gram-positivos aerbios. Coincidentemente, os relatrios

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mensais da comisso de controle de infeco hospitalar do HU-UFSC (CCIH) nos meses de 11/2007 a 01/2008, mostraram 18 casos de infeco hospitalar por Staphylococcus spp. Dos isolados com forma de bacilo, supe-se que o isolado 8 seja um organismo patognico ou oportunista, devido a algumas de suas caractersticas, como a colorao gram-negativa, a capacidade -hemoltica, e o tamanho reduzido das clulas. Observou-se a presena de

endsporo no isolado 1, o que torna estes microorganismos mais resistentes para a sobrevivncia no ar (TORTORA, FUNKE e CASE, 2005; GRIGOREVSKI-LIMA et al., 2006). A aparncia microscpica destes dois isolados pode ser comparada visualmente na Figura 32.
Tabela 26: Caractersticas das bactrias e leveduras isoladas

Isolado 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28

Meio de Cultura ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASC ASD ASD ASD ASD ASD ASD ASD ASD ASD

Hemlise no no -hemoltica -hemoltica -hemoltica no -hemoltica -hemoltica no no no no no no -hemoltica no -hemoltica no no n.a. n.a. n.a. n.a. n.a. n.a. n.a. n.a. n.a.

cor cinza amarela branca branca branca branca bege branca branca branca bege branca branca amarela bege branca branca amarela bege salmo branca branca branca branca branca branca bege amarela

textura lisa lisa lisa lisa lisa lisa enrugada enrugada lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa lisa

Gram + + + + + + + + + + + n.a. n.a. + + + +

forma/arranjo estreptobacilos estafilococos estafilococos estafilococos estafilococos estafilococos bacilos bacilos micrococos estafilococos estafilococos estafilococos estafilococos cocos estreptobacilos estafilococos estafilococos sarcinas estreptobacilos leveduriforme leveduriforme estafilococos estafilococos estafilococos bacilos bacilos bacilos sarcinas

*n.a.: no aplicvel

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Figura 32: Fotomicrografias dos isolados 1 e 8, mostrando bacilo longos em cadeia (estreptobacilos) e bacilos fracamente corados e de menor dimenso, respectivamente.

A Figura 33 mostra duas fotomicrografias de dois isolados -hemolticos gram-positivos, com colnias de aparncia similar mas com a forma e o arranjo das clulas distintos.

Figura 33: Fotomicrografias dos isolados 15 e 17, mostrando estreptobacilos e estafilococos, respectivamente.

Estes resultados mostram a grande variabilidade de microorganismos isolados no ambiente interno. No foram encontradas bactrias com o arranjo de estreptococos ou ainda actinomicetos (bactrias filamentosas). Essas bactria foram relatadas como freqentes em estudos feitos com amostradores de Andersen de 6 estgios. Nesses casos, elas foram

encontradas somente nos estgios inferiores do amostrador, o que poderia explicar sua ausncia no presente estudo onde foi empregado um amostrador de apenas um estgio (GRIGOREVSKI-LIMA et al.; 2006).

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6. CONCLUSES
A partir de uma anlise dos resultados obtidos, possvel concluir, especificamente, os seguintes pontos: A velocidade mdia das correntes do ar, temperatura e umidade do ar, assim como a concentrao de dixido de carbono atendem aos requisitos da resoluo RE no 9 da ANVISA para todos os ambientes estudados, bem como o grau de renovao de ar das salas de cirurgia. A concentrao de CO2 nas salas de cirurgia apresentou uma relao linear direta com o grau de ocupao das mesmas, evidenciando que os sistemas de ar condicionado so projetados para atender a um determinado grau de ocupao no ambiente. Estipula-se, como ocupao mxima, 21 pessoas na sala de cirurgia no 1 e 19 pessoas na sala no 3. O sistema de ar condicionado do centro cirrgico continua operando de maneira apropriada em relao sua vazo aps mais de 25 anos da sua instalao. Alguns dos COV presentes no centro cirrgico so resultado da mistura dos sedativos aplicados aos pacientes. A concentrao de fungos filamentosos no ar o parmetro microbiolgico que melhor representa o nvel de ocupao dos ambientes, confirmando seu uso como indicador da qualidade do ar interno. A qualidade do ar das salas de cirurgia no se deteriora com o passar do dia. A eficincia do filtro-bolsa do sistema de ar condicionado inferior ao valor esperado para a remoo de material particulado de 0,4 m, enquanto que a eficincia do filtro absoluto de 100%. Os gneros de fungos mais freqentes nesses ambientes so Aspergillus e Penicillium e o gnero mais freqente de bactrias Staphylococcus. Em relao concentrao de microorganismos no ar, no foi possvel confirmar se o valor mximo recomendado pela CP n 109, de 200 UFC/m3 para a contagem total de microorganismos um bom parmetro para ambientes como UTI e salas de cirurgia.

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Entretanto, em relao resoluo RE no 9, possvel afirmar que um mximo de 750 UFC/m3 para ambientes internos uma exigncia de grande tolerncia.

7. RECOMENDAES
Em relao legislao nacional sobre a qualidade do ar em ambientes internos possvel fazer as seguintes recomendaes: Recomenda-se que a concentrao de CO2 seja contemplada na resoluo a ser estabelecida a partir da consulta pblica CP no 109, pois a concentrao desse gs um parmetro indicador da taxa de renovao do ar, que considera o grau de ocupao do ambiente. H alguns pontos a serem levados em considerao sobre a seguinte frase, da resoluo RE no9 (ANVISA):
O valor mximo recomendvel VMR, para a contaminao microbiolgica deve ser 750 UFC/m3 de fungos, para relao I/E 1,5, onde I a quantidade de fungos no ambiente interior e E a quantidade de fungos no ambiente exterior.

Como se observou um crescimento numeroso de colnias de bactrias e leveduras no meio de cultura ASD (seletivo para fungos), recomenda-se que esta frase seja alterada para que se esclarea se a contagem deve ser de fungos filamentosos somente ou se as leveduras devem ser includas. Neste trabalho no se realizou a amostragem de material particulado (MP), porm sabido que no ambiente externo a concentrao de MP, de toda a granulometria, superior que nos ambientes internos, haja vista que o ar insuflado pelo sistema de ar condicionado passa por diversos filtros para a remoo de MP. Assim sendo, e sabendo-se que a microbiota do ar transportada pelo material particulado, entende-se que a concentrao de microorganismos seja superior nos ambientes externos, fato este confirmado nos resultados deste trabalho. Desta forma, critica-se a relao I/E 1,5 que indica que o ambiente interno pode ter uma concentrao de microorganismos 150% maior que o ambiente externo. Sugere-se que, especialmente no ambiente hospitalar, essa relao seja reduzida para I/E < 1,0. O tempo de incubao de fungos filamentosos no deve ser fixado em 7 dias para a contagem das colnias, pois, em alguns casos a superfcie do meio de cultura na placa

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de Petri pode ser rapidamente coberta pelo miclio em menos tempo, o que impossibilita a contagem das colnias. Para tanto, recomenda-se que a resoluo especifique o monitoramento dirio das placas com lupa (3 a 30X) at que o nmero de colnias se estabilize, o que ocorre em prazo menor do que 7 dias. possvel afirmar que um mximo de 750 UFC/m3 para ambientes internos uma exigncia de grande tolerncia. Sugere-se sua alterao para um valor menor, j que em nenhuma amostra analisada, mesmo no ambiente externo, obteve-se resultados desta ordem de grandeza. Embora o objetivo geral deste trabalho tenha sido atingido, existem diversas recomendaes a serem feitas para novos estudos nesta temtica: Recomenda-se o prosseguimento do trabalho, com a identificao dos fungos filamentosos, especialmente os do gnero Aspergillus, devido a sua maior freqncia e a seu potencial patognico; Recomenda-se o uso de um amostrador de Andersen (ou impactador) de 6 estgios, para que uma maior variedade de microorganismos possam ser amostrados, como actinomicetos e bactrias do gnero Legionella, e para que o material amostrado possa representar a faixa inalvel do sistema respiratrio humano. Para avaliar a presena de microorganismos patognicos no ar do hospital (avaliao qualitativa), recomenda-se o estabelecimento de amostragem do ar por impactador de 6 estgios, ou, considerando o alto custo deste aparelho no mercado nacional, a amostragem, em paralelo, com impactador de um estgio e com um impactador em meio lquido (amostrador do tipo Impinger). A meta deste trabalho foi atingida, uma vez que foram dadas contribuies para o melhoramento da legislao nacional no mbito da qualidade do ar interno em ambientes hospitalares, e simultaneamente, mostrou-se os principais aspectos da qualidade do ar neste tipo de ambiente, instigando a discusso nos meios acadmico, mdico e legislativo sobre o tema.

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8. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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APNDICE DESCRIO DOS FUNGOS IDENTIFICADOS

Podem ser observadas imagens do aspecto macroscpico das colnias desenvolvidas no meio de cultura gar Sabouraud dextrose (ASD), em tubos de ensaio. Tambm foram selecionadas fotomicrografias das estruturas caractersticas de cada gnero. Gnero: Acremonium (ordem: Moniliales; famlia: Moniliaceae). Local(is): UTN Nmero de Isolados: 2 Caractersticas Macroscpicas (observadas em gar Sabouraud dextrose): Colnia filamentosa, de colorao branca a bege, com reverso branco Caractersticas Microscpicas: Possui hifas septadas hialinas, longas e finas. Apresenta clamidsporos (estruturas globosas na ponta de hifas especializadas); apresenta esporos hialinos aderidos sobre uma matriz gelatinosa na ponta de hifas especializadas. Aspecto das colnias em ASD:

Fotomicrografias: Condios corados com corante azul de algodo Clamidsporo :

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Gnero: Aspergillus (ordem: Eurotiales; famlia: Trichocomaceae) Local(is): UTI, UTN, CC1, CC3 Nmero de Isolados: 15 Caractersticas Macroscpicas (observadas em gar Sabouraud dextrose): Colnia filamentosa. Miclio inicialmente branco, evoluindo para uma variedade de cores, na maioria dos casos verde, podendo ser amarelo, negro ou mesmo permanecendo branco. Cor do reverso geralmente branca, podendo, em alguns casos, ser bege ou amarelada. Caractersticas Microscpicas: Possui hifas septadas e hialinas. Apresenta conidiforos bem diferenciados, que se desenvolveram rapidamente em microcultivo (dentro de 24horas). Os condios globosos e ornamentados se formam de forma radial na ponta da filide reta e solitria. Aspecto das colnias em ASD:

Conidiforos (fotomicrografia):

Conidiforo (fotomicrografia):

Detalhe mostrando esporos ornamentados:

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Circinella (ordem Mucorales; famlia Mucoraceae) Gnero: Local(is): CC1 Nmero de Isolados: 1 Caractersticas Macroscpicas (observadas em gar Sabouraud dextrose): Colnia filamentosa com miclio volumoso, de colorao cinza e uniforme. Caractersticas Microscpicas: Apresenta hifas no-septadas e sub-hialinas. Possui esporngios globosos e escuros, formados na ponta de esporangiforos curtos, solitrios e circinados (curvado sobre si prprio). Aspecto da colnia em ASD:

Esporngios (fotomicrografias):

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Cladosporium (ordem: Moniliales; famlia: Dematiaceae) Gnero: Local(is): UTI, UTN, CC1 Nmero de Isolados: 8 Caractersticas Macroscpicas (observadas em gar Sabouraud dextrose): Apresenta hifas escuras. Condios sub-hialinos ou na colorao marrom-claro, so elpticos ou cilndricos, terminais em conidiforos ramificados. Caractersticas Microscpicas: Apresenta hifas hialinas. Condios hialinos ou na colorao marrom-claro, so elpticos ou cilndricos, terminais em conidiforos ramificados. Aspecto da colnias em ASD:

Conidiforos com condios (fotomicrografias):

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Curvularia (ordem: Pleosporales; famlia: Pleosporaceae) Gnero: Local(is): CC3 Nmero de Isolados: 1 Caractersticas Macroscpicas (observadas em gar Sabouraud dextrose): Colnia com aparncia acamurada. Miclio rosado, com reverso bege. Caractersticas Microscpicas: As hifas so septadas e sub-hialinas (escuras). Os conidiforos so solitrios e nos seus pices se desenvolvem os condios que tambm apresentam colorao escura. Estes so formados por 3 a 4 clulas, e a segunda clula mais protuberante, o que lhe confere uma aparncia curvada. Aspecto da colnia em ASD: Conidiforo com condios (fotomicrografia):

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Fusarium (ordem: Hypocreales; famlia: Hypocreaceae) Gnero: Local(is): UTN Nmero de Isolados: 2 Caractersticas Macroscpicas: Colnia filamentosa de crescimento difuso, com miclio rosado com reverso branco. Caractersticas Microscpicas: Apresenta hifas hialinas e septadas. Apresenta clamidsporos, microcondios e macrocondios hialinos. Os microcondios foram visualizados com abundncia, afixados em uma matriz gelatinosa, na ponta de filides curtas e pouco diferenciadas das hifas. Aspecto de uma colnia em ASD:

Microcondios (fotomicrografia):

Macrocondios (fotomicrografia):

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Gnero: Penicillium (ordem: Eurotiales; famlia: Trichomaceae) Local(is): UTN, CC1, CC3 Nmero de Isolados: 14 Caractersticas Macroscpicas (observadas em gar Sabouraud dextrose): Colnia filamentosa. Quando jovem, apresenta miclio branco, que evolui para verde oliva ou acinzentado, enquanto as bordas das colnias permanecem brancas. O reverso branco; em um caso o reverso era rosa. Caractersticas Microscpicas: As hifas so hialinas e septadas. Apresenta condios globosos e catenulados na ponta de conidiforos ramificados e diferenciados das hifas. Aspecto das colnias em ASD:

Conidiforos com condios (fotomicrografias):

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Gnero: Pithomyces (ordem: Dothideales; famlia: Pleosporaceae) Local(is): CC1 Nmero de Isolados: 1 Caractersticas Macroscpicas (observadas em gar Sabouraud dextrose): Colnia filamentosa, com miclio de colorao uniforme, variando entre bege e marrom claro, reverso marrom. Caractersticas Microscpicas: Hifas sub-hialinas. Os condios so formados na extremidade de conidiforos curtos que se desenvolvem ao longo da hifa. Os condios so escuros e multicelulares (apresentam 3 a 4 septos), com formato oblongo, e ornamentados (verrugosos). Fotomicrografias: Aspecto das colnias em ASD: Fotomicrografia dos conidiforos e condios:

Gnero: Trichoderma (ordem: Hypocreales; famlia: Hypocreaceae) Local(is): UTI, UTN, CC3 Nmero de Isolados: 4 Caractersticas Macroscpicas (observadas em gar Sabouraud dextrose): Colnia filamentosa, com miclio branco, apresentando pequenas manchas de colorao verde-escuro ou espalhadas sobre o miclio, reverso branco. Caractersticas Microscpicas: As hifas so hialinas e septadas. Os conidiforos so hialinos e ramificados, ligados s filides por ngulos mais ou menos retos. Mltiplos condios globosos e escuros so ligados ponta de cada conidiforo. Fotomicrografias: Aspecto das colnias em ASD: Fotomicrografia dos conidiforos e condios:

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Verticillium (ordem: Hypocreales; famlia: Hypocreaceae) Gnero: Local(is): CC3 Nmero de Isolados:1 Caractersticas Macroscpicas (observadas em gar Sabouraud dextrose): Colnia com miclio branco bem difuso e reverso branco. Caractersticas Microscpicas: As hifas so hialinas e septadas. Os conidiforos so hialinos e ramificados, e se desenvolvem de forma radial a um eixo central. Fotomicrografias: Aspecto da colnia em ASD: Fotomicrografia dos conidiforo e condios: