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UNIVERSIDADE FEDERAL DE SERGIPE

CENTRO DE CINCIAS BIOLGICAS E DA SADE


DEPARTAMENTO DE MORFOLOGIA

Cocos Gram
Gram-positivos
positivos

Profa. Maria Regina Pires Carneiro

Cocos Gram-positivos
Gram positivos
catalase- positivos

Taxonomia
FAMLIA MICROCOCCACEAE
(contedo G-C 66 - 75%)
Arthrobacter, Micrococcus, Kocuria, Nesterenkonia, Rothia, Stomatococcus,
Terracoccus Renibacterium,
Terracoccus,
Renibacterium Demetria,
Demetria Leucobacter,
Leucobacter Bogoriella

FAMLIA STAPHYLOCOCCACEAE
(contedo G-C 30 - 45%)
Staphylococcus, Macrococcus (1998), Gemella, Salinicoccus

Micrococcus: bem distribudo no ambiente,


principalmente
i i l
t como microbiota
i bi t transitria
t
it i na pele
l
de humanos e outros mamferos.
Algumas cepas produzem pigmentos que variam de
laranja a rosa.
Isolados de infeces humanas, em pacientes
i
imunocomprometidos,
tid
muitas
it
vezes
so

confundidos com Staphylococcus.

Micrococcus apresenta 10 espcies:


M. luteus
M. lylae
M varians
M.
M. roseus
M agilis
M.
M. kristinae
M nishinomiyaensis
M.
i hi
i
i
M. sedentarius
M. halobius
M. antarcticus

Gnero Staphylococcus
a. Espcies:
E i

S. aureus
S
S. epidermidis
S saprophyticus
S.
h ti

b. Caractersticas morfo-tintoriais:

c. Caractersticas fsicas de cultivo


- atmosfera
facultativos

de

incubao: aerbicos ou anaerbicos

- faixa de temperatura de cultivo: 35 - 37C


- faixa de pH: 7,0 7,5
- meios : Agar sangue (processamento primrio)
Agar Manitol Salgado (meio seletivo)

d Importncia do estudo
d.
est do dos estafilococos
.1. agentes primrios / secundrios de infeces superficiais /
disseminadas
.2. adquirem facilmente resistncia a antimicrobianos
.3. mutantes por presso seletiva responsvel por infeces
hospitalares
.4. intoxicao alimentar

e. Doenas e sintomas causados

Staphylococcus
p y
aureus
Processos supurativos
p

- foliculite: mo da pele e mucosas colonizam glndulas sebceas e folculos

pilosos

- furnculos: situam-se no tecido subcutneo

- sicose da barba: complicaes da acne

- hordolo: na base da pestana

- infeces em feridas superficiais que podem ser graves em hospitalizados

Processos txicos
- Sndrome da pele escaldada: toxina
-exfoliativa produz descamao de
lminas epidrmicas
- Impetigo: toxina ataca protena que ajuda a manter clulas epiteliais unidas. a
protena danificada, p
p
permite q
que as bactrias se espalham
p

- Sndrome do choque txico: exotoxina; febre alta, vmito, diarria, confuso,


exantema cutneo (como queimadura solar), entre 3-7 dias aps incio;
descamao da pele produz desprendimento epidrmico, frequente nas palmas
d mos
das
e plantas
l t dos
d ps

-Toxiinfeco alimentar: alimento contaminado c/ enterotoxina estafilocccica


incubao: 1-6 h; sintomas: febre no elevada, vmito e diarria

f. Fatores de virulncia: fatores de adeso (adesinas que se


ligam
g
p
ptn da matriz);
); de evaso ((evasinas,, cpsula
p
ep
ptn A)) e de leso
(agressinas, toxinas e enzimas)

f.1. Componentes da superfcie celular


. Cpsula: polissacardica; antifagocitria
. Peptidoglicano (PG) e cidos teicicos: ativam via alternativa do
complemento; estimulam produo de citocinas (~LPS G -)
. Protena A (SpA): ligada ao PG; nica cadeia polipeptdica com 4
resduos de tirosina, expostos na superfcie; liga-se poro Fc das
lgG impedindo interao com clulas fagocitrias
.

Protenas (MSCRAMMs: Microbial Surface Components


Recognizing Adhesive Matrix Molecules) que se ligam
Fibronectina, Colgeno e Fibrinognio: ancoradas no PG,
funcionam como adesinas (colonizao).
A que se liga
li ao fibrinognio
fib i
i (fator
(f t clumping)
l
i ) atua
t como receptor
t para fibrinognio
fib i
i
livre, demonstrada por suspenso de S. aureus em gota de plasma de coelho, onde
aglutinam

- f.2.Toxinas
-

S. aureus produz toxinas que atuam por diferentes mecanismos:

- a. citotoxinas
- .1.-toxina
1 toxina (-hemolisina):
( hemolisina): forma poros na membrana celular dos
leuccitos (ao antifagocitria); leso celular causada pela -toxina
pode promover liberao de citocinas (choque sptico).
A
Amostras
t
d S.
de
S aureus que produzem
d
e -hemolisinas,
,
h
li i
podem
d
lesar membrana de diferentes clulas
- .2. leucocidina (destroi leuccitos como a -toxina; 90% das
amostras de S. aureus isoladas de leses dermonecrticas graves
produzem leucocidina

- b
b. superantgenos - estimulam linfcito T a liberar citocinas
que provocam choque:
- - TSST-1 ((toxic shock syndrome
y
toxin-1))
- - enterotoxinas estafiloccicas
- c. toxinas que degradam molculas de adeso do epitlio
cutneo
cut
eo ((toxinas
o as es
esfoliativas);
o a as); h
4 tipos
pos imunolgicos:
u o g cos
- - ETA, age sobre a desmoglena, protena da superfcie das
clulas epiteliais da pele que promove adeso entre elas
- - ETB,
ETB ETC e ETD,
ETD responsveis
i pela
l sndrome
d
d pele
da
l
escaldada (epiderme separada da derme)

f.3. Enzimas
S. aureus produz vrias enzimas extracelulares:
- coagulase: caracterstica da espcie; coagula o plasma pela
transformao de protrombina em trombina, que ativa formao de fibrina a
partir do fibrinognio

- catalase: todos os estafilococos; protege mo do perxido de hidrognio


txico, acumulado aps metabolismo bacteriano

DNAse: somente em S. aureus;; despolimeriza


p
o DNA
hialuronidase: hidrolisa c. hialurnico; em mais de 90% de S. aureus
lipases: hidrolizam lipdios; todos S. aureus e mais de 30% de SCN
proteases: hidrlise de ptn e outras molculas geram nutrientes
utilizveis por S. aureus para sua disseminao pelos tecidos

- penicilinase: confere resistncia a penicilina


- Estafiloquinase (=fibrinolisina): em quase todos S. aureus
transforma plasminognio em plasmina, que dissolve cogulos

g. Aspectos
A
t genticos
ti
d
da virulncia
i l i
- Genes
G
d virulncia
de
i l i de
d S.
S aureus podem
d
ser cromossmicos
i
(genes da toxina do choque txico fazem parte de uma ilha de
patogenicidade) ou transportados (genes da esfoliatina e enterotoxina
A so transportados por bacterifagos)
- A regulao dos genes de expresso de virulncia de S.
S aureus
controlada por molcula de m-RNA (RNA III), que atua na transcrio
e, na traduo; inibe a expresso de genes que codificam adesinas e
induz a expresso de genes que codificam toxinas
- Relao curva de crescimento/expresso de virulncia:
. adesinas: na fase de crescimento exponencial: colonizar
. toxinas: na fase estacionria: causar danos

h. Epidemiologia
h
E id i l i
- ubquos na pele e mucosas
i Profilaxia/Tratamento
i.
- cuidados de higiene pessoal e alimentar
-p
penicilinas semi-sintticas ((meticilina,, oxacilina))
- vancomicina

j. Diagnstico laboratorial
. coleta

. cultura

. isolamento

. identificao

. antibiograma

Diagnstico molecular

Pulsed-field gel electrophoresis profiles of SmaI- and EagI-Digested DNA. NCTC, National Collection of
Type Cultures 8325 control.
control
Lane 1, patient's oxacillin-resistant vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus (VISA);
lane 2, patient's oxacillin-susceptible VISA;
lane 3, patient's oxacillin-resistant S. aureus (ORSA, vancomycin MIC = 2 g/mL) from anterior nares;
lanes 4 and 5, isolates of ORSA (vancomycin MIC = 2 g/mL) from the health-care worker's anterior
nares.

Staphylococcus epidermidis
- Tornou-se importante
p
agente
g
de infeco
hospitalar,
p
,p
pela capacidade
p
de formar
biofilmes em superfcie de polmeros, alm de constituir um reservatrio de
bactrias estrategicamente posicionadas, dificulta penetrao e difuso de
antimicrobianos e de elementos de defesa do organismo.
Obs: biofilmes de S.
S epidermidis no contm outras bactrias,
bactrias devido a ao de
bacteriocinas
Formao de biofilme: bactrias aderem tanto superfcie livre do
polmero [1] como superfcie da camada de protenas que mais tarde
passa a recobrir o polmero [2]; aderidas, proliferam formando mltiplas
camadas (fase de acmulo) [3]

- aderncia superfcie livre do polmero mediada por protenas e por


molcula de polissacardeo capsular conhecida como PS/A (adesina
polissacardica)
- quando superfcie do polmero torna-se recoberta pela camada protica, S.
epidermidis interage por meio de diferentes molculas de sua superfcie,
(protena ligada
g
ao fibrinognio
g
de S. epidermidis)
p
)q
que fixa
como a Fbe (p
a bactria ao fibrinognio.
- na formao

das camadas bacterianas,, necessrio q


que as clulas da
bactria se liguem uma s outras por meio de molcula polissacardica,
denominada PIA (adesina polissacardeca intercelular) e protena
extracelular, denominada AAP (protena associada a acumulao).
- o rompimento do biofilme, com conseqente liberao de clulas
bacterianas, parece estar associado a ao detergente da d-lisina
(BUERIS e col.,
col 2004).
2004)

PRINCIPAIS AGENTES ETIOLGICOS DE INFECES CAUSADAS PELO


USO DE CATETER VENOSO CENTRAL (CVC) EM PACIENTES INTERNOS
NO HOSPITAL GOVERNADOR JOO ALVES FILHO - SERGIPE
MUNIZ & CARNEIRO,
CARNEIRO 2004

PRINCIPAIS CAUSAS DE IH PELO USO DO CVC: FLEBITE


TROMBOFLEBITE, SEPTICEMIA, ENDOCARDITE e ENDOFTALMITE

Obs: A flebite uma inflamao de uma veia, geralmente nas pernas (podem
ocorrer nos braos, ombro ou abdmen); quando associada formao de
cogulos sanguneos (resultado de leso ou infeco), chamada tromboflebite.

C
Cocos
G
Gram-positivos
ii
catalase- negativos
g
Famlia Streptococcaceae

G Streptococcus
Gn.
St
t
a. Espcies: S.
S pyogenes
S. agalactiae
S. pneumoniae
Grupo viridans: S. mutans, S. sanguis

Gn. Enterococcus: E. faecalis


b. Caractersticas morfo-tintoriais: cocos GRAM positivo aos pares ou em
cadeia

c. Caractersticas
C
t ti
f i
fsicas
d cultivo
de
lti
- atmosfera de incubao: anaerbios facultativos, anaerbios microaerfilos
- faixa de temperatura de cultivo: 35 - 37C
- faixa de pH: 7.4 a 7.8
- meios : Agar sangue / Agar chocolate (processamento primrio)
Caldo crebro corao
de boi ((BHI)) / Caldo tripticase
p
soja
j ((CTS))

(meios de enriquecimento)

d. Importncia do estudo dos estreptococos


.1. participao em infeces localizadas e generalizadas
.2.
2 iimportncia
t i odontolgica
d t l i
.3. participao em doenas ps-estreptocccica

e. Fatores de virulncia
. Toxinas
. eritrognica
. leucocidinas
e o s as
. , e hemolisinas
. estreptolisinas S e O
. Enzimas
. fibrolisina (estreptoquinase)
(
p q
)
. desoxirribonuclease
. hialuronidase
. Substncias antifagocitrias
. cpsula
. protena M
. cido lipoteicico

f Doenas e sintomas causados


f.

Escarlatina

Streptococcus pyogenes
Faringotonsilite

Impetigo
comum

Erisipela

- Faringotonsilite estreptocccica: infeco da faringe ou das tonsilas


que produz uma resposta inflamatria; cursa com dor de garganta, febre,
enrijecimento da faringe e exudado amigdalar purulento.

- Escarlatina: causada por S. pyogenes portador de fago lisognico


produtor de toxina que provoca descamao da pele, parece um exantema
na parte superior do trax que se extende a todo o corpo com dor de
garganta, calafrios, febre, cefalia e lngua em morango (papilas
i fl
inflamadas).
d )

- Impetigo comum: infeco cutnea supurativa que ocasiona leses


costrosas e vesculas rodeadas de um bordo vermelho.

- Erisipela: inflamao da derme cutnea,


cutnea mais frequente em pessoas
com antecedentes de faringoamigdalite, manchas vermelhas e leses
dolorosas na pele).
- Febres puerperais: infeco generalizada que surge depois do parto.
- Febre reumtica: doena auto-imunitria que ocasiona leses
inflamatrias que afetam vlvulas cardacas, articulaes, SNC e tecido
subcutneo.
- Glomerulonefrite: inflamao dos glomrulos renais; sintomas, febre,
hipertenso e sangue na urina.
Tratamento: penicilinas (benzilpenicilina) ou eritromicina; h cepas
resistentes tetraciclina.

Streptococcus agalactiae

Pertencem ao grupo B de Lancefield. Formam cadeias curtas ou pares


(diplococo); so hemolticos,
hemolticos porm com halo menos definido que os do
grupo A.
Presentes nas mucosas de seres vivos e animais,
animais colonizando
principalmente os tratos intestinal e genito-urinrio de seres humanos;
assintomticos ou acarretando leves sintomas.
A maior significncia clnica est relacionada contaminao de neonatos,
que pode ocorrer de forma ascendente ainda no tero ou durante o parto
ocasionando quadros graves de septicemia e meningite.
Atualmente tem crescido sua significncia como patgeno de adultos,
especialmente aqueles em condies debilitantes.
Sintomas: insuficincia respiratria, febre, retardo ou irritabilidade,
p
e hipotermia
p
ep
pode ocasionar meningite.
g
hipotenso
Tratamento: penicilinas (benzilpenicilina) ou eritromicina; h muitas
cepas resistentes tetraciclina.

Streptococcus pneumoniae

Grupo viridans
S mutans e S.
S.
S sanguis

Streptococcus
p
pneumoniae (p
p
(pneumococo)),

mais frequentes
q
em
pneumonias no homem. So cocos lanceolados em pares que apresentam uma
cpsula polissacardica. Dos pulmes se disseminam ao sistema nervoso e so a
causa mais normal da meningite purulenta aguda em adultos.

Tratamento:
T
t
t
a princpio
i i eram muito
it sensiveis
i i a penicilina,
i ili
atualmente
t l
t esto
t
surgindo cepas resistentes; eritromicina e vancomicina como alternativa.

Grupo viridans
S. mutans e S. Sanguis,

utilizam a sacarosa dos alimentos para formar


polmeros insolveis de dextranos e levanos,
levanos que os capacita para aderirem s
clulas epiteliais da mucosa e superficie do dente, onde formam o biofilme
dental. Fermentam os acares com formao de cidos, que desmineralizam o
esmalte e a dentina superficial originando cries.
Em
E casos de
d imunidade
i
id d baixa
b i
podem
d
ocasionar
i
b t
bacteremias
i
d
depois
i de
d uma
extrao dentria; mais frequentes de endocardites, quando se localizam nas
vlvulas cardacas.
Tratamento: penicilina e eritromicina.

Enterococcus faecalis

Agrupa os antigos estreptococos de origem fecal, correspondentes ao grupo


D de Lancefield; so -hemolticos
Forma parte da miocrobiota intestinal do homem; eliminado pelas fezes.
empregado como ndice de contaminao fecal, pois muito resistente
dessecao.
Apesar de no ser considerado patgeno, nos ltimos 20 anos est
adquirindo grande importancia hospitalar como agente de infeces do trato
urinrio (ITU); endocardite aguda e bacteremia nosocomial, j que muito
resistente a penicilina e outros antimicrobianos.

Gn. Streptococcus
g. Epidemiologia
h. Profilaxia / Tratamento
i. Diagnstico laboratorial
. coleta

Diagnstico laboratorial
. cultura

Diagnstico laboratorial
. Isolamento

Diagnstico laboratorial
Identificao

Beta Hemlise

Alfa/Gama Hemlise

Bacitracina
CAMP
Bile Esculina
Optoquina

(S)
(+)
(+)
( -)
(R)
(S)

Grupo "A"
Grupo "B"
Grupo "D"

S. py
pyogenes
g
S. agalactiae
g
S. viridans

NaCI 6,5%
S. pneumoniae
Prova Negativas
(+)
(-)

Identificao Sorolgica
Enterococo No Enterococo
Grupos: A,B,C,D,F,G
(E. faecalis)
S = sensvel R = resistente
(+) = Positivo (-) =Negativo

Sorologia

Diagnstico laboratorial
* Grupo sorolgico

A (S. pyogenes)
B (S
(S. agalactiae)
D (E. faecalis)

Tipo de hemlise

D (no enterococo)
G
Grupo
viridans
i id
S. pneumoniae