Você está na página 1de 29

BIOQUMICA QBQ 0215

Farmcia, Nutrio e Medicina

PROFESSORES
Nadja Cristhina de Souza Pinto - COORDENADORA
Fbio Luis Forti
Ricardo Giordano
Mrio Jos Politi

DOUTORANDO RESPONSVEL PELA DISCIPLINA


Felipe Augusto Godoy

2013

GLICLISE

1. A gliclise a principal via catablica da glicose compreendendo as 10 reaes


enzimaticamente catalisadas que so mostradas na figura abaixo e cuja estequiometria
total pode ser observada na equao qumica seguinte:
Glicose + 2 NAD+ + 2 ADP + 2 Pi 2 Piruvato + 2 NADH + 2 ATP + 2 H2O + 4 H+
A gliclise, como todas as vias catablicas, exergnica e equao acima corresponde
um Go = -43,4 kj/mol-1. Mas, o dado da variao de energia livre mais interessante em
termos de G, cujo valor exato depende de cada clula especfica, por exemplo, em
msculo cardaco estima-se que seja igual a 74,0 kj/mol-1.

2. A finalidade da gliclise obteno de energia, como a equao estequiomtrica indica,


cada molcula de glicose degradada a duas de piruvato e parte da energia livre liberada
nesta degradao retida nos produtos na forma de 2 NADH e 2 ATP.

3. A reao que permite a obteno de NADH a nica de oxido-reduo da gliclise, pela


qual gliceraldedo-3-P oxidado a glicerato-1,3-bisP, atravs da ao oxidante de NAD +
catalisada pela enzima gliceraldedo desidrogenase. A manuteno da capacidade oxidante
da gliclise exige que NADH seja re-oxidada a NAD+ , uma alternativa para isso
apresentada na figura, atravs da reao pela qual NADH reduz piruvato a lactato,
recuperando NAD+. Esta alternativa ocorre no msculo esqueltico com baixos nveis de O2.

4. J ATP produzido em duas reaes distintas pelas quais um radical fosforil transferido
de, respectivamente, glicerato-1,3-P e P-enolpiruvato para ADP, em transferncias
catalisadas por glicerato-1,3-P-quinase e P-enolpiruvato-quinase. Esta maneira de
fosforilao de ADP conhecida como fosforilao a nvel do substrato, para distingui-la da
fosforilao oxidativa da mitocndria que ser vista mais adiante.

5. Na gliclise, h 3 reaes de fosforilao irreversveis catalisadas, respectivamente, pela


hexoquinase, fosfofrutoquinase e piruvato-quinase, que funcionam como marca-passos da
via, cuja regulao se d por um elaborado sistema de controle alostrico das enzimas.
6. Diversas outras hexoses, como frutose, galactose e manose, tambm so metabolisadas
pela via glicoltica.

7. A gliclise em condies anaerbicas tem energtica e funes variadas, conforme o


organismo. Cabe fazer dois destaques importantes.
8. Em vertebrados, encontram-se msculos esquelticos muito pobres em mitocndria, que
so especializados para produzir ATP a partir de gliclise anaerbica, cuja energtica
obedece a seguinte reao geral: Glicose 2Lactato + 2H+ ; Go = -196kJ/mol. Mas, parte
dessa energia livre liberada que seria dissipada (61kJ/mol) retida na forma de 2ATP
produzidos por mol de glicose degradada. Deve-se ainda enfatizar que o lactato no
descartado, pois vai ser aproveitado no fgado, aonde reoxidado a piruvato, alternativa
metablica importante a ser examinada mais frente.

9. Leveduras mostram um exemplo de gliclise anaerbica na forma da fermentao


alcolica, segundo a reao geral: Glicose 2Etanol + CO 2; Go = -235kJ/mol. Aqui
tambm parte da energia livre, +61kJ/mol, mantida com a produo de 2ATP. A parte
final da fermentao alcolica compreende duas reaes: a primeira envolve a
descarboxilao de piruvato e liberao de acetaldedo, catalisada pela enzima piruvatocarboxilase, que no existe em animais. Na segunda reao a desidrogenase alcolica
catalisa a reduo do acetaldedo por NADH.

HOCH2

HO

GLICLISE

OH
OH

Glicose

OH
ATP

ATP

ADP

ADP

P -OCH2
O
HO

OH

Glicose 6-fosfato

OH
OH

Grupo de
P -O-CH2 O
CH2OH
HO
OH

Frutose 6-fosfato

HO
ATP

ATP

ADP
P -O-CH2 O

ADP

CH2O- P

HO OH

Frutose 1,6 bisfosfato

HO

HC=O

H2C-O- P
C=O

Diidroxiacetona
fosfato

HC-OH

H2C-OH

H2C-O- P

Gliceraldedo
3-fosfato

Pi
NAD+

Pi
NAD+

NADH

NADH

O=C-O- P
HC-OH

1,3 Bisfosfoglicerato

H2C-O- P
ADP

ADP

ATP

ATP

O=C-OHC-OH

3-Fosfoglicerato

H2C-O- P

COOHC-O- P

2-Fosfoglicerato

H2C-OH
H2O
COOC-O- P
CH2

Fosfoenolpiruvato

ADP

ADP

ATP

C=O

HC-OH
CH3

ATP

COO-

COO-

NAD+

NADH

CH3

Lactato

Piruvato
NAD+

NADH

discusso:
1.) Equacione a reao lquida da transformao de glicose em piruvato. Como regenerada
a capacidade oxidante do sistema NAD +/NADH necessria atividade glicoltica nos

glbulos vermelhos humanos (que no tm mitocndria) e na cultura de levedo sem O 2


(fermentao).
2.) Calcular a energia armazenada pela clula ao degradar glicose pela via glicoltica.

CICLO DE KREBS

1. Em condies aerbicas, o destino do piruvato produzido na gliclise sofrer uma


descarboxilao oxidativa catalisada pela piruvato desidrogenase, que um complexo

multienzimtico existente no interior da mitocndria de eucariotos. Portanto, o piruvato


precisa entrar na mitocndria para ser degradado por essa via. A reao geral a seguinte:
Piruvato + CoA + NAD+ Acetil-CoA + NADH + CO2

2. O acetilCoA resultante da metabolizao do piruvato totalmente oxidado no ciclo do cido


ctrico, tambm chamado ciclo de Krebs, conforme a seguinte reao geral:
Acetil-CoA + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi 2CO2 + 3NADH + FADH2 + GTP + CoA
O ciclo de Krebs, esquematizado na figura, compreende 8 reaes, envolvendo 8 enzimas
e 8 cidos carboxlicos, di e tri-cidos, todos dispersos na matriz da mitocondria. Portanto,
comeando no piruvato e passando pelo acetilCoA, ocorre oxidao completa desses
metabolitos liberando 3CO2 sem participao de O2 molecular. Os agentes oxidantes em
todas as reaes so NAD+ ou FAD e as formas reduzidas destas co-enzimas (NADH +
FADH2 ), resultantes do processo, s so reoxidadas na cadeia respiratria, uma via
especializada que se localiza na membrana mitocondrial interna e ser considerada mais
adiante.
3. O ciclo de Krebs, conforme sua reao geral indica, essencialmente catablico, pois
promove a oxidao do radical acetil a 2CO2 e retm parte da energia livre desta reao na
forma de coenzimas reduzidos que, posteriormente, serviro produo de ATP atravs
da fosforilao oxidativa. Para cumprir esta funo basta que os 8 intermedirios do ciclo
ocorram em concentraes catalticas. Mas, o ciclo possui outra funo, alm da
catablica, diversos de seus intermedirios alimentam as vias de sntese de aminocidos,
lipdeos e glicose, isto , o ciclo tem tambm funo anablica e, portanto, deve ser
classificado como anfiblico. Para que o ciclo desempenhe concomitantemente ambas as
funes, catablica e anablica, as concentraes dos intermedirios so mantidas e
controladas atravs de um complexo sistema de reaes auxiliares, conhecidas como
reaes anaplerticas. Um exemplo de reao anaplertica a carboxilao de piruvato
para obter oxalacetato, catalisada pela enzima piruvato carboxilase.
4

A transformao de piruvato em acetil-CoA, uma reao para a qual convergem


diversas vias catablicas e anablicas, alm da gliclise. Por esse motivo a piruvato
desidrogenase est sujeita a um controle altamente elaborado, compreendendo dois
nveis de regulao: a) controle alostrico atravs da inibio pelo produto, exercido por
NADH e acetil-CoA; b) modificao covalente reversvel da subunidade E1 da enzima,
por fosforilao/desfosforilao.

5. As enzimas citrato sintase, isocitrato desidrogenase e -cetoglutarato desidrogenase so


as reguladoras do fluxo metablico atravs do ciclo de Krebs e esto sujeitas a controle
alostrico, envolvendo NADH como inibidor e Ca+ e ADP como ativadores.

Piruvato

CoASH + NAD+
CO2 + NADH

Acetil-CoA
H2O

Oxaloacetato

CoASH

Citrato

NADH + H+

H2O

NAD+

cis-Aconitato

L-Malato

H2O

H2O

Fumarato

Ciclo de Krebs

FADH2

Isocitrato
NAD+

FAD

NADH + H+

Succinato

Oxalosuccinato

GTP
CO2

GDP + Pi

Succinil-CoA
NADH
+ H+

CoASH

CO2

a-Cetoglutarato
NAD+

Grupo de discusso:
1.) Escrever a reao de formao de acetil-CoA a partir de piruvato e indicar:
a) as 5 coenzimas necessrias
b) as vitaminas envolvidas
c) a sua localizao celular
2.) Quais os produtos do ciclo de Krebs?

3.) Explique porque piruvato convertido a CO 2 na respirao de fatias de msculo mantidas


em soluo fisiolgica, porm em um exerccio intenso, esse piruvato destinado a
produo de lactato.

CADEIA RESPIRATRIA E FOSFORILAO OXIDATIVA

1. Fosforilao oxidativa o processo bioqumico pelo qual a oxidao de NADH e FADH 2 ,


produzidos na gliclise e ciclo de Krebs, ocorre acoplada produo de ATP, a partir de
ADP + Pi. Este processo se d na cadeia respiratria ou cadeia de transporte de eltrons,
que compreende um conjunto ordenado de enzimas e transportadores de eltrons inseridos
na membrana interna da mitocndria.

2. A cadeia respiratria contem 4 complexos, I,II, III e IV, ordenados por ordem crescente de
potencial redox, indo do potencial padro de NAD+/NADH (E0= -0,315V) ao do O2/H2O (E0=
+0,815V). Os eltrons so transferidos do complexo I ou II para o complexo III pela
coenzima Q (ou ubiquinona), e do complexo III para o complexo IV pelo citocromo C
para chegar ao O2. NADH e FADH2 , cedem eltrons, respectivamente, aos complexo I e II.
A transferncia exergnica de eltrons do nvel redox de NADH para o de O 2 (E0= 1,130V)
envolve uma diferena de energia livre liberada (G 0= -218kJ/mol) que em parte retida
pelo transporte de H+ do lado interno para o externo da membrana, criando o gradiente
eletroqumico de prtons que permitir empurrar o processo endergnico de fosforilao
de ADP por Pi para gerar ATP, atravs da bomba de prtons que constitui a ATP sintase
(tambm conhecida com F1F0- ATPase).
Espao
Intermembranar

2 H+

4 H+

2 H+
Cit C

Complexo I

Matrix
Mitocondrial

Complexo III

Complexo IV

NAD+
1/2 O2 + 2H+

NADH + H+

H2O

Complexo II
FADH2
3. A ATP sintase distinta e fisicamente separada da cadeia de transporte de eltrons. A
transferncia de 2e de NADH at O2 envolve um G0= -218kJ/mol, que gera um incremento
no gradiente de prtons suficiente para mover a ATP sintase, permitindo a produo de 3
moles de ATP (G0= +30,5kJ/mol). Nestas condies, a ATP sintase trabalha com uma
eficincia termodinmica igual a 42%. , no entanto, necessrio destacar que quando os 2e
saem do nvel redox de FADH2 , formam-se apenas 2ATP. Naturalmente, para uma melhor

medida da real eficincia termodinmica da fosforilao oxidativa seria preciso estimar o


G da transferncia de eltrons em vez do G0.

4. A grande quantidade de energia livre que seria dissipada na oxidao completa da glicose a
CO2 e H2O [C6H12O6 + 6 O2 6 CO2 + 6 H2O; G0= -2823 kJ/mol] aproveitada para
produo de ATP, graas quase exclusivamente ao processo de fosforilao oxidativa,
rendendo 38ATP por mol de glicose (incluindo neste total 2ATP da gliclise e 2 do ciclo de
Krebs).

5. Vrios mecanismos da cadeia de transporte de eltrons e de seu acoplamento sntese de


ATP foram elucidados atravs da utilizao de inibidores e desacopladores, entre os quais
esto: rotenona, amital, antimicina A, cianeto e DNP.
Rotenona e amital inibem a reduo dos complexo I e III por NADH.
Antimicina A inibe o transporte de eltrons no complexo II.
Cianeto inibe o transporte no complexo IV.
DNP desacoplador, pois promove o vazamento de H+ ,levando dissipao do gradiente
de prtons e contnuo transporte de eltrons, desacoplado da sntese de ATP.

6. A sntese de ATP a partir de ADP e P i na mitocndria, que catalisada pela ATP sintase,
dirigida pelo processo de transporte de eltrons. Mas como a ATP sintase fisicamente
separada das protenas do transporte de eltrons, a energia livre liberada no transporte de
eltrons deve ser conservada em uma forma que possa ser utilizada pela ATP sintase. A
energia livre do transporte de eltrons conservada pelo bombeamento de H + da matriz
mitocondrial para o espao intermembranar, criando um gradiente de H+ atravs
Grupo de discusso:
1.) Entre os transportadores universais de eltrons da cadeia respiratria esto NAD + e os
nucleotdeos de flavina (FAD e FMN), quais so as diferenas entre estes transportadores
de eltrons quanto a potencial redox e forma de interao com as enzimas com as quais
atuam?
3.) Classifique os seguintes inibidores quanto a seus mecanismos de ao na cadeia
respiratria: a) rotenona; b) antimicina A; c) oligomicina e d) DNP (2,4-dinitrofenol).

GLICONEOGNESE.

1. O fgado humano precisa manter nveis mnimos da glicose circulante, porque crebro e
hemcias dependem quase exclusivamente de glicose para produo de energia. No entanto,
a reserva de glicognio heptico no suficiente para essa finalidade. Por isso, o fgado
sintetiza glicose de novo a partir de lactato, piruvato, glicerol, intermedirios do ciclo de Krebs
e aminocidos, atravs de uma via anablica chamada de gliconeognese. No jejum, mesmo
o jejum de poucas horas, a gliconeognese a principal fonte da glicose liberada pelo fgado
na circulao.
2. A gliclise, como j foi visto, um a via catablica com a finalidade de produzir energia na
forma de 2NADH + 2ATP a partir da degradao de glicose a piruvato de acordo com a
equao qumica seguinte:
Glicose + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi 2Piruvato + 2NADH + 2ATP + 2H2O + 4H+
A gliconeognese tem a finalidade de sintetizar glicose a partir de piruvato, isto , faz o
caminho metablico inverso ao da gliclise. Mas, a gliconeognese , contrariamente
gliclise, muito endergnica. Para produzir glicose a partir de piruvato necessitam-se
2NADH+4ATP+2GTP, conforme a estequiometria indicada na equao abaixo:
2Piruvato+2NADH+4H++4ATP+2GTP+6H2O Glicose+2NAD++4ADP+2GDP+6Pi
3. A gliconeognese utiliza enzimas glicolticas reversivelmente, mas trs dessas enzimas, a
hexoquinase, a fosfofrutoquinase e a piruvato quinase, catalizam reaes com G- muito
negativo,

sendo

essencialmente

irreversveis.

Estas

reaes

so

substitudas

na

gliconeognese por reaes exergnicas, tornando termodinamicamente favorvel a sntese


de glicose a partir de piruvato. Destas reaes, as duas primeiras correspondentes s enzimas
hexoquinase e fosfofrutoquinase, so substitudas por reaes simples de hidrlise de ligao
fosfo-ester, catalisadas, respectivamente, pelas enzimas glicose-6-P-fosfatase e frutose-1,6bis-fosfatase. J a terceira reao, que permite a volta de piruvato para P-enolpiruvato mais
complexa e se d em duas etapas catalisadas, respectivamente, por piruvato-carboxilase e Penolpiruvato-carboxiquinase.
4. O balanceamento entre gliclise e gliconeognese coordenadamente controlado por um
complexo sistema de regulao enzimtica, envolvendo interaes alostricas e modificaes
covalentes. Todo esse controle est concentrado nas 3 reaes nas quais gliclise e

gliconeognese seguem reaes independentes, irreversveis e opostas, que so: 1) glicose /


glicose-6-P; 2) frutose-6-P / frutose-1,6-bisP; 3) P-enolpiruvato / piruvato.
Grupo de discusso:
1.) Citar os efetuadores alostricos positivos e negativos de fosfofrutoquinase no fgado. Quais
so as consequncias destes efetuadores no fluxo relativo dos metabolitos atravs da
neoglicognese e da gliclise?

METABOLISMO DE CIDOS GRAXOS

1.

Os triacilglicerdeos desempenham um papel de reserva de energia metablica.

Algumas de suas propriedades fsico-quimicas so ideais para essa funo: a) elevado grau
de reduo de seus C, maximizando a quantidade de energia livre liberada na oxidao e b)
alta hidrofobicidade, permitindo estocagem livre de gua (estoques anidros). No por acaso
que os triglicerdeos compe cerca de 90% da reserva de energia metablica e tambm da
dieta lipdica dos humanos.
2.

A reserva de triacilglicerdeos do tecido adiposo mobilizada atravs da hidrlise a

glicerol e cidos graxos livres, catalisada por lpase especfica. Os cidos graxos livres so
carregados pela corrente sangunea na forma de complexos com albumina, que representa
50% da protena do plasma. cidos graxos livres so muito insolveis, a ~1microM formam
micelas, que so altamente txicas.
3.

A via catablica de degradao de cidos graxos para produo de ATP ocorre na

matriz mitocondrial e se chama beta-oxidao. Esta via leva clivagem sequencial da cadeia
do cido graxo em pares de C, liberando a cada ciclo: 1acetilCoA, 1NADH e 1FADH 2 (ver
reaes abaixo), que alimentaro, respectivamente, o ciclo de Krebs e a cadeia respiratria.
Mas, a beta-oxidao exige previamente uma ativao inicial que consome 1 ATP e libera o
cido graxo na forma de acilCoA. Esta etapa preliminar de ativao se d associada
membrana externa da mitocndria e, a transferncia da acilCoa para dentro da mitocndria,
mediada pela carnitina.

Reaes de um ciclo de beta-oxidao


O
R CH2 CH2 CH2 C S-CoA

(acil-CoA)

oxidao

FAD
FADH2
H

R CH2 C = C C S-CoA

(enoil-CoA)

H
hidratao

H2O

HO H

R CH2 C C C S-CoA
H

(L-hidroxiacil-CoA)

H
NAD+

oxidao

NADH
O

R CH2 C CH2 C S-CoA


tilise

(ceto acil-CoA)
CoA

R CH2 C S-CoA +

H3C C S-CoA

4.

(acetil-CoA)

A oxidao completa de uma molcula de palmitato (16C) a CO2 e H2O, atravs da

beta-oxidao, ciclo de Krebs e cadeia respiratria, rende 129ATP. importante destacar que
este rendimento, medido em ATP/mol-oxidado, muito superior ao da oxidao completa de
aucares e protenas, pois a oxidao de um cido graxo leva liberao de 37,6kJ/g de
energia livre, enquanto oxidao de aucares ou protenas libera apenas 16,7kJ/g.
5.

Os cidos graxos so sintetizados no citosol por via anablica prpria que adiciona

sequencialmente unidades de 2C cadeia em crescimento. Esta via alimentada por


acetilCoA, mas s a primeira unidade de 2C entra como acetilCoA, as subseqentes so na
forma de malonilCoA. Portanto, o acetilCoA precisa ser previamente ativado a malonilCoA, por
carboxilao e consumo de 1ATP, para permitir a reao de condensao, levando ao
crescimento da cadeia do cido graxo de uma unidade de 2C, por ciclo de sntese. A ativao

de acetilCoA catalisada pela acetilCoA-carboxilase, uma enzima sujeita a controle complexo,


envolvendo regulao alostrica e ativao / desativao por modificao covalente
(fosforilao / desfosforilao).
6.

A sntese de palmitato (16C) altamente endergnica, obedecendo a sequinte

estequiometria:
AcetilCoA+7malonilCoA+14NADPH+7H+ palmitato+7CO2+14NADP++8CoA+6H2O
A elongao da cadeia alm de 16C e a insero de duplas ligaes feita por outros
sistemas enzimticos especializados,

que se localizam

na membrana do retculo

endoplasmtico. Mas, mamferos no possuem enzimas para introduzir duplas ligaes em


cadeias de cidos graxos acima do C9. Por isso, linoleato (18:2) e linolenato (18:3), so cidos
graxos essenciais que precisam ser adquiridos pela dieta.
7.

importante destacar que animais degradam eficientemente glicose at acetilCoA pela

gliclise e assim podem converter C de acar em cadeias de lipdeo de reserva. Mas, estes
organismos no podem fazer o caminho de volta de cadeias de cido graxo para glicose, pois
no possuem reaes que convertam acetilCoA em piruvato ou oxalacetato.

Grupo de discusso:

1.) Ponto de fuso dos cidos graxos. Os pontos de fuso de uma srie de cidos graxos de
18 tomos de carbono so: cido esterico (69,9 oC), cido olico (13,4oC), cido linolico(5oC) e cido linolnico (-11oC). Que aspecto estrutural destes cidos graxos de 18
carbonos pode ser correlacionado com o ponto de fuso? Fornea uma explicao
molecular para esta tendncia do ponto de fuso.

2.) Mostre como os cidos graxos so ativados antes de serem degradados. Em que
compartimento celular isso ocorre?
3.) Aonde e sob que forma so estocados os cidos graxos? Como os cidos graxos da
reserva metablica so mobilizados para serem oxidados na matriz mitocondrial?
4. Explique os passos da -oxidao dos cidos graxos, partindo de uma molcula de
palmitato. Calcule o rendimento energtico da oxidao completa de palmitato a CO2 e
H2O.

5.) Na -oxidao, a cadeia de cidos graxos degradada aos pares de carbono. Na sntese
de cidos graxos, a cadeia cresce tambm aos pares de carbono. No entanto, o precursor na
elongao da cadeia, durante a sntese, malonil-CoA e no acetil-CoA. Explique porqu.

CICLO DAS PENTOSES

1. Muitas funes celulares que envolvem reaes endergnicas so efetuadas graas


hidrlise exergnica de ATP. Outras reaes endergnicas, como a sntese de cidos
graxos e colesterol e a fotossntese, requerem NADPH, que tem um grande poder redutor.
2. O grupo fosforila no carbono 2 de uma das unidades de ribose do NADPH o diferencia de
NADH. NADH oxidado pela cadeia respiratria para gerar ATP, enquanto que NADPH
serve como um doador de eltrons em reaes biossintticas redutoras.
3. Na via das pentoses, NADPH gerado quando a glicose-6-fosfato oxidada a ribose-5fosfato, que um acar de 5 carbonos, componente de vrios compostos importantes,
como ATP, CoA, NAD+, FAD, RNA e DNA.
4. A via das pentoses tambm catalisa a interconverso de acares de 3, 4, 5, 6 e 7
carbonos, em uma srie de reaes no oxidativas que ocorrem no citosol.
5. As reaes da via das pentoses so as seguintes:
glicose-6-fosfato desidrogenado e convertido a ribulose-5-fosfato, em trs reaes,
produzindo 2 NADPH + H+.
ribulose-5-fosfato isomerizada a ribose-5-fosfato.
Nestas reaes, 2 NADPH + H+ e uma ribose-5-fosfato so gerados para cada glicose-6fosfato oxidada.
ribose-5-fosfato

convertida

gliceraldedo-3-fosfato

frutose-6-fosfato

pela

transcetolase e transaldolase. A transcetolase catalisa a transferncia de unidades de


C2 de uma cetose para uma aldose. A transaldolase transfere unidades de C3 de uma
aldose para uma cetose.
As reaes de transcetolase e transaldolase criam uma ligao reversvel entre a via das
pentoses e a via glicoltica. O resultado dessas reaes a formao de 2 hexoses e 1
triose a partir de 3 pentoses:
C5 + C5

C3 + C7

Transcetolase

C7 + C3

C4 + C6

Transaldolase

C5 + C4

C3 + C6

Transcetolase

6. O excesso de ribose-5-fosfato formado pela vias das pentoses pode ser completamente
convertido em intermedirios da via glicoltica.
7. A primeira reao da via das pentoses, a desidrogenao da glicose-6-fosfato,
praticamente irreversvel. E essa a reao em que a via das pentoses controlada. O
fator regulatrio mais importante o nvel de NADP +, o receptor de eltrons na oxidao da
glicose-6-fosfato a 6-fosfogluconolactona. Alm disso, NADPH compete com NADP + pela
ligao enzima. A parte no oxidativa da via das pentoses controlada principalmente
pela disponibilidade de substratos.]]
8. A via percorrida pela glicose-6-fosfato depende da necessidade celular de NADPH + H +,
ribose-5-fosfato e ATP:
Quando muito mais ribose-5-fosfato requerida que NADPH + H +, a maior parte de
glicose-6-fosfato convertida a frutose-6-fostato e gliceraldedo-3-fosfato pela via
glicoltica, a transaldolase e a transcetolase convertem esses em ribose-3-fosfato.
Quando a necessidade de NADPH + H+ e ribose-5-fosfato esto balanceadas, a
reao predominante a formao de 2 NADPH e uma ribose-5-fosfato de glicose6-fosfato pela fase oxidativa da via das pentoses.
Quando muito mais NADPH + H + requerido que ribose-5-fosfato, a glicose-6fosfato completamente oxidada a CO2, ou convertida a piruvato.

Grupo de discusso:
1.) Mostre os produtos das vias das pentoses e seus destinos.

METABOLISMO DE AMINOCIDOS

1.

Em animais, o N do grupo amino dos aminocidos so eficientemente obtidos a partir


de NH4+ pelas reaes catalisadas pelas enzimas desidrogenase glutmica e glutamina
sintetase, fornecendo, respectivamente, glutamato e glutamina.

2.

Ainda em animais de forma geral, os aminocidos alanina e aspartato podem ser


obtidos a partir de, respectivamente, piruvato e oxalacetato, atravs da reao de
transaminao tendo glutamato como doador de grupo amino. Outros aminocidos
exigem reaes adicionais, alm da transaminao para sua sntese final. Mas, como
regra, os esqueletos de C dos aminocidos so obtidos a partir dos intermedirios da
gliclise, do ciclo de Krebs e do ciclo das pentoses.

3.

H, no entanto, aminocidos que no podem ser sintetizados por animais devido a falta
do precursor que fornece o esqueleto de C. Estes so ditos aminocidos essenciais e
tem que ser obtidos na dieta. Por exemplo, humanos tem que conseguir da dieta 9
aminocidos essenciais.

4.

Triglicerdeos e glicognio so compostos de reserva, mobilizados quando h


necessidade de energia. Em animais, no existem espcies de protena com funes
de reserva energtica, mas no jejum prolongado protenas so hidrolisadas para liberar
aminocidos que sero catabolisados para produo de energia. O fgado o centro de
catabolisao de aminocidos.

5.

O catabolismo de aminocidos envolve a eliminao de N na forma de NH 4+ e a


transformao dos esqueletos de C em intermedirios da gliclise e do ciclo de Krebs.

6.

Duas reaes principais permitem a eliminao do amino grupo. Diversos aminocidos


podem transferir o grupo amino para o alfa-cetoglutarato numa reao catalisada por
transaminases:
aspartato + alfa-cetoglutarato oxalacetato + glutamato

7. Por outro lado, glutamina e glutamato podem ser desaminados em reaes catalisadas
pela glutaminase e desidrogenase glutmica, respectivamente:
glutamina + H2O glutamato + NH4+
glutamato + NAD+ (ou NADP+) + H2O NH4+ + alfa-cetoglutarato + NADH (ou NADPH) + H+

O ction amnio txico, sendo utilizado para a sntese de glutamina ou convertido em


uria no ciclo correspondente, para fins de excreo.

8. Aminocidos como alanina, aspartato e glutamato so ditos glicognicos porque podem ser
convertidos em, respectivamente, piruvato, oxalacetato e alfa-cetoglutarato, que, por sua vez,
podem ser transformados em fosfoenolpiruvato para sntese de glicose. J os aminocidos
leucina e lisina so chamados cetognicos por produzirem exclusivamente acetilCoA como
produto de degradao, portanto servindo sntese de corpos cetnicos, mas no de glicose.

Grupo de discusso:
1.) O que so aminocidos glicognicos e cetognicos? D exemplos e explique mostrando as
reaes relevantes do metabolismo.
2.) Mostre de onde vem e para onde vai os grupamentos amina e o esqueleto carbnico na
sntese e degradao dos aminocidos.

ADENDO
CICLO DO NITROGNIO.

1.

Os gases mais abundantes no ar atmosfrico, O2 e N2, so essenciais para a existncia


da vida biolgica no planeta Terra, mas divergem quanto reatividade qumica. O O 2
tem propriedades de radical livre reagindo com relativa facilidade, da servir muito bem
como oxidante final na respirao de todos os organismos. J o N 2 possui uma tripla
ligao altamente estvel que lhe confere baixssima reatividade qumica. Apesar disso,
o N2 gasoso da atmosfera a fonte do elemento N que garante a vida na Terra. Por
essas razes fsico-qumicas a reduo do N2 atmosfrico pelos sistemas biolgicos
tem caractersticas muito peculiares.

2.

A reduo qumica do N2 a NH3 exige condies drsticas, 500 graus Celsius de


temperatura e 300 atm de presso, certamente incompatveis com a vida biolgica. Mas
bactrias especializadas do gnero Rhyzobium, que so simbiontes de plantas
leguminosas, reduzem eficientemente N2 a NH4+, uma espcie qumica totalmente
compatvel com o metabolismo de todos os organismos. Portanto, o N 2 fixado por essa
simbiose entre planta e bactria garante a disponibilidade do elemento N para todas as
formas de vida terrestre. As bactrias fixadoras de N2 possuem um complexo enzimtico
singular, a nitrogenase. A reao de reduo do N2 a NH4+ (fixao de nitrognio), qual

envolve um redutor poderoso a grande investimento de energia na forma de ATP,


catalisado pela nitrogenase, qual usa NADPH + H+ como doador de eltrons:
N2 + 8 H+ + 8 e- + 16 ATP + 16 H2O 2 NH3 + H2 + 16 ADP +16 Pi
3.

A volatilidade do NH4+ (NH3 + H+) no favorece sua permanncia no solo, mas existem
bactrias autotrficas de vida livre, muito abundantes e largamente disseminadas, que
so especializadas na oxidao do ction amnio a nitrito e nitrato para fins de
obteno de energia metablica. Desta maneira o elemento N estavelmente
depositado no solo na forma de espcies qumicas, sais de nitrito e nitrato, que so
eficientemente absorvidas pelas razes das plantas e prontamente reduzidas a NH 4+ no
interior da clula vegetal.
As etapas sumariamente mencionadas compreendem o ciclo do nitrognio na natureza: a)
reduo do N2 a NH4+; b) oxidao de NH4+ a nitrito e nitrato; c) reduo de nitrito e nitrato
a NH4+ e d) transformao do elemento N de inorgnico para orgnico com a sntese de
aminocidos a partir de NH4+, reao possvel em todas a formas de organismos
biolgicos.

CONTROLE HORMONAL DO METABOLISMO e INTEGRAO METABLICA.

1. A regulao metablica feita de interferncia direta de determinadas reaes qumicas


que compem o metabolismo, aumentando ou reduzindo sua velocidade. O resultado
direto deste processo a maior oferta de substratos ou acmulo de metablitos que
acabar por influenciar outras vidas dependentes destes compostos e a forma mais
eficiente de regulao desta rede aumentar a concentrao ou alterar a eficincia da
enzima.

2. Pode se controlar a sntese ou degradao enzimtica; tambm se pode modular a


atividade enzimtica atravs de mudanas conformacionais da prpria enzima provocada
atravs da ligao de compostos ou grupos na cadeia peptdica: regulao alostrica e
regulao por modificao covalente. A concentrao enzimtica tambm pode variar
conforme a oferta do substrato; alterao mediada atravs de hormnios.

3. Hormnios so sinais qumicos que permitem a comunicao entre clulas. So


sintetizados em clulas glandulares para atingir clulas alvo atravs da circulao
sangunea. As clulas alvo respondem a hormnios especficos por possurem os
respectivos receptores hormonais. A ligao do hormnio ao receptor segue uma reao
de equilbrio semelhante interao enzima-substrato: H + R [RH]: a constante de
dissociao de RH (KD), correspondente reao inversa muito baixa - (10 -12 a 10-9 M) devido alta afinidade entre hormnio e receptor.
4. Uma parte importante dos receptores hormonais so protenas integrais de membrana,
muitas da quais tem, atualmente, sua estrutura primria conhecida e sua estrutura
tridimensional modelada, em conseqncia da clonagem e seqenciamento dos seus
respectivos genes. Por exemplo, o receptor -adrenrgico do hormnio adrenalina,
encontrado em hepatcito e outros tipos celulares, possui um peso molecular de 64 kD,
compreendendo uma nica cadeia peptdica que, de maneira serpentiforme, atravessa a
membrana 7 vezes, deixando do lado extracelular, a extremidade N-terminal e 3 alas, e
do lado intracelular, outras 3 alas mais a extremidade C-terminal. A poro extracelular
do receptor contm o stio de ligao da adrenalina, enquanto a poro intracelular se
associa a um trmero de protenas conhecidas como protena-G, por ter um stio
especfico para ligao do nucleotdeo GTP. So hoje conhecidos mais de 1000
receptores, de mltiplos hormnios, com esta estrutura bsica formando a superfamlia
chamada dos receptores associados a protena-G. A funo deste receptor transduzir o

sinal adrenalina de fora para dentro da clula, processo que mediado pelas protenasG. H tambm receptores presentes no citoplasma nuclear e citoplasmtico e neste caso,
o hormnio precisa ter alta solubilidade a lipdeos, atravessando a membrana plasmtica
como os hormnios esterides para encontrar o seu receptor dentro da clula.

4. Os hormnios esto envolvidos no metabolismo em dois nveis: induo ou represso


gnica de determinadas enzimas ou atravs da modificao covalente: A fosforilao
mediada pelas protenas quinases que transferem o grupo fosfato do ATP para resduos
especficos de serina, treonina e tirosina, formando uma ligao ster fosfrico ou a
retirada do grupo fosfato catalisada pela ao de fosfoprotenas fosfatases atravs da
hidrlise.

5. A ligao de adrenalina ao receptor -adrenrgico acoplado a protena G ativa a enzima


adenilato ciclase atravs da ativao da subunidade (por ligao de GTP), presente na
face interna da membrana citoplasmtica, qual ativa a adenilato ciclase, catalisando a
formao de cAMP a partir de ATP e desencadeando a transduo de sinal. A descoberta
de cAMP, por Sutherland e colaboradores h cerca de 40 anos, levou criao do
conceito do segundo mensageiro da ao hormonal, sendo cAMP o primeiro a ser
descrito, e permitiu dar incio progressiva compreenso dos mecanismos de ao do
receptor de adrenalina. Devemos lembrar que os primeiros mensageiros qumicos
extracelulares so os hormnios. cAMP tem efeito transiente e hidrolisada pela ao da
fosfodiesterase. Na clula, o balano entre as reaes de sntese (a) e degradao (b)
regula a concentrao intracelular do cAMP.

7.

a)

ATP + H2O cAMP + 2 Pi; catalisada pela adenilato ciclase

b)

cAMP + H2O AMP; catalisada pela fosfodiesterase.


A base da ao metablica do cAMP a ativao alostrica de uma quinase cujos

substratos so protenas, sendo conhecida como protena quinase dependente de cAMP, ou


simplesmente PKA (Protein Kinase dependent on cAMP). A PKA, uma vez ativada, catalisa a
fosforilao ativadora (modificao covalente) de uma cascata de protenas quinases que
terminam na fosforilao da fosforilase a e da sintase do glicognio, causando,
respectivamente, a ativao e a inativao dessas enzimas. O resultado final dessa seqncia
de ativaes enzimticas, com alternncia de regulao alostrica e modificao covalente,
a fosforlise do glicognio liberando glicose-1P, comandada por sinais hormonais
extracelulares.
8. Os efeitos de ativao ou no da via dependem do receptor ativado, no caso dos receptores
adrenrgicos, os efeitos de 1 so mediados atravs dos ons clcio e e a ativao de 2
leva a inibio da via de adenilato ciclase. H casos aonde a protena G do tipo G s sendo

ativadora de adenilato ciclase e do tipo GR inibindo a adenilato ciclase. Algumas toxinas podem
ativar ou bloquear a via de transduo de sinal: toxina da clera e a toxina da coqueluche.
9. Dois hormnios so os principais responsveis pelo equilbrio da concentrao da glicose
circulante: Glucagon e insulina.
10. O glucagon um hormnio que tem efeitos equivalentes ao da adrenalina no controle do
metabolismo do glicognio: possui um receptor da famlia dos receptores acoplados a
protena-G e ativa a cascata que se inicia com cAMP/PKA. Este liberado em condies de
hipoglicemia ativando processos degradativos para manuteno da glicemia sangunea. A PKA
(protena quinase ativada por cAMP) fosforila a fosforilase quinase tornando-a ativa. A
fosforilase quinase fosforila agora glicognio fosforilase. A glicognio fosforilase ativada
(quando fosforilada, glicognio fosforilase b a) catalisa a hidrlise de resduos de glicose do
glicognio liberando grupos de glicose-1-fosfato. No mesmo tempo, a fosforilase quinase,
ativada pela cascata do receptor de glucagon-protena-G, cAMP/PKA, fosforila a glicognio
sntase , a qual se torna inativa quando fosforilada (sntase I sintase D).
b) A insulina tem efeito oposto, promove a absoro de glicose pelo fgado e msculos e usa
deposio nas reservas de glicognio. Mas importante notar que a insulina tem mecanismos
de ao totalmente diferentes da adrenalina e do glucagon. Os receptores de insulina no
pertencem famlia dos receptores acoplados a protena-G e no tm ao sobre a adenilato
ciclase. Seus receptores so do grupo de receptores cujo domnio intracelular apresenta
atividade intrnseca de protena-quinase de tirosina. A insulina estimula fosfoprotenas
fosfatases. Para reverter a ao do glucagon, a insulina promove a ativao da fosfoprotena
fosfatase que catalisa a desfosforilao da glicognio fosforilase e da glicognio sintase,
levando a inativao da primeira (fosforilase a b) e ativao da segunda (sntase D
sintase I). Desta forma o fluxo glicoseglicognio favorecido. O transporte da glicose no
interior das clulas com a atuao da insulina um processo passivo mediado por uma famlia
de permeases denominadas GLUT (glicose transporter).
11. Respostas celulares rpidas desencadeadas por hormnios s podem ser obtidas atravs
da ativao, ou da inibio, de enzimas pr-existentes. Hormnios esterides (por exemplo
cortisol) quando secretados difundem-se pela membrana citoplasmtica e ligam-se ao seus
receptores intracelulares os quais, quando ativados, promovem no ncleo a regulao do
metabolismo pela induo da transcrio de genes que codificam enzimas especficas,
levando sntese de novo das protenas correspondentes, fenmeno conhecido como induo
enzimtica. Mas o mecanismo de induo enzimtica desencadeado por hormnios resulta
necessariamente numa resposta celular lenta, uma vez que os RNAs mensageiros (mRNAs)
precisam ser transcritos, processados, transportados para o citoplasma e
traduzidos para produzir as protenas enzimticas exigidas.

finalmente

12. A adrenalina estimula uma resposta local no msculo. A liberao de adrenalina induzida
por estmulo nervoso autnomo em situaes de perigo, exerccio fsico, e hipoglicemia e
induz a degradao do glicognio com os fins de fornecer glicose-1-fosfato como fonte de
energia para atividades musculares que permitem ao animal reagir a estas situaes.
13. Regulao da gliclise e gliconeognese
A gliclise uma das vias metablicas prinicipais para o fornecimento de energia. No fgado,
encontra-se tambm a gliconeognese, a qual , de forma geral, uma via antagnica da
gliclise. A regulao das duas vias feita de forma reciproca, isto , quando uma delas est
ativa, a outra est inibida. H trs vias sob controle metablico: as converses reversveis de:
(i) glicose para glicose-6-fosfato (hexoquinase e glicose-6-fosfatase); (ii) frutose-6-fosfato e
frutose-1,6-bisfosfato (fosfofrutoquinase e frutose-1,6-bisfosfatase; e (iii) fosfoenolpiruvato e
piruvato (piruvato quinase e fosfoenolpiruvato carboxiquinase, piruvato carboxilase).
A fosfofrutoquinase o principal ponto de regulao da gliclise. AMP e frutose-2,6-bisfosfato
agem como efetuadores alostricos positivos. A formao de frutose-2,6-bisfosfato est sob
controle hormonal. Em condies de hipoglicemia, o glucagon estimula a produo de cAMP
no fgado. Isso ativa a PKA a fosforilar e inativar a fosfofrutoquinase e ativar a frutosebisfosfatase-2, diminuindo a concentrao de frutose-2,6-bisfosfatase. Como resultado, o
equilbrio entre as reaes de fosfofrutoquinase alterado, em favor da sntese de frutose-6fosfato, aumentado o fluxo gliconeognico e a sntese de glicose-6-fosfato. Ao contrrio, em
condies de hiperglicemia, as concentraes de cAMP diminuram, e o consequente aumento
de frutose-2,6-bisfosfato ativa a fosfofrutoquinase e promove a gliclise.

FOTOSSNTESE

1. A fotossntese o processo pelo qual a energia luminosa transformada em energia


qumica e poder redutor, armazenada nas molculas de ATP e NADH +H +. Num segundo
passo fase escura (na verdade, fase independente de luz) a energia armazenada utilizada
para sntese de glicose a partir de CO 2 +H2O. A fotossntese ocorre nos cloroplastos, uma
organela que, como a mitocndria, possui uma membrana externa altamente permevel e
uma

membrana

interna

praticamente

impermevel,

separadas

por

um

espao

intermembranar.
A equao geral da fotossntese :
6 CO2 + 6 H2O C6H12O6 + 6 O2 Go= +2.870 KJ x mol-1
3. As reaes dependentes de luz ocorrem na membrana tilacide e envolvem processos
semelhantes ao transporte de eltrons e fosforilao oxidativa da mitocndria. As reaes
independentes de luz ocorrem no estroma.
4. Os primeiros estudos de fotossntese realizados levaram concluso de que CO 2 era a
fonte do O2 gerado na fotossntese. Em 1931, entretanto, demonstrou-se que bactrias
fotossintetizantes anaerbicas, sintetizam glicose a partir de CO2, sem gerar O2:
CO2 + 2 H2S luz (CH2O) + 2 S + H2O
5. A reao geral da fotossntese pode ser demonstrada como segue:
CO2 + 2 H2A luz (CH2O) + 2 A + H2O
Em cianobactrias, H2A H2S, e em plantas, H2O. Isso sugere que a

fotossntese seja

um processo de duas fases, nos quais a energia solar utilizada para oxidar H2A (fase
clara):
2 H2A luz 2 A + 4[H]
e o agente redutor resultante [H] subsequentemente reduz CO2 (fase escura):
4[H] + CO2

(CH2O) + H2O

luz

6. O principal fotorreceptor na fotossntese a clorofila. A luz absorvida pelas clorofilas antena


e pigmentos acessrios transferida para centros de reao fotossintticos, onde ocorrem
as principais reaes da fotossntese.

7. Plantas e cianobactrias utilizam o poder redutor gerado pela oxidao de H 2O dirigida pela
luz para produzir NADPH.

8. A produo de O2 na fotossntese requer 2 fotossistemas: Fotossistema I (P700) gera um


forte agente redutor, capaz de reduzir NADP +, e concomitantemente, um oxidante fraco;
Fotossistema II (P680) gera um forte agente oxidante, capaz de oxidar H 2O, e
concomitantemente, um redutor fraco. O redutor fraco reduz o oxidante fraco. Assim,
fotossistemas I e II precisam funcionar em srie para acoplar a oxidao da H2O com a
reduo de NADP+ (transferncia de eltrons de H 2O para NADP+, formando O2 e NADPH
+ H+).

9. Quando iluminado, o FS II passa para uma forma excitada e perde eltrons, os quais so
transportados por reaes de xido-reduo para o fotossistema I. O PS I iluminado
fornece eltrons para a reduo de NADP+. Como resultado temos a oxidao do FS II e a
reduo do FS I. A reposio de eltrons em PS II feita por eltrons provenientes da
oxidao de gua e, em PSI, por eltrons emitidos por PSII.

10.

Os componentes envolvidos no transporte de eltrons de H2O para NADP+ com

produo de NAPDPH + H+ esto organizados em trs partculas, que esto ligadas a


membrana tilacide: (1) fotossistema II; (2) complexo do citocromo b 6f; (3) fotossistema I
(fotofosforilao no-ciclica).

11.

Os cloroplastos geram ATP de maneira muito semelhante da mitocndria, ou seja,

atravs do acoplamento da dissipao de um gradiente de prtons sntese de ATP.

12.

Na fotofosforilao cclica, os eltrons emitidos por P700 (PSI) so transferidos ao

complexo citocromo b6f, retornando finalmente a P700. No h sntese de NADPH + H+,


nem liberao de oxignio.

13.

Na fase clara da fotossntese, ATP e NADPH + H + so sintetizados, e esses so

utilizados na fase escura para a sntese de carboidratos. A via pela qual as plantas
incorporam CO2 em carboidratos denominada de Ciclo de Calvin.

14.

O ciclo de Calvin engloba duas fases: (1) a fase de produo, na qual 3 molculas de

ribulose-5-fosfato reagem com 3 molculas de CO2, gerando 6 molculas de gliceraldedo3-fosfato, com o gasto de 9 ATPs e 6 NADPH + H +; (2) a fase de recuperao, na qual os
tomos de carbono de 5 gliceraldedo-3-fosfato entram em uma srie de reaes para dar
origem a 3 ribulose-5-fosfato, com as quais o ciclo recomea.

Grupo de discusso:
1.) Porque as folhas das plantas so verdes? Explique em termos de composio e espectro
de absoro dos pigmentos foliares.

2.) Compare a fase clara da fotossntese com o processo de respirao na mitocndria,


indicando diferenas e semelhanas.
3.) Sabe-se que a produo de O2 na fotossntese requer o funcionamento de dois
fotossistemas. Explique resumidamente como ocorre a interao entre os dois
fotossistemas, incluindo doador e receptor de eltrons no processo.
4.) Explique a regulao do ciclo de Calvin, mencionado as enzimas-chave sujeitas a
regulao e como as reaes da fase controla
5.) Explique como algumas bactrias anaerbicas podem realizar a fotossntese.
6.) Explique como organismos fotossintetizantes sintetizam carboidratos a partir de CO2 e H2O.