Espectrofotometria de absoro no UV-Visvel

A espectrofotometria pode ser definida como toda tcnica analtica que usa a luz
para medir as concentraes das solues, atravs da interao da luz com a
matria.
Fundamento da espectrofotometria
A luz de uma maneira geral mais bem descrita como sendo uma radiao
eletromagntica em virtude de sua natureza dualstica. Ou seja, ela existe e tem um
comportamento de campos eltricos e magnticos oscilantes como a figura abaixo
representa:
Onde:
O comprimento de onda () distancia em metros, de
um pico ao outro da onda;
A frequncia (v) o grau de oscilao das ondas, em
funo

da velocidade

da

luz no

vcuo

que
8

-1

representada pela constante c (c=2, 998x10 m. s ).

De modo que: . v = c

Lei de Lambert-Beer
A fora vital da espectrofotometria est fundamentada na lei de Lambert-Beer,
que estabelece:
A absorbncia diretamente proporcional a concentrao da soluo de amostra.

Os componentes principais de um espectrofotmetro so apresentados e suas

respectivas funes:

Fonte de Luz: composta por uma lmpada de deutrio e uma lmpada

de tungstnio (semelhante lmpada de carro). A lmpada de deutrio emite
radiao UV e a de tungstnio emite luz visvel.
Monocromador: alguns espectrofotmetros ainda possuem um prisma como
monocromador, porm os mais modernos possuem dispositivos eletrnicos que
transformam a luz incidida em vrios comprimentos de onda, em um s
comprimento, ou seja, a luz monocromtica.
Cubeta: o recipiente propcio para conter a amostra que ser utilizada na
anlise, as cubetas podem ser de quartzo, vidro e acrlico, porm recomenda-se que
seja usada uma cubeta de quartzo por que o vidro e o plstico absorvem UV e
causa a reflexo da luz visvel.
Detector: o detector um dispositivo que detecta a frao de luz que passou pela
amostra e transfere para o visor e para o computador acoplado ao aparelho.
Cuidados em espectrofotometria

imprescindvel que o equipamento seja calibrado e manuseado de acordo

com as instrues do fabricante;

Evitar erros de leitura certificar-se de que o equipamento esteja fechado.

Antes da leitura a luz do ambiente pode interferir no resultado;

Manter sempre limpo e fechado a fim de evitar o acumulo de partculas de

poeira que interferem na anlise. Em hiptese alguma toque a cubeta com as mos
sem luvas, a nossa mo contm gorduras e interferem na leitura.

S podem ser analisados por espectrofotometria de absoro compostos que

absorvem luz.

Em caso de solues fortemente coloridas como permangantos, complexos

altamente coloridos, dicromatos, cromatos e outros compostos com cores altamente
acentuadas devero ser feitas no mnimo 5 diluies de concentrao conhecida e
lidas no espectrofotmetro e uma curva analtica dever ser traada afim de
determinar o coeficiente de extino molar. Solues muito concentradas tendem

provocar erros de leitura por que existem muitas molculas prximas umas das
outras.