BACTRIA

CRISTINA F. SILVA BATISTA

Filos do Domnio Bacteria

Proteobacteria

Gram positivo

Cianobactrias

Planctomyces

Espiroquetas Heterotrficos

Bacterias verdes sulfurosas Autotrficos

Bacterias verdes no-sulfurosas

Chlamydia

Deinococcus

Thermotoga

Aquifex

50 filos atualmente
Filos do Domnio Archaea

Euryarchaeota Quimiotrficas

Crenarchaeota
Caractersticas

Procarioto*

Unicelular

Reproduo assexuada

Nutrio por absoro

Metabolismo diversificado (heterotrficas e autotrficas)

Nmero de cromossomos: 1 ou 2
MORFOLOGIA
BACTERIANA
Tamanho

2 8 micrometros (m)

0,2 0,5 m
 Morfologia celular
Formas mais comum de bactrias
Arranjo

Arranjo de cocos
Arranjo

Arranjo de bacilos
Estrutura celular de bactrias
ESTRUTURAS EXTERNAS
DA PAREDE CELULAR
Flagelos - locomoo

Anfitrquio

Monotrqueo

Lofotrqueo Peritrqueo
Estrutura de flagelos bacterianos
Etapas da biossntese dos flagelos
Flagelos
Taxia- movimento direcionado.

Quimiotaxia

Fototaxia

Aerotaxia

Osmotaxia

FMBRIAS - Aderncia
Fmbrias- biofilme

PILI - Conjugao
Glicoclice Cpsula- rgido
Camada limosa- flexveis

Composio qumica
Funo: varivel
Polissacardeo
Aderncia
Proteca
Reserva nutriente cido poli D- glutmico

Proteo- agentes qumicos,

fagocitose e dessecao
Streptococcus sp (crie) Pseudomonas
Parede Celular
Estrutura do Peptideoglicano
Maneira pela qual as unidades de peptdeos e glicanos se associam,
originando a camada de peptideoglicano
 Carga negativa

Estrutura geral de uma parede de

bactrias Gram-positivas
Acido teicico, polmero
de unidades repetidas de
ribitol
Parede Celular

endotoxina

Parede celular de Gram negativas

Fosfolipdeos + protenas+ POLISSACARDEOS
ESTRUTURAS INTERNAS
A PAREDE CELULAR
Membrana citoplasmtica
Estrutura da membrana citoplasmtica
Ausncia de esteris (confere rigidez) e presena de hopanoides
Funes da membrana citoplasmtica
Funes da membrana citoplasmtica
 Permeabilidade da membrana plasmtica
Substancia Grau de Potencial de difuso
permeabilidade para o interior da
clula
gua 100 Excelente
Glicerol 0,1 Bom
Triptofano 0,001 Moderado/fraco
Glicose 0,001 Moderado/fraco
on cloretp 0,000001 Muito fraco
on potssio 0,0000001 Extremamente fraco
on sdio 0,00000001 Extremamente fraco

Fonte: Microbiologia de Brock, 2010.

Proteinas transportadoras

Permite acmulo de soluto contra gradiente de concentrao

Permite maior velocidade no transporte de solutos

Permite a entrada dos solutos (ou seja no somente aqueles difundveis

pela membrana)
As trs classes de sistemas transportadores de
membrana (protenas transportadoras)
Estruturas dos transportadores transmembrnicos e
os tipos de eventos de transporte
Atividade do sistema Lac permease (um simportador) de
E. coli e de vrios outros transportadores simples
Mecanismos do sistema fosfotransferase de E. coli
Mecanismos transportados do tipo ABC
Cromossomo e plasmdeos

Geralmente 1
cromossomo circular;
plasmdeos- vrias
cpias- compatveis
Ribossomos
Corpsculos de incluso

Grnulos de armazenamento utilizados como fonte de material
de reserva ou energia dentre os compostos armazenados esto
os orgnicos glicognio e poliidroxibutirato e os inorgnicos
polifosfatos (volutina ou metacromticos) e enxofre.
Vesculas de gs

Planctnicos

Cianobactrias, bactrias fototrficas verdes e
prpuras, Archaea
Esporulao
FUNES DAS ESTRUTURAS DE SUPERFCIE DE BACTRIAS

ESTRUTURA FUNO COMPOSIO QUMICA

Flagelos Locomoo Protena

Fmbrias Conjugao Protena

Adesividade celular

Cpsula Proteo Polissacardios e polipetdios

Receptores fgicos
Adesividade celular

Parede celular Proteo mecnica Peptidioglicano, cido teicico

(Gram positiva) Receptores fgicos Polissacardios

Envoltrio externo Permeabilidade Fosfolipdio e lipopolissacardio

(Gram negativa) Receptores fgicos

Membrana citoplasm. Permeabilidade Fosfolipdio e protena

e mesossomos Biossntese, CTE
Fixao e migrao de cromossomos
NUTRIO

MICROBIANA
Viso geral

Conceito

Macronutrientes

Micronutrientes

Fatores de crescimento

Meios de cultura
Conceito

Mecanismo que fornece s clulas as ferramentas

qumicas necessrias sntese de diversos monmeros

Fornecimento de nutrientes Sntese de
macromolculas

Catabolismo
Metabolismo
Anabolismo
Exigncias Nutricionais

GUA
Essencial para os microrganismos:
absoro nutrientes dissolvidos
Disponibilidade varivel no ambiente
Se ambiente possui < concentrao de gua: clula
aumenta
ENERGIA

O2
Compostos orgnicos

Autotrficos
Heterotrficos
fotossintetizantes

CO2

H2O
Classificao nutricional de organismos

Grupo nutricional Fonte de Carbono Fonte de energia Exemplos

Quimioautotrficos CO2 Compostos Bactrias nitrificantes

inorgnicos e sulfurosas

Quimioheterotrficos Compostos Orgnicos Compostos Maioria das

Orgnicos bactrias, fungos,
protozorios e
animais
Fotoautroficos CO2 Luz Algas, Cianobactrias
e plantas
Fotoheterotrficos Compostos orgnicos Luz Bactrias violetas no
sulfurosas
 Nutrio microbiana

Macronutrientes

So nutrientes essenciais (provenientes do ambiente) e necessrios

em grande quantidade

Carbono,
nitrognio, fsforo,
Mg+2, Fe+2, K+ , Na+2 (molcula sinal)
hidrognio,
oxignio e enxofre

Comporo
lipdeos, cofatores
carboidratos
cidos nuclicos e
protenas
 Nutrio microbiana

COMPOSIO QUMICA MDIA DE BACTRIAS,

LEVEDURAS E FUNGOS (% PESO SECO)

Elementos Bacteria Levedura Fungo

Carbono 50-53 45-50 40-63
Hidrognio 7 7 7
Nitrognio 12-15 7.5-11 7-10
Fsforo 2-3 0.8-2.6 0.4-4.5
Enxofre 0.2-1 0.01-0.24 0.1-0.5
Potssio 1-4.5 1-4 0.2-2.5
Sdio 0.5-1 0.01-0.1 0.02-0.5
Clcio 0.01-1.1 0.1-0.3 0.1-1.4
Magnsio 0.1-0.5 0.1-0.5 0.1-0.5
Cloreto 0.5 - -
Ferro 0.02-0.2 0.01-0.5 0.1-0.2
 Nutrio microbiana

MACRONUTRIENTES ENCONTRADOS NATUREZA E EM MEIOS DE CULTURA

Elementos

Carbono

Hidrognio

Oxignio
Nitrognio

Fsforo

Enxofre
Potssio
Magnsio
Sdio
Clcio
Ferro
 Nutrio microbiana

Fontes de carbono

Melao de cana, melao de beterraba, amido, glicose

sacarose e lactose

Fatores que influenciam a escolha da fonte de carbono:

1- Alta concentrao de acares rapidamente metabolizados
2- custo
3- pureza da fonte
4- facilidade de esterilizao
CARBONO

todos os organismos requerem alguma

forma de carbono

esqueleto das 3 maiores classes de nutrientes

orgnicos: lipdeos,carboidratos e protenas

heterotrficos utilizam compostos orgnicos

como fonte de carbono

autotrficos utilizam o CO2 como fonte de

carbono
Preferncia da fonte de Carbono por fungos
filamentosos

1- Metano 8- amido

2- Hidrocarboneto de 9- celulose e
Proporo de uso

7 cadeia longa hemicelulose

3- lcool 10- lipdeos e protenas

11- quitina
4- Glicerol
12- queratina

5- acar alcolicos
1 13 6- dissacardeos 13- lignina

7- monossacardeos

Complexidade qumica
 Nutrio microbiana

Fontes de Nitrognio:

Inorgnico : sais de amnia e nitratos.

Orgnico: uria, farinha de soja, resduos de frigorficos e
resduos de fermentao.

Fatores que influenciam a escolha da fonte de nitrognio:

1- ausncia de inibidores
2- custo
3- mistura de fontes de N influenciam a regulao metablica
NITROGNIO

todos os organismos necessitam em alguma forma

parte essencial dos aminocidos(protenas) e cidos nuclicos

bactrias so mais versteis para N que Eucariotos

podem utilizar o N2 (fixao biolgica),nitratos, nitritos e sais de

amnia

em geral compostos nitrognio orgnico: aminocidos e peptdeos

ENXOFRE, HIDROGNIO E FSFORO

essenciais a todos os organismos

S necessrio na biossntese de cistena, cistina, metionina

e de vitaminas (tiamina e biotina)

P essencial para a sntese de cidos nuclicos e ATP

sais inorgnicos (sulfatos e fosfatos) podem ser utilizados

para suprir estes elementos tambm presentes em fontes
proticas (aa), DNA e RNA

alguns destes elementos so encontrados na gua ou na

atmosfera
POTSSIO, MAGNSIO, CLCIO E FERRO

K, Mg cofatores enzimtico

Ca estabilizao parede celular e formao de

endosporos

Fe faz parte dos citocromos, e protenas

transporte eltrons
 Nutrio microbiana

Micronutrientes
So nutrientes essenciais (provenientes do ambiente) e
necessrios em pequena quantidades.
MICRONUTRIENTES OU ELEMENTOS
TRAO

cofatores de enzimas

geralmente no preciso adicionar: presentes na

gua

se gua desmineralizada: adicionar soluo

elementos traos
 Nutrio microbiana

Fatores de crescimento

So compostos orgnicos que alguns microrganismos

necessitam em pequenas quantidades.

Vitaminas, aminoacidos, purinas e pirimidinas.

OBS: Microrganismos muito exigentes nutricionalmente

apresentam menor capacidade biossinttica que os
microrganismos menos exigentes
Fatores de crescimento: vitaminas e suas funes Nutrio microbiana
 Nutrio microbiana

MEIO DE CULTIVO

So solues nutrientes utilizadas para promover o crescimento

dos microrganismos em laboratrio.

Slidos, lquidos

Definidos, indefinidos (complexos), enriquecimento, seletivos,

diferenciais
 Nutrio microbiana

MEIO DE CULTIVO

Definidos: so preparados pela adio de quantidades precisas

de compostos qumicos inorgnicos ou orgnicos altamente
purificados a uma determinada quantidade de gua.

Indefinidos: A composio exata de cada nutriente no

conhecida. Ex: peptona, extrato de levedura, leite soja, carne
entre outros
Substratos para meios complexos:
Extrato de Carne: extrato aquoso de tecido muscular,
concentrado sob a forma de pasta, contm carboidratos, N
orgnico, vitaminas hidrossolveis e sais.

Peptona: produto da digesto da carne (enzimtica ou

cida), fonte de N orgnico e vitaminas.

Triptona: hidrolisado pancretico de carne , rica em

nitrognio-amnico; destinado ao isolamento de organismos de
difcil crescimento.

Extrato de Levedura: extrato aquoso de clulas de
leveduras lisadas, fonte excelente de substncias
estimulantes do crescimento como vitamina complexo
B; contm compostos orgnicos de N e C.

Extrato de malte: extrato aquoso de cevada

malteada. Rica em carboidratos, contm material
nitrogenado, vitaminas e sais minerais.

Tripticase: peptona derivada da casena por

digesto pancretica,fonte rica em nitrognio de
aminocidos.

Meios complexos so altamente nutritivos

geralmente mais fceis de preparar

so os mais usados ( composio exata no

necessria)

mais adequados para fastidiosos

 Nutrio microbiana
MEIO DE CULTIVO

Enriquecidos: Estimula o crescimento de microrganismos que est em baixo nmero

permitindo que o microrganismos seja detectado. Ex: Meio com fenol

Seletivos: Favorece o crescimento de um microrganismo em detrimento de outro.

Ex: meio com antibitico, gar Sabouraud: pH 5,6 e alta concentrao de
glicose (seletivo para fungos), gar verde brilhante: seletivo para
enterobactrias Gram - (Salmonella); o corante verde brilhante adicionado ao
meio inibe as bactrias Gram (+)

Diferencial: Meio de cultura que permite diferenciar caractersticas bioqumicas

de microrganismos com mesma capacidade de crescimento.
Produo de enzimas: adio substrato e verificao halo hidrlise
Hemlise e gar sangue: Streptococcus e Staphylococcus hemolticos
 gar sangue - diferencial

EMB - seletivo
Meios Seletivos/Diferenciais

diagnstico de patognicos (coliformes fecais)

Ex: gar MacConkey - contm sais biliares e
corante cristal violeta, que inibem o crescimento de
Gram + e permitem o desenvolvimento de Gram -
e ainda lactose e o indicador vermelho neutro, que
distingue as Gram negativas produtoras de cido
(vermelhas) das Gram negativas no produtoras de
cido (amarelas) identificao de coliformes
Exemplos de meios seletivos e diferenciais

gar MacConkey

Quanto ao estado fsico os meios podem ser:

lquidos: (caldos) nutrientes so dissolvidos em gua e

esterilizados

slidos: so preparados a partir da adio de um
agente solidificante, antes da esterilizao do meio.

gar-gar: polissacardeo obtido de algas marinhas .
Usado como agente solidificante dos meios. Funde a
100C e gelifica quando a temperatura menor de
45C. No serve como nutriente!!!!

semi-slidos: obtido atravs da adio de uma
quantidade reduzida de agente solidificante (0,3 a
0,5% de gar)

Meios lquidos: multiplicao celular ; processos
industriais em reatores

Meios slidos: usados para imobilizao de m.o. em
placas ou tubos

aparecimento de massas celulares: colnias

Colnia: originada da multiplicao de m.o. em meio
slido importante para a caracterizao dos m.o. para
colnia ser visvel : 1 x 106 clulas so isolados em
meios slido visando obteno de culturas puras

Cultura pura: contm um nico tipo de m.o. sem
contaminantes
Como cultivar um microrganismo em meio de
cultura

Meios lquidos (caldos)- agitao ou no

Meios slidos
Tcnicas
Plaqueamento direto
Plaqueamento por diluio
Espalhamento
Pour plate
Cultivo em meio lquido
Cultivo em meio slido- Plaqueamento direto
Cultivo em meio slido- Plaqueamento de diluies
(espalhamento)
Cultivo em meio slido- Plaqueamento Pour plate
Transporte de nutrientes

Classes de sistema de transportadores

Transporte simples
Transporte de grupo
Sistema ABC

Tipos de transporte
Uniportador
Simportador
Antiportador
CRESCIMENTO MICROBIANO
Conceito: Aumento do nmero de clulas
Condies ambientais
 Temperatura
 oxignio
 pH
 Presso atmosfrica, hidrosttica e osmtica
Efeito da temperatura no crescimento microbiano
Efeito do oxignio no crescimento microbiano

Aerbio Anaerbio Facultativo Microaerfilo Anaerbio aerotolerante

Sistema para cultivo de anaerbios
Sistema para cultivo
de aerbios
Efeito do pH sobre o crescimento

Microrganismo acidfilo

Microrganismo alcalfilico

pH intracelular sempre prximo do neutro

Efeito da concentrao de NaCl no crescimento
METABOLISMO
MICROBIANO
 Metabolismo:

grego: metabole = mudana, transformao

Toda a atividade qumica realizada pelos organismos

So de dois tipos gerais:

- Aquelas que envolvem a liberao de energia: CATABOLISMO

- Aquelas envolvidas na utilizao da energia: ANABOLISMO

Muitos dos mecanismos metablicos microbianos so tambm utilizados

pelos macro organismos, inclusive o homem.
~ 76%
 Requerimentos de energia:

Sntese dos componentes celulares: parede, membrana, etc.

sntese de enzimas, cidos nuclicos, polissacardeos, etc.
reparos e manuteno da clula
crescimento e multiplicao
acumulao de nutrientes e excreo de produtos
indesejveis
motilidade
 Catabolismo

Metabolismo
Anabolismo

Biomolculas: Carboidratos, lipdeos, proteinas, bases

nitrogenadas

Integrao catabolismo e anabolismo

Metabolismo primrio e secundrio

Diversidade metablica
Fontes de energia

Para a maioria dos microrganismos a energia

retirada de molculas qumicas (nutrientes)

Para outros a energia proveniente da luz.

Reaes de oxidao-reduo
(redox)

So reaes onde eltrons se movem de um doador,

o agente redutor, para um aceitador de eltrons, o
agente oxidante.

Oxidante + (n) e- redutor

Exemplo de uma reao de oxidao-reduo
Compostos que armazenam
energia
Estrutura da coenzima NAD+
Exemplo esquemtico de uma reao de oxidao-reduo, envolvendo
as formas oxidadas e reduzidas de NAD+ e NADH
Fluxo da energia

A concentrao de ATP na
clula baixa.
Numa clula em plena
atividade chega a 2 mM

At 45%

Em motores a exploso ou em turbinas o

Fosforilao
rendimento oscila em torno de 30%.
 Respirao Aerbica
Gerao de ATP
1- Fosforilao em nvel de substrato
Ex1) 2-P-glicerato PEP ------- piruvato
Ex2) 1,3 di-Pglicerato 3-P glicerato

2 Fosforilao oxidativa

3- Fotofosforilao ocorre somente em clulas fotossintticas

 1. Fosforilao em nvel de
substrato

O grupo fosfato adicionado a

algum intermedirio tornando-se de
alta energia que pode ser
transferido ao ADP.
 2. Fosforilao oxidativa

A energia liberada pela oxidao de compostos qumicos utilizada na sntese de

ATP

Oxidao: perda de eltrons (ou tambm perda de H)

H H+ + e-
COOH-CH2-CH2-COOH COOH-CH=CH-COOH + 2H
(cido succnico)

A Fosforilao oxidativa envolve uma cadeia de transporte de eltrons (srie

de reaes integradas)

energia liberada aos poucos e mais eficientemente (at 45 %)

Fosforilao oxidativa

Sistema O/R: prximo membro do sistema tem maior capacidade para receber
eltrons
3.Fotofosforilao:
A energia da luz utilizada para a sntese de ATP

O NADPH utilizado para reduzir o CO2 no processo de fixao do CO2

 Vias de degradao de nutrientes para produo
energia

Microrganismos que obtm energia de nutrientes orgnicos

(Quimiotrficos) devem inicialmente decompor os nutrientes em
compostos que possam ser utilizados para a produo de energia.

Isso feito por meio de uma srie de reaes qumicas catalisadas

por enzimas: catabolismo
Vias de degradao de nutrientes para produo de energia

Gliclise ou via Embden-Meyerhorf-Parnas

Objetivo: Oxidao de carboidratos (principalmente glicose)

piruvato.

2 estgios:
Estgio 1- sem reao de xido-reduo. Consumo
de 2 ATPs

Estgio 2- Reao de xido-reduo e produo de 4

ATPs

Rendimento energtico lquido: 2ATPs + 2NADH

Alguns compostos intermedirios so usados na via biossinttica

C6H12O6 + 6O2 + 38ADP + 38P 6CO2 + 6H2O + 38ATP

Via Entner-Doudoroff

Provavelmente esta via evoluiu mais precocemente e

envolve menos etapa de fosforilao (uma etapa) e
menor produo de ATP.

Gram e Archaea

Rendimento lquido: 1ATP + 1NADH + 1NADPH

Via Entner-Doudoroff

Via Pentose Fosfato (PPS)

Gera mais intermedirios para as vias biossintticas que

a EMP e ED.

H uma descarboxilao que gera CO2 ( o que no

ocorria nas outras vias).

Produo de ribulose 5P

Rendimento lquido: 1ATP + 2 NADPH

Ciclo do cido ctrico- TCA

Para cada molcula de cido pirvico 3 molculas de CO2 so

formadas.

Formao de compostos intermedirios- via anablica

Ex: Acetil coA- sntese de cidos graxos
cetoglutarato e oxalacetato- sntese de aa
succinil coA- anel porfirina de citocromos
oxalacetato- sntese de fosfoenolpiruvato para formao
de glicose- GLICONEOGNESE

Rendimento lquido: 4 NADH + 1 FADH2 + 1 ATP


Cadeia transportadora de e-

Carreadores associados membrana.

As reaes de transporte de e- faz-se com que a membrana

fique energizado- fora prton motiva- que gerar ATP.

Sequncia dos carreadores- diferente para cada

microrganismo
- Sequencia dos carreadores esto arranjados em ordem
crescente de potencial redutor mais positivos
- Alternancia dos carreadores de transportam somente e- e os
que transportam somente tomos de H
- Gerao de uma fora prton motiva, resultante da separao
de cargas ao longo da membrana tornando o ambiente
extracelular cido e intracelular, alcalino
Transporte de eltrons e gerao Quimiosmtica de ATP
Estrutura e funo da ATP sintase (ATPase)

Fermentao

Conceito bioqumico:
Obteno de En a partir da oxidao parcial de
carboidratos.
Fosforilao em nvel de substrato

Baixo rendimento energtico:

- Oxidao parcial dos compostos organicos

- Pouca diferena do Eh do doador e do receptor.


Autotrficos

Fotossntese

Cianobactrias

H2O + CO2 + Luz PR + ATP (CHO)n + H2O + E

clorofila a

Prpuras

H2S + CO2 + Luz PR + ATP (CHO)n + H2O + SO

Bacterioclorofila

Fotossntese

transformao de energia luminosa em energia qumica

processando o dixido de carbono e outros compostos (CO2),
gua (H2O) e minerais em compostos orgnicos e produzindo
oxignio gasoso (O2)

A fotossntese ocorre ao longo de duas etapas:

1-A fase fotoqumica, fase luminosa ou fase clara (fase

dependente da luz solar ou etapa clara ou no claro) a
primeira fase do processo fotossinttico

2-A fase qumica ou "fase escura", onde ocorre o ciclo de

Calvin-benson
 Compostos Classe do Qumica de Uso do O2 Sistemas para
metabolizados metabolismo aquisio de En aquisio de En
Organotrpico Fermentao Doador e- (comp. org) Anaerbico EMP, ED, ou PPS
(comp. org, Doador e- (comp. Org)
doador de e- Respirao Receptor- O2 ou Aerbico e EMP, ED ou PPS
outros anaerbico TCA, cadeia e-

Litotrfico Litotrfico ou Doador e- (H2, Fe +2, Aerbico e cadeia e-

(comp. Inorg. quimioautotrfico H2S, NH4+) anaerbico
doador e-) Receptor (O2 ou NO3)
Metanogenesis Doador e- (H2, Anaerbico Metanognesis
CH3OH, CH3NH2)
Receptor CO2
Fotoautotrfico Fotlise do H2O Aerbico Fotossistemas I e II
Fotlise H2S, HS-, Anaerbico
Fe+2
Absoro de luz Fotoheterotrfico Fotlise H2S, HS- Fotossistemas I e II
suplememta o Bacteriorodopsina
uso de Bomba de H+ ou Na+
compostos
organicos
Biossntese de
aminocidos
Catabolismo de compostos aromticos
RECOMBINAO BACTERIANA

AS BACTRIAS NO APRESENTAM REPRODUO
SEXUADA!

COMO ENTO ACONTECE A VARIABILIDADE

GENTICA?
TRANSFORMAO
TRANSDUO
CONJUGAO