Você tem está trabalhando em uma
cromatografia de fase reversa. Explique
o que isso significa e diga qual o
solvente de maior força. R: Quando se
trabalha com cromatografia de fase
reversa teremos uma coluna preenchida
por sílica modificada apolar e para tanto
necessitamos de solvente mais polares,
logo o n-hexano será um solvente mais
forte para este sistema. //Diferencie
cromatografia de fase normal e de fase
reversa. R: Fase normal: FE de alta
polaridade; FM de baixa a média
polaridade. Fase reversa teremos FE de
baixa polaridade e a FM com alta a média
polaridade. //Qual tipo cromatográfico
você escolheria ao saber que o seu
produto de interesse tem as seguintes
propriedades: pelo molecular de 103, é
polar, solúvel em água, porém sem
troca iônica? R: Cromatografia de
Partição em fase normal. //Defina:
tempo morto, tempo de retenção e fator
de capacidade. R: Tempo morto: Tempo
que uma substância não retida leva para
atravessar a coluna. É a fase móvel.
Tempo de retenção: Tempo que decorre
entre o momento da injeção da amostra
até a meia diluição, isto é, máximo do
pico. Fator de capacidade: Tempo de
retenção corrigido, descrevendo como
migrar um composto pela coluna
cromatográfica. K´= tempo de retenção -
tempo morto/ tempo morto. //Que
considerações podem ser feitas quanto à
escolha do comprimento da coluna? R:
Quanto maior o comprimento da coluna,
maior a eficiência de separação (aumenta
o número de pratos teóricos),
entretanto, aumenta a pressão do
sistema. //A eluição cromatográfica
pode ser feita utilizando um sistema
isocrático ou por gradiente. Explique
esses sistemas. R: Sistema isocrático:
Composição da fase móvel constante
durante toda corrida cromatográfica.
Sistema gradiente: Composição de fase
móvel variável durante a corrida
cromatográfica (necessário mais de uma
bomba). //Como se procede à análise
qualitativa e quantitativa? R: Análise
qualitativa: comparação entre os tempos
de retenção de um padrão com a sua
amostra. Análise quantitativa: necessário
à construção de uma curva analítica. É
feita a correlação entre a área do pico e
a quantidade do analito na curva
analítica. //O que é coeficiente de
partição. Que consideração pode ser
feita em relação ao tempo de eluição. R:
Razão da concentração do soluto na fase
estacionária e a concentração na fase
móvel. //Quais os requisitos para uma
quantificação exata e precisa? R: Boa
resolução dos picos: cada pico representa
apenas uma substância; Não poderá
haver adsorção e/ou decomposição das
substâncias no sistema cromatográfico;
Existência de substâncias de pureza
confiável para serem usadas como
padrões – identificação e fator de
correção da área; A amostra a ser
analisada deve ser representativa do
total ; Não deve haver perdas no preparo;
Não deve haver contaminação; Técnica
de injeção correta; A temperatura e
vazão da fase móvel não deve alterar a
resposta do detector; A amostra injetada
deve estar dentro da faixa linear do
detector. //Você tem a seguinte situação:
Cromatografia em fase reversa; FM: 2:8;
Solvente A: água (+ fraco) e solvente B:
Metanol (+ forte). 80% METANOL. R:
Para melhorar a resolução desse
cromatograma diminuiria a quantidade
de metanol (fase B), ou seja a minha fase
móvel passaria a ser mais polar ou mais
fraca o que resultaria em uma aumento
do tempo de retenção, e uma maior
separação das substâncias da amostra.