UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA

FACULDADE DE FARMÁCIA
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM FARMÁCIA

TALITA NUNES DOURADO CARVALHO

AVALIAÇÃO DOS ANTICORPOS ANTI-RODS E ANTI-RINGS (ANTI-RR) EM

PORTADORES DE HEPATITE C CRÔNICA, PRÉ E PÓS-TRATAMENTO

Salvador
2018
 TALITA NUNES DOURADO CARVALHO

AVALIAÇÃO DOS ANTICORPOS ANTI-RODS EANTI-RINGS (ANTI-RR) EM

PORTADORES DE HEPATITE C CRÔNICA, PRÉ E PÓS-TRATAMENTO

Dissertação apresentada ao Programa de Pós-graduação

em Farmácia, da Universidade Federal da Bahia como
requisito parcial para obtenção do título de Mestra em
Farmácia.

Orientadora: Profa. Dra. Maria Luiza B. de Souza Atta.

Co-orientadora: Dra. Isabela Silva de Oliveira.

Salvador
2018
 AGRADECIMENTOS

Agradeço primeiramente a Deus que por ter me proporcionado a oportunidade de

estar aqui hoje e me deu força e sabedoria para seguir em frente mesmo nas
situações mais difíceis. Agradeço aos meus familiares que sempre me ensinaram a
nunca desistir e persistir em trilhar novos caminhos. Agradeço minha orientadora,
Profa. Dra. Maria Luiza B. de Souza Atta, por todo o seu ensinamento, dedicação e
tempo despendidos para a realização da presente Dissertação de Mestrado. À
minha co-orientadora, Dra. Isabela Silva de Oliveira que me conduziu com suas
orientações e paciência. Agradeço toda família LAPIM-DILDA que me acolheu e
ajudou durante essa jornada. Agradeço às minhas amigas que tanto me
aconselharam e me apoiaram nesta trajetória.
 RESUMO

A hepatite C crônica (HCC) é uma das principais causas de doença do fígado.

Recentemente, os autoanticorpos anti-rodseanti-rings (anti-RR)têm sido associados
a pacientes com hepatite C tratados com interferon-α mais ribavirina. OBJETIVOS:
Investigar a presença e frequência dos anticorpos anti-RR em portadores de hepatite
C crônica, pré e pós tratamento, sua relação aos demais marcadores de
autoimunidade, e associações com achados clínicos e virológicos. PACIENTES,
MATERIAIS E MÉTODOS: Estudo de coorte retrospectivo, onde foram incluídas 52
amostras de indivíduos de ambos os sexos, oriundos do Ambulatório de Hepatites
do Complexo Hospitalar HUPES, diagnosticados clinicamente e sorologicamente
para hepatite C. As amostras dos pacientes foram obtidas antes e durante o
tratamento antiviral duplo (12ª e 24ª semana). Os dados de genotipagem e
estadiamento da fibrose dos pacientes com HCC foram obtidos a partir dos registros
médicos. A pesquisa dos autoanticorpos anti-RR foi realizada através da reação de
imunofluorescência indireta usando como antígenos células HEp-2, obtidas em
conjunto comercial de imunodiagnóstico (INOVA Diagnostics). Os marcadores de
autoimunidade, FR e crioglobulinas, foram pesquisados pelas técnicas de
nefelometria e crioprecipitação, respectivamente. RESULTADOS: Foram analisadas
52 amostras de indivíduos antes do tratamento e na semana 12, e apenas 19
pacientes na 24ª semana de tratamento. A prevalência dos anticorpos anti-RR foi de
2% em pacientes não tratados, 4% na 12ª semana de tratamento e 21% na 24ª
semana de tratamento. Não foi encontrada associação entre a presença de
anticorpos anti-RR e parâmetros clínicos e virológicos da infecção, porém o genótipo
3 foi associado ao anti-RR na 24ª semana de tratamento antiviral. CONCLUSÃO: A
presença do anticorpo anti-RR está associada com a duração do tratamento antiviral
interferon-α mais ribavirina.

Palavras chaves: Autoanticorpos anti-RR. Hepatite C crônica. Ribavirina. Interferon.

 ABSTRACT

Chronic Hepatitis C is a main cause of liver disease. Recently, autoantibodies anti-

RR (anti-rings and roads) have been described whose antigenic targets are key
enzymes in the biosynthesis of nucleic acids and phospholipids, the CTPS1 (cytidina
triphosphate synthase 1) and IMPDH2 (inosine monophosphate dehydrogenase 2).
These enzymes have been associated with non-responders or relapses to treatment
with interferon-α plus ribavirin (IFN/RBV). OBJECTIVES: To investigate the presence
and frequency of anti-RR antibodies in patients with chronic hepatitis C, pre and post
treatment, its relation to other autoimmunity markers, and associations with clinical
and virological findings. PATIENTS, MATERIALS AND METHODS: This was a
retrospective cohort study, which included 52 samples of individuals of both sexes,
coming from the HUPES Hospital Complex,who were diagnosed clinically and
serologically for hepatitis C. The data from genotyping and staging of fibrosis in
patients with CHC were obtained from medical records. The test of anti-RR
antibodies was performed by indirect immunofluorescence (IIF) using as antigens
Hep-2 cells, obtained from a commercial set of immunodiagnostic (INOVA
Diagnostics).The autoimmunity markers, FR and cryoglobulins were investigated by
nephelometry and cryoprecipitation, respectively. RESULTS: We analyzed 52
individuals before treatment and at week 12, and only 19 patients at week 24 of
treatment.The prevalence of anti-RR antibodies was 2% in untreated patients, 4% in
the 12th week of treatment and 21% in the 24th week of treatment. No association was
found between the presence of anti-RR antibodies and clinical and virological
parameters of the infection, but genotype 3 was associated with anti-RR in the 24 th
week of antiviral treatment. CONCLUSION: The presence of the anti-RR antibody is
associated with the duration of antiviral treatment with interferon-α plus ribavirin.

Keywords: Anti-rings and rods autoantibodies. Chronic hepatitis C. HCV. Ribavirin.

Interferon.
 LISTA DE ILUSTRAÇÕES

Figura 1. Analise da associação entre FR antes do tratamento, após o tratamento e

no grupo de
NR..............................................................................................................................31

Figura 2. Analise da associação entre Crioglobulinas antes do tratamento, após o

tratamento e no grupo de
NR..............................................................................................................................31

Figura 3. Analise da associação entre o padrão RR antes do tratamento, após o

tratamento e no grupo de
NR..............................................................................................................................32

Figura 4. Imunofluorescência indireta em HEp-2 do paciente de hepatite C,

mostrando padrões de bastões e
anéis...........................................................................................................................33
 LISTAS DE TABELAS

Tabela 1. Características demográficas, clínicas e bioquímicas dos 62 pacientes

infectados pelo vírus da hepatite
C.................................................................................................................................29

Tabela 2. Classificação dos pacientes segundo o tipo resposta virológica durante o

tratamento..................................................................................................................30

Tabela 3. A associação dos pacientes segundo o genótipo e a presença do padrão

RR no tempo
24................................................................................................................................33

Tabela 4. Associação dos pacientes segundo a resposta virologica respondedor e

não respondedor e presença do padrão
RR..............................................................................................................................34

Tabela 5. Associação dos pacientes segundo o sexo masculino e feminino e

presença do padrão
RR..............................................................................................................................34

Tabela 6. Características clínicas e laboratoriais dos pacientes que foram positivos

ao padrão
RR..............................................................................................................................34
 LISTA DE ABREVIATURAS

ALT Alanina aminotransferases

ANA Antinucleares

Anti-LKM1 Anticorpo do fígado de microrganismo tipo 1

BAFF Fator ativador de células B

BCV Boceprevir

CHC Carcinoma hepatocelular

CM Crioglobulinemia mista

CTPS1 Citidina trifosfato sintase 1

DAD Drogas de ação direta

DM/PM Dermatomiosite/Polimiosite

DMTC Doença Mista do Tecido Conjuntivo

DRAI Doenças Reumáticas autoimunes

ES Esclerose Sistêmica

FR Fator reumatoide

GTP Guanosina trifosfato

HCC Hepatite C crônica

HEp-2 Células epiteliais humanas

HVR1 Região hipervariável 1

HVR2 Região hipervariável 2

IFI Imunofluorescência indireta

IMP Inosina monofosfato

IMPDH Inosina-5'-monofosfato desidrogenase

INF Interferon alfa

LAPIM Laboratório de Pesquisa em Imunologia

LES Lúpus Eritematoso Sistêmico

LNH Linfoma não-Hodgkin de células B

LPDs Distúrbios linfoproliferativos

MEH Manifestações extra-hepáticas

MPA Ácido micofenólico

NOSA Autoanticorpos não-órgãos específicos

NR Não respondedor

Peg-INF Interferon peguilado

RBV Ribavirina

RNA Ácido ribonucleico

RR Rods and rings

RVS Resposta Virológica Sustentada

SMA Anticorpos antimúsculo liso

SS Síndrome de Sjögren

SUS Sistema único de saúde

TLV Telaprevir

VHC Vírus da Hepatite C

XMP Xantosina monofosfato

 SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO 11

1.1 VÍRUS HEPATITE C 12

1.2 HEPATITE C CRÔNICA 14

1.3 MANIFESTAÇÕES EXTRA-HEPÁTICASEM PACIENTES COM VHC 16

1.4. ANTICORPOS RR 19

1.4.1 VHC eoanti-RR 21

2 RELEVÂNCIA 23

21 HIPÓTESES 23

3 OBJETIVOS 24

3.1 GERAL 24

3.2 ESPECÍFICOS 24

4 PACIENTES, MATERIAIS E MÉTODOS 25

4.1 PACIENTES 25

4.2 AMOSTRAS DE SANGUE 26

4.3 OBTENÇÃO DOS DADOS DE GENÓTIPO E HISTOPATOLÓGIA 26

4.4 PESQUISA DOS AUTOANTICORPOS ANTI-RR 26

4.5 DETERMINAÇÃO DE MARCADORES DE AUTOIMUNIDADE: 26

CRIOGLOBULINAS E FATOR REUMATOIDE

4.6 DETERMINAÇÕES DE MARCADORES BIOQUÍMICOS 27

4.7 ACOMPANHAMENTOS CLÍNICOS 27

4.8 ANÁLISES ESTATÍSTICAS 27

5 RESULTADOS 28

6 DISCUSSÃO 35

7 CONCLUSÃO 38

REFERÊNCIAS 39

ANEXO A – PARECER CONSUBSTANCIADO DE PROJETO 44