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Staphylococcus spp
Marcos J. P. Gomes
INTRODUO Clulas esfricas com 0,5-1,5 micrmetros de dimetro, ocorrendo em arranjos individuais em pares, e agrupamentos irregulares. Gram positivos, no mveis, no esporulados. Anaerbios facultativos. Quimiorganotrfico com metabolismo respiratrio e fermentativo. As colnias so geralmente opacas, podendo ser brancas ou creme e, algumas vezes, de amarelas laranja. Geralmente catalase positivo com citocromo presente, mas geralmente oxidase negativa. Nitrato geralmente reduzido a nitrito. Suscetvel lise pelo lisoestafina, mas no lisozima. Geralmente crescem a 10% de NaCl. A temperatura tima de 30-37C. Esto associados, principalmente com a pele e mucosas de vertebrados de sangue quente, mas isolados, freqentemente de produtos alimentares, p e gua. Algumas espcies so patgenos oportunistas dos animais e do homem, onde produzem toxinas extracelulares. Os estafilococos so organismos perfeitamente esfricos e de tamanho uniforme (0,8 m). No pus, apresentam-se sob a forma de massas agrupadas irregularmente, lembrando a forma de cachos de uva. Esta aparncia inspirou o mdico escocs Alexander Ogston (1880) a adotar o nome genrico do grupo da palavra grega staphylo que significa cacho de uvas. Nocard, em 1887, isolou estafilococos de mastite ovina. Guillebeau, em 1890, sugeriu que este organismo era responsvel pela mastite em vacas. Gnero Staphylococcus spp Atualmente, segundo http://www.bacterio.cict.fr/s/staphylococcus.html existe 40 espcies e 24 subespcies registradas no gnero Staphylococcus. Staphylococcus aureus o principal patgeno dentre 40 diferentes espcies. A habilidade de produzir coagulase (enzima) divide os estafilococos em 2 principais grupos: coagulase positivos, incluindo as espcies S. aureus, S. intermedius, S. schleiferi subsp. coagulans e S. delphini; e os estafilococos coagulase negativos, incluindo 25 diferentes espcies. A espcie S. hyicus , variavelmente coagulase positivo e, freqentemente includo nos coagulase negativos. As principais espcies do gnero Staphylococcus e as principais doenas dos animais esto contidas na tabela 1. Tabela 1. Associao dos estafilococos coagulase positivos e negativos com hospedeiro e enfermidade. Espcies coagulase + Hospedeiro Doena principal S. aureus Bovinos Mastites, leses supurativas. Ovinos Mastites, piemia. Sunos Leses supurativas Eqinos Botriomicose, artrites, mastites. Caninos Piodermites, infeces urinrias e Discoespondilites Aves Leses de pele, artrites, Bumblefoot S. intermedius Caninos Otite externa, piodermites leses supurativas. Eqinos Leses supurativas Aves Abscessos e artrites S. schleiferi subsp. coagulans Caninos Otite externa S. delphini Delfins Leses supurativas de pele S. hyicus Sunos Epidermite exsudativa

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Estes microorganismos, em meio lquido, aparecem individualizados, em pequenos grupos ou em cadeias curtas. No so mveis. No esporulados. No possuem substncia capsular "in vitro". Entretanto, algumas vezes, podem apresentar cpsula de polissacardeos em amostras clnicas. So facilmente corveis por corantes comuns, quando a amostra recentemente isolada. So Gram positivos. Culturas velhas podem perder a habilidade de reter o corante de Gram. Tabela 2. Associao dos estafilos coagulases negativos com os hospedeiros animais. Espcies coagulase S. hyicus Hospedeiro Sunos Bovinos Aves Bovinos Bovinos Bovinos Bovinos Bovinos Aves Bovinos Ovinos, caprinos Eqinos Aves, bovinos Sunos, ovinos Caprinos aves Eqinos Bovinos Bovinos Felinos Doena principal Epidermite exsudativa Mastites Leses supurativas Mastites Mastites Mastites Mastites Mastites Leses de pele Mastites Mastites Mastites Leses supurativas de pele. Leses supurativas de pele. Leses supurativas de pele Infeces do trato genital Mastites Mastites Otite externa

S. chromogenes S. simulans S. xylosus S. epidermidis S. cohnii

S. sciuri

S. gallinarum S. lentus

S. equorum S. haemolyticus S. warneri S. felis

CARACTERSTICAS CULTURAIS E BIOQUMICAS As colnias patognicas dos estafilos so da cor de porcelana ou alaranjadas quando crescidas em meio slido. O pigmento carotenide pode ser visualizado, em meios que contenham, amido ou cido graxo. As colnias crescem (1 a 3 mm) em agar-sangue, aps o crescimento de 18 horas. Algumas espcies deste gnero possuem grande importncia em Medicina Veterinria, conforme tabela 3.

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Tabela 3. Espcies de estafilococos com importncia veterinria.
Teste ou caracterstica Pigmentao colonial Produo coagulase Fermentao do manitol Hialuronidase Acetona Beta galactosidase Fermentao da maltose DNAse S. epidermidis S. aureus + + + + + + + S. intermedius +tubo +tardia + +fraca + S. hyicus subsp hyicus +tubo + + +

+ reao positiva - reao negativa Os estafilos esto entre os microrganismos no esporulados mais resistentes. Eles resistem dissecao, so resistentes ao calor e toleram os desinfetantes comuns melhor que a maioria das bactrias. TIPAGEM DOS ESTAFILOCOCOS A fagotipagem dos estafilococos utilizada na epidemiologia das infeces humanas. Existem 22 fagos distribudos em 4 grupos (I, II, III e IV) e 4 grupos no classificados. A maioria das amostras humana lisadas por um nico grupo. Algumas amostras de bovinos e de outras origens, geralmente no podem ser fagotipadas, de acordo com o esquema desenvolvido para as cepas humanas. Cepas de animais, evidentemente tm um grau de adaptao ao hospedeiro. Os estafilococos de caprinos pertencem ao grupo II e a grupos no classificados.

Staphylococcus aureus
Marcos J. P. Gomes CARACTERSTICAS CULTURAIS & BIOQUMICAS Foi denominado S. aureus pela colorao da colnia (amarelo-ouro), entretanto algumas colnias no so pigmentadas ou perderam esta caracterstica durante os sucessivos subcultivos. DETERMINANTES DA VIRULNCIA Staphylococcus aureus e outras espcies coagulase positivas, tais como o S. intermedius produzem grande quantidade de protenas extracelulares associadas s clulas do hospedeiro. Essas protenas so importantes para a colonizao e crescimento dos estafilos em vrios tecidos. A presena desses organismos na superfcie e, de seus produtos extracelulares, demonstra como esse patgeno estabelece infeco. Muitas toxinas citolticas, freqentemente chamadas de hemolisinas, e enzimas tais como proteases, lipases, hialuronidase agem associadas para criar leso tecidual, fornecendo nutrientes de baixo peso molecular que podem ser assimilados e utilizados para o seu rpido crescimento. A doena resulta de um fenmeno complexo entre as vrias protenas de superfcie envolvidas na colonizao celular, a matriz extracelular, enzimas e toxinas. Nenhum fator de virulncia predominante na superao da resposta do hospedeiro, exceto no caso da toxina exfoliativa e da toxina da sndrome do choque txico (TSST-1) em que o produto bacteriano , primariamente responsvel por sinais da doena. Entretanto, parece que certas exotoxinas citolticas e enzimas contribuem com o processo da doena. Alem disso, mutantes podem perder mais de um fator de virulncia (alfa toxina e coagulase).

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EXOTOXINAS (Alfa toxina) A toxina mais bem caracterizada a alfa toxina, (alfa hemolisina) uma protena de 34kDa, produzida pela maioria das amostras de S. aureus. Conhecida, inicialmente como alfa hemolisina, ela lisa hemcias de algumas espcies animais. A alfa toxina liga-se a membrana da clula alvo, tais como plaquetas e mastcitos, induzindo a formao de poros na membrana. A clula perde ons rapidamente, sendo lisada. A morte de clulas alvo por esta toxina formadora de poros causa liberao de prostaglandina e outros mediadores da inflamao. Existe evidncia que a alfa toxina causa alterao da funo do macrfago, promovendo leso tecidual no local do abscesso. A toxina alfa dermonecrtica, aps a inoculao na derme de coelhos e outros animais, tendo uma poderosa ao na musculatura lisa vascular. A inoculao de pequenas quantidades da toxina alfa no bere de caprinos e ovinos resulta em necrose tecidual. A alfa toxina detoxicada (alfa toxide) induz uma proteo parcial contra mastite por S. aureus, em caprinos e ovinos, bem como no modelo de mastite em coelhos. Os principais fatores associados com a virulncia dos estafilos esto contidos na Tabela 2. Beta toxina A beta toxina induz a clssica hot cold hemolysis em hemcias de ovinos pela especfica degradao da esfingomielina na membrana. A beta toxina uma enzima txica, denominada de esfingomielinase. A susceptibilidade de clulas de diferentes espcies animais depende da quantidade de esfingomielina na membrana celular. Esta enzima txica age sinergicamente com um nmero de outras toxinas e enzimas destruidoras de membrana, permitindo a degradao tecidual, sob certas circunstncias. Amostras isoladas de bovinos produzem beta toxina e, s ocasionalmente as amostras humanas a produzem. A beta toxina parece ter uma participao particular na mastite, pois a toxina aumenta o crescimento bacteriano na glndula mamria. O toxide beta produziu alguma proteo contra a mastite experimental em coelhos. Gama toxina A gama toxina, recentemente tem sido estudada em detalhes e, sua importncia nas infeces animais no tem sido explorada. A toxina composta de duas protenas, uma das quais uma protease que pode estar encoberta por estruturas de ligao membrana celular especfica para o segundo componente. Delta toxina A delta toxina comporta-se como um detergente, produzindo leso em todas as clulas do hospedeiro. Entretanto, os lipdios da pele podem rapidamente ligar e neutralizar a toxina delta, especialmente em coelhos e camundongos inoculados experimentalmente.

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Tabela 2. Determinantes da virulncia do S. aureus.
Determinantes Ao nos tecidos do hospedeiro ____________________________________________________________________________________________ Polissacardio capsular Antifagoctica Composio da parede celular Peptidoglicano cido teicico Protena da superfcie celular Protena A Protena de ligao ao fibrinognio Protena de ligao a fibrinonectina Protena de ligao a laminina Protena de ligao a colgeno Protena de ligao a vitronectina Toxinas extracelulares e Enzimas Alfa, beta, gama e delta toxinas Leucocidina P-V Toxina da sndrome do choque txico Enterotoxinas Toxina epidermoltica Coagulase Lipase Enzima modificadora de cidos graxos Proteases

Piognico, quimioatrativo Liberado, pode proteger contra o Complemento Interage com a regio Fc da IgG Liga-se ao fibrinognio Liga-se a fibrinonectina Liga-se a laminina Liga-se ao colgeno Liga-se a vitronectina Citotxica para tecidos e leuccitos. Destri leuccitos (leucocida) Liga-se s molculas do complexo de histocomp. (classe ll) induz sntese de citocinas causando mlt. Disfunes orgnicas Emtica e diarria Lisa a ligao da clula com estrato granuloso Catalisa a converso de fibrinognio em fibrina Degrada os lipdios Modifica os cidos graxos liberados pela degradao lipdica Contribu com a formao de abscessos. Degrada 1 srie de protenas, incluindo um nmero de Protenas envolvidas na defesa do hospedeiro. Degrada fosfolipdios Converte plasminognio em plasmina fibrinoltica Degrada o cido hialurnico Cliva tanto o DNA quanto o RNA

Fosfolipases Estafiloquinase Hialuronidase Nuclease

Leucocidina Um pequeno nmero de amostras de S. aureus produz leucocidina (Panton-Valentine leukocidin) que composta de 2 protenas chamadas de F (Fast) e S (Slow), tendo com base a sua mobilidade eletrofortica em agarose. A toxina liga-se aos polimorfonucleares (PMN) e, os destri, aps rpida desgranulao. Existe evidncia que cepas bovinas de S. aureus produzem uma leucocidina que txica para PMN de bovinos, porm bem menos txica para PMN do Homem. Toxic Shock Syndrome Toxin (TSST-1) Algumas amostras de S. aureus produzem uma protena de 22 kDa denominada toxina da sndrome do choque txico (TTST-1), podendo ser absorvida das mucosas, atravs da circulao, assim como as endotoxinas dos organismos Gram negativos.

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A TSST-1 pertence a mesma superfamlia da enterotoxina estafiloccica e toxinas eritrognicas dos estreptococos do grupo A. Elas agem como imunomoduladores ou superantgenos. Estas toxinas ligam-se s regies conservadas do complexo de histocompatibilidade da classe II da clula do hospedeiro, induzindo uma superproduo de linfocinas, resultando em leso tecidual. Essas toxinas podem liberar o fator de necrose tumoral (Tumor Necrosis Factor, TNF) e outras citoquinas que podem induzir o choque cardiovascular associado com a formao de microtrombos nos capilares. Alem disso, as clulas em que a toxina se liga, so destrudas por clulas T. O conhecimento sobre o papel destas toxinas ou superantgenos nas infeces animais, tais como mastite bovina muito limitada. As amostras bovinas de S. aureus produzem TSST-1 que idntica a TSST-1 do Homem. As cepas de ovinos e caprinos produzem uma variante com massa molecular e antigenicidade semelhante, mas com diferente ponto isoeltrico. Estas imunotoxinas, provavelmente sejam controladas tanto pela resposta celular quanto humoral; quer em infeces locais ou sistmicas, tanto nos animais domsticos quanto no Homem. As imunotoxinas podem ser responsveis pela resposta imune fraca em infeces estafiloccicas severas e, freqentemente fulminante, no Homem e em infeces experimentais, nos animais. Enterotoxinas As enterotoxinas so produzidas por aproximadamente 30% das cepas de S. aureus, isoladas de vrias infeces humanas e provenientes de alimentos contaminados. H 6 tipos antignicos de enterotoxinas (A, B, C1, C2, D e E). As toxinas so todas semelhantes na estrutura protica; so termoestveis, resistindo a 100 C por vrios minutos. Quando a toxina pr-formada de alimentos contaminados ingerida; microgramas da toxina pode causar nusea, vmito e diarria (todos os sinais de intoxicao alimentar por estafilococos, no Homem). A maioria das espcies animais resistente as enterotoxinas, exceto macacos e gatos jovens. O vmito devido ao efeito da toxina sobre centros nervosos no estmago e intestino que enviam a mensagem ao centro, no crebro. O mecanismo da diarria no , ainda conhecido. Enterotoxinas como a TSST-1 so potentes mitgenos, induzindo a liberao de imunomediadores tais como interleucina (IL-l) dos linfcitos. Entretanto, as participaes das diversas classes de linfcitos nas diferentes espcies animais no tm sido estudadas sistematicamente. Os efeitos imunolgicos, previamente atribudos s outras protenas dos estafilococos, tais como protena A tem sido mostrada ser devido a contaminao com pequenas quantidades de enterotoxinas estafiloccicas, o mitgeno protico mais potente at agora descrito. Toxinas exfoliativas (Toxinas epidermolticas) H 2 tipos de toxina exfoliativa; a ETA e a ETB. Elas pertencem ao fago do grupo ll, responsvel por leses vesiculares em crianas e adultos e, com subseqentes alteraes imunolgicas. ETA um produto de gene cromossomal e ETB produto de um gene plasmdico. As 2 toxinas possuem aproximadamente 30kDa, mas diferem antigenicamente em sua composio. As duas agem, rompendo o encaixe de uma clula a outra, no estrato granuloso. A inoculao da toxina A ou B em camundongo neonatos, induzem a leses vesiculares semelhantes ao que visto em pnfigos neonatal ou impetigo, no Homem. Surtos da doena envolvem, geralmente alta percentagem de crianas em enfermarias. O possvel papel dessas toxinas no tem sido estudado nos animais. Outras toxinas Muitas cepas de S. aureus causam infeces animais e do Homem, bem como os estafilos coagulase negativos produzem um polipeptdio, com peso molecular igual a 12kDa, que lesiona a membrana com propriedades semelhantes a melitina; veneno encontrado no picada de abelha.

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EXOENZIMAS Coagulase O S. aureus produz 2 formas de coagulase; uma ligada clula ou clumping factor e outra extracelular ou coagulase livre. A protena de ligao ao fibrinognio na superfcie dos estafilococos, sem ao enzimtica, pode diretamente converter diretamente fibrinognio em fibrina insolvel, causando grumos ou clumping. Por outro lado, a exoenzima livre causa ativao especfica da trombina plasmtica, levando a converso de fibrinognio em fibrina. Observa-se que a formao de fibrina prxima infeco estafiloccica localiza o processo, impedindo a fagocitose do agente. O papel da coagulase na virulncia no muito claro. Quando o gene para a produo de coagulase foi alterado pela biologia molecular, os organismos coagulases negativos no demonstraram reduo na virulncia em modelos experimentais (camundongos). Lipases, Esterases e Enzima modificadora de cidos graxos. Algumas cepas do S. aureus so capazes de multiplicar-se rapidamente sobre a pele, produzindo enzimas que degradam lipdios (lipases e esterases) e uma enzima chamada de enzima modificadora de cidos graxos ou Fatty Acid-Modifying Enzyme (FAME). Os cidos graxos bactericidas liberados pela degradao lipdica so quimicamente modificados pela FAME, perdendo suas propriedades bactericidas. Deste modo, a enzima FAME importante, especialmente em cepas capazes de formar abscessos eficientemente. Catalase Todas as amostras de S. aureus produzem catalase, enzima que catalisa a converso do perxido de hidrognio em gua e oxignio. A catalase protege o patgeno do perxido de hidrognio que se acumula durante o metabolismo bacteriano e liberado durante a fagocitose. Proteases O S. aureus produz pelo menos 4 proteases e uma enzima de degradao especfica da leso, recentemente relatada. Esta protease, assim como outras exoenzimas hidrolticas, tais como a hialuronidase e a nuclease so importantes no incio do processo, assim como na degradao do pus do abscesso, permitindo a liberao de nutrientes para as clulas jovens continuem os seus processos de multiplicao, levando a cronificao da infeco. Entretanto, um abscesso local com uma barreira de fibrina e com organismos com pequena produo de estafiloquinase e protease, freqentemente torna-se estril. DETERMINANTES DE VIRULNCIA SUPERFCIE CELULAR Peptidoglicano O principal, polmero da parede celular do S. aureus e dos estafilos coagulase negativos o peptidoglicano (glicopeptdio ou murena). Este polmero liberado em grandes quantidades no local da infeco (pele, abscesso muscular e articulaes). O peptidoglicano estimula a produo de pirgeno endgenos e um potente quimioatrativo para os leuccitos. Cpsula de polissacardeo A cpsula do S. aureus tem sido dividida em 12 imunotipos. A produo de cpsula verdadeira pode ser visualizada no microscpio, aps a colorao com tinta Nankin ou ndia. Ela rara entre S. aureus do homem ou dos animais. Macrocpsula produzidas por cepas do sorotipo 1 impede a opsonizao e fagocitose, estando associados virulncia. Uma fina microcpsula de polissacardeo produzida pela maioria das amostras isoladas de S. aureus. A maioria dessas cepas produz o sorotipo 5 ou 8. Aquelas cepas que produzem tendem a resistir fagocitose em estudos in vitro. O papel destas cpsulas sobre a virulncia parece variar, conforme o tipo de infeco

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investigada. Cepas mutantes de S. aureus que perderam a habilidade de produzir cpsula mostram um decrscimo na virulncia na mastite bovina. Por outro lado, mutantes (defectivos) quanto a produo de microcpsula, no mostraram diferenas entre as amostras capsulas. As amostras mutantes (cpsula negativas) so 50% menos eficazes na produo de endocardite experimental induzida por cateterismo, em ratos. cidos Teicicos Esses cidos so fosfatos de poliribitol e poliglicerol que esto, tanto associados com o peptidoglicano ou encontrados extracelularmente. Anticorpos aos cidos teicicos esto presentes no soro normal; cidos teicicos extracelulares protege os organismos da opsonizao pela ativao do complemento e reduz os componentes necessrios interao com as bactrias. Protena A A protena A a principal protena superficial de ligao imunoglobulina encontrada em mais de 98% das amostras de origem animal e do homem. A protena A liga-se poro Fc da IgG1, IgG2 e IgG4, inibindo a opsonizao e fagocitose. Estudos com amostras no produtoras de protena A resultaram numa reduo de virulncia na infeco subcutnea e intraperitonial, mas no houve diferenas em mastite. Fibrinonectina (Fn-binding Proteins) (FnBPs) A FnBPs est presente na maioria das amostras de S. aureus. Os estudos sobre a ligao da fibrinonectina do S. aureus e da ligao ao fibrinognio do Streptococcus pyogenes demonstraram que estas s protenas tissulares e soro induziam uma protena do hospedeiro que inibiam a fagocitose. Recentemente, foi demonstrado que o pr-tratamento com anticorpo a FnBPs aumenta a fagocitose. Protenas de ligao ao fibrinognio A maioria dos S. aureus, assim como S. intermedius e, possivelmente o S. hyicus, aglutinam o fibrinognio extrado de animais e do homem. Existe pelo menos 3 protenas de superfcie j identificadas, sendo provvel que a famlia das protenas de ligao ao fibrinognio aumente brevemente. provvel que cepas de origem animal ou humana possuam diferentes protenas de ligao, visto que tm sido observadas diferenas entre S. aureus de vrias espcies de hospedeiros. Parece lgico definir as enzimas estafiloccicas que promovem a coagulao sangnea como as coagulases e, aquelas que ativam a dissoluo do cogulo sangneo como estafiloquinases. Outras protenas de ligao Protena de ligao ao colgeno e a vitronectina so duas protenas de ligao aos estafilococos matriz extracelular que tem sido recentemente, descrita, identificada, purificada e caracterizada. Essas protenas de ligao tm sido detectadas no S. aureus e, em vrias amostras de estafilos coagulase negativos, sendo patognicas para o bere bovino e para o homem. Alem disso, outras estruturas de ligao ao plasminognio, a tromboespondina e laminina foram caracterizadas por diferentes laboratrios, mas o seu papel na adeso tissular ainda no foi investigado.

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Outros fatores de virulncia menos definidos Produo de muco por espcies coagulase negativas (ECN), especialmente isoladas de infeces causadas pelo S. epidermidis. Aps o crescimento, a bactria produz grandes quantidades de muco que so predominantemente polissacardeos extracelulares e pouco definidos quimicamente, incluindo vrios acares, tais como, cido manurnico e o cido galacurnico. O muco dos estafilos coagulases negativos crescem sobre a superfcie de instrumentos intramamrios, equipamento de ordenha e cateteres; tornam-se misturados com protenas do hospedeiro, formando um biofilme amorfo. Biofilme e infeces associadas a este material so difceis de tratar pela fraca penetrao de antimicrobianos que, geralmente liga-se ao polmero do biofilme. Alem disso, os fagcitos no podem penetrar com eficincia no biofilme assim que o agente fica protegido. Alem disso, o muco mostrou propriedades imunossupressoras quando inoculadas em animais. Regulao do Ferro e crescimento in vivo Estudos recentes demonstraram que S. aureus, S. epidermidis e outros estafilos coagulases negativos, crescidos em modelos in vivo mostram uma grande diferena na produo de protenas de superfcie, quando comparadas com a mesma cepa, crescida em meio convencional de laboratrio. Alem disso, os estafilos crescidos em meios in vitro suplementados com fluido peritonial, leite bovino ou fraes do leite, tais como lactoferrina, sugere que os ons ferrosos (Fe++) e, possivelmente outros ctions divalentes podem estar envolvidos com a regulao de genes s vrias protenas de superfcie, bem como protenas extracelulares e intracelulares. PATOGENIA A virulncia dos estafilos coagulase positivos e negativos no pode ser explicada apenas por um nico determinante de virulncia. Interaes complexas ocorrem entre inmeros mecanismos de interaes, toxinas extracelulares, protenas de superfcie e enzimas responsveis pela virulncia dos estafilococos. Colonizao do S. aureus (pele, nariz, orofaringe). Penetrao e Infeco. Resistncia fagocitose mediada pela protena A e ao material capsular. Sobrevivncia intracelular em clulas fagocticas. Resistncia mediada pela coagulase ao fator antibactericida. Produo de hialuronidase. Produo de alfa toxina. Produo de outras leucocidinas. Desenvolvimento de reao de hipersensibilidade retardada. Adeso s clulas epiteliais. Fatores predisponentes: trauma, esmagamento, estado imune do animal, remoo da flora competitiva, virose primria produo de lipases etc. Mastite estafiloccica INTRODUO Mastite uma reao inflamatria da glndula mamria. O S. aureus o agente mais importante causador de mastite, em todo o mundo. Os estafilos coagulases negativos so tidos como patgenos menores, mas algumas vezes, so responsveis por mastites severas. H diferenas entre os estafilos coagulases negativos em vrios pases. Entretanto, o S. epidermidis, S. chromogenes, S. simulans, S. xylosus, S. hyicus e S. haemolyticus so as espcies mais prevalentes. Mastite estafiloccica pode resultar em sinais clnicos ou pode ser subclnica. O S. aureus encontrado em leses supurativas de bovinos, especialmente nas mastites. Em muitas regies criatrias o principal agente relacionado com a glndula mamria.

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O sistema moderno de confinamento e ordenhamento tm favorecido a penetrao do agente na glndula pelo canal da glndula. O microrganismo um ativo colonizador do canal galactforo. A transmisso pode ocorrer, atravs da ordenhadeira e pelas mos do ordenhador. Na maioria dos casos, os estafilococos alcanam o tecido mamrio, atravs de leses ou feridas na superfcie do teto. Aps a entrada, h o desenvolvimento de leses agudas ou crnicas, estando relacionadas: ao fator de aderncia superfcie interna do canal do teto, presena de anticorpo para a alfa toxina, nmero de neutrfilos na secreo mamria, produo de beta toxina e coagulase, freqncia de ordenhamento e a capacidade nutricional e multiplicativa da bactria em utilizar nutrientes dentro da glndula mamria. A fagocitose e a morte intracelular do S. aureus pelo leuccito no leite inibida pelos glbulos de gordura do leite. A casena tambm inibe a destruio intracelular, pelo bloqueio do efeito bactericida do sistema de lactoperoxidase e das histonas. Embora a eficincia do sistema fagoctico de defesa possa ser reduzido, ela , ainda importante, na manuteno dos mecanismos de defesa infeco subclnica do Staphylococcus epidermidis ou pelo Streptococcus agalactiae ou Escherichia coli pelo aumento no nmero de clulas produzidos em resposta a presena de S. epidermidis. A mastite por S. aureus pode variar de subclnica a gangrenosa. A maioria dos casos subclnica e crnica. So formas inaparentes, mas com significado econmico maior. A mastite gangrenosa superaguda causada pelo S. aureus ocorre, geralmente em vacas de primeira cria (1 lactao), acarretando perda de grande quantidade de tecido mamrio. A leso txica aos vasos resulta numa necrose coagulativa isqumica dos tecidos adjacentes. A pele torna-se prpura sobre a rea afetada e pode desprender-se. Os animais tm febre alta, podendo morrer por toxemia em 2 a 3 dias. A mastite estafiloccica crnica resulta no endurecimento do bere, aumento na contagem celular e coagulao acasional do leite. Staphylococcus aureus tambm causa mastite em ovelhas, cabras, guas, porcas, gatas e marta.

Staphylococcus hyicus
Marcos J. P. Gomes INTRODUO Existe 2 subespcies de S. hyicus: S. hyicus subsp. hyicus agente da epidermite exsudativa do suno e o S. hyicus subsp. chromogenes um microrganismo de virulncia questionvel e freqentemente isolado de mastite. Epidermite exsudativa uma infeco aguda e generalizada da derme de leites. A doena caracterizada pela pelo excesso de secreo sebcea, exfoliao e exsudao. Essas mudanas resultam em perda da funo que, geralmente compromete toda a superfcie do corpo. ETIOPATOGENIA O S. hyicus subsp. hyicus contagioso e, facilmente difunde-se de um grupo de sunos para outro. O trnsito de animais tem sido um fator importante na difuso da doena. A doena tem um perodo de aproximadamente 2 semanas, aps a introduo de um animal infectado. Leites de 1 a 7 semanas so geralmente afetados. A mortalidade e morbilidade so variveis. Os microrganismos penetram, atravs de solues de continuidade da pele (mordida dos leites), geralmente devido competio pelo espao. A doena pode se apresentar com o corpo inteiro coberto com exsudato mido ou sob a forma crnica onde o comeo lento e a pele enrugada. As leses aparecem poucos dias aps a inoculao experimental. Inicialmente, aparecem as vesculas nas regies da superfcie da pele sem plos, bandas coronarianas e atrs das orelhas. A doena progride por todo o corpo e a pele torna-se espessada e a camadas da epiderme pode descamar-se. Os sunos tornam-se recuperados em 2 semanas, aps o incio da doena e, totalmente

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recuperados aps, 30-40 dias. O exame histolgico da pele revela acmulo de material protico, clulas inflamatrias e bactrias sobre a camada superficial. Na necropsia, os ureteres esto aumentados e o rim cstico pelo acmulo de detritos e bloqueio do fluxo normal da urina. Grande surto pode ocorrer em que aproximadamente 50% dos animais morreram aps apresentarem anorexia, febre, e sinais de intensa sede. A pele apresenta intensa alopecia, fissura e paraqueratose. Parece que as necessidades de biotina nesta doena esto alteradas, ou seja, a doena pode ser agravada pela carncia de biotina. O tratamento medicamentoso com complexo B, nos animais infectados contribuiu para sua recuperao. MATERIAL A SER ENVIADO AO LABORATRIO: Devemos enviar leites vivos ou recentemente mortos bem como subios das leses cutneas. As amostras colhidas no campo e distantes do laboratrio devem ser enviadas sob refrigerao em caixa de isopor. DIAGNSTICO LABORATORIAL Inoculao das amostras colhidas em agar-sangue (AS) (ovinos ou bovinos). Incubao em estufa a 37C durante 24 horas. Reconhecimento das colnias de Staphylococcus spp. Em amostras contaminadas podem-se utilizar meios seletivos (sais de manitol, Columbia CNA agar). A identificao das diferentes espcies est contida na Tabela 1. TESTE DE SENSIBILIDADE ANTIMICROBIANA (TSA) Os S. hyicus subsp. hyicus so sensveis a ampicilina, canamicina, cloranfenicol, clortetraciclina e a nitrofurazona. Resistentes estreptomicina, polimixina B e compostos da sulfa. Penicilina administrada 3 vezes ao dia mostrou-se efetiva em leites quando ainda no evidenciavam leses de epidermite exsudativa (dermatite exsudativa). A terapia com antimicrobiano bem menos efetiva, quando a leso est instalada.

Gnero Micrococcus spp

Marcos J. P. Gomes INTRODUO

Atualmente, conforme www.bacterio.cict.fr/m/micrococcus.html, H 11 espcies descritas e nenhuma subespcie neste gnero. Clulas esfricas com 0,5 - 2,0 m de dimetro, ocorrendo em pares, tetradas ou grumos irregulares, mas no em cadeias. Gram positivos. Raramente mveis; no esporulados. Estritamente aerbios.
As colnias so geralmente pigmentadas em tons de amarelo ou vermelho. Quimiorganotrficos com metabolismo respiratrio produzindo pouco ou no produzindo cidos dos carboidratos. Crescem em meio simples. Catalase positivos. Freqentemente oxidase positiva, embora fraco. Geralmente holotolerantes crescendo com 5% de NaCl. Contem citocromo e so resistentes a lisoestafina. Temperatura tima de 25-37C. Ocorrem primariamente na pele de mamferos, no solo, mas so isolados de produtos alimentares e o ar. Estes cocos se assemelham morfologicamente aos estafilococos, apresentando-se tanto individualmente quanto aos pares. So Gram + a Gram variveis. Podem ser mveis ou imveis. Algumas colnias podem ser despigmentadas.

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Cowan & Steel distinguem os estafilococos dos micrococos com base no teste de O-F (Oxidao-Fermentao). A maioria dos estafilos utiliza os acares pela fermentao, enquanto que os micrococos utilizam os acares pela oxidao.

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