Gustavo Henrique 157D

GENÉTICA - Mapa genético: localização de todos os genes no

Projeto Genoma Humana: forneceu a sequência quase cromossomo.
completa do DNA humano  base de esforços para catalogar Cromossomos  Genoma  DNA (genes) Nucleotídeos
todos os genes humanos, reconhecer suas funções, - A maioria dos genes codifica produtos de proteína.
estruturas e regulação e descobrir como a variação genética Dogma Central da Genética
contribui para doenças.
- Consórcio de centenas de laboratórios em todo o mundo,
formado para determinar e formar a sequência dos 3,3
bilhões de pares de bases de DNA localizados entre os 24
tipos de cromossomos humanos.
- Foi montada uma sequência de “referência” (semelhança Estrutura dos cromossomos
de 99,5% entre os genomas humanos), usada como base para - Cada cromossomo humano é constituído por um único DNA
comparação posterior com sequências de genomas de dupla hélice contínuo; ou seja, cada cromossomo é uma
individuais  banco de dados público para facilitar a molécula de DNA de dupla fita longa e o genoma nuclear
descoberta científica e sua tradução em possíveis avanços consiste, por conseguinte, em 46 moléculas de DNA lineares,
úteis para a medicina. totalizando mais de 6 bilhões de pares de nucleotídeos.
Genes: unidades funcionais do DNA cromossômico, contém a - Os cromossomos não são dupla-hélices desprotegidas.
informação codificada no DNA. Dentro de cada célula, o genoma é empacotado como
DNA: acido desoxirribonucleico  contém em sua estrutura cromatina, na qual o DNA genômico está conjulgado com
a informação genética (na porção do gene) essencial para a várias classes de proteínas especializadas. Exceto durante a
funcionalidade humana e é responsável por transmitir as divisão celular (quando o genoma condensa-se e aparece
características hereditárias  composto por nucleotídeos e como cromossomos microscopicamente visíveis), a cromatina
se organiza em dupla hélice. é distribuída por todo o núcleo (fase de não divisão =
Genoma: conjunto de todos os genes da espécie humana, interfase) e seu aspecto é relativamente homogêneo à
engloba todo o DNA funcional humano. aparência ao microscópio.
Cromossomo: organelas em forma de bastonete, que - A molécula de DNA de um cromossomo existe na cromatina
organiza e contém a longa sequência de DNA, com seus como um complexo com uma família de proteínas
vários genes e outras sequências de nucleotídeos com cromossômicas básicas denominadas histonas (responsável
funções específicas nas células dos seres vivos. pela compactação e descompactação do DNA). Essa unidade
 Sequências de DNA de cópia única: onde fica a fundamental interage com um grupo heterogêneo de
maioria das sequências que realmente codificam proteínas não histonas, que estão envolvidas no
proteínas (porção codificantes dos genes). estabelecimento de um ambiente espacial e funcional
 Sequências repetitivas de DNA: DNA´s satélites adequado para garantir o comportamento cromossômico
(repetição em tandem), família Alu, família LINE, normal e a expressão gênica apropriada.
duplicações segmentadas  porções não - Complexo DNA+histonas=nucleossomo.
codificantes, mas extremamente importantes para a - Mitose: células somáticas (2n)  crescimento,
regulação dos genes e para a estrutura do diferenciação, reparos  2 células filhas idênticas à mãe.
cromossomo. - Meiose: células germinativas (n)  formação de gametas
Organismo humano  corpo humano é constituído por  células filhas n, com a mãe 2n.
trilhões de células  cada núcleo celular contém um
conjunto idêntico de cromossomos  cada cromossomo é
uma longa molécula de DNA e os genes são regiões
fundamentais deste DNA  DNA é uma dupla hélice.

- Todas as células do corpo são nucleadas, exceto hemácias. Octâmero de histonas

(colar de contas)
- Seres humanos  núcleo com 23 pares de cromossomos
Fibra cromossômica
(22 autossomos e 1 sexual – homens XY ou mulheres XX)
tem formato de
- Cerca de 20 mil genes traduzem todas as proteínas do solenoide.
corpo humano
- Cariótipo: complemento cromossômico característico de Lembrete:
cada espécie. Fase G1 e G2:
- Locus: porção precisa do gene na sequência de DNA no crescimento celular
cromossomo. Fase S: duplicação
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Na mitose, os cromossomos estão alinhados no centro e
separa-se as cromátides irmãs. Já na meiose, os
cromossomos estão pareados no centro, dividindo-se
primeiramente, na meiose I, os cromossomos homólogos e
depois, na meiose II, as cromátides irmãs.
Estrutura do DNA/Nucleotídeos
- DNA contém toda a informação biológica/genética de um
organismo, arranjada no interior de cromossomos.
- 1953: J. Watson e F. Crick propõem a estrutura molecular
do DNA.
- As duplas hélices se ligam pelo pareamento de bases
complementares, propiciado por ligações de hidrogênio.
- Ligação entre uma purina e pirimidina mantém uma largura
constante. - As fitas de DNA possuem orientação oposta, são
Purinas: Adenina e Guanina. antiparalelas.
Pirimidinas: Citosina e Timina (Uracila no RNA) - Ácidos Nucleicos: são moléculas com extensas cadeias
Adenina pareia com Timina (2 ligações de hidrogênio) carbônicas, formados por nucleotídeos {fosfato + glicídio
Citosina pareia com Guanina (3 ligações de hidrogênio) (açúcar) + base nitrogenada}, compondo o material genético.
DNA  desoxirribose  A,C,G,T  fita dupla
RNA  ribose  A,C,G,U  fita simples
- Cromatina: constitui o cromossomo. Subdividida em
eucromatina (menos condensada, menos visível e maior
atividade gênica) x heterocromatina (mais condensada, mais
visível e menor atividade gênica).
- Código genético: é a correspondência entre a trinca de
bases de nucleotídeos (códon) e a sequência correspondente
- A estrutura básica do nucleotídeo engloba grupo fosfato, de aminoácido.
um açúcar tipo ribose e uma base nitrogenada. Replicação do DNA
 Base nitrogenada: Purina (Adenina ou Guanina) ou - DNA consegue se autoduplicar.
Pirimidina (Citosina ou Timina ou Uracila no RNA) - A replicação é semiconservativa.
 Açúcar: Desoxirribose ou Ribose no RNA - Sentido da replicação: sempre de 5`para 3`.
 Grupo fosfato: PO4  monofosfato (1P), difosfato (2P) ou - Novos nucleotídeos são sempre adicionados à ponta 3`da
trifosfato (3P). fita sendo sintetizada. Geralmente, os nucleotídeos são
adicionados na forma de trifosfatos (3P) de
desoxirribonucleotídeos  a quebra dos trifosfatos gera ATP,
energia.

- Os nucleotídeos se polimerizam por ligações fosfodiéster

5`- 3`  O grupo fosfato de um nucleotídeo, anexo ao
carbono 5, se liga com o OH, anexo ao carbono 3 do outro
nucleotídeo. Assim, tal processo ocorre sucessivamente,
juntando os nucleotídeos e formando as fitas de DNA.
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- Filamento Leading: replicação contínua  mesmo sentido - Une os pedaços quebrados de DNA, catalisando a formação
da forquilha. de uma ligação fosfodiéster entre a extremidade 5`- fosfato
- Filamento Lagging: replicação descontínua  sentido de um fragmento e o grupo 3`- OH adjacente de outro
oposto à forquilha. Cada prímer é um pouco alongado pela fragmento.
polimerase, formando os Fragmentos de Okazaki. Helicase
* Fragmentos de Okazaki: curtos filamentos de DNA - Enzima que promove a bertura da hélice de DNA
produzidos por síntese descontínua. (desenrola); quebram as ligações de hidrogênio na forquilha
DNA Polimerase I de replicação.
- Uma atividade de polimerase, que catalisa o crescimento da SSB
cadeia no sentido 5` para 3`. - Ligam-se às cadeias molde separadas pela DNA Helicase,
- Uma atividade de exonuclease 3`para 5`, que remove as impedindo que estas voltem a se ligar.
bases incorretamente pareadas. DNA Girase (Topoisomerase)
- Uma atividade de exonuclease de 5`para 3`, que degrada os - Relaxam o DNA, removem torções extras.
filamento simples de DNA ou RNA (prímer). Telomerase
DNA Polimerase III - Relacionada ao envelhecimento celular (desgaste dos
- Atua na forquilha de replicação: síntese de DNA (= a poli I). telômeros).
Pode ampliar uma cadeia, mas não começa-la (prímer). - Sequências repetidas no fim da cadeia de nucleotídeos,
- Também faz a revisão (exonuclease 3`para 5´). finalizando a síntese de DNA.
Prímer (Primase) Precisão da replicação do DNA: é inserido menos de um erro
- São sintetizados por um grupo de proteínas (primossomo), por 1010 nucleotídeos. Por quê?
do qual um componente central é a enzima primase (RNA - DNA Polimerase I e III exercem atividade de exonuclease
Polimerase). 3`para 5`, tendo uma função de revisar, removendo bases
- Primase sintetiza um trecho curto (8 a 12 nucleotídeos) de inseridas erroneamente  Corrigem 99,9% dos erros iniciais.
RNA complementar a uma região específica do cromossomo Replissomo: máquina molecular que faz a sínteses de DNA
(região repleta de adenina e timina indica o início da síntese). com precisão e velocidade (reunião de todas as enzimas
No filamento leading: apenas um prímer inicial  o DNA em citadas).
crescimento serve com prímer para a adição contínua. Reparo por excisão: detecta distorções da dupla hélice 
No filamento legging: cada fragmento de Okazaki precisa de corte do segmento que contém o dano, o segmento é
seu próprio prímer. removido  DNA Polimerase I sintetiza novos nucleotídeos
- DNA Polimerase I remove os primers e RNA com sua com o molde e ligase une as pontas recém-sintetizadas 
atividade de exonuclease de 5` para 3`e preenche os espaços Não ocorre necessariamente na replicação, pode ocorrer a
com sua atividade de polimerase de 5`para 3`. qualquer momento mediante o reconhecimento da lesão.
Etapas na síntese do filamento descontínuo Xesoderma pigmentoso (XP): doença de defeito no reparo
1) A primase sintetiza oligonucleotídeos curtos de RNA do DNA por excisão de nucleotídeo.
copiados do DNA, em locais sinalizados por - Autossômico recessivo.
sequências AT. - Principais caraterísticas fenotípicas: idade de início na
2) A DNA Polimerase III alonga os prímers com seu novo infância, sensibilidade à luz, câncer de pele (tumores de peles
DNA. devido a mutações, como dímeros de timina) e disfunção
3) A DNA Polimerase I remove o RNA a partir da ponta neurológica.
5´, perto do final do fragmento vizinho anterior, e - A capacidade reduzida (ou ausente) de reparo global do
preenche o espaço. genoma ou reparo pós-replicação representa a perda das
4) A DNA Ligase conecta fragmentos adjacentes. funções necessárias para a manutenção da integridade do
genoma, e resulta em acúmulo de mutações oncogênicas que
parecem ser altamente específicas do UV.
Etapas da Replicação
1) Iniciação: repetições de pares de bases, dentre elas
sequências de adenina e timina.
2) Alongamento: envolve duas operações distintas, mas
relacionadas:
1. Síntese da fita líder (filamento leading).
2. Síntese da fita atrasada (filamento lagging).
- Processo da forquilha de replicação, com as enzimas.
3) Terminação:
- Em procariotos: DNA circular, quando as duas forquilhas de
replicação se encontram ela termina.
- Em eucariotos: sequências de nucleotídeos específicas no
final dos cromossomos, incorporadas a telômeros.
DNA Ligase Bolhas de Replicação: nos eucariotos, a replicação requer
- Junta a ponta 3` do DNA preenchedor do espaço à ponta 5` “múltiplas origens”, devido ao tamanho de seu genoma. A
do fragmento de Okazaki posterior. replicação é bidirecional e, em ambas as fitas, simultânea.
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Pontos Importantes da Replicação - RNA, como as proteínas, mas não como o DNA, pode
- Replicação do DNA: semiconservativa; bases nos filamentos catalisar reações biológicas. Ribozimas são moléculas de RNA
moldes determinam bases complementares no filamento de que funcionam como enzimas proteicas.
DNA nascente. Classes de RNA
- Replicação é iniciada em origens únicas e continua RNA mensageiro (mRNA): servem como intermediários e
bidirecionalmente a partir de cada origem. passam a informação do DNA para a proteína.
- A síntese de DNA é catalisada pela DNA polimerase. RNA transportador (tRNA): levam o aminoácido correto para
- A DNA polimerase precisa de um filamento prímer, que é o mRNA no processo de tradução.
amplificado, e um filamento molde, que é copiado. RNA ribossômico (rRNA): moléculas dos principais
- DNA-polimerase adiciona um nucleotídeo na extremidade componentes dos ribossomos.
3’-OH do primer, ou seja, a síntese de DNA ocorre no sentido Pequenos RNA nucleares (sn RNA): parte de um sistema que
5’ para 3’. processa o RNA transcrito, formam o spliceossomo que
- A DNA polimerase tem atividade revisora. remove íntrons.
Transcrição do RNA - A transcrição ocorre apenas em um dos filamentos de
- Nos eucariotos, os genes estão no núcleo e os polipeptídeos nucleotídeos de DNA  filamento molde 3` para 5`.
são sintetizados no citoplasma  Transcrição ocorre no - Novos nucleotídeos são acrescentados ao grupo 3`-OH do
núcleo. RNA crescente; assim, a transcrição continua, como a
replicação, no sentido 5`para 3`.
- O outro filamento não molde é a fita codificadora (5`  3`).
- A sequência de RNA é complementar à fita molde e
idêntica à fita codificadora, trocando apenas T por U.

Semelhanças entre transcrição e replicação

- DNA lido de 3` para 5`.
- Síntese é de 5` para 3`.
 Éxons: regiões expressas, que codificam partes das - Ocorrem no núcleo.
proteínas. - DNA é fita molde.
 Íntrons: regiões intercalares, transcritas em RNA no - Complementariedade (U ao invés de T) e antiparalelismo.
núcleo, mas não presentes no mRNA maduro no citoplasma. - RNA Polimerase (RNAp) similar à DNA Polimerase.
- Uma cópia de RNA contendo tanto éxons, quanto íntrons é Outras características da transcrição
sintetizada de um gene. - Muitos RNA´s podem ser simultaneamente transcritos de
- Uma máquina biológica (spliceossomo) remove íntrons e um gene  compensa possíveis erros não reparados.
une os éxons: recomposição do RNA  RNA final totalmente - Não se precisa de prímer.
processado, pronto para sintetizar proteínas é o mRNA. - Cada ribonucleotídeo é posicionado em oposição à sua base
DNA: núcleo ? É necessário um intermediário: os mRNA´s são complementar pela enzima RNA Polimerase II (RNAp).
moléculas intermediárias que levam as
Proteínas: citoplasma informações do DNA para os ribossomos, onde RNA Polimerase II
Propriedades do RNA serão sintetizadas as proteínas. - Reconhece e liga-se ao DNA, movendo-se ao longo dele,
- É um ácido nucleico. unindo os ribonucleotídeos alinhados antes por ela mesma.
- Fita simples (mais flexível, pareamento intramolecular) - Desnatura o DNA (=helicase) e mantém a dupla fita aberta
- Açúcar ribose (OH ligado ao C2`)  No DNA, é desoxirribose (=SSB)  a medida que ela se move, desenrola a dupla fita de
(H ligado ao C2`). DNA a frente e reenrola o DNA que já foi transcrito.
- Ligação fosfodiéster 5`- 3` também. - Mantém estável a estrutura DNA:RNA.
- Bases: Adenina, Citosina, Guanina e Uracila. - Termina a síntese (=telomerase).
- Restaura DNA depois.
- Não é REVISORA!!!  Por ela não ter o complexo sistema
de reparo, o tempo de síntese de RNA diminui, o processo é
muito mais rápido; assim, os erros se compensam com os
milhares de RNA certos.
*Apesar de fazer quase tudo sozinha, a RNAp depende das
proteínas acessórias  RNAp nunca sozinha.
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Proteínas Acessórias: ajudam a especificar para a célula qual 5` Pré mRNA 3`
Promotor ATG 5` Éxon Íntron Éxon Íntron Éxon 3` A
gene será transcrito, onde começar.
- Fatores de transcrição = proteínas reguladoras específicas Sentido da transcrição ---------------------->
que controlam a transcrição. Região promotora (geralmente fica 10 bases antes do gene
- Sítio de iniciação da transcrição = local exato do início da iniciador da transcrição)  TATA BOX (atrai TBP, que atrai a
transcrição. RNAp)  início da síntese.
- Sequências regulatórias presentes no próprio DNA, como ATG: Códon iniciador  Sítio de iniciação.
promotores (região anterior ao sítio de iniciação, indicando a Região 5´: não traduzida, mas transcrita.
proximidade e identificando o início da transcrição  TATA Éxons: sequências codificantes.
BOX), enhancers (acentuadores, aumentam o nível da Íntrons: sequências não codificantes.
transcrição e são imprescindíveis para o início dela) e Região 3´: não traduzida, mas transcrita.
silenciadores (abaixam a taxa ou impedem a transcrição). Região A: sinal da poliadenilação.
 Equivalência Genômica: se cada célula do corpo contém Regulação da transcrição: proteínas regulatórias e sequências
os genes para a hemoglobina e proteínas de insulina, por que localizadas na região 5`, como promotor TATA BOX,
é que as proteínas da hemoglobina são produzidas apenas enhancers e silenciadores.
nas células vermelhas do sangue e as proteínas da insulina 2) Alongamento: nucleotídeos são colocados, a medida que
são produzidas apenas em certas células do pâncreas? a RNA Polimerase se move ao longo do DNA, desenrola o
- Questão abordada no experimento da ovelha Dolly – uma DNA à frente dele e reenrola o DNA que já foi transcrito.
célula da glândula mamária deu origem às células de todo o Desse modo, ela mantém uma região unifilamentar de DNA,
corpo. dentro da qual o filamento molde é exposto.
- Década de 1960: consenso de que a resposta a essa - Bolhas de transcrição: transcrição ocorrendo em várias
pergunta reside na expressão gênica diferencial. localidades do DNA simultaneamente, formando várias
1° postulado: cada núcleo celular contém o genoma bolhas de transcrição (fitas híbridas de RNA e DNA).
completo estabelecido no óvulo fertilizado. Em termos - À medida que a cadeia de RNA aumenta em sua ponta 3`, a
moleculares, os DNA´s de todas as células diferenciadas são ponta 5`é liberada pela polimerase.
idênticos. 3) Terminação: a transcrição continua além do segmento
2° postulado: os genes não utilizados em células codificante da proteína do gene, criando uma região 3´não
diferenciadas não são destruídos nem mutados, mas retêm o traduzida na ponta do transcrito. O alongamento continua
potencial de serem expressos. até que a RNA polimerase reconheça sequências especiais de
3° postulado: apenas uma pequena porcentagem de genoma nucleotídeos (sinal de poliadnilação), que atuam como um
é expressa em cada célula, e uma parte do RNA sintetizado sinal de término.
em cada célula é específica para esse tipo de célula. Processamento do RNA
- A expressão gênica pode ser regulada em vários níveis, de - Ocorre durante a síntese de RNA, tornando o RNA útil,
modo que os diferentes tipos de células sintetizam diferentes funcional.
conjuntos de proteínas. - RNA recém sintetizado  transcrito primário ou pré-mRNA.
 A transcrição gênica diferencial regula quais genes - Transcrito totalmente processado, que já pode ir para fora
nucleares são transcritos em RNA nuclear. do núcleo  mRNA.
- Aspectos relevantes para a transcrição:
• Decisão de iniciar - controle da situação;
• Temporal / Momento - estado fisiológico, estado do corpo
(temperatura, Ph).
• Específico / Seletivo - ocorre para tecido específico.
- Na embriogênese, o ovócito leva RNA e proteínas prontos. A
diferenciação ocorre por variados potenciais de ação, que
segregam as células ao seu folheto embrionário específico.
 Maior metilação dos DNA´s e das histonas, maior
* A RNA polimerase II deve sintetizar RNA e,
compressão das histonas com o DNA, menos transcrição.
simultaneamente, coordenar uma gama diversa de eventos
 Maior acetilação dos DNA´s e das histonas, menor
processantes:
compressão (libera o DNA) das histonas com o DNA, mais
- Adição de um revestimento (cap) na ponta 5` cap 5`
transcrição.
- Recomposição para eliminar os íntrons (splicing). Os éxons
Etapas da Transcrição
são a porção codificadora presente no mRNA. Já os íntrons é
- Iniciação, Alongamento e Término.
são a porção não codificante, não presente no mRNA.
1) Iniciação: a RNA polimerase II se liga a uma sequência
- Adição de uma cauda 3` composta por nucleotídeos de
específica de DNA chamada promotor, situada perto do início
adenina (poliadenilação)  Regiões consenso no DNA
da região transcrita, na ponta 5`.
molde ricas em A/ Regiões consenso no DNA não molde ricas
- Região promotora = Região reguladora 5´.
em T.
5` mRNA pronto 3`
Cap 5` 5` Éxon Éxon Éxon 3` PoliA
Região poli A  cheia de adeninas.
Região cap 5` adição de grupo metil.
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Capping – Cap 5` - Diferentes combinações de fatores de transcrição podem
O que é: Adição de grupo metil. apresentar interações únicas que resultam em padrões
Local: 1° nucleotídeo do lado 5` da fita. distintos de expressão gênica.
Funções: proteção/facilitar o transporte do RNA para o Pontos Importantes da Transcrição
citoplasma/ facilitar a migração no splicing - Síntese de RNA é similar a do DNA: 5`3`.
Quando: assim que possível - Apenas um filamento de DNA serve como molde.
Cauda-Poli A - 3 estágios: iniciação, alongamento e terminação.
O que é: adição de aproximadamente 200 adeninas. - Fita molde de DNA = DNA molde.
Local: último nucleotídeo da extremidade 3`. - Fita não molde de DNA = DNA codificador = cDNA=RNA.
Funções: estabilizar/facilitar o transporte do RNA. Tradução de Proteínas  Biossíntese de Proteínas
Quando: logo após a terminação. - A biossíntese de proteínas insere-se no dogma central da
Splicing biologia molecular.
- Remoção de todos os íntros do pré-mRNA e junção (ligases)
dos éxons não contíguos.
- Máquina ativa que realiza o splicing: spliceossomo.
 Splicing alternativo: 1 gene pode codificar várias
proteínas; por esse processo, diferentes mRNA e diferentes
proteínas são produzidas pelo mesmo pré-mRNA,
recompondo diferentes combinações de éxons.
- Um gene pode codificar mais de um polipeptídeo quando
seu pré-mRNA é alternativamente recomposto.
- Os eucariotos processam extensivamente o RNA destinado
a se tornar mRNA; transcritos primários em eucariotos
recebem um "cap" na extremidade 5' e uma cauda poli A na
extremidade 3'.
- Nos eucariotos quase todos os mRNAs são clivados; íntrons
são retirados para formar mRNAs com mensagens contínuas.

- Código Genético: é um conjunto de sequências de bases

(três) no mRNA que codifica a natureza e a posição de
Nesse caso, foram formadas 3 proteínas distintas a partir da aminoácidos numa cadeia proteica.
informação de um único gene.
Regulação da expressão gênica em eucariotos
1) Estrutura da cromatina (DNA condensado ou
descondensado)
- Genes ou regiões regulatória ATIVOS: acetilação de histonas
 descondensa o DNA  mais descondensados 
eucromatina.
- Genes INATIVOS: metilação de histonas  condensa o DNA
 mais condensados, mais compactados 
heterocromatina.
2) Fatores de transcrição e sequências regulatórias
- Proteínas que regulam a transcrição e sequências na região
5`, como promotores (TATA BOX), elementos reforçadores
(enhancers) e silenciadores.
Enhancers: sequência em que ativadores se ligam 
imprescindíveis para o início da transcrição (se for o único) e - O código é degenerado: Isso ocorre pelo fato de que um
aumentam a taxa de transcrição (fatores basais de mesmo aminoácido pode ser codificado por diferentes
transcrição posicionam a RNAp em resposta a mensagem de códons. Na tabela, percebe-se que 3 aminoácidos (Arg, Leu,
ativadores). Ser) tem 6 códons; outros tem 3 ou 4 códons; apenas Met
Silenciadores: sequência em que repressores se ligam  tem 1 único códon.
diminuem a taxa de transcrição, ou, até mesmo, a impede de -O código genético padrão está muito disseminado, mas não
ocorrer. é, a bem da verdade, universal. O código é quase universal:
- Locus multigênico: presume o compartilhamento de Isso ocorre pelo fato de que os códons têm quase o mesmo
promotores entre sequências de transcrição. significado em quase todos os organismos, com raras
3) Processamento do mRNA (splicing) exceções, a exemplo de ciliados em que os códons UAA e
4) Estabilidade do mRNA UAG não especificam parada e sim Gln.
5) Modificações pós-traducionais - XYU e XYC sempre especificam o mesmo aminoácido.
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- Aparentemente, o código evoluiu para minimizar o efeito Emparelhamento Wobble/Hipótese da Oscilação: consiste
deletério de mutações. num emparelhamento entre dois nucleotídeos
- AUG, além de traduzir a metionina, é um sinal de iniciação. (códon/anticódon) em moléculas de RNA que não segue o
dogma de Watson e Crick. No caso abaixo, a guanina pareou
com a uracila (par guanina-uracilo).

Pontos Importantes
- Todos os 20 AA´s são especificados por um ou mais
trinucleotídeos no mRNA.
- Dos 64 trinucleotídeos possíveis, 61 especificam AA´s e 3 - Há certa oscilação na complementaridade entre códon e
sinalizam o término da cadeia. anticódon de modo que um dado anticódon pode reconhecer
- O código genético é degenerado. mais do que um códon. Regras de pareamento:
- O código genético é quase universal; com poucas exceções,
os 64 trinucleotídeos têm o mesmo significado em todos os
organismos.
Hipótese do adaptador
- Em 1955, Francis Crick lançou a hipótese de que a tradução
(síntese das proteínas) ocorreria através da mediação de
moléculas de um "adaptador". Cada adaptador deveria - Costuma-se dividir a síntese de proteínas em três etapas:
carrear um aminoácido e reconhecer um códon iniciação, elongação e terminação.
correspondente. Crick sugeriu que este adaptador poderia Iniciação
ser o RNA porque o reconhecimento poderia então ocorrer - Formação do chamado complexo de iniciação:
através da complementaridade de bases. a) Ribossomo completo.
b) mRNA posicionado.
c) tRNA de iniciação ligado ao aminoácido de iniciação (Met)
posicionado no chamado sítio P (peptidil do ribossomo).
- O códon AUG define o início da proteína; este é o códon da
Met.

- Os adaptadores de Crick acabaram revelando-se tipos

- O ribossomo acomoda dois tRNAs carregados.
especiais de RNA: os RNAs de transferência ou tRNAs.
Estrutura do tRNA
1. São cadeias simples contendo entre 73 e 94 nucleotídeos.
2. A sequência 3' terminal é sempre CCA; é o sítio de ligação
do aminoácido.
3. Metade dos nucleotídeos está pareado formando dupla
hélice; mas, há regiões que nunca estão pareadas como a
alça (loop) TC, por exemplo.
4. O anticódon é complementar ao códon. A alça anticódon
tem um padrão característico: duas pirimidinas antes; uma
purina modificada depois.

Elongação (Alongamento)
- O mRNA é traduzido na direção 5'3'.
- As proteínas são sintetizadas na direção amino (H2N) para
carboxila terminal (COO-).
- Os AAs da cadeia crescente de polipeptídeo vão sendo ligados
por uma reação catalisada pela enzima Peptidil Transferase.
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Terminação 3) Secreção para o espaço extracelular: com ou sem
- Fator de liberação: é uma proteína que permite a modificações prévias, as modificações podem ocorrer
terminação da tradução, reconhecendo o códon de também extracelularmente.
terminação ou o códon de parada em uma sequência de Estruturas Primárias, secundárias, terciárias e quaternárias
mRNA. No caso abaixo, o códon de parada é o UAG.

* Ligações peptídicas: desidratação entre aminoácidos para

formar as cadeias polipeptídicas, as proteínas.

- Mutações podem ser expressas ou não, dependendo do

local onde ela se encontra. Pode estar na região dos
promotores ou dos íntrons (será excluída), pode estar nos
éxons que compões a estrutura ou até mesmo no sítio ativo
da proteína, sendo, nesse caso, mais grave e perceptível,
podendo afetar a funcionalidade da proteína.
* Polissomo ou Polirribossomo: Vários ribossomos podem
traduzir simultaneamente uma molécula de mRNA. Cada
ribossomo funciona independentemente dos demais.
- Os ribossomos movem-se ao longo de um mRNA na direção
5'3'.

Pontos Importantes da Tradução

- As informações genéticas no mRNA são traduzidas em
sequências de AA´s  esse processo chama-se tradução. Regulação da síntese de proteínas
- As moléculas de tRNA são adaptadores, mediando a - Procariotos: A regulação ocorre, basicamente, na
interação de mRNA aos AA´s. transcrição; não há controle na tradução porque os mRNAs
- Interações códon-tRNA (anticódon  oscilação); em procariotos têm meia-vida de apenas alguns minutos.
- A tradução é dividida em Iniciação, Alongamento e Término; - Eucariotos: A regulação pode ocorrer na transcrição e na
- O processo é controlado pelas especificações do Código tradução; os mRNAs de eucariotos têm meia-vida de horas
Genético (lista de códons é a correspondência). ou dias. Regulação na transcrição, por exemplo, é aquela
Modificações Pós-Traducionais controlada pela cascata de hormônios (insulina, esteróides)
- Muitas proteínas emergem do ribossomo prontas para através dos fatores de transcrição (proteínas regulatórias
funcionarem. Outras, no entanto, sofrem uma série de que favorecem ou impedem a transcrição).
modificações pós-tradução. * A expressão gênica pode ser regulada em vários níveis, de
1) Modificações para transformar o polipeptídeo numa modo que diferentes tipos de células sintetizam diferentes
forma funcional: quebras, reorientações de certos conjuntos de proteínas:
fragmentos, deleções, adições. - Tradução de RNA mensageiro seletivo regula quais mRNAs
2) Transferência física para outro compartimento: um no citoplasma são traduzidos em proteínas.
exemplo é a transferência de proteínas do citosol para a - A modificação diferencial da proteína regula quais
mitocôndria. proteínas permanecem e / ou funcionam na célula.
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Diversidade Genética – Origem e implicações RNA transcritos voltam à forma de DNA (reversa
- Possuímos um acentuado grau de variação genética: altura, transcriptase) e são translocados em novos lugares.
cor de pele, etc. Também podemos falar das doenças * Agentes mutagênicos
herdadas - extremo da variação. Qual a origem desta * Erros na replicação do DNA, apesar de o mecanismo de
variação? correção corrigir cerca de 99,9% dos erros de replicação.

Mutações podem:
- Afetar o número de cromossomos da célula: mutações - Reparo de lesões do DNA: algumas, mas nem todas, as
genômicas. lesões do DNA são corrigidas. A maquinaria reparadora
- Alterar a estrutura de cromossomos específicos: mutações poderá não ter o filamento complementar com precisão e
cromossômicas. criará mutações se inserir essas bases incorretamente 
- Alterar genes individualmente: mutações gênicas. Lesões do DNA, muitas vezes, geram mutações permanentes.
 Mutações genômicas são alterações no número de * Não há tantas doenças genéticas se estas forem analisadas
cromossomos intactos que surgem de erros na segregação individualmente. Por quê? 2 motivos principais:
cromossômica durante a meiose ou mitose. - O código genético é degenerado/redundante: troca de
 Mutações cromossômicas são mudanças envolvendo bases podem não significar mudanças fenotípicas, os códons
apenas uma parte de um cromossomo, como duplicações ou trocados podem codificar o mesmo aminoácido.
triplicações parciais, deleções, inversões e translocações. - Várias doenças genéticas são recessivas e não se
Podem ocorrer espontaneamente ou resultar de segregações expressam: precisam de 2 alelos para se expressar.
anormais de cromossomos translocados durante a meiose.
 Mutações gênicas são mudanças da sequência do DNA
dos genomas nucleares ou mitocondriais, muda a sequência
nucleotídica, envolve mudança de um único (ou poucos)
pares de base.
Variação fenotípica  mutações que não causam doenças,
que não possuem efeitos fenotípicos negativos, só dá
características diferentes aos indivíduos.
Na mutação genômica (de não disjunção), temos por
exemplo, a trissomia do cromossomo 21 (Síndrome de Down)
e a monossomia do X (X0- Síndrome de Turner).
Definição de Mutação Gênica - Exemplo de mutação  Guanina tautômera, modificada:
- Mutações mudam uma forma alélica para outra e coloca-se timina aleatoriamente, qualquer uma que estiver
constituem a fonte básica da variação genética. passando  O corpo não a reconhece como uma guanina
- O estudo da genética tem como base a variação mutacional. normal, por isso a aleatoriedade  Acaba mutando pares de
- As mutações ocorrem espontaneamente ou são produzidas bases em sequências posteriores.
por agentes mutagênicos.
- Mudanças de DNA transmissíveis de uma geração para a
outra: células germinativas são o que interessa do ponto de
vista genético. Mutações somáticas não podem ser
transmitidas aos descendentes.
Polimorfismo
- Média de uma base diferente a cada 1000 bases  definem
os diferentes Alelos.
- Alelos comuns com frequência maior que 1% na população
em geral  Polimorfismo Genético (doenças como
hipertensão, diabetes).
- Os alelos com frequência menor que 1% na população em
geral  Variantes Raras.
Causas das mutações
- Múltiplas causas:
* Integração de transposons  gene que sai do DNA, mas
depois volta realocado em outra região do DNA, ou então, os
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 Mutação de ponto (Substituição de nucleotídeo) proteína truncada defeituosa. O mecanismo chama-se:
- Se baseia na substituição de base: Decaimento mediado por mutação sem sentido – NMD.
* Transição
- A  G (purina  purina) (A·T  G·C)
- C  T (pirimidina  pirimidina) (C·G  T·A)
* Transversão
- Purina  pirimidina (ex., A  C) (A·T  C·G)
 Se mutação não altera o aminoácido, é devido ao fato de o
código genético ser redundante, degenerado: é uma Se o códon de parada prematuro tiver na região verde, o
substituição silenciosa. NMD consegue reconhecer e degrada o mRNA.
Tipos de mutação de ponto Mutação no processamento do DNA
Mutação de sentido trocado (missense) - Destrói consenso de locais de união, destrói local de Cap 5 e
- Troca de um único par de base troca aminoácido. poliadenilação ou cria novas regiões. De forma geral,
TAC CAC GTG GAC TAC CCC GTG GAC interfere na recomposição normal de RNA nas regiões de
AUG GUG CAC CUG AUG GGG CAC CUG ligação éxon-éxon (afeta o splicing).
MET VAL HIS LEU MET GLY HIS LEU
 Consequências:
- Algumas substituições de AA afetam a estabilidade da
estrutura tridimensional da proteína.
- Frequentemente as proteínas são clivadas, glicosiladas,
fosforiladas, etc. Mutações de sentido trocado que alteram
AA importantes para a estrutura tridimensional podem
culminar em proteínas com perda de função.
 Exemplos:
Anemia Falciforme: Modifica um par de base, que troca o
aminoácido  Valina vira ácido glutâmico (glutamato)
- Muda cadeia β da hemoglobina, muda sua conformação
para o formato de foice, diminuindo a afinidade por O2.
- É uma doença genética autossômica recessiva (mutação
precisa estar nos 2 alelos para se expressar)
- Traço falcêmico: só tem um dos alelos, não expressa a
doença inteiramente, mas apresenta sintomas falcêmicos,
como propensão a problemas cardiovasculares.
Fibrose Cística ou mucoviscidose: mutação no gene CFTR no
canal de cloreto. O muco bloqueia as vias áreas,
atrapalhando o funcionamento correto dos pulmões.

Mutação sem sentido (nonsense)

- Troca de um par de base gera códon de terminação
prematuro.
- Códons de parada: (UAA, UAG e UGA).
TAC CAC GTG ATA TGA TAC CAC GTG ATT TGA
AUG GUG CAC UAU ACU AUG GUG CAC UAA
MET VAL HIS TYR THR MET VAL HIS STOP
 Exemplo:
- Proteína truncada: cadeia menor, sem final, fora do seu  Deleções e Inserções
formato ideal, parada prematura que afeta a função final da - Se o número de bases envolvidas não é um múltiplo de 3,
proteína. uma mudança de matriz de leitura (frameshift) resulta numa
 Consequências: sequência posterior de terminação prematura.
- Na maior parte das vezes, o RNAm com mutação sem - Se o número de bases é um múltiplo de 3, não ocorreu
sentido não produz proteína truncada. As células possuem mudança de matriz de leitura e haverá a inserção ou deleção
um mecanismo para detectar e degradar RNAm que de AAs adicionais específicos no produto gênico traduzido.
contenha códon de parada prematuro, evitando formar a Mudança de matriz de leitura (frameshift)
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* Dominante negativo: há a produção de um produto gênico
alterado que age de forma antagônica ao alelo selvagem.
Essas mutações levam a uma ação molecular alterada
(geralmente inativa, perde sua função) e são caracterizadas
por um fenótipo dominante ou com dominância incompleta.
É simplesmente um gene antagônico que atrapalha todos os
outros. Ex: osteogênese imperfeita – certa mutação no gene
do colágeno tipo 1 impede a maturação total das outras
- Deleção ou Inserção de base nitrogenada na sequência proteínas.
gênica codificadora sem ser múltiplo de 3: altera a leitura das - Mutações de ganho de função: mudam o produto gênico de
trincas de nucleotídeos, formando proteínas erradas. forma que este ganhe uma nova função. Essas mutações
- Em geral o que vemos é uma degradação do produto - geralmente têm fenótipos dominantes. Ex: Charcot-Marie-
perda de função: dobramento incorreto, processamento Tooth  a mutação faz o gene expressar sensibilidade à
incorreto, etc. compressão (pressão e alongamento), levando a episódios de
Distrofia Muscular de Duchenne dormência, formigamento e fraqueza muscular  ganho de
- Recessiva liga ao X. função que foi prejudicial.
- Falta de distrofina  sem escamas no músculos * Ganho de função, mais que um novo produto, falamos do
esqueléticos, tornam-se liso  fatal, vida vai até aos 12 anos produto funcional quando e onde não deveria estar.
aproximadamente. - Receptor de célula constitutivamente ativo: receptores
-Indivíduos com pouca distrofina  Distrofia de Becker passam a funcionar continuadamente permanecendo a
(muito menos grave que a de Duchenne). divisão mitótica contínua – proliferação das células
 Mutações leves no promotor, geralmente, só alteram a cancerígenas.
maior/menor afinidade e a quantidade de RNA transcrito  - Huntington: também tem ganho de função prejudicial.
não traz danos fenotípicos significativos. - De forma geral ganho de função necessita de um produto,
Duplicações assim não é possível vermos mutação sem sentido ou de
- Doença de Charcot-Marie-Tooth – PMP22 – proteína de mudança de fase de leitura. O mais provável seria mutação
mielina periférica (Um dos dois cromossomos estão de sentido trocado e de sequências reguladoras.
duplicados – 3 cromossomos no total)  causa degradação OBS: A classificação recessivo ou dominante é para os
da bainha de mielina, afeta a transmissão do impulso fenótipos, nunca genótipos.
nervoso, doença degenerativa.  Espera-se que o ganho de função produza fenótipos
Expansões de trinucleotídeos dominantes, visto que deve existir um produto.
- Doença de Huntington: demência prematura.  Já para a perda de funções, podemos observar tanto os
- Distrofia Miotônica: perda do tônus muscular, boca e olhos fenótipos dominantes ou recessivos. Vai depender do quanto
caídos  aumento excessivo da região 3` da cauda poli A a mutação afetou o produto.
(expansão GCT na região 3` não traduzida)  Região CGT
replicada várias vezes repetitivamente em sequência.

Efeitos das mutações sobre o produto gênico

- Perda de função é mais comum que o ganho de função.
- Mutações de perda de função: são aquelas que resultam
num produto gênico que tem menos ou nenhuma função,
em comparação ao gene não mutado. Quando o alelo perde
completamente a função, (alelo nulo), denomina-se uma
mutação amórfica. Fenótipos associados a essas mutações
geralmente são recessivos.
- Dentro desse grupo, têm-se exceções à recessividade.
* Haploinsuficiência: tem caráter dominante, apesar de a
cópia do alelo padrão, em heterozigose com um alelo
variante, ser insuficiente para produzir o fenótipo padrão,
perde a função. Ex: Hipercolesterolemia  colesterol alto.
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vida menor, por isso as hemácias terão menor duração no
organismo), resultando em anemia e necessidade de
tratamento.
Hidropsia fetal (–/–): há casos em que a mutação atinge os
quatro genes, o que causa completa incapacidade do
organismo em produzir as cadeias alfa, tornando impossível a
produção normal de hemoglobina. A doença desenvolvida é
incompatível com a vida e leva o feto ao óbito ainda no
útero. Mas felizmente, isso é raro.
Talassemia β
- A síntese da cadeia β é reduzida ou inexiste – mutação
pontual.
Hemoglobinopatias - A síntese da cadeia α é normal.
A) Anemia Falciforme - Os tretâmeros ficam instáveis e ocorre morte prematura
- Produto de alteração de um nucleotídeo no gene da cadeia das células que produziriam os glóbulos vermelhos maduros.
de β globina (mutação pontual). - Possui 3 tipos:
- É homozigota recessiva, de herança autossômica. Talassemia β menor (ou traço talassêmico): seus portadores
- Ela se manifesta quando HbF é substituída por HbS. apresentam apenas uma herança genética da talassemia,
1. Substituição de AA`s nas cadeias do HbS. adquirida do pai ou da mãe. Eles apresentam uma leve
- 2 dímeros: α1β1 e α2β2 – o ácido glutâmico da posição 6 é anemia, sem necessidade de tratamento.
substituído pela valina, na cadeia β. Talassemia β intermediária: como o nome sugere, este tipo
2. Alterações falciformes e anóxia tecidual está entre a talassemia menor (sem gravidade alguma) e a
- A substituição do AA promove alteração na forma da talassemia maior (mais grave), e é causada por uma mutação
hemoglobina. que pode ter sido herdada apenas do pai ou da mãe, não de
- Em condições de baixa p(O2), ocorre uma distorção das ambos. Por este motivo, em alguns casos o portador pode
células e isso produz células vermelhas rijas e deformadas. apresentar uma anemia mais discreta, e em outros mais
- Estas bloqueiam mecanicamente o fluxo sanguíneo nos grave.
capilares, o que leva à anóxia tecidual (falta total de Talassemia β maior: este é o tipo mais grave, pois seus
oxigênio). portadores apresentam uma anemia severa. A produção de
3. Vantagem seletiva do heterozigoto hemoglobina é falha, originando hemácias (glóbulos
- Os heterozigotos da anemia falciforme têm maior vermelhos) mais frágeis e de menor duração, e capacidade de
resistência à malária, cuja doença passa pela penetração do levar oxigênio por todo o organismo é reduzida.
parasita nas hemácias. Reparo do DNA
- As hemácias dos portadores de HbS têm menor expectativa - 3 x 109 pb que são replicados a cada divisão celular.
de vida. - Taxa de mutação é baixa (10-10).
B) Talassemias - Revisão da replicação – procura de bases “danificadas”.
- São doenças hemolíticas hereditárias. Ex.: desaminação da CITOSINA - resulta em filamento de DNA
- A síntese da cadeia α ou β é defeituosa. com URACILA  esse dano é facilmente percebido pelo
Talassemia α sistema de reparo.
- A síntese da cadeia α é reduzida ou inexiste – mutação por
deleção.
- Existe um gradiente na doença, já que o genoma humano
contém 4 cópias do gene da αglobina (2 em cada
cromossomo 16).
* Doença mais grave: as 4 cadeias α afetadas. Menos grave:
só 1 cadeia α afetada.
Portador silencioso (α-/αα): neste tipo de alteração, o
indivíduo é o portador de um gene defeituoso, herdado de
um dos pais, sem apresentar sintomas ou necessitar de
tratamento. Ou seja, o portador silencioso não é considerado
doente e não precisam de tratamento.
Traço talassemia alfa (α-/α- ou –/αα): este tipo de talassemia
alfa acontece quando dois genes são defeituosos, o
hemograma apresenta algumas alterações leves, e o portador
pode apresentar palidez na pele e, quando adulto, sentir um
pouco de cansaço. Erro no meio do DNA (sem abrir): DNA Glicolase retira a base
Doença da hemoglobina H (α-/–): considerado entre os casos errada  Endonuclease corta o DNA (desfaz as ligações
mais graves, onde a pessoa herda dos pais três genes fosfodiéster)  Exonuclease libera o espaço removendo as
alterados, o indivíduo pode manifestar a doença da bases  DNA Polimerase consegue se encaixar para agir 
hemoglobina H (que tem uma função semelhante à da Ligase recompõe o DNA, refazendo as ligações fosfodiéster.
hemoglobina normal, mas é mais instável e seu tempo de
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 Síndrome de Werner: ocasiona envelhecimento precoce.
Ocorre devido à falta de helicase, o que altera o sistema de
reparo e propicia o acúmulo de mutações no gene. Por isso, o
envelhecimento celular.
Envelhecimento celular ocorre por dois motivos principais:
diminuição da efetividade do sistema de reparo, acumulando
mutações, e desgaste dos telômeros.
 Qual o significado da variação genética humana?
- Localização da maior parte da variação genética está fora
dos genes.
- Conservação evolutiva: ancestral comum
- Dentro dos genes: algumas mutações podem ter efeito
positivo dependendo do ambiente (CCR5 - resistentes ao HIV
- e Anemia Falciforme - resistentes à malária)
- Mutações que causam doenças: podem ser raras ou
comuns.
 Como o entendimento dessa variação afeta a medicina?
- Entender a causa primeira de uma doença genética - o que
é uma doença genética?
- Virtualmente, toda doença humana tem um componente
genético.

Enviromental = ambiental / Genetic = ganético

Como o entendimento dessa variação afeta a medicina?
- Conhecimento da exata mutação que causou a doença pode
ajudar no tratamento (PKU)  Teste do pezinho identifica
fenilcetonúria (acúmulo de fenilalanina se torna tóxico 
mata células germinativas neuronais  afeta
desenvolvimento cognitivo).
- Eventualmente todos nós poderemos ser beneficiados por
estes estudos  estimativa: carregamos entre 5 à 50
mutações potencialmente de risco!