Ministério da Educação
Curso de Bacharelado em Biomedicina
Disciplina: Biologia Molecular
Organização gênica de
procariotos e eucariotos
(genes, cromossomos e
genomas)
Profa. Ag-Anne Melo
Introdução
Procariotos e eucariotos
Divergências Replicação Transcrição Tradução
Energético e Sistema de
Metabolismo
biossintético códons
O principal critério de distinção é a organização celular
Introdução
O principal critério de distinção é a organização celular
PROCARIOTOS:
- Unicelulares
- Ausência de núcleo
- DNA organizado em um único cromossomo
- Sem histonas
- Plasmídeos
(pequenas moléculas de DNA circular livres
no citoplasma)
•Reproduzir de forma independentemente
do DNA cromossômico
• Resistência a antibióticos
Introdução
O principal critério de distinção é a organização celular
EUCARIOTOS:
- Multicelulares
- Presença de núcleo
- DNA organizado em um ou mais
cromossomos
- Com histonas
- Não há plasmídeos
Introdução
A evolução do conceito de gene
Gene = Classicamente definido como a porção do cromossomo que
determina ou afeta uma característica ou fenótipo
A noção básica do conceito de gene foi introduzida por Mendel
Ele utilizava palavras como caráter e fator para descrever os
agentes que se segregariam na herança
Wilhelm Johannsen
Criou o termo gene para definir essa entidade que
produz o caráter na célula germinativa
Genótipo e fenótipo
A evolução do conceito de gene
1 gene = 1 enzima
Mas nem todas as proteínas têm função
enzimática
1 gene = 1 proteína
Muitas proteínas são formadas por várias cadeias
Estudos genéticos e bioquímicos polipeptídicas
do mofo do pão Neurospora
1 gene = 1 cadeia polipeptídica (cadeia de
aminoácido)
A evolução do conceito de gene
Alguns genes não codificam polipeptídeos
Alguns genes realmente codificam moléculas de RNA funcional ao invés de
polipeptídeos
Vários genes não se expressam como proteínas : RNAt, RNAr, snRNA...
O que é um gene?
• Uma sequência de DNA necessária e suficiente para a síntese de
algum produto biológico funcional (RNA ou proteína) com função
estrutural ou catalítica
Conceito em termos moleculares
Estrutura dos genes procarióticos
Sinal de término
da transcrição
Genes bacterianos são frequentemente encontrados em óperons
5’ 3’
DNA
Promotor A B C
Um óperon é uma unidade Genes transcritos em uma
Seqüência regulatória OPERON
funcional do genoma procarioto unidade transcricional
A B C
mRNA
Transcrito policistrônico
É definido como um conjunto de genes
estruturais organizados em sequência e
sob o controle de um único promotor
Proteínas
A B C
Estrutura dos genes procarióticos
Sinal de término
da transcrição
Cada óperon contém sequências de
DNA reguladoras (Promotor) 5’ 3’
DNA
Sítios de ligação de proteínas Promotor A B C
reguladoras que promovem ou
Genes transcritos em uma
inibem a transcrição Seqüência regulatória OPERON
unidade transcricional
2 ou mais genes sobre regulação de
um único promotor
A B C
mRNA
Transcrito policistrônico
Possui informação para codificar várias
proteínas- Policistrônico
Genes procarióticos não são interrompidos por
Proteínas
sequências não-codificantes
A B C
Estrutura dos genes eucariotos
1 único gene sobre regulação de um único promotor
Cada mRNA contém informação para um único gene
A informação gênica é interrompida por sequências não-codificantes
Exon Intron Exon
5´ 3´
Promotor
Início da informação Término da informação
biológica biológica
Éxon : expressed sequence • Regiões codificantes
Íntron : intragenic sequence • Correspondem às regiões codificantes que contêm a
Não expressas informação para a síntese da proteína
Estrutura dos genes
mRNA é formado
apenas pelas regiões
de éxon
95% dos genes
contém íntrons DNA
Eucariotos cada
região é regulada RNA
por uma região
promotora
Cromossomos
Os cromossomos são estruturas que abrigam o material
genético dentro da célula
Um cromossomo é uma molécula de DNA condensada
As moléculas de DNA :
•São as maiores macromoléculas das células
•São constituídas por genes e por seqüências não-codificantes
Bactérias e vírus : geralmente contêm 1 cromossomo (geralmente circular)
Eucariotos : vários cromossomos (lineares)
aCo)njunto de todos os genes e DNA intergênico (DNA regulatório)
de um organismo : GENOMA
Genoma dos procariotos
E. coli: 1 molécula de DNA dupla fita circular com
DNA genômicos
genes essenciais (necessário para sobrevivência)
Setas plasmídeos
Elementos extra-cromossômicos: plasmídeos
Informação extra mas não essencial
4.639.221 pb
Altamente empacotado
Tratamento com elevadas
concentrações de sais o que promoveu ~4.300 genes
a ruptura da membrana celular
Genoma dos procariotos
E. coli: 1 molécula de DNA dupla fita circular com genes essenciais
Elementos extra-cromossômicos: plasmídeos
87,8% = genes que codificam
proteínas
0,8% = genes que codificam RNAs
(transportador, ribossomos, etc)
11,4% = sequência de regulação
(promotora, Oric C)
Sequências repetidas
99% de DNA representando região codificadora (proteínas e RNA)
Rico em regiões codificantes
Elevada densidade gênica
Variação na composição cromossômica em
diferentes organismos
Densidades gênicas dos genomas de diferentes organismos
O tamanho do genoma está relacionado com a
complexidade do organismo
Organismos mais complexos apresentam
densidade gênica menor
Aumento no tamanho do gene
Para armazenar toda informação
Aumento no DNA entre os genes
(seqüências intergênicas)
3.2
bilhões 8,4
Mais áreas regulando os genes
Densidades gênicas dos genomas de diferentes organismos
Organismos mais complexos
Significativo aumento nas regiões
de DNA necessárias para direcionar
e regular a transcrição
Sequências regulatórias
Regiões codificantes descontínuas
(íntrons)
Densidades gênicas dos genomas de diferentes organismos
Organismos mais complexos
Significativo aumento nas
regiões de DNA necessárias
para direcionar e regular a
transcrição
Sequências regulatórias
Níveis de organização do DNA
Supercoiling (super-helicoidização) Organizar o DNA
Enrolar uma dupla hélice
Macromolécula Compactar
Nucleossomo
Torção para caber
dentro da célula
Replicação
Transcrição
Expressão gênica
Níveis de organização do DNA
Estado relaxado: 10pb por giro da sua hélice Um DNA circular está sujeito a essa torção
DNA plasmidial
Estratégias para aumentar o grau de compactação
Níveis de organização do DNA
Supercoiling Torcido na direção da hélice
positivo
Bases estão unidas mais firmemente
Supercoiling Torção na direção oposta
negativo
Afrouxamento das bases
Topoisomerase
Enzimas aumentam ou diminuem o grau de subenrolamento do DNA
Níveis de organização do DNA
Adição de dois giros Remoção de dois giros
(mais torcido) (menos torcido)
Super
espiras
Ocupam
menos espaço
Mais pares de
bases por giro Menos pares de
bases por giro
Níveis de organização do DNA
DNA plasmidial
Relaxado Helicoidizado
Diferença no
tamanho da
área ocupadas
• Evento observado no DNA eucarioto e procarioto
• A maior parte do DNA celular é negativamente superelicoidizada
• Facilita a separação dos filamentos de DNA
• Permite que o DNA seja embalado em pequenos espaços
Níveis de organização do DNA
1 cromossomo humano médio
2 m de DNA/célula Compactação
Cromossomo de E. coli : 1,7 mm
(850 vezes o tamanho da célula bacteriana)
Alças
de Proteínas
DNA
Redução do
Interações tamanho do
DNA
Compactação
Compactação do DNA
Os cromossomos eucarióticos
Moléculas de ácido nucléico que contém a informação genética
Termo: Corpos densamente corados vistos no núcleo
Cromossomos são característicos em células em divisão
Forma de compactação é observada nesses estágios
Cromatina filamento de DNA muito longo e
muito fino localizado no núcleo da célula
interfásica
(Não em divisão)
Compactação do DNA
Divisão celular: Intérfase: cromatina
cromossomos (cromatina (eucromatina e Regiões menos
muito condensada) heterocromatina) condensadas
Eucromatina
Heterocromatina
Descondensadas
Densamente
Estado de menor
compactada
compactação
Cromatina
Cromatina
DNA menos condensado
Formada: Material cromossômico amorfo e casualmente disperso no núcleo
DNA Proteínas Nucleossomo
Nucleossomo
Nucleossomo: unidade estrutural básica da cromatina
Cordão de contas Histonas
Ricas em lisina e arginina (aa básicos)
1º grau de organização do DNA 5 classes de histonas :
150 a 250 pb associados a um octâmero de histonas H1, H2A, H2B, H3 e H4
2 H2A, 2 H2B, 2 H3 e 2 H4
Nucleossomo
2º grau de organização do DNA
Fibras de 30nm
O nucleossomo está organizado em
fibras de 30 nm
Compacta o DNA cerca de 100 vezes
100 vezes menos espaço
Outros níveis de organização do DNA
A fibra de 30 nm associa-se com esqueleto de proteínas não-histônicas
Arcabouço proteico nuclear
(tratamento com solução salina concentrada)
Outros níveis de organização do DNA
Outros níveis de organização do DNA
• Estrutura varia de cromossomo para cromossomo
• Varia de uma região para outra dentro do
cromossomo
• Muda de um momento para outro durante o
tempo de vida da célula
10.000 vezes compactada
Se um gene precisa ser expresso aquela região do
gene se encontra estará em um grau de
compactação baixo
Genoma
O genoma é toda a informação hereditária codificada no DNA
Nuclear
Genoma
Mitocondrial
Núcleo Mitocôndrias
Genoma Humano
Nuclear Mitocondrial
25.000-30.000
genes
5% Genes funcionais DNA repetitivo 95% DNA espaçador
Cópia única
Moderadamente repetitivo Sequências funcionais Seqüências sem função conhecida
Famílias de genes
codificantes Seqüências funcionais Repetições em Número variável Seqüências
(e pseudogenes não-codificantes heterocromatina de repetições transpostas
centromérica em tandem
correlatos)
Famílias de Famílias de Retro-
Transposons transposons
genes genes em
dispersos tandem
Genes funcionais
Seqüências individuais presentes em apenas uma cópia por genoma
Genes estruturais= gene funcionais
Distribuição variada entre os diferentes cromossomos
Regiões sub-teloméricas
Codificam polipeptídios que integram: Os genes (vermelho) não
estão distribuídos
enzimas/hormônios/receptores/ proteínas estruturais e reguladoras
uniformemente pelo genoma
Seqüências repetidas funcionais
Codificantes
Produtos gênicos necessários em grandes quantidades
(Ex. histonas, genes para RNAr, RNAt)
Genes de histona de ouriço-do-mar
Genes de histona da mosca das frutas
Seqüências repetidas funcionais
Não-codificantes
Função específicas mas não são transcritos( mRNA ou proteínas)
Seqüências teloméricas (TTAGGG em humanos)
Protegem as extremidades dos cromossomos
Fim do cromossomo
Primer de RNA removido e ligação
dos fragmentos de DNA
Replicação
e
Primer de RNA
DNA recém sintetizado
Seqüências sem função conhecida
Número variável de repetições em tandem (VNTRs)
Seqüências de 15 a 100 pb repetidos
Não se conhece seu papel dentro da célula
Cada individuo apresenta um padrão de
repetição exclusivo
Os VNTRs são uma mistura do provenientes do
pai e da mãe
Base do fingerprints de DNA Sangue corado
suspeitos
DNA altamente repetitivo em tandem
(que se repete)
DNA mitocondrial
Circular de cadeia dupla
Não apresenta, íntrons e arcabouço de histonas
Compacto (16 kb)
37 Genes: para RNAr, RNAt e para polipeptídeos
necessários para produção de ATP
Herança materna
Replicação independente do núcleo
Genoma Nuclear x Genoma Mitocondrial
Sugestão
Sugestão
Revisão
Em 1940 os biólogos George Beadle e Edward Tatum anunciaram:
Esse anúncio indica que os biólogos descobriram:
a) A estrutura da molécula de DNA
b) A sequência de bases do DNA
c) O mecanismo de transcrição do código genético
d) O papel biológico do Gene
A evolução do conceito de gene
1 gene = 1 enzima
Mas nem todas as proteínas têm função
enzimática
1 gene = 1 proteína
Muitas proteínas são formadas por várias cadeias
Estudos genéticos e bioquímicos polipeptídicas
do mofo do pão Neurospora
1 gene = 1 cadeia polipeptídica (cadeia de
aminoácido)
Revisão
O conjunto de genes estruturais
organizados em sequência e sob o
controle de um único promotor é
definido como: .
Estrutura dos genes procarióticos
Sinal de término
da transcrição
Genes bacterianos são frequentemente encontrados em óperons
5’ 3’
DNA
Promotor A B C
Um óperon é uma unidade Genes transcritos em uma
Seqüência regulatória OPERON
funcional do genoma procarioto unidade transcricional
A B C
mRNA
Transcrito policistrônico
É definido como um conjunto de genes
estruturais organizados em sequência e
sob o controle de um único promotor
Proteínas
A B C
Revisão
Julgue a afirmativa:
• Humanos possuem alta densidade gênica.
Densidades gênicas dos genomas de diferentes organismos
O tamanho do genoma está relacionado com a
complexidade do organismo
Organismos mais complexos apresentam
densidade gênica menor
Aumento no tamanho do gene
Para armazenar toda informação
Aumento no DNA entre os genes
(seqüências intergênicas)
3.2
bilhões 8,4
Mais áreas regulando os genes
Ministério da Educação
Curso de Bacharelado em Biomedicina
Disciplina: Biologia Molecular
Organização gênica de
procariotos e eucariotos
(genes, cromossomos e
genomas)
