CRESCIMENTO BACTERIANO

PROF RENATA DALMASCHIO DALTO

Em microbiologia, o termo crescimento referese a um aumento do nmero de clulas e no

ao aumento das dimenses celulares.

CRESCIMENTO BACTERIANO

Nutrientes

Fonte de Carbono

Fonte de Energia

Fonte de Eltrons

Precurssores Metablicos

Macromolculas

Diviso Celular

Crescimento das culturas bacterianas

Diviso bacteriana Fisso binria ou
bipartio

A alongamento da clula
B duplicao do material
gentico

C invaginao da parede
D separao das paredes
E separao das duas
clulas-filhas

Crescimento das culturas bacterianas

Tempo de gerao
Tempo necessrio para uma clula se dividir
formando duas clulas-filhas idnticas
Ex.: Escherichia coli tempo de gerao de 20min.

MULTIPLICAO BACTERIANA
Fisso Binria Transversa

Cultura Bacteriana duplica a cada 20 minutos

Ex: Escherichia coli massa = 1x10 -12 g
48 horas 2144 bactrias / massa = 2,2 x1031 g (4.000 vezes a massa do planeta
Terra!!!!!!!!!!!)

Crescimento Bacteriano Autolimitante

FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO

Falta de nutrientes
Acmulo de subprodutos txicos
Equilbrio multiplicao e morte
Ativao de enzimas que lisam parede ceular

Nmero de Bactrias (log)

multiplicao

3
adaptao

Fase
Estacionria

4
Fase de Morte

Fase Log
(Exponencial)

Fase Lag

Tempo

 Fases da curva de crescimento

Fase lag: processo de diviso pouco ou ausente; adaptao das
clulas ao meio.

Fase log: alto processo de diviso; crescimento exponencial;

absoro de nutrientes do meio; produo de metablitos
(toxinas).

Fase estacionria: diminuio da velocidade de diviso

bacteriana; diminuio da atividade metablica; tiram nutrientes
das clulas mortas; acmulo de substncias txicas; esporulao.

Fase de morte celular: nmero de clulas mortas excede o

nmero de clulas vivas.

FATORES FSICOS QUE AFETAM O CRESCIMENTO

BACTERIANO

Psicrfilas (12 a 17 graus C)

TEMPERATURA

Mesfilas (28 a 37 graus C)

Termfilas (57 a 90 graus C)
Termfilas extremas (>100 graus C)
Neutrfilas

pH

Acidfilas (ph<5)
Alcalfilas (pH>10)

Oxigenao

Aerbias , Anaerbias , Facultativas, Microaerfilas (

PO2)

Salinidade

Bactrias Halfitas

Temperatura - Classificao

Oxignio - Classificao
Aerbios estritos ou obrigatrios
necessitam da presena de O2 livre para
crescer
Ex. Mycobacterium tuberculosis

Classificao
Facultativas
anaerbio.

crescimento

Ex. Staphylococcus, Escherichia

aerbio

Classificao
Anaerbias obrigatrias s crescem na
ausncia de O2.
Ex. Treponema pallidum

Classificao
Anaerbias aerotolerantes crescem na
ausncia de O2, mas toleram sua presena.
Ex. Streptococcus

Classificao
Microaerfilas crescimento aerbio, porm,
em baixas concentraes de O2.
Ex. Neisseria

Classificao

1)Aerbios estritos
2)Anaerbios estritos
3) Facultativos
4)Microaerfilo
5)Anaerbios aerotolerantes

GENTICA BACTERIANA

 Mais simples que genomas eucariticos;

DNA em nico cromossomo circular;

Ausncia de um complemento diplide de genes;
Uso de quase todo genoma na codificao e na
regulao;
Existncia

de

unidades

genticas

acessrias

(plasmdeos, bacterifagos e elementos transponveis).

UNIDADES GENTICAS ACESSRIAS

Plasmdeos

Bacterifagos
Elementos genticos transponveis (Tranposons)

Genoma Bacteriano

Cerne gnico

Conj flexvel de
genes

Cromossomos

Plasmdeos
Fagos
Transposons

Ribossomos
Envelope Celular

Enzimas metablicas
Replicao do DNA

Patogenicidade
Resistncia a antibiticos
Metabolismo secundrio

Plasmdeos
So elementos extracromossomais com capacidade de
multiplicao autnoma, constiudo por uma molcula
de DNA fita dupla circular ou lineares.

Os plasmdeos no so indispensveis para clula, mas

podem conferir-lhe vantagens seletivas.

Funes codificadas por plasmdeos

Produo de toxinas;
Produo de pilinas e outras adesinas;
Resistncia a agentes antimicrobianos;
Produo de bacteriocinas;
Resistncia a metais pesados;
Fatores de virulncia.

 Plasmdeo de tipo sexual: so importantes para a

transferncia de plasmdeos de uma clula receptora;

Plasmdeo R: a resistncia a antibiticos pois contm

informaes para a sntese de enzimas que inativam
antibiticos especficos;
Plasmdeo Col: Capazes de produzir
(protenas capazes de inibir o crescimento);

colicinas

Plasmdeos Virulentos: Transportam informaes que

favorecem a virulncia durante a infeco;

Plasmdeos

Transposons
Segmentos mveis de DNA de bactrias que so

movimentados (transpostos) em baixa frequncia no

cromossomo;
Transposons levando genes
antibiticos so comuns.

de

resistncia

MUTAES
Principais variaes
mutaes:
Resistncia drogas;
Variaes Morfolgicas;
Temperatura Sensveis (TS);

fenotipicas

resultantes

das

Recombinao Gnica

Recombinao
Processos que produzem rearranjos entre os
genes ou parte destes;
Enquanto a mutao garante a variabilidade
gentica, a recombinao assegura que diferentes
combinaes de genes sejam possveis.

Mecanismos que permitem a recombinao

Transformao;
Transduo;
Conjugao.

Transformao
o processo no qual DNA bacteriano disperso no
meio tomado pela clula bacteriana, resultando
em alteraes genotpicas desta;

Transformao
Molcula de DNA circular

Fragmentos de
DNA doador

Lise celular
Clula bacteriana

Quebra
do DNA

Clula bacteriana

Fragmentos de DNA
ligam-se superfcie
da clula receptora.

O fragmento de DNA
incorporado clula receptora.
O fragmento de DNA integrado
ao cromossomo da clula receptora.
Clula transformada

Transduo
Processo de transferncia de DNA bacteriano de
uma clula para outra via bacterifago;

Transduo
Fago

O DNA de
um fago penetra
na clula de
uma bactria.

Genes de outra bactria

so introduzidos e
integrados ao DNA
da bactria hospedeira.

O DNA do fago
integra-se ao DNA
da bactria como
um profago.

Quando o profago inicia o ciclo

ltico, o DNA da bactria
degradado e novos fagos podem
conter algum trecho do DNA
da bactria.

DNA do fago
com genes da
bactria

O fago infecta
nova bactria.

A clula
bacteriana se
rompe e libera
muitos fagos, que
podem infectar
outras clulas.

Conjugao
a transferncia de material gentico (plasmdeo)
de uma bactria para outra que rerquer contato.

F factor (plasmid)

Conjugao
(cont.)

Male (donor)
cell
Bacterial
chromosome

F factor starts
replication and
transfer

F+

F-

Plasmid completes
transfer and
circularizes

F+

F+

Cell now male

CONTROLE DE
MICROORGANISMOS

CONCEITOS BSICOS
ESTERILIZAO: processo de matar ou remover todos os
microrganismos viveis. Usa agentes fsicos ou agentes
qumicos para destruir todas as formas microbianas,
incluindo os endosporos bacterianos.
DESINFECO: processo que usa agentes fsicos ou
qumicos para remover ou matar a maioria das formas
microbianas; esporos bacterianos e outras formas de
vida relativamente resistentes (exs. micobactrias,
fungos e vrus no envelopados) podem permanecer
viveis.

CONCEITOS BSICOS
ANTI-SEPSIA: processo que usa agentes qumicos,
denominados anti-spticos, sobre a pele ou tecidos
vivos para inibir ou eliminar microrganismos
patognicos.
ASSEPSIA: conjunto de meios usados para impedir a
penetrao de microrganismos em local que no os
contenha. Ou seja, qualquer prtica que impea a
entrada de agentes infecciosos em materiais estreis.

FATORES QUE AFETAM A TAXA DE MORTE MICROBIANA

Tempo de exposio da populao microbiana ao

agente.
Nmero de microrganismos da populao. Uma
carga maior de contaminantes requer mais tempo para
ser destruda.
Natureza dos microrganismos da populao.
Populaes mistas, de bactrias, fungos, esporos, vrus,
apresentam maior resistncia.

FATORES QUE AFETAM A TAXA DE MORTE MICROBIANA

Temperatura e pH do ambiente em que esto os

microrganismos.
Concentrao (dosagem, intensidade) do agente
antimicrobiano.
O modo de ao do agente: microbicida ou
microbiosttico.

Incinerao

Seco

Forno seco
Vapor sob
presso

Calor

Esterilizao
mido

AGENTES FSICOS

gua fervente
Pasteurizao Desinfeco
gua quente
Ionizante
Esterilizao

Raios X
catdicos
gama
No ionizante

Desinfeco

UV

Radiao

CALOR MIDO NO CONTROLE DE MICRORGANISMOS

MTODO

TEMPERATURA

APLICAES

LIMITAES

Calor mido
(Fervura)

100C, 15 min.

Mata clulas
vegetativas em
instrumentos,
recipientes

Endosporos no
so mortos.
No esteriliza

Calor mido sob

presso

121C a presso
de 1 atm

Esterilizao de
Instrumentos,
Tecidos, meios de
cultura, etc.

Ineficiente em
materiais
impermeveis
ao vapor e em
termossensveis

Pasteurizao

62,9C por 30 min. ou Mata clulas

71,7C por 30 seg.
vegetativas de
patgenos no leite,
suco de frutas, etc.

No esteriliza

TEMPERATURA NO CONTROLE DE MICROORGANISMOS

MTODO

TEMPERATURA

APLICAES

LIMITAES

Calor seco
Incinerao

Centenas de C

Esterilizao de alas
bacteriolgicas, animais
infectados e objetos
contaminados descartveis

Tamanho do
incinerador (adequado
carga).
Poluio do ar.

Forno de ar seco 160C por 2h

170C por 1h

Esterilizao de objetos
impermeveis ao vapor ou
danificados pela umidade.
Ps, leos, instrumentos
metlicos, vidraria.

No pode ser usado em

materiais que no
suportam altas
temperaturas (papis,
tecidos, etc.)

Congelamento

Abaixo de 0C
(- 20C ou 70C)

Preservao de alimentos,
drogas e espcimes
laboratoriais

Ao apenas
microbiosttica,
raramente microbicida.

Nitrognio
lquido

-196C

Preservao de
microrganismos, clulas, etc.

Alto custo do
nitrognio lquido

COMPARAO DE TEMPO E TEMPERATURA PARA

ESTERILIZAO COM CALOR MIDO E CALOR SECO
TEMPERATURA

TEMPO PARA
ESTERILIZAO

CALOR
MIDO

121C
125C
134C

15 minutos
10 minutos
3 minutos

CALOR SECO

121C
140C
160C
170C

600 minutos
180 minutos
120 minutos
60 minutos

Esterilizao por calor mido sob

presso - Autoclave

CONTROLES DA ESTERILIZAO
CONTROLE BIOLGICO
A resistncia de esporos ao calor seco (estufa) difere
da resistncia ao calor mido (autoclave);
Para estufa de calor seco so esporos de Bacillus
subtillis;
Para autoclave (calor mido sob presso) so
esporos de Geobacillus (Bacillus) stearothermophilus.

RADIAES
RADIAES

NO IONIZANTES: UV e MICROONDAS

LMPADAS DE UV ( 260-280nm) usadas para aplicaes

germicidas, incluindo lquidos, ar e desinfeco de superfcies
MICROONDAS: eficcia contra bactrias, fungos e vrus, com
pouca atividade contra endosporos bacterianos.

RADIAO IONIZANTE: RAIOS (Co60 e Ce137)- Aplicaes

na desinfeco de dispositivos mdicos, alimentos, cosmticos, gua.
E em esterilizao de produtos farmacuticos, dispositivos prempacotados, marcapassos, implantes ortopdicos, suturas
cirrgicas, agulhas e seringas, luvas, etc.

FILTRAO
Usada para lquidos e gases;

Mtodo fsico remoo fsica de microrganismos, ao

invs de sua inativao.

FILTRO HEPA
(HEPA= High Efficiency Particulate Air);
So de camadas de fibra de vidro de vrias eficincias;
Largamente usado para gs, especialmente para
descontaminao do ar (quartos de isolamento e salas de
preparo de produtos farmacuticos estreis, salas de
cirurgia e aparelhos de ventilao).

FILTRO HEPA
Tambm utilizado em cmaras de fluxo laminar ou
cabines de biossegurana.

AGENTES QUMICOS
CIDOS E DERIVADOS CIDOS
Uso primrio como preservativo de alimentos, produtos
farmacuticos, cosmticos, sabes.
Mais usados so os cidos orgnicos actico, propinico
e benzico.

LCOOIS
Desinfetantes e anti-spticos: lcool isoproplico e
lcool etlico;
concentraes de 50 a 90%. Melhor atividade a 70%;

Usados para limpeza e secagem de superfcies e para

desinfeco (anti-sepsia) da pele em hospitais e outros
locais;

LCOOIS
So bactericidas e micobactericidas (70% em 30
segundos);
Contra fungos e vrus requer mais de 2 minutos;
Pouca ou nenhuma atividade contra esporos e contra
protozorios.

Modo de ao: Desnaturao e coagulao de protenas.

ALDEDOS
GLUTARALDEDO, ORTOFTALALDEDO (OPA)

GLUTARALDEDO: dispositivos mdicos, como exemplos:

Endoscpios flexveis, instrumentos urolgicos, respiradores, lentes
de instrumentos);
VANTAGENS DO USO DE GLUTARALDEDO:
Ao na presena de matria orgnica, podendo ser usado na
descontaminao de artigos antes de serem esterilizados;
LIMITAES DO GLUTARALDEDO:
Irritante para olhos, nariz e garganta;
Requer ventilao
adequada, fechamento hermtico dos
recipientes onde so colocados os artigos para desinfeco ou
esterilizao.

DETERGENTES CATINICOS
Exs.: Cloreto de benzalcnio, cetrimida e cloreto de
cetilpiridnio.
Tem baixa toxicidade;
Em geral so bacteriostticos, fungistticos,
tuberculosttico e esporosttico a baixas conc. (< 500
g/ml);

DETERGENTES CATINICOS
Para atividade microbicida requer altas conc (> 1
mg/ml).
Rompem membranas celulares e parede celular, e
precipitam protenas.
Uso: sanitizantes de superfcies e equipamentos;
anti-septicos para cavidade bucal.

FENOL E COMPOSTOS FENLICOS

H compostos fenlicos usados para desinfeco,
preservao (em cosmticos e perfumaria) e anti-sepsia.
Ex.: Triclosan usado como anti-spticos em
formulaes como sabes, detergentes e cosmticos, na
concentrao de 0,3 a 2%.

IODO
Solues so preparadas pela dissoluo de iodo e
iodeto de potssio.

Solues de iodo so anti-spticos usados em

feridas, preparaes pr- operatrias.