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Estudo Dos Ácidos Nucléicos

 Ácido Desoxirribonucléico
 Ácido Ribonucléico

 O código genético

 Síntese de proteínas
“Não nos passou despercebido
que o pareamento específico
que postulamos sugere
imediatamente um mecanismo
de cópia possível para o
material genético.” Nature
25/04/1953

James D. Watson e Francis Crick


DNA no núcleo celular em Eucariotos
Bases nitrogenadas
 Bases púricas: Adenina ( A )
Guanina ( G )
 Bases pirimídicas: Citosina ( C )
Timina ( T )

 Relação entre as bases


 Pontes de Hidrogênio
 A=T
C G
O DOGMA CENTRAL DA BIOLOGIA MOLECULAR
REPLICAÇÃO DO DNA
1953: Watson e Crick 
postulado teórico (não
testado experimentalmente)
 replicação semi-
conservativa.
1958: Meselson e Stahl 
confirmam, através de
experimentação, a hipótese
feita por Watson e Crick de
que o DNA se replica de
maneira semiconservativa.
REPLICAÇÃO DO DNA
Necessidade de fita molde.
Sentido da síntese: 5’  3’  necessidade
de extremidade 3’-OH livre para que
ocorra a ligação fosfodiéster.
Necessidade de um iniciador ou“primer” 
oligonucleotídeo de RNA, complementar
ao DNA fita-molde.
REPLICAÇÃO DO DNA
REPLISSOMO OU SISTEMA DA DNA REPLICASE:
1- Desenovelar dupla hélice e separar as duas fitas: helicase 
reconhece a origem de replicação, corta e separa as duas fitas.
2- Manter o DNA desenovelado: proteína de estabilização de DNA
fita simples (SSB –Single-Strand Binding protein) em procariotos e
RPA (Replication Protein A) em eucariotos.
3- Superenovelamento para anular a tensão criada pela abertura da
dupla hélice  necessidade de mais uma atividade enzimática que
reduz a tensão da molécula  topoisomerase.
REPLISSOMO - POLIMERIZAÇÃO
4- Iniciases: sintetizar os iniciadores.
5- DNA polimerase: adição de nucleotídeos no
sentido 5’  3’.
 Após adição de um nucleotídeo, a DNA polimerase
se dissocia ou se move ao longo do molde para
adicionar um outro nucleotídeo:
 Dissociação e reassociação podem limitar a
velocidadede da polimerização  processo
geralmente mais rápido se a polimerase adicionar
nucleotídeos sem se dissociar do molde.
 Número médio de nucleotídeos adicionados
antes que a polimerase se dissocie 
processividade  variável  algumas
polimerases adicionam apenas alguns
nucleotídeos enquanto outras adicionam milhares
antes que a dissociação ocorra.
REPARO
Revisão de leitura e correção: DNA
polimerase  correção de leitura no sentido
contrário ao de polimerização  3’  5’.

Sistema de reparo: pareamentos errados


são instáveis e provocam dobras na molécula
(alteração espacial)  percebidos e
corrigidos.
REPLICAÇÃO
Replicação
 DNA Iniciase (PRIMASE) – Síntese do
fragmento de RNA iniciador.
 HELICASE – Desenrola a dupla hélice de DNA.
 DNA Polimerase I e III – Adiciona ou remove
nucleotídeos durante a síntese.
 DNA topoisomerases (DNA GIRASE) – Desfaz
as regiões de superdobramento da dupla hélice.
Rotaciona a molécula.
 DNA ligase – Une os nucleotídeos dos
fragmentos de Okasaki.
PRINCIPAIS DNA POLIMERASES DE BACTÉRIAS

DNA
FUNÇÃO PRINCIPAL
POLIMERASE
Principal enzima de reparo do
I
DNA.

II Reparo do DNA

Principal enzima de replicação


III
do DNA.
Transcrição

O RNA é constituído
por uma cadeia simples
de nucleotídeos. Estes
são formados por um
açúcar(ribose), um
grupo fosfato e uma
base, que pode se
Adenina, Uracila,
Citosina ou Guanina.
Transcrição
RNA-POLIMERASE
À medida que a enzima se move, o duplex de DNA é
reformado  permite a formação de uma ligação
fosfodiéster apenas quando um nucleotídeo complementar
pareia com a base do molde  nucleotídeo é expulso se
não formar um par apropriado.
Funções:
 desenrolar e enrolar o DNA;
 manter as fitas de DNA separadas e segurar o produto de
RNA;
 catalisar a adição de ribonucleotídeos à cadeia de RNA
nascente;
 ajustar-se às dificuldades na progressão clivando o RNA
e reiniciando a sua síntese (com a assistência de alguns
fatores acessórios).
TIPOS DE RNA-POLIMERASES
RNA-polimerase I: As RNA-polimerases
eucarióticas consistem
 localização: nucléolo; de muitas subunidades.

 função: transcreve rRNA.


RNA-polimerase II:
 localização: nucleoplasma;
 função: transcreve mRNA.
RNA-polimerase III:
 localização: nucleoplasma;
 função: transcreve tRNA.
“SPLICING”
DEFINIÇÃO

Processo em que são removidos os íntrons


do RNA mensageiro, tornando-o maduro.
Splicing
GENE

Seqüência codante Cauda de poliadenina


ATG
Promotor E1 I1 E2 I2 E3 PoliA

Interruptor do gene Seqüência não-codante


Fatores transcricionais Splicing
RNA polimerase
mRNA EUCARIÓTICO
Características
Moléculas altamente instáveis
 Cap de Guanina
 Poliadenilação


5´ mRNA
AAAAAAA
TRANSCRIÇÃO GÊNICA

Promotor E1 I1 E2 I2 E3 PoliA

3´ 5´

5´ 3´

mRNA
Região à Região à
montante (5’) jusante (3’)
Região Transcrita
TAC : Inicio ATT, ATC, ou ACT : Parada

Exon 1 Exon 2 Exon 3


TATA
Box Intron 1 Intron 2
UTR 5’ UTR 3’
DNA

PROCESSAMENTO
TRANSCRIÇÃO

RNA Transcrito Primário


ADIÇÃO DO CAP DE

DE UM
GUANINA E DA CAUDA
DE POLI(A)

GENE EUCARIÓTICO
CORTE DE INTRONS
E UNIÃO DE EXONS

mRNA

TRADUÇÃO Proteína
ARN transportador ou de
transferência

 Também chamado anti-códon, é o responsável por


levar os aminoácidos do citoplasma até os
polissomos para que ocorra o processo de tradução
da mensagem na síntese protéica.
 O ARN t é constituído por uma cadeia de
nucleotídeos dobrada sobre si mesma, com aspecto
de folha de trevo.
ARN ribossômico
 Responsável juntamente com o nucléolo pela
síntese dos ribossomos.
 Possui uma seqüência de bases altamente
repetitiva.
O Código Genético
Ribossomos e o Ergastoplasma
Uma visão do Ergastoplasma
A síntese de proteínas
A síntese de proteínas
A síntese de proteínas

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