O que é aExpressão

filosofia?da
informação genética
DNA - replicação
Ácidos
Nucleicos
Utilizados para o
armazenamento e a
expressão da
informação genética
Composição dos ácidos nucleicos
• Os ácidos nucleicos são moléculas constituídas por unidades básicas designadas nucleótidos.
• Cada nucleótido é formado por uma base nitrogenada, uma pentose (glícido com cinco carbonos) e
um grupo fosfato (ácido fosfórico).
• O conjunto formado pela pentose e pela base nitrogenada é designado nucleósido.

Os nucleótidos são os monómeros dos ácidos

nucleicos.
•

(Os algarismos assinalados com ‘ referem-se ao número de

ordem atribuído aos carbonos da pentose.)
Componentes dos nucleótidos do DNA e do RNA
Ligação entre nucleótidos de uma cadeia

Os nucleótidos que
a cadeia
polinucleotídica
ligam-se entre si
através de ligações
covalentes (do tipo
fosfodiéster), que
se estabelecem
entre o grupo
fosfato e os
carbonos 3' e 5' das
pentoses.
DNA – ácido desoxirribonucleico

• Monómeros: nucleótidos
uma base nitrogenada (adenina,
• Constituídos por citosina, guanina ou timina)
um grupo fosfato
uma pentose (desoxirribose)

Pirimidinas (anel simples) Purinas (anel duplo)

Citosina (C) Timina (T) Guanina (G) Adenina (A)

DNA - Localização na célula
Núcleo
O DNA contém a informação (contém a maior parte do DNA)
genética e está localizado no
núcleo das células
eucarióticas.

As células animais contêm

ainda uma pequena
molécula
de DNA na mitocôndria.
Mitocôndria
(contém uma pequena
porção de DNA)
Célula animal
 DNA - Localização na célula
Núcleo
(contém a maior
Nas células vegetais, parte do DNA)
o DNA está localizado no
núcleo e também nas
mitocôndrias
e nos cloroplastos.

Cloroplasto
(contém uma pequena Mitocôndria
porção de DNA) (contém uma pequena
porção de DNA)
Célula vegetal
DNA - Localização na célula

Nas células Nucleoide

procarióticas, o (DNA)
DNA está
localizado numa
região do
citoplasma
denominada
nucleoide.

Célula procariótica
DNA – ácido desoxirribonucleico

A molécula de DNA tem uma

estrutura em dupla hélice (arranjo
helicoidal) formada por duas
cadeias antiparalelas.
Cada uma das cadeias é formada
por:
• um “esqueleto” de pentoses e
grupos fosfato, que se localizam
na parte mais externa da
molécula.
• bases nitrogenadas, que se
localizam no seu interior,
fazendo a ligação entre as duas
cadeias.
 DNA – ácido desoxirribonucleico
Cada cadeia de nucleótidos
apresenta uma extremidade
designada 3' e outra 5’.
Cada cadeia desenvolve-se em
sentidos opostos, iniciando-se na
extremidade 5' e terminando na
extremidade 3’. A polimerização de
uma cadeia ocorre no sentido 5’- 3’
Assim:
• à extremidade 5' de uma cadeia
irá corresponder a extremidade
3' da outra cadeia
• por esta razão, as cadeias
designam-se antiparalelas, ou
seja, desenvolvem-se em
sentidos opostos.
DNA – ácido desoxirribonucleico

A ligação entre as duas cadeias

faz-se por pontes de hidrogénio
entre as bases nitrogenadas,
verificando-se uma
complementaridade:
• adenina só emparelha com a
timina (por duas pontes de
hidrogénio);
• a guanina só emparelha com a
citosina (por três pontes de
hidrogénio).
RNA – ácido ribonucleico

• Monómeros: nucleótidos
uma base nitrogenada (adenina,
• Constituídos por citosina, guanina ou uracilo)
um grupo fosfato
uma pentose (ribose)

Pirimidinas (anel simples) Purinas (anel duplo)

Citosina (C) Uracilo (U) Guanina (G) Adenina (A)

 RNA – ácido ribonucleico
• A molécula de RNA é, geralmente, formada por um
cadeia polinucleotídica simples.
• Os RNA encontram-se no núcleo e no citoplasma.
• A cadeia de RNA, tal como a de DNA, apresenta a
orientação 5’- 3’, mas a presença de um grupo hidroxilo
ligado ao carbono 2’ da ribose torna a molécula mais
reativa, portanto mais instável do que o DNA.

Em alguns casos, o RNA pode dobrar-se por

complementaridade de bases e adquirir
formas variáveis
• adenina emparelha com uracilo
• citosina emparelha com guanina
 As moléculas de RNA são sintetizadas usando o DNA como molde e podem
RNA – ácido ribonucleico apresentar, sob o ponto de vista de estrutura e função, diferentes formas.
As moléculas de RNA que estão envolvidas na síntese de proteínas podem
ser classificadas em:

RNA mensageiro RNA de transferência RNA ribossomal

P Local de ligação Ribossoma

ao aminoácido

P Local de reconhecimento
do mRNA (anticodão)
Contributos para a descoberta da estrutura da molécula de DNA

Em 1950, o bioquímico Chargaff analisou o DNA de seres vivos de várias

espécies e descobriu regularidades na proporção de bases de DNA.
Concluiu que:
a proporção das diferentes bases nitrogenadas varia entre espécies
mas é, aproximadamente, igual nos indivíduos da mesma espécie.
Quantidade de base (percentagem do DNA total)

Origem do DNA A T G C

Ser humano (Homo

31,0 31,5 19,1 18,4
sapiens)

Milho (Zea mays) 25,6 25,3 24,5 24,6

Erwin Chargaff
Mosca da fruta
(Drosophila 27,3 27,6 22,5 22,5
melanogaster)

Bactéria
26,1 23,9 24,9 25,1
(Escherichia coli)
Contributos para a descoberta da estrutura da molécula de DNA
Segundo Chargaff, em todas as moléculas de DNA, independentemente do ser vivo considerado, a quantidade
de adeninas é, aproximadamente, igual à de timinas (A=T) e a de guaninas à de citosinas (C=G).
Consequentemente, a quantidade total de purinas é aproximadamente, igual ao número total de pirimidinas.
Esta relação de igualdade entre as bases presentes na molécula de DNA foi designada por REGRA DE
CHARGAFF.
 Contributos para a descoberta da estrutura da molécula de DNA

Por outro lado, em 1952, a química inglesa Rosalind Franklin e Maurice Wilkins, utilizando a difração de raios
X, analisaram amostras de DNA cristalizado, tendo obtido padrões que permitiram inferir que a molécula
deveria ter uma estrutura helicoidal, formada por duas cadeias: “FOTO 51”

FOTO 51 - Há quem considere a fotografia mais importante alguma vez

tirada. Rosalind Franklin morreu aos 37 anos, na sequência de um cancro,
não tendo chegado a ser nomeada para o Nobel, uma vez que este não
pode ser atribuído a título póstumo.
Rosalind Franklin (1920-1958)
Contributos para a descoberta da estrutura da molécula de DNA

Tendo tido acesso às fotografias de difração de raios X obtidas por Franklin e Wilkins, e com base no que se
conhecia da composição química do DNA, o geneticista americano James Watson e o físico inglês Francis
Crick, conseguiram, após várias tentativas, construir um modelo da estrutura da molécula de DNA, em 1953.
 EXERCÍCIOS
1. Numa das cadeias de DNA a percentagem de timina é de 40% e a de citosina é de 22%.
a) Qual a percentagem de bases A+G na cadeia complementar desse DNA?
b) Qual a percentagem de bases A+G na cadeia de DNA inicialmente considerada?

2. Uma cadeia de DNA apresenta a seguinte sequência: -----------------------------------

Qual a sequência encontrada na cadeia complementar?

3. Considere um fragmento de uma molécula de DNA com 100 nucleótidos (50 em cada cadeia
polinucleotídica), dos quais 32 são nucleótidos de guanina. Determine, pela aplicação da regra
de Chargaff, o número de nucleótidos de adenina nesse fragmento de DNA.
 Atividade
Quais foram os principais contributos para a descoberta do material genético das células? (Página 12 do manual)

Doc. 1 Experiências de Frederick Griffith, 1928.

Estirpe S Estirpe R Estirpe S morta pelo calor Estirpe R com estirpe S morta pelo calor

A B C D

Bactérias S
Bactérias R

Ratos morrem com Ratos saudáveis. Ratos morrem com

Ratos saudáveis.
pneumonia. pneumonia.
Atividade
Quais foram os principais contributos para a descoberta do material genético das células?

Doc. 1 Experiências de Frederick Griffith, 1928.

Estirpe S Estirpe R Estirpe S morta pelo calor Estirpe R com estirpe S morta pelo calor

A B C D

Bactérias S
Bactérias R

Griffith sugeriu que as bactérias mortas do tipo S deveriam transmitir alguma substância
química às bactérias do tipo R, de tal forma que estas seriam capazes de produzir uma
cápsula, tornando-se bactérias do tipo S. Designou este fenómeno por transformação.
 Atividade
Quais foram os principais contributos para a descoberta do material genético das células?

Doc. 2 Experiências
de Oswald e Avery, 1944.

A descoberta da natureza química

do principio transformante surgiu,
em 1944, como resultado de
trabalhos de investigação realizados
por uma equipa de investigadores
norte-americanos (Oswald Avery,
Collin MacLeod e Maclyn McCarty).

Bactérias S mortas foram

submetidas a tratamentos com
diferentes enzimas capazes de
degradar proteínas (protéase), RNA
(RNAase) e DNA (DNAase).
 Atividade
Quais foram os principais contributos para a descoberta do material genético das células?

Doc. 2 Experiências
de Oswald e Avery, 1944.

Estes resultados permitiram a estes

investigadores concluírem que o
DNA era o principio transformante,
que passa das bactérias do tipo S
mortas para as bactérias do tipo R,
dando-lhes a informação necessária
para que estas produzam cápsula.
Só quando a molécula de DNA é
degradada é que as bactérias R não
produzem a cápsula.
Ou seja, concluiu-se que o DNA é o
material genético das bactérias.
 Atividade
Quais foram os principais contributos para a descoberta do material genético das células?

Doc. 3 Experiências de Alfred Hershey

e Martha Chase, 1952.

Em 1953, Alfred Hershey e Martha Chase

utilizaram vírus que infetam bactérias, por
isso chamados bacteriófagos, contribuindo
para confirmar definitivamente que a
molécula de DNA é o suporte físico da
informação genética e não as proteínas.
 Atividade
Quais foram os principais contributos para a descoberta do material genético das células?

Doc. 3 Experiências de Alfred Hershey

e Martha Chase, 1952.

Os resultados de Hershey e Chase indicaram

que o DNA dos bacteriófagos penetra na
célula bacteriana, mas as proteínas do
bacteriófago não o fazem.

Assim, concluíram que é o DNA, e não as

proteínas, a molécula responsável pela
informação genética dos bacteriófagos,
necessária para a produção de novos vírus.
Replicação do DNA
Como é possível que uma única célula (ovo) dê origem a um organismo grande e complexo?

Um organismo resulta da divisão

sucessiva dessa célula primordial, o ovo.

As instruções para todo o funcionamento

de uma célula ou um organismo estão
«escritas» no DNA.

Para uma célula originar duas células

filhas, o seu DNA tem de ser copiado
(replicado) e cada célula filha receberá
assim as instruções necessárias para
o seu funcionamento.

Inicialmente não se conhecia a forma

como o DNA se duplicava (replicava).
Foram levantadas três hipóteses/
modelos.
Replicação do DNA
– Modelos hipotéticos
Conservativo Semiconservativo Dispersivo
replicação
Primeira
Resultados esperados

replicação
Segunda
Replicação do DNA
– Modelos hipotéticos

Replicação conservativa - Em cada replicação, uma das

moléculas de DNA produzida seria composta pelas 2
cadeias da molécula original e a outra molécula seria
composta por 2 cadeias novas.
Replicação do DNA
– Modelos hipotéticos

Replicação semiconservativa – Em cada replicação,

cada molécula de DNA produzida é composta por uma
cadeia da molécula original e outra nova.
Replicação do DNA
– Modelos hipotéticos

Replicação dispersiva - Em cada replicação, ambas as

moléculas de DNA produzidas seriam formadas por
fragmentos da molécula original e outros formados de
novo.

Destas três hipóteses, veio a comprovar-se a forma como

o DNA se replica através das experiências de Meselson e
Stahl, 1958, com isótopos radioativos.
 Atividade
Como se replica o DNA?

Replicação semi-conservativa – Trabalhos de Meselson e Stahl

PROCEDIMENTO

1. Cultivaram bactérias (E.coli) num meio de cultura com 15N. RESULTADOS

2. Após várias gerações de bactérias se terem desenvolvido no

meio com nitrogénio pesado, foram transferidas para um meio de
cultura com nitrogénio leve (14N).

3. Imediatamente após a transferência, foi retirada uma amostra

de onde se extraiu o DNA que foi sujeito a centrifugação.

4. Ao fim de 20 minutos (tempo necessário para que estas

bactérias se dividam e originem uma nova geração), foi retirada
uma amostra, extraído o DNA e centrifugado.

5. Ao fim de 40 minutos, foi retirada uma nova amostra que foi

sujeita ao procedimento anterior (extração e centrifugação do
DNA).
Atividade
Como se replica o DNA?

Replicação semi-conservativa – Trabalhos de Meselson e Stahl

RESULTADOS
INTERPRETAÇÃO
Atividade
Como se replica o DNA?

Ao fim da 1ª geração (G1),

qual das 3 hipóteses iniciais
para a replicação do DNA
pode já eliminar-se?

Após a 2ª geração (G2), qual

a hipótese que é confirmada?

Experiências de Meselson e Stahl, 1958.

Atividade
Como se replica o DNA?

Previsões dos diferentes modelos de replicação vs. Resultados de Meselson e Stahl

A confrontação dos resultados obtidos por Meselson e Stahl com as previsões dos diferentes modelos permitem
validar a hipótese semiconservativa e rejeitar as hipóteses conservativa e dispersiva.

Modelo (ou hipótese) Modelo (ou hipótese) Modelo (ou hipótese)

conservativo semiconservativo dispersivo
Replicação do DNA
Processo através do qual se obtêm cópias de DNA – replicação semiconservativa
• A replicação é semiconservativa.

Cada cadeia de DNA parental serve de

molde à formação de uma nova cadeia,
resultando duas cadeias duplas, cada uma
constituída por uma cadeia parental e uma
cadeia nova
• A replicação inicia-se em sequências
nucleotídicas específicas - origem de
replicação.

• Ligam-se proteínas que promovem a

desestabilização da dupla hélice.

• A enzima DNA helicase desenrola e separa a

dupla hélice formando a bolha de replicação,
originando a forquilha de replicação
(estrutura em forma de Y). Da ação desta
enzima resultam duas cadeias simples
antiparalelas.
• A enzima DNA polimerase forma as cadeias complementares do DNA molde por adição de
nucleótidos (que existem livres na célula) segundo a regra da complementaridade de bases AT/GC.

Enzima responsável por desenrolar

a dupla hélice do DNA

Proteínas que se ligam às cadeias molde,

separadas pela DNA helicase, impedindo que estas
se voltem a ligar
A replicação inicia-se ao mesmo tempo em
vários locais da molécula de DNA (várias
origens de replicação), onde se ligam os
primers (ou iniciadores) que são
sequências curtas de RNA, com cerca de
5 a 10 nucleótidos.
A DNA polimerase reconhece as zonas onde estão ligados os RNA primers e, a
partir delas, adiciona nucleótidos livres com bases azotadas complementares
àquelas que ficaram expostas pela abertura da molécula.
Só replicam na direção 5’-3’.
• A replicação é bidirecional.
Ocorre para ambos os lados da origem da replicação.
• A replicação é bidirecional.

As cadeias complementares são

sintetizadas em direção antiparalela da
cadeia molde, no sentido 5’-3’
• A replicação é semidescontínua.
Uma cadeia cresce de modo contínuo e a outra de modo descontínuo.
Adição sucessiva de nucleótidos na direção 5’→3’ para formar AMBAS as cadeias.
• A replicação é semidescontínua.
A partir da cadeia molde da molécula de DNA que tem livre a extremidade 3’ (cadeia
líder/avançada ou cadeia contínua), a nova cadeia começa a crescer em 5’ e os
nucleótidos vão sendo adicionados de um modo contínuo.
• A replicação é semidescontínua.
A partir da cadeia molde complementar (cadeia atrasada ou cadeia descontínua), que tem livre a extremidade 5’, a
nova cadeia não começa a crescer na extremidade, mas de uma localização mais avançada na forquilha de
replicação e em direção à extremidade. Por isso, não se forma de modo contínuo mas por porções, com o uso de
vários primers de RNA.
Chama-se a cada porção da cadeia de DNA sintetizada deste modo um fragmento de Okazaki.
Primase: síntese de RNA primers.
DNA ligase: é a enzima que une os fragmentos de Okazaki para completar a cadeia descontínua.
Após os primers de RNA serem removidos e substituídos por DNA (por outra DNA polimerase), a DNA ligase
une os fragmentos de Okazaki à cadeia em crescimento.
Findo o processo de replicação, formam-se duas moléculas de DNA iguais entre si e iguais à molécula original.
Em cada uma das novas moléculas, uma das cadeias de polinucleótidos pertencia à molécula original e a outra
foi formada de novo.
Replicação do DNA

• É possível graças à ação da enzima DNA polimerase.

• Permite a formação de duas moléculas de DNA iguais a uma molécula de DNA anterior.
• Cada uma das moléculas de DNA formadas integra uma das cadeias polinucleotídicas da molécula
original, razão pela qual se considera que a replicação é semiconservativa.

Cadeia de Novas moléculas

crescimento contínuo de DNA

DNA preexistente

Fragmento de Okazaki

Cadeia de
Replicação crescimento descontínuo
 EXERCÍCIOS
1. Coloque pela ordem correta as afirmações seguintes, que dizem respeito aos
acontecimentos que se verificam durante a replicação do DNA, de modo a reconstituir
a sua sequência.
A. A DNA ligase liga os fragmentos de Okazaki.
B. A DNA polimerase estabelece a ligação de nucleótidos livres, por complementaridade
de bases azotadas.
C. A helicase separa as duas cadeias polinucleotídicas da molécula de DNA.
D. Os primers são removidos e substituídos por DNA.
E. Os primers de RNA ligam-se ao DNA em determinados locais.

C, E, B, D, A
Nas células eucarióticas, o núcleo contém
o DNA associado a proteínas, formando a
cromatina (agregados filamentosos de DNA
e PROTEÍNAS).
A cromatina pode apresentar duas formas:
- cromatina dispersa ou distendida
(quando a célula não se encontra em divisão, a
cromatina apresenta-se dispersa no núcleo,
formando filamentos longos e finos, que se
assemelham a um fio de pérolas);
 - cromatina condensada (quando a
célula está em divisão a cromatina apresenta-se
em filamentos curtos e espessos, com uma
grande afinidade para corantes).

Atualmente cada filamento de cromatina, quer

sob a forma dispersa quer sob a forma
condensada, designa-se por cromossoma.
Os cromossomas (cromo = colorido + soma =
corpo) possuem esta designação não por serem
coloridos mas por possuírem uma grande
afinidade para certos corantes.
A unidade básica de um cromossoma de
uma célula eucariótica é uma longa
molécula de DNA que se encontra ligada a
proteínas.

O DNA transporta a informação genética,

enquanto que as proteínas são
responsáveis pela forma física do
cromossoma, ao mesmo tempo que
regulam a atividade do DNA.
A hélice do DNA enrola-se em torno de
conjuntos de proteínas - as histonas -
formando os nucleossomas, que são as
unidades básicas de compactação do DNA.
Cada nucleossoma tem a forma de um disco constituído por 8
unidades de histonas (proteínas), à volta das quais se enrola o
filamento de DNA, formando duas espirais.
Cada nucleossoma está separado do nucleossoma seguinte por
uma porção de DNA, que é o DNA de ligação.
Um outro tipo de histonas encaixa-se no exterior do DNA,
segurando-o às histonas dos nucleossomas.
Os diferentes filamentos cromossómicos apresentam uma grande capacidade de condensação
graças a um estratégico arranjo entre as moléculas de DNA e as proteínas (histonas).